CN111217797B - Rho相关蛋白激酶抑制剂、包含其的药物组合物及其制备方法和用途 - Google Patents

Rho相关蛋白激酶抑制剂、包含其的药物组合物及其制备方法和用途 Download PDF

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Abstract

Description

Rho相关蛋白激酶抑制剂、包含其的药物组合物及其制备方法 和用途
本申请是2018年6月29日提交的、发明名称为“Rho相关蛋白激酶抑制剂、包含其的药物组合物及其制备方法和用途”的中国专利申请201880028332.7的分案申请。
技术领域
本发明涉及Rho相关蛋白激酶抑制剂、包含其的药物组合物、其制备方法及其用于预防或治疗Rho相关蛋白激酶(ROCK)介导的疾病的用途。
背景技术
Rho相关蛋白激酶(ROCK)为AGC激酶家族的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，其包括两种亚型，ROCK1和ROCK2。ROCK1和ROCK2在特定组织中被差异性地表达和调节。例如ROCK1以相对高的水平普遍表达，而ROCK2在心脏、脑和骨骼肌中优先表达。ROCK是第一个被发现的Rho蛋白下游效应因子，其通过磷酸化下游的效应蛋白(MLC、Lin-11、Isl-1、LIMK、ERM、MARCKS、CRMP-2等)来实现其生物学功能。研究表明多种疾病(如肺纤维化、心脑血管疾病、神经***疾病和癌症等)与ROCK介导的通路有关，因此在药物研发中，ROCK被认为是一类重要的靶点。
然而，目前仅有法舒地尔(Fasudil)作为ROCK抑制剂在日本被批准用于治疗脑血管痉挛和缺血。虽然目前还有多种小分子ROCK抑制剂报道，但大多为局部眼科用药，目前没有适用于全身***给药的小分子ROCK抑制剂。
发明内容
本发明提供用作ROCK(优选ROCK2)抑制剂的化合物，其具有对ROCK(优选ROCK2)的优异的抑制活性、良好的选择性(相对于ROCK1，对ROCK2具有更高的选择性)、更好的物理化学性质(例如溶解度、物理和/或化学稳定性)、改善的药物代谢动力学性质(例如改善的生物利用度、合适的半衰期和作用持续时间)、改善的安全性(较低的毒性和/或较少的副作用，较宽的治疗窗)等更优异的性质。
本发明的一个方面提供化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，其中所述化合物具有式(I)的结构：
Figure BDA0002391547790000011
其中：
X和Y各自独立地选自直接键、C(＝O)、O、S(＝O)i和NR；
R选自H、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、饱和或部分不饱和的C3-10环烃基、饱和或部分不饱和的3-10元杂环基、C6-10芳基、5-14元杂芳基和C6-12芳烷基，所述环烃基和杂环基中至多2个环成员为C(＝O)；
环A和环B各自独立地选自饱和或部分不饱和的C3-10烃环、饱和或部分不饱和的3-10元杂环、C6-10芳环和5-14元杂芳环，所述烃环和杂环中至多2个环成员为C(＝O)，条件是当环B为含有氮原子的杂环时，环B不通过所述氮原子与X连接；
环C选自饱和或部分不饱和的C3-10烃环、饱和或部分不饱和的3-10元杂环、C6-10芳环和5-14元杂芳环，所述烃环和杂环中至多2个环成员为C(＝O)；
环D不存在或者选自饱和或部分不饱和的C3-10烃环、饱和或部分不饱和的3-10元杂环、C6-10芳环和5-14元杂芳环，所述烃环和杂环中至多2个环成员为C(＝O)；
环E选自
Figure BDA0002391547790000012
环F选自饱和或部分不饱和的C3-10烃环、饱和或部分不饱和的3-10元杂环、C6-10芳环和5-14元杂芳环，所述烃环和杂环中至多2个环成员为C(＝O)；
R1选自H、-NH2、C1-6烷基、C6-10芳基、5-14元杂芳基、N-甲基四氢吡咯基、N-甲基哌啶基、
Figure BDA0002391547790000021
乙酰基、
Figure BDA0002391547790000022
-C(＝O)-(C1-6亚烷基)n-CF3、-C(＝O)-(C1-6亚烷基)n-CN、-C(＝O)-(饱和或部分不饱和的C3-10环烃基)、-NHC(＝O)-(饱和或部分不饱和的C3-10环烃基)、-C(＝O)-(饱和或部分不饱和的3-10元杂环基)、-C(＝O)-C1-6亚烷基-(饱和或部分不饱和的3-10元杂环基)、-C(＝O)-(5-14元杂芳基)、-C(＝O)-C1-6亚烷基-NH(C1-6烷基)、-C(＝O)-C1-6亚烷基-N(C1-6烷基)2、N-甲基哌嗪取代的乙酰基、-S(＝O)2R1a、-P(＝O)R1aR1b、
Figure BDA0002391547790000023
Figure BDA0002391547790000024
条件是，当R1和R10中一个为C1-6烷基且另一个为H或C3-10环烃基时，X和Y中至少一个为直接键且环C不是5元杂芳环；当R1和R10中一个为H且另一个为
Figure BDA0002391547790000025
时，环C不是5元杂芳环；当R1和R10均为H时，环A包含至少1个氮原子且不为5或6元环；当R1和R10中一个为H且另一个为
Figure BDA0002391547790000026
时，环C不是5元杂芳环；并且当R1和R10中一个为H且另一个为H或乙酰基时，环D不存在；
R1a和R1b各自独立地选自H、卤素、氨基、氰基、硝基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-10环烃基、3-10元杂环基、C6-10芳基、5-14元杂芳基、C6-12芳烷基、-C(＝O)R5、-OC(＝O)R5、-C(＝O)OR5、-OR5、-SR5、-S(＝O)R5、-S(＝O)2R5、-S(＝O)2NR5R6、-NR5R6、-C(＝O)NR5R6、-NR5-C(＝O)R6、-NR5-C(＝O)OR6、-NR5-S(＝O)2-R6、-NR5-C(＝O)-NR5R6、-C1-6亚烷基-NR5R6、-C1-6亚烷基-OR5和-O-C1-6亚烷基-NR5R6，条件是当R1a与R1b之一为正丙基时，另一个不为H；或者R1a和R1b连同其所连接的原子共同构成3-12元杂环或杂芳环；
R2、R3、R4、R7、R8、R9和R10在每次出现时各自独立地选自H、卤素、氨基、氰基、硝基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-10环烃基、3-10元杂环基、C6-10芳基、5-14元杂芳基、C6-12芳烷基、-C(＝O)R5、-OC(＝O)R5、-C(＝O)OR5、-OR5、-SR5、-S(＝O)R5、-S(＝O)2R5、-S(＝O)2NR5R6、-NR5R6、-C(＝O)NR5R6、-NR5-C(＝O)R6、-NR5-C(＝O)OR6、-NR5-S(＝O)2-R6、-NR5-C(＝O)-NR5R6、-C1-6亚烷基-NR5R6、-C1-6亚烷基-O(P＝O)(OH)，和-O-C1-6亚烷基-NR5R6；
上述烷基、亚烷基、烯基、炔基、环烃基、烃环、杂环基、杂环、芳基、芳环、杂芳基、杂芳环和芳烷基在每次出现时各自任选地被一个或多个独立地选自下列的取代基取代：卤素、羟基、氧代、氨基、氰基、硝基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烃基、3-10元杂环基、C6-10芳基、5-14元杂芳基、C6-12芳烷基、＝N-OR5、-C(＝NH)NH2、-C(＝O)R5、-OC(＝O)R5、-C(＝O)OR5、-OR5、-SR5、-S(＝O)R5、-S(＝O)2R5、-S(＝O)2NR5R6、-NR5R6、-C(＝O)NR5R6、-NR5-C(＝O)R6、-NR5-C(＝O)OR6、-NR5-S(＝O)2-R6、-NR5-C(＝O)-NR5R6、-C1-6亚烷基-NR5R6和-O-C1-6亚烷基-NR5R6，所述烷基、环烃基、杂环基、芳基、杂芳基和芳烷基进一步任选地被一个或多个独立地选自下列的取代基取代：卤素、羟基、氧代、氨基、氰基、硝基、C1-6烷基、C3-6环烃基、3-10元杂环基、C6-10芳基、5-14元杂芳基和C6-12芳烷基；
R5和R6在每次出现时各自独立地选自H、C1-6烷基、C3-10环烃基、3-10元杂环基、C6-10芳基、5-14元杂芳基和C6-12芳烷基；
m在每次出现时各自独立地为0、1、2或3的整数；
n为0、1或2的整数；
i为0、1或2的整数；并且
g为0、1、2、3或4的整数。
本发明的另一方面提供药物组合物，其包含预防或治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药以及一种或多种药学上可接受的载体，所述药物组合物优选为固体制剂、半固体制剂、液体制剂或气态制剂。
本发明的另一方面提供本发明的化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药或者本发明的药物组合物在制备用作Rho相关蛋白激酶(ROCK)抑制剂，优选选择性ROCK2抑制剂的药物中的用途。
本发明的另一方面提供本发明的化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药或者本发明的药物组合物，其用作Rho相关蛋白激酶(ROCK)抑制剂，优选选择性ROCK2抑制剂。
本发明的另一方面提供预防或治疗Rho相关蛋白激酶(ROCK)介导的疾病的方法，所述方法包括向需要其的个体给药有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药或者本发明的药物组合物。
本发明的另一方面提供制备本发明的化合物的方法。
具体实施方式
定义
除非在下文中另有定义，本文中所用的所有技术术语和科学术语的含义意图与本领域技术人员通常所理解的相同。提及本文中使用的技术意图指在本领域中通常所理解的技术，包括那些对本领域技术人员显而易见的技术的变化或等效技术的替换。虽然相信以下术语对于本领域技术人员很好理解，但仍然阐述以下定义以更好地解释本发明。
术语“包括”、“包含”、“具有”、“含有”或“涉及”及其在本文中的其它变体形式为包含性的（inclusive)或开放式的，且不排除其它未列举的元素或方法步骤。
如本文中所使用，术语“亚烷基”表示饱和二价烃基，优选表示具有1、2、3、4、5或6个碳原子的饱和二价烃基，例如亚甲基、亚乙基、亚丙基或亚丁基。
如本文中所使用，术语“烷基”定义为线性或支化饱和脂肪族烃。在一些实施方案中，烷基具有1至12个，例如1至6个碳原子。例如，如本文中所使用，术语“G1-6烷基”指1至6个碳原子的线性或支化的基团(例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基或正己基)，其任选地被1或多个(诸如1至3个)适合的取代基如卤素取代(此时该基团被称作“卤代烷基”)(例如CH2F、CHF2、CF3、CCl3、C2F5、C2Cl5、CH2CF3、CH2Cl或-CH2CH2CF3等)。术语“G1-4烷基”指1至4个碳原子的线性或支化的脂肪族烃链(即甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基)。
如本文中所使用，术语“烯基”意指线性的或支化的单价烃基，其包含一个双键，且具有2-6个碳原子(“C2-6烯基”)。所述烯基为例如乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、4-戊烯基、2-己烯基、3-己烯基、4-己烯基、5-己烯基、2-甲基-2-丙烯基和4-甲基-3-戊烯基。当本发明的化合物含有亚烯基时，所述化合物可以纯E(异侧(entgegen))形式、纯z(同侧(zusammen))形式或其任意混合物形式存在。
如本文中所使用，术语“炔基”表示包含一个或多个三键的单价烃基，其优选具有2、3、4、5或6个碳原子，例如乙炔基或丙炔基。
如本文中所使用，术语“环烷基”指饱和的单环或多环(诸如双环)烃环(例如单环，诸如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环壬基，或双环，包括螺环、稠合或桥连***(诸如双环[1.1.1]戊基、双环[2.2.1]庚基、双环[3.2.1]辛基或双环[5.2.0]壬基、十氢化萘基等))，其任选地被1或多个(诸如1至3个)适合的取代基取代。所述环烷基具有3至15个碳原子。例如，术语“C3-6环烷基”指3至6个成环碳原子的饱和的单环或多环(诸如双环)烃环(例如环丙基、环丁基、环戊基或环己基)，其任选地被1或多个(诸如1至3个)适合的取代基取代，例如甲基取代的环丙基。
如本文中所使用，术语“亚环烃基”、“环烃基”和“烃环”是指具有例如3-10个(适合地具有3-8个，更适合地具有3-6个)环碳原子的饱和(即，“亚环烷基”和“环烷基”)或不饱和的(即在环内具有一个或多个双键和/或三键)单环或多环烃环，其包括但不限于(亚)环丙基(环)、(亚)环丁基(环)、(亚)环戊基(环)、(亚)环己基(环)、(亚)环庚基(环)、(亚)环辛基(环)、(亚)环壬基(环)、(亚)环己烯基(环)等。
如本文中所使用，术语“杂环基”、“亚杂环基”和“杂环”是指具有例如3-10个(适合地具有3-8个，更适合地具有3-6个)环原子、其中至少一个环原子是选自N、O和S的杂原子且其余环原子是C的饱和(即，杂环烷基)或部分不饱和的(即在环内具有一个或多个双键和/或三键)环状基团。例如，“3-10元(亚)杂环(基)”是具有2-9个(如2、3、4、5、6、7、8或9个)环碳原子和独立地选自N、O和S的一个或多个(例如1个、2个、3个或4个)杂原子的饱和或部分不饱和(亚)杂环(基)。亚杂环基和杂环(基)的实例包括但不限于：(亚)环氧乙烷基、(亚)氮丙啶基、(亚)氮杂环丁基(azetidinyl)、(亚)氧杂环丁基(oxetanyl)、(亚)四氢呋喃基、(亚)二氧杂环戊烯基(dioxolinyl)、(亚)吡咯烷基、(亚)吡咯烷酮基、(亚)咪唑烷基、(亚)吡唑烷基、(亚)吡咯啉基、(亚)四氢吡喃基、(亚)哌啶基、(亚)吗啉基、(亚)二噻烷基(dithianyl)、(亚)硫吗啉基、(亚)哌嗪基或(亚)三噻烷基(trithianyl)。所述基团也涵盖双环***，包括螺环、稠合或桥连***(诸如8-氮杂螺[4.5]癸烷、3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷、2-氮杂双环[2.2.2]辛烷等)。亚杂环基和杂环(基)可任选地被一个或多个(例如1个、2个、3个或4个)适合的取代基取代。
如本文中所使用，术语“(亚)芳基”和“芳环”指具有共轭π电子***的全碳单环或稠合环多环芳族基团。例如，如本文中所使用，术语“C6-10(亚)芳基”和“C6-10芳环”意指含有6至10个碳原子的芳族基团，诸如(亚)苯基(苯环)或(亚)萘基(萘环)。(亚)芳基和芳环任选地被1或多个(诸如1至3个)适合的取代基(例如卤素、-OH、-CN、-NO2、C1-6烷基等)取代。
如本文中所使用，术语“(亚)杂芳基”和“杂芳环”指单环、双环或三环芳族环系，其具有5、6、8、9、10、11、12、13或14个环原子，特别是1或2或3或4或5或6或9或10个碳原子，且其包含至少一个可以相同或不同的杂原子(所述杂原子是例如氧、氮或硫)，并且，另外在每一种情况下可为苯并稠合的。特别地，“(亚)杂芳基”或“杂芳环”选自(亚)噻吩基、(亚)呋喃基、(亚)吡咯基、(亚)噁唑基、(亚)噻唑基、(亚)咪唑基、(亚)吡唑基、(亚)异噁唑基、(亚)异噻唑基、(亚)噁二唑基、(亚)***基、(亚)噻二唑基等，以及它们的苯并衍生物；或(亚)吡啶基、(亚)哒嗪基、(亚)嘧啶基、(亚)吡嗪基、(亚)三嗪基等，以及它们的苯并衍生物。
如本文中所使用，术语“芳烷基”优选表示芳基或杂芳基取代的烷基，其中所述芳基、杂芳基和烷基如本文中所定义。通常，所述芳基可具有6-14个碳原子，所述杂芳基可具有5-14个环原子，并且所述烷基可具有1-6个碳原子。示例性芳烷基包括但不限于苄基、苯基乙基、苯基丙基、苯基丁基。
如本文中所使用，术语“卤代”或“卤素”基团定义为包括F、Cl、Br或I。
如本文中所使用，术语“含氮杂环”指饱和或不饱和的单环或双环基团，其在环中具有2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12或13个碳原子和至少一个氮原子，其还可任选地包含一个或多个(例如一个、两个、三个或四个)选自N、O、C＝O、S、S＝O和S(＝O)2的环成员，其通过所述含氮杂环中的氮原子以及任一其余环原子与分子的其余部分连接，所述含氮杂环任选地为苯并稠合的，并且优选通过所述含氮杂环中的氮原子以及所稠合的苯环中的任一碳原子与分子的其余部分连接。
术语“取代”指所指定的原子上的一个或多个(例如一个、两个、三个或四个)氢被从所指出的基团的选择代替，条件是未超过所指定的原子在当前情况下的正常原子价并且所述取代形成稳定的化合物。取代基和/或变量的组合仅仅当这种组合形成稳定的化合物时才是允许的。
如果取代基被描述为“任选地被取代”，则取代基可(1)未被取代或(2)被取代。如果取代基的碳被描述为任选地被取代基列表中的一个或多个取代，则碳上的一个或多个氢(至存在的任何氢的程度)可单独和/或一起被独立地选择的任选的取代基替代。如果取代基的氮被描述为任选地被取代基列表中的一个或多个取代，则氮上的一个或多个氢(至存在的任何氢的程度)可各自被独立地选择的任选的取代基替代。
如果取代基被描述为“独立地选自”一组，则各取代基独立于另一者被选择。因此，各取代基可与另一(其他)取代基相同或不同。
如本文中所使用，术语“一个或多个”意指在合理条件下的1个或超过1个，例如2个、3个、4个、5个或10个。
除非指明，否则如本文中所使用，取代基的连接点可来自取代基的任意适宜位置。
当取代基的键显示为穿过环中连接两个原子的键时，则这样的取代基可键连至该可取代的环中的任一成环原子。
本发明还包括所有药学上可接受的同位素标记的化合物，其与本发明的化合物相同，除了一个或多个原子被具有相同原子序数但原子质量或质量数不同于在自然界中占优势的原子质量或质量数的原子替代。适合包含入本发明的化合物中的同位素的实例包括(但不限于)氢的同位素(例如氘(2H)、氚(3H))；碳的同位素(例如11C、13C及14C)；氯的同位素(例如36Cl)；氟的同位素(例如18F)；碘的同位素(例如123I及125I)；氮的同位素(例如13N及15N)；氧的同位素(例如15O、17O及18O)；磷的同位素(例如32P)；及硫的同位素(例如35S)。某些同位素标记的本发明的化合物(例如掺入放射性同位素的那些)可用于药物和/或底物组织分布研究(例如分析)中。放射性同位素氚(即3H)及碳-14(即14C)因易于掺入且容易检测而特别可用于该目的。用正电子发射同位素(例如11C、18F、15O及13N)进行取代可在正电子发射断层显像术(PET)研究中用于检验底物受体占据情况。被同位素标记的本发明的化合物可通过与描述于随附路线和/或实施例及制备中的那些类似的方法通过使用适当的被同位素标记的试剂代替之前采用的非标记的试剂来制备。本发明的药学上可接受的溶剂合物包括其中结晶溶剂可被同位素取代的那些，例如，D2O、丙酮-d6或DMSO-d6。
术语“立体异构体”表示由于至少一个不对称中心形成的异构体。在具有一个或多个(例如一个、两个、三个或四个)不对称中心的化合物中，其可产生外消旋混合物、单一对映异构体、非对映异构体混合物和单独的非对映异构体。特定个别分子也可以几何异构体(顺式/反式)存在。类似地，本发明的化合物可以两种或更多种处于快速平衡的结构不同的形式的混合物(通常称作互变异构体)存在。互变异构体的代表性实例包括酮-烯醇互变异构体、苯酚-酮互变异构体、亚硝基-肟互变异构体、亚胺-烯胺互变异构体等。要理解，本申请的范围涵盖所有这样的以任意比例(例如60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％)的异构体或其混合物。
本文中可使用实线
Figure BDA0002391547790000051
实楔形
Figure BDA0002391547790000052
或虚楔形
Figure BDA0002391547790000053
描绘本发明的化合物的化学键。使用实线以描绘键连至不对称碳原子的键欲表明，包括该碳原子处的所有可能的立体异构体(例如，特定的对映异构体、外消旋混合物等)。使用实或虚楔形以描绘键连至不对称碳原子的键欲表明，存在所示的立体异构体。当存在于外消旋混合物中时，使用实及虚楔形以定义相对立体化学，而非绝对立体化学。除非另外指明，否则本发明的化合物意欲可以立体异构体(其包括顺式及反式异构体、光学异构体(例如R及S对映异构体)、非对映异构体、几何异构体、旋转异构体、构象异构体、阻转异构体及其混合物)的形式存在。本发明的化合物可表现一种以上类型的异构现象，且由其混合物(例如外消旋混合物及非对映异构体对)组成。
本发明涵盖本发明的化合物的所有可能的结晶形式或多晶型物，其可为单一多晶型物或多于一种多晶型物的任意比例的混合物。
还应当理解，本发明的某些化合物可以游离形式存在用于治疗，或适当时，以其药学上可接受的衍生物形式存在。在本发明中，药学上可接受的衍生物包括但不限于，药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、N-氧化物、代谢物或前药，在将它们向需要其的患者给药后，能够直接或间接提供本发明的化合物或其代谢物或残余物。因此，当在本文中提及“本发明的化合物”时，也意在涵盖化合物的上述各种衍生物形式。
本发明的化合物的药学上可接受的盐包括其酸加成盐及碱加成盐。
适合的酸加成盐由形成药学可接受盐的酸来形成。实例包括乙酸盐、己二酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、碳酸氢盐/碳酸盐、硫酸氢盐/硫酸盐、硼酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环己氨磺酸盐、乙二磺酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、延胡索酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、葡糖醛酸盐、六氟磷酸盐、海苯酸盐、盐酸盐/氯化物、氢溴酸盐/溴化物、氢碘酸盐/碘化物、羟乙基磺酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、顺丁烯二酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、甲基硫酸盐、萘甲酸盐(naphthylate)、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、乳清酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、磷酸盐/磷酸氢盐/磷酸二氢盐、焦谷氨酸盐、糖二酸盐、硬脂酸盐、丁二酸盐、单宁酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐、三氟乙酸盐及昔萘酸盐(xinofoate)。
适合的碱加成盐由形成药学可接受盐的碱来形成。实例包括铝盐、精氨酸盐、苄星青霉素盐、钙盐、胆碱盐、二乙胺盐、二乙醇胺盐、甘氨酸盐、赖氨酸盐、镁盐、葡甲胺盐、乙醇胺盐、钾盐、钠盐、氨丁三醇盐及锌盐。
适合的盐的综述参见Stahl及Wermuth的“Handbook of Pharmaceutical Salts：Properties，Selection，and Use”(Wiley-VCH，2002)。用于制备本发明的化合物的药学上可接受的盐的方法为本领域技术人员已知的。
如本文中所使用，术语“酯”意指衍生自本申请中各个通式化合物的酯，其包括生理上可水解的酯(可在生理条件下水解以释放游离酸或醇形式的本发明的化合物)。本发明的化合物本身也可以是酯。
本发明的化合物可以溶剂合物(优选水合物)的形式存在，其中本发明的化合物包含作为所述化合物晶格的结构要素的极性溶剂，特别是例如水、甲醇或乙醇。极性溶剂特别是水的量可以化学计量比或非化学计量比存在。
本领域技术人员会理解，由于氮需要可用的孤对电子来氧化成氧化物，因此并非所有的含氮杂环都能够形成N-氧化物；本领域技术人员会识别能够形成N-氧化物的含氮杂环。本领域技术人员还会认识到叔胺能够形成N-氧化物。用于制备杂环和叔胺的N-氧化物的合成方法是本领域技术人员熟知的，包括用过氧酸如过氧乙酸和间氯过氧苯甲酸(MCPBA)、过氧化氢、烷基过氧化氢如叔丁基过氧化氢、过硼酸钠和双环氧乙烷(dioxirane)如二甲基双环氧乙烷来氧化杂环和叔胺。这些用于制备N-氧化物的方法已在文献中得到广泛描述和综述，参见例如：T.L.Gilchrist，Comprehensive Organic Synthesis，vol.7，pp748-750；A.R.Katritzky和A.J.Boulton，Eds.，Academic Press；以及G.W.H.Cheeseman和E.S.G.Werstiuk，Advances in Heterocyclic Chemistry，vol.22，pp 390-392，A.R.Katritzky和A.J.Boulton，Eds.，Academic Press。
在本发明的范围内还包括本发明的化合物的代谢物，即在给药本发明的化合物时体内形成的物质。这样的产物可由例如被给药的化合物的氧化、还原、水解、酰胺化、脱酰胺化、酯化、酶解等产生。因此，本发明包括本发明的化合物的代谢物，包括通过使本发明的化合物与哺乳动物接触足以产生其代谢产物的时间的方法制得的化合物。
本发明在其范围内进一步包括本发明的化合物的前药，其为自身可具有较小药理学活性或无药理学活性的本发明的化合物的某些衍生物当被给药至身体中或其上时可通过例如水解裂解转化成具有期望活性的本发明的化合物。通常这样的前药会是所述化合物的官能团衍生物，其易于在体内转化成期望的治疗活性化合物。关于前药的使用的其他信息可参见“Pro-drugs as Novel Delivery Systems”，第14卷，ACS Symposium Series(T.Higuchi及V.Stella)。本发明的前药可例如通过用本领域技术人员已知作为“前-部分(pro-moiety)(例如“Design of Prodrugs”，H.Bundgaard(Elsevier，1985)中所述)”的某些部分替代本发明的化合物中存在的适当官能团来制备。
本发明还涵盖含有保护基的本发明的化合物。在制备本发明的化合物的任何过程中，保护在任何有关分子上的敏感基团或反应基团可能是必需的和/或期望的，由此形成本发明的化合物的化学保护的形式。这可以通过常规的保护基实现，例如，在T.W.Greene&P.G.M.Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，John Wiley&Sons，1991中所述的那些保护基，这些参考文献通过援引加入本文。使用本领域已知的方法，在适当的后续阶段可以移除保护基。
术语“约”是指在所述数值的±10％范围内，优选±5％范围内，更优选±2％范围内。
化合物
在一些实施方案中，本发明提供化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，其中所述化合物具有式(I)的结构：
Figure BDA0002391547790000061
其中：
X和Y各自独立地选自直接键、C(＝O)、O、S(＝O)i和NR；
R选自H、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、饱和或部分不饱和的C3-10环烃基、饱和或部分不饱和的3-10元杂环基、C6-10芳基、5-14元杂芳基和C6-12芳烷基，所述环烃基和杂环基中至多2个环成员为C(＝O)；
环A和环B各自独立地选自饱和或部分不饱和的C3-10烃环、饱和或部分不饱和的3-10元杂环、C6-10芳环和5-14元杂芳环，所述烃环和杂环中至多2个环成员为C(＝O)，条件是当环B为含有氮原子的杂环时，环B不通过所述氮原子与X连接；
环C选自饱和或部分不饱和的C3-10烃环、饱和或部分不饱和的3-10元杂环、C6-10芳环和5-14元杂芳环，所述烃环和杂环中至多2个环成员为C(＝O)；
环D不存在或者选自饱和或部分不饱和的C3-10烃环、饱和或部分不饱和的3-10元杂环、C6-10芳环和5-14元杂芳环，所述烃环和杂环中至多2个环成员为C(＝O)；
环E选自
Figure BDA0002391547790000062
环F选自饱和或部分不饱和的C3-10烃环、饱和或部分不饱和的3-10元杂环、C6-10芳环和5-14元杂芳环，所述烃环和杂环中至多2个环成员为C(＝O)；
R1选自H、-NH2、C1-6烷基、C6-10芳基、5-14元杂芳基、N-甲基四氢吡咯基、N-甲基哌啶基、
Figure BDA0002391547790000071
乙酰基、
Figure BDA0002391547790000072
-C(＝O)-(C1-6亚烷基)n-CF3、-C(＝O)-(C1-6亚烷基)n-CN、-C(＝O)-(饱和或部分不饱和的C3-10环烃基)、-NHC(＝O)-(饱和或部分不饱和的C3-10环烃基)、-C(＝O)-(饱和或部分不饱和的3-10元杂环基)、-C(＝O)-C1-6亚烷基-(饱和或部分不饱和的3-10元杂环基)、-C(＝O)-(5-14元杂芳基)、-C(＝O)-C1-6亚烷基-NH(C1-6烷基)、-C(＝O)-C1-6亚烷基-N(C1-6烷基)2、N-甲基哌嗪取代的乙酰基、-S(＝O)2R1a、-P(＝O)R1aR1b、
Figure BDA0002391547790000073
Figure BDA0002391547790000074
条件是，当R1和R10中一个为C1-6烷基且另一个为H或C3-10环烃基时，X和Y中至少一个为直接键且环C不是5元杂芳环；当R1和R10中一个为H且另一个为
Figure BDA0002391547790000075
时，环C不是5元杂芳环；当R1和R10均为H时，环A包含至少1个氮原子且不为5或6元环；当R1和R10中一个为H且另一个为
Figure BDA0002391547790000076
时，环C不是5元杂芳环；并且当R1和R10中一个为H且另一个为H或乙酰基时，环D不存在；
R1a和R1b各自独立地选自H、卤素、氨基、氰基、硝基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-10环烃基、3-10元杂环基、C6-10芳基、5-14元杂芳基、C6-12芳烷基、-C(＝O)R5、-OC(＝O)R5、-C(＝O)OR5、-OR5、-SR5、-S(＝O)R5、-S(＝O)2R5、-S(＝O)2NR5R6、-NR5R6、-C(＝O)NR5R6、-NR5-C(＝O)R6、-NR5-C(＝O)OR6、-NR5-S(＝O)2-R6、-NR5-C(＝O)-NR5R6、-C1-6亚烷基-NR5R6、-C1-6亚烷基-OR5和-O-C1-6亚烷基-NR5R6，条件是当R1a与R1b之一为正丙基时，另一个不为H；或者R1a和R1b连同其所连接的原子共同构成3-12元杂环或杂芳环；
R2、R3、R4、R7、R8、R9和R10在每次出现时各自独立地选自H、卤素、氨基、氰基、硝基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-10环烃基、3-10元杂环基、C6-10芳基、5-14元杂芳基、C6-12芳烷基、-C(＝O)R5、-OC(＝O)R5、-C(＝O)OR5、-OR5、-SR5、-S(＝O)R5、-S(＝O)2R5、-S(＝O)2NR5R6、-NR5R6、-C(＝O)NR5R6、-NR5-C(＝O)R6、-NR5-C(＝O)OR6、-NR5-S(＝O)2-R6、-NR5-C(＝O)-NR5R6、-C1-6亚烷基-NR5R6、-C1-6亚烷基-O(P＝O)(OH)2和-O-C1-6亚烷基-NR5R6；
上述烷基、亚烷基、烯基、炔基、环烃基、烃环、杂环基、杂环、芳基、芳环、杂芳基、杂芳环和芳烷基在每次出现时各自任选地被一个或多个独立地选自下列的取代基取代：卤素、羟基、氧代、氨基、氰基、硝基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烃基、3-10元杂环基、C6-10芳基、5-14元杂芳基、C6-12芳烷基、＝N-OR5、-C(＝NH)NH2、-C(＝O)R5、-OC(＝O)R5、-C(＝O)OR5、-OR5、-SR5、-S(＝O)R5、-S(＝O)2R5、-S(＝O)2NR5R6、-NR5R6、-C(＝O)NR5R6、-NR5-C(＝O)R6、-NR5-C(＝O)OR6、-NR5-S(＝O)2-R6、-NR5-C(＝O)-NR5R6、-C1-6亚烷基-NR5R6和-O-C1-6亚烷基-NR5R6，所述烷基、环烃基、杂环基、芳基、杂芳基和芳烷基进一步任选地被一个或多个独立地选自下列的取代基取代：卤素、羟基、氧代、氨基、氰基、硝基、C1-6烷基、C3-6环烃基、3-10元杂环基、C6-10芳基、5-14元杂芳基和C6-12芳烷基；
R5和R6在每次出现时各自独立地选自H、C1-6烷基、C3-10环烃基、3-10元杂环基、C6-10芳基、5-14元杂芳基和C6-12芳烷基；
m在每次出现时各自独立地为0、1、2或3的整数；
n为0、1或2的整数；
i为0、1或2的整数；并且
g为0、1、2、3或4的整数。
在一些实施方案中，本发明提供化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，其中X和Y各自独立地选自直接键、C(＝O)、O、S、S(＝O)、S(＝O)2、NH和NCH3，并且优选地，X和Y中至少一个为直接键。
在一些实施方案中，本发明提供化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，其中环A与环B中至少一个选自饱和或部分不饱和的3-10元杂环和5-14元杂芳环，所述杂环中至多2个环成员为C(＝O)。
在一些实施方案中，
Figure BDA0002391547790000081
为
Figure BDA0002391547790000082
优选为
Figure BDA0002391547790000083
以上基团通过#或##标记的两个位置之一与X连接，并且另一位置与R1连接，
其中
Figure BDA0002391547790000084
表示单键或双键且相邻的键不同时为双键；
Z1、Z2、Z3、Z4、Z5、Z6、Z7、Z8和Z9在每次出现时各自独立地选自C、CR9、C(R9)2、CR10、C(R10)2、C(＝O)、N、NR9、NR10、O和S；优选地，Z1、Z2、Z3、Z4、Z5、Z6、Z7、Z8和Z9在每次出现时各自独立地选自C、CH、CF、CCl、CCH3、CH2、C(CH3)2、C-OCH3、C(＝O)、N、NH、NCH3、NCH2CH3、NCH(CH3)2、NCH＝CH2、NCH2F、NCHF2、NCH2CHF2、NC(＝O)CH3、NCH2OH、NCH2OMe、NCH2CH2OMe、NCH2-O(P＝O)(OH)2、
Figure BDA0002391547790000085
NCH2CH2-N(CH3)2、O和S；
j为0、1、2、3或4；并且
条件是z1-Z9中的至多两个基团同时为C(＝O)，并且与X连接的原子不是氮原子。
在更优选的实施方案中，
Figure BDA0002391547790000086
为
Figure BDA0002391547790000087
其中环A’和环B’各自独立地选自饱和或部分不饱和的3-10元杂环和5-14元杂芳环，所述杂环中至多2个环成员为C(＝O)，条件是当环B’为含有氮原子的杂环时，所述环B’不通过所述氮原子与X连接。
在一些实施方案中，
Figure BDA0002391547790000088
优选为
Figure BDA0002391547790000089
优选为
Figure BDA00023915477900000810
在优选的实施方案中，R9和R10在每次出现时各自独立地选自卤素(例如F、Cl或Br)、甲基、乙基、丙基(例如正丙基或异丙基)、乙烯基、环丙基、环丁基、环戊基、氧杂环丁烷基、单氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、-CH2CHF2、乙酰基、-OCH3、-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2CH2OCH3、-CH2-O(P＝O)(OH)2、
Figure BDA0002391547790000091
和-CH2CH2-N(CH3)2。
在最优选的实施方案中，
Figure BDA0002391547790000092
选自
Figure BDA0002391547790000093
Figure BDA0002391547790000094
Figure BDA0002391547790000101
Figure BDA0002391547790000111
以上基团通过#或##标记的两个位置之一与X连接，并且另一位置与R1连接，条件是与X连接的原子不是氮原子。
在一些实施方案中，本发明提供化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，其中
Figure BDA0002391547790000112
为
Figure BDA0002391547790000113
Figure BDA0002391547790000114
更优选为
Figure BDA0002391547790000115
其更优选为
Figure BDA0002391547790000116
Figure BDA0002391547790000117
以上基团通过*或**标记的两个位置之一与Y连接，并且另一位置与X连接，
其中
Figure BDA0002391547790000118
表示单键或双键且相邻的键不同时为双键；
V1、V2、V3、V4、V5、V6、V7、V8和V9在每次出现时各自独立地选自C、CR7、C(R7)2、CR8、C(R8)2、C(＝O)、N、NR7、NR8、O和S；优选地，V1、V2、V3、V4、V5、V6、V7、V8和V9在每次出现时各自独立地选自C、CH、CF、CCl、CCN、CCH3、C-OCH3、CCF3、C-CH2-Ph、C-NH-Ph、C-O-Ph、C-CH2OCH3、C-CH2-NHCH3、C-N(CH3)2、C-CH2NH2、C-C(＝O)OH、C-C(＝O)OCH2CH3、C-C(＝O)NH2、-C-O-CH2CH2-N(CH3)2、CH2、C(＝O)、N、NH、NCH3、N-C(＝O)CH3、N-Ph、-N-CH2CH2-N(CH3)2、O和S；
k为0、1、2、3或4；并且
条件是V1-V9中的至多两个基团同时为C(＝O)。
在优选的实施方案中，
Figure BDA0002391547790000119
为
Figure BDA00023915477900001110
更优选为
Figure BDA00023915477900001111
在优选的实施方案中，R7和R8在每次出现时各自独立地选自F、C1、Br、I、氰基、-N(CH3)2、甲基、乙基、丙基、甲氧基、三氟甲基、苯基、-CH2-Ph、-NH-Ph、-O-Ph、-CH2OCH3、-CH2NH2、-CH2-NHCH3、-C(＝O)CH3、-C(＝O)OH、-C(＝O)OCH2CH3、-C(＝O)NH2、-O-CH2CH2-N(CH3)2和-CH2CH2-N(CH3)2。
在最优选的实施方案中，
Figure BDA0002391547790000121
为
Figure BDA0002391547790000122
Figure BDA0002391547790000123
Figure BDA0002391547790000131
Figure BDA0002391547790000132
以上基团通过*或**标记的两个位置之一与Y连接，并且另一位置与X连接。
在一些实施方案中，本发明提供化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，其中环E为
Figure BDA0002391547790000133
Figure BDA0002391547790000134
优选为
Figure BDA0002391547790000135
Figure BDA0002391547790000136
在一些实施方案中，R3和R4在每次出现时各自独立地选自H、F、Cl、Br、I、-OH、甲基、乙基、丙基、甲氧基、-NH2、-N(CH3)2、-O-亚乙基-N(CH3)2。
在优选实施方案中，环E为
Figure BDA0002391547790000141
Figure BDA0002391547790000142
在一些实施方案中，本发明提供化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，其中R1为甲基、-CH2OH、
Figure BDA0002391547790000143
Figure BDA0002391547790000144
Figure BDA0002391547790000145
-C(＝O)CF3、-C(＝O)CH2CF3、-C(＝O)CH2CN、-C(＝O)OCH3、-C(＝O)OC(CH3)3、
Figure BDA0002391547790000146
Figure BDA0002391547790000147
Figure BDA0002391547790000151
Figure BDA0002391547790000152
-S(＝O)2CH2CH3、
Figure BDA0002391547790000153
-C(＝O)CH2N(CH3)2、
Figure BDA0002391547790000154
(例如
Figure BDA0002391547790000155
更优选为
Figure BDA0002391547790000156
Figure BDA0002391547790000157
其中R11为H、卤素、氨基、氰基、硝基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-10环烃基、3-10元杂环基、C6-10芳基、5-14元杂芳基、C6-12芳烷基、-C(＝O)R5、-OC(＝O)R5、-C(＝O)OR5、-OR5、-SR5、-S(＝O)R5、-S(＝O)2R5、-S(＝O)2NR5R6、-NR5R6、-C(＝O)NR5R6、-NR5-C(＝O)R6、-NR5-C(＝O)OR6、-NR5-S(＝O)2-R6、-NR5-C(＝O)-NR5R6、-C1-6亚烷基-NR5R6或-O-C1-6亚烷基-NR5R6。
在一些实施方案中，本发明提供化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，其中R1a和R1b各自独立地选自H、甲基、-CF3、乙基、-CH2CF3、-CH2CH2CF3、-CH(CH3)CF3、正丙基、异丙基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、-亚乙基-O-甲基、-CH2CN、-CH2CH2CN、-CH2CH2OH、
Figure BDA0002391547790000158
Figure BDA0002391547790000159
Figure BDA0002391547790000161
Figure BDA0002391547790000171
或者R1a和R1b连同其所连接的原子共同构成以下基团：
Figure BDA0002391547790000172
Figure BDA0002391547790000173
Figure BDA0002391547790000174
(例如
Figure BDA0002391547790000175
)、
Figure BDA0002391547790000176
Figure BDA0002391547790000177
Figure BDA0002391547790000181
在一些实施方案中，本发明提供化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，其中所述化合物具有任意下式的结构：
Figure BDA0002391547790000182
Figure BDA0002391547790000191
Figure BDA0002391547790000201
其中：
Z选自O、S(＝O)i和NR；
其余各基团如上文所定义。
在优选的实施方案中，本发明提供化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，其中所述化合物具有式(XVII)或式(XVII’)的结构：
Figure BDA0002391547790000202
其中：
R选自H和C1-6烷基；
环D为饱和或部分不饱和的3-10元杂环、C6-10芳基或5-10元杂芳环，优选为
Figure BDA0002391547790000203
Figure BDA0002391547790000204
苯环、N-甲基吡咯环、呋喃环或噻吩环；
R2选自H和C1-6烷基；
R3、R4、R7、R7’和R8在每次出现时各自独立地选自H、卤素、-NH2、-OH、C1-6烷基和-OR5；
R9和R10在每次出现时各自独立地选自H、卤素、C1-6烷基、C2-6烯基、C3-10环烃基、3-10元杂环基、C6-10芳基、5-14元杂芳基、C6-12芳烷基、-C(＝O)R5和-C1-6亚烷基-O(P＝O)(OH)2；
上述烷基、烯基、环烃基、杂环基、芳基、杂芳基、杂芳环和芳烷基在每次出现时各自任选地被一个或多个独立地选自卤素、C1-6烷基和-OR5的取代基取代；
R5和R6在每次出现时各自独立地选自H、C1-6烷基、C3-10环烃基、3-10元杂环基、C6-10芳基、5-14元杂芳基和C6-12芳烷基；
m在每次出现时各自独立地为0、1、2或3的整数；
n为0、1或2的整数。
在优选的实施方案中，R5和R6在每次出现时各自独立地选自H、甲基和乙基。
在优选的实施方案中，R3、R4、R7、R7’和R8在每次出现时各自独立地选自H、F、Cl、Br、-NH2、-OH、甲基、三氟甲基、-CH2-Ph、甲氧基、乙氧基和-CH2OCH3。
在优选的实施方案中，R9和R10在每次出现时各自独立地选自H、F、Cl、Br、甲基、乙基、正丙基、异丙基、乙烯基、环丙基、环丁基、环戊基、氧杂环丁烷基、单氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、乙酰基、-CH2CHF2、-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2CH2OCH3、-CH2-O(P＝O)(OH)2、
Figure BDA0002391547790000211
Figure BDA0002391547790000212
本发明涵盖对各个实施方案进行任意组合所得的化合物。
在一些实施方案中，本发明提供化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，其中所述化合物的结构及表征数据如下：
Figure BDA0002391547790000213
Figure BDA0002391547790000221
Figure BDA0002391547790000231
Figure BDA0002391547790000241
Figure BDA0002391547790000251
Figure BDA0002391547790000261
Figure BDA0002391547790000271
Figure BDA0002391547790000281
Figure BDA0002391547790000291
Figure BDA0002391547790000301
Figure BDA0002391547790000311
Figure BDA0002391547790000321
Figure BDA0002391547790000331
Figure BDA0002391547790000341
Figure BDA0002391547790000351
Figure BDA0002391547790000361
Figure BDA0002391547790000371
Figure BDA0002391547790000381
Figure BDA0002391547790000391
Figure BDA0002391547790000401
Figure BDA0002391547790000411
Figure BDA0002391547790000421
Figure BDA0002391547790000431
Figure BDA0002391547790000441
Figure BDA0002391547790000451
Figure BDA0002391547790000461
Figure BDA0002391547790000471
Figure BDA0002391547790000481
Figure BDA0002391547790000491
Figure BDA0002391547790000501
Figure BDA0002391547790000511
Figure BDA0002391547790000521
Figure BDA0002391547790000531
Figure BDA0002391547790000541
Figure BDA0002391547790000551
Figure BDA0002391547790000561
Figure BDA0002391547790000571
Figure BDA0002391547790000581
Figure BDA0002391547790000591
Figure BDA0002391547790000601
Figure BDA0002391547790000611
Figure BDA0002391547790000621
Figure BDA0002391547790000631
Figure BDA0002391547790000641
Figure BDA0002391547790000651
Figure BDA0002391547790000661
Figure BDA0002391547790000671
Figure BDA0002391547790000681
Figure BDA0002391547790000691
Figure BDA0002391547790000701
Figure BDA0002391547790000711
Figure BDA0002391547790000721
Figure BDA0002391547790000731
Figure BDA0002391547790000741
Figure BDA0002391547790000751
Figure BDA0002391547790000761
Figure BDA0002391547790000771
Figure BDA0002391547790000781
Figure BDA0002391547790000791
Figure BDA0002391547790000801
Figure BDA0002391547790000811
Figure BDA0002391547790000821
Figure BDA0002391547790000831
Figure BDA0002391547790000841
Figure BDA0002391547790000851
Figure BDA0002391547790000861
Figure BDA0002391547790000871
Figure BDA0002391547790000881
Figure BDA0002391547790000891
Figure BDA0002391547790000901
在一些实施方案中，本发明提供制备式(II)的化合物的方法，其包括以下步骤：
Figure BDA0002391547790000902
其中：
R2为H；
Hal1和Hal2为相同或不同的卤素，例如F、Cl、Br或I；
PG1为羧基保护基，优选为C1-6烷基；
PG2为H或氨基保护基，优选为叔丁氧羰基(Boc)；
Ra和Ra’在每次出现时各自独立地选自H和C1-6烷基；或者Ra和Ra’连同其所连接的基团共同构成5-10元环系；
其余基团如上文所定义；
各步骤的反应条件如下：
第一步：将化合物a-1与硼酸或硼酸酯在钯催化剂的催化下(优选在碱存在下)反应，得到化合物b-1；
第二步：将化合物b-1与化合物REG-1在钯催化剂的催化下(优选在碱存在下)反应，得到化合物c-1；以及
第三步：将化合物c-1与化合物REG-2反应(优选在适合的缩合剂和适合的碱的存在下反应)，得到式(II)的化合物；
或者，所述方法包括以下步骤：
Figure BDA0002391547790000911
其中各基团如上述所定义；
各步骤的反应条件如下：
第一步：将化合物a-2与化合物REG-2反应(优选在适合的缩合剂和适合的碱的存在下反应)，得到化合物b-2；
第二步：将化合物b-2与硼酸或硼酸酯在钯催化剂的催化下(优选在碱存在下)反应，得到化合物c-2；以及
第三步：将化合物c-2与化合物REG-1在钯催化剂的催化下(优选在碱存在下)反应，得到式(II)的化合物；
或者，所述方法包括以下步骤：
Figure BDA0002391547790000912
其中各基团如上述所定义；
各步骤的反应条件如下：
第一步：将化合物a-1与硼酸或硼酸酯在钯催化剂的催化下(优选在碱存在下)反应，得到化合物b-1；
第二步：将化合物b-1在与PG1对应的条件下脱保护，得到化合物c-3；
第三步：将化合物c-3与化合物REG-2反应(优选在适合的缩合剂和适合的碱的存在下反应)，得到化合物d-3；以及
第四步：将化合物d-3与化合物REG-1在钯催化剂的催化下(优选在碱存在下)反应，得到式(II)的化合物。
在一些实施方案中，本发明提供制备式(XII)的化合物的方法，其包括以下步骤：
Figure BDA0002391547790000913
其中：
R2为H；
Hal1和Hal2为相同或不同的卤素，例如F、Cl、Br或I；
PG1为羧基保护基，优选为C1-6烷基；
PG2为H或氨基保护基，优选为叔丁氧羰基(Boc)；
Ra和Ra’在每次出现时各自独立地选自H和C1-6烷基；或者Ra和Ra’连同其所连接的基团共同构成5-10元环系；
其余基团如上文所定义；
各步骤的反应条件如下：
第一步：将化合物a-1与硼酸或硼酸酯在钯催化剂的催化下(优选在碱存在下)反应，得到化合物b-1；
第二步：将化合物b-1与化合物REG-1’在钯催化剂的催化下(优选在碱存在下)反应，得到化合物c-1’；以及
第三步：将化合物c-1’与化合物REG-2’反应(优选在适合的缩合剂和适合的碱的存在下反应)，得到式(XII)的化合物。
在一些实施方案中，本发明提供制备式(XIII)的化合物的方法，其包括以下步骤：
Figure BDA0002391547790000921
其中：
R2为H；
Hal1和Hal2为相同或不同的卤素，例如F、Cl、Br或I；
pG1为羧基保护基，优选为C1-6烷基；
pG2为H或氨基保护基，优选为叔丁氧羰基(Boc)；
Ra和Ra’在每次出现时各自独立地选自H和C1-6烷基；或者Ra和Ra’连同其所连接的基团共同构成5-10元环系；
其余基团如上文所定义；
各步骤的反应条件如下：
第一步：将化合物a-1与硼酸或硼酸酯在钯催化剂的催化下(优选在碱存在下)反应，得到化合物b-1；
第二步：将化合物b-1与化合物REG-1在钯催化剂的催化下(优选在碱存在下)反应，得到化合物c-1；以及
第三步：将化合物c-1与化合物REG-2’反应(优选在适合的缩合剂和适合的碱的存在下反应)，得到式(XIII)的化合物。
在一些实施方案中，本发明提供制备式(XIV)的化合物的方法，其包括以下步骤：
Figure BDA0002391547790000922
其中：
R2为H；
Hal1和Hal2为相同或不同的卤素，例如F、Cl、Br或I；
PG1为羧基保护基，优选为C1-6烷基；
pG2为H或氨基保护基，优选为叔丁氧羰基(Boc)；
Ra和Ra’在每次出现时各自独立地选自H和C1-6烷基；或者Ra和Ra’连同其所连接的基团共同构成5-10元环系；
其余基团如上文所定义；
各步骤的反应条件如下：
第一步：将化合物a-1与硼酸或硼酸酯在钯催化剂的催化下(优选在碱存在下)反应，得到化合物b-1；
第二步：将化合物b-1与化合物REG-1’在钯催化剂的催化下(优选在碱存在下)反应，得到化合物c-1’；以及
第三步：将化合物c-1’与化合物REG-2反应(优选在适合的缩合剂和适合的碱的存在下反应)，得到式(XIV)的化合物；
或者，所述方法包括以下步骤：
Figure BDA0002391547790000923
其中各基团如上述所定义；
各步骤的反应条件如下：
第一步：将化合物a-2与化合物REG-2反应(优选在适合的缩合剂和适合的碱的存在下反应)，得到化合物b-2；
第二步：将化合物b-2与硼酸或硼酸酯在钯催化剂的催化下(优选在碱存在下)反应，得到化合物c-2；以及
第三步：将化合物c-2与化合物REG-1’在钯催化剂的催化下(优选在碱存在下)反应，得到式(XIV)的化合物；
或者，所述方法包括以下步骤：
Figure BDA0002391547790000931
其中各基团如上述所定义；
各步骤的反应条件如下：
第一步：将化合物a-1与硼酸或硼酸酯在钯催化剂的催化下(优选在碱存在下)反应，得到化合物b-1；
第二步：将化合物b-1在与PG1对应的条件下脱保护，得到化合物c-3；
第三步：将化合物c-3与化合物REG-2反应(优选在适合的缩合剂和适合的碱的存在下反应)，得到化合物d-3；以及
第四步：将化合物d-3与化合物REG-1’在钯催化剂的催化下(优选在碱存在下)反应，得到式(XIV)的化合物。
在优选的实施方案中，所述硼酸或硼酸酯例如双联频哪醇硼酸酯。
在优选的实施方案中，所述钯催化剂例如Pd(dppf)Cl2、Pd(PPh3)4、Pd(OAc)2或Pd(PPh3)2Cl2。
在优选的实施方案中，所述缩合剂例如DCC、EDCI、HATU、PyBOP。
在优选的实施方案中，所述适合的碱例如二异丙基乙胺、三乙胺、吡啶、碳酸钠、乙酸钾、碳酸钾、氢氧化钾、碳酸铯。
药物组合物和治疗方法
在一些实施方案中，本发明提供药物组合物，其包含预防或治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药以及一种或多种药学上可接受的载体，所述药物组合物优选为固体制剂、半固体制剂、液体制剂或气态制剂。在一些实施方案中，所述药物组合物还可包含一种或多种其它治疗剂。
在一些实施方案中，本发明提供本发明的化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药或者本发明的药物组合物在制备用作Rho相关蛋白激酶(ROCK)抑制剂，优选选择性ROCK2抑制剂的药物中的用途。
在一些实施方案中，本发明提供本发明的化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药或者本发明的药物组合物，其用作Rho相关蛋白激酶(ROCK)抑制剂，优选选择性ROCK2抑制剂。
在一些实施方案中，本发明提供预防或治疗Rho相关蛋白激酶(ROCK)介导的疾病的方法，所述方法包括向需要其的个体给药有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药或者本发明的药物组合物。
在一些实施方案中，所述Rho相关蛋白激酶(ROCK)介导的疾病包括自身免疫性疾病(其包括类风湿性关节炎、全身性红斑狼疮(SLE；狼疮)、银屑病、克罗恩病、特应性皮炎、湿疹或移植物抗宿主病(GVHD))；心血管病症(其包括高血压、动脉粥样硬化、再狭窄、心脏肥大、脑缺血、脑血管痉挛或***功能障碍)；炎症(其包括哮喘、心血管炎症、溃疡性结肠炎或肾脏炎症)；中枢神经***病症(其包括神经元变性或脊髓损伤；所述中枢神经***病症优选为亨延顿氏病、帕金森氏病、阿尔茨海默病、肌萎缩性脊髓侧索硬化症(ALS)或多发性硬化症)；动脉血栓性病症(其包括血小板聚集或白细胞聚集)；纤维化病症(其包括肝纤维化、肺纤维化或肾纤维化)；瘤性疾病(其包括淋巴瘤、癌(例如鳞状细胞癌、小细胞肺癌、垂体癌、食道癌、非小细胞肺癌、肺腺癌、肺鳞癌、腹膜癌、肝细胞癌、胃肠癌、胰腺癌、胶质母细胞瘤、***、卵巢癌、膀胱癌、肝癌、乳腺癌、结肠癌、结直肠癌、子宫内膜癌或子宫癌、唾液腺癌、肾癌、***癌、外阴癌、甲状腺癌、脑癌、子宫内膜癌、睾丸癌、胆管癌、胆囊癌、胃癌、黑色素瘤或头颈部癌症)、白血病、星形细胞瘤、软组织肉瘤、肉瘤或母细胞瘤)；代谢综合征；胰岛素抗性；高胰岛素血症；2型糖尿病；葡萄糖耐受不良；骨质疏松症；眼部病症(其包括高眼压、年龄相关性黄斑变性(AMD)、脉络膜新生血管形成(CNV)、糖尿病性黄斑水肿(DME)、虹膜新生血管形成、葡萄膜炎、青光眼(其包括原发性开角型青光眼、急性闭角型青光眼、色素性青光眼、先天性青光眼、正常张力青光眼、继发青光眼或新生血管性青光眼)或早产儿视网膜病变(ROP))。
在一些实施方案中，所述Rho相关蛋白激酶(ROCK)介导的疾病包括狼疮肾炎、动脉粥样硬化、类风湿性关节炎(RA)、血管瘤、血管纤维瘤、肺纤维化、银屑病、角膜移植排斥、胰岛素依赖型糖尿病、多发性硬化症、重症肌无力、克罗恩病、自身免疫性肾炎、原发性胆汁性肝硬化、急性胰腺炎、异体排异、过敏性炎症、接触性皮炎、迟发型超敏反应、炎症性肠病、感染性休克、骨质疏松、骨关节炎、神经元炎症、Osler-Weber综合征、再狭窄、真菌感染、寄生虫感染和病毒感染。
本发明中“药学上可接受的载体”是指与治疗剂一同给药的稀释剂、辅剂、赋形剂或媒介物，并且其在合理的医学判断的范围内适于接触人类和/或其它动物的组织而没有过度的毒性、刺激、过敏反应或与合理的益处/风险比相应的其它问题或并发症。
在本发明的药物组合物中可使用的药学上可接受的载体包括但不限于无菌液体，例如水和油，包括那些石油、动物、植物或合成来源的油，例如花生油、大豆油、矿物油、芝麻油等。当所述药物组合物通过静脉内给药时，水是示例性载体。还可以使用生理盐水和葡萄糖及甘油水溶液作为液体载体，特别是用于注射液。适合的药物赋形剂包括淀粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明胶、麦芽糖、白垩、硅胶、硬脂酸钠、单硬脂酸甘油酯、滑石、氯化钠、脱脂奶粉、甘油、丙二醇、水、乙醇等。所述组合物还可以视需要包含少量的湿润剂、乳化剂或pH缓冲剂。口服制剂可以包含标准载体，如药物级的甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、糖精钠、纤维素、碳酸镁等。适合的药学上可接受的载体的实例如在Remington’s PharmaceuticalSciences(1990)中所述。
本发明的药物组合物可以***地作用和/或局部地作用。为此目的，它们可以适合的途径给药，例如通过注射(如静脉内、动脉内、皮下、腹膜内、肌内注射，包括滴注)或经皮给药；或通过口服、含服、经鼻、透粘膜、局部、以眼用制剂的形式或通过吸入给药。
对于这些给药途径，可以适合的剂型给药本发明的药物组合物。
所述剂型包括但不限于片剂、胶囊剂、锭剂、硬糖剂、散剂、喷雾剂、乳膏剂、软膏剂、栓剂、凝胶剂、糊剂、洗剂、软膏剂、水性混悬剂、可注射溶液剂、酏剂、糖浆剂。
如本文中所使用的术语“有效量”指被给药后会在一定程度上缓解所治疗病症的一或多种症状的化合物的量。
可调整给药方案以提供最佳所需响应。例如，可给药单次推注，可随时间给药数个分剂量，或可如治疗情况的急需所表明而按比例减少或增加剂量。要注意，剂量值可随要减轻的病况的类型及严重性而变化，且可包括单次或多次剂量。要进一步理解，对于任何特定个体，具体的给药方案应根据个体需要及给药组合物或监督组合物的给药的人员的专业判断来随时间调整。
所给药的本发明的化合物的量会取决于所治疗的个体、病症或病况的严重性、给药的速率、化合物的处置及处方医师的判断。一般而言，有效剂量在每日每kg体重约0.0001至约50mg，例如约0.01至约10mg/kg/日(单次或分次给药)。对70kg的人而言，这会合计为约0.007mg/日至约3500mg/日，例如约0.7mg/日至约700mg/日。在一些情况下，不高于前述范围的下限的剂量水平可以是足够的，而在其它情况下，仍可在不引起任何有害副作用的情况下采用较大剂量，条件是首先将所述较大剂量分成数个较小剂量以在一整天中给药。
本发明的化合物在药物组合物中的含量或用量可以是约0.01mg至约1000mg，适合地是0.1-500mg，优选0.5-300mg，更优选1-150mg，特别优选1-50mg，例如1.5mg、2mg、4mg、10mg、25mg等。
除非另外说明，否则如本文中所使用，术语“治疗(treating)”意指逆转、减轻、抑制这样的术语所应用的病症或病况或者这样的病症或病况的一或多种症状的进展，或预防这样的病症或病况或者这样的病症或病况的一或多种症状。
如本文所使用的“个体”包括人或非人动物。示例性人个体包括患有疾病(例如本文所述的疾病)的人个体(称为患者)或正常个体。本发明中“非人动物”包括所有脊椎动物，例如非哺乳动物(例如鸟类、两栖动物、爬行动物)和哺乳动物，例如非人灵长类、家畜和/或驯化动物(例如绵羊、犬、猫、奶牛、猪等)。
在一些实施方案中，本发明的药物组合物还可以包含一种或多种另外的治疗剂或预防剂。
实施例
以下结合实施例进一步描述本发明，但提供这些实施例并非意在限制本发明的范围。
化合物的结构通过核磁共振波谱(1H NMR)或质谱(MS)进行确证。
化学位移(δ)以百万分之一(ppm)为单位给出。1HNMR的测定在Bruker BioSpinGmbH 400核磁仪上进行，测试溶剂为氘代甲醇(CD3OD)、氘代氯仿(CDCl3)或六氘代二甲基亚砜(DMSO-d6)，内标为四甲基硅烷(TMS)。
LC-MS的测定在岛津LC-MS-2020液质联用仪(生产商：岛津，型号：岛津LC-MS-2020)上进行。
制备高效液相色谱法使用waters 2767(waters sunfire，C18，19×250mm10um色谱柱)进行。
薄层色谱法(TLC)使用黄海牌HSGF 254(5×20cm)硅胶板进行，薄层制备色谱法采用规格为烟台产GF 254(0.4～0.5nm)硅胶板进行。
采用薄层色谱法(TLC)或LC-MS检测反应，使用的展开剂体系包括二氯甲烷和甲醇体系、正己烷和乙酸乙酯体系以及石油醚和乙酸乙酯体系，根据要分离的化合物的极性不同对展开剂体系进行调节(通过调节溶剂的体积比或者加入三乙胺等进行)。
微波反应使用BiotageInitiator+(400W，RT～300℃)微波反应器。
柱色谱法一般使用于成化工200～300目硅胶为固定相。洗脱剂的体系包括二氯甲烷和甲醇体系和正己烷和乙酸乙酯体系，根据要分离的化合物的极性不同对洗脱剂体系进行调节(通过调节溶剂的体积比或者加入三乙胺等进行)。
如在实施例中无特殊说明，反应的温度为室温(20℃～30℃)。
实施例中所使用的试剂购自Acros Organics、Aldrich Chemical Company或上海毕得医药科技有限公司等公司。
本发明中的缩写具有以下含义：
Figure BDA0002391547790000951
Figure BDA0002391547790000961
中间体的制备
中间体实施例1
Figure BDA0002391547790000971
第一步：
在1L烧瓶中加入化合物Reg-1-1-a(26g，159.38mmol)和四氢呋喃(400mL)，加入三乙胺(45mL，324.6mmol)和4-二甲氨基吡啶(2.92g，23.91mmol)，然后缓慢向其中滴入Boc2O(41.74g，191.25mmol)，室温下反应过夜。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)分析显示反应完全。将反应液浓缩得到粗品，将粗品溶解在二氯甲烷(400mL)中，将有机相再用0.5M的稀盐酸水溶液洗三次。将有机相再用饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到化合物Reg-1-1-b(39g，棕色固体，产率：92.95％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 8.70(d，J＝2.1Hz，1H)，8.42(dd，J＝9.1，2.1Hz，1H)，8.34(d，J＝9.6Hz，2H)，1.75(s，9H).MS m/z(ESI)：164.2[M-Boc+H]。
第二步：
将化合物Reg-1-1-b(38g，144.35mmol)溶于甲醇中(700mL)中，加入Pd/C(3.8g，10％水)，氢气换气3次，置于氢气氛围下反应过夜。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)分析显示反应完全。将反应液用硅藻土过滤得到化合物Reg-1-1-c(33.2g，棕色固体，产率：98.6％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.97(d，J＝10.8Hz，2H)，7.00-6.87(m，2H)，3.74(s，2H)，1.71(s，9H).
第三步：
将化合物Reg-1-1-c(4g，17.14mmol)和2，4-二氯嘧啶(5.1g，34.28mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(60mL)中，加入二异丙基乙胺(11.08g，85.8mmol)，置于80℃油浴中反应过夜。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝2∶1)分析显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩得到粗品，将粗品经制备色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝100∶1～1.5∶1)分离得到化合物Reg-1-1(3g，黄色固体，产率：50.60％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.50-9.23(m，1H)，8.52-7.91(m，4H)，7.89-7.45(m，1H)，7.28-6.51(m，1H)，1.73(s，9H).MS m/z(ESI)：346.1[M+H]。
以与中间体实施例1中所述类似方法制备以下中间体：
Figure BDA0002391547790000972
Figure BDA0002391547790000981
Figure BDA0002391547790000991
Figure BDA0002391547790001001
*在用于合成Reg-1-10路线第三步中涉及的试剂通过以下反应制备：
Figure BDA0002391547790001002
将化合物Reg-1-10-1(1.0g，5.32mmol)、苯硼酸(972.79mg，7.98mmol)和吡啶(2.52g，31.86mmol)溶于二氯甲烷(30mL)中，然后加入醋酸铜(0.966g，4.99mmol)和分子筛(0.5g)，然后在氧气氛围中反应12h。LC-MS显示反应完全。将反应液过滤，滤液减压浓缩得到粗品，将粗品经中压制备柱(石油醚∶乙酸乙酯＝100∶1～3∶1)分离纯化得到化合物Reg-1-10-2(0.9g，白色固体，产率：64.07％)。MS m/z(ESI)：264.0[M+H]。
中间体实施例2
Figure BDA0002391547790001003
第一步：
在100mL烧瓶中加入化合物Reg-1-16-a(4.5g，2.58mmol)和二氯甲烷(200mL)，加入二异丙基乙胺(5.99g，46.38mmol)和4-二甲氨基吡啶(424mg，3.48mmol)，然后缓慢向其中滴入Boc2O(7.59g，34.79mmol)，在室温下反应过夜。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)分析显示反应完全。将反应液浓缩得到粗品，将粗品溶解在二氯甲烷(100mL)中，将有机相再用0.5M的稀盐酸水溶液洗三次。将有机相再用饱和食盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到化合物Reg-1-16-b(6.8g，无色油状物，产率：99.68％)。MS m/z(ESI)：195.2[M-Boc+H]。
第二步：
将化合物Reg-1-16-b(6.8g，23.12mmol)和1-溴-4-硝基苯(7.0g，34.68mmol)溶于1，4-二氧六环/水(4∶1)的混合液(200mL)中，加入碳酸钾(9.58g，69.35mmol)及Pd(dppf)Cl2(0.9g，1.16mmol)，氩气换气3次，置于80℃油浴中反应过夜。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，过滤，减压浓缩，得到化合物Reg-1-16-c(12g，棕色固体)。将粗品直接用于下一步反应。MS m/z(ESI)：190.1[M+H]。
第三步：
在250mL烧瓶中加入化合物Reg-1-16-c(4.5g，2.58mmol)和二氯甲烷(200mL)，加入二异丙基乙胺(8.54mL，52.86mmol)和4-二甲氨基吡啶(484mg，3.96mmol)，然后缓慢向其中滴入BOC2O(8.65g，39.65mmol)，在室温下反应过夜。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)分析显示反应完全。将反应液浓缩得到粗品，将粗品经快速柱色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝100∶1到1.5∶1)纯化得到化合物Reg-1-16-d(6g，淡黄色油状物，产率：78.47％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 8.44(s，1H)，8.27(d，J＝8.8Hz，2H)，8.06(s，1H)，7.69(d，J＝8.8Hz，2H)，1.34-1.12(m，9H).MS m/z(ESI)：190.2[M-Boc+H]。
第四步：
将化合物Reg-1-16-d(6g，20mmol)溶于甲醇中(100mL)中，加入Pd/C(10％水)，氢气换气3次，置于氢气氛围下反应过夜。LC-MS显示反应完全。将反应液通过硅藻土过滤，浓缩得到化合物Reg-1-16-e(5g，白色固体，产率：92.97％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.74(s，1H)，7.49(s，1H)，6.89-6.82(m，2H)，6.25(d，J＝8.8Hz，2H)，1.43-1.08(m，9H).MS m/z(ESI)：260.2[M+H]。
第五步：
将化合物Reg-1-16-e(3.8g，14.65mmol)和2，4-二氯嘧啶(4.37g，29.31 mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(30mL)中，加入二异丙基乙胺(7.22mL，43.98mmol)，在80℃油浴中反应8h。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩得到粗品，将粗品经制备色谱法(二氯甲烷/甲醇＝100∶1～100∶5)分离得到化合物Reg-1-16(2.2g，黄色固体，产率：54.80％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 8.31(s，1H)，8.16(d，J＝5.9Hz，1H)，7.99(s，1H)，7.57(d，J＝8.4Hz，2H)，7.38(d，J＝8.4Hz，2H)，6.98(s，1H)，6.62(d，J＝5.9Hz，1H)，1.69(s，9H).MS m/z(ESI)：372.1[M+H]。
以与中间体实施例2中所述类似方法制备以下中间体：
Figure BDA0002391547790001011
中间体实施例3
Figure BDA0002391547790001012
将化合物Reg-1-17-a(650mg，4.30mmol)和2，4-二氯嘧啶(1.28g，8.60mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中，加入二异丙基乙胺(2.22g，17.2mmol)，在80℃油浴中反应过夜。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1)分析显示反应完全。将反应液冷却至室温，用乙酸乙酯(80mL)稀释，依次用饱和氯化铵水溶液(80mL x 2)和饱和食盐水(100mL x2)洗涤，将有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，将粗品用柱色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1，4∶1到2∶1)分离纯化得到化合物Reg-1-17(480mg，黄色固体，产率：42.5％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 13.20(s，1H)，9.75(s，1H)，8.21-8.06(m，2H)，7.98(d，J＝7.6Hz，1H)，7.50(d，J＝12.0Hz，1H)，6.67(s，1H).
以与中间体实施例3中所述类似方法制备以下中间体：
Figure BDA0002391547790001021
中间体实施例4
Figure BDA0002391547790001031
将化合物Reg-3-a(3g，15.63mmol)、2-(二甲基氨基)乙醇(1.7g，19.11mmol)和三苯基膦(5.01g19.11mmol)溶于四氢呋喃(200mL)中，0℃下加入偶氮二甲酸二异丙酯(4.83g，23.89mmol)，氩气换气3次，在室温下反应6小时。LC-MS检测显示反应完全。向反应液中加入200mL乙酸乙酯；将有机相用水(100mL x 3)洗涤，干燥，减压浓缩，将残留物通过柱色谱法(二氯甲烷∶甲醇＝100∶1～20∶1)纯化得到化合物Reg-3(3g，棕色固体，收率72.55％)。MS m/z(ESI)：259.0[M+H]。
中间体实施例5
Figure BDA0002391547790001032
将化合物2，4-二氯-5-(三氟甲基)嘧啶(3g，13.825mmol)和N，N-二异丙基乙胺(2.14g，16.59mmol)溶于异丙醇(100mL)中，再将化合物Reg-1-1-c(3.2g，13.825mmol)分批加入上述溶液中，反应液在室温下反应16小时。LC-MS显示反应完全，将反应液过滤，将滤饼用异丙醇润洗一次后得到化合物Reg-1-24(2.3g，粉红色固体，收率：40.19％)；将滤液用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后浓缩至干得化合物Reg-1-23(1.84g，暗红色固体，收率：32.15％)。化合物表征数据如下：
Figure BDA0002391547790001033
中间体实施例6
Figure BDA0002391547790001034
将化合物Reg-1-20(0.8g，3.09mmol)溶于二氯甲烷(100mL)中，加入DIEA(1.59g，12.36mmol)和DMAP(188mg，1.55mmol)，室温搅拌十分钟后加入Boc2O(2.02g，9.27mmol)，室温反应3小时。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝2∶1)显示反应完全。将反应液用二氯甲烷(400mL)溶解，依次用水(250mL x 3)和饱和食盐水(250mL)洗涤，将有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，将残留物通过柱色谱法分离(石油醚∶乙酸乙酯＝1∶0到5∶1)进行纯化，得到化合物Reg-1-25(2.01g，白色固体)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 8.45(d，J＝5.6Hz，1H)，8.15(d，J＝8.8Hz，1H)，7.96(d，J＝5.6Hz，1H)，7.41(d，J＝1.6Hz，1H)，7.29(d，J＝1.6Hz，1H)，2.59(s，3H)，1.74(s，9H)，1.41(s，9H).MS m/z(ESI)：460.3[M+H]。
以与中间体实施例6中所述类似方法制备以下中间体：
Figure BDA0002391547790001035
Figure BDA0002391547790001041
中间体实施例7
Figure BDA0002391547790001042
第一步：
向250mL单口瓶中加入Reg-1-29-a(6.7g，30.612mmol)和Reg-1-16-b(6.0g，20.408mmol)溶于二氧六环与水(4∶1)的混合液(84mL)中，加入碳酸钾(11.28g，81.59mmol)及[1，1’-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯二氯甲烷络合物(833mg，1.020mmol)，氩气换气3次，置于70℃油浴中反应3小时。冷却至室温，加入水(50mL)，用乙酸乙酯萃取3次(150mL)，将有机相用硫酸钠干燥，过滤，旋干并直接用于下一步反应。MS m/z(ESI)：208.2[M+H]。
第二步：
将Reg-1-29-b(4.58g，22.126mmol)在二氯甲烷(50mL)中溶解，加入DMAP(270mg，2.213mmol)和DIEA(5.7g，44.251mmol)，然后缓慢向其中滴入Boc2O(5.79g，26.551mmol)，在室温下反应过夜。反应完全后，将反应液减压浓缩得到粗品，将粗品经中压制备色谱法分离得到Reg-1-29-c(3.6g，黄色固体，产率：53.04％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.44(s，1H)，8.17-8.10(m，1H)，8.03(s，1H)，7.43(dt，J＝6.5，2.1Hz，2H)，1.69(s，9H).MS m/z(ESI)：206.1[M-Boc-H]。
第三步：
向250mL单口瓶中加入Reg-1-29-c(3.6g，11.726mmol)和甲醇(100mL)，然后加入Pd/C(10wt％，360mg)，置于氢气氛围下反应过夜。薄层色谱法检测显示反应完全后，将反应液用硅藻土过滤得到Reg-1-29-d(3.0g，棕色油状物，产率：92.36％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 8.17(s，1H)，7.89(s，1H)，7.18-7.08(m，2H)，6.82-6.75(m，1H)，1.67(s，9H).MS m/z(ESI)：178.3[M-Boc+H]。
第四步：
将Reg-1-29-d(3.3g，12.74mmol)和2，4-二氯嘧啶(3.8g，25.48mmol)溶于DMF(60mL)中，加入DIEA(4.93g，38.22mmol)，置于120℃油浴中反应过夜。薄层色谱法检测显示反应完全。将反应液冷却至室温，加水(30mL)，用乙酸乙酯萃取(150mL)，将有机相用硫酸钠干燥，过滤，旋干得到粗品，将粗品经柱色谱法分离得到Reg-1-29(1g，黄色固体，产率：29.52％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.04(s，1H)，9.78(s，1H)，8.33-7.96(m，3H)，7.79-7.57(m，2H)，7.48(dd，J＝8.3，1.5Hz，1H)，6.75(d，J＝5.3Hz，1H).MS m/z(ESI)：290.0[M+H]。
以与中间体实施例7中所述类似方法制备以下中间体：
Figure BDA0002391547790001043
Figure BDA0002391547790001051
中间体实施例8
Figure BDA0002391547790001052
将化合物Reg-1-30(2.0g，5.26mmol)在无水乙醇(20mL)中溶解，加入二甲氨基乙醇(468mg，5.26mmol)和DIPEA(905mg，5.26mmol)。将所得的混合物加热至90℃，在该温度下反应过夜。LC-MS显示原料反应完全。将反应液减压浓缩，向残留物中加入乙酸乙酯(40mL)和水(40mL)，分离有机层，减压蒸除溶剂后得到Reg-1-31。MS m/z(ESI)：432.9[M+H]。
以与中间体实施例8中所述类似方法制备以下中间体：
Figure BDA0002391547790001053
中间体实施例9
Figure BDA0002391547790001054
第一步：
将TDI01314-1-a(8.00g，37.20mmol)和2-(氯甲基)环氧乙烷(6.88g，74.40mmol)溶于乙腈(200mL)中，加入碳酸钾(15.42g，111.60mmol)，并于80℃下反应过夜。薄层色谱法检测显示反应完全。将反应液减压浓缩，将粗品用快速柱色谱法分离纯化得到TDI01314-1-b(6g，白色固体，产率：59.49％)。MS m/z(ESI)：271.1；273.1[M+H]。
第二步：
将TDI01314-1-b(6g，22.13mmol)溶于二氯甲烷中(100mL)中，加入间氯过氧苯甲酸(7.64g，44.26mmol)，在40℃下反应8小时。薄层色谱法检测显示反应完全。将反应液冷却至室温，加入饱和亚硫酸钠溶液，搅拌半小时。有白色固体析出，过滤，将有机相浓缩，将粗品用柱色谱法分离纯化得到TDI01314-1-c(3g，白色固体，产率：47.21％)。MS m/z(ESI)：287.1；289.1[M+H]。
第三步：
将TDI01314-1-c(3g，10.45mmol)溶于四氢呋喃(100mL)和水(10mL)中，加入氢氧化钠(835.85mg，20.90mmol)，常温反应过夜。薄层色谱法检测显示反应完全。将反应液用乙酸乙酯萃取，减压浓缩，将残留物通过柱色谱法分离纯化，得到TDI01314-1-d(2g，无色油状物，产率：78.1％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.06(dd，J＝11.2，2.3Hz，1H)，6.95(dd，J＝8.6，2.3Hz，1H)，6.75(d，J＝8.6Hz，1H)，4.33-4.22(m，2H)，4.14-4.05(m，1H)，3.95-3.79(m，2H)。
第四步：
将TDI01314-1-d(2g，8.16mmol)加入水(100mL)中，然后加入碳酸钾(2.26g，16.32mmol)和高锰酸钾(2.58g，16.32mmol)，常温反应12小时。LC-MS检测显示反应完全。将反应液过滤，滤液浓缩得到粗品，用柱色谱法分离纯化得到TDI01314-1(1g，白色固体，产率：47.3％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.16(d，J＝2.3Hz，1H)，6.99(dd，J＝8.7，2.3Hz，1H)，6.76(d，J＝8.6Hz，1H)，4.88(dd，J＝4.3，3.0Hz，1H)，4.44(dd，J＝11.5，4.4Hz，1H)，4.36(dd，J＝11.5，2.9Hz，1H).
中间体实施例10
Figure BDA0002391547790001061
将化合物Reg-1-38-a(320mg，1.24mmol)和2，4-二氯嘧啶(221mg，1.48mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中，加入二异丙基乙胺(638mg，4.94mmol)，将反应液缓慢升温至80℃并在此温度下反应16小时。薄层色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝2∶1)显示反应完全。将反应液用乙酸乙酯(250mL)溶解，依次用水(250mL x 2)和饱和食盐水(250mL)洗涤，将有机相用无水硫酸钠干燥，浓缩，将粗品直接用于下一步反应。
将上一步中获得的粗品溶于二氯甲烷(20mL)中，加入二异丙基乙胺(417mg，3.24mmol)和4-二甲氨基吡啶(99mg，0.81mmol)，在室温下搅拌十分钟，然后加入二碳酸二叔丁酯(705mg，3.24mmol)，室温下反应3小时。薄层色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝2∶1)显示反应完全。将反应液用二氯甲烷(400mL)溶解，依次用水(250mL x 2)和饱和食盐水(250mL)洗涤，将有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，将残留物通过柱色谱法分离(石油醚∶二氯甲烷＝100∶1到0∶1)进行纯化，得到化合物Reg-1-38(400mg，淡黄色油状物)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 8.44(d，J＝5.6Hz，1H)，8.31(s，1H)，7.99(s，1H)，7.90(d，J＝5.6Hz，1H)，7.73(dd，J＝5.6，3.2Hz，1H)，7.53(dd，J＝5.6，3.2Hz，3H)，7.08(d，J＝7.6Hz，1H)，1.68(s，9H)，1.43(s，9H).MS m/z(ESI)：472.3[M+H]。
中间体实施例11
Figure BDA0002391547790001071
第一步：
将化合物Reg-1-39-1(15g，68mmol)、3-氟-4-溴硝基苯(24.2g，82mmol)和碳酸钾(28g，204mmol)混合于1，4-二氧六环(500mL)与水(50mL)的混合溶剂中，以N2置换3次后加入Pd(dppf)Cl2(10g，13.6mmol)，再次以N2置换3次后将反应液加热至回流反应16小时。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，过滤以除掉盐杂质，滤液减压浓缩，将粗品经硅胶柱色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1～1∶3)分离得到化合物Reg-1-39-2(10g，棕色固体，产率：71.7％)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ13.40(s，1H)，8.42(s，1H)，8.29-7.95(m，4H).MS m/z(ESI)：207.8[M+H]。
第二步：
将化合物Reg-1-39-2(10g，48mmol)和Pd/C(10g，10％)混合于异丙醇(50mL)和四氢呋喃(50mL)中，用氢气置换3次，将反应物置于室温中在氢气氛围下反应过夜。LC-MS显示反应完全。过滤，以四氢呋喃(200mL)反复洗涤滤饼，滤液合并后减压浓缩得到化合物Reg-1-39-3(8g，棕色固体，产率：94％)。
1H NMR(301 MHz，DMSO-d6)δ 12.84(s，1H)，7.89(s，1H)，7.73(s，1H)，7.32(t，J＝8.8Hz，1H)，6.38(t，J＝9.2Hz，2H)，5.35(s，2H).MS m/z(ESI)：178.0[M+H]。
第三步：
将化合物Reg-1-39-3(8g，45mmol)、2，4-二氯嘧啶(6.69g，45mmol)和DIPEA(17.42g，135mmol)溶于DMF(160 mL)中并加热至80℃反应过夜。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩，将粗品经硅胶柱色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1～1∶3)分离得到化合物Reg-1-39-4(4.8g，黄色固体，产率：36.9％)。
1H NMR(301MHz，DMSO-d6)δ 10.22(s，1H)，8.20(d，J＝5.9Hz，1H)，8.01(s，2H)，7.73-7.66(m，2H)，7.36(dd，J＝8.5，2.1Hz，1H)，6.80(d，J＝5.9Hz，1H).MS m/z(ESI)：289.8，291.7[M+H，Cl].
第四步：
将化合物Reg-1-39-4(4.8g，16.6mmol)和Boc2O(5.07g，23mmol)溶于DMF(50mL)中，加入DIPEA(6.4g，49.8mmol)和DMAP(0.203g，1.66mmol)，使反应在室温下搅拌过夜。LC-MS显示反应完全。减压浓缩，将粗品经快速色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1～1∶3)分离得到化合物Reg-1-39(4.6g，黄色固体，产率：71.3％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.30(s，1H)，8.54(d，J＝1.1Hz，1H)，8.27-8.22(m，2H)，7.85(t，J＝8.7Hz，1H)，7.75(dd，J＝13.7，1.9Hz，1H)，7.41(dd，J＝8.6，2.0Hz，1H)，6.82(d，J＝5.9Hz，1H)，1.61(s，9H).MS m/z(ESI)：389.6，391.6[M+H，Cl]。
以与中间体实施例11中所述类似方法制备以下中间体：
Figure BDA0002391547790001072
Figure BDA0002391547790001081
Figure BDA0002391547790001091
Figure BDA0002391547790001101
中间体实施例12
Figure BDA0002391547790001102
第一步：
将化合物Reg-1-51-1(50mg，0.27mmol)、4-(1H-吡唑-4-基)苯胺(43.4mg，0.27mmol)溶于乙醇(3mL)中，加入N，N-二异丙基乙胺(0.07mL，0.4mmol)，反应液加热至90℃反应16小时。LC-MS显示反应完全，将反应液冷却至室温，真空旋蒸移除反应溶剂得到粗品化合物Reg-1-51-2(100mg)。
MS m/z(ESI)：305.8[M+H]。
第二步：
将化合物Reg-1-51-2(100mg，0.27mmol)溶于乙醇(50mL)，加入2-(二甲氨基)乙醇(24mg，0.27mmol)，将反应液加热至90℃搅拌过夜。LC-MS显示反应完全，真空旋蒸移除反应溶剂得到化合物Reg-1-51-3(150mg，粗品)。
MS m/z(ESI)：358.8[M+H]。
第三步：
将化合物Reg-1-51-3(150mg，0.418mmol)溶于二氯甲烷(5mL)，分别加入BOC酸酐(228mg，1.045mmol)、三乙胺(0.2mL，1.254mmol)和4-二甲氨基吡啶(5mg，0.042mmol)，反应液在室温下搅拌16小时。LC-MS检测显示反应完成，真空旋蒸移除反应溶剂。残留物通过硅胶制备板(石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1)进行纯化，得到化合物Reg-1-51(80mg，41.7％收率)。
MS m/z(ESI)：458.7[M+H]。
中间体实施例13
Figure BDA0002391547790001103
第一步：
将化合物Reg-1-52-1(1.02g，5mmol)和1-Boc-吡唑-4-硼酸频哪醇酯(1.47g，5mmol)溶于1，4-二氧六环∶水(40∶4mL)中，加入碳酸钾(2.07g，15mmol)，氮气置换三次。加入Pd(dppf)Cl2(0.366g，0.5mmol)，氮气置换三次，反应液在85℃下搅拌6小时。LC-MS检测显示反应完成，反应液冷却至室温，过滤，滤液真空旋蒸移除溶剂。残留物通过柱色谱法分离(石油醚∶乙酸乙酯＝1∶2到乙酸乙酯)进行纯化，得到化合物Reg-1-52-2(0.5g，34.5％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.16(s，1H)，9.13(d，J＝2.1Hz，1H)，8.61(dd，J＝8.5，2.3Hz，1H)，8.56(s，1H)，8.38(d，J＝8.5Hz，1H)，1.62(s，9H).
第二步：
将化合物Reg-1-52-2(0.5g，1.71mmol)混悬于异丙醇(20mL)中，加入Pd/C(0.5g)，氢气置换三次，反应液在常压氢气环境下室温反应过夜。LC-MS检测反应完成，反应液过滤，滤液真空旋蒸移除溶剂得到化合物Reg-1-52-3(0.4g，89％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.54(s，1H)，8.32(d，J＝2.1Hz，1H)，8.19(s，1H)，7.79-7.66(m，1H)，6.47(d，J＝8.4Hz，1H)，6.05(s，2H)，1.59(s，9H).
第三步：
将化合物Reg-1-52-3(52mg，0.2mmol)、2，4-二氯嘧啶(29.8mg，0.2mmol)、碳酸铯(130mg，0.4mmol)、Pd2(dba)3(18.3mg，0.02mmol)和Xantphos(11.6mg，0.02mmol)混和于二氧六环(2mL)中，氮气置换3次，加热至110℃反应1小时。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，过滤以除掉不溶性盐杂质，滤液减压浓缩，将粗品经硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇＝20/1)分离得化合物Reg-1-52(20mg，黄色固体，产率：26.8％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.78(s，1H)，8.80(s，1H)，8.77(d，J＝2.1Hz，1H)，8.36(d，J＝5.9Hz，1H)，8.35(s，1H)，8.18(dd，J＝8.6，2.4Hz，1H)，7.78(s，1H)，7.63(d，J＝8.5Hz，1H)，1.61(s，9H).
以与中间体实施例13中所述类似方法制备以下中间体：
Figure BDA0002391547790001111
中间体实施例14
Figure BDA0002391547790001112
第一步：
向化合物Reg-1-62-1(200mg，1.26mmol)和叔丁醇(12mL)混合物中加入2，4-二氯-5H-吡咯并[3，2-d]嘧啶(236mg，1.26mmol)和三氟乙酸(716mg，5mmol)，加热至100℃反应2小时。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩，得粗品Reg-1-62-2(800mg，黄色固体)，将其直接用于下一步反应。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.05(s，1H)，10.39(s，1H)，8.11(s，2H)，7.87(d，J＝8.7Hz，2H)，7.74(t，J＝2.9Hz，1H)，7.66(d，J＝8.7Hz，2H)，6.45(dd，J＝2.9，2.0Hz，1H).
MS m/z(ESI)：310.7[M+H，Cl]。
第二步：
将化合物Reg-1-62-2(0.8g，粗品，1.26mmol)和Boc酸酐(1.37g，6.28mmol)溶于DCM(20mL)中，加入TEA(0.95g，9.42mmol)和DMAP(0.019g，0.157mmol)，使反应在室温下搅拌过夜。LC-MS显示反应完全。减压浓缩，将粗品经快速色谱法柱色谱(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1M∶3)分离得到化合物Reg-1-62(0.63g，黄色固体，产率：78％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 10.80(s，1H)，8.72(s，1H)，8.31(s，1H)，8.07(d，J＝3.8Hz，1H)，7.82(d，J＝8.7Hz，2H)，7.74(d，J＝8.8Hz，2H)，6.73(d，J＝3.8Hz，1H)，1.67(s，9H)，1.62(s，9H).MSm/z(ESI)：510.9[M+H，Cl]。
以与中间体实施例14中所述类似方法制备以下中间体：
Figure BDA0002391547790001113
Figure BDA0002391547790001121
中间体实施例15
Figure BDA0002391547790001122
将化合物Reg-1-40(110mg，0.3mmol)溶于乙腈(3mL)中，加入碳酸铯(147mg，0.45mmol)及碘甲烷(64mg，0.45mmol)。将反应于室温搅拌过夜，LC-MS显示反应完全。蒸除溶剂，残余物以快速制备色谱法(EA/PE＝0～25％)纯化得浅黄色固体Reg-1-67(110mg，产率：90.9％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 8.78(s，1H)，8.33(s，1H)，8.19(d，J＝5.3Hz，1H)，7.80(d，J＝8.2Hz，2H)，7.41(d，J＝8.2Hz，2H)，3.44(s，3H)，1.61(s，9H).
中间体实施例16
Figure BDA0002391547790001123
第一步：
将金属钠(3.9g，170mmol)分批加入搅拌的乙醇(250mL)中，继续搅拌直至溶液澄清。一次性加入尿素(10.2g，170mmol)，混合物加热至回流反应15分钟，缓慢降温至室温，加入2-甲氧基丙酸二甲酯(25g，154mmol)，生成粉色沉淀，反应液加热至100℃反应48小时。LC-MS检测显示反应完成，真空旋蒸移除反应溶剂。残留物中加入水(200mL)，用浓盐酸调节pH值到3-4。乙酸乙酯萃取(300mL×2)，有机相合并，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液真空旋蒸移除溶剂得到褐色油状物(23g，粗品)。MS m/z(ESI)：159.0[M+H]。
第二步：
将化合物Reg-1-69-2(23g，粗品，145mmol)和三氯氧磷(50mL)混合。加热至100℃过夜反应。LC-MS检测显示原料消失，新产物无MS信号。反应液冷却至室温，真空旋蒸移除三氯氧磷，残留物缓慢加入冰水混合物中(200mL)，乙酸乙酯萃取(200mL×2)，有机相合并，用饱和碳酸氢钠(100mL)洗涤。无水硫酸钠干燥，过滤，滤液真空旋蒸移除溶剂。残留物通过柱色谱法分离(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1)进行纯化，得到化合物Reg-1-69-3(13g，白色固体，42％收率)。
第三步：
将化合物Reg-1-69-3(13.7g，64mol)和2-羟基乙酸甲酯(6.93g，77mmol)溶于四氢呋喃(300mL)，氮气保护下冷却至-5℃-0℃，分批加入NaH(3.08g，77mmol)，反应液自然升温至室温，搅拌16小时。LC-MS检测显示反应完成，向反应液中加入水(300mL)，乙酸乙酯萃取(300mL×2)，有机相合并，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液真空旋蒸移除溶剂。残留物通过柱色谱法分离(石油醚∶乙酸乙酯＝8∶1)进行纯化，得到化合物Reg-1-69-4(15.6g，无色油状物，91.3％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ5.15(s，2H)，3.90(s，3H)，3.73(s，2H).MS m/z(ESI)：266.8[M+H]。
第四步：
将化合物Reg-1-69-4(14.6g，54.7mmol)溶于甲醇(146mL)，分批加入硼氢化钠(6.2g，164mmol)，反应液在室温下搅拌16小时。LC-MS检测显示反应完成，反应液加入水(10mL)淬灭反应，真空旋蒸移除反应溶剂得到粗品化合物Reg-1-69-5(41g，粗品)。MS m/z(ESI)：238.7[M+H]。
第五步：
将化合物Reg-1-69-5(41g，粗品，54.7mmol)溶于二氯甲烷(300mL)，氮气保护下冷却至-50℃，缓慢滴加三溴化硼(54.7mL，109.4mmol)，反应液自然升温至室温，搅拌16小时。LC-MS检测显示反应基本完成，向反应液中加入水(500mL)，乙酸乙酯萃取(300mL×2)，有机相合并，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液真空旋蒸移除溶剂。残留物通过柱色谱法分离(乙酸乙酯)进行纯化，得到化合物Reg-1-69-6(5.6g)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.73(s，1H)，4.85(s，1H)，4.41(t，J＝4.9Hz，2H)，3.75(t，J＝4.9Hz，2H).MS m/z(ESI)：224.8[M+H]。
第六步：
将化合物Reg-1-69-6(5.45g，24.2mmol)和三苯基膦(7.63g，29.1mmol)溶于四氢呋喃(270mL)，氮气保护，室温下加入偶氮二甲酸二异丙酯(5.88g，29.1mmol)，反应液在室温下搅拌16h。LC-MS检测显示反应完成，真空旋蒸移除反应溶剂。残留物通过柱色谱法分离(石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1至1∶1)进行纯化，得到化合物Reg-1-69-7(6.7g，53％纯度)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 4.64-4.60(m，2H)，4.48-4.43(m，2H).MS m/z(ESI)：206.8[M+H]。
第七步：
将化合物Reg-1-69-7(960mg，53％纯度，2.46mmol)和4-(1H-吡唑-4-基)苯胺(390mg，2.46mmol)溶于N-甲基吡咯烷酮(10mL)，加入N，N-二异丙基乙胺(1.3mL，7.38mmol)，反应液在200℃下微波反应2小时。LC-MS检测显示反应基本完成，反应液中加入水(80mL)，用乙酸乙酯萃取(50mL×2)，有机相合并，真空旋蒸移除溶剂。残留物通过柱色谱法分离(二氯甲烷：甲醇＝30∶1)进行纯化，得到化合物Reg-1-69-8(600mg，74％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.89(s，1H)，9.22(s，1H)，8.02(d，J＝28.9Hz，2H)，7.66(d，J＝8.5Hz，2H)，7.56(d，J＝8.6Hz，2H)，4.52(s，2H)，4.38(s，2H).MS m/z(ESI)：329.8[M+H]。
第八步：
将化合物Reg-1-69-8(600mg，1.82mmol)溶于四氢呋喃(15mL)，分别加入BOC酸酐(834mg，3.82mmol)、三乙胺(0.76mL，5.46mmol)和4-二甲氨基吡啶(22mg，0.182mmol)，反应液在室温下搅拌16小时。LC-MS检测显示反应完成，真空旋蒸移除反应溶剂。残留物通过柱色谱法分离(石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1至1∶1)进行纯化，得到化合物Reg-1-69(350mg，36.3％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 8.74(s，1H)，8.30(s，1H)，7.73(d，J＝8.5Hz，2H)，7.21(d，J＝8.5Hz，2H)，4.63(s，2H)，4.44(s，2H)，1.60(s，9H)，1.42(s，9H).MS m/z(ESI)：552.0[M+Na]。
中间体实施例17
Figure BDA0002391547790001131
将化合物Reg-1-84-1(1.1g，6.0mmol)溶于四氢呋喃(20mL)中，氮气保护下降温至-78℃，滴加入苄基氯化镁(6.0mL，6.0mmol)，加毕自然升温至室温，反应过夜。LC-MS显示反应完全。将反应液减压浓缩，剩余物加入二氯甲烷(30mL)和水(30mL)，萃取分液，有机相用浓盐水(30mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压旋蒸得到粗品化合物Reg-1-84-2(1.5g，油状物)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.35(d，J＝8.0Hz，1H)，7.29-7.15(m，5H)，4.12(s，2H).MS m/z(ESI)：238.8[M+H]。
中间体实施例18
Figure BDA0002391547790001141
将化合物Reg-1-16-e(0.3g，1.158mmol)和2，4-二氯-5-(三氟甲基)嘧啶(0.25g，1.158mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中，加入二异丙基乙胺(449mg，3.47mmol)，在冰盐浴中反应。LC-MS显示反应完全。将反应液加水(20mL)稀释，用二氯甲烷萃取(30mL x 3)，合并有机相，硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩的到残留物，经快速色谱法柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝5∶1～1∶5)分离得到化合物Reg-1-85和Reg-1-86混合物(396mg，无色油状物，产率：78％)。
MS m/z(ESI)：439.9[M+H](tR＝1.701min)，439.9[M+H](tR＝1.784min)。
最终产物的制备
实施例1：6-(4-((1H-吲唑-5-基)氨基)嘧啶-2-基)-N-(四氢呋喃-3-基)苯并[b]噻吩-2-甲酰胺(TDI01113)的制备
Figure BDA0002391547790001142
第一步：
将化合物TDI01113-1(500mg，1.95mmol)溶于无水甲醇(20mL)中，缓慢滴加氯化亚砜(4mL)，反应液在70℃下反应2小时。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1)显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩，将粗品用二氯甲烷(40mL)溶解，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(50mL X 2)和饱和食盐水(50mL X 2)洗涤，将有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到化合物TDI01113-2(550mg，黄色固体，粗品)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 8.01(s，2H)，7.73(d，J＝8.4Hz，1H)，7.51(d，J＝8.4Hz，1H)，3.95(s，3H).
第二步：
将化合物TDI01113-2(550mg，2.04mmol)和双联频哪醇硼酸酯(621mg，2.44mmol)溶于1，4-二氧六环(20mL)中，加入乙酸钾(600mg，6.12mmol)及Pd(dppf)Cl2(140mg，0.20mmol)，用氩气置换3次，将反应物置于80℃油浴中反应过夜。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1)显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩，将残留物通过柱色谱法分离(石油醚∶乙酸乙酯＝20∶1)纯化得到化合物TDI01113-3(600mg，白色固体，产率：92.3％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 8.35(s，1H)，8.06(s，1H)，7.87(d，J＝8.0Hz，1H)，7.80(d，J＝8.0Hz，1H)，3.95(s，3H)，1.38(s，12H).
第三步：
将化合物TDI01113-3(600mg，1.90mmol)和Reg-1-1(546mg，1.58mmol)溶于乙醇/水(10∶1)的混合液(55mL)中，加入碳酸钠(335mg，3.16mmol)及Pd(PPh3)2Cl2(112mg，0.16mmol)，氩气置换3次，将反应物置于110℃油浴中反应过夜。薄层色谱法(乙酸乙酯)显示反应完全。将反应液冷却至室温，过滤，减压浓缩，将残留物用水(40mL)溶解，用乙酸乙酯(50mL X 2)萃取，将水相用4N HCl调节至pH＝2，将析出的固体过滤，并用甲醇溶解，然后浓缩得到化合物TDI01113-4(700mg，黄色固体，粗品)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 11.90(s，1H)，9.06(s，1H)，8.37(d，J＝6.4Hz，2H)，8.25-8.18(m，4H)，7.68(d，J＝8.0Hz，2H)，7.51(d，J＝7.6Hz，1H)，7.20(s，1H).MS m/z(ESI)：388.1[M+H]。
第四步：
将化合物TDI01113-4(200mg，0.52mmol)和四氢呋喃-3-胺(54.6mg，0.62mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(10mL)中，加入HATU(236mg，0.62mmol)和二异丙基乙胺(268mg，2.08mmol)，在室温下反应过夜。薄层色谱法(二氯甲烷/甲醇＝10∶1)显示反应完全。将水(60mL)缓慢加入到反应液中，有大量固体析出，搅拌30分钟后，过滤，将固体用高效液相色谱法纯化得到化合物TDI01113(56.2mg，黄色固体，产率：23.7％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.05(s，1H)，9.67(s，1H)，8.93(s，1H)，8.90(d，J＝6.4Hz，1H)，8.42(dd，J＝8.4，1.2Hz，1H)，8.39(d，J＝6.0Hz，1H)，8.23(s，1H)，8.18(s，1H)，8.10(s，1H)，8.06(d，J＝8.4Hz，1H)，7.59(s，2H)，6.71(d，J＝6.0Hz，1H)，4.51-4.45(m，1H)，3.91-3.85(m，2H)，3.77-3.71(m，1H)，3.66-3.63(m，1H)，2.24-2.15(m，1H)，1.99-1.92(m，1H).MS m/z(ESI)：457.0[M+H]。
通过与实施例1中所述类似方法，制备表1中的化合物。
Figure BDA0002391547790001161
Figure BDA0002391547790001171
Figure BDA0002391547790001181
Figure BDA0002391547790001191
Figure BDA0002391547790001201
Figure BDA0002391547790001211
Figure BDA0002391547790001221
Figure BDA0002391547790001231
Figure BDA0002391547790001241
Figure BDA0002391547790001251
Figure BDA0002391547790001261
Figure BDA0002391547790001271
Figure BDA0002391547790001281
Figure BDA0002391547790001291
Figure BDA0002391547790001301
Figure BDA0002391547790001311
Figure BDA0002391547790001321
Figure BDA0002391547790001331
Figure BDA0002391547790001341
Figure BDA0002391547790001351
Figure BDA0002391547790001361
Figure BDA0002391547790001371
Figure BDA0002391547790001381
Figure BDA0002391547790001391
Figure BDA0002391547790001401
Figure BDA0002391547790001411
Figure BDA0002391547790001421
Figure BDA0002391547790001431
Figure BDA0002391547790001441
Figure BDA0002391547790001451
Figure BDA0002391547790001461
Figure BDA0002391547790001471
Figure BDA0002391547790001481
Figure BDA0002391547790001491
Figure BDA0002391547790001501
Figure BDA0002391547790001511
Figure BDA0002391547790001521
Figure BDA0002391547790001531
Figure BDA0002391547790001541
Figure BDA0002391547790001551
Figure BDA0002391547790001561
Figure BDA0002391547790001571
Figure BDA0002391547790001581
Figure BDA0002391547790001591
Figure BDA0002391547790001601
Figure BDA0002391547790001611
实施例2：6-(4-((1H-吲唑-5-基)氨基)嘧啶-2-基)-N-异丙基苯并呋喃-2-甲酰胺(TDI01102)的制备
Figure BDA0002391547790001621
第一步：
将化合物TDI01102-1(3.6g，17.9mmol)和2-溴乙酸叔丁酯(5.38g，27.6mmol)溶于二甲基亚砜(100mL)中，加入碳酸铯(17.51g，53.7mmol)，将反应物置于100℃油浴中反应3小时。薄层色谱法(石油醚)显示反应完全。将反应液冷却至室温，分别用乙酸乙酯(100mL x3)和水萃取，并用饱和食盐水(100mL x 3)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到化合物TDI01102-2(4.0g，棕色固体，粗品)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.75(s，1H)，7.52(d，J＝8.4Hz，1H)，7.41(m，H)，7.38(s，1H)，1.62(s，9H).
第二步：
将化合物TDI01102-2(4.0g，13.47mmol)溶于无水二氯甲烷(40mL)中，加入三氟乙酸(10mL)，反应在室温下进行4小时。薄层色谱法(石油醚)显示反应完全。将反应液减压浓缩，将粗品用二氯甲烷溶解再浓缩得到化合物TDI01102-3(3.0g，黄色固体，粗品)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 13.63(s，1H)，8.06(s，1H)，7.76(d，J＝8.4Hz，1H)，7.69(s，1H)，7.53(m，1H).MS m/z(ESI)：239.0[M-H]。
第三步：
将化合物TDI01102-3(400mg，1.66mmol)和异丙胺(119mg，2.0mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(10mL)中，加入HATU(762mg，2.0mmol)和二异丙基乙胺(1.07g，8.3mmol)，在室温下反应3小时。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1)显示反应完全。将水(100mL)缓慢加入到反应液中，有大量固体析出，搅拌30min后，过滤得到化合物TDI01102-4(400mg，黄色固体，粗品)。MS m/z(ESI)：282.0/283.0[M+H]。
第四步：
将化合物TDI01102-4(400mg，1.42mmol)和双联频哪醇硼酸酯(440mg，1.7mmol)溶于1，4-二氧六环(50mL)中，加入乙酸钾(424mg，4.26mmol)及Pd(dppf)Cl2(52mg，0.071mmol)，氩气置换3次，在90℃油浴中反应4小时。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1)显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩，将残留物通过柱色谱法分离(石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1到2∶1)进行纯化，得到化合物TDI01102-5(360mg，黄色固体，粗品)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.94(s，1H)，7.72(d，J＝7.6Hz，1H)，7.66(d，J＝7.6Hz，1H)，7.45(s，1H)，6.46(d，J＝7.6Hz，1H)，4.31(m，1H)，1.37(s，12H)，1.31(d，J＝6.6Hz，6H).MS m/z(ESI)：330.2[M+H]。
第五步：
将化合物Reg-1-1(300mg，0.87mmol)和TDI01102-5(360mg，1.10mmol)溶于乙醇/水(10∶1)的混合液(30mL)中，加入碳酸钠(184mg，1.74mmol)及Pd(PPh3)2Cl2(63.0mg，0.09mmol)，氩气置换3次，在110℃油浴中反应过夜。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，过滤，减压浓缩，将残留物通过制备液相色谱法进行纯化，得到化合物TDI01102(100mg，黄色固体，产率：27.9％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.11(s，1H)，10.66(s，1H)，8.63(d，J＝8.0Hz，1H)，8.44(s，1H)，8.40(d，J＝8.0Hz，1H)，8.24(d，J＝8.0Hz，1H)，8.16(s，1H)，8.11(s，1H)，7.97(d，J＝8.0Hz，1H)，7.67-7.60(m，3H)，6.86(d，J＝8.0Hz，1H)，4.14(m，1H)，1.21(d，J＝8.0Hz，6H).MS m/z(ESI)：413.2[M+H]。
通过与实施例2中所述类似方法，制备下表2中的化合物。
Figure BDA0002391547790001631
Figure BDA0002391547790001641
Figure BDA0002391547790001651
Figure BDA0002391547790001661
Figure BDA0002391547790001671
Figure BDA0002391547790001681
Figure BDA0002391547790001691
Figure BDA0002391547790001701
Figure BDA0002391547790001711
Figure BDA0002391547790001721
Figure BDA0002391547790001731
Figure BDA0002391547790001741
Figure BDA0002391547790001751
Figure BDA0002391547790001761
实施例3：6-(4-((1H-吲唑-5-基)氧基)嘧啶-2-基)-N-(哒嗪-4-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺(TDI01212)的制备
Figure BDA0002391547790001771
中间体TDI01212-b的制备
中间体TDI01212-a的制备参考实施例1第一步和第二步，并将第一步中的
Figure BDA0002391547790001772
用
Figure BDA0002391547790001773
代替。
将中间体TDI01212-a(3.00g，9.97mmol)溶于甲醇与水(2∶1)的混合液(60mL)中，加入一水合氢氧化锂(4.19g，99.7mmol)，反应液在室温下反应过夜。LC-MS显示反应完全。将反应液减压浓缩除去甲醇，将水相用6N HCl调节pH至3，有大量固体析出，室温搅拌30分钟，过滤得到中间体TDI01212-b(2.1g，黄色固体，收率：73.2％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.89(s，1H)，7.82(s，1H)，7.64(d，J＝8.0Hz，1H)，7.34(d，J＝8.0Hz，1H)，7.09(s，1H)，1.30(s，12H).
第一步：
向50mL烧瓶中加入化合物TDI01212-1(600mg，3.36mmol)、2，4-二氯嘧啶(736mg，3.70mmol)，TEA(1.36g，10mmol)和无水乙醇(20mL)，升温至80℃反应过夜。薄层色谱法(甲醇/二氯甲烷＝1∶10)显示反应完全。将反应液浓缩得到粗品，将粗品加入至20mLMTBE和7.5mL无水乙醇中，将混合物升温至50℃，研磨后得到TDI01212-2(1.2g，黄色固体，产率：87％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.33(s，1H)，8.61(d，J＝5.7Hz，1H)，8.11(s，1H)，7.67-7.63(m，2H)，7.25(dd，J＝9.0，2.0Hz，1H)，7.14(d，J＝5.7Hz，1H).MS m/z(ESI)：247[M+H]。
第二步：
向100mL烧瓶中加入化合物TDI01212-2(1g，4mmol)、TDI01212-b(1.44g，4.8mmol)、Pd(PPh3)Cl2(0.28g，0.4mmol)、Na2CO3(0.85g，8mmol)、40mL乙醇和5mL水，用氩气换气3次，将反应物升温至105℃反应4h。将反应物降温至50℃，加入0.32g氢氧化钠，继续反应1h，LC-MS显示反应完全。将反应液减压浓缩，将pH调节至3-4，过滤得固体1.5g，然后加入20mL MTBE得到浆液，干燥后得到化合物TDI01212-3(0.4g，黄色固体，产率：27％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.26(s，1H)，12.05(s，1H)，8.74(d，J＝5.7Hz，1H)，8.38(s，1H)，8.13(s，1H)，7.92(d，J＝8.6Hz，1H)，7.66(d，J＝8.6Hz，3H)，7.51(d，J＝6.9Hz，2H)，7.34(d，J＝9.2Hz，2H)，7.09(s，1H)，6.91(d，J＝5.7Hz，1H).MS m/z(ESI)：372[M+H]。
第三步：
向25mL烧瓶中加入化合物TDI01212-3(200mg，0.54mmol)、哒嗪-4-胺(61.6mg，0.64mmol)、HATU(244mg，0.64mmol)、DIEA(280mg，2.16mmol)和12mL DMF，在室温下反应3h，LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，加入至100mL水中，析出固体，将固体过滤并干燥后用制备液相色谱法纯化，得TDI01212(50mg，黄色固体，收率：13.8％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.28(s，1H)，12.27(s，1H)，11.08(s，1H)，9.58(d，J＝2.0Hz，1H)，9.19(d，J＝6.2Hz，1H)，8.76(d，J＝5.7Hz，1H)，8.41(s，1H)，8.28(dd，J＝6.0，2.5Hz，1H)，8.13(s，1H)，7.96(d，J＝8.5Hz，1H)，7.77(d，J＝8.5Hz，1H)，7.72-7.66(m，2H)，7.57(s，1H)，7.34(dd，J＝8.9，2.1Hz，1H)，6.93(d，J＝5.7Hz，1H).MS m/z(ESI)：449.1[M+H]。
实施例4：7-(4-((1H-吲唑-5-基)氨基)嘧啶-2-基)-N-异丙基-2，3-二氢苯并[b][1，4]二噁英-2-甲酰胺(TDI01103)的制备
Figure BDA0002391547790001781
第一步：
将化合物TDI01103-1(250mg，0.84mmol)和双联频哪醇硼酸酯(254mg，1.00mmol)溶于1，4-二氧六环(15mL)中，加入乙酸钾(247mg，2.52mmol)及Pd(dppf)Cl2(61.5mg，0.08mmol)，氩气置换3次，在80℃油浴中反应过夜。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1)显示反应完全后，将反应液冷却至室温，减压浓缩，将残留物通过制备色谱板(石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1)纯化得到化合物TDI01103-2(240mg，黄色固体，产率：82.8％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.43(d，J＝1.2Hz，1H)，7.35(dd，J＝8.0，1.2Hz，1H)，6.91(d，J＝8.0Hz，1H)，6.40(s，1H)，4.63-4.55(m，2H)，4.15-4.08(m，2H)，1.33(s，12H)，1.21(d，J＝6.4Hz，3H)，1.14(d，J＝6.4Hz，3H).MS m/z(ESI)：348.2[M+H]。
第二步：
将化合物TDI01103-2(240mg，0.68mmol)和Reg-1-1(200mg，0.57mmol)溶于乙醇/水(10∶1)的混合液(22mL)中，加入碳酸钠(120mg，1.14mmol)及Pd(PPh3)2Cl2(42.1mg，0.06mmol)，氩气置换3次，在110℃油浴中反应过夜。LC-MS显示反应完全后，将反应液冷却至室温，过滤，减压浓缩，将残留物通过制备液相色谱法进行纯化，得到化合物TDI01103(18.5mg，黄色固体，产率：9.4％)。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ 8.16(d，J＝7.2Hz，1H)，8.13(s，1H)，7.95(d，J＝7.6Hz，1H)，7.86(s，1H)，7.73(d，J＝8.4Hz，1H)，7.67(d，J＝8.8Hz，1H)，7.59(s，1H)，7.11(d，J＝8.8Hz，1H)，6.84(d，J＝6.4Hz，1H)，4.80-4.77(m，1H)，4.53-4.50(m，1H)，4.36-4.31(m，1H)，4.07-4.01(m，1H)，1.19(d，J＝6.4Hz，3H)，1.13(d，J＝6.4Hz，3H).MS m/z(ESI)：431.2[M+H]。
实施例5：2-(4-((1H-吲唑-5-基)氨基)嘧啶-2-基)-N-异丙基苯并[b]噻吩-6-甲酰胺(TDI01106)的制备
Figure BDA0002391547790001791
第一步：
将化合物TDI01106-1(2.50g，7.04mmol)和CuCN(1.58g，17.6mmol)溶于N-甲基吡咯烷酮(25mL)中，微波下于200℃下反应1小时。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1)显示反应完全，将反应液冷却至室温，加入水(100mL)，用乙酸乙酯(50mL X 3)萃取，将合并的有机相用饱和食盐水(80mL X 3)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，将残留物通过柱色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝20∶1)进行纯化，得到化合物TDI01106-2(1.00g，黄色固体，产率：54.1％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 8.22(s，1H)，7.90(d，J＝8.4Hz，1H)，7.72(d，J＝5.6Hz，1H)，7.60(dd，J＝8.4，1.2Hz，1H)，7.42(d，J＝5.6Hz，1H).
第二步：
将化合物TDI01106-2(800mg，5.09mmol)和氢氧化钾(2.85g，50.9mmol)溶于甲醇/水(2∶1)的混合液(30mL)中，在120℃的油浴中反应过夜。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1)显示反应完全后，将反应液冷却至室温。减压浓缩除去甲醇后，加入水(50mL)，用4N HCl调pH至2，有大量固体析出，室温搅拌30分钟后，过滤。将固体用甲醇溶解，再减压浓缩得到化合物TDI01106-3(900mg，黄色固体，产率：99.2％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 8.70(s，1H)，8.10(dd，J＝8.4，1.2Hz，1H)，7.90(d，J＝8.4Hz，1H)，7.70(d，J＝5.4Hz，1H)，7.42(d，J＝5.4Hz，1H).MS m/z(ESI)：179.1[M+H]。
第三步：
将化合物TDI01106-3(900mg，5.06mmol)和异丙胺(358mg，6.07mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(40mL)中，加入HATU(2.31g，6.07mmol)和二异丙基乙胺(2.61g，20.2mmol)，室温反应过夜。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1)显示反应完全后，向反应液中加入水(50mL)，用乙酸乙酯(80mL X2)萃取，合并有机相，依次用饱和氯化铵水溶液(100mL X 2)和饱和食盐水(80mL X 3)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到化合物TDI01106-4(1.06g，黄色固体，产率：95.5％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.33(s，1H)，7.84(d，J＝8.4Hz，1H)，7.71(dd，J＝8.4，1.2Hz，1H)，7.58(d，J＝5.4Hz，1H)，7.37(d，J＝5.4Hz，1H)，6.03(s，1H)，4.37-4.29(m，1H)，1.29(d，J＝6.4Hz，6H).MS m/z(ESI)：220.1[M+H]。
第四步：
将化合物TDI01106-4(1.06g，4.84mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(40mL)中，加入N-溴代丁二酰亚胺(1.89g，10.7mmol)，将反应液缓慢升温至80℃并在此温度下反应1小时。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1)显示反应完全后，将反应液冷却至室温，缓慢加入到水(100mL)中，有大量固体析出。室温搅拌30分钟后过滤，将固体通过柱色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1)进行纯化，得到化合物TDI01106-5(1.10g，黄色固体，产率：75.8％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.32(s，1H)，7.86(d，J＝8.4Hz，1H)，7.81-7.76(m，1H)，7.58(s，1H)，5.99(s，1H)，4.38-4.29(m，1H)，1.30(d，J＝6.4Hz，6H).MS m/z(ESI)：298.0/300.0[M+H]。
第五步；
将化合物TDI01106-5(1.00g，3.34mmol)和双联频哪醇硼酸酯(1.02g，4.01mmol)溶于1，4-二氧六环(40mL)中，加入乙酸钾(980mg，10.0mmol)及Pd(dppf)Cl2(242mg，0.33mmol)，氩气置换3次，在80℃油浴中反应过夜。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1)显示反应完全后，将反应液冷却至室温，减压浓缩，将残留物通过柱色谱法分离(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1到2∶1)进行纯化，得到化合物TDI01106-6(450mg，黄色固体，产率：39.1％)。MSm/z(ESI)：346.1[M+H]。
第六步：
将化合物Reg-1-1(200mg，0.58mmol)和TDI01106-6(240mg，0.69mmol)溶于乙醇/水(10∶1)的混合液(22mL)中，加入碳酸钠(123mg，1.16mmol)及Pd(PPh3)2Cl2(42.0mg，0.06mmol)，氩气置换3次，在110℃油浴中反应过夜。LC-MS显示反应完全后，将反应液冷却至室温，过滤，减压浓缩，将残留物通过制备液相色谱法进行纯化，得到化合物TDI01106(87.1mg，黄色固体，产率：35.1％)。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ 8.81(s，1H)，8.70-8.65(m，1H)，8.46(s，1H)，8.27(d，J＝7.2Hz，1H)，8.11(s，1H)，8.06(s，1H)，7.69(d，J＝8.8Hz，2H)，7.58(d，J＝8.4Hz，1H)，6.89(d，J＝7.2Hz，1H)，4.27-4.20(m，1H)，1.27(d，J＝6.4Hz，6H).MS m/z(ESI)：429.2[M+H]。
实施例6：6-(4-((1H-吲唑-5-基)氨基)吡啶-2-基)-N-异丙基苯并[b]噻吩-2-甲酰胺(TDI01117)的制备
Figure BDA0002391547790001801
第一步：
将化合物TDI01117-1(500mg，2.15mmol)和2-氯-4-碘吡啶(615mg，2.58mmol)溶于甲苯(20mL)，加入醋酸钯(24.1mg，0.11mmol)、BINAP(137mg，0.22mmol)和碳酸铯(1.40g，4.30mmol)，用氩气置换3次，在90℃的油浴中反应过夜。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1)显示反应完全后，将反应液冷却至室温，过滤。将滤液减压浓缩，将粗品通过柱色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1到1∶1)纯化得到化合物TDI01117-2(350mg，黄色固体，产率：47.3％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 13.09(s，1H)，9.00(s，1H)，8.05(s，1H)，7.93(d，J＝6.0Hz，1H)，7.59-7.58(m，2H)，7.23-7.18(m，1H)，6.75(dd，J＝6.0，2.0Hz，1H)，6.70(d，J＝1.6Hz，1H).
第二步：
将化合物TDI01117-2(200mg，0.82mmol)和N-异丙基-6-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[b]噻吩-2-甲酰胺(339mg，0.98mmol，其合成请参考表2中TDI01104制备中对应中间体的合成)溶于乙醇/水(10∶1)的混合液(33mL)中，加入碳酸钠(174mg，1.64mmol)及Pd(PPh3)2Cl2(56.2mg，0.08mmol)，氩气置换3次，在110℃油浴中反应过夜。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，过滤，减压浓缩。将残留物通过制备液相色谱法进行纯化，得到化合物TDI01117(85.0mg，黄色固体，产率：24.3％)。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ 8.38(s，1H)，8.17(d，J＝7.2Hz，1H)，8.14-8.07(m，2H)，8.05(s，1H)，7.84(s，1H)，7.76-7.71(m，2H)，7.40(d，J＝8.8Hz，1H)，7.29(s，1H)，7.06(s，1H)，4.25-4.18(m，1H)，1.29(d，J＝6.4Hz，6H).MS m/z(ESI)：428.2[M+H]。
实施例7：6-(5-((1H-吲唑-5-基)氨基)-1，3，4-噻二唑-2-基)-N-异丙基苯并[b]噻吩-2-甲酰胺(TDI01139)的制备
Figure BDA0002391547790001811
第一步：
将化合物TDI01139-1(600mg，2.34mmol)和异丙胺(166mg，2.81mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中，加入HATU(1.07g，2.81mmol)和二异丙基乙胺(1.21g，9.36mmol)，在室温下反应过夜。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝2∶1)显示反应完全后，将反应液用乙酸乙酯(80mL)稀释，依次用水(50mL X 2)、饱和氯化铵水溶液(80mL X 2)和饱和食盐水(80mLX 3)洗涤。将有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到化合物TDI01139-2(700mg，黄色固体，产率：99.5％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 8.00(s，1H)，7.68-7.66(m，2H)，7.49(dd，J＝8.8，1.6Hz，1H)，5.89(s，1H)，4.33-4.25(m，1H)，1.29(d，J＝6.4Hz，6H).
第二步：
将化合物TDI01139-2(600mg，2.01mmol)和CuCN(271mg，3.01mmol)溶于N-甲基吡咯烷酮(15mL)中，微波下于200℃下反应2小时。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝2∶1)显示反应完全后，将反应液用乙酸乙酯(80mL)稀释，依次用水(80mL X 2)和饱和食盐水(100mLX 2)洗涤，将有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。将残留物通过柱色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1到2∶1)进行纯化，得到化合物TDI01139-3(350mg，黄色固体，产率：71.4％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 8.70(d，J＝7.2Hz，1H)，8.66(s，1H)，8.21(s，1H)，8.12(d，J＝8.4Hz，1H)，7.80(d，J＝8.4Hz，1H)，4.11-4.06(m，1H)，1.20(d，J＝6.4Hz，6H).
第三步：
将化合物TDI01139-3(350mg，1.43mmol)溶于盐酸-甲醇溶液(20mL)，反应液100℃反应过夜。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝2∶1)显示有原料剩余，将反应液直接减压浓缩，将粗品通过柱色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1到6∶1)进行纯化，得到化合物TDI01139-4(100mg，白色固体，产率：25.2％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 8.58(s，1H)，8.04(dd，J＝8.4，1.2Hz，1H)，7.86(d，J＝8.4Hz，1H)，7.76(s，1H)，5.92(d，J＝6.0Hz，1H)，4.33-4.28(m，1H)，3.97(s，3H)，1.30(d，J＝6.4Hz，6H).MS m/z(ESI)：278.1[M+H]。
第四步：
将化合物TDI01139-4(100mg，0.36mmol)溶于乙醇(5mL)，加入水合肼(181mg，3.60mmol)，将反应液缓慢升温至80℃并在此温度下反应过夜。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝2∶1)显示反应完全后，将反应液冷却至室温，减压浓缩得到化合物TDI01139-5(70mg，黄色固体，产率：70.0％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.88(s，1H)，8.60(d，J＝7.6Hz，1H)，8.44(s，1H)，8.15(s，1H)，7.98(d，J＝8.4Hz，1H)，7.86(d，J＝8.4Hz，1H)，4.54(s，2H)，4.11-4.04(m，1H)，1.19(d，J＝6.4Hz，6H).
第五步：
将化合物TDI01139-5(70.0mg，0.25mmol)和5-异硫氰酸基-1H-吲唑-1-甲酸叔丁酯(69.5mg，0.25mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，将反应液在室温下搅拌。然后将浓硫酸(0.5mL)缓慢加入到反应液，在室温下反应5小时。LC-MS显示反应完全。将反应液减压浓缩，用饱和碳酸钠水溶液调节pH至9，有固体析出，过滤。将固体通过高效液相色谱法进行纯化，得到化合物TDI01139(4.2mg，黄色固体，产率：3.7％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.03(s，1H)，10.56(s，1H)，8.60(d，J＝7.6Hz，1H)，8.50(s，1H)，8.27(s，1H)，8.16(s，1H)，8.08-8.01(m，2H)，7.98(d，J＝8.4Hz，1H)，7.56(d，J＝8.8Hz，1H)，7.43(d，J＝8.8Hz，1H)，4.12-4.07(m，1H)，1.20(d，J＝6.4Hz，6H).MS m/z(ESI)：435.1[M+H]。
实施例8：N-(2-(2-((异丙基氨基)甲基)-1H-吲哚-6-基)嘧啶-4-基)-1H-吲唑-5-胺(TDI01155)的制备
Figure BDA0002391547790001821
第一步：
将化合物TDI01155-1(600mg，2.36mmol)溶于四氢呋喃(20mL)之中，并于0℃下缓慢加入LiAlH4(269.3mg，7.09mmol)，搅拌30min后缓慢升温至室温，并于室温下继续搅拌反应5h。LC-MS检测显示反应完全后，将水(0.27mL)、NaOH(15％aq.，0.27mL)和水(0.81mL)依次加入上述反应混合液，并于室温下搅拌30min，然后加入无水Mg2SO4干燥，过滤，洗涤滤饼，并收集滤液。将滤液减压浓缩，得到化合物TDI01155-2(600mg，粗品)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.43(s，1H)，7.49(s，1H)，7.42(d，J＝8.4Hz，1H)，7.20(m，1H)，6.36(s，1H)，4.93-4.74(m，2H)，3.86-3.68(m，1H).MS m/z(ESI)：228.0[M+H]。
第二步：
将化合物TDI01155-2(600mg，2.65mmol)溶于乙腈(20mL)中，加入MnO2(692mg，7.96mmol)，于室温下搅拌反应过夜。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1)和LC-MS检测显示反应完全后，将反应液经减压浓缩，将残留物通过柱色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1到1∶1)进行纯化，得到化合物TDI01155-3(520mg，黄色固体，产率：87.6％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 9.86(s，1H)，9.22(s，1H)，7.65(s，1H)，7.61(d，J＝8.4Hz，1H)，7.30-7.28(m，1H)，7.25(br，1H).MS m/z(ESI)：224.0/226.0[M+H]。
第三步：
将化合物TDI01155-3(200mg，0.89mmol)和双联频哪醇硼酸酯(272mg，1.07mmol)溶于1，4-二氧六环(20mL)中，加入乙酸钾(262.5mg，2.68mmol)及Pd(dppf)Cl2(33mg，0.045mmol)，氩气置换3次，在90℃油浴中反应过夜。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1)显示反应完全后，将反应液冷却至室温，减压浓缩，将残留物通过柱色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1到1∶1)进行纯化，得到化合物TDI01155-4(200mg，黄色固体，产率：82.6％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 9.87(s，1H)，9.04(s，1H)，7.94(s，1H)，7.75(d，J＝8.0Hz，1H)，7.59(d，J＝8.0Hz，1H)，7.27(br，1H)，1.38(s，12H).MS m/z(ESI)：272.1[M+H]。
第四步：
将化合物TDI01155-4(200mg，0.74mmol)和异丙胺(53mg，0.89mmol)溶于1，2-二氯乙烷(10mL)中，加入冰乙酸10滴，在室温下搅拌反应1h后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(471mg，2.22mmol)。在室温下搅拌反应过夜。薄层色谱法(二氯甲烷/甲醇＝10∶1)显示反应完全后，减压浓缩移除溶剂，将残留物通过柱色谱法(二氯甲烷∶甲醇＝10∶1到1∶1)进行纯化，得到化合物TDI01155-5(185mg，黄色固体，产率：58.9％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 10.53(s，1H)，8.00(s，1H)，7.55-7.50(m，2H)，6.54(s，1H)，4.29(s，2H)，3.11-3.05(m，1H)，1.38(d，J＝6.4Hz，6H)，1.35(s，12H).MS m/z(ESI)：315.2[M+H]。
第五步：
将化合物Reg-1-21(170mg，0.49mmol)和化合物TDI01155-5(185mg，0.59mmol)溶于乙醇/水(10∶1)的混合液(20mL)中，加入碳酸钠(104mg，0.98mmol)及Pd(PPh3)2Cl2(35mg，0.049mmol)，氩气置换3次，在110℃的油浴中反应过夜。LC-MS显示反应完全后，将反应液冷却至室温，过滤，减压浓缩。将残留物通过液相色谱法进行纯化，得到化合物TDI01155(85mg，黄色固体，产率：21.4％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 12.05(s，1H)，11.03(s，1H)，9.15(s，2H)，8.38-8.34(m，2H)，8.19(s，2H)，7.94(d，J＝8.4Hz，1H)，7.80(d，J＝8.4Hz，1H)，7.68(d，J＝8.8Hz，1H)，7.62(br，1H)，6.88(d，J＝5.6Hz，1H)，6.76(s，1H)，4.42-4.41(m，2H)，3.41-3.33(m，1H)，1.32(s，3H)，1.30(s，3H).MS m/z(ESI)：398.1[M+H]。
实施例9：6-(4-((1H-吲唑-5-基)氨基)嘧啶-2-基)-N-(吡嗪-2-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺(TDI01160)的制备
Figure BDA0002391547790001831
第一步：
将化合物TDI01160-1(1000mg，4.17mmol)和吡嗪-2-胺(476mg，5.01mmol)溶于四氢呋喃(20mL)中，加入吡啶(501mg，6.255mmol)和三氯氧磷(770mg，5.01mmol)，反应液在室温下反应过夜。LC-MS显示反应完全。将反应液在搅拌下缓慢加入到水(15mL)中，过滤，将残留物用甲醇(50mL)加热润洗得粗品TDI01160-2(260mg，黄色固体，产率：19.67％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 12.02(s，1H)，11.24(s，1H)，9.47(s，1H)，8.52-8.40(m，2H)，7.67(dd，J＝8.7，4.1Hz，3H)，7.22(dd，J＝8.6，1.2Hz，1H).MS m/z(ESI)：317.0[M+H]。
第二步：
将化合物TDI01160-2(260mg，0.82mmol)和双联频哪醇硼酸酯(417mg，1.64mmol)溶于1，4-二氧六环(8mL)中，加入乙酸钾(242mg，2.49mmol)及醋酸钯(10mg，0.04mmol)，氩气置换3次，置于110℃微波中反应1h。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，过滤，加入水(5mL)，依次用二氯甲烷(10mL×3)及饱和食盐水(5mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩后通过柱色谱法分离(二氯甲烷∶甲醇＝100∶0到20∶1)进行纯化，得到化合物TDI01160-3(80mg，黄色固体，产率：26.8％)。MS m/z(ESI)：365.2[M+H]。
第三步：
将化合物TDI01160-3(66mg，0.147mmol)和Reg-1-27(80mg，0.22mmol)溶于1，4-二氧六环∶水＝5∶1(总共2.4mL)中，加入碳酸钠(32mg，0.249mmol)及Pd(PPh3)2Cl2(11mg，0.015mmol)，用氩气置换3次，置于110℃微波中反应1h。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，过滤，加入水(5mL)，用二氯甲烷(10mL×3)和饱和食盐水(5mL×2)洗涤，用无水硫酸钠干燥，浓缩后通过薄层色谱法(二氯甲烷∶甲醇＝10∶1)进行纯化，得到化合物TDI01160-4(30mg，黄色固体，产率：37.3％)。MS m/z(ESI)：548.3[M+H]。
第四步：
将三氟乙酸(1mL)加入到TDI01160-4(30mg，0.055mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液中，在室温下反应2小时。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩，将残留物通过液相色谱法进行纯化，得到化合物TDI01160(5.4mg，黄色固体，产率：22.0％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.14(s，1H)，12.37(s，1H)，11.31(s，1H)，10.36(s，1H)，9.51(s，1H)，8.48(dd，J＝21.9，6.7Hz，3H)，8.35(d，J＝6.4Hz，1H)，8.20(d，J＝18.1Hz，2H)，8.05(d，J＝8.4Hz，1H)，7.86(d，J＝8.6Hz，1H)，7.77(s，1H)，7.64(d，J＝8.4Hz，2H)，6.78(d，J＝6.4Hz，1H).MS m/z(ESI)：448.2[M+H]。
通过与实施例9中所述类似方法，制备下表3中的化合物。
表3：
Figure BDA0002391547790001841
实施例10：6-(3-((1H-吲唑-5-基)氨基)吡咯烷-1-基)-N-(哒嗪-4-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺(TDI01209)的制备
Figure BDA0002391547790001842
第一步：
向50mL单口瓶中加入化合物TDI01209-1(1.0g，4.3mmol)、3-氧代吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(800mg，4.3mmol)、1，2-二氯乙烷(30mL)和8滴冰乙酸，在室温(15～25℃)下反应1.5h，再加入醋酸硼氢化钠(2.73g，12.9mmol)，在50℃下反应2h。向反应液中加入40mL水，用二氯甲烷(15mL x 2)萃取，合并有机相，再用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，柱色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1-7∶1)纯化得TDI01209-2(1.44g，浅黄色固体，产率：83.7％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 8.04-7.94(m，2H)，6.88(dd，J＝8.9，2.1Hz，1H)，6.78(d，J＝1.9Hz，1H)，3.47(s，4H)，2.22(s，1H)，1.95(d，J＝9.0Hz，1H)，1.71(s，9H)，1.46(s，10H)，1.26(t，J＝7.1Hz，1H).MS m/z(ESI)：403.2[M+H]。
第二步：
向50mL单口瓶中加入化合物TDI01209-2(1.44g，3.58mmol)和30mL氯化氢甲醇溶液(3mol/L)，升温至50℃反应1h。将反应液减压浓缩移除甲醇，加入(20mL)甲醇溶解后再加入甲醇钠固体至pH为碱性，过滤收集滤液，然后蒸干得化合物TDI01209-3(1.14g，灰色固体，粗品)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 9.70(s，1H)，9.48(s，1H)，8.15(s，1H)，7.76(s，1H)，7.65(d，J＝8.9Hz，1H)，7.43(d，J＝8.5Hz，1H)，3.48(ddd，J＝19.5，11.2，5.2Hz，3H)，3.24(dd，J＝12.1，6.2Hz，1H)，3.08-3.02(m，1H)，2.25-2.14(m，2H)，1.20(t，J＝7.3Hz，2H).MSm/z(ESI)：203.2[M+H]。
第三步：
将化合物TDI01209-4(1g，4.167mmol)和4-氨基哒嗪(475mg，4.999mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(40mL)，加入HATU(1.586g，4.167mmol)和二异丙基乙胺(1.612g，12.501mmol)，在室温下反应16h。反应完全后加入水(50mL)，有大量固体析出，搅拌30min后，过滤得化合物TDI01209-5(1.17g，黄色固体，收率88.9％)。MS m/z(ESI)：316.9[M+H]。
第四步：
将化合物TDI01209-5(250mg，0.788mmol)、TDI01209-3(175mg，0.867mmol)、Pd2(dba)3(75mg，0.0788mmol)、t-BuXPhos(67mg，0.1576mmol)、碳酸铯(770mg，2.364mmol)和叔丁醇(10mL)加入微波管中，在微波110℃下反应2.5h。将反应液用甲醇(20mL)溶解，过滤除去不溶物后浓缩至干，将残留物通过高效液相色谱法纯化得到TDI01209(12.66mg，黄色固体，收率3.7％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 12.07(s，1H)，11.00(s，1H)，9.60(d，J＝2.1Hz，1H)，9.15(d，J＝6.0Hz，1H)，8.93(s，2H)，8.22(dd，J＝6.0，2.7Hz，1H)，8.13(s，1H)，7.92(d，J＝8.6Hz，1H)，7.77(s，1H)，7.70(d，J＝9.0Hz，1H)，7.64(d，J＝1.3Hz，1H)，7.53(dd，J＝8.6，1.8Hz，1H)，6.98(dd，J＝9.0，2.0Hz，1H)，6.86(d，J＝1.8Hz，1H)，4.15(m，1H)，3.48(m，1H)，3.33(m，2H)，3.12(m，1H)，2.26(dd，J＝14.0，7.7Hz，1H)，1.95(m，1H).MS m/z(ESI)：439.1[M+H]。
通过与实施例10中所述类似方法，制备化合物TDI01219(6-(3-((1H-吲唑-5-基)氨基)吡咯-1-基)-N-异丙基-1H-吲哚-2-甲酰胺)：
Figure BDA0002391547790001851
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 11.66(s，1H)，8.86(s，2H)，8.30(d，J＝7.92Hz，1H)，8.10(s，1H)，7.77(d，J＝8.6Hz，1H)，7.70(s，1H)，7.65(d，J＝9.0Hz，1H)，7.42(dd，J＝8.6，1.9Hz，1H)，7.23(d，J＝1.4Hz，1H)，6.95(dd，J＝9.0，2.0Hz，1H)，6.83(d，J＝1.8Hz，1H)，5.87(s，1H)，4.14(d，J＝6.6Hz，2H)，3.35(s，2H)，3.12(d，J＝4.52Hz，1H)，2.36-2.21(m，2H)，1.95(d，J＝4.8Hz，1H)，1.21(d，J＝6.6Hz，6H).MS m/z(ESI)：403.2[M+H]。
实施例11：1-(6-(4-((1H-吲唑-5-基)氨基)嘧啶-2-基)-1H-吲哚-1-基)乙-1-酮(TDI01229)的制备
Figure BDA0002391547790001852
第一步：
将化合物TDI01229-1(3g，15.3mmol)溶于无水乙腈(100mL)中，加入乙酰氯(9.69g，61.2mmol)和碳酸铯(19.95g，61.2mmol)，反应液在50℃下反应5小时。LC-MS监测显示反应完全。将反应液冷却至室温，过滤、减压浓缩，残留物通过柱色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝20∶1)纯化得到化合物TDI01229-2(1g，棕色固体，粗品)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 8.66(s，1H)，7.40(d，J＝3.0Hz，1H)，7.39-7.37(m，1H)，6.60(d，J＝3.7Hz，1H)，2.62(s，3H).MS m/z(ESI)：240.0[M+H]。
第二步：
将化合物TDI01229-2(1g，4.2mmol)和双联频哪醇硼酸酯(1.60g，6.3mmol)溶于1，4-二氧六环(40mL)中，加入乙酸钾(1.23g，12.6mmol)及Pd(dppf)Cl2(462mg，0.63mmol)，氩气置换3次，置于90℃油浴中反应过夜。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1)显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩，将残留物通过柱色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1)纯化得到化合物TDI01229-3(372mg，白色固体，产率：20.8％)。MS m/z(ESI)：286.1[M+H]。
第三步：
向化合物TDI01229-3(300mg，0.87mmol)和Reg-1-1(372mg，1.3mmol)的乙醇/水(10∶1)的混合液(11mL)中加入乙酸钾(170mg，1.738mmol)及Pd(dppt)Cl2(63.0mg，0.087mmol)，氩气置换，置于110℃微波中反应1h。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，过滤、减压浓缩，将残留物通过液相色谱法进行纯化，得到化合物TDI01229(3.99mg，黄色固体，产率：1.2％)。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ 8.42(dd，J＝30.4，13.8Hz，4H)，8.27-8.14(m，3H)，7.99(s，1H)，7.69(s，2H)，6.90(s，1H)，2.57(s，3H).MS m/z(ESI)：369.3[M+H]。
实施例12：6-((4-(1H-吡唑-4-基)苯基)氨基)-N-(哒嗪-4-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺(TDI01243)的制备
Figure BDA0002391547790001861
第一步：
向50mL单口瓶中依次加入TDI01243-1(1.0g，4.17mmol)及N，N-二甲基甲酰胺(10mL)，在搅拌下小心加入HATU(2.38g，5.0mmol)和DIEA(1.72mL，10.43mmol)，油浴50℃反应1h。反应完全后，将反应液缓慢倾入搅拌的水(20mL)中，有大量固体析出，搅拌30min后，过滤，将固体依次用冰水及石油醚与乙酸乙酯混合溶剂(v/v＝20/1)洗涤数次，得TDI01243-2(1.26g，灰黄色固体，产率：95.5％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 12.08(s，1H)，10.83(s，1H)，9.56(s，1H)，9.10(d，J＝5.9Hz，1H)，8.12(dd，J＝5.5，2.2Hz，1H)，7.73(d，J＝8.5Hz，1H)，7.66(s，1H)，7.54(s，1H)，7.25(d，J＝8.5Hz，1H).MS m/z(ESI)：317.0[M+H]。
第二步：
向25mL微波管中依次加入化合物TDI01243-2(190.3mg，0.6mmol)、Reg-1-16-e(130mg，0.5mmol)、Pd2(dba)3(50mg，0.05mmol)、t-BuXPhos(106mg，0.25mmol)、碳酸铯(325.8mg，1mmol)及10mL叔丁醇，氩气换气4次，115℃微波下反应2.5h。LC-MS检测反应完全。将反应液过滤，减压浓缩后将固体分别用30mL水和30mL二氯甲烷润洗得0.3g固体，将其通过制备色谱法纯化得到TDI01243(6.90mg，棕黑色固体，收率：1.7％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 11.51(s，1H)，10.64(s，1H)，9.56(s，1H)，9.06(d，J＝5.9Hz，1H)，8.28(s，1H)，8.12(d，J＝3.3Hz，1H)，7.96(s，2H)，7.57(d，J＝8.5Hz，1H)，7.50(d，J＝8.3Hz，2H)，7.45(s，1H)，7.17(s，1H)，7.13(d，J＝8.4Hz，2H)，6.89(d，J＝8.9Hz，1H)，6.57(s，1H).MS m/z(ESI)：396.1[M+H]。
实施例13：6-(2-((1H-吲唑-6-基)氨基)嘧啶-4-基)-N-(哒嗪-4-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺(TDI01249)的制备
Figure BDA0002391547790001862
Figure BDA0002391547790001871
TDI01249-1的制备：
向100mL烧瓶中加入TDI01249-1-a(2g，8.33mmol)和甲醇(20mL)，加入氯化亚砜(1.98g，16.66mmol)，然后在60℃下反应3小时。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1)检测显示反应完全。将反应液浓缩得到粗品，将粗品溶解在二氯甲烷(100mL)中，将二氯甲烷相再用碳酸氢钠饱和水溶液洗两次(每次50mL)。将二氯甲烷相再用饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到TDI01249-1-b(2.149g，棕色固体，产率：100％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.59(s，1H)，7.54(d，J＝8.5Hz，1H)，7.25(d，J＝8.6Hz，1H)，7.18(s，1H)，3.96(s，3H).
将TDI01249-1-b(2g，7.87mmol)和双联频哪醇硼酸酯(3.0g，11.81mmol)溶于1，4-二氧六环(20mL)中，加入乙酸钾(2.32g，23.61mmol)及Pd(dppf)Cl2(130mg，0.157mmol)，氩气置换3次，置于80℃油浴中反应过夜。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝20∶1)检测显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩，将残留物通过柱色谱法分离(石油醚∶乙酸乙酯＝100∶1到5∶1)纯化得到TDI01249-1(2.0g，白色固体，产率：84.37％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 9.08-8.93(m，1H)，7.97-7.86(m，1H)，7.69(d，J＝8.1Hz，1H)，7.61-7.52(m，1H)，7.21(dd，J＝2.1，1.0Hz，1H)，3.95(s，3H)，1.37(s，12H).MS m/z(ESI)：302.2[M+H]。
第一步：
向250mL单口瓶中加入化合物TDI01249-1(2g，6.64mmol)、2，4-二氯嘧啶(1.08g，7.30mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(47mg，0.07mmol)、碳酸钠(1.40g，13.28mmol)，60mL二氧六环及15mL水，氩气换气4次，升温至105℃反应3h，LC-MS显示反应完全。将反应液降温后减压浓缩移除二氧六环，加入100mL水，室温搅拌1h，过滤后得黄色固体2.3g。将固体用二氯甲烷(80mL x 4)润洗得TDI01249-2(0.62g，黄色固体，产率：32.6％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 12.33(s，1H)，8.78(d，J＝5.2Hz，1H)，8.34(s，1H)，8.13(d，J＝5.3Hz，1H)，7.89(d，J＝8.4Hz，1H)，7.83(d，J＝8.5Hz，1H)，7.24(s，1H)，3.91(s，3H).MS m/z(ESI)：288.0[M+H]。
第二步：
向250mL单口瓶中加入化合物TDI01249-2(400mg，1.39mmol)、5-氨基-1H-吲唑-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.86mmol)、Pd2(dba)3(85.6mg，0.09mmol)、2-二叔丁基膦-2′，4′，6′-三异丙基联苯(182.4mg，0.43mmol)、叔丁醇钾(193mg，1.72mmol)及80mL二氧六环，氩气换气4次，升温至110℃反应3h，补加20mg Pd2(dba)3、40mg 2-二叔丁基膦-2′，4′，6′-三异丙基联苯和50mg叔丁醇钾，继续反应1h，LC-MS显示反应完全。将反应液减压浓缩移除二氧六环，加入80mL乙酸乙酯，过滤得滤液，将粗品纯化得TDI01249-3(100mg，黄色固体，产率：24％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 12.31(s，1H)，9.92(s，1H)，8.58(d，J＝5.2Hz，1H)，8.55(d，J＝1.5Hz，1H)，8.46(s，1H)，8.35(s，1H)，8.03(s，1H)，7.94(dd，J＝9.2，1.8Hz，1H)，7.91-7.88(m，1H)，7.84(s，1H)，7.45(d，J＝5.3Hz，1H)，7.25(d，J＝1.2Hz，1H)，3.92(s，3H)，1.67(s，9H).MS m/z(ESI)：485.1[M+H]。
第三步：
向100mL单口瓶中加入化合物TDI01249-3(100mg，0.135mmol)及2mol/L的盐酸/甲醇(5mL)。升温至60℃反应1.5h，LC-MS显示反应完全。将反应液降至室温，加入10mL2mol/L氢氧化钠水溶液，升温至60℃反应0.5h，LC-MS显示反应完全。反应液降至室温再用浓盐酸调节pH＞12，减压浓缩移除甲醇，再加入20mL水，搅拌后过滤，将过滤后得到的固体干燥后得化合物TDI01249-4(50mg，黄色固体，收率：23.8％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 12.22(s，1H)，9.82(s，1H)，8.57(d，J＝5.4Hz，1H)，8.39(s，2H)，8.15(s，1H)，7.92(d，J＝1.1Hz，1H)，7.87(s，1H)，7.72(dd，J＝10.6，9.0Hz，1H)，7.60(s，1H)，7.46(d，J＝5.4Hz，1H)，7.22(s，1H).MS m/z(ESI)：371.0[M+H]。
第四步：
向25mL单口瓶中加入化合物TDI01249-4(50mg，0.135mmol)、哒嗪-4-胺(15.4mg，0.162mmol)、HATU(61.7mg，0.162mmol)、DIEA(70mg，0.54mmol)和4mLN，N-二甲基甲酰胺，在室温下反应0.5h，LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，加入至20mL水中，得固体，将其干燥后通过制备色谱法纯化，得到TDI01249(14.38mg，黄色固体，收率：23.8％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 12.89(s，1H)，12.33(s，1H)，10.94(s，1H)，9.62(d，J＝17.6Hz，2H)，9.14(d，J＝5.8Hz，1H)，8.54(d，J＝5.2Hz，1H)，8.36(d，J＝5.8Hz，2H)，8.18(d，J＝3.2Hz，1H)，8.08(s，1H)，7.90(s，2H)，7.69(s，1H)，7.61(s，1H)，7.51(d，J＝8.8Hz，1H)，7.38(d，J＝5.2Hz，1H).MS m/z(ESI)：448.0[M+H]。
实施例14：6-(2-((1H-吲唑-5-基)氨基)-6-甲基嘧啶-4-基)-N-(哒嗪-4-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺(TDI01261)的制备
Figure BDA0002391547790001881
第一步：
将化合物TDI01261-1(2.0g，8.58mmol)和5-氨基-1H-吲唑-1-甲酸叔丁酯(1.68g，10.296mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(150mL)中，加入二异丙基乙胺(4.427g，34.32mmol)，将反应液缓慢升温至100℃，并在此温度下反应16小时。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝2∶1)监测显示反应完全。将反应液缓慢倒入水(900mL)中，搅拌30分钟后过滤，将残留物通过柱色谱法分离(石油醚∶乙酸乙酯＝1∶0到1∶1)进行纯化，得到化合物TDI01261-2(300mg，淡黄色固体)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 10.18(s，1H)，8.40(s，1H)，8.37(s，1H)，7.98(d，J＝9.2Hz，1H)，7.77(dd，J＝9.2，1.6Hz，1H)，6.92(s，1H)，2.40(s，3H)，1.65(s，8H).MS m/z(ESI)：360.0[M+H]。
第二步：
将化合物TDI01261-2(300mg，0.836mmol)和TDI01249-1(299mg，1.672mmol)溶于乙醇∶水(10∶1)的混合液(30mL)中，加入碳酸钠(177mg，1.672mmol)及Pd(PPh3)2Cl2(59mg，0.0836mmol)，氩气置换3次，置于110℃油浴中反应过夜。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，过滤，减压浓缩，将残留物用二氯甲烷(500mL)溶解，用水(500mL x 3)洗涤，将水相用浓盐酸(3mL)调节pH至2左右，过滤得到化合物TDI01261-3(110mg，黄色固体，产率：32.7％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 12.20(s，1H)，9.90(s，1H)，8.33(d，J＝5.6Hz，2H)，8.12(s，1H)，7.87(d，J＝8.4Hz，1H)，7.81(d，J＝8.4Hz，1H)，7.71-7.66(m，1H)，7.56(d，J＝8.8Hz，1H)，7.42(s，1H)，7.17(s，1H)，2.09(s，3H).MS m/z(ESI)：385.1[M+H]。
第三步：
将化合物TDI01261-3(100mg，0.26mmol)和哒嗪-4-胺(30mg，0.313mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(10mL)中，加入HATU(120mg，0.313mmol)和二异丙基乙胺(130mg，1.04mmol)，反应液在室温下反应过夜。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，过滤，减压浓缩，将残留物通过液相色谱法进行纯化，得到化合物TDI01261(11.02mg，黄色固体，产率：10.2％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 13.07-12.76(m，1H)，12.35(s，1H)，11.07(s，1H)，9.61(s，2H)，9.18(d，J＝5.6Hz，1H)，8.39(d，J＝20.0Hz，2H)，8.26(d，J＝3.6Hz，1H)，8.09(s，1H)，7.90(s，2H)，7.72(d，J＝8.8Hz，1H)，7.63(s，1H)，7.51(d，J＝8.8Hz，1H)，7.32(s，1H)，2.46(s，3H).MS m/z(ESI)：462.1[M+H]。
实施例15：6-(5-((1H-吲唑-5-基)氨基)-1，3，4-噻二唑-2-基)-N-异丙基-1H-吲哚-2-甲酰胺(TDI01147)的制备
Figure BDA0002391547790001891
第一步：
将化合物TDI01147-1(2.00g，8.33mmol)溶于无水甲苯(30mL)中，在回流下缓慢加入1，1-二叔丁氧基-N，N-二甲基甲胺(4.56g，22.5mmol)，在油浴120℃下反应过夜。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1)监测显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩，将粗品用柱色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝15∶1)分离纯化得到化合物TDI01147-2(1.85g，白色固体，产率：75.2％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.95(s，1H)，7.59(s，1H)，7.53(d，J＝8.4Hz，1H)，7.24(dd，J＝8.4，1.6Hz，1H)，7.10(d，J＝1.2Hz，1H)，1.62(s，9H).
第二步：
将化合物TDI01147-2(1.85g，6.27mmol)溶于甲醇(150mL)中，加入三乙胺(1.90g，18.8mmol)及Pd(dppf)Cl2(461mg，0.63mmol)，用CO置换3次，置于80℃油浴中反应过夜。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1)显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩，将残留物用二氯甲烷(150mL)稀释，依次用水(150mL)和饱和食盐水(150mL x 2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，将粗品用柱色谱法(乙酸乙酯/石油醚＝6.2％～8.5％)分离纯化得到化合物TDI01147-3(620mg，黄色固体，产率：36.0％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 9.10(s，1H)，8.18(s，1H)，7.82(dd，J＝8.4，1.2Hz，1H)，7.70(d，J＝8.4Hz，1H)，7.16(d，J＝1.2Hz，1H)，3.95(s，3H)，1.63(s，9H).
第三步：
将化合物TDI01147-3(570mg，2.07mmol)溶于乙醇(12mL)，加入水合肼(3mL)，微波90℃反应1小时。LC-MS显示原料和产物各有一半。将反应液用乙酸乙酯(80 mL)稀释，依次用水(100mL)和饱和食盐水(100mL x 2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，将粗品用乙酸乙酯润洗得到化合物TDI01147-4(300mg，黄色固体，产率：52.6％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 11.98(s，1H)，9.76(s，1H)，7.95(s，1H)，7.67(d，J＝8.4Hz，1H)，7.52(dd，J＝8.4，1.2Hz，1H)，7.08(s，1H)，4.49(s，2H)，1.58(s，9H).
第四步：
将化合物TDI01147-4(250mg，0.91mmol)溶于无水二氯甲烷/1，2-二氯乙烷(2∶1)的混合液(15mL)中，加入化合物5-异硫氰酸基(isothiocyanato)-1H-吲唑-1-甲酸叔丁酯(250mg，0.91mmol)，反应液缓慢升温至50℃并在此温度下反应16小时。将反应液冷却至室温，将浓硫酸缓慢加入到搅拌的反应液中，在室温下反应6小时。LC-MS显示反应完全。将反应液减压浓缩，将粗品用水(30mL)稀释，用饱和碳酸钠水溶液调节pH至9，有大量固体析出，室温搅拌1小时，过滤，将固体用甲苯溶解再浓缩得到化合物TDI01147-5(250mg，黄色固体，产率：73.3％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 13.02(s，2H)，12.00(s，1H)，10.46(s，1H)，8.27(s，1H)，8.07(s，1H)，7.91(s，1H)，7.77(d，J＝8.4Hz，1H)，7.60-7.54(m，2H)，7.43(d，J＝8.6Hz，1H)，7.15(s，1H).MS m/z(ESI)：377.1[M+H]。
第五步：
将化合物TDI01147-5(100mg，0.27mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(6mL)中，加入HATU(122mg，0.32mmol)和二异丙基乙胺(139mg，1.08mmol)，室温反应30min后加入异丙胺(18.8mg，0.32mmol)，继续室温反应过夜。LC-MS显示反应完全。将反应液缓慢加入水(20mL)中，有大量固体析出，搅拌30min后，过滤，将固体用高效液相色谱法纯化得到化合物TDI01147(6.03mg，黄色固体，产率：5.4％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.01(s，1H)，11.79(s，1H)，10.44(s，1H)，8.34(d，J＝7.6Hz，1H)，8.27(s，1H)，8.07(s，1H)，7.90(s，1H)，7.73(d，J＝8.4Hz，1H)，7.56(d，J＝8.4Hz，2H)，7.43(d，J＝8.8Hz，1H)，7.22(s，1H)，4.17-4.12(m，1H)，1.21(d，J＝6.4Hz，6H).MS m/z(ESI)：418.1[M+H]。
实施例16：6-(3-((1H-吲唑-5-基)氨基)哌啶-1-基)-N-(哒嗪-4-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺(TDI01234)的制备
Figure BDA0002391547790001901
第一步：
将化合物TDI01234-1(2.0g，8.86mmol)溶于1，2-二氯乙烷(150mL)中，加入三乙胺(746mg，7.38mmol)，将反应液升温至30℃搅拌1.5小时。然后加入5-氨基-1H-吲唑-1-甲酸叔丁酯(1.72g，7.38mmol)和醋酸(443mg，7.38mmol)，搅拌0.5小时后加入三乙酰氧基硼氢化钠(4.69g，22.14mmol)，保持30℃反应过夜。薄层色谱法(二氯甲烷∶甲醇＝60∶1)监测显示反应完全。将反应液用二氯甲烷(1500mL)溶解，依次用水(150mL x 2)和饱和食盐水(150mL)洗涤，将有机相用无水硫酸钠干燥，浓缩，通过柱色谱法(二氯甲烷∶甲醇＝1∶0到60∶1)进行纯化，得到化合物TDI01234-2(1.0g，棕黄色固体)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.96(s，1H)，7.93(d，J＝8.8Hz，1H)，7.30(dd，J＝13.6，5.2Hz，4H)，7.24(dd，J＝5.2，3.2Hz，1H)，6.88(dd，J＝8.8，2.1Hz，1H)，6.75(d，J＝1.6Hz，1H)，4.16(s，1H)，3.66-3.44(m，3H)，2.57(d，J＝120.0Hz，4H)，1.70(s，11H)，1.59(s，2H).MS m/z(ESI)：407.3[M+H]。
第二步：
将化合物TDI01234-2(0.6g，1.478mmol)溶于甲醇(50mL)中，加入钯/碳(100mg)，用氢气置换3次，置于35℃油浴中反应过夜。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，过滤，减压浓缩，通过柱色谱法(二氯甲烷∶甲醇＝1∶0到10∶1)进行纯化，得到化合物TDI01234-3(200mg，类白色固体)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.98(s，1H)，7.93(d，J＝8.8Hz，1H)，6.94-6.88(m，1H)，6.83-6.78(m，1H)，4.09(s，1H)，3.56(s，1H)，3.33-3.19(m，1H)，2.99-2.90(m，1H)，2.81(d，J＝8.0Hz，1H)，2.68(dd，J＝11.2，7.1Hz，1H)，1.84(dd，J＝13.6，6.7Hz，2H)，1.71(s，9H)，1.59(dd，J＝19.2，13.9Hz，3H).MS m/z(ESI)：317.3[M+H]。
第三步：
根据实施例2中第三步，并将
Figure BDA0002391547790001911
用
Figure BDA0002391547790001912
代替，将
Figure BDA0002391547790001913
用
Figure BDA0002391547790001914
代替，制备得到6-溴N-(哒嗪-4-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺。
将化合物TDI01234-3(400mg，1.27mmol)和6-溴N-(哒嗪-4-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺(400mg，1.27mmol)溶于二甲基亚砜(10mL)中。然后加入Pd2(dba)3(120mg，0.127mmol)、t-BuXPhos(823mg，2.53mmol)和碳酸铯(268.4mg，0.63mmol)，氩气保护下微波反应2小时。LC-MS显示反应完全后，将反应液冷却至室温，缓慢加入到水(80mL)中，过滤，将滤饼用二氯甲烷∶乙酸乙酯＝1∶1(20 mL x 2)润洗，将残留物通过液相色谱法进行纯化，得到化合物TDI01234(2.58mg，黄色固体)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 12.06(s，1H)，11.05(s，1H)，10.20(s，1H)，9.61(s，1H)，9.10(s，2H)，8.95(s，1H)，8.18(s，1H)，8.07(s，1H)，7.87(d，J＝8.4Hz，1H)，7.76(s，1H)，7.66(d，J＝9.6Hz，1H)，7.51(d，J＝8.8Hz，1H)，6.98(d，J＝8.4Hz，1H)，6.89(s，1H)，3.24(s，1H)，2.87(s，1H)，1.95(d，J＝46.4Hz，3H)，1.74(s，2H)，1.52(s，2H).MS m/z(ESI)：451.3[M-H]。
实施例17：6-((3-(1H-吡唑-4-基)苯基)氨基)-N-(哒嗪-4-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺(TDI01245)的制备
Figure BDA0002391547790001915
第一步：
将化合物TDI01245-1(5.0g，25.77mmol)溶于二氯甲烷(100mL)中，加入二异丙基乙胺(13.30g，100.08mmol)和4-二甲氨基吡啶(1.57g，12.88mmol)，室温搅拌十分钟后加入二碳酸二叔丁酯(11.24g，51.55mmol)。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)显示反应完全。将反应液用二氯甲烷(400mL)溶解，依次用水(500mL x 2)和饱和食盐水(500mL)洗涤，将有机相用无水硫酸钠干燥，浓缩，通过柱色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝1∶0到10∶1)进行纯化，得到化合物TDI01245-2(4.58g，白色固体)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 8.42-8.34(m，1H)，7.93(s，1H)，1.65(s，9H)，1.34(s，12H).
第二步：
将化合物TDI01245-2(5.0g，17.01mmol)和1-溴-3-硝基苯(2.863g，14.17mmol)溶于1，4-二氧六环/水(8∶1)的混合液(500mL)中，加入碳酸钾(3.91g，28.34mmol)及Pd(dppf)Cl2(497mg，0.708mmol)，氩气置换3次，置于110℃油浴中反应过夜。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，过滤，减压浓缩，将残留物用二氯甲烷(500mL)溶解，依次用水(500mL x2)和饱和食盐水(500mL)洗涤，将有机相用无水硫酸钠干燥，浓缩，通过柱色谱法(二氯甲烷∶甲醇＝1∶0到50∶1)进行纯化，得到化合物TDI01245-3(850mg，黄色固体)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 13.14(s，1H)，8.44(d，J＝11.2Hz，2H)，8.20-8.06(m，2H)，8.03(dd，J＝8.0，1.6Hz，1H)，7.65(t，J＝8.0Hz，1H).MS m/z(ESI)：190.3[M+H]。
第三步：
将化合物TDI01245-3(850mg，4.497mmol)溶于二氯甲烷(100mL)中，加入二异丙基乙胺(2.32g，17.989mmol)和4-二甲氨基吡啶(274mg，2.249mmol)，室温搅拌十分钟后加入二碳酸二叔丁酯(1.96g，8.995mmol)。薄层色谱法(二氯甲烷)显示反应完全。将反应液用二氯甲烷(400mL)溶解，依次用水(250mL x 2)和饱和食盐水(250mL)洗涤，将有机相用无水硫酸钠干燥，浓缩，通过柱色谱法(石油醚∶二氯甲烷＝10∶1到1∶1)进行纯化，得到化合物TDI01245-4(820mg，白色固体)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 8.43(s，1H)，8.38(t，J＝1.6Hz，1H)，8.16(dd，J＝8.0，1.2Hz，1H)，7.85(d，J＝7.6Hz，1H)，7.59(t，J＝8.0Hz，1H)，7.26(s，1H)，1.70(s，9H).
第四步：
将化合物TDI01245-4(820mg，2.837mmol)溶于甲醇(100mL)中，加入钯/碳(100mg)，氢气置换3次，置于35℃油浴中反应过夜。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，过滤，减压浓缩，通过柱色谱法分离(二氯甲烷∶甲醇＝1∶0到100∶1)进行纯化，得到化合物TDI01245-5(650mg，类白色固体)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 8.25(s，1H)，7.95(s，1H)，7.18(t，J＝7.6Hz，1H)，6.92(d，J＝7.6Hz，1H)，6.84(s，1H)，6.63(d，J＝8.0Hz，1H)，3.71(s，2H)，1.67(s，9H).MS m/z(ESI)：249.0[M-H]。
第五步：
将化合物TDI01245-5(300mg，1.158mmol)和6-溴N-(哒嗪-4-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺(其合成方法如实施例12中所描述)(366mg，1.158mmol)溶于叔丁醇(8mL)中。加入Pd2(dba)3(110mg，0.116mmol)、t-BuXPhos(753mg，2.316mmol)和碳酸铯(245.5mg，0.579mmol)，氩气保护下微波115℃反应2小时。LC-MS显示反应完全。将反应液旋转蒸发至干燥，用二氯甲烷(20mL)打浆，过滤，将残留物通过液相色谱法进行纯化，得到化合物TDI01245(53.25mg，棕红色固体)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 11.55(s，1H)，10.81(s，1H)，9.56(s，1H)，9.13(s，1H)，8.23(s，2H)，7.98(s，2H)，7.58(d，J＝8.8Hz，1H)，7.47(s，1H)，7.37(s，1H)，7.25(s，2H)，7.09(d，J＝7.6Hz，1H)，6.93(dd，J＝21.2，7.9Hz，2H).MS m/z(ESI)：396.2[M-H]。
实施例18：6-(4-((1H-吲唑-5-基)氨基)嘧啶-2-基)-N-(1，3，4-噻二唑-2-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺(TDI01247)的制备
Figure BDA0002391547790001921
第一步；
将化合物TDI01247-1(其合成如实施例13中所述)(3.00g，9.97mmol)溶于四氢呋喃(50mL)中，加入二异丙基乙胺(5.15g，39.9mmol)和二甲基氨基吡啶(182mg，1.50mmol)，在室温下于搅拌下缓慢加入二碳酸二叔丁酯(3.25g，14.9mmol)，室温反应过夜。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1)显示反应完全。将反应液用水(80mL)稀释，乙酸乙酯萃取(100mL x 2)，合并有机相，并将其依次用0.5M HCl(80mL x2)和饱和食盐水(100mL x 2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到化合物TDI01247-2(2.8g，黄色固体，产率：70％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 8.58(s，1H)，7.69(d，J＝8.0Hz，1H)，7.59(d，J＝8.0Hz，1H)，7.07(s，1H)，3.93(s，3H)，1.63(s，9H)，1.36(s，12H).
第二步：
将化合物TDI01247-2(2.8g，6.98mmol)溶于四氢呋喃/甲醇/水(2∶2∶1)的混合液(25mL)中，加入氢氧化锂(2.93g，69.8mmol)，室温反应过夜。LC-MS显示原料反应完全。将反应液减压浓缩，粗品用柱色谱法(二氯甲烷/甲醇＝12∶1)纯化得到化合物TDI01247-3(1.3g，黄色固体，产率：48.3％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 11.89(s，1H)，8.37(s，1H)，7.70(d，J＝8.0Hz，1H)，7.58(d，J＝8.0Hz，1H)，7.20(s，1H)，1.57(s，9H)，1.32(s，12H).MS m/z(ESI)：388.2[M+H]。
第三步：
将化合物TDI01247-3(800mg，2.07mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(10mL)中，加入HATU(945mg，2.48mmol)和二异丙基乙胺(1.07g，8.28mmol)，室温搅拌30min后加入1，3，4-噻二唑-2-胺(250mg，2.48mmol)，继续在室温下反应过夜。LC-MS和薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1)监测显示反应完全。将反应液用乙酸乙酯(80mL)稀释，依次用水(60mL x 2)和饱和食盐水(80mL x 2)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，将粗品用柱色谱法(乙酸乙酯/石油醚＝10％～50％)分离纯化得到化合物TDI01247-4(100mg，黄色固体，产率：10.3％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 11.45(s，1H)，8.86(s，1H)，8.65(s，1H)，7.74(d，J＝8.0Hz，1H)，7.66(d，J＝8.0Hz，1H)，7.39(s，1H)，1.60(s，9H)，1.37(s，12H).MS m/z(ESI)：471.2[M+H]。
第四步：
将化合物TDI01247-5(6.00g，17.4mmol)溶于四氢呋喃(150mL)中，加入二异丙基乙胺(8.98g，69.6mmol)和二甲基氨基吡啶(212mg，1.74mmol)，室温下，于搅拌下缓慢加入二碳酸二叔丁酯(4.55g，20.9mmol)，室温反应过夜。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1)显示反应完全。将反应液用水(80mL)稀释，乙酸乙酯萃取(100mL x 2)，合并有机相，并将其依次用0.5M HCl(150mL x 2)和饱和食盐水(200mL x 2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到化合物TDI01247-6(Reg-1-27，7.0g，黄色固体，产率：90.9％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 8.63(d，J＝6.0Hz，1H)，8.45(s，1H)，8.13(d，J＝8.8Hz，1H)，8.02(d，J＝6.0Hz，1H)，7.82(d，J＝2.0Hz，1H)，7.50(dd，J＝8.8，2.0Hz，1H)，1.67(s，9H)，1.36(s，9H).
第五步：
将化合物TDI01247-4(100mg，0.21mmol)和TDI01247-6(78.9mg，0.18mmol)溶于乙醇/水(8∶1)的混合液(9mL)中，加入碳酸钠(38.2mg，0.36mmol)及Pd(PPh3)2Cl2(14.0mg，0.02mmol)，氩气置换3次，置于110℃油浴中反应过夜。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，过滤，减压浓缩，将残留物用薄层制备色谱法(乙酸乙酯)纯化得到化合物TDI01247-7(50mg，黄色油状物，产率：51.0％)。MS m/z(ESI)：554.2[M+H]。
第六步：
将化合物TDI01247-7(50mg，0.09mmol)溶于二氯甲烷(2mL)中，室温下加入三氟乙酸(1mL)，油浴40℃反应2小时。LC-MS显示反应完全。将反应液减压浓缩，将粗品用高效液相色谱法(三氟乙酸)分离纯化得到化合物TDI01247(8.23mg，黄色固体，产率：20.1％)。
1H NMR(400MHz，CD3OD，DMSO-d6)δ 9.12(s，1H)，8.42(s，1H)，8.23(d，J＝7.2Hz，1H)，8.18(s，2H)，7.95(d，J＝8.4Hz，2H)，7.90(d，J＝8.8Hz，1H)，7.71(d，J＝8.8Hz，2H)，7.63(s，2H)，6.90(d，J＝6.8Hz，1H).MS m/z(ESI)：454.1[M+H]。
实施例19：1-(6-(4-((1H-吲唑-5-基)氨基)嘧啶-2-基)-1H-吲哚-1-基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙-1-酮(TDI01230)的制备
Figure BDA0002391547790001941
第一步：
将化合物2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙酸(2.4g，15.3mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(10mL)中，加入PyBOP(7.9g，15.3mmol)，将反应液在常温下搅拌1小时。再加入TDI01230-1(2g，10.2mmol)和DIPEA(3.9g，30.6mmol)，常温继续反应2h。由LC-MS监测显示反应完全。向反应液加入水(25mL)，用二氯甲烷(50mL×3)萃取，将有机相用饱和食盐水(10mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩后通过柱色谱法(二氯甲烷∶甲醇＝100∶0到20∶1)进行纯化，得到化合物TDI01230-2(600g，黄色固体，粗品，产率：11.6％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 8.51(s，1H)，7.95(d，J＝3.8Hz，1H)，7.60(d，J＝8.3Hz，1H)，7.46(d，J＝1.7Hz，1H)，6.76(d，J＝3.7Hz，1H)，3.89(s，2H)，2.70(d，J＝5.7Hz，8H)，2.38(s，3H).MS m/z(ESI)：336.1[M+H]。
第二步：
将化合物TDI01230-2(600mg，1.79mmol)和双联频哪醇硼酸酯(908mg，6.3mmol)溶于1，4-二氧六环(10mL)中，加入乙酸钾(527mg，5.37mmol)及Pd(dppf)Cl2(132mg，0.18mmol)，氩气置换3次，置于110℃油浴中反应过夜。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝20∶1)显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩，将残留物通过柱色谱法(二氯甲烷/甲醇＝100∶0到20∶1)纯化，得到化合物TDI01230-3(300mg，棕色固体，产率：43.8％)。MS m/z(ESI)：384.3[M+H]。
第三步：
将化合物TDI01230-3(100mg，0.225mmol)和5-((叔丁氧羰基)(2-氯嘧啶-4-基)氨基)-1H-吲唑-1-甲酸叔丁酯(其合成请参见实施例18)(129mg，0.337mmol)溶于四氢呋喃/水(1∶2)的混合液(3mL)中，加入磷酸钾(96mg，0.45mmol)及氯(2-二环己基膦基-2′，4′，6＇-三异丙基-1，1＇-联苯基)[2-(2′-氨基-1，1′-联苯)]钯(II)(4mg，0.005mmol)，氩气置换，置于60℃油浴中反应2h。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，加入水(5mL)，用二氯甲烷(5mL×3)萃取，将有机相用饱和食盐水(5mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩后通过薄层色谱法(二氯甲烷∶甲醇＝15∶1)进行纯化得到化合物TDI01230-4(30mg，黄色固体，产率：20.0％)。MS m/z(ESI)：369.3[M+H]。
第四步：
将三氟乙酸(1.5mL)加入到TDI01230-4(30mg，0.045mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液中，室温反应2小时。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩，将残留物通过液相色谱法进行纯化，得到化合物TDI01230(7.13mg，黄色固体，产率：34.0％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 10.47(s，1H)，9.77(s，1H)，9.55(s，1H)，8.64(s，1H)，8.44-8.31(m，2H)，8.26(d，J＝7.8Hz，1H)，8.09(s，1H)，7.81(d，J＝7.9Hz，1H)，7.63(d，J＝8.5Hz，1H)，7.52(d，J＝8.0Hz，1H)，6.95-6.78(m，2H)，4.14(s，2H)，3.47(s，2H)，3.20(s，4H)，2.85(s，3H)，2.73(s，2H).MS m/z(ESI)：467.3[M+H]。
实施例20：2-(5-(4-((1H-吲唑-5-基)氨基)嘧啶-2-基)异二氢吲哚-2-基)-N-(哒嗪-4-基)乙酰胺(TDI01238)的制备
Figure BDA0002391547790001951
第一步：
将化合物TDI01238-1(1g，10.526mmol)、氯乙酰氯(1.3g，11.504mmol)及三乙胺(1.17g，11.584mmol)溶于二氯甲烷(10mL)中，反应液在室温下反应3小时。LC-MS显示反应完全，将水(25mL)和二氯甲烷(30mL)加入反应液，有沉淀析出，过滤后将滤饼用水和正己烷洗涤，干燥后得化合物TDI01238-2(950mg，棕色固体，收率：52.78％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 10.97(s，1H)，9.30(dd，1H)，9.07(dd，1H)，7.92(dd，1H)，4.37(s，2H).MS m/z(ESI)：172.1[M+H]。
第二步：
将化合物TDI01238-3(500mg，2.132mmol)、4-甲苯磺酰氯(447mg，2.345mmol)、4-二甲氨基吡啶(78mg，0.6396mmol)、二异丙基乙胺(825mg，6.396mmol)和四氢呋喃/乙腈(20/8mL)混合后，在室温下反应16h。反应结束后将反应液浓缩至干，向残留物加入水后用乙酸乙酯(20mL x 2)萃取，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后浓缩至干，用石油醚润洗得到化合物TDI01238-4(700mg，白色固体，收率：93.58％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.76(d，2H)，7.33(dd，4H)，7.03(d，1H)，4.57(d，4H)，2.41(s，3H).MS m/z(ESI)：352.1[M+H]。
第三步：
将化合物TDI01238-4(700mg，1.988mmol)和双联频哪醇硼酸酯(757mg，2.983mmol)溶于1，4-二氧六环(20mL)中，加入乙酸钾(584mg，5.964mmol)及Pd(dppf)Cl2(146mg，0.199mmol)，氩气置换3次，置于105℃油浴中反应4h。反应完毕后，将反应液过滤，滤液减压浓缩至干，向残留物加入水后用二氯甲烷(20mL x 2)萃取，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后浓缩至干，用柱色谱法纯化(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1)得化合物TDI01238-5(740mg，白色固体，收率：93.3％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.76(d，2H)，7.67(d，1H)，7.61(s，1H)，7.30(d，2H)，7.17(d，1H)，4.62(d，4H)，2.39(s，3H)，1.32(s，12H).MS m/z(ESI)：400.2[M+H]。
第四步：
将化合物TDI01238-5(0.5g，1.253mmol)和Reg-1-1(288mg，0.835mmol)溶于乙醇/水(8/1 mL)的混合液中，加入碳酸钠(266mg，2.505mmol)及Pd(PPh3)2Cl2(59mg，0.0835mmol)，氩气置换3次，置于100℃油浴中反应2h。反应完毕后，将反应液过滤，将滤液减压浓缩至干，向残留物加入水后用乙酸乙酯(20mL x 3)萃取，合并有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后浓缩至干，用柱色谱法纯化(二氯甲烷∶甲醇＝30∶1-20∶1)得化合物TDI01238-6(260mg，黄色油状物，收率：64.68％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 8.30(dd，1H)，8.20(s，0.5H)，8.09(d，1H)，7.77(dd，2.5H)，7.68(m，1H)，7.55(dd，1H)，7.47(d，0.5H)，7.32(m，5H)，7.17(d，0.3H)，7.02(s，0.4H)，6.49(dd，0.7H)，4.65(dd，4H)，2.40(d，3H).MS m/z(ESI)：483.3[M+H]。
第五步：
将化合物TDI01238-6(245mg，0.508mmol)和氢溴酸(5mL)置于95℃油浴中反应6h。反应完毕后将反应液减压浓缩至干，加入甲苯10mL复溶后再减压浓缩至干，得化合物TDI01238-7(150mg，黄色固体，收率：90.36％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 11.47(s，1H)，9.69(s，2H)，9.48(s，1H)，8.40(d，1H)，8.19(s，2H)，7.70(m，2H)，7.49(d，1H)，7.13(d，1H)，4.67(s，3H)，4.53(t，2H).MS m/z(ESI)：329.2[M+H]。
第六步：
将化合物TDI01238-7(100mg，0.244mmol)、TDI01238-2(37mg，0.219mmol)及N，N-二异丙基乙胺(94mg，0.732mmol)溶于乙腈(4mL)中，70℃油浴中反应3h。反应结束后过滤除去不溶物，将滤液蒸干，用薄层制备色谱法纯化(二氯甲烷∶甲醇＝10∶1)得到50mg粗品，用高效液相色谱法纯化得到化合物TDI01238(13.17mg，黄色固体，产率：11.65％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.07(s，1H)，11.30(s，1H)，9.92(s，1H)，9.36(s，1H)，9.14(d，1H)，8.36(m，2H)，8.19(s，1H)，8.11(s，1H)，7.97(m，1H)，7.57(dd，2H)，6.75(d，1H)，4.84(s，3H)，4.60(s，1H).MS m/z(ESI)：464.3[M+H]。
实施例21：5-(4-((1H-吲唑-5-基)氨基)嘧啶-2-基)-N-(哒嗪-4-基)异二氢吲哚-2-甲酰胺(TDI01237)的制备
Figure BDA0002391547790001961
第一步：
在冰浴下，将氯甲酸苯酯(1.24g，7.89mmol)加入到TDI01237-1(500mg，5.27mmol)和三乙胺(1.06g，10.54mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中，室温反应2h。由LC-MS监测反应完全。加入水(15mL)淬灭，依次用二氯甲烷(30mL)萃取，饱和食盐水(15mL)洗涤，干燥，浓缩得TDI01237-2(600mg，粗品)。MS m/z(ESI)：216.1[M+H]。
第二步：
将化合物TDI01237-2(410mg，1.91mmol)和5-溴异二氢吲哚盐酸盐(895mg，3.82mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(5mL)，加入三乙胺(2mL)，油浴100℃反应1h。由LC-MS监测显示反应完全。将水(15mL)缓慢加入到反应液中，有大量固体析出，搅拌30min后，过滤，得固体为TDI01237-3(380mg，酒红色固体，产率：62.56％)。MS m/z(ESI)：319.2[M+H]。
第三步：
将化合物TDI01237-3(350mg，1.09mmol)和双联频哪醇硼酸酯(558mg，2.19mmol)溶于二氧六环(12mL)中，加入乙酸钾(323mg，3.29mmol)及Pd(dppf)Cl2(81mg，0.11mmol)，氩气置换3次，置油浴中反应过夜。薄层色谱法(二氯甲烷/甲醇＝10∶1)显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩，将残留物通过柱色谱法分离(二氯甲烷/甲醇＝20∶1)，得到化合物TDI01237-4(120mg，黄色固体，产率：30.08％)。MS m/z(ESI)：367.2[M+H]。
第四步：
将化合物TDI01237-4(100mg，0.273mmol)和中间体Reg-1-27(80mg，0.182mmol)溶于乙醇/水＝5/2(7mL)中，加入碳酸钠(58mg，0.546mmol)及Pd(PPh3)2(13mg，0.018mmol)，氩气置换3次，微波110℃下反应1.5h。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，过滤，浓缩后加入水(5mL)，用二氯甲烷(15mL)萃取，用饱和食盐水(5mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩后通过薄层色谱法分离(二氯甲烷∶甲醇＝10∶1)进行纯化，得到化合物TDI01237-5(30mg，黄色固体，产率：30.03％)。MS m/z(ESI)：550.3[M+H]。
第五步：
将三氟乙酸(1mL)加入到TDI01237-5(30mg，0.055mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液中，室温反应2小时。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩，将残留物通过液相色谱法进行纯化，得到化合物TDI01237(2.13mg，黄色固体，产率：8.53％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 10.09(s，1H)，9.79(s，1H)，9.46(d，J＝2.3Hz，1H)，9.11(d，J＝6.4Hz，1H)，8.36(d，J＝6.2Hz，1H)，8.29(d，J＝8.1Hz，2H)，8.19(dd，J＝7.4，4.8Hz，2H)，8.12(s，1H)，7.62-7.53(m，3H)，6.76(d，J＝6.2Hz，1H)，4.95(s，4H).MS m/z(ESI)：450.2[M+H]。
通过与实施例21中所述类似方法，制备下表4中的化合物。
Figure BDA0002391547790001981
Figure BDA0002391547790001991
实施例22：2-(6-(4-((1H-吲唑-5-基)氨基)嘧啶-2-基)-1-氧代异二氢吲哚-2-基)-N-(哒嗪-4-基)乙酰胺(TDI01239)的制备
Figure BDA0002391547790002001
第一步：
将TDI01239-1(500mg，2.358mmol)溶于四氢呋喃(24mL)中并冷却至0℃，氮气保护下将60％NaHH(236mg，5.895mmol)加入上述反应液中，加完后室温反应1h。然后于0℃加入溴乙酸乙酯，之后室温反应2h。LC-MS检测反应完全。反应完成后加入冰水和1N HCl溶液淬灭反应，将水相用乙酸乙酯(15mL)萃取，将合并的有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后浓缩至干，得TDI01239-2(700mg，黄色固体，收率：99.57％)。MS m/z(ESI)：298.1[M+H]。
第二步：
将TDI01239-2(700mg，2.357mmol)、一水合氢氧化锂(297mg，7.071mmol)加入到四氢呋喃(10mL)与水(10mL)的混合溶液中，然后室温搅拌反应2h。LC-MS检测反应完全。用稀盐酸调节pH＝3后，再用乙酸乙酯(2mL)萃取。合并有机相，并用饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥后浓缩至干，得TDI01239-3(600mg，黄色固体，收率：94.64％)。MS m/z(ESI)：270.1[M+H]。
第三步：
将TDI01239-3(0.3g，1.115mmol)和双联频哪醇硼酸酯(425mg，1.673mmol)溶于1，4-二氧六环(10mL)中，加入乙酸钾(328mg，3.345mmol)及Pd(dppf)Cl2(82mg，0.1115mmol)，氩气置换3次，置于100℃油浴中反应3h。LC-MS检测反应完全。反应完毕过滤后，将滤液减压浓缩得TDI01239-4(350mg，黑色油状物，粗品)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 7.96(s，1H)，7.90(d，1H)，7.64(d，1H)，4.55(s，2H)，4.27(s，2H)，1.32(s，12H)。MS m/z(ESI)：318.2[M+H]。
第四步：
将TDI01239-4(350mg，1.104mmol)和Reg-1-1(254mg，0.736mmol)溶于乙醇(10mL)和水(1.25mL)的混合液中，加入碳酸钠(234mg，2.208mmol)及Pd(PPh3)2Cl2(52mg，0.0736mmol)，氩气置换3次，置于100℃油浴中反应16h。LC-MS检测反应完全，将反应液过滤并蒸干滤液，将残留物经柱色谱法纯化(二氯甲烷∶甲醇＝20∶1-1∶1)，得到TDI01239-5(130mg，浅黄色固体，收率：29.48％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.88(s，1H)，8.63(s，1H)，8.55(d，1H)，8.36(d，J＝5.9Hz，1H)，8.20(s，1H)，8.04(s，1H)，7.69(d，1H)，7.57(s，2H)，6.75(d，1H)，4.62(s，2H)，3.87(s，2H)。MS m/z(ESI)：401.2[M+H]。
第五步：
将TDI01239-5(70mg，0.175mmol)和4-氨基哒嗪(20mg，0.21mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(2mL)中，加入HATU(66mg，0.175mmol)和二异丙基乙胺(68mg，0.525mmol)，室温反应16h。LC-MS检测反应完全后，蒸干溶剂，将残留物经制备色谱板纯化(二氯甲烷∶甲醇∶氨水＝8∶1∶10滴)得粗品。然后将所得固体用高效液相色谱纯化得到化合物TDI01239(5.29mg，黄色固体，产率：6.37％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 11.10(s，1H)，10.32(s，1H)，9.33(d，1H)，9.11(d，1H)，8.65(s，1H)，8.55(dd，1H)，8.39(d，1H)，8.15(s，1H)，8.10(s，1H)，8.00(dd，1H)，7.84(d，1H)，7.62(d，1H)，7.55(d，1H)，6.81(d，1H)，4.70(s，2H)，4.56(s，2H)。MS m/z(ESI)：478.2[M+H]。
通过与实施例22中所述类似方法，制备下表5中的化合物
表5：
Figure BDA0002391547790002011
实施例23：N-(1H-吲唑-5-基)-2-(1-(1-甲基吡咯烷-3-基)-1H-吲哚-6-基)喹唑啉-4-胺(TDI01272)的制备
Figure BDA0002391547790002012
第一步：
将TDI01272-1(10.0g，45.7mmol)溶于无水甲醇(100mL)中，冰浴下分批加入硼氢化钠(3.38g，91.4mmol)，反应液在室温下反应2h。薄层色谱法(乙酸乙酯)显示反应完全。将反应液用水(80mL)淬灭，二氯甲烷(300mL)萃取，将合并的有机相用饱和食盐水(300mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，将粗品用柱色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1到0∶1)分离纯化得到TDI01272-2(5.20g，黄色油状物，产率：51.9％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.34-7.21(m，5H)，4.32-4.28(m，1H)，3.60(s，2H)，2.86-2.79(m，1H)，2.66-2.63(m，1H)，2.54-2.51(m，1H)，2.31-2.26(m，1H)，2.22-2.12(m，1H)，1.75-1.65(m，1H).
第二步：
将TDI01272-2(5.20g，23.6mmol)溶于二氯甲烷(150mL)，加入三乙胺(7.15g，70.8mmol)，在冰浴下加入甲磺酰氯(4.04g，35.5mmol)，反应液在室温下反应3h。薄层色谱法检测显示反应完全。将反应液用水(100mL)淬灭，用二氯甲烷(300mL)萃取，将合并的有机相用饱和食盐水(400mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到TDI01272-3(7.50g，黄色油状物，粗品)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.33-7.29(m，4H)，7.28-7.24(m，1H)，5.21-5.15(m，1H)，3.68(d，J＝12.8Hz，1H)，3.62(d，J＝12.8Hz，1H)，2.98(s，3H)，2.86-2.78(m，3H)，2.53-2.47(m，1H)，2.35-2.28(m，1H)，2.11-2.04(m，1H).
第三步：
将6-溴-1H-吲哚(2.50g，12.8mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(40mL)中，在冰浴下加入氢化钠(1.03g，25.6mmol)，0℃反应30分钟，将TDI01272-3(7.20g，24.1mmol)缓慢加入到反应液中，50℃下反应过夜。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1)检测显示反应完全。反应液用水(100mL)淬灭，用乙酸乙酯(200mL)萃取，将合并的有机相依次用饱和氯化铵水溶液(300mL)和饱和食盐水(300mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，将粗品用柱色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝20∶1到8∶1)分离纯化，得到TDI01272-4(4.10g，黄色油状物，产率：80.4％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.76(s，1H)，7.45(d，J＝8.4Hz，1H)，7.39(d，J＝7.2Hz，2H)，7.34(dd，J＝9.2，6.0Hz，3H)，7.27(s，1H)，7.17(dd，J＝8.4，1.6Hz，1H)，6.45(d，J＝3.2Hz，1H)，4.94-4.88(m，1H)，3.74(d，J＝12.8Hz，1H)，3.65(d，J＝12.8Hz，1H)，3.10-3.07(m，1H)，3.00-2.96(m，1H)，2.80-2.76(m，1H)，2.50-2.43(m，2H)，2.12-2.05(m，1H).
第四步：
将TDI01272-4(2.00g，5.01mmol)和双联频哪醇硼酸酯(2.54g，10.0mmol)溶于1，4-二氧六环(40mL)中，加入乙酸钾(4.90g，20.0mmol)及Pd(dppf)Cl2(366mg，0.50mmol)，氩气置换3次，油浴(90℃)下反应过夜。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1)显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩，将残留物通过柱色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝20∶1到8∶1)分离纯化，得到TDI01272-5(2.10g，黄色油状物，产率：93.9％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.92(s，1H)，7.60(d，J＝8.0Hz，1H)，7.54-7.50(m，2H)，7.38(d，J＝7.2Hz，2H)，7.32(t，J＝7.2Hz，2H)，7.26-7.24(m，1H)，6.51(d，J＝3.2Hz，1H)，5.17-5.10(m，1H)，3.71(d，J＝12.8Hz，1H)，3.66(d，J＝12.8Hz，1H)，3.06-3.02(m，1H)，2.95-2.92(m，1H)，2.83-2.79(m，1H)，2.54-2.45(m，2H)，2.08-2.02(m，1H)，1.37(s，12H).
第五步：
将TDI01272-5(2.10g，4.71mmol)溶于甲醇(50mL)中，加入Pd/C(210mg)，将反应液先用氩气置换3次再用氢气置换3次，在氢气氛围下于室温下反应6小时。薄层色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1)和LC-MS检测显示反应完全。将反应液过滤，将滤液减压浓缩，将粗品用柱色谱法(二氯甲烷/甲醇＝20∶1到10∶1)分离纯化，得到TDI01272-6(550mg，黄色油状物，产率：37.6％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.91(s，1H)，7.63(d，J＝8.0Hz，1H)，7.56(d，J＝8.0Hz，1H)，7.30(d，J＝3.2Hz，1H)，6.53(d，J＝3.2Hz，1H)，5.14-5.08(m，1H)，3.41-3.36(m，1H)，3.31-3.25(m，1H)，3.17-3.10(m，2H)，2.43-2.34(m，1H)，2.16-2.09(m，1H)，1.38(s，12H).MS m/z(ESI)：313.3[M+H]。
第六步：
将TDI01272-6(300mg，0.96mmol)和多聚甲醛(144mg，4.81mmol)溶于1，2-二氯乙烷(10mL)中，加入5滴乙酸，室温搅拌1小时后加入NaBH(OAc)3(611mg，2.88mmol)。反应液在室温下反应过夜。薄层色谱法(二氯甲烷/甲醇＝10∶1)和LC-MS检测显示反应完全。将反应液用水(40mL)淬灭，用二氯甲烷(100mL)萃取，将合并有机相依次用饱和碳酸钠水溶液(100mL)和饱和食盐水(160mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，将粗品用制备薄层色谱法(二氯甲烷/甲醇＝10∶1)分离纯化，得到TDI01272-7(100mg，黄色油状物，产率：31.9％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.87(s，1H)，7.62(d，J＝8.0Hz，1H)，7.54(d，J＝8.0Hz，1H)，7.50(d，J＝3.2Hz，1H)，6.54(d，J＝3.2Hz，1H)，5.25-5.20(m，1H)，3.12-3.06(m，1H)，2.99-2.98(m，2H)，2.66-2.61(m，1H)，2.58-2.54(m，1H)，2.50(s，3H)，2.19-2.14(m，1H)，1.37(s，12H).MS m/z(ESI)：327.3[M+H]。
第七步：
将TDI01272-7(98.8mg，0.303mmol)和Reg-1-2(100mg，0.253mmol)溶于乙醇∶水(8∶1)的混合液(9mL)中，加入碳酸钠(53.6mg，0.506mmol)及Pd(PPh3)Cl2(17.6mg，0.025mmol)，氩气置换3次，微波110℃反应1小时。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩，向粗品中加入甲醇并过滤，将所得固体用高效液相色谱法纯化，得到化合物TDI01272(86.9mg，黄色固体，产率：74.9％)。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.60(d，J＝8.4Hz，1H)，8.44(s，1H)，8.23(d，J＝3.2Hz，2H)，8.13-8.06(m，2H)，7.99(dd，J＝8.4，1.6Hz，1H)，7.84(t，J＝6.8Hz，1H)，7.79-7.74(m，4H)，6.73(d，J＝3.2Hz，1H)，5.50-5.43(m，1H)，3.99-3.58(m，4H)，3.03(s，3H)，2.73-2.68(m，1H)，2.52-2.47(m，1H).MS m/z(ESI)：460.2[M+H]。
实施例24：N-(2-(1-(2-(二甲基氨基)乙基)-1H-吲哚-6-基)嘧啶-4-基)-1H-吲唑-5-胺(TDI01287)的制备
Figure BDA0002391547790002031
第一步：
在冰浴下，将NaH(612mg，15.3mmol)加入到TDI01287-1(1.0g，7.6mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(10mL)的溶液中，升至室温搅拌1h后，然后加入二甲氨基氯乙烷盐酸盐(1.1g，7.6mmol)，反应2h。LC-MS检测显示反应完全。加入水(25mL)，用二氯甲烷(150mL)萃取，用饱和食盐水(30mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，然后通过柱色谱法(二氯甲烷∶甲醇＝100∶0到15∶1)进行纯化，得到TDI01287-2(500mg，黄色固体，产率：12.23％)。MS m/z(ESI)：267.1[M+H]。
第二步：
将TDI01287-2(500mg，1.873mmol)和双联频哪醇硼酸酯(952mg，3.75mmol)溶于二氧六环(8mL)中，加入乙酸钾(368mg，3.75mmol)及Pd(dppf)Cl2(138mg，0.187mmol)，氩气置换3次，置于90℃油浴中反应过夜。薄层色谱法(二氯甲烷∶甲醇＝15∶1)显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩，残留物通过柱色谱法分离(石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1)纯化得到TDI01287-3(360mg，黄色固体，产率：61.21％)。MS m/z(ESI)：315.3[M+H]。
第三步：
将化合物Reg-1-27(200mg，0.637mmol)和TDI01287-3(189mg，0.425mmol)溶于1，4-二氧六环/水＝4/1(5mL)中，加入碳酸钠(91mg，0.85mmol)、2-二环己基磷-2，4，6-三异丙基联苯(40mg，0.085mmol)及三(二亚苄基丙酮)二钯(39mg，0.043mmol)，氩气置换3次，置于110℃微波中反应1h。LC-MS检测显示反应完全。将反应液冷却至室温，过滤，加入水(5mL)，用二氯甲烷(30mL)萃取，用饱和食盐水(10mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，浓缩后通过薄层色谱法(二氯甲烷∶甲醇＝10∶1)进行纯化，得到TDI01287-4(50mg，黄色固体，产率：15.79％)。MS m/z(ESI)：498.4[M+H]。
第四步：
将三氟乙酸(1mL)加入到TDI01287-4(50mg，0.1mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液中，室温反应2小时。LC-MS检测显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩，将残留物通过液相色谱法进行纯化，得到化合物TDI01287(2.41mg，黄色固体，产率：6.07％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 10.77(s，1H)，9.86(s，1H)，8.48(s，1H)，8.38(d，J＝6.6Hz，1H)，8.21(s，1H)，8.16(s，1H)，7.99(d，J＝8.2Hz，1H)，7.79(d，J＝8.4Hz，1H)，7.71(s，1H)，7.66(d，J＝8.8Hz，1H)，7.60(d，J＝8.8Hz，1H)，6.84(d，J＝3.8Hz，1H)，6.66(d，J＝3.0Hz，1H)，4.67(t，J＝6.7Hz，2H)，3.60(t，J＝6.3Hz，2H)，2.81(s，6H).MS m/z(ESI)：398.2[M+H]。
实施例25：N-(2-(2-甲基异二氢吲哚-5-基)嘧啶-4-基)-1H-吲唑-5-胺(TDI01288)的制备
Figure BDA0002391547790002041
第一步：
向50mL单口瓶中加入TDI01288-1(450mg，1.919mmol)、40％甲醛溶液(576mg，7.676mmol)、DCE(20mL)及5滴冰乙酸，室温反应1h，再加入醋酸硼氢化钠(1.6g，7.676mmol)，室温反应2h。过滤反应液，然后将滤液蒸干得TDI01288-2(405mg，黑色油状物)。MS m/z(ESI)：212.1[M+H]。
第二步：
将TDI01288-2(400mg，1.896mmol)和双联频哪醇硼酸酯(963mg，3.791mmol)溶于二氧六环(18mL)中，加入乙酸钾(557mg，5.688mmol)及Pd(dppf)Cl2(138mg，0.189mmol)，氩气置换3次，置于100℃油浴中反应3.5h。反应完毕过滤，然后将滤液减压浓缩，将残留物经柱色谱法纯化(二氯甲烷∶甲醇＝50∶1-20∶1)得TDI01288-3(520mg，黑色油状物)。MSm/z(ESI)：260.2[M+H]。
第三步：
将TDI01288-3(300mg，1.159mmol)和Reg-1-1(200mg，0.579mmol)溶于乙醇(8mL)和水(1mL)的混合溶液中，加入碳酸钠(184mg，1.737mmol)及Pd(PPh3)2Cl2(41mg，0.0579mmol)，氩气置换3次，微波(115℃)反应3h。过滤反应液，将滤液浓缩，然后经制备薄层色谱法纯化(二氯甲烷∶甲醇＝5∶1)得粗品(60mg)，通过高效液相色谱法纯化得到化合物TDI01288(8.09mg，黄色固体，产率：4.04％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.87(s，1H)，9.95(s，1H)，8.35(m，3H)，8.20(s，1H)，8.11(s，1H)，7.57(m，3H)，6.75(d，1H)，4.91(m，2H)，4.57(s，2H)，3.07(s，3H).MS m/z(ESI)：343.2[M+H]。
实施例26：2-(8-(4-((1H-吲唑-5-基)氨基)嘧啶-2-基)-4-氧代-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[b][1，4]二氮杂
Figure BDA0002391547790002042
-1-基)乙酸甲酯(TDI01298)的制备
Figure BDA0002391547790002051
第一步：
向100mL封管中加入TDI01298-1(6g，27.27mmol)、3-氨基丙酸甲酯(3.8g，27.27mmol)、碳酸钾(11.29g，81.81mmol)及四氢呋喃60mL。升温至100℃，反应5h，LC-MS显示反应完全。将反应液过滤，收集滤液，减压浓缩得TDI01298-2(8.5g，黄色固体，产率：100％)。MS m/z(ESI)：305.1[M+H]。
第二步：
向500mL烧瓶中加入TDI01298-2(8.5g，28mmol)、锌粉(18.2g，280mmol)、氯化铵(15g，280mmol)及260mL甲醇，升温至50℃，反应2h，LC-MS显示反应完全。将反应液过滤，收集滤液，滤液浓缩至干得油状物，柱色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1～3∶1)纯化，得到TDI01298-3(5.4g，褐色固体，产率：70.7％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.80-6.72(m，2H)，6.56(d，J＝8.1Hz，1H)，3.71(s，3H)，3.39(t，J＝6.3Hz，4H)，2.66(t，J＝6.3Hz，2H).MS m/z(ESI)：275.1[M+H]。
第三步：
向250mL烧瓶中加入TDI01298-3(5.0g，18.3mmol)、氢氧化钠(2.2g，54.9mmol)、100mL甲醇及10mL水，升温至50℃，反应1h，LC-MS显示反应完全。将反应液用浓盐酸调节pH＝4-5，减压浓缩移除大部分甲醇，过滤收集固体得到TDI01298-4(4.4g，褐色固体，收率：92.8％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 6.55(dd，J＝8.1，2.1Hz，1H)，6.47(t，J＝5.7Hz，2H)，3.23(t，J＝6.7Hz，2H)，2.53-2.49(m，2H).MS m/z(ESI)：259.1[M+H]。
第四步：
向250mL烧瓶中加入TDI01298-4(4g，15.44mmol)、HATU(7.06g，18.53mmol)、二异丙基乙胺(8.0g，61.8mmol)及150mLN，N-二甲基甲酰胺，在室温下反应0.5h，LC-MS显示反应完全。将反应液合并后加入至600mL水中，用乙酸乙酯(600mL)萃取，将有机相干燥后减压浓缩得棕红色固体，用10mL乙酸乙酯和60mL石油醚润洗，得到TDI01298-5(3.8g，棕色固体，收率：100％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 9.49(s，1H)，6.91(s，1H)，6.80(d，J＝8.4Hz，1H)，6.73(s，1H)，6.01(s，1H)，2.71(d，J＝17.3Hz，1H)，2.52(d，J＝5.2Hz，3H).MS m/z(ESI)：241.1[M+H]。
第五步：
向100mL烧瓶中加入化合物TDI01298-5(800mg，3.32mmol)、40mL四氢呋喃，降温至0～10℃，加入氢化钠(146mg，3.65mmol)反应20分钟后，加入溴乙酸甲酯(813mg，5.31mmol)，升至室温反应0.5h，TLC检测显示反应完全。将反应液过滤，收集滤液，减压浓缩得棕红色油状物，柱色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝8∶1～1∶1)纯化得TDI01298-6(900mg，棕红色油状物，收率：86.5％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 7.11(d，J＝2.1Hz，1H)，6.99(dt，J＝8.6，5.3Hz，2H)，5.66(s，1H)，4.37(s，2H)，3.67(s，3H)，3.60-3.54(m，2H)，2.48-2.43(m，2H).MS m/z(ESI)：315.21[M+H]。
第六步：
向30mL微波管中加入化合物TDI01298-6(850mg，2.71mmol)、双联频哪醇硼酸酯(826mg，3.25mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(95mg，0.14mmol)、碳酸钠(575mg，5.42mmol)和15mL甲醇。氩气换气4次，升温至95℃，反应1.5h。LC-MS显示反应完全。将反应液过滤，将滤液减压浓缩干得棕黑色油状物，柱色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1～1∶1)纯化得TDI01298-7(650mg，黄色固体，收率：66.6％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.34(s，1H)，7.18(d，J＝7.8Hz，1H)，7.07(d，J＝7.9Hz，1H)，5.34(s，1H)，4.38(s，2H)，3.68(s，3H)，3.57(t，J＝6.1Hz，2H)，2.41(t，J＝6.2Hz，2H)，1.28(s，12H).MS m/z(ESI)：361.3[M+H]。
第七步：
向30mL微波管中加入化合物TDI01298-7(240mg，0.67mmol)、Reg-1-1(150mg，0.43mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(28mg，0.04mmol)、碳酸钠(92mg，0.86mmol)和12mL甲醇。向反应液中通入氩气，持续1分钟，升温至100℃，微波反应3h。LC-MS显示反应完全后，将反应液过滤，滤液减压浓缩至干得固体，用5mL乙酸乙酯和20mL石油醚洗涤，得0.48g固体，通过高效液相色谱法纯化，得到TDI01298(62.97mg，黄色固体，收率：33％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 10.48(s，1H)，8.32(d，J＝6.5Hz，1H)，8.15(d，J＝4.1Hz，2H)，7.85(s，1H)，7.76-7.72(m，1H)，7.61(q，J＝8.9Hz，2H)，7.28(d，J＝8.5Hz，1H)，6.80(d，J＝6.5Hz，1H)，4.46(s，2H)，3.70(s，3H)，3.68-3.62(m，4H).MS m/z(ESI)：444.3[M+H]。
实施例27：6-(4-((1H-吲唑-5-基)氨基)嘧啶-2-基)-N-(吡啶-2-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺(TDI01311)的制备
Figure BDA0002391547790002061
第一步：
向25mL烧瓶中依次加入TDI01311-1(2.4g，10mmol)及氯化亚砜(10mL)，在搅拌下小心滴加1滴干燥的N，N-二甲基甲酰胺，油浴升温至70℃，反应1h。待反应液变澄清后，减压移除氯化亚砜。将残留物溶于二氯甲烷(10mL)，直接用于下一步反应。
第二步：
向50mL三口瓶中依次加入2-氨基吡啶(1.13g，12mmol)、二异丙基乙胺(3.88g，30mmol)及二氯甲烷(10mL)，氮气置换三次。在冰浴及氮气保护下，小心滴加上一步制备的产物的二氯甲烷溶液(10mL)，滴加完毕后先0℃下搅拌15分钟，再撤去冰浴，于室温下反应2小时。LC-MS显示反应完成。此时，析出大量黄色固体，过滤，将固体依次用冰水(20mL)及石油醚：乙酸乙酯的混合溶剂(20mL)洗涤，再用乙腈(20mL)洗涤，得第一批产品(黄色固体，2.1g)。将滤液用二氯甲烷(60mL)萃取，将有机相依次用水(30mL)及饱和食盐水(30mL)洗涤、用无水硫酸钠干燥半小时、过滤并浓缩至干燥，得第二批产品(黄色固体，0.9g)。两批一共得TDI01311-3(3.0g，产率：94.9％，黄色固体)。MS m/z(ESI)：316.1[M+H]。
第三步：
向100mL烧瓶中依次加入TDI01311-3(800mg，2.53mmol)、双联频哪醇硼酸酯(964mg，3.80mmol)、乙酸钾(496mg，5.06mmol)和二氧六环(20mL)，氮气置换三次。在氮气保护下，小心加入Pd(dppf)Cl2(185mg，0.253mmol)，加入完毕后，油浴120℃下反应2小时。反应结束后，将反应液降至室温，过滤移除不溶物，并用乙酸乙酯(10mL x 2)洗涤，将滤液减压移除溶剂，纯化得黄色固体TDI01311-4(458mg，产率：50.0％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.94(s，1H)，10.88(s，1H)，8.42(d，J＝3.6Hz，1H)，8.24(d，J＝8.4Hz，1H)，7.89-7.85(m，2H)，7.68-7.63(m，2H)，7.36(d，J＝8.1Hz，1H)，7.21-7.15(m，1H)，1.16(s，12H).MS m/z(ESI)：364.3[M+H]。
第四步：
向10mL烧瓶中依次加入TDI01311-4(200mg，0.449mmol)、Reg-1-27(196mg，0.539mmol)、磷酸钾(190mg，0.898mmol)、四氢呋喃(3mL)和水(0.5mL)，氮气吹扫三分钟后，小心加入氯(2-二环己基膦基-2′，4′，6′-三异丙基-1，1′-联苯基)[2-(2＇-氨基-1，1′-联苯)]钯(II)(7mg，0.009mmol)，油浴70℃下反应2小时。LC-MS检测到约有18％的目标产物，将反应液降至室温，再倒入10mL水中，用乙酸乙酯萃取(60mL)，合并有机相，用水(20mL)及饱和食盐水(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥、过滤并浓缩得粗品85mg，再经薄层制备色谱法分离得到TDI01311-5(25mg，黄色固体，收率：8.6％)。MS m/z(ESI)：647.5[M+H]。
第五步：
向10mL烧瓶中依次加入TDI01311-5(20mg，0.03mmol)及二氯甲烷(1mL)，搅拌下小心滴加三氟乙酸(1mL)，滴毕，室温下搅拌1小时。LC-MS监测显示反应完成，减压移除溶剂得化合物TDI01311(7.24mg，黄色固体，产率：41.9％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 12.37(s，1H)，11.00(s，1H)，8.45(s，1H)，8.43(d，J＝3.8Hz，1H)，8.34(d，J＝6.7Hz，1H)，8.25(d，J＝8.3Hz，1H)，8.19(s，1H)，7.99(d，J＝8.7Hz，1H)，7.92-7.85(m，2H)，7.75(d，J＝1.2Hz，1H)，7.65(t，J＝9.5Hz，2H)，7.24(s，1H)，7.21(dd，J＝7.3，5.5Hz，1H)，7.11(s，1H)，6.98(s，1H)，6.83(d，J＝6.4Hz，1H).MS m/z(ESI)：447.2[M+H]。
实施例28：5-(4-((1H-吲唑-5-基)氨基)嘧啶-2-基)-N-异丙基异二氢吲哚-2-甲酰胺(TDI01312)的制备
Figure BDA0002391547790002071
第一步：
向50mL单口瓶中加TDI01312-1(150mg，1.765mmol)、5-溴异二氢吲哚(620mg，2.647mmol)、二异丙基乙胺(341mg，2.647mmol)和二氯甲烷(9mL)，在室温下反应2h。向反应液中加入10mL水，用二氯甲烷(10mL x 2)萃取，合并有机相，然后用饱和食盐水洗、无水硫酸钠干燥，浓缩得TDI01312-2(575mg，棕色固体，粗品)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.41(m，2H)，7.13(m，1H)，4.65(d，4H)，4.04(m，1H)，1.22(t，6H).MS m/z(ESI)：283.1[M+H]。
第二步：
将TDI01312-2(300mg，1.064mmol)和双联频哪醇硼酸酯(405mg，1.596mmol)溶于二氧六环(10mL)中，加入乙酸钾(312mg，3.192mmol)及Pd(dppf)Cl2(79mg，0.1064mmol)，氩气置换3次，置于100℃油浴中反应2h。反应完毕后过滤，然后将滤液减压浓缩，得TDI01312-3(400mg，黑色固体，粗品)。MS m/z(ESI)：331.3[M+H]。
第三步：
将化合物TDI01312-3(400mg，1.212mmol)和Reg-1-1(279mg，0.808mmol)溶于乙醇(8mL)和水(1mL)的混合液中，加入碳酸钠(257mg，2.424mmol)及Pd(PPh3)2Cl2(57mg，0.08mmol)，氩气置换3次，100℃反应16h。过滤反应液，将滤液浓缩，然后将残留物经薄层色谱法纯化(二氯甲烷∶甲醇＝8∶1，含1％氨水)，得粗品100mg，然后通过高效液相色谱法制备得到化合物TDI01312(34.73mg，黄色固体，收率10.43％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 13.15(s，1H)，10.47(s，1H)，8.35(d，1H)，8.17(dd，4H)，7.62(d，1H)，7.54(t，2H)，6.81(d，1H)，6.05(d，1H)，4.67(s，4H)，3.83(d，1H)，1.12(d，6H).MS m/z(ESI)：414.2[M+H]。
通过与实施例28中所述类似方法，制备下表6中的化合物。
Figure BDA0002391547790002091
Figure BDA0002391547790002101
实施例29：2-(5-(4-((1H-吲唑-5-基)氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-2-基)异二氢吲哚-2-基)-N-异丙基乙酰胺(TDI01271)的制备
Figure BDA0002391547790002111
第一步：
将TDI01271-1(1.0g，16.95mmol)溶于无水二氯甲烷(20mL)中，缓慢滴加三乙胺(1.88g，18.64mmol)和氯乙酰氯(2.1g，18.64mmol)。反应液于室温下反应5小时。LC-MS检测显示反应完全。将反应液经减压浓缩，将粗品用饱和二氯甲烷(150mL)萃取，并用饱和食盐水(100mL)洗涤，将有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到TDI01271-2(440mg，粗品)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 8.13(s，1H)，3.99(s，2H)，3.87-3.79(m，1H)，1.07(d，J＝6.4Hz，6H).MS m/z(ESI)：136.2[M+H]。
第二步：
将TDI01271-2(400mg，2.96mmol)和5-溴异二氢吲哚盐酸盐(696.3mg，2.96mmol)溶于无水乙腈(20mL)中，并加入碳酸钾(1.7g，11.85mmol)，将该反应液于90℃下反应过夜。LC-MS检测显示反应完全。将反应液经减压浓缩，将粗品用饱和二氯甲烷(150mL)萃取，并用饱和食盐水(150mL)洗涤，将有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到TDI01271-3(400mg，粗品)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.36(d，J＝4.0Hz，2H)，7.13-7.05(m，1H)，6.90(s，1H)，4.19-4.12(m，1H)，4.01(s，2H)，3.97(s，2H)，3.38(s，2H)，1.17(d，J＝6.8Hz，6H).MS m/z(ESI)：297.1[M+H]。
第三步：
将TDI01271-3(400mg，1.347mmol)和双联频哪醇硼酸酯(648mg，2.694mmol)溶于1，4-二氧六环(20mL)中，加入乙酸钾(528mg，5.388mmol)及Pd(dppf)Cl2(98mg，0.1347mmol)，氩气置换3次，置于80℃油浴中反应过夜。LC-MS检测显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩，将残留物通过柱色谱法分离纯化得到TDI01271-4(300mg，白色固体，产率：64.7％)。MS m/z(ESI)：345.3[M+H]。
第四步：
将TDI01271-4(274.3mg，0.797mmol)和Reg-1-28(200mg，0.665mmol)溶于乙醇/水(10∶1)的混合溶剂(22mL)中，加入碳酸钠(141mg，1.329mmol)及Pd(PPh3)2Cl2(47mg，0.0665mmol)，氩气置换3次，置于110℃油浴中反应过夜。LC-MS检测显示反应完全。将反应液减压浓缩，将粗品用高效液相色谱法纯化得到化合物TDI01271(40.0mg，黄色固体，产率：10.4％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 13.13(s，1H)，11.03(s，1H)，9.92(s，1H)，8.45(d，J＝7.2Hz，1H)，8.39(d，J＝5.6Hz，2H)，8.22(d，J＝5.6Hz，1H)，8.14(d，J＝9.2Hz，2H)，7.69(d，J＝8.8Hz，1H)，7.62(d，J＝8.8Hz，1H)，7.53(d，J＝8.4Hz，1H)，7.50(d，J＝5.6Hz，1H)，4.92(s，2H)，4.63(s，2H)，4.23(s，2H)，3.99-3.90(m，1H)，1.13(d，J＝6.8Hz，6H).MS m/z(ESI)：484.2[M+H]。
实施例30：2-(6-(4-((1H-吲唑-5-基)氨基)嘧啶-2-基)-1H-吲哚-1-基)-N-异丙基乙酰胺(TDI01286)的制备
Figure BDA0002391547790002121
第一步：
将TDI01286-1(1.0g，16.95mmol)溶于无水二氯甲烷(20mL)中，缓慢滴加三乙胺(1.88g，18.64mmol)和氯乙酰氯(2.1g，18.64mmol)。反应液于室温下反应5小时。LC-MS检测显示反应完全。将反应液经减压浓缩，将粗品依次用饱和二氯甲烷(150mL)萃取，并用饱和食盐水(100mL)洗涤，将有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到TDI01286-2(800mg，粗品)。MS m/z(ESI)：136.2[M+H]。
第二步：
将5-溴-1H-吲哚(700mg，3.57mmol)溶于无水DMF(10mL)中，并于0℃下加入NaH(60％，429mg，10.71mmol)，将该反应液缓慢升温至室温，并反应过夜。然后，于室温下加入TDI01286-2(579mg，4.29mmol)，并于室温下继续搅拌反应3小时。LC-MS检测显示反应完成。将反应液缓慢加入100mL水中，并于室温下搅拌30min，有大量固体析出，将该固体混合液经抽滤，洗涤滤饼，并收集滤饼、干燥得到TDI01286-3(800mg，粗品)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 8.17(d，J＝7.2Hz，1H)，7.61(s，1H)，7.50(d，J＝8.4Hz，1H)，7.33(d，J＝3.2Hz，1H)，7.15(d，J＝8.4Hz，1H)，6.46(d，J＝2.8Hz，1H)，4.77(s，2H)，3.88-3.80(m，1H)，1.09(d，J＝6.4Hz，6H).MS m/z(ESI)：297.2[M+H]。
第三步：
将TDI01286-3(500mg，1.695mmol)和双联频哪醇硼酸酯(861mg，3.390mmol)溶于二氧六环(20mL)中，加入乙酸钾(664.4mg，6.780mmol)及Pd(dppt)Cl2(124mg，0.1695mmol)，氩气置换3次，置于80℃油浴中反应过夜。薄层色谱法检测显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩，将残留物通过柱色谱法分离纯化得到TDI01286-4(400mg，黄色固体，产率：69％)。MS m/z(ESI)：343.3[M+H]。
第四步：
将Reg-1-21(300mg，0.87mmol)和TDI01286-4(357mg，1.04mmol)溶于乙醇/水(10∶1)的混合液(15mL)中，加入碳酸钠(184mg，1.74mmol)及Pd(PPh3)2Cl2(61.0mg，0.087mmol)，氩气置换3次，置于110℃微波反应2小时。LC-MS检测显示反应完全。将反应液冷却至室温，过滤，减压浓缩，将残留物通过液相色谱法进行纯化，得到化合物TDI01286(30mg，黄色固体，产率：8.1％)。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ 8.46(s，1H)，8.30(d，J＝6.0Hz，2H)，8.16(d，J＝8.4Hz，1H)，8.10(s，1H)，7.67-7.58(m，3H)，7.39(d，J＝3.2Hz，1H)，6.63(d，J＝6.0Hz，1H)，6.54(d，J＝3.2Hz，1H)，4.89(s，2H)，3.97-3.90(m，1H)，1.10(d，J＝6.4Hz，6H).MS m/z(ESI)：426.4[M+H]。
通过与实施例30中所述类似方法，制备下表7中的化合物。
表7：
Figure BDA0002391547790002131
实施例31：1-(6-(4-((1H-吲唑-5-基)氨基)嘧啶-2-基)二氢吲哚-1-基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙酮(TDI01326)的制备
Figure BDA0002391547790002132
第一步：
将TDI01326-1(5.0g，25.64mmol)溶于二氯甲烷(400mL)中，加入三氟乙酸(27.5mL)，然后加入三乙基硅烷(10.5mL，64.1mmol)，室温反应16小时。薄层色谱法检测显示反应完全。往反应体系中缓慢加入氨水，调节pH到9左右，再次加入二氯甲烷(200mL)，依次用水(750mL)和饱和食盐水(250mL)洗涤，将有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，将残留物通过柱色谱法分离纯化，得到TDI01326-2(3.6g，淡黄色油状物)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 6.93(d，J＝7.6Hz，1H)，6.78(dd，J＝7.6，1.6Hz，1H)，6.73(d，J＝1.6Hz，1H)，3.56(t，J＝8.4Hz，2H)，2.96(t，J＝8.4Hz，2H).MS m/z(ESI)：200.1[M+H]。
第二步：
将TDI01326-2(2.6g，13.2mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(100mL)中，加入HATU(5.03g，13.2mmol)和二异丙基乙胺(5.68g，44mmol)，搅拌30分钟后加入2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙酸(1.74g，11mmol)，室温反应2小时。LC-MS检测显示反应完全。将反应液用乙酸乙酯(500mL)溶解，依次用水(500mL)和饱和食盐水(250mL)洗涤，将有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到TDI01326-3(3.1g，淡黄色油状物)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 7.96(s，2H)，7.20-7.17(m，1H)，2.90(s，6H)，2.74(s，6H)，2.69(s，5H).MS m/z(ESI)：338.3[M+H]。
第三步：
将TDI01326-3(3.0g，8.90mmol)和双联频哪醇硼酸酯(3.4g，13.35mmol)溶于二氧六环(100mL)中，加入乙酸钾(2.62g，26.7mmol)及Pd(dppf)Cl2(312mg，0.45mmol)，氩气置换3次，置于80℃油浴中反应过夜。薄层色谱法检测显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩，将残留物通过柱色谱法进行纯化，得到TDI01326-4(2.0g，棕黄色油状物)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 8.61(s，1H)，7.49(d，J＝7.2Hz，1H)，7.20(d，J＝7.2Hz，1H)，4.08(t，J＝8.0Hz，2H)，3.31(s，2H)，3.19(t，J＝8.0Hz，2H)，2.81(br.s，5H)，2.47(br.s，3H)，2.03(s，3H)，1.32(s，12H).
第四步：
将TDI01326-4(134mg，0.35mmol)和Reg-1-1(100mg，0.29mmol)溶于乙醇/水(8∶1)的混合液(2.7mL)中，加入碳酸钠(61.5mg，0.58mmol)及Pd(PPh3)2Cl2(21.1mg，0.03mmol)，氩气置换3次，微波110℃下反应1小时。LC-MS检测显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩，将残留物通过高效液相色谱得到化合物TDI01326(5.18mg，黄色固体，产率：3.8％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 9.21(s，1H)，8.76(s，1H)，8.45(s，1H)，8.20(d，J＝7.2Hz，1H)，7.85(d，J＝7.6Hz，1H)，7.66(d，J＝8.8Hz，1H)，7.51(d，J＝8.0Hz，2H)，6.94(s，1H)，4.24(t，J＝8.4Hz，2H)，3.67(s，2H)，3.50-3.48(m，4H)，3.37(t，J＝8.4Hz，2H)，3.16-3.02(m，4H)，2.96(s，3H).MS m/z(ESI)：469.3[M+H]。
实施例32：N-(2-(2，3，4，5-四氢苯并[b][1，4]氧氮杂
Figure BDA0002391547790002142
-7-基)嘧啶-4-基)-1H-吲唑-5-胺(TDI01264)的制备
Figure BDA0002391547790002141
第一步：
将TDI01264-1(3.0g，1.38mmol)和1，3-二溴丙烷(8.35g，4.14mmol)溶于乙腈(100mL)中，加入碳酸钾(6.09g，4.14mmol)，置于80℃油浴中反应12h。LC-MS检测显示反应完全。将反应液冷却至室温，过滤，减压浓缩，将残留物通过柱色谱法分离纯化得到TDI01264-2(3.2g，砖红色油状物，68.6％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.98(t，J＝6.1Hz，1H)，7.64(dd，J＝8.9，2.5Hz，1H)，7.01(d，J＝8.9Hz，1H)，4.25(t，J＝5.7Hz，2H)，3.65(t，J＝6.2Hz，2H)，2.48-2.27(m，2H).
第二步：
将TDI01264-2(2.9g，8.56mmol)溶于甲醇(100mL)中，加入氯化铵(9.15g，171.10mmol)，然后分批加入锌粉(5.59g，85.6mmol)，在常温下反应12h。LC-MS检测显示反应完全。将反应液过滤，减压浓缩得到粗品，将粗品经中压制备柱色谱法分离得到TDI01264-3(0.9g，棕色固体，产率：34.05％)。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.54(dd，J＝8.9，2.4Hz，1H)，7.50-7.46(m，1H)，7.04(dt，J＝11.0，5.5Hz，1H)，4.10(s，2H)，3.46(dd，J＝13.7，6.6Hz，2H)，2.23-2.12(m，2H).MS m/z(ESI)：307.9；309.9[M+H]。
第三步：
将TDI01264-3(0.7g，2.27mmol)溶于乙腈(100mL)中，加入碳酸钾(0.626g，4.53mmol)，置于80℃油浴中反应12h。LC-MS检测显示反应完全。将反应液冷却至室温，过滤，减压浓缩，将残留物通过柱色谱法纯化得到TDI01264-4(0.3g，棕色固体，产率：58.06％)。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ 7.10(d，J＝2.3Hz，1H)，6.96(dd，J＝8.5，2.4Hz，1H)，6.85(d，J＝8.5Hz，1H)，4.07-4.00(m，2H)，3.25-3.16(m，2H)，2.05-1.99(m，2H).MS m/z(ESI)：228.0[M+H]。
第四步：
将TDI01264-4(0.27g，1.18mmol)和双联频哪醇硼酸酯(0.599g，2.36mmol)溶于二氧六环(30mL)中，加入乙酸钾(0.347g，3.54mmol)及Pd(dppf)Cl2(48mg，0.059mmol)，氩气置换3次，置于80℃油浴中反应12h。LC-MS检测显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩，将残留物通过柱色谱法分离纯化得到TDI01264-5(0.2g，棕色固体，产率：61.40％)。MSm/z(ESI)：276.2[M+H]。
第五步：
将TDI01264-5(160mg，0.581mmol)和Reg-1-27(0.20g，0.465mmol)溶于乙醇/水(10∶1)的混合液11mL)中，加入碳酸钠(0.18g，11.74mmol)及Pd(PPh3)2Cl2(20.39mg，0.029mmol)，氩气换气3次，置于110℃微波中反应2h。LC-MS检测显示反应完全。将反应液冷却至室温，过滤，减压浓缩，将粗品经制备液相色谱法分离得到TDI01264(13.69mg；黄色固体，产率：6.57％)。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ 8.14(d，J＝6.7Hz，2H)，7.68(d，J＝8.3Hz，2H)，7.59(s，1H)，7.50(d，J＝8.2Hz，1H)，7.06(d，J＝8.4Hz，1H)，6.84(s，1H)，4.28-4.12(m，2H)，3.28(s，2H)，2.09-1.96(m，2H).MS m/z(ESI)：359.2[M+H]。
实施例33：7-(4-((1H-吲唑-5-基)氨基)嘧啶-2-基)-1，3，4，5-四氢-2H-苯并[b][1，4]二氮杂
Figure BDA0002391547790002152
-2-酮(TDI01265)的制备
Figure BDA0002391547790002151
第一步：
向50mL封管中加入化合物TDI01265-1(2g，9.1mmol)、3-氨基丙酸甲酯盐酸盐(1.27g，9.1mmol)、碳酸钾(3.8g，27.3mmol)及四氢呋喃(30mL)。升温至100℃反应4.5h，LC-MS显示反应完全。将反应液过滤，收集滤液，减压浓缩得固体，柱色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝20∶1～8∶1)纯化得TDI01265-2(1.8g，黄色固体，产率：65.2％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 8.21(s，1H)，8.04(d，J＝9.1Hz，1H)，7.04(d，J＝1.8Hz，1H)，6.79(dd，J＝9.1，1.9Hz，1H)，3.75(s，3H)，3.62(dd，J＝12.4，6.5Hz，2H)，2.73(t，J＝6.6Hz，2H).MS m/z(ESI)：305.1[M+H]。
第二步：
向100mL烧瓶中加入化合物TDI01265-2(1.3g，4.29mmol)、锌粉(2.79g，42.9mmol)、氯化铵(2.30g，42.9mmol)及50mL甲醇，升温至50℃反应2h，LC-MS显示反应完全。将反应液过滤，收集滤液，将滤液浓缩至干得油状物，柱色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1～4∶1)纯化得TDI01265-3(1g，棕红色油状物，产率：85.5％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.80-6.71(m，2H)，6.55(d，J＝8.1Hz，1H)，3.71(s，3H)，3.39(t，J＝6.3Hz，2H)，2.65(t，J＝6.3Hz，2H).MS m/z(ESI)：275.1[M+H]。
第三步：
向100mL烧瓶中加入15mL甲醇，降温至0℃，分批加入金属钠(0.25g，10.99mmol)，固体溶解完全；向另一100mL烧瓶中加入TDI01265-3(1.0g，3.66mmol)、15mL甲醇，降温至0℃，滴加制备好的甲醇钠甲醇溶液，滴毕，室温反应过夜，然后升温至60℃反应2h，LC-MS显示反应完全。将反应液降温至0～10℃，用氯化氢甲醇溶液调节pH＝6，将反应液减压浓缩，加入20mL无水乙醇，过滤收集滤液，减压浓缩得TDI01265-4(0.98g，棕红色固体，收率：100％)。MS m/z(ESI)：259.0[M+H]。
第四步：
向250mL烧瓶中加入化合物TDI01265-4(500mg，1.92mmol)、HATU(880mg，2.30mmol)、二异丙基乙胺(990mg，7.68mmol)及100mLN，N-二甲基甲酰胺，室温反应10分钟，LC-MS显示反应完全。将反应液加入至500mL水中，用乙酸乙酯(200 mL x 2)萃取，将有机相干燥后减压浓缩得棕红色油状物，柱色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1～1∶2)纯化得TDI01265-5(250mg，棕红色固体，收率：53.9％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 8.09(s，1H)，6.88(d，J＝6.9Hz，2H)，6.74(d，J＝8.3Hz，1H)，3.91(s，1H)，3.65(d，J＝1.5Hz，2H)，2.76-2.69(m，2H).MS m/z(ESI)：241.1[M+H]。
第五步：
向25mL烧瓶中加入化合物TDI01265-5(150mg，0.62mmol)、双联频哪醇硼酸酯(190mg，0.75mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(42mg，0.06mmol)、Na2CO3(131mg，1.24mmol)、10mL乙醇及2mL水，氩气换气4次，升温至100℃反应2h，LC-MS显示反应完全。将反应液过滤，将滤液减压浓缩至干得固体，柱色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1～1∶2)纯化得TDI01265-6(100mg，类白色固体，收率：56％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.54(s，1H)，7.16(s，1H)，6.93(d，J＝7.9Hz，1H)，6.87(d，J＝7.8Hz，1H)，5.71(s，1H)，3.40(d，J＝5.7Hz，2H)，2.49-2.47(m，2H)，1.26(s，12H).MSm/z(ESI)：289.2[M+H]。
第六步：
向30mL微波管中加入化合物TDI01265-6(70mg，0.24mmol)、Reg-1-1(70mg，0.20mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(14mg，0.02mmol)、碳酸钠(42mg，0.40mmol)、15mL乙醇及2mL水，用氩气向体系鼓气1分钟，升温至95℃微波反应1h，LC-MS显示反应完全。将反应液过滤，将滤液减压浓缩得固体，高效液相色谱法纯化得TDI01265(8.95mg，黄色固体，收率：12％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 12.99(s，1H)，9.57(d，J＝37.4Hz，2H)，8.28(d，J＝5.3Hz，1H)，8.13(d，J＝31.2Hz，2H)，7.82(s，1H)，7.64-7.54(m，3H)，6.99(d，J＝8.0Hz，1H)，6.62(d，J＝5.7Hz，1H)，5.94(s，1H)，3.47(s，2H)，2.57(s，2H).MS m/z(ESI)：372.3[M+H]。
实施例34：(6-(4-((4-(1H-吡唑-4-基)苯基)氨基)嘧啶-2-基)-1-甲基-1H-吲哚-2-基)(3，3-二氟氮杂环丁烷-1-基)甲酮(TDI01470)的制备
Figure BDA0002391547790002171
第一步：
在500mL烧瓶中加入化合物TDI01470-1(20g，83.31mmol)和乙醇(200mL)，加入氯化亚砜(19.82g，166.63mmol)，然后60℃反应3小时。薄层色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝10∶1)检测显示反应完全。将反应液浓缩得到粗品，将粗品在二氯甲烷(500mL)中溶解，将所得溶液用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤两次(每次150mL)。将有机相再用饱和食盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到化合物TDI01470-2(21g，棕色固体，产率：94.01％)。MS m/z(ESI)：266.1；268.1[M-H]。
第二步：
将化合物TDI01470-2(21g，78.33mmol)和联硼酸频哪醇酯(26.85g，105.74mmol)溶于1，4-二氧六环(200mL)中，加入乙酸钾(23.06g，234.98mmol)及Pd(dppf)Cl2(3.24g，3.91mmol)，氩气置换3次，置于80℃油浴中反应过夜。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩，将残留物通过柱色谱法分离(石油醚/乙酸乙酯＝100∶1到5∶1)纯化得到化合物TDI01470-3(17.5g，白色固体，产率：70.89％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 8.92(s，1H)，7.92(s，1H)，7.69(d，J＝8.1Hz，1H)，7.57(d，J＝8.1Hz，1H)，7.22-7.18(m，1H)，4.42(q，J＝7.1Hz，2H)，1.42(t，J＝7.1Hz，3H)，1.37(s，12H).MS m/z(ESI)：316.2[M+H]。
第三步：
将化合物TDI01470-3(10.0g，31.8mmol)溶于四氢呋喃(250mL)中，冰浴下加入氢化钠(1.91g，47.8mmol)后反应30分钟，将碘甲烷(13.5g，95.4mmol)缓慢加入到反应液中，室温反应过夜。薄层色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝5∶1)显示反应完全。将反应液用水(100mL)淬灭，用乙酸乙酯(150mL x 2)萃取，将合并的有机相依次用饱和氯化铵水溶液(200mL x2)和饱和食盐水(300mL x 2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。将粗品用柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝15∶1)分离纯化得到化合物TDI01470-4(6.5g，黄色固体，产率：62.5％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.91(s，1H)，7.68-7.65(m，1H)，7.57(d，J＝8.0Hz，1H)，7.27(s，1H)，4.12(s，3H)，3.91(s，3H)，1.38(s，12H).
第四步：
将化合物Reg-1-16(1.00g，2.70mmol)和TDI01470-4(1.33g，4.04mmol)溶于乙醇/水(8∶1)的混合液(120mL)中，加入碳酸钠(572mg，5.40mmol)及Pd(PPh3)Cl2(189mg，0.27mmol)，氩气置换3次，置于110℃油浴中反应过夜，LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩，将残留物用水(30mL)稀释，用6N HCl调节pH至1，有大量固体析出，过滤，将固体用甲醇润洗得到化合物TDI01470-5(900mg，黄色固体，粗品)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 11.54(s，1H)，8.77(s，1H)，8.38(d，J＝7.2Hz，1H)，8.14(s，2H)，8.03(d，J＝8.8Hz，1H)，7.92(d，J＝8.4Hz，1H)，7.80-7.69(m，4H)，7.33(s，1H)，7.07(d，J＝8.0Hz，1H)，4.16(s，3H).
第五步：
将化合物TDI01470-5(300mg，0.73mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(6mL)，加入HATU(335mg，0.88mmol)和DIEA(377mg，2.92mmol)，室温反应30min后加入化合物TDI01470-a(114mg，0.88mmol)，继续室温反应2小时。LC-MS显示反应完全。将反应液减压浓缩，将粗品用高效液相色谱法纯化得到化合物TDI01470(185mg，黄色固体，产率：52.1％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.63(s，1H)，8.52(s，1H)，8.41(d，J＝6.4Hz，1H)，8.09(s，2H)，8.06(dd，J＝8.4，1.2Hz，1H)，7.83(d，J＝8.4Hz，1H)，7.77(d，J＝8.0Hz，2H)，7.72(d，J＝8.4Hz，2H)，7.13(s，1H)，6.86(d，J＝6.4Hz，1H)，4.91(s，2H)，4.57(s，2H)，4.05(s，3H).MSm/z(ESI)：486.2[M+H]。
通过与实施例34中TDI01470合成路线所述的类似方法，制备下表8中的化合物。
Figure BDA0002391547790002191
Figure BDA0002391547790002201
Figure BDA0002391547790002211
Figure BDA0002391547790002221
Figure BDA0002391547790002231
Figure BDA0002391547790002241
Figure BDA0002391547790002251
依照与实施例34中所述类似方法，省略其中第三步，制备得到化合物TDI01434。
Figure BDA0002391547790002261
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 12.28(s，1H)，10.61(s，1H)，8.48(s，1H)，8.35(d，J＝6.4Hz，1H)，8.07(s，2H)，8.00(d，J＝8.4Hz，1H)，7.83(d，J＝8.4Hz，1H)，7.79(d，J＝7.6Hz，2H)，7.71(d，J＝8.4Hz，2H)，7.03(s，1H)，6.85(d，J＝6.4Hz，1H)，5.03(s，2H)，4.58(s，2H).MS m/z(ESI)：472.1[M+H]。
通过与实施例34中TDI01434合成路线所述的类似方法，制备下表9中的化合物。
Figure BDA0002391547790002271
Figure BDA0002391547790002281
Figure BDA0002391547790002291
Figure BDA0002391547790002301
Figure BDA0002391547790002311
Figure BDA0002391547790002321
Figure BDA0002391547790002331
Figure BDA0002391547790002341
Figure BDA0002391547790002351
Figure BDA0002391547790002361
Figure BDA0002391547790002371
实施例35：1-(5-(4-((1H-吲唑-5-基)氨基)嘧啶-2-基)异二氢吲哚-2-基)-2-(二甲氨基)乙-1-酮(TDI01364)的制备
Figure BDA0002391547790002381
第一步：
将化合物TDI01364-1(1.36g，5.82mmol)和N，N-二甲基氨基乙酸(500mg，4.85mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(50mL)中，加入HATU(2.22g，5.82mmol)和二异丙基乙胺(2.5g，19.4mmol)，反应液室温反应过夜。LC-MS显示反应完全。将反应液溶于乙酸乙酯(250mL)中，依次用水(250mL x 3)、饱和食盐水(250mL x 2)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，浓缩得到化合物TDI01364-2(1.05g，淡黄色油状物)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 7.59(d，J＝6.4Hz，1H)，7.48(d，J＝8.0Hz，1H)，7.34-7.30(m，1H)，4.87(d，J＝16.0Hz，2H)，4.62(d，J＝16.8Hz，2H)，3.15(s，2H)，2.25(s，6H).MSm/z(ESI)：283.1[M+H]。
第二步：
将化合物TDI01364-2(1.0g，3.55mmol)和联硼酸频哪醇酯(1.8g，7.09mmol)溶于1，4-二氧六环(100mL)中，加入乙酸钾(1.04g，10.64mmol)及Pd(dppf)Cl2(125mg，0.18mmol)，氩气置换3次，置于80℃油浴中反应过夜。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩，残留物通过柱色谱法分离(二氯甲烷∶甲醇＝1∶0到10∶1)进行纯化，得到化合物TDI01364-3(400mg，淡黄色油状物)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.72(d，J＝14.4Hz，2H)，7.30(d，J＝7.2Hz，1H)，4.89(d，J＝18.4Hz，2H)，4.82(d，J＝4.8Hz，2H)，3.25(s，2H)，2.42(s，6H)，1.35(s，12H).MS m/z(ESI)：331.4[M+H]。
第三步：
将化合物TDI01364-3(115mg，0.35mmol)和中间体Reg-1-1(100mg，0.29mmol)溶于乙醇/水(10∶1)的混合液(5mL)中，加入碳酸钠(62mg，0.58mmol)及Pd(PPh3)2Cl2(21mg，0.03mmol)，氩气置换3次，微波110℃反应2小时。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩，残留物用二甲基亚砜(5mL)溶解，过滤，滤液通过液相色谱法进行纯化，得到化合物TDI01364(21.4mg，白色固体)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.02(s，1H)，9.62(s，1H)，8.36-8.30(m，2H)，8.28(d，J＝5.6Hz，1H)，8.18(s，1H)，8.09(s，1H)，7.57(t，J＝7.2Hz，2H)，7.48(t，J＝8.8Hz，1H)，6.68(d，J＝5.6Hz，1H)，4.97(s，2H)，4.73(d，J＝14.4Hz，2H)，3.18(d，J＝7.2Hz，2H)，2.27(d，J＝5.6Hz，6H).MS m/z(ESI)：414.2[M+H]。
实施例36：5-(4-((1H-吲唑-5-基)氨基)吡啶-2-基)-N-(哒嗪-4-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺(TDI01384)的制备
Figure BDA0002391547790002391
第一步：
将化合物TDI01384-1(500mg，2.14mmol)、2-氯-4-碘吡啶(332mg，1.62mmol)、碳酸铯(2.09g，6.42mmol)和BINAP(68.49mg，0.11mmol)溶于甲苯(20mL)中，然后加入醋酸钯(24.70mg，0.11mmol)，置于100℃油浴中反应4小时。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，过滤，并通过柱色谱法分离(二氯甲烷∶甲醇＝100∶1～10∶1)得到化合物TDI01384-2(170mg，23.0％，黄色固体)。MS m/z(ESI)：345.1[M+H]。
第二步：
将化合物TDI01384-2(170mg，0.493mmol)和实施例18中的中间体TDI01247-1(178.17mg，0.591mmol)溶于乙醇/水(8∶1)的混合液(45mL)中，加入碳酸钠(156.77mg，1.48mmol)及Pd(PPh3)2Cl2(17.30mg，0.0247mmol)，氩气置换3次，置于110℃油浴中反应过夜。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩，残留物用水(40mL)稀释，用6NHCl调pH＝1，有大量固体析出，过滤，固体用甲醇打浆得到化合物TDI01384-3(100mg，黄色固体，产率43.20％)。MS m/z(ESI)：370.1[M+H]。
第三步：
将化合物TDI01384-3(90.0mg，0.243mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(5mL)，加入HATU(110mg，0.29mmol)和二异丙基乙胺(94.22mg，0.73mmol)，室温反应30min后加入化合物4-氨基哒嗪(27.81mg，0.29mmol)，继续室温反应过夜。质谱显示反应完全。将反应液浓缩，固体用高效液相色谱(三氟乙酸)纯化得到化合物TDI01384(13.32mg，黄色固体，产率12.24％)。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ 9.59(s，1H)，9.18(d，J＝6.5Hz，1H)，8.55(s，1H)，8.13(s，2H)，7.96-7.91(m，1H)，7.84(s，1H)，7.72(d，J＝8.6Hz，1H)，7.58(s，1H)，7.47(d，J＝7.4Hz，2H)，7.41(d，J＝7.4Hz，1H)，7.35(d，J＝8.2Hz，1H)，7.08-7.01(m，1H).MS m/z(ESI)：447.1[M+H]。
实施例37：9-(6-(4-((1H-吲唑-5-基)氨基)嘧啶-2-基)-1H-吲哚-2-羰基)-3，9-二杂螺[5.5]十一碳-3-甲脒(TDI01400)的制备
Figure BDA0002391547790002392
将实施例1表1中的化合物TDI01360(30.00mg，0.059mmol)、化合物1H-吡唑甲脒(10.42mg，0.071mmol)和二异丙基乙胺(23mg，0.178mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(1mL)中，常温搅拌过夜。将反应液减压浓缩，经制备液相色谱法分离，冻干得目标化合物(8.04mg，收率24.25％)。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ 8.36(s，1H)，8.19(d，J＝7.2Hz，1H)，8.16(s，1H)，7.98(s，1H)，7.86(s，2H)，7.69(s，2H)，6.92(s，2H)，3.86(s，4H)，3.59-3.40(m，4H)，1.70(s，6H)，1.37(s，2H).MS m/z(ESI)：529.3[M+H]。
实施例38：(3，3-二氟氮杂环丁烷-1-基)(1-甲基-6-(4-((4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯基)氨基)嘧啶-2-基)-1H-吲哚-2-基)甲酮(TDI01698)的制备
Figure BDA0002391547790002401
按实施例46第一步到第三步完成实施例38中化合物TDI01698-1的合成。
第一步：
将化合物TDI01698-1(5g，13.3mmol)、2-氯-4-氨基嘧啶(1.7g，13mmol)和碳酸钾(5.38g，39mmol)混合于1，4-二氧六环(100mL)与水(10mL)的混合溶剂中，加入Pd(dppf)Cl2(952mg，1.3mmol)，以N2置换3次后将反应液加热至回流反应过夜。LC-MS显示产物为目标产物TDI01698-2和副产物TDI01699B的混合物。将反应液冷却至室温，过滤以除掉盐杂质，滤液减压浓缩，将粗品以快速制备色谱法(甲醇/二氯甲烷＝0～4％)分离，得到化合物TDI01698-2(0.36g，浅褐色固体，粗产率：8％)和TDI01699B(0.1g，浅黄色固体，粗产率：1.8％)。
TDI01698-2：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.45(s，1H)，8.19(d，J＝5.7Hz，1H)，8.14(d，J＝8.4Hz，1H)，7.66(d，J＝8.5Hz，1H)，7.04(s，1H)，6.90(s，2H)，6.36(d，J＝5.8Hz，1H)，4.84(s，2H)，4.58(s，2H)，4.00(s，3H).
第二步：
将化合物TDI01698-3(223mg，1mmol)溶于DMF(3mL)中，N2保护下以冰水浴冷却至0℃，加入NaH(60％，60mg，1.5mmol)，搅拌0.5小时后加入碘甲烷(213mg，1.5mmol)。将反应于室温搅拌过夜，LC-MS显示反应完全。加入水(20mL)，搅拌10分钟，过滤，滤饼以水(10mL)洗，减压干燥得化合物TDI01698-4(0.2g，褐色固体，产率：84％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 8.17(s，1H)，7.88(s，1H)，7.52(s，4H)，3.85(s，3H).
第三步：
将化合物TDI01698-2(70mg，0.2mmol)、化合物TDI01698-4(48mg，0.2mmol)和碳酸铯(196mg，0.6mmol)混合于1，4-二氧六环(3mL)中，加入Pd2(dba)3(37mg，0.04mmol)及Xantphos(69mg，0.12mmol)，以N2置换3次后将反应液加热至回流反应过夜。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，过滤以除掉盐杂质，滤液减压浓缩，将粗品以制备HPLC(乙腈/水(0.5％TFA)＝20～60％，30分钟)分离，得化合物TDI01698(10mg，黄色固体，产率：8％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 10.59(s，1H)，8.52(s，1H)，8.40(d，J＝8.4Hz，1H)，8.14(s，1H)，8.06(d，J＝8.4Hz，1H)，7.88(s，1H)，7.82(d，J＝8.3Hz，1H)，7.77(d，J＝7.4Hz，2H)，7.66(d，J＝8.3Hz，2H)，7.12(s，1H)，6.85(d，J＝6.7Hz，1H)，4.89(s，2H)，4.57(s，2H)，4.05(s，3H)，3.88(s，3H).MS m/z(ESI)：500.1[M+H]。
实施例39：1-(6-(4-((4-(1H-吡唑-4-基)苯基)氨基)嘧啶-2-基)-1H-吲哚-2-羰基)氮杂环丁烷基-3-甲酸(TDI01466)的制备
Figure BDA0002391547790002402
步骤一：
以中间体TDI01434-1为原料，参照TDI01434合成步骤中第五步的合成方法，与中间体TDI01466-1反应，得到化合物TDI01466-2。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.10(s，1H)，8.54(s，1H)，8.36(d，J＝6.2Hz，1H)，8.14-8.02(m，3H)，7.92-7.64(m，5H)，6.91(d，J＝37.8Hz，2H)，4.74(d，J＝8.5Hz，1H)，4.61(s，1H)，4.31(t，J＝9.3Hz，1H)，4.15(s，1H)，3.61-3.59(m，1H)，3.38(s，3H).MS m/z(ESI)：494.2[M+H]。
步骤二：
将化合物TDI01466-2(50mg，0.1mmol)溶于(二氯甲烷(10mL)/水(5mL))，再加入LiOH(42mg，1.0mmol)，50℃反应1小时后LC-MS显示反应完全，旋干溶剂，加5mL水，过滤，制备色谱法纯化得化合物TDI01466(15mg，黄色固体，30.0％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 12.26(s，1H)，10.75(s，1H)，8.46(s，1H)，8.35(s，1H)，8.09(s，2H)，7.97(d，J＝7.5Hz，1H)，7.83-7.74(m，5H)，6.99(s，1H)，6.87(s，1H)，4.75(s，1H)，4.62(s，1H)，4.31(s，1H)，4.16(s，1H)，3.60-3.59(m，1H).MS m/z(ESI)：480.2[M+H]。
实施例40：(5-(4-((4-(1H-吡唑-4-基)苯基)氨基)嘧啶-2-基)异二氢吲哚-2-基)(3，3-二氟氮杂环丁烷-1-基)甲酮(TDI01467)的制备
Figure BDA0002391547790002411
第一步：
将化合物5-溴异二氢吲哚盐酸盐(5.0g，21.3mmol)溶于溶于四氢呋喃(100mL)，加入二碳酸二叔丁酯(9.3g，42.6mmol)、二异丙基乙胺(11.0g，85.2mmol)和4-二甲氨基吡啶(123mg，1.06mmol)，反应液室温反应过夜。薄层色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝5∶1)显示反应完全。反应液用乙酸乙酯(100mL)稀释，依次用饱和氯化铵(150mL x 2)和饱和氯化钠(200mL x 2)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物通过柱色谱法分离(石油醚/乙酸乙酯＝10∶1)纯化得到化合物TDI01467-1(2.7g，白色固体，产率42.9％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.42-7.36(m，2H)，7.15-7.08(m，1H)，4.63(t，J＝15.2Hz，4H)，1.51(s，9H).
第二步：
将化合物TDI01467-1(2.70g，9.06mmol)和联硼酸频哪醇酯(3.45g，13.6mmol)溶于1，4-二氧六环(100mL)中，加入乙酸钾(2.67g，27.2mmol)及Pd(dppf)Cl2(666mg，0.91mmol)，氩气置换3次，置于100℃油浴中反应过夜。薄层色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝5∶1)显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩，残留物通过柱色谱法分离(石油醚/乙酸乙酯＝10∶1)得到化合物TDI01467-2((3.0g，白色固体，产率96.1％)
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.72(s，1H)，7.71-7.65(m，1H)，7.29-7.23(m，1H)，4.70-4.62(m，4H)，1.52(s，9H)，1.35(s，12H).
第三步：
将化合物TDI01467-2(1.00g，2.89mmol)溶于甲醇(10mL)中，加入3M盐酸甲醇溶液(10mL)，反应液室温搅拌过夜。薄层色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝5∶1)显示反应完全。将反应液减压浓缩得到化合物TDI01467-3(800mg，黄色固体，粗品)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.95(s，1H)，7.71(s，1H)，7.65(d，J＝7.6Hz，1H)，7.42(d，J＝7.6Hz，1H)，4.54-4.47(m，4H)，1.17(s，12H).
第四步：
将化合物TDI01467-3(800mg，2.84mmol)溶于四氢呋喃(20mL)，加入二异丙基乙胺(1.47g，11.4mmol)，冰浴下加入对硝基苯基氯甲酸酯(570mg，2.84mmol)，继续室温反应过夜。LC-MS显示反应完全。反应液用乙酸乙酯(50mL)稀释，依次用水(40mL x 2)、饱和氯化铵(50mL x 2)和饱和氯化钠(80mL x 2)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，粗品用柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝10∶1)分离得到化合物TDI01467-4(670mg，黄色固体，产率57.6％)
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 8.32-8.25(m，2H)，8.19-8.14(m，1H)，7.42-7.37(m，2H)，7.36-7.29(m，1H)，6.91-6.86(m，1H)，4.95(d，J＝15.2Hz，2H)，4.85(d，J＝8.0Hz，2H)，1.37(s，12H).MS m/z(ESI)：411.2[M+H]。
第五步：
将化合物TDI01467-4(400mg，0.98mmol)和中间体TDI01470-a(151mg，1.17mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(10mL)，加入二异丙基乙胺(506mg，3.92mmol)，100℃油浴中反应24小时。LC-MS显示反应完全。反应液用乙酸乙酯(40mL)稀释，依次用水(50mL x 2)，饱和氯化铵(80mL x 2)和饱和氯化钠(100mL x 2)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，粗品用柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝3∶1)分离得到化合物TDI01467-5(140mg，黄色固体，产率39.4％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.74(d，J＝7.6Hz，1H)，7.71(s，1H)，7.28(s，1H)，4.74(s，2H)，4.72(s，2H)，4.39(t，J＝12.4Hz，4H)，1.35(s，12H).MS m/z(ESI)：365.1[M+H]。
第六步：
将中间体化合物Reg-1-16(90mg，0.174mmol)和TDI01467-5(95mg，0.262mmol)溶于二氧六环/水(10∶1)的混合液(8.8mL)中，加入碳酸钾(48mg，0.348mmol)及Pd(dppf)Cl2(12.7mg，0.017mmol)，氩气置换3次，置于100℃油浴中反应过夜。LC-MS显示原料反应完全，将反应液减压浓缩，粗品溶于二氯甲烷(6mL)，加入三氟乙酸(2mL)，室温反应2小时。LC-MS显示反应完全。将反应液减压浓缩，粗品用高效液相色谱法纯化得到化合物TDI01467(11.71mg，黄色固体，产率20.9％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 10.25(s，1H)，8.38(d，J＝6.0Hz，1H)，8.24(d，J＝7.2Hz，2H)，8.06(d，J＝6.0Hz，2H)，7.75(d，J＝6.4Hz，2H)，7.68(d，J＝7.2Hz，2H)，7.53(d，J＝7.6Hz，1H)，6.82(d，J＝6.4Hz，1H)，4.77(d，J＝6.4Hz，4H)，4.49-4.41(m，4H).MS m/z(ESI)：474.3[M+H]。
实施例41：(5-(4-((1H-吲唑-5-基)氨基)嘧啶-2-基)异二氢吲哚-2-基)(吡啶-4-基)甲酮(TDI01544)的制备
Figure BDA0002391547790002421
第一步：
将中间体化合物Reg-1-1(500mg，1.45mmol)和TDI01544-1(599mg，1.74mmol)溶于乙醇(30mL)和水(3mL)中，加入碳酸钠(459.77mg，4.34mmol)和Pd(PPh3)2Cl2(50.75mg，0.072mmol)，氮气保护下110℃回流过夜。LC-MS显示反应完全。冷却至室温，反应液用硅藻土过滤，滤液浓缩，柱色谱法分离(二氯甲烷∶甲醇＝100∶1～10∶1)得到化合物TDI01544-2(600mg，产率78.50％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.35(d，J＝5.9Hz，1H)，8.33-8.19(m，2H)，8.08(s，1H)，7.76(d，J＝4.6Hz，1H)，7.48(t，J＝14.6Hz，2H)，7.39-7.32(m，1H)，7.28(d，J＝5.7Hz，1H)，4.70(dd，J＝18.6，8.9Hz，4H)，1.54(s，9H).MS m/z ESI：429.3[M+H]。
第二步；
将化合物TDI01544-2(0.6g，1.41mmol)溶于二氯甲烷(20mL)中，然后加入三氟乙酸(2mL)，反应于30℃下搅拌3小时。LC-MS原料反应完全，将反应液旋干得到目标产品TDI01544-3(0.35g，棕色油状物，收率76.12％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.38(d，J＝6.7Hz，1H)，8.22(d，J＝11.8Hz，2H)，8.18-8.09(m，2H)，7.65(d，J＝9.6Hz，2H)，7.56(d，J＝9.0Hz，1H)，6.89(d，J＝6.7Hz，1H)，4.72-4.57(m，4H).MS m/zESI：329.1[M+H]。
第三步：
将化合物TDI01544-3(50mg，0.152mmol)和4-吡啶甲酸(22.41mg，0.182mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(5mL)，加入HATU(69.16mg，0.182mmol)和二异丙基乙胺(58.94mg，0.456mmol)，室温反应1小时。LC-MS显示反应完全。减压蒸除溶剂，粗品经高效液相色谱法分离得到化合物TDI01544(4.04mg，黄色固体，产率6.12％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 10.38(s，1H)，8.87(s，1H)，8.73(s，1H)，8.34(dd，J＝17.0，10.2Hz，2H)，8.25-8.17(m，1H)，8.17-8.06(m，3H)，7.57(ddd，J＝42.5，24.1，8.5Hz，4H)，6.79(t，J＝6.6Hz，1H)，4.99(d，J＝9.7Hz，2H)，4.93(d，J＝11.8Hz，2H).MS m/z ESI：434.2[M+H]。
通过与实施例41中所述类似方法，制备下表10中的化合物。
表10：
Figure BDA0002391547790002431
实施例42：吡啶-4-基5-(4-((4-(1H-吡唑-4-基)苯基)氨基)嘧啶-2-基)异二氢吲哚-2-甲酸酯(TDI01535)的制备
Figure BDA0002391547790002432
第一步：
将化合物TDI01535-1(46g，0.15mol)和联硼酸频那醇酯(46g，0.18mol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(800mL)中，加入乙酸钾(46g，0.47mol)和Pd(dppf)Cl2(10g，14mmol)，氮气置换三次，反应液在110℃下搅拌16小时。LC-MS检测显示反应完成，反应液冷却至室温，真空旋蒸移除反应溶剂。残留物通过柱色谱法分离(石油醚∶乙酸乙酯＝20∶1至5∶1)进行纯化，得到化合物TDI01535-2(37g，白色固体，收率73％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.67-7.72(m，2H)，7.22-7.29(m，1H)，4.62-4.69(m，4H)，1.52(s，9H)，1.35(s，12H)，MS m/z(ESI)：367.9[M+Na]。
第二步：
将化合物TDI01535-2(5.17g，13.9mmol)和化合物Reg-1-16(4.8g，13.9mmol)溶于二氧六环(100mL)和水(10mL)的混合溶液中，加入碳酸钾(5.76g，41.7mmol)，氮气置换三次，加入Pd(dppf)Cl2(3.05g，4.17mmol)，再次氮气置换三次，反应液在110℃下搅拌16h。LC-MS检测显示反应完成，反应液冷却至室温，真空旋蒸移除反应溶剂。残留物通过柱色谱法分离(石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1到纯乙酸乙酯)进行纯化，得到化合物TDI01535-3(2.5g，类白色固体)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.87(s，1H)，8.38(d，J＝6.0Hz，1H)，8.29-8.24(m，2H)，8.05(s，2H)，7.76(d，J＝8.4Hz，2H)，7.66(d，J＝8.5Hz，2H)，7.49(d，J＝4.5Hz，1H)，6.76(d，J＝6.0Hz，1H)，4.68(t，J＝9.9Hz，4H)，1.48(s，9H).MS m/z(ESI)：455.0[M+H]。
第三步：
将化合物TDI01535-3(2.5g，5.5mmol)溶于二氯甲烷(20mL)，滴加入盐酸二氧六环溶液(8mL)，产生大量固体沉淀，反应物在室温下继续搅拌16h。LC-MS检测显示反应完成，真空旋蒸移除反应溶剂得到TDI01535-4(2.2g，黄色固体，粗品)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.01(s，1H)，9.58(s，2H)，8.39(d，J＝6.0Hz，1H)，8.34(d，J＝8.2Hz，2H)，8.04(s，2H)，7.76(d，J＝8.4Hz，2H)，7.66(d，J＝8.6Hz，2H)，7.59(d，J＝7.9Hz，1H)，6.80(d，J＝6.0Hz，1H)，4.61(dd，J＝10.7，5.2Hz，4H).MS m/z(ESI)：354.7[M+H]。
第四步：
将化合物4-羟基吡啶(25mg，0.26mmol)和DNPC(79mg，0.26mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(4mL)中，加入二异丙基乙胺(134mg，1.04mmol)，室温搅拌1h，加入TDI01535-4(92mg，0.26mmol)，反应物在室温下搅拌16h。LC-MS检测显示反应完成，真空旋蒸移除反应溶剂，残留物通过制备液相色谱法进行纯化，得到化合物TDI01535(18.8mg，产率15.2％)
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ 10.45(s，1H)，8.35(d，J＝6.4Hz，1H)，8.19(dd，J＝23.5，7.2Hz，4H)，8.04(s，2H)，7.69(dd，J＝20.8，8.4Hz，4H)，7.56(d，J＝7.3Hz，1H)，6.85(s，1H)，6.42-6.33(m，2H)，4.99(d，J＝7.3Hz，4H).MS m/z(ESI)：475.6[M+H]。
通过与实施例42中所述类似方法，制备下表11的化合物。
Figure BDA0002391547790002451
Figure BDA0002391547790002461
Figure BDA0002391547790002471
Figure BDA0002391547790002481
Figure BDA0002391547790002491
Figure BDA0002391547790002501
Figure BDA0002391547790002511
实施例43：N-(4-(1H-吡唑-4-基)苯基)-2-(2-(乙基磺酰基)异二氢吲哚-5-基)嘧啶-4-胺(TDI01558)的制备
Figure BDA0002391547790002521
第一步：
将化合物TDI01557(80mg，0.224mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(5mL)中，加入二异丙基乙胺(144mg，1.12mmol)和乙基磺酰氯(28mg，0.224mmol)，室温搅拌16h，LC-MS检测显示反应完成，真空旋蒸移除反应溶剂，残留物通过制备液相色谱法进行纯化，得到化合物TDI01558(65mg，产率65％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 10.28(s，1H)，8.38(d，J＝6.3Hz，1H)，8.25(d，J＝9.6Hz，2H)，8.06(s，2H)，7.71(dd，J＝28.0，8.4Hz，4H)，7.54(d，J＝7.9Hz，1H)，6.83(d，J＝5.4Hz，1H)，4.78(d，J＝10.1Hz，4H)，3.23(q，J＝7.4Hz，2H)，1.25(t，J＝7.4Hz，3H).MS m/z(ESI)：447.1[M+H]。
通过与实施例43中所述类似方法，制备下表12中的化合物。
表12：
Figure BDA0002391547790002522
实施例44：(5-(4-((4-(1H-吡唑-4-基)苯基)氨基)嘧啶-2-基)异二氢吲哚-2-基)(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)甲酮(TDI01546)的制备
Figure BDA0002391547790002523
按实施例42第一步到第二步完成实施例44中第一步到第三步的合成。
第四步；
将化合物TDI01546-4(30mg，0.085mmol)和HATU(39mg，0.102mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(3mL)中，加入7.(叔丁氧羰基).7-氮杂螺[3，5]-壬烷-2-羧酸(23mg，0.085mmol)和二异丙基乙胺(32mg，0.255mmol)，室温搅拌2h。反应液加水(10mL)稀释，用二氯甲烷(20mL x 3)萃取，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，残留物用快速柱色谱法(二氯甲烷∶甲醇＝20∶1)纯化，得到化合物TDI01546-5(43mg，黄色油状物，粗品)。
MS m/z(ESI)：605.8[M+H]
第五步：
将化合物TDI01546-5(43mg，0.071mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入盐酸二氧六环溶液(3mL)，在室温下反应16h，反应液减压浓缩，残留物通过制备液相色谱法进行纯化，得到化合物TDI01546(17mg，黄色固体，产率48％)。
1H NMR(301MHz，DMSO-d6)δ 10.22(s，1H)，8.38(d，J＝5.6Hz，2H)，8.30-8.16(m，2H)，8.06(s，2H)，7.71(dd，J＝24.1，7.0Hz，4H)，7.59-7.46(m，1H)，6.81(d，J＝5.9Hz，1H)，4.82(s，2H)，4.73(d，J＝8.6Hz，2H)，3.45-3.27(m，1H)，2.99(d，J＝28.4Hz，4H)，2.21-1.95(m，4H)，1.80(s，2H)，1.65(s，2H).MS m/z(ESI)：505.8[M+H]。
通过与实施例44中所述类似方法，制备下表13的化合物。
Figure BDA0002391547790002541
Figure BDA0002391547790002551
Figure BDA0002391547790002561
Figure BDA0002391547790002571
Figure BDA0002391547790002581
Figure BDA0002391547790002591
Figure BDA0002391547790002601
Figure BDA0002391547790002611
Figure BDA0002391547790002621
实施例45：(5-(4-((4-(1H-吡唑-4-基)苯基)氨基)嘧啶-2-基)异二氢吲哚-2-基)(3，3-二氟环丁基)甲酮(TDI01944)的制备
Figure BDA0002391547790002631
第一步：
将化合物TDI01944-1(20g，67mmol)溶于二氯甲烷(20mL)中，加入三氟乙酸(50mL)，反应液在室温下搅拌16小时，真空旋蒸移除反应溶剂和三氟乙酸，残留物加入20mL水和40mL浓盐酸析出固体，过滤干燥得到化合物TDI01944-2(15.3g，灰色固体)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.39(s，1H)，7.34(d，J＝8.2Hz，1H)，7.12(d，J＝8.0Hz，1H)，4.22(d，J＝14.1Hz，4H).MS m/z(ESI)：197.9，199.8[M-CH+。
第二步：
将化合物3，3.二氟环丁酸(3.1g，23mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(100mL)，依次加入HATU(9.5g，25mmol)、二异丙基乙胺(8.7g，67mmol)和TDI01944-2(4.5g，19mmol)，反应物在室温下继续搅拌16小时，真空旋蒸移除反应溶剂，残留物溶于20mL二氯甲烷，水洗(20mL×3)后浓缩有机相至有固体析出，待固体完全析出后过滤，干燥得TDI01944-3(4.2g，灰色固体，粗品，70％收率)。
MS m/z(ESI)：315.7，317.8[M+H]。
第三步：
将化合物TDI01944-3(4.1g，13mmol)和联硼酸频那醇酯(4.1g，16mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(100mL)中，加入乙酸钾(4.1g，16mmol)和Pd(dppf)Cl2(0.95g，1.3mmol)，氮气置换三次，反应液在110℃下搅拌16小时。LC-MS检测显示反应完成，反应液冷却至室温，真空旋蒸移除反应溶剂。残留物通过柱色谱法分离(石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1)进行纯化，得到化合物TDI01944-4(3.8g，白色固体，81％收率)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.73-7.79(m，2H)，728-7.35(m，1H)，4.78-4.85(m，4H)，3.09-3.17(m，1H)，2.94-3.05(m，2H)，2.80-2.85(m，2H)，1.38(s，12H).MS m/z(ESI)：363.9[M+H]。
第四步：
将化合物TDI01944-4(3.72g，10.0mmol)和化合物Reg-1-16(3.63g，10.0mmol)溶于二氧六环(80mL)和水(8mL)的混合溶液中，加入碳酸钾(4.15g，30.0mmol)，氮气置换三次，加入Pd(dppf)Cl2(1.46g，2.0mmol)，再次氮气置换三次，反应液在110℃下搅拌16h。LC-MS检测显示反应完成，反应液冷却至室温，真空旋蒸移除反应溶剂。残留物通过柱色谱法分离(石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1到纯乙酸乙酯)进行纯化，得到化合物TDI01944(1.35g，类白色固体，28.7％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 12.90(s，1H)，9.68(s，1H)，8.38(dd，J＝5.8，1.2Hz，1H)，8.36-8.28(m，2H)，8.16(s，1H)，7.92(s，1H)，7.77(d，J＝6.7Hz，2H)，7.64(dd，J＝8.6，3.5Hz，2H)，7.49(dd，J＝15.4，8.0Hz，1H)，6.73(d，J＝5.9Hz，1H)，4.91(d，J＝11.0Hz，2H)，4.76(d，J＝14.9Hz，2H)，3.29(d，J＝8.3Hz，1H)，2.87(dd，J＝16.5，8.6Hz，4H).MS m/z(ESI)：472.5[M+H]。
通过与实施例45中所述类似方法，制备下表14中的化合物。
Figure BDA0002391547790002641
Figure BDA0002391547790002651
Figure BDA0002391547790002661
Figure BDA0002391547790002671
Figure BDA0002391547790002681
Figure BDA0002391547790002691
Figure BDA0002391547790002701
实施例46：(6-(4-((4-(1H-吡唑-4-基)苯基)氨基)呋喃并[3，2-d]嘧啶-2-基)-1-甲基-1H-吲哚-2-基)(3，3-二氟氮杂环丁烷-1-基)甲酮(TDI01916)的制备
Figure BDA0002391547790002711
第一步：
在1L烧瓶中加入TDI1916-1(31.3g，130mmol)、3，3-二氟氮杂环丁烷盐酸盐(20g，140mmol)、HATU(60g，160mmol)和DMF(330mL)，加入DIEA(50g，390mmol)，使反应于室温下搅拌过夜。LC-MS显示反应完全。将反应液浓缩得到粗品，加入水(200mL)、甲醇(20mL)和乙腈(20mL)，将此混合物于室温搅拌1小时，过滤，将所得固体重复上述打浆操作，干燥后得TDI1916-2(41g，棕色固体，产率：100％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 11.88(s，1H)，7.61(s，1H)，7.60(d，J＝8.6Hz，1H)，7.20(d，J＝8.6Hz，1H)，6.94(s，1H)，4.98(s，2H)，4.56(s，2H).MS m/z(ESI)：314.9，316.9[M+H，Br]。
第二步：
将TDI1916-2(30g，96mmol)溶于DMF(300mL)中，N2保护下以冰水浴冷却至0℃，分批加入NaH(60％，7.62g，191mmol)，搅拌1小时后加入碘甲烷(41g，288mmol)。将反应于30℃搅拌3小时，LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至0℃，加入水(300mL)，有大量固体析出，过滤，滤饼以水(1L)洗至中性，干燥后得TDI1916-3(30.5g，棕色固体，产率：96.5％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 7.85(s，1H)，7.58(d，J＝8.4Hz，1H)，7.25(d，J＝8.4Hz，1H)，7.03(s，1H)，4.83(s，2H)，4.53(s，2H)，3.92(s，3H).MS m/z(ESI)：328.9，330.9[M+H，Br]。
第三步：
将TDI1916-3(30.5g，93mmol)、联硼酸频那醇酯(26g，100mmol)和醋酸钾(27.3g，280mmol)溶于1，4-二氧六环(500mL)中，以N2置换3次后加入Pd(dppf)Cl2(10g，14mmol)，再次以N2置换3次后置于108℃油浴中反应4小时。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩得到粗品，将粗品经硅胶柱色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1)分离得到TDI1916-4(27.5g，棕色固体，产率：78.6％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.82(s，1H)，7.62(d，J＝8.0Hz，1H)，7.41(d，J＝8.0Hz，1H)，7.02(s，1H)，4.85(s，2H)，4.54(s，2H)，3.97(s，3H)，1.32(s，12H).MS m/z(ESI)：377.0[M+H]。
第四步：
将化合物TDI01916-4(3.0g，7.28mmol)和化合物Reg-1-44(2.74g，7.28mmol)溶于二氧六环(80mL)和水(8mL)的混合溶液中，加入碳酸钾(3g，21.8mmol)，氮气置换三次，加入Pd(dppf)Cl2(1.6g，2.18mmol)，再次氮气置换三次，反应液在110℃下搅拌16h。LC-MS检测显示反应完成，反应液冷却至室温，真空旋蒸移除反应溶剂。残留物通过柱色谱法分离(二氯甲烷∶甲醇＝60∶1-40∶1)进行纯化，得到化合物TDI01916粗品(2g)，粗品在10mL二氯甲烷中搅拌0.5h，过滤，二氯甲烷洗涤滤饼(2mL×3)，并将滤饼真空干燥得类白色固体TDI01916(1.7g，44.4％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.92(s，1H)，10.02(s，1H)，8.56(s，1H)，8.39(s，1H)，8.25-8.17(m，2H)，8.02-7.93(m，3H)，7.70(dd，J＝18.9，8.4Hz，3H)，7.17(s，1H)，7.07(s，1H)，4.85(s，2H)，4.59(s，2H)，4.05(s，3H).MS m/z(ESI)：525.6[M+H]。
通过与实施例46中所述类似方法，制备下表15中的化合物。
Figure BDA0002391547790002721
Figure BDA0002391547790002731
Figure BDA0002391547790002741
Figure BDA0002391547790002751
Figure BDA0002391547790002761
Figure BDA0002391547790002771
Figure BDA0002391547790002781
Figure BDA0002391547790002791
实施例47：N-(4-(1H-吡唑-4-基)苯基)-2-(2-(噻唑-2-基)-1H-吲哚-6-基)嘧啶-4-胺(TDI01826)的制备
Figure BDA0002391547790002801
第一步：
将化合物TDI01826-1(10.0g，41.6mmol)、NH4Cl(2.67g，49.9mmol)，HATU(18.96g，49.9mmol)和DIPEA(22ml，124.8mmol)溶于DMF(60mL)中。反应液室温搅拌16小时。LC-MS检测反应完成，真空旋蒸移除反应溶剂。残留物通过柱色谱法分离(石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1)进行纯化，得到化合物TDI01826-2(9.3g，类白色固体，93.5％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 11.70(s，1H)，8.04(s，1H)，7.59(d，J＝8.0Hz，2H)，7.45(s，1H)，7.18-7.13(m，2H).MS m/z(ESI)：238.9[M+H]。
第二步：
将化合物TDI01826-2(9.3g，38.9mmol)和劳森试剂(18.9g，46.7mmol)溶于四氢呋喃(200mL)中，反应液在90℃下搅拌2小时。LC-MS检测显示反应完成，真空旋蒸移除反应溶剂。残留物加入饱和碳酸氢钠水溶液(150mL)和乙酸乙酯(150ml)。萃取分液，有机相干燥后旋蒸移除溶剂，得到化合物TDI01826-3(16g，粗品)。MS m/z(ESI)：254.9[M+H]。
第三步：
将化合物TDI01826-3(16g，粗品，62.7mmol)和溴代乙醛缩二乙醇(13.6g，69mmol)溶于乙醇(125mL)中，加入浓盐酸(2.5mL)，反应液在90℃下搅拌16小时。LC-MS检测显示反应完成，反应液冷却至室温，真空旋蒸移除反应溶剂，残留物通过柱色谱法分离(乙酸乙酯；二氯甲烷∶甲醇＝10∶1)进行纯化，得到化合物TDI01826-4(4.9g，45％收率)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ12.04(s，1H)，7.92(d，J＝3.1Hz，1H)，7.79(d，J＝1.6Hz，1H)，7.54(d，J＝12.4Hz，2H)，7.15(d，J＝8.4Hz，1H)，7.06(s，1H).MS m/z(ESI)：278.7[M+H]。
第四步：
将化合物TDI01826-4(4.9g，17.55mmol)和联硼酸频那醇酯(5.35g，21.06mmol)溶于1，4-二氧六环(60mL)中，加入乙酸钾(5.16g，52.65mmol)，氮气置换三次。加入Pd(dppf)Cl2(1.28g，1.755mmol)，氮气置换三次，反应液在100℃下搅拌16小时。LC-MS检测显示反应完成，反应液冷却至室温，真空旋蒸移除反应溶剂。残留物通过柱色谱法分离(石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1)进行纯化，得到化合物TDI01826-5(1.27g，白色固体，22％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.06(s，1H)，7.96(d，J＝3.2Hz，1H)，7.83-7.80(m，2H)，7.58(d，J＝8.0Hz，1H)，7.34(dd，J＝8.0，0.8Hz，1H)，7.08(d，J＝1.4Hz，1H)，1.32(s，12H).MS m/z(ESI)：326.9[M+H]。
第五步：
将化合物TDI01826-5(180mg，0.55mmol)和Reg-1-16(150mg，0.55mmol)溶于1，4-二氧六环∶水(15∶2mL)中，加入碳酸钾(229mg，1.66mmol)，氮气置换三次。加入Pd(dppf)Cl2(80mg，0.11mmol)，氮气置换三次，反应液在110℃下搅拌16小时。LC-MS检测显示反应完成，反应液冷却至室温，真空旋蒸移除反应溶剂。残留物通过柱色谱法分离(二氯甲烷∶甲醇＝10∶1)进行纯化，得到化合物TDI01826(39mg，16％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 12.20(s，1H)，9.63(s，1H)，8.54(s，1H)，8.37(d，J＝4.0Hz，1H)，8.13(d，J＝8.0Hz，2H)，8.04(s，2H)，7.96(s，1H)，7.85-7.81(m，3H)，7.67(t，J＝8.0Hz，3H)，7.11(s，1H)，6.68(d，J＝4.0Hz，1H).MS m/z(ESI)：436.2[M+H]。
通过与实施例47中所述类似方法，制备下表16中的化合物。
Figure BDA0002391547790002811
Figure BDA0002391547790002821
实施例48：N-(4-(1H-吡唑-4-基)苯基)-2-(1-甲基-(2-(噻唑-2-基)-1H-吲哚-6-基)嘧啶-4-胺(TDI01919)的制备
Figure BDA0002391547790002831
第一步：
将化合物TDl01826-5(489mg，1.5mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(30mL)中，0℃下加入氢化钠(72mg，3mmol)，搅拌30min后加入碘甲烷(638mg，4.5mmol)，反应液在室温下搅拌16小时。LC-MS检测显示反应完成，反应液真空旋蒸移除反应溶剂，残留物通过柱色谱法分离(石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1)进行纯化，得到化合物TDI01919-1(420mg，白色固体，82.3％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 8.02(d，J＝3.3Hz，1H)，7.88-7.83(m，2H)，7.63(d，J＝8.0Hz，1H)，7.42(d，J＝7.9Hz，1H)，7.11(s，1H)，4.18(s，3H)，1.33(s，12H).MS m/z(ESI)：341.0[M+H]。
第二步：
将化合物TDI01919-1(150mg，0.44mmol)和Reg-1-16(164mg，0.44mmol)溶于1，4-二氧六环∶水(8∶0.8mL)中，加入碳酸钾(182mg，1.32mmol)，氮气置换三次，加入Pd(dppf)Cl2(129mg，0.176mmol)，氮气置换三次，反应液在110℃下搅拌16小时。LC-MS检测显示反应完成，反应液冷却至室温，真空旋蒸移除反应溶剂。残留物通过制备液相法分离纯化，得到化合物TDI01919(40mg，20％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 10.78(s，1H)，8.53(s，1H)，8.40(d，J＝6.6Hz，1H)，8.07(dd，J＝15.3，12.2Hz，4H)，7.93(d，J＝3.0Hz，1H)，7.88-7.70(m，5H)，7.23(s，1H)，6.87(s，1H)，4.26(s，3H).MS m/z(ESI)：449.9[M+H]。
实施例49：1-(5-(4-((1H-吲唑-5-基)氨基)嘧啶-2-基)异二氢吲哚-2-基)-2-吗啉代乙-1-酮(TDI01806)的制备
Figure BDA0002391547790002832
按实施例35中第一步到第三步所述类似方法完成化合物TDI01806-1的合成。
氮气保护下将TDI01806-1(100mg，0.305mmol)加入二氯甲烷(10mL)中，降至0℃，缓慢滴加2-溴乙酰基溴(38mg，0.336mmol)和三氟乙酸(31mg，0.305mmol)，室温搅拌两小时，一次性加入吗啉(200mg，2.30mmol)，自然回升温至室温，并搅拌两个小时。LC-MS显示反应完全。旋蒸溶解得到粗品，制备得到化合物TDI01806(12mg，黄色固体，产率：9％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 8.32(d，J＝5.1Hz，1H)，8.19(dd，J＝24.1，14.6Hz，4H)，7.59(dt，J＝14.1，7.8Hz，3H)，6.82(d，J＝6.4Hz，1H)，4.91(s，2H)，4.83(d，J＝8.5Hz，2H)，4.34(s，2H)，3.75(s，4H)，3.08(s，4H).MS m/z(ESI)：456.0[M+H]。
实施例50：N-(2-(2-(苯并[d]噁唑-2-基)-1H-吲哚-6-基]嘧啶-4-基)-1H-吲唑-5-胺(TDI01816)的制备
Figure BDA0002391547790002841
第一步：
将化合物TDI01816-1(5g，20.8mmol)与二氯亚砜(25mL)混合，室温下搅拌直至TLC显示无原料剩余，反应混合物浓缩除去二氯亚砜，溶于干燥二氯甲烷(50mL)中，在0℃下逐滴加入邻氨基苯酚(2.15g，19.7mmol)的二氯甲烷(50mL)溶液中，室温下搅拌16小时。反应液过滤除去不溶物，滤液浓缩得化合物TDI01816-2(1.95g，棕色固体粗品，28％收率)。
MS m/z(ESI)：330.9[M+H]。
第二步：
将化合物TDI01816-2(500mg，1.51mmol)溶于甲苯(50mL)中，加入对甲苯磺酸(321mg，1.86mmol)，反应液在120℃下搅拌48小时。LC-MS检测显示反应基本完成。反应液冷却至室温，加入100mL乙酸乙酯和50mL饱和碳酸氢钠水溶液，分液后，水相用乙酸乙酯萃取(50mL)，有机相合并旋干，真空旋蒸移除反应溶剂。残留物通过柱色谱(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1到5∶1)进行纯化得到化合物TDI01816-3(249mg，白色固体，53％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 12.48(s，1H)，7.83-7.80(m，2H)，7.68(d，J＝8.8Hz，1H)，7.66(s，1 H)，7.49-7.42(m，2H)，7.38(s，1H)，7.25(d，J＝8.4Hz，1H).MS m/z(ESI)：312.9，314.8[M+H]。
第三步：
将化合物TDI01816-3(210mg，0.67mmol)和联硼酸频那醇酯(170mg，0.67mol)溶于1，4-二氧六环(20mL)中，加入乙酸钾(197mg，2.01mmol)和Pd(dppf)Cl2(49mg，0.067mmol)，氮气置换三次，反应液在100℃下搅拌8小时。LC-MS检测显示反应完成，反应液冷却至室温，过滤，真空旋蒸移除反应溶剂，残留物通过柱色谱(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1到5∶1)进行纯化得到化合物TDI01816-4(153mg，63％收率)。
MS m/z(ESI)：361.0[M+H]。
第四步：
将化合物TDI01816-4(100mg，0.28mmol)和Reg-1-1(96mg，0.28mmol)溶于四氢呋喃(20mL)和水(2mL)中，加入磷酸钾(176mg，0.83mmol)和Pd(PPh3)4(32mg，0.028mmol)，氮气置换三次，反应液在80℃下搅拌16小时。LC-MS检测显示反应未完全完成。反应液冷却至室温，真空旋蒸移除反应溶剂。残留物通过高压制备液相色谱进行纯化，得到化合物TDI01816(1.8mg，1.5％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.78(s，1H)，10.22(s，1H)，8.55(s，2H)，8.38(s，2H)，8.24(d，J＝29.3Hz，2H)，8.13(s，1H)，7.87(s，3H)，7.65(s，2H)，7.46(t，J＝14.8Hz，2H)，6.74(s，1H).MS m/z(ESI)：443.7[M+H]。
通过与实施例50中所述类似方法，制备下表18中的化合物。
表18：
Figure BDA0002391547790002842
Figure BDA0002391547790002851
实施例51：4-((4-(1H-吡唑-4-基)苯基)氨基)-2-(2-(3，3-二氟环丁烷-1嵌基)异二氢吲哚-5-基)嘧啶-5-羧酸(TDI01567C)和4-((4-(1H-吡唑-4-基)苯基)氨基)-2-(2-(3，3-二氟环丁基-1-羰基)异二氢吲哚-5-基)嘧啶-5-甲酰胺(TDI01567)的制备
Figure BDA0002391547790002852
第一步：
将化合物TDI01567B(195mg，0.358mmol)溶于THF(6mL)和MeOH(6mL)中，加入1M氢氧化钠水溶液(6mL)。反应液在室温反应3h。LC-MS检测显示反应完成。真空旋蒸移除反应溶剂，残留物通过高压制备液相进行纯化，得到化合物TDI01567C(117mg，黄色固体，收率64％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.56(s，1H)，9.02(s，1H)，8.35(dd，J＝16.6，8.7Hz，2H)，8.10(s，2H)，7.83-7.78(m，2H)，7.71(dd，J＝8.4，4.0Hz，2H)，7.53(dd，J＝15.5，8.0Hz，2H)，4.92(d，J＝6.7Hz，2H)，4.77(d，J＝12.7Hz，2H)，3.28(d，J＝5.8Hz，1H)，2.87(dd，J＝16.4，8.6Hz，4H).MS m/z(ESI)：516.7[M+H]。
第二步：
将化合物TDI01567C(100mg，0.194mmol)和HATU(81mg，0.213mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺中，加入二异丙基乙胺(125mg，0.968mmol)。向反应液中通入氨气，反应液在室温条件下搅拌2h。LC-MS检测显示反应完成，真空旋蒸移除反应溶剂。残留物通过高压制备液相进行纯化，得到化合物TDI01567(20.59mg，黄色固体，收率20％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 11.49-11.46(m，1H)，9.01(s，1H)，8.44(s，1H)，8.32(d，J＝9.7Hz，2H)，8.08(s，2H)，7.89-7.83(m，1H)，7.80-7.77(m，2H)，7.70-7.67(m，2H)，7.56-7.49(m，1H)，4.91(s，2H)，4.76(s，2H)，2.87(d，J＝8.6Hz，4H).MS m/z(ESI)：515.8[M+H]。
实施例52：6-(4-((4-(1H-吡唑-4-基)苯基)氨基)嘧啶-2-基)-N-(3-氰基吡啶-4-基)-1H-吲哚-2-甲酰胺(TDI01829B)的制备
Figure BDA0002391547790002853
将化合物TDI01829C(30mg，0.05mmol)和Zn(CN)2(17mg，0.15mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(3mL)中，加入Pd(PPh3)4(11mg，0.01mmol)，氮气置换三次，反应液在110℃下搅拌16小时。LC-MS检测显示反应完成，反应液冷却至室温，加水(5mL)，乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机相真空旋蒸移除溶剂。残留物通过高压制备液相色谱法进行纯化，得到化合物TDI01829B(2.37mg，黄色色固体，10％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 12.52(s，1H)，11.08(s，1H)，9.03(s，1H)，8.85(s，1H)，8.54(s，1H)，8.38(d，J＝5.6Hz，1H)，8.09(s，4H)，7.96(s，1H)，7.76(dd，J＝27.9，10.9Hz，6H)，7.59(s，1H)，6.85(s，1H).MS m/z(ESI)：498.0[M+H]。
实施例53：(6-(4-((4-(1H-吡唑-4-基)苯基)氨基)嘧啶-2-基)-1H-吲哚-2-基)二甲基膦氧化物(TDI01846)的制备
Figure BDA0002391547790002861
第一步：
将化合物TDI01846-1(1.0g，5.1mmol)和联频哪醇硼酸酯(1.3g，5.1mmol)溶于1，4-二氧六环(20mL)中，加入乙酸钾(1.5g，15.3mmol)和Pd(dppf)Cl2(373mg，0.51mmol)，氮气置换三次，反应液在100℃下搅拌16小时。LC-MS检测显示反应完成，反应液冷却至室温，过滤除去不溶物，滤液真空旋蒸移除溶剂。残留物通过柱色谱法分离(石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1)进行纯化，得到化合物TDI01846-2(670mg，黄色固体，54％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 11.17(s，1H)，7.76(s，1H)，7.52(d，J＝7.9Hz，1H)，7.44(t，J＝2.7Hz，1H)，7.28(d，J＝7.9Hz，1H)，6.43(s，1H)，1.30(s，12H).MS m/z(ESI)：244.0[M+H]。
第二步：
将化合物TDI01846-2(150mg，0.6mmol)和化合物Reg-1-16(290mg，0.78mmol)溶于二氧六环(15mL)和水(1.5mL)的混合溶液中，加入磷酸钾(382mg，1.8mmol)和Pd(dppf)Cl2(42mg，0.06mmol)，氮气置换三次，反应液在100℃下搅拌16h。LC-MS检测显示反应完成，反应液冷却至室温，过滤除去不溶物，滤液真空旋蒸移除反应溶剂。残留物通过柱色谱法分离(二氯甲烷∶甲醇＝30∶1)进行纯化，得到化合物TDI01846-3(344mg，粗品)。
MS m/z(ESI)：453.0[M+H]。
第三步：
将化合物TDI01846-3(344mg，0.76mmol)溶于二氯甲烷(10mL)中，加入三乙胺(232mg，23mmol)和4，4-二甲氨基吡啶9mg，0.076mmol)，然后加入Boc2O(479mg，2.3mmol)，室温下反应过夜。将反应液浓缩得到粗品，残留物通过柱色谱法分离(石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1)进行纯化，得到化合物TDI01846-4(120mg，类白色固体，24％收率)。
MS m/z(ESI)：652.8[M+H]。
第四步：
将化合物TDI01846-4(70mg，0.11mmol)、Ag2CO3(41mg，0.15mmol)和Mg(NO3)2(22mg，0.15mmol)的混合物加入乙腈(5mL)，然后一次性加入HPOMe2(12mg，0.15mmol)，氮气置换三次，反应液在80℃下搅拌24小时。LC-MS检测显示反应完成，反应液冷却至室温，真空旋蒸移除反应溶剂，残留物通过制备薄层色谱法进行纯化(展开剂为二氯甲烷∶甲醇＝15∶1)，得到化合物TDI01846-5(100mg，粗品)。
MS m/z(ESI)：628.9[M+H]。
第五步：
将化合物TDI01846-5(100mg，粗品，理论0.11mmol)溶于四氢呋喃(2mL)中，加入4MHCl/二氧六环(1mL)，反应液在室温下搅拌16小时。LC-MS检测显示反应完成，反应液冷却至室温，真空旋蒸移除反应溶剂，残留物通过制备液相色谱法进行纯化，得到化合物TDI01846(6.1mg，黄色固体，产率13％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 12.20(s，1H)，8.46(s，1H)，8.36(s，1H)，8.08(s，1H)，8.03(s，1H)，7.92-7.76(m，3H)，7.71(d，J＝8.2Hz，2H)，7.66(s，1H)，7.02(s，1H)，6.89-6.75(m，2H)，1.77(t，J＝26.9Hz，6H).MS m/z(ESI)：428.9[M+H]。
实施例54：N-(2-(2-(苯并[d]噻唑-2-基)-1H-吲哚-6-基)嘧啶-4-基)-1H-吲唑-5-胺(TDI01881)的制备
Figure BDA0002391547790002871
第一步：
将化合物TDI01881-1(200mg，0.59mmol)、2-碘苯并[d]噻唑(170mg，0.65mmol)、碳酸钠(191mg，1.77mmol)和Pd(PPh3)Cl2(42mg，0.059mmol)混合于乙腈(20mL)与水(2mL)的混合溶剂中，以N2置换3次后将反应液加热至回流反应1小时。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，过滤以除掉盐杂质，滤液减压浓缩，将粗品经硅胶柱色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1)分离得到化合物TDI01881-2(160mg，棕色粘油，产率：63.5％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.23(d，J＝12.7Hz，2H)，8.12(d，J＝8.0Hz，1H)，8.02(d，J＝8.3Hz，1H)，7.73(d，J＝8.4Hz，1H)，7.62(d，J＝7.5Hz，1H)，7.52(m，2H)，1.25(s，9H).MS m/z(ESI)：428.5，430.5[M+H，Br]。
第二步：
将化合物TDI01881-2(160mg，0.37mmol)、联硼酸频那醇酯(150mg，0.49mmol)、醋酸钾(109mg，1.11mmol)和Pd(dppf)Cl2(27mg，0.037mmol)溶于1，4-二氧六环(8mL)中，以N2置换3次后置于108℃油浴中回流反应10小时。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩得到粗品，将粗品经硅胶柱色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1)分离得到化合物TDI01881-3(158mg，橙色固体，产率：88.8％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 8.46(s，1H)，8.23(d，J＝7.8Hz，1H)，8.11(d，J＝8.2Hz，1H)，7.75(d，J＝7.8Hz，1H)，7.61(m，2H)，7.53(m，1H)，7.36(s，1H)，1.34(s，12H)，1.24(s，9H).
第三步：
将化合物TDI01881-3(50mg，0.24mmol)、化合物Reg-1-1(98g，0.28mmol)、碳酸钾(116mg，0.84mmol)和Pd(dppf)Cl2(82mg，0.112mmol)混合于1，4-二氧六环(5mL)与水(0.5mL)的混合溶剂中，以N2置换3次后将反应液加热至回流过夜。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，过滤以除掉盐杂质，滤液减压浓缩得到粗品，制备分离得化合物TDI01881-4(16mg，黄色固体，产率：27.3％)。
MS m/z(ESI)：559.5[M+H]。
第四步：
将化合物TDI01881-4(16mg，0.029mmol)溶于三氟乙酸(2mL)和四氢呋喃(3mL)中，加热至回流过夜。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩得到粗品，制备分离得化合物TDI01881(1.45mg，黄色固体，产率：11.2％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.12(s，1H)，12.68(s，1H)，8.52(s，1H)，8.35(d，J＝6.1Hz，1H)，8.28-8.16(m，3H)，8.09(d，J＝7.9Hz，1H)，7.81(s，1H)，7.68-7.56(m，3H)，7.52-7.48(m，1H)，7.36(s，1H)，7.20(s，1H)，6.74(s，1H)，6.66(s，1H).MS m/z(ESI)：460.0[M+H]。
通过与实施例54中所述类似方法，制备下表19中的化合物。
表19：
Figure BDA0002391547790002872
Figure BDA0002391547790002881
实施例55：2-(2-(1H-咪唑-1-基)-1-甲基-1H-吲哚-6-基)-N-(4-(1H-吡唑-4-基)苯基)嘧啶-4-胺(TDI01876B)的制备
Figure BDA0002391547790002882
第一步：
将化合物TDI01876B-1(200mg，1.05mmol)溶于四氢呋喃(5mL)中，氮气保护并降至0℃，分批加入氢化钠(63mg，60％，1.53mmol)，0℃反应0.5小时，一次性加入碘甲烷(435mg，3.06mmol)，加毕使反应于室温下搅拌过夜。LC-MS显示反应完全。滴入0.1mL水，旋蒸溶解得到粗品，将粗品经硅胶柱色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1)分离得得化合物TDI01876B-2(180mg，棕色固体，产率：84.5％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 7.69(s，1H)，7.49(d，J＝8.4Hz，1H)，7.34(d，J＝3.0Hz，1H)，7.13(m，1H)，6.44(d，J＝3.0Hz，1H)，3.78(s，3H).
第二步：
将化合物TDI01876B-2(180mg，0.86mmol)和咪唑(146mg，2.15mmol)溶于1，4-二氧六环(1mL)与甲酸铵的饱和水溶液(1mL)的混合溶剂中，一次性加入固体碘(539mg，2.125mmol)，室温搅拌过夜。LC-MS显示反应完全。用饱和硫代硫酸钠溶液洗去碘，用乙酸乙酯(15mL)分三次萃取，合并有机相并旋蒸得到粗品，通过快速柱色谱法纯化得化合物TDI01876B-3(110mg，棕色固体，产率：46.4％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 8.03(s，1H)，7.86(s，1H)，7.58(m，2H)，7.26(d，J＝8.4Hz，1H)，7.19(s，1H)，6.66(s，1H)，3.56(s，3H).MS m/z(ESI)：275.9，278.0[M+H，Br]。
第三步：
将化合物TDI01876B-3(110mg，0.4mmol)、联硼酸频那醇酯(112mg，0.44mmol)和醋酸钾(118g，1.2mmol)溶于1，4-二氧六环(10mL)中，以N2置换3次后加入Pd(dppf)Cl2(30mg，0.04mmol)，再次以N，置换3次后置于108℃油浴中反应4小时。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩得到粗品，将粗品经硅胶柱色谱法(石油醚∶乙酸乙酯＝8∶1)分离得到化合物TDI01876B-4(80mg，黄色固体，产率：62％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 8.03(s，1H)，7.82(s，1H)，7.60(d，J＝7.4Hz，2H)，7.44(d，J＝7.9Hz，1H)，7.19(s，1H)，6.64(s，1H)，3.60(s，3H)，1.32(s，9H).MS m/z(ESI)：324.2[M+H]。
第四步：
将化合物TDI01876B-4(80mg，0.25mmol)、Reg-1-16(92mg，0.25mmol)和碳酸钾(104mg，0.75mmol)混合于1，4-二氧六环(5mL)与水(0.5mL)的混合溶剂中，加入Pd(dppf)Cl2(37mg，0.05mmol)，以N2置换3次后将反应液加热至回流反应20小时。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，过滤以除掉盐杂质，滤液减压浓缩得到粗品，制备分离得到TDI01876B(10mg，黄色固体，产率：9.3％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 12.90(s，1H)，9.66(s，1H)，8.54(s，1H)，8.40(d，J＝5.4Hz，1H)，8.22(d，J＝8.3Hz，1H)，8.16(s，1H)，8.07(s，1H)，7.92(s，1H)，7.82(d，J＝7.6Hz，2H)，7.76-7.60(m，4H)，7.21(s，1H)，6.69(s，2H)，3.66(s，3H).MS m/z(ESI)：433.1[M+H]。
通过与实施例55中所述类似方法，制备下表20中的化合物。
表20：
Figure BDA0002391547790002891
实施例56：(6-(4-((4-(1H-吡唑-4-基)苯基)氨基)嘧啶-2-基)-1-乙烯基-1H-吲哚-2-基)(3，3-二氟氮杂环丁烷-1-基)甲酮(TDI01923)的制备
Figure BDA0002391547790002892
按实施例46中第一步方法合成起始化合物TDI01923-1。
第一步：
将化合物TDI01923-1(500mg，1.59mmol)溶于DMF(15mL)中，N2保护下以冰水浴冷却至0℃，分批加入NaHH(60％，96mg，2.39mmol)，搅拌15分钟后加入1-溴-2-氯乙烷(339mg，2.39mmol)。将反应于30℃搅拌16小时，LC-MS显示反应一半。将反应液冷却至0℃，加入水(45 mL)后用乙酸乙酯萃取(15mL×3)，有机相旋干后所得残留物通过柱色谱法分离(石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1)进行纯化，得到化合物TDI01923-2(280mg，白色固体，47％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 7.98(s，1H)，7.60(d，J＝8.5Hz，1H)，7.27(dd，J＝8.5，1.1Hz，1H)，7.09(s，1H)，4.84(t，J＝6.0Hz，2H)，4.82(s，2H)，4.53(s，2H)，3.95(t，J＝6.0Hz，2H).MS m/z(ESI)：398.6，400.4[M+Na]。
第二步：
将化合物TDI01923-2(280mg，0.74mmol)、氢氧化钾(376mg，6.7mmol)和对苯二酚(2mg，0.0074mmol)溶于甲苯(10mL)中，氮气置换3次，在115℃油浴中反应16小时。LC-MS检测显示反应完全。将反应液冷却至室温，浓缩，将残留物通过柱色谱法分离(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1)进行纯化，得到化合物TDI01923-3(70mg，白色固体，28％收率)。
MS m/z(ESI)：340.9，342.9[M+H]。
第三步：
将化合物TDI01923-3(70mg，0.21mmol)和联频哪醇硼酸酯(63mg，0.25mmol)溶于1，4-二氧六环(10mL)中，加入乙酸钾(62mg，0.63mmol)及Pd(dppf)Cl2(31mg，0.042mmol)，氮气置换3次，在110℃油浴中反应16小时。LC-MS检测显示反应完全。将反应液冷却至室温，过滤除去不溶物，滤液减压浓缩，将残留物通过柱色谱法分离(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1到5∶1)进行纯化，得到化合物TDI01923-4(55mg，白色固体，67％收率)。
MS m/z(ESI)：389.0[M+H]。
第四步：
将化合物TDI01923-4(55mg，0.14mmol)和Reg-1-16(58mg，0.16mmol)溶于1，4-二氧六环∶水(5∶0.5mL)中，加入碳酸钾(58mg，0.42mmol)和Pd(dppf)Cl2(20mg，0.028mmol)，氮气置换三次，反应液在110℃下搅拌16小时。LC-MS检测显示反应完成，反应液冷却至室温，过滤除去不溶物，滤液真空旋蒸移除溶剂。残留物通过高压制备液相色谱进行纯化，得到化合物TDI01923(5.7mg，黄色固体，8％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 10.45(s，1H)，8.81(s，1H)，8.40(d，J＝6.4Hz，1H)，8.15(d，J＝8.4Hz，1H)，8.10(s，2H)，7.86(d，J＝8.4Hz，1H)，7.78(d，J＝7.8Hz，2H)，7.68(d，J＝8.4Hz，2H)，7.56(d，J＝7.0Hz，1H)，7.26(s，1H)，6.84(d，J＝6.4Hz，1H)，5.60(d，J＝16.0Hz，2H)，5.41(d，J＝8.8Hz，1H)，4.90(s，2H)，4.55(s，2H).MS m/z(ESI)：498.0[M+H]。
实施例57：(6-(4-((4-(1H-吡唑-4-基)苯基)氨基)嘧啶-2-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吲哚-2-基)(3，3-二氟氮杂环丁烷-1-基)甲酮(TDI01678)的制备
Figure BDA0002391547790002901
按实施例2第三步到第四步完成实施例57中化合物TDI01678-1的合成。
第一步：
将化合物TDI01678-1(200mg，0.55mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(5mL)中，0℃下加入氢化钠(33mg，0.83mmol)，搅拌30min后加入1，1-二氟-2-碘乙烷(159mg，0.83mmol)，反应液在室温下搅拌16小时。LC-MS检测显示有产物生成，反应液真空旋蒸移除反应溶剂，残留物通过柱色谱法分离(石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1)进行纯化，得到化合物TDI01678-2(105mg，44.8％收率)。
MS m/z(ESI)：426.9[M+H]。
第二步：
将化合物TDI01678-2(105mg，0.246mmol)和Reg-1-16(92mg，0.246mmol)溶于1，4-二氧六环：水(10∶1mL)中，加入碳酸钾(102mg，0.738mmol)，氮气置换三次，加入Pd(dppf)Cl2(54mg，0.074mmol)，氮气置换三次，反应液在110℃下搅拌16小时。LC-MS检测显示反应完成，反应液冷却至室温，真空旋蒸移除反应溶剂。残留物通过制备液相法分离纯化，得到化合物TDI01678(7mg)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 10.37(s，1H)，8.64(s，1H)，8.41(d，J＝6.2Hz，1H)，8.13(d，J＝8.3Hz，1H)，8.04(s，2H)，7.89-7.79(m，3H)，7.68(d，J＝8.1Hz，2H)，7.25(s，1H)，6.83(d，J＝5.9Hz，1H)，6.66-6.38(m，1H)，5.01(dd，J＝36.5，21.2Hz，4H)，4.57(s，2H).MS m/z(ESI)：535.5[M+H]。
实施例58：5-(4-((4-(1H-吡唑-4-基)苯基)氨基)-5-氟嘧啶-2-基)-2-((3，3-二氟环丁基)甲基)异二氢吲哚-1-酮(TDI01593)的制备
Figure BDA0002391547790002902
第一步：
将化合物TDI01593-1(5g，40.95mmol)和4-甲基苯磺酰氯(9.37g，49.14mmol)溶于二氯甲烷(150mL)中，加入4-二甲氨基吡啶(500mg，4.095mmol)和三乙胺(12.4g，123.0mmol)，反应液在室温下搅拌16小时。LC-MS检测显示反应完成，反应液真空旋蒸移除反应溶剂，残留物通过柱色谱法分离(石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1)进行纯化，得到化合物TDI01593-2(11.2g，99％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 7.81(d，J＝7.9Hz，2H)，7.50(d，J＝7.9Hz，2H)，4.10(d，J＝6.6Hz，2H)，2.67-2.56(m，2H)，2.43(s，4H)，2.30(dd，J＝14.0，6.3Hz，2H).MS m/z(ESI)：299.0[M+Na]。
第二步：
将化合物TDI01593-2(6.5g，23.6mmol)和5-溴异二氢吲哚-1-酮(2.0g，9.43mmol)溶于乙腈(100mL)中，加入碳酸铯(7.7mg，23.6mmol)和碘化钠(3.54g，23.6mmol)，反应液在100℃下搅拌16小时。LC-MS检测显示有产物生成，反应液真空过滤，滤液真空旋蒸移除溶剂，残留物通过柱色谱法分离(石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1到1∶1)进行纯化，得到化合物TDI01593-3(800mg，26.8％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 7.87(s，1H)，7.69(d，J＝8.1Hz，1H)，7.62(d，J＝8.1Hz，1H)，4.50(s，2H)，3.65(d，J＝7.3Hz，2H)，2.74-2.64(m，2H)，2.48-2.30(m，3H).MSm/z(ESI)：315.7[M+H]。
第三步：
将化合物TDI01593-3(600mg，1.9mmol)和联硼酸频那醇酯(579mg，2.28mmol)溶于1，4-二氧六环(20mL)中，加入乙酸钾(559mg，5.7mmol)，氮气置换三次。加入Pd(dppf)Cl2(278mg，0.38mmol)，氮气置换三次，反应液在100℃下搅拌16小时。LC-MS检测显示反应完成，反应液冷却至室温，真空旋蒸移除反应溶剂。残留物通过柱色谱法分离(石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1)进行纯化，得到化合物TDI01593-4(620mg，89.8％收率)。
MS m/z(ESI)：364.1[M+H]。
第四步：
将化合物TDI01593-4(200mg，0.55mmol)和Reg-1-40(215mg，0.55mmol)溶于1，4-二氧六环：水(10∶1mL)中，加入碳酸钾(228mg，1.65mmol)，氮气置换三次，加入Pd(dppf)Cl2(121mg，0.165mmol)，氮气置换三次，反应液在110℃下搅拌16小时。LC-MS检测显示反应完成，反应液冷却至室温，真空旋蒸移除反应溶剂。残留物通过柱色谱分离法和制备液相法分离纯化，得到化合物TDI01593(52mg)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.75(s，1H)，8.53(d，J＝3.1Hz，1H)，8.44(s，1H)，8.40(d，J＝7.7Hz，1H)，8.07(s，2H)，7.87(d，J＝8.2Hz，2H)，7.79(d，J＝8.0Hz，1H)，7.67(d，J＝8.2Hz，2H)，4.60(s，2H)，3.69(d，J＝6.9Hz，3H)，2.68(s，4H).MS m/z(ESI)：491.1[M+H]。
通过与实施例58中所述类似方法，制备下表21中的化合物。
表21：
Figure BDA0002391547790002911
生物学测试
采用商品化的CISBIO激酶检测试剂盒HTRF KinEASE-STKS2试剂盒(62ST2PEC)进行激酶ICs0测定。反应所用的激酶ROCK2(01-119)购自Cama Biosciences。
实验开始前，根据需要，按照激酶检测试剂盒说明书用相应试剂配制如下工作液：1×激酶缓冲液，5×STK-S2底物工作液(1.5μM)和5×ATP工作液(1.5μM)、5×ROCK2激酶工作液、4×抗生蛋白链菌素-XL665工作液、4×STK-Ab-穴状化合物2检测液，然后进行如下操作。
采用DMSO浓度为2.5％的1×激酶缓冲液配制得到10000nM的化合物溶液，采用上述含DMSO的激酶缓冲液再对化合物进行逐级稀释，得到9个不同浓度的待测化合物溶液。除测试化合物孔外，设置阳性孔(含有除化合物之外的所有试剂)和阴性孔(含有除待测化合物和激酶外的所有试剂)。除对照孔(阳性孔和阴性孔)外，向所有反应孔中加入4μL的待测化合物溶液，向对照孔中加入4μL2.5％的DMSO溶液。然后，再向所有反应孔中加入2μM底物(即2μL 5×STK-S2底物工作液)。向除阴性孔外的所有反应孔中加入2μL的5×ROCK2激酶工作液(含1.4ng ROCK2激酶)，阴性孔用2μL的1×激酶缓冲液补足体积。向所有反应孔中加入2μL 5×ATP工作液，室温孵育2小时。待激酶反应结束后，向所有反应孔中加入5μL 4×抗生蛋白链菌素-XL665工作液，混匀后立即加入5μL 4×STK-Ab-穴状化合物2检测液，室温孵育1小时后，用ENVISION(Perkinelmer)仪器检测荧光信号(激发波长为320nm，发射波长为665nm和615nm)。通过各孔荧光强度值计算出每个孔中的抑制率：ER(Emission Ratio，发射光比率)＝(665nm处荧光强度/615nm处荧光强度)；抑制率＝(ER阳性-ER待测化合物)/(ER阳性-ER阴性)*100％，用软件PRISM 5.0绘制曲线图，同时用PRISM 5.0拟合得到各待测化合物的半数抑制浓度(IC50)。化合物IC50值如下表所示。
Figure BDA0002391547790002921
Figure BDA0002391547790002931
Figure BDA0002391547790002941
Figure BDA0002391547790002951
Figure BDA0002391547790002961
Figure BDA0002391547790002971
Figure BDA0002391547790002981
依照与上述类似的生物学测试方法，测试化合物对ROCK1的IC50值，结果如下表中所示。
Figure BDA0002391547790002982
Figure BDA0002391547790002991
Figure BDA0002391547790003001
Figure BDA0002391547790003011
Figure BDA0002391547790003021
Figure BDA0002391547790003031
Figure BDA0002391547790003041
由以上数据可见，所测试化合物对ROCK2的IC50值显著低于对ROCK1的IC50值，这表明本发明化合物对于ROCK2具有良好的选择性。
除本文中描述的那些外，根据前述描述，本发明的各种修改对本领域技术人员而言会是显而易见的。这样的修改也意图落入所附权利要求书的范围内。本申请中所引用的各参考文献(包括所有专利、专利申请、期刊文章、书籍及任何其它公开)均以其整体援引加入本文。

Claims (25)

1.化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物具有式(XVII)的结构：
Figure FDA0002748818060000011
其中：
R选自H和C1-6烷基；
R2选自H和C1-6烷基；
R3、R4、R7和R7’在每次出现时各自独立地选自H、卤素、-NH2、-OH、C1-6烷基和-OR5；
R9和R10在每次出现时各自独立地选自H、卤素、C1-6烷基和C2-6烯基；
上述烷基和烯基在每次出现时各自任选地被一个或多个独立地选自卤素、C1-6烷基和-OR5的取代基取代；
R5在每次出现时各自独立地选自H和C1-6烷基；
m在每次出现时各自独立地为0、1、2或3的整数；
n为0、1或2的整数。
2.权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中R为H。
3.权利要求1或2的化合物或其药学上可接受的盐，其中R2为H。
4.权利要求1或2的化合物或其药学上可接受的盐，其中R3为H。
5.权利要求1或2的化合物或其药学上可接受的盐，其中R4、R7和R7’在每次出现时各自独立地选自H、F和甲氧基。
6.权利要求1或2的化合物或其药学上可接受的盐，其中R9为H。
7.权利要求1或2的化合物或其药学上可接受的盐，其中R10在每次出现时各自独立地选自H、甲基、乙基、异丙基、乙烯基、单氟甲基、二氟甲基、-CH2OCH3和-CH2CH2OCH3。
8.权利要求1或2的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物具有以下结构：
Figure FDA0002748818060000012
Figure FDA0002748818060000021
9.药物组合物，其包含预防或治疗有效量的权利要求1-8中任一项的化合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体。
10.权利要求9的药物组合物，其中所述药物组合物为固体制剂、半固体制剂、液体制剂或气态制剂。
11.权利要求1-8中任一项的化合物或其药学上可接受的盐或者权利要求9的药物组合物在制备用作Rho相关蛋白激酶(ROCK)抑制剂的药物中的用途。
12.权利要求1-8中任一项的化合物或其药学上可接受的盐或者权利要求9的药物组合物在制备用作选择性ROCK2抑制剂的药物中的用途。
13.权利要求11或12的用途，其中所述药物用于预防或治疗选自下列的疾病：自身免疫性疾病；心血管病症；炎症；中枢神经***病症；动脉血栓性病症；纤维化病症；瘤性疾病；代谢综合征；胰岛素抗性；高胰岛素血症；2型糖尿病；葡萄糖耐受不良；骨质疏松症；眼部病症。
14.权利要求11或12的用途，其中所述药物用于预防或治疗选自下列的疾病：狼疮肾炎、动脉粥样硬化、类风湿性关节炎(RA)、血管瘤、肺纤维化、银屑病、角膜移植排斥、胰岛素依赖型糖尿病、多发性硬化症、重症肌无力、克罗恩病、原发性胆汁性肝硬化、急性胰腺炎、接触性皮炎、迟发型超敏反应、感染性休克、骨质疏松、骨关节炎、神经元炎症、Osler-Weber综合征、再狭窄、真菌感染、寄生虫感染和病毒感染。
15.权利要求13的用途，其中所述自身免疫性疾病选自类风湿性关节炎、全身性红斑狼疮(SLE)、银屑病、克罗恩病、特应性皮炎、湿疹和移植物抗宿主病(GVHD)。
16.权利要求13的用途，其中所述心血管病症选自高血压、动脉粥样硬化、再狭窄、心脏肥大、脑缺血、脑血管痉挛和***功能障碍。
17.权利要求13的用途，其中所述炎症选自哮喘、心血管炎症、溃疡性结肠炎和肾脏炎症。
18.权利要求13的用途，其中所述中枢神经***病症选自神经元变性或脊髓损伤、亨延顿氏病、帕金森氏病、阿尔茨海默病、肌萎缩性脊髓侧索硬化症(ALS)和多发性硬化症。
19.权利要求13的用途，其中所述动脉血栓性病症为血小板聚集或白细胞聚集。
20.权利要求13的用途，其中所述纤维化病症为肝纤维化、肺纤维化或肾纤维化。
21.权利要求13的用途，其中所述瘤性疾病选自淋巴瘤、白血病、星形细胞瘤、肉瘤和母细胞瘤。
22.权利要求13的用途，其中所述瘤性疾病选自鳞状细胞癌、小细胞肺癌、垂体癌、食道癌、非小细胞肺癌、肺腺癌、肺鳞癌、腹膜癌、肝细胞癌、胃肠癌、胰腺癌、胶质母细胞瘤、***、卵巢癌、膀胱癌、肝癌、乳腺癌、结肠癌、结直肠癌、子宫内膜癌或子宫癌、唾液腺癌、肾癌、***癌、外阴癌、甲状腺癌、脑癌、睾丸癌、胆管癌、胆囊癌、胃癌、黑色素瘤和头颈部癌症。
23.权利要求13的用途，其中所述眼部病症选自高眼压、年龄相关性黄斑变性(AMD)、脉络膜新生血管形成(CNV)、糖尿病性黄斑水肿(DME)、虹膜新生血管形成、葡萄膜炎、青光眼和早产儿视网膜病变(ROP)。
24.权利要求23的用途，其中所述青光眼选自原发性开角型青光眼、急性闭角型青光眼、色素性青光眼、先天性青光眼、正常张力青光眼、继发青光眼和新生血管性青光眼。
25.权利要求11或12的用途，其中所述药物用于预防或治疗选自下列的疾病：狼疮、血管纤维瘤、自身免疫性肾炎、异体排异、过敏性炎症、炎症性肠病和软组织肉瘤。
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