CN109688841B - 营养组合物的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供用于制备营养组合物的方法,所述方法包括以下步骤:(a)为营养组合物提供包含至少一种矿物质的溶液;(b)将至少一种马铃薯蛋白质添加到步骤(a)的溶液中;(c)将至少一种碳水化合物和/或至少一种脂肪添加到步骤(b)的溶液中;以及(d)将步骤(c)的溶液喷雾干燥。
Description
技术领域
本发明涉及营养组合物及其制备方法。特别地,本发明涉及适用于对牛乳蛋白质出现***反应的个体的婴儿配方食品。
背景技术
人类母乳和母乳喂养被认为是健康婴儿在出生后头几个月期间的最佳营养形式。然而,需要除母乳之外还可使用的营养来源。此外,并非所有婴儿都能母乳喂养,更虚弱的婴儿诸如早产儿的需求不能通过其母乳来实现,因此也需要母乳的替代品。
满足婴儿营养需求的营养组合物可用作人类母乳的替代品或补充品。优选,婴儿配方食品应具有可接受的味道,并且在针对具有变应性或存在***反应风险的婴儿时是低变应原性的。
婴儿配方食品通常用牛乳蛋白质配制。例如,牛乳清蛋白质和/或酪蛋白通常用作婴儿配方食品中的蛋白质来源。然而,一些婴儿表现出对牛乳蛋白质出现***反应,使得此类配方食品不适合。对牛乳和含有牛乳蛋白质的婴儿配方食品出现***反应可能是由于在牛乳中的蛋白质与人乳中的蛋白质之间的差异。主要公认的牛乳变应原是α-乳白蛋白(aLA)、β-乳球蛋白(bLG)和牛血清白蛋白(BSA)。
为了降低变应原性,牛乳蛋白质可为被部分水解的(例如酶促),或者对于旨在管理对牛乳蛋白质出现***反应(CMPA)的产品可深度水解。然而,此类蛋白质必须经过高度处理以提供足够的水解,才能降低***反应的风险。随着提供更天然饮食的趋势增大,这种处理可能被视为不利的,并且强效水解过程也趋于对味道产生负面影响。此外,广泛的处理增大了产品配方食品的成本。
牛乳蛋白质的替代品可用于营养组合物,例如大豆蛋白质和大米蛋白质。然而,由于存在交叉变应性应答的风险,欧洲儿科胃肠病、肝病和营养学协会(ESPGHAN)不建议将基于大豆的营养组合物用于婴儿(0至12个月)。由于大米蛋白质中的天然氨基酸分布不完全,因此基于大米的营养组合物需要添加许多游离氨基酸才能向婴儿配方食品提供合适的氨基酸组成。这增大了成本,并且可能使所得配方食品具有较不可口的味道。此外,大米蛋白质通常是不溶的并且需要至少部分水解以便溶解。
对于具有多种变应性的严重病例婴儿,婴儿配方食品可完全由游离氨基酸配制。然而,ESPGHAN指南指出,对于具有牛乳蛋白质变应性的婴儿,此类配方食品不应用作首选解决方案。此外,基于氨基酸的配方食品的过量的处方增加了国家卫生***的成本负担,因为基于氨基酸的配方食品甚至比深度水解的配方食品更昂贵。因此,非常需要这样的营养组合物,诸如婴儿配方食品,其包括较少潜在变应原,并且优选需要最少的处理、具有良好的味道和较低的成本。特别地,需要适用于施用于对牛乳蛋白质出现***反应的个体的营养组合物,诸如婴儿配方食品。
发明内容
本发明人开发了基于马铃薯蛋白质作为主要蛋白质来源的营养组合物,其天然缺乏在牛奶和大豆中发现的主要变应原。因此,该营养组合物可提供适用于对牛乳蛋白质出现***反应的个体的天然低变应原性营养组合物(例如婴儿配方食品)。
特别地,本发明人开发了用于制备基于马铃薯蛋白质的营养组合物的改善方法,其提供了多项改善,诸如降低了在加工期间的粘度。例如,在加工期间粘度降低,增大喷雾干燥的容易性,以形成粉末状产品。
本发明人惊奇地发现,矿物质的添加顺序对液体产品的粘度具有显著影响。优化该顺序可实现能够改善喷雾干燥并提高喷雾干燥的粉末产品质量的粘度。例如,本发明人发现,在马铃薯蛋白质之前将一些矿物质添加到溶液中以及在之后添加一些矿物质是有益的,就像在蛋白质之前添加所有矿物质一样。
此外,本发明人发现马铃薯蛋白质具有良好平衡的氨基酸组成,其比大米蛋白质或大豆蛋白质更接近人乳。因此,需要添加较少的游离氨基酸以提供具有所需营养组成的组合物,这使得所得产品更具成本效益并且赋予其更可口的味道。
由于其较低的变应原组成,因此马铃薯蛋白质组分不需要深度水解,这在成本和婴儿发育方面提供显著有益效果,因为完整或轻微水解的蛋白质有利于改善的肠道成熟。
此外,使用马铃薯蛋白质提供良好的接受度,例如在营养组合物的味道和质地方面。
因此,在一个方面,本发明提供制备营养组合物的方法,该方法包括以下步骤:
(a)为营养组合物提供包含至少一种矿物质的溶液;
(b)将至少一种马铃薯蛋白质添加到步骤(a)的溶液中;
(c)将至少一种碳水化合物和/或至少一种脂肪添加到步骤(b)的溶液中;以及
(d)将步骤(c)的溶液喷雾干燥。
在一个实施方案中,在步骤(a)和/或(b)期间搅拌溶液。优选,搅拌溶液,使蛋白质、碳水化合物和/或脂肪溶解和/或水合。例如,在步骤(a)和/或(b)期间,可搅拌溶液约0.5小时至3.0小时或0.5小时至1.5小时,优选0.5小时至1.5小时。
在一个实施方案中,将溶液(例如,步骤(a)至(d)的溶液)保持在酸性pH下(即,pH小于7)。在一个实施方案中,将溶液(例如,步骤(a)至(d)的溶液)保持在约3.8至7.0、4.0至7.0、5.0至7.0、6.0至7.0、6.2至6.8或6.4至6.8,优选约6.4至6.8的pH下。在另一个优选的实施方案中,将溶液(例如,步骤(a)至(d)的溶液)保持在约3.8至4.2的pH下。用于水解马铃薯蛋白质的任何另外步骤可在不同的pH下进行。
在一个实施方案中,步骤(a)还包括在添加至少一种马铃薯蛋白质的步骤(b)之前,将溶液的pH调节至约3.8至7.0、4.0至7.0、5.0至7.0、6.0至7.0、6.2至6.8或6.4至6.8、优选约6.4至6.8。在另一个优选的实施方案中,步骤(a)还包括在添加至少一种马铃薯蛋白质的步骤(b)之前,将溶液的pH调节至约3.8至4.2。
在一个实施方案中,步骤(c)还包括在添加至少一种碳水化合物之后并且优选在添加至少一种脂肪之前,将溶液的pH调节至约3.8至7.0、4.0至7.0、5.0至7.0、6.0至7.0、6.2至6.8或6.4至6.8、优选约6.4至6.8。在另一个优选的实施方案中,步骤(c)还包括在添加至少一种碳水化合物之后并且优选在添加至少一种脂肪之前,将溶液的pH调节至约6.0至6.4。
在一个实施方案中,产品营养组合物在中性pH或酸性pH下,例如约3.8至7.0、4.0至7.0、5.0至7.0、6.0至7.0、6.2至6.8、6.4至6.8或6.0至6.4的pH。
在一个实施方案中,步骤(c)包括在添加至少一种脂肪之前,添加至少一种碳水化合物。
在一个实施方案中,在混合矿物质、蛋白质和碳水化合物的步骤(a)至(c)期间,溶液在约55℃至65℃或55℃至60℃,优选55℃至60℃的温度下。
在一个实施方案中,在添加脂肪之前,步骤(c)的溶液的总固形物为约35%至45%。
在一个实施方案中,在添加脂肪之后,步骤(c)的溶液的总固形物为约40%至55%。
在一个优选的实施方案中,该方法不包括均质化步骤。优选,在步骤(d)的喷雾干燥之前,不将步骤(c)的溶液均质化。不施用均质化步骤通过在喷雾干燥之前降低溶液粘度来提供对该方法的进一步改善。
在另一个实施方案中,该方法还包括均质化步骤。优选,在步骤(d)的喷雾干燥之前,将步骤(c)的溶液均质化。
在一个实施方案中,在均质化期间,溶液在至少约75℃,例如,75℃至90℃、75℃至85℃或75℃至80℃的温度下。
在一个实施方案中,在温度增大到至少约75℃(例如,75℃至90℃、75℃至85℃或75℃至80℃)之后添加脂肪。在另一个实施方案中,在温度增大至至少约75℃(例如,75℃至90℃、75℃至85℃或75℃至80℃)之前添加脂肪。
在一个实施方案中,在约200巴至350巴的压力下进行均质化。
在一个实施方案中,优选在约10巴至100巴的压力下,在单个步骤中进行均质化。
在另一个实施方案中,在两个步骤中进行均质化。优选,第一均质化步骤处于约50巴至250巴的压力下并且第二均质化步骤处于约20巴至150巴的压力下。
在一个优选的实施方案中,营养组合物是婴儿配方食品。
在一个实施方案中,步骤(a)的至少一种矿物质包括柠檬酸钙和/或柠檬酸钾,以及任选地柠檬酸钠和/或磷酸二氢钾。在另一个实施方案中,步骤(a)的至少一种矿物质还包括氯化镁、氧化镁、氯化钙、甘油磷酸钙、氯化钠、磷酸钙、氢氧化钾和/或氢氧化钠。
在一个实施方案中,步骤(a)的至少一种矿物质包括柠檬酸钙、柠檬酸钾和/或磷酸二氢钾,以及任选地柠檬酸钠、氯化镁、氧化镁、氯化钙、甘油磷酸钙、氯化钠、磷酸钙、氢氧化钾和/或氢氧化钠。
在一个实施方案中,步骤(a)至少一种矿物质包括柠檬酸钙、柠檬酸钾、磷酸二氢钾、柠檬酸钠、氯化镁、氧化镁、氯化钙、甘油磷酸钙、氯化钠、磷酸钙、氢氧化钾和氢氧化钠。
在一个实施方案中,步骤(c)还包括优选在添加至少一种碳水化合物之后并且优选在添加至少一种脂肪之前,添加至少一种维生素。
在一个实施方案中,步骤(c)还包括优选在添加至少一种碳水化合物之后并且优选在添加至少一种脂肪之前,添加至少一种矿物质。
在一个实施方案中,在步骤(a)期间添加的矿物质不会在步骤(c)期间再次添加。
在一个实施方案中,在步骤(c)中添加的至少一种矿物质包括氯化镁、氧化镁、氯化钙、甘油磷酸钙、磷酸二氢钾、氯化钠、磷酸钙、柠檬酸钠、氢氧化钠和/或氢氧化钾。
在一个优选的实施方案中,主要蛋白质来源是马铃薯蛋白质。
在一个特别优选的实施方案中,营养组合物不包含乳蛋白质。
在一个优选的实施方案中,营养组合物中的主要蛋白质来源是马铃薯蛋白质并且其余蛋白质是植物蛋白质。
术语“主要蛋白质来源是马铃薯蛋白质”是指组合物中按重量计的总蛋白质的最大级分源自马铃薯蛋白质。
在一个实施方案中,按营养组合物中总蛋白质的重量计,至少约50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%或95%、优选至少约75%是马铃薯蛋白质。
在一个优选的实施方案中,按营养组合物中总蛋白质的重量计,100%是马铃薯蛋白质。
在一个优选的实施方案中,蛋白质(特别是马铃薯蛋白质)是完整蛋白质。优选,蛋白质未经人工水解。
在一个实施方案中,马铃薯蛋白质是水解的马铃薯蛋白质。在一个实施方案中,蛋白质(特别是马铃薯蛋白质)是部分水解的蛋白质。在一个实施方案中,蛋白质(特别是马铃薯蛋白质)是深度水解的蛋白质。
在一个实施方案中,该方法还包括通过包括以下步骤的方法制备水解的马铃薯蛋白质:
(i)提供包含马铃薯蛋白质的溶液,以及任选地将该溶液的pH调节至约5.0至8.0、5.0至7.6、5.0至7.4、6.0至7.6、7.0至7.6或7.2至7.6,优选7.2至7.6;
(ii)将蛋白酶,优选碱性蛋白酶添加到步骤(i)的溶液;
(iii)在适用于水解马铃薯蛋白质的条件下温育步骤(ii)的溶液;以及
(iv)使蛋白酶失活。
在一个实施方案中,步骤(iii)的温育包括添加蛋白酶以提供按重量计的约0.5%至5%的酶:底物的比例。
在一个实施方案中,步骤(iii)的温育包括在约50℃至70℃或55℃至60℃、优选55℃至60℃的温度下温育溶液。
在一个实施方案中,步骤(iii)的温育为约0.5小时至5小时。
在一个实施方案中,步骤(iv)的失活包括将溶液加热至约85℃至95℃或88℃至92℃,优选88℃至92℃。优选,将溶液加热至少约5分钟,例如约5分钟至30分钟、5分钟至20分钟、5分钟至15分钟或5分钟至10分钟。优选,在步骤(iv)的失活之后,将溶液冷却至约55℃至65℃或55℃至60℃,优选55℃至60℃。
在一个实施方案中,步骤(i)中包含马铃薯蛋白质的溶液具有约9%至16%的总蛋白质固形物。
在一个实施方案中,营养组合物还包含游离氨基酸。
在一个实施方案中,营养组合物不包含另外的乳化剂。马铃薯蛋白质可提供作为乳化剂的足够功能。
在一个实施方案中,营养组合物(例如,婴儿配方食品)还包含乳糖(即,碳水化合物可包含乳糖)。在一个实施方案中,营养组合物(例如,婴儿配方食品)不包含乳糖。
在一个实施方案中,营养组合物(例如,婴儿配方食品)还包含麦芽糖糊精(即,碳水化合物可包含麦芽糖糊精)。在一个实施方案中,营养组合物(例如,婴儿配方食品)不包含麦芽糖糊精。
在一个实施方案中,营养组合物(例如,婴儿配方食品)还包含乳糖和麦芽糖糊精(即,碳水化合物可包含乳糖和麦芽糖糊精)。
在一个实施方案中,营养组合物(例如,婴儿配方食品)用于对牛乳蛋白质出现***反应的个体(例如,婴儿)。
在一个实施方案中,营养组合物(例如,婴儿配方食品)还包含益生菌。在一个实施方案中,营养组合物(例如,婴儿配方食品)不包含益生菌。
在一个实施方案中,婴儿配方食品还包含核苷酸。在一个实施方案中,婴儿配方食品不包含核苷酸。
在一个实施方案中,婴儿配方食品包含:
(a)1.8g至3.2g蛋白质/100kcal;
(b)9g至14g碳水化合物/100kcal;和
(c)4.0g至6.0g脂质/100kcal。
在另一方面,本发明提供营养组合物,该营养组合物能够通过本发明的方法获得。
在另一方面,本发明提供包括向个体施用本发明的营养组合物的个体喂食方法。
在一个优选的实施方案中,个体为婴儿。特别优选,个体对牛乳蛋白质出现***反应。
在另一方面,本发明提供用于喂食对牛乳蛋白质出现***反应的个体(优选婴儿)的本发明的营养组合物。
附图说明
图1
在马铃薯蛋白质和大米蛋白质的必需氨基酸的水平与FAO 2013建议值之间的比较。
图2
在马铃薯蛋白质和大米蛋白质的必需氨基酸的水平与FAO 2013建议值之间的比较。
图3
在马铃薯蛋白质和大米蛋白质的组氨酸的水平与美国国家医学院(Institute ofMedicine of the National Academies)建议值之间的比较(假定婴儿配方食品摄入量为1000mL/天,对于6月龄的婴儿,最少为1.8g蛋白质/100kcal(或12.6g蛋白质/天))。
图4
在马铃薯蛋白质和大米蛋白质的异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸和色氨酸的水平与美国国家医学院建议值之间的比较(假设婴儿配方食品摄入量为1000mL/天,对于6月龄的婴儿,最少为1.8g蛋白质/100kcal(或12.6g蛋白质/天))。
图5
在马铃薯蛋白质和大米蛋白质的支链氨基酸(BCAA)的水平与全脂乳之间的比较。
图6
在马铃薯蛋白质和大米蛋白质的苏氨酸和赖氨酸的平均水平与FAO 2013建议值之间的比较。
图7
在马铃薯蛋白质和大米蛋白质的组合芳香氨基酸的平均水平与全脂乳之间的比较。
具体实施方式
现将通过非限制性示例来描述本发明的各优选特征和实施方案。
除非另外指明,本发明的实践将采用常规化学、生物化学、分子生物学、微生物学和免疫学技术,这些技术均在本领域普通技术人员的能力范围之类。此类技术在文献中有所阐述。参见:例如Sambrook,J.,Fritsch,E.F.和Maniatis,T.(1989)“MolecularCloning:A Laboratory Manual”,第二版,Cold Spring Harbor Laboratory Press;Ausubel,F.M.等人(1995and periodic supplements)Current Protocols in MolecularBiology,Ch.9,13and 16,John Wiley&Sons;Roe,B.、Crabtree、J.和Kahn,A.(1996)“DNAIsolation and Sequencing:Essential Techniques”,John Wiley&Sons;Polak,J.M.和McGee,J.O’D.(1990)“In Situ Hybridization:Principles and Practice”,OxfordUniversity Press;Gait,M.J.(1984)Oligonucleotide Synthesis:A PracticalApproach,IRL Press;以及Lilley,D.M.And和Dahlberg,J.E.(1992)Methods inEnzymology:DNA Structures Part A:Synthesis and Physical Analysis of DNA,Academic Press。这些一般性文本中的每一个以引用的方式并入本文。
***反应
术语“***反应”是指免疫***对通常耐受的物质的超敏反应。***反应可能是由医生检测到的***反应。
术语“食物***反应”是指对营养组合物出现***反应。
婴儿配方食品通常用牛乳蛋白质配制。例如,牛乳清蛋白质和/或酪蛋白通常用作婴儿配方食品中的蛋白质来源。然而,一些婴儿表现出对牛乳蛋白质出现***反应,使得此类配方食品不适合。
除婴儿之外,较大年龄的个体(例如,年龄更大的儿童)也可能经受牛乳蛋白质***反应。
对牛乳和含有牛乳蛋白质的婴儿配方食品出现***反应可能是由于在牛乳中的蛋白质与人乳中的蛋白质之间的差异。主要公认的牛乳变应原是α-乳白蛋白(aLA)、β-乳球蛋白(bLG)和牛血清白蛋白(BSA)。
个体
在本公开中被称为本文公开的营养组合物的目标个体为人类个体。
在一个优选的实施方案中,个体为婴儿。
术语“婴儿”是指12个月以下的儿童,例如介于0和6月龄之间的儿童。
在另一个实施方案中,个体为12月龄至36月龄。可用于此类个体的本发明营养组合物可为较大婴儿配方食品。
营养组合物
术语“营养组合物”是指提供营养的组合物。该组合物优选包含蛋白质、碳水化合物、脂肪和/或用于为个体补充营养的其他组分(例如,维生素和矿物质)。可选择营养组合物中各组分的水平,以便为个体提供定制的营养摄入量。
在一个优选的实施方案中,营养组合物是婴儿配方食品。
在一个优选的实施方案中,营养组合物是较大婴儿配方食品。
婴儿配方食品
术语“婴儿配方食品”可指旨在供出生后第一年期间的婴儿用于特定营养用途并且本身满足该类人群的营养需求的食料,如2006年12月22日欧盟委员会指令2006/141/EC中所定义。
可只用婴儿配方食品喂食婴儿,或者可将婴儿配方食品用作人乳的补充物。
术语“婴儿配方食品”包括低变应原性婴儿配方食品。低变应原性组合物是不太可能引起***反应的组合物。
本发明的婴儿配方食品可为粉末或液体形式。液体可为例如浓缩液体婴儿配方食品或即食配方食品。婴儿配方食品可为重构婴儿配方食品的形式(即,从粉末状形式重构的液体婴儿配方食品)。优选,婴儿配方食品为粉末形式。
粉末优选能够重构成适用于喂食婴儿的液体组合物,例如通过添加水。类似地,浓缩液体婴儿配方食品优选能够稀释成适用于喂食婴儿的液体组合物,例如通过添加水。
在一个实施方案中,当按照指示配制时,婴儿配方食品具有约60kcal/100mL至70kcal/100mL的能量密度。
蛋白质
术语“蛋白质”是指氨基酸的聚合物,包括多肽和肽。术语“蛋白质”不涵盖也可能存在于本发明的营养组合物(例如,婴儿配方食品)中的游离氨基酸。
本发明的婴儿配方食品的蛋白质含量优选在1.8g蛋白质/100kcal至3.2g蛋白质/100kcal的范围内。在一个优选的实施方案中,本发明的婴儿配方食品的蛋白质含量在1.8g蛋白质/100kcal至2.8g蛋白质/100kcal的范围内。
本发明的营养组合物(例如,婴儿配方食品)包含马铃薯蛋白质作为主要蛋白质来源。在一个实施方案中,按营养组合物中总蛋白质的重量计,至少约50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%或95%、优选至少约75%、更优选100%是马铃薯蛋白质。
本发明的营养组合物中的剩余蛋白质可为适用于营养组合物(特别是婴儿配方食品)的任何蛋白质。
优选,营养组合物不包含乳蛋白质。因此,在一个优选的实施方案中,按营养组合物中总蛋白质的重量计,100%是非乳蛋白质。
在一个优选的实施方案中,按营养组合物中总蛋白质的重量计,100%是植物蛋白质。
除马铃薯蛋白质之外,可任选地用于本文所公开的营养组合物的示例植物蛋白质包括豌豆蛋白质、大米蛋白质、藜麦蛋白质、燕麦蛋白质、葵花蛋白质、椰子蛋白质或它们的组合。
用于本文所公开的营养组合物的另外的示例非乳蛋白包括藻蛋白质或叶蛋白质。
在一个优选的实施方案中,婴儿配方食品中的主要蛋白质来源是马铃薯蛋白质并且剩余蛋白质是植物蛋白质。
在一个优选的实施方案中,按营养组合物中总蛋白质的重量计,100%是马铃薯蛋白质。
用于本发明的营养组合物的马铃薯蛋白质易于获得或购得,例如作为浓缩物或分离物,例如来自商业来源。
马铃薯蛋白质可从马铃薯块汁中提取,马铃薯块汁本身可通过本领域已知的许多适合的技术中的任一种从马铃薯固形物分离。色谱技术可用于以类似于分离乳蛋白质的方式从块汁中纯化马铃薯蛋白质。一旦分离,马铃薯蛋白质即可进行浓缩并经受温度处理和/或pH调节。另外的步骤可包括例如去除三糖苷生物碱、喷雾干燥和/或UV处理。
适合的马铃薯蛋白质来源包括完整的马铃薯蛋白质提取物(即,未经分子量级分的提取物);和经分子量级分的马铃薯蛋白质,例如高分子量级分(例如大于35kDa);或低分子量级分(例如小于35kDa)。在一个实施方案中,马铃薯蛋白质来源为小于35kDa的低分子量马铃薯蛋白质级分。
蛋白质可为例如完整蛋白质或水解的蛋白质(例如部分水解的蛋白质)。优选,蛋白质是完整蛋白质。
蛋白质的水解一般可被表述为“部分”或“深度”,具体取决于水解的进行程度。蛋白质水解产物可具有通过NPN/TN%来表征的水解程度,这是指非蛋白质氮除以总氮×100。非蛋白质氮是指与试剂诸如三硝基苯磺酸(TNBS)自由反应的氨基氮。NPN/TN%可根据Adler-Nissen(Adler-Nissen,J.(1979)J.Agric.Food Chem.27:1256-1262(1979年,《农业食品化学杂志》,第27卷,第1256-1262))中所述进行测量。
术语“深度水解”可指提供NPN/TN%大于95%的蛋白质的水解。术语“部分水解”可指提供NPN/TN%在70%至85%的范围内的蛋白质的水解。
在一个实施方案中,蛋白质具有介于5%至90%之间、70%至90%或70%至85%、优选介于70%至85%之间的NPN/TN%。在另一个实施方案中,蛋白质的NPN/TN%介于5%至25%之间或15%至25%。在另一个实施方案中,蛋白质的NPN/TN%介于25%至55%之间、25%至50%或50%至55%。
在一个实施方案中,60%至70%的蛋白质群体具有小于3000Da的分子量。
在另一个实施方案中,蛋白质具有大于95%的NPN/TN%。这些是“深度”水解产物。在一个实施方案中,至少95%的蛋白质群体具有小于3000Da的分子量。
用于本发明的营养组合物中的蛋白质可通过本领域已知的任何适合的方法水解。例如,蛋白质可例如使用蛋白酶酶促水解。例如,蛋白质可使用碱性蛋白酶水解。
优选,蛋白质通过本文所公开的方法水解。
在一个方面,本发明提供水解方法,该方法包括以下步骤:
(i)提供包含马铃薯蛋白质的溶液,以及任选地将该溶液的pH调节至约5.0至8.0、5.0至7.6、5.0至7.4、6.0至7.6、7.0至7.6或7.2至7.6,优选7.2至7.6;
(ii)将蛋白酶,优选碱性蛋白酶添加到步骤(i)的溶液;
(iii)在适用于水解马铃薯蛋白质的条件下温育步骤(ii)的溶液;和
(iv)使蛋白酶失活。
在一个实施方案中,步骤(iii)的温育包括添加蛋白酶以提供按重量计的约0.5%至5%的酶:底物的比例。
在一个实施方案中,步骤(iii)的温育包括在约50℃至70℃或55℃至60℃、优选55℃至60℃的温度下温育溶液。
在一个实施方案中,步骤(iii)的温育为约0.5小时至5小时。
在一个实施方案中,步骤(iv)的失活包括将溶液加热至约85℃至95℃或88℃至92℃,优选88℃至92℃。优选,将溶液加热至少约5分钟,例如约5分钟至30分钟、5分钟至20分钟、5分钟至15分钟或5分钟至10分钟。优选,在步骤(iv)的失活之后,将溶液冷却至约55℃至65℃或55℃至60℃,优选55℃至60℃。
游离氨基酸
本文所公开的营养组合物还可包含游离氨基酸,即,可在本发明的方法期间添加游离氨基酸。此类游离氨基酸提供蛋白质当量来源。
游离氨基酸可掺入本文所公开的营养组合物中以补充蛋白质中包含的氨基酸。可选择游离氨基酸的水平以提供足以用于特定个体营养的氨基酸组成,特别地,满足营养法规(例如,欧洲委员会指令2006/141/EC)的氨基酸组成。优选,选择游离氨基酸水平以提供足够婴儿营养。
用于本文所公开的营养组合物中的示例游离氨基酸包括组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、半胱氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸、丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、脯氨酸、丝氨酸、肉碱、牛磺酸以及它们的混合物。
碳水化合物
本发明的婴儿配方食品的碳水化合物含量优选在9g至14g碳水化合物/100kcal的范围内。
碳水化合物可为适用于营养组合物(特别是婴儿配方食品)的任何碳水化合物。
用于本文所公开的营养组合物的示例碳水化合物包括乳糖、蔗糖、麦芽糖糊精和淀粉。可使用碳水化合物的混合物。
在一个实施方案中,碳水化合物包含麦芽糖糊精。在一个实施方案中,按营养组合物中总碳水化合物的重量计,至少40%、50%、60%、或70%为麦芽糖糊精。
在一个实施方案中,该碳水化合物包含乳糖。在一个实施方案中,按营养组合物中总碳水化合物的重量计,至少40%、50%、60%或70%为乳糖。
在一个实施方案中,碳水化合物包含乳糖和麦芽糖糊精。
脂肪
本发明的婴儿配方食品的脂肪含量优选在4.0g脂质/100kcal至6.0g脂质/100kcal的范围内。
脂肪可为适用于营养组合物(特别是婴儿配方食品)的任何脂质或脂肪。
用于本文所公开的营养组合物中的示例脂肪包括葵花油、低芥酸菜籽油、红花油、芥花油、橄榄油、椰子油、棕榈仁油、大豆油、鱼油、棕榈油酸、高油酸葵花油和高油酸红花油、以及含有长链多不饱和脂肪酸的微生物发酵油。
脂肪还可为衍生自这些油的级分的形式,诸如棕榈油精、中链甘油三酯和脂肪酸(诸如花生四烯酸、亚油酸、棕榈酸、硬脂酸、二十二碳六烯酸、亚麻酸、油酸、月桂酸、癸酸、辛酸、己酸等)的酯。
另外的示例脂肪包括结构化脂质(即,化学或酶促改性以改变其结构的脂质)。优选,结构化脂质是sn2结构化脂质,例如包含在甘油三酯的sn2位置具有升高水平的棕榈酸的甘油三酯。
还可添加含有大量预先形成的花生四烯酸和/或二十二碳六烯酸的油,诸如鱼油或微生物油。
可添加长链多不饱和脂肪酸,诸如二高-γ-亚麻酸、花生四烯酸、二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸。Willemsen等人指出,添加此类脂肪酸有助于上皮屏障完整性和降低IL-4介导的渗透性(Willemsen,L.E.等人,(2008)Eur.J.Nutr.47:183-91(2008年,《欧洲营养学杂志》,第47卷,第183-191页))。
可添加或可省略结构化脂质。可添加或可省略中链甘油三酯。
另外的成分
该营养组合物还可含有据悉日常饮食中必不可少的营养上显著量的一些或一切维生素和矿物质。已确定某些维生素和矿物质的最低需求。
用于营养组合物的示例维生素、矿物质和其他营养素包括维生素A、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、维生素E、维生素K、维生素C、维生素D、叶酸、肌醇、烟酸、生物素、泛酸、胆碱、钙、磷、碘、铁、镁、铜、锌、锰、氯、钾、钠、硒、铬、钼、牛磺酸和左旋肉碱。
矿物质通常以其盐的形式添加。
营养组合物也可包含至少一种益生菌。术语“益生菌”是指对宿主的健康或良好状态具有有益效果的微生物细胞制剂或微生物细胞组分(Salminen,S.等人,(1999)TrendsFood Sci.Technol.10:107-10(199年,《食品科学与技术趋势》,第10卷,第107-110页))。特别地,益生菌可改善肠道屏障功能(Rao,R.K.,(2013)Curr.Nutr.Food Sci.9:99-107(2013年,《营养与食品科学最新进展》,第9卷,第99-107页))。
优选的益生菌是总体上是安全的益生菌,是制备L(+)乳酸的培养物,对于需要保持稳定且有效长达24个月的产品具有可接受的货架期。
用于营养组合物的益生菌微生物示例包括:酵母,诸如酵母属(Saccharomyces)、德巴利酵母属(Debaromyces)、假丝酵母属(Candida)、毕赤酵母属(Pichia)和球拟酵母属(Torulopsis);以及细菌,诸如双歧杆菌属(Bifidobacterium)、拟杆菌属(Bacteroides)、梭菌属(Clostridium)、梭杆菌属(Fusobacterium)、蜜蜂球菌属(Melissococcus)、丙酸杆菌属(Propionibacterium)、链球菌属(Streptococcus)、肠球菌属(Enterococcus)、乳球菌属(Lactococcus)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、消化链球菌属(Peptostrepococcus)、芽孢杆菌属(Bacillus)、片球菌属(Pediococcus)、微球菌属(Micrococcus)、明串珠菌属(Leuconostoc)、魏斯氏菌属(Weissella)、气球菌属(Aerococcus)、酒球菌属(Oenococcus)和乳杆菌属(Lactobacillus)。
适合的益生菌微生物的具体示例为:酿酒酵母(Saccharomyces cereviseae)、凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)、婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)、长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)、屎肠球菌(Enterococcus faecium)、粪肠球菌(Enterococcus faecalis)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、消化乳杆菌(Lactobacillus alimentarius)、干酪乳杆菌干酪亚种(Lactobacillus casei subsp.casei)、干酪乳酸杆菌代田株(Lactobacilluscasei Shirota)、弯曲乳杆菌(Lactobacillus curvatus)、德氏乳杆菌乳酸亚种(Lactobacillus delbruckii subsp.lactis)、香肠乳杆菌(Lactobacillus farciminus)、加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)、瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)、约氏乳杆菌(Lactobacillus johnsonii)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus(Lactobacillus GG))、清酒乳杆菌(Lactobacillus sake)、乳酸乳球菌(Lactococcuslactis)、变异微球菌(Micrococcus varians)、乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)、戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)、乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)、嗜盐片球菌(Pediococcus halophilus)、粪链球菌(Streptococcus faecalis)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、肉葡萄球菌(Staphylococcus carnosus)和木糖葡萄球菌(Staphylococcus xylosus)。
优选的益生细菌菌株包括鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus);鼠李糖乳杆菌LPR(CGMCC 1.3724);尤其由丹麦汉森集团公司(Christian Hansen company,Denmark)出售的商标为BB 12的乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)BL818(CNCM 1-3446);以及由日本森永乳业有限公司(Morinaga Milk Industry Co.Ltd.,Japan)出售的商标为BB536的长双歧杆菌BL999(ATCC BAA-999)。
营养组合物还可含有可具有有益效果的其他物质,诸如人乳低聚糖、益生元、乳铁蛋白、纤维、核苷酸、核苷等。
实施例
实施例1
在马铃薯蛋白质与大米蛋白质之间的营养比较
与大米蛋白质相比,马铃薯蛋白质含有更高水平的以下必需氨基酸(图1和图2):缬氨酸;异亮氨酸;亮氨酸;赖氨酸;苏氨酸和芳香氨基酸。
在马铃薯蛋白质与大米蛋白质之间的色氨酸和含硫氨基酸浓度类似。
然而,大米蛋白质含有比马铃薯蛋白质更高浓度的组氨酸。
总体而言,马铃薯蛋白质中的必需氨基酸浓度优于大米蛋白质,并且可能需要较低水平的另外氨基酸强化。
与大米蛋白质相比,马铃薯蛋白质含有更多必需氨基酸,符合FAO2013建议值(表1)。
氨基酸 | 马铃薯 | 大米 |
Val | √ | × |
Ile | × | × |
Leu | × | × |
Lys | × | × |
His | × | √ |
Thr | √ | × |
Trp | × | × |
Met+Cys | √ | √ |
Phe+Tyr | √ | × |
表1.马铃薯蛋白质和大米蛋白质中的氨基酸浓度符合针对0至6个月大婴儿的FAO
2013建议值。
虽然马铃薯蛋白质中组氨酸水平低于大米蛋白质,并且低于针对0至6个月大婴儿的FAO 2013建议值,但马铃薯蛋白质仍将提供符合214mg/d组氨酸的组氨酸水平,这是由美国国家医学院针对0至6个月大的婴儿的适当摄入量(AI)所建议的(图3)。
虽然与FAO 2013建议值相比,马铃薯中异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸和色氨酸的浓度较低,但这些水平与大米中的水平相似或更高。此外,马铃薯蛋白质将符合美国国家医学院对这些氨基酸的AI建议值,而大米蛋白质将不符合对异亮氨酸和赖氨酸的建议值(图4)。
除美国国家医学院的AI建议值之外,从供应商数据中获得的异亮氨酸、亮氨酸和赖氨酸的浓度表明这些氨基酸的水平符合WHO 2007、2013和EC指令2006/141/EC以及法典标准(CODEX STAN 72-1981)。
支链氨基酸(BCAA)
支链氨基酸(BCAA;亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸)在蛋白质合成中起到重要作用。亮氨酸是mTOR的激活因子,并且促进蛋白质合成并抑制蛋白质分解代谢,从而导致在限制饮食摄入量期间维持肌肉蛋白质。对食物出现***反应的儿童遵循饮食限制,他们存在出现营养不良的风险,因此食用具有高水平的BCAA的植物蛋白可有助于维持肌肉蛋白质。
此外,BCAA的最佳食物来源是肉、鱼、乳制品和蛋类,对食物出现***反应的婴儿和年龄较小的儿童完全不能食用这些食物或至少少量食用。图5示出了马铃薯中BCAA的总和(%AA)接近牛奶,因此为对牛乳蛋白质出现***反应的儿童提供了优势。因此,提供具有较高水平的BCAA的蛋白质来源可有益于该儿科群体。
赖氨酸和苏氨酸
赖氨酸和苏氨酸分别是食用主要基于谷物的饮食(诸如小麦和大米)的人类个体中蛋白质合成的第一和第二主要限制性氨基酸。赖氨酸和苏氨酸的主要作用在于蛋白质合成。与其他植物蛋白质来源诸如大米蛋白质和小麦蛋白质不同,马铃薯蛋白质含有较高水平的这两种氨基酸,赖氨酸水平接近FAO 2013建议值所设定的需求和苏氨酸水平则超出(图6)。
苏氨酸和赖氨酸的最佳食物来源是大豆、乳制品、坚果、以及鱼、牛肉或鸡肉。对食物出现***反应的婴儿和年龄较小的儿童完全不能食用这些食物来源或至少少量食用。因此,提供具有高浓度的这两种氨基酸的非动物蛋白质来源将有益于该儿科群体。
芳香氨基酸
苯丙氨酸是酪氨酸、神经递质多巴胺、降肾上腺素和肾上腺素以及皮肤色素黑色素的前体。马铃薯蛋白质超出了针对0至6个月大婴儿的FAO 2013建议值所设定的需求,而大米不符合建议水平。
苯丙氨酸的最佳食物来源是蛋类、鸡肉、肝脏、牛肉、牛奶和大豆。对食物出现***反应的婴儿和年龄较小的儿童完全不能食用这些食物来源或至少少量食用。然而,马铃薯蛋白质中苯丙氨酸和酪氨酸的组合水平与牛奶相似(图7),这为对牛乳蛋白质出现***反应的婴儿和儿童提供了优势。
实施例2
将包含马铃薯蛋白质的营养组合物的制造方法进行比较,这些方法采用不同的矿物质添加过程。
表2中的数据表明,在营养组合物的制备过程期间矿物质的添加顺序对液体产品的粘度具有显著影响。优化该顺序可实现能够改善喷雾干燥并改善喷雾干燥的粉末产品质量的粘度。
具体地讲,据发现,在马铃薯蛋白质之前将一些矿物质(例如,柠檬酸钙和/或柠檬酸钾、以及任选地柠檬酸钠和/或磷酸二氢钾)添加到溶液中对所得溶液的粘度是有益的。其他矿物质(例如,氯化镁、氧化镁、氯化钙、甘油磷酸钙和/或氯化钠、以及任选地磷酸钙、氢氧化钾和/或氢氧化钠)可在马铃薯蛋白质之后添加(该方案在表1中标注为“先加和后加矿物质”)。
此外,据发现,在蛋白质之前添加所有矿物质也是有益的(该方案在表1中标注为“先加矿物质”)。
在均质化之前和之后将pH调节回6.0发现不影响粘度或粒度(PSD)。
表2.粘度和粒度分析.
在上述说明书中提到的所有出版物均以引用方式并入本文。本发明所述的组合物和方法的各种修改和变型在不脱离本发明范围和实质的情况下对本领域的技术人员将是显而易见的。虽然已结合具体优选实施方案对本发明进行了描述,但是应当理解,受权利要求书保护的本发明不应不当地限于此类具体实施方案。实际上,对生物化学和生物技术或相关领域技术人员显而易见的对用于实践本发明的所述模式的各种修改旨在落在以下权利要求书的范围内。
Claims (22)
1.用于制备营养组合物的方法,所述方法包括以下步骤:
(a)为营养组合物提供包含至少一种矿物质的溶液,其中步骤(a)所述至少一种矿物质包括柠檬酸钙、柠檬酸钾和/或磷酸二氢钾,以及任选地柠檬酸钠、氯化镁、氧化镁、氯化钙、甘油磷酸钙、氯化钠、磷酸钙、氢氧化钾和/或氢氧化钠;
(b)将至少一种马铃薯蛋白质添加到步骤(a)的所述溶液中,其中在步骤(b)期间搅拌所述溶液,使所述蛋白质溶解和/或水合;
(c)将至少一种碳水化合物和/或至少一种脂肪添加到步骤(b)的所述溶液中;以及
(d)将步骤(c)的所述溶液喷雾干燥。
2.根据权利要求1所述的方法,其中在步骤(a)和/或(b)期间搅拌所述溶液。
3.根据权利要求1所述的方法,其中步骤(a)还包括在添加所述至少一种马铃薯蛋白质的步骤(b)之前,将所述溶液的pH调节至3.8至7.0。
4.根据权利要求3所述的方法,其中步骤(a)还包括在添加所述至少一种马铃薯蛋白质的步骤(b)之前,将所述溶液的pH调节至6.4至6.8或3.8至4.2。
5.根据权利要求1-4中的任一项所述的方法,其中步骤(c)还包括在添加所述至少一种碳水化合物之后,将所述溶液的pH调节至3.8至7.0。
6.根据权利要求5所述的方法,其中步骤(c)还包括将所述溶液的pH调节至6.4至6.8或6.0至6.4。
7.根据权利要求5所述的方法,其中步骤(c)还包括在添加所述至少一种碳水化合物之后并且在添加所述至少一种脂肪之前,将所述溶液的pH调节至3.8至7.0。
8.根据权利要求1-4中的任一项所述的方法,其中所述方法不包括均质化步骤。
9.根据权利要求1-4中的任一项所述的方法,其中所述营养组合物为婴儿配方食品。
10.根据权利要求1-4中的任一项所述的方法,其中步骤(c)还包括添加至少一种矿物质和/或维生素。
11.根据权利要求10所述的方法,其中步骤(c)还包括在添加所述至少一种碳水化合物之后添加至少一种矿物质和/或维生素。
12.根据权利要求10所述的方法,其中步骤(c)还包括在添加所述至少一种碳水化合物之后并且在添加所述至少一种脂肪之前,添加至少一种矿物质和/或维生素。
13.根据权利要求10所述的方法,其中在步骤(c)中添加的所述至少一种矿物质包括氯化镁、氧化镁、氯化钙、甘油磷酸钙、磷酸二氢钾、氯化钠、磷酸钙、氢氧化钾、柠檬酸钠和/或氢氧化钠。
14.根据权利要求1-4中的任一项所述的方法,其中步骤(c)包括在所述至少一种脂肪之前添加所述至少一种碳水化合物。
15.根据权利要求1-4中的任一项所述的方法,其中所述至少一种马铃薯蛋白质为水解的马铃薯蛋白质。
16.根据权利要求15所述的方法,其中所述至少一种马铃薯蛋白质为水解的马铃薯蛋白质,并且其中所述方法还包括通过包括以下步骤的方法制备所述水解的马铃薯蛋白质:
(i)提供包含马铃薯蛋白质的溶液,以及任选地将所述溶液的pH调节至5.0至8.0;
(ii)将蛋白酶添加到步骤(i)的所述溶液;
(iii)在适用于水解所述马铃薯蛋白质的条件下温育步骤(ii)的所述溶液;以及
(iv)使所述蛋白酶失活。
17.根据权利要求16所述的方法,其中所述的蛋白酶为碱性蛋白酶。
18.根据权利要求16所述的方法,其中步骤(iii)的所述温育包括添加所述蛋白酶以提供按重量计的0.5%至5%的酶:底物的比例。
19.根据权利要求16所述的方法,其中步骤(iii)的所述温育包括在55℃至60℃的温度下温育所述溶液0.5小时至5小时。
20.根据权利要求1-4中的任一项所述的方法,其中按总蛋白质的重量计,至少75%是马铃薯蛋白质。
21.根据权利要求20所述的方法,其中按总蛋白质的重量计,100%是马铃薯蛋白质。
22.营养组合物,所述营养组合物能够通过权利要求1-21中的任一项所述的方法获得。
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