JP2023545928A - ヒト乳オリゴ糖を含む栄養組成物 - Google Patents

Abstract

ヒト乳オリゴ糖（ＨＭＯ） ２’－フコシルラクトース（２ＦＬ）、３’－フコシルラクトース（３ＦＬ）、３’－シアリルラクトース（ＳＳＬ）、及びラクト－Ｎ－ネオテトラオース（ＬＮｎＴ）を含む栄養組成物。栄養組成物は、アレルゲンに対する耐性を誘導すること、及び／又はアレルギーのアウトグロースを加速させること、及び／又はインターロイキンＩＬ－１０介在性疾患を治療すること若しくはそのリスクを低減することに有用である。【選択図】 なし

Description

本発明は、アレルゲンに対する耐性（ｔｏｌｅｒａｎｃｅ）を誘導することにおける使用のための栄養組成物に関する。特に、本発明は、ヒト乳オリゴ糖（ＨＭＯ） ２’－フコシルラクトース（２ＦＬ）、３’－フコシルラクトース（３ＦＬ）、３’－シアリルラクトース（３ＳＬ）、ラクト－Ｎ－ネオテトラオース（ＬＮｎＴ）、並びに任意に６’－シアリルラクトース（６ＳＬ）及びラクト－Ｎ－テトラオース（ＬＮＴ）を含む栄養組成物に関する。

［背景技術］
食品アレルギー、アトピー性皮膚炎、及び喘息などのアレルギー疾患の罹患率は世界的に増加している。例えば、世界中で３億人が喘息を患っており、欧州連合では１１００万人～２６００万人が食品アレルギーを有する（Ｍａｒｔｉｎｓ，Ｔ．Ｂ．ｅｔ ａｌ．（２０１４）Ｊ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ １３３：５８９－９１）。

牛乳タンパク質（ＣＭＰ）は、乳児の食物アレルギーの主要な原因であり、世界中で２～３％の小児に影響を及ぼしている。ＣＭＰアレルギー（ＣＭＰＡ）を有する小児のほとんどは、２つ以上の症状を有する：５０～７０％は皮膚症状があり；５０～６０％は胃腸症状があり；２０～３０％は気道症状がある。１０％の小児では、重篤な生命を脅かす症状が現れることがある。（Ｎｕｔｔｅｎ，２０１８．ＥＭＪ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｉｍｍｕｎｏｌ，３（１），ｐｐ．５０－５９）。

乳児の腸内微生物組成が乳児宿主の免疫分化経路及びアレルギー発症に関与するという証拠が増えてきている（Ｑｕａｎｔｅ Ｍ．ｅｔ ａｌ．（２０１２）ＢＭＣ Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ １２：１０２１）。その結果、食事、汚染、都市生活、清浄度、及び出産方法などの環境要因が、免疫系の発達及びアレルギー疾患の発症と関連付けられてきた（Ｓｅｐｐｏ，Ａ．Ｅ．ｅｔ ａｌ．（２０１７）Ｊ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ １３９：７０８－１１ ｅ５；Ａｚａｄ，Ｍ．Ｂ．ｅｔ ａｌ．（２０１８）Ｊ Ｎｕｔｒ １４８：１７３３－４２）。

母乳は免疫学的に活性な分泌液であり、免疫系の発達を調節し、ひいてはアレルギー疾患の発症を調節し得る多くの成分を含有する。母乳中に３番目に豊富な成分であるヒトミルクオリゴ糖（ＨＭＯ）がアレルギー疾患の発症に及ぼす影響は、特に関心を集めてきた。ＨＭＯは、短鎖及び長鎖オリゴ糖の両方を含む、構造的に多様なラクトース系複合体グリカンである。ヒト母乳中のＨＭＯの数（２００超のＨＭＯが同定されている）及び構造の多様性は、他の哺乳動物乳では観察されていない。ＨＭＯの組成は、環境及び遺伝の両方の影響を受け、母体集団によって大きく異なる。乳腺で合成される母乳中のＨＭＯ量は、初乳の約２０．９ｇ／Ｌから成熟乳の１２．９ｇ／Ｌまで様々である。

関連する研究により、乳児のミルクアレルギー又は食物アレルギーと相関するいくつかの母乳中ＨＭＯ濃度の特定がなされてきた。しかしながら、アレルギーを調節するのに有益であり得る特定のＨＭＯの同一性に関して不確かさが残っている。

生後数ヶ月の健康な乳児にとって、ヒトの母乳及び母乳栄養は栄養の最適な形態であると考えられている。しかしながら、母乳に追加して使用することができる栄養源が必要とされている。更に、乳児には必ずしも母乳栄養が可能なわけではなく、早産児などのより脆弱な乳児のニーズは母乳では達成できないため、母乳の代替品も必要とされている。乳児の栄養要件を満たす乳児用フォーミュラなどの栄養組成物は、ヒトの母乳を代替するもの又は補完するものとして使用することができる。しかしながら、乳児用フォーミュラの組成は、栄養要件を満たし、許容できる味を提供し、更に乳児の発達を助けるために、特にアレルギーの乳児又はアレルギーのリスクがある乳児を対象とする場合は、慎重に制御される必要がある。

アレルギーの乳児及び小児に適した栄養組成物が依然として切に必要とされている。特に、アレルゲンに対する耐性を誘導し、アレルギー、特に牛乳アレルギーのアウトグロース（ｏｕｔｇｒｏｗｔｈ）の加速に対して有効な製剤が必要とされている。

［発明の概要］
本発明者らは、驚くべきことに、ＨＭＯの特定の組合せがＩＬ－１０の誘導において最も有効であることを見出した。この組み合わせは、アレルギー感作を低減し、アレルゲンに対する耐性を誘導するのに有用である。

したがって、一態様では、本発明は、ヒト乳オリゴ糖（ＨＭＯ） ２’－フコシルラクトース（２ＦＬ）、３’－フコシルラクトース（３ＦＬ）、３’－シアリルラクトース（３ＳＬ）、及びラクト－Ｎ－ネオテトラオース（ＬＮｎＴ）を含む栄養組成物を提供する。

いくつかの実施形態では、栄養組成物中のＨＭＯは、２ＦＬ、３ＦＬ、３ＳＬ、及びＬＮｎＴからなるか、又は本質的になる。

いくつかの実施形態では、栄養組成物中のＨＭＯは、以下：
ｉ．約４０重量％～約８０重量％、好ましくは約５５重量％～約７５重量％、好ましくは約６５重量％～約７０重量％の２ＦＬ、
ｉｉ．約２重量％～約１５重量％、好ましくは約４重量％～約１２重量％、好ましくは約６重量％～約９重量％のＬＮｎＴ、
ｉｉｉ．約５重量％～約３０重量％、好ましくは約１０重量％～約２５重量％、好ましくは約１５重量％～約２０重量％の３ＦＬ、及び
ｉｖ．約２重量％～約１５重量％、好ましくは約４重量％～約１２重量％、好ましくは約７重量％～約９重量％の３ＳＬ、からなるか、又は本質的になる。

いくつかの実施形態では、栄養組成物中に存在する２ＦＬ、３ＦＬ、３ＳＬ、及びＬＮｎＴの総量は、１０μｇ／ｍＬ～１００００μｇ／ｍＬ、好ましくは５０μｇ／ｍＬ～５０００μｇ／ｍＬの濃度である。

別の態様では、本発明は、ヒト乳オリゴ糖（ＨＭＯ） ２’－フコシルラクトース（２ＦＬ）、３’－フコシルラクトース（３ＦＬ）、３’－シアリルラクトース（３ＳＬ）、ラクト－Ｎ－ネオテトラオース（ＬＮｎＴ）、６’－シアリルラクトース（６ＳＬ）及びラクト－Ｎ－テトラオース（ＬＮＴ）を含む栄養組成物を提供する。

いくつかの実施形態では、栄養組成物中のＨＭＯは、２ＦＬ、３ＦＬ、３ＳＬ、ＬＮｎＴ、６ＳＬ及びＬＮＴからなるか、又は本質的になる。

いくつかの実施形態では、栄養組成物中のＨＭＯは、以下：
ｉ．約３５重量％～約６０重量％、好ましくは約４０重量％～約５０重量％、好ましくは約４３重量％～約４７重量％の２ＦＬ、
ｉｉ．約１重量％～約１０重量％、好ましくは約３重量％～約７重量％、好ましくは約４重量％～約６重量％のＬＮｎＴ、
ｉｉｉ．約１０重量％～約３０重量％、好ましくは約１５重量％～約２５重量％、好ましくは約１８重量％～約２２重量％のＬＮＴ、
ｉｖ．約３重量％～約２０重量％、好ましくは約７重量％～約１５重量％、好ましくは約１０重量％～約１３重量％の３ＦＬ、
ｖ．約１重量％～約１０重量％、好ましくは約４重量％～約８重量％、好ましくは約５重量％～約７重量％の３ＳＬ、及び
ｖｉ．約５重量％～約２０重量％、好ましくは約７重量％～約１５重量％、好ましくは約１０重量％～約１４重量％の６ＳＬ、からなるか、又は本質的になる。

いくつかの実施形態では、栄養組成物中に存在する２ＦＬ、３ＦＬ、３ＳＬ、ＬＮｎＴ、６ＳＬ及びＬＮＴの総量は、１０μｇ／ｍＬ～１００００μｇ／ｍＬ、好ましくは５０μｇ／ｍＬ～５０００μｇ／ｍＬの濃度である。

本発明の栄養組成物は、好ましくは乳児（ｉｎｆａｎｔ）又は幼児（ｙｏｕｎｇ－ｃｈｉｌｄ）に投与するためのものである。

一実施形態では、栄養組成物は、乳児用フォーミュラ、スターター乳児用フォーミュラ、フォローオン若しくはフォローアップ乳児用フォーミュラ、グローイングアップミルク、強化剤又はサプリメントの形態であり得る。一実施形態では、本発明の栄養組成物は、乳児用又は幼児用のフォーミュラである。

いくつかの実施形態では、本発明の栄養組成物は、高度加水分解フォーミュラ（ｅＨＦ）又はアミノ酸ベースフォーミュラ（ＡＡＦ）である。

いくつかの実施形態では、本発明の栄養組成物は、
（ａ）１００ｋｃａｌ当たり１．８～３．２ｇのタンパク質、
（ｂ）１００ｋｃａｌ当たり９～１４ｇの炭水化物、及び／又は
（ｃ）１００ｋｃａｌ当たり４．０～６．０ｇの脂肪
を含む。

いくつかの実施形態では、本発明の栄養組成物は、１００ｋｃａｌ当たり約２．４ｇ以下のタンパク質を含む。

いくつかの実施形態では、本発明の栄養組成物は、１００ｋｃａｌ当たり１．８～２．４ｇのタンパク質、１００ｋｃａｌ当たり２．１～２．３ｇのタンパク質、又は１００ｋｃａｌ当たり２．１５～２．２５ｇのタンパク質を含む。

いくつかの実施形態では、栄養組成物は、１００ｋｃａｌ当たり約２．２ｇのタンパク質を含む。

いくつかの実施形態では、本発明の栄養組成物中の脂肪の約３０重量％以下は、中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）である。

いくつかの実施形態では、栄養組成物はサプリメントである。一実施形態では、サプリメント中に存在する２ＦＬ、３ＦＬ、３ＳＬ、及びＬＮｎＴの総量は、サプリメントの単位用量当たり０．２ｇ～２ｇ、好ましくは単位用量当たり約０．４ｇ～１．５ｇ、好ましくは単位用量当たり０．５ｇ～１ｇの量であり得る。一実施形態では、サプリメント中に存在する２ＦＬ、３ＦＬ、３ＳＬ、ＬＮｎＴ、６ＳＬ及びＬＮＴの総量は、サプリメントの単位用量当たり０．２ｇ～２ｇ、好ましくは単位用量当たり約０．４ｇ～１．５ｇ、好ましくは単位用量当たり０．５ｇ～１ｇの量であり得る。

別の態様では、アレルゲン、好ましくは食物アレルゲンに対する耐性を誘導することにおける使用のための、本明細書で定義される栄養組成物が提供される。一実施形態では、アレルゲンは牛乳タンパク質である。

一態様では、本発明は、アレルゲン、好ましくは食物アレルゲンに対して対象の耐性を誘導する方法を提供する。一実施形態では、アレルゲンは牛乳タンパク質であり、本明細書で定義される栄養組成物を対象に投与することを含む。好ましくは、対象は乳児又は小児である。

別の態様では、アレルギー、好ましくは食物アレルゲンに対するアレルギーのアウトグロースを加速させることにおける使用のための、本明細書で定義される栄養組成物が提供される。一実施形態では、アレルギーは、牛乳アレルギーである。

一態様では、本発明は、本明細書で定義される栄養組成物を対象に投与することを含む、対象においてアレルギーのアウトグロースを加速させる方法を提供する。好ましくは、対象は乳児又は小児である。

別の態様では、インターロイキンＩＬ－１０介在性疾患を治療することにおける使用のための、本明細書で定義される栄養組成物が提供される。

一態様では、本発明は、対象においてインターロイキンＩＬ－１０介在性疾患を治療する、予防する、又はそのリスクを低減する方法であって、本明細書で定義される栄養組成物を対象に投与することを含む方法を提供する。好ましくは、対象は乳児又は小児である。

一態様では、本発明は、対象においてインターロイキンＩＬ－１０の発現を増加させる方法であって、本明細書で定義される栄養組成物を対象に投与することを含む方法を提供する。好ましくは、対象は乳児又は小児である。

ＨＭＯは、末梢血単核細胞におけるＩＬ－１０発現レベルを誘導した。ＰＢＭＣはＴＨ２表現型に偏っていた。異なるＨＭＯ混合物を試験した。ＨＭＯ混合物インキュベート後の上清中のＩＬ－１０レベルを定量した。 本発明によるＨＭＯの混合物による免疫寛容原性マーカーの誘導。単球を新鮮なＰＢＭＣから単離し、ＨＭＯ混合物２、ＨＭＯ混合物４、ＨＭＯ混合物６、並びにラクトース及び母乳（ＢＭ）由来のＨＭＯの存在下でＤＣに分化させた。ＬＰＳを、ＤＣマーカー（ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ４０、ＨＬＡＤＲ、ＰＤ－Ｌ１、ＯＸ４０Ｌ）の発現の陽性対照として使用した。ＬＰＳと比較して中程度の発現は、免疫寛容原性ＤＣのマーカーとみなされる。 本発明によるＨＭＯの混合物による免疫寛容原性マーカーの誘導。単球を新鮮なＰＢＭＣから単離し、等モル比又は母乳比（ＢＭ比）に近い比の４種類及び６種類のＨＭＯからなる混合物の存在下でＤＣに分化させた。ＬＰＳを、ＤＣマーカー（ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ４０、ＨＬＡＤＲ、ＰＤ－Ｌ１、ＯＸ４０Ｌ）の発現の陽性対照として使用し、ＬＰＳと比較して中程度の発現を、免疫寛容原性ＤＣのマーカーとした。

［発明を実施するための形態］
次に、本発明の様々な好ましい特徴及び実施形態を、非限定的な実施例により記載する。

本明細書及び添付の特許請求の範囲において使用する場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は、別段の指示がない限り、複数の指示対象を含むことについて留意する必要がある。

本明細書で使用する場合、用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、及び「を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｄ ｏｆ）」は、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」又は「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」又は「含有する（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」又は「含有する（ｃｏｎｔａｉｎｓ）」と同義であり、他を包含し得るもの、すなわちオープンエンドであり、かつ追加の、列挙されていない構成、要素、又は工程を除外しない。「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、及び「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｄ ｏｆ）」という用語はまた、「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」及び「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」という用語を含む。

本明細書で使用される「から本質的になる」という用語は、任意の追加の列挙されていない部材、要素、又はステップが、特許請求される装置、組成物、方法などの特徴に実質的に影響を及ぼさないことを意味する。適切には、列挙されたＨＭＯ「から本質的になる」ＨＭＯを含む組成物は、組成物の特性に実質的に影響を及ぼさない非掲載の微量のＨＭＯ（例えば、全ＨＭＯの１重量％未満、０．５重量％未満、又は０．１重量％未満）を含み得る。

本明細書で使用するとき、用語「約」は、およそ、ほぼ、概ね、又はその付近、を意味する。用語「約」が数値又は範囲と共に使用される場合、その値又は範囲は、記載された数値（複数可）の上方及び下方の境界を拡大することによって、その値又は範囲を修正する。一般に、用語「約」及び「ほぼ」は、本明細書では、規定された値（複数可）を１０％超える及び下回る数値（複数可）を調整するために使用される。

本明細書で論じられる刊行物は、単に本出願の出願日より前にそれらが開示されていたがために提供されている。本明細書において引用されるいかなる文献も、これらの刊行物が本明細書に添付の特許請求の範囲に対する先行技術を構成するものであると認めるものとして解釈されるべきではない。

本開示は、本明細書に開示される例示的な方法及び材料によって限定されず、本明細書に記載されるものと類似又は同等の任意の方法及び材料を、本開示の実施形態の実施又は試験に使用することができる。数値範囲は、その範囲を画定する数を含む。

栄養組成物
表現「栄養組成物」は、対象に栄養を与える組成物を意味する。

この栄養組成物は、通常、経口で摂取され、通常、脂質源又は脂肪源及びタンパク質源を含む。

特定の実施形態では、栄養組成物は、合成栄養組成物である。「合成栄養組成物」という表現は、化学的及び／又は生物学的手段によって得られる混合物を意味し、これは、哺乳動物の乳汁において天然に存在する混合物と化学的に同一とすることができる（すなわち、合成栄養組成物は母乳ではない）。

好ましい実施形態では、栄養組成物は、乳児又は幼児のためのものである。乳児は、例えば、０～１歳又は０～６ヶ月齢であり得る。小児は、例えば、１～３歳であり得る。特に好ましい実施形態では、栄養組成物は、乳児用フォーミュラ又は幼児用フォーミュラである。

「乳児用フォーミュラ」という用語は、生後１年の間の乳児の特定栄養用途食品であって、当該フォーミュラ単独で、このカテゴリーに該当するヒトの栄養要件（２０１５年９月２５日の欧州委員会規則（ＥＵ）２０１６／１２７に定義される）を満たす、食品を指し得る。

「乳児用フォーミュラ」という表現は、「スターター乳児用フォーミュラ」及び「フォローアップフォーミュラ」又は「フォローオンフォーミュラ」の両方を包含する。

「フォローアップフォーミュラ」又は「フォローオンフォーミュラ」は、６か月目以降に与えられる。

本発明の乳児用フォーミュラは、低アレルギー性乳児用フォーミュラであり得る。本発明の乳児用フォーミュラは、高度加水分解乳児用フォーミュラ（ｅＨＦ）又はアミノ酸ベース乳児用フォーミュラ（ＡＡＦ）であり得る。あるいは、乳児用フォーミュラは、部分加水分解乳児用フォーミュラ（ｐＨＦ）であり得る。

「高度加水分解フォーミュラ」又は「ｅＨＦ」という用語は、高度加水分解タンパク質（ｅｘｔｅｎｓｉｖｅｌｙ ｈｙｄｒｏｌｙｓｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ）を含むフォーミュラを指し得る。ｅＨＦは、未処理の牛乳タンパク質（Ｃｏｗ’ｓ ｍｉｌｋ ｐｒｏｔｅｉｎ、ＣＭＰ）を消化することができない、又はＣＭＰに対して不耐性若しくはアレルギーを有する乳児に対して完全栄養を提供する、低アレルギー性乳児用フォーミュラであり得る。

「アミノ酸ベースフォーミュラ」又は「ＡＡＦ」という用語は、タンパク質の供給源として遊離アミノ酸のみを含むフォーミュラを指し得る。ＡＡＦは、検出可能なペプチドを含有しない場合がある。ＡＡＦは、食物タンパク質アレルギー及び／又は食物タンパク質不耐性を有する乳児に対して完全栄養を提供する低アレルギー性乳児用フォーミュラであり得る。例えば、ＡＡＦは、未処理のＣＭＰを消化することができない、又はＣＭＰに対して不耐性若しくはアレルギーを有する、また複数の食品に対して極めて重篤な若しくは生命を脅かす症状及び／若しくは感作を有し得る乳児に対して完全栄養を提供する低アレルギー性乳児用フォーミュラであり得る。

「低アレルギー性」組成物は、アレルギー反応を引き起こす可能性が低い組成物である。低アレルギー性乳児用フォーミュラは、ＣＭＰアレルギーを有する乳児の９０％超によって許容され得る。これは、米国小児科学会が提供するガイダンスに沿ったものである（Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｏｎ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ，２０００．Ｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ，１０６（２），ｐｐ．３４６－３４９）。かかる乳児用フォーミュラは、ＣＭＰ特異的ＩｇＥ、例えばＣＭＰＡを有する対象のＩｇＥによって認識されるペプチドを含有し得ない。

乳児には乳児用フォーミュラのみを与えることができる、又は乳児用フォーミュラを、ヒト母乳を補完するものとして使用できる。

「幼児用フォーミュラ」という用語は、１～３歳の幼児の栄養要求を部分的に満たすことが意図された食品を指し得る。「幼児用フォーミュラ」という表現は、「幼児用ミルク」、「グローイングアップミルク」、又は「幼児用フォーミュラ」を包含する。ＥＳＰＧＨＡＮ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｏｎ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎは、最近、幼児用フォーミュラをレビューしている（Ｈｏｊｓａｋ，Ｉ．，ｅｔ ａｌ．，２０１８．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｐｅｄｉａｔｒｉｃ ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ，６６（１），ｐｐ．１７７－１８５）。適切には、幼児用フォーミュラは、Ｈｏｊｓａｋ，Ｉ．，ｅｔ ａｌ．，２０１８．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｐｅｄｉａｔｒｉｃ ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ，６６（１），ｐｐ．１７７－１８５及び／又はＳｕｔｈｕｔｖｏｒａｖｕｔ，Ｕ．，ｅｔ ａｌ．，２０１５．Ａｎｎａｌｓ ｏｆ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ ａｎｄ Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ，６７（２），ｐｐ．１１９－１３２において提案された組成要件を満たし得る。

本発明の幼児用フォーミュラは、低アレルギー性の幼児用フォーミュラであり得る。本発明の幼児用フォーミュラは、高度加水分解幼児用フォーミュラ又はアミノ酸ベース幼児用フォーミュラであり得る。あるいは、幼児用フォーミュラは、部分加水分解幼児用フォーミュラ（ｐＨＦ）であり得る。

本発明の乳児用フォーミュラ又は幼児用フォーミュラは、粉末又は液体の形態であり得る。

液体は、例えば、濃縮液体フォーミュラ又はレディ・トゥ・フィードフォーミュラであり得る。フォーミュラは、再構成された乳児用又は幼児用フォーミュラ（すなわち、粉末形態から再構成された液体フォーミュラ）の形態であり得る。濃縮液体乳児用又は幼児用フォーミュラは、好ましくは、例えば水を加えることによって、乳児又は小児に与えるのに好適な液体組成物に希釈することができる。

いくつかの実施形態では、乳児用又は幼児用フォーミュラは粉末形態である。粉末は、例えば水を加えることによって、乳児又は小児に与えるのに好適な液体組成物に再構成することができる。

栄養組成物は、指示通りに配合した場合、１００ｍＬ当たり約６０～７２ｋｃａｌのエネルギー密度を有し得る。好適には、栄養組成物は、指示通りに配合した場合、１００ｍＬ当たり約６０～７０ｋｃａｌのエネルギー密度を有し得る。

本発明による栄養組成物は、例えば、乳児用フォーミュラ、スターター乳児用フォーミュラ、フォローオン若しくはフォローアップフォーミュラ、ヒト乳強化剤などの強化剤、又はサプリメントであり得る。いくつかの特定の実施形態では、本発明の組成物は、乳児用フォーミュラ、幼児用フォーミュラ、又はサプリメントである。一つの好ましい実施形態では、本発明の栄養組成物は、乳児用フォーミュラである。

本発明の文脈において、「強化剤」という用語は、乳児に対して栄養上の利益を有する１つ以上の栄養素を含む組成物を指す。「乳強化剤」という用語は、ヒト母乳、乳児用フォーミュラ、グローイングアップミルク、又は他の栄養素で強化されたヒト母乳のいずれかを強化又は補充するために使用される任意の組成物を意味する。したがって、本発明のヒト乳強化剤は、ヒト母乳、乳児用フォーミュラ、グローイングアップミルク、又は他の栄養素で強化されたヒト母乳に溶解させた後に投与することができ、あるいは独立した組成物として投与することができる。

独立した組成物として投与される場合、本発明のヒト乳強化剤は、「サプリメント」であると特定することもできる。一実施形態では、本発明の乳強化剤はサプリメントである。いくつかの実施形態では、本発明の栄養組成物は強化剤である。強化剤は、母乳強化剤（例えば、ヒト母乳強化剤）又は乳児用フォーミュラ強化剤若しくはフォローオン／フォローアップフォーミュラ強化剤などの、フォーミュラ強化剤とすることができる。

栄養組成物がサプリメントである場合、単位用量の形態で提供することができる。サプリメントは、例えば、タブレット、カプセル、トローチ、又は液体の形態であり得る。ダイエタリーサプリメントは、保護親水コロイド（ガム、タンパク質、加工デンプンなど）、結合剤、皮膜形成剤、カプセル化剤／材料、壁／シェル材料、マトリックス化合物、コーティング、乳化剤、表面活性剤、可溶化剤（油、脂肪、ワックス、レシチンなど）、吸着剤、担体、充填剤、共化合物、分散剤、湿潤剤、加工助剤（溶媒）、流動剤、味覚マスキング剤、増量剤、ゼリー化剤、及びゲル形成剤を更に含有してもよい。かかるサプリメントはまた、従来の医薬添加剤及び補助剤、添加物、及び希釈剤を含有してもよく、これには、水、任意の由来のゼラチン、植物ガム、リグニンスルホネート、タルク、糖、デンプン、アラビアガム、植物油、ポリアルキレングリコール、風味剤、防腐剤、安定剤、乳化剤、緩衝液、潤滑剤、着色剤、湿潤剤、充填剤などが挙げられるが、これらに限定されない。

更に、サプリメントには、経口又は非経口投与に好適な有機又は無機担体材料に加え、ＵＳＲＤＡなどの政府機関の推奨に従い、ビタミン類、ミネラル類、微量元素及びその他の微量栄養素を含有させることもできる。

本発明の栄養組成物は、固体（例えば、粉末）、液体、又はゼラチン状の形態とすることができる。

ヒト乳オリゴ糖
本発明の栄養組成物は、ヒト乳オリゴ糖（ＨＭＯ）を含有する。

ヒト母乳には多くの種類のＨＭＯが見出される。各個々のオリゴ糖は、グルコース、ガラクトース、シアル酸（Ｎ－アセチルノイラミン酸）、フコース、及び／又はＮ－アセチルグルコサミンの組み合わせをベースに、それらの間に多種多様な結合を有するため、ヒト母乳中には非常に多様なオリゴ糖が含まれることになる。ほとんど全てのＨＭＯは、還元末端にラクトース部分を有し、非還元末端の末端位置は、シアル酸及び／又はフコース（存在する場合）が占める。ＨＭＯは、酸性（例えば、荷電シアル酸含有オリゴ糖）又は中性（例えば、フコシル化オリゴ糖）であり得る。

いくつかの実施形態では、栄養組成物中のＨＭＯは、２’－フコシルラクトース（２ＦＬ）、３’－フコシルラクトース（３ＦＬ）、３’－シアリルラクトース（３ＳＬ）及びラクト－Ｎ－ネオテトラオース（ＬＮｎＴ）を含むか、本質的にそれらからなるか、又は好ましくはそれらからなる。したがって、栄養組成物は、２ＦＬ、３ＦＬ、３ＳＬ及びＬＮｎＴ以外の他のタイプのＨＭＯを含まなくてもよい。

別の実施形態では、栄養組成物中のＨＭＯは、２’－フコシルラクトース（２ＦＬ）、３’－フコシルラクトース（３ＦＬ）、３’－シアリルラクトース（３ＳＬ）、ラクト－Ｎ－ネオテトラオース（ＬＮｎＴ）、６’－シアリルラクトース（６ＳＬ）及びラクト－Ｎ－テトラオース（ＬＮＴ）を含むか、本質的にそれらからなるか、又は好ましくはそれらからなる。したがって、栄養組成物は、２ＦＬ、３ＦＬ、３ＳＬ、ＬＮｎＴ、６ＳＬ及びＬＮＴ以外の他のタイプのＨＭＯを含まなくてもよい。

ＨＭＯは、任意の適切な方法によって得られ得る。ＨＭＯを合成するための適切な方法は、当業者に周知である。例えば、微生物発酵、酵素プロセス、化学合成、又はこれらの技術の組み合わせによってＨＭＯを産生するためのプロセスが開発されている（Ｚｅｕｎｅｒ ｅｔ ａｌ．，２０１９．Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ，２４（１１），ｐ．２０３３）。

２ＦＬは、酵素ベースの発酵技術（組換え酵素又は天然酵素）又は微生物発酵技術のいずれかを用いた、特定のフコシルトランスフェラーゼ及び／又はフコシダーゼを使用するバイオテクノロジー手段によって生成され得る。後者の場合、微生物が、それらの天然酵素及び基質を発現し得る、又はそれぞれの基質及び酵素を生成するように操作され得る。あるいは、２ＦＬは、ラクトース及び遊離フコースからの化学合成によって生成され得る。

３ＦＬは、酵素的、生物工学的及び／又は化学的プロセスによって合成され得る。３ＦＬは、遺伝子改変された微生物を用いた発酵によって製造され得る。あるいは、３ＦＬは、国際公開第２０１３／１３９３４４号パンフレットに記載されているように製造され得る。

３ＳＬは、酵素的、生物工学的及び／又は化学的プロセスによって合成され得る。３ＳＬは、国際公開第２０１４／１５３２５３号に記載されているように製造され得る。

ＬＮｎＴは、例えば米国特許第５，２８８，６３７号及び国際公開第１９９６／０１００８６号に記載されているように、グリコシルトランスフェラーゼを使用して、ドナー部分からアクセプター部分への糖単位の酵素的な転移によって化学的に合成され得る。あるいは、ＬＮｎＴは、Ｗｒｏｄｎｉｇｇ，Ｔ．Ｍ．及びＳｔｕｔｚ，Ａ．Ｅ．（１９９９）Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．３８：８２７－８２８に記載されているように、遊離ケトヘキソース、又はオリゴ糖（例えば、ラクツロース）に結合したケトヘキソース（例えば、フルクトース）をＮ－アセチルヘキソサミン又はＮ－アセチルヘキソサミン含有オリゴ糖に化学変換することにより調製され得る。このようにして生成されたＮ－アセチル－ラクトサミンは、次いでアクセプター部分としてラクトースに転移され得る。あるいは、ＬＮｎＴは、国際公開第２０１１／１００９８０号パンフレット又は国際公開第２０１３／０４４９２８号パンフレットに記載されているように製造され得る。

６ＳＬは、グリコシルハライド、チオグリコシド又はジエチルホスファイトのドナー活性化を使用して、４’，６’－糖ジオール又は６’－糖アルコールのいずれかの立体選択的６’－０－シアリル化を含む化学的方法によって合成され得る。あるいは、６ＳＬは、グリコシルトランスフェラーゼ及びシアリダーゼを使用して酵素により製造され得る。６ＳＬは、国際公開第２０１１／１００９７９号パンフレットに記載されているように製造され得る。

ＬＮＴは、酵素的、生物工学的及び／又は化学的プロセスによって合成され得る。ＬＮＴは、国際公開第２０１２／１５５９１６号パンフレット又は国際公開２０１３／０４４９２８号パンフレットに記載されているように製造され得る。ＬＮＴ及びＬＮｎＴの混合物は、国際公開第２０１３／０９１６６０号パンフレットに記載されているように作製することができる。

いくつかの実施形態では、栄養組成物は、ヒト乳オリゴ糖（ＨＭＯ） ２’－フコシルラクトース（２ＦＬ）、３’－フコシルラクトース（３ＦＬ）、３’－シアリルラクトース（３ＳＬ）、及びラクト－Ｎ－ネオテトラオース（ＬＮｎＴ）を含む。いくつかの実施形態では、栄養組成物中のＨＭＯは、２ＦＬ、３ＦＬ、３ＳＬ、及びＬＮｎＴからなるか、又は本質的になる。

いくつかの実施形態では、栄養組成物中のＨＭＯは、以下：
ｉ．約４０重量％～約８０重量％、好ましくは約５５重量％～約７５重量％、好ましくは約６５重量％～約７０重量％の２ＦＬ、
ｉｉ．約２重量％～約１５重量％、好ましくは約４重量％～約１２重量％、好ましくは約６重量％～約９重量％のＬＮｎＴ、
ｉｉｉ．約５重量％～約３０重量％、好ましくは約１０重量％～約２５重量％、好ましくは約１５重量％～約２０重量％の３ＦＬ、及び
ｉｖ．約２重量％～約１５重量％、好ましくは約４重量％～約１２重量％、好ましくは約７重量％～約９重量％の３ＳＬ、からなるか、又は本質的になる。

いくつかの実施形態では、栄養組成物中に存在する２ＦＬ、３ＦＬ、３ＳＬ、及びＬＮｎＴの総量は、１μｇ／ｍＬ～５０００μｇ／ｍＬ、好ましくは１０μｇ／ｍＬ～１００μｇ／ｍＬの濃度である。いくつかの実施形態では、栄養組成物中に存在する２ＦＬ、３ＦＬ、３ＳＬ、及びＬＮｎＴの総量は、１μｇ／ｋｃａｌ～１００００μｇ／ｋｃａｌ、好ましくは１０μｇ／ｋｃａｌ～２００μｇ／ｋｃａｌの濃度である。

いくつかの実施形態では、本発明は、ヒト乳オリゴ糖（ＨＭＯ） ２’－フコシルラクトース（２ＦＬ）、３’－フコシルラクトース（３ＦＬ）、３’－シアリルラクトース（３ＳＬ）、ラクト－Ｎ－ネオテトラオース（ＬＮｎＴ）、６’－シアリルラクトース（６ＳＬ）及びラクト－Ｎ－テトラオース（ＬＮＴ）を含む栄養組成物を提供する。いくつかの実施形態では、栄養組成物中のＨＭＯは、２ＦＬ、３ＦＬ、３ＳＬ、ＬＮｎＴ、６ＳＬ及びＬＮＴからなるか、又は本質的になる。

いくつかの実施形態では、栄養組成物中のＨＭＯは、以下：
ｉ．約３５重量％～約６０重量％、好ましくは約４０重量％～約５０重量％、好ましくは約４３重量％～約４７重量％の２ＦＬ、
ｉｉ．約１重量％～約１０重量％、好ましくは約３重量％～約７重量％、好ましくは約４重量％～約６重量％のＬＮｎＴ、
ｉｉｉ．約１０重量％～約３０重量％、好ましくは約１５重量％～約２５重量％、好ましくは約１８重量％～約２２重量％のＬＮＴ、
ｉｖ．約３重量％～約２０重量％、好ましくは約７重量％～約１５重量％、好ましくは約１０重量％～約１３重量％の３ＦＬ、
ｖ．約１重量％～約１０重量％、好ましくは約４重量％～約８重量％、好ましくは約５重量％～約７重量％の３ＳＬ、及び
ｖｉ．約５重量％～約２０重量％、好ましくは約７重量％～約１５重量％、好ましくは約１０重量％～約１４重量％の６ＳＬ、からなるか、又は本質的になる。

いくつかの実施形態では、特に栄養組成物が乳児用フォーミュラ又は幼児用フォーミュラである場合、栄養組成物中に存在する２ＦＬ、３ＦＬ、３ＳＬ、及びＬＮｎＴの総量は、（指示どおりに配合された場合）１０μｇ／ｍＬ～１００００μｇ／ｍＬ、好ましくは５０μｇ／ｍＬ～５０００μｇ／ｍＬの濃度である。

いくつかの実施形態において特に、栄養組成物が乳児用フォーミュラ又は幼児用フォーミュラである場合、栄養組成物中に存在する２ＦＬ、３ＦＬ、３ＳＬ、ＬＮｎＴ、６ＳＬ及びＬＮＴの総量は、（指示どおりに配合された場合）１０μｇ／ｍＬ～１００００μｇ／ｍＬ、好ましくは５０μｇ／ｍＬ～５０００μｇ／ｍＬの濃度である。

いくつかの実施形態では、栄養組成物がサプリメントの形態である場合、サプリメント中に存在する２ＦＬ、３ＦＬ、３ＳＬ及びＬＮｎＴ又は２ＦＬ、３ＦＬ、３ＳＬ、ＬＮｎＴ、６ＳＬ及びＬＮＴの総量は、サプリメントの単位用量当たり０．２ｇ～２ｇ、好ましくは単位用量当たり約０．４ｇ～１．５ｇ、好ましくは単位用量当たり０．５ｇ～１ｇの量であり得る。一実施形態では、栄養組成物がサプリメントの形態である場合、サプリメント中に存在する２ＦＬ、３ＦＬ、３ＳＬ及びＬＮｎＴの総量、又は２ＦＬ、３ＦＬ、３ＳＬ、ＬＮｎＴ、６ＳＬ及びＬＮＴの総量は、サプリメントの単位用量当たり０．７ｇ～０．８ｇの量であり得る。

本発明の特定の実施形態では、栄養組成物は、２’－フコシルラクトース（２ＦＬ）及びラクト－Ｎ－ネオテトラオース（ＬＮｎＴ）を、２ＦＬ：ＬＮｎＴ重量比で１：１０～１２：１、例えば、１：７～１０：１、又は１：５～５：１、又は２：１～５：１、又は１：３～３：１、又は１：２～２：１、又は１：１～３：１、又は１：５～１：０．５、例えば、２：１又は１０：１で含む。本発明の特定の実施形態では、栄養組成物は、２’－フコシルラクトース（２ＦＬ）及びラクト－Ｎ－ネオテトラオース（ＬＮｎＴ）を、２ＦＬ：ＬＮｎＴ重量比で約２：１で含む。

タンパク質
「タンパク質」という用語は、ペプチド及び遊離アミノ酸を含む。栄養組成物のタンパク質含有量は、当業者に既知の任意の方法によって計算され得る。好適には、タンパク質含有量は、窒素タンパク質換算法によって算出され得る。例えば、Ｍａｕｂｏｉｓ，Ｊ．Ｌ．ａｎｄ Ｌｏｒｉｅｎｔ，Ｄ．（２０１６）Ｄａｉｒｙ Ｓｃｉｅｎｃｅ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ９６（１）：１５－２５に記載の通りである。好ましくは、タンパク質含有量は、２０１５年９月２５日の欧州委員会規則（ＥＵ）２０１６／１２７に定義されるように、窒素含有量×６．２５として計算される。窒素含有量は、当業者に既知の任意の方法によって特定され得る。例えば、窒素含有量は、ケルダール法によって測定され得る。

本発明の栄養組成物、特に本発明の乳児用フォーミュラのタンパク質含量は、好ましくは１００ｋｃａｌ当たり１．６～３．２ｇタンパク質の範囲である。いくつかの実施形態では、栄養組成物のタンパク質含有量は、１００ｋｃａｌ当たり１．８～２．８ｇの範囲のタンパク質である。

ｅＨＦは、典型的には、１００ｋｃａｌ当たり２．６～２．８ｇのタンパク質を含有し、ＡＡＦは、典型的には、１００ｋｃａｌ当たり２．８～３．１ｇのタンパク質を含有するものであり、例えば、重度の吸収不良を含む胃腸病変のある乳児、又は高い代謝率を補うためにタンパク質及びカロリーをより多く必要とする乳児のニーズに対応する。

より低いタンパク質含有量を有するｅＨＦ又はＡＡＦなどの乳児用フォーミュラは、アレルギー乳児の適切な発育及び発達をサポートすると共に、安全性及び耐容性があり得る。

したがって、いくつかの実施形態では、本発明の栄養組成物、特に本発明の乳児用フォーミュラは、１００ｋｃａｌ当たり約２．４ｇ以下のタンパク質を含み得る。例えば、栄養組成物は、１００ｋｃａｌ当たり約２．３ｇ以下のタンパク質、１００ｋｃａｌ当たり２．２５ｇ以下のタンパク質、又は１００ｋｃａｌ当たり２．２ｇ以下のタンパク質を含み得る。

好適には、本発明の栄養組成物、特に本発明の乳児用フォーミュラは、１００ｋｃａｌ当たり約１．８ｇ以上のタンパク質を含む。例えば、栄養組成物は、１００ｋｃａｌ当たり約１．８６ｇ以上のタンパク質、１００ｋｃａｌ当たり１．９ｇ以上のタンパク質、１００ｋｃａｌ当たり２．０ｇ以上のタンパク質、又は１００ｋｃａｌ当たり２．１ｇ以上のタンパク質を含み得る。いくつかの実施形態では、栄養組成物は、乳児用フォーミュラのための現行のＥＵ規則（ＥＦＳＡ ＮＤＡ Ｐａｎｅｌ（２０１４）ＥＦＳＡ ｊｏｕｒｎａｌ １２（７）：３７６０）に準拠して、１００ｋｃａｌ当たり約１．８６ｇ以上のタンパク質を含む。

いくつかの実施形態では、本発明の栄養組成物、具体的には本発明の乳児用フォーミュラは、１００ｋｃａｌ当たり１．８～２．４ｇのタンパク質、１００ｋｃａｌ当たり１．８６～２．４ｇのタンパク質、１００ｋｃａｌ当たり１．９～２．４ｇのタンパク質、１００ｋｃａｌ当たり２．０～２．４ｇのタンパク質、１００ｋｃａｌ当たり２．０～２．３ｇのタンパク質、１００ｋｃａｌ当たり２．１～２．３ｇのタンパク質、又は１００ｋｃａｌ当たり２．１５～２．２５ｇのタンパク質を含み得る。

タンパク質の供給源
タンパク質の供給源は、栄養組成物における使用に好適な任意の供給源であり得る。

好適には、タンパク質は牛乳タンパク質である。いくつかの実施形態では、栄養組成物は、牛乳タンパク質を含まない。

いくつかの実施形態では、栄養組成物は、乳タンパク質を含まない。したがって、いくつかの実施形態では、総タンパク質の１００重量％は非乳タンパク質である。

高度加水分解／加水分解されたホエイベースのフォーミュラは、高度加水分解／加水分解されたカゼインベースのフォーミュラよりも嗜好性が高い場合があり、及び／又は対象はカゼインタンパク質にのみ感作される場合がある。したがって、好適には、タンパク質の約５０％超、約６０％超、約７０％超、約８０％超、約９０％超、又は約１００％がホエイタンパク質である。好ましくは、タンパク質の供給源はホエイタンパク質である。

ホエイタンパク質は、チーズの製造に由来するホエイであってよく、特に、レンネットによるカゼインの凝固により得られるものなどのスイートホエイ、酸によるカゼインの凝固又は発酵物の酸性化により得られる酸性ホエイ、あるいは更には酸による及びレンネットによる凝固により得られる混合ホエイであってよい。この原料は、イオン交換により、及び／又は電気透析により脱塩された、脱塩乳清タンパク質（ＤＷＰ）として知られる乳清であり得る。

ホエイタンパク質の供給源は、カゼイノ－グリコマクロペプチド（ＣＧＭＰ）が完全に又は部分的に除去されたスイートホエイであり得る。このホエイは、変性スイートホエイ（ＭＳＷ）と呼ばれる。スイートホエイからＣＧＭＰを除去すると、スレオニン及びトリプトファン含有量がヒト母乳により近いタンパク質材料が得られる。スイートホエイからのＣＧＭＰの除去プロセスは、欧州特許第８８０９０２号に記載されている。

ホエイタンパク質はＤＷＰ及びＭＳＷの混合物であってよい。

いくつかの実施形態では、栄養組成物中のカゼインの量は検出不可能であり、例えば、０．２ｍｇ／ｋｇ未満である。カゼインの量は、当業者に既知の任意の方法によって特定され得る。

加水分解度
加水分解タンパク質は、加水分解反応が実施される程度により、「部分的に加水分解された」又は「高度に加水分解された」として評価され得る。現在、ＷＡＯ（国際アレルギー学会）による牛乳タンパク質アレルギー（ＣＭＡ）についてのガイドラインに準拠する、高度加水分解生成物は、法律上／臨床上の定義合意には至っていないものの、かかる加水分解フォーミュラは、ＣＭＡに罹患している小児のためのタンパク質源として有用であることが証明されており、広く使用されていることが認められる。本発明において、部分加水分解タンパク質は、タンパク質／ペプチド集団の６０～７０％が１０００ダルトン未満の分子量を有するタンパク質であり、一方、高度加水分解タンパク質は、タンパク質／ペプチド集団の少なくとも９５％が１０００ダルトン未満の分子量を有するタンパク質である。現在、工業界ではこれらの定義が使用されている。部分加水分解タンパク質は、通常、低アレルギー性（ＨＡ）であると考えられ、一方、広度加水分解タンパク質は、通常、非アレルギー性であると考えられている。

本発明の加水分解されたタンパク質は、ＮＰＮ／ＴＮ％により特徴づけられる加水分解度を有し得る。全窒素に対する非タンパク質窒素は、酵素加水分解によって生成される可溶性ペプチドの尺度として広く使用されている。ＮＰＮ／ＴＮ％は、非タンパク質窒素を全窒素で除したものに１００を乗じたものを意味する。ＮＰＮ／ＴＮ％は、Ａｄｌｅｒ－Ｎｉｓｓｅｎ Ｊ－，１９７９，Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍ．，２７（６），１２５６～１２６２に記載のとおりに測定され得る。概して、高度加水分解タンパク質は、９５％超のＮＰＮ／ＴＮ％を有するものとして特徴づけられる一方、部分加水分解タンパク質は、７５％～８５％の範囲のＮＰＮ／ＴＮ％を有するものとして特徴づけられる。部分加水分解タンパク質はまた、それらのタンパク質／ペプチド集団のうちの少なくとも６０～７０％が１０００ダルトン未満の分子量を有することを特徴とし得る。

好適な実施形態では、タンパク質は、９０％超、９５％超、又は９８％超のＮＰＮ／ＴＮ％を有し得る。「高度」加水分解タンパク質が所望される好ましい実施形態では、本発明の加水分解タンパク質は、９５％を超える範囲のＮＰＮ／ＴＮ％を有する。好適には、タンパク質は、９０％超、９５％超、又は９８％超のＮＰＮ／ＴＮ％を有し得る。これらの高度加水分解タンパク質はまた、それらのタンパク質／ペプチド集団のうちの少なくとも９５％が１０００ダルトン未満の分子量を有することを特徴とし得る。

加水分解の程度はまた、加水分解度によって特定され得る。「加水分解度」（ＤＨ）は、タンパク質加水分解物中の切断されたペプチド結合の割合として定義され、当業者に既知の任意の方法によって特定され得る。好適には、加水分解度は、ｐＨスタット、トリニトロベンゼンスルホン酸（ＴＮＢＳ）、ｏ－フタルジアルデヒド（ＯＰＡ）、トリクロロ酢酸可溶性窒素（ＳＮ－ＴＣＡ）、又はホルモール滴定法によって特定される。（Ｒｕｔｈｅｒｆｕｒｄ，Ｓ．Ｍ．（２０１０）Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ＡＯＡＣ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ９３（５）：１５１５－１５２２）。タンパク質の加水分解度（ＤＨ）は、例えば、９０超、９５超、又は９８超であり得る。

加水分解の程度はまた、ペプチド分子量分布によって特定され得る。ペプチド分子量分布は、高性能サイズ排除クロマトグラフィーによって、任意にＵＶ検出器を用いて（ＨＰＳＥＣ／ＵＶ）特定され得る（Ｊｏｈｎｓ，Ｐ．Ｗ．ｅｔ ａｌ．（２０１１）Ｆｏｏｄ ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ １２５（３）：１０４１－１０５０）。例えば、ペプチド分子量分布は、２０５ｎｍ、２１４ｎｍ、又は２２０ｎｍで特定されたＨＰＳＥＣピーク面積ベースの推定値であり得る。好適には、ペプチド分子量分布がＨＰＳＥＣ／ＵＶによって特定される場合、ある特定の分子量を有する「ペプチドの重量パーセント」は、２０５ｎｍ、２１４ｎｍ、又は２２０ｎｍで特定された、その分子量を有する「総ピーク面積の百分率としてのピーク面積の分率」によって推定され得る。好適には、加水分解の程度は、国際公開第２０１６／１５６０７７号に記載されている方法によって特定され得る。あるいは、ペプチド分子量分布は、当業者に既知の任意の方法、例えば、ドデシル硫酸ナトリウム－ポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）によって特定され得る（Ｃｈａｕｖｅａｕ，Ａ．ｅｔ ａｌ．（２０１６）Ｐｅｄｉａｔｒｉｃ Ａｌｌｅｒｇｙ ａｎｄ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ２７（５）：５４１－５４３）。

理論的には、細胞膜結合型ＩｇＥと結合するためには、ペプチドは約１５００Ｄａ（約１５アミノ酸）を超えるサイズである必要があり、ＩｇＥ分子を架橋して免疫反応を誘導するためには、約３０００Ｄａ（約３０アミノ酸）を超えるサイズである必要がある（Ｎｕｔｔｅｎ（２０１８）ＥＭＪ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｉｍｍｕｎｏｌ ３（１）：５０－５９）。

したがって、好適には、ｅＨＦ中のペプチドの少なくとも約９５重量％、少なくとも約９８重量％、少なくとも約９９重量％、又は約１００重量％は、約３０００Ｄａ未満の分子量を有する。例えば、ｅＨＦ中には約３０００Ｄａ以上のサイズの検出可能なペプチドは存在し得ない。

したがって、好適には、ｅＨＦ中のペプチドの少なくとも約９５重量％、少なくとも約９８重量％、少なくとも約９９重量％、又は約１００重量％は、約１５００Ｄａ未満の分子量を有する。好ましくは、ペプチドの少なくとも９９重量％は、約１５００Ｄａ未満の分子量を有する。例えば、ｅＨＦ中には約１５００Ｄａ以上のサイズの検出可能なペプチドは存在し得ない。

好ましくは、ｅＨＦ中のペプチドの少なくとも約８５重量％、少なくとも約９０重量％、少なくとも約９５重量％、少なくとも約９８重量％、又は少なくとも約９９重量％は、約１２００Ｄａ未満の分子量を有する。より好ましくは、ｅＨＦ中のペプチドの少なくとも９５重量％又は９８重量％は、約１２００Ｄａ未満の分子量を有する。

好適には、ｅＨＦ中のペプチドの少なくとも約８０重量％、少なくとも約８５重量％、少なくとも約９０重量％、又は少なくとも約９５重量％は、約１０００Ｄａ未満の分子量を有する。好ましくは、ｅＨＦ中のペプチドの少なくとも約９５重量％は、約１０００Ｄａ未満の分子量を有する。

好ましくは、ｅＨＦは、約３０００Ｄａ以上のサイズの検出可能なペプチドを有しておらず、ペプチドの少なくとも約９５重量％は、約１２００Ｄａ未満の分子量を有する。

ジペプチド及びトリペプチドの割合が高いと、腸機能障害のある患者でも窒素（タンパク質）吸収が改善され得る。ＰＥＰＴ１は、低分子ペプチド（例えば、ジペプチド及びトリペプチド）の吸収を促進する専用の輸送経路である。生後数週間においては、腸のＰＥＰＴ１は栄養摂取に重要であり、その後は離乳後の食移行に重要である。

したがって、ｅＨＦ中のペプチドの少なくとも約３０重量％、少なくとも約４０重量％、又は少なくとも約５０重量％は、ジペプチド及びトリペプチドであり得る。好ましくは、ｅＨＦ中のペプチドの少なくとも約４５重量％、少なくとも約５０重量％、４５～５５重量％、又は５０～５４重量％は、ジペプチド及びトリペプチドである。より好ましくは、ｅＨＦ中のペプチドの約５１～５３重量％、又はより好ましくは約５２重量％は、ジペプチド及びトリペプチドである。

好適には、ｅＨＦ中のペプチドの少なくとも約３０重量％、少なくとも約４０重量％、又は少なくとも約５０重量％は、２４０～６００Ｄａの分子量を有する。好ましくは、ｅＨＦ中のペプチドの少なくとも約４５重量％、少なくとも約５０重量％、４５～５５重量％、又は５０～５４重量％は、２４０～６００Ｄａの分子量を有する。より好ましくは、ｅＨＦ中のペプチドの約５１～５３重量％、又は最も好ましくは、約５２重量％は、２４０～６００Ｄａの分子量を有する。

ｅＨＦ中のペプチドは、例えば、３００Ｄａ～３７０Ｄａ、好ましくは３２０Ｄａ～３６０Ｄａの分子量中央値を有し得る。

主要な牛乳アレルゲンとしては、α－ラクトアルブミン（ａＬＡ）、β－ラクトグロブリン（ｂＬＧ）、及びウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）が認識されている。

したがって、好適には、ｅＨＦは、検出不可能なａＬＡ含有量、例えば、約０．０１０ｍｇ／ｋｇ以下のａＬＡを有し得、ｅＨＦは、検出不可能なｂＬＧ含有量、例えば、約０．０１０ｍｇ／ｋｇ以下のｂＬＧを有し得、及び／又はｅＨＦは、検出不可能なＢＳＡ含有量、例えば、約０．０１０ｍｇ／ｋｇ以下のＢＳＡを有し得る。好ましくは、ｅＨＦは、検出可能な量のａＬＡ、ｂＬＧ、及びＢＳＡを含まない。ａＬＡ、ｂＬＧ、及びＢＳＡの含有量は、当業者に既知の任意の方法、例えばＥＬＩＳＡによって特定され得る。

加水分解方法
栄養組成物、好ましくは本発明の乳児用フォーミュラに使用するためのタンパク質は、当該技術分野において既知の任意の好適な方法によって加水分解され得る。例えば、タンパク質は、例えばプロテアーゼを使用して、酵素加水分解され得る。例えば、タンパク質は、アルカラーゼを使用して加水分解され得る（例えば、約１～１５重量％の酵素：基質比で、約１～１０時間の持続時間）。温度は、約４０℃～６０℃の範囲、例えば、約５５℃であり得る。反応時間は、例えば、１～１０時間であり得、加水分解を開始する前のｐＨ値は、例えば、６～９、好ましくは６．５～８．５、より好ましくは７．０～８．０の範囲内にあり得る。

加水分解プロセスには、ブタ酵素、特にブタ膵臓酵素が使用され得る。例えば、国際公開第１９９３００４５９３（Ａ１）号は、トリプシン及びキモトリプシンを使用した加水分解プロセスについて開示している。このプロセスには２ステップの加水分解反応が含まれており、２ステップの間には、最終的な加水分解物を、未処理のアレルゲン性タンパク質を実質的に含まないものにすることを担保すべく、熱変性ステップが含まれている。これらの方法に使用されるトリプシン及びキモトリプシンは、ブタ膵臓抽出物により製造される調製物である。

国際公開第２０１６１５６０７７（Ａ１）号は、乳ベースのタンパク性材料を、微生物由来アルカリセリンプロテアーゼと、ブロメライン、アスペルギルス属（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）由来のプロテアーゼ、及びバシラス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）由来のプロテアーゼとの組み合わせにより加水分解することを含む、乳タンパク質加水分解物の調製プロセスについて開示している。

遊離アミノ酸
本発明の栄養組成物は、遊離アミノ酸を含み得る。

遊離アミノ酸の濃度は、乳児栄養に十分なアミノ酸プロファイル、特に栄養規則（例えば、欧州委員会指令２００６／１４１／ＥＣ）を満たすアミノ酸プロファイルを提供するように選択され得る。

遊離アミノ酸は、ペプチドに含まれるアミノ酸を補充するために本発明のｅＨＦに組み込まれ得る。

本発明の栄養組成物に使用するための遊離アミノ酸の例としては、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、システイン、フェニルアラニン、チロシン、スレオニン、トリプトファン、バリン、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、プロリン、セリン、カルニチン、タウリン、及びそれらの混合物が挙げられる。

遊離アミノ酸は、タンパク質と同等の供給源を提供する（すなわち、窒素含有量に寄与する）。上記のように、ジペプチド及びトリペプチドの割合が高いと、腸機能障害のある患者でも、窒素（タンパク質）吸収が改善され得る。したがって、遊離アミノ酸の割合が低いと、腸機能障害のある患者でも、窒素（タンパク質）吸収が改善され得る。

したがって、好適には、ｅＨＦ中の遊離アミノ酸は、アミノ酸の総重量に基づいて、５０重量％以下、４０重量％以下、３０重量％以下、又は２５重量％以下の濃度で存在し得る。好ましくは、ｅＨＦは、アミノ酸の総重量に基づいて、２５重量％以下の遊離アミノ酸を含む。より好ましくは、ｅＨＦ中の遊離アミノ酸は、アミノ酸の総重量に基づいて、２０～２５重量％、２１～２３重量％、又は約２２重量％の濃度で存在する。

遊離アミノ酸含有量は、当業者に既知の任意の方法によって特定され得る。好適には、遊離アミノ酸含有量は、イオン交換クロマトグラフィーによる水性サンプル抽出物中に存在する遊離アミノ基の分離及びニンヒドリン試薬によるポストカラム誘導体化後の光検出によって得られ得る。総アミノ酸含有量は、窒素下、６ｍｏｌ／ＬのＨＣｌ中での試験部分の加水分解によって、及び上記のようにイオン交換クロマトグラフィーによる個々のアミノ酸の分離によって得られ得る。

炭水化物
炭水化物は、栄養組成物における使用に好適な任意の炭水化物であり得る。

本発明の栄養組成物、特に本発明の乳児用フォーミュラの炭水化物含量は、好ましくは１００ｋｃａｌ当たり９～１４ｇ炭水化物の範囲である。

栄養組成物に使用するための炭水化物の例としては、ラクトース、サッカロース、マルトデキストリン、及びデンプンが挙げられる。炭水化物の混合物を使用してもよい。

いくつかの実施形態では、炭水化物含有量は、マルトデキストリンを含む。いくつかの実施形態では、総炭水化物含有量の少なくとも約２０重量％、少なくとも約２５重量％、少なくとも約３０重量％、少なくとも約３５重量％、少なくとも約４０重量％、少なくとも約５０重量％、少なくとも約６０重量％、又は少なくとも約７０重量％は、マルトデキストリンである。

いくつかの実施形態では、炭水化物含有量は、ラクトースを含む。いくつかの実施形態では、総炭水化物含有量の少なくとも約２０重量％、少なくとも約２５重量％、少なくとも約３０重量％、少なくとも約３５重量％、少なくとも約４０重量％、少なくとも約５０重量％、少なくとも約６０重量％、又は少なくとも約７０重量％は、ラクトースである。

いくつかの実施形態では、炭水化物は、ラクトース及びマルトデキストリンを含む。

脂肪
本発明の栄養組成物、特に本発明の乳児用フォーミュラの脂肪含量は、好ましくは１００ｋｃａｌ当たり４．０～６．０ｇ脂肪の範囲である。

本発明の栄養組成物に使用するための脂肪の例としては、ヒマワリ油、低エルカ酸菜種油、ベニバナ油、キャノーラ油、オリーブ油、ココナッツ油、パーム核油、大豆油、魚油、パームオレイン油（ｐａｌｍ ｏｌｅｉｃ）、高オレイン酸ヒマワリ油及び高オレイン酸ベニバナ油、並びに長鎖多価不飽和脂肪酸を含有する微生物発酵油（ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｏｉｌ）が挙げられる。

脂肪はまた、パームオレイン、中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）、及び脂肪酸（例えば、アラキドン酸、リノール酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ドコサヘキサエン酸、リノレン酸、オレイン酸、ラウリン酸、カプリン酸、カプリル酸、カプロン酸など）のエステルなどのこれらの油に由来する画分の形態であり得る。

更なる脂肪の例としては、構造化脂質（すなわち、構造を変化させるための化学的又は酵素的な修飾を受けた脂質）が挙げられる。好ましくは、構造化脂質は、ｓｎ２構造化脂質であり、例えば、トリグリセリドのｓｎ２位にパルミチン酸を有する割合が高められているトリグリセリドが含まれる。構造化脂質は、添加してもよく、又は含めなくてもよい。

あらかじめ形成されたアラキドン酸（ＡＲＡ）及び／又はドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）を多量に含有する魚油又は微生物油などの油を添加してもよい。

ジホモ－γ－リノレン酸、アラキドン酸（ＡＲＡ）、エイコサペンタエン酸、及びドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）などの長鎖多価不飽和脂肪酸を添加してもよい。

中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）
高濃度のＭＣＴは、早期の体重増加を損なう可能性がある。ＭＣＴは蓄積されず、脂肪の蓄積をサポートしない。例えば、Ｂｏｒｓｃｈｅｌらは、ＭＣＴを含まないフォーミュラを与えられた乳児は、ＭＣＴ由来の脂肪を５０％含有するフォーミュラを与えられた乳児よりも、１～５６日の間に有意により多い体重の増加を示したと報告している（Ｂｏｒｓｃｈｅｌ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．（２０１８）Ｎｕｔｒｉｅｎｔｓ １０（３）：２８９）。

したがって、本発明の栄養組成物において、脂肪の約３０重量％以下は、例えば、中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）であり得る。

いくつかの実施形態では、中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）は、脂肪の約２５重量％以下、２０重量％以下、１５重量％以下、１０重量％以下、５重量％以下、４重量％以下、３重量％以下、２重量％以下、１重量％以下、０．５重量％以下、又は０．１重量％以下である。

いくつかの実施形態では、中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）は、脂肪の０～３０重量％、０～２５重量％、０～２０重量％、０～１５重量％、０～１０重量％、０～５重量％、０～４重量％、０～３重量％、０～２重量％、０～１重量％、０～０．５重量％、又は０～０．１重量％である。

いくつかの実施形態では、栄養組成物は、添加されたＭＣＴを含まない。好適には、脂肪の約０重量％がＭＣＴであり、かつ／又は組成物は検出可能なＭＣＴを含まない。好適には、栄養組成物は、ＭＣＴを含まない。

更なる成分
本発明の栄養組成物、特に乳児用フォーミュラ又は幼児用フォーミュラはまた、毎日の食生活において及び栄養上相当の量で必須であると理解されている全てのビタミン及びミネラルを含有し得る。特定のビタミン及びミネラルに関しては、最小必要量が確立されている。

本発明の栄養組成物、特に本発明の乳児用フォーミュラに使用するためのビタミン、ミネラル、及びその他の栄養素の例としては、ビタミンＡ、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２、ビタミンＥ、ビタミンＫ、ビタミンＣ、ビタミンＤ、葉酸、イノシトール、ナイアシン、ビオチン、パントテン酸、コリン、カルシウム、リン、ヨウ素、鉄、マグネシウム、銅、亜鉛、マンガン、塩素、カリウム、ナトリウム、セレン、クロム、モリブデン、タウリン、及びＬ－カルニチンが挙げられる。ミネラルは、通常、その塩形態で添加される。

栄養組成物は、１種以上のカロテノイドを含み得る。

本発明の栄養組成物はまた、少なくとも１種のプロバイオティクスを含み得る。「プロバイオティクス」という用語は、宿主の健康又はウェル・ビーイングに有益な効果を有する微生物細胞の調製物又は微生物細胞の成分を指す。具体的には、プロバイオティクスは、腸内バリア機能を改善することができる。

本発明の栄養組成物に使用するためのプロバイオティック微生物の例としては、サッカロミセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）、デバロミセス（Ｄｅｂａｒｏｍｙｃｅｓ）、カンジダ（Ｃａｎｄｉｄａ）、ピキア（Ｐｉｃｈｉａ）及びトルロプシス（Ｔｏｒｕｌｏｐｓｉｓ）などの酵母、並びにビディドバクテリウム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、バクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）、フゾバクテリウム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、メリソコッカス（Ｍｅｌｉｓｓｏｃｏｃｃｕｓ）、プロピオニバクテリウム（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、ストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）属などの細菌が挙げられる。

好ましいプロバイオティクスは、全体として安全であり、Ｌ（＋）乳酸産生培養物であり、２４ヶ月まで安定かつ有効なままであることが必要とされる製品について許容可能な貯蔵寿命を有するものであり、エンテロコッカス属（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）、ラクトコッカス属（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ）、スタフィロコッカス属（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）、ペプトストレプトコッカス属（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｏｃｏｃｃｕｓ）、バシラス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、ペディオコッカス属（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ）、マイクロコッカス属（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ）、ロイコノストック属（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）、ワイセラ属（Ｗｅｉｓｓｅｌｌａ）、アエロコッカス属（Ａｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）、オエノコッカス属（Ｏｅｎｏｃｏｃｃｕｓ）及びラクトバシラス属（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）が挙げられる。

好適なプロバイオティクス微生物の具体例は、サッカロミセス・セレビジエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｅａｅ）、バシラス・コアグランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｏａｇｕｌａｎｓ）、バシラス・リケニフォルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）、バシラス・ズブティリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、ビフィドバクテリウム・ビフィダム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｉｆｉｄｕｍ）、ビフィドバクテリウム・インファンティス（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｉｎｆａｎｔｉｓ）、ビフィドバクテリウム・ロンガム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｏｎｇｕｍ）、エンテロコッカス・フェシウム（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃｉｕｍ）、エンテロコッカス・フェカリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）、ラクトバシラス・アシドフィラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）、ラクトバシラス・アリメンタリウス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ａｌｉｍｅｎｔａｒｉｕｓ）、ラクトバシラス・カゼイ亜種カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ ｓｕｂｓｐ．ｃａｓｅｉ）、ラクトバシラス・カゼイ・シロタ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ Ｓｈｉｒｏｔａ）、ラクトバシラス・クルバトゥス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｕｒｖａｔｕｓ）、ラクトバシラス・デルブルキ亜種ラクティス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒｕｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｌａｃｔｉｓ）、ラクトバシラス・ファルシミナス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｆａｒｃｉｍｉｎｕｓ）、ラクトバシラス・ガゼリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｇａｓｓｅｒｉ）、ラクトバシラス・ヘルベティクス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｈｅｌｖｅｔｉｃｕｓ）、ラクトバシラス・ジョンソニ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｊｏｈｎｓｏｎｉｉ）、ラクトバシラス・ラムノサス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｒｈａｍｎｏｓｕｓ） （ラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ） ＧＧ） 、ラクトバシラス・サケ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｓａｋｅ）、ラクトバシラス・ラクティス（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔｉｓ）、ミクロコッカス・バリアンス（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ ｖａｒｉａｎｓ）、ペディオコッカス・アシディラクティシ（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ ａｃｉｄｉｌａｃｔｉｃｉ）、ペディオコッカス・ペントサセウス（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｎｔｏｓａｃｅｕｓ）、ペディオコッカス・アシディラクティシ（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ ａｃｉｄｉｌａｃｔｉｃｉ）、ペディオコッカス・ハロフィラス（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ ｈａｌｏｐｈｉｌｕｓ）、ストレプトコッカス・フェカリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）、スタフィロコッカス・カルノスス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｃａｒｎｏｓｕｓ）及びスタフィロコッカス・キシロスス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｘｙｌｏｓｕｓ）、ラクチカゼイバシラス・ラムノスス（Ｌａｃｔｉｃａｓｅｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｒｈａｍｎｏｓｕｓ）、ラクチカゼイバシラス・パラカゼイ（Ｌａｃｔｉｃａｓｅｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐａｒａｃａｓｅｉ）、リモシラクトバシリア（Ｌｉｍｏｓｉｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｉａ）、アケルメムシア（Ａｋｋｅｒｍｅｍｓｉａ）、クロストリダレス（Ｃｌｏｓｔｒｉｄａｌｅｓ）、プレボテラ（Ｐｒｅｂｏｔｅｌｌａ）である。

本発明の栄養組成物はまた、プレバイオティクス、ラクトフェリン、繊維、ヌクレオチド、及びヌクレオシドなどの、有益な効果を有し得る他の物質を含有し得る。

ＩＬ－１０及びアレルギー感作
本発明者らは、驚くべきことに、ＨＭＯの特定の組合せがインターロイキン－１０（ＩＬ－１０）を誘導するのに最も有効であり、それによってアレルゲンに対するアレルギー感作を低減し、アレルゲンに対する耐性を誘導するのに有用であることを見出した。

ＩＬ－１０は、アレルギー、感染に関連する免疫病理及び自己免疫から宿主を保護するのに重要な多面的な免疫調節サイトカインである。

ＩＬ－１０は、当初、Ｔヘルパー（ＴＨ）２特異的であるとして評価された。しかしながら、さらなる調査により、ＩＬ－１０産生はＴ調節性（Ｔｒｅｇ）細胞応答にも関連することが明らかになった。ＩＬ－１０欠損マウスは、抗原に対して長期の過度の免疫応答を示し、その多くの場合に過剰な炎症及び組織損傷を伴い、またしばしば慢性腸炎を発症する（Ｋｕｈｎ ｅｔ ａｌ．，１９９３，Ｃｅｌｌ ７５，２６３－２７４、Ｌｅｏｎ ｅｔ ａｌ．，１９９８，Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８５６，６９－７５）。ＲＡ（Ｈａｊｅｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９９８，Ｓｃａｎｄ．Ｊ．Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．２７，１４２－１４５）、重症喘息（Ｌｉｍ ｅｔ ａｌ．，１９９８，Ｌａｎｃｅｔ ３５２，１１３）、及びＳＬＥ（Ｇｉｂｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，２００１，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６６，３９１５－３９２２）を有する患者では、ＩＬ－１０のｍＲＮＡの低発現に関連する一塩基多型（ＳＮＰ）も過剰に示されている。

胸腺及び末梢で生成されたＦｏｘＰ３＋制御性Ｔ細胞は、ＩＬ－１０を分泌する（Ｓｋｙ Ｎｇ ｅｔ ａｌ．，３１ Ｍａｙ ２０１３）。

ＴＨ２細胞によって分泌されるサイトカインＩＬ－４、ＩＬ－５、及びＩＬ－１３は、寄生虫感染に関連して防御免疫を提供するが、ＩｇＥの産生を増強することによってアレルギー反応を開始、増幅、及び延長し、好酸球及び肥満細胞の動員、増殖、及び分化に関与する（Ｒｏｂｉｎｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，１９９２，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３２６，２９８－３０４、Ｒｏｍａｇｎａｎｉ，１９９４，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１２，２２７－２５７、Ｎｏｒｔｈｒｏｐ ｅｔ ａｌ．，２００６，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７７，１０６２－１０６９）。トリチュリス・ムリス（Ｔｒｉｃｈｕｒｉｓ ｍｕｒｉｓ）及びＴ．クルジィ（Ｔ．ｃｒｕｚｉｉ）などの実験的なＴＨ２誘導性寄生生物感染の初期の研究は、致死的なＴ細胞応答を予防する際のＩＬ－１０の重要な役割を実証している（Ｓｃｈｏｐｆ ｅｔ ａｌ．，２００２，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６８，２３８３－２３９２）。

ＴＨ２由来ＩＬ－１０は、アレルギー反応中のＩＬ－４及びＩＬ－１３の下方制御に関連する（Ｇｒｕｎｉｇ ｅｔ ａｌ．，１９９７，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１８５，１０８９－１１００、Ｊｕｔｅｌ ｅｔ ａｌ．，２００３，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３３，１２０５－１２１４、Ａｋｄｉｓ ｅｔ ａｌ．，２００４，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１９９，１５６７－１５７５）。アレルギー性肺炎症のマウスモデルにおいて、ＩＬ－１０は、ＴＨ２応答を抑制するのに重要である（Ｇｒｕｎｉｇら、１９９７）。アスペルギルス・フミガーツス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）のアレルゲンを繰り返し吸入した後のＩＬ－１０ノックアウトマウス由来の肺細胞及び気管支肺胞洗浄（ＢＡＬ）液では、より高レベルのＩＬ－４、ＩＬ－５、及びＩＦＮ－γが産生され、気道炎症の悪化をもたらした（Ｇｒｕｎｉｇ ｅｔ ａｌ．，１９９７）。加えて、喘息患者から単離された肺胞マクロファージは、非喘息患者由来のものと比較してより低レベルでＩＬ－１０を分泌する（Ｂｏｒｉｓｈ，１９９８、Ｊｏｈｎ ｅｔ ａｌ．，１９９８，Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｒｉｔ．Ｃａｒｅ Ｍｅｄ．１５７，２５６－２６２）。

ＩＬ－１０は、抗原特異的治療による耐性を首尾よく介するという重要な役割を果たす。例えば、ＯＶＡに由来するペプチドの鼻腔内投与は、ＴＨ２により駆動されるＯＶＡ／ミョウバン誘導性気道知覚過敏（ＡＨＲ）の症状を低減することができる（Ａｋｂａｒｉ ｅｔ ａｌ．，２００１）。ＡＨＲからの保護は、インビトロにおいてＩＬ－４及びＩＬ－１０を分泌するＯＶＡ特異的ＣＤ４＋Ｔ細胞を誘導する能力を有し、ＩＬ－１０を分泌する肺ＤＣの誘導と関連する（Ａｋｂａｒｉ ｅｔ ａｌ．，２００１）。耐性誘導中のＩＬ－１０の中和は、ＯＶＡ特異的ＩｇＥ産生の上昇をもたらし、ＯＶＡ投与の防御効果を打ち消す（Ｖｉｓｓｅｒｓ ｅｔ ａｌ．，２００４，Ｊ．Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１１３，１２０４－１２１０）。ヒトにおいて成功したアレルゲン特異的免疫療法（ＳＩＴ）、例えば、イネ科植物花粉又はチリダニアレルギーの処置におけるその療法は、ＩＬ－１０分泌ＣＤ４＋Ｔ細胞の生成と関連がある（Ｊｕｔｅｌ ｅｔ ａｌ．，２００３，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３３，１２０５－１２１４）。ＩＬ－１０は、ＩＬ－４の下方制御、ＤＣ上のＭＨＣクラスＩＩによる抗原提示の阻害、並びにＣＤ２８、ＩＣＯＳ、及びＣＤ２を含む共刺激分子の発現の抑制によって、ＴＨ２応答を制限する（Ｔａｙｌｏｒ ｅｔ ａｌ．，２００７，Ｊ．Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１２０，７６－８３）。ナイーブＣＤ４＋Ｔ細胞においてｓｒｃ相同性ホスファターゼ（ＳＨＰ）－１に介在されるこの制限は、ＩＬ－１０がエフェクター応答を調節することができ、またナイーブＣＤ４＋Ｔ細胞からのＴＨ２細胞の分化を防止できることを示唆している（Ｔａｙｌｏｒ ｅｔ ａｌ．，２００７）。

本発明の栄養組成物は、インターロイキンＩＬ－１０介在性疾患を治療し、予防し、又はそのリスクを低減するために使用することができる。免疫調節におけるＩＬ－１０の重要な役割は、アレルギー性疾患の予防にとどまらず、炎症性腸疾患及び自己免疫疾患を含む他の疾患にまで及ぶ。ＩＢＤに関しては、ＩＬ－１０欠損マウスが大腸炎を自然発症することが示されている（Ｋｕｈｎ ｅｔ ａｌ；１９９３，Ｃｅｌｌ．７５，２６３－２７４）。このプロセスは、ＩＬ－１０投与又はＩＬ－１０過剰発現によって防止することができる（Ｓｔｅｉｄｌｅｒ ｅｔ ａｌ；２０００，Ｓｃｉｅｎｃｅ．２８９，１３５２－１３５５及びＨａｇｅｎｂａｕｇｈ ｅｔ ａｌ；１９９７，Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ．１８５，２１０１－２１１０）。同様に、ヒトにおけるＩＢＤ素因は、ＩＬ－１０応答の欠損と強く関連している（Ｇｌｏｃｋｅｒ ｅｔ ａｌ；２００９，Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．３６１，２０３３－２０４５）。前臨床モデルでは、ＩＬ－１０の欠如がリウマチ性関節炎（Ｈａｔａ ｅｔ ａｌ；２００４，Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ．１１４，５８２－５８８）、狼瘡（Ｉｓｈｉｄａ ｅｔ ａｌ；１９９４，Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ．１７９，３０５－３１０）及び脳脊髄炎（Ｂｅｔｔｅｌｉ ｅｔ ａｌ；１９９８，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６１，３２９９－３３０６）の発症を悪化させたことから、一定範囲の自己免疫病理において、免疫調節におけるＩＬ－１０の重要性がさらに実証されている。

本発明の栄養組成物は、アレルゲンに対するアレルギー感作を治療又は予防するために使用され得る。

本発明の栄養組成物は、アレルゲンに対する耐性を誘導するために使用され得る。

アレルゲンの例としては、乳タンパク質、卵タンパク質、小麦タンパク質、大豆タンパク質、ピーナッツタンパク質、ナッツ類タンパク質、魚タンパク質、甲殻類タンパク質、貝類タンパク質及びゴマタンパク質が挙げられる。特に好ましいアレルゲンは、牛乳タンパク質である。

本発明の栄養組成物は、アレルギー、好ましくは牛乳アレルギーのアウトグロースを加速させるために使用され得る。

「アレルギー」という用語は、通常は耐容性がある物質（アレルゲン）に対する、免疫系の過敏症を指す。アレルギーは、医師によって診断されたアレルギーであり得る。アレルギーの例としては、食物アレルギー、アトピー性皮膚炎、湿疹、喘息及び鼻炎が挙げられる。本発明は、乳児及び小児においてそのようなアレルギー、特に、乳タンパク質、卵タンパク質、小麦タンパク質、大豆タンパク質、ピーナッツタンパク質、ナッツ類タンパク質、魚タンパク質、甲殻類タンパク質、貝類タンパク質、及びゴマタンパク質に対するアレルギーを低減することにおける使用のための、本明細書に記載の栄養組成物を提供する。本明細書で言及される特に好ましいアレルギーは、牛乳アレルギーである。

「アレルギー感作」という用語は、通常は耐容性があり、アレルギー反応の非存在下では典型的には無害である作用物質（アレルゲンとして知られる、例えば食品又は花粉中の物質）に対する、免疫系の感作を指す。したがって、アレルギー感作とは、アレルゲンを認識するための免疫系のプライミングを指し得る。このようにして感作された個体は、アレルゲンへの再曝露時にアレルギー反応を発症し得る。

本発明の栄養組成物は、対象においてアレルギー感作の発生を低減するため、及び／又は対象においてアレルギー感作を予防するために使用され得る。好ましくは、対象は乳児又は小児である。

本明細書で使用される場合、アレルギー感作の「発生を低減する」とは、栄養組成物がアレルギー感作の可能性を低減させることを意味する。

本明細書で使用される場合、アレルギー感作を「予防する」とは、対象、例えば乳児がまだ感作されておらず、栄養組成物がアレルギー感作を予防することを意味する。

いくつかの実施形態では、対象、特に乳児は、１つ以上のアレルギーを発症するリスクがある。例えば、乳児は、１つ以上のアレルギーの病歴を有する家族に属し得る。好ましくは、本発明の栄養組成物は、乳児又は幼児に投与される。好ましくは、幼児は１～３歳の小児である。

製造方法
本発明の栄養組成物は、任意の好適な方法で調製することができる。

例えば、本明細書に記載の栄養組成物は、タンパク質の供給源、炭水化物の供給源、及び脂肪の供給源を、適切な割合で一緒にブレンドすることによって調製することができる。更に乳化剤を使用する場合、この時点で含めることができる。この時点でビタミン及びミネラルを添加してもよいが、通常、ビタミンは熱分解を避けるために後で添加する。任意の親油性ビタミン及び乳化剤などを、ブレンド前に脂肪の供給源に溶解してもよい。次いで、水、好ましくは逆浸透処理した水を混合して、液体混合物を形成することができる。市販の液化装置を用いて液体混合物を形成することができる。次いで、液体混合物を均質化してもよい。

次いで、液体混合物を熱処理して、細菌含有量を低減することができる。この熱処理は、例えば、蒸気注入によって、又はオートクレーブ若しくは熱交換器、例えば、プレート熱交換器を使用して行うことができる。

次いで、液体混合物を冷却、及び／又は均質化してもよい。均質化した混合物のｐＨ及び固形分含有量は、この時点で調整することができる。

次いで、均質化した混合物を、噴霧乾燥機又は凍結乾燥機などの好適な乾燥装置に移し、粉末に変換することができる。栄養組成物が好ましい場合、均質化された混合物を滅菌し、次いで適切な容器に無菌充填してもよく、又は最初に容器に充填し、次いでレトルト処理してもよい。

当業者は、開示される本発明の範囲から逸脱することなく、本明細書に開示される本発明の全ての特徴を組み合わせることができることを理解されたい。

本発明の好ましい特徴及び実施形態を、非限定的な例によってこれより記述する。

［実施例］
実施例１
末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を単離し、以前に公開された研究に従って培養した（Ｈｏｌｖｏｅｔ ｅｔ ａｌ ２０１３ － Ｉｎｔ Ａｒｃｈ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２０１３；１６１：１４２－１５４）。健康なボランティアの献血からのバフィコートを、Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆ Ｌａｕｓａｎｎｅ（Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ ｉｎｔｅｒｅｇｉｏｎｎａｌｅ ＣＲＳ）で回収した。ヒトＰＢＭＣをバフィーコートから単離した。細胞を等体積栄養組成物懸濁した。Ｈｉｓｔｏｐａｑｕｅ（Ｓｉｇｍａ）での密度勾配遠心分離によってＰＢＭＣを単離した。間期の細胞を回収し、ＰＢＳ＋２％ＦＣＳで２回洗浄した。ＰＢＭＣを、１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ、Ｔｈｅｒｍｏｆｉｓｈｅｒ ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）、１％ペニシリン／ストレプトマイシン（Ｓｉｇｍａ）を含有する完全ＲＰＭＩ １６４０培地、ＧｌｕｔａＭＡＸ（商標）サプリメント（Ｔｈｅｒｍｏｆｉｓｈｅｒ ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）に再懸濁した。Ｔｈ２サイトカイン表現型を誘導するために、４８ウェルプレート（Ｍｉｌｉａｎ、Ｍｅｙｒｉｎ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）で、ｃＩＭＤＭ中の５０ｎｇ／ｍＬのＩＬ－４（Ｂｉｏｃｏｎｃｅｐｔ）及び１μｇ／ｍＬの抗ＣＤ４０抗体（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ、Ａｂｉｎｇｄｏｎ、ＵＫ）の存在下で細胞を１．５×１０^６個／ｍＬで培養した。ＬＰＳを１００μｇ／ｍＬで使用した。３日間の培養後、ＨＭＯの個々の混合物を最終１００μｇ／ｍＬで添加した。成分を添加した後、ＰＢＭＣの培養をさらに４８時間継続し、５日間の総培養期間とした。

Ｉｌ－１０発現レベルを図１に示す。２ＦＬ、３ＦＬ、３ＳＬ及びＬＮｎＴ；並びに２ＦＬ、３ＦＬ、３ＳＬ、ＬＮｎＴ、６ＳＬ及びＬＮＴの組合せは、最高レベルのＩＬ－１０発現をもたらした。

実施例２
樹状細胞（ＤＣ）は、適応免疫応答の開始において重要である。樹状細胞の抗原提示能力と、適切なレベルの共刺激分子の供給との組み合わせにより、樹状細胞はＴ細胞応答を運命づけることができる。免疫寛容原性ＤＣは、ＩＬ－１０、ＴＧＦ－ββ及びＩＬ－２７を含む免疫調節サイトカインを高レベルで発現し、かつ重要なことにはＴｒｅｇの分化を駆動する。これらの免疫寛容原性ＤＣは、ＣＤ８０、ＣＤ８６、及びＣＤ４０などの共刺激分子のレベルの低下、並びに阻害マーカーＰＤ－Ｌ１の発現の増加によって同定することができる（Ｔａｋｅｎａｋａ ｅｔ ａｌ；２０１７，Ｓｅｍｉ Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌ．３９，１１３－１２０）。

免疫寛容原性ＤＣの生成のために、健常ドナー由来のＰＢＭＣを用い、ＥａｓｙＳｅＰ（ＴＭ）ヒト単球単離キット（ＳＴＥＭＣＥＬＬ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用するネガティブ選抜によって単球を（上記のように）単離した。単球をＥａｓｙＳｅｐ培地（ＳＴＥＭＣＥＬＬ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）に１×１０^６個／ｍＬで再懸濁し、１：１００希釈のＩｍｍｏｃｕｌｔ^（商標）－ＡＣＦ樹状細胞分化サプリメント（ＳＴＥＭＣＥＬＬ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）の存在下で６日間、ＤＣに分化させた。６日間の培養後、ＨＭＯの混合物を１００μｇ／ｍＬで培養ＤＣに２４時間添加した。異なる表面マーカー（ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ４０、ＨＬＡ－ＤＲ、ＰＤ－Ｌ１及びＯＸ－４０Ｌ）の発現をフローサイトメトリーによって測定して、免疫寛容原性ＤＣを同定した。２ＦＬ、３ＦＬ、３ＳＬ及びＬＮｎＴの混合物、並びに２ＦＬ、３ＦＬ、３ＳＬ、ＬＮｎＴ、６ＳＬ及びＬＮＴの混合物は、免疫寛容原性レベルのＣＤ８６、ＰＤ－Ｌ１及びＣＤ４０などのＤＣマーカーを誘導した（図２）。

興味深いことに、ＣＤ４０、ＨＬＡＤＲ、ＯＸ４０Ｌ及びＰＤ－Ｌ１などのＤＣマーカーの免疫寛容原性レベルの誘導では、４種の混合物の場合には６７％ ２’ＦＬ、１７％ ３ＦＬ、８％ ３’ＳＬ、７％ ＬＮＴ、又は６種の混合物の場合には４６％ ２’ＦＬ、１２％ ３ＦＬ、６％ ３’ＳＬ、１２％ ６’ＳＬ、５％ ＬＮｎｔ、２０％ ＬＮＴという特定の比が、等モル比のＨＭＯよりも有効であった（図３参照）。

Claims (15)

1. ヒト乳オリゴ糖（ＨＭＯ） ２’－フコシルラクトース（２ＦＬ）、３’－フコシルラクトース（３ＦＬ）、３’－シアリルラクトース（３ＳＬ）、及びラクト－Ｎ－ネオテトラオース（ＬＮｎＴ）を含む栄養組成物であって、好ましくは乳児又は小児において、アレルゲンに対する耐性を誘導すること、及び／又はアレルギーのアウトグロースを加速させること、及び／又はインターロイキンＩＬ－１０介在性疾患を治療若しくはそのリスクを低減することにおける使用のための栄養組成物。
2. 前記栄養組成物中の前記ヒト乳オリゴ糖（ＨＭＯ）が、２ＦＬ、３ＦＬ、３ＳＬ、及びＬＮｎＴからなる、請求項１に記載の使用のための栄養組成物。
3. ２’－フコシルラクトース（２ＦＬ）、３’－フコシルラクトース（３ＦＬ）、３’－シアリルラクトース（３ＳＬ）、ラクト－Ｎ－ネオテトラオース（ＬＮｎＴ）、６’－シアリルラクトース（６ＳＬ）及びラクト－Ｎ－テトラオース（ＬＮＴ）を含む、請求項１に記載の使用のための栄養組成物。
4. 前記栄養組成物中の前記ＨＭＯが、２ＦＬ、３ＦＬ、３ＳＬ、ＬＮｎＴ、６ＳＬ及びＬＮＴからなる、請求項３に記載の使用のための栄養組成物。
5. 前記栄養組成物中の前記ＨＭＯが、
   ｉ．約４０重量％～約８０重量％、好ましくは約５５重量％～約７５重量％、好ましくは約６５重量％～約７０重量％の２ＦＬ、
   ｉｉ．約２重量％～約１５重量％、好ましくは約４重量％～約１２重量％、好ましくは約６重量％～約９重量％のＬＮｎＴ、
   ｉｉｉ．約５重量％～約３０重量％、好ましくは約１０重量％～約２５重量％、好ましくは約１５重量％～約２０重量％の３ＦＬ、及び
   ｉｖ．約２重量％～約１５重量％、好ましくは約４重量％～約１２重量％、好ましくは約７重量％～約９重量％の３ＳＬ、からなる、請求項１又は２に記載の使用のための栄養組成物。
6. 前記栄養組成物中の前記ＨＭＯが、
   ｉ．約３５重量％～約６０重量％、好ましくは約４０重量％～約５０重量％、好ましくは約４３重量％～約４７重量％の２ＦＬ、
   ｉｉ．約１重量％～約１０重量％、好ましくは約３重量％～約７重量％、好ましくは約４重量％～約６重量％のＬＮｎＴ、
   ｉｉｉ．約１０重量％～約３０重量％、好ましくは約１５重量％～約２５重量％、好ましくは約１８重量％～約２２重量％のＬＮＴ、
   ｉｖ．約３重量％～約２０重量％、好ましくは約７重量％～約１５重量％、好ましくは約１０重量％～約１３重量％の３ＦＬ、
   ｖ．約１重量％～約１０重量％、好ましくは約４重量％～約８重量％、好ましくは約５重量％～約７重量％の３ＳＬ、及び
   ｖｉ．約５重量％～約２０重量％、好ましくは約７重量％～約１５重量％、好ましくは約１０重量％～約１４重量％の６ＳＬ、からなる、請求項１、３又は４に記載の使用のための栄養組成物。
7. 前記栄養組成物が、乳児用フォーミュラ、スターター乳児用フォーミュラ、フォローオン若しくはフォローアップ乳児用フォーミュラ、グローイングアップミルク、強化剤又はサプリメントである、請求項１～６のいずれか一項に記載の使用のための栄養組成物。
8. 栄養組成物中に存在する２ＦＬ、３ＦＬ、３ＳＬ及びＬＮｎＴの総量が１０μｇ／ｍＬ～１００００μｇ／ｍＬ、好ましくは５０μｇ／ｍＬ～５０００μｇ／ｍＬの濃度である、請求項１、２もしくは５に記載の使用のための栄養組成物、又は栄養組成物中に存在する２ＦＬ、３ＦＬ、３ＳＬ、ＬＮｎＴ、６ＳＬ及びＬＮＴの総量が１０μｇ／ｍＬ～１００００μｇ／ｍＬ、好ましくは５０μｇ／ｍＬ～５０００μｇ／ｍＬの濃度である、請求項１、３、４もしくは６に記載の使用のための栄養組成物であって、前記栄養組成物が乳児用フォーミュラ又は幼児用フォーミュラである、栄養組成物。
9. 前記栄養組成物が、高度加水分解フォーミュラ（ｅＨＦ）又はアミノ酸ベースフォーミュラ（ＡＡＦ）である、請求項１～８のいずれか一項に記載の使用のための栄養組成物。
10. 請求項１～９のいずれか一項に記載の使用のための栄養組成物であって、前記栄養組成物が、乳児用又は幼児用フォーミュラであり、
    （ａ）１００ｋｃａｌ当たり１．６～３．２ｇのタンパク質、
    （ｂ）１００ｋｃａｌ当たり９～１４ｇの炭水化物、及び／又は
    （ｃ）１００ｋｃａｌ当たり４．０～６．０ｇの脂肪
    を含む、栄養組成物。
11. アレルゲンに対する耐性を誘導することにおける使用のための、請求項１～１０のいずれかに記載の栄養組成物であって、好ましくは前記アレルゲンが牛乳タンパク質である、栄養組成物。
12. アレルギー、好ましくは牛乳アレルギーのアウトグロースを加速させることにおける使用のための、請求項１～１０のいずれか一項に記載の栄養組成物。
13. インターロイキンＩＬ－１０介在性疾患を治療すること又はそのリスクを低減することにおける使用のための、請求項１～１０のいずれか一項に記載の使用のための栄養組成物。
14. ２’－フコシルラクトース（２ＦＬ）、３’－フコシルラクトース（３ＦＬ）、３’－シアリルラクトース（３ＳＬ）、及びラクト－Ｎ－ネオテトラオース（ＬＮｎＴ）から本質的になるヒト乳オリゴ糖（ＨＭＯ）の混合物を含む合成栄養組成物。
15. 請求項１４に記載の栄養組成物であって、前記栄養組成物中の前記ＨＭＯが、
    ｉ．約４０重量％～約８０重量％、好ましくは約５５重量％～約７５重量％、好ましくは約６０ ６５重量％～約７０重量％の２ＦＬ、
    ｉｉ．約２重量％～約１５重量％、好ましくは約４重量％～約１２重量％、好ましくは約７ ６重量％～約９重量％のＬＮｎＴ、
    ｉｉｉ．約５重量％～約３０重量％、好ましくは約１０重量％～約２５重量％、好ましくは約１５重量％～約２０重量％の３ＦＬ、及び
    ｉｖ．約２重量％～約１５重量％、好ましくは約４重量％～約１２重量％、好ましくは約７重量％～約９重量％の３ＳＬ、からなる、栄養組成物。