CN108516997A - 一种从甜茶叶中提取甜茶苷的方法 - Google Patents

一种从甜茶叶中提取甜茶苷的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN108516997A
CN108516997A CN201810727160.4A CN201810727160A CN108516997A CN 108516997 A CN108516997 A CN 108516997A CN 201810727160 A CN201810727160 A CN 201810727160A CN 108516997 A CN108516997 A CN 108516997A
Authority
CN
China
Prior art keywords
sweet tea
rubusoside
reduced pressure
extracting
organic solvent
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201810727160.4A
Other languages
English (en)
Other versions
CN108516997B (zh
Inventor
陈钱
黄华学
贺进军
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Hunan Huacheng Biotech Inc
Original Assignee
Hunan Huacheng Biotech Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hunan Huacheng Biotech Inc filed Critical Hunan Huacheng Biotech Inc
Priority to CN201810727160.4A priority Critical patent/CN108516997B/zh
Publication of CN108516997A publication Critical patent/CN108516997A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN108516997B publication Critical patent/CN108516997B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H15/20—Carbocyclic rings
    • C07H15/24—Condensed ring systems having three or more rings
    • C07H15/256—Polyterpene radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
    • C07H1/06—Separation; Purification
    • C07H1/08—Separation; Purification from natural products

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Tea And Coffee (AREA)

Abstract

一种从甜茶叶中提取甜茶苷的方法，包括以下步骤：（1）将甜茶叶粉碎，过筛，加水，连续逆流提取，过滤；（2）加入酶制剂酶解，灭活，冷却，絮凝，过滤，水洗滤渣；（3）超滤、纳滤；（4）上大孔吸附树脂层析柱吸附，水洗，水洗液弃掉，有机溶剂梯度洗脱，减压浓缩；（5）上氧化铝层析柱吸附，水洗，减压浓缩；（6）加入活性炭，搅拌，过滤，减压浓缩，喷雾干燥；（7）有机溶剂溶解，过滤，结晶，抽滤，真空干燥，粉碎，得甜茶苷产品。本发明方法所提取的甜茶苷产品呈纯白色，纯度≥99%，收率≥90.5%；本发明方法操作工艺简单，提取时间短，能耗、成本低，可实现连续大规模生产。

Description

一种从甜茶叶中提取甜茶苷的方法
技术领域
本发明涉及一种提取甜茶苷的方法，具体涉及一种从甜茶叶中提取甜茶苷的方法。
背景技术
甜茶为蔷薇科悬钩子属多年生落叶灌木，主产于广西大瑶地区，主要入药部位为甜茶叶，甜茶叶主要成分为甜茶苷、甜茶多酚、黄酮及叶绿素等。
甜茶苷为一种高甜度、低热量的天然甜味剂，其甜度约为蔗糖的300倍，而热量仅为蔗糖的1%，因此，适用于糖尿病、肥胖病及高血脂患者，并广泛运用于食品、饮料等中，拥有巨大的市场价值。但是，由于甜茶叶中含有大量的甜茶多酚和黄酮，在分离纯化过程中很难彻底去掉，这样就会影响甜茶苷提取物的质量，主要表现在甜茶苷提取物有苦涩味和颜色较深。
目前，分离纯化高纯度甜茶苷产品的常规工艺路线是：提取→过滤→大孔吸附树脂纯化→离子交换树脂脱色→结晶和重结晶，但是，该工艺由于黄酮和多酚易被大孔吸附树脂吸附，导致甜茶苷提纯纯度不高，同时颜色也较深，而再用离子交换树脂进行脱色，处理量较小，色素处理不彻底，导致生产成本较高。
CN102702284A公开了一种高纯度甜茶苷的生产工艺，是将甜茶叶用沸水提取3次，提取液再浓缩，用水溶性壳聚糖絮凝澄清，絮凝液离心过滤，用大孔吸附树脂精制，解吸液回收完乙醇后，用离子交换树脂脱色，再用脱盐树脂脱盐，最后用一种复合脱色剂脱色，脱色液浓缩，喷雾干燥，得甜茶苷含量≥98%产品。虽然该方法可获得甜茶苷98%以上产品，但是，用壳聚糖絮凝，虽然能够去除提取液中的部分大分子物质，如蛋白质和鞣质等，但不能去掉甜茶多酚和黄酮，导致大孔吸附树脂纯化效果较差，颜色较深，从而引起后续离子交换树脂脱色效果较差。
CN104193788A公开了一种甜茶苷的提取方法，基本步骤是：提取→过滤→浓缩→离心→脱色、去涩、除杂→干燥，其中脱色、去涩、除杂是依次通过大孔吸附树脂、离子交换树脂、聚酰胺树脂来实现的。但是，该方法不仅操作步骤繁琐，且所得甜茶苷的纯度偏低。
CN101003552A公开了一种高纯度甜茶苷的制备方法，基本步骤是：回流提取→树脂吸附→洗脱→柱层析除杂→干燥→乙醇溶解→过滤→结晶，其中用大孔树脂吸附，用聚酰胺、氧化铝或离子交换树脂进行柱层析除杂。但是，该方法仅单纯用聚酰胺、氧化铝或离子交换树脂中的一种方式进行柱层析除杂，处理量较小，杂质脱除不彻底。
CN104262425A公开了一种提取甜茶苷的新方法，基本工艺是：原料粉碎→溶剂提取→膜浓缩→调pH值→大孔树脂纯化→酸碱处理→洗脱→复合离子交换树脂层析→浓缩→结晶→干燥。但是，该方法的缺点是大孔吸附树脂纯化后，再用酸碱处理，对用水量要求较大，且用复合离子交换树脂层析脱色，处理量较小。
CN102838644A公开了一种从甜茶叶中提取甜茶苷的生产方法，其工艺流程是：原料破碎→溶剂提取→浓缩→乙醇沉淀→大孔树脂纯化→浓缩→聚酰胺树脂层析→浓缩→结晶和重结晶→干燥。但是，该方法的缺点是：使用水提醇沉的方式，虽然能去除部分杂质，如蛋白质等，但不能去除色素，且成本较高，采用聚酰胺树脂脱色的成本也较高。
CN105294790A公开了一种从甜叶菊中提取高纯度甜菊糖苷的方法，工艺流程是：浸泡→酶解→提取→絮凝→大孔树脂脱色→硅胶柱层析。但是，该方法的缺点是：采用硅胶柱层析所使用的有机溶剂量大，操作复杂，且工业化大规模生产困难。
CN106632540A公开了一种甜茶苷的提取的方法，基本工艺是：甜茶粉碎→酶解水提→微波醇提→大孔树脂柱层析→聚酰胺树脂柱纯化。但是，该方法的缺点是：提取工艺复杂，对设备及操作要求较高，回收率偏低。
CN105061526A公开了一种高纯度甜茶苷的提取的方法，基本工艺：前处理-微波逆流提取-大孔树脂吸附分离-超滤-浓缩-结晶与重结晶。但是，该方法的缺点是：大孔吸附分离后所得甜茶粗提取物未经过脱色分离纯化，产品结晶颜色较深，收率较低，质量稳定性差。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是，克服现有技术存在的上述缺陷，提供一种所得产品质量稳定，纯度、收率高，操作工艺简单，提取时间短，能耗、成本低，可实现连续大规模生产的从甜茶叶中提取甜茶苷的方法。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案如下：一种从甜茶叶中提取甜茶苷的方法，包括以下步骤：
（1）粉碎、提取：将甜茶叶粉碎，过筛，加水，进行连续逆流提取，过滤，得提取液；
（2）酶解、絮凝：在步骤（1）所得提取液中加入酶制剂，进行酶解，酶解液灭活，冷却，絮凝，过滤，水洗滤渣至无甜味，得絮凝液；
（3）超滤、纳滤：将步骤（2）所得絮凝液进行超滤，纳滤，得纳滤截留液；
（4）大孔吸附树脂吸附：将步骤（3）所得纳滤截留液上大孔吸附树脂层析柱吸附，水洗至无甜味，水洗液弃掉，再用有机溶剂梯度洗脱，减压浓缩，得浓缩液；
（5）氧化铝精制：将步骤（4）所得浓缩液上氧化铝层析柱吸附，收集流出液，水洗至无甜味，收集水洗液，流出液和水洗液减压浓缩，得浓缩液；
（6）脱涩、脱苦：在步骤（5）所得浓缩液中，加入活性炭，搅拌，过滤，减压浓缩，喷雾干燥，得甜茶苷粗品；
（7）结晶：将步骤（6）所得甜茶苷粗品用有机溶剂溶解，过滤，结晶，抽滤，真空干燥，粉碎，得甜茶苷产品。
优选地，步骤（1）中，所述甜茶叶中甜茶苷的质量含量为3～6%。
优选地，步骤（1）中，所述过筛的目数为10～50目。
优选地，步骤（1）中，所述水的总用量为甜茶叶质量的5～30倍（更优选10～25倍）。
优选地，步骤（1）中，所述连续逆流提取的温度为80～100℃，每次提取的时间为1～4h，提取的次数≥1次。由于甜茶苷极易溶于热水，浸出时间短，浸出率高，所以使用热水作为提取溶剂，既节约成本，又安全环保，而且使用逆流提取能够保证连续工业化生产。
优选地，步骤（1）中，用100～300目滤布过滤。
优选地，步骤（2）中，所述酶制剂的添加量为提取液质量的0.01～0.5%（更优选0.1～0.3%）。由于热水提取甜茶叶的同时也会将部分水溶性纤维和蛋白质一同提取，如果不通过酶解，会导致后面的膜分离纯化效果较差。
优选地，步骤（2）中，所述酶制剂为纤维素酶制剂、半纤维素酶制剂、果胶酶制剂或蛋白酶制剂等中的一种或几种。
优选地，步骤（2）中，所述酶解的温度为40～60℃，pH值为2.0～9.0（更优选4.0～7.0），时间为1～2h。
优选地，步骤（2）中，所述灭活的温度为90～120℃，时间为30～60s，压力为常压。
优选地，步骤（2）中，所述冷却为板式冷却至常温。
优选地，步骤（2）中，所述絮凝是：将絮凝剂加入酶解液中进行絮凝，加入的过程中不断搅拌，至pH值为2～6，再搅拌0.5～1.5h，静置0.5～1.5h，然后调节pH值≥8，再搅拌0.5～1.5h，静置1～4h。
优选地，所述絮凝剂为FeCl3、FeSO4或AlCl3等中的一种或几种。甜茶叶中含有大量的多酚、黄酮及鞣酸，而这些杂质可以通过与金属絮凝剂络合而迅速沉淀，从而实现杂质的去除，减少后续纯化的压力。
优选地，用饱和石灰水调节pH值≥8。石灰水主要起到助滤的效果。
优选地，步骤（2）中，所述过滤方式为板框压滤，滤膜孔径为0.4～30μm（更优选0.5～5.0μm）。
优选地，步骤（2）中，水洗滤渣的用水量为甜茶叶原料质量的1～2倍。
优选地，步骤（3）中，用于超滤的超滤膜为陶瓷膜，孔径为0.3～1.0μm。由于过滤只能去除大部分固体杂质，而使用超滤能够去除小部分粒径更小的杂质，使料液澄清透亮。
优选地，步骤（3）中，所述纳滤是将超滤液先通过截留分子量为800～5000道尔顿的纳滤膜，水赶膜至透过液无甜味，透过液再通过截留分子量为100～500道尔顿的纳滤膜，水赶膜至截留液的百利度≥20%为止，得纳滤截留液。纳滤先通过截留分子量大的纳滤膜，可除去大分子杂质及大部分色素，再过截留分子量小的纳滤膜，可去除小分子杂质及脱盐。
优选地，步骤（4）中，所述大孔吸附树脂层析柱由≥2根层析柱组成，纳滤截留液先上第1根层析柱，待其流出液有甜味后，流出液上串接的第2根层析柱，同时纳滤截留液开始上第2根层析柱，以此类推，上柱完成后，将第1根至最末1根层析柱串接起来进行水洗，水洗液弃掉，再用有机溶剂分别对每根层析柱进行梯度洗脱。所述流出液有甜味时，流出液中甜茶苷的质量百分数≥0.05%。此上柱方式优势是：既能确保每根层析柱都能达到吸附饱和，从而最大程度的利用树脂，又能保证生产的连续性，提高了生产效率，同时，串接起来进行水洗的方式，使得在前层析柱被洗脱掉的甜茶苷又会被在后层析柱重新吸附，提高了甜茶苷的收率。
优选地，步骤（4）中，所述大孔吸附树脂层析柱的径高比为1:2～8（更优选1:4～6）。
优选地，步骤（4）中，所述大孔吸附树脂与甜茶叶原料的体积质量比（L/kg）为1:5～10。
优选地，步骤（4）中，所述上柱的流速为1～4BV/h。
优选地，步骤（4）中，所述大孔吸附树脂的型号为D-101、AB-8、LX-T28、DM-130或X-5等中的一种或几种。碱性条件下，甜茶苷易被大孔吸附树脂所吸附，而大部分多酚和黄酮则不易被吸附，从而达到良好的纯化效果。大孔树脂吸附主要用于富集甜茶苷，但同时也有少量多酚和黄酮一起被富集，之后通过氧化铝层析柱，则能吸附此部分多酚和黄酮，而甜茶苷不被吸附，随流出液流出，从而提高甜茶苷纯度。
优选地，步骤（4）中，所述水洗的流速为1.0～3.0BV/h。
优选地，步骤（4）中，所述有机溶剂梯度洗脱的流速为0.5～2.0BV/h。
优选地，步骤（4）中，所述梯度洗脱是指：先用1～3BV体积分数10～30%的有机溶剂洗脱，弃掉洗脱液，再用1～3BV体积分数60～95%（更优选65～80%）的有机溶剂洗脱，收集洗脱液。采用体积分数10～30%的有机溶剂洗脱主要可去除少部分极性较大的杂质，比如残留树脂中的少量多酚和黄酮等，而体积分数60～95%的有机溶剂则主要洗脱富集在树脂上的甜茶苷，采用梯度洗脱能使产品中甜茶苷纯度更高，颜色更浅，质量稳定性更好。
优选地，步骤（4）中，所述有机溶剂为食用乙醇溶液。
优选地，步骤（4）中，所述减压浓缩的温度为60～90℃，压力为-0.09～-0.07MPa，减压浓缩至固含量为10～30%。
优选地，步骤（5）中，所述上柱的流速为0.5～2.0BV/h。
优选地，步骤（5）中，所述氧化铝层析柱的径高比为1:2～8。
优选地，步骤（5）中，所述氧化铝与甜茶叶原料的体积质量比（L/kg）为1:40～100（更优选1:50～80）。氧化铝的作用主要是吸附脱除大孔吸附树脂洗脱液中残留的少量有色物质，比如多酚和黄酮；且氧化铝较离子交换树脂或聚酰胺树脂具有脱色成本低，效果好等优势。
优选地，步骤（5）中，所述氧化铝为酸性氧化铝或中性氧化铝。
优选地，步骤（5）中，所述氧化铝在使用前先进行活化：先将氧化铝在500～600℃的高温条件下，活化10～20h后，再用体积分数为85～98%的乙醇溶液清洗至流出液无色透明，且除乙醇味外无其它气味为止，最后水洗至无乙醇味。
优选地，步骤（5）中，所述氧化铝的目数为80～300目。
优选地，步骤（5）中，所述水洗的流速为0.5～1.0BV/h。
优选地，步骤（5）中，所述减压浓缩的温度为60～90℃，压力为-0.09～-0.07MPa，减压浓缩至固含量为40～60%。
优选地，步骤（6）中，所述活性炭的用量为浓缩液质量的0.1～0.5%。
优选地，步骤（6）中，所述活性炭的目数为60～200目。
优选地，步骤（6）中，所述搅拌的温度为80～100℃，时间为0.5～1.5h。
优选地，步骤（6）中，所述过滤为先用板框压滤，再用陶瓷膜过滤。
优选地，所述板框压滤所用板式滤膜的孔径为0.4～30μm（更优选0.5～5.0μm），所述陶瓷膜的孔径为0.3～1.0μm。
优选地，步骤（6）中，所述减压浓缩的温度为60～90℃，压力为-0.09～-0.07MPa，减压浓缩至固含量为40～60%。
优选地，步骤（6）中，所述喷雾干燥的进风温度为180～220℃，出风温度为70～90℃。
优选地，步骤（7）中，所述甜茶苷粗品与有机溶剂的质量比为1:5～15（更优选1:6～10）。
优选地，步骤（7）中，所述有机溶剂的体积分数为60～95%。
优选地，步骤（7）中，所述溶解的温度为60～90℃。
优选地，步骤（7）中，所述结晶的温度为-5～10℃，时间为2～24h。
优选地，步骤（7）中，所述有机溶剂为甲醇、乙醇、丙醇或异丙醇中的一种或几种。
优选地，步骤（7）中，所述真空干燥的温度为60～90℃，真空度为-0.01～-0.09MPa，时间为2～24h。
本发明方法的有益效果如下：
（1）本发明方法所提取的甜茶苷产品呈纯白色，纯度≥99%，收率≥90.5%；
（2）本发明方法采用先酶解后絮凝的方式来去除甜茶提取液中的多酚、黄酮及鞣质，去除效果显著，比其它方式成本低；本发明方法采用超滤、纳滤来实现分离纯化及脱盐脱色，同样相比传统的离子交换树脂脱盐脱色成本低，工艺简便；酶解+絮凝的方式可去除大部分色素，超滤+纳滤的方式可去除大部分杂质，大部分色素和杂质都去除后，再用大孔吸附树脂吸附甜茶苷的方式，相比提取液直接上大孔树脂吸附，不仅吸附量大，且大孔树脂吸附后，产品纯度更高，可达90%以上，再通过氧化铝+活性炭的方式精制、脱色、脱涩、脱苦，结晶，处理量大，效果更好，产品质量更稳定；
（3）本发明方法操作工艺简单，提取时间短，能耗、成本低，可实现连续大规模生产。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明。
本发明实施例所使用的甜茶叶产于广西大瑶山，甜茶苷的质量含量为4.5%；本发明实施例所使用的纤维素酶制剂、半纤维素酶制剂、果胶酶制剂和蛋白酶制剂均购于山东隆科特酶制剂有限公司；本发明实施例所使用的NF8040-800D、NF8040-300D、NF8040-5000D、NF8040-500D、NF8040-1000D型高分子材料有机纳滤膜，均购于江苏久吾高科技股份有限公司；本发明实施例所使用的D-101型、AB-8型大孔吸附树脂，均购于西安蓝晓科技新材料股份有限公司；本发明实施例所使用的X-5型树脂，购于天津南开和成科技有限公司；本发明实施例所使用酸性氧化铝，目数为200目，购于青岛海洋化工有限公司；本发明实施例所使用的乙醇溶液均为食品级；本发明实施例所使用的活性炭购于天津科密欧化学试剂有限公司；本发明实施例所使用的原料和化学试剂，如无特殊说明，均通过常规商业途径获得。
参考例1
本发明实施例所使用的酸性氧化铝在使用前先进行活化：先将酸性氧化铝在550℃的高温条件下，活化18h后，再用体积分数为95%的乙醇溶液清洗至流出液无色透明，且除乙醇味外无其它气味为止，最后水洗至无乙醇味。
实施例1
（1）粉碎、提取：将5t甜茶叶粉碎，过20目筛，加入50t水，在85℃下，进行连续逆流提取1h，用100目滤布过滤，得35t提取液；
（2）酶解、絮凝：在步骤（1）所得35t提取液中加入35kg纤维素酶制剂和35kg蛋白酶制剂，在50℃，pH值为5下，进行酶解1h，酶解液在110℃，常压下，灭活60s，板式冷却至常温，再将FeCl3加入酶解液中进行絮凝，加入的过程中不断搅拌，至pH值为3，再搅拌0.8h，静置1.2h，用饱和石灰水调节pH值至8，再搅拌1.2h，静置1h，用滤膜孔径为2.0μm的板式滤膜进行板框压滤，再用6t水，水洗滤渣至无甜味，得41t絮凝液；
（3）超滤、纳滤：将步骤（2）所得41t絮凝液用孔径0.5μm的陶瓷膜进行超滤，然后超滤液先通过截留分子量为800道尔顿的NF8040-800D型纳滤膜，水赶膜至透过液无甜味，透过液再通过截留分子量为300道尔顿的NF8040-300D型纳滤膜，水赶膜至截留液的百利度≥20%为止，得10t纳滤截留液；
（4）大孔吸附树脂吸附：大孔吸附树脂层析柱由2根D-101型大孔吸附树脂层析柱（每根层析柱的径高比为1:6，总树脂体积为700L）组成，先将步骤（3）所得10t纳滤截留液以流速2BV/h，上第1根层析柱，待其流出液中甜茶苷的质量百分数≥0.05%后，流出液上串接的第2根层析柱，同时纳滤截留液开始以流速2BV/h，上第2根层析柱，上柱完成后，将第1根和第2根层析柱串接起来，以流速2.5BV/h水洗至无甜味，水洗液弃掉，再以0.5BV/h流速，先用总体积2100L（即3BV）、体积分数为10%的食用乙醇溶液分别对2根层析柱进行洗脱，弃掉洗脱液，再用总体积2100L（即3BV）、体积分数为65%的食用乙醇溶液分别对2根层析柱进行洗脱，收集洗脱液，在70℃，-0.08MPa下，减压浓缩至固含量为15%，得1.6t浓缩液；
（5）氧化铝精制：将步骤（4）所得1.6t浓缩液以流速1.5BV/h，上酸性氧化铝层析柱（径高比为1:3，氧化铝体积为100L）进行吸附，收集流出液，以速度1BV/h水洗至无甜味，收集水洗液，流出液和水洗液在70℃，-0.08MPa下，减压浓缩至固含量为50%，得510.74kg浓缩液；
（6）脱涩、脱苦：在步骤（5）所得501.74kg浓缩液中，加入2.5kg、80目的活性炭，100℃下，搅拌0.5h，然后先用孔径为2.0μm的板式滤膜进行板框压滤，再用孔径为1.0μm的陶瓷膜进行过滤，在60℃，-0.08MPa下，减压浓缩至固含量为40%，浓缩液在进风温度为180℃，出风温度为70℃下，进行喷雾干燥，得250.87kg甜茶苷粗品；
（7）结晶：将步骤（6）所得250.87kg甜茶苷粗品用2.5t体积分数85%的甲醇溶液在80℃下溶解，过滤，再在5℃下，结晶20h，抽滤晶体，最后在70℃，-0.09MPa下，真空干燥20h，粉碎，得205.68kg甜茶苷产品。
经检测，所得甜茶苷产品为纯白色，纯度为99.0%，收率为90.5%。
实施例2
（1）粉碎、提取：将5t甜茶叶粉碎，过30目筛，加入100t水，在95℃下，进行连续逆流提取3h，用300目滤布过滤，得95t提取液；
（2）酶解、絮凝：在步骤（1）所得95t提取液中加入47.5kg半纤维素酶制剂和47.5kg果胶酶制剂，在55℃，pH值为4下，进行酶解2h，酶解液在100℃，常压下，灭活40s，板式冷却至常温，再将FeSO4加入酶解液中进行絮凝，加入的过程中不断搅拌，至pH值为5，再搅拌1.2h，静置0.8h，用饱和石灰水调节pH值至9，再搅拌0.8h，静置3h，用滤膜孔径为1.0μm的板式滤膜进行板框压滤，再用8t水，水洗滤渣至无甜味，得103t絮凝液；
（3）超滤、纳滤：将步骤（2）所得103t絮凝液用孔径0.5μm的陶瓷膜进行超滤，然后超滤液先通过截留分子量为5000道尔顿的NF8040-5000D型纳滤膜，水赶膜至透过液无甜味，透过液再通过截留分子量为500道尔顿的NF8040-500D型纳滤膜，水赶膜至截留液的百利度≥20%为止，得15t纳滤截留液；
（4）大孔吸附树脂吸附：大孔吸附树脂层析柱由3根AB-8型大孔吸附树脂层析柱（每根层析柱的径高比为1:5，总树脂体积为800L）组成，先将步骤（3）所得15t纳滤截留液以流速1.5BV/h，上第1根层析柱，待其流出液中甜茶苷的质量百分数≥0.05%后，流出液上串接的第2根层析柱，同时纳滤截留液开始以流速1.5BV/h，上第2根层析柱，待其流出液中甜茶苷的质量百分数≥0.05%后，流出液上串接的第3根层析柱，同时纳滤截留液开始以流速1.5BV/h，上第3根层析柱，上柱完成后，将第1根和第3根层析柱串接起来，以流速2BV/h水洗至无甜味，水洗液弃掉，再以1.5BV/h流速，先用总体积2000L（即2.5BV）、体积分数为15%的食用乙醇溶液分别对3根层析柱进行洗脱，弃掉洗脱液，再用总体积2000L（即2.5BV）、体积分数为75%的食用乙醇溶液分别对3根层析柱进行洗脱，收集洗脱液，在80℃，-0.09MPa下，减压浓缩至固含量为13%，得1.75t浓缩液；
（5）氧化铝精制：将步骤（4）所得1.75t浓缩液以流速2BV/h，上酸性氧化铝层析柱（径高比为1:5，氧化铝体积为80L）进行吸附，收集流出液，以速度1BV/h水洗至无甜味，收集水洗液，流出液和水洗液在80℃，-0.09MPa下，减压浓缩至固含量为52%，得431.08kg浓缩液；
（6）脱涩、脱苦：在步骤（5）所得431.08kg浓缩液中，加入1.5kg、100目的活性炭，80℃下，搅拌1.5h，然后先用孔径为1.0μm的板式滤膜进行板框压滤，再用孔径为0.5μm的陶瓷膜进行过滤，在80℃，-0.09MPa下，减压浓缩至固含量为50%，浓缩液在进风温度为200℃，出风温度为80℃下，进行喷雾干燥，得224.6kg甜茶苷粗品；
（7）结晶：将步骤（6）所得224.6kg甜茶苷粗品用1.5t体积分数95%的甲醇溶液在70℃下溶解，过滤，再在5℃下，结晶24h，抽滤晶体，最后在70℃，-0.08MPa下，真空干燥8h，粉碎，得206.3kg甜茶苷产品。
经检测，所得甜茶苷产品为纯白色，纯度为99.5%，收率为91.2%。
实施例3
（1）粉碎、提取：将5t甜茶叶粉碎，过40目筛，加入75t水，在90℃下，进行连续逆流提取2h，用200目滤布过滤，得70t提取液；
（2）酶解、絮凝：在步骤（1）所得70t提取液中加入35kg纤维素酶制剂、35kg蛋白酶制剂和35kg果胶酶制剂，在60℃，pH值为6下，进行酶解1.5h，酶解液在90℃，常压下，灭活50s，板式冷却至常温，再将FeCl3加入酶解液中进行絮凝，加入的过程中不断搅拌，至pH值为4，再搅拌0.5h，静置0.5h，用饱和石灰水调节pH值至9，再搅拌0.5h，静置2h，用滤膜孔径为0.5μm的板式滤膜进行板框压滤，再用7t水，水洗滤渣至无甜味，得77t絮凝液；
（3）超滤、纳滤：将步骤（2）所得77t絮凝液用孔径1.0μm的陶瓷膜进行超滤，然后超滤液先通过截留分子量为1000道尔顿的NF8040-1000D型纳滤膜，水赶膜至透过液无甜味，透过液再通过截留分子量为500道尔顿的NF8040-500D型纳滤膜，水赶膜至截留液的百利度≥30%为止，得13t纳滤截留液；
（4）大孔吸附树脂吸附：大孔吸附树脂层析柱由3根X-5型大孔吸附树脂层析柱（每根层析柱的径高比为1:4，总树脂体积为1000L）组成，先将步骤（3）所得13t纳滤截留液以流速1BV/h，上第1根层析柱，待其流出液中甜茶苷的质量百分数≥0.05%后，流出液上串接的第2根层析柱，同时纳滤截留液开始以流速1BV/h，上第2根层析柱，待其流出液中甜茶苷的质量百分数≥0.05%后，流出液上串接的第3根层析柱，同时纳滤截留液开始以流速1BV/h，上第3根层析柱，上柱完成后，将第1根和第3根层析柱串接起来，以流速1.5BV/h水洗至无甜味，水洗液弃掉，再以1.0BV/h流速，先用总体积2000L（即2BV）、体积分数为20%的食用乙醇溶液分别对3根层析柱进行洗脱，弃掉洗脱液，再用总体积2000L（即2BV）、体积分数为70%的食用乙醇溶液分别对3根层析柱进行洗脱，收集洗脱液，在70℃，-0.08MPa下，减压浓缩至固含量为16%，得1.55t浓缩液；
（5）氧化铝精制：将步骤（4）所得1.55t浓缩液以流速1.0BV/h，上酸性氧化铝层析柱（径高比为1:4，氧化铝体积为90L）进行吸附，收集流出液，以速度0.5BV/h水洗至无甜味，收集水洗液，流出液和水洗液在70℃，-0.08MPa下，减压浓缩至固含量为50%，得468.63kg浓缩液；
（6）脱涩、脱苦：在步骤（5）所得468.63kg浓缩液中，加入2.3kg、60目的活性炭，90℃下，搅拌1h，然后先用孔径为0.5μm的板式滤膜进行板框压滤，再用孔径为0.3μm的陶瓷膜进行过滤，在70℃，-0.08MPa下，减压浓缩至固含量为45%，浓缩液在进风温度为180℃，出风温度为70℃下，进行喷雾干燥，得234.31kg甜茶苷粗品；
（7）结晶：将步骤（6）所得234.31kg甜茶苷粗品用2.0t体积分数90%的乙醇溶液在90℃下溶解，过滤，再在0℃下，结晶12h，抽滤晶体，最后在80℃，-0.09MPa下，真空干燥12h，粉碎，得208.54kg甜茶苷产品。
经检测，所得甜茶苷产品为纯白色，纯度为99.8%，收率为92.5%。

Claims (9)

1.一种从甜茶叶中提取甜茶苷的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）粉碎、提取：将甜茶叶粉碎，过筛，加水，进行连续逆流提取，过滤，得提取液；
（2）酶解、絮凝：在步骤（1）所得提取液中加入酶制剂，进行酶解，酶解液灭活，冷却，絮凝，过滤，水洗滤渣至无甜味，得絮凝液；
（3）超滤、纳滤：将步骤（2）所得絮凝液进行超滤，纳滤，得纳滤截留液；
（4）大孔吸附树脂吸附：将步骤（3）所得纳滤截留液上大孔吸附树脂层析柱吸附，水洗至无甜味，水洗液弃掉，再用有机溶剂梯度洗脱，减压浓缩，得浓缩液；
（5）氧化铝精制：将步骤（4）所得浓缩液上氧化铝层析柱吸附，收集流出液，水洗至无甜味，收集水洗液，流出液和水洗液减压浓缩，得浓缩液；
（6）脱涩、脱苦：在步骤（5）所得浓缩液中，加入活性炭，搅拌，过滤，减压浓缩，喷雾干燥，得甜茶苷粗品；
（7）结晶：将步骤（6）所得甜茶苷粗品用有机溶剂溶解，过滤，结晶，抽滤，真空干燥，粉碎，得甜茶苷产品。
2.根据权利要求1所述从甜茶叶中提取甜茶苷的方法，其特征在于：步骤（1）中，所述过筛的目数为10～50目；所述水的总用量为甜茶叶质量的5～30倍；所述连续逆流提取的温度为80～100℃，每次提取的时间为1～4h，提取的次数≥1次；用100～300目滤布过滤。
3.根据权利要求1或2所述从甜茶叶中提取甜茶苷的方法，其特征在于：步骤（2）中，所述酶制剂的添加量为提取液质量的0.01～0.5%；所述酶制剂为纤维素酶制剂、半纤维素酶制剂、果胶酶制剂或蛋白酶制剂中的一种或几种；所述酶解的温度为40～60℃，pH值为2.0～9.0，时间为1～2h；所述灭活的温度为90～120℃，时间为30～60s，压力为常压。
4.根据权利要求1～3之一所述从甜茶叶中提取甜茶苷的方法，其特征在于：步骤（2）中，所述絮凝是：将絮凝剂加入酶解液中进行絮凝，加入的过程中不断搅拌，至pH值为2～6，再搅拌0.5～1.5h，静置0.5～1.5h，然后调节pH值≥8，再搅拌0.5～1.5h，静置1～4h；所述絮凝剂为FeCl3、FeSO4或AlCl3中的一种或几种；用饱和石灰水调节pH值≥8；所述过滤方式为板框压滤，滤膜孔径为0.4～30μm；水洗滤渣的用水量为甜茶叶原料质量的1～2倍。
5.根据权利要求1～4之一所述从甜茶叶中提取甜茶苷的方法，其特征在于：步骤（3）中，用于超滤的超滤膜为陶瓷膜，孔径为0.3～1.0μm；所述纳滤是将超滤液先通过截留分子量为800～5000道尔顿的纳滤膜，水赶膜至透过液无甜味，透过液再通过截留分子量为100～500道尔顿的纳滤膜，水赶膜至截留液的百利度≥20%为止，得纳滤截留液。
6.根据权利要求1～5之一所述从甜茶叶中提取甜茶苷的方法，其特征在于：步骤（4）中，所述大孔吸附树脂层析柱由≥2根层析柱组成，纳滤截留液先上第1根层析柱，待其流出液有甜味后，流出液上串接的第2根层析柱，同时纳滤截留液开始上第2根层析柱，以此类推，上柱完成后，将第1根至最末1根层析柱串接起来进行水洗，水洗液弃掉，再用有机溶剂分别对每根层析柱进行梯度洗脱；所述大孔吸附树脂层析柱的径高比为1:2～8；所述大孔吸附树脂与甜茶叶原料的体积质量比为1:5～10；所述上柱的流速为1～4BV/h；所述大孔吸附树脂的型号为D-101、AB-8、LX-T28、DM-130或X-5中的一种或几种；所述水洗的流速为1.0～3.0BV/h；所述有机溶剂梯度洗脱的流速为0.5～2.0BV/h；所述梯度洗脱是指：先用1～3BV体积分数10～30%的有机溶剂洗脱，弃掉洗脱液，再用1～3BV体积分数60～95%的有机溶剂洗脱，收集洗脱液；所述有机溶剂为食用乙醇溶液；所述减压浓缩的温度为60～90℃，压力为-0.09～-0.07MPa，减压浓缩至固含量为10～30%。
7.根据权利要求1～6之一所述从甜茶叶中提取甜茶苷的方法，其特征在于：步骤（5）中，所述上柱的流速为0.5～2.0BV/h；所述氧化铝层析柱的径高比为1:2～8；所述氧化铝与甜茶叶原料的体积质量比为1:40～100；所述氧化铝为酸性氧化铝或中性氧化铝；所述氧化铝在使用前先进行活化：先将氧化铝在500～600℃的高温条件下，活化10～20h后，再用体积分数为85～98%的乙醇溶液清洗至流出液无色透明，且除乙醇味外无其它气味为止，最后水洗至无乙醇味；所述氧化铝的目数为80～300目；所述水洗的流速为0.5～1.0BV/h；所述减压浓缩的温度为60～90℃，压力为-0.09～-0.07MPa，减压浓缩至固含量为40～60%。
8.根据权利要求1～7之一所述从甜茶叶中提取甜茶苷的方法，其特征在于：步骤（6）中，所述活性炭的用量为浓缩液质量的0.1～0.5%；所述活性炭的目数为60～200目；所述搅拌的温度为80～100℃，时间为0.5～1.5h；所述过滤为先用板框压滤，再用陶瓷膜过滤；所述板框压滤所用板式滤膜的孔径为0.4～30μm，所述陶瓷膜的孔径为0.3～1.0μm；所述减压浓缩的温度为60～90℃，压力为-0.09～-0.07MPa，减压浓缩至固含量为40～60%；所述喷雾干燥的进风温度为180～220℃，出风温度为70～90℃。
9.根据权利要求1～8之一所述从甜茶叶中提取甜茶苷的方法，其特征在于：步骤（7）中，所述甜茶苷粗品与有机溶剂的质量比为1:5～15；所述有机溶剂的体积分数为60～95%；所述溶解的温度为60～90℃；所述结晶的温度为-5～10℃，时间为2～24h；所述有机溶剂为甲醇、乙醇、丙醇或异丙醇中的一种或几种；所述真空干燥的温度为60～90℃，真空度为-0.01～-0.09MPa，时间为2～24h。
CN201810727160.4A 2018-07-05 2018-07-05 一种从甜茶叶中提取甜茶苷的方法 Active CN108516997B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810727160.4A CN108516997B (zh) 2018-07-05 2018-07-05 一种从甜茶叶中提取甜茶苷的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810727160.4A CN108516997B (zh) 2018-07-05 2018-07-05 一种从甜茶叶中提取甜茶苷的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN108516997A true CN108516997A (zh) 2018-09-11
CN108516997B CN108516997B (zh) 2020-06-26

Family

ID=63428624

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201810727160.4A Active CN108516997B (zh) 2018-07-05 2018-07-05 一种从甜茶叶中提取甜茶苷的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN108516997B (zh)

Cited By (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109497229A (zh) * 2018-12-24 2019-03-22 桂林莱茵生物科技股份有限公司 一种改善甜茶苷提取物口感的方法
CN109497218A (zh) * 2019-01-15 2019-03-22 福建仙洋洋生物科技有限公司 一种节能生产高品质茶浓缩液的工艺
CN109717445A (zh) * 2019-01-30 2019-05-07 湖南绿蔓生物科技股份有限公司 甜味组合物及其制备方法和应用
CN110776537A (zh) * 2019-10-18 2020-02-11 临夏回族自治州林业和草原局 一种从甜叶菊中制备甜菊糖或ra的方法
CN110786443A (zh) * 2019-10-22 2020-02-14 湖南华诚生物资源股份有限公司 一种甜茶提取物脱苦脱涩的方法
CN112704074A (zh) * 2021-01-05 2021-04-27 广东省田园农业生物科技有限公司 一种天然植物内源成分的提取方法
CN112920034A (zh) * 2021-01-26 2021-06-08 桂林莱茵生物科技股份有限公司 一种提取含量≥98% 6-姜酚的方法
CN113429444A (zh) * 2021-04-25 2021-09-24 杭州天草科技有限公司 一种从甜叶菊母液糖中分离纯化甜茶苷的方法
CN113831374A (zh) * 2021-11-08 2021-12-24 湖南华诚生物资源股份有限公司 一种甜茶苷的结晶方法
CN114028836A (zh) * 2021-09-26 2022-02-11 承创(常熟)医药科技有限公司 一种去除植物提取物中色素及气味的方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101003552A (zh) * 2006-01-18 2007-07-25 广西师范大学 高纯度甜茶甙的制备方法
CN101112458A (zh) * 2007-07-21 2008-01-30 陈显刚 甜茶有效成份的提取方法
CN102199177A (zh) * 2011-03-23 2011-09-28 武汉普赛特膜技术循环利用有限公司 一种纯天然高纯度甜菊糖的生产方法
CN102702284A (zh) * 2012-05-23 2012-10-03 广西甙元植物制品有限公司 高纯度甜茶苷的生产工艺
US20130040033A1 (en) * 2011-08-10 2013-02-14 Purecircle Sdn Bhd High-Purity Rubusoside And Process For Purification Of The Same

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101003552A (zh) * 2006-01-18 2007-07-25 广西师范大学 高纯度甜茶甙的制备方法
CN101112458A (zh) * 2007-07-21 2008-01-30 陈显刚 甜茶有效成份的提取方法
CN102199177A (zh) * 2011-03-23 2011-09-28 武汉普赛特膜技术循环利用有限公司 一种纯天然高纯度甜菊糖的生产方法
US20130040033A1 (en) * 2011-08-10 2013-02-14 Purecircle Sdn Bhd High-Purity Rubusoside And Process For Purification Of The Same
CN102702284A (zh) * 2012-05-23 2012-10-03 广西甙元植物制品有限公司 高纯度甜茶苷的生产工艺

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
刘落宪: "《中药制药工程原理与设备》", 31 July 2003, 中国中医药出版社 *
司佳等: "从甜茶叶中制备甜茶素的工艺研究", 《食品科技》 *
孔令义: "《中药制药化学》", 30 April 2007, 中国医药科技出版社 *

Cited By (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109497229A (zh) * 2018-12-24 2019-03-22 桂林莱茵生物科技股份有限公司 一种改善甜茶苷提取物口感的方法
CN109497218A (zh) * 2019-01-15 2019-03-22 福建仙洋洋生物科技有限公司 一种节能生产高品质茶浓缩液的工艺
CN109717445A (zh) * 2019-01-30 2019-05-07 湖南绿蔓生物科技股份有限公司 甜味组合物及其制备方法和应用
WO2020155494A1 (zh) * 2019-01-30 2020-08-06 湖南绿蔓生物科技股份有限公司 甜味组合物及其制备方法和应用
CN109717445B (zh) * 2019-01-30 2022-10-18 湖南绿蔓生物科技股份有限公司 甜味组合物及其制备方法和应用
CN110776537A (zh) * 2019-10-18 2020-02-11 临夏回族自治州林业和草原局 一种从甜叶菊中制备甜菊糖或ra的方法
CN110776537B (zh) * 2019-10-18 2022-09-06 临夏回族自治州林业和草原局 一种从甜叶菊中制备甜菊糖或ra的方法
CN110786443B (zh) * 2019-10-22 2022-08-02 湖南华诚生物资源股份有限公司 一种甜茶提取物脱苦脱涩的方法
CN110786443A (zh) * 2019-10-22 2020-02-14 湖南华诚生物资源股份有限公司 一种甜茶提取物脱苦脱涩的方法
CN112704074A (zh) * 2021-01-05 2021-04-27 广东省田园农业生物科技有限公司 一种天然植物内源成分的提取方法
CN112920034A (zh) * 2021-01-26 2021-06-08 桂林莱茵生物科技股份有限公司 一种提取含量≥98% 6-姜酚的方法
CN112920034B (zh) * 2021-01-26 2023-04-28 桂林莱茵生物科技股份有限公司 一种提取含量≥98% 6-姜酚的方法
CN113429444A (zh) * 2021-04-25 2021-09-24 杭州天草科技有限公司 一种从甜叶菊母液糖中分离纯化甜茶苷的方法
CN114028836A (zh) * 2021-09-26 2022-02-11 承创(常熟)医药科技有限公司 一种去除植物提取物中色素及气味的方法
CN113831374A (zh) * 2021-11-08 2021-12-24 湖南华诚生物资源股份有限公司 一种甜茶苷的结晶方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN108516997B (zh) 2020-06-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN108516997A (zh) 一种从甜茶叶中提取甜茶苷的方法
CN106008645B (zh) 一种从罗汉果中提取罗汉果苷v的方法
CN105218612B (zh) 一种提高罗汉果甜苷中罗汉果甜甙v纯度的方法
CN109180755A (zh) 一种从甜茶叶中提取甜茶苷的方法
CN108752231B (zh) 从甜茶中提取茶氨酸以及同时提取甜茶苷和茶多酚的方法
CN107397103A (zh) 一种罗汉果脱色风味浓缩汁的制备方法
CN101177444A (zh) 一种从罗汉果中提取罗汉果甜甙的方法
CN106866759B (zh) 从罗汉果甜甙脱色树脂柱排出的废液中生产罗汉果黄酮的工艺
CN101671294B (zh) 一种从桑叶中连续提取分离1-脱氧野尻霉素(dnj)、黄酮的方法
CN107629105A (zh) 一种风味罗汉果甜苷v的提纯方法
CN102643315B (zh) 一种从苹果根皮中纯化根皮甙的方法
CN111574372B (zh) 电渗析法从中草药中提取绿原酸的方法
CN110981921B (zh) 一种从无花果同步提取多种有效成分的连续化方法
CN109717445B (zh) 甜味组合物及其制备方法和应用
CN109369733B (zh) 一种从苦荞叶中同时提取多种黄酮类化合物的方法
CN102443619A (zh) 从金银花中提取绿原酸和常春藤皂苷元的方法
CN113637038B (zh) 一种从甜茶叶中提取无苦涩味甜茶苷和甜茶多酚的方法
CN105053952A (zh) 一种无苦涩味的陈皮提取物的加工工艺
CN110917240B (zh) 一种从青钱柳中分离多种有效成分的连续化方法
CN113429444B (zh) 一种从甜叶菊母液糖中分离纯化甜茶苷的方法
CN110590876B (zh) 一种高纯甜菊糖苷及其制备方法
CN103408614A (zh) 一种甜菊素和莱鲍迪苷a的新型制备技术
CN115109112A (zh) 一种提高罗汉果甜苷v含量的罗汉果甜苷工业生产方法
CN110156601B (zh) 一种从甜叶菊中制备高纯度绿原酸的方法
CN107712169B (zh) 一种茶叶加工方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
TA01 Transfer of patent application right
TA01 Transfer of patent application right

Effective date of registration: 20200608

Address after: 410205 401-406, floor 4, No. 8, Xingkang South Road, Changsha high tech Development Zone, Changsha City, Hunan Province

Applicant after: Hunan Green Fruit Dessert Co.,Ltd.

Address before: 410205 No. 8 Xing Kang South Road, Changsha hi tech Zone, Hunan

Applicant before: HUNAN HUACHENG BIOTECH, Inc.

TR01 Transfer of patent right
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20210818

Address after: No.8 Xingkang South Road, high tech Zone, Changsha City, Hunan Province, 410205

Patentee after: HUNAN HUACHENG BIOTECH, Inc.

Address before: 410205 401-406, floor 4, No. 8, Xingkang South Road, Changsha high tech Development Zone, Changsha City, Hunan Province

Patentee before: Hunan Green Fruit Dessert Co.,Ltd.