CN107236684A - 奥奈达希瓦氏菌及其固定化小球在处理印染废水中的应用 - Google Patents

奥奈达希瓦氏菌及其固定化小球在处理印染废水中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种奥奈达希瓦氏菌固定化小球及奥奈达希瓦氏菌在处理印染废水中的应用。本发明首次提出了将奥奈达希瓦氏菌用于印染废水处理中，为印染废水脱色提供了一种新途径。奥奈达希瓦氏菌对印染废水的脱色效率尤为突出，因此本发明将奥奈达希瓦氏菌制成固定化小球，固定化小球不仅有效提高了奥奈达希瓦氏菌的重复利用率，而且大大提高了对印染废水的脱色效率，脱色效率最高可达43.31%。

Description

奥奈达希瓦氏菌及其固定化小球在处理印染废水中的应用
技术领域
本发明属于印染废水处理技术领域，具体涉及一种奥奈达希瓦氏菌固定化小球及奥奈达希瓦氏菌在处理印染废水中的应用。
背景技术
纺织印染行业是我国用水量大、排放量大的工业部门之一。随着化学纤维织物的广泛使用，染料工业的飞速发展，后整理技术也不断进步，新型助剂、染料、整理剂等被大量使用。据资料统计，2002年我国纺织废水总排放量为70亿吨，其中80％是印染废水。
由于印染废水排放量大、色度深、含盐量高、可生化性低，且活性染料水溶性好，因此很难对其进行脱色处理，印染废水如果直接排放则会对人类健康和生存环境带来极大危害，废水中残存的染料组分即使浓度很低，排入水体后也会造成水体透光率降低，倒是水体生态***被破坏，造成水资源的浪费。
印染废水的脱色处理一直是印染防止和染料生产所面临的主要任何，目前印染废水脱色处理的物理化学方法主要由吸附脱色技术、混凝沉淀技术、化学氧化技术、粒子交换技术、超滤膜脱色技术、光催化技术、高压脉冲电解技术等等。物理化学方法由于处理费用高、极易产生大量难处理污泥以及可能造成二次污染等缺点已越来越难以满足生产和环保的要求。生物方法成本低、效率高，是印染废水处理的一大趋势。
如授权公告号为CN 103667108 B的中国发明专利公开了一种红球菌菌株在处理印染废水中的应用，该应用将红球菌菌株制成菌液或微生物菌剂后应用到印染废水处理工艺的不同阶段中，以达到处理高盐印染废水的目的。
如公开号为CN 101734800 A的中国发明专利申请公开了一种采用固定化真菌菌体对印染废水脱色的方法，该方法将真菌孢子或菌丝段接种于装有固定化基质材料的液体培养基中，再将覆盖、固定有菌丝的固定化基质材料投加到印染废水中，进行脱色处理。
目前还没有将奥奈达希瓦氏菌用于印染废水脱色中的相关报道。
发明内容
本发明提供了奥奈达希瓦氏菌在处理印染废水中的应用，为印染废水脱色提供了一种新途径。
奥奈达希瓦氏菌(Shewanella oneidensis MR-1)在处理印染废水中的应用。
作为优选，所述印染废水的染料浓度不低于30mg/L。染料浓度过低时，基本不被奥奈达希瓦氏菌所降解，脱色效率极低。当提高染料浓度后，奥奈达希瓦氏菌对印染废水的脱色效率也逐渐增加。
本发明提供了两种奥奈达希瓦氏菌用于印染废水脱色中的方法，其中一种应用方法包括：将所述奥奈达希瓦氏菌驯化后制成菌悬液，将所述菌悬液投加到所述印染废水中；
所述印染废水的温度为16～22℃，pH为7.5～10。
本发明发现，奥奈达希瓦氏菌的悬浮菌体对印染废水的脱色效率随环境温度的升高逐渐降低，在16～22℃下脱色率较佳，其中在16℃下脱色率最高为58.03％；同时奥奈达希瓦氏菌的悬浮菌体在偏碱性环境下脱色性能较佳，当环境pH为8时脱色率最高达45.2％。
作为优选，所述菌悬液的投加量为：投加该菌悬液后，印染废水中奥奈达希瓦氏菌的初始菌OD600为0.50～0.55。
另一种应用方法包括：将所述奥奈达希瓦氏菌制成固定化小球，将所述固定化小球驯化后投加到所述印染废水中；
所述印染废水的温度为20～37℃，pH为4～9。
本发明发现，奥奈达希瓦氏菌固定化小球的适宜脱色温度较奥奈达希瓦氏菌菌悬液要高，在28℃下脱色率最高达到43.31％；同时，奥奈达希瓦氏菌固定化小球则在偏酸性环境下具有较佳的脱色性能，当环境pH为6时脱色率最高达43.31％。
作为优选，所述印染废水中，固定化小球的投加量为40～60g/L。
作为优选，所述固定化小球的制备方法包括以下步骤：
(1)将聚乙烯醇加入水中，在80～90℃水浴下搅拌至完全溶解，向溶解液中加入海藻酸钠，搅拌，混合均匀，获得PVA-SA悬浊液；
作为优选，所述PVA-SA悬浊液中，聚乙烯醇的质量分数为8％，海藻酸钠的质量分数为1％，所述聚乙烯醇的平均聚合度为1800±100。
试验发现，当PVA-SA悬浊液中聚乙烯醇与海藻酸钠的质量比为8:1时，最易形成固定化小球，且固定化小球活性高。
(2)向奥奈达希瓦氏菌菌悬液中加入活性炭，混合吸附，获得预处理液；
作为优选，混合吸附的时间为至少10min。先采用活性炭进行预先吸附，活性炭的多孔结构不仅可以提高固定化颗粒的载菌量，而且还能增强固定化颗粒的强度，从而提高固定化颗粒的脱色效率，延长其使用寿命。
(3)将所述预处理液加入到已冷却的PVA-SA悬浊液中，搅拌，混合均匀，获得混合菌液；
作为优选，所述预处理液与PVA-SA悬浊液的质量比为1:5～1:50。若质量比过小，固定化小球中奥奈达希瓦氏菌的浓度较低，酶催化反应速率会变慢，导致脱色率降低；若质量比过大，则奥奈达希瓦氏菌消耗量大，成本会增加。
(4)在搅拌条件下，将所述混合菌液滴加到含氯化钙的饱和硼酸溶液中进行交联反应，获得固定化小球。
作为优选，所述含氯化钙的饱和硼酸溶液中，氯化钙的质量分数为1％，所述含氯化钙的饱和硼酸溶液的pH为4.0～7.0，温度为5～15℃。本发明中，含氯化钙的饱和硼酸溶液作为交联剂。实验发现，交联剂的pH以及其中氯化钙的质量分数对固定化小球的成球性具有较大影响，当交联剂的pH为4.0～7.0、氯化钙的质量分数为1％时，成球操作容易，固定化小球的活性较高。
含氯化钙的饱和硼酸溶液，其本身pH为3.4左右，这种酸性环境不仅会对微生物的生长产生抑制作用，致其活性下降，也会影响PVA的凝胶过程。因此本发明中需要将其pH调节至6.5～7.0，以便降低固定化过程中酸性环境对微生物活性的影响。
同时，试验发现，交联温度对固定化小球的脱色率也具有较大影响。其中，当交联温度在5～15℃(更优选为5℃)时，制得的固定化小球中奥奈达希瓦氏菌的活性较高，脱色率较高，且较低的温度也有利于交联反应的进行。
滴加混合菌液时，液珠应当是逐滴加入的，液珠与液珠之间不存在连续，否则无法生成固定化小球。
同时，搅拌速度应控制在150～200r/min。若搅拌速度过快，由于离心力较大容易造成固定化小球发生拖尾现象；若搅拌速度过慢，则固定化小球之间容易发生粘连。
滴加混合菌液的仪器(如注射器)的出液口直径对固定化小球的大小有直接影响，出液口直径过小容易造成活性炭粉末堵塞，液珠中活性炭含量少导致固定化小球中菌含量稀少，出液口直径过大则形成的固定化小球过大，不利于小球微环境内的物质交换，导致细菌生长环境不佳。
优选地，滴加混合菌液的仪器的出液口直径为0.5～0.8mm。获得的固定化小球用生理盐水洗涤后，再加少量生理盐水以使固定化小球表面保持湿润，再置于4℃下保存、备用。
鉴于奥奈达希瓦氏菌在印染废水脱色中的突出效果，本发明还提供了一种奥奈达希瓦氏菌固定化小球，该奥奈达希瓦氏菌固定化小球由以下方法制备而成：
(1)将聚乙烯醇加入水中，在80～90℃水浴下搅拌至完全溶解，向溶解液中加入海藻酸钠，搅拌，混合均匀，获得PVA-SA悬浊液；
(2)向奥奈达希瓦氏菌菌悬液中加入活性炭，混合吸附，获得预处理液；
(3)将所述预处理液加入到已冷却的PVA-SA悬浊液中，搅拌，混合均匀，获得混合菌液；
(4)在搅拌条件下，将所述混合菌液滴加到含氯化钙的饱和硼酸溶液中进行交联反应，获得奥奈达希瓦氏菌固定化小球。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
本发明首次提出了将奥奈达希瓦氏菌用于印染废水处理中，奥奈达希瓦氏菌对印染废水的脱色效率尤为突出，因此本发明将奥奈达希瓦氏菌制成固定化小球，固定化小球不仅有效提高了奥奈达希瓦氏菌的重复利用率，而且大大提高了对印染废水的脱色效率，脱色效率最高可达43.31％。
附图说明
图1为本发明奥奈达希瓦氏菌固定化小球的外观图；
具体实施方式
下面结合附图和具体实施方式对本发明的技术方案作进一步的详细说明。
实施例1 奥奈达希瓦氏菌固定化小球的制备
一种奥奈达希瓦氏菌固定化小球的制备方法，包括以下步骤：
(1)称取8g聚乙烯醇(平均聚合度为1800±100)加到100mL去离子水中，浸泡30min后，在80～90℃水浴下搅拌至完全溶解，然后向溶解液中加入0.5g海藻酸钠，搅拌，混合均匀，获得PVA-SA悬浊液；
(2)将奥奈达希瓦氏菌菌种以挑取单菌落接种在6mL LB培养基(氯化钠，5g；酵母粉，5g；蛋白胨，10g)内，培养约48h；将培养液在3000r/min下离心20min，移去上清液，用质量分数为0.9％生理盐水清洗，重复操作离心2次后，再加入质量分数为0.9％生理盐水，配制成奥奈达希瓦氏菌菌悬液；
(3)向12mL奥奈达希瓦氏菌菌悬液中加入0.2g活性炭，混合吸附10min，获得预处理液；
(4)将预处理液加入到已冷却的PVA-SA悬浊液中，预处理液与PVA-SA悬浊液的质量比为1:20，搅拌，混合均匀，获得混合菌液；
搅拌速度以不产生气泡为宜；
(5)滴管(出液口直径为0.6mm)滴加20mL含1％氯化钙的饱和硼酸溶液(硼酸浓度为4％，用NaHCO3调节pH至6.5，溶液温度为5℃)，交联10min，获得固定化小球，此过程保持磁力搅拌，搅拌速度180r/min；
将固定化小球取出，用生理盐水洗涤2～3次，再加少量生理盐水以使固定化小球表面保持湿润，置于4℃下保存、备用。
由图1可见，本实施例制备的固定化小球外观圆润，颗粒直径在2～3mm之间，活性炭颗粒在固定化小球中分布均匀。
实施例2～4
采用与实施例1相同的方法制备奥奈达希瓦氏菌固定化小球，但步骤(1)的PVA-SA悬浊液中，聚乙烯醇和海藻酸钠的质量分数变为：
实施例2：聚乙烯醇2％，海藻酸钠1％；
实施例3：聚乙烯醇4％，海藻酸钠1％；
实施例4：聚乙烯醇6％，海藻酸钠1％。
实施例5：聚乙烯醇10％，海藻酸钠1％。
观察发现，当所使用的PVA-SA悬浊液中PVA的质量分数为6～10％(海藻酸钠为1％)时，可以成球，当当PVA-SA悬浊液中聚乙烯醇与海藻酸钠的质量比为8:1(实施例1)时，最易形成固定化小球，固定化小球的成球率最高；而当PVA的质量分数过低时，形成的固定化小球弹性差，强度低；当PVA的质量分数过高时，PVA不易溶解，利用率低。
实施例6～10
采用与实施例1相同的方法制备奥奈达希瓦氏菌固定化小球，但步骤(4)中，预处理液与PVA-SA悬浊液的质量比变为1:5、1:10、1:30、1:40、1:50。
实施例11～13
采用与实施例1相同的方法制备奥奈达希瓦氏菌固定化小球，但步骤(5)中，含1％氯化钙的饱和硼酸溶液的温度为5℃、15℃。
实施例14～16
采用与实施例1相同的方法制备奥奈达希瓦氏菌固定化小球，但步骤(5)中，饱和硼酸溶液中氯化钙的质量分数为0.5％、2％、5％。
实施例17～20
采用与实施例1相同的方法制备奥奈达希瓦氏菌固定化小球，但步骤(5)中饱和硼酸溶液的pH为6.0、7.0、7.5，同时设置不调节pH的对照组。
测试例1 奥奈达希瓦氏菌固定化小球对模拟印染废水的处理
利用上述实施例制备的奥奈达希瓦氏菌固定化小球对印染废水进行脱色处理的方法，包括以下步骤：
(1)模拟印染废水的配制：
按以下配方配制模拟印染废水：
甲基橙30mg/L，硫酸锰5.7mg/L，葡萄糖800mg/L，硫酸镁59.3mg/L，硫酸亚铁0.3mg/L，尿素40mg/L，碳酸氢钠100mg/L，磷酸二氢钾47.5mg/L，氯化钙5.7mg/L，pH7.0。
(2)取200μL模拟印染废水加入到96孔板中，用酶标仪在450nm的吸收波长下进行吸光值测定，并拍照、记录，重复三次取平均值；
(3)在每支试管中加入10mL模拟印染废水，并将实施例1～18制备的奥奈达希瓦氏菌固定化小球按质量比20:1分别加入试管中，同一实施例的奥奈达希瓦氏菌固定化小球设置三个平行试管，将所有试管放入28℃的生化培养箱密封遮光培养48h；
(4)48h后，取出试管，8000rpm/min离心3min，取200μL上清液加入到96孔板中，用酶标仪在450nm的吸收波长下进行吸光值测定，并拍照、记录，重复三次取平均值；
(5)根据以下公式计算脱色率：
其中，A0代表了染料的初始吸光度，At是在不同时间点上染料的吸光度。
1、实施例1和实施例6～10制备的奥奈达希瓦氏菌固定化小球对印染废水的脱色率见表1。
表1 实施例1、6～10制备的奥奈达希瓦氏菌固定化小球对印染废水的脱色率比较
预处理液与PVA-SA悬浊液的质量比 脱色率(％)
实施例6(1:5) 33.89
实施例7(1:10) 37.66
实施例1(1:20) 43.31
实施例8(1:30) 39.97
实施例9(1:40) 34.36
实施例10(1:50) 26.96
由表1可见，随预处理液与PVA-SA悬浊液的质量比逐渐变小，奥奈达希瓦氏菌固定化小球对印染废水的脱色率也逐渐降低。这是因为预处理液与PVA-SA悬浊液的质量比越小，固定化小球中奥奈达希瓦氏菌的含量越低，导致酶催化反应速度变慢。
考虑到成本和奥奈达希瓦氏菌的消耗，预处理液与PVA-SA悬浊液的质量比优选为1:20。
2、实施例1、11～13制备的奥奈达希瓦氏菌固定化小球对印染废水的脱色率结果见表2。
表2 实施例1、11～12制备的奥奈达希瓦氏菌固定化小球对印染废水的脱色率比较
交联温度(℃) 脱色率(％)
实施例11(5℃) 34.76
实施例1(10℃) 43.31
实施例12(15℃) 32.23
由表2可见，当交联温度控制在5～15℃时，获得的固定化小球的脱色效率较佳。
3、实施例1、13～15制备的奥奈达希瓦氏菌固定化小球对印染废水的脱色率结果见表3。
表3 实施例1、13～15制备的奥奈达希瓦氏菌固定化小球对印染废水的脱色率比较
饱和硼酸溶液中氯化钙的质量分数(％) 脱色率(％)
实施例13(0.5％) 29.60
实施例1(1.0％) 43.31
实施例14(2.0％) 35.96
实施例15(5.0％) 29.49
由表3可见，在氯化钙质量分数在1.0％～2.0％之间，获得的固定化小球的脱色效率较佳。
4、实施例1、17～18制备的奥奈达希瓦氏菌固定化小球对印染废水的脱色率结果见表4。
表4 实施例1、16～19制备的奥奈达希瓦氏菌固定化小球对印染废水的脱色率比较
饱和硼酸溶液的pH 脱色率(％)
实施例16(4.0) 8.25
实施例17(6.0) 25.50
实施例1(6.5) 43.31
实施例18(7.0) 27.41
实施例19(7.5) 24.33
由表4可见，通过将含氯化钙的饱和硼酸溶液(本身pH约为3.4)的pH调节至6.5～7.0，可以降低固定化过程中酸性环境对微生物活性的影响，保证固定化小球的脱色效果。
测试例2 脱色处理条件对脱色率的影响
以实施例1制备的奥奈达希瓦氏菌固定化小球为例，考察脱色处理过程中的参数变化对其脱色率的影响。
1、印染废水组成
配制LB培养液100mL(配方：氯化钠5g/L；酵母粉5g/L；蛋白胨10g/L，pH 7.0)，高温高压灭菌，待用。
设置三种待处理印染废水：①配制含30mg/L甲基橙的LB培养液，每支试管中分装10mL，分装三支试管；
②配制含30mg/L甲基橙、59.3mg/L硫酸镁、5.7mg/L氯化钙、5.7mg/L硫酸锰、0.3mg/L硫酸亚铁的LB培养液，每支试管中分装10mL，分装三支试管；
③与测试例1相同的模拟印染废水，每支试管中分装10mL，分装三支试管。
采用与测试例1相同的方法检测实施例1制备的奥奈达希瓦氏菌固定化小球对上述三种待处理印染废水的脱色率，结果见表5。
表5 奥奈达希瓦氏菌固定化小球对三种不同待处理印染废水的脱色率
待处理印染废水 脱色率(％)
① 79.42
② 81.68
③ 43.31
由表5可见，LB培养液的存在对固定化小球的脱色率有积极作用，而印染废水中金属离子的存在则对固定化小球的脱色率有一定的抑制作用。
提示在具体应用过程中，可以在向印染废水投加奥奈达希瓦氏菌固定化小球的同时，向印染废水中添加适量的细菌培养液，以提高固定化小球的活性。同时，若能在使用奥奈达希瓦氏菌固定化小球前，预先除去印染废水中的金属离子将能提高固定化小球的脱色率。
2、固定化小球持续使用时间
采用与测试例1相同的方法检测实施例1制备的奥奈达希瓦氏菌固定化小球对模拟印染废水(该模拟印染废水的组成与测试例1，下同)的脱色率，但步骤(3)和(4)中，每隔24h测定一次废水的吸光值，并计算其脱色率，考察固定化小球持续使用时间对脱色率的影响，结果见表6。
表6 不同时间段内奥奈达希瓦氏菌固定化小球对模拟印染废水的脱色率
固定化小球持续使用时间(h) 脱色率(％)
24 13.08
48 43.31
72 50.56
120 56.95
168 59.97
336 82.22
432 89.13
504 92.60
由表6可见，在72～168h内，固定化小球对模拟印染废水的脱色率波动较小。72h时脱色率降低，72h后脱色率有所回升，可能是固定小球降解破裂，导致细菌从中出来，悬浮细菌与固定化细菌同时存在于模拟印染废水中，造成脱色率出现上升。
提示实际应用过程中，当奥奈达希瓦氏菌固定化小球持续使用72h后，应当回收，下次再行投入使用。
3、脱色底物浓度
采用与测试例1相同的方法检测实施例1制备的奥奈达希瓦氏菌固定化小球对模拟印染废水的脱色率，但改变模拟印染废水中甲基橙的浓度，考察脱色底物浓度对固定化小球脱色率的影响，考察结果见表7。
表7 不同甲基橙浓度下奥奈达希瓦氏菌固定化小球对模拟印染废水的脱色率
甲基橙浓度(mg/L) 脱色率(％)
15 29.97
30 43.31
60 40.72
90 32.55
120 27.59
150 24.22
由表7可见，在底物浓度低于100mg/L时，当底物浓度较低时，脱色率也较低。这是因为底物浓度低时，基本上不被光化细菌降解。当底物浓度增加后，脱色率也随之增加。
4、脱色环境温度
采用与测试例1相同的方法检测实施例1制备的奥奈达希瓦氏菌固定化小球对模拟印染废水的脱色率，但改变步骤(3)中生化培养箱的温度，分别考察脱色环境温度对奥奈达希瓦氏菌固定化小球、奥奈达希瓦氏菌菌悬液(OD600＝0.5)的脱色率的影响，考察结果见表8。
表8 不同温度下奥奈达希瓦氏菌对模拟印染废水的脱色率
由表8可见，奥奈达希瓦氏菌菌悬液的脱色率随温度升高而降低，在20℃时最高为58.03％。而奥奈达希瓦氏菌固定化小球的脱色率在28℃时最高为43.31％。固定化后，奥奈达希瓦氏菌的适宜脱色温度相对提高了。
提示在天气炎热的地区或季节，可以使用奥奈达希瓦氏菌固定化小球进行印染废水脱色；而在气温较低的地区或季节，可以使用奥奈达希瓦氏菌菌悬液进行印染废水脱色。
5、脱色环境pH
采用与测试例1相同的方法检测实施例1制备的奥奈达希瓦氏菌固定化小球对模拟印染废水的脱色率，但改变模拟印染废水的pH，分别考察脱色环境pH对奥奈达希瓦氏菌固定化小球、奥奈达希瓦氏菌菌悬液(OD600＝0.5)的脱色率的影响，考察结果见表9。
表9 不同pH下奥奈达希瓦氏菌对模拟印染废水的脱色率
由表9可见，奥奈达希瓦氏菌菌悬液在偏碱性环境下具有较佳的脱色率，在pH为8时脱色率最高达45.2％，高于固定化小球在这个环境下的脱色率；而奥奈达希瓦氏菌固定化小球在偏酸性环境下具有较佳的脱色率，在pH为6时脱色率最高达43.02％，高于菌悬液在这个环境下的脱色率；并且在pH为7～8时固定化小球的脱色率仍较为可观。
6、使用次数
将奥奈达希瓦氏菌固定化小球置于模拟印染废水中培养24h后取出，用生理盐水冲洗2-3次，投加到相同浓度的模拟印染废水中，在相同条件下脱色24h后，在重复以上操作数次，直至固定化小球出现降解破裂，计算次数，并测定脱色率，检测结果见表10。
表10 重复使用对奥奈达希瓦氏菌固定化小球脱色率的影响
使用次数 脱色率(％)
1 13.08％
2 7.05％
3 -2.81％
由表10可见，第二次比第一次脱色率高，这说明，重复脱色对固定化小球来说是一个驯化过程，菌体能更好的利用染料作为底物进行生长代谢活动。但第三次比第二次有所下降，这是因为固定化小球开始出现溶胀破解现象，小球内部空间已不能满足菌体生长所需；重复使用4次后，固定化小球破裂程度增加，废水中悬浮菌体的数量远高于固定化小球中的菌体数量，其生长空间充足，在底物仍然充足的情况下，生长没有受到抑制，因此脱色率有所回升。
提示适当增加小球机械强度可提高固定化小球的重复利用率，使其有效运用于实际生产中。

Claims (10)

1.奥奈达希瓦氏菌及奥奈达希瓦氏菌固定化小球在处理印染废水中的应用。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述印染废水的染料浓度不低于30 mg/L。
3.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于，包括：将所述奥奈达希瓦氏菌驯化后制成菌悬液，将所述菌悬液投加到所述印染废水中；
所述印染废水的温度为16~22℃，pH为7.5~10。
4.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于，包括：将所述奥奈达希瓦氏菌制成固定化小球，将所述固定化小球驯化后投加到所述印染废水中；
所述印染废水的温度为22~40℃，pH为6~8。
5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述印染废水中，固定化小球的投加量为40~60 g/L。
6.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述固定化小球的制备方法包括以下步骤：
（1）将聚乙烯醇加入水中，在80~90℃水浴下搅拌至完全溶解，向溶解液中加入海藻酸钠，搅拌，混合均匀，获得PVA-SA悬浊液；
（2）向奥奈达希瓦氏菌菌悬液中加入活性炭，混合吸附，获得预处理液；
（3）将所述预处理液加入到已冷却的PVA-SA悬浊液中，搅拌，混合均匀，获得混合菌液；
（4）在搅拌条件下，将所述混合菌液滴加到含氯化钙的饱和硼酸溶液中进行交联反应，获得固定化小球。
7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，步骤（1）中，所述PVA-SA悬浊液中，聚乙烯醇的质量分数为8%，海藻酸钠的质量分数为1%，所述聚乙烯醇的平均聚合度为1800±100。
8.如权利要求6所述的应用，其特征在于，步骤（3）中，所述预处理液与PVA-SA悬浊液的质量比为1:10~1:20。
9.如权利要求6所述的应用，其特征在于，步骤（4）中，所述含氯化钙的饱和硼酸溶液中，氯化钙的质量分数为1%，所述含氯化钙的饱和硼酸溶液的pH为6.5~7.0，温度为5~15℃。
10.一种奥奈达希瓦氏菌固定化小球，其特征在于，由以下方法制备而成：
（1）将聚乙烯醇加入水中，在80~90℃水浴下搅拌至完全溶解，向溶解液中加入海藻酸钠，搅拌，混合均匀，获得PVA-SA悬浊液；
（2）向奥奈达希瓦氏菌菌悬液中加入活性炭，混合吸附，获得预处理液；
（3）将所述预处理液加入到已冷却的PVA-SA悬浊液中，搅拌，混合均匀，获得混合菌液；
（4）在搅拌条件下，将所述混合菌液滴加到含氯化钙的饱和硼酸溶液中进行交联反应，获得奥奈达希瓦氏菌固定化小球。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN110407400A (zh) * 2019-06-18 2019-11-05 范明淯 基于微生物的农业水污染处理装置及应用
CN111320266A (zh) * 2020-02-28 2020-06-23 江苏大学 一种低碳源成本的染料厌氧生物脱色体系及方法

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