CN107173393A - 防治草莓采前采后病害及促生长的菌剂、制备方法及应用 - Google Patents

防治草莓采前采后病害及促生长的菌剂、制备方法及应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种防治草莓采前采后病害及促进生长的菌剂，原料由以下质量百分比的组分组成：85～95％的混合发酵菌液、0.05～0.1％的吐温80、0.2～0.5％的氯化钙、0.1～0.5％的硅酸钠、0.75～2％的壳聚糖，余量为水；混合发酵菌液由梅奇酵母Y‑3发酵菌液、伯克氏菌B‑1发酵菌液以及肠杆菌B‑6‑1发酵菌液按照1：1～2：0.5～1的质量比组成。此外，本发明还提供了一种防治草莓采前采后病害及促进生长的菌剂的制备方法及其应用。本发明的菌剂采前喷施，有效降低了草莓采后病害的发生率，降低草莓果实采后的腐烂率，还促进了草莓生长，为草莓的绿色生产及保鲜提供了新途径。

Description

防治草莓采前采后病害及促生长的菌剂、制备方法及应用
技术领域
本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种防治草莓采前采后病害及促进生长的菌剂、制备方法及其应用。
背景技术
草莓属蔷薇科草莓属，果实颜色鲜艳，果肉酸甜适口，具有很高的营养及经济价值。但是由于其果皮娇嫩，极易产生机械伤，易导致采后生理失调、水分损失和病原菌侵染。草莓在采后贮藏或贮运过程中，引起果实腐烂的病原菌大多来源于田间，因此，在田前采取有效措施来降低采后果实表面的带菌量，对于减少采后腐烂有重要作用。
目前降低草莓采前采后腐烂的主要方法是使用化学杀菌剂，而化学杀菌剂会给环境和人类健康造成威胁以及带来病原菌的抗药性等问题，从而使其使用范围越来越受限制，所以寻找其它防治方法势在必行。
发明内容
本发明提供的一种防治草莓采前采后病害及促进生长的菌剂，解决了草莓采前容易发生病害，采后容易腐烂的问题。
本发明的第一个目的是提供一种防治草莓采前采后病害及促进生长的菌剂，其原料由以下质量百分比的组分组成：85～95％的混合发酵菌液、0.05～ 0.1％的吐温80、0.2～0.5％的氯化钙、0.1～0.5％的硅酸钠、0.75～2％的壳聚糖，余量用水补足到100％；
所述混合发酵菌液中菌落总数为1.0×106～1.0×1011cfu/ml；
所述混合发酵菌液由Metschnikowia zizyphicola Y-3发酵菌液、伯克氏菌B-1(Burkholderia contaminans B-1)发酵菌液以及肠杆菌B-6-1 (Enterobacter cowaniiB-6-1)发酵菌液按照1：1～2：0.5～1的质量比混合而成；
其中，所述Metschnikowia zizyphicola Y-3发酵菌液是由Metschnikowiazizyphicola Y-3纯菌株培养到对数末期得的；所述伯克氏菌B-1发酵菌液是由伯克氏菌B-1纯菌株培养到对数末期得到的；所述肠杆菌B-6-1发酵菌液是由肠杆菌B-6-1纯菌株培养到对数末期得到的。
优选的，所述防治草莓采前采后病害及促进生长的菌剂，其原料由以下质量百分比的组分组成：90％的混合发酵菌液、0.08％的吐温80、0.3％的氯化钙、 0.3％的硅酸钠、1％的壳聚糖，余量用水补足到100％；
所述混合发酵菌液中菌落总数为1.0×108cfu/ml；
所述混合发酵菌液由Metschnikowia zizyphicola Y-3发酵菌液、伯克氏菌B-1发酵菌液以及肠杆菌B-6-1发酵菌液按照2：2：1的质量比混合而成。
本发明的第二个目的是提供一种防治草莓采前采后病害及促进生长的菌剂的制备方法，包括以下步骤：
步骤1，将Metschnikowia zizyphicola Y-3的纯菌株在-80℃取出后于28℃下在PDA平板划线培养48h，然后挑取单菌落于NYDB液体培养基中，以200r/min 的振荡速度培养72h，得到Metschnikowia zizyphicola Y-3的初始发酵菌液；
将伯克氏菌B-1的纯菌株在-80℃取出后于28℃下在PDA平板划线培养 48h后，挑取单菌落于YSP液体培养基中，以200r/min的振荡速度培养24h，得到伯克氏菌B-1的初始发酵菌液；
将肠杆菌B-6-1的纯菌株在-80℃取出后于28℃下在PDA平板划线培养48h 后，挑取单菌落于LB液体培养基中，以200r/min的振荡速度培养24h，得到肠杆菌B-6-1的初始发酵菌液；
步骤2，将Metschnikowia zizyphicola Y-3的初始发酵菌液置于NYDB液体培养基中，然后在28℃下以200r/min振荡速度培养至对数末期，得到 Metschnikowiazizyphicola Y-3发酵菌液；
将伯克氏菌B-1的初始发酵菌液置于NYDB液体培养基中，然后在28℃下以200r/min振荡速度培养至对数末期，得到伯克氏菌B-1发酵菌液；
将肠杆菌B-6-1的初始发酵菌液置于NYDB液体培养基中，然后在28℃下以200r/min振荡速度培养至对数末期，得到肠杆菌B-6-1发酵菌液；
步骤3，将步骤2中得到的Metschnikowia zizyphicola Y-3发酵菌液、伯克氏菌B-1发酵菌液以及肠杆菌B-6-1发酵菌液按1：1～2：0.5～1的质量比混合，得到混合发酵菌液；
步骤4，称取质量百分比为90％的上述混合发酵菌液、0.05％～0.1％的吐温80、0.2～0.5％的氯化钙、0.1～0.5％硅酸钠、0.75％～2％的壳聚糖，余量用水补足100％；
步骤5，向步骤4中称取的混合发酵菌液中添加步骤4中称取的吐温80、氯化钙、硅酸钠、壳聚糖以及水，混合均匀后，即得到所述防治草莓采前采后病害及促进生长的菌剂。
优选的，每升所述YSP液体培养基中包含下述组分：蛋白胨10g、酵母膏 5g、葡萄糖10g，余量为水。
优选的，每升所述NYDB液体培养基中包含下述组分：牛肉膏8g，酵母浸膏5g、葡萄糖10g，余量为水。
优选的，每升所述LB液体培养基中包含下述组分：胰蛋白胨10g、酵母提取物5g、NaCl 10g，余量为水。
本发明的第三个目的是提供一种防治草莓采前采后病害及促进生长的菌剂在草莓生长以及采前采后病害防治中的应用。
微生物保藏信息说明：
Metschnikowia zizyphicola Y-3：已保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国武汉市武汉大学，其保藏号为CCTCC NO.M2016564，保藏日期：2016年 10月17日。
伯克氏菌B-1(Burkholderia contaminans B-1)：已保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国武汉市武汉大学，保藏号为CCTCC NO.M2014076，保藏日期：2014年3月7日。
肠杆菌B-6-1(Enterobacter cowanii B-6-1)：已保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国武汉市武汉大学，保藏号为CCTCC NO.M2012398，保藏日期：2012年10月11日。
其中，伯克氏菌B-1已经在2016年10月12日授权的授权公告号为CN 104109645 B的中国专利《用于防治果蔬采后病害的菌株及生防防菌剂》中被公开；
肠杆菌B-6-1已经在2016年4月27日授权的授权公告号为CN 103952327 B的中国专利《防治果蔬采后病害的生物拮抗菌株、其制备方法及其应用》中被公开。
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
1)本发明提供的防治草莓采前采后病害及促进生长的菌剂在采前喷施可以有效降低草莓采后病害的发生率，同时还能促进草莓生长。
2)本发明提供的防治草莓采前采后病害及促进生长的菌剂在采后喷施能有效降低果实表面带菌量，降低草莓果实采后的腐烂率，为草莓的绿色生产及保鲜提供了新途径。
附图说明
图1为采前喷施实施例2制备出的防治草莓采前采后病害及促进生长的菌剂对草莓果实灰霉病的影响结果图；
图2为采前喷施实施例2制备出的防治草莓采前采后病害及促进生长的菌剂对草莓果实自然腐烂的影响结果图。
具体实施方式
为了使本领域技术人员更好地理解本发明的技术方案能予以实施，下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，但所举实施例不作为对本发明的限定。
本发明各实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
实施例1
一种防治草莓采前采后病害及促进生长的菌剂，其原料由以下质量百分比的组分组成：85％的混合发酵菌液、0.05％的吐温80、0.5％的氯化钙、0.1％的硅酸钠、2％的壳聚糖，余量用水补足到100％；
混合发酵菌液中菌落总数为1.0×106cfu/ml；
混合发酵菌液由Metschnikowia zizyphicola Y-3发酵菌液、伯克氏菌B-1发酵菌液以及肠杆菌B-6-1发酵菌液组成按照1：1.5：0.8的质量比混合而成；
其中，Metschnikowia zizyphicola Y-3发酵菌液是由Metschnikowiazizyphicola Y-3纯菌株培养到对数末期得的；伯克氏菌B-1发酵菌液是由伯克氏菌B-1纯菌株培养到对数末期得到的；肠杆菌B-6-1发酵菌液是由肠杆菌B-6-1 纯菌株培养到对数末期得到的。
具体实施步骤如下：
步骤1，将Metschnikowia zizyphicola Y-3的纯菌株在-80℃取出后于28℃下在PDA平板划线培养48h，然后挑取单菌落于NYDB液体培养基中，以200r/min 的振荡速度培养72h，得到Metschnikowia zizyphicola Y-3的初始发酵菌液；
将伯克氏菌B-1的纯菌株在-80℃取出后于28℃下在PDA平板划线培养 48h后，挑取单菌落于YSP液体培养基中，以200r/min的振荡速度培养24h，得到伯克氏菌B-1的初始发酵菌液；
将肠杆菌B-6-1的纯菌株在-80℃取出后于28℃下在PDA平板划线培养48h 后，挑取单菌落于LB液体培养基中，以200r/min的振荡速度培养24h，得到肠杆菌B-6-1的初始发酵菌液；
其中，每升YSP液体培养基中包含下述组分：蛋白胨10g、酵母膏5g、葡萄糖10g，余量为水；
其中，每升NYDB液体培养基中包含下述组分：牛肉膏8g、酵母浸膏5g、葡萄糖10g，余量为水；
其中，每升LB液体培养基中包含下述组分：胰蛋白胨10g、酵母提取物 5g、NaCl10g，余量为水；
步骤2，将Metschnikowia zizyphicola Y-3的初始发酵菌液置于NYDB液体培养基中，然后在28℃下以200r/min振荡速度培养至对数末期，得到 Metschnikowiazizyphicola Y-3发酵菌液；
将伯克氏菌B-1的初始发酵菌液置于NYDB液体培养基中，然后在28℃下以200r/min振荡速度培养至对数末期，得到伯克氏菌B-1发酵菌液；
将肠杆菌B-6-1的初始发酵菌液置于NYDB液体培养基中，然后在28℃下以200r/min振荡速度培养至对数末期，得到肠杆菌B-6-1发酵菌液；
步骤3，将步骤2中得到的Metschnikowia zizyphicola Y-3发酵菌液、伯克氏菌B-1发酵菌液以及肠杆菌B-6-1发酵菌液按照1：1.5：0.8的质量比混合，得到混合发酵菌液；
步骤4，称取质量百分比为85％的上述混合发酵菌液、0.05％的吐温80、 0.5％的氯化钙、0.1％的硅酸钠、2％的壳聚糖，余量用水补足100％；
步骤5，向步骤4中称取的混合发酵菌液中添加步骤4中称取的吐温80、氯化钙、硅酸钠、壳聚糖以及水，混合均匀后，即得到所述防治草莓采前采后病害及促进生长的菌剂。
实施例2
一种防治草莓采前采后病害及促进生长的菌剂，其原料由以下质量百分比的组分组成：90％的混合发酵菌液、0.08％的吐温80、0.3％的氯化钙、0.3％的硅酸钠、1％的壳聚糖，余量用水补足到100％；
混合发酵菌液中菌落总数为1.0×108cfu/ml；
混合发酵菌液由Metschnikowia zizyphicola Y-3发酵菌液、伯克氏菌B-1发酵菌液以及肠杆菌B-6-1发酵菌按照1：1：0.5的质量比混合而成。
具体实施步骤如下：
步骤1，将Metschnikowia zizyphicola Y-3的纯菌株在～80℃取出后于28℃下在PDA平板划线培养48h，然后挑取单菌落于NYDB液体培养基中，以 200r/min的振荡速度培养72h，得到Metschnikowia zizyphicola Y-3的初始发酵菌液；
将伯克氏菌B-1的纯菌株在-80℃取出后于28℃下在PDA平板划线培养 48h后，挑取单菌落于YSP液体培养基中，以200r/min的振荡速度培养24h，得到伯克氏菌B-1的初始发酵菌液；
将肠杆菌B-6-1的纯菌株在-80℃取出后于28℃下在PDA平板划线培养48h 后，挑取单菌落于LB液体培养基中，以200r/min的振荡速度培养24h，得到肠杆菌B-6-1的初始发酵菌液；
其中，NYDB液体培养基、YSP液体培养基以及LB液体培养基同实施例 1；
步骤2，将Metschnikowia zizyphicola Y-3的初始发酵菌液置于NYDB液体培养基中，然后在28℃下以200r/min振荡速度培养至对数末期，得到 Metschnikowiazizyphicola Y-3发酵菌液；
将伯克氏菌B-1的初始发酵菌液置于NYDB液体培养基中，然后在28℃下以200r/min振荡速度培养至对数末期，得到伯克氏菌B-1发酵菌液；
将肠杆菌B-6-1的初始发酵菌液置于NYDB液体培养基中，然后在28℃下以200r/min振荡速度培养至对数末期，得到肠杆菌B-6-1发酵菌液；
步骤3，将步骤2中得到的Metschnikowia zizyphicola Y-3发酵菌液、伯克氏菌B-1发酵菌液以及肠杆菌B-6-1发酵菌液按照1：1：0.5的质量比混合，得到混合发酵菌液；
步骤4，称取质量百分比为90％的上述混合发酵菌液、0.08％的吐温80、 0.3％的氯化钙、0.3％的硅酸钠、1％的壳聚糖，余量用水补足100％；
步骤5，向步骤4中称取的混合发酵菌液中添加步骤4中称取的吐温80、氯化钙、硅酸钠、壳聚糖以及水，混合均匀后，即得到所述防治草莓采前采后病害及促进生长的菌剂。
实施例3
一种防治草莓采前采后病害及促进生长的菌剂，其原料由以下质量百分比的组分组成：95％的混合发酵菌液、0.1％的吐温80、0.2％的氯化钙、0.5％的硅酸钠、0.75％的壳聚糖，余量用水补足100％；
所述混合发酵菌液中菌落总数为1.0×1011cfu/ml；
所述混合发酵菌液由Metschnikowia zizyphicola Y-3发酵菌液、伯克氏菌B-1发酵菌液以及肠杆菌B-6-1发酵菌液按照1：2：1的质量比混合而成；
具体实施步骤如下：
步骤1，将Metschnikowia zizyphicola Y-3的纯菌株在-80℃取出后于28℃下在PDA平板划线培养48h，然后挑取单菌落于NYDB液体培养基中，以200r/min 的振荡速度培养72h，得到Metschnikowia zizyphicola Y-3的初始发酵菌液；
将伯克氏菌B-1的纯菌株在-80℃取出后于28℃下在PDA平板划线培养 48h后，挑取单菌落于YSP液体培养基中，以200r/min的振荡速度培养24h，得到伯克氏菌B-1的初始发酵菌液；
将肠杆菌B-6-1的纯菌株在-80℃取出后于28℃下在PDA平板划线培养48h 后，挑取单菌落于LB液体培养基中，以200r/min的振荡速度培养24h，得到肠杆菌B-6-1的初始发酵菌液；
其中，NYDB液体培养基、YSP液体培养基以及LB液体培养基同实施例 1；
步骤2，将Metschnikowia zizyphicola Y-3的初始发酵菌液置于NYDB液体培养基中，然后在28℃下以200r/min振荡速度培养至对数末期，得到 Metschnikowiazizyphicola Y-3发酵菌液；
将伯克氏菌B-1的初始发酵菌液置于NYDB液体培养基中，然后在28℃下以200r/min振荡速度培养至对数末期，得到伯克氏菌B-1发酵菌液；
将肠杆菌B-6-1的初始发酵菌液置于NYDB液体培养基中，然后在28℃下以200r/min振荡速度培养至对数末期，得到肠杆菌B-6-1发酵菌液；
步骤3，将步骤2中得到的Metschnikowia zizyphicola Y-3发酵菌液、伯克氏菌B-1发酵菌液以及肠杆菌B-6-1发酵菌液按照1：2：1的质量比混合，得到混合发酵菌液；
步骤4，称取质量百分比为95％的混合发酵菌液、0.1％的吐温80、0.2％的氯化钙、0.5％的硅酸钠、0.75％的壳聚糖，余量用水补足100％；
步骤5，向步骤4中称取的混合发酵菌液中添加步骤4中称取的吐温80、氯化钙、硅酸钠、壳聚糖以及水，混合均匀后，即得到所述防治草莓采前采后病害及促进生长的菌剂。
下面结合防治草莓采前采后病害及促进生长的菌剂的应用来对本发明的效果做进一步的说明。
由于实施例1-3制备出的菌剂用来喷施草莓后，测定出的草莓各项性能参数相似，因此仅以实施例2中优选的菌剂喷施草莓后测定出的性能参数作为说明。
一、利用实施例2的防治草莓采前采后病害及促进生长的菌剂对草莓病害的防治实验
实验材料：草莓(品种为“红颜”)于山西省榆次市东阳镇温室种植，未使用化学杀菌剂。
对照样：使用无菌水喷洒。
处理样：使用实施例2制备出的防治草莓采前采后病害及促进生长的菌剂。
实施方法：分别于采前6d、3d和0d时使用手动喷雾器对草莓进行喷施，喷施到有液滴滴下为止，每个喷施期重复喷施3次，每次喷施重复40株草莓，待草莓成熟期时将喷施过的草莓果实采收后运回实验室，挑选色泽一致无机械伤的果实进行实验，实验结果如下：
1、采前喷施菌剂对草莓果实灰霉病的控制
将上述采收后的草莓果实在浓度为1×105孢子/ml的灰葡萄孢悬液中蘸 10s，无菌风吹干后将其装入灭菌塑料盒中，加塑料袋保湿后依次放置于6℃下 15d和16℃下7d，记录病害发生率，每批处理重复3次，具体实验结果见图1。
从图1可以看出，16℃下贮藏7d后，用菌剂处理的草莓果实灰霉菌的发病率为32.23％，而对照样的草莓果实灰霉菌的发病率为93.87％；6℃下贮藏15d 的草莓果实灰霉菌的发病情况与16℃下贮藏7d的情况相似，喷洒3次菌剂处理后草莓果实灰霉菌的发病率相对于对照样来说也明显降低，由此可见，相对于喷施无菌水的草莓对照样来说，喷施本发明的菌剂能够很好的控制采后草莓果实灰霉病的发病率。
2、采前喷施菌剂对草莓果实自然腐烂的影响
将采收后的草莓果实装入塑料盒中，将塑料盒保湿放置于6℃下15d和16℃下7d，记录果实的腐烂率，每批处理重复3次，具体实验结果见图2。
从图2可看出，采前喷施菌剂后，在两个不同温度下，喷施菌剂处理过的草莓果实腐烂率明显降低，处理后在6℃，15d时腐烂率为24.14％，16℃，7d 时腐烂率为20.72％。而对照样的腐烂率在16℃，7d时为78.98％，在6℃，15d 时为76.73％。因此，喷施本发明的复合菌剂能够很好的防止草莓腐烂，降低草莓的腐烂率。
3、采前喷施菌剂对草莓果实采后品质的影响
果实表面色差值采用CR-400型色差仪(Minolta，日本)测定，其中L*值表示亮度，a*值负值表示绿光，正值表示红光，H值表示色相角，色差值均在果实赤道部位进测定，采前喷施菌剂对草莓果实采后表面色差的影响见表1。
表1采前复合菌剂处理对草莓采后色泽变化的影响
从表1中可以看出，经过贮藏期后两个不同温度条件下的用复合菌剂处理过的样品亮度值均下降。与对照样相比，两个温度下贮藏7d和15d后，虽然处理样的L*值比对照样略高，但差异并不显著。a*值和H值也得到相似的结论，经贮藏后各处理样a*值普遍升高，而H值普遍降低，表明果实颜色进一步转红，而处理样与对照样间差异不明显，表明采前喷施菌剂对草莓果实贮藏期颜色影响并不明显。
采前喷施菌剂对草莓品质的影响见表2。
表2采前复合菌剂处理对草莓采后品质的影响
采前喷施菌剂对草莓品质的影响见表2，16℃下贮藏7d后草莓果实失重率较6℃下15d大，但在相同温度条件下无显著差异。此外，采前喷施菌剂可以在一定程度上延缓果实硬度、SSC、可滴定酸、Vc含量的下降。
二、利用实施例2的防治草莓采前采后病害及促进生长的菌剂对草莓生长影响的实验
实验材料：草莓(品种为“红颜”)于山西省榆次市东阳镇温室种植，未使用化学杀菌剂。
对照样：使用无菌水喷洒。
处理样：使用实施例2制备出的防治草莓采前采后病害及促进生长的菌剂。
实验过程：在草莓盛果期时(4月上旬)，于白粉病发生较严重的地块对草莓植株进行喷施，隔2天喷洒1次菌剂，共喷3次。喷施时使用手动喷雾器对草莓进行喷施，喷施到有液滴滴下为止，每次喷施重复120株草莓，对对照不作处理。最后一次喷施菌剂10d后，观察记录对照和处理的草莓植株生长情况，记录草莓植株的株高、地上部鲜重、单株叶片数，以及白粉病的发生情况。
1、菌剂对草莓的促生效应
喷施复合菌剂后对草莓的促生效果见表3。
表3菌剂处理对草莓苗生长的影响
处理 株高(cm) 植株鲜重 单株叶片数
处理样 24.26±0.27 103.59±2.42 7.53±0.28
对照样 19.56±0.43 89.42±2.83 5.31±0.42
从表3可以看出，采前喷施3次菌剂对草莓植株的生长表现出一定促进作用。与对照植株相比，喷施3次的草莓植株比较健壮，叶片浓绿，长势明显优于对照，采前喷施3次的植株株高、植株鲜重和单株叶片数均有明显增加。
2、菌剂对白粉病的抑制作用
喷洒菌剂剂10d后，将处理和对照进入转红期以后的草莓全部采收，并分别统计草莓果实和植株白粉病的发病率，实验结果见表4。
表4菌剂处理对草莓苗白粉病的影响
处理 植株发病率 果实发病率
处理样 12.97±1.42 56.43±2.18
对照样 27.52±1.35 29.08±1.53
从表4可以看出，处理样的植株发病率和果实发病率菌明显低于对照样，喷施复合菌剂后草莓苗抑制白粉病发病率的效果明显。
尽管已描述了本发明的优选实施例，但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念，则可对这些实施例作出另外的变更和修改。所以，所附权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。
显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内也意图包含这些改动和变型在内。

Claims (7)

1.一种防治草莓采前采后病害及促进生长的菌剂，其特征在于，其原料由以下质量百分比的组分组成：85～95％的混合发酵菌液、0.05～0.1％的吐温80、0.2～0.5％的氯化钙、0.1～0.5％的硅酸钠、0.75～2％的壳聚糖，余量用水补足到100％；
所述混合发酵菌液中的菌落总数为1.0×106～1.0×1011cfu/mL；
所述混合发酵菌液由梅奇酵母Y-3(Metschnikowia chrysoperlae Y-3)发酵菌液、伯克氏菌B-1(Burkholderia contaminans B-1)发酵菌液以及肠杆菌B-6-1(EnterobactercowaniiB-6-1)发酵菌液按照1：1～2：0.5～1的质量比混合而成；
其中，所述梅奇酵母Y-3发酵菌液是由梅奇酵母Y-3纯菌株培养到对数末期得的；所述伯克氏菌B-1发酵菌液是由伯克氏菌B-1纯菌株培养到对数末期得到的；所述肠杆菌B-6-1发酵菌液是由肠杆菌B-6-1纯菌株培养到对数末期得到的。
2.根据权利要求1所述的防治草莓采前采后病害及促进生长的菌剂，其特征在于，其原料由以下质量百分比的组分组成：90％的混合发酵菌液、0.08％的吐温80、0.3％的氯化钙、0.3％的硅酸钠、1％的壳聚糖，余量用水补足到100％；
所述混合发酵菌液中菌落总数为1.0×108cfu/ml；
所述混合发酵菌液由梅奇酵母Y-3发酵菌液、伯克氏菌B-1发酵菌液以及肠杆菌B-6-1发酵菌液按照1：1：0.5的质量比混合而成。
3.根据权利要求1所述的防治草莓采前采后病害及促进生长的菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1，将梅奇酵母Y-3的纯菌株在-80℃取出后于28℃下在PDA平板划线培养48h，然后挑取单菌落于NYDB液体培养基中，以200r/min的振荡速度培养72h，得到梅奇酵母Y-3的初始发酵菌液；
将伯克氏菌B-1的纯菌株在-80℃取出后于28℃下在PDA平板划线培养48h后，挑取单菌落于YSP液体培养基中，以200r/min的振荡速度培养24h，得到伯克氏菌B-1的初始发酵菌液；
将肠杆菌B-6-1的纯菌株在-80℃取出后于28℃下在PDA平板划线培养48h后，挑取单菌落于LB液体培养基中，以200r/min的振荡速度培养24h，得到肠杆菌B-6-1的初始发酵菌液；
步骤2，将梅奇酵母Y-3的初始发酵菌液置于NYDB液体培养基中，然后在28℃下以200r/min振荡速度培养至对数末期，得到梅奇酵母Y-3发酵菌液；
将伯克氏菌B-1的初始发酵菌液置于NYDB液体培养基中，然后在28℃下以200r/min振荡速度培养至对数末期，得到伯克氏菌B-1发酵菌液；
将肠杆菌B-6-1的初始发酵菌液置于NYDB液体培养基中，然后在28℃下以200r/min振荡速度培养至对数末期，得到肠杆菌B-6-1发酵菌液；
步骤3，将步骤2中得到的梅奇酵母Y-3发酵菌液、伯克氏菌B-1发酵菌液以及肠杆菌B-6-1发酵菌液按1：1～2：0.5～1的质量比混合，得到混合发酵菌液；
步骤4，称取质量百分比为85～95％的上述混合发酵菌液、0.05％～0.1％的吐温80、0.2～0.5％的氯化钙、0.1～0.5％硅酸钠、0.75％～2％的壳聚糖，余量用水补足100％，备用；
步骤5，向步骤4中称取的混合发酵菌液中添加步骤4中称取的吐温80、氯化钙、硅酸钠、壳聚糖以及水，混合均匀后，即得到所述防治草莓采前采后病害及促进生长的菌剂。
4.根据权利要求3所述的防治草莓采前采后病害及促进生长的菌剂的制备方法，其特征在于，每升所述YSP液体培养基中包含下述组分：蛋白胨10g、酵母膏5g、葡萄糖10g，余量为水。
5.根据权利要求4所述的防治草莓采前采后病害及促进生长的菌剂的制备方法，其特征在于，每升所述NYDB液体培养基中包含下述组分：牛肉膏8g、酵母浸膏5g、葡萄糖10g，余量为水。
6.根据权利要求5所述的防治草莓采前采后病害及促进生长的菌剂的制备方法，其特征在于，每升所述LB液体培养基中包含下述组分：胰蛋白胨10g、酵母提取物5g、NaCl 10g，余量为水。
7.根据权利要求1所述的菌剂在草莓生长以及采前采后病害防治中的应用。
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