CN107108632A

CN107108632A - 作为激酶调节剂的氘化的***并哒嗪

Info

Publication number: CN107108632A
Application number: CN201580065572.0A
Authority: CN
Inventors: P·B·富雷尔; R·A·H·J·吉利森; I·N·乌皮; L·梅尔珀尔; T·P·S·佩雷拉; P·J·派伊
Original assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Current assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Priority date: 2014-12-04
Filing date: 2015-12-03
Publication date: 2017-08-29
Anticipated expiration: 2035-12-03
Also published as: CN107108632B; US10464939B2; KR102643179B1; PL3227296T3; PT3227296T; HUE050285T2; EP3227296B1; ES2795666T3; JP2017537112A; US10138246B2; IL252356B; TW201636350A; EA033193B1; EP3227296A1; SG11201704078XA; CA2968294A1; JP6795502B2; CA2968294C; AU2015357085A1; ZA201703386B

Abstract

本发明涉及一种式(I)***并哒嗪化合物，其N氧化物、药学上可接受的盐和溶剂合物，其中D表示氘，使用这些化合物作为蛋白质酪氨酸激酶调节剂，特别是c‑Met的抑制剂，以及这些化合物用于减少或抑制细胞或受试者(对象)中c‑Met的激酶活性，并调节细胞或受试者(对象)中的c‑Met表达，以及这些化合物用于预防或治疗受试者(对象)中细胞增殖性障碍和/或与c‑Met相关的障碍的用途。本发明进一步涉及包含本发明化合物的药物组合物和治疗诸如癌症和其它细胞增殖性障碍的状况的方法。

Description

作为激酶调节剂的氘化的***并哒嗪

技术领域

本发明涉及用作蛋白质酪氨酸激酶调节剂的新化合物。更具体地说，本发明涉及作为c-Met的抑制剂的新化合物。

本发明背景技术

本发明涉及作为酪氨酸激酶、包括c-Met抑制剂的***并哒嗪。已经报道了具有有用治疗特性的***并哒嗪，其包括在WO2007/075567中。

蛋白质激酶是信号转导途径的酶组分，其催化末端磷酸从ATP转移到蛋白质的酪氨酸，丝氨酸和/或苏氨酸残基的羟基。因此，抑制蛋白质激酶功能的化合物是评估蛋白质激酶激活的生理后果的有价值的工具。正常或突变蛋白质激酶在哺乳动物中的过度表达或不适当的表达已成为广泛研究的课题，已被证明在许多疾病的发展中发挥重要作用，所述疾病包括糖尿病，血管生成，银屑病，再狭窄，眼部疾病，精神***症，类风湿关节炎，动脉粥样硬化，心血管疾病和癌症。还研究了激酶抑制的强心益处。总之，蛋白质激酶的抑制剂在人和动物疾病的治疗中具有特别的用途。

肝细胞生长因子(HGF)(也称为散射因子(SF))受体、c-Met是调节细胞增殖、形态发生和运动的受体酪氨酸激酶。将c-Met基因翻译成170kD蛋白，其被加工成由140kDβ跨膜亚单位和50kD糖基化的细胞外α亚单位组成的细胞表面受体。

c-Met中的突变，c-Met和/或HGF/SF的过表达，相同细胞的c-Met和HGF/SF的表达，以及过表达和/或异常c-Met信号传导存在于多种人类实体瘤中，并且被认为参与血管生成，肿瘤发生，侵袭和转移。

例如，具有不受控制的c-Met激活的细胞系都是高侵袭性和转移性的。表达c-Met受体的正常细胞和转化细胞之间的显著差异是肿瘤细胞中酪氨酸激酶结构域的磷酸化通常与配体的存在无关。

已经在多种人类疾病中识别出C-Met突变/改变，所述疾病包括肿瘤和癌症-例如遗传性和散发性人***状肾癌，乳腺癌，结肠直肠癌，胃癌，胶质瘤，卵巢癌，肝细胞癌，头部和颈部鳞状细胞癌，睾丸癌，基底细胞癌，肝癌，肉瘤，恶性胸膜间皮瘤，黑素瘤，多发性骨髓瘤，骨肉瘤，胰腺癌，***癌，滑膜肉瘤，甲状腺癌，非小细胞肺癌(NSCLC)和小细胞肺癌，膀胱移行细胞癌，睾丸癌，基底细胞癌，肝癌和白血病，淋巴瘤和骨髓瘤例如急性淋巴细胞白血病(ALL)，急性髓样白血病(AML)，急性早幼粒细胞白血病(APL)，慢性淋巴细胞白血病(CLL)，慢性髓样白血病(CML)，慢性嗜中性粒细胞白血病(CNL)，急性未分化白血病(AUL)，间变性大细胞淋巴瘤(ALCL)，幼淋巴细胞白血病(PML)，青少年骨髓单核细胞白血病(JMML)，成人T细胞ALL，具有三系骨髓发育不良(trilineage myelodysplasia)的AML(AML/TMDS)，混合谱系白血病(MLL)，骨髓发育不良综合征(MDS)，骨髓增生性疾病(MPD)，多发性骨髓瘤，(MM)，髓样肉瘤，非霍奇金淋巴瘤和霍奇金病(也称为霍奇金淋巴瘤)。

由于异常HGF/SF-Met信号传导在各种人类癌症发病机制中的作用，c-Met受体酪氨酸激酶的抑制剂在治疗癌症中具有广泛的应用，在所述癌症中Met活性有助于侵袭/转移表型，包括那些c-Met不被过度表达或以其他方式改变的癌症。c-Met的抑制剂也抑制血管生成，因此被认为可用于治疗与新血管***形成相关的疾病，例如类风湿性关节炎，视网膜病变。

c-Met的过表达也被认为是某些疾病预后的潜在有用的预测因子，所述疾病例如乳腺癌，非小细胞肺癌，胰腺内分泌肿瘤，***癌，食管腺癌，结肠直肠癌，唾液腺癌，弥漫性大B细胞淋巴瘤和子宫内膜癌。

已经设计出许多策略来减弱人类肿瘤中的异常Met信号传导。这些策略中的一些包括使用HGF拮抗剂和小分子抑制剂。

对具有以下结构的有效和选择性c-Met抑制剂的安全性、药代动力学、药效学和初始功效

(以下称为化合物A)

在I期、首次在人体中的试验中进行了探索。这导致了意外肾毒性的检测。这些数据与临床前试验相矛盾，临床前试验相显示了在大鼠和狗中的无毒性特征。进行了大量额外的临床前实验来了解肾脏效应的性质。代谢数据指向的方向是，兔子成为合适的毒理学物种。兔的毒理学研究表明，化合物A确实影响肾功能，并且组织学分析显示晶体形成，随之而来的是肾脏的退行性和炎性变化。进一步的研究表明醛氧化酶依赖性物种特异性的不溶性代谢产物的产生，所述不溶性代谢产物通过肾小管中的晶体形成引起肾损伤。发现以下代谢产物形成晶体：

代谢产物1：

6-{二氟[6-(1H-吡唑-4-基)[1,2,4]***并[4,3-b]哒嗪-3-基]甲基}喹啉-2(1H)-酮。

代谢产物2:

6-{二氟[6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)[1,2,4]***并[4,3-b]哒嗪-3-基]甲基}喹啉-2(1H)-酮。

代谢产物2的溶解度:

在pH 4.84，0.001mg/ml的溶解度

在pH 7.33，0.002mg/ml的溶解度。

因为没有确定可行的策略来规避肾毒性，所以放弃了化合物A的进一步临床开发。

发明概述

本发明提供了一种新的***并哒嗪作为蛋白质酪氨酸激酶调节剂，特别是c-Met的抑制剂，以及这种化合物在细胞或受试者(对象)中减少或抑制c-Met的激酶活性并调节c-Met在细胞或受试者(对象)中的表达的用途，以及这种化合物在受试者(对象)中预防或治疗细胞增殖性障碍和/或与c-Met相关的障碍的用途。特别地，本发明涉及所述化合物用作药物，其用于治疗细胞增殖性障碍和/或与c-Met相关的障碍。本发明涉及所述化合物用于预防或治疗，特别是治疗癌症，细胞增殖性障碍和/或与c-Met相关的病症，或涉及所述化合物在制备药物中的用途，所述药物用于预防或治疗，特别是治疗癌症，细胞增殖性障碍和/或与c-Met相关的障碍。

本发明还涉及包含本发明化合物和药学上可接受的载体的药物组合物。本发明的另一方面是通过将本发明的化合物和药学上可接受的载体混合而制备的药物组合物。

本发明的其它特征和优点将从以下对本发明的详细说明和权利要求书中显而易见。

附图

图1：A)EBC-1的蛋白质印迹；B)在EBC-1细胞中归一化至肌动蛋白的pMet蛋白水平；C)Snu-5B的蛋白质印迹：D)归一化至Snu-5细胞中的肌动蛋白的pMet蛋白水平。

发明详述

本发明涉及下列式(I)化合物：

和其N氧化物、药学上可接受的盐和溶剂合物，其中D表示氘。

在一方面，本发明涉及下列式(I)化合物：

以及其药学上可接受的盐和溶剂合物，其中D表示氘。

在一方面，本发明涉及下列式(I)化合物：

和其药学上可接受的盐，其中D表示氘。

在一方面，本发明涉及下列式(I)化合物：

其中D表示氘。

将认识到，根据合成中使用的化学材料的来源，天然同位素丰度的某些变化发生在合成化合物中。因此，化合物A的制备将固有地含有少量的氘。与本发明化合物的氘含量相比，这种天然存在的氘的浓度小(天然丰度为0.015％)并且是非重要的。

本发明的化合物与这种天然存在的次要形式不同，因为本发明中使用的术语“化合物”是指其中氘的丰度远高于天然丰度(0.015％)(例如，至少高1000倍(15％))的物质组合物。

在本发明的一个方面，式(I)化合物在喹啉的2-位具有的氘含量(D)为至少50％(D/H比率至少1:1)，至少60％，至少70％，至少80％，至少90％，至少91％，至少92％，至少93％，至少94％，至少95％，至少96％，至少97％，至少98％，至少99％。优选地，喹啉的2位中的氘含量(D)是至少93％，更优选喹啉的2-位的氘含量(D)是至少97％或98％。

当一个位置被特别指定为“H”或“氢”，或其化学表现意味着氢时，它应被理解为具有天然丰度同位素组成的氢。

被发现的是，通过本发明式(I)化合物，不溶性/较不溶性的醛氧化酶介导的代谢产物的形成被下调。这可能降低肾毒性。

此外，发现的是，与化合物A的代谢(CYP450介导的代谢产物形成的上调)相比，本发明式(I)化合物具有代谢转换。在本发明式(I)化合物的情况下，在施用化合物A时，与具有以下结构的N-去甲基代谢产物的形成相比

更多具有以下结构的N-去甲基代谢产物形成

(活性代谢产物)。这可能降低与化合物A相比的式(I)化合物的治疗有效剂量。

此外，发现的是，式(I)化合物也显示对OCT2细胞中¹⁴C-二甲双胍摄取的抑制。

如下文所用，术语“式(I)的化合物”和“式(I)的化合物”也包括其N-氧化物，药学上可接受的盐和溶剂合物。

药学上可接受的盐

本发明的化合物还可以药学上可接受的盐，特别是药学上可接受的酸加成盐的形式存在。

对于在药物中的用途，本发明化合物的盐是指无毒的“药学上可接受的盐”。FDA批准药学上可接受的盐形式(参考International J.Pharm.1986，33，201-217；J.Pharm.Sci.，1977，Jan，66(1)，p1)包括药学上可接受的酸性/阴离子或碱性/阳离子盐。

药学上可接受的酸加成盐包括但不限于乙酸盐，苯磺酸盐，苯甲酸盐，碳酸氢盐，酒石酸氢盐，溴化物，依地酸钙，樟脑磺酸盐，碳酸盐，氯化物，柠檬酸盐，二盐酸盐，依地酸盐，乙二磺酸盐，依托酸盐(estolate)，乙磺酸盐，富马酸盐，glyceptate，葡糖酸盐，谷氨酸盐，乙醇酰对氨基苯基砷酸盐(glycollylarsanilate)，己基间苯二酚盐(hexylresorcinate)，海巴明，氢溴酸盐，氢氯酸盐，羟基萘甲酸盐，碘化物，羟乙基磺酸盐，乳酸盐，乳糖酸盐，苹果酸盐，马来酸盐，扁桃酸盐，甲磺酸盐，甲基溴，甲基硝酸盐，甲基硫酸盐，粘酸盐，萘磺酸盐，硝酸盐，双羟萘酸盐，泛酸盐，磷酸盐/二磷酸盐(磷酸氢盐)，聚半乳糖醛酸盐，水杨酸盐，硬脂酸盐，次乙酸盐，琥珀酸盐，硫酸盐，鞣酸盐，酒石酸盐，8-氯茶碱盐，甲苯磺酸盐和三乙基碘化物。有机酸或无机酸还包括但不限于氢碘酸，高氯酸，硫酸，磷酸，丙酸，乙醇酸，甲磺酸，羟基乙磺酸，草酸，2-萘磺酸，对甲苯磺酸，环己烷氨基磺酸，已糖酸(saccharinic)或三氟乙酸。本发明的药学上可接受的盐还包括其立体化学异构形式。

立体异构形式

本领域技术人员将认识到，式(I)化合物，特别是在盐的情况下，其结构中可具有一个或多个不对称碳原子。意图是，本发明在其范围内包括化合物的单一对映异构体形式，外消旋混合物，和存在对映异构体过量的对映异构体的混合物。

本文所用的术语“单一对映异构体”定义了式(I)化合物可能具有的所有可能的纯手性形式。

立体化学纯的异构形式可以通过应用本领域已知的原理获得。非对映异构体可以通过物理分离方法如分级结晶和色谱技术分离，并且对映异构体可以通过非对映异构体盐与光学活性酸或碱的选择性结晶或通过手性色谱法彼此分离。纯立体异构体也可以由适当的立体化学纯的原料合成制备，或通过使用立体选择性反应制备。

术语“异构体”是指具有相同组成和分子量但物理和/或化学性质不同的化合物。这些物质具有相同数量和种类的原子，但结构不同。结构差异可以是构型(几何异构体)或旋转偏振光平面(对映异构体)的能力。

术语“立体异构体”是指在空间中原子排列不同的相同构成的异构体。对映异构体和非对映异构体是其中不对称取代的碳原子充当手性中心的立体异构体。

术语“手性”是指不能将其叠加在其镜像上的分子的结构特征。

术语“对映异构体”是指一对分子物质之一，它们是彼此的镜像并且不是重叠的。

术语“非对映体”是指不是镜像的立体异构体。

符号“R”和“S”表示手性碳原子周围的取代基的构型。

术语“外消旋体”或“外消旋混合物”是指由等摩尔量的两种对映异构体组成的组合物，其中组合物没有光学活性。

术语“纯手性”是指对映体纯度的状态。

术语“光学活性”是指纯手性分子或手性分子的非外消旋旋光混合物旋转偏振光平面的程度。

术语“几何异构体”是指与碳碳双键，环烷基环或桥连双环体系有关的取代基原子取向不同的异构体。在碳碳双键的每一侧上的取代基原子(不是H)可以是E或Z构型。在“E”(相对侧面)构型中，取代基在相对于碳碳双键的对侧；在“Z”(相同侧面)构型中，取代基定向在相对于碳碳双键的同侧。连接到碳环上的取代基原子(不是H)可以是顺式或反式构型。在“顺式”构型中，取代基处于相对于环的平面的同侧；在“反式”构型中，取代基处于相对于环的平面的相对侧。具有“顺式”和“反式”物质混合物的化合物被称为“顺式/反式”。

应当理解，用于制备本发明化合物的各种可被取代的立体异构体，几何异构体和其混合物是可商购的，可以从市售的原料合成制备，或者可以制备为异构体混合物，然后使用本领域普通技术人员熟知的技术作为拆分的异构体的形式而获得。

如本文所述，使用异构体描述符“R”，“S”，“E”，“Z”，“顺式”和“反式”表示相对于核心分子的原子构型，并且旨在使用如文献(IUPAC Recommendation for FundamentalStereochemistry(E节)，Pure Appl.Chem.，1976，45：13-30)中所定义的。

本发明的化合物可以通过异构体特异性合成或从异构体混合物中拆分来制备为单个异构体。常规拆分技术包括使用光学活性盐形成异构体对的每个异构体的游离碱(随后是分级结晶和游离碱的再生)，形成异构体对的各异构体的酯或酰胺(随后是色谱分离和去除手性助剂)或使用制备型TLC(薄层色谱法)或手性HPLC(高性能/高压液相色谱)柱拆分原料或最终产物的异构体混合物。

同质多象变体和溶剂合物

此外，本发明的化合物可以具有一种或多种多晶型晶型或者可以是无定形的。因此，这些形式旨在被包括在本发明的范围内。此外，化合物可以形成溶剂合物，例如与水(即水合物)或普通的有机溶剂(例如醇)形成溶剂合物。如本文所用，术语“溶剂合物”是指本发明的化合物与一个或多个溶剂分子的物理缔合。这种物理缔合涉及不同程度的离子和共价键，包括氢键。在某些情况下，溶剂合物将能够分离，例如当一个或多个溶剂分子掺入结晶固体的晶格中时。术语“溶剂合物”旨在包括溶液相和可分离的溶剂合物。合适的溶剂合物的非限制性实例包括乙醇化物，甲醇化物等。意图是本发明在其范围内包括本发明化合物的溶剂合物。本发明化合物的药学上可接受的盐和N-氧化物也可以形成溶剂合物。本发明化合物的药学上可接受的盐和N-氧化物的溶剂合物也包括在本发明的范围内。

因此，在本发明的治疗或预防方法中，术语“施用”应包括用本发明化合物或其溶剂合物治疗、改善或预防本文所述的综合征、障碍或疾病的手段，其显然将被包括在本发明的范围内，尽管没有具体公开。

本发明化合物的制备

式(I)化合物可以通过以下来制备：还原氘化式(II)的中间体(其中W₁表示氯，溴或碘，碘是优选的)，在氘气存在下，并在合适的催化剂(例如钯催化剂，例如钯炭10％(10％Pd/C)或Pt催化剂，钯催化剂，特别是钯炭是优选的)存在下，在合适的溶剂或溶剂混合物(例如甲醇，氘化甲醇(d1-MeOD，d4-MeOD)，四氢呋喃，N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)或其混合物，例如四氢呋喃和甲醇的混合物，或四氢呋喃和氘化甲醇的混合物，后者是优选的)存在下，在合适的碱(例如三乙胺或碳酸钠(Na₂CO₃)，后者是优选的)存在下。优选将催化剂干燥，因为痕量的水可以作为氢源。此外，催化剂优选用氘气预氘化以除去催化剂界定的氢。此外，优选洗涤催化剂以除去催化剂界定的氢。溶剂混合物中氘化甲醇与四氢呋喃的v:v比率优选为1:9至1:2，优选为1:4。

式(I)化合物也可以通过以下制备：使式(III)的中间体(其中W₂表示合适的离去基团，例如卤代，例如氯代等)与式(IV)的中间体在合适的溶剂(如醇，例如正丁醇)的存在下反应。

对于式(III)的中间体的合成，参考WO2007/075567，其通过引用并入本文。

式(I)化合物还可以通过以下来制备：使式(Ⅴ)的中间体(其中W₃表示合适的离去基团，例如卤代，例如卤代)与(VI)的中间体反应，在合适的催化剂(例如Pd₂dba₃)存在下，在合适的配体(例如P(tBu₃)BF₄)存在下，在合适的碱(例如Na₂CO₃)存在下，和在合适的溶剂(例如二氧六环)存在下。

对于式(VI)的中间体的合成，参考WO2007/075567，其通过引用并入本文。

式(Ⅴ)的中间体可以通过以下制备：使式(IV)的中间体与式(VII)的中间体(其中W₃如上定义)反应，在合适的溶剂例如醇如正丁醇存在下。

对于式(VII)的中间体的合成，参考WO2007/075567，其通过引用并入本文。

本发明的实施方案涉及制备式(I)化合物的方法，其特征在于：

a)在氘气存在下和在合适的催化剂、合适的溶剂或溶剂混合物、和合适的碱的存在下，还原氘化式(II)的中间体，其中W₁表示氯，溴或碘，

其中D表示氘；

b)使式(III)的中间体(其中W₂代表合适的离去基团)与式(IV)中间体(其中D表示氘)在合适的溶剂存在下反应，

c)在合适的催化剂、合适的碱和合适的溶剂的存在下，使式(Ⅴ)的中间体(其中W₃代表合适的离去基团，并且其中D代表氘)与式(VI)的中间体反应，

或者如果需要，通过用酸处理将式(I)化合物转化成治疗活性的无毒酸加成盐，或者相反地，通过用碱处理将酸加成盐形式转化成游离碱，或者，如果需要，制备其溶剂合物或N-氧化物形式。

单个化合物合成的实例如下所示。

实施例1

a)干燥催化剂：将催化剂10％Pd/C(Escat 1931，BASF)在使用前进行干燥。应用以下条件

·柜式干燥器，应用85℃/<100mbar/24小时，然后施加85℃/<1mbar/24小时

·湿催化剂在烧杯玻璃中扩散(填充高<5mm，用薄纸(组织)(tissue)覆盖的容器)

b)催化剂的预氘化：将含有19.3g干催化剂(10％Pd/C，Escat 1931，BASF)、40.6g碳酸钠(2当量，0.384mol，Aldrich 71347)，1.6L四氢呋喃(THF)(Aldrich 87371)和200mld1-甲醇(Aldrich 151939)的摇瓶(6L，玻璃)用氮气冲洗。将摇瓶密封，用三次循环氘/真空吹扫，最后置于氘气氛(1.05巴，绝对)下。起动摇床，催化剂在25℃预氘化1小时。

用氮气代替氘气，停止预氘化。最后，通过倾析除去溶剂。

c)还原性氘化方法：将96.5g原料1(0.192mol)在1.6l THF(Aldrich 87371)和390ml d1-甲醇(Aldrich 151939)中的浆料加入预氘化的催化剂/添加剂混合物中。将摇瓶密封，用三次循环氘/真空吹扫，最后置于氘气氛(1.05巴)下。启动摇床并监测氘吸收。(在第一个小时的反应时间内，氘的摄取处于非常低的水平)

24小时反应时间后，用氮气置换氘气，中断氘化。取分析样品并通过HPLC分析。根据HPLC分析，原料完全转化。

将反应混合物用1l二氯甲烷(DCM)稀释，滤出催化剂，滤饼用500ml DCM洗涤。为了分离所需产物2，通过在45℃/真空下蒸发除去溶剂。分离出约100g粗制产物，为黄色固体(仍含有无机盐)。

液-液提取：将粗制产物溶于1.6l DCM/1l 1M NaOH中并转移到分液漏斗中。混合后，分离两层，有机层用1l升去离子水洗涤。所有含水层用1l DCM提取第二次。将两个DCM层合并，用Na₂SO₄干燥，最后通过蒸发(45℃/真空)除去溶剂。

分离65.4g产物2(式(I)化合物)，为灰白色固体。根据HPLC分析，材料的纯度为97％。基于¹H-NMR分析，喹啉部分2-位的氘含量为98.6％

原料1按照以下反应方案制备：

步骤1：在合适的氧化试剂(例如mCPBA(间氯过苯甲酸))和合适的溶剂(例如二氯甲烷)存在下。反应在室温进行。

步骤2：在TosCl(甲苯磺酰氯；4-甲基苯磺酰氯)、合适的碱、例如NaOAc(乙酸钠)和合适的溶剂、例如二氯甲烷存在下，然后是在LiOH和合适的溶剂，例如醇，例如，甲醇存在下的反应。

步骤3：在NaI、(CF₃SO₂)₂O(三氟甲磺酸酐；三氟甲磺酸酐)的存在下，在合适的溶剂例如乙腈和吡啶的存在下。

合成原料3

将原料4(400g)(化合物A；WO2007/075567)，mCBA(间氯过苯甲酸)(1.2当量)和二氯甲烷(10V)(1V是每公斤原料1升)在室温混合17小时。将混合物用饱和Na₂CO₃水溶液中和直到pH>8。将混合物搅拌0.5小时。将混合物过滤，固体用水洗涤直到pH为约7。将固体在室温真空干燥。产量：410g原料3。

合成原料2

将原料3(410g)，TosCl(甲苯磺酰氯；4-甲基苯磺酰氯)(2当量)和二氯甲烷(20V)(1V为1升/kg原料)混合。加入NaOAc(4当量)，将混合物搅拌2小时。真空除去溶剂。加入甲醇(20V)。搅拌该混合物。加入LiOH·H₂O(5当量)，将混合物在室温下搅拌17小时。将混合物浓缩以除去16V甲醇，并加入20V水。将混合物用浓HCl中和直到pH为约6。将混合物搅拌0.5小时并过滤。将固体在50℃真空干燥。将固体用水(10V)制浆0.5小时。将混合物过滤。将固体在50℃真空干燥。重复制浆步骤和干燥步骤一次。产量：375g原料2。

合成原料1

将原料2(190g)，吡啶(1当量)和乙腈(10当量)混合，将混合物冷却至0℃以下。(CF₃SO₂)₂O(4当量)逐滴缓慢添加，反应温度控制在5℃以下。加入后，将混合物加热至20℃并搅拌1小时。将反应混合物冷却至0℃以下。(CF₃SO₂)₂O(1当量)逐滴缓慢添加。缓慢添加NaI(7V)(1V是1升/kg原料)，将反应温度控制在5℃以下。加入后，将反应混合物加热至50℃，在50℃下搅拌17小时。加入乙酸乙酯，混合物用水、10％Na₂S₂O₃溶液、盐水洗涤。有机层用无水Na₂SO₄干燥，用凝胶色谱纯化。产量：98.5g原料1。

实施例2：

·中间体1的合成：

·在室温将3-氯过氧苯甲酸(13.5g，78.4mmol)分批加入到在CHCl₃(300mL)中的6-碘代喹啉(CAS 13327-31-6)(10g，39.2mmol)。将反应混合物搅拌2天，然后倒入K₂CO₃10％的水溶液中。有机层用二氯甲烷(DCM)提取。将有机层干燥(MgSO₄)，过滤并蒸发至干，得到10.5g中间体1(99％)。

·中间体2的合成：

将中间体1(5.2g，19.2mmol)和NaOD(40％D₂O)溶液(3.4mL，48.4mmol)在D₂O(100mL)中的混合物加热至100℃持续2天。将混合物冷却至室温。加入D₂O，过滤沉淀物，用D₂O洗涤，干燥，得到4.9g中间体2(96％)。

中间体3的合成:

将中间体2(4.8g，17.64mmol)，HCOO-NH₄ ⁺(6.68g，0.106mol)和兰尼镍(6.2g，0.106mol)在MeOH(甲醇)(130mL)中的混合物加热至60℃，持续1.5小时。将反应混合物冷却至室温，倒入D₂O中，用K₂CO₃碱化，用EtOAc(乙酸乙酯)提取。将有机层干燥(MgSO₄)，过滤并蒸发至干。

将残余物(4g)通过硅胶色谱法纯化(80g不规则SiOH35-40μm，流动相：100％DCM至95％DCM 5％CH₃OH 0.1％NH₄OH的梯度)。收集纯级份并蒸发至干，得到2.9g中间体3(83％)。

中间体4的合成:

将(+)-L-抗坏血酸钠(2.32g，11.7mmol)在N₂气氛下，在室温，加入CuSO₄·5H₂O(1.95g，7.8mmol)在二甲基亚砜(DMSO)(25mL)中的溶液中，将混合物搅拌2小时。加入乙基溴二氟乙酸酯(0.55mL，4.3mmol)，将反应混合物搅拌1.5小时，然后加入中间体3(1g，3.9mmol)。在50℃加热15小时后，将混合物冷却至10℃，加入NH₂-NH₂.H₂O(4.76mL，78.1mmol)。滴加H₂O(12mL)(放热)，将混合物在室温下搅拌20分钟。加入EtOAc，将混合物通过短垫过滤。提取有机层，干燥(MgSO₄)，过滤并蒸发至干。

将残余物(1g)通过硅胶色谱法纯化(40g硅胶30μm，流动相：100％DCM至90％DCM10％CH₃OH 0.1％NH₄OH的梯度)。收集纯级份并蒸发至干，得到0.42g中间体4(45％)。

中间体5的合成:

将3，6-二氯哒嗪(4.57g，0.0031mol)，(1-甲基-1H-吡唑-4-基)硼酸频哪醇酯(3.82g，0.0184mol)和Na₂CO₃ 2M(18.3mL)的二氧六环(18.4mL)溶液搅拌1分钟。加入PdCl₂(PPh₃)₂(1.29g，0.0018mol)，将溶液在80℃加热15小时。将混合物冷却至室温并倒入水中。加入K₂CO₃，混合物通过短垫过滤。将有机层干燥(MgSO₄)，过滤并蒸发至干。将用CH₂Cl₂洗涤，将滤液干燥(MgSO₄)并蒸发。残余物从CH₂Cl₂中结晶。将沉淀物过滤并干燥，得到1.5g第一批中间体5(42％)。滤液通过硅胶色谱法纯化(30gSiOH15-40μm，流动相：CH₂Cl₂ 100％梯度，CH₂Cl₂ 95％/CH₃OH 5％)。收集纯级分并蒸发至干，得到1.58g第二批中间体5(44％)。

总产量＝86％

式(I)的化合物的合成:

将中间体4(0.41g，1.7mmol)和中间体5[943541-20-6](0.335g，1.7mmol)在正丁醇(30mL)中的混合物在125℃加热15小时。将反应混合物冷却至室温并蒸发至干。残余物通过硅胶色谱法纯化(40g不规则SiOH35-40μm，流动相：100％DCM至90％DCM 10％CH₃OH0.1％NH₄OH的梯度)。收集纯级份并蒸发至干。残余物(0.41g)通过非手性SFC(超临界流体色谱法)(固定相：2ETHYLPYRIDINE 6μm 150×21.2mm，流动相：85％CO₂，15％MeOH)纯化。收集纯级份并蒸发至干。将残余物(0.387g)从二异丙醚中结晶。将沉淀物过滤并干燥，得到0.315g式(I)的化合物(48％，喹啉部分2位的氘含量＝93-94％)。熔点＝201.6℃(DSC)。

实施例3

中间体6的合成:

将中间体4(0.42g，1.76mmol)和3，6-二氯哒嗪(0.788g，5.3mmol)在正丁醇(12mL)中的混合物在130℃加热2小时。将混合物冷却至室温并蒸发至干。加入DCM，并将混合物与10％K₂CO₃水溶液一起搅拌。提取有机层，干燥(MgSO₄)，过滤并蒸发至干。残余物(0.9g)通过硅胶色谱法纯化(40g不规则SiOH35-40μm，流动相：100％DCM至95％DCM 5％CH₃OH 0.1％NH₄OH的梯度)。收集纯级份并蒸发至干，得到0.385g中间体6(66％)。

式(I)的化合物的合成

在密封的管中，中间体6(183mg，0.55mmol)，(1-甲基-1H-吡唑-4-基)硼酸频哪醇酯(343mg，1.65mmol)，P(tBu₃)BF₄(47.9mg，0.165mmol)和Na₂CO₃ 2M(1.65mL，3.3mmol)在二氧六环(4mL)中的含水溶液用N₂吹扫10分钟。加入Pd₂dba₃(101mg，0.11mmol)，并将混合物再次吹扫5分钟。将混合物在85℃加热15小时并冷却至室温。(1-甲基-1H-吡唑-4-基)硼酸频哪醇酯(343mg，1.65mmol)，P(tBu₃)BF₄(47.9mg，0.165mmol)，Pd₂dba₃(101mg，0.11mmol)和Na₂CO₃ 2M水溶液(1.65mL，3.3mmol)被加入，将混合物加热至85℃，持续5小时。将混合物冷却至室温，倒入H₂O+K₂CO₃中并用EtOAc提取。将有机层干燥(MgSO₄)，过滤并蒸发至干。残余物通过硅胶色谱法纯化(24g不规则SiOH35-40μm，流动相：100％DCM至95％DCM 5％CH₃OH0.1％NH₄OH的梯度)。收集纯级份并蒸发至干，得到58mg式(I)化合物(28％，喹啉部分的2位中的氘含量为93-94％)。

实施例1中用于测定氘/氢含量的NMR方法

仪器 Bruker Avance 300

溶剂 CDCl₃

样品制备 10-25mg在0.7ml CDCl₃中，过滤的

探头 5mm QNP 1H/13

脉冲程序 zg30

扫描次数 16或254

温度 29℃

弛豫时间 4.6sec.

化学位移根据¹H-NMR预测，化学位移8.84ppm被预期(ChemOffice)。基于积分和预期的化学位移，氢信号在8.9至9.0ppm的范围内被分配到相应的位置。

实施例2和3中用于测定氘/氢含量的NMR方法

仪器 Bruker Avance III 500

溶剂 DMSO或CDCl₃

样品制备～4mg在0.7ml CDCl₃或DMSO中

探头 5mm TXI Z-GRD(¹H/¹³C/¹⁵N)

脉冲程序 zg30

扫描次数 16

温度 22℃

弛豫时间 1sec.

化学位移基于9.02ppm的积分和化学位移测定的氘/氢比。

实施例1中测定产品纯度的分析性HPLC方法

滞留时间:产物2(式(I)化合物):5.1分钟。

生物活性

可以在确定本发明范围内的化合物的生物活性时进行以下代表性测定。施用它们以非限制性的方式说明本发明。

通过式(I)化合物抑制携带Met扩增并依赖于Met信号传导的癌细胞的增殖

阿拉玛(Alamar)蓝增殖分析

将细胞接种在96孔板中在180μl生长培养基中。根据生长曲线测试，每孔的细胞数量对于每个细胞系是不同的。将细胞在37℃的培养箱中在潮湿的5％CO₂气氛中孵育过夜。第二天：制备化合物板，并将4μl化合物加入到196μl预热的培养基中。将前述的20μl加入到180μl细胞中。将这在37℃、加湿5％CO₂气氛中加入化合物后，孵育4天。4天后，加入40μl阿拉玛(Alamar)蓝溶液。将其在37℃在潮湿的5％CO₂气氛中孵育4小时(取决于细胞系，这是在生长曲线试验期间孵育不同小时之前测试的)。4小时后，在激发530nm、发射590nm处测量荧光。将对照的荧光(DMSO处理)作为100％，并且相对于对照值计算与化合物孵育的细胞的荧光，以％计。因此，可以制作剂量反应曲线，并且可以计算IC₅₀。

生长培养基，细胞培养基其被使用：

用于Snu-5培养基(Medium)

IMDM	500ml
		20％FCS	120ml
2mM L-谷氨酰胺	6ml
		50μg/ml庆大霉素	6ml

针对EBC-1培养基(Medium)

EMEM	500ml
		10％FCS	57ml
2mM L-谷氨酰胺	5.7ml
		1％PenStrep	5.7ml

结果：

细胞系	IC₅₀化合物A[M]	IC₅₀式(I)化合物[M]
			SNU-5	1.38E-8	1.32E-8
EBC1	1.34E-08	1.2E-08

通过式(I)化合物以剂量响应的方式抑制Met的磷酸化

蛋白质印迹

细胞系：EBC-1和Sun-5

样品在SDS-PAGE上运行。之后，凝胶在I-Blot机(Invitrogen)上运行。原理：通过电气将蛋白质转移到PDVF膜。

首先用封闭缓冲液(Odyssey Blocking buffer(PBS)；Licor)将PDVF膜在室温下封闭1小时。封闭后，将膜与第一抗体在4℃孵育过夜。第二天，用TBS-tween 0.1％洗涤印迹3次5分钟，将二抗在室温放在印迹上1小时。孵育后，用TBS-tween 0.1％洗涤印迹3次5分钟，扫描印迹以获取信号。

使用的抗体：

一抗：

信号传导技术(Cell Signaling technology)#3077，抗-(anti-)pMet(Tyr1234/1235)兔mAb，1/2,000

信号传导技术(Cell Signaling technology)#3127，抗-(anti-)Met(25H2)小鼠mAb，1/1,000

Sigma A1978，抗-(anti-)b-Act小鼠mAb，1/30,000

二抗：

Invitrogen#A21076，Alexa 680Goat Anti-Rabbit IgG(H+L)，1/4,000

Rockland#610-732-124，小鼠(Mouse)IgG(H&L)抗体(Antibody)缀合的预吸附的(Conjugated Pre-adsorbed)，1/4,000

结果如图1所示

新西兰白兔中化合物(I)、化合物A及其代谢产物的体内药代动力学测定。

使用雄性新西兰兔(Crl：KBL(NZW)，Charles River，法国)和新西兰雌性兔(NZWINRA A1077，Center Lago)。每化合物(化合物(I)和化合物A)使用一只雄性和两只雌性兔子，平均重量为2.6±0.2kg。从每只动物获得完整的血浆浓度时间曲线。标准饮食和自来水随意可用。式(I)化合物和化合物A都以1mg/ml的终浓度溶解在10％(w/v)SBE-B-CD(磺丁基醚-β-环糊精)研究级(Captisol)溶液中。加入HCl和PVP K30以促进化合物的溶解。总溶解后，将pH用NaOH升至2.6/2.7。制剂在室温下保存，免于光照，并在制备当天用LC-MS/MS定量分析。在施用当天检查制剂的稳定性。通过管饲法以10ml/kg口服施用动物以获得10mg/kg的最终剂量。从每个个体被施用的动物，在口服施用后30分钟，1，2，4，7和24小时取血样。通过从外耳静脉多次取样将血液收集到600K3E管(Sarstedt)中。将样品立即置于熔融的冰上，并以约1900×g在4℃离心10分钟后获得血浆。所有样品被屏蔽以避免日光，并在分析前保存在≤-18℃。血浆被分析以针对化合物(I)，化合物A，代谢产物1，代谢产物2，N-去甲基代谢产物3(其在N-去甲基代谢产物4的曲线上计算)和N-去甲基代谢产物4，使用合格的研究LC-MS/MS方法。报告了该方法的关键分析性能(线性，定量上限和下限，准确度和精度)以及血浆浓度。对于所有化合物，血浆的定量下限(LLOQ)为1.00ng/ml。使用Phoenix^TM Professional(6.2.1版)进行有限的药代动力学分析。对于所有数据，使用了使用lin/log内插的lin/log梯形规则的非分区分析。

结果

在雄性和雌性兔子中单次口服10mg/kg化合物(I)后，式(I)化合物及其代谢产物的基本药代动力学参数。还检测到化合物A(杂质)

*ND:未测定的

**MRT:平均停留时间(小时)

在雄性和雌性兔中单次口服10mg/kg化合物A后，化合物A及其代谢产物的基本药代动力学参数。

*ND:未测定的

**MRT:平均停留时间(小时)

代谢产物1:

6-{二氟[6-(1H-吡唑-4-基)[1,2,4]***并[4,3-b]哒嗪-3-基]甲基}喹啉-2(1H)-酮

代谢产物2:

6-{二氟[6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)[1,2,4]***并[4,3-b]哒嗪-3-基]甲基}喹啉-2(1H)-酮

N-去甲基代谢产物3；

N-去甲基代谢产物4；

6-{二氟[6-(1H-吡唑-4-基)[1,2,4]***并[4,3-b]哒嗪-3-基]甲基}喹啉

通过式(I)化合物对OCT2(SLC22A2)运输的抑制的体外研究

这是使用中国仓鼠(Chinese Hamster)卵巢(CHO)细胞进行测试，所述细胞是亲本或用OCT2稳定转染的。¹⁴C-二甲双胍用作OCT2底物。

亲本和用OCT2稳定转染的CHO细胞系获自Solvo Biotechnology(匈牙利)。

将CHO细胞培养于DMEM-F12(达尔伯克改良伊格尔培养基(Dulbecco's ModifiedEagle medium)，其补充有0.03mg/mL L-脯氨酸，1％L-谷氨酰胺，青霉素(50-100U/mL)，链霉素(50-100μg/mL)的)和10％(v/v)胎牛血清或牛血清(FCS)，进一步称为“CHO培养基”。

1.OCT2抑制试验

复方制剂

如果需要，将非放射性标记和放射性标记的化合物混合以获得适当的化学和放射性浓度。使用下表所示的溶剂制备储备溶液(200x)。包括适当的溶剂对照。所需试验项目及所有参考和抑制性化合物如下表所示。

对于亲本和OCT2转染的CHO细胞系：

孵育程序

T＝-24小时

在CHO培养基中，将CHO亲本和OCT2细胞两者接种到24孔板(1mL/孔，400000个细胞/孔)中。

实验日

运输实验在补充有pH7.4的10mM HEPES的Hank平衡盐溶液^+Ca，+Mg(HBSS^+/+)中进行。将所有添加到细胞和板中的培养基保持在37℃。

孵育前，每孔中的细胞在37℃用1mL HBSS^+/++10mM Hepes pH7.4洗涤两次。接下来，加入含有参考底物和抑制剂(或抑制剂溶剂)的培养基(250μL/孔)。

在施用时间(0分钟)时，将150μL施用溶液一式三份取样，以通过液体闪烁计数(LSC)测定初始浓度。在孵育期间，将板保持在37℃。

为了停止反应，向每个孔中加入1.5mL冰冷的HBSS^+/+并抽吸液体。再次，向每个孔中将2mL冰冷的HBSS^+/+加入并抽吸，同时保持板的角度。在最后一孔的抽吸之后，再次抽吸所有的孔，注意不接触细胞。

为了裂解细胞，将250μL的哺乳动物蛋白质提取试剂(M-PER)裂解缓冲液加入每个孔中，并且将板摇动至少10分钟(400rpm)。对于LSC，取150μL样品/孔，对于蛋白质，取25μL样品/孔。蛋白质分析根据双金鸡宁酸(bicinchoninic acid)(BCA)法进行。

数据分析

数据表示为每毫升蛋白质皮摩尔数，和对照的百分比(溶剂对照＝DMSO)。Sigmaplot用于计算IC₅₀值。

结果和讨论

与亲代细胞相比，在OCT2转染的CHO细胞中¹⁴C-二甲双胍(OCT2底物)的摄取高得多(7.39和17.2倍)。这种摄取被阳性对照抑制剂，300μM奎尼丁(85.5％，100％)抑制。这些数据表明使用的测定条件有效地用于研究测试化合物对OCT2依赖性运输的抑制作用。

式(I)化合物在OCT2细胞中显示¹⁴C-二甲双胍摄取的抑制，IC₅₀为0.67±0.02μM。

细胞毒性试验

式(I)化合物的细胞毒性在100μM测定，并且在CHO亲本和OCT2细胞中测定。还包括1％Triton-X100条件作为阳性对照细胞毒性试剂。孵育1分钟后，抽吸上清液，干细胞用1mLHBSS^+/++10mM Hepes pH 7.4(37℃)洗涤两次。抽吸缓冲液后，加入HBSS^+/++10mM Hepes pH7.4中PrestoBlue^TM活力试剂(Life Technologies)的1/10稀释液，将板在37℃下孵育60分钟，避光保存。将每个孔在黑色96孔板中取样(150μL)，并测量荧光(激发：560nm/12nm带宽，发射：590nm/12nm带宽)。

结果与讨论

对于100μM的式(I)化合物，没有观察到细胞毒性作用。使用阳性对照细胞毒性试剂，Triton X-100的1％溶液，活力急剧下降(见下表)。这表明可能的抑制作用与细胞活力的丧失无关。

治疗/预防方法；化合物的使用

在本发明的另在一方面，本发明的化合物可用于抑制酪氨酸激酶活性或表达，包括c-Met活性，降低激酶活性或表达，包括c-Met活性，以及调节细胞或受试者(对象)中c-Met的表达，或治疗受试者(对象)中与c-Met激酶活性或表达相关的障碍。c-Met活性的抑制被认为间接调节c-Met表达。

在这方面的一个实施方案中，本发明提供了在细胞中减少或抑制c-Met的激酶活性并调节c-Met表达的方法，包括使细胞与式(I)化合物接触的步骤。本发明还提供在受试者(对象)中减少或抑制c-Met的激酶活性并调节c-Met表达的方法，所述方法包括向受试者(对象)施用式(I)化合物的步骤。本发明还提供一种抑制细胞中细胞增殖的方法，包括使细胞与式(I)化合物接触的步骤。本发明还提供了用于减少或抑制c-Met的激酶活性并调节c-Met表达的式(I)化合物。

本文所用的术语“受试者(对象)”是指作为治疗，观察或实验对象的动物，优选哺乳动物，最优选人。

本文所用的术语“接触”是指向细胞中加入化合物使得化合物被细胞摄取。

在这方面的其它实施方案中，本发明提供了用于治疗处于发展细胞增殖性障碍或与c-Met相关的障碍的风险(或易于发展细胞增殖性障碍或与c-Met相关的障碍)的受试者(对象)的预防和治疗方法。这些障碍包括与c-Met表达(或过表达)和/或c-Met突变相关的预先存在的状况。

在一个实例中，本发明提供了在受试者(对象)中预防细胞增殖性障碍或与c-Met相关的障碍的方法，其包括向受试者(对象)施用预防有效量的包含式(I)化合物和药学上可接受的载体的药物组合物。所述预防剂的施用可以在表现出细胞增殖性障碍或与c-Met相关的障碍特征症状之前发生，使得疾病或障碍被预防或者延迟其进展。本发明提供了用于预防细胞增殖性障碍或与c-Met相关的障碍的式(I)化合物。本发明提供了式(I)化合物在制备用于预防细胞增殖性障碍或与c-Met相关的障碍的药物中的用途。

在另一个实例中，本发明涉及在受试者(对象)中治疗细胞增殖性障碍或与c-Met相关的障碍的方法，包括向受试者(对象)施用治疗有效量的包含式(I)化合物和药学上可接受的载体的药物组合物。所述治疗剂的施用可以与障碍特征性症状的表现同时发生，使得所述治疗剂用作补偿细胞增殖性障碍或与c-Met相关的障碍的治疗剂。本发明提供了，式(I)化合物用于治疗细胞增殖性障碍或与c-Met相关的障碍。本发明提供了式(I)化合物用于制备用于治疗细胞增殖性障碍或与c-Met相关的障碍的药物的用途。

在另一个实例中，本发明涉及在受试者(对象)中调节细胞增殖性障碍或与c-Met相关的障碍的方法，使得c-Met表达或c-Met活性水平的调节可以用于改善细胞增殖性障碍或与c-Met相关的障碍，包括向受试者(对象)施用治疗有效量的包含式(I)化合物和药学上可接受的载体的药物组合物。本发明提供了，式(I)化合物用于调节细胞增殖性障碍或与c-Met相关的障碍，使得c-Met表达或c-Met活性水平的调节可以用于改善细胞增殖性障碍或与c-Met相关的障碍。本发明提供了式(I)化合物在制备用于调节细胞增殖性障碍或与c-Met相关的障碍的药物中的用途，使得c-Met表达或c-Met活性水平的调节可以用于改善细胞增殖性障碍或与c-Met相关的障碍。

术语“预防有效量”是指由研究人员，兽医，医生(医学博士)或其他临床医生寻求的抑制或延迟受试者(对象)发作障碍的活性化合物或药剂的量。

本文所用的术语“治疗有效量”是指在研究人员，兽医，医生(医学博士)或其他临床医生寻求的引发受试者(对象)中生物或药物应答的活性化合物或药剂的量，所述应答包括减轻所治疗的疾病或障碍的症状。

本领域已知用于确定本发明药物组合物的治疗和预防有效剂量的方法。

本领域已知用于确定本发明化合物的治疗和预防有效量的方法。

如本文所用，术语“组合物”旨在包括包含指定量的特定成分的产品，以及直接或间接由指定量的指定成分的组合产生的任何产品。

如本文所用，术语“与c-Met相关的障碍”或“与c-Met受体酪氨酸激酶相关的障碍”应包括与c-Met活性、例如c-Met的过度活性相关或牵连的疾病以及伴随这些状况。术语“c-Met的过度活性”是指1)通常不表达c-Met的细胞中的c-Met表达；2)通常不具有活性c-Met的细胞的c-Met活性；3)增加的c-Met表达，其导致不希望的细胞增殖；或4)导致c-Met的组成型激活的突变。“与c-Met相关的障碍”的实例包括由于c-Met异常高量或c-Met中的突变引起的c-Met过度刺激而导致的障碍，或由于c-Met异常高量或c-Met中的突变引起的c-Met活性异常高量而导致的障碍。

已知c-Met的过度活性已经涉及许多疾病如细胞增殖性障碍，肿瘤性疾病和癌症的发病机制。

术语“细胞增殖性障碍”是指多细胞生物体中细胞一个或多个亚群的不需要的细胞增殖，其导致对多细胞生物体的危害(即，不适或降低的预期寿命)。细胞增殖性障碍可发生在不同类型的动物和人类中。细胞增殖性障碍包括肿瘤性疾病(如本文所用，“肿瘤性疾病”是指由异常或不受控制的细胞生长引起的肿瘤)和其它细胞增殖性障碍。

与c-Met相关的细胞增殖性障碍的实例包括肿瘤和癌症-例如遗传性和散发性人***状肾癌，乳腺癌，结肠直肠癌，胃癌，神经胶质瘤，卵巢癌，肝细胞癌，头颈鳞状细胞癌，睾丸癌，基底细胞癌，肝癌，肉瘤，恶性胸膜间皮瘤，黑素瘤，多发性骨髓瘤，骨肉瘤，胰腺癌，***癌，滑膜肉瘤，甲状腺癌，非小细胞肺癌(NSCLC)和小细胞肺癌，膀胱移行细胞癌，睾丸癌，基底细胞癌，肝癌-包括白血病，淋巴瘤和骨髓瘤--例如，急性淋巴细胞性白血病(ALL)，急性髓样白血病(AML)，急性早幼粒细胞白血病(APL)，慢性淋巴细胞性白血病(CLL)，慢性髓样白血病(CML)，慢性嗜中性粒细胞白血病(CNL)，急性未分化白血病(AUL)，间变性大细胞淋巴瘤(ALCL)，前淋巴细胞性白血病(PML)，青少年骨髓单核细胞白血病(JMML)，成人T细胞ALL，具有三系骨髓发育不良的AML(AML/TMDS)，混合谱系(mixedlineage)白血病(MLL)，骨髓发育不良综合征(MDSs)，骨髓增生性疾病(MPD)，多发性骨髓瘤，(MM)，髓样肉瘤，非霍奇金淋巴瘤和霍奇金病(也称为霍奇金淋巴瘤)以及与形成新脉管***相关的疾病，如类风湿，关节炎，和视网膜病变。

其中c-Met的过度活性涉及其发病机制的其他细胞增殖性障碍包括其中c-Met活性有助于侵袭/转移表型的癌症，包括c-Met不被过表达或以其他方式改变的癌症。

在该方面的另一个实施方案中，本发明包括用于治疗或抑制受试者(对象)中与细胞增殖性障碍或与c-Met相关的障碍的发作的组合疗法(联合疗法)。组合疗法(联合疗法)包括向受试者(对象)施用治疗或预防有效量的式(I)化合物和一种或多种其他抗-细胞增殖疗法，包括化学疗法，放射治疗，基因治疗和免疫治疗。

在本发明的一个实施方案中，本发明的化合物可以与化学疗法组合施用。如本文所用，化学疗法是指涉及化学治疗剂的治疗。因此，本发明涉及式(I)化合物与其他化学治疗剂的组合。在本文公开的组合治疗方法中可以使用各种化学治疗剂。考虑作为示例性的化学治疗剂包括但不限于：铂化合物(含铂的抗-癌药)(例如顺铂，卡铂，奥沙利铂)；紫杉烷化合物(例如紫杉醇，多西他赛)；喜树碱类化合物(campotothecin compound)(伊立替康，托泊替康)；长春花生物碱(例如长春新碱，长春碱，长春瑞滨)；抗-肿瘤核苷衍生物(例如5-氟尿嘧啶，甲酰四氢叶酸，吉西他滨，卡培他滨)；烷化剂(例如环磷酰胺，卡莫司汀，洛莫司汀，噻替派)；表鬼臼毒素/鬼臼毒素(例如依托泊苷，替尼泊苷)；芳香酶抑制剂(例如阿那曲唑，来曲唑，依西美坦)；抗-***化合物(例如，他莫昔芬，氟维司群)，抗叶酸剂(例如，培美曲塞二钠(premetrexed disodium))；低甲基化剂(如阿扎胞苷)；生物制剂(例如，吉妥珠单抗，西妥昔单抗，利妥昔单抗，培妥珠单抗，曲妥珠单抗，贝伐珠单抗，厄洛替尼)；抗生素/蒽环类(anthracylines)(例如伊达比星，放线菌素D，博来霉素，柔红霉素，多柔比星，丝裂霉素C，更生霉素，洋红霉素，道诺霉素)；抗代谢药(例如氯法拉滨，氨基蝶呤，胞嘧啶阿糖核苷，甲氨蝶呤)；微管蛋白结合剂(例如考布他汀，秋水仙碱，诺考达唑)；拓扑异构酶抑制剂(例如喜树碱)；分化剂(例如类视黄醇(retinoids)，维生素D和视黄酸)；视黄酸代谢阻断剂(RAMBA)(例如，异维生素a酸(异维甲酸)(accutane))；激酶抑制剂(例如，黄氟哌啶醇(flavoperidol)，甲磺酸伊马替尼，吉非替尼)；法呢基转移酶抑制剂(例如替匹法尼(tipifarnib))；组蛋白脱乙酰酶抑制剂；泛素-蛋白酶体途径的抑制剂(例如，硼替佐米，Yondelis)；FGFR(成纤维细胞生长因子受体)抑制剂。

在一个实施方案中，可以特别地在本文所述组合(联合)中使用的化学治疗剂是铂化合物(含铂的抗-癌药)(例如顺铂，卡铂，奥沙利铂)，特别是在考虑到(I)化合物的OCT2抑制活性。这种组合可以降低铂化合物的副作用，因此可以提供比铂化合物更长的处理(治疗)时间。因此，本发明涉及式(I)化合物和含有铂的抗癌药物的组合，所述含有铂的抗癌药物例如顺铂，卡铂，奥沙利铂。在一方面，本发明涉及产品，其含有作为第一活性成分的含铂的抗-癌药物(例如顺铂，卡铂，奥沙利铂)和作为第二活性成分的式(I)化合物，作为组合制剂，用于同时、分开或顺序用于治疗患有癌症的患者。

在本发明的组合中，含铂的抗-癌药物，例如顺铂，卡铂，奥沙利铂和式(I)化合物可以配制成分开的药物剂型，其可以彼此独立出售，但具有组合使用它们的指示或说明(书)。所述指示或说明(书)可以是患者传单等的形式，或以任何通信的形式，例如书面或口头形式。

在一个实施方案中，特别可以在本文所述组合(联合)中使用的化学治疗剂是FGFR抑制剂。这些组合可能是被特别关注的，因为式(I)的cMet抑制剂可用于预防抗性，延迟抗性，阻止抗性出现或延缓肿瘤或癌症对FGFR抑制剂的抗性的出现，所述FGFR抑制剂特别是如本文所述的FGFR抑制剂。

在一方面，本发明涉及产品，其含有作为第一活性成分的FGFR抑制剂，以及作为第二活性成分的式(I)化合物，作为组合制剂用于同时、分开或顺序用于治疗患有癌症的患者。

FGFR抑制剂和式(I)化合物可以同时施用(例如以分开或单一组合物(组分))或以任意顺序依次顺序施用。在后一种情况下，两种化合物将以足以确保实现有利或协同效应的时间和量和方式施用。应当理解，组合的每种组分的优选方法和施用顺序以及各自的剂量和方案将取决于特定的其它药物(药剂)和施用的本发明组合的化合物，其施用途径，正在治疗的特定肿瘤和正在治疗的特定宿主。本领域技术人员使用常规方法和鉴于本文所述的信息可容易地确定施用的最佳方法和顺序以及剂量和制剂。

组合的化合物的重量比率可以由本领域技术人员来确定。所述比率和施用的确切剂量和频率取决于组合的具体化合物，所治疗的具体病症，待治疗状况的严重程度，特定患者的年龄，体重，性别，饮食，施用时间和一般身体状况，施用方式以及个体可能服用的其它药物，如本领域技术人员所熟知的。此外，显然根据治疗的受试者(对象)的反应和/或取决于开具本发明组合的处方的医师的评估，有效的每日量可以降低或增加。FGFR抑制剂和式(I)化合物的重量比率可以为1/10至10/1，更特别是1/5至5/1，甚至更特别为1/3至3/1。

在一个实施方案中，本发明组合的FGFR抑制剂和式(I)化合物以分开的施用方案以任意顺序依次顺序施用。在这种情况下，两种化合物将以足以确保实现有利或协同效应的时间和量和方式施用。

在本发明的组合中，FGFR抑制剂和式(I)化合物可以配制成分开的药物剂型，其可以彼此独立地出售，但具有组合使用它们的指示或说明(书)。所述指示或说明(书)可以是患者传单等的形式，或以任何通信的形式，例如书面或口头形式。

在本发明的组合中，FGFR抑制剂和式(I)化合物可以通过相同的施用途径或经由不同的施用途径来施用。

在一个实施方案中，本发明组合的FGFR抑制剂和式(I)化合物通过相同的施用途径，特别是通过口服途径施用。

本发明还涉及包含根据本发明的组合的药物产品或商业包装，特别是连同用于治疗FGFR酪氨酸激酶活性介导的疾病、特别是癌症的同时、分开或顺序使用的说明(书)。

在一个实施方案中，在本发明的组合中，同时施用FGFR抑制剂和式(I)化合物。

在包含化合物X或其药学上可接受的盐或其溶剂合物作为FGFR抑制剂的本发明的组合的情况下，施用所述化合物比式(I)化合物更不频繁是有利的，其原因在于化合物X显示向溶酶体性质和长时间的目标关闭(target shut down)。

本发明组合的FGFR抑制剂和式(I)化合物也可以共同配制在单一制剂中。

在一个实施方案中，本发明涉及药物组合物，其包含药学上可接受的载体和作为第一活性成分的FGFR抑制剂，特别是选自N-(3,5-二甲氧基苯基)-N'-(1-甲基乙基)-N-[3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)喹喔啉-6-基]乙烷-1,2-二胺或其药学上可接受的盐或其溶剂合物、和N-(2-氟-3,5-二甲氧基苯基)-N-(1H-咪唑-2-基甲基)-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[2,3-b]吡嗪-6-胺或其药学上可接受的盐或其溶剂合物的化合物；并包含作为第二活性成分的式(I)化合物。

FGFR抑制剂的实例

*)N-(3,5-二甲氧基苯基)-N'-(1-甲基乙基)-N-[3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)喹喔啉-6-基]乙烷-1,2-二胺(化合物X)由下式表示

*)N-(2-氟-3,5-二甲氧基苯基)-N-(1H-咪唑-2-基甲基)-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[2,3-b]吡嗪-6-胺(化合物Y)由下式表示

化合物N-(3,5-二甲氧基苯基)-N'-(1-甲基乙基)-N-[3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)喹喔啉-6-基]乙烷-1,2-二胺(化合物X)或其药学上可接受的盐或其溶剂合物，和N-(2-氟-3,5-二甲氧基苯基)-N-(1H-咪唑-2-基甲基)-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[2,3-b]吡嗪-6-胺(化合物Y)或其药学上可接受的盐或其溶剂合物，和它们的化学合成描述在WO2011/135376和WO2013/061080中，其通过引用并入本文。它们被描述为某些蛋白质酪氨酸激酶，特别是FGFR的活性的抑制剂或调节剂，因此所述化合物可用于治疗或预防、特别是治疗由这些酪氨酸激酶、特别是FGFR介导的疾病状态或状况。所述化合物可用于治疗或预防癌症，特别是治疗癌症。

在WO2011/135376中，还列举了化合物X作为盐酸盐。在WO2013/061080中，本化合物Y也作为硫酸盐，盐酸盐，磷酸盐，乳酸盐，富马酸盐被列举。

本文所述的FGFR激酶抑制剂化合物X和Y具有差异化的选择性特性，其提供了在患有由FGFR脱调节驱动的疾病的患者亚组中使用这些靶向药剂的新机会。本文所述的FGFR激酶抑制剂化合物X和Y表现出对另外的激酶，特别是VEGFR，更特别是VEGFR2和PDGFR，特别是PDGFR-β的减少的抑制作用，并提供具有分化(区别)的副作用或毒性特征的机会，因此允许更有效地治疗这些适应症。VEGFR2和PDGFR-β的抑制剂分别与高血压或水肿等毒性相关。在VEGFR2抑制剂的情况下，这种高血压效应通常是剂量限制的，可能在某些患者群体中是禁忌的，需要临床管理。本文所述的FGFR激酶抑制剂化合物X和Y是FGFR1，2，3和4抑制剂。

血管内皮生长因子(VEGFR)

血管内皮生长因子(VEGF)，一种多肽，对体内内皮细胞有促有丝***，并在体内刺激血管生成应答。VEGF也与不适当的血管生成有关。VEGFR是蛋白质酪氨酸激酶(PTKs)。PTKs催化涉及细胞功能的蛋白质中特异性酪氨酸残基的磷酸化，从而调节细胞生长，存活和分化。

已经鉴定了三种针对VEGF的PTK受体：VEGFR-1(Flt-1)；VEGFR-2(Flk-1或KDR)和VEGFR-3(Flt-4)。这些受体参与血管生成并参与信号转导。特别感兴趣的是VEGFR-2，其是主要在内皮细胞中表达的跨膜受体PTK。通过VEGF激活VEGFR-2是启动肿瘤血管生成的信号转导途径中的关键步骤。VEGF表达可能对于肿瘤细胞而言是构成性的，并且也可以响应某些刺激而被上调。一种这样的刺激是缺氧，其中VEGF表达在肿瘤和相关宿主组织中上调。VEGF配体通过与其细胞外VEGF结合位点结合而激活VEGFR-2。这导致VEGFR的受体二聚化和在VEGFR-2的细胞内激酶结构域处的酪氨酸残基的自磷酸化。激酶结构域用于将磷酸从ATP转移到酪氨酸残基，从而提供VEGFR-2下游的信号传导蛋白的结合位点，最终开始血管生成。

PDGFR

恶性肿瘤是不受控制的细胞增殖的产物。细胞生长由生长促进和生长抑制因子之间的微妙平衡控制。在正常组织中，这些因子的产生和活性导致以受控和调节的方式分化的细胞生长，其维持器官的正常完整性和功能。恶性细胞逃避了这种控制；自然平衡受到干扰(通过各种机制)，发生不规律的异常细胞生长。在肿瘤发展中重要的生长因子是血小板衍生生长因子(PDGF)，其包括肽生长因子家族，所述肽生长因子家族通过细胞表面酪氨酸激酶受体(PDGFR)发信号，并刺激包括生长、增殖和分化在内的各种细胞功能。

*)BGJ398(3-(2，6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)-1-[6-[4-(4-乙基哌嗪-1-基)苯胺基]嘧啶-4-基]-1-甲基脲)具有下式

*)AZD-4547(N-(5-(3,5-二甲氧基苯乙基)-1H-吡唑基-3-基)-4-((3S,5R)-3,5-二甲基哌嗪-1-基)苯甲酰胺)具有下式

*)PD 173074(N-[2-[[4-(二乙基氨基)丁基]氨基]-6-(3,5-二甲氧基苯基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基]-N'-(1,1-二甲基乙基)脲)具有下式

*)LY-2874455((R,E)-2-(4-(2-(5-(1-(3,5-二氯吡啶-4-基)乙氧基)-1H-吲唑-3-基)乙烯基)-1H-吡唑基-1-基)乙醇)具有下式

*)布立尼布(Brivanib)(丙氨酸酯)(S)-(R)-1-((4-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-5-甲基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-基)氧基)丙烷-2-基2-氨基丙酸酯。

*)因特达尼布(Intedanib)

*)度维替尼(Dovitinib)

*)西地尼布(Cediranib)

*)马赛替尼(Masitinib)

*)奥兰替尼(Orantinib)

*)普纳替尼(Ponatinib)(AP24534)

*)E-7080(乐伐替尼(lenvatinib))

*)E-3810(lucitanib)

*)BAY1163877，TAS-120，ARQ087，ASP5878，FF284，

*)抗体或相关化合物，例如HGS1036/FP-1039；MFGR1877S；AV-370；GP369/AV-396b；HuGAL-FR21；单克隆抗体(BAY1179470，RG-7444)

用于本文所述组合的其它有用药剂包括维拉帕米，钙拮抗剂，其被发现可以与抗肿瘤剂组合以用于在对接受的化学治疗剂具有抗性的肿瘤细胞中建立化学敏感性，并且增强这些化合物在药物敏感性恶性肿瘤中的功效。参见Simpson WG,The calcium channelblocker verapamil and cancer chemotherapy.Cell Calcium.1985Dec；6(6):449-67。另外，尚未出现被认为可与本发明的化合物组合使用的化学治疗剂。

在本发明的另一个实施方案中，本发明的化合物可以与放射治疗组合施用。如本文所用，“放射治疗”是指包括将有需要的受试者(对象)暴露于辐射的治疗。这种治疗是本领域技术人员已知的。放射治疗的适当方案将类似于临床治疗中已经使用的放射治疗，其中放射治疗单独使用或与其他化学治疗剂组合使用。

在本发明的另一个实施方案中，本发明的化合物可以与基因治疗组合施用。如本文所用，“基因治疗”是指靶向涉及肿瘤发展的特定基因的治疗。可能的基因治疗策略包括恢复缺陷性癌症抑制基因，用对应于编码生长因子及其受体的基因的反义DNA进行细胞转导或转染，基于RNA的策略如核酶，RNA诱饵，反义信使RNA和小干扰RNA(siRNA)分子和所谓的“***基因”。

在本发明的其它实施方案中，本发明的化合物可以与免疫治疗组合施用。如本文所用，“免疫治疗”是指通过特异于这种蛋白质的抗体靶向参与肿瘤发展的特定蛋白质的治疗。例如，针对血管内皮生长因子的单克隆抗体已被用于治疗癌症。

当除了本发明的化合物之外还使用第二种药物时，两种药物可以如下施用：同时(例如在分开或单一组合物中)以任意顺序依次顺序，以大致相同的时间或采用分开的施用方案。在后一种情况下，两种化合物将以足以确保实现有利或协同效应的时间和量和方式施用。应当理解，组合的每个组分的优选的施用方法和施用顺序以及各自的剂量和方案将取决于与本发明的化合物结合施用的特定化学治疗剂，它们的施用途径，正在治疗的特定肿瘤和正在治疗的特定宿主。

如本领域普通技术人员将理解的，化学治疗剂的适当剂量通常与临床疗法中已经使用的那些相当或比那些更小，其中化学治疗剂单独施用或与其它化学治疗剂组合施用。

本领域技术人员使用常规方法和鉴于本文所述的信息可容易地确定最佳方法和施用顺序以及剂量和方案。

仅作为示例，铂化合物有利地以1至500mg/平方米(mg/m²)、例如50至400mg/m²的体表面积的剂量施用，特别是对于顺铂剂量为约75mg/m²和对于卡铂剂量为约300mg/m²每疗程。顺铂不能口服吸收，因此必须通过静脉内、皮下、肿瘤内或腹膜内注射进行输送。

仅作为示例，紫杉烷化合物有利地以50至400mg/平方米(mg/m²)(例如75至250mg/m²)的体表面积的剂量施用，特别是对于紫杉醇剂量为约175至250mg/m²和对于多西他赛为每疗程。

仅作为示例，喜树碱化合物有利地以0.1至400mg/平方米(mg/m²)、例如1至300mg/m²的体表面积的剂量施用，特别是对于伊立替康剂量为约100至350mg/m²和对于托泊替康剂量为约1至2mg/m²每疗程。

仅以举例的方式，长春花生物碱可有利地以2至30mg每平方米(mg/m²)的体表面积的剂量施用，特别是对于长春碱剂量为约3至12mg/m²，对于长春新碱剂量为约1-2mg/m²，和对于长春瑞滨剂量为约10-30mg/m²每疗程。

仅作为举例，抗-肿瘤核苷衍生物可有利地以200至2500mg每平方米(mg/m²)体积表面积、例如700至1500mg/m²的剂量施用。5-氟尿嘧啶(5FU)通常通过静脉内施用，剂量范围为200至500mg/m²(优选3至15mg/kg/天)。吉西他滨有利地以约800至1200mg/m²的剂量施用，并且卡培他滨有利地以每疗程约1000-2500mg/m²施用。

仅作为示例，烷化剂可有利地以100至500mg/平方米(mg/m²)的体表面积，例如120至200mg/m²的剂量施用，特别是对于环磷酰胺剂量为约100至500mg/m²，对于苯丁酸氮芥剂量为约0.1至0.2mg/kg体重，对于卡莫司汀剂量为约150至200mg/m²，和对于洛莫司汀为约100至150mg/m²每疗程。

仅作为实例，鬼臼毒素衍生物可有利地以30至300mg/平方米(mg/m²)的体表面积(例如50至250mg/m²)的剂量施用，特别是对于依托泊苷剂量为约35至100mg/m²，并且对于替尼泊苷剂量为约50至250mg/m²每疗程。

仅作为实例，蒽环类衍生物可有利地以10至75mg/平方米(mg/m²)体表面积、例如15至60mg/m²的剂量施用，特别是对于多柔比星剂量为约40至75mg/m²，对于柔红霉素剂量为约25至45mg/m²，并且对于伊达比星剂量为约10至15mg/m²每疗程。

仅作为举例，抗-***化合物可有利地以每天约1至100mg的剂量施用，这取决于具体药剂和待治疗的状况。他莫昔芬有利地以5至50mg，优选10至20mg的剂量每天两次口服施用，继续治疗足够的时间以达到和保持治疗效果。托瑞米芬有利地以约60mg的剂量一天一次口服，继续治疗足够的时间以实现和保持治疗效果。阿那曲唑有利地以约1mg的剂量一天一次口服施用。屈洛昔芬有利地以约20-100mg的剂量每天一次口服施用。雷洛昔芬有利地以约60mg的剂量一天一次口服施用。依西美坦有利地以约25mg的剂量一天一次口服施用。

仅作为示例，生物制剂可有利地以约1至5mg/平方米(mg/m²)体表面积的剂量施用，或如本领域已知的，如果不同。例如，曲妥珠单抗有利地以1至5mg/m²的剂量特别是2至4mg/m²每疗程的剂量施用。

可以施用剂量，例如每疗程一次，两次或更多次，其可以例如每7，14，21或28天重复。

本发明的化合物可以通过全身、例如静脉内、口服、皮下、肌肉内、皮内或肠胃外施用于受试者(对象)。本发明的化合物也可以局部施用于受试者(对象)。局部递送***的非限制性实例包括使用包括血管内药物递送导管，导线(线)，药理支架和腔内涂膜(endoluminal paving)的管腔内医疗装置。特别地，本发明的化合物是口服施用的。

本发明的化合物可以进一步与靶向药剂组合施用于受试者(对象)，以在目标部位实现化合物的高局部浓度。此外，本发明的化合物可以配制成用于快速释放或缓慢释放，目的是将药物或试剂与靶组织的接触持续数小时至数周的时期范围。

本发明还提供了包含与药学上可接受的载体结合的式(I)化合物的药物组合物。药物组合物可以含有约0.1mg至1000mg，优选约100至500mg的化合物，并且可以构成适合所选择的施用方式的任何形式。

术语“药学上可接受的”是指当适当施用至动物或人时不产生不利的，过敏的或其他不利的反应的分子实体和组合物。兽医用途同样包括在本发明中，“药学上可接受的”组合物包括用于临床和/或兽医用途的组合物。

载体包括必需和惰性的药物赋形剂，包括但不限于粘合剂，悬浮剂，润滑剂，调味剂，甜味剂，防腐剂，染料和涂料。适合口服施用的组合物包括固体形式，例如丸剂，片剂，胶囊型片剂，胶囊(各自包括立即释放，定时释放和持续释放制剂)，颗粒剂和粉剂，以及液体形式，例如溶液剂，糖浆剂，酏剂，乳剂，和混悬剂。用于胃肠外施用的形式包括无菌溶液，乳剂和混悬剂。

本发明的药物组合物还包括用于缓释本发明化合物的药物组合物。该组合物包括缓释载体(通常为聚合物载体)和本发明的化合物。

缓释生物可降解载体是本领域公知的。这些是可以形成颗粒的材料，所述颗粒在其中捕获活性化合物并在合适的环境(例如，水性，酸性，碱性等)下缓慢降解/溶解，从而降解/溶解在体液中并释放活性化合物。颗粒优选为纳米颗粒(即，直径范围为约1至500nm，直径优选为约50-200nm，最优选直径为约100nm)。

本发明还提供了制备本发明的药物组合物的方法。作为活性成分的式(I)化合物根据常规药物复合技术与药物载体紧密混合，该载体可以根据施用(例如口服或肠胃外如肌内)所需的制剂形式而采取多种形式。在制备口服剂型组合物时，可以使用任何通常的药物介质。因此，对于液体口服制剂，例如混悬剂，酏剂和溶液剂，合适的载体和添加剂包括水，二醇，油，醇，调味剂，防腐剂，着色剂等；对于固体口服制剂，例如粉剂，胶囊，胶囊型片剂，软胶囊和片剂，合适的载体和添加剂包括淀粉，糖，稀释剂，造粒剂，润滑剂，粘合剂，崩解剂等。由于片剂和胶囊易于施用，片剂和胶囊代表最有利的口服剂量单位形式，在这种情况下，明显地使用固体药物载体。如果需要，片剂可以通过标准技术被(糖)包衣或肠溶包衣。对于肠胃外，载体通常将包含无菌水，尽管可以包括其它成分，例如用于辅助溶解性或用于保存的目的的其它成分。也可以制备可注射的混悬剂，在这种情况下可以使用合适的液体载体，悬浮剂等。在用于缓慢释放的制剂中，例如缓释载体(通常为聚合物载体)和本发明的化合物首先被溶解或分散在有机溶剂中。然后将得到的有机溶液加入含水溶液中，得到水包油型乳液。优选地，含水溶液包括表面活性剂。随后，从水包油型乳液中蒸发有机溶剂，得到含有缓释载体和本发明化合物的颗粒的胶态悬浮液。

本文的药物组合物将每剂量单位(例如片剂，胶囊，粉末(粉剂)，注射剂，一茶匙等)包含一定量的活性成分，其是递送如上所述有效剂量所需的。本文的药物组合物将每单位剂量单位(例如片剂，胶囊，粉剂，注射剂，栓剂，一茶匙等)含有约0.01mg至200mg/kg体重每天。优选地，该范围为约0.03至约100mg/kg体重/天，最优选约0.05至约10mg/kg体重/天。化合物可以每天1至5次的方式施用。然而，剂量可以根据患者的要求，所治疗病症的严重程度和所使用的化合物而变化。可以使用每日施用或后定期(post periodic)施用。

优选地，这些组合物是单位剂型，例如片剂，丸剂，胶囊，粉剂，颗粒，无菌肠胃外溶液或混悬剂，计量气溶胶或液体喷雾剂，滴剂，安瓿，自动注射器装置或栓剂；用于口服肠胃外，鼻内，舌下或直肠施用，或用于通过吸入或吹入施用。或者，组合物可以以适于每周一次或每月一次施用的形式存在；例如，活性化合物的不溶性盐如癸酸盐可以适于提供用于肌内注射的贮库制剂。为了制备固体组合物如片剂，将主要活性成分与药物载体混合(所述药物载体例如常规的压片成分如玉米淀粉，乳糖，蔗糖，山梨糖醇，滑石，硬脂酸，硬脂酸镁，磷酸二钙或树胶，以及其它药物稀释剂，例如，水)，以形成含有本发明的化合物或其药学上可接受的盐的均匀混合物的固体处方前(preformulation)分组合物。当将这些处方前组合物称为均匀时，是指活性成分均匀地分散在整个组合物中，使得组合物可以容易地分成等效的剂型，例如片剂，丸剂和胶囊剂。然后将该固体处方前组合物细分为上述类型的单位剂型，其含有0.1至约500mg本发明的活性成分。新组合物的片剂或丸剂可以被包衣或以其它方式复合以提供具有延长作用的优点的剂型。例如，片剂或丸剂可以包含内部剂量和外部剂量组分，后者在前者上为封套的形式。两个组分可以被肠溶层分开，肠溶层用于抵抗在胃中的崩解，并允许内部组分完整地进入十二指肠或延迟释放。各种材料可以用于这样的肠溶层或涂层，这些材料包括许多聚合酸，其具有诸如虫胶(紫胶)，乙酰醇和乙酸纤维素的材料。

可以将式(I)化合物掺入口服或注射施用的液体形式包括含水溶液，适当调味的糖浆，水性或油性悬浮液(混悬剂)和具有食用油(如棉籽油，芝麻油，椰子油或花生油)的调味乳液，以及酏剂和类似的制药媒介物。用于水性悬浮液(混悬剂)的合适的分散剂或悬浮剂包括合成和天然树胶如黄蓍胶，***胶，藻酸盐(海藻酸盐)，葡聚糖，羧甲基纤维素钠，甲基纤维素，聚乙烯基吡咯烷酮或明胶。合适调味的悬浮剂或分散剂中的液体形式也可以包括合成和天然树胶，例如黄蓍胶，***胶，甲基纤维素等。对于肠胃外施用，需要无菌悬浮液和溶液。当需要静脉内施用时，使用通常含有合适防腐剂的等渗制剂。

有利地，式(I)化合物可以以单一日剂量施用，或者总日剂量可以以每天两次，三次或四次的分开剂量施用。此外，本发明的化合物可以通过局部使用合适的鼻内媒介物或通过本领域普通技术人员熟知的经皮肤贴剂以鼻内形式施用。为了以透皮递送***的形式施用，当然，剂量施用在整个施用方案中是连续的而不是间歇的。

例如，对于片剂或胶囊形式的口服施用，活性药物组分可与口服，无毒的药学上可接受的惰性载体如乙醇，甘油，水等组合。此外，当期望或需要时，合适的粘合剂；润滑剂，崩解剂和着色剂也可以并入混合物中。合适的粘合剂包括但不限于淀粉，明胶，天然糖如葡萄糖或β乳糖，玉米甜味剂，天然和合成树胶如***胶，黄蓍胶或油酸钠，硬脂酸钠，硬脂酸镁，苯甲酸钠，乙酸钠，氯化钠等等。崩解剂包括但不限于淀粉，甲基纤维素，琼脂，膨润土，黄原胶等。

本发明的化合物的日剂量可以在每个成年人每天1至5000mg的宽范围内变化。对于口服施用，组合物优选以片剂的形式提供，片剂含有0.01，0.05，0.1，0.5，1.0，2.5，5.0，10.0，15.0，25.0，50.0，100，150，200，250和500毫克的活性成分，其用于对待治疗患者的剂量进行有症状调整。通常以每天约0.01mg/kg至约200mg/kg体重的剂量水平提供有效量的药物。特别地，该范围为约0.03至约100mg/kg或约0.03至约15mg/kg体重/天，更特别地为约0.05至约10mg/kg体重/天。本发明的化合物可以以每天最多四次或更多次，优选每天1至2次的方式施用。

待施用的最佳剂量可以由本领域技术人员容易地确定，并且将随着所使用的具体化合物，施用方式，制剂的强度，施用方式和疾病状况的进展而变化。此外，与被治疗的特定患者相关的因素，包括患者年龄，体重，饮食和施用时间将导致需要调整剂量。

本发明的化合物还可以以脂质体递送***的形式施用，脂质体递送***例如小单层囊泡，大单层囊泡和多层囊泡。脂质体可以由各种脂质形成，脂质包括但不限于两亲性脂质如磷脂酰胆碱，鞘磷脂，磷脂酰乙醇胺，磷酰胆碱，心磷脂，磷脂酰丝氨酸，磷脂酰甘油，磷脂酸，磷脂酰肌醇，二酰基三甲基铵丙烷，二酰基二甲基铵丙烷和硬脂酰胺，中性脂质如甘油三酸酯，及它们的组合。它们可能含有胆固醇，也可能不含胆固醇。

本发明的化合物也可以局部施用。可以使用任何递送装置，例如血管内药物输送导管，导线(线)，药理支架和腔内涂膜。用于这种装置的递送***可以包括以由施用者控制的速率递送化合物的局部输注导管。

本发明提供了一种药物递送装置，其包括腔内医疗装置，优选支架和本发明的化学物质的治疗剂量。

术语“支架”是指能够由导管递送的任何装置。常规使用支架来防止血管闭塞，导致血管闭塞的原因在于物理异常，例如手术创伤导致的血管组织的不期望的向内生长等。它通常具有适于留在管道的管腔内的管状的，膨胀的格子型结构以减轻梗阻。支架具有管腔壁接触表面和管腔暴露表面。管腔壁接触表面是管的外表面，管腔暴露表面是管的内表面。支架可以是聚合物，金属或聚合物和金属的，并且其可以可选地是可生物降解的。

通常，支架以非扩张形式***管腔中，然后自主地或借助于第二装置原位扩张。典型的扩张方法是通过使用导管安装的血管成形术球囊发生的，所述球囊在狭窄的血管或体通道内被充气，以便剪切和破坏与血管的壁部件相关联的障碍物并获得增大的管腔。也可以使用如U.S 6,776,796(Falotico等人)中所述的自扩张支架。支架与预防炎症和增殖的药物、药剂或化合物的组合可为后血管再狭窄提供最有效的治疗。

式(I)化合物可以以多种方式和使用任何数量的生物相容性材料并入或固定在支架上。在一个示例性实施方案中，化合物直接并入聚合物基质，例如聚合物聚吡咯，并随后涂覆在支架的外表面上。化合物通过聚合物扩散从基质中洗脱出来。在本领域中详细讨论了支架和在支架上涂覆药物的方法。在另一个示例性实施方案中，首先采用基层涂覆支架，所述基层包含化合物、乙基烯-共-乙基乙酸酯和聚丁基甲基丙烯酸酯的溶液。然后，支架被外层进一步涂覆，所述外层仅包含聚丁基甲基丙烯酸酯。外层作为扩散屏障，以防止化合物过快地洗脱并进入周围组织。外层或面层的厚度决定化学物质从基质中洗脱的速率。WIPO公开WO9632907，美国公开第2002/0016625号及其中公开的参考文献详细讨论了支架和涂层的方法。

本发明的化合物和生物相容性材料/聚合物的溶液可以多种方式合并入支架或到支架上。例如，溶液可以喷雾到支架上，或者可以将支架浸入溶液中。在优选的实施方案中，将溶液喷雾到支架上，然后使其干燥。在另一个示例性实施例中，溶液可以被充电到一个极性，并且支架电气地改变为相反的极性。以这种方式，溶液和支架将彼此吸引。在使用这种类型的喷雾工艺时，可以减少浪费并且可以实现对涂层厚度的更多控制。化合物优选仅固定在与一个组织接触的支架的外表面上。然而，对于一些化合物，整个支架可以被涂覆。应用于支架的化合物的剂量与控制药物释放的聚合物涂层的组合在药物的有效性中是重要的。该化合物优选保留在支架上至少三天、至多大约六个月或更久，优选七天至三十天。

任何数量的非可侵蚀的生物相容性聚合物可以与本发明的化合物结合使用。重要的是注意不同的聚合物可以用于不同的支架。例如，上述乙基烯基-共-乙烯基乙酸酯和聚丁基甲基丙烯酸酯基体与不锈钢支架一起良好地发挥作用。其他聚合物可以更有效地用于由其它材料形成的支架，其它材料包括显示超弹性的材料，例如镍和钛的合金。

冠状动脉血管成形术后再狭窄导致显著的发病率和死亡率。再狭窄通过四种过程的组合发生，过程包括弹性反冲(弹性回缩)(elastic recoil)，血栓形成，内膜增生和细胞外基质重塑。最近已经确定了几种生长因子在这些过程中起重要作用，导致再狭窄。参见Schiele TM等人,2004,“Vascular restenosis-striving for therapy.”Expert OpinPharmacother.5(11):2221-32。血管平滑肌细胞(VSMC)表达c-Met受体。暴露于肝细胞生长因子，c-Met的配体，刺激这些细胞表现出迁移表型。参见Taher等，Hepatocyte growthfactor triggers signaling cascades mediating vascular smooth muscle cellmigration.Biochem Biophys Res Commun.(2002)298(1):80-6；Morishita R,Aoki M,YoY,Ogihara T.Hepatocyte growth factor as cardiovascular hormone:role of HGF inthe pathogenesis of cardiovascular disease.Endocr J.(2002)Jun；49(3):273-84。由于VSMC从培养基向动脉内膜的迁移在动脉粥样硬化和再狭窄的发展中起作用，认为c-Met激酶活性的拮抗剂在这些疾病的治疗中呈现出可行的治疗策略。

因此，本发明提供了一种用于治疗与c-Met相关的疾病(包括再狭窄，内膜增生或炎症，在血管壁中的)的方法，包括通过从管腔内医疗装置(例如支架)释放而受控递送治疗有效量的本发明的化合物。本发明还提供了用于治疗与c-Met相关的疾病(包括再狭窄，内膜增生或炎症，在血管壁中的)的式(I)化合物。

将支架引入机体官腔内的方法是众所周知的，并且本发明的化合物涂覆的支架优选使用导管引入。如本领域普通技术人员将理解的，方法将基于支架植入的位置而稍微改变。对于冠状动脉支架植入，承载支架的气囊导管***冠状动脉，支架位于所需位置。气囊充气，扩张支架。当支架膨胀时，支架与管腔壁接触。一旦定位支架，气囊就会放气并取出。支架保持在官腔接触表面承载化学物质直接接触管腔壁表面的位置。根据需要，支架植入可伴随抗凝治疗。

用于本发明的支架的用于递送化合物的最佳条件可以随所用的不同的局部递送***以及所用化合物的性质和浓度而变化。可以优化的条件包括例如化合物的浓度，输送体积，输送速率，血管壁的穿透深度，近端充气压力，穿孔的量和尺寸以及药物输送导管气囊的配合。可以优化条件以抑制损伤部位的平滑肌细胞增殖，从而不会发生由于再狭窄引起的显著的动脉阻塞，例如通过平滑肌细胞的增殖能力或通过血管阻力或管腔直径的变化所测量的。可以根据使用常规计算方法的动物模型研究的数据确定最佳条件。

用于施用本发明化合物的另一种替代方法可以是通过将化合物与靶向剂缀合，所述靶向剂将缀合物引导至其预期的作用部位，即血管内皮细胞，或肿瘤细胞。可以使用抗体和非抗体靶向剂。由于靶向剂与其相应的结合配偶体之间的特异性相互作用，本发明的化合物可以在靶位点处或其附近以高局部浓度施用，从而更有效地治疗靶位点的障碍。

抗体靶向剂包括与肿瘤细胞，肿瘤血管***(脉管***)或肿瘤基质(间质)的可靶向或可接近的组分结合的抗体或其抗原结合片段。肿瘤细胞，肿瘤血管或肿瘤基质(间质)的“可靶向或可接近的成分”优选是表面表达的，表面可接近的或表面定位的组分。抗体靶向剂还包括结合从坏死肿瘤细胞释放的细胞内成分的抗体或其抗原结合片段。优选地，这样的抗体是单克隆抗体或其抗原结合片段，所述单克隆抗体或其抗原结合片段结合至不可溶性细胞内抗原，其存在于可能被诱导为可渗透的细胞中，或在基本上所有肿瘤和正常细胞的细胞宿主中，但在哺乳动物的正常活细胞的外部是不存在或可接近的。在本发明中，可靶向或可接近的组分可以是c-Met受体，因为它在靶组织上或附近是可以接近和表达的。

如本文所用，术语“抗体”旨在广义地指任何免疫学结合剂，例如IgG，IgM，IgA，IgE，F(ab')2，单价片段，例如Fab'，Fab，Dab，以及如重组抗体，人源化抗体，双特异性抗体等工程抗体。尽管单克隆是优选的，但抗体可以是多克隆或单克隆抗体。本领域已知有非常广泛的抗体，其具有对实质上任何固体肿瘤类型的细胞表面的免疫学特异性(参见Thorpe等人的美国专利号5，855，866的实体瘤单克隆抗体的总结表)。生产和分离抗肿瘤抗体的方法是本领域技术人员已知的(Thorpe等人的美国专利No.5，855，866和Thorpe等人的美国专利No.6，34，2219)。

将治疗性部分与抗体缀合的技术是公知的，参见例如Amon等人,"MonoclonalAntibodies For Immunotargeting Of Drugs In Cancer Therapy",in MonoclonalAntibodies And Cancer Therapy,Reisfeld等人(eds.),pp.243-56(Alan R.Liss,Inc.1985)；Hellstrom等人,"Antibodies For Drug Delivery",in Controlled DrugDelivery(2nd Ed.),Robinson等人(eds.),pp.623-53(Marcel Dekker,Inc.1987)；Thorpe,"Antibody Carriers Of Cytotoxic Agents In Cancer Therapy:A Review",inMonoclonal Antibodies'84:Biological And Clinical Applications,Pinchera等人(eds.),pp.475-506(1985)。也可以应用类似技术将本发明的化合物与非抗体靶向剂连接。本领域技术人员将知道或能够确定与非抗体靶向剂如小分子，寡肽，多糖或其它聚阴离子化合物形成缀合物的方法。

尽管在血液中相当稳定的任何连接部分可用于将本发明的化合物与靶向剂连接，但是生物可释放的键和/或可选择性切割的间隔物或接头(连接体)是优选的。“生物可释放的键”和“可选择性切割的间隔物或接头(连接体)”在循环中仍然具有合理的稳定性，但是仅在或优选地在某些条件下(即在某些环境中，或与特定试剂接触)，是可释放的，可切割的或可水解的。这种键包括例如二硫键和三硫键和酸不稳定键，如在美国专利5，474，765和5，762，918中所述，以及酶敏感键，包括肽键，酯，酰胺，磷酸二酯和糖苷，如在美国专利第5，474，765和5，762，918号中所述。这种选择性释放设计特征有助于化合物在预期靶位点上从缀合物的持续释放。

本发明提供一种药物组合物，其包含与靶向剂缀合的有效量的本发明化合物和药学上可接受的载体。

本发明还提供了治疗与c-Met相关的障碍、特别是肿瘤的方法，其包括向受试者(对象)施用治疗有效量的与靶向剂缀合的式(I)化合物。本发明进一步提供与用于治疗与c-Met相关的障碍、特别是肿瘤的与靶向剂缀合的式(I)化合物。本发明还提供了与靶向剂缀合的式(I)化合物用于制备药物的用途，所述药物用于治疗与c-Met相关的障碍、特别是肿瘤。

当蛋白质如抗体或生长因子或多糖用作靶向剂时，优选以可注射组合物的形式施用。可注射的抗体溶液将在2分钟至约45分钟，优选10至20分钟的时间内施用入静脉、动脉或入脊髓液中。在某些情况下，皮内和腔内施用对于限于靠近皮肤的特定区域和/或特定体腔的区域的肿瘤是有利的。此外，鞘内施用可用于位于脑中的肿瘤。

与靶向剂缀合的本发明化合物的治疗有效剂量取决于个体，疾病类型，疾病状态，施用方法和其他临床变量。使用动物模型的数据可以容易地确定有效剂量。携带实体肿瘤的实验动物经常用于在转化为临床环境之前优化适当的治疗剂量。已知这种模型在预测有效的抗-癌症策略中非常可靠。例如，携带实体肿瘤的小鼠被广泛用于临床前测试，以确定以最小的毒性实现有益抗-肿瘤效应的治疗剂的工作范围。

HGF/MET途径涉及直接通过调节T细胞活性以及间接通过诱导负责T细胞无反应性的酶、诱导更多的免疫抑制性肿瘤微环境。因此，式(I)化合物导致的Met途径抑制可能引起对检查点阻断剂的免疫应答(检查点封闭剂包括例如PD-1和CTLA-4的阻断剂)，以及减轻肿瘤诱导的免疫抑制并激活宿主免疫应答。

虽然前面的说明书教导了本发明的原理，为了说明的目的提供了实例，但是，应当理解，本发明的实践包括所有在以下权利要求及其等同物范围内的通常的变化，调整和/或修改。

Claims

1.式(I)的化合物

其N氧化物、药学上可接受的盐或溶剂合物，其中D表示氘。

2.根据权利要求1所述的化合物，其中所述化合物为

碱。

3.根据权利要求1或2所述的化合物，其中喹啉(位于D位置)的2-位的氘含量为至少93％。

4.根据权利要求3所述的化合物，其中所述喹啉(位于D位置)的2-位的氘含量为至少95％。

5.根据权利要求4所述的化合物，其中所述喹啉(位于D位置)的2-位的氘含量为至少98％。

6.根据前述权利要求中任一项所述的化合物，用作药物。

7.根据权利要求1至5中任一项所述的化合物，用于治疗癌症。

8.根据权利要求1至5中任一项所述的化合物，用于治疗细胞增殖性障碍。

9.一种药物组合物，其包含药学上可接受的载体，以及作为活性成分的治疗有效量的如权利要求1至5中任一项所述的化合物。

10.制备如权利要求1中所述的化合物的方法，其特征在于

在氘气存在下和在合适的催化剂、合适的溶剂或溶剂混合物、和合适的碱的存在下，还原氘化式(II)的中间体，其中W₁代表氯，溴或碘，

其中D表示氘；

或者，如果需要，通过用酸处理将式(I)化合物转化成治疗活性的无毒酸加成盐，或者相反地，通过用碱处理将酸加成盐形式转化成游离碱，或者，如果所需的，制备其溶剂合物或N-氧化物形式。

11.如权利要求1至5中任一项所述的化合物，用于治疗癌症。

12.如权利要求1至5中任一项所述的化合物，用于治疗细胞增殖性障碍。

13.权利要求1至5中任一项所述的化合物与其他化学治疗剂的组合。

14.根据权利要求13的组合，其中所述化学治疗剂是激酶抑制剂。

15.根据权利要求14的组合，其中所述激酶抑制剂是FGFR抑制剂。

16.根据权利要求13的组合，其中所述化学治疗剂是含铂的抗-癌药物。

17.一种用于降低受试者(对象)中c-Met的激酶活性的方法，包括向受试者(对象)施用如权利要求1至5中任一项所述的化合物的步骤。