CN106165811A - 一种金银花菌深层发酵液加工制成饮料制备工艺 - Google Patents

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    • A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
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Abstract

一种金银花菌深层发酵液添加配料加工制成饮料制备工艺属微生物工程技术领域。本发明公开了一种金银花菌规模化人工深层发酵液生产及加工制成饮料技术。其特征是用获取的纯菌种，经过PDA培养基培养，转为液体培养基培养，再经过种子罐培养放大，按照10％接种量转入生产罐，经过36～72小时生产发酵液体达到最佳。该发酵液富含蛋白质、脂肪、碳水化合物和真菌多糖营养素，含有甾醇类、有机酸类、酮类化学成分。发酵液与添加其他食品原辅料和(或)食品添加剂经科学配比加工制成健康功能饮料，作为健康营养补充剂具有药理学性质功效，它有利于清咽利喉、清肺祛霾，辅以治疗上呼吸道感染、抗病毒、抗肿瘤作用。本发明以期维护大众健康和造福人类社会。

Description

一种金银花菌深层发酵液加工制成饮料制备工艺
技术领域
本发明属于微生物工程技术领域，涉及一种金银花菌(分类命名：茶藨子叶状层菌Phylloporia ribis(Schumach.：Fr.)Ryvarden)深层发酵液加工制成饮料制备工艺，用该发酵液加工生产制成饮料，属于传统中药和现代生物技术有机结合的产物。
背景技术
金银花菌(分类命名：茶藨子叶状层菌Phylloporia ribis(Schumach.：Fr.)Ryvarden)，曾用名环棱褐孔菌，又名金芝，俗称金银花莪子，是山东著名道地药材金银花植株上的一种药用真菌，2002年载入《山东省中药材标准》。在当地民间具有悠久的食药用历史，该菌子实体用于治疗咽炎、喉炎、扁桃体炎等炎症，临床疗效显著。药理实验研究证明，该菌具有抗炎、抗病毒、抗肿瘤、促进肌体免疫等生物活性，是一种珍贵的、可以替代金银花清热解毒、消炎作用的真菌药物资源。为开发利用这一资源，我们对其进行了深入研究，从金银花植株上获得金银花菌母种并对其分离纯化，得到了该菌的纯菌种，然后通过液体深层发酵的生物技术，达到用规模化生产金银花菌发酵液而加工制成功能饮料的目的。
目前，我国金银花年产量仅800万公斤，而国内外市场需求量为2000万公斤以上，每年供需缺口达1200万公斤。本发明生产的发酵液，在一定程度上可以替代金银花的泡制使用，以缓解金银花供需紧张的局面。此外本发明生产的发酵液经检测富含蛋白质、脂肪、碳水化合物和真菌多糖等营养素，含有甾醇类、三萜类、有机酸、酮类等化学成分；作为健康营养补充剂具有药理学功效，有利于清咽利喉、清肺祛霾，辅以治疗上呼吸道感染和抗病毒、抗肿瘤的作用。以金银花菌发酵液为主要原料，经科学添加其他食品原辅料和(或)食品添加剂加工制成健康型功能饮料等产品，对维护大众健康，提高人们生活品质具有重要意义。
发明内容
本发明所用金银花菌的原菌种经鉴定，属于真菌界、担子菌门、无隔担子菌纲、非褶菌目、绣革孔菌科真菌。子实体形状不规则，呈扁平状、拳形、半圆形或云片状。菌盖表面粗糙，硬而韧，覆瓦状排列，赤酱色至浅栗色，无光泽，有同心环状棱纹及细微绒毛，1.5-4×3-7cm，边缘薄或稍钝，深肉桂色。无菌柄，子实体背面黄褐色，肉眼可见布满细小的管口，管口浅肝褐色至暗褐色，有时可见成簇的新生子实体。断面可见菌肉呈纤维质，棕黄色，菌管长1-2mm。孢子呈淡黄色，球形或阔卵形，直径3μm。
我们选用PDA培养基，对该菌进行了菌种分离纯化，得到了该菌的纯菌种，并通过液体培养实验，初步确定了菌丝体的发酵培养基配方为麦芽汁(10Bx)10％，蛋白胨0.3％，葡萄糖1％，蔗糖1％，玉米浆0.5％，PH5.5-6.0。采用以上培养基，27℃培养96小时摇瓶培养发酵液收率92％，废渣液等8％。确立了中试发酵生产流程：试管斜面菌种——500ml三角瓶液体种子(装量200m1)——5L血清瓶种子(装量3L)——1吨发酵罐(装量500L)——过滤贮存——添加其他食品原辅料和(或)食品添加剂——均质加工——灌装灭菌——包装入库。中试发酵培养基和大生产培养基为；麦芽汁(10Bx)15％，蔗糖1％，葡萄糖1％，蛋白胨0.3％，玉米浆0.5％，PH5.5-6.0，培养条件为：装量50％，接种量6-10％；温度27±1℃，搅拌转速160rpm，通气量6立方米/小时，36～48小时发酵液收率95％。此阶段培养基发酵液收率达到最佳且质量稳定，然后经冷却过滤添加配料和均质加工灌装灭菌等步骤获得功能饮料。
对发酵液质量进行测评，首先是感官要求指标：饮料色泽为淡黄色、口感微甜、具有真菌特有的清香味、外观透明澄清液体、无肉眼可见的外来杂质；理化指标检测：真菌多糖/(mg/mL)≥1.0，可溶性固形物/％≥6；微生物指标检测：菌落总数/(cfu/mL)≤100，大肠菌群/(MPN/100mL)≤3，致病菌不得检出。其次采用气相色谱—质谱(GC-Ms)法分析检测发酵液的成分，表明醇类、酸有机、酮类等化学成分含量高稳定性好。同时还分析测定了其他总膳食纤维符合有关要求规定。
该菌种已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保存(北京市海淀区中国科学院微生物研究所；邮编100080)；
分类命名：茶藨子叶状层菌Phylloporia ribis(Schumach.：Fr.)Ryvarden
保藏编号为；CGMCC No.1195，保藏日期2004年7月22日。
附图说明
附图为一种金银花菌深层发酵液加工制成饮料生产流程。
具体实施方式：
一种金银花菌深层发酵液加工制成饮料生产流程
1、在PDA培养基上的培养情况：将分离到的纯菌种调取少许，转移到PDA培养基上，30℃培养3天，菌落圆形，边缘整齐，平铺，中间部分***，白色，絮状，致密，背面黄色，具放射状沟纹，直径2.7-3.2cm。显微镜下观察菌丝无色，细长，具横隔，纵横交错，多分枝，直径2-2.5μm；菌丝细胞的细胞壁薄而透明，菌丝生长初期可见锁状联合，生长后期分枝较多时，锁状联合不明显。
2、液体培养：将马铃薯去除芽眼与外皮，切成1cm见方的小块，称取600克，加水3000ml，用铝锅在电炉上加热，待其沸腾后，保持30分钟，然后用四层纱布过滤，滤液备用。另外称取葡萄糖60克、磷酸二氢钾6克、硫酸镁1.5克、尿素1.2克，加适量水溶解后，与上述马铃薯水煎液混合，最后定容至3000ml。
取300ml三角瓶，洗净烘干放冷后，每瓶加入上述培养液150ml，注意不要使液体粘附到瓶壁上，上盖棉塞，最后用牛皮纸、橡皮筋封口。在接种菌种之前，将包装好的三角瓶整体置于紫外灯下消毒40分钟。
3、菌丝的接种与培养：取小三角瓶中固体培养生长情况较好的金银花菌菌丝进行接种，注意剔除底部含有琼脂的固体培养基，菌丝团的直径大约为1～2mm，尽量使所取菌丝团的大小保持一致，每瓶取5个菌丝团。如前重新封瓶后，置于恒温振荡器上进行培养，保持温度27℃，振幅为2cm，震荡速率为100rpm。
4、菌丝体培养条件优化：摇瓶培养的温度和培养时间的确定，采用500ml三角瓶，装量200ml，摇瓶转速150rpm，在30℃温度条件下，发酵后测定菌丝体干重的收率。由此表明菌丝体的适宜培养温度为27℃，在27℃条件下摇瓶培养的时间为96小时。
5、发酵生产：菌丝体的发酵培养基配方为麦芽汁(10Bx)10％，蛋白胨0.3％，葡萄糖1％，蔗糖1％，玉米浆0.5％，PH5.5-6.0。采用以上培养基，27℃培养96小时摇瓶培养发酵液收率92％，废渣液等8％。确立了中试发酵生产流程：试管斜面菌种——500ml三角瓶液体种子(装量200ml)——5L血清瓶种子(装量3L)——500L发酵罐(装量300L)——5吨发酵罐。培养基为：麦芽汁(10Bx)15％，蔗糖1％，葡萄糖1％，蛋白胨0.3％，玉米浆0.5％，PH5.5-6.0，培养条件为：装量60％，接种量10％；温度27℃，搅拌转速160rpm，通气量6立方米/小时，36小时发酵液收率95％。36小时培养基发酵液收率达到最佳并且质量稳定。
6、在发酵时间达到最佳时，将发酵罐的发酵液与菌丝转入压滤工序，滤掉菌丝体，保留可溶性成分，集中收取压滤后的金银花菌发酵液贮存，然后通过科学配比添加其他食品原辅料和(或)食品添加剂，经均质加工并通过无菌管道处理方式进行灌装，然后灭菌，包装入库。
参考文献
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[7].中华人民共和国国家标准GB/T31326-2014植物饮料2015-12-1实施
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[9].刘玉红，徐凌川，***.茶藨子叶孔菌化学成分的研究《中药材》2005，28(11)

Claims (4)

1.一种以金银花菌为母种，经分离纯化培养用发酵法生产金银花菌发酵液，以金银花菌发酵液为主要原料添加配料经加工制成饮料的工艺技术，其特征在于：发酵培养基配方为麦芽汁(10Bx)10％，蛋白胨0.3％，葡萄糖1％，蔗糖1％，玉米浆0.5％，PH5.5-6.0；27℃培养96小时摇瓶培养发酵液收率92％；生产工艺流程：试管斜面菌种——三角瓶液体种子——血清瓶种子——种子罐培养——生产罐发酵——过滤贮存——添加其他食品原辅料和(或)食品添加剂——均质加工——灌装灭菌——包装入库。
2.一种权利要求1所述的金银花菌其特征在于：该菌是从金银花植株上获得母种经分离纯化培养得到的菌种；所述金银花菌经鉴定分类命名：茶藨子叶状层菌Phylloporiaribis(Schumach.：Fr.)Ryvarden，其保藏号为：CGMCC No 1195；培养基上生长的菌丝颜色洁白而浓密，用金银花菌发酵生产所得液体为淡黄色。
3.一种权利要求1所述的金银花菌发酵液，富含蛋白质、脂肪、碳水化合物和真菌多糖营养素，含有甾醇类、有机酸类、酮类等化学成分，作为健康营养补充剂具有药理学性质功效，有利于清咽利喉、清肺祛霾，辅以治理上呼吸道感染和抗病毒、抗肿瘤作用。
4.一种权利要求1所述的以金银花菌发酵液为原料，添加其他食品原辅料和(或)食品添加剂，经科学加工制成的健康功能饮料。
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106929464A (zh) * 2017-03-01 2017-07-07 济南大学 一种利用植物源烟水促进茶藨子叶状层菌中甾醇类有效成分积累的方法
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CN111920833A (zh) * 2020-07-23 2020-11-13 舟山桓连食品有限公司 茶藨子叶状层菌发酵液在制备治疗免疫因子风暴药物上的应用
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