CN106011175A - 一种生物转化制备天然可可香料的方法及其应用 - Google Patents
一种生物转化制备天然可可香料的方法及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106011175A CN106011175A CN201610389870.1A CN201610389870A CN106011175A CN 106011175 A CN106011175 A CN 106011175A CN 201610389870 A CN201610389870 A CN 201610389870A CN 106011175 A CN106011175 A CN 106011175A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- bioconversion
- cocoa
- natural
- spice
- cacao flavor
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 244000299461 Theobroma cacao Species 0.000 title claims abstract description 78
- 235000009470 Theobroma cacao Nutrition 0.000 title claims abstract description 40
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 23
- 235000013599 spices Nutrition 0.000 title abstract description 12
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title abstract description 6
- 230000036983 biotransformation Effects 0.000 title abstract 2
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 claims abstract description 40
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 claims abstract description 40
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 claims abstract description 37
- 241000563903 Bacillus velezensis Species 0.000 claims abstract description 6
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims abstract description 3
- 235000005764 Theobroma cacao ssp. cacao Nutrition 0.000 claims description 37
- 235000005767 Theobroma cacao ssp. sphaerocarpum Nutrition 0.000 claims description 37
- 235000001046 cacaotero Nutrition 0.000 claims description 37
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 claims description 16
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 13
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 claims description 12
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 11
- 241000193755 Bacillus cereus Species 0.000 claims description 10
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 10
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 claims description 9
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 9
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims description 8
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 8
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 8
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims description 8
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 8
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 8
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 8
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 8
- 238000010992 reflux Methods 0.000 claims description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims description 5
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 claims description 4
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 claims description 4
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 claims description 4
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 claims description 4
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims description 4
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 claims description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 4
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 claims description 4
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 4
- 238000005284 basis set Methods 0.000 claims 1
- 241000208125 Nicotiana Species 0.000 abstract description 28
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 abstract description 22
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 abstract description 9
- 230000008569 process Effects 0.000 abstract description 7
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 abstract description 6
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 abstract description 6
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 abstract description 6
- 239000008267 milk Substances 0.000 abstract description 6
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 abstract description 6
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 abstract description 6
- 230000008901 benefit Effects 0.000 abstract description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 abstract description 3
- 239000000779 smoke Substances 0.000 abstract 3
- 235000019504 cigarettes Nutrition 0.000 description 14
- UGFAIRIUMAVXCW-UHFFFAOYSA-N Carbon monoxide Chemical compound [O+]#[C-] UGFAIRIUMAVXCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000003546 flue gas Substances 0.000 description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 7
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 6
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 6
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 6
- 238000002290 gas chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 6
- 239000002304 perfume Substances 0.000 description 6
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- RYYVLZVUVIJVGH-UHFFFAOYSA-N caffeine Chemical compound CN1C(=O)N(C)C(=O)C2=C1N=CN2C RYYVLZVUVIJVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 4
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 4
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 4
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 4
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 4
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 4
- YAPQBXQYLJRXSA-UHFFFAOYSA-N theobromine Chemical compound CN1C(=O)NC(=O)C2=C1N=CN2C YAPQBXQYLJRXSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 3
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 3
- 235000014121 butter Nutrition 0.000 description 3
- 229940119429 cocoa extract Drugs 0.000 description 3
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 3
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- -1 fatty acid ester Chemical class 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 3
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 3
- XNGIFLGASWRNHJ-UHFFFAOYSA-N phthalic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1C(O)=O XNGIFLGASWRNHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- XYHKNCXZYYTLRG-UHFFFAOYSA-N 1h-imidazole-2-carbaldehyde Chemical compound O=CC1=NC=CN1 XYHKNCXZYYTLRG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-M 3-Methylbutanoic acid Natural products CC(C)CC([O-])=O GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- ROWKJAVDOGWPAT-UHFFFAOYSA-N Acetoin Chemical compound CC(O)C(C)=O ROWKJAVDOGWPAT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NLZUEZXRPGMBCV-UHFFFAOYSA-N Butylhydroxytoluene Chemical compound CC1=CC(C(C)(C)C)=C(O)C(C(C)(C)C)=C1 NLZUEZXRPGMBCV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Chemical compound CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000628997 Flos Species 0.000 description 2
- LPHGQDQBBGAPDZ-UHFFFAOYSA-N Isocaffeine Natural products CN1C(=O)N(C)C(=O)C2=C1N(C)C=N2 LPHGQDQBBGAPDZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 2
- DHKHKXVYLBGOIT-UHFFFAOYSA-N acetaldehyde Diethyl Acetal Natural products CCOC(C)OCC DHKHKXVYLBGOIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001241 acetals Chemical class 0.000 description 2
- GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-N beta-methyl-butyric acid Natural products CC(C)CC(O)=O GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 2
- 229960001948 caffeine Drugs 0.000 description 2
- VJEONQKOZGKCAK-UHFFFAOYSA-N caffeine Natural products CN1C(=O)N(C)C(=O)C2=C1C=CN2C VJEONQKOZGKCAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- XIRNKXNNONJFQO-UHFFFAOYSA-N ethyl hexadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC XIRNKXNNONJFQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 2
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 2
- HYBBIBNJHNGZAN-UHFFFAOYSA-N furfural Chemical compound O=CC1=CC=CO1 HYBBIBNJHNGZAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N gallic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000002391 heterocyclic compounds Chemical class 0.000 description 2
- JARKCYVAAOWBJS-UHFFFAOYSA-N hexanal Chemical compound CCCCCC=O JARKCYVAAOWBJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 2
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 2
- 230000001953 sensory effect Effects 0.000 description 2
- 230000035943 smell Effects 0.000 description 2
- 230000000391 smoking effect Effects 0.000 description 2
- 235000018553 tannin Nutrition 0.000 description 2
- 229920001864 tannin Polymers 0.000 description 2
- 239000001648 tannin Substances 0.000 description 2
- 235000012976 tarts Nutrition 0.000 description 2
- 229960004559 theobromine Drugs 0.000 description 2
- 239000001149 (9Z,12Z)-octadeca-9,12-dienoate Substances 0.000 description 1
- WTTJVINHCBCLGX-UHFFFAOYSA-N (9trans,12cis)-methyl linoleate Natural products CCCCCC=CCC=CCCCCCCCC(=O)OC WTTJVINHCBCLGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IWYDHOAUDWTVEP-ZETCQYMHSA-N (S)-mandelic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)C1=CC=CC=C1 IWYDHOAUDWTVEP-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- KGRVJHAUYBGFFP-UHFFFAOYSA-N 2,2'-Methylenebis(4-methyl-6-tert-butylphenol) Chemical compound CC(C)(C)C1=CC(C)=CC(CC=2C(=C(C=C(C)C=2)C(C)(C)C)O)=C1O KGRVJHAUYBGFFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ICKWICRCANNIBI-UHFFFAOYSA-N 2,4-di-tert-butylphenol Chemical class CC(C)(C)C1=CC=C(O)C(C(C)(C)C)=C1 ICKWICRCANNIBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HVGZQCSMLUDISR-UHFFFAOYSA-N 2-Phenylethyl propanoate Chemical compound CCC(=O)OCCC1=CC=CC=C1 HVGZQCSMLUDISR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WRMNZCZEMHIOCP-UHFFFAOYSA-N 2-phenylethanol Chemical compound OCCC1=CC=CC=C1 WRMNZCZEMHIOCP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MGADZUXDNSDTHW-UHFFFAOYSA-N 2H-pyran Chemical compound C1OC=CC=C1 MGADZUXDNSDTHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LNJCGNRKWOHFFV-UHFFFAOYSA-N 3-(2-hydroxyethylsulfanyl)propanenitrile Chemical compound OCCSCCC#N LNJCGNRKWOHFFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000005979 Citrus limon Nutrition 0.000 description 1
- 244000131522 Citrus pyriformis Species 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 101000823778 Homo sapiens Y-box-binding protein 2 Proteins 0.000 description 1
- QAOBEOXFSUJDJL-QFLFCSHESA-O Hyacinthin Natural products O=C(OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](Oc2c(-c3cc(O)c(O)cc3)[o+]c3c(c(O)cc(O)c3)c2)O1)/C=C/c1ccc(O)cc1 QAOBEOXFSUJDJL-QFLFCSHESA-O 0.000 description 1
- 102000004317 Lyases Human genes 0.000 description 1
- 108090000856 Lyases Proteins 0.000 description 1
- PKIXXJPMNDDDOS-UHFFFAOYSA-N Methyl linoleate Natural products CCCCC=CCCC=CCCCCCCCC(=O)OC PKIXXJPMNDDDOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 208000004880 Polyuria Diseases 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 208000032140 Sleepiness Diseases 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 206010041349 Somnolence Diseases 0.000 description 1
- QAOBEOXFSUJDJL-RYHKZSCWSA-O [(3s,6s)-6-[2-(3,4-dihydroxyphenyl)-5,7-dihydroxychromenylium-3-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxan-2-yl]methyl (e)-3-(4-hydroxyphenyl)prop-2-enoate Chemical compound C1([C@H](C(C(O)[C@H](OC=2C(=[O+]C3=CC(O)=CC(O)=C3C=2)C=2C=C(O)C(O)=CC=2)O1)O)O)COC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C=C1 QAOBEOXFSUJDJL-RYHKZSCWSA-O 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 239000010692 aromatic oil Substances 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012159 carrier gas Substances 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 210000003710 cerebral cortex Anatomy 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- 235000019219 chocolate Nutrition 0.000 description 1
- 238000013329 compounding Methods 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002027 dichloromethane extract Substances 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 230000035619 diuresis Effects 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 1
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 1
- 229940067592 ethyl palmitate Drugs 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000002964 excitative effect Effects 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 229940074391 gallic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000004515 gallic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 235000008216 herbs Nutrition 0.000 description 1
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 231100000021 irritant Toxicity 0.000 description 1
- 239000002085 irritant Substances 0.000 description 1
- KQNPFQTWMSNSAP-UHFFFAOYSA-N isobutyric acid Chemical compound CC(C)C(O)=O KQNPFQTWMSNSAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- RZJSUWQGFCHNFS-UHFFFAOYSA-N monoisobutyl phthalate Chemical class CC(C)COC(=O)C1=CC=CC=C1C(O)=O RZJSUWQGFCHNFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 230000007096 poisonous effect Effects 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 150000003222 pyridines Chemical class 0.000 description 1
- 239000008159 sesame oil Substances 0.000 description 1
- 235000011803 sesame oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000037321 sleepiness Effects 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 238000010025 steaming Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 150000003505 terpenes Chemical class 0.000 description 1
- 235000007586 terpenes Nutrition 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 150000004670 unsaturated fatty acids Chemical group 0.000 description 1
- 235000021122 unsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P1/00—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes
- C12P1/04—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes by using bacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A24—TOBACCO; CIGARS; CIGARETTES; SIMULATED SMOKING DEVICES; SMOKERS' REQUISITES
- A24B—MANUFACTURE OR PREPARATION OF TOBACCO FOR SMOKING OR CHEWING; TOBACCO; SNUFF
- A24B3/00—Preparing tobacco in the factory
- A24B3/12—Steaming, curing, or flavouring tobacco
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A24—TOBACCO; CIGARS; CIGARETTES; SIMULATED SMOKING DEVICES; SMOKERS' REQUISITES
- A24B—MANUFACTURE OR PREPARATION OF TOBACCO FOR SMOKING OR CHEWING; TOBACCO; SNUFF
- A24B3/00—Preparing tobacco in the factory
- A24B3/14—Forming reconstituted tobacco products, e.g. wrapper materials, sheets, imitation leaves, rods, cakes; Forms of such products
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/07—Bacillus
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Mycology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Fats And Perfumes (AREA)
- Seasonings (AREA)
Abstract
本发明提供一种生物转化制备天然可可香料的方法及其应用，其采用食甲醇芽孢杆菌VJ4‑1(保藏号为CCTCC NO:M 2012004)生物转化天然可可香料，制备的天然可可香料香气质提高，香气丰富，大分子刺激性成分减少，且工艺方法具有天然环保无害优点，应用到再造烟叶中，使烟气质提升，增加可可气息与烘烤香气、豆香奶香底蕴，降低烟气刺激，减少杂气，丰富烟香，改善了再造烟叶刺激大、口感不适的吸味缺陷，能与其它烟用香精香料混合调配使用。
Description
技术领域
本发明涉及再造烟叶添加剂技术领域，具体是一种生物转化制备天然可可香料的方法及其应用。
背景技术
再造烟叶，主要由烟末、碎片、烟梗或低次烟叶加入胶粘剂和其他添加剂等组成，国内的造纸法再造烟叶生产工艺在很大程度上只是一个原材料的物理重组过程，用该方法所得到的再造烟叶与作为原料的烟叶、烟梗化学组分差别不大，导致再造烟叶存在杂气重、刺激性大和口感不适等吸味缺陷，影响了再造烟叶在卷烟产品中的使用效果和添加量。国内通常的做法是采用加料的办法来改善部分不足之处，烟用较多的烟草、天然植物类提取物一般采用传统方法制得，即采用单体烟叶或复配的叶组为原料通过水、醇提取或分子蒸馏得到，添加后对卷烟的改善有一定局限，改善程度有限，仍有刺激性大、杂气多的缺陷。
可可豆中含有可可碱、咖啡因等神经中枢兴奋物质以及丹宁，丹宁与巧克力的色、香、味有很大关系，可可碱，咖啡因会刺激大脑皮质，消除睡意、增强触觉与思考力以及可调整心脏机能，又有扩张肾脏血管、利尿等作用。通过传统回流提取所制备的可可浸膏，具有纯正天然可可香气，丰富烟香；但同时，也具有增加刺激性、增加残留的负面效果。采用食甲醇芽孢杆菌生物转化制备天然可可香料，绿色环保无害，工艺过程简单易操作，不产生有毒副产品、无污染等；在再造烟叶中应用，能降低刺激、减少杂气、丰富烟香、改善口感，尚未见报道。
发明内容
针对目前再造烟叶存在杂气重、刺激性大和口感不适等吸味缺陷，本发明提供了一种生物转化制备天然可可香料的方法，将其制备的香料应用到再造烟叶中，能降低刺激、减少杂气、丰富烟香、改善口感。
一种生物转化制备天然可可香料的方法，包括以下步骤：
1)将可可粉与水按质量比1∶20～50混合，回流提取3～5h后过滤，重复1～3次回流提取，合并滤液，即得可可底液，并灭菌；
2)菌种活化：将食甲醇芽孢杆菌VJ4-1接种到葡萄糖麦芽糖琼脂斜面培养基上，在25～38℃，静置培养24～72h后得到活化菌种，置于4℃冰箱中，所述食甲醇芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)VJ4-1保藏在武汉大学中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCCNO:M 2012004，保藏日期：2012年1月11日；
3)制备种子培养液：将步骤2)中所得的斜面培养物，接种到种子培养基，在25～35℃、pH5-8条件下，100～150rpm/min振荡培养24h～72h，连续转接1～3次，制得种子培养液；
4)生物转化：将种子培养液按体积比10～20％接种到到上述步骤1)中的灭菌的可可底液，接种后的可可底液的装罐量为30～40％，pH5～8，温度32～38℃，转速100～150rpm，不避光条件下生物转化1～5天，得到可生物转化可可液；
5)将生物转化可可液抽滤浓缩，与95％乙醇按质量比1∶3～5，沉淀过夜，4000～8000rpm离心10～20min，取滤液后减压浓缩至密度为1.1～1.3的浸膏，即得生物转化天然可可香料。
优选地，所述斜面培养基为：半乳糖120mL/L，果糖20g/L，琼脂15g/L。
优选地，所述种子液培养基组成为：葡萄糖50g/L，酵母粉10g/L，氯化钠5g/L。
本发明还提供一种上述方法所得生物转化天然可可香料的应用，所述生物转化天然可可香料作为天然烟草添加剂加入再造烟叶中，所述生物转化天然可可香料与再造烟叶的质量比为0.05～0.2％，可使再造烟叶烟气质提升，增加可可特征气息与烘烤香气、豆香奶香底蕴、水果花甜香，降低烟气刺激，减少杂气，丰富烟香，改善了再造烟叶刺激大、口感不适的吸味缺陷。
采用GC/MS对本发明制备的生物转化可可香料与未转化的可可提取物(以下简称对照)进行挥发性致香成分GC/MS对比分析。
(1)同时蒸馏萃取
将5g生物转化可可香料或对照装入圆底烧瓶中，加入400mL水，用电热套加热至沸腾，另一侧的圆底烧瓶中加入200mL的二氯甲烷，60℃水浴沸腾，待中间分液管处液面出现分层后计时萃取2h。萃取结束后，向二氯甲烷萃取液中加入无水硫酸钠，过夜，过滤并浓缩至1mL，浓缩液用于进行GC/MS分析。
(2)GC/MS分析：HP-5MS(50m×0.25mm×0.25μm)毛细管柱；进样温度：250℃；分流比50:1；载气：He，1mL/min；升温程序：从50℃(1min)以5℃/min升到250℃(5min)；传输线温度：250℃；离子源：EI源；电子能量：70eV；扫描范围：50～550amu；使用WILEY和MINILAB谱库进行检索。
(3)挥发性成分对比分析
通过GC/MS对本发明的生物转化天然可可香料及其未转化对照进行香气成分分析，从表1中可以看出：
①未经生物转化的可可提取物中共鉴定出49种挥发性成分，主要包括酸类、脂肪酸酯类、酮类、醛类、醇类、酚类、杂环化合物等；
②生物转化可可香料中分离鉴定出69种挥发性成分，主要包括酸类、脂肪酸酯类、酮类、醛类、醇类、杂环化合物等；
③经生物转化的可可香料中新出现了35种挥发性成分，主要有3-羟基-2-丁酮(18.76％)、糠醛(3.18％)、乳酸、乙缩醛、乙酸、2-庚醇、己醛、异戊酸等香气成分，其中3-羟基-2-丁酮具有强烈的奶油、脂肪、白脱样香气，高度稀释后有令人愉快的奶香气，微甜；糠醛具有苦杏仁的香气；乳酸酸味柔和，具后酸味，可提供柔和的风味；乙缩醛是醇、酯、醛、酮等化合物在发酵、蒸馏或漫长的贮存过程中相互间引发的化学变化后生成的物质,产生柔和的芳香；2-庚醇呈鲜柠檬似香气和青草-草药气味，略有醚香和油香；异戊酸具有极扩散的酸香，适度稀释后有干酪香气，高度稀释后有药草气味；
④经生物转化的可可香料中，有6种挥发性成分的相对百分含量具有不同程度的提高，其中异丁酸有类似丁酸的刺激性气味，稀溶液有酸败油的气味；苯乙醛(5.13％)具有类似风信子的香气，稀释后具行水果的甜香气；苯乙醇(5.22％)天然存在于橙花油，玫瑰油，香叶油等芳香油中，因它具有柔和、愉快而持久的玫瑰香气；棕榈酸乙酯呈微弱蜡香、果爵和奶油香气；亚油酸甲酯是不饱和脂肪酸，是构成卷烟香味的重要物质，柔和烟气，减轻刺激；
⑤同时，有42种挥发性成分在生物转化可可香料中含量降低或消失，包括一些大分子的刺激性物质如2,2'-亚甲基双-(4-甲基-6-叔丁基苯酚)、邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯、2,4-二叔丁基苯酚、2,6-二叔丁基对甲酚、邻苯二甲酸丁基异己酯、邻苯二甲酸异丁酯等，降低了其吸入人体后对喉部的刺激性，给烟气带来杂气和刺激；也有棕榈酸等挥发性香气成分；这些大分子可能通过微生物产香菌的复杂的酶体系转化发酵作用下，发生大分子物质断裂分解、降解、转化，产生更多的小分子香气物质或者转化成别的挥发性香气成分甚至消失，可能有利于可可香料香气品质的提高，加入到烟草中也可能有利于卷烟品质的提高。
所有这些挥发性香气成分赋予其可可特征香气的同时，带来了坚果烘烤香、豆香、奶香、水果花甜香等丰富的香气，降低了刺激，香气质提高。总之，从挥发性成分的变化看，经生物转化的天然可可香料在再造烟叶中的加香效果可能比对照好。
表1.生物转化天然可可香料与其未转化对照的挥发性成分GC/MS对比分析
其中符号“－”表示未检出；内标为丙酸苯乙酯。
微生物在增殖过程中可产生庞大的高活性酶系，如多糖水解酶类、蛋白酶类、酯化酶类、氧化还原酶类及裂合酶类等，在酶促作用、化学作用及微生物体内复杂代谢的协同作用下，以可可为原料发生分解、降解、氧化、还原、聚合、偶联、转化等作用，形成复杂的低分子化合物，其中包括各种香味化合物，如醇类、醛类、酮类、酸类、脂类、酚类、吡喃类、吡啶类和萜烯类等，这些香气物质无疑也是烟草或用于烟草的添加剂的香气组分。
本发明的优点是：
1、本发明以天然可可提取液为唯一碳源、氮源、以及底物，容易让微生物酶体系利用来进行生物转化产香，制备的天然可可香料香气质提高，香气丰富，大分子刺激性成分减少，且工艺方法具有天然环保无害优点。
2、采用食甲醇芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus VJ4-1CCTCC NO:M2012004)生物转化天然可可香料，应用到再造烟叶中，使烟气质提升，增加可可气息与烘烤香气、豆香奶香底蕴，降低烟气刺激，减少杂气，丰富烟香，改善了再造烟叶刺激大、口感不适的吸味缺陷，能与其它烟用香精香料混合调配使用。
3、本发明方法工艺过程简单，产香菌来源易得，生物转化工艺条件温和，有工业化使用前景
具体实施方式
下面列举一部分实施例对本发明的有关技术问题作进一步详细的描述，有必要在此指出以下具体实施例只是对本发明的进一步说明，不代表对本发明保护范围的限制。其他人根据本发明做出的一些非本质的修改和调整，仍属于本发明的保护范围。
实施例1
本发明利用食甲醇芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus VJ4-1CCTCC NO:M2012004)生物转化天然可可香料的制备方法如下：
1)将可可粉与水按质量比1∶20混合，回流提取3h后过滤，重复2次回流提取，合并滤液，即得可可底液，并灭菌；
2)菌种活化：将食甲醇芽孢杆菌(VJ4-1)接种到葡萄糖麦芽糖琼脂斜面培养基上，在28℃，静置培养24h后得到活化菌种，置于4℃冰箱中；
3)制备种子培养液：将步骤2)中所得的斜面培养物，接种到种子培养基，在25℃、pH5条件下，120rpm/min振荡培养24h，转接1次，制得种子培养液；
4)生物转化：将种子培养液按体积比10％接种到到上述步骤1)中的灭菌的可可底液，接种后的可可底液的装罐量为30％，pH5，温度32℃，转速110rpm，不避光条件下生物转化2天，得到可生物转化可可液；
5)将生物转化可可液抽滤浓缩，与95％乙醇按质量比1∶3，沉淀过夜，5000rpm离心12min，取滤液后减压浓缩至密度为1.1的浸膏，即得生物转化天然可可香料。
优选地，所述斜面培养基为：半乳糖120mL/L，果糖20g/L，琼脂15g/L。
优选地，所述种子液培养基组成为：葡萄糖50g/L，酵母粉10g/L，氯化钠5g/L。
实施例2
本发明利用食甲醇芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus VJ4-1CCTCC NO:M2012004)生物转化天然可可香料的制备方法如下：
1)将可可粉与水按质量比1∶30混合，回流提取4h后过滤，重复33次回流提取，合并滤液，即得可可底液，并灭菌；
2)菌种活化：将食甲醇芽孢杆菌(VJ4-1)接种到葡萄糖麦芽糖琼脂斜面培养基上，在32℃，静置培养48h后得到活化菌种，置于4℃冰箱中；
3)制备种子培养液：将步骤2)中所得的斜面培养物，接种到种子培养基，在35℃、pH 6条件下，120rpm/min振荡培养48h，连续转接2次，制得种子培养液；
4)生物转化：将种子培养液按体积比15％接种到到上述步骤1)中的灭菌的可可底液，接种后的可可底液的装罐量为35％，pH 7，温度35℃，转速130rpm，不避光条件下生物转化3天，得到可生物转化可可液；
5)将生物转化可可液抽滤浓缩，与95％乙醇按质量比1∶4，沉淀过夜，6000rpm离心15min，取滤液后减压浓缩至密度为1.15的浸膏，即得生物转化天然可可香料。
优选地，所述斜面培养基为：半乳糖120mL/L，果糖20g/L，琼脂15g/L。
优选地，所述种子液培养基组成为：葡萄糖50g/L，酵母粉10g/L，氯化钠5g/L。
实施例3
生物转化天然可可香料在再造烟叶中应用的感官评吸
本发明人将上述生物转化天然可可香料按再造烟叶质量0.05％、0.1％、0.2％，分别添加到再造烟叶(B类)上。将再造烟叶装入密封袋中，放置烘箱中80℃恒温30min，至重组烟叶水分合适，卷制成烟支，放入恒温恒湿箱内(22℃+1、相对湿度为60％+2％)平衡48h，请专家评吸小组评吸。对照为喷加相同量可可提取物的再造烟叶(B类)卷制的卷烟。经专家评吸小组反复评吸，认为：本生物转化天然可可香料，与再造烟叶量比例为0.05％、0.1％时，具有使再造烟叶烟气质提升，增加可可气息与烘烤香气、豆香奶香底蕴，降低烟气刺激，丰富烟香的优点，改善再造烟叶刺激大、口感不适的吸味缺陷。
表2.生物转化天然可可香料在再造烟叶中应用的感官评吸
Claims (4)
1.一种生物转化制备天然可可香料的方法，其特征在于包括以下步骤：
1)将可可粉与水按质量比1∶20～50混合，回流提取3～5h后过滤，重复1～3次回流提取，合并滤液，即得可可底液，并灭菌；
2)菌种活化：将食甲醇芽孢杆菌VJ4-1接种到葡萄糖麦芽糖琼脂斜面培养基上，在25～38℃，静置培养24～72h后得到活化菌种，置于4℃冰箱中，所述食甲醇芽孢杆菌(Bacillusmethylotrophicus)VJ4-1保藏在武汉大学中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO:M2012004，保藏日期：2012年1月11日；
3)制备种子培养液：将步骤2)中所得的斜面培养物，接种到种子培养基，在25～35℃、pH 5-8条件下，100～150rpm/min振荡培养24h～72h，连续转接1～3次，制得种子培养液；
4)生物转化：将种子培养液按体积比10～20％接种到到上述步骤1)中的灭菌的可可底液，接种后的可可底液的装罐量为30～40％，pH5～8，温度32～38℃，转速100～150rpm，不避光条件下生物转化1～5天，得到可生物转化可可液；
5)将生物转化可可液抽滤浓缩，与95％乙醇按质量比1∶3～5，沉淀过夜，4000～8000rpm离心10～20min，取滤液后减压浓缩至密度为1.1～1.3的浸膏，即得生物转化天然可可香料。
2.如权利要求1所述的生物转化制备天然可可香料的方法，其特征在于：所述斜面培养基为：半乳糖120mL/L，果糖20g/L，琼脂15g/L。
3.如权利要求1所述的生物转化制备天然可可香料的方法，其特征在于：所述种子液培养基组成为：葡萄糖50g/L，酵母粉10g/L，氯化钠5g/L。
4.一种如权利要求1-3中任一项所述方法所得天然可可香料的应用，其特征在于：所述生物转化天然可可香料作为天然烟草添加剂加入再造烟叶中，所述生物转化天然可可香料与再造烟叶的质量比为0.05～0.2％。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610389870.1A CN106011175A (zh) | 2016-06-03 | 2016-06-03 | 一种生物转化制备天然可可香料的方法及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610389870.1A CN106011175A (zh) | 2016-06-03 | 2016-06-03 | 一种生物转化制备天然可可香料的方法及其应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN106011175A true CN106011175A (zh) | 2016-10-12 |
Family
ID=57090500
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201610389870.1A Pending CN106011175A (zh) | 2016-06-03 | 2016-06-03 | 一种生物转化制备天然可可香料的方法及其应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN106011175A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2022083007A1 (zh) * | 2020-10-19 | 2022-04-28 | 济南瑞隆安生物技术有限公司 | 一种使用可可粉生产高含量凝结芽孢杆菌芽孢益生菌的发酵方法及其应用 |
Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101445766A (zh) * | 2008-12-17 | 2009-06-03 | 华宝食用香精香料（上海）有限公司 | 可可香料的制备方法、采用该方法所得到的产品及其用途 |
| CN102618475A (zh) * | 2012-04-18 | 2012-08-01 | 湖北中烟工业有限责任公司 | 一种食甲醇芽孢杆菌及其烟用升麻浸膏的制备方法和应用 |
| CN102628026A (zh) * | 2012-04-18 | 2012-08-08 | 湖北中烟工业有限责任公司 | 一种食甲醇芽孢杆菌及其烟用咖啡浸膏的制备方法和应用 |
| CN102793262A (zh) * | 2012-08-17 | 2012-11-28 | 深圳波顿香料有限公司 | 一种烟用香料及其制备、使用方法 |
| CN102851229A (zh) * | 2012-04-18 | 2013-01-02 | 湖北中烟工业有限责任公司 | 一种食甲醇芽孢杆菌及其烟用当归浸膏制备方法和应用 |
| CN102851230A (zh) * | 2012-04-18 | 2013-01-02 | 湖北中烟工业有限责任公司 | 一种食甲醇芽孢杆菌及其烟用谷壳浸膏的制备方法和应用 |
| CN102851228A (zh) * | 2012-04-18 | 2013-01-02 | 湖北中烟工业有限责任公司 | 一种食甲醇芽孢杆菌及其烟用酸枣仁浸膏的制备方法和应用 |
| CN102978127A (zh) * | 2012-09-05 | 2013-03-20 | 湖北中烟工业有限责任公司 | 烟叶、可可提取物复合发酵香料的制备方法及其在重组烟叶中的应用 |
-
2016
- 2016-06-03 CN CN201610389870.1A patent/CN106011175A/zh active Pending
Patent Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101445766A (zh) * | 2008-12-17 | 2009-06-03 | 华宝食用香精香料（上海）有限公司 | 可可香料的制备方法、采用该方法所得到的产品及其用途 |
| CN102618475A (zh) * | 2012-04-18 | 2012-08-01 | 湖北中烟工业有限责任公司 | 一种食甲醇芽孢杆菌及其烟用升麻浸膏的制备方法和应用 |
| CN102628026A (zh) * | 2012-04-18 | 2012-08-08 | 湖北中烟工业有限责任公司 | 一种食甲醇芽孢杆菌及其烟用咖啡浸膏的制备方法和应用 |
| CN102851229A (zh) * | 2012-04-18 | 2013-01-02 | 湖北中烟工业有限责任公司 | 一种食甲醇芽孢杆菌及其烟用当归浸膏制备方法和应用 |
| CN102851230A (zh) * | 2012-04-18 | 2013-01-02 | 湖北中烟工业有限责任公司 | 一种食甲醇芽孢杆菌及其烟用谷壳浸膏的制备方法和应用 |
| CN102851228A (zh) * | 2012-04-18 | 2013-01-02 | 湖北中烟工业有限责任公司 | 一种食甲醇芽孢杆菌及其烟用酸枣仁浸膏的制备方法和应用 |
| CN102793262A (zh) * | 2012-08-17 | 2012-11-28 | 深圳波顿香料有限公司 | 一种烟用香料及其制备、使用方法 |
| CN102978127A (zh) * | 2012-09-05 | 2013-03-20 | 湖北中烟工业有限责任公司 | 烟叶、可可提取物复合发酵香料的制备方法及其在重组烟叶中的应用 |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2022083007A1 (zh) * | 2020-10-19 | 2022-04-28 | 济南瑞隆安生物技术有限公司 | 一种使用可可粉生产高含量凝结芽孢杆菌芽孢益生菌的发酵方法及其应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102978127B (zh) | 烟叶、可可提取物复合发酵香料的制备方法及其在重组烟叶中的应用 | |
| CN102851228B (zh) | 一种食甲醇芽孢杆菌及其烟用酸枣仁浸膏的制备方法和应用 | |
| CN106136303B (zh) | 一种栀子烟用提取物的制备方法及其应用 | |
| CN104293487A (zh) | 葡萄发酵提取物通过美拉德反应生产烟用香料的方法 | |
| CN107227204A (zh) | 一种菊苣根烟用香料及其制备方法和应用 | |
| CN106551422A (zh) | 烟用酸枣仁浸膏的制备方法和应用 | |
| CN108707510A (zh) | 一种红枣烟草复合美拉德反应物的制备方法及其应用 | |
| CN102851229B (zh) | 一种食甲醇芽孢杆菌及其烟用当归浸膏制备方法和应用 | |
| CN107164094A (zh) | 增色增香脯氨酸美拉德反应物制备方法及其应用 | |
| CN106434828A (zh) | 一种发酵型金雀花烟用香料的制备方法 | |
| CN107043788A (zh) | 一种基于生物产香制备无花果香料的方法及其应用 | |
| CN102628026B (zh) | 一种食甲醇芽孢杆菌及其烟用咖啡浸膏的制备方法和应用 | |
| CN106929536A (zh) | 一种生物产香制备罗汉果香料的方法及其应用 | |
| CN107974349A (zh) | 一种生物发酵当归油的制备方法及其应用 | |
| CN102851230B (zh) | 一种食甲醇芽孢杆菌及其烟用谷壳浸膏的制备方法和应用 | |
| CN103224894B (zh) | 桑肠杆菌及其生物转化发酵型烟用麸皮浸膏的方法和应用 | |
| CN109090697A (zh) | 一种混菌发酵烟草的方法 | |
| CN102618475B (zh) | 一种食甲醇芽孢杆菌及其烟用升麻浸膏的制备方法和应用 | |
| CN108456591A (zh) | 一种白柠檬挥发油的制备方法及其应用 | |
| CN107997228A (zh) | 一种带烘烤香的当归提取物的制备方法及其应用 | |
| CN102488317B (zh) | 一种烟用生物香料及其制备方法与它的用途 | |
| CN106011175A (zh) | 一种生物转化制备天然可可香料的方法及其应用 | |
| CN109536283B (zh) | 一种提高品质的苏合香油的制备方法及其应用 | |
| CN102488321A (zh) | 烟用生物香料及其制备方法与它的用途 | |
| CN109868186A (zh) | 一种利用冬虫夏草或金耳及花制备烟用香精香料的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20161012 |