CN106008503A

CN106008503A - 螺环芳基砜作为蛋白激酶抑制剂

Info

Publication number: CN106008503A
Application number: CN201610179546.7A
Authority: CN
Inventors: 丁照中; 陈曙辉; 赵保平; 刘希乐; 鄢笑非; 张路
Original assignee: NANJING MINGDE NEW DRUG RESEARCH AND DEVELOPMENT Co Ltd
Current assignee: Qilu Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2015-03-31
Filing date: 2016-03-25
Publication date: 2016-10-12
Anticipated expiration: 2036-03-25
Also published as: CN106008503B

Abstract

本发明公开了螺环芳基砜类化合物，尤其是式(I)化合物作为ALK抑制剂。

Description

螺环芳基砜作为蛋白激酶抑制剂

发明领域

本发明涉及螺环芳基砜化合物，尤其是式(I)化合物作为ALK抑制剂。

发明背景

蛋白激酶能够调控细胞周期的各个环节；蛋白激酶的异常表达既会引起疾病，同时疾病也会造成蛋白激酶的异常表达，这些疾病包括癌症，炎症和糖尿病等，因此蛋白激酶逐渐成为比较流行的药物靶标。

自从2001年格列卫上市以来，很多蛋白激酶已经成为非常有吸引力的癌症治疗靶标。其中间变性淋巴瘤激酶(ALK)吸引了大量关注，由于其在许多人类癌症中具有潜在的致癌基因以及在癌症的发病机理中扮演着重要角色，如ALCLS，非小细胞肺癌，乳腺癌，结肠直肠癌，神经母细胞瘤，卵巢癌等。

间变性淋巴瘤激酶(ALK)是一种受体酪氨酸激酶(RTK)，为胰岛素受体(IR)超家族成员。1994年ALK首次以融合蛋白NPM(核磷蛋白)-ALK的形式在60-80％间变性大细胞淋巴瘤(ALCLS)细胞系中被发现，NPM-ALK是由t(2；5)染色体易位造成。尽管ALK在癌症中的生理功能还不清楚，但ALK融合蛋白已经在ALCLs以及在各种人类癌症中发现，如乳腺癌，结肠直肠癌，炎性肌纤维母细胞瘤(IMT)，弥散性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)，其中最为显著的是在非小细胞肺癌(NSCLC)中。因此，与ALK融合蛋白相关的激酶活性被认为对人类癌细胞存活与增殖起着非常重要的作用。

ALK基因提供了一种信号传导的指令，使受体酪氨酸激酶将信号从细胞表面传导到细胞中。这一过程起始于当激酶在细胞表面受到刺激后，然后附着到类似的激酶(二聚)。二聚化后，激酶被一个磷酸基团标记，这一过程称为磷酸化。磷酸化激活激酶，活化激酶是能够将磷酸基转移到细胞内的另一个蛋白，活化持续通过信号通路中一系列的蛋白质。而这些信号通路对于许多细胞过程非常重要，如细胞生长和***(增殖)或成熟(分化)等。

通常ALK染色体重排，使得ALK的酪氨酸激酶结构域与其它蛋白的5’-端的结构域融合，例如棘皮动物微管相关蛋白样4(EML4)中NSCLC或核磷蛋白(NPM)在间变性大细胞淋巴瘤。对所有ALK融合基因其断点非常保守，位于外显子编码的基因内区的上游激酶域。由于ALK涉及的重排的部分不包括跨膜结构域，所形成的融合蛋白从细胞膜重新迁移到细胞质。融合蛋白的5′-端通常含有卷曲螺旋或亮氨酸拉链结构域，从而使融合蛋白低聚化，并且导致ALK酪氨酸激酶的配体依赖性活化。这一结果反过来又组成性激活下游信号传导，如的Ras/MAPK，PI3K/AKT，和JAK/STAT等通路。ALK驱动的肺癌在用ALK小分子酪氨酸激酶抑制剂治疗后产生响应和消退。这一发现表明了“肿瘤基因的依赖性”，即癌细胞变得依赖于致癌驱动基因，因此对抑制癌基因高度敏感。

Crizotinib是第一个被FDA批准的用于治疗ALK阳性肺癌的ALK抑制剂。尽管对Crizotinib治疗最初响应非常有效，但多数患者由于产生耐药性而在治疗的第一年发生复发。Crizotinib耐药机制一般分为两大类，第一类是靶标的基因改变，也就是说ALK通过突变或基因扩增发生改变。许多ALK激酶结构域耐药突变已经从患者样本得到鉴定，包括L1196M和C1156Y G1269A，1151Tins，L1152R，G1202R和S1206Y。大约有三分之一的患者由于ALK融合基因的突变和/或扩增，在使用Crizotinib治疗期间发生复发。第二类耐药机制是可以激活其它信号通路，从而绕过ALK。例如在体外ALK阳性对克唑替尼产生耐药的细胞系中已经观察到表皮生长因子受体信号的上调，这与临床前的研亢结果一致，将近一半的ALK阳性肿瘤在对克唑替尼产生耐药时表现出EGFR激活。在临床上，Crizotinib治疗复发通常与中枢神经***(CNS)的转移有关。这一发现也提出了一个药代动力学的问题，药物暴露不足，可能是ALK阳性患者CNS复发率高的原因。

2014年4月29日，FDA批准Ceritinib用于治疗间变性淋巴瘤激酶(ALK)阳性的转移性非小细胞肺癌(NSCLC)，包括对Crizotinib有效以及耐药的患者。还有一些化合物正在临床研亢中用于治疗癌症，如Alectinib，AP-26113，X-396，PF-06463992，LDK378等。一些杂环化合物也已披露，用于各种癌症的治疗，这些专利包括WO2014033136，WO2014025128，WO2014006554，WO2014002922，WO2013192512，WO2013177092，WO2013148857，WO2013138210，WO2012139499，WO2012140114，WO2012048259。

然而，尽管有半数以上的NSCLC患者对Crizotinib的疗效良好，然而耐药总是会随治疗时间的延长而产生，从而药物失去其有效性。虽然近几年来，国内外都在大力开发用于治疗非小细胞肺癌的ALK抑制剂，但其疗效并不令人满意。因此开发新型的，更加有效安全的ALK抑制剂非常迫切需要。

发明内容

本发明的目的在于提供式(I)所示化合物或其药学上可接受的盐

其中，

T₁选自N或C(R₀₁)；

T₂选自-N(R₀₁)-、O、S(＝O)₂、-CH(NR₀₁R₀₂)-或-C(＝O)N(R₀₁)-；

R₀₁、R₀₂分别独立地选自H、F、Cl、Br、I、CN、OH、SH、NH₂、或任选被1、2或3个卤素、羟基、氨基和/或氰基所取代的：C_1-6烷基、C_1-6杂烷基、C_3-6环烷基-(CH₂)_0-3-和C_3-6杂环烷基-(CH₂)_0-3-，其中所述“杂”代表1、2或3个杂原子或杂原子团，所述杂原子或杂原子团选自O、S、N、S(＝O)₂或S(＝O)；

任选地，T₂上的R₀₁和R₀₂相互连接到同一个N上形成1个3～6元环，所述的环上含有1、2或3个杂原子，所述杂原子选自O、S和N；

D₁～D₄分别独立地选自-(CR₁R₂)_1-3-、O、S、C(＝O)、S(＝O)₂和S(＝O)；

R₃选自R₀₃、OR₀₃和SR₀₃；

R₀₃选自C_1-4烷基、C_1-4卤代烷基和C_3-5环烷基-(CH₂)_0-3-；

Z选自N和C(R₄)；

R₅选自C_1-4烷基；

R₁、R₂和R₄分别独立地选自H、F、Cl、Br、I、CN、OH、SH、NH₂、或任选被1、2或3个卤素、羟基和/或氰基所取代的：C_1-6烷基、C_1-6杂烷基、C_3-6环烷基-(CH₂)_0-3-和C_3-6杂环烷基-(CH₂)_0-3-，其中所述“杂”代表1、2、或3个杂原子，所述杂原子选自O、S和N。

本发明的一个方案中，上述R₀₁和R₀₂分别独立地选自H、-CH₃、-CD₃、-CF₃、-CHF₂、-CH₂CH₃、CH(CH₃)₂、-CH₂CF₃、-CH₂CH₂CF₃、-CH₂CH₂F、-CH₂CH₂S(＝O)₂CH₃、-CH₂CH₂CN、 -CH₂CH(OH)(CH₃)₂、-CH₂CH(F)(CH₃)₂、-CH₂CH₂F。

本发明的一个方案中，NR₀₁R₀₂选自NHCH₃、N(CH₃)₂、N(CH₂CH₃)₂、

本发明的一个方案中，上述R₀₃选自-CH₃、-CD₃、-CF₃、-CHF₂、-CH₂CH₃、-CH(CH₃)₂、-CH₂CF₃、-CH₂CH₂CF₃、-CH₂CH₂F和

本发明的一个方案中，上述R₅选自-CH(CH₃)₂。

本发明的一个方案中，上述R₁、R₂和R₄分别独立地选自H、F、Cl、Br、I、-CH₃、-CD₃、-CF₃、-CHF₂、-CH₂CH₃、-CH(CH₃)₂、-CH₂CF₃、-CH₂CH₂CF₃、-CH₂CH₂F、-CH₂CH₂S(＝O)₂CH₃、-CH₂CH₂CN、 -CH₂CH(OH)(CH₃)₂、-CH₂CH(F)(CH₃)₂和-CH₂CH₂F。

本发明的一方案中，上述T₂选自-NH-、-N(Me)-、-C(＝O)NH-、-C(＝O)N(CH₃)-、-O-和-CH(NCH₃CH₃)-。

本发明的一个方案中，上述螺环结构单元选自：和

本发明的一个方案中，上述化合物或其药学上可接受的盐，其选自：

本发明的另一个目的在于提供制备上述化合物的方法，其中T₁代表N或CH，T₂代表NH，其制备路线如方案A或C所示：

方案A

方案C

其中PG是氨基保护基，优选自BOC、Bn和Cbz。

本发明的一个方案中，其中A5的制备方法如方案B所示：

方案B

本发明的目的在于使用上述化合物治疗ALK和EGFR以及它们的突变引起的非小细胞肺癌及其它癌症。

本发明的目的还在于使用上述化合物与ROS1，BRAF，c-MET，HER2，KRAS/MEK，PIK3CA，FDFR，DDR2，VEGFR等抑制剂联合治疗癌症，以及与细胞毒素，如多西他赛，卡铂等联合治疗癌症。

定义和说明

C_1-6选自于由C₁，C₂，C₃，C₄，C₅和C₆组成的基团，数字表示碳原子数的基团；C_3-6选自于由C₃，C₄，C₅，和C₆组成的基团。

C_1-6烷基，C_1-6杂烷基，C_3-6环烷基，C_3-6杂环烷基，C_1-6烷基被C_3-6环烷基或C_3-6杂环烷基取代，和C_1-6杂烷基被C_3-6环烷基或C_3-6杂环烷基取代，包括但不限于：甲基，乙基，正丙基，异丙基，-CH₂C(CH₃)(CH₃)(OH)，环丙基，环丁基，丙基亚甲基，环丙基酰基，苄氧基，环丙基烯基，三氟甲基，氨基甲基，羟甲基，甲氧基，甲基酰基，甲氧酰基，甲基磺酰基，甲基亚磺酰基，乙氧基，乙酰基，乙基磺酰基，乙氧酰基，二甲基氨基，二乙基氨基，二甲基氨基，和二乙基氨基；N(CH₃)₂，NH(CH₃)，-CH₂CF₃，-CH2CH₂CF₃，-CH₂CH₂F，-CH₂CH₂S(＝O)₂CH₃，-CH₂CH₂CN， -CH₂CH(OH)(CH₃)₂，-CH₂CH(F)(CH₃)₂，-CH₂CH₂F，-CH₂CF₃，-CH₂CH₂CF₃，-CH₂CH₂NH₂，-CH₂CH₂OH，-CH₂CH₂OCH₃，-CH₂CH₂CH₂OCH₃，-CH₂CH₂N(CH₃)₂，-S(＝O)₂CH₃，-CH₂CH₂S(＝O)₂CH₃，

这里所采用的术语“药学上可接受的”，是针对那些化合物、材料、组合物和/或剂型而言，它们在可靠的医学判断的范围之内，适用于与人类和动物的组织接触使用，而没有过多的毒性、刺激性、过敏性反应或其它问题或并发症，与合理的利益/风险比相称。

术语“药学上可接受的盐”是指本发明化合物的盐，由本发明发现的具有特定取代基的化合物与相对无毒的酸或碱制备。当本发明的化合物中含有相对酸性的功能团时，可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的碱与这类化合物的中性形式接触的方式获得碱加成盐。药学上可接受的碱加成盐包括钠、钾、钙、铵、有机氨或镁盐或类似的盐。当本发明的化合物中含有相对碱性的官能团时，可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的酸与这类化合物的中性形式接触的方式获得酸加成盐。药学上可接受的酸加成盐的实例包括无机酸盐，所述无机酸包括例如盐酸、氢溴酸、硝酸、碳酸，碳酸氢根，磷酸、磷酸一氢根、磷酸二氢根、硫酸、硫酸氢根、氢碘酸、亚磷酸等；以及有机酸盐，所述有机酸包括如乙酸、丙酸、异丁酸、马来酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、反丁烯二酸、乳酸、扁桃酸、邻苯二甲酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、柠檬酸、酒石酸和甲磺酸等类似的酸；还包括氨基酸(如精氨酸等)的盐，以及如葡糖醛酸等有机酸的盐(参见Berge et al.，″PharmaceuticalSalts″，Journal of Pharmaceutical Science 66：1-19(1977))。本发明的某些特定的化合物含有碱性和酸性的官能团，从而可以被转换成任一碱或酸加成盐。

优选地，以常规方式使盐与碱或酸接触，再分离母体化合物，由此再生化合物的中性形式。化合物的母体形式与其各种盐的形式的不同之处在于某些物理性质，例如在极性溶剂中的溶解度不同。

本文所用的“药学上可接受的盐”属于本发明化合物的衍生物，其中，通过与酸成盐或与碱成盐的方式修饰所述母体化合物。药学上可接受的盐的实例包括但不限于：碱基比如胺的无机酸或有机酸盐、酸根比如羧酸的碱金属或有机盐等等。药学上可接受的盐包括常规的无毒性的盐或母体化合物的季铵盐，例如无毒的无机酸或有机酸所形成的盐。常规的无毒性的盐包括但不限于那些衍生自无机酸和有机酸的盐，所述的无机酸或有机酸选自2-乙酰氧基苯甲酸、2-羟基乙磺酸、乙酸、抗坏血酸、苯磺酸、苯甲酸、碳酸氢根、碳酸、柠檬酸、依地酸、乙烷二磺酸、乙烷磺酸、富马酸、葡庚糖、葡糖酸、谷氨酸、乙醇酸、氢溴酸、盐酸、氢碘酸盐、羟基、羟萘、羟乙磺酸、乳酸、乳糖、十二烷基磺酸、马来酸、苹果酸、扁桃酸、甲烷磺酸、硝酸、草酸、双羟萘酸、泛酸、苯乙酸、磷酸、多聚半乳糖醛、丙酸、水杨酸、硬脂酸、亚乙酸、琥珀酸、氨基磺酸、对氨基苯磺酸、硫酸、单宁、酒石酸和对甲苯磺酸。

本发明的药学上可接受的盐可由含有酸根或碱基的母体化合物通过常规化学方法合成。一般情况下，这样的盐的制备方法是：在水或有机溶剂或两者的混合物中，经由游离酸或碱形式的这些化合物与化学计量的适当的碱或酸反应来制备。一般地，优选醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈等非水介质。

除了盐的形式，本发明所提供的化合物还存在前药形式。本文所描述的化合物的前药容易地在生理条件下发生化学变化从而转化成本发明的化合物。此外，前体药物可以在体内环境中通过化学或生化方法被转换到本发明的化合物。

本发明的某些化合物可以以非溶剂化形式或者溶剂化形式存在，包括水合物形式。一般而言，溶剂化形式与非溶剂化的形式相当，都包含在本发明的范围之内。本发明的某些化合物可以具有不对称碳原子(光学中心)或双键。外消旋体、非对映异构体、几何异构体和单个的异构体都包括在本发明的范围之内。

本文中消旋体、ambiscalemic and scalemic或者对映体纯的化合物的图示法来自Maehr，J.Chem.Ed.1985，62：114-120。1985年，62：114-120。除非另有说明，用楔形键和虚线键表示一个立体中心的绝对构型。当本文所述化合物含有烯属双键或其它几何不对称中心，除非另有规定，它们包括E、Z几何异构体。同样地，所有的互变异构形式均包括在本发明的范围之内。

本发明的化合物可以存在特定的几何或立体异构体形式。本发明设想所有的这类化合物，包括顺式和反式异构体、(-)-和(+)-对对映体、(R)-和(S)-对映体、非对映异构体、(D)-异构体、(L)-异构体，及其外消旋混合物和其他混合物，例如对映异构体或非对映体富集的混合物，所有这些混合物都属于本发明的范围之内。烷基等取代基中可存在另外的不对称碳原子。所有这些异构体以及它们的混合物，均包括在本发明的范围之内。

可以通过的手性合成或手性试剂或者其他常规技术制备光学活性的(R)-和(S)-异构体以及D和L异构体。如果想得到本发明某化合物的一种对映体，可以通过不对称合成或者具有手性助剂的衍生作用来制备，其中将所得非对映体混合物分离，并且辅助基团裂开以提供纯的所需对映异构体。或者，当分子中含有碱性官能团(如氨基)或酸性官能团(如羧基)时，与适当的光学活性的酸或碱形成非对映异构体的盐，然后通过本领域所公知的拆分方法进行非对映异构体拆分，然后回收得到纯的对映体。此外，对映异构体和非对映异构体的分离通常是通过使用色谱法完成的，所述色谱法采用手性固定相，并任选地与化学衍生法相结合(例如由胺生成氨基甲酸盐)。

本发明的化合物可以在一个或多个构成该化合物的原子上包含非天然比例的原子同位素。例如，可用放射性同位素标记化合物，比如氚(³H)，碘-125(¹²⁵I)或C-14(¹⁴C)。本发明的化合物的所有同位素组成的变换，无论放射性与否，都包括在本发明的范围之内。

术语“药学上可接受的载体”是指能够递送本发明有效量活性物质、不干扰活性物质的生物活性并且对宿主或者患者无毒副作用的任何制剂或载体介质代表性的载体包括水、油、蔬菜和矿物质、膏基、洗剂基质、软膏基质等。这些基质包括悬浮剂、增粘剂、透皮促进剂等。它们的制剂为化妆品领域或局部药物领域的技术人员所周知。关于载体的其他信息，可以参考Remington：The Science and Practice of Pharmacy，21st Ed.，Lippincott，Williams&Wilkins(2005)，该文献的内容通过引用的方式并入本文。

术语“赋形剂”通常是指配制有效的药物组合物所需要载体、稀释剂和/或介质。

针对药物或药理学活性剂而言，术语“有效量”或“治疗有效量”是指无毒的但能达到预期效果的药物或药剂的足够用量。对于本发明中的口服剂型，组合物中一种活性物质的“有效量”是指与该组合物中另一种活性物质联用时为了达到预期效果所需要的用量。有效量的确定因人而异，取决于受体的年龄和一般情况，也取决于具体的活性物质，个案中合适的有效量可以由本领域技术人员根据常规试验确定。

术语“活性成分”、“治疗剂”、“活性物质”或“活性剂”是指一种化学实体，它可以有效地治疗目标紊乱、疾病或病症。

术语“被取代的”是指特定原子上的任意一个或多个氢原子被取代基取代，包括重氢和氢的变体，只要特定原子的价态是正常的并且取代后的化合物是稳定的。当取代基为酮基(即＝O)时，意味着两个氢原子被取代。酮取代不会发生在芳香基上。术语“任选被取代的”是指可以被取代，也可以不被取代，除非另有规定，取代基的种类和数目在化学上可以实现的基础上可以是任意的。

当任何变量(例如R)在化合物的组成或结构中出现一次以上时，其在每一种情况下的定义都是独立的。因此，例如，如果一个基团被0-2个R所取代，则所述基团可以任选地至多被两个R所取代，并且每种情况下的R都有独立的选项。此外，取代基和/或其变体的组合只有在这样的组合会产生稳定的化合物的情况下才是被允许的。

当一个取代基的键可以交叉连接到一个环上的两个原子时，这种取代基可以与这个环上的任意原子相键合。当所列举的取代基中没有指明其通过哪一个原子连接到化学结构通式中包括但未具体提及的化合物时，这种取代基可以通过其任何原子相键合。取代基和/或其变体的组合只有在这样的组合会产生稳定的化合物的情况下才是被允许的。

烷基和杂烷基原子团(包括通常被称为亚烷基、链烯基、亚杂烷基、杂烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的那些基团)的取代基一般被称为“烷基取代基”，它们可以选自但不限于下列基团中的一个或多个：-R’、-OR’、＝O、＝NR’、＝N-OR’、-NR’R”、-SR’、卤素、-SiR’R”R”’、OC(O)R’、-C(O)R’、-CO₂R’、-CONR’R”、-OC(O)NR’R”、-NR”C(O)R’、NR’C(O)NR”R”’、-NR”C(O)₂R’、-NR””’-C(NR’R”R”’)＝NR””、NR””C(NR’R”)＝NR”’、-S(O)R’、-S(O)₂R’、-S(O)₂NR’R”、NR”SO₂R’、-CN、-NO₂、-N₃、-CH(Ph)₂和氟代(C₁-C₄)烷基，取代基的数目为0～(2m’+1)，其中m’是这类原子团中碳原子的总数。R′、R”、R”＇、R””和R””’各自独立地优选氢、被取代或未被取代的杂烷基、被取代或未被取代的芳基(例如被1～3个卤素取代芳基)、被取代或未被取代的烷基、烷氧基、硫代烷氧基基团或芳烷基。当本发明的化合物包括一个以上的R基团时，例如，每一个R基团是独立地加以选择的，如同当存在一个以上的R′、R”、R”＇、R””和R””’基团时的每个这些基团。当R′和R”附着于同一个氮原子时，它们可与该氮原子结合形成5-，6-或7-元环。例如，-NR′R“意在包括但不仅限于1-吡咯烷基和4-吗啉基。根据上述关于取代基的讨论中，本领域技术人员可以理解，术语“烷基”意在包括碳原子键合于非氢基团所构成的基团，如卤代烷基(例如-CF₃、-CH₂CF₃)和酰基(例如-C(O)CH₃、-C(O)CF₃、-C(O)CH₂OCH₃等)。与烷基原子团所述取代基相似，芳基和杂芳基取代基一般统称为“芳基取代基”，选自例如-R’、-OR’、-NR’R”、-SR’、-卤素，-SiR’R”R”’、OC(O)R’、-C(O)R’、-CO2R’、-CONR’R”、-OC(O)NR’R”、-NR”C(O)R’、NR’C(O)NR”R”’、-NR”C(O)2R’、-NR””’-C(NR’R”R”’)＝NR””、NR””C(NR’R”)＝NR”’、-S(O)R’、-S(O)₂R’、-S(O)₂NR’R”、NR”SO₂R’、-CN、-NO₂、-N₃、-CH(Ph)₂、氟(C₁-C₄)烷氧基和氟(C₁-C₄)烷基等，取代基的数量为0到芳香环上开放化合价的总数之间；其中R’、R”、R”’、R””和R””’独立地优选自氢、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的杂烷基、被取代或未被取代的芳基和被取代或未被取代的杂芳基。当本发明的化合物包括一个以上的R基团时，例如，每个R基团是独立地加以选择的，如同当存在一个以上R’、R”、R”’、R””和R””’基团时的每个这些基团。

芳基或杂芳基环的相邻原子上的两个取代基可以任选地被通式为-T-C(O)-(CRR’)q-U-的取代基所取代，其中T和U独立地选自-NR-、-O-、CRR′-或单键，q是0到3的整数。作为替代选择，芳基或杂芳基环的相邻原子上的两个取代基可以任选地被通式为-A(CH2)r B-的取代基所取代，其中A和B独立的选自-CRR’-、-O-、-NR-、-S-、-S(O)-、S(O)₂-、-S(O)₂NR’-或单键，r是1～4的整数。任选地，由此形成的新环上的一个单键可以替换为双键。作为替代选择，芳基或杂芳基环的相邻原子上的两个取代基可以任选地被通式为-A(CH2)r B-的取代基所取代，其中s和d分别独立的选自0～3的整数，X是-O-、-NR’、-S-、-S(O)-、-S(O)₂-或-S(O)₂NR’-。取代基R、R’、R”和R”’分别独立地优选自氢和被取代或未被取代的(C₁-C₆)烷基。

除非另有规定，术语“卤代素”或“卤素”本身或作为另一取代基的一部分表示氟、氯、溴或碘原子。此外，术语“卤代烷基”意在包括单卤代烷基和多卤代烷基。例如，术语“卤代(C₁-C₄)烷基”意在包括但不仅限于三氟甲基、2，2，2-三氟乙基、4-氯丁基和3-溴丙基等等。

卤代烷基的实例包括但不仅限于：三氟甲基、三氯甲基、五氟乙基，和五氯乙基。“烷氧基”代表通过氧桥连接的具有特定数目碳原子的上述烷基。C_1-6烷氧基包括C₁、C₂、C₃、C₄、C₅和C₆的烷氧基。烷氧基的例子包括但不限于：甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基和S-戊氧基。“环烷基”包括饱和环基，如环丙基、环丁基或环戊基。3-7环烷基包括C₃、C₄、C₅、C₆和C₇环烷基。“链烯基”包括直链或支链构型的烃链，其中该链上任何的稳定位点上存在一个或多个碳-碳双键，例如乙烯基和丙烯基。

术语“卤”或“卤素”是指氟、氯、溴和碘。

本文所用术语“杂原子”包括碳(C)和氢(H)以外的原子，例如包括氧(O)、氮(N)、硫(S)、硅(Si)、锗(Ge)、铝(Al)和硼(B)等。

除非另有说明，术语“杂”，“杂原子”或“杂自由基”(即自由基含杂原子)，包括除碳(C)和氢(H)外的原子，也包含上述杂原子的自由基。例如包括氧(O)、氮(N)、硫(S)、硅(Si)、锗(Ge)、铝(Al)和硼(B)等，还包括任意取代的-C(＝O)N(H)-、-N(H)-、-C(＝NH)-、-S(＝O)2N(H)-，or-S(＝O)N(H)-。

“环”表示被取代或未被取代的环烷基、被取代或未被取代的杂环烷基、被取代或未被取代的芳基或被取代或未被取代的杂芳基。所谓的环包括稠环。环上原子的数目通常被定义为环的元数，例如，“5～7元环”是指环绕排列5～7个原子。除非另有规定，该环任选地包含1～3个杂原子。因此，“5～7元环”包括例如苯基吡啶和哌啶基；另一方面，术语“5～7元杂环烷基环”包括吡啶基和哌啶基，但不包括苯基。术语“环”还包括含有至少一个环的环系，其中的每一个“环”均独立地符合上述定义。

术语“杂环”或“杂环基”意指稳定的单环或双环或双环杂环，它们可以是饱和的、部分不饱和的或不饱和的(芳族的)，它们包含碳原子和1、2、3或4个独立地选自N、O和S的环杂原子，其中上述任意杂环可以稠合到一个苯环上形成双环。氮和硫杂原子可任选被氧化(即NO和S(O)p)。氮原子可以是被取代的或未取代的(即N或NR，其中R是H或本文已经定义过的其他取代基)。该杂环可以附着到任何杂原子或碳原子的侧基上从而形成稳定的结构。如果产生的化合物是稳定的，本文所述的杂环可以发生碳位或氮位上的取代。杂环中的氮原子任选地被季铵化。一个优选方案是，当杂环中S及O原子的总数超过1时，这些杂原子彼此不相邻。另一个优选方案是，杂环中S及O原子的总数不超过1。如本文所用，术语“芳族杂环基团”或“杂芳基”意指稳定的5、6、7元单环或双环或7、8、9或10元双环杂环基的芳香环，它包含碳原子和1、2、3或4个独立地选自N、O和S的环杂原子。氮原子可以是被取代的或未取代的(即N或NR，其中R是H或本文已经定义过的其他取代基)。氮和硫杂原子可任选被氧化(即NO和S(O)p)。值得注意的是，芳香杂环上S和O原子的总数不超过1。桥环也包含在杂环的定义中。当一个或多个原子(即C、O、N或S)连接两个不相邻的碳原子或氮原子时形成桥环。优选的桥环包括但不限于：一个碳原子、两个碳原子、一个氮原子、两个氮原子和一个碳-氮基。值得注意的是，一个桥总是将单环转换成三环。桥环中，环上的取代基也可以出现在桥上。

杂环化合物的实例包括但不限于：吖啶基、吖辛因基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并巯基呋喃基、苯并巯基苯基、苯并恶唑基、苯并恶唑啉基、苯并噻唑基、苯并***基、苯并四唑基、苯并异恶唑基、苯并异噻唑基、苯并咪唑啉基、咔唑基、4aH-咔唑基、咔啉基、苯并二氢吡喃基、色烯、噌啉基十氢喹啉基、2H，6H-1，5，2-二噻嗪基、二氢呋喃并[2，3-b]四氢呋喃基、呋喃基、呋咱基、咪唑烷基、咪唑啉基、咪唑基、1H-吲唑基、吲哚烯基、二氢吲哚基、中氮茚基、吲哚基、3H-吲哚基、isatino基、异苯并呋喃基、吡喃、异吲哚基、异二氢吲哚基、异吲哚基、吲哚基、异喹啉基、异噻唑基、异恶唑基、亚甲二氧基苯基、吗啉基、萘啶基，八氢异喹啉基、恶二唑基、1，2，3-恶二唑基、1，2，4-恶二唑基、1，2，5-恶二唑基、1，3，4-恶二唑基、恶唑烷基、恶唑基、异恶唑基、羟吲哚基、嘧啶基、菲啶基、菲咯啉基、吩嗪、吩噻嗪、苯并黄嘌呤基、酚恶嗪基、酞嗪基、哌嗪基、哌啶基、哌啶酮基、4-哌啶酮基、胡椒基、蝶啶基、嘌呤基、吡喃基、吡嗪基、吡唑烷基、吡唑啉基、吡唑基、哒嗪基、吡啶并恶唑、吡啶并咪唑、吡啶并噻唑、吡啶基、嘧啶基、吡咯烷基、吡咯啉基、2H-吡咯基、吡咯基、吡唑基、喹唑啉基、喹啉基、4H-喹嗪基、喹喔啉基、奎宁环基、四氢呋喃基、四氢异喹啉基、四氢喹啉基、四唑基，6H-1，2，5-噻二嗪基、1，2，3-噻二唑基、1，2，4-噻二唑基、1，2，5-噻二唑基、1，3，4-噻二唑基、噻蒽基、噻唑基、异噻唑基噻吩基、噻吩基、噻吩并恶唑基、噻吩并噻唑基、噻吩并咪唑基、噻吩基、三嗪基、1，2，3-***基、1，2，4-***基、1，2，5-***基、1，3，4-***基和呫吨基。还包括稠环和螺环化合物。

除非另有规定，术语“烃基”或者其下位概念(比如烷基、烯基、炔基、苯基等等)本身或者作为另一取代基的一部分表示直链的、支链的或环状的烃原子团或其组合，可以是完全饱和的、单元或多元不饱和的，可以是单取代、二取代或多取代的，可以包括二价或多价原子团，具有指定数量的碳原子(如C₁-C₁₀表示1至10个碳)。“烃基”包括但不限于脂肪烃基和芳香烃基，所述脂肪烃基包括链状和环状，具体包括但不限于烷基、烯基、炔基，所述芳香烃基包括但不限于6-12元的芳香烃基，例如苯、萘等。在一些实施例中，术语“烷基”表示直链的或支链的原子团或它们的组合，可以是完全饱和的、单元或多元不饱和的，可以包括二价和多价原子团。饱和烃原子团的实例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、仲丁基、异丁基、环己基、(环己基)甲基、环丙基甲基，以及正戊基、正己基、正庚基、正辛基等原子团的同系物或异构体。不饱和烷基具有一个或多个双键或三键，其实例包括但不限于乙烯基、2-丙烯基、丁烯基、巴豆基、2-异戊烯基、2-(丁二烯基)、2，4-戊二烯基、3-(1，4-戊二烯基)、乙炔基、1-和3-丙炔基，3-丁炔基，以及更高级的同系物和异构体。

除非另有规定，术语“杂烃基”或者其下位概念(比如杂烷基、杂烯基、杂炔基、杂芳基等等)本身或者与另一术语联合表示稳定的直链的、支链的或环状的烃原子团或其组合，有一定数目的碳原子和至少一个杂原子组成。在一些实施例中，术语“杂烷基”本身或者与另一术语联合表示稳定的直链的、支链的烃原子团或其组合物，有一定数目的碳原子和至少一个杂原子组成。在一个典型实施例中，杂原子选自B、O、N和S，其中氮和硫原子任选地被氧化，氮杂原子任选地被季铵化。杂原子B、O、N和S可以位于杂烃基的任何内部位置(除该烃基基附着于分子其余部分的位置之外)。实例包括但不限于-CH₂-CH₂-O-CH₃、-CH₂-CH₂-NH-CH₃、-CH₂-CH₂-N(CH₃)-CH₃、-CH₂-S-CH₂-CH₃、-CH₂-CH₂、-S(O)-CH₃、-CH₂-CH₂-S(O)₂-CH₃、-CH＝CH-O-CH₃、-CH₂-CH＝N-OCH₃和-CH＝CH-N(CH₃)-CH₃。至多两个杂原子可以是连续的，例如-CH₂-NH-OCH₃。

术语“烷氧基”、“烷氨基”和“烷硫基”(或硫代烷氧基)属于惯用表达，是指分别通过一个氧原子、氨基或硫原子连接到分子的其余部分的那些烷基基团。

除非另有规定，术语“环烃基”、“杂环烃基”、“环烃杂基”或者其下位概念(比如芳基、杂芳基、芳杂基、环烷基、杂环烷基、环烷杂基、环烯基、杂环烯基、环烯杂基、环炔基、杂环炔基、环炔杂基等等)本身或与其他术语联合分别表示环化的“烃基”、“杂烃基”或“烃杂基”。此外，就杂烃基或杂环烃基(比如杂烷基、杂环烷基)而言，杂原子可以占据该杂环附着于分子其余部分的位置。环烷基的实例包括但不限于环戊基、环己基、1-环己烯基、3-环己烯基、环庚基等。杂环基的非限制性实例包括1-(1，2，5，6-四氢吡啶基)、1-哌啶基、2-哌啶基，3-哌啶基、4-吗啉基、3-吗啉基、四氢呋喃-2-基、四氢呋喃吲哚-3-基、四氢噻吩-2-基、四氢噻吩-3-基，1-哌嗪基和2-哌嗪基。

除非另有规定，术语“芳基”表示多不饱和的芳族烃取代基，可以是单取代、二取代或多取代的，它可以是单环或多环(优选1至3个环)，它们稠合在一起或共价连接。术语“杂芳基”是指含有一至四个杂原子的芳基(或环)。在一个示范性实例中，杂原子选自B、N、O和S，其中氮和硫原子任选地被氧化，氮原子任选地被季铵化。杂芳基可通过杂原子连接到分子的其余部分。芳基或杂芳基的非限制性实施例包括苯基、1-萘基、2-萘基、4-联苯基、1-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基、3-吡唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、吡嗪基、2-恶唑基、4-恶唑基、2-苯基-4-恶唑基、5-恶唑基、3-异恶唑基、4-异恶唑基、5-异恶唑基、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、2-呋喃基、3-呋喃基、2-噻吩基、3-噻吩基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-苯并噻唑基、嘌呤基、2-苯并咪唑基、5-吲哚基、1-异喹啉基、5-异喹啉基、2-喹喔啉基、5-喹喔啉基、3-喹啉基和6-喹啉基。上述任意一个芳基和杂芳基环系的取代基选自下文所述的可接受的取代基。

为简便起见，芳基在与其他术语联合使用时(例如芳氧基、芳硫基、芳烷基)包括如上定义的芳基和杂芳基环。因此，术语“芳烷基”意在包括芳基附着于烷基的那些原子团(例如苄基、苯乙基、吡啶基甲基等)，包括其中碳原子(如亚甲基)已经被例如氧原子代替的那些烷基，例如苯氧基甲基、2-吡啶氧甲基3-(1-萘氧基)丙基等。

术语“离去基团”是指可以被另一种官能团或原子通过取代反应(例如亲和取代反应)所取代的官能团或原子。例如，代表性的离去基团包括三氟甲磺酸酯；氯、溴、碘；磺酸酯基，如甲磺酸酯、甲苯磺酸酯、对溴苯磺酸酯、对甲苯磺酸酯等；酰氧基，如乙酰氧基、三氟乙酰氧基等等。

术语“保护基”包括但不限于“氨基保护基”、“羟基保护基”或“巯基保护基”。术语“氨基保护基”是指适合用于阻止氨基氮位上副反应的保护基团。代表性的氨基保护基包括但不限于：甲酰基；酰基，例如链烷酰基(如乙酰基、三氯乙酰基或三氟乙酰基)；烷氧基羰基，如叔丁氧基羰基(Boc)；芳基甲氧羰基，如苄氧羰基(Cbz)和9-芴甲氧羰基(Fmoc)；芳基甲基，如苄基(Bn)、三苯甲基(Tr)、1，1-二-(4′-甲氧基苯基)甲基；甲硅烷基，如三甲基甲硅烷基(TMS)和叔丁基二甲基甲硅烷基(TBS)等等。术语“羟基保护基”是指适合用于阻止羟基副反应的保护基。代表性羟基保护基包括但不限于：烷基，如甲基、乙基和叔丁基；酰基，例如链烷酰基(如乙酰基)；芳基甲基，如苄基(Bn)，对甲氧基苄基(PMB)、9-芴基甲基(Fm)和二苯基甲基(二苯甲基，DPM)；甲硅烷基，如三甲基甲硅烷基(TMS)和叔丁基二甲基甲硅烷基(TBS)等等。

本发明所使用的所有溶剂是市售的，无需进一步纯化即可使用。反应一般是在惰性氮气下、无水溶剂中进行的。质子核磁共振数据记录在Bruker Avance III 400(400MHz)分光仪上，化学位移以四甲基硅烷低场处的(ppm)表示。质谱是在安捷伦1200系列加6110(&1956A)上测定。LC/MS或Shimadzu MS包含一个DAD：SPD-M20A(LC)和Shimadzu Micromass2020检测器。质谱仪配备有一个正或负模式下操作的电喷雾离子源(ESI)。

本发明采用下述缩略词：aq代表水；DCM代表二氯甲烷；PE代表石油醚；DMF代表N，N-二甲基甲酰胺；DMSO代表二甲基亚砜；EtOAc代表乙酸乙酯；EtOH代表乙醇；MeOH代表甲醇；Cbz代表苄氧羰基，一种胺保护基；Boc代表叔丁基氧羰基，一种胺保护基；HOAc代表乙酸；NaBH(OAc)₃代表三乙酰氧基硼氢化钠；r.t代表室温；THF代表四氢呋喃；Boc₂O代表二叔丁基二碳酸酯；TFA代表三氟乙酸；DIPEA代表二异丙基乙胺；Pd(dppf)Cl₂代表[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)；POCl₃代表三氯氧磷；NaH代表氢化钠；LAH代表氢化铝锂；Pd(OAc)₂代表钯(II)乙酸盐；Pd₂(dba)₃代表三(二亚苄基丙酮)二钯；Pd(PPh₃)₄代表四(三苯基膦)钯；Et₃SiH代表三乙基硅烷；PPh₃代表三苯基膦；Xantphos代表4，5-双(二苯基膦基)-9，9-二甲基；MeSO₃H代表甲磺酸；Xphos代表2-二环己基膦基-2′，4′，6′-三异丙基联苯；劳森试剂代表2，4-二(4-甲氧基苯基)-1，3-二硫杂-2，4-二磷烷-2，4-二硫化物；NBS代表N-溴代丁二酰亚胺；t-BuOK代表叔丁醇钾。

化合物经手工或者软件命名，市售化合物采用供应商目录名称。

用配有Shimadzu SIL-20A自动进样器和日本岛津DAD：SPD-M20A探测器的岛津LC20AB***进行高效液相色谱分析，采用Xtimate C18(3m填料，规格为2.1x 300mm)色谱柱。0-60AB_6分钟的方法：应用线性梯度，以100％A(A为0.0675％TFA的水溶液)开始洗脱，并以60％B(B为0.0625％TFA的MeCN溶液)结束洗脱，整个过程为4.2分钟，然后以60％B洗脱1分钟。将色谱柱再平衡0.8分钟达到100∶0，总运行时间为6分钟。10-80AB_6分钟的方法：应用线性梯度，以90％A(A为0.0675％TFA的水溶液)开始洗脱，并以80％B(B为0.0625％TFA的乙腈溶液)结束洗脱，整个过程为4.2分钟，然后以80％B洗脱1分钟。将色谱柱再平衡0.8分钟达到90∶10，总运行时间为6分钟。柱温为50℃，流速为0.8mL/min。二极管阵列检测器扫描波长为200-400nm。

在Sanpont-group的硅胶GF254上进行薄层色谱分析(TLC)，常用紫外光灯照射检出斑点，在某些情况下也采用其他方法检视斑点，在这些情况下，用碘(10g硅胶中加入约1g碘并彻底混合而成)、香草醛(溶解大约1g香草醛于100mL 10％H₂SO₄中制得)、茚三酮(从Aldrich购得)或特殊显色剂(彻底混合(NH₄)₆Mo₇O₂₄·4H₂O、5g(NH₄)₂Ce(IV)(NO₃)₆、450mLH₂O和50mL浓H2SO₄而制得)展开薄层板，检视化合物。采用Still，W.C.；Kahn，M.；and Mitra，M.Journal of Organic Chemistry，1978，43，2923-2925.中所公开技术的类似方法，在Silicycle的40-63μm(230-400目)硅胶上进行快速柱色谱。快速柱色谱或薄层色谱的常用溶剂是二氯甲烷/甲醇、乙酸乙酯/甲醇和己烷/乙酸乙酯的混合物。

在Gilson-281Prep LC 322***上采用吉尔森UV/VIS-156探测器进行制备色谱分析，所采用的色谱柱是Agella Venusil ASB Prep C18，5m、150x 21.2mm；PhenomenexGemini C18、5m、150x 30mm；Boston Symmetrix C18，5m、150x 30mm；或者PhenomenexSynergi C18、4m、150x 30mm。在流速约为25mL/min时，用低梯度的乙腈/水洗脱化合物，其中水中含有0.05％HCl、0.25％HCOOH或0.5％NH₃·H₂O，总运行时间为8-15分钟。

本发明涉及一类的新型螺环芳基砜化合物是ALK和其突变体的抑制剂，可以用来治疗癌症和其他疾病。本发明的这种新型螺芳砜化合物展示了对ALK，ALK突变体和EGFR突变体酶更好的抑制活性；同时体内药效方面，在ALK驱动患者来源的非小细胞肺癌细胞系PDX模型中展示了比参考化合物LDK378更好的活性，因此本发明可能为ALK酶异常引起疾病的患者提供更有效的治疗。

具体实施方式

在一些实施例中，具有式(I)的化合物可以按照方案A中所述的合成方法制备。

方案A

芳基砜类化合物(A1)与2，4，5-三氯嘧啶(A2)在溶剂中，如THF，DMF中处理，在碱的存在下，如氢化钠，碳酸钾，反应得到嘧啶芳基砜类化合物(A3)。化合物(A3)在溶剂(如叔丁醇)中用酸(如甲烷磺酸)催化可以与芳基胺A6反应得到化合物A7。A7可进一步反应，如通过还原胺化，得到式(I)的化合物。该螺环胺类化合物A4可以购买，或者可以通过方案B来制备。A4可以通过取代反应在溶剂如二甲基甲酰胺中，制备化合物A5，A5通过加氢还原得到芳基胺类化合物A6.

方案B

方案B为螺环胺类化合物B5(A4)的一般合成方法。酮B1与氰基乙酸酯反应，得到螺环化合物B2，水解得到B3，然后B4，用还原剂如氢化铝锂，还原B4得到B5；B5可以与方案A中的芳基氯偶联得到A5。

方案C

方案C是制备式(I)化合物的一般合成方法，其中T1是CH。醛的C1化合物与甲基乙烯基酮，在碱如KOH作用下反应，得到酮C2，氢化得到C3，三氟甲磺酸酯化生成C4；然后与氨基芳基或硝基芳硼酸偶联得到C5，还原得到化合物C6；然后与化合物A4偶联，得到式I的化合物C7(I)，或脱掉保护基后，进一步还原胺化得到式I的化合物C7(I)。

本发明现在进一步通过实施例描述。下面给出的实施例仅用于说明目的，而不是仅限于此发明。本发明的化合物可以用有机合成领域中许多已知的方法来制备。本发明的实施例可以使用下面描述的方法来合成，以及有机合成化学领域中已知的合成方法，或在其基础上通过改进的方法。优选的方法包括，但不限于以下描述方法。

具体实施方式

为了更详细地说明本发明，给出下列实例，但本发明的范围并非限定于此。

实施例1

化合物1：5-氯N4-(2-(异丙基磺酰基)苯基)-N2-(2-甲氧基-4-(9-甲基-3，9-二氮杂螺[5.5]十一碳-3-基)苯基)嘧啶-2，4二胺

实施例1A

9-苄基-2，4-二氧代-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-1，5-二腈

在5-8℃下，醋酸铵(2.04克，26.42毫摩尔，0.10当量)加入到氰基乙酸酯(90克，796毫摩尔，3.00当量)的甲醇溶液(100mL)中；然后1-苄基哌啶4-酮(50克，0.264摩尔)加入到上述反应混合物中；然后，在10℃以下，氨水(46.3克，370毫摩尔，1.40当量)加入到反应混合物中，将该混合物在0-5℃下搅拌1小时。然后反应混合物升温至20℃(室温)，并搅拌20小时。LCMS显示生成产物。水(100mL)加入到混合物中，并加热至55℃。加入浓盐酸(12M)将pH调至4，并保持温度不超过70℃。然后将反应液冷却至10℃，搅拌30分钟后过滤。滤饼用水洗涤，放置空气中干燥，得到标题化合物(66克，77％产率)为白色固体。LCMS(ESI)(0-30AB)：m/z：323.0[M+1].

实施例1B

1′-苄基-3，7-二氮杂螺[二环[3.3.1]壬烷-9，4′-哌啶]-2，4，6，8-四酮

实施例1A(1.00克，3.10毫摩尔，1.00当量)的硫酸(88％，4mL)混合液在60℃下搅拌4小时。然后向反应液中加入水(1.4mL)，并加热到100℃搅拌1小时。再向反应混合物中加入水(5mL)，并冷却至10℃，并在10℃下搅拌30分钟，然后过滤。滤饼用冷水(5mL)洗涤并干燥，得到标题化合物(1.11克，粗品)为白色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：11.87(s，2H)，9.56(br.s.，1H)，7.47(s，5H)，4.34(d，J＝4.4Hz，2H)，3.75(br.s.，1H)，3.22(br.s.，4H)，1.88(br.s.，4H).

实施例1C

9-苄基-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-2，4-二酮

在15℃下，向实施例1B(1.10克，3.22毫摩尔，1.00当量)的烧瓶中加入NaOH水溶液(5N，5mL)，然后，将混合物升温至70℃并搅拌4小时。将混合液冷却至45℃，然后将浓盐酸(12N，～1.5mL)慢慢地加入，直到溶液的pH值为7左右。再将混合物加热至70-75℃，然后将浓HCl(12N，～1mL)逐滴加入，以控制二氧化碳释放的速度，直到pH值调至3-4左右。将混合物加热到70-75℃并进一步反应1小时。将所得悬浮液冷却至10℃并搅拌0.5小时。将固体过滤并用水洗涤(25mL)中。将固体干燥，得到标题化合物(380毫克，1.40毫摩尔，2步产率45％)为白色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：10.89(s，1H)，10.60(br.s，1H)，7.57(br.s.，2H)，7.44(br.s.，3H)，4.28(br.s.，2H)，3.11(br.s.，4H)，2.76(br.s.，2H)，2.42(br.s.，2H)，2.00-1.48(m，4H).

实施例1D

3-苄基-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷

在0-10℃下，向实施例1C(10.6克，38.92毫摩尔，1.00当量)的四氢呋喃溶液(120mL)中加入氢化铝锂(5.17克，136.22毫摩尔，3.50当量)，然后将混合液在65℃下搅拌下3小时。TLC显示反应完成。将混合液冷却至10℃，并加入水(5.2mL)淬灭反应，接着加入氢氧化钠水溶液(1N，5.2mL)。将混合物过滤，滤液浓缩，得到标题化合物(7.40克，30.28毫摩尔，77.81％产率)为淡黄色油状物。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：7.34-7.27(m，5H)，3.52(s，2H)，2.88-2.73(m，4H)，2.46-2.35(m，4H)，1.58-1.51(m，4H)，1.48-1.39(m，4H).

实施例1E

叔丁酯3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-羧酸甲酯

向实施例1D(500毫克，2.05毫摩尔)和Boc₂O(450毫克，2.06毫摩尔)的甲醇混合液中加入三乙胺(311毫克，3.08毫摩尔)，然后将混合物在20-30℃下搅拌16小时。将反应混合物浓缩，残余物用乙酸乙酯(20mL)稀释，并用水(15mL×2)和盐水(20mL)洗涤，将有机层用无水硫酸钠干燥，浓缩。将粗中间体溶于乙醇(15mL)和醋酸(2mL)中，然后加入氢氧化钯/碳(0.1克)，并将该混合物在氢气(50Psi)下反应20小时。将混合物过滤，滤液浓缩，得到标题化合物的乙酸盐(320毫克，1.26毫摩尔，61.37％产率)。

实施例1F

叔丁酯9-(3-甲氧基-4-硝基苯基)-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-羧酸甲酯

将实施例1D(150毫克，0.589毫摩尔)溶于4.0mL DMSO中，并加入4-氟-2-甲氧基-1-硝基苯(131毫克，0.766毫摩尔)和碳酸钾(244毫克，1.77毫摩尔)。氮气保护下，反应液90℃搅拌16小时。冷却至室温，加入60mL二氯甲烷稀释，有机相用水(15ml×3)，饱和食盐水(15ml)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩，得到标题化合物(250毫克，收率：62％)为黄色油状物。¹H NMR(400MHz，CD₃OD)：δ，7.95(d，J＝9.2Hz，1H)，6.55(dd，J＝9.6，2.4Hz，1H)，6.48(d，J＝2.4Hz，1H)，3.95(s，3H)，3.56-3.41(m，8H)，1.72-1.65(m，4H)，1.58-1.50(m，4H)，1.48(s，9H).

实施例1G

3-(3-甲氧基-4-硝基苯基)-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷

将实施例1F(0.7g，1.73mmol)溶于4mL三氟乙酸和4mL二氯甲烷的混合溶液中，16℃下搅拌1小时。LCMS显示反应完成。反应液加入50mL饱和碳酸钠溶液，并加入(50mL×2)二氯甲烷萃取。有机相用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到标题化合物(0.7g，粗品)，为黄色固体.LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：306.0[M+1].

实施例1H

3-(3-甲氧基-4-硝基苯基)-9-甲基-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷

将实施例1G(0.7g，2.3mmol)溶于10ml四氢呋喃溶液中，16℃下加入37％的甲醛水溶液(207mg，6.9mmol)，并搅拌0.5小时。然后加入(1.5g，6.9mmol)硼氢化钠继续搅拌12小时。LCMS显示反应完成。反应液用60ml DCM稀释，过滤并浓缩，得到标题化合物(0.6g，收率：82％)，为黄色油状物LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：320.2[M+1].

实施例1I

2-甲氧基-4-(9-甲基-3，9-二氮杂螺[5.5]十一碳-3-基)苯胺

向实施例1H(0.6克，1.9毫摩尔)的乙醇-水(12毫升)溶液中加入铁粉(1.1克，18.8毫摩尔)和氯化铵(1.1克，18.8毫摩尔)。将混合物在80℃下搅拌2小时。TLC(二氯甲烷∶甲醇＝6∶1)显示反应完成。将混合物过滤并浓缩。将所得到的残余物通过制备型TLC纯化(二氯甲烷∶甲醇＝6∶1)，得到了标题化合物(400mg，产率74％)为绿色固体1H NMR(400MHz，CD3OD)：δ，6.72(d，J＝8.4Hz，1H)，6.64(d，J＝2.0Hz，1H)，6.51(d，J＝8.4Hz，1H)，3.86(s，3H)，3.08-2.96(m，4H)，2.58-2.45(m，4H)，2.32(s，3H)，1.75-1.52(m，8H).

化合物1

5-氯N4-(2-(异丙基磺酰基)苯基)-N2-(2-甲氧基-4-(9-甲基-3，9-二氮杂螺[5.5]十一碳-3-基)苯基)嘧啶-2，4二胺

将实施例1I(200mg，0.69mmol)和2，5-二氯-N-(2-(异丙基磺酰基)苯基)嘧啶-4-胺(263mg，0.76mmol)加入5毫升叔丁醇中，搅拌下加入甲烷磺酸(399mg，4.15mmol)。反应液100℃下搅拌12小时。LCMS显示反应完成。反应混合物通过制备型HPLC(酸性方法)纯化，得到标题化合物(221mg，收率：53％)，为无色油状物。1H NMR(400MHz，CD3OD)：δ，8.35(s，1H)，8.11(m，1H)，8.07(d，J＝8.0Hz，1H)，7.89(t，J＝8.0Hz，1H)，7.73(d，J＝8.8Hz，1H)，7.68(t，J＝8.0Hz，1H)，7.60(m，1H)，7.28(m，1H)，4.03(s，3H)，3.66-3.82(m，4H)，3.38-3.52(m，3H)，3.20-3.28(m，2H)，2.94(s，3H)，1.95-2.46(m，6H)，1.78-1.89(m，2H)，1.26(d，J＝6.8Hz，6H).LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：599.2[M+1].

实施例2

化合物2：5-氯-N2-(2-(二氟甲氧基)-4-(9-甲基-3，9-二氮杂螺[5.5]十一碳-3-基)苯基)-N4-(2-(异丙基磺酰基)苯基)嘧啶-2-，4-二胺

实施例2A

5-氟-2-硝基苯酚

在0℃下，向搅拌的4-氟-2-甲氧基硝基苯(3克，17.53毫摩尔)的二氯甲烷(30mL)的溶液中滴加三溴化硼。反应液在0℃下搅拌1.5小时。TLC(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1)显示4-氟-2-甲氧基硝基苯消失。将溶液缓慢加入到冰水(100mL)中，并用二氯甲烷(50mL×3)萃取。将有机相干燥并浓缩，得到标题化合物(2.5g，收率90.8％)为黄色油状物。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ，10.80(s，1H)，8.16(dd，J＝9.6，5.6Hz，1H)，6.84(dd，J＝9.6，2.4Hz，1H)，6.77-6.67(m，1H).

实施例2B

2-(二氟甲氧基)-4-氟-1-硝基苯

在不断搅拌下，向实施例11A(2.0克，12.73毫摩尔)的N，N-二甲基甲酰胺(20mL)溶液中加入ClCF₂COONa(6.9克，44.56毫摩尔)和碳酸钠(1.62克，15.28毫摩尔)。将反应混合液加热至90℃并搅拌16小时。TLC(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1)显示5-氟-2-硝基苯酚消失。将反应液用乙酸乙酯稀释(100mL)，并用水(20mL×2)洗涤。有机层干燥并浓缩，得到粗产物，将其通过硅胶柱纯化(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1)，得到标题化合物(1.4g，收率53.1％)为黄色油状物。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ，8.07-7.98(m，1H)，7.17-7.05(m，2H)，6.65(t，J＝72.0Hz，1H).

实施例2C

3-(3-(二氟甲氧基)-4-硝基苯基)-9-甲基-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷

将3-甲基-3，9-二氮杂[5.5]十一烷(1g，5.94mmol)、实施例2B(1.48g，7.13mmol)和碳酸钾(2.46g，17.82mmol)加入20mL乙腈中，混合物90℃下搅拌16小时。TLC(二氯甲烷∶甲醇＝10∶1)显示原料反应完毕。将混合物过滤并浓缩，所得粗品用柱色谱分离(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝50∶1，20∶1)得到标题化合物(1.9g，收率：90％)为黄色油状物。1H NMR(400MHz，CD3OD)：δ，8.03-8.06(m，1H)，6.44-6.82(m，3H)，3.39-3.43(m，3H)，3.03-3.07(m，1H)，2.43-2.49(m，4H)，2.33(s，3H)，1.61-1.65(m，8H).

实施例2D

2-(二氟甲氧基)-4-(9-甲基-3，9-二氮杂螺[5.5]十一碳-3-基)苯胺

向实施例2C(1.9g，5.35mmol)的甲醇(30mL)溶液中，加入铁粉(2.1g，32.08mmol)和氯化铵(1.72g，32.08mmol)，反应混合物在20℃下搅拌0.5小时。TLC(二氯甲烷∶甲醇＝10∶1)显示反应完成。将混合物过滤并浓缩，加入30mL饱和碳酸钠溶液，水相用二氯甲烷(50ml×3)萃取。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到标题化合物(1.5g，粗品)，为棕色油状物。1H NMR(400MHz，CD3OD)：δ，6.28-6.76(m，4H)，3.00-3.03(m，3H)，2.82-2.85(m，1H)，2.43-2.46(m，4H)，2.33(s，3H)，1.57-1.62(m，8H).

实施例2E

5-氯-N2-(2-(二氟甲氧基)-4-(9-甲基-3，9-二氮杂螺[5.5]十一碳-3-基)苯基)-N4-(2-(异丙基磺酰基)苯基)嘧啶-2-，4-二胺

将实施例2D(80mg，0.25mmol)和2，5-二氯-N-(2-(异丙基磺酰基)苯基)嘧啶-4-胺(94mg，0.27mmol)的叔丁醇(5mL)溶液中，缓慢加入甲烷磺酸(71mg，0.74mmol)，反应混合物在100℃下搅拌12小时。LCMS显示反应完成。反应混合物通过Pre-HPLC纯化，得到标题化合物(71.01mg，收率：11％)为无色油状物。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：635.2[M+1]RT：1.774min/4min.

实施例3

化合物3：5-氯N4-(2-(异丙基磺酰基)苯基)-N2-(2-甲氧基-4-(3-甲基-3-氮杂螺[5.5]十一碳-9-基)苯基)嘧啶-2，4-二胺

实施例3A

4-甲酰基哌啶-1-甲酸叔丁酯

在-70℃，氮气保护下，向二甲基亚砜(4.37克，46.52毫摩尔)的二氯甲烷(25mL)溶液中滴加草酰氯(5.9克，46.52毫摩尔)的二氯甲烷(75mL)溶液；然后在-70℃下将4-(羟甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(5克，23.26毫摩尔)的二氯甲烷(40mL)溶液逐滴加入到上述混合物中。反应混合物在-70℃下搅拌15分钟，逐滴加入三乙胺(11.76克，116.3毫摩尔)到反应混合物中。加完后反应混合物在-70℃下搅拌1小时，并升温至15℃。将反应混合物倒入水中，并用二氯甲烷(200mL)萃取。将有机层用碳酸氢钠溶液(100mL)洗涤后，无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩至干。将所得油状物通过柱层析纯化(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1至3∶1)，得到标题化合物(2.4克，产率为48％)为黄色油状物。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ，9.68(s，1H)，3.98-3.92(m，2H)，2.96-2.91(m，2H)，2.45-2.42(m，1H)，1.89-1.60(m，2H)，1.60-1.54(m，2H)，1.47(s，9H).

实施例3B

9-氧代-3-氮杂螺[5.5]十一碳-7-烯-3-羧酸叔丁酯

丁-3-烯-2-酮(0.658克，9.39毫摩尔)加入到实施例3A(2克，9.39毫摩尔)的四氢呋喃(100mL)溶液中。将反应混合物冷却至-5℃，将氢氧化钾-乙醇(3摩尔/升，1.57mL，4.7毫摩尔)溶液在5分钟内逐滴加入到反应混合物中。反应混合物升温至15℃并搅拌16小时。将石油醚(10mL)加入到反应混合物中，并将该混合物用盐水(100mL)洗涤。有机层浓缩，得到粗产物，粗产品通过硅胶柱层析纯化(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1至2∶1)，得到标题化合物(1.12克，产率为45％)为黄色油状物。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ，6.82(d，J＝10Hz，1H)，5.97(d，J＝10Hz，1H)，3.57-3.56(m，2H)，2.50-2.47(m，2H)，2.01-1.97(m，2H)，1.67-1.65(m，2H)，1.61-1.59(m，2H)，1.49(s，9H).

实施例3C

9-氧代-3-氮杂螺[5.5]十一烷-3-羧酸叔丁酯

向实施例3B(5.00克，18.84毫摩尔)的甲醇(100mL)溶液中加入钯/碳(200毫克，1.88毫摩尔)。将此悬浮液抽真空并用氢气置换几次。反应混合物在氢气(18psi)下保持温度10-25℃并搅拌5小时。将反应混合物过滤，滤液浓缩。粗产物通过硅胶柱层析纯化(石油醚∶乙酸乙酯＝2∶1)，得到标题化合物(4.78克，17.88毫摩尔，产率为94.9％)为白色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ，3.47-3.44(m，4H)，2.38-2.35(m，4H)，1.81-1.77(m，4H)，1.58-1.56(m，4H)，1.49(s，9H).

实施例3D

9-(((三氟甲基)磺酰)氧基)-3-氮杂螺[5.5]十一碳-8-烯-3-羧酸叔丁酯

在-78℃氮气保护下，向实施例3C(2克，7.5毫摩尔)的四氢呋喃(20mL)溶液中逐滴加入二异丙基氨基锂(2.5M，1.22mL，9毫摩尔)，加完后，将反应混合物搅拌2小时。然后逐滴加入1，1，1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲磺酰胺(2.67克，7.48毫摩尔，溶解在5mL的THF中)到反应液中，并在-78℃下搅拌1.5小时。将混合物升温至10℃搅拌2.5小时，反应混合物用氯化铵溶液(30mL)淬灭，并用乙酸乙酯(50mL×2)萃取。将有机层用盐水(50mL)洗涤，用Na₂SO₄干燥并浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱层析纯化(石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1)，得到标题化合物(2.3g，产率为77％)为棕色油状物。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ，5.71(t，J＝4.0Hz，1H)，3.51-3.45(m，2H)，3.39-3.32(m，2H)，2.37-2.35(m，2H)，2.16-2.09(m，2H)，1.71-1.67(m，2H)，1.48(s，9H).1.45-1.42(m，4H).

实施例3E

4-溴-2-甲氧基苯胺

向2-甲氧基苯胺(3克，24.36毫摩尔)的乙腈(30mL)溶液中加入N-溴代丁二酰亚胺(4.34克，24.36毫摩尔)，将反应混合物在15℃下搅拌15分钟。向反应混合物中加入亚硫酸钠溶液(40mL)淬灭反应，将混合物用乙酸乙酯(50ml)萃取；有机层用硫酸钠干燥，浓缩，得到粗产物，将其通过硅胶柱层析纯化(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1)得到标题化合物(2.7克，产率55％)为黄色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ，6.93-6.91(m，2H)，6.62-6.59(dd，J＝1.6，2.0Hz，1H)，3.86(s，1H).

实施例3F

2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼戊环-2-基)苯胺

向实施例3E(500毫克，2.47毫摩尔)的DMSO(5mL)溶液中加入双联频那醇硼酸酯(628.4毫克，2.47毫摩尔)，四三苯基膦钯(150毫克，0.13毫摩尔)和醋酸钾(485毫克，4.95毫摩尔)，将反应混合物在150℃微波下搅拌40分钟。将反应混合物用乙酸乙酯(50mL)和水(30mL)稀释。有机层分离，干燥并浓缩，得到粗品，将其通过硅胶柱层析纯化(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1)得到标题化合物(160毫克，产率为26％)为黄色油状物。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ，7.31(d，J＝8.0Hz，1H)，7.22(s，1H)，6.71(d，J＝8.0Hz，1H)，3.91(s，3H)，1.35(s，12H).

实施例3G

9-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-3-氮杂螺[5.5]十一碳-8-烯-3-羧酸叔丁酯

向实施例27D(300毫克，0.75毫摩尔)，实施例3F(187毫克，0.75毫摩尔)的二氧六环(10mL)溶液中加入Pd(dppf)Cl₂(15毫克，0.075毫摩尔)和碳酸钾(204毫克，1.5毫摩尔)，将反应混合物在110℃搅拌16小时。将反应混合物通过硅藻土过滤，滤液浓缩，得到粗产物，将其通过硅胶柱层析纯化(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，得到标题化合物(110mg，产率为39％)为黄色油状物。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：373.2[M+1].

实施例3H

9-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-3-氮杂螺[5.5]十一烷-3-羧酸叔丁酯

在N₂保护下，向实施例3G(110毫克，0.3毫摩尔)的甲醇(5mL)溶液中加入钯/碳(10毫克，10％)，将反应混合物在氢气(15PSI)下，于16℃搅拌5小时。将反应混合物通过硅藻土过滤并真空浓缩，得到粗品标题化合物(130毫克)为黄色油状物。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：319.1[M-56+1].

实施例3I

5-氯N4-(2-(异丙基磺酰基)苯基)-N2-(2-甲氧基-4-(3-氮杂螺[5.5]十一碳-9-基)苯基)嘧啶-2，4-二胺

N2保护下，将实施例3H(1.20g，3.20mmol)和2，5-二氯-N-(2-异丙基苯基砜)嘧啶-4-胺(1.22g，3.52mmol)加入20mL叔丁醇中，并缓慢滴加甲烷磺酸(1.54g，16.02mmol)。反应液在90℃搅拌16小时。LCMS显示反应完成。将反应混合物倒入10mL饱和碳酸钠溶液中并搅拌10分钟。得到的固体用水洗涤；收集滤饼真空干燥，得到标题化合物(580mg，0.95mmol，收率：29.79％，纯度：96％)为白色固体。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：584.2[M+1].

化合物3

5-氯N4-(2-(异丙基磺酰基)苯基)-N2-(2-甲氧基-4-(3-甲基-3-氮杂螺[5.5]十一碳-9-基)苯基)嘧啶-2，4-二胺

将实施例3I(180mg，0.308mmol)溶于6mL MeOH中，一次性加入HCHO溶液(46.27mg，1.54mmol)，反应混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后加入NaBH3CN(97mg，1.54mmol)。反应混合物继续搅拌2小时。反应混合物用(15mL)水稀释，并用(20ml×2)DCM萃取；有机层干燥，浓缩，所得粗品经Pre-HPLC(酸性方法)纯化，得到标题化合物(162mg，0.25mmol，收率：82.84％)为黄色固体。

实施例4

化合物4：5-氯-N2-(2-异丙氧基-5-甲基-4-(3-甲基-3-氮杂螺[5.5]十一碳-9-基)苯基)-N4-(2-(异丙基磺酰基)苯基)嘧啶-2-，4-二胺

实施例4A

1-氯-5-异丙氧基-2-甲基-4-硝基苯

2-

将1-氯-5-氟-2-甲基-4-硝基苯(5.40g，28.49mmol)溶于60ml异丙醇中，加入碳酸铯(46.41g，142.45mol)。反应液在60℃搅拌16小时。TLC(石油醚∶乙酸乙酯＝20∶1)显示反应完成。将混合物浓缩，残余物加入乙酸乙酯(100mL)，分别用水(100mL)和饱和食盐水(100mL)洗涤。有机相用无水硫酸钠干燥并浓缩，得到1-氯-5-异丙氧基-2-甲基-4-硝基苯(6.50g，28.30mmol，收率：99.34％)为黄色固体。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ，7.71(s，1H)，7.08(s，1H)，4.66-4.57(m，1H)，2.35(s，3H)，1.40(d，J＝6.0Hz，6H).

实施例4B

2-(5-异丙氧基-2-甲基-4-硝基苯基)-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼戊环

将实施例4A(1.00g，4.35mmol)溶于20毫升1，4-二氧六环中，加入双联片呐醇硼酸酯(1.22g，4.79mmol)，PCy3(122.11mg，0.44mmol)，Pd2(dba)2(199.36mg，0.22mmol)和醋酸钾(619.62mg，6.31mmol)。在N2保护下反应混合物在100℃搅拌2.5小时。TLC(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1)显示反应完成。将反应液过滤并浓缩，所得残余物通过柱色谱分离(洗脱剂：石油醚∶乙酸乙酯＝50∶1)，得到标题化合物(2.00g，粗品)为黄色油状物。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ，7.52(s，1H)，7.45(s，1H)，4.79-4.64(m，1H)，2.49(s，3H)，1.40-1.37(m，6H)，1.36(s，12H).

实施例4C

叔丁基-9-(5-异丙氧基-2-甲基-4-硝基苯基)-3-氮杂螺[5.5]十一碳-8-烯-3-羧酸

向实施例4B(600mg，1.87mmol)的1，4-二氧六环(10mL)溶液中，加入实施例3D(746.16mg，1.87mmol)，Pd(dppf)Cl2(136.69mg，0.18mmol)和碳酸钠(594.00mg，5.60mmol)。在N2保护下反应液在100℃搅拌16小时。TLC(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1)显示反应完成。将混合物过滤并浓缩。残余物通过柱色谱分离(洗脱剂：石油醚∶乙酸乙酯＝20∶1)纯化得到标题化合物(580mg，收率：69.77％)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ，7.62(s，1H)，6.75(s，1H)，5.53(br.s.，1H)，4.67-4.59(m，1H)，3.59-3.48(m，2H)，3.43-3.33(m，2H)，2.23-2.17(m，5H)，2.10(br.s.，2H)，1.65(t，J＝6.4Hz，2H)，1.49-1.46(m，13H)，1.38(d，J＝6.0Hz，6H).

实施例4D

9-(5-异丙氧基-2-甲基-4-硝基苯基)-3-甲基-3-氮杂螺[5.5]十一碳-8-烯

实施例4C中的溶液(590毫克，1.33毫摩尔)在DCM(2毫升)和TFA(2毫升)的混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物浓缩，得到黄色油状物。将该油溶解于MeOH(5mL)中并加入aq.HCHO(538.41毫克，6.63毫摩尔)。将混合物在25℃下搅拌1小时。的混合物中加入三乙酰基硼氢化钠(843.58毫克，3.98毫摩尔)。将混合物在25℃下搅拌16小时。LCMS显示反应完成。将混合物浓缩，残余物中加入水(10mL)并用二氯甲烷(10×3)萃取。有机层经硫酸钠干燥并浓缩。残余物通过柱层析纯化(DCM∶甲醇＝50∶1)，得到标题化合物(369.00毫克，77.40％产率)为黄色油状物。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ，7.62(s，1H)，6.75(s，1H)，5.53(br.s.，1H)，4.69-4.58(m，1H)，2.79-2.55(m，4H)，2.48(s，3H)，2.28-2.16(m，5H)，2.13-2.07(m，2H)，1.73-1.61(m，6H)，1.37-1.41(m，6H).

实施例4E

2-异丙氧基-5-甲基-4-(3-甲基-3-氮杂螺[5.5]十一碳-9-基)苯胺

将实施例4D(369.00mg，1.03mmol)溶于10mL甲醇中，N2保护下加入Pd/C(50.00mg)。反应混合物抽真空，并用氢气置换多次。将反应混合物50psi氢气压力下，50℃搅拌16小时。LCMS显示起始起始原料反应完。将反应混合物过滤，浓缩，得到标题化合物(300mg，0.91mmol，收率：88.13％)为黄色固体。LCMS(ESI)(30-90CD)：m/z：331.2[M+1].

实施例4F

5-氯-N2-(2-异丙氧基-5-甲基-4-(3-甲基-3-氮杂螺[5.5]十一碳-9-基)苯基)-N4-(2-(异丙基磺酰基)苯基)嘧啶-2-，4-二胺

将实施例4D(500.00mg，1.51mmol)和2，5-二氯-N-(2-异丙基苯基砜)嘧啶-4-胺(523.78mg，1.51mmol)的叔丁醇(10ml)溶液中，滴加甲烷磺酸(872.38mg，9.08mmol)，反应液在90℃下搅拌16小时。LCMS显示反应完成。将混合物浓缩，所得残余物通过Pre-HPLC(酸性方法)分离纯化，得到标题化合物(271mg，收率28.03％)为棕色固体。1H NMR(400MHz，MeOD)：δ，8.23(br.s.，2H)，8.01(dd，J＝8.0，1.2Hz，1H)，7.74(br.s.，1H)，7.56(t，J＝7.2Hz，1H)，7.23(br.s.，1H)，6.98(s，1H)，4.74-4.62(m，1H)，3.46-3.32(m，3H)，3.25-3.11(m，2H)，2.89(s，3H)，2.82-2.69(m，1H)，2.45(d，J＝14.4Hz，1H)，2.31(d，J＝13.6Hz，1H)，2.18(br.s.，3H)，1.87-1.50(m，10H)，1.31-1.22(m，12H).LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：640.3[M+1].

实施例5

化合物5：9-(4-((5-氯-4-((2-(异丙基磺酰基)苯基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)-3，9-二氮杂螺[5.5]十一碳-2-酮

实施例5A

9-苄基-3，9-二氮杂螺[5.5]十一碳-2-酮

将9-苄基-3，9二氮杂螺[5.5]十一烷-2-，4-二酮(5.00g，18.36mmol)溶于四氢呋喃(80mL)溶液中，N2保护下缓慢加入氢化铝锂(1.74g，45.90mmol)并控制体系温度在55℃以下。将反应液在55℃搅拌1小时。TLC显示反应完成。将混合物冷却至25℃，依次缓慢加入2ml水和氢氧化钠溶液(5mol/L，2ml)淬灭反应，滤出固体，滤液真空浓缩。将残余物通过柱色谱分离(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝20/1)纯化，得到标题化合物(450mg，收率：7.8％，纯度：78％)为白色固体。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)：δ1.31-1.47(m，4H)，1.55(t，J＝6.0Hz，2H)，2.00(s，1H)，2.26-2.40(m，4H)，3.11(t，J＝6Hz，1H)，3.45(s，2H)，7.21-7.34(m，5H)，7.37(br.s.，1H).LCMS(ESI)(10-80CD)：m/z：259.1[M+1].

实施例5B

3，9-二氮杂螺[5.5]十一碳-2-酮

N2保护下，向实施例5A(500mg，1.94mmol)的乙醇(10mL)溶液中，加入Pd-C(100mg)和AcOH(0.1mL)。将反应混合物抽真空，并用H2置换数次。反应混合物在50psi氢气压力下，50℃搅拌12小时。将反应混合物过滤，浓缩得标题化合物(400mg，粗品)为白色固体，直接用于下一步反应。

实施例5C

9-(3-甲氧基-4-硝基苯基)-3，9-二氮杂螺[5.5]十一碳-2-酮

向实施例5B(220mg，1.31mmol)和4-氟-2-甲氧基-1-硝基-苯(223.78mg，1.31mmol)的DMA(10mL)溶液中，加入N，N-二异丙基乙基胺(169.31mg，1.31mmol)，反应混合物在90℃下搅拌6小时。TLC显示反应完成。将反应液减压浓缩，残余物通过柱色谱分离(洗脱剂：二氯甲烷∶甲醇＝50∶1，10∶1)得到标题化合物(280mg，收率：63.58％，纯度：95％)为黄色固体。1HNMR(400MHz，CDCl3)：δ1.69(t，J＝6.0Hz，4H)1.78(t，J＝6.0Hz，2H)，2.36(s，2H)，3.34-3.45(m，4H)，3.46-3.55(m，2H)，3.96(s，3H)，5.82(br.s.，1H)，6.32(d，J＝4.0Hz，1H)，6.43(dd，J＝8.4Hz，1H)，8.02(d，J＝8.0Hz，1H)

实施例5D

9-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-3，9-二氮杂螺[5.5]十一碳-2-酮

将实施例5C(100mg，0.31mmol)溶于5ml四氢呋喃溶液中，N2保护下加入Pd-C(0.1g)。反应混合物抽真空，并用氢气置换数次。25℃下，将混合物在氢气(50psi)下，搅拌3小时。LCMS显示反应完全。反应混合物过滤，滤液浓缩，得到标题化合物(110mg，粗品)为白色固体。LCMS(ESI)(0-60CD)：m/z：290.1[M+1].

实施例5E

9-(4-((5-氯-4-((2-(异丙基磺酰基)苯基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)-3，9-二氮杂螺[5.5]十一碳-2-酮

向实施例5D(120.00mg，0.41mmol)和2，5-二氯-N-(2-异丙基苯基砜)嘧啶-4-胺(172.30mg，0.5mmol)的1，4-二氧六环(3mL)溶液中，加入MeSO3H(119.57mg，1.24mmol)。反应液在50℃下搅拌12小时。LCMS显示反应完成。将混合物通过Pre-HPLC(酸性方法)纯化，得到标题化合物(33.00mg，0.05mmol，收率：13.15％，纯度：99％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz，METHANOL-d4)：δ1.24(d，J＝8.0Hz，6H)1.90-2.16(m，6H)2.47(br.s.，2H)3.37-3.45(m，3H)3.71(br.s.，4H)4.01(s，3H)7.21(d，J＝8.0Hz，1H)7.53(br.s.，1H)7.62-7.75(m，2H)7.86(t，J＝8.0Hz，1H)8.04-8.12(m，2H)8.34(s，1H).LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：599.2[M+1].

实施例6

化合物6：9-(4-((5-氯-4-((2-(异丙基磺酰基)苯基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)-3-甲基-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-2-酮

实施例6A

9-(3-甲氧基-4-硝基苯基)-3-甲基-3，9-二氮杂螺[5.5]十一碳-2-酮

向实施例5C(150.00mg，0.47mmol)的DMF(5mL)溶液中，在0℃下，加入NaH(15.03mg，0.38mmol，60％)并搅拌0.5h，在0℃下加入MeI(53.34mg，0.38mmol，1.20eq)，将反应液升温至25℃并搅拌3小时。LCMS显示起始物质反应完全。缓慢加入冰水淬灭反应，然后用DCM萃取(15ml×3)。合并的有机相用饱和食盐水(10ml×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到标题化合物(110mg，收率：61.82％，纯度：88％)为黄色固体。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：356.1[M+23]RT：1.090min/2min.

实施例6B

9-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-3-甲基-3，9-二氮杂螺[5.5]十一碳-2-酮

将实施例6A(110.00mg，0.33mmol，1.00eq)溶于5.00ml四氢呋喃中，N2保护下加入Pd-C(100mg)。将反应混合物抽真空，并用氢气置换数次。反应液25℃下在15psi氢气压力下搅拌3小时。LCMS显示起始原料反应完全。将反应混合物过滤，浓缩，得到标题化合物(100mg，0.29mmol，产率：87.91％，纯度：88％)为白色固体，可直接用于下一步。

实施例6C

9-(4-((5-氯-4-((2-(异丙基磺酰基)苯基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)-3-甲基-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-2-酮

将实施例6B(100mg，0.33mmol)和2，5-二氯-N-(2-异丙基苯基砜)-嘧啶-4-胺(114.12mg，0.33mmol)的1，4-二氧六环(3.00ml)溶液中，缓慢加入甲烷磺酸(95.03mg，0.99mmol)。该混合物在60℃下搅拌12小时。LCMS显示反应完成。反应液通过Pre-HPLC(酸性方法)纯化，得到标题化合物(45mg，收率：22.10％，纯度：97％)为黄色固体。1H NMR(400MHz，METHANOL-d4)：1.23(s，3H)1.24(s，3H)2.05(m，6H)2.53(br.s.，2H)2.95-3.05(m，3H)3.41(dt，J＝12.0，6.0Hz，1H)3.50(t，J＝6.0Hz，2H)3.72(br.s.，4H)4.01(s，3H)7.28(d，J＝12Hz，1H)7.60(s，1H)7.65-7.71(m，2H)7.87(t，J＝6.0Hz，1H)8.05(d，J＝8.0Hz，2H)8.36(s，1H).LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：613.2[M+1].

生化实验

实验材料

酶：ALK野生型，ALK C1156Y和ALK L1196M均购自Cama Biosciences(Japan)，EGFRT790M/L858R购自Life technology(Madison，WI)。

HTRF试剂盒：购自Cis-Bio International，内含Eu标记TK1抗体，XL665和biotin标记的TK1多肽底物。

检测仪器：Envision(PerkinElmer)。

实验方法

将测试化合物3倍梯度稀释，获得终浓度从1uM到0.017nM 11个剂量。

10ul野生型ALK酶反应混合物体系：0.5nM野生型ALK，1uM biotin-TK1peptide，30uM ATP。反应缓冲液：50mM Hepes(pH7.5)，10mM MgCl2，0.01mM NaV3VO4.反应板为whiteProxiplate 384-Plus plate(PerkinElmer)，室温反应90分钟。

10ul ALK C1156Y酶反应混合物体系：0.15nM ALK C1156Y，1uM biotin-TK1peptide，30uM ATP。反应缓冲液：50mM Hepes(pH7.5)，10mM MgCl2，0.01mM NaV3VO4.反应板为white Proxiplate 384-Plus plate(PerkinElmer)。室温反应60分钟。

10ul ALK L1196M酶反应混合物体系：0.15nM ALK L1196M，1uM biotin-TK1peptide，30uM ATP。反应缓冲液：50mM Hepes(pH7.5)，10mM MgCl2，0.01mM NaV3VO4.反应板为white Proxiplate 384-Plus plate(PerkinElmer)，室温反应60分钟。

10ul EGFR T790M/L858R酶反应混合物体系：0.08nM EGFR T790M/L858R，1uMbiotin-TK1peptide，20uM ATP。反应缓冲液：50mM Hepes(pH7.5)，10mM MgCl2，0.01mMNaV3VO4.反应板为white Proxiplate 384-Plus plate(PerkinElmer)。室温反应60分钟。

检测反应：加10ul检测试剂至反应板中，Antibody终浓度为2nM，XL665为62.5nM。室温孵育60分钟。Envision读板。

数据分析

通过下列公式将读数转化成抑制率(％)(Min-Ratio)/(Max-Min)*100％。4参数曲线拟合(Model 205in XLFIT5，iDBS)测得IC50数据。

细胞实验

实验材料

RPMI1640，胎牛血清，青霉素/链霉素溶液，均购自Life Technology(Madison，WI)。Cell Titer-Glo luminescent cell viability reagents购自Promega(Madison，WI)。Karpas299cell line购自European Collection of Cell Cultures(ECACC)。读板仪器：Envision(PerkinElmer)。

实验方法

384孔板，每孔种2500个Karpas-299细胞，45ul体积。在CO 2培养箱中37℃过夜培养。待测化合物做3倍梯度稀释，获得浓度从2.5mM到0.127uM 10个剂量浓度，两复孔。中间板每孔加49ul培养基。从梯度稀释化合物板转移1ul化合物至中间板，混合充分。再从中间板取5ul液体转至细胞板。细胞继续在CO2培养箱中培养72小时。72小时后，加入25ul检测试剂。室温孵育10分钟，Envision读板。

数据分析

通过下列公式将读数转化成抑制率(％)(Max-Sample)/(Max-Min)＊100％。参数曲线拟合(Model 205in XLFIT5，iDBS)测得IC 50数据。

本发明化合物的ALK酶抑制IC 50，ALK L1196M酶抑制IC 50，ALK C1156Y酶抑制IC50，EGFR T790M/L858R酶抑制IC 50，以及Karpas-299细胞的ALK IC50的数据在以下表1中展示。

表1

体内药效研究

以下体内药效数据表明，本发明的化合物在野生型LU-01-0015肺癌患者来源的异种移植(PDX)模型(BALB/c裸鼠)和野生型LU-01-0319肺癌患者来源的异种移植(PDX)模型(BALB/c裸鼠)这两种模型上都展示了比参考化合物LDK378略优或相当的抗肿瘤活性。举例来说，在野生型LU-01-0319肺癌患者来源的异种移植(PDX)模型(BALB/c裸鼠)代表性化合物2在给药(10毫克/公斤)21天后，肿瘤体积从最开始的约370mm³减小至222mm³，而LDK378减少到268mm³。

1.在皮下移植LU-01-0319肺癌患者来源的异种移植瘤(PDX)，BALB/c裸鼠上进行抗肿瘤体内药效实验

最初是从手术切除的临床样本中获得的LU-01-0319异种移植瘤模型，并植入裸鼠，此定义为批次P0(LU-01-0319-P0)。接下来的一批从P0的肿瘤植入定义为批次P1(LU-01-0319-P1)。FP3是从P2重新获得，接下来的批次从FP3肿瘤植入被定义为批次FP4。植入肿瘤后约2-3周，肿瘤大小达到约200-400mm³时，开始给药。试验化合物每天一次口服给药。肿瘤尺寸每周测量两次，用卡尺两个维度，并使用下面的公式计算体积：V＝0.5a x b2，其中a和b是分别肿瘤的长径和短径。抗肿瘤药效是通过用化合物处理过的动物的平均肿瘤增加体积除以未处理过动物的平均肿瘤增加体积来确定。实验结果见表2。

表2

2.在皮下植入LU-01-0015肺癌患者来源的异种移植(PDX)BALB/c裸小鼠上进行体内药效实验.

BALB/c裸鼠，雌性，6-8周，体重约18-22克，将小鼠保持在一个特殊的无病原体的环境中，且在单个通风笼中(5只小鼠每笼)。所有的笼子，铺垫和水在使用前进行消毒。所有的动物都可以自由获取标准认证的商业实验室饮食。共有80只购于上海BK LaboratoryAnimal Co.，LTD的小鼠用于研亢。每只小鼠在右胁腹皮下植入肿瘤组织(20-30立方毫米)，用于肿瘤的生长。当平均肿瘤体积达到约～160立方毫米时开始实验。将试验化合物每日口服给药，10毫克/公斤或20毫克/公斤。肿瘤体积每3天用二维卡尺测量，体积以立方毫米计量，通过以下公式计算：V＝V＝0.5a x b2，其中a和b分别是肿瘤的长径和短径。抗肿瘤药效是通过用化合物处理过的动物的平均肿瘤增加体积除以未处理过动物的平均肿瘤增加体积来确定。实验结果见表3。

表3

注：*10mg/kg QD X 1W，5mg/kg QD X 2W，PO，10μl/g；**20mg/kg，PO，10μl/g，QD X21

本发明所报道的ALK抑制剂，可用于治疗各种癌症包括间变性大细胞淋巴瘤，非小细胞肺癌，扩散的大B-细胞淋巴瘤，炎性肌纤维母细胞肿瘤，成神经细胞瘤，甲状腺未分化癌和横纹肌肉瘤。ALK抑制剂，可以作为单独治疗或与其它化疗剂联合使用。

Claims

1.式(I)所示化合物或其药学上可接受的盐，

其中，

T₁选自N或C(R₀₁)；

R₃选自R₀₃、OR₀₃和SR₀₃；

R₀₃选自C_1-4烷基、C_1-4卤代烷基和C_3-5环烷基-(CH₂)_0-3-；

Z选自N和C(R₄)；

R₅选自C_1-4烷基；

2.根据权利要求1所述化合物或其药学上可接受的盐，其中所述R₀₁和R₀₂分别独立地选自H、-CH₃、-CD₃、-CF₃、-CHF₂、-CH₂CH₃、CH(CH₃)₂、-CH₂CF₃、-CH₂CH₂CF₃、-CH₂CH₂F、-CH₂CH₂S(＝O)₂CH₃、-CH₂CH₂CN、-CH₂CH(OH)(CH₃)₂、-CH₂CH(F)(CH₃)₂、-CH₂CH₂F；和/或

所述NR₀₁R₀₂选自NHCH₃、N(CH₃)₂、N(CH₂CH₃)₂、

3.根据权利要求1所述化合物或其药学上可接受的盐，其中所述R₀₃选自-CH₃、-CD₃、-CF₃、-CHF₂、-CH₂CH₃、-CH(CH₃)₂、-CH₂CF₃、-CH₂CH₂CF₃、-CH₂CH₂F和

4.根据权利要求1所述化合物或其药学上可接受的盐，其中R₅选自-CH(CH₃)₂。

5.根据权利要求1所述化合物或其药学上可接受的盐，其中所述R₁、R₂和R₄分别独立地选自H、F、Cl、Br、I、-CH₃、-CD₃、-CF₃、-CHF₂、-CH₂CH₃、-CH(CH₃)₂、-CH₂CF₃、-CH₂CH₂CF₃、-CH₂CH₂F、-CH₂CH₂S(＝O)₂CH₃、-CH₂CH₂CN、-CH₂CH(OH)(CH₃)₂、-CH₂CH(F)(CH₃)₂和-CH₂CH₂F。

6.根据权利要求1所述化合物或其药学上可接受的盐，其中，T₂选自-NH-、-N(Me)-、-C(＝O)NH-、-C(＝O)N(CH₃)-、-O-和-CH(NCH₃CH₃)-。

7.根据权利要求1所述化合物或其药学上可接受的盐，其中，螺环结构单元选自：

8.根据权利要求1所述化合物或其药学上可接受的盐，其选自：

9.根据权利要求1所述式(I)化合物的制备方法，其中T₁代表N或CH，T₂代表NH，其制备路线如方案A或C所示：

方案A

方案C

其中PG是氨基保护基，优选自BOC、Bn和Cbz，其他变量如上述权利要求所定义。

10.根据权利要求9所述化合物的制备方法，其中A5的制备方法如方案B所示：

方案B

11.根据权利要求1～10任意一项所述化合物或其药学上可接受的盐在制备治疗与ALK和/或EGFR以及它们的突变相关的癌症、与ROS1、BRAF、c-MET、HER2、KRAS/MEK、PIK3CA、FDFR、DDR2和/或VEGFR抑制剂联合治疗的癌症、或与细胞毒素联合治疗的癌症的药物中的应用。