CN105492009A - 以嘧啶化合物为有效成分的医药组合物 - Google Patents

以嘧啶化合物为有效成分的医药组合物 Download PDF

Info

Publication number
CN105492009A
CN105492009A CN201480047119.2A CN201480047119A CN105492009A CN 105492009 A CN105492009 A CN 105492009A CN 201480047119 A CN201480047119 A CN 201480047119A CN 105492009 A CN105492009 A CN 105492009A
Authority
CN
China
Prior art keywords
compound
compd
cancer
fgf19
officinal salt
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201480047119.2A
Other languages
English (en)
Inventor
二见崇史
竹下留美
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Yamanouchi Pharmaceutical Co Ltd
Original Assignee
Yamanouchi Pharmaceutical Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Yamanouchi Pharmaceutical Co Ltd filed Critical Yamanouchi Pharmaceutical Co Ltd
Publication of CN105492009A publication Critical patent/CN105492009A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00

Abstract

本发明提供一种与FGFR4相关的癌、与FGF19相关的癌或FGF？19基因扩增阳性肝癌的治疗用医药组合物。本发明人对具有FGFR抑制作用的化合物进行了研究，确认到特定的嘧啶化合物具有FGFR4抑制作用，含有这些化合物作为有效成分的医药组合物对于与FGFR4相关的癌、作为另一方式与FGF19相关的癌、作为又另一方式FGF？19基因扩增阳性肝癌具有治疗效果，从而完成了本发明。

Description

以嘧啶化合物为有效成分的医药组合物
技术领域
本发明涉及以嘧啶化合物或其可药用盐为有效成分的、与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物，作为另一方式，涉及以嘧啶化合物或其可药用盐为有效成分的、与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物，作为又另一方式，涉及以嘧啶化合物或其可药用盐为有效成分的、FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗用医药组合物。
背景技术
由成纤维细胞生长因子(FGF)及其受体成纤维细胞生长因子受体(FGFR)形成的信号通路是生成进展中从早期胚胎形成起至各种器官形成为止的阶段中具有最重要功能的信号通路之一。编码FGF的基因存在18种，编码FGFR的基因存在4种(FGFR1～4)，由各种类型的细胞表达，与细胞增殖、分化和生存相关。已知FGF19为FGFR4的生理配体，饭后由小肠分泌，并且已知通过肝脏的FGFR4来控制胆固醇的分解代谢(NatRevDrugDiscov.2009Mar；8(3):235-53)。另外，近年来，已经示出FGF19与包括肝癌、大肠癌在内的多种癌相关(CancerCell.2011,19(3):347-58、Oncogene.2008Jan3；27(1):85-97、AdvExpMedBiol.2012；728:183-94)。
原发性的肝癌根据组织学分类被分为肝实质细胞癌、胆管细胞癌和肝母细胞瘤等，肝实质细胞癌占原发性肝癌的约90％。肝实质细胞癌为预后不良的难治性癌症之一，尤其是占诊断为肝实质细胞癌的患者的70％的不能外科切除的肝癌患者的5年生存率约为10％。即使外科切除后，1年内也有约25％、5年内也有约80％的患者复发(Nat.Rev.Gastroenterol.Hepatol.6,423-432(2009),CancerMPact2010,TreatmentArchitectureUS(2011),NationalCancerInstitute,PhysicianDataQuery(2012),GLOBOCAN2008,IARC.http://globocan.iarc.fr/)。日本、美国、欧洲(法国、德国、意大利、西班牙、英国)的肝癌治疗对象患者约为10万人(CancerMPact2010)。另外，肝癌治疗对象患者在东南亚尤其多见，推测全世界的新患者数约为75万人(GLOBOCAN2008,InternationalAgencyforResearchonCancer)。
作为不能外科切除的肝癌的分子靶向药物，唯一承认有sorafenib，生存期间从7.9个月延长至10.7个月(NEnglJMed.2008Jul24；359(4):378-90)。
近年来，已经做出了以下报道：该报道提出FGF19基因扩增与肝实质细胞癌有关(CancerCell.2011,19(3):347-58)。根据该报道，肝实质细胞癌的14％在染色体11q13.3区域中确认到基因扩增，在该区域中包含FGF19基因。另外，对于作为FGF19基因扩增阳性肝实质细胞癌细胞株的HuH-7细胞，通过在其培养液中添加FGF19中和抗体，抑制了细胞增殖。另外，给予FGF19中和抗体使皮下携带有HuH-7细胞的裸鼠中的肿瘤生长得到抑制(CancerCell.2011,19(3):347-58)。此外，有以下报道：该报道提出，过表达FGF19的转基因小鼠自然发展成肝癌(AmJPathol.2002Jun；160(6):2295-307)、FGF19在肝癌患者的肿瘤部位高度表达且高度表达患者群预后不良(BMCCancer.2012Feb6；12(1):56)等、其他FGF19与肝癌的关联。
另一方面，提出了过表达FGF19的转基因小鼠的肝癌发病被编码FGFR4的基因缺陷抑制，因此FGF19通过FGFR4与肝癌发病相关(PLoSOne.2012；7(5):e36713)。此外，示出了：通过以RNAi效应抑制FGF19基因扩增阳性肝实质细胞癌细胞株的FGFR4表达、或者通过在培养液中添加FGFR4中和抗体从而抑制FGFR4的功能，由此抑制了细胞增殖(CancerDiscov.2012Dec；2(12):1118-33、BMCCancer.2012Feb6；12:56、PLoSOne.2012；7(5):e36713)。这些报道教导了以下可能性：对于具有FGF19基因扩增的肝实质细胞癌患者的治疗，FGFR4抑制剂是有效的。
近年来，报道了各种癌种类的发病中FGF信号的重要性，进行了FGFR或FGF选择性抑制剂的开发(NatureReviewsCancer2010,10,116-129、J.Med.Chem.2011,54,7066-7083、AACR2011,No.1643AstraZeneca)。
报道了下式(X1)的化合物示出各种激酶抑制，可用作癌及心肌梗塞等的血管障碍治疗剂(专利文献1)。在该文献的表2中披露了某些化合物对Yes、VEGFR、EphB4、PDGFRβ和FGFR1的激酶抑制的试验结果，披露了FGFR1抑制活性的IC50值比1000nM大，与其他激酶活性抑制相比弱。另外，该文献中没有披露作为本发明的医药组合物的有效成分的化合物。
[化学式1]
(式中，A各自为CH、N等，B各自为CH等，A1为O、CR2等，A2为NR、O等，R0为H等，R为H等，L1为键、O等，L2为键、C1-C6烷基等，R1为三元至六元杂环等，而且Re、Rf为C1-C6烷基、羟烷基等。其他符号参考该公报。)
报道了下式(X2)的化合物显示出Abl抑制作用，对于各种癌有用(专利文献2)。然而，该文献中没有关于FGFR抑制作用的具体记载。此外，该文献中没有披露作为本发明的医药组合物的有效成分的化合物。
[化学式2]
(式中，G为CH等，A为3-羟基苯基等，Y为乙烯基或亚乙基。其他符号参考该公报。)
报道了下式(X3)的化合物对于由Src、VEGFR2、Yes、Fyn、Lck、Abl、PDGFR、EGFR及RET构成的各种激酶具有抑制作用，可以用于治疗癌、血管障碍等(专利文献3)。然而，该文献中没有披露对于FGFR的抑制作用。此外，该文献中没有披露作为本发明的医药组合物的有效成分的化合物。
[化学式3]
(式中，G1表示可被取代的芳基、可被取代的杂芳基等，L1表示O、SO、SO2、可被取代的烷基等，L2表示可被取代的烷基、杂环等，A1表示键、O、C(Ra)2等，A2表示NRa、O等，Ra表示H等。其他符号参考该公报。)
在本申请最早的优先权日之后公开的文献(专利文献4)中披露了下式(X4)的化合物作为与FGFR1、2和/或3相关的各种癌，例如与FGFR1相关的肺癌或激素疗法抵抗性的乳癌、与FGFR2相关的胃癌、三阴性乳腺癌或子宫内膜癌、以及与FGFR3相关的膀胱癌及成胶质母细胞瘤的治疗剂是有用的。而且，在该文献中将作为本发明的医药组合物的有效成分的化合物作为实施例化合物具体公开，但是关于FGFR4抑制作用和对肝癌的作用没有公开。
[化学式4]
(式中的符号参考该公报。)
现有技术文献
专利文献
专利文献1：国际公开第WO2006/101977号小册子
专利文献2：国际公开第WO2007/056075号小册子
专利文献3：国际公开第WO2008/008234号小册子
专利文献4：国际公开第WO2013/129369号小册子
发明内容
发明所要解决的课题
提供一种与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物，作为另一方式与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物，作为又另一方式FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗用医药组合物。
解决课题的手段
本发明人以制备与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物，作为另一方式与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物，作为又另一方式FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗用医药组合物为目的，对于具有FGFR4抑制作用的化合物进行了深入探讨，结果发现，特定的嘧啶化合物或其可药用盐具有优异的FGFR4抑制作用，以这些化合物为有效成分的医药组合物作为与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物、作为另一方式与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物、作为又另一方式FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗用医药组合物是有用的，从而完成了本发明。
即，本发明涉及一种与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物、作为另一方式与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物、作为又另一方式FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗用医药组合物，其包含5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-{3-甲氧基-4-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基]苯基}嘧啶-2-胺(以下有时称为“化合物A”。)、2-[4-({5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]嘧啶-2-基}氨基)-1H-吡唑-1-基]乙醇(以下有时称为“化合物B”。)、(2R)-3-[4-({5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]嘧啶-2-基}氨基)-1H-吡唑-1-基]丙烷-1,2-二醇(以下有时称为“化合物C”。)、5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]嘧啶-2-胺(以下有时称为“化合物D”。)或5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-{1-甲基-5-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]-1H-吡唑-3-基}嘧啶-2-胺(以下有时称为“化合物E”。)或其可药用盐、以及赋形剂。
需要说明的是，本发明的医药组合物所涉及的化合物A、化合物B、化合物C、化合物D和化合物E为上述专利文献4中具体记载的化合物。
另外，本发明包括与FGFR4相关的癌的治疗剂、作为另一方式与FGF19相关的癌的治疗剂、作为又另一方式FGF19基因扩增阳性肝癌治疗剂，其包含化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化合物E、或它们的可药用盐。
另外，本发明涉及化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化合物E、或它们的可药用盐在制造与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物、作为另一方式与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物、作为又另一方式FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗用医药组合物中的用途；化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化合物E、或它们的可药用盐在与FGFR4相关的癌的治疗、作为另一方式与FGF19相关的癌的治疗、作为又另一方式FGF19基因扩增阳性肝癌治疗中的用途；用于治疗与FGFR4相关的癌、作为另一方式用于治疗与FGF19相关的癌、作为又另一方式用于治疗FGF19基因扩增阳性肝癌的化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化合物E、或它们的可药用盐；以及与FGFR4相关的癌的治疗方法、作为另一方式与FGF19相关的癌的治疗方法、作为又另一方式FGF19基因扩增阳性肝癌治疗方法，其包括向对象施用有效量的化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化合物E、或它们的可药用盐。需要说明的是，“对象”是指需要该治疗的人或其他动物，作为某一方式，为需要该治疗的人。
发明的效果
作为本发明的医药组合物的有效成分的化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化合物E、或它们的可药用盐具有FGFR4抑制作用，可以用作与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物、作为另一方式与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物、作为又另一方式FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗用医药组合物的有效成分。
具体实施方式
以下详细说明本发明。
5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-{3-甲氧基-4-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基]苯基}嘧啶-2-胺(化合物A)的化学结构如下所示。
[化学式5]
(式中，Me表示甲基。需要说明的是，关于其以下的化学式，同样地Me也表示甲基。)
另外，2-[4-({5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]嘧啶-2-基}氨基)-1H-吡唑-1-基]乙醇(化合物B)的化学结构如下所示。
[化学式6]
此外，(2R)-3-[4-({5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]嘧啶-2-基}氨基)-1H-吡唑-1-基]丙烷-1,2-二醇(化合物C)的化学结构如下所示。
[化学式7]
此外，5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]嘧啶-2-胺(化合物D)的化学结构如下所示。
[化学式8]
此外，5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-{1-甲基-5-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]-1H-吡唑-3-基}嘧啶-2-胺(化合物E)的化学结构如下所示。
[化学式9]
“与FGFR4相关的癌”是指FGFR4的激活与癌的发病、进展相关的癌。例如，是指发生作为FGFR4的配体的FGF19的基因扩增(CancerCell.2011,19(3):347-58)、或表达增强的癌(Oncogene.2008Jan3；27(1):85-97)、或FGFR4的激活突变(例如，具有从以GenBank登录号：NM_002011.3定义的FGFR4亚型1的535号的天冬酰胺到天冬氨酸或赖氨酸的突变、从第550号的缬氨酸到亮氨酸或谷氨酸的突变的癌(JClinInvest.2009Nov；119(11):3395-407)、具有从第376号的酪氨酸到半胱氨酸的突变的癌(Oncogene.2010Mar11；29(10):1543-52.)、具有从第712号的脯氨酸到苏氨酸的突变的癌(ProcNatlAcadSciUSA.2013Jul8EpubaheadofprintPMID:23836671))等。
“与FGF19相关的癌”是指发生FGF19的基因扩增或表达增强的癌。基因扩增的诊断可以使用FISH(荧光原位杂交)法、阵列比较基因组杂交法等利用了杂交的方法、或数字化PCR(聚合物酶链反应)法的PCR法等多种方法。
“FGF19基因扩增阳性肝癌”是指在肝癌患者中，FGF19基因区域扩增的患者中的肝癌。FGF19基因扩增阳性肝癌的患者与FGF19基因没有扩增的患者或者正常人相比，FGF19mRNA和/或FGF19蛋白质的表达量增强，因此也可以以FGF19mRNA和/或FGF19蛋白质为指标进行诊断。作为一例，FGF19mRNA表达可通过PCR法或核酸杂交法来测定。组织中的FGF19蛋白质可通过免疫组织化学法等(PLoSOne.2012；7(5):e36713、Oncogene.2008Jan3；27(1):85-97)检测，血液中的FGF19蛋白质可通过酶联免疫吸附测定法(BMCCancer.2012Feb6；12(1):56)检测。
本发明的一些方式在下面示出。
(1-1)一种与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物，其包含化合物A或其可药用盐、以及赋形剂。作为另一方式，一种与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物，其包含化合物A或其可药用盐、以及赋形剂。作为又另一方式，一种FGF19基因扩增阳性肝癌治疗用医药组合物，其包含化合物A或其可药用盐、以及赋形剂。
(1-2)化合物A或其可药用盐在制造与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物中的用途。作为另一方式，化合物A或其可药用盐在制造与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物中的用途。作为又另一方式，化合物A或其可药用盐在制造FGF19基因扩增阳性肝癌治疗用医药组合物中的用途。
(1-3)化合物A或其可药用盐在与FGFR4相关的癌的治疗中的用途。作为另一方式，化合物A或其可药用盐在与FGF19相关的癌的治疗中的用途。作为又另一方式，化合物A或其可药用盐在FGF19基因扩增阳性肝癌治疗中的用途。
(1-4)一种化合物A或其可药用盐，其用于与FGFR4相关的癌的治疗。作为另一方式，一种化合物A或其可药用盐，其用于与FGF19相关的癌的治疗。作为又另一方式，一种化合物A或其可药用盐，其用于FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗。
(1-5)一种与FGFR4相关的癌的治疗方法，包括将有效量的化合物A或其可药用盐施用给对象。作为另一方式，一种与FGF19相关的癌的治疗方法，包括将有效量的化合物A或其可药用盐施用给对象。作为又另一方式，一种FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗方法，包括将有效量的化合物A或其可药用盐施用给对象。
(2-1)一种与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物，其包含化合物B或其可药用盐、以及赋形剂。作为另一方式，一种与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物，其包含化合物B或其可药用盐、以及赋形剂。作为又另一方式，一种FGF19基因扩增阳性肝癌治疗用医药组合物，其包含化合物B或其可药用盐、以及赋形剂。
(2-2)化合物B或其可药用盐在制造与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物中的用途。作为另一方式，化合物B或其可药用盐在制造与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物中的用途。作为又另一方式，化合物B或其可药用盐在制造FGF19基因扩增阳性肝癌治疗用医药组合物中的用途。
(2-3)化合物B或其可药用盐在与FGFR4相关的癌的治疗中的用途。作为另一方式，化合物B或其可药用盐在与FGF19相关的癌的治疗中的用途。作为又另一方式，化合物B或其可药用盐在FGF19基因扩增阳性肝癌治疗中的用途。
(2-4)一种化合物B或其可药用盐，其用于与FGFR4相关的癌的治疗。作为另一方式，一种化合物B或其可药用盐，其用于与FGF19相关的癌的治疗。作为又另一方式，一种化合物B或其可药用盐，其用于FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗。
(2-5)一种与FGFR4相关的癌的治疗方法，包括将有效量的化合物B或其可药用盐施用给对象。作为另一方式，一种与FGF19相关的癌的治疗方法，包括将有效量的化合物B或其可药用盐施用给对象。作为又另一方式，一种FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗方法，包括将有效量的化合物B或其可药用盐施用给对象。
(3-1)一种与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物，其包含化合物C或其可药用盐、以及赋形剂。作为另一方式，一种与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物，其包含化合物C或其可药用盐、以及赋形剂。作为又另一方式，一种FGF19基因扩增阳性肝癌治疗用医药组合物，其包含化合物C或其可药用盐、以及赋形剂。
(3-2)化合物C或其可药用盐在制造与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物中的用途。作为另一方式，化合物C或其可药用盐在制造与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物中的用途。作为又另一方式，化合物C或其可药用盐在制造FGF19基因扩增阳性肝癌治疗用医药组合物中的用途。
(3-3)化合物C或其可药用盐在与FGFR4相关的癌的治疗中的用途。作为另一方式，化合物C或其可药用盐在与FGF19相关的癌的治疗中的用途。作为又另一方式，化合物C或其可药用盐在FGF19基因扩增阳性肝癌治疗中的用途。
(3-4)一种化合物C或其可药用盐，其用于与FGFR4相关的癌的治疗。作为另一方式，一种化合物C或其可药用盐，其用于与FGF19相关的癌的治疗。作为又另一方式，一种化合物C或其可药用盐，其用于FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗。
(3-5)一种与FGFR4相关的癌的治疗方法，包括将有效量的化合物C或其可药用盐施用给对象。作为另一方式，一种与FGF19相关的癌的治疗方法，包括将有效量的化合物C或其可药用盐施用给对象。作为又另一方式，一种FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗方法，包括将有效量的化合物C或其可药用盐施用给对象。
(4-1)一种与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物，其包含化合物D或其可药用盐、以及赋形剂。作为另一方式，一种与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物，其包含化合物D或其可药用盐、以及赋形剂。作为又另一方式，一种FGF19基因扩增阳性肝癌治疗用医药组合物，其包含化合物D或其可药用盐、以及赋形剂。
(4-2)化合物D或其可药用盐在制造与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物中的用途。作为另一方式，化合物D或其可药用盐在制造与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物中的用途。作为又另一方式，化合物D或其可药用盐在制造FGF19基因扩增阳性肝癌治疗用医药组合物中的用途。
(4-3)化合物D或其可药用盐在与FGFR4相关的癌的治疗中的用途。作为另一方式，化合物D或其可药用盐在与FGF19相关的癌的治疗中的用途。作为又另一方式，化合物D或其可药用盐在FGF19基因扩增阳性肝癌治疗中的用途。
(4-4)一种化合物D或其可药用盐，其用于与FGFR4相关的癌的治疗。作为另一方式，一种化合物D或其可药用盐，其用于与FGF19相关的癌的治疗。作为又另一方式，一种化合物D或其可药用盐，其用于FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗。
(4-5)一种与FGFR4相关的癌的治疗方法，包括将有效量的化合物D或其可药用盐施用给对象。作为另一方式，一种与FGF19相关的癌的治疗方法，包括将有效量的化合物D或其可药用盐施用给对象。作为又另一方式，一种FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗方法，包括将有效量的化合物D或其可药用盐施用给对象。
(5-1)一种与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物，其包含化合物E或其可药用盐、以及赋形剂。作为另一方式，一种与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物，其包含化合物E或其可药用盐、以及赋形剂。作为又另一方式，一种FGF19基因扩增阳性肝癌治疗用医药组合物，其包含化合物E或其可药用盐、以及赋形剂。
(5-2)化合物E或其可药用盐在制造与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物中的用途。作为另一方式，化合物E或其可药用盐在制造与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物中的用途。作为又另一方式，化合物E或其可药用盐在制造FGF19基因扩增阳性肝癌治疗用医药组合物中的用途。
(5-3)化合物E或其可药用盐在与FGFR4相关的癌的治疗中的用途。作为另一方式，化合物E或其可药用盐在与FGF19相关的癌的治疗中的用途。作为又另一方式，化合物E或其可药用盐在FGF19基因扩增阳性肝癌治疗中的用途。
(5-4)一种化合物E或其可药用盐，其用于与FGFR4相关的癌的治疗。作为另一方式，一种化合物E或其可药用盐，其用于与FGF19相关的癌的治疗。作为又另一方式，一种化合物E或其可药用盐，其用于FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗。
(5-5)一种与FGFR4相关的癌的治疗方法，包括将有效量的化合物E或其可药用盐施用给对象。作为另一方式，一种与FGF19相关的癌的治疗方法，包括将有效量的化合物E或其可药用盐施用给对象。作为又另一方式，一种FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗方法，包括将有效量的化合物E或其可药用盐施用给对象。
此外，“化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化合物E的可药用盐”是指化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化合物E的酸加成盐，具体来说，可以举出与盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、硝酸、磷酸等的无机酸，或与甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、乳酸、苹果酸、苦杏仁酸、酒石酸、二苯甲酰基酒石酸、二甲苯酰基酒石酸、柠檬酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、p-甲苯磺酸、天冬氨酸、谷氨酸等有机酸的酸加成盐。需要说明的是，“化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化合物E”包括化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化合物E的溶剂合物，具体而言，例如水合物和乙醇合物。
需要说明的是，作为“化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化合物E、或其可药用盐”的某些方式，可以举出没有形成盐的游离碱(フリーベース)，即化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化合物E，作为另一方式，为化合物A，作为又另一方式，为化合物B，作为又另一方式，为化合物C，作为又另一方式，为化合物D，作为又另一方式，为化合物E。
含有化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化合物E、或其可药用盐作为有效成分的医药组合物可以使用本领域常用的赋形剂(即药用赋形剂和药用载体等)，并通过常用的方法来制备。
给药可以为通过片剂、丸剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、液体制剂等的口服给药，或者通过静脉内等的注射剂、栓剂、经皮用液体制剂、经皮贴剂、经粘膜液体制剂等的非经口给药中的任意一种形式。
作为用于经口给药的固体组合物，可以使用片剂、散剂、颗粒剂等。在这样的固体组合物中，将1种或2种以上的有效成分与至少一种惰性赋形剂混合。按照常规方法，组合物也可以含有惰性添加剂，例如润滑剂或崩解剂、稳定剂、溶解助剂。根据需要，片剂或丸剂也可以用糖衣或者胃溶性或肠溶性物质的膜进行包衣。
用于经口给药的液体组合物包括可药用的乳液剂、溶液剂、悬浮剂、糖浆剂或酏剂等，并且含有通常可使用的惰性稀释剂，例如纯化水或乙醇。除了惰性稀释剂以外，该液体组合物中也可以含有诸如增溶剂、润湿剂、悬浮剂之类的助剂、甜味剂、矫味剂、芳香剂、防腐剂。
用于非经口给药的注射剂包括无菌的水性或非水性溶液制剂、悬浮剂或乳液剂。作为水性溶剂，包括(例如)注射用蒸馏水或生理盐水。作为非水性溶剂，例如有乙醇之类的醇类。这样的组合物还可以含有等渗剂、防腐剂、润湿剂、乳化剂、分散剂、稳定剂、或溶解助剂。例如，可以采用通过可截留细菌的过滤器进行过滤、添加杀菌剂或者进行辐射的方法来对所述组合物进行灭菌。此外，也可以将这些组合物制成无菌的固体组合物，在使用前将其溶解或混悬于无菌水或无菌的注射用溶剂中而使用。
通常口服给药时，1天的给药量按体重约为0.001mg/kg～100mg/kg，优选为0.01mg/kg～30mg/kg，更优选为0.1mg/kg～10mg/kg，并将该给药量1次服用或分2次～4次服用。静脉内给药时，1天的给药量按体重约为0.0001mg/kg～10mg/kg是适当的，并将该给药量分为每日一次至多次给药。而且，使用经粘膜剂时，按体重约为0.001mg/kg～100mg/kg，分为每日一次至多次给药。应考虑症状、年龄、性别等，根据每个患者的情况，来适当地决定给药量。
虽然根据给药路径、剂型、给药部位、赋形剂或添加剂的种类而不同，但本发明的医药组合物含有0.01至100重量％、作为一个方式0.01至50重量％的作为有效成分的1种或其以上的化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化合物E、或其可药用盐。
本发明的医药组合物可以与被认为对癌(尤其是与FGFR4相关的癌、与FGF19相关的癌、FGF19基因扩增阳性肝癌或肝癌)表现出有效性的各种治疗剂或预防剂并用。在并用时，可以同时给药，或者分别连续给药、或按所希望的时间间隔给药。同时给药时的制剂可以是配合剂，也可以分别制成制剂。
实施例
下面将化合物A、化合物B、化合物C、化合物D及化合物E的制造方法作为制造例示出。需要说明的是，这些化合物的制造方法不仅限于以下示出的具体制造例的制造方法，也可以通过这些制造方法的组合、或本领域技术人员显而易见的方法来制造。此外，这些化合物也可以通过前述专利文献4中记载的方法或者以其为标准的方法来制造。
制造例1化合物A的制造
(1)将3,5-二甲氧基苯甲酸甲酯(1g)和乙腈(20mL)的混合物用冰冷却，加入N-氟-N'-(氯甲基)三乙二胺双(四氟硼酸盐)(4.09g)，在室温下搅拌整夜。向反应混合物中加入饱和碳酸氢钠水溶液，用乙酸乙酯萃取。用饱和食盐水洗涤有机层，加入无水硫酸镁和碱性硅胶，搅拌30分钟后，过滤。将滤液减压浓缩，之后用硅胶柱色谱(乙酸乙酯/己烷)纯化残留物，得到2,6-二氟-3,5-二甲氧基苯甲酸甲酯(292mg)。
MS(ESI+):233[(M+H)+].
(2)将2,6-二氟-3,5-二甲氧基苯甲酸甲酯(10g)和四氢呋喃(57mL)的混合物用冰冷却，加入硼氢化锂(3.0mol/L四氢呋喃溶液，43mL)之后，在室温下搅拌65小时。将反应混合物再次用冰冷却，进一步加入硼氢化锂(3.0mol/L四氢呋喃溶液，14.4mL)，在室温下搅拌22小时。将反应混合物用冰冷却，并缓缓加入到冰水(300mL)中。进一步缓缓加入浓盐酸(25mL)，在室温下搅拌1小时。用甲苯/乙酸乙酯(1:1)萃取，用饱和碳酸氢钠水溶液和饱和食盐水洗涤有机层，并用无水硫酸镁干燥后，过滤。将滤液减压浓缩，得到(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苯基)甲醇(8.67g)。
MS(EI+):204[(M)+].
(3)将(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苯基)甲醇(1.71g)、三乙胺(2.57mL)和四氢呋喃(34.2mL)的混合物用冰冷却，加入甲磺酰氯(716μL)后，搅拌1小时。滤除不溶物后，将滤液减压浓缩。向残余物中加水，用乙酸乙酯萃取。用饱和食盐水洗涤有机层，并用无水硫酸镁干燥后，过滤。将滤液减压浓缩，得到甲磺酸2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基酯(2.32g)。
NMR(DMSO-d6):3.24(3H,s),3.88(6H,s),5.30(2H,s),7.12(1H,t,J＝8.4Hz).
(4)向2-氯-5-羟基嘧啶(4.38g)、甲磺酸2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基酯(7.89g)和N,N-二甲基甲酰胺(78.9mL)的混合物中加入碳酸钾(9.27g)后，在60℃下搅拌1小时。向反应混合物中加入水后，在冰冷却下搅拌30分钟。过滤收集生成的固体，用水洗涤后，减压干燥，得到2-氯-5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]嘧啶(8.53g)。
MS(APCI/ESI+):317[(M+H)+].
(5)在氩气氛下，于室温下向2-氯-5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]嘧啶(1.03g)、3-甲氧基-4-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基]苯胺(1.29g)、1,1'-联萘-2,2'-二基双(二苯基膦)(609mg)、碳酸铯(3.19g)及二噁烷(20.6mL)的混合物中加入乙酸钯(146mg)，在100℃下搅拌4小时。向反应混合物中加入水，用乙酸乙酯萃取。用饱和食盐水洗涤有机层，并用无水硫酸镁干燥后，过滤。将滤液减压浓缩，将残余物用硅胶柱色谱(氯仿/甲醇/浓氨水)纯化，之后用碱性硅胶柱色谱(乙酸乙酯)纯化后，用乙酸乙酯、之后用乙醇固化，得到5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-{3-甲氧基-4-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基]苯基}嘧啶-2-胺(化合物A：830mg)。
MS(ESI+):585[(M+H)+].
NMR(DMSO-d6):1.45-1.60(2H,m),1.73-1.84(2H,m),2.14(3H,s),2.17-2.58(11H,m),3.24-3.36(2H,m),3.75(3H,s),3.87(6H,s),5.16(2H,s),6.79(1H,d,J＝8.8Hz),7.07(1H,t,J＝8.4Hz),7.24(1H,dd,J＝8.8,2.4Hz),7.32(1H,d,J＝2.4Hz),8.29(2H,s),9.21(1H,s).
制造例2化合物B的制造
(1)在氩气氛下，于室温下向用与制造例1(4)相同的方法制造的2-氯-5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]嘧啶(800mg)、2-(4-氨基-1H-吡唑-1-基)乙醇(642mg)、1,1'-联萘-2,2'-二基双(二苯基膦)(472mg)、碳酸铯(2.47g)及二噁烷(16mL)的混合物中加入醋酸钯(113mg)，在100℃下搅拌6小时。向反应混合物中加入水和氯仿，滤除不溶物后，用氯仿萃取滤液。用饱和食盐水洗涤有机层，并用无水硫酸镁干燥后，过滤。将滤液减压浓缩，用硅胶柱色谱(氯仿/甲醇)纯化残余物，得到2-[4-({5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]嘧啶-2-基}氨基)-1H-吡唑-1-基]乙醇(化合物B：139mg)。
MS(ESI+):408[(M+H)+].
NMR(DMSO-d6):3.69(2H,dd,J＝11.0,5.6Hz),3.87(6H,s),4.07(2H,t,J＝5.6Hz),4.83(1H,t,J＝5.4Hz),5.14(2H,s),7.07(1H,t,J＝8.4Hz),7.45(1H,d,J＝0.6Hz),7.88(1H,d,J＝0.6Hz),8.26(2Hs),9.20(1H,s).
制造例3化合物C的制造
(1)在氩气氛下，于室温下向用与制造例1(4)相同的方法制造的2-氯-5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]嘧啶(1.33g)、1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-胺(913mg)、1,1'-联萘-2,2'-二基双(二苯基膦)(785mg)、乙酸钯(189mg)及二噁烷(26.6mL)的混合物中加入碳酸铯(4.11g)，在100℃下搅拌4小时。向反应混合物中加入水，用乙酸乙酯萃取。用饱和食盐水洗涤有机层，并用无水硫酸钠干燥后，过滤。将滤液减压浓缩，用硅胶柱色谱(乙酸乙酯/己烷)纯化残余物，得到5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-[1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-胺(1.73g)。
MS(APCI/ESI+):448[(M+H)+].
(2)向5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-[1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-胺(3.59g)及甲醇(20mL)的混合物中加入氯化氢(4mol/L二噁烷溶液，40mL)，在室温下搅拌6小时。将反应混合物减压浓缩后，向残余物中加入饱和碳酸氢钠水溶液。过滤收集生成的固体，用二***洗涤后，减压干燥，得到5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-(1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺(2.9g)。
MS(APCI/ESI+):364[(M+H)+].
(3)向5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-(1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺(50mg)、碳酸钾(57mg)及N,N-二甲基甲酰胺(1mL)的混合物中加入4-甲基苯磺酸[(4S)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基]甲酯(118mg)，在60℃下搅拌1小时，并在110℃下搅拌4天。向反应混合物中加入水，用乙酸乙酯萃取。用饱和食盐水洗涤有机层，并用无水硫酸镁干燥后，过滤。将滤液减压浓缩后，将得到的残余物用硅胶柱色谱(乙酸乙酯/己烷)纯化，得到5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-(1-{[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基]甲基}-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺(39mg)。
MS(APCI/ESI+):478[(M+H)+].
(4)向5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-(1-{[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基]甲基}-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺(45mg)及四氢呋喃(2mL)的混合物中加入盐酸(1mol/L、1mL)，在50℃下搅拌3小时。向反应混合物中加入饱和碳酸氢钠水溶液，用氯仿萃取。用饱和食盐水洗涤有机层，并用无水硫酸钠干燥后，过滤。将滤液减压浓缩，用硅胶柱色谱(氯仿/甲醇)纯化残余物后，用乙酸乙酯固化，得到(2R)-3-[4-({5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]嘧啶-2-基}氨基)-1H-吡唑-1-基]丙烷-1,2-二醇(化合物C：25mg)。
MS(ESI+):438[(M+H)+].
NMR(DMSO-d6):3.23-3.38(2H,m),3.72-3.80(1H,m),3.84-3.96(7H,m),4.15(1H,dd,J＝13.8,4.1Hz),4.67(1H,t,J＝5.6Hz),4.91(1H,d,J＝5.3Hz),5.14(2H,s),7.06(1H,t,J＝8.4Hz),7.45(1H,d,J＝0.6Hz),7.87(1H,d,J＝0.6Hz),8.26(2H,s),9.21(1H,s).
制造例4化合物D的制造
(1)在氩气氛下，于室温下向用与制造例1(4)相同的方法制造的2-氯-5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]嘧啶(150mg)、4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯胺(109mg)、1,1'-联萘-2,2'-二基双(二苯基膦)(88mg)、碳酸铯(463mg)及二噁烷(3mL)的混合物中加入醋酸钯(21mg)，在100℃下搅拌4小时。向反应混合物中加入水，并用乙酸乙酯萃取。用饱和食盐水洗涤有机层，并用无水硫酸镁干燥后，过滤。将滤液减压浓缩，用硅胶柱色谱(氯仿/甲醇/浓氨水)纯化残余物后，用乙酸乙酯和二异丙醚固化，得到5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]嘧啶-2-胺(化合物D：156mg)。
MS(ESI+):472[(M+H)+].
NMR(DMSO-d6):2.21(3H,s),2.41-2.48(4H,m),2.98-3.08(4H,m),3.87(6H,s),5.15(2H,s),6.81-6.90(2H,m),7.07(1H,t,J＝8.4Hz),7.47-7.55(2H,m),8.26(2H,s),9.15(1H,s).
制造例5化合物E的制造
(1)向(1-甲基-3-硝基-1H-吡唑-5-基)甲醇(398mg)、3,4-二氢-2H-吡喃(459μL)及乙酸乙酯(8mL)的混合物中加入p-甲苯磺酸一水合物(96mg)，在室温下搅拌1.5小时。进一步加入3,4-二氢-2H-吡喃(459μL)及p-甲苯磺酸一水合物(96mg)，并在室温下搅拌1.5小时。向反应混合物中加入水，并用乙酸乙酯萃取。用饱和食盐水洗涤有机层，并用无水硫酸钠干燥后，过滤。将滤液减压浓缩后，用硅胶柱色谱(己烷/乙酸乙酯)纯化残余物，得到1-甲基-3-硝基-5-[(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基]-1H-吡唑(487mg)。
MS(APCI/ESI+):242[(M+H)+].
(2)向1-甲基-3-硝基-5-[(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基]-1H-吡唑(487mg)、四氢呋喃(4.9mL)及乙醇(4.9mL)的混合物中加入10％钯-碳(含水、50mg)。在氢氛围下搅拌12小时后，滤去不溶物。将滤液减压浓缩，得到1-甲基-5-[(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基]-1H-吡唑-3-胺(426mg)。
MS(APCI/ESI+):212[(M+H)+].
(3)按与制造例3(1)同样的方法，使用1-甲基-5-[(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基]-1H-吡唑-3-胺及用与制造例1(4)相同的方法制造的2-氯-5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]嘧啶为原料，得到5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-{1-甲基-5-[(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基]-1H-吡唑-3-基}嘧啶-2-胺。
MS(APCI/ESI+):492[(M+H)+].
(4)向5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-{1-甲基-5-[(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基]-1H-吡唑-3-基}嘧啶-2-胺(706mg)和甲醇(8mL)的混合物中加入氯化氢(4mol/L二噁烷溶液、8mL)，并在室温下搅拌3小时。将反应混合物减压浓缩后，向残余物中加入饱和碳酸氢钠水溶液，用氯仿萃取。用无水硫酸钠干燥有机层后，过滤。将滤液减压浓缩，用硅胶柱色谱(乙酸乙酯/己烷)纯化残余物后，用乙醇固化，得到[3-({5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]嘧啶-2-基}氨基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基]甲醇(444mg)。
MS(ESI+):408[(M+H)+].
(5)将[3-({5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]嘧啶-2-基}氨基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基]甲醇(350mg)、三乙胺(359μL)、二氯甲烷(7mL)及四氢呋喃(7mL)的混合物用冰冷却，加入甲磺酰氯(120μL)之后，在室温下搅拌3小时。向反应混合物中加入水和乙酸乙酯，过滤收集生成的固体后，减压干燥，得到甲磺酸[3-({5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]嘧啶-2-基}氨基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基]甲酯(218mg)。
NMR(CDCl3):2.96(3H,s),3.85(3H,s),3.89(6H,s),5.16(2H,s),5.25(2H,s),6.68(1H,t,J＝8.0Hz),6.91(1H,s),7.63(1H,brs),8.24(2H,s).
(6)向甲磺酸[3-({5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]嘧啶-2-基}氨基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基]甲酯(795mg)和N-甲基吡咯烷酮(15.9mL)的混合物中加入1-甲基哌嗪(901μL)，在80℃下搅拌2小时。向反应混合物中加入水和饱和碳酸氢钠水溶液，过滤收集生成的固体后，用氯仿萃取滤液。用无水硫酸钠干燥有机层后，过滤。将滤液减压浓缩，将残余物与先前过滤收集的固体合并后，用硅胶柱色谱(氯仿/甲醇)纯化，接下来用碱性硅胶柱色谱(乙酸乙酯/甲醇)纯化后，用乙醇/二异丙醚固化，得到5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-{1-甲基-5-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]-1H-吡唑-3-基}嘧啶-2-胺(化合物E：168mg)。
MS(ESI+):490[(M+H)+].
NMR(DMSO-d6):2.14(3H,s),2.18-2.53(8H,m),3.45(2H,s),3.67(3H,s),3.87(6H,s),5.15(2H,s),6.46(1H,s),7.06(1H,t,J＝8.4Hz),8.26(2H,s),9.42(1H,s).
本发明的医药组合物的药理效果通过以下实施例来确认。
试验例1FGFR4酶活性检测
酶活性检测使用人重组FGFR4(カルナバイオ公司，产品目录编号：08CBS-0716C)。测定法的概要如下所示。
用二甲基亚砜(DMSO)溶解被验化合物，以使得DMSO浓度成为2％的方式用反应缓冲液(100nMHEPES(pH7.5)、0.003％Briji-35、0.004％Tween20、0.5mMDTT、10mMMgCl2)稀释，制备化合物溶液。向384孔板1well中，
(1)添加化合物溶液4μL，
(2)添加2μL用反应稀释液稀释过的FGFR4酶(3ng/μL)，
(3)20分钟后添加荧光底物肽水溶液(组成为100mMHEPES(pH7.5)、0.003％Brij-35、0.004％Tween20、0.5mMDTT、10mMMgCl2、3.75μMsubstrate-FL-peptide30(PerkinElmer产品编号760430)、750μMATP)4μL，
(4)于室温下使之反应30分钟(检测时的被验化合物终浓度为10nM)。
(5)加入15μL/well的20mMEDTA溶液使反应停止后，用LabChipEZReader(PerkinElmer)测定通过FGFR4的激酶反应而生成的磷酸化底物肽量。
将未添加被验化合物(仅加入DMSO)的well的测定值设为0％抑制，将未添加FGFR4酶的well的测定值设为100％抑制，算出各化合物在10nM下的FGFR4酶抑制率。即，FGFR4酶抑制率通过<FGFR4酶抑制率(％)>＝[1-{<添加被验化合物的well的测定值>-<未添加FGFR4酶的well的测定值>}/{<未添加被验化合物(仅添加DMSO)的well的测定值>-<未添加FGFR4酶的well的测定值>}]×100算出。其结果示于表1。
[表1]
各被验化合物(10nM)的FGFR4激酶活性抑制率
被验化合物 抑制率(％)
化合物A 78
化合物B 65
化合物C 71
化合物D 82
化合物E 31
由以上结果可以确认，作为本发明的医药组合物的有效成分的化合物A、化合物B、化合物C、化合物D和化合物E抑制了FGFR4的激酶活性。
试验例2FGFR19基因扩增阳性肝癌细胞(HuH-7)的增殖检测
HuH-7细胞为报告了FGF19基因扩增的肝实质细胞癌细胞株(Cancercell.2011,19(3):347-58)。
将HuH-7细胞(购自ヒューマンサイエンス研究資源バンク，JCRB0403)以500细胞/90μL/well逐一接种到96孔聚苯乙烯制平底板上，第二天添加被验化合物溶液(10μL)(被验化合物溶液的最终浓度为37nM，DMSO的最终浓度为0.1％)。添加被验化合物溶液五天后，使用CellTiter-GloLuminescentCellViabilityAssay(Promega)通过ARVO×3(PerkinElmer)测定HuH-7细胞的细胞数。将未添加被验化合物(仅加入DMSO)的well的测定值设为0％抑制，将未接种细胞(仅培养基)的well的测定值设为100％抑制，算出各被验化合物在37nM下的增殖抑制率。即，通过<増殖抑制率(％)>＝[1-{<添加被验化合物的well的测定值>-<未接种细胞(仅培养基)的well的测定值>}/{<未添加被验化合物(仅添加DMSO)的well的测定值>-<未接种细胞(仅培养基)的well的测定值>}]×100算出。将其结果示于表2。
[表2]
各被验化合物(37nM)的HuH-7细胞增殖抑制率
被验化合物 抑制率(％)
化合物A 53
化合物B 47
化合物C 55
化合物D 65
化合物E 11
从以上结果可以确认，作为本发明的医药组合物的有效成分的化合物A、化合物B、化合物C、化合物D及化合物E抑制了FGF19基因扩增的肝癌细胞的增殖。
试验例3FGF19基因扩增阳性肝癌细胞(HuH-7)皮下移植小鼠模型抗肿瘤试验
向裸鼠(CAnN.Cg-Foxn1nu/CrlCrlj(nu/nu)：日本チャールスリバー，雄性，4-5周龄)右腹侧皮下移植3×106cells/0.1mL(PBS和Matrigel以1:1悬浮的溶液)的HuH-7细胞。从移植开始到约3周后，按照肿瘤体积和体重实施分组。各被验化合物给予组由4或5只小鼠构成，各组的平均肿瘤体积为147-180mm3。将被验化合物使用0.5％甲基纤维素水溶液制成悬浊液，每日一次连续经口给药。关于被验化合物的给予量，化合物C设为0.3mg/kg/day，化合物A、化合物B、化合物D及化合物E设为1mg/kg/day，在给药开始日(第0天)和最终测定日(化合物E为第9天，化合物A、化合物C及化合物D为第10天，化合物B为第13天)测定肿瘤体积。关于肿瘤体积，用游标卡尺测定短径、长径，以(肿瘤体积mm3)＝(短径mm×短径mm×长径mm)/2算出。另外，将未添加被验化合物的组(即仅给予0.5％甲基纤维素水溶液)作为对照组，将对照组的最终测定日设为各化合物的最终测定日的同日(关于针对化合物E的对照组为第9天，关于针对化合物A、化合物C及化合物D的对照组为第10天，关于针对化合物B的对照组为第13天)。各被验化合物的肿瘤增殖抑制率通过<肿瘤増殖抑制率(％)>＝<1-(被验化合物给予组肿瘤体积增加量/对照组肿瘤体积增加量)>×100算出。肿瘤体积增加量以(肿瘤体积增加量)＝(各组的最终测定日的肿瘤体积)-(各组第0天的肿瘤体积)算出。其结果在表3中示出。
[表3]
HuH-7细胞皮下移植小鼠模型中的肿瘤增殖抑制率
被验化合物 肿瘤增殖抑制率(％)
化合物A 80
化合物B 80
化合物C 56
化合物D 67
化合物E 44
从以上结果可以确认，作为本发明的医药组合物的有效成分的化合物A、化合物B、化合物C、化合物D及化合物E抑制了皮下移植有FGF19基因扩增阳性肝癌细胞的动物模型中肝癌的生长。
试验例1至3的结果示出，化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化合物E、或其可药用盐抑制了FGFR4的激酶活性，对于与FGFR4或FGF19相关的各种癌(尤其是肝癌，作为一个方式FGF19基因扩增阳性肝癌)的增殖抑制是有用的。
工业实用性
作为本发明的医药组合物的有效成分的化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化合物E、或其可药用盐具有FGFR4抑制作用，可用作与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物、作为另一方式与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物、作为又另一方式FGF19基因扩增阳性肝癌治疗用医药组合物的有效成分。

Claims (8)

1.一种与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物，其包含5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-{3-甲氧基-4-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基]苯基}嘧啶-2-胺、2-[4-({5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]嘧啶-2-基}氨基)-1H-吡唑-1-基]乙醇、(2R)-3-[4-({5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]嘧啶-2-基}氨基)-1H-吡唑-1-基]丙烷-1,2-二醇、5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]嘧啶-2-胺或5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-{1-甲基-5-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]-1H-吡唑-3-基}嘧啶-2-胺或其可药用盐、以及赋形剂。
2.根据权利要求1所述的医药组合物，其中与FGFR4相关的癌为与FGF19相关的癌。
3.根据权利要求1所述的医药组合物，其中与FGFR4相关的癌为FGF19基因扩增阳性肝癌。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的医药组合物，其包含5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-{3-甲氧基-4-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基]苯基}嘧啶-2-胺或其可药用盐、以及赋形剂。
5.根据权利要求1至3中任一项所述的医药组合物，其包含2-[4-({5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]嘧啶-2-基}氨基)-1H-吡唑-1-基]乙醇或其可药用盐、以及赋形剂。
6.根据权利要求1至3中任一项所述的医药组合物，其包含(2R)-3-[4-({5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]嘧啶-2-基}氨基)-1H-吡唑-1-基]丙烷-1,2-二醇或其可药用盐、以及赋形剂。
7.根据权利要求1至3中任一项所述的医药组合物，其包含5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]嘧啶-2-胺或其可药用盐、以及赋形剂。
8.根据权利要求1至3中任一项所述的医药组合物，其包含5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-{1-甲基-5-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]-1H-吡唑-3-基}嘧啶-2-胺或其可药用盐、以及赋形剂。
CN201480047119.2A 2013-08-28 2014-08-27 以嘧啶化合物为有效成分的医药组合物 Pending CN105492009A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2013-176355 2013-08-28
JP2013176355 2013-08-28
PCT/JP2014/072349 WO2015030021A1 (ja) 2013-08-28 2014-08-27 ピリミジン化合物を有効成分とする医薬組成物

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN105492009A true CN105492009A (zh) 2016-04-13

Family

ID=52586573

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201480047119.2A Pending CN105492009A (zh) 2013-08-28 2014-08-27 以嘧啶化合物为有效成分的医药组合物

Country Status (16)

Country Link
US (1) US20160199371A1 (zh)
EP (1) EP3040072A4 (zh)
JP (1) JPWO2015030021A1 (zh)
KR (1) KR20160040719A (zh)
CN (1) CN105492009A (zh)
AR (1) AR097455A1 (zh)
AU (1) AU2014312919A1 (zh)
CA (1) CA2922352A1 (zh)
HK (1) HK1219432A1 (zh)
IL (1) IL244206A0 (zh)
MX (1) MX2016002589A (zh)
PH (1) PH12016500372A1 (zh)
RU (1) RU2016106774A (zh)
SG (1) SG11201601461RA (zh)
TW (1) TW201605452A (zh)
WO (1) WO2015030021A1 (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107541495A (zh) * 2016-06-28 2018-01-05 上海市东方医院 一种fgf19过表达的人肝癌细胞系及其应用

Families Citing this family (28)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8754114B2 (en) 2010-12-22 2014-06-17 Incyte Corporation Substituted imidazopyridazines and benzimidazoles as inhibitors of FGFR3
ME03300B (me) 2012-06-13 2019-07-20 Incyte Holdings Corp Supsтituisana triciklična jedinjenja као inhibiтori fgfr
WO2014026125A1 (en) 2012-08-10 2014-02-13 Incyte Corporation Pyrazine derivatives as fgfr inhibitors
US9266892B2 (en) 2012-12-19 2016-02-23 Incyte Holdings Corporation Fused pyrazoles as FGFR inhibitors
DK2986610T5 (en) 2013-04-19 2018-12-10 Incyte Holdings Corp BICYCLIC HETEROCYCLES AS FGFR INHIBITORS
TWI597268B (zh) 2013-10-18 2017-09-01 衛材Ｒ＆Ｄ企管股份有限公司 纖維母細胞受體４（ｆｇｆｒ４）抑制劑
SG11201602183QA (en) 2013-10-25 2016-05-30 Novartis Ag Ring-fused bicyclic pyridyl derivatives as fgfr4 inhibitors
EP3200786B1 (en) 2014-10-03 2019-08-28 Novartis AG Use of ring-fused bicyclic pyridyl derivatives as fgfr4 inhibitors
US10851105B2 (en) 2014-10-22 2020-12-01 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as FGFR4 inhibitors
MA41551A (fr) 2015-02-20 2017-12-26 Incyte Corp Hétérocycles bicycliques utilisés en tant qu'inhibiteurs de fgfr4
WO2016134294A1 (en) 2015-02-20 2016-08-25 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as fgfr4 inhibitors
EA038045B1 (ru) 2015-02-20 2021-06-28 Инсайт Корпорейшн Бициклические гетероциклы в качестве ингибиторов fgfr
US9802917B2 (en) 2015-03-25 2017-10-31 Novartis Ag Particles of N-(5-cyano-4-((2-methoxyethyl)amino)pyridin-2-yl)-7-formyl-6-((4-methyl-2-oxopiperazin-1-yl)methyl)-3,4-dihydro-1,8-naphthyridine-1(2H)-carboxamide
ES2864712T3 (es) 2015-04-14 2021-10-14 Eisai R&D Man Co Ltd Compuesto inhibidor de FGFR4 cristalino y usos del mismo
WO2017196854A1 (en) 2016-05-10 2017-11-16 Eisai R&D Management Co., Ltd. Drug combinations for reducing cell viability and/or cell proliferation
WO2018055503A1 (en) 2016-09-20 2018-03-29 Novartis Ag Combination comprising a pd-1 antagonist and an fgfr4 inhibitor
RU2742033C2 (ru) 2016-11-02 2021-02-01 Новартис Аг Комбинации ингибиторов fgfr4 и секвестрантов желчных кислот
AR111960A1 (es) 2017-05-26 2019-09-04 Incyte Corp Formas cristalinas de un inhibidor de fgfr y procesos para su preparación
US11466004B2 (en) 2018-05-04 2022-10-11 Incyte Corporation Solid forms of an FGFR inhibitor and processes for preparing the same
EA202092649A1 (ru) 2018-05-04 2021-06-21 Инсайт Корпорейшн Соли ингибитора fgfr
US11628162B2 (en) 2019-03-08 2023-04-18 Incyte Corporation Methods of treating cancer with an FGFR inhibitor
US11591329B2 (en) 2019-07-09 2023-02-28 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as FGFR inhibitors
IL291901A (en) 2019-10-14 2022-06-01 Incyte Corp Bicyclyl heterocycles as fgr suppressors
WO2021076728A1 (en) 2019-10-16 2021-04-22 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as fgfr inhibitors
KR20220131900A (ko) 2019-12-04 2022-09-29 인사이트 코포레이션 Fgfr 억제제의 유도체
WO2021113479A1 (en) 2019-12-04 2021-06-10 Incyte Corporation Tricyclic heterocycles as fgfr inhibitors
US20230172867A1 (en) * 2020-05-15 2023-06-08 Eisai R&D Management Co., Ltd. A method for treating cancer with an oral dosage form of an fgfr4 inhibitor
AR126102A1 (es) 2021-06-09 2023-09-13 Incyte Corp Heterociclos tricíclicos como inhibidores de fgfr

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104144915A (zh) * 2012-02-28 2014-11-12 安斯泰来制药有限公司 含氮芳香族杂环化合物

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20060247250A1 (en) 2005-03-16 2006-11-02 Targegen, Inc. Pyrimidine inhibitors of kinases
US20070149508A1 (en) 2005-11-02 2007-06-28 Targegen, Inc. Six membered heteroaromatic inhibitors targeting resistant kinase mutations
WO2008008234A1 (en) 2006-07-07 2008-01-17 Targegen, Inc. 2-amino-5-substituted pyrimidine inhibitors
MX365214B (es) * 2012-03-08 2019-05-27 Astellas Pharma Inc Nuevo producto de fusion de fgfr3.

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104144915A (zh) * 2012-02-28 2014-11-12 安斯泰来制药有限公司 含氮芳香族杂环化合物

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DOROTHY M. FRENCH ET AL: "Targeting FGFR4 Inhibits Hepatocellular Carcinoma in Preclinical Mouse Models", 《PLOS ONE》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107541495A (zh) * 2016-06-28 2018-01-05 上海市东方医院 一种fgf19过表达的人肝癌细胞系及其应用
CN107541495B (zh) * 2016-06-28 2022-04-26 上海市东方医院 一种fgf19过表达的人肝癌细胞系及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
RU2016106774A (ru) 2017-10-03
US20160199371A1 (en) 2016-07-14
AR097455A1 (es) 2016-03-16
CA2922352A1 (en) 2015-03-05
EP3040072A4 (en) 2017-03-29
AU2014312919A1 (en) 2016-03-10
KR20160040719A (ko) 2016-04-14
HK1219432A1 (zh) 2017-04-07
SG11201601461RA (en) 2016-03-30
EP3040072A1 (en) 2016-07-06
TW201605452A (zh) 2016-02-16
PH12016500372A1 (en) 2016-05-02
WO2015030021A1 (ja) 2015-03-05
JPWO2015030021A1 (ja) 2017-03-02
IL244206A0 (en) 2016-04-21
MX2016002589A (es) 2016-06-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105492009A (zh) 以嘧啶化合物为有效成分的医药组合物
JP6169185B2 (ja) キナーゼ阻害剤としての新規ベンゾイミダゾール誘導体
US20210401859A1 (en) Methods of treating cancer in biomarker-identified patients with non-covalent inhibitors of cyclin-dependent kinase 7 (cdk7)
JP2013510824A (ja) セリン／トレオニンキナーゼを調節または制御するための化合物、その調製のための方法、医薬組成物、化合物の使用、方法ならびにセリン／トレオニンキナーゼ調節剤
EP2121634A1 (en) Pyrimidine-2,4-diamine derivatives and their use as jak2 kinase inhibitors
CN105008355A (zh) 作为蛋白激酶抑制剂的氮杂吲哚衍生物
EP2581371B1 (en) Pyrrolyl substituted dihydroindol-2-one derivatives, preparation methods and uses thereof
EA018118B1 (ru) СОЕДИНЕНИЯ, ПРИГОДНЫЕ ДЛЯ ИНГИБИРОВАНИЯ Chk1
CN101233129A (zh) 取代的联芳杂环衍生物作为蛋白激酶抑制剂治疗癌症及其他疾病
WO2012089106A1 (zh) 作为蛋白激酶抑制剂的芳炔类衍生物及其医疗用途
JP7036939B2 (ja) 癌細胞の成長抑制効果を示す新規なピリミジン誘導体及びそれを含む薬剤学的組成物
JP2022536965A (ja) スプライシングを調節するための方法
US9642851B2 (en) Indolinone derivative as tyrosine kinase inhibitor
WO2021036814A1 (zh) 吡唑衍生物及其用途
KR20230116005A (ko) Cdc7 억제제로 사용되는 염 형태 및 이의 결정 형태
AU2020374269A1 (en) Novel heterocyclic-substituted pyrimidine derivative exhibiting cancer cell growth inhibitory effect, and pharmaceutical composition containing same
TWI725041B (zh) 用於治療神經母細胞瘤及/或軟組織肉瘤之chk1/2抑制劑
US20240034742A1 (en) Dosing regimens for cyclin-dependent kinase 7 (cdk7) inhibitors
RU2805207C1 (ru) Производные пиразола и их применение
CN111138426B (zh) 吲唑类激酶抑制剂及其用途
WO2011158931A1 (ja) インダゾール誘導体の有用な塩

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: DE

Ref document number: 1219432

Country of ref document: HK

WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20160413

REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: WD

Ref document number: 1219432

Country of ref document: HK