CN105285326A - 一种利用柑橘皮生产饲用微生态制剂的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种利用柑橘皮生产饲用微生态制剂的制备方法及其产品。该制备方法是将德氏乳杆菌(保藏号CCTCC？M？207096)、枯草芽胞杆菌(保藏号CCTCC？M？207097)、奇异酵母(保藏号CCTCC？M？207098)分别接种至相应的液体培养基中，37℃恒温培养18～24小时，再将制得的菌液按照一定比例混合接种到灭菌的以柑橘皮为主要原料的固态发酵培养基中，30～40℃下发酵36～48小时，50～55℃低温干燥，粉碎，即得。本发明的生产工艺具有投资少、能耗低、无废液污染等优点，同时为柑橘皮的利用开辟了新途径。

Description

一种利用柑橘皮生产饲用微生态制剂的制备方法

技术领域

本发明涉及饲料工业和畜牧养殖业领域，具体涉及一种利用柑橘皮生产饲用微生态制剂的制备方法。

背景技术

自从20世纪中叶发现抗生素以亚治疗剂量添加于饲料中具有促生长效果以来，抗生素已被广泛应用于畜牧生产中，给畜牧业带来了一定的经济效益。目前，不论是畜禽疾病的预防还是畜禽疾病的治疗，仍基本使用抗生素。但长期大量使用抗生素，使得病原微生物产生耐药性、畜产品中药物残留和畜禽机体自身免疫力下降等问题日益突出，导致畜禽疾病的发生日趋频繁、畜禽死亡率和淘汰率逐年上升，给畜牧养殖业带来了巨大的经济损失。同时抗生素等药物通过食物链的积累也对人类健康具有潜在的危害性。因此，世界各国对抗生素的使用采取禁用或限用等措施，同时也促使人们寻找抗生素的替代品作为饲料添加剂。

微生态制剂被认为是抗生素的有效替代品。微生态制剂是使用有益微生物经发酵等特殊工艺制成的含活菌和(或)死菌、包括其组分和产物的活菌制品，具有无毒、无副作用、无残留等优点，并能维持肠道内正常微生物区系平衡，改善粘膜表面处微生物或酶的平衡，改善机体代谢和增强机体免疫等作用。目前，市售的液态或固态的微生态制剂还存在一定的问题，如市售的液态微生态制剂，其生产设备要求高、能耗大，排放的废水可污染环境；市售的固态微生态制剂的主要原料是豆粕、麦麸等饲用原料，若用来生产微生态制剂将会挤占紧缺的饲料原料，难以降低养殖成本。因此，在建设环境友好型、资源节约型社会的背景下，发展生态农业成为了一种趋势，特别是在饲料资源短缺和行业竞争日趋激烈的压力下，将废渣制成环保性、低成本的饲用微生态制剂具有重要意义。

目前，随着柑橘加工业的不断发展，存在大量的柑橘皮，仅湖南省年产柑橘皮约20万吨。柑橘皮具有营养价值和药用价值，含有丰富的碳水化合物、脂肪、维生素、氨基酸和矿物质等营养成分，但未经干燥的柑橘皮含水量很高，容易腐烂变质，不适合于长途运输和长期保存，弃之易造成资源的浪费和对环境的污染。目前，国内大部分的柑橘皮被填埋丢弃浪费掉，只有一小部分被烘干做为中草药或青贮成动物饲料，制成动物饲料也因其苦味重、适口性差、蛋白质含量不高、动物吸收不好而难以产业化，所以对柑橘皮的利用、研究、创新势在必行。

目前国内外对于柑橘皮在畜牧上的应用及研究：一个主要的途径就是柑橘皮加工成饲料。每年巴西、美国等柑橘加工大国把40％以上的柑橘皮干燥后制成颗粒饲料；据研究用1％～2％的柑橘皮粉加入鸭饲料，2％～3％加入鸡饲料，5％～10％加入猪饲料及用10％～20％加入牛饲料中喂养，均取得良好的效果。例如柑橘皮掺入猪饲料中喂猪，日增重比一般的猪多50～100克。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种可以高效利用柑橘皮生产饲用微生态制剂的制备方法及应用有益微生物多菌固态发酵柑橘皮生产的饲用微生态制剂。该饲用微生态制剂可以提高畜禽的采食量，提高饲料转化效率，促进生长；调节免疫功能，增强抗病能力；替代饲用抗生素，降低腹泻率；降低粪中氮磷排放量，减少***物对环境的污染，降低饲料成本及养殖成本，是一种畜禽用高效环保型饲料添加剂。

为达到上述目的，本发明提供了一种利用柑橘皮生产饲用微生态制剂的制备方法，其包括下列步骤：

1)制备种子液：将保藏号为CCTCCM207096的德氏乳杆菌、保藏号为CCTCCM207097的枯草芽胞杆菌、保藏号为CCTCCM207098的奇异酵母分别接种至MRS液体培养基、肉汤液体培养基、马铃薯葡萄糖液体培养基中，30℃～37℃下培养18～24小时；

2)制备发酵用固体培养基：按重量比将风干后柑橘皮100份、啤酒糟10～15份、麦麸15-20份、葡萄糖3～5份、豆粕8～10份、尿素2～3份、硫酸铵2～3份、磷酸二氢钾0.2～0.5份、硫酸镁0.3～0.4份，分别粉碎，过40目筛后混合均匀，加入蒸馏水100～120份，充分拌匀后121℃下高温灭菌15-30分钟，冷却至室温备用即可；

3)固态发酵：将步骤1)制备的德氏乳杆菌、枯草芽胞杆菌、奇异酵母的种子液按体积比1～2：1～2：1～2混合，将混合菌液按5-10％V/W比例加入到步骤2)制备的固体培养基中，30～40℃下发酵36～48小时，制得发酵产物；

4)将发酵产物进行50～55℃低温干燥，粉碎，即得饲用微生态制剂。

利用上述制备方法制得的饲用微生态制剂呈金黄色粉状，含水量≤10％，其有益活菌总数分别为：芽胞杆菌≥1×10⁸CFU/g，乳酸杆菌≥1×10⁸CFU/g，酵母菌≥2×10⁸CFU/g。

本发明将柑橘皮经筛选出的有益菌发酵制成饲用微生态制剂，直接添加入牲畜饲料中，能发挥柑橘皮和有益菌的双重效用，增加动物肠道中有益微生物的数量，提供某些必须的矿物元素，提高饲料的转化率，防止疾病发生，并能增加经济效益。利用微生物处理柑橘皮是发展生态农业，合理使用废弃资源、有效保护环境的可持续发展道路。迄今为止还未见多菌固态发酵柑橘皮生产饲用微生态制剂方面的报道。

本发明的优点在于：

1、本发明开辟出了柑橘皮科学合理的再生利用途径，从而解决了其对环境的污染问题，为柑橘加工业实现零排放提供可能，不但为企业节约了治污费用还可创造经济效益，符合可持续发展战略。

2、本发明采用多菌固态发酵工艺生产饲用微生态制剂，加工方便，能耗低，产投比高，整个加工过程既易控制又无废弃物排放之忧，可实现清洁生产。

3、本发明75％以上的原料是柑橘皮和其他渣类物质，其来源丰富、价格低廉、生产成本低，可提高企业的竞争力。

具体实施方式

实施例1：

1)将德氏乳杆菌(保藏号CCTCCM207096)、枯草芽胞杆菌(保藏号CCTCCM207097)、奇异酵母(保藏号CCTCCM207098)分别接种至100mlMRS液体培养基、100ml肉汤液体培养基、100ml马铃薯葡萄糖液体培养基中，37℃恒温下培养24小时制得种子液；

2)按重量比将风干后柑橘皮100份、啤酒糟10份、麦麸15份、葡萄糖3份、豆粕8份、尿素2份、硫酸铵2份、磷酸二氢钾0.2份、硫酸镁0.3份，分别粉碎，过40目筛后混合均匀，加入蒸馏水100份，充分拌匀后121℃下高温灭菌15分钟，冷却至室温备用,即得固体培养基；

3)将上述制备的三种种子液按体积比1：1：1混合，将所得混合菌液按10％(V/W)比例加入到步骤2)所得的固体培养基中，32℃下发酵36小时，制得发酵产物；

4)将发酵产物进行50℃低温干燥，粉碎，即得饲用微生态制剂。

本工艺所得到的微生态制剂呈金黄色粉状，含水量≤10％，其有益活菌总数分别为：德氏乳杆菌1×10⁸CFU/g～1×10⁹CFU/g，枯草芽胞杆菌1×10⁸CFU/g～4×10⁹CFU/g，奇异酵母2×10⁸CFU/g～1×10⁹CFU/g。

实施例2：

1)将德氏乳杆菌(保藏号CCTCCM207096)、枯草芽胞杆菌(保藏号CCTCCM207097)、奇异酵母(保藏号CCTCCM207098)分别接种至100mlMRS液体培养基、100ml肉汤液体培养基、100ml马铃薯葡萄糖液体培养基中，30℃恒温下培养21小时制得种子液；

2)按重量比将风干后柑橘皮100份、啤酒糟12份、麦麸17份、葡萄糖4份、豆粕9份、尿素2.5份、硫酸铵2.5份、磷酸二氢钾0.35份、硫酸镁0.35份，分别粉碎，过40目筛后混合均匀，加入蒸馏水110份，充分拌匀后121℃下高温灭菌30分钟，冷却至室温备用,即得固体培养基；

3)将上述制备的三种种子液按体积比2：2：2混合，将混合菌液按7％(V/W)比例加入到已灭菌的固体培养基中，35℃下发酵42小时，制得发酵产物；

4)将发酵产物进行52℃低温干燥，粉碎，即得饲用微生态制剂。

本工艺所得到的微生态制剂呈金黄色粉状，含水量≤10％，其有益活菌总数分别为：乳酸杆菌1×10⁸CFU/g～1×10⁹CFU/g，芽胞杆菌1×10⁸CFU/g～4×10⁹CFU/g，酵母菌2×10⁸CFU/g～1×10⁹CFU/g。

实施例3：

1)将德氏乳杆菌(保藏号CCTCCM207096)、枯草芽胞杆菌(保藏号CCTCCM207097)、奇异酵母(保藏号CCTCCM207098)分别接种至100mlMRS液体培养基、100ml肉汤液体培养基、100ml马铃薯葡萄糖液体培养基中，34℃恒温下培养18小时制得种子液；

2)按重量比将风干后柑橘皮100份、啤酒糟15份、麦麸20份、葡萄糖5份、豆粕10份、尿素3份、硫酸铵3份、磷酸二氢钾0.5份、硫酸镁0.4份，分别粉碎，过40目筛后混合均匀，加入蒸馏水120份，充分拌匀后121℃下高温灭菌20分钟，冷却后至室温备用,即得固体培养基；

3)将上述制备的三种种子液按体积比2：1：2混合，将混合菌液按5％(V/W)比例加入到已灭菌的固体培养基中，40℃下发酵48小时，制得发酵产物；

4)将发酵产物进行55℃低温干燥，粉碎，即得饲用微生态制剂。

本工艺所得到的微生态制剂呈金黄色粉状，含水量≤10％，其有益活菌总数分别为：乳酸杆菌1×10⁸CFU/g～1×10⁹CFU/g，芽胞杆菌1×10⁸CFU/g～4×10⁹CFU/g，酵母菌2×10⁸CFU/g～1×10⁹CFU/g。

下面通过试验说明本发明制备的微生态制剂对畜禽生长的影响：

试验1：

选用健康、日龄相近、初始体重28kg左右的生长猪(杜×长×大)48头，随机分成3个处理，每组4个重复，每重复4头猪，公母各半。对照组只饲喂基础日粮，抗生素组饲喂基础日粮+75mg/kg金霉素，试验组饲喂基础日粮+2000mg/kg的微生态制剂。预饲期7天，试验期28天。

试验数据如下(表1-4)：

表1微生态制剂对生长猪生长性能的影响

表2微生态制剂对生长猪养分消化率的影响

表3微生态制剂对生长猪血液指标的影响

表4微生态制剂对生长猪N、P排放量的影响

从试验结果来看，添加柑橘皮经发酵制成的微生态制剂能提高生长猪日采食量，提高日增重及降低料肉比，粗蛋白、脂肪等营养物质的表观消化率及能量利用率提高，替代抗生素在饲料中应用。另外，还可提高机体免疫能力和减少N、P排放量。

试验2：

本试验选用健康、日龄相近、初始体重相近的青脚麻鸡，选用120只1日龄肉鸡，随机分成4组，每组三个重复，每个重复10只鸡。采用垫料平养。空白组饲喂基础日粮，对照组饲喂基础日粮+抗生素，试验组1饲喂基础日粮+0.1％微生态制剂，试验组2基础日粮+0.2％微生态制剂。试验期为28天。

试验数据如下(表5)：

表5微生态制剂对鸡生产性能的影响

从试验结果来看，添加柑橘皮发酵制成的微生态制剂能提高雏鸡提高日增重及降低料肉比，替代抗生素在饲料中的应用。

Claims (2)

1.一种利用柑橘皮生产饲用微生态制剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1)制备种子液：将保藏号为CCTCCM207096的德氏乳杆菌、保藏号为CCTCCM207097的枯草芽胞杆菌、保藏号为CCTCCM207098的奇异酵母分别接种至MRS液体培养基、肉汤液体培养基、马铃薯葡萄糖液体培养基中，30℃～37℃下培养18～24小时；

2)制备发酵用固体培养基：按重量比将风干后柑橘皮100份、啤酒糟10～15份、麦麸15-20份、葡萄糖3～5份、豆粕8～10份、尿素2～3份、硫酸铵2～3份、磷酸二氢钾0.2～0.5份、硫酸镁0.3～0.4份，分别粉碎，过40目筛后混合均匀，加入蒸馏水100～120份，充分拌匀后121℃下高温灭菌15-30分钟，冷却至室温备用即可；

3)固态发酵：将步骤1)制备的德氏乳杆菌、枯草芽胞杆菌、奇异酵母的种子液按体积比1～2：1～2：1～2混合，将混合菌液按5-10％V/W比例加入到步骤2)制备的固体培养基中，30～40℃下发酵36～48小时，制得发酵产物；

4)将发酵产物进行50～55℃低温干燥，粉碎，即得饲用微生态制剂。

2.一种利用权利要求1所述制备方法制得的饲用微生态制剂，其特征在于：该饲用微生态制剂呈金黄色粉状，含水量≤10％，其有益活菌总数分别为：芽胞杆菌≥1×10⁸CFU/g，乳酸杆菌≥1×10⁸CFU/g，酵母菌≥2×10⁸CFU/g。