CN104745494A

CN104745494A - 一种用于替代抗生素及改善肠道微生态环境的猪用凝结芽孢杆菌制剂及其制备方法

Info

Publication number: CN104745494A
Application number: CN201310744727.6A
Authority: CN
Inventors: 何河; 罗国升; 戴富全; 彭地纬; 张煌; 易能文; 常翠维; 王玲; 刘亚力
Original assignee: HUNAN PERFECT BIO-TECHNOLOGY Co Ltd
Current assignee: HUNAN PERFECT BIO-TECHNOLOGY Co Ltd
Priority date: 2013-12-31
Filing date: 2013-12-31
Publication date: 2015-07-01

Abstract

本发明属于微生物应用技术领域，具体涉及一种用于替代抗生素及改善肠道微生态的猪用凝结芽孢杆菌制剂及其制备方法。本发明主要特征在于凝结芽孢杆菌PFK1102A(BacilluscoagulansPFK1102A)，已于2012年4月24日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号：CGMCCNO.6047。通过对凝结芽孢杆菌PFK1102A、肠道供能物质和酶制剂进行综合配伍组合使用，可达到促进动物肠道发育、提高动物免疫力、替代或减少抗生素使用、改善肠道微生态环境的效果，以及满足肠道营养生理和营养需求动力学变化的作用。

Description

一种用于替代抗生素及改善肠道微生态环境的猪用凝结芽孢杆菌制剂及其制备方法

技术领域

本发明属于微生物应用技术领域，具体涉及一种用于替代抗生素及改善肠道微生态环境的猪用凝结芽孢杆菌制剂及其制备方法。

背景技术

近半个世纪以来，抗生素作为抗菌助长剂添加到饲料中得到了广泛的应用，抗生素对控制畜禽疾病的发生，促进畜禽生长发育，提高饲养效益确实起到了积极的作用。但是随着抗生素的广泛使用，人们逐渐认识到它存在着一些弊端，主要有如下问题：

抗生素的使用破坏了动物体内原有的微生物平衡，动物体内存在着有害的病原微生物，也存在着一些有益的微生物，抗生素在动物体内对病原微生物杀灭和抑制的同时，也杀灭抑制了有益的微生物，扰乱了微生物菌群之间相互制约的格局，破坏了微生物的生态平衡，从而导致消化功能紊乱，引起了各种消化道疾病，如慢性腹泻等；长期使用抗生素会使病原微生物产生抗药性，这些有抗药性的病原微生物大量繁殖后，使动物患病机会增多，并给疾病的治疗带来了困难，甚至使抗生素失去作用，导致动物死亡率增高，造成养殖损失；抗生素代谢后在动物机体内有一段残留时间，若此时被人食用，则会影响人体免疫力和抗病力，长期服用会导致人体免疫功能紊乱，在疾病控制方面埋下巨大隐患等。

为此，许多国家相继推出了限制或禁止在饲料中添加抗生素的一系列强制措施；随着我国畜牧业的飞速发展，抗生素问题也逐步受到重视，我国也逐步出台了一些措施来限制饲料中添加抗生素的种类和添加量，因此“无抗”饲料将会成为未来畜牧业发展的大趋势，抗生素替代品的研究与开发已成为畜牧行业发展的热点。

现有研究表明，添加有益的外源性微生物能通过增加消化道内的有益菌，抑制有害菌，调整或维持肠道菌群平衡，达到预防疾病，促进生长，提高饲料利用率的作用。因此外源微生物作为抗生素替代品已成为研究热门。但是单一使用外源微生物作为抗生素替代品，不能达到维持动物肠道健康的目的。

本发明针对上述情况，研制出一种既能替代或减少抗生素使用，又能满足动物肠道发育、提高免疫功能、营养生理及营养需求动力学变化的猪用凝结芽孢杆菌制剂。

发明内容

本发明目的在于提供一种替代或减少抗生素，并能够改善肠道菌群平衡，增强动物免疫机能，提高动物肠道健康及养分吸收效率，减少***物中氮、磷和有害气体含量的猪用凝结芽孢杆菌制剂。

本发明的技术方案是：

一种替代抗生素及改善肠道微生态环境的凝结芽孢杆菌制剂，其组成成分及重量百分比为：

凝结芽孢杆菌PFK1102A 60～90%；

谷氨酰氨0.5～5%；

谷氨酸0.5～5%；

天冬氨酸1～5%；

甘露聚糖酶0.5～5%；

蛋白酶0.5～5%；

耐高温a-淀粉酶0.3～5%；

酸性蛋白酶0.3～5%；

β-葡聚糖酶0.3～3%；

纤维素酶0.3～3%；

植酸酶0.2～3%；

余量为药学上可接受的辅料。

上述凝结芽孢杆菌制剂中所述组成成分的重量百分比优选为：凝结芽孢杆菌PFK1102A80%、谷氨酰氨3%、谷氨酸3%、天冬氨酸2.5%、甘露聚糖酶2%、蛋白酶2%、耐高温a-淀粉酶1.5%、酸性蛋白酶1.5%、β-葡聚糖酶1.5%、纤维素酶1.5%、植酸酶1%，余量为药学上可接受的辅料。

所述的辅料为沸石粉、可溶性淀粉、蔗糖或乳糖等辅料中至少一种。

按照上述比例称取凝结芽孢杆菌PFK1102A、谷氨酰氨、谷氨酸、天冬氨酸、甘露聚糖酶、蛋白酶、耐高温a-淀粉酶、酸性蛋白酶、β-葡聚糖酶、纤维素酶、植酸酶以及辅料，混合均匀，即制得本发明凝结芽孢杆菌制剂。

上述凝结芽孢杆菌制剂中所述的谷氨酰氨、谷氨酸、天冬氨酸以及辅料，均可自市场上购买。如可自美国国际原料公司购买。　

上述凝结芽孢杆菌制剂中所述的酶制剂和植酸酶，可自市场上购买。如可自诺维信（中国）投资有限公司或自广东溢多利生物科技股份有限公司购买。

上述凝结芽孢杆菌制剂的使用方法，按照0.03～0.15%的重量百分比将上述微生态制剂加入到猪饲料中，混合均匀即可。

其中，凝结芽孢杆菌PFK1102A它既具备乳酸杆菌耐酸、厌氧代谢、产乳酸的一切优良特征，又具备芽孢杆菌耐高温、耐酸等特征，具有降低动物应激反应、防病、保健、促进生长、改善养殖环境等功效；并在发酵过程中代谢产出L-乳酸，不产生对人体、养殖动物有害的物质，且具有无毒、无残留、无副作用等特点，可广泛应用于高产、优质、高效、生态、安全的畜禽养殖生态环境调控；同时凝结芽孢杆菌PFK1102A还是一种环境友好型微生物，不会对环境造成污染。

小肠的主要供能物质为谷氨酰胺、谷氨酸、天门冬氨酸。饲料日粮中谷氨酰胺、谷氨酸和天门冬氨酸90％为肠道所利用，其中50％-70％用于氧化供能，如果缺乏、进食不足或通过肠内营养水平不足均可导致仔猪小肠和黏膜重量降低、绒毛高度下降、蛋白质和DNA合成能力降低、细菌移位。

饲用酶制剂作为一种高效、环保、安全的微生态制剂，可以补充动物内源酶的不足，能消除和降低饲料中抗营养因子的不良作用，提高饲料利用率，促进生长。氮、磷是畜禽生长的主要营养元素，也是目前一方面资源紧缺，另一方面却利用不充分、过量***导致环境严重污染的两种元素。植酸酶不仅能水解饲料中的植酸及其盐类而提高蛋白质和磷、钙等矿物元素的利用率，而且能够改善饲料的潜在营养价值，从而达到节约饲料资源，降低饲料成本。

本发明通过凝结芽孢杆菌PFK1102A、肠道供能物质、酶制剂的综合配伍组合，达到替代或减少抗生素使用量、促进动物肠道发育、提高免疫功能、满足营养生理及营养需求动力学变化的作用；其中凝结芽孢杆菌PFK1102A能产乳酸，还能分泌大量的酶，能够提高酶的活性；同时，谷氨酰胺、谷氨酸和天门冬氨酸可满足肠道的持续供能，为微生态制剂在肠道的定植和产酸提供源源不断的动力，从而达到改善动物肠道健康，提高养分吸收效率，减少***物中氮、磷和有害气体含量的目的。

与现有技术相比，本发明具有如下优点：（1）本发明可替代或减少抗生素的使用量，有利于动物肠道微生物区系的建立和维持；（2）本发明可满足肠道的持续供能，为微生态制剂在肠道的定植和产酸提供源源不断的动力;（3）本发明生态、安全、无任何副作用。

具体实施方式　

以下基于实施例来对本发明作进一步的说明，但不对本发明构成任何限制。

实施例1 本发明凝结芽孢杆菌制剂的制备

按照如下比例取各组分：凝结芽孢杆菌PFK1102A80%、谷氨酰氨3%、谷氨酸3%、天冬氨酸2.5%、甘露聚糖酶2%、蛋白酶2%、耐高温a-淀粉酶1.5%、酸性蛋白酶1.5%、β-葡聚糖酶1.5%、纤维素酶1.5%、植酸酶1%，可溶性淀粉0.5%；将上述物料按照比例称取后再放入搅拌器中进行充分搅拌混合即可得本发明凝结芽孢杆菌制剂。

试验实施例1 本发明凝结芽孢杆菌制剂替代抗生素对断奶仔猪生长性能和肠道菌群的影响　

（1）饲料配方

对照组饲料：现行普通配合断奶仔猪料，其原料成分及重量百分比为：玉米 63.065%，大豆粕 26.00%，进口蒸气鱼粉3.00%，乳清粉 2.00%，大豆油2.00%，磷酸氢钙1.50%，石粉 1.00%，盐0.5%，矿物质预混料 0.15%，维生素预混料 0.04%，喹乙醇0.015%，吉他霉素0.01%，硫酸粘杆菌素0.02%，赖氨酸0.40%，苏氨酸0.20%，蛋氨酸0.10%。将上述物料按照比例称取后再放入搅拌器中进行充分搅拌混合即可。

试验组饲料：将实施例1的凝结芽孢杆菌制剂替代喹乙醇，其原料成分及重量百分比为：玉米 63.00%，大豆粕 26.00%，进口蒸气鱼粉3.00%，乳清粉 2.00%，大豆油2.00%，磷酸氢钙1.50%，石粉 1.00%，盐0.5%，矿物质预混料 0.15%，维生素预混料 0.04%，施例1的凝结芽孢杆菌制剂0.08%，吉他霉素0.01%，硫酸粘杆菌素0.02%，赖氨酸0.40%，苏氨酸0.20%，蛋氨酸0.10%。将上述物料按照比例称取后再放入搅拌器中进行充分搅拌混合即可。

（2）试验分组及方法：

试验分组：选用28日龄断奶的杜×长×大三元杂交仔猪80头，按体重随机分为2个处理（性别不限，P>0.05），每个处理5栏（每栏为一个重复），每栏8头。

饲养管理及疾病防治：各种饲养管理及疾病防治按《北京六马标准养猪模式》（中国农业出版社，2006.8）提供的方法进行。从3月喂至5月，试验期35天，试验开始（第1天）和结束（第35天）时分别对每头仔猪进行空腹称重，记录投料量、余料量和损耗量，根据平均日增重和平均日采食量计算料重比；试验期每天7:30-19:00观察仔猪的排粪情况，粪便较粘、不成形、较多水分者计为腹泻，腹泻率=腹泻头数/仔猪总头数×100%；在试验的第35d早上以重复为单位每栏抽取2头猪采血，离心后-20℃保存待测血清中葡萄糖、总蛋白、白蛋白、甘油三酯、血清尿素氮、谷草转氨酶和谷丙转氨酶含量；在试验的第35d早上以重复为单位收取仔猪排出的新鲜粪样，用无菌塑料袋封装，在无菌操作台中，准确称取粪样1g，放于盛有99 mL灭菌生理盐水的三角瓶中，充分振荡，取稀释液进行10倍的倍比稀释，吸取0.1 mL稀释液接种于选择性培养基上，对大肠杆菌、乳酸杆菌、双歧杆菌进行菌落计数。

（3）试验结果如下：（表1，表2，表3）

表1 本发明凝结芽孢杆菌制剂替代抗生素对断奶仔猪生长性能的影响

由表1可见，本发明凝结芽孢杆菌制剂可替代饲粮中部分抗生素，试验组试验猪平均末重对照组提高了0.13kg；试验组和对照组腹泻率持平，均为0.60%；试验组及对照组的存活率均为100%。

表2 本发明凝结芽孢杆菌制剂替代抗生素对断奶仔猪血清生化指标的影响

由表2可见，试验组与对照组血清中葡萄糖、总蛋白、白蛋白、甘油三酯、血清尿素氮、谷草转氨酶和谷丙转氨酶差异不显著（P>0.05），说明本发明凝结芽孢杆菌制剂可替代饲粮中部分抗生素。

表3 本发明凝结芽孢杆菌制剂替代抗生素对断奶仔猪肠道微生态的影响。

由表3可见，本发明凝结芽孢杆菌制剂替代饲粮中部分抗生素，试验组大肠杆菌数量有下降的趋势，乳酸杆菌和双歧杆菌数量有提高的趋势，更有利于肠道微生态的平衡和维持肠道健康。

Claims

1.一株猪用优良凝结芽孢杆菌，其特征在于：所述凝结芽孢杆菌PFK1102A是一株既具备乳酸杆菌耐酸、厌氧代谢、产乳酸的一切优良特征，又具备芽孢杆菌耐高温、耐酸、来胆碱、保存期长等特征，具有降低动物应激反应、防病、保健、促进生长、改善养殖环境等功效；该菌株已于2012年4月24日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号：CGMCC NO.6047。

2.一种凝结芽孢杆菌的应用，其特征在于：凝结芽孢杆菌PFK1102A、肠道供能物质、酶制剂的综合配伍组合。

3. 一种猪用凝结芽孢杆菌制剂的制备，其组成成分及重量百分比为：凝结芽孢杆菌PFK1102A60～90%；谷氨酰氨0.5～5%；谷氨酸0.5～5%；天冬氨酸1～5%；甘露聚糖酶0.5～5%；蛋白酶0.5～5%；耐高温a-淀粉酶0.3～5%；酸性蛋白酶0.3～5%；β-葡聚糖酶0.3～3%；纤维素酶0.3～3%；植酸酶0.2～3%；余量为药学上可接受的辅料。

4. 根据权利要求3所述的猪用凝结芽孢杆菌制剂，其特征在于，所述的最佳重量百分比优选为：凝结芽孢杆菌PFK1102A80%、谷氨酰氨3%、谷氨酸3%、天冬氨酸2.5%、甘露聚糖酶2%、蛋白酶2%、耐高温a-淀粉酶1.5%、酸性蛋白酶1.5%、β-葡聚糖酶1.5%、纤维素酶1.5%、植酸酶1%，余量为药学上可接受的辅料。