CN105193905A

CN105193905A - 一种灵芝－黄芪双向发酵的中药加工技术

Info

Publication number: CN105193905A
Application number: CN201410296409.2A
Authority: CN
Inventors: 艾对元; 张卫兵; 贠建民
Original assignee: Gansu Agricultural University
Current assignee: Gansu Agricultural University
Priority date: 2014-06-27
Filing date: 2014-06-27
Publication date: 2015-12-30

Abstract

本发明公开了一种灵芝－黄芪双向发酵的中药加工技术,包括黄芪预处理、灵芝菌种活化、双向发酵培养基配制、双向发酵及药性变化和发酵菌质的处理。本发明旨在通过双向发酵技术增强两者的生物活性及药效，黄芪的抗氧化活性经发酵之后提高了20%以上且易于吸收。因此可以作为增强抵抗力、延年益寿的功能性食品及药品，应用前景良好。

Description

一种灵芝－黄芪双向发酵的中药加工技术

技术领域

本发明属于生物工程技术领域，涉及一种以中药为原料的微生物双向发酵技术。

背景技术

甘肃拥有丰富的药用资源，但目前一般仍是以原药材和初级加工品供应市场为主，有效成分含量低，增值效益少，也无法保证市场对高端及多样性的需求；当务之急是进行道地药材的科技攻关，提高中药材的利用价值；甘肃的当归、党参、黄（红）芪、大黄、甘草产量分别占全国的95%,60%、50%、60%、25%，以上5种药材的出口量占全国的80%以上；黄芪RadixAstragali是中医临床的常用药，为豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根；黄芪具有利尿脱毒、排脓、敛疮生肌之功效。主要化学成分有黄酮类、皂苷类和多糖类，另外还含有单糖、氨基酸、蛋白质、叶酸、维生素D、亚油酸、棕榈酸、正十六醇等成分；

灵芝GanodermaLucidum是我国传统名贵真菌，是具有滋补强壮、扶正固本的珍贵药材，久服有延年益寿之功效；科学研究证实灵芝具有提高免疫力、抗肿瘤、抗癌、镇痛、保肝、增强记忆、抗菌、抗氧化、消炎、抗诱变等药理活性；临床上灵芝对慢性支气管炎、冠性病、肝炎、肝硬化、动脉硬化、高血脂、高血压、神经衰弱、肿瘤病的辅助治疗等有不同程度的疗效；这些药理活性与灵芝中含有的多糖类、三萜类、呋喃类、生物碱类、氨基酸蛋白质类、油脂类、无机离子、甾醇类等多种活性物质密切相关；近年来灵芝的需求量不断增大,野生灵芝非常稀少,远远不能满足人们的需要，人工栽培灵芝生长周期长；利用发酵工程可使灵芝生产周期短、活性提高；双向发酵即用一定的药用菌种接种在一定的基质上，在一定环境条件下，经过一定时间发酵，在特定的质量指标控制下达到发酵终点而产生菌质；可以利用中药作为培养基的组成部分，构建药性菌质，为中药与药用真菌的结合寻找突破点，并开发具有良好功效的药物。

发明内容

中药双向发酵技术系采用不同的中药材为底物组成不同的药性基质，或在营养基质中加入具有活性成分的中药材组成全性基质，或用两种以上中药材经交叉组合成为多样性(复方)基质，通过接种不同的菌种如药用真菌，使发酵的作用从原来单向性的仅由C、N源等营养成分，发展到应用菌种的酶使药性基质的组织及成分分解，变化，产生新的成分，使发酵作用演变成双向性，从而形成新的性味、功能不同的药性菌质或全性菌质，故具有双向性或多样性；本课题以主产于甘肃岷县的黄芪作为主要发酵基质，用灵芝作为菌种，采用真菌双向发酵技术进行发酵，旨在增加两者的生物活性成分及增强药效，尤其是增强其抗氧化功效；利用灵芝菌在发酵中能分泌纤维素酶、过氧化物酶、超氧化物歧化酶、酯酶等多种胞外酶,使其作用于黄芪以提高其药物析出率，增加次生代谢产物的变化；本发明的目的是按如下技术方案实现的，其特征是它包括以下步骤：

（1）黄芪预处理：将黄芪洗净干燥后，切片，磨制成4-40目大小粉末；

（2）灵芝菌种活化：将林芝通过PDA斜面培养基活化，28℃恒温培养7天；玉米粉液体培养基扩大培养4天，待菌丝长满斜面备用；

（3）双向发酵培养基配制：黄芪粉为5-15%，玉米与玉米芯混合料为83%-93%（玉米芯:玉米粉=1:3）,MgSO₄（0.5%）、(NH₄)₂SO₄（0.5%）、KH₂PO₄（1%），以上均为质量/质量浓度；将上述物质混合后，加入其总重65%水搅拌均匀后灭菌备用；

（4）双向发酵：将活化后的灵芝接入上述培养基，以固态或者液态方式发酵，最适温度28度，灵芝接种量12%（12mL/100g），pH=5.5-6.5，通风黑暗培养7-13d；

（5）药性变化：当灵芝长满整个发酵罐，且其菌丝球呈球形，外观浓密、洁白时，发酵即告结束；黄芪固态发酵前后DPPH自由基清除率分别为61.21%、75.41%，发酵后较发酵前提高了23.20%；羟基自由基清除率分别为59.24％、71.08％，发酵后较发酵前提高了19.99%；灵芝生物量（g）=10.58/100ml，菌丝球直径（mm）=4.9；菌丝外观浓密、洁白；

（6）发酵菌质的处理：在4000r／min条件下对发酵液离心15min，取上清液为最终产品；固体发酵物的均质处理：在45-65℃条件下将发酵产物(包含菌丝及培养基质成分在内的混合物即菌质)烘至恒重，粉碎后过40目筛，滤过物即为最终产品；

本发明的有益效果

（1）工艺简单，设备要求不高，适于工业化推广；

（2）利用黄芪及灵芝所特有的药性及功能成分，通过二者的深层次相互作用提升其抗氧化、抗自由基、增强免疫力等医疗保健功能；

（3）将以上产品包装成灵芝发酵干粉及口服液可以作为增强抵抗力、延缓衰老、延年益寿的功药品及功能性食品，应用前景良好。

具体实施方式

下面的实施例可以进一步说明本发明，但不以任何方式限制本发明

实施例1

固态双向发酵——称取干制黄芪若干，通过粉碎机研磨成40目大小粉末；以灵芝为发酵药用真菌种子，PDA斜面培养基活化，采用玉米粉液体培养基扩大培养；通过在设定的基础培养基中加入15%(占培养基的全重量)浓度的黄芪粉末，制成全性培养基(玉米芯:玉米粉=1:3,MgSO₄（0.5%）、(NH₄)₂SO₄（0.5%）、KH₂PO₄（1%），均为质量浓度)。接入灵芝种子液，置于在28℃、通过机械通风来控制通氧量,自然Ph条件下，培养13d；当灵芝长满整个发酵罐，且其菌丝球呈球形，外观浓密、洁白时，发酵即告结束；

实施例2

液态双向发酵——称取干制黄芪若干，通过切片机切成0.5cm*2cm见方大小条状物，然后加入9倍质量水溶液，搅拌并浸泡3小时；然后1000r-3000r/min离心15min，取上清液；以灵芝为发酵药用真菌种子，用无菌接种产产下灵芝菌种两块，接种于斜面培养基（PDA培养基）中部，置于28℃恒温培养箱中培养7天；采用玉米粉液体培养基扩大培养；通过在设定的基础培养基中加入30%浓度的黄芪水提取液，制成全性培养基(玉米芯:玉米粉=1:3,MgSO₄（0.5%）、(NH₄)₂SO₄（0.5%）、KH₂PO₄（1%），均为质量浓度)；接入灵芝种子液，置于在28℃、摇床转速150-180r/min,自然Ph条件下，培养7d；当灵芝长满整个发酵罐，且其菌丝球呈球形，外观浓密、洁白时，发酵即告结束；

实施例3

液态双向发酵——称取干制黄芪若干，通过粉碎机研磨成40目大小粉末；以灵芝为发酵药用真菌种子，用无菌接种产产下灵芝菌种两块，接种于斜面培养基（PDA培养基）中部，置于28℃恒温培养箱中培养7天；采用玉米粉液体培养基扩大培养；通过在设定的基础培养基中加入5%(占培养基的全重量)浓度的黄芪粉末，制成全性培养基(玉米芯:玉米粉=1:3,MgSO₄（0.5%）、(NH₄)₂SO₄（0.5%）、KH₂PO₄（1%），均为质量浓度)；接入灵芝种子液，置于在28℃、摇床转速150r/min,自然Ph条件下，培养7d；当灵芝长满整个发酵罐，且其菌丝球呈球形，外观浓密、洁白时，发酵即告结束。

Claims

1.一种灵芝－黄芪双向发酵的中药加工技术,其特征在于步骤如下：

（3）双向发酵培养基配制：黄芪粉为5-15%，玉米与玉米芯混合料为83%-93%（玉米芯:玉米粉=1:3）,MgSO₄（0.5%）、(NH₄)₂SO₄（0.5%）、KH₂PO₄（1%），以上均为质量/质量浓度；将上述物质混合后，加入其总重65%水搅拌均匀后灭菌备用

（4）双向发酵：将活化后的林芝接入上述培养基，以固态或者液态方式发酵，最适温度28度，灵芝接种量12%（12mL/100g），pH=5.5-6.5，65℃通风黑暗培养7-13d；

（6）发酵菌质的处理：在4000r／min条件下对发酵液离心15min，取上清液为最终产品；固体发酵物的均质处理：在45-65℃条件下将发酵产物(包含菌丝及培养基质成分在内的混合物即菌质)烘至恒重，粉碎后过40目筛，滤过物即为最终产品。