CN105106277A - 一种抗敏、止痒复合植物提取物及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种抗敏、止痒复合植物提取物的制备方法，通过以下方法制备获得：(1)取三七，在三七中加入水，进行超声细胞破壁处理，备用，取金银花和洋甘菊粉碎后备用；(2)将经步骤(1)预处理过的三七、金银花和洋甘菊混匀，加入纤维素酶和麦芽糖酶进行酶解，得酶解物；(3)将酶解物置于提取溶剂中提取后得提取液，将提取液经后续处理制得抗敏、止痒复合植物提取物。本发明还公开了采用上述方法制成的抗敏、止痒复合植物提取物，该复合植物提取物安全无刺激，可以用于制备止痒、抗过敏的药物或化妆品。且抗过敏、止痒效果，明显优于传统方法制备的植物提取物。

Description

一种抗敏、止痒复合植物提取物及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于中药技术领域，具体涉及一种抗敏、止痒复合植物提取物及其制备方法和应用。

背景技术

随着社会的发展、人们的生活水平不断提高，伴随而来的是来自工作、生活等各方面的社会压力也越来越大，各类疾病困扰着人们，特别是过敏、瘙痒等疾病的困扰，更是让广大人们苦不堪言。人们对安全有效的天然抗过敏和/或止痒产品的需求也越来越大。

现有技术中抗过敏和/或止痒产品以激素类产品居多，依赖性较强，副作用较大。虽然也有部分天然植物产品，但颜色深、气味冲、抗敏止痒效果不理想，成本高。

发明内容

本发明所要解决的第一个技术问题是提供一种抗敏、止痒复合植物提取物的制备方法，该方法采用天然植物作为原料，并通过酶解，可以使植物中的有效成分高效析出。

本发明所要解决的第二个技术问题是采用上述抗敏、止痒复合植物提取物的制备方法制成的抗敏、止痒复合植物提取物，该复合植物提取物抗敏、止痒效果好，安全无刺激，且颜色浅、气味清淡，成本较低。

本发明所要解决的最后一个技术问题是上述抗敏、止痒复合植物提取物在制备具有抗敏、止痒功效的药物或化妆品中的应用。

本发明上述第一个技术问题是通过以下技术方案来实现的：一种抗敏、止痒复合植物提取物的制备方法，通过以下方法制备获得：

(1)取三七，在三七中加入水，进行超声细胞破壁处理，备用，取金银花和洋甘菊粉碎后备用；

(2)将经步骤(1)预处理过的三七、金银花和洋甘菊混匀，加入纤维素酶和麦芽糖酶进行酶解，得酶解物；

(3)将酶解物置于提取溶剂中提取后得提取液，将提取液经后续处理制得抗敏、止痒复合植物提取物。

上述抗敏、止痒复合植物提取物的制备方法中：

步骤(1)中三七优选为伞形目五加科人参属多年生草本植物三七的新鲜根。

步骤(1)中三七、金银花和洋甘菊的质量份配比优选为10～80：10～80：10～80。

步骤(1)中在三七中加入水，优选碾磨成400～800目的糊状后再进行超声细胞破壁处理，超声细胞破壁处理时，超声波的频率优选为25000～35000赫兹，超声时间优选为20～40min，金银花和洋甘菊优选粉碎至10～60目。

步骤(2)中纤维素酶和麦芽糖酶的添加量优选占步骤(1)中原料药材三七、金银花和洋甘菊总质量的0.6～2.4％，纤维素酶和麦芽糖酶二者的质量份配比优选为1：5～5：1。

酶解温度优选为30～50℃，酶解时间优选为4～8h，酶解时控制含水量为50～70％。

酶解时含水量的控制通过在预处理过的三七、金银花和洋甘菊中加入水来控制。

纤维素酶和麦芽糖酶二者的酶活分别为50000～100000u/g，纤维素酶和麦芽糖酶两者在90℃以上半小时，能完全失活且不可逆。二者均为市售产品。

酶解后酶解物还需要在90℃以上半小时左右进行灭酶处理，然后再进行下一步的提取处理。

步骤(3)中所述的提取溶剂为甲醇水溶液或乙醇水溶液，其中甲醇水溶液中甲醇的体积百分含量为70％～99％，较佳的为80％，乙醇水溶液中乙醇的体积百分含量为70％～99％，较佳的为80％，提取溶剂的用量为步骤(1)中原料药材三七、金银花和洋甘菊总质量的5～20倍，提取温度为30～100℃，较佳的为60～95℃，提取次数为1～3次，佳的为2次，当提取次数大于1时合并提取液，每次提取1～4h。

步骤(3)中所述后续处理优选包括将提取液过滤，取滤液浓缩除去提取溶剂，得浓缩物，在浓缩物中加入溶剂混匀，即制得抗敏、止痒复合植物提取物。

所述溶剂优选为水、丁二醇、丙三醇、丙二醇和二丙二醇中的一种或几种，其用量为复合植物提取物总质量的40～80％。

本发明的第二个技术问题是通过以下技术方案来实现的：采用上述抗敏、止痒复合植物提取物的制备方法制成的抗敏和/或止痒复合植物提取物。

人们皮肤病的主要类型之一就是，来自外源或内源的物质刺激肥大细胞，进而产生组织胺作用于神经末梢，从而产生红斑、丘疹、瘙痒、疼痛、过敏等症状。对此，我们一方面要抑制组织胺的释放，一方法面要增加皮肤对组织胺的耐受，从而达到抗过敏、止痒的目的。

本发明所制作的植物提取物，就是一方面通过抑制组织胺释放的原理，达到了临床抗过敏、止痒的效果，一方面通过增加皮肤对组织胺的耐受，从而达到抗过敏、止痒的目的。

本发明中的植物原料三七、金银花和洋甘菊在酶工程技术下，所获得的提取物具有明显的协同作用，三味植物组合并经过本发明方法制备后，经过实施例中的试验证明，制备的复合植物提取物抑制组织胺的效果明显优于这三种植物通过传统工艺制备的植物提取物及单味植物抑制组织胺的效果。

本发明的第三个技术问题是通过以下技术方案来实现的：上述抗敏、止痒复合植物提取物在制备具有抗过敏、止痒功效的药物或化妆品中的应用。

本发明制备的植物提取物，能够明显的增加皮肤对组织胺的耐受，在小鼠抓挠测试中，具有明显的抗敏和/或止痒效果，且有明显的量效果关系，在配方中，其使用量为1％时，与复方醋酸***乳膏、复方酮康唑软膏等激素类皮炎药物相当。

与现有技术相比，本发明具有如下优点：

(1)本发明方法通过酶解的方式以及对药材进行预处理，可以使药材中的有效成分高效析出；

(2)本发明之所以使用新鲜的三七，原因在于，植物中的物质与能够水解该物质的酶往往是共存的，只是存在于不同的部位，不能够催化水解，所以本发明通过碾磨及超声的方式，将细胞打开，释放各种酶，从而达到自水解的目的，协助添加酶的酶解，从而合理的对植物各成分进行温和酶解，这也是中药生物技术研究的内容和方向之一；

(3)本发明所选的酶不耐高温，这样可以容易的终止酶解过程，从而可以任意选择合适的终止水解时间；

(4)本发明所制备的复合植物提取物，其抗敏和/或止痒效果，比不通过酶解直接提取所制备的提取物，明显高出很多；

(5)本发明所制备的复合植物提取物，具有很好的抗敏和/或止痒效果，在一定范围内，可以替代复方醋酸***乳膏、复方酮康唑软膏等激素类皮炎药物，作为天然的，相对安全的提取物，这对化妆品及药品的发展，具有很大的推动作用，其社会价值和经济价值，都非常的高。

附图说明

图1是本发明具体实施方式中第三部分抗敏、止痒复合植物提取物抗敏、止痒效果实验中各组小鼠30min内的搔抓次数比较。

具体实施方式

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数按重量计算。

下述各实施例中的相对密度均为20℃时测得的值。

同时对实施例中的生物技术抗敏止痒方1、生物技术抗敏止痒方2、传统技术抗敏止痒方1、传统技术抗敏止痒方2、三七提取液、金银花提取液、洋甘菊提取液做了动物瘙痒测试，测试方法、结果见附表，并采用组胺所致豚鼠局部皮肤瘙痒实验对上述测试结果进行了验证(组织胺耐受实验)。

第一部分抗敏、止痒复合植物提取物的制备方法及复合植物提取物

实施例1生物技术抗敏止痒方1的制备

取新鲜三七根45kg，加入100kg水，通过胶体磨，磨碎成400目至800目的糊，并在25000赫兹条件下，超声处理20分钟；取金银花35kg，洋甘菊20kg，粉碎为10～60目的颗粒。

将上述三种处理过的药材混合均匀，加入0.1kg的纤维素酶、0.5kg的麦芽糖酶，并混合均匀，在35℃条件，酶解5个小时，得酶解物，酶解时控制含水量为50～70％。

提取溶剂：配制体积百分含量为80％的乙醇水溶液(V/V)。

将上述酶解混合物，用提取溶剂700L，在70℃条件下提取3小时，过滤，将滤液中乙醇蒸干，浓缩至10～15kg，加入75kg丙二醇，并加水补充到100kg，即得生物技术抗敏止痒方1。

实施例2生物技术抗敏止痒方2的制备

取新鲜三七根65kg，加入150kg水，通过胶体磨，磨碎成400目至800目的糊，并在30000赫兹条件下，超声处理35分钟；取金银花10kg，洋甘菊25kg，粉碎为10～60目的颗粒。

将上述三种处理过的药材混合均匀，加入1.2kg的纤维素酶、0.3kg的麦芽糖酶，并混合均匀，在45℃条件，酶解8个小时。

提取溶剂：配制体积浓度85％乙醇水溶液(V/V)。

将上述酶解混合物，用提取溶剂800L，在70℃条件下提取3小时，过滤，将滤液中乙醇蒸干，浓缩至10～15kg，加入75kg丙二醇，加水补充到100kg，即得生物技术抗敏止痒方2。

实施例3

本实施例提供的抗敏、止痒复合植物提取物的制备方法，通过以下方法制备获得：

(1)取三七，在三七中加入水，碾磨成糊状后进行超声细胞破壁处理，备用，取金银花和洋甘菊粉碎后备用；

(2)将处理后的三七、金银花和洋甘菊混匀，加入纤维素酶和麦芽糖酶后酶解，得酶解物；

(3)将酶解物置于提取溶剂中提取后得提取液，将提取液经后续处理制得抗敏、止痒复合植物提取物。

在上述抗敏、止痒复合植物提取物的制备方法中：

步骤(1)中三七、金银花和洋甘菊的质量份配比为10：80：10。

步骤(1)中碾磨成400～800目的糊状，超声波为频率为25000赫兹，超声时间为40min，金银花和洋甘菊粉碎至10～60目。

步骤(2)中纤维素酶和麦芽糖酶的添加量占步骤(1)中原料药材三七、金银花和洋甘菊总质量的2.0％，纤维素酶和麦芽糖酶二者的质量份配比为3:1；酶解温度为30℃，时间为8h，酶解时控制含水量为50～70％。

步骤(3)中所述的提取溶剂为甲醇水溶液，其中甲醇水溶液中甲醇的体积百分含量为70％，提取溶剂的用量为原料药才三七、金银花和洋甘菊总质量的5倍，提取温度为30℃，提取次数为3次，每次提取3h，提取后合并提取液。

步骤(3)中后续处理包括将提取液过滤，取滤液浓缩除去提取溶剂，得浓缩物，在浓缩物中加入溶剂混匀，即制得抗敏、止痒复合植物提取物，其中溶剂为二丙二醇和水，其用量为复合植物提取物总质量的50％。

实施例4

本实施例提供的抗敏、止痒复合植物提取物的制备方法，通过以下方法制备获得：

(1)取三七，在三七中加入水，碾磨成糊状后进行超声细胞破壁处理，备用，取金银花和洋甘菊粉碎后备用；

(2)将处理后的三七、金银花和洋甘菊混匀，加入纤维素酶和麦芽糖酶后酶解，得酶解物；

(3)将酶解物置于提取溶剂中提取后得提取液，将提取液经后续处理制得抗敏、止痒复合植物提取物。

在上述抗敏、止痒复合植物提取物的制备方法中：

步骤(1)中三七、金银花和洋甘菊的质量份配比为80：10：80。

步骤(1)中碾磨成400～800目的糊状，超声波为频率为28000赫兹，超声时间为20min，金银花和洋甘菊粉碎至10～60目。

步骤(2)中纤维素酶和麦芽糖酶的添加量占步骤(1)中原料药材三七、金银花和洋甘菊总质量的2.4％，纤维素酶和麦芽糖酶二者的质量份配比为1:1；酶解温度为50℃，时间为4h，酶解时控制含水量为50～70％。

步骤(3)中所述的提取溶剂为甲醇水溶液，其中甲醇水溶液中甲醇的体积百分含量为99％，提取溶剂的用量为步骤(1)中原料药材三七、金银花和洋甘菊总质量的20倍，提取温度为100℃，提取次数为2次，每次提取2h，合并提取液。

步骤(3)中后续处理包括将提取液过滤，取滤液浓缩除去提取溶剂，得浓缩物，在浓缩物中加入溶剂混匀，即制得抗敏、止痒复合植物提取物，其中溶剂为丁二醇，其用量为复合植物提取物总质量的60％。

实施例5传统技术抗敏止痒方1

取药材三七根45kg，加入100kg水，通过胶体磨，磨碎成400目至800目的糊，并在25000赫兹条件下，超声处理20分钟；取金银花35kg，洋甘菊20kg，粉碎为10～60目的颗粒。

将上述三种处理过的药材混合均匀，在35℃条件，堆积5个小时。

提取溶剂：配制体积浓度80％乙醇水溶液(V/V)。

将上述混合物，用提取溶剂700L，在70℃条件下提取3小时，过滤，将滤液中乙醇蒸干，浓缩至10～15kg，加入75kg丙二醇，加水补充到100kg，即得传统技术抗敏止痒方1。

实施例6传统技术抗敏止痒方2

取新鲜三七根65kg，加入150kg水，通过胶体磨，磨碎成400目至800目的糊，并在30000赫兹条件下，超声处理35分钟；取金银花10kg，洋甘菊25kg，粉碎为10～60目的颗粒。

提取溶剂：配制体积浓度85％乙醇水溶液(V/V)。

将上述混合物，用提取溶剂800L，在70℃条件下提取3小时，过滤，将滤液中乙醇蒸干，浓缩至10～15kg，加入75kg丙二醇，加水补充到100kg，即得传统技术抗敏止痒方2。

实施例7传统技术三七提取液、金银花提取液、洋甘菊提取液

提取溶剂：配制体积浓度80％乙醇水溶液(V/V)。

取药材三七根100kg，加入150kg水，通过胶体磨，磨碎成400目至800目的糊，并在25000赫兹条件下，超声处理20分钟；用提取溶剂700L，在70℃条件下提取3小时，过滤，将滤液中乙醇蒸干，浓缩至10～15kg，加入75kg丙二醇，加水补充到100kg，即得三七提取液。

取金银花100kg，粉碎为10～60目的颗粒；用提取溶剂700L，在70℃条件下提取3小时，过滤，将滤液中乙醇蒸干，浓缩至10～15kg，加入75kg丙二醇，加水补充到100kg，即得金银花提取液。

取洋甘菊100kg，粉碎为10～60目的颗粒；用提取溶剂700L，在70℃条件下提取3小时，过滤，将滤液中乙醇蒸干，浓缩至10～15kg，加入75kg丙二醇，加水补充到100kg，即得洋甘菊提取液。

第二部分抗敏、止痒复合植物提取物应用实施例

应用实施例1舒敏面膜液的制备

表1止痒香波配方

按配比称量好上述物料，先把A相中透明质酸钠分散在丁二醇、甘油中，搅匀，然后加入去离子水,搅拌均匀后，加热升温到85～90℃，搅拌均匀；搅拌下冷却至45～50℃；加入B相，加入适量防腐剂和香精，pH值控制在5.0～7.0，搅拌均匀出料，获得舒敏面膜液。

应用实施例2舒敏精华液的制备

表2舒敏精华液配方

按配比称量好上述物料，先把A相中Carbopol941(美国露博润公司)分散在去离子水中，搅匀，然后加入用丁二醇分散好的透明质酸钠，搅拌均匀后，加热升温到85～90℃，搅拌均匀；搅拌下冷却至45～50℃；加入B相，加入适量防腐剂和香精，pH值控制在5.0～7.0，搅拌均匀出料，获得舒敏精华液。

应用实施例3舒敏面霜的制备

表3舒敏面霜的配方

按配比称量好上述物料，先把黄原胶分散在甘油中，再分散在水中并同时升高温度到85℃，然后加入B相其他组分，搅拌均匀；将A相于85℃溶解完全，搅拌均匀；将A相加入B相中搅拌均质，约4分钟，消泡冷却至50℃；加入C相，加入适量香精和防腐剂，pH值控制在5.0～7.0，搅拌均匀出料，获得舒敏面霜。

应用实施例4止痒香波的制备

表4止痒香波配方

按配比称量好上述物料，先把A相中将脂肪醇醚硫酸酯钠(TexaponN70,Cognis)，乙二胺四乙酸二钠(EDTA-2Na，DOW)加入去离子水中，75℃下搅拌，完全溶解后，加入椰油酰胺丙基甜菜碱(CAB-35，天赐)，搅拌下冷却至45～50℃；加入B相，加入适量防腐剂和香精，pH值控制在5.0～7.0，搅拌均匀出料，获得止痒香波。

第三部分抗敏、止痒复合植物提取物的瘙痒抑制实验

下面是瘙痒抑制实验的具体方法及测试结果：

1、材料

1.1主要仪器AL204型电子分析天平，梅特勒—托利多仪器(上海)有限公司；

1.2试药

生物技术抗敏止痒方1(实施例1)，生物技术抗敏止痒方2(实施例2)，传统技术抗敏止痒方1(实施例5)，传统技术抗敏止痒方2(实施例6)，三七提取液、金银花提取液、洋甘菊提取液(实施例7)；复方醋酸***乳膏，惠州市九惠制药股份有限公司生产，批号1310002H；75％丙二醇溶液(溶剂)。

1.3实验动物

昆明种小鼠，18～22g，由复旦大学医学院实验动物中心提供。

2方法

选体重18～22g的昆明小白鼠1000只雌雄各半，随机分为10组，每组100只，每组分10批且每批中雌雄各5只。将小鼠背部毛用剪刀剪掉，再用脱毛膏洗干净使其露出皮肤，然后分别对10组小鼠给药，给药方法见表5。10组均是涂抹给药，每天各给药1次，连续给药5天，末次给药1h后，对每只小鼠尾静脉注射0.02％右旋糖酐生理盐水注射液0.2ml，观察小鼠出现以瘙痒、咬尾、挠背等为瘙痒特征的潜伏期以及30min内的搔抓次数，统计每批平均值(注：生理盐水组为模型组，1％的溶剂组为空白对照，溶剂为75％的丙二醇水溶液)。

表5各组给药情况和给药量

3实验结果

统计各组小鼠30min内各批的搔抓次数均值，并作比较，见表6和图1。生理盐水组(模型组)，1％的溶剂(空白对照组)，出现较高频率的抓挠现象；与模型组比较，复方醋酸***乳膏(阳性对照组)、1％单、复方提取液均能减少右旋糖酐酐所致小鼠瘙痒次数。1％的生物技术抗敏止痒方对瘙痒的抑制率在33％左右，与阳性对照药作用相当。

表6各组小鼠30min内的搔抓次数比较(原始数据)

4、结论

小鼠尾静脉注射0.02mg/mL右旋糖酐生理盐水注射液后，观察各组小鼠30min内出现的搔抓次数，从模型组中可以看出，右旋糖酐对小鼠有很好的制痒作用，该组小鼠30min内出现的搔抓次数非常明显，而经过复方醋酸***乳膏阳性对照组给药后再注射0.02mg/mL右旋糖酐生理盐水注射液，小鼠30min内出现的搔抓次数明显小于模型组，由此可以得出用右旋糖建立模型有很好的效果。

纵向比较模型组、空白对照组、阳性对照组、试验组又能得出空白组即溶剂与模型组接近，即对抑制瘙痒不发挥效果，阳性药和试验药对右旋糖酐所致小鼠瘙痒有明显的抑制作用，其中1％生物技术抗敏止痒方2与阳性对照组抑制瘙痒效果基本无差异。

同时1％生物技术抗敏止痒方1优于1％传统技术抗敏止痒方1的抑制瘙痒效果，1％生物技术抗敏止痒方2优于1％传统技术抗敏止痒方2的抑制瘙痒效果，说明生物技术条件下的抗敏止痒方明显比传统技术条件下的抗敏止痒方抑制瘙痒效果好。

各抗敏止痒方都明显比三七提取液、金银花提取液、洋甘菊提取液单独抑制瘙痒效果好，说明这三个植物在抑制瘙痒的功效上，具有明显的协同作用。

以上对本发明的描述并不用于限制本发明的范围。对于本领域的普通技术人员来说，可以根据本发明提供的技术方案做出各种相应的改变，这些改变都应属于本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种抗敏、止痒复合植物提取物的制备方法，其特征是通过以下方法制备获得：

(1)取三七，在三七中加入水，进行超声细胞破壁处理，备用，取金银花和洋甘菊粉碎后备用；

(2)将经步骤(1)预处理过的三七、金银花和洋甘菊混匀，加入纤维素酶和麦芽糖酶进行酶解，得酶解物；

(3)将酶解物置于提取溶剂中提取后得提取液，将提取液经后续处理制得抗敏、止痒复合植物提取物。

2.根据权利要求1所述的抗敏、止痒复合植物提取物的制备方法，其特征是：步骤(1)中三七、金银花和洋甘菊的质量份配比为10～80：10～80：10～80。

3.根据权利要求1所述的抗敏、止痒复合植物提取物的制备方法，其特征是：步骤(1)中在三七中加入水，碾磨成400～800目的糊状后再进行超声细胞破壁处理，超声细胞破壁处理时，超声波的频率为25000～35000赫兹，超声时间为20～40min，金银花和洋甘菊粉碎至10～60目。

4.根据权利要求1所述的抗敏、止痒复合植物提取物的制备方法，其特征是：步骤(2)中纤维素酶和麦芽糖酶的添加量占步骤(1)中原料药材三七、金银花和洋甘菊总质量的0.6～2.4％，纤维素酶和麦芽糖酶二者的质量份配比为1：5～5：1。

5.根据权利要求4所述的抗敏、止痒复合植物提取物的制备方法，其特征是：酶解温度为30～50℃，酶解时间为4～8h，酶解时控制含水量为50～70％。

6.根据权利要求1所述的抗敏、止痒复合植物提取物的制备方法，其特征是：步骤(3)中所述的提取溶剂为甲醇水溶液或乙醇水溶液，其中甲醇水溶液中甲醇的体积百分含量为70％～99％，乙醇水溶液中乙醇的体积百分含量为70％～99％，提取溶剂的用量为步骤(1)中的原料药材三七、金银花和洋甘菊总质量的5～20倍，提取温度为30～100℃，提取次数为1～3次，每次提取1～4h。

7.根据权利要求1所述的抗敏、止痒复合植物提取物的制备方法，其特征是：步骤(3)中所述后续处理包括将提取液过滤，取滤液浓缩除去提取溶剂，得浓缩物，在浓缩物中加入溶剂混匀，即制得抗敏、止痒复合植物提取物。

8.根据权利要求7所述的抗敏、止痒复合植物提取物的制备方法，其特征是：所述溶剂为水、丁二醇、丙三醇、丙二醇和二丙二醇中的一种或几种，其用量为复合植物提取物总质量的40～80％。

9.一种采用权利要求1-8任一项所述抗敏、止痒复合植物提取物的制备方法制成的抗敏、止痒复合植物提取物。

10.权利要求9所述的抗敏、止痒复合植物提取物在制备具有抗过敏、止痒功效的药物或化妆品中的应用。