CN105029603A - 一种复合鲜花果蔬草本酵素及其制备方法与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种复合鲜花果蔬草本酵素及其制备方法与应用，属于生物医药技术领域。本发明采用几十种常见的水果、蔬菜、谷物、鲜花和药食同源草本植物作为原料，能全方位补充身体所需的营养素、微生物、微量元素和膳食纤维；鲜花的加入使得本发明的鲜花果蔬草本酵素具有鲜花的香气和植物花青素；花青素类物质是很强的植物抗氧化剂，在酵素高酸度的溶液中，花青素能很好的被浸提和释放，提高该酵素的抗氧化能力；药食同源草本植物多为具有提高免疫力、降血脂、降血糖、降血压的功效，益生菌的加入，能使草本植物中的多糖和功效成分完全萃取出来，增强该酵素的保健功效。本发明制备方法简单，有效地避免逐层发酵过程中的污染和产生怪味等问题。
Description
技术领域
本发明属于生物医药技术领域，具体属于天然药化技术领域，具体涉及一种复合鲜花果蔬草本酵素及其制备方法与应用。
背景技术
酵素，(Enzyme)又称为“酶”，又称植物综合活性酶。酵素就是“酶”的俗称；在日本和台湾地区叫酵素，在中国叫酶（英文ENZYME）。酵素产品起源于日本，始于二十世纪初，迄今已有长达80多年的历史，风靡于欧美及台湾地区。人类目前已发现的酵素1500种以上，已命名的700种以上。人的生老病死都与酵素有关，酵素决定着我们的健康。目前酵素产品在日本已有超过2000万人每日服用。一些世界非常著名的化妆品品牌的产品中也含有酵素。世界各地（尤其日本，台湾，以及美国）有关酵素的书籍不下几十种。酵素产品不但从日本本土行销台湾20余年，而且近几年也陆续被新加坡、马来西亚、韩国、美国等地引进。
现代科学表明，酵素会将淀粉分解成葡萄糖，将蛋白质分解成氨基酸，将脂肪分解成脂肪酸，分解后的养分才能被细胞吸收利用。所以，酵素也是生命活动必不可缺的源动力，在消化、吸收人体必需的营养素和排出体内沉积毒素的过程中起决定作用，有了酵素人体才可以进行正常的新陈代谢，一旦缺乏酵素，体内各种生化反应将不能正常进行，五大营养素（碳水化合物、脂类、蛋白质、维生素、矿物质）也就无法被人体吸收和利用，更无法维持身体的健康状态。酵素储存量愈大，人就越健康、越长寿，相反缺乏酵素，人体就越容易生病和衰老。
酵素中含有的有益成分为多酚类、黄酮、类黄酮、花青素、儿茶素、酚酸、香豆素、木质素、单宁、鞣质、有机酸、琥珀酸、没食子酸、丙酮酸、苹果酸、多糖等。
吉林敖东大高酵素有限公司申请的“一种人参酵素的制作工艺”（申请号CN201210387842）仅以人参一种中草药为原料，功效较弱，使用范围较窄。2014年申请的“一种含有益生菌的复合植物酵素及其应用”（申请号CN201410129081）采用多周期不连续补料发酵，选用了多种水果蔬菜、药食两用植物作为发酵底物，发酵时间较长，工艺复杂，且逐层发酵过程中容易收到污染和产生怪味。因此如何克服现有技术的不足是目前生物医药技术领域亟需解决的问题。
发明内容
本发明的目的是为了解决现有技术的不足，提供一种复合鲜花果蔬草本酵素及其制备方法与应用，该方法用鲜花、水果、蔬菜、草本植物、谷物分别进行发酵，再通过二次深层发酵获得完全发酵的复合鲜花果蔬草本酵素，该酵素是一种全营养素、高膳食纤维、降三高和增强免疫力的天然植物酵素，符合大众的需求。
本发明采用的技术方案如下：
一种复合鲜花果蔬草本酵素，包括按照重量份数计的如下的蔬菜类原料、水果类原料、草本植物类原料、花类原料和谷物类原料：
蔬菜类原料：草菇1～3份、香菇1～3份、大枣1～5份、黑木耳1～5份、茄子1～5份、苦瓜2～7份、冬瓜1～5份、胡萝卜1～5份、白萝卜2～7份、南瓜1～5份、马铃薯1～5份、丝瓜1～5份、小黄瓜1～5份、秋葵1～3份、花椰菜1～5份、地瓜菜1～5份、空心菜1～5份、芋头1～3份、芹菜2～7份、茭白1～5份、玉米1～5份、大白菜1～5份、菠菜1～5份、苋菜1～5份、芥蓝1～5份、小白菜1～5份、龙葵1～5份、甜椒1～2份、青椒1～3份、豌豆1～5份、豌豆苗1～5份、玉米须1～5份、莴苣1～5份、芦笋1～5份、甘蓝1～5份、黄花菜1～5份；
水果类原料：柠檬5～10份、菠萝2～7份、葡萄5～10份、西红柿1～5份、青梅4～10份、苹果1～5份、柚子1～5份、葡萄柚2～7份、椪柑1～5份、甜橙1～5份、番石榴1～5份、香瓜1～5份、桑葚2～7份、李子1～5份、火龙果1～5份、猕猴桃2～5份、荔枝1～5份、桂圆1～5份、桃子1～5份、哈密瓜1～5份、石榴5～10份、枇杷1～5份、杨梅5～10份、樱桃1～5份、番木瓜1～5份、金桔5～10份；
草本植物类原料：仙草1～5份、枸杞1～5份、黄精1～5份、桔梗1～5份、山楂5～8份、余甘子5～10份、木瓜5～10份、甘草2～7份、鱼腥草1～5份、玉竹1～5份；
花类原料：石斛花0.1～0.3份、金线莲0.1～0.3份、槐花1～5份、金雀花1～5份、玫瑰2～7份、金银花3～10份、牡丹花1～5份、百合1～5份、茉莉花1～5份、素馨花1～5份、桂花1～5份、玫瑰茄1～5份、勿忘我1～5份、合欢花1～5份、菊花2～7份；
谷物类原料：薏苡仁1～5份、糙米1～5份、粳米10～20份、糯米10～20份、苦荞1～5份、紫米1～5份、皂角米1～5份、黑豆1～5份、绿豆1～5份、红豆1～5份；
经过发酵制成。
上述复合鲜花果蔬草本酵素的制备方法，包括如下步骤：
步骤（1），果蔬酵素的发酵：将水果类原料和蔬菜类原料切成片状或块状按原料配比的比例混合，然后加入黄糖，黄糖的质量比上水果类原料与蔬菜类原料的总质量为1:2～3，再加入水果类原料与蔬菜类原料的总质量的0.1～1.0%的食盐，接着加入蒸馏水，蒸馏水体积为水果类原料、蔬菜类原料、黄糖和食盐的总体积的5～6倍，最后加入乳酸杆菌，乳酸杆菌的接种量为0.01～0.05%，搅拌均匀，在常温下密封7～15天，得到果蔬酵素；
步骤（2），鲜花草本酵素的发酵：将草本植物类原料和花类原料切碎至直径为1～2cm小块按原料配比的比例混合，然后加入黄糖，黄糖的质量比上草本植物类原料和花类原料的总质量为为1:2～3，再加入草本植物类原料和花类原料的总质量的0.1～1.0%的食盐，接着加入蒸馏水，蒸馏水体积为草本植物类原料、花类原料、黄糖和食盐的总体积的5～6倍，再接着加入乳酸杆菌，乳酸杆菌的接种量为0.01～0.05%，常温下密封发酵5～6天后，得到发酵物料，向发酵物料中加入酵母菌，酵母菌的接种量0.01～0.1%，搅拌均匀，继续在常温下密封发酵5～6天，得到鲜花草本酵素；
步骤（3），谷物酵素的发酵：将谷物类原料按原料配比的比例混合，然后蒸至所有谷物都蒸软透心，接着加入蒸馏水，蒸馏水体积为谷物类原料体积的5～6倍，再加入接种量为0.01～0.1%的酵母菌，搅拌均匀，密封，在25～28℃下发酵7～15天，得到谷物酵素；
步骤（4），混合后二次发酵：将步骤（1）得到的果蔬酵素、步骤（2）得到的鲜花草本酵素和步骤（3）得到的谷物酵素一起混合均匀后，过滤，取滤液，密封，在25～30℃下发酵7～15天，用咖啡滤纸过滤，取滤液，静置5～10天，再次过滤，取滤液，得到复合鲜花果蔬草本酵素。
进一步，优选的是所述的步骤（3）蒸至所有谷物都蒸软透心需要蒸2～3h。
进一步，优选的是所述的乳酸杆菌的制备方法为：将嗜酸乳杆菌、乳酸双歧杆菌和我植物乳酸杆菌按等比例混合，加水溶解，用MRS培养基活化培养；然后将MRS培养好的菌种用BLS液体培养基扩大培养；
所述的MRS培养基组成为：牛肉膏10～20g，葡萄糖10～20g，乳糖2～3g，磷酸氢二钾2～3g，食盐0.01～0.05g，琼脂20～30g，加水至1000mL；
所述的BLS液体培养基的组成为：蛋白胨5～10g、牛肉粉3～5g、葡萄糖10～20g、磷酸氢二钾1～2g、磷酸二氢钾1～2g、硫酸镁0.1～0.2g、氯化钠0.01～0.05g、琼脂20～30g、吐温-801～2g，加水至1000mL。
进一步，优选的是所述的酵母菌的制备方法为：将啤酒酵母、茶酵母、葡萄酒酵母和酵素酵母按等比例混合，接种于麦芽汁斜面试管中，接种量为3～5%，接种于麦芽汁斜面试管中，于25～28℃培养36±2小时活化，置于4℃冰箱中保存备用；
将活化后培养液振荡均匀后，在10～15Brix的麦芽汁中扩大培养24±0.5小时，以3～5％的接种量接种，进行扩大培养。
进一步，优选的是所述扩大培养时接种于250mL三角瓶中，装液量为40～50mL。
上述复合鲜花果蔬草本酵素在制备植物酵素软饮料中的应用，按照重量份数计，将复合鲜花果蔬草本酵素10～30份、木糖醇1～5份、CMC-Na1～5份和竹叶黄酮0.8～1.2份，加矿泉水至100份后，混合均匀，灭菌，灌装，保存，得到植物酵素软饮料。
上述复合鲜花果蔬草本酵素在制备植物酵素粉中的应用，按照重量份数计，将复合鲜花果蔬草本酵素50～80份、乳糖1～5份、木糖醇1～5份和麦芽糊精1～10份混合均匀，40℃以下低温干燥，粉碎，分包装，保存，得到植物酵素粉。
上述复合鲜花果蔬草本酵素在制备植物酵素片中的应用，所述的酵素片包括按照重量份数计的如下组分：复合鲜花果蔬草本酵素30～50份，可压性淀粉20～30份，乳糖1～5份，硬脂酸镁1～2份，微晶纤维素1～5份，混合均匀后压制成植物酵素片。
上述复合鲜花果蔬草本酵素作为添加剂的应用，添加到牙膏、洗发液、沐浴露、洗面奶或香皂中，制作成酵素牙膏、酵素洗发液、酵素沐浴露、酵素洗面奶或酵素香皂，添加的质量百分数为1～5%。
本发明与现有技术相比，其有益效果为：
（1）本发明采用复合益生菌为发酵菌种，该复合益生菌的组成为酵母菌和乳酸杆菌，酵母菌的加入能促进发酵，缩短酵素制备时间，能有效的将葡萄糖转化成乙醇，而乳酸杆菌能将乙醇转化成乙酸，使发酵完全，能生成更多的过氧化物酶，提高该酵素的抗氧化活性；
（2）本发明采用几十种常见的水果、蔬菜、谷物、鲜花和药食同源草本植物作为原料，能全方位补充身体所需的营养素、微生物、微量元素和膳食纤维；鲜花的加入，使得本发明的鲜花果蔬草本酵素具有鲜花的香气和植物花青素；花青素类物质是很强的植物抗氧化剂，在酵素高酸度的溶液中，花青素能很好的被浸提和释放，提高该酵素的抗氧化能力；药食同源草本植物多为具有提高免疫力、降血脂、降血糖、降血压的功效，益生菌的加入，能使草本植物中的多糖和功效成分完全萃取出来，增强该酵素的保健功效；
（3）本发明的复合鲜花果蔬草本酵素是一种全营养素、高膳食纤维、降三高和增强免疫力的天然植物酵素，通过发酵产生的超氧化物歧化酶、蛋白酶、脂肪酶等多种酶是该酵素的真正功效组分，脂肪酶可以使脂肪水解，产生甘油二酯、甘油一酯、甘油以及脂肪酸；蛋白酶可以使蛋白质发生水解，主要生成肽类以及氨基酸，能够调理胃肠，增加消化吸收，增强体质；谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）可以使脂质过氧化物还原成脂肪酸的醇类，它与SOD共同组成消除自由基的酶系防御体系；
（4）本发明与常规的酵素制备方法不同之处在于，采用鲜花、水果、蔬菜、草本植物、谷物分别进行发酵，再通过二次深层发酵获得完全发酵的天然植物发酵酵素；
（5）与CN201210387842相比，本发明的一种复合鲜花果蔬植物酵素却加入了数十种药食同源的草本植物，扩大了功效范围，都属于食品范畴，不影响上市销售；
（6）与CN201410129081相比，区别在于，本发明所采用的原料更为丰富和全面，并且采用了益生菌加速发酵，比CN201410129081专利的发酵时间缩短了一半以上，工序简单，不同类别的原料分别发酵，再混合，避免逐层发酵过程中的污染和产生怪味等问题，因此本发明是更为全面，更简单、快速的植物酵素发酵方法。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的详细描述。
本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过购买获得的常规产品。
实施例1
一种复合鲜花果蔬草本酵素，包括按照重量份数计的如下的蔬菜类原料、水果类原料、草本植物类原料、花类原料和谷物类原料：
蔬菜类原料：草菇1份、香菇1份、大枣1份、黑木耳1份、茄子1份、苦瓜2份、冬瓜1份、胡萝卜1份、白萝卜2份、南瓜1份、马铃薯1份、丝瓜1份、小黄瓜1份、秋葵1份、花椰菜1份、地瓜菜1份、空心菜1～5份、芋头1份、芹菜2份、茭白1份、玉米1份、大白菜1份、菠菜1份、苋菜1份、芥蓝1份、小白菜1份、龙葵1份、甜椒1份、青椒1份、豌豆1份、豌豆苗1份、玉米须1份、莴苣1份、芦笋1份、甘蓝1份、黄花菜1份；
水果类原料：柠檬5份、菠萝2份、葡萄5份、西红柿1份、青梅4份、苹果1份、柚子1份、葡萄柚2份、椪柑1份、甜橙1份、番石榴1份、香瓜1份、桑葚2份、李子1份、火龙果1份、猕猴桃2份、荔枝1份、桂圆1份、桃子1份、哈密瓜1份、石榴5份、枇杷1份、杨梅5份、樱桃1份、番木瓜1份、金桔5份；
草本植物类原料：仙草1份、枸杞1份、黄精1份、桔梗1份、山楂5份、余甘子5份、木瓜5份、甘草2份、鱼腥草1份、玉竹1份；
花类原料：石斛花0.1份、金线莲0.1份、槐花1份、金雀花1份、玫瑰2份、金银花3份、牡丹花1份、百合1份、茉莉花1份、素馨花1份、桂花1份、玫瑰茄1份、勿忘我1份、合欢花1份、菊花2份；
谷物类原料：薏苡仁1份、糙米1份、粳米10份、糯米10份、苦荞1份、紫米1份、皂角米1份、黑豆1份、绿豆1份、红豆1份；按如下步骤：
步骤（1），果蔬酵素的发酵：将水果类原料和蔬菜类原料切成片状或块状按原料配比的比例混合，然后加入黄糖，黄糖的质量比上水果类原料与蔬菜类原料的总质量为1:2，再加入水果类原料与蔬菜类原料的总质量的0.1%的食盐，接着加入蒸馏水，蒸馏水体积为水果类原料、蔬菜类原料、黄糖和食盐的总体积的5倍，最后加入乳酸杆菌，乳酸杆菌的接种量为0.01%，搅拌均匀，在常温下密封7天，得到果蔬酵素；
步骤（2），鲜花草本酵素的发酵：将草本植物类原料和花类原料切碎至直径为1～2cm小块按原料配比的比例混合，然后加入黄糖，黄糖的质量比上草本植物类原料和花类原料的总质量为为1:2，再加入草本植物类原料和花类原料的总质量的0.1%的食盐，接着加入蒸馏水，蒸馏水体积为草本植物类原料、花类原料、黄糖和食盐的总体积的5倍，再接着加入乳酸杆菌，乳酸杆菌的接种量为0.01%，常温下密封发酵5天后，得到发酵物料，向发酵物料中加入酵母菌，酵母菌的接种量0.01%，搅拌均匀，继续在常温下密封发酵5天，得到鲜花草本酵素；
步骤（3），谷物酵素的发酵：将谷物类原料按原料配比的比例混合，然后蒸2h，接着加入蒸馏水，蒸馏水体积为谷物类原料体积的5倍，再加入接种量为0.01%的酵母菌，搅拌均匀，密封，在25℃下发酵7天，得到谷物酵素；
步骤（4），混合后二次发酵：将步骤（1）得到的果蔬酵素、步骤（2）得到的鲜花草本酵素和步骤（3）得到的谷物酵素一起混合均匀后，过滤，取滤液，密封，在25℃下发酵7天，用咖啡滤纸过滤，取滤液，静置5天，再次过滤，取滤液，得到复合鲜花果蔬草本酵素。
本实施例复合鲜花果蔬草本酵素的制备方法中所述的乳酸杆菌的制备方法为：将嗜酸乳杆菌、乳酸双歧杆菌和我植物乳酸杆菌按等比例混合，加水溶解，用MRS培养基活化培养；然后将MRS培养好的菌种用BLS液体培养基扩大培养；
所述的MRS培养基组成为：牛肉膏10g，葡萄糖10g，乳糖2g，磷酸氢二钾2g，食盐0.01g，琼脂20g，加水至1000mL；
所述的BLS液体培养基的组成为：蛋白胨5g、牛肉粉3g、葡萄糖10g、磷酸氢二钾1g、磷酸二氢钾1g、硫酸镁0.1g、氯化钠0.01g、琼脂20g、吐温-801g，加水至1000mL。
本实施例复合鲜花果蔬草本酵素的制备方法中所述的酵母菌的制备方法为：将啤酒酵母、茶酵母、葡萄酒酵母和酵素酵母按等比例混合，接种于麦芽汁斜面试管中，接种量为3%，接种于麦芽汁斜面试管中，于25℃培养34小时活化，置于4℃冰箱中保存备用；
将活化后培养液振荡均匀后，在10Brix的麦芽汁中扩大培养23.5小时，以3％的接种量接种于250mL三角瓶中，装液量为40mL，进行扩大培养。
实施例2
一种复合鲜花果蔬草本酵素，包括按照重量份数计的如下的蔬菜类原料、水果类原料、草本植物类原料、花类原料和谷物类原料：
蔬菜类原料：草菇3份、香菇3份、大枣5份、黑木耳5份、茄子5份、苦瓜7份、冬瓜5份、胡萝卜5份、白萝卜7份、南瓜5份、马铃薯5份、丝瓜5份、小黄瓜5份、秋葵3份、花椰菜5份、地瓜菜5份、空心菜5份、芋头3份、芹菜7份、茭白5份、玉米5份、大白菜5份、菠菜5份、苋菜5份、芥蓝5份、小白菜5份、龙葵5份、甜椒2份、青椒3份、豌豆5份、豌豆苗5份、玉米须5份、莴苣5份、芦笋5份、甘蓝5份、黄花菜5份；
水果类原料：柠檬10份、菠萝7份、葡萄10份、西红柿5份、青梅10份、苹果5份、柚子5份、葡萄柚7份、椪柑5份、甜橙5份、番石榴5份、香瓜5份、桑葚7份、李子5份、火龙果5份、猕猴桃5份、荔枝5份、桂圆5份、桃子5份、哈密瓜5份、石榴10份、枇杷5份、杨梅10份、樱桃5份、番木瓜5份、金桔10份；
草本植物类原料：仙草5份、枸杞5份、黄精5份、桔梗5份、山楂8份、余甘子10份、木瓜10份、甘草7份、鱼腥草5份、玉竹5份；
花类原料：石斛花0.3份、金线莲0.3份、槐花5份、金雀花5份、玫瑰7份、金银花10份、牡丹花5份、百合5份、茉莉花5份、素馨花5份、桂花5份、玫瑰茄5份、勿忘我5份、合欢花5份、菊花7份；
谷物类原料：薏苡仁5份、糙米5份、粳米20份、糯米20份、苦荞5份、紫米5份、皂角米5份、黑豆5份、绿豆5份、红豆5份；
经过如下步骤：
步骤（1），果蔬酵素的发酵：将水果类原料和蔬菜类原料切成片状或块状按原料配比的比例混合，然后加入黄糖，黄糖的质量比上水果类原料与蔬菜类原料的总质量为1:3，再加入水果类原料与蔬菜类原料的总质量的1.0%的食盐，接着加入蒸馏水，蒸馏水体积为水果类原料、蔬菜类原料、黄糖和食盐的总体积的6倍，最后加入乳酸杆菌，乳酸杆菌的接种量为0.05%，搅拌均匀，在常温下密封15天，得到果蔬酵素；
步骤（2），鲜花草本酵素的发酵：将草本植物类原料和花类原料切碎至直径为1～2cm小块按原料配比的比例混合，然后加入黄糖，黄糖的质量比上草本植物类原料和花类原料的总质量为为1:3，再加入草本植物类原料和花类原料的总质量的1.0%的食盐，接着加入蒸馏水，蒸馏水体积为草本植物类原料、花类原料、黄糖和食盐的总体积的6倍，再接着加入乳酸杆菌，乳酸杆菌的接种量为0.05%，常温下密封发酵6天后，得到发酵物料，向发酵物料中加入酵母菌，酵母菌的接种量0.1%，搅拌均匀，继续在常温下密封发酵6天，得到鲜花草本酵素；
步骤（3），谷物酵素的发酵：将谷物类原料按原料配比的比例混合，然后蒸3h，接着加入蒸馏水，蒸馏水体积为谷物类原料体积的6倍，再加入接种量为0.1%的酵母菌，搅拌均匀，密封，在28℃下发酵15天，得到谷物酵素；
步骤（4），混合后二次发酵：将步骤（1）得到的果蔬酵素、步骤（2）得到的鲜花草本酵素和步骤（3）得到的谷物酵素一起混合均匀后，过滤，取滤液，密封，在30℃下发酵15天，用咖啡滤纸过滤，取滤液，静置10天，再次过滤，取滤液，得到复合鲜花果蔬草本酵素。
本实施例复合鲜花果蔬草本酵素的制备方法中所述的乳酸杆菌的制备方法为：将嗜酸乳杆菌、乳酸双歧杆菌和我植物乳酸杆菌按等比例混合，加水溶解，用MRS培养基活化培养；然后将MRS培养好的菌种用BLS液体培养基扩大培养；
所述的MRS培养基组成为：牛肉膏20g，葡萄糖20g，乳糖3g，磷酸氢二钾3g，食盐0.05g，琼脂30g，加水至1000mL；
所述的BLS液体培养基的组成为：蛋白胨10g、牛肉粉5g、葡萄糖20g、磷酸氢二钾2g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁0.2g、氯化钠0.05g、琼脂30g、吐温-802g，加水至1000mL。
本实施例复合鲜花果蔬草本酵素的制备方法中所述的酵母菌的制备方法为：将啤酒酵母、茶酵母、葡萄酒酵母和酵素酵母按等比例混合，接种于麦芽汁斜面试管中，接种量为5%，接种于麦芽汁斜面试管中，于28℃培养38小时活化，置于4℃冰箱中保存备用；
将活化后培养液振荡均匀后，在15Brix的麦芽汁中扩大培养24.5小时，以5％的接种量接种于250mL三角瓶中，装液量为50mL，进行扩大培养。
实施例3
一种复合鲜花果蔬草本酵素，包括按照重量份数计的如下的蔬菜类原料、水果类原料、草本植物类原料、花类原料和谷物类原料：
蔬菜类原料：草菇2份、香菇2份、大枣4份、黑木耳2份、茄子3份、苦瓜5份、冬瓜3份、胡萝卜4份、白萝卜6份、南瓜2份、马铃薯2份、丝瓜4份、小黄瓜3份、秋葵2份、花椰菜3份、地瓜菜4份、空心菜3份、芋头2份、芹菜5份、茭白3份、玉米4份、大白菜2份、菠菜1.8份、苋菜3.5份、芥蓝3份、小白菜4份、龙葵2份、甜椒1.6份、青椒2.5份、豌豆2份、豌豆苗2份、玉米须4.2份、莴苣4份、芦笋4份、甘蓝3份、黄花菜3份；
水果类原料：柠檬7份、菠萝6份、葡萄8份、西红柿4份、青梅6份、苹果3份、柚子2份、葡萄柚4份、椪柑4份、甜橙2份、番石榴3份、香瓜3份、桑葚5份、李子4份、火龙果3份、猕猴桃3份、荔枝4份、桂圆4份、桃子3份、哈密瓜3份、石榴8份、枇杷2份、杨梅9份、樱桃2份、番木瓜3份、金桔6份；
草本植物类原料：仙草4份、枸杞3份、黄精2份、桔梗3份、山楂7份、余甘子7份、木瓜9份、甘草6份、鱼腥草2份、玉竹2份；
花类原料：石斛花0.2份、金线莲0.15份、槐花4份、金雀花4份、玫瑰6份、金银花8份、牡丹花3份、百合3份、茉莉花3份、素馨花4份、桂花2.5份、玫瑰茄3份、勿忘我3份、合欢花3份、菊花6份；
谷物类原料：薏苡仁2份、糙米3份、粳米15份、糯米17份、苦荞4份、紫米3份、皂角米2.8份、黑豆2份、绿豆3.5份、红豆4份；
经过如下步骤：
步骤（1），果蔬酵素的发酵：将水果类原料和蔬菜类原料切成片状或块状按原料配比的比例混合，然后加入黄糖，黄糖的质量比上水果类原料与蔬菜类原料的总质量为1:2.4，再加入水果类原料与蔬菜类原料的总质量的0.6%的食盐，接着加入蒸馏水，蒸馏水体积为水果类原料、蔬菜类原料、黄糖和食盐的总体积的5.5倍，最后加入乳酸杆菌，乳酸杆菌的接种量为0.03%，搅拌均匀，在常温下密封10天，得到果蔬酵素；
步骤（2），鲜花草本酵素的发酵：将草本植物类原料和花类原料切碎至直径为1～2cm小块按原料配比的比例混合，然后加入黄糖，黄糖的质量比上草本植物类原料和花类原料的总质量为为1:2.6，再加入草本植物类原料和花类原料的总质量的0.6%的食盐，接着加入蒸馏水，蒸馏水体积为草本植物类原料、花类原料、黄糖和食盐的总体积的5.3倍，再接着加入乳酸杆菌，乳酸杆菌的接种量为0.01～0.05%，常温下密封发酵5.5天后，得到发酵物料，向发酵物料中加入酵母菌，酵母菌的接种量0.07%，搅拌均匀，继续在常温下密封发酵5.5天，得到鲜花草本酵素；
步骤（3），谷物酵素的发酵：将谷物类原料按原料配比的比例混合，然后蒸2.7h，接着加入蒸馏水，蒸馏水体积为谷物类原料体积的5.4倍，再加入接种量为0.06%的酵母菌，搅拌均匀，密封，在27℃下发酵13天，得到谷物酵素；
步骤（4），混合后二次发酵：将步骤（1）得到的果蔬酵素、步骤（2）得到的鲜花草本酵素和步骤（3）得到的谷物酵素一起混合均匀后，过滤，取滤液，密封，在27℃下发酵10天，用咖啡滤纸过滤，取滤液，静置8天，再次过滤，取滤液，得到复合鲜花果蔬草本酵素。
本实施例复合鲜花果蔬草本酵素的制备方法中所述的乳酸杆菌的制备方法为：将嗜酸乳杆菌、乳酸双歧杆菌和我植物乳酸杆菌按等比例混合，加水溶解，用MRS培养基活化培养；然后将MRS培养好的菌种用BLS液体培养基扩大培养；
所述的MRS培养基组成为：牛肉膏16g，葡萄糖13g，乳糖2.5g，磷酸氢二钾2.4g，食盐0.03g，琼脂24g，加水至1000mL；
所述的BLS液体培养基的组成为：蛋白胨7g、牛肉粉4g、葡萄糖14g、磷酸氢二钾1.3g、磷酸二氢钾1.5g、硫酸镁0.17g、氯化钠0.04g、琼脂25g、吐温-801.4g，加水至1000mL。
本实施例复合鲜花果蔬草本酵素的制备方法中所述的酵母菌的制备方法为：将啤酒酵母、茶酵母、葡萄酒酵母和酵素酵母按等比例混合，接种于麦芽汁斜面试管中，接种量为4%，接种于麦芽汁斜面试管中，于26℃培养36小时活化，置于4℃冰箱中保存备用；
将活化后培养液振荡均匀后，在13Brix的麦芽汁中扩大培养24小时，以4％的接种量接种于250mL三角瓶中，装液量为47mL，进行扩大培养。
应用例1
一种植物酵素软饮料，采用实施例1制得的复合鲜花果蔬草本酵素，其制备方法为：按照重量份数计，将复合鲜花果蔬草本酵素10份、木糖醇1份、CMC-Na1份和竹叶黄酮0.8份，加矿泉水至100份后，混合均匀，灭菌，灌装，保存，得到植物酵素软饮料。
应用例2
一种植物酵素软饮料，采用实施例1制得的复合鲜花果蔬草本酵素，其制备方法为：按照重量份数计，将复合鲜花果蔬草本酵素30份、木糖醇5份、CMC-Na5份和竹叶黄酮1.2份，加矿泉水至100份后，混合均匀，灭菌，灌装，保存，得到植物酵素软饮料。
应用例3
一种植物酵素软饮料，采用实施例1制得的复合鲜花果蔬草本酵素，其制备方法为：按照重量份数计，将复合鲜花果蔬草本酵素22份、木糖醇3份、CMC-Na4份和竹叶黄酮1份，加矿泉水至100份后，混合均匀，灭菌，灌装，保存，得到植物酵素软饮料。
应用例4
一种植物酵素粉，采用实施例2制得的复合鲜花果蔬草本酵素，其制备方法为：按照重量份数计，将复合鲜花果蔬草本酵素50份、乳糖1份、木糖醇1份和麦芽糊精1份混合均匀，40℃以下低温干燥，粉碎，分包装，保存，得到植物酵素粉。
应用例5
一种植物酵素粉，采用实施例2制得的复合鲜花果蔬草本酵素，其制备方法为：按照重量份数计，将复合鲜花果蔬草本酵素80份、乳糖5份、木糖醇5份和麦芽糊精10份混合均匀，40℃以下低温干燥，粉碎，分包装，保存，得到植物酵素粉。
应用例6
一种植物酵素粉，采用实施例2制得的复合鲜花果蔬草本酵素，其制备方法为：按照重量份数计，将复合鲜花果蔬草本酵素70份、乳糖3份、木糖醇4份和麦芽糊精6份混合均匀，40℃以下低温干燥，粉碎，分包装，保存，得到植物酵素粉。
应用例7
一种植物酵素片，采用实施例3制得的复合鲜花果蔬草本酵素，包括按照重量份数计的如下组分：复合鲜花果蔬草本酵素30份，可压性淀粉20份，乳糖1份，硬脂酸镁1份，微晶纤维素1份。若采用酵素粉添加，可采用粉末直接压片方法制备，若为酵素液，采用湿法制粒法制备。该酵素片的使用方法为，每日1～2片，口服。
应用例8
一种植物酵素片，采用实施例3制得的复合鲜花果蔬草本酵素，包括按照重量份数计的如下组分：复合鲜花果蔬草本酵素50份，可压性淀粉30份，乳糖5份，硬脂酸镁2份，微晶纤维素5份。若采用酵素粉添加，可采用粉末直接压片方法制备，若为酵素液，采用湿法制粒法制备。该酵素片的使用方法为，每日1～2片，口服。
应用例9
一种植物酵素片，采用实施例3制得的复合鲜花果蔬草本酵素，包括按照重量份数计的如下组分：复合鲜花果蔬草本酵素40份，可压性淀粉27份，乳糖4份，硬脂酸镁1.6份，微晶纤维素3份。若采用酵素粉添加，可采用粉末直接压片方法制备，若为酵素液，采用湿法制粒法制备。该酵素片的使用方法为，每日1～2片，口服。
应用例10
本发明制得的复合鲜花果蔬草本酵素可以作为添加剂，添加到牙膏、洗发液、沐浴露、洗面奶或香皂中，制作成酵素牙膏、酵素洗发液、酵素沐浴露、酵素洗面奶或酵素香皂，添加的质量百分数为1～5%。
复合酵素的检测
1、酶活力测定
对本发明所制备的复合鲜花果蔬草本酵素进行了酶活力测定，主要测定了抗氧化物歧化酶和过氧化氢酶的活力，发酵后的酶主要是超氧化物歧化酶、蛋白酶、脂肪酶。蛋白酶的测定采用国家标准QB/T1803-1993方法，蛋白酶活力为50.72u/mL，用此法测定的木瓜蛋白酶活力仅为9.38u/mL（罗远秀，2000）；脂肪酶测定采用对硝基苯酚法，酶活力为18.7u/mL，略低于同法测定菠萝皮所含脂肪酶，菠萝的酶活力为43.66u/mL（谵素华，2004）；超氧化物歧化酶的酶活力测定采用SOD邻苯三酚测活法测定，酶活力为128u/mL，相当于蜂王浆的酶活力；过氧化物酶采用愈创木酚法测量酶活力，23.1u/mL，相同测定条件下，比玉米的酶活力高10倍。酶是人体内新陈代谢的催化剂，只有酶存在，人体内才能进行各项生化反应。人体内酶越多，越完整，其生命就越健康。当人体内没有了活性酶，生命也就结束。人类的疾病，大多数均与酶缺乏或合成障碍有关。其中，超氧化物歧化酶能清除人体内过多的有害的氧自由，是对健康的有益的功效成分。具有调节血脂的保健作用，可预防动脉粥样硬化，预防高血脂引起的心脑血管疾病。降低脂质过氧化物的含量。脂肪酶能消解体内多余的脂肪，蛋白酶能促进蛋白质的吸收和消化，达到瘦身排毒的作用，本发明的酵素含有高活力单位的酶，是一种天然保健饮品。
2、微生物检测结果
对本发明所制备的复合鲜花果蔬草本酵素进行了微生物检测，结果如表1所示。
表1
检测和判定依据为：
GB4789.2-2010《食品微生物学检验菌落总数测定》
GB4789.3-2010《食品微生物学检验大肠菌群计数》
GB4789.15-2010《食品微生物学检验霉菌和酵母计数》
GB4789.4-2010《食品微生物学检验沙门氏菌检验》
GB4789.5-2012《食品微生物学检验志贺氏菌检验》
GB4789.10-2010《食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验》
GB4789.7-2013《食品微生物学检验副溶血性弧菌检验》
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定 。
Claims (10)
1.一种复合鲜花果蔬草本酵素，其特征在于，包括按照重量份数计的如下的蔬菜类原料、水果类原料、草本植物类原料、花类原料和谷物类原料：
蔬菜类原料：草菇1～3份、香菇1～3份、大枣1～5份、黑木耳1～5份、茄子1～5份、苦瓜2～7份、冬瓜1～5份、胡萝卜1～5份、白萝卜2～7份、南瓜1～5份、马铃薯1～5份、丝瓜1～5份、小黄瓜1～5份、秋葵1～3份、花椰菜1～5份、地瓜菜1～5份、空心菜1～5份、芋头1～3份、芹菜2～7份、茭白1～5份、玉米1～5份、大白菜1～5份、菠菜1～5份、苋菜1～5份、芥蓝1～5份、小白菜1～5份、龙葵1～5份、甜椒1～2份、青椒1～3份、豌豆1～5份、豌豆苗1～5份、玉米须1～5份、莴苣1～5份、芦笋1～5份、甘蓝1～5份、黄花菜1～5份；
水果类原料：柠檬5～10份、菠萝2～7份、葡萄5～10份、西红柿1～5份、青梅4～10份、苹果1～5份、柚子1～5份、葡萄柚2～7份、椪柑1～5份、甜橙1～5份、番石榴1～5份、香瓜1～5份、桑葚2～7份、李子1～5份、火龙果1～5份、猕猴桃2～5份、荔枝1～5份、桂圆1～5份、桃子1～5份、哈密瓜1～5份、石榴5～10份、枇杷1～5份、杨梅5～10份、樱桃1～5份、番木瓜1～5份、金桔5～10份；
草本植物类原料：仙草1～5份、枸杞1～5份、黄精1～5份、桔梗1～5份、山楂5～8份、余甘子5～10份、木瓜5～10份、甘草2～7份、鱼腥草1～5份、玉竹1～5份；
花类原料：石斛花0.1～0.3份、金线莲0.1～0.3份、槐花1～5份、金雀花1～5份、玫瑰2～7份、金银花3～10份、牡丹花1～5份、百合1～5份、茉莉花1～5份、素馨花1～5份、桂花1～5份、玫瑰茄1～5份、勿忘我1～5份、合欢花1～5份、菊花2～7份；
谷物类原料：薏苡仁1～5份、糙米1～5份、粳米10～20份、糯米10～20份、苦荞1～5份、紫米1～5份、皂角米1～5份、黑豆1～5份、绿豆1～5份、红豆1～5份；
经过发酵制成。
2.权利要求1所述的复合鲜花果蔬草本酵素的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤（1），果蔬酵素的发酵：将水果类原料和蔬菜类原料切成片状或块状按原料配比的比例混合，然后加入黄糖，黄糖的质量比上水果类原料与蔬菜类原料的总质量为1:2～3，再加入水果类原料与蔬菜类原料的总质量的0.1～1.0%的食盐，接着加入蒸馏水，蒸馏水体积为水果类原料、蔬菜类原料、黄糖和食盐的总体积的5～6倍，最后加入乳酸杆菌，乳酸杆菌的接种量为0.01～0.05%，搅拌均匀，在常温下密封7～15天，得到果蔬酵素；
步骤（2），鲜花草本酵素的发酵：将草本植物类原料和花类原料切碎至直径为1～2cm小块按原料配比的比例混合，然后加入黄糖，黄糖的质量比上草本植物类原料和花类原料的总质量为为1:2～3，再加入草本植物类原料和花类原料的总质量的0.1～1.0%的食盐，接着加入蒸馏水，蒸馏水体积为草本植物类原料、花类原料、黄糖和食盐的总体积的5～6倍，再接着加入乳酸杆菌，乳酸杆菌的接种量为0.01～0.05%，常温下密封发酵5～6天后，得到发酵物料，向发酵物料中加入酵母菌，酵母菌的接种量0.01～0.1%，搅拌均匀，继续在常温下密封发酵5～6天，得到鲜花草本酵素；
步骤（3），谷物酵素的发酵：将谷物类原料按原料配比的比例混合，然后蒸至所有谷物都蒸软透心，接着加入蒸馏水，蒸馏水体积为谷物类原料体积的5～6倍，再加入接种量为0.01～0.1%的酵母菌，搅拌均匀，密封，在25～28℃下发酵7～15天，得到谷物酵素；
步骤（4），混合后二次发酵：将步骤（1）得到的果蔬酵素、步骤（2）得到的鲜花草本酵素和步骤（3）得到的谷物酵素一起混合均匀后，过滤，取滤液，密封，在25～30℃下发酵7～15天，用咖啡滤纸过滤，取滤液，静置5～10天，再次过滤，取滤液，得到复合鲜花果蔬草本酵素。
3.根据权利要求2所述的复合鲜花果蔬草本酵素的制备方法，其特征在于，所述的步骤（3）蒸至所有谷物都蒸软透心需要蒸2～3h。
4.根据权利要求2所述的复合鲜花果蔬草本酵素的制备方法，其特征在于，所述的乳酸杆菌的培养方法为：将嗜酸乳杆菌、乳酸双歧杆菌和我植物乳酸杆菌按等比例混合，加水溶解，用MRS培养基活化培养；然后将MRS培养好的菌种用BLS液体培养基扩大培养；
所述的MRS培养基组成为：牛肉膏10～20g，葡萄糖10～20g，乳糖2～3g，磷酸氢二钾2～3g，食盐0.01～0.05g，琼脂20～30g，加水至1000mL；
所述的BLS液体培养基的组成为：蛋白胨5～10g、牛肉粉3～5g、葡萄糖10～20g、磷酸氢二钾1～2g、磷酸二氢钾1～2g、硫酸镁0.1～0.2g、氯化钠0.01～0.05g、琼脂20～30g、吐温-801～2g，加水至1000mL。
5.根据权利要求2所述的复合鲜花果蔬草本酵素的制备方法，其特征在于，所述的酵母菌的培养方法为：将啤酒酵母、茶酵母、葡萄酒酵母和酵素酵母按等比例混合，接种于麦芽汁斜面试管中，接种量为3～5%，于25～28℃培养36±2小时活化，置于4℃冰箱中保存备用；
将活化后培养液振荡均匀后，在10～15Brix的麦芽汁中扩大培养24±0.5小时，以3～5％的接种量接种，进行扩大培养。
6.根据权利要求5所述的复合鲜花果蔬草本酵素的制备方法，其特征在于，所述扩大培养时接种于250mL三角瓶中，装液量为40～50mL。
7.权利要求1所述的复合鲜花果蔬草本酵素在制备植物酵素软饮料中的应用，其特征在于，按照重量份数计，将复合鲜花果蔬草本酵素10～30份、木糖醇1～5份、CMC-Na1～5份和竹叶黄酮0.8～1.2份，加矿泉水至100份后，混合均匀，灭菌，灌装，保存，得到植物酵素软饮料。
8.权利要求1所述的复合鲜花果蔬草本酵素在制备植物酵素粉中的应用，其特征在于，按照重量份数计，将复合鲜花果蔬草本酵素50～80份、乳糖1～5份、木糖醇1～5份和麦芽糊精1～10份混合均匀，40℃以下低温干燥，粉碎，分包装，保存，得到植物酵素粉。
9.权利要求1所述的复合鲜花果蔬草本酵素在制备植物酵素片中的应用，其特征在于，所述的酵素片包括按照重量份数计的如下组分：复合鲜花果蔬草本酵素30～50份，可压性淀粉20～30份，乳糖1～5份，硬脂酸镁1～2份，微晶纤维素1～5份混合均匀，压制成植物酵素片。
10.权利要求1所述的复合鲜花果蔬草本酵素在制备添加剂中的应用，其特征在于，添加到牙膏、洗发液、沐浴露、洗面奶或香皂中，制作成酵素牙膏、酵素洗发液、酵素沐浴露、酵素洗面奶或酵素香皂，添加的质量百分数为1～5%。
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