CN104945524A

CN104945524A - 活化成纤维细胞生长因子受体的n-硫酸盐低聚糖,其制备,及其治疗用途

Info

Publication number: CN104945524A
Application number: CN201510262907.XA
Authority: CN
Inventors: P.杜肖索伊; P.方斯; A.弗洛伊德比斯
Original assignee: Sanofi Aventis France
Current assignee: Sanofi Aventis France
Priority date: 2009-08-14
Filing date: 2010-08-12
Publication date: 2015-09-30
Also published as: EP2464359A2; CN102625704B; WO2011018587A3; MX2012001945A; CA2771055C; IL218069A0; JP5732460B2; FR2949115B1; CA2771055A1; SG178406A1; RU2559629C2; JP2013501838A; MY160505A; AU2010283613B2; RU2012109572A; US20120202769A1; KR20120059552A; IL218069A; BR112012002980A2; WO2011018587A2

Abstract

本发明涉及活化FGF受体的具有式(I)的N-硫酸盐低聚糖，其中R₁、R₄、R₆和R₈为-OSO₃-或羟基，R₂为-O-烷基或具有式(II)的单糖基团，R₃为具有式(III)的二糖基团，R₅为具有式(IV)的二糖基团，R₇为羟基或具有式(VI)的二糖基团，以及R₉为羟基或-O-烷基或具有式(VII)的二糖基团，其中R₁₀为-O-烷基。本发明还涉及所述低聚糖的制备及其治疗用途。

Description

活化成纤维细胞生长因子受体的N-硫酸盐低聚糖,其制备,及其治疗用途

本发明申请是基于申请日为2010年8月12日，申请号为201080046342.7(国际申请号为PCT/FR2010/051702)，发明名称为“活化成纤维细胞生长因子受体的N-硫酸盐低聚糖，其制备，及其治疗用途”的专利申请的分案申请。

技术领域

本发明涉及N-硫酸盐低聚糖，其为FGF/FGFR体系的激动剂，以及涉及它们的制备和治疗用途。

背景技术

血管发生是生成新毛细血管的过程。在血管的堵塞期间，与动脉生成(毛细血管的扩张)结合的血管发生改善堵塞区域的血管重建。已经在体外和体内显示出，几种生长因子，例如成纤维细胞生长因子(FGF)，刺激新生血管形成过程。

FGF是23个成员的家族。FGF2(或碱性FGF(basic FGF))是18kDa蛋白。FGF2在培养中的内皮细胞中诱导它们的增殖和迁移以及蛋白酶的产生。在体内，FGF2促进新生血管形成。FGF2经两类受体与内皮细胞相互作用，这两类受体即具有酪氨酸激酶活性的高亲和性受体(FGFR)和硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPG)类型的低亲和性受体。

已知的是，具有酪氨酸激酶活性的细胞表面受体以二聚体形式与由两个配体分子和一个硫酸乙酰肝素分子形成的络合物相关联。这种络合物的形成触发一连串的细胞内信号，导致细胞增殖和迁移的活化，所述细胞增殖和迁移是在血管发生中牵涉的两种主要过程。

因此，对于针对活化或抑制血管发生过程的治疗，FGF2及其受体是非常恰当的靶标。

合成低聚糖也已经是与FGF受体相互作用的研究主题，并且已经显示出对FGF-2与平滑肌细胞上它的受体结合的抑制作用，IC50为16μg/mL，并且还抑制由FGF-2诱导的这些细胞的增殖，IC50约为23μg/mL(C.Tabeur et al.,Bioorg.&Med.Chem.,1999,7,2003-2012；C.Noti et al.,Chem.Eur.J.,2006,12,8664-8686)。

发明内容

我们现在已经发现了新的合成低聚糖，其能够促进FGF/FGFR络合物的形成并因此能够促进内皮细胞的体外存活和能够提高新血管的体外和体内形成。

本发明的一个主题是对应于式(I)的新的低聚糖化合物:

其中：

-R₁表示基团-OSO₃ ^-或羟基，

-R₂表示基团-O-烷基或式(II)的单糖基团，其中R表示烷基：

-R₃表示式(III)的二糖基团:

其中：

-R₄表示基团-OSO₃ ^-或羟基，

-R₅表示式(IV)的二糖基团：

其中：

-R₆表示基团-OSO₃ ^-或羟基，

-R₇表示羟基或式(VI)的二糖基团：

其中：

-R₈表示基团-OSO₃ ^-或羟基，

-R₉表示羟基或基团-O-烷基，或式(VII)的二糖基团：

其中R₁₀表示基团-O-烷基，

条件是：当R₂表示如上定义的式(II)的单糖基团时，R₉表示羟基或基团-O-烷基；当R₂表示基团-O-烷基时，R₇表示如上定义的式(VI)的二糖基团；以及R₁、R₄、R₆和R₈不同时表示羟基。

在本发明的上下文中，除非在上下文中另作说明，将术语“烷基”理解为表示含1-4个碳原子的直链或支链的饱和脂族基团。可提及的实例包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基和叔丁基。在本发明化合物(包括下文将定义的化合物的每个亚组)中，烷基有利地表示甲基，除了取代基R₉和R₁₀，在R₉和R₁₀中基团-O-烷基的烷基有利地表示丙基。

本发明化合物是合成低聚糖，即，它们是通过从中间体合成子开始的全合成得到的化合物，如下文中所详述。在这方面，它们不同于通过从多糖如肝素或低分子量肝素的复合混合物解聚或分离得到的低聚糖。具体地，本发明化合物具有由它们的化学合成导致的明确定义的结构，并且为纯低聚糖的形式，即，它们不含其它低聚糖物类。

本发明涵盖呈酸的形式或其任何药用盐的形式的式(I)化合物。在酸形式中，官能团-COO^-和-SO₃ ^-分别为-COOH和-SO₃H形式。

术语“本发明化合物的药用盐”是指这样的化合物，即，其中官能团-COO^-和/或-SO₃ ^-中的一个或多个以离子形式与药用阳离子连接。本发明的优选盐是这样的盐，即，其中所述阳离子选自碱金属阳离子，尤其是Na⁺阳离子。

本发明式(I)化合物也包括这样的化合物，即，其中一个或多个氢或碳原子被放射性同位素(例如氚或碳¹⁴C)替代。这种标记化合物可用于考察、代谢或药代动力学研究，在生物化学实验中作为配体。

在本发明化合物的式(I)中，应理解的是：

-式(II)的单糖经位于其糖醛酸单元4位的氧原子与式(I)表示的二糖单元连接，

-式(III)的二糖经位于其葡糖胺单元1位的氧原子与式(I)表示的二糖单元连接，

-类似地，式(IV)的二糖经位于其葡糖胺单元1位的氧原子与式(III)的二糖连接，

-类似地，式(VI)的二糖经位于其葡糖胺单元1位的氧原子与式(IV)的二糖连接，

-类似地，式(VII)的二糖经位于其葡糖胺单元1位的氧原子与式(VI)的二糖连接。

术语“葡糖胺单元”表示具有下式的单糖单元：

存在于本发明化合物中的其它类型的糖单元是糖醛酸，更具体地，对应于下式的艾杜糖醛酸：

因此，本发明的式(I)化合物也可根据式(I’)如下表示，其中艾杜糖醛酸单元和葡糖胺单元交替出现并且其中R₁、R₂、R₄、R₆和R₇如前面所定义：

取决于R₂和R₇的含义，本发明低聚糖因此可包含7–10个糖单元。

在作为本发明主题的式(I)/(I’)化合物中，可提及这样的化合物，其中：

-R₁、R₃、R₄、R₅和R₆如前面所定义，

-R₂表示前面定义的式(II)的单糖基团，以及

-R₇表示羟基。

这种化合物为七糖(heptasaccharides)。它们对应于下式(I-1)，其中R₇表示羟基以及R、R₁、R₄和R₆如前面所定义，以及呈酸的形式或其任何药用盐的形式。

在作为本发明主题的式(I)/(I’)化合物中，可提及这样的化合物亚组，其中R₂表示基团-O-烷基。

这种化合物为八糖或十糖。它们对应于下式(I-2)，其中R₁、R₄、R₆、R₈和R₉如前面所定义以及R₂表示基团-O-烷基，以及呈酸的形式或其任何药用盐的形式。

在作为本发明主题的式(I)/(I’)化合物中，可提及这样的化合物亚组，其中：

-R₂表示基团-O-烷基，以及

-R₇表示如上定义的式(VI)的二糖基团，其中R₉表示如上定义的式(VII)的二糖基团。

这种化合物为十糖。它们对应于下式(I-3)，其中R₁、R₄、R₆、R₈和R₁₀如前面所定义，以及呈酸的形式或其任何药用盐的形式。

在作为本发明主题的式(I)化合物中，可提及这样的化合物亚组，其中：

-R₂表示基团-O-烷基，以及

-R₇表示如上定义的式(VI)的二糖基团，其中R₉表示羟基或基团-O-烷基。

这种化合物为八糖并对应于上式(I-2)，其中R₁、R₄、R₆和R₈如前面所定义，R₂表示基团-O-烷基以及R₉表示羟基或基团-O-烷基。

有利地，本发明的八糖是R₉表示基团-O-烷基的八糖。

本发明化合物的其它亚组可具有上面对于前面定义的每个亚组列出的特征中的几个。

本发明具体涉及下列低聚糖：

-甲基(4-O-丙基-2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]₂-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖苷(No.1)；

-甲基(4-O-丙基-2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]₃-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖苷(No.2)；

-[甲基(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]₂-2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖苷]-醛酸钠(No.3)；

-甲基(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖苷(No.4)；

-甲基(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖苷(No.5)；

-甲基(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖苷(No.6)；

-甲基(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖苷(No.7)；

-甲基(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-[(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)]₂-(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖苷(No.8)；

-甲基(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-[(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)]₂-(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-2-脱氧-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖苷(No.9)。

原则上，制备本发明化合物的方法使用如先前在文献中报导而制备的二聚糖或低聚糖合成子。具体地，参见专利或专利申请EP 0 300 099、EP 0 529 715、EP 0 621 282和EP 0 649 854，以及C.Van Boeckel和M.Petitou在Angew.Chem.Int.Ed.Engl.,1993,32,1671-1690中出版的出版物。然后将这些合成子偶联在一起，以得到本发明化合物的完全保护的等价物。然后将这种保护的等价物转化成本发明化合物。在上述偶联反应中，在异头碳上活化的“供体”二聚糖或低聚糖与带有游离羟基的“受体”二聚糖或低聚糖反应。

本发明因此涉及制备式(I)/(I’)化合物的方法，其特征在于：

-在第一阶段中，合成希望的化合物(I)的完全保护的等价物，

-在第二阶段中，将基团-COO^-和-OSO₃ ^-引入和/或暴露，

-在第三阶段中，将整个化合物去保护，以及

-在第四阶段中，引入N-硫酸盐基团。

希望的化合物(I)的完全保护的等价物的合成根据本领域技术人员公知的反应和使用合成低聚糖的方法(例如G.J.Boons,Tetrahedron(1996),52,1095-1121以及专利申请WO 98/03554和WO 99/36443)实施，其中使供给糖苷键的低聚糖与接受糖苷键的低聚糖偶联，以得到另一种低聚糖，其尺寸等于两种反应性物质的尺寸之和。重复这种顺序，直到得到式(I)/(I’)化合物，其任选呈被保护的形式。根据本领域技术人员熟知的规则，最终希望的化合物的电荷的性质和分布决定在各个合成步骤中使用的化学物质的性质。例如可参见C.Van Boeckel和M.Petitou,Angew.Chem.Int.Ed.Engl.(1993),32,1671-1690，或者可选择地，参见H.Paulsen,“Advances in selective chemicalsyntheses of complex oligosaccharides”,Angew.Chem.Int.Ed.Engl.(1982),21,155-173。

自然地，本发明化合物可使用低聚糖合成领域的技术人员已知的各种策略制备。上述方法是本发明的优选方法。然而，式(I)/(I’)化合物可经糖化学的其它熟知方法制备，例如描述于“Monosaccharides,their chemistry and theirroles in natural products”,P.M.Collins和R.J.Ferrier,J.Wiley&Sons(1995)和G.J.Boons的Tetrahedron(1996),52,1095-1121。

在制备式(I)/(I’)化合物的方法中使用的保护基团是这样的基团，这些基团使得首先在合成中保护反应性官能团如羟基或胺，其次在合成的末尾重新产生完整的反应性官能团。使用在糖化学中常用的保护基团来实施本发明方法，例如，如"Protective Groups in Organic Synthesis",Greene et al.,3rdedition(John Wiley&Sons,Inc.,New York)中所述。保护基团例如选自乙酰基、卤代甲基、苯甲酰基、乙酰丙酰基(levulinyl)、苄基、烯丙基、叔丁基二苯基甲硅烷基(tBDPS)。

也可使用活化基团；这些活化基团是在糖化学中常规使用的基团，例如根据G.J.Boons,Tetrahedron(1996),52,1095-1121。这些活化基团例如选自酰亚胺化物和硫代糖苷。

上述方法允许以盐的形式得到本发明化合物，有利地以钠盐的形式。为得到相应的酸，可使盐形式的本发明化合物与酸形式的阳离子交换树脂接触。然后可用碱中和酸形式的本发明化合物，以得到希望的盐。为了制备式(I)/(I’)化合物的盐，可使用与式(I)/(I’)化合物得到药用盐的任何无机碱或有机碱。

本发明的主题也是下式20A的化合物，其中Pg、Pg’和Pg”可相同或不同，表示保护基团：

这种化合物在式(I)/(I’)化合物的合成中可用作中间体。

具体地，本发明的主题是化合物20A，其中Pg、Pg’和Pg”分别表示苄基、烯丙基和乙酰基。这种化合物对应于下面在方案2中说明的二糖20，可用于合成本发明化合物1和2，如下文详述:

具体实施方式

随后的实施例描述根据本发明某些化合物和合成中间体的制备。这些化合物是非限制性的，仅用于说明本发明。当起始化合物和试剂的制备方式未明确描述时，这些起始化合物和试剂可商购或描述在文献中，或者可根据文献中描述的方法制备或者是本领域技术人员已知的。

使用下列缩写：

[α]_D：旋光度

Ac：乙酰基

All：烯丙基

Bn：苄基

Bz：苯甲酰基

TLC：薄层色谱法

CrO₃：三氧化铬

DDQ：2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌

ESI：电喷雾离子化

h：小时

H₂SO₄：硫酸

Lev：乙酰丙酰基

Me：甲基

min：分钟

Rf：滞留因数(在TLC上测量的保留系数与溶剂迁移前沿的比值)

tBDPS：叔丁基二苯基甲硅烷基

Z：苯甲氧基羰基

制备合成中间体:

方案1：制备供体二糖15

(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-乙酰丙酰基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸苄基酯)-(1→4)-1,6-脱水-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(12)

向化合物11(11.6g，16.2mmol)(在专利申请WO 2006/021653的化合物8的制备中描述)在无水二噁烷(340mL)中的溶液相继添加4-二甲基氨基吡啶(2.12g，17.3mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(6.5g，34.3mmol)和乙酰丙酸(3.6mL；34.3mmol)。在搅拌4小时30分钟后，用二氯甲烷(1800mL)稀释混合物。将有机相相继用10％硫酸氢钾水溶液，用饱和氯化钠溶液，用饱和碳酸氢钠水溶液和用水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发至干。通过色谱法在硅胶柱(5/1v/v甲苯/丙酮)上纯化残留物，得到12.7g化合物12。

TLC：Rf＝0.42，硅胶，3/1v/v甲苯/丙酮

(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-乙酰丙酰基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸苄基酯)-(1→4)-1,6-二-O-乙酰基-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α,β-D-吡喃葡萄糖(13)

在0℃向化合物12(12.76g，16.2mmol)在乙酸酐(160mL)中的溶液添加三氟乙酸(14.1mL，183mmol)。将反应介质在室温搅拌16小时。在浓缩后，将混合物与甲苯共蒸发。通过色谱法在硅胶柱(4/1v/v甲苯/丙酮)上纯化残留物，得到10.5g化合物13。

TLC：Rf＝0.49，硅胶，(4/1v/v甲苯/丙酮)

(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-乙酰丙酰基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸苄基酯)-(1→4)-6-O-乙酰基-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α,β-D-吡喃葡萄糖(14)

将化合物13(10.5g，12.0mmol)和苄胺(50mL，457mmol)在***(360mL)中的溶液在室温搅拌2小时。用***(2000mL)稀释反应混合物。将有机相相继用冷的1M盐酸水溶液和用水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩至干。在硅胶柱(3/1v/v甲苯/丙酮)上色谱纯化残留物，得到7.14g化合物14。

TLC：Rf＝0.40，硅胶，3/1v/v甲苯/丙酮

(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-乙酰丙酰基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸苄基酯)-(1→4)-6-O-乙酰基-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α,β-D-吡喃葡萄糖三氯乙酰亚胺酯(15)

将三氯乙腈(4.3mL，42.8mmol)和碳酸铯(1.89g，13.7mmol)添加至化合物14(7.14g，8.56mmol)在二氯甲烷(160mL)中的溶液。在搅拌30分钟后，将反应介质过滤并浓缩。通过色谱法在硅胶柱(2/1v/v甲苯/丙酮+0.1％三乙胺)上纯化残留物，得到7.0g化合物15。

TLC：Rf＝0.37和0.28，硅胶，2/1v/v甲苯/丙酮

方案2：制备糖基供体20

(2-O-乙酰基-4-O-(烯丙氧基)羰基-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸苄基酯)-(1→4)-1,6-脱水-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(16)

在0℃向化合物11(11.7g，17.3mmol)(在专利申请WO 2006/021653的化合物8的制备中描述)在无水四氢呋喃中的溶液相继添加吡啶(14mL；173mmol)、4-二甲基氨基吡啶(2.12g，17.3mmol)和氯甲酸烯丙酯(18.3mL，173mmol)。在室温搅拌16小时后，在0℃添加水(47mL)。在搅拌30分钟后，用乙酸乙酯(800mL)稀释混合物。将有机相相继用10％硫酸氢钾水溶液和水然后用饱和碳酸氢钠水溶液和水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发至干。通过色谱法在硅胶柱(2/1v/v环己烷/乙酸乙酯)上纯化残留物，得到11.4g化合物16。

TLC：Rf＝0.37，硅胶，2/1v/v环己烷/乙酸乙酯。

(2-O-乙酰基-4-O-烯丙基-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸苄基酯)-(1→4)-1,6-脱水-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(17)

将化合物16(11.44g，15.1mmol)溶解在四氢呋喃(100mL)中。添加乙酸钯(67.6mg，0.30mmol)和三苯基膦(395mg，1.5mmol)。在回流下搅拌2小时后，将反应介质浓缩至干。通过色谱法在硅胶柱(3/1v/v环己烷/乙酸乙酯)上纯化残留物，得到8.0g化合物17。

TLC：Rf＝0.33，硅胶，2/1v/v环己烷/乙酸乙酯。

(2-O-乙酰基-4-O-烯丙基-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸苄基酯)-(1→4)-1,6-二-O-乙酰基-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α,β-D-吡喃葡萄糖(18)

向化合物16(7.96g，11.1mmol)在乙酸酐(105mL)中的冷却至0℃的溶液添加三氟乙酸(9.4mL)。将反应介质在室温搅拌16小时。在浓缩后，将混合物与甲苯(5x 200mL)共蒸发。通过色谱法在硅胶柱(2/1v/v环己烷/乙酸乙酯)上纯化残留物，得到7.72g化合物18。

TLC：Rf＝0.40，硅胶，2/1v/v环己烷/乙酸乙酯

(2-O-乙酰基-4-O-烯丙基-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸苄基酯)-(1→4)-6-O-乙酰基-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α,β-D-吡喃葡萄糖(19)

将化合物18(7.72g，9.44mmol)和苄胺(3.9mL，35.2mmol)在***(280mL)中的溶液在室温搅拌6小时。用***(800mL)稀释反应混合物。将有机相用1M盐酸水溶液然后用水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩至干。通过色谱法在硅胶柱(5/2v/v甲苯/乙酸乙酯)上纯化残留物，得到6.14g化合物19。

TLC：Rf＝0.45，硅胶，5/3v/v甲苯/乙酸乙酯

(2-O-乙酰基-4-O-烯丙基-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸苄基酯)-(1→4)-6-O-乙酰基-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α,β-D-吡喃葡萄糖三氯乙酰亚胺酯(20)

将三氯乙腈(4mL，39.6mmol)和碳酸铯(4.13g，12.7mmol)添加至化合物19(6.14g，7.9mmol)在二氯甲烷(150mL)中的溶液。在搅拌30分钟后，将反应介质过滤并浓缩。通过色谱法在硅胶柱(4/1v/v甲苯/乙酸乙酯)上纯化残留物，得到6.5g化合物20。

TLC：Rf＝0.50，硅胶，3/1v/v甲苯/乙酸乙酯

异头质子的化学位移(500MHz，CDCl₃)δ5.27IdoUA^II，5.57Glc^Iβ和5.28IdoUA^II，6.36Glc^Iα

LC-MS m/z 798.2[(M+Na)⁺]。T_R1＝13.59min以及T_R2＝13.75min

方案3：制备八糖26

甲基(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-乙酰丙酰基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸苄基酯)-(1→4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-6-O-乙酰基-3-O-苄基-2-{[(苯甲氧基)羰基]氨基}-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(22)

将酰亚胺酯15(541mg，0.553mmol)、糖基受体21(650mg，0.83mmol)(根据Carbohydrate Research(1987),16767-75中所述的方法制备)和粉状分子筛(412mg)在甲苯/二氯甲烷混合物(23mL，20/3v/v)中的混合物在氩气氛下于25℃搅拌1小时。将反应混合物冷却至-25℃并将三氟甲磺酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯在二氯甲烷(82.5μL)中的1M溶液添加至反应介质。在15分钟后，通过添加固体碳酸氢钠中和反应介质。在过滤和浓缩后，通过尺寸排阻色谱法(LH20，120x 3cm，1/1v/v二氯甲烷/乙醇)纯化所得残留物，得到746mg化合物22。

TLC：Rf＝0.37，硅胶，5/6v/v环己烷/乙酸乙酯。

甲基(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸苄基酯)-(1→4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-乙酰基-3-O- 苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-6-O-乙酰基-3-O-苄基-2-{[(苯甲氧基)羰基]氨基}-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(23)

向化合物22(2.3g，1.44mmol)在1/2v/v甲苯/乙醇混合物(290mL)中的溶液添加乙酸肼(662.3mg，7.2mmol)。将反应介质在室温搅拌2小时。在浓缩后，通过快速色谱法在硅胶柱(5/6v/v环己烷/乙酸乙酯)上纯化残留物，得到1.84g化合物23。

TLC：Rf＝0.48，硅胶，5/6v/v环己烷/乙酸乙酯。

甲基(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-乙酰丙酰基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸苄基)-(1→4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸苄基酯)-(1→4)-(6-O- 乙酰基-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基-(1→4)-(2-O-乙酰基-3-O- 苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-6-O-乙酰基-3-O-苄基-2-{[(苯甲氧基)羰基]氨基}-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(24)

将糖基受体23(1.97g，1.12mmol)、酰亚胺酯15(1.63g，1.66mmol)和粉状分子筛(2.6g)在1/1v/v二氯甲烷/甲苯混合物(75mL)中的混合物在氩气氛下于25℃搅拌1小时。将反应混合物冷却至-20℃并将三氟甲磺酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯在二氯甲烷(250μL)中的1M溶液添加至反应介质。在10分钟后，通过添加固体碳酸氢钠中和反应介质。在过滤并浓缩后，通过尺寸排阻色谱法(LH20，190x 3.2cm，1/1v/v二氯甲烷/乙醇)纯化所得残留物，得到1.63g化合物24。

TLC：Rf＝0.33，硅胶，3/1v/v甲苯/丙酮。

甲基(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸苄基酯)-(1→4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-乙酰基-3-O- 苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸苄基酯)-(1→4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮基-3-O-苄基-2- 脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-6-O-乙酰基-3-O-苄基-2-{[(苯甲氧基)羰基]氨基}-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(25)

向化合物24(1.7g，0.73mmol)在1/2v/v甲苯/乙醇混合物(145mL)中的溶液添加乙酸肼(338mg，3.67mmol)。将反应介质在室温搅拌2小时。在浓缩后，通过快速色谱法在硅胶柱(1/1v/v环己烷/乙酸乙酯)上纯化残留物，得到化合物25(1.41g)。

TLC：Rf＝0.47，硅胶，1/1v/v环己烷/乙酸乙酯。

甲基(2-O-乙酰基-4-O-烯丙基-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸苄基酯)-(1→4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸苄基酯)-(1→4)-(6-O- 乙酰基-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)] ₂ -(2-O-乙酰基 -3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-6-O-乙酰基-3-O-苄基-2-{[(苯甲氧基)羰基]氨基}-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(26)

将酰亚胺酯20(0.681mg，0.74mmol)、糖基受体25(1.10g，0.5mmol)和粉状分子筛(0.555g)在1/1v/v二氯甲烷/甲苯混合物(26mL)中的混合物在氩气气氛下于25℃搅拌1小时。将反应混合物冷却至-20℃并添加三氟甲磺酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯在二氯甲烷(111μL)中的1M溶液。在20分钟后，通过添加固体碳酸氢钠中和反应介质。在滤过并浓缩后，将所得残留物在尺寸排阻柱(LH20，190x 3.2cm，1/1v/v二氯甲烷/乙醇)上色谱纯化，相继得到468mg八糖26以及842mg含六糖25和八糖26的混合物。

在上面的条件下处理这种混合物(842mg)，在处理和柱色谱纯化(LH20，190x 3.2cm，1/1v/v二氯甲烷/乙醇)后得到化合物26(513.6mg)。

将两种级份(468mg和513.6mg)合并并且通过制备性HPLC色谱法在硅胶柱(2/1v/v甲苯/乙酸乙酯)上纯化，得到化合物26(1.03g).

TLC：Rf＝0.44，硅胶，2/1v/v甲苯/乙酸乙酯.

方案4：制备八糖30

甲基(4-O-烯丙基-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[(3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)] ₂ -(3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-3-O-苄基-2-{[(苯甲氧基)羰基]氨基}-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(27)

在0℃，在氩气气氛下，向化合物26(819mg，0.27mmol)在2/3v/v二氯甲烷/甲醇混合物(83mL)中的含分子筛(10.3g)的溶液添加甲醇钠在甲醇(1.65mL)中的1M溶液。在-18℃ 16小时后，用50WX4H⁺树脂中和反应介质。在过滤并浓缩后，将残留物通过尺寸排阻色谱法(LH20，120x 3cm，1/1v/v二氯甲烷/乙醇)纯化，接着通过色谱法在硅胶柱(4/3v/v甲苯/丙酮)上纯化，得到605mg化合物27。

TLC：Rf＝0.41，硅胶，4/3v/v甲苯/丙酮。

甲基(4-O-烯丙基-3-O-苄基-2-O-磺酸三乙基铵-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸三乙基铵-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[(3-O-苄基-2-O-磺酸三乙基铵-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸三乙基铵-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)] ₂ -(3-O-苄基-2-O-磺酸三乙基铵-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-3-O-苄基-2-{[(苯甲氧基)羰基]氨基}-2-脱氧-6-O-磺酸三乙基铵 -α-D-吡喃葡糖苷(28)

将化合物27(300mg，0.12mmol)通过N,N-二甲基甲酰胺(3x 10mL)的共蒸馏干燥，然后溶解在N,N-二甲基甲酰胺(11mL)中。向此溶液添加三氧化硫-三乙胺复合物(902mg；4.98mmol)。将混合物在55℃避光搅拌16小时，然后用甲醇(202μL，4.98mmol)中和。将反应介质沉积在LH20凝胶柱(95x 2cm)上，用1/1v/v二氯甲烷/乙醇混合物洗脱，得到化合物28(426mg)。

TLC：Rf＝0.32，硅胶，11/7/1.6/4v/v/v/v乙酸乙酯/吡啶/乙酸/水。

甲基(4-O-烯丙基-3-O-苄基-2-O-磺酸锂-α-L-吡喃艾杜糖醛酸锂)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸锂-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[(3-O-苄基-2-O-磺酸锂-α-L-吡喃艾杜糖醛酸锂)-(1→4)-(2-叠氮基 -3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸锂-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)] ₂ -(3-O-苄基-2-O-磺酸锂-α-L-吡喃艾杜糖醛酸锂)-(1→4)-3-O-苄基-2-{[(苯甲氧基)羰基]氨基}-2-脱氧-6-O-磺酸锂-α-D-吡喃葡糖苷(29)

在0℃向化合物28(459mg，0.12mmol)在1/1v/v四氢呋喃/甲醇混合物(19mL)中的溶液添加0.7M的氢氧化锂水溶液(7.6mL；0.2M的化学计量(qs)最终浓度)。在0℃ 1小时，然后在室温16小时之后，将反应介质冷却至0℃，用乙酸(305μL)中和，然后沉积在LH20柱(95x 2cm)上，用4/1v/v甲醇/水混合物洗脱，得到化合物29(368mg)。

TLC：Rf＝0.25，硅胶，27/19/4.2/11v/v/v/v乙酸乙酯/吡啶/乙酸/水。

甲基(4-O-正丙基-2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-氨基 -2-脱氧-6-O-磺酸钠-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-氨基-2-脱氧-6-O-磺酸钠-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)] ₂ -(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-2-氨基-2-脱氧 -6-O-磺酸钠-α-D-吡喃葡糖苷(30)

将化合物29(170mg)在2/3v/v叔丁醇/水混合物(27mL)中的溶液在氢气压力(1bar)下，在10％钯/碳(340mg)的存在下，在30℃处理24小时。在过滤(LSWP 5μm滤器)后，将反应混合物沉积在G25-fine柱(90x 3cm)上，用0.2M氯化钠水溶液洗脱。将含产物的级份浓缩并使用相同的柱用水洗脱除盐。在浓缩至干后，得到化合物30(205mg)。

质量：“ESI”法，负模式(negative mode)：理论质量＝2327.55；实验质量：2239a.m.u.(以COOH形式观察到艾杜糖醛酸)。

方案5：制备十糖33

甲基(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-乙酰丙酰基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸苄基酯)-(1→4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸苄基酯)-(1→4)-(6-O- 乙酰基-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)] ₂ -(2-O-乙酰基 -3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-6-O-乙酰基-3-O-苄基-2-{[(苯甲氧基)羰基]氨基}-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(31)

将酰亚胺酯15(250mg，0.255mmol)、糖基受体25(376mg，0.169mmol)和粉状分子筛(396mg)在1/1v/v二氯甲烷/甲苯混合物(11.4mL)中的混合物在氩气气氛下于25℃搅拌1小时。将反应混合物冷却至-20℃并添加三氟甲磺酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯在二氯甲烷(381μL)中的0.1M溶液。在12分钟后，通过添加固体碳酸氢钠中和反应介质。在过滤并浓缩后，在LH20柱(120x 3cm，1/1v/v二氯甲烷/乙醇)上色谱纯化所得残留物，相继得到150mg粗化合物31以及318mg含六糖25和八糖31的混合物。

在上面的条件下处理含六糖25和八糖33的混合物，在尺寸排阻色谱法(LH20)后得到151mg粗化合物31和191mg含六糖25和八糖31的混合物。将这种操作重复两次，直到六糖25耗尽。

将含粗八糖31的级份合并并且通过快速色谱法在硅胶柱(7/3v/v甲苯/乙酸乙酯)上纯化，得到化合物31(351mg)。

TLC：Rf＝0.37，硅胶，7/5v/v甲苯/乙酸乙酯。

甲基(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸苄基酯)-(1→4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[(2-O-乙酰基-3-O- 苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸苄基酯)-(1→4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮基-3-O-苄基-2- 脱氧-α-D-吡喃葡糖基-(1→4)] ₂ -(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-6-O-乙酰基-3-O-苄基-2-{[(苯甲氧基)羰基]氨基}-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(32)

向化合物31(335mg，0.11mmol)在1/2v/v甲苯/乙醇混合物(22mL)中的溶液添加乙酸肼(51mg，0.55mmol)。将反应介质在室温搅拌2小时。用二氯甲烷(50mL)稀释反应混合物。将有机相用2％硫酸氢钾水溶液洗涤，然后用水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩至干。通过色谱法在硅胶柱(7/3v/v甲苯/丙酮)上纯化残留物，得到化合物32(238mg)。

TLC：Rf＝0.50，硅胶，5/6v/v环己烷/乙酸乙酯。

甲基(2-O-乙酰基-4-O-烯丙基-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸苄基酯)-(1→4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸苄基酯)-(1→4)-(6-O- 乙酰基-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)] ₃ -(2-O-乙酰基 -3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-6-O-乙酰基-3-O-苄基-2-{[(苯甲氧基)羰基]氨基}-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(33)

将酰亚胺酯20(64mg，0.066mmol)、糖基受体32(130mg，0.044mmol)和粉状分子筛(49mg)在1/1v/v二氯甲烷/甲苯混合物(2.2mL)中的混合物在氩气气氛下于25℃搅拌1小时。将反应混合物冷却至-20℃并添加三氟甲磺酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯在二氯甲烷(100μL)中的0.1M溶液。在10分钟后，通过添加固体碳酸氢钠中和反应介质。在过滤并浓缩后，在LH20柱(120x 3cm，1/1v/v二氯甲烷/乙醇)上色谱纯化所得残留物，相继得到61mg粗化合物33以及87.7mg含八糖32和十糖33的混合物。

在上面的条件下处理上面的混合物(87.7mg)，在LH20柱(120x 3cm，1/1v/v二氯甲烷/乙醇)上色谱纯化后得到粗化合物33(120mg)。

将含粗化合物的两种级份合并并且通过快速色谱法在硅胶柱(7/2v/v甲苯/乙酸乙酯)上纯化，得到化合物33(120mg)。

TLC：Rf＝0.52，硅胶，1/1v/v环己烷/乙酸乙酯

方案6：制备十糖37

甲基(4-O-烯丙基-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[(3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)] ₃ -(3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-3-O-苄基-2-{[(苯甲氧基)羰基]氨基}-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(34)

在氩气气氛下，向化合物33(51.8mg，0.014mmol)在2/3v/v二氯甲烷/甲醇混合物(982μL)中的含分子筛(125mg)的冷却至0℃的溶液添加甲醇钠在甲醇(21.0μL)中的1M溶液。在室温5小时后，用50WX4H⁺树脂中和反应介质。在过滤并浓缩后，通过尺寸排阻色谱法(LH20，95x 2cm，1/1v/v二氯甲烷/乙醇)纯化残留物，得到化合物34(31.4mg)。

TLC：Rf＝0.47，硅胶，7/3v/v二氯甲烷/丙酮

甲基(4-O-烯丙基-3-O-苄基-2-O-磺酸三乙基铵-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸三乙基铵-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[(3-O-苄基-2-O-磺酸三乙基铵-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸三乙基铵-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)] ₃ -(3-O-苄基-2-O-磺酸三乙基铵-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-3-O-苄基-2-{[(苯甲氧基)羰基]氨基}-2-脱氧-6-O-磺酸三乙基铵 -α-D-吡喃葡糖苷(35)

如在化合物28的制备中一样处理化合物34(31.5mg，10.6μmol)，在尺寸排阻色谱法(LH20，100x 1.2cm，1/1v/v二氯甲烷/甲醇)后得到化合物35(47.0mg)。

TLC：Rf＝0.55，硅胶，16/11/2.6/7v/v/v/v乙酸乙酯/吡啶/乙酸/水。

甲基(4-O-烯丙基-3-O-苄基-2-O-磺酸锂-α-L-吡喃艾杜糖醛酸锂)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸锂-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[(3-O-苄基-2-O-磺酸锂-α-L-吡喃艾杜糖醛酸锂)-(1→4)-(2-叠氮基 -3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸锂-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)] ₃ -(3-O-苄基-2-O-磺酸锂-α-L-吡喃艾杜糖醛酸锂)-(1→4)-3-O-苄基-2-{[(苯甲氧基)羰基]氨基}-2-脱氧-6-O-磺酸锂-α-D-吡喃葡糖苷(36)

在0℃向化合物35(47mg，12.5μmol)在1/1v/v四氢呋喃/甲醇混合物(2.0mL)中的溶液添加氢氧化锂在水(500μL；0.2M的化学计量最终浓度)中的1M溶液。在0℃ 1小时，然后在室温4小时后，将反应介质用乙酸中和，然后留在-20℃达16小时。将反应混合物沉积在LH20凝胶柱上，用4/1v/v甲醇/水混合物洗脱，得到化合物36(38.9mg)。

甲基(4-O-丙基-2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-氨基-2- 脱氧-6-O-磺酸钠-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-氨基-2-脱氧-6-O-磺酸钠-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)] ₃ -(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-2-氨基-2-脱氧-6-O-磺酸钠-α-D-吡喃葡糖苷(37)

将化合物36(40mg，10.8μmol)在6/9v/v叔丁醇/水混合物(1mL)中的溶液在氢气压力(11bar)下，在10％钯/碳(80mg，待还原的化合物量的2倍)的存在下，于40℃处理4小时。在过滤(LSWP 5μm滤器)后，将溶液沉积在100树脂柱(1mL)上，用水洗脱，然后浓缩至干。所得粗化合物(27mg)不经进一步纯化就用于后续步骤。

质量：“ESI”法，负模式：理论质量＝2781.10；实验质量：2782.05±0.30a.m.u.。

方案7：制备七糖43

[甲基(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-乙酰丙酰基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲酯)-(1→4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖苷]醛酸甲基酯(40)

将酰亚胺酯38(1.1g，1.22mmol)(根据C.Tabeur et al.,BioOrg.Med.Chem.(1999)7,2003-2012描述的方法制备)、糖基受体39(864mg，2.44mmol)(根据Koshida,S.et al.,Tetrahedron Lett.,1999,40,5725-5728描述的方法制备)和粉状分子筛(914mg)在甲苯(43mL)中的混合物在氩气气氛下于25℃搅拌1小时。将反应混合物冷却至-20℃并添加三氟甲磺酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯在二氯甲烷(183μL)中的1M溶液。在搅拌1小时后，通过添加固体碳酸氢钠中和反应介质。在滤过并浓缩后，将所得残留物在LH20柱(120x 3cm，1/1v/v二氯甲烷/乙醇)上色谱纯化，接着通过色谱法在硅胶柱(1/1v/v甲苯/乙酸乙酯)上纯化，得到化合物40(936mg)。

TLC：Rf＝0.38，硅胶，1/1v/v甲苯/乙酸乙酯

[甲基(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(6-O- 乙酰基-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-2-O-乙酰基-3-O- 苄基-α-L-吡喃艾杜糖苷]醛酸甲基酯(41)

根据与对化合物23的制备所述的操作相同的操作处理化合物40(2.56g，2.34mmol)，在硅胶柱(1/1v/v甲苯/乙酸乙酯)上快速色谱纯化后得到化合物41(2.17g)。

TLC：Rf＝0.35，硅胶，1/1v/v甲苯/乙酸乙酯

[甲基(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-乙酰丙酰基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲酯)-(1→4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(6-O- 乙酰基-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-2-O-乙酰基-3-O- 苄基-α-L-吡喃艾杜糖苷]醛酸甲基酯(42)

将酰亚胺酯38(1.1g，1.22mmol)、糖基受体41(1.2g，1.20mmol)和粉状分子筛(903mg)在二氯甲烷(42mL)中的混合物在氩气气氛下于25℃搅拌1小时。将反应混合物冷却至-20℃并添加三氟甲磺酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯在二氯甲烷(181μL)中的1M溶液。在15分钟后，通过添加固体碳酸氢钠中和反应介质。在过滤并浓缩后，将所得残留物通过色谱法在尺寸排阻柱(LH20，190x 3.2cm，1/1v/v二氯甲烷/乙醇)上纯化，接着通过色谱法在硅胶柱(1/1v/v甲苯/乙酸乙酯)上纯化，得到1.63g化合物42。

TLC：Rf＝0.30，硅胶，1/1v/v甲苯/乙酸乙酯

[甲基(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(6-O- 乙酰基-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-乙酰基 -3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖苷] 醛酸甲基酯(43)

根据与对化合物23的制备所述的操作相同的操作处理化合物42(3.90g，2.25mmol)。在硅胶柱(1/1v/v甲苯/乙酸乙酯)上的色谱纯化得到化合物43(3.39g)。

TLC：Rf＝0.33，硅胶，1/1v/v甲苯/乙酸乙酯

方案8：制备二糖50

(3,4-二-O-苄基-2-O-(4-甲氧基)苄基-6-O-叔丁基二甲基甲硅烷基-α-L-吡喃艾杜糖基)-(1→4)-1,6-脱水-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(45)

在0℃和在氮气下，向化合物44(32.3g，42.2mmol)(在专利申请WO 2006/021653的化合物108的制备中描述)在N,N-二甲基甲酰胺(210mL)中的溶液添加苄基溴(25mL，211mmol)，然后添加55％NaH(3g，126mmol)。在磁力搅拌20分钟后，添加甲醇(30mL)，真空浓缩反应介质，并将粗反应产物用乙酸乙酯稀释，相继用水和饱和氯化钠水溶液洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。所得残留物不经纯化就用于后续步骤中。

LC-MS m/z 871.7[(M+NH₄)⁺]。T_R＝13.86min

(2-O-乙酰基-3,4-二-O-苄基-6-O-叔丁基二甲基甲硅烷基-α-L-吡喃艾杜糖基)-(1→4)-1,6-脱水-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(46)

向粗化合物45(38.6g)在二氯甲烷(1.6L)中的溶液添加水(80mL)，然后，在0℃添加DDQ(14.2g)。在0℃搅拌4小时45分钟后，用二氯甲烷稀释介质并添加碳酸氢钠水溶液。然后将有机相用水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。所得化合物不经纯化就用于后续步骤中。

将所得残留物溶解在二氯甲烷(350mL)中，并添加三乙胺(13mL)、4-二甲基氨基吡啶(2g)和乙酸酐(60mL)。在0℃磁力搅拌10分钟，然后在室温磁力搅拌1小时45分钟后，将反应混合物用二氯甲烷稀释，然后相继用10％硫酸氢钾水溶液，水洗涤，然后将有机相干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。

在硅胶(乙酸乙酯/环己烷)上纯化所得残留物，得到化合物46(26.8g)。

LC-MS m/z 798.3[(M+Na)⁺]。T_R＝12.97min

(2-O-乙酰基-3,4-二-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-1,6-脱水-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(47)

在0℃向化合物46(26.3g，33.9mmol)在丙酮(1.4L)中的溶液添加CrO₃(10.5g)在3.5M H₂SO₄水溶液(47mL)中的溶液。在0℃机械搅拌4小时后，将反应介质用二氯甲烷稀释，用水洗至中性，然后将有机相干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。所得化合物不经纯化就用于后续步骤中。

将所得残留物溶解在N,N-二甲基甲酰胺(210mL)中，并添加碳酸氢钾(17g)和碘甲烷(21mL)。将反应混合物在室温搅拌16小时，然后真空浓缩。将残留物用乙酸乙酯稀释，然后用水，用饱和硫代硫酸钠水溶液，用饱和氯化钠水溶液洗涤，然后干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。所得化合物不经纯化就用于后续步骤中。

LC-MS m/z 707.3[(M+NH₄)⁺]。T_R＝10.37min

(2-O-乙酰基-3,4-二-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-1,6-二 -O-乙酰基-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α,β-D-吡喃葡萄糖(48)

将上述步骤中得到的粗残留物溶解在乙酸酐(177mL)中，然后添加三氟乙酸(TFA)(17.7mL)。将反应混合物搅拌16小时，然后浓缩，与甲苯共蒸发并在硅胶(环己烷/乙酸乙酯)上纯化，得到化合物48(17.4g)。

LC-MS m/z 809.3[(M+NH₄)⁺]。T_R＝10.81min

(2-O-乙酰基-3,4-二-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-6-O-乙酰基-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α,β-D-吡喃葡萄糖(49)

在0℃和在氩气下，向化合物48(7g，8.84mmol)在***(303mL)中的溶液添加苄胺(BnNH₂)(29.7mL)。在0℃磁力搅拌1小时，然后在室温磁力搅拌6小时后，将反应混合物用冷的1N HCl水溶液中和，用水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩，并在硅胶(乙酸乙酯/环己烷)上纯化，得到化合物49(5.95g)。

LC-MS m/z 767.7[(M+NH₄)⁺]。T_R＝1.64min

(2-O-乙酰基-3,4-二-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-6-O-乙酰基-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α,β-D-吡喃葡萄糖三氯乙酰亚胺酯(50)

在氩气下，向化合物49(5.94g，7.9mmol)在二氯甲烷(150mL)中的溶液添加碳酸铯(Cs₂CO₃)(4.1g)，然后添加三氯乙腈(CCl₃CN)(3.9mL)。在室温搅拌45分钟后，将反应混合物过滤，然后浓缩。在硅胶(乙酸乙酯/环己烷+0.1％三乙胺)上纯化残留物，得到化合物50(5.7g)。

LC-MS m/z 912.0[(M+NH₄)⁺]。T_R＝1.81min

方案9：制备七糖55

{甲基(2-O-乙酰基-3,4-二-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(6-O- 乙酰基-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)] ₂ -2-O-乙酰基 -3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖苷}醛酸甲基酯(51)

将糖基受体43(200mg，0.12mmol)、亚氨酸酯50(163mg，0.18mmol)和粉状分子筛(137mg)在二氯甲烷(6.5mL)中的混合物在氩气气氛下于25℃搅拌1小时。将反应混合物冷却至-20℃并添加三氟甲磺酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯在二氯甲烷(27μL)中的1M溶液。在1小时后，通过添加固体碳酸氢钠中和反应介质。在过滤并浓缩后，将所得残留物通过色谱法在尺寸排阻柱LH20，90x 3cm，1/1v/v二氯甲烷/乙醇)上纯化，接着通过色谱法在硅胶柱(2/1v/v甲苯/乙酸乙酯)上纯化，得到化合物51(212mg)。

TLC：Rf＝0.38，硅胶，1/1v/v甲苯/乙酸乙酯。

{甲基(3,4-二-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基 -3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[(3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)] ₂ -3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖苷}醛酸甲基酯(52)

根据与对于化合物27的制备所述的操作相同的操作处理化合物51(271mg，0.11mmol)，在尺寸排阻柱(LH20，120x 3cm，1/1v/v二氯甲烷/乙醇)上色谱纯化，接着在硅胶柱(5/3v/v甲苯/丙酮)上色谱纯化之后得到化合物52(186mg)。

TLC：Rf＝0.65，硅胶，4/3v/v甲苯/乙酸乙酯

{甲基(3,4-二-O-苄基-2-O-磺酸三乙基铵-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸三乙基铵-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[(3-O-苄基-2-O-磺酸三乙基铵-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸三乙基铵-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)] ₂ -3-O-苄基-2-O-磺酸三乙基铵-α-L-吡喃艾杜糖苷}醛酸甲基酯(53)

根据与对于化合物28的制备所述的操作相同的操作处理化合物52(172mg，0.08mmol)，在尺寸排阻色谱纯化(LH20，120x 3cm，1/1v/v二氯甲烷/乙醇)后得到化合物53(196mg)。

主要异头质子的¹H NMR(D₂O)δ：5.41；5.38；5.34；5.15；5.14；5.05；5.15；5.02ppm.

{甲基(3,4-二-O-苄基-2-O-磺酸锂-α-L-吡喃艾杜糖醛酸锂)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸锂-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[(3-O-苄基-2-O- 磺酸锂-α-L-吡喃艾杜糖醛酸锂)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸锂-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)] ₂ -3-O-苄基-2-O-磺酸锂-α-L-吡喃艾杜糖苷}醛酸锂(54)

根据与对于化合物29的制备所述的操作相同的操作处理化合物53(186mg，70.7μmol)，在尺寸排阻色谱纯化(LH20，120x 3cm，50/50/1v/v/v二氯甲烷/乙醇/水)后得到化合物54(141mg)。

TLC：Rf＝0.24，硅胶，27/19/4.2/11v/v/v/v乙酸乙酯/吡啶/乙酸/水

{甲基(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-氨基-2-脱氧 -6-O-磺酸钠-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-氨基-2-脱氧-6-O-磺酸钠-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)] ₂ -2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖苷}醛酸钠(55)

将化合物54(60.0mg，0.022mmol)在1/1v/v叔丁醇/水混合物(6mL)中的溶液在氢气压力(<200mbar)下，在10％钯/碳(60mg)的存在下，在室温处理。在搅拌24小时后，将反应介质过滤(LSWP 5μm滤器)，然后浓缩至干。这样得到的粗产物55(48.7mg)不经进一步纯化就用于后续步骤。

方案10：制备糖苷受体60

甲基(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-乙酰丙酰基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲酯)-(1→4)-6-O-乙酰基-3-O-苄基-2-苯甲氧基羰基氨基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(57)

在0℃和在惰性气氛下，向化合物56(23.5g，30mmol；根据CarbohydrateResearch(1987)，167，67-75中所述的方法制备)在二氯甲烷(600mL)中的溶液添加4-二甲基氨基吡啶(733mg，6mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(11.5g，60mmol)和乙酰丙酸(6.2mL，60mmol)。在室温搅拌16小时后，用二氯甲烷(1.5L)稀释混合物。将有机相相继用10％硫酸氢钾水溶液，用水，用饱和碳酸氢钠溶液和用水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩至干。通过快速色谱法在硅胶柱(1/3环己烷/乙酸乙酯)上纯化残留物，得到化合物57(22.6g)。

Rf＝0.37，硅胶，1/3v/v环己烷/乙酸乙酯

甲基(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-乙酰丙酰基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲酯)-(1→4)-3-O-苄基-2-苯甲氧基羰基氨基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(58)

在惰性气氛下，向化合物57(20.2g，23mmol)在1/1四氢呋喃/甲醇混合物(140mL)中的溶液添加根据A.Orita et al.,Chem.Eur.J.(2001)7,3321制备的[tBu₂SnCl(OH)]₂(226mg，0.79mmol)。将反应介质在35℃搅拌38小时。在浓缩后，残留物(20.8g)不经纯化就用于后续步骤中。

Rf＝0.23，硅胶，1/3v/v环己烷/乙酸乙酯

甲基(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-乙酰丙酰基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲酯)-(1→4)-3-O-苄基-2-苯甲氧基羰基氨基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(59)

在0℃和在惰性气氛下，向粗化合物58(23mmol)在二氯甲烷(190mL)中的溶液添加三乙胺(8mL，57.5mmol)、4-二甲基氨基吡啶(1.4g，11.5mmol)和叔丁基二苯基甲硅烷基氯(12mL，46.0mmol)。将反应介质在室温搅拌16小时。用二氯甲烷稀释反应混合物。将有机相相继用饱和氯化钠水溶液和用水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过快速色谱法在硅胶柱(2/1环己烷/乙酸乙酯)上纯化残留物，得到化合物59(24.4g)。

Rf＝0.42，硅胶，2/1v/v环己烷/乙酸乙酯

甲基(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-3-O-苄基-2-苯甲氧基羰基氨基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(60)

向化合物59(22.6g，20.0mmol)在1/2甲苯/乙醇混合物(2.5L)中的溶液添加乙酸肼(9.21g，100.0mmol)。将反应介质在室温搅拌30分钟。在浓缩后，通过快速色谱法在硅胶柱(2/1环己烷/乙酸乙酯)上纯化残留物，得到17.6g化合物60。

Rf＝0.40，硅胶，2/1v/v环己烷/乙酸乙酯

方案11：制备糖苷供体65

(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-乙酰丙酰基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲酯)-(1→4)-1-O-乙酰基-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡萄糖(62)

向61(11g，13.7mmol)(根据C.Tabeur et al.,Carbohydr.Res.,281(1996)253-276所述的方法制备)在1/1甲醇/四氢呋喃混合物(80mL)中的溶液添加根据A.Orita et al.,Chem.Eur.J.(2001)7,3321制备的[tBu₂SnCl(OH)]₂(0.55g)。在35℃搅拌5.5小时，然后在室温搅拌16小时，然后再次在35℃搅拌4小时后，将反应混合物真空浓缩，然后通过色谱法纯化，得到化合物62(5.97g)。

LC-MS m/z 780.2[(M+Na)⁺]。T_R＝9.14min

(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-乙酰丙酰基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲酯)-(1→4)-1-O-乙酰基-2-叠氮基-3-O-苄基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡萄糖(63)

将化合物62(5.97g，7.88mmol)溶解在二氯甲烷(63mL)中。在0℃和在氩气下，相继添加4-二甲基氨基吡啶(0.481g)、三乙胺(2.7mL)和叔丁基二苯基甲硅烷基氯化物(4mL)。在磁力搅拌4小时后，将反应介质用二氯甲烷稀释，用10％硫酸氢钾水溶液，用水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。在硅胶(乙酸乙酯/庚烷)上纯化所得残留物，得到化合物63(7g)。

LC-MS m/z 1018.3[(M+Na)⁺]。T_R＝12.33min

(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-乙酰丙酰基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲酯)-(1→4)-2-叠氮基-3-O-苄基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α,β-D-吡喃葡萄糖(64)

在0℃，向化合物63(7g，7.03mmol)在***(70mL)中的溶液添加苄胺(BnNH₂)(29mL)。在0℃搅拌15分钟，然后在室温搅拌6小时后，将反应混合物用乙酸乙酯稀释，然后用冷的1N HCl中和，用水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩，并在硅胶(乙酸乙酯/甲苯)上纯化，得到化合物64(5.86g)。

LC-MS m/z 976.3[(M+Na)⁺]。T_R＝27.6/27.8min

(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-乙酰丙酰基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲酯)-(1→4)-2-叠氮基-3-O-苄基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α,β-D-吡喃葡萄糖三氯乙酰亚胺酯(65)

在氩气下，向化合物64(6.5g，6.81mmol)在二氯甲烷(140mL)中的溶液和在粉状分子筛(7g)存在下添加碳酸铯(Cs₂CO₃)(3.5g)，然后在0℃添加三氯乙腈(CCl₃CN)(3.4mL)。在0℃搅拌15分钟，然后在室温搅拌5小时后，将反应混合物过滤然后浓缩。在硅胶(1/4乙酸乙酯/甲苯+0.1％三乙胺)上纯化残留物，得到化合物65(6.33g)。

LC-MS m/z 1119.1[(M+Na)⁺]。T_R＝31.2

方案12：制备四糖67

甲基(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-乙酰丙酰基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-3-O-苄基-2-苯甲氧基羰基氨基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(66)

将糖基受体59(8.80g，9.00mmol)、酰亚胺酯65(6.58g，6.00mmol)和粉状分子筛(4.50g)在二氯甲烷(210mL)中的混合物在氩气气氛下于25℃搅拌1小时。将反应混合物冷却至-20℃并添加三氟甲磺酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯在二氯甲烷(900μL)中的1M溶液。在1小时20分钟后，通过添加固体碳酸氢钠中和反应介质。在滤过并浓缩后，将所得残留物在LH20柱(190x 3.2cm，1/1二氯甲烷/乙醇)上色谱纯化，得到8.26g化合物66。

Rf＝0.30，硅胶，2/1环己烷/乙酸乙酯

甲基(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-3-O- 苄基-2-苯甲氧基羰基氨基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(67)

根据与对于化合物23的合成所述的操作相同的操作，将化合物66(8.26g，4.31mmol)转化成化合物67(6.41g)。

Rf＝0.34，硅胶，2/1环己烷/乙酸乙酯

方案13：制备六糖69

甲基(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-乙酰丙酰基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-3-O-苄基-2-苯甲氧基羰基氨基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(68)

将糖基受体67(7.42g，4.09mmol)、酰亚胺酯65(6.73g，6.1mmol)和粉状分子筛(4.60g)在二氯甲烷(215mL)中的混合物在氩气气氛下于25℃搅拌1小时。将反应混合物冷却至-20℃并添加三氟甲磺酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯在二氯甲烷(920μL)中的1M溶液。在1小时30分钟后，通过添加固体碳酸氢钠中和反应介质。在滤过后，用二氯甲烷(800mL)稀释反应介质。将有机相相继用2％碳酸氢钠水溶液，用水洗涤，然后用硫酸钠干燥，过滤然后蒸发至干。将所得残留物通过LH20柱(190x 3.2cm，1/1二氯甲烷/乙醇)上的色谱法，接着通过硅胶柱(6/1甲苯/乙酸乙酯)上的色谱法纯化，得到6.13g化合物68。

Rf＝0.46，硅胶，4/1v/v甲苯/乙酸乙酯

甲基(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-3-O- 苄基-2-苯甲氧基羰基氨基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(69)

根据与对于化合物23的合成所述的操作相同的操作，将化合物68(7.14g，2.59mmol)转化成化合物69(6.07g)。

Rf＝0.37，硅胶，2/1v/v环己烷/乙酸乙酯

方案14：制备二糖73

(3,4-二-O-苄基-2-O-(4-甲氧基)苄基-6-O-叔丁基二甲基甲硅烷基-α-L-吡喃艾杜糖基)-(1→4)-1,6-脱水-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(70)

在0℃和在氩气下，向化合物44(32.3g，42.2mmol)(在专利申请WO 2006/021653的化合物108的制备中描述)在N,N-二甲基甲酰胺(210mL)中的溶液添加苄基溴(25mL)，然后添加55％NaH(3g)。在磁力搅拌20分钟后，添加甲醇(30mL)，真空浓缩反应介质，并将粗反应产物用乙酸乙酯稀释，用水，然后用饱和氯化钠水溶液洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。所得残留物(38.6g)不经纯化就用于后续步骤中。

LC-MS m/z 871.7[(M+NH₄)⁺]。T_R＝13.86min

(2-O-乙酰基-3,4-二-O-苄基-6-O-叔丁基二甲基甲硅烷基-α-L-吡喃艾杜糖基)-(1→4)-1,6-脱水-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(71)

向粗化合物70(38.6g)在二氯甲烷(1.6L)中的溶液添加水(80mL)，然后在0℃添加DDQ(14.2g)。在0℃搅拌4小时45分钟后，用二氯甲烷稀释介质并添加碳酸氢钠水溶液。然后将有机相用水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。所得化合物不经纯化就用于后续步骤中。

将所得残留物溶解在二氯甲烷(350mL)中，然后添加三乙胺(13mL)、4-二甲基氨基吡啶(2g)和乙酸酐(60mL)。在0℃磁力搅拌10分钟，然后在室温磁力搅拌1小时45分钟后，将反应混合物用二氯甲烷稀释，然后相继用10％硫酸氢钾水溶液，水洗涤，然后将有机相干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。在硅胶(乙酸乙酯/环己烷)上纯化所得残留物，得到化合物71(26.8g)。

LC-MS m/z 798.3[(M+Na)⁺]。T_R＝12.97min

(2-O-乙酰基-3,4-二-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-1,6-脱水-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(72)

在0℃向化合物71(26.3g，33.9mmol)在丙酮(1.4L)中的溶液添加CrO₃(10.5g)在3.5M H₂SO₄水溶液(47mL)中的溶液。在0℃机械搅拌4小时后，将反应介质用二氯甲烷稀释，用水洗至中性，然后将有机相干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。所得化合物不经纯化就用于后续步骤中。

LC-MS m/z 707.3[(M+NH₄)⁺]。T_R＝10.37min

(2-O-乙酰基-3,4-二-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-1,6-二 -O-乙酰基-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α,β-D-吡喃葡萄糖(73)

将上述步骤中得到的粗残留物溶解在乙酸酐(177mL)中，然后添加三氟乙酸(TFA)(17.7mL)。将反应混合物搅拌16小时，然后浓缩，与甲苯共蒸发，并在硅胶(环己烷/乙酸乙酯)上纯化，得到化合物73(17.4g)。

LC-MS m/z 809.3[(M+NH₄)⁺]。T_R＝10.81min

方案15：制备糖基供体77

(2-O-乙酰基-3,4-二-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-1-O-乙酰基-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡萄糖(74)

向化合物73(5.05g，6.3mmol)在1/1甲醇/四氢呋喃混合物(76mL)中的溶液添加根据A.Orita et al.,Chem.Eur.J.(2001)7,3321制备的[tBu₂SnCl(OH)]₂(0.25g，0.88mmol)。在室温搅拌72小时后，将反应混合物真空浓缩，然后通过色谱法纯化，得到化合物74(2.89g)。

LC-MS m/z 772.4[(M+Na)⁺]。T_R＝10.23min

(2-O-乙酰基-3,4-二-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-1-O-乙酰基-2-叠氮基-3-O-苄基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡萄糖(75)

将化合物74(2.89g，3.86mmol)溶解在二氯甲烷(31mL)中。在0℃和在氩气下，相继添加三乙胺(1.3mL)、4-二甲基氨基吡啶(0.235g)和叔丁基二苯基甲硅烷基氯(2mL)。在磁力搅拌3小时后，将反应介质用二氯甲烷稀释，用10％硫酸氢钾水溶液，用水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。在硅胶(乙酸乙酯/环己烷)上纯化所得残留物，得到化合物75(3.4g)。

LC-MS m/z 1010.6[(M+Na)⁺]。T_R＝13.10min

(2-O-乙酰基-3,4-二-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-2-叠氮基-3-O-苄基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α,β-D-吡喃葡萄糖(76)

在0℃向化合物75(3.44g，3.48mmol)在***(35mL)中的溶液添加苄胺(BnNH₂)(14.5mL)。在室温搅拌8小时后，将反应混合物置于-18℃达16小时，然后再次在室温放置2.5小时。然后将介质用乙酸乙酯稀释，然后用冷的1N HCl中和，用水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩，并在硅胶(乙酸乙酯/环己烷15/85)上纯化，得到化合物76(3.83g)。

LC-MS m/z 963.6[(M+NH₄)⁺]。T_R＝12.37，12.47min

(2-O-乙酰基-3,4-二-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-2-叠氮基-3-O-苄基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α,β-D-吡喃葡萄糖三氯乙酰亚胺酯(77)

在0℃和在氩气下，向化合物76(2.99g，3.16mmol)在二氯甲烷(60mL)中的溶液和在粉状分子筛(3g)存在下添加碳酸铯(Cs₂CO₃)(1.6g)，然后添加三氯乙腈(CCl₃CN)(1.6mL)。在0℃搅拌20分钟，在室温搅拌7小时，在-18℃贮存16小时，然后在室温磁力搅拌8小时，在-18℃贮存16小时，并最后在室温磁力搅拌1小时，然后将反应混合物过滤并浓缩。在硅胶(15/85乙酸乙酯/环己烷+0.1％三乙胺)上纯化残留物，得到化合物77(2.69g)。

LC-MS m/z 1113.4[(M+Na)⁺]。T_R＝14.58min

方案16：制备八糖79

甲基(2-O-乙酰基-3,4-二-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2- 叠氮基-3-O-苄基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)] ₂ -(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-3-O- 苄基-2-苯甲氧基羰基氨基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(78)

将糖基受体69(3.50g，1.32mmol)、酰亚胺酯77(2.16g，1.98mmol)和粉状分子筛(1.48g)在二氯甲烷(69mL)中的混合物在氩气气氛下于室温搅拌1小时。将反应混合物冷却至-20℃并添加三氟甲磺酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯在二氯甲烷(297μL)中的1M溶液。在2小时30分钟后，通过添加固体碳酸氢钠中和反应介质。在滤过后，用二氯甲烷(400mL)稀释反应介质。将有机相相继用2％碳酸氢钠水溶液，用水洗涤，然后用硫酸钠干燥，过滤并蒸发至干。将所得残留物通过色谱法在LH20柱(190x 3.2cm，1/1二氯甲烷/乙醇)上，接着通过色谱法在硅胶柱(4/1环己烷/乙酸乙酯)上纯化，得到3.04g化合物78。

Rf＝0.30，硅胶，3/1环己烷/乙酸乙酯

甲基(3,4-二-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O- 苄基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[(3-O-苄基 -α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)] ₂ -(3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-3-O-苄基-2-苯甲氧基羰基氨基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基 -2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(79)

在氩气气氛下和在0℃，向化合物78(2.23g，0.623mmol)在2/3二氯甲烷/甲醇混合物(187mL)中的含分子筛(78mg)的溶液添加甲醇钠在甲醇(99.7μL)中的1M溶液。在室温24小时后，用Dowex AG 50WX4H⁺树脂中和反应介质。在过滤并浓缩后，将残留物在LH20柱(120x 3cm，1/1二氯甲烷/乙醇)上色谱纯化，接着在硅胶柱(100/0→66/34环己烷/乙酸乙酯)上实施快速色谱法，得到1.80g化合物79。

Rf＝0.38，硅胶，3/1v/v环己烷/乙酸乙酯

方案17：制备八糖80，81，82，83，84，85，86和87

甲基(3,4-二-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O- 苄基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[(3-O-苄基 -α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)] ₂ -(3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-3-O-苄基-2-{[(苯甲氧基)羰基]氨基}-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(80)

甲基(3,4-二-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O- 苄基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O-苄基 -α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O-苄基 -α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-3-O-苄基-2-{[(苯甲氧基)羰基]氨基}-2- 脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(81)

甲基(3,4-二-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O- 苄基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O-苄基 -α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O- 苄基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O-苄基 -α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-3-O-苄基-2-{[(苯甲氧基)羰基]氨基}-2- 脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(82)

甲基(3,4-二-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O- 苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[(3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)] ₂ -(3-O-苄基 -α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-3-O-苄基-2-{[(苯甲氧基)羰基]氨基}-2- 脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(87)

向化合物79(373mg，0.11mmol)在甲醇(14mL)中的溶液添加氟化铵(324mg，8.74mmol)。在室温搅拌20小时后，将反应混合物沉积在LH20凝胶柱(120x 3cm，1/1v/v二氯甲烷/乙醇)上，接着在硅胶柱(1/0→7/3v/v甲苯/丙酮)上实施快速色谱法，相继得到：

-化合物80(58.8mg)

TLC：Rf＝0.63，硅胶，65/35v/v甲苯/丙酮

-化合物81(44.4mg)

TLC：Rf＝0.53，硅胶，65/35v/v甲苯/丙酮

-化合物82(37.7mg)

TLC：Rf＝0.45，硅胶，65/35v/v甲苯/丙酮

-化合物83和化合物84的混合物(54.0mg)

-化合物85和化合物86的混合物(48.3mg)

-化合物87(26.6mg)

TLC：Rf＝0.14，硅胶，65/35v/v甲苯/丙酮

甲基(3,4-二-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O- 苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基 -3-O-苄基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O- 苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-3-O-苄基-2-{[(苯甲氧基)羰基]氨基}-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(83)

甲基(3,4-二-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O- 苄基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[(3-O-苄基 -α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)] ₂ -(3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-3-O-苄基 -2-{[(苯甲氧基)羰基]氨基}-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(84)

通过快速色谱法在硅胶柱(100/0→85/15v/v甲苯/甲醇)上纯化化合物83和84的混合物(260mg)，得到化合物83(27.8mg)。

TLC：Rf＝0.22，硅胶，85/15v/v甲苯/甲醇

通过快速色谱法在硅胶柱(100/0→97/3v/v二氯甲烷/甲醇)上再次纯化剩余级份，得到化合物84(45.3mg)。

TLC：Rf＝0.13，硅胶，85/15v/v甲苯/甲醇

甲基(3,4-二-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O- 苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基 -3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-3-O-苄基-2-{[(苯甲氧基)羰基]氨基}-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(85)

甲基(3,4-二-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O- 苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O-苄基 -α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-3-O-苄基-2-{[(苯甲氧基)羰基]氨基}-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(86)

通过HPLC色谱法在C18凝胶柱(Sunfire,5μm,150x 19mm,9/1乙腈/水+0.1％三氟乙酸)上纯化化合物85和86的混合物(135mg)，相继得到：

-化合物85(32.6mg)，在尺寸排阻色谱法(LH20，120x 3cm，1/1v/v二氯甲烷/乙醇)后

质量：“ESI”法，负模式：理论质量＝2698.96；实验质量：2698.55±0.65a.m.u.

-化合物86(26.5mg)，在尺寸排阻色谱法(LH20，120x 3cm，1/1v/v二氯甲烷/乙醇)后

质量：“ESI”法，负模式：理论质量＝2698.96；实验质量：2698.95±1.05a.m.u.

方案18：制备八糖91

甲基(3,4-二-O-苄基-2-O-磺酸三乙基铵-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸三乙基铵-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸三乙基铵-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸三乙基铵-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸三乙基铵-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-3-O-苄基-2-{[(苯甲氧基)羰基]氨基}-2-脱氧-6-O-磺酸三乙基铵 -α-D-吡喃葡糖苷(88)

根据与对于化合物28的制备所述的操作相同的操作处理化合物81(69mg，23.5μmol)，在尺寸排阻色谱法LH20，120x 3cm，1/1v/v二氯甲烷/乙醇)后得到化合物88(85.1mg)。

TLC：Rf＝0.62，硅胶，17/9/2.2/5v/v/v/v乙酸乙酯/吡啶/乙酸/水。

甲基(3,4-二-O-苄基-2-O-磺酸铵-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2- 叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸铵-α-L- 吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸铵-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸铵-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O-苄基-2-O- 磺酸铵-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-3-O-苄基-2-{[(苯甲氧基)羰基]氨基}-2-脱氧-6-O-磺酸铵-α-D-吡喃葡糖苷(89)

向化合物88(85.1mg，21.1μmol)在甲醇(2.7mL)中的溶液添加氟化铵(31.3mg，0.846mmol)。在55℃ 48小时后，将反应混合物沉积在LH20凝胶柱(95x 2cm)上，用N,N-二甲基甲酰胺洗脱，得到化合物89(64mg)。

[α]_D 19.4°(c 1.0；MeOH)

甲基(3,4-二-O-苄基-2-O-磺酸锂-α-L-吡喃艾杜糖醛酸锂)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸锂-α-L-吡喃艾杜糖醛酸锂)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸锂-α-L-吡喃艾杜糖醛酸锂)-(1→4)-(2-叠氮基 -3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸锂-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸锂-α-L-吡喃艾杜糖醛酸锂)-(1→4)-3-O-苄基-2-{[(苯甲氧基)羰基]氨基}-2-脱氧-6-O-磺酸锂-α-D-吡喃葡糖苷(90)

根据与对于化合物29的制备所述的操作相同的操作处理化合物89(63.3mg；17.8μmol)。在LH20凝胶柱(120x 3cm，50/50/1v/v/v二氯甲烷/乙醇/水)上实施色谱法，得到化合物90(49.8mg)。

[α]_D 14.6°(c 1.0；MeOH)

甲基(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-氨基-2-脱氧-α-D- 吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-氨基 -2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-氨基-2-脱氧-6-O-磺酸钠-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-2-氨基-2-脱氧-6-O-磺酸钠-α-D-吡喃葡糖苷(91)

在室温向化合物90(7.6mg；2.6μmol)在1/1v/v叔丁醇/水混合物(516μL)中的溶液相继添加甲酸铵(21.2mg；0.33μmol)和10％钯/碳(49.4mg)。在搅拌4小时后，将反应介质过滤(LSWP 5μm滤器)并沉积在G25-细凝胶柱(95x 2cm)上，用0.2M NaCl水溶液洗脱。将含希望化合物的级份合并并且沉积在G25-细凝胶柱(95x 2cm)上，用水洗脱。这样得到的粗产物91(5.5mg)不经进一步纯化就用于后续步骤。

方案19：制备八糖95

甲基(3,4-二-O-苄基-2-O-磺酸三乙基铵-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸三乙基铵-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸三乙基铵-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸三乙基铵-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸三乙基铵-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-3-O-苄基-2-{[(苯甲氧基)羰基]氨基}-2-脱氧-6-O-磺酸三乙基铵 -α-D-吡喃葡糖苷(92)

根据与对于化合物28的制备所述的操作相同的操作处理化合物82(16.5mg，5.6μmol)，在LH20凝胶柱(120x 3cm，1/1v/v二氯甲烷/乙醇)上色谱纯化后得到化合物92(21.5mg)。

TLC：Rf＝0.73，硅胶，28/16/3.8/9v/v/v/v乙酸乙酯/吡啶/乙酸/水。

甲基(2-O-磺酸铵-3,4-二-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2- 叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸铵-3-O-苄基-α-L- 吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(6-O-硫酸铵-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D- 吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸铵-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸铵 -3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-6-O-磺酸铵-3-O-苄基-2-{[(苯甲氧基)羰基]氨基}-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(93)

根据与对于化合物89的制备所述的操作相同的操作处理化合物92(21.5mg，5.3μmol)，在尺寸排阻色谱法(LH20，95x 2cm，N,N-二甲基甲酰胺)后得到化合物93(21.5mg)。

TLC：Rf＝0.63，硅胶，11/7/1.6/4v/v/v/v乙酸乙酯/吡啶/乙酸/水。

甲基(3,4-二-O-苄基-2-O-磺酸锂-α-L-吡喃艾杜糖醛酸锂)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸锂-α-L-吡喃艾杜糖醛酸锂)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸锂-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸锂-α-L-吡喃艾杜糖醛酸锂)-(1→4)-(2-叠氮基 -3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸锂-α-L-吡喃艾杜糖醛酸锂)-(1→4)-3-O-苄基-2-{[(苯甲氧基)羰基]氨基}-2-脱氧-6-O-磺酸锂 -α-D-吡喃葡糖苷(94)

根据与对于化合物31的制备所述的操作相同的操作处理化合物93(14.7mg，4.1μmol)，在尺寸排阻色谱法(LH20，95x 2cm，50/50/1v/v/v二氯甲烷/乙醇/水)后得到化合物94(13.0mg)。

TLC：Rf＝0.56，硅胶，28/16/3.8/9v/v/v/v乙酸乙酯/吡啶/乙酸/水

甲基(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-氨基-2-脱氧-α-D- 吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-氨基 -2-脱氧-6-O-磺酸钠-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-氨基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L- 吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-2-氨基-2-脱氧-6-O-磺酸钠-α-D-吡喃葡糖苷(95)

向化合物94(13mg，4.4μmol)在1/1v/v叔丁醇/水混合物(883μL)中的溶液添加甲酸铵(36mg，0.57mmol)和10％钯/碳(34mg)。在室温搅拌4小时后，将反应介质过滤(LSWP 5μm过滤)并浓缩至干。将残留物沉积在G25-细凝胶柱(95x 2cm)上，用0.2M NaCl水溶液洗脱。将含希望化合物的级份合并并且沉积在G25-细凝胶柱(95x 2cm)上，用水洗脱。这样得到的粗产物95(2.5mg)不经进一步纯化就用于后续步骤。

方案20：制备八糖99

甲基(3,4-二-O-苄基-2-O-磺酸三乙基铵-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸三乙基铵-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[(3-O-苄基-2-O-磺酸三乙基铵-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸三乙基铵-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)] ₂ -3-O-苄基-2-{[(苯甲氧基)羰基]氨基}-2-脱氧-6-O-磺酸三乙基铵 -α-D-吡喃葡糖苷(96)

根据与对于化合物28的制备所述的操作相同的操作处理化合物83(35.1mg，12.0μmol)，在LH20凝胶柱(120x 3cm，1/1v/v二氯甲烷/乙醇)上色谱纯化后得到化合物96(46.3mg)。

[α]_D 111°(c 0.95；CH₂Cl₂)

甲基(2-O-磺酸铵-3,4-二-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(6-O-磺酸铵-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸铵-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸铵-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸铵-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-6-O- 磺酸铵-3-O-苄基-2-{[(苯甲氧基)羰基]氨基}-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(97)

根据与对于化合物89的制备所述的操作相同的操作处理化合物96(45.0mg，11.2μmol)，在LH20凝胶柱(95x 2cm，N,N-二甲基甲酰胺)上色谱纯化后得到化合物97(30.8mg)。

[α]_D 14.7°(c 0.95；MeOH)

甲基(3,4-二-O-苄基-2-O-磺酸锂-α-L-吡喃艾杜糖醛酸锂)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸锂-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[(3-O-苄基-2-O-磺酸锂-α-L-吡喃艾杜糖醛酸锂)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)] ₂ -(3-O-苄基-2-O-磺酸锂-α-L-吡喃艾杜糖醛酸锂)-(1→4)-3-O-苄基-2-{[(苯甲氧基)羰基]氨基}-2-脱氧-6-O-磺酸锂-α-D-吡喃葡糖苷(98)

根据与对于化合物29的制备所述的操作相同的操作处理化合物97(27.1mg，7.6μmol)，在LH20凝胶柱(95x 2cm，50/50/1v/v/v二氯甲烷/乙醇/水)上色谱纯化后得到化合物98(20.7mg)。

[α]_D 14.4°(c 1.01；MeOH)

甲基(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-氨基-2-脱氧-6-O- 磺酸钠-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-氨基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)] ₂ -(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-2-氨基-2-脱氧-6-O-磺酸钠-α-D-吡喃葡糖苷(99)

根据与对于化合物91的制备所述的操作相同的操作处理化合物98(17.5mg，5.9μmol)，得到化合物99(9.5mg)。

质量：“ESI”法，负模式：理论质量＝2081.38；实验质量：1993.28±0.14a.m.u.(以COOH形式观察到艾杜糖醛酸)。

方案21：制备八糖104

甲基(3,4-二-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O- 苄基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[(3-O-苄基 -α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)] ₂ -(3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-6-O-苯甲酰基-3-O-苄基-2-{[(苯甲氧基)羰基]氨基}-2-脱氧 -α-D-吡喃葡糖苷(100)

将化合物80(355mg，0.117mmol)、苯甲酸酐(75.8mg，0.335mmol)和三乙胺(47.3μL，0.335mmol)在1,2-二氯乙烷(5.6mL)中的溶液在60℃搅拌24小时，然后在室温搅拌64小时。将反应混合物沉积在LH20凝胶柱(120x 3cm)上，用1/1v/v二氯甲烷/乙醇混合物洗脱，接着在硅胶柱(100/0→85/15v/v甲苯/丙酮)上实施快速色谱法，得到化合物100(193.2mg)。

TLC：Rf＝0.38，硅胶，2/1v/v环己烷/乙酸乙酯

甲基(3,4-二-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O- 苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[(3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)] ₂ -(3-O-苄基 -α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-6-O-苯甲酰基-3-O-苄基-2-{[(苯甲氧基) 羰基]氨基}-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(101)

根据与对于化合物89的制备所述的操作相同的操作处理化合物100(60.0mg，0.018mmol)，在LH20凝胶柱(120x 3cm，1/1v/v二氯甲烷/乙醇)上色谱纯化后得到化合物101(46.1mg)。

质量：“ESI”法，负模式：理论质量＝2564.66；实验质量：2563.66±0.19a.m.u.

甲基(3,4-二-O-苄基-2-O-磺酸三乙基铵-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸三乙基铵-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[(3-O-苄基-2-O-磺酸三乙基铵-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸三乙基铵-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)] ₂ -(3-O-苄基-2-O-磺酸三乙基铵-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-6-O-苯甲酰基-3-O-苄基-2-{[(苯甲氧基)羰基]氨基}-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(102)

根据与对于化合物28的制备所述的操作相同的操作处理化合物101(42.9mg，0.016mmol)，在LH20凝胶柱(120x 3cm，1/1v/v二氯甲烷/乙醇)上实施色谱法，然后在C₁₈硅胶柱(40-60μm；A：甲醇，5％水，23mM乙酸铵；B：乙腈，45％甲醇，5％水，17mM乙酸铵；A→B100/0→70/30)上实施快速色谱法，接着在LH20柱(95x 2cm，50/50/1v/v/v二氯甲烷/乙醇/水)上脱盐后得到化合物102(28.7mg)。

甲基(3,4-二-O-苄基-2-O-磺酸锂-α-L-吡喃艾杜糖醛酸锂)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸锂-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[(3-O-苄基-2-O-磺酸锂-α-L-吡喃艾杜糖醛酸锂)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸锂 -α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)] ₂ -(3-O-苄基-2-O-磺酸锂-α-L-吡喃艾杜糖醛酸锂)-(1→4)-3-O-苄基-2-{[(苯甲氧基)羰基]氨基}-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(103)

根据与对于化合物29的制备所述的操作相同的操作处理化合物102(28.7mg，7.5μmol)，得到粗化合物103(17.3mg)。

甲基(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-氨基-2-脱氧-6-O- 磺酸钠-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-氨基-2-脱氧-6-O-磺酸钠-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)] ₂ -(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-2-氨基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(104)

根据与对于化合物91的制备所述的操作相同的操作处理化合物103(17.3mg，5.7μmol)。将这样得到的粗化合物104再次皂化。在0℃向粗化合物104在1/1v/v四氢呋喃/甲醇混合物(506μL)中的溶液添加氢氧化锂在水(202μL，0.2M的化学计量最终浓度)中的0.7M溶液。在0℃ 1小时然后在室温16小时后，将反应介质在排阻柱(G25-细凝胶，95x 2cm，0.2M NaCl，然后G25-细凝胶，95x 2cm，水)上色谱纯化，得到化合物104(6.5mg)。

异头质子的¹H NMR[600MHz](D₂O)δ：5.45；5.44；5.43；5.26；5.25；5.24；5.18；4.98ppm

方案22：制备八糖108

甲基(3,4-二-O-苄基-2-O-磺酸三乙基铵-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸三乙基铵-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸三乙基铵-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-6-O-叔丁基二苯基甲硅烷基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸三乙基铵-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸三乙基铵-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸三乙基铵-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-3-O-苄基-2-脱氧-2-[(苯甲氧基)羰基]氨基-6-O-磺酸三乙基铵-α-D- 吡喃葡糖苷(105)

根据与对于化合物28的制备所述的操作相同的操作处理化合物85(31.4mg，11.6μmol)，在LH20凝胶柱(120x 3cm，50/50/1 v/v/v二氯甲烷/乙醇/水)上色谱纯化后得到化合物105(40.2mg)。

甲基(2-O-磺酸铵-3,4-二-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(6-O-磺酸铵-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸铵-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸铵-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(6-O-磺酸铵-2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸铵-3-O-苄基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-6-O-磺酸铵-3-O-苄基-2-[(苯甲氧基)羰基]氨基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(106)

根据与对于化合物89的制备所述的操作相同的操作处理化合物105(38.4mg，9.68μmol)，在LH20凝胶柱(95x 2cm，N,N-二甲基甲酰胺)上色谱纯化后得到化合物106(28.4mg)。

Rf＝0.21(28/16/3.8/9 EtOAc/吡啶/AcOH/H₂O)。

甲基(3,4-二-O-苄基-2-O-磺酸锂-α-L-吡喃艾杜糖醛酸锂)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸锂-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸锂-α-L-吡喃艾杜糖醛酸锂)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸锂-α-L-吡喃艾杜糖醛酸锂)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸锂-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸锂-α-L-吡喃艾杜糖醛酸锂)-(1→4)-3-O-苄基-2-脱氧-2-[(苯甲氧基)羰基]氨基-6-O-磺酸锂-α-D-吡喃葡糖苷(107)

根据与对于化合物89的制备所述的操作相同的操作处理化合物106(28.4mg，7.62μmol)，在LH20凝胶柱(95x 2cm，50/50/1v/v/v二氯甲烷/乙醇/水)上色谱纯化后得到化合物107(28.0mg)。

Rf＝0.12(28/16/3.8/9 EtOAc/吡啶/AcOH/H₂O)。

甲基(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1-4)-(2-氨基-2-脱氧-6-O- 磺酸钠-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1-4)-(2-氨基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1-4)-(2-氨基-2-脱氧-6-O-磺酸钠-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O- 磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1-4)-2-氨基-2-脱氧-6-O-磺酸钠-α-D-吡喃葡萄苷(108)

根据与对于化合物91的制备所述的操作相同的操作处理化合物107(5.8mg，2.85μmol)，得到化合物108(2.5mg)，其不经进一步纯化就用于后续步骤。

异头质子的¹H NMR[600MHz](D₂O)δ：5.45；5.44；5.42；5.26；5.25；5.24；5.17；5.03ppm

方案23：制备八糖111

甲基(3,4-二-O-苄基-2-O-磺酸三乙基铵-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸三乙基铵-α-D-吡喃葡糖基)-[(1→4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸三乙基铵-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸三乙基铵-α-D-吡喃葡糖基)] ₂ -(1→4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸三乙基铵-α-L-吡喃艾杜糖醛酸甲基酯)-(1→4)-3-O-苄基-2-苯甲氧基羰基氨基-2-脱氧-6-O-磺酸三乙基铵-α-D-吡喃葡糖苷(109)

将化合物87(37.0mg，0.15mmol)通过N,N-二甲基甲酰胺(3x 1.4mL)的共蒸馏干燥，然后溶解在N,N-二甲基甲酰胺(1.4mL)中。向此溶液添加三氧化硫-三乙胺复合物(109mg；6.01mmol)。将混合物在55℃避光搅拌16小时，然后用甲醇(25μL)破坏过量试剂。将反应介质沉积在LH20柱(120x 3cm)上，用1/1二氯甲烷/乙醇混合物洗脱，得到化合物109(59.8mg)。

Rf＝0.26，硅胶，28/16/3.8/9乙酸乙酯/吡啶/乙酸/水。

甲基(3,4-二-O-苄基-2-O-磺酸锂-α-L-吡喃艾杜糖醛酸锂)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸锂-α-D-吡喃葡糖基)-[(1→4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸锂-α-L-吡喃艾杜糖醛酸锂)-(1→4)-(2-叠氮基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸锂 -α-D-吡喃葡糖基)] ₂ -(1→4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸锂-α-L-吡喃艾杜糖醛酸锂)-(1→4)-3-O-苄基-2-苯甲氧基羰基氨基-2-脱氧-6-O-磺酸锂-α-D-吡喃葡糖苷(110)

在0℃向化合物109(57.3mg，13.7μmol)在1/1v/v四氢呋喃/甲醇混合物(2.2mL)中的溶液添加氢氧化锂在水(0.88mL；0.2M的化学计量最终浓度)中的0.7M溶液。在0℃ 1小时，然后在室温16小时后，将反应介质沉积在LH20柱(120x 3cm)上，用50/50/1v/v/v二氯甲烷/乙醇/水混合物洗脱，得到化合物110(38.1mg)。

[α]_D 13.1°(c 1.0；MeOH)

甲基(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-氨基-2-脱氧-6-O- 磺酸钠-α-D-吡喃葡糖基)-[(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-氨基-2-脱氧-6-O-磺酸钠-α-D-吡喃葡糖基)] ₂ -(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-2-氨基-2-脱氧-6-O-磺酸钠-α-D-吡喃葡糖苷(111)

向化合物110(40mg，12.8μmol)在1/1v/v叔丁醇/水混合物(2.6mL)中的溶液添加甲酸铵(105mg，1.67mmol)和10％钯/碳(260mg)。在室温搅拌4小时后，将反应介质过滤(LSWP 5μm滤器)并浓缩至干。将残留物沉积在G25-细凝胶柱(95x 2cm)上，用0.2M NaCl水溶液洗脱。将含希望化合物的级份合并并且沉积在G25-细凝胶柱(95x 2cm)上，用水洗脱。这样得到的粗产物111(14.7mg)不经进一步纯化就用于后续步骤。

质量：“ESI”法，负模式：理论质量＝2285.47；实验质量：2197.20±0.34a.m.u.(以COOH形式观察到艾杜糖醛酸)。

本发明化合物的实施例:

实施例1：甲基(4-O-丙基-2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)] ₂ -(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖苷(化合物1)

在0℃和在氩气气氛下，向化合物30(180mg，0.077mmol)在饱和碳酸氢钠水溶液(15mL，100mL/mmol)中的新鲜制备的溶液添加固体碳酸氢钠(1.17g，13.9mmol)，然后滴加吡啶-三氧化硫复合物(985mg，6.19mmol)，历时30分钟。在室温16小时后，将反应混合物沉积在G25-细凝胶柱(90x 3cm)上，用0.2M NaCl水溶液洗脱。将含希望化合物的级份合并并且沉积在G25-细凝胶柱(90x 3cm)上，用水洗脱。在浓缩含希望化合物的级份后，得到200mg化合物1。

异头质子的¹H NMR[600MHz](D₂O)δ：5.45；5.42(2H)；5.22；5.21；5.20；5.18；5.03ppm.

质量：“ESI”法，负模式：理论质量＝2735.72；实验质量：2734a.m.u.

实施例2：甲基(4-O-丙基-2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)] ₃ -(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖苷(化合物2)

根据与对于化合物1的制备所述的操作相同的操作处理化合物37(29.5mg，11.56μmol)，在通过离子交换色谱法(SAX柱，条件：0.5mL/min，A：H₂O，B：2M NaCl，梯度30％B至90％，历时30分钟)纯化，接着在G25-细凝胶柱(54x 1.7cm，水)上色谱纯化后，得到化合物2(7.4mg)。

异头质子的¹H NMR[600MHz](D₂O)δ：5.45；5.42；5.41(2H)；5.22；5.21(2H)；5.20；5.18；5.03ppm.

质量：“ESI”法，负模式：理论质量＝3401.12；实验质量：3400.40±0.76a.m.u.

实施例3：[甲基(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧 -6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[(2-O-磺酸钠基 -α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D- 吡喃葡糖基)-(1→4)] ₂ -2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖苷]醛酸钠(化合物3)

根据与对于化合物1的制备所述的操作相同的操作处理粗化合物55(48.7mg)，得到化合物3(37.6mg)。

异头质子的¹H NMR[600MHz](D₂O)δ：5.43(2H)；5.35；5.25；5.24；5.19；5.18；5.09ppm.

实施例4：甲基(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-2- 氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸钠基 -α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D- 吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-2-脱氧 -6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖苷(化合物4)

根据与对于化合物1的制备所述的操作相同的操作处理化合物91(5.5mg，2.64μmol)，得到化合物4(4.5mg)。

异头质子的¹H NMR[600MHz](D₂O)δ：5.44；5.40；5.31；5.25；5.24；5.22；5.16；5.03ppm.

质量：“ESI”法，负模式：理论质量＝2489.55；实验质量：2465.63±0.64a.m.u.

实施例5：甲基(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-2- 氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖苷(化合物5)

根据与对于化合物1的制备所述的操作相同的操作处理化合物95(2.5mg，1.2μmol)，得到化合物5(1.9mg)。

异头质子的¹H NMR[600MHz](D₂O)δ：5.45；5.43；5.33；5.25；5.23；5.21；5.16；5.05ppm.

实施例6：甲基(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧 -6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L- 吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖苷(化合物6)

根据与对于化合物1的制备所述的操作相同的操作处理化合物99(8.9mg，4.28μmol)，得到化合物6(7.3mg)。

异头质子的¹H NMR[600MHz](D₂O)δ：5.46；5.32(2H)；5.26；5.25；5.21；5.20；5.05ppm.

质量：“ESI”法，负模式：理论质量＝2489.55；实验质量：2488.00±1.5a.m.u。

实施例7：甲基(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧 -6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L- 吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖苷(化合物7)

根据与对于化合物1的制备所述的操作相同的操作处理化合物108(3.7mg，1.42μmol)，得到化合物7(1.8mg)。

异头质子的¹H NMR[600MHz](D₂O)δ：5.46；5.42；5.31；5.26；5.24；5.22；5.18；5.03ppm.

实施例8：甲基(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧 -6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-[(1→4)-(2-O-磺酸钠基 -α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D- 吡喃葡糖基)] ₂ -(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-2-脱氧 -6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖苷(化合物8)

根据与对于化合物1的制备所述的操作相同的操作处理化合物111(42mg，18.4μmol)，得到化合物8(44.1mg)。

异头质子的¹H NMR[600MHz](D₂O)δ：5.45；5.44；5.25；5.24(2H)；5.20；5.04ppm.

质量：“ESI”法，负模式：理论质量＝2693.84；实验质量：2692.97±0.18a.m.u.

实施例9：甲基(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧 -6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-[(1→4)-(2-O-磺酸钠基 -α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-(2-脱氧-6-O-磺酸钠基-2-氨基磺酸钠基-α-D- 吡喃葡糖基)] ₂ -(1→4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸钠)-(1→4)-2-脱氧 -2-氨基磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖苷(化合物9)

根据与对于化合物1的制备所述的操作相同的操作处理化合物104(6.5mg，2.98μmol)，得到化合物9(6.0mg)。

异头质子的¹H NMR[600MHz](D₂O)δ：5.44(2H)；5.43；5.22(2H)；5.19；5.18；5.05ppm.

质量：“ESI”法，负模式：理论质量＝2591.60；实验质量：2591.80±0.33a.m.u.

本发明实施例化合物进行了药理学试验以测定它们对FGF受体的激动剂作用以及它们对血管发生和缺血后血管重建的活性。

体外血管发生的模型：对FGF2的特异性活性

体外血管发生模型对应于人静脉内皮细胞在生物基质上的重排。所述基质通过以下方法制造：将在胶原(鼠尾胶原，I型：Becton Dickinson 354249)中稀释至1/3的60μl(生长因子减少的：Becton Dickinson356230)分散到96孔板(Becton Dickinson 353872)的每个孔中。生物基质在37℃于1小时后硬化。

将人静脉内皮细胞(HUVEC ref：C-12200-Promocell)在120μl培养基(Endothelial Basal Medium，Lonza C3121)+2％FCS(胎牛血清-Lonza)+10μg/ml hEGF(重组人表皮生长因子-Lonza)中以7800个细胞/孔接种到生物基质上。将细胞用10ng/ml FGF2(R&D Systems/234-FSE-050)或用本发明产物在5％CO₂的存在下于37℃刺激18小时。在24小时后，在显微镜(X4物镜)下观察细胞并借助于图像软件(Biocom VisioLab 2000软件)实施假小管(pseudo-tubules)长度分析。

在这种体外血管发生试验中，本发明实施例化合物的比活性为10^-6M-10^-12M。例如，化合物1和7在10^-6M具有活性。

具有下式的化合物10以钠盐形式测试，在这种体外血管发生试验中也呈现活性：

而且，在体外细胞试验中证实，与六糖类似物(C.Tabeur等人在Bioorg.&Med.Chem.,1999,7,2003-2012中描述的化合物)相比，本发明的8号八糖、3号七糖和2号十糖是较好的FGF-2活化剂。此外，本发明其它八糖化合物中的大部分，例如7号化合物，对于体外模型具有与8号八糖相同的活性。

在小鼠中的纤维素植入物模型

这种模型是Andrade等人(Microvascular Research,1997,54,253-61)描述的用于测试能够活化血管发生开始的药物的模型的变型。

将动物(白色血亲BALB/c J小鼠)用赛拉嗪(10mg/kg)/***(1000，100mg/kg)混合物腹膜内麻醉。将动物的背剃毛并用消毒。通过注射5ml无菌空气在老鼠的背上在皮下创建气囊。在动物的背的顶部制造约2cm的切口，以引入无菌纤维素植入物(直径为1cm，厚2mm的圆盘,ref.0501)，该植入物用50μl含试验产物的无菌溶液浸渍。然后将切口缝合并用清洁。

在***植入物之后的日子里，小鼠可在气体麻醉(5％异氟醚(Baxter))下接受通过皮肤注射到植入物中的产物(50μl/植入物/天)。

在***海绵7天后，通过腹膜内给药致命剂量的戊巴比妥钠(CEVA SantéAnimale)处死小鼠。然后切除海绵周围约1cm的皮肤，同时避免伤疤，以放出皮肤和海绵。然后将海绵切成几块并置于含1ml溶胞缓冲液的(Cell Death Detection ELISA，Roche)中。使用细胞粉碎机(FP 120)，将试管以力道4(force 4)连续摇晃4次，20秒钟。然后将试管在20℃以2000×g离心10分钟并将上清液在-20℃冷冻，直到血红蛋白测定时。在测定的当天，将试管在解冻后再次离心并用Drabkin试剂(Sigma，体积/体积)通过在分光光度计上在405nm读数针对标准范围的牛血红蛋白(Sigma)测量血红蛋白浓度。

由得自所述范围的多项式回归，将每个样品中的血红蛋白浓度以mg/ml表示。对于每组，将结果表示为平均值(±sem)。组间的差值使用方差分析(ANOVA)，接着通过邓奈特检验对值的平方根进行检验。

在这种体内试验中，本发明实施例化合物显示5-45ng/位点的比活性。因此，化合物1和7在45ng/位点的浓度具有活性。

因此，似乎本发明化合物对FGF受体具有激动剂活性，以及对血管发生和缺血后血管重建具有活性。这些化合物因此可用于制备药物，尤其是可用于治疗需要活化FGF受体的疾病的药物，或者用于制备可用于需要活化血管发生和缺血后血管重建的病状的药物。

因此，根据另一方面，本发明的主题因此是包含式(I)/(I’)化合物或化合物10，或其药用盐的药物。

更一般地，本发明的一个主题是包含式(I)化合物的药物:

其中：

-R₁表示基团-OSO₃ ^-或羟基，

-R₂表示基团-O-烷基或式(II)的单糖基团，其中R表示烷基：

-R₃表示式(III)的二糖基团:

其中：

-R₄表示基团-OSO₃ ^-或羟基，

-R₅表示式(IV)的二糖基团：

其中：

-R₆表示基团-OSO₃ ^-或羟基，

-R₇表示羟基或下式(V)的单糖基团，或式(VI)的二糖基团：

其中：

-R₈表示基团-OSO₃ ^-或羟基，

-R₉表示羟基或基团-O-烷基，或式(VII)的二糖基团：

其中R₁₀表示基团-O-烷基，

这种化合物包括上面定义的式(I)/(I’)的化合物，以及在专利申请US 2006/0079483 A1中描述的先前定义的七糖10。

这些药物具有治疗用途，尤其是治疗缺血(心脏缺血，下肢动脉缺血)，治疗与动脉变窄或阻塞相关的疾病或治疗动脉炎(arterites)，治疗心绞痛，治疗闭塞性血栓性脉管炎，治疗动脉粥样硬化，治疗在血管成形术或动脉内切除术(endoarterectomy)后再狭窄的抑制，治疗瘢痕形成，肌肉再生治疗，肌细胞存活的治疗，治疗周围神经病，治疗手术后神经损害，治疗神经缺陷如帕金森病，阿尔茨海默病，朊病毒病和酒精性神经元变性(neuronaldegeneration in alcoholics)，治疗痴呆，用于在糖尿病的情况中改善生物人工胰腺移植物的存活的治疗，用于改善移植物血管重建和移植物存活的治疗，治疗视网膜变性，治疗色素视网膜炎(pigmentary retinitis)，治疗骨关节炎，治疗先兆子痫或治疗血管性损害和急性呼吸窘迫综合征，用于软骨修复的治疗，用于修复和保护骨的治疗，用于修复和保护毛囊以及用于保护和调节毛发生长的治疗。

缺血是器官中动脉循环的降低，从而导致受损组织中氧浓度的降低。在缺血后血管重建的机制中，牵涉两种主要的机制：血管发生和动脉生成。血管发生是从预先存在的血管产生新的毛细血管的过程。动脉生成促进在缺血或无血管区域周围侧副管的发展(尺寸和管径的提高)。

在这些血管重建过程中牵涉的生长因子中，已经最广泛地描述了FGF家族并且尤其是FGF-2(Post,M.J.,Laham,R.,Sellke,F.W.&Simons,M.Therapeutic angiogenesis in cardiology using protein formulations.Cardiovasc.Res.49,522-31,2001)。

因此，对于针对诱导血管发生和动脉生成过程的治疗，FGF2及其受体是非常适合的靶标(Khurana,R.&Simons,M.Insights from angiogenesis trialsusing fibroblast growth factor for advanced arteriosclerotic disease.TrendsCardiovasc.Med.13,116-22,2003)。

本发明化合物的一个应用是在心脏闭塞或周围动脉闭塞后的缺血后治疗。关于心脏缺血的治疗，一种最有前途的临床试验是这样的临床试验，即，其中在肝素的存在下将FGF-2隔绝在藻酸盐微球中(Laham,R.J.et al.Localperivascular delivery of basic fibroblast growth factor in patients undergoingcoronary bypass surgery:results of a phase I randomized,double-blind,placebo-controlled trial.Circulation 100,1865-71,1999)。将这些微球靠近心肌中的缺血部位植入。在90天后，用FGF2治疗的所有患者不显示缺血性心脏症状。相比之下，在对照组中，7位患者中的3位在90天中具有持续性症状以及2位患者需要血管外科手术。有趣地，在3年的监测后维持治疗益处。这些观察暗示，模拟FGF2的化合物对于治疗心脏缺血的后果是选用疗法。

在冠状动脉变窄的治疗中，实施了将FGF2注射到冠状动脉中的3个临床试验(Laham,R.J.et al.Intracoronary basic fibroblast growth factor(FGF-2)inpatients with severe ischemic heart disease:results of a phase I open-label doseescalation study.J.Am.Coll.Cardiol.36,2132-9,2000；Simons,M.et al.Pharmacological treatment of coronary artery disease with recombinant fibroblastgrowth factor-2:double-blind,randomized,controlled clinical trial.Circulation105,788-93,2002；Unger,E.F.et al.Effects of a single intracoronary injection ofbasic fibroblast growth factor in stable angina pectoris.Am.J.Cardiol.85,1414-9,2000)。这三个试验的结果显示，FGF2的冠状动脉内输注良好耐受并且显著改善患者的病症。因此，本发明所述化合物可用于治疗与冠状动脉的变窄相关的疾病，并且尤其是用于治疗心绞痛。

远端动脉疾病并且尤其是下肢动脉炎由灌注四肢的小动脉的慢性阻塞引起。这些病状主要影响下肢。在I期临床试验中，患有导致跛行的外周动脉病状的患者接受FGF2注射(Lazarous,D.F.et al.,Basic fibroblast growthfactor in patients with intermittent claudication:results of a phase I trial.J.Am.Coll.Cardiol.36,1239-44,2000)。在这种情况下，FGF2在这些患者中良好耐受并且临床数据暗示FGF2的有益效果并且尤其是对于改善行走的有益效果。这些临床数据暗示，本发明化合物是用于治疗与远端动脉的阻塞相关的疾病的选用治疗工具。

Buerger病或闭塞性血栓性脉管炎影响远端血管结构并且特征在于腿部的远端动脉炎伴有疼痛和溃疡。在这种情况下，血管发生(angiogenesis)和血管生成(vasculogenesis)的诱发代表对此病状的治疗。所述本发明化合物代表对闭塞性血栓性脉管炎的选用治疗。

周围神经病是运动和/或感觉周围神经的轴突或脱髓鞘性侵袭，其导致远肢的脱敏。糖尿病主要继发性并发症中的一种是周围神经病的慢性发展。在这种情况下，已经证实，FGF2诱导轴突再生，其可为治疗周围神经损伤并因此治疗周围神经病的选用疗法(Basic fibroblast growth factor isoformspromote axonal elongation and branching of adult sensory neurons in vitro.Klimaschewski L,Nindl W,Feurle J,Kavakebi P,Kostron H.Neuroscience.2004；126(2):347-53)。由于对FGF受体的激动活性，所述本发明化合物在健康或糖尿病患者的情况中代表对周围神经病的选用治疗。

已明确证实，FGF2在发育过程中是神经细胞的活化剂。近来的结果暗示，FGF2也是成人中促进神经元再生的关键因素(Sapieha PS,Peltier M,Rendahl KG,Manning WC,Di Polo A.,Fibroblast growth factor-2gene deliverystimulates axon growth by adult retinal ganglion cells after acute optic nerveinjury.Mol.Cell.Neurosci.2003Nov.；24(3):656-72)。由于它们对FGF受体的激动活性，所述本发明化合物在修复手术后神经损害中，在修复神经缺陷如帕金森病、阿尔茨海默病、朊病毒病和酒精性神经元变性中或者在痴呆的情况中代表选用治疗。

血管平滑肌细胞的增殖和迁移促进动脉的内膜肥大，并因此在动脉粥样硬化中和在血管成形术和动脉内切除术后的再狭窄中起主要作用。已经证实，血管生成因子VEGF通过加速再内皮化显著降低内膜厚度(Van Belle,E.,Maillard,L.,Tio,F.O.&Isner,J.M.Accelerated endothelialization by localdelivery of recombinant human vascular endothelial growth factor reducesin-stent intimal formation.Biochem.Biophys.Res.Commun.235,311-6,1997)。因此，具有前血管生成活性的本发明化合物可用于治疗动脉粥样硬化和用于抑制血管成形术或动脉内切除术后的再狭窄。

血管网络对于组织的发育和维持是必需的。通过促进营养、氧和细胞的递送，血管帮助维持组织的功能和结构完整性。在这种情况下，血管发生和血管生成使得可以在缺血后保存和灌注组织。因此血管生成生长因子如VEGF和FGF2促进组织再生的血管重建。本发明提供的化合物在肌肉再生治疗中可代表选用治疗。

营养障碍或正常肌肉的肌肉再生过程取决于局部水平的细胞因子和血管生成生长因子的供应(Fibbi,G.,D’Alessio,S.,Pucci,M.,Cerletti,M.&DelRosso,M.Growth factor-dependent proliferation and invasion of muscle satellitecells require the cell-associated fibrinolytic system.Biol.Chem.383,127-36,2002)。已经提出，FGF体系是肌肉再生以及成肌细胞存活和增殖的重要体系(Neuhaus,P.et al.Reduced mobility of fibroblast growth factor(FGF)-deficientmyoblasts might contribute to dystrophic changes in the musculature ofFGF2/FGF6/mdx triple-mutant mice.Mol.Cell.Biol.23,6037-48,2003)。可开发FGF2和所述本发明化合物以促进心脏再生。因此它们将改善在缺血后心肌的灌注(Hendel,R.C.et al.Effect of intracoronary recombinant humanvascular endothelial growth factor on myocardial perfusion:evidence for adose-dependent effect.Circulation 101,118-21,2000)以及移植肌细胞的存活和发展，尤其是在进行性假肥大性肌营养不良中。

血管发生是皮肤瘢痕形成中的必需现象。形成的新血管供应组织修复所需的氧和营养。在糖尿病的情况中，瘢痕形成是缓慢和困难的过程，呈现血管发生缺陷。在瘢痕形成阶段中，FGF属于在血管发生过程中牵涉最多的生长因子。在皮肤损害后，某些FGF在表皮细胞中高度过调节。由于它们对FGF受体的激动活性，对于治疗健康或糖尿病患者中的瘢痕形成，所述本发明化合物代表选用疗法。

对于治疗某些类型的糖尿病，生物人工胰腺移植是非常有前途的技术。在糖尿病大鼠中已经证实，当胰腺含有携带FGF2的微球时，在生物人工胰腺中的血管化顺利得多(Sakurai,Tomonori；Satake,Akira,Sumi,Shoichiro,Inoue,Kazutomo,Nagata,Natsuki,Tabata,Yasuhiko.The EfficientPrevascularization Induced by Fibroblast Growth Factor 2With aCollagen-Coated Device Improves the Cell Survival of a Bioartificial Pancreas.Pancreas.28(3):e70-e79,April 2004)。因此这种血管重建改善植入的生物人工胰腺的存活并因此改善移植物的存活。由于它们对FGF受体的激动活性，所述本发明化合物在改善糖尿病患者中的生物人工胰腺移植物的存活中，并且更一般地，在改善移植物的血管重建并因此改善移植物的存活中代表选用疗法。

色素视网膜炎是牵涉视网膜的进行性退化的病状，其特征在于光受体的退化和视网膜血管的闭塞。Lahdenranta等人(An anti-angiogenic state in miceand humans with retinal photoreceptor cell degeneration.Proc.Natl.Acad.Sci.USA 98,10368-73,2001)提出，血管生成生长因子通过同时用作光受体存活因子和用作内皮细胞调节剂来调节视网膜的神经协调和相关的血管化。在这种情况下，FGF2的玻璃体内注射通过作用于视网膜存活和视网膜血管发生来延迟光受体的退化(Faktorovich,E.G.,Steinberg,R.H.,Yasumura,D.,Matthes,M.T.&LaVail,M.M.Basic fibroblast growth factor and local injuryprotect photoreceptors from light damage in the rat.J.Neurosci.12,3554-67,1992)。这些观察证实了本发明所述化合物作为视网膜变性中并且尤其是色素视网膜炎中的疗法的重要性。

在骨关节炎领域中，针对恢复受损的关节软骨进行了许多研究。在这种情况下，已经报导，在体外，软骨细胞的增殖和分化受FGF2刺激(Kato Y,Gospodarowicz D.Sulfated proteoglycan synthesis by confluent cultures ofrabbit costal chondrocytes grown in the presence of fibroblast growth factor.J.Cell Biol.1985Feb.；100(2):477-85)。而且，Cuevas等人显示，FGF2在体内诱导软骨修复(Cuevas P,Burgos J,Baird A.Basic fibroblast growthfactor(FGF)promotes cartilage repair in vivo.Biochem.Biophys.Res.Commun.1988Oct.31；156(2):611-8)。Takafuji等人显示，在患有骨关节炎的兔中FGF2植入物显著改善颞下颌软骨(Takafuji H,Suzuki T,Okubo Y,Fujimura K,Bessho K Regeneration of articular cartilage defects in the temporomandibularjoint of rabbits by fibroblast growth factor-2:a pilot study.Int.J.Oral Maxillofac.Surg.2007Oct.；36(10):934-7)。这些观察证实了本发明所述化合物作为治疗骨关节炎和软骨修复中的疗法的重要性。

在骨修复领域中，基本需要之一是寻找刺激骨形成的药物。在主要生长因子中，已经确认，FGF2的全身性给药促进骨修复(Acceleration of fracturehealing in nonhuman primates by fibroblast growth factor-2.Kawaguchi H,Nakamura K,Tabata Y,Ikada Y,Aoyama I,Anzai J,Nakamura T,Hiyama Y,Tamura M.J.Clin.Endocrinol.Metab.2001Feb.；86(2),875-880)。FGF2在明胶基质中的局部施用加速灵长类的骨修复，暗示了FGF2在治疗骨折中的临床有效性。由于它们对FGF受体的激动性质，本发明所述化合物代表骨修复中的选用治疗。

先兆子痫是与血管化缺陷相关的胎盘病状(Sherer,D.M.&Abulafia,O.Angiogenesis during implantation,and placental and early embryonicdevelopment.Placenta 22,1-13,2001)。这些血管化缺陷被认为是血管发生缺陷导致的，并导致胎盘破坏，而胎盘破坏可导致胎儿死亡。本发明化合物可为用于克服先兆子痫胎盘中的血管发生缺陷的选用治疗。

除了诱导血管发生的效果之外，生长因子如VEGF或FGF2保护内皮细胞免于内源性和外源性细胞凋亡诱导物。内源性信号途径由线粒体响应于应激如剥夺或DNA损伤而激活，而外源性信号途径由凋亡前因子如TNF-α或Fas的结合而诱导。现在已经清楚地描述，VEGF和FGF2是内皮细胞存活的两种因子(Role of Raf in Vascular Protection from Distinct Apoptotic Stimuli:A Alavi,J.D.Hood,R.Frausto,D.G.Stupack,D.A.Cheresh:Science 4July2003:Vol.301.No.5629,pp.94-96)。急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的特征在于心血管和神经精神性问题。在心血管问题的情况中，患者呈现出主要血管性损害，并且尤其是内皮细胞凋亡的高诱导率。近来，Hamacher等人证实，患有ARDS的患者的支气管肺泡灌洗液显示出针对肺微血管内皮细胞的凋亡前活性(Tumor necrosis factor-alpha and angiostatin are mediators ofendothelial cytotoxicity in bronchoalveolar lavages of patients with acuterespiratory distress syndrome.Am.J.Respir.Crit.Care Med.2002Sep.1；166(5):651-6:Hamacher J.,Lucas R.,Lijnen H.R.,Buschke S.,Dunant Y.,Wendel A.,Grau G.E.,Suter P.M.,Ricou B.)。由于它们对内皮细胞存活的活性，本发明的产物在患有血管性损害的患者并且尤其是患有ARDS的患者的血管改善中可为选用治疗。

在病理情况中或者在肿瘤治疗后，FGF7(或KGF)和FGF18的内源性过调节似乎是促进毛囊的增殖、迁移和保护的重要机制(ComprehensiveAnalysis of FGF and FGFR Expression in Skin:FGF18Is Highly Expressed inHair Follicles and Capable of Inducing Anagen from Telogen Stage Hair Follicles.Mitsuko Kawano,Akiko Komi-Kuramochi,Masahiro Asada,Masashi Suzuki,Junko Oki,Ju Jiang and Toru Imamura)。由于它们对FGF受体的激动活性，所述本发明化合物可为修复和保护毛囊以及保护和调节毛发生长的选用治疗。

根据另一方面，本发明涉及药物组合物，其包含作为活性成分的本发明化合物或化合物10。这些药物组合物含有有效剂量的至少一种本发明化合物或化合物10，或所述化合物的药用盐，以及至少一种药用赋形剂。根据药物形式和希望的给药方式，所述赋形剂选自本领域技术人员已知的常用赋形剂。

因此，本发明的一个主题是药物组合物，其包含作为活性成分的至少一种式(I)化合物或所述化合物的药用盐，以及至少一种药用赋形剂，其中：

-R₁表示基团-OSO₃ ^-或羟基，

-R₂表示基团-O-烷基或式(II)的单糖基团，其中R表示烷基：

-R₃表示式(III)的二糖基团:

其中：

-R₄表示基团-OSO₃ ^-或羟基，

-R₅表示式(IV)的二糖基团：

其中：

-R₆表示基团-OSO₃ ^-或羟基，

-R₇表示羟基或下式(V)的单糖基团，或式(VI)的二糖基团：

其中：

-R₈表示基团-OSO₃ ^-或羟基，

-R₉表示羟基或基团-O-烷基，或式(VII)的二糖基团：

其中R₁₀表示基团-O-烷基，

这种化合物涵盖上面定义的式(I)/(I’)化合物，以及上面定义的七糖10，其已经描述在专利申请US 2006/0079483 A1中。

在用于口服、舌下、皮下、肌内、静脉内、表面(topical)、局部(local)、气管内、鼻内、经皮或直肠给药的本发明药物组合物中，上面的活性成分或其盐可按单位给药形式，作为与标准药物赋形剂的混合物给药于人和动物，用于预防或治疗上面的障碍或疾病。

适合的单位给药形式包括口服形式如片剂、软胶囊剂或硬胶囊剂、粉末剂、颗粒剂和口服溶液或混悬剂，舌下、含服、气管内、眼内、鼻内或吸入给药形式，表面、经皮、皮下、肌内或静脉内给药形式，直肠给药形式和埋植剂。对于表面应用，本发明化合物可按乳膏剂、凝胶剂、软膏剂或洗剂使用。

可注射给药形式是特别有利的，常规地包含在氯化钠的存在下溶解在注射用水中的活性化合物。活性化合物的单位剂量应适合于希望的疗效；它可为例如0.1-100mg的活性成分。

根据另一方面，本发明还涉及本发明化合物或化合物10或其药用盐用于治疗上述病状的用途。

因此，本发明的一个主题是式(I)化合物或所述化合物的药用盐，其中：

-R₁表示基团-OSO₃ ^-或羟基，

-R₂表示基团-O-烷基或式(II)的单糖基团，其中R表示烷基：

-R₃表示式(III)的二糖基团:

其中：

-R₄表示基团-OSO₃ ^-或羟基，以及

-R₅表示式(IV)的二糖基团：

其中：

-R₆表示基团-OSO₃ ^-或羟基，

-R₇表示羟基或下式(V)的单糖基团，或式(VI)的二糖基团：

其中：

-R₈表示基团-OSO₃ ^-或羟基，

-R₉表示羟基或基团-O-烷基，或式(VII)的二糖基团：

其中R₁₀表示基团-O-烷基，

条件是：当R₂表示如上定义的式(II)的单糖基团时，R₉表示羟基或基团-O-烷基；当R₂表示基团-O-烷基时，R₇表示如上定义的式(VI)的二糖基团；以及R₁、R₄、R₆和R₈不同时表示羟基，

其用于治疗上述的病状。

根据另一方面，本发明还涉及治疗上述病状的方法，其包括向患者给药有效剂量的本发明化合物或化合物10或其药用盐。

本发明的药物、药物组合物和治疗方法也可涉及前面定义的化合物的任何亚组。

Claims

1.对应于式(I)的低聚糖化合物，其呈酸的形式或其任何药用盐的形式：

其中：

-R₁表示基团-OSO₃ ^-或羟基，

-R₂表示基团-O-烷基或式(II)的单糖基团，其中R表示烷基：

-R₃表示式(III)的二糖基团：

其中：

-R₄表示基团-OSO₃ ^-或羟基，

-R₅表示式(IV)的二糖基团：

其中：

-R₆表示基团-OSO₃ ^-或羟基，

-R₇表示羟基或式(VI)的二糖基团：

其中：

-R₈表示基团-OSO₃ ^-或羟基，

-R₉表示羟基或基团-O-烷基，或式(VII)的二糖基团：

其中R₁₀表示基团-O-烷基，

2.权利要求1的化合物，其中R₂表示式(II)的单糖基团以及R₇表示羟基。

3.权利要求1或权利要求2的化合物，其呈酸的形式或其任何药用盐的形式，对应于下式(I-1)，其中R₇表示羟基以及R、R₁、R₄和R₆如权利要求1中所定义：

4.权利要求1的化合物，其中R₂表示基团-O-烷基。

5.权利要求1或权利要求4的化合物，其呈酸的形式或其任何药用盐的形式，对应于下式(I-2)，其中R₂表示基团-O-烷基以及R₁、R₄、R₆、R₈和R₉如权利要求1中所定义：

6.权利要求1的化合物，其中：

-R₂表示基团-O-烷基，以及

-R₇表示如权利要求1中所定义的式(VI)的二糖基团，其中R₉表示如权利要求1中所定义的式(VII)的二糖基团。

7.权利要求1或权利要求6的化合物，其呈酸的形式或其任何药用盐的形式，对应于下式(I-3)，其中R₂和R₉如权利要求6中所定义以及R₁、R₄、R₆、R₈和R₁₀如权利要求1中所定义：

8.权利要求1的化合物，其中：

-R₂表示基团-O-烷基，以及

-R₇表示如权利要求1中所定义的式(VI)的二糖基团，其中R₉表示羟基或基团-O-烷基。

9.权利要求1或权利要求8的化合物，其呈酸的形式或其任何药用盐的形式，对应于下式(I-2)，其中R₁、R₄、R₆和R₈如权利要求1中所定义，R₂表示基团-O-烷基以及R₉表示羟基或基团-O-烷基：

10.权利要求8或权利要求9的化合物，其中R₉表示基团-O-烷基。

11.权利要求1–10中的任一项的化合物，其特征在于它们对应于式(I’)，其中R₁、R₂、R₄、R₆和R₇如权利要求1–9中的任一项中所定义：

12.药物，其特征在于它包含权利要求1–11中的任一项的化合物或其药用盐，其中R₇表示羟基或下式(V)的单糖基团，或式(VI)的二糖基团，其中R₈和R₉如权利要求1–10中的任一项中所定义：

13.权利要求12的药物，其特征在于它包含权利要求1–11中的任一项的化合物，或其药用盐。

14.药物组合物，其特征在于它包含权利要求1–11中的任一项的化合物或其药用盐，以及至少一种药用赋形剂，其中R₇表示羟基或下式(V)的单糖基团，或式(VI)的二糖基团，其中R₈和R₉如权利要求1-10中的任一项中所定义:

15.药物组合物，其特征在于它包含权利要求1–11中的任一项的化合物，或其药用盐，以及至少一种药用赋形剂。

16.式20A的化合物，其中Pg、Pg’和Pg”可相同或不同，表示保护基团：

17.权利要求16的化合物，其中Pg、Pg’和Pg”分别表示苄基、烯丙基和乙酰基。

18.权利要求1-11中任一项的化合物或其药用盐在制备用于治疗需要活化FGF受体的病状的药物中的用途，其中R₇表示羟基或下式(V)的单糖基团，或式(VI)的二糖基团，其中R₈和R₉如权利要求1–10中的任一项中所定义：

19.权利要求1-11中任一项的化合物或其药用盐在制备用于治疗需要活化FGF受体的病状的药物中的用途。

20.权利要求1-11中任一项的化合物或其药用盐在制备用于治疗需要血管发生活化和缺血后血管重建的病状的药物中的用途，其中R₇表示羟基或下式(V)的单糖基团，或式(VI)的二糖基团，其中R₈和R₉如权利要求1–10中的任一项中所定义：

21.权利要求1-11中任一项的化合物或其药用盐在制备用于治疗需要血管发生活化和缺血后血管重建的病状的药物中的用途。

22.权利要求1-11中任一项的化合物或其药用盐在制备用于治疗以下病状的药物中的用途，其中R₇表示羟基或下式(V)的单糖基团，或式(VI)的二糖基团，其中R₈和R₉如权利要求1–10中的任一项中所定义：

用于治疗缺血例如心脏缺血和下肢的动脉缺血，用于治疗与动脉变窄或阻塞相关的疾病或用于治疗动脉炎，用于治疗心绞痛，用于治疗闭塞性血栓性脉管炎，用于治疗动脉粥样硬化，用于在血管成形术或动脉内切除术后再狭窄的抑制的治疗，用于治疗瘢痕形成，肌肉再生治疗，用于肌细胞存活的治疗，用于治疗周围神经病，用于治疗手术后神经损害，用于治疗神经缺陷如帕金森病、阿尔茨海默病、朊病毒病和酒精性神经元变性，用于治疗痴呆，用于在糖尿病的情况中改善生物人工胰腺移植物的存活的治疗，用于改善移植物血管重建和移植物存活的治疗，用于治疗视网膜变性，用于治疗色素视网膜炎，用于治疗骨关节炎，用于治疗先兆子痫或用于治疗血管性损害和急性呼吸窘迫综合征，用于修复软骨的治疗，用于修复和保护骨的治疗，用于修复和保护毛囊以及用于保护和调节毛发生长的治疗。

23.权利要求1-11中任一项的化合物或其药用盐在制备用于治疗以下病状的药物中的用途：用于治疗缺血例如心脏缺血和下肢的动脉缺血，用于治疗与动脉变窄或阻塞相关的疾病或用于治疗动脉炎，用于治疗心绞痛，用于治疗闭塞性血栓性脉管炎，用于治疗动脉粥样硬化，用于在血管成形术或动脉内切除术后再狭窄的抑制的治疗，用于治疗瘢痕形成，肌肉再生治疗，用于肌细胞存活的治疗，用于治疗周围神经病，用于治疗手术后神经损害，用于治疗神经缺陷如帕金森病、阿尔茨海默病、朊病毒病和酒精性神经元变性，用于治疗痴呆，用于在糖尿病的情况中改善生物人工胰腺移植物的存活的治疗，用于改善移植物血管重建和移植物存活的治疗，用于治疗视网膜变性，用于治疗色素视网膜炎，用于治疗骨关节炎，用于治疗先兆子痫或用于治疗血管性损害和急性呼吸窘迫综合征，用于修复软骨的治疗，用于修复和保护骨的治疗，用于修复和保护毛囊以及用于保护和调节毛发生长的治疗。