CN104910112A - 一种高纯度的中药丹参有效成分丹酚酸b的制备方法、药物制剂及临床应用 - Google Patents
一种高纯度的中药丹参有效成分丹酚酸b的制备方法、药物制剂及临床应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104910112A CN104910112A CN201510208692.3A CN201510208692A CN104910112A CN 104910112 A CN104910112 A CN 104910112A CN 201510208692 A CN201510208692 A CN 201510208692A CN 104910112 A CN104910112 A CN 104910112A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- salvianolic acid
- preparation
- salviamiltiorrhizabung
- highly purified
- effective constituent
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- SNKFFCBZYFGCQN-UHFFFAOYSA-N 2-[3-[3-[1-carboxy-2-(3,4-dihydroxyphenyl)ethoxy]carbonyl-2-(3,4-dihydroxyphenyl)-7-hydroxy-2,3-dihydro-1-benzofuran-4-yl]prop-2-enoyloxy]-3-(3,4-dihydroxyphenyl)propanoic acid Chemical compound C=1C=C(O)C=2OC(C=3C=C(O)C(O)=CC=3)C(C(=O)OC(CC=3C=C(O)C(O)=CC=3)C(O)=O)C=2C=1C=CC(=O)OC(C(=O)O)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 SNKFFCBZYFGCQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 84
- SNKFFCBZYFGCQN-VWUOOIFGSA-N Lithospermic acid B Natural products C([C@H](C(=O)O)OC(=O)\C=C\C=1C=2[C@H](C(=O)O[C@H](CC=3C=C(O)C(O)=CC=3)C(O)=O)[C@H](OC=2C(O)=CC=1)C=1C=C(O)C(O)=CC=1)C1=CC=C(O)C(O)=C1 SNKFFCBZYFGCQN-VWUOOIFGSA-N 0.000 title claims abstract description 84
- STCJJTBMWHMRCD-UHFFFAOYSA-N salvianolic acid B Natural products OC(=O)C(Cc1ccc(O)c(O)c1)OC(=O)C=Cc2cc(O)c(O)c3OC(C(C(=O)OC(Cc4ccc(O)c(O)c4)C(=O)O)c23)c5ccc(O)c(O)c5 STCJJTBMWHMRCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 84
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 46
- 239000003814 drug Substances 0.000 title abstract description 23
- 229940079593 drug Drugs 0.000 title abstract description 8
- 235000011135 Salvia miltiorrhiza Nutrition 0.000 title abstract description 4
- 241000304195 Salvia miltiorrhiza Species 0.000 title abstract 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 title 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 17
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 48
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 35
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 35
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 23
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 21
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 17
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 16
- 235000017276 Salvia Nutrition 0.000 claims description 15
- 239000000470 constituent Substances 0.000 claims description 14
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 13
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 11
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 10
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 9
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 8
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 7
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 claims description 5
- 239000008213 purified water Substances 0.000 claims description 5
- 206010053615 Thermal burn Diseases 0.000 claims description 3
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 claims description 3
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 claims description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 claims description 3
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 2
- 241001072909 Salvia Species 0.000 claims 4
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 39
- 230000009466 transformation Effects 0.000 abstract description 10
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 abstract description 8
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 abstract description 8
- 239000008280 blood Substances 0.000 abstract description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 abstract description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 5
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 abstract description 3
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 abstract description 3
- 230000004089 microcirculation Effects 0.000 abstract description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract description 2
- 208000031225 myocardial ischemia Diseases 0.000 abstract description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 abstract 4
- 206010002660 Anoxia Diseases 0.000 abstract 1
- 241000976983 Anoxia Species 0.000 abstract 1
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 abstract 1
- 230000007953 anoxia Effects 0.000 abstract 1
- 238000004134 energy conservation Methods 0.000 abstract 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 abstract 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 abstract 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 abstract 1
- 208000010110 spontaneous platelet aggregation Diseases 0.000 abstract 1
- 240000007164 Salvia officinalis Species 0.000 description 18
- 230000008569 process Effects 0.000 description 18
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 16
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 14
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 14
- 239000000463 material Substances 0.000 description 13
- 229940090044 injection Drugs 0.000 description 12
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 12
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 11
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 10
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N N-Vinyl-2-pyrrolidone Chemical compound C=CN1CCCC1=O WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 7
- 235000005412 red sage Nutrition 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 6
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 6
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 6
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 6
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 6
- 244000132619 red sage Species 0.000 description 6
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 6
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 6
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 5
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 5
- WTPPRJKFRFIQKT-UHFFFAOYSA-N 1,6-dimethyl-8,9-dihydronaphtho[1,2-g][1]benzofuran-10,11-dione;1-methyl-6-methylidene-8,9-dihydro-7h-naphtho[1,2-g][1]benzofuran-10,11-dione Chemical compound O=C1C(=O)C2=C3CCCC(=C)C3=CC=C2C2=C1C(C)=CO2.O=C1C(=O)C2=C3CCC=C(C)C3=CC=C2C2=C1C(C)=CO2 WTPPRJKFRFIQKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 4
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 4
- 238000012552 review Methods 0.000 description 4
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 4
- 235000003143 Panax notoginseng Nutrition 0.000 description 3
- 241000180649 Panax notoginseng Species 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 3
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 3
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 3
- 238000007599 discharging Methods 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 3
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 239000011122 softwood Substances 0.000 description 3
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- DTGKSKDOIYIVQL-WEDXCCLWSA-N (+)-borneol Chemical compound C1C[C@@]2(C)[C@@H](O)C[C@@H]1C2(C)C DTGKSKDOIYIVQL-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 2
- REPVLJRCJUVQFA-UHFFFAOYSA-N (-)-isopinocampheol Natural products C1C(O)C(C)C2C(C)(C)C1C2 REPVLJRCJUVQFA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-UHFFFAOYSA-N 3,3-dimethyl-7-oxo-6-[(2-phenylacetyl)amino]-4-thia-1-azabicyclo[3.2.0]heptane-2-carboxylic acid Chemical compound O=C1N2C(C(O)=O)C(C)(C)SC2C1NC(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 2
- 229920002153 Hydroxypropyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 2
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 2
- 229920003081 Povidone K 30 Polymers 0.000 description 2
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 2
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 2
- 239000006286 aqueous extract Substances 0.000 description 2
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 2
- 229940116229 borneol Drugs 0.000 description 2
- CKDOCTFBFTVPSN-UHFFFAOYSA-N borneol Natural products C1CC2(C)C(C)CC1C2(C)C CKDOCTFBFTVPSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920005549 butyl rubber Polymers 0.000 description 2
- 235000011089 carbon dioxide Nutrition 0.000 description 2
- 208000026106 cerebrovascular disease Diseases 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 239000003610 charcoal Substances 0.000 description 2
- 239000003245 coal Substances 0.000 description 2
- 230000006837 decompression Effects 0.000 description 2
- DTGKSKDOIYIVQL-UHFFFAOYSA-N dl-isoborneol Natural products C1CC2(C)C(O)CC1C2(C)C DTGKSKDOIYIVQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 2
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 2
- -1 fuse Substances 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 239000001863 hydroxypropyl cellulose Substances 0.000 description 2
- 235000010977 hydroxypropyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 2
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 2
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 2
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 2
- VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N methane Chemical compound C VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 2
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 2
- 239000012982 microporous membrane Substances 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 2
- 238000013139 quantization Methods 0.000 description 2
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
- FIWQZURFGYXCEO-UHFFFAOYSA-M sodium;decanoate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCC([O-])=O FIWQZURFGYXCEO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000007901 soft capsule Substances 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 235000020985 whole grains Nutrition 0.000 description 2
- SOXUSBQFIOBYJU-VPIXDIMLSA-N (2r)-2-[(e)-3-[2-[(e)-3-[(1r)-1-carboxy-2-(3,4-dihydroxyphenyl)ethoxy]-1-(3,4-dihydroxyphenyl)-3-oxoprop-1-en-2-yl]-3,4-dihydroxyphenyl]prop-2-enoyl]oxy-3-(3,4-dihydroxyphenyl)propanoic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)O)OC(=O)\C=C\C=1C(=C(O)C(O)=CC=1)\C(=C/C=1C=C(O)C(O)=CC=1)C(=O)O[C@H](CC=1C=C(O)C(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 SOXUSBQFIOBYJU-VPIXDIMLSA-N 0.000 description 1
- IBGBGRVKPALMCQ-UHFFFAOYSA-N 3,4-dihydroxybenzaldehyde Chemical compound OC1=CC=C(C=O)C=C1O IBGBGRVKPALMCQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YMGFTDKNIWPMGF-AGYDPFETSA-N 3-(3,4-dihydroxyphenyl)-2-[(e)-3-[2-[(e)-2-(3,4-dihydroxyphenyl)ethenyl]-3,4-dihydroxyphenyl]prop-2-enoyl]oxypropanoic acid Chemical compound C=1C=C(O)C(O)=C(\C=C\C=2C=C(O)C(O)=CC=2)C=1/C=C/C(=O)OC(C(=O)O)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 YMGFTDKNIWPMGF-AGYDPFETSA-N 0.000 description 1
- 239000004925 Acrylic resin Substances 0.000 description 1
- 229920000178 Acrylic resin Polymers 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 206010002383 Angina Pectoris Diseases 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YMGFTDKNIWPMGF-QHCPKHFHSA-N Salvianolic acid A Natural products OC(=O)[C@H](Cc1ccc(O)c(O)c1)OC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2C=Cc3ccc(O)c(O)c3 YMGFTDKNIWPMGF-QHCPKHFHSA-N 0.000 description 1
- UMPZKDHDIZUVTO-UHFFFAOYSA-N Salvianolic acid D Natural products Cc1ccc(C=CC(=O)OC(Cc2ccc(O)c(O)c2)C(=O)O)c(CC(=O)O)c1O UMPZKDHDIZUVTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KFCMFABBVSIHTB-WUTVXBCWSA-N Salvianolic acid D Chemical compound OC(=O)CC1=C(O)C(O)=CC=C1\C=C\C(=O)O[C@@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 KFCMFABBVSIHTB-WUTVXBCWSA-N 0.000 description 1
- XLXWKULPMYZQSQ-UHFFFAOYSA-N Salvianolic acid E Natural products Cc1ccc(CC(OC(=O)C(=Cc2ccc(O)c(O)c2)c3c(O)c(O)ccc3C=CC(=O)OC(Cc4ccc(O)c(O)c4)C(=O)O)C(=O)O)cc1O XLXWKULPMYZQSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M Sodium bisulfite Chemical compound [Na+].OS([O-])=O DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- HYXITZLLTYIPOF-UHFFFAOYSA-N Tanshinone II Natural products O=C1C(=O)C2=C3CCCC(C)(C)C3=CC=C2C2=C1C(C)=CO2 HYXITZLLTYIPOF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010047115 Vasculitis Diseases 0.000 description 1
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 239000002390 adhesive tape Substances 0.000 description 1
- 230000000274 adsorptive effect Effects 0.000 description 1
- 230000003260 anti-sepsis Effects 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 238000005261 decarburization Methods 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 1
- 239000003405 delayed action preparation Substances 0.000 description 1
- 238000007598 dipping method Methods 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 239000007919 dispersible tablet Substances 0.000 description 1
- 230000000857 drug effect Effects 0.000 description 1
- 238000003255 drug test Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 239000003337 fertilizer Substances 0.000 description 1
- 239000007888 film coating Substances 0.000 description 1
- 238000009501 film coating Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 229940093181 glucose injection Drugs 0.000 description 1
- 239000007902 hard capsule Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 235000008216 herbs Nutrition 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000011229 interlayer Substances 0.000 description 1
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000002932 luster Substances 0.000 description 1
- 239000009064 mailuoning Substances 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 1
- TZBAVQKIEKDGFH-UHFFFAOYSA-N n-[2-(diethylamino)ethyl]-1-benzothiophene-2-carboxamide;hydrochloride Chemical compound [Cl-].C1=CC=C2SC(C(=O)NCC[NH+](CC)CC)=CC2=C1 TZBAVQKIEKDGFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006191 orally-disintegrating tablet Substances 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 239000002985 plastic film Substances 0.000 description 1
- 229920006255 plastic film Polymers 0.000 description 1
- 238000005498 polishing Methods 0.000 description 1
- 229940093429 polyethylene glycol 6000 Drugs 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 238000010926 purge Methods 0.000 description 1
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 1
- 238000002390 rotary evaporation Methods 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 238000007493 shaping process Methods 0.000 description 1
- 239000008354 sodium chloride injection Substances 0.000 description 1
- 235000010267 sodium hydrogen sulphite Nutrition 0.000 description 1
- AZEZEAABTDXEHR-UHFFFAOYSA-M sodium;1,6,6-trimethyl-10,11-dioxo-8,9-dihydro-7h-naphtho[1,2-g][1]benzofuran-2-sulfonate Chemical compound [Na+].C12=CC=C(C(CCC3)(C)C)C3=C2C(=O)C(=O)C2=C1OC(S([O-])(=O)=O)=C2C AZEZEAABTDXEHR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000005563 spheronization Methods 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- AIGAZQPHXLWMOJ-UHFFFAOYSA-N tanshinone IIA Natural products C1=CC2=C(C)C=CC=C2C(C(=O)C2=O)=C1C1=C2C(C)=CO1 AIGAZQPHXLWMOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009424 thromboembolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 229940126680 traditional chinese medicines Drugs 0.000 description 1
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 239000011718 vitamin C Substances 0.000 description 1
- 235000019154 vitamin C Nutrition 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
- 238000003809 water extraction Methods 0.000 description 1
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 1
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 1
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
- C07D307/77—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D307/78—Benzo [b] furans; Hydrogenated benzo [b] furans
- C07D307/86—Benzo [b] furans; Hydrogenated benzo [b] furans with an oxygen atom directly attached in position 7
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0053—Mouth and digestive tract, i.e. intraoral and peroral administration
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
- A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/1617—Organic compounds, e.g. phospholipids, fats
- A61K9/1623—Sugars or sugar alcohols, e.g. lactose; Derivatives thereof; Homeopathic globules
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
- A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
- A61K9/1635—Organic macromolecular compounds obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyvinyl pyrrolidone, poly(meth)acrylates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
- A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
- A61K9/1652—Polysaccharides, e.g. alginate, cellulose derivatives; Cyclodextrin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
- A61K9/2004—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/2013—Organic compounds, e.g. phospholipids, fats
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
- A61K9/2004—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/2022—Organic macromolecular compounds
- A61K9/2031—Organic macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, polyethylene oxide, poloxamers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
- A61K9/28—Dragees; Coated pills or tablets, e.g. with film or compression coating
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
- A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
- A61K9/5084—Mixtures of one or more drugs in different galenical forms, at least one of which being granules, microcapsules or (coated) microparticles according to A61K9/16 or A61K9/50, e.g. for obtaining a specific release pattern or for combining different drugs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
- A61K31/34—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having five-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom, e.g. isosorbide
- A61K31/343—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having five-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom, e.g. isosorbide condensed with a carbocyclic ring, e.g. coumaran, bufuralol, befunolol, clobenfurol, amiodarone
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Physiology (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
本发明涉及一种药物有效成分的制备方法、药物制剂及临床应用，尤其是从中药丹参制备丹酚酸B的方法、药物制剂及其应用，属于中药技术领域。本发明运用了中药化学的新方法和新理念实现了完全绿色化、智能化和循环经济的目标，有效地避免目标化合物的降解或转化，节能减排，减少损失，降低成本，设备简单，可操作性强，收率提高到65～76％(以提取液含量计)，更适合于工业化生产。本发明还公开了药学上可接受的各种剂型和新剂型及其在保护心肌缺血、缺氧，改善微循环，降低血液粘度，抑制血小板聚集和血栓形成等临床应用。
Description
技术领域
本发明涉及一种药物有效成分的制备方法、制剂及临床应用，尤其是从中药丹参制备丹酚酸B的方法、药物制剂及其临床应用，属于中药技术领域。
背景技术
心脑血管疾病是中老年人常见病、多发病之一，全世界每年有6000万病人接受肝素治疗(其中我国有1000万以上)。用化学药治疗各种血栓栓塞疾病效果不尽理想，且不能标本兼治，中药治疗多能标本兼治，但因中药质量受产地、生长环境、生长年限等多因素制约，其有效成分悬殊很大，因而造成中药的疗效不稳定，测定或提取中药的有效成分，制定数字化量化的质量标准是中药现代化当务之急。中药丹参注射液、三七注射液、脉络宁注射液是目前用于治疗血管闭塞性疾病的常用药，用于保护心肌缺血、缺氧，改善微循环，降低血液粘度，抑制血小板聚集，血栓形成，中枢镇静及抗菌消炎等，治疗胸中憋闷，冠心病，心绞痛和心肌梗塞，脉管炎等疾病，取得了令人满意的效果。
丹参是最重要用量最大的祛瘀剂之一，丹参制剂品种较多，产量较大，据不完全统计，每年仅丹参注射液的用量就达到30亿支以上，丹参滴注液数亿瓶。仅丹参滴丸的年销售额达10亿元以上。丹参注射剂工艺技术日益提高，其活性最强的丹酚酸B含量已达到50％-80％，并且制定了数字化量化的质量标准，这无疑是中药注射剂领域一大突破。申请人了解到现有技术中已存在从中药丹参药材中提取分离纯化，制备高纯度丹酚酸B，具体见表1。
表1已有专利制备丹酚酸B的流程一览表
上述专利技术或工艺过程复杂，或费时，或费事，或耗煤耗能，或成本太高，或仅为小试，或未见收率。现有的技术存在两大瓶颈，一是工艺繁琐，大多要经4-5步反复处理过柱，很难实现连续化工业化生产；二是丹酚酸B的稳定性相对较差，在加热提取和分离纯化过程中产生的降解和转化率在10％～15％，总收率较低。特别是用减压加热浓缩分离纯化得到的丹酚酸B纯度在98.5％以上稀洗脱液过程中造成降解约5％，使已经纯化好的产品又不合格，并且是很难弥补的。凡此,本领域迫切需要一种绿色化、智能化、工艺简单、收率高、成本低、能工业化的制备高纯度丹酚酸B的工艺，尽快使丹酚酸B作为一类新药推上临床，为人类的健康服务。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术存在的缺陷，提供一种制备高纯度丹酚酸B的方法、制剂及其应用，实现完全绿色化、智能化，操作更简单，收率更高，成本更低的目的。
本发明通过以下技术方案解决技术问题：一种高纯度的中药丹参有效成分丹酚酸B的制备方法，包括以下步骤：
第一步，将丹参药材在室温下以水为溶剂进行常规搅拌提取，提取时间5-10分钟，丹参药材与水之比为1︰4-10，得到提取液；
第二步，调整所述提取液的pH为5.0-6.5(优选是5.5-6.0)后，再过大孔树脂树脂柱，分离、纯化，得到第一次洗脱液；
第三步，调整所述第一次洗脱液的pH为1.5-3.5(优选是2.0-2.5)后，第二次过大孔树脂柱，富集得到第二次洗脱液；
第四步，将所述第二次洗脱液过滤，滤液经过喷雾干燥，得到丹酚酸B。
发明人在制备丹酚的研究中发现，丹参中的丹酚酸B在长时间高温水煮、高温高压灭菌和强酸强碱调节pH的过程中有10-15％的丹酚酸B被降解转化为丹参素、原儿茶醛、丹酚酸A、丹酚酸D、丹酚酸E等，采用超短时间水提方法即所述第一步中，提取的次数为2次，第一次提取时间10分钟，丹参药材与水之比为1︰10；第二次提取时间5分钟，丹参药材与水之比为1︰4。所述提取液经过三足离心机甩滤粗滤除去大部分滤渣后，调节滤液pH为3.0～4.0，再用错流过滤精滤，调滤液pH为5.5～6.0，得提取液备用。
以上步骤的药渣经检测水溶性成分已经提取完全。该药渣可以加乙醇使醇浓度达75％左右，搅拌提取丹参酮ⅡA等脂溶性成分；醇提后的药渣可用来制备沼气，作为能源；制沼气的废料可做种植丹参的肥料，如此实现了循环经济的目标。
本发明的提取方法完全避免了丹酚酸B的降解转化，既不需要像浸渍、渗漉等提取花几十小时到一百多小时繁琐操作，也不要像闪式、超声、微波、CO2临界萃取等需要特殊提取设备，省时省事，成本低廉。实践证明，药材用“室温超短时间水常规搅拌提取”，提取液中含丹酚酸B在80％左右(归一化法)，而用水煮醇沉老工艺得到的丹参提取物中丹酚酸B的含量在10％以下(归一化法)，最差的工艺甚至为3.6％。在丹参提取的工作中，水提取液的成分复杂，各种细小的有机和无机的微粒，泥沙，皂甙，使其成为一种“类胶体”，过滤很难，沉淀也很难，有时几天都沉淀不好，水提取液的过滤难以实现，500L丹参水提取液过滤需要3-4个人忙碌10小时以上，过滤的质量还得不到保证，过滤已成为生产的瓶颈，经反复摸索试验，用三足离心机甩滤粗滤与错流过滤精滤联合应用，可以获得非常满意的过滤效果，效率提高40倍以上，并且实现了人-机对话，智能化控制过滤。
在丹参提取液过分离2号或色谱3号大孔树脂之前，提取液的pH必须调为5.0-6.5(优选是5.5-6.0)，否则是无法实现分离纯化，洗脱得到的产物的纯度在85％以下；本发明调节的pH及其相关操作与现有的专利文献报道截然不同，丹参水提液以3-9BV/h流速过大孔树脂柱至结束，纯化水以3-9BV/h流速充分洗涤后，用15-25％乙醇以3-9BV/h流速洗脱至无丹酚酸B止,丹酚酸B的分离纯化工作即告完成，不需要反复蒸馏浓缩，反复调节酸碱、反复醇沉和反复上柱等复杂的处理过程。操作简捷，收率可提高10％以上。如此操作，分离纯化在一个树脂柱中完成，具体是所述第二步中，分离纯化时洗涤的醇浓度为0％-15％，洗脱液的醇浓度为15％-25％；洗涤和/或洗脱速度为2-10BV。大孔树脂柱为分离2号或色谱3号，树脂柱的径高比1︰8～15；提取液以3-9BV/h流速过大孔树脂至结束，纯化水以3-9BV/h流速充分洗涤后，用15-25％乙醇以3-9BV/h流速洗脱至无丹酚酸B止,丹酚酸B的分离纯化完成。所述提取液中丹酚酸B的量与大孔树脂用量之比为1︰50-100。
本发明通过创造性劳动，反复试验，摸索出很稀的分离纯化洗脱液过富集柱前，必须先调节稀洗脱液的pH1.0-3.5(优选是2.0-2.5)，如果不调节pH，而将分离纯化的洗脱液直接过富集柱，会有15％-20％甚至更多的丹酚酸B泄漏，无法实现富集过程，调节稀洗脱液的pH后，既可以增加树脂的吸附量，也能够降低泄漏率，富集的效果最理想，富集时还可以用适量的纯化水洗涤以进一步纯化，即以3-9BV/h流速过相同和/或不同的大孔树脂，用适量的稀乙醇洗涤后，再用50％-95％乙醇洗脱至无丹酚酸B止即可，避免加热减压浓缩操作，不仅节省能源，而且可避免引起丹酚酸B的降解转化，在浴温为40℃旋转蒸发时，会造成丹酚酸B的降解转化达5％，浴温越高，时间越长，造成降解转化率越高，此时的降解转化会对产品纯度产生极其重要的影响，并且是很难弥补的，因此本发明所述第三步中，富集时，洗脱液以3-9BV/h流速过大孔树脂柱，所述大孔树脂柱是非极性或弱极性的大孔树脂，如分离2号、色谱3号、D101、D101-1、AB-8中的至少一种，用纯化水稀释的乙醇洗涤后，再以50％-95％乙醇洗脱至无丹酚酸B止，丹酚酸B的富集完成。
所述第四步中，喷雾干燥的暖风温度为50℃±10℃，出风温度为23℃±2℃，流速应以所用设备的生产能力而调定。高纯度丹酚酸B的醇洗脱液的醇浓度约为70％左右，喷雾干燥，即得高纯度丹酚酸B；如果其晶形、色泽或纯度不够理想时，可以重新精制，甚至重新过柱，必要时可以加适量的针用活性炭助滤和脱色；本发明制备丹酚酸B的提取率提高到到65％-76％(由于丹参药材中丹酚酸B的含量是相差很大，本发明以丹参提取液中含有的丹酚酸B计)。
本发明进一步提供含有高纯度的中药丹参有效成分丹酚酸B及药学上可接受的载体和制剂，方法可以是常规方法或新方法，如注射用丹酚酸B、丹酚酸B注射液、可溶片、口崩片、分散片、滴丸、微丸、控释片、控释微丸、软胶囊、片剂、胶囊、复方丹酚酸B制剂等口服制剂，眼用制剂，凝胶剂，外用制剂等。
本发明再进一步提供上述制剂的在预防和治疗包括心脑血管、肝、肾、眼科和烫伤在内的疾病的应用，是根据病人治疗需要，选择适当剂型和剂量，治疗患者的心脑血管、肝、肾、眼科和烫伤外科等疾病的治疗和心脑血管病等的预防。
本发明在从中药丹参药材中提取分离纯化制备高纯度丹酚酸B的过程中，克服了技术困难，取得了突破性的进展，主要如下：
(1)室温超短时间的水常规搅拌提取，避免了因受热而引起降解转化，收率提高10％以上；
(2)创造性运用调节溶液的pH，即将丹参提取液调pH为5.5-6.0过柱，加很稀的乙醇梯度洗涤，再用稀乙醇洗脱，实现了一次过柱达到了分离纯化的目的。稀洗脱液调pH为2.0-2.5，再一次过柱完成了浓缩过程，既节省能源，又避免了降解转化的风险。
(3)克服了中药丹参提取液过滤难的工艺瓶颈，实现人-机对话，智能化过滤，效率提高40倍以上，质量得到根本性保证；
(4)分离纯化的全过程都不加热，不仅提高了收率和纯度，而且节省了大量的能源，减少了大量的废气排放，仅以生产1000支/瓶丹参注射剂而言，原来的水煮醇沉工艺，要耗标准煤1584吨，折合人民币190.08万元，排放二氧化碳4150.08吨，二氧化硫13.464吨，氮氧化物11.726吨。如果将年生产32-33亿支/瓶丹参注射剂(文献数据，非精确统计)都用本发明的工艺，这个节能减排数量就非常庞大了。本发明实现了工艺“完全绿色化”，耗能减排等都不存在。丹酚酸B的制备方法和制备理念实际上是中药化学的一个崭新的研究平台，丹参注射剂以及中药制药的若干品种都能用此方法和理念实现上述目标，那将为我国的节能减排做出相当大的贡献。这不仅是丹参制药行业的革命性变化，而且对整个中药制药行业将产生里程碑式的影响。
附图说明
图1 丹酚酸B对照品的HPLC图谱。
图2 实施例11丹参提取液的HPLC图谱。
图3 实施例11放大验证制备的丹酚酸B的HPLC图谱。
图4 实施例11中试放大验证制备的丹酚酸B质谱图。
具体实施方式
实施例1
1、室温超短时间水常规搅拌提取.
将丹参药材粉碎，第一次加10倍量水室温搅拌提取10分钟，第二次加4倍量水室温搅拌提取5分钟,合并提取液，粗滤除去大部分滤渣后，调节滤液pH为3.0～4.0，再用错流过滤精滤，调滤液pH为5.5～6.0，得提取液备用；
2.过大孔树脂分离纯化和富集
(1)第一次过柱分离纯化取提取液过大孔树脂分离二号柱，柱径:柱高＝1:8，药材:树脂＝1:2，流速为2BV/h；然后依次用4～10BV的水(流速为4BV～10BV/h)、3～5BV的1～5％乙醇(流速为4BV～8BV/h)、2～4BV 8％～10％乙醇洗(流速为4BV～6BV/h)洗涤大孔树脂柱后，用6Bv～10BV16％～22％乙醇洗脱，前2BV可以每1BV接收，然后每1/4BV分段接收，合并纯度98.5％以上洗脱液。
(2)第二次过柱富集纯度98.5％以上的洗脱液，加0.01％针用活性炭，搅拌15分钟，脱碳、精滤，滤液pH调至2.0-2.5，过分离2号大孔树脂柱(径高比为1︰9,每1000ml～2000ml上样液用100g树脂)，先用2～5BV纯化水洗涤，再用2～3BV95％乙醇洗脱，每0.5BV体积分段接收，合并99％以上洗脱液过滤；滤液喷雾干燥(35～45℃,40～60流量)，即得丹酚酸B，重18.3g，收率为71.53％(按测得提取液的含量计)，纯度为99.11％(归一化)。图1为丹酚酸B对照品的HPLC图谱，对照品来源是国家食品药品检定研究所，批号为111562-201313(ID:6ZA6-B1NZ,纯度99.13％，归一化法。
实施例2
除分离纯化用大孔树脂(色谱3号)外，均与实施例1相同，总收率为71.53％，纯度为99.17％。
实施例3
粗滤除去大部分滤渣后，先用0.45微米的微孔膜过滤，滤液再调pH为3.0～4.0，其他配比和操作同实施例1，总收率为71.62％，纯度为99.13％。
实施例4
提取用水量为12倍，其他配比和操作同实施例1，总收率为71.92％，纯度为99.10％。
实施例5
提取用水量为15倍，其他配比和操作同实施例1，总收率为71.80％，纯度为99.21％。
实施例6
用闪式提取两次，每次1分钟，其他配比和操作同实施例1，总收率为71.78％，纯度为99.26％。
实施例7
用闪式提取两次，每次1分钟，其他配比和操作同实施例3，总收率为72.1％，纯度为99.22％。
实施例8
第一次过柱分离纯化用大孔树脂为色谱3号，其他配比和操作同实施例1，总收率为70.78％，纯度为99.17％。
实施例9
取丹参药材粉5kg，室温搅拌提取2次，每次10分钟，其他配比和操作同实施例1，总收率为72.83％，纯度为99.20％。
实施例10
取丹参药材粉10kg，室温搅拌提取2次，每次10分钟，其他配比和操作同实施例6，总收率为74.77％，纯度为99.28％。
实施例11
取丹参药材粉10kg，室温搅拌提取2次，每次10分钟，其他配比和操作同实施例6，总收率为75.58％，纯度为99.37％。其中，丹参提取液的HPLC图谱见图2，含丹酚酸B为83.16％，归一化法。放大验证制备的丹酚酸B的HPLC图谱见图3，纯度为99.37％，归一化法。中试放大验证制备的丹酚酸B质谱图见图4，据图计算，丹酚酸B纯度达99.97％。以下实施例12-17为丹酚酸B的剂型的制备
实施例12
注射用丹酚酸B制备
处方
操作过程
1、溶液配制 取丹酚酸B、甘露醇、维生素C加注射用水至2500ml，搅拌使溶解，取样测定丹酚酸B含量,调节含量在规定范围内，加针用活性炭0.5g，搅拌15分钟，脱炭，备用溶液；
2、灌装 备用溶液经过0.2、0.2、0.1μm微孔膜折叠棒过滤，滤液分装于10ml西林瓶中，每瓶2.5ml；
3、冷冻干燥 减压、冷冻、干燥24小时后，慢慢升至室温，再继续干燥5小时，压紧丁基胶塞、解除压力，取出样品，扎盖，取样全检；
4、包装 产品贴标签/印字，包装，入库。
实施例13
注射用丹酚酸B制备
处方
操作过程
1、溶液配制 取丹酚酸B、甘露醇、亚硫酸氢钠加注射用水至2500ml，搅拌使溶解，取样测定丹酚酸B含量,调节含量在规定范围内，加针用活性炭0.5g，搅拌15分钟，脱炭，备用溶液；
2、灌装 备用溶液经过0.2、0.2、0.1μm微孔膜折叠棒过滤，滤液分装于10ml西林瓶中，每瓶2.5ml；
3、冷冻干燥 减压、冷冻、干燥24小时后，慢慢升至室温，再继续干燥5小时，压紧丁基胶塞、解除压力，取出样品，扎盖，取样全检；
4、包装 产品贴标签/印字，包装，入库。
实施例14
复方丹酚酸B片的制备
处方
操作过程
预处理
(1)取丹酚酸B、三七总皂苷、冰片乳糖、微晶纤维素、羟丙纤维素、聚维酮K30、癸酸钠、硬脂酸镁分别过80目筛，备用；
(2)取PVPK30加60％乙醇制成5％PVPK3060％乙醇溶液，备用；
制粒干燥
(3)按等量递增的原则，量少的辅料相混合均匀，再与部分大量原料混合，直至全部原辅料混合均匀；
(4)向混合均匀的原辅料中加入适量5％PVPK3060％乙醇溶液充分搓揉，制成软材；
(5)过20目筛制粒，置45±5℃烘箱中干燥真空干燥30-50分钟；整粒与总混
(6)将烘干的颗粒过18目筛整粒，加入硬脂酸镁充分混合均匀；
(7)测中间体含量，计算应压片重；
压片与包衣
(8)根据计算的应压片重，压制素片；
(9)包薄膜衣(增重约为3％)，取样全检；
分装、贴标签、包装、入库
(10)将包衣的片剂分装、贴标签、包装、入库。
实施例15
复方丹酚酸B滴丸的制备
处方
操作过程
预处理
1、取丹酚酸B、三七总皂苷、冰片、癸酸钠、聚乙二醇6000、聚乙二醇4000按等量递增的原则充分混匀，备用；
熔融搅拌
2、取备用物料，置熔料罐中，夹层通80±5℃水熔解搅匀(必要时加纯水16.46g)；
滴制
3、经2.5mm滴口滴制滴丸，每分钟滴30滴，滴距为55mm，成形油温为20～25℃
洗涤干燥；
4、将滴丸淋干冷却油，再用少量乙醇洗涤，风干至无乙醇味；
分装、贴标签、全检、包装、入库
5、将上述滴丸分装、贴标签、全检、包装、入库。
实施例16
丹酚酸B微丸胶囊的制备
处方
操作过程：挤出-滚圆法
预处理
1、取丹酚酸B、乳糖、微晶纤维素、羟丙纤维素、聚维酮K30分别过80目筛，备用；
2、取PVPK30加60％乙醇制成5％PVPK3060％乙醇溶液，备用；
挤出-滚圆
3、按等量递增的原则，量少的辅料相混合均匀，再与部分大量原料混合，直至全部原辅料混合均匀；
4、向混合均匀的原辅料中加入适量5％PVPK3060％乙醇溶液充分搓揉，制成软材；
5、挤压制成条状；
6、切断，经滚圆机滚圆，干燥；
测中间体含量
7、测中间体含量,计算应分装的剂量；
装胶囊
8、根据计算的重量装硬胶囊
分装、贴标签、全检、包装、入库
9、将装好的胶囊分装、贴标签、全检、包装、入库。
实施例17
丹酚酸B缓控释微丸胶囊的制备
丸芯1处方(快速释放)
包衣材料：包普通薄膜衣(绿色)
丸芯2处方(中速释放，缓释6h)
包衣材料：包EC衣(黄色)
丸芯3处方(缓速释放，缓释12h)
包衣材料：包丙烯酸树脂衣(红色)
操作过程：
预处理工序
1、分别取各处方项下原、辅料分别过80目筛，备用。
混料与制丸
2、分别称取各处方项下原、辅料，按等量递增的原则混合并过60目筛3次使其充分混合均匀，加入适量粘合剂制成软材，经挤出机挤成0.7-0.9mm细条。
3、细条经滚圆机，切割、滚圆，调节滚圆转速：50r/min-30r/min和滚圆时间(5-7min)。干燥
4、取微丸置恒温鼓风干燥箱中，在45-50℃干燥2-3h，筛分16-24目微九。
测定各中间体微丸含量
5测定中间体微丸含量，确定各处方微丸重量比和每粒胶囊应装微丸总重量。
灌装与分装
6、将三种微丸混合均匀后，灌装于透明胶囊壳中。
剔瘪抛光，分装于铝塑泡罩板中，每板14粒，每盒两板。
包装与全检
7、每20盒用热缩塑料膜做成一捆，每箱装20捆，入库。
8、取样全检。
以上实施例制备的丹酚酸B，可以作为一种中药原料药和/或化学药原料药上市，使丹参的研究达到了一个崭新的水平，一条崭新的完全绿色化、智能化，连续化、工业化生产丹酚酸B的工艺和循环经济的目标将成为现实。在制备丹酚酸B的方法中，药材-水的比例，提取时间，提取次数，；树脂的种类、型号与粒径，树脂柱的径-高比，树脂-药材(或有效成分)比等都经过严格的方法学研究，小试工艺成熟后，又经中试放大验证制备了丹酚酸B产品，各主要关键技术参数没有变化，唯总收率提高1％以上。本法制备的丹酚酸B，可用于制备注射剂，如注射用丹酚酸B，丹酚酸B木糖醇注射液，丹酚酸B氯化钠注射液，丹酚酸B葡萄糖注射液；口服固体制剂如丹酚酸B片，丹酚酸B缓释/控释制剂、滴丸、微丸、软胶囊；复方丹酚酸B口服制剂、眼用制剂、凝胶剂以及药学上可以接受的其他制剂及新制剂等。丹酚酸B产品的药效与药理毒理学研究，已有一些文献报道，具有保护心肌缺血、缺氧，改善微循环，降低血液粘度，抑制血小板聚集，血栓形成等活血化瘀功能。小鼠静脉注射LD50为636.8909mg·kg－1，LD50的95％可信限为617.2255～657.1828mg·kg－1，死亡动物尸检，各主要脏器肉眼未见明显改变，14天后各剂量组存活小鼠体重均增加。结论是丹酚酸B原料毒性较小。
除上述实施外，本发明还可以有其他实施方式。凡采用等同替换或等效变换形成的技术方案，均落在本发明要求的保护范围。
Claims (10)
1.一种高纯度的中药丹参有效成分丹酚酸B的制备方法，包括以下步骤：
第一步，将丹参药材在室温下以水为溶剂进行常规搅拌提取，提取时间5-10分钟，丹参药材与水之比为1︰4-10，得到提取液；
第二步，调整所述提取液的pH为5.0-6.5后，再过大孔树脂树脂柱，分离、纯化，得到第一次洗脱液；
第三步，调整所述第一次洗脱液的pH为1.5-3.5后，第二次过大孔树脂柱，富集得到第二次洗脱液；
第四步，将所述第二次洗脱液过滤，滤液经喷雾干燥，得到丹酚酸B。
2.根据权利要求1所述高纯度的中药丹参有效成分丹酚酸B的制备方法，其特征在于：室温超短时间搅拌提取，所述第一步中，提取的次数为2次，第一次提取时间10分钟，丹参药材与水之比为1︰10；第二次提取时间5分钟，丹参药材与水之比为1︰4。
3.根据权利要求2所述高纯度的中药丹参有效成分丹酚酸B的制备方法，其特征在于：所述提取液经过三足离心机甩滤粗滤除去大部分滤渣后，调节滤液pH为3.0～4.0，再用错流过滤精滤，调滤液pH为5.5～6.0，得提取液备用。
4.根据权利要求1所述高纯度的中药丹参有效成分丹酚酸B的制备方法，其特征在于：所述第二步中，分离纯化时洗涤的醇浓度为0％-15％，洗脱液的醇浓度为15％-25％；洗涤和/或洗脱速度为2-10BV。
5.根据权利要求4所述高纯度的中药丹参有效成分丹酚酸B的制备方法，其特征在于：大孔树脂柱为分离2号或色谱3号，树脂柱的径高比1︰8～15；提取液以3-9BV/h流速过大孔树脂至结束，纯化水以3-9BV/h流速充分洗涤后，用15-25％乙醇以3-9BV/h流速洗脱至无丹酚酸B止,丹酚酸B的分离纯化完成。
6.根据权利要求4所述高纯度的中药丹参有效成分丹酚酸B的制备方法，其特征在于：所述提取液中丹酚酸B的量与大孔树脂用量之比为1︰50-100。
7.根据权利要求1所述高纯度的中药丹参有效成分丹酚酸B的制备方法，其特征在于：所述第三步中，富集时，调节第二步得到的洗脱液pH为1.5～3.5；以3-9BV/h流速过大孔树脂柱，所述大孔树脂为分离2号、色谱3号、D101、D101-1、AB-8等非极性或弱极性的大孔树脂中的至少一种，用纯化水稀释的稀乙醇洗涤后，再以50％-95％乙醇洗脱至无丹酚酸B止，丹酚酸B的富集完成。
8.根据权利要求1所述高纯度的中药丹参有效成分丹酚酸B的制备方法，其特征在于：所述第四步中，喷雾干燥的暖风温度为50℃±10℃，出风温度为23℃±2℃，每分钟的流量是以所用设备的能力而调定。
9.含有权利要求1所述高纯度的中药丹参有效成分丹酚酸B及药学上可接受的载体和制剂。
10.权利要求9的制剂在预防和治疗包括心脑血管、肝、肾、眼科和烫伤在内的疾病的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510208692.3A CN104910112B (zh) | 2015-04-28 | 2015-04-28 | 一种中药丹参有效成分丹酚酸b的制备方法、药物制剂及临床应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510208692.3A CN104910112B (zh) | 2015-04-28 | 2015-04-28 | 一种中药丹参有效成分丹酚酸b的制备方法、药物制剂及临床应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN104910112A true CN104910112A (zh) | 2015-09-16 |
| CN104910112B CN104910112B (zh) | 2018-03-27 |
Family
ID=54079610
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201510208692.3A Active CN104910112B (zh) | 2015-04-28 | 2015-04-28 | 一种中药丹参有效成分丹酚酸b的制备方法、药物制剂及临床应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN104910112B (zh) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108339008A (zh) * | 2017-01-25 | 2018-07-31 | 邢为藩 | 一种丹酚制剂在抗脑缺血再灌注损伤药物中的应用 |
| CN108452010A (zh) * | 2017-02-20 | 2018-08-28 | 南京宸翔医药研究有限责任公司 | 一种抗缺血性心脑血管病药丹酚的生产工艺、药物制剂、含量测定法与临床应用 |
| CN109467581A (zh) * | 2018-12-19 | 2019-03-15 | 南京宸翔医药研究有限责任公司 | 一种荷叶黄酮苷的提取方法以及包括荷叶黄酮苷的药物制剂 |
| CN110563677A (zh) * | 2019-08-23 | 2019-12-13 | 惠州市九惠制药股份有限公司 | 一种丹酚酸b及其粉雾剂胶囊和制备方法 |
Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH02131423A (ja) * | 1988-07-08 | 1990-05-21 | Terumo Corp | ５−リポキシゲナーゼ作用阻害剤 |
| US5358962A (en) * | 1993-04-22 | 1994-10-25 | Minophagen Pharmaceutical Company | Antihypertensive method |
| CN1425659A (zh) * | 2002-12-31 | 2003-06-25 | 南京虹桥医药技术研究所 | 丹参丹酚酸b的制备方法 |
| CN1578668A (zh) * | 2001-08-30 | 2005-02-09 | 财团法人邹济勳医学研究发展基金会 | 丹酚酸b |
| CN101434590A (zh) * | 2007-11-12 | 2009-05-20 | 北京科士蓝医药技术有限公司 | 丹酚酸b纯品的制备方法 |
| CN101638401A (zh) * | 2008-07-29 | 2010-02-03 | 上海医药工业研究院 | 一种高纯度丹酚酸b的制备方法 |
| CN101638404A (zh) * | 2008-07-29 | 2010-02-03 | 王宇 | 高纯度丹酚酸b、制备方法及应用 |
| CN104072456A (zh) * | 2014-04-24 | 2014-10-01 | 浙江永宁药业股份有限公司 | 一种高纯度丹酚酸b的制备方法 |
-
2015
- 2015-04-28 CN CN201510208692.3A patent/CN104910112B/zh active Active
Patent Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH02131423A (ja) * | 1988-07-08 | 1990-05-21 | Terumo Corp | ５−リポキシゲナーゼ作用阻害剤 |
| US5358962A (en) * | 1993-04-22 | 1994-10-25 | Minophagen Pharmaceutical Company | Antihypertensive method |
| CN1578668A (zh) * | 2001-08-30 | 2005-02-09 | 财团法人邹济勳医学研究发展基金会 | 丹酚酸b |
| CN1425659A (zh) * | 2002-12-31 | 2003-06-25 | 南京虹桥医药技术研究所 | 丹参丹酚酸b的制备方法 |
| CN101434590A (zh) * | 2007-11-12 | 2009-05-20 | 北京科士蓝医药技术有限公司 | 丹酚酸b纯品的制备方法 |
| CN101638401A (zh) * | 2008-07-29 | 2010-02-03 | 上海医药工业研究院 | 一种高纯度丹酚酸b的制备方法 |
| CN101638404A (zh) * | 2008-07-29 | 2010-02-03 | 王宇 | 高纯度丹酚酸b、制备方法及应用 |
| CN104072456A (zh) * | 2014-04-24 | 2014-10-01 | 浙江永宁药业股份有限公司 | 一种高纯度丹酚酸b的制备方法 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| 卢召战: "pH及添加剂对丹酚酸B水溶液稳定性的影响", 《大连工业大学学报》 * |
| 张春光，等: "丹参提取物中的丹酚酸B在不同pH条件下的稳定性研究", 《中国实验方剂学杂志》 * |
| 张翠英，等: "大孔吸附树脂纯化丹酚酸B的工艺研究", 《安徽农业科学》 * |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108339008A (zh) * | 2017-01-25 | 2018-07-31 | 邢为藩 | 一种丹酚制剂在抗脑缺血再灌注损伤药物中的应用 |
| CN108452010A (zh) * | 2017-02-20 | 2018-08-28 | 南京宸翔医药研究有限责任公司 | 一种抗缺血性心脑血管病药丹酚的生产工艺、药物制剂、含量测定法与临床应用 |
| CN108452010B (zh) * | 2017-02-20 | 2022-03-01 | 南京宸翔医药研究有限责任公司 | 一种丹酚、药物制剂、测定方法和医药用途 |
| CN109467581A (zh) * | 2018-12-19 | 2019-03-15 | 南京宸翔医药研究有限责任公司 | 一种荷叶黄酮苷的提取方法以及包括荷叶黄酮苷的药物制剂 |
| CN110563677A (zh) * | 2019-08-23 | 2019-12-13 | 惠州市九惠制药股份有限公司 | 一种丹酚酸b及其粉雾剂胶囊和制备方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN104910112B (zh) | 2018-03-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US9687516B2 (en) | Preparation method for extractive of jinxuan hemorrhoid washing powder botanicals | |
| CN104910112A (zh) | 一种高纯度的中药丹参有效成分丹酚酸b的制备方法、药物制剂及临床应用 | |
| CN103948659A (zh) | 三七叶总皂苷的制备方法 | |
| CN104224911B (zh) | 一种新的丹参提取物及其制备 | |
| CN104258193A (zh) | 一种治疗神经衰弱和预防老年痴呆症的药物组合物 | |
| CN1903241A (zh) | 一种三七药材的提取分离方法 | |
| CN109010504A (zh) | 一种黑枸杞总黄酮的提取方法 | |
| CN105030925A (zh) | 一种用于治疗血瘀疾病的植物提取物及药物制剂 | |
| CN106237067B (zh) | 一种消渴降糖胶囊及其制备方法 | |
| CN101375988B (zh) | 一种用于治疗急性***炎的消炎制剂及其制备方法 | |
| CN105125408A (zh) | 一种根茎类中药材免煎剂的制备方法及其应用 | |
| CN101371882A (zh) | 一种茵陈蒿汤制剂的制备方法 | |
| CN100382790C (zh) | 复方红豆杉滴丸及其制备方法 | |
| CN101757058A (zh) | 一种蜀葵花总黄酮提取物、其制备及应用 | |
| CN101401843A (zh) | 一种中药丹参有效成分的提取方法 | |
| CN105998104B (zh) | 一种榆钱提取物在制备治疗神经保护药物方面的用途 | |
| CN102100737A (zh) | 包含人参总皂苷与丹参总酚酸的药物组合物及其制备方法 | |
| CN101310739B (zh) | 一种桂枝茯苓组合物及其制备方法 | |
| CN1321651C (zh) | 复方丹参方两类有效部位口腔喷雾剂及制备工艺 | |
| CN106943354A (zh) | 一种新生化颗粒的制备方法 | |
| CN102309543A (zh) | 复方丹参浓缩制剂及其制备、检测方法 | |
| CN113230309A (zh) | 麻黄-桂枝药对中药配方颗粒及其制备方法 | |
| CN1704113A (zh) | 治疗心脑血管疾病的中药丹红制剂及其制备方法 | |
| CN112402515A (zh) | 一种含虫类药中药提取物及其制剂的制备方法 | |
| CN102631386B (zh) | 柴胡解热镇痛制剂及其制备工艺 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| ASS | Succession or assignment of patent right |
Owner name: NANJING KUIKE BIOPHARMACETICAL CO., LTD. Free format text: FORMER OWNER: NANJING CHENXIANG MEDICAL RESEARCH LLC Effective date: 20150902 |
|
| C41 | Transfer of patent application or patent right or utility model | ||
| C53 | Correction of patent of invention or patent application | ||
| CB03 | Change of inventor or designer information |
Inventor after: Chen Beining Inventor after: Xing Weifan Inventor after: Wu Zudong Inventor after: Yu Xirong Inventor after: Zhang Jingzhu Inventor before: Xing Weifan Inventor before: Wu Zudong Inventor before: Yu Xirong Inventor before: Zhang Jingzhu |
|
| COR | Change of bibliographic data |
Free format text: CORRECT: INVENTOR; FROM: QUAN ZHESHAN LI WEI LU ZHIGANG YU YINGZHOU DENG XIANQING TO: QUAN ZHESHAN LI WEI DONG FANGYAN LU ZHIGANG YU YINGZHOU DENG XIANQING Free format text: CORRECT: INVENTOR; FROM: XING WEIFAN WU ZUDONG YU XIRONG ZHANG JING TO: CHEN BEINING XING WEIFAN WU ZUDONG YU XIRONG ZHANG JING 201410059768.6;2015.09.23;CHANGE OF BIBLIOGRAPHIC DATA |
|
| TA01 | Transfer of patent application right |
Effective date of registration: 20150902 Address after: Jiangning District of Nanjing City, Jiangsu province 211100 dry road No. 5 4 floor Applicant after: Nanjing Hong Ke biotechnology Co.,Ltd. Address before: Jiangning District of Nanjing City, Jiangsu province 211100 dry road No. 5 Life Science Innovation Center Applicant before: NANJING CHENXIANG MEDICAL RESEARCH CO.,LTD. |
|
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| TA01 | Transfer of patent application right |
Effective date of registration: 20180222 Address after: Jiangning District of Nanjing City, Jiangsu province 211100 dry road No. 5 Life Science Innovation Center Applicant after: NANJING CHENXIANG MEDICAL RESEARCH CO.,LTD. Address before: Jiangning District of Nanjing City, Jiangsu province 211100 dry road No. 5 4 floor Applicant before: Nanjing Hong Ke biotechnology Co.,Ltd. |
|
| TA01 | Transfer of patent application right | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20240320 Address after: Room 1001-5, No. 187 Science Avenue, Huangpu District, Guangzhou City, Guangdong Province, 510711 Patentee after: Jinning Zhihua (Guangzhou) Technology Development Co.,Ltd. Country or region after: Zhong Guo Address before: 211100 Life Science Innovation Center, No. 5 Qiande Road, Jiangning District, Nanjing City, Jiangsu Province Patentee before: NANJING CHENXIANG MEDICAL RESEARCH CO.,LTD. Country or region before: Zhong Guo |
|
| TR01 | Transfer of patent right |