CN104774193A - 吲哚酮类化合物、其制备方法及医药用途 - Google Patents

Abstract

本发明属于药物领域，具体涉及一种具有式(I)结构的吲哚酮类化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用。实验结果表明，该类化合物对蛋白激酶的活性具有调节作用，可以抑制多种蛋白酪氨酸激酶的活性，并且对多种肿瘤细胞的增殖具有抑制作用。

Description

吲哚酮类化合物、其制备方法及医药用途

技术领域

本发明属于药物领域，具体涉及一种吲哚酮类化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐以及其制备方法和医药用途，特别是在制备抗肿瘤药物中的应用。

背景技术

血管的生成在肿瘤的发生、发展和转移过程中起着至关重要的作用。早在1971年Folkman就提出了肿瘤血管生成理论，认为肿瘤的生长和转移依赖于新生血管的形成(Folkman J.New Engl J Med，1971，285(7)：404-405)。随后的研究也证实了新血管的形成的显明影响肿瘤的生长(Folkman J.Semin Cancer Biol，1992，3(2)：65-71；Folkman J.SeminOncol，2002，29(6 Suppl 16)：15-8)。血管的生成为肿瘤组织提供营养物质和氧气，***代谢物，血管又是肿瘤发生转移的主要途径。肿瘤血管的生成与血管生成相关因子密切相关。

血管内皮生长因子(VEGF)是一种重要的血管生长相关因子，具有促进内皮细胞增殖、提高血管通透性、诱导血管生成等多种功能，它是血管内皮生长因子受体(VEGFR)的天然配体，其功能主要是通过与VEGFR结合而实现。

VEGFR是一类重要的蛋白酪氨酸激酶家族，包含VEGFR-1、VEGFR-2和VEGFR-3等3个亚型。VEGFR-1主要分布于血管内皮细胞、造血干细胞和巨噬细胞等，主要和造血干细胞的生长调节有关；VEGFR-2主要表达在血管内皮细胞及淋巴内皮细胞，与血管内皮细胞增殖、血管通透性及新血管生成有关；而VEGFR-3则主要分布在淋巴内皮细胞，涉及淋巴内皮细胞的生长调控。这三种受体在不同的组织器官中介导不同的生理功能，它们的过度表达会导致病理性的血管或***生成。许多由VEGF所引起的内皮细胞生理或病理的改变主要是由VEGFR-2介导。VEGFR-1与VEGF的亲和力比VEGFR-2高10倍，但其调节内皮细胞的活性却比VEGFR-2低很多(Holmes K，et al.Cell signal，2007，19(10)：2003-2012)，因此VEGFR-2所介导的信号转导通路是调控血管新生的关键途径。

VEGFR主要由免疫球蛋白样的胞外结构域、单次跨膜结构域和胞内酪氨酸激酶结构域等三个部分组成。VEGFR通过胞外结构域与配体VEGF结合，诱导VEGFR构象发生变化，导致激酶受体二聚化，并使激酶结构域内的酪氨酸残基发生自身磷酸化，从而激活下游信号转导通路，进而诱导血管的生成。VEGF/VEGFR的功能异常与肿瘤的生长和转移密切相关(Rapisarda A，et al.Adv Cancer Res，2012，114：237-267)。

舒尼替尼(Sunitinib)是首个上市的吲哚酮类抗肿瘤血管生成药物，对VEGFR-2、PDGFRα和β、c-Kit、Flt-3、CSF-1R和GFR均有明显的抑制作用，临床用于治疗肾细胞癌(RCC)和伊马替尼耐药的胃肠道间质瘤(GIST)，可以提高RCC患者的存活率和延长对伊马替尼已产生耐药的GIST部分患者的生命(Faivre S，et al.Nat Rev Drug Discov，2007，6(9)：734-745)。Nintedanib是另一个已上市的吲哚酮类蛋白激酶抑制剂，它能有效地抑制VEGFR1/2/3、FGFR1/2/3、PDGFRα/β、Flt-3和Src等，对非小细胞肺癌、卵巢癌、特发性肺纤维化等肿瘤具有良好的疗效(Roth GJ，et al.J Med Chem，2015，58(3)：1053-1063)。此外，还有一系列吲哚酮类化合物具有多靶点蛋白激酶抑制作用(Prakash CR，et al.Pharmacology & Pharmacy，2012，3，62-71)。

发明内容

本发明涉及一种具有式(I)所示的吲哚酮类化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用。实验结果表明，该类化合物可以抑制多种蛋白酪氨酸激酶的活性，并且对多种肿瘤细胞的增殖具有抑制作用。

本发明公开通式(I)所示的吲哚酮类化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐：

其中：

R₁代表C₁-C₈烷基、C₃-C₆环烷基、C₂-C₁₀烯基、C₆-C₁₀芳基或C₅-C₁₀芳杂环基，其中所述的烷基、环烷基、杂环烷基、烯基、芳基或芳杂环基可任选地被下述相同或不相同的取代基单取代至五取代，所述取代基选自：卤素、羟基、硝基、三氟甲基、氰基、C₁-C₈烷基、C₃-C₆环烷基、C₆-C₁₀芳基、C₅-C₁₀芳杂环基或NR₅R₆，其中所述的芳基或芳杂环基可任选地被下述相同或不相同的取代基单取代至五取代，所述取代基选自：卤素、羟基、硝基、氰基、三氟甲基、C₁-C₈烷基、C₁-C₈烷氧基或C(O)OR₇；

R₂代表C₁-C₈烷基、C₁-C₈烷氧基、C₃-C₆环烷基、或NR₅R₆，其中所述的烷基、烷氧基或环烷基可任选地被下述相同或不相同的取代基单取代至五取代，所述取代基选自：卤素、羟基、C₁-C₈烷基或C₁-C₈烷氧基；

R₃和R₄可相同或不相同，任选自：氢、卤素、羟基、硝基、氰基、氨基、C₁-C₈烷基或C₃-C₆环烷基；

R₅和R₆可相同或不相同，任选自：氢、C₁-C₈烷基或R₅和R₆与和它们相连的氮一起形成5-7元杂环基，其中所述的烷基可任选地被C₁-C₈烷氧基或NR₈R₉取代，所述的杂环基可任选地包含一个或多个选自O、S或N的其它杂原子，并且该杂环基可任选地由下述相同或不同的取代基单取代至五取代，所述取代基包括：卤素、羟基、硝基、氰基、氨基、C₁-C₈烷基或C₁-C₈烷氧基；

R₇代表氢或C₁-C₈烷基；

R₈和R₉可相同或不相同，任选自氢或C₁-C₈烷基。

进一步地，具有通式(I)所示的吲哚酮类化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其特征在于：

R₁代表C₁-C₈烷基或C₂-C₆烯基，其中所述的烷基或烯基可任选地被下述相同或不相同的取代基单取代至五取代，所述取代基选自：氰基、C₁-C₈烷基、C₃-C₆环烷基、C₆-C₁₀芳基、C₅-C₁₀芳杂环基或NR₅R₆，其中所述的芳基或芳杂环基可任选地被下述相同或不相同的取代基单取代至五取代，所述取代基选自：三氟甲基、C₁-C₈烷基、C₁-C₈烷氧基或C(O)OR₇；

R₂代表NR₅R₆；

R₃和R₄可相同或不相同，任选自：氢或C₁-C₈烷基；

R₅和R₆可相同或不相同，任选自氢、C₁-C₈烷基或R₃和R₄与和它们相连的氮一起形成5-7元杂环基基，其中所述的烷基可任选地被C₁-C₈烷氧基或NR₈R₉取代，所述的杂环基可任选地包含一个或多个选自O或N的其它杂原子，并且该杂环基团可任选地由下述相同或不同的取代基单取代至五取代，所述取代基为C₁-C₈烷基；

R₇代表C₁-C₈烷基；

R₈和R₉可相同或不相同，任选自氢或C₁-C₈烷基。

再进一步地，具有通式(I)所示的吲哚酮类化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其特征在于：

R₁任选自：

R₂代表NR₅R₆；

R₃和R₄可相同或不相同，任选自：氢或C₁-C₈烷基；

R₅和R₆可相同或不相同，任选自氢、C₁-C₈烷基或R₃和R₄与和它们相连的氮一起形成5-7元杂环基基，其中所述的烷基可任选地被C₁-C₈烷氧基或NR₈R₉取代，所述的杂环基可任选地包含一个或多个选自O或N的其它杂原子，并且该杂环基团可任选地由下述相同或不同的取代基单取代至五取代，所述取代基为C₁-C₈烷基；

R₈和R₉可相同或不相同，任选自氢或C₁-C₈烷基；

R₁₀代表氢、C₁-C₈烷基、C₃-C₆环烷基、C₆-C₁₀芳基或C₅-C₁₀芳杂环基，其中所述的芳基或芳杂环基可任选地被下述相同或不相同的取代基单取代至五取代，所述取代基选自：卤素、羟基、三氟甲基、C₁-C₈烷基、C₃-C₆环烷基、C₁-C₈烷氧基或C(O)O(C₁-C₈)烷基。

更进一步地，具有通式(I)所示的吲哚酮类化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其特征在于：

R₁任选自：

R₂任选自：

R₃和R₄为C₁-C₈烷基。

具体来说，通式(I)所示的吲哚酮类化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐优选自下列化合物：

N-[2-(二乙氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-(5-丙烯酰胺-2-吲哚酮-3-亚基)甲基-吡咯-3-甲酰胺(LL-1)；

N-[2-(二甲氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[(5-丙烯酰胺-2-吲哚酮-3-亚基)甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-2)；

N-[(二甲氨基)丙基]-2，4-二甲基-5-[(5-丙烯酰胺-2-吲哚酮-3-亚基)甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-3)；

N-[3-(二乙氨基)丙基]-2，4-二甲基-5-[(5-丙烯酰胺-2-吲哚酮-3-亚基)甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-4)；

N-[3-[3，5-二甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-羰基)-吡咯-2-基]亚甲基-2-吲哚酮-5-基]丙烯酰胺(LL-5)；

N-[3-[[3，5-二甲基-4-(吗啉-4-羰基)-吡咯-2-基]亚甲基]-2-吲哚酮-5-基]丙烯酰胺(LL-6)；

N-[2-(二甲基氨基)乙基]-N，2，4-三甲基-5-[(5-丙烯酰胺-2-吲哚酮-3-亚基)甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-7)；

N-[2-(二乙氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[2-氧代-5-[3-(哌啶-1-基)丙酰氨基]二氢吲哚-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺的(LL-8)；

N-[2-(二甲基氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[2-氧代-5-[3-(哌啶-1-基)丙酰氨基]二氢吲哚-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-9)；

N-[3-(二甲基氨基)丙基]-2，4-二甲基-5-[[2-氧代-5-[3-(哌啶-1-基)丙酰氨基]二氢吲哚-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-10)；

N-[3-(二乙基氨基)丙基]-2，4-二甲基-5-[[2-氧代-5-[3-(哌啶-1-基)丙酰氨基]二氢吲哚-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-11)；

N-[3-[[3，5-二甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-羰基)-吡咯-2-基]亚甲基]-2-吲哚酮-5-基]-3-(哌啶-1-基)丙酰胺(LL-12)；

N-[3-[[3，5-二甲基-4-(吗啉-4-羰基)-吡咯-2-基]亚甲基]-2-吲哚酮-5-基]-3-(哌啶-1-基)丙酰胺(LL-13)；

N-[2-(二甲基氨基)乙基]-N，2，4-三甲基-5-[[2-氧代-5-[3-(哌啶-1-基)丙酰氨基]二氢吲哚-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-14)；

N-[2-(二乙氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[5-(3-吗啉丙酰胺)-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-15)；

N-[2-(二甲氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[5-(3-吗啉丙酰胺)-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-16)；

N-[2-(二甲氨基)丙基]-2，4-二甲基-5-[[5-(3-吗啉丙酰胺)-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-17)；

N-[2-(二乙氨基)丙基]-2，4-二甲基-5-[[5-(3-吗啉丙酰胺)-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-18)；

N-[3-[3，5-二甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-羰基)-吡咯-2-基]亚甲基-2-吲哚酮-5-基]-3-吗啉丙酰胺(LL-19)；

N-[3-[3，5-二甲基-4-(吗啉-4-羰基)-吡咯-2-基]亚甲基-2-吲哚酮-5-基]-3-吗啉丙酰胺(LL-20)；

N-[2-(二甲基氨基)乙基]-N，2，4-三甲基-5-[[5-(3-吗啉丙酰胺)-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-20)；

N-[2-(二乙氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[5-[2-氰基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙烯酰氨基]-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-22)；

5-乙基-[2-氰基-3-[3-[[4-[[2-(二乙基氨基)乙基)氨基甲酰基]-3，5-二甲基-吡咯-2-基]亚甲基]-2-吲哚酮-5-基]氨基]-3-氧代丙-1-烯-1-基]-2，4-二甲基-吡咯-3-羧酸乙酯(LL-23)；

N-[2-(二乙氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[(5-(2-氰基-4，4-二甲基戊-2-烯酰胺)-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-24)；

N-[2-(二乙氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[5-[2-氰基-3-(1H-吡咯-2-基)丙烯酰氨基]-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-25)；

N-[2-(二乙氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[5-(2-氰基-3-环丙基丙烯酰胺)-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-26)；

N-[2-(二乙氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[5-[2-氰基-3-(2-甲氧基苯基)丙烯酰氨基]-2-吲哚酮-3-亚基]基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-27)；

N-[2-(二乙氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[5-[2-氰基-3-(咪唑-2-基)丙烯酰氨基]-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-28)；

N-[2-(二甲氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[5-(2-氰基-3-环丙基丙烯酰胺)-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-29)；

N-[2-(二甲氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[5-[2-氰基-3-(2-甲氧基苯基)丙烯酰氨基]-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-30)；

N-[2-(二乙氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[5-(2-氰基-4，4-二甲基戊-2-烯酰胺)-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-31)；

N-[2-(二甲氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[5-[2-氰基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙烯酰氨基]2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-32)；

下面药理实验中涉及的化合物代号等同于此处代号所对应的化合物。

本发明的另一目的在于提供通式(I)所示化合物的制备方法，其特征在于：

a)当R₁为乙烯基时，通式(I)所示化合物的制备方法为：5-醛基吡咯-3-羧酸1与胺类化合物反应制得中间体2，5-胺基吲哚-2-酮与丙烯酰氯反应制得中间体3，3与2缩合制得通式(I)所示的化合物，其合成路线如下：

其中，R₂，R₃和R₄的定义如权利要求1所述；

b)当R₁为时，通式(I)所示化合物的制备方法为：中间体3与哌啶或吗啉反应制得4a-b，4a-b与2缩合制得通式(I）所示的化合物，其合成路线如下：

其中，R₂，R₃和R₄的定义如权利要求1所述；

c)当R₁为时，通式(I)所示化合物的制备方法为：5-硝基吲哚-2-酮与中间体2反应制得中间体5，5经还原得到中间体6，6与氰基乙酸缩合得到中间体7，7与醛类化合物缩合制得通式(I)所示的化合物，其合成路线如下：

其中，R₂，R₃，R₄和R₁₀的定义如权利要求1所述。

本发明的进一步目的在于提供一种药物组合物，其由治疗上有效量的权利要求1-5中任一项所述的吲哚酮类化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体或辅料组成。

本发明的再一目的是提供具有通式(I)的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤药物中的应用，其中所述的肿瘤为肺癌、肝癌、结肠癌、胃癌、胰腺癌、乳腺癌、膀胱癌、***或肾癌。

具体实施方式

为了进一步阐明本发明，下面给出一系列实施例，这些实施例完全是例证性的，它们仅用来对本发明具体描述，不应当理解为对本发明的限制。

实施例1

N-(2-二乙胺基乙基)-2，4-二甲基-5-甲酰基-1H-吡咯-3-甲酰胺(2a)的制备

将2，4-二甲基-5-甲酰基-1H-吡咯-3-甲酸(0.50g，2.99mmol)、EDCI·HCl(0.86g，4.48mmol)、DMAP(0.44g，3.59mmol)和三乙胺(0.83mL，5.98mmol)溶于30mL DMF中，室温搅拌1小时，加入N，N-二乙基乙二胺(0.85mL，5.98mmol)，继续反应9h，倒入200mL冰水中，乙酸乙酯萃取，柱层析得浅黄色固体0.30g，收率40.0％，mp 159-161℃。

N-[3-(1H-吡咯-2-基)亚甲基]-2-吲哚酮-5-基-丙烯酰胺(3)的制备

5-氨基吲哚酮(261mg，1.76mmol)溶于无水四氢呋喃中，冰浴冷却，滴加丙烯酰氯(191mg.2.11mmol)，撤去冰浴，室温反应1h，过滤，旋干滤液，乙酸乙酯重结晶，干燥得到白色固体147mg，收率41％，mp 177-179℃。ESI-MS：201.1[M-H]^-；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：3.48(s，2H)，5.7(d，1H)，6.2(d，1H)，6.4(t，1H，J＝10Hz)，6.75(d，1H)，7.4(d，1H)，7.6(s，1H)，10(s，1H)，8.59(s，1H)，8.79(s，1H)，9.87(s，1H)，13.3(s，1H).

N-[2-(二乙氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-(5-丙烯酰胺-2-吲哚酮-3-亚基)甲基-吡咯-3-甲酰胺(LL-1)的制备

将3(0.28g，0.854mmol)和2a(0.142g，0.535mmol)溶于10mL乙腈中，搅拌下加入3滴三乙胺，回流6h，冰浴冷却，过滤，冷乙腈洗涤，干燥，得橙黄色固体0.128g，收率53.2％，mp 243-245℃。ESI-MS：450.2[M+H]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：0.93(t，6H，J＝8.0Hz)，1.23(q，4H，J＝8.2Hz)，1.45(t，2H，J＝7.1Hz)，2.08～2.12(m，2H)，2.44(s，3H)，2.48(s，3H)，5.50(d，1H)，6.25(d，1H)，6.5(t，1H)，6.52(s，1H)，6.9(d，1H)，7.38(d，1H)，7.47(s，1H)，7.49(s，1H)，8.0(s，1H)，10.22(s，1H)，10.9(s，1H).

实施例2

N-(2-二甲胺基乙基)-2，4-二甲基-5-甲酰基-1H-吡咯-3-甲酰胺(2b)的制备

参照2a的制备方法，由1和N，N-二甲基乙二胺反应得到白色固体，收率为52％，mp142-144℃。¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：1.01(t，6H)，2.30(s，3H)，2.40(s，3H)，2.41～2.43(m，4H)，2.53(t，2H)，3.36(t，2H，J＝8.0Hz)，7.35(t，1H)，9.53(s，1H)，11.81(s，1H).

N-[2-(二甲氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[(5-丙烯酰胺-2-吲哚酮-3-亚基)甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-2)的制备

参照LL-1的制备方法，由3和2b反应得到黄色固体，收率为39％，mp 251-253℃。ESI-MS：420.2[M-H]^-；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：0.94(t，6H，J＝8.0Hz)，1.45(t，2H，J＝7.1Hz)，2.09～2.11(m，4H)，2.3(s，6H)，2.44(s，3H，)，2.48(s，3H)，5.7(d，1H)，6.25(d，1H)，6.5(t，1H)，6.52(s，1H)，6.9(d，1H)，7.38(d，1H)，7.47(s，1H)，7.49(s，1H)，10.2(s，1H)，11(s，1H)，13.8(s，1H).

实施例3

N-(2-二甲胺基丙基)-2，4-二甲基-5-甲酰基-1H-吡咯-3-甲酰胺(2c)的合成

参照2a的制备方法，由1和N，N-二甲基-1，3-丙二胺反应得到白色固体，收率为28％，mp 161-163℃。ESI-MS：250.2[M-H]^-；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：1.69～1.71(m，2H)，2.30(s，6H)，2.40(t，2H)，3.18(t，2H)，7.56(t，1H)，9.53(s，1H)，11.81(s，1H).

N-[(二甲氨基)丙基]-2，4-二甲基-5-[(5-丙烯酰胺-2-吲哚酮-3-亚基)甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-3)的制备

参照LL-1的制备方法，由3和2c反应得到黄色固体，收率为34％，mp 239-241℃。ESI-MS：434.2[M-H]^-；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：1.92(m，2H)，2.3(s，6H)，2.65(t，2H，J＝7.5Hz)，2.7(m，2H)，3.0(s，3H，)，3.1(s，3H)，5.50(d，1H)，6.25(d，1H)，6.5(t，1H)，6.52(s，1H)，6.9(d，1H)，7.38(d，1H)，7.47(s，1H)，7.49(s，1H)，10.2(s，1H)，10.92(s，1H)，13.7(s，1H).

实施例4

N-(2-二乙胺基丙基)-2，4-二甲基-5-甲酰基-1H-吡咯-3-甲酰胺(2d)的合成

参照2a的制备方法，由1和N，N-二乙胺基-1，3-丙二胺反应得到白色固体，收率为32％，mp 155-157℃。ESI-MS：278.2[M-H]^-；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：1.02(t，6H)，1.60(m，2h)，2.46(t，2H)，2.40(q，4H，J＝8.0Hz)，3.18(t，2H)，7.56(t，1H)，9.63(s，1H)，11.84(s，1H).

N-[3-(二乙氨基)丙基]-2，4-二甲基-5-[(5-丙烯酰胺-2-吲哚酮-3-亚基)甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-4)的制备

参照LL-1的制备方法，由3和2d反应得到黄色固体，收率为37％，mp 235-237℃。ESI-MS：464.2[M+H]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：0.96(t，6H，J＝7.6Hz)，2.3(m，2H)，2.65(t，2H，J＝7.5Hz)，2.7(m，2H)，2.8(q，4H，J＝7.45Hz)，3.2(s，3H)，3.4(s，3H)，5.50(d，1H)，6.25(d，1H)，6.5(t，1H)，6.52(s，1H)，6.9(d，1H)，7.68(d，1H)，7.77(s，1H)，7.89(s，1H)，10.2(s，1H)，10.92(s，1H)，13.7(s，1H).

实施例5

3，5-二甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-羰基)-1H-吡咯-2-甲醛(2e)的合成

参照2a的制备方法，由1和N-甲基哌嗪反应得到白色固体，收率为31％，mp 115-117℃。¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：2.26(s，3H)，2.27(t，4H，J＝7.1Hz)，2.32(t，4H，J＝7.1Hz)，9.63(s，1H)，11.90(s，1H).

N-[3-[3，5-二甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-羰基)-吡咯-2-基]亚甲基-2-吲哚酮-5-基]丙烯酰胺(LL-5)的制备

参照LL-1的制备方法，由3和2e反应得到黄色固体，收率为31％，mp 175-177℃。ESI-MS：434.2[M+H]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：2.26(s，3H)，2.31(t，2H，J＝7.5Hz)，2.4(s，3H)，2.45(s，3H，)，2.54(t，4H，J＝7.5Hz)，5.70(d，1H，J＝7.5Hz)，6.25(d，1H)，6.5(t，1H)，6.52(s，1H)，6.9(d，1H)，7.68(d，1H)，7.77(s，1H)，7.89(s，1H)，10.2(s，1H)，10.92(s，1H)，13.7(s，1H).

实施例6

3，5-二甲基-4-(吗啉-4-羰基)-1H-吡咯-2-甲醛(2f)的合成

参照2a的制备方法，由1和吗啉反应得到白色固体，收率为48％，mp 102-104℃。ESI-MS：235.1[M-H]^-；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：2.16(t，3H，J＝7.1Hz)，2.21(t，3H，J＝7.1Hz)，3.56(t，4H，J＝7.1Hz)，3.63(t，4H，J＝7.1Hz)，9.63(s，1H)，11.93(s，1H).

N-[3-[[3，5-二甲基-4-(吗啉-4-羰基)-吡咯-2-基]亚甲基]-2-吲哚酮-5-基]丙烯酰胺(LL-6)的制备

参照LL-1的制备方法，由3和2f反应得到黄色固体，收率为47％，mp 140-142℃。ESI-MS：419.2[M-H]^-；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：2.26(s，3H)，2.31(s，3H)，3.45(t，4H，J＝7.3Hz)，3.55(t，4H，J＝7.3Hz)，5.70(d，1H，J＝7.5Hz)，6.25(d，1H)，6.5(t，1H)，6.52(s，1H)，6.9(d，1H)，7.68(d，1H)，7.77(s，1H)，7.89(s，1H)，10.2(s，1H)，10.92(s，1H)，13.6(s，1H).

实施例7

N-[2-(二甲基氨基)乙基]-5-甲酰基-N，2，4-三甲基-1H-吡咯-3-甲酰胺(2g)的合成

参照2a的制备方法，由1和N’，N，N-三甲基乙二胺反应得到白色固体，收率为89％，mp104-106℃。ESI-MS：250.2[M-H]^-；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：2.16(s，6H)，2.17(s，3H)，2.36(t，2H，J＝7.1Hz)，2.37(s，3H)，3.46(t，2H，J＝7.1Hz)，3.63(s，3H)，9.63(s，1H)，11.93(s，1H).

5-[(5-丙烯酰胺-2-吲哚酮-3-亚基)甲基]-N-[2-(二甲基氨基)乙基]-N，2，4-三甲基-吡咯-3-甲酰胺(LL-7)的制备

参照LL-1的制备方法，由3和2g反应得到黄色固体，收率为42％，mp 177-179℃。ESI-MS：436.2[M+H]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：1.24(t，6H，J＝7.92Hz)，2.05(t，2H，J＝7.92Hz)，2.3(s，6H)，2.4(s，3H)，2.94(s，3H)，3.68(s，3H)，5.7(d，1H)，6.25(d，1H)，6.5(t，1H)，6.52(s，1H)，6.9(d，1H)，7.38(d，1H)，7.47(s，1H)，7.49(s，1H)，10.2(s，1H)，10.89(s，1H)，13.6(s，1H).

实施例8

N-[2-(二乙氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[2-氧代-5-[3-(哌啶-1-基)丙酰氨基]二氢吲哚-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-8)的制备

将3(0.28g，1.385mmol)和2a(0.142g，0.535mmol)溶于15mL乙腈中，搅拌下加入哌啶(59μL，0.60mmol)，回流4h，冷却析晶，过滤，乙腈重结晶，干燥，得橙黄色固体0.286g，收率89.0％，mp 269-271℃。ESI-MS：535.4[M+H]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：0.98(t，6H，J＝7.6Hz)，1.23(m，2H)，1.45(t，2H，J＝7.35Hz)，1.6(m，4H)，2.25(s，3H)，2.34(q，4H，J＝7.5Hz)，2.36(t，2H，J＝7.45Hz)，2.40(t，4H，J＝7.21Hz)，2.45(s，3H)，2.5(t，4H，J＝7.45Hz)，3.60(m，2H)，6.8(d，1H)，7.22(d，1H)，7.45(s，1H)，7.47(s，1H)，7.87(s，1H)，10.2(s，1H)，10.92(s，1H)，13.7(s，1H).

实施例9

N-[2-(二甲基氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[2-氧代-5-[3-(哌啶-1-基)丙酰氨基]二氢吲哚-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-9)的制备

参照LL-8的制备方法，由3与哌啶、2b反应得到黄色固体，收率为85％，mp 262-264℃。ESI-MS：505.4[M-H]^-；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：1.31(m，2H)，1.53(m，4H)，2.15(s，6H)，2.25(s，3H)，2.36(t，2H，J＝7.35Hz)，2.40(s，3H)，2.47(t，4H，J＝7.42Hz)，2.48(t，2H，J＝7.41Hz)，2.60(m，2H)，3.34(t，2H，J＝7.41Hz)，6.8(d，1H)，7.22(d，1H)，7.45(s，1H)，7.47(s，1H)，7.87(s，1H)，10.1(s，1H)，10.92(s，1H)，13.7(s，1H).

实施例10

N-[3-(二甲基氨基)丙基]-2，4-二甲基-5-[[2-氧代-5-[3-(哌啶-1-基)丙酰氨基]二氢吲哚-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-10)的制备

参照LL-8的制备方法，由3与哌啶、2c反应得到黄色固体，收率为85％，mp 270-272℃。ESI-MS：521.3[M+H]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：1.31(m，2H)，1.60(m，2H)，2.13(m，4H)，2.15(s，6H)，2.25(s，3H)，2.36(t，2H，J＝7.35Hz)，2.40(s，3H)，2.47(t，4H，J＝7.42Hz)，2.48(t，2H，J＝7.41Hz)，3.26(m，2H)，3.54(t，2H，J＝7.41Hz)，6.8(d，1H)，7.22(d，1H)，7.45(s，1H)，7.47(s，1H)，7.87(s，1H)，10.00(s，1H)，10.92(s，1H)，13.7(s，1H).

实施例11

N-[3-(二乙基氨基)丙基]-2，4-二甲基-5-[[2-氧代-5-[3-(哌啶-1-基)丙酰氨基]二氢吲哚-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-11)的制备

参照LL-8的制备方法，由3与哌啶、2d反应得到黄色固体，收率为82％，mp 294-296℃。ESI-MS：549.5[M+H]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：1.45(t，6H，J＝7.37Hz)，1.51(m，2H)，1.60(m，2H)，2.13(m，4H)，2.25(s，3H)，2.35(q，4H，J＝7.37Hz)，2.36(t，2H，J＝7.35Hz)，2.40(s，3H)，2.47(t，4H，J＝7.42Hz)，2.48(t，2H，J＝7.41Hz)，2.56(m，2H)，3.24(t，2H，J＝7.41Hz)，6.8(d，1H)，7.22(d，1H)，7.45(s，1H)，7.47(s，1H)，7.87(s，1H)，10.00(s，1H)，10.82(s，1H)，13.64(s，1H).

实施例12

N-[3-[[3，5-二甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-羰基)-吡咯-2-基]亚甲基]-2-吲哚酮-5-基]-3-(哌啶-1-基)丙酰胺(LL-12)的制备

参照LL-8的制备方法，由3与哌啶、2e反应得到黄色固体，收率为81％，mp 131-133℃。ESI-MS：519.4[M+H]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：1.31(m，2H)，1.65(m，4H)，1.75(s，3H)，2.25(t，4H，J＝7.17Hz)，2.31(t，4H，J＝7.35Hz)，2.35(s，3H)，2.68(s，3H)，2.70(t，2H，J＝7.42Hz)，3.26(t，4H，J＝7.35Hz)，3.64(t，2H，J＝7.42Hz)，6.8(d，1H)，7.22(d，1H)，7.45(s，1H)，7.47(s，1H)，7.87(s，1H)，8.90(s，1H)，11.2(s，1H)，13.34(s，1H).

实施例13

N-[3-[[3，5-二甲基-4-(吗啉-4-羰基)-吡咯-2-基]亚甲基]-2-吲哚酮-5-基]-3-(哌啶-1-基)丙酰胺(LL-13)的制备

参照LL-8的制备方法，由3与哌啶、2f反应得到黄色固体，收率为89％，mp 145-147℃。ESI-MS：506.3[M+H]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：1.31(m，2H)，1.45(m，4H)，2.21(s，3H)，2.25(t，4H，J＝7.17Hz)，2.31(t，4H，J＝7.35Hz)，2.33(s，3H)，2.65(t，2H，J＝7.42Hz)，3.66(t，4H，J＝7.35Hz)，3.67(t，2H，J＝7.42Hz)，6.8(d，1H)，7.22(d，1H)，7.45(s，1H)，7.47(s，1H)，7.97(s，1H)，10.06(s，1H)，10.82(s，1H)，13.74(s，1H).

实施例14

N-[2-(二甲基氨基)乙基]-N，2，4-三甲基-5-[[2-氧代-5-[3-(哌啶-1-基)丙酰氨基]二氢吲哚-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-14)的制备

参照LL-8的制备方法，由3与哌啶、2g反应得到黄色固体，收率为82％，mp 307-309℃。ESI-MS：521.3[M+H]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：1.31(m，2H)，1.53(m，4H)，2.15(s，6H)，2.25(s，3H)，2.36(t，2H，J＝7.35Hz)，2.40(s，3H)，2.47(t，4H，J＝7.42Hz)，2.48(t，2H，J＝7.41Hz)，2.60(t，2H，J＝7.35Hz)，3.34(t，2H，J＝7.41Hz)，3.40(s，3H)，6.8(d，1H)，7.22(d，1H)，7.45(s，1H)，7.47(s，1H)，7.87(s，1H)，10.1(s，1H)，10.92(s，1H)，13.7(s，1H).

实施例15

N-[2-(二乙氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[5-(3-吗啉丙酰胺)-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-15)的制备

将化合物3(0.28g，1.385mmol)溶于10mL乙腈，滴加吗啉(52μL，0.60mmol)，回流5h，加入2a(0.142g，0.535mmol)，继续回流4h，冰浴冷却，减压过滤，乙腈重结晶，干燥，得黄色固体0.25g，收率85％，mp 260-262℃。ESI-MS：537.3[M+H]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：0.98(t，6H，J＝7.21Hz)，2.22(t，2H，J＝7.35Hz)，2.24(t，4H，J＝7.33Hz)，2.25(s，3H)，2.34(q，4H，J＝7.21Hz)，2.36(t，2H，J＝7.45Hz)，2.45(s，3H)，2.5(m，2H)，3.3(t，2H，J＝7.35Hz)，3.64(t，4H，J＝7.33Hz)，6.8(d，1H)，7.22(d，1H)，7.45(s，1H)，7.47(s，1H)，7.87(s，1H)，9.92(s，1H)，10.92(s，1H)，13.64(s，1H).

实施例16

N-[2-(二甲氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[5-(3-吗啉丙酰胺)-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-16)的制备

参照LL-15的制备方法，由3与吗啉和2b反应得到黄色固体，收率为88％，mp 255-257℃。ESI-MS：509.3[M+H]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：2.20(s，6H)，2.25(t，2H，J＝7.35Hz)，2.36(t，4H，J＝7.33Hz)，2.49(s，3H)，2.52(t，2H，J＝7.45Hz)，2.55(s，3H)，2.57(m，2H)，3.3(t，2H，J＝7.35Hz)，3.64(t，4H，J＝7.33Hz)，6.8(d，1H)，7.22(d，1H)，7.45(s，1H)，7.47(s，1H)，7.87(s，1H)，9.88(s，1H)，10.85(s，1H)，13.63(s，1H).

实施例17

N-[2-(二甲氨基)丙基]-2，4-二甲基-5-[[5-(3-吗啉丙酰胺)-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-17)的制备

参照LL-15的制备方法，由3与吗啉和2c反应得到黄色固体，收率为81％，mp 265-267℃。ESI-MS：523.4[M+H]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：1.60(m，2H)，2.13(t，4H，J＝7.42Hz)，2.15(s，6H)，2.25(s，3H)，2.36(t，2H，J＝7.35Hz)，2.40(s，3H)，2.48(t，2H，J＝7.41Hz)，3.07(t，4H，J＝7.42Hz)，3.26(m，2H)，3.54(t，2H，J＝7.41Hz)，6.8(d，1H)，7.22(d，1H)，7.45(s，1H)，7.47(s，1H)，7.87(s，1H)，10.00(s，1H)，10.92(s，1H)，13.62(s，1H).

实施例18

N-[2-(二乙氨基)丙基]-2，4-二甲基-5-[[5-(3-吗啉丙酰胺)-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-18)的制备

参照LL-15的制备方法，由3与吗啉和2d反应制得黄色固体，收率为80％，mp 267-269℃。ESI-MS：551.3[M+H]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：1.45(t，6H，J＝7.37Hz)，1.60(m，2H)，2.25(s，3H)，2.35(q，4H，J＝7.37Hz)，2.36(t，2H，J＝7.35Hz)，2.40(s，3H)，2.47(t，4H，J＝7.42Hz)，2.48(t，2H，J＝7.41Hz)，2.56(m，2H)，3.17(t，4H，J＝7.42Hz)，3.24(t，2H，J＝7.41Hz)，6.8(d，1H)，7.22(d，1H)，7.45(s，1H)，7.47(s，1H)，7.87(s，1H)，10.00(s，1H)，10.82(s，1H)，13.64(s，1H)。

实施例19

N-[3-[3，5-二甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-羰基)-吡咯-2-基]亚甲基-2-吲哚酮-5-基]-3-吗啉丙酰胺(LL-19)的制备

参照LL-15的制备方法，由3与吗啉和2e反应制得黄色固体，收率为75％，mp 174-176℃。ESI-MS：521.3[M+H]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：2.20(s，3H)，2.25(t，4H，J＝7.17Hz)，2.31(t，4H，J＝7.35Hz)，2.35(s，3H)，2.56(t，4H，J＝7.17Hz)，2.68(s，3H)，2.70(t，2H，J＝7.42Hz)，3.62(t，4H，J＝7.35Hz)，3.65(t，2H，J＝7.42Hz)，6.8(d，1H)，7.22(d，1H)，7.45(s，1H)，7.47(s，1H)，7.87(s，1H)，8.90(s，1H)，10.82(s，1H)，13.69(s，1H).

实施例20

N-[3-[3，5-二甲基-4-(吗啉-4-羰基)-吡咯-2-基]亚甲基-2-吲哚酮-5-基]-3-吗啉丙酰胺(LL-20)的制备

参照LL-15的制备方法，由3与吗啉和2f反应制得黄色固体，收率为85％，mp 162-164℃。ESI-MS：506.3[M-H]^-；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：2.20(t，4H，J＝7.17Hz)，2.21(s，3H)，2.31(t，4H，J＝7.35Hz)，2.33(s，3H)，2.65(t，2H，J＝7.42Hz)，3.65(t，4H，J＝7.17Hz)，3.66(t，4H，J＝7.35Hz)，3.67(t，2H，J＝7.42Hz)，6.8(d，1H)，7.22(d，1H)，7.45(s，1H)，7.47(s，1H)，7.97(s，1H)，10.06(s，1H)，10.82(s，1H)，13.74(s，1H).

实施例21

N-[2-(二甲基氨基)乙基]-N，2，4-三甲基-5-[[5-(3-吗啉丙酰胺)-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺；(LL-21)的制备

参照LL-15的制备方法，由3与吗啉和2g反应得到黄色固体，收率为81％，mp 134-136℃。ESI-MS：521.3[M-H]^-；H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：2.13(t，4H，J＝7.42Hz)，2.15(s，6H)，2.25(s，3H)，2.36(t，2H，J＝7.35Hz)，2.40(s，3H)，2.48(t，2H，J＝7.41Hz)，2.60(t，2H，J＝7.35Hz)，3.34(t，2H，J＝7.41Hz)，3.40(s，3H)，3.47(t，4H，J＝7.42Hz)，6.8(d，1H)，7.22(d，1H)，7.45(s，1H)，7.47(s，1H)，7.87(s，1H)，10.1(s，1H)，10.92(s，1H)，13.7(s，1H).

实施例22

(Z)-N-[2-(二乙氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[(5-硝基-2-吲哚酮-3-亚基)甲基]-吡咯-3-甲酰胺(5a)的制备

将5-硝基吲哚酮(1.78g，10mmol)和2a(2.65g，10mmol)溶于50ml乙醇中，加入5μL哌啶，回流3h，冷却，抽滤，乙醇重结晶，干燥得黄色固体3.8g，收率为89％，mp 263-265℃。ESI-MS：426.2[M+H]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：0.95(t，6H，J＝7.32Hz)，2.47(s，3H)，2.51(q，4H，J＝7.32Hz)，2.60(s，3H)，2.62(t，2H，J＝7.35Hz)，3.37(m，2H)，7.0(d，1H)，7.52(d，1H)，8.15(s，1H)，8.87(s，1H)，11.47(s，1H)，13.7(s，1H).

(Z)-N-[2-(二乙氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[(5-氨基-2-吲哚酮-3-亚基)甲基]-吡咯-3-甲酰胺(6a)的制备

将5a(4.25g，10mmol)溶于100ml乙醇，加入铁粉(1.29g，23.4mmol)，缓慢加入4mL浓盐酸，回流4h，饱和碳酸氢钠溶液调pH 8，乙酸乙酯萃取，干燥得淡黄色固体2.4g，收率60％，mp 254-256℃。

(Z)-5-[[5-(2-氰基乙酰基)-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-N-[2-(二乙氨基)乙基]-2，4-二甲基-吡咯-3-甲酰胺(7a)的制备

腈基乙酸(0.5g，5.95mmol)溶于20mLDMF中，依次加入EDC·HCl(2.4g，12.5mmol)、DIPEA(3.3mL，18.8mmol)和6a(1.22g，3.1mmol)，室温反应10h，倒入50mL水中，搅拌10min，抽滤，干燥得橙黄色固体0.81g，收率56％，mp 247-249℃。ESI-MS：463.2[M+H]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：0.96(t，6H，J＝7.32Hz)，2.38(s，3H)，2.51(q，4H，J＝7.32Hz)，2.60(s，3H)，2.62(t，2H，J＝7.35Hz)，3.37(m，2H)，3.60(s，2H)，7.0(d，1H)，7.52(d，1H)，8.15(s，1H)，8.87(s，1H)，11.47(s，1H)，13.7(s，1H).

N-[2-(二乙氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[5-[2-氰基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙烯酰氨基]-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-22)的制备

将7a(46mg，0.10mmol)溶于5mL乙腈中，滴加2-三氟甲基苯甲醛(0.12mmol)，加入催化量哌啶乙酸，室温反应4h，抽滤，依次用乙腈和***洗涤，干燥得黄色固体39mg，收率64％，mp 213-215℃。ESI-MS：619.3[M+H]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：0.94(t，6H，J＝7.11Hz)，2.33(q，4H，J＝7.11Hz)，2.35(t，2H，J＝7.1Hz)，2.40(s，3H，)，2.45(m，2H)，3.28(s，3H)，6.90(d，1H)，7.25(d，1H)，7.5(t，1H)，7.52(s，1H)，7.9(d，1H)，8.08(d，1H)，8.18(d，1H)，8.20(d，1H)，8.47(s，1H)，8.37(m，1H)，8.49(s，1H)，10.51(s，1H)，11.07(s，1H)，13.81(s，1H).

实施例23

5-乙基-[2-氰基-3-[3-[[4-[[2-(二乙基氨基)乙基)氨基甲酰基]-3，5-二甲基-吡咯-2-基]亚甲基]-2-吲哚酮-5-基]氨基]-3-氧代丙-1-烯-1-基]-2，4-二甲基-吡咯-3-羧酸乙酯(LL-23)的制备

参照LL-22的制备方法，由7a和2，4-二甲基-5-甲酰基-吡咯-3-羧酸乙酯反应得到黄色固体，收率为61％，mp 280-282℃。ESI-MS：640.3[M+H]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：0.91(t，3H，J＝7.34Hz)，2.33(t，6H，J＝7.11Hz)，2.34(q，4H，J＝7.11Hz)，2.35(t，2H，J＝7.1Hz)，2.37(s，3H)，2.40(s，3H)，2.45(m，2H)，2.60(s，3H)，3.28(s，3H)，4.21(q，2H，J＝7.34Hz)，6.90(d，1H)，7.25(d，1H)，7.5(s，1H)，7.52(s，1H)，7.6(s，1H)，8.08(d，1H)，10.03(s，1H)，11.04(s，1H)，11.07(s，1H)，13.71(s，1H)。

实施例24

N-[2-(二乙氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[(5-(2-氰基-4，4-二甲基戊-2-烯酰胺)-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-24)的制备

参照LL-22的制备方法，由7a和特戊醛反应得到黄色固体，收率为66％，mp 237-239℃。ESI-MS：531.3[M+H]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：0.99(t，6H，J＝7.11Hz)，1.25(s，9H)，1.63(q，4H，J＝7.11Hz)，1.95(t，2H，J＝7.21Hz)，2.30(s，3H)，2.41(s，3H)，2.9(m，2H)，6.89(d，1H)，7.25(d，1H)，7.5(s，1H)，7.52(s，1H)，7.9(d，1H)，10.11(s，1H)，10.92(s，1H)，13.63(s，1H).

实施例25

N-[2-(二乙氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[5-[2-氰基-3-(1H-比咯-2-基)丙烯酰氨基]-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-25)的制备

参照LL-22的制备方法，由7a和吡咯-2-甲醛反应得到黄色固体，收率为61％，mp279-281℃。ESI-MS：540.3[M+H]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：2.33(t，6H，J＝7.11Hz)，2.34(q，4H，J＝7.11Hz)，2.35(t，2H，J＝7.1Hz)，2.40(s，3H)，2.45(m，2H)，3.28(s，3H)，6.90(d，1H)，7.12(t，1H，J＝7.41Hz)，7.21(t，1H，J＝7.53Hz)，7.25(d，1H)，7.35(d，1H)，7.5(s，1H)，7.52(s，1H)，7.6(s，1H)，8.08(d，1H)，10.03(s，1H)，11.04(s，1H)，11.07(s，1H)，13.71(s，1H).

实施例26

N-[2-(二乙氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[5-(2-氰基-3-环丙基丙烯酰胺)-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-26)的制备

参照LL-22的制备方法，由7a和环丙基甲醛反应得到黄色固体，收率为68％，mp231-233℃。ESI-MS：515.3[M+H]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：0.97(t，6H，J＝7.12Hz)，1.27(m，1H)，1.83(q，4H，J＝7.12Hz)，1.85(m，4H)，1.95(t，2H，J＝7.21Hz)，2.40(s，3H)，2.41(s，3H)，2.43(m，2H)，6.89(d，1H)，7.25(d，1H)，7.5(s，1H)，7.52(s，1H)，7.9(d，1H)，9.99(s，1H)，10.94(s，1H)，13.63(s，1H).

实施例27

N-[2-(二乙氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[5-[2-氰基-3-(2-甲氧基苯基)丙烯酰氨基]-2-吲哚酮-3-亚基]基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-27)的制备

参照LL-22的制备方法，由7a和2-甲氧基苯甲醛反应得到黄色固体，收率为63％，mp270-272℃。ESI-MS：581.3[M+H]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：2.33(t，6H，J＝7.11Hz)，2.34(q，4H，J＝7.11Hz)，2.35(t，2H，J＝7.1Hz)，2.40(s，3H)，2.45(m，2H)，3.28(s，3H)，3.68(s，3H)，6.90(d，1H)，6.93(d，1H)，7.12(t，1H，J＝7.41Hz)，7.21(t，1H，J＝7.53Hz)，7.25(d，1H)，7.35(d，1H)，7.46(s，1H)，7.52(s，1H)，7.6(s，1H)，8.08(d，1H)，10.03(s，1H)，11.07(s，1H)，13.71(s，1H).

实施例28

N-[2-(二乙氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[5-[2-氰基-3-(咪唑-2-基)丙烯酰氨基]-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-28)的制备

参照LL-22的制备方法，由7a和咪唑-2-甲醛反应得到黄色固体，收率为58％，mp255-257℃。ESI-MS：541.3[M+H]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：1.32(t，6H，J＝7.11Hz)，2.34(q，4H，J＝7.11Hz)，2.35(t，2H，J＝7.1Hz)，2.40(s，3H)，2.45(m，2H)，3.28(s，3H)，6.90(d，1H)，7.12(t，1H，J＝7.41Hz)，7.21(t，1H，J＝7.53Hz)，7.25(d，1H)，7.5(s，1H)，7.52(s，1H)，7.6(s，1H)，8.08(d，1H)，10.03(s，1H)，11.04(s，1H)，13.07(s，1H)，13.73(s，1H).

实施例29

N-[2-(二甲氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[5-(2-氰基-3-环丙基丙烯酰胺)-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-29)的制备

参照LL-22的制备方法，由7b和环丙基甲醛反应得到黄色固体，得黄色固体，收率为64％，mp 281-283℃。ESI-MS：485.3[M-H]^-；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：1.27(m，4H)，1.85(m，1H)，1.95(t，2H，J＝7.21Hz)，2.40(s，3H)，2.41(s，3H)，2.43(m，2H)，2.47(s，6H)，6.89(d，1H)，7.25(d，1H)，7.5(s，1H)，7.52(s，1H)，7.9(d，1H)，9.99(s，1H)，10.94(s，1H)，13.63(s，1H).

实施例30

N-[2-(二甲氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[5-[2-氰基-3-(2-甲氧基苯基)丙烯酰氨基]-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-30)的制备

参照LL-22的制备方法，由7b和2-甲氧基苯甲醛反应得到黄色固体，收率为65％，mp264-266℃。ESI-MS：553.3[M+H]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：2.35(t，2H，J＝7.1Hz)，2.40(s，3H)，2.45(m，2H)，2.63(s，6H)，3.28(s，3H)，3.68(s，3H)，6.90(d，1H)，6.93(d，1H)，7.12(t，1H，J＝7.41Hz)，7.21(t，1H，J＝7.53Hz)，7.25(d，1H)，7.35(d，1H)，7.46(s，1H)，7.52(s，1H)，7.6(s，1H)，8.08(d，1H)，10.03(s，1H)，11.07(s，1H)，13.71(s，1H).

实施例31

N-[2-(二乙氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[5-(2-氰基-4，4-二甲基戊-2-烯酰胺)-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-31)的制备

参照LL-22的制备方法，由7b和特戊醛反应得到黄色固体，收率为66％，mp 293-295℃。ESI-MS：503.3[M+H]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：1.25(s，9H)，1.95(t，2H，J＝7.21Hz)，2.30(s，3H)，2.41(s，3H)，2.63(s，6H)，2.9(m，2H)，6.89(d，1H)，7.25(d，1H)，7.5(s，1H)，7.52(s，1H)，7.9(d，1H)，10.11(s，1H)，10.92(s，1H)，13.63(s，1H).

实施例32

N-[2-(二甲氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[5-[2-氰基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙烯酰氨基]2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺(LL-32)的制备

参照LL-22的制备方法，由7b和对三氟甲基苯甲醛反应得到黄色固体，收率为66％，mp 270-272℃。ESI-MS：591.3[M+H]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ(ppm)：2.35(t，2H，J＝7.1Hz)，2.40(s，3H)，2.43(s，6H)，2.45(m，2H)，3.28(s，3H)，6.90(d，1H)，7.25(d，1H)，7.5(t，1H)，7.52(s，1H)，7.9(d，1H)，8.08(d，1H)，8.18(d，1H)，8.20(d，1H)，8.47(s，1H)，8.37(m，1H)，8.49(s，1H)，10.51(s，1H)，11.07(s，1H)，13.81(s，1H)。

实施例33

蛋白酪氨酸激酶抑制活性测试

实验方法：采用Z-Lyte荧光共振能量转移法进行VEGFR1/2/3、FGFR-1及PDGFR-β抑制活性测试，阳性对照药为舒尼替尼。

实验材料：蛋白激酶VEGFR、FGFR-1及PDGFR-β及其相应的底物试剂盒(Lifetechnologies，USA)；阳性药舒尼替尼(来自本实验室合成)；Envision Multilabel Reader多功能酶标仪(PerkinElmer，USA)；Echo520超声波微量液体转移***(Labcyte，USA)。

实验步骤：

1)在384微孔板内加入5μL适量的蛋白激酶与5μL相应底物(反应终浓度为2μM)的混合液，然后用Echo520超声波微量液体转移***加入一系列梯度稀释的化合物，最后加入相应浓度的ATP，振荡混匀5min后，置于29℃恒温箱内反应1.5h；

2)加入5μL相应浓度的检测液，振荡混匀5min，置于29℃恒温箱内反应1h；

3)加入5μL终止液，振荡混匀后用Envision Multilabel Reader多功能酶标仪进行检测，激发光波长为400nm，发射光波长分别为445nm和520nm；

4)根据荧光比值计算化合物对酶反应的抑制率；

$\mathrm{Emission\; Ratio}(\%)=\frac{\mathrm{Coumarin\; Emission}\left(445\mathrm{nm}\right)}{\mathrm{Fluorescein\; Emission}\left(520\mathrm{nm}\right)}$

$\%\mathrm{Phosphorylation}=\frac{(\mathrm{Emission\; Ratio}\×F100\%)-C100\%}{(C0\%-C100\%)+[\mathrm{Emission\; Ratio}\×(F100\%-F0\%)]}$

5)根据初筛结果，选择抑制率大于50％的目标化合物，梯度稀释10个浓度双孔复筛。GraphPad Prism 5.0软件计算各化合物的IC₅₀值。实验结果如表1所示。

表1 本发明化合物对蛋白酪氨酸激酶的抑制活性(IC₅₀：μM)

实验结果表明，本发明化合物对VEGFR、FGFR-1及PDGFR-β激酶具有不同程度的抑制活性，其中部分化合物的活性优于或相当于阳性药舒尼替尼。

实施例34

本发明化合物细胞增殖抑制活性测试

采用四甲基氮唑蓝比色法(MTT)评价本发明部分化合物对细胞增殖的抑制活性。MTT法已广泛用于大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感测定等。

人源性细胞株：脐静脉内皮细胞HUVEC，肝癌HepG2细胞；结肠癌HT-29细胞，肺癌NCI-H460细胞，肾癌A498细胞，胃肠道间质瘤GIST882细胞。

实验方法：取对数生长期的细胞配成4.5×10⁵/mL细胞悬液，接种至96孔培养板中，每孔180μL，每组设5个平行孔，分别加入不同浓度受试物各20μL。置于恒温CO₂培养箱中培养48小时，将四甲基氮唑蓝加入96孔板中，每孔20μL，继续培养4小时。吸去上清液，加入DMSO，每孔150μL，平板摇床上振摇5分钟。用酶联免疫检测仪在波长为570nm处测定每孔的吸收度，以上实验各重复3次。由下式计算细胞增殖抑制率，根据抑制率建立直线回归方程求得半数抑制浓度IC₅₀值。结果见表2。

表2 本发明部分化合物对肿瘤细胞增殖的抑制活性(IC₅₀：μM)

实验结果表明，本发明化合物对多种肿瘤细胞增殖具有不同程度的抑制作用，其中部分化合物的活性优于或相当于阳性药舒尼替尼。

Claims (9)

1.通式(I)所示的吲哚酮类化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐：

其中：

R₁代表C₁-C₈烷基、C₃-C₆环烷基、C₂-C₁₀烯基、C₆-C₁₀芳基或C₅-C₁₀芳杂环基，其中所述的烷基、环烷基、杂环烷基、烯基、芳基或芳杂环基可任选地被下述相同或不相同的取代基单取代至五取代，所述取代基选自：卤素、羟基、硝基、三氟甲基、氰基、C₁-C₈烷基、C₃-C₆环烷基、C₆-C₁₀芳基、C₅-C₁₀芳杂环基或NR₅R₆，其中所述的芳基或芳杂环基可任选地被下述相同或不相同的取代基单取代至五取代，所述取代基选自：卤素、羟基、硝基、氰基、三氟甲基、C₁-C₈烷基、C₁-C₈烷氧基或C(O)OR₇；

R₂代表C₁-C₈烷基、C₁-C₈烷氧基、C₃-C₆环烷基、或NR₅R₆，其中所述的烷基、烷氧基或环烷基可任选地被下述相同或不相同的取代基单取代至五取代，所述取代基选自：卤素、羟基、C₁-C₈烷基或C₁-C₈烷氧基；

R₃和R₄可相同或不相同，任选自：氢、卤素、羟基、硝基、氰基、氨基、C₁-C₈烷基或C₃-C₆环烷基；

R₅和R₆可相同或不相同，任选自：氢、C₁-C₈烷基或R₅和R₆与和它们相连的氮一起形成5-7元杂环基，其中所述的烷基可任选地被C₁-C₈烷氧基或NR₈R₉取代，所述的杂环基可任选地包含一个或多个选自O、S或N的其它杂原子，并且该杂环基可任选地由下述相同或不同的取代基单取代至五取代，所述取代基包括：卤素、羟基、硝基、氰基、氨基、C₁-C₈烷基或C₁-C₈烷氧基；

R₇代表氢或C₁-C₈烷基；

R₈和R₉可相同或不相同，任选自氢或C₁-C₈烷基。

2.根据权利要求1所述的吲哚酮类化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其特征在于：

R₁代表C₁-C₈烷基或C₂-C₆烯基，其中所述的烷基或烯基可任选地被下述相同或不相同的取代基单取代至五取代，所述取代基选自：氰基、C₁-C₈烷基、C₃-C₆环烷基、C₆-C₁₀芳基、C₅-C₁₀芳杂环基或NR₅R₆，其中所述的芳基或芳杂环基可任选地被下述相同或不相同的取代 基单取代至五取代，所述取代基选自：三氟甲基、C₁-C₈烷基、C₁-C₈烷氧基或C(O)OR₇；

R₂代表NR₅R₆；

R₃和R₄可相同或不相同，任选自：氢或C₁-C₈烷基；

R₅和R₆可相同或不相同，任选自氢、C₁-C₈烷基或R₃和R₄与和它们相连的氮一起形成5-7元杂环基基，其中所述的烷基可任选地被C₁-C₈烷氧基或NR₈R₉取代，所述的杂环基可任选地包含一个或多个选自O或N的其它杂原子，并且该杂环基团可任选地由下述相同或不同的取代基单取代至五取代，所述取代基为C₁-C₈烷基；

R₇代表C₁-C₈烷基；

R₈和R₉可相同或不相同，任选自氢或C₁-C₈烷基。

3.根据权利要求1所述的吲哚酮类化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其特征在于：

R₁任选自：

或

R₂代表NR₅R₆；

R₃和R₄可相同或不相同，任选自：氢或C₁-C₈烷基；

R₅和R₆可相同或不相同，任选自氢、C₁-C₈烷基或R₃和R₄与和它们相连的氮一起形成5-7元杂环基基，其中所述的烷基可任选地被C₁-C₈烷氧基或NR₈R₉取代，所述的杂环基可任选地包含一个或多个选自O或N的其它杂原子，并且该杂环基团可任选地由下述相同或不同的取代基单取代至五取代，所述取代基为C₁-C₈烷基；

R₈和R₉可相同或不相同，任选自氢或C₁-C₈烷基；

R₁₀代表氢、C₁-C₈烷基、C₃-C₆环烷基、C₆-C₁₀芳基或C₅-C₁₀芳杂环基，其中所述的芳基或芳杂环基可任选地被下述相同或不相同的取代基单取代至五取代，所述取代基选自：卤素、羟基、三氟甲基、C₁-C₈烷基、C₃-C₆环烷基、C₁-C₈烷氧基或C(O)O(C₁-C₈)烷基。

4.根据权利要求1所述的吲哚酮类化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其特征在于：R₁任选自：

或

R₂任选自：

或

R₃和R₄为C₁-C₈烷基。

5.根据权利要求1所述的吲哚酮类化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其特征在于所述化合物优先选自：

N-[2-(二乙氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-(5-丙烯酰胺-2-吲哚酮-3-亚基)甲基-吡咯-3-甲酰胺；

N-[2-(二甲氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[(5-丙烯酰胺-2-吲哚酮-3-亚基)甲基]-吡咯-3-甲酰胺；

N-[(二甲氨基)丙基]-2，4-二甲基-5-[(5-丙烯酰胺-2-吲哚酮-3-亚基)甲基]-吡咯-3-甲酰胺；

N-[3-(二乙氨基)丙基]-2，4-二甲基-5-[(5-丙烯酰胺-2-吲哚酮-3-亚基)甲基]-吡咯-3-甲酰胺；

N-[3-[3，5-二甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-羰基)-吡咯-2-基]亚甲基-2-吲哚酮-5-基]丙烯酰胺；

N-[3-[[3，5-二甲基-4-(吗啉-4-羰基)-吡咯-2-基]亚甲基]-2-吲哚酮-5-基]丙烯酰胺；

N-[2-(二甲基氨基)乙基]-N，2，4-三甲基-5-[(5-丙烯酰胺-2-吲哚酮-3-亚基)甲基]-吡咯-3-甲酰胺；

N-[2-(二乙氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[2-氧代-5-[3-(哌啶-1-基)丙酰氨基]二氢吲哚-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺；

N-[2-(二甲基氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[2-氧代-5-[3-(哌啶-1-基)丙酰氨基]二氢吲哚-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺；

N-[3-(二甲基氨基)丙基]-2，4-二甲基-5-[[2-氧代-5-[3-(哌啶-1-基)丙酰氨基]二氢吲哚-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺；

N-[3-(二乙基氨基)丙基]-2，4-二甲基-5-[[2-氧代-5-[3-(哌啶-1-基)丙酰氨基]二氢吲哚-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺；

N-[3-[[3，5-二甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-羰基)-吡咯-2-基]亚甲基]-2-吲哚酮-5-基]-3-(哌啶-1-基)丙酰胺；

N-[3-[[3，5-二甲基-4-(吗啉-4-羰基)-吡咯-2-基]亚甲基]-2-吲哚酮-5-基]-3-(哌啶-1-基)丙酰胺；

N-[2-(二甲基氨基)乙基]-N，2，4-三甲基-5-[[2-氧代-5-[3-(哌啶-1-基)丙酰氨基]二氢吲哚-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺；

N-[2-(二乙氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[5-(3-吗啉丙酰胺)-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺；

N-[2-(二甲氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[5-(3-吗啉丙酰胺)-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲 酰胺；

N-[2-(二甲氨基)丙基]-2，4-二甲基-5-[[5-(3-吗啉丙酰胺)-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺；

N-[2-(二乙氨基)丙基]-2，4-二甲基-5-[[5-(3-吗啉丙酰胺)-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺；

N-[3-[3，5-二甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-羰基)-吡咯-2-基]亚甲基-2-吲哚酮-5-基]-3-吗啉丙酰胺；

N-[3-[3，5-二甲基-4-(吗啉-4-羰基)-吡咯-2-基]亚甲基-2-吲哚酮-5-基]-3-吗啉丙酰胺；

N-[2-(二甲基氨基)乙基]-N，2，4-三甲基-5-[[5-(3-吗啉丙酰胺)-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺；

N-[2-(二乙氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[5-[2-氰基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙烯酰氨基]-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺；

5-乙基-[2-氰基-3-[3-[[4-[[2-(二乙基氨基)乙基)氨基甲酰基]-3，5-二甲基-吡咯-2-基]亚甲基]-2-吲哚酮-5-基]氨基]-3-氧代丙-1-烯-1-基]-2，4-二甲基-吡咯-3-羧酸乙酯；

N-[2-(二乙氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[(5-(2-氰基-4，4-二甲基戊-2-烯酰胺)-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺；

N-[2-(二乙氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[5-[2-氰基-3-(1H-吡咯-2-基)丙烯酰氨基]-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺；

N-[2-(二乙氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[5-(2-氰基-3-环丙基丙烯酰胺)-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺；

N-[2-(二乙氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[5-[2-氰基-3-(2-甲氧基苯基)丙烯酰氨基]-2-吲哚酮-3-亚基]基]-吡咯-3-甲酰胺；

N-[2-(二乙氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[5-[2-氰基-3-(咪唑-2-基)丙烯酰氨基]-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺；

N-[2-(二甲氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[5-(2-氰基-3-环丙基丙烯酰胺)-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺；

N-[2-(二甲氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[5-[2-氰基-3-(2-甲氧基苯基)丙烯酰氨基]-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺；

N-[2-(二乙氨基)乙基]-2，4-二甲基-5-[[5-(2-氰基-4，4-二甲基戊-2-烯酰胺)-2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-吡咯-3-甲酰胺；

5-[[5-[2-氰基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙烯酰氨基]2-吲哚酮-3-亚基]甲基]-N-[2-(二甲氨基)乙基]-2，4-二甲基-吡咯-3-甲酰胺。

6.根据权利要求1所述的吲哚酮类化合物的制备方法，其特征在于：

a)当R₁为乙烯基时，通式(I)所示化合物的制备方法为：5-醛基吡咯-3-羧酸1与胺类化合物反应制得中间体2，5-胺基吲哚-2-酮与丙烯酰氯反应制得中间体3，3与2缩合制得通式(I)所示的化合物，其合成路线如下：

其中，R₂，R₃和R₄的定义如权利要求1所述；

b)当R₁为或时，通式(I)所示化合物的制备方法为：中间体3与哌啶或吗啉反应制得4a-b，4a-b与2缩合制得通式(I)所示的化合物，其合成路线如下：

其中，R₂，R₃和R₄的定义如权利要求1所述；

c)当R₁为时，通式(I)所示化合物的制备方法为：5-硝基吲哚-2-酮与中间体2反应制得中间体5，5经还原得到中间体6，6与氰基乙酸缩合得到中间体7，7与醛类化合物缩合制得通式(I)所示的化合物，其合成路线如下：

其中，R₂，R₃，R₄和R₁₀的定义如权利要求1所述。

7.一种***的药物组合物，其由治疗上有效量的权利要求1-5中任一项所述的吲哚酮类化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体或辅料组成。

8.权利要求1-5中任一项所述的化合物、其立体异构体、其药学上可接受的盐或权利要求7所述的组合物在制备抗肿瘤药物中的应用。

9.根据权利要求8所述的应用，其中所述的肿瘤为肺癌、肝癌、结肠癌、胃癌、胰腺癌、乳腺癌、膀胱癌、***或肾癌。