CN104473977A - 一种蛹虫草水提物、制备方法及其应用 - Google Patents

一种蛹虫草水提物、制备方法及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供一种蛹虫草水提物的制备方法，使用资源丰富、价格便宜的水作为溶剂，达到降低生产成本、避免有机溶剂污染的目的。通过这种方法制得的蛹虫草水提物可用于制备降低尿酸浓度、改善痛风病症的药物、保健品或辅助药剂。

Description

一种蛹虫草水提物、制备方法及其应用
【技术领域】
本发明涉及一种蛹虫草水提物、制备方法及其应用，属于保健品和中药领域。
【背景技术】
痛风病严重困扰人类生活，新西兰、美国和中国的流行病学研究表明痛风病症变得越来越普遍，发病率约为2％，并不断升高。其中65岁及以上人群发生率最高，男性的发病率比女性发病率两倍还高。痛风病是高尿酸血症发展的结果，是由于体内尿酸浓度高于血液溶解能力(>360μmol/L)，导致尿酸钠晶体在软组织、关节沉积，这些沉积结晶引起软组织、关节和骨组织反复发炎性剧烈疼痛，严重降低患者生活质量。
痛风病分为急性和慢性两种。目前市场上针对急性痛风病治疗药物包括非甾体抗炎药、秋水仙素、促肾上腺皮质激素或类固醇，这些药物主要是作用于炎症因子，降低患者痛苦。对于慢性痛风病，管理血液尿酸水平是关键。目前，用来降低人体内尿酸浓度的药物主要有：别嘌呤醇、促尿酸***药物以及利尿药物，包括苯溴马隆、尿酸酶、PEG改性的尿酸酶等，这些药物因为对肝和肾代谢器官有较强副作用使得患有肝病和肾病的患者不能使用，同时这些药物容易引发胃肠道和心血管病。这使得患有高血压、充血性心力衰竭、胃炎/溃疡或者肾功能不全的痛风患者服用上述药物通常具有较高危险性。中药疗效好、副作用低，其优势逐渐显现，因而在临床上广泛使用。
针对痛风病，有文报道了蛹虫草乙醇提取物具有降低尿酸、缓解痛风病的作用。但是其制备方法复杂、成本高，并且均采用有机溶剂提取，存在有机溶剂污染大的问题。
【发明内容】
针对上述问题，本发明的在于提供一种蛹虫草水提物的制备方法，使用资源丰富、价格便宜的水作为溶剂，达到降低生产成本、避免有机溶剂污染的目的。具体包括以下步骤：
(1)将干燥的蛹虫草子实体粉碎；
(2)将粉碎后的蛹虫草子实体置于5-25倍重量的水中、在60-100℃下提取1-2小时，用400目滤网过滤；
(3)用与步骤(2)相同的条件重复提取所得滤渣中的营养物质。
(4)将步骤(2)和(3)所得的滤液合并后减压蒸馏浓缩至250-350mL；
(5)将步骤(4)所得的浓缩液冻干得到蛹虫草水提物。
优选的，上述步骤(2)中的提取过程为超声提取，温度最好为80℃。
按照上述方法制得的蛹虫草水提物，是从蛹虫草子实体中提取的营养成分，含有粗蛋白、粗脂肪、碳水化合物、甘露醇、虫草油、虫草素、甾醇类、核苷类、氨基酸、肽类、多糖、单糖、有机酸、维生素及无机元素，其中，甘露醇含量为：4-7％，多糖含量为20-25％，核苷含量为0.25-0.35％。
取上述方法制得的蛹虫草水提物进行体内将尿酸试验，结果表明用蛹虫草水提物连续灌胃7天，可将高尿酸小鼠的血液尿酸浓度降低到正常小鼠尿酸水平。
因此，本发明的另一目的是提供上述蛹虫草水提物在制备降低尿酸浓度、改善痛风病症的药物、保健品或辅助药剂中的应用。
本发明的另一目的是提供一种治疗痛风病的药物，其特征在于，该药物含有上述的蛹虫草水提物。
本发明的有益效果在于：
1、本发明所述蛹虫草水提物的制备工艺简单，成本低；
2、本发明采用水作为溶剂提取蛹虫草水提物，不存在有机溶剂污染的问题，安全环保；
3、本发明蛹虫草水提物具有显著的降尿酸作用，能够用于制备缓解痛风病症的药物。
【附图说明】
图1：各组小鼠血清中尿酸浓度
【具体实施方式】
以下结合实施例来进一步解释本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。
实施例1
一、蛹虫草水提取物(ETCM)的制备
取蛹虫草子实体100g，使用粉碎机粉碎后加入锥形瓶中，并加入2L蒸馏水，将混合物在80℃下水浴提取2小时后使用400目滤网过滤。提取实验重复一次，将所得滤液合并后减压蒸馏浓缩至300mL，冻干得到蛹虫草水提取物53g，产率为53％。
二、蛹虫草水提取物中各组分含量测定
甘露醇测定：利用甘露醇与高碘酸钠和Nash试剂的显色反应测定甘露醇含量。其中所用试剂的配制如下：Nash试剂：取乙酸胺150g，用适量蒸馏水溶解后，加入2mL冰醋酸和2mL乙酰丙酮，用蒸馏水定溶至1000mL；0.015mol/L高碘酸钠：取高碘酸钠3.2g溶于1000mL的0.12mol/L HCI中；0.1％L-鼠李糖：取L-鼠李糖0.1g，溶于100mL蒸馏水中。甘露醇标准品溶液：取甘露醇标准品100mg，溶于100mL蒸馏水中。
在实验试管中加入待测样品溶液0.03mL，补蒸馏水至1mL，空白对照管中加入蒸馏水1mL，标准液对照管中加入甘露醇标准品溶液1mL，然后分别在实验管、空白对照管和标准液对照管中加入0.015mol/L高碘酸钠液1mL，混匀后室温放置10分钟，每个试管加0.1％鼠李糖2mL，充分混匀后，加入Nash试剂4mL，53℃水浴保温15min。冷却后使用紫外可见分光光度计在413nm处测定其吸收值，根据甘露醇标准溶液的光吸收值计算样品中的甘露醇含量。此法测得实施例1样品中甘露醇含量为4％。
采用硫酸-苯酚法测得实施例1样品中多糖含量为22％。
利用HPLC测得实施例1样品中核苷含量为0.29％。
三、蛹虫草水提取物降尿酸实验
取60只雄性SPF昆明小鼠(20±2g)，随机分为6组：正常对照组、高尿酸血症模型对照组、阳性对照组1、阳性对照组2、ETCM低剂量组、ETCM高剂量组。除正常对照组腹腔注射和灌胃生理盐水外，其他组按照100mg/kg/d的剂量腹腔注射氧嗪酸钾盐，同时灌胃600mg/kg/d剂量的次黄嘌呤造模。造模前一个小时禁食不禁水，造模后1小时，阳性对照组灌胃5mg/kg/d剂量的别嘌呤醇(AL)，阳性对照组2灌胃10mg/kg/d剂量的别嘌呤醇(AL)，蛹虫草水提物低剂量组灌胃50mg/kg/d剂量的蛹虫草水提物(ETCM)，蛹虫草水提物高剂量组灌胃200mg/kg/d剂量的蛹虫草水提物(ETCM)，正常对照组和高尿酸血症模型对照组则灌胃相同体积的生理盐水，连续7天。第7天灌胃给药1小时后，麻醉摘眼球取血，使用离心机在3500r/min速度下离心10min分离得到血清，检测血清中尿酸浓度，结果如图1所示(*表示与正常对照组相比，差异显著(P<0.01)；#表示与模型对照组相比，差异显著(P<0.01))。
从图1中可以看出，本发明蛹虫草水提取物具有良好的降尿酸效果，其降尿酸效果可以使高尿酸模型组血液尿酸浓度降低到正常小鼠尿酸水平。另外，蛹虫草作为药食同源的真菌，对人身体无损伤，它的水提取物可以用于制备降尿酸、改善痛风的药物、保健品或辅助药剂中。
实施例2
取蛹虫草子实体100g，使用粉碎机粉碎后加入锥形瓶中，并加入500mL蒸馏水，将混合物在60℃下超声提取2小时后使用400目滤网过滤。提取实验重复一次，将所得滤液合并后减压蒸馏浓缩至250mL，冻干得到蛹虫草水提取物39g，产率为39％。
按照实施例1所述的检测方法测得该蛹虫草水提物中甘露醇含量为7％，多糖含量为20％，核苷含量为0.35％。
实施例3
取蛹虫草子实体100g，使用粉碎机粉碎后加入锥形瓶中，并加入2.5L蒸馏水，将混合物在100℃下煎煮提取2小时后使用400目滤网过滤。提取实验重复一次，将所得滤液合并后减压蒸馏浓缩至350mL，冻干得到蛹虫草水提取物45g，产率为45％。
按照实施例1所述的检测方法测得该蛹虫草水提物中甘露醇含量为5.4％，多糖含量为25％，核苷含量为0.25％。
实施例4
取蛹虫草子实体100g，使用粉碎机粉碎后加入锥形瓶中，并加入1.5L蒸馏水，将混合物在90℃下水浴提取2小时后使用400目滤网过滤。提取实验重复一次，将所得滤液合并后减压蒸馏浓缩至300mL，冻干得到蛹虫草水提取物49g，产率为49％。
按照实施例1所述的检测方法测得该蛹虫草水提物中甘露醇含量为6.2％，多糖含量为24％，核苷含量为0.33％。

Claims (7)

1.一种蛹虫草水提物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将干燥的蛹虫草子实体粉碎；
(2)将粉碎后的蛹虫草子实体置于5-25倍重量的水中、在60-100℃下提取1-2小时，用400目滤网过滤；
(3)用与步骤(2)相同的条件重复提取所得滤渣中的营养物质。
(4)将步骤(2)和(3)所得的滤液合并后减压蒸馏浓缩至250-350mL；
(5)将步骤(4)所得的浓缩液冻干。
2.根据权利要求1所述的蛹虫草水提物的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中的提取温度为80℃。
3.根据权利要求1所述的蛹虫草水提物的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中的提取过程为超声提取。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的蛹虫草水提物的制备方法制得的蛹虫草水提物。
5.根据权利要求4所述的蛹虫草水提物，其特征在于，所述蛹虫草水提物中，甘露醇含量为4-7％，多糖含量为20-25％，核苷含量为0.25-0.35％。
6.权利要求4所述的蛹虫草水提物在制备降低尿酸浓度、改善痛风病症的药物、保健品或辅助药剂中的应用。
7.一种治疗痛风病的药物，其特征在于，所述药物含有权利要求4所述的蛹虫草水提物。
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Assignor: GUANGDONG INSTITUTE OF MICROBIOLOGY

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Denomination of invention: Water extract, preparation method and application of Cordyceps militaris

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