CN103705772B - 一种抗炎保肝的中药组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种抗炎保肝的中药组合物及其制备方法，制成该中药组合物的方法主要为：取广金钱草、玉米须、石韦、鸡骨草、茯苓、车前草、海金沙草、白茅根共8味药材，鸡骨草用柠檬酸-乙醇溶液提取，车前草用碳酸氢钠-乙醇溶液提取，广金钱草、海金沙草、石韦、玉米须、白茅根、茯苓水提，最后合并三种提取方法所得流浸膏。通过动物药效实验及临床试验，结果证明：本发明提供的中药组合物在治疗泌尿***结石时，抗炎保肝效果优于现有技术。

Description

一种抗炎保肝的中药组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及治疗泌尿***结石的中药组合物，具体涉及一种抗炎保肝的中药组合物及其制备方法。

背景技术

泌尿***结石属中医淋病中的“砂淋”、“石淋”及“血淋”范围，主要包括4种证型：

(1)气滞血瘀型：症见腰部隐痛，钝痛，脉正常或弦紧，舌正常；或溺时小便突然中断，疼痛剧烈，上连腰腹，砂石排出后疼痛即缓；或腰、侧腹部疼痛如掣如绞，痛引少腹，频频发作，痛时面色苍白、冷汗、呕恶，伴尿血或尿色黄赤，舌质暗红或有瘀点、瘀斑，脉弦紧或缓涩。

(2)湿热下注型：证见恶寒发热，腰痛，少腹急满，小便频数短赤，溺时涩痛难忍，淋沥不爽。苔黄腻，脉弦滑或滑数。

(3)肾阴虚型：结石久停，邪热久郁。真阴亏损，头昏耳鸣，腰酸腿痛，小便淋沥或不爽，失眠多梦，时有低热，心悸气短，五心烦热，盗汗，眼干或涩，腹胀便秘，纳差，脉细数，舌质红或少苔。

(4)肾阳虚型：结石久留，肾阳虚衰，腰腿酸重，精神不振，全身怯冷，四肢欠温或下半身常有冷感，尿频或小便不利，夜尿多，面色皓白，脉沉细弱，苔白舌质淡。

《***药品标准》第13册公开的结石通片公开了如下信息：

1）组成：广金钱草、玉米须、石韦、鸡骨草、茯苓、车前草、海金沙草、白茅根。

2）制法：以上八味，取茯苓96g粉碎成细粉，剩余茯苓与其余玉米须等七味加水煎煮二次，每次3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成相对密度为1.19—1.20(90℃)的清膏，加入茯苓细粉，混匀，干燥，粉碎成细粉，过筛，加适量辅料，制颗粒，混匀，压制成1000片，包糖衣，即得。

3）功能与主治：清热利湿，通淋排石，镇痛止血。用于泌尿***感染，膀胱炎，肾炎水肿，***，血尿，淋沥混浊，尿道灼痛等。

但是在所述部颁标准中没有明确各成分的配比量。

关于结石通的提取方法有以下报道：

中国专利申请01100318.9明确了结石通的制备方法为：所有药材粉碎为纳米级，微波萃取，减压浓缩，干燥。

中国专利申请200510032580.3公开了结石通丸、滴丸、微丸、分散片、微丸胶囊等制剂。该专利公开的制备方法采用部分茯苓粉碎，剩余茯苓与其余7味药材水提，或全部药材水提。

中国专利申请200510047400.9公开了一种用于治疗***的中药无糖颗粒剂及其制备方法。该专利原料为结石通片原料，公开的制备方法为部分茯苓粉碎，剩余茯苓与其余7味药材水提，采用低温干燥方法。

中国专利申请200910224023.x公开了治疗泌尿***疾病的药物组合物及其组份的检测方法。该专利使用的原料为结石通片原料，公开的制备方法为部分茯苓粉碎，剩余茯苓与其余7味药材水提。公开了制剂中鸡骨草、绿原酸的检测方法。

中国专利申请200910249899.x公开了治疗泌尿***疾病的药物组合物的制备方法及其组份的检测方法。该专利使用的原料为结石通片原料，公开的制备方法为部分茯苓粉碎，剩余茯苓与其余7味药材水提。公开了制剂中石韦的检测方法。

由于八味药材中活性成分的性质各不相同，如上述专利中制备方法均采用水提法，会导致一些活性成分无法提出，或提取率低，影响药效的发挥。

因此，需要提供一种可以提高药品的活性成分提取率，以提高药品抗炎保肝疗效的制备方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种疗效确切的抗炎保肝的中药组合物。

本发明提供的一种抗炎保肝的中药组合物，其活性成分的制备方法包括以下步骤：

1）取以下重量份的药材：广金钱草456份、玉米须302份、石韦228份、鸡骨草228份、茯苓228份、车前草165份、海金沙草165份、白茅根228份；

2）鸡骨草使用柠檬酸-乙醇溶液为提取溶媒提取，提取物制成流浸膏；

3）车前草使用碳酸氢钠-乙醇溶液为提取溶媒提取，提取物制成流浸膏；

4）广金钱草、海金沙草、石韦、玉米须、白茅根、茯苓加水提取，提取物制成流浸膏；

5）将步骤2）、3）、4）所得三种流浸膏混匀，即得。

上面所述制备抗炎保肝的中药组合物步骤中：

步骤2）中所述柠檬酸-乙醇溶液配比浓度优选为：0.1-5%柠檬酸的10-40%乙醇溶液；

步骤2）中所述柠檬酸-乙醇溶液配比浓度进一步优选为：0.5-1%柠檬酸的30%乙醇溶液。

步骤2）所述提取方法优选为：

鸡骨草加柠檬酸-乙醇溶液提取2-3次，每次加药材总重量8-20倍量的柠檬酸-乙醇溶液，每次提取时间为1-4小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏。

本发明所述的柠檬酸-乙醇溶液制备方法如下：

按所需提取溶媒总体积计算出柠檬酸含量为0.1-5%时所需的柠檬酸重量，以及配制成10-40%乙醇溶液所需的95%乙醇体积量，配制时先加入95%乙醇，再加入柠檬酸，最后加水至所需溶媒总体积，搅拌均匀，即得。

步骤3）中所述碳酸氢钠-乙醇溶液配比浓度优选为：0.1-5%碳酸氢钠的10-40%乙醇溶液。

步骤3）所述碳酸氢钠-乙醇溶液配比浓度进一步优选为：碳酸氢钠-乙醇溶液为：0.5-1%碳酸氢钠的20%乙醇溶液。

本发明所述的碳酸氢钠-乙醇溶液制备方法如下：

按所需提取溶媒总体积计算出碳酸氢钠含量为0.1-5%时所需的碳酸氢钠重量，以及配制成10-40%乙醇溶液所需的95%乙醇体积量，配制时先加入95%乙醇，再加入碳酸氢钠，最后加水至所需溶媒总体积，搅拌均匀，即得。

步骤3）所述提取方法优选为：

车前草加碳酸氢钠-乙醇溶液提取2-3次，每次加药材总重量10-20倍量的碳酸氢钠-乙醇溶液，每次提取时间为1-4小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏。

步骤4）所述提取方法优选为：

广金钱草、海金沙草、石韦、玉米须、白茅根、茯苓加水提取2-3次，每次加药材总重量6-12倍量的水，每次煎煮1-3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成流浸膏。

步骤4）所述提取方法进一步优选为：

广金钱草、海金沙草、石韦、玉米须、白茅根、茯苓加水提取2-3次，每次加药材总重量8-10倍量的水，每次煎煮2-3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成流浸膏。

步骤4）所述提取方法更进一步优选为：

广金钱草、海金沙草、石韦、玉米须、白茅根、茯苓加水提取2次，每次加药材总重量8-10倍量的水，每次煎煮2-3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成流浸膏。

本发明还提供了含上述中药组合物的制剂，该制剂由中药组合物单独制成或由中药组合物和药学上可接受的载体组成。

所述制剂为固体制剂或液体制剂，固体制剂为片剂、胶囊剂或颗粒剂；液体制剂为合剂或口服液。

所述药学上可接受的载体为乳糖、淀粉、糊精、甘露醇、蔗糖、羟丙甲基纤维素、交联羧甲基纤维素钠、低取代羟丙基纤维素、微晶纤维素、微粉硅胶、预胶化淀粉、山梨醇、硬脂酸镁、滑石粉、羟丙甲基纤维素、低取代羟丙基纤维素、苯甲酸钠、山梨酸钾、蔗糖或阿斯巴甜中、味精、蜂蜜、甜橙香精的一种或几种。

本发明中药组合物制剂的制备方法，该方法可以采用常规制剂工艺制备为各种常见剂型。

例如：

方法1：本发明中药组合物胶囊剂

取中药组合物制备步骤5）中所得中药组合物，干燥成干膏粉，加入胶囊剂常用辅料，按常规生产方法制备得本发明中药组合物的胶囊剂。

方法2：本发明中药组合物片剂

取中药组合物制备步骤5）中所得中药组合物，干燥成干膏粉，加入片剂常用辅料，按常规生产方法制备得本发明中药组合物的片剂。

方法3：本发明中药组合物颗粒剂

取中药组合物制备步骤5）中所得中药组合物，干燥成干膏粉，加入颗粒剂常用辅料，按常规生产方法制备得本发明中药组合物的颗粒剂。

方法4：本发明中药组合物合剂

取中药组合物制备步骤5）中所得中药组合物，加入合剂常用辅料，按常规生产方法制备得本发明中药组合物的合剂。

方法5：本发明中药组合物口服液

取中药组合物制备步骤5）中所得中药组合物，加入口服液常用辅料，按常规生产方法制备得本发明中药组合物的口服液。

方法6：本发明中药组合物糖浆剂

取中药组合物制备步骤5）中所得中药组合物，加入糖浆剂常用辅料，按常规生产方法制备得本发明中药组合物的糖浆剂。

本发明还提供了上述中药组合物或制剂在制备治疗泌尿***结石疾病时提高抗炎保肝效果的应用。

泌尿***结石在中医淋病中属石淋、砂淋，由于湿热下注，化炎灼阴，煎熬尿液，结为砂石，淤积水道，而为石淋。积于下则膀胱气化失司，尿出不利，甚则欲出不能，窘迫难受，痛引少腹；滞留于上，则影响肾脏司小便之职，郁结不得下泄，气血滞涩，不通则痛，由肾而波及膀胱、***；砂石伤络则为尿血。淋久不愈，湿热害脾，以致脾气虚弱，中气下陷，脾气不旺，运化失常，引致血液生化不足，肝血亏虚。因此，治疗石淋应在涤除砂石、通淋利尿的同时，对泌尿***出现的感染症状及时治疗，防止炎症进一步扩大，影响到其他正常器官。同时，应养护因久患淋病导致的肝损伤。使病情得以尽快彻底痊愈

本发明所公开的中药组合物有效成分是由广金钱草、玉米须、石韦、鸡骨草、茯苓、车前草、海金沙草、白茅根等原料制备而成。发明人在多年的制剂研究过程中发现，相同的药物用量，不同提取工艺制备所得的活性成分，其药理作用也会存在较大的差异和侧重点，为此，申请人对本发明的中药组合物结合药理实验进行了一系列的工艺研究，总结出本发明的提取工艺方法，并且经实验验证这样的改进带来了药效增效：鸡骨草用柠檬酸-乙醇溶液提取，车前草用碳酸氢钠-乙醇溶液提取，广金钱草、海金沙草、石韦、玉米须、白茅根、茯苓水提，最后合并三种提取方法所得的流浸膏用于治疗泌尿***结石时，其抗炎保肝作用远远优于相同处方的现有提取技术，临床疗效显示，

本发明的提取物与现有技术相比，抗炎保肝疗效有显著差异，具有显著性进步。

发明人对本发明中药组合物检测，发现：

1、以相思子碱为代表的生物碱类成分含量很高，与现有提取工艺所得产品相比，两者有明显差异，可能是由于鸡骨草中此类成分易溶于酸性乙醇溶液，所以在柠檬酸-乙醇溶液中提取较完全。

2、以桃叶珊瑚苷为代表的环烯醚萜苷类成分含量很高，与现有提取工艺所得产品相比，两者有明显差异，可能是由于此类成分易溶于碱性乙醇溶液，所以在碳酸氢钠-乙醇溶液中提取较完全。

上述检测结果从侧面表明了各组成分中某些有效成分的提取优于现有技术。由于每味中药材均含有诸多的活性成分，至少尚未有任何一味中药被完完全全地分析清楚所有成分，不同的中药合并在一起用不同提取方式提取时，由于溶剂、温度及不同成分之间的相互影响和作用，会产生极为复杂的化学反应。因此，上述有效成分只是中药提取物活性成分的一部分，对于整体药物的药效作用影响尚不明确。目前我们只能通过药效实验来对比不同提取方式在某个治疗用途方面的优劣，尚无法从部分有效成分的变化指标来判断复方中成药的疗效变化。

我们通过“对角叉菜胶所致的大鼠足肿胀的影响”动物实验对比不同提取方式消炎的疗效；通过“对大鼠急性肝损伤的影响”对比不同提取方式在保肝方面的效果。

发明人对结石通的各个药材的提取方法与药物优效进行了大量***性的研究实验，通过把药材拆分为多组，用不同的方法提取，最后得到了本发明的提取技术方案，使相同配方的药材，发挥出治疗目的更明确、疗效更显著的作用。

本发明提供的一种抗炎保肝的中药组合物具有以下优点：

1、本发明中药组合物保肝作用明显，给药后大鼠与模型组大鼠相比肝细胞索排列相对整齐、坏死灶明显减少炎性细胞浸润显著减少，且本发明组较对比例组效果更为显著。此外，肝组织病理切片镜检结果也证实了本发明提供的中药组合物能减轻干细胞变性、坏死、出血，促进肝细胞再生，对肝脏起到较好的保护作用。

2、本发明中药组合物抗炎作用明显，对角叉菜胶所致的大鼠足肿胀减轻显著（P＜0.01，P＜0.05）；且本发明与对比例比较，存在极显著性差异（P＜0.01）或显著性差异（P＜0.05）。药效试验结果表明，本发明提供的中药组合物抗炎作用优于现有技术

3、临床试验结果显示：本发明对抗炎、保肝效果良好，且本发明疗效优于对照组，与对照组相比抗炎效果具有显著性差异（P<0.05），护肝效果具有极显著性差异（P<0.01），。本发明药物对泌尿***炎症和肝功能的改善效果优于结石通片。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

如无特殊说明，本发明中的乙醇浓度均为体积百分比。

实施例1：

1）取以下重量份的药材：广金钱草456g、玉米须302g、石韦228g、鸡骨草228g、茯苓228g、车前草165g、海金沙草165g、白茅根228g；

2）鸡骨草加柠檬酸-乙醇溶液提取2次，每次分别加药材总重量20倍、15倍量的0.1%柠檬酸的10%乙醇溶液，每次提取时间分别为4小时、2小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

3）车前草加碳酸氢钠-乙醇溶液提取2次，每次分别加药材总重量20倍、15倍量的0.1%碳酸氢钠的10%乙醇溶液，每次提取时间分别为4小时、2小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

4）广金钱草、海金沙草、石韦、玉米须、白茅根、茯苓加水提取2次，每次分别加药材总重量12倍、10倍量的水，每次分别煎煮3小时、2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

5）将步骤2）、3）、4）所得三种流浸膏混匀，得中药组合物。

实施例2：

1）取以下重量份的药材：广金钱草456g、玉米须302g、石韦228g、鸡骨草228g、茯苓228g、车前草165g、海金沙草165g、白茅根228g；

2）鸡骨草加柠檬酸-乙醇溶液提取3次，每次分别加药材总重量20倍、15倍、8倍量的5%柠檬酸的40%乙醇溶液，每次提取时间分别为4小时、2小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

3）车前草加碳酸氢钠-乙醇溶液提取3次，每次分别加药材总重量20倍、15倍、10倍量的5%碳酸氢钠的40%乙醇溶液，每次提取时间分别为4小时、2小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

4）广金钱草、海金沙草、石韦、玉米须、白茅根、茯苓加水提取3次，每次分别加药材总重量12倍、10倍、6倍量的水，每次分别煎煮3小时、2小时、1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

5）将步骤2）、3）、4）所得三种流浸膏混匀，得中药组合物。

实施例3：

1）取以下重量份的药材：广金钱草456g、玉米须302g、石韦228g、鸡骨草228g、茯苓228g、车前草165g、海金沙草165g、白茅根228g；

2）鸡骨草加柠檬酸-乙醇溶液提取3次，每次分别加药材总重量20倍、15倍、10倍量的0.5%柠檬酸的20%乙醇溶液，每次提取时间分别为3小时、2小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

3）车前草加碳酸氢钠-乙醇溶液提取3次，每次分别加药材总重量20倍、15倍、10倍量的0.5%碳酸氢钠的30%乙醇溶液，每次提取时间分别为3小时、2小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

4）广金钱草、海金沙草、石韦、玉米须、白茅根、茯苓加水提取3次，每次分别加药材总重量10倍、8倍、8倍量的水，每次分别煎煮3小时、2小时、2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

5）将步骤2）、3）、4）所得三种流浸膏混匀，得中药组合物。

实施例4：

1）取以下重量份的药材：广金钱草456g、玉米须302g、石韦228g、鸡骨草228g、茯苓228g、车前草165g、海金沙草165g、白茅根228g；

2）鸡骨草加柠檬酸-乙醇溶液提取2次，每次分别加药材总重量20倍、10倍量的1%柠檬酸的20%乙醇溶液，每次提取时间分别为2小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

3）车前草加碳酸氢钠-乙醇溶液提取2次，每次分别加药材总重量20倍、10倍量的1%碳酸氢钠的30%乙醇溶液，每次提取时间分别为2小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

4）广金钱草、海金沙草、石韦、玉米须、白茅根、茯苓加水提取2次，每次分别加药材总重量10倍、10倍量的水，每次分别煎煮3小时、2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

5）将步骤2）、3）、4）所得三种流浸膏混匀，得中药组合物。

实施例5：

1）取以下重量份的药材：广金钱草456g、玉米须302g、石韦228g、鸡骨草228g、茯苓228g、车前草165g、海金沙草165g、白茅根228g；

2）鸡骨草加柠檬酸-乙醇溶液提取3次，每次分别加药材总重量20倍、15倍、15倍量的0.1%柠檬酸的40%乙醇溶液，每次提取时间分别为2小时、2小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

3）车前草加碳酸氢钠-乙醇溶液提取3次，每次分别加药材总重量20倍、15倍、15倍量的0.1%碳酸氢钠的40%乙醇溶液，每次提取时间分别为2小时、2小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

4）广金钱草、海金沙草、石韦、玉米须、白茅根、茯苓加水提取2次，每次分别加药材总重量10倍、8倍量的水，每次分别煎煮3小时、2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

5）将步骤2）、3）、4）所得三种流浸膏混匀，得中药组合物。

实施例6：

1）取以下重量份的药材：广金钱草456g、玉米须302g、石韦228g、鸡骨草228g、茯苓228g、车前草165g、海金沙草165g、白茅根228g；

2）鸡骨草加柠檬酸-乙醇溶液提取3次，每次分别加药材总重量20倍、15倍、10倍量的5%柠檬酸的10%乙醇溶液，每次提取时间分别为2小时、2小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

3）车前草加碳酸氢钠-乙醇溶液提取3次，每次分别加药材总重量20倍、15倍、15倍量的5%碳酸氢钠的10%乙醇溶液，每次提取时间分别为2小时、2小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

4）广金钱草、海金沙草、石韦、玉米须、白茅根、茯苓加水提取2次，每次分别加药材总重量10倍、8倍量的水，每次分别煎煮3小时、2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

5）将步骤2）、3）、4）所得三种流浸膏混匀，得中药组合物。

实施例7：

1）取以下重量份的药材：广金钱草456g、玉米须302g、石韦228g、鸡骨草228g、茯苓228g、车前草165g、海金沙草165g、白茅根228g；

2）鸡骨草加柠檬酸-乙醇溶液提取2次，每次分别加药材总重量10倍、8倍量的0.1%柠檬酸的20%乙醇溶液，每次提取时间分别为2小时、2小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

3）车前草加碳酸氢钠-乙醇溶液提取2次，每次分别加药材总重量15倍、8倍量的0.1%碳酸氢钠的30%乙醇溶液，每次提取时间分别为2小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

4）广金钱草、海金沙草、石韦、玉米须、白茅根、茯苓加水提取2次，每次分别加药材总重量10倍、10倍量的水，每次分别煎煮3小时、2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

5）将步骤2）、3）、4）所得三种流浸膏混匀，得中药组合物。

实施例8：胶囊剂

1、组成：实施例1所得的流浸膏，干燥成干膏粉，得316g，加入预胶化淀粉69g，硬脂酸镁6.4g，微粉硅胶6.4g。

2、制备方法：参照常规中药制剂的方法制成胶囊剂。

实施例9：片剂

1、组成：实施例2所得的流浸膏，干燥成干膏粉，得318g，加入微晶纤维素103g，预胶化淀粉8.8g，微粉硅胶5.7g。

2、制备方法：参照常规中药制剂的方法制成片剂。

实施例10：颗粒剂

1、组成：实施例3所得的流浸膏，干燥成干膏粉，得315g，加入蔗糖1310g，预胶化淀粉156g。

2、制备方法：参照常规中药制剂的方法制成颗粒剂。

实施例11：口服液

1、组成：实施例4所得流浸膏4.6L(相对密度1.050～1.065/30℃)，蔗糖550g，味精8.7g，苯甲酸钠5.4g。

2、制备方法：将流浸膏加热至80℃以上，然后加入蔗糖及防腐剂，灌封，灭菌，制成口服液。

实施例12：糖浆剂

1、组成：实施例5所得流浸膏9.0L(相对密度1.015～1.035/30℃)，蔗糖8.2kg，蜂蜜1.0kg，苯甲酸钠22g。

2、制备方法：参照常规中药制剂的方法制成糖浆剂。

对比例1：

参考《***药品标准》第13册公开的结石通片提取及制备方法，具体如下：

称取广金钱草456g、玉米须302g、石韦228g、鸡骨草228g、茯苓228g、车前草165g、海金沙草165g、白茅根228g；

以上八味，取茯苓96g粉碎成细粉，剩余茯苓与其余玉米须等七味加水煎煮二次，每次3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成相对密度为1.19(90℃)的清膏，加入茯苓细粉，混匀，干燥，粉碎成细粉，过筛，即得。

对比例2：全水提

称取广金钱草456g、玉米须302g、石韦228g、鸡骨草228g、茯苓228g、车前草165g、海金沙草165g、白茅根228g；

以上八味，加水提取3次，每次加药材总重量10倍量的水，每次煎煮3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至70℃时相对密度为1.10的清膏，加浓度为95%的乙醇使得含醇量达到60%，静置12小时，滤过，滤液浓缩至70℃时相对密度为1.15的清膏，干燥成干膏粉，即得。

对比例3：全醇提

称取广金钱草456g、玉米须302g、石韦228g、鸡骨草228g、茯苓228g、车前草165g、海金沙草165g、白茅根228g；

以上八味，用乙醇提取3次，每次加药材总重量10倍量80%乙醇，每次提取2小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩至60℃时相对密度为1.15的清膏，干燥成干膏粉，即得。

实验例1：鸡骨草提取方法比较

用不同的提取方法对鸡骨草进行提取，通过动物药效实验比较不同提取物的抗炎效果。

1提取溶媒：0.1%柠檬酸的30%乙醇、30%乙醇溶液、水。

2提取方法：按处方量称取鸡骨草，加上述不同溶媒分别提取3次，每次分别加药材总重量12倍、10倍、10倍量的溶媒，每次提取时间分别为5小时、4小时、3小时，合并提取液，滤过，回收药渣，滤液浓缩成流浸膏。

3抗炎效果试验方法：对角叉菜胶所致的大鼠足肿胀的影响

4分析结果见表1

表1不同提取方法对角叉菜胶所致的大鼠足肿胀的影响

注：与空白组比较，*P<0.05，**P<0.01；与0.1%柠檬酸的30%乙醇溶液实验组比较，#P<0.05。

表1结果显示：以0.1%柠檬酸的30%乙醇溶液为溶媒提取所得的提取物，对角叉菜胶所致大鼠足肿胀减轻最高，抗炎效果最好，与30%乙醇实验组、水实验组相比具有显著性差异（P<0.05）。

实验例2：车前草提取方法比较

用不同的提取方法对车前草进行提取，通过动物药效实验比较不同提取物的镇痛作用。

1提取溶媒：0.5%碳酸氢钠的20%乙醇、20%乙醇溶液、水。

2提取方法：按处方量称取车前草，加上述不同溶媒分别提取3次，每次分别加药材总重量12倍、10倍、10倍量的溶媒，每次提取时间分别为5小时、4小时、3小时，合并提取液，滤过，回收药渣，滤液浓缩成流浸膏。

3保肝试验方法：对大鼠急性肝损伤的影响。

4分析结果见表2

表2各组大鼠ALT、AST活性比较

注：与正常对照组比较，**P<0.01；与模型对照组比较，#P<0.05，##P<0.01；与0.5%碳酸氢钠的20%乙醇溶液实验组比较，；与0.1%的碳酸氢钠溶液实验组比较，◆◆P<0.01。

表2结果显示：以0.5%碳酸氢钠的20%乙醇为溶媒提取所得的提取物，与模型组大鼠相比肝细胞索排列相对整齐、坏死灶明显减少炎性细胞浸润显著减少，且本发明组较20%乙醇实验组、水实验组效果更为显著。此外，肝组织病理切片镜检结果也证实了本发明提供的中药组合物能减轻干细胞变性、坏死、出血，促进肝细胞再生，对肝脏起到较好的保护作用。

实验例3：中药组合物提取方法的比较

1样品分组

实施例1-7、对比例1-3分别制成干膏粉，分组。

2对比项目

生物碱类含量：用高效液相色谱法测定以相思子碱为对照的生物碱类有效成分；

环烯醚萜苷类含量：用高效液相色谱法测定以桃叶珊瑚苷为对照的环烯醚萜苷类有效成分；

3实验结果，见表3

表3不同提取方法对药材的提取效果

组别	相思子碱（mg·g-1）	桃叶珊瑚苷（mg·g-1）
			实施例1	0.811±1.64	0.369±1.01
实施例2	0.809±1.58	0.364±1.13
			实施例3	0.805±1.53	0.378±1.07
实施例4	0.811±1.60	0.359±1.06
			实施例5	0.816±1.57	0.371±1.03
实施例6	0.814±1.56	0.358±1.12
			实施例7	0.796±1.57	0.376±1.07
对比例1	0.461±1.62	0.235±1.06
			对比例2	0.508±1.59	0.247±1.12
对比例3	0.473±1.61	0.239±1.08

表3结果显示：本发明实施例1-7、以相思子碱为代表的生物碱类成分、以桃叶珊瑚苷为代表的环烯醚萜苷类有效成分含量优于对比例1-3。实验结果提示本发明技术提取生物碱成分及总黄酮与现有技术相比，提取较完全。

抗炎保肝药效实验

一、对角叉菜胶所致的大鼠足肿胀的影响

1、实验材料

（1）动物

SD大鼠，雄性，体重200±20g，购买自广西医科大学实验动物中心（生产许可证号：SCXK桂2009-0002）。

（2）药品与仪器

本发明实施例1-7、对比例1-3、0.9%生理盐水（广西南宁百会药业集团有限公司）、***（浙江仙琚制药有限公司)、角叉菜胶（湖北新胤河化工有限公司）、YLS-7C足趾容积测量仪（济南益延科技有限公司）。

2、实验分组

选用健康SD大鼠120只，雌性，随机分为12组，每组10只：

空白对照组：灌胃等体积生理盐水；

实验组：给予实施例1-7、对比例1-3药物；

阳性对照组：灌胃等体积***药液。

3、实验方法

各组动物每天灌胃给药1次，阳性对照组给予***0.02g/kg/d，实施例1-7组和对比例1-3组按生药量3.1g/kg/d计，空白对照组给予等体积生理盐水，连续灌胃给药7d。末次给药后1h在大鼠右足踝关节注射1%角叉菜胶混悬液0.1mL致炎，并分别在致炎前和致炎后6h按容量法测量大鼠足趾至踝关节的容积，按以下公式计算足肿胀度：

肿胀度（%）=（致炎后足趾容积－致炎前足趾容积）/致炎前足趾容积×100%。

4、实验结果

表4各试验组对角叉菜胶所致大鼠足肿胀的影响

注：与空白对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与对比例1组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01；与对比例2组比较，▲P＜0.05，▲▲p＜0.01；与对比例3组比较，◆P＜0.05，◆◆P＜0.01。

表4结果显示，与空白对照组相比，实施例1-7组、对比例1-3组均降低了角叉菜胶所致大鼠足肿胀度，且效果显著（P＜0.01，P＜0.05）；与对比例1-3组相比，实施例1-7组大鼠足肿胀度明显低于对比例1-3组（P＜0.01，P＜0.05）。

结果表明：本发明提供的中药组合物具有抗炎作用，且效果优于现有技术。

二、对急性肝损伤模型小鼠的作用

1、实验材料

（1）动物

健康SPF级昆明种小鼠，体质量18～22g，购买自广西医科大学实验动物中心（生产许可证号：SCXK桂2009-0002）。

（2）药品与试剂

本发明实施例1-7、对比例1-3、0.9%生理盐水（广西南宁百会药业集团有限公司）、四氯化碳(AR，阿拉丁)、甲醛（AR，阿拉丁）、ALT（丙氨酸转氨酶）、AST（天门冬氨酸转氨酶）测定试剂盒（南京建成生物工程研究所）；苏木精-伊红溶液（福州迈新）。

2、实验分组

取小鼠120只，雌雄各半，随机分成12组：正常对照组、模型对照组、实施例1-7组、对比例1-3组，每组10只。

3、实验方法

实施例1-7各组及对比例1-3各组给药剂量均按生药量4.5g/kg/d计，每天灌胃1次；正常组和模型组给予等容积0.9％生理盐水溶液，连续14d。最后一次给药后1h，除正常组外，各组小鼠均腹腔注射1％CC14花生油溶液，10mL/kg，空白组注射等量的植物油。造模24h后禁食不禁水，第2d经眼眶取血，3500rmp离心10min，分离血清，

检测血清ALT、AST活性。取肝大叶，10％甲醛溶液固定，石蜡包埋切片，常规苏木精-伊红染色，观察肝组织病理改变。

4、实验结果

表5各试验组小鼠血清ALT与AST的活性

注：与正常对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与模型对照组比较，☆P＜0.05，☆☆P＜0.01；与对比例1组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01；与对比例2组比较，▲P＜0.05，▲▲p＜0.01；与对比例3组比较，◆P＜0.05，◆◆P＜0.01。

结论：

1）CCl₄诱导的肝损伤小鼠血清ALT与AST的活性

表5结果显示，与正常对照组相比，模型组血清ALT与AST的含量明显升高（P＜0.01），表明此时小鼠肝细胞已经损伤，模型制备成功。与模型组相比，实施例1-7组及对比例1-3组血清中ALT、AST含量均显著降低（P＜0.01，P＜0.05）。说明它们能降低CCl₄对肝细胞膜的溶解作用，对肝细胞膜具有一定的保护作用。且实施例1-7组ALT、AST含量与对比例1-3组相比，存在显著性差异（P＜0.01，P＜0.05）。

2）肝组织病理检查

将小鼠处死后，剖腹取肝，观察肝脏颜色，发现空白组小鼠肝脏颜色为红褐色，湿润有光泽，富有弹性，模型组小鼠肝颜色较空白组浅，镜检小鼠肝组织切片，可观察到急性肝损伤空白组肝小叶结构正常，肝索排列整齐。肝窦明显，结构清晰可辨，肝细胞质多，细胞核大，未见肝细胞变性坏死。而模型组小鼠的肝小叶失去正常结构，肝索排列紊乱，肝组织出现较大面积的坏死，即病灶点很多，肝细胞不同程度坏死伴炎细胞浸润.部分可见浊肿，肝细胞体积增大，呈现气球样病变，核大小不等，呈不同程度固缩。而实施例1-7组与对比例1-3组的上述肝损伤现象均有不同程度减轻，且实施例1-7组较对比例1-3组效果更为显著。此外，肝组织病理切片镜检结果也证实了本发明提供的中药组合物能减轻干细胞变性、坏死、出血，促进肝细胞再生，对肝脏起到较好的保护作用。

结果表明，本发明提供的中药组合物对肝脏损伤具有保护作用，

且效果优于现有技术。

临床试验：

对本发明抗炎保肝的疗效进行临床观察，通过对比服药前后患者的肝功能情况及消炎效果分析本发明的抗炎保肝效果。

1诊断依据

1.1泌尿***炎症

1.1.1症状

症见寒战、发烧、尿急、尿频、尿痛、腰痛、无力、血尿、脓尿等，慢性期炎症或炎症反复发作可出现浮肿、高血压、蛋白尿等。

1.1.2尿常规检查

尿比重增高或降低、尿蛋白阳性、尿糖阳性，显微镜检查发现红细胞大于3个/HP，发现白细胞和上皮细胞、管型等。

1.1.3影像学检查

通过腹部平片、尿路造影、MRI等可进一步确定炎症部位和程度。

1.2肝功能异常

1.2.1蛋白质代谢功能检查：血清总蛋白、清蛋白、球蛋白、清蛋白与球蛋白比值A/G等高于或低于临床正常值。

1.2.2胆红素代谢功能检查：检测血清总胆红素、直接胆红素和间接胆红素。

1.2.3血清酶学检查：血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）正常参考值：比色法为5-25U（卡门单位），速率法<40U/L（37℃）；血清天门冬氨酸氨基转移酶（AST）正常参考值8-12U；血清碱性磷酸酶（ALP）正常参考值：比色法3-13金氏单位，速率法<240U/L。

2病例选择

年龄20～70岁，愿意接受2周治疗者，签署进入临床研究知情同意书者。

3治疗药物

实验组：实施例3

对照组：结石通，广西梧州制药（集团）股份有限公司

4疗效指标

4.1尿常规化验

治愈：临床症状及体征均消失；尿常规化验全部阴性；

好转：临床症状消失；尿常规化验有少许红细胞；

无效：症状无明显改善，尿常规化验有红细胞、尿蛋白、上皮细胞；

4.2肝功能检查

显效：临床症状明显好转，肝脾肿大缩小或稳定不变，肝功能检查ALT，TB恢复正常；

有效：临床症状好转或稳定不变，肝脾肿大稳定不变，肝功能检查ALT，AST或(和)TB较前降低>50％以上；

无效：无改变，达不到以上标准或病情进展者。

5临床分组及治疗方法

入组病例286例患者，男156例，女130例；平均约46岁；所有患者均经彩超或腹平片检查确诊为泌尿***炎症且肝功能检测异常者，病例随机分为两组。

治疗方法：

实验组：本发明实施例5，每次服用量相当于原药材10g，一日三次。

对照组：结石通片，每次1.5g，一日三次。

实验组和对照组在服药同时，加大每日饮水量，平均日饮水量为3000～5000ml，多做运动，以跳跃运动或登楼梯运动为主，双手于背侧交叉叩击后腰部。

6结果

实验例组病例中大部分患者服用本发明实施例3后，阵发性腰痛伴血尿现象减小或消失，经彩超或腹平片检查，结石下移、减小或消失。

表6：治疗后尿常规检查结果

注：与对照组比较，*P＜0.05。

表7：治疗后肝功能检查结果

注：与对照组比较，*P＜0.01。

结果分析：对两组患者治疗后的尿常规检查结果进行分析，实验组和对照组尿常规、保肝效果均良好，但实验组的疗效更优，与对照组相比抗炎效果具有显著性差异（P<0.05），护肝效果具有极显著性差异（P<0.01），。本发明药物对泌尿***炎症和肝功能的改善效果优于结石通片。

典型病例：

1.曾某，男性，60岁。自述右腰痛麻木半年，近期病情加重，有低热，与2008-11-12日去医院检查，B超提示右肾多发性结石7枚，上输尿管有高密度影，直径为0.73cm，肝功能检查ALT：122，AST：103。因患者要求采取保守治疗，经建议予本发明实施例12糖浆剂，3次/日，每次50ml。并配合跳跃动作及日饮开水4000ml左右，服药3天后症状减轻，第6天小便时排出结石3枚，最大的直径约0.7cm，第11天再排出结石2枚，直径约0.4cm。第20天复查尿常规正常，肝功能恢复明显。B超探查提示右肾结石数为2枚，输尿管未见结石膀胱均未见结石，肝功能检查示ALT：42，AST：38（无临床病理意义）。

2.黄某，男，50岁。小便淋沥不尽伴腰痛数天，腰痛以左侧为甚，小便频数，淋沥不尽。舌红苔黄，脉弦数。尿检蛋白少许，红细胞+++。B超探查见左肾内有一黄豆大小强光团，后伴声影，伴有轻度积水，诊断为肾结石伴积水；肝功能检查ALT：202,AST：78。中医诊断属淋证之湿热并重型。予本发明实施例8胶囊，1日3次，每次5粒。服药3天后诸症大减，其痛隐隐向左少腹放射。服药6天后小便时血尿淋沥，点滴而下，尿道有胀刺痛感并排出结石1枚(约0.6cm×0.5cm)。服药第8日B超检查泌尿系未见异常光团，血常规未见异常，肝功能常规检查示ALT：53，AST：32，疾病基本痊愈。

虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (5)

1.一种抗炎保肝的中药组合物，其特征在于其活性成分的制备方法包括以下步骤：

1)取以下重量份的药材：广金钱草456份、玉米须302份、石韦228份、鸡骨草228份、茯苓228份、车前草165份、海金沙草165份、白茅根228份；

2)鸡骨草加0.1-5％柠檬酸的10-40％乙醇溶液提取2-3次，每次加药材总重量8-20倍量的柠檬酸-乙醇溶液，每次提取时间为1-4小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

3)车前草加0.1-5％碳酸氢钠的10-40％乙醇溶液提取2-3次，每次加药材总重量10-20倍量的碳酸氢钠-乙醇溶液，每次提取时间为1-4小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

4)广金钱草、海金沙草、石韦、玉米须、白茅根、茯苓加水提取2-3次，每次加药材总重量6-12倍量的水，每次煎煮1-3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

5)将步骤2)、3)、4)所得三种流浸膏混匀，即得。

2.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述柠檬酸-乙醇为：0.5-1％柠檬酸的30％乙醇溶液。

3.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述碳酸氢钠-乙醇溶液为：0.5-1％碳酸氢钠的20％乙醇溶液。

4.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，步骤4)所述水提方法为：

广金钱草、海金沙草、石韦、玉米须、白茅根、茯苓加水提取2-3次，每次加药材总重量8-10倍量的水，每次煎煮2-3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成流浸膏。

5.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，步骤4)所述水提方法为：

广金钱草、海金沙草、石韦、玉米须、白茅根、茯苓加水提取2次，每次加药材总重量8-10倍量的水，每次煎煮3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成流浸膏。