CN104404102A - 一种香菇多糖的制备方法 - Google Patents
一种香菇多糖的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104404102A CN104404102A CN201410698305.4A CN201410698305A CN104404102A CN 104404102 A CN104404102 A CN 104404102A CN 201410698305 A CN201410698305 A CN 201410698305A CN 104404102 A CN104404102 A CN 104404102A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- extraction
- preparation
- lentinan
- fermentation
- liquid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 229920001491 Lentinan Polymers 0.000 title claims abstract description 64
- 229940115286 lentinan Drugs 0.000 title claims abstract description 64
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 23
- 240000000599 Lentinula edodes Species 0.000 claims abstract description 71
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 52
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 52
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 50
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims abstract description 34
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims abstract description 34
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims abstract description 34
- 235000001715 Lentinula edodes Nutrition 0.000 claims abstract description 24
- 238000003809 water extraction Methods 0.000 claims abstract description 13
- 238000000194 supercritical-fluid extraction Methods 0.000 claims abstract description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 8
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 7
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 94
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 28
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 claims description 22
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 claims description 21
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 15
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 claims description 11
- 235000019733 Fish meal Nutrition 0.000 claims description 10
- 244000017020 Ipomoea batatas Species 0.000 claims description 10
- 235000002678 Ipomoea batatas Nutrition 0.000 claims description 10
- 102000011759 adducin Human genes 0.000 claims description 10
- 108010076723 adducin Proteins 0.000 claims description 10
- 239000012043 crude product Substances 0.000 claims description 10
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 claims description 10
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 claims description 10
- 238000012869 ethanol precipitation Methods 0.000 claims description 10
- 239000004467 fishmeal Substances 0.000 claims description 10
- 230000009467 reduction Effects 0.000 claims description 10
- 238000009834 vaporization Methods 0.000 claims description 10
- 230000008016 vaporization Effects 0.000 claims description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 4
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 3
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 claims description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 2
- 239000012533 medium component Substances 0.000 claims description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 abstract description 2
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 abstract 2
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 abstract 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 abstract 2
- 239000010802 sludge Substances 0.000 abstract 2
- 239000000306 component Substances 0.000 description 8
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 8
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 8
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 4
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000004308 accommodation Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000008512 biological response Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 230000009567 fermentative growth Effects 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005760 tumorsuppression Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/54—Improvements relating to the production of bulk chemicals using solvents, e.g. supercritical solvents or ionic liquids
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Abstract
本发明涉及一种香菇多糖的制备方法，包括以下步骤：发酵培养，发酵过程中调节pH值；超临界萃取，将发酵培养得到的香菇菌丝体菌泥，不烘干直接置于超临界CO2萃取釜中萃取，去除香菇菌丝体脂溶性膜蛋白及脂肪；浸提多糖，将萃取后溶出液转入热水浸提釜中，进行多糖的浸提。本发明的有益效果表现在：在发酵培养时对pH值进行调控，使香菇菌丝体发酵量最大化，并且将发酵得到的香菇菌丝体菌泥不烘干直接进行超临界萃取，去除香菇菌丝体脂溶性膜蛋白及脂肪，提高了香菇多糖的提取率。
Description
技术领域
本发明涉及多糖的提取方法领域，特别涉及一种香菇多糖的制备方法。
背景技术
香菇多糖是从香菇中分离出的一种生理活性多糖物质，作为具有“生物应答效应物”真菌多糖，具有抗病毒、抗肿瘤、增强人体免疫力等多种功能,在开发具有抑制肿瘤、治疗心血管疾病、抗病毒药品及相关保健食品方面具有广阔的应用前景。
香菇药用菌子实体具有栽培周期长，占用场地大特点，子实体中生物活性多糖物质累计受环境、栽培基质等影响，同时子实体质地细胞坚硬色素含量高香菇多糖提取困难，因而从实体中提取活性成分难度大、生产周期长、成本高等问题。
作为现代生物技术之一规模深层发酵技术，可在有限空间内，不受自然环境影响人为控制各种培养参数定向高效率获取目标产物，利用该技术培养香菇丝状体具有周期短、成本低、产量大可工业化生产特点。国外早在上世纪40年代即开始香菇菌丝体发酵培养，比如Humfeld(1947)开始发酵培养蘑菇菌丝体。国内上世纪70年代也开始以香菇菌丝体为代表的大型真菌菌丝体培养研究。香菇菌丝体中香菇多糖生物活性和子实体香菇生物活性一致，通过发酵参数优化使得香菇发酵液中香菇多糖含量和香菇子实体相同甚至含量更高。
香菇菌丝体发酵过程中pH值往往随着发酵进程而出现变化，不利于香菇菌丝体快速生长，发明香菇菌丝体最适发酵生长pH并加以控制无疑对提高单位发酵液中的香菇菌丝体供应量，提高香菇多糖的收率具有积极意义。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于针对现有技术存在的问题，提供了一种种香菇多糖的制备方法，提高了香菇菌丝体湿重收率和香菇多糖的收率。
本发明提供了一种香菇多糖的制备方法，包括以下步骤：发酵培养，发酵过程中调节pH值；超临界萃取，将发酵培养得到的香菇菌丝体菌泥，不烘干直接置于超临界CO2萃取釜中萃取，去除香菇菌丝体脂溶性膜蛋白及脂肪；浸提多糖，将萃取后溶出液转入热水浸提釜中，进行多糖的浸提。
进一步地，所述发酵培养包括：选取活化好的香菇菌种装入液体培养基中，25-28℃条件下，150r/min摇床培养4-6天制备得一级种子，以6-8％的接种量将所述一级种子接于液体培养基中，摇床培养，制备成发酵种子液；一定发酵培养条件下，以6-8％的接种量将所述发酵种子液接种于装有灭菌好的液体培养基发酵罐中，调节pH值，发酵培养，采用管式离心机对所述香菇发酵液离心处理，收集香菇菌丝体泥。
进一步地，所述灭菌液体培养基成分为：红薯浸出液200g/L，鱼粉80g/L，啤酒酵母浸出液50g/L，pH6.5。
进一步地，所述一定发酵培养条件为：5％-10％的种子液接种量，发酵温度25℃-28℃，罐压为0.04-0.06MPa，通气量0.3-0.9vvm，通过调整发酵罐转速及通气量维持DO在10％-70％。
进一步地，所述调节pH值包括：发酵起始12小时内pH值由起始pH6.5降至4.2-4.5，向发酵罐内流加氨水使发酵罐内发酵液pH回归至5.2-5.5；随发酵进行，脉冲式向发酵罐内流加氨水保持所述发酵液pH保持在5.2-5.5,直至停止发酵，收集发酵液中的香菇菌丝体。
进一步地，所述管式离心机转速12000r/min，进样频率为3L/min。
进一步地，所述超临界萃取条件为：萃取压力控制在10-12MPa，萃取温度40℃-42℃。
进一步地，所述浸提多糖包括：称取经超临界萃取处理的香菇菌丝体菌泥，加入5倍体积去离子水，酸碱调pH6-7，温度86℃热水浸提55min，过滤去除浸提菌残渣收集过滤清液。
进一步地，所述制备方法还包括：将所述清液转入减压蒸发釜中，40℃-60℃温度下真空浓缩过滤至原体积的三分之一得到香菇多糖浓缩液；加入3倍体积的95％-98％乙醇于所述香菇多糖浓缩液中沉淀析出多糖，过滤获取香菇多糖沉淀，烘干得到香菇多糖粗品。
进一步地，所述真空浓缩压力不大于0.001MPa。
本发明的有益效果表现在：
在发酵培养时对pH值进行调控，使香菇菌丝体发酵量最大化，并且将发酵得到的香菇菌丝体菌泥不烘干直接进行超临界萃取，去除香菇菌丝体脂溶性膜蛋白及脂肪，提高了香菇多糖的提取率。
具体实施方式
在以下详细描述中，提出大量特定细节，以便于提供对本发明的透彻理解。但是，本领域的技术人员会理解，即使没有这些特定细节也可实施本发明。
下面的优选实施例，对本发明做详细描述。
实施例1
液体培养基成分：红薯浸出液200g/L，鱼粉80g/L，啤酒酵母浸出液50g/L，调pH6.5。
从活化好的香菇菌种接入150mL液体培养基中(500mL三角瓶)，25℃、150r/min摇床培养4天制备成一级种子液，以6％的接种量将一级种子接于液体培养基中，摇床培养6天，制备成发酵种子液；以7％的接种量接种于液体培养基中，发酵温度控制在26℃，罐压0.05MPa，通气量0.6vvm，通过调整发酵罐转速维持DO在30％，培养5天，获得香菇发酵液，采用管式离心机对上述获得的香菇发酵液离心处理(管式离心机离心转速13000r/min，进样频率5L/min，收取香菇菌丝体泥。将香菇菌丝体放于干燥箱中干燥12小时，转入粉碎机粉碎成香菇粉末。称取一定量的香菇粉末于超临界CO2萃取釜中，萃取60min得超临界CO2萃取处理香菇菌丝体(临界CO2萃取压力控制在10MPa，萃取温度42℃)。取超临界CO2萃取处理菌丝体，加入5倍体积去离子水，调PH6.4，85℃热水浸提60min，过滤去除浸提菌残渣得过滤清液。将上述获得的香菇多糖过滤清液转入减压蒸发釜中，45℃温度下真空浓缩(浓缩压力≤0.001MPa)过滤清液至原体积的三分之一得到香菇多糖浓缩液。加入3倍体积的95％乙醇于香菇多糖浓缩液中沉淀析出多糖，过滤获取香菇多糖沉淀于40℃干燥箱中烘干得到香菇多糖粗品，多糖收率10.3％。
实施例2
液体培养基成分：红薯浸出液200g/L，鱼粉80g/L，啤酒酵母浸出液50g/L，调pH6.5。
从活化好的香菇菌种接入150mL液体培养基中(500mL三角瓶)，25℃、150r/min摇床培养4天制备成一级种子液，以6％的接种量将一级种子接于液体培养基中，摇床培养6天，制备成发酵种子液；以7％的接种量接种于液体培养基中，发酵培养条件为：发酵温度控制在26℃，罐压0.05MPa，通气量0.6vvm，通过调整发酵罐转速维持DO在30％，0-12小时pH自然降至4.3，12-120小时通过脉冲流加氨水方式控制pH5.2-5.5，获得香菇发酵液；采用管式离心机对上述获得的香菇发酵液离心处理(管式离心机离心转速13000r/min，进样频率5L/min，收取香菇菌丝体泥。称取一定量的香菇菌丝体泥于超临界CO2萃取釜中，萃取60min得超临界CO2萃取处理香菇菌丝体泥(临界CO2萃取压力控制在10MPa，萃取温度42℃)。取超临界CO2萃取处理菌丝体泥，加入5倍体积去离子水，调PH6.4，85℃热水浸提60min，过滤去除浸提菌残渣得过滤清液。将上述获得的香菇多糖过滤清液转入减压蒸发釜中，45℃温度下真空浓缩(浓缩压力≤0.001MPa)过滤清液，至原体积的三分之一得到香菇多糖浓缩液。加入3倍体积的95％乙醇于香菇多糖浓缩液中沉淀析出多糖，过滤获取香菇多糖沉淀于40℃干燥箱中烘干得到香菇多糖粗品，多糖收率13.8％。
实施例3
液体培养基成分：红薯浸出液200g/L，鱼粉80g/L，啤酒酵母浸出液50g/L，调pH6.5。
从活化好的香菇菌种接入150mL液体培养基中(500mL三角瓶)，26℃、150r/min摇床培养4天制备成一级种子液，以6％的接种量将一级种子接于液体培养基中，摇床培养7天，制备成发酵种子液；以6％的接种量接种于液体培养基中，发酵培养3天，条件为：发酵温度控制在26℃，罐压0.05MPa，通气量0.6vvm，通过调整发酵罐转速维持DO在30％，0-12小时pH自然降至4.2，12-72小时通过脉冲流加氨水方式控制pH5.2-5.5，获得香菇发酵液；采用管式离心机对上述获得的香菇发酵液离心处理(管式离心机离心转速12000r/min，进样频率4L/min，收取香菇菌丝体泥(湿重收率110.2g/L)。称取一定量的香菇菌丝体泥于超临界CO2萃取釜中，萃取60min得超临界CO2萃取处理香菇菌丝体泥(临界CO2萃取压力控制在10MPa，萃取温度42℃)。取超临界CO2萃取处理菌丝体泥，加入5倍体积去离子水，调PH6.4，85℃热水浸提60min，过滤去除浸提菌残渣得过滤清液。将上述获得的香菇多糖过滤清液转入减压蒸发釜中，45℃温度下真空浓缩(浓缩压力≤0.001MPa)过滤清液，至原体积的三分之一得到香菇多糖浓缩液。加入3倍体积的95％乙醇于香菇多糖浓缩液中沉淀析出多糖，过滤获取香菇多糖沉淀于38℃干燥箱中烘干得到香菇多糖粗品，多糖收率14.3％。
实施例4
液体培养基成分：红薯浸出液200g/L，鱼粉80g/L，啤酒酵母浸出液50g/L，调pH6.5。
从活化好的香菇菌种接入150mL液体培养基中(500mL三角瓶)，26℃、150r/min摇床培养4天制备成一级种子液，以6％的接种量将一级种子接于液体培养基中，摇床培养7天，制备成发酵种子液；以6％的接种量接种于液体培养基中，发酵培养3天，条件为：发酵温度控制在26℃，罐压0.05MPa，通气量0.6vvm，通过调整发酵罐转速维持DO在30％，0-12小时pH自然降至4.2，12-72小时通过脉冲流加氨水方式控制pH5.2-5.5，获得香菇发酵液；采用管式离心机对上述获得的香菇发酵液离心处理(管式离心机离心转速12000r/min，进样频率4L/min，收取香菇菌丝体泥(湿重收率110.2g/L)。称取一定量的香菇菌丝体泥于超临界CO2萃取釜中，萃取60min得超临界CO2萃取处理香菇菌丝体泥(临界CO2萃取压力控制在10MPa，萃取温度42℃)。取超临界CO2萃取处理菌丝体泥，加入5倍体积去离子水，调PH6.4，85℃热水浸提60min，过滤去除浸提菌残渣得过滤清液。将上述获得的香菇多糖过滤清液转入减压蒸发釜中，45℃温度下真空浓缩(浓缩压力≤0.001MPa)过滤清液，至原体积的三分之一得到香菇多糖浓缩液。加入3倍体积的95％乙醇于香菇多糖浓缩液中沉淀析出多糖，过滤获取香菇多糖沉淀于38℃干燥箱中烘干得到香菇多糖粗品，多糖收率14.0％。
实施例5
液体培养基成分：红薯浸出液200g/L，鱼粉80g/L，啤酒酵母浸出液50g/L，调pH6.5。
从活化好的香菇菌种接入150mL液体培养基中(500mL三角瓶)，26℃、150r/min摇床培养4天制备成一级种子液，以6％的接种量将一级种子接于液体培养基中，摇床培养7天，制备成发酵种子液；以6％的接种量接种于液体培养基中，发酵培养3天，条件为：发酵温度控制在25℃，罐压0.04MPa，通气量0.3vvm，通过调整发酵罐转速维持DO在26％，0-12小时pH自然降至4.2，12-72小时通过脉冲流加氨水方式控制pH5.2-5.5，获得香菇发酵液；采用管式离心机对上述获得的香菇发酵液离心处理(管式离心机离心转速12000r/min，进样频率4L/min，收取香菇菌丝体泥(湿重收率110.2g/L)。称取一定量的香菇菌丝体泥于超临界CO2萃取釜中，萃取60min得超临界CO2萃取处理香菇菌丝体泥(临界CO2萃取压力控制在10MPa，萃取温度42℃)。取超临界CO2萃取处理菌丝体泥，加入5倍体积去离子水，调PH6.4，85℃热水浸提60min，过滤去除浸提菌残渣得过滤清液。将上述获得的香菇多糖过滤清液转入减压蒸发釜中，45℃温度下真空浓缩(浓缩压力≤0.001MPa)过滤清液，至原体积的三分之一得到香菇多糖浓缩液。加入3倍体积的95％乙醇于香菇多糖浓缩液中沉淀析出多糖，过滤获取香菇多糖沉淀于38℃干燥箱中烘干得到香菇多糖粗品，多糖收率14.2％。
实施例6
液体培养基成分：红薯浸出液200g/L，鱼粉80g/L，啤酒酵母浸出液50g/L，调pH6.5。
从活化好的香菇菌种接入150mL液体培养基中(500mL三角瓶)，28℃、150r/min摇床培养4天制备成一级种子液，以5％的接种量将一级种子接于液体培养基中，摇床培养6天，制备成发酵种子液；以5％的接种量接种于液体培养基中，发酵培养4天，条件为：发酵温度控制在28℃，罐压0.06MPa，通气量0.9vvm，通过调整发酵罐转速维持DO在34％，0-12小时pH自然降至4.4，12-96小时通过脉冲流加氨水方式控制pH5.2-5.5，获得香菇发酵液；采用管式离心机对上述获得的香菇发酵液离心处理(管式离心机离心转速11000r/min，进样频率3L/min，收取香菇菌丝体泥(湿重收率112.7g/L)。称取一定量的香菇菌丝体泥于超临界CO2萃取釜中，萃取60min得超临界CO2萃取处理香菇菌丝体泥(临界CO2萃取压力控制在10MPa，萃取温度42℃)。取超临界CO2萃取处理菌丝体泥，加入5倍体积去离子水，调PH6.6，85℃热水浸提55min，过滤去除浸提菌残渣得过滤清液。将上述获得的香菇多糖过滤清液转入减压蒸发釜中，45℃温度下真空浓缩(浓缩压力≤0.001MPa)过滤清液，至原体积的三分之一得到香菇多糖浓缩液。加入3倍体积的95％乙醇于香菇多糖浓缩液中沉淀析出多糖，过滤获取香菇多糖沉淀于38℃干燥箱中烘干得到香菇多糖粗品，多糖收率14.1％。
实施例7
液体培养基成分：红薯浸出液200g/L，鱼粉80g/L，啤酒酵母浸出液50g/L，调pH6.5。
从活化好的香菇菌种接入150mL液体培养基中(500mL三角瓶)，28℃、150r/min摇床培养4天制备成一级种子液，以5％的接种量将一级种子接于液体培养基中，摇床培养6天，制备成发酵种子液；以5％的接种量接种于液体培养基中，发酵培养4天，条件为：发酵温度控制在28℃，罐压0.04MPa，通气量0.7vvm，通过调整发酵罐转速维持DO在29％，0-12小时pH自然降至4.4，12-96小时通过脉冲流加氨水方式控制pH5.2-5.5，获得香菇发酵液；采用管式离心机对上述获得的香菇发酵液离心处理(管式离心机离心转速11000r/min，进样频率3L/min，收取香菇菌丝体泥(湿重收率112.7g/L)。称取一定量的香菇菌丝体泥于超临界CO2萃取釜中，萃取60min得超临界CO2萃取处理香菇菌丝体泥(临界CO2萃取压力控制在10MPa，萃取温度42℃)。取超临界CO2萃取处理菌丝体泥，加入5倍体积去离子水，调PH6.6，85℃热水浸提55min，过滤去除浸提菌残渣得过滤清液。将上述获得的香菇多糖过滤清液转入减压蒸发釜中，45℃温度下真空浓缩(浓缩压力≤0.001MPa)过滤清液，至原体积的三分之一得到香菇多糖浓缩液。加入3倍体积的95％乙醇于香菇多糖浓缩液中沉淀析出多糖，过滤获取香菇多糖沉淀于38℃干燥箱中烘干得到香菇多糖粗品，多糖收率13.9％。
实施例8
液体培养基成分：红薯浸出液200g/L，鱼粉80g/L，啤酒酵母浸出液50g/L，调pH6.5。
从活化好的香菇菌种接入150mL液体培养基中(500mL三角瓶)，28℃、150r/min摇床培养4天制备成一级种子液，以5％的接种量将一级种子接于液体培养基中，摇床培养6天，制备成发酵种子液；以5％的接种量接种于液体培养基中，发酵培养4天，条件为：发酵温度控制在27℃，罐压0.04MPa，通气量0.6vvm，通过调整发酵罐转速维持DO在30％，0-12小时pH自然降至4.4，12-96小时通过脉冲流加氨水方式控制pH5.2-5.5，获得香菇发酵液；采用管式离心机对上述获得的香菇发酵液离心处理(管式离心机离心转速11000r/min，进样频率3L/min，收取香菇菌丝体泥。将香菇菌丝体放于干燥箱中干燥12小时，转入粉碎机粉碎成香菇粉末。称取一定量的香菇粉末于超临界CO2萃取釜中，萃取60min得超临界CO2萃取处理香菇菌丝体(临界CO2萃取压力控制在10MPa，萃取温度42℃)。取超临界CO2萃取处理菌丝体，加入5倍体积去离子水，调pH6.4，85℃热水浸提60min，过滤去除浸提菌残渣得过滤清液。将上述获得的香菇多糖过滤清液转入减压蒸发釜中，45℃温度下真空浓缩(浓缩压力≤0.001MPa)过滤清液至原体积的三分之一得到香菇多糖浓缩液。加入3倍体积的95％乙醇于香菇多糖浓缩液中沉淀析出多糖，过滤获取香菇多糖沉淀于40℃干燥箱中烘干得到香菇多糖粗品，多糖收率11.6％。
如实施例1-8所示，实施例1为现有技术中所使用的香菇多糖制备方法，实施例2-7为本发明所使用的香菇多糖制备方法，本发明使用控制发酵时的pH值,提高了多糖的收率，实施例3为最优选实施例，多糖收率14.3％；实施例8为控制发酵时的pH值,对得到的香菇菌丝体泥进行烘干的制备方法，多糖收率11.6％，与实施例2-7结果相比，本发明使用未烘干的香菇菌丝体泥，多糖的收率更高。
熟练的技术人员可以针对每个特定应用，以变通的方式实现所描述的功能，但是，这种实现决策不应解释为背离本公开的保护范围。
Claims (10)
1.一种香菇多糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
发酵培养，发酵过程中调节pH值；
超临界萃取，将发酵培养得到的香菇菌丝体菌泥，不烘干直接置于超临界CO2萃取釜中萃取，去除香菇菌丝体脂溶性膜蛋白及脂肪；
浸提多糖，将萃取后溶出液转入热水浸提釜中，进行多糖的浸提。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述发酵培养包括：选取活化好的香菇菌种装入液体培养基中，25-28℃条件下，150r/min摇床培养4-6天制备得一级种子，以6-8％的接种量将所述一级种子接于液体培养基中，摇床培养，制备成发酵种子液；一定发酵培养条件下，以6-8％的接种量将所述发酵种子液接种于装有灭菌好的液体培养基发酵罐中，调节pH值，发酵培养，采用管式离心机对所述香菇发酵液离心处理，收集香菇菌丝体泥。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述灭菌液体培养基成分为：红薯浸出液200g/L，鱼粉80g/L，啤酒酵母浸出液50g/L，pH6.5。
4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述一定发酵培养条件为：5％-10％的种子液接种量，发酵温度25℃-28℃，罐压为0.04-0.06MPa，通气量0.3-0.9vvm，通过调整发酵罐转速及通气量维持DO在10％-70％。
5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述调节pH值包括：发酵起始12小时内pH值由起始pH6.5降至4.2-4.5，向发酵罐内流加氨水使发酵罐内发酵液pH回归至5.2-5.5；随发酵进行，脉冲式向发酵罐内流加氨水保持所述发酵液pH保持在5.2-5.5,直至停止发酵，收集发酵液中的香菇菌丝体。
6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述管式离心机转速12000r/min，进样频率为3L/min。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述超临界萃取条件为：萃取压力控制在10-12MPa，萃取温度40℃-42℃。
8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述浸提多糖包括：称取经超临界萃取处理的香菇菌丝体菌泥，加入5倍体积去离子水，酸碱调pH6-7，温度86℃热水浸提55min，过滤去除浸提菌残渣收集过滤清液。
9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法还包括：将所述清液转入减压蒸发釜中，40℃-60℃温度下真空浓缩过滤至原体积的三分之一得到香菇多糖浓缩液；加入3倍体积的95％-98％乙醇于所述香菇多糖浓缩液中沉淀析出多糖，过滤获取香菇多糖沉淀，烘干得到香菇多糖粗品。
10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，所述真空浓缩压力不大于0.001MPa。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410698305.4A CN104404102B (zh) | 2014-11-26 | 2014-11-26 | 一种香菇多糖的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410698305.4A CN104404102B (zh) | 2014-11-26 | 2014-11-26 | 一种香菇多糖的制备方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN104404102A true CN104404102A (zh) | 2015-03-11 |
| CN104404102B CN104404102B (zh) | 2017-12-19 |
Family
ID=52641767
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201410698305.4A Active CN104404102B (zh) | 2014-11-26 | 2014-11-26 | 一种香菇多糖的制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN104404102B (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106832043A (zh) * | 2017-03-16 | 2017-06-13 | 上海芝映生物科技有限公司 | 一种燕麦β‑葡聚糖提取液的制备方法 |
| CN109554416A (zh) * | 2018-12-19 | 2019-04-02 | 武汉工程大学 | 一种香菇硒多糖的制备方法 |
| CN111744231A (zh) * | 2020-06-29 | 2020-10-09 | 漯河医学高等专科学校 | 香菇发酵液中抑制白色念珠菌生长的活性成分富集方法 |
-
2014
- 2014-11-26 CN CN201410698305.4A patent/CN104404102B/zh active Active
Non-Patent Citations (6)
| Title |
|---|
| 刘静波等: "《功能食品学》", 31 March 2008 * |
| 尹艳丽等: "香菇多糖菌丝发酵及胞内多糖提取条件的优化", 《粮油加工》 * |
| 张素霞: "香菇多糖提取工艺的比较研究", 《长江蔬菜（学术版）》 * |
| 李坚: "破壁灵芝孢子中多糖的提取、纯化及其抗氧化的研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 农业科技辑》 * |
| 温鲁: "《食用菌制种技术》", 30 April 1987 * |
| 贾新成等: "《食用菌贮藏保鲜与加工新技术》", 30 April 2000 * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106832043A (zh) * | 2017-03-16 | 2017-06-13 | 上海芝映生物科技有限公司 | 一种燕麦β‑葡聚糖提取液的制备方法 |
| CN109554416A (zh) * | 2018-12-19 | 2019-04-02 | 武汉工程大学 | 一种香菇硒多糖的制备方法 |
| CN111744231A (zh) * | 2020-06-29 | 2020-10-09 | 漯河医学高等专科学校 | 香菇发酵液中抑制白色念珠菌生长的活性成分富集方法 |
| CN111744231B (zh) * | 2020-06-29 | 2021-11-19 | 漯河医学高等专科学校 | 香菇发酵液中抑制白色念珠菌生长的活性成分富集方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN104404102B (zh) | 2017-12-19 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101702984B (zh) | 一种利用真菌诱导子提高桑黄黄酮产量的桑黄菌丝体液体发酵方法 | |
| CN103005402B (zh) | 液体发酵生产冬虫夏草菌粉的方法 | |
| CN104885788A (zh) | 一种黑皮鸡枞菌菌丝体的培养方法 | |
| CN110129207A (zh) | 一种高产抗氧化蝉花菌丝体的液体发酵培养基及其抗氧化蝉花菌丝体冲剂的生产方法 | |
| CN101463326B (zh) | 广东虫草菌丝体的生产方法 | |
| CN104404102B (zh) | 一种香菇多糖的制备方法 | |
| CN102925527A (zh) | 一种金针菇、灵芝混菌发酵的方法 | |
| CN108486188A (zh) | 一种真菌菌丝发酵高产真菌多糖的方法 | |
| CN102168017B (zh) | 一种产石杉碱甲的胶孢炭疽菌及用其发酵生产石杉碱甲的方法 | |
| CN103864944B (zh) | 一种滑菇多糖粗品的制备方法 | |
| CN102172171B (zh) | 一种富锗蛹虫草菌丝体的培养方法 | |
| CN108640956A (zh) | 一种从油茶籽中制备黄酮苷的方法 | |
| CN102838689A (zh) | 发酵法提取香菇多糖的生产工艺及其产品 | |
| CN103554287A (zh) | 一种美味牛肝菌菌丝多糖的提取方法 | |
| CN111996223A (zh) | 利用双向发酵技术获取灵芝板蓝根生物多糖的方法 | |
| CN108588142A (zh) | 利用真菌多糖提高灵芝菌丝体多糖含量的方法及所得灵芝制品 | |
| CN105713841A (zh) | 一种尖孢镰孢及其在苦荞麦种子萌发预处理上的应用 | |
| CN105586267B (zh) | 生产灵芝菌丝体的灵芝诱变菌株 | |
| CN105754865B (zh) | 利用诱变菌株生产灵芝菌丝体原料的方法 | |
| CN103833715B (zh) | 一种发酵提取茅岩莓茶中二氢杨梅素的方法 | |
| CN108795770B (zh) | 用以提高白桦茸中多醣体含量的固态培养方法 | |
| CN109220537B (zh) | 用以提高白桦茸中三萜类化合物含量的培养方法 | |
| CN105713937A (zh) | 一种从西兰花毛状根培养体系中获取萝卜硫素的方法 | |
| CN109168954A (zh) | 一种促生长培养基及其在冬虫夏草培养中的应用 | |
| CN101182443B (zh) | 一种猪苓发酵酒的生产方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right |
Denomination of invention: A preparation method of Lentinan Effective date of registration: 20211222 Granted publication date: 20171219 Pledgee: Shandong Zhucheng rural commercial bank Limited by Share Ltd. Pledgor: SHANDONG SINDER TECHNOLOGY Co.,Ltd. Registration number: Y2021980015708 |
|
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right | ||
| PC01 | Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right | ||
| PC01 | Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right |
Date of cancellation: 20221223 Granted publication date: 20171219 Pledgee: Shandong Zhucheng rural commercial bank Limited by Share Ltd. Pledgor: SHANDONG SINDER TECHNOLOGY Co.,Ltd. Registration number: Y2021980015708 |
|
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right | ||
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right |
Denomination of invention: A Preparation Method of Lentinan Effective date of registration: 20230608 Granted publication date: 20171219 Pledgee: Shandong Zhucheng rural commercial bank Limited by Share Ltd. Pledgor: SHANDONG SINDER TECHNOLOGY Co.,Ltd. Registration number: Y2023980043376 |
|
| PC01 | Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right |
Granted publication date: 20171219 Pledgee: Shandong Zhucheng rural commercial bank Limited by Share Ltd. Pledgor: SHANDONG SINDER TECHNOLOGY Co.,Ltd. Registration number: Y2023980043376 |