CN103483187B - 4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸及其药用组合物和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了具有式（1）结构的4‑乙氧基‑2‑羟基‑6‑甲基苯甲酸及其药用组合物和应用。该化合物体内和体外均能显著性杀灭和/或抑制人类和动物的多种肿瘤细胞，该化合物与临床抗肿瘤药物具有显著性联合抗肿瘤作用，该化合物或其药学上可接受的盐可应用于制备抗肿瘤的药物、抗肿瘤药物组合物、联合抗肿瘤药物组合物或辅助抗肿瘤保健品。该化合物能显著性促进癌细胞凋亡和坏死、调节癌细胞生长周期、抑制癌细胞增殖。该化合物在有效抗癌剂量下，对小鼠的体重增长和脏器发育无显著性毒性，或毒性作用显著性低于临床抗癌药物如环磷酰胺和5‑氟尿嘧啶。

Description

4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸及其药用组合物和应用
技术领域
本发明属于化学医药领域，特别是涉及一种4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸及其药用组合物和应用。
背景技术
癌症是严重威胁人类健康和生命安全的一个重大疾病，目前已成为人类的第一位死因。据全球癌症统计报告，2008年全球新发癌症病例为1266.1万例，死亡756.4万例；中国癌症新发病例为281.6万例，死亡195.8万例。《2012中国肿瘤登记年报》披露，中国2012年新发癌症病例312万，平均每分钟有6人确诊为恶性肿瘤。癌症的发病率还在上升，癌症已成为严重威胁人民健康和生命安全的一个主要卫生问题。
癌症在世界上目前仍是一种难治之症。癌症的化学药物治疗作为全身性治疗措施，在癌症的治疗中占有极重要的地位，也是今后彻底解决癌症治疗问题的希望。
临床上目前使用的癌症化疗药物，很多药物存在毒副作用大、疗效不确定、选择性差以及癌细胞耐药等问题，使癌症化学药物治疗在临床上的应用和效果受到很大限制。因此，开发疗效明确、低毒安全、特别是具有选择性抗癌作用的化疗药物，是抗癌新药研究的一个重要方向和迫切任务。
发明内容
基于此，本发明的目的是提供一种具有抗肿瘤作用的4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸。
具体的技术方案如下：
具有式（1）结构的4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸（4-ethoxy-2-hydroxy-6-methylbenzoic acid）或药学上可接受的盐，
本发明的另一目的是提供一种抗肿瘤的药物组合物。
具体的技术方案如下：
一种抗肿瘤的药物组合物，其活性成分包括上述的4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸或其药学上可接受的盐。
在其中一些实施例中，该药物组合物的剂型为：注射液、粉针剂、片剂、口服液、胶囊、颗粒剂或冲剂。
本发明的另一目的是提供一种联合抗肿瘤的药物组合物。
具体的技术方案如下：
一种联合抗肿瘤的药物组合物，其活性成分包括上述4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸或其药学上可接受的盐，和5-氟尿嘧啶、紫杉醇、顺铂或环磷酰胺中的至少一种。
本发明的另一目的是提供上述4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸的应用。
具体的技术方案如下：
上述4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸或其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤药物中的应用。
在其中一些实施例中，所述肿瘤为以下人类肿瘤中的任一种：人乳腺癌、***癌、肺癌、胃癌、***、结肠癌、肝癌，卵巢癌、白血病、神经瘤、肉瘤。
本发明的另一目的是提供上述4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸在辅助抗肿瘤保健品中的应用。
具体的技术方案如下：
上述4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸或其药学上可接受的盐在辅助抗肿瘤保健品中的应用。
一种辅助抗肿瘤保健品，其活性成分包括上述4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸或其药学上可接受的盐。该辅助抗肿瘤保健品的剂型为：片剂、口服液、胶囊、颗粒剂或冲剂。
本发明的优点如下：
本发明4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸（4-ethoxy-2-hydroxy-6-methylbenzoicacid）化合物为新结构物质，可以通过相转移催化反应进行化学合成；该化合物或其盐类可作为抗肿瘤化学治疗药物，或作为抗肿瘤药物活性成分的抗肿瘤药物组合物，以及作为辅助抗肿瘤保健品。4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸体外能显著性杀灭和/或抑制人类和动物的多种癌细胞，如人乳腺癌、***癌、肺癌、胃癌、***、结肠癌、肝癌细胞，以及小鼠肉瘤、肝癌、肺癌细胞等。该化合物体内对balb/c裸鼠移植人类肺癌和人类肝癌，以及昆明种小鼠和ICR小鼠移植的小鼠肉瘤和小鼠肝癌，C57BL/6J小鼠移植的小鼠肺癌等肿瘤，均具有显著性的生长抑制作用。该化合物与临床使用的抗肿瘤化疗药物在体外和/或体内都具有联合协同抗肿瘤作用。该化合物具有选择性抗癌作用，不同癌细胞株的敏感性不同，肝癌细胞对该化合物非常敏感。该化合物能显著性促进癌细胞凋亡、调节癌细胞周期与分化、抑制癌细胞的增殖。该化合物在有效抗癌剂量下，对小鼠的体重增长和脏器发育无显著性毒性，或毒性作用显著性低于临床抗癌药物如环磷酰胺和5-氟尿嘧啶。
附图说明
图1为式（1）化合物的质谱图；
图2为式（1）化合物的核磁氢谱图；
图3为式（1）化合物的核磁碳谱图和DEPT谱图；
图4为本发明式（1）化合物对不同肿瘤细胞株的剂量-效应曲线图；
图5为本发明式（1）化合物体外抗肿瘤实验的时间-效应、剂量-效应关系曲线图；
图6为本发明式（1）化合物体内抗肿瘤(NCI-H460)试验时，不同时间点的肿瘤相对体积（RTV）；
图7为本发明式（1）化合物体内抗肿瘤(NCI-H460)试验时，不同时间点的肿瘤相对增值率（%）；
图8为本发明式（1）化合物给药10次后的NCI-H460肿瘤重量；
图9为本发明式（1）化合物体内抗肿瘤（QGY-7703）试验时，不同时间点的肿瘤相对体积(RTV)；
图10为本发明式（1）化合物体内抗肿瘤（QGY-7703）试验时，不同时间点的肿瘤相对增殖率(%)；
图11为本发明式（1）化合物体内抗肿瘤（QGY-7703）实验结束时，各组的肿瘤平均重量；
图12为本发明式（1）化合物体内抗肿瘤（QGY-7703）实验结束时，各组动物的肿瘤照片；
图13为本发明式（1）化合物体内抗肿瘤（QGY-7703）实验结束时，各组动物的脾脏照片；
图14为本发明式（1）化合物溶剂对照的流式细胞仪检测结果(QGY-7703)；
图15为本发明式（1）化合物的流式细胞仪检测结果（QGY-7703）；
图16为本发明式（1）化合物（D4，50μM）在QGY-7703的Western Blot检测结果；
图17为本发明式（1）化合物（D1，200μM）在HCT-116的Western Blot检测结果；
图18为本发明式（1）化合物（D2,150μM）在MCF-7的Western Blot检测结果；
图19为本发明式（1）化合物（D1,200μM）在A-549的Western Blot检测结果；
图20为本发明式（1）化合物与5-氟尿嘧啶的体外联合抗A-549肿瘤作用；
图21为本发明式（1）化合物与顺铂的体外联合抗A-549肿瘤作用。
具体实施方式
以下通过实施例对本发明做进一步的阐述。
实施例1：式（1）所示化合物4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸（4-ethoxy-2-hydroxy-6-methylbenzoic acid）的合成及结构鉴定
1、制备方法
相转移催化合成与柱层析分离
利用相转移催化反应，在氢氧化钠存在下，2,4-二羟基-6-甲基苯甲酸与硫酸二乙酯（摩尔比为0.2:0.18），在催化剂HA-1（双十八烷基甲基胺氯化苄季铵盐）作用下于60-65℃反应3h。反应完毕后，冷却到25℃，倒入冰水中，用稀盐酸调PH值至中性，分出有机层；水层用甲苯萃取2次，合并有机层；水洗有机层3次，无水硫酸钠干燥。减压蒸去溶剂甲苯，产物再采用硅胶柱层析技术进行分离纯化，得到化合物4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸。
2、结构鉴定
化合物4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸的质谱图（如图1所示）；
化合物4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸的核磁氢谱图（如图2所示）；
化合物4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸的核磁碳谱图和DEPT谱图（如图3所示）。
实施例2：式（1）化合物4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸的生物学实验结果
下面通过部分具体实验例证来说明本发明的式（1）化合物4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸（以下图表中以D6B2或D表示，下同；D1为200μM、D2为150μM、D3为100μM、D4为50μM、D5为25μM）具有显著性和选择性抗肿瘤作用、与临床抗肿瘤药物的联合抗肿瘤作用、以及其毒理学安全性、抗肿瘤作用机理。
1、4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸的体外抗癌作用：
试验方法：式（1）化合物4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸以DMSO溶解，按最终浓度为25、50、100、150、200μM进行体外抗癌试验。收集对数生长期人类或动物肿瘤细胞，以完全培养基混悬后，接种于6孔板，每孔加入2ml细胞悬液。37℃、5%CO2培养箱培养24小时后，取3孔细胞计数作为0小时的细胞数；吸去其余孔的培养液，然后按设计分别加入含有相应浓度式（1）化合物的完全培养液2ml，同时设DMSO溶剂对照。每浓度及DMSO对照组做9孔平行，细胞在加药后于37℃、5%CO2培养箱继续培养。于加药后24h、48h、72h，每浓度分别收集3孔细胞进行计数，计算细胞数的平均值和标准差，绘制细胞生长曲线，进行统计学差异检验。同时采用96孔板培养，以MTT法测定药物处理24、48和72小时后的OD值，观察药物的时间-效应关系。
结果：式（1）化合物4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸对人乳腺癌细胞株MCF-7、人肺癌细胞株A-549、人结肠癌细胞株HCT-116、人肝癌细胞株QGY-7703等均具有显著性抗癌作用。该化合物对不同癌细胞的抑制率有显著性差异，人类肝癌细胞QGY-7703对该化合物非常敏感。在200μM浓度、72小时，该化合物对QGY-7703、MCF-7、A-549和HCT-116的抑制率分别为95.07%、78.26%、50.39%和51.84%，具有明显的剂量-反应关系，其半数抑制浓度(IC50)分别为70μM、135μM、190μM和200μM。72小时的体外抗癌结果见图4。在其它体外抗癌活性筛选试验中，式（1）化合物处理癌细胞72小时后，在显微镜下见对人***细胞Hela、人胃癌细胞SGC-7901、人***癌细胞PC-3、人卵巢癌细胞SKOV-3、人白血病细胞K-562和HL-60、人神经胶质瘤细胞U-251等具有显著性体外抑制或杀灭作用（目前暂未对这几个细胞株进行剂量-效应关系和时间-效应关系研究）。
该化合物在不同剂量下对人肝癌细胞QGY-7703体外抗癌作用的剂量-效应关系图和时间-效应关系图（MTT法）见图5.
2、4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸对balb/c裸鼠移植的人类大细胞肺癌NCI-H460的体内抗癌作用
试验方法：雄性balb/c裸鼠（体重16～18g），每只右侧背部皮下接种人类大细胞肺癌NCI-H460细胞悬液0.1ml（5×107cells/ml）。接种癌细胞后的第12天，大部分小鼠皮下出现肉眼可见肿瘤。用游标卡尺测量、计算每只小鼠的肿瘤体积。将荷瘤小鼠按肿瘤体积大小随机分为DMSO对照组和式（1）化合物给药组，每组8只荷瘤小鼠。式（1）化合物以无菌的质谱纯DMSO配制，给药剂量为30mg/kg；对照组小鼠给予同等体积的DMSO。小鼠从分组后的第二天开始腹腔注射给药，隔天给药1次，每4天测定1次肿瘤体积和体重，计算肿瘤的相对体积、肿瘤的相对增值率。给药10次后，处死小鼠，完整剥离肿瘤、肝、脾、肾和睾丸，测定肿瘤重量以及各脏器重量，计算肿瘤重量抑制率及各脏器系数。
结果：4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸对NCI-H460肿瘤的抑制结果见图6、图7、图8。4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸能显著性抑制人类肺癌NCI-H460的生长（p<0.05），试验结束时，肿瘤的重量抑制率为43.51%，肿瘤的相对增值率为51.96%，给药组的肿瘤重量、肿瘤相对体积与阴性对照组（以NC表示，下同）比较，呈显著性下降（p<0.05）。
3、4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸对裸鼠体内移植性人类肝癌QGY-7703的抗癌作用
试验方法：对经适应性饲养1周的雌性balb/c裸鼠（体重16～18g），每只在右侧背部皮下接种QGY-7703细胞悬液0.1ml（1×108cells/ml）。裸鼠饲养在SPF实验室。接种癌细胞后的第21天，小鼠皮下出现肉眼可见肿瘤。用游标卡尺测量小鼠肿瘤的长径和横径，计算肿瘤体积。将荷瘤小鼠按照肿瘤体积大小随机分为DMSO溶剂对照组、5-氟尿嘧啶（5-Fu）阳性药物对照组和式（1）化合物给药组，每组共6只荷瘤小鼠。4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸以无菌的质谱纯DMSO溶解后，再以等体积无菌PBS稀释，给药剂量为20mg/kg；溶剂对照组小鼠给予同等体积的DMSO/PBS（1:1）；5-Fu以等体积DMSO稀释，5-Fu使用剂量为30mg/kg。小鼠从分组后的第二天开始腹腔注射给药，隔天给药1次，每4天测定1次肿瘤体积和体重。给药12次后，处死小鼠，完整剥离肿瘤、肝、脾、肾，测定肿瘤重量、小鼠体重以及各脏器重量。
结果：式（1）化合物4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸对QGY-7703肿瘤的抑制结果见图9、图10、图11。式（1）化合物能显著性抑制人类肝癌QGY-7703的生长（p<0.05），试验结束时，肿瘤的重量抑制率为69.83%，肿瘤的相对增值率为30.84%，给药组的肿瘤重量、肿瘤相对体积与对照组比较，呈显著性下降（p<0.05）。该化合物对人类肝癌的抑制作用显著性强于对肺癌的抑制作用。实验结束时各组的QGY-7703肿瘤照片见图12。
4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸对昆明种小鼠和ICR小鼠移植的小鼠肉瘤S-180、小鼠肝癌H-22，以及C57BL/6J小鼠移植的小鼠肺癌3ll均具有显著性的体内抗癌作用(p<0.05)，并具有剂量-效应关系。
4、4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸对裸鼠的毒性作用
实验方法：裸鼠体内抗癌试验中，在测量肿瘤体积的各时间点，同时测量小鼠的体重；在试验结束时，处死小鼠，完整取出小鼠肝脏、脾脏、肾脏、睾丸（雄鼠）并称重，计算各脏器系数。
(1)对雄鼠体重和脏器发育的影响
表1.雄性balb/c小鼠不同时间点的体重(g)
*：P<0.05
结果：给药4次后，式（1）化合物4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸对小鼠体重增长呈现抑制作用。
表2.雄性balb/c小鼠的脏器系数
*:P<0.05
结果：式（1）化合物4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸能影响雄性裸鼠的肝脏和脾脏发育，但不影响雄性小鼠的肾脏和睾丸发育。
(2)对雌性小鼠死亡、体重和脏器发育的影响
表3.雌性balb/c小鼠不同时间点的体重(g)
#：5-氟尿嘧啶组2只小鼠在第20天死亡，另有3只极度消瘦、濒死；
*：从第8天开始，5-氟尿嘧啶和D6B2组体重显著性低于溶剂对照组，P<0.05；
结果：抗癌药物5-氟尿嘧啶和式（1）化合物能显著性影响小鼠体重发育，5-氟尿嘧啶对小鼠体重影响显著性高于该化合物。在实验的第20天，5-Fu组有2只动物因衰竭死亡，另有3只小鼠极度衰竭而濒死。式（1）化合物组动物在试验结束时仍健康活泼、无死亡。
表4.雌性balb/c小鼠的脏器系数
*：P<0.05
结果：4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸能影响雌性小鼠肾脏发育，而5-氟尿嘧啶能显著性影响小鼠的脾脏和肾脏发育（各组小鼠的脾脏照片见图13）。该化合物对小鼠体重和脏器的发育影响显著性低于抗癌药物5-氟尿嘧啶。
5、4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸对肿瘤细胞凋亡和细胞周期的影响：
实验方法：肝癌细胞QGY-7703经式（1）化合物处理48h后，采用流式细胞仪(FACS)检测细胞周期和细胞凋亡情况。结果见图14和图15。
结果：式（1）化合物能显著性促进癌细胞的凋亡和坏死，药物处理组在剂量为100μM、150μM和200μM时，细胞凋亡和坏死形成的DNA碎片峰(P2)分别为13.5%、24.7%和32.7%，有明显的剂量-效应关系，显著性高于对照组的6.8%，并且该化合物显著性推后癌细胞的G0/G1和G2/M峰值和细胞周期分布比例，明显影响癌细胞的分化和周期。
6、4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸对细胞凋亡标志蛋白Cleaved Caspase-3和Cleaved PARP水平、及肿瘤抑制基因PTEN表达的影响：
实验方法：肝癌细胞QGY-7703、结肠癌细胞HCT-116、乳腺癌细胞MCF-7、肺癌细胞A-549经式（1）化合物处理24小时后，收集细胞、裂解、调整蛋白浓度，采用Western Blot技术测定。结果见图16、图17、图18、图19（SP表示阳性对照物Staurosporine,SP1为50nM,SP2为100nM）。
结果：4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸能显著性促进肝癌细胞QGY-7703、结肠癌细胞HCT-116中细胞凋亡标志引物Cleaved PARP的形成，对乳腺癌细胞MCF-7、肺癌细胞A-549中Cleaved PARP的形成无作用。该化合物也不影响癌细胞的Cleaved Caspase-3水平和PTEN的表达。
7、4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸与其它抗癌药物的联合抗肿瘤作用：
在体外抗癌试验中，化合物4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸与抗癌药物5-氟尿嘧啶、紫杉醇和顺铂具有显著性体外联合抗肿瘤作用。结果见表5、表6、和图20、图21。
试验方法：体外抗癌试验中，设置阴性对照组、一个剂量的阳性抗癌药物组、3个剂量的D6B2组和三个剂量的D6B2加阳性抗癌药物组，在加药后72小时收集细胞计数，计算抑制率和进行统计分析。
表5.D6B2联合5-Fu对人肺癌A-549细胞的体外抑制作用（n=3，x±s）
与对照组比较,*P＜0.05，**P＜0.01；与5-FU比较,△P＜0.05，△△P＜0.01.
表6D6B2联合顺铂（DDP）对肺癌A-549细胞的抑制作用（n=3，）
与对照组比较,*P＜0.05，**P＜0.01；与DDP比较,△P＜0.05，△△P＜0.01.
紫杉醇在1nM浓度时，体外对MCF-7的抑制率为28.85%，D6B2在浓度为100μM时对MCF-7的抑制率为15.38%，二者联合作用时对MCF-7的抑制率为52.16%，4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸与紫杉醇在体外对人乳腺癌细胞MCF-7具有显著性联合协同体外抗癌作用。
在体内抗癌试验中，4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸与环磷酰胺在体内具有联合抑制小鼠肝癌H-22。环磷酰胺在40mg/kg时，对小鼠肝癌H-22的抑制率为75.83%，D6B2在40mg/kg时对H-22的抑制率为38.99%，二者联合使用时，联合组小鼠未见有肿瘤生长。
实施例3：
式（1）化合物4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸与碳酸氢钠在加热条件下进行中和反应，然后以纯碱溶液调PH值至7.0-7.5，加热、蒸发、结晶即形成式（1）化合物的钠盐Sodium4-ethoxy-2-hydroxy-6-methylbenzoate，能溶于水。式（1）化合物也能与其它碱性离子或基团形成盐类。
实施例4：
式（1）化合物4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸，以少量DMSO溶解，按常规加注射用水，精滤，灌封灭菌制成注射液。
实施例5：
式（1）化合物的钠盐Sodium4-ethoxy-2-hydroxy-6-methylbenzoate，按常规加注射用水溶解，精滤，灌封灭菌制成注射液。
实施例6：
式（1）化合物4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸或其盐类，以少量乙醇、甲醇或蒸馏水溶解后，用无菌抽滤漏斗过滤，再无菌精滤，分装于安瓿中，低温冷冻干燥后无菌熔封得粉针剂。
实施例7：
式（1）化合物4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸或其盐类，按制剂需要的比例加入赋形剂，制成粉剂。
实施例8：
式（1）化合物4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸或其盐类，按制剂需要的比例加入赋形剂，制粒压片制成片剂。
实施例9：
式（1）化合物4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸或其盐类，按常规口服液制法制成口服液。
实施例10：
式（1）化合物4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸或其盐类，按制剂需要的比例加入赋形剂，制成胶囊、或颗粒剂、或冲剂。
实施例11：
式（1）化合物4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸或其盐类，按产品需要的比例加入食品或其它载体，制成保健品或其它功能性用品。
实施例12:
式（1）化合物4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸或其盐类，按治疗需要，与其它抗肿瘤药物按比例混合，制成各种制剂，形成联合抗肿瘤药物组合物。
以上所述实施例仅部分表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (4)

1.一种联合抗肿瘤的药物组合物，其特征在于，其活性成分包括具有式(1)结构的4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸或其药学上可接受的盐，和5-氟尿嘧啶、紫杉醇、顺铂或环磷酰胺中的至少一种，
2.具有式(1)结构的4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸或其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤药物中的应用，
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述肿瘤为以下人类肿瘤中的任一种：人乳腺癌、***癌、肺癌、胃癌、***、结肠癌、肝癌、卵巢癌、白血病、神经瘤、肉瘤。
4.具有式(1)结构的4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸或其药学上可接受的盐在制备辅助抗肿瘤保健品中的应用，
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