CN104586873B

CN104586873B - 木蝴蝶苷a在制备治疗癌症药物中的应用

Info

Publication number: CN104586873B
Application number: CN201510042359.XA
Authority: CN
Inventors: 周泉生; 曹志飞
Original assignee: Suzhou University
Current assignee: Suzhou University
Priority date: 2015-01-28
Filing date: 2015-01-28
Publication date: 2017-08-25
Anticipated expiration: 2035-01-28
Also published as: CN104586873A

Abstract

本发明涉及中药技术领域，特别涉及木蝴蝶苷A在制备治疗癌症药物中的应用。本发明研究结果表明木蝴蝶苷A有抑制肿瘤血管生成的作用，能够明显抑制肿瘤细胞的增殖和生长，诱导肿瘤细胞呈衰老样死亡、周期阻滞和细胞凋亡，抑制肿瘤细胞粘附、迁移、侵袭和血管生成；木蝴蝶苷A对荷瘤小鼠肿瘤的生长具有很好的抑制作用。

Description

木蝴蝶苷A在制备治疗癌症药物中的应用

技术领域

本发明涉及中药技术领域，特别涉及木蝴蝶苷A在制备治疗癌症药物中的应用。

背景技术

肿瘤(Tumor)是机体在各种致癌因素作用下，局部组织的某一个细胞在基因水平上失去对其生长的正常调控，导致其克隆性异常增生而形成的异常病变。学界一般将肿瘤分为良性和恶性两大类。近几年恶性肿瘤的发病率也在逐年上升。国家***统计资料表明目前中国恶性肿瘤患者达到1.15‰～1.27‰，由于恶性肿瘤而死亡人数居全部死因的第二位。近半个世纪以来，恶性肿瘤的治疗虽然取得很大进展，但目前还缺乏理想的治疗药物，无法满足临床需要，恶性肿瘤仍被人们视为难治疾病。寻找安全有效的抗肿瘤药物，仍然是各国医药界关注的热点和难点。

肿瘤的生长、转移依靠新生血管提供营养和转移通道。抑制肿瘤血管生成，与阻断肿瘤的发生、发展、浸润和转移密切相关。近年来，人们对肿瘤血管生成机制的研究不断深入，许多抗肿瘤血管生成的药物已在临床上推广应用。这类药物不但可以用于大多数实体肿瘤的治疗，还可以用于肿瘤的预防和血液***恶性肿瘤的治疗，同时对其他与血管生成有关的疾病如糖尿病视网膜病变、风湿性关节炎、银屑病、血管瘤、动脉粥样硬化等的预防与治疗，都具有一定的理论和现实意义。但是，到目前还没有治疗效果比较好的药物和方法产生，很多方法和药物副作用大，且愈后易复发等问题还有待解决，亟需寻找新的抗肿瘤药物和方法。

近年来，中药抗肿瘤研究逐渐引起人们的关注，而且由于很多中药组分属于天然提取药物，具有副作用小等优点，如将对其抗肿瘤机制做深入研究，很多都有可能成为临床抗肿瘤的候选药物。

中药木蝴蝶又名千层纸、玉蝴蝶等，作为一常用中药始载于《滇南本草》，具有几百年的药用历史，《中国药典》2005年版将其收录其中，现代医学研究表明，木蝴蝶具有镇痛、抗炎、抗菌、抗氧化、抑制病毒及肿瘤生长等多种药理作用。种子提取物中含有苯甲酸(benzoic acid)，白杨素(chrysin)，木蝴蝶苷(oroxin)A、B，黄芩甙元(baicalein)，特土甙(tetuin)，5-羟基-6，7二甲氧基黄酮(5-hydroxy-6，7-dimethoxyflavone)，木蝴蝶素(oroxylin)A，5，6-二羟基-7-甲氧基黄酮(5，6-dihydroxy-7-methoxyflavone)等多种中药组分，其中木蝴蝶苷A(OA)是黄酮类化合物，是木蝴蝶的专属性成分，可作为木蝴蝶药材质量控制的重要指标。下面是两种中药单体的结构式：

现有资料中未见关于木蝴蝶苷A在制备抗肿瘤药物中的报道。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了木蝴蝶苷A在制备治疗癌症药物中的应用。本发明研究结果表明木蝴蝶苷A有抑制肿瘤血管生成的作用，能够明显抑制肿瘤细胞的增殖和生长，诱导肿瘤细胞呈衰老样死亡、周期阻滞和细胞凋亡，抑制肿瘤细胞粘附、迁移、侵袭和血管生成；木蝴蝶苷A对荷瘤小鼠肿瘤的生长具有很好的抑制作用。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了木蝴蝶苷A在制备治疗癌症药物中的应用。

本发明采用木蝴蝶苷A进行了抑制肿瘤生长和血管生成的体外和体内试验。体外试验包括细胞增殖实验、Giemsa染色实验、细胞周期实验、细胞凋亡实验、细胞粘附实验、细胞迁移实验、细胞侵袭实验、血管生成实验，体内试验采用肿瘤细胞移植瘤实验。结果表明木蝴蝶苷A有抑制肿瘤血管生成的作用，能够明显抑制肿瘤细胞的增殖和生长，诱导肿瘤细胞呈衰老样死亡、周期阻滞和细胞凋亡，抑制肿瘤细胞粘附、迁移、侵袭和血管生成。

在本发明提供的一些实施例中，木蝴蝶苷A抑制肿瘤血管生成。

在本发明提供的一些实施例中，木蝴蝶苷A抑制肿瘤细胞的增殖和生长。

在本发明提供的一些实施例中，木蝴蝶苷A诱导肿瘤细胞衰老样死亡、周期阻滞和细胞凋亡。

在本发明提供的一些实施例中，木蝴蝶苷A抑制肿瘤细胞粘附、迁移、侵袭。

在本发明提供的一些实施例中，癌症为乳腺癌、淋巴瘤、白血病、T淋巴细胞瘤、肿瘤干细胞、骨肉瘤、黑色素瘤、脑胶质瘤、肺癌、胃癌、肝癌、结肠癌、肾癌、骨髓瘤、卵巢癌或***。

本发明还提供了一种治疗癌症的药物，包括木蝴蝶苷A和药学上可接受的载体。

在本发明提供的一些实施例中，木蝴蝶苷A在药物中的质量百分含量为0.1％～99.5％。

作为优选，木蝴蝶苷A在药物中的质量百分含量为0.5％～95％。

有效成分木蝴蝶苷A制备治疗癌症的药物用常规药用制剂的形式来使用。所述的常规药用制剂含作为活性成分的木蝴蝶苷A该活性成分在制剂与药学上可接受的载体如适宜于胃肠内给药的有机或无机的固体或液体赋形剂混合。在本发明提供的一些实施例中，药物的剂型为片剂、颗粒剂、胶囊剂、悬浮剂、糖浆剂、乳剂。但本发明并不局限于此，本领域技术人员认可的剂型均在本发明的保护范围之内。

在本发明提供的另一些实施例中，药物的剂型为注射剂。

作为优选，药物的口服剂量不大于70mg/天。

本发明的活性成分木蝴蝶苷A制成各种剂型的口服药物，成人口服，常用剂量一次25mg，1日3次，最大剂量的木蝴蝶苷A含量应为每天75mg，饭后服用，儿童用药酌情减量。

在本发明提供的一些实施例中，***的药物中药学上可接受的载体为药物制剂辅助物质、稳定剂、润湿剂、增溶剂和/或其它常用的添加剂，如乳糖、滑石粉、纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、淀粉、果胶、吐温-80、聚乙烯醇等。但本发明并不局限于此，本领域技术人员认可的药学上可接受的载体均在本发明的保护范围之内。

本发明提供了木蝴蝶苷A在制备治疗癌症药物中的应用。本发明采用木蝴蝶苷A进行了抑制肿瘤生长和血管生成的体外和体内试验。体外试验包括细胞增殖实验、Giemsa染色实验、细胞周期实验、细胞凋亡实验、细胞粘附实验、细胞迁移实验、细胞侵袭实验、血管生成实验，体内试验采用肿瘤细胞移植瘤实验。结果表明木蝴蝶苷A有抑制肿瘤血管生成的作用，能够明显抑制肿瘤细胞的增殖和生长，诱导肿瘤细胞呈衰老样死亡、周期阻滞和细胞凋亡，抑制肿瘤细胞粘附、迁移、侵袭和血管生成。本发明进一步考察了木蝴蝶苷A对MCF-7荷瘤小鼠的疗效，结果显示木蝴蝶苷A对荷瘤小鼠肿瘤的生长具有很好的抑制作用。

附图说明

图1示本发明实施例1木蝴蝶苷A对人肿瘤细胞MCF-7细胞增殖的影响；

图2示本发明实施例2木蝴蝶苷A对人乳腺癌细胞形态的影响(400×)；

图3示本发明实施例7木蝴蝶苷A对体外肿瘤细胞MCF-7血管生成作用结果(40×)；

图4示本发明实施例8木蝴蝶苷A对荷瘤小鼠体重的影响结果；

图5示本发明实施例8木蝴蝶苷A对荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用结果。

具体实施方式

本发明公开了木蝴蝶苷A在制备治疗癌症药物中的应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。

本发明提供的木蝴蝶苷A在制备治疗癌症药物中的应用中所用原料药或辅料均可由市场购得。

下面结合实施例，进一步阐述本发明：

实施例1木蝴蝶苷A抑制多种恶性肿瘤细胞增殖的体外实验

(一)实验材料

(1)肿瘤细胞株(34株)：人乳腺癌细胞MCF-7、人肝癌细胞系BEL-7402、QGY-7703、HCC-8910、小鼠前肿瘤干细胞3B5C、PMKO-102-3#、p3B11、2C4G2、PMKO-891-5#、人慢性髓原白血病细胞K562、人胶质瘤细胞SHG44、人原髓细胞白血病细胞HL-60、人***细胞Hela、人骨肉瘤细胞MG-63、U-2OS、人胃癌细胞N87、人胶质瘤细胞A172、人骨髓瘤细胞系LP-1、人黑色素瘤高转移细胞株A375、人单核细胞白血病细胞THP-1、人肾上腺神经母细胞瘤细胞(脑转移)KP-N-NS、人结肠癌细胞系SW480、人Burkitt′s淋巴瘤细胞Raji、NAMALWA、人成巨核细胞白血病细胞Dami、人回盲肠癌细胞CCL-244、小鼠肿瘤内皮细胞3B11、人***肠转移细胞Caski、人肺癌细胞系NCI-H292、人T淋巴细胞白血病细胞Jurkat、人恶性胚胎横纹肌瘤细胞RD、人乳腺浸润性导管癌旁皮肤细胞CCD-1095SK、人肾透明细胞癌皮肤转移细胞Caki-1、人盲肠腺癌细胞Hce-8693均来自本所实验室细胞库。

细胞培养基RPMI 1640和DMEM(高糖)为Hyclone公司产品。Alamarblue试剂为INVITROGEN公司产品。

(2)受试药物：木蝴蝶苷A(从商业公司购买)用二甲基亚砜(DMSO)助溶，用培养基稀释成所需浓度。

(二)实验方法

细胞培养：细胞用含体积分数10％小牛血清及1％双抗(抗青霉素和抗链霉素)的RPMI1640或DMEM(高糖)培养液常规培养。每48-72h用0.25％胰酶消化，1:2～1:4扩瓶传代。

(1)贴壁细胞

用0.25％胰酶消化贴壁细胞，离心后计数，以合适的浓度接种于96孔板，37℃、5％CO₂培养箱中培养24h，分别加入不同浓度的木蝴蝶苷A，另外以单纯的培养液和未经药物作用的细胞作为空白对照和阴性对照，每组设3个复孔，培养46h后，加入AlamarBlue试剂10ul/孔，继续培养2h，用微孔检测仪进行测定荧光下OD560nm/OD590nm，按以下公式计算平均抑制率：

细胞抑制率(％)＝1-(加药孔RFU-空白对照RFU)/(对照组RFU-空白对照RFU)×100％。

(2)悬浮细胞

吸取悬浮细胞悬液，离心计数，以合适的浓度与不同浓度的木蝴蝶苷A混合后，接种于96孔板，分别以单纯的培养液和未经药物作用的细胞作为空白对照和阴性对照，每组设3个复孔，37℃、5％CO₂培养箱中培养46h后，加入AlamarBlue试剂10ul/孔，继续培养2h，用微孔检测仪进行测定荧光下OD560nm/OD590nm，按上述公式计算平均抑制率。

(三)实验结果

表1 木蝴蝶苷A对34种肿瘤细胞增殖的影响

编号	细胞株	细胞株来源	IC₅₀
				1	MCF-7	人乳腺癌细胞	27.3
2	BEL-7402	人肝癌细胞系	40.6
				3	QGY-7703	人肝癌细胞系	45.8
4	3B5C	小鼠前肿瘤干细胞	79.3
				5	K562	人慢性髓原白血病细胞	80.3
6	SHG44	人胶质瘤细胞	84.0
				7	PMKO-102-3#	小鼠前肿瘤干细胞	86.7
8	HL-60	人原髓细胞白血病细胞	87.5
				9	Hela	人***细胞	89.3
10	p3B11	小鼠前肿瘤干细胞	92.7
				11	MG-63	人骨肉瘤细胞	103.3
12	PMKO-891-5#	小鼠前肿瘤干细胞	103.5
				13	N87	人胃癌细胞	108.0
14	2C4G2	小鼠前肿瘤干细胞	111.0
				15	A172	人胶质瘤细胞	120.5

16	LP-1	人骨髓瘤细胞系	121.7
				17	A375	人黑色素瘤高转移细胞株	122.7
18	THP-1	人单核细胞白血病细胞	123.0
				19	KP-N-NS	人肾上腺神经母细胞瘤细胞(脑转移)	124.3
20	SW480	人结肠癌细胞系	124.5
				21	Raji	人Burkitt′s淋巴瘤细胞	127.5
22	Dami	人成巨核细胞白血病细胞	127.7
				23	CCL-244	人回盲肠癌细胞	129.3
24	3B11	小鼠肿瘤内皮细胞	130.5
				25	Caski	人***肠转移细胞	131.0
26	NCI-H292	人肺癌细胞系	135.0
				27	U-2OS	人骨肉瘤细胞	151.5
28	NAMALWA	人Burkitt′s淋巴瘤细胞	165.5
				29	Jurkat	人T淋巴细胞白血病细胞	165.5
30	RD	人恶性胚胎横纹肌瘤细胞	171.5
				31	HCC-8910	人肝癌细胞	196.5
32	CCD-1095SK	人乳腺浸润性导管癌旁皮肤细胞	200.5
				33	Caki-1	人肾透明细胞癌皮肤转移细胞	207.5
34	Hce-8693	人盲肠腺癌细胞	231.5

结果表明(表1)：木蝴蝶苷A对乳腺癌、淋巴瘤、白血病、T淋巴细胞瘤、肿瘤干细胞、骨肉瘤、黑色素瘤、脑胶质瘤、肺癌、胃癌、肝癌、结肠癌、肾癌、骨髓瘤、卵巢癌、***等34种肿瘤细胞的增殖具有明显的抑制作用，且随着药物浓度的增加，对肿瘤细胞增殖抑制作用相应地增强，其半数抑制浓度分布在27.3～231.5μM范围内，其中木蝴蝶苷A对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的抑制效果最强，见表1所示。

实施例2木蝴蝶苷A抑制乳腺癌细胞增殖的体外实验

(一)实验材料

(1)肿瘤细胞株：人乳腺癌细胞MCF-7为本实验室冻存。细胞培养基DMEM(高糖)为Hyclone公司产品。

(2)受试药物：木蝴蝶苷A(从商业公司购买)用二甲基亚砜(DMSO)助溶，用DMEM(高糖)培养基稀释成所需浓度。

(二)实验方法

Alamarblue法：取对数生长期的人乳腺癌细胞MCF-7，调整细胞浓度为3×10⁴/ml，以100μl/孔接种于96孔细胞培养板，CO₂培养箱继续培养24h，待贴壁后，吸走上清，每孔分别加入不同浓度的木蝴蝶苷A，浓度设置有0μM、20μM、40μM、60μM、80μM、100μM。当药物作用46小时后，以10μL/孔加Alarma Blue染液至各孔内，轻拍混匀，于37℃继续孵育2小时后待检测。将孔板置于多功能酶标仪中进行检测，并于560/590nm测取各孔的荧光单位值。根据测取的荧光单位值绘制药物作用48h对人乳腺癌细胞MCF-7抑制率曲线。

按照上述方法绘制药物作用24h(药物作用22h，加入染液后孵育2h)、72h(药物作用70h，加入染液后孵育2h)对人乳腺癌细胞MCF-7抑制率曲线。结果如图1所示。

(三)实验结果

Alamarblue结果显示(图1)，木蝴蝶苷A对人肿瘤细胞MCF-7表现出较好的增殖抑制作用，且随着药物浓度的提高，对肿瘤细胞增殖抑制作用相应地增强。

实施例3木蝴蝶苷A诱导肿瘤细胞形态学变化的体外实验

(一)实验材料

(二)实验方法

瑞-姬氏染色测法定：取对数生长期的人乳腺癌细胞，调整细胞浓度为10⁴/孔，接种于24孔培养板内。24h后分别加入含不同浓度OA的完全培养基，对照组加入含0.1％DMSO的培养基。48h和72h后去除培养基，依次加入瑞-姬氏染液A 50μL/孔，静置1min，再加入100μL/孔染液B，混匀后作用5min，吸弃染液，PBS洗2次，OLYMPUS FSX-100拍照。结果如图2所示。

(三)实验结果

瑞-姬氏染色结果显示(图2)，木蝴蝶苷A对人乳腺癌细胞表现出较好的增殖抑制作用，且随着药物浓度的提高，对肿瘤细胞增殖抑制作用相应地增强。此外，木蝴蝶苷A给药后乳腺癌细胞体积变大、细胞间连接松散、出现多核细胞等细胞形态学变化，提示木蝴蝶苷A能够诱导人乳腺癌细胞进入衰老。

实施例4木蝴蝶苷A对体外肿瘤细胞细胞周期的影响

(一)实验材料

(二)实验方法

将不同浓度的木蝴蝶苷A处理人乳腺癌细胞MCF-7 48h后，收集细胞，PBS洗涤2次，加入体积分数为70％的乙醇，4℃固定过夜。离心洗涤后，加入5μL RNase，37℃温育30min后，再加入10mg/mL2.5μL PI染液混匀，置4℃避光30min后上流式细胞仪检测细胞周期分布，实验独立重复3次。

(三)实验结果

表2 木蝴蝶苷A对人肿瘤细胞细胞周期的作用

OA(μM)	G0/G1期	S期	G2/M期
				0	54.51％±1.76％	18.68％±0.88％	27.24％±1.35％

10	51.27％±1.91％	20.61％±1.65％	28.65％±0.31％
				20	49.33％±1.15％	20.63％±0.76％	30.57％±0.47％
25	46.32％±1.95％	22.67％±1.28％	31.53％±1.18％
				30	44.26％±3.34％	23.06％±1.55％	33.26％±2.34％
35	41.43％±4.82％	26.48％±2.37％	32.84％±2.73％

流式细胞仪检测结果显示：随着木蝴蝶苷A浓度的增高，肿瘤细胞周期G2/M期明显升高，G0/G1期明显下降(表2)。

实施例5木蝴蝶苷A对体外肿瘤细胞凋亡的影响

(一)实验材料

(二)实验方法

将不同浓度的木蝴蝶苷A处理人乳腺癌细胞MCF-748h后，收集细胞包括其上清液，1000rpm离心5min弃上清，用冰PBS重悬细胞，转移至1.5ml的EP管中，2000rpm离心5min，弃上清，加入300μL AnnexinⅤbinding buffer重悬细胞后，再分别加入4.5μL PI及3μLAnnexinⅤ后，置4℃避光10min后上流式细胞仪检测细胞凋亡，实验独立重复3次。

(三)实验结果

表3 木蝴蝶苷A对人肿瘤细胞细胞凋亡的作用

OA(μM)	早期凋亡	晚期凋亡
			0	1.77％±0.21％	2.06％±0.24％
10	1.89％±0.24％	1.65％±0.19％
			20	1.63％±0.42％	1.85％±0.57％
25	1.65％±0.23％	2.23％±0.69％
			30	3.72％±1.19％	3.11％±0.38％

35	11.17％±1.51％	6.46％±0.86％
			40	17.25％±8.13％	7.67％±0.18％
45	39.26％±0.79％	9.51％±1.27％
			50	74.17％±4.12％	9.00％±1.65％

流式细胞仪检测结果显示：随着木蝴蝶苷A浓度的增高，肿瘤细胞凋亡的比例明显升高，且早期凋亡率显著大于晚期凋亡率(表3)。

实施例6木蝴蝶苷A对体外肿瘤细胞粘附的影响

(一)实验材料

(二)实验方法

将不同浓度木蝴蝶苷A处理人肿瘤细胞24h，用无血清培养基重悬后用台盼蓝计数活细胞，调整细胞密度接种于0.1％明胶包被的96孔板中。待细胞贴壁后吸弃培养基，PBS洗三次，加入新鲜培养基，以10μL/孔加入Alamarblue试剂。2h后用酶标仪测OD560/590值，计算细胞粘附率。实验独立重复3次。

(三)实验结果

表4 木蝴蝶苷A对人肿瘤细胞粘附的作用

OA(μM)	细胞粘附比例
		0	100.00％±2.06％
10	51.66％±1.30％
		20	45.24％±1.68％
30	40.76％±2.48％
		35	28.04％±1.50％

通过设定不同的药物浓度，在细胞培养1-2h后可以发现10μM OA能明显抑制细胞粘附，当浓度达到35μM时细胞粘附率约为28％。结果表明低浓度的木蝴蝶苷A对人肿瘤细胞具有明显的粘附抑制作用(表4)。

实施例7木蝴蝶苷A对体外肿瘤细胞侵袭的影响

(一)实验材料

(二)实验方法

将处于对数生长期的人乳腺癌细胞MCF-7细胞以合适密度接种于T25培养瓶中，24h后进行不同浓度OA给药，作用24h后吸弃培养基，用PBS洗两次后无血清培养基重悬并计数，以5×10⁵/mL200μL加入事先铺有Matrigel的上室，下室加入500μL 10％FBS的DMEM培养基，放入37℃、5％CO₂培养箱培养24h，取下小室膜，进行固定瑞姬氏染色，拍照，实验独立重复3次。

(三)实验结果

表5 木蝴蝶苷A对人肿瘤细胞侵袭的作用

OA(μM)	细胞侵袭比例
		0	100.00％±7.70％
20	60.00％±5.74％
		30	44.44％±8.11％

通过比较对照组和给药组细胞穿膜数量来判断侵袭能力，与对照组相比，木蝴蝶苷A能明显抑制肿瘤细胞的侵袭并具有浓度依赖性(表5)。

实施例8木蝴蝶苷A对体外肿瘤细胞血管生成的影响

(一)实验材料

(二)实验方法

实验前一天将Matrigel置于冰上过夜，实验时取融化的Matrigel，加入到48孔板中，37℃孵育0.5h。将事先给予木蝴蝶苷A作用24h的肿瘤细胞接种在Matrigel上，于37℃、5％CO₂培养箱培养4小时后染色拍照。

(三)实验结果

实验结果如图3所示。实验结果显示，当木蝴蝶苷A浓度分别为0、5、10、20μM时，MCF-7细胞形成完整管腔的能力逐渐减弱，当浓度为20μM时，类血管结构大部分被打断。与空白组比较木蝴蝶苷A能使MCF-7细胞管腔形成数及管腔长度明显减少，结果表明木蝴蝶苷A可以抑制MCF-7细胞体外类血管结构的形成(图3)。

实施例9木蝴蝶苷A对MCF-7荷瘤小鼠的疗效

(一)实验材料

(1)实验动物：

品系：BALB/c裸鼠，雌性；

来源：苏州大学医学院实验动物中心；

合格证：实验动物生产许可证号：XCYK(苏)2002-0008，实验动物使用许可证号：SYXK(苏)2002-0037；

体重：18-22g；

每组动物数：3只。

(2)肿瘤细胞株：肿瘤细胞株MCF-7为本所实验室冻存。

(3)受试药物：木蝴蝶苷A用生理盐水稀释成所需浓度。

(二)实验方法

BALB/c雌性裸鼠6只，体重18-22g。随机分为二组，每组3只：模型组和木蝴蝶苷A组。将准备好的MCF-7肿瘤细胞悬液以5×10⁶/只接种于模型组和木蝴蝶苷A组小鼠背部皮下。在接种肿瘤细胞的当天开始腹腔注射给药，木蝴蝶苷A组每天给药10mg/kg/d，模型组给药等体积的生理盐水，每天一次。第36天脱臼法处死小鼠，取出肿瘤拍照。

统计学分析：采用SPSS11.5统计软件进行统计学分析。每组实验重复3次，组间比较采用独立样本t检验。

(三)实验结果

荷瘤小鼠经给药36天后，与模型组相比，经木蝴蝶苷A干预后的荷瘤小鼠体重没有明显变化(图4)，但肿瘤生长和肿瘤体积明显降低(图5)，提示木蝴蝶苷A对荷瘤小鼠肿瘤的生长具有很好的抑制作用。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims

1.木蝴蝶苷A在制备治疗癌症药物中的应用，所述治疗癌症药物的有效活性成分为木蝴蝶苷A，所述癌症为乳腺癌或肝癌。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述木蝴蝶苷A抑制肿瘤血管生成。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述木蝴蝶苷A抑制肿瘤细胞的增殖和生长。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述木蝴蝶苷A诱导肿瘤细胞衰老样死亡、周期阻滞和细胞凋亡。

5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述木蝴蝶苷A抑制肿瘤细胞粘附、迁移、侵袭。

6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述治疗癌症药物由木蝴蝶苷A和药学上可接受的载体组成。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述木蝴蝶苷A在药物中的质量百分含量为0.1％～99.5％。

8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述药物的剂型为片剂、颗粒剂、胶囊剂、悬浮剂、糖浆剂、乳剂或注射剂。

9.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述药物的口服剂量不大于70mg/天。