CN103249732A - 抑制2-乙基氨甲酰氨基-1,3-苯并噻唑-5-基的细菌拓扑异构酶ii - Google Patents
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Abstract
本发明提供了下式化合物及其盐：
Description
技术领域
本发明涉及新种类化合物、其作为抗菌剂的应用、包含其的化合物和其生产工艺。
背景技术
II型拓扑异构酶通过转运一个DNA片段经过另一个来催化DNA拓扑异构体的互换。细菌编码两种II型拓扑异构酶、DNA促旋酶和DNA拓扑异构酶IV。促旋酶控制DNA的超螺旋并且缓解拓扑压力。在复制后，拓扑异构酶IV使子染色体解开连接，并且也能放松超螺旋DNA。
细菌II型拓扑异构酶形成由两个亚基组成的异源四聚体复合物。促旋酶形成由GyrA和GyrB组成的A2B2复合物，而拓扑异构酶形成由ParC和ParE组成的C2E2复合物。相反，真核II型拓扑异构酶是同源二聚体。理想地，基于抑制细菌II型拓扑异构酶的抗生素对于细菌酶有选择性，而针对真核II型拓扑异构酶相对无活性。
所述II型拓扑异构酶是高度保守的酶，能设计广谱抑制剂。另外，所述GyrB和ParE亚基功能上相似，在N末端结构域和C末端结构域有与其他亚基(分别是GyrA和ParC)和所述DNA相互作用的ATP酶结构域。所述促旋酶和拓扑异构酶IV活性位点之间的保守性提示了位点抑制剂可同时靶定两种II型拓扑异构酶。这种双重靶向抑制剂有吸引力，因为其具有降低基于靶标抗性发展的潜能。
II型拓扑异构酶是大量抗细菌剂的靶标。这些试剂中最显著的是喹诺酮。最初喹诺酮抗生素包含萘啶酸、西诺沙星和恶喹酸。加入氟产生新药物种类－氟喹诺酮，其有更广的抗菌谱和改善的药代动力学属性。所述氟喹诺酮包含诺氟沙星、环丙沙星、和***喹喏酮加替沙星和莫西沙星。香豆素和cyclothialidine是抑制II型拓扑异构酶的其他抗生素种类，然而由于其在细菌中的较差渗透性、真核毒性和低水溶性，其没有广泛使用。这种抗生素的示例包含新生霉素和香豆霉素A1、cyclothialidine、cinodine和克来罗西汀。然而，抗生素抗性的连续出现要求持续开发新种类的抗生素，并且需要抑制细菌拓扑异构酶的替代化合物。
WO2007/148093和WO2009/074812描述了抑制细菌促旋酶活性的化合物。本申请人现在鉴定了一类相关化合物，包括含有α取代的羧酸盐/酯或酰胺的碳环或杂环。这类化合物似乎拥有很多优势，包含在生理上可接受pH下增强的溶解度，特定是静脉内(IV)给药的有利溶解度，和/或有利的药代动力学特性。
发明内容
根据第一方面，提供了下面通式的化合物或其盐：
其中：
R1选自H、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、S(O)2OH、S(O)2-C1-6烷基、和M，其中M表示单价或双价阳离子；
R2与-C(=O)-X-R1部分连接到相同的环B原子上，并且R2选自C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、(C1-6烷基)tC3-7环烷基、(C1-6烷基)t芳基、(C1-6烷基)t杂环基、(C1-6烷基)t杂芳基、NH2、NH(C1-6烷基)、N(C1-6烷基)2、CN、OH、C1-6烷氧基、SO2H、SO2C1-6烷基、SH、SC1-6烷基、卤素、卤代C1-6烷基、-NH(C=O)OC1-6烷基、-NH(C=O)OC(C1-3烷基)3，并且其中各情况中的C1-3烷基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-7环烷基、芳基和杂环基还可特定用一种或多种选自下面的取代基可选取代：NH2、NH(C1-6烷基)、N(C1-6烷基)2、CN、OH、C1-6烷氧基、SO2H、SO2C1-6烷基、SH、SC1-6烷基和卤素，或者R2是3-4个碳原子构成或3-4个碳和杂原子构成的链并与临近的B环原子结合以形成可选取代的稠合碳环或杂环。
环“A”可选取代，并且选自饱和或不饱和单环C3-7环烷基、饱和或不饱和单环3-7元杂环、饱和或不饱和稠合双环C8-10环烷基、饱和或不饱和稠合双环8-10元杂环基、C6-10芳基和5-10元杂芳基；
环“B”可选取代，并且选自饱和或不饱和单环C3-7环烷基、饱和或不饱和单环3-7元杂环、饱和或不饱和稠合双环C8-10环烷基、饱和或不饱和稠合双环8-12元杂环基、C6-10芳基、5-10元杂芳基、和螺双环8-12元杂环***；
或者环“A”和环“B”可以结合在一起以形成饱和或不饱和稠合双环C8-10环烷基、饱和或不饱和稠合双环8-10元杂环基和螺双环8-12元杂环***；
各Z独立选自C-H、C-C1-3烷基、C-OH、C-OC1-3烷基、C-卤代、C-卤代C1-3烷基、C-CN、N或C-(X2)nR3，其中R3是H、卤素、OH、CN、C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6烯基、饱和或不饱和单环C3-7环烷基、饱和或不饱和单环3-7元杂环、饱和或不饱和稠合双环C8-10环烷基、饱和或不饱和稠合双环8-10元杂环基、C6-10芳基和5-10元杂芳基，其中各R3可选被取代；前提是一个Z是用环“A”取代的C；
X是O、NH或N(C1-6烷基)；
m、n和t各独立是整数0或1；
当m是0时，X1是共价键、螺环中心、或稠合环键，或者，当m是1时，选自可选取代C1-3亚烷基、可选取代C2-3亚烯基和可选取代C2-3亚炔基，并且其中C1-3亚烷基中的各碳原子可选用氧或氮杂原子或C(=O)取代；
当n是0时，X2是共价键，或者当n是1时，选自可选取代C1-4亚烷基、可选取代C2-3亚烯基和可选取代C2-3亚炔基，其中C1-3亚烷基和C2-3亚烯基中的各碳原子可选用氧或氮杂原子(其中氮原子可以用H或C1-3烷基取代)或C(=O)取代；
Y1和Y2各自独立选自C、N、O或S；
Y3选自C或N；
------指示双键或单键（视情况而定）；和
Alk是C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烷基。
在一个实施方式中，所述化合物是式I或其盐
式I
其中：
Z1、Z2和Z3各独立选自C-H、C-C1-3烷基、C-OH、C-OC1-3烷基、C-卤代代、C-卤代C1-3烷基、C-CN、N或C-(X2)nR3，其中R3是H、卤素、OH、CN、C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6烯基、饱和或不饱和单环C3-7环烷基、饱和或不饱和单环3-7元杂环、饱和或不饱和稠合双环C8-10环烷基、饱和或不饱和稠合双环8-10元杂环基、C6-10芳基和5-10元杂芳基，其中各R3可选被取代；
并且其中R1、R2、环“A”、环“B”、X、Y1、Y2、Y3、m、------和Alk如前面通式所定义。
根据第二方面，提供了治疗抗细菌感染的方法，所述方法包含向遭受所述感染的对象给予式I化合物或其药学上可接受的盐。在优选实施方式中，给药是静脉内给药、口服给药或其组合。
根据第三方面，提供了式I化合物或其药学上可接受的盐在治疗抗细菌感染中的应用。
根据第四方面，提供了包含式I化合物或其药学上可接受盐的抗菌剂。
根据第五方面，提供了包含式I化合物或其盐的组合物。在一个实施方式中，所述组合物是药物组合物，以及所述盐是药学上可接受的盐。
根据第六方面，提供了式I化合物或其药学上可接受的盐在作为促旋酶抑制剂中的应用。
根据第七方面，提供了生产式I化合物的工艺，所述工艺包含将式IIa中间体与L-(X2)n-R3前体部分偶联的步骤；
式IIa
或者可选包含将式IIb中间体
式IIb
与通式前体部分偶联的步骤
以形成式I化合物；
其中R1、X、R2、(X1)m、环A、环B、Z1、Z2、Y1、Y2、Alk、(X2)n和R3如式I所定义，并且L是合适的反应基团。在一个实施方式中，所述工艺还包含形成其盐的步骤。
根据第八方面，提供了生产式I化合物的工艺，所述工艺包含将式IIIa前体与式IVa硼酸中间体偶联的步骤
式IIIa 式IVa
或者替代地包含将式IVb硼酸中间体与卤代-(X2)n-R3前体部分偶联的步骤
式IVb
以形成式I化合物；
其中R1、X、R2、(X1)m、环A、环B、Z1、Z2、Y1、Y2、Alk、(X2)n和R3如式I所定义，并且B(OR)2是硼酸(B(OH)2)或频那醇硼烷。在一个实施方式中，所述工艺还包含形成其盐的步骤。
根据第九方面，提供了处理基质（substrate）中细菌污染的方法，所述方法包含向这种污染位点应用足够量的式I化合物或其药学上可接受的盐以抑制细菌生长。
附图说明
在图1–8中，X轴表示时间(小时)，而Y轴表示血浆浓度(ng/mL)。
图1：显示了小鼠试验中两个α未取代的比较化合物A和B的IV和口服药代动力学概况。
图2：显示了大鼠试验中(A)化合物1和(B)化合物4的IV和口服药代动力学概况。
图3：显示了大鼠试验中(A)化合物29和(B)化合物98的IV和口服药代动力学概况。
图4：显示了大鼠试验中(A)化合物103和(B)化合物136的IV和口服药代动力学概况。
图5：显示了大鼠试验中(A)化合物141和(B)化合物143的IV和口服药代动力学概况。
图6：显示了大鼠试验中(A)化合物161的IV和口服药代动力学概况。
图7：显示了小鼠试验中(A)化合物4和(B)化合物88的IV和口服药代动力学概况。
图8：显示了小鼠试验中(A)化合物98和(B)化合物136的IV和口服药代动力学概况。
具体实施方式
本发明基于发现了显示一种或多种有利药学属性的新种类化合物。更特别地，这类化合物显示了靶标促旋酶活性。因此，在一个实施方式中，式I化合物用于调节促旋酶活性，更特别地作为促旋酶抑制剂。
这类化合物也显示了抗菌活性，更特别地是针对革兰氏阳性和/或革兰氏阴性菌株种类的抗菌活性，所述种类例如葡萄球菌、肠球菌、链球菌和血友病，例如金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、粪肠球菌（Enterococcus faecalis）、酿脓链球菌（Streptococcus pyogenes）和流感嗜血杆菌（Haemophilus influenzae）。本发明关注的化合物因此用于治疗细菌感染或污染，例如治疗革兰氏阳性感染和社区获得性肺炎等。因此，在一个实施方式中，式(I)化合物用于治疗由革兰氏阳性菌株引起的细菌感染。在另一个实施方式中，式(I)化合物用于治疗由革兰氏阴性菌株引起的细菌感染。
发展出抗菌耐药性在医院环境中特别常见。医院患者因此特别处于被耐药菌株感染的风险中。在医院环境中，IV给予抗菌剂经常是优选的或需要的给药形式。因此，抗菌剂的化合物可溶性在开发IV给药的抗菌剂中特别重要。已良好证明的所述抗菌剂和药代动力学(PK)概况的生物可用性在其他因素中也是重要的考虑因素，特别是促进给药的替换模式，例如IV转换到口服。显示相似的IV和口服PK概况的化合物因此是有利的，因为相同剂量活性成分能通过两个给药途径给予。这种类型的PK概况对IV/口服转换治疗是理想的，所述治疗能使患者从IV给药中获益以控制在前1-3天左右的细菌感染，然后口服给药完成治疗过程。
已经发现了式I化合物显示了高-极高的可溶性。当与没有α取代的羧化物或酰胺特性的化合物（更特别是α取代的羧酸）比较时,尤其如此。式(I)化合物显示了良好的生物可用性和有利的药代动力学概况。
本文所用的术语“卤代”或“卤素”指氟(氟代)、氯(氯代)、溴(溴代)或碘(碘代)。
本文单独使用或在化合物术语如NH(烷基)或N(烷基)2中使用的术语"烷基"，指有合适的1–3、1–6或1–10个碳原子的单价直链或分支烃基。例如，合适的烷基包括但不限于甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、2-、3-或4-甲基戊基、2-乙基丁基、正己基或2-、3-、4-或5-甲基戊基。
术语“卤代烷基”指有一个或多个卤代取代基的烷基。特别优选一个、两个或三个卤代取代基。例如，CF3是卤代烷基，CHF2也如此。
术语“烷氧基”包括C1-6烷氧基，指有氧原子的烷基，所述氧原子将烷基连接到化合物的其他部分或者沿着烃链定位。
术语“羧化物（carboxylate）”包含羧酸和羧酸酯，而术语“酯”指用例如C1-6烷基、芳基或烷芳基取代氢的羧酸基团。
本文使用的术语“烯基”包括C2-6烯基，指有一个或多个碳原子间双键的直链或分支烃基。合适的烯基包括但不限于：乙烯基、烯丙基、丙烯基、异丙烯基、丁烯基、戊烯基和己烯基。
本文使用的术语"炔基"包括C2-6炔基，指含有一个或多个三键的支链或分支烃基。合适的炔基包括但不限于：乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基和己炔基。
本文使用的术语"环烷基"、“碳环”和“碳环基”指环状烃基。合适的环烷基包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基和环己基。
本文使用的术语"芳基"指C6-C10芳族烃基，例如苯基或萘基。
术语"烷基芳基"包括例如苄基。
当单独使用或在化合物词语中使用时，术语"杂环"、“杂环的”和“杂环基（heterocyclyl）”包含单环、多环、稠合或偶联烃残基，其中一个或多个碳原子(和合适时连接其上的氢原子)由杂原子取代以提供非芳族残基。原子之间的键可以是饱和或不饱和的。合适的杂原子包含O、N和S。当两个或多个碳原子被取代时，这可通过两个或多个相同的杂原子或不同的杂原子。合适的杂环基示例可包含氮杂环丁烷、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、氮杂环庚烷、吗啉基、喹啉基、异喹啉基、硫代吗啉基、二噁烷基、2,2'-二甲基-[1,3]-二氧戊环基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、四氢吡咯基、环磺酰胺如磺内酰胺等。
术语"杂芳基"包括但不限于含有一个或多个选自O、N和S的杂原子的5-或6-元杂芳环。合适的杂芳基示例包含呋喃基、苯硫基、四唑基、1,2,3-***基、1,2,4-***基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、噁唑基、噁二唑基、噻唑基、噻二唑基等。杂芳环可以稠合到5-或6-元芳族或杂芳族环以形成9-或10-元双环芳族环***，例如苯并呋喃、吡咯并嘧啶（pyrollopyrimidine）、呋喃并吡啶（furopyridine）等。
除非另外说明，各烷基、烯基、炔基、烷氧基、环烷基、烷基芳基、芳基、杂环基或杂芳基可选用一种或多种以下基团取代：C1-C3烷基、C2-3烯基、C2-3炔基、C3-C6环烷基、C6芳基、杂环基、杂芳基、C1-C3烷基杂环基、C1-C3烷基杂芳基、C1-C3烷基OH、烷基芳基、OH、OC1-C3烷基、卤素、CN、NO2、CO2H、CO2C1-C3烷基、CONH2、CONH(C1-C3烷基)、C(O)N(C1-C3烷基)2、卤代C1-3烷基例如CF3和CHF2、卤代C1-3烷氧基如OCHCF2和OCF3、=O、C(O)C1-3烷基、C(O)卤代C1-3烷基、NH2、NH(C1-C3烷基)或N(C1-C3烷基)2。例如，可选取代的芳基可以是4-甲基苯基或4-羟基苯基，并且可选取代的烷基可以是2-羟乙基、三氟甲基或二氟甲基。各可选的烷基、环烷基、烷基芳基、芳基、杂环基或杂芳基取代基也可以是可选取代的。例如，含有氮杂原子的杂环基和杂芳基当可选用烷基如C1-3烷基取代时，所述烷基可以在任何可用的碳原子和/或氮环原子(如N-甲基)上。
可选取代基的示例也包含合适的氧和氮保护基团(见"Protective Groups in OrganicSynthesis（《有机合成中的保护基团》）"Theodora Greene和Peter Wuts，第三版，威利国际科学出版公司（Wiley Interscience）,1999)。
现在描述实施方式。
在一个实施方式中，所述化合物是式I或其盐
式I
其中：
R1、R2、环“A”、环“B”、X、X1、X2、Y1、Y2、Y3、m、n、t、------和Alk如前面通式所定义；和
Z1、Z2和Z3各独立选自C-H、C-C1-3烷基、C-OH、C-OC1-3烷基、C-卤代、C-卤代C1-3烷基、C-CN、N或C-(X2)nR3，其中R3是H、卤素、OH、CN、C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6烯基、饱和或不饱和单环C3-7环烷基、饱和或不饱和单环3-7元杂环、饱和或不饱和稠合双环C8-10环烷基、饱和或不饱和稠合双环8-10元杂环基、C6-10芳基和5-10元杂芳基，其中各R3可选被取代。
在一个实施方式中，M选自药学上可接受的阳离子例如钠、钾、锂、钙、镁、锌、铵、烷基铵如从三乙基胺形成的盐、烷氧基铵如从乙醇胺形成的那些和从乙二胺形成的盐、胆碱或氨基酸例如精氨酸、赖氨酸或组氨酸。
在一个实施方式中，R1是H或选自甲基、乙基、丙基和异丙基的C1-3烷基，优选H。
在另一个实施方式中，R2是C1-6烷基或C3-7环烷基，优选C1-3烷基或环丙基，更优选甲基、乙基、正丙基和异丙基，最优选甲基或乙基。
在一个实施方式中，X是O。在另一个实施方式中，X是NH。优选X是O。
在一个实施方式中，Y1和Y2各独立是N或S，优选一个是N和另一个是S，更优选Y1是N和Y2是S。
在另一个实施方式中，Y1和Y2各独立是N或O，优选一个是N和另一个是O，更优选Y1是N和Y2是O。
在另一个实施方式中，Y1和Y2各独立是N。
在另一个实施方式中，Y1是N和Y2是CH。
在一个实施方式中，Y3是C。在另一个实施方式中，Y3是N。优选Y3是C。
在另一个实施方式中，Alk是C1-6烷基，优选C1-3烷基，最优选乙基。
在另一个实施方式中，m是0和X1是共价键或稠合环键。在一个优选实施方式中，当m是0时，X1是共价键。
在其他实施方式中，当X1是共价键时，环“B”是可选取代的5-或6-元杂环或杂芳基，优选含有氮杂原子，在5-或6-元杂环基情况下，所述氮杂原子优选是与X1的连接点。
在另一个实施方式中，m是1和X1选自-C(O)NH-或-NHC(O)-、–NH-、-CH2NH-、-NHCH2-、–N(CH3)-、-CH2N(CH3)-、-N(CH3)CH2-、亚甲基、亚乙基、丙烯和C=O。优选X1选自亚甲基、NH、N(CH3)和C(=O)。当X1是–NH-或–N(CH3)-，最优选–NH-时，环“B”优选是可选取代的C3-7环烷基或可选取代的C6芳基，优选可选取代的环己基。
在一个实施方式中，Z1、Z2和Z3之一是C-(X2)nR3，优选Z2和/或Z3，最优选Z3。在其他实施方式中，C-(X2)nR3不是C-H。
在一个实施方式中，n是0和X2是共价键。
在另一个实施方式中，n是1，和X2选自O，C(=O)，C1-6亚烷基、优选C1-3亚烷基、最优选–CH2-，C1-6烷基O-、优选C1-3烷基O-、最优选–CH2O-，C1-6烷基NH-、优选C1-3烷基NH-、最优选–CH2NH-，C1-6烷基N(C1-3烷基)-、优选C1-3烷基N(C1-3烷基)-、最优选–CH2N(Me)-，C2-6亚烯基优选C2-3亚烯基，C2-6亚炔基优选C2-3亚炔基，–CH2N(C1-3烷基)-，NH，N(C1-3烷基)优选N(Me)，-C(O)NH-，-C(O)N(C1-3烷基)-优选-C(O)N(Me)-，-NHC(O)-，-C(C1-3烷基)=N-O-(优选–C(Et)=N-O-或–C(Me)=N-O-)和-CH=N-O-。
在一个实施方式中，R3选自可选取代的C3-7环烷基优选C3-6环烷基、可选取代的5-6元杂环、可选取代的5-6元杂芳基、和可选取代的9元杂环。
优选可选取代的C3-6环烷基包含环丙基、环丁基、环戊基和环己基。优选可选取代的5-6元杂环包含四氢吡喃、哌啶基、吗啉基和二氢异噁唑基。优选可选取代的5-6元杂芳基包含吡咯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、噁唑基、噻唑基、噻二唑基、咪唑基、吡唑基、***基。优选可选取代的9元杂环包含吡咯并嘧啶和呋喃并吡啶（furopyridine）。
在特定的优选实施方式中，R3是可选取代的5-6元杂芳基。在更优选实施方式中，R3是选自吡啶基(优选2-吡啶基)、嘧啶基(优选2-或4-嘧啶基)和吡嗪基(优选2-吡嗪基)的可选取代的6元杂芳基。最优选可选取代的2-或4-嘧啶基。
在另一个实施方式中，R3选自H、卤素、OH、CN、可选取代的C1-6烷氧基(优选C1-3烷氧基，更优选C1-2烷氧基)、可选取代的C1-6烷基(优选C1-3烷基，更优选C1-2烷基)和C1-3卤代烷基优选C1-2卤代烷基，包含CF3和CHF2。
在一个实施方式中，X2是–C(C1-3烷基)=N-O-(优选–C(Et)=N-O-或–C(Me)=N-O-)或-CH=N-O-，以及R3是H或可选取代的C1-6烷基(优选C1-3烷基，更优选C1-2烷基)。
在另一个实施方式中，n是0和X2不存在。
在另一个实施方式中，R3可选取代有一个或多个，优选1或2个独立选择的可选取代基。R3上合适的可选取代基包括但不限于C1-6烷基(优选C1-3烷基，选自甲基、乙基、正丙基和异丙基)、卤素(特别是Br、F和I)、C1-6卤代烷基(优选C1-2卤代烷基，最优选CF3和CHF2)、CN、OH、C1-6烷氧基(优选C1-3烷氧基，选自甲氧基、乙氧基、正丙氧基和异丙氧基，最优选甲氧基)、氨基(包含NH2、NH(C1-3烷基)和N(C1-3烷基)2)、苯基、=O、CO2H、CO2C1-3烷基、NHCOC1-3烷基、OSO2C1-3烷基、5-6元杂芳基和5-6元杂环基(包含吗啉基和哌啶基)，其中各可选取代基可以进一步可选取代。
在另一个实施方式中，R3未取代。
在一个实施方式中，环“A”是可选取代的6-元芳基或者可选取代的5-或6-元杂芳基。在其他实施方式中，环“A”是可选取代的5-或6-元杂芳基，优选含氮，并且甚至更特别选自噻唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基和吡嗪基。在特别优选的实施方式中，环“A”是可选取代的吡啶基、嘧啶基和吡嗪基，更优选吡啶基和嘧啶基，并且最优选嘧啶基。
在另一个实施方式中，环“B”是可选取代的C3-7环烷基或者可选取代的4-、5-、6-或7-元杂环基，优选可选取代的C5-6环烷基，优选环己基，或者可选取代的5-或6-元杂环基，优选6-元。在其他实施方式中，环“B”是含氮和/或氧的杂环基，并且包含二噁烷、哌啶基、吡咯烷基、氮杂环庚烷、异恶唑基和吗啉基，和甚至更特定选自哌啶基、吡咯烷基、氮杂环庚烷、异恶唑基和吗啉基。特别优选哌啶基。
在一个实施方式中，环“A”和/或环“B”可选取代有一种或多种，优选1或2种可选取代基，所述取代基独立选自C1-3烷基(优选甲基)、OH、=O、卤素(优选F)和C1-3烷氧基，优选甲氧基。
在一个实施方式中，环“B”在对位用R1XC(=O)/R2部分取代。
在特定实施方式中，基团(R1XC(=O)/R2)-环B-(X1)m-环A-是式：
在优选实施方式中，X是O，R1是H，和R2是C1-6烷基，优选选自甲基、乙基、正丙基和异丙基的C1-3烷基，最优选甲基。
在一个实施方式中，提供了式Ia的化合物或其盐
式Ia
其中，R1、R2、R3、X1、X2、Z1、Z2、Y1、Y2、环A、环B、Alk、m和n如式I所定义。
在其他实施方式中，提供了式Ia的化合物或其盐，其中
R1选自H、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基和M，更优选R1选自H、C1-3烷基、C2-3烯基和M，最优选R1是H；
环“A”可选取代，并且选自饱和或不饱和单环C3-7环烷基、饱和或不饱和单环3-7元杂环、饱和或不饱和稠合双环C8-10环烷基、饱和或不饱和稠合双环8-10元杂环基、C6-10芳基和5-10元杂芳基，更优选环“A”可选取代，并且选自饱和或不饱和单环C3-7环烷基、饱和或不饱和单环3-7元杂环、C6芳基和5-6元杂芳基；
环“B”可选取代，并且选自饱和或不饱和单环C3-7环烷基、饱和或不饱和单环3-7元杂环、饱和或不饱和稠合双环C8-10环烷基、饱和或不饱和稠合双环8-10元杂环基、C6-10芳基和5-10元杂芳基，更优选环“B”可选取代，并且选自饱和或不饱和单环C3-7环烷基、饱和或不饱和单环3-7元杂环、C6芳基和5-6元杂芳基；
或者环“A”和环“B”可以结合在一起形成饱和或不饱和稠合双环C8-10环烷基或饱和或不饱和稠合双环8-10元杂环基；
Z1和Z2各独立选自C-H、C-C1-3烷基、C-OC1-3烷基、C-卤代、C-卤代C1-3烷基、C-CN或N，更优选Z1和Z2各独立选自C-H、C-卤代、C-OCH3或N；
Y1和Y2各独立选自N、O或S，更优选N或S，最优选Y1是N和Y2是S；
m是0和X1是共价键或稠合环键，优选共价键，或m是1时X1优选选自CH2、C(=O)、NH或N(Me)；
Alk是C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6烯基，优选C1-6烷基，更优选C1-3烷基和最优选乙基;和-(X2)n-R3如前所定义。
在一个实施方式中，提供了式Ia化合物，其中X2选自–CH2N(C1-3)烷基-、C2-3亚炔基(优选C2炔基)、NH、N(C1-3烷基)、-C(O)NH-、-NHC(O)-、–C(C1-3烷基)=N-O-(优选–C(Me)=N-O-)和–CH=N-O-。
在一个实施方式中，提供了式Ia化合物，其中R3选自可选取代的C3-6环烷基、可选取代的5-6元杂环(包含四氢吡喃、哌啶基、吗啉基和二氢异噁唑基)、可选取代的5-6元杂芳基(包含吡咯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、噁唑基、噻唑基、噻二唑基、咪唑基、吡唑基、***基)和可选取代的9元杂环(包含吡咯并嘧啶和呋喃并吡啶)。
在另一个实施方式中，提供了式Ia化合物，其中R3选自H、C1-2烷基、和C1-2卤代烷基。
在其他实施方式中，提供了式Ia-(i)的化合物或其盐
式Ia-(i)
其中：
D1、D2、D3和D4各独立选自C-H、C-C1-3烷基、C-C1-3烷氧基、C-卤代和N；
各-(CH2)-部分用一种或多种独立选自下面的取代基可选取代：C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤素、卤代C1-3烷氧基、卤代C1-3烷基、OH和=O；
q和r各是独立选自0、1、2、3、4和5的整数，前提是q和r一起至少是1并且不大于6；和
R1、R2、R3、X1、X2、Z1、Z2、m和n如式I或Ia定义。
在另一个实施方式中，提供了式Ia-(ii)的化合物或其盐
式Ia-(ii)
其中：
D1、D2、D3和D4各独立选自C-H、C-C1-3烷基、C1-3烷氧基、C-卤代和N；
各-(CH2)-部分用一种或多种选自下面的取代基可选取代：C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤素、卤代C1-3烷氧基、卤代C1-3烷基、OH和=O；
q和r各是独立选自0、1、2、3、4和5的整数，前提是q和r一起至少是1并且不大于6；和
R1、R2、R3、X1、X2、Z1、Z2、m和n如式I或Ia定义。
在另一个实施方式中，提供了式Ia-(iii)的化合物及其盐
式Ia-(iii)
其中：
D1、D2、D3和D4各独立选自C-H、C-C1-3烷基、C1-3烷氧基、C-卤代和N；和
R1、R2、R3、X1、X2、Z1、Z2、m和n如式I或Ia定义。
在另一个实施方式中，提供了式Ia-(iv)的化合物及其盐
式Ia-(iv)
式中，R2、R3、Z1、Z2、X2、n、D1和D2如前所定义。
在优选实施方式中，D1和D2独立是N或CH，优选D1或D2中至少一个是N或者D1和D2两者都是N。
在另一个优选实施方式中，R2是C1-3烷基，优选甲基或乙基。
在一个实施方式中，提供了式Ia、Ia-(i)、Ia-(ii)、Ia-(iii)、Ia-(iv)化合物或其盐，其中
R1是H或C1-6烷基，优选C1-3烷基，最优选R1是H；
R2选自C1-6烷基，优选C1-3烷基，最优选甲基;C2-6烯基，优选C3烯基;(C1-6烷基)tC3-7环烷基，优选(C1-3烷基)tC3-6环烷基;(C1-6烷基)t芳基,优选(C1-3烷基)t芳基,更优选(C1-3烷基)t苯基;(C1-6烷基)t杂环基,优选(C1-3烷基)t杂环基;NH2;NH(C1-6烷基),优选NH(C1-3烷基);N(C1-6烷基)2,优选N(C1-3烷基)2;CN;OH;C1-6烷氧基,优选C1-3烷氧基;SO2H;SO2C1-6烷基,优选SO2C1-3烷基;SH;SC1-6烷基,优选SC1-3烷基;卤素;卤代C1-6烷基,优选卤代C1-3烷基,更优选卤代C1-2烷基;并且其中各烷基、烯基、环烷基、芳基和杂环基进一步用一个或多个选自下面的取代基可选取代：NH2、NH(C1-6烷基)、N(C1-6烷基)2、CN、OH、C1-6烷氧基、SO2H、SO2C1-6烷基、SH、SC1-6烷基和卤素；
R3选自可选取代的饱和或不饱和单环C3-7环烷基、饱和或不饱和单环3-7元杂环、饱和或不饱和稠合双环C8-10环烷基、饱和或不饱和稠合双环8-10元杂环基、C6-10芳基和5-10元杂芳基，更优选R3选自可选取代的饱和或不饱和单环3-7元杂环、C6芳基和5-6元杂芳基，最优选R3是可选取代的5-6元杂芳基；
D1、D2、D3和D4各独立选自C-H或N，优选D1、D2、D3和D4中的任何一个或两个是N且剩余的是C-H，并且甚至更优选在式Ia-(i)、Ia-(iii)和Ia-(iv)化合物情况下D1和/或D3优选是N，和式Ia-(ii)化合物情况下D1和/或D4优选是N；
q和r各是独立选自0、1、2、3、4或5的整数，前提是q和r一起是3、4或5，优选q和r一起是4；
m是0和X1是共价键，或者m是1和X1选自-C(O)NH-或-NHC(O)-、–NH-、-CH2NH-、-NHCH2-、–N(CH3)-、-CH2N(CH3)-、-N(CH3)CH2-、亚甲基、亚乙基、丙烯和C=O；优选X1选自亚甲基、NH、N(CH3)和C(=O);和
n是0和X2是共价键，或者n是1和X2选自O，C(=O)，C1-6亚烷基、优选C1-3亚烷基、最优选–CH2-，C1-6烷基O-、优选C1-3烷基O-、最优选–CH2O-，C1-6烷基NH-、优选C1-3烷基NH-、最优选–CH2NH-，C1-6烷基N(C1-3烷基)-、优选C1-3烷基N(C1-3烷基)-、最优选–CH2N(Me)-，C2-6亚烯基优选C2-3亚烯基，C2-6亚炔基优选C2-3亚炔基，–CH2N(C1-3烷基)-，NH，N(C1-3烷基)优选N(Me)，-C(O)NH-，-C(O)N(C1-3烷基)-优选-C(O)N(Me)-，-NHC(O)-，–C(C1-3烷基)=N-O-(优选–C(Et)=N-O-或–C(Me)=N-O-)和-CH=N-O-；优选X2是–C(C1-3烷基)=N-O-(优选–C(Et)=N-O-或–C(Me)=N-O-)或-CH=N-O-和R3是H或可选取代的C1-6烷基(优选C1-3烷基，更优选C1-2烷基)。
在一个实施方式中，Z1和Z2独立选自C-H和N。在另一个实施方式中，Z1和Z2各是C-H。在另一个实施方式中，Z1或Z2之一是N，而另一个是C-H。在另一个实施方式中，Z1和Z2各独立选自C-H、C-卤代和C-C1-3烷氧基(优选甲氧基)，更优选Z1或Z2之一是C-H，而另一个是C-卤代，更优选C-F或C-C1-3烷氧基，优选甲氧基。
在另一个实施方式中，提供了式Ib的化合物及其盐
式Ib
其中，R1、R2、R3、X1、X2、Z1、Z2、Y1、Y2、环A、环B、Alk、m和n如式I定义。
在其他实施方式中，提供了式Ib的化合物或其盐，其中
R1选自H;C1-6烷基，优选C1-3烷基;S(O)2OH或S(O)2-C1-6烷基，优选S(O)2-C1-3烷基；
环“A”可选取代，并且选自饱和或不饱和单环C3-7环烷基、饱和或不饱和单环3-7元杂环、饱和或不饱和稠合双环C8-10环烷基、饱和或不饱和稠合双环8-10元杂环基、C6-10芳基和5-10元杂芳基，更优选环“A”可选取代，并且选自饱和或不饱和单环C3-7环烷基、饱和或不饱和单环3-7元杂环、C6芳基和5-6元杂芳基；
环“B”可选取代，并且选自饱和或不饱和单环C3-7环烷基、饱和或不饱和单环3-7元杂环、饱和或不饱和稠合双环C8-10环烷基、饱和或不饱和稠合双环8-10元杂环基、C6-10芳基和5-10元杂芳基，更优选环“B”可选取代，并且选自饱和或不饱和单环C3-7环烷基、饱和或不饱和单环3-7元杂环、C6芳基和5-6元杂芳基；
或者环“A”和环“B”可以结合一起形成饱和或不饱和稠合双环C8-10环烷基或饱和或不饱和稠合双环8-10元杂环基；
Z1和Z2各独立选自C-H、C-C1-3烷基、C-OC1-3烷基、C-卤代、C-卤代C1-3烷基、C-CN或N，更优选Z1和Z2各独立选自C-H、C-卤代、或N；
Y1和Y2各独立选自N、O或S，更优选N或S；
m是0和X1是共价键或稠合环键；和
Alk是C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6烯基，优选C1-6烷基，更优选C1-3烷基和最优选乙基。
在一个实施方式中，提供了式Ib化合物，其中X2是–CH2N(C1-3)烷基-、C2-3亚炔基(优选C2炔基)、NH、N(C1-3烷基)、-C(O)NH-、-NHC(O)-、–C(C1-3烷基)=N-O-(优选–C(Me)=N-O-)或–CH=N-O-。
在一个实施方式中，提供了式Ib化合物，其中R3选自可选取代的C5-6环烷基、可选取代的5-6元杂环（包含四氢吡喃、哌啶基和吗啉基)、可选取代的5-6元杂芳基（包含吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、噁唑基、噻唑基、噻二唑基、咪唑基、吡唑基、***基）和可选取代的9元杂环（包含吡咯并嘧啶和呋喃并吡啶）。
在另一个实施方式中，提供了式Ib化合物，其中R3选自H、C1-2烷基、和C1-2卤代烷基。
在另一个实施方式中，提供了式Ib-(i)的化合物或其盐
式Ib-(i)
其中：
D1、D2、D3和D4各独立选自C-H、C-C1-3烷基、C-卤代或N；
各-(CH2)-部分用一个或多个取代基可选取代，所述取代基选自C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤素、卤代C1-3烷氧基、卤代C1-3烷基、OH和=O；
q和r各是独立选自0、1、2、3、4和5的整数，前提是q和r一起至少是1并且不大于6；和
R1、R2、R3、X1、X2、Z1、Z2、m和n如式I或Ib定义。
在一个实施方式中，提供了式Ib-(i)的化合物，其中
R1是H;C1-6烷基，优选C1-3烷基;S(O)2OH或S(O)2-C1-6烷基，优选S(O)2-C1-3烷基；
R2选自C1-6烷基，优选C1-3烷基;C2-6烯基，优选C3烯基;(C1-6烷基)tC3-7环烷基，优选(C1-3烷基)tC3-6环烷基;(C1-6烷基)t芳基,优选(C1-3烷基)t芳基,更优选(C1-3烷基)t苯基;(C1-6烷基)t杂环基,优选(C1-3烷基)t杂环基;NH2;NH(C1-6烷基),优选NH(C1-3烷基);N(C1-6烷基)2,优选N(C1-3烷基)2;CN;OH;C1-6烷氧基,优选C1-3烷氧基;SO2H;SO2C1-6烷基,优选SO2C1-3烷基;SH;SC1-6烷基,优选SC1-3烷基;卤素;卤代C1-6烷基,优选卤代C1-3烷基,更优选卤代C1-2烷基;其中t是整数0或1，并且其中各烷基、烯基、环烷基、芳基和杂环基进一步用一个或多个选自下面的取代基可选取代：NH2、NH(C1-6烷基)、N(C1-6烷基)2、CN、OH、C1-6烷氧基、SO2H、SO2C1-6烷基、SH、SC1-6烷基和卤素；
R3选自可选取代的饱和或不饱和单环C3-7环烷基、饱和或不饱和单环3-7元杂环、饱和或不饱和稠合双环C8-10环烷基、饱和或不饱和稠合双环8-10元杂环基、C6-10芳基和5-10元杂芳基，更优选R3选自可选取代的饱和或不饱和单环3-7元杂环、C6芳基和5-6元杂芳基，最优选R3是可选取代的5-6元杂芳基；
D1、D2、D3和D4各独立选自C-H或N，优选D1、D2、D3和D4中的任何一个或两个是N且其余的是C-H；
q和r各是独立选自0、1、2、3、4或5的整数，前提是q和r一起是3、4或5，优选q和r一起是4；
m是0和X1是共价键；和
n是0和X2是共价键。
在一个实施方式中，Z1和Z2选自C-H和N。在另一个实施方式中，Z1和Z2各是C-H。在另一个实施方式中，Z1或Z2之一是N，而另一个是C-H。在另一个实施方式中，Z1和Z2选自C-H和C-卤代，优选Z1或Z2之一是C-H和另一个是C-卤代，更优选C-F。
在式I、Ia、Ia-(i)、Ia-(ii)、Ia-(iii)、Ia-(iv)、Ib和1b-(i)中任一个化合物的另一个实施方式中，(X2)n-R3是5-6元含N杂芳基或肟基(即X2选自–C(C1-3烷基)=N-O-和-CH=N-O-和n是1)，其中所述杂芳基或肟基的至少一个氮临近连接6元环的位点。例如，如果(X2)n-R3是吡啶，那么吡啶的氮是与6元环连接的碳的邻位。
在另一个实施方式中，式I化合物是选自实施例1–234化合物中任何一个的化合物或其盐。
在另一个实施方式中，式I化合物显示了在生理pH7.4下增强的溶解度，包含高(H)–极高(VH)的溶解度。在特定优选实施方式中，所述化合物的溶解度在生理pH7.4下极高(VH)。下表提供了本发明示例性化合物的溶解度。
表1：pH7.4时的化合物溶解度
L=“低”溶解度<12.5μg/mL;M=“中等”溶解度≥12.5μg/mL-<400μg/mL;H=“高”溶解度≥400μg/mL-<800μg/mL;和VH=“极高”溶解度≥800μg/mL。
为了比较目的，本发明人测定了最大活性化合物的溶解度，即是在申请人的早期相关申请WO2007/148093和WO2009/074812中，显示“A”范围活性的那些(针对粪肠球菌的MIC活性<0.25μg/mL)。在各个示例中，那些化合物仅显示了如下表所示在pH7.4时的低–中等溶解度。
表2：pH7.4时的对比化合物溶解度
L=“低”溶解度<12.5μg/mL;M=“中等”溶解度≥12.5μg/mL-<400μg/mL;H=“高”溶解度≥400μg/mL-<800μg/mL;和VH=“极高”溶解度≥800μg/mL。
也检测本发明的选定化合物以测定其在生理可接受pH范围pH4-pH9中的最大溶解度。在pH4、7.4和9测量各化合物的溶解度，并且在表中显示最大溶解度(μg/mL)以及显示所述溶解度的pH。
表3：根据本发明的化合物在生理可接受pH下的最大溶解度
L=“低”溶解度<12.5μg/mL;M=“中等”溶解度≥12.5μg/mL-<400μg/mL;H=“高”溶解度≥400μg/mL-<800μg/mL;和VH=“极高”溶解度≥800μg/mL。
不希望受理论限制，认为环“B”上的α取代羧化物或酰胺部分提供了有增强溶解度和/或有利药代动力学概况的化合物。在动物模型（小鼠和/或大鼠试验）中测定所选示例性化合物的药代动力学IV和口服概况，包含非α取代的比较化合物A和B(图1)。
如图2–8所示，式(I)的α取代化合物显示了有利的药代动力学概况，如其增加的生物可用性和降低的清除速率所显示。所述化合物也显示了相似的IV和口服药代动力学概况，因此提供了有效IV口服给药的可能。
因此，在一个实施方式中，所述化合物静脉内或口服给予或采用其组合。在另一个实施方式中，所述化合物配制用于静脉内(IV)给药。在另一个实施方式中，所述化合物配制用于口服给药。
在另一个实施方式中，式I化合物可以是盐的形式，包含药学上可接受的盐。
下表提供了盐形式的示范性示例。
表4：化合物4的盐形式
式I化合物的盐优选是药学上可接受的，但是应了解非药学上可接受的盐也在本发明范围内，因为其可用于制备药学上可接受的盐的中间体。
合适的药学上可接受的盐包括但不限于：药学上可接受的无机酸如盐酸、硫酸、磷酸、硝酸、碳酸、硼酸、氨基磺酸和氢溴酸的盐，或药学上可接受的有机酸如乙酸、丙酸、丁酸、酒石酸、马来酸、羟基马来酸、反丁烯二酸、马来酸、柠檬酸、乳酸、粘酸、葡糖酸、苯甲酸、琥珀酸、草酸、苯基乙酸、甲磺酸、甲苯磺酸、苯磺酸、水杨酸、对氨基苯磺酸、天冬氨酸、谷氨酸、依地酸、硬脂酸、棕榈酸、油酸、月桂酸、泛酸、鞣酸、抗坏血酸和戊酸的盐。
碱盐包括但不限于有药学上可接受的阳离子形式，所述阳离子例如钠、钾、锂、钙、镁、锌、铵、烷基铵如从三乙基胺形成的盐、烷氧基铵如从乙醇胺形成的那些和从乙二胺形成的盐、胆碱或氨基酸例如精氨酸、赖氨酸或组氨酸。药学上可接受的盐类型和其形成的一般信息为本领域技术人员已知，并且描述于通用教材如“Handbookof Pharmaceutical salts（《药用盐手册》）”P.H.Stahl,C.G.Wermuth,第1版,2002,威利-德国化学学会出版社（Wiley-VCH）。
碱性含氮基团可以用如下试剂季铵化：低级卤代烷，如氯代、溴代和碘代甲烷、乙烷、丙烷和丁烷；二烷基硫酸酯，如硫酸二甲酯和硫酸二乙酯等。
羟基可以与基团酯化，所述基团包含低级烷基羧酸，例如乙酸和2,2-二甲基丙酸，或与基团磺化，所述基团包含烷基磺酸如甲基磺酸。
应认可式I化合物可以具有不对称中心，因此能一种以上的立体异构体形式存在。本发明还涉及一个或多个不对称中心的基本纯异构体形式的化合物，如约大于90％ee，如约95％或97％ee，或大于99％ee，及其混合物，包括外消旋混合物。这些异构体可以采用不对称合成例如用手性中间体，或通过手性拆分来制备。
本发明也包含式I化合物的前药。有游离氨基、酰氨基、羟基或羧基的式I化合物能转化成前药。
前药包含某些化合物，其中氨基酸残基、或两个或多个（如2、3或4个）氨基酸残基的多肽链共价连接到式I化合物的游离氨基、羟基和羧酸基团。所述氨基酸残基包含通常由三字母符号表示的20个天然产生的氨基酸，并且也包含4-羟基脯氨酸、羟基赖氨酸、锁链赖氨酸(demosine)、异锁链赖氨酸(isodemosine)、3-甲基组氨酸、正缬氨酸、β-丙氨酸、γ-氨基丁酸、瓜氨酸、高半胱氨酸、高丝氨酸、鸟氨酸和蛋氨酸砜。前药也包含某些化合物，其中碳酸盐、氨基甲酸盐、酰胺和烷基酯通过羰基碳前药侧链共价连接到上面式I取代基上。前药也包含通过磷氧键结合到式I化合物的游离羟基上的式I化合物的磷酸衍生物(如酸、酸盐或酯)。
本发明提供了治疗抗细菌感染的方法，所述方法包含向遭受所述感染的对象给予式I化合物或其药学上可接受的盐。
本发明化合物可以通过任何合适方法给药，所述方法例如口服、胃肠外、如通过皮下、静脉内、肌肉内、或脑池内注射或灌注技术(如作为无菌可注射水性或非水性溶液或悬浮液)。
在优选实施方式中，给药是静脉内给药、口服给药或其组合。
本发明也提供式I化合物或其药学上可接受的盐，以用于治疗抗细菌感染。
也提供了包含式I化合物或其盐的组合物。优选地，所述组合物还包含药学上可接受的运载体、稀释剂或赋形剂。
可例如通过使用常规固体或液体载剂或稀释剂以及适于所需给药模式的药学添加剂类型（例如赋形剂、粘合剂、防腐剂、稳定剂、风味剂等）按照如药学制剂领域熟知的那些技术来配制本发明组合物。
药物制剂包括适于口服、直肠、经鼻、局部（包括口颊和舌下）、***或肠胃外（包括肌肉内、皮下和静脉内）给予的那些或以适于吸入或吹入给予的形式。本发明的化合物与传统的佐剂、运载体、或稀释剂一起，可因此以药物组合物形式和其单位剂量放置，以及所述形式可以用作固体如药片或填充的胶囊，或液体如溶液、悬浮液、乳液、酏剂或相同填充的胶囊，所有用于口服，以栓剂形式用于直肠给予；或以无菌注射溶液形式用于胃肠外(包含皮下)应用。
除了灵长类动物如人，各种其他动物可以根据本发明方法治疗。例如，能治疗哺乳动物，包括但不限于母牛、绵羊、山羊、马、狗、猫、豚鼠、大鼠或其他牛科、绵羊科、马科、犬科、猫科、啮齿动物或鼠种类。然而，所述方法也能应用于其他物种，例如禽鸟物种(如鸡)。
上面方法治疗的对象是哺乳动物，包括但不限于母牛、绵羊、山羊、马、狗、猫、豚鼠、大鼠或其他牛科、绵羊科、马科、犬科、猫科、啮齿动物或鼠种类，并且优选人类，男性或女性。
术语"有效量"指引发研究人员、兽医、医生或其它临床工作人员所寻求组织、***、动物或人的生物学或医学反应的对象组合物用量。
本文使用的术语“组合物”意在包括含有特定量特定成分的产品，以及从特定量的特定成分组合而直接或间接产生的产品。"药学上可接受的"指必须与制剂中其它成分相容的运载体、稀释剂或者赋形剂，且对接受者没有毒害作用。
术语"给予"和或"给药"化合物应理解为指向需要治疗的个体提供本发明的化合物。
给予本发明化合物的药物组合物可方便地以剂量单位形式呈现，可由制药领域熟知的任何方法制备。所有方法均包括使活性成分与构成一种或多种附加成分的运载体结合的步骤。通常，使活性成分与液体运载体或细分固体运载体或二者均一且密切地结合以制备药物组合物，然后，如果需要，将该产物成型，得到所需制剂。在药物组合物中，活性对象化合物的含量足以对疾病的过程或病症产生所需的影响。本文使用的术语“组合物”意在包括含有特定量特定成分的产品，以及从特定量的特定成分组合直接或间接产生的产品。
药物组合物可以是无菌可注射水性或油性悬浮液的形式。可按照本领域已知方法，用如上所述合适的分散剂或湿润剂和助悬剂配制该悬浮液。无菌注射制品也可以是溶于胃肠道外可接受的无毒稀释剂或溶剂中的无菌注射溶液或悬浮液，例如1.3-丁二醇中的溶液。可以使用的可接受载剂和溶剂是水、林格氏溶液和等张氯化钠溶液。此外，通常采用无菌非挥发油作为溶剂或悬浮介质。出于此种目的，可采用任何温和固定油，包括合成的甘油单酯或甘油二酯。此外，脂肪酸如油酸可用于制备注射剂。
在治疗或预防细菌感染中，合适的剂量水平通常是约0.01-500mg/kg患者体重/天，能以单个或多个剂量给药。对于口服给药，优选以片剂形式提供该组合物，其中含有1.0-1000毫克活性成分。
然而应理解，任何具体患者的特定剂量水平和剂量频率可能不同，这取决于各种因素，包括所用特定化合物的活性、该化合物的代谢稳定性和作用长度，年龄、体重、总体健康状况、性别、饮食，给药方式和时间、***率、联合用药、具体病症的严重程度和接受治疗的宿主。
本发明化合物通常可以通过将式IIa中间体与L-(X2)n-R3前体部分偶联以形成式I化合物
式IIa
或者将式IIb中间体
式IIb
与通式的前体部分偶联
以形成式I化合物；
其中R1、X、R2、(X1)m、环A、环B、Z1、Z2、Y1、Y2、Alk、(X2)n和R3如式I定义，并且L是反应基团。
尽管本领域那些技术人员熟悉合适的偶联条件和选择部分L，特别合适的偶联条件包含Suzuki和Stille偶联条件。也应理解有X-R1的式I化合物是OH，可以通过酯保护中间体（如X-R1是O-烷基或其他合适的保护基团）和后续脱保护来形成。
制备本发明化合物通常也可通过式IIIa前体与式IVa硼酸中间体在合适偶联条件下偶联形成式I化合物。
式IIIa 式IVa
或者替代地包含将式IVb硼酸中间体与卤代-(X2)n-R3前体部分偶联的步骤
式IVb
以形成式I化合物；
其中R1、X、R2、(X1)m、环A、环B、Z1、Z2、Y1、Y2、Alk、(X2)n和R3如式I定义，并且B(OR)2是硼酸(B(OH)2)或频那醇硼烷。
尽管包含Suzuki偶联和Stille偶联条件，合适的偶联条件和反应基团L为本领域技术人员熟悉。Suzuki偶联条件下合适的反应基团L包含硼酸部分B(OR)2，如硼酸B(OH)2和频那醇硼烷。Stille偶联条件下合适的反应基团L包含甲锡烷基化（stannylated）部分，如Sn(Bu)3。
技术人员应理解特别描述了偶联条件下作为离去基团的所述卤素部分官能团，并且因此可以与合适的替代离去基团如三氟甲磺酸盐(CF3SO3-)互换。
技术人员也应理解所述离去基团如卤素和所述反应基团L可以在前体或中间体上存在。即是，当所述中间体包含离去基团如卤素时，所述反应基团会在所述中间体偶联的前体部分上存在，并且或者当前体包含离去基团时，所述反应基团会在中间体上存在，从而所述前体和中间体可以在合适条件如前面所述那些条件下偶联。
在一个实施方式中，提供了选自式IIa、IIb、IVa和IVb的中间体。
在一个实施方式中，提供了式IIIa或以下通式的前体
在另一个实施方式中，通过将选自前体实施例1-32中任一个前体与选自中间体实施例1-17中任一个中间体在偶联条件下偶联来形成式I的化合物。
在另一个实施方式中，提供了选自中间体实施例1-17中任一个的中间体。
在另一个实施方式中，提供了选自前体实施例1-32中任一个的前体。
实施例
本领域技术人员会理解，除了特定说明以外，可以对本文所述的发明进行变化和修改。现在描述本发明，但不受参考下述实施例的限制。
化合物合成
1H NMR谱图记录在Brüker Avance DRX400、AC200或AM300光谱仪上。使用所述残留溶剂峰作为参照在氘化溶剂(CDCl3、MeOD、DMSO、CD3CN或丙酮)中记录谱图。在δ等级以百万分之(ppm)报道化学位移，使用下面惯例分配多重性:s(单重)、d(双重)、t(三重)、q(四重)、p(六重)、m(多重)和预先固定的br(宽度)。在Micromass Platform QMS或Thermo Finnigan LCQ Advantage光谱仪上记录质谱(ESI)。在40-63μm硅胶60(默克公司（Merck）编号9385)上进行快速色谱。在Combi-FlashTM纯化***上使用Combi-FlashTM硅胶柱或者在Biotage SP4纯化***上使用GraceResolvTM硅胶管、Grace RevelerisTMC-18反相硅胶管或Biotage SNAPTMC-18反相硅胶管上进行自动快速色谱。使用有Gilson215液体处理器和HP1100PDA检测器的Gilson322泵或者Agilent1200系列质量检测制备LCMS用Varian XRsC-18100x21.2mm柱完成制备HPLC。除非另有说明，所述HPLC***使用Phenomenex C8(2)柱，用乙腈或含有以下的乙腈：水中0.06%TFA、含0.1%TFA的水或含0.1%甲酸的水。
反应中，需要保护很多部分。合适的保护基团在工业上熟知，并且描述在很多参考文献中，如Protecting Groups in Organic Synthesis（《有机合成中的保护基团》）,Greene T W,纽约的威利国际科学出版公司（Wiley Interscience）,1981。
除非另有说明，实施例中使用的缩写如下：
Ac：乙酰基
CAN：乙腈
AIBN:2-[(E)-(1-氰基-1-甲基-乙基)偶氮]-2-甲基-丙腈)
CEM:CEM公司
conc.:浓缩的
DCM：二氯甲烷
DIPEA：N,N-二异丙基乙胺
DIPEA：N,N-二异丙基乙胺
DMAP:N,N-二甲基吡啶-4-胺
DMF：N,N-二甲基甲酰胺
DMSO：二甲亚砜
EtOAc：乙酸乙酯
Et2O:二***
EtOH：乙醇
ESI:电喷雾电离
h:小时
HATU:2-(7-氮杂-1H-苯并***-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓六氟磷酸盐
HPLC：高效液相色谱
IPA:丙-2-醇
LCMS:液相色谱-质谱
LDA：二异丙基酰胺锂
LHMDS:双(三甲基甲硅烷基)氨基锂
min:分钟
MeCN:甲基氰
MeI:甲基碘
MeOH：甲醇
MS：质谱
NBS:N-溴代琥珀酰亚胺
NMR:核磁共振
NOE:核欧沃豪斯效应
PTFE:聚(四氟乙烯)
s:秒
rt：室温
THF：四氢呋喃
TLC：薄层色谱
TMEDA:N,N,N’,N’-四甲基乙二胺
制备中间体
中间体1：[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]硼酸
2-氨基-3-溴-5-硝基-苯酚：搅拌下，在30min时间段内向2-氨基-5-硝基-苯酚(500g,3.24mol)的ACN(12L)溶液逐滴加入溴(290mL,5.63mol)。30-35°C下将所得混合物搅拌1小时。反应完成(通过TLC)后，溶剂蒸发至干。加入己烷(2L)并且蒸发混合物以除去痕量溶剂。再向残留物中加入己烷(5L)，并且所述混合物搅拌1h，然后过滤。用己烷(2L)洗涤所得固体(1102g)。所述残留物加入到冰水(2.5L)中，然后加入硫代硫酸钠饱和溶液(2.5L)，和用EtOAc(2x10L)提取。所述合并的有机层用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤和在40-45°C下减压浓缩以获得所需产物(643g粗产率85%)。
3-溴-5-硝基-苯酚：在35min时间段内向2-氨基-3-溴-5-硝基-苯酚(643g,2.76mol)的EtOH(13L)***液(-10°C)中于-10--2°C加入浓H2SO4(515mL,9.97mol)。使反应混合物加温到室温，然后加热到50-55°C，随后在30min时间段内逐份加入NaNO2(671g,9.72mol)，然后回流下加热3h。反应完成(通过TLC)后，所述混合物浓缩到3L并且冷却至0°C，然后加入冷水(5L)，并用EtOAc(3x6L)提取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水Na2SO4干燥，过滤，并且在减压下浓缩以获得半固体残留物。所述残留物用25%***-己烷混合物(6L)处理并且搅拌1h。所述固体过滤，用己烷(3L)洗涤以获得所需产物(505g,84%)。
1-苄氧基-3-溴-5-硝基-苯：在30min时间段内向3-溴-5-硝基-苯(770g,3.53mol)的丙酮(10L)溶液室温一次性（in one portion）加入粉碎的K2CO3(2.45kg,17.75mol)，然后加入苄基溴(632mL,5.32mol)。所得反应混合物搅拌15min，然后回流加热3h。反应完成(通过TLC)后，所述反应混合物通过硅藻土过滤，并且蒸馏去除丙酮。因此获得的所述粗残留物在硅胶(60-120M)上使用EtOAc:己烷(5:95)过滤以获得所需产物(551g,51%)。
3-苄氧基-5-溴-苯胺：向1-苄氧基-3-溴-5-硝基-苯(551g,1.78mol)的THF(11L)溶液一次性加入SnCl2.2H2O(2.17kg,9.62mol)。反应混合物回流3小时。反应完成(通过TLC)后，所述反应混合物冷却到0-5°C，并用饱和NaHCO3溶液碱化，然后用EtOAc(4x5L)提取。所述合并的有机层用盐水洗涤，在无水Na2SO4上干燥，过滤并且减压浓缩以获得粗的液体产物(480g,97%)，所述产物不需进一步纯化即用于下一步。
N-[(3-苄氧基-5-溴苯基)氨基硫代甲酰基（carbamothioyl）]-苯甲酰胺：向3-苄氧基-5-溴-苯胺(480g,1.73mol)的丙酮(10L)溶液室温加入异硫氰酸苯甲酯(280mL,2.08mol)。搅拌所述反应混合物15min后，固体沉淀，并且室温持续搅拌30min。反应完成(通过TLC)后，蒸馏去除丙酮。加入己烷(2L)，并且再浓缩。向浓缩固体加入己烷(4L)，搅拌下加入到40°C持续30min，并过滤所述固体。所述固体用己烷(2x2L)洗涤以获得所需产物(648g,85%)。
(3-苄氧基-5-溴-苯基)硫脲：向N-[(3-苄氧基-5-溴-苯基)氨基硫代甲酰基]苯甲酰胺(648g,1.47mol)的THF(12L)溶液室温加入NaOH溶液(300g,3L H2O中7.5mol)。所述反应混合物加入到69-70°C过夜。反应完成(通过TLC)后，倒出THF层，并且水层用EtOAc(3x2L)提取。用盐水洗涤合并的有机层(THF+EtOAc)，用无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩。所述粗残留物用Et2O和己烷混合物(5:95,3.0L)处理，过滤，用己烷洗涤，并且高真空下干燥以获得所需产物(387g,78%)。
5-苄氧基-7-溴-1,3-苯并噻唑-2-胺。在30min时间段内向(3-苄氧基-5-溴-苯基)硫脲(372g,1.10mol)的乙腈(6L)冰冷悬浮液逐滴加入溴(50mL乙腈中65mL1.26mol)溶液。所述反应混合物0-5°C搅拌30min，然后能缓慢回到室温，从而析出固体。室温下搅拌所得混合物1小时。反应完成(通过TLC)后，滤除所述固体，并且用己烷(2x3L)充分洗涤。所述固体残留物溶于冰水，用水性NH3(pH10-12)碱化，并且在5-10°C搅拌30min。滤除所得固体，用水洗涤，并且在高真空下干燥以获得所需产物(216g,59%)。1H NMR(DMSO-d6):δ5.12(s,2H),6.92(d,J=2.40Hz,1H),6.98(d,J=2.0Hz,1H),7.307.45(m,5H)和7.69(br s,2H)。LCMS:334.79[M+H]+。
1-(5-苄氧基-7-溴-1,3-苯并噻唑-2-基)-3-乙基-脲：向5-苄氧基-7-溴-1,3-苯并噻唑-2-胺(216g,0.64mol)的1,4-二噁烷(4L)悬浮液加入异氰酸乙酯(380mL,4.81mol)。所述反应混合物加热到80-85℃过夜。反应完成(通过TLC)后，蒸馏去除1,4二噁烷且所述残留物与己烷共蒸发。所述残留物用水在78-80°C处理3-5h。滤除所得固体、并且再用热水洗涤，在高真空下干燥以获得灰白色固体，所述灰白色固体用己烷洗涤以获得所需产物(196g,75%)。1H NMR(DMSO-d6):δ1.08(t,J=7.20Hz,3H),3.18(q,J=6.80Hz,2H),5.17(s,2H),6.71(br s,1H),7.15(d,J=2.0Hz,1H),7.26(brs,1H),7.317.47(m,5H)和10.82(br s,1H)。LCMS:405.90[M+H]+。
1-(5-苄氧基-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-2-基)-3-乙基-脲：向1-(5-苄氧基-7-溴-1,3-苯并噻唑-2-基)-3-乙基-脲(110g,0.27mol)的DMF(1.1L)搅拌溶液中加入2-三丁基甲锡烷基吡啶(298g,0.81mol)。所得溶液用N2吹扫15-20min，然后加入四(三苯基膦)钯(0)(25.41g,0.022mol)。所得混合物然后在N2气氛下加热到100°C15-16h。所述反应物料冷却到40-45°C，然后通过硅藻土过滤。所述硅藻土床用DMF(500mL)和热EtOAc(1.50L)洗涤，并且所述合并的滤液在60-70°C减压浓缩。所述残留物通过硅胶(20%EtOAc-己烷-100%EtOAc)纯化以获得所需产物(76g,70%)。1H NMR(DMSO-d6):δ1.08(t,J=7.20Hz,3H),3.19(q,J=6.80Hz,2H),5.26(s,2H),6.84(br s,1H),7.327.43(m,5H),7.51(d,J=7.20Hz,2H),7.69(d,J=2.0Hz,1H),7.95(m,1H),8.25(m,1H),8.78(m,1H)和10.46(br s,1H)。LCMS:405.30[M+H]+。
1-乙基-3-[5-羟基-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-2-基]-脲：在30min内向1-[5-苄氧基-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-2-基]-3-乙基-脲(76g,0.187mol)的DCM(1.7L)搅拌溶液逐滴加入甲磺酸(270mL,4.17mol)。然后室温下搅拌该反应混合物3小时。反应完成(通过TLC)后，所述反应物料在减压下浓缩。将EtOAc(1L)加入到残留物中，并且所述溶液仔细倒入压碎的冰上。通过加入饱和NaHCO3溶液将所述溶液pH维持在8-9，然后用EtOAc(3x5L)提取。用水、盐水洗涤合并的有机物，（无水Na2SO4）干燥，过滤，减压浓缩。因此所得的残留物在Et2O(1.0L)中室温搅拌1h，然后过滤以获得所需产物(57.0g,97%)。1H NMR(DMSO-d6):δ1.08(t,J=7.20Hz,3H),3.20(m,2H),6.86(br s,1H),7.0(s,1H),7.46(s,2H),7.96(m,1H),8.10(m,1H),8.76(m,1H),9.59(br s,1H)和10.41(br s,1H)。LCMS:315.06[M+H]+。
[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]三氟甲磺酸酯：向1-乙基-3-[5-羟基-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-2-基]脲(57g,0.181mol)的DMF(1.7L)搅拌溶液中加入N-苯基双(三氟甲磺酰亚胺)(80.74g,0.226mol)和DIPEA(28.04g,0.217mol)。然后室温下搅拌所得反应混合物3小时。反应完成(通过TLC)后，所述反应混合物在60-70°C减压浓缩。Et2O加入到残留物中，并且蒸发至干。因此所得的残留物用Et2O(1.50L)搅拌1h，然后过滤以获得所需产物(55.0g,68%)。1H NMR(DMSO-d6):δ1.11(t,J=7.20Hz,3H),3.20(m,2H),6.81(br s,1H),7.50(m,1H),7.78(d,J=2.0Hz,1H),8.01(m,1H),8.12(d,J=2.40Hz,1H),8.35(m,1H),8.84(m,1H)和10.77(br s,1H)。LCMS:446.98[M+H]+。
[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]硼酸(中间体1):向[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-三氟甲磺酸酯(25g,56.1mmol)的DMSO(250mL)搅拌溶液室温下加入双(新戊基乙二醇)二硼(25.20g,112.10mmol)和乙酸钾(16.5g,168.2mmol)。所得反应混合物通过N2吹扫脱气15-20min，然后加入[1,1’-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)DCM加合物(6.8g,8.4mmol)。所述反应混合物再用N2吹扫15-20min，然后加热到80°C持续90min。反应完成(通过TLC)后，所述反应混合物倒入饱和NH4Cl溶液(1L)。所得沉淀进行过滤、洗涤和真空下干燥。所述固体块溶于2N NaOH(200mL)中，并且室温搅拌45min。过滤所述溶液并且所述滤液酸化到pH5-6。因此所得的固体进行过滤，并且干燥以获得所需产物(17g,88%)。1H NMR(DMSO-d6):δ1.10(t,J=7.20Hz,3H),3.20(m,2H),6.84(br s,1H),7.41(m,1H),8.01(m,1H),8.12(s,1H),8.25(m,3H),8.40(s,1H),8.79(d,J=4.0Hz,1H)和10.57(br s,1H)。MS:343.25[M+H]+。
中间体2：1-(7-溴-5-碘-1,3-苯并噻唑-2-基)-3-乙基-脲
2-溴-4,6-二硝基苯胺：在30min内向搅拌的水(3.75L)和乙酸(375mL)混合物室温加入2,4-二硝基苯胺(500g,2.73mol)，然后逐滴加入溴(210mL,4.09mol)。所述反应混合物室温搅拌15min，然后加热到100°C持续2h。所述反应混合物然后冷却到室温，倒入冰冷水(5-6L)上，并且用氨水(pH8-10)碱化。因而所得的固体进行过滤，用冷水洗涤并在真空下干燥。所得固体用正戊烷洗涤以获得所需产物(600g,84%)。
1,2-二溴-3,5-二硝基苯。向2-溴-4,6-二硝基苯胺(600g,2.28mol)的ACN(5L)搅拌溶液中室温加入亚硝酸叔丁酯(680mL,5.7mol)和溴化铜(767g,3.43mol)。所得反应混合物在氮气氛下加热到70°C持续1h。所述反应混合物冷却到室温，用1N HCl溶液酸化，加入水(4L)，并用EtOAc(3x4L)提取。所述合并的有机物在无水Na2SO4上干燥，过滤，并且减压浓缩以获得所需产物(723g,97%)。
(2-溴-4,6-二硝基-苯基)-硫氰酸酯：向1,2-二溴-3,5-二硝基苯(723g,2.22mol)的MeOH(7.5L)搅拌溶液中室温加入硫氰酸钾(431g,4.44mol)，并且所得反应混合物在氮气氛下搅拌16h。然后过滤所述反应混合物，并用甲醇洗涤。在30-33°C减压浓缩滤液。因此所得的残留物通过硅胶(2-6%EtOAc-己烷)纯化以获得所需产物(549g,81%)。
7-溴苯并噻唑-2,5-二胺：在30min内向搅拌的EtOH(8.37L)和水(8.37L)混合物室温加入(2-溴-4,6-二硝基-苯基)-硫氰酸酯(549g,1.81mol)，然后加入Fe粉(2.02kg,36.11mol)并且逐滴加入HCl(12N,527mL)。所得反应混合物室温搅拌20min，然后加热到80℃持续45min。反应完成(通过TLC)后，所述反应混合物冷却到室温，并通过加入氨水溶液碱化到pH8-10。所得溶液通过硅藻土床，用EtOAc洗涤，并且减压蒸干所述合并的滤液。向所得残留物加入水(8L)，然后用EtOAc(2x4L)提取。所述合并的有机物用盐水洗涤，（无水Na2SO4）干燥，过滤，并且减压浓缩以获得所需产物(412g,93%)。1H NMR(DMSO-d6):δ5.16(br s,2H),6.50(d,J=2.0Hz,1H),6.53(d,J=1.60Hz,1H)和7.44(br s,2H)。LCMS:243.86[M+H]+。
7-溴-5-碘苯并噻唑-2-胺。在20min内于-78°C，N2气氛下向THF(6L)加入BF3-***(50%试验，708mL,2.81mol)，然后缓慢加入7-溴苯并噻唑-2,5-二胺(275g,1.02mol)的THF(500mL)溶液。然后-78°C下向溶液中加入亚硝酸叔丁酯(548L,4.61mol)。所述反应混合物相同温度下搅拌40min，然后加热到-5-0°C。(-5-0°C下)加入Et2O，并且相同温度持续搅拌20min。过滤所沉淀的固体，然后0°C下加入丙酮，随后顺序加入碘化钾(510g,3.07mol)和碘(519g,2.04mol)，并且0°C下搅拌30min。反应完成后，所述混合物用饱和焦亚硫酸钠溶液淬灭，然后用EtOAc(3x5L)提取。所述合并的有机物在无水Na2SO4上干燥，过滤，并45°C下减压浓缩。因此所得的残留物通过碱性氧化铝(30-35%EtOAc-己烷)纯化以获得所需浅棕色固体的产物(235g,65%)。1H NMR(DMSO-d6):δ7.50(d,J=1.20Hz,1H),7.63(d,J=1.20Hz,1H)和7.91(br s,2H)。LCMS:354.90[M+H]+。
1-(7-溴-5-碘苯并噻唑-2-基)-3-乙基脲(中间体2)：向7-溴-5-碘苯并噻唑-2-胺(250g,0.70mol)的1,4-二噁烷搅拌溶液室温加入异氰酸乙酯(278mL,3.52mol)。所得反应混合物在N2气氛下加热到80℃持续10-12h。反应完成(通过TLC)后，蒸发所述溶剂，然后加入正己烷，并重复蒸发过程。所得残留物在热水(2L)中于60-65°C搅拌30-40min，然后过滤。因此所得的残留物用Et2O和正戊烷的混合物处理，过滤以获得所需产物(264g,88%)。1H NMR(DMSO-d6):δ1.08(t,J=7.20Hz,3H),3.20(q,J=6.80,2H),6.73(br s,1H),7.72(s,1H),7.96(s,1H)和11.07(br s,1H)。MS:426.0[M+H]+。
中间体3：1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯
4-甲基哌啶-1,4-二羧酸-O1-叔丁酯-O4-乙酯。哌啶-1,4-二羧酸-O1-叔丁酯-O4-乙酯(1.5g,5.84mmol)的THF(25mL)溶液冷却到–78°C，然后–78°C下逐滴加入LDA(THF中1.80M,6.5mL,11.68mmol)。所得混合物相同温度下搅拌45分钟，然后–78°C下加入MeI(1.2mL,17.52mmol)。所述反应混合物的温度缓慢增加到室温，并且室温下搅拌6h。所述反应混合物然后冷却到0°C，通过逐滴加入饱和NH4Cl溶液(50mL)淬灭，并用EtOAc(3x100mL)提取。用盐水洗涤合并的有机物，（Na2SO4）干燥，过滤和减压浓缩。所述粗残留物通过100-200M硅胶使用2%EtOAc:己烷纯化以获得所需液体产物(1.0g,65%)。
4-甲基哌啶-4-羧酸乙酯盐酸盐：向4-甲基哌啶-1,4-二羧酸-O1-叔丁酯-O4-乙酯(1g,3.68mmol)的1,4-二噁烷(10mL)冰***液中加入HCl-1,4-二噁烷(4.0M,15mL)溶液。在室温下将所述混合物搅拌30分钟。反应完成(通过TLC)后，蒸发溶剂以获得棕色固体材料(0.90g)，其不需纯化即用于下一步骤。MS:172.16[M+H]+。
1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸乙酯(中间体3)。向4-甲基哌啶-4-羧酸乙酯盐酸盐(0.9g,4.35mmol)的EtOH(10mL)溶液室温加入DIPEA(2.30mL,13mmol)。所得混合物室温搅拌10分钟，然后加入5-溴-2-氯嘧啶(0.7g,3.6mmol)。所述混合物加热到70°C持续1h。反应完成(通过TLC)后，蒸发溶剂，并且所述粗残留物通过100-200M硅胶使用1.5%EtOAc:己烷纯化以获得所需灰白色固体化合物的产物(0.90g,75%)。1H NMR(DMSO-d6):δ1.17(s,3H),1.21(t,J=7.20Hz,3H)1.40(m,2H),2.00(m,2H),3.24(m,2H),4.11(m,2H),4.15(q,J=7.20Hz,2H),8.43(s,2H)。MS:328.08[M+H]+。
中间体4：1-[5-[7-溴-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯
4-甲基-1-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)嘧啶-2-基)哌啶-4-羧酸乙酯。向1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸乙酯(25g,76.2mmol)的1,4-二噁烷(250mL)溶液室温下加入乙酸钾(22.4g,228.6mmol)和双(频哪醇合)二硼(38.7g,152.4mmol)。所得混合物用N2吹扫15-20min来脱气，然后加入三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(4.0g,3.80mmol)和三环己基磷(2.55gm,9.12mmol)。所述反应混合物再脱气15-20min，然后加热到80°C持续3h。反应完成(通过TLC)后，所述反应冷却到室温，并且用500mL EtOAc稀释。所述混合物通过硅藻土，并且所述滤液蒸发获得粗材料(20g,70%)，其不需纯化即可用于下一步骤。MS:376.30[M+H]+。
1-[5-[7-溴-2-(3-乙基脲基)苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基哌啶-4-羧酸乙酯(中间体4)。向1-(7-溴-5-碘苯并[d]噻唑-2-基)-3-乙基脲(22.7g,53.20mmol)和4-甲基-1-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)嘧啶-2-基)哌啶-4-羧酸乙酯(20g,53.2mmol)的1,4-二噁烷:MeOH(300:180mL)溶液中室温加入磷酸钾(17g,79mmol)。所得混合物用N2吹扫15-20min来脱气，然后加入四(三苯基膦)钯(0)(6.1g,5.32mmol)。所述反应混合物再脱气15-20min，然后加热到80°C持续5h。反应完成(通过TLC)后，所述反应冷却到室温，用EtOAc(500mL)稀释并且通过硅藻土。蒸发所述滤液，并且所述粗残留物通过100-200M硅胶使用1.50%MeOH:DCM纯化以获得所需灰白色固体产物(12g,41%)。1H NMR(DMSO-d6):δ1.09(t,J=7.20Hz,3H),1.20(m,6H),1.45(m,2H),2.03(m,2H),3.16(m,2H),3.30(q,J=7.20,2H),4.12(q,J=6.80Hz,2H),4.25(m,2H),6.75(br s,1H),7.69(s,1H),7.86(s,1H);8.75(s,2H)和10.91(br s,1H)。MS:547.11[M+H]+。
中间体5：1-[5-[7-溴-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
向1-(5-(7-溴-2-(3-乙基脲基)苯并噻唑-5-基)嘧啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸乙酯(25g,45.7mmol)的DMSO(50mL)冰***液加入叔丁醇钾(25.5g,228mmol)。在室温下将所得混合物搅拌1h。反应完成(通过TLC)后，加入水(250mL)然后用EtOAc(2x250mL)提取。弃去有机层;水层的pH调节到4-5，并且然后用热EtOAc(3x250mL)提取。所述合并的有机层通过Na2SO4干燥，过滤并减压蒸干。因此所得的残留物用***研磨以获得所需灰白色固体产物(21g,88%)。1H NMR(DMSO-d6):δ1.09(t,J=7.20Hz,3H),1.18(s,3H),1.41(m,2H),2.02(m,2H),3.20(m,2H),3.33(m,2H),4.29(m,2H),6.80(br s,1H),7.70(s,1H),7.87(s,1H),8.76(s,2H),10.95(br s,1H)和12.46(br,s,1H)。MS:519.19[M+H]+。
中间体6：1-[5-(2-氯嘧啶-5-基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-2-基)-3-乙基-脲：
向5-溴-2-氯嘧啶(6.80g,35.1mmol)的DMF(40mL)溶液中加入[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]硼酸(10g,29.24mmol)和K3PO4水溶液(9.3g,43.86mmol)。所述反应混合物通过N2吹扫脱气15min，然后加入氯化二(三苯基膦)钯(II)(3.10g,4.4mmol)。所述反应混合物再脱气10-15min，然后加热到80°C持续2h。反应完成(通过TLC)后，减压蒸发溶剂，加入50mL水，然后用EtOAc(3x200mL)提取。用盐水洗涤合并的有机物，无水Na2SO4干燥，过滤，减压蒸发。所述粗残留物通过60-120M硅胶使用5%MeOH:DCM纯化以获得***研磨的灰白色固体化合物(4.80g)。通过重复提取获得其他产物(1.20g)，产生组合的总产率6.0g(50%)。1H NMR(DMSO-d6):δ1.12(t,J=7.20Hz,3H),3.20(m,2H),6.83(br s,1H),7.46(m,1H),8.0(m,1H),8.17(s,1H),8.40(s,1H),8.50(d,J=8.0Hz,1H),8.82(d,J=4.0Hz,1H),9.35(s,2H)和10.61(br s,1H)。MS:411.16[M+H]+。
中间体7：1-(5-溴-4-氟-7-(吡啶-2-基苯并噻唑-2-基)-3-乙基脲
N-(2-溴-5-氟苯基)-新戊酰胺：向2-溴5-氟苯胺(50.0g,263.14mmol)的DCM(400mL)冰***液中加入三乙胺(48.0mL,342.10mmol)。所得混合物在0°C下搅拌10min，随后加入新戊酰氯(36.0mL,289.50mmol)，然后室温搅拌3h。反应完成(通过TLC)后，所述反应混合物用DCM稀释，并用饱和NaHCO3溶液洗涤。用盐水洗涤有机层，无水Na2SO4干燥，过滤，减压蒸发。所述粗残留物通过100,200-200M硅胶使用1.0%EtOAc:己烷纯化以获得灰白色固体的产物(66.0g,92%产率)。
N-(5-氟-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-苯基)新戊酰胺：向N-(2-溴-5-氟苯基)-新戊酰胺(20.0g,72.97mmol)的1,4-二噁烷(200mL)溶液中室温加入乙酸钾(35.80g,364.85mmol)和双频哪醇合二硼(37.10g,145.93mmol)。所得混合物通过N2吹扫脱气15-20min，然后加入(1,1-二(二苯基膦基)二茂铁)二氯化钯(II)DCM加合物(6.0gm,7.30mmol)。所述反应混合物脱气15-20min，然后加热到100°C持续2h。反应完成(通过TLC)后，所述反应冷却到室温，并且用500mL EtOAc稀释。所得溶液通过硅藻土。蒸发所述滤液以获得所述粗材料(23.40g)，其不需进一步纯化即用于下一步骤。MS:322.24[M+H]+。
N-(5-氟-2-(吡啶-2-基)-苯基)-新戊酰胺：向N-(5-氟-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2基)-苯基)新戊酰胺(23.4g,72.97mmol)的乙腈(280mL)溶液中加入2-溴吡啶(16.14g,102.12mmol)和K2CO3水溶液(50.40g,364.90mmol)。所述反应混合物通过N2吹扫脱气15min，然后加入四(三苯基膦)钯(0)(8.40g,7.30mmol)。所述混合物再脱气10-15min，然后加热到80°C持续8h。反应完成(通过TLC)后，所述混合物倒入100mL冰冷水中，并且用EtOAc(3x250mL)提取。用盐水洗涤合并的有机物，无水Na2SO4干燥，过滤，减压蒸发。所述粗残留物通过100-200M硅胶使用2.0%EtOAc:己烷纯化以获得所需无色液体的产物(19.0g,96%产率)。
N-(4-溴-5-氟-2-(吡啶-2-基)-苯基)-新戊酰胺：向N-(5-氟-2-(吡啶-2-基)-苯基)-新戊酰胺(19.0g,69.83mmol)的乙酸(140.0mL)溶液中0°C加入NBS(24.86g,139.66mmol)。在50°C下将所得混合物搅拌1h。反应完成(通过TLC)后，所述混合物倒入100mL碾碎的冰中，并且用EtOAc(3x100mL)提取。用盐水洗涤结合的有机层，无水Na2SO4干燥，减压蒸发溶剂。所述粗残留物通过100,200-200M硅胶使用2%EtOAc:己烷纯化以获得所需灰白色固体的产物(17.50g,72%)。
N-(4-溴-3-氟-2-硝基-6-(吡啶-2-基)-苯基)-新戊酰胺：向N-(4-溴-5-氟-2-(吡啶-2-基)-苯基)新戊酰胺(17.5g,50.0mmol)的浓H2SO4(50.0mL)冰***液中逐滴加入发烟HNO3(10.0mL)。在0-10℃下将所得混合物搅拌1h。反应完成(通过TLC)后，所述混合物倒入500mL碾碎的冰中，搅拌30min，然后用EtOAc(3x500mL)提取。用盐水洗涤合并的有机层，无水Na2SO4干燥，减压蒸发。用Et2O研磨所述粗材料以获得所需黄色固体的产物(15.0g,76%)。MS:396.23[M+H]+。
4-溴-3-氟-2-硝基-6-(吡啶-2-基)-苯胺：N-(4-溴-3-氟-2-硝基-6-(吡啶-2-基)苯基)新戊酰胺(7.50g,18.93mmol)的70%H2SO4水溶液(31.2mL)加热到80°C持续30min。反应完成(通过TLC)后，所述混合物倒入100mL碾碎的冰中，并且用20%NaOH溶液碱化到pH6-7。过滤沉淀的固体，并且真空下干燥以获得所需黄色固体的产物(4.96g,84%)。
2-(5-溴-4-氟-2-碘-3-硝基苯基)-吡啶：向4-溴-3-氟-2-硝基-6-(吡啶-2-基)苯胺(4.0g,12.81mmol)的氯仿(50mL)冰***液中加入碘(18.21g,71.77mmol)，并且所得混合物在0°C搅拌10min，然后加入异戊腈(3.44mL,25.63mmol)。所述混合物然后加热到65°C持续5h。反应完成(通过TLC)后，所述反应用10%亚硫酸氢钠稀释，并用DCM(3x100mL)提取。用盐水洗涤合并的有机层，无水Na2SO4干燥，减压蒸发。所述粗残留物通过100-200M硅胶使用20%EtOAc:己烷纯化以获得所需灰白色固体的产物(2.0g,37%)。
3-溴-2-氟-6-碘-5-(吡啶-2-基)-苯胺：向2-(5-溴-4-氟-2-碘-3-硝基苯基)-吡啶(1.0g,2.36mmol)的MeOH(25mL)溶液中0°C加入Fe粉末(0.66mL,11.82mmol)。所述混合物室温搅拌10min，然后加入NH4Cl水溶液(0.63g,11.82mmol)。所述混合物然后加热到80℃持续2h。反应完成(通过TLC)后，所述混合物倒入100mL冰冷水中，并且EtOAc(3x100mL)提取。用盐水洗涤合并的有机层，无水Na2SO4干燥，减压蒸发溶剂。所述粗残留物通过100-200M硅胶使用6%EtOAc:己烷纯化以获得所需白色固体的产物(0.90g,97%)。
N-(5-溴-4-氟-7-(吡啶-2-基苯并噻唑-2-基)苯甲酰胺向3-溴-2-氟-6-碘-5-(吡啶-2-基)苯胺(1.60g,4.07mmol)的丙酮(30mL)溶液室温加入异硫氰酸苯甲酰酯(2.70mL,20.35mmol)。所述混合物室温搅拌16h。反应完成(通过TLC)后，减压蒸发溶剂。所述粗残留物用己烷研磨以获得所需黄色固体的产物(2.10g)，其不需要进一步纯化即用于下一步骤。MS:428.07[M+H]+。
5-溴-4-氟-7-(吡啶-2-基)-苯并噻唑-2-胺：向N-(5-溴-4-氟-7-(吡啶-2-基苯并噻唑-2-基)苯甲酰胺(2.30g,5.37mmol)的MeOH(25mL)溶液中0°C加入2N NaOH水溶液(3.01g,75.41mmol)。所述反应混合物加热到80℃持续16h。反应完成(通过TLC)后，所述混合物倒入100mL冰冷水中，并且用EtOAc(3x100mL)提取。所述合并的有机层用盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，并且减压蒸发溶剂以获得所需白色固体产物(1.20g,70%)。
1-(5-溴-4-氟-7-(吡啶-2-基苯并噻唑-2-基)-3-乙基脲
向5-溴-4-氟-7-(吡啶-2-基)-苯并噻唑-2-胺(0.15g,0.46mmol)的1,4-二噁烷(5.0mL)溶液中室温加入异氰酸乙酯(0.19mL,2.31mmol)。所述反应混合物加热到80℃持续6h。反应完成(通过TLC)后，减压蒸发溶剂。将20mL水加入到残留物中，并用热EtOAc(3x20mL)提取。所述合并的有机层用盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，并且减压蒸发溶剂以获得白色固体化合物，用***研磨所述化合物以获得所需产物(0.095g,50%)。
中间体8：1-(4,6-二溴噻唑并[5,4-c]吡啶-2-基)-3-乙基脲
2,6-二溴吡啶-1-氧化物：在1h内向2,6-二溴吡啶(50g,0.21mol)的三氟乙酸(250mL)冰***液逐滴加入30%H2O2溶液(70mL)。反应化合物进行洗涤，加热到100°C持续16h，然后冷却到室温，倒入1.50L水中，并且过滤沉淀物。因而所得的固体(10g)是起始材料(2,6-二溴吡啶)。用二氯甲烷(3x1L)提取所述滤液，并且所述合并的有机层用0.50M K2CO3溶液洗涤(3x500mL)。然后通过无水Na2SO4干燥有机层，过滤，减压浓缩。所述残留物用己烷处理，然后过滤以获得所得灰白色固体产物(根据起始材料的回收，有38.50g、72%和90%产率)。
2,6-二溴-4-硝基吡啶-1-氧化物：2,6-二溴吡啶-1-氧化物(34.0g,0.13mol)的硫酸(120mL)溶液冷却到0-5°C，然后加入硝酸(60mL)。所述反应混合物相同温度下搅拌15min，然后加热到60-65℃持续20h。所述反应然后冷却到室温，倒入冰冷水中，并用氨水溶液中和。所得溶液在0-5°C下搅拌10min，然后过滤，并干燥以获得所需浅黄色固体产物(32g,83%)。
2,6-二溴吡啶-4-胺：向2,6-二溴-4-硝基吡啶-1-氧化物(6.80g,22.82mmol)的乙酸(100mL)溶液室温加入Fe粉末(6.40g,114.13mmol)。所得反应混合物加热到100℃持续1h。反应完成(通过TLC)后，减压蒸馏去除乙酸，所述残留物用氨水溶液碱化，并用EtOAc提取(3x250mL)。用盐水洗涤合并的有机物，（Na2SO4）干燥，过滤，减压浓缩。因此所得的残留物用***和己烷处理，并且过滤获得所需灰白色固体产物(5.40g,94%)。
N-(2,6-二溴吡啶-4-基氨基硫代甲酰基)苯甲酰胺：向2,6-二溴吡啶-4-胺的THF(250mL)溶液中加入异硫氰酸苯甲酰酯(3.50mL,26.0mmol))，并且所得反应化合物加入到70°C持续16h。再加入1.50mL(11.20mmol)异硫氰酸苯甲酰酯以完成反应，并且所述反应在70°C搅拌16h。完成(通过TLC)后，减压下蒸馏所述溶剂，所述残留物用10%MeOH-***溶液处理，然后过滤获得所需黄色固体产物(7.60g,85%)。
1-(2,6-二溴吡啶-4-基)硫脲：向N-(2,6-二溴吡啶-4-基氨基硫代甲酰基)苯甲酰胺(14.50g,34.93mmol)的THF(600mL)和MeOH(200mL)混合物的溶液中加入溶于200mL水的NaOH(7.0g,174.65mmol)溶液。将该混合物加热到70℃持续16小时。反应后，所述溶液进行减压蒸馏，加入水，并用EtOAc提取(3x500mL)。用盐水洗涤合并的有机物，（Na2SO4）干燥，过滤，减压浓缩。因此所得的残留物用20%EtOAc-己烷处理，并且最终过滤获得所需灰白色固体产物(9.0g,83%)。
4,6-二溴噻唑并[5,4c]吡啶-2-胺：1-(2,6-二溴吡啶-4-基)硫脲(1.0g,3.22mmol)的THF(250mL)溶液冷却到-78°，然后在30min内逐滴加入溴(0.40mL,7.73mmol)的THF(50mL)溶液。反应升温至室温，并持续搅拌20h。所述反应然后冷却到0°C，用氨水碱化，并减压浓缩。向残留物中加入水，然后用EtOAc提取(3x100mL)。用盐水洗涤合并的有机物，（Na2SO4）干燥，过滤和浓缩。所述残留物然后通过中性氧化铝纯化(70%丙酮-己烷与30%EtOAc-己烷)以获得所需产物，所述产物最后用己烷研磨(0.38g,38%)。1H NMR(DMSO-d6):δ7.30(s,1H)和8.59(br s,2H)。
1-(4,6-二溴噻唑并[5,4-c]吡啶-2-基)-3-乙基脲：向4,6-二溴噻唑并[5,4c]吡啶-2-胺(1.47g,每LCMS56.74%,2.70mmol)的1,4-二噁烷(75mL)溶液中加入异氰酸乙酯(1.30mL,16.25mmol)，并且所得反应混合物加热到80°C持续16h。减压蒸馏去除所述溶剂，并且所述残留物然后与己烷共蒸馏(两次)。因此所获的固体在80°C热水中搅拌30min，然后过滤。所述固体材料通过硅胶(100-200M,30-40%EtOAc-己烷)纯化以获得所需灰白色固体产物(0.85g,82%)。
中间体9：1-[5-[7-溴-2-(3-乙基-5-甲基-2-氧代-1,3,5-三嗪（triazinan）-1-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯
1-[5-[7-溴-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(3.11g,5.68mmol)悬浮于EtOH(120mL)中。向搅拌的悬浮液中加入NMM(3.1mL,28.4mmol)、水性甲醛(4.61mL,56.8mmol)和甲基胺水溶液(14.2mL,28.4mmol)。所述反应混合物然后在80°C搅拌16h。将该反应混合物冷却至室温并过滤。所述沉淀用EtOH、Et2O洗涤，并干燥以提供所需灰白色固体化合物(2.58g,75%)。
m/z=602.09和604.02[M+H]+。
中间体10：1-(5-(6-溴哒嗪-4-基)-7-(吡啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)-3-乙基脲
3,5-二溴哒嗪：5-氯哒嗪-3(2H)-酮(0.20g,1.53mmol)的POBr3(0.883g,3.07mmol)溶液加热到90°C持续4h。反应完成(通过TLC)后，饱和NaHCO3溶液增加到pH9-10，然后用EtOAc提取(3x150mL)。所述合并的有机层通过Na2SO4干燥，过滤并减压蒸发。因此所得的残留物用***研磨以获得所需固体产物(0.32g,88%)。1H NMR(CDCl3):δ9.14(s,1H)和7.94(s,1H)。
1-(5-(6-溴哒嗪-4-基)-7-(吡啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)-3-乙基脲
向3,5-二溴哒嗪(0.32g,1.34mmol)的DMF(5mL)溶液中加入2-(3-乙基脲基)-7-(吡啶-2-基)苯并噻唑-5-基硼酸(0.46g,1.34mmol)和K3PO4水溶液(0.43g,2.01mmol)。所述反应通过N2吹扫脱气15min，然后加入氯化二(三苯基膦)钯(II)(0.11g,0.13mmol)。所述反应混合物再脱气10-15min，然后加热到80°C持续2-3h。反应完成(通过TLC)后，所述混合物倒入碾碎的冰中，并且用EtOAc(3x50mL)提取。用盐水洗涤合并的有机物，无水Na2SO4干燥，过滤，减压蒸发。所述粗残留物通过100-200M硅胶使用3%MeOH-DCM纯化以获得所需灰白色固体产物(0.52g,85%)。1H NMR(DMSO-d6):δ10.71(s,1H),9.94(m,2H),8.82(m,1H),8.55(d,J=8.0Hz,1H),8.38(s,1H),8.21(s,1H),8.02(t,J=8.0Hz,1H),7.46(m,1H),7.17(br s,1H),3.22(q,J=7.20Hz,2H),和1.11(t,J=7.20Hz,3H)。
中间体11：1-(5-溴-6-甲氧基-1,3-苯并噻唑-2-基)-3-乙基-脲：
1-乙基-3-(6-甲氧基-1,3-苯并噻唑-2-基)-脲：6-甲氧基-1,3-苯并噻唑-2-胺(5.00g,27.74mmol)溶于无水DMSO(20mL)和三乙基胺(15.50mL,110.97mmol)，然后是异氰酸乙酯(4.39mL,55.49mmol)。所述混合物于N2下室温搅拌4h，然后用水(～200mL)淬灭，并且搅拌1h。形成的白色固体通过过滤收集，用水冲洗，然后用丙酮(100mL)洗涤，并且所述过滤物单独收集成水滤液。所述固体部分溶解在丙酮中，因此所述滤液减压浓缩至干，并且与过滤收集的固体合并以获得所需白色固体化合物，6.27g(90%)。m/z:251.96[M+H]+。
1-(5-溴-6-甲氧基-1,3-苯并噻唑-2-基)-3-乙基-脲：1-乙基-3-(6-甲氧基-1,3-苯并噻唑-2-基)脲(1.10g,4.38mmol)悬浮在DCM(50mL)和MeOH(5mL)中。加入溴(0.34mL,6.60mmol)，并且室温搅拌混合物。所述混合物总共搅拌1.5h，然后减压浓缩至干。获得所需橙色固体化合物，2.17g，并且不需进一步纯化即可使用，进一步反应中起始纯度为66质量%。m/z:329.94/331.91[M+H]+。
中间体12：[5-[2-(4-乙氧基羰基-4-甲基-1-哌啶基)嘧啶-5-基]-2-(3-乙基-5-甲基-2-氧代-1,3,5-三嗪-1-基)-1,3-苯并噻唑-7-基]硼酸
1-[5-[7-溴-2-(3-乙基-5-甲基-2-氧代-1,3,5-三嗪（triazinan）-1-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯：1-[5-[7-溴-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(吉友联（Jubilant）)(3.0g,5.48mmol)悬浮于EtOH(120mL)中。加入N-甲基吗啉(3.0mL,27.4mmol)、水性甲醛(4.45mL,54.8mmol)和甲基胺水溶液(2M)(13.7mL,27.4mmol)，并且所述反应化合物室温搅拌16h，然后在80°C搅拌4h。将该反应混合物冷却至室温并过滤所得沉淀。所述沉淀用EtOH、Et2O洗涤，并使用真空箱干燥以提供所需产物(2.5g,灰白色固体)。
1H NMR(MeOD/CDCl3)δ8.59(s,2H),7.78(d,J=1.5Hz,1H),7.55(d,J=1.5Hz,1H),5.19(s,2H),4.43–4.34(m,4H),4.20(q,J=7.1Hz,2H),3.52–3.42(m,2H),3.36–3.28(m,2H,被溶剂变遮蔽（obscured by solvent）),2.65(s,3H),2.22–2.12(m,2H),1.52–1.42(m,2H),1.29(t,J=7.1Hz,3H),1.26–1.20(m,6H)。m/z[M+H]+602.0/604.0。
[5-[2-(4-乙氧基羰基-4-甲基-1-哌啶基)嘧啶-5-基]-2-(3-乙基-5-甲基-2-氧代-1,3,5-三嗪-1-基)-1,3-苯并噻唑-7-基]硼酸：1-[5-[7-溴-2-(3-乙基-5-甲基-2-氧代-1,3,5-三嗪-1-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(100mg,0.166mmol)、双(新戊基乙二醇)二硼(75mg,0.33mmol)、Pd(dppf)Cl2.DCM(14mg,0.017mmol)、乙酸钾(49mg,0.50mmol)和甲苯(2mL)在氩气下密封在微波反应瓶中，并且加热到130°C持续40min。所述反应混合物用正己烷(10mL)稀释，然后过滤除去颗粒钯残留物。浓缩所述滤液以获得所需产物(118mg,淡褐色固体)。1H NMR(MeOD)δ8.63(s,2H),7.91(d,J=1.9Hz,1H),7.82(d,J=1.8Hz,1H),5.20(s,2H),4.44–4.34(m,4H),4.21(q,J=7.1Hz,2H),3.50–3.42(m,2H),3.33–3.28(m,2H,被溶剂遮蔽（obscuredby solvent）),2.65(s,3H),2.21–2.13(m,2H),1.69–1.38(m,2H),1.33–1.19(m,9H)。m/z[M+H]+568.1。
中间体13：2-(3-乙基脲基)-7-丙酰基苯并[d]噻唑-5-基-三氟甲磺酸酯
1-(5-(苄氧基)-7-丙酰基苯并[d]噻唑-2-基)-3-乙基脲
向溴化乙基镁(THF中3M,70mL,212.82mmol)溶液中室温加入1-(5-(苄氧基)-7-氰基苯并[d]噻唑-2-基)-3-乙基脲(7.50g,21.28mmol)。室温下搅拌所述反应4小时。反应完成(通过TLC)后，0°C加入饱和氯化铵水溶液(250ml)，并用EtOAc(8x200mL)提取。用盐水洗涤合并的有机层，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩。所述残留物通过柱色谱在硅胶(100-200M,50%EtOAc-己烷)上纯化以获得所需产物(7.50gm,91%)。1H NMR(DMSO-d6):δ10.62(s,1H),7.68(s,1H),7.56(s,1H),7.50(d,J=7.2Hz,2H),7.397.43(m,2H),7.327.36(m,1H),6.78(s,1H),5.21(s,2H),3.163.21(m,4H),1.051.22(m,6H)。LCMS:384.29[M+H]+。
1-乙基-3-(5-羟基-7-丙酰基苯并[d]噻唑-2-基)脲：
向1-(5-(苄氧基)-7-丙酰基苯并[d]噻唑-2-基)-3-乙基脲(5.50g,14.34mmol)的二氯甲烷(50mL)溶液中室温加入甲磺酸(18.6mL,286.8mmol)。室温下搅拌该混合物1h。反应完成(通过TLC)后，0°C加入冰冷水(100mL)，然后用EtOAc(3x100mL)提取。用水、盐水洗涤合并的有机层，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩。所述残留物通过柱色谱(硅胶100-200M,5%MeOH-DCM)纯化以获得所需灰白色固体产物(4.30g,64%)。1H NMR(DMSO-d6):δ10.95(br s,1H),9.80(br s,1H),7.43(s,1H),7.25(s,1H),6.80(br s,1H),3.153.20(m,2H),3.083014(m,2H),1.071.14(m,6H)。LCMS:294.20[M+H]+。
2-(3-乙基脲基)-7-丙酰基苯并[d]噻唑-5-基-三氟甲磺酸酯
向1-乙基-3-(5-羟基-7-丙酰基苯并[d]噻唑-2-基)脲(3.20g,10.9mmol)的DMF(20mL)的溶液中0°C加入DIPEA(3.80mL,21.80mmol)，并且所述混合物0°C搅拌15min。0°C加入N-苯基双三氟甲磺酰亚胺(5.80g,16.35mmol)，并且所述混合物缓慢加热到室温，然后搅拌过夜。所述反应通过加入水淬灭，并且用EtOAc(3x100mL)提取水层。通过无水Na2SO4干燥合并的有机层，过滤，减压浓缩。所述残留物通过***洗涤纯化，以获得所需米色固体产物(4.30g,93%)。1H NMR(DMSO-d6):δ10.95(br s,1H),8.108.11(d,J=2.0Hz,1H),8.028.03(d,J=1.6Hz,1H),6.82(br s,1H),3.173.32(m,4H),1.131.16(t,J=7.2Hz,3H),1.081.12(t,J=7.2Hz,3H)。LCMS:424.27[M H]-。
中间体14：1-(5,7-二溴-6-甲氧基-1,3-苯并噻唑-2-基)-3-乙基-脲
3,5-二溴-4-甲氧基-苯胺：4-氨基-2,6-二溴-苯酚(14.13g,52.9mmol)溶解在丙酮(425mL)中获得深褐色溶液。加入碳酸钾(21.95g,158.8mmol)，然后加入碘代甲烷(3.46mL,55.6mmol)。在室温下将该混合物搅拌过夜。减压除去丙酮，并且所述残留物在EtOAc和水之间分层。加入焦亚硫酸钠和盐水以帮助分层。所述混合物用EtOAc(4x150mL)提取。所述合并的有机层用焦亚硫酸钠溶液(饱和，水性)洗涤，然后用盐水洗涤，Na2SO4干燥，减压浓缩。静置结晶获得深褐色油。所述混合物通过色谱、Biotage SP4、330g Si管、含20%EtOAc的环己烷纯化。合并相关组分以生成所需褐色固体化合物，11.31g(76%)。m/z:280.03/282.00/284.02[M+H]+。
2,3,5-三溴-4-甲氧基-苯胺：3,5-二溴-4-甲氧基-苯胺(13.04g,46.42mmol)溶解在DCM(500mL)中，并且逐滴加入溴(2.38mL,46.42mmol)的DCM(80mL)溶液。形成厚、米色沉淀。45分钟后，所述混合物用NaHCO3溶液(饱和，水性)淬灭到pH9，所述层分离，并用DCM(3x50mL)提取水层。合并的有机相用盐水洗涤，Na2SO4干燥，并减压浓缩至干以生成褐色固体。所述混合物通过色谱、Biotage SP4、2x120g串联Si管、含10-50%EtOAc的环己烷纯化。相关组分合并以生成2,3,5-三溴-4-甲氧基-苯胺，有一些2,3,5,6-四溴-4-甲氧基-苯胺污染(12.64g)。再洗脱柱以生成恢复的起始材料3,5-二溴-4-甲氧基-苯胺(2.84g)。恢复的起始材料3.5-二溴-4-甲氧基-苯胺(2.84g,10.11mmol)溶解在DCM(100mL)中，并且逐滴加入溴(0.52mL,10.11mmol)的DCM(5mL)溶液。在室温下将该混合物搅拌2.5小时。所述混合物用NaHCO3溶液(饱和，水性)淬灭到pH9，所述层分离，并用DCM(3x50mL)提取水层。所述合并的有机相通过Na2SO4干燥，并减压浓缩至干。这些材料与不纯的2,3,5-三溴-4-甲氧基-苯胺合并，并用色、Biotage SP4、330g Si管、含10%EtOAc的环己烷纯化。合并相关组分以生成所需有机油化合物，9.95g(60%)。m/z:357.93/359.89/361.90/363.84[M+H]+。
N-[(2,3,5-三溴-4-甲氧基-苯基)氨基硫代甲酰基]氨基甲酸乙酯：2,3,5-三溴-4-甲氧基-苯胺(4.72g,13.1mmol)溶解在丙酮(150mL)中，并且加入乙氧基羰基异硫氰酸酯(1.63mL,14.4mmol)。将所述溶液加热至40℃。20分钟后，形成浅黄色沉淀。所述粘稠混合物冷却到室温，并且室温下搅拌过夜。减压去除溶剂。环己烷(～150mL)加入到残留物中，并且超声处理所述悬浮液。所述固体通过PTFE过滤器过滤收集以生成灰白色絮状固体，所述固体在真空箱(40°C)中干燥以生成所需灰白色固体化合物，6.00g(93%)。m/z:488.78/490.80/492.75/494.80[M+H]+。
(2,3,5-三溴-4-甲氧基-苯胺)硫脲：N-[(2,3,5-三溴-4-甲氧基-苯基)氨基硫代甲酰基]氨基甲酸乙酯(500mg,1.02mmol)溶解在乙胺溶液(5.09mL,10.18mmol,THF中2M)中，并且室温搅拌过夜。所述混合物减压下浓缩至干以生成所需灰白色固体化合物。所述混合物无需进一步纯化即可用于下一步骤。m/z:416.83/418.84/420.83/422.83[M+H]+。
5,7-二溴-6-甲氧基-1,3-苯并噻唑-2-胺：无水DMSO(2mL)加入到N-[(2,3,5三溴-4-甲氧基-苯基)氨基硫代甲酰基]氨基甲酸乙酯(426mg,1.02mmol)、CuO(8mg,0.10mmol)和碳酸钾(211mg,1.53mmol)的混合物中。所述混合物超声处理，然后在预热的加热块中于空气下加热到90°C。55分钟后所述混合物冷却到室温，并且用水稀释。所述混合物在EtOAc(3x50mL)中提取，并且用水洗涤合并的有机层，然后用盐水洗涤。所述有机层通过Na2SO4干燥，并且所述混合物通过PTFE过滤器过滤以除去铜盐，然后所述滤液减压下浓缩至干。获得所需灰白色固体化合物，208mg(2个步骤60%)。m/z:337.01/339.01/340.97[M+H]+。
1-(5,7-二溴-6-甲氧基-1,3-苯并噻唑-2-基)-3-乙基-脲：5,7-二溴-6-甲氧基-1,3-苯并噻唑-2-胺(208mg,0.62mmol)溶于无水DMSO(1mL)和三乙基胺(0.189mL,1.35mmol)，然后是异氰酸乙酯(0.058mL,0.74mmol)。在室温下搅拌该混合物。3h后加入其他等分异氰酸乙酯(0.058mL,0.74mmol)。待3.75小时后，用水（100mL）稀释所述混合物，并用EtOAc(3×30mL)提取。用水和盐水洗涤合并的有机相，Na2SO4干燥，并减压浓缩至干。获得所需浅黄色固体化合物，234mg(93%)。所述材料无须进一步纯化即可用于下一个步骤。m/z:407.83/409.83/411.81[M+H]+。
中间体15：5,7-二氯[1,2,4]***并[1,5a]吡啶-2-胺
[(4,6-二氯吡啶-2-基)氨基硫代甲酰基]氨基甲酸乙酯：乙氧基羰基异硫氰酸酯(2g,16mmol)加入到4,6-二氯吡啶-2-胺(2.2g,13mmol)的1,4-二噁烷(100mL)溶液中，并且室温搅拌18h。LCMS显示了所需产物。所述反应混合物真空浓缩，并且所述残留物与EtOAc(3x20mL)共沸以生成乳膏状固体，其用EtOAc研磨以生成所需白色固体产物(2.9g,76%)。1H NMR(DMSO)δ12.31(s,1H),11.77(s,1H),8.86(d,J=1.1Hz,1H),7.66(d,J=1.5Hz,1H),4.25(q,J=7.1Hz,2H),1.28(t,J=7.1Hz,3H)。m/z[M+H]+=293.88
5,7-二氯[1,2,4]***并[1,5a]吡啶-2-胺：[(4,6-二氯吡啶-2-基)氨基硫代甲酰基]氨基甲酸乙酯(2.9g,9.9mmol)作为固体逐份加入盐酸羟胺(1.1g,16mmol)和DIEA(1.9g,15mmol)的MeOH/EtOH(1:1,40mL)搅拌悬浮液中。所述混合物室温搅拌2h，并且然后在80°C加热18h。所述反应混合物真空浓缩，并且所得残留物用水处理，生成乳膏状固体，过滤并且真空箱中40°C干燥18h以生成所需产物(1.2g,60%)。1H NMR(DMSO)δ7.58(d,J=2.0Hz,1H),7.35(d,J=2.0Hz,1H),6.44(s,2H)。m/z[M+H]+=203.15。
中间体16：7-溴-5-氯-咪唑并[1,2a]吡啶-2-羧酸乙酯
5-氨基-7-溴-咪唑并[1,2a]吡啶-2-羧酸乙酯：4-溴吡啶-2,6-二胺(3g,15.96mmol)溶解在EtOH(300mL)中。加入溴代丙酮酸乙酯(2.34mL,16.8mmol,90%工业级)。所述混合物回流加热5小时。所述溶剂减压蒸发以生成深棕褐色泡沫，用200mL饱和NaHCO3研磨过夜。过滤所述固体，用2x10mL饱和NaHCO3洗涤，然后用EtOAc(100mL)研磨两次，过滤并空气干燥以生成所需棕褐色粉末产物，重量为3.15g(70%)。
7-溴-5-氯-咪唑并[1,2a]吡啶-2-羧酸乙酯：5-氨基-7-溴-咪唑并[1,2a]吡啶-2-羧酸酯(3.15g,11.1mmol)悬浮于4M HCl(315mL)中，并且剧烈搅拌过夜以形成HCl盐。所述材料然后在冰/MeOH浴中冷却，并用亚硝酸钠(1.1g,17mmol)处理。所述混合物搅拌1h，然后加热到～5°C，再维持搅拌30分钟。加入尿素(470mg,7.8mmol)，并且再搅拌1小时，同时加热到室温。缓慢加入固体NaHCO3(～90g)，从而碱化所述混合物，然后用EtOAc(400mL)提取，浓缩和塞住（plug）(0-50%EtOAc/庚烷)。快速洗脱材料(TLC,40%EtOAc/己烷,Rf～0.4)浓缩成胶(产率0.867g(26%))。LCMS m/z[M+1]+304.9。
中间体17：1-(5.7-二溴-1,3-苯并噁唑-2-基)-3-乙基脲
5,7-二溴-1,3-苯并噁唑-2-胺1(1050mg;3.60mmol)的DMSO(0.7mL)和二噁烷(16mL)溶液用三乙基胺(980mg,9.7mmol)和异氰酸乙酯(767mg,10.79mmol)处理。所述反应在60°C搅拌24h。之后，加入额外批次异氰酸乙酯(400mg,6mmol)和三乙基胺(500mg,5mmol)，所述混合物在60°C再搅拌24h。然后加入水，并且过滤形成的固体，用水冲洗，然后用EtOAc研磨以生成所需灰白色固体产物(m=950mg;产率:73%)。1H NMR(DMSO)δ11.25(br s,1H),8.16–8.10(m,1H),8.09(s,1H),7.91(s,1H),3.30–3.22(m,2H),1.13(t,J=7.2Hz,3H)。ESI MI m/z[M+H]+:293.1。1根据J.Pharm.Sci(1964)卷53，第538-544页所述方法制备。
制备偶联前体
前体1：1-(5-溴嘧啶-2-基)-2-甲基哌啶-2-羧酸
1-(5-溴嘧啶-2-基)-哌啶-2-羧酸乙酯：向哌啶-2-羧酸乙酯盐酸盐(0.5g,2.58mmol)的DMF(15mL)溶液中室温加入碳酸钾(1.77g,12.89mmol)。所述混合物室温搅拌10min，然后加入5-溴-2-氯嘧啶(0.5g,2.58mmol)。反应加热到80℃持续3小时。反应完成(通过TLC)后，所述混合物倒入100mL冰冷水中，并且用EtOAc(3x100mL)提取。用盐水洗涤合并的有机层，无水Na2SO4干燥，减压蒸发。所述粗残留物通过100-200M硅胶使用1.50%EtOAc:己烷纯化以获得所需灰白色固体的产物(0.37g,46%产率)。MS:314.08[M+H]+。
1-(5-溴嘧啶-2-基)-2-甲基哌啶-2-羧酸（前体1）：向1-(5-溴嘧啶-2-基)哌啶-2-羧酸乙酯(0.37g,1.18mmol)的THF(25mL)冰***液中逐份加入NaH(矿物油中的60%分散液，0.06g,1.41mmol)。所述混合物在相同温度下搅拌45分钟，然后在0°C加入MeI(0.52mL,8.26mmol)。所述混合物的温度缓慢提高到室温，并且搅拌6h。所述反应然后冷却到0°C，逐滴加入冰冷水淬灭，然后用EtOAc(3x100mL)提取。用盐水洗涤合并的有机物，（Na2SO4）干燥，过滤，减压浓缩。所述粗残留物通过100-200M硅胶使用2%EtOAc:己烷纯化以获得所需灰白色固体的产物(0.115g,32%产率)。MS:300.09[M+H]+。
前体2：1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-羟基-3-甲基-哌啶-3-羧酸甲酯
4-氧代哌啶-1,3-二羧酸-O1-叔丁酯-O3-甲酯：向4-氧代哌啶-3-羧酸甲酯盐酸盐(1g,5.18mmol)的DCM(10mL)冰***液中加入DMAP(1.2g,10.36mmol)，然后加入Boc酸酐(1mL,5.18mmol)。该混合物室温搅拌16小时。反应完成(通过TLC)后，加入DCM(75mL)，并且所述有机层用水和盐水洗涤，然后无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。所述粗残留物通过100-200M硅胶使用10%EtOAc:己烷纯化以获得粘稠液体产物(1.30g,76%产率)。MS:258.32[M+H]+。
3-甲基-4-氧代-哌啶-1,3-二羧酸-O1-叔丁酯-O3-甲酯：4-氧代哌啶-1,3-二羧酸-O1-叔丁酯-O3-甲酯(1g,3.88mmol)的DMF(100mL)溶液冷却到0°C，然后逐份加入NaH(矿物油中的60%分散液,0.16g,3.88mmol)。所得混合物在相同温度下搅拌15min，随后0°C加入MeI(0.7mL,11.64mmol)，然后室温搅拌44h。反应完成(通过TLC)后，加入水(100mL)，并用EtOAc(3x100mL)提取。所述合并的有机物用盐水洗涤，（Na2SO4）干燥，过滤，并且减压浓缩以获得黄色油产物(0.9g)。MS:272.12[M+H]+。
4-羟基-3-甲基-哌啶-1,3-二羧酸-O1-叔丁酯-O3-甲酯：向3-甲基-4-氧代-哌啶-1,3-二羧酸-O1-叔丁酯-O3-甲酯(0.5g,1.85mmol)的MeOH(10mL)溶液中加入乙酸(0.5mL)，然后逐份加入氰基硼氢化钠(0.12g,1.85mmol)。所述混合物室温下搅拌4h。反应完成(通过TLC)后，加入水(50mL)，并用DCM(3x100mL)提取。所述合并的有机层用盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤并且减压浓缩以获得粘稠液体的产物(0.5g)。MS:274.13[M+H]+。
4-羟基-3-甲基-哌啶-3-羧酸甲酯盐酸盐：向4-羟基-3-甲基-哌啶-1,3-二羧酸-O1-叔丁酯-O3-甲酯(0.5g,1.83mmol)的1,4-二噁烷(10mL)冰***液中加入HCl-二噁烷(4.0M,5mL)溶液。所得混合物室温搅拌30分钟。反应完成(通过TLC)后，蒸发溶剂以获得所需固体产物(0.4g)。MS:174.13[M+H]+。
1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-羟基-3-甲基-哌啶-3-羧酸甲酯（前体2）：向4-羟基-3-甲基-哌啶-3-羧酸甲酯盐酸盐(0.4g,1.91mmol)的EtOH(10mL)溶液室温加入DIPEA(1.7mL,9.55mmol)。所得混合物室温搅拌10min，然后加入5-溴-2-氯嘧啶(0.37g,1.91mmol)。所述反应混合物加热到70°C持续1h。反应(通过TLC)完成后，蒸发溶剂，并且所述粗残留物通过100-200M硅胶使用25%EtOAc:己烷纯化以获得所需灰白色固体产物(0.345g,55%)。MS:330.12[M+H]+。
前体3：1-(5-溴嘧啶-2-基)-3,4-二甲基-哌啶-4-羧酸乙酯
步骤1：1-苄基-3-甲基哌啶-4-酮(5g,24.6mmol)的DMF(100mL)溶液冷却到0°C，然后逐滴加入叔丁醇钾(1M的THF溶液)(73.8mL,73.82mmol)。所得混合物在相同温度下搅拌15分钟，然后0°C加入对甲苯磺酰甲基异腈(7.2g,36.9mmol)和EtOH(3.8mL,60mmol)。所述混合物50°C搅拌1h，并且反应完成(通过TLC)后，加入水(100mL)，并用EtOAc(3x100mL)提取。用盐水洗涤合并的有机物，（Na2SO4）干燥，过滤，减压浓缩。所述粗残留物通过100-200M硅胶使用10%EtOAc:己烷纯化以获得所需产物(2.60g,50%产率)。MS:215.15[M+H]+。
步骤2：1-苄基-3-甲基哌啶-4-腈(2.6g,12.1mmol)和浓HCl(50mL)溶液加热到110°C，并且在相同温度下搅拌48h。反应完成(通过TLC)后，浓缩所述溶剂，加入10mL水，水层pH调节到5-6，然后用热EtOAc提取(3x100mL)。所述合并的有机层通过Na2SO4干燥，并且溶剂蒸发以获得所需粘性固体产物(0.5g,18%产率)。MS:234.16[M+H+。
步骤3：向1-苄基-3-甲基哌啶-4-羧酸(0.5g,2.14mmol)的EtOH(10mL)搅拌溶液0°C加入浓H2SO4(0.5mL)。所得混合物加热到80℃持续2h。反应完成(通过TLC)后，浓缩所述溶剂，加入10mL水到反应物料中，并且水层pH通过使用NaHCO3中和，然后用热EtOAc提取(3x100mL)。所述合并的有机层通过Na2SO4干燥，并减压蒸发溶剂。所述粗残留物通过100-200M硅胶使用5%EtOAc:己烷纯化以获得黄色油化合物(0.5g,89%产率)。MS:262.25[M+H]+。
步骤4：向1-苄基-3-甲基哌啶-1,4-羧酸甲酯(0.5g,1.91mmol)的THF(10mL)溶液冷却到–78°C，然后逐滴加入LDA(THF中1.80M,2.4mL,3.82mmol)。所得混合物在相同温度下搅拌45分钟，然后–78°C下加入MeI(0.36mL,5.73mmol)。所述反应的温度缓慢提高到室温，并且搅拌6h。所述反应然后冷却到0°C，并且逐滴加入饱和NH4Cl溶液(25mL)淬灭。所述反应然后用EtOA(3x75mL)提取，所述合并的有机物用盐水洗涤，(Na2SO4)干燥，过滤并减压浓缩。所述粗残留物通过100-200M硅胶使用5%EtOAc:己烷纯化以获得橙色粘稠液体化合物(0.33g,62%产率)。MS:276.22[M+H]+。
步骤5：向1-苄基-3,4-二甲基哌啶-4-羧酸乙酯(0.33g,1.2mmol)的MeOH(10mL)搅拌溶液中室温加入氢氧化钯。在H2气氛下室温搅拌所述混合物6小时。反应完成(通过TLC)后，所述混合物通过硅藻土，并蒸发溶剂。所述粗(0.20g)残留物不需进一步纯化即可用于下一步。MS:186.19[M+H]+。
1-(5-溴嘧啶-2-基)-3,4-二甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(前体3)：向3,4-二甲基哌啶-4-羧酸乙酯(0.2g,1.08mmol)的EtOH(7mL)溶液室温加入DIPEA(0.6mL,3.24mmol)。所述混合物室温搅拌10min，随后加入5-溴-2-氯嘧啶(0.21g,1.08mmol)，然后加入到70°C持续1h。反应完成(通过TLC)后，蒸发溶剂，并且所述粗残留物通过100-200M硅胶使用10%EtOAc:己烷纯化以获得所需黄色固体产物(0.33g,95%产率)。MS:341.03[M+H]+。
前体4：1-(5-溴-3-吡啶基)-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯
向4-甲基哌啶-4-羧酸乙酯盐酸盐(3.6g,21.10mmol)的DMF(5mL)溶液中室温加入Cs2CO3(1.63g,5mmol)。所得混合物室温搅拌10min，然后加入3,5-二溴吡啶(1.0g,4.20mmol)。反应加热到150℃持续48小时。反应完成(通过TLC)后，所述反应混合物倒入100mL冰冷水中，并且用EtOAc(3x100mL)提取。用盐水洗涤合并的有机物，无水Na2SO4干燥，过滤，减压蒸发。所述粗残留物通过100-200M硅胶使用20.0%EtOAc:己烷纯化以获得粘稠液体产物(0.2g,14%产率)。MS:327.08[M+H]+。
前体5：3-(5-溴-2-吡啶基)-5-甲基-4H-异噁唑-5-羧酸乙酯
(2E)-5-溴吡啶-2-甲醛肟：向5-溴吡啶-2-甲醛(0.5g,2.69mmol)的MeOH(5.8mL)溶液中0°C加入水(5.8mL)。所述混合物在相同温度下搅拌10min，然后加入盐酸羟胺(0.23g,3.38mmol)和Na2CO3水溶液(0.17g,1.6mmol)。所述反应随后加热到60°C持续1h。完成(通过TLC)后，所述混合物倒入25mL冰冷水中。因此过滤沉淀的固体，并且真空下干燥以获得白色固体产物(0.5g,93%产率)。MS:201.12[M+H]+。
5-溴-N-羟基-吡啶-2-羧亚酰胺酰氯：向(2E)5-溴吡啶-2-醛肟(0.5g,2.49mmol)的DMF(1.50mL)溶液中0°C加入NCS(0.4g,2.97mmol)。所述混合物在相同温度下搅拌10min，然后干HCl(g)在0°C吹扫20min。所述反应然后倒入25mL冰冷水中，并且过滤所沉淀的固体和真空干燥以获得白色固体产物(0.5g,86%产率)。MS:234.93[M+H]+。
3-(5-溴-2-吡啶基)-5-甲基-4H-异噁唑-5-羧酸乙酯(前体5)：向5-溴-N-羟基-吡啶-2-羧亚酰胺酰氯(0.6g,2.56mmol)的EtOAc(15mL)溶液中0°C加入甲基丙烯酸乙酯(1.5mL,13.33mmol)。所述混合物在相同温度下搅拌10min，然后0°C加入三乙胺(0.35mL,2.82mmol)，随后0°C搅拌1h。反应完成(通过TLC)后，所述残留物倒入100mL冰冷水中，然后用EtOAc(3x100mL)提取。用盐水洗涤合并的有机物，无水Na2SO4干燥，过滤，减压蒸发。所述粗残留物通过100-200M硅胶使用5.0%EtOAc:己烷纯化以获得白色固体产物(0.70g,88%产率)。1H NMR(DMSO-d6):δ1.19(t,J=7.20Hz,3H),1.60(s,3H),3.41(m,1H),3.86(m,1H),4.16(q,J=7.20Hz,2H),7.87(d,J=8.4Hz,1H),8.14(d,J=2.4Hz,1H)和8.79(s,1H)。
前体6：1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-苯基-哌啶-4-羧酸
1-(5-溴嘧啶-2-基)-2-苯基-哌啶-4-腈：向4-苯基哌啶-4-腈(0.35g,1.55mmol)的EtOH(5mL)溶液室温加入DIPEA(0.8mL,4.55mmol)。所述混合物室温搅拌10min，然后加入5-溴-2-氯嘧啶(0.15g,1.3mmol)。所述混合物加热到70°C持续1h。反应完成(通过TLC)后，溶剂蒸发，并且所述粗残留物通过100-200M硅胶使用10%EtOAc:己烷纯化以获得黄色固体产物(0.31g,70%产率)。MS:343.09[M+H]+。
1-(5-溴嘧啶-2-基)-2-苯基-哌啶-4-羧酰胺：1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-苯基哌啶-4-腈(0.31g,0.9mmol)的HBr乙酸(12mL)溶液回流16h。反应完成(通过TLC)后，所述混合物倒入100mL冰冷水中，并且用EtOAc(3x150mL)提取。所述合并的有机物用盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤并且蒸发以获得所需白色固体产物(0.12g)。MS:361.15[M+H]+。
1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-苯基哌啶-4-羧酸（前体6）：向1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-苯基哌啶-4-羧酰胺(0.10g,0.28mmol)的6N HCl(2.0mL)溶液在微波辐射中加热到150°C持续20min。所述反应混合物然后倒入100mL冰冷水中，并且用EtOAc(3x150mL)提取。所述合并的有机物用盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤并且蒸发以获得所需白色固体产物(0.08g,80%产率)。1H NMR(DMSO-d6):δ1.78(m,2H),2.44(m,2H),3.16(m,2H),4.42(m,2H),7.24to7.40(m,5H),8.44(s,2H)和12.78(br,s,1H)。
前体7：1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-氰基-哌啶-4-羧酸乙酯
4-氰基哌啶-1,4-二羧酸-O1-叔丁酯-O4-乙酯：4-氰基哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.75g,3.57mmol)的THF(25.0mL)溶液冷却到–78°C，然后逐滴加入LDA(THF中1.8M,6.0mL,5.35mmol)，并且在相同温度(–78°C)搅拌45min，随后加入氯甲酸乙酯(0.46g,4.28mmol)。所述反应的温度缓慢提高到室温，并且搅拌6h。所述反应然后冷却到0°C，并逐滴加入饱和NH4Cl溶液(50mL)淬灭，用EtOAc(3x100mL)提取，并且所述合并的有机物用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤和减压浓缩。所述粗残留物通过100-200M硅胶使用7%EtOAc:己烷纯化以获得橙色粘稠液体产物(0.4g,48%产率)。MS:283.14[M+H]+。
4-氰基哌啶-4-羧酸乙酯盐酸盐：向4-氰基哌啶-1,4-二羧酸-O1-叔丁酯-O4-乙酯(0.4g,1.41mmol)的1,4-二噁烷(10mL)冰***液中加入HCl-二噁烷(4.0M,5mL)溶液。所得混合物室温搅拌30分钟。反应完成(通过TLC)后，蒸发溶剂以获得固体产物(0.28g)。MS:183.27[M+H]+。
1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-氰基-哌啶-4-羧酸乙酯(前体7)：向4-氰基哌啶-4-羧酸乙酯盐酸盐(0.56g,2.6mmol)的EtOH(10mL)溶液室温加入DIPEA(0.8mL,4.29mmol)，并且室温搅拌10min，然后加入5-溴-2-氯嘧啶(0.33g,1.73mmol)。所述反应混合物加热到70℃持续1h。反应完成(通过TLC)后，溶剂蒸发，并且所述粗残留物通过100-200M硅胶使用10%EtOAc:己烷纯化以获得黄色固体产物(0.4g,68%产率)。1HNMR(DMSO-d6):δ1.20(t,J=7.20Hz,3H),2.04(m,2H),2.22(m,2H),3.22(m,2H),4.15(q,J=7.20Hz,2H),4.32(m,2H)和8.50(s,2H)。
前体8：1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-羟基-哌啶-4-羧酸
1-苄基-4-羟基-哌啶-4-羧酸：1-苄基-4-羟基哌啶-4-腈(1g,4.60mmol)的6N HCl(5mL)溶液在微波辐射中加热到120°C持续30min。反应完成(通过TLC)后，减压下浓缩溶剂以生成所需产物(1.5g。MS:236.16[M+H]+。
4-羟基哌啶-4-羧酸甲酯：向1-苄基-4-羟基哌啶-4-羧酸(1.2g,5.10mmol)的MeOH(15mL)搅拌溶液加入氢氧化钯，并且所得混合物在H2气氛下室温搅拌6h。反应完成(通过TLC)后，所述反应通过硅藻土，并且所述滤液减压蒸发以生成所需产物(1g)。MS:160.18[M+H]+。
1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-羟基-哌啶-4-羧酸甲酯(前体8)。向4-羟基哌啶-4-羧酸甲酯(0.4g,2.52mmol)的EtOH(10mL)溶液加入DIPEA(2.2mL,12.57mmol)，并且所得溶液室温搅拌10min，然后加入5-溴-2-氯嘧啶(0.49g,2.52mmol)。反应混合物随后加热到70℃持续1小时。反应完成(通过TLC)后，蒸发溶剂，并且所述粗残留物通过100-200M硅胶使用10%EtOAc:己烷纯化以获得黄色固体产物(0.35g,44%产率)。1HNMR(DMSO-d6):δ1.64(m,2H),1.82(m,2H),3.20(m,2H),3.64(s,3H),4.27(m,2H),5.60(s,1H)和8.44(s,2H)。
前体9：1-(5-溴嘧啶-2-基)-2-甲氧基-哌啶-4-羧酸
1-苄基-4-羟基-哌啶-4-羧酸。1-苄基-4-羟基哌啶-4-腈(1g,4.6mmol)的6N HCl(5mL)溶液在微波辐射中加热到120℃持续30min。反应完成(通过TLC)后，减压浓缩溶剂以生成所需产物(1.5g)。MS:236.16[M+H]+。
4-羟基哌啶-4-羧酸甲酯。向1-苄基-4-羟基哌啶-4-羧酸(1.2g,5.1mmol)的MeOH(15mL)搅拌溶液加入氢氧化钯，并且所得混合物在H2气氛下室温搅拌6h。完成(通过TLC)后，所述混合物通过硅藻土，并减压蒸发过滤物。所述粗(1g)残留物无需进一步纯化即用于下一步。MS:160.18[M+H]+。
1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-羟基-哌啶-4-羧酸甲酯：向4-羟基哌啶-4-羧酸甲酯(0.4g,2.52mmol)的EtOH(10mL)溶液加入DIPEA(2.2mL,12.57mmol)，并且所述溶液室温搅拌10min，然后加入5-溴-2-氯嘧啶(0.49g,2.52mmol)。然后所述混合物加热到70°C持续1h。反应完成(通过TLC)后，蒸发溶剂，并且所述粗残留物通过100-200M硅胶使用10%EtOAc:己烷纯化以获得所需黄色固体产物(0.35g,44%产率)。1H NMR(DMSO-d6):δ1.64(m,2H),1.82(m,2H),3.20(m,2H),3.64(s,3H),4.27(m,2H),5.60(s,1H)和8.44(s,2H)。
1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-甲氧基-哌啶-4-羧酸（前体9）。1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-羟基哌啶-4-羧酸甲酯(0.2g,0.63mmol)的DMF(25mL)溶液冷却到0°C，然后逐份加入NaH(矿物油中的60%分散液,0.05g,1.08mmol)并且所述混合物0°C搅拌45min，然后加入MeI(0.20mL,3.16mmol)。所述反应的温度缓慢提高到室温，并且搅拌4h。所述反应然后冷却到0°C，并逐滴加入饱和NH4Cl溶液(50mL)淬灭，用EtOAc(3x100mL)提取，并且所述合并的有机物用盐水洗涤，(Na2SO4)干燥，过滤和减压浓缩。所述粗残留物通过100-200M硅胶使用3%EtOAc:己烷纯化以获得灰白色固体的产物(0.12g,57%产率)。MS:330.18[M+H]+。
前体10：1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-甲磺酰基-哌啶-4-羧酸乙酯
4-(甲磺酰基)-哌啶-1,4-二羧酸-1-叔丁酯-4-乙酯:哌啶-1,4-二羧酸-1-叔丁酯-4-乙酯(2g,7.78mmol)的THF(25.0mL)溶液冷却到–78°C，然后逐滴加入LDA(THF中1.8M,8.8mL,15.56mmol)，并且在相同温度下搅拌45min，随后–78°C加入甲磺酰氯(1.3g,11.67mmol)。所述反应的温度缓慢提高到室温，并且搅拌6h。所述反应然后冷却到0°C，并逐滴加入饱和NH4Cl溶液(50mL)淬灭，用EtOAc(3x100mL)提取，并且所述合并的有机物用盐水洗涤，(Na2SO4)干燥，过滤和减压浓缩。所述粗残留物通过100-200M硅胶使用30%EtOAc:己烷纯化以获得橙色粘稠液体产物(0.20g,8.0%产率)。MS:336.18[M+H]+。
4-(甲磺酰基)哌啶-4-羧酸乙酯盐酸盐：向4-(甲磺酰基)哌啶-1,4-二羧酸-1-叔丁酯-4-乙酯(0.20g,0.60mmol)的1,4-二噁烷(5mL)冰***液中加入HCl-二噁烷(4.0M,1.0mL)溶液，并且所得混合物室温搅拌30min。反应完成(通过TLC)后，蒸发溶剂以获得棕色固体材料(0.20g)，其不需进一步纯化即用于下一步骤。MS:236.11[M+H]+。
1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-甲磺酰基-哌啶-4-羧酸乙酯(前体10)：向4-(甲磺酰基)哌啶-4-羧酸乙酯盐酸盐(0.20g,0.74mmol)的EtOH(7mL)溶液室温加入DIPEA(0.03mL,1.86mmol)，并且所述混合物室温搅拌10min，然后加入5-溴-2-氯嘧啶(0.12g,0.62mmol)。然后所述反应加热到70°C持续1h。完成(通过TLC)后，蒸发溶剂，并且所述粗残留物通过100-200M硅胶使用15%EtOAc:己烷纯化以获得所需黄色固体产物(0.108g,45%产率)。1H NMR(DMSO-d6):δ1.20(t,J=7.20Hz,3H),1.62(m,2H),2.07(m,2H),2.69(m,2H),3.69(s,3H),4.62(q,J=7.20Hz,2H),4.86(m,2H)和8.46(s,2H)。
前体11：4-苄基-1-(5-溴嘧啶-2-基)哌啶-4-羧酸乙酯
向4-苄基哌啶-4-羧酸乙酯(0.46g,1.86mmol)的EtOH(10mL)溶液室温加入DIPEA(0.80mL,4.65mmol)，并且室温搅拌10min，然后加入5-溴-2-氯嘧啶(0.30g,1.55mmol)。所述反应加热到70°C持续1h。反应完成(通过TLC)后，蒸发溶剂，并且所述粗残留物通过100-200M硅胶使用4%EtOAc:己烷纯化以获得所需黄色固体产物(0.108g,45%产率)。1H NMR(DMSO-d6):δ1.16(t,J=7.20Hz,3H),1.47(m,2H),2.00(m,2H),2.80(s,2H),2.97(m,2H),4.08(q,J=7.20Hz,2H),4.40(m,2H),7.02to7.27(m,5H)和8.43(s,2H)。
前体12：1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-氟-哌啶-4-羧酸乙酯
4氟哌啶-1,4-二羧酸-1-叔丁酯-4-乙酯:哌啶-1,4-二羧酸-1-叔丁酯-4-乙酯(1.50g,5.81mmol)的THF(25.0mL)溶液冷却到–78°C，然后逐滴加入LDA(THF中1.80M,6.50mL,11.62mmol)，并且相同温度下搅拌45min，随后–78°C加入N-氟苯磺酰亚胺(3.60g,11.62mmol)。所述反应的温度缓慢提高到室温，并且搅拌5-6h。所述反应然后冷却到0°C，并逐滴加入饱和NH4Cl溶液(50mL)淬灭，用EtOAc(3x100mL)提取，并且所述合并的有机物用盐水洗涤，(Na2SO4)干燥，过滤和减压浓缩。所述粗残留物通过100-200M硅胶使用2%EtOAc:己烷纯化以获得橙色粘稠液体产物(1.0g,63%产率)。MS:276.27[M+H]+。
4-氟哌啶-4-羧酸乙酯盐酸盐：向4-氟哌啶-1,4-二羧酸-1-叔丁酯-4-乙酯(1.0g,3.89mmol)的1,4-二噁烷(10mL)冰***液中加入HCl-二噁烷(4.0M,15mL)溶液，并且所述混合物室温搅拌30min。反应完成(通过TLC)后，蒸发溶剂以获得棕色固体材料(0.78g)，其不需纯化即用于下一步骤。MS:176.20[M+H]+。
1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-氟哌啶-4-羧酸乙酯(前体12)。向4-氟哌啶-4-羧酸酯盐酸盐(0.70g,4.34mmol)的EtOH(10mL)溶液室温加入DIPEA(1.92mL,10.86mmol)，并且所述混合物室温搅拌10min，然后加入5-溴-2-氯嘧啶(0.70g,3.62mmol)。所述反应加热到70°C持续1h。反应完成(通过TLC)后，蒸发溶剂，并且所述粗残留物通过100-200M硅胶使用3.0%EtOAc:己烷纯化以获得所需黄色固体产物(0.50g,42%产率)。MS:332.12[M+H]+。
前体13：4-烯丙基-1-(5-溴嘧啶-2-基)哌啶-4-羧酸乙酯
4-烯丙基哌啶-1,4-二羧酸-1-叔丁酯-4-乙酯:哌啶-1,4-二羧酸-1-叔丁酯-4-乙酯(5g,19.37mmol)的THF(50mL)溶液冷却到–78°C，然后逐滴加入LDA(THF中1.80M,21.67mL,38.74mmol)溶液，并且相同温度下搅拌45min，随后–78°C加入烯丙基溴(5mL,58.14mmol)。所述反应的温度缓慢提高到室温，并且搅拌5-6h。所述反应然后冷却到0°C，并逐滴加入饱和NH4Cl溶液(50mL)淬灭，用EtOAc(3x100mL)提取，并且所述合并的有机物用盐水洗涤，(Na2SO4)干燥，过滤和减压浓缩。所述粗残留物通过100-200M硅胶使用1%EtOAc:己烷纯化以获得橙色粘稠液体产物(5g,87%产率)。MS:298.19[M+H]+。
4-烯丙基哌啶-4-羧酸乙酯盐酸盐：向4-烯丙基哌啶-1,4-二羧酸-1-叔丁酯-4-乙酯(2g,6.70mmol)的1,4-二噁烷(10mL)冰***液中加入HCl-二噁烷(4.0M,15mL)溶液，并且室温搅拌30min。反应完成(通过TLC)后，蒸发溶剂以获得棕色固体材料(1.30g)，其不需进一步纯化即可用于下一步骤。MS:198.28[M+H]+。
4-烯丙基-1-(5-溴嘧啶-2-基)哌啶-4-羧酸乙酯（前体13）。向4-烯丙基哌啶-4-羧酸乙酯盐酸盐(1.30g,6.59mmol)的EtOH(20mL)溶液室温加入DIPEA(3.0mL,16.47mmol)，并且所述混合物室温搅拌10min，然后加入5-溴-2-氯嘧啶(1.06g,5.49mmol)。然后所述反应加热到70°C持续1h。反应完成(通过TLC)后，蒸发溶剂，并且所述粗残留物通过100-200M硅胶使用2.0%EtOAc:己烷纯化以获得所需黄色固体产物(1.0g,56%产率)。1H NMR(DMSO-d6):δ1.19(t,J=6.80Hz,3H),1.44(m,2H),2.02(m,2H),2.27(m,2H),3.10(m,2H),4.13(q,J=6.80Hz,2H),4.29(m,2H),5.06(m,2H),5.66(m,1H)和8.43(s,2H)。
前体14：2-(5-溴嘧啶-2-基)-1,3,4,5,6,6a-六氢环戊并[c]吡咯-3a-羧酸甲酯
2-苄基八氢环戊并[c]吡咯-3a-羧酸甲酯：向环戊-1-烯羧酸甲酯(2.0g,15.89mmol)的DCM(15.0mL)搅拌溶液室温加入(苄基((三甲基甲硅烷基)甲基)氨基)甲磺酸甲酯(4.0mL,15.88mmol)，并且所述混合物0°C搅拌15min，然后逐滴加入三氟乙酸(0.50mL)。然后室温下搅拌该混合物16小时。反应完成(通过TLC)后，蒸发溶剂，加入水(50.0mL)，然后用EtOAc(3x100mL)提取，并且所述合并的有机层用盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤和减压蒸发。所述粗残留物通过100-200M硅胶使用7%EtOAc:己烷纯化以获得浅黄色液体产物(1.50g,75%产率)。MS:260.16[M+H]+。
2-八氢环戊并[c]吡咯-3a-羧酸甲酯：向2-苄基八氢环戊并[c]吡咯-3a-羧酸甲酯(2.0g,7.69mmol)的MeOH(15.0mL)搅拌溶液加入氢氧化钯(0.20g,10%w/w)，并且所述混合物在H2气氛下室温搅拌16h。反应完成(通过TLC)后，所述反应混合物通过硅藻土，并蒸发溶剂。所述粗(1.50g)残留物无需进一步纯化即用于下一步。MS:170.18[M+H]+。
2-(5-溴嘧啶-2-基)八氢环戊并[c]吡咯-3a-羧酸甲酯（前体14）：向八氢环戊并[c]吡咯-3a-羧酸甲酯(1.0g,5.91mmol)的EtOH(10mL)溶液室温加入DIPEA(2.80mL,16.12mmol)，并且所述混合物室温搅拌10min，然后加入5-溴-2-氯嘧啶(1.10g,5.37mmol)。所述反应加热到70°C持续2h。完成(通过TLC)后，蒸发溶剂，并且所述粗残留物通过100-200M硅胶使用7.0%EtOAc:己烷纯化以获得所需白色固体产物(0.80g,45%)。MS:326.19[M+H]+。
前体15：1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-甲硫烷基-哌啶-4-羧酸乙酯
4-甲基磺酰哌啶-1,4-二羧酸-O1-叔丁酯-O4-乙酯：哌啶-1,4-二羧酸-1-叔丁酯-4-乙酯(2.0g,7.75mmol)的THF(100.0mL)溶液冷却到–78°C，然后逐滴加入LDA(THF中1.80M,8.80mL,15.56mmol)，并且所述混合物在相同温度下搅拌45min，随后–78°C加入二甲基二硫醚(5mL,23.25mmol)。所述反应的温度缓慢提高到室温，并且搅拌6h。所述反应然后冷却到0°C，并逐滴加入饱和NH4Cl溶液(50mL)淬灭，用EtOAc(3x100mL)提取，并且所述合并的有机物用盐水洗涤，(Na2SO4)干燥，过滤和减压浓缩。所述粗残留物通过100-200M硅胶使用5%EtOAc:己烷纯化以获得橙色粘稠液体产物(1.90g,83%产率)。MS:304.19[M+H]+。
4-甲基磺酰哌啶-4-羧酸乙酯盐酸盐：向4-甲基磺酰哌啶-1,4-二羧酸-O1-叔丁酯-O4-乙酯(0.23g,7.75mmol)的1,4-二噁烷(20mL)冰***液中加入HCl-二噁烷(4M,15mL)溶液，并且所述混合物室温搅拌30min。反应完成(通过TLC)后，蒸发溶剂以获得棕色固体材料(0.17g)，其不需进一步纯化即用于下一步骤。MS:204.10[M+H]+。
1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-甲基磺酰-哌啶-4-羧酸乙酯(前体15)：向4-(甲硫基)哌啶-4-羧酸乙酯盐酸盐(0.17g,0.75mmol)的EtOH(10.0mL)溶液室温加入DIPEA(0.03mL,3.75mmol)，并且所述混合物室温搅拌10min，然后加入5-溴-2-氯嘧啶(0.18g,0.90mmol)。所述反应加热到70°C持续1h。反应完成(通过TLC)后，蒸发溶剂，并且所述粗残留物通过100-200M硅胶使用3.0%EtOAc:己烷纯化以获得所需白色固体产物(0.16g,60%产率)。1H NMR(DMSO-d6):δ1.18(t,J=7.20Hz,3H),1.70(m,2H),2.04(s,3H),2.14(m,2H),3.50(m,2H),4.00(m,2H),4.20(q,J=7.20Hz,2H),和8.46(s,2H)。
前体16：1-(5-溴嘧啶-2-基)-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-羧酸甲酯
3-(三氟甲基)吡咯烷-3-羧酸甲酯盐酸盐：3-(三氟甲基)-吡咯烷-3-羧酸(0.25g,1.36mmol)的MeOH(5.0mL)冰***液用干HCl(气体)吹扫10分钟。所述混合物室温下搅拌12h。反应完成(通过TLC)后，蒸发溶剂以获得棕色固体材料(0.32g)，其不需纯化即用于下一步骤。MS:198.15[M+H]+。
1-(5-溴嘧啶-2-基)-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-羧酸甲酯（前体16）：向3-(三氟甲基)吡咯烷-3-羧酸甲酯盐酸盐(0.32g,1.36mmol)的EtOH(10.0mL)溶液室温加入DIPEA(1.1mL,6.79mmol)，并且所述混合物室温搅拌10min，然后加入5-溴-2-氯嘧啶(0.26g,1.36mmol)。所述反应加热到70°C持续1h。反应完成(通过TLC)后，蒸发溶剂，并且所述粗残留物通过60-120M硅胶使用10.0%EtOAc:己烷纯化以获得所需黄色固体产物(0.30g,63%产率)。MS:354.02[M+H]+。
前体17：1-[(5-溴嘧啶-2-基)甲基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯
5-溴-2-(溴甲基)嘧啶：向5-溴-2-甲基嘧啶(3.5g,20.23mmol)的CCl4(20mL)冰***液中加入AIBN(0.14g,2.02mmol)，然后逐份加入NBS(3.6g,20.23mmol)，并且所述混合物在70°C搅拌30h。反应完成(通过TLC)后，加入DCM(150mL)，并用水和盐水洗涤。通过无水Na2SO4干燥有机层，过滤，减压浓缩。所述粗残留物通过100-200M硅胶使用2%EtOAc:己烷纯化以获得所需产物(1.30g,25%产率)。1HNMR(CDCl3):δ4.68(s,2H)和9.03(s,2H)。
1-[(5-溴嘧啶-2-基)甲基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯（前体17）：向4-甲基哌啶-4-羧酸乙酯盐酸盐(0.08g,0.48mmol)的EtOH(5.0mL)溶液室温加入DIPEA(0.22mL,1.20mmol)，并且所述混合物室温搅拌10min，然后加入5-溴-2-(溴甲基)-嘧啶(0.10g,0.40mmol)。所述反应加热到70°C持续1h。反应完成(通过TLC)后，蒸发溶剂，并且所述粗残留物通过100-200M硅胶使用20%EtOAc:己烷纯化以获得所需黄色固体产物(0.10g,73%产率)。1H NMR(DMSO-d6):δ1.09(s,3H),1.13(t,J=7.20Hz,3H),1.45(m,2H),2.00(m,2H),3.12(m,2H),3.32(m,2H),3.62(q,J=7.20Hz,2H),4.08(m,2H)和8.94(s,2H)。
前体18：1-(5-溴-3-氟-吡啶基)-4-甲基-哌啶-4-羧酸甲酯
5-溴-2-氯-3-氟吡啶(100mg,0.475mmol)、4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯盐酸盐(118mg,0.57mmol)、乙基二异丙基胺(248uL,1.426mmol)和1-甲基-吡咯烷-2-酮(0.5mL)转移到微波反应瓶中。将管密封并210°C加热15分钟。再加入一份4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯盐酸盐(118mg,0.57mmol)，并且所述反应混合物于210°C再加热15分钟。所述反应混合物用水(25mL)稀释，使用1M HCl调节pH到3，然后用DCM(3x25mL)提取。合并有机部分，(棉绒塞)干燥，并且真空浓缩以生成粗棕色油。通过硅胶上的快速色谱用含DCM(0-100%梯度)的正己烷洗脱以生成不纯的混合物，所述混合物再通过硅胶上的快速色谱纯化，用0-4%EtOAc梯度、4%等度、然后含4-10%EtOAc的正己烷洗脱以获得所需产物(75mg,澄清油)。1H NMR(丙酮)δ8.05(dd,J=2.0,1.1Hz,1H),7.60(dd,J=12.6,2.0Hz,1H),4.17(q,J=7.1Hz,1H),3.83–3.75(m,1H),3.16–3.07(m,1H),2.19–2.11(m,1H),1.60–1.50(m,1H),1.25(t,J=7.1Hz,3H),1.22(s,3H)。m/z345.0,346.9[M+H]+。
前体19：1-(4-溴-2-吡啶基)-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯
4-溴-2-氟吡啶(500mg,2.84mmol)和甲基-哌啶-乙酯(590mg,2.84mmol)的无水THF(4mL)悬浮液用三乙基胺(1.46mL,11.4mmol)处理，然后微波150°C加热10min。所述反应进行浓缩，所述粗残留物(00801)悬于DCM，并且使用硅的正相色谱纯化，用含0-20%EtOAc的己烷洗脱以生成所需浅黄色油的产物(466mg,50%产率)。m/z327/329[M+H]+。
前体20：4-环丙基哌啶-4-羧酸乙酯盐酸盐：
4-环丙基哌啶-1,4-二羧酸-1-叔丁酯-4-乙酯。将LHMDS(1M THF溶液;2.4mL,2.4mmol)加入到哌啶1,4-二羧酸-1-叔丁酯-4-乙基酯(514mg,2mmol)的无水THF(5mL)-78°C溶液中，并且所述反应能在30min过程内于惰性气氛下加热到0°C。所述溶液在惰性气氛下于-60°C逐滴加入经烘箱干燥烧瓶中的烯丙基氯化钯二聚物(365mg,1mmol)、TMEDA(302uL,2mmol)的无水THF(2.5mL)溶液。连接一氧化碳气囊并且所述反应0°C搅拌2.5h。加入饱和氯化铵溶液(10mL)，所述反应混合物用Et2O(20mL)提取，并且所述有机相用饱和盐水(20mL)洗涤，(MgSO4)干燥，并真空浓缩。通过正相色谱(Grace12g,25-75%己烷:EtOAc,洗脱梯度;焦磷酸染色观察)分离出所需油产物(164mg,28%产率)。1H NMR(CDCl3)δ4.16(q,J=7.1Hz,2H),4.08–3.84(m,2H),2.72(s,2H),1.99(dd,J=13.5,2.0Hz,2H),1.43(s,9H),1.33–1.16(m,5H),0.91(tt,J=8.1,5.8Hz,1H),0.41–0.26(m,4H)。
4-环丙基哌啶-4-羧酸乙酯盐酸盐（前体20）。4-环丙基哌啶-1,4-二羧酸-1-叔丁酯-4-乙酯(164mg,0.55mmol)在含4M氯化氢的二噁烷(2mL,8mmol)中室温搅拌35分钟。除去挥发物，并且真空下干燥所述残留物以提供所需晶体固体产物(129mg)。1H NMR(MeOD)δ4.22(q,J=7.1Hz,2H),3.38(dd,J=10.5,2.7Hz,2H),2.99–2.82(m,2H),2.23(dd,J=14.6,2.2Hz,2H),1.74(td,J=14.3,4.2Hz,2H),1.29(t,J=7.1Hz,3H),1.11–0.96(m,1H),0.50–0.43(m,2H),0.43–0.36(m,2H)。
前体21：1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸-
1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸乙酯(400mg,1.22mmol)在二噁烷(4ml)中搅拌，并且加入浓盐酸(2.8ml)。所述反应在封闭管中100°C搅拌5h。LCMS指示了90%的酸转化。使所述反应冷却，用饱和碳酸氢钠水溶液稀释，以调节pH到固体沉淀点的约pH5。所述固体通过过滤收集，并且干燥以提供所需黄色固体产物(270mg，通过LCMS的90%纯度)(77%)。
前体224-烯丙基-1-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)嘧啶-2-基)哌啶-4-羧酸乙酯
向4-烯丙基-1-(5-溴嘧啶-2-基)哌啶-4-羧酸乙酯(1.0g,2.80mmol)的1,4-二噁烷(20mL)溶液中室温加入乙酸钾(0.42g,4.20mmol)和双频哪醇合二硼(0.78g,3.10mmol)，并且所述混合物通过N2吹扫脱气15-20min，然后加入三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(0.144g,0.14mmol)和三环己基膦(0.09gm,0.33mmol)。所述反应混合物再脱气15-20min，然后加热到80°C持续3h。反应完成(通过TLC)后，所述混合物冷却到室温，并且用500mL EtOAc稀释。所述混合物通过硅藻土，并且所述溶剂蒸发以获得粗材料(0.80g)，所述材料不用进一步纯化就可用于下一步(即合成化合物139)。MS:402.31[M+H]+。
前体23：4-(三氟甲基)哌啶-4-羧酸乙酯盐酸盐：
4-(三氟甲基)-哌啶-1,4-二羧酸-1-叔丁酯-4-乙酯:哌啶-1,4-二羧酸-1-叔丁酯-4-乙酯(0.5g,1.94mmol)的THF(20mL)溶液冷却到–78°C，然后逐滴加入LDA(THF中1.80M,2.15mL,3.88mmol)，并且所述混合物在相同温度下搅拌45min，随后–78°C加入S-(三氟甲基)二苯并噻吩鎓三氟甲磺酸盐(1.56g,3.88mmol)。所述反应的温度缓慢提高到室温，并且搅拌6h。所述反应然后冷却到0°C，并逐滴加入饱和NH4Cl溶液(50mL)，用EtOAc(3x100mL)提取，并且所述合并的有机物用盐水洗涤，(Na2SO4)干燥，过滤和减压浓缩。所述粗残留物通过100-200M硅胶使用2%EtOAc:己烷纯化以获得黄色固体产物(0.15g,23%产率)。MS:326.15[M+H]+。
4-(三氟甲基)哌啶-4-羧酸乙酯盐酸盐：向4-(三氟甲基)哌啶-1,4-二羧酸-1-叔丁酯-4-乙酯(0.15g,0.19mmol)的1,4-二噁烷(10mL)冰***液中加入HCl-1,4-二噁烷(4.0M,15mL)溶液，并且所述混合物室温搅拌30min。反应完成(通过TLC)后，蒸发溶剂以获得棕色固体材料(0.12g)，其不需纯化即用于下一步骤(即合成化合物142)。MS:226.12[M+H]+。
前体24：7-溴-2-甲基-3-氧代-3,4-二氢-2H-吡啶并[3,2b][1,4]噁嗪-2-羧酸乙酯
向2-氨基-5-溴吡啶-3-醇(1g,5.29mmol)的DMF(10mL)冰***液中加入KF(0.77g,13.23mmol)，然后加入2-溴-2-甲基丙二酸二乙酯(1mL,5.29mmol)，并且所述混合物加热到60°C持续4h。完成(通过TLC)后，所述反应冷却，用水淬灭，并用EtOAc(3x100mL)提取。所述合并的有机物用盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，并且在减压浓缩以获得所需灰白色固体产物(1g,60%)。
前体25：1-(4-溴噻唑-2-基)-4-乙基-哌啶-4-羧酸乙酯
向4-乙基哌啶-4-羧酸乙酯盐酸盐(140mg,0.62mmol)和2,4-二溴噻唑(100mg,0.41mmol)的DMF(0.3mL)溶液中室温加入三乙基胺(0.26mL,1.9mmol)，并且所述混合物加入到100°C并搅拌2h。所述混合物冷却到室温，然后用EtOAc(2mL)和MeOH(2mL)稀释，随后减压蒸发至干。所述粗残留物通过硅胶使用EtOAc:环己烷(10%-60%)纯化以获得所需粘性油产物，所述粘性油产物静置固化(127mg,89%产率)。MS:347.03,349.01[M+H]+。
前体26：1-(5-溴噻唑-2-基)-4-乙基-哌啶-4-羧酸乙酯
向4-乙基哌啶-4-羧酸乙酯盐酸盐(140mg,0.62mmol)和2.5-二溴噻唑(100mg,0.41mmol)的DMF(0.3mL)溶液中室温加入三乙基胺(0.26mL,1.9mmol)，并且所述混合物加热到100°C并搅拌2h。所述混合物冷却到室温，用EtOAc(2mL)和MeOH(2mL)稀释，然后减压蒸发至干。所述粗残留物通过12g硅胶使用EtOAc:环己烷(10%-60%)纯化以获得所需粘性油产物(110mg,77%产率)。MS:347.03,349.01[M+H]+。
前体27：1-(3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)-4-乙基哌啶-4-羧酸乙酯
将3,5-二氯-1,2,4-噻二唑(135mg,0.87mmol)加入到4-乙基哌啶-4-羧酸乙酯盐酸盐(190mg,0.87mmol)和三乙基胺(264mg,2.61mmol)的THF(9mL)溶液中，并且室温搅拌1h，生成悬浮液，所述悬浮液过滤，并且所述滤液真空浓缩以生成1-(3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)-4-乙基哌啶-4-羧酸乙酯黄色油(260mg,98%)。ESI MI m/z304.2[M+H]+。
前体28：1-(5-溴嘧啶-2-羰基)-4-甲基哌啶-4-羧酸乙酯
惰性气氛下向5-溴嘧啶-2-羧酸(0.150g,0.742mmol)和DMF(1滴,催化量)的DCM(10mL)溶液0°C逐滴加入草酰氯(0.10mL,1.11mmoL)，并且所述混合物室温搅拌1h。所述溶剂在惰性气氛下减压蒸发，并且所述残留物溶于THF(5mL)，然后0°C加入DIPEA(0.70mL,3.71mmol)和4-甲基哌啶-4-羧酸乙酯盐酸盐(0.14g,0.89mmoL)。室温下搅拌所得混合物16小时。反应完成(通过TLC)后，所述混合物倾倒入冰冷水(100mL)中，用EtOAc(3x100mL)提取，并且合并的有机物用水和盐水洗涤，Na2SO4干燥和过滤。所述溶剂减压蒸发，并且所述粗残留物通过硅胶纯化，用含40%EtOAc的己烷洗脱以获得所需灰白色半固体产物(0.10g,37%产率)。MS:358.01[M+H]+。
前体29：4-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)-1-甲基环己烷羧酸乙酯
4-氨基环己烷羧酸乙酯：向4-氨基环己烷羧酸(5.0g,34.92mmol)的乙醇(20mL)冰***液中加入亚硫酰氯(7.60ml,104.76mmol)，并且所述混合物加热到80°C持续2-3h。反应完成(通过TLC)后，减压下蒸发溶剂从而以定量产率生成所需产物。
4-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-环己烷羧酸乙酯：4-氨基环己烷羧酸乙酯(0.50g,2.92mmol)的甲苯(10mL)溶液中加入Et3N(1.02mL,7.30mmol)和邻苯二甲酸酐(0.56g,3.80mmol)，并且所述混合物使用迪安斯塔克(Dean-Stark)设备回流6-8h以除去水。反应完成(通过TLC)后，所述溶剂减压蒸发，加入水(50mL)，并且室温搅拌30min。因此所得的固体材料在真空下过滤收集，并且干燥以获得所需灰白色固体产物(0.30g,34%)。1H NMR(DMSO-d6):δ7.84(s,4H),4.19(q,J=7.20Hz,2H),3.71(m,1H),2.71(m,1H),2.06(m,2H),1.90(m,2H),1.69(m,2H),1.60(m,2H),和1.23(t,J=7.20Hz,3H)。
4-(1.3-二氧代异吲哚啉-2-基)-1-甲基环己烷羧酸乙酯：4-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)环己烷羧酸乙酯(0.30g,1.00mmol)的THF(10mL)溶液冷却到–78°C，然后-78°C逐滴加入LDA(THF中1.60M,1.88mL,3.00mmol)。所述混合物在相同温度下搅拌30分钟，然后–78°C下加入MeI(0.311mL,5.00mmol)。所述反应的温度缓慢提高到室温，并且搅拌过夜。所述反应然后冷却到0°C，并逐滴加入饱和NH4Cl溶液(30mL)淬灭，用EtOAc(3x50mL)提取，并且所述合并的有机物用盐水洗涤，(Na2SO4)干燥，过滤和减压浓缩以获得所需粘稠液体产物(0.30g,97%)。MS:316.12[M+H]+。
4-氨基-1-甲基环己烷羧酸乙酯：向4-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-1-甲基环己烷羧酸乙酯(0.30g,0.95mmol)的EtOH(20mL)溶液中加入水合肼(0.115mL,2.38mmol)，并且所得混合物加热到80°C持续2-3h。反应完成(通过TLC)后，减压蒸发溶剂，加入水(20mL)，用EtOAc(3x50mL)提取，并且所述合并的有机物用盐水洗涤，(Na2SO4)干燥，过滤和减压浓缩以获得所需粘稠液体产物(0.18g,粗)。MS:186.20[M+H]+。
4-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)-1-甲基环己烷羧酸乙酯：向4-氨基-1-甲基环己烷羧酸乙酯(0.18g,0.97mmol)的EtOH(5.0mL)溶液中加入DIPEA(0.52mL,2.91mmol)，然后加入5-溴-2-氯嘧啶(0.185g,0.97mmol)。所述混合物加热到80°C持续6-8h，然后冷却到室温后，加入水，并用EtOAc(3x100mL)提取。用盐水洗涤合并的有机物，无水Na2SO4干燥，过滤，减压蒸发。所述粗残留物通过100-200M硅胶使用4%EtOAc:己烷纯化以获得所需产物(0.064g,19%)。MS:342.01[M+H]+。
前体30：4-((5-溴嘧啶-2-基)(甲基)氨基)-1-甲基环己烷羧酸乙酯
向4-(5-溴嘧啶-2-基氨基)-1-甲基环己烷羧酸乙酯(0.30g,0.88mmol)的THF(10mL)冰***液逐份加入NaH(0.053g,1.32mmol,矿物油中的60%分散液)，并且所述混合物在0°C搅拌10min，然后逐滴加入MeI(0.066ml,1.06mmol)。所述混合物加热到65℃持续6-8小时。完成(通过TLC)后，所述反应冷却到0°C，并用冰冷水(20mL)淬灭，用EtOAc(2x50mL)提取，并且所述合并的有机物用水、盐水洗涤，Na2SO4干燥。所述粗残留物通过100-200M硅胶使用2%EtOAc:己烷纯化以获得所需黄色液体产物(0.074g,24%产率)。1H NMR(DMSO-d6):δ8.42(s,2H),4.51(m,1H),4.15(q,J=6.80Hz,2H),2.85(s,3H),2.15(m,2H),1.52(m,4H),1.36(m,2H),1.29(t,J=6.80Hz,3H)和1.21(s,3H)。
前体31：1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-乙氧基哌啶-4-羧酸乙酯
1-苄基-4-羟基哌啶-4-羧酸：1-苄基-4-羟基哌啶-4-腈(2.5g,11.55mmol)的6NHCl(5.0mL)溶液在微波辐射中加热到100℃持续2h。反应完成(通过TLC)后，溶剂减压浓缩，并且所述粗残留物(4.0g)不需要进一步纯化就可用于下一步骤。MS:236.16[M+H]+。
4-羟基哌啶-4-羧酸：向1-苄基-4-羟基哌啶-4-羧酸(1.0g,4.25mmol)的EtOH(15.0mL)溶液室温加入氢氧化钯(0.40g,40%w/w)，并且所述混合物在H2气氛下室温搅拌20h。反应完成(通过TLC)后，所述混合物通过硅藻土，并蒸发溶剂。所述粗(0.70g)残留物无需进一步纯化即用于下一步骤。MS:145.99[M+H]+。
4-羟基哌啶-4-羧酸乙酯：向4-羟基哌啶-4-羧酸(1.20g,8.26mmol)的EtOH(30ml)溶液室温加入浓HCl(5ml)，并且所述混合物加热到80°C持续2-3h。完成(通过TLC)后，减压蒸发溶剂以获得所需产物(1.20g,粗)，其无需进一步纯化即用于下一步骤。1H NMR(D2O):δ4.20(q,J=7.20Hz,2H),3.28(M,4H),2.22(m,2H),1.91(m,2H),和1.22(t,J=7.20Hz,3H)。
1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-羟基哌啶-4-羧酸乙酯：向4-羟基哌啶羧酸乙酯(0.60g,3.44mmol)的EtOH(15mL)溶液中加入DIPEA(2.95mL,17.24mmol)，然后加入5-溴-2-氯嘧啶(0.67g,3.44mmol)。所述反应加热到80°C持续3-8h，然后冷却到室温，加入水，并用EtOAc(3x100mL)提取。用盐水洗涤合并的有机物，无水Na2SO4干燥，过滤，减压蒸发。所述粗残留物通过100-200M硅胶使用20%EtOAc:己烷纯化以获得所需黄色固体产物(0.57g,88%)。1H NMR(DMSO-d6):δ8.44(s,2H),5.58(s,1H),4.27(m,2H),4.10(q,J=7.20Hz,2H),3.28(m,2H),1.81(m,2H),1.66(m,2H),和1.18(t,J=7.20Hz,3H)。
1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-乙氧基哌啶-4-羧酸乙酯：向1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-羟基哌啶-4-羧酸乙酯(0.50g,1.51mmol)的DMF(5mL)冰***液逐份加入NaH(0.066g,1.67mmol,矿物油中的60%分散液)，并且所述混合物在0°C搅拌10min，然后逐滴加入乙基碘(0.58mL,7.57mmol)。0°C下搅拌所述反应2小时。反应完成(通过TLC)后，所述反应用饱和NH4Cl溶液淬灭(100mL)，用EtOAc(3x100mL)提取，并且合并的有机物用水和盐水洗涤，Na2SO4干燥。所述粗残留物通过100-200M硅胶使用10%EtOAc:己烷纯化以获得所需黄色液体产物(0.24g,44%产率)。1H NMR(DMSO-d6):δ8.27(s,2H),4.31(m,2H),4.22(q,J=6.40Hz,2H),3.44(m,4H),1.96(m,4H),和1.28(m,6H)。
前体32：5-[(5-溴嘧啶-2-基)甲基]-2-甲基-1,3-二噁烷-2-羧酸乙酯
5-[(5-溴嘧啶-2-基)氨基]-2-甲基-1,3-二噁烷-2-羧酸乙酯：
组合5-溴-2-氯-嘧啶(200mg,1.03mmol)、2-氨基丙烷-1,3-二醇(188mg,2.07mmol)、三乙基胺(0.58mL)和DMSO(2mL)并且加热到100C持续3h。所述反应混合物用水稀释(25mL)，并且所得沉淀进行过滤(弃去滤液)以提供所需产物(227mg,白色固体)。1H NMR(MeOD/CDCl3)δ8.25(s,2H),4.03-3.98(m,1H),3.75–3.66(m,4H)。m/z[M+H]+248.0/250.0。
5-[(5-溴嘧啶-2-基)氨基]-2-甲基-1,3-二噁烷-2-羧酸乙酯：
室温组合2-[(5-溴嘧啶-2-基)氨基]丙烷-1,3-二醇(100mg,0.40mmol)、丙酮酸乙酯(80μL,0.72mmol)和乙腈(2mL)。加入等份***合三氟化硼(100μL,0.80mmol)到反应混合物中，并且室温持续搅拌24h。再加入一份***合三氟化硼(100μL,0.80mmol)到反应混合物中，并且室温再搅拌24h。所述反应混合物直接加载到柱上以进行快速色谱(12g硅胶柱)，用含0-100%EtOAc梯度的正庚烷洗脱，以生成所需产物(105mg,淡褐色油)。m/z345.9/347.9[M+H]+。
化合物1：1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯：向1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸乙酯(0.50g,1.52mmol)的EtOH(15mL)溶液加入[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]硼酸(0.52g,1.52mmol)和2.0M Na2CO3水溶液(0.24g,2.28mmol)。所述反应通过N2吹扫脱气15min，然后加入四(三苯基膦)钯(0)(0.18g,0.15mmol)。所述反应再脱气10-15min，然后加热到80°C持续2h。所述反应混合物然后通过硅藻土，并且蒸发溶剂。所述粗残留物通过100-200M硅胶使用1.50%MeOH:DCM纯化以获得灰白色固体的产物，所述产物最终用醚研磨(0.18g,22%产率)。1H NMR(DMSO-d6):δ1.15(t,J=7.20Hz,3H),1.20(m,6H),1.45(m,2H),2.06(m,2H),2.54(m,2H),3.21(q,J=7.20,2H),4.15(q,J=6.80Hz,2H),4.32(m,2H),6.86(br s,1H),7.44(m,1H),7.99(m,2H),8.23(s,1H),8.47(m,1H),8.80(m,1H),8.92(s,2H)和10.55(br s,1H)。MS:546.12[M+H]+。
1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸(1):向1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(0.18g,0.33mmol)的DMSO(2mL)冰***液加入叔丁醇钾(0.184g,1.65mmol)，并且所述混合物室温搅拌2h。反应完成(通过TLC)后，加入水(10mL)然后用EtOAc(2x50mL)提取。弃去有机层并且水层的pH调节到4-5，然后用热EtOAc(3x100mL)提取。所述合并的有机层通过Na2SO4干燥，过滤并减压蒸发。因此所得的残留物用***研磨以提供所需灰白色固体产物(0.11g,65%)。1HNMR(DMSO-d6):δ1.10(t,J=7.20Hz,3H),1.19(s,3H),1.40(m,2H),2.04(m,2H),3.22(q,J=7.20,2H),3.39(m,2H),4.30(m,2H),6.87(br s,1H,可交换的D2O),7.44(m,1H),7.92(s,1H),7.99(m,1H),8.18(s,1H),8.42(d,J=8.0Hz,1H),8.78(d,(J=4.40Hz,1H),8.85(s,2H),10.54(br s,1H,可交换的D2O)和12.45(br s,1H,可交换的D2O)。MS:518.27[M+H]+。
从其各自前体通过与中间体1和合适的芳基卤偶联来相似制备下列化合物。所述芳基卤可以使用就合成中间体3所述的方法生成。
化合物6：1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(4-甲基-2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(4-甲基-2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯：向1-(5-(7-溴-2-(3-乙基脲基)苯并噻唑-5-基)嘧啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸乙酯(中间体4)(0.5g,0.91mmol)的DMSO(5mL)冰***液加入双(新戊基乙二醇)二硼(0.41g,1.82mmol)和乙酸钾(0.18g,1.82mmol)。所述反应用N2吹扫15min脱气，然后加入二氯[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)(0.07g,0.091mmol)和再脱气10-15min，然后加热到80°C持续2h。反应完成(TLC以及MS监测)后，所述反应冷却到室温，然后加入2-氯-4-甲基吡啶(0.23g,1.37mmol)和Cs2CO3水溶液(0.45g,1.37mmol,溶解在最小量水中)。所述反应用N2吹扫15min脱气，然后加入四(三苯基膦)钯(0)(0.11g,0.091mmol)并再脱气10-15min，然后加热到80°C持续16h。反应完成后，加入100mL冰冷水，然后用EtOAc提取(3x150mL)，并且合并的有机层用盐水洗涤，Na2SO4干燥，过滤和减压蒸发。所述粗残留物通过100-200M硅胶使用1.50%MeOH:DCM纯化以获得米色固体，再通过制备（preperative）HPLC纯化以获得所需灰白色固体产物(0.016g,3%)。
1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(4-甲基-2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸(6):向1-(5-(2-(3-乙基脲基)-7-(4-甲基吡啶-2-基)苯并噻唑-5-基)嘧啶-2-基)-4-基哌啶-4-羧酸乙酯(0.015g,0.026mmol)的THF冰***液加入水性LiOH(0.006g,0.134mmol溶解在最小量H2O中)，并且所述混合物加热到65°C持续3h。反应完成(通过TLC)后，所述溶剂浓缩，并且加入10mL水，用EtOAc(2x50mL)洗涤。弃去所述有机层，并且水层pH调节到4-5，然后用热EtOAc(3x50mL)提取，所述合并的有机层通过Na2SO4干燥，并减压蒸发溶剂。因此所得的残留物用***研磨以提供所需灰白色固体产物(0.005g,35%)。1H NMR(DMSO-d6):δ1.11(t,J=7.20Hz,3H),1.19(s,3H),1.41(m,2H),2.07(m,2H),2.45(s,3H),3.173.24(m,4H),4.32(m,2H),6.93(br s,1H),7.27(d,J=4.80,1H),7.94(s,1H),8.23(s,1H),8.35(s,1H),8.65(d,J=4.8Hz,1H),8.91(s,2H)和10.60(br s,1H)。MS:530.21[M H]-。
用类似方法制备以下化合物。
化合物23：1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-甲氧基噻唑-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-甲氧基噻唑-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸：1-(5-(7-溴-2-(3-乙基脲基)苯并[d]噻唑-5-基)嘧啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸乙酯(150mg,0.274mmol)、四(三苯基膦)钯(16mg,0.0138mmol)和2-甲氧基-4-(三丁基甲锡烷基)噻唑(0.33mL,0.822mmol)的无水DMF(3.0mL)搅拌混合物用N2吹扫20min。所述反应瓶密封，并且110°C加热10h。冷却到室温后，所述混合物用水(50mL)稀释，并用EtOAc(3x20mL)提取，用盐水(30mL)洗涤和(MgSO4)干燥。真空除去溶剂，并且所述残留物通过快速硅色谱纯化，用含0-100%EtOAc的异己烷洗脱以生成99mg所需灰白色粘性固体产物。
1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-甲氧基噻唑-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸(23)：向1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-甲氧基噻唑-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸(99mg,0.17mmol)的最少DMSO搅拌溶液在冰浴中冷却，并用叔丁醇钾处理(95mg,0.85mmol)。当完成加入时，所述混合物能到达室温，并搅拌1h，到该时间LCMS显示完成反应。用水（20mL）稀释该反应混合物，用EtOAc(20mL)洗涤。所述水部分通过加入稀盐酸来酸化(pH4)，并真空浓缩到小体积。所述残留物溶解在DMSO中，并通过制备HPLC纯化。获得浅黄色固体化合物23(31mg,33%产率)。1H NMRδ(ppm)(DMSO-d6):8.88(2H,s),8.02(1H,d,J=1.67Hz),7.87(2H,s),6.96(1H,s),4.32(2H,dt,J=13.81,4.49Hz),4.25(3H,s),3.38(2H,ddd,J=14.70,8.77,3.84Hz),3.24(2H,p,J=6.77Hz),2.06(2H,dt,J=13.42,3.67Hz),1.42(2H,ddd,J=13.42,10.03,3.87Hz),1.22(3H,s),1.14(3H,t,J=7.18Hz)。MS554.0[M+H]+
用类似方法制备以下化合物。
化合物26：1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-羟基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸。
[5-[2-(4-乙氧基羰基-4-甲基-1-哌啶基)嘧啶-5-基]-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-7-基]硼酸:1-[5-[7-溴-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(513mg,0.938mmol)、双(新戊基)乙二醇二硼(634mg,2.822mmol)、乙酸钾(366mg,3.75mmol)和1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]氯化钯(II)(76mg,0.094mmol)溶于无水DMF(9.8mL)的搅拌混合物用N2吹扫15min，密封并加热到80°C持续16h，到该时间HPLC显示完成反应。所述反应混合物冷却到室温，用DCM(100mL)稀释，用水(100mL)然后盐水(100mL)洗涤，并(MgSO4)干燥。真空除去溶剂，并且所述残留物通过快速硅色谱纯化，用含0-100%EtOAc的异己烷洗脱以生成所需灰白色固体产物(316mg,60%产率)。
1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-羟基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸(26):[5-[2-(4-乙氧基羰基-4-甲基-1-哌啶基)嘧啶-5-基]-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-7-基]硼酸(166mg,0.286mmol)的NaOH水溶液(2M,1.3mL)的搅拌悬浮液用过量过氧化氢(27.5%水溶液,0.45mL)处理，并且保持室温3天，到该时间LCMS显示完成反应。所得混合物用水(30mL)稀释，并加入少量浓硫酸来酸化。所述沉淀固体通过过滤收集，用水(10mL)洗涤，并真空干燥以生成白色固体化合物26(102mg,78%产率)。1H NMR(DMSO-d6):δ10.37(1H,s),8.67(2H,s),7.37(1H,s),6.85(1H,s),6.77(1H,t,J=5.86Hz),4.30(2H,dt,J=13.75,4.56Hz),3.36(2H,ddd,J=13.34,9.92,3.07Hz),3.22(2H,p,J=6.69Hz),2.04(2H,dt,J=13.63,3.69Hz),1.42(2H,ddd,J=13.55,10.29,3.91Hz),1.22(3H,s),1.13(3H,t,J=7.19Hz)。m/z:457[M+H]+。
化合物37:1-{5-[7-乙基-2-(3-乙基-脲基)-苯并噻唑-5-基]-嘧啶-2-基}-4-甲基-哌啶-4-羧酸(或称为1-[5-[7-乙基-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸)
1-[5-[2-(3-乙基-脲基)-7-乙烯基-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯：1-{5-[7-溴-2-(3-乙基-脲基)-苯并噻唑-5-基]-嘧啶-2-基}-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(50mg)、4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(28mg)、PdCl2(dppf).DCM(4mg)、氟化钾(16mg)、1,4-二噁烷(1.5mL)和水(0.5mL)在0.5-2mL微波瓶中合并，脱气并在预热的油浴中90°C加热过夜。所述混合物冷却到室温，用水稀释，并用EtOAc(4×10mL)提取。所述有机相用盐水洗涤，Na2SO4干燥，并真空浓缩。所述残留物通过Biotage Si色谱，12g Grace管，含45%MeOH的DCM纯化。组合有关组分以生成固体(56mg)，再通过Biotage Si色谱，12g Grace管，含2%MeOH的DCM等度纯化。组合相关组分以生产所需浅橙色固体产物(27mg,60%)。m/z:495[M+H]+。
1-[5-[7-乙基-2-(3-乙基-脲基)-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯：1-{5-[2-(3-乙基-脲基)-7-乙烯基-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基}-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(27mg)溶解在EtOH(5mL)、THF(0.5mL)和乙酸(0.5mL)中，并且加入10%钯碳（palladium on carbon）(6mg)和甲酸铵(168mg)。排空所述烧瓶，并用N2吹扫(x2)和60°C搅拌4天。所述混合物冷却到室温，并通过PTFE过滤器过滤。所述过滤器用EtOH/DCM冲洗，并且所述滤液在减压下浓缩。所述残留物然后溶于EtOAc，并用Na2CO3(饱和，水性)洗涤。用EtOAc洗涤水层。合并的有机层用盐水洗涤，Na2SO4干燥，然后真空浓缩。所述残留物通过色谱，Biotage,12g Grace管，含DCM-4%MeOH的DCM纯化，并且所述相关组分合并，并减压浓缩以生成所需白色固体产物(19mg,70%)。m/z:497[M+H]+。
1-[5-[7-乙基-2-(3-乙基-脲基)-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸(37)：1-{5-[7-乙基-2-(3-乙基-脲基)-苯并噻唑-5-基]-嘧啶-2-基}-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(19mg)溶解在EtOH(1mL)中，并加入1M水性NaOH(1mL)。70°C搅拌所述混合物过夜。所述混合物冷却到室温，并用1M HCl(水性)酸化到pH3，然后真空浓缩，并且所述残留物悬浮(超声处理)于含～10%MeOH的DCM。所述混合物通过注射器过滤器(20微米)过滤，并且真空浓缩滤液。获得乳膏状固体(54mg)，并通过制备HPLC(吉尔森(Gilson),40s70-100%水/MeCN+0.1%甲酸)纯化。所述相关组分进行合并，并真空轻度浓缩，然后冻干生成白色固体化合物37(2mg)。1H NMR(CDCl3+CD3OD):δ1.21(3H,t,J=7.2Hz),1.25(3H,s),1.35(3H,t,J=7.6Hz),1.45(2H,m),2.17(2H,br d,J=13.6Hz),2.85(2H,q,J=7.6Hz),3.323.41(4H,m),4.31(2H,br dt,J=13.8和4.0Hz),7.14(1H,s),7.54(1H,s),8.54(1H,s),8.54(1H,s)。m/z:469[M+H]+。
化合物381-{5-[2-(3-乙基-脲基)-7-甲基-苯并噻唑-5-基]-嘧啶-2-基}-4-甲基-哌啶-4-羧酸(或称为1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-甲基-1,3-苯并噻唑-5-基]-嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸)
1-[5-[2-(3-乙基-脲基)-7-甲基-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯：1-{5-[7-溴-2-(3-乙基-脲基)-苯并噻唑-5-基]-嘧啶-2-基}-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(75mg)、2,4,6-三甲基-环三硼氧烷(0.19mL)和PdCl2(dppf).DCM(6mg)溶解在2-5mL微波瓶的1,4-二噁烷(2mL)中，并加入氟化钾(24mg)的水(0.67mL)溶液。所述混合物脱气，并在130°C微波加热20分钟。LCMS显示反应大约50%转化成产物。所述混合物用水稀释，EtOAc(4x10mL)提取，并且所述有机相用盐水洗涤，Na2SO4干燥，并减压浓缩。所述混合物通过色谱Si12g Grace管，含DCM-75%EtOAc的DCM纯化。所述相关组分合并生成乳膏状固体(55mg)，通过含1H NMR的CDCl3加上滴MeOD显示为起始材料和产物的大约1:1混合物。所述混合物无需进一步纯化即可使用。m/z:483[M+H]+。
1-[5-[2-(3-乙基-脲基)-7-甲基-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸(38)：1-{5-[2-(3-乙基-脲基)-7-甲基-苯并噻唑-5-基]-嘧啶-2-基}-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(55mg,约50%纯度)溶解在EtOH(1mL)中，并加入1M水性NaOH(1mL)。所述混合物70°C加热过夜。所述混合物冷却到室温，并用1M HCl(水性)酸化到pH3。所述混合物真空浓缩，所述残留物在MeCN中悬浮，并再浓缩至干。所得白色固体在含～10%MeOH的DCM中超声处理，并通过硅藻土过滤。减压浓缩滤液得到乳膏状固体(33mg)。所述混合物在MeOH加上滴水中悬浮，并过滤，所述滤液通过制备HPLC(吉尔森,等度45%水/MeCN+0.1%甲酸)纯化。所述相关组分合并且冻干以提供白色固体化合物38(9mg)。1H NMR(CDCl3+CD3OD):δ1.19(3H,t,J=7.2Hz),1.26(3H,s),1.46(2H,m),2.14(2H,br d,J=14.0Hz),2.49(3H,s),3.33(2H,q,J=7.2Hz),3.45(2H,m),4.23(2H,br dt,J=14.0和4.5Hz),7.07(1H,s),7.50(1H,s),8.50(2H,s)。m/z:455[M+H]+。
化合物391-{5-[7-环己基-2-(3-乙基-脲基)-苯并噻唑-5-基]-嘧啶-2-基}-4-甲基-哌啶-4-羧酸(或称为1-[5-[7-环己基-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸)
1-[5-[7-环己基-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯：将含环己基氯化镁的Et2O(2.03mL,3.65mmol)室温加入LiCl(53mg,1.25mmol)和含1M氯化锌的Et2O(4.38mL,4.38mmol)的THF(2.5mL)溶液，然后立即形成灰色沉淀。室温搅拌15min，1-{5-[7-溴-2-(3-乙基-脲基)-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基}-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(100mg,182.66mmol)和Pd(dppf)Cl2.DCM(10mol%)的THF溶液(3mL)室温搅拌30min。随后回流加热生成所需产物和等摩尔量氢化脱溴起始材料的最小形成。所述反应混合物转移到微波容器，并110°C加热30min。所述反应混合物用1M HCl(1x5mL)淬灭，用EtOAc(10mL)提取，干燥(MgSO4)，真空浓缩，并通过反相HPLC(60-80%水(0.1%FA):MeOH)提供2.7mg(3%分离产率)白色固体。
1-[5-[7-环己基-2-(3-乙基-脲基)-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸(39)：前面步骤所得的材料然后溶解在3:2EtOH:1M NaOH(0.5mL)中，并在微波反应器中120°C辐射30min。所述反应混合物用水/EtOH(1mL)稀释，用1M HCl(1.0mL)酸化，用EtOAc(6mL)提取，并且所述有机组分用饱和盐水(4mL)洗涤，(MgSO4)干燥，并真空浓缩以提供2mg(77%)产率的化合物39。1H NMR(CDCl3)δ8.57(s,2H),7.53(d,J=6.3Hz,1H),7.17(t,J=8.9Hz,1H),4.11(dd,J=13.5,6.9Hz,2H),3.82(s,2H),3.48–3.40(m,2H),2.72(dd,J=13.4,10.5Hz,1H),2.30–0.80(m,21H)。MS:566.2[M+H]+。
化合物411-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(1-苯基***-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(1-苯基***-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯：含苯胺(18.9mg,0.203mmol)的ACN(2mL)冷却到0°C，逐滴加入亚硝酸叔丁酯(31.4mg,0.305mmol)，所述反应搅拌5分钟，然后加入一份叠氮基三甲基硅烷(50.7mg,0.244mmol)，并且所述混合物加热到室温，并搅拌2小时。加入1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-乙炔基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(100mg,0.203mmol)和抗坏血酸钠(8.1mg,0.040mmol)，然后加入含硫酸铜(1.6mg,0.010mmol)的0.1mL水。所述反应室温搅拌18小时，通过keiselguhr垫过滤，并且真空除去所述溶剂以生成褐色胶。所述粗材料通过制备HPLC纯化生成灰白色固体产物28mg,22.6%产率。
1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(1-苯基***-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸(41)：使用与就化合物9所述相似的条件进行水解以生成灰白色固体的化合物41，7.9mg,29%产率。1H NMR(DMSO-d6):δ12.50(1H,s),10.82(1H,s),9.68(1H,s),8.92(2H,s),8.12(1H,d,J=1.65Hz),8.03(2H,d,J=7.99Hz),7.97(1H,d,J=1.63Hz),7.72(2H,t,J=7.76Hz),7.60(1H,t,J=7.44Hz),6.97(1H,t,J=5.49Hz),4.34(2H,dt,J=13.69,4.45Hz),3.40(2H,t,J=10.86Hz),3.26(2H,p,J=6.70Hz),2.06(2H,dt,J=13.58,3.73Hz),1.43(2H,ddd,J=13.68,9.65,3.95Hz),1.23(3H,s),1.16(3H,t,J=7.18Hz)。MS:584[M+H]+。
化合物461-{5-[2-(3-乙基-脲基)-苯并噻唑-5-基]-嘧啶-2-基}-4-甲基-哌啶-4-羧酸(或称为1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸)
1-[5-[7-溴-2-(3-乙基-脲基)-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸：1-{5-[7-溴-2-(3-乙基-脲基)-苯并噻唑-5-基]-嘧啶-2-基}-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(50mg)溶解在THF(1mL)中，并加入1M水性NaOH(1mL)。所述混合物70°C加热过夜。LCMS显示约50%转化成产物。加入EtOH(0.5mL)，并且再持续加热6h。所述混合物用1M HCl(水性)酸化到pH3，并且减压浓缩。所述混合物悬浮在～10%MeOH的DCM中，并且通过注射过滤器过滤。真空浓缩所述滤液以生成所需灰白色固体(16mg)，其不需要进一步纯化就可用于下一步骤。m/z:519/521[M+H]+。
1-[5-[2-(3-乙基-脲基)-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸(46)：1-{5-[7-溴-2-(3-乙基-脲基)-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基}-4-甲基-哌啶-4-羧酸(16mg)溶解在EtOH(5mL)、THF(1mL)和乙酸(0.5mL)中，并且加入10%钯碳(3mg)，然后加入甲酸铵(78mg)。所述混合物脱气，并加热到60°C持续4天，然后冷却到室温。所述混合物通过注射器过滤器过滤，并且真空浓缩滤液。所述材料通过制备HPLC(吉尔森,4060%,水/MeCN+0.1%甲酸)纯化。所述相关组分合并且冻干过夜以提供白色固体化合物46(5.2mg)。1H NMR((CD3)2SO):δ1.09(3H,t,J=7.2Hz),1.13(3H,s),1.29(2H,m),2.03(2H,br d,J=13.5Hz),3.17(4H,m),4.1(1H,br s),4.23(2H,br dt,J=13.5和4.7Hz),7.43(1H,dd,J=8.2和1.5Hz),7.6(1H,br s),7.83(1H,d,J=1.5Hz),7.88(1H,d,J=8.2Hz),8.71(2H,s),11.5(1H,br s)。m/z:441[M+H]+。
化合物471-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-四氢吡喃-4-基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
溴(四氢吡喃-4-基)锌：锌粉(920mg,14mmol)和氯化银(420mg,10mmol)在双颈圆底烧瓶中由加热枪辅助真空加热15分钟，并冷却到环境温度。所述反应容器用氩气回填，并抽气三次，然后THF(6mL)通过橡胶隔片引入。所述LiCl/Zn悬浮液通过加入三甲基甲硅烷基氯(18μL,140nmol)和二溴乙烷(60μL,700nmol)活化。加入4-溴-四氢吡喃(1g,6.06mmol)，并且所述反应室温搅拌过夜。这个阶期后，所得有机物质根据文献方法用碘定量滴定(A.Krasovskiy,A.Gavryushin,P.Knochel,Synlett(2006),792)，并且通常测定为0.65–0.8M。
1-[5-[2-(3-乙基-脲基)-7-(四氢-吡喃-4-基)-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(47)：第二烷基溴化锌(0.80M;0.32mmol,.4mL)的THF溶液室温加入到芳基溴(55mg,.1mmol)、CuI(15mg,79umol)和Pd(dppf)Cl2(5mol%)的THF(3mL)搅拌溶液中。所述反应加入到75°C(密封管)并在这个温度维持过夜。再加入3.2当量烷基溴化锌的THF(400μL,79μmol)溶液，并75°C搅拌2h。使所述反应混合物冷却，并用1M HCl(5mL)淬灭，并用EtOAc(2x10mL)洗涤，然后用饱和NaHCO3(10mL)和饱和盐水(1x10mL)洗涤。所述有机层(MgSO4)进行干燥，并真空浓缩以提供49.7mg黄色蜡。这通过反相HPLC(60-80MeCN/水，有0.1%甲酸改性剂)纯化以提供12.2mg(21%产率)的白色固体化合物47。1H NMR(CDCl3)δ8.57(s,2H),7.58(s,1H),7.19(s,1H),4.11(d,J=10.6Hz,4H),3.78(d,J=20.6Hz,2H),3.56(t,J=10.3Hz,2H),3.50–3.36(m,2H),2.98(s,2H),2.23(s,2H),1.94(s,3H),1.55(dd,J=19.5,10.9Hz,2H),1.38(s,3H),1.26(dt,J=14.6,7.1Hz,3H)。MS:525.2[M+H]+。
化合物741-[5-[7-(1-乙酰基-4-哌啶基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
相似制备。
(CDCl3)δ8.54(s,2H),7.58(s,1H),7.13(s,1H),4.85(d,J=13.3Hz,1H),4.17(d,J=14.5Hz,2H),3.97(d,J=13.0Hz,1H),3.74–3.63(m,2H),3.43(dd,J=13.1,7.1Hz,2H),3.20(t,J=12.1Hz,1H),2.95(t,J=12.0Hz,1H),2.66(t,J=13.4Hz,1H),2.28–2.19(m,2H),2.16(s,3H),2.02(dd,J=19.4,10.4Hz,2H),1.87–1.70(m,2H),1.54(dd,J=15.7,6.5Hz,2H),1.37(s,3H),1.28(t,J=7.2Hz,3H)。MS566.2[M+H]+。
化合物501-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(1-甲基***-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(1-(三甲基甲硅烷基甲基)***-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯：含1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-乙炔基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(115mg,0.233mmol)、(叠氮基甲基)三甲基硅烷(150mg,1.169mmol)、碘化亚铜(I)(8.9mg,0.0467mmol)、N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(30.1mg,0.233mmol)的2mL DMF室温搅拌24小时。所述反应用10mL水稀释，过滤并用水洗涤，然后干燥生成所需米色固体化合物95mg,65.5产率%。
1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(1-甲基***-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯：含1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(1-(三甲基甲硅烷基甲基)***-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(95mg,0.1529mmol)的1mL THF冷却到0°C。加入水(5滴)，然后加入四丁基氟化铵(0.153mL,1.0M的THF溶液)。所述反应室温搅拌18小时，再加入0.2mL四丁基氟化铵溶液，并再搅拌24小时。所述反应通过keiselguhr垫过滤，并且真空除去所述溶剂以生成褐色胶。所述粗材料通过制备HPLC纯化生成褐色胶产物63mg,75%产率。
1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(1-甲基***-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸(50)：使用与就化合物9所述相似的条件进行水解以生成灰白色固体的化合物50，22.5mg,38%产率。1H NMR(DMSO-d6):δ10.96(1H,s),8.878.88(2H,m),7.97(1H,d,J=1.65Hz),7.89(1H,d,J=1.63Hz),7.15(1H,t,J=5.59Hz),4.33(2H,dt,J=13.66,4.46Hz),4.21(3H,s),3.453.32(2H,m),3.24(2H,p,J=6.75Hz),2.06(2H,ddd,J=13.11,4.63,2.99Hz),1.42(2H,ddd,J=13.44,10.10,3.98Hz),1.22(3H,s),1.15(3H,t,J=7.18Hz)。MS:522[M+H]+。
化合物72：(E)-1-(5-(2-(3-乙基脲基)-7-((甲氧亚氨基)甲基)苯并[d]噻唑-5-基)嘧啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸(也称为1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[(E)-甲氧基亚氨基甲基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸)
1-(5-(苄氧基)-7-氰基苯并[d]噻唑-2-基)-3-乙基脲：1-(5-(苄氧基)-7-溴苯并[d]噻唑-2-基)-3-乙基脲(5.00g,12.29mmol)、氰化锌(1.58g,13.49mmol)、1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁(20mg,0.033mmol)、乙酸锌(90mg,0.50mmol)和锌粉(33.3mg,0.50mmol)在反应管中于脱气DMF(60ml)和水(600ul)内搅拌。加入三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(113.2mg,0.133mmol)，并且所述反应用N2吹扫，密封和搅拌加热到100°C持续18h。LCMS指示清洁转化（clean conversion）成所需材料。减压除去溶剂，所得残留物用水研磨，通过过滤收集固体，并真空箱干燥以提供所需浅白色固体材料，4.4g(100%)。该物质无需进一步纯化即可直接用于下一步骤。
1-(5-(苄氧基)-7-甲酰基苯并[d]噻唑-2-基)-3-乙基脲：1-(5-(苄氧基)-7-氰基苯并[d]噻唑-2-基)-3-乙基脲(1.00g,2.84mmol)在甲酸(75ml)和水(20ml)中搅拌。加入铝镍合金(5.5g,64.7mmol)，并且所述反应在95°C N2下搅拌5h。LCMS指示60%转化成所需醛。冷却所述反应，然后减压除去所述挥发物。所得浓缩溶液用2M氢氧化钠水溶液中和到pH9，然后用EtOAc提取，所述合并的提取物浓缩，并且所得残留物通过柱色谱纯化，用含EtOAc50-100%的石油醚洗脱以提供黄色固体的醛(200mg,通过LC-MS的99%纯度)(20%)。
(E)-1-(5-(苄氧基)-7-((甲氧亚氨基)甲基)苯并[d]噻唑-2-基)-3-乙基脲：1-(5-(苄氧基)-7-甲酰基苯并[d]噻唑-2-基)-3-乙基脲(425mg,1.20mmol)、甲氧胺盐酸盐(105.2mg,1.26mmol)和N,N’-二异丙基乙胺(0.77g,1.05ml)在用N2脱气的DMF中搅拌。所述反应用N2吹扫，密封并加热到105°C持续18h。之后LCMS指示完全消耗了起始材料。减压除去所述溶剂，并且所得残留物吸附到硅，并通过快速柱色谱纯化，用含0-100%EtOAc的石油醚洗脱以提供白色固体产物325mg(70%)，其可直接用于下一步骤。
(E)-1-乙基-3-(5-羟基-7-((甲氧亚氨基)甲基)苯并[d]噻唑-2-基)脲：
(E)-1-(5-(苄氧基)-7-((甲氧亚氨基)甲基)苯并[d]噻唑-2-基)-3-乙基脲(325mg,0.85mmol)在DCM(17ml)中搅拌，并且加入甲磺酸(2.8ml)。所述反应在装有干燥管的圆底烧瓶中室温搅拌1h。LCMS显示产物和起始材料的混合物，并且所述反应再搅拌1h，LCMS显示没有进一步的反应。加入甲磺酸(0.5ml)，并且所述反应搅拌18h，用DCM(30ml)稀释，并用水(2x25ml)提取。所述DCM层主要包含起始材料和LCMS的杂质。合并水组分，并且采用固体碳酸氢钠调节pH到～10，然后用1:1的DCM-Et2O混合物提取。所述合并的有机提取物用水洗涤，(MgSO4)干燥，并且浓缩以提供黄色固体(100mg,通过LC-MS的80%纯度)(40%)，其可直接用于下一步骤。
(E)-2-(3-(乙基脲基)-7-((甲氧亚氨基)甲基)苯并[d]噻唑-5-基)三氟甲磺酸酯：(E)-1-乙基-3-(5-羟基-7-((甲氧亚氨基)甲基)苯并[d]噻唑-2-基)脲(100mg,0.34mmol)、三乙基胺(41.4mg,0.41mmol,57ul)和N-苯基-双(三氟甲烷磺酰亚胺)(133mg,0.37mmol)在DMF(1.5ml)搅拌。所述反应室温搅拌，并且2.5h后LCMS显示完全消耗了起始材料。减压浓缩所述反应，并且所得残留物在EtOAc和水之间分层。分层，用DCM萃取水组分。(MgSO4)干燥所述合并的有机提取物，并且浓缩提供粗残留物225mg(100%)，其可直接用于下一步骤。
(E)-1-(5-(2-(3-乙基脲基)-7-((甲氧亚氨基)甲基)苯并[d]噻唑-5-基)嘧啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸(72):(E)-2-(3-乙基脲基)-7-((甲氧亚氨基)甲基)苯并[d]噻唑-5-基-三氟甲磺酸酯(225mg,0.34mmol)、双(新戊基)乙二醇二硼(180mg,0.8mmol)和乙酸钾(100mg,1.02mmol)的无水DMF(3.5ml)搅拌溶液用N2吹扫15min。加入1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁氯化钯(II)(30mg,0.034mmol)，所述反应管密封，并80°C加热2h。所述反应混合物冷却到环境温度，用1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸(120mg,0.4mmol)然后是碳酸铯水溶液(3.7M0.5ml,0.343mmol)处理。所述反应混合物用N2吹扫5min，用1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁氯化钯(II)(30mg,0.034mmol)处理，密封并80°C加热2h。冷却所述反应，过滤并且化合物72通过制备HPLC纯化为褐色固体(40mg,LC-MS指示97%纯度)(24%)。1H NMR(CH3OH-d4):δ8.67(2H,s),8.40(1H,s),7.86(1H,d,J=1.66Hz),7.53(1H,d,J=1.67Hz),4.42(2H,dt,J=13.74,4.26Hz),4.11(3H,s),3.453.32(2H,m),2.21(2H,dt,J=13.45,3.31Hz),1.49(2H,ddd,J=13.45,10.71,4.04Hz),1.30(3H,s),1.26(3H,t,J=7.28Hz)。MS:498[M+H]+
类似制备以下化合物。
化合物87：1-{5-[7-环丙基-2-(3-乙基-脲基)-苯并噻唑-5-基]-嘧啶-2-基}-4-甲基-哌啶-4-羧酸(或称为1-[5-[7-环丙基-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸)
1-[5-[7-溴-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸(137mg,0.25mmol)、环丙基三氟硼酸钾(666mg,4.5mmol)、K3PO4(1.75g,8.25mmol)和Pd(dppf)Cl2.DCM(20mol%)悬浮在3:1甲苯/水的异质混合物中(10mL)。所述反应短暂超声处理以帮助不溶物溶解，并且用120°C微波辐射30min，然后LCMS分析起始材料的定量消耗(m/z509[M+H]+。分层所述有机相，(MgSO4)干燥，并真空浓缩以生成橙黄色无定形固体。这用MeCN研磨，并通过真空过滤收集提供65mg米色固体。这在超声帮助下溶解于3:1EtOH:1M NaOH中，并且在微波反应器中100°C辐射30min。所述反应用水(10mL)稀释，真空除去挥发性组分，并且所得水相用EtOAc(2x10mL)洗涤。所述碱性水相用1M HCl(pH～2)酸化，并用EtOAc(3x20mL)提取，并且所述有机组分合并，用饱和盐水洗涤(60mL)和MgSO4干燥，浓缩并通过反相色谱纯化(SNAP12g,25%-90%H2O/MeCN)以提供冻干后化合物87，29mg(97%纯度HPLC,两步后产率31%)。1HNMR(CDCl3)δ8.55(s,2H),7.53(d,J=11.2Hz,1H),7.00(d,J=3.5Hz,1H),4.22–4.08(m,2H),3.73(s,2H),3.48–3.36(m,2H),2.22(s,2H),2.05(d,J=13.3Hz,1H),1.60–1.49(m,2H),1.37(s,3H),1.27(dd,J=12.4,5.2Hz,3H),1.05(d,J=8.3Hz,2H),0.84(d,J=4.8Hz,2H)。MS:481.1[M+H]+。
化合物88：1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[(E)-N-甲氧基-C-甲基-碳亚胺基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
1-[5-[7-(1-乙氧基乙烯基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯：1-[5-[7-溴-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(1g,1.82mmol)和三丁基-(1-乙氧基-乙烯基)-锡烷(1.31g,3.64mmol)溶解在DMF(20mL)中，并且所述混合物通过向溶液鼓泡N2脱氧20min。加入Pd(PPh3)4,(210mg,0.18mmol)，并且所述反应在N2气氛下加热到100°C持续4h，直到LCMS指示完全形成乙烯基醚。所述反应减压浓缩，然后用EtOAc稀释，用水然后用盐水洗涤，(MgSO4)干燥所述有机层，过滤，并且真空除去溶剂以生成所需化合物。
1-[5-[7-乙酰基-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯：1-[5-[7-(1-乙氧基乙烯基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯溶剂在THF(24mL)和水(6mL)中。加入磺酸树脂MP(200mg,3.2mmol/g)，并且所述反应室温搅拌1h，之后LCMS指示完全转化成酮。过滤所述反应混合物，并且真空除去所述溶剂以生成固体，所述固体用Et2O研磨以生成所需黄色固体产物(600mg,2个步骤后64%产率)。
1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[(E)-N-甲氧基-C-甲基-碳亚胺基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯：将O-甲基羟胺盐酸盐(64mg,0.784mmol)加入到含1-[5-[7-乙酰基-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(200mg,0.39mmol)的DMF(5mL)。所述反应混合物加热到60°C持续4h，之后LCMS指示清洁转化成所需产物。所述反应用EtOAc稀释，用水然后用盐水洗涤，并且(MgSO4)干燥所述有机层，过滤并真空除去溶剂。在下一个步骤中使用获得的粗产物。
1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[(E)-N-甲氧基-C-甲基-碳亚胺基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸(88)：
将tBuOK(124mg,1.11mmol)加入到1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[(E)-N-甲氧基-C-甲基-碳亚胺基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯的DMSO(4mL)中。所述混合物在环境温度搅拌2h，之后LCMS指示清洁转化成酸。所述混合物通过棉绒过滤以除去固体颗粒，并且通过制备HPLC纯化以生成白色固体化合物88，76mg,2个步骤40%产率。1H NMR(DMSO-d6):δ10.89(1H,s),8.85(2H,s),7.95(1H,d,J=1.62Hz),7.76(1H,d,J=1.69Hz),7.16(1H,t,J=5.50Hz),4.32(2H,dt,J=13.67,4.40Hz),4.09(3H,s),3.38(2H,ddd,J=13.49,10.48,3.40Hz),3.23(2H,p,J=6.71Hz),2.42(3H,s),2.05(2H,dt,J=13.34,3.66Hz),1.41(2H,ddd,J=13.34,10.04,3.92Hz),1.21(3H,s),1.14(3H,t,J=7.15Hz)。MS:512[M+H]+。
用类似方法制备以下化合物。
化合物97：1-[5-[7-(乙基氨甲酰基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸。
3-(苯甲酰氨基硫代甲酰基氨基)-5-甲氧基-苯甲酸：异硫氰酸苯甲酰酯(169μl,1.25mmol)加入到3-氨基-5-甲氧基-苯甲酸(0.2g,1.19mmol)的丙酮(10mL)溶液。所述反应在环境温度搅拌，并且10分钟后形成厚的沉淀。LCMS指示起始材料的完全转化。真空除去所述溶剂，并且所述粗材料用异己烷研磨，减压干燥，并直接用于下一步骤。
3-(氨基硫代甲酰基氨基)-5-甲氧基-苯甲酸：甲醇钠(4.76mL,2.38mmol,0.5M的甲醇溶液)加入到含步骤1中3-(苯甲酰氨基硫代甲酰基氨基)-5-甲氧基-苯甲酸的MeOH(4mL)溶液。所述反应在环境温度搅拌2h，之后LCMS指示起始材料的全部转化。真空除去所述溶剂，粗组分在水和DCM之间分层、分离有机层和水层用浓HCl酸化到pH5，生成厚的沉淀。所述沉淀用EtOAc提取，然后用盐水洗涤，(MgSO4)干燥，过滤并真空浓缩。获得灰白色固体的产物248mg,92%产率。
2-氨基-5-甲氧基-1,3-苯并噻唑-7-羧酸：溴(56μl,1.09mmol)加入到3-(氨基硫代甲酰基氨基)-5-甲氧基-苯甲酸(248mg,1.09mmol)的氯仿(7mL)悬浮液中。所述反应在环境温度搅拌，生成用刮刀粉碎的大颗粒固体材料，通过移液管除去所述氯仿，并且所述残留固体用二氯甲烷研磨以生成浅黄色固体产物200mg,81%产率。
2-氨基-N-乙基-5-甲氧基-1,3-苯并噻唑-7-羧酰胺：乙胺(2mL,4.02mmol,2M的甲醇溶液)加入到2-氨基-5-甲氧基-1,3-苯并噻唑-7-羧酸(300mg,1.34mmol)、二异丙基乙胺(0.93mL,5.36mmol)和HATU(560mg,1.47mmol)的DMF(6mL)溶液中。所述反应在环境温度搅拌2小时，之后LCMS指示完全转化成产物。所述反应用EtOAc稀释，然后用水和盐水洗涤，然后(MgSO4)干燥，过滤并真空浓缩。所述粗材料通过DCM研磨生成灰白色固体产物178mg,53%产率。
N-乙基-2-(乙基氨甲酰基氨基)-5-甲氧基-1,3-苯并噻唑-7-羧酰胺：异氰酸乙酯(0.87mL,10.9mmol)加入到2-氨基-N-乙基-5-甲氧基-1,3-苯并噻唑-7-羧酰胺(549mg,2.18mmol)和二乙酸二丁基锡(4滴，催化量)的二噁烷(12mL)悬浮液中。所述反应加热到60°C持续8h，之后LCMS指示完全转化成所需产物。真空除去所述反应溶剂，并且所述粗材料直接用于下一步骤。
N-乙基-2-(乙基氨甲酰基氨基)-5-羟基-1,3-苯并噻唑-7-羧酰胺：将三溴化硼(8.72mL,8.72mmol,4M的DCM溶液加入到N-乙基-2-(乙基氨甲酰基氨基)-5-甲氧基-1,3-苯并噻唑-7-羧酰胺的二氯甲烷(10mL)悬浮液中。所述反应在环境温度搅拌过夜，然后用EtOAc稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，并且(MgSO4)干燥有机层，过滤并真空浓缩。所述粗材料通过快速色谱在硅胶上使用DCM:MeOH95:5纯化。获得白色固体的产物212mg,31%产率。
[7-(乙基氨甲酰基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]三氟甲磺酸酯：将N-苯基双(三氟甲烷磺酰亚胺(270mg,0.757mmol)加入到N-乙基-2-(乙基氨甲酰基氨基)-5-羟基-1,3-苯并噻唑-7-羧酰胺(212mg,0.688mmol)和三乙基胺(0.115mL,0.826mmol)的DMF(4mL)溶液中。所述反应混合物在环境温度搅拌6小时，之后LCMS指示完全转化成所需产物。所述反应用EtOAc稀释，然后用水和盐水洗涤，然后(MgSO4)干燥，过滤并真空浓缩。该产物无需进一步纯化即可用于下一步骤。
1-[5-[7-(乙基氨甲酰基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯：[7-(乙基氨甲酰基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]三氟甲磺酸酯(150mg,0.344mmol)、双(新戊基乙二醇)二硼(155mg,0.688mmol)和乙酸钾(100mg,0.89mmol)称量到Kymax管中。加入DMF(4mL)，并且所述混合物通过鼓泡N215min脱气。加入Pd(dppf)Cl2(28mg,0.0344mmol)，并且所述反应进行密封和加热到80°C持续3h，之后LCMS指示完全形成硼酸。使所述反应冷却到环境温度，然后加入1-(5-溴-嘧啶-2-基)-4-乙基-哌啶-4-羧酸乙酯(169mg,0.516mmol)、碳酸铯溶液(185μl,0.688mmol,3.7M水溶液)和Pd(dppf)Cl2(28mg,0.0344mmol)，并且所述反应进行密封，加热到90°C持续3h，之后LCMS指示形成所需产物。所述反应混合物用EtOAc稀释，用水然后用盐水洗涤，并且(MgSO4)干燥所述有机层，过滤并真空除去溶剂。所述粗材料通过快速色谱在硅胶上纯化，使用DCM:MeOH96:4作为洗脱剂。获得浅褐色固体的产物78mg,42%产率。
1-[5-[7-(乙基氨甲酰基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸(97)：将叔丁醇钾(67mg,0.59mmol)加入到1-[5-[7-(乙基氨甲酰基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(78mg,0.147mmol)的DMSO(1.5mL)溶液中。所述混合物在环境温度搅拌2h，之后LCMS指示完全转化成酸。所述混合物通过棉绒过滤除去固体颗粒，并通过制备HPLC纯化。获得白色固体的化合物97，44mg,75%产率。1H NMR(DMSO-d6):δ10.86(1H,s),8.88(2H,s),8.82(1H,t,J=5.47Hz),8.12(1H,d,J=1.57Hz),8.05(1H,d,J=1.45Hz),7.14(1H,t,J=5.61Hz),4.32(2H,dt,J=13.66,4.46Hz),3.24(5H,p,J=6.88Hz),3.203.27(2H,m),2.06(2H,dt,J=13.52,3.72Hz),1.41(2H,ddd,J=13.42,10.06,3.89Hz),1.24(1H,s),1.22(3H,t,J=3.29Hz),1.21(3H,s),1.14(3H,t,J=7.17Hz)。MS:512[M+H]+。
化合物159：相似制备1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(吗啉-4-羰基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸。
LCMS[M+H]+554。
化合物114：4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-吗啉代-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-哌啶-4-羧酸
1-[5-[7-溴-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-乙基-哌啶-4-羧酸(100mg)置于DCM5ml中，并且加入乙酸铜47mg、三乙基胺122mg、4A分子筛(粉末)和吗啉17mg，并且所述混合物在整个周末室温搅拌。LCMS显示形成了一些所需产物和紧密运行7-H杂质。过滤所述混合物，并且真空除去所述溶剂以生成深色胶，通过制备HPLC使用苯基己基柱纯化，用65-75%ACN洗脱以生成灰白色固体化合物114(8mg)。1H NMR(CDCl3)δ8.52(s,2H),7.38(s,1H),6.84(s,1H),4.504.42(m,2H),3.893.85(m,4H),3.353.29(m,4H),3.213.17(m,4H),2.222.14(m,2H),1.611.54(m,2H),1.451.35(m,2H),1.19(t,J=7.2Hz,3H),0.86(t,J=7.5Hz,3H)。MS:540.13[M+H]+。
在这个反应中也分离化合物113
4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-哌啶-4-羧酸
1H NMR(CDCl3)δ8.55(s,2H),7.76(d,J=8.3Hz,1H),7.69(s,1H),7.32(d,J=8.3Hz,1H),4.534.45(m,2H),3.383.31(m,2H),3.21(t,J=12Hz,2H),2.21(d,J=12Hz,2H),1.651.56(m,2H),1.481.38(m,2H),1.241.18(m,3H),0.88(t,J=7Hz,3H)。MS:455.07[M+H]+。
化合物116：4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[(E)-N-甲氧基-C-甲基-碳亚胺基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-哌啶-4-羧酸
1-(5-苄氧基-7-(1-乙氧基乙烯基)-1,3-苯并噻唑-2-基)-3-乙基-脲：
1-(5-苄氧基-7-溴-1,3-苯并噻唑-2-基)-3-乙基-脲(1g,2.46mmol)和三丁基-(1-乙氧基-乙烯基)-锡烷(1.77g,4.92mmol)溶解在DMF(30mL)中，并且所述混合物通过向溶液鼓泡N2脱氧20min。加入Pd(PPh3)4,(284mg,0.246mmol)，并且所述反应在N2气氛下加热到100°C持续4h，之后LCMS指示完全形成乙烯基醚。所述反应减压浓缩，用EtOAc稀释，用水然后用盐水洗涤，(MgSO4)干燥所述有机层，过滤，并且真空除去溶剂以生成所需化合物。
1-(7-乙酰基-5-苄氧基-1,3-苯并噻唑-2-基)-3-乙基-脲1-[5-苄氧基-7-(1-乙氧基乙烯基)-1,3-苯并噻唑-2-基]-3-乙基-脲溶解在THF(24mL)中，并且加入2M盐酸水溶液(2mL)，和所述反应在环境温度搅拌4h，之后LCMS指示完全转化成酮。真空除去所述反应溶剂以生成所需化合物(650mg,70%产率)。
1-[5-苄氧基-7-[(E)-N-甲氧基-C-甲基-碳亚胺基]-1,3-苯并噻唑-2-基]-3-乙基-脲：将O-甲基羟胺盐酸盐(289mg,3.46mmol)加入到1-(7-乙酰基-5-苄氧基-1,3-苯并噻唑-2-基)-3-乙基-脲(650mg,1.73mmol)的DMF(7mL)中。所述反应混合物加热到60°C持续2h，之后LCMS指示完全转化成所需产物。所述反应用EtOAc稀释，用水然后用盐水洗涤，(MgSO4)干燥所述有机层，过滤，并且真空除去溶剂以生成所需灰白色固体化合物550mg,78%产率。
1-乙基-3-[5-羟基-7-[(E)-N-甲氧基-C-甲基-碳亚胺基]-1,3-苯并噻唑-2-基]脲：将含甲磺酸(6.5mL)的DCM(32mL)溶液加入到1-[5-苄氧基-7-[(E)-N-甲氧基-C-甲基-碳亚胺基]-1,3-苯并噻唑-2-基]-3-乙基-脲(718mg,1.8mmol)，并且所述反应在环境温度搅拌2h，之后LCMS指示完全转化成所需产物。所述反应用DCM稀释，用水洗涤并且所述水层用饱和Na2CO3水溶液中和，并用EtOAc提取。所述有机层用(MgSO4)干燥，过滤，并且真空除去所述溶剂。所得的粗材料通过快速色谱的硅胶纯化，使用MeOH:DCM3:97作为洗脱剂生成所需灰白色固体化合物300mg,54%产率。
[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[(E)-N-甲氧基-C-甲基-碳亚胺基]-1,3-苯并噻唑-5-基]三氟甲磺酸酯：N-苯基双(三氟甲烷磺酰亚胺(383mg,1.07mmol)加入到1-乙基-3-[5-羟基-7-[(E)-N-甲氧基-C-甲基-碳亚胺基]-1,3-苯并噻唑-2-基]脲(300mg,0.97mmol)和三乙基胺(162μl,1.16mmol)的DMF(5mL)溶液中。所述反应室温搅拌18小时，然后用EtOAc稀释，用水然后用盐水洗涤，(MgSO4)干燥所述有机层，过滤，并且真空除去溶剂以生成所需灰白色固体化合物220mg,50%产率。
4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[(E)-N-甲氧基-C-甲基-碳亚胺基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-哌啶-4-羧酸乙酯
[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[(E)-N-甲氧基-C-甲基-碳亚胺基]-1,3-苯并噻唑-5-基]三氟甲磺酸酯(220mg,0.5mmol)、双(新戊基乙二醇)二硼(226mg,1mmol)和乙酸钾(147mg,1.5mmol)称量到Kymax管中。加入DMF(4mL)，并且所述混合物通过鼓泡N215min脱气。加入Pd(dppf)Cl2(26mg,0.05mmol)，并且所述反应进行密封，并加热到80°C持续3h，之后LCMS指示完全形成硼酸。使所述反应冷却到环境温度，然后在反应管中分成两个等分。向一个管加入1-(5-溴-嘧啶-2-基)-4-乙基-哌啶-4-羧酸乙酯(103mg,0.3mmol)、碳酸铯溶液(170μl,0.63mmol,3.7M水溶液)和Pd(dppf)Cl2(13mg,0.025mmol)，并且所述反应进行密封，并加热到90°C持续3h，该时间结束时LCMS指示形成所需产物。所述反应混合物用EtOAc稀释，用水然后用盐水洗涤，并且(MgSO4)干燥所述有机层，过滤并真空除去溶剂。所得的粗材料通过快速色谱的硅胶纯化，使用汽油-DCM0-100%梯度作为洗脱剂生成所需灰白色固体化合物87mg,32%产率。
4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[(E)-N-甲氧基-C-甲基-碳亚胺基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-哌啶-4-羧酸(116)：将叔丁醇钾(71mg,0.63mmol)加入到4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[(E)-N-甲氧基-C-甲基-碳亚胺基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸乙酯(87mg,0.16mmol)的DMSO(1.5mL)中。所述混合物室温搅拌2h，之后LCMS指示完全转化成酸。所述混合物通过棉绒过滤以除去固体颗粒，并且通过制备HPLC纯化以生成白色固体化合物116，27mg,25%产率。1H NMR(DMSO-d6):δ12.49(1H,s),10.66(1H,s),8.85(2H,s),7.95(1H,d,J=1.58Hz),7.76(1H,d,J=1.64Hz),6.94(1H,t,J=5.58Hz),4.49(2H,dt,J=13.57,3.98Hz),4.10(3H,s),3.303.15(4H,m),2.42(3H,s),2.10(2H,dt,J=13.97,2.91Hz),1.57(2H,q,J=7.49Hz),1.38(2H,ddd,J=13.34,11.14,4.02Hz),1.14(3H,t,J=7.17Hz),0.85(3H,t,J=7.43Hz)。MS:526[M+H]+.
化合物128：4-氨基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-哌啶-4-羧酸
4-((叔丁氧基羰基)氨基)哌啶-1,4-二羧酸-1-苄酯-4-甲酯：向1-((苄氧基)羰基)-4-((叔丁氧基羰基)氨基)哌啶-4-羧酸(0.50g,1.32mmol)的ACN(15mL)冰***液中加入Cs2CO3(0.52g,1.59mmol)，并且所得反应混合物在相同温度下搅拌10min，然后加入MeI(0.4mL,4.2mmol)。室温下搅拌所述反应混合物1h。反应完成(通过TLC)后，所述混合物通过硅藻土，并且减压蒸发溶剂以获得白色固体化合物(0.52g,96%产率)。MS:393.31[M+H]+。
4-((叔丁氧基羰基)氨基)-哌啶-4-羧酸甲酯：向4-((叔丁氧基羰基)氨基)哌啶-1,4-二羧酸-1-苄酯-4-甲酯(0.50g,1.27mmol)的MeOH(10mL)溶液中室温加入钯碳(0.05g,10%)。所述反应于氢气氛(大气压力)下室温搅拌16h。完成(通过TLC)后，所述残留物通过硅藻土，并且减压蒸发溶剂以获得白色固体化合物(0.32g,98%产率)。MS:259.22[M+H]+。
1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-((叔丁氧基羰基)氨基)-哌啶-4-羧酸甲酯：向4-((叔丁氧基羰基)氨基)-哌啶-4-羧酸甲酯(0.11g,0.42mmol)的EtOH(5mL)溶液中室温加入5-溴-2-氯嘧啶(0.09g,0.46mmol)，并且所述反应化合物加热到70°C持续1h。完成(通过TLC)后，蒸发溶剂，并且所述粗残留物通过100-200M硅胶使用20%EtOAc:己烷纯化以获得所需黄色固体产物(0.09g,52%产率)。MS:415.17[M+H]+。
1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-((叔丁氧基羰基)氨基)-哌啶-4-羧酸：向1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-((叔丁氧基羰基)氨基)-哌啶-4-羧酸甲酯(0.157g,0.38mmol)的THF冰***液中加入水性LiOH(0.08g,1.89mmol溶解在最小量H2O中)。所得混合物加热到65℃持续5-6h。完成(通过TLC)后，浓缩溶剂，并且加入10mL水，所述水层用EtOAc(2x50mL)洗涤，并且弃去所述有机层。水层的pH调节到4-5，然后用热EtOAc(3x100mL)提取，并且合并的有机层用Na2SO4干燥，并蒸发溶剂。因此所得的残留物用***研磨以提供所需灰白色固体产物(0.15g,99%产率)。MS:401.16[M+H]+。
4-((叔丁氧基羰基)氨基)-1-(5-(2-(3-乙基脲基)-7-(吡啶-2-基)-苯并噻唑-5-基)-嘧啶-2-基)-哌啶-4-羧酸：向1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-((叔丁氧基羰基)-氨基)-哌啶-4-羧酸(0.15g,0.38mmol)的DMF(5.0mL)溶液中加入2-(3-乙基脲基)-7-(吡啶-2-基)-苯并噻唑-5-基硼酸(0.26g,0.75mmol)和K3PO4水溶液(0.12g,0.57mmol)，并且所述混合物通过N2吹扫15min脱气，然后加入二(三苯基膦)氯化钯(II)(0.026g,0.038mmol)。所述反应混合物再脱气10-15min，然后加热到80°C持续2h。反应完成(通过TLC)后，所述混合物倾倒入100mL冰冷水中，用EtOAc(3x100mL)提取，并且合并的有机物用盐水洗涤，Na2SO4干燥，过滤并减压蒸发。所述粗残留物通过100-200M硅胶使用6:92:2比率的MeOH:DCM:NH3纯化，以获得灰白色化合物，所述化合物最终用***研磨(0.02g,9%产率)。1H NMR(DMSO-d6):δ1.11(t,J=7.20Hz,3H),1.40(s,9H),1.83(m,2H),2.05(m,2H),3.19(q,J=7.20Hz,2H),3.33(m,2H),4.34(m,2H),6.88(br s,1H),7.43(br,s,1H),7.96(m,2H),8.01(s,1H),8.19(m,1H),8.49(m,1H),8.81(m,1H),8.92(s,2H)和10.54(br s,1H)。MS:618.99[M+H]+。
4-氨基-1-(5-(2-(3-乙基脲基)-7-(吡啶-2-基)苯并噻唑-5-基)嘧啶-2-基)哌啶-4-羧酸盐酸盐(128):向4-((叔丁氧基羰基)-氨基)-1-(5-(2-(3-乙基脲基)-7-(吡啶-2-基)-苯并噻唑-5-基)-嘧啶-2-基)-哌啶-4-羧酸(0.02g,0.03mmol)的1,4-二噁烷(2.0mL)冰***液中加入HCl-二噁烷(4.0M,1.0mL)溶液，并且所述反应混合物室温搅拌30min。完成(通过TLC)后，蒸发溶剂以获得棕色固体材料，所述材料最终用***研磨以提供盐酸盐化合物128(0.01g)。1H NMR(DMSO-d6):δ1.11(t,J=7.20Hz,3H),1.87(m,2H),2.11(m,2H),3.19(m,2H),3.40(m,2H),3.93(m,2H),4.12(m,2H),6.99(br s,1H),7.45(m,1H),7.95(br s,2H),8.25(s,1H),8.49(d,J=8.0Hz,1H),8.62(s,2H),8.80(d,J=4.0Hz,1H),8.97(s,1H)和10.65(br s,1H)。LCMS:519.30[M+H]+
化合物139：4-烯丙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-吡嗪-2-基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸
4-烯丙基-1-[5-[7-溴-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸乙酯：向1-(7-溴-5-碘苯并噻唑-2-基)-3-乙基脲(0.55g,1.29mmol)和4-烯丙基-1-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)嘧啶-2-基)哌啶-4-羧酸乙酯(0.79g,1.97mmol)的1,4-二噁烷:MeOH(30:20mL)溶液中室温加入磷酸钾(0.41g,1.97mmol)，并且所述混合物通过N2吹扫15-20min脱气，然后加入四(三苯基膦)钯(0)(0.15g,0.13mmol)。所述反应混合物再脱气15-20min，然后加热到80°C持续5h。反应(通过TLC)完成后，所述反应混合物冷却到室温，用EtOAc(500mL)稀释并且通过硅藻土。蒸发所述滤液，并且所述粗残留物通过100-200M硅胶使用1.50%MeOH:DCM纯化以获得所需米色固体产物(0.20g,27%产率)。1H NMR(DMSO-d6):δ1.09(t,J=7.20Hz,3H),1.21(t,J=6.80Hz,3H),1.47(m,2H),2.05(m,2H),2.29(m,2H),3.18(m,2H),3.21(q,J=7.20,2H),4.17(q,J=6.80Hz,2H),4.46(m,2H),5.05(m,2H),5.72(m,1H)6.74(br s,1H),7.69(s,1H),7.87(s,1H);8.77(s,2H)和10.90(br s,1H)。
4-烯丙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-吡嗪-2-基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸乙酯：向1-(5-(7-溴-2-(3-乙基脲基)-苯并噻唑-5-基)-嘧啶-2-基)-哌啶-4-羧酸-4-烯丙酯(0.45g,0.78mmol)的DMSO(5.0mL)溶液中加入双(新戊基乙二醇)二硼(0.35g,1.57mmol)和乙酸钾(0.11g,1.17mmol)，并且所述混合物通过N2吹扫15min脱气，然后加入二氯(1,1-双(二苯基膦基)二茂铁)钯(II)(0.057g,0.078mmol)。所述反应混合物再脱气10-15min，然后加热到80°C持续2h。反应完成后，所述混合物冷却到室温，然后加入2-氯吡嗪(0.20g,1.17mmol)和Cs2CO3水溶液(0.38g,1.17mmol,溶解在最小量氨水中)，并且所述混合物通过N2吹扫15min脱气，然后加入四(三苯基膦)钯(0)(0.09g,0.078mmol)。所述反应混合物再脱气10-15min，然后加热到80°C持续16h。反应完成后，所述混合物倾倒入100mL冰冷水中，用EtOAc(3x150mL)提取，并且合并的有机层用盐水洗涤，Na2SO4干燥和过滤并蒸发。所述粗残留物通过100-200M硅胶使用1.50%MeOH:DCM纯化以获得所需米色固体产物(0.26g,58%产率)。1H NMR(DMSO-d6):δ1.09(t,J=7.20Hz,3H),1.21(t,J=6.80Hz,3H),1.47(m,2H),2.05(m,2H),2.29(m,2H),3.18(m,2H),3.21(q,J=7.20,2H),4.17(q,J=6.80Hz,2H),4.46(m,2H),5.05(m,2H),5.72(m,1H)6.80(br s,1H),8.04(s,1H),8.40(s,1H);8.69(s,1H),8.87(s,1H),8.94(s,2H),9.77(s,1H)和10.64(br s,1H)。
4-烯丙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-吡嗪-2-基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸：向4-烯丙基-1-(5-(2-(3-乙基脲基)-7-(吡嗪-2-基)苯并噻唑-5-基)嘧啶-2-基)-哌啶-4-羧酸乙酯(0.26g,0.45mmol)的DMSO(2.0mL)冰***液加入叔丁醇钾(0.25g,2.25mmol)。在室温下将所得混合物搅拌2h。反应完成(通过TLC)后，加入水(10mL)然后用EtOAc(2x50mL)提取。弃去所述有机层，并且水层pH调节到4-5，然后用热EtOAc(3x100mL)提取，并所述合并的有机层通过Na2SO4干燥，过滤并减压蒸发。因此所得的残留物用***研磨以获得所需米色固体化合物139(0.13g,53%产率)。1H NMR(DMSO-d6):δ1.09(t,J=7.20Hz,3H),1.44(m,2H),2.05(m,2H),2.29(m,2H),3.173.22(m,4H),4.43(m,2H),5.07(m,2H),5.71(m,1H),6.90(br s,1H),8.03(s,1H),8.40(s,1H),8.69(d,J=2.80Hz,1H),8.87(d,J=2.0Hz,1H),8.94(s,2H),9.77(s,1H),10.71(br s,1H)和12.69(br s,1H)。MS:545.26[M+H]+。
化合物142：1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-(三氟甲基)哌啶-4-羧酸
1-(5-(2-(3-乙基脲基)-7-(吡啶-2-基)苯并噻唑-5-基)嘧啶-2-基)-4-(三氟甲基)哌啶-4-羧酸乙酯：向4-(三氟甲基)哌啶-4-羧酸乙酯盐酸盐(0.1g,0.44mmol)的DMA(5.0mL)溶液室温加入DIPEA(0.25mL,1.46mmol)，并且所述混合物室温搅拌10min，然后加入1-(5-(2-氯嘧啶-5-基)-7-(吡啶-2-基)苯并噻唑-2-基)-3-乙基脲(0.12g,0.29mmol)。所述反应加热到80°C持续16h，并且完成(通过TLC)后，所述混合物倾倒入50mL冰冷水中，用EtOAc(3x50mL)提取，并且合并的有机物用盐水洗涤，(Na2SO4)干燥，过滤并减压浓缩。所述粗残留物通过100-200M硅胶使用1.50%MeOH：DCM纯化以获得灰白色固体产物(0.09g,51%)。1H NMR(DMSO-d6):δ1.15(t,J=7.20Hz,3H),1.20(t,J=6.80Hz,3H),1.45(m,2H),2.06(m,2H),2.54(m,2H),3.21(q,J=7.20,2H),4.15(q,J=6.80Hz,2H),4.32(m,2H),6.86(br s,1H),7.44(m,1H),7.99(m,2H),8.23(s,1H),8.47(m,1H),8.80(m,1H),8.92(s,2H)和10.56(br s,1H)。
1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-(三氟甲基)哌啶-4-羧酸：向1-(5-(2-(3-乙基脲基)-7-(吡啶-2-基)苯并噻唑-5-基)嘧啶-2-基)-4-(三氟甲基)哌啶-4-羧酸乙酯(0.05g,0.08mmol)的DMSO(2.0mL)冰***液加入叔丁醇钾(0.046g,0.41mmol)，并且所述混合物室温搅拌2h。反应完成(通过TLC)后，加入水(10mL)然后用EtOAc(2x50mL)提取，并且弃去有机层。水层的pH调节到4-5，然后用热EtOAc(3x75mL)提取，并且合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并减压蒸发。因此所得的残留物用***研磨以获得所需灰白色固体化合物142(0.04g,84%产率)。1H NMR(DMSO-d6):δ1.09(t,J=7.20Hz,3H),1.65(m,2H),2.31(m,2H),3.01(m,2H),3.20(q,J=7.20Hz,2H),4.75(m,2H),6.87(br s,1H,可交换的D2O),7.43(m,1H),7.99(m,2H),8.23(s,1H),8.48(d,J=7.20Hz,1H),8.80(d,J=3.60Hz,1H),8.92(s,2H),10.57(br s,1H,可交换的D2O)和14.06(br s,1H,可交换的D2O)。MS:572.10[M+H]+。
从其各自前体相似制备下列化合物。
化合物144：1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[2-(3-甲基咪唑-4-基)乙炔基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[2-(3-甲基咪唑-4-基)乙炔基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯
1-[5-[7-溴-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(150mg,0.27mmol)、碘化亚铜(I)(5mg,0.027mmol)和5-乙炔基-1-甲基-1H-咪唑(56μl,0.54mmol)溶解在三乙基胺(2mL)和DMF(1mL)中，并且所述混合物经鼓泡N2通过溶液20min来脱氧。加入Pd(PPh3)2Cl2,(19mg,0.027mmol)，并且所述反应在N2气氛下加热到80°C持续4h，该时间结束时LCMS指示形成产物。所述反应用EtOAc稀释，用水然后用盐水洗涤，并且(MgSO4)干燥所述有机层，过滤并真空除去溶剂以生成所需化合物。
1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[2-(3-甲基咪唑-4-基)乙炔基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸(144)：
将叔丁醇钾(150mg,1.35mmol)加入到1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[2-(3-甲基咪唑-4-基)乙炔基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯的DMSO(1.5mL)溶液中。所述混合物室温搅拌2h，之后LCMS指示完全转化成酸。所述混合物通过棉绒过滤以除去固体颗粒，并且通过制备HPLC纯化以生成白色固体化合物144，43mg,2个步骤的29%产率。1H NMRδ(ppm)(DMSO-d6):8.81(2H,s),7.95(1H,d,J=1.55Hz),7.89(1H,s),7.73(1H,d,J=1.56Hz),7.45(1H,s),7.27(1H,t,J=5.58Hz),4.32(2H,dt,J=13.70,4.46Hz),3.83(3H,s),3.37(2H,ddd,J=14.10,10.43,4.06Hz),3.23(2H,p,J=6.90Hz),2.06(2H,dt,J=13.39,3.62Hz),1.41(2H,ddd,J=13.36,10.05,3.86Hz),1.21(3H,s),1.13(3H,t,J=7.15Hz)。MS:545[M+H]+。
用类似方法制备以下化合物
化合物1451-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(噻唑-2-基氨甲酰基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
1-(5-(7-(4,5-二氢噻唑-2-基氨甲酰基)-2-(3-乙基脲基)苯并[d]噻唑-5-基)嘧啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸乙酯：1-(5-(7-溴-2-(3-乙基脲基)苯并[d]噻唑-5-基)嘧啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸乙酯(200mg,0.37mmol)和2-氨基噻唑(111mg,1.11mmol)在DMF(3ml)中搅拌，并且加入三乙基胺(3ml)。通过所述化合物鼓泡一氧化碳10min。加入Xantphos（氧杂蒽膦）(86.3mg,0.15mmol)和乙酸钯(II)(18mg,0.08mmol)，并且所述反应用一氧化碳吹扫，密封，然后加热到90°C持续18h。冷却所述反应，然后减压除去所述溶剂。所得残留物用水研磨，造成固体沉淀，通过过滤分离，以在真空箱干燥后提供靶标材料(185mg,通过LC-MS的80%纯度)(86%)。该材料无需进一步纯化即可直接用于下一步骤。
1-(5-(7-(4.5-二氢噻唑-2-基氨甲酰基)-2-(3-乙基脲基)苯并[d]噻唑-5-基)嘧啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸(145)：1-(5-(2-(3-乙基脲基)-7-(噻唑-2-羰基)苯并[d]噻唑-5-基)嘧啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸乙酯(185mg,0.31mmol)在搅拌下于溶解DMSO(2ml)中，并且加入叔丁醇钾(174mg,1.56mmol)。在室温下搅拌所述反应1h。过滤所述反应，通过制备HPLC纯化以提供固体化合物145(7mg,HPCL95%纯度)(4%)。1H NMR(DMSO-d6):δ9.008.95(2H,m),8.63(1H,s),8.19(1H,s),7.65(1H,d,J=3.59Hz),7.37(1H,d,J=3.57Hz),6.93(1H,t,J=5.58Hz),4.34(2H,dt,J=13.73,4.50Hz),3.41(2H,dd,J=11.79,3.40Hz),3.25(2H,p,J=6.76Hz),2.06(2H,dt,J=13.53,3.67Hz),1.44(2H,ddd,J=13.50,9.94,4.01Hz),1.23(3H,s),1.15(3H,t,J=7.18Hz)。MS:567[M+H]+。
化合物911-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[乙基(甲基)氨甲酰基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
相似制备：
1H NMR(DMSO-d6):δ8.80(2H,s),7.96(1H,d,J=1.61Hz),7.51(1H,s),7.17(1H,t,J=5.70Hz),4.31(2H,dt,J=13.72,4.50Hz),3.37(2H,ddd,J=14.36,9.75,4.17Hz),3.22(2H,p,J=6.87Hz),3.03(3H,s),2.05(2H,dt,J=13.49,3.73Hz),1.40(2H,ddd,J=13.38,10.04,4.01Hz),1.21(3H,s),1.13(3H,t,J=7.17Hz)。MS:526[M+H]+。
化合物146：1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(嘧啶-2-羰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(嘧啶-2-羰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯：1-[5-[7-氨基-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(159mg,0.27mmol)、嘧啶-2-羧酸(64.2mg,0.52mmol)和二异丙基乙胺(271mg,2.1mmol)溶解在DMF(5mL)中。所述反应用N2吹扫，然后加入HATU(197mg,0.52mmol)，并且室温搅拌所述反应18h。减压下除去DMF，并且所得残留物用水稀释，并用EtOAc提取。工作中，通过过滤收集并在真空箱中干燥的固体沉淀提供粗产物(100mg,66%产率)。
1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(嘧啶-2-羰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸(146)：1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(嘧啶-2-羰基氨基)1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(100mg,0.17mmol)在搅拌下溶解于DMSO(0.5ml)中，并且加入叔丁醇钾(40mg,0.35mmol)。在室温下搅拌该反应2h。过滤所述反应混合物，通过制备HPLC纯化以提供固体化合物146(5mg)。1H NMR(DMSO-d6):δ11.01(1H,s),9.12(2H,d,J=4.86Hz),8.77(2H,s),7.83(1H,d,J=4.75Hz),7.82(1H,t,J=1.44Hz),7.67(1H,d,J=1.66Hz),7.01(1H,s),4.32(2H,d,J=13.32Hz),3.22(2H,p,J=7.59Hz),2.05(2H,dd,J=13.04,4.48Hz),1.42(2H,t,J=11.27Hz),1.22(3H,s),1.13(3H,dd,J=7.16,7.16Hz)。MS:562[M+H]+。
化合物1471-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[[甲基(嘧啶-2-基)氨基]甲基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(甲基氨基甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯：在配有搅拌器的微波管中，1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-甲酰基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(140mg,0.28mmol)在7M甲基胺的THF(8mL)溶液中搅拌。所述反应在有搅拌的CEM探测器微波中辐射到80°C持续1h。冷却后，减压除去所述溶剂，所得残留物溶解在无水MeOH(8mL)中，并且所述反应转入装有氯化钙干燥管的圆底烧瓶。加入硼氢化钠(43mg,1.12mmol)，并且所述反应室温搅拌18h。之后，LCMS指示70%转化成所需材料。所述反应用水(20mL)稀释，用EtOAc(3x20mL)提取，并且合并的有机提取物用盐水洗涤，(MgSO4)干燥，并减压浓缩以提供玻璃态褐色/灰色固体的粗产物130mg(91%产率)。
1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[[甲基(嘧啶-2-基)氨基]甲基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯：1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(甲基氨基甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(130mg,0.25mmol)、N,N’-二异丙基乙胺(3.69mmol,477mg,324ul)和2-氯嘧啶(1.75mmol,200mg)在装有搅拌器的微波管异丙醇(2mL)中组合。所述管用N2吹扫，密封，并在有搅拌的CEM探测器微波中辐射到110°C持续1h，然而LCMS指示仅存在起始材料，并且所述反应用异丙醇(4mL)和N,N’-二异丙基乙胺(4.19mmol,540mg,400ul)稀释，然后用N2吹扫，密封，然后在有搅拌的CEM探测器微波中辐射到110°C持续1h。LCMS指示连同相应的异丙酯和起始材料一起，转化成所需产物。使所述反应冷却，减压除去溶剂，并且所得残留物在EtOAc和水之间分开，分离层。所述水部分用EtOAc提取，并且合并的有机物组分进行(MgSO4)干燥，并浓缩以提供粗产物(160mg)。所述材料通过快速硅胶色谱纯化，用含0-50%EtOAc的石油醚然后含0-10%MeOH的DCM洗脱以提供所述靶标材料(40mg,27%产率)。
1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[[甲基(嘧啶-2-基)氨基]甲基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸(147)：
1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[[甲基(嘧啶-2-基)氨基]甲基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(40mg,0.068mmol)的搅拌溶液在搅拌下溶解于DMSO(1mL)中，并加入叔丁醇钾(31mg,0.27mmol)。所述反应室温搅拌1h，然后所述反应过滤并通过制备HPLC纯化以提供固体化合物74(8mg,21%产率)。1HNMR(DMSO-d6):δ8.74(2H,s),8.00(1H,dd,J=4.99,1.80Hz),7.79(1H,s),7.48(1H,s),7.42(1H,ddd,J=8.42,7.00,1.94Hz),7.16(2H,t,J=5.74Hz),6.59(1H,d,J=8.41Hz),6.55(1H,ddd,J=7.00,5.02,0.90Hz),4.70(2H,d,J=5.58Hz),4.59(2H,dt,J=13.29,3.70Hz),3.20(2H,p,J=6.82Hz),3.14(2H,t,J=12.51Hz),1.92(2H,dd,J=12.80,3.92Hz),1.54(2H,q,J=11.74Hz),1.12(3H,t,J=7.16Hz)。MS:562[M+H]+。
化合物1491-(5-(2-(3-乙基脲基)-7-(甲吡啶酰氨基)苯并[d]噻唑-5-基)嘧啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸(或称为1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(吡啶-2-羰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸)
1-(5-(7-氨基-2-(3-乙基脲基)苯并[d]噻唑-5-基)嘧啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸乙酯：1-(5-(7-溴-2-(3-乙基脲基)苯并[d]噻唑-5-基)嘧啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸乙酯
(306mg,0.56mmol)、反-(1R,2R)-N,N’-双甲基-1,2-环己烷(24mg,0.17mmol)、叠氮化钠(73mg,1.12mmol)和抗坏血酸钠(6mg,0.028mmol)在DMSO-水1:1(3ml)中搅拌，然后用N2脱气。加入CuI(11mg,0.0056mmol)，并且所述管用N2吹扫，密封，并加热到110°C持续2h。所述混合物变黑，并且观察到气体放出。之后LCMS指示34%转化成所需的胺，并且起始材料剩余。加入额外当量的所有试剂，并且所述反应再加热到110°C持续2h。之后，LCMS指示75%转化成所需材料。减压除去溶剂，并且所得残留物用水研磨。所得固体通过过滤分离，并且干燥提供粗产物(250mg,通过LCMS的73%纯度)(92%)。该材料无需进一步纯化即可直接用于下一步骤。
1-(5-(2-(3-乙基脲基)-7-(甲吡啶酰氨基)-苯并[d]噻唑-5-基)嘧啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸乙酯：1-(5-(7-氨基-2-(3-乙基脲基)苯并[d]噻唑-5-基)嘧啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸乙酯(119mg,0.25mmol)溶解在吡啶(2ml)中，然后搅拌加入氯化甲基吡啶盐酸盐(58mg,0.33mmol)，并且所述反应室温搅拌18h。减压除去所述吡啶，并且所述残留物用水研磨。所得固体通过过滤收集，并且干燥以提供粗产物100mg(68%)。该物质无需进一步纯化即可直接用于下一步骤。
1-(5-(2-(3-乙基脲基)-7-(甲吡啶酰氨基)-苯并[d]噻唑-5-基)嘧啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸(149)：1-(5-(2-(3-乙基脲基)-7-(甲吡啶酰氨基)苯并[d]噻唑-5-基)嘧啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸乙酯(100mg,0.17mmol)在搅拌下溶解于DMSO(2ml)中，并且加入叔丁醇钾(76mg,0.68mmol)。所述反应室温搅拌2小时。过滤所述反应混合物，通过制备HPLC纯化以提供固体化合物149(29mg,通过LC-MS的98%纯度)(30%)。1HNMR(DMSO-d6):δ10.87(1H,s),8.84(1H,d,J=4.78Hz),8.78(2H,s),8.25(1H,d,J=7.82Hz),8.15(1H,td,J=7.67,1.67Hz),7.81(1H,s),7.77(1H,dd,J=7.65,4.87Hz),7.73(1H,s),6.86(1H,s),4.32(2H,dt,J=13.67,4.43Hz),3.22(2H,p,J=6.69Hz),2.05(2H,dt,J=13.55,3.74Hz),1.43(2H,ddd,J=13.38,9.93,3.91Hz),1.22(3H,s),1.13(3H,t,J=7.15Hz)。MS:561[M+H]+。
化合物152：1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[2-(6-甲氧基-2-吡啶基)乙炔基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-三甲基甲硅烷基乙炔基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯：向1-[5-[7-溴-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4羧酸乙酯(3g,5.47mmol)的DMF(25mL)溶液中加入三甲基甲硅烷基乙炔(0.91g,9.3mmol)和三乙基胺(4.6mL,32.8mmol)，并且所述混合物通过N2吹扫15min脱气，然后加入CuI(0.1g,0.54mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(0.38g,0.54mmol)。所述反应混合物再脱气10-15min，然后加热到80°C持续4h。反应完成(通过TLC)后，所述混合物倾倒入100mL冰冷水中，用EtOAc(3x100mL)提取，并且合并的有机层用盐水洗涤，Na2SO4干燥和过滤并减压蒸发。所述粗残留物通过100-200M硅胶使用30%EtOAc:己烷纯化以获得灰白色固体化合物的产物(2.4g,77%产率)。1H NMR(DMSO-d6):δ0.29(s,9H),1.09(t,J=7.20Hz,3H),1.20(m,6H),1.42(m,2H),2.04(m,2H),3.19(m,2H),3.33(q,J=7.20,2H),4.13(q,J=6.80Hz,2H),4.25(m,2H),6.74(br s,1H),7.58(s,1H),7.90(s,1H);8.76(s,2H)和10.86(br s,1H)。MS:565.26[M+H]+。
1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-乙炔基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯：向1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-三甲基甲硅烷基乙炔基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(1.1g,1.94mmol)的EtOH(40mL)冰***液中加入粉末KOH(0.24g,4.21mmol)，并且所述混合物室温搅拌4h。反应完成(通过TLC)后，减压蒸发溶剂，加入水，并用EtOAc(3x100mL)提取。合并的有机层用盐水和水洗涤，然后通过无水Na2SO4干燥。减压蒸发溶剂以获得浅黄色固体产物(0.8g,83%产率)。1H NMR(DMSO-d6):δ1.11(t,J=7.20Hz,3H),1.21(m,6H),1.42(m,2H),2.04(m,2H),3.20(m,2H),3.33(q,J=7.20,2H),4.13(q,J=6.80Hz,2H),4.25(m,2H),4.67(s,1H),6.80(br s,1H),7.61(s,1H),7.94(s,1H);8.78(s,2H)和10.86(br s,1H)。MS:493.12[M+H]+。
1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-乙炔基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯：向1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-乙炔基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(1.1g,2.23mmol)的DMSO(10mL)冰***液加入叔丁醇钾(1.25g,11.1mmol)，并且所述混合物室温搅拌1h。反应完成(通过TLC)后，加入水(100mL)然后用EtOAc(2x100mL)提取，且随后弃去有机层。水层的pH调节到4-5，用热EtOAc(3x100mL)提取，并且合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并减压蒸发。因此所得的残留物用***研磨以获得所需灰白色固体产物(0.9g,87%产率)。1HNMR(DMSO-d6):δ1.14(t,J=7.20Hz,3H),1.21(s,3H),1.42(m,2H),2.04(m,2H),3.20(m,2H),3.33(q,J=7.20,2H),4.25(m,2H),4.67(s,1H),6.80(br s,1H),7.61(s,1H),7.94(s,1H);8.86(s,2H),10.78(br s,1H)和12.46(br,s,1H)。
1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[2-(6-甲氧基-2-吡啶基)乙炔基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸(152)：向1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-乙炔基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸(0.18g,0.39mmol)的DMF(5mL)溶液中加入2-溴-6-甲氧基-吡啶(0.15g,0.77mmol)和DIPEA(0.16mL,1.16mmol)。所述反应物料通过N2吹扫脱气15min，然后加入CuI(0.015g,0.077mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(0.067g,0.058mmol)。所述反应混合物再脱气10-15min，然后微波辐射下加热到80°C持续30min。所述混合物然后倾倒入100mL冰冷水中，用EtOAc(3x100mL)提取，并且合并的有机层用盐水洗涤，Na2SO4干燥和过滤并减压蒸发。所述粗残留物通过100-200M硅胶使用30%EtOAc:己烷纯化以获得灰白色固体的化合物152(0.01g,5%产率)。1H NMR(DMSO-d6):δ1.09(t,J=7.20Hz,3H),1.19(s,3H),1.41(m,2H),2.02(m,2H),3.19(m,2H),3.30(m,2H),3.90(s,3H),4.30(m,2H),6.77(br s,1H),6.93(d,J=8.40Hz,1H),7.34(d,J=7.20Hz,1H),7.667.82(m,2H),7.97(s,1H),8.81(s,2H),10.91(br s,1H)和12.46(br s,1H)。MS:572.05[M+H]+。
用类似方法制备以下化合物。
化合物1581-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(吗啉代甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
1-[5-[7-溴-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸(138mg,0.27mmol)、(吗啉-4-基)甲基-三氟硼酸钾(54mg,0.27mmol)、X-phos(13mg,0.0265mmol)和碳酸铯(0.26g,0.80mmol)在THF-水(10:1)混合物中搅拌，用N2脱气。加入乙酸钯(II)(3mg,0.0133mmol)，并且所述混合物用N2吹扫，密封，并加热到90°C持续18h。LCMS指示3%转化成所需材料。再加入2当量的硼酸盐、10mol%X-phos和5mol%乙酸钯，并且所述混合物用N2吹扫，密封，并加热到90°C持续18h。LCMS指示30%转化成所需材料。使所述反应冷却，过滤，然后通过制备HPLC纯化以提供固体的化合物158(3.5mg)。1H NMR(DMSO-d6):δ10.81(1H,s),8.76(2H,s),7.79(1H,s),7.39(1H,s),7.09(1H,s),4.31(2H,dt,J=13.55,4.31Hz),3.74(2H,s),3.66(4H,t,J=4.25Hz),3.23(2H,p,J=6.75Hz),2.45(4H,t,J=4.16Hz),2.05(2H,dt,J=13.32,3.59Hz),1.39(2H,dt,J=12.77,5.07Hz),1.20(3H,s),1.13(3H,t,J=7.17Hz)。MS:540[M+H]+。
化合物161：1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-4-氟-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
1-(5-(2-(3-乙基脲基)-4-氟-7-(吡啶-2-基苯并噻唑-5-基嘧啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸乙酯：向1-(5-溴-4-氟-7-(吡啶-2-基苯并噻唑-2-基)-3-乙基脲(中间体7)(0.095g,0.24mmol)的DMF(4.0mL)溶液中加入硼酸酯(0.18g,0.48mmol，和K3PO4水溶液(0.102g,0.48mmol)，并且所述混合物通过N2吹扫15min脱气，然后加入二(三苯基膦)氯化钯(II)(0.016g,0.024mmol)。所述反应混合物再脱气10min，然后加热到80°C持续2h。反应完成(通过TLC)后，所述混合物倾倒入25mL冰冷水中，用EtOAc(3x25mL)提取，并且合并的有机物用盐水洗涤，Na2SO4干燥和过滤并减压蒸发。所述粗残留物通过100-200M硅胶使用1.50%MeOH:DCM纯化以获得所需灰白色固体的产物，所述产物最终用***研磨(0.070g,55%产率)。1H NMR(DMSO-d6):δ1.10(t,J=7.20Hz,3H),1.20(m,6H),1.45(m,2H),2.06(m,2H),3.20(q,J=7.20Hz,2H),3.33(m,2H),4.16(q,J=6.80Hz,2H),4.29(m,2H),6.74(br,s,1H),7.44(m,1H),7.97(m,1H),8.12(d,J=8.80Hz,1H),8.40(d,J=8.40Hz,1H),8.74(s,2H),8.80(d,J=4.40Hz,1H)和10.88(br s,1H)。
1-(5-(2-(3-乙基脲基)-4-氟-7-(吡啶-2-基)-苯并噻唑-5-基)-嘧啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸乙酯(161)：向1-(5-(2-(3-乙基脲基)-4-氟-7-(吡啶-2-基苯并噻唑-5-基嘧啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸乙酯(0.060g,0.10mmol)的DMSO(3.0mL)冰***液加入叔丁醇钾(0.059g,0.532mmol)，并且所述混合物室温搅拌20min。反应完成(通过TLC)后，加入水(10mL)然后用EtOAc(3x25mL)提取，并且弃去有机层。水层的pH调节到4-5，然后用热EtOAc(3x100mL)提取，并且合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并减压蒸发。因此所得的残留物用***研磨以获得所需灰白色固体化合物161(0.050g,88%)。1H NMR(DMSO-d6):δ1.11(t,J=7.20Hz,3H),1.20(s,3H),1.44(m,2H),2.01(m,2H),3.21(m,2H),3.37(m,2H),4.30(m,2H),6.75(br,s,1H),7.44(m,1H),7.97(m,1H),8.11(d,J=6.40Hz,1H),8.41(d,J=8.0Hz,1H),8.73(s,2H),8.80(d,J=4.40Hz,1H),10.86(br s,1H)和12.50(br s,1H)。MS:536.37[M+H]+。
化合物162：1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-4-(2-吡啶基)噻唑并[5,4c]吡啶-6-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
1-(6-溴-4-(吡啶-2-基)噻唑并[5,4c]吡啶-2-基)-3-乙基脲：1-(4,6-二溴噻唑并[5,4c]吡啶-2-基)-3-乙基脲(中间体8)(0.25g,0.65mmol)和2-(三丁基甲锡烷基)吡啶(0.21mL,0.65mmol)的DMF(10mL)溶液用N2吹扫15min，然后加入四(三苯基膦)钯(0)(0.075g,0.065mmol)。所述反应再用N2吹扫15min脱气，然后加热到80°C持续16h。所述溶液减压蒸馏，加入水(25mL)，并用EtOAc提取(3x100mL)。通过无水Na2SO4干燥合并的有机物，过滤，减压浓缩。所述残留物通过硅胶(100-200M,2.50%MeOH-DCM)纯化以提供最终用***研磨的所需产物(0.10g,40%)。通过NOE实验确定区域选择性化学（regio chemistry）。
1-(5-(2-(3-乙基脲基)-4-(吡啶-2-基)噻唑并[5,4c]吡啶-6-基)嘧啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸乙酯：向1-(6-溴-4-(吡啶-2-基)噻唑并[5,4c]吡啶-2-基)-3-乙基脲(0.075g,0.20mmol)的DMF-H2O(6:4mL)溶液中加入硼酸酯(0.075g,0.20mmol)和磷酸钾(0.085g,0.40mmol)，并且所述混合物通过N2吹扫15min脱气，然后加入二(三苯基膦)氯化钯(II)(0.015g,0.02mmol)。所述反应再用N2吹扫15min脱气，然后加热到80°C持续16h。然后所述反应减压蒸馏，加入水(50mL)，并用EtOAc提取(3x50mL)。用盐水洗涤合并的有机物，（Na2SO4）干燥，过滤，减压浓缩。所述残留物通过硅胶(60-120M,70%MeOH-己烷)纯化以提供最终用***研磨的所需产物(0.06g,55%)。1H NMR(DMSO-d6):δ1.10(t,J=7.20Hz,3H),1.22(m,6H),1.46(m,2H),2.03(m,2H),3.21(m,2H),3.38(m,2H),4.16(q,J=7.20Hz,2H),4.34(m,2H),6.85(br s,1H),7.56(m,1H),8.05(m,1H),8.16(s,1H),8.788.84(m,2H),9.26(s,2H)和10.93(br s,1H)。LCMS:547.18[M+H]+
1-(5-(2-(3-乙基脲基)-4-(吡啶-2-基)噻唑并[5,4c]吡啶-6-基)嘧啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸(162)：向1-(5-(2-(3-乙基脲基)-4-(吡啶-2-基)噻唑并[5,4c]吡啶-6-基)嘧啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸乙酯(0.050g,0.091mmol)的DMSO(2.0mL)溶液室温加入叔丁醇钾(0.052g,0.45mmol)，并且所述混合物室温搅拌15-20min。反应完成(通过TLC)后，加入水(25mL)然后用EtOAc(3x50mL)提取，并且弃去有机层。水层的pH调节到4-5，用热EtOAc(3x50mL)提取，并且合并的有机层用盐水洗涤，Na2SO4干燥，过滤并减压蒸发。因此所得残留物用***研磨以提供化合物162(0.030g,64%)。1HNMR(DMSO-d6):δ1.10(t,J=7.20Hz,3H),1.20(s,3H),1.44(m,2H),2.04(m,2H),3.22(m,2H),3.37(m,2H),4.35(m,2H),6.86(br s,1H),7.53(m,1H),8.05(m,1H),8.16(s,1H),8.80(d,J=8.40Hz,1H),8.84(d,J=4.40Hz,1H),9.26(s,2H),10.93(br s,1H)和12.45(br s,1H)。MS:519.28[M+H]+。
类似制备以下化合物：
化合物1907-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-2-甲基-3-氧代-4H-吡啶并[3,2b][1,4]噁嗪-2-羧酸
2-甲基-3-氧代-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3,4-二氢-2H-吡啶并[3,2b][1,4]噁嗪-2-羧酸乙酯：向7-溴-2-甲基-3-氧代-3,4-二氧-2H-吡啶并[3,2b][1,4]噁嗪-2-羧酸乙酯(0.5g,1.59mmol)的1,4-二噁烷(10mL)溶液中室温加入乙酸钾(0.23g,2.38mmol)和双频哪醇合二硼(0.6g,2.38mmol)，并且所述混合物通过N2吹扫脱气15-20min，然后加入三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(0.082g,0.08mmol)和三环己基膦(0.053gm,0.19mmol)。所述反应再脱气15-20min，然后加热到80°C持续3h。反应完成(通过TLC)后，所述反应化合物冷却到室温，用500mL EtOAc稀释，通过硅藻土，并且蒸发所述滤液以获得粗材料(0.4g,70%)，所述材料不需进一步纯化就可用于下一步骤。MS:363.25[M+H]+。
7-(2-(3-乙基脲基)-7-(吡啶-2-基)苯并噻唑-5-基)-2-甲基-3-氧代-3,4-二氢-2H-吡啶并[3,2b][1,4]噁嗪-2-羧酸乙酯：向2-(3-乙基脲基)-7-(吡啶-2-基)苯并噻唑-5-基-三氟甲磺酸酯(0.5g,1.12mmol)和2-甲基-3-氧代-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3,4-二氢-2H-吡啶并[3,2b][1,4]噁嗪-2-羧酸乙酯(0.4g,1.12mmol)的1,4-二噁烷:MeOH(5:3mL)溶液中室温加入磷酸钾(0.36g,1.68mmol)，并且所述混合物通过N2吹扫15-20min脱气，然后加入二氯(1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁)钯(II)(0.091g,0.11mmol)。所述反应再脱气15-20min，然后加热到80°C持续5h。反应完成(通过TLC)后，所述反应冷却到室温，用EtOAc(500mL)稀释，通过硅藻土，减压浓缩所述滤液，并且粗残留物通过100-200M硅胶纯化，使用2.3%MeOH:DCM洗脱剂以获得所需灰白色固体产物(0.25g,42%)。1H NMR(DMSO-d6):δ1.061.13(m,6H),1.77(s,3H),3.21(q,J=7.20,2H),4.14(m,2H),6.87(br s,1H),7.45(m,1H),7.978.03(m,2H),8.09(s,1H),8.29(s,1H),8.55(s,2H),8.80(d,J=4.0Hz,1H),10.62(br s,1H)和11.73(br s,1H)。MS:533.24[M+H]+。
7-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-2-甲基-3-氧代-4H-吡啶并[3,2b][1,4]噁嗪-2-羧酸(190)：向7-(2-(3-乙基脲基)-7-(吡啶-2-基)苯并噻唑-5-基)-2-甲基-3-氧代-3,4-二氢-2H-吡啶并[3,2b][1,4]噁嗪-2-羧酸乙酯(0.10g,0.19mmol)的THF冰***液中加入LiOH(0.023g,0.57mmol溶解在最小量H2O中)，并且所述混合物室温搅拌3h。反应完成(通过TLC)后，浓缩所述溶剂，并且加入10mL水到反应中。所述水层用EtOAc(2x50mL)洗涤，并且弃去所述有机层。水层的pH调节到4-5，用热EtOAc(3x50mL)提取，并且合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。因此所得的残留物用***研磨以获得所需灰白色固体化合物190(0.06g,63%)。1H NMR(DMSO-d6):δ1.11(t,J=7.20Hz,3H),1.74(s,3H),3.21(m,2H),6.86(br s,1H),7.44(m,1H),7.978.06(m,3H),8.28(s,1H),8.50(s,1H),8.56(d,J=8.0Hz,1H),8.81(d,J=4.0Hz,1H),10.63(br s,1H)和11.57(br s,1H)。MS:505.29[M+H]+。
使用本文所述通用方法和/或实施例相似制备下列化合物。
化合物193：1-[5-[7-氨甲酰基-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[(E)-甲氧基亚氨基甲基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸乙酯(619mg,1.147mmol)100悬浮在MeOH(9mL)和NaOH(水性)(1M,9mL)中，密封在微波管中，85°C辐射1h，然后65°C传统加热过夜。用水(40mL)稀释所述反应，用EtOAc洗涤(1x50mL)。用HCl(水性)(1M,pH2)酸化水相，并用EtOAc(3x60mL)反提取，生成直接用于反相色谱的蜡状固体(5-100%H2O/MeCN)，产生25mg(5%产率)作为醛肟副产品的化合物193。1H NMR(DMSO-d6)δ8.84(s,2H),8.33(s,1H),8.11(d,J=1.4Hz,1H),8.03(d,J=1.4Hz,1H),7.71(s,1H),6.87(t,J=5.4Hz,1H),4.46(dd,J=9.9,3.6Hz,2H),3.18(qd,J=13.2,4.8Hz,4H),2.06(d,J=13.4Hz,2H),1.54(q,J=7.4Hz,2H),1.35(td,J=13.6,4.0Hz,2H),1.11(t,J=7.2Hz,3H),0.81(t,J=7.5Hz,3H)。MS:498.2[M+H]+。
化合物199：4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-甲酰基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸
4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-甲酰基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸乙酯：中压反应容器装有下列试剂和溶剂：1-[5-[7-溴-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-乙基-哌啶-4-羧酸乙酯(2.54g,4.52mmol)、乙酸钯(102mg,0.452mmol)、Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(200mg,0.2mmol)、3-二苯基膦基丙基(二苯基)膦(200mg,0.5mmol)、三乙基硅烷(2.3mL,14mmol)、三乙基胺(1.3mL,9.05mmol)的DMF(35mL)溶液。所述混合物加压到一氧化碳100psi，并且75°C加热过夜。所述反应通过0.4微米过滤器过滤，并且真空除去大部分DMF。粗混合物在DCM(100mL)之间分层，并用水(100mL)洗涤，然后用饱和盐水(100mL)洗涤，MgSO4干燥并除去挥发物以提供深红色糖浆剂。所述残留物进行快速色谱(Grace80g,010%DCM/MeOH)，生成黄色固体产物1.85g(80%产率)。1HNMR(CDCl3)δ10.20(d,J=12.8Hz,1H),8.65(d,J=9.9Hz,2H),8.11(d,J=1.6Hz,1H),7.86(d,J=1.7Hz,1H),4.58(dt,J=13.7,3.4Hz,2H),4.23(qd,J=7.1,3.4Hz,2H),3.57-3.41(m,2H),3.28-3.10(m,2H),2.26(d,J=13.2Hz,2H),1.61(dt,J=7.5,5.7Hz,4H),1.52-1.39(m,2H),1.31(td,J=7.2,3.6Hz,6H),0.91-0.84(m,3H)。MS:511.0[M+H]+。
4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-甲酰基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸：4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-甲酰基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸乙酯(1.75g,3.43mmol)溶解在THF(60mL)和MeOH(125mL)中，并且引入KOH(125mL;1mol/L)水溶液，并回流过夜。这个阶段后，所述混合物用水(150mL)稀释，用Et2O/EtOAc(1:1,100mL)洗涤，并且所述残留水溶液酸化到pH1(3M HCl)并用EtOAc(3x100mL)反提取。合并所述有机组分，(MgSO4)干燥，并真空浓缩，快速硅胶柱色谱(010%DCM/MeOH)后提供浅黄色固体产物1.05g(64%产率)。1HNMR(CDCl3):δ10.16(s,1H),8.56(d,J=20.7Hz,2H),7.95(d,J=1.5Hz,1H),7.81(d,J=1.6Hz,1H),4.51(d,J=13.9Hz,2H),3.39-3.32(m,2H),3.26-3.15(m,2H),2.20(d,J=13.4Hz,2H),1.59(q,J=7.5Hz,2H),1.48-1.34(m,2H),1.21(t,J=7.2Hz,3H),0.87(t,J=7.5Hz,3H)。MS:483.1[M+H]+。
化合物2021-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(甲氧基甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
1-[5-[2-(3-乙基-5-甲基-2-氧代-1,3,5-三嗪（triazinan）-1-基)-7-甲酰基-1,3-苯并噻唑-5-基]-嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯：
1-[5-[7-溴-2-(3-乙基-5-甲基-2-氧代-1,3,5-三嗪-1-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(中间体9)(2.58g,4.28mmol)溶解在DMF(50mL)中。加入三乙基胺(1.19mL,8.56mmol)、1,3-双(二苯基膦)丙烷(200mg,0.4mmol)、三乙基硅烷(2.05mL,12.8mmol)、Pd(OAc)2(100mg,0.4mmol)和Pd(dppf)Cl2.DCM(200mg,0.2mmol)，并且所述混合物在75°C，一氧化碳(160psi)气氛下搅拌32h。所述反应混合物冷却至室温，浓缩至干并且通过快速柱色谱(80g GraceResolv硅胶管–干燥加入)纯化所述固体残留物，用0-20%MeOH/CH2Cl2洗脱以提供褐色固体。所述固体用EtOAc洗涤以提供所需灰白色固体化合物(690mg,29%)。MS:552.08[M+H]+。
1-[5-[2-(3-乙基-5-甲基-2-氧代-1,3,5-三嗪-1-基)-7-(羟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯：
1-[5-[2-(3-乙基-5-甲基-2-氧代-1,3,5-三嗪-1-基)-7-甲酰基-1,3-苯并噻唑-5-基]-嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(560mg,1.02mmol)溶解在1:1EtOH/CH2Cl2(40mL)中，并且冷却到0°C。加入NaBH4(77mg,2.03mmol)，并且所述混合物在搅拌下加热到室温2h。所述混合物用EtOAc(200mL)稀释，用水、盐水洗涤并且分离。所述有机组分用(Na2SO4)干燥，减压浓缩以提供所需白色固体化合物(484mg,86%)。MS:554.12[M+H]+。
1-[5-[2-(3-乙基-5-甲基-2-氧代-1,3,5-三嗪-1-基)-7-(碘甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯：咪唑(75mg,1.09mmol)、三苯基膦(276mg,1.05mmol)和碘(267mg,1.05mmol)溶解在CH2Cl2(15mL)中，并且室温搅拌5min。然后加入1-[5-[2-(3-乙基-5-甲基-2-氧代-1,3,5-三嗪-1-基)-7-(羟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(485mg,0.88mmol)的CH2Cl2(10mL)溶液，并且所述混合物室温搅拌2h。所述混合物预吸附到硅胶上，并通过快速柱色谱(80gGraceResolv硅胶管–干燥加载)纯化，用25-100%EtOAc/庚烷洗脱以提供所需浅黄色泡沫状化合物(323mg,56%)。MS:664.02[M+H]+。
1-[5-[2-(3-乙基-5-甲基-2-氧代-1,3,5-三嗪-1-基)-7-(2-甲氧基乙氧基甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯：1-[5-[2-(3-乙基-5-甲基-2-氧代-1,3,5-三嗪-1-基)-7-(碘甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(160mg,0.241mmol)和2-甲氧基乙醇(95μL,1.21mmol)溶解在THF(10mL)中。逐份加入氢化钠(96mg,2.41mmol)，并且所述混合物在氩气下室温搅拌1h。所述混合物然后用EtOAc(50mL)稀释，用饱和NH4Cl水溶液小心淬灭，用水、盐水洗涤，并分离。所述有机组分用(Na2SO4)干燥，减压浓缩，并且所得固体残留物通过快速柱色谱纯化(40g GraceResolv,硅胶管)，用50-100%EtOAc/庚烷洗脱以提供所需无色树脂化合物(86mg,58%)。MS:612.16[M+H]+。
1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-甲氧基乙氧基甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸(202)：1-[5-[2-(3-乙基-5-甲基-2-氧代-1,3,5-三嗪-1-基)-7-(2-甲氧基乙氧基甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(86mg,0.141mmol)溶解在EtOH(15mL)中，并且加入2M水性NaOH(5mL)。所述反应然后在70°C搅拌2h，随后冷却到室温，加入2M HCl(10mL)并且所述混合物搅拌1h。所述混合物然后用EtOAc(3x25mL)提取，并且合并的有机组分用盐水洗涤，分离，(Na2SO4)干燥，并减压浓缩以提供灰白色固体化合物202(60mg,81%)。1H NMR(DMSO-d6):δ=12.40(bs,1H),10.76(bs,1H),8.75(s,2H),7.82(d,J=1.5Hz,1H),7.41(d,J=1.4Hz,1H),6.84(bt,J=5.4Hz,1H),4.68(s,2H),4.28(dt,J=13.8和4.2Hz,2H),3.393.30(m,2H),3.35(s,3H),3.253.17(m,2H),2.052.00(m,2H),1.39(ddd,J=13.8,10.2和3.9Hz,2H),1.20(s,3H),1.12(t,J=7.2Hz,3H)。MS:529.16[M+H]+。
类似制备以下化合物。
1H NMR(DMSO-d6):δ=8.78(s,2H),7.85(d,J=1.6Hz,1H),7.497.45(m,1H),7.45(d,J=1.4Hz,1H),4.75(s,2H),4.30(dt,J=13.9和4.1Hz,2H),3.61(dd,J=5.9和3.3Hz,2H),3.54(dd,J=5.9和3.3Hz,2H),3.343.33(m,2H),3.29(s,3H),3.303.11(m,2H),2.102.00(m,2H),1.39(ddd,J=13.8,10.2和3.8Hz,2H),1.20(s,3H),1.11(t,J=7.2Hz,3H)。MS:485.12[M+H]+。
化合物195：1-(5-(2-(3-乙基脲基)-7-(吡啶-2-基-苯并噻唑-5-基-哒嗪-3-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸(或称为1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]哒嗪-3-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸)
1-(5-(2-(3-乙基脲基)-7-(吡啶-2-基)苯并[d]噻唑-5-基)哒嗪-3-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸乙酯：向1-(5-(6-溴哒嗪-4-基)-7-(吡啶-2-基)-苯并噻唑-2-基)-3-乙基脲(中间体10)(0.090g,0.19mmol)的DMF(2mL)溶液中加入Et3N(0.08mL,0.57mmol)，然后加入4-甲基哌啶-4-羧酸乙酯盐酸盐(0.06g,0.29mmol)，并且所述混合物加热到90°C持续20h，然后冷却到室温，加入水，并用EtOAc(3x75mL)提取。用盐水洗涤合并的有机物，通过无水Na2SO4干燥，过滤，减压蒸发。所述粗残留物通过100-200M硅胶使用3%MeOH:DCM纯化以获得所需黄色固体产物(0.05g,47%)。MS:546.40[M+H]+。
1-(5-(2-(3-乙基脲基)-7-(吡啶-2-基)-苯并噻唑-5-基)-哒嗪-3-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸(195)：向1-(5-(2-(3-乙基脲基)-7-(吡啶-2-基)苯并[d]噻唑-5-基)哒嗪-3-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸乙酯(0.05g,0.092mmol)的DMSO(2mL)冰***液中加入叔丁醇钾(0.051g,0.45mmol)，并且所述混合物室温搅拌2h。反应完成(通过TLC)后，加入水(10mL)然后用EtOAc(3x50mL)提取，并且弃去有机层。水层的pH调节到4-5，用EtOAc(3x50mL)提取，并且合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并减压蒸发。因此所得的残留物用***研磨以提供所需灰白色固体化合物195(0.025g,53%)。1HNMR(DMSO-d6):δ9.15(s,1H),8.82(m,1H),8.55(d,J=8.0Hz,1H),8.38(s,1H),8.21(s,1H),8.02(t,J=8.0Hz,1H),7.90(m,1H),7.64(s,1H),7.46(m,1H),7.17(br s,1H),4.20(m,2H),3.193.24(m,4H),2.10(m,2H),1.43(m,2H),1.22(s,3H)和1.01(t,J=7.2Hz,3H)。MS:518.29[M+H]+。
化合物1971-[5-[7-(4,5-二氢异噁唑-3-基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-乙基-哌啶-4-羧酸
4-乙基-1-[5-[2-(3-乙基-5-甲基-2-氧代-1,3,5-三嗪-1-基)-7-(3-羟基丙-1-炔基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-嘧啶-2-基]-哌啶-4-羧酸乙酯：1-[5-[7-溴-2-(3-乙基-5-甲基-2-氧代-1,3,5-三嗪-1-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-乙基-哌啶-4-羧酸乙酯(700mg,1.14mmol)、PdCl2(PPh3)2(32mg,0.05mmol)和三苯基膦(3mg,0.01mmol)置于10-20mL微波管中，并加入无水DMF(14mL)，然后快速加入三乙基胺(0.95mL,6.81mmol)和炔丙基醇(0.13mL,2.27mmol)。所述溶液用氩气鼓泡～3分钟，然后加入CuI(4mg,0.02mmol)。所述瓶加盖，并且混合物脱气，然后在100°C微波加热30分钟。加入更多的PdCl2(PPh3)2(11mg)和炔丙基醇(0.05mL)，并且氩气鼓泡通过所述混合物，然后加入CuI(1.5mg)。所述瓶加盖，并且混合物脱气，然后再次100°C微波加热15分钟。所述粗反应混合物通过PTFE过滤器过滤。所述过滤器通过EtOAc冲洗，然后水冲洗。所述滤液用水稀释，用EtOAc(4x60mL)提取，并且合并的有机层用水(2x50mL)和盐水洗涤，Na2SO4干燥，并且减压浓缩至干以生成褐色固体。所述混合物通过色谱Biotage SP4,40g Si管，含50-80%EtOAc的环己烷纯化，并且合并相关组分以生成所需灰白色固体化合物247mg(37%)。MS:592.13[M+H]+。
4-乙基-1-[5-[2-(3-乙基-5-甲基-2-氧代-1,3,5-三嗪-1-基)-7-(3-甲基磺酰氧基丙-1-炔基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-嘧啶-2-基]-哌啶-4-羧酸乙酯：4-乙基-1-[5-[2-(3-乙基-5-甲基-2-氧代-1,3,5-三嗪-1-基)-7-(3-羟基丙-1-炔基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-嘧啶-2-基]-哌啶-4-羧酸乙酯(325mg,0.55mmol)在氩气下溶解于无水DCM(32mL)中，并且所述溶液冷却到0°C。加入三乙基胺(0.19mL,1.40mmol)，然后加入甲磺酰氯(0.064mL,0.82mmol)，使所述混合物加温到室温并且搅拌45分钟。所述混合物用水稀释，DCM(3x20mL)提取，并且所述合并的有机层用盐水洗涤，Na2SO4干燥，并减压浓缩至干。获得所需黄色油化合物，其不需进一步纯化即用于下一个步骤。MS:670.09[M+H]+。
1-[5-[7-[3-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)氧基丙-1-炔基]-2-(3-乙基-5-甲基-2-氧代-1,3,5-三嗪-1-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-嘧啶-2-基]-4-乙基-哌啶-4-羧酸乙酯：4-乙基-1-[5-[2-(3-乙基-5-甲基-2-氧代-1,3,5-三嗪-1-基)-7-(3-甲基磺酰氧基丙-1-炔基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-嘧啶-2-基]-哌啶-4-羧酸乙酯(368mg,0.55mmol)、N-羟基邻苯二甲酰亚胺(134mg,0.82mmol)、碘化钾(9mg,0.05mmol)和碳酸钾(152mg,1.10mmol)在氩气下溶解在无水DCM(32mL)中，并且所述溶液加热到60℃持续3h。所述冷却的混合物用水稀释，EtOAc(4x30mL)提取，并且所述有机相用水然后盐水洗涤，Na2SO4干燥，并减压浓缩至干。获得黄色固体，并且所述混合物通过色谱，Biotage SP4,40gSi管，含50-80%EtOAc的环己烷纯化。组合相关组分以生产所需浅黄色油状化合物，233mg(58%)。MS:737.13[M+H]+。
1-[5-[7-(4,5-二氢异噁唑-3-基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸(197)：1-[5-[7-[3-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)氧基丙-1-炔基]-2-(3-乙基-5-甲基-2-氧代-1,3,5-三嗪-1-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-乙基-哌啶-4-羧酸乙酯(233mg,0.32mmol)悬浮在EtOH(20mL)中，并且加入氢氧化钠溶液(10mL,1M,水性)以生成浅黄色溶液。所述溶液在100°C加热，并且48小时后冷却到室温。所述混合物减压浓缩至干，并且剩余水用MeCN共沸。所得黄色残留物在超声处理和加热下悬于MeOH中，然后通过PTFE滤杯过滤。获得（丢弃）白色(盐样)固体和黄色滤液。所述黄色滤液减压浓缩至干以生成黄色固体，所述固体悬浮在水中，超声处理，加入DCM，并且所述混合物通过PTFE滤杯过滤，留下浅黄色固体。所述固体溶解在MeOH中，通过滤杯，并且所述溶液减压浓缩至干以生成通过色谱、Biotage SP4、40g Si管、含05%MeOH的DCM纯化的浅黄色固体。相关组分合并以提供9mg浅黄色固体化合物197。1H NMR(MeOD):δ8.67(2H,s),7.85(1H,d,J=1.6Hz),7.51(1H,d,J=1.6Hz),4.57(2H,t,J=10.2Hz),4.57(2H,m),3.60(2H,t,J=10.2Hz),3.36(2H,q,J=7.2Hz),3.24(2H,m),2.22(2H,dm,J=13.4Hz),1.64(2H,J=7.5Hz),1.45(2H,m),1.24(3H,t,J=7.2Hz),0.93(3H,t,J=7.5Hz)。MS:524.14[M+H]+。
化合物1911-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-6-甲氧基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯;和化合物1981-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-6-甲氧基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-6-甲氧基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(191)：1-(5-溴-6-甲氧基-1,3-苯并噻唑-2-基)-3-乙基-脲(中间体11)(200mg,66质量%,0.40mmol)、4-甲基-1-[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸乙酯(粗产物,638mg,47质量%,0.80mmol)和Pd(dppf)Cl2.DCM(16mg,0.02mmol)溶解在微波管内的二噁烷(7.5mL)中，并且加入碳酸铯(391mg,1.20mmol)的水(2.5mL)溶液。所述瓶加盖，混合物脱气，并且110℃微波加热30分钟。所述混合物倾倒入水中，EtOAc(4x20mL)提取，并且所述有机层用盐水洗涤，Na2SO4干燥，并真空浓缩至干。获得黄色固体，并且所述混合物通过色谱、Biotage SP4、12g Si管、含05%MeOH的DCM纯化。所述相关组分合并生成褐色固体，其进一步通过色谱Biotage SP4、12g Si管、含50%EtOAc的己烷(等度)纯化，然后用EtOAc冲洗柱。相关组分合并以生成白色固体化合物191，110mg(55%)。1H NMR(MeCN d3):δ1.19(3H,t,J=7.2Hz),1.26(3H,s),1.29(3H,t,J=7.1Hz),1.49(2H,ddd,J=14.0,10.5和4.1Hz),2.14(2H,m),3.32(4H,m),3.87(3H,s),4.20(2H,q,J=7.1Hz),4.37(2H,dt,J=14.0和4.1Hz),6.16(1H,br s),7.51(1H,s),7.61(1H,s),8.55(2H,s),8.77(1H,br s)。MS:499.12[M+H]+。
1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-6-甲氧基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸(198)：1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-6-甲氧基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(101mg,0.20mmol)悬浮在乙醇(2mL)中，并且加入氢氧化钠(2mL,1M水性)溶液以生成浅黄色溶液，并且所述混合物加热到60°C持续1小时40分钟，然后静置冷却到室温过夜。所述混合物用HCl(1M,水性)溶液酸化到pH3，并且用水稀释。加入DCM，但是所述材料不溶解，因此所述混合物减压浓缩以除去DCM，然后通过PTFE过滤器过滤(所述过滤器用～2mL DCM处理以使其对水性悬浮液的透过性更好)，并且用水(2mL)冲洗。真空箱中40°C干燥获得白色固体以生成化合物198,75mg(79%)。1H NMR(DMSO):δ1.11(3H,t,J=7.1Hz),1.21(3H,s),1.40(2H,ddd,J=13.8,9.9和3.8Hz),2.02(2H,dt,J=13.8和3.8Hz),3.20(2H,dt,J=12.8和7.1Hz),3.33(2H,m),3.83(3H,s),4.28(2H,dt,J=13.8和4.5Hz),6.71(1H,br t,J=5.7Hz),7.56(1H,s),7.65(1H,s),8.53(2H,s),10.56(1H,br s),12.44(1H,br s)。MS:471.13[M+H]+。
化合物200：1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-甲氧基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
1-[5-[2-(3-乙基-5-甲基-2-氧代-1,3,5-三嗪-1-基)-7-羟基-1,3-苯并噻唑-5-基]-嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯：[5-[2-(4-乙氧基羰基-4-甲基-1-哌啶基)嘧啶-5-基]-2-(3-乙基-5-甲基-2-氧代-1,3,5-三嗪-1-基)-1,3-苯并噻唑-7-基]硼酸(中间体12)(1.88g,3.32mmol)溶解在丙酮(60mL)中，并且冷却到0°C。将溶于碳酸氢钠（饱和水性）(40mL)的过硫酸氢钾制剂(Oxone)(2.45g,3.98mmol)逐滴加入到反应混合物中，生成深红色溶液。加入后，所述混合物0°C搅拌5min，然后加入1M HCl，使反应混合物达到～pH2。用水（100mL）和EtOAc(100mL)稀释所述反应混合物。除去所述有机层，用EtOAc(2x100mL)再提取两次水层。干燥有机组分，并且真空浓缩生成深褐色固体。快速色谱(40g硅胶柱)，用含0-100%EtOAc梯度的正庚烷洗脱，生成所需产物(2.1g,深红色固体)。1H NMR(MeOD)δ8.61(s,2H),7.41(d,J=1.4Hz,1H),6.84(d,J=1.5Hz,1H),5.21(s,2H),4.47–4.36(m,4H),4.28–4.20(m,2H),3.53–3.44(m,2H),3.35–3.25(m,2H,被溶剂遮蔽),2.67(s,3H),2.19(d,J=13.5Hz,2H),1.56–1.46(m,2H),1.36–1.21(m,9H)。MS:[M H]-538.1。
1-[5-[2-(3-乙基-5-甲基-2-氧代-1,3,5-三嗪-1-基)-7-甲氧基-1,3-苯并噻唑-5-基]-嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯：向1-[5-[2-(3-乙基-5-甲基-2-氧代-1,3,5-三嗪-1-基)-7-甲氧基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(533mg,0.593mmol)、碳酸铯(dicesium carbonate)(390mg,1.19mmol)和N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中0°C加入MeI(55μL,0.89mmol)，并且所述反应混合物加热到室温，然后搅拌1h。再加入一份MeI(110μL,1.78mmol)，并且所述混合物室温再搅拌18h。用氯化铵溶液（50mL）和EtOAc(50mL)稀释所述反应。分离所述有机层，并且再用一份EtOAc(2x50mL)洗涤所述水层。合并所述有机层，(MgSO4)干燥，并且真空浓缩生成粗产物混合物，然后通过快速色谱(12g硅柱)，用含0-100%EtOAc梯度的正庚烷洗脱以生成所需产物(226mg,浅褐色固体)。1H NMR(CDCl3)δ8.63(s,2H),7.51(d,J=1.3Hz,1H),6.82(d,J=1.3Hz,1H),5.23(s,2H),4.42(dt,J=13.6,4.0Hz,2H),4.35(s,2H),4.25(q,J=7.1Hz,2H),4.04(s,3H),3.563.50(m,2H),3.433.34(m,2H),2.70(s,3H),2.25(d,J=13.6Hz,2H),1.58–1.48(m,2H),1.38–1.24(m,9H)。MS:554.1[M+H]+。
1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-甲氧基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸(200)：1-[5-[2-(3-乙基-5-甲基-2-氧代-1,3,5-三嗪-1-基)-7-甲氧基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(225mg,0.41mmol)溶解在NaOH(1mL)和THF(3mL)溶液中，并且所述混合物室温搅拌3h。再加入一份NaOH(1M)(1mL)，并且室温再继续搅拌1h。所述反应加热到60°C持续16h，然后100C2h，然后再用一份NaOH(1M,1mL)持续4h。加入5M NaOH溶液(1mL,5mmol)，并且室温继续搅拌过夜，然后60°C2h。所述反应混合物冻干浓缩，然后使用反相色谱(C18柱)纯化，用含20-60%ACN梯度的水(有0.1%甲酸)洗脱以生成化合物200(60mg,浅黄色固体)。1H NMR(MeOD)δ8.63(s,2H),7.43(s,1H),6.94(s,1H),4.45–4.35(m,2H),4.05(s,3H),3.46–3.35(m,4H,被溶剂变遮蔽),2.23–2.16(m,2H),1.53–1.42(m,2H),1.28(s,3H),1.24(t,J=7.2Hz,3H)。[M+H]+471.1。
化合物2034-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(甲氧基甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-哌啶-4-羧酸
4-乙基-1-[5-[2-(3-乙基-5-甲基-2-氧代-1,3,5-三嗪-1-基)-7-甲酰基-1,3-苯并噻唑-5-基]-嘧啶-2-基]-哌啶-4-羧酸乙酯：1.4M BuLi(600μL,0.84mmol)在-90°C加入到含1-[5-[7-溴-2-(3-乙基-5-甲基-2-氧代-1,3,5-三嗪-1-基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-乙基-哌啶-4-羧酸乙酯(250mg,0.41mmol)的THF(10mL)中，并且所述反应搅拌10min，然后加入DMF(300μL)，并且所述反应再搅拌20min。所述反应用饱和NH4Cl(水性)淬灭，然后加热到室温，再用EtOAc(3x)提取。干燥合并的EtOAc提取物，并且蒸发溶剂以生成粗产物，所述粗产物通过12g SiO2上的快速色谱纯化，使用EtOAc/环己烷梯度0-0%3CV、0-100%20CV、100-100%5CV生成所需产物(105mg,46%)。1H NMR(CDCl3)δ10.22(s,1H),8.63(s,2H),8.06(d,J=1.7Hz,1H),7.83(d,J=1.7Hz,1H),5.21(s,2H),4.56(dt,J=13.8,3.5Hz,2H),4.33(s,2H),4.23(q,J=7.1Hz,2H),3.51(q,J=7.2Hz,2H),3.23–3.13(m,2H),2.67(s,3H),2.25(bd,J=13.4Hz,2H),1.61(q,J=7.6Hz,2H),1.45(ddd,J=13.5,11.9,4.2Hz,2H),1.30(t,J=7.1Hz,3H),1.25(t,J=7.2Hz,3H),0.86(t,J=7.5Hz,3H)。
1-[5-[7-(二甲氧基甲基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-乙基-哌啶-4-羧酸乙酯：4-乙基-1-[5-[2-(3-乙基-5-甲基-2-氧代-1,3,5-三嗪-1-基)-7-甲酰基-1,3-苯并噻唑-5-基]-嘧啶-2-基]-哌啶-4-羧酸乙酯(33mg,0.058mmol)悬浮于MeOH(2mL)中，并且用浓H2SO4(～5μL)处理。所述反应加热到50°C持续1.5h，然后用DCM和饱和NaHCO3(水性)稀释。分离所述有机层，并且再用DCM(2x)提取水层，然后干燥合并的DCM提取物，并且蒸发溶剂以生成粗产物(35mg)。粗产物无需进一步纯化即可用于下一步骤。MS:557.16[M+H]+。
4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(甲氧基甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸乙酯：1-[5-[7-(二甲氧基甲基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-乙基-哌啶-4-羧酸乙酯(35mg,0.063mmol)溶解在DCM(2mL)，冷却到0°C，并用Et3SiH(50μL,0.313mmol)和BF3:OEt2(15μL,0.119mmol)顺序处理，并且所述混合物搅拌10min，然后加热到室温。40分钟后，室温加入额外的Et3SiH(50μL,0.313mmol)，然后加入BF3:OEt2(15μL,0.119mmol)，并且所述混合物搅拌2.5h，之后所述反应用饱和NaHCO3(水性)稀释，用DCM(3x)提取，干燥，并且蒸发溶剂以生成粗产物(31.7mg)。所述粗产物通过12g SiO2纯化，使用EtOAc/环己烷梯度0-0%3CV、0-100%30CV、100-100%5CV以生成所需化合物(22.3mg,73%)。1H NMR(CDCl3)δ8.59(s,2H),7.79(d,J=1.2Hz,1H),7.25(d,J=0.9Hz,1H),4.66(s,2H),4.53(dt,J=13.7,3.5Hz,2H),4.22(q,J=7.1Hz,2H),3.51–3.40(m,2H),3.38(s,3H),3.22–3.07(m,2H),2.23(d,J=13.4Hz,2H),1.59(q,J=7.5Hz,2H),1.48–1.43(m,2H),1.29(dd,J=10.0,4.1Hz,6H),0.85(t,J=7.5Hz,3H)。MS:527.15[M+H]+
4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(甲氧基甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-哌啶-4-羧酸(203)：4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(甲氧基甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸乙酯(23mg,0.042mmol)溶解在EtOH(1mL)中，并加入2M水性NaOH(330μL,0.66mmol)。所述反应混合物在70°C搅拌15min，然后加入额外2M NaOH(670μL,1.34mmol)，并且所述反应继续1.5h，然后温度增加到100°C且反应继续4h，然后所述反应冷却到室温过夜。之后LCMS指示少量起始材料仍然存在，并且所述反应通过再加热到100°C持续2h完成，然后所述反应冷却到室温，用水稀释，并用DCM(3x)提取。所述水层用10%HCl(水性)酸化，然后EtOAc(3x)提取，所述合并的EtOAc提取物进行干燥，并且蒸发所述溶剂以生成化合物203(13.5mg,64%)。1H NMR(MeOD)δ8.54(s,2H),7.66(bd,J=1.4Hz,1H),7.28(s,1H),4.68(s,2H),4.48(dt,J=13.7,3.6Hz,2H),3.35–3.28(m,2H),3.22–3.11(m,2H),2.20–2.13(m,2H),1.60(q,J=7.5Hz,2H),1.44–1.34(m,2H),1.21(t,J=7.2Hz,3H),0.89(t,J=7.5Hz,3H)。MS:499.12[M+H]+
化合物207：4-乙基-1-(5-(2-(3-乙基脲基)-7-丙酰基苯并[d]噻唑-5-基-嘧啶-2-基)-哌啶-4-羧酸(或称为4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-丙酰基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-哌啶-4-羧酸)
4-乙基-1-(5-(2-(3-乙基脲基)-7-丙酰基苯并[d]噻唑-5-基)嘧啶-2-基)-哌啶-4-羧酸乙酯：N2气氛下向2-(3-乙基脲基)-7-丙酰基苯并[d]噻唑-5-基-三氟甲磺酸酯(中间体13)(0.25g,0.587mmol)的1,4-二噁烷:MeOH(21mL:14mL)溶液室温加入4-甲基-1-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)嘧啶-2-基)哌啶-4-羧酸乙酯(0.46g,1.17mmol)和磷酸钾(0.19g,0.88mmol)。所述反应混合物通过N2脱气15min，然后加入四(三苯基膦)钯(0)(0.068g,0.058mmol)。所述反应混合物再通过N2脱气15min，然后80°C搅拌2h。反应完成(通过TLC)后，加入水(50mL)，然后用EtOAc(3x50mL)提取，并且所述合并的有机层用水、盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤和减压浓缩。所述残留物通过柱色谱(硅胶100-200M,70%EtOAc-己烷)纯化以提供所需灰白色固体产物(0.110g,35%)。1H NMR(DMSO-d6):δ10.70(br s,1H),8.87(s,2H),8.23(s,1H),8.14(s,1H),6.80(br s,1H),4.47(m,2H),4.17(q,J=7.20Hz,2H),3.33(m,2H),3.123.22(m,4H),2.09(m,2H),1.56(q,J=7.60Hz,2H),1.39(m,2H),1.22(t,J=7.20Hz,3H),1.16(t,J=7.2Hz,3H),1.10(t,J=7.2Hz,3H)和0.75(t,J=7.2Hz,3H)。MS:539.52[M+H]+
4-乙基-1-(5-(2-(3-乙基脲基)-7-丙酰基苯并[d]噻唑-5-基)嘧啶-2-基)-哌啶-4-羧酸(207)：向4-乙基-1-(5-(2-(3-乙基脲基)-7-丙酰基苯并[d]噻唑-5-基)嘧啶-2-基)哌啶-4-羧酸乙酯(0.025g,0.046mmol)的EtOH(5mL)溶液中加入NaOH(0.0092g,0.232mmol)水溶液(1mL)，并且所述混合物在80°C搅拌过夜。反应完成(通过TLC)后，减压蒸发所述EtOH，加入水(10mL)到所述残留物中，并用EtOAc(3x25mL)提取，弃去所述有机层。所述水层用1N HCl酸化到pH4-5，用EtOAc(3x25mL)提取，并且所述合并的有机层用盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，然后减压浓缩。所述残留物通过制备TLC(含5%MeOH的DCM)纯化以获得白色固体化合物207(0.007g,30%)。1HNMR(DMSO-d6):δ10.82(br s,1H),8.86(s,2H),8.23(s,1H),8.14(s,1H),6.95(br s,1H),4.46(m,2H),3.36(m,2H),3.133.24(m,4H),2.08(m,2H),1.511.53(m,2H),1.32(m,2H),1.16(t,J=7.2Hz,3H),1.10(t,J=7.2Hz,3H)和0.81(t,J=7.2Hz,3H)。MS:511.24[M+H]+。
化合物223：(E/Z)4-乙基-1-(5-(2-(3-乙基脲基)-7-(1-(甲氧亚氨基)丙基)苯并[d]噻唑-5-基)嘧啶-2-基)-哌啶-4-羧酸(或称为4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(C-乙基-N-甲氧基-碳亚胺基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-哌啶-4-羧酸)
(E/Z)4-乙基-1-(5-(2-(3-乙基脲基)-7-(1-(甲氧亚氨基)丙基)苯并[d]噻唑-5-基)嘧啶-2-基)-哌啶-4-羧酸乙酯：
N2气氛下向4-乙基-1-(5-(2-(3-乙基脲基)-7-丙酰基苯并[d]噻唑-5-基)嘧啶-2-基)哌啶-4-羧酸乙酯(0.25g,0.464mmol)的无水DMF溶液室温加入O-甲氧胺盐酸盐(0.078g,0.928mmol)，并且所述混合物在80°C搅拌2h。反应完成(通过TLC)后，所述反应加入冰水(50mL)淬灭，然后用EtOAc(3x25mL)提取，并且所述合并的有机层用水、盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，和减压浓缩。所述残留物通过***洗涤纯化，以获得所需米色固体产物(0.22g,84%)。1H NMR(DMSO-d6):δ10.56(br s,1H),8.81(s,2H),7.92(br s,1H),7.71(br s,1H),6.80(br s1H),4.46(d,J=13.6Hz,2H),4.144.19(m,2H),4.058(s,3H),3.183.23(m,2H),3.093.15(m,2H),2.902.95(m,2H),2.08(d,J=15.2Hz,2H),1.541.57(m,2H),1.361.41m,2H),1.22(t,J=7.2Hz,3H),1.091.14(m,6H)和0.75(t,J=7.2Hz,3H)。MS:568.2[M+H]+。
(E/Z)4-乙基-1-(5-(2-(3-乙基脲基)-7-(1-(甲氧亚氨基)丙基)苯并[d]噻唑-5-基)嘧啶-2-基)-哌啶-4-羧酸(223)：向(E/Z)4-乙基-1-(5-(2-(3-乙基脲基)-7-(1-(甲氧亚氨基)丙基)苯并[d]噻唑-5-基)嘧啶-2-基)哌啶-4-羧酸乙酯(0.25g,0.440mmol)的EtOH(10mL)溶液中加入NaOH(0.088g,2.20mmol)水溶液(2mL)，并且所述混合物在80°C搅拌过夜。反应完成(通过TLC)后，减压蒸发EtOH，加入水(20mL)，用EtOAc(3x50mL)提取，并弃去所述合并的有机层。所述水层用1N HCl酸化(pH～4.0-5.0)，用EtOAc(3x50mL)提取，并且所述合并的有机层用盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，然后减压浓缩。所述残留物通过柱色谱(硅胶100-200M,5%MeOH-DCM)纯化以获得灰白色固体化合物223(0.12g,51%)。1H NMR(DMSO-d6):δ10.66(br s,1H),8.82(s,2H),7.92(s,1H),7.72(s,1H),6.88(br s,1H),4.45(d,J=12.8Hz,2H),4.05(s,3H),3.16-3.18(m,4H),2.05(d,J=13.2Hz,2H),1.52-1.54(m,2H),1.33-1.37(m,2H),1.22-1.23(m,2H),1.07-1.14(m,6H),0.80(t,J=7.2Hz,3H)。LCMS:540.29[M+H]+
化合物224：(E)4-乙基-1-(5-(2-(3-乙基脲基)-7-(1-(甲氧亚氨基)丙基)苯并[d]噻唑-5-基)嘧啶-2-基)-哌啶-4-羧酸(或称为4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[(E)-C-乙基-N-甲氧基-碳亚胺基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-哌啶-4-羧酸)；和化合物211：(Z)4-乙基-1-(5-(2-(3-乙基脲基)-7-(1-(甲氧亚氨基)丙基)苯并[d]噻唑-5-基)嘧啶-2-基)-哌啶-4-羧酸(或称为4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[(Z)-C-乙基-N-甲氧基-碳亚胺基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-哌啶-4-羧酸)
(E/Z)4-乙基-1-(5-(2-(3-乙基脲基)-7-(1-(甲氧亚氨基)丙基)苯并[d]噻唑-5-基)嘧啶-2-基)-哌啶-4-羧酸通过制备HPLC纯化
方法：柱：X-选择氟苯基(19x250)mm,5μ。
流动相：A-5mM醋酸铵
B-甲醇
流速：15mL/min
模式：梯度
稀释剂：ACN/MeOH、DMF和水的混合物。
生成：(E)4-乙基-1-(5-(2-(3-乙基脲基)-7-(1-(甲氧亚氨基)丙基)苯并[d]噻唑-5-基)嘧啶-2-基)-哌啶-4-羧酸。1H NMR(DMSO-d6):δ8.81(s,2H),7.92(s,1H),7.72(s,1H),6.81(br s,1H),4.46(d,J=14.0Hz,2H),4.05(s,3H),3.11-3.21(m,4H),2.93(q,J=7.2Hz,2H),2.05(d,J=15.2Hz,2H),1.52-1.54(m,2H),1.34-1.36(m,2H),1.04-1.14(m,6H),0.81(t,J=7.2Hz,3H)。MS:540.33[M+H]+和
(Z)-4-乙基-1-(5-(2-(3-乙基脲基)-7-(1-(甲氧亚氨基)丙基)苯并[d]噻唑-5-基)嘧啶-2-基)-哌啶-4-羧酸。1H NMR(DMSO-d6):δ8.76(s,2H),7.86(s,1H),7.40(s,1H),6.78(brs,1H),4.44-4.47(m,2H),3.75(s,3H),3.13-3.16(m,4H),2.61-2.62(m,2H),2.04(d,J=10.0Hz,2H),1.53(m,2H),1.27-1.32(m,2H),1.09(m,3H),0.98(m,3H),0.81(m,3H)。MS:540.32[M+H]+
化合物189：4–乙基–1–[5–[2–(乙基氨甲酰基氨基)–7–[(E)–甲氧基亚氨基甲基]–1,3–苯并噻唑–5–基]嘧啶–2–基]哌啶–4–羧酸;和化合物225：4–乙基–1–[5–[2–(乙基氨甲酰基氨基)–7–[(Z)–甲氧基亚氨基甲基]–1,3–苯并噻唑–5–基]嘧啶–2–基]哌啶–4–羧酸
将O–甲基羟胺盐酸盐(545mg,6.53mmol)加入到4–乙基–1–[5–[2–(乙基氨甲酰基氨基)–7–甲酰基–1,3–苯并噻唑–5–基]嘧啶–2–基]哌啶–4–羧酸(1.05g;2.18mmol)和二异丙基乙胺(1.2mL,7.0mmol)的DMF(25mL)溶液中，并且加热到70°C持续3.5小时，之后LCMS分析证明了起始醛的定量消耗。真空浓缩DMF，并且粗残留物溶于DCM(100mL)，用饱和NaHCO3(水性)(75mL)洗涤，然后用饱和盐水(水溶液)(75mL)洗涤，(MgSO4)干燥，并真空浓缩，然后通过快速柱色谱(0–10%DCM/MeOH)以提供860mg(77%产率)黄色固体。通过反相色谱(Revelerais C18,80g;25–75%0.1%水性FA/MeCN)纯化生成白色固体化合物189(627mg)。混合组分的制备反相HPLC生成化合物225(25mg)。
化合物189：1HNMR(DMSO)δ10.61(d,J=90.5Hz,1H),8.76(s,2H),8.50(s,1H),7.95(s,1H),7.73(d,J=12.6Hz,1H),6.84(s,1H),4.45(d,J=13.3Hz,2H),4.00(d,J=13.8Hz,3H),3.25–3.10(m,5H),2.05(d,J=13.7Hz,2H),1.53(q,J=7.1Hz,2H),1.43–1.26(m,2H),1.10(t,J=7.1Hz,3H),0.81(t,J=7.4Hz,3H)。MS:m/z512.1[M+H]+。
化合物225：1HNMR(DMSO)δ10.61(d,J=90.5Hz,1H),8.72(s,2H),7.94(t,J=4.1Hz,1H),7.89(d,J=1.6Hz,1H),7.75(s,1H),6.94(s,1H),4.50–4.39(m,2H),3.97(s,3H),3.24–3.10(m,5H),2.05(d,J=13.2Hz,2H),1.53(q,J=7.4Hz,2H),1.33(td,J=13.5,4.0Hz,2H),1.10(td,J=7.2,2.5Hz,3H),0.81(t,J=7.5Hz,3H)。MS:m/z512.1[M+H]+。
化合物2081-[5-[7-溴-2-(乙基氨甲酰基氨基)-6-甲氧基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
1-[5-[7-溴-2-(乙基氨甲酰基氨基)-6-甲氧基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯：1-(5,7-二溴-6-甲氧基-1,3-苯并噻唑-2-基)-3-乙基-脲(中间体14)(234mg,0.57mmol)、4-甲基-1-[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸乙酯(716mg,1.14mmol，60质量%)和Pd(dppf)Cl2.DCM(23mg,0.03mmol)溶解在微波管的二噁烷(7.5mL)中，并且加入碳酸铯(559mg,1.72mmol)的水(2.5mL)溶液。所述瓶加盖，混合物脱气，并且在110℃微波加热30分钟。所述混合物倾倒入水中，并用EtOAc(4x40mL)提取。有机层用盐水洗涤，Na2SO4干燥，然后真空浓缩至干。所述混合物通过色谱、Biotage SP4、40g Si管、含10-100%EtOAc的庚烷纯化。检测两种化合物，质量离子(m/z)和保留时间与LCMS相同，但是与TLC(含60%EtOAc的庚烷)不同，所以推定是两种区域异构体。合并相关组分以生产所需浅黄色油的化合物，47mg(14%)。MS:577.04/579.07[M+H]+。
1-[5-[7-溴-2-(乙基氨甲酰基氨基)-6-甲氧基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸(208)：1-[5-[7-溴-2-(乙基氨甲酰基氨基)-6-甲氧基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(47mg,0.081mmol)溶解在EtOH(3mL)中，并且加入NaOH溶液(1mL,1M,水性)以生成浅黄色溶液。所述混合物加热到60°C过夜，然后冷却到室温，减压除去EtOH，并且所述残留物用HCl溶液(1M,水性)酸化到pH3。所述混合物用EtOAc(3x15mL)提取，并且所述合并的有机层用盐水洗涤，Na2SO4干燥，并减压浓缩至干。所述混合物通过色谱、Biotage SP4、4g Si管、含50-100%EtOAc的庚烷纯化。合并相关组分以生成灰白色固体化合物208，8mg(18%)。1H NMR(CDCl3):δ1.31(3H,t,J=7.2Hz),1.42(3H,s),1.61(2H,m),2.27(2H,m),3.47(2H,m),3.64(3H,s),3.84(2H,m),4.15(2H,q,J=7.2Hz),4.27.2(3H,br s),7.48(1H,s),8.62(2H,s)。MS:549.07/551.06[M+H]+。
化合物209：4-乙基-1-[4-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]噻唑-2-基]哌啶-4-羧酸
4-乙基-1-[4-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]噻唑-2-基]哌啶-4-羧酸乙酯：1-(4-溴噻唑-2-基)-4-乙基-哌啶-4-羧酸乙酯(56mg,0.16mmol)、2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基-硼酸(50mg,0.15mmol)、和碳酸铯(42mg,0.22mmol)悬浮在5mL微波管的DMF(1mL)中。所得混合物用Ar脱气5min。[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)，将与二氯甲烷(10mg,0.01mmol)的复合物加入到所述混合物中，然后所述管密封，微波中120°C加热60min。所述混合物冷却到室温，然后蒸发至干，并且所述粗残留物通过12g硅胶柱纯化，使用MeOH:DCM洗脱梯度(0-5%)以获得粘性油产物(30mg,36%产率)。MS:565.13[M+H]+。
4-乙基-1-[4-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]噻唑-2-基]哌啶-4-羧酸(209)：向4-乙基-1-[4-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]噻唑-2-基]哌啶-4-羧酸乙酯(20mg,0.035mmol)的EtOH(1mL)溶液中加入水性NaOH(0.3mL,3.5M)。所述溶液加热到70°C持续22h，然后冷却到室温，并且所述溶液的pH调节到4-5。所述混合物用EtOAc(3x1mL)提取，并且组合所述合并的有机层，用Na2SO4干燥，过滤然后减压蒸发。所述残留物吸附到0.5g硅塞，然后使用4g硅胶柱和MeOH:DCM洗脱梯度纯化。分离灰白色固体的混合物209（3.4mg,18%产率）。1H NMR(MeOD)δ8.75(ddd,J=4.8,1.8,0.9Hz,1H),8.38(d,J=1.5Hz,1H),8.22(d,J=8.2Hz,1H),8.18(d,J=1.4Hz,1H),7.97–7.91(m,1H),7.37(ddd,J=7.5,4.9,0.9Hz,1H),7.16(s,1H),3.95(dt,J=13.1,3.7Hz,2H),3.36(t,J=7.2Hz,2H),3.25(td,J=13.3,2.9Hz,2H),2.24(d,J=13.2Hz,2H),1.70–1.53(m,4H),1.24(td,J=7.2,2.0Hz,3H),0.92(td,J=7.5,4.2Hz,3H)。MS:537.12[M+H]+。
化合物2131-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
1-[5-[7-氰基-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯：1-[5-[7-溴-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(600mg,0.658mmol)、氰化锌(96mg,0.822mmol)和Pd(PPh3)4(76mg,0.066mmol)悬浮在DMF(10mL)中，并且Ar脱气/吹扫(x3)。所述反应混合物然后在100°C微波辐射加热40min，冷却到室温，用EtOAc(50mL)稀释，用水、盐水洗涤，并分离。所述有机组分进行干燥(Na2SO4)，并减压浓缩，并且所得固体通过快速柱色谱(40g GraceResolv硅管-干燥加载)纯化，用0-10%MeOH/CH2Cl2洗脱。所得残留物用MeOH洗涤以提供所需灰白色固体化合物(327mg,～100%)。MS:494.14[M+H]+。
1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯：1-[5-[7-氰基-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(327mg,0.66mmol)和盐酸羟胺(230mg,3.31mmol)悬浮在吡啶(20mL)中，并且所述混合物在80°C搅拌4h。所述反应冷却到室温，并加入乙酰氯(565μL,7.95mmol)，然后80°C搅拌9h。所述反应用EtOAc(100mL)稀释，用稀HCl(2x100mL)、盐水洗涤，并分离。所述有机组分进行干燥(Na2SO4)，减压浓缩，并且油状残留物通过快速柱色谱纯化(40g GraceResolv硅管–干燥加载)，用50-100%EtOAc/庚烷洗脱以提供所需白色固体化合物(192mg,53%)。MS:551.13[M+H]+。
1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸(213)：1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯(192mg,0.349mmol)溶解在EtOH(20mL)中，并且加入2M水性NaOH(10mL)。所述反应混合物在70°C搅拌2h，然后冷却到室温，并且加入2M HCl(20mL)。所述混合物用热EtOAc(3x50mL)提取，所述水相用NaCl饱和且再用EtOAc(50mL)提取，合并的有机组分用盐水洗涤，分离，(Na2SO4)干燥，并且减压浓缩。所述固体残留物用MeCN然后Et2O洗涤以提供浅黄色固体化合物213(163mg,89%)。1H NMR(DMSO-d6):δ10.98(bs,1H),8.81(s,2H),8.11(d,J=1.8Hz,1H),8.10(d,J=1.8Hz,1H),7.06(bt,J=5.4Hz,1H),4.31(dt,J=13.9和4.4Hz,2H),3.37(ddd,J=13.3,10.2和2.9Hz,2H),3.263.19(m,2H),2.76(s,3H),2.092.02(m,2H),1.43(ddd,J=13.8,10.2和3.9Hz,2H),1.21(s,3H),1.13(t,J=7.2Hz,3H)。MS:523.13[M+H]+。
化合物221：4-乙基-1-[4-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]噻唑-2-基]哌啶-4-羧酸
4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]噻唑-2-基]哌啶-4-羧酸乙酯：1-(5-溴噻唑-2-基)-4-乙基-哌啶-4-羧酸乙酯(66mg,0.19mmol)、2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基-硼酸(50mg,0.15mmol)、和碳酸铯(42mg,0.22mmol)悬浮在5mL微波管的DMF(1mL)中，并且所述混合物用Ar脱气5min。将[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)，与DCM(10mg,0.01mmol)的复合物加入到所述混合物中，然后所述容器密封，并在微波中120°C加热60min。所述混合物冷却到室温，然后蒸发至干，并且所述粗残留物通过12g硅胶柱纯化，使用MeOH:DCM洗脱梯度(0-5%)以获得粘性油产物(30mg,36%产率)。MS:565.17[M+H]+。
4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]噻唑-2-基]哌啶-4-羧酸(221)：向4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]噻唑-2-基]哌啶-4-羧酸乙酯(30mg,0.053mmol)的EtOH(1mL)溶液中加入水性NaOH(0.3mL,3.5M)。所述溶液加热到70°C持续22h，然后冷却到室温，并且所述溶液的pH调节到4-5。所述混合物用EtOAc(3x1mL)提取，并且所述合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤然后减压蒸发。所述残留物吸附到0.5g硅塞，然后使用4g硅柱通过MeOH:DCM洗脱梯度纯化。分离灰白色固体的混合物221（2.0mg,11%产率）。1H NMR(MeOD)δ8.75(ddd,J=4.8,1.8,0.9Hz,1H),8.20(d,J=8.3Hz,1H),8.00(d,J=1.6Hz,1H),7.97–7.90(m,1H),7.73(d,J=1.6Hz,1H),7.59(s,1H),7.38(ddd,J=7.5,4.9,0.9Hz,1H),3.87(dd,J=9.6,3.7Hz,2H),3.39–3.32(m,2H),3.25(td,J=13.3,2.9Hz,2H),2.23(d,J=13.3Hz,2H),1.64(q,J=7.5Hz,2H),1.61–1.52(m,2H),1.23(t,J=7.2Hz,3H),0.92(t,J=7.5Hz,3H)。MS:537.13[M+H]+。
化合物229：4-乙基-1-(5-(2-(3-乙基脲基)-7-(吡啶-2-基)-1H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基)-哌啶-4-羧酸(或称为4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1H-苯并咪唑-5-基]嘧啶-2-基]-哌啶-4-羧酸)
4-硝基苄基异硫脲氢(carbamimidothioate)溴酸盐：向硫脲(3.87g,50.92mmol)的丙酮(15mL)溶液中加入1-(溴甲基)-4-硝基苯(10g,46.29mmol)的丙酮(15mL)溶液，并且所述混合物室温搅拌2h，形成白色沉淀。反应完成(通过TLC)后，过滤所述混合物，并且固体分别用EtOAc和丙酮洗涤以提供所需灰白色固体产物(12.0g,89%)。1H NMR(DMSO-d6):δ9.17(br s,4H),8.24(d,J=8.40Hz,2H),7.70(d,J=8.40Hz,2H)和4.66(s,2H)。MS:212.08[M+H]+
N,N-二乙基脲-2-(4-硝基苄基)-2-硫代假脲：向4-硝基苄基异硫脲(carbamimidothioate)氢溴酸盐(2.5g,8.55mmol)的DMF(10mL)溶液中加入乙酸铵(pH～7,4.0mL)的水性缓冲溶液，然后室温加入异氰酸乙酯(10mL.85.57mmol)，并且所述混合物室温搅拌48h。反应完成(通过TLC)后，加入水(10mL)，形成白色沉淀。过滤所述反应混合物，并且固体用水洗涤以获得所需白色固体产物(1.40g,41%)。MS:354.18[M+H]+
4-乙基-1-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)嘧啶-2-基)哌啶-4-羧酸乙酯：向1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-乙基哌啶-4-羧酸乙酯(10.0g,29.22mmol)的1,4-二噁烷(250mL)溶液加入双(频哪醇合)二硼(8.16g,32.14mmol)和KOAc(4.30g,43.83mmol)。所述混合物通过吹扫N215min脱气，然后加入三(二苯亚甲基丙酮)二钯(0)(1.51g,1.46mmol)和三环己基膦(0.98g,3.50mmol)。所述混合物脱气10min，然后加热到80°C持续2h。反应完成后，所述混合物冷却到室温，通过硅藻土过滤，并且减压浓缩所述滤液以获得粗产物(21.59g,粗产率)，其不需纯化就可用于下一步骤。
1-(5-(4-氨基-3-硝基苯基)嘧啶-2-基)-4-乙基哌啶-4-羧酸乙酯：
向4-溴-2-硝基苯胺(10.0g,46.07mmol)的1,4-二噁烷(240mL)和MeOH(140mL)溶液加入4-乙基-1-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)嘧啶-2-基)哌啶-4-羧酸乙酯(21.59g,55.28mmol)和磷酸钾(14.69g,69.10mmol)，并且所述混合物通过吹扫N2脱气15min。然后将1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)(3.75g,6.91mmol)加入到再脱气10min的反应混合物中。反应加热到80℃持续16小时。完成后，蒸发溶剂并用水(150mL)稀释，用EtOAc(4x150mL)提取，并且所述合并的有机层用盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，然后减压浓缩。所述粗残留物通过100-200M硅胶柱色谱使用20%EtOAc:己烷纯化以获得所需米色固体的产物(6.0g,2个步骤51%)。1H NMR(CDCl3):δ8.49(s,2H),8.23(s,1H),7.48(d,J=8.4Hz,1H),6.88(d,J=8.4Hz,1H),6.11(br s,2H),4.52(m,2H),4.19(m,2H),3.11(m,2H),2.22(m,2H),1.561.58(m,2H),1.401.42(m,2H),1.29(t,J=7.20Hz,3H)和0.83(t,J=7.20Hz,3H)。MS:400.25[M+H]+。
1-(5-(4-氨基-3-溴-5-硝基苯基)嘧啶-2-基)-4-乙基哌啶-4-羧酸乙酯：向1-(5-(4-氨基-3-硝基苯基)嘧啶-2-基)-4-乙基哌啶-4-羧酸乙酯(6.0g,15.02mmol)的乙酸(60.0mL)溶液室温逐滴加入溴(0.85mL,16.52mmol)，并且所述混合物然后室温搅拌16h。反应完成后，所述混合物倾倒入100mL冰冷水中，用EtOAc(3x150mL)提取，并且合并的有机层用盐水洗涤，Na2SO4干燥，过滤并减压蒸发。所述粗残留物通过100-200M硅胶柱色谱使用10%EtOAc:己烷纯化以获得所需米色固体的产物(5.60g,78%)。1H NMR(CDCl3):δ8.66(s,2H),8.18(s,2H),7.21(br s,2H),4.394.43(m,2H),4.13-4.18(m,2H),3.06-3.11(m,2H),2.04-2.08(m,2H),1.50-1.52(m,2H),1.38-1.39(m,2H),1.21(t,J=7.60Hz,3H)和0.75(t,J=7.60Hz,3H)。MS:478.11[M+H]+,81%。
1-(5-(4-氨基-3-溴-5-(吡啶-2-基)苯基)嘧啶-2-基)-4-乙基哌啶-4-羧酸乙酯：向含1-(5-(4-氨基-3-溴-5-硝基苯基)嘧啶-2-基)-4-乙基哌啶-4-羧酸乙酯(1.5g,3.14mmol)的DMF(10.0mL)中加入2-(三丁基甲锡烷基)吡啶(1.73g,4.72mmol)，并且所述混合物通过吹扫N2脱气15min，然后加入四(三苯基膦)钯(0)(0.36g,0.314mmol)。所述反应混合物脱气10min，然后加热到120°C持续5h。反应完成后，加入100mL冰冷水，然后用EtOAc提取(4x100mL)，并且合并的有机层分别用冰冷水、盐水溶液洗涤，Na2SO4干燥，过滤和减压蒸发。所述粗残留物通过中性氧化铝使用15%EtOAc:己烷纯化以获得所需产物(0.712g,47%产率)。1H NMR(CDCl3):δ8.68-8.69(m,1H),8.63(s,2H),8.38(s,1H),7.89(s,1H),7.84(s,1H),7.69(d,J=8.4Hz,1H),7.347.36(m,1H),4.654.67(m,2H),4.20-4.22(m,2H),3.21-3.25(m,2H),2.30-2.34(m,2H),1.58-1.60(m,2H),1.44-1.46(m,2H),1.30(t,J=7.20Hz,3H)和0.86(t,J=7.60Hz,3H)。MS:477.44[M+H]+。
1-(5-(3,4-二氨基-5-(吡啶-2-基)苯基)嘧啶-2-基)-4-乙基哌啶-4-羧酸乙酯：向1-(5-(4-氨基-3-硝基-5-(吡啶-2-基)苯基)嘧啶-2-基)-4-乙基哌啶-4-羧酸乙酯(0.70g,1.46mmol)的EtOAc(20.0mmol)溶液加入Pd/C(0.14g,20%w/w)，并且所述混合物在氢气下室温搅拌16h。反应完成(通过TLC)后，所述混合物通过硅藻土过滤，所述滤液减压浓缩，并用Et2O研磨以提供所需产物(0.65g,99%)。1H NMR(DMSO-d6):δ8.618.62(m,1H),8.58(s,2H),7.867.88(m,2H),7.287.30(m,1H),7.11(s,1H),6.84(s,1H),6.16(s,2H),4.78(br s,2H),4.384.42(m,2H),4.13-4.18(m,2H),3.04-3.10(m,2H),2.04-2.08(m,2H),1.55-1.57(m,2H),1.37-1.39(m,2H),1.19(t,J=7.20Hz,3H)和0.83(t,J=7.20Hz,3H)。MS:447.35[M+H]+
4-乙基-1-(5-(2-(3-乙基脲基)-7-(吡啶-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)嘧啶-2-基)-哌啶-4-羧酸乙酯：向乙酸钠(0.606g,7.38mmol)的水溶液(8.0mL)逐滴加入浓缩硫酸直到pH～3.5，然后加入1-(5-(3,4-二氨基-5-(吡啶-2-基)苯基)嘧啶-2-基)-4-乙基哌啶-4-羧酸乙酯(0.55g,1.23mmol)以获得黄色悬浮液。向N,N-二乙基脲-2-(4-硝基苄基)-2-硫代假脲(0.454g,1.23mmol)的DME(15.0mL)溶液加入所得混合物。所述均匀混合物搅拌并且加热到80°C5持续h。反应完成(通过TLC)后，过滤所述混合物，并且所述滤液减压浓缩。因此所得的残留物分别用水、EtOAc和Et2O研磨以获得产物(0.40g,60%)。1H NMR(TFA-d1):d10.03(br s,1H),9.91(s,1H),9.86(m,1H),9.47(m,1H),9.27(m,2H),8.96(s,1H),5.57(m,2H),5.43(q,J=7.20Hz,2H),5.09(m,4H),4.84(m,2H),4.62(q,J=7.20Hz,2H),3.59(m,2H),2.76-2.83(m,4H),2.44(t,J=7.20Hz,3H),2.32(t,J=7.20Hz,3H)和1.98(t,J=7.60Hz,3H)。
4-乙基-1-(5-(2-(3-乙基脲基)-7-(吡啶-2-基)-1H-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基)-哌啶-4-羧酸(229)：向4-乙基-1-(5-(2-(3-乙基脲基)-7-(吡啶-2-基)-1H-苯并[d]噻唑-5-基)嘧啶-2-基)哌啶-4-羧酸乙酯(0.20g,0.37mmol)的DMSO(3.0mL)中加入叔丁醇钾(0.2.06g,1.84mmol)，并且所述混合物室温搅拌16h。反应完成(通过TLC)后，加入水(10mL)然后用EtOAc(3x25mL)提取，并且弃有机层。水层的pH调节到4-5，用EtOAc(3x25mL)提取，并且合的有机层Na2SO4干燥，过滤并减压蒸。因此所得的残留物用正戊烷研磨以获得所需黄色固体化合物229(0.10g,53%)。1H NMR(DMSO-d6+D2O):δ8.78(m,3H),8.38(m,1H),7.95-8.0(m,2H),7.69(s,1H),7.39(br s,1H),4.44(m,2H),3.22(m,2H),3.13(m,2H),2.06(m,2H),1.51(m,2H),1.34(m,2H),1.11(t,J=7.20Hz,3H)和0.80(t,J=7.20Hz,3H)。LCMS:515.19[M+H]+
化合物2271-(5-(2[(乙基氨甲酰基)氨基]-5-(1H-吡唑-1-基)[1,2,4]***并[1,5a]吡啶-7-基)嘧啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸(或称为1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-5-吡唑-1-基-[1,2,4]***并[1,5a]吡啶-7-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸)
7-氯-5-(1H-吡唑-1-基)[1,2,4]***并[1,5a]吡啶-2-胺：5,7-二氯[1,2,4]***并[1,5a]吡啶-2-胺(中间体15)(0.5g,2.46mmol)、碳酸铯(1.6g,4.93mmol)和吡唑(0.5g,7.39mmol)悬浮于DMF(10mL)中，并且70°C搅拌2h，之后LCMS显示形成所需产物。所述反应混合物通过硅藻土过滤，再用DMF洗涤，并且所得绿色/褐色溶液真空浓缩以生成褐色残留物，其在10%IPA/DCM(20mL)和水(10mL)之间分层，分离所述有机层，并且再用10%IPA/DCM(2x10mL)提取水层。合并所述有机层，干燥(MgSO4)，过滤，并真空浓缩以生成所需褐色固体产物(0.4g,69%)。1H NMR(DMSO)δ9.16(d,J=2.6Hz,1H),7.99(d,J=1.4Hz,1H),7.54(d,J=2.1Hz,1H),7.36(d,J=2.1Hz,1H),6.72(dd,J=2.4,1.9Hz,1H),6.46(s,2H)。MS:235.12[M+H]+。
1-{5-[2-氨基-5-(1H-吡唑-1-基)[1,2,4]***并[1,5a]吡啶-7-基]嘧啶-2-基}-4-甲基哌啶-4-羧酸乙酯：将4-甲基-1-[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸乙酯(360mg,0.97mmol)、7-氯-5-(1H-吡唑-1-基)[1,2,4]***并[1,5a]吡啶-2-胺(190mg,0.81mmol)、碳酸铯(400mg,1.2mmol)和Pd(dppf)2Cl2(60mg,0.08mmol)的1,4-二噁烷(4.5mL)和水(0.5mL)悬浮液加入到微波管中，并用N2脱气。所述容器然后在微波反应器中110°C加热60min。真空浓缩所得溶液并且所述残留物通过快速柱色谱(Biotage SP4,40g0-10%MeOH/DCM)和(Biotage SP4,12g2%MeOH/DCM,然后用10%MeOH/DCM冲洗)纯化以生成所需乳膏状固体产物(200mg,55%)MS:448.27[M+H]+。
1-{5-[2-[(乙基氨甲酰基)氨基]-5-(1H-吡唑-1-基)[1,2,4]***并[1,5a]吡啶-7-基]嘧啶-2-基}-4-甲基哌啶-4-羧酸乙酯：将异氰酸乙酯(143mg,2.01mmol)加入1-{5-[2-氨基-5-(1H-吡唑-1-基)[1,2,4]***并[1,5a]吡啶-7-基]嘧啶-2-基}-4-甲基哌啶-4-羧酸乙酯(180mg,0.40mmol)的1,4-二噁烷(15mL)溶液中，并且80°C搅拌22h。LCMS显示形成所需产物。所得黑色反应混合物真空浓缩以生成褐色柏油状固体，所述固体用EtOAc(10mL)研磨以生成所需灰色固体产物(88mg,42%)MS:519.23[M+H]+。
1-{5-[2-[(乙基氨甲酰基)氨基]-5-(1H-吡唑-1-基)[1,2,4]***并[1,5a]吡啶-7-基]嘧啶-2-基}-4-甲基哌啶-4-羧酸(227)：将2N NaOH水溶液(5mL)加入1-(5-{2-[(乙基氨甲酰基)氨基]-5-(1H-吡唑-1-基)[1,2,4]***并[1,5a]吡啶-7-基}嘧啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸乙酯(88mg,0.17mmol)的EtOH(15mL)溶液中，并70°C加热。2h后，所述反应混合物冷却到室温，并且真空浓缩到～1/3体积。加入水(10mL)，并且所得溶液用EtOAc(2x10mL)提取。所述水溶液然后酸化到pH1-2，并用10%IPA/DCM(3x10mL)提取。所述有机层进行合并和干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩以生成灰白色固体，所述固体通过半制备HPLC纯化以生成乳膏状固体化合物227(20mg,24%)。1HNMR(DMSO)δ10.01(s,1H),9.00(d,J=2.4Hz,1H),8.94(s,2H),8.16–8.06(m,1H),8.01(s,2H),7.81(s,1H),6.77–6.73(m,1H),4.35(d,J=13.5Hz,2H),3.25(s,2H),2.05(d,J=12.9Hz,2H),1.38(s,2H),1.25(s,2H),1.19(s,3H),1.14(d,J=7.2Hz,3H)。MS:491.1[M+H]+。
化合物2304-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-5-吡唑-1-基-咪唑并[1,2a]吡啶-7-基]嘧啶-2-基]-哌啶-4-羧酸
7-溴-5-吡唑-1-基-咪唑并[1,2a]吡啶-2-羧酸乙酯：7-溴-5-氯-咪唑并[1,2a]吡啶-2-羧酸酯(中间体16)(0.867g,2.86mmol)和吡唑(0.194g,2.86mmol)的混合物溶解在DMF(15mL)中。加入碳酸铯(1.95g,2.1当量)，并且室温搅拌混合物。16小时后，TLC指示了反应清洁但是未完成，并且在整个周末继续搅拌。加入饱和水性NH4Cl(50mL)，生成泡腾和凝胶状沉淀，然后破裂，加入水(30mL)，并且真空过滤所述固体。此材料用水洗涤，并吸干以生成糊料。所述滤液用EtOAc(100mL)提取，用水(30mL)、盐水(30mL)洗涤，并且备用。所述糊料溶解在EtOAc(200mL)中，与所述滤液组合，MgSO4干燥，过滤并蒸发以生成静置结晶的褐色残留物。用EtOAc(15mL)和庚烷(50mL)研磨生成黄色粉末,0.363g(38%)。MS:335,337[M+H]+。
7-溴-5-吡唑-1-基-咪唑并[1,2a]吡啶-2-碳酰肼：向7-溴-5-吡唑-1-基-咪唑[1,2a]吡啶-2-羧酸乙酯(3.96g,11.8mmol)的EtOH(100mL)悬浮液加入水合肼(5.91mL,0.118mmol)，并且所述混合物室温搅拌过夜。3天后，LCMS显示反应基本完成，因此搅拌再维持1夜。所述混合物用EtOH(50mL)稀释，过滤并且所述固体用EtOH(2x50mL)、EtOAc(2x50mL)和庚烷(50mL)洗涤，然后空气干燥。产率为3.56g(94%)。LCMS MS:321.01,322.98[M+H]+。
N-(7-溴-5-吡唑-1-基-咪唑并[1,2a]吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯：7-溴-5-吡唑-1-基-咪唑并[1,2a]吡啶-2-碳酰肼(3.56g,11.1mmol)悬浮于1M HCl(50mL)中并且搅拌过夜。所述反应在冰/水浴中冷却，并且加入亚硝酸钠(918mg,含13.3mmol的10mL)水溶液。所述混合物搅拌2.5小时。仔细加入1M NaOH(40mL)和饱和NaHCO3(15mL)，并且所述混合物用EtOAc(3x100mL)提取，MgSO4干燥，并蒸发(水浴温度<25°C)以生成灰白色固体，所述固体用DCM(10mL)研磨和过滤，生成1.06g晶体材料。TLC(Rf=0.7,50%EtOAc/DCM)指示了完全消耗掉起始材料。再过滤保留所述水层和固体物质，生成另外2.5克固体，用水洗涤、空气干燥、DCM和庚烷研磨后生成另外叠氮化物产物(1.5g)。1.06g叠氮化物悬浮于二噁烷(20mL)和叔丁醇(20mL)中，并且80°C加热3小时，然后90°C加热5小时。LCMS指示了转化成所需Boc保护的胺。所述溶液然后冷却，并真空浓缩，并且所述残留物用冷MeOH(10mL)研磨，然后过滤生成灰色固体，称重650mg(MS:377.8,379.8[M+H]+)(叠氮化物的54%产率，来自酰肼的叠氮化物产率=68%)。
1-[5-[2-(叔丁氧基羰基氨基)-5-吡唑-1-基-咪唑并[1,2a]吡啶-7-基]嘧啶-2-基]-4-乙基-哌啶-4-羧酸乙酯：1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-乙基-哌啶-4-羧酸酯(0.882g,2.58mmol)、双(频哪醇合)二硼(0.818g,2.58mmol)、乙酸钾(0.379g,3.87mmol)和三环己基膦,43mg,0.15mmol的二噁烷(10mL)溶液用N2脱气10min。引入Pd2(dba)3(71mg,0.077mmol)，并且所述反应加热到95°C持续2小时。TLC指示完全消耗掉起始材料。所述溶液通过硅藻土过滤，所述固体用10mL二噁烷洗涤，并且所述合并的滤液加入到单独烧瓶中，所述烧瓶包括含N-(7-溴5-吡唑-1-基-咪唑并[1,2a]吡啶-2-基)氨基甲酸酯(0.650g,1.72mmol)和K3PO4(0.694g;3.27mmol)的二噁烷(10mL)和水(2mL)所述混合物用N2脱气10min，然后加入PdCl2(PPh3)2(92mg,0.131mmol)。所述混合物N2下加热到85°C持续3小时，然后冷却，并用EtOAc(50mL)稀释。过滤所述悬浮液，生成略呈绿色的白色固体，具有所要求的分子离子(MS:561.05[M+H]+)。所述粗产物悬浮于EtOAc(30mL)中，加入DCM(20mL)和MeOH(10mL)，加热直到部分溶解，然后冷却过夜。所述固体一旦再过滤，用少量EtOAc洗涤，然后庚烷洗涤，并且干燥，生成0.530g(55%)产物，其不需要进一步纯化即用于下一步骤。
4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-5-吡唑-1-基-咪唑并[1,2a]吡啶-7-基]嘧啶-2-基]-哌啶-4-羧酸乙酯：来自前面步骤的材料悬浮于CH2Cl2(5mL)中，并用4M HCl/二噁烷(2.35mL4M溶液)室温处理60分钟。然后加入CH2Cl2(50mL)，并且剧烈搅拌所述混合物，然后用庚烷稀释(100mL)。所述混合物搅拌过夜，过滤，用1:1CH2Cl2/庚烷(30mL)洗涤，然后庚烷(30mL)洗涤，并且空气干燥以生成0.550g(定量质量回收)产物。MS:461.3[M+H]+。所述胺盐(500mg,1.086mmol)用过量异氰酸乙酯(1.5mL)和三乙基胺(1.5mL)的二噁烷处理2天。所述混合物蒸发至干，用DCM研磨，并且过滤，生成灰白色固体，MS:532.19[M+H]+。
4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-5-吡唑-1-基-咪唑并[1,2a]吡啶-7-基]嘧啶-2-基]-哌啶-4-羧酸(230)：来自上一步骤的材料悬浮于EtOH(5mL)中，并加入NaOH(1mL,1M)。70℃下加热所述混合物3天。加入MeOH(2mL)以增加反应速率，并且再继续加热2天。所述混合物浓缩，用1M HCl酸化到pH3，过滤，并且所述残留物用MeOH洗涤，生成过滤的不溶性黄色固体。所述滤液浓缩并且通过制备HPLC(3050%ACN/0.1%水性甲酸)纯化以提供14.6mg化合物230(2.7%)。1H NMR(DMSO-d6):δ9.06(1H,s);8.92(2H,s);8.50(1H,dd,J=2.4,0.4Hz);8.04(1H,dd,J=1.6,0.4Hz);7.87(1H,s);7.83(1H,d,J=1.2Hz);7.48(1H,d,J=1.6Hz);6.72(1H,dd,J=2.4,2Hz);6.70(1H,br s);4.48(2H,d,J=13Hz);3.15(4H,m);2.07(2H,d,J=13Hz);1.53(2H,q,J=7Hz);1.33(2H,m);1.07(3H,t,J=7Hz);0.82(3H,t,J=7Hz)。MS:504.14[M+H]+。
化合物2311-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-5-吡唑-1-基-咪唑并[1,2a]吡啶-7-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
1(7-溴-5-吡唑-1-基-咪唑并[1,2a]吡啶-2-基)-3-乙基-脲：向N-(7-溴-5-吡唑-1-基-咪唑并[1,2a]吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(1.096g,2.90mmol)的DCM(15mL)溶液加入4M HCl/二噁烷(2.35mL4M溶液)，并且室温搅拌混合物60分钟。再加入5mLHCl/二噁烷，并且继续搅拌过夜。24小时后，加入***(200mL)，并且过滤黑褐色固体。所述固体用***(50mL)和庚烷(50mL)洗涤以生成1.03g胺盐。此材料悬浮于二噁烷(10mL)中，用异氰酸乙酯(2ml)处理，并且因为所述混合物不均匀，加入三乙基胺(1mL)。维持室温搅拌36小时。所述混合物用EtOAc(80mL)稀释，过滤，所述浅灰色固体用EtOAc(30mL)、庚烷(20mL)洗涤，并且干燥。再用THF(10mL)和EtOAc(60mL)洗涤（swish），然后过滤，庚烷洗涤，并且干燥生成0.833g(两个步骤82%)产物。MS:348.9,350.9[M+H]+。
1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-5-吡唑-1-基-咪唑并[1,2a]吡啶-7-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯：1-(5-溴嘧啶-2-基)-4-乙基-哌啶-4-羧酸酯(0.469g,1.25mmol)、双(频哪醇合)二硼(0.397g,1.56mmol)、乙酸钾(0.184g,1.87mmol)和三环己基膦(21mg,0.075mmol)溶解在二噁烷(10mL)溶液中，并用N2脱气10min。加入Pd2(dba)3(34mg,0.037mmol)，并且所述反应加热到90℃持续2小时。再加入21mg三环己基膦和34mg Pd2(dba)3，并且再加热4小时。所述溶液通过硅藻土过滤，所述固体用2x10mL二噁烷洗涤，并且收集母液用于下一步骤。
加入硼酸溶液到单独烧瓶中，所述烧瓶包含N-(7-溴-5-吡唑-1-基-咪唑并[1,2a]吡啶-2-基)氨基甲酸酯(0.349g,1.00mmol)、K3PO4(0.694g;3.27mmol)和水(3mL)。加入PdCl2(PPh3)2(92mg;0.1311mmol)，并且所述混合在N2下加热到85°C持续3小时。再加入92mg PdCl2(PPh3)2，并且所述混合物在80°C加热过夜。所述溶液冷却，用EtOAc(50mL)稀释，并且过滤所述悬浮液，生成黑褐色固体，所述固体用水洗涤，在DCM中溶解，并且通过硅胶塞住(20-50%EtOAc/DCM然后是5%MeOH/DCM)。所述包含组分的产物进行浓缩，然后悬浮于冷EtOAc(50mL)中，并且过滤生成绿色粉末的偶联酯50.1mg(8%)。MS:518.6[M+H]+。
1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-5-吡唑-1-基-咪唑并[1,2a]吡啶-7-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸(231)：来自前面步骤的酯(50mg,0.097mmol)溶解在MeOH(5mL)中，并用1M NaOH(2mL)在55°C处理过夜。需要总共72小时以实现完全转化。加入MeOH(10mL)，并且过滤所述混合物，然后浓缩生成橙色固体，所述固体溶解在水(5mL)中，用1M HCl酸化到pH3，过滤，并且所述固体在硅胶(515%MeOH/CH2Cl2)的短塞上纯化以提供化合物231。1H NMR(MeOD d4):δ8.77(2H,s);8.31(1H,s);7.99(1H,s);7.85(1H,s);7.68(1H,s);7.36(1H,s);6.70(1H,s);4.43(2H,d,J=15Hz);3.29(4H,m);2.10(2H,d,J=10Hz);1.47(2H,t,J=10.8Hz);1.32(3H,s);1.20(3H,t,J=7Hz)。MS:490.15[M+H]+。
化合物2324-乙基-1-(3-{2-[(乙基氨甲酰基)氨基]-7-(吡啶-2-基)-1,3-苯并噻唑-5-基}-1,2,4-噻二唑-5-基)哌啶-4-羧酸
4-乙基-1-(3-{2-[(乙基氨甲酰基)氨基]-7-(吡啶-2-基)-1,3-苯并噻唑-5-基}-1,2,4-噻二唑-5-基)哌啶-4-羧酸乙酯：1-(3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)-4-乙基哌啶-4-羧酸乙酯(110mg,0.35mmol)、碳酸铯(285.6mg,0.88mmol)、Pd(dppf)2Cl2(20mg,0.03mmol)和{2-[(乙基氨甲酰基)氨基]-7-(吡啶-2-基)-1,3-苯并噻唑-5-基}硼酸(100mg,0.29mmol)悬浮于THF(9mL)和水(1mL)的混合物中，并且在110°C微波加热50min。所述反应混合物真空浓缩并且残留物在10%IPA/DCM(10mL)和水(10mL)之间分层。分离所述有机层，且所述水层再用10%IPA/DCM(3x10mL)提取，所述有机层进行合并，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩以生成黑色固体，所述固体预吸附到硅胶上并且通过快速柱色谱(Biotage SP412g,2%MeOH/DCM-5%MeOH/DCM-8%MeOH/DCM)纯化以生成所需褐色固体产物。MS:566.11[M+H]+。
4-乙基-1-(3-{2-[(乙基氨甲酰基)氨基]-7-(吡啶-2-基)-1,3-苯并噻唑-5-基}-1,2,4-噻二唑-5-基)哌啶-4-羧酸(232)：4-乙基-1-(3-{2-[(乙基氨甲酰基)氨基]-7-(吡啶-2-基)-1,3-苯并噻唑-5-基}-1,2,4-噻二唑-5-基)哌啶-4-羧酸乙酯(70mg,0.09mmol)溶解在EtOH(15mL)和2M水性NaOH(5mL)中，并且90°C搅拌18h。所述反应冷却到室温，并且浓缩到～1/5体积。加入水(10mL)和DCM(10mL)，并且分离水层，弃去有机层，并且所述水层酸化到pH～2，用DCM(3x10mL)提取。所述有机层进行合并，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩生成褐色固体，通过快速柱色谱(Biotage,SP4,12g,2-8%MeOH,DCM)纯化以提供乳膏状固体化合物232(18mg,38%)。
1H NMR(CDCl3)δ8.70(dd,J=4.8,0.8Hz,1H),8.62(d,J=1.4Hz,1H),8.44(d,J=1.3Hz,1H),8.09(d,J=8.2Hz,1H),7.78(td,J=7.8,1.8Hz,1H),7.22(ddd,J=7.4,4.9,0.8Hz,1H),3.83(brs,2H),3.39–3.29(m,5H),2.22(d,J=13.3Hz,2H),1.70–1.40(m,4H),1.19(t,J=7.3Hz,4H),0.86(t,J=7.5Hz,3H)。MS:538.08[M+H]+。
化合物2331-(5-{2-[(乙基氨甲酰基)氨基]-7-(吡啶-2-基)-1,3-苯并噻唑-5-基}-1,2,4-噻二唑-3-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸
1-[5-(3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)-7-(吡啶-2-基)-1,3-苯并噻唑-2-基]-3-乙基脲：3,5-二氯-1,2,4-噻二唑(50mg,0.32mmol)、碳酸铯(285.6mg,0.88mmol)、Pd(dppf)2Cl2(20mg,0.03mmol)和{2-[(乙基氨甲酰基)氨基]-7-(吡啶-2-基)-1,3-苯并噻唑-5-基}硼酸(100mg,0.29mmol)悬浮于THF(9mL)和水(1mL)的混合物中，并且110°C微波加热50min。所述反应混合物真空浓缩并且残留物在10%IPA/DCM(10mL)和水(10mL)之间分层。分离所述有机层，所述水层再用10%IPA/DCM(3x10mL)提取，所述有机层进行合并，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩，然后预吸附到硅胶上并且通过快速柱色谱(BiotageSP412g,2%MeOH/DCM-5%MeOH/DCM-8%MeOH/DCM)纯化以生成褐色固体1-[5-(3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)-7-(吡啶-2-基)-1,3-苯并噻唑-2-基]-3-乙基脲。(100mg,81%)MS:416.92[M+H]+。
1-(5-{2-[(乙基氨甲酰基)氨基]-7-(吡啶-2-基)-1,3-苯并噻唑-5-基}-1,2,4-噻二唑-3-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸乙酯：向1-[5-(3-氯-1,2,4-噻二唑-5-基)-7-(吡啶-2-基)-1,3-苯并噻唑-2-基]-3-乙基脲(100mg,0.24mmol)和三乙基胺(73mg,0.72mmol)的DMF(10mL)溶液加入4-乙基哌啶-4-羧酸乙酯盐酸盐(100mg,0.48mmol)并且所述混合物室温搅拌1h，生成悬浮液。LCMS仅显示SM，因此所述反应在90°C加热3天，之后LCMS显示主要产物峰。所述反应混合物真空浓缩以生成橙色胶，通过快速柱色谱(BiotageSP4,12g2-10%MeOH/DCM)纯化以生成所需乳膏状固体产物(100mg,52%)MS:552.11[M+H]+。
1-(5-{2-[(乙基氨甲酰基)氨基]-7-(吡啶-2-基)-1,3-苯并噻唑-5-基}-1,2,4-噻二唑-3-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸：1-(5-{2-[(乙基氨甲酰基)氨基]-7-(吡啶-2-基)-1,3-苯并噻唑-5-基}-1,2,4-噻二唑-3-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸乙酯(100mg,0.13mmol)溶解在EtOH(10mL)中，加入2M水性NaOH(2.5mL)，并且所述混合物在90°C搅拌18h，冷却到室温，并浓缩到～1/5体积，加入水(10mL)和DCM(10mL)。分离水层，并且弃去有机层。所得水层酸化到pH～2，用DCM提取(3x10mL)，所述有机层进行合并，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩生成褐色固体，通过快速柱色谱(2x Biotage,SP4,12g,2-8%MeOH,DCM)纯化以提供乳膏状固体化合物233(23mg,34%)。1H NMR(CDCl3)δ8.70(dd,J=4.8,0.8Hz,1H),8.62(d,J=1.4Hz,1H),8.44(d,J=1.3Hz,1H),8.09(d,J=8.2Hz,1H),7.78(td,J=7.8,1.8Hz,1H),7.22(ddd,J=7.4,4.9,0.8Hz,1H),3.83(brs,2H),3.39–3.29(m,5H),2.22(d,J=13.3Hz,2H),1.70–1.40(m,4H),1.19(t,J=7.3Hz,4H),0.86(t,J=7.5Hz,3H)。MS:524.06[M+H]+。
化合物234{1,1'-({2-[(乙基氨甲酰基)氨基]-1,3-苯并噁唑-5,7-二基}二嘧啶-5,2-二基)双(4-乙基哌啶-4-羧酸)}二乙酯
在4个微波容器中均分所述反应混合物，并且在逐步使用时重新组合。在各瓶中，4-乙基-1-[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸乙酯(300mg,0.77mmol)与1-(5,7-二溴-1,3-苯并噁唑-2-基)-3-乙基脲(中间体17)(200mg,0.55mmol)在1,4二噁烷11.4mL中混合。所述微波瓶冻干，抽真空，并用Ar装填(3次)。然后所述混合物回到室温，并且加入催化剂[1,1’-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(22mg,0.027mmol)。然后所述混合物冻干，抽真空，并用Ar装填(3次)，随后110°C微波加热30分钟。然后所述重组合的反应混合物通过硅藻土过滤，所述硅藻土垫用1,4-二噁烷冲洗。所述滤液真空浓缩，用EtOAc(40mL)溶解，并且所述混合物用水(30mL)洗涤。所述有机物真空浓缩以生成残留物，通过快速色谱使用biotage SP4(庚烷中EtOAc梯度;40g管)纯化。回收了大量的起始材料。收集包含产物的组分，并且真空浓缩，使用制备LCMS(水中ACN梯度，包含0.1%甲酸)纯化。分离化合物234(2.3mg,产率:1%)。1H NMR(DMSO)δ11.11(br s,J=53.9Hz,1H),8.34–8.27(m,1H),8.15(d,J=4.1Hz,4H),7.65(s,1H),7.52(s,1H),4.41–4.29(m,4H),4.15(q,J=7.1Hz,4H),3.30–3.24(m,2H),3.10–2.98(m,4H),2.05(br d,J=13.2Hz,4H),1.53(br q,J=7.1Hz,4H),1.36(dd,J=24.2,11.1Hz,4H),1.21(t,J=7.1Hz,6H),1.15(t,J=7.2Hz,3H),0.77(t,J=7.4Hz,6H)。MS:728.33[M+H]+。
溶解度数据
比浊法试验：测定溶解度
使用比浊法测定化合物的溶解度。在纯二甲亚砜(DMSO)中制备化合物的一系列双倍稀释。在微孔分析板中，5μl样品稀释20倍到95μl体积的100mM柠檬酸盐缓冲液(pH4)、磷酸盐缓冲盐水(PBS,pH7.4)或碳酸盐-碳酸氢盐缓冲液(pH9)中，并且室温达到平衡24小时。在620nm波长分光光度测量读取板上各孔的吸光度。当达到最大水溶解度水平时，形成沉淀。引用的数值是最高浓缩，其中所述化合物在溶液中，即没有可测量的沉淀存在。L=“低”溶解度<12.5μg/mL;M=“中等”溶解度≥12.5μg/mL-<400μg/mL;H=“高”溶解度≥400μg/mL-<800μg/mL;和VH=“极高”溶解度≥800μg/mL。ND=未测定
生物学数据
靶标酶试验：测定促旋酶ATP酶活性
促旋酶将ATP转变成ADP和无机磷。所释放的磷酸盐能通过加入孔雀绿溶液检测，并且通过监测600nm吸光度的增加来测量。所述ATP酶试验在包含2mU/μl促旋酶(金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)A2B2复合物)、0.08mg/ml双链DNA、8mM HEPES.KOH pH7.6、100mM谷氨酸K、2mM乙酸Mg、2mM DTT、0.01mg/ml BSA和5%DMSO溶液（包含抑制剂）的缓冲液中进行。或者，所述ATP酶试验在包含4.8μg/mL促旋酶(大肠杆菌（Escherichia coli）的A2B2复合物)、0.08μg/mLssDNA、35mM Tris pH7.5、24mM KCl、2mM MgCl2、6.5%甘油、2mM DTT、1.8mM亚精胺、0.5mg/mL BSA和5%DMSO溶液（包含抑制剂）的缓冲液中进行。所述反应通过加入ATP到终浓度1mM来起始，并且30°C孵育60分钟。所述反应通过加入200μl孔雀绿溶液(0.034%孔雀绿、10mM钼酸铵、1M HCl、3.4%乙醇、0.01%吐温20)终止。显色5分钟，并且分光光度测量600nm吸光度。使用无化合物和无酶的对照读取吸光度来测定IC50值。本发明化合物通常显示促旋酶ATP酶活性值等于或小于0.1μg/mL，化合物18、22、26、39、44、91、146、159、178显示活性等于或小于0.3μg/mL，化合物232显示了活性0.5μg/mL，化合物179显示活性0.6μg/mL，和化合物234显示活性>1μg/mL。
细菌试验：测定抗菌活性
通过液体或固体培养基中的敏感性试验检测本发明化合物的抗菌活性。通过肉汤微稀释或琼脂稀释法测定针对各株的化合物MIC，所述方法根据临床实验室标准化研究所指南，临床实验室标准化研究所是原来的国家临床实验室标准委员会(临床实验室标准化研究所Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests forBacteria That Grow Aerobically;Approved Standard–Seventh Edition.（用于有氧生长细菌的稀释抗菌敏感性试验的方法；认可标准-第7版）文献M7A7.CLSI,Wayne,Pa,2006;临床实验室和标准研究所。测试的革兰氏阳性菌株包含金黄色葡萄球菌(S.aureus)(Staphylococcus aureus(分离编号ATCC29213)),粪肠球菌(E.faecalis)(Enterococcus faecalis(分离编号ATCC29212))和酿脓链球菌(S.pyogenes)(（Streptococcus pyogenes(分离编号ATCC51339))。测试的革兰氏阴性菌包含株流感嗜血杆菌(H.influenzae)(Haemophilus influenzae(分离编号ATCC49247))。
表5：抗菌活性
“A”活性≤0.25μg/mL;“B”活性>0.25μg/mL–1.0μg/mL;“C”活性>1.0μg/mL-16μg/mL;“D”活性>16μg/mL和ND=未测定
药代动力学试验：测定PK概况
测量所述化合物的药代动力学模式是通过由LC/MS/MS测量血浆中化合物浓度，延后以3mg/kg剂量单独静脉内或经口给予化合物。所述浓度是三个动物中各时间点的平均血浆浓度。静脉内剂量制剂通过尾静脉作为单个推注剂量给予。口服剂量制剂通过口服强饲针给予动物。两种示例中，所述剂量容量是5.0mL/kg。血液使用颈静脉导管从大鼠收集，以及通过毛细管导入眼窝窦后丛而从麻醉小鼠收集。收集的血液进行离心以获得血浆，并且在甲醇中提取所述化合物，然后通过LC/MS/MS测量所述化合物浓度。本发明选定化合物的结果示于图2–8，其中X轴表示时间(小时)，而Y轴表示血浆浓度(ng/mL)。下表提供所述C最大口服(μg/mL)、AUCiv(μg.hr/mL)、AUC口服(μg.hr/mL)和F(%)值，其中C最大口服是最大口服浓度，AUC是静脉内(IV)和口服曲线下的面积，和F(%)表示如[AUC口服/AUCiv]x100%计算的化合物生物利用度。
表6：在大鼠和/或小鼠试验中选定化合物针对非α取代的比较化合物A和B的最大口服浓度(C最大)和化合物生物利用度(F(%))值。
除非另有说明，在本说明书和所附权利要求书中，术语“包含”以及变化形式如“包括”和“含有”应理解为是指包括所述的整数或步骤或者多个整数或步骤的组，但是不排除任何其它整数或步骤或者多个整数或步骤的组。
在说明书中对任何在先出版物(或由此得到的资料)或任何已知事物的参考不作为并且不应被看作承认或认可或者以任何形式提示在先出版物(或由此得到的资料)或任何已知事物形成本说明书所涉及领域中普通常识的一部分。
Claims (17)
1.一种如下面通式的化合物或其盐：
其中：
R1选自H、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、S(O)2OH、S(O)2-C1-6烷基、和M，其中M表示单价或双价阳离子；
R2与-C(=O)-X-R1部分连接到相同的环B原子上，并且R2选自C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、(C1-6烷基)tC3-7环烷基、(C1-6烷基)t芳基、(C1-6烷基)t杂环基、(C1-6烷基)t杂芳基、NH2、NH(C1-6烷基)、N(C1-6烷基)2、CN、OH、C1-6烷氧基、SO2H、SO2C1-6烷基、SH、SC1-6烷基、卤素、卤代C1-6烷基、-NH(C=O)OC1-6烷基、-NH(C=O)OC(C1-3烷基)3，并且其中各情况中的C1-3烷基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-7环烷基、芳基和杂环基还可以用一种或多种选自下面的取代基可选取代：NH2、NH(C1-6烷基)、N(C1-6烷基)2、CN、OH、C1-6烷氧基、SO2H、SO2C1-6烷基、SH、SC1-6烷基和卤素，或者R2是3-4个碳原子构成或3-4个碳和杂原子构成的链并与临近的B环原子结合以形成可选取代的稠合碳环或杂环；
环“A”可选取代，并且选自饱和或不饱和单环C3-7环烷基、饱和或不饱和单环3-7元杂环、饱和或不饱和稠合双环C8-10环烷基、饱和或不饱和稠合双环8-10元杂环基、C6-10芳基和5-10元杂芳基；
环“B”可选取代，并且选自饱和或不饱和单环C3-7环烷基、饱和或不饱和单环3-7元杂环、饱和或不饱和稠合双环C8-10环烷基、饱和或不饱和稠合双环8-12元杂环基、C6-10芳基、5-10元杂芳基、和螺双环8-12元杂环***；
或者环“A”和环“B”可以结合在一起以形成饱和或不饱和稠合双环C8-10环烷基、饱和或不饱和稠合双环8-10元杂环基和螺双环8-12元杂环***；
各Z独立选自C-H、C-C1-3烷基、C-OH、C-OC1-3烷基、C-卤代、C-卤代C1-3烷基、C-CN、N或C-(X2)nR3，其中R3是H、卤素、OH、CN、C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6烯基、饱和或不饱和单环C3-7环烷基、饱和或不饱和单环3-7元杂环、饱和或不饱和稠合双环C8-10环烷基、饱和或不饱和稠合双环8-10元杂环基、C6-10芳基和5-10元杂芳基，其中各R3可选被取代，前提是一个Z是用环“A”取代的C；
X是O、NH或N(C1-6烷基)；
m、n和t各独立是整数0或1；
当m是0时，X1是共价键、螺环中心、或稠合环键，或者，当m是1时，X1选自可选取代的C1-3亚烷基、可选取代的C2-3亚烯基和可选取代的C2-3亚炔基，并且其中C1-3亚烷基中的各碳原子可选用氧或氮杂原子或C(=O)取代；
当n是0时，X2是共价键，或者，当n是1时，X2选自可选取代的C1-4亚烷基、可选取代的C2-3亚烯基和可选取代的C2-3亚炔基，并且其中C1-3亚烷基和C2-3亚烯基中的各碳原子可选用氧或氮杂原子(其中氮原子可以用H或C1-3烷基取代)或C(=O)取代；
Y1和Y2各自独立选自C、N、O或S；
Y3选自C或N；
------指示双键或单键（视情况而定）；和
Alk是C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烷基。
2.一种如权利要求1所述式I的化合物或其盐
其中：
Z1、Z2和Z3各独立选自C-H、C-C1-3烷基、C-OH、C-OC1-3烷基、C-卤代、C-卤代C1-3烷基、C-CN、N或C-(X2)nR3，其中R3是H、卤素、OH、CN、C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6烯基、饱和或不饱和单环C3-7环烷基、饱和或不饱和单环3-7元杂环、饱和或不饱和稠合双环C8-10环烷基、饱和或不饱和稠合双环8-10元杂环基、C6-10芳基和5-10元杂芳基，其中各R3可选被取代；
并且其中R1、R2、环“A”、环“B”、X、Y1、Y2、Y3、m、------和Alk如前面权利要求1所定义。
3.一种如权利要求2所述式Ia的化合物或其盐
其中，R1、R2、R3、X1、X2、Z1、Z2、Y1、Y2、环A、环B、Alk、m和n如权利要求2所定义。
4.一种如权利要求3所述式Ia-(i)的化合物或其盐
其中：
D1、D2、D3和D4各独立选自C-H、C-C1-3烷基、C-C1-3烷氧基、C-卤代和N；
各-(CH2)-部分用一种或多种独立选自下面的取代基可选取代：C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤素、卤代C1-3烷氧基、卤代C1-3烷基、OH和=O；
q和r各是独立选自0、1、2、3、4和5的整数，前提是q和r一起至少是1并且不大于6；和
R1、R2、R3、X1、X2、Z1、Z2、m和n如权利要求2或权利要求3所定义。
5.一种如权利要求4所述式Ia-(iv)的化合物及其盐
其中，R2、R3、Z1、Z2、X2、n、D1和D2如权利要求4所定义。
6.一种如权利要求3所述式Ia-(ii)的化合物或其盐
其中：
D1、D2、D3和D4各独立选自C-H、C-C1-3烷基、C1-3烷氧基、C-卤代和N；
各-(CH2)-部分用一种或多种选自下面的取代基可选取代：C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤素、卤代C1-3烷氧基、卤代C1-3烷基、OH和=O；
q和r各是独立选自0、1、2、3、4和5的整数，前提是q和r一起至少是1并且不大于6；和
R1、R2、R3、X1、X2、Z1、Z2、m和n如权利要求2所定义。
7.一种如权利要求3所述式Ia-(iii)的的化合物及其盐
其中：
D1、D2、D3和D4各独立选自C-H、C-C1-3烷基、C1-3烷氧基、C-卤代和N；和
R1、R2、R3、X1、X2、Z1、Z2、m和n如权利要求2所定义。
8.一种如权利要求2所述式Ib的化合物及其盐
其中，R1、R2、R3、X1、X2、Z1、Z2、Y1、Y2、环A、环B、Alk、m和n如权利要求2所定义。
9.一种如权利要求1所述的选自下组的化合物或其盐：
1)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
2)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-2-甲基-哌啶-2-羧酸;
3)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-羟基-3-甲基-哌啶-3-羧酸;
4)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-2-吡啶基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
5)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-3-甲基-2-吡啶基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
6)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(4-甲基-2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
7)1-[5-[7-(5,6-二甲氧基-2-吡啶基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
8)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(4-甲氧基嘧啶-2-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
9)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-3,4-二甲基-哌啶-4-羧酸;
10)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(4-氟-2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
11)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-吡嗪-2-基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
12)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(4-甲基嘧啶-2-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
13)1-[5-[7-(3-氰基-2-吡啶基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
14)1-[5-[7-(5-氰基-2-吡啶基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
15)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(6-甲氧基嘧啶-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
16)1-[5-[7-(4-氰基-2-吡啶基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
17)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(4-甲氧基-2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
18)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(3-氟-2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
19)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-噁唑-2-基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
20)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-噻唑-5-基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
21)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-噻唑-4-基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
22)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-己-1-炔基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
23)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-甲氧基噻唑-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
24)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(1-甲基吡唑-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
25)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(1H-吡唑-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
26)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-羟基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
27)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[4-(羟甲基)噻唑-2-基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
28)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-乙炔基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
29)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-吡唑-1-基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
30)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(1-甲基吡咯-2-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
31)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(5-甲基-2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
32)1-[5-[7-(6-氰基-2-吡啶基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
33)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-咪唑-1-基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
34)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(5-氟嘧啶-2-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
35)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
36)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-3-氟-2-吡啶基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
37)1-[5-[7-乙基-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
38)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-甲基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
39)1-[5-[7-环己基-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
40)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]吡嗪-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
41)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(1-苯基***-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
42)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-甲氧基嘧啶-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
43)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-甲基嘧啶-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
44)1-[5-[7-(2-氰基嘧啶-4-基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
45)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(6-甲基嘧啶-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
46)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
47)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-四氢吡喃-4-基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
48)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(6-异丙氧基嘧啶-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
49)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[6-(2-甲氧基乙氧基)-2-甲基-嘧啶-4-基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
50)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(1-甲基***-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
51)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(5-甲氧基嘧啶-2-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
52)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(6-甲氧基-2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
53)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(5-氟-6-甲基-2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
54)1-[5-[7-(3,5-二氟-2-吡啶基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
55)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(3-氟-4-甲氧基-2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
56)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(5-甲氧基吡嗪-2-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
57)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(1-异丙基-6-氧代-嘧啶-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
58)1-[5-[7-(5-氰基-6-甲基-2-吡啶基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
59)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(5-甲基嘧啶-2-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
60)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(5-乙基嘧啶-2-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
61)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(3-甲氧基-2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
62)1-[5-[7-(3-氨基-6-甲氧基-2-吡啶基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
63)1-[5-[7-(5-氰基-3-氟-2-吡啶基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
64)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(3-甲氧基-6-甲基-2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
65)1-[5-[7-(3-氰基-5-甲基-2-吡啶基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
66)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(5-甲基吡嗪-2-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
67)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-噻唑-4-基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
68)1-[5-[7-(4-乙氧基-2-吡啶基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
69)1-[5-[7-(5-氰基-3-甲基-2-吡啶基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
70)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-呋喃并[3,2-c]吡啶-4-基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
71)1-[5-[7-(3-氰基-4-(二甲基氨基)-2-吡啶基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
72)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[(E)-甲氧基亚氨基甲基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
73)1-[5-[7-(6-叔丁氧基吡嗪-2-基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
74)1-[5-[7-(1-乙酰基-4-哌啶基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
75)1-[5-[7-[2-(二甲基氨基)噻唑-5-基]-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
76)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吗啉代噻唑-5-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
77)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-乙基噻唑-5-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
78)1-[5-[7-(2-乙氧基噻唑-5-基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
79)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(1-甲基-2-氧代-4-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
80)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[1-(2-甲氧基乙基)-6-氧代-嘧啶-4-基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
81)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(6-甲氧基吡嗪-2-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
82)1-[5-[7-(5-(氰基甲基)-2-吡啶基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
83)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(5-乙基吡嗪-2-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
84)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(3-甲基吡嗪-2-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
85)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(5-氟-4-甲基-2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
86)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(3-甲氧基吡嗪-2-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
87)1-[5-[7-环丙基-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
88)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[(E)-N-甲氧基-C-甲基-碳亚胺基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
89)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(4-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
90)1-[5-[7-(3-氰基-4-甲氧基-2-吡啶基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
91)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[乙基(甲基)氨甲酰基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
92)1-[5-[7-(5-氰基-4-甲基-2-吡啶基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
93)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(3-氟-5-甲基-2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
94)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[(E)-C-甲基-N-(2,2,2-三氟乙氧基)碳亚胺基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
95)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[(E)-N-羟基-C-甲基-碳亚胺基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
96)1-[5-[7-[(E)-N-乙氧基-C-甲基-碳亚胺基]-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
97)1-[5-[7-(乙基氨甲酰基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
98)4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸;
99)4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-吡嗪-2-基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸;
100)1-[5-[7-(4-氰基-2-吡啶基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-乙基-哌啶-4-羧酸;
101)4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(4-甲基嘧啶-2-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸;
102)4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(4-甲氧基-2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸;
103)4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-2-吡啶基]哌啶-4-羧酸;
104)1-[5-[7-(3-氰基-2-吡啶基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-乙基-哌啶-4-羧酸;
105)1-[5-[7-(5-氰基-2-吡啶基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-乙基-哌啶-4-羧酸;
106)4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸;
107)1-[5-[7-溴-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
108)4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]吡嗪-2-基]哌啶-4-羧酸;
109)4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(4-甲氧基嘧啶-2-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸;
110)4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(6-甲氧基嘧啶-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸;
111)4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(6-氧代-1H-嘧啶-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸;
112)4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(4-甲基嘧啶-2-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]吡嗪-2-基]哌啶-4-羧酸;
113)4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸;
114)4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-吗啉代-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸;
115)4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(4-氟苯基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸;
116)4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[(E)-N-甲氧基-C-甲基-碳亚胺基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸;
117)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-丙基-哌啶-4-羧酸;
118)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-吡嗪-2-基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-丙基-哌啶-4-羧酸;
119)1-[5-[7-溴-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-丙基-哌啶-4-羧酸;
120)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(4-甲基嘧啶-2-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-丙基-哌啶-4-羧酸;
121)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(6-甲氧基嘧啶-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-丙基-哌啶-4-羧酸;
122)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(4-甲氧基-2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-丙基-哌啶-4-羧酸;
123)1-[5-[7-(4-氰基-2-吡啶基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-丙基-哌啶-4-羧酸;
124)1-[5-[7-(5-氰基-2-吡啶基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-丙基-哌啶-4-羧酸;
125)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-丙基-哌啶-4-羧酸;
126)1-[5-[7-(3-氰基-2-吡啶基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-丙基-哌啶-4-羧酸;
127)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(4-甲氧基嘧啶-2-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-丙基-哌啶-4-羧酸;
128)4-氨基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸;
129)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-苯基-哌啶-4-羧酸;
130)4-氰基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸;
131)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-羟基-哌啶-4-羧酸;
132)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲氧基-哌啶-4-羧酸;
133)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲磺酰基-哌啶-4-羧酸;
134)4-苄基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸;
135)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-氟-哌啶-4-羧酸;
136)4-烯丙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸;
137)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-异丙基-哌啶-4-羧酸;
138)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲硫烷基-哌啶-4-羧酸;
139)4-烯丙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-吡嗪-2-基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸;
140)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-(2,2,2-三氟乙基)哌啶-4-羧酸;
141)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-(甲氧基甲基)哌啶-4-羧酸;
142)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-(三氟甲基)哌啶-4-羧酸;
143)4-环丙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸;
144)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[2-(3-甲基咪唑-4-基)乙炔基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
145)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(噻唑-2-基氨甲酰基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
146)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(嘧啶-2-羰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
147)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[[甲基(嘧啶-2-基)氨基]甲基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
148)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[2-(3-吡啶基)乙炔基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
149)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(吡啶-2-羰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
150)1-[5-[7-(2-环戊基乙炔基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
151)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[2-(4-吡啶基)乙炔基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
152)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[2-(6-甲氧基-2-吡啶基)乙炔基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
153)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[2-(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)乙炔基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
154)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-嘧啶-2-基乙炔基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
155)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-嘧啶-4-基乙炔基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
156)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-噻唑-2-基乙炔基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
157)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡嗪-2-基乙炔基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
158)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(吗啉代甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
159)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(吗啉-4-羰基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
160)1-[[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]甲基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
161)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-4-氟-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
162)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-4-(2-吡啶基)噻唑并[5,4-c]吡啶-6-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
163)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-2-甲基-吡咯烷-2-羧酸;
164)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-羧酸;
165)2-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-1,3,4,5,6,6a-六氢环戊并[c]吡咯-3a-羧酸;
166)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-氮杂环庚烷-4-羧酸;
167)4-(叔丁氧基羰基氨基)-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸甲酯;
168)4-氨基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸甲酯;
169)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸甲酯;
170)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-3-甲基-4-氧代-哌啶-3-羧酸甲酯;
171)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯;
172)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-羟基-3-甲基-哌啶-3-羧酸甲酯;
173)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-羟基-哌啶-4-羧酸甲酯;
174)4-氰基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸乙酯;
175)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲氧基-哌啶-4-羧酸甲酯;
176)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲磺酰基-哌啶-4-羧酸乙酯;
177)4-苄基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸乙酯;
178)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-四氢吡喃-4-基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯;
179)1-[5-[7-(1-乙酰基-4-哌啶基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯;
180)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-羧酸甲酯;
181)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-3-吡啶基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
182)1-[4-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-2-吡啶基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
183)3-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-2-吡啶基]-5-甲基-4H-异噁唑-5-羧酸;
184)3-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-2-吡啶基]-5-甲基-4H-异噁唑-5-羧酸乙酯;
185)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-苯基-哌啶-4-羧酰胺;
186)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-N-甲磺酰基-哌啶-4-羧酰胺;
187)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[(E)-N-(2-羟基乙氧基)-C-甲基-碳亚胺基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
188)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[(E)-N-(2-甲氧基乙氧基)-C-甲基-碳亚胺基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
189)4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[(E)-甲氧基亚氨基甲基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-哌啶-4-羧酸;
1907-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-2-甲基-3-氧代-4H-吡啶并[3.2b][1,4]噁嗪-2-羧酸;
191)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-6-甲氧基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸乙酯
192)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-羰基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
193)1-[5-[7-氨甲酰基-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
194)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-甲氧基乙氧基甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
195)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]哒嗪-3-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
196)5-[[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]氨基]-2-甲基-1,3-二噁烷-2-羧酸
197)1-[5-[7-(4,5-二氢异噁唑-3-基)-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-乙基-哌啶-4-羧酸
198)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-6-甲氧基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
199)4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-甲酰基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸
200)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-甲氧基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
201)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-3-甲基-吡咯烷-3-羧酸
202)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(甲氧基甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
203)4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(甲氧基甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-哌啶-4-羧酸
204)1-[5-[7-[(E)-乙氧基亚氨基甲基]-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
205)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[5-(吗啉代甲基)-2-吡啶基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
206)3-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]吡咯烷-3-羧酸
207)4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-丙酰基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸
208)1-[5-[7-溴-2-(乙基氨甲酰基氨基)-6-甲氧基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
209)4-乙基-1-[4-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]噻唑-2-基]哌啶-4-羧酸
210)4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-4-(2-吡啶基)噻唑并[5,4-c]吡啶-6-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸
211)4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[(Z)-C-乙基-N-甲氧基-碳亚胺基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸
212)4-乙氧基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸
213)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
214)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-4-甲基-嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
215)1-[5-[7-溴-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
216)5-[[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]氨基]-2-甲基-1,3-二噁烷-2-羧酸乙酯
217)1-[5-[7-[5-[(4,4-二氟-1-哌啶基)甲基]-2-吡啶基]-2-(乙基氨甲酰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸;
218)4-[[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-甲基-氨基]-1-甲基-1-环己烷羧酸
219)2-乙基-7-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-羧酸
220)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-4-甲氧基-嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
221)4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]噻唑-2-基]哌啶-4-羧酸
222)4-[[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]氨基]-1-甲基-1-环己烷羧酸
223)4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[C-乙基-N-甲氧基-碳亚胺基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸
224)4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[(E)-C-乙基-N-甲氧基-碳亚胺基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸
225)4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-[(Z)-甲氧基亚氨基甲基]-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]-哌啶-4-羧酸
226)4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(5-甲基嘧啶-2-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸
227)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-5-吡唑-1-基-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-7-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
228)4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-嘧啶-2-基-1,3-苯并噻唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸
229)4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-7-(2-吡啶基)-1H-苯并咪唑-5-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸;
230)4-乙基-1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-5-吡唑-1-基-咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基]嘧啶-2-基]哌啶-4-羧酸
231)1-[5-[2-(乙基氨甲酰基氨基)-5-吡唑-1-基-咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基]嘧啶-2-基]-4-甲基-哌啶-4-羧酸
232)4-乙基-1-(3-{2-[(乙基氨甲酰基)氨基]-7-(吡啶-2-基)-1,3-苯并噻唑-5-基}-1,2,4-噻二唑-5-基)哌啶-4-羧酸
233)1-(5-{2-[(乙基氨甲酰基)氨基]-7-(吡啶-2-基)-1,3-苯并噻唑-5-基}-1,2,4-噻二唑-3-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸；和
234){1,1'-({2-[(乙基氨甲酰基)氨基]-1,3-苯并噁唑-5,7-二基}二嘧啶-5,2-二基)双(4-乙基哌啶-4-羧酸)}二乙酯。
10.一种治疗抗细菌感染的方法，所述方法包含给予遭受所述感染的对象如权利要求1-9中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐。
11.一种如权利要求1–9中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在治疗抗细菌感染中的应用。
12.一种包含如权利要求1–9中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐的抗菌剂。
13.一种包含如权利要求1–9中任一项所述的化合物或其盐的组合物。
14.一种如权利要求1–9中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐作为促旋酶抑制剂的应用。
15.一种生产如权利要求2所述式I化合物的工艺，所述工艺包含将式IIa中间体与L-(X2)n-R3前体部分偶联的步骤；
或者替代地包含将式IIb中间体
与以下通式的前体部分偶联的步骤
以形成式I化合物；
其中R1、X、R2、(X1)m、环A、环B、Z1、Z2、Y1、Y2、Alk、(X2)n和R3如权利要求2所定义，并且L是合适的反应基团。
16.一种生产如权利要求2所述式I化合物的工艺，所述工艺包含将式IIIa前体与式IVa硼酸中间体偶联的步骤
或者替代地包含将式IVb硼酸中间体与卤代-(X2)n-R3前体部分偶联的步骤
以形成式I化合物；
其中R1、X、R2、(X1)m、环A、环B、Z1、Z2、Y1、Y2、Alk、(X2)n和R3如权利要求2所定义，并且B(OR)2是硼酸(B(OH)2)或频那醇硼烷。
17.一种处理基质细菌污染的方法，所述方法包含向所述污染位点应用足够量的如权利要求1-9中任一项所述化合物或其药学上可接受的盐以抑制细菌生长。
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