CN102892423B - 促进脂联素产生的组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明要解决的课题在于提供一种促进脂联素产生且在副作用和毒性等安全性方面不存在问题并且能够口服摄取的组合物。制备一种促进脂联素产生的组合物，其含有鲑鱼鱼白提取物、啤酒酵母提取物、鸡胶原蛋白和含矿物质酵母，并且具有促进脂联素产生的作用。作为鲑鱼鱼白提取物，优选含有通过对鲑鱼鱼白进行酶处理而分解成寡核苷酸和寡肽的低分子成分。作为啤酒酵母提取物，优选含有50~80%的RNA。作为含矿物质酵母，优选在干酵母中含有2~3%的锌、0.3~0.5%的铜和0.01~0.02%的硒。另外，优选每100质量份的鲑鱼鱼白提取物含有16~17质量份的啤酒酵母提取物、33~34质量份的鸡胶原蛋白和22~23质量份的含矿物质酵母。

Description

促进脂联素产生的组合物
技术领域
本发明涉及一种促进脂联素产生的组合物，更详细而言，本发明涉及一种包含鲑鱼鱼白提取物、啤酒酵母提取物、鸡胶原蛋白、含矿物质酵母(含有Zn、Se、Cu)的脂联素产生促进剂。
背景技术
脂联素(Adiponectin)是由包含244个氨基酸的脂肪组织分泌的激素，于1996年自人脂肪组织中被分离出来。脂联素是脂肪组织特异性的分泌蛋白(非专利文献2)，不仅大量存在于脂肪组织中，而且还大量存在于血液中(在正常人中为5~10μg/ml)(非专利文献3)。已知其在骨骼肌和肝脏中通过活化AMP激酶(AMP-activated protein kinase；AMPK)而促进脂肪的燃烧和糖的摄取。已知该脂联素在小型脂肪细胞中大量地分泌，当脂肪细胞肥大化时，其分泌量会减少。
此外，脂联素作为抑制动脉硬化的有益脂肪细胞因子而为人所知。脂肪细胞因子中，除上述有益脂肪细胞因子以外，还存在PAI-1、TNF-α等促进动脉硬化的有害脂肪细胞因子。在正常状态下，这些有益脂肪细胞因子和有害脂肪细胞因子的分泌量保持平衡。但是，当由于肥胖等导致脂肪细胞肥大化时，有益脂肪细胞因子的分泌量会减少，而另一方面，有害脂肪细胞因子会过剩地分泌。结果，两者的平衡崩溃而成为II型糖尿病、动脉硬化症等生活习惯病发病的原因。
可见，脂联素与肥胖及伴随肥胖而来的生活习惯病相关，认为活化该脂联素对预防或治疗生活习惯病有效。而且，还已知脂联素具有抑制肝纤维化的效果。已发现脂联素具有改善高血压、改善脂代谢、改善胰岛素敏感性、抗炎作用、抑制肝纤维化、促进正常肝细胞增殖的效果(专利文献1)、抗炎效果(专利文献2)等多方面的作用(专利文献2~5)，可以说使血中的脂联素浓度上升的药品或饮食品显示出对代谢综合征具有预防、改善作用。
在上述背景下，作为促进脂联素产生的药剂，已知有噻唑烷衍生物。但是，该噻唑烷衍生物有时伴有腹泻、便秘、恶心等消化***症状、肝脏损伤等副作用。
此外，提出了若干种促进脂联素产生的化合物或成分。例如，专利文献6中公开了：N-乙酰半胱氨酸使脂肪细胞的脂联素的表达量增加；以及夹竹桃麻素使血浆中的脂联素浓度上升且使脂肪组织中的脂联素的表达量增加。专利文献7中公开了姜辣素化合物，专利文献8中公开了余甘子果实或其提取物使脂联素的产生增强。除这些物质以外，还期待优良的促进脂联素产生的物质。因此，在代谢综合征的对策成为社会问题的当前，要求开发出一种具有促进并增强脂联素在体内产生的作用的安全的物质。
现有技术文献
专利文献
专利文献1：日本特开2002-363094号公报
专利文献2：日本特开2000-256208号公报
专利文献3：日本专利第3018186号公报
专利文献4：美国专利申请公开第2002/0132773号
专利文献5：日本特开2005-325072号公报
专利文献6：日本特开2005-232059号公报
专利文献7：日本特开2006-45210号公报
专利文献8：日本特开2006-56836号公报
非专利文献
非专利文献1：馬場きみ江等,Foods&Food Ingredients Journal ofJapan,1998年,No.178,p.52-60
非专利文献2：Maeda K et al.,Biochem.Biophys.Res.Commun.,221:286(1996)
非专利文献3：Arita Y et al.,Biochem.Biophys.Res.Commun.,257:79~83(1999)
发明内容
发明所要解决的问题
本发明的课题在于提供一种促进脂联素产生且在副作用和毒性等安全性方面不存在问题并且能够口服摄取的组合物。
用于解决问题的手段
发明人对各种食材进行了关于脂联素产生的研究，结果发现，通过将鲑鱼鱼白提取物、啤酒酵母提取物、鸡胶原蛋白、含矿物质酵母(含有Zn、Se、Cu)组合而制备的混合物显示出优良的促进脂联素产生的能力，从而完成了本发明。
即，本发明涉及：[1]一种促进脂联素产生的组合物，其特征在于，含有鲑鱼鱼白提取物、啤酒酵母提取物、鸡胶原蛋白和含矿物质酵母，并且具有促进脂联素产生的作用；[2]如上述[1]所述的促进脂联素产生的组合物，其特征在于，鲑鱼鱼白提取物为含有通过对鲑鱼鱼白进行酶处理而分解成寡核苷酸和寡肽的低分子成分的鲑鱼鱼白提取物；[3]如上述[1]或[2]所述的促进脂联素产生的组合物，其特征在于，啤酒酵母提取物为含有50~80%的RNA的啤酒酵母提取物；[4]如上述[1]~[3]中任一项所述的促进脂联素产生的组合物，其特征在于，含矿物质酵母为在干酵母中含有2~3%的锌、0.3~0.5%的铜和0.01~0.02%的硒的含矿物质酵母；[5]如上述[1]~[4]中任一项所述的促进脂联素产生的组合物，其特征在于，每100质量份的鲑鱼鱼白提取物含有16~17质量份的啤酒酵母提取物、33~34质量份的鸡胶原蛋白和22~23质量份的含矿物质酵母。
发明效果
本发明的脂联素产生促进剂在以鲑鱼鱼白提取物作为主要成分并单独含有啤酒酵母提取物、鸡胶原蛋白、含矿物质酵母时不具有产生脂联素的能力，而通过将上述物质混合则具有优良的促进脂联素产生的效果。本发明的脂联素产生促进剂对改善、治疗或预防糖尿病、肥胖、动脉硬化症以及起因于上述疾病的症状例如糖尿病并发症(糖尿病视网膜病变、糖尿病神经病变、糖尿病性肾病等)、脑梗塞、心肌梗塞、肾硬化症等有效。
附图说明
图1是表示使用本发明的促进脂联素产生的组合物测定分泌到脂肪细胞的培养上清中的脂联素浓度而得到的结果的图。
具体实施方式
作为本发明的促进脂联素产生的组合物，只要是含有鲑鱼鱼白提取物、啤酒酵母提取物、鸡胶原蛋白和含矿物质酵母并且具有促进脂联素产生的作用的组合物，则没有特别限制，在此，促进脂联素产生的作用是指促进作为糖代谢、脂代谢等的重要调节因子的脂联素的分泌、从而使体内特别是血中的脂联素量增加的作用。
作为上述鲑鱼鱼白提取物，只要是可以作为食品用途使用的鲑鱼鱼白提取物则没有特别限制，优选含有通过对鲑鱼鱼白进行酶处理而分解成寡核苷酸和寡肽的低分子成分的鲑鱼鱼白提取物。特别优选含有20~70%的分子量1000~3000的寡核苷酸、寡肽的鲑鱼鱼白提取物。这样的鲑鱼鱼白提取物例如可以从株式会社ェル·ェス·ファクトリ一等获得。
另外，上述鲑鱼鱼白提取物也可以依据日本特开2004-16143中记载的方法来制备。即，从鲑鱼的鱼白中除去皮、肌肉、血管等后，进行纯化而去除油分，接着利用蛋白酶和核酸酶进行处理。上述蛋白酶是以胰蛋白酶作为主体的蛋白酶。胰蛋白酶为具有高特异性的丝氨酸蛋白酶，在精氨酸和赖氨酸的羧基侧选择性地水解肽键，因此适于含有大量精氨酸的鱼精蛋白的水解。另外，上述蛋白酶除了包含胰蛋白酶以外，还可以包含其他蛋白酶例如胰凝乳蛋白酶等。作为良好的蛋白酶，可以列举ノボノルディスクバィォィンダストリ一株式会社制造的蛋白酶。另外，利用核酸酶进行水解反应的温度为60~75℃的范围，其中最优选70℃。蛋白酶处理和核酸酶处理的顺序没有特别限制，优选先利用蛋白酶进行处理，接着利用核酸酶进行处理。
作为上述啤酒酵母提取物，只要是可以作为食品用途使用的啤酒酵母提取物则没有特别限制，优选含有50~80%的RNA的啤酒酵母提取物。这样的啤酒酵母提取物例如可以从株式会社ェル·ェス·ファクトリ一等获得。
作为上述鸡胶原蛋白，没有特别限制，可以优选使用食品用的鸡胶原蛋白，可以优选列举例如株式会社ェル·ェス·ファクトリ一制造的鸡胶原蛋白。
作为上述含矿物质酵母，只要是提高了矿物质含量的面包酵母则没有特别限制，优选在干酵母中含有2~3%的锌的含矿物质酵母，其中可以列举在干酵母中含有2~3%的锌、0.3~0.5%的铜、0.01~0.02%的硒的含矿物质酵母。这样的含矿物质酵母可以从株式会社ェル·ェス·ファクトリ一等获得。另外，可以通过将富含锌的锌酵母、富含铜的铜酵母、富含硒的硒酵母混合来制备这样的含矿物质酵母。富含各矿物质的酵母可以从株式会社ェル·ェス·ファクトリ一等获得。
另外，作为本发明的促进脂联素产生的组合物中的鲑鱼鱼白提取物、啤酒酵母提取物、鸡胶原蛋白和含矿物质酵母的配合比例，可以优选例示每100质量份的鲑鱼鱼白提取物含有10~25质量份、优选16~17质量份的啤酒酵母提取物，25~40质量份、优选33~34质量份的鸡胶原蛋白和15~30质量份、优选22~23质量份的含矿物质酵母的组合物。
本发明的促进脂联素产生的组合物中，除了可以添加药学上容许的通常的载体、粘合剂、稳定剂、赋形剂、稀释剂、pH缓冲剂、崩解剂、增溶剂、助溶剂、等渗剂等各种调剂用配合成分以外，还可与其他脂联素产生促进剂等治疗药并用。
本发明的促进脂联素产生的组合物可以用作对治疗或预防由脂联素的产生下降引起的疾病有用的药品、补充品、食品、饲料等，施用量或摄取量优选为成年人每人每天0.1~10g，更优选0.5~5g。
作为可以应用本发明的促进脂联素产生的组合物的食品或食品材料的种类，没有特别限制，可以列举例如：酸奶、饮料型酸奶、果汁、牛奶、豆奶、酒类、咖啡、红茶、煎茶、乌龙茶、运动饮料等各种饮料，布丁、饼干、面包、蛋糕、果冻、煎饼等烘烤糕点，羊羹等日式糕点，冷冻甜点、口香糖等的面包/糕点类，乌冬面、荞麦面等面类，鱼糕、火腿、鱼肉香肠等掺有鱼肉的制品，味噌、酱油、调味汁、蛋黄酱、甜味料等调味品类，奶酪、奶油等乳制品，豆腐、魔芋以及咸烹海味、饺子、炸肉饼、沙拉等各种家常菜。另外，可以根据需要在应用了促进脂联素产生的组合物的食品或食品材料中进一步配合维生素、矿物质等其他营养成分。在将本发明的促进脂联素产生的组合物应用于食品或饲料中的情况下，可以在食品或食品材料或者饲料或饲料材料的包装体或附带的说明书中标明具有促进脂联素产生的作用的主旨。
以下，利用实施例具体地说明本发明，但本发明的技术范围并不限定于这些例示。
实施例1
[试样的制备]
将60mg鲑鱼鱼白提取物(株式会社ェル·ェス·ファクトリ一制造的“ヌクレゲン”)、10mg啤酒酵母提取物(株式会社ェル·ェス·ファクトリ一制造的“啤酒酵母提取RNA”)、20mg胶原蛋白(株式会社ェル·ェス·ファクトリ一制造的“鸡胶原蛋白”)、13.5mg含矿物质酵母(株式会社ェル·ェス·ファクトリ一制造的“混合含矿物质酵母C”)悬浮于PBS中，制备成2.5mg/ml后，利用φ0.45μm的过滤器进行过滤。使用该滤液，以表1所示的试样浓度进行评价。
表1
[促进脂联素产生的效果]
(1)3T3-L1细胞的培养和传代培养
将3T3-L1细胞(小鼠成纤维细胞)在含有10%胎牛血清的杜尔贝科改良的伊格尔培养基(CS-DMEM)中培养至达到密集的状态(铺满)后，除去培养烧瓶内的培养基，并利用PBS(-)洗涤2次。然后，添加0.1%胰蛋白酶-EDTA溶液而将细胞从烧瓶底面剥离，将该剥离的细胞和0.1%胰蛋白酶-EDTA溶液转移至离心沉淀管中。向其中添加等体积的10%CS-DMEM，并以1500rpm进行5分钟的离心分离。然后，使细胞在10%FCS-DMEM中达到均匀，接种至烧瓶中并放入CO2孵育箱中，在5%CO2的条件下在37℃下进行培养。
(2)向脂肪细胞的分化诱导
在10%CS-DMEM中培养3T3-L1细胞，自达到密集状态(铺满)之日起2天后，将培养基更换为分化培养基1并进一步培养2天。接着，将培养基更换为分化培养基2并培养2天。向脂肪细胞的分化诱导中使用了分化培养基1和分化培养基2。
分化培养基1为包含10%FBS、0.5mM异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX)、1μM***(DEX)和10μg/ml胰岛素的DMEM。分化培养基1的制备通过将10mg/ml胰岛素、500mM IBMX和1mM DEX的混合液用10%FCS-DMEM稀释来进行。另外，分化培养基2为包含10%FCS和1μM胰岛素的DMEM。分化培养基2的制备通过将10mg/ml胰岛素用10%FCS-DMEM稀释来进行。
(3)促进脂联素产生的效果的评价
分化成脂肪细胞后，将培养基更换为0.1%BSA-DMEM并培养24小时。然后，添加混合物以分别达到0μg/ml(试样1)、50μg/ml(试样2)、250μg/ml(试样3)，进而在37℃下孵育48小时。收集培养上清，使用脂联素ELISA试剂盒(大塚制药株式会社)测定上清中的脂联素量。结果示于图1中，数值化后的结果示于表2中。
结果，添加50μg/ml和250μg/ml时与未添加(试样1)时相比，观察到脂联素浓度呈浓度依赖性地增加。若将未添加时(对照)设为100%，则在添加50μg/ml的混合物时分泌到培养上清中的脂联素浓度显示为对照的126%，在添加250μg/ml的混合物时分泌到培养上清中的脂联素浓度显示为对照的183%(显著性水平为1%时具有显著差异)。此时，在任何浓度下对存活率均无影响。
表2
实施例2
按下述表3所示的比例将鲑鱼鱼白提取物(株式会社ェル·ェス·ファクトリ一制造的“ヌクレゲン”)、啤酒酵母提取物(株式会社ェル·ェス·ファクトリ一制造的“啤酒酵母提取RNA”)、胶原蛋白(株式会社ェル·ェス·ファクトリ一制造的“鸡胶原蛋白”)、含矿物质酵母(株式会社ェル·ェス·ファクトリ一制造的“混合含矿物质酵母C”)进行配合，并添加其他维生素类，制备用于口服施用的脂联素产生促进剂(片剂)。
表3
成分 6粒中
鲑鱼鱼白提取物 600mg
啤酒酵母提取物 100mg
胶原蛋白 200mg
含矿物质酵母 135mg
产业上的可利用性
本发明的脂联素产生促进剂促进作为糖代谢、脂代谢等的重要调节因子的脂联素的分泌，从而使体内特别是血中的脂联素量增加。本发明的脂联素产生促进剂对改善、治疗或预防糖尿病、肥胖、动脉硬化症以及起因于上述疾病的症状例如糖尿病并发症(糖尿病视网膜病变、糖尿病神经病变、糖尿病性肾病等)、脑梗塞、心肌梗塞、肾硬化症等有效。本发明的促进脂联素产生的组合物(脂联素产生促进剂)可作为药品、补充品、食品等使用。

Claims (2)

1.一种促进脂联素产生的组合物，其特征在于，以相对于鲑鱼鱼白提取物100质量份、啤酒酵母提取物为16～17质量份、鸡胶原蛋白为33～34质量份、含矿物质酵母为22～23质量份的配合比例，含有鲑鱼鱼白提取物、啤酒酵母提取物、鸡胶原蛋白和含矿物质酵母，并且具有促进脂联素产生的作用，所述鲑鱼鱼白提取物含有通过对鲑鱼鱼白进行酶处理而分解成寡核苷酸和寡肽的低分子成分，所述含矿物质酵母在干酵母中含有2～3％的锌、0.3～0.5％的铜和0.01～0.02％的硒。
2.如权利要求1所述的促进脂联素产生的组合物，其特征在于，啤酒酵母提取物为含有50～80％的RNA的啤酒酵母提取物。
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