CN102153544B

CN102153544B - 一类酪氨酸激酶抑制剂的制备及用途

Info

Publication number: CN102153544B
Application number: CN201010109992.3A
Authority: CN
Inventors: 樊后兴; 韦举志; 郭川胜; 陈绍俊; 陈义朗
Original assignee: Shanghai Sun Sail Pharmaceutical Science and Technology Co Ltd
Current assignee: Nanjing Changao Pharmaceutical Science and Technology Co Ltd
Priority date: 2010-02-12
Filing date: 2010-02-12
Publication date: 2015-04-29
Anticipated expiration: 2030-02-12
Also published as: CN102153544A

Abstract

本发明涉及一类新型酪氨酸激酶抑制剂的制备及用途。具体地，本发明涉及一类式I所示的新型酪氨酸激酶抑制剂，其中各取代基的定义如说明书中所述。本发明还涉及所述酪氨酸激酶抑制剂的其制备方法及其在制备***药物中的用途。

Description

一类酪氨酸激酶抑制剂的制备及用途

技术领域

本发明属于药物学、药物化学和药理学领域，更具体而言，涉及一类新型酪氨酸激酶抑制剂的制备方法和在制备***药物中的用途。

背景技术

据***公布的2006年我国城乡居民主要死亡原因的数据显示，恶性肿瘤、脑血管病和心脏病为城市居民前三位的死因，农村居民前三位死因则分别为恶性肿瘤、脑血管病和呼吸***疾病，其中恶性肿瘤的死亡率较2005年分别上升18.6％和23.1％。由此可见，恶性肿瘤已成为我国居民的首要死亡原因，并且呈加速发展趋势。

蛋白酪氨酸激酶(protein tyrosine kinases，PTKs)与肿瘤的发生和发展密切相关，酪氨酸激酶的活性过高，导致其下游信号途径激活，从而导致细胞分化、增殖、迁移、抑制细胞凋亡，最终导致肿瘤的形成和转移[Top Med Chem，2007(1)：83-132.]。因此，酪氨酸激酶抑制剂已成为发展最迅速的一类抗肿瘤药物，至2008年底已有拉帕替尼(lapatinib)、舒尼替尼(sunitimib)等数个小分子酪氨酸激酶抑制剂先后上市[Nature，2006，441，457-462]。与传统的细胞毒类抗肿瘤药物相比，这类药物选择性好，疗效高、毒副作用小，已成为当前抗肿瘤药物研究的热点。

但是这些上市药物都存在一些缺点，如早期上市的药物抗肿瘤活性需要进一步提高，伊马替尼使用后出现耐药性问题。苹果酸舒尼替尼存在一些难以克服的副作用，如：左心室功能紊乱、出血、血压升高、腹泻、恶心、口腔炎、消化不良、呕吐、皮症、味觉异常、手足综合症等[Clin.Cancer Res.，2003，9(1)，327-337.]。拉帕替尼水溶性较差，口服生物利用度较低。

因此，本领域迫切需要开发出结构新颖，活性强，毒副作用小的新型酪氨酸激酶抑制剂。

发明内容

本发明的目的是提供一类新型的酪氨酸激酶抑制剂、其制备方法及其应用。

在本发明的第一方面，提供了如通式(I)表示的化合物及其各种光学异构体，各种晶型，药学上可接受的无机或有机盐，水合物或溶剂合物，以及含有式(I)所示化合物及其上述衍生物作为主要活性成分的药物组合物。

式中：

X为O或者NH；

R¹可以选自下列结构单元：

其中R⁴，R⁵单独为H，F，Cl，Br，I，CH₃，OCH₃，NO₂，NH₂，SO₂NH₂，CF₃或OCF₃；

R⁶选自：

(1)氢，C_1-6烷基和C_3-7环烷基，所述的烷基或环烷基是未取代的或被一至三个卤素取代；

(2)芳基亚甲基或杂芳环亚甲基，其是未取代的或被一至三个独立选自下组的基团所取代：卤素，OH，NH₂，NO₂，CH₃，C₂H₅，(CH₃)₂CH，^tBu，CN，CF₃，OCH₃，或OCF₃；

(3)芳基或杂芳基，其是未取代的或被一至三个独立选自下组的基团所取代：卤素，OH，NH₂，NO₂，CH₃，C₂H₅，(CH₃)₂CH，^tBu，CN，CF₃，OCH₃，或OCF₃；

R²可以选自下列结构单元：

其中m，n，o单独为1，2或3的整数，Y独立选自CO，CO₂，S，SO，SO₂， NHCO，NHSO₂，或Y为化学键；

R⁹选自：

(1)氢原子，C_1-6链状或C_3-7环状烷基，所述的烷基是未取代的或被一至三个独立选自下组的基团所取代：卤素，OH，O，N，S，SO，SO₂或CN；

(3)芳基或杂芳基，其是未取代的或被一至三个独立选自下组的基团所取代：卤素，OH，NH₂，NO₂，CH₃，C₂H₅，(CH₃)₂CH，^tBu，CN，CF₃，OCH₃，或OCF₃。

在另一优选例中，R¹选自下组：3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯基，3-氯-4-氟苯基，4-溴-2-氟苯基，4-((吡啶-2-基)甲氧基)-3-氯苯基，4-((吡啶-3-基)甲氧基)-3-氯苯基，1-(吡啶-2-基甲基)-1H-吲唑-5-基，2-(3-氟苄基)-1H-吲唑-5-基，1-(吡啶-2-基甲基)-2H-吲唑-5-基，2-(3-氟苄基)-2H-吲唑-5-基，4-甲基-3-磺酰氨基苯基，(R)-1-苯基乙基，5-氯苯并[d][1，3]双氧杂戊基-4-基，2，4-二氯-5-甲氧基苯基，4-(6-甲基吡啶-3-基氧基)-3-甲基苯基。

在另一优选例中，R¹为3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯基。

在另一优选例中，X为O或者NH；和/或

R²选自下组：1-环己基哌啶-4-基，1-甲基哌啶-4-基，1-环戊基哌啶-4-基，1-异丁基哌啶-4-基，1-(戊基-3-基)哌啶-4-基，1-特戊基哌啶-4-基，1-异丙基哌啶-4-基，1-环丁基哌啶-4-基，1-苄基哌啶-4-基，1-(4-甲氧基苄基)哌啶-4-基，1-((吡啶-4-基)甲基)哌啶-4-基，1-((呋喃-2-基)甲基)哌啶-4-基，1-((噻吩-2-基)甲基)哌啶-4-基，1-(4-叔丁基苄基)哌啶-4-基，1-叔丁基哌啶-4-基，1-环丙基哌啶-4-基，1-(4-(二甲基胺基)丁-2-烯-1-羰基)哌啶-4-基，1-((2-(二甲基胺基)乙基)氨基甲酰基)哌啶-4-基，1-(戊烷-3-基)氮杂环丁烷-3-基，1-异丙基氮杂环丁烷-3-基，1-环戊基氮杂环丁烷-3-基，1-环丁基氮杂环丁烷-3-基，1-(环丁氧-3-基)氮杂环丁烷-3-基，1-甲基氮杂环丁烷-3-基，1-(环丙基甲基)氮杂环丁烷-3-基，1-(2-(甲基砜基)乙基)氮杂环丁烷-3-基，1-苄基氮杂环丁烷-3-基，1-(4-叔丁基苄基)氮杂环丁烷-3-基，1-(吡啶-4-基)氮杂环丁烷-3-基，1-(呋喃-2-基)氮杂环丁烷-3-基，1-(噻吩-2-基)氮杂环丁烷-3-基，1-(5-甲基呋喃-2-基)氮杂环丁烷-3-基，1-环丙基氮杂环丁烷-3-基，1-叔丁基氮杂环丁烷-3-基，2-(2-(甲磺基)乙基胺基)乙基，2-(吡咯-1-基)乙基，2-(4-甲磺酰基哌嗪-1-基)乙基，2-(4-甲基哌嗪-1-基) 乙基，2-(4-甲胺基甲酰基哌嗪-1-基)乙基，2-(4-氨基甲酰基哌嗪-1-基)乙基，2-(N，N-二乙基胺基)乙基，2-(哌啶-1-基)乙基，2-(吗啉基)乙基，2-(4-(N，N-二甲胺基)甲酰基哌嗪-1-基)乙基，2-(4-(吗啉基)甲酰基哌嗪-1-基)乙基，2-(4-(吡咯烷-1基)甲酰基哌嗪-1-基)乙基，2-羟基乙基，(R)-1-苄基吡咯烷-3-基，(S)-1-苄基吡咯烷-3-基，(R)-1-乙基吡咯烷-3-基。

在另一优选例中，X是NH。

在另一优选例中，R²是1-叔丁基氮杂环丁烷-3-基。

在另一优选例中，所述化合物是表1中的化合物1至84。

在本发明的第二方面，提供了上述具有抗肿瘤活性的新型苯并嘧啶类化合物或其药学上可接受的无机或有机盐、水合物或溶剂合物的制备方法。

本发明化合物药学上可接受的盐，具体地可列举上述化合物与盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等无机酸的盐，与甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、苦味酸、甲磺酸、对甲基苯磺酸、乙磺酸等有机酸和天门氨酸、谷氨酸等酸性氨基酸的酸形成盐。

在另一优选例中，所述的化合物为甲磺酸盐、对甲基苯磺酸盐或盐酸盐。

在本发明的第三方面，提供了一种药物组合物，它含有药理上可接受的赋形剂或载体，以及本发明的上述化合物(或其各光学异构体、各晶型)及其药学上可接受的无机或有机盐、水合物或溶剂合物。

在本发明的第四方面，提供了本发明所述的化合物、或其各光学异构体、各晶型、药学上可接受的无机或有机盐、水合物或溶剂合物的用途，它被用于制备酪氨酸激酶抑制剂。

在本发明的第五方面，提供了本发明所述的化合物、或其各光学异构体、各晶型、药学上可接受的盐、水合物或溶剂合物的用途，它被用于制备抑制酪氨酸激酶活性的药物或用于制备治疗、预防以及缓解与酪氨酸激酶活性过高相关的疾病的药物。

在另一优选例中，所述的与酪氨酸激酶活性过高相关的疾病选自肿瘤。

在本发明的第五方面，提供了一种体外非治疗性的抑制肿瘤细胞生长的方法，所述方法包括如下步骤：将所述的肿瘤细胞与本发明第一方面中所述的化合物、或其各光学异构体、各晶型、药学上可接受的盐、水合物或溶剂合物的接触，从而抑制肿瘤细胞的生长。

在本发明的第六方面，提供了一种抑制个体的肿瘤细胞生长的方法，所述方法包括如下步骤：将本发明第一方面中所述的化合物、或其各光学异构体、各晶型、药学上可接受的盐、水合物或溶剂合物的施用于所述的个体，从而抑制肿瘤细胞的生长。

在本发明的第七方面，提供了上述新型苯并嘧啶类化合物或其药学上可接受的盐在制备***疾病的药物中的应用。

应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。

具体实施方式

本发明人经过广泛的研究，合成并筛选了大量的化合物，首次发现式(I)化合物对酪氨酸激酶具有很高的抑制活性并且具有很强的抗肿瘤活性，特别适合用于制备抗肿瘤药物。本发明人在此基础上完成了本发明。

优选地，本发明如式(I)结构所示化合物中，代表性的化合物名称及结构式见下表1。

表1代表性化合物及其结构式

发明的详细说明

除非有特别说明，下列用在说明书和权利要求书中的术语具有下述含义：

“烷基”指饱和的脂族烃基团，包括1至6个碳原子的直链和支链基团。优选含有1至6个碳原子的中等大小烷基，例如甲基、乙基、丙基、2-丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、戊基等。更优选的是含有1至4个碳原子的低级烷基，例如甲基、乙基、丙基、2-丙基、正丁基、异丁基、叔丁基等。

“环烷基”指3至8元全碳单环、全碳5元/6元或6元/6元稠合环或多环稠合环基团，其中一个或多个环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子***。环烷基实例有环丙基、环丁基、环戊基、环己烷、环己二烯、金刚烷、环庚烷、环庚三烯等。

“芳基”指具有至少一个芳环结构的基团，即具有共轭的π电子***的芳环，包括碳环芳基、杂芳基。

“杂芳基”指具有1至3个杂原子作为环原子，其余的环原子为碳的芳基，杂原子包括氧、硫、氮。所述环可以是5元或6元环。杂环芳基基团的实例包括但不限于呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡咯、N-烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、咪唑基、吡唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、***基、四唑基、吲哚基、三嗪基、嘌呤基、喹啉基、异喹啉基等。

“卤素”指氟、氯、溴或碘。

本发明的化合物可以含有一个或多个不对称中心，并因此以消旋体、外消旋混合物、单一对映体、非对映异构体化合物和单一非对映体的形式出现。可以存在的不对称中心，取决于分子上各种取代基的性质。每个这种不对称中心将独立地产生两个旋光异构体，并且所有可能的旋光异构体和非对映体混合物以及纯或部分纯的化合物包括在本发明的范围之内。本发明意味着包括这些化合物的所有这种异构形式。

本文描述的一些化合物可以以互变异构体形式存在，其具有伴有一个或多个双键移位的不同的氢联接点。

活性成分

如本文所用，术语“活性成分”指式(I)所示化合物。“活性成分”还包括式(I)化合物的各种晶型、药学上可接受的无机或有机盐、水合物或溶剂合物。本发明化合物存在1个或多个不对称碳原子，因此，式(I)所示化合物包括外消旋体物，外消旋混合物，单一对映体，非对映体混合物和单一非对映体。

药学上可接受的盐

本文所用“药学上可接受的盐”是指只要是药学上可以接受的盐就没有特别的限定，具体地可列举本发明化合物与酸形成的盐，适合成盐的酸包括(但不限于)：盐酸、氢溴酸、氢氟酸、硫酸、硝酸、磷酸等无机酸，甲酸、乙酸、丙酸、草酸、三氟乙酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、苦味酸、甲磺酸、对甲基苯磺酸等有机酸以及天冬氨酸、谷氨酸等酸性氨基酸。

本发明化合物的合成方法

下面具体地描述本发明通式(I)结构化合物的制备方法，但这些具体方法不对本发明构成任何限制。

本发明通式(I)结构化合物可通过如下的方法制得，然而该方法的条件，例如反应物、溶剂、碱、所用化合物的量、反应温度、反应所需时间等不限于下面的解释。本发明化合物还可以任选将在本说明书中描述的或本领域已知的各种合成方法组合起来而方便的制得，这样的组合可由本发明所属领域的技术人员容易的进行。

在本发明的制备方法中，各反应通常在惰性溶剂中，在-30℃至溶剂回流温度(优选室温～80℃)下进行。反应时间通常为0.1小时～60小时，较佳地为0.5～48小时。

本发明通式(I)化合物的制备方法可通过以下各流程制备，其中包括：

流程I：中间体I-3a-I-3n的制备

流程1

式中，代表性的R包括以下基团：

(1)中间体I-1(US2005101617)在极性溶剂(惰性溶剂)中，在中性或碱性条件下，于-20℃-100℃(或回流温度下)和相应的胺反应1-12小时得到中间体I-2a-I-2n。极性溶剂可以是甲醇，乙醇，异丙醇，叔丁醇，乙腈，DMF。碱可以选自碳酸氢钠，碳酸钠，碳酸钾等无机碱或DBU，三乙胺，二异丙基乙基胺，N-甲基吗啉等有机碱。最佳反应条件为以异丙醇为溶剂，70-90℃反应1-5小时。(2)中间体I-2a-I-2n在极性非质子性溶剂中，在合适的温度下，惰性气体和适当的碱存在下，以钯/铜混合催化剂催化三甲基硅乙炔与卤化物交叉偶联得到一系列三甲基硅乙炔基取代中间体。极性非质子性溶剂选自四氢呋喃，***，二氯甲烷，甲苯，1，4-二氧六环，二甲基甲酰胺，N-甲基吡咯烷酮，乙腈等；温度范围在20-120℃之间；碱可选自碳酸钠，碳酸钾，碳酸铯，三乙胺，二异丙胺，吡啶，N-甲基吗啉，吗啉，N，N-二异丙基乙胺等；钯催化剂可选二(三苯基膦)二氯化钯，二(氰基苯)二氯化钯，四(三苯基膦)钯，醋酸钯等；铜催化剂选用碘化亚铜。优选条件为：以二(三苯基膦)二氯化钯和碘化亚铜为催化剂，三乙胺为碱，四氢呋喃为溶剂在回流条件下反应6小时。此系列三甲基硅乙炔基取代中间体的四氢呋喃溶液直接在氟试剂存在下，于-20℃-50℃反应0.1-4小时，得到中间体I-3a-I-3n。最佳反应条件为三氟乙酸存在下室温反应5-30分钟。

流程II：中间体II-3a-II-3d的制备

流程2

式中，代表性的R包括以下基团：

(1)中间体I-1在极性溶剂(惰性溶剂)中，在碱性条件下，于-20℃-100℃和相应的酚类化合物反应1-24小时得到中间体II-2a-II-2d。极性溶剂可以是甲醇，乙醇，异丙醇，叔丁醇，乙腈，DMF。碱可以选自碳酸氢钠，碳酸钠，碳酸钾等无机碱或DBU，三乙胺，二异丙基乙基胺，N-甲基吗啉等有机碱。最佳反应条件为以DMF为溶剂，碳酸钾做碱，室温反应4-16小时；

(2)中间体II-2a-II-2d在极性非质子性溶剂中，在合适的温度下，惰性气体和适当的碱存在下，以钯/铜混合催化剂催化三甲基硅乙炔与卤化物交叉偶联得到一系列三甲基硅乙炔基取代中间体。极性非质子性溶剂选自四氢呋喃，***，二氯甲烷，甲苯，1，4-二氧六环，二甲基甲酰胺，N-甲基吡咯烷酮，乙腈等；温度范围在20-120℃之间；碱可选自碳酸钠，碳酸钾，碳酸铯，三乙胺，二异丙胺，吡啶，N-甲基吗啉，吗啉，N，N-二异丙基乙胺等；钯催化剂可选二(三苯基膦)二氯化钯，二(氰基苯)二氯化钯，四(三苯基膦)钯，醋酸钯等；铜催化剂选用碘化亚铜。优选条件为：以二(三苯基膦)二氯化钯和碘化亚铜为催化剂，三乙胺为碱，四氢呋喃为溶剂在回流条件下反应6小时。此系列三甲基硅乙炔基取代中间体的四氢呋喃溶液直接在氟试剂存在下，于-20℃-50℃反应0.1-4小时，得到中间体II-3a-II-3d。最佳反应条件为三氟乙酸存在下室温反应5-30分钟。

流程III：中间体III-3a-III-3n的制备

流程3

式中，R¹R²CH基团如下：

(1)原料III-1在极性溶剂中和相应的醛或酮在-20至80℃下，在还原试剂的存在下进行还原胺化反应1-24小时得到相对应的中间体III-2a-III-2n。极性溶剂可以选自甲醇，乙醇，异丙醇，四氢呋喃，二氯甲烷，1，2-二氯乙烷，1，4-二氧六环，DMF，乙腈，乙二醇二甲醚等。还原剂选自硼氢化钠，硼氢化钾，氰基硼氢化钠，三乙酰氧基硼氢化钠等。最佳反应条件为，二氯甲烷为溶剂，三乙酰氧基硼氢化钠为还原剂，在室温下反应4-16小时。

(2)中间体III-2a-III-2n在三苯基膦存在下和叠氮化试剂进行Mitsunobu反应得到中间体III-3a-III-3n。溶剂可以选用四氢呋喃，1，4-二氧六环，甲基叔丁醚等；叠氮化试剂可以选自叠氮化钠，DPPA等。最佳反应条件为，在三苯基膦存在下，以四氢呋喃为溶剂，DPPA为叠氮化试剂，室温反应4-16小时。

流程IV：中间体IV-4a和IV-4b的制备

流程4

(1)原料IV-1(J.Org.Chem.，2005，70(5)，1930-1933)在丙烯酸存在下，在碱性条件下，以水做溶剂和相应的胺在室温-80℃反应2-24小时得到中间体IV-2a和IV-2b。碱可以选自氢氧化锂，氢氧化钠，氢氧化钾，氢氧化钡等有机碱，最佳反应条件为以氢氧化钠为碱，在40-70℃反应6-16小时。

(2)原料IV-2a和IV-2b在极性质子溶剂中，与还原剂在-20℃至50℃反应2-12小时得到中间体IV-3a和IV-3b。极性质子溶剂可以选自甲醇，乙醇，异丙醇，叔丁醇等，还原剂可以选自硼氢化钠，硼氢化锂，硼氢化钾等。最佳反应条件为乙醇做溶剂，硼氢化钠做还原剂室温反应2-6小时。

(3)中间体IV-3a和IV-3b在三苯基膦存在下和叠氮化试剂进行Mitsunobu反应得到中间体IV-4a和IV-4b。溶剂可以选用四氢呋喃，1，4-二氧六环，甲基叔丁醚等；叠氮化试剂可以选自叠氮化钠，DPPA等。最佳反应条件为，在三苯基膦存在下，以四氢呋喃为溶剂，DPPA为叠氮化试剂，室温反应6-16小时。

流程V：中间体V-2b和V-3a的制备

流程5

(1)在极性非质子性溶剂中，在合适温度下，V-1(Tetrahrdron Lett.，2005，46(16)，2911-2914)与相应的酰氯，在碱的存在下反应，得到中间体V-2a和V-2b。极性非质子性溶剂选自二氯甲烷，氯仿，1，2-二氯乙烷，乙酸乙酯，四氢呋喃，***，甲基叔丁醚，1，4-二氧六环，二甲基甲酰胺，二甲基亚砜，乙腈等；温度范围在0-100℃之间；碱可选自咪唑，三乙胺，吡啶，N-甲基吗啉，吗啉，N，N-二异丙基乙胺等；优选条件为：以三乙胺为碱，以四氢呋喃为溶剂，室温反应过夜。

(2)中间体V-2a在非极性质子溶剂中，在碱性条件下和N¹，N¹-二甲基乙二胺反应在合适温度下反应1-24小时得到中间体V-3a。极性非质子性溶剂选自二氯甲烷，氯仿，1，2-二氯乙烷，乙酸乙酯，四氢呋喃，***，甲基叔丁醚，1，4-二氧六环，二甲基甲酰胺，二甲基亚砜，乙腈等；温度范围在0-100℃之间；碱可选自碳酸钠，碳酸钾，咪唑，三乙胺，吡啶，N-甲基吗啉，吗啉，N，N- 二异丙基乙胺等；优选条件为：以碳酸钾为碱，以二甲基甲酰胺为溶剂，30-60℃反应过夜。

流程VI：中间体VI-3a-VI-3q的制备

流程6

式中，R¹R²CH基团如下：

(1)原料VI-1(WO2006021881)在极性溶剂中和相应的醛或酮在-20-80℃下，在还原试剂的存在下进行还原胺化反应1-24小时得到相对应的中间体VI-2a-VI-2o。极性溶剂可以选自甲醇，乙醇，异丙醇，四氢呋喃，二氯甲烷，1，2-二氯乙烷，1，4-二氧六环，DMF，乙腈，乙二醇二甲醚等，还原剂选自硼氢化钠，硼氢化钾，氰基硼氢化钠，三乙酰氧基硼氢化钠等。最佳反应条件为，二氯甲烷为溶剂，三乙酰氧基硼氢化钠为还原剂，在室温下反应2-16小时。

(2)中间体VI-2a-VI-2o，1-环丙基氮杂环丁烷-3-醇(SyntheticCommunications，2003，22(24)，4297-4302.)，1-叔丁基氮杂环丁烷-3-醇 (Synthetic Communications，2003，22(24)，4297-4302.)在极性非质子性溶剂中，在合适温度下，在碱的存在下反应，和甲磺酰氯反应得到相应的甲磺酸酯中间体。极性非质子性溶剂选自二氯甲烷，氯仿，1，2-二氯乙烷，乙酸乙酯，四氢呋喃，***，甲基叔丁醚，1，4-二氧六环，二甲基甲酰胺，二甲基亚砜，乙腈等；温度范围在0-100℃之间；碱可选自咪唑，三乙胺，吡啶，N-甲基吗啉，吗啉，N，N-二异丙基乙胺等；优选条件为：以三乙胺为碱，以二氯甲烷为溶剂，0℃-室温反应3小时。得到的甲磺酸酯中间体在极性非质子溶剂中，在合适温度下，和叠氮化试剂反应得到中间体VI-3a-VI-3q，极性非质子性溶剂选自二氯甲烷，氯仿，1，2-二氯乙烷，乙酸乙酯，四氢呋喃，***，甲基叔丁醚，1，4-二氧六环，二甲基甲酰胺，二甲基亚砜，乙腈等；温度范围在0℃-100℃之间；叠氮化试剂，可以选自叠氮化钠，叠氮化钾等；最佳条件为，以DMF为溶剂，叠氮化钠为叠氮化试剂，在30-80℃反应2-8小时。

流程VII：中间体VII-2a-VII-2l的制备

流程7

(1)在极性非质子性溶剂中，在合适温度下，VII-1(Org.Lett.，2001，3(25)，4091-4094)与相应的胺，在碱的存在下反应，得到中间体VII-2a-VII-2l。极性非质子性溶剂选自二氯甲烷，氯仿，1，2-二氯乙烷，乙酸乙酯，四氢呋喃，***，甲基叔丁醚，1，4-二氧六环，DMF，二甲基亚砜，乙腈等；温度范围在0-100℃之间；碱可选自咪唑，三乙胺，吡啶，N-甲基吗啉，吗啉，N，N-二异丙基乙胺等；优选条件为：以三乙胺为碱，以乙腈为溶剂，回流反应反应过夜。

流程VIII：化合物1-14的制备

流程8

原料I-3a-I-3n在极性溶剂中，在铜试剂和抗坏血酸钠为催化剂，在惰性气体保护下，在合适温度和原料VI-3q进行D-A反应生成化合物1-14。极性溶剂可以选自甲醇，乙醇，异丙醇，叔丁醇等极性质子溶剂和二氯甲烷，氯仿，1，2-二氯乙烷，乙酸乙酯，四氢呋喃，***，甲基叔丁醚，1，4-二氧六环，DMF，二甲基亚砜，乙腈等极性非质子溶剂；铜试剂可以选自无水硫酸铜，五水硫酸铜，醋酸铜，碘化亚铜；温度为室温-120℃，反应时间为0.1-24小时。最佳反应条件为，以DMF为溶剂，以五水硫酸铜和抗坏血酸钠为催化剂在氩气保护下，加热到40-80℃反应0.2-4小时。

流程IX：化合物15-18的制备

流程9

原料II-3a-II-3d在极性溶剂中，在铜试剂和抗坏血酸钠为催化剂，在惰性气体保护下，在合适温度和原料VI-3q进行D-A反应生成化合物15-18。极性溶剂可以选自甲醇，乙醇，异丙醇，叔丁醇等极性质子溶剂和二氯甲烷，氯仿，1，2-二氯乙烷，乙酸乙酯，四氢呋喃，***，甲基叔丁醚，1，4-二氧六环，DMF，二甲基亚砜，乙腈等极性非质子溶剂；铜试剂可以选自无水硫酸铜，五水硫酸铜，醋酸铜，碘化亚铜；温度为室温-120℃，反应时间为0.1-24小时。最佳反应条件为，以DMF为溶剂，以五水硫酸铜和抗坏血酸钠为催化剂在氩气保护下，加热到40-80℃反应0.2-4小时。

流程X：化合物19-68的制备

流程10

原料I-3a在极性溶剂中，在铜试剂和抗坏血酸钠为催化剂，在惰性气体保护下，在合适温度和原料III-3a-3n，IV-4a，IV-4b，V-2b，V-3a，VI-3a-3p，VII-2a-2l，(R)-3-叠氮-1-苄基吡咯(J.Med.Chem.，1992，35(22)，4205-4213.)，(S)-3-叠氮-1-苄基吡咯(WO2004056767)，(S)-3-叠氮-1-乙基吡咯(J.Org.Chem.，1998，63(23)，8266-8275.)进行D-A反应生成化合物19-68。极性溶剂可以选自甲醇，乙醇，异丙醇，叔丁醇等极性质子溶剂和二氯甲烷，氯仿，1，2-二氯乙烷，乙酸乙酯，四氢呋喃，***，甲基叔丁醚，1，4-二氧六环，DMF，二甲基亚砜，乙腈等极性非质子溶剂；铜试剂可以选自无水硫酸铜，五水硫酸铜，醋酸铜，碘化亚铜；温度为室温-120℃，反应时间为0.1-24小时。最佳反应条件为，以DMF为溶剂，以五水硫酸铜和抗坏血酸钠为催化剂在氩气保护下，加热到40-80℃反应0.2-4小时。

流程XI：化合物69-76的制备

流程11

原料I-3b在极性溶剂中，在铜试剂和抗坏血酸钠为催化剂，在惰性气体保护下，在合适温度和原料III-3e，IV-4a，VI-3a，VI-3b，VI-3j VII-2a，VII-2f，2-叠氮基乙醇(Org.Lett.，2001，3(25)，4091-4094)进行D-A反应生成化合物69-76。极性溶剂可以选自甲醇，乙醇，异丙醇，叔丁醇等极性质子溶剂和二氯甲烷，氯仿，1，2-二氯乙烷，乙酸乙酯，四氢呋喃，***，甲基叔丁醚，1，4-二氧六环，DMF，二甲基亚砜，乙腈等极性非质子溶剂；铜试剂可以选自无水硫酸铜，五水硫酸铜，醋酸铜，碘化亚铜；温度为室温-120℃，反应时间为0.1-24小时。最佳反应条件为，以DMF为溶剂，以五水硫酸铜和抗坏血酸钠为催化剂在氩气保护下，加热到40-80℃反应0.2-4小时。

流程XII：化合物77-80的制备

流程12

原料I-3d在极性溶剂中，在铜试剂和抗坏血酸钠为催化剂，在惰性气体保护下，在合适温度和原料III-3e，IV-3a，VI-3a，VI-3b进行D-A反应生成化合物77-80。极性溶剂可以选自甲醇，乙醇，异丙醇，叔丁醇等极性质子溶剂和二氯甲烷，氯仿，1，2-二氯乙烷，乙酸乙酯，四氢呋喃，***，甲基叔丁醚，1，4-二氧六环，DMF，二甲基亚砜，乙腈等极性非质子溶剂；铜试剂可以选自无水硫酸铜，五水硫酸铜，醋酸铜，碘化亚铜；温度为室温-120℃，反应时间为0.1-24小时。最佳反应条件为，以DMF为溶剂，以五水硫酸铜和抗坏血酸钠为催化剂在氩气保护下，加热到40-80℃反应0.2-4小时。

流程XIII：化合物81-84的制备

流程13

原料I-3g在极性溶剂中，在铜试剂和抗坏血酸钠为催化剂，在惰性气体保护下，在合适温度和原料III-3e，IV-3a，VI-3a，VI-3b进行D-A反应生成化合物81-84。极性溶剂可以选自甲醇，乙醇，异丙醇，叔丁醇等极性质子溶剂和二氯甲烷，氯仿，1，2-二氯乙烷，乙酸乙酯，四氢呋喃，***，甲基叔丁醚，1，4-二氧六环，DMF，二甲基亚砜，乙腈等极性非质子溶剂；铜试剂可以选自无水硫酸铜，五水硫酸铜，醋酸铜，碘化亚铜；温度为室温-120℃，反应时间为0.1-24小时。最佳反应条件为，以DMF为溶剂，以五水硫酸铜和抗坏血酸钠为催化剂在氩气保护下，加热到40-80℃反应0.2-4小时。

根据需要，可以将本发明的化合物在极性质子性溶剂中，如甲醇，乙醇，异丙醇，和药学上可以接受的酸反应生成药学上可接受的盐制备得到。所述的药学上可接受的无机或有机酸为：盐酸、氢溴酸、氢氟酸、硫酸、硝酸、磷酸、甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、苦味酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲基苯磺酸、天冬氨酸或者谷氨酸。

药物组合物和施用方法

由于本发明化合物具有优异的酪氨酸激酶抑制作用，因此本发明化合物及其各种晶型、药学上可接受的无机或有机盐、水合物或溶剂合物，以及含有本发明化合物为主要活性成分的药物组合物可用于治疗、预防以及缓解酪氨酸激酶相关疾病。具体地，本发明化合物可用于抑制肿瘤(细胞)的生长。

本发明的药物组合物包含安全、有效量范围内的本发明化合物或其药理上可接受的盐及药理上可以接受的赋形剂或载体。其中“安全、有效量”指的是：化合物的量足以明显改善病情，而不至于产生严重的副作用。通常，药物组合物含有1-1000mg本发明化合物/剂，较佳地5-500mg本发明化合物/剂，更佳地，含有10-200mg本发明化合物/剂。

本发明的化合物及其药理上可接受的盐可制成各种制剂，其中包含安全、有效量范围内的本发明化合物或其药理上可接受的盐及药理上可以接受的赋形剂或载体。其中“安全、有效量”指的是：化合物的量足以明显改善病情，而不至于产生严重的副作用。化合物的安全、有效量根据治疗对象的年龄、病情、疗程等具体情况来确定。

“药理上可以接受的赋形剂或载体”指的是：一种或多种相容性固体或液体填料或凝胶物质，它们适合于人使用，而且必须有足够的纯度和足够低的毒性。“相容性”在此指的是组合物中各组份能与本发明的化合物以及它们之间相互掺和，而不明显降低化合物的药效。药理上可以接受的赋形剂或载体部分例子有纤维素及其衍生物(如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素钠、纤维素乙酸酯等)、明胶、滑石、固体润滑剂(如硬脂酸、硬脂酸镁)、硫酸钙、植物油(如豆油、芝麻油、花生油、橄榄油等)、多元醇(如丙二醇、甘油、甘露醇、山梨醇等)、乳化剂(如吐温 )、润湿剂(如十二烷基硫酸钠)、着色剂、调味剂、稳定剂、抗氧化剂、防腐剂、无热原水等。

施用本发明化合物时，可以口服、直肠、肠胃外(静脉内、肌肉内或皮下)、局部给药。

用于口服给药的固体剂型包括胶囊剂、片剂、丸剂、散剂和颗粒剂。在这些固体剂型中，活性化合物与至少一种常规惰性赋形剂(或载体)混合，如柠檬酸钠或磷酸二钙，或与下述成分混合：(a)填料或增容剂，例如，淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸；(b)粘合剂，例如，羟甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖和***胶；(c)保湿剂，例如，甘油；(d)崩解剂，例如，琼脂、碳酸钙、马铃薯淀粉或木薯淀粉、藻酸、某些复合硅酸盐、和碳酸钠；(e)缓溶剂，例如石蜡；(f)吸收加速剂，例如，季胺化合物；(g)润湿剂，例如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯；(h)吸附剂，例如，高岭土；和(i)润滑剂，例如，滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠，或其混合物。胶囊剂、片剂和丸剂中，剂型也可包含缓冲剂。

固体剂型如片剂、糖丸、胶囊剂、丸剂和颗粒剂可采用包衣和壳材制备，如肠衣和其它本领域公知的材料。它们可包含不透明剂，并且，这种组合物中活性化合物或化合物的释放可以延迟的方式在消化道内的某一部分中释放。可采用的包埋组分的实例是聚合物质和蜡类物质。必要时，活性化合物也可与上述赋形剂中的一种或多种形成微胶囊形式。

用于口服给药的液体剂型包括药学上可接受的乳液、溶液、悬浮液、糖浆或酊剂。除了活性化合物外，液体剂型可包含本领域中常规采用的惰性稀释剂，如水或其它溶剂，增溶剂和乳化剂，例知，乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、丙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲酰胺以及油，特别是棉籽油、花生油、玉米胚油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油或这些物质的混合物等。

除了这些惰性稀释剂外，组合物也可包含助剂，如润湿剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、娇味剂和香料。

除了活性化合物外，悬浮液可包含悬浮剂，例如，乙氧基化异十八烷醇、聚氧乙烯山梨醇和脱水山梨醇酯、微晶纤维素、甲醇铝和琼脂或这些物质的混合物等。

用于肠胃外注射的组合物可包含生理上可接受的无菌含水或无水溶液、分散液、悬浮液或乳液，和用于重新溶解成无菌的可注射溶液或分散液的无菌粉末。适宜的含水和非水载体、稀释剂、溶剂或赋形剂包括水、乙醇、多元醇及其适宜的混合物。

用于局部给药的本发明化合物的剂型包括软膏剂、散剂、贴剂、喷射剂和吸入剂。活性成分在无菌条件下与生理上可接受的载体及任何防腐剂、缓冲剂，或必要时可能需要的推进剂一起混合。

本发明化合物可以单独给药，或者与其他药学上可接受的化合物联合给药。

使用药物组合物时，是将安全有效量的本发明化合物适用于需要治疗的哺乳动物(如人)，其中施用时剂量为药学上认为的有效给药剂量，对于60kg体重的人而言，日给药剂量通常为1～1000mg，优选20～500mg。当然，具体剂量还应考虑给药途径、病人健康状况等因素，这些都是熟练医师技能范围之内的。

本发明的主要优点包括：

(1)本发明化合物是一类新分子结构的酪氨酸激酶抑制剂。

(2)本发明化合物对酪氨酸激酶有更强的抑制活性。

(3)本发明化合物对肿瘤细胞有更强的抑制活性。

(4)本发明化合物具有优异的药代动力学性质。

在下述实施例中更具体地解释本发明。然而，应当理解，这些实施例是为了举例说明本发明，而并不是以任何方式限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则份数和百分比为重量份和重量百分比。

所有实施例中，熔点用X-4熔点仪测定，温度计未校正；¹H-NMR用VarianMercury 300或400核磁共振仪记录，化学位移以δ(ppm)表示；分离用硅胶未说明均为200-300目，洗脱液的配比均为体积比。

实施例1 N-(3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯基)-6-碘喹唑啉-4-胺(I-2a)

将原料I-1(1.0g，3.44mmol)溶解于异丙醇(50mL)中，搅拌下加入3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯胺(0.87g，3.44mmol)，加热回流3h，冷却至室温，静置6 小时，有大量固体析出，过滤，滤饼用少量异丙醇洗涤，烘干，得到中间体I-2a(黄色固体(1.7g，98％)。

¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ5.21(s，2H)，7.15(m，1H)，7.29(m，3H)，7.46(m，1H)，7.64(m，1H)，7.70(m，1H)，7.90(s，1H)，8.36(d，J＝6.30Hz，1H)，8.92(s，1H)，9.26(s，1H)，11.53(br s，1H).

类似于中间体I-2a的合成，下列中间体I-2b至I-2n可由原料I-1与各种芳胺合成得到。

表2

实施例2 N-(4-(3-氟苄氧基)-3-氯苯基)-6-乙炔基喹唑啉-4-胺(I-3a)

将I-2a(2.0g，4.2mmol)溶解于THF(120mL)中，搅拌下加入CuI(70mg，0.36mol)，Pd(PPh₃)₂Cl₂(164mg，0.3mmol)，Et₃N(1.42mL)，三甲基硅乙炔(0.98mL，4.2mmol)，在氩气的保护下，加热，回流，控制油浴温度在80℃左右，反应过夜，TLC监测反应完全后，冷却到室温，过滤，滤饼用THF洗涤。将滤液转入250mL三口瓶中，通入氩气，搅拌。用少量THF溶解四正丁基氟化铵(2.0g，7.6mg)，快速加入体系，室温下反应5min后，反应完全，将反应液倒入装有冷水(1200mL)的锥形瓶中，有大量棕黑色固体析出，过滤，虑饼用水洗涤，烘干，用少量THF溶解，硅胶拌样，柱层析(V_PE:THF＝5/1)，得到黄色固体I-3a(黄色固体530mg，34％)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ4.42(s，1H)，5.18(s，2H)，6.99-7.06(m，2H)7.21-7.26(m，2H)，7.34-7.40(m，2H)，7.52(dd，J₁＝2.7Hz，J₂＝8.8Hz，1H)，7.86(d，J＝3.2Hz，3H)，8.03(s，1H)，8.75(s，1H).

类似于中间体I-3a的合成，下列中间体I-3b至I-3n可由原料I-2b至I-2n进行合成得到。

表3

实施例3 4-(4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基氧基)-6-碘喹唑啉(II-2a)向DMF(50mL)中加入I-1(3.35g，1mmol)，4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-酚 (2.0g，1.05mmol)、碳酸钾(1.91g，1.2mmol)，室温搅拌下反应40h。加入水稀释，乙酸乙酯和四氢呋喃混合液萃取，有机层再水洗4次，无水硫酸钠干燥、过滤、浓缩、拌样柱层析(V_正己烷∶V_乙酸乙酯＝3/1)。得到产物II-2a(1.62g，33％)。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ2.42(s，3H)，6.24(s，1H)，7.01(t，J＝8.0Hz，1H)，7.16(d，J＝8.8Hz，1H)，7.78(d，J＝8.8Hz，1H)，8.30(dd，J＝8.8，2.0Hz，1H)，8.72(s，1H)，8.74(d，J＝1.4Hz，1H)，11.37(s，1H).

类似于中间体II-2a的合成，下列中间体II-2b至II-2d可由原料I-1与各种取代酚合成得到。

表4

实施例44-(4--2-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基氧基)-6-乙炔基喹唑啉(II-3a)

氩气下向四氢呋喃(130mL)中加入YF-50-184(1.62g，3.86mmol)、碘化亚铜(55mg，0.286mmol)、二(三苯基膦)二氯化钯(130mg，0.278mmol)、三乙胺(1.34mL)、三甲基硅基乙炔(1.30mL)搅拌下回流反应。3h后停止反应，抽滤，少量四氢呋喃溶液洗。氩气下向上述四氢呋喃溶液(180mL)中加入四正丁基氟化铵(2.02g，7.72mmol)的四氢呋喃溶液(20mL)，室温反应5min，倒入冰水(800mL)中搅拌，抽滤、水洗、烘干。得到棕黑色固体物YF-50-190(1.22g，99％)。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ(ppm)2.41(s，3H)，4.50(s，1H)，6.26(d，J＝0.6Hz，1H)，7.01-7.05(m，1H)，7.17-7.20(m，1H)，7.55-7.65(m，1H)，8.00-8.09(m，2H)，8.49(d，J＝2.2Hz，1H)，8.73(s，1H)，11.38(s，1H).

类似于中间体II-3a的合成，下列中间体II-3b至II-3d可由原料II-2b至II-2d进行合成得到。

表5

实施例5 1-环己基-4-羟基哌啶(III-2a)

将4-羟基哌啶(4.05g，40mmol)溶解于干燥的二氯甲烷(100mL)中，再加入环己酮(5.8g，60mmol)，加完搅拌15分钟，加入NaBH(OAc)₃(16.93g，80mmol)，室温下搅拌过夜，TLC检测反应完毕，加入饱和碳酸氢钠，二氯甲烷(80mL*3)萃取，无水硫酸钠干燥，过滤，蒸干滤液得粗产物YF-230-80(2.1g，40％)。

MS(ESI-LR)m/z：184.2(M+1)⁺.

类似于中间体III-2a的合成，下列中间体III-2b至III-2n可由原料III-1和各种胺反应得到。

表6

实施例6 1-环己基-4-叠氮哌啶(III-3a)

将III-2a(1.83g，10mmol)溶解于新蒸的THF(30mL)中，搅拌下加入PPh₃(3.94g，15mmol)，氩气保护，冰盐浴下滴加DIAD(3mL，15mmol)，DPPA(3.3mL，15mmol)，10min后移出冰浴，室温搅拌过夜，TLC监测反应完毕，浓缩，除掉溶剂，加入乙酸乙酯(60mL)，水(100mL)和稀盐酸(18mL)，分液，水相用二氯甲烷洗，用NaOH溶液调节使溶液为强碱性，在用二氯甲烷(100mL*3)萃取，无水硫酸钠干燥，浓缩，得到棕色液体YF-230-111(0.89g，46％)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ1.22-1.25(m，4H)，1.61-1.72(m，4H)，1.79-1.83(m，4H)，1.90-1.93(m，2H)，2.36-2.39(m，3H)，2.82-2.87(m，2H)，3.36(s，1H).

类似于中间体III-3a的合成，下列中间体III-3b至III-3n可由原料III-2b至III-2n反应得到。

表7

实施例7 1-叔丁基哌啶-4-酮(IV-2a)

向水(100mL)中加入丙烯酸(34.5mL，0.5mol)搅拌下滴加入10N氢氧化钠(46mL)，完毕后加入IV-1(24.51g，0.1mol)，叔丁胺(200mL)，升温至回流反应过夜。反应结束后减压除去低沸点物，残余物加用乙酸乙酯萃取，有机层无水硫酸钠干燥，过滤、浓缩，减压蒸馏得到产物IV-2a(5.05g，32％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ1.06(s，9H)，2.36(t，J＝6.0Hz，4H)，2.78(t，J＝6.0Hz，4H).

实施例8 1-环丙基哌啶-4-酮(IV-2b)

类似实施例7的操作，得到中间体IV-2b(4.8g，40％)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ0.37-0.47(m，4H)，1.64-1.68(m，1H)，2.33-2.36(m，4H)，2.83-2.86(m，4H).

实施例9 1-叔丁基哌啶-4-醇(IV-3a)

向乙醇(100mL)中加入IV-2a(2.0g，12.88mmol)，水浴下分批加入硼氢化钠(0.75g，19.32mmol)搅拌下反应3.5h。减压除去乙醇，残余物加稀盐酸溶解后，碳酸钠溶液中和，二氯甲烷萃取，有机层无水硫酸钠干燥，过滤、浓缩。得到产物IV-3a(1.875g，92％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ1.02(s，9H)，1.50-1.59(m，2H)，1.83-1.90(m，2H)，2.17-2.25(m，2H)，2.82-2.88(m，2H)，3.57-3.51(m，1H).

实施例10 1-环丙基哌啶-4-醇(IV-3b)

类似实施例9的操作，得到中间体IV-3b(4.58g，94％)。

实施例11 1-叔丁基-4-叠氮哌啶(IV-4a)

类似实施例6的操作，可以得到中间体IV-4a(2.6g，95％)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ1.03(s，9H)，1.56-1.65(m，2H)，1.86-1.89(m，2H)，2.20-2.26(m，2H)，2.84-2.88(m，2H)，3.28-3.32(m，1H).

实施例12 1-环丙基-4-叠氮哌啶(YF-50-194)

类似实施例6的操作，可以得到中间体IV-4b(2.8g，96％)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ0.32-0.39(m，4H)，1.51-1.59(m，3H)，1.80-1.83(m，2H)，2.25-2.31(m，2H)，2.81-2.87(m，2H)，3.30-3.34(m，1H).

实施例13 4-叠氮哌啶-1甲酸苯酯(V-2a)

原料V-1(2.52g，20mmol)溶于四氢呋喃(50mL)中，加入三乙胺(3mL)，冰盐浴冷却，加入率甲酸苯酯(3.14g，20mmol)，加完，室温反应3小时，停止反应，旋干溶剂，残留物溶于乙酸乙酯(100mL)中，水洗，饱和氯化钠溶液洗，无水硫酸钠干燥，旋干，得到中间体V-2a(3.12g，63％)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ1.42(m，2H)，1.63(m，2H)，3.36(m，4H)，3.78(m，1H)，7.10-7.23(m，5H).

实施例14(E)-1-(4-叠氮哌啶-1-基)-4-(二甲基胺基)-丁-2-烯-1-酮(V-2b)

类似实施例13的操作，可以得到中间体V-2b(0.86g，25％)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ1.41(m，2H)，1.63(m，2H)，2.28(s，6H)，3.14(d，J＝6.1Hz，2H)，3.34(m，4H)，3.75(m，1H)，6.25(d，J＝15.3Hz，1H)，6.54(m，1H).

实施例15 4-叠氮-N-(2-(二甲基胺基)乙基)哌啶-1-甲酰胺(V-3a)

原料V-2a(2.46g，10mmol)溶于干燥DMF(20mL)中，加入碳酸钾(2.76g，20mmol)，N¹，N¹-二甲基乙二胺(1.06g，12mol)，加热到50℃反应过夜，停止反应，加水(100mL)稀释，二氯甲烷(50mL*2)萃取，合并二氯甲烷层，饱和食盐水洗，无水钠干燥，旋干，柱层析(V_二氯甲烷/V_甲醇＝20/1)，得到中间体 V-3a(1.12g，47％)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ1.41(m，2H)，1.63(m，2H)，2.34(s，6H)，2.56(t，J＝6.5Hz，2H)，3.26(m，2H)，3.34(m，4H)，3.75(m，1H)，6.23(t，J＝6.10Hz，1H).

实施例16 1-(戊烷-3-基)氮杂环丁烷-3-醇的合成(VI-2a)

VI-1(2.5g，0.022mol)溶于DCM(100mL)中，加入3-戊酮(1.9g，0.022mol)，搅拌下加入三乙酰氧基硼氢化钠(7g，0.033mol)，碳酸钾(3.78g，0.027mol)和少量活化分子筛，室温反应过夜，TLC原料反应完全，过滤浓缩后加EA搅拌，再次过滤，滤液浓缩后得到中间体VI-2a(1.6g，49％)。MS(ESI-LR)：142.2(M+1)⁺.

类似于中间体VI-2a的合成，下列中间体VI-2b至VI-2o可由原料VI-1与各种不同的醛酮化合物反应得到。

表8

实施例17 3-叠氮-1-(3-戊基)环丁胺的合成(VI-3a)

将VI-2a(1.6g，0.011mol)溶解在干燥的DCM(25mL)中.加入三乙胺(3mL，0.022mol)冰盐冷却下，滴加甲烷磺酰氯(1mL，0.013mol)和DCM(10mL)的混合液，滴毕反应两小时TLC原料反应完全，加饱和碳酸氢钠溶液，分层并用DCM萃取水相一次，合并有机相，饱和碳酸氢钠和水各洗涤一次，干燥浓缩得到甲磺酸酯中间体。将上述中间体(1.7g，0.0076mol)加入DMF(30mL)，加叠氮化钠(1g，0.015mol)，在氩气保护下加热到60℃反应过夜。原料反应完全后，加入水(100mL)，DCM萃取两次，用分别用饱和碳酸氢钠溶液和水洗涤一次，干燥后浓缩柱层析(hex-hex：EA＝10/1)纯化后得到VI-3a(0.25g，19％)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ0.80-0.85(m，6H)，1.28-1.42(m，4H)，2.00-2.04(m，1H)，2.92-2.97(m，2H)，3.57-3.62(m，2H)，3.96-4.00(m，1H).

类似于中间体VI-3a的合成，下列中间体VI-3b至VI-3o可分别由原料VI-2b至VI-2o，1-环丙基氮杂环丁烷-3-醇，1-叔丁基氮杂环丁烷-3-醇反应得到。

表9

实施例18 N-(2-叠氮乙基)-2-(甲基磺酰基)乙胺(VII-2a)

原料VII-1(2.46g，20mmol)溶于干燥乙腈(30mL)中，加入无水碳酸钾(2.76g，20mmol)，2-(甲基磺酰基)乙胺(4.82g，20mmol)，加热到50℃反应过夜。停止反应，TLC(CH₂Cl₂/MeOH＝50/1)监测反应，待反应完成后，停止反应，过滤，乙酸乙酯洗，浓缩，残留物柱层析(CH₂Cl₂/MeOH＝50/1)，得到中间体VII-2a(油状物1.48g，产率39％)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ3.38(t，J＝5.6Hz，2H)，3.15(m，4H)，2.98(s，3H)，2.76(t，J＝5.6Hz，2H)，1.55(br s，1H)。

类似于中间体VII-2a的合成，下列中间体VII-2b-3f可分别由原料VII-1与不同取代的胺反应得到.

表10

实施例19N-(4-(3-氟苄氧基)-3-氯苯基)-6-(1-(1-叔丁基氮杂环丁烷-3-基)-1H-1，2，3-三氮唑-4-基)喹唑啉-4-胺(化合物1)

将I-3a(238mg，0.5mmol)溶解于DMF(5mL)中，加入CuSO₄.5H₂O(38mg，0.15mmol)，L-(+)抗坏血酸钠(50mg，25mmol)，再加入VI-3q(155mg，1.5mmol)，在氩气的保护下加热到60℃反应0.5h，TLC检测反应完全，冷却，将反应液倒入冰入水(50mL)中，析出大量固体，过滤，水洗，固体干燥后，溶于少量二氯甲烷中，加硅胶旋干拌样，柱层析(V_二氯甲烷/V_甲醇＝20/1)，得到黄色固体YF-230-34(178mg，64％)。

¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)：δ1.04(s，9H)，3.79-3.84(m，4H)，5.24(s，2H)，5.31-5.36(m，1H)，7.13-7.20(m，1H)，7.24-7.33(m，3H)，7.42-7.49(m，1H)，7.76(dd，J₁＝1.4Hz，J₂＝9.0Hz，1H)，8.03(d，J＝2.4Hz，1H)，8.32(s，1H)，8.82(s，1H)，9.12(s，H)，10.0(s，1H)；ESI-LR：558.2[M+1]⁺.

实施例20-32

类似化合物1的合成，化合物2-14可分别由原料I-3b至I-3n与VI-3q反应得到。

表11

实施例33-46

类似化合物1的合成，化合物5-18可分别由原料II-3a至II-3d与VI-3q反应得到。

表12

实施例47-96

类似化合物1的合成，化合物19-68可由原料I-3a分别与III-3a至III-3n，IV-4a，IV-4b，V-2b，V-3a，VI-3a-3p，VII-2a-21，(R)-3-叠氮-1-苄基吡咯，(S)-3-叠氮-1-苄基吡咯，(S)-3-叠氮-1-乙基吡咯反应得到。

表13

实施例97-104

类似化合物1的合成，化合物69-76可由原料I-3b分别与III-3e，IV-4a，VI-3a，VI-3b，VI-3j VII-2a，VII-2f，2-叠氮基乙醇反应得到。

表14

实施例105-108

类似化合物1的合成，化合物77-80可由原料I-3d分别与III-3e，IV-3a，VI-3a，VI-3b反应得到。

表15

实施例109-112

类似化合物1的合成，化合物81-84可由原料I-3g分别与III-3e，IV-3a，VI-3a，VI-3b反应得到。

表16

实施例113化合物盐的制备

化合物1(5.58g，10mmol)溶于乙酸乙酯(160mL)和甲醇(40mL)的混合溶剂中，加热全溶后，滴加甲磺酸(0.96g，10mmol)，加完，减压蒸干溶剂，残留物用无水乙醇(100mL)加热悬浮0.5小时，冷却至室温后，过滤，固体用少量无水乙醇洗，收集固体，真空干燥得到化合物1的甲磺酸盐(淡黄色固体5.98g，产率91％)。熔点：208-209℃，液相纯度：99.602％。

实施例114药物组合物

按常规方法，将上述药物组合物的各组分混合均匀后，装入普通明胶胶囊，得到1000颗胶囊。

按类似方法，制得含化合物25的胶囊。

实施例115：胶囊剂的制备

按类似方法，制得含化合物25的胶囊。

试验实施例

1.肿瘤抑制活性(IC₅₀)

把对数生长期的非小细胞肺癌A549细胞和人乳腺癌SKBR3细胞消化后，吹打成单细胞悬液，分别接种于96孔培养板；每孔5×10³个细胞，每孔加入培养基100μL，37℃、5％CO₂培养箱中培养过夜。待细胞贴壁后，分别加入高、中、低三个剂量的受试化合物和拉帕替尼，配置三种不同浓度的样品，以空白组为阴性对照组，以拉帕替尼为阳性对照组，在培养箱中再培养72h。然后，每孔加入20μL质量浓度为5mg/mL的MTT液，连续培养4h。吸去上清液，每孔加入100μL二甲亚砜，将培养板置于微孔板振荡器上振荡10min，使结晶物溶解。在570nm波长处用酶标仪测吸光度A值，计算抑制率；按Bliss法计算IC₅₀。试验结果见下表17。

表17部分化合物对非小细胞肺癌A549细胞和人乳腺癌SKBR3细胞的抑制活性

由上表中的数据可以看出，该本发明化合物均具有比对照药拉帕替尼更强的抗肿瘤活性。

2.体内抗肿瘤活性

A549肺癌细胞用含10％胎牛血清的1640于37℃、5％CO₂培养箱中常规培养，传代后，待细胞达到所需量时，消化收集细胞。将3×10⁶个A549人肺癌细胞注射入每只裸小鼠左侧腋下，待肿瘤生长至100～200mm³后，将动物随机分组开始给药。从30只预先接种A549裸小鼠中选择肿瘤生长较一致的21只裸小鼠随机分成3组，分别为1)溶剂对照组，7只；2)化合物1100mg/kg组，7只；4)拉帕替尼100mg/kg组，7只。溶剂对照组每天灌胃CMCNa溶剂；化合物1100mg/kg组每天灌胃10mg/mL的化合物溶液0.1mL/10g；拉帕替尼100mg/kg组每天灌胃10mg/mL的拉帕替尼溶液0.1mL/10g。每周一、三、五称重并测定肿瘤体积，于给药第24天处死裸小鼠，称体重，测定瘤块体积，计算相对肿瘤体积(RTV)、相对肿瘤增值率(T/C)和肿瘤抑制百分率，做统计学检测。试验结果见下表18。

表18.化合物1对人肺癌A549裸小鼠移植瘤的实验治疗作用

与对照相比^*：P＜0.05；^**：P＜0.01；^***：P＜0.001

d1：分笼给药时间。RTV：相对肿瘤体积，计算公式为：RTV＝V_t/V₀.

T/C(％)＝T_RTV/C_RTV×100.T_RTV：为治疗组RTV；C_RTV：为阴性对照组RTV.

疗效评价标准：T/C(％)＞60为无效；T/C(％)≤60，并经统计学处理P＜0.05为有效.

由上表可以看出化合物1具有比对照药拉帕替尼更强的体内抗肿瘤活性，显著优于空白对照组。

3.药代动力学研究

化合物1进行了大鼠体内药代动力学研究。

化合物1采用灌胃和静注两种给药方式，给药剂量均为15mg/kg，每组健康SD大鼠4只，雌雄各半。给药容积均为10ml/kg，其中灌胃以0.5％CMC-Na配制，静注以DMSO、吐温80和生理盐水配制。给药前禁食12h，自由饮水，于给药后5min，15min，0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，7.0，9.0，24和48h 经大鼠眼球后静脉丛取静脉血0.3mL，置肝素化试管中，3500rpm离心10min，分离血浆，-20℃保存待测。以液相色谱-串联质谱法测定血浆中化合物1的浓度，根据血浆浓度-时间曲线求出相应的药代动力学参数。见下表19。

表19化合物1的主要药代动力学参数

由上表数据可以看出，本发明化合物1具有比对照药拉帕替尼(现有技术)更为优异的药代动力学性质。本发明化合物1的大鼠口服生物利用度为62.7％，而拉帕替尼为24.0％，因此，本发明化合物有可能成为更好的临床抗肿瘤药物。

总之，该系列化合物具有比对照药拉帕替尼更强的抗肿瘤活性和更优异的药代动力学性质，同时，化合物具有结构新颖，合成工艺简单等优点。

在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

Claims

1.一种式(I)所示的化合物，或其药学上可接受的无机或有机盐：

式中：

X为O或者NH；

R¹可以选自下列结构单元：

R²可以选自下列结构单元：

其中m，n,o单独为1或2，Y为化学键；

R⁹选自C_1-6链状或C_3-7环状烷基，所述的烷基是未取代的或被一至三个独立选自下组的基团所取代：卤素或CN。

2.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，R¹选自下组：(R)-1-苯基乙基，5-氯苯并[d][1,3]双氧杂戊基-4-基，2,4-二氯-5-甲氧基苯基。

3.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，X为O或者NH；和/或

R²选自下组：1-环己基哌啶-4-基，1-甲基哌啶-4-基，1-环戊基哌啶-4-基，1-异丁基哌啶-4-基，1-(戊基-3-基)哌啶-4-基，1-特戊基哌啶-4-基，1-异丙基哌啶-4-基，1-叔丁基哌啶-4-基，1-环丙基哌啶-4-基，1-(戊烷-3-基)氮杂环丁烷-3-基，1-异丙基氮杂环丁烷-3-基，1-环戊基氮杂环丁烷-3-基，1-环丁基氮杂环丁烷-3-基，1-甲基氮杂环丁烷-3-基，1-环丙基氮杂环丁烷-3-基，1-叔丁基氮杂环丁烷-3-基，(R)-1-乙基吡咯烷-3-基。

4.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述的化合物为甲磺酸盐、对甲基苯磺酸盐或盐酸盐。

5.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述化合物是6-(1-(1-叔丁基氮杂环丁烷-3-基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-N-((R)-1-苯基乙基)喹唑啉-4-胺、6-(1-(1-叔丁基氮杂环丁烷-3-基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-N-(5-氯苯并[d][1,3]双氧杂戊基-4-基)喹唑啉-4-胺、或6-(1-(1-叔丁基氮杂环丁烷-3-基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-N-(2,4-二氯-5-甲氧基苯基)喹唑啉-4-胺。

6.一种药物组合物，其特征在于，它含有药理上可接受的赋形剂或载体，以及权利要求1所述的化合物、或其药学上可接受的无机或有机盐。

7.一种权利要求1所述的化合物、或其药学上可接受的无机或有机盐的用途，其特征在于，用于制备酪氨酸激酶抑制剂。

8.一种权利要求1所述的化合物、或其药学上可接受的盐的用途，其特征在于，用于制备抑制酪氨酸激酶活性的药物或用于制备治疗、预防以及缓解与酪氨酸激酶活性过高相关的疾病的药物。

9.如权利要求8所述的用途，其特征在于，所述的与酪氨酸激酶活性过高相关的疾病选自肿瘤。