CN101918358A - 新型维生素d受体活化剂及制造方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及维生素D受体活化剂化合物，包含这类化合物的组合物、使用这类化合物和组合物的方法、制备这类化合物的方法和在这类方法的过程中获得的中间体。

Description

新型维生素D受体活化剂及制造方法
技术领域
本申请涉及新型维生素D化合物和制造这些化合物的方法。这些新型化合物可用作治疗各种疾病的药物，包括但不限于骨病、心血管病、甲状旁腺功能亢进、免疫失调、增殖性疾病、肾病和血栓形成。
发明背景
在超过30年前发现维生素D3是功能活性激素1，25-二羟基维生素D3的前体。后来的研究导致我们目前的理解——由皮肤中的7-脱氢胆甾醇在紫外线暴露后产生维生素D3，被肝中的维生素D3-25-羟化酶改性，随后被肾中的25-羟基维生素D3-1α-羟化酶(CYP27B1)改性以形成活性激素1，25-二羟基维生素D3(骨化三醇，可以以商标名CALCIJEX购自Abbott Laboratories，Abbott Park，IL)。骨化三醇通过结合到维生素D受体(下文缩写为“VDR”或可与“VDR”互换使用)——一种核受体——上来发挥作用。骨化三醇与VDR的结合活化该受体以恢复辅因子，从而形成结合到靶基因的启动子区中的维生素D响应元件上以调节基因转录的络合物。维生素D信号通路概括在图1中。
在过去的三十年间，VDR领域中的大部分研究集中于阐明骨化三醇的生物化学作用，例如在矿物质体内平衡中，其包括甲状旁腺激素、肠内钙和磷酸盐吸收以及骨代谢的调节。如图2中所示，肾中的1α-羟化酶(CYP27B1)负责生成活性代谢物1α，25-二羟基维生素D3(骨化三醇)，其随后结合到VDR上并最终发挥其生理学作用，包括调节肠内钙转运和骨内钙代谢、调节甲状旁腺激素(PTH)合成和通过反馈机制下调CYP27B1。PTH进而刺激CYP27B1，提高钙再吸收和降低肾中的磷酸盐再吸收。通过PTH和骨化三醇的协同功能，维持钙和磷的体内平衡。骨化三醇被CYP24(24-羟化酶)氧化成***的代谢物。在多于30种组织中发现VDR，并可能除其在控制PTH和矿物质体内平衡方面的功能外还具有其它作用。
由于这些研究，已经开发出骨化三醇的许多新类似物，一些具有降低的高钙血效应，且数种类似物，如帕立骨化醇(可以以商标名ZEMPLAR购自Abbott Laboratories，Abbott Park，IL)和度骨化醇(可以以商标名HECTOROL购自Genzyme，Cambridge，MA)目前上市用于治疗慢性肾病(CKD)继发性甲状旁腺功能亢进。此外，一些VDR调节剂上市用于治疗牛皮癣和骨质疏松症。
此外，由于VDR广泛分布在全身的器官和组织中，其可能牵涉许多病状。许多临床前研究的结果表明，VDR调节剂可能有益于治疗各种疾病，包括心血管病(CVD)、免疫失调、肿瘤相关的血栓形成等。
特别地，若干条证据支持下述观点，即VDR在人体内的心血管生理学、免疫***和其它生物生理***的调节中起到重要作用。但是，临床前数据已表明，至少一些维生素D受体活化剂(下文缩写为“VDRA”或可与“VDRA”互换使用)和/或维生素D类似物，尤其是在较高剂量下，可能造成高钙血症，其与血管钙化、心肌梗塞、心力衰竭、心肌病和脑血管意外联系在一起。因此，医疗团体不赞成使用这些化合物作为心血管病的疗法，而是推荐仅有限使用。
类似地，尽管一些VDRA和/或维生素D类似物目前用于治疗牛皮癣——一种免疫失调，但由于对高钙血副作用的担忧，它们的使用有限。
最近的数据比较了进行血液透析和用骨化三醇或帕立骨化醇治疗的慢性肾病患者的存活(Teng，M.等人.N.Engl.J.Med.，2003，349，446-456)。使用帕立骨化醇的患者与使用骨化三醇的相比，有显著的存活优势。尽管帕立骨化醇治疗的患者中钙和磷水平在较小程度上提高，但该研究没有鉴别帕立骨化醇的提高的存活优势是否归因于特异性维生素D疗法的矿物质失衡或效应的改善。另外，存活率与维生素D受体活化剂剂量没有联系并且与基线血清钙、磷或甲状旁腺激素水平无关，表明较低发病率的原因并非严格依赖于这些疾病指标水平。实际上，尚未弄清该优势的实际机制。但是，由于心血管病是大多数透析患者的死因，可能通过帕立骨化醇对心血管***的作用提高患者存活率。
其它研究(Salusky，I.B.；Goodman，W.G.Nephrology，Dialysis and Transplantation，2002，17，336-339.)表明，维生素D受体活化剂疗法实际上由于副作用，如血管钙化而使慢性肾病患者的存活率变差。这导致医疗团体限制维生素D受体活化剂疗法的使用。
通过calcimimetics如Cinacalcet(
Figure BPA00001184760800031
Amgen)提供对维生素D受体活化剂疗法的替代疗法。相反地，Cinacalcet通过提高甲状旁腺的钙敏感受体的敏感度来降低甲状旁腺激素水平。但是，该治疗方法有局限性。超敏性和严重的低钙血症都是观察到的禁忌征。需要剂量调整以建立最佳疗法。一些临床医师建议与VDRA共同给药以作为治疗继发性甲状旁腺功能亢进的方法。
药理学维生素D受体活化剂疗法的施用传统上包括将剂量调节至校正甲状旁腺激素和/或血清钙水平的效果。监视过度剂量以防止毒性。因此开发在宽剂量范围内具有有益作用(例如降低慢性肾病中的甲状旁腺激素水平)同时在提高血清钙水平方面具有有限作用，由此基本提高治疗窗的维生素D受体活化剂是有利的。也看似存在可能与改善的心血管健康相关的存活优势。临床前研究确实表现出如心血管指征所示的所需改善。维生素D受体活化剂疗法的这些方面中的改善代表有机会扩展维生素D受体活化剂疗法的使用。
维生素D衍生物是复杂分子，它们的合成能够具有挑战性。例如，用非自然的20S立体化学合成化合物需要C20中心(如维生素D编号***所命名和如式(I)所示)的差向异构方法以及两种所得异构体的分离方法，这通常是色谱法。因此，差向异构和用于区别异构体的化学方法的温和条件有助于这些化合物的合成。
同样地，含2-亚甲基部分的A-环(关于编号，见上文)的所报道的合成法只需要六个步骤，但总收率差，且没有结晶中间体以助于提纯。
此外，A-环部分与C/D环的最终偶联通常以差收率进行；更好的偶联程序会使维生素D衍生物更加可得。
发明概述
本发明涉及维生素D受体活化剂、包含这类化合物的组合物、制备这类化合物的方法和在这类方法的过程中获得的中间体。本发明的一个方面涉及式(I)的化合物
Figure BPA00001184760800041
或其可药用盐或前药，其中
与X相连的碳能够具有R或S构型；
X是-CH2OR1、-CH2OC(O)R2、-CR3R4-(CH2)m-CR5R6-CR7(CH3)2或OR8；
Y1和Y2各自是氢或一起构成亚甲基；
Y3和Y4各自是氢或一起构成亚甲基；
Z1是氟、羟基或羟甲基；
Z2是氟或羟基；
R1是氢、烷基或芳基；
R2是烷基、烷基氨基、烷基羰氧基烷基或羟基烷基；
R3和R4独立地为氢或烷氧基，条件是两者不都是烷氧基；
R5和R6独立地为氢或烷基；
R7是氢、烷氧基或羟基；
R8是-CH2CH2C(CH3)2OH；且
m是1、2或3。
本发明的另一方面涉及包含本发明的化合物的药物组合物。这类组合物能够根据本发明的方法施用，特别是作为治疗或预防与维生素D受体活性相关的病症和失调症的治疗方案的一部分，特别是在哺乳动物中。
本发明的再一方面涉及选择性调节维生素D受体活性的方法。该方法可用于治疗、预防或治疗和预防哺乳动物中的与维生素D受体活性相关的病症和失调症。更特别地，该方法可用于与肾病相关的病症和失调症、与慢性肾病相关联的继发性甲状旁腺功能亢进、骨质疏松症、骨软化症、骨营养不良、血栓形成、肾素-血管紧张素***、心肌肥大、高血压、自体免疫失调、免疫抑制、移植排斥、关节炎、多发性硬化、牛皮癣、炎性肠病、1型糖尿病或全身性红斑狼疮、结肠癌、***癌、乳癌、白血病或卡波西肉瘤。
本文进一步描述该化合物、包含该化合物的组合物、使用该化合物的方法和制备该化合物的方法，以及在这类方法的过程中获得的中间体。
附图简述
图1示意性显示人体中的维生素D信号通路。
图2示意性显示维生素D在矿物质体内平衡中的作用。
图3示意性显示确定在本发明的化合物上进行以评估生物活性的各种体外和/或体内检验的流程图。
发明详述
术语定义
本说明书和所附权利要求中使用的下列术语具有下列含义：
本文所用的术语“链烯基”是指含有2至10个碳并含有至少一个通过除去两个氢而形成的碳-碳双键的直链或支链烃。链烯基的代表性实例包括，但不限于，乙烯基、2-丙烯基、2-甲基-2-丙烯基、3-丁烯基、4-戊烯基、5-己烯基、2-庚烯基、2-甲基-1-庚烯基和3-癸烯基。
术语“亚烯基”是指衍生自含至少一个双键的具有2至10个碳原子的直链或支链烃的二价基团。亚烯基的代表性实例包括，但不限于，-CH＝CH-、-CH＝CH2CH2-和-CH＝C(CH3)CH2-。
本文所用的术语“链烯氧基”是指经由氧原子附加到母体分子部分上的如本文定义的链烯基。链烯氧基的代表性实例包括，但不限于，烯丙氧基、2-丁烯氧基和3-丁烯氧基。
本文所用的术语“烷氧基”是指经由氧原子附加到母体分子部分上的如本文定义的烷基。烷氧基的代表性实例包括，但不限于，甲氧基、乙氧基、丙氧基、2-丙氧基、丁氧基、叔丁氧基、戊氧基和己氧基。
本文所用的术语“烷氧基烷氧基”是指经由如本文定义的另一烷氧基附加到母体分子部分上的如本文定义的烷氧基。烷氧基烷氧基的代表性实例包括，但不限于，叔丁氧基甲氧基、2-乙氧基乙氧基、2-甲氧基乙氧基和甲氧基甲氧基。
本文所用的术语“烷氧基烷氧基烷基”是指经由如本文定义的烷基附加到母体分子部分上的如本文定义的烷氧基烷氧基。烷氧基烷氧基烷基的代表性实例包括，但不限于，叔丁氧基甲氧基甲基、乙氧基甲氧基甲基、(2-甲氧基乙氧基)甲基和2-(2-甲氧基乙氧基)乙基。
本文所用的术语“烷氧基烷基”是指经由如本文定义的烷基附加到母体分子部分上的如本文定义的烷氧基。烷氧基烷基的代表性实例包括，但不限于，叔丁氧基甲基、2-乙氧基乙基、2-甲氧基乙基和甲氧基甲基。
本文所用的术语“烷氧基羰基”是指经由如本文定义的羰基附加到母体分子部分上的如本文定义的烷氧基。烷氧基羰基的代表性实例包括，但不限于，甲氧基羰基、乙氧基羰基和叔丁氧基羰基。
本文所用的术语“烷氧基羰基烷基”是指经由如本文定义的烷基附加到母体分子部分上的如本文定义的烷氧基羰基。烷氧基羰基烷基的代表性实例包括，但不限于，3-甲氧基羰基丙基、4-乙氧基羰基丁基和2-叔丁氧基羰基乙基。
本文所用的术语“烷氧基磺酰基”是指经由如本文定义的磺酰基附加到母体分子部分上的如本文定义的烷氧基。烷氧基磺酰基的代表性实例包括，但不限于，甲氧基磺酰基、乙氧基磺酰基和丙氧基磺酰基。
本文所用的术语“烷基”是指含有1至10个碳原子的直链或支链烃。烷基的代表性实例包括，但不限于，甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基、正己基、3-甲基己基、2，2-二甲基戊基、2，3-二甲基戊基、正庚基、正辛基、正壬基和正癸基。
本文所用的术语“烷基氨基”是指经由-N(H)-基团附加到母体分子部分上的如本文定义的烷基。烷基氨基的代表性实例包括，但不限于甲基氨基、环丙基氨基和叔丁基氨基。
本文所用的术语“烷基羰基”是指经由如本文定义的羰基附加到母体分子部分上的如本文定义的烷基。烷基羰基的代表性实例包括，但不限于，乙酰基、1-氧代丙基、2，2-二甲基-1-氧代丙基、1-氧代丁基和1-氧代戊基。
本文所用的术语“烷基羰基烷基”是指经由如本文定义的烷基附加到母体分子部分上的如本文定义的烷基羰基。烷基羰基烷基的代表性实例包括，但不限于，2-氧代丙基、3，3-二甲基-2-氧代丙基、3-氧代丁基和3-氧代戊基。
本文所用的术语“烷基羰氧基”是指经由氧原子附加到母体分子部分上的如本文定义的烷基羰基。烷基羰氧基的代表性实例包括，但不限于，乙酰氧基、乙基羰氧基和叔丁基羰氧基。
本文所用的术语“烷基羰氧基烷基”是指经由如本文定义的烷基附加到母体分子部分上的如本文定义的烷基羰氧基。烷基羰氧基烷基的代表性实例包括，但不限于，乙酰氧基甲基、乙酰氧基乙基和新戊酰氧基甲基。
术语“亚烷基”具有1至10个碳原子的直链或支链烃的二价基团。亚烷基的代表性实例包括，但不限于，-CH2-、-CH(CH3)-、-C(CH3)2-、-CH2CH2-、-CH2CH2CH2-、-CH2CH2CH2CH2-和-CH2CH(CH3)CH2-。
本文所用的术语“烷基亚磺酰基”是指经由如本文定义的亚磺酰基附加到母体分子部分上的如本文定义的烷基。烷基亚磺酰基的代表性实例包括，但不限于，甲基亚磺酰基和乙基亚磺酰基。
本文所用的术语“烷基亚磺酰基烷基”是指经由如本文定义的烷基附加到母体分子部分上的如本文定义的烷基亚磺酰基。烷基亚磺酰基烷基的代表性实例包括，但不限于，甲基亚磺酰基甲基和乙基亚磺酰基甲基。
本文所用的术语“烷基磺酰基”是指经由如本文定义的磺酰基附加到母体分子部分上的如本文定义的烷基。烷基磺酰基的代表性实例包括，但不限于，甲基磺酰基和乙基磺酰基。
本文所用的术语“烷基磺酰基烷基”是指经由如本文定义的烷基附加到母体分子部分上的如本文定义的烷基磺酰基。烷基磺酰基烷基的代表性实例包括，但不限于，甲基磺酰基甲基和乙基磺酰基甲基。
本文所用的术语“烷硫基”是指经由硫原子附加到母体分子部分上的如本文定义的烷基。烷硫基的代表性实例包括，但不限于，甲硫基、乙硫基、叔丁硫基和己硫基。
本文所用的术语“烷硫基烷基”是指经由如本文定义的烷基附加到母体分子部分上的如本文定义的烷硫基基团。烷硫基烷基的代表性实例包括，但不限于，甲硫基甲基和2-(乙硫基)乙基。
本文所用的术语“炔基”是指含有2至10个碳原子并含有至少一个碳-碳三键的直链或支链烃基。炔基的代表性实例包括，但不限于，乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、3-丁炔基、2-戊炔基和1-丁炔基。
术语“亚炔基”是指衍生自含有至少一个三键的具有2至10个碳原子的直链或支链烃的二价基团。亚炔基的代表性实例包括，但不限于，-C≡C-、-CH2C≡C-、-CH(CH3)CH2C≡C-、-C≡CCH2-和-C≡CCH(CH3)CH2-。
本文所用的术语“炔氧基”是指经由氧原子附加到母体分子部分上的如本文定义的炔基。炔氧基的代表性实例包括，但不限于，2-丙炔氧基和2-丁炔氧基。
本文所用的术语“芳基”是指苯基、双环芳基或三环芳基。该双环芳基是萘基、稠合到环烷基上的苯基或稠合到环烯基上的苯基。双环芳基的代表性实例包括，但不限于，二氢化茚基、茚基、萘基、二氢化萘基和四氢化萘基。该三环芳基是蒽或菲，或稠合到环烷基上的双环芳基或稠合到环烯基上的双环芳基或稠合到苯基上的双环芳基。三环芳基环的代表性实例包括，但不限于，薁基、二氢化蒽基、芴基和四氢化菲基。
本发明的芳基能够被1、2、3、4或5个独立地选自链烯基、烷氧基、烷氧基烷氧基、烷氧基烷氧基烷基、烷氧基烷基、烷氧基羰基、烷氧基羰基烷基、烷基、烷基羰基、烷基羰基烷基、烷基羰氧基、烷基亚磺酰基、烷基亚磺酰基烷基、烷基磺酰基、烷基磺酰基烷基、烷硫基、烷硫基烷基、炔基、羧基、羧基烷基、氰基、氰基烷基、甲酰基、甲酰基烷基、卤素、卤代烷基、羟基、羟基烷基、巯基、硝基、-NZ7Z8和(NZ9Z10)羰基的取代基取代。
本文所用的术语“芳基烷氧基”是指经由如本文定义的烷氧基附加到母体分子部分上的如本文定义的芳基。芳基烷氧基的代表性实例包括，但不限于，2-苯基乙氧基、3-萘-2-基丙氧基和5-苯基戊氧基。
本文所用的术语“芳基烷氧基羰基”是指经由如本文定义的羰基附加到母体分子部分上的如本文定义的芳基烷氧基。芳基烷氧基羰基的代表性实例包括，但不限于，苄氧基羰基和萘-2-基甲氧基羰基。
本文所用的术语“芳基烷基”是指经由如本文定义的烷基附加到母体分子部分上的如本文定义的芳基。芳基烷基的代表性实例包括，但不限于，苄基、2-苯基乙基、3-苯基丙基和2-萘-2-基乙基。
本文所用的术语“芳基烷硫基”是指经由硫原子附加到母体分子部分上的如本文定义的芳基烷基。芳基烷硫基的代表性实例包括，但不限于，2-苯基乙硫基、3-萘-2-基丙硫基和5-苯基戊硫基。
本文所用的术语“芳基羰基”是指经由如本文定义的羰基附加到母体分子部分上的如本文定义的芳基。芳基羰基的代表性实例包括，但不限于，苯甲酰基和萘甲酰基。
本文所用的术语“芳氧基”是指经由氧原子附加到母体分子部分上的如本文定义的芳基。芳氧基的代表性实例包括，但不限于，苯氧基、萘氧基、3-溴苯氧基、4-氯苯氧基、4-甲基苯氧基和3，5-二甲氧基苯氧基。
本文所用的术语“芳氧基烷基”是指经由如本文定义的烷基附加到母体分子部分上的如本文定义的芳氧基。芳氧基烷基的代表性实例包括，但不限于，2-苯氧基乙基、3-萘-2-氧基丙基和3-溴苯氧基甲基。
本文所用的术语“芳硫基”是指经由硫原子附加到母体分子部分上的如本文定义的芳基。芳硫基的代表性实例包括，但不限于，苯硫基(phenylthio)和2-萘硫基。
本文所用的术语“芳硫基烷基”是指经由如本文定义的烷基附加到母体分子部分上的如本文定义的芳硫基基团。芳硫基烷基的代表性实例包括，但不限于，苯硫基甲基、2-萘-2-基硫代乙基和5-苯硫基甲基。
本文所用的术语“叠氮基”是指-N3基团。
本文所用的术语“羰基”是指-C(O)-基团。
本文所用的术语“羧基”是指-CO2H基团。
本文所用的术语“羧基烷基”是指经由如本文定义的烷基附加到母体分子部分上的如本文定义的羧基。羧基烷基的代表性实例包括，但不限于，羧基甲基、2-羧基乙基和3-羧基丙基。
本文所用的术语“氰基”是指-CN基团。
本文所用的术语“氰基烷基”是指经由如本文定义的烷基附加到母体分子部分上的如本文定义的氰基。氰基烷基的代表性实例包括，但不限于，氰基甲基、2-氰基乙基和3-氰基丙基。
本文所用的术语“环烯基”是指含有3至8个碳并含有至少一个通过除去两个氢而形成的碳-碳双键的环烃。环烯基的代表性实例包括，但不限于，2-环己烯-1-基、3-环己烯-1-基、2，4-环己二烯-1-基和3-环戊烯-1-基。
本文所用的术语“环烷基”是指单环、双环或三环体系。单环体系以含有3至8个碳原子的饱和环烃基团为例。单环体系的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。双环体系以桥连的单环体系为例，其中该单环的两个相邻或非相邻碳原子通过具有1至3个另外的碳原子的亚烷基桥连接。双环体系的代表性实例包括，但不限于，双环[3.1.1]庚烷、双环[2.2.1]庚烷、双环[2.2.2]辛烷、双环[3.2.2]壬烷、双环[3.3.1]壬烷和双环[4.2.1]壬烷。三环体系以其中双环的两个非相邻碳原子通过键结或具有1至3个碳原子的亚烷基桥连接的双环体系为例。三环体系的代表性实例包括，但不限于，三环[3.3.1.03，7]壬烷和三环[3.3.1.13，7]癸烷(金刚烷)。
本发明的环烷基任选被1、2、3、4或5个选自链烯基、烷氧基、烷氧基烷氧基、烷氧基烷基、烷氧基羰基、烷氧基磺酰基、烷基、烷基羰基、烷基羰氧基、烷基磺酰基、烷硫基、烷硫基烷基、炔基、羧基、氰基、甲酰基、卤代烷氧基、卤代烷基、卤素、羟基、羟基烷基、巯基、氧代、-NZ7Z8和(NZ9Z10)羰基的取代基取代。
本文所用的术语“环烷基烷基”是指经由如本文定义的烷基附加到母体分子部分上的如本文定义的环烷基。环烷基烷基的代表性实例包括，但不限于，环丙基甲基、2-环丁基乙基、环戊基甲基、环己基甲基和4-环庚基丁基。
本文所用的术语“环烷基羰基”是指经由如本文定义的羰基附加到母体分子部分上的如本文定义的环烷基。环烷基羰基的代表性实例包括，但不限于，环丙基羰基、2-环丁基羰基和环己基羰基。
本文所用的术语“环烷氧基”是指经由如本文定义的氧原子附加到母体分子部分上的如本文定义的环烷基。环烷氧基的代表性实例包括，但不限于，环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基、环己氧基、环庚氧基和环辛氧基。
本文所用的术语“环烷硫基”是指经由如本文定义的硫原子附加到母体分子部分上的如本文定义的环烷基。环烷硫基的代表性实例包括，但不限于，环丙硫基、环丁硫基、环戊硫基、环己硫基、环庚硫基和环辛硫基。
本文所用的术语“亚乙二氧基”是指-O(CH2)2O-基团，其中该亚乙二氧基的氧原子经由一个碳原子连接到母体分子部分上，从而形成5元环，或该亚乙二氧基的氧原子经由两个相邻的碳原子连接到母体分子部分上，从而形成6元环。
本文所用的术语“甲酰基”是指-C(O)H基团。
本文所用的术语“甲酰基烷基”是指经由如本文定义的烷基附加到母体分子部分上的如本文定义的甲酰基。甲酰基烷基的代表性实例包括，但不限于，甲酰基甲基和2-甲酰基乙基。
本文所用的术语“卤代”或“卤素”是指-Cl、-Br、-I或-F。
本文所用的术语“卤代烷氧基”是指经由如本文定义的烷氧基附加到母体分子部分上的至少一个如本文定义的卤素。卤代烷氧基的代表性实例包括，但不限于，氯甲氧基、2-氯乙氧基、三氟甲氧基和五氟乙氧基。
本文所用的术语“卤代烷基”是指经由如本文定义的烷基附加到母体分子部分上的至少一个如本文定义的卤素。卤代烷基的代表性实例包括，但不限于，氯甲基、2-氟乙基、三氟甲基、五氟乙基和2-氯-3-氟戊基。
本文所用的术语“杂芳基”是指单环杂芳基或双环杂芳基。单环杂芳基是含有至少一个选自氮、氧和硫的杂原子的5或6元环。5元环含有两个双键，且6元环含有三个双键。5或6元杂芳基经由杂芳基内所含的任何碳原子或任何可取代的氮原子连接到母体分子部分上，只要保持适当化合价。单环杂芳基的代表性实例包括，但不限于，呋喃基、咪唑基、异噁唑基、异噻唑基、噁二唑基、噁唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吡唑基、吡咯基、四唑基、噻二唑基、噻唑基、噻吩基、***基和三嗪基。该双环杂芳基由稠合到苯基上的单环杂芳基、或稠合到环烷基上的单环杂芳基、或稠合到环烯基上的单环杂芳基、或稠合到单环杂芳基上的单环杂芳基构成。该双环杂芳基经由该双环杂芳基内所含的任何碳原子或任何可取代的氮原子连接到母体分子部分上，只要保持适当化合价。双环杂芳基的代表性实例包括，但不限于，吖吲哚基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并噁二唑基、苯并异噁唑、苯并异噻唑、苯并噁唑、1，3-苯并噻唑基、苯并苯硫基(benzothiophenyl)、噌啉基、呋喃并吡啶、吲哚基、吲唑基、异苯并呋喃、异吲哚基、异喹啉基、1，5-二氮杂萘基、噁唑并吡啶、喹啉基、喹喔啉基和噻吩并吡啶基。
本发明的杂芳基任选被1、2、3或4个独立地选自链烯基、烷氧基、烷氧基烷氧基、烷氧基烷基、烷氧基羰基、烷氧基羰基烷基、烷氧基磺酰基、烷基、烷基羰基、烷基羰基烷基、烷基羰氧基、烷硫基、烷硫基烷基、炔基、羧基、羧基烷基、氰基、氰基烷基、甲酰基、卤代烷氧基、卤代烷基、卤素、羟基、羟基烷基、巯基、硝基、-NZ7Z8和(NZ9Z10)羰基的取代基取代。被羟基取代的本发明的杂芳基可作为互变异构体存在。本发明的杂芳基涵盖所有互变异构体，包括非芳族互变异构体。
本文所用的术语“杂芳基烷氧基”是指经由如本文定义的烷氧基附加到母体分子部分上的如本文定义的杂芳基。杂芳基烷氧基的代表性实例包括，但不限于，呋喃-3-基甲氧基、1H-咪唑-2-基甲氧基、1H-咪唑-4-基甲氧基、1-(吡啶-4-基)乙氧基、吡啶-3-基甲氧基、6-氯吡啶-3-基甲氧基、吡啶-4-基甲氧基、(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲氧基、(6-(氰基)吡啶-3-基)甲氧基、(2-(氰基)吡啶-4-基)甲氧基、(5-(氰基)吡啶-2-基)甲氧基、(2-(氯)吡啶-4-基)甲氧基、嘧啶-5-基甲氧基、2-(嘧啶-2-基)丙氧基、噻吩-2-基甲氧基和噻吩-3-基甲氧基。
本文所用的术语“杂芳基烷基”是指经由如本文定义的烷基附加到母体分子部分上的如本文定义的杂芳基。杂芳基烷基的代表性实例包括，但不限于，呋喃-3-基甲基、1H-咪唑-2-基甲基、1H-咪唑-4-基甲基、1-(吡啶-4-基)乙基、吡啶-3-基甲基、6-氯吡啶-3-基甲基、吡啶-4-基甲基、(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基、(6-(氰基)吡啶-3-基)甲基、(2-(氰基)吡啶-4-基)甲基、(5-(氰基)吡啶-2-基)甲基、(2-(氯)吡啶-4-基)甲基、嘧啶-5-基甲基、2-(嘧啶-2-基)丙基、噻吩-2-基甲基和噻吩-3-基甲基。
本文所用的术语“杂芳基烷基羰基”是指经由如本文定义的羰基附加到母体分子部分上的如本文定义的杂芳基烷基。
本文所用的术语“杂芳基烷硫基”是指经由硫原子附加到母体分子部分上的如本文定义的杂芳基烷基。杂芳基烷硫基的代表性实例包括，但不限于，呋喃-3-基甲硫基、1H-咪唑-2-基甲硫基、1H-咪唑-4-基甲硫基、吡啶-3-基甲硫基、6-氯吡啶-3-基甲硫基、吡啶-4-基甲硫基、(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲硫基、(6-(氰基)吡啶-3-基)甲硫基、(2-(氰基)吡啶-4-基)甲硫基、(5-(氰基)吡啶-2-基)甲硫基、(2-(氯)吡啶-4-基)甲硫基、嘧啶-5-基甲硫基、2-(嘧啶-2-基)丙硫基、噻吩-2-基甲硫基和噻吩-3-基甲硫基。
本文所用的术语“杂芳基羰基”是指经由如本文定义的羰基附加到母体分子部分上的如本文定义的杂芳基。杂芳基羰基的代表性实例包括，但不限于，呋喃-3-基羰基、1H-咪唑-2-基羰基、1H-咪唑-4-基羰基、吡啶-3-基羰基、6-氯吡啶-3-基羰基、吡啶-4-基羰基、(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)羰基、(6-(氰基)吡啶-3-基)羰基、(2-(氰基)吡啶-4-基)羰基、(5-(氰基)吡啶-2-基)羰基、(2-(氯)吡啶-4-基)羰基、嘧啶-5-基羰基、嘧啶-2-基羰基、噻吩-2-基羰基和噻吩-3-基羰基。
本文所用的术语“杂芳氧基”是指经由氧原子附加到母体分子部分上的如本文定义的杂芳基。杂芳氧基的代表性实例包括，但不限于，呋喃-3-基氧基、1H-咪唑-2-基氧基、1H-咪唑-4-基氧基、吡啶-3-基氧基、6-氯吡啶-3-基氧基、吡啶-4-基氧基、(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)氧基、(6-(氰基)吡啶-3-基)氧基、(2-(氰基)吡啶-4-基)氧基、(5-(氰基)吡啶-2-基)氧基、(2-(氯)吡啶-4-基)氧基、嘧啶-5-基氧基、嘧啶-2-基氧基、噻吩-2-基氧基和噻吩-3-基氧基。
本文所用的术语“杂芳氧基烷基”是指经由如本文定义的烷基附加到母体分子部分上的如本文定义的杂芳氧基。杂芳氧基烷基的代表性实例包括，但不限于，吡啶-3-基氧基甲基和2-喹啉-3-基氧基乙基。
本文所用的术语“杂芳硫基”是指经由硫原子附加到母体分子部分上的如本文定义的杂芳基。杂芳硫基的代表性实例包括，但不限于，吡啶-3-基硫基和喹啉-3-基硫基。
本文所用的术语“杂芳硫基烷基”是指经由如本文定义的烷基附加到母体分子部分上的如本文定义的杂芳硫基。杂芳硫基烷基的代表性实例包括，但不限于，吡啶-3-基硫代甲基和2-喹啉-3-基硫代乙基。
本文所用的术语“杂环”或“杂环状”是指单环杂环、双环杂环或三环杂环。单环杂环是含有至少一个独立地选自O、N和S的杂原子的3、4、5、6或7元环。3或4元环含有1个选自O、N和S的杂原子。5元环含有0或1个双键和1、2或3个选自O、N和S的杂原子。6或7元环含有0、1或2个双键和1、2或3个选自O、N和S的杂原子。该单环杂环经由该单环杂环内所含的任何碳原子或任何氮原子连接到母体分子部分上。单环杂环的代表性实例包括，但不限于，氮杂环丁烷基、氮杂环庚烷基(azepanyl)、吖丙啶基、氮杂环庚烷基(diazepanyl)、1，3-二氧杂环己烷基、1，3-二氧戊环基、1，3-二硫戊环基、1，3-二噻烷基、咪唑啉基、咪唑烷基、异噻唑啉基、异噻唑烷基、异噁唑啉基、异噁唑烷基、吗啉基、噁二唑啉基、噁二唑烷基、噁唑啉基、噁唑烷基、哌嗪基、哌啶基、吡喃基、吡唑啉基、吡唑烷基、吡咯啉基、吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、噻二唑啉基、噻二唑烷基、噻唑啉基、噻唑烷基、硫代吗啉基、1，1-二氧(dioxido)硫代吗啉基(硫代吗啉砜)、硫代吡喃基和trithianyl。该双环杂环是稠合到苯基上的5或6元单环杂环，或稠合到环烷基上的5或6元单环杂环，或稠合到环烯基上的5或6元单环杂环，或稠合到单环杂环上的5或6元单环杂环。该双环杂环经由该双环杂环内所含的任何碳原子或任何氮原子连接到母体分子部分上。双环杂环的代表性实例包括，但不限于，1，3-苯并间二氧杂环戊烯基、1，3-苯并dithiolyl、2，3-二氢-1，4-苯并二氧杂环己烯基、苯并间二氧杂环戊烯基、2，3-二氢-1-苯并呋喃基、2，3-二氢-1-苯并噻吩基、苯并吡喃基和1，2，3，4-四氢喹啉基。该三环杂环是稠合到苯基上的双环杂环、或稠合到环烷基上的双环杂环、或稠合到环烯基上的双环杂环、或稠合到单环杂环上的双环杂环。该三环杂环经由该三环杂环内所含的任何碳原子或任何氮原子连接到母体分子部分上。三环杂环的代表性实例包括，但不限于，2，3，4，4a，9，9a-六氢-1H-咔唑基、5a，6，7，8，9，9a-六氢二苯并[b，d]呋喃基和5a，6，7，8，9，9a-六氢二苯并[b，d]噻吩基。
本发明的杂环任选被1、2、3或4个独立地选自链烯基、烷氧基、烷氧基烷氧基、烷氧基烷基、烷氧基羰基、烷氧基羰基烷基、烷氧基磺酰基、烷基、烷基羰基、烷基羰基烷基、烷基羰氧基、烷硫基、烷硫基烷基、炔基、羧基、羧基烷基、氰基、氰基烷基、甲酰基、卤代烷氧基、卤代烷基、卤素、羟基、羟基烷基、巯基、氧代、-NZ7Z8和(NZ9Z10)羰基的取代基取代。
本文所用的术语“杂环烷氧基”是指经由如本文定义的烷氧基附加到母体分子部分上的如本文定义的杂环基团。杂环烷氧基的代表性实例包括，但不限于，2-吡啶-3-基乙氧基、3-喹啉-3-基丙氧基和5-吡啶-4-基戊氧基。
本文所用的术语“杂环烷基”是指经由如本文定义的烷基附加到母体分子部分上的如本文定义的杂环。杂环烷基的代表性实例包括，但不限于，哌啶-4-基甲基、哌嗪-1-基甲基、3-甲基-1-吡咯烷-1-基丁基、(1R)-3-甲基-1-吡咯烷-1-基丁基、(1S)-3-甲基-1-吡咯烷-1-基丁基。
本文所用的术语“杂环烷基羰基”是指经由如本文定义的羰基附加到母体分子部分上的如本文定义的杂环烷基。杂环烷基羰基的代表性实例包括，但不限于，哌啶-4-基甲基羰基、哌嗪-1-基甲基羰基、3-甲基-1-吡咯烷-1-基丁基羰基、(1R)-3-甲基-1-吡咯烷-1-基丁基羰基、(1S)-3-甲基-1-吡咯烷-1-基丁基羰基。
本文所用的术语“杂环烷硫基”是指经由硫原子附加到母体分子部分上的杂环烷基。杂环烷硫基的代表性实例包括，但不限于，2-吡啶-3-基乙硫基、3-喹啉-3-基丙硫基和5-吡啶-4-基戊硫基。
本文所用的术语“杂环羰基”是指经由如本文定义的羰基附加到母体分子部分上的杂环。
本文所用的术语“杂环羰基烷基”是指经由如本文定义的烷基附加到母体分子部分上的杂环羰基。
本文所用的术语“杂环氧基”是指经由氧原子附加到母体分子部分上的如本文定义的杂环基团。杂环氧基的代表性实例包括，但不限于，吡啶-3-基氧基和喹啉-3-基氧基。
本文所用的术语“杂环氧基烷基”是指经由如本文定义的烷基附加到母体分子部分上的杂环氧基。杂环氧基烷基的代表性实例包括，但不限于，吡啶-3-基氧基甲基和2-喹啉-3-基氧基乙基。
本文所用的术语“杂环硫基”是指经由硫原子附加到母体分子部分上的如本文定义的杂环基团。杂环硫基的代表性实例包括，但不限于，吡啶-3-基硫基和喹啉-3-基硫基。
本文所用的术语“杂环硫代烷基”是指经由如本文定义的烷基附加到母体分子部分上的如本文定义的杂环硫基基团。杂环硫代烷基的代表性实例包括，但不限于，吡啶-3-基硫代甲基和2-喹啉-3-基硫代乙基。
本文所用的术语“羟基”是指-OH基团。
本文所用的术语“羟烷基”是指至少一个如本文定义的羟基经由如本文定义的烷基附加到母体分子部分上。羟烷基的代表性实例包括，但不限于，羟甲基、2-羟乙基、3-羟丙基、2，3-二羟基戊基和2-乙基-4-羟庚基。
术语“羟基-保护基”或“O-保护基”是指保护羟基以免在合成程序过程中发生不合意的反应的取代基。羟基-保护基的实例包括，但不限于，取代甲基醚，例如，甲氧基甲基、苄氧基甲基、2-甲氧基乙氧基甲基、2-(三甲基甲硅烷基)-乙氧基甲基、苄基和三苯基甲基；四氢吡喃基醚；取代乙基醚，例如，2，2，2-三氯乙基和叔丁基；甲硅烷基醚，例如，三乙基甲硅烷基、三甲基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基和叔丁基二苯基甲硅烷基；环状缩醛和缩酮，例如，亚甲基缩醛、丙酮化合物和亚苄基缩醛；环状原酸酯，例如，甲氧基亚甲基；环状碳酸酯；和环状硼酸酯。在T.W.Greene和P.G.M.Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，第3版，John Wiley & Sons，New York(1999)中公开了常用的羟基-保护基。
本文所用的术语“低碳链烯基”是如本文定义的链烯基的子集，并且是指含有2至4个碳原子的链烯基。低碳链烯基的实例是乙烯基、丙烯基和丁烯基。
本文所用的术语“低碳烷氧基”是如本文定义的烷氧基的子集，并且是指经由如本文定义的氧原子附加到母体分子部分上的如本文定义的低碳烷基。低碳烷氧基的代表性实例包括，但不限于，甲氧基、乙氧基、丙氧基、2-丙氧基、丁氧基和叔丁氧基。
本文所用的术语“低碳烷基”是如本文定义的烷基的子集，并且是指含有1至4个碳原子的直链或支链烃基。低碳烷基的实例是甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基。
本文所用的术语“低碳烷硫基”是烷硫基的子集，是指经由硫原子附加到母体分子部分上的如本文定义的低碳烷基。低碳烷硫基的代表性实例包括，但不限于，甲硫基、乙硫基和叔丁硫基。
本文所用的术语“低碳炔基”是如本文定义的炔基的子集，并且是指含有2至4个碳原子的炔基。低碳炔基的实例是乙炔基、丙炔基，和丁炔基。
本文所用的术语“低碳卤代烷氧基”是如本文定义的卤代烷氧基的子集，并且是指含有1至4个碳原子的直链或支链卤代烷氧基。低碳卤代烷氧基的代表性实例包括，但不限于，三氟甲氧基、三氯甲氧基、二氯甲氧基、氟甲氧基和五氟乙氧基。
本文所用的术语“低碳卤代烷基”是如本文定义的卤代烷基的子集，并且是指含有1至4个碳原子的直链或支链卤代烷基。低碳卤代烷基的代表性实例包括，但不限于，三氟甲基、三氯甲基、二氯甲基、氟甲基和五氟乙基。
本文所用的术语“巯基”是指-SH基团。
本文所用的术语“巯基烷基”是指经由如本文定义的烷基附加到母体分子部分上的如本文定义的巯基。巯基烷基的代表性实例包括，但不限于，2-巯基乙基和3-巯基丙基。
本文所用的术语“亚甲二氧基”是指-OCH2O-基团，其中该亚甲二氧基的氧原子经由两个相邻的碳原子连接到母体分子部分上。
本文所用的术语“氮保护基”是指用于保护氨基以免在合成程序过程中发生不合意的反应的那些基团。优选的氮保护基是乙酰基、苯甲酰基、苄基、苄氧基羰基(Cbz)、甲酰基、苯基磺酰基、叔丁氧基羰基(Boc)、叔丁基乙酰基、三氟乙酰基和三苯基甲基(trityl)。
本文所用的术语“硝基”是指-NO2基团。
本文所用的术语“NZ7Z8”是指经由氮原子附加到母体分子部分上的两个基团Z7和Z8。Z7和Z8各自独立地选自氢、烷基、烷基羰基、烷氧基羰基、芳基、芳基烷基、甲酰基和(NZ11Z12)羰基。在本发明中的某些情况中，Z7和Z8与和它们相连的氮原子一起形成杂环。NZ7Z8的代表性实例包括，但不限于，氨基、甲基氨基、乙酰基氨基、乙酰基甲基氨基、苯基氨基、苄基氨基、氮杂环丁烷基、吡咯烷基和哌啶基。
本文所用的术语“NZ9Z10”是指经由氮原子附加到母体分子部分上的两个基团Z9和Z10。Z9和Z10各自独立地选自氢、烷基、芳基和芳基烷基。NZ9Z10的代表性实例包括，但不限于，氨基、甲基氨基、苯基氨基和苄基氨基。
本文所用的术语“NZ11Z12”是指经由氮原子附加到母体分子部分上的两个基团Z11和Z12。Z11和Z12各自独立地选自氢、烷基、芳基和芳基烷基。NZ11Z12的代表性实例包括，但不限于，氨基、甲基氨基、苯基氨基和苄基氨基。
本文所用的术语“(NZ9Z10)羰基”是指经由如本文定义的羰基附加到母体分子部分上的如本文定义的NZ9Z10基团。(NZ9Z10)羰基的代表性实例包括，但不限于，氨基羰基、(甲基氨基)羰基、(二甲基氨基)羰基和(乙基甲基氨基)羰基。
本文所用的术语“氧代”是指＝O部分。
本文所用的术语“亚磺酰基”是指-S(O)-基团。
本文所用的术语“磺酰基”是指-SO2-基团。
本文所用的术语“互变异构体”是指质子从化合物的一个原子移向同一化合物的另一原子，其中两种或更多种结构上不同的化合物彼此平衡。
本发明的化合物
本发明的化合物可具有如发明概述中所述的式(I)。
在一个实施方案中，本发明的化合物可具有式(I)，其中X是-CR3R4-(CH2)m-CR5R6-CR7(CH3)2；Y1和Y2各自是氢或一起构成亚甲基；Y3和Y4各自是氢或一起构成亚甲基；Z1是氟、羟基或羟甲基；Z2是氟或羟基；R3和R4独立地为氢或烷氧基；R5和R6独立地为氢或烷基；R7是氢、烷氧基或羟基；且m是1或2。
在另一实施方案中，本发明的化合物可具有式(I)，其中X是-CH2OC(O)R2；Y1和Y2各自是氢；Y3和Y4一起构成亚甲基；Z1是羟基；Z2是羟基；且R2是烷基、烷基氨基、烷基羰氧基烷基或羟烷基。
在另一实施方案中，本发明的化合物能够具有式(I)，其中X是-CH2OR1；Y1和Y2各自是氢；Y3和Y4一起构成亚甲基；Z1是羟基；Z2是羟基；且R1是氢、烷基或芳基。
在另一实施方案中，本发明的化合物可具有式(I)，其中X是-OR8；Y1和Y2各自是氢；Y3和Y4一起构成亚甲基；Z1是羟基；Z2是羟基；且R8是-CH2CH2C(CH3)2OH。
在另一实施方案中，本发明的化合物可具有式(I)，其中X是-OR8；Y1和Y2各自是氢；Y3和Y4一起构成亚甲基；Z1是羟甲基；Z2是羟基；且R8是-CH2CH2C(CH3)2OH。
被视为本发明的一部分的具体实施方案包括，但不限于式(I)的化合物或其盐或前药，例如：
新戊酸(2S)-2-[(1R，3R，7E，17β)-1，3-二羟基-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-(secoestra-5，7-dien-)17-基]丙基酯；
(1R，3R，7E，17β)-17-[(1S)-2-羟基-1-甲基乙基]-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1，3-二醇；
新戊酸(2R)-2-[(1R，3R，7E，17β)-1，3-二羟基-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-17-基]丙基酯；
2，2-二甲基丁酸(2S)-2-[(1R，3R，7E，17β)-1，3-二羟基-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-17-基]丙基酯；
叔丁基氨基甲酸(2S)-2-[(1R，3R，7E，17β)-1，3-二羟基-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-17-基]丙基酯；
2-(乙酰氧基)-2-甲基丙酸(2S)-2-[(1R，3R，7E，17β)-1，3-二羟基-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-17-基]丙基酯；
(1R，3R，7E)-2-亚甲基-17-[(1R，4S)-1，4，5-三甲基己基]-9，10-裂环雌-5，7-二烯-(secoestra-5，7-diene-)1，3-二醇；
(1R，3R，7E，17β)-17-[(1S)-1-(3-羟基-3-甲基丁氧基)乙基]-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1，3-二醇；
(1R，3R，7E)-17-[(1R，4S)-1，4，5-三甲基己基]-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1，3-二醇；
(1S，3R，5Z，7E，24R)-22，25-二甲氧基-9，10-裂环麦角-5，7，10-三烯-(secoergosta-5，7，10-triene-)1，3-二醇；
(1R，3R，7E，17β)-17-[(1S，4R)-2，5-二甲氧基-1，4，5-三甲基己基]-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1，3-二醇；
(1R，3R，7E，17β)-2-亚甲基-17-[(1S)-1-甲基-2-苯氧基乙基]-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1，3-二醇；
(1R，3S，5Z，7E，17β)-3-氟-17-[(1R)-5-羟基-1，5-二甲基己基]-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1-醇；
2-羟基-2-甲基丙酸(2S)-2-[(1R，3R，7E，17β)-1，3-二羟基-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-17-基]丙基酯；
(1R，3R，7E，17β)-17-[(1R，4R)-5-羟基-1，4，5-三甲基己基]-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1，3-二醇；
(1R，3R，5E，7E，17β)-17-[(1R)-5-羟基-1，5-二甲基己基]-3-(羟甲基)-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1-醇；
(1R，3R，5E，7E，17β)-3-(羟甲基)-17-[(1S)-1-(3-羟基-3-甲基丁氧基)乙基]-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1-醇；和
(1R，3S，5E，7E，17β)-3-氟-17-[(1R)-5-羟基-1，5-二甲基己基]-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1-醇。
本发明的化合物可作为立体异构体存在，其中存在不对称或手性中心。这些立体异构体根据手性元素周围的取代基的构型而为“R”或“S”。本文所用的术语“R”和“S”是如IUPAC 1974Recommendations for Section E，Fundamental Stereochemistry，Pure Appl.Chem.，1976，45：13-30中定义的构型。本发明涉及各种立体异构体及其混合物，并特别包括在本发明的范围内。立体异构体包括对映体和非对映体，以及对映体或非对映体的混合物。本发明的化合物的各立体异构体可以由含有不对称或手性中心的市售原材料合成制备或通过制备外消旋混合物随后如本领域普通技术人员公知的那样拆分来制备。这些拆分方法的实例是：(1)如Furniss、Hannaford、Smith和Tatchell，″Vogel′s Textbook of Practical Organic Chemistry″，第5版(1989)，Longman Scientific & Technical，Essex CM202JE，England中所述，使对映体混合物附着到手性助剂上，通过重结晶或色谱法分离所得非对映体的混合物，和任选从该助剂上释放旋光纯的产物，或(2)在手性色谱柱上直接分离旋光对映体的混合物，或(3)分馏重结晶法。
因此，在本发明的另一实施方案中，涉及制造(1R，3aR，4S，7aR)-1-[(1R)-2-羟基-1-甲基乙基]-7a-甲基八氢-1H-茚-4-酚的方法，包括：
(a)使维生素D2与臭氧在甲醇和吡啶中在大约-70℃反应以提供(2S)-2-[(1R，3aR，7aR)-7a-甲基-4-氧代八氢-1H-茚-1-基]丙醛；
(b)使(2S)-2-[(1R，3aR，7aR)-7a-甲基-4-氧代八氢-1H-茚-1-基]丙醛与大约0.05至0.30当量的选自吡咯烷或哌啶的碱在选自叔丁基甲醚、氯仿、二氯甲烷、乙酸异丙酯、乙酸乙酯、甲苯或甲醇的溶剂中在等于或约等于环境温度下在惰性气氛下反应大约10至24小时；在继续搅拌大约另外24至120小时的情况下添加大约另外0.1当量的该碱提供(2R)-2-[(1R，3aR，7aR)-7a-甲基-4-氧代八氢-1H-茚-1-基]丙醛和(2S)-2-[(1R，3aR，7aR)-7a-甲基-4-氧代八氢-1H-茚-1-基]丙醛的比率为大约1∶1至2∶1的混合物；
(c)使(2R)-2-[(1R，3aR，7aR)-7a-甲基-4-氧代八氢-1H-茚-1-基]丙醛和(2S)-2-[(1R，3aR，7aR)-7a-甲基-4-氧代八氢-1H-茚-1-基]丙醛的混合物与硼氢化钠在叔丁基甲醚或乙腈和选自甲醇、乙醇和正丙醇的质子溶剂的混合物中在大约0至15℃反应，随后经大约0.5至3小时逐渐升温至室温以提供(1R，3aR，4S，7aR)-1-[(1R)-2-羟基-1-甲基乙基]-7a-甲基八氢-1H-茚-4-酚和(1R，3aR，4S，7aR)-1-[(1S)-2-羟基-1-甲基乙基]-7a-甲基八氢-1H-茚-4-酚的比率为大约1∶1至2∶1的混合物；通过色谱提纯法提高(R)-异构体的比率；和
(d)使(1R，3aR，4S，7aR)-1-[(1R)-2-羟基-1-甲基乙基]-7a-甲基八氢-1H-茚-4-酚和(1R，3aR，4S，7aR)-1-[(1S)-2-羟基-1-甲基乙基]-7a-甲基八氢-1H-茚-4-酚的混合物与1至3摩尔当量的乙酸乙烯酯和15至300重量％的选自脂肪酶AK或脂肪酶PS的酶在选自叔丁基甲醚、乙腈、甲苯或乙酸异丙酯的溶剂中在大约5至50℃反应大约4至7小时和在0至15℃反应大约2至15小时以提供(1R，3aR，4S，7aR)-1-[(1R)-2-羟基-1-甲基乙基]-7a-甲基八氢-1H-茚-4-酚和不想要的乙酸酯形式的异构体，将它们色谱分离。
本发明的另一实施方案因此涉及使式(II)的A-环氧化膦偶联到式(III)的C/D-环酮上的方法，包括：
(a)在甲苯中混合式(II)的A-环氧化膦与大约1.4当量的式(III)的C/D-环酮，并随后蒸发挥发物；该过程重复第二次；其中Y1和Y2各自是氢或一起构成亚甲基；Y3和Y4各自是氢或一起构成亚甲基；Z5是氟、-O-(羟基保护基)或-CH2O-(羟基保护基)；Z4是氟或-O-(羟基保护基)；X1是-CH2OR1、-CH2OC(O)R2、-CR3R4-(CH2)m-CR5R6-CR7a(CH3)2或OR8a；R1是氢、烷基或芳基；R2是烷基、烷基氨基、烷基羰氧基烷基或羟烷基；R3和R4独立地为氢或烷氧基，条件是两者不都是烷氧基；R5和R6独立地为氢或烷基；R7a是氢、烷氧基、羟基或被保护的羟基；R8a是-CH2CH2C(CH3)2OH或-CH2CH2C(CH3)2OSi(CH3)3；且m是1、2或3，
Figure BPA00001184760800221
(b)在大约-80至-65℃将式(II)的A-环氧化膦和式(III)的C/D-环酮的混合物溶解在四氢呋喃中；
(c)在继续搅拌15至30分钟的情况下缓慢添加碱，如双(三甲基甲硅烷基)氨基化锂，随后升温至大约-10至10℃并在此温度再搅拌大约15至30分钟以提供式(IV)的化合物。
Figure BPA00001184760800222
本发明的另一实施方案因此涉及可用于制备式(I)的化合物的式(V)的化合物，其中Y1a和Y2a各自是氢；Y3和Y4各自是氢或一起构成亚甲基；Z3是氟、羟基、羟甲基、-O-(羟基保护基)或-CH2O-(羟基保护基)；且Z4是氟、羟基或-O-(羟基保护基)。优选的羟基保护基选自叔丁基(二甲基)甲硅烷基和叔丁基(二苯基)甲硅烷基。
被视为本发明的一部分的具体实施方案包括，但不限于，式(V)的化合物，例如：
(3R，5R)-3-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-5-{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}-4-亚甲基环己酮；
(3R，5R)-3-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-5-({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)-4-亚甲基环己酮；或
(3R，5R)-3，5-双{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}-4-亚甲基环己酮
本发明的方法
本发明的化合物和组合物可用于调节维生素D受体的作用。特别地，本发明的化合物和组合物可用于治疗或预防受维生素D受体调节的失调症。通常，可通过选择性调节哺乳动物体内的维生素D受体，优选通过单独或与另一活性剂结合(例如作为治疗方案的一部分)施用本发明的化合物或组合物来改善这类失调症。
此外，本发明涉及治疗或预防受维生素D受体调节的病症、失调症或缺陷的方法，其中该病症、失调症或缺陷选自骨病、心血管病、甲状旁腺功能亢进、免疫失调、增殖性疾病、肾病和血栓形成，包括施用治疗合适量的式(I)的化合物，
Figure BPA00001184760800231
或其可药用盐或前药，其中与X相连的碳能够具有R或S构型；X是-CH2OR1、-CH2OC(O)R2、-CR3R4-(CH2)m-CR5R6-CR7(CH3)2或OR8；Y1和Y2各自是氢或一起构成亚甲基；Y3和Y4各自是氢或一起构成亚甲基；Z1是氟、羟基或羟甲基；Z2是氟或羟基；R1是氢、烷基或芳基；R2是烷基、烷基氨基、烷基羰氧基烷基或羟烷基；R3和R4独立地为氢或烷氧基，条件是两者不都是烷氧基；R5和R6独立地为氢或烷基；R7是氢、烷氧基或羟基；R8是-CH2CH2C(CH3)2OH；且m是1、2或3。
本发明还涉及治疗或预防受维生素D受体调节的病症或失调症的方法，包括施用式(I)的化合物的步骤，其中该病症或失调症选自肾病和与慢性肾病相关的继发性甲状旁腺功能亢进。
本发明还涉及治疗或预防受维生素D受体调节的病症或失调症的方法，包括施用式(I)的化合物的步骤，其中该病症或失调症选自与骨质疏松症、骨软化症和骨营养不良相关的骨病。
本发明还涉及治疗或预防受维生素D受体调节的病症或失调症的方法，包括施用式(I)的化合物的步骤，其中该病症或失调症选自与血栓形成、肾素-血管紧张素***、心肌肥大和高血压相关的心血管病。
本发明还涉及治疗或预防受维生素D受体调节的病症或失调症的方法，包括施用式(I)的化合物的步骤，其中该病症或失调症选自与自体免疫失调、免疫抑制、移植排斥、关节炎、多发性硬化、牛皮癣、炎性肠病、1型糖尿病和全身性红斑狼疮相关的免疫失调。
本发明还涉及治疗或预防受维生素D受体调节的病症或失调症的方法，包括施用式(I)的化合物的步骤，其中该病症或失调症选自结肠癌、***癌、乳癌、白血病和卡波西肉瘤。
本发明的方法用的化合物，包括但不限于实施例中指定的或以其它方式专门指出的那些，能够调节维生素D受体并通常具有对维生素D受体的亲合力。作为维生素D受体活化剂，本发明的化合物能够用于治疗或预防许多维生素D受体介导的疾病或病症。
例如，维生素D受体活化剂已表明在降低甲状旁腺激素水平方面发挥显著作用(Hudson，J.Q.The Annals of Pharmacotherapy，2006，40，1584-1593)。因此，维生素D受体活化剂适用于治疗与慢性肾病相关的病症和失调症。一些维生素D受体活化剂不会上调肠内维生素D受体，由此限制钙血和高磷血效应和相关的副作用(Slatopolsky，E.；Finch，J.；Ritter，C.；Takahashi，F.American Journal of Kidney Disease，1998，4，S40-S47)。研究已表明，维生素D受体活化剂疗法减轻肾病的发展(Agarwal，R.；Acharya，M.；Tian，J.；Hippensteel，R.L.；Melnick，J.Z.；Qiu，P.；Williams，L.；Batlle，D.Kidney International，2005，68，2823-2828和Schwarz，U.；Amann，K.；Orth，S.R.；Simonaviciene，A.；Wessels，S.；Ritz，E.Kidney International，1998，53，1696-1705)。
此外，维生素D受体活化剂已表明参与骨骼和矿物质体内平衡。这些受体活化剂对肠内钙吸收和随后对骨的合成代谢活性是重要的(Hendy，G.N.；HruSka，K.A.；Methew，S.；Goltzman，D.Kidney International，2006，69，218-223)。某些激动剂已表现出在对甲状旁腺激素抑制的影响减轻的情况下选择性治疗骨病的潜力(Shevde，N.K.；Plum，L.A.；Clagett-Dame，M.；Yamamoto，H.；Pike，J.W.；DeLuca，H.F.Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.2002，99，13487-13491；Uchiyama，Y.；Higuchi，Y.；Takeda，S.；Masaki，T.；Shira-Ishi，A.；Sato，K.；Kubodera，N.；Ikeda，K.；Ogata，E.Bone，2002，4，582-588和Shiraishi，A.；Higashi，S.；Ohkawa，H.；Kubodera，N.；Hirasawa，T.；Ezawa，I.；Ikeda，K.；Ogata，E.Calcified Tissue International，1999，65，311-316)。
维生素D受体活化剂已表明对循环***的许多方面具有影响。该维生素D受体***在维持抗血栓形成的体内平衡中发挥重要作用(Aihara，K.；Azuma，H.；Akaike，M.；Ikeda，Y.；Yamashita，M.；Sudo，T.；Hayashi，H.；Yamada，Y.；Endoh，F.；F u.j imura，M.；Yoshida，T.；Yamaguchi，H.；Hashizume，S.；Kato，M.；Yoshimura，K.；Yamamoto，Y.；Kato，S.；Matsumoto，T.J.Biol.Chem.，2004，279，35798-35802)。维生素D受体活化剂已表明改变对凝结而言重要的蛋白质，如血栓调节蛋白、组织因子和纤溶酶原激活物抑制剂1的表达和活性，从而在动脉粥样硬化病中提供潜在治疗(Beer，T.M.；Venner，P.M.；Ryan，C.W.；Petrylak，D.P.；Chatta，G.；Ruether，J.D.；Chi，K.N.；Curd，J.G.；DeLoughery，T.G.British Journal of Haematology，2006，135，392-394和Ohsawa，M.；Koyama，T.；Yamamoto，K.；Hirosawa，S.；Kamei，S.；Kamiyama，R.Circulation，2000，102，2867-2872)。肾素-血管紧张素II***在血压调节中至关重要，升高的肾素水平造成高血压和心脏肥大。维生素D受体活化剂直接抑制维生素D受体依赖性机制中的肾素基因转录，从而为此体系提供控制机制(Li，Y.C.；Qiao，G.；Uskokovic，M.；Xiang，W.；Zheng，W.；Kong，J.Journal of SteroidBiochemistry & Molecular Biology，2004，89-90，397-392)。接受维持性血液透析的慢性肾病患者常患有心血管并发症，其中由左心室肥大引起的缺血性心脏病是最突出的。甲状旁腺功能亢进是一项病因，即使用维生素D受体活化剂部分控制也会在不改变其它血液动力学参数的情况下遏制心肌肥大(Park，C.W.；Oh，Y.S.；Shin，Y.S.；Kim，C.-M.；Kim，Y.-S.；Kim，S.Y.；Choi，E.J.；Chang，Y.S.；Bang，B.K.American Journal of Kidney Diseases，1999，33，73-81)。
维生素D受体在免疫***的大多数细胞类型上表达，特别是在调节T细胞响应方面。目前，维生素D受体活化剂局部用于治疗牛皮癣。动物模型表明，维生素D受体活化剂有益于治疗关节炎、自体免疫性糖尿病、实验性***反应性脑脊髓炎、炎性肠病或全身性红斑狼疮，表明在人体中的治疗应用的扩展(Adorini，L.Cellular Immunology，2005，233，115-124)。
癌症所涉及的许多信号通路受维生素D受体活化剂的影响。尽管有大量的多样性，但它们在通过基因组和非基因组机制二者介导的多种癌症中主要负责抗增殖、抗血管生成和促分化效应(Deeb，K.K.；Trump，D.L.；Johnson，C.S.Nature Reviews Cancer，2007，7，684-700)。在***中细胞增殖的调节中，维生素D代谢的角色看起来是重要的(Lou，Y.-R.；Qiao，S.；Talonpoika，R.；H.；Tuohimaa，P.Journal of Steroid Biochemistry and Molecular Biology，2004，92，317-3250)。维生素D受体活化剂对自分泌生长因子IL-6和IL-8的抑制和卡波西肉瘤的发展有联系(Masood，R.；Nagpal，S.；Zheng，T.；Cai，J.；Tulpule，A.；Smith，D.L.；Gill，P.S.Blood，2000，96，3188-3194)。维生素D类似物对白血病细胞施加分化作用(James，S.Y.；Williams，M.A.；Newland，A.C.；Colston，K.W.Gen.Pharmac.，1999，32，143-154)。
能够改变本发明的药物组合物中活性成分的实际剂量水平以获得对特定患者、组合物和给药模式而言有效实现所需治疗响应的活性化合物的量。所选剂量水平取决于特定化合物的活性、给药途径、治疗的病症的严重性以及治疗的患者的状况和先前病史。但是，在本领域技术范围内的是，以比实现所需治疗效果所需的量更低的水平开始该化合物的剂量并逐渐提高该剂量直至实现所需效果。
当用在上述或其它治疗中时，治疗有效量的本发明的化合物之一能够以纯净形式使用，或以可药用盐、酯、酰胺或前药形式使用(当存在这些形式时)。或者，该化合物可作为含有所述化合物以及一种或多种可药用载体的药物组合物施用。术语“治疗有效量”的本发明的化合物是指足以在适用于任何医疗治疗的合理的效益/风险比下治疗失调症的量的该化合物。但是，要理解的是，本发明的化合物和组合物的总日剂量将由主治医师在合理医疗判断的范围内决定。任何特定患者的具体治疗有效剂量水平将取决于各种因素，包括治疗的失调症和该失调症的严重程度；所用具体化合物的活性；所用的具体组合物；患者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；所用具体化合物的给药时间、给药途径和***速率；治疗持续时间；与所用具体化合物结合或同时使用的药物；和医疗领域中公知的类似因素。例如，在本领域技术范围内的是，以比实现所需治疗效果所需的量更低的水平开始该化合物的剂量并逐渐提高该剂量直至实现所需效果。
施用于人或低等动物的本发明的化合物的总日剂量为大约0.01微克至大约150毫克。更优选的剂量可以为大约0.010微克至大约10毫克。如果需要，有效的日剂量可以分成用于给药的多剂量。因此，单剂量组合物可含有这样的量或其约数以构成日剂量。
制备本发明的化合物的方法
联系下列合成图式和方法——它们显示了制备该化合物的途径，能够更好地理解本发明的化合物。
图式和其后的实施例的描述中所用的缩写是：9-BBN代表9-硼杂双环[3.3.1]壬烷；BCA代表双金鸡纳酸(bicinchoninic acid)；BUN代表血尿素氮；CASMC代表冠状动脉平滑肌细胞；DAST代表(二乙基氨基)三氟化硫；DIBAL代表二异丁基氢化铝；DMEM代表Dulbecco改性的Eagle′s最低必需培养基；DTT代表二硫苏糖醇；Et2AlCl代表二乙基氯化铝；GC代表气相色谱法；HOAC代表乙酸；HPLC代表高压液相色谱法；LiHMDS代表双(三甲基甲硅烷基)氨基化锂；MsCl代表甲磺酰氯；NBT代表氮蓝四唑；nBuLi代表正丁基锂；Ncorl代表核受体辅助抑制因子1；PA％代表峰面积百分比；PB S-T代表含TWEEN 20的磷酸盐缓冲盐水；PCR代表聚合酶链式反应；PMA代表佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯(phorbol 12-myrystate 13-acetate)；PPAR代表过氧化物酶体增殖因子活化受体；PPTS代表对甲苯磺酸吡啶鎓；psi代表磅/平方英寸；PVDF代表聚偏二氟乙烯；RPMI代表Roswell Park Memorial Institute；SDS-PAGE代表十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳；TBAF代表四-正丁基氟化铵；TBDPS-Cl代表叔丁基二苯基甲硅烷基氯；TBS-Cl代表叔丁基二甲基甲硅烷基氯；TBS-咪唑代表叔丁基二甲基甲硅烷基咪唑；TBS-OTf代表三氟甲磺酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯；TES-Cl代表三乙基甲硅烷基氯；TMP代表2，2，6，6-四甲基哌啶；Tris代表三羟甲基氨基甲烷；TWEEN 20代表聚氧乙烯失水山梨糖醇单月桂酸酯；VDR代表维生素D受体；wt％代表重量％。
具有式(I)的化合物可以通过以下示为例的合成化学方法制造。要理解的是，如果必要，可以改变该方法中的步骤的次序，可以替代专门提到的那些试剂、溶剂和反应条件，可以保护和脱保护脆弱的部分。能够如本领域技术人员已知的那样如本发明的范围内所述取代某些基团。代表性程序显示于，但不限于图式1-7。
图式1
Figure BPA00001184760800281
如图式1中所示，其中X如本文所述的式(1)的化合物能够在溶剂如二氯甲烷中在0℃至30℃的温度用试剂(例如在氧化铝上的氯铬酸吡啶鎓或含对甲苯磺酸吡啶鎓的二铬酸吡啶鎓)氧化12至48小时以提供式(2)的化合物。式(2)的化合物可以与式(3)的化合物的阴离子反应。式(3)的阴离子通过使式(3)的化合物在溶剂(例如四氢呋喃或二氧杂环己烷)中在-78℃至0℃的温度范围与碱，如双(三甲基甲硅烷基)氨基化锂或二异丙基氨基化锂反应1-24小时来制备。
图式2
式(5)的化合物是图式1中所示的化合物(1)、(2)和(4)的代表，其中X是-CH2OH且附加到C-环底部(
Figure BPA00001184760800292
)上的官能团是羟基、被保护的羟基、氧代或二烯和以式(4)的化合物为例的A-环。可以改性式(5)的化合物以提供具有各种官能团的化合物。
例如，式(5)的化合物可以通过在溶剂(如二氯甲烷)中在碱(例如吡啶)存在下在0℃至30℃的温度范围与式R10C(O)Cl的酰基氯(其中R10是烷基)反应6至48小时来酯化以提供式(6)的酯。或者，式(5)的化合物可以通过在溶剂(例如甲苯)中在三苯基膦和二-叔丁基偶氮二羧酸酯存在下在30至100℃的温度范围与式R10CO2H的羧酸(其中R10是羟烷基)反应1至24小时来酯化。
式(7)的氨基甲酸酯可以由式(5)的化合物通过在溶剂(如二甲基甲酰胺和甲苯)的混合物中在50至110℃的温度暴露在异氰酸酯R11NCO(其中R11是烷基)中1至5天来制备。
式(5)的化合物可以在溶剂(例如二氯甲烷)中在
Figure BPA00001184760800301
分子筛存在下在10至30℃的温度范围用氧化剂，如四-正丙基过钌酸铵和N-甲基吗啉氧化物经1至24小时氧化成式(8)的醛。
式(5)的化合物也可以在Mitsunobu条件下转化成式(9)的醚。例如，式(5)的化合物可以在溶剂(例如甲苯)中在三苯基膦和二-叔丁基偶氮二羧酸酯存在下在30至100℃的温度范围与酚反应0.5至24小时。
式(6)的酯有时可充当式(5)的化合物的羟基部分的保护基。可以通过在溶剂(例如醚或四氢呋喃)中用试剂(例如氢化锂铝)在最初大约-78℃的温度还原5至30分钟，随后逐渐升温到0至25℃0.5至6小时来实现脱保护以暴露出羟基。
图式3
式(10)的醛——其中R12是甲硅烷基保护基，如叔丁基二甲基甲硅烷基或叔丁基二苯基甲硅烷基——能够与式(11)和(14)的砜在Kutner，A.等人，Journal of Organic Chemistry 1988，53，3450-3457中所述的条件下反应以分别提供式(12)和(15)的化合物。
式(12)的化合物随后通过在溶剂(例如四氢呋喃)中在氢化钠存在下在等于或接近环境温度下用过量甲基碘处理6至48小时来转化成式(13)的化合物。
式(15)的化合物——其中R13是氢或三甲基甲硅烷基——在溶剂(例如乙酸)中在催化剂(例如载铂碳)存在下或在溶剂(例如乙酸乙酯)中在催化剂(例如载钯碳)存在下用氢还原以提供式(16)的化合物。
图式4
Figure BPA00001184760800311
式(17)的化合物在溶剂(例如乙酸)中在氢和催化剂(例如载铂碳)存在下还原成式(18)的化合物。
图式5
Figure BPA00001184760800312
式(19)的化合物能够通过下列程序转化成式(20)的化合物。首先通过在溶剂(例如二甲基甲酰胺)中在咪唑存在下暴露在叔丁基二甲基甲硅烷基氯中(先在等于或接近环境温度下大约4小时和随后再在30至80℃的提高的温度下8至48小时)，以相应的叔丁基二甲基甲硅烷基醚形式保护式(19)的化合物的羟基部分。随后在溶剂(例如四氢呋喃)中在35至60℃的温度用9-硼杂双环[3.3.1]壬烷处理该链烯2至24小时。随后在等于或接近0℃用氢氧化钠和过氧化物水溶液处理以提供式(20)的化合物。
式(20)的化合物通过下列合成程序转化成式(22)的化合物。通过在溶剂(例如四氢呋喃)中在等于或接近回流温度下用碱(例如氢化钠)处理0.5至8小时，用式(21)的化合物将式(20)的化合物的羟基烷基化。在冷却至环境温度后，用氢化锂铝处理2至16小时立体选择性地打开该环氧化物以产生相应的叔甲醇。通过在四氢呋喃中在60至80℃的温度暴露在四-正丁基氟化铵中8至24小时来除去叔丁基二甲基甲硅烷基保护基，由此完成式(22)的化合物的制备程序。
图式6
Figure BPA00001184760800321
图式6中所示的合成程序描述了A-环的制备和使用如对式(31)的化合物所绘的图式1中所述的方法引入官能团以使其连接到C/D-环部分上。以(R)-香芹酮氧化物(23)开始建立立体化学。通过在甲醇中在0℃将(23)与CeCl3合并，实现Luche还原。在冷却至-20℃后，缓慢加入硼氢化钠，并使该混合物升温至环境温度。由此形成的羟基通过在二甲基甲酰胺中在环境温度下暴露在叔丁基二苯基甲硅烷基氯和咪唑中48至100小时来以其叔丁基二苯基甲硅烷基醚形式保护以提供(24)。
在二氯甲烷和甲醇的混合物中在-70℃在碳酸氢钠存在下用臭氧将(24)的异亚丙基氧化。在二氯甲烷和吡啶的混合物中用对硝基苯甲酰氯实现该中间体上的Criegee重排，在＜5℃的最初反应温度下1小时，随后升至环境温度8至24小时。在环境温度下在水和甲醇的混合物中用碱如碳酸钾将该中间体乙酸盐水解1至6小时。在环境温度下在二甲基甲酰胺中在咪唑存在下使暴露出的羟基部分暴露在三乙基甲硅烷基氯中8至24小时以提供化合物(25)。
通过在溶剂(例如甲苯)中在二乙基氯化铝存在下在0℃用2，2，6，6-四甲基哌啶和正丁基锂处理并经几小时逐渐升温至环境温度，打开(25)的环氧化物以产生烯丙醇(26)。
烯丙醇(26)可以通过在0℃在溶剂(例如二氯甲烷)中在碱如2，6-二甲基吡啶存在下暴露在三氟甲磺酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯中来转化成相应的叔丁基二甲基甲硅烷基醚。通过在环境温度中在乙醇中用对甲苯磺酸吡啶鎓处理1-5小时，实现三乙基甲硅烷基保护基的选择性脱除。随后能够在0℃在溶剂(例如二氯甲烷)中在碱如碳酸氢钠存在下用戴斯-马丁试剂(1，1，1-三(乙酰氧基)-1，1-二氢-1，2-苯碘酰(benziodoxol)-3-(1H)-酮)将暴露出的羟基氧化成相应的酮以提供化合物(27)。
酮(27)能够通过使(27)与三甲基甲硅烷基乙酸乙酯和正丁基锂在溶剂(例如四氢呋喃)中在-78℃反应4至8小时来转化成α，β-不饱和酯(28)。通过在环境温度下在乙醇中用浓盐酸处理8至24小时来选择性除去叔丁基二甲基甲硅烷基醚，以提供链烯混合物，其能够色谱分离以提供(28)。
(28)的羟基能够在二氯甲烷中在-78℃与(二乙基氨基)三氟化硫反应20至120分钟以提供氟化物(29)。
(29)的α，β-不饱和酯能够在二氯甲烷和甲苯的混合物中在-78℃用二异丁基氢化铝还原10至60分钟以提供相应的烯丙醇。随后在0℃在三乙胺存在下用三光气处理30至60分钟，接着经1至3小时逐渐升温至环境温度以产生烯丙基氯(30)。
烯丙基氯(30)能够在-60℃在四氢呋喃中用二苯基膦的锂阴离子处理1至4小时。在0℃通过暴露在空气中或用在二氯甲烷中的过氧化氢水溶液，经0.5至3小时氧化成相应的二苯基膦氧化物以提供化合物(31)。
图式7
Figure BPA00001184760800341
(S)-香芹酮氧化物(32)能够在-78℃在溶剂(例如四氢呋喃)中用立体选择性还原5至12小时以产生醇(33)。这种产物可以通过图式6中所述的步骤转化以提供烯丙醇(34)。
烯丙醇(34)能够通过在0℃在二氯甲烷中在二甲基氨基吡啶存在下用甲磺酰氯处理3至8小时来转化成相应的甲磺酸盐。随后在丙酮中在碳酸氢钠和亚硫酸钠存在下用碘化钠处理以产生烯丙碘(35)。
能够由化合物(35)通过在四氢呋喃和水的混合物中在甲醛存在下暴露在铟中来制造化合物(36)。
能够通过在环境温度下在二氯甲烷中用叔丁基二甲基甲硅烷基咪唑处理24至48小时来实现化合物(36)的伯羟基的选择性保护。随后能够在环境温度下在溶剂(例如二氯甲烷)中用氧化剂，如戴斯-马丁试剂进行仲羟基的氧化1至8小时以获得酮(37)。
酮(37)能够通过图式6中所述的反应程序转化成二苯基膦氧化物(38)。
联系下列实施例将更好地理解本发明的化合物和方法，这些实施例是本发明的范围的举例说明而非限制。现在描述合成本发明的这些新型化合物的示例性方法。一般而言，这些实施例显示可用于制造多种维生素D化合物，包括本发明的新颖性和创造性的化合物的新型合成法。因此，根据本发明的一些实施方案，制造所需维生素D化合物的片段，如果需要，将片段另外改性，随后最终偶联以形成所需维生素D化合物。
实施例
Figure BPA00001184760800351
实施例1.
新戊酸(2S)-2-[(1R，3R，7E，17β)-1，3-二羟基-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-17-基]丙基酯
实施例1A.
[2-((3R，5R)-3，5-双{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}-4-亚甲基亚环己基)乙基](二苯基)膦氧化物
通过DeLuca和Sicinski在WO98/41500中所述的程序的轻微修改制备标题化合物。
实施例1B.
(1R，3aR，4S，7aR)-1-[(1S)-2-羟基-1-甲基乙基]-7a-甲基八氢-1H-茚-4-酚
根据Sardina等人在J.Org.Chem.1986，51(8)，1264-1269中所述的程序由维生素D2制备标题化合物。
实施例1C.
新戊酸(2S)-2-[(1R，3aR，4S，7aR)-4-羟基-7a-甲基八氢-1H-茚-1-基]丙基酯
将实施例1B的化合物(1.57克，6.7毫摩尔)溶解在10毫升二氯甲烷和5毫升吡啶中；将该溶液冷却至0℃并经5分钟逐滴添加0.94毫升新戊酰氯。将所得混合物在0℃搅拌4小时，随后使其升温至环境温度过夜。用水猝灭该反应，并用保持在低于环境温度的浴真空浓缩该混合物。使该粗材料在醚和0.5N HCl水溶液之间分配；有机相用0.5N HCl水溶液，随后盐水洗涤，并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂；残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中10％至20％乙酸乙酯的梯度洗脱以提供标题化合物(1.25克，63％)。
实施例1D.
新戊酸(2S)-2-[(1R，3aR，7aR)-7a-甲基-4-氧代八氢-1H-茚-1-基]丙基酯
将实施例1C的化合物(1.1克，3.7毫摩尔)溶解在5毫升二氯甲烷中并冷却至0℃；加入4.1克二铬酸吡啶鎓，接着加入30毫克对甲苯磺酸吡啶鎓。将所得混合物在0℃搅拌8小时；再加入1.8克二铬酸吡啶鎓和20毫克对甲苯磺酸吡啶鎓，并使该混合物升温至环境温度过夜。该混合物用醚稀释并经硅藻土垫在醚洗涤下过滤。滤液用1NHCl水溶液洗涤，随后经硅胶塞过滤。粗产物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中10％至15％乙酸乙酯的梯度洗脱以提供标题化合物(1.0克，94％)。
实施例1E.
新戊酸(2S)-2-[(1R，3R，7E，17β)-1，3-二羟基-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-17-基]丙基酯
注：在暗罩中进行下列程序。将实施例1A的化合物(64毫克，0.077毫摩尔)与实施例1D的化合物(32毫克，0.11毫摩尔)合并，并通过与1毫升甲苯共沸两次，干燥所得混合物。加入四氢呋喃(2毫升)并将该溶液冷却至-78℃。分两份逐滴加入双(三甲基甲硅烷基)氨基化锂溶液(在四氢呋喃中0.6M；0.40毫升)，产生橙黄色，其经20分钟消退。将该溶液升温至0℃并在此温度下搅拌20分钟。通过添加1毫升1N NH4Cl水溶液，猝灭该反应，并用乙酸乙酯萃取该混合物。有机萃取物用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中0％至6％乙酸乙酯的梯度洗脱。将该产物(61毫克)溶解在2毫升处于四氢呋喃中的1N四-正丁基氟化铵中；加入0.25毫升乙酸，并使该混合物升温至70℃过夜。使反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。有机相用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中25％至40％乙酸乙酯的梯度洗脱以提供标题化合物(21毫克)。1H NMR(500MHz，CD2Cl2)δppm 6.33(d，J＝11.0Hz，1H)5.90(d，J＝11.3Hz，1H)5.06(d，J＝5.8Hz，2H)4.35-4.50(m，2H)4.04(dd，J＝10.7，3.4Hz，1H)3.79(dd，J＝10.7，7.0Hz，1H)2.82(s，1H)2.76(dd，J＝13.1，4.3Hz，1H)2.55(dd，J＝13.1，4.0Hz，1H)2.40-2.50(m，1H)2.01(dd，J＝12.4，3.8Hz，2H)1.90(s，1H)1.65-1.78(m，4H)1.32-1.40(m，4H)1.24-1.33(m，1H)1.23-1.34(m，3H)1.13-1.23(m，9H)0.96-1.06(m，3H)0.58(s，3H)；MS(+DCI)m/z 448(M+NH4)+。
实施例2.
(1R，3R，7E，17β)-17-[(1S)-2-羟基-1-甲基乙基]-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1，3-二醇
实施例2A.
新戊酸(2S)-2-((1R，3R，7E，17β)-1，3-双{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-17-基)丙基酯
注：在暗罩中进行下列程序。将实施例1A的化合物(64毫克，0.077毫摩尔)与实施例1D的化合物(32毫克，0.11毫摩尔)合并，并通过与1毫升甲苯共沸两次，干燥所得混合物。加入四氢呋喃(2毫升)，并将该溶液冷却至-78℃。分两份逐滴加入双(三甲基甲硅烷基)氨基化锂溶液(在四氢呋喃中0.6M；0.40毫升)，产生橙黄色，其经20分钟消退。将该溶液升温至0℃并在此温度下搅拌20分钟。通过添加1毫升1N NH4Cl水溶液，猝灭该反应，并用乙酸乙酯萃取该混合物。有机萃取物用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中0％至6％乙酸乙酯的梯度洗脱。
实施例2B.
(1R，3R，7E，17β)-17-[(1S)-2-羟基-1-甲基乙基]-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1，3-二醇
注：在暗罩中进行下列程序。将实施例2A的化合物(70毫克，0.77毫摩尔)溶解在1.5毫升醚中并冷却至-78℃。加入氢化锂铝在四氢呋喃中的溶液(1.0M，0.62毫升)；将该混合物搅拌10分钟，随后使其升温至0℃50分钟。通过小心添加乙酸乙酯，接着添加罗谢尔盐溶液，猝灭该反应。搅拌15分钟后，该混合物用乙酸乙酯萃取；有机萃取物用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂。将该材料的样品(19毫克)与1.5毫升在四氢呋喃中的1N四-正丁基氟化铵和0.2毫升乙酸合并，并在70℃加热过夜。使反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。有机相用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中50％至66％乙酸乙酯的梯度洗脱。合并含产物的级分并真空浓缩以提供标题化合物(4毫克)。1H NMR(400MHz，CD2Cl2)δppm 6.31(d，J＝11.2Hz，1H)，5.88(d，J＝11.2Hz，1H)，5.03-5.06(m，2H)，4.37-4.45(m，2H)，3.60(dd，J＝10.4，3.2Hz，1H)，3.33(dd，J＝10.4，6.8Hz，1H)，2.78-2.87(m，1H)，2.74(dd，J＝13.2，4.3Hz，1H)，2.53(dd，J＝13.2，4.1Hz，1H)，2.24-2.32(m，2H)，1.96-2.06(m，2H)，1.78-1.94(m，2H)，1.60-1.74(m，3H)，1.44-1.60(m，4H)，1.28-1.40(m，4H)，1.03(d，J＝6.5Hz，3H)，0.56(s，3H)；MS(+DCI)m/z 364(M+NH4)+。
Figure BPA00001184760800381
实施例3.
新戊酸(2R)-2-[(1R，3R，7E，17β)-1，3-二羟基-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-17-基]丙基酯
实施例3A
(2S)-2-[(1R，3aR，7aR)-7a-甲基-4-氧代八氢-1H-茚-1-基]丙醛
将维生素D2(30.04克，75.7毫摩尔)溶解在1050毫升甲醇(35毫升/克)和10.5毫升吡啶(1％的甲醇)中。将用氮气吹扫的所得溶液冷却至-70℃。一些维生素D2在冷却时从溶液中沉淀。将臭氧鼓过该冷的充分搅拌的浆料，其逐渐变成溶液，直至在甲醇溶液中存在过量臭氧的蓝色。用氮气流从溶液中吹除过量臭氧。经13分钟加入亚磷酸三甲酯(77毫升，652.8毫摩尔)，温度从-75.1攀升至-69.5℃。移除冷却浴并使该反应升温至室温(1.5小时)。该反应混合物的GC重量/重量分析表明71.9％酮醛，实施例3A。在旋转蒸发器上蒸馏除去溶剂以产生98.03克稠油。使用500毫升饱和盐水和500毫升叔丁基甲醚将该油转移到分液漏斗中。层分离后，用另外2x500毫升叔丁基甲醚萃取水层。合并的有机萃取物经硫酸钠干燥并浓缩产生50.20克油。GC分析表明75.13％的标题酮醛和1.27至4.97％的五种杂质(忽视磷酸三甲酯)。将该油溶解在500毫升甲醇中并在旋转蒸发器上汽提。用另外500毫升甲醇、300毫升正丁醇和500毫升甲醇重复该过程以产生57.04克油。将该材料溶解在500毫升叔丁基甲醚中并用3x100毫升碳酸氢钠饱和水溶液洗涤。合并水性洗液并用200毫升叔丁基甲醚反萃取。用乙酸乙酯萃取界面处的乳状液。有机溶液经硫酸钠干燥并从叔丁基甲醚中浓缩产生24.40克粗制标题酮醛和从乙酸乙酯中浓缩产生1.53克粗制标题酮醛。1H NMR表明它们具有相当的纯度，因此将它们合并且不经进一步提纯即用于下一步骤中所述的差向异构。GC表明在粗制酮醛中留有大约4PA％磷酸三甲酯。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ0.69(s，3H，18-H3)，1.17(d，J＝6.86Hz，3H，21-H3)，2.47(dd，J＝7.41，11.66Hz，1H，14-H)，9.60(d，J＝2.88Hz，1H，22-H)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ13.18(CH3)，13.80(CH3)，19.82(CH2)，24.18(CH2)，26.70(CH2)，38.82(CH2)，41.11(CH2)，49.26，50.13(C-13)，51.60，61.10，203.35(C-22)，210.35(C-8)；GC：(柱：RTX-5，1.5μm，30mx0.53mm ID；入口110℃，检测器250℃；炉程序：100至250℃@6℃/分钟，随后至275℃@10℃/分钟并在275℃保持5分钟；柱10psi压头@40℃；36毫升/分钟的分流，吹扫10毫升/分钟)。酮醛实施例3A的保留时间：～16.5分钟。
实施例3B
(2R)-2-[(1R，3aR，7aR)-7a-甲基-4-氧代八氢-1H-茚-1-基]丙醛(3B)知
(2S)-2-[(1R，3aR，7aR)-7a-甲基-4-氧代八氢-1H-茚-1-基]丙醛(3A)
将粗制酮醛(实施例3A，25.93克，75.73毫摩尔理论)溶解在155毫升叔丁基甲醚中并置于氮气氛下。加入吡咯烷(0.65毫升，7.9毫摩尔)并在室温下搅拌该溶液并通过GC监测。在15.5小时后，差向异构体比率为0.3∶1(3B∶3A)。加入另外0.65毫升吡咯烷。在另外24小时后，差向异构体比率为1.3∶1。24小时后，差向异构体比率为1.79∶1。该溶液再搅拌72小时。此时，差向异构体比率为1.86∶1。该反应直接进行至还原。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ0.64(s，3H，18-H3)，1.08(d，J＝6.86Hz，3H，21-H3)，2.49(dd，J＝6.79，11.73Hz，1H，14-H)，9.56(d，J＝4.80Hz，1H，22-H)；GC：(柱：RTX-5，1.5μm，30mx0.53mmID；入口110℃，检测器250℃；炉程序：100至250℃@6℃/分钟，随后至275℃@10℃/分钟并在275℃保持5分钟；柱10psi压头@40℃；36毫升/分钟的分流，吹扫10毫升/分钟)。差向异构酮醛(3B)的保留时间：～15.9分钟。
实施例3C
(1R，3aR，4S，7aR)-1-[(1R)-2-羟基-1-甲基乙基]-7a-甲基八氢-1H-茚-4-酚(3C′)和
(1R，3aR，4S，7aR)-1-[(1S)-2-羟基-1-甲基乙基]-7a-甲基八氢-1H-茚-4-酚(3C″)
来自上述差向异构反应的酮醛差向异构体(75.73毫摩尔，理论)的叔丁基甲醚溶液(155毫升叔丁基甲醚)在冰浴中冷却，随后用225毫升甲醇稀释。将该溶液在氮气氛下保持在0℃。向反应溶液中分份加入硼氢化钠(10.3克，272.6毫摩尔)。在添加后，移除冷却浴，使反应升温至室温。一旦其达到室温(1小时)，将该反应冷却回0℃。经10分钟加入160毫升1N HCl，并使反应升温至室温。在旋转蒸发器上在真空下除去溶剂。使残留物在100毫升饱和盐水和200毫升乙酸乙酯之间分配。使用1N HCl将pH调节至2。分离各层，水层用另外2x100毫升乙酸乙酯萃取。合并有机层并用饱和盐水洗涤和经硫酸钠干燥。该溶液在旋转蒸发器上浓缩，随后用二氯甲烷冲洗。残留物使用真空泵抽气以产生16.6克油。样品的1H NMR表明差向异构体比率为1.84∶1(3C′∶3C″)。该二醇混合物在用乙酸乙酯∶己烷梯度洗脱的两个330g Biotage 65MTM柱上色谱分离。
第一级分：7.06克，含有93.73PA％二醇3C′、2.65PA％二醇3C″和1.67％(1S，3aR，4S，7aR)-1-[(1S)-1-羟乙基]-7a-甲基八氢-1H-茚-4-酚。
第二级分：4.66克，含有21.31PA％二醇3C′、77.22PA％二醇3C″和1.47％未知物。
二醇3C′：1H NMR(400MHz，CDCl3)δ0.96(s，3H，18-H3)，0.96(d，J＝6.72Hz，3H，21-H3)，3.45(dd，J＝6.86，10.57Hz，1H，22-H)，3.71(dd，J＝3.57，10.70Hz，1H，22-H)，4.08(bd q，J＝2.70Hz，1H，8-H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)δ14.24(CH2)，16.90(CH2)，17.76，22.64，26.84，33.80，37.65(CH2)，40.00，41.85(C-13)，52.64(CH2)，53.00(CH2)，66.75(C-8)，69.27(C-22)；GC：(柱：RTX-5，1.5μm，30mx0.53mm ID；入口110℃，检测器250℃；炉程序：100至250℃@6℃/分钟，随后至275℃@10℃/分钟并在275℃保持5分钟；柱10psi压头@40℃；36毫升/分钟的分流，吹扫10毫升/分钟)。二醇3C′的保留时间：～17.3分钟。
实施例3D
(1R，3aR，4S，7aR)-1-[(1R)-2-羟基-1-甲基乙基]-7a-甲基八氢-1H-茚-4-酚
来自上述步骤的二醇混合物(实施例3C′∶3C″，1.86∶112.2克，潜能(potency)：这两种差向异构体总计93％)、乙酸乙烯酯(14.8克，3当量)和脂肪酶AK(批次#56-678-AS，3.0克，25重量％，Amano Enzyme USA，Elgin，IL)在叔丁基甲醚(40毫升，32.8毫升/克二醇)中在9℃混合6.5小时，然后在6℃混合15.5小时。
通过NMR，非天然二醇(3D)/非天然乙酸酯/天然乙酸酯的比率：62.1％/2.5％/35.4％。通过GC：59.2％/2.7％/36.9％。
粗产物的潜能：53.97％非天然二醇
39.24％天然乙酸酯+非天然乙酸酯
在Biotage 65MTM柱上提纯这种混合物。分离的非天然二醇随后用己烷-叔丁基甲醚(95∶5)重结晶以产生标题化合物(6.395克，67.6％)。
实施例3E.
新戊酸(2R)-2-[(1R，3aR，4S，7aR)-4-羟基-7a-甲基八氢-1H-茚-1-基]丙基酯
将实施例3D的化合物(0.58克，2.7毫摩尔)溶解在4毫升二氯甲烷和2毫升吡啶中；将该溶液冷却至0℃，并经5分钟逐滴加入0.39毫升新戊酰氯。将所得混合物在0℃搅拌2.5小时，随后将其用水猝灭，并用保持在低于环境温度的浴真空浓缩该混合物。使该粗材料在醚和0.5N HCl水溶液之间分配；有机相用0.5N HCl水溶液，随后盐水洗涤，并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂；残留物(0.96克)不经进一步提纯即继续使用。
实施例3F.
新戊酸(2R)-2-[(1R，3aR，7aR)-7a-甲基-4-氧代八氢-1H-茚-1-基]丙基酯
将实施例3E的粗制化合物(0.96克)溶解在19毫升二氯甲烷中并冷却至0℃；加入3.1克二铬酸吡啶鎓，接着加入22毫克对甲苯磺酸吡啶鎓。将所得混合物在0℃搅拌1.5小时；加入另外1.3克二铬酸吡啶鎓和20毫克对甲苯磺酸吡啶鎓，并使该混合物升温至环境温度过夜。该混合物用醚稀释并经硅藻土垫在醚洗涤下过滤。滤液用1N HCl水溶液洗涤，随后经硅胶塞过滤。粗产物通过在Analogix IntelliFlash280TM上的色谱法提纯，用己烷中8％至15％乙酸乙酯的梯度洗脱。合并含标题化合物的级分并真空浓缩(0.77克，96％，2步骤)。
实施例3G.
新戊酸(2R)-2-[(1R，3R，7E，17β)-1，3-二羟基-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-17-基]丙基酯
注：在暗罩中进行下列程序。将实施例1A的化合物(30毫克，0.036毫摩尔)与实施例3F的化合物(23毫克，0.08毫摩尔)合并，并通过与1毫升甲苯共沸两次，干燥所得混合物。加入四氢呋喃(2毫升)，并将该溶液冷却至-78℃。分三份逐滴加入双(三甲基甲硅烷基)氨基化锂的溶液(在四氢呋喃中1M；0.33毫升)，产生橙黄色，其经30分钟消退。将该溶液升温至0℃并在此温度下搅拌30分钟。通过添加1毫升1N NH4Cl水溶液，猝灭该反应，并用乙酸乙酯萃取该混合物。有机萃取物用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中0％至4％乙酸乙酯的梯度洗脱。将该产物(22毫克)溶解在1.5毫升处于四氢呋喃中的1N四-正丁基氟化铵中；加入0.2毫升乙酸，并使该混合物升温至70℃过夜。使反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。有机相用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中10％至38％乙酸乙酯的梯度洗脱。合并含产物的级分并真空浓缩以提供标题化合物(5.7毫克)。1H NMR(500MHz，CD2Cl2)δppm 6.33(d，J＝11.2Hz，1H)，5.89(d，J＝11.2Hz，1H)，5.04-5.07(m，2H)，4.38-4.48(m，2H)，4.15(dd，J＝10.7，3.5Hz，1H)，3.82(dd，J＝10.8，6.7Hz，1H)，2.80-2.85(m，1H)，2.77(dd，J＝13.1，4.5Hz，1H)，2.52-2.57(m，1H)，2.24-2.32(m，2H)，2.02-2.08(m，1H)，1.88-1.97(m，1H)，1.83-1.87(m，1H)，1.74-1.81(m，1H)，1.64-1.73(m，4H)，1.58-1.64(m，1H)，1.47-1.56(m，3H)，1.28-1.41(m，3H)，1.19(s，9H)，0.96(d，J＝6.6Hz，3H)，0.59(s，3H)；MS(+ESI)m/z 448(M+NH4)+。
Figure BPA00001184760800431
实施例4.
2，2-二甲基丁酸(2S)-2-[(1R，3R，7E，17β)-1，3-二羟基-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-17-基]丙基酯
实施例4A.
(2S)-2-((1R，3R，7E，17β)-1，3-双{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-17-基)丙-1-醇
注：在暗罩中进行下列程序。将实施例2A的化合物(70毫克，0.77毫摩尔)溶解在1.5毫升醚中并冷却至-78℃。加入氢化锂铝在四氢呋喃中的溶液(1.0M，0.62毫升)；将该混合物搅拌10分钟，随后升温至0℃50分钟。通过小心添加乙酸乙酯，接着添加罗谢尔盐溶液，猝灭该反应。搅拌15分钟后，该混合物用乙酸乙酯萃取；有机萃取物用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂以提供标题化合物(74毫克)。
实施例4B.
2，2-二甲基丁酸(2S)-2-[(1R，3R，7E，17β)-1，3-二羟基-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-17-基]丙基酯
注：在暗罩中进行下列程序。将实施例4A的化合物(29毫克，0.03毫摩尔)溶解在2.5毫升1，2-二氯乙烷中；加入三乙胺(120微升)，将该溶液冷却至0℃。加入2，2-二甲基丁酰氯(90毫克)，接着加入催化量的4-二甲基氨基吡啶，并将该混合物缓慢升温至环境温度。2小时后，真空除去溶剂，并使残留物在乙酸乙酯和1N HCl水溶液之间分配。有机萃取物用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中0％至6％乙酸乙酯的梯度洗脱。将该产物(34毫克)溶解在1.5毫升处于四氢呋喃中的1N四-正丁基氟化铵中；加入0.2毫升乙酸，并使该混合物升温至70℃过夜。使反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。有机相用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中30％至45％乙酸乙酯的梯度洗脱。合并含标题化合物的级分并真空浓缩(4.7毫克)。1H NMR(500MHz，CD2Cl2)δppm 6.33(d，J＝11.2Hz，1H)，5.90(d，J＝11.2Hz，1H)，5.05-5.07(m，2H)，4.38-4.48(m，2H)，4.04(dd，J＝10.6，3.2Hz，1H)，3.79(dd，J＝10.7，6.9Hz，1H)，2.80-2.86(m，1H)，2.76(dd，J＝13.2，4.5Hz，1H)，2.55(dd，J＝13.3，4.0Hz，1H)，2.25-2.33(m，2H)，1.98-2.08(m，2H)，1.83-1.96(m，1H)，1.63-1.77(m，5H)，1.51-1.63(m，2H)，1.56(q，J＝7.5Hz，2H)，1.31-1.48(m，4H)，1.14(s，6H)，1.04(d，J＝6.6Hz，3H)，0.84(t，J＝7.5Hz，3H)，0.58(s，3H)；MS(+DCI)m/z 462(M+NH4)+。
Figure BPA00001184760800451
实施例5.
叔丁基氨基甲酸(2S)-2-[(1R，3R，7E，17β)-1，3-二羟基-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-17-基]丙基酯
注：在暗罩中进行下列程序。将实施例4A的化合物(20毫克，0.02毫摩尔)溶解在1毫升1∶1甲苯∶二甲基甲酰胺中；经3天分三份加入异氰酸叔丁酯(0.2毫升)，同时在100-105℃加热该混合物。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中0％至20％乙酸乙酯的梯度洗脱。将该材料溶解在1.5毫升处于四氢呋喃中的1N四-正丁基氟化铵中，加入0.2毫升乙酸，并将该混合物在70℃温热过夜。使该反应混合物在3∶2乙酸乙酯/己烷和水之间分配。有机相用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中25％至45％乙酸乙酯的梯度洗脱。合并含产物的级分并真空浓缩以提供标题化合物(1.7毫克)。1H NMR(500MHz，CD2Cl2)δppm 6.33(d，J＝11.3Hz，1H)5.89(d，J＝11.3Hz，1H)5.06(d，J＝6.4Hz，2H)4.66(s，1H)4.34-4.49(m，2H)3.95-4.06(m，1H)3.63-3.77(m，1H)2.70-2.91(m，2H)2.55(dd，J＝13.4，4.0Hz，2H)2.20-2.38(m，5H)1.94-2.05(m，2H)1.83-1.96(m，2H)1.52-1.62(m，2H)1.33-1.47(m，4H)1.26-1.33(m，9H)0.98-1.06(m，3H)0.57(s，3H)。
Figure BPA00001184760800452
实施例6.
2-(乙酰氧基)-2-甲基丙酸(2S)-2-[(1R，3R，7E，17β)-1，3-二羟基-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-17-基]丙基酯
实施例6A.
[2-((3R，5R)-3，5-双{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-4-亚甲基亚环己基)乙基](二苯基)膦氧化物
使用DeLuca和Sicinski在WO98/41500中所述的程序制备标题化合物。
实施例6B.
新戊酸(2S)-2-((1R，3R，7E，17β)-1，3-双{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-17-基)丙基酯
注：在暗罩中进行下列程序。将实施例6A的化合物(64毫克，0.077毫摩尔)与实施例1D的化合物(32毫克，0.11毫摩尔)合并，并通过与1毫升甲苯共沸两次，干燥所得混合物。加入四氢呋喃(2毫升)，并将该溶液冷却至-78℃。分两份逐滴加入双(三甲基甲硅烷基)氨基化锂的溶液(在四氢呋喃中0.6M；0.40毫升)，产生橙黄色，其经20分钟消退。将该溶液升温至0℃并在此温度搅拌20分钟。通过添加1毫升1N NH4Cl水溶液，猝灭该反应，并用乙酸乙酯萃取该混合物。有机萃取物用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中0％至6％乙酸乙酯的梯度洗脱。
实施例6C.
(2S)-2-((1R，3R，7E，17β)-1，3-双{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-17-基)丙-1-醇
注：在暗罩中进行下列程序。将实施例6B的化合物(70毫克，0.77毫摩尔)溶解在1.5毫升醚中并冷却至-78℃。加入氢化锂铝在四氢呋喃中的溶液(1.0M，0.62毫升)；将该混合物搅拌10分钟，随后使其升温至0℃50分钟。通过小心添加乙酸乙酯，接着添加罗谢尔盐溶液，猝灭该反应。搅拌15分钟后，该混合物用乙酸乙酯萃取；有机萃取物用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂以提供标题化合物(74毫克)。
实施例6D.
2-(乙酰氧基)-2-甲基丙酸(2S)-2-[(1R，3R，7E，17β)-1，3-二羟基-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-17-基]丙基酯
注：在暗罩中进行下列程序。将实施例6C的化合物(31毫克，0.054毫摩尔)溶解在2毫升1，2-二氯乙烷中；加入三乙胺(75微升，过量)，接着加入62微升乙酰氧基异丁酰氯和催化量的4-二甲基氨基吡啶。2小时后，真空除去溶剂，并使残留物在醚和1N HCl水溶液之间分配。有机萃取物用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中0％至8％乙酸乙酯的梯度洗脱。将该产物(40毫克)溶解在2毫升处于四氢呋喃中的1N四-正丁基氟化铵中并在环境温度搅拌2.5小时。使反应混合物在3∶1乙酸乙酯/己烷和水之间分配。有机相用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中30％至50％乙酸乙酯的梯度洗脱以提供标题化合物(3.6毫克)。1H NMR(400MHz，CD2Cl2)δppm 6.33(d，J＝11.0Hz，1H)5.89(d，J＝11.4Hz，1H)5.06(d，J＝4.6Hz，2H)4.34-4.49(m，2H)4.00-4.13(m，1H)3.85(dd，J＝10.7，6.8Hz，1H)2.70-2.90(m，2H)2.55(dd，J＝13.2，4.0Hz，1H)2.22-2.38(m，2H)1.96-2.08(m，5H)1.84-1.93(m，2H)1.65-1.76(m，4H)1.55-1.62(m，2H)1.55-1.60(m，1H)1.49-1.57(m，6H)1.30-1.46(m，3H)0.97-1.06(m，3H)0.58(s，3H)；MS(+DCI)m/z 492(M+NH4)+。
Figure BPA00001184760800471
实施例7.
(1R，3R，7E)-2-亚甲基-17-[(1R，4S)-1，4，5-三甲基己基]-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1，3-二醇
实施例7A.
(1R，3aR，4S，7aR)-7a-甲基-1-[(1R，2E，4R)-1，4，5-三甲基己-2-烯基]八氢-1H-茚-4-酚
通过应用Toh和Okamura在J.Org.Chem.1983，48，1414中开发的程序，但使用维生素D2作为原材料，制备标题化合物。由此，将20.6克(52毫摩尔)维生素D2转化成4.75克所需产物(33％，四步骤程序的总收率)。
实施例7B.
(1R，3aR，4S，7aR)-7a-甲基-1-[(1R，4S)-1，4，5-三甲基己基]八氢-1H-茚-4-酚
将实施例7A的化合物(400毫克，1.4毫摩尔)溶解在20毫升乙酸中并使用10％载铂碳催化剂氢化。在用氮气吹扫和过滤以除去催化剂后，真空除去溶剂，并使残留物在乙酸乙酯和碳酸氢钠饱和水溶液之间分配。有机相用盐水洗涤并经硫酸钠干燥。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中5％至30％乙酸乙酯的梯度洗脱以提供标题化合物，390毫克。
实施例7C.
(1R，3aR，7aR)-7a-甲基-1-[(1R，4S)-1，4，5-三甲基己基]八氢-4H-茚-4-酮
将实施例7B的化合物(66毫克，0.25毫摩尔)溶解在5毫升二氯甲烷中并冷却至0℃；加入370毫克二铬酸吡啶鎓和2毫克对甲苯磺酸吡啶鎓，并将所得混合物在环境温度下摇振4小时。该反应在用乙酸乙酯洗涤下先经硅藻土垫，随后经硅胶垫过滤。将合并的滤液浓缩并通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中的10％乙酸乙酯洗脱以提供标题化合物，56毫克。
实施例7D.
(1R，3R，7E)-2-亚甲基-17-[(1R，4S)-1，4，5-三甲基己基]-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1，3-二醇
注：在暗罩中进行下列程序。将实施例6A的化合物(20毫克，0.034毫摩尔)与实施例7C的化合物(19毫克，0.068毫摩尔)合并，并通过与1毫升甲苯共沸两次，干燥所得混合物。加入四氢呋喃(1毫升)，并将该溶液冷却至-78℃。分两份逐滴加入双(三甲基甲硅烷基)氨基化锂的溶液(在四氢呋喃中1M；0.30毫升)，产生橙黄色，其经20分钟消退。将该溶液升温至0℃并在此温度下搅拌20分钟。通过添加1毫升1N氯化铵水溶液，猝灭该反应，并用乙酸乙酯萃取该混合物。有机萃取物用盐水洗涤和经硫酸钠干燥。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中的2％乙酸乙酯洗脱。将该产物(10毫克)溶解在0.3毫升处于四氢呋喃中的1N四-正丁基氟化铵中并在环境温度下搅拌过夜。使反应混合物在3∶1乙酸乙酯/己烷和水之间分配。有机相用盐水洗涤并经硫酸钠干燥。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中的30％乙酸乙酯洗脱，以提供标题化合物，6毫克。1H NMR(400MHz，CD2Cl2)δppm 6.33(d，J＝11.4Hz，1H)5.88(d，J＝11.0Hz，1H)5.06(d，J＝4.3Hz，2H)4.34-4.51(m，2H)2.83(d，J＝4.3Hz，2H)2.78(d，J＝4.6Hz，2H)2.55(dd，J＝13.2，4.0Hz，1H)2.21-2.43(m，4H)1.97-2.08(m，2H)1.82-1.99(m，2H)1.52-1.63(m，3H)1.31-1.47(m，4H)1.18-1.34(m，3H)0.83-0.93(m，6H)0.73-0.83(m，6H)0.55(s，3H)；MS(DCI+)m/z 432(M+NH4)+。
Figure BPA00001184760800491
实施例8.
(1R，3R，7E，17β)-17-[(1S)-1-(3-羟基-3-甲基丁氧基)乙基]-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1，3-二醇
实施例8A
(1Z，3aR，4S，7aS)-1-亚乙基-7a-甲基八氢-1H-茚-4-酚
根据Daniewski和Liu在J.Org.Chem.2001，66(2)，626-628中所述的程序制备标题化合物。
实施例8B
叔丁基{[(1Z，3aR，4S，7aS)-1-亚乙基-7a-甲基八氢-1H-茚-4-基]氧基}二甲基硅烷
将实施例8A的化合物(0.74克，4.1毫摩尔)溶解在4毫升二甲基甲酰胺中；加入0.4克咪唑，接着加入0.7克叔丁基二甲基甲硅烷基氯。将所得混合物在环境温度下搅拌4小时；加入等份数的叔丁基二甲基甲硅烷基氯和咪唑，并将该混合物在60℃加热过夜。加入水；将该混合物在环境温度下搅拌30分钟，随后用醚萃取。该有机相用1N H3PO4水溶液、水和盐水相继洗涤，并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中0％至10％乙酸乙酯的梯度洗脱。分离标题化合物，其被一些未反应的原材料污染(0.31克，42％)。
实施例8C.
(1S)-1-((1S，3aR，4S，7aR)-4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-7a-甲基八氢-1H-茚-1-基)乙醇
将实施例8B的化合物(1.9克，6.4毫摩尔)溶解在9-硼杂双环[3.3.1]壬烷(9-BBN)溶液(在四氢呋喃中0.5M；28毫升)中；该混合物在45℃温热5小时，随后冷却至0℃，并通过添加8毫升2N NaOH和4毫升30％过氧化氢溶液的组合来猝灭。将所得溶液升温至环境温度并搅拌过夜。该反应混合物用乙酸乙酯萃取；有机相用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash280TM上的色谱法提纯，用己烷中10％至90％乙酸乙酯的梯度洗脱以提供标题化合物(定量)。
实施例8D.
3-(溴甲基)-2，2-二甲基环氧乙烷
根据Shimizu和共事者在Org.Proc.Res.& Dev.2005，9，278-287中所述的程序制备标题化合物。
实施例8E.
4-{[(1S)-1-((1S，3aR，4S，7aR)-4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-7a-甲基八氢-1H-茚-1-基)乙基]氧基}-2-甲基丁-2-醇
将实施例8C的化合物(1.1克，3.5毫摩尔)溶解在5毫升四氢呋喃中；加入氢化钠(0.28克60％油分散体)，并将该混合物在环境温度下搅拌10分钟，同时停止气体释放。加入实施例8D的化合物(1.2克)，并将该混合物在回流下加热60分钟。将该混合物冷却至环境温度，并逐滴加入6.5毫升在四氢呋喃中的1N氢化锂铝溶液(注意：在简短诱导期后，该反应伴随着剧烈放热进行。)随着放热平息，将该混合物搅拌2小时，随后通过添加10毫升乙酸乙酯，猝灭该反应(接着发生更放热的反应)。标准Fieser后处理提供凝胶质，其与固体Na2SO4一起搅拌2小时，随后在用乙酸乙酯洗涤的情况下经硅藻土垫过滤。将合并的洗液真空浓缩，且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中10％至80％乙酸乙酯的梯度洗脱。极性较高的级分作为原料醇回收；极性较低的混合级分在Analogix IntelliFlash 280TM上再色谱处理，用己烷中0％至40％乙酸乙酯的梯度洗脱以获得标题化合物(0.80克，57％)。
实施例8F.
(1S，3aR，4S，7aS)-1-[(1S)-1-(3-羟基-3-甲基丁氧基)乙基]-7a-甲基八氢-1H-茚-4-酚
将实施例8E的化合物(230毫克，0.58毫摩尔)溶解在8毫升处于四氢呋喃中的1N四-正丁基氟化铵中并在80℃温热过夜。使反应混合物在醚和水之间分配；有机相用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中0％至50％乙酸乙酯的梯度洗脱以分离标题化合物(140毫克，85％)。
实施例8G
(1S，3aR，7aR)-1-[(1S)-1-(3-羟基-3-甲基丁氧基)乙基]-7a-甲基八氢-4H-茚-4-酮
将实施例8F的化合物(70毫克，0.25毫摩尔)溶解在1.5毫升二氯甲烷中；加入350毫克二铬酸吡啶鎓和15毫克对甲苯磺酸吡啶鎓，并将所得混合物在环境温度下搅拌过夜。真空除去溶剂；将该残留物溶解在乙酸乙酯中并在用乙酸乙酯洗涤的情况下经硅藻土过滤。浓缩该滤液且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中10％至40％乙酸乙酯的梯度洗脱，以分离标题化合物(65毫克，73％)。
实施例8H.
(1R，3R，7E，17β)-17-[(1S)-1-(3-羟基-3-甲基丁氧基)乙基]-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1，3-二醇
注：在暗罩中进行下列程序。将实施例6A的化合物(50毫克，0.088毫摩尔)与实施例8G的化合物(32毫克，0.09毫摩尔)合并，并通过与1毫升甲苯共沸两次，干燥所得混合物。加入四氢呋喃(1.5毫升)，并将该溶液冷却至-78℃。分两份逐滴加入双(三甲基甲硅烷基)氨基化锂的溶液(在四氢呋喃中1M；0.20毫升)，产生橙黄色，其经20分钟消退。将该溶液升温至0℃并在此温度下搅拌15分钟。通过添加1毫升1N NH4Cl水溶液，猝灭该反应，并用乙酸乙酯萃取该混合物。有机萃取物用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂；将该残留物溶解在1.5毫升处于四氢呋喃中的1N四-正丁基氟化铵中并在环境温度下搅拌过夜。使反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。有机相用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中10％至100％乙酸乙酯的梯度洗脱以提供标题化合物(18毫克)。1H NMR(500MHz，CD2Cl2)δppm 6.32(d，J＝11.3Hz，1H)5.90(d，J＝11.3Hz，1H)5.06(d，J＝7.0Hz，2H)4.33-4.50(m，2H)3.75-3.90(m，1H)3.41-3.55(m，2H)3.26(dd，J＝7.9，6.1Hz，1H)2.69-2.89(m，2H)2.55(dd，J＝13.1，4.0Hz，1H)2.21-2.39(m，2H)1.96-2.04(m，3H)1.89(dd，J＝15.4，2.9Hz，2H)1.50-1.65(m，6H)1.31(d，J＝4.3Hz，1H)1.14-1.27(m，12H)0.54(s，3H)；MS(+ESI)m/z 441(M+Na)+。
Figure BPA00001184760800521
实施例9.
(1R，3R，7E)-17-[(1R，4S)-1，4，5-三甲基己基]-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1，3-二醇
实施例9A.
[2-((3R，5R)-3，5-双{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}亚环己基)乙基](二苯基)膦氧化物
根据DeLuca等人在EP 516410 B1中所述的程序制备标题化合物。
实施例9B.
(1R，3R，7E)-17-[(1R，4S)-1，4，5-三甲基己基]-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1，3-二醇
注：在暗罩中进行下列程序。将实施例9A的化合物(20毫克，0.034毫摩尔)与实施例7C的化合物(20毫克，0.07毫摩尔)合并，并通过与1毫升甲苯共沸两次，干燥所得混合物。加入四氢呋喃(1毫升)，并将该溶液冷却至-78℃。分两份逐滴加入双(三甲基甲硅烷基)氨基化锂的溶液(在四氢呋喃中1M；0.20毫升)，产生橙黄色，其经20分钟消退。将该溶液升温至0℃并在此温度下搅拌20分钟。通过添加1毫升1N NH4Cl水溶液，猝灭该反应，并用乙酸乙酯萃取该混合物。有机萃取物用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，并将该残留物溶解在1毫升处于四氢呋喃中的0.5N四-正丁基氟化铵中并在环境温度下搅拌过夜。使反应混合物在3∶1乙酸乙酯/己烷和水之间分配。有机相用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中50％至60％乙酸乙酯的梯度洗脱以提供标题化合物(6毫克)。1H NMR(500MHz，CD2Cl2)δppm 6.28(d，J＝11.3Hz，1H)5.86(d，J＝11.3Hz，1H)3.90-4.15(m，2H)2.61-2.85(m，2H)2.45(dd，J＝13.3，3.5Hz，1H)2.11-2.26(m，2H)1.98-2.05(m，4H)1.81-1.94(m，4H)1.72-1.79(m，1H)1.61-1.72(m，4H)1.29-1.36(m，3H)1.22-1.38(m，7H)0.76-0.89(m，9H)0.54(s，3H)；MS(+ESI)m/z 420(M+NH4)+。
实施例10.
(1S，3R，5Z，7E，24R)-22，25-二甲氧基-9，10-裂环麦角-5，7，10-三烯-1，3-二醇
实施例10A.
[(2Z)-2-((3S，5R)-3，5-双{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-亚甲基亚环己基)乙基](二苯基)膦氧化物
根据Radinov和共事者在J.Org.Chem.2002，67(5)，1580-1587中所述的程序制备标题化合物。
实施例10B.
(3S)-2，3-二甲基-4-(苯基磺酰基)丁-2-醇
根据Kutner等人在J.Org.Chem.1988，53，3450-3457中所述的程序制备标题化合物。
实施例10C.
三甲基{[(2S)-1，1，2-三甲基-3-(苯基磺酰基)丙基]氧基}硅烷
将实施例10B的化合物(0.95克，3.9毫摩尔)溶解在3毫升二甲基甲酰胺中；加入1毫升1-(三甲基甲硅烷基)咪唑，并将所得溶液在环境温度下搅拌过夜，随后在80℃加热8小时。使该粗制混合物在乙酸乙酯和水之间分配；有机相用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中0％至20％乙酸乙酯的梯度洗脱以提供标题化合物(1.18克，96％)。
实施例10D.
新戊酸(2S)-2-((1R，3aR，4S，7aR)-4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-7a-甲基八氢-1H-茚-1-基)丙基酯
将实施例1B的化合物(5.05克，24毫摩尔)溶解在35毫升二氯甲烷和15毫升吡啶中；将该溶液冷却至0℃，并经5分钟逐滴加入3.3毫升新戊酰氯。将所得混合物在0℃搅拌4小时，随后经30分钟将反应混合物升温至环境温度。用水猝灭该反应，并用保持在低于环境温度的浴真空浓缩该混合物。使该粗材料在醚和0.5N HCl水溶液之间分配；有机相用0.5N HCl水溶液，随后盐水洗涤，并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂；将该残留物溶解在15毫升二甲基甲酰胺中。加入咪唑(2.0克)和叔丁基二甲基甲硅烷基氯(4.0克)，并将所得混合物在环境温度下搅拌4天，随后升温至60℃4小时。真空除去溶剂；使该残留物在乙酸乙酯和1.5N HCl水溶液之间分配。有机相用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中0％至60％乙酸乙酯的梯度洗脱以提供标题化合物(6.45克，66％)。
实施例10E.
(2S)-2-((1R，3aR，4S，7aR)-4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-7a-甲基八氢-1H-茚-1-基)丙-1-醇
将实施例10D的化合物(6.45克，16毫摩尔)溶解在30毫升醚中并冷却至-30℃；以保持恒定温度和适度气体释放速率的速率加入35毫升氢化锂铝在醚中的1N溶液。将该混合物在-30℃搅拌10分钟，随后将其升温至0℃1小时。通过仔细添加乙酸乙酯(注意！剧烈气体释放)，猝灭该反应，并搅拌10分钟，随后用罗谢尔盐的溶液猝灭。所得混合物在乙酸乙酯和水之间分配；有机相用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中5％至30％乙酸乙酯的梯度洗脱。
实施例10F.
(2S，5R)-2-((1R，3aR，4S，7aR)-4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-7a-甲基八氢-1H-茚-1-基)-5，6-二甲基-6-[(三甲基甲硅烷基)氧基]庚-3-醇
将实施例10E的化合物(200毫克，0.61毫摩尔)溶解在2毫升二氯甲烷中；加入100毫克
Figure BPA00001184760800551
分子筛，接着加入15毫克四丙基过钌酸铵和75毫克4-甲基吗啉N-氧化物。将该混合物在环境温度下搅拌2小时，随后经硅藻土过滤以除去固体。该粗产物通过使用Analogix IntelliFlashTM 40的硅胶色谱法提纯，用己烷中5％至30％乙酸乙酯的梯度洗脱。将实施例10C的化合物(200毫克，0.63毫摩尔)与这种醛根据Kutner等人在J.Org.Chem.1988，53，3450-3457中所述的偶联程序合并。在使用Analogix IntelliFlash 280TM色谱提纯后分离所述产物(脱硫而未消除的产物)，用己烷中0％至50％乙酸乙酯的梯度洗脱。
实施例10G.
叔丁基({(1R，3aR，4S，7aR)-1-[(1S，4R)-2，5-二甲氧基-1，4，5-三甲基己基]-7a-甲基八氢-1H-茚-4-基}氧基)二甲基硅烷
将实施例10F的化合物(50毫克，0.1毫摩尔)溶解在0.5毫升无水四氢呋喃中；加入20毫克NaH(60％油分散体；过量)，接着(在气体释放停止后)加入0.1毫升(过量)碘甲烷。将所得混合物在环境温度下搅拌过夜，然后用水猝灭并用乙酸乙酯萃取。有机相用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中0％至20％乙酸乙酯的梯度洗脱以提供标题化合物(43毫克，94％)。
实施例10H.
(1R，3aR，4S，7aR)-1-[(1S，4R)-2，5-二甲氧基-1，4，5-三甲基己基]-7a-甲基八氢-1H-茚-4-酚
将实施例10G的化合物(42毫克，0.093毫摩尔)溶解在1.5毫升处于四氢呋喃中的1N四-正丁基氟化铵中，并在80℃温热过夜。使反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配；有机相用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中0％至25％乙酸乙酯的梯度洗脱以提供标题化合物(27毫克，86％)。
实施例10I.
(1R，3aR，7aR)-1-[(1S，4R)-2，5-二甲氧基-1，4，5-三甲基己基]-7a-甲基八氢-4H-茚-4-酮
将实施例10H的化合物(27毫克，0.079毫摩尔)溶解在1毫升二氯甲烷中；加入150毫克二铬酸吡啶鎓和10毫克对甲苯磺酸吡啶鎓，并将所得混合物在环境温度下搅拌过夜。加入硅藻土(～500毫克)并真空除去溶剂。将该残留物溶解在乙酸乙酯中并加载到二氧化硅塞上。用己烷中50％至100％乙酸乙酯的梯度洗脱和浓缩合并的洗出液，产生产物，其不经进一步提纯即继续使用。
实施例10J.
(1S，3R，5Z，7E，24R)-22，25-二甲氧基-9，10-裂环麦角-5，7，10-三烯-1，3-二醇
注：在暗罩中进行下列程序。将实施例10A的化合物(20毫克，0.035毫摩尔)与实施例10I的化合物(12毫克，0.036毫摩尔)在1毫升甲苯中合并；真空除去溶剂以彻底干燥试剂。将该残留物溶解在1.5毫升无水四氢呋喃中并冷却至-78℃。逐滴加入双(三甲基甲硅烷基)氨基化锂的溶液(在四氢呋喃中1.0M；0.1毫升)，产生橙黄色，其经20分钟消退。加入另外0.05毫升双(三甲基甲硅烷基)氨基化锂试剂；将所得混合物在-78℃搅拌1小时，随后升温至0℃并在此温度下搅拌30分钟。通过添加1毫升1N NH4Cl水溶液，猝灭该反应，并用乙酸乙酯萃取该混合物。有机萃取物用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，并将该残留物溶解在1毫升处于四氢呋喃中的1N四-正丁基氟化铵中。在环境温度下搅拌过夜后，使反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。有机相用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中10％至100％乙酸乙酯的梯度洗脱，接着在100％乙酸乙酯下溶剂保存(solvent hold)以提供标题化合物(1.2毫克)。1H NMR(400MHz，CD2Cl2)δppm 6.37(d，J＝11.0Hz，1H)6.03(d，J＝11.4Hz，1H)4.38(dd，J＝4.3Hz，1H)4.09-4.24(m，2H)3.25-3.34(m，3H)3.17-3.21(m，1H)3.07-3.16(m，3H)2.86(s，1H)2.55(d，J＝3.1Hz，1H)2.27(dd，J＝13.3，6.3Hz，1H)1.59-1.79(m，7H)1.42-1.54(m，4H)1.18-1.34(m，5H)1.01-1.13(m，7H)0.81-1.00(m，9H)0.51-0.63(m，3H)。
Figure BPA00001184760800571
实施例11.
(1R，3R，7E，17β)-17-[(1S，4R)-2，5-二甲氧基-1，4，5-三甲基己基]-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1，3-二醇
注：在暗罩中进行下列程序。将实施例9A的化合物(20毫克，0.035毫摩尔)与实施例10I的化合物(12毫克，0.036毫摩尔)在1毫升甲苯中合并；真空除去溶剂以彻底干燥试剂。将该残留物溶解在1.5毫升无水四氢呋喃并冷却至-78℃。逐滴加入双(三甲基甲硅烷基)氨基化锂的溶液(在四氢呋喃中1.0M；0.1毫升)，产生橙黄色，其经20分钟消退。加入另外0.05毫升双(三甲基甲硅烷基)氨基化锂试剂；将所得混合物在-78℃搅拌1小时，随后升温至0℃并在此温度下搅拌30分钟。通过添加1毫升1N NH4Cl水溶液，猝灭该反应，并用乙酸乙酯萃取该混合物。有机萃取物用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，并将该残留物溶解在1毫升处于四氢呋喃中的1N四-正丁基氟化铵中。在环境温度下搅拌过夜后，使反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。有机相用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中10％至100％乙酸乙酯的梯度洗脱，接着在100％乙酸乙酯下溶剂保存(solvent hold)以提供标题化合物(4.4毫克)。1H NMR(400MHz，CD2Cl2)δppm 6.29(d，J＝11.4Hz，1H)5.87(d，J＝11.4Hz，1H)4.02(d，J＝26.7Hz，1H)3.29(s，3H)3.17-3.27(m，1H)3.12(s，3H)2.75-2.90(m，1H)2.63-2.73(m，1H)2.44(d，J＝3.7Hz，2H)2.18(d，J＝5.5Hz，2H)1.82-2.03(m，4H)1.61-1.70(m，2H)1.60-1.81(m，7H)1.34-1.59(m，6H)1.19-1.40(m，3H)1.07(s，6H)0.82-0.96(m，3H)0.56(s，3H)。
Figure BPA00001184760800581
实施例12.
(1R，3R，7E，17β)-2-亚甲基-17-[(1S)-1-甲基-2-苯氧基乙基]-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1，3-二醇
注：在暗罩中进行下列程序。将实施例6C的化合物(16毫克，0.028毫摩尔)与8毫克酚和20毫克三苯基膦在2毫升甲苯中合并，接着加入18毫克偶氮二羧酸二叔丁酯。用氩气吹扫该混合物并在85℃加热4小时。真空除去溶剂后，该残留物通过在Analogix IntelliFlash280TM上的色谱法提纯，用己烷中0％至5％乙酸乙酯的梯度洗脱。将该产物(6毫克)溶解在1.5毫升处于四氢呋喃中的1N四-正丁基氟化铵中。在环境温度下搅拌3小时后，使反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。有机相用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中25％至45％乙酸乙酯的梯度洗脱以提供标题化合物(4毫克)。1H NMR(500MHz，CD2Cl2)δppm 7.20-7.37(m，2H)6.76-7.01(m，3H)6.34(d，J＝11.0Hz，1H)5.90(d，J＝11.3Hz，1H)5.06(d，J＝5.5Hz，2H)4.32-4.54(m，2H)3.94(dd，J＝3.1Hz，1H)3.69(dd，J＝7.3Hz，1H)2.69-2.94(m，2H)2.55(dd，J＝13.4，4.0Hz，2H)2.19-2.39(m，3H)1.98-2.14(m，4H)1.81-1.99(m，3H)1.64-1.77(m，2H)1.49-1.66(m，2H)1.27-1.35(m，1H)0.85-1.02(m，3H)0.61(s，3H)；MS(+DCI)m/z440(M+NH4)+。
Figure BPA00001184760800591
实施例13.
(1R，3S，5Z，7E，17β)-3-氟-17-[(1R)-5-羟基-1，5-二甲基己基]-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1-醇
实施例13A.
叔丁基{[(1R，2R，4R，6R)-4-异丙烯基-1-甲基-7-氧杂双环[4.1.0]庚-2-基]氧基}二苯基硅烷
将(R)-香芹酮氧化物(106克，640毫摩尔，如Klein和Ohloff在Tetrahedron 1963，19，1091-1099中对对映体所述制备)溶解在120毫升甲醇中，并将该溶液添加到预冷至0℃的CeCl3(七水合物；119克，320毫摩尔)在1.5升甲醇中的溶液中。用60毫升甲醇漂洗烧瓶，并将该混合物冷却至-20℃。经1小时添加NaBH4溶液(在三甘醇二甲醚中2M，175毫升)。在-20℃搅拌30分钟后，加入720毫升水，并使该混合物升温至环境温度。真空除去有机溶剂；加入800毫升乙酸乙酯，接着加入足量2N HCl水溶液(～100毫升)以使该溶液的pH值达到～5.5。滗析水相，有机相用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。将该溶液真空浓缩以产生粗制醇的三甘醇二甲醚溶液。加入二甲基甲酰胺(300毫升)，接着加入咪唑(70克，1000毫摩尔)和叔丁基二苯基甲硅烷基氯(236克，1000毫摩尔)。将该混合物在环境温度下搅拌84小时，在24小时后加入另外50毫升二甲基甲酰胺以改进溶解度。该混合物在冰浴中冷却，加入30毫升水，并继续搅拌30分钟。使该反应在庚烷和水之间分配；有机相相继用水和盐水洗涤，并经MgSO4干燥。真空浓缩后，该粗产物通过快速色谱法提纯，用己烷中1∶5至1∶4二氯甲烷的梯度洗脱以提供标题化合物(206克，79％)。
实施例13B.
(1R，3R，5R，6R)-5-{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}-6-甲基-7-氧杂双环[4.1.0]庚-3-醇
将实施例13A的化合物(34克，92重量％，77毫摩尔)和NaHCO3(3.3克，39毫摩尔)在300毫升二氯甲烷和60毫升甲醇中的混合物冷却至＜-70℃并用臭氧(7-8psi，90伏(volts)，4slpm)处理直至观察到持久的蓝色。在用氮气吹扫以脱色后，使该反应升温至～0℃，随后经纸过滤并浓缩。在用2x100毫升苯冲洗后，加入300毫升二氯甲烷和60毫升吡啶并将该反应冷却至＜5℃。加入对硝基苯甲酰氯(22.2克，120毫摩尔)并搅拌1小时，随后移除浴并将该反应在环境温度下搅拌过夜。将所得悬浮液真空浓缩成稠浆，随后用乙酸乙酯稀释，并通过过滤除去固体。该滤液用250毫升碳酸氢钠饱和水溶液，随后用各100毫升的2N HCl、1N HCl和2N HCl，和用各200毫升的1NHCl、碳酸氢钠饱和水溶液和盐水洗涤。将有机层经MgSO4干燥，过滤并浓缩以产生粗制酯。将该产物的样品(20.6克，32毫摩尔)溶解在115毫升甲醇中；加入15毫升水，接着加入11.0克K2CO3。2小时后，用6.5毫升乙酸猝灭该反应，随后真空浓缩。用100毫升水处理该残留物，然后相继用150毫升和100毫升乙酸乙酯萃取。合并的有机层用各100毫升的碳酸氢钠饱和水溶液，随后10％NaCl水溶液，随后20％NaCl水溶液洗涤。将乙酸乙酯层经MgSO4干燥，过滤并浓缩。色谱法(ISco
Figure BPA00001184760800601
***，Analogix RS 300300g柱，1∶9乙酸乙酯∶二氯甲烷5分钟，随后经35分钟至12∶88，随后保持10分钟)提供标题化合物(10.3克，91重量％，76％)。
实施例13C.
叔丁基({(1R，2R，4R，6R)-1-甲基-4-[(三乙基甲硅烷基)氧基]-7-氧杂双环[4.1.0]庚-2-基}氧基)二苯基硅烷
将实施例13B的化合物(16.0克，42毫摩尔)溶解在20毫升二甲基甲酰胺中；加入7.1克咪唑(100毫摩尔，2.5当量)，接着加入10.5毫升氯三乙基硅烷。将所得混合物在环境温度下搅拌过夜，然后用水稀释并用乙酸乙酯萃取。浓缩有机相，用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空浓缩后，该残留物通过快速色谱法提纯，用己烷中50％至100％二氯甲烷的梯度洗脱以提供标题化合物(14.0克，90％)。
实施例13D.
(1R，3R，5R)-3-{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}-2-亚甲基-5-[(三乙基甲硅烷基)氧基]环己醇
将2，2，6，6-四甲基哌啶(47毫升)溶解在250毫升甲苯中；加入正丁基锂(在己烷中2.5M，113毫升)并将所得混合物搅拌40分钟。加入二乙基氯化铝(在己烷中1.0M，289毫升)，并继续搅拌1小时。将该溶液冷却至0℃；将实施例13C的化合物(34.9克，70毫摩尔)溶解在100毫升甲苯中并经5分钟添加。将该混合物搅拌3小时，缓慢升温至环境温度。通过添加NH4Cl饱和水溶液，猝灭该反应；搅拌5分钟后，加入2N HCl水溶液以使pH值达到～1.5。该混合物用乙酸乙酯萃取；有机相相继用水和盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂以产生标题化合物，其不经进一步提纯即继续使用。
实施例13E.
(3R，5R)-3-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-5-{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}-4-亚甲基环己酮
将实施例13D的化合物(8.5克，17毫摩尔)溶解在50毫升二氯甲烷中；加入4.4毫升2，6-二甲基吡啶，并将所得溶液冷却至0℃。加入三氟甲磺酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯(5.9毫升)，并将该混合物搅拌1小时。通过添加NH4Cl饱和水溶液，猝灭该反应，真空除去溶剂，并使残留物在乙酸乙酯和水之间分配。有机相用1N HCl水溶液，随后盐水洗涤，并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂；该残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中2％至5％乙酸乙酯的梯度洗脱。将该产物(9.3克)溶解在75毫升乙醇中；加入对甲苯磺酸吡啶鎓(390毫克)，并将该混合物在环境温度下搅拌1小时。真空除去溶剂；该残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中9％至17％乙酸乙酯的梯度洗脱。将该产物的样品(6.8克中的5.8克)溶解在30毫升二氯甲烷中；加入3.0克NaHCO3，并将该混合物冷却至0℃。加入戴斯-马丁试剂(5.9克)，并继续搅拌2小时。真空除去溶剂，并使残留物在乙酸乙酯和水之间分配。有机相用1N HCl水溶液，随后盐水洗涤，并经Na2SO4干燥。使该有机相通过硅胶塞并真空浓缩，以获得标题化合物(5.5克，71％)。
实施例13F.
(2E)-((3R，5R)-3-{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}-5-羟基-4-亚甲基亚环己基)乙酸乙酯
将二异丙胺(1.2毫升，9.4毫摩尔)在10毫升四氢呋喃中的溶液冷却至-78℃；加入正丁基锂(在己烷中2.5M，3.6毫升)，接着在5分钟后，加入三甲基甲硅烷基乙酸乙酯(1.7毫升)。将所得溶液在-78℃搅拌30分钟，随后经5分钟加入实施例13E的化合物(2.0克，4毫摩尔)在10毫升四氢呋喃中的溶液。继续搅拌4小时。通过添加NH4Cl饱和水溶液，猝灭该反应；将该混合物升温至环境温度，在乙酸乙酯和水之间分配。有机相用1N HCl水溶液和盐水洗涤，并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂；该残留物通过在Analogix IntelliFlash280TM上的色谱法提纯，用己烷中5％至10％乙酸乙酯的梯度洗脱。将该产物(1.9克)溶解在17毫升乙醇中；加入1.3毫升浓HCl，并将所得溶液在环境温度下搅拌过夜。真空除去溶剂，将该残留物溶解在碳酸氢钠饱和水溶液中并用乙酸乙酯萃取。将该有机相真空浓缩并通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用乙腈中2％至3％二氯甲烷的梯度洗脱。作为较慢洗脱的材料分离标题化合物(0.62克)。
实施例13G.
(2Z)-((3R，5S)-3-{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}-5-氟-4-亚甲基亚环己基)乙酸乙酯
将实施例13F的化合物(96毫克，0.22毫摩尔)溶解在2毫升二氯甲烷中，并将所得溶液冷却至-78℃。加入(二乙基氨基)三氟化硫(DAST，0.12毫升)；将该混合物搅拌30分钟，随后通过添加碳酸氢钠饱和水溶液来猝灭。将该混合物升温至环境温度；有机相经Na2SO4干燥。真空除去溶剂；该残留物通过在Analogix IntelliFlash280TM上的色谱法提纯，用己烷中的10％乙酸乙酯洗脱以获得标题化合物(42毫克，44％)。
实施例13H.
(2Z)-2-((3R，5S)-3-{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}-5-氟-4-亚甲基亚环己基)乙醇
将实施例13G的化合物(40毫克，0.09毫摩尔)溶解在1毫升1∶1二氯甲烷/甲苯中并冷却至-78℃。加入二异丁基氢化铝(在己烷中1M，0.36毫升)，并将该混合物搅拌20分钟。通过添加水，猝灭该反应；将该混合物升温至环境温度，随后通过添加浓HCl，酸化至pH～2。该混合物用乙酸乙酯萃取；有机物用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂；该残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中的17％乙酸乙酯洗脱以获得标题化合物(25毫克，68％)。
实施例13I.
[(2Z)-2-((3R，5S)-3-{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}-5-氟-4-亚甲基亚环己基)乙基](二苯基)膦氧化物
将实施例13H的化合物(180毫克，0.44毫摩尔)溶解在2毫升己烷中；加入85毫克(0.28毫摩尔)三光气，并将该混合物冷却至0℃。经2分钟逐滴加入三乙胺(0.22毫升，1.5毫摩尔)；将反应混合物搅拌30分钟，随后经1小时升温至环境温度。再加入己烷(3毫升)，并相继用冷3％HCl水溶液、水和盐水洗涤反应混合物。有机相经Na2SO4干燥；真空除去溶剂以提供粗制烯丙基氯。
将二苯基膦(0.72克，7当量)溶解在2毫升四氢呋喃中，并将该溶液冷却至0℃。加入正丁基锂的溶液(在己烷中2.5M)，并将该混合物搅拌5分钟。同时，将上述中间体烯丙基氯溶解在1毫升四氢呋喃中并冷却至-60℃。经5分钟加入该阴离子溶液，并将所得混合物在-60℃搅拌1小时。用水猝灭该反应；将该混合物升温至环境温度并用乙酸乙酯萃取。有机相用1N HCl水溶液和盐水洗涤，并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂；该残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中40％至50％乙酸乙酯的梯度洗脱以提供标题化合物(200毫克，76％)。
实施例13J.
(1R，3aR，7aR)-1-{(1R)-1，5-二甲基-5-[(三甲基甲硅烷基)氧基]己基}-7a-甲基八氢-4H-茚-4-酮
根据Kiegiel、Wovkulich和
Figure BPA00001184760800631
在Tetrahedron Lett.1991，32(43)，6057中所述的程序制备标题化合物。
实施例13K
(1R，3S，5Z，7E，17β)-3-氟-17-[(1R)-5-羟基-1，5-二甲基己基]-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1-醇
注：在暗罩中进行下列程序。将实施例13I的化合物(20毫克，0.034毫摩尔)与实施例13J的化合物(12毫克，0.056毫摩尔)在1毫升甲苯中合并；真空除去溶剂以彻底干燥试剂。将该残留物溶解在1毫升无水四氢呋喃中并冷却至-78℃。逐滴加入双(三甲基甲硅烷基)氨基化锂的溶液(在四氢呋喃中1.0M；0.1毫升)，产生橙黄色，其经20分钟消退。将所得混合物在-78℃搅拌1小时，随后升温至0℃并在此温度下搅拌30分钟。通过添加1毫升1N NH4Cl水溶液，猝灭该反应，并用乙酸乙酯萃取该混合物。有机萃取物用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，并将该残留物溶解在1毫升处于四氢呋喃中的1N四-正丁基氟化铵中。在环境温度下搅拌过夜后，使反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。有机相用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中20％至50％乙酸乙酯的梯度洗脱以提供标题化合物(6毫克)。1H NMR(500MHz，CD2Cl2)δppm 6.25-6.41(m，1H)5.98-6.13(m，1H)5.16-5.26(m，2H)4.91(d，1H)4.02-4.22(m，1H)2.87-3.05(m，1H)2.60(dd，J＝12.8，4.6Hz，1H)2.42-2.53(m，3H)2.40(d，J＝15.3Hz，1H)2.13-2.32(m，4H)2.00(s，1H)1.80-1.95(m，2H)1.66-1.79(m，2H)1.55-1.66(m，4H)1.27-1.45(m，6H)1.10-1.25(m，9H)0.91-1.01(m，3H)；MS(+DCI)m/z 436(M+NH4)+。
Figure BPA00001184760800641
实施例14.
2-羟基-2-甲基丙酸(2S)-2-[(1R，3R，7E，17β)-1，3-二羟基-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-17-基]丙酯
将实施例6C的化合物(20毫克，0.034毫摩尔)与11毫克(3当量)2-羟基异丁酸和25毫克(2.8当量)三苯基膦在1.5毫升甲苯中合并；加入22毫克(2.8当量)偶氮二羧酸二叔丁酯，用氩气吹扫所得溶液并在70℃加热1.5小时。浓缩该混合物并通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中5％至12％乙酸乙酯的梯度洗脱。将该粗制中间体(25毫克总量中的21毫克)溶解在2毫升处于四氢呋喃中的1N四-正丁基氟化铵中。在环境温度下搅拌3小时后，使反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。有机相用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash280TM上的色谱法提纯，用己烷中45％至68％乙酸乙酯的梯度洗脱以提供标题化合物(5.1毫克)。1H NMR(500MHz，CD2Cl2)δppm 6.33(d，J＝11.3Hz，1H)5.90(d，J＝11.3Hz，1H)5.06(d，J＝5.8Hz，1H)4.36-4.52(m，2H)4.16(dd，J＝10.7，3.4Hz，1H)3.92(dd，J＝10.7，7.0Hz，1H)2.83(dd，J＝12.1，3.8Hz，1H)2.76(dd，J＝13.1，4.6Hz，1H)2.55(dd，J＝13.1，4.0Hz，1H)2.21-2.35(m，2H)2.02-2.11(m，2H)1.95-2.04(m，2H)1.85-1.94(m，1H)1.64-1.81(m，4H)1.49-1.65(m，4H)1.37-1.45(m，9H)1.04(d，J＝6.7Hz，3H)0.58(s，3H)；MS(+DCI)m/z364(M+NH4)+。
Figure BPA00001184760800651
实施例15.
(1R，3R，7E，17β)-17-[(1R，4R)-5-羟基-1，4，5-三甲基己基]-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1，3-二醇
实施例15A.
叔丁基(二甲基)[((1R，3aR，4S，7aR)-7a-甲基-1-{(1R，2E，4R)-1，4，5-三甲基-5-[(三甲基甲硅烷基)氧基]己-2-烯基}八氢-1H-茚-4-基)氧基]硅烷和(3R，4E，6R)-6-((1R，3aR，4S，7aR)-4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-7a-甲基八氢-1H-茚-1-基)-2，3-二甲基庚-4-烯-2-醇
将实施例10E的化合物(200毫克，0.61毫摩尔)溶解在2毫升二氯甲烷中；加入100毫克分子筛，接着加入15毫克四丙基过钌酸铵和75毫克4-甲基吗啉N-氧化物。将该混合物在环境温度下搅拌2小时，随后经硅藻土过滤以除去固体。该粗产物通过使用Analogix IntelliFlashTM 40的硅胶色谱法提纯，用己烷中5％至30％乙酸乙酯的梯度洗脱。将实施例10C的化合物(200毫克，0.63毫摩尔)与这种醛根据Kutner等人在J.Org.Chem.1988，53，3450-3457中所述的偶联程序合并。在使用Analogix IntelliFlash 280TM色谱提纯后，以三甲基甲硅烷基醚(级分A)和羟基(级分B)的混合物形式分离所述产物，用己烷中0％至50％乙酸乙酯的梯度洗脱。合并这些产物并继续用于下一步骤。
实施例15B.
(1R，3aR，4S，7aR)-1-[(1R，2E，4R)-5-羟基-1，4，5-三甲基己-2-烯基]-7a-甲基八氢-1H-茚-4-酚
将实施例15A的混合级分溶解在2毫升处于四氢呋喃中的1N四-正丁基氟化铵中；将所得溶液在环境温度下搅拌2小时，在60℃温热过夜，然后加热至80℃3小时。用水猝灭该反应并用乙酸乙酯萃取。有机相用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中10％至40％乙酸乙酯的梯度洗脱以提供标题化合物(72毫克)。
实施例15C.
(1R，3aR，4S，7aR)-1-[(1R，4R)-5-羟基-1，4，5-三甲基己基]-7a-甲基八氢-1H-茚-4-酚
将实施例15B的化合物(89毫克)溶解在乙酸中并在10％载铂碳上氢化。在用氮气吹扫后，该混合物经硅藻土垫过滤以除去催化剂并真空浓缩以获得不经进一步提纯即继续用于下一步骤的材料。
实施例15D.
(1R，3aR，7aR)-7a-甲基-1-{(1R，4R)-1，4，5-三甲基-5-[(三甲基甲硅烷基)氧基]己基}八氢-4H-茚-4-酮
将实施例15C的化合物(73毫克，0.25毫摩尔)溶解在1毫升二氯甲烷中；加入150毫克二铬酸吡啶鎓和10毫克对甲苯磺酸吡啶鎓，并将所得混合物在环境温度下搅拌过夜。真空除去溶剂；将该残留物溶解在乙酸乙酯中并经硅藻土垫过滤。真空除去溶剂，并将该残留物溶解在1毫升二甲基甲酰胺中。加入1-(三甲基甲硅烷基)咪唑(100毫克)，并将该溶液升温至50℃3小时。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中10％至40％乙酸乙酯的梯度洗脱以提供标题化合物(72毫克，79％)。
实施例15E.
(1R，3R，7E，17β)-17-[(1R，4R)-5-羟基-1，4，5-三甲基己基]-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1，3-二醇
注：在暗罩中进行下列程序。将实施例9A的化合物(57毫克，0.1毫摩尔)与实施例15D的化合物(36毫克，0.1毫摩尔)在1毫升甲苯中合并；真空除去溶剂以彻底干燥试剂。将该残留物溶解在1.5毫升无水四氢呋喃中并冷却至-78℃。逐滴加入双(三甲基甲硅烷基)氨基化锂的溶液(在四氢呋喃中1.0M；0.1毫升)，产生橙黄色，其经20分钟消退。加入另外0.05毫升双(三甲基甲硅烷基)氨基化锂试剂；将所得混合物在-78℃搅拌1小时，随后升温至0℃并在此温度下搅拌30分钟。通过添加1毫升1N NH4Cl水溶液，猝灭该反应，并用乙酸乙酯萃取该混合物。有机萃取物用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，并将该残留物溶解在1毫升处于四氢呋喃中的1N四-正丁基氟化铵中。在50℃温热5小时后，使反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。有机相用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中0％至100％乙酸乙酯的梯度洗脱，接着在100％乙酸乙酯下溶剂保存(solvent hold)以提供标题化合物(13毫克)。1H NMR(500MHz，CD2Cl2)δppm 6.28(d，J＝11.3Hz，1H)5.86(d，J＝11.3Hz，1H)3.90-4.15(m，2H)2.75-2.87(m，1H)2.75-2.86(m，1H)2.67(dd，J＝13.1，4.0Hz，1H)2.45(dd，J＝13.1，3.4Hz，1H)2.10-2.26(m，2H)1.97-2.06(m，2H)1.81-1.94(m，2H)1.43-1.81(m，9H)1.23-1.39(m，3H)1.06-1.20(m，8H)0.81-1.00(m，9H)0.55(s，3H)；MS(+DCI)m/z436(M+NH4)+。
Figure BPA00001184760800671
实施例16.
(1R，3R，5E，7E，17β)-17-[(1R)-5-羟基-1，5-二甲基己基]-3-(羟甲基)-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1-醇
实施例16A.
(1R，2R，4R，6S)-4-异丙烯基-1-甲基-7-氧杂双环[4.1.0]庚-2-醇
将(S)-香芹酮氧化物(75.7克，455毫摩尔；通过Klein和Ohloff在Tetrahedron 1963，19，1091-1099中所述的程序制备)溶解在750毫升四氢呋喃中并冷却至-78℃。经71分钟加入
Figure BPA00001184760800681
(在四氢呋喃中1M，708毫升，708毫摩尔)。再搅拌4小时后，通过添加250毫升甲醇，猝灭该反应，随后升温至环境温度过夜。将该混合物回流(大约63℃)7小时，然后冷却至环境温度并搅拌过夜(16.5小时，包括冷却)。将该混合物真空浓缩并用250毫升甲醇冲洗。该粗产物用300毫升水洗涤两次。合并的含水洗液用各250毫升的叔丁基甲醚萃取三次。将该叔丁基甲醚萃取物和另外500毫升叔丁基甲醚添加到粗产物中。将该叔丁基甲醚溶液用100毫升水洗涤三次，用275毫升盐水洗涤一次，然后经MgSO4干燥。过滤后，将该溶液真空浓缩，溶解在450毫升四氢呋喃中并冷却至3℃。加入300毫升10％NaOH溶液，接着加入300毫升30％H2O2溶液。将所得溶液在环境温度下搅拌过夜。分离两个所得层后，将500毫升四氢呋喃添加到有机层中。该四氢呋喃溶液随后用250毫升18％NaHSO3水溶液洗涤两次。真空除去四氢呋喃，并在浓缩物中加入1000毫升叔丁基甲醚。该叔丁基甲醚溶液用100毫升水洗涤三次，随后用300毫升盐水洗涤，并经MgSO4干燥。滤除MgSO4并在高真空下将该滤液浓缩至干。该产物在2.0千克硅胶60柱上用己烷∶叔丁基甲醚(4∶1至13∶7)提纯以提供标题化合物(11.1克，14.5％)。
实施例16B.
叔丁基{[(1S，2R，4S，6S)-4-异丙烯基-1-甲基-7-氧杂双环[4.1.0]庚-2-基]氧基}二甲基硅烷
用5.37克(1.2当量)咪唑，接着用11.2克(1.14当量)叔丁基二甲基甲硅烷基氯处理在66毫升二甲基甲酰胺中的实施例16A的化合物(11.0克，65毫摩尔)。将该反应在环境温度下搅拌20小时。将该反应溶液与200毫升水混合并分离所得层。水层用各120毫升的叔丁基甲醚萃取三次。合并有机层并用各125毫升的10％NaCl水溶液洗涤两次。该叔丁基甲醚溶液经MgSO4干燥，随后过滤并真空浓缩。该产物在2.00千克硅胶60上用19∶1(8升)至9∶1(4升)的己烷∶叔丁基甲醚梯度洗脱以提供16.2克标题化合物(16.2克，91％)。
实施例16C.
(1S，3S，5R，6S)-5-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-6-甲基-7-氧杂双环[4.1.0]庚-3-基乙酸酯
将实施例16B的化合物(14.0克，50毫摩尔)溶解在405毫升二氯甲烷和85毫升甲醇中；加入2.15克(25.6毫摩尔，0.52当量)NaHCO3。将该混合物冷却至低于-70℃，并将O3鼓过该反应混合物直至其保持蓝色(大约35分钟)。通过在低于-70℃将N2鼓过反应混合物，除去过量O3，直至其变无色。使反应混合物升温至环境温度；滤除固体NaHCO3并用60毫升二氯甲烷漂洗。将合并的滤液和洗液浓缩成粘稠油，其用425毫升苯冲洗以除去残留甲醇。将所得油溶解在400毫升二氯甲烷和80毫升吡啶中。将该溶液冷却至-10℃并经10分钟向该溶液中加入溶解在80毫升二氯甲烷中的4-硝基苯甲酰氯(11.6克，61.4毫摩尔，1.24当量)。在添加过程中使温度保持在低于-6℃。将反应溶液冷却至低于-10℃并在此温度搅拌过夜。使该反应溶液升温至44℃并搅拌3小时。在冷却至环境温度后，将该反应真空浓缩并将残留物溶解在600毫升乙酸乙酯中。该乙酸乙酯溶液用100毫升水洗涤四次，随后浓缩成稠浆，其用100毫升己烷研制。滤除固体并用各65毫升的己烷洗涤三次。将合并的己烷滤液和洗液浓缩和过滤。向该滤液中加入400毫升己烷；所得溶液用100毫升水洗涤三次，随后用100毫升10％NaCl洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。所得粗材料在2.00千克硅胶60上使用己烷∶叔丁基甲醚＝9∶1(24.0升)提纯以提供标题化合物(8.35克，56％)。
实施例16D.
(1S，3S，5R，6S)-5-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-6-甲基-7-氧杂双环[4.1.0]庚-3-醇
将实施例16C的化合物(9.20克，30.6毫摩尔)溶解在105毫升甲醇中。加入K2CO3(10.1克，72.1毫摩尔，2.35当量)，并将反应混合物在环境温度下搅拌2小时。向反应混合物中加入6.60毫升(115毫摩尔，3.77当量)乙酸；混合10分钟后，滤除固体并用40毫升甲醇漂洗。将合并的滤液和洗液浓缩成残留物，将其与106毫升水混合。分离各层，且水层用50毫升乙酸乙酯萃取三次。将合并的有机层用45毫升盐水洗涤两次，经MgSO4干燥，过滤并浓缩以提供标题化合物(7.72克，98％)。
实施例16E.
叔丁基(二甲基)({(1S，2R，4S，6S)-1-甲基-4-[(三乙基甲硅烷基)氧基]-7-氧杂双环[4.1.0]庚-2-基}氧基)硅烷
将实施例16D的化合物(4.71克，18.2毫摩尔)和咪唑(1.76克，25.6毫摩尔，1.4当量)溶解在36毫升二甲基甲酰胺中。随后加入氯三乙基硅烷(3.34克，21.9毫摩尔)，并将该反应在环境温度下搅拌2小时。向反应混合物中加入125毫升水。获得两个液体层并分离大约6克上层。随后将下方水层用各100毫升的叔丁基甲醚萃取三次。合并的有机层用125毫升10％NaCl水溶液洗涤，经MgSO4干燥，过滤并真空浓缩以提供标题化合物(6.71克，99％)。
实施例16F.
(1S，3R，5S)-3-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-亚甲基-5-[(三乙基甲硅烷基)氧基]环己醇
将四甲基哌啶(9.66克，67.7毫摩尔)溶解在76毫升苯中并冷却至低于0℃。在低于2.5℃将正丁基锂(在己烷中2.5M，27.5毫升，68.8毫摩尔)添加到该苯溶液中。在低于0℃搅拌所得溶液。在低于3℃将Et2AlCl(在甲苯中1.8M，39毫升，70.2毫摩尔)添加到该反应中，接着加入5.0毫升苯洗液。将所得溶液在低于0℃搅拌30分钟。在低于1℃经10分钟将溶解在25毫升苯中的实施例16E的化合物(6.36克，17.1毫摩尔)添加到该反应溶液中。使用5.0毫升苯作为洗液。该反应在低于0℃搅拌2.7小时。将该反应混合物猝灭到441克17.2重量％NH4Cl溶液(冷却到低于5℃)中。将104克10重量％HCl溶液缓慢添加到该混合物中，并将pH调节至2.0。分离各层，且水层用100毫升乙酸乙酯萃取四次。合并的有机层用100毫升水，然后100毫升7.8重量％NaHCO3和100毫升盐水洗涤三次，然后经MgSO4干燥。过滤和真空浓缩产生标题化合物(6.13克，96％)。
实施例16G.
叔丁基({(1R，5S)-2-(碘甲基)-5-[(三乙基甲硅烷基)氧基]环己-2-烯-1-基}氧基)二甲基硅烷
将实施例16F的化合物(2.76克，7.4毫摩尔)和4-二甲基氨基吡啶(1.35克，11.1毫摩尔)溶解在74毫升二氯甲烷中并冷却至0℃。加入甲磺酰氯(0.72毫升，9.25毫摩尔)，并将该反应在环境温度下搅拌4.5小时。用追加的二氯甲烷稀释后，该反应混合物用10％NaCl洗涤两次，随后经MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。将该残留物溶解在74毫升丙酮中，并加入NaHCO3(0.5克)、Na2SO3(0.5克)和NaI(4.5克，30毫摩尔)。将该反应加热至55℃90分钟，然后在环境温度下搅拌过夜。该混合物用500毫升叔丁基甲醚稀释，用250毫升8∶1∶110％NaCl∶1N NaHCO3∶1M Na2SO3洗涤两次，然后用盐水洗涤。所得溶液经MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱法提纯(300毫升SiO2，用1∶1二氯甲烷∶己烷洗脱)提供标题化合物(2.52克，70％)。
实施例16H.
(1S，3R，5R)-3-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-5-(羟甲基)-4-亚甲基环己醇
将实施例16G的化合物(2.5克，5.2毫摩尔)溶解在20毫升水和30毫升四氢呋喃中。加入铟粉末(0.90克)，接着加入甲醛(37％水溶液，1.6毫升，21毫摩尔)。加入另外两份铟(各0.3克)以驱使反应完成。该反应用180毫升水稀释并用各250毫升乙酸乙酯萃取两次。合并的有机层相继用5％NaHCO3和盐水洗涤，然后经MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱法提纯(200毫升SiO2，用1∶1至3∶1乙酸乙酯∶己烷的梯度洗脱)提供标题化合物(0.97克，68％)。
实施例16I.
(1S，3R，5R)-3-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-5-({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)-4-亚甲基环己醇
将实施例16H的化合物(574毫克，2.1毫摩尔)溶解在35毫升二氯甲烷中并加入叔丁基二甲基甲硅烷基咪唑(0.54毫升，2.8毫摩尔)。搅拌过夜后，该反应用二氯甲烷稀释并用10％NaCl洗涤两次，然后经MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。使用340毫克起始二醇运行第二遍后，合并的未提纯的产物混合物通过硅胶色谱法(200毫升SiO2，用1∶4乙酸乙酯∶己烷至乙酸乙酯的梯度洗脱)提纯以提供被少量区域异构的双-TBS醚污染的标题化合物(940毫克)。
实施例16J.
(3R，5R)-3-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-5-({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)-4-亚甲基环己酮
将实施例16I的化合物(0.93克，2.4毫摩尔)溶解在30毫升二氯甲烷中并用1.02克(2.4毫摩尔)戴斯-马丁氧化剂处理。2.5小时后，该反应用追加的二氯甲烷稀释并用100毫升4∶1 1M NaHCO3∶1MNa2SO3，然后100毫升9∶120％NaCl∶1M NaHCO3洗涤。有机层经MgSO4干燥，过滤并真空浓缩，然后通过硅胶色谱法(200毫升SiO2，用1∶4乙酸乙酯∶己烷洗脱)提纯以提供标题化合物(794毫克，85％)。
实施例16K.
(2E)-[(3R，5R)-3-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-5-({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)-4-亚甲基亚环己基]乙酸乙酯
在-78℃将正丁基锂(在己烷中2.5M，1.6毫升，4毫摩尔)添加到二异丙胺(0.56毫升，4毫摩尔)在5毫升四氢呋喃中的溶液中。30分钟后，加入三甲基甲硅烷基乙酸乙酯(0.73毫升，4毫摩尔)。搅拌30分钟后，加入实施例16J的化合物(787毫克，2毫摩尔)在8毫升四氢呋喃中的溶液，接着用2毫升四氢呋喃漂洗。2小时后，通过添加10毫升NH4Cl饱和水溶液，猝灭该反应。升温至环境温度后，将该混合物倒入100毫升20％NaCl中，然后用100毫升叔丁基甲醚萃取两次。合并的叔丁基甲醚萃取物经MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。该残留物通过硅胶色谱法(300毫升SiO2，用1∶1二氯甲烷∶己烷至二氯甲烷的梯度洗脱)提纯以提供538毫克(58％收率)～4∶1异构体混合物，以标题化合物为主(538毫克，58％)。
实施例16L.
(2E)-2-[(3R，5R)-3-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-5-({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)-4-亚甲基亚环己基]乙醇
将实施例16K的化合物(589毫克，1.3毫摩尔)溶解在20毫升甲苯和10毫升二氯甲烷中并在干冰/丙酮浴中冷却。逐滴加入二异丁基氢化铝(在己烷中1M，5.8毫升，5.8毫摩尔)。1小时后，通过添加20毫升20％酒石酸钠钾水溶液，猝灭该反应。向该混合物中加入25毫升水，接着加入6毫升2N HCl。所得混合物用二氯甲烷萃取三次。合并的萃取物用10％NaCl水溶液洗涤，经MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱法提纯(70毫升SiO2，用二氯甲烷洗脱)提供被～20％烯烃异构体污染的标题化合物(294毫克，55％)。
实施例16M.
{(2E)-2-[(3R，5R)-3-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-5-({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)-4-亚甲基亚环己基]乙基}(二苯基)膦氧化物
在0℃将正丁基锂(在己烷中2.5M，0.62毫升，1.55毫摩尔)添加到二苯基膦(0.30毫升，1.73毫摩尔)在3毫升四氢呋喃中的溶液中，从而产生二苯基磷化锂的溶液。
在0℃将实施例16L的化合物(241毫克，0.58毫摩尔)溶解在6.2毫升四氢呋喃中。加入正丁基锂(在己烷中2.5M，0.24毫升，0.61毫摩尔)，接着加入甲苯磺酰氯(124毫克，0.65毫摩尔)在3毫升四氢呋喃中的溶液。逐滴添加该二苯基磷化锂溶液直至红色持续存在。再搅拌1小时后，用水猝灭该反应，然后真空浓缩。将该残留物溶解在12毫升二氯甲烷中，并在0℃加入10％过氧化氢水溶液(3毫升)。1小时后，将该反应倒入冷1M Na2SO3中并用二氯甲烷萃取两次。合并的有机层用20％NaCl水溶液洗涤，经MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱法提纯(120毫升SiO2，用1∶4至1∶1乙酸乙酯∶己烷的梯度洗脱)提供标题化合物(250毫克，72％)。
实施例16N.
(1R，3R，5E，7E，17β)-17-[(1R)-5-羟基-1，5-二甲基己基]-3-(羟甲基)-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1-醇
注：在暗罩中进行下列程序。将实施例16M的化合物(40毫克，0.07毫摩尔)与实施例13J的化合物(32毫克，0.09毫摩尔)在1毫升甲苯中合并；真空除去溶剂以彻底干燥试剂。将该残留物溶解在1.5毫升无水四氢呋喃中并冷却至-78℃。逐滴加入双(三甲基甲硅烷基)氨基化锂的溶液(在四氢呋喃中1.0M；0.1毫升)，产生橙黄色，其经20分钟消退。加入另外0.05毫升双(三甲基甲硅烷基)氨基化锂试剂；将所得混合物在-78℃搅拌1小时，随后升温至0℃并在此温度下搅拌30分钟。通过添加1毫升1N NH4Cl水溶液，猝灭该反应，并用乙酸乙酯萃取该混合物。有机萃取物用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，并将该残留物溶解在1毫升处于四氢呋喃中的1N四-正丁基氟化铵中。在50℃温热4.5小时后，使反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。有机相用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中10％至100％乙酸乙酯的梯度洗脱，接着在100％乙酸乙酯下溶剂保存(solvent hold)以提供标题化合物(10.2毫克)。1H NMR(500MHz，CD2Cl2)δppm 6.20(d，J＝11.3Hz，1H)6.04(d，J＝11.0Hz，1H)5.10(s，1H)4.88(s，1H)4.21(dd，J＝7.6，4.6Hz，1H)3.49-3.72(m，2H)2.59-2.73(m，1H)2.57(dd，J＝12.8，4.6Hz，1H)2.43-2.52(m，2H)2.31(dd，J＝13.6，6.6Hz，1H)2.23(dd，J＝12.8，7.9Hz，1H)2.06-2.18(m，2H)1.81-1.93(m，1H)1.66-1.77(m，2H)1.55-1.66(m，6H)1.44-1.54(m，2H)1.31-1.44(m，5H)1.22-1.31(m，3H)1.13-1.22(m，9H)0.92-0.97(m，3H)；MS(+DCI)m/z 449(M+NH4)+。
Figure BPA00001184760800741
实施例17.
(1R，3R，5E，7E，17β)-3-(羟甲基)-17-[(1S)-1-(3-羟基-3-甲基丁氧基)乙基]-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1-醇
注：在暗罩中进行下列程序。将实施例16M的化合物(40毫克，0.07毫摩尔)与实施例8G的化合物(35毫克，0.1毫摩尔)在1毫升甲苯中合并；真空除去溶剂以彻底干燥试剂。将该残留物溶解在1.5毫升无水四氢呋喃中并冷却至-78℃。逐滴加入双(三甲基甲硅烷基)氨基化锂的溶液(在四氢呋喃中1.0M；0.1毫升)，产生橙黄色，其经20分钟消退。加入另外0.05毫升双(三甲基甲硅烷基)氨基化锂试剂；所得混合物在-78℃搅拌1小时，随后升温至0℃并在此温度下搅拌30分钟。通过添加1毫升1N NH4Cl水溶液，猝灭该反应，并用乙酸乙酯萃取该混合物。有机萃取物用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，并将该残留物溶解在1毫升处于四氢呋喃中的1N四-正丁基氟化铵中。在50℃温热5小时后，使反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。有机相用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中10％至100％乙酸乙酯的梯度洗脱，接着在100％乙酸乙酯下溶剂保存(solvent hold)以提供标题化合物(5毫克)。1H NMR(500MHz，CD2Cl2)δppm 6.26(d，J＝11.3Hz，1H)5.86(d，J＝11.3Hz，1H)5.11(s，1H)4.91(s，1H)4.20(dd，J＝7.9，4.9Hz，1H)3.74-3.90(m，1H)3.49-3.68(m，2H)3.42-3.51(m，2H)3.40-3.52(m，2H)3.26(dd，J＝7.9，6.1Hz，1H)3.26(dd，J＝7.9，6.1Hz，1H)2.82(dd，J＝12.2，4.0Hz，1H)2.63-2.70(m，1H)2.58(dd，J＝12.8，4.6Hz，1H)2.32-2.46(m，2H)2.22(dd，J＝12.4，8.4Hz，2H)1.98-2.08(m，2H)1.63-1.76(m，6H)1.53-1.64(m，6H)1.10-1.24(m，9H)；MS(+DCI)m/z 450(M+NH4)+。
Figure BPA00001184760800751
实施例18.
(1R，3S，5E，7E，17β)-3-氟-17-[(1R)-5-羟基-1，5-二甲基己基]-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1-醇
实施例18A.
(2Z)-((3R，5R)-3-{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}-5-羟基-4-亚甲基亚环己基)乙酸甲酯
将二异丙胺(1.2毫升，9.4毫摩尔)在10毫升四氢呋喃中的溶液冷却至-78℃；加入正丁基锂(在己烷中2.5M，3.6毫升)，接着在5分钟后，加入三甲基甲硅烷基乙酸甲酯(1.7毫升)。将所得溶液在-78℃搅拌30分钟，然后经5分钟加入实施例13E的化合物(2.0克，4毫摩尔)在10毫升四氢呋喃中的溶液。继续搅拌4小时。通过添加NH4Cl饱和水溶液，猝灭该反应；将该混合物升温至环境温度，并在乙酸乙酯和水之间分配。有机相用1N HCl水溶液和盐水洗涤，并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂；该残留物通过在Analogix IntelliFlash280TM上的色谱法提纯，用己烷中5％至10％乙酸乙酯的梯度洗脱。将该产物(1.9克)溶解在17毫升乙醇中；加入1.3毫升浓HCl，并将所得溶液在环境温度下搅拌过夜。真空除去溶剂，将该残留物溶解在碳酸氢钠饱和水溶液中并用乙酸乙酯萃取。将有机相真空浓缩并通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用乙腈中2％至3％二氯甲烷的梯度洗脱以提供标题化合物(0.76克)。
实施例18B.
(2E)-((3R，5S)-3-{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}-5-氟-4-亚甲基亚环己基)乙酸甲酯
将实施例18A的化合物(600毫克，0.23毫摩尔)溶解在2.4毫升二氯甲烷中，并将所得溶液冷却至-78℃。加入(二乙基氨基)三氟化硫(DAST，0.6毫升)；将该混合物搅拌30分钟，然后通过添加碳酸氢钠饱和水溶液来猝灭。将该混合物升温至环境温度；有机相经Na2SO4干燥。真空除去溶剂；该残留物通过在Analogix IntelliFlash280TM上的色谱法提纯，用己烷中5％至7％乙酸乙酯的梯度洗脱以获得标题化合物加上一些混合级分。
实施例18C.
(2E)-2-((3R，5S)-3-{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}-5-氟-4-亚甲基亚环己基)乙醇
将实施例18B的化合物(130毫克，0.3毫摩尔)溶解在1毫升1∶1二氯甲烷/甲苯中并冷却至-78℃。加入二异丁基氢化铝(在己烷中1M，0.7毫升，2.5当量)并将该混合物搅拌30分钟。通过添加甲醇，接着添加NH4Cl饱和水溶液，猝灭反应；将该混合物升温至环境温度并用乙酸乙酯萃取。有机物用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂；该残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中的15％乙酸乙酯洗脱以获得标题化合物(111毫克，95％)。
实施例18D.
[(2E)-2-((3R，5S)-3-{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}-5-氟-4-亚甲基亚环己基)乙基](二苯基)膦氧化物
将实施例18C的化合物(110毫克，0.27毫摩尔)溶解在2毫升己烷中；加入54毫克(0.18毫摩尔)三光气，并将该混合物冷却至0℃。经2分钟逐滴加入三乙胺(0.14毫升，0.95毫摩尔)；将反应混合物搅拌30分钟，随后经1小时升温至环境温度。再加入己烷(3毫升)，并相继用冷3％HCl水溶液、水和盐水洗涤反应混合物。有机相经Na2SO4干燥；真空除去溶剂。
将二苯基膦(0.51克)溶解在2毫升四氢呋喃中，并将该溶液冷却至0℃。加入正丁基锂的溶液(在己烷中2.5M，0.85毫升)，并将该混合物搅拌5分钟。同时，将上述中间体烯丙基氯溶解在1毫升四氢呋喃中并冷却至-60℃。经5分钟加入该阴离子溶液，并将所得混合物在-60℃搅拌1小时。用水猝灭该反应；将该混合物升温至环境温度并用乙酸乙酯萃取。有机相用1N HCl水溶液和盐水洗涤，并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂；该残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中40％至50％乙酸乙酯的梯度洗脱以提供标题化合物(160毫克，76％)。
实施例18E.
(1R，3S，5E，7E，17β)-3-氟-17-[(1R)-5-羟基-1，5-二甲基己基]-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1-醇
注：在暗罩中进行下列程序。将实施例18D的化合物(15毫克，0.026毫摩尔)与实施例13J的化合物(13毫克，0.06毫摩尔)在1毫升甲苯中合并；真空除去溶剂以彻底干燥试剂。将该残留物溶解在1毫升无水四氢呋喃中并冷却至-78℃。逐滴加入双(三甲基甲硅烷基)氨基化锂的溶液(在四氢呋喃中1.0M；0.1毫升)，产生橙黄色，其经20分钟消退。将所得混合物在-78℃搅拌1小时，随后升温至0℃并在此温度下搅拌30分钟。通过添加1毫升1N NH4Cl水溶液，猝灭该反应，并用乙酸乙酯萃取该混合物。有机萃取物用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，并将该残留物溶解在1毫升处于四氢呋喃中的1N四-正丁基氟化铵中。在环境温度下搅拌过夜后，使反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。有机相用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空除去溶剂，且残留物通过在Analogix IntelliFlash 280TM上的色谱法提纯，用己烷中20％至27％乙酸乙酯的梯度洗脱以提供标题化合物(4毫克)。1H NMR(500MHz，CD2Cl2)δppm 6.32(d，J＝11.3Hz，1H)6.08(d，J＝11.3Hz，1H)5.14-5.25(m，2H)4.75-5.01(m，1H)2.88(dd，J＝13.1，4.6Hz，1H)2.61-2.75(m，1H)2.36-2.55(m，3H)2.13-2.27(m，3H)2.00(s，2H)1.81-1.91(m，2H)1.67-1.79(m，2H)1.56-1.67(m，4H)1.45-1.56(m，6H)1.35-1.45(m，2H)1.11-1.26(m，9H)0.84-0.92(m，3H)。
Figure BPA00001184760800781
实施例19.
(3R，5R)-3，5-双{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}-4-亚甲基环己酮
实施例19A.
(1R，4R，6R)-4-异丙烯基-1-甲基-7-氧杂双环[4.1.0]庚-2-酮
(R)-香芹酮根据E.Klein和G.Ohloff的方法(Tetrahedron，1963，11，1091-1099)的修改版本环氧化。因此，在＜5℃将H2O2(31％，95毫升，836毫摩尔，1.3当量)添加到(L)-香芹酮(100毫升，640毫摩尔)在650毫升甲醇中的溶液中。在冷却至＜0℃后，加入6N NaOH(10.5毫升，63毫摩尔，0.1当量)。使反应温度保持在＜5℃。5小时后，该反应用650毫升水稀释，随后用0.5N KH2PO4(250毫升)和325毫升1摩尔浓度的Na2SO3猝灭，使温度保持在＜25℃。该反应用2x750毫升叔丁基甲醚萃取。将合并的叔丁基甲醚萃取物用各500毫升的20％NaCl水溶液，随后10％，随后25％洗涤，以提供清澈的有机层，将其经MgSO4干燥，然后过滤并浓缩，然后用100毫升甲醇冲洗。所得溶液检验(GC)为101.3克(96％)标题化合物，其含有5％的次要异构体。1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 1.40(s，3H)1.70(s，3H)1.89(ddd，J＝14.75，11.11，1.17Hz，1H)2.02(dd，J＝17.56，11.66Hz，1H)2.31-2.41(m，1H)2.58(ddd，J＝17.56，4.67，1.37Hz，1H)2.65-2.76(m，1H)3.44(dd，J＝3.09，1.03Hz，1H)4.70(d，J＝0.69Hz，1H)4.75-4.80(m，1H)。
实施例19B
(1S，2R，4S，6R)-4-异丙烯基-1-甲基-7-氧杂双环[4.1.0]庚-2-醇
将CeCl3·7H2O(128克，343毫摩尔，0.5当量)在1.5升甲醇中的溶液冷却至＜0℃。加入实施例19A(在甲醇中的47重量％溶液，242克，685毫摩尔)并用60毫升甲醇漂洗。冷却至＜-20℃后，经23分钟加入NaBH4(在三甘醇二甲醚中2M，190毫升，380毫摩尔，0.55当量)，保持温度＜-20℃。再搅拌25分钟后，用720毫升水猝灭该反应。通过蒸馏除去甲醇，并加入800毫升乙酸异丙酯。加入2N HCl(100毫升)以使pH值达到～5.5，此后分离各层，水层用400毫升乙酸异丙酯萃取。将合并的乙酸异丙酯层用500毫升5％NaCl，然后525毫升19∶1 10％NaCl∶10％NaHCO3，然后500毫升20％NaCl洗涤。该有机溶液随后经MgSO4干燥，过滤并浓缩以提供193克油，其被检验为54.7重量％(105.6克检验值，92％收率)标题产物。
实施例19C.
叔丁基{[(1R，2R，4R，6R)-4-异丙烯基-1-甲基-7-氧杂双环[4.1.0]庚-2-基]氧基}二苯基硅烷
向实施例19B(54.7重量％，18.4克，60毫摩尔)和咪唑(6.94克，102毫摩尔，1.7当量)在100毫升二甲基甲酰胺中的溶液中加入TBDPS-Cl(23.4毫升，90毫摩尔，1.5当量)。将该反应搅拌90小时，然后在冰/水浴中冷却。加入水(3毫升)，移除该浴，并将该反应搅拌15分钟。将该反应转移到含110毫升庚烷和55毫升水的分液漏斗中，摇振和分离。将更多水(25毫升)添加到水层中，其用2x50毫升庚烷进一步萃取。将合并的庚烷萃取物用2x100毫升10％NaCl洗涤，然后经MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。
色谱法(ISco
Figure BPA00001184760800791
***，Analogix RS300300g柱，80∶20己烷∶CH2Cl2 10分钟，然后65∶35 25分钟，然后60∶40 10分钟)产生26.1克油，其相对于标样检验为83重量％(21.6克检验值，89％收率)标题化合物。
实施例19D.
(1R，3R，5R，6R)-5-{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}-6-甲基-7-氧杂双环[4.1.0]庚-3-醇
将实施例19C(34克，92重量％，77毫摩尔)和NaHCO3(3.3克，39毫摩尔，0.5当量)在300毫升CH2Cl2和60毫升甲醇中的混合物冷却至＜-70℃并用臭氧(7-8psi，90伏(volts)，4slpm)处理直至观察到持久的蓝色。用氮气吹扫直至脱色后，使该反应升温至～0℃，随后经纸过滤并浓缩。
在用2x100毫升苯冲洗后，加入300毫升CH2Cl2和60毫升吡啶并将该反应冷却至＜5℃。加入对硝基苯甲酰氯(22.2克，120毫摩尔，1.5当量)，并将反应混合物搅拌1小时，随后移除浴并将该反应在环境温度下搅拌过夜。在旋转蒸发器上将所得悬浮液浓缩成稠浆，随后用乙酸乙酯稀释，并过滤除去固体。该滤液用250毫升1摩尔浓度的NaHCO3，随后用各100毫升的2N HCl、1N HCl和2N HCl，和用各200毫升的1N HCl、1摩尔浓度的NaHCO3和20％NaCl洗涤。有机层经MgSO4干燥，过滤并浓缩以产生49.6克油状的乙酸酯中间体。
向乙酸酯(20.6克，32毫摩尔理论值)在115毫升甲醇和15毫升水的溶液中加入11.0克K2CO3。2小时后，用6.5毫升HOAc猝灭该反应，随后浓缩。用100毫升水处理该残留物，然后用150毫升乙酸乙酯，然后100毫升乙酸乙酯萃取。该合并的乙酸乙酯层用各100毫升的1摩尔浓度的NaHCO3，然后10％NaCl，然后20％NaCl洗涤。该乙酸乙酯层经MgSO4干燥，过滤并浓缩。
色谱法(Isco***，Analogix RS300300g柱，10∶90乙酸乙酯∶CH2Cl2 5分钟，然后经35分钟至12∶88，然后保持10分钟)产生10.3克油，其被检验为91重量％(76％收率)标题化合物。1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 1.12(s，9H)1.16(s，3H)1.64-1.74(m，1H)1.87(dt，J＝14.10，4.48Hz，1H)2.09-2.18(m，2H)3.04(t，J＝1.92Hz，1H)3.72-3.90(m，2H)4.14-4.25(m，1H)7.33-7.52(m，6H)7.61-7.78(m，4H)。
实施例19E
叔丁基[((1R，2R，4R，6R)-4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-1-甲基-7-氧杂双环[4.1.0]庚-2-基)氧基]二苯基硅烷
在室温下向实施例1D(8.6克，20.46毫摩尔)和咪唑(2.37克，34.86毫摩尔)在二甲基甲酰胺(80毫升)中的溶液中一次性加入TBS-Cl(4.6克，30.51毫摩尔)。将该反应搅拌1小时，此时HPLC显示＜1％残留原材料。将该反应倒入水(150毫升)中并用叔丁基甲醚(3x50毫升)萃取水层。合并的有机层用盐水(50毫升)洗涤，经Na2SO4干燥并真空浓缩成油。该粗材料用5％乙酸乙酯/庚烷色谱处理以产生11.48克油状标题化合物(99％收率，样品含有残留乙酸乙酯)。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ-0.20(s，3H)，-0.16(s，3H)，0.73(s，9H)，1.09(s，9H)，1.19-1.30(m，1H)，1.43(s，3H)，1.51-1.65(m，2H)，2.04(s，乙酸乙酯)，2.17-2.32(M，1H)，3.05(s，1H)，3.36-3.46(m，1H)，3.90-3.97(dd，J＝10.63，5.97Hz，1H)，4.09-4.14(q，乙酸乙酯)，7.32-7.45(m，6H)，7.63-7.70(m，4H)ppm。
实施例19F
(1R，3R，5R)-5-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-3-{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}-2-亚甲基环己醇
在-5℃向2，2，6，6-四甲基哌啶(4.55克，32.2毫摩尔)在苯(40毫升)中的溶液中经20分钟逐滴加入正丁基锂(在己烷中2.5M，12.9毫升，32.2毫摩尔)(-10＜T＜-5℃)。该反应在0至-10℃搅拌25分钟并经20分钟逐滴加入二乙基氯化铝(17.9毫升，32.2毫摩尔)(-10＜T＜0C)。该反应在0--10℃保持1小时25分钟，并经10分钟逐滴加入在苯(10毫升)中的实施例19E(4.0克，8.05毫摩尔)(-10＜T＜0℃)。将该反应搅拌75分钟并倒入饱和NH4Cl(165毫升)/20％罗谢尔盐(42毫升)/冰(165克)的混合物中。向该混合物中加入乙酸乙酯(300毫升)和10％柠檬酸(75毫升)，搅拌该双相混合物直至气体释放停止(5分钟)。分离各层，水层用乙酸乙酯(2x200毫升)萃取。合并的有机物用1M磷酸盐缓冲剂(250毫升)，然后盐水(250毫升)洗涤，经Na2SO4干燥并真空浓缩成油。该粗材料通过硅胶色谱法(5％-10％乙酸乙酯/己烷)提纯，随后在室温下真空干燥一周以提供油状的标题化合物(3.62克，90.5％)：1HNMR(400MHz，CDCl3)δppm-0.14(s，3H)-0.12(s，3H)0.77(s，9H)1.10(s，9H)1.17-1.19(m，1H)1.34(q，J＝11.43Hz，1H)1.38-1.46(m，1H)1.85-1.92(m，1H)1.99-2.06(m，1H)3.82-3.93(m，1H)4.41-4.47(m，J＝1.37Hz，1H)4.49-4.56(m，1H)5.00(t，J＝1.92Hz，1H)5.34(t，J＝2.06Hz，1H)7.30-7.44(m，6H)7.61-7.72(m，4H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)δppm-4.5，-4.3，18.4，19.7，26.1，27.3，42.8，46.4，65.4，68.2，72.9，108.8，127.26，127.30，129.3，129.4，133.5，134.0，135.3，135.5，150.8；HRMS(ESI)[MNa+]C29H44O3Si2的计算值519.2721，实测值519.2729；C29H44O3Si2的分析计算值：C 70.11，H8.93。实测值：C 69.93，H 9.27。
实施例19G
[((3R，5R)-3，5-双{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}-4-亚甲基环己基)氧基](叔丁基)二甲基硅烷
在室温下向在二甲基甲酰胺(6毫升)中的实施例19F(0.65克，1.31毫摩尔)中加入咪唑(0.31克，4.58毫摩尔)和TBDPS-Cl(1.08克，3.92毫摩尔)，并将反应混合物搅拌3天。将该反应倒入水(50毫升)中并用叔丁基甲醚(3x50毫升)萃取。将合并的有机萃取层用水(2x)和盐水(2x)洗涤，经MgSO4干燥，并浓缩成油。该粗材料用5％醚/己烷色谱处理以产生0.92克(95％)无色油状的标题化合物。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ-0.16(s，6H)，0.74(s，9H)，0.92(s，9H)，1.12(s，9H)，1.17(ddd，J＝13.07，10.94，2.47Hz，1H)，1.30(q，J＝11.43Hz，1H)，1.68-1.77(m，1H)，1.81-1.90(m，1H)，3.90-4.02(m，1H)，4.38(t，J＝2.74Hz，1H)，4.63-4.72(m，2H)5.23-5.30(m，1H)，7.28-7.44(m，12H)，7.54-7.59(m，4H)，7.65-7.73(m，4H)。
实施例19H
(3R，5R)-3，5-双{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}-4-亚甲基环己醇
向实施例19G(1.05克，1.43毫摩尔)在乙醇(8毫升)中的悬浮液中加入在乙醇(2毫升)中的浓HCl(104微升，1.28毫摩尔)，并将反应混合物在室温下搅拌3小时。将该反应倒入1M NaHCO3(35毫升)中并用叔丁基甲醚(3x35毫升)萃取。该合并的有机物用盐水(35毫升)洗涤，经Na2SO4干燥并真空浓缩成油。该粗材料通过硅胶色谱法(5％乙酸乙酯/己烷)提纯，随后在室温下真空干燥一周以提供白色固体状的标题化合物(0.74克，83％)：1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 1.01(s，9H)1.02(s，9H)1.60-1.85(m，4H)2.46(s，1H)3.96-4.06(m，1H)4.63(dd，J＝6.79，4.05Hz，1H)4.74(t，J＝5.35Hz，1H)4.85(s，1H)4.91(s，1H)7.27-7.45(m，12H)7.56-7.67(m，8H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)δ19.5，19.6，27.2，27.3，44.6，67.0，70.4，107.9，127.21，127.24，127.3，129.33，129.35，129.5，132.6，133.2，133.4，133.9，135.44，135.48，135.54，135.6，149.9；HRMS(ESI)[MNa+]C39H48O3Si2的计算值643.3034，实测值643.3022；C39H48O3Si2的分析计算值：C 75.43，H 7.79。实测值：C 75.50，H 7.97。
实施例19I
(3R，5R)-3，5-双{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}-4-亚甲基环己酮
向实施例19H(0.50克，0.805毫摩尔)在CH2Cl2(7毫升)中的溶液中加入戴斯-马丁氧化剂(Dess-Martin periodinane)(0.376克，0.886毫摩尔)，并将该悬浮液在室温下搅拌3.5小时。将该反应用CH2Cl2(10毫升)稀释并用3∶1 1M NaHCO3∶1M Na2SO3(10毫升)，接着3∶11/2饱和盐水∶1M NaHCO3(10毫升)洗涤。该有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩成白色固体。该粗材料通过硅胶色谱法(5％乙酸乙酯/己烷)提纯，随后在室温下真空干燥一周以提供白色固体状的标题化合物(0.49克，98％)：1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 0.99(s，18H)2.29-2.49(m，4H)4.74-4.80(m，2H)5.17(t，J＝1.07Hz，2H)7.29-7.36(m，8H)7.36-7.45(m，4H)7.54-7.63(m，8H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)δ19.5，27.2，51.2，70.9，109.2，127.3，127.4，129.5，129.6，132.7，133.1，135.40，135.43，148.6，205.8；HRMS(ESI)[M+Na+]C39H46O3Si2的计算值641.2878，实测值641.2869；[M+NH4 +]计算值636.3324，实测值636.3313；C39H46O3Si2的分析计算值：C 75.68，H7.49。实测值：C 75.48，H 7.59。
本发明的组合物
本发明还提供包含治疗有效量的式(I)的化合物结合可药用载体的药物组合物。该组合物包含与一种或多种无毒可药用载体一起配制的本发明的化合物。该药物组合物能够配制成用于以固体或液体形式口服、用于肠道外注射或用于直肠给药。
本文所用的术语“可药用载体”是指任何类型的无毒的惰性固体、半固体或液体填料、稀释剂、包封材料或配制助剂。能够充当可药用载体的材料的一些实例是糖，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素及其衍生物，如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素；粉状黄蓍胶；麦芽；明胶；滑石；可可脂和栓剂蜡；油，如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；二醇，如丙二醇；酯，如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂，如氢氧化镁和氢氧化铝；藻酸；无热原水；等渗盐水；林格氏溶液；乙基醇和磷酸盐缓冲溶液，并且根据配制领域技术人员的判断，在该组合物中也可以存在其它无毒的相容润滑剂，如十二烷基硫酸钠和硬脂酸镁，以及着色剂、防粘剂、包衣剂、增甜、调味和加香剂、防腐剂和抗氧化剂。
本发明的药物组合物能够经口、经直肠、肠道外、脑池内、***内、腹膜内、局部(通过粉剂、油膏或滴剂)、经颊或以口腔或鼻喷剂形式适用于人和其它哺乳动物。本文所用的术语“肠道外”是指包括静脉内、肌内、腹膜内、胸骨内、皮下、关节内注射和输液在内的给药模式。
非肠道注射用的药物组合物包括可药用的无菌含水或非水溶液、分散体、悬浮液或乳状液，和用于重构成无菌可注射溶液或分散体的无菌粉末。合适的含水和非水载体、稀释剂、溶剂或赋形剂的实例包括水、乙醇、多元醇(丙二醇、聚乙二醇、甘油等，和它们的合适的混合物)、植物油(如橄榄油)和可注射有机酯，如油酸乙酯或它们的合适的混合物。可以例如通过使用涂料，如卵磷脂，在分散体的情况下通过维持所需粒度，和通过使用表面活性剂来维持该组合物的合适的流动性。
这些组合物还能够含有辅助剂，如防腐剂、润湿剂、乳化剂和分散剂。能够通过各种抗菌和抗真菌剂，例如，对羟基苯甲酸酯、氯丁醇、酚、山梨酸等确保防止微生物的作用。包括等渗剂，例如糖、氯化钠等也是合意的。能够使用延长吸收的试剂，例如单硬脂酸铝和明胶实现可注射药物形式的延长吸收。
在一些情况下，为了延长药物的作用，减缓该药物从皮下或肌内注射的吸收通常是合意的。这能够使用水溶性差的结晶或非晶材料的液体悬浮液实现。该药物的吸收速率能够取决于其溶解速率，这又可能取决于晶体粒度和结晶形式。或者，肠道外给药的药物形式能够通过将该药物溶解或悬浮在油赋形剂中来施用。
悬浮液除含有该活性化合物外还能够含有悬浮剂，例如，乙氧基化异硬脂醇、聚氧乙烯山梨糖醇和失水山梨糖醇酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝(aluminum metahydroxide)、膨润土、琼脂、黄蓍胶及其混合物。
如果需要且为了更有效分布，本发明的化合物能够掺入缓释或靶向输递体系，如聚合物基质、脂质体和微球中。它们可例如通过经细菌留存过滤器过滤或通过掺入无菌固体组合物形式的杀菌剂(其可以在即将使用之前溶解在无菌水或一些其它无菌可注射介质中)来灭菌。
通过形成该药物在可生物降解的聚合物，如聚交酯-聚乙交酯中的微囊包封基质，制造可注射的贮库(depot)形式。根据药物/聚合物比率和所用的特定聚合物的性质，能够控制药物释放速率。其它可生物降解的聚合物的实例包括聚(原酸酯)和聚(酐)。还通过使药物截留在与体组织相容的脂质体或微乳液中来制备贮库可注射制剂。
该可注射配制剂可例如通过经细菌留存过滤器过滤或通过掺入无菌固体组合物形式的杀菌剂(其能够在即将使用之前溶解或分散在无菌水或其它无菌可注射介质中)来灭菌。
能够使用合适的分散或润湿剂和悬浮剂根据已知技术配制可注射制剂，例如无菌可注射含水或油性悬浮液。该无菌可注射制剂也能够是在无毒的肠道外可接受稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液、悬浮液或乳状液，如在1，3-丁二醇中的溶液。能够使用的可接受的赋形剂和溶剂包括水、林格氏溶液、U.S.P.和等渗氯化钠溶液。此外，传统上使用无菌不挥发油作为溶剂或悬浮介质。为此，能够使用任何温和不挥发油，包括合成的甘油单酯或甘油二酯。此外，在注射剂制备中使用脂肪酸，如油酸。
口服用固体剂型包括胶囊剂、片剂、丸剂、粉剂和颗粒剂。在这类固体剂型中，将一种或多种本发明的化合物与至少一种惰性可药用载体，如柠檬酸钠或磷酸二钙和/或a)填料或增量剂，如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和水杨酸；b)粘合剂，如羧甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖和***树胶；c)保湿剂，如甘油；d)崩解剂，如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、藻酸、某些硅酸盐，和碳酸钠；e)溶解阻滞剂，如石蜡；f)吸收加速剂，如季铵化合物；g)润湿剂，如十六烷醇和单硬脂酸甘油酯；h)吸收剂，如高岭土和膨润土；和i)润滑剂，如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠和它们的混合物混合。在胶囊剂、片剂和丸剂的情况下，该剂型还可包含缓冲剂。
在使用乳糖或奶糖(milk sugar)以及高分子量聚乙二醇的软和硬填充的明胶胶囊中也可以使用类似类型的固体组合物作为填料。
片剂、锭剂、胶囊剂、丸剂和颗粒剂的固体剂型能够用包衣料和外壳，如肠溶包衣和药物配制领域中公知的其它包衣料制备。它们能够任选含有乳浊剂，也能够具有以延迟方式仅在或优选在肠道的特定部分中释放活性成分的组成。可用于延迟活性剂释放的材料的实例能够包括聚合物质和蜡。
直肠或***给药用的组合物优选是能够通过将本发明的化合物与在环境温度下是固体但在体温下是液体并因此在直肠或***腔中熔融和释放活性化合物的合适的无刺激性载体，如可可脂、聚乙二醇或栓剂蜡混合而制成的栓剂。
口服用液体剂型包括可药用乳状液、微乳液、溶液、悬浮液、糖浆和酏剂。除活性化合物外，该液体剂型还可含有本领域中常用的惰性稀释剂，例如，水或其它溶剂、增溶剂和乳化剂，如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄基醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油(特别是棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢糠醇、聚乙二醇和失水山梨糖醇的脂肪酸酯，和它们的混合物。
除惰性稀释剂外，该口服组合物还能够包括辅助剂，如润湿剂、乳化和悬浮剂、增甜、调味和加香剂。
本发明的化合物的局部或经皮给药用的剂型包括油膏、糊剂、霜剂、洗液、凝胶、粉剂、溶液、喷雾剂、吸入剂或贴剂。将所需的本发明的化合物在无菌条件下与可药用载体和任何所需防腐剂或可能需要的缓冲剂混合。眼科配制剂、滴眼液、眼药膏、粉剂和溶液也被视为在本发明的范围内。
该油膏、糊剂、霜剂和凝胶除本发明的活性化合物外还可含有动物和植物脂肪、油、蜡、石蜡、淀粉、黄蓍胶、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅酮、膨润土、硅酸、滑石和氧化锌，或它们的混合物。
粉剂和喷雾剂除本发明的化合物外还能够含有乳糖、滑石、硅酸、氢氧化铝、硅酸钙和聚酰胺粉末，或这些物质的混合物。喷雾剂能够另外含有常规推进剂，如氯氟烃。
本发明的化合物还能够以脂质体形式给药。如本领域中已知的那样，脂质体通常衍生自磷脂或其它脂质物质。通过分散在含水介质中的单层或多层水合液晶形成脂质体。可以使用能够形成脂质体的任何无毒的、生理学可接受和可代谢的脂质。脂质体形式的本组合物除本发明的化合物外还可含有稳定剂、防腐剂等。优选脂质是单独或一起使用的天然和合成的磷脂和磷脂酰胆碱(卵磷脂)。
形成脂质体的方法是本领域已知的。参见例如Prescott，Ed.，Methods in Cell Biology，第XIV卷，Academic Press，New York，N.Y.，(1976)，第33页及下列各页。
本发明的化合物的局部给药用的剂型包括粉剂、喷雾剂、油膏和吸入剂。将该活性化合物在无菌条件下与可药用载体和任何所需防腐剂、缓冲剂或推进剂混合。眼科配制剂、眼药膏、粉剂和溶液也被视为在本发明的范围内。本发明的含水液体组合物也特别有用。
本发明的化合物能够以衍生自无机或有机酸的可药用盐形式使用。本文所用的术语“可药用盐”包括在合理医学判断的范围内适合与人和低等动物的组织接触使用而没有不适当的毒性、刺激、过敏响应等，与合理的效益/风险比相称并有效用于其预期用途的式(I)的化合物的盐和两性离子。
术语“可药用盐”是指在合理医学判断的范围内适合与人和低等动物的组织接触使用而没有不适当的毒性、刺激、过敏响应等，与合理的效益/风险比相称的那些盐。可药用盐是本领域中公知的。该盐能够在本发明的化合物的最终分离和提纯过程中原位制备或单独通过使游离碱官能与合适的有机酸反应来制备。
代表性的酸加成盐包括，但不限于，乙酸盐、己二酸盐、藻酸盐、柠檬酸盐、门冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、二葡糖酸盐、乙磺酸盐、甘油磷酸盐、庚酸盐、己酸盐、反丁烯二酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、羟基丁酸盐、2-羟基乙磺酸盐(羟乙基磺酸盐)、乳酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、烟酸盐、2-萘磺酸盐、草酸盐、双羟萘酸盐、pectinate、过硫酸盐、苯基乙酸盐、3-苯基丙酸盐、苦味酸盐、新戊酸酯、丙酸盐、水杨酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、磷酸盐、谷氨酸盐、碳酸盐、对甲苯磺酸盐和十一烷酸盐。
碱性含氮基团也能够用低碳烷基卤化物，如甲基、乙基、丙基和丁基氯化物、溴化物和碘化物；硫酸二烷基酯，如硫酸二甲酯、硫酸二乙酯、硫酸二丁酯和硫酸二戊酯；长链卤化物，如癸基、十二烷基、十四烷基和十八烷基氯化物、溴化物和碘化物；芳基烷基卤化物，如苄基和苯乙基溴化物等试剂季化。由此获得水或油溶性或分散性产物。
能够在本发明的化合物的最终分离和提纯过程中通过使含羧酸的部分与合适的碱，如可药用金属阳离子的氢氧化物、碳酸盐或碳酸氢盐或与氨或有机伯、仲或叔胺反应来原位制备碱性加成盐。可药用盐包括，但不限于，基于碱金属或碱土金属，如锂、钠、钾、钙、镁和铝盐等的阳离子，和无毒季氨和胺阳离子，包括铵、四甲铵、四乙铵、甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、二乙胺和乙胺。可用于形成碱加成盐的其它代表性有机胺包括乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌啶和哌嗪。
本文所用的术语“可药用酯”是指体内水解的本发明的化合物的酯，并包括在人体中容易分解以留下母体化合物或其盐的那些。本发明的可药用的无毒酯的实例包括C1-至-C6烷基酯和C5-至-C7环烷基酯，但C1-至-C4烷基酯是优选的。式(I)的化合物的酯能够根据传统方法制备。可药用酯能够通过含有羟基的化合物与酸和烷基羧酸，如乙酸，或与酸和芳基羧酸，如苯甲酸反应来附加到羟基上。在含羧酸基的化合物的情况下，由含羧酸基的化合物通过该化合物与碱，如三乙胺和烷基卤化物或三氟甲磺酸烷基酯，例如与甲基碘、三氟甲磺酸甲酯、苄基碘或环戊基碘的反应制备该可药用酯。它们也能够通过该化合物与酸(如盐酸)和醇(如乙醇或甲醇)，或与醇和偶联剂(如1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDAC)或1，3-二环己基碳二亚胺(DCC))的反应制备。
本文所用的术语“可药用酰胺(amides)”是指衍生自氨、伯C1-至-C6烷基胺和仲C1-至-C6二烷基胺的本发明的无毒酰胺。在仲胺的情况下，该胺也能够是含有一个氮原子的5-或6-元杂环形式。衍生自氨的酰胺、C1-至-C3烷基伯酰胺和C1-至-C2二烷基仲酰胺是优选的。式(I)的化合物的酰胺能够根据传统方法制备。能够由含伯或仲胺基团的化合物通过含有氨基的化合物与烷基酐、芳基酐、酰基卤化物或芳酰基卤化物的反应制备可药用酰胺。在含羧酸基的化合物的情况下，由含羧酸基的化合物通过该化合物与碱，如三乙胺，脱水剂，如二环己基碳二亚胺或羰基二咪唑，和烷基胺或二烷基胺，例如与甲胺、二乙胺或哌啶的反应制备该可药用酯。它们也能够如加入的分子筛的情况那样通过使该化合物与酸，如硫酸和烷基羧酸，如乙酸，或与酸和芳基羧酸，如苯甲酸在脱水条件下反应来制备。该组合物能够含有可药用前药形式的本发明的化合物。
本文所用的术语“可药用前药”或“前药”代表在合理医学判断的范围内适合与人和低等动物的组织接触使用而没有不适当的毒性、刺激、过敏响应等，与合理的效益/风险比相称并有效用于其预期用途的本发明的化合物的那些前药。本发明的前药能够快速体内转化成式(I)的母体化合物，例如通过在血液中水解。在T.Higuchi和V.Stella，Pro-drugs as Novel Delivery Systems，V.14of the A.C.S.Symposium Series中和在Edward B.Roche，ed.，Bioreversible Carriers in Drug Design，American Pharmaceutical Association and Pergamon Press(1987)中提供全面论述。
本发明还涉及在施用于有需要的患者时可通过体内生物转化作用转化成式(I)的化合物的可药用化合物。
使用方法
能够改变本发明的药物组合物中活性成分的实际剂量水平以获得对特定患者、组合物和给药模式而言有效实现所需治疗响应的活性化合物的量。所选剂量水平取决于特定化合物的活性、给药途径、治疗的病症的严重性以及治疗的患者的状况和先前病史。但是，在本领域技术范围内的是，以比实现所需治疗效果所需的量更低的水平开始该化合物的剂量并逐渐提高该剂量直至实现所需效果。
当用在上述或其它治疗中时，治疗有效量的本发明的化合物之一能够以纯净形式使用，或以可药用盐形式使用(如果存在这些形式)。或者，该化合物能够作为含有所述化合物以及一种或多种可药用载体的药物组合物施用。术语“治疗有效量”的本发明的化合物是指足以在适用于任何医疗治疗的合理的效益/风险比下治疗失调症的量的该化合物。但是，要理解的是，本发明的化合物和组合物的总日剂量由主治医师在合理医疗判断的范围内决定。任何特定患者的特定治疗有效剂量水平取决于各种因素，包括治疗的失调症和该失调症的严重程度；所用特定化合物的活性；所用的特定组合物；患者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；所用特定化合物的给药时间、给药途径和***速率；治疗持续时间；与所用特定化合物结合或同时使用的药物；和医疗领域中公知的类似因素。例如，在本领域技术范围内的是，以比实现所需治疗效果所需的量更低的水平开始该化合物的剂量并逐渐提高该剂量直至实现所需效果。
本发明的化合物可以单独给药或与一种或多种其它本发明的化合物联合给药，或与一种或多种附加药剂联合给药(即共同给药)。联合疗法包括含有一种或多种本发明的化合物和一种或多种附加药剂的单一药物配制剂的给药，以及本发明的化合物和各附加药剂在它们各自的独立药物配制剂中给药。例如，式(I)的化合物和一种或多种附加药剂可以在具有各活性成分的固定比率的单一口服剂型组合物中一起施用于患者；或各药剂可以在独立的口服制剂中给药。
当使用独立的制剂时，本发明的化合物和一种或多种附加药剂可以基本在相同时间(例如同时)或在错开的时间(例如相继)给药。
施用于人或动物的本发明的化合物的总日剂量为大约0.01微克至大约150毫克。更优选的剂量可以为大约0.010微克至大约10毫克。如果需要，有效的日剂量可以分成用于给药的多剂量。因此，单剂量组合物可含有这样的量或其约数以构成日剂量。
生物活性的测定
使用帕立骨化醇作为参照，评估化合物的生物活性以识别具有合意的生物化学特性的潜在化合物。图3显示如何进行这些评估的流程图。首先使用与维生素D核受体的体外结合、报道子基因检验和HL-60分化评估化合物活性。本发明的化合物根据与帕立骨化醇相比的效力评级。选择根据这些检验法中的一个或多个被发现具有为帕立骨化醇的大约100倍低的效力的化合物进行追加评估。
接着使用正常小鼠评测化合物以测定钙血作用和在适当的细胞系中测定对心血管生物标记，尤其是心肌细胞中的纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)、血栓调节蛋白、凝血栓蛋白-1和肾素的影响。也在As4.1细胞中评测肾素活性。需要识别具有在小鼠中比帕立骨化醇更小的钙血作用和在生物标记检验中比帕立骨化醇更大的效力的化合物。
为了指示治疗指数，接着在肾病大鼠模型中在PTH抑制和钙血症方面评测化合物。目标是识别治疗指数(TI)为帕立骨化醇的至少三倍的化合物和不在比帕立骨化醇更大的程度上造成主动脉(或软组织)钙化的那些。
最后，使用左心室肥大的体内模型测定治疗心血管病的潜力。随着循环***的钙化，发展高血压。由于心脏必须更努力运动以维持脉管***中的流动，造成左心室的mycocardium的增厚。需要大于帕立骨化醇的效力。
下面更详细描述各个这些活性评估，但本领域技术人员熟悉它们并承认它们为常规技术。
VDR结合
使用下列程序评估本发明的所选化合物与VDR的体外结合。将纯化的重组全长人维生素D核受体(可购自PanVera/Invitrogen(Carlsbad，CA)Part Number P2190)在VDR结合缓冲液(50mM Tris(pH 7.5)、5mM DTT、300mM KCl、0.01％TWEEN 20)中稀释。在即将检验之前，在硅化Eppendorf管中在结合缓冲液中稀释[3H]-骨化三醇(1α，25-二羟基[23，24(n)-3H]胆钙化甾醇，Amersham Biosciences，Piscataway，NJ；产品编号TRK588-5UCI)。各受试化合物随后在结合缓冲液中连续稀释至本领域技术人员可确定的适合检验的浓度。将稀释的受试化合物或阳性对照物(帕立骨化醇，可作为ZEMPLAR购自Abbott Laboratories，Illinois)添加到96孔微滴定板(Wallac Isoplate Part 1450-516，可购自Perkin-Elmer Co.，Boston，MA)的各孔中，接着加入[3H]-骨化三醇(1nM最终)。
随后向各孔中加入稀释的VDR储液(100纳克/孔)。最终检验体积为100微升。将填充的板在温和摇振下在4℃培养过夜。培养18小时后，向各孔中加入再悬浮在结合缓冲液中的20微升小麦胚芽凝集素-涂布的硅酸钇闪烁亲近检验(SPA)珠(可购自Amersham Biosciences，Piscataway，NJ；Part#RPNQ0270)(200微克/孔)并将该板在温和摇振下在室温下培养2小时。随后使用Packard Top-Count计数结合的[3H]-骨化三醇。非特异性结合是指在过量(10uM)帕立骨化醇存在下结合的cpm[3H]-骨化三醇。
表1.概括对所选化合物获得的结合数据
表1.
Figure BPA00001184760800921
VDRE报道子基因检验
也通过考察维生素D响应元件(VDRE)报道子基因检验法来评估化合物活性。在96孔板中在含有10％胎牛血清的DMEM培养基中以～4x105个细胞/毫升(100微升/孔)培养具有稳定的VDR表达的人胚肾细胞(HEK细胞)。细胞用0.2微克/孔的VDRE-荧光素酶-报 道子结构体(来自Y.Li，University of Chicago)转染，然后用受试药剂以所示浓度处理24小时。随后根据制造商指示(Promega，Madison，WI)测量荧光素酶活性。检验各样品的信号强度且检验信号的提高显示在表2中。
表2.
Figure BPA00001184760800922
HL-60分化
人早幼粒细胞白血病(HL60)细胞获自American Type Culture Collection(ATCC Cat.#CCL-240，Manassas，Virginia)。细胞在5％CO2下和37℃保存在含有10％胎牛血清(可购自Invitrogen，Carlsbad，CA)的RPMI 1640培养基(可购自Invitrogen，Carlsbad，CA)中。细胞每周传代，并且不使其变成＞90％融合。对于该检验，细胞在200微升培养基中以每孔5x105个细胞置于板中。受试化合物以10-6-10-10M的浓度在培养基中稀释，随后添加到适当的孔中。细胞随后在5％CO2气氛中在37℃培养4天。培养后，从各孔抽出培养基并在各孔中加入75微升NBT溶液(氮蓝四唑：200ng/mL PMA(佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯)和2mg/ml在蒸馏H2O中的NBT(氮蓝四唑))，接着在37℃进一步培养2小时。在培养后，在各孔中加入150微升裂解液(225毫升二甲基甲酰胺，67.5克SDS)、PMA储液(2毫克/毫升在乙醇中)，并使该板在室温下静置4小时。检验HL-60细胞分化。作为时间的函数，检查各化合物对细胞生长的影响；在570nm下测量各孔中的吸光度。表3显示所选化合物的EC50。
表3.
Figure BPA00001184760800931
As4.1中的肾素mRNA
在湿润的5％CO2-95％空气气氛中在37℃，在含有10％胎牛血清的Dulbecco’s Modified Eagle Medium DMEM(可购自Invitrogen，Carlsbad，CA)中培养As4.1细胞(ATCC，Manassas，VA)。通过LIPOFECTAMINETM 2000(Invitrogen，Carlsbad，CA)用pcDNA-hVDR质粒(Yan Chun Li，University of Chicago提供)转染细胞。根据制造商规程通过LIPOFECTAMINETM 2000用pcDNA-hVDR质粒转染siRNA。转染后24小时，用受试药剂处理细胞。
用MyiQ Real-time PCR Detection System(可购自BioRad，Hercules，CA)进行实时反转录-PCR。各样品具有25微升的最终体积，含有100纳克cDNA、各0.4mM的正向和反向PCR引物和0.1mM的TaqManTM探针。使用用报道子6-羧基荧光素(FAM)5’标记和用猝灭剂四甲基若丹明(TAMRA)3’标记的TaqManTM探针，且引物和探针组获自Applied Biosystems(Foster City，CA)。温度条件由在95℃5分钟的步骤和接着在60℃1分钟和在95℃15秒的45个循环构成。在PCR反应的各延伸阶段中收集数据并用附带软件包(BioRad，Hercules，CA)分析。测定各基因的阈循环数。所选IC50值显示在表4中。
表4.
Figure BPA00001184760800941
平滑肌细胞中的心血管生物标记
在湿润的5％CO2-95％空气气氛中在37℃，在平滑肌培养基SmGM-2(可购自Lonza BioScience)中培养人冠状动脉平滑肌细胞(CASMC)的原代培养物(可购自Cambrex，Walkersville，MD)，其中所述SmGM-2含有5.5mM葡萄糖、5％FB S、50微克/毫升艮他霉素、50纳克/毫升两性霉素-B、5微克/毫升胰岛素、2纳克/毫升人重组成纤维细胞生长因子(hFGF)和0.5纳克/毫升人重组表皮生长因子(hEGF)。细胞生长至＞80％融合并在5代内使用。
用MyiQ Real-Time PCR Detection System(BioRad，Hercules，CA)进行实时反转录-PCR。各样品具有25微升的最终体积，含有100纳克cDNA、各0.4mM的正向和反向PCR引物和0.1mM的相关基因的TaqManTM探针(Applied Biosystems，Foster City，CA)。温度条件由在95℃5分钟的步骤，接着在60℃1分钟和在95℃15秒40个循环而构成。在PCR反应的各延伸阶段中收集数据并用软件包(BioRad，Hercules，CA)分析。测定各基因的阈循环数。
SDS-PAGE和蛋白质印迹分析：将细胞(每样品1x106个细胞)或细胞提取物制品溶解在SDS-PAGE样品缓冲液(Invitrogen，Carlsbad，CA)中，并通过Pierce(Rockford，IL)BCA蛋白检验法测定各样品中的蛋白质含量。通过SDS-PAGE使用4-12％NuPAGE凝胶(Invitrogen，Carlsbad，CA)分解样品，并将蛋白质电泳转移到PVDF膜上以进行蛋白质印迹法。该膜在25℃用PBS-T中的5％脱脂奶粉封闭1小时，然后在4℃在PBS-T中用兔抗-骨保护素多克隆抗体(1∶100倍稀释，Santa Cruz Biotechnology，Santa Cruz，CA)、鼠抗-纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)单克隆抗体(1000-倍稀释，Santa Cruz Biotechnology，Santa Cruz，CA)、鼠抗-凝血栓蛋白-1(THBSl)单克隆抗体(2000-倍稀释，Calbiochem，La Jolla，CA)、鼠抗-血栓调节蛋白(TM)单克隆抗体(2000-倍稀释，Santa Cruz Biotechnology，Santa Cruz，CA)、鼠抗-VDR单克隆抗体(1∶500倍稀释)、鼠抗-PPARγ(1∶200倍稀释)单克隆抗体(Santa Cruz Biotechnology，Santa Cruz，CA)、兔抗-NFκB多克隆抗体(1∶200倍稀释，Cell Signaling Technology，Danvers，MA)或兔抗-Ncorl多克隆抗体(1∶200倍稀释，Abcam Inc.，Cambridge，MA)培养过夜。用PBS-T洗涤该膜并用辣根过氧化物酶-标记的抗-鼠(用于VDR和PPARγ)或抗-兔(用于骨保护素，NFκB和Ncorl的65亚单位)二抗在25℃培养1小时。然后用检测试剂(SuperSignal WestPico，Pierce，Rockford，IL)培养该膜。通过使该纸暴露在Kodak BioMax胶片中，显示特定谱带。通过Quantity One(BioRad，Hercules，CA)量化谱带强度。所选IC50和EC50值显示在表5中。
表5.
Figure BPA00001184760800961
正常小鼠钙血症模型
雄性的C57BL6小鼠获自Jackson Laboratories。该小鼠用正常饮食饲养四天(D10001，Research Diets Inc.)。用在三log剂量范围内给药的赋形剂(20％乙醇/30％丙二醇/50％水，0.05毫升，s.c.)或受试药剂开始治疗。动物每天给药一次，持续3天。在最后一次给药后24小时，动物用***/甲苯噻嗪(100/18mg/kg)麻醉并通过心脏穿刺术放学以测量PTH和其它端点。
PTH和矿物质的测量：使用Abbott
Figure BPA00001184760800971
(Abbott Laboratories，Abbott Park，IL)由血清测量钙(Ca)、血清磷(Pi)、肌酸酐和BUN。使用
Figure BPA00001184760800972
***(Abbott Laboratories，East Windsor，NJ)测定血液离子钙(iCa)。使用获自ALPCO/Immutopics，Inc.(Windham，NH)的小鼠甲状旁腺激素(PTH)EIA试剂盒测量血清PTH。所选数据显示在表6中。图4中的图给出剂量响应的指示。要注意的是，实施例1在至少三log剂量范围内造成大约30％的PTH降低且没有大于1mg/dL的血清钙附随升高。这种数据表明与受试的其它两种化合物相比更宽的治疗窗潜力。
数据分析：计算各组的平均值±平均值的标准误差。使用单因素方差分析和随后Dunnett′s试验评估赋形剂和药物治疗组之间的差异。*p＜0.05＝显著性
表6.
  小鼠钙血症   1mg/dLΔ总Ca   PTH ED50
  μg/kg   μg/kg
  骨化三醇   0.026   0.0091
  帕立骨化醇   0.286   0.028
  实施例1   ＞100   10.47
***大鼠中的主动脉钙化
5/6肾切除的大鼠：雄性Sprague-Dawley，5/6NX大鼠(～200克)获自Charles River。使用标准的两步骤外科手术切除程序进行肾切除。在肾切除后大约2周开始，用诱导高磷血症的饮食(0.9％磷和0.6％钙)饲养大鼠达到该研究的持续时间，以诱导继发性甲状旁腺功能亢进(SHPT)。在使用特殊饮食4周后，大鼠每周三次接受赋形剂(5％乙醇/95％丙二醇；0.4mL/kg；i.p.)或受试药剂，持续41天。在第0、13和41天，收集血液(给药后24小时)。
为使病状中的差异引发的偏差最小化，在高磷饮食4周后(在治疗前)评估5/6NX大鼠，并对研究用的大鼠采用下列纳入/排除标准：
·血清肌酸酐＝0.8-2.0mg/dL(假对照＝0.43±0.01mg/dL；n＝20)
·排除：血清钙≤8.5mg/dL(假对照＝10.05±0.05mg/dL；n＝20)
·排除：血清磷＞12mg/dL(假对照＝7.09±0.12mg/dL；n＝20)
·排除：iPTH＜400pg/mL(假对照＝430±33pg/mL；n＝20)
PTH和血清矿物质水平的测量：使用大鼠完整PTH ELISA试剂盒(ALPCO/Immutopics，Inc.，Windham，NH)测量血清PTH。使用Abbott
Figure BPA00001184760800981
(Abbott，Abbott Park，IL)测量血清钙、磷、肌酸酐和BUN浓度。使用
Figure BPA00001184760800982
便携式临床分析仪(Abbott Laboratories，East Windsor，NJ)测定血液离子钙。
切开主动脉，与外来组织分离，称重，在高温下化成灰烬，在酸缓冲剂中稀释，并用临床分析仪(Abbott Laboratories，Abbott Park，IL)分析总钙。
数据分析：列出各组的平均值±SEM。使用单因素方差分析(anovaOne-Way ANOVA)和随后Dunnett′s post-hoc试验评估SHAM、赋形剂和VDRA-治疗组中的相应天数之间的差异。*p＜0.05对(vs)相应天数；#p＜0.05对(vs)5/6NX。
实施例1在＜100μg/kg下对主动脉钙化没有影响。
研究1：该研究的目的是在5/6NX大鼠模型中比较实施例1对血清PTH、离子Ca++、总Ca++和磷的影响。
方法：在6周***中，5/6NX大鼠在研究之前用正常饮食(Teklad 8640；0.9％Phos.和1.1％Ca++)喂饲4周，并在该研究持续期间用该饮食饲养。用赋形剂和10、30或100μg/kg的A-实施例1治疗5/6NX大鼠。大鼠每周三次腹膜注射给药，持续2周。在第0和13天收集血液以测定PTH、离子Ca++、总Ca++和磷的浓度。用配对t-试验进行统计分析以比较第0天对(vs.)第13天；在p＜0.05下实现统计显著性。
结果：在30和100μg/kg下的实施例1治疗分别将PTH降低26％和78％。在100μg/kg的实施例1下，离子化的和总Ca++都升高。实施例1不影响血清磷水平；但是，在赋形剂治疗的假对象(sham)和5/6NX大鼠中降低。
研究2：用于测定用实施例1(1，10 & 100μg/kg)治疗是否减轻5/6NX***大鼠中的左心室肥大(LVH)。
方法：之前的研究表明，5/6NX大鼠是高血压的并存在左心室肥大。因此，5/6NX大鼠在2周***获自Charles River并在研究前4周喂饲TD04151(0.6％Ca和0.9％P)。用实施例1(1，10 & 100μg/kg)或赋形剂(95％PG/5％ EtOH)治疗5/6NX，每周3次，持续六周。在第0、13和41天，提取血液(给药后24小时)。在6周治疗期结束时，用异氟烷麻醉大鼠，并进行超声心动描记术。根据美国超声心动描记术学会(American Society of Echocardiography)的建议使用立方法(cube method)测定左心室质量。在安乐死后，获得左心室重量的直接测量。注：为了比较，在此研究中包括来自之前的研究的赋形剂治疗的SHAM和5/6NX大鼠(每周三次，持续六周)。所有值为平均值±SEM。使用ANOVA和在注明时使用t-试验分析数据。*表明与SHAM相比p＜0.05。
结果：实施例1(1，10和100μg/kg，每周三次，持续六周)治疗的5/6NX大鼠与赋形剂治疗的5/6NX大鼠相比，左心室质量没有可检出的差异。组之间不存在心功能差异。与对照组相比，用实施例1治疗不加剧LVH。
本发明的方法
本发明的化合物和组合物可用于调节维生素D受体的作用。特别地，本发明的化合物和组合物能够用于治疗和预防受维生素D受体调节的失调症。通常，能够通过选择性调节哺乳动物体内的维生素D受体，优选通过单独或与另一活性剂结合(例如作为治疗方案的一部分)施用本发明的化合物或组合物来改善这类失调症。
本发明的化合物，包括但不限于实施例中指定的那些，具有对维生素D受体的亲合力。作为维生素D受体活化剂，本发明的化合物可用于治疗和预防许多维生素D受体介导的疾病或病症。
例如，维生素D受体活化剂已表明在降低甲状旁腺激素水平方面发挥显著作用(Hudson，J.Q.The Annals of Pharmacotherapy，2006，40，1584-1593)。因此，维生素D受体活化剂适用于治疗与慢性肾病相关的病症和失调症。一些维生素D受体活化剂不上调肠内维生素D受体，由此限制钙血和高磷血效应和相关的副作用(Slatopolsky，E.；Finch，J.；Ritter，C.；Takahashi，F.American Journal of Kidney Disease，1998，4，S40-S47)。研究已表明，维生素D受体活化剂疗法减轻肾病的发展(Agarwal，R.；Acharya，M.；Tian，J.；Hippensteel，R.L.；Melnick，J.Z.；Qiu，P.；Williams，L.；Batlle，D.Kidney International，2005，68，2823-2828和Schwarz，U.；Amann，K.；Orth，S.R.；Simonaviciene，A.；Wessels，S.；Ritz，E.Kidney International，1998，53，1696-1705)。
此外，维生素D受体活化剂已表明参与骨骼和矿物质体内平衡。这些受体活化剂对肠内钙吸收和随后对骨的合成代谢活性是重要的(Hendy，G.N.；Hruska，K.A.；Methew，S.；Goltzman，D.Kidney International，2006，69，218-223)。某些激动剂已表现出在对甲状旁腺激素抑制的影响减轻的情况下选择性治疗骨病的潜力(Shevde，N.K.；Plum，L.A.；Clagett-Dame，M.；Yamamoto，H.；Pike，J.W.；DeLuca，H.F。Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.2002，99，13487-13491；Uchiyama，Y.；Higuchi，Y.；Takeda，S.；Masaki，T.；Shira-Ishi，A.；Sato，K.；Kubodera，N.；Ikeda，K.；Ogata，E.Bone，2002，4，582-588和Shiraishi，A.；Higashi，S.；Ohkawa，H.；Kubodera，N.；Hirasawa，T.；Ezawa，I.；Ikeda，K.；Ogata，E.Calcified Tissue International，1999，65，311-316)。
维生素D受体活化剂已表明对循环***的许多方面具有影响。该维生素D受体***在维持抗血栓形成的体内平衡中发挥重要作用(Aihara，K.；Azuma，H.；Akaike，M.；Ikeda，Y.；Yamashita，M.；Sudo，T.；Hayashi，H.；Yamada，Y.；Endoh，F.；F u.jimura，M.；Yoshida，T.；Yamaguchi，H.；Hashizume，S.；Kato，M.；Yoshimura，K.；Yamamoto，Y.；Kato，S.；Matsumoto，T.J.Biol.Chem.，2004，279，35798-35802)。维生素D受体活化剂已表明改变对凝结而言重要的蛋白质，如血栓调节蛋白、组织因子和纤溶酶原激活物抑制剂1的表达和活性，从而在动脉粥样硬化病中提供潜在治疗(Beer，T.M.；Venner，P.M.；Ryan，C.W.；Petrylak，D.P.；Chatta，G.；Ruether，J.D.；Chi，K.N.；Curd，J.G.；DeLoughery，T.G.British Journal of Haematology，2006，135，392-394和Ohsawa，M.；Koyama，T.；Yamamoto，K.；Hirosawa，S.；Kamei，S.；Kamiyama，R.Circulation，2000，102，2867-2872)。肾素-血管紧张素II***在血压调节中至关重要，且升高的肾素水平造成高血压和心脏肥大。维生素D受体活化剂直接抑制维生素D受体依赖性机制中的肾素基因转录，从而为此***提供控制机制(Li，Y.C.；Qiao，G.；Uskokovic，M.；Xiang，W.；Zheng，W.；Kong，J.Journal of Steroid Biochemistry & Molecular Biology，2004，89-90，397-392)。接受维持性血液透析的慢性肾病患者常患有心血管并发症，其中由左心室肥大引起的缺血性心脏病是最显著的。甲状旁腺功能亢进是一项病因，甚至用维生素D受体活化剂部分控制也会在不改变其它血液动力学参数的情况下遏制心肌肥大(Park，C.W.；Oh，Y.S.；Shin，Y.S.；Kim，C.-M.；Kim，Y.-S.；Kim，S.Y.；Choi，E.J.；Chang，Y.S.；Bang，B.K.American Journal of Kidney Diseases，1999，33，73-81)。
维生素D受体在免疫***的大多数细胞类型上表达，特别是在调节T细胞响应方面。目前，维生素D受体活化剂局部用于治疗牛皮癣。动物模型表明，维生素D受体活化剂能够有益于治疗关节炎、自体免疫性糖尿病、实验性***反应性脑脊髓炎、炎性肠病或全身性红斑狼疮，表明在人体中的治疗应用的扩展(Adorini，L.Cellular Immunology，2005，233，115-124)。
癌症所涉及的许多信号通路受维生素D受体活化剂影响。尽管有大量的多样性，但它们在通过基因组和非基因组机制介导的多种癌症中主要负责抗增殖、抗血管生成和促分化效应(Deeb，K.K.；Trump，D.L.；Johnson，C.S.Nature Reviews Cancer，2007，7，684-700)。在***中细胞增殖的调节中，维生素D代谢的角色看起来是重要的(Lou，Y.-R.；Qiao，S.；Talonpoika，R.；
Figure BPA00001184760801011
H.；Tuohimaa，P.Journal of Steroid Biochemistry and Molecular Biology，2004，92，317-3250)。维生素D受体活化剂对自分泌生长因子IL-6和IL-8的抑制与卡波西肉瘤的发展有联系(Masood，R.；Nagpal，S.；Zheng，T.；Cai，J.；Tulpule，A.；Smith，D.L.；Gill，P.S.Blood，2000，96，3188-3194)。维生素D类似物对白血病细胞施加分化作用(James，S.Y.；Williams，M.A.；Newland，A.C.；Colston，K.W.Gen.Pharmac.，1999，32，143-154)。
能够改变本发明的药物组合物中活性成分的实际剂量水平以获得对特定患者、组合物和给药模式而言有效实现所需治疗响应的一种或多种活性化合物的量。所选剂量水平取决于特定化合物的活性、给药途径、治疗的病症的严重性以及治疗的患者的状况和先前病史。但是，在本领域技术范围内的是，以比实现所需治疗效果所需的量更低的水平开始该化合物的剂量并逐渐提高该剂量直至实现所需效果。
当用在上述或其它治疗中时，治疗有效量的本发明的化合物之一能够以纯净形式使用，或以可药用盐、酯、酰胺或前药形式使用(如果存在这些形式)。或者，该化合物能够作为含有所述化合物以及一种或多种可药用载体的药物组合物施用。术语“治疗有效量”的本发明的化合物是指足以在适用于任何医疗治疗的合理的效益/风险比下治疗失调症的量的该化合物。但是，要理解的是，本发明的化合物和组合物的总日剂量由主治医师在合理医疗判断的范围内决定。任何特定患者的特定治疗有效剂量水平取决于各种因素，包括治疗的失调症和该失调症的严重程度；所用特定化合物的活性；所用的特定组合物；患者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；所用特定化合物的给药时间、给药途径和***速率；治疗持续时间；与所用特定化合物结合或同时使用的药物；和医疗领域中公知的类似因素。例如，在本领域技术范围内的是，以比实现所需治疗效果所需的更量低的水平开始该化合物的剂量并逐渐提高该剂量直至实现所需效果。
施用于人或低等动物的本发明的化合物的总日剂量为大约0.01微克至大约150毫克。更优选的剂量可以为大约0.010微克至大约10毫克。如果需要，有效的日剂量可以分成用于给药的多剂量。因此，单剂量组合物可能含有这样的量或其约数以构成日剂量。
本发明的化合物是通过改变受体或信号传输的活性来调节维生素D受体的功能的维生素D受体活化剂。因此，向哺乳动物施用治疗有效量的式(I)的化合物提供了选择性调节维生素D受体的作用的方法。
此外，向哺乳动物施用治疗有效量的式(I)的化合物提供了治疗或预防选自肾病、与慢性肾病相关的继发性甲状旁腺功能亢进、骨质疏松症、骨软化症、骨营养不良、血栓形成、肾素-血管紧张素***、心肌肥大、高血压、自体免疫失调、免疫抑制、移植排斥、关节炎、多发性硬化、牛皮癣、炎性肠病、1型糖尿病和全身性红斑狼疮、结肠癌、***癌、乳癌、白血病和卡波西肉瘤的病症或失调症的方法。更优选地，向哺乳动物施用治疗有效量的式(I)的化合物提供了治疗继发性甲状旁腺功能亢进、高血压和心肌肥大的方法。
通过上述方法确定的化合物可作为仅有的药剂给药或与一种或多种其它药剂联合给药，其中该联合不造成不可接受的不利作用。
要理解的是，上文的详述和附随实施例仅是示例性的，且不应被视为对本发明的范围的限制，该范围仅由所附权利要求及其对等物规定。本领域技术人员容易看出对所公开的实施方案的各种变动和修改。可以在不背离其精神和范围的情况下作出这类变动和修改，包括但不限于与本发明的化学结构、取代基、衍生物、中间体、合成法、制剂和/或使用方法相关的那些。

Claims (32)

1.式(I)的化合物：
Figure FPA00001184760700011
或其可药用盐或前药，其中
与X相连的碳能够具有R或S构型；
X是-CH2OR1、-CH2OC(O)R2、-CR3R4-(CH2)m-CR5R6-CR7(CH3)2或OR8；
Y1和Y2各自是氢或一起构成亚甲基；
Y3和Y4各自是氢或一起构成亚甲基；
Z1是氟、羟基或羟甲基；
Z2是氟或羟基；
R1是氢、烷基或芳基；
R2是烷基、烷基氨基、烷基羰氧基烷基或羟烷基；
R3和R4独立地为氢或烷氧基，条件是两者不都是烷氧基；
R5和R6独立地为氢或烷基；
R7是氢、烷氧基或羟基；
R8是-CH2CH2C(CH3)2OH；且
m是1、2或3。
2.权利要求1的化合物，其中
X是-CR3R4-(CH2)m-CR5R6-CR7(CH3)2；
Y1和Y2各自是氢或一起构成亚甲基；
Y3和Y4各自是氢或一起构成亚甲基；
Z1是氟、羟基或羟甲基；
Z2是氟或羟基；
R3和R4独立地为氢或烷氧基，条件是两者不都是烷氧基；
R5和R6独立地为氢或烷基；
R7是氢、烷氧基或羟基；且
m是1或2。
3.权利要求2的化合物，其中
X是-CR3R4-(CH2)m-CR5R6-CR7(CH3)2；
Y1和Y2一起构成亚甲基；
Y3和Y4各自是氢；
Z1是羟基；
Z2是羟基；
R3和R4之一是氢且另一个是烷氧基；
R5和R6之一是氢且另一个是烷基；
R7是烷氧基；且
m是1。
4.权利要求2的化合物，其中
X是-CR3R4-(CH2)m-CR5R6-CR7(CH3)2；
Y1和Y2各自是氢；
Y3和Y4各自是氢；
Z1是羟基；
Z2是羟基；
R3和R4之一是氢且另一个是烷氧基；
R5和R6之一是氢且另一个是烷基；
R7是烷氧基；且
m是1。
5.权利要求2的化合物，其中
X是-CR3R4-(CH2)m-CR5R6-CR7(CH3)2；
Y1和Y2各自是氢；
Y3和Y4一起构成亚甲基；
Z1是氟；
Z2是羟基；
R3和R4是氢；
R5和R6是氢；
R7是羟基；且
m是1。
6.权利要求2的化合物，其中
X是-CR3R4-(CH2)m-CR5R6-CR7(CH3)2；
Y1和Y2各自是氢；
Y3和Y4一起构成亚甲基；
Z1是羟基；
Z2是氟；
R3和R4是氢；
R5和R6是氢；
R7是羟基；且
m是1。
7.权利要求2的化合物，其中
X是-CR3R4-(CH2)m-CR5R6-CR7(CH3)2；
Y1和Y2各自是氢；
Y3和Y4一起构成亚甲基；
Z1是羟甲基；
Z2是羟基；
R3和R4是氢；
R5和R6是氢；
R7是羟基；且
m是1。
8.权利要求2的化合物，其中
X是-CR3R4-(CH2)m-CR5R6-CR7(CH3)2；
Y1和Y2各自是氢；
Y3和Y4各自是氢；
Z1是羟基；
Z2是羟基；
R3和R4是氢；
R5和R6之一是氢且另一个是烷基；
R7是氢；且
m是1。
9.权利要求2的化合物，其中
X是-CR3R4-(CH2)m-CR5R6-CR7(CH3)2；
Y1和Y2各自是氢；
Y3和Y4各自是氢；
Z1是羟基；
Z2是羟基；
R3和R4是氢；
R5和R6之一是氢且另一个是烷基；
R7是羟基；且
m是1。
10.权利要求2的化合物，其中
X是-CR3R4-(CH2)m-CR5R6-CR7(CH3)2；
Y1和Y2各自是氢；
Y3和Y4一起构成亚甲基；
Z1是羟基；
Z2是羟基；
R3和R4是氢；
R5和R6之一是氢且另一个是烷基；
R7是氢；且
m是1。
11.权利要求1的化合物，其中
X是-CH2OC(O)R2；
Y1和Y2各自是氢；
Y3和Y4一起构成亚甲基；
Z1是羟基；
Z2是羟基；且
R2是烷基、烷基氨基、烷基羰氧基烷基或羟烷基。
12.权利要求11的化合物，其中
X是-CH2OC(O)R2；
Y1和Y2各自是氢；
Y3和Y4一起构成亚甲基；
Z1是羟基；
Z2是羟基；且
R2是烷基。
13.权利要求11的化合物，其中
X是-CH2OC(O)R2；
Y1和Y2各自是氢；
Y3和Y4一起构成亚甲基；
Z1是羟基；
Z2是羟基；且
R2是烷基氨基。
14.权利要求11的化合物，其中
X是-CH2OC(O)R2；
Y1和Y2各自是氢；
Y3和Y4一起构成亚甲基；
Z1是羟基；
Z2是羟基；且
R2是烷基羰氧基烷基。
15.权利要求11的化合物，其中
X是-CH2OC(O)R2；
Y1和Y2各自是氢；
Y3和Y4一起构成亚甲基；
Z1是羟基；
Z2是羟基；且
R2是羟烷基。
16.权利要求1的化合物，其中
X是-CH2OR1；
Y1和Y2各自是氢；
Y3和Y4一起构成亚甲基；
Z1是羟基；
Z2是羟基；且
R1是氢、烷基或芳基。
17.权利要求16的化合物，其中
X是-CH2OR1；
Y1和Y2各自是氢；
Y3和Y4一起构成亚甲基；
Z1是羟基；
Z2是羟基；且
R1是氢。
18.权利要求16的化合物，其中
X是-CH2OR1；
Y1和Y2各自是氢；
Y3和Y4一起构成亚甲基；
Z1是羟基；
Z2是羟基；且
R1是芳基。
19.权利要求1的化合物，其中
X是-OR8；
Y1和Y2各自是氢；
Y3和Y4一起构成亚甲基；
Z1是羟基；
Z2是羟基；且
R8是-CH2CH2C(CH3)2OH。
20.权利要求1的化合物，其中
X是-OR8；
Y1和Y2各自是氢；
Y3和Y4一起构成亚甲基；
Z1是羟甲基；
Z2是羟基；且
R8是-CH2CH2C(CH3)2OH。
21.化合物，其是
新戊酸(2S)-2-[(1R，3R，7E，17β)-1，3-二羟基-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-17-基]丙基酯；
(1R，3R，7E，17β)-17-[(1S)-2-羟基-1-甲基乙基]-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1，3-二醇；
新戊酸(2R)-2-[(1R，3R，7E，17β)-1，3-二羟基-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-17-基]丙基酯；
2，2-二甲基丁酸(2S)-2-[(1R，3R，7E，17β)-1，3-二羟基-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-17-基]丙基酯；
叔丁基氨基甲酸(2S)-2-[(1R，3R，7E，17β)-1，3-二羟基-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-17-基]丙基酯；
2-(乙酰氧基)-2-甲基丙酸(2S)-2-[(1R，3R，7E，17β)-1，3-二羟基-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-17-基]丙基酯；
(1R，3R，7E)-2-亚甲基-17-[(1R，4S)-1，4，5-三甲基己基]-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1，3-二醇；
(1R，3R，7E，17β)-17-[(1S)-1-(3-羟基-3-甲基丁氧基)乙基]-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1，3-二醇；
(1R，3R，7E)-17-[(1R，4S)-1，4，5-三甲基己基]-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1，3-二醇；
(1S，3R，5Z，7E，24R)-22，25-二甲氧基-9，10-裂环麦角-5，7，10-三烯-1，3-二醇；
(1R，3R，7E，17β)-17-[(1S，4R)-2，5-二甲氧基-1，4，5-三甲基己基]-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1，3-二醇；
(1R，3R，7E，17β)-2-亚甲基-17-[(1S)-1-甲基-2-苯氧基乙基]-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1，3-二醇；
(1R，3S，5Z，7E，17β)-3-氟-17-[(1R)-5-羟基-1，5-二甲基己基]-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1-醇；
2-羟基-2-甲基丙酸(2S)-2-[(1R，3R，7E，17β)-1，3-二羟基-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-17-基]丙基酯；
(1R，3R，7E，17β)-17-[(1R，4R)-5-羟基-1，4，5-三甲基己基]-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1，3-二醇；
(1R，3R，5E，7E，17β)-17-[(1R)-5-羟基-1，5-二甲基己基]-3-(羟甲基)-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1-醇；
(1R，3R，5E，7E，17β)-3-(羟甲基)-17-[(1S)-1-(3-羟基-3-甲基丁氧基)乙基]-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1-醇；或
(1R，3S，5E，7E，17β)-3-氟-17-[(1R)-5-羟基-1，5-二甲基己基]-2-亚甲基-9，10-裂环雌-5，7-二烯-1-醇；
或它们的可药用盐。
22.药物组合物，其在可药用载体中包含治疗有效量的权利要求1的化合物或其盐。
23.制造(1R，3aR，4S，7aR)-1-[(1R)-2-羟基-1-甲基乙基]-7a-甲基八氢-1H-茚-4-酚的方法，包括：
(a)使维生素D2与臭氧在甲醇和吡啶中在大约-70℃反应以提供(2S)-2-[(1R，3aR，7aR)-7a-甲基-4-氧代八氢-1H-茚-1-基]丙醛；
(b)使(2S)-2-[(1R，3aR，7aR)-7a-甲基-4-氧代八氢-1H-茚-1-基]丙醛与大约0.05至0.30当量的选自吡咯烷或哌啶的碱在选自叔丁基甲醚、氯仿、二氯甲烷、乙酸异丙酯、乙酸乙酯、甲苯或甲醇的溶剂中在为或大约为环境温度下在惰性气氛下反应大约10至24小时；在继续搅拌大约另外24至120小时的情况下添加大约另外0.1当量的该碱提供(2R)-2-[(1R，3aR，7aR)-7a-甲基-4-氧代八氢-1H-茚-1-基]丙醛和(2S)-2-[(1R，3aR，7aR)-7a-甲基-4-氧代八氢-1H-茚-1-基]丙醛的比率为大约1∶1至2∶1的混合物；
(c)使(2R)-2-[(1R，3aR，7aR)-7a-甲基-4-氧代八氢-1H-茚-1-基]丙醛和(2S)-2-[(1R，3aR，7aR)-7a-甲基-4-氧代八氢-1H-茚-1-基]丙醛的混合物与硼氢化钠在叔丁基甲醚或乙腈和选自甲醇、乙醇和正丙醇的质子溶剂的混合物中在大约0至15℃反应，随后经大约0.5至3小时时期逐渐升温至室温以提供(1R，3aR，4S，7aR)-1-[(1R)-2-羟基-1-甲基乙基]-7a-甲基八氢-1H-茚-4-酚和(1R，3aR，4S，7aR)-1-[(1S)-2-羟基-1-甲基乙基]-7a-甲基八氢-1H-茚-4-酚的比率为大约1∶1至2∶1的混合物；通过色谱提纯法提高(R)-异构体的比率；和
(d)使(1R，3aR，4S，7aR)-1-[(1R)-2-羟基-1-甲基乙基]-7a-甲基八氢-1H-茚-4-酚和(1R，3aR，4S，7aR)-1-[(1S)-2-羟基-1-甲基乙基]-7a-甲基八氢-1H-茚-4-酚的混合物与1至3摩尔当量的乙酸乙烯酯和15至300重量％的选自脂肪酶AK或脂肪酶PS的酶在选自叔丁基甲醚、乙腈、甲苯或乙酸异丙酯的溶剂中在大约5至50℃反应大约4至7小时和在0至15℃反应大约2至15小时，以提供(1R，3aR，4S，7aR)-1-[(1R)-2-羟基-1-甲基乙基]-7a-甲基八氢-1H-茚-4-酚和不想要的乙酸酯形式的异构体，将它们色谱分离。
24.使式(II)的A-环氧化膦与式(III)的C/D-环酮偶联的方法，包括：
(a)在甲苯中使式(II)的A-环氧化膦与大约1.4当量的式(III)的C/D-环酮混合，随后蒸发挥发物；该过程重复第二次；其中
Y1和Y2各自是氢或一起构成亚甲基；
Y3和Y4各自是氢或一起构成亚甲基；
Z5是氟、-O-(羟基-保护基)或-CH2O-(羟基-保护基)；
Z6是氟或-O-(羟基-保护基)；
X1是-CH2OR1、-CH2OC(O)R2、-CR3R4-(CH2)m-CR5R6-CR7a(CH3)2或OR8a；
R1是氢、烷基或芳基；
R2是烷基、烷基氨基、烷基羰氧基烷基或羟烷基；
R3和R4独立地为氢或烷氧基，条件是两者不都是烷氧基；
R5和R6独立地为氢或烷基；
R7a是氢、烷氧基、羟基或被保护的羟基；
R8a是-CH2CH2C(CH3)2OH或-CH2CH2C(CH3)2OSi(CH3)3；且
m是1、2或3，
Figure FPA00001184760700091
(b)在大约-80至-65℃将式(II)的A-环氧化膦和式(III)的C/D-环酮的混合物溶解在四氢呋喃中；
(c)在继续搅拌15至30分钟的情况下缓慢添加碱，如双(三甲基甲硅烷基)氨基化锂，随后升温至大约-10至10℃并在此温度下再搅拌大约15至30分钟以提供式(IV)的化合物
25.式(V)的化合物，
Figure FPA00001184760700102
其中
Y1a和Y2a各自是氢；
Y3和Y4各自一起构成亚甲基；
Z3是-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)或-CH2O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)；且
Z4是氟、-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)或-O-(叔丁基二苯基甲硅烷基)
条件是Z3和Z4不能都是-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)。
26.权利要求25的化合物，其选自：
(3R，5R)-3-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-5-{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}-4-亚甲基环己酮；和
(3R，5R)-3-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-5-({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)-4-亚甲基环己酮；和
(3R，5R)-3，5-双{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}-4-亚甲基环己酮。
27.治疗或预防受维生素D受体调节的病症、失调症或缺陷的方法，其中该病症、失调症或缺陷选自骨病、心血管病、甲状旁腺功能亢进、免疫失调、增殖性疾病、肾病和血栓形成，包括施用治疗合适量的式(I)的化合物。
28.根据权利要求27的方法，其中该病症或失调症是肾病和与慢性肾病相关的继发性甲状旁腺功能亢进。
29.根据权利要求27的方法，其中该病症或失调症是与骨质疏松症、骨软化症和骨营养不良相关的骨病。
30.根据权利要求27的方法，其中该病症或失调症是与血栓形成、肾素-血管紧张素***、心肌肥大和高血压相关的心血管病。
31.根据权利要求27的方法，其中该病症或失调症是与自体免疫失调、免疫抑制、移植排斥、关节炎、多发性硬化、牛皮癣、炎性肠病、1型糖尿病和全身性红斑狼疮相关的免疫失调。
32.根据权利要求27的方法，其中该病症或失调症是与结肠癌、***癌、乳癌、白血病和卡波西肉瘤相关的增殖性疾病。
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