CN101828634A - 微生物发酵无抗生素饲料及其制作方法 - Google Patents
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Abstract
一种微生物发酵无抗生素饲料，其包括配合料和复合发酵料；配合料为如下重量份配比的原料组成：玉米30～50份、豆粕20～40份、棉籽粕5～20份、磷酸氢钙2～5份、食盐0.2～0.4份、复合微量元素0.1～0.2份、复合维生素0.2～0.4份；复合发酵料为如下重量份配比的发酵料组成：嗜酸乳杆菌发酵料30～70份、枯草芽孢杆菌发酵料10～20份、酿酒酵母发酵料20～35、长柄木霉发酵料1～3份、黑曲霉发酵料1～3份、米曲霉发酵料1～3份；其中配合料与复合发酵料的重量之比为：96～92∶4～8。
Description
技术领域
本发明涉及一种动物饲料，特别是一种微生物发酵无抗生素饲料及其制作方法。
背景技术
20世纪在饲料中添加抗生素类药物，带来了全球畜牧养殖业的飞速发展。但是，动物长期饲用添加抗生素的饲料，会在体内产生耐药菌株，并造成动物产品的药物残留等问题。随着人民生活水平的逐步提高，消费者对畜禽产品的需求已经从追求数量过渡到追求质量，所以在饲料中添加抗生素的做法越来越受到限制，目前在欧洲、北美、亚洲等地区的许多国家已经禁止在饲料中添加抗生素。
开发出无抗生素饲料，从源头上解决药物残问题，已经成为当前世界肉、蛋、奶产品市场竞争力的核心要素。目前，国内外开展了大量抗生素替代品的研究，其中微生物发酵无抗饲料效果最佳。
中国专利CN100546491C公开了一种动物发酵浓缩饲料和配合饲料及其制作方法和设备，该专利公开的饲料虽然提升了乳酸菌和酿酒酵母及各种酶、粗蛋白、氨基酸等，微生物代谢产生的酶也很高，为无抗生素饲料，饲喂动物效果好；但是该项发明存在几个不足之处：
1、有益菌品种仅限厌养菌和兼性厌养菌，代替抗生素的作用有限：使用带有呼吸阀的发酵包装袋发酵只能培养厌氧菌和兼性厌养菌，如芽孢杆菌及多种产酶的好氧菌等不能生长繁殖，更谈不上代谢产物了，仅靠厌氧菌和兼性厌养菌代替抗生素的作用有限；
2、饲料全部组份不灭菌进行发酵造成质量不可控制：世界公认采用生料发酵是极其危险的，由于杂菌量因原料而异，使用带有呼吸阀的发酵包装袋发酵，在培养有益菌的同时，也培养了由原料带来的杂菌，不排除带有致病菌，一旦发生疫情将会造成巨大的损失；
3、能量损失及维生素问题：把饲料的全部组分做为培养基全部发酵，由于发酵热的产生，造成能量成分大量流失；饲料配方中没有添加复合维生素，主要是由于其工艺条件限制，不便添加复合维生素，因为复合维生素在含水40％～50％、温度30℃～40℃、PH值≤5的环境里，发酵几十天，再加上矿物质对其破坏，仓库存放、运输、养殖户存放，维生素类的效价所剩无几，不添加复合维生素或添加量不足的饲料、，动物食用后会出现各种维生素缺乏症的严重后果；
4、成本高、使用不方便：饲料中水分高达40％以上，采用带有呼吸阀的发酵包装袋发酵增加了包装及运输成本，且在运输和存放过程中容易出现破损、霉变浪费等现象，还易结成难破碎的粘湿硬块，使养殖户增加搅拌设备仍拌不匀，使用极其不便；
5、周转期长、压库量大：发酵生产中所接菌种只占发酵料的万分之一(即万分之一的接种量)，造成了发酵周期长达几十天，使生产厂家的压库量特大，增加了生产成本。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的上述不足而提供一种微生物发酵无抗生素饲料，其富含有益活菌、多糖、抗菌肽、消化酶、有机酸及促生长因子等，因而其有利于动物采食、消化和吸收，可以代替抗生素促进动物生长和提高抗病能力。
本发明的另一目的是提供一种上述微生物发酵无抗生素饲料的制作方法。
本发明的技术方案是：一种微生物发酵无抗生素饲料，其包括配合料和复合发酵料；配合料为如下重量份配比的原料组成：玉米30～50份、豆粕20～40份、棉籽粕5～20份、磷酸氢钙2～5份、食盐0.2～0.4份、复合微量元素0.1～0.2份、复合维生素0.2～0.4份；
复合发酵料为如下重量份配比的发酵料组成：嗜酸乳杆菌发酵料30～70份、枯草芽孢杆菌发酵料10～20份、酿酒酵母发酵料20～35份、长柄木霉发酵料1～3份、黑曲霉发酵料1～3份、米曲霉发酵料1～3份；嗜酸乳杆菌发酵料为嗜酸乳杆菌在培养基上接种发酵而得、枯草芽孢杆菌发酵料为枯草芽孢杆菌在培养基上接种发酵而得、酿酒酵母发酵料为酿酒酵母在培养基上接种发酵而得、长柄木霉发酵料为长柄木霉在培养基上接种发酵而得、黑曲霉发酵料为黑曲霉在培养基上接种发酵而得、米曲霉发酵料为米曲霉在培养基上接种发酵而得；
其中配合料与复合发酵料的重量之比为：96～92∶4～8。
本发明进一步的技术方案是：所述的嗜酸乳杆菌发酵料为在如下重量份配比的培养基中接种嗜酸乳杆菌制得：玉米粉15～25份、麦麸40～50份、豆粕粉8～20份、棉籽粕粉3～8份、玉米胚芽粕8～20份、酵母提取物粉1～3份、含有70～90％水份的玉米浆5～15份、含有40～60％水份的糖蜜5～15份、石粉1～2份、磷酸氢钙1～2份，嗜酸乳杆菌发酵料中嗜酸乳杆菌活菌数大于1X108个/克、含水量≤12％；
所述的枯草芽孢杆菌发酵料为在如下重量份配比的培养基中接种枯草芽孢杆菌制得：玉米粉15～25份、麦麸30～50份、豆粕粉5～15份、棉籽粕粉5～15份、玉米胚芽粕10～20份、含有70～90％水份的玉米浆2～5份、含有40～60％水份的糖蜜2～8份，枯草芽孢杆菌发酵料中枯草芽孢杆菌活菌数大于1×109个/克、木聚糖酶活性大于1.2×104u/g、含水量≤12％；
所述的酿酒酵母发酵料为在如下重量份配比的培养基中接种酿酒酵母制得：玉米粉10～20份、麦麸20～40份、豆粕粉3～8份、棉籽粕粉8～16份、玉米胚芽粕15～25份、次粉5～15份、含有70～90％水份的玉米浆2～5份、含有40～60％水份的糖蜜2～8份，酿酒酵母发酵料中酿酒酵母活菌数大于1×109个/克、含水量≤12％；
所述的长柄木霉发酵料为在如下重量份配比的培养基中接种长柄木霉制得：玉米粉5～15份、麦麸30～50份、豆粕粉3～8份、棉籽粕粉10～20份、玉米胚芽粕17～27份、含有70～90％水份的玉米浆2～5份、含有40～60％水份的糖蜜2～8份，长柄木霉发酵料中纤维素酶活性大于1200u/g、含水量≤12％；
所述的黑曲霉发酵料为在如下重量份配比的培养基中接种黑曲霉制得：玉米粉10～20份、麦麸30～50份、豆粕粉5～15份、棉籽粕粉5～15份、玉米胚芽粕12～22份、含有70～90％水份的玉米浆2～5份、含有40～60％水份的糖蜜2～8份，黑曲霉发酵料中β-葡聚糖酶活性大于10000u/g、含水量≤12％；
所述的米曲霉发酵料为在如下重量份配比的培养基中接种米曲霉制得：玉米粉10～20份、麦麸30～50份、豆粕粉5～15份、棉籽粕粉5～15份、玉米胚芽粕12～22份、含有70～90％水份的玉米浆2～5份、含有40～60％水份的糖蜜2～8份，米曲霉发酵料中蛋白酶活性大于1500u/g、含水量≤12％。
本发明另一技术方案是：一种微生物发酵无抗生素饲料的制作方法，其包括如下步骤：
一、制备菌种：取嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、长柄木霉、黑曲霉、米曲霉为出发菌，分别逐级增温驯化、选提、复壮，得到能达到耐制粒温度的目的菌种，然后分别扩培制得含菌量为1×107～1×108个/g的各菌种液；即得到嗜酸乳杆菌种液、枯草芽孢杆菌种液、酿酒酵母种液、长柄木霉种液、黑曲霉种液、米曲霉种液；
二、制作发酵料
制作嗜酸乳杆菌发酵料、枯草芽孢杆菌发酵料、酿酒酵母发酵料、长柄木霉发酵料、黑曲霉发酵料、米曲霉发酵料，嗜酸乳杆菌发酵料为嗜酸乳杆菌在培养基上接种发酵而得、枯草芽孢杆菌发酵料为枯草芽孢杆菌在培养基上接种发酵而得、酿酒酵母发酵料为酿酒酵母在培养基上接种发酵而得、长柄木霉发酵料为长柄木霉在培养基上接种发酵而得、黑曲霉发酵料为黑曲霉在培养基上接种发酵而得、米曲霉发酵料为米曲霉在培养基上接种发酵而得；
三、配制复合发酵料
将下述重量份配比的各发酵料经过混合、搅拌制得复合发酵料：嗜酸乳杆菌发酵料30～70份、枯草芽孢杆菌发酵料10～20份、酿酒酵母发酵料20～35、长柄木霉发酵料1～3份、黑曲霉发酵料1～3份、米曲霉发酵料1～3份；
四、配制微生物发酵无抗生素饲料
取如下重量份配比的原料：玉米30～50份、豆粕20～40份、棉籽粕5～20份、磷酸氢钙2～5份、食盐0.2～0.4份、复合微量元素0.1～0.2份、复合维生素0.2～0.4份、复合发酵料4～8份；将其中的玉米、豆粕、棉籽粕粉碎后与其它原料混合搅拌，制得微生物发酵无抗生素饲料。
本发明进一步的另一技术方案是：所述的制作发酵料包括如下步骤：
(1)制作嗜酸乳杆菌发酵料
A、制作嗜酸乳杆菌发酵培养基
取如下重量份配比的原料：玉米粉15～25份、麦麸40～50份、豆粕粉8～20份、棉籽粕粉3～8份、玉米胚芽粕8～20份、酵母提取物粉1～3份、含有70～90％水份的玉米浆5～15份、含有40～60％水份的糖蜜5～15份、石粉1～2份、磷酸氢钙1～2份；将取得的原料加水、搅拌均匀，原料与加入的水的重量之比为70～60∶30～40，得到复合料；将复合料放入高压蒸汽灭菌锅中，在0.1～0.12Mpa气压下灭菌30～50分钟；然后将复合料出锅，在无菌环境下待复合料温度降至25～40℃，得到嗜酸乳杆菌培养基；
B、培养嗜酸乳杆菌
将上述的嗜酸乳杆菌种液加入到嗜酸乳杆菌培养基中进行接种，其中加入的嗜酸乳杆菌种液与嗜酸乳杆菌培养基的重量之比为1.5～2.5∶98.5～97.5，在温度为35℃～42℃的厌氧环境下培养6～8天，待活菌数大于1×108个/克时，再在45～50℃低温环境下干燥至含水量≤12％，然后密封包装、避光保存，得到嗜酸乳杆菌发酵料；
(2)制作枯草芽孢杆菌发酵料
A 、制作枯草芽孢杆菌发酵培养基
取如下重量份配比的原料：玉米粉15～25份、麦麸30～50份、豆粕粉5～15份、棉籽粕粉5～15份、玉米胚芽粕10～20份、含有70～90％水份的玉米浆2～5份、含有40～60％水份的糖蜜2～8份；将取得的原料加水、搅拌均匀，原料与加入的水的重量之比为70～60∶30～40，得到复合料；将复合料放入高压蒸汽灭菌锅中，在0.1～0.12Mpa气压下灭菌30～50分钟；然后将复合料出锅，在无菌环境下待复合料温度降至25～40℃，制得枯草芽孢杆菌培养基；
B、培养枯草芽孢杆菌
将上述的枯草芽孢杆菌种液加入到枯草芽孢杆菌培养基中进行接种，其中加入的枯草芽孢杆菌种液与枯草芽孢杆菌培养基的重量之比为1.5～2.5∶98.5～97.5，在温度为35℃～42℃的供氧环境下培养2～3天，待枯草芽孢杆菌活菌数大于1×109个/克、木聚糖酶活性大于1.2×104u/g时，再在45～50℃低温环境下干燥至含水量≤12％，然后密封包装、避光保存，得到枯草芽孢杆菌发酵料；
(3)制作酿酒酵母发酵料
A、制作酿酒酵母发酵培养基
取如下重量份配比的原料：玉米粉10～20份、麦麸20～40份、豆粕粉3～8份、棉籽粕粉8～16份、玉米胚芽粕15～25份、次粉5～15份、含有70～90％水份的玉米浆2～5份、含有40～60％水份的糖蜜2～8份；将取得的原料加水、搅拌均匀，原料与加入的水的重量之比为70～60∶30～40，得到复合料；将复合料放入高压蒸汽灭菌锅中，在0.1～0.12Mpa气压下灭菌30～50分钟；然后将复合料出锅，在无菌环境下待复合料温度降至25～40℃，制得酿酒酵母发酵培养基；
B、培养酿酒酵母
将上述的酿酒酵母种液加入到酿酒酵母培养基中进行接种，其中加入的酿酒酵母种液与酿酒酵母培养基的重量之比为1.5～2.5∶98.5～97.5，在温度为35℃～42℃的供氧环境下培养2～3天，待酿酒酵母活菌数大于1×109个/克时，再在45～50℃低温环境下干燥至含水量≤12％，然后密封包装、避光保存，得到酿酒酵母发酵料；
(4)制作长柄木霉发酵料
A、取如下重量份配比的原料：玉米粉5～15份、麦麸30～50份、豆粕粉3～8份、棉籽粕粉10～20份、玉米胚芽粕17～27份、含有70～90％水份的玉米浆2～5份、含有40～60％水份的糖蜜2～8份；将取得的原料加水、搅拌均匀，原料与加入的水的重量之比为65～55∶35～45，得到复合料；将复合料放入高压蒸汽灭菌锅中，在0.1～0.12Mpa气压下灭菌30～50分钟；然后将复合料出锅，在无菌环境下待复合料温度降至25～40℃，制得长柄木霉发酵培养基；
B、培养长柄木霉
将上述的长柄木霉种液加入到长柄木霉培养基中进行接种，其中加入的长柄木霉种液与长柄木霉培养基的重量之比为1.5～2.5∶98.5～97.5，在温度为35℃～42℃的供氧环境下培养2～3天，待纤维素酶活性大于1200u/g时，再在45～50℃低温环境下干燥至含水量≤12％，然后密封包装、避光保存，得到长柄木霉发酵料；
(5)制作黑曲霉发酵料：
A、取如下重量份配比的原料：玉米粉10～20份、麦麸30～50份、豆粕粉5～15份、棉籽粕粉5～15份、玉米胚芽粕12～22份、含有70～90％水份的玉米浆2～5份、含有40～60％水份的糖蜜2～8份；将取得的原料加水、搅拌均匀，使原料与加入的水的重量之比为65～55∶35～45，得到复合料；将复合料放入高压蒸汽灭菌锅中，在0.1～0.12Mpa气压下灭菌30～50分钟；然后将复合料出锅，在无菌环境下待复合料温度降至25～40℃，制得黑曲霉发酵培养基；
B、培养黑曲霉
将上述的黑曲霉种液加入到黑曲霉培养基中进行接种，其中加入的黑曲霉种液与黑曲霉培养基的重量之比为1.5～2.5∶98.5～97.5，在温度为35℃～42℃的供氧环境下培养2～3天，待β-葡聚糖酶活性大于10000u/g时，再在45～50℃低温环境下干燥至含水量≤12％，然后密封包装、避光保存，得到黑曲霉发酵料；
(6)制作米曲霉发酵料：
A、取如下重量份配比的原料：玉米粉10～20份、麦麸30～50份、豆粕粉5～15份、棉籽粕粉5～15份、玉米胚芽粕12～22份、含有70～90％水份的玉米浆2～5份、含有40～60％水份的糖蜜2～8份；将取得的原料加水、搅拌均匀，使原料与加入的水的重量之比为65～55∶35～45，得到复合料；将复合料放入高压蒸汽灭菌锅中，在0.1～0.12Mpa气压下灭菌30～50分钟；然后将复合料出锅，在无菌环境下待复合料温度降至25～40℃，制得米曲霉发酵培养基；
B、培养米曲霉
将上述的米曲霉种液加入到米曲霉培养基中进行接种，其中加入的米曲霉种液与米曲霉培养基的重量之比为1.5～2.5∶98.5～97.5，在温度为35℃～42℃的供氧环境下培养2～3天，待蛋白酶活性大于1500u/g时，再在45～50℃低温环境下干燥至含水量≤12％，然后密封包装、避光保存，得到米曲霉发酵料。
本发明与现有技术相比具有如下特点：
1、本发明得到的微生物发酵无抗生素饲料有益菌品种多，数量大，同时还含有β-葡聚糖酶、木聚糖酶、纤维素酶、蛋白酶等多种高活性消化酶，起到了很好的协同作用，能够提高动物机体免疫力，改善肠道微生态环境，从而改善动物健康状况；
2、本发明得到的微生物发酵无抗生素饲料品质稳定：以熟料发酵代替生料发酵，减少了产品中的杂菌含量，确保了该饲料的安全性；
3、通过部分发酵(复合发酵料只占饲料总重量的4～8％)代替现有的整体发酵手段，生产无抗生素的发酵饲料，维生素不参与发酵，因而，不会造成配合饲料中能量和维生素的损失；同时大大缩短了生产周期，减少了劳动量及压库量，降低了生产成本；
4、本发明得到的微生物发酵无抗生素饲料的水分含量≤14％，使用普通纤维编织袋包装，与现有的带有呼吸阀的发酵包装袋比较，不仅大大降低了包装费用，有利于储存和运输；便于养殖户使用。
为了更清楚地说明本发明，列举以下实施例，但其对发明的范围无任何限制。
具体实施方式
实施例1
一种微生物发酵无抗生素饲料，其包括配合料和复合发酵料；配合料为如下重量份配比的原料组成：玉米30～50份(例：30份、40份、50份)、豆粕20～40份(例：20份、30份、40份)、棉籽粕5～20份(例：5份、12份、20份)、磷酸氢钙2～5份(例：2份、3份、5份)、食盐0.2～0.4份(例：0.2份、0.3份、0.4份)、复合微量元素0.1～0.2份(例：0.1份、0.2份)、复合维生素0.2～0.4份(例：0.2份、0.3份、0.4份)；
复合发酵料为如下重量份配比的发酵料组成：嗜酸乳杆菌发酵料30～70份(例：30份、45份、70份)、枯草芽孢杆菌发酵料10～20份(例：10份、15份、20份)、酿酒酵母发酵料20～35(例：20份、27份、35份)、长柄木霉发酵料1～3份(例：1份、2份、3份)、黑曲霉发酵料1～3份(例：1份、2份、3份)、米曲霉发酵料1～3份(例：1份、2份、3份)；
其中配合料与复合发酵料的重量之比为：96～92∶4～8；
嗜酸乳杆菌发酵料为在如下重量份配比的培养基中接种嗜酸乳杆菌制得：玉米粉15～25份(例：15份、20份、25份)、麦麸40～50份(例：40份、43份、50份)、豆粕粉8～20份(例：8份、10份、20份)、棉籽粕粉3～8份(例：3份、5份、8份)、玉米胚芽粕8～20份(例：8份、10份、20份)、酵母提取物粉1～3份(例：1份、2份、3份)、含有70～90％水份的玉米浆5～15份(例：5份、10份、15份)、含有40～60％水份的糖蜜5～15份(例：5份、10份、15份)、石粉1～2份(例：1份、1.5份、2份)、磷酸氢钙1～2份(例：1份、1.5份、2份)，嗜酸乳杆菌发酵料中嗜酸乳杆菌活菌数大于1×108个/克、含水量≤12％；
枯草芽孢杆菌发酵料为在如下重量份配比的培养基中接种枯草芽孢杆菌制得：玉米粉15～25份(例：15份、20份、25份)、麦麸30～50份(例：30份、40份、50份)、豆粕粉5～15份(例：5份、10份、15份)、棉籽粕粉5～15份(例：5份、10份、15份)、玉米胚芽粕10～20份(例：10份、15份、20份)、含有70～90％水份的玉米浆2～5份(例：2份、3份、5份)、含有40～60％水份的糖蜜2～8份(例：2份、5份、8份)，枯草芽孢杆菌发酵料中枯草芽孢杆菌活菌数大于1×109个/克、木聚糖酶活性大于1.2×104u/g、含水量≤12％；
酿酒酵母发酵料为在如下重量份配比的培养基中接种酿酒酵母制得：玉米粉10～20份(例：10份、15份、20份)、麦麸20～40份(例：20份、30份、40份)、豆粕粉3～8份(例：3份、5份、8份)、棉籽粕粉8～16份(例：8份、12份、16份)、玉米胚芽粕15～25份(例：15份、20份、25份)、次粉5～15份(例：5份、10份、15份)、含有70～90％水份的玉米浆2～5份(例：2份、3份、5份)、含有40～60％水份的糖蜜2～8份(例：2份、5份、8份)，酿酒酵母发酵料中酿酒酵母活菌数大于1×109个/克、含水量≤12％；
长柄木霉发酵料为在如下重量份配比的培养基中接种长柄木霉制得：玉米粉5～15份(例：5份、10份、15份)、麦麸30～50份(例：30份、40份、50份)、豆粕粉3～8份(例：3份、5份、8份)、棉籽粕粉10～20份(例：10份、15份、20份)、玉米胚芽粕17～27份(例：17份、22份、27份)、含有70～90％水份的玉米浆2～5份(例：2份、3份、5份)、含有40～60％水份的糖蜜2～8份(例：2份、5份、8份)，长柄木霉发酵料中纤维素酶活性大于1200u/g、含水量≤12％；
黑曲霉发酵料为在如下重量份配比的培养基中接种黑曲霉制得：玉米粉10～20份(例：10份、15份、20份)、麦麸30～50份(例：30份、40份、50份)、豆粕粉5～15份(例：5份、10份、15份)、棉籽粕粉5～15份(例：5份、10份、15份)、玉米胚芽粕12～22份(例：12份、17份、22份)、含有70～90％水份的玉米浆2～5份(例：2份、3份、5份)、含有40～60％水份的糖蜜2～8份(例：2份、5份、8份)，黑曲霉发酵料中β-葡聚糖酶活性大于10000u/g、含水量≤12％；
米曲霉发酵料为在如下重量份配比的培养基中接种米曲霉制得：玉米粉10～20份(例：10份、15份、20份)、麦麸30～50份(例：30份、40份、50份)、豆粕粉5～15份(例：5份、10份、15份)、棉籽粕粉5～15份(例：5份、10份、15份)、玉米胚芽粕12～22份(例：12份、17份、22份)、含有70～90％水份的玉米浆2～5份(例：2份、3份、5份)、含有40～60％水份的糖蜜2～8份(例：2份、5份、8份)，米曲霉发酵料中蛋白酶活性大于1500u/g、含水量≤12％。
上述菌种可从中国工业微生物菌种保藏管理中心等购买到：
嗜酸乳杆菌Lactobacillus acidophilus CICC 6090；
枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis CICC 20037；
酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae CICC 31015；
黑曲霉Aspergillus niger CICC 40613；
米曲霉Aspergillus oryzae CICC 40188；
长柄木霉Trichoderma longibrachitun TB9702。
实施例2
一种微生物发酵无抗生素饲料的制作方法，其包括如下步骤：
一、制备菌种：取嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、长柄木霉、黑曲霉、米曲霉为出发菌，分别逐级增温驯化、选提、复壮，得到能达到耐制粒温度的目的菌种，然后分别扩培制得含菌量为1×107～1×108个/g的各菌种液，即得到嗜酸乳杆菌种液、枯草芽孢杆菌种液、酿酒酵母种液、长柄木霉种液、黑曲霉种液、米曲霉种液。
上述菌种可从中国工业微生物菌种保藏管理中心等购买到：
嗜酸乳杆菌Lactobacillus acidophilus CICC 6090；
枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis CICC 20037；
酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae CICC 31015；
黑曲霉Aspergillus niger CICC 40613；
米曲霉Aspergillus oryzae CICC 40188；
长柄木霉Trichoderma longibrachitun TB9702。
二、制作发酵料：
(1)制作嗜酸乳杆菌发酵料
A 、制作嗜酸乳杆菌发酵培养基
取如下重量份配比的原料：玉米粉15～25份(例：15份、20份、25份)、麦麸40～50份(例：40份、43份、50份)、豆粕粉8～20份(例：8份、10份、20份)、棉籽粕粉3～8份(例：3份、5份、8份)、玉米胚芽粕8～20份(例：8份、10份、20份)、酵母提取物粉1～3份(例：1份、2份、3份)、含有70～90％水份的玉米浆5～15份(例：5份、10份、15份)、含有40～60％水份的糖蜜5～15份(例：5份、10份、15份)、石粉1～2份(例：1份、1.5份、2份)、磷酸氢钙1～2份(例：1份、1.5份、2份)；将取得的原料放至搅拌机中，加水，使原料与加入的水的重量之比为70～60∶30～40，搅拌均匀，得到复合料；将复合料移至高压蒸汽灭菌锅中，在0.1～0.12Mpa气压下灭菌30～50分钟；然后将复合料出锅，在无菌环境下待复合料温度降至25～40℃，得到嗜酸乳杆菌培养基。
B、培养嗜酸乳杆菌
将上述的嗜酸乳杆菌种液加入到嗜酸乳杆菌培养基中进行接种，其中加入的嗜酸乳杆菌种液与嗜酸乳杆菌培养基的重量之比为1.5～2.5∶98.5～97.5，在温度为35℃～42℃的厌氧环境下培养6～8天，待活菌数大于1×108个/克时，再在45～50℃低温环境下干燥至含水量≤12％，然后密封包装、避光保存，得到嗜酸乳杆菌发酵料。
(2)制作枯草芽孢杆菌发酵料
A 、制作枯草芽孢杆菌发酵培养基
取如下重量份配比的原料：玉米粉15～25份(例：15份、20份、25份)、麦麸30～50份(例：30份、40份、50份)、豆粕粉5～15份(例：5份、10份、15份)、棉籽粕粉5～15份(例：5份、10份、15份)、玉米胚芽粕10～20份(例：10份、15份、20份)、含有70～90％水份的玉米浆2～5份(例：2份、3份、5份)、含有40～60％水份的糖蜜2～8份(例：2份、5份、8份)；将取得的原料放至搅拌机中，加水，使原料与加入的水的重量之比为70～60∶30～40，搅拌均匀，得到复合料；将复合料移至高压蒸汽灭菌锅中，在0.1～0.12Mpa气压下灭菌30～50分钟；然后将复合料出锅，在无菌环境下待复合料温度降至25～40℃，制得枯草芽孢杆菌培养基；
B、培养枯草芽孢杆菌
将上述的枯草芽孢杆菌种液加入到枯草芽孢杆菌培养基中进行接种，其中加入的枯草芽孢杆菌种液与枯草芽孢杆菌培养基的重量之比为1.5～2.5∶98.5～97.5，在温度为35℃～42℃的供氧环境下培养2～3天，待枯草芽孢杆菌活菌数大于1×109个/克、木聚糖酶活性大于1.2×104u/g时，再在45～50℃低温环境下干燥至含水量≤12％，然后密封包装、避光保存，得到枯草芽孢杆菌发酵料。
(3)制作酿酒酵母发酵料
A 、制作酿酒酵母发酵培养基
取如下重量份配比的原料：玉米粉10～20份(例：10份、15份、20份)、麦麸20～40份(例：20份、30份、40份)、豆粕粉3～8份(例：3份、5份、8份)、棉籽粕粉8～16份(例：8份、12份、16份)、玉米胚芽粕15～25份(例：15份、20份、25份)、次粉5～15份(例：5份、10份、15份)、含有70～90％水份的玉米浆2～5份(例：2份、3份、5份)、含有40～60％水份的糖蜜2～8份(例：2份、5份、8份)；将取得的原料放至搅拌机中，加水，使原料与加入的水的重量之比为70～60∶30～40，搅拌均匀，得到复合料；将复合料移至高压蒸汽灭菌锅中，在0.1～0.12Mpa气压下灭菌30～50分钟；然后将复合料出锅，在无菌环境下待复合料温度降至25～40℃，制得酿酒酵母发酵培养基；
B、培养酿酒酵母
将上述的酿酒酵母种液加入到酿酒酵母培养基中进行接种，其中加入的酿酒酵母种液与酿酒酵母培养基的重量之比为1.5～2.5∶98.5～97.5，在温度为35℃～42℃的供氧环境下培养2～3天，待酿酒酵母活菌数大于1×109个/克时，再在45～50℃低温环境下干燥至含水量≤12％，然后密封包装、避光保存，得到酿酒酵母发酵料；
(4)制作长柄木霉发酵料
A 、取如下重量份配比的原料：玉米粉5～15份(例：5份、10份、15份)、麦麸30～50份(例：30份、40份、50份)、豆粕粉3～8份(例：3份、5份、8份)、棉籽粕粉10～20份(例：10份、15份、20份)、玉米胚芽粕17～27份(例：17份、22份、27份)、含有70～90％水份的玉米浆2～5份(例：2份、3份、5份)、含有40～60％水份的糖蜜2～8份(例：2份、5份、8份)；将取得的原料放至搅拌机中，加水，使原料与加入的水的重量之比为65～55∶35～45，搅拌均匀，得到复合料；将复合料移至高压蒸汽灭菌锅中，在0.1～0.12Mpa气压下灭菌30～50分钟；然后将复合料出锅，在无菌环境下待复合料温度降至25～40℃，制得长柄木霉发酵培养基；
B、培养长柄木霉
将上述的长柄木霉种液加入到长柄木霉培养基中进行接种，其中加入的长柄木霉种液与长柄木霉培养基的重量之比为1.5～2.5∶98.5～97.5，在温度为35℃～42℃的供氧环境下培养2～3天，待纤维素酶活性大于1200u/g时，再在45～50℃低温环境下干燥至含水量≤12％，然后密封包装、避光保存，得到长柄木霉发酵料；
(5)制作黑曲霉发酵料：
A、取如下重量份配比的原料：玉米粉10～20份(例：10份、15份、20份)、麦麸30～50份(例：30份、40份、50份)、豆粕粉5～15份(例：5份、10份、15份)、棉籽粕粉5～15份(例：5份、10份、15份)、玉米胚芽粕12～22份(例：12份、17份、22份)、含有70～90％水份的玉米浆2～5份(例：2份、3份、5份)、含有40～60％水份的糖蜜2～8份(例：2份、5份、8份)；将取得的原料放至搅拌机中，加水，使原料与加入的水的重量之比为65～55∶35～45，搅拌均匀，得到复合料；将复合料移至高压蒸汽灭菌锅中，在0.1～0.12Mpa气压下灭菌30～50分钟；然后将复合料出锅，在无菌环境下待复合料温度降至25～40℃，制得黑曲霉发酵培养基；
B、培养黑曲霉
将上述的黑曲霉种液加入到黑曲霉培养基中进行接种，其中加入的黑曲霉种液与黑曲霉培养基的重量之比为1.5～2.5∶98.5～97.5，在温度为35℃～42℃的供氧环境下培养2～3天，待β-葡聚糖酶活性大于10000u/g时，再在45～50℃低温环境下干燥至含水量≤12％，然后密封包装、避光保存，得到黑曲霉发酵料；
(6)制作米曲霉发酵料：
A、取如下重量份配比的原料：玉米粉10～20份(例：10份、15份、20份)、麦麸30～50份(例：30份、40份、50份)、豆粕粉5～15份(例：5份、10份、15份)、棉籽粕粉5～15份(例：5份、10份、15份)、玉米胚芽粕12～22份(例：12份、17份、22份)、含有70～90％水份的玉米浆2～5份(例：2份、3份、5份)、含有40～60％水份的糖蜜2～8份(例：2份、5份、8份)；将取得的原料放至搅拌机中，加水，使原料与加入的水的重量之比为65～55∶35～45，搅拌均匀，得到复合料；将复合料移至高压蒸汽灭菌锅中，在0.1～0.12Mpa气压下灭菌30～50分钟；然后将复合料出锅，在无菌环境下待复合料温度降至25～40℃，制得米曲霉发酵培养基；
B、培养米曲霉
将上述的米曲霉种液加入到米曲霉培养基中进行接种，其中加入的米曲霉种液与米曲霉培养基的重量之比为1.5～2.5∶98.5～97.5，在温度为35℃～42℃的供氧环境下培养2～3天，待蛋白酶活性大于1500u/g时，再在45～50℃低温环境下干燥至含水量≤12％，然后密封包装、避光保存，得到米曲霉发酵料；
三、配制复合发酵料
将下述重量份配比的各发酵料经过混合、搅拌制得复合发酵料：嗜酸乳杆菌发酵料30～70份(例：30份、45份、70份)、枯草芽孢杆菌发酵料10～20份(例：10份、15份、20份)、酿酒酵母发酵料20～35(例：20份、27份、35份)、长柄木霉发酵料1～3份(例：1份、2份、3份)、黑曲霉发酵料1～3份(例：1份、2份、3份)、米曲霉发酵料1～3份(例：1份、2份、3份)；
四、配制微生物发酵无抗生素饲料
取如下重量份配比的原料：玉米30～50份(例：30份、40份、50份)、豆粕20～40份(例：20份、30份、40份)、棉籽粕5～20份(例：5份、12份、20份)、磷酸氢钙2～5份(例：2份、3份、5份)、食盐0.2～0.4份(例：0.2份、0.3份、0.4份)、复合微量元素0.1～0.2份(例：0.1份、0.2份)、复合维生素0.2～0.4份(例：0.2份、0.3份、0.4份)、复合发酵料4～8份(例：4份、6份、8份)；将其中的玉米、豆粕、棉籽粕粉碎后与其它原料混合搅拌，制得微生物发酵无抗生素饲料。
试验检测数据
对比试验1
泌乳母猪试验，选取预产期相近(±7天)、胎次相近(3～5胎)、体况相近、健康状况良好的长白×大约克母猪50头，随机分成两组，每组设5个重复，一组饲喂根据泌乳母猪营养需要在本发明实施例范围内选配的微生物发酵无抗生素饲料(试验组)，另一组饲喂中国专利CN100546491C公开的泌乳母猪用发酵饲料(对照组)，饲喂期为从产仔前7天至产仔后第21天，共28天，试验结束时做粪便PH和大肠杆菌数检测，得到两组检测数据的平均值及标准差如下表所示：
以上试验数据表明：试验组母猪粪便pH值低于对照组，说明试验组饲料降低肠道PH值的能力优于对照组饲料，因而更利于动物肠道微生态环境的改善；与对照组相比，试验组粪便中大肠杆菌含量降低70％以上，这便大大减少了仔猪感染疾病的机会；试验中还可以观察到：试验组母猪健康状况优于对照组，采食和粪便状态正常、泌乳量也高于对照组。
对比试验2
断奶仔猪试验
选用72头日龄、胎次相近，体重在8kg左右的杜长大三元仔猪，公母各半，随机分为2组，每组设4个重复，一组饲喂根据断奶仔猪营养需要在本发明实施例范围内选配的微生物发酵无抗生素饲料(试验组)，另一组饲喂中国专利CN100546491C公开的发酵饲料(对照组)，试验期为30天；试验结束时得到数据如下表所示：
以上试验数据表明：试验组饲料能够有效提高断奶仔猪的生产性能，并降低发病率和腹泻率，提高育成率；在试验过程中还观察到，试验组仔猪较对照组精神状态好，食欲旺盛，患病次数少，皮毛光滑，色泽好，各方面均优于对照组。
对比试验3
屠宰试验
选用128头日龄、胎次相近，体重在20kg左右的杜长大三元仔猪，公母各半，随机分为2组，每组4个重复，一组全程饲喂本发明得到的微生物发酵无抗生素饲料(试验组)，另一组全程饲喂中国专利CN100546491C公开的发酵饲料(对照组)。试验结束时，各处理均取一头体重接***均体重的公猪进行屠宰测定，得到的测定结果如下：
以上试验数据表明：生猪饲喂本发明生产的微生物发酵无抗生素饲料后，猪肉品质有了明显改善，试验组生猪胴体品质与对照组没有明显性差异，但肉色得到了显著提高。
Claims (4)
1.一种微生物发酵无抗生素饲料，其特征是：其包括配合料和复合发酵料；配合料为如下重量份配比的原料组成：玉米30～50份、豆粕20～40份、棉籽粕5～20份、磷酸氢钙2～5份、食盐0.2～0.4份、复合微量元素0.1～0.2份、复合维生素0.2～0.4份；
复合发酵料为如下重量份配比的发酵料组成：嗜酸乳杆菌发酵料30～70份、枯草芽孢杆菌发酵料10～20份、酿酒酵母发酵料20～35、长柄木霉发酵料1～3份、黑曲霉发酵料1～3份、米曲霉发酵料1～3份；嗜酸乳杆菌发酵料为嗜酸乳杆菌在培养基上接种发酵而得、枯草芽孢杆菌发酵料为枯草芽孢杆菌在培养基上接种发酵而得、酿酒酵母发酵料为酿酒酵母在培养基上接种发酵而得、长柄木霉发酵料为长柄木霉在培养基上接种发酵而得、黑曲霉发酵料为黑曲霉在培养基上接种发酵而得、米曲霉发酵料为米曲霉在培养基上接种发酵而得；
其中配合料与复合发酵料的重量之比为：96～92∶4～8。
2.根据权利要求1所述的一种微生物发酵无抗生素饲料，其特征是：所述的嗜酸乳杆菌发酵料为在如下重量份配比的培养基中接种嗜酸乳杆菌制得：玉米粉15～25份、麦麸40～50份、豆粕粉8～20份、棉籽粕粉3～8份、玉米胚芽粕8～20份、酵母提取物粉1～3份、含有70～90％水份的玉米浆5～15份、含有40～60％水份的糖蜜5～15份、石粉1～2份、磷酸氢钙1～2份，嗜酸乳杆菌发酵料中嗜酸乳杆菌活菌数大于1X108个/克、含水量≤12％；
所述的枯草芽孢杆菌发酵料为在如下重量份配比的培养基中接种枯草芽孢杆菌制得：玉米粉15～25份、麦麸30～50份、豆粕粉5～15份、棉籽粕粉5～15份、玉米胚芽粕10～20份、含有70～90％水份的玉米浆2～5份、含有40～60％水份的糖蜜2～8份，枯草芽孢杆菌发酵料中枯草芽孢杆菌活菌数大于1X109个/克、木聚糖酶活性大于1.2X104u/g、含水量≤12％；
所述的酿酒酵母发酵料为在如下重量份配比的培养基中接种酿酒酵母制得：玉米粉10～20份、麦麸20～40份、豆粕粉3～8份、棉籽粕粉8～16份、玉米胚芽粕15～25份、次粉5～15份、含有70～90％水份的玉米浆2～5份、含有40～60％水份的糖蜜2～8份，酿酒酵母发酵料中酿酒酵母活菌数大于1X109个/克、含水量≤12％；
所述的长柄木霉发酵料为在如下重量份配比的培养基中接种长柄木霉制得：玉米粉5～15份、麦麸30～50份、豆粕粉3～8份、棉籽粕粉10～20份、玉米胚芽粕17～27份、含有70～90％水份的玉米浆2～5份、含有40～60％水份的糖蜜2～8份，长柄木霉发酵料中纤维素酶活性大于1200u/g、含水量≤12％；
所述的黑曲霉发酵料为在如下重量份配比的培养基中接种黑曲霉制得：玉米粉10～20份、麦麸30～50份、豆粕粉5～15份、棉籽粕粉5～15份、玉米胚芽粕12～22份、含有70～90％水份的玉米浆2～5份、含有40～60％水份的糖蜜2～8份，黑曲霉发酵料中β-葡聚糖酶活性大于10000u/g、含水量≤12％；
所述的米曲霉发酵料为在如下重量份配比的培养基中接种米曲霉制得：玉米粉10～20份、麦麸30～50份、豆粕粉5～15份、棉籽粕粉5～15份、玉米胚芽粕12～22份、含有70～90％水份的玉米浆2～5份、含有40～60％水份的糖蜜2～8份，米曲霉发酵料中蛋白酶活性大于1500u/g、含水量≤12％。。
3.一种微生物发酵无抗生素饲料的制作方法，其特征是：其包括如下步骤：
一、制备菌种：取嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、长柄木霉、黑曲霉、米曲霉为出发菌，分别逐级增温驯化、选提、复壮，得到能达到耐制粒温度的目的菌种，然后分别扩培制得含菌量为1X107～1X108个/g的各菌种液，即得到嗜酸乳杆菌种液、枯草芽孢杆菌种液、酿酒酵母种液、长柄木霉种液、黑曲霉种液、米曲霉种液；
二、制作发酵料
制作嗜酸乳杆菌发酵料、枯草芽孢杆菌发酵料、酿酒酵母发酵料、长柄木霉发酵料、黑曲霉发酵料、米曲霉发酵料，嗜酸乳杆菌发酵料为嗜酸乳杆菌在培养基上接种发酵而得、枯草芽孢杆菌发酵料为枯草芽孢杆菌在培养基上接种发酵而得、酿酒酵母发酵料为酿酒酵母在培养基上接种发酵而得、长柄木霉发酵料为长柄木霉在培养基上接种发酵而得、黑曲霉发酵料为黑曲霉在培养基上接种发酵而得、米曲霉发酵料为米曲霉在培养基上接种发酵而得；
三、配制复合发酵料
将下述重量份配比的各发酵料经过混合、搅拌制得复合发酵料：嗜酸乳杆菌发酵料30～70份、枯草芽孢杆菌发酵料10～20份、酿酒酵母发酵料20～35、长柄木霉发酵料1～3份、黑曲霉发酵料1～3份、米曲霉发酵料1～3份；
四、配制微生物发酵无抗生素饲料
取如下重量份配比的原料：玉米30～50份、豆粕20～40份、棉籽粕5～20份、磷酸氢钙2～5份、食盐0.2～0.4份、复合微量元素0.1～0.2份、复合维生素0.2～0.4份、复合发酵料4～8份；将其中的玉米、豆粕、棉籽粕粉碎后与其它原料混合搅拌，制得微生物发酵无抗生素饲料。
4.根据权利要求3所述的微生物发酵无抗生素饲料的制作方法，其特征是：所述的制作发酵料包括如下步骤：
(1)制作嗜酸乳杆菌发酵料
A、制作嗜酸乳杆菌发酵培养基
取如下重量份配比的原料：玉米粉15～25份、麦麸40～50份、豆粕粉8～20份、棉籽粕粉3～8份、玉米胚芽粕8～20份、酵母提取物粉1～3份、含有70～90％水份的玉米浆5～15份、含有40～60％水份的糖蜜5～15份、石粉1～2份、磷酸氢钙1～2份；将取得的原料加水、搅拌均匀，原料与加入的水的重量之比为70～60∶30～40，得到复合料；将复合料放入高压蒸汽灭菌锅中，在0.1～0.12Mpa气压下灭菌30～50分钟；然后将复合料出锅，在无菌环境下待复合料温度降至25～40℃，得到嗜酸乳杆菌培养基；
B、培养嗜酸乳杆菌
将上述的嗜酸乳杆菌种液加入到嗜酸乳杆菌培养基中进行接种，其中加入的嗜酸乳杆菌种液与嗜酸乳杆菌培养基的重量之比为1.5～2.5∶98.5～97.5，在温度为35℃～42℃的厌氧环境下培养6～8天，待活菌数大于1X108个/克时，再在45～50℃低温环境下干燥至含水量≤12％，然后密封包装、避光保存，得到嗜酸乳杆菌发酵料；
(2)制作枯草芽孢杆菌发酵料
A、制作枯草芽孢杆菌发酵培养基
取如下重量份配比的原料：玉米粉15～25份、麦麸30～50份、豆粕粉5～15份、棉籽粕粉5～15份、玉米胚芽粕10～20份、含有70～90％水份的玉米浆2～5份、含有40～60％水份的糖蜜2～8份；将取得的原料加水、搅拌均匀，原料与加入的水的重量之比为70～60∶30～40，得到复合料；将复合料放入高压蒸汽灭菌锅中，在0.1～0.12Mpa气压下灭菌30～50分钟；然后将复合料出锅，在无菌环境下待复合料温度降至25～40℃，制得枯草芽孢杆菌培养基；
B、培养枯草芽孢杆菌
将上述的枯草芽孢杆菌种液加入到枯草芽孢杆菌培养基中进行接种，其中加入的枯草芽孢杆菌种液与枯草芽孢杆菌培养基的重量之比为1.5～2.5∶98.5～97.5，在温度为35℃～42℃的供氧环境下培养2～3天，待枯草芽孢杆菌活菌数大于1X109个/克、木聚糖酶活性大于1.2X104u/g时，再在45～50℃低温环境下干燥至含水量≤12％，然后密封包装、避光保存，得到枯草芽孢杆菌发酵料；
(3)制作酿酒酵母发酵料
A、制作酿酒酵母发酵培养基
取如下重量份配比的原料：玉米粉10～20份、麦麸20～40份、豆粕粉3～8份、棉籽粕粉8～16份、玉米胚芽粕15～25份、次粉5～15份、含有70～90％水份的玉米浆2～5份、含有40～60％水份的糖蜜2～8份；将取得的原料加水、搅拌均匀，原料与加入的水的重量之比为70～60∶30～40，得到复合料；将复合料放入高压蒸汽灭菌锅中，在0.1～0.12Mpa气压下灭菌30～50分钟；然后将复合料出锅，在无菌环境下待复合料温度降至25～40℃，制得酿酒酵母发酵培养基；
B、培养酿酒酵母
将上述的酿酒酵母种液加入到酿酒酵母培养基中进行接种，其中加入的酿酒酵母种液与酿酒酵母培养基的重量之比为1.5～2.5∶98.5～97.5，在温度为35℃～42℃的供氧环境下培养2～3天，待酿酒酵母活菌数大于1X109个/克时，再在45～50℃低温环境下干燥至含水量≤12％，然后密封包装、避光保存，得到酿酒酵母发酵料；
(4)制作长柄木霉发酵料
A、取如下重量份配比的原料：玉米粉5～15份、麦麸30～50份、豆粕粉3～8份、棉籽粕粉10～20份、玉米胚芽粕17～27份、含有70～90％水份的玉米浆2～5份、含有40～60％水份的糖蜜2～8份；将取得的原料加水、搅拌均匀，原料与加入的水的重量之比为65～55∶35～45，得到复合料；将复合料放入高压蒸汽灭菌锅中，在0.1～0.12Mpa气压下灭菌30～50分钟；然后将复合料出锅，在无菌环境下待复合料温度降至25～40℃，制得长柄木霉发酵培养基；
B、培养长柄木霉
将上述的长柄木霉种液加入到长柄木霉培养基中进行接种，其中加入的长柄木霉种液与长柄木霉培养基的重量之比为1.5～2.5∶98.5～97.5，在温度为35℃～42℃的供氧环境下培养2～3天，待纤维素酶活性大于1200u/g时，再在45～50℃低温环境下干燥至含水量≤12％，然后密封包装、避光保存，得到长柄木霉发酵料；
(5)制作黑曲霉发酵料：
A、取如下重量份配比的原料：玉米粉10～20份、麦麸30～50份、豆粕粉5～15份、棉籽粕粉5～15份、玉米胚芽粕12～22份、含有70～90％水份的玉米浆2～5份、含有40～60％水份的糖蜜2～8份；将取得的原料加水、搅拌均匀，使原料与加入的水的重量之比为65～55∶35～45，得到复合料；将复合料放入高压蒸汽灭菌锅中，在0.1～0.12Mpa气压下灭菌30～50分钟；然后将复合料出锅，在无菌环境下待复合料温度降至25～40℃，制得黑曲霉发酵培养基；
B、培养黑曲霉
将上述的黑曲霉种液加入到黑曲霉培养基中进行接种，其中加入的黑曲霉种液与黑曲霉培养基的重量之比为1.5～2.5∶98.5～97.5，在温度为35℃～42℃的供氧环境下培养2～3天，待β-葡聚糖酶活性大于10000u/g时，再在45～50℃低温环境下干燥至含水量≤12％，然后密封包装、避光保存，得到黑曲霉发酵料；
(6)制作米曲霉发酵料：
A、取如下重量份配比的原料：玉米粉10～20份、麦麸30～50份、豆粕粉5～15份、棉籽粕粉5～15份、玉米胚芽粕12～22份、含有70～90％水份的玉米浆2～5份、含有40～60％水份的糖蜜2～8份；将取得的原料加水、搅拌均匀，使原料与加入的水的重量之比为65～55∶35～45，得到复合料；将复合料放入高压蒸汽灭菌锅中，在0.1～0.12Mpa气压下灭菌30～50分钟；然后将复合料出锅，在无菌环境下待复合料温度降至25～40℃，制得米曲霉发酵培养基；
B、培养米曲霉
将上述的米曲霉种液加入到米曲霉培养基中进行接种，其中加入的米曲霉种液与米曲霉培养基的重量之比为1.5～2.5∶98.5～97.5，在温度为35℃～42℃的供氧环境下培养2～3天，待蛋白酶活性大于1500u/g时，再在45～50℃低温环境下干燥至含水量≤12％，然后密封包装、避光保存，得到米曲霉发酵料。
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