CN101810793A - 玉米须黄酮在制备治疗高血脂症和减肥药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及玉米须黄酮在制备治疗高血脂症和减肥药物中的应用,属于医药领域,尤其是指玉米须黄酮的新用途,玉米须黄酮在制备治疗高血脂症和减肥的药物中的应用。本发明的有益效果是:玉米须黄酮为纯天然药物,在降低血脂的同时,还能够减轻体重,说明其降血脂机制不是单一环节,而是多方面、多靶点综合作用的结果。将其作为防治高血脂及其并发症或减肥药物开发具有重要的现实意义,还可以增加植物资源的新用途,带动区域经济的发展。
Description
技术领域
本发明属于医药领域,尤其指玉米须黄酮的新药物用途。
背景技术
含有黄酮成分的玉米须的药理作用
1抗氧化作用
1.1提取物抗氧化活性
刘平等将玉米须乙醇提取物再用氯仿、乙酸乙脂、正丁醇和甲醇分别萃取,获得极性不同的5个组分,比较这5种不同溶剂萃取物在二苯基苦基苯肼(DPPH)体系及在Fe2+诱发卵黄脂蛋白多不饱和脂肪酸(PUFA)过氧化体系中的抗氧化活性。结果表明:在DPPH体系中,正丁醇萃取物的抗氧化活性最强,氯仿萃取物次之;在Fe2+诱发脂蛋白PUFA过氧化体系中,氯仿萃取物的抗氧化活性最强,乙酸乙酯萃取物次之。由此可看出,同一组萃取物在不同测试体系中,抗氧化活性顺序不同,故对抗氧化活性的评价必须考虑具体的测试体系。对于玉米须萃取物抗氧化作用的机理及影响抗氧化活性的因素有待进一步的研究。
Z.A.Maksimoviand报道成熟玉米须甲醇提取物对脂质过氧化体系有抗氧化作用,活性最强的部位是中等油脂类浓缩物,包括酚酸类、黄酮类及其类似物。
方敏等采用DPPH法和FRAP分析法评估了玉米须乙醇提取物的抗氧化活性。结果表明,不同浓度乙醇提取物显示出不同的抗氧化活性,用五种不同浓度乙醇溶液浸提烘干至恒重的玉米须,用两种方法测量其抗氧化活性,80%乙醇提取物的抗氧化能力最强。玉米须总黄酮的抗氧化作用明显,对DPPH自由基的清除率达到77.18%,总抗氧化能力FRAP值为691.04μmol/L。用新鲜玉米须进行试验,发现新鲜玉米须的无水乙醇提取物清除DPPH自由基能力和总抗氧化能力均最强。
吴亚楠利用二苯代苦味酰基自由基体系、H2O2/Fe2+产生的羟基自由基体系、超氧阴离子自由基体系对玉米须黄酮粗提物、乙酸乙酯与正丁醇萃取物的体外清除自由基的能力进行研究,并以芦丁的测定值为对照。试验结果为:清除DPPH自由基的能力依次为:玉米须黄酮粗提物>正丁醇萃取物>乙酸乙酯萃取物。各试样达到最大清除率的浓度及清除率分别为:1、2、2g/L及93%、78%和71%;清除羟自由基的能力依次为:玉米须黄酮粗提物>乙酸乙酯萃取物>正丁醇萃取物,当试样浓度为20g/L时,清除率达到最大,依次为92.04%、82.6%和56.5%;清除超氧阴离子自由基的能力依次为:玉米须黄酮粗提物>乙酸乙酯萃取物>正丁醇萃取物,当试样的浓度为20g/L时,清除率达到最大,依次为94.8%、90%和58%。结果表明,各试样清除羟自由基和超氧阴离子自由基的效果优于芦丁的效果,玉米须黄酮具有较好的清除自由基的能力。
许钢研究了从玉米的不同部位中提取黄酮类物质,并对其抗氧化性能进行了比较研究。结果表明:玉米须中黄酮类物质含量最多,达到了2.106%;其次是玉米叶1.013%、玉米芯0.662%,玉米粒含量最少为0.411%。通过与TBHQ、VC茶多酚比较,发现除玉米粒外,其他三者都表现出良好的抗氧化性能,其抗氧化性能随提取物浓度的增加而增强。
牛鹏飞等通过比较玉米须中不同极性的黄酮类化合物对羟基自由基生成体系以及对Fe2+诱发脂蛋白多不饱和脂肪酸(PUFA)过氧化体系的抑制作用,研究了不同极性黄酮类化合物的抗氧化活性(AOA)。结果表明不同极性的黄酮类化合物的抗氧化活性有较大差别。在羟基自由基生成体系中,抗氧化活性顺序依次为氯仿>正丁醇>乙酸乙酯。而在Fe2+诱发脂蛋白PUFA过氧化体系中,抗氧化活性顺序依次为氯仿>乙酸乙酯>正丁醇,严格按照极性由小到大的顺序排列。同时发现,即使极性相同的黄酮类化合物,在不同抗氧化体系中,其抗氧化活性也有着明显的差别。
舒孝和报道分别在猪油中加0.01%的提取物(玉米须总黄酮)、抗坏血酸、柠檬酸、己二胺基四乙酸二钠(EDTA)。每隔几天测定其POV值,结果四种试剂中抗氧化性强弱顺序如下:EDTA>提取液>柠檬酸>坏血酸。得出提取物的抗氧化活性比较强。
1.2有效成分抗氧化活性
任顺成等[利用硫代巴比妥酸法(TBA法)、共轭二烯检测法(紫外法)对从玉米须中分离得到的2个黄酮类ax-5″-methane-3′-methoxymaysin和ax-4″-OH-3′-methoxymaysin的抗脂质体过氧化的能力进行了检测.结果表明前者比后者对共轭二烯(CD-POV)的产生有更强的抑制能力,均表现出一定的量效关系。玉米须黄酮类单体对丙二醛(MDA)的抑制能力和对CD-POV的抑制能力基本一致,只是MDA达最大值时比CD-POV达最大值时需要的时间更长,表现出抗氧化活性。
近几年玉米须黄酮类化学成分国内外研究的比较多,抗氧化方面取得了一定的成果。研究已发现同一组提取物在不同测试体系中,所表现出来的抗氧化活性不同,故对其抗氧化活性的评价必须考虑具体的测试体系。选用何种评价方式最为科学及玉米须提取物抗氧化作用的机理与影响因素等问题都有待于进一步深入研究。
2玉米须水提取物对血液粘度的作用
高妮娜等玉米须总黄酮可降低瘀血模型动物全血黏度和血浆黏度,改善血液循环。玉米须总黄酮对血瘀证模型动物血浆黏度的影响血浆黏度观察表明,模型组动物血浆黏度(1.6774±0.0826)较空白对照组(1.2108±0.1069)明显升高(P<0.01),与模型组比较,玉米须总黄酮高剂量组动物血浆黏度(1.3642±0.1096)明显降低(P<0.05),而阳性药对照组(1.4335±0.1127)、玉米须总黄酮中剂量组(1.4552±0.1138)和低剂量组(1.5220±0.1871)与模型组无差异(P>0.05),表明玉米须总黄酮可降低瘀血模型动物血浆黏度。
3玉米须水提取物有降血脂作用
Miura T报道玉米须水提物能够明显降低正常小鼠和实验小鼠血中胆固醇含量。对正常小鼠血中甘油三酯能够显著降低。对实验小鼠血中甘油三酯含量未影响。结果提示,玉米须水提物降胆固醇作用是由于阻止胆固醇在肝脏合成。
4玉米须制剂调血脂作用
许卫等研制的玉芩蓬口服液为中药复方制剂,由猪毛菜、玉米须、杜仲炭、黄芩4味中药组成,具有降低血压,调节血脂、消肿利尿之功效。本实验表明玉芩蓬口服液对大鼠长期喂以高脂饲料所造成的血清TC、TG、LDL-C的升高、HDL-C的降低有明显抑制作用,对已经形成高脂血症的大鼠,也可使TC、TG、LDL-C水平明显降低,并使HDL-C水平有一定程度的升高,表明玉芩蓬口服液对大鼠实验性高脂血症有明显的预防和治疗作用。另外,急性毒性试验及慢性毒性试验均表明玉芩蓬口服液毒性较低。因此,玉芩蓬口服液在调血脂和防治AS方面有较好的应用前景。
中药降脂的研究进展
1降脂中药的研究
有降脂作用的中草药有90余种,如:山楂、泽泻、丹参丹、大黄、决明子、何首乌、甘草、茯苓、柴胡、芍药、川芎、白术、黄芪、菊花、茵陈、当归、葛根、荷叶、桑寄生、桃仁、生地黄、党参、姜黄、人参、绞股蓝、枸杞子、灵芝、刺五加叶、女贞子、冬虫夏草、怀牛膝、杜仲、月见草、蒲黄、红花、三七、没药、银杏叶、沙棘、虎杖、陈皮、半夏、漏芦、黄连、黄芩、鬼箭羽、赤松叶、火麻仁、柿叶、花粉、马齿苋、大豆、大蒜、茶叶、海带、米糠、香菇、紫菜、燕麦、洋葱、桔梗、薤白、水蛭、熊胆、木耳等。其中以降胆固醇(TC)为主的中药有:山楂、泽泻、何首乌、柴胡、川芎、当归、荷叶、党参、人参、灵芝、刺五加叶、怀牛膝、蒲黄、沙棘、陈皮、半夏、漏芦、大豆、薤白等。降三酰甘油(TG)为主的中药有:甘草、刺五加叶、黄连、黄芩等。降TC、TG的中药有:大黄、决明子、葛根、桑寄生、姜黄、人参、绞股蓝、枸杞、女贞子、虫草、月见草、三七、银杏叶、虎杖、马齿苋、大蒜、茶叶、水蛭、熊胆、木耳等。其降脂作用以降血清胆固醇居多;其功效多属补肝肾、健脾益气、活血化瘀及消食、除痰、利水等。
2中药降血脂有效成分研究
经大量的实验研究和临床考察发现,有多种活性成分具有良好的降脂作用,现就多种降脂活性成分的药效及作用机制概述如下。
皂苷类成分:具有降脂作用的有效成分以皂苷类居多。以这类成分降脂作用为主的天然药物有:绞股蓝、人参、柴胡、三七叶、刺五加叶等,它们对高脂血症动物的TC、TG和LDL有显著降低作用。
蒽醌类成分:广泛存在于天然药物中,而以蓼科、豆科植物居多,主要代表药物有:大黄、何首乌、虎杖等。
黄酮类成分:其生理活性多样,降血脂主要通过抗氧化作用实现。代表植物中,山楂为常用中药材,主要含金丝桃苷为主的黄酮类有机酸,能明显降低小鼠血清TC和升高HDL/TC;荞麦总黄酮、沙棘黄酮、银杏叶黄酮均能抑制高脂血症动物TC、TG的升高,对高脂血症有显著的预防和治疗作用。
生物碱类成分:生物碱是天然药物中存在最多的一类化学成分,具有强烈的生理活性。如利用荷叶生物碱制剂喂饲高脂血症小鼠,其血清TC的含量有明显降低。
挥发油及脂肪油类:挥发油为一类主要由萜类、低分子脂肪族和芳香族化合物组成的混合物。如沙棘油、微孔草油、月见草油、中华大蒜油及火麻仁油均属于此类。
蛋白质类成分:主要指一些活性蛋白质、活性肽及氨基酸等富有特殊生物活性的物质。大豆蛋白、甘薯粘蛋白、决明子蛋白质都属于此类,均能使高脂血症大鼠的TC、TG和LDL显著降低。因为这类蛋白质中含有与胆汁酸相结合的组分,从而抑制胆固醇的吸收和在体内的沉积。
活性多糖类:降脂机制与蛋白质类似。枸杞多糖、北虫草多糖、海带多糖、石莼多糖和魔芋中所含葡甘聚糖,都可以显著降低高脂血症动物血脂中的TC、TG水平,同时提高HDL/TC值。
不饱和脂肪酸:它能与胆固醇结合生成熔点低、易于运转、代谢和***的酯,改变胆固醇体内分布,减少血管壁中脂酯沉积。
多酚:降脂机制与黄酮类似,也是通过抗氧化作用和清除自由基来实现的。
其他类成分:除了上述降脂活性成分外,还有少数固醇类,萜类等化合物。如:绿豆中所含植物固醇能够减少胆固醇的吸收。泽泻主含三萜类化合物,可降低血清TC、TG,升高血清HDL。
综上所述,中药降血脂是一种简便快捷、行之有效的方法。在降脂中药中,有一部分既是药品又是食品,如山楂、枸杞子、荷叶、菊花、大蒜、海带、马齿苋等,这为开发降脂食品创造了良好条件。但目前仍存在一些亟待解决的问题,如中医药在防治高脂血症方面低水平重复现象严重;临床实验大多缺少现代科学的理论依据;研究近期效果远多于远期效果;很多报道中没有进行深层次的有效化学成分的研究。所以今后不仅要进行有效药物的筛选,而且应该深入地研究药理和中药化学成分,根据构效关系拟制出降脂效果好的配方,以便更好地为人类健康服务。目前,寻找新的降脂中药,对已发现的中药进行评价已经成为一个重要的研究方向。
急性毒性
玉米须黄酮小鼠急性毒性毒性太低,无法测得LD50,最大耐受量为16g/kg。
发明内容
本发明提供一种玉米须黄酮在治疗高血脂症和减肥的药物中的应用,目的在于提供一种新型的降血脂、减肥药物,满足人们对该类药物的需要。
本发明玉米须黄酮可以采取常规方法或文献中记载的方法获得,优选为包括下列步骤:
1、工艺流程
玉米须→备料→脱脂→水提→浓缩→脱色→醇析→上清液→回收乙醇→层析→干燥→玉米须黄酮
2、生产控制参数及具体操作
①备料:选取无虫蛀、无霉变、新鲜的玉米须为原料,洗净、干燥、粉碎,过40目筛,待用。
②脱脂:玉米须粉料加入95%乙醇,浸泡过夜,以除去脂溶性杂质。真空过滤,滤饼再用相同浓度乙醇处理一次,待用;回收乙醇,循环使用。
③水提:将脱脂后的药材粉料投入圆底烧瓶中,加入10~20倍量的的去离子水,搅拌,浸泡24h后,于80~90℃加热30min,提取3次,合并提取清液,待用。
④浓缩:把浸提清夜投入真空旋转蒸发仪中浓缩,减压、低温浓缩至料液原体积1/5左右,得浓缩液,待用。
⑤脱色:把浓缩液投入圆底烧瓶中,在搅拌下加入少量浓度为20~30%的双氧水,混合均匀,加热,脱色时间2h,加热温度50℃,趁热过滤,得脱色液,加热蒸去残留双氧水,待用。
⑥醇析:把脱色液投入烧杯中,加入适量的95%乙醇,使料液中乙醇浓度为70%~75%(V/V),搅拌、混合均匀,静止于冰箱中,醇析过夜,离心分离,收集液相回收乙醇,待用。
⑦层析:把回收乙醇浓缩液上AB-8大孔吸附树脂,水洗后,不同浓度乙醇洗脱,收集60%-70%乙醇部分,回收乙醇,待用。
⑧干燥:把玉米须乙醇部分至真空干燥箱中,干燥,过100目筛,得玉米须黄酮。
⑨用芦丁做对照品、三氯化铝甲醇做显色剂和待测样品溶液摇匀,放置10分钟,以60%乙醇为溶剂空白,在272血紫外测定吸光度,代入回归方程中,计算出百分含量。要求纯度在50%以上为合格。
本发明药物可以采用中药制剂的常规方法制备成任何常规内服制剂、外用制剂。
本发明专利的有益效果
1、用水作溶剂提取黄酮的提取方法简单易行,浓缩后乙醇沉淀,沉淀部分为多糖,上清液即为黄酮部分。将玉米须多糖和黄酮同时提取,节约能源。
2、采用AB-8对粗黄酮进行精制,使黄酮的纯度由约5%提高到50%以上。并对含量测定进行方法学考查,RSD均小于2%。
3、增加植物资源的新用途玉米须现阶段作为废弃物被白白扔掉,作为药用资源对其研究亦甚少,属未开发利用品种。将玉米须总黄酮开发成降血脂、减肥制剂是对中草药资源的有效利用。
4、带动区域经济的发展吉林省是玉米的主产区之一,可年产玉米须90万吨,现阶段还未进行有效的利用,由于降糖降脂药物临床需求量较大,必将带动区域产业经济的发展。
本发明制成的药物玉米须黄酮降血脂作用显著并有减肥作用。服用剂量可以根据服用方式,病人的年龄和体重及病情严重程度和其它类似的因素而改变,口服量为:0.45-3.0g/日·人,每日分一~三次服用。
具体实施方式
下面通过药效学实验进一步验证本发明。
第一部分玉米须总黄酮对正常大鼠血脂的影响
1.材料和方法
1.1主要试剂、药品及仪器
玉米须黄酮 吉林化工学院玉米须研发小组提供(含量为54%)
戊巴比妥钠 上海清析化工科技有限公司20070416
生理盐水 吉林康乃尔制药有限公司20070515
数显恒温水浴锅 国华电器有限公司HH-2型
低速自动平衡离心机 北京医用机厂LDZ5-2型
电子天平 上海友声衡器有限公司BS-600L型
1.2实验动物
Wistar大鼠,雄性,40只,体重120~160g(吉林大学实验动物中心提供合格证号:医动字第10-5112)。
1.3药物配制及动物分组
1.3.1药物配制
将玉米须黄酮用蒸馏水配成0.4%、0.8%和1.6%的溶液。
1.3.2动物分组及给药方案
40只大鼠按体重随机分为4组,每组10只,灌胃给药,每日一次,连续28d。
空白组 蒸馏水 10mL/kg
低剂量组 玉米须黄酮 40mg/kg
中剂量组 玉米须黄酮 80mg/kg
高剂量组 玉米须黄酮 160m/kg
1.4实验方法
给药期间,每7d记录每组每只大鼠的体重,饮水量和摄食量。末次给药前,各组动物禁食不禁水14h,末次给药后30min,将动物用3%戊巴比妥钠30mg/kg腹腔麻醉,腹主动脉采血,分离血清,测定血清中胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白以及游离脂肪酸的含量。
2.统计学方法
3.结果
3.1玉米须黄酮对正常大鼠饮水量、摄食量和体重的影响
与空白组比较,玉米须黄酮中、高剂量能降低21d和28d正常大鼠的饮水量和摄食量,p<0.05或p<0.01,见Tab.1及Tab.2,玉米须黄酮中、高剂量可明显降低正常大鼠的体重,p<0.05或p<0.01,见Tab.3。
Tab.1玉米须黄酮对正常大鼠饮水量的影响(n=10)
与空白组比较,*P<0.05,**P<0.01。
Tab.2玉米须黄酮对正常大鼠摄食量的影响(n=10)
与空白组比较,*P<0.05,**P<0.01。
Tab.3玉米须黄酮对正常大鼠体重的影响(n=10)
与空白组比较,*P<0.05,**P<0.01。
3.2玉米须黄酮对正常大鼠血脂的影响
与空白组比较,玉米须黄酮对正常大鼠有降低血清胆固醇含量、降低血清甘油三酯含量、降低血清高密度脂蛋白含量、增加血清低密度脂蛋白含量以及降低血清游离脂肪酸含量的趋势,但无统计学意义,见Tab.4。
4.结论
①玉米须黄酮能降低正常大鼠的饮水量和摄食量
②玉米须黄酮对正常大鼠的体重有降低作用
③玉米须黄酮对正常大鼠血清TC、TG、LDL-c和FFA有降低的趋势
综上所述,玉米须黄酮在降低饮水量和摄食量的情况下,能明显降低正常大鼠的体重;对正常大鼠有降血脂的趋势。
第二部分玉米须黄酮对高脂血症大鼠血脂的影响
1.材料和方法
1.1主要试剂、药品及仪器
玉米须黄酮 吉林化工学院玉米须研发小组提供(含量为54%)
洛伐他汀 黑龙江肇东华富药业有限公司 20091101
丙硫氧嘧啶 上海朝晖药业有限公司 20090604
胆固醇 天津市光复精细化工研究所 20090630
胆酸钠 中国惠世生化试剂有限公司 20050830
戊巴比妥钠 上海清析化工科技有限公司 20070416
全自动生化分析仪 美国雅培 C8000型
数显恒温水浴锅 国华电器有限公司 HH-2型
低速离心机 北京医用机厂 LDZ5-2型
电子天平 上海友声衡器有限公司 BS-600L型
1.2实验动物
Wistar大鼠,雄性,80只,体重120~160g(吉林大学实验动物中心提供合格证号:医动字第10-5112)。
1.3药物配制及动物分组
1.3.1高脂饲料配方
2.0%胆固醇、0.2%丙硫氧嘧啶、0.3%胆酸钠、7.5%猪油、2..0%蛋黄、88.0%基础饲料
1.3.2药品配制
将玉米须黄酮用蒸馏水配成0.4%、0.8%和1.6%的溶液;洛伐他汀用0.5%羧甲基纤维素钠配成0.3%混悬液。
1.3.3动物分组及给药方案
Wistar雄性大鼠80只,体重120~160g,先将其分为空白组(10只)和高脂饲料组(80只),空白组正常饮食,高脂饲料组给高脂饲料,连续喂养21d,取血,分离血清,测定高脂饲料组大鼠血清中胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白以及游离脂肪酸的含量(取血之前禁食不禁水14h)。选取血脂较高的大鼠,根据血脂水平对高脂饲料组重新分为5组,即:模型组、阳性药组、玉米须黄酮低、中、高剂量组,每组10只,灌胃给药,每日一次,连续28d。
空白组 普通饲料 蒸馏水 10mL/kg
模型组 高脂饲料 蒸馏水 10mL/kg
洛伐他汀组 高脂饲料 洛伐他汀 30mg/kg
低剂量组 高脂饲料 玉米须黄酮 40mg/kg
中剂量组 高脂饲料 玉米须黄酮 80mg/kg
高剂量组 高脂饲料 玉米须黄酮 160mg/kg
1.4实验方法
给药期间,每7d记录每组每只大鼠的体重,摄水量和进食量。末次给药前,各组动物禁食不禁水14h,末次给药后30min,将动物用3%戊巴比妥钠30mg/kg腹腔麻醉,腹主动脉采血,测定血清中胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白以及游离脂肪酸的含量。
2.统计学方法
所有结果均采用Excel进行组间差异性t检验,结果以均值±标准差(x±s)表示。
3.结果
3.1玉米须黄酮对高脂血症大鼠饮水量、摄食量和体重的影响
与模型组比较,玉米须黄酮中、高剂量能降低28d高脂血症大鼠的饮水量和摄食量,p<0.05或p<0.01,见Tab.5及Tab.6;与模型组比较,玉米须多糖低、中、高剂量可明显降低高血脂症大鼠的体重,p<0.05,见Tab.7。
与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01。
与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01。
与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01。
3.2玉米须黄酮对高脂血症大鼠血脂的影响
与空白组比较,模型组TC和LDL-c显著升高,p<0.01,说明血脂代谢已经紊乱,高脂血症模型造模成功;与模型组比较,阳性药能降低高血脂大鼠血清TC、TG、LDL-c水平,p<0.05或p<0.01,玉米须黄酮中、高剂量组能降低2型糖尿病大鼠血清TC、TG、LDL-c和FFA水平,p<0.05或p<0.01见Tab.8。
与空白组比较,△P<0.05,△△P<0.01;与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01。
4.结论
①玉米须黄酮能降低高脂血症大鼠的饮水量和摄食量
②玉米须黄酮能明显降低高脂血症大鼠的体重。
③玉米须黄酮能明显降低高脂血症大鼠血清的TC、TG、LDL-c和FFA水平
综上所述,玉米须黄酮在降低高脂血症大鼠饮水量和摄食量的情况下,能明显降低高脂血症大鼠的体重,具有降低高脂血症大鼠血脂的作用。
第三部分玉米须黄酮对型糖尿病大鼠血脂的影响
1.材料和方法
1.1主要试剂、药品及仪器
玉米须黄酮 吉林化工学院玉米须研发小组提供(含量为54%)
二甲双胍 江苏衡山药业有限公司 20091201
丙硫氧嘧啶 上海朝晖药业有限公司 20090604
胆固醇 天津市光复精细化工研究所 20090630
胆酸钠 中国惠世生化试剂有限公司 20050830
戊巴比妥钠 上海清析化工科技有限公司 20070416
全自动生化分析仪 美国雅培 C8000型
数显恒温水浴锅 国华电器有限公司 HH-2型
低速离心机 北京医用机厂 LDZ5-2型
电子天平 上海友声衡器有限公司 BS-600L型
血糖仪 长沙三诺生物传感技术有限公司 SXT-1型
1.2实验动物
Wistar大鼠,雄性,80只,体重120~160g(吉林大学实验动物中心提供合格证号:医动字第10-5112)。
1.3药物配制及动物分组
1.3.1高脂饲料配方
2.0%胆固醇、0.2%丙硫氧嘧啶、0.3%胆酸钠、7.5%猪油,2.0%蛋黄,88.0%基础饲料
1.3.2药品配制
将玉米须黄酮用蒸馏水配成0.4%、0.8%和1.6%的溶液;二甲双胍用0.5%羧甲基纤维素钠配成0.4%混悬液;四氧嘧啶,用生理盐水配制成12%溶液,现用现配。
1.3.3动物分组及给药方案
先80只大鼠分为空白组(10只)和高脂饲料组(70只),空白组正常饮食,高脂饲料组给予高脂饲料。连续喂养21d,取血,分离血清,测定高脂饲料组大鼠血清中胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、游离脂肪酸的含量以及血糖值并测定空白组血糖值(取血之前均禁食不禁水14h)。选取高脂饲料组中血脂较高的大鼠,腹腔注射四氧嘧啶,120mg/kg对其进行造模。三天后,测定造模大鼠的空腹血糖值,选取血糖值>11.1mmol/L的大鼠,根据血糖、血脂和体重将造模大鼠重新分为5组,即:模型组、阳性药组、玉米须黄酮低、中、高剂量组,每组10只,灌胃给药,每日一次,连续28d。
空白组 普通饲料 蒸馏水 10mL/kg
模型组 高脂饲料 蒸馏水 10mL/kg
二甲双胍组 高脂饲料 二甲双胍 40mg/kg
低剂量组 高脂饲料 玉米须黄酮 40mg/kg
中剂量组 高脂饲料 玉米须黄酮 80mg/kg
高剂量组 高脂饲料 玉米须黄酮 160mg/kg
1.4实验方法
给药期间,记录每组大鼠的体重,摄水量和进食量。于第7d,14d和21d,给药30min后,尾静脉取血,用测定每组大鼠的血糖值(取血之前禁食不仅水14h)。末次给药前,各组动物禁食不禁水14h,末次给药后30min,测定每组大鼠的血糖值,用3%戊巴比妥钠30mg/kg腹腔麻醉,腹主动脉采血,测定血清中胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白以及游离脂肪酸的含量。
2.统计学方法
3.结果
3.1玉米须黄酮对2型糖尿病大鼠血糖的影响
与空白组比较,模型组7d、14d、21d、28d血糖值均显著升高,p<0.01,说明高血糖模型造模成功;与模型组比较,阳性药能降低第21d和28d2型糖尿病大鼠的血糖值,p<0.05,玉米须黄酮各组对2型糖尿病大鼠的血糖有降低的趋势,但无统计学意义,见Tab.9。
与空白组比较,△P<0.05,△△P<0.01;与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01。
3.2玉米须黄酮对2型糖尿病大鼠血脂的影响
与空白组比较,模型组TC、TG、LDL-c显著升高,p<0.01,说明血脂代谢已经紊乱,2型糖尿病模型造模成功;与模型组比较,阳性药能降低2型糖尿病大鼠血清TC、TG、LDL-c水平,p<0.05或p<0.01,玉米须黄酮中、高剂量组能降低2型糖尿病大鼠血清TC和FFA水平,玉米须黄酮低、中、高剂量组能降低2型糖尿病大鼠血清TG和LDL-c水平,p<0.05或p<0.01见Tab.10。
与空白组比较,△P<0.05,△△P<0.01;与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01。
4.结论
①玉米须黄酮对2型糖尿病大鼠的血糖有降低的趋势
②玉米须黄酮降低2型糖尿病大鼠的TC、TG、LDL-c和FFA水平
综上所述,玉米须黄酮2型糖尿病大鼠的血糖有降低的趋势,具有降低2型糖尿病大鼠的血脂的作用。
本发明的制备方法:
实施例1
①备料:选取无虫蛀、无霉变、新鲜的青玉米须为原料,洗净、干燥、粉碎,过40目筛,待用。
②脱脂:玉米须粉料加入95%乙醇,浸泡过夜,以除去脂溶性杂质。真空过滤,滤饼再用相同浓度乙醇处理一次,待用;回收乙醇,循环使用。
③水提:将脱脂后的药材粉料投入圆底烧瓶中,加入10~20倍量的的去离子水,搅拌,浸泡24h后,于80~90℃加热30min,提取3次,合并提取液,待用。
④浓缩:把提取夜投入真空旋转蒸发仪中浓缩,减压、低温浓缩至料液原体积1/5左右,得浓缩液,待用。
⑤脱色:把浓缩液投入圆底烧瓶中,在搅拌下加入少量浓度为20~30%的双氧水,混合均匀,加热,脱色时间2h,加热温度50℃,趁热过滤,得脱色液,加热蒸去残留双氧水,待用。
⑥醇析:把脱色液投入烧杯中,加入适量的95%乙醇,使料液中乙醇浓度为70%~75%(V/V),搅拌、混合均匀,静止于冰箱中,醇析过夜,离心分离,收集液相回收乙醇,待用。
⑦层析:把回收乙醇浓缩液上AB-8大孔吸附树脂,水洗后,不同浓度乙醇洗脱,收集60%-70%乙醇部分,回收乙醇,待用。
⑧干燥:把玉米须乙醇部分至真空干燥箱中,干燥,过100目筛,得玉米须黄酮。
⑨用芦丁做对照品、三氯化铝甲醇做显色剂和待测样品溶液摇匀,放置10分钟,以60%乙醇为溶剂空白,在272nm紫外测定吸光度,代入回归方程中,计算出百分含量。要求纯度在50%以上为合格。
实施例2
①备料:选取无虫蛀、无霉变、新鲜的青玉米须为原料,洗净、干燥、粉碎,过40目筛,待用。
②脱脂:玉米须粉料加入95%乙醇,浸泡过夜,以除去脂溶性杂质。真空过滤,滤饼再用相同浓度乙醇处理一次,待用;回收乙醇,循环使用。
③醇提:将脱脂后的药材粉料投入圆底烧瓶中,加入10~20倍量60%-70%的乙醇,搅拌,浸泡24h后,于70~80℃加热30min,提取3次,合并提取液,待用。
④浓缩:把提取夜投入真空旋转蒸发仪中浓缩,减压、低温浓缩至料液原体积1/5左右,得浓缩液,待用。
⑤脱色:把浓缩液投入圆底烧瓶中,在搅拌下加入少量浓度为20~30%的双氧水,混合均匀,加热,脱色时间2h,加热温度50℃,趁热过滤,得脱色液,加热蒸去残留双氧水,待用。
⑥层析:把脱色液上AB-8大孔吸附树脂,水洗后,不同浓度乙醇洗脱,收集60%-70%乙醇部分,回收乙醇,待用。
⑦干燥:把玉米须乙醇部分置真空干燥箱中,干燥,过100目筛,得玉米须黄酮。
⑧用芦丁做对照品、三氯化铝甲醇做显色剂和待测样品溶液摇匀,放置10分钟,以60%乙醇为溶剂空白,在272nm紫外测定吸光度,代入回归方程中,计算出百分含量。要求纯度在50%以上为合格。
实施例3
AB-8精制玉米须粗黄酮的工艺研究
将玉米须水提物浓缩至原溶液体积的1/5,按计算量加入95%乙醇,使得溶液浓度达到70-80%,静置24小时,离心后收集溶液,即得玉米须水提醇沉上清液,将其浓缩后真空蒸干得干燥样品粉末(粗品黄酮);称取40mg上述粉末,置于100mL容量瓶中,加70%乙醇适量,超声使之溶解,放冷并用70%乙醇稀释至刻度,摇匀,即得供试品溶液。
为了能更好的缩减实验成本,提高效率,使工艺条件得以进一步优化,以单因素探索实验所得最佳条件为基准,缩小相应因素的水平范围,选定正交实验三因素三水平:
Tab.11正交实验因素与水平设计表
Tab.12L9(34)正交实验结果
经过一系列的正交实验可以得出:用AB-8型大孔吸附树脂对玉米须总黄酮进行精制,得出的最佳工艺条件为:洗脱剂流速3.6mL/min,洗脱剂pH值5.61,洗脱剂浓度70%;采用优化的工艺条件,总黄酮的纯度由14.24%提高到58.32%,得率达到了69.35%。说明AB-8树脂对玉米须总黄酮有较好的特异性和解吸附性能,富集效果好,具有操作简便,所得产品纯度和转移率较高,易于实现工业化生产。
实施例4
玉米须黄酮降脂胶囊的制备及质量控制
①原料按实施例1或2的方法提取,实施例3的方法精制,置70℃真空干燥,粉碎,过7号标准筛,备用。
②制成硬胶囊将上述药粉加入碳酸钙和淀粉充分搅拌均匀,过筛。必要时加乙醇调整湿度,于60℃~70℃烘干,装入1或2号胶囊中,共制成1000粒。常规灭菌,整粒后密封包装,每粒重含玉米须黄酮的胶囊0.03~0.2g。每日三次,每次3~5丸。
③质量控制外观、水分、装量差异、崩解时限、卫生标准均符合要求。
④玉米须黄酮胶囊具有工艺简单、质量稳定、纯度高、剂量准确、疗效确切,服用方便,便于识别、储存和运输等优点。
Claims (3)
1.玉米须黄酮在制备治疗高血脂药物中的应用。
2.玉米须黄酮在制备治疗减肥药物中的应用。
3.如权利要求1或2或3所述的药物中应用,其特征在于玉米须黄酮的制备方法包括如下步骤:
①备料:选取无虫蛀、无霉变、新鲜的玉米须为原料,洗净、干燥、粉碎,过40目筛,待用。
②脱脂:玉米须粉料加入95%乙醇,浸泡过夜,以除去脂溶性杂质。真空过滤,滤饼再用相同浓度乙醇处理一次,待用;回收乙醇,循环使用。
③水提:将脱脂后的药材粉料投入圆底烧瓶中,加入10~20倍量的的去离子水,搅拌,浸泡24h后,于80~90℃加热30min,提取3次,合并提取液,待用。
④浓缩:把提提夜投入真空旋转蒸发仪中浓缩,减压、低温浓缩至料液原体积1/5左右,得浓缩液,待用。
⑤脱色:把浓缩液投入圆底烧瓶中,在搅拌下加入少量浓度为20~30%的双氧水,混合均匀,加热,脱色时间2h,加热温度50℃,趁热过滤,得脱色液,加热蒸去残留双氧水,待用。
⑥醇析:把脱色液投入烧杯中,加入适量的95%乙醇,使料液中乙醇浓度为70%~75%(V/V),搅拌、混合均匀,静止于冰箱中,醇析过夜,离心分离,收集液相回收乙醇,待用。
⑦层析:把回收乙醇浓缩液上AB-8大孔吸附树脂,水洗后,不同浓度乙醇洗脱,收集60%-70%乙醇部分,回收乙醇,待用。
⑧干燥:把玉米须乙醇部分至真空干燥箱中,干燥,过100目筛,得玉米须黄酮。
⑨用芦丁做对照品、三氯化铝甲醇做显色剂和待测样品溶液摇匀,放置10分钟,以60%乙醇为溶剂空白,在272nm紫外测定吸光度,代入回归方程中,计算出百分含量。要求纯度在50%以上为合格。
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Cited By (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102178873A (zh) * | 2011-04-23 | 2011-09-14 | 王效山 | 一种包括外用剂和内服剂相组合的中药减肥制剂及其制备方法 |
CN102908599A (zh) * | 2012-06-19 | 2013-02-06 | 谢文龙 | 一种降糖降脂降压的药物 |
CN102908538A (zh) * | 2011-08-02 | 2013-02-06 | 苏州宝泽堂医药科技有限公司 | 一种棒子毛总黄酮的提取方法 |
CN103652161A (zh) * | 2013-11-18 | 2014-03-26 | 肖森林 | 玉米须枸杞茶 |
CN104082374A (zh) * | 2014-07-04 | 2014-10-08 | 贵州黄平靓鸥桑综合开发有限公司 | 一种可以降血脂的饼干 |
JP2015101586A (ja) * | 2013-11-25 | 2015-06-04 | カトリック ユニバーシティ インダストリー アカデミック コーオペレイション ファウンデーション | メイシンを含む肥満予防及び治療用医薬組成物 |
CN105011287A (zh) * | 2015-08-14 | 2015-11-04 | 青岛浩大海洋保健食品有限公司 | 一种具有调节血脂功效的玫瑰花海洋功能性保健饮料 |
CN106070887A (zh) * | 2016-06-26 | 2016-11-09 | 贾恩助 | 一种祛湿消脂茶 |
CN107183427A (zh) * | 2017-05-17 | 2017-09-22 | 霍山延年居石斛科技有限公司 | 一种石斛汁及其制备方法 |
CN112956624A (zh) * | 2021-03-17 | 2021-06-15 | 吉林化工学院 | 一种玉米须复合饮料的稳定性的研究 |
CN113243528A (zh) * | 2021-04-26 | 2021-08-13 | 上海市农业科学院 | 高效降血糖降血脂的玉米须提取物及其制备方法 |
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Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
《中国优秀硕士学位论文》 20061231 刘平 玉米须黄酮的提取分离及生物活性研究 , 2 * |
《吉林工商学院学报》 李坦城等 玉米须中有效成分及其功能和药理作用研究文献综述 , 第02期 2 * |
Cited By (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102178873A (zh) * | 2011-04-23 | 2011-09-14 | 王效山 | 一种包括外用剂和内服剂相组合的中药减肥制剂及其制备方法 |
CN102178873B (zh) * | 2011-04-23 | 2012-11-28 | 王效山 | 一种包括外用剂和内服剂相组合的中药减肥制剂及其制备方法 |
CN102908538A (zh) * | 2011-08-02 | 2013-02-06 | 苏州宝泽堂医药科技有限公司 | 一种棒子毛总黄酮的提取方法 |
CN102908599A (zh) * | 2012-06-19 | 2013-02-06 | 谢文龙 | 一种降糖降脂降压的药物 |
CN103652161A (zh) * | 2013-11-18 | 2014-03-26 | 肖森林 | 玉米须枸杞茶 |
JP2015101586A (ja) * | 2013-11-25 | 2015-06-04 | カトリック ユニバーシティ インダストリー アカデミック コーオペレイション ファウンデーション | メイシンを含む肥満予防及び治療用医薬組成物 |
CN104082374A (zh) * | 2014-07-04 | 2014-10-08 | 贵州黄平靓鸥桑综合开发有限公司 | 一种可以降血脂的饼干 |
CN105011287A (zh) * | 2015-08-14 | 2015-11-04 | 青岛浩大海洋保健食品有限公司 | 一种具有调节血脂功效的玫瑰花海洋功能性保健饮料 |
CN106070887A (zh) * | 2016-06-26 | 2016-11-09 | 贾恩助 | 一种祛湿消脂茶 |
CN107183427A (zh) * | 2017-05-17 | 2017-09-22 | 霍山延年居石斛科技有限公司 | 一种石斛汁及其制备方法 |
CN112956624A (zh) * | 2021-03-17 | 2021-06-15 | 吉林化工学院 | 一种玉米须复合饮料的稳定性的研究 |
CN113243528A (zh) * | 2021-04-26 | 2021-08-13 | 上海市农业科学院 | 高效降血糖降血脂的玉米须提取物及其制备方法 |
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