CN101718705B - 一种羟基自由基的测定方法 - Google Patents

一种羟基自由基的测定方法 Download PDF

Info

Publication number
CN101718705B
CN101718705B CN2009101987151A CN200910198715A CN101718705B CN 101718705 B CN101718705 B CN 101718705B CN 2009101987151 A CN2009101987151 A CN 2009101987151A CN 200910198715 A CN200910198715 A CN 200910198715A CN 101718705 B CN101718705 B CN 101718705B
Authority
CN
China
Prior art keywords
hydrogen peroxide
add
moll
free radical
concentration
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN2009101987151A
Other languages
English (en)
Other versions
CN101718705A (zh
Inventor
闻海峰
秦琴
施文健
路荣春
杨琴淋
周艳
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
University of Shanghai for Science and Technology
Original Assignee
University of Shanghai for Science and Technology
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by University of Shanghai for Science and Technology filed Critical University of Shanghai for Science and Technology
Priority to CN2009101987151A priority Critical patent/CN101718705B/zh
Publication of CN101718705A publication Critical patent/CN101718705A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN101718705B publication Critical patent/CN101718705B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
  • Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)

Abstract

本发明提供一种测定羟基自由基的测定方法。即在水溶液中，羟基自由基氧化夜蓝，夜蓝溶液褪色，对波长618nm处的可见光有选择性吸收，通过测定溶液的吸光度可以得到溶液中羟基自由基的浓度。本发明的检测方法可检测浓度范围为0.039～0.379mg/L的羟基自由基，具有仪器简单、检测成本低、操作简便快捷、灵敏度高，摩尔吸光系数以双氧水浓度计高达3.6×104L·mol-1·cm-1等优点。

Description

一种羟基自由基的测定方法
技术领域
本发明涉及一种羟基自由基的测定方法。具体地说，涉及一种利用萘基二苯甲烷染料-夜蓝作为显色剂，利用分光光度法测定羟基自由基的新方法。
背景技术
羟基自由基(·OH)对生物体毒性强危害大，并且反应活性大，寿命短，存在浓度低。目前，国内外报道的测定羟基自由基的方法有：电子自旋共振法、高效液相色谱法、荧光法、共振散射光谱法和分光光度法等。这些方法或仪器昂贵，或灵敏度不够。
发明内容
本发明的目的是克服上述技术弊端，提供一种具有使用设备简单、检测成本低、操作简便、灵敏度高等优点的羟基自由基的测定方法。
本发明的技术原理
在水溶液中，羟基自由基氧化夜蓝，夜蓝溶液褪色，对波长618nm处的可见光有选择性吸收，通过测定溶液的吸光度可以得到溶液中羟基自由基的浓度。
本发明的技术方案
一种羟基自由基的测定方法，测定步骤如下：
(1)标准曲线的绘制
分别往编号为①到⑥的6个50mL容量瓶中都加入2.0×10-4mol·L-1的夜蓝水溶液9.0mL，pH为3.1～3.3的磷酸-磷酸二氢钠缓冲溶液5.0mL，1.0×10-3mol·L-1FeSO4水溶液0.3mL；
再分别往①到⑤号的5个容量瓶中加入现配制的5.0×10-4mol·L-1的双氧水，其中①号中加入0.2mL双氧水，②号中加入0.4mL双氧水，③号中加入0.6mL双氧水，④号中加入0.8mL双氧水，⑤号中加入1.0mL双氧水；
⑥号中不加双氧水，作为参比液；
将①到⑥号分别充分混匀，静置15min后，用蒸馏水定容，摇匀；
用1cm比色皿，用⑥号作参比，测定618nm处①到⑤号的5个容量瓶中溶液的吸光度；
以吸光度为纵坐标，双氧水浓度为横坐标，绘制标准曲线；
(2)回归方程的获得
根据步骤(1)的标准曲线获得回归方程：A＝1.07C(mg·L-1)-0.0038；其中A为吸光度；C为双氧水摩尔浓度；
(3)羟基自由基的测定
往50mL容量瓶中加入2.0×10-4mol·L-1夜蓝水溶液9.0mL，pH为3.1～3.3的磷酸-磷酸二氢钠缓冲溶液5.0mL，1.0×10-3mol·L-1FeSO4水溶液0.3mL，加入可产生羟基自由基的物质，充分混匀，静置15min后，用蒸馏水定容，摇匀，用1cm比色皿，用步骤(1)中的⑥号作参比，测定618nm处溶液的吸光度，根据步骤(2)的回归方程计算羟基自由基的浓度；
其中加入可产生羟基自由基的物质的量按其最终含羟基自由基浓度为0.039～0.379mg/L计算。
本发明的测定方法当H2O2浓度为0.17mg·L-1，相对误差小于5％时，以下离子允许量为(mg·L-1)：K+(2000)、Ca2+(2000)、Sn2+(2000)、Al3+(2000)、Pb2+(2000)、NO3 -(2000)、SO4 2-(2000)、NH4 +(2000)、Br-(2000)、HC2O4 -(2000)、H2BO3 -(2000)、H4P3O10 -(2000)、柠檬酸根(2000)，Ni+(100)、Cu2+(100)、Co2+(100)、Mn2+(100)、Cr3+(100)，Cl-(5000)，Fe3+(400)，F-(30)，硅酸氢根(1000)，Ag+(0.05)，Hg2+(0.03)，Cd2+(0.05)，Mn7+(0.2)，Cr6+(0.6)。以上离子浓度上限未做。
本发明的有益效果
目前国内外报道的测定羟基自由基的方法有：电子自旋共振法、高效液相色谱法、荧光法、共振散射光谱法和分光光度法等。这些方法或仪器昂贵，或灵敏度不高，本发明采用夜蓝为显色剂，分光光度法测定羟基自由基，可检测浓度范围为0.039～0.379mg/L的羟基自由基，该方法具有仪器简单、检测成本低、操作简便快捷、灵敏度高，摩尔吸光系数以双氧水浓度计高达3.6×104L·mol-1·cm-1等优点。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明进一步阐述，但并不限制本发明。
本发明检测方法所用的仪器
UV757CRT紫外可见分光光度计(上海精密科学仪器有限公司)
PHS-2C型精密酸度计(上海雷磁仪器厂)
JA2003型电子天平(上海精科天平厂)
本发明检测方法所用的试剂：
FeSO4、H2O2、H3PO4和NaH2PO4均为分析纯
商品化夜蓝(C.I 44085)
实施例1
(1)标准曲线的绘制
分别往编号为①到⑥的6个50mL容量瓶中都加入2.0×10-4mol·L-1的夜蓝水溶液9.0mL，pH为3.1～3.3的磷酸-磷酸二氢钠缓冲溶液5.0mL，1.0×10-3mol·L-1eSO4水溶液0.3mL；
再分别往①到⑤号的5个容量瓶中加入现配制的5.0×10-4mol·L-1的双氧水，其中①号中加入0.2mL双氧水，②号中加入0.4mL双氧水，③号中加入0.6mL双氧水，④号中加入0.8mL双氧水，⑤号中加入1.0mL双氧水；
⑥号中不加双氧水，作为参比液；
将①到⑥号分别充分混匀，静置15min后，用蒸馏水定容，摇匀；
用1cm比色皿，用⑥号作参比，测定618nm处①到⑤号的5个容量瓶中溶液的吸光度；
以吸光度为纵坐标，双氧水浓度为横坐标，绘制标准曲线；
(2)回归方程的获得
根据步骤(1)的标准曲线获得回归方程：A＝1.07C(mg·L-1)-0.0038；其中A为吸光度；C为双氧水摩尔浓度；
(3)羟基自由基的测定
往50mL容量瓶中加入含乳化剂2.0×10-4mol·L-1夜蓝水溶液9.0mL，pH为3.1～3.3的磷酸-磷酸二氢钠缓冲溶液5.0mL，1.0×10-3mol·L-1FeSO4水溶液0.3mL，现配制的浓度为5.0×10-4mol·L-1的双氧水0.1mL，充分混匀，静置15min后，用蒸馏水定容，摇匀，用1cm比色皿，用步骤(1)中的⑥号作参比，测定618nm处溶液的吸光度为0.038，根据步骤(2)的回归方程计算羟基自由基的浓度为0.039mg/L；
实施例2
(1)标准曲线的绘制
同实施例1；
(2)回归方程的获得
同实施例1
(3)羟基自由基的测定
往50mL容量瓶中加入含乳化剂2.0×10-4mol·L-1夜蓝水溶液9.0mL，pH为3.1～3.3的磷酸-磷酸二氢钠缓冲溶液5.0mL，1.0×10-3mol·L-1FeSO4水溶液0.3mL，现配制的浓度为5.0×10-4mol·L-1的双氧水0.7mL，充分混匀，静置15min后，用蒸馏水定容，摇匀，用1cm比色皿，用步骤(1)中的⑥号作参比，测定618nm处溶液的吸光度为0.252，根据步骤(2)的回归方程计算羟基自由基的浓度为0.119mg/L；
实施例3
(1)标准曲线的绘制
同实施例1；
(2)回归方程的获得
同实施例1
(3)羟基自由基的测定
往50mL容量瓶中加入含乳化剂2.0×10-4mol·L-1夜蓝(C.I 44085)水溶液9.0mL，pH为3.1～3.3的磷酸-磷酸二氢钠缓冲溶液5.0mL，1.0×10-3mol·L-1FeSO4水溶液0.3mL，现配制的浓度为5.0×10-4mol·L-1的双氧水1.1mL，充分混匀，静置15min后，用蒸馏水定容，摇匀，用1cm比色皿，用步骤(1)中的⑥号作参比，测定618nm处溶液的吸光度为0.401，根据步骤(2)的回归方程计算羟基自由基的浓度为0.379mg/L。
以上所述内容仅为本发明构思下的基本说明，而依据本发明的技术方案所作的任何等效变换，均应属于本发明的保护范围。

Claims (1)

1.一种羟基自由基的测定方法，其特征在于测定步骤如下：
(1)标准曲线的绘制
分别往编号为①到⑥的6个50mL容量瓶中都加入2.0×10-4mol·L-1的夜蓝水溶液9.0mL，pH为3.1～3.3的磷酸-磷酸二氢钠缓冲溶液5.0mL，1.0×10-3mol·L-1FeSO4水溶液0.3mL；
再分别往①到⑤号的5个容量瓶中加入现配制的5.0×10-4mol·L-1的双氧水，其中①号中加入0.2mL双氧水，②号中加入0.4mL双氧水，③号中加入0.6mL双氧水，④号中加入0.8mL双氧水，⑤号中加入1.0mL双氧水；
⑥号中不加双氧水，作为参比液；
将①到⑥号分别充分混匀，静置15min后，用蒸馏水定容，摇匀；
用1cm比色皿，用⑥号作参比，测定618nm处①到⑤号的5个容量瓶中溶液的吸光度；
以吸光度为纵坐标，双氧水浓度为横坐标，绘制标准曲线；
(2)回归方程的获得
根据步骤(1)的标准曲线获得回归方程：A＝1.07C-0.0038；其中A为吸光度；C为双氧水摩尔浓度，单位为mg.L-1；
(3)羟基自由基的测定
往50mL容量瓶中加入2.0×10-4mol·L-1夜蓝水溶液9.0mL，pH为3.1～3.3的磷酸-磷酸二氢钠缓冲溶液5.0mL，1.0×10-3mol·L-1FeSO4水溶液0.3mL，加入可产生羟基自由基的物质，充分混匀，静置15min后，用蒸馏水定容，摇匀，用1cm比色皿，用步骤(1)中的⑥号作参比，测定618nm处溶液的吸光度，根据步骤(2)的回归方程计算羟基自由基的浓度。
CN2009101987151A 2009-11-13 2009-11-13 一种羟基自由基的测定方法 Expired - Fee Related CN101718705B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2009101987151A CN101718705B (zh) 2009-11-13 2009-11-13 一种羟基自由基的测定方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2009101987151A CN101718705B (zh) 2009-11-13 2009-11-13 一种羟基自由基的测定方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN101718705A CN101718705A (zh) 2010-06-02
CN101718705B true CN101718705B (zh) 2011-09-21

Family

ID=42433310

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2009101987151A Expired - Fee Related CN101718705B (zh) 2009-11-13 2009-11-13 一种羟基自由基的测定方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN101718705B (zh)

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103115882B (zh) * 2013-02-26 2015-05-20 南京工业大学 一种检测h2o2的方法
CN103712928A (zh) * 2013-12-05 2014-04-09 同济大学 一种测定污水中阴离子表面活性剂浓度的检测剂
CN103954569B (zh) * 2014-04-21 2016-03-02 浙江大学 一种碳中心自由基的测定方法
CN103983592B (zh) * 2014-06-06 2016-05-11 哈尔滨工业大学 一种检测溶液中羟基自由基浓度的方法
CN105259126B (zh) * 2015-11-12 2017-11-10 东北石油大学 一种定量检测Fenton分解体系中羟基自由基浓度的方法
CN110632041B (zh) * 2019-08-16 2021-10-29 朱彧 一种石蒜碱作为检测羟自由基荧光探针的测定方法
CN113959995B (zh) * 2020-07-20 2023-12-26 中国科学院化学研究所 羟基自由基的测量装置、测量方法及其用途
CN113109288B (zh) * 2021-03-11 2021-12-17 首都师范大学 一种利用太赫兹光谱快速检测自由基的方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101241076A (zh) * 2008-03-12 2008-08-13 江苏大学 一种羟基自由基浓度的测定方法
CN101413896A (zh) * 2008-12-02 2009-04-22 上海理工大学 一种羟基自由基的测定方法
CN100498287C (zh) * 2007-11-15 2009-06-10 广西师范大学 检测羟基自由基的纳米银分光光度法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN100498287C (zh) * 2007-11-15 2009-06-10 广西师范大学 检测羟基自由基的纳米银分光光度法
CN101241076A (zh) * 2008-03-12 2008-08-13 江苏大学 一种羟基自由基浓度的测定方法
CN101413896A (zh) * 2008-12-02 2009-04-22 上海理工大学 一种羟基自由基的测定方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
刘建伟 等.羟基自由基检测方法的研究进展.《江西化工》.2009,(第2期),15-19. *
施文健 等.测定水体中镉的维多利亚艳蓝BO-碘分光光度法.《环境与健康杂志》.2003,第20卷(第5期),298-300. *

Also Published As

Publication number Publication date
CN101718705A (zh) 2010-06-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101718705B (zh) 一种羟基自由基的测定方法
CN101413896B (zh) 一种羟基自由基的测定方法
Ensafi et al. On-line separation and preconcentration of lead (II) by solid-phase extraction using activated carbon loaded with xylenol orange and its determination by flame atomic absorption spectrometry
Bunting Determination of soluble silica in very low concentrations
KR101340766B1 (ko) 고농도의 인산염 인 검출시약 및 검출키트
Karlıdağ et al. Determination of cobalt in chamomile tea samples at trace levels by flame atomic absorption spectrophotometry after poly (vinyl alcohol)-magnetic hydrogel based dispersive solid phase extraction
Yoshimura et al. Gel-phase absorptiometry of phosphate with molybdate and Malachite Green and its Application to Flow Analysis
KR101340695B1 (ko) 저농도의 인산염 인 농도 검출시약 및 검출키트
CN111474167B (zh) 一种Cu-MOF-鲁米诺-H2O2化学发光体系检测Pb2+的方法
CN101637693B (zh) 一种no2吸收剂和吸收管及其应用
CN103698448B (zh) 一种快速分离并测定聚磷酸铵中不同形态磷酸盐的方法
KR101350081B1 (ko) 고농도의 인산염 인 농도 검출방법
CN106855507A (zh) 一种饮料抗氧化性能的评价方法
CN101949846A (zh) 一种无色孔雀石绿的检测方法
CN101051027A (zh) 一种以分光光度法水相测定水或废水中微量汞的方法
Fernandez-de Cordova et al. Determination of Trace Amounts of Cobalt at sub-μg 1− 1Level by Solid Phase Spectrophotometry
KR101340767B1 (ko) 저농도의 인산염 인 농도 검출방법
CN103018184B (zh) 一种测定水中痕量溴酸盐的方法
CN108548788B (zh) 一种在水溶液中检测AcO-或F-的试剂及其检测方法
CN108195832B (zh) 一种检测水中无机砷含量的方法及检测试剂盒
KR101363294B1 (ko) 구리 농도 측정용 조성물 및 이를 이용한 검출방법
CN111007049A (zh) 一种以黄素单核苷酸为荧光探针测定磷酸根含量的方法
CN101620163A (zh) 无机磷(磷酸根)诊断/测定试剂盒及无机磷(磷酸根)的浓度测定方法
CN101464328A (zh) 硒诊断/测定试剂盒及硒的浓度测定方法
CN101464331A (zh) 硒诊断/测定试剂盒及硒的浓度测定方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20110921

Termination date: 20141113

EXPY Termination of patent right or utility model