CN101691568A - 一种可食性固定化活性益生菌的生产方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开的是一种可食性固定化活性益生菌的生产方法：是将培养成熟的一种或多种益生菌种子，按一定比例加入到含有适合益生菌生长繁殖的固定化载体溶液中，然后将含有一种或多种益生菌种子的固定化载体溶液滴入一种固化液中，或将固化液加入固定化载体中使之凝固。凝固后的含有一种或多种益生菌的固定化载体用无菌水洗涤，然后置于10℃-45℃密闭培养8-72小时。本发明生产的固定化益生菌不需要分离冻干，可直接作为益生菌服用，也可放入其他食品中。常温下长期密闭保存，菌数可不断生长。
Description
(一)技术领域
本发明涉及一种活性益生菌的生产方法，具体属于一种可食性固定化活性益生菌的生产方法。
(二)背景技术
益生菌(Probiotics)是一类改善人类肠道微生态平衡，对人体健康具有调理作用的有益的微生物，它们主要是通过维护肠道的微生态平衡而起到促进人体健康的作用，它的生理学功能得到全世界科技界普遍认同。全世界每年发表关于研究益生菌的论文极其丰富，概括起来益生菌具有以下几方面的作用：
(1)提高免疫力：双歧杆菌和嗜酸乳杆菌可产生大量的免疫球蛋白。从而激活机体的免疫细胞，使得外在菌难以留存体内，达到免疫调节作用。(2)改善胃肠道功能：双歧杆菌和嗜酸乳杆菌在肠道粘膜表面形成保护屏障，抵御有害菌对肠道粘膜的侵袭破坏，能产生乳酸和醋酸等酸性物质，造成不利于有害菌生长的环境，抑制有害菌的生长、繁殖，起到调节肠道菌群的作用。(3)营养作用：双歧杆菌和嗜酸乳杆菌在人体肠道内发酵后可产生乳酸和醋酸，能提高钙、磷、铁的利用率，促进铁和维生素D的吸收，产生维生素K及维生素B，产生乳糖酶帮助消化乳糖。(4)通肠润便：双歧杆菌和嗜酸乳杆菌在肠内可产生大量的短链脂肪酸等酸性物质，能刺激肠道蠕动，增加粪便湿度，起到通便的效果。(5)恢复因使用抗生素后而被破坏的肠道正常微生物菌群：抗生素是引起肠道菌群失调的重要因素。抗生素在杀灭有害菌的同时，也杀灭了很多的有益菌，及时补充双岐杆菌和嗜酸乳杆菌，对帮助肠道恢复菌群平衡、提高营养吸收能力是非常必要的。(6)降低胆固醇、防止动脉硬化。(7)抑制内毒素的产生，延缓衰老。(8)抑制肠道中致癌因子的产生，预防肿瘤的发生。(9)抗辐射等。因此，肠道微生态制剂的研究已成为当前世界微生物学领域一个研究重点。目前，虽然市场上益生菌产品极其丰富，但是，益生菌产品只有液体益生菌和益生菌冻干粉两种形式。
(三)发明内容
本发明的目的在于提供一种可食性固定化活性益生菌的生产方法，它包括两歧双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种、青春双歧杆菌、长双歧杆菌、短双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌、植物乳杆菌和动物双歧杆。
本发明的目的是这样实现的：
(1)首先分别培养试管斜面菌种，培养12-72小时，然后接入三角瓶液体培养基中进行分别培养或混合培养，20℃-45℃培养8-72小时，再逐级进行扩大培养，然后再进行发酵罐发酵培养，20℃-45℃培养8-72小时，使发酵液中益生菌总数达到1.0×104-1.0×109/mL，此培养液作为种子液；
(2)将培养成熟的种子液，按浓度为0.01％-20.0％加入灭菌冷却好的含有适合益生菌生长繁殖的固定化载体溶液为A液中，彻底混合均匀制成固定化载体溶液B液；所述的固定化载体溶液A液的配制方法：称取海藻酸钠0.1-200g、蛋白胨0.1-100.0克、乳清粉1.0-5.0克、低聚麦芽糖1.0-50.0克、蜂蜜1.0-50.0克、牛肉膏0.1-10.0克、酵母膏0.1-10.0克、柠檬酸钠0.1-10.0克、醋酸钠0.1-5.5克、磷酸氢二钾0.1-2.5克、硫酸镁0.01-0.75克，浓度为2.0％-25％的西红柿汁5-200mL、浓度为2.0％-25％的胡萝卜汁5-200mL、浓度为2.0％-25％大豆浸汁5-200mL、加水定容至1000毫升，彻底溶解，pH5.0-7.0，115℃灭菌15分钟，冷却至37℃以下备用。
(3)将含有益生菌种子的固定化载体溶液B液灌入制球机或注射器中，将B液缓缓地滴入固定化载体溶液C液中，以达到B液与C液为1∶1～1∶8的比例，经2～8小时的固化使之凝固，然后捞出载体球用无菌水洗涤两次，置于10℃-45℃密闭培养8-72小时；所述的固定化载体溶液C液的配制方法：称取氯化钙1.0-200.0g或氯化钾1.0-200.0g，加入1000mL水，搅拌，彻底溶解，115℃温度灭菌15分钟，冷却至10℃-35℃。
本发明还有这样一些技术特征：
步骤(3)另外一种方法是将固定化载体溶液B液放入容积为0.01cm3-1.0m3容器中，B液的深度0.1～10cm，然后将固定化载体溶液C液按1∶1～1∶8轻轻倒入B液中，经2～8小时的固化，固定化益生菌可制成球状、丝状、柱状、条状、块状、薄膜状。
固定化载体溶液A液的配置方法，所述的海藻酸钠0.1-200g用卡拉胶0.1-200g或角叉菜0.1-200g替代。海藻酸钠、κ-卡拉胶可单独使用，也可两者按比例混合使用，
固定化载体溶液C液的配制方法，所述的氯化钙、氯化钾可单独配制，也可混合配制，如果海藻酸钠、κ-卡拉胶单独使用，则氯化钙、氯化钾单独配制。如果海藻酸钠、κ-卡拉胶混合配制，则氯化钙、氯化钾就混合配制。
本发明所生产的固定化活性益生菌不需要分离冻干，可直接作为益生菌服用，常温下可长期保存，活菌数不但不降低且可以继续繁殖生长，菌数有所升高。
(四)具体实施方式
实施例一：
(1)将干酪乳杆菌试管斜面菌种，培养12-72小时，然后接入三角瓶液体培养基中培养，37℃培养20小时，再逐级进行扩大培养，然后再进行发酵罐发酵培养，37℃培养20小时，使发酵液中总菌数达到1.0×109/mL，此培养液作为种子液；
(2)将培养成熟的种子液，按3.0％加入灭菌冷却好的海藻酸钠固定化载体溶液(A液)中，彻底混合均匀制成(B液)。
(3)然后将固定化载体溶液(B液)滴入4％氯化钙(C液)中，使之凝固。凝固后的含有干酪乳杆菌的固定化载体用无菌水洗涤，然后置于10℃-45℃密闭培养8-72小时。
(4)固定化载体溶液(A液)的配制：称取海藻酸钠30.0g、蛋白胨5.0克、乳清粉5.0克、低聚麦芽糖10.0克、蜂蜜20.0克、牛肉膏5.0克、酵母膏2.0克、柠檬酸钠1.0克、醋酸钠1.0克、磷酸氢二钾1.0克、硫酸镁0.5克，浓度为10％的西红柿汁50mL、浓度为10％的胡萝卜汁50mL、5％大豆浸汁50mL、加水定容至1000毫升，彻底溶解，pH5.0-7.0，115℃灭菌15分钟，冷却至37℃以下备用。
(5)氯化钙固化液(C液)的配制：称取氯化钙40.0g，加入1000mL水，搅拌，彻底溶解，然后，115℃温度灭菌15分钟，冷却至25℃，此溶液为氯化钙固化液(C液)。
(6)将B液灌入注射器中，缓缓地滴入氯化钙固化液(C液)中，B液与氯化钙固化液(C液)的比例按1∶4，经2小时的固化，捞出载体球用无菌水洗涤两次，然后置于37℃密闭培养8-72小时。包装即可。
实施例二：
(1)将干酪乳杆菌试管斜面菌种，培养12-72小时，然后接入三角瓶液体培养基中培养，37℃培养20小时，再逐级进行扩大培养，然后再进行发酵罐发酵培养，37℃培养20小时，使发酵液中总菌数达到1.0×109/mL，此培养液作为种子液；
(2)将培养成熟的种子液，按2.0％加入灭菌冷却好的κ-卡拉胶固定化载体溶液(A液)中，彻底混合均匀制成(B液)。
(3)然后将固定化载体溶液(B液)滴入4％氯化钾(C液)中，使之凝固。凝固后的含有干酪乳杆菌的固定化载体用无菌水洗涤，然后置于37℃密闭培养20小时。
(4)固定化载体溶液(A液)的配制：称取κ-卡拉胶20.0克、蛋白胨5.0克、乳清粉5.0克、低聚麦芽糖10.0克、蜂蜜20.0克、牛肉膏5.0克、酵母膏2.0克、柠檬酸钠1.0克、醋酸钠1.0克、磷酸氢二钾1.0克、硫酸镁0.5克，浓度为10％的西红柿汁50mL、浓度为10％的胡萝卜汁50mL、5％大豆浸汁50mL、加水定容至1000毫升，彻底溶解，pH5.0-7.0，115℃灭菌15分钟，冷却至37℃以下备用。
(5)氯化钾固化液(C液)的配制：称取氯化钾40.0g，加入1000mL水，搅拌，彻底溶解，然后，115℃温度灭菌15分钟，冷却至25℃，此溶液为氯化钾固化液(C液)。
(6)将B液灌入注射器中，缓缓地滴入氯化钾固化液(C液)中，B液与氯化钾固化液(C液)的比例按1∶4，经2小时的固化，捞出载体球用无菌水洗涤两次，然后置于37℃密闭培养8-72小时。包装即可。
实施例三：
(1)将鼠李糖乳杆菌、嗜酸乳杆菌试管斜面菌种，培养12-72小时，然后分别接入三角瓶液体培养基中培养，37℃培养20小时，再逐级进行扩大培养，然后再进行发酵罐发酵培养，37℃培养20小时，使发酵液中总菌数达到1.0×109/mL，此培养液作为种子液，将两液等体积混合；
(2)将培养成熟的种子液，按2.0％加入灭菌冷却好的海藻酸钠、κ-卡拉胶固定化载体混合溶液(A液)中，彻底混合均匀制成(B液)。
(3)然后将固定化载体溶液(B液)滴入4％氯化钙、4％氯化钾(C液)混合液中，使之凝固。凝固后的含有干酪乳杆菌的固定化载体用无菌水洗涤，然后置于10℃-45℃密闭培养8-72小时。
(4)固定化载体溶液(A液)的配制：称取海藻酸钠30.0克、κ-卡拉胶20.0克、蛋白胨5.0克、乳清粉5.0克、低聚麦芽糖10.0克、蜂蜜20.0克、牛肉膏5.0克、酵母膏2.0克、柠檬酸钠1.0克、醋酸钠1.0克、磷酸氢二钾1.0克、硫酸镁0.5克，浓度为10％的西红柿汁50mL、浓度为10％的胡萝卜汁50mL、5％大豆浸汁50mL、加水定容至1000毫升，彻底溶解，pH5.0-7.0，115℃灭菌15分钟，冷却至37℃以下备用。
(5)氯化钙-氯化钾固化液(C液)的配制：称取氯化钙40.0克、氯化钾40.0克，加入1000mL水，搅拌，彻底溶解，然后，115℃温度灭菌15分钟，冷却至25℃，此溶液为氯化钙-氯化钾固化液(C液)。
(6)将B液灌入注射器中，缓缓地滴入氯化钙-氯化钾固化液(C液)中，B液与氯化钙-氯化钾固化液(C液)的比例按1∶4，经2小时的固化，捞出载体球用无菌水洗涤两次，然后置于37℃密闭培养8-72小时。包装即可。
Claims (3)
1.一种可食性固定化活性益生菌的生产方法，所述的益生菌包括：两歧双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种、青春双歧杆菌、长双歧杆菌、短双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌、植物乳杆菌和动物双歧杆菌，
步骤如下：
(1)首先分别培养试管斜面菌种，培养12-72小时，然后接入三角瓶液体培养基中进行分别培养或混合培养，20℃-45℃培养8-72小时，再逐级进行扩大培养，然后再进行发酵罐发酵培养，20℃-45℃培养8-72小时，使发酵液中益生菌总数达到1.0×104-1.0×109/mL，此培养液作为种子液；
(2)将培养成熟的种子液，按浓度为0.01％-20.0％加入灭菌冷却好的含有适合益生菌生长繁殖的固定化载体溶液A液中，彻底混合均匀制成固定化载体溶液B液；所述的A液配制方法，其特征在于：称取海藻酸钠0.1-200g、蛋白胨0.1-100.0克、乳清粉1.0-5.0克、低聚麦芽糖1.0-50.0克、蜂蜜1.0-50.0克、牛肉膏0.1-10.0克、酵母膏0.1-10.0克、柠檬酸钠0.1-10.0克、醋酸钠0.1-5.5克、磷酸氢二钾0.1-2.5克、硫酸镁0.01-0.75克，浓度为2.0％-25％的西红柿汁5-200mL、浓度为2.0％-25％的胡萝卜汁5-200mL、浓度为2.0％-25％大豆浸汁5-200mL、加水定容至1000毫升，彻底溶解，pH5.0-7.0，115℃灭菌15分钟，冷却至37℃以下备用；
(3)将含有益生菌种子的固定化载体溶液B液灌入制球机或注射器中，将B液缓缓地滴入固定化载体溶液C液中，以达到B液与C液为1∶1～1∶8的比例，经2～8小时的固化使之凝固，然后捞出载体球用无菌水洗涤两次，置于10℃-45℃密闭培养8-72小时；所述的C液的配制方法，其特征在于：称取氯化钙1.0-200.0g或氯化钾1.0-200.0g，加入1000mL水，搅拌，彻底溶解，115℃温度灭菌15分钟，冷却至10℃-35℃。
2.根据权利要求1所述的一种可食性固定化活性益生菌的生产方法，其特征在于所述的步骤(3)另一种方法是将固定化载体溶液B液放入容积为0.01cm3-1.0m3容器中，B液的深度0.1～10cm，然后将固定化载体溶液C液按1∶1～1∶8轻轻倒入B液中，经2～8小时的固化，固定化益生菌可制成球状、丝状、柱状、条状、块状或薄膜状。
3.根据权利要求1所述的一种可食性固定化活性益生菌的生产方法，其特征在于所述的步骤中海藻酸钠0.1-200g用卡拉胶0.1-200g或角叉菜0.1-200g替代。
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Cited By (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101914439A (zh) * | 2010-07-02 | 2010-12-15 | 大连百奥泰科技有限公司 | 用于油田微生物增产或环保的微生物菌剂的制备方法 |
| CN102077932A (zh) * | 2010-11-29 | 2011-06-01 | 哈尔滨美华生物技术股份有限公司 | 一种富含高活性肠道益生菌营养果冻的制作方法 |
| CN102178047A (zh) * | 2011-03-04 | 2011-09-14 | 广东天浩生物工程股份有限公司 | 一种微生态制剂及其制备方法 |
| CN102337231A (zh) * | 2010-07-28 | 2012-02-01 | 泰州市科星生物技术有限公司 | 一种发酵型健肠乳酪/粉的制造方法及其所应用的干酪乳杆菌 |
| CN102440375A (zh) * | 2010-09-30 | 2012-05-09 | 杜涵 | 一种儿童服用的益生菌及其制备方法 |
| CN105254424A (zh) * | 2015-10-26 | 2016-01-20 | 北京鑫鑫盛达生物工程技术有限公司 | 一种由枯草芽孢杆菌制备的微生物肥料及其制备方法 |
| CN106072265A (zh) * | 2016-07-04 | 2016-11-09 | 南京喜之郎食品有限公司 | 一种活性乳酸菌果冻及其制备方法 |
| CN106497821A (zh) * | 2016-09-20 | 2017-03-15 | 杭州益儒信息科技有限公司 | 一种食材用于益生菌培养的方法及其应用 |
| CN113367286A (zh) * | 2021-05-26 | 2021-09-10 | 西安国际医学生物技术有限公司 | 植物基原料复合发酵益生菌源液 |
| TWI755617B (zh) * | 2019-07-19 | 2022-02-21 | 國立高雄科技大學 | 益生菌組合物之製造方法及其用途 |
| CN116970512A (zh) * | 2023-05-11 | 2023-10-31 | 南昌大学第二附属医院 | 一种植物乳杆菌、植物乳杆菌的培养方法及其应用 |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN100360658C (zh) * | 2006-02-17 | 2008-01-09 | 哈尔滨美华生物技术股份有限公司 | 肠道微生态制剂及其制备方法 |
| CN1846716A (zh) * | 2006-05-12 | 2006-10-18 | 河北农业大学 | 一种功能性双歧杆菌微胶囊 |
| CN100469869C (zh) * | 2006-09-08 | 2009-03-18 | 哈尔滨美华生物技术股份有限公司 | 一种肠道益生菌包埋保护方法 |
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| CN101323850B (zh) * | 2008-07-28 | 2011-05-04 | 天津科技大学 | 瑞士乳杆菌微胶囊及其制备与应用 |
| CN101401638B (zh) * | 2008-10-17 | 2011-11-16 | 东北农业大学 | 一种食用菌合生元微胶囊的制备方法 |
-
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Cited By (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101914439A (zh) * | 2010-07-02 | 2010-12-15 | 大连百奥泰科技有限公司 | 用于油田微生物增产或环保的微生物菌剂的制备方法 |
| CN102337231A (zh) * | 2010-07-28 | 2012-02-01 | 泰州市科星生物技术有限公司 | 一种发酵型健肠乳酪/粉的制造方法及其所应用的干酪乳杆菌 |
| CN102440375A (zh) * | 2010-09-30 | 2012-05-09 | 杜涵 | 一种儿童服用的益生菌及其制备方法 |
| CN102077932A (zh) * | 2010-11-29 | 2011-06-01 | 哈尔滨美华生物技术股份有限公司 | 一种富含高活性肠道益生菌营养果冻的制作方法 |
| CN102178047A (zh) * | 2011-03-04 | 2011-09-14 | 广东天浩生物工程股份有限公司 | 一种微生态制剂及其制备方法 |
| CN105254424A (zh) * | 2015-10-26 | 2016-01-20 | 北京鑫鑫盛达生物工程技术有限公司 | 一种由枯草芽孢杆菌制备的微生物肥料及其制备方法 |
| CN106072265A (zh) * | 2016-07-04 | 2016-11-09 | 南京喜之郎食品有限公司 | 一种活性乳酸菌果冻及其制备方法 |
| CN106072265B (zh) * | 2016-07-04 | 2019-10-22 | 南京喜之郎食品有限公司 | 一种活性乳酸菌果冻及其制备方法 |
| CN106497821A (zh) * | 2016-09-20 | 2017-03-15 | 杭州益儒信息科技有限公司 | 一种食材用于益生菌培养的方法及其应用 |
| TWI755617B (zh) * | 2019-07-19 | 2022-02-21 | 國立高雄科技大學 | 益生菌組合物之製造方法及其用途 |
| CN113367286A (zh) * | 2021-05-26 | 2021-09-10 | 西安国际医学生物技术有限公司 | 植物基原料复合发酵益生菌源液 |
| CN116970512A (zh) * | 2023-05-11 | 2023-10-31 | 南昌大学第二附属医院 | 一种植物乳杆菌、植物乳杆菌的培养方法及其应用 |
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