CN101547922B

CN101547922B - 作为钙受体拮抗剂的吡啶并[4,3-d]嘧啶-4(3H)-酮衍生物

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Publication number: CN101547922B
Application number: CN2007800374756A
Authority: CN
Inventors: 毕峰; 玛丽·蒂瑞兹·迪丢科; 大卫·安德鲁·格里菲思; 安格尔·古兹曼-派瑞兹; 凯文·康-志·刘; 丹尼尔·帕特里克·沃克
Original assignee: Pfizer Products Inc
Current assignee: Pfizer Products Inc
Priority date: 2006-10-04
Filing date: 2007-09-26
Publication date: 2012-06-20
Anticipated expiration: 2027-09-26
Also published as: AR063122A1; US20080085887A1; CN101547922A; US20110028452A1; KR101129868B1; NO20091328L; AU2007303846A1; US7829572B2; EP2079739A2; CL2007002864A1; TW200822929A; HK1137753A1; IL197536A0; MX2009003673A; WO2008041118A2; AU2007303846B2; KR20090074066A; PE20081455A1; WO2008041118A3; CA2663436A1

Abstract

本发明涉及新颖的结构式I的吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮衍生物及其医药学上可接受的盐，其中变量R¹、R²、R³、R⁴及R⁵如说明书所述。本发明还提供包含式I化合物的医药组合物以及使用式I化合物治疗特征在于骨胳或矿物质体内平衡异常的疾病或病症的治疗方法，该疾病或病症诸如：副甲状腺机能减退症、骨质疏松症、骨质减少症、牙周病、佩吉特氏病、骨折、骨关节炎、类风湿性关节炎及恶性肿瘤的体液高钙血症。

Description

作为钙受体拮抗剂的吡啶并[4,3-d]嘧啶-4(3H)-酮衍生物

技术领域

本发明涉及新颖的吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮衍生物，含有该化合物的医药组合物，其使用方法及其制备方法。此类新颖的吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮衍生物能够抑制钙受体活性且因此充当钙受体拮抗剂。

背景技术

在哺乳动物体内，在健康哺乳动物体内血清钙浓度严格维持在约1.1mM至1.3 mM浓度的情况下，细胞外Ca²⁺处于严格的体内平衡控制下。细胞外Ca²⁺的体内平衡(homeostasis)依赖于Ca²⁺流量关于肠、肾及骨胳的综合调控而定。细胞外Ca²⁺调控多种过程，诸如血液凝固、神经及肌肉兴奋及正常骨胳体内平衡。当Ca²⁺血清浓度降低50％时，出现强直，且当Ca²⁺血清浓度增加50％时，意识模糊，在这两种情况下，均处于潜在生命危险境况中。细胞外Ca²⁺还抑制副甲状腺细胞分泌副甲状腺激素(PTH)，抑制破骨细胞的骨再吸收，刺激C-细胞分泌降钙素且涉及在肾脏中的再吸收及分泌。

细胞外钙感应受体(CaSR)为类激素受体，更具体为属于G蛋白耦合受体(GPCR)超家族的第3家族的质膜结合GPCR。GPCR超家族的第3家族包括代谢型谷氨酸受体(metabotropic glutamate receptor，mGluR)、γ-氨基丁酸B型受体(γ-aminobutyric acid B-type receptor，GABA_BR)以及假定信息素(putative pheromone)及味觉受体(taste receptor)。CaSR具有展示″捕蝇草″(Venus flytrap)拓扑的大细胞外域，即七个跨膜域及相对大的细胞质域。人类CaSR由1078个氨基酸组成且与牛CaSR具有93％的氨基酸同源性。CaSR感应细胞外Ca²⁺含量变化且由其活化。CaSR存在于某些特殊细胞上使得此类Ca²⁺感应细胞能够对细胞外Ca²⁺浓度变化起反应。Ca²⁺感应细胞的实例包括副甲状腺的副甲状腺分泌细胞、甲状腺的降钙素分泌C细胞及肾脏中的某些细胞。另外，已在包括肠、骨胳、骨髓、脑、皮肤、胰腺、肺及心脏的多种其他组织中发现CaSR。

副甲状腺主细胞表面上的CaSR为调控副甲状腺细胞分泌PTH的主要实体。细胞外Ca²⁺对副甲状腺主细胞上的CaSR的活化抑止PTH产生及分泌，抑制副甲状腺细胞增殖且可能抑制PTH基因表达。甲状腺的降钙素分泌C细胞表面上的CaSR调节高细胞外Ca²⁺浓度对降钙素分泌的刺激作用，从而增加Ca²⁺降低激素降钙素的循环含量。CaSR亦存在于肾脏中，沿大部分肾单位及存在于皮层厚升支中的底外侧表面。在皮层厚升支中的底外侧表面中，认为CaSR调节高Ca²⁺诱发的对Ca²⁺及镁的管式再吸收的抑制作用。1,25(OH)₂维生素D的肾皮层合成减少及伴随稀尿的多尿症部分地为肾单位中CaSR高钙血活化作用的结果。

PTH为调控血液及细胞外液中Ca²⁺体内平衡的主要内分泌激素。PTH通过作用于骨胳及肾脏细胞而增加血浆中的Ca²⁺含量。血浆Ca²⁺浓度的此增加随后充当负反馈信号，从而抑制PTH分泌。细胞外Ca²⁺与PTH分泌之间的互反关系形成维持身体Ca²⁺体内平衡的重要机制。已发现虽然PTH增加骨胳转换，但对骨胳的总体效应依赖于PTH循环含量的瞬时变化。如副甲状腺机能亢进症中所表现的，已发现循环血浆PTH含量的持续升高对骨胳产生纯分解代谢效应。相反，已发现通过每日或几乎每日注射外源激素所达成的血浆PTH含量的暂时性增加对骨胳展示纯合成代谢效应。PTH对骨胳的效应可能归因于PTH能够诱导钙自骨胳的快速释放且通过直接作用于骨母细胞且间接作用于破骨细胞来调节其他变化。PTH影响骨母细胞中的细胞代谢活性、离子转运、细胞形状、基因转录活性及蛋白酶的分泌。PTH亦刺激在破骨细胞分化及活性中发挥关键作用的蛋白质RANKL的产生。

已知多种化合物调节细胞外Ca²⁺对CaSR的效应。拟钙剂为充当CaSR异位调节剂的药剂，其增加CaSR对细胞外Ca²⁺活化的敏感性。钙阻滞剂(Calcilytic)或钙受体拮抗剂为充当CaSR调节剂的药剂，其抑制CaSR活性。对CaSR活性的此抑制作用导致一种或多种由细胞外Ca²⁺引发的CaSR活性降低。

诸如PCT国际公开案WO 02/059102中所公开的某些脲衍生物被描述为具有拟钙活性。另外，某些苯基烷基胺衍生物已被鉴定为拟钙剂。苯基烷基胺拟钙剂化合物包括(R)-N-(1-(3-甲氧基苯基)乙基)-3-苯基丙-1-胺盐酸盐(NPS-467)、(R)-3-(2-氯苯基)-N-(1-(3-甲氧基苯基)乙基)丙-1-胺盐酸盐(NPS R-568，特卡塞盐酸盐(tecalcet hydrochloride))及(R)-(-)-N-(1-(萘-1-基)乙基)-3-(3-(三氟甲基)苯基)丙-1-胺盐酸盐(NPS-1493，西那卡塞盐酸盐(cinacalcet hydrochloride))。西那卡塞盐酸盐及其用途公开于美国专利第6,011,068号、第6,031,003号、第6,211,244号及第6,313,146号中。西那卡塞盐酸盐分别以Sensipar

及Minpara

在美国及欧洲销售且注明用于经透析治疗罹患慢性肾病的患者的继发性副甲状腺机能亢进症及用于治疗罹患副甲状腺癌的患者的高钙血症。

钙阻滞剂或钙受体拮抗剂已描述于多个公开案中，诸如PCT国际公开案第WO 93/04373号；第WO 94/18959号；第WO 95/11211号；第WO97/37967号；第WO 98/44925号；第WO 98/45255号；第WO 99/51241号；第WO 99/51569号；第WO 00/45816号；第WO 02/14259号；第WO 02/38106号；第WO 2004/041755号及第WO 2005/030746号；Nemeth，E.F.；Journal of Molecular Endocrinology(2002)29，15-21；Kessler，A.等人；ChemBioChem(2004)5，1131；Steddon，S.J.等人；Lancet(2005)365，2237-2239及Shcherbakova，I.等人；Bioorganic&Medicinal ChemistryLetters(2005)15，1557-1560。

钙受体拮抗剂适用于治疗多种疾病状态，此类疾病状态的特征在于(例如)诸如激素、酶或生长因子的多肽的一种或多种组份的异常含量，该组份的表达及/或分泌受一种或多种CaSR的活性调控或影响。钙受体拮抗剂的靶疾病或病症包括涉及异常的骨胳及矿物质体内平衡的疾病。异常钙体内平衡的特征在于一种或多种以下活性：血清钙的异常增加或降低；尿钙排量的异常增加或降低；骨胳钙含量的异常增加或降低(例如，如骨胳矿物质密度测量所评定)；饮食钙的异常吸收；诸如PTH及降钙素的影响血清钙含量的信息产生及/或释放的异常增加或降低；及由影响血清钙含量的信使引发的反应的异常变化。

本发明的新颖钙受体拮抗剂适用于治疗与异常骨胳或矿物质体内平衡相关的疾病。因此，这类钙受体拮抗剂适用于治疗副甲状腺机能减退症、骨质疏松症、骨质减少症、牙周病、骨折、骨关节炎、类风湿性关节炎、佩吉特氏病(Paget′s disease)、与恶性肿瘤相关的体液高钙血症。

发明内容

本发明涉及钙受体拮抗剂化合物、含有此类钙受体拮抗剂化合物的医药组合物及使用此类钙受体拮抗剂化合物的治疗方法。

具体而言，本发明涉及结构式I的吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮衍生物的钙受体拮抗剂：

其中

R¹为-Q或(C₁-C₆)烷基-Q；

R²为(C₁-C₆)烷基、(C₃-C₇)环烷基、芳基或杂芳基；其中该芳基或杂芳基经羟基取代，且另外R²定义范围内的该(C₁-C₆)烷基、(C₃-C₇)环烷基、芳基或杂芳基可选地被1至3个独立地选自以下各基团的取代基取代：卤基、氰基、三氟甲基、三氟甲氧基、(C₁-C₆)烷基、(C₁-C₆)烷氧基或羟基；

R³为氢、(C₁-C₆)烷基、(C₃-C₇)环烷基、(C₁-C₆)烷基-Q、芳基、杂芳基、OR⁶或NR⁷R⁸；其中该(C₁-C₆)烷基、(C₃-C₇)环烷基、芳基或杂芳基可选地被1至3个独立地选自以下各基团的取代基取代：卤基、氰基、三氟甲基、三氟甲氧基、(C₁-C₆)烷基、(C₁-C₆)烷氧基、NR⁷R⁸或羟基；

R⁴及R⁵各自独立地为氢、卤基、氰基、可选地被1至3个氟基取代的(C₁-C₆)烷基、芳基、杂芳基或OR⁶；

R⁶在每次出现时独立地为(C₁-C₆)烷基、(C₃-C₇)环烷基、(C₃-C₇)环烷基-(C₁-C₆)烷基、芳基、杂芳基、(C₁-C₆)烷基芳基或(C₁-C₆)烷基杂芳基；该(C₁-C₆)烷基、(C₃-C₇)环烷基、(C₃-C₇)环烷基-(C₁-C₆)烷基、芳基、杂芳基、(C₁-C₆)烷基芳基或(C₁-C₆)烷基杂芳基各自可选地被1至3个独立地选自卤基、羟基或(C₁-C₃)烷基的取代基取代；

R⁷及R⁸在每次出现时独立地为氢、(C₁-C₆)烷基或(C₃-C₇)环烷基；或R⁷及R⁸连同它们所连接的氮一起形成可选地含有1至2个独立地选自N(R⁹)_n、O或S(O)_p的其他杂原子的3至7元完全饱和、部分饱和或完全不饱和环；

n为0或1；

p为0、1或2；

R⁹为氢或(C₁-C₆)烷基；

Q在每次出现时独立地为芳基或杂芳基；其中该芳基或杂芳基可选地被1至3个独立地选自以下各基团的取代基取代：卤基、氰基、三氟甲基、三氟甲氧基、(C₁-C₆)烷基、(C₁-C₆)烷氧基或羟基；

或其医药学上可接受的盐。

″卤基″指氟基、氯基、溴基或碘基。

″(C₁-C₆)烷基″指具有1至6个经碳碳单键连接在一起的碳原子的烃基团。(C₁-C₆)烷基可为直链或含有一或多个支链且可未经取代或如所说明经取代。(C₁-C₆)烷基的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、(1-甲基)丁基、(2-甲基)丁基、(3-甲基)丁基、(1，2-二甲基)丙基、正己基、(1-甲基)戊基、(2-甲基)戊基、(3-甲基)戊基、(4-甲基)戊基、(1-乙基)丁基、(2-乙基)丁基、(1，2-二甲基)丁基、(1，3-二甲基)丁基、(2，3-二甲基)丁基及其类似基团。

″(C₁-C₆)烷氧基″指与(C₁-C₆)烷基连接的氧。(C₁-C₆)烷氧基部分中的(C₁-C₆)烷基可为直链或含有一或多个支链且可未经取代或如所说明经取代。(C₁-C₆)烷氧基的实例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基及其类似基团。同样，诸如″(C₁-C₃)烷基″或″(C₁-C₃)烷氧基″之类的具有不同长度的烷基或烷氧基以相同方式定义但受所指定的碳数目限制。

″(C₃-C₇)环烷基″指具有3至7个碳的饱和碳环基且涵盖环丙基、环丁基、环戊基、环己基及环庚基。(C₃-C₇)环烷基可未经取代或如所说明经取代。

″芳基″指具有至少一个带有共轭π电子***的环的6至16元碳环芳族基团。芳基可具有共轭或稠合环且可未经取代或如所说明经取代。芳基的实例包括苯基、萘基、蒽基、菲基、薁基(azulenyl)及联苯基。

″杂芳基″指具有至少一个带有共轭π电子***的环且含有1至4个诸如N、O或S的杂原子的5至16元芳族基团。杂芳基可具有共轭或稠合环且可未经取代或如所说明经取代。杂芳基的实例包括噻吩基、呋喃基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、恶唑基、异恶唑基、噻唑基、异噻唑基、***基、恶二唑基、噻二唑基、四唑基、吡啶基、吡啶嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、吲哚基、异吲哚基、吲嗪基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、嘌呤基、喹嗪基、喹啉基、异喹啉基、噌啉基、呔嗪基、喹唑啉基、喹喏啉基、萘啶基、喋啶基、咔唑基、吖啶基、啡嗪基、啡噻嗪基或啡恶嗪基。

附图说明

图1为描绘正常大鼠体内自静脉内注射1mg/kg实例1的化合物2-(2-羟基-苯基)-3-苯乙基-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮)之时至静脉内注射后480分钟的血浆PTH含量的曲线图。

具体实施方式

本发明提供结构式I的新颖吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮衍生物及其医药学上可接受的盐：

其中变量R¹、R²、R³、R⁴及R⁵如上文所述。式I化合物的医药学上可接受的盐包括其酸加成盐及碱盐(包括二盐)。

合适的酸加成盐由形成无毒盐的酸形成。实例包括乙酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、碳酸氢盐/碳酸盐、硫酸氢盐/硫酸盐、硼酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、乙二磺酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、反丁烯二酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、葡萄糖醛酸盐、六氟磷酸盐、苯扎盐、盐酸盐/氯化物、氢溴酸盐/溴化物、氢碘酸盐/碘化物、羟乙磺酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、顺丁烯二酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、甲基硫酸盐、萘酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、乳清酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、磷酸盐/磷酸氢盐/磷酸二氢盐、蔗糖酸盐、硬脂酸盐、丁二酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐及三氟乙酸盐。

合适的碱盐由形成无毒盐的碱形成。实例包括铝、精氨酸、苄星(benzathine)、钙、胆碱、二乙胺、二醇胺、甘氨酸、赖氨酸、镁、葡甲胺、醇胺、钾、钠、缓血酸胺及锌的盐。合适盐的综述参见Stahl及Wermuth的″Handbook of Pharmaceutical Salts：Properties，Selection，and Use″(Wiley-VCH，Weinheim，Germany，2002)。

式I化合物的医药学上可接受的盐可易于通过将式I化合物的溶液适当地与所需酸或碱混合在一起来制备。盐可自溶液沉淀且通过过滤收集或可通过蒸发溶剂回收。盐的电离度可自完全电离至几乎未电离变化。

本发明的化合物包括如上文所定义的式I化合物、如下文所定义的其多晶型物及异构体(包括光学异构体、几何异构体及互变异构体)及经同位素标记的式I化合物。

本发明的化合物可以前药形式给药。因此，自身可能具有极小或不具有药理学活性的式I化合物的某些衍生物在投与体内或体表时可(例如)通过水解裂解而转化为具有所需活性的式I化合物。此类衍生物称为′前药′。使用前药的其他信息可见于′Pro-drugs as Novel Delivery Systems，第14卷，ACS Symposium Series(T Higuchi及W Stella)及′BioreversibleCarriers in Drug Design′，Pergamon Press，1987(E B Roche编，American Pharmaceutical Association)。

例如，前药可通过用如(例如)H Bundgaard的″Design of Prodrugs″(Elsevier，1985)中所述的′promoieties′的本领域技术人员已知的某些片段置换式I化合物中所存在的适当官能基来制备。

此类前药的一些实例包括：

(i)当式I化合物含有羧酸官能基(-COOH)时，它的酯，例如用(C₁-C₈)烷基置换氢；

(ii)当式I化合物含有醇官能基(-OH)时，它的醚，例如用(C₁-C₆)烷酰氧基甲基置换氢；及

(iii)当式I化合物含有一级或二级胺基官能基(-NH₂或-NHR，其中R不为H)时，它的酰胺，例如用(C₁-C₁₀)烷酰基置换一或两个氢。根据上述实例及其他前药类型的实例的置换基团的其他实例可见于上述参考文献中。最后，某些式I化合物自身可充当其他式I化合物的前药。

含有一或多个不对称碳原子的式I化合物可以两种或两种以上立体异构体形式存在。当式I化合物含有烯基或亚烯基时，可能为几何顺/反(或Z/E)异构体。当化合物含有(例如)酮或肟基团或芳族部分时，可出现互变异构现象(tautomeric isomerism，′tautomerism′)。由此可见单一化合物可表现出一种以上类型的异构现象。

在所要求保护的式I化合物的范畴内包括式I化合物的所有立体异构体、几何异构体及互变异构形式，包括展示一种以上类型的异构现象的化合物及其一种或多种的混合物。亦包括酸加成盐或碱盐，其中抗衡离子具有光学活性，例如D-乳酸盐或L-赖氨酸；或具有外消旋形式，例如DL-酒石酸盐或DL-精氨酸。顺/反异构体可通过例如层析法及分步结晶法的本领域技术人员熟知的公知技术而分离。制备/分离个别对映异构体的公知技术包括由合适光学纯前驱体的手性合成或使用(例如)手性高压液相色谱(HPLC)拆分外消旋体(或盐或衍生物的外消旋体)。

或者，可使外消旋体(或外消旋前驱体)与合适光学活性化合物反应，光学活性化合物(例如)为醇或在式(I)化合物含有酸性或碱性部分的情况下为诸如酒石酸或1-苯基乙胺的酸或碱。所得非对映异构体混合物可由层析及/或分步结晶法分离且可由本领域技术人员熟知的方式将一或两种非对映异构体转化为相应的纯对映异构体。本发明的手性化合物(及其手性前驱体)可使用层析法(通常为HPLC)在不对称树脂上用由含有0至50％、通常2％至20％异丙醇及0至5％烷基胺、通常为0.1％二乙胺的烃(通常为庚烷或己烷)组成的移动相以对映异构富集形式获得。浓缩洗脱液提供富集混合物。立体异构体的混合物可由本领域技术人员已知的公知技术分离。[参见，例如E L Eliel的″Stereochemistry of Organic Compounds″(Wiley，New York，1994)]。

本发明包括所有医药学上可接受的经同位素标记的式I化合物，其中一或多个原子经具有相同原子序数，但具有与自然界中通常可见的原子质量或质量数不同的原子质量或质量数的原子置换。

适于包括在本发明化合物中的同位素的实例包括氢同位素，诸如²H及³H；碳同位素，诸如¹¹C、¹³C及¹⁴C；氯同位素，诸如³⁶Cl；氟同位素，诸如¹⁸F；碘同位素，诸如¹²³I及¹²⁵I；氮同位素，诸如¹³N及¹⁵N；氧同位素，诸如¹⁵O、¹⁷O及¹⁸O；磷同位素，诸如³²P；及硫同位素，诸如³⁵S。例如含有放射性同位素的某些经同位素标记的式I化合物适用于药物及/或受质组织分布研究。鉴于放射性同位素氚(即³H)及碳14(即¹⁴C)的引入较容易且检测方便，其尤其适用于此目的。经诸如氘(即²H)的更重同位素取代可提供某些由更高代谢稳定性而产生的治疗优势，例如，增加活体内半衰期或降低剂量需求，且因此其在某些情况下是优选的。经诸如¹¹C、¹⁸F、¹⁵O及¹³N的正电子发射同位素取代可适用于检查底物受体占有率的正电子发射断层扫描(Positron Emission Topography)(PET)研究。经同位素标记的式(I)化合物通常可由本领域技术人员已知的公知技术或由类似于后附实例及制备例中所述方法的方法使用适当的经同位素标记的试剂代替先前所使用的未经标记试剂来制备。

本发明的优选实施方式为如上文所述的式I化合物，其中R²为芳基或杂芳基，其中该芳基或杂芳基经羟基取代且可选地被1至3个独立地选自(C₁-C₆)烷氧基或卤基的取代基取代；或其医药学上可接受的盐。本发明的另一优选实施方式为式I化合物，其中R²为2-羟基-苯基或3-羟基-吡啶-2-基，其中该2-羟基-苯基或3-羟基-吡啶-2-基可选地被1至2个独立地选自(C₁-C₆)烷氧基或氟基的取代基取代；或其医药学上可接受的盐。本发明的又一优选实施方式为如上文所述的式I化合物，其中R¹为(C₁-C₆)烷基-Q；且Q为可选地被1或2个氟基取代的苯基；或其医药学上可接受的盐。

本发明的另一优选实施方式为式I化合物，其中R¹为苯乙基或1-甲基-2-(苯基)乙基，其中该苯乙基或1-甲基-2-(苯基)乙基可选地在苯基上经1或2个卤基取代；且R²为2-羟基-苯基或3-羟基-吡啶-2-基，其中该2-羟基-苯基或3-羟基-吡啶-2-基可选地被1或2个独立地选自(C₁-C₃)烷基或卤基的取代基取代；或其医药学上可接受的盐。

本发明的另一优选实施方式为式I化合物，其中R¹为苯乙基或1-甲基-2-(苯基)乙基，其中该苯乙基或1-甲基-2-(苯基)乙基可选地在苯基上经1或2个卤基取代；且R²为2-羟基-苯基或3-羟基-吡啶-2-基，其中该2-羟基-苯基或3-羟基-吡啶-2-基可选地被1或2个独立地选自(C₁-C₃)烷基或卤基的取代基取代；R³为(C₁-C₆)烷基、(C₁-C₆)烷基-Q、芳基、杂芳基、OR⁶或NR⁷R⁸，其中该(C₁-C₆)烷基、芳基或杂芳基可选地被1至3个独立地选自以下各基团的取代基取代：卤基、氰基、三氟甲基、三氟甲氧基、(C₁-C₆)烷基、(C₁-C₆)烷氧基、NR⁷R⁸或羟基；且R⁴及R⁵各自为氢；或其医药学上可接受的盐。

本发明的另一优选实施方式为式I化合物，其中R¹为苯乙基或1-甲基-2-(苯基)乙基，其中该苯乙基或1-甲基-2-(苯基)乙基可选地在苯基上经1或2个卤基取代；R²为2-羟基-苯基或3-羟基-吡啶-2-基，其中该2-羟基-苯基或3-羟基-吡啶-2-基可选地被1或2个独立地选自(C₁-C₃)烷基或卤基的取代基取代；R³为三氟甲基；且R⁴及R⁵各自为氢；或其医药学上可接受的盐。

本发明的另一优选实施方式为式I化合物，其中R¹为苯乙基或1-甲基-2-(苯基)乙基，其中该苯乙基或1-甲基-2-(苯基)乙基可选地在苯基上经1或2个卤基取代；且R²为2-羟基-苯基或3-羟基-吡啶-2-基，其中该2-羟基-苯基或3-羟基-吡啶-2-基可选地被1或2个独立地选自(C₁-C₃)烷基或卤基的取代基取代；R³为(C₁-C₆)烷基；且R⁴及R⁵各自为氢；或其医药学上可接受的盐。

本发明的另一优选实施方式为式I化合物，其中R¹为苯乙基或1-甲基-2-(苯基)乙基，其中该苯乙基或1-甲基-2-(苯基)乙基可选地在苯基上经1或2个卤基取代；且R²为2-羟基-苯基或3-羟基-吡啶-2-基，其中该2-羟基-苯基或3-羟基-吡啶-2-基可选地被1或2个独立地选自(C₁-C₃)烷基或卤基的取代基取代；R³为(C₁-C₆)烷基-Q；且R⁴及R⁵各自为氢；或其医药学上可接受的盐。

本发明的另一优选实施方式为式I化合物，其中R¹为苯乙基或1-甲基-2-(苯基)乙基，其中该苯乙基或1-甲基-2-(苯基)乙基可选地在苯基上经1或2个卤基取代；且R²为2-羟基-苯基或3-羟基-吡啶-2-基，其中该2-羟基-苯基或3-羟基-吡啶-2-基可选地被1或2个独立地选自(C₁-C₃)烷基或卤基的取代基取代；R³为芳基，其中该芳基可选地被1至3个独立地选自以下各基团的取代基取代：卤基、氰基、三氟甲基、三氟甲氧基、(C₁-C₆)烷基、(C₁-C₆)烷氧基、NR⁷R⁸或羟基；且R⁴及R⁵各自为氢；或其医药学上可接受的盐。

本发明的另一优选实施方式为式I化合物，其中R¹为苯乙基或1-甲基-2-(苯基)乙基，其中该苯乙基或1-甲基-2-(苯基)乙基可选地在苯基上经1或2个卤基取代；且R²为2-羟基-苯基或3-羟基-吡啶-2-基，其中该2-羟基-苯基或3-羟基-吡啶-2-基可选地被1或2个独立地选自(C₁-C₃)烷基或卤基的取代基取代；R³为杂芳基；其中该杂芳基可选地被1至3个独立地选自以下各基团的取代基取代：卤基、氰基、三氟甲基、三氟甲氧基、(C₁-C₆)烷基、(C₁-C₆)烷氧基、NR⁷R⁸或羟基；且R⁴及R⁵各自为氢；或其医药学上可接受的盐。

本发明的另一优选实施方式为式I化合物，其中R¹为苯乙基或1-甲基-2-(苯基)乙基，其中该苯乙基或1-甲基-2-(苯基)乙基可选地在苯基上经1或2个卤基取代；且R²为2-羟基-苯基或3-羟基-吡啶-2-基，其中该2-羟基-苯基或3-羟基-吡啶-2-基可选地被1或2个独立地选自(C₁-C₃)烷基或卤基的取代基取代；R³为OR⁶；且R⁴及R⁵各自为氢；或其医药学上可接受的盐。

本发明的另一优选实施方式为式I化合物，其中R¹为苯乙基或1-甲基-2-(苯基)乙基，其中该苯乙基或1-甲基-2-(苯基)乙基可选地在苯基上经1或2个卤基取代；且R²为2-羟基-苯基或3-羟基-吡啶-2-基，其中该2-羟基-苯基或3-羟基-吡啶-2-基可选地被1或2个独立地选自(C₁-C₃)烷基或卤基的取代基取代；R³为NR⁷R⁸；且R⁴及R⁵各自为氢；或其医药学上可接受的盐。

本发明的一优选实施方式为式I化合物，其中R³为三氟甲基；或其医药学上可接受的盐。本发明的另一优选实施方式为式I化合物，其中R³为三氟甲基；且R⁴及R⁵各自独立地为氢或甲基；或其医药学上可接受的盐。本发明的又一优选实施方式为式I化合物，其中R²为芳基或杂芳基，其中该芳基或杂芳基经羟基取代且可选地被1至3个独立地选自(C₁-C₃)烷基、(C₁-C₃)烷氧基或氟基的取代基取代；R³为三氟甲基；且R⁴及R⁵各自独立地为氢或甲基；或其医药学上可接受的盐。本发明的又一优选实施方式为式I化合物，其中R²为羟基-苯基或羟基-吡啶基，其中该羟基-苯基或羟基-吡啶基可选地被1至3个独立地选自甲基、甲氧基或氟基的取代基取代；R³为三氟甲基；且R⁴及R⁵各自独立地为氢或甲基；或其医药学上可接受的盐。

本发明的另一优选实施方式为式I化合物，其中R¹为(C₁-C₆)烷基-Q；Q为可选地被1或2个独立地选自氟基、甲基或甲氧基的取代基取代的苯基；R²为羟基-苯基或羟基-吡啶基，其中该羟基-苯基或羟基-吡啶基可选地被1至3个独立地选自甲基、甲氧基或氟基的取代基取代；R³为三氟甲基；且R⁴及R⁵各自独立地为氢或甲基；或其医药学上可接受的盐。本发明的又一优选实施方式为式I化合物，其中R¹为苯乙基或1-甲基-2-(苯基)乙基，其中该苯乙基或1-甲基-2-(苯基)乙基可选地在苯基上经1或2个氟基取代；R³为三氟甲基；且R⁴及R⁵各自独立地为氢或甲基；或其医药学上可接受的盐。

本发明的另一优选实施方式为式I化合物，其中R¹为苯乙基或1-甲基-2-(苯基)乙基，其中该苯乙基或1-甲基-2-(苯基)乙基可选地在苯基上经1或2个卤基取代；R²为羟基-苯基或羟基-吡啶基，其中该羟基-苯基或羟基-吡啶基可选地被1或2个独立地选自(C₁-C₃)烷基或卤基的取代基取代；R³为三氟甲基；且R⁴及R⁵各自独立地为氢或甲基；或其医药学上可接受的盐。

本发明的另一优选实施方式为式I化合物，其中R¹为苯乙基或1-甲基-2-(苯基)乙基，其中该苯乙基或1-甲基-2-(苯基)乙基可选地在苯基上经1或2个独立地选自卤基、(C₁-C₃)烷基或(C₁-C₃)烷氧基的取代基取代；R²为2-羟基-苯基或3-羟基-吡啶-2-基，其中该2-羟基-苯基或3-羟基-吡啶-2-基可选地被1或2个独立地选自(C₁-C₃)烷基或卤基的取代基取代；R³为(C₁-C₆)烷基、(C₃-C₇)环烷基、(C₁-C₆)烷基-Q、芳基、杂芳基或OR⁶；其中该(C₁-C₆)烷基、(C₃-C₇)环烷基、芳基或杂芳基可选地被1至3个独立地选自以下各基团的取代基取代：氟基、氰基、三氟甲基、三氟甲氧基、(C₁-C₃)烷基、(C₁-C₃)烷氧基、NR⁷R⁸或羟基；且R⁴及R⁵各自独立地为氢或甲基；或其医药学上可接受的盐。

本发明的另一优选实施方式为选自由以下各物组成的组的化合物：

2-(2-羟基-苯基)-3-苯乙基-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

2-(3-氟-2-羟基-苯基)-3-苯乙基-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

2-(3-羟基-吡啶-2-基)-3-苯乙基-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

(R)-2-(2-羟基-苯基)-3-(1-甲基-2-苯基-乙基)-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

(S)-2-(2-羟基-苯基)-3-(1-甲基-2-苯基-乙基)-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

(R)-2-(3-羟基-吡啶-2-基)-3-(1-甲基-2-苯基-乙基)-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

(R，S)-2-(3-羟基-吡啶-2-基)-3-(1-甲基-2-(2-氟苯基)乙基)-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

(R)-2-(3-羟基-吡啶-2-基)-3-(1-甲基-2-(2-氟苯基)乙基)-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

(S)-2-(3-羟基-吡啶-2-基)-3-(1-甲基-2-(2-氟苯基)乙基)-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

2-(2-羟苯基)-3-(2-氟苯基)乙基)-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

2-(2-羟苯基)-3-(3-氟苯基)乙基)-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

2-(3-氟-2-羟基-苯基)-3-[2-(2-氟-苯基)-乙基]-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

2-(2-羟基-苯基)-7-甲基-3-(苯基-乙基)-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

2-(3-氟-2-羟基-苯基)-3-[2-(3-氟-苯基)-乙基]-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

3-[2-(2-氟-苯基)-乙基]-2-(3-羟基-吡啶-2-基)-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

3-[2-(3，4-二氟-苯基)-乙基]-2-(3-羟基-吡啶-2-基)-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

3-[2-(2，4-二氟-苯基)-乙基]-2-(3-羟基-吡啶-2-基)-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

2-(2-羟基-苯基)-5-甲基氨基-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

2-(2-羟基-苯基)-5-异丙基氨基-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

2-(2-羟基-苯基)-3-苯乙基-5-吡咯烷-1-基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

2-(2-羟基-苯基)-5-(4-甲基-哌嗪-1-基)-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

2-(2-羟基-苯基)-3-苯乙基-5-哌嗪-1-基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

5-二甲基氨基-2-(2-羟基-苯基)-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

2-(2-羟基-苯基)-5-吗啉-4-基-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

5-吖丁啶-1-基-2-(2-羟基-苯基)-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d-嘧啶-4-酮；

2-(2-羟基-苯基)-3-苯乙基-5-苯基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

5-苄基-2-(2-羟基-苯基)-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

2-(2-羟基-苯基)-5-甲基-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

5-(6-二甲基氨基-吡啶-3-基)-2-(2-羟基-苯基)-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

5-(6-二甲基氨基-5-甲基-吡啶-3-基)-2-(2-羟基-苯基)-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

5-(6-吡咯烷-5-吡啶-3-基)-2-(2-羟基-苯基)-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

2-(2-羟基-苯基)-5-甲氧基-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

2-(2-羟基-苯基)-5-(1-甲基-环丙基甲氧基)-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

2-(2-羟基-苯基)-3-苯乙基-5-丙氧基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

5-环丁氧基-2-(2-羟基-苯基)-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

2-(2-羟基-苯基)-5-异丁氧基-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

2-(2-羟基-苯基)-5-异丙氧基-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

2-(2-羟基-苯基)-3-苯乙基-5-(2，2，2-三氟乙氧基)-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

3-(1-(3，4-二氟苯基)丙-2-基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

(R)-3-(1-(3，4-二氟苯基)丙-2-基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

(S)-3-(1-(3，4-二氟苯基)丙-2-基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

3-(1-(2，4-二氟苯基)丙-2-基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

3-(2-甲氧基苯乙基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

3-(2，3-二氟苯乙基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

3-(5-氟-2-甲氧基苯乙基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

3-(2-氟-6-甲氧基苯乙基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

2-(3-羟基吡啶-2-基)-3-(1-(2-甲氧基苯基)丙-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

3-(1-(2-氟苯基)丁-2-基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

3-(3-氟-2-甲氧基苯乙基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

3-(2-环戊基乙基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

3-(2-环己基乙基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

(R)-3-(1-环己基丙-2-基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

(S)-3-(1-环己基丙-2-基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

(R，S)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-3-(2-(四氢-2H-吡喃-2-基)乙基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

(R)-2-(3-氟-2-羟苯基)-3-(1-苯基丙-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

(R)-2-(1H-咪唑-2-基)-3-(1-苯基丙-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

N-(2-(3-(2-氟苯乙基)-4-氧代-5-(三氟甲基)-3，4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2-基)吡啶-3-基)乙酰胺；

(R)-3-(1-苯基丙-2-基)-2-(噻唑-4-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

3-苯乙基-2-(噻唑-4-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

3-(2-甲氧基苯乙基)-2-(2-羟苯基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

3-(2-氟苯乙基)-2-(噻唑-4-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

(R)-2-环戊基-3-(1-苯基丙-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

2-异丙基-3-苯乙基-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

2-环戊基-3-苯乙基-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

3-(2-甲氧基苯乙基)-2-(噻唑-4-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

3-(2-环己基乙基)-2-(噻唑-4-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

2-(3-(2-环己基乙基)-4-氧代-5-(三氟甲基)-3，4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2-基)苯甲腈；

2-(3-氨基吡啶-2-基)-3-苯乙基-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

N-(2-(4-氧代-3-苯乙基-5-(三氟甲基)-3，4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2-基)吡啶-3-基)甲烷磺酰胺；

3-(1-(2-氟苯基)丙-2-基)-2-(噻唑-4-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

2-(3-羟基吡啶-2-基)-3-异戊基-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

2-(3-羟基吡啶-2-基)-3-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

2-(3-羟基吡啶-2-基)-3-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

3-(2-氟-5-甲氧基苯乙基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

3-(2-氟-3-甲氧基苯乙基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

2-(3-(2-氟苯乙基)-4-氧代-5-(三氟甲基)-3，4-二氢喹唑啉-2-基)苯甲腈；

N-(2-(3-(2-氟苯乙基)-4-氧代-5-(三氟甲基)-3，4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2-基)吡啶-3-基)-2，2，2-三氟乙酰胺；

(R)-2，2，2-三氟-N-(2-(4-氧代-3-(1-苯基丙-2-基)-5-(三氟甲基)-3，4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2-基)吡啶-3-基)乙酰胺；

3-环己基-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

3-(环己基甲基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

3-苯乙基-5-三氟甲基-2-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮；

2-(5-氨基噻唑-4-基)-3-苯乙基-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

2-(2-(二氟甲基)苯基)-3-苯乙基-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

2-(3-(二氟甲基)吡啶-2-基)-3-苯乙基-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

3-(2-环己基乙基)-5-(三氟甲基)-2-(2-(三氟甲基)苯基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；及

3-(2-环己基乙基)-5-(三氟甲基)-2-(3-(三氟甲基)吡啶-2-基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

或其医药学上可接受的盐。

本发明的另一实施方式为一种医药组合物，其包含如上文前述任意一种实施方式中所述的式I化合物及医药学上可接受的载剂、佐剂或稀释剂。

本发明的另一实施方式为新颖中间化合物4-氨基-2-(三氟甲基)烟酸或4-氨基-2-氯烟酸；或其医药学上可接受的盐。

本发明的另一实施方式为一种治疗以异常的骨胳或矿物质体内平衡为特征的疾病或病症的方法，其包含向需要该治疗的患者投与治疗有效量的如上文前述任一实施方式中所述的式I化合物。本发明的一优选实施方式为根据前述实施方式的方法，其中以异常的骨胳或矿物质体内平衡为特征的疾病或病症选自由以下各病组成的组：骨质疏松症、骨质减少症、牙周病、佩吉特氏病、骨折、骨关节炎、类风湿性关节炎及恶性肿瘤之体液高钙血症。又一优选实施方式为根据前述实施方式的方法，其中以异常的骨胳或矿物质体内平衡为特征的疾病或病症为骨质疏松症。

以下反应流程(即反应流程I-IV)描绘了式I化合物的合成方法。在以下制备式I化合物的一般方法中，除非另有说明，变量R¹、R²、R³、R⁴及R⁵如之前对式I化合物所定义。本文所述的反应流程意欲提供用于制备给定的诸多实例的方法学的一般描述。然而，由实验部分中所给的详细描述将显而易见，所使用的制备模式与本文所述的一般程序相比进一步扩展。特别地，应注意根据该流程所制备的化合物可经进一步改性以提供本发明范畴内的新颖实例。以下实例中所用的试剂及中间产物可自市面上购得或可根据标准文献程序由熟习有机合成的技术人员制备。

下文的反应流程I描绘适用于制备式I化合物的式V中间产物的合成。在约-65℃至-78℃下，在诸如THF的适当溶剂中用诸如二异丙基乙基酰胺锂的适当碱处理适当经取代的式IX吡啶，接着添加CO₂且经处理后酸化，提供相应的式VIII烟酸。用诸如正丁基锂及2，2，6，6-四甲基哌啶锂(LiTMP)的适当碱处理适当经取代的式VIII烟酸，接着用诸如六氯乙烷的适当卤素源捕集，且接着用(例如)重氮甲烷酯化，提供相应的式VII氯化吡啶酯。随后，通常在40℃至50℃下，在诸如DMF的适当溶剂中用诸如叠氮化合物阴离子(即叠氮化钠)的适当氮源处理氯化吡啶酯VII历时1至24小时以提供式VI的叠氮基吡啶酯[参看：Kiyama，Chem.Pharm.Bull.1995，43，450.]。可使用多种现有技术已知的程序使式VI化合物中的叠氮基还原为相应胺，此类程序诸如催化氢化，在环境温度下用氢碘酸水溶液处理或用三苯膦处理。随后可在40℃至100℃、较佳约85℃的温度下以多种方式，诸如于诸如二氧杂环己烷∶MeOH∶水(3∶2∶1)的适当溶剂中的氢氧化锂水溶液，进行酯的皂化历时1至24小时以提供相应的式V烟酸。应了解，式IX、VIII、VII、VI及V化合物中的基团R³可具有如对式I化合物中的基团R³所定义的相同含义，或者可为可转化为如对式I化合物所定义的基团R³的官能基。举例而言，式IX、VIII、VII、VI及V中的R³可为卤基，诸如氯基，其随后可(例如)如下文的反应流程VI所示进一步转化为如对式I化合物所定义的基团R³。

反应流程I

下文的反应流程II描绘式I化合物的制备。通过使相应式V的酸与多种通式R¹NH₂的一级胺在标准酰胺偶合条件下反应4至24小时之间之时期来制备式IV化合物。在介于55℃至100℃之间、通常80℃的温度下，在催化量的诸如对甲苯磺酸的酸存在下，在诸如乙腈或甲苯的合适反应惰性溶剂中通过使式IV化合物与适当醛R²′CHO反应1至24小时之间的时期来制备式III化合物。式R²′CHO醛中的R²′部分为其中通常存在受保护羟基的部分，诸如甲氧基或苄氧基，其接着可经去保护为式I化合物的基团R²中所存在的游离羟基。随后，在介于20℃至50℃之间、通常环境温度的温度下，用诸如高锰酸钾的氧化剂在诸如丙酮的极性溶剂中处理式III化合物以在1至24小时的时期后提供式II化合物。可通过标准去保护条件使含有诸如合适甲基醚部分或苄氧基部分之受保护羟基的式II化合物转化为游离羟基(诸如酚性羟基)。

反应流程II

在本文所述的反应流程中，应了解适用于制备式I化合物的中间产物中的羟基可由本领域技术人员已知的其他公知保护基保护。举例而言，含有羟基的中间产物可经保护成为相应的苄氧基醚，且接着通过氢化去保护以提供游离羟基衍生物。合适的保护基团及其移除方法说明于ProtectiveGroups in Organic Synthesis，第3版，Theodora W.Greene及Peter G.M.Wuts(John Wiley&Sons，1999)中。举例而言，在式II化合物含有合适甲基醚部分的情况下，在介于-78℃至10℃之间的温度下，将式II化合物溶解于诸如二氯甲烷的合适溶剂中，接着添加三氯化硼或三溴化硼。将反应混合物在10℃至50℃下搅拌1至24小时以提供所需的去保护式I化合物。类似地，可通过氢化，诸如在环境温度下使用甲醇作为溶剂进行的H-cube氢化(Pd/C滤筒)使含有合适苄氧基部分的式II化合物去保护以提供式I化合物。

反应流程III

反应流程III描绘通过使相应式Va的酸与多种通式R¹NH₂的一级胺在标准酰胺偶合条件下反应4至24小时之间之时期来制备式IVa化合物。可在介于55℃至100℃之间、通常80℃的温度下，在催化量的诸如对甲苯磺酸的酸存在下，在诸如乙腈或甲苯的合适反应惰性溶剂中通过使式IVa化合物与适当醛R²′CHO反应1至24小时之间的时期来制备式IIIa化合物。式R²′CHO醛中的R²′片段为其中羟基通常受保护的片段，诸如甲氧基或苄氧基，其接着可经去保护为式I化合物的基团R²中所存在的游离羟基。随后，在介于20℃至50℃之间、通常为环境温度的温度下，用诸如高锰酸钾的氧化剂在诸如丙酮的极性溶剂中处理式IIIa化合物以在1至24小时之时期后提供式IIa化合物。

反应流程IV

反应流程IV描绘适用于制备式I化合物的各种中间产物的R³位置处的官能基的转化。在55℃至120℃之间、通常100℃的温度下，在黑暗中在诸如乙腈或丙腈的惰性溶剂中使其中R³为氯的式IIa化合物通过与诸如碘化钠及三甲基硅烷基氯的试剂反应1至24小时之间之时期而转化为其中R³为碘基的式IIb化合物。在55℃至120℃之间、通常80℃的温度下，在诸如HMPA及DMF的溶剂混合物中通过使式IIb化合物与甲基-2，2-二氟-2-(氟-磺酰基)乙酸酯及碘化铜反应1至24小时之间的时期来制备式IIc化合物。式IIa、IIb及IIc化合物中的R²′基团为其中存在受保护羟基的基团，诸如甲氧基或苄氧基，其接着可经去保护为相应式I化合物的基团R²中所存在的游离羟基。

反应流程V

反应流程V描绘某些其中R²为2-甲氧基苯基的式VI或VI′中间产物中的甲基醚部分转化为式Ia或Ia′化合物中的游离酚性羟基部分。可通过在-78℃至10℃之间的温度下将含有甲基醚部分的式VI(或其中R³为CF₃的VI′)化合物溶解于诸如二氯甲烷的合适溶剂中，接着添加三氯化硼或三溴化硼而将式VI或VI′化合物转化为游离酚。将反应混合物在10℃至50℃下搅拌1至24小时以提供所需化合物，诸如式Ia或Ia′化合物。

下文的反应流程VI描绘三个分别展示氯基衍生物IIa或IIa′转化为烷氧基连接衍生物(Ib，其中R³为OR⁶)、氨基连接衍生物(Ic，其中R³为NR⁷R⁸)及碳连接衍生物(Id，其中R³由诸如芳基硼酸、杂芳基硼酸或(C₁-C₆)烷基硼酸的适当硼酸衍生物产生)的反应。可在20℃至80℃下，在诸如氢化钠的合适碱存在下，在诸如DMF或THF的惰性溶剂中通过用相应醇R⁶OH处理6至24小时，接着必要时去保护以提供式Ib化合物而将式IIa化合物转化为式Ib化合物。

在20℃至80℃下，可使其中R²中的羟基部分为去保护形式的式IIa′化合物在诸如甲醇或乙醇的溶剂中与式R⁷R⁸NH的适当胺反应1至24小时以提供式Ic化合物。亦可在微波中，在50℃至150℃下在诸如肆(三苯膦)钯的催化剂存在下，在碳酸钠水溶液与诸如二氧杂环己烷的极性溶剂的混合物中用适当的相应式R³B(OH)₂的硼酸衍生物将式IIa化合物处理1至25分钟，接着必要时去保护以提供式Id化合物。

反应流程VI

术语″需要该治疗的患者″表示患有以异常的骨胳或矿物质体内平衡为特征的疾病或病症或存在罹患该疾病或病症风险的人类及其他动物。″需要该治疗的患者″可患有以异常骨胳或矿物质体内平衡为特征的疾病或病症或存在罹患该疾病或病症的风险，该疾病或病症选自由以下各病组成的组：骨质疏松症、骨质减少症、牙周病、佩吉特氏病、骨折、骨关节炎、类风湿性关节炎及恶性肿瘤的体液高钙血症。因为所治疗的某些病状在女性中具有更高的发病率，所以优选患者为女性且尤其为绝经后女性人类。

如本文所用的术语″治疗″包括预防性(例如，预防剂)、缓解性、辅佐性及治疗性治疗。举例而言，如本文所用的治疗骨质疏松症表示可根据本文所述的方法治疗患有骨质疏松症或存在罹患骨质疏松症风险的患者。就经受预防性治疗的患者而言，正经预防性治疗的疾病状态发病率的降低是预防性治疗的可测结果。

本发明提供通过向需要该治疗的患者投与有治疗有效量的式I化合物来治疗骨质减少症及骨质疏松症的方法。骨质减少症为骨胳稀化，但比骨质疏松症中所见的程度小且为真正骨质疏松症之前的阶段。世界卫生组织(World Health Organization)已开发基于骨胳质量密度(BMD)的诊断目录以指示个人具有正常骨胳、患有骨质减少症或患有骨质疏松症。正常骨胳密度为在年轻成人平均骨胳密度的一个标准偏差(+1或-1)范围内。骨质减少症(低骨胳质量)被定义为骨胳密度在年轻成人平均值1至2.5个标准偏差以下(-1至-2.5)，且骨质疏松症被定义为骨胳密度在年轻成人平均值2.5个标准偏差或更大以下(＞-2.5)。

本发明提供通过向有需要的患者投与治疗有效量的式I化合物来治疗骨折的方法。骨折可为体内任何骨胳的断裂，且髋骨骨折尤其受到关注。髋骨骨折对医药资源及患者发病率及死亡率具有显著影响。几乎没有确诊罹患髋骨骨折的患者考虑旨在降低进一步骨折风险的预防措施。当前，10％-13％的患者随后将遭受第二次髋骨骨折。遭受第二次髋骨骨折的患者中，第二次骨折后与第一次骨折后相比，更少的患者保持其独立行走的能力(分别为53％及91％，P＜0.0005)。Pearse E.O.等人，Injury，2003，34(7)，518-521。第二次髋骨骨折后，患者移动能力程度决定其未来的社会独立性。年长患者及具有多次跌倒病史的患者在各次骨折之间的时间间隔更短。第二次髋骨骨折对患者的移动能力及社会独立性具有显著的进一步影响。因此，希望具有用于治疗包括髋骨骨折的骨折的新颖方法。

式I化合物可连同其他适用于治疗以异常骨胳或矿物质体内平衡为特征的疾病或病症的药剂一起给药。尤其预期的其他药剂包括除式I化合物以外的钙受体拮抗剂、选择性***受体调节剂(SERM)、双膦酸盐、副甲状腺激素(PTH)及其片段及类似物、***、降钙素、合成类固醇、合成异黄酮、维生素D类似物、维生素K类似物、锶盐、组织蛋白酶K抑制剂、α_vβ₃整合素(玻璃连结蛋白)拮抗剂、***素(PGE2)受体促效剂及核因子κB受体活化剂配体(RANKL)抑制剂。

可在本发明的方法及组合物中连同式I化合物一起使用的其他钙受体拮抗剂包括以下文献中所述的那些受体拮抗剂：PCT国际公开案第WO93/04373号；第WO 94/18959号；第WO 95/11211号；第WO97/37967号；第WO 98/44925号；第WO 98/45255号；第WO 99/51241号；第WO 99/51569号；第WO 00/45816号；第WO 02/14259号；第WO 02/38106号；第WO 2004/041755号及第WO 2005/030746号；Nemeth，E.F.；Journal of Molecular Endocrinology(2002)29，15-21；Kessler，A.等人；ChemBioChem(2004)5，1131；Steddon，S.J.等人；Lancet(2005)365，2237-2239；及Shcherbakova，I.等人；Bioorganic&MedicinalChemistry Letters(2005)15，1557-1560。可在本发明的方法及组合物中连同式I化合物一起使用的特定钙阻滞剂化合物包括NPS-2143及423562。

可在本发明的方法及组合物中连同式I化合物一起使用的SERM包括(但不限于)拉索昔芬(lasofoxifene)(Oporia

)、雷诺昔酚(raloxifene)(Evista

)、阿佐昔芬(arzoxifene)、苯卓昔芬(bazedoxifene)、奥培昔芬(ospemifene)、Chiesi的CHF-4227及Prostrakan的PSK-3471。可在本发明的方法及组合物中连同式I化合物一起使用的双膦酸盐包括(但不限于)替鲁膦酸盐(tiludronate)(Skelid)、克络膦酸盐(clondronate)(Bonefos

)、依替膦酸盐(etidronate)(Didronel

)、阿仑膦酸盐(alendronate)(Fosamax

)、利塞膦酸盐(risedronate)(Actonel

)、伊班膦酸盐(ibandronate)(Boniva

)、唑来膦酸盐(zoledronate)(Zometa)、密诺膦酸盐(minodronate)(Onobis

)、奈立膦酸盐(neridronate)及帕米膦酸盐(pamidronate)。

在人类中，PTH为由副甲状腺产生的84氨基酸多肽，其经由对各种细胞起作用来控制血清钙含量。研究人员认为PTH的数种N末端氨基酸片段，包括1-31、1-34及1-38片段(PTH相关蛋白；″PTHrP″)在生物学上与全长激素等效。可在本发明的方法及组合物中连同式I化合物一起使用的副甲状腺激素(PTH)及其片段及类似物包括(但不限于)全长PTH(诸如PTH 1-84、Preos/Preotact

、Unigene的768974、Bone Medical的BN-003)、1-31(诸如Zelos Therapeutics的Ostabolin-C)、1-34(诸如特立帕肽(teriparatide)、Forteo

或Ipsen的BIM-44058)或1-38片段。可在本发明的方法及组合物中连同式I化合物一起使用的***包括(但不限于)***、共轭马***(Wyeth的Premarin)或其他***。

降钙素为由甲状腺产生的32氨基酸肽激素，其通过与那些细胞表面上的降钙素受体结合而抑制破骨细胞活性。可本发明的方法及组合物中连同式I化合物一起使用的降钙素包括(但不限于)人类降钙素或鲑鱼或鳗鱼降钙素。降钙素可用作可注射调配物或鼻内调配物，诸如Miacalcin

、Miacalcic

、Calcitonia

、Fortical

或Elcitonin

；或用作口服调配物，诸如Novartis的SMC-021、Bone Medical的BN-002(Capsitonin

)或Nobex的NCT-025 (Oratonin

)。

可在本发明的方法及组合物中连同式I化合物一起使用的合成类固醇包括(但不限于)混合***及孕酮促效剂，诸如以Livial

销售的替勃龙(tibolone)。合成异黄酮为化学合成的植物异黄酮衍生物，诸如自大豆产品萃取的植物***。可在本发明的方法及组合物中连同式I化合物一起使用的合成异黄酮包括(但不限于)由Takeda以Iprosten

及Osten销售的伊帕黄酮(ipraflavone)。

维生素D类似物为在骨母细胞中通过与核维生素D受体结合而起作用的化合物。可在本发明的方法及组合物中连同式I化合物一起使用的维生素D类似物包括(但不限于)Chugai的ED-7 1及Deltanoid的2MD。

可在本发明的方法及组合物中连同式I化合物一起使用的锶盐包括(但不限于)雷尼酸锶(strontium ranelate)(Servier的Protelos

)。可在本发明的方法及组合物中连同式I化合物一起使用的组织蛋白酶K抑制剂包括(但不限于)Novartis的AAE-581、拜利卡伯(balicatib)，GlaxoSmithKline的SB-462795及Merck的c-3578。可在本发明的方法及组合物中连同式I化合物一起使用的α_vβ₃整合素(玻璃连结蛋白)拮抗剂包括(但不限于)Merck的MRL-123。

可在本发明的方法及组合物中连同式I化合物一起使用的***素E2(PGE2)受体促效剂包括(但不限于)PGE2亚型2(EP2)受体促效剂，诸如(3-{[4-叔丁基-苄基)-(吡啶-3-磺酰基)-氨基]-甲基}-苯氧基)-乙酸或其医药学上可接受的盐或PGE2亚型4(EP4)受体促效剂，诸如ONO-4819。可在本发明的方法及组合物中连同式I化合物一起使用的核因子κB受体活化剂配体(RANKL)抑制剂包括(但不限于)Amgen的RANKL抗体AMG-162。

尤其关注的特定组合包括式I化合物与拉索昔芬或式I化合物与(3-{[4-叔丁基-苄基)-(吡啶-3-磺酰基)-氨基]-甲基}-苯氧基)-乙酸或其医药学上可接受的盐。

意欲用于医药用途的本发明化合物可以结晶或非晶形产物形式给药。例如，此类化合物可通过诸如沉淀、结晶、冷冻干燥、喷雾干燥或蒸发干燥的方法以固体栓塞、散剂或薄膜的形式获得。出于此目的，可使用微波或射频干燥。

就上述治疗使用而言，所投与的剂量当然将随所使用的化合物、投药模式、所需的治疗及所指示的病症而变化。式I化合物/盐/溶剂化物(活性成份)的总每日剂量通常将在1毫克至1克、优选1毫克至250毫克、更优选10毫克至100毫克的范围内。总每日剂量可以单次给药或分次给药形式给药。本发明亦涵盖持续释放型组合物。

举例而言，医药组合物可呈适合于经口投药的形式，如锭剂、胶囊、丸剂、散剂、持续释放型调配物、溶液、悬浮液；非经肠注射的形式，如无菌溶液、悬浮液或乳液；局部投药的形式，如软膏或乳膏；或经直肠投药的形式，如栓剂。医药组合物可为具有精确剂量的适合于单次投药的单位剂型。医药组合物将包括公知医药载剂或赋形剂及作为活性成份的本发明化合物。另外，其可包括其他医学或医药剂、载剂、佐剂等。水溶性差的化合物的溶解速率可通过使用喷雾干燥分散液而增强，诸如由Takeuchi，H.等人于″Enhancement of the dissolution rate of a poorly water-soluble drug(tolbutamide)by a spray-drying solvent depostion method anddisintegrants″J.Pharm.Pharmacol.，39，769-773(1987)中所述。

示例性非经肠投药形式包括活性化合物于无菌水溶液中的溶液或悬浮液，例如丙二醇或右旋糖水溶液。若需要，此类剂型则可经适当缓冲。

合适医药载剂包括惰性稀释剂或填充剂、水及各种有机溶剂。若需要，医药组合物可含有其他成份，诸如调味剂、粘合剂、赋形剂及其类似物。因此，就经口投药而言，含有各种赋形剂(诸如柠檬酸)的锭剂可连同各种崩解剂(诸如淀粉、褐藻酸及某些错合物硅酸盐)及粘合剂(诸如蔗糖、明胶及***胶)一起使用。另外，诸如硬脂酸镁、月桂基硫酸钠及滑石的润滑剂通常适用于制锭目的。类似类型的固体组合物亦可以软质及硬质填充明胶胶囊形式使用。因此，优选的物质包括乳糖(lactose或milk sugar)及高分子量聚乙二醇。当希望水性悬浮液或酏剂经口投与时，可使其中的活性化合物与各种甜味剂或调味剂、着色物质或染料及(若需要)乳化剂或悬浮剂连同诸如水、乙醇、丙二醇、甘油或其组合的稀释剂一起组合。制备各种具有特定量活性化合物的医药组合物的方法为本领域技术人员所已知或对其而言是显而易见的。例如，参见Remington′s PharmaceuticalSciences，Mack Publishing Company，Easter，Pa.，第15版(1975)。

可调整给药疗程以提供最佳的所需反应。举例而言，可投与单一大丸剂，可随时间投与数次分次剂量，或如治疗情形紧急需要按比例减少或增加剂量。就投药容易性及剂量均一性而言，尤其有利的是调配单位剂型的非经肠组合物。本文所用的“单位剂型”指就所治疗的哺乳动物受检者而言适合作为单位剂量的物理离散单元；每一单元含有经计算产生所需治疗效应的预定量的活性化合物以及所需的医药载剂。本发明的单位剂型的规格由以下各情形指示且直接取决于以下情形：(a)化疗剂的独特特征及待达成的特定治疗或预防效应，及(b)就个体的治疗敏感性而言混配该活性化合物的技术中的固有限制。因此，基于本文所提供的公开内容，本领域技术人员应了解剂量及给药疗程可根据治疗技术中所熟知的方法来调整。即，可易于确定最大可容许剂量，且亦可判定向患者提供可检测治疗益处的有效量，亦可确定投与各药剂以向患者提供可检测治疗益处的时间要求。因此，虽然本文示出某些剂量及投药疗程，但此类实例无论如何不限制在实践本发明中可提供给患者的剂量及投药疗程。

应注意剂量值可随待缓和的病状的类型及严重性而变化且可包括单次剂量或多次剂量。进一步应了解，对于任何特定受检者而言，应根据个人需要及投与或监督组合物投药的人士的专业判断而随时间调整特定给药疗程，且本文所陈述的剂量范围仅为示例性的且不意欲限制所主张组合物的范畴或实践。举例而言，可基于药物动力学或药效学参数调整剂量，此类参数可包括临床效应，诸如毒性效应及/或实验室值。因此，本发明涵盖如本领域技术人员所确定的患者内的剂量扩大。确定投与化疗剂的适当剂量及疗程在相关技术中为熟知的且一旦被本文所公开，则本领域技术人员应理解其涵盖于本文中。

本发明的医药组合物可以单一单位剂量或复数个单一单位剂量形式整批制备、封装或出售。如本文所用，″单位剂量″为包含预定量的活性成份的医药组合物的离散量。活性成份的量通常等于将投与受检者的活性成份的剂量或该剂量的方便分数，诸如该剂量的二分之一或三分之一。

本发明医药组合物中的活性成份、医药学上可接受的载剂及任何其他成份的相对量应依赖于所治疗受检者的特性、体型及病状且进一步依赖于投与组合物的途径而变化。举例而言，组合物可包含介于0.1％与100％(w/w)之间的活性成份。

除活性成份以外，本发明的医药组合物可进一步包含一种或多种其他医药活性剂。尤其预期的其他药剂包括选择性***受体调节剂(SERM)、双膦酸盐、副甲状腺激素(PTH)及其片段及类似物、***、降钙素、合成类固醇、合成异黄酮、维生素D类似物、维生素K类似物、锶盐、组织蛋白酶K抑制剂、α_vβ₃整合素(玻璃连结蛋白)拮抗剂、***素(PGE2)受体促效剂及核因子κB受体活化剂配体(RANKL)抑制剂，诸如上文所述的彼等药剂。

可使用公知技术制备本发明医药组合物的受控释放调配物或持续释放调配物。

如本文所用，医药组合物的″非经肠投药″包括以受检者组织的物理性破裂且经由组织中的裂口投与医药组合物为特征的任何投药途径。因此，非经肠投药包括(但不限于)通过注射组合物投与医药组合物、经由手术切开应用组合物、经由组织穿透非手术伤口应用组合物及其类似者。具体而言，预期非经肠投药包括(但不限于)皮下、腹膜内、肌肉内、胸骨内注射及肾透析输注技术。

适合于非经肠投药的医药组合物的调配物包含活性成份以及医药学上可接受的载剂，诸如无菌水或无菌等张生理食盐水。此类调配物可以适合于快速投药或连续投药的形式制备、封装或出售。可注射调配物可以单位剂型制备、封装或出售，诸如安瓿或含有防腐剂的多剂量容器。如下文所论述，用于非经肠投药的调配物包括(但不限于)于油性或水性媒剂中的悬浮液、溶液、乳液；糊剂及可植入的持续释放调配物或生物可降解调配物。此类调配物可进一步包含一种或多种其他成份，包括(但不限于)悬浮剂、稳定剂或分散剂。在用于非经肠投药的调配物之一实施例中，活性成份以干燥(即粉末或颗粒)形式提供以用于经合适媒剂(例如，无菌无热原质水)复原，之后非经肠投与经复原的组合物。

可通过现有技术中已知的多种方法投与本发明的组合物。投药途径及/或模式视所需结果而变化。活性化合物可与保护化合物以免快速释放的载剂一起制备，诸如受控释放调配物，包括植入剂、经皮贴片及微囊密封传递***。可使用生物可降解的生物相容聚合物，诸如乙烯乙酸乙烯酯、聚酸酐、聚乙醇酸、胶原、聚原酸酯及聚乳酸。许多制备此类调配物的方法由(例如)Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems，J.R.Robinson编，Marcel Dekker，Inc.，New York，(1978)描述。优选在GMP条件下制造医药组合物。

医药组合物可以无菌可注射水性或油性悬浮液或溶液形式制备、封装或出售。该悬浮液或溶液可根据已知技术调配且除活性成份以外，亦可包含本文所述的其他成份，诸如分散剂、润湿剂或悬浮剂。此类无菌可注射调配物可(例如)使用诸如水或1，3-丁二醇的无毒非经肠可接受的稀释剂或溶剂来制备。其他可接受的稀释剂及溶剂包括(但不限于)林格氏溶液(Ringer′s solution)、等张氯化钠溶液及诸如合成单甘油酯或二甘油酯的不挥发性油。其他适用的可非经肠投与的调配物包括包含微晶形式、脂质体制剂或作为可生物降解的聚合物***的组份的活性成份的调配物。用于持续释放或植入的组合物可包含医药学上可接受的聚合物质或疏水性物质，诸如乳液、离子交换树脂、微溶聚合物或微溶盐。

同时，所投与各活性成份的精确剂量将视诸多因素而变化，这些因素包括(但不限于)动物的类型及待治疗疾病状态的类型、动物年龄及投药途径。待投与的各种式I的CaR拮抗剂化合物的量可在考虑以下因素的情况下由标准程序来确定：诸如化合物IC₅₀、EC₅₀、化合物的生物半衰期、患者的年龄、体型及重量及与患者相关的病状或症状的类型。此类及其他待考虑因素的重要性为一般本领域技术人员所知。

可使用现有技术中已知的技术测量PTH分泌(参见，例如U.S.6,031,003，其以引用的方式并入本文中)。举例而言，可通过首先将细胞悬浮于含有0.5mM CaCl₂及0.1％牛血清白蛋白的副甲状腺细胞缓冲液中来测量PTH分泌。可在含有0.3mL细胞悬浮液的塑料管(Falcon 2058)中在具有或不具有小体积的CaCl₂及/或有机聚阳离子的情况下进行培育。在37℃下培育通常30分钟之后，随后可将管置于冰上且在2℃下使细胞形成小球。随后，应以乙酸使上清液样品到达pH 4.5，且若需要，储存于-70℃下。牛细胞上清液中PTH的量可由同源放射免疫检定法使用GW-1抗体或其等效物在1/45000的最终稀释倍数下测定。125I-PTH(65-84；INCSTAR，Stillwater，Minn.)可用作示踪物且级份由葡聚糖-活性炭分离。可在PackardCobra 5005 γ计数器上进行样品计数及数据缩减。为测试人类细胞上清液中的PTH含量，识别完整及N末端人类PTH的市售放射免疫检定套件(INS-PTH；Nichols Institute，Los Angeles，Calif.)是优选的，这是因为GW-1抗体识别人类PTH欠佳。

另外，适用于评估式I化合物的特定检定包括如下所述的评估测试化合物的效能及选择性的FLIPR检定；评估测试化合物对内源性PTH分泌的效应的检定；测试化合物对活体内PTH分泌的效应的评估；钙受体拮抗剂式I化合物对高龄完整及经切除卵巢的雌性大鼠体重、身体组成及骨胳密度的效应；及骨折愈合检定。

评估测试化合物的效能及选择性的FLIPR检定

使用表达钙受体(CasR)的人类肾细胞(HEK 293)使用荧光影像板读数器(FLIPR，Molecular Devices，Sunnyvale CA)来检测受体的拮抗剂。由细胞外钙活化受体导致钙自细胞内储存物释放至细胞溶质中。由来自生长培养基的细胞使荧光指示剂(Fluo-4)内在化(internalize)且荧光指示剂与释放至细胞溶质中的钙相互作用以提供定量测量细胞内Ca²⁺含量及受体促效作用/拮抗作用的方法。由FLIPR CCD相机检测荧光强度且作为时间的函数绘图。潜在拮抗剂由其降低该荧光反应的能力来鉴别。

为确定IC₅₀值，在37℃下历时1小时使细胞负载有Fluo4(2.05mMFluo-4、0.04％泊洛尼克酸(pluronic acid)、于90％DMEM高葡萄糖中的2.6mM丙磺舒(probenecid)、10％透析胎牛血清、1×Pen Strep、1×L-谷酰胺、3μg/ml嘌呤霉素(Puromycin)、27.5nM甲胺喋呤(Methotrexate))。在添加测试化合物之前，用10mM HEPES缓冲溶液洗涤细胞。以各种剂量(1μM至3nM)添加测试化合物(例如实例1的化合物)且将其与细胞一起预培育30分钟，接着通过添加1.7mM Ca²⁺刺激CasR。IC₅₀值是基于细胞抑制Ca²⁺诱导的细胞内Ca²⁺增加的能力。在通过添加1.7mM Ca²⁺刺激CasR后42秒钟时读取荧光信号。

评估测试化合物对内源性PTH分泌的效应的检定

该检定中使用具有颈静脉导管的成年雄性或雌性Sprague-Dawley大鼠(Charles River Laboratories，Wilmington，MA)。经由各种投药途径(包括皮下注射或静脉内注射)以各种剂量将测试化合物给予动物。在使用市售大鼠完整PTH ELISA试剂盒(Immutopics，Inc.San Clemente，CA.目录号60-2500)于各时间给药之前或之后检查血清或血浆PTH浓度。

评估测试化合物对活体内PTH分泌的效应

该研究中使用具有颈静脉导管的过夜禁食雄性Sprague-Dawley大鼠(250g)。在化合物治疗之前从各动物收集全血样品以用于测量基线PTH浓度。随后，由静脉内投药经由颈静脉给予测试动物于甘油缩甲醛：2％DMSO中的1mg/kg的单一剂量的测试化合物。在给药后2、5、15、30及45分钟以及1、2、3、4、6及8小时时收集全血样品。通过离心作用获得血浆样品且使用市售大鼠完整PTH ELISA试剂盒(Immutopics，Inc.SanClemente，CA.目录号60-2500)测定PTH浓度。在用测试化合物处理后可见PTH的显著增加。由测试化合物诱导的PTH分泌升高在给药后2分钟出现峰值且在给药后30分钟返回至基线含量(图1)。

钙受体拮抗剂式I化合物对高龄完整及经切除卵巢的雌性大鼠体重、身体组成及骨胳密度的效应

该研究的目的在于测试包含式I化合物的测试组合物在高龄完整或经切除卵巢(OVX)的雌性大鼠模型中的效应。在以下方法中，式I化合物可以其医药学上可接受的盐或前药形式给药。

研究方法

在Sprague-Dawley雌性大鼠18月大时对其进行假手术或OVX，同时在第0天对一组大鼠验尸以用作基线对照。手术后第1天，将大鼠用媒剂或式I测试化合物或式I测试化合物与其他活性剂测试化合物的组合处理59天。经口、经口管饲或经皮下注射(s.c.)投与媒剂或式I测试化合物，其中测试化合物以治疗有效剂量给药。

在验尸前2天及12天，经皮下注射给与所有大鼠10mg/kg钙黄绿素(Sigma，St.Louis，MO)用于荧光骨胳标记。验尸当日，在开他敏(ketamine)/甲苯噻嗪(xylazine)麻醉下称重所有大鼠，且使其经受配备有Rat WholeBody Scan软件的双能X射线吸光测定(DXA，QDR-4500/W，Hologic Inc.，Waltham，MA)以进行瘦体及肥体质量测定。对大鼠验尸，随后尸体剖检且通过心脏穿刺获得血液。由周边定量电脑化断层摄影术(pQCT)分析各大鼠的远端股骨干骺端及股骨干，且测定体积总骨矿物质含量及密度、小梁骨矿物质含量及密度以及皮层骨矿物质含量及密度。

周边定量电脑化断层摄影术(pQCT)分析：由具有5.40版软件的pQCTX射线机(Stratec XCT Research M，Norland Medical Systems，Fort Atkinson，WI.)扫描所切除的股骨。在邻近体素尺寸(voxel size)为0.10mm的远端5.0mm(近端股骨干骺端，主要疏松骨部位)及13mm(股骨干，皮层骨部位)处取股骨干骺端的1毫米(mm)厚横截面。使用轮廓模式(contour mode)2及皮层模式(cortical mode)4定义及分析皮层骨。使用340mg/cm³的外部阈值设定来区分皮层外殻与软组织，且使用529mg/cm³的内部阈值来区分沿皮层内表面的皮层骨。使用阈值为655mg/cm³的剥离模式4测定小梁骨以区分(下)皮层与疏松骨。使用所界定疏松骨的1％的另一同心剥离以确保从分析去除(下)皮层骨。测定小梁骨与皮层骨两者的体积含量、密度及面积(Jamsa T.等人，Bone 23：155-161，1998；Ke，H.Z.等人，Journal of Bone andMineral Research，16：765-773，2001)。

该方法的实验组如下：

第I组：基线对照

第II组：假手术+媒剂

第III组： OVX+媒剂

第IV组： OVX+式I的测试化合物(于媒剂中)

第V组： OVX+式I的测试化合物及其他活性剂

注意：当希望测试式I化合物与其他活性剂的组合时，仅使用第V组。

骨折愈合检定

全身性投药后对骨折愈合的效应的检定

骨折技术：用开他敏使3个月大的Sprague-Dawley大鼠麻醉。在右胫骨或股骨的近端部分的前内态样处切开1cm。以下描述胫骨外科技术。进行切开直至骨胳，且在邻近胫骨结节远端态样4mm距前脊向内侧2mm处钻1mm的孔。用0.8mm的不锈钢管(最大负荷36.3N，最大刚度61.8N/mm，在与骨胳相同的条件下测试)进行骨髓内骨折钉固术。不进行髓管扩孔。使用具有钝钳头的经特别设计的可调整钳在胫腓骨接合点以上2mm处通过三点弯曲产生标准闭合骨折。为使软组织损伤最小化，小心以不使骨折移位。用单丝尼龙缝合线缝合皮肤。在无菌条件下进行手术。在钉固之后，立即采集所有骨折的放射线照片，且排除在所规定的骨干区域外部骨折或具有移位钉的大鼠。将剩余动物随机分为以下各组，其中每一子组10-12个动物在每个时间点均测试骨折愈合。第一组接受每只大鼠每日管饲1ml媒剂(水∶100％乙醇＝95∶5)，而其他组接受每日管饲0.01至100mg/kg/天待测试式I化合物(每只大鼠1ml)历时10、20、40及80天。

在第10、20、40及80天时，用开他敏使各组的10-12只大鼠麻醉且放血处死。通过解剖移除胫腓骨且剥离所有软组织。将来自各组5-6只大鼠的骨胳储存于70％乙醇中以用于组织学分析，且将来自各组另外5-6只大鼠的骨胳储存于经缓冲的格林氏溶液(+4℃，pH 7.4)中以用于放射线照相及所进行的生物力学测试。

组织学分析：骨折骨胳的组织学分析方法之前已由Mosekilde及Bak公开(The Effects of Growth Hormone on Fracture Healing in Rats：AHistological Description.Bone，14：19-27，1993)。简而言之，将骨折部位锯开8mm至骨折线的每一侧，在未脱钙的情况下包埋于甲基丙烯酸甲酯中，且在Reichert-Jung Polycut切片机上以8μm的厚度切割前切片。使用经Masson-Trichrome染色的中前切片(包括胫骨与腓骨)来观测细胞及组织在经处理及未经处理的情况下对骨折愈合的反应。使用经天狼星红(Sirius red)染色的切片来显示骨痂结构的特征且区分骨折部位处的织网骨与板状骨。进行以下测量：(1)骨折间隙，测量为骨折中皮层骨末端之间的最短距离；(2)骨痂长度及骨痂直径；(3)骨痂的总骨胳体积面积；(4)骨痂区域内部每个组织面积的骨组织；(5)骨痂中的纤维组织；及(6)骨痂中的软骨面积。

生物力学分析：生物力学分析方法之前已由Bak及Andreassen公开(The Effects of Aging on Fracture Healing in Rats.Calcif Tissue Int 45：292-297，1989)。简而言之，在生物力学测试之前采集所有骨折的放射线照片。由破坏性三点或四点弯曲程序分析愈合骨折的力学特性。测定最大负荷、刚度、最大负荷下的能量、最大负荷下的偏转及最大应力。

钙受体拮抗剂可与另一药理学活性化合物或两种或两种以上其他药理学活性化合物有效组合，尤其在治疗骨质疏松症中。举例而言，钙受体拮抗剂(尤其是如上文所定义的式I化合物或其医药学上可接受的盐或溶剂化物)可同时、相继或分开与一种或多种选自以下各物的药剂组合给药：选择性***受体调节剂(SERM)、双膦酸盐、副甲状腺激素(PTH)及其片段及类似物、***、降钙素、合成类固醇、合成异黄酮、维生素D类似物、维生素K类似物、锶盐、组织蛋白酶K抑制剂、α_vβ₃整合素(玻璃连结蛋白)拮抗剂、***素(PGE2)受体促效剂及核因子κB受体活化剂配体(RANKL)抑制剂。

以下非限制性制备例及实例说明本发明化合物的制备。

在所有下述实例中，所得¹H核磁共振(NMR)波谱均与所提出的结构相符。特征化学位移(δ)使用主峰名称的公知缩写以来自四甲基硅烷低磁场的每百万份数(ppm)给出：例如s，单重峰；d，双重峰；t，三重峰；q，四重峰；m，多重峰；br，宽峰。使用电喷雾电离(ESI)或大气压化学电离(APCI)记录质谱(m/z)。以下缩写用于常用溶剂及各种试剂：CDCl₃，氘化氯仿；DIEA，二异丙基乙胺；DMF，二甲基甲酰胺；CD₃OD，氘化甲醇；D₆-DMSO，氘化二甲亚砜；HBTU，O-(苯并***-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯；HCl，盐酸；HI，氢碘酸；HMPA，六甲基磷酰胺；KMnO₄，高锰酸钾；MgSO₄，硫酸镁；NaHCO₃，碳酸氢钠；NaHSO₃，亚硫酸氢钠；NaOH，氢氧化钠；Na₂SO₄，硫酸钠；NH₄Cl，氯化铵；TEA，三乙胺；THF，四氢呋喃。′氨′指具有0.88的比重的浓氨水溶液。当使用薄层层析(TLC)时，其指使用硅胶60F₂₅₄板的硅胶TLC，R_f为TLC板上化合物移动的距离除以溶剂前沿移动的距离。HPLC指高效液相色谱。

为了说明性目的包括以下特定实例，但不应理解为这些实例限制本发明的范围。

中间产物的制备

制备2，4-二氯烟酸：

在低于-65℃下，向二异丙基乙胺(11.1ml，81.08mmol)于THF(50ml)中的搅拌溶液中逐滴添加BuLi(1.46M，43.3ml，73.65mmol)于己烷中的溶液且将混合物搅拌40分钟。在-78℃下向该溶液中逐滴添加于THF(15mL)中的2，4-二氯吡啶(10g，67.57mmol)且搅拌30分钟。使由新鲜压碎的干冰产生的二氧化碳穿过CaCl₂防护管且随后送入反应混合物中历时10分钟并使反应混合物缓慢升至室温。将溶剂于减压下蒸发且溶解于最小体积的水中。将水层用水洗涤且用浓HCl酸化至pH 4。随后，将其用乙酸乙酯萃取，将有机层用盐水洗涤且经硫酸钠干燥。在减压下移除有机溶剂以提供呈奶白色固体状的2，4-二氯烟酸(10.6g，82％)。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ14.88-14.54(br s，1H)，8.46(d，J＝5.3Hz，1H)，7.74(d，J＝5.5Hz，1H)。FIA MS[M+H]：191.8

制备2，4-二氯烟酸甲酯：

将溶解于***(30ml)中的亚硝基甲基脲(8g，78.16mmol)冷却至0℃且在冷却下缓慢添加25％的KOH水溶液。收集***层，经KOH干燥且在0℃下逐滴添加至2，4-二氯烟酸(3g，15.62mmol)于甲醇(5mL)中的搅拌溶液中。使反应混合物在1小时内升至室温。在减压下移除有机溶剂且将粗残余物经管柱层析(5-10％于己烷中的EtOAc)纯化以获得呈无色油状物的纯2，4-二氯烟酸甲酯(3.00g，99％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ8.34(d，J＝5.3Hz，1H)，7.33(d，J＝5.4Hz，1H)，3.99(s，3H)。

制备4-叠氮基-2-氯烟酸甲酯：

根据文献程序J.Prakt.Chem，2000；342，33-39(在50℃下使2，4-二氯烟酸甲酯与NaN₃在DMF中反应，接着用水处理)，2，4-二氯烟酸甲酯(20g，96.67mmol)产生呈乳色固体状的4-叠氮基-2-氯烟酸甲酯(15g，73％)。¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ8.37(d，J＝5.52Hz，1H)，7.06(d，J＝5.6Hz，1H)，3.96(s，3H)。FIA MS[M+H]：213.1(小峰)。IR(KBr)：2126，1741cm^-1

制备4-氨基-2-氯烟酸甲酯：

根据文献程序Tetrahedron letters，2002；43，6629-6631(在室温下，通过在HI水溶液中搅拌4-叠氮基-2-氯烟酸甲酯使4-叠氮基-2-氯烟酸甲酯中的叠氮基还原为相应胺)，4-叠氮基-2-氯烟酸甲酯(15g，70.75mmol)产生呈淡黄色固体状的4-氨基-2-氯烟酸甲酯(11.2g，85％)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ7.81(d，J＝5.79Hz，1H)，6.76(br s，2H)，6.62(d，J＝5.81Hz，1H)，3.82(s，3H)。FIA MS[M+H]：186.9

制备4-氨基-2-氯烟酸：

将4-氨基-2-氯烟酸甲酯(21.0g，112.9mmol)及LiOH(10.3g，247.5mmol)溶解于二氧杂环己烷∶MeOH∶水(3∶2∶1，ml)的混合物中且将反应混合物加热至85℃历时2小时。在减压下蒸发溶剂，将残余物溶解于最小体积的水中且用饱和柠檬酸酸化(至多pH 4)。浓缩水溶液直至刚开始沉淀。在10℃下使混合物静置过夜以完全沉淀。通过过滤收集所得白色固体且将其自异丙醇-己烷重结晶以产生4-氨基-2-氯烟酸(13g，产率66％)。¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ7.59(d，1H)，6.47(d，1H)，6.37(brs，2H)。

制备4-氯-2-(三氟甲基)烟酸

在-78℃浴中，向2，2，6，6-四甲基哌啶(21.0mL，124mmol)于无水THF(200mL)中的搅拌溶液中添加正丁基锂(66.2mL于己烷中的2.5M溶液，166mmol)。在-78℃下，将溶液搅拌30分钟，接着经由套管添加2-(三氟甲基)烟酸(7.90g，41.4mmol)于THF(35mL)中的溶液。将溶液在-78℃下搅拌20分钟，接着温至-50℃历时1小时(以提供相应锂化吡啶)。在一独立烧瓶中，将六氯乙烷(29.4g，124mmol)溶解于THF(200mL)中且冷却至-15℃且快速搅拌。经由套管将含有锂化吡啶的溶液添加至六氯乙烷溶液中。添加完成后，使混合物温至室温。添加水(约200mL)，接着在真空下移除四氢呋喃。将剩余残余物水溶液用***-戊烷(1∶1，100mL)萃取。丢弃有机层。用盐酸(约50mL 1.0M溶液)酸化水层。用乙酸乙酯萃取水层。将有机层经无水硫酸镁干燥，过滤且真空浓缩以产生8.75g(94％)呈棕褐色固体状的标题化合物：¹H NMR(400MHz，CD₃OD)，8.63(d，1H)，7.79(d，1H)。LC/MS(M+1)＝226.1；[参见，Schlosser等人，Eur.J.Org.Chem.2003，1559]。

制备4-氯-2-(三氟甲基)烟酸甲酯

在冰浴中，向4-氯-2-(三氟甲基)烟酸(8.75g，38.8mmol)于乙酸乙酯(100mL)中的搅拌溶液中添加重氮甲烷[由12g(116mmol)N-亚硝基-N-甲基脲产生]于***(200mL)中的溶液。将溶液搅拌15分钟，接着添加乙酸(直至停止冒泡)。真空浓缩溶液以产生9.75g(99％)呈棕色油状物的标题化合物：¹H NMR(400MHz，CD₃OD)，8.686(d，1H)，7.828(d，1H)，3.937(s，3H)。LC/MS(M+1)＝240.1

制备4-叠氮基-2-(三氟甲基)烟酸甲酯

向4-氯-2-(三氟甲基)烟酸甲酯(9.75g，40.7mmol)于DMF(300mL)中的搅拌溶液中添加叠氮化钠(21.2g，326mmol)。将溶液温至45℃历时3小时且随后温至50℃历时1小时。将反应用水(300mL)稀释且用***-戊烷(1∶1，约1L)萃取。将有机层用水反萃取(3次)。将有机层经无水硫酸镁干燥，过滤且真空浓缩以产生9.50g(95％)呈棕色油状物的标题化合物：¹HNMR(400MHz，CD₃OD)，8.651(d，1H)，7.603(d，1H)，3.878(s，3H)。

制备4-氨基-2-(三氟甲基)烟酸甲酯及4-氨基-2-(三氟甲基)烟酸

将冷(0℃冰浴)浓氢碘酸(182mL的57％水溶液)添加至烧瓶中的4-叠氮基-2-(三氟甲基)烟酸甲酯(7.50g，30.5mmol)中。在0℃下搅拌混合物直至TLC(乙酸乙酯-己烷，75∶25)显示起始物质完全消耗。将混合物倾入冰冷氢氧化钾溶液中(95g固体KOH溶解于300mL水中)。用***萃取混合物。将醚层用水洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤且真空浓缩以产生黄色固体。将固体溶解于最小量的二氯甲烷中且穿过用乙酸乙酯-己烷(10∶90)洗脱的硅胶栓塞。浓缩洗脱剂以产生3.42g(51％)呈奶白色固体状的4-氨基-2-(三氟甲基)烟酸甲酯。¹HNMR(400MHz，CD₃OD)，8.11(d，1H)，6.93(d，1H)，3.878(s，3H)。LC/MS(M+1)＝221.2

将上述剩余的水层用浓盐酸酸化至pH 2。用乙酸乙酯萃取水层(16次)。将有机层用水洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤且真空浓缩以提供橙色固体。将橙色固体于***中研磨以产生2.5g(40％)呈黄色固体状的4-氨基-2-(三氟甲基)烟酸。¹H NMR(400MHz，CD₃OD)，8.09(d，1H)，6.93(d，1H)，LC/MS(M+1)＝207.1。

制备4-氨基-2-(三氟甲基)烟酸

向4-氨基-2-(三氟甲基)烟酸甲酯(1.97g，8.97mmol)于二氧杂环己烷/甲醇/水(3∶2∶1体积比)中的搅拌溶液中添加氢氧化锂(0.365g，15.2mmol)。将混合物在85℃下加热8小时。将反应混合物冷却至室温且逐滴添加浓HCl以将pH值调整至2-3。添加饱和NaCl溶液。用乙酸乙酯萃取水层(12次)。将有机层用水洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤且真空浓缩以产生1.75g(95％)呈黄色固体状的4-氨基-2-(三氟甲基)烟酸。¹H NMR(400MHz，CD₃OD)，8.09(d，1H)，6.93(d，1H)，LC/MS(M+1)＝207.1。

制备2-氨基-2-氰基乙酸乙酯

向(羟基亚氨基)氰基乙酸乙酯(10g，70.4mmol)于水及碳酸氢钠饱和溶液(80mL)中的搅拌溶液中添加连二亚硫酸钠(34.3g，197mmol)。将反应加热至35℃历时3h。随后将溶液用氯化钠饱和且用乙酸乙酯(3×200mL)萃取。将经合并的有机相经硫酸钠干燥且浓缩，产生油状物2-氨基-2-氰基乙酸乙酯(1.6g)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ4.42(s，1H)，4.32(q，2H)，1.33(t，3H)。

制备2-氰基-2-甲酰氨基乙酸乙酯

在0℃下，向于二氯甲烷(5mL)中的2-氨基-2-氰基乙酸乙酯(800mg，6.24mmol)中逐滴添加于二氯甲烷(5mL)中的氰基甲酸甲酯(531mg，6.24mmol)。将反应温至室温历时12小时。将反应浓缩且经硅胶层析纯化以产生油状物2-氰基-2-甲酰氨基乙酸乙酯(500mg)。NMR波谱显示起始物质与所需产物的1∶1比率混合物。将产物溶解于二氯甲烷(10mL)中。向该溶液中添加氰基甲酸甲酯(797mg，9.37mmol)且将反应再搅拌12小时。将反应浓缩且经硅胶层析纯化以产生油状物2-氰基-2-甲酰氨基乙酸乙酯(460mg)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.30(s，1H)，6.61(s，1H)，5.55(d，2H)，4.36(q，2H)，1.35(t，3H)。

制备5-氨基噻唑-4-甲酸乙酯

将2-氰基-2-甲酰氨基乙酸乙酯(480mg，3.07mmol)及拉尔森试剂(Lawesson′s reagent)(746mg，1.84mmol)于甲苯(5mL)中的溶液加热至80℃过夜。随后将反应用碳酸钠水溶液(20mL)及二氯甲烷(50mL)稀释。将有机相用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥且浓缩。经硅胶层析纯化以产生固体物质5-氨基噻唑-4-甲酸乙酯(120mg)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.86(s，1H)，5.98(s，br，2H)，4.38(q，2H)，1.41(t，3H)。MS m/z 173.2(M+H)⁺。

制备5-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)噻唑-4-甲酸乙酯

将5-氨基噻唑-4-甲酸乙酯(91.3mg，0.53mmol)、三氟甲磺酸钪(III)(2.61mg，0.005mmol)及2，5-己二酮(1.5mL)的混合物由微波加热至180℃历时1h。随后将反应浓缩且经硅胶层析纯化以产生棕褐色固体5-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)噻唑-4-甲酸乙酯(104mg)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.82(s，1H)，5.92(s，2H)，4.25(q，2H)，2.01(s，6H)，1.20(t，3H)。MSm/z 251.3(M+H)⁺。

制备5-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)噻唑-4-甲酸乙酯

在-78℃下，向于THF中的5-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)噻唑-4-甲酸乙酯(104mg，0.415mmol)中缓慢逐滴添加1M DIBAL/THF(1.24mL，1.24mmol)且搅拌1h。将反应混合物缓慢温至室温且搅拌12小时。随后将反应用冰水(5mL)终止且用乙酸乙酯(100mL)及2N NaOH(20mL)稀释。随后将有机相用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥且浓缩，产生半固体5-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)噻唑-4-甲酸乙酯(86mg)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.81(s，1H)，5.90(s，2H)，4.43(s，2H)，2.00(s，6H)。MS m/z 209.3(M+H)⁺。

制备5-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)噻唑-4-甲醛

向(5-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)噻唑-4-基)甲醇(86mg，0.41mmol)于二氯甲烷中的溶液中添加二氧化锰(359mg，4.13mmol)。将反应温至回流历时3h。将粗混合物经硅胶层析纯化以产生油状物5-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)噻唑-4-甲醛(17mg)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ9.72(s，1H)，8.87(s，1H)，5.98(s，2H)，2.05(s，6H)。MS m/z 207.2(M+H)⁺。

2-(5-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)噻唑-4-基)-3-苯乙基-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

将4-氨基-N-苯乙基-2-(三氟甲基)烟酰胺(25.5mg，0.082mmol)、5-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)噻唑-4-甲醛(17mg，0.082mmol)及TsOH(1.4mg，0.008mmol)于甲苯中的溶液在回流下加热过夜。随后将反应过滤且向粗混合物中添加氧化锰。将反应在110℃下加热4h。将反应混合物过滤，浓缩且经硅胶层析纯化，提供固体2-(5-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)噻唑-4-基)-3-苯乙基-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮(7mg)。¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δ9.02(s，1H)，8.76(d，1H)，7.69(m，1H)，7.51(m，1H)，7.48(d，1H)，7.32(m，5H)，4.20(m，2H)，3.32(m，2H)，2.07(s，6H)。MSm/z 496.5(M+H)⁺。

制备2-(二氟甲基)苯甲酸甲酯

将2-甲酰基苯甲酸甲酯(1.0g，6.09mmol)及双(2-甲氧基乙基)氨基-三氟化硫(4.04g，18.3mmol)于二氯甲烷(10mL)中的溶液在回流下加热12小时。将反应浓缩，用乙酸乙酯(200mL)及水(100mL)稀释。使用碳酸氢钠固体将混合物缓慢中和至pH 8。随后将有机相分离且用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥且浓缩。将残余物经硅胶层析纯化以产生呈油状物的2-(二氟甲基)苯甲酸甲酯(700mg)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.02(d，1H)，7.82(d，1H)，7.64(t，1H)，7.52(m，1H).7.39(t，1H)，3.93(s，3H)。

制备(2-(二氟甲基)苯基)甲醇

在室温下，向2-(二氟甲基)苯甲酸甲酯(700mg，3.76mmol)于THF中的溶液中逐滴添加于THF(5.64mL，11.3mmol)中的1M氢化铝锂历时1h。随后将反应倾入冰水(100mL)中且用乙酸乙酯(200mL)及2N氢氧化钠水溶液(100mL)稀释。随后将有机相分离且用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥且浓缩以产生呈油状物的(2-(二氟甲基)苯基)甲醇(480mg)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.56(d，1H)，7.41(m，3H)，6.93(t，1H)，4.82(s，2H)。

制备2-(二氟甲基)苯甲醛

将(2-(二氟甲基)苯基)甲醇(100mg，0.632mmol)及氧化锰(275mg，3.16mmol)于二氯甲烷中的混合物在室温下搅拌12小时且随后在45℃下搅拌1h。将反应经硅藻土过滤且浓缩以产生呈油状物的2-(二氟甲基)苯甲醛(99mg)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ10.2(s，1H)，7.94(d，1H)，7.81(d，1H)，7.70(m，2H)，6.93(t，1H)。

制备2-甲基烟碱甲醛

将于二氯甲烷(10mL)中的(2-甲基吡啶-3-基)甲醇(1.0g，8.12mmol)及氧化锰(7.06g，81.2mmol)的混合物在室温下搅拌60小时且随后在45℃下加热4h。将反应经硅藻土及使用乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶栓塞(5×7cm)过滤。随后浓缩滤液以产生呈油状物的2-甲基烟碱甲醛(680mg)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ10.32(s，1H)，8.67(dd，1H)，8.09(dd，1H)，7.31(dd，1H)，2.88(s，3H)。

制备3-(二氟甲基)-2-甲基吡啶

将2-甲基烟碱甲醛(680mg，5.61mmol)及双(2-甲氧基乙基)氨基-三氟化硫(3.72g，16.8mmol)于二氯乙烷(10mL)中的溶液在回流下加温过夜。将反应浓缩，用乙酸乙酯(200mL)及水(100mL)稀释。使用碳酸氢钠固体将混合物缓慢中和至pH 8。随后将有机相分离且用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥且浓缩。将残余物经快速层析(25+S Biotage，庚烷/乙酸乙酯＝100∶0至80∶20)纯化以产生呈油状物的3-(二氟甲基)-2-甲基吡啶(110mg)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.58(d，1H)，7.81(d，1H)，7.22(m，1H)，6.77(t，1H)，2.64(s，3H)。

制备3-(二氟甲基)吡啶甲醛

将3-(二氟甲基)-2-甲基吡啶(110mg，0.768mmol)及氧化硒(102mg，0.922mmol)于1，4-二氧杂环己烷(3mL)中的混合物在回流下加温12小时。随后将反应混合物浓缩且经快速层析(12+S Biotage，庚烷/乙酸乙酯＝1∶0至1∶1)纯化以产生呈油状物的3-(二氟甲基)吡啶甲醛(11mg)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ10.1(s，1H)，8.90(d，1H)，8.22(d，1H)，7.64(m，1H)，7.59(t，1H)。

制备1，2-二氟-4-(2-硝基丙-1-烯基)苯

将3，4-二氟苯甲醛(54g，380mmol)、乙酸铵(19g，247mmol)及4

分子筛(54g)合并于硝基乙烷(810mL)中且在回流下加热24小时。将反应过滤且真空浓缩。将所得混合物在乙酸乙酯(500mL)与水(300mL)之间分配。将有机相分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩。将残余物冷却至4℃历时2小时，随后添加乙醇(100mL)以产生黄色晶体，其经过滤而收集。(57.2g，产率75.6％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.0(s，1H)，7.15-7.25(m，2H)，3.7(t，1H)，2.4(s，3H)。

制备1-(3，4-二氟苯基)丙-2-胺盐酸盐

将(E，Z)-1，2-二氟-4-(2-硝基丙-1-烯基)苯(2.52g，12.65mmol)溶解于无水THF(30mL)中且在冰浴中冷却。向其中添加氢化铝锂的1.0M THF溶液(38mL，38mmol)。将反应在室温下搅拌15分钟，随后在回流下加热2小时。将反应混合物冷却至室温，且通过连续添加水(1.5mL)、15％NaOH(1.5mL)及水(4.5mL)处理。搅拌反应混合物以将经过滤的白色沉淀粒化。将滤液用水(50mL)稀释，用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将有机相经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩。将残余物再溶解于乙酸乙酯(25mL)中，向其中添加4N HCl/二氧杂环己烷溶液(7mL)，且将所得混合物在室温下搅拌10分钟。将该混合物真空浓缩且用己烷研磨以产生呈无色固体状的产物(2.32g，产率88％)。¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.2(m，2H)，7.05(m，1H)，3.5(m，1H)，2.8-3.0(dd，2H)，1.25(d，3H)。MS m/z 172.2(M+H)⁺。

制备4-氨基-N-(1-(3，4-二氟苯基)丙-2-基)-2-(三氟甲基)烟酰胺

将4-氨基-2-(三氟甲基)烟酸(4.4g，18.14mmol)悬浮于无水DMF(100mL)与无水二氯甲烷(200mL)的混合物中。向其中添加三乙胺(6g，60mmol)，接着添加1-(3，4-二氟苯基)丙-2-胺(3.75g，21.90mmol)。添加HBTU(9.63g，25.4mmol)且使混合物在室温下搅拌过夜。真空浓缩反应混合物以移除二氯甲烷。将所得DMF溶液倾入水中且用乙酸乙酯萃取两次。将有机层依次用1N NaOH及水洗涤，随后经硫酸镁干燥，过滤且真空浓缩以产生油状物。将该油状物经使用20-40％丙酮/己烷作为洗脱剂的硅胶管柱层析纯化以提供呈无色固体状的产物(6.57g，产率55％)。¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δ8.2(d，1H)，7.1(m，2H)，6.95(m，1H)，6.7(d，1H)，4.07(m，1H)，4.9(bd，2H)，4.4(m，1H)，2.7-2.9(dd，2H)，1.2(d，2H)。MS m/z360.2(M+H)⁺。

制备(3-(苄氧基)吡啶-2-基)甲醇

将2-羟基甲基-3-羟基吡啶(100.3g，620.7mmol)溶解于丙酮(1L)中。添加碳酸钾(180g，1.3mol)，接着添加苄基溴(127g，745mmol)。将混合物在回流下加热48小时。将所得混合物冷却至室温且经硅藻土过滤。用丙酮(1L)洗涤滤饼。将经合并的滤液真空浓缩以提供橙色油状物。将该油状物经使用10-40％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂的硅胶管柱层析纯化。将所得棕褐色固体由己烷重结晶以提供产物(88.2g，产率66％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.2(t，1H)，7.4(m，5H)，7.15(d，2H)，5.1(s，2H)，4.8(d，2H)，4.3(t，1H)。

制备3-(苄氧基)吡啶甲醛

将(3-(苄氧基)吡啶-2-基)甲醇(87g，400mmol)溶解于无水二氧杂环己烷(80mL)中。添加二氧化锰(351g)且将混合物在80℃下加热2小时。

经硅藻土过滤反应混合物且用乙酸乙酯(300mL)洗涤滤饼。真空浓缩滤液以产生棕色油状物，其在静置后固化。(84.12g，产率98％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.4(d，1H)，7.25-7.45(m，8H)，5.25(s，2H)。

制备2-(3-(苄氧基)吡啶-2-基)-3-(1-(3，4-二氟苯基)丙-2-基)-5-(三氟甲基)-2，3-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(1H)-酮

将4-氨基-N-(1-(3，4-二氟苯基)丙-2-基)-2-(三氟甲基)烟酰胺(3.61g，10.05mmol)及3-(苄氧基)吡啶甲醛(2.57g，12.1mmol)连同催化量的4-甲苯磺酸(0.03g，0.20mmol)一起合并于无水甲苯(150mL)中。将其在配备有迪恩-斯达克捕集器(Dean-Stark trap)的圆底烧瓶中在回流下加热过夜。将所得暗色溶液冷却至室温，真空浓缩为暗棕色油状物。将该油状物经使用30％丙酮/己烷作为洗脱剂的硅胶管柱层析纯化以提供呈油状物的产物非对映异构体(4.61g，产率82％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.2(m，1H)，8.0(m，1H)，7.3-7.6(m，7H)，5.15(d，2H)，3.0(dd，1H)，2.8(m，1H)，1.25(d，3H)。MS m/z 555.2(M+H)⁺。

制备3-(1-(3，4-二氟苯基)丙-2-基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)-2，3-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(1H)-酮

将2-(3-(苄氧基)吡啶-2-基)-3-(1-(3，4-二氟苯基)丙-2-基)-5-(三氟甲基)-2，3-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(1H)-酮(4.61g，8.31mmol)溶解于无水乙醇(150mL)中。向其中添加10％钯/碳(0.50g)且将混合物在Parr震荡器上在45PSI下氢化2.5小时。经硅藻土过滤反应且用乙醇洗涤滤饼。将经合并的滤液真空浓缩为油状物。将该油状物经使用20％-40％丙酮/己烷作为洗脱剂的硅胶管柱层析纯化以产生呈浅黄色发泡体状的产物非对映异构体(3.86g，产率77％)。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.0(t，1H)，7.8(t，1H)，7-7.2(m，5H)，4.8(m，1H)，4.5(m，1H)，2.8-3.1(dd，2H)，1.3(d，3H)，1.0(d，3H)。MS m/z 465.3(M+H)⁺。

制备3-(1-(3，4-二氟苯基)丙-2-基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

将3-(1-(3，4-二氟苯基)丙-2-基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)-2，3-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(1H)-酮(27.3g，58.8mmol)溶解于4-甲基-2-戊酮(500mL)中。向其中添加二氧化锰(76.7g，882mmol)且将混合物加热至90℃历时1小时。将反应混合物冷却且经硅藻土过滤。用乙酸乙酯洗涤滤饼。将经合并的滤液真空浓缩为浅黄色固体(8.35g)。将固体于己烷中形成浆液且收集所得无色固体。将滤液浓缩且经使用20-30％丙酮/己烷作为洗脱剂的硅胶管柱层析纯化以产生额外产物(3.47g，总产率43.5％)。

制备(R)-4-氨基-N-(1-苯基丙-2-基)-2-(三氟甲基)烟酰胺

将4-氨基-2-(三氟甲基)烟酸(15g，61.83mmol)悬浮于无水DMF(300mL)及无水二氯甲烷(500mL)的混合物中。向其中添加三乙胺(30.4mL，216mmol)，接着添加L-***盐酸盐(12.7g，74.2mmol)。添加HBTU(30.5g，80.4mmol)且使混合物在室温下搅拌过夜。真空浓缩反应混合物以移除二氯甲烷。将所得DMF溶液倾入水中，用乙酸乙酯(1L)萃取。将有机层依次用1N NaOH、饱和碳酸氢钠、水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩以产生油状物。将该油状物经使用40-70％乙酸乙酯/庚烷作为洗脱剂的硅胶管柱层析纯化以提供呈无色发泡体状的产物(18.3g，产率92％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.2(d，1H)，7.2-7.4(m，5H)，6.6(d，1H)，5.8(d，1H)，4.7(bs，2H)，4.5(m，1H)，2.9(m，2H)，1.25(d，3H)。MSm/z 324.3(M+H)⁺。

制备2-(2-甲氧基苯基)-3-((R)-1-苯基丙-2-基)-5-(三氟甲基)-2，3-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(1H)-酮

将(R)-4-氨基-N-(1-苯基丙-2-基)-2-(三氟甲基)烟酰胺(16.23g，50.2mmol)及邻大茴香醛(8.2g，60.2mmol)连同催化量的4-甲苯磺酸(0.174g，1.0mmol)一起合并于无水甲苯(550mL)中。将该混合物在配备有迪恩-斯达克捕集器的圆底烧瓶中在回流下加热过夜。将所得暗色溶液冷却至室温，随后真空浓缩为暗棕色糊剂。将该糊剂悬浮于乙酸乙酯中，且通过过滤收集所得固体以提供产物(6.94g)。将滤液真空浓缩，随后经使用40％-60％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂的硅胶管柱层析纯化以产生12.1g额外的产物非对映异构体(总产率84％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.19(d，1H)，7.1-7.3(mm，7H)，6.9(d，1H)，6.8(t，1H)，6.5(d，1H)，5.95(d，1H)，5.7(d，1H)，4.8(m，1H)，3.95(s，3H)，3.0(dd，1H)，2.4(dd，1H)，1.3(d，3H)。MS m/z442.4(M+H)⁺。

制备(R)-2-(2-甲氧基苯基)-3-(1-苯基丙-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

将2-(2-甲氧基苯基)-3-((R)-1-苯基丙-2-基)-5-(三氟甲基)-2，3-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(1H)-酮(19.04g，43.13mmol)溶解于丙酮(800mL)中。向其中添加5％高锰酸钾水溶液(34.1g KMnO₄于700mL水中)。将所得混合物在室温下搅拌过夜。通过将反应倾入10％亚硫酸氢钠水溶液(3L)中而使其终止。用乙酸乙酯(3×700mL)萃取所得水溶液。将有机相用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤且真空浓缩以提供油状物。将该油状物经使用25％-50％乙酸乙酯/庚烷作为洗脱剂的快速层析纯化以提供呈固体状的产物。将该固体由乙酸乙酯/己烷重结晶以产生无色固体(12.5g)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.8(d，1H)，7.65(d，1H)，7.4(t，1H)，7.15(m，7H)，6.95(t，1H)，6.8(d，1H)，6.35(d，1H)，4.2(m，1H)，3.8(s，3H)，3.6(dd，1H)，2.9(dd，1H)，1.75(d，3H)。MS m/z 440.3(M+H)⁺。

实例1

制备2-(2-羟基-苯基)-3-苯乙基-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

制备1a：4-氨基-2-氯-N-苯乙基-烟酰胺

将4-氨基-2-氯-烟酸(1g，5.795mmol)溶解于DMF(30mL)及二氯甲烷(50mL)中。添加苯乙胺(0.87mL，6.954mmol，1.2当量)，接着添加TEA(1.21mL，8.693mmol，1.5当量)及HBTU(2.64g，6.954mmol，1.2当量)且将反应在20℃下搅拌12小时。随后用二氯甲烷稀释反应混合物且用20％异丙醇/二氯甲烷萃取水层。将经合并的有机部分用0.5N NaOH溶液、NH₄Cl溶液、水、盐水洗涤，经无水MgSO₄干燥，过滤且浓缩。将粗物质经使用2∶1乙酸乙酯∶己烷的管柱层析纯化以提供1.23g(77％)产物。

制备1b：5-氯-2-(2-甲氧基-苯基)-3-苯乙基-2，3-二氢-1H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

在20℃下向4-氨基-2-氯-N-苯乙基-烟酰胺(808mg，2.93mmol)于8mL乙腈中的溶液中添加邻大茴香醛(399mg，2.93mmol)及催化量的对甲苯磺酸(10mg，0.059mmol)。随后，在迪恩-斯达克捕集器下将所得溶液加热至回流历时12小时。将反应混合物冷却至20℃且用乙酸乙酯稀释。随后将混合物在乙酸乙酯与碳酸氢钠水溶液之间分配。将有机相用NaHCO₃洗涤3次、用水洗涤1次、用盐水洗涤1次，且随后经无水Na₂SO₄干燥，过滤且蒸发至干燥。获得1.08g浅黄色粘性固体。所得粗物质不经进一步纯化即使用。

制备1c：5-氯-2-(2-甲氧基-苯基)-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

将5-氯-2-(2-甲氧基-苯基)-3-苯乙基-2，3-二氢-1H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮(1.0g，2.54mmol)置放于一烧瓶中，添加丙酮(10mL)且将混合物在20℃下剧烈搅拌。添加5％高锰酸钾(KMnO₄)水溶液(50.8mmol，2当量)。由HPLC监控反应进程。将反应搅拌12小时。再添加2当量KMnO₄且将反应在环境温度下搅拌4小时直至根据HPLC反应完成。随后，将反应用10％NaHSO₃水溶液终止，通过重力过滤来过滤且在乙酸乙酯与水之间分配。将水层用乙酸乙酯萃取3次，将经合并的有机层用水洗涤1次、用盐水洗涤1次，且随后经无水Na₂SO₄干燥。过滤且蒸发溶剂产生398mg棕褐色固体。将最初的滤饼悬浮于二氯甲烷中且经超声波处理5分钟，随后再重复两次。将悬浮液经尼龙过滤器过滤，合并且蒸发至干燥，再产生282mg棕褐色固体状产物，其合并总粗产量为680mg(68％)。产物不经纯化即进一步使用。

制备1d：5-碘-2-(2-甲氧基-苯基)-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮：

在氮下在黑暗中，将5-氯-2-(2-甲氧基-苯基)-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮(300mg，0.766mmol)、三甲基硅烷基氯(0.097mL，0.766mmol)及碘化钠(344mg，2.297mmol，3当量)于丙腈(7.66mL)中的混合物加热至回流历时4小时。TLC显示无起始物质剩余。将反应混合物冷却至环境温度且倾入1N NaOH(30mL)中。将所得悬浮液用乙酸乙酯(3×20mL)萃取，将经合并的萃取物用水、盐水洗涤且干燥，过滤且真空浓缩以产生棕色油状物。将粗产物经使用于二氯甲烷中的10％乙酸乙酯的管柱层析纯化以提供235mg(64％)产物。

制备1e：2-(2-甲氧基-苯基)-3-苯乙基-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

在火焰干燥的2打兰(2-dram)小瓶中，在氮下，将5-碘-2-(2-甲氧基-苯基)-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮(67mg，0.138mmol)、2，2-二氟-2-(氟-磺酰基)乙酸甲酯(0.035mL，0.277mmol，2当量)、碘化铜(32mg，0.167mmol，1.2当量)、HMPA(0.048mL，0.277mmol，2当量)于DMF(2mL)中的混合物在80℃下搅拌12小时。随后将反应混合物冷却至环境温度，用二氯甲烷稀释且用水洗涤3次。随后将有机相经无水MgSO₄干燥，过滤且浓缩。将粗物质在制备型TLC上于50∶50乙酸乙酯∶己烷中纯化以提供16.8mg产物(29％)。

2-(2-羟基-苯基)-3-苯乙基-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

将2-(2-甲氧基-苯基)-3-苯乙基-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮(8.4mg，0.0197mmol)溶解于二氯甲烷(0.5mL)中，将混合物冷却至0℃且添加三氯化硼溶液(1M于己烷中，0.16mL，8当量)。随后将反应混合物在40℃下加热过夜。随后将反应混合物冷却至环境温度，用甲醇(2mL)稀释且随后加热至70℃历时1小时。蒸发溶剂且将残余物在二氯甲烷与饱和NaHCO₃溶液之间分配。用二氯甲烷萃取水层3次。将所汇集的有机萃取物用水、盐水洗涤，干燥，过滤且浓缩。将粗产物使用制备型TLC于50∶50乙酸乙酯∶己烷中纯化以提供5mg(62％)最终产物。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.82(d，1H)，7.67(d，1H)，7.41(t，1H)，7.27(m，1H)，7.15(m，3H)，7.05(m，2H)，6.86(m，2H)，4.38(t，2H)，2.94(t，2H)。MS m/z 412.3(M+H)⁺。

或者，可使用4-氨基-2-(三氟甲基)烟酸作为起始物质来制备2-(2-羟基-苯基)-3-苯乙基-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮。

制备1f：4-氨基-N-苯乙基-2-(三氟甲基)烟酰胺

将4-氨基-2-(三氟甲基)烟酸(150mg，0.78mmol)溶解于DMF(4mL)及二氯甲烷(6mL)中。添加苯乙胺(106mg，0.87mmol，1.2当量)，接着添加TEA(0.15mL，1.1mmol，1.5当量)及HBTU(331mg，0.87mmol，1.2当量)且将反应在20℃下搅拌12小时。随后用二氯甲烷稀释反应混合物且用二氯甲烷萃取水层。将经合并的有机部分用0.5N NaOH溶液、NH₄Cl溶液、水、盐水洗涤，经无水MgSO₄干燥，过滤且浓缩。将粗物质经使用2∶1乙酸乙酯∶己烷的管柱层析纯化以提供79mg(36％)产物。可通过使用上文制备1f的标题化合物且根据如上文所述的制备1b中所述的程序(用适当醛R²′CHO缩合)，制备1c中所述的程序(用KMnO₄氧化)及使用BCl₃的去保护步骤(当将R²′中的甲氧基部分转化为R²中的羟基时)将产物转化为2-(2-羟基-苯基)-3-苯乙基-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮。

可以类似于实例1的方式，使用制备1a的4-氨基-2-氯-N-苯乙基-烟酰胺或4-氨基-2-氯-6-甲基烟酸或制备1f的4-氨基-N-苯乙基-2-(三氟甲基)烟酰胺或其他适当烟酰胺衍生物及相应式R²′CHO的醛(应理解R²′部分中的甲氧基或苄氧基可经去保护为相应羟基以提供式I化合物中的R²部分)来制备以下标题化合物。

实例2

2-(3-氟-2-羟基-苯基)-3-苯乙基-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.90(d，1H)，7.75(d，1H)，7.25(t，3H)，7.05(m，3H)，6.90(m，2H)，4.39(m，2H)，2.94(m，2H)。MS m/z 430.3(M+H)⁺。

实例3

2-(3-羟基-吡啶-2-基)-3-苯乙基-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.95(d，1H)，8.30(d，1H)，7.75(d，1H)，7.45(m，3H)，7.25(m，5H)，4.99(m，2H)，3.33(m，2H)。MS m/z 413.2(M+H)⁺。

实例4a

(R)-2-(2-羟基-苯基)-3-(1-甲基-2-苯基-乙基)-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

将(R)-2-(2-甲氧基苯基)-3-(1-苯基丙-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮(6.6g，15.02mmol)溶解于无水二氯甲烷(75mL)中且在冰浴中冷却至0℃。向其中缓慢添加三氯化硼(31.5mL，31.5mmol)的1M二氯甲烷溶液以维持温度。添加之后，将反应混合物搅拌2-5分钟。在搅拌下将反应混合物经由套管转移至0℃的二乙醇胺水溶液(10.3g，97.6mmol于150mL水中)中。使反应混合物升至室温且搅拌1小时。用二氯甲烷稀释反应混合物，且分离各层。将有机层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤且真空浓缩以提供发泡体。将该发泡体经使用20％-40％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂的硅胶管柱层析纯化以产生无色发泡体，随后将该无色发泡体由乙酸乙酯/己烷结晶以提供产物(4.2g)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.79(d，1H)，7.6(d，1H)，7.45(m，1H)，7.00(m，6H)，6.90(m，2H)，3.60(m，2H)，3.10(m，2H)，1.99(t，3H)。MS m/z 426.3(M+H)⁺。

实例4b

(S)-2-(2-羟基-苯基)-3-(1-甲基-2-苯基-乙基)-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

类似于实例4a，由(S)-2-(2-甲氧基苯基)-3-(1-苯基丙-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮起始制备。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.79(d，1H)，7.6(d，1H)，7.45(m，1H)，7.00(m，6H)，6.90(m，2H)，3.60(m，2H)，3.10(m，2H)，1.99(t，3H)。MS m/z 426.3(M+H)⁺。

实例5

(R)-2-(3-羟基-吡啶-2-基)-3-(1-甲基-2-苯基-乙基)-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.78(d，1H)，8.31(dd，1H)，7.49(d，1H)，7.41(m，2H)，7.02(m，2H)，6.88(m，3H)，5.31(m，1H)，3.62(dd，1H)，3.18(dd，1H)，1.89(d，3H)。MS m/z 427.4(M+1)。

实例6

(R，S)-2-(3-羟基-吡啶-2-基)-3-(1-甲基-2-(2-氟苯基)乙基)-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)，8.784(d，1H)，8.10(dd，1H)，7.701(d，1H)，7.40(m，2H)，7.14(m，1H)，6.97(t，1H)，6.890(m 2H)，4.23(m，1H)，3.42(dd，2H)，3.29(dd，2H)，1.59(d，3H)

MS m/z(M+1)445.4

通过制备型层析法在Chiralpak^TM AS(10cm×50cm)管柱(Daicel(U.S.A.)Chemical Industries，Ltd，Fort Lee，NJ 07024，U.S.A.)上使用庚烷/EtOH(90/10)作为移动相，以475mL/min的流动速率，可将实例6的外消旋化合物分离为其单一对映异构体组份(实例6a及6b)。

实例6a

对映异构体1：2-(3-羟基-吡啶-2-基)-3-(1-甲基-2-(2-氟苯基)乙基)-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)，8.78(d，1H)，8.10(dd，1H)，7.70(d，1H)，7.40(m，2H)，7.12(m，1H)，6.96(dt，1H)，6.87(m，2H)，4.28(m，1H)，3.34(m，1H)，3.30(m，1H)，1.59(d，2H)

LC/MS(M+1)＝445.3

实例6b

对映异构体2：2-(3-羟基-吡啶-2-基)-3-(1-甲基-2-(2-氟苯基)乙基)-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

LC/MS(M+1)＝445.3。

实例7

2-(2-羟苯基)-3-(2-氟苯基)乙基)-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.8(d，1H)，7.75(d，1H)，7.4(m，1H)，7.2(m，1H)，6.8-7(m，6H)，4.2(t，2H)，2.95(t，2H)。MS m/z 430.1(M+H)⁺。

实例8

2-(2-羟苯基)-3-(3-氟苯基)乙基)-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.8(d，1H)，7.75(d，1H)，7.45(t，1H)，7.15(m，2H)，7(m，2H)，6.9(m，1H)，6.65(d，1H)，6.55(d，1H)，4.15(t，2H)，2.9(t，2H)。MS m/z 430.1(M+H)⁺。

实例9

2-(3-氟-2-羟基-苯基)-3-[2-(2-氟-苯基)-乙基]-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.85(d，1H)，7.8(d，1H)，7.35(m，1H)，7.2(m，1H)，7(m，2H)，6.9(m，1H)，6.65(d，1H)，6.6(d，1H)，4.15(t，2H)，2.9(t，2H)。MS m/z 448.2(M+H)⁺。

实例10

2-(2-羟基-苯基)-7-甲基-3-(苯基-乙基)-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.6(s，1H)，7.45(m，1H)，7.30(m，1H)，7.12(m，5H)，6.90(m，2H)，4.44(m，2H)，2.99(m，2H)，2.80(s，3H)。MS m/z 426.3(M+H)⁺。

实例11

2-(3-氟-2-羟基-苯基)-3-[2-(3-氟-苯基)-乙基]-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.8(d，1H)，7.75(d，1H)，7.25(m，1H)，7.2(m，1H)，6.8-7(m，4H)，6.75(d，1H)，4.2(t，2H)，2.95(t，2H)。MS m/z 448.2(M+H)⁺。

实例12

3-[2-(2-氟-苯基)-乙基]-2-(3-羟基-吡啶-2-基)-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

¹H NMR(400MHz，(CD₃)₂SO)δ9.89(s，1H)，8.95(d，1H)，8.25(d，1H)，7.95(d，1H)，7.50(m，2H)，7.25(m，1H)，7.00(m，3H)，4.11(m，2H)，2.99(m，2H)。MS m/z 431.1(M+H)⁺。

实例13

3-[2-(3，4-二氟-苯基)-乙基]-2-(3-羟基-吡啶-2-基)-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ12.66(brs，1H)，8.86(d，1H)，8.30(d，1H)，7.66(d，1H)，7.44(m，2H)，7.10-6.95(m，3H)，4.84(t，2H)，3.24(t，2H)。MS(LC-MS)449.2(M+H)⁺。

实例14

3-[2-(2，4-二氟-苯基)-乙基]-2-(3-羟基-吡啶-2-基)-5-三氟甲基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)旋转异构混合物δ12.40(brs)，8.85(d)，8.82(d)，8.25(m)，7.68(d)，7.65(d)，7.37(m)，7.15(q)，7.06(m)，6.71(m)，4.98(t)，4.20(t)，3.23(t)，3.13(t)。

MS(LC-MS)449.2(M+H)⁺。

实例15

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.83(d，1H)，7.84(brs，1H)，7.67(d，1H)，7.44(dt，1H)，7.28(dd，1H)，7.04(t，1H)，7.02(d，1H)，6.91(q，1H)，6.59(m，2H)，4.34(t，2H)，2.88(t，2H)。

MS(LC-MS)448.2(M+H)⁺。

实例16

2-(2-羟基-苯基)-5-甲基氨基-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

将5-氯-2-(2-羟基-苯基)-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮(得自实例1，制备1c及去保护1f)(0.0048mmol，1当量)溶解于甲醇(0.5mL)中，随后添加500μL甲基胺(2M溶液于甲醇中)。随后将反应混合物加热至50℃历时48小时。移除溶剂且将粗产物经制备型HPLC或制备型TLC(80％乙酸乙酯于己烷中)纯化。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.17(d，1H)，7.40(t，1H)，7.15(m，3H)，7.05(d，1H)，6.94(m，2H)，6.80(m，2H)，6.59(d，1H)，4.10(t，2H)，3.08(s，3H)，2.85(t，2H)。MS m/z 373.2(M+H)⁺。

可以类似于实例16的方式，用相应的胺按照实例16的程序，接着使用实例1的最后步骤中的利用BCl₃的去保护条件来制备以下标题化合物(实例17-23)。

实例17

2-(2-羟基-苯基)-5-异丙基氨基-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ9.00(m，1H)，8.17(d，1H)，7.40(t，1H)，7.15(m，3H)，7.05(d，1H)，6.94(m，2H)，6.80(m，2H)，6.59(d，1H)，4.30(m，1H)，4.09(t，2H)，2.85(t，2H)，1.32(d，6H)。MS m/z 401.3(M+H)⁺。

实例18

2-(2-羟基-苯基)-3-苯乙基-5-吡咯烷-1-基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.12(d，1H)，7.41(t，1H)，7.14(m，4H)，6.95(m，2H)，6.85(m，2H)，6.70(d，1H)，4.12(t，2H)，3.51(t，4H)，2.81(t，2H)，1.97(m，4H)。MS m/z 413.2(M+H)⁺。

实例19

2-(2-羟基-苯基)-5-(4-甲基-哌嗪-1-基)-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.27(d，1H)，7.4(m，1H)，7.11-7.15(m，4H)，6.94(m，2H)，6.88(d，1H)，6.82(m，2H)，4.15(t，2H)，3.46(bs，4H)，2.80(t，2H)，2.65(t，4H)，2.36(S，3H)。MS m/z 440.1(M+H)⁺。

实例20

2-(2-羟基-苯基)-3-苯乙基-5-哌嗪-1-基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.26(d，1H)，7.41(t，1H)，7.14-7.10(m，4H)，6.92-6.96(m，2H)，6.89(d，1H)，6.83-6.81(m，2H)，4.16(t，2H)，3.42(t，4H)，3.04(t，4H)，2.79-2.83(m，2H)。MS m/z 428.2(M+H)⁺。

实例21

5-二甲基氨基-2-(2-羟基-苯基)-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.19(d，1H)，7.39-7.43(m，1H)，7.15-7.09(m，4H)，6.98-6.94(m，2H)，6.83-6.80(m，2H)，6.75(d，1H)，4.11(t，2H)，3.07(s，6H)，2.82(t，2H)。MS m/z 387.1(M+H)⁺。

实例22

2-(2-羟基-苯基)-5-吗啉-4-基-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.28(d，1H)，7.44-7.39(m，1H)，7.15-7.11(m，4H)，6.99-6.95(m，2H)，6.89(d，1H)，6.83-6.81(m，2H)，4.14(t，2H)，3.86(t，4H)，3.41(t，4H)，2.81(t，2H)。MS m/z 429.2(M+H)⁺。

实例23

5-吖丁啶-1-基-2-(2-羟基-苯基)-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]-嘧啶-4-酮

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.19(d，1H)，7.4(t，1H)，7.15-7.13(m，3H)，7.07-7.04(m，1H)，6.95-6.93(m，2H)，6.82-6.8(m，2H)，6.71(d，1H)，4.26(t，4H)，4.09(t，2H)，2.82(t，2H)，2.37(q，2H)。MS m/z 399.1(M+H)⁺。

实例24

制备2-(2-羟基-苯基)-3-苯乙基-5-苯基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

将5-氯-2-(2-甲氧基-苯基)-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮、苯基硼酸(1.1当量)、四(三苯膦)钯(7mol％)及2N Na₂CO₃水溶液(4当量)合并于二氧杂环己烷(0.5mL)中且在微波中加热至140℃历时15分钟。将反应混合物冷却至室温，用水稀释且用乙酸乙酯萃取(3次)。将经合并的有机萃取物用盐水洗涤，经无水MgSO₄干燥且过滤。将粗产物在制备型TLC上使用1∶1乙酸乙酯∶己烷纯化。通过使用实例1的最后步骤中的利用BCl₃的甲基醚去保护条件及分离条件可获得所需产物。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.90(s，1H)，8.78(d，1H)，7.53(m，2H)，7.46(m，3H)，7.37(t，1H)，7.29(d，1H)，7.13(m，3H)，6.97(m，2H)，6.77(m，2H)，4.30(t，2H)，2.79(t，2H)。MS m/z 420.4(M+H)⁺。

可以类似于实例24的方式，用相应的硼酸按照实例24的程序，接着使用实例1的最后步骤中的利用BCl₃的去保护条件及分离条件来制备以下标题化合物(实例25-29)。

实例25

5-苄基-2-(2-羟基-苯基)-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ9.40(s，1H)，7.58(d，1H)，7.40-7.26(m，4H)，7.24(m，2H)，7.12(m，5H)，6.96(m，2H)，6.74(m，2H)，4.87(s，2H)，4.29(t，2H)，2.81(t，2H)。MS m/z 434.3(M+H)⁺。

实例26

2-(2-羟基-苯基)-5-甲基-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.44(d，1H)，7.42(m，2H)，7.30-7.10(m，5H)，7.00(m，1H)；6.82(m，2H)，4.30(t，2H)，3.16(s，3H)，2.89(t，2H)。MSm/z 358.3(M+H)⁺。

实例27

5-(6-二甲基氨基-吡啶-3-基)-2-(2-羟基-苯基)-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.72(d，1H)，8.30(s，1H)，7.72(d，1H)，7.46(m，2H)，7.15(m，4H)，7.00(m，2H)，6.80(m，2H)，6.73(d，1H)，4.08(t，2H)，3.19(s，6H)，2.80(t，2H)。MS m/z 464.4(M+H)⁺。

实例28

5-(6-二甲基氨基-5-甲基-吡啶-3-基)-2-(2-羟基-苯基)-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.77(d，1H)，8.20(s，1H)，7.66(s，1H)，7.54(d，1H)，7.45(m，1H)，7.19(d，1H)，7.12(m，3H)，6.99(m，2H)，6.78(m，2H)，4.09(t，2H)，2.87(s，6H)，2.80(t，2H)，2.40(s，3H)。MS m/z 478.4(M+H)⁺。

实例29

5-(6-吡咯烷-5-吡啶-3-基)-2-(2-羟基-苯基)-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.72(d，1H)，8.28(s，1H)，7.72(d，1H)，7.45(m，2H)，7.19(d，1H)，7.15(m，3H)，6.99(m，2H)，6.79(m，2H)，6.58(d，1H)，4.09(t，2H)，3.55(t，4H)，2.80(t，2H)，2.07(m，4H)。MS m/z 490.4(M+H)⁺。

实例30

制备2-(2-羟基-苯基)-5-甲氧基-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

制备2-(2-苄氧基-苯基)-5-氯-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

使5-氯-2-(2-甲氧基-苯基)-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮经受实例1的最后步骤中的相同去保护条件以提供所需的5-氯-2-(2-羟基-苯基)-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮。将5-氯-2-(2-羟基-苯基)-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮(88mg，0.233mmol)、碳酸钾(64mg，0.466mmol，2当量)及苄基溴(0.029mL，0.245mmol，1.05当量)于2mL丙酮中的混合物加热至回流过夜。将反应混合物冷却至室温(RT)，经硅藻土过滤，浓缩且将残余物在制备型TLC板上使用1∶1乙酸乙酯∶庚烷纯化以产生95mg(87％)的所需产物。

制备2-(2-苄氧基-苯基)-5-甲氧基-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

将2-(2-苄氧基-苯基)-5-氯-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮、氢化钠(60％于矿物油中的悬浮液)(1.5当量)及相应醇(1.5当量)于THF中的混合物在70℃下加热过夜。将反应冷却至室温，移除溶剂，添加水及乙酸乙酯且分离各相。将水相用乙酸乙酯洗涤(2次)，将有机部分合并，用水、盐水洗涤，经无水MgSO₄干燥，过滤且浓缩。将残余物在制备型TLC板上使用1∶1乙酸乙酯∶庚烷纯化。

2-(2-羟基-苯基)-5-甲氧基-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

使溶解于甲醇(0.05M)中的2-(2-苄氧基-苯基)-5-甲氧基-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮经受H-cube氢化(室温，Pd/C滤筒)。随后移除溶剂且将产物在制备型TLC板上纯化以产生所需的2-(2-羟基-苯基)-5-甲氧基-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.33(d，1H)，7.42(t，1H)，7.16(m，3H)，7.05(m，2H)，6.95(m，2H)，6.80(m，2H)，4.10(m，5H)，2.86(t，2H)。MS m/z374.2(M+H)⁺。

可以类似于实例30的方式，用相应的醇按照实例30的程序，接着H-cube氢化来制备以下标题化合物(实例31-36)。

实例31

2-(2-羟基-苯基)-5-(1-甲基-环丙基甲氧基)-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.33(d，1H)，7.45(t，1H)，7.19(m，3H)，7.12(d，1H)，7.05(d，1H)，7.00(m，2H)，6.83(m，2H)，4.39(s，2H)，4.12(t，2H)，2.91(t，2H)，1.32(s，3H)，0.70(t，2H)，0.47(t，2H)。MS m/z 428.2(M+H)⁺。

实例32

2-(2-羟基-苯基)-3-苯乙基-5-丙氧基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.33(d，1H)，7.45(t，1H)，7.19(m，3H)，7.12(d，1H)，7.05(d，1H)，7.00(m，2H)，6.83(m，2H)，4.52(t，2H)，4.12(t，2H)，2.91(t，2H)，1.93(m，2H)，1.12(t，3H)。MS m/z 402.2(M+H)⁺。

实例33

5-环丁氧基-2-(2-羟基-苯基)-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.33(d，1H)，7.45(t，1H)，7.19(m，3H)，7.12(d，1H)，7.05(d，1H)，7.00(m，2H)，6.83(m，2H)，5.41(m，1H)，4.12(t，2H)，2.91(t，2H)，2.55(m，2H)，2.36(m，2H)，1.93(m，1H)，1.76(m，1H)。MSm/z 414.2(M+H)⁺。

实例34

2-(2-羟基-苯基)-5-异丁氧基-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.33(d，1H)，7.45(t，1H)，7.19(m，3H)，7.12(d，1H)，7.05(d，1H)，7.00(m，2H)，6.83(m，2H)，4.33(d，2H)，4.12(t，2H)，2.91(t，2H)，2.28(m，1H)，1.12(d，6H)。MS m/z 416.3(M+H)⁺。

实例35

2-(2-羟基-苯基)-5-异丙氧基-3-苯乙基-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.34(d，1H)，7.46(t，1H)，7.19(m，3H)，7.10(d，1H)，7.04(d，1H)，7.00(m，2H)，6.82(m，2H)，5.61(m，1H)，4.12(t，2H)，2.90(t，2H)，1.50(d，6H)。MS m/z 402.3(M+H)⁺。

实例36

2-(2-羟基-苯基)-3-苯乙基-5-(2，2，2-三氟乙氧基)-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.36(d，1H)，7.45(t，1H)，7.15(m，5H)，7.00(m，2H)，6.83(m，2H)，5.10(q，2H)，4.15(m，2H)，2.90(t，2H)。MS m/z442.2(M+H)⁺。

实例37

制备3-(1-(3，4-二氟苯基)丙-2-基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

将由上述相同反应条件所制备的2-(3-(苄氧基)吡啶-2-基)-3-(1-(3，4-二氟苯基)丙-2-基)-5-(三氟甲基)-2，3-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(1H)-酮(12.1克，21.8mmol)溶解于300mL乙醇中且添加至含有10％Pd(C)的parr瓶中。使混合物经受氢化条件(45psi)历时两小时。此时，将反应混合物经硅藻土过滤且用乙醇洗涤。将滤液真空浓缩且经硅胶层析纯化以产生浅黄色发泡体3-(1-(3，4-二氟苯基)丙-2-基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)-2，3-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(1H)-酮。

将3-(1-(3，4-二氟苯基)丙-2-基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)-2，3-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(1H)-酮(5.90g，12.7mmol)溶解于500mL的4-甲基-2-戊酮中。向该溶液中添加二氧化锰(16.6g，191mmol)且将混合物加热至90℃历时1小时。将反应冷却，经硅藻土过滤且用CH₂Cl₂洗涤。收集滤液且将其真空浓缩为黄色固体，将黄色固体经硅胶层析纯化以产生外消旋混合物3-(1-(3，4-二氟苯基)丙-2-基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮。

可通过制备型层析法在Chiralcel OD-H(2.1cm×25cm)管柱(Daicel(U.S.A.)Chemical Industries，Ltd，Fort Lee，NJ 07024，U.S.A.)上使用MeOH/CHCl₃(3/1)作为移动相，以65g/min的流动速率，将实例37的外消旋化合物分离为其单一对映异构体组份(实例37a及37b)。

实例37a

(R)-3-(1-(3，4-二氟苯基)丙-2-基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ11.4(s，1H)，8.85(d，1H)，8.39(d，1H)，7.60(d，1H)，7.42(m，2H)，6.99(m，2H)，6.67(brs，1H)，5.24(m，1H)，3.63(m，1H)，3.24(m，1H)，1.90(d，3H)。

MS m/z 463.3(M+H)⁺。

实例37b

(S)-3-(1-(3，4-二氟苯基)丙-2-基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

MS m/z 463.3(M+H)⁺。

实例38a

3-(1-(2，4-二氟苯基)丙-2-基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.90(d，1H)，8.30(d，1H)，7.60(d，1H)，7.42(m，2H)，6.99(m，1H)，6.66(m，2H)，5.65(m，1H)，3.63(m，1H)，3.20(m，1H)，1.90(d，3H)。

MS m/z 463.2(M+H)⁺。

实例38b

MS m/z 463.2(M+H)⁺。

实例39

3-(2-甲氧基苯乙基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ10.64(s，1H)，8.87(d，1H)，8.17(dd，1H)，7.87(d，1H)，7.46(dq，2H)，7.10(dt，1H)，6.81(t，1H)，6.79(t，1H)，6.721(t，1H)，3.97(t，2H)，3.45(s，3H)，2.75(t，2H)。MS m/z 443.1(M+H)⁺。

实例40

3-(2，3-二氟苯乙基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.85(d，1H)，8.28(m，1H)，7.65(d，1H)，7.37(m，2H)，6.95(m，4H)，5.01(t，2H)，3.31(t，2H)。MS m/z 449.1(M+H)⁺。

实例41

3-(5-氟-2-甲氧基苯乙基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.90(d，1H)，8.20(d，1H)，7.70(d，1H)，7.38(m，2H)，6.80(m，1H)，6.56(m，2H)，3.40(s，3H)，3.01(m，2H)。MS m/z 461.2(M+H)⁺。

实例42

3-(2-氟-6-甲氧基苯乙基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

MS m/z 461(M+H)⁺。

实例43

2-(3-羟基吡啶-2-基)-3-(1-(2-甲氧基苯基)丙-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.90(d，1H)，8.10(m，1H)，7.70(d，1H)，7.40(m，2H)，7.10(t，1H)，6.90(d，1H)，6.70(d，1H)，6.61(t，1H)，4.45(m，1H)，3.40(s，3H)，3.39(m，1H)，3.01(m，2H)，1.75(d，3H)。MS m/z 457.3(M+H)⁺。

实例43a

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.90(d，1H)，8.10(m，1H)，7.70(d，1H)，7.40(m，2H)，7.10(t，1H)，6.90(d，1H)，6.70(d，1H)，6.61(t，1H)，4.45(m，1H)，3.40(s，3H)，3.39(m，1H)3.01(m，2H)，1.75(d，3H)。MS m/z 457.3(M+H)⁺。

实例43b

实例44

3-(1-(2-氟苯基)丁-2-基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.75(d，1H)，8.07(brs，1H)，7.51(d，1H)，7.36(t，2H)，7.07(m，2H)，6.95(m，2H)，6.84(m，2H)，6.76(t，1H)，4.48(m，1H)，3.48(dd，1H)，3.24(dd，1H)，2.41(m，1H)，2.29(m，1H)，0.91(t，3H)。MSm/z 458.3(M+H)⁺。

实例45

3-(3-氟-2-甲氧基苯乙基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.90(d，1H)，8.18(d，1H)，7.80(d，1H)，7.45(m，2H)，6.99(m，1H)，6.85(m，1H)，6.79(d，1H)，4.25(m，2H)，3.60(s，3H)，2.99(m，2H)。MS m/z 461.2(M+H)⁺。

实例46

3-(2-环戊基乙基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

¹H NMR(400MHz，dmso-d₆)δ10.64(s，1H)，8.87(d，1H)，8.15(dd，1H)，7.86(d，1H)，7.43(m，2H)，3.77(bm，2H)，1.48(brm，5H)，1.34(brm，4H)，0.69(brm，2H)。MS m/z 405.2(M+H)⁺。

实例47

3-(2-环己基乙基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

¹H NMR(400MHz，dmso-d₆)δ10.62(s，1H)，8.87(d，1H)，8.15(dd，1H)，7.86(d，1H)，7.43(m，2H)，3.81(m，2H)，1.48(bm，5H)，1.50-1.25(m，7H)，1.00(m，4H)，0.58(m，2H)。MS m/z 419.2(M+H)⁺。

实例48a

(R)-3-(1-环己基丙-2-基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

¹H NMR(400MHz，dmso-d₆)δ10.61(s，1H)，8.85(d，1H)，8.12(dd，1H)，7.83(d，1H)，7.39(m，2H)，3.97(brs，1H)，1.82(m，1H)，1.72(m，1H)，1.46(m，2H)，1.42(d，3H)，1.35(m，2H)，1.17-0.93(m，5H)，0.66(m，1H)，0.56(m，1H)。MS m/z 433.3(M+H)⁺。

实例48b

(S)-3-(1-环己基丙-2-基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

实例49

(R，S)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-3-(2-(四氢-2H-吡喃-2-基)乙基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

¹H NMR(400MHz，dmso-d₆)δ10.61(s，1H)，8.86(d，1H)，8.15(dd，1H)，7.85(d，1H)，7.41(m，2H)，3.94(m，1H)，3.79(m，1H)，3.56(d，1H)，3.10(t，1H)，3.02(m，1H)，1.57(m，3H)，1.27(m，3H)，1.07(m，4H)，0.93(m，1H)。MSm/z 421.3(M+H)⁺。

实例50

(R)-2-(3-氟-2-羟苯基)-3-(1-苯基丙-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.80(d，1H)，7.60(d，1H)，7.2(m，5H)，6.90(m，1H)，6.80(m，1H)，6.67(brs，1H)，4.44(m，1H)，3.63(m，1H)，3.10(m，1H)，1.90(d，3H)。MS m/z 444.3(M+H)⁺。

实例51

(R)-2-(1H-咪唑-2-基)-3-(1-苯基丙-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.79(d，1H)，7.58(d，1H)，7.4(s，1H)，7.30(d，1H)，7.10(m，4H)，6.98(m，1H)，3.70(m，1H)，3.30(m，1H)，1.90(d，3H)。MS m/z 400.2(M+H)⁺。

实例52

N-(2-(3-(2-氟苯乙基)-4-氧代-5-(三氟甲基)-3，4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2-基)吡啶-3-基)乙酰胺

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ9.40(brs，1H)，8.98(d，1H)，8.80(d，1H)，8.45(m，1H)，7.67(d，1H)，7.44(m，1H)，7.10(m，1H)，7.00(m，1H)，6.99(m，1H)，6.85(m，1H)，4.60(m，2H)，3.05(m，2H)，2.10(s，3H)。MS m/z 472.1(M+H)⁺。

实例53

(R)-3-(1-苯基丙-2-基)-2-(噻唑-4-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.99(s，1H)，8.89(d，1H)，7.60(d，1H)，7.59(s，1H)，7.10(m，3H)，6.98(m，2H)，4.61(m，1H)，3.61(m，2H)，3.10(m，2H)，1.90(d，3H)。MS m/z 417.2(M+H)⁺。

实例54

3-苯乙基-2-(噻唑-4-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.99(s，1H)，8.89(d，1H)，8.01(s，1H)，7.70(d，1H)，7.22(m，5H)，4.60(m，2H)，3.15(m，2H)，3.24(m，1H)。

实例55

3-(2-甲氧基苯乙基)-2-(2-羟基苯基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.82(d，1H)，7.65(d，1H)，7.40(m，1H)，7.20(m，2H)，6.90(m，2H)，6.79(d，1H)，6.65(m，2H)，4.60(t，2H)，3.40(s，3H)，3.01(t，2H)。MS m/z 442.3(M+H)⁺。

实例56

3-(2-氟苯乙基)-2-(噻唑-4-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.99(s，1H)，8.89(d，1H)，7.90(s，1H)，7.79(d，1H)，7.22(m，5H)，4.68(m，2H)，3.15(m，2H)。MS m/z 421.3(M+H)⁺。

实例57

(R)-2-环戊基-3-(1-苯基丙-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.79(d，1H)，7.59(d，1H)，7.2(m，5H)，4.67(brd，1H)，3.69(m，1H)，3.30(m，1H)，3.0(brm，1H)，1.90(m，8H)，1.89(d，3H)。MS m/z 402.3(M+H)⁺。

实例58

2-异丙基-3-苯乙基-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.80(d，1H)，8.65(d，1H)，7.35(m，5H)，4.42(m，2H)，3.13(m，2H)，2.99(m，1H)，1.90(d，6H)。MS m/z 362.3(M+H)⁺。

实例59

2-环戊基-3-苯乙基-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.79(d，1H)，8.65(d，1H)，7.35(m，5H)，4.40(m，2H)，3.10(m，2H)，2.00-1.6(m，8H)。MS m/z 388.3(M+H)⁺。

实例60

3-(2-甲氧基苯乙基)-2-(噻唑-4-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.89(t，2H)，8.70(d，1H)，7.45(s，1H)，7.10(m，1H)，6.79(m，1H)，6.70(m，1H)，6.60(d，1H)，4.80(m，2H)，3.40(s，3H)，3.0(t，2H)，MS m/z 433.4(M+H)⁺。

实例61

3-(2-环己基乙基)-2-(噻唑-4-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δppm 0.78-0.95(m，2H)，1.07-1.25(m，3H)，1.24-1.34(m，1H)，1.56-1.74(m，7H)，4.35-4.52(m，2H)，7.75(d，1H)，8.22(d，1H)，8.86(d，1H)，8.98(d，1H)。MS m/z 409.5(M+H)⁺。

实例62

2-(3-(2-环己基乙基)-4-氧代-5-(三氟甲基)-3，4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2-基)苯甲腈

¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ(ppm)0.67-0.80(m，2H)，1.03-1.20(m，4H)，1.44(d，2H)，1.50-1.57(m，2H)，1.57-1.65(m，3H)，3.87-4.02(m，2H)，7.64(d，1H)，7.70-7.81(m，2H)，7.85(t，1H)，7.93(d，1H)，8.91(d，1H)。MS m/z 427.5(M+H)⁺。

实例63

2-(3-氨基吡啶-2-基)-3-苯乙基-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.84(d，1H)，8.17(q，1H)，7.69(d，1H)，7.27(m，1H)，7.18(m，4H)，7.06(m，2H)，4.68(s，br，2H)，4.38(m，2H)，3.11(m，2H)。MS m/z 412.4(M+H)⁺。

实例64

N-(2-(4-氧代-3-苯乙基-5-(三氟甲基)-3，4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2-基)吡啶-3-基)甲烷磺酰胺

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.94(s，1H)，8.90(d，1H)，8.55(dd，1H)，8.12(dd，1H)，7.70(d，1H)，7.52(dd，1H)，7.22(m，3H)，7.07(m，2H)，4.44(m，2H)，3.19(m，2H)，3.11(s，3H)。MS m/z 490.5(M+H)⁺。

实例65

3-(1-(2-氟苯基)丙-2-基)-2-(噻唑-4-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.99(s，1H)，8.89(d，1H)，7.65(d，1H)，7.59(s，1H)，7.18(m，1H)，6.99(m，1H)，6.86(m，2H)，4.88(m，1H)，3.60(m，1H)，3.05(m，1H)，1.90(d，3H)。

MS m/z 435.2(M+H)⁺。

实例66

2-(3-羟基吡啶-2-基)-3-异戊基-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

¹H NMR(400MHz，dmso-d₆)δ10.63(s，1H)，8.87(d，1H)，8.16(m，1H)，7.86(d，1H)，7.42(m，2H)，3.79(t，2H)，1.40-1.28(m，3H)，0.58(d，6H)。MSm/z 379.2(M+H)⁺。

实例67

2-(3-羟基吡啶-2-基)-3-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

¹H NMR(400MHz，dmso-d₆)δ10.66(s，1H)，8.87(d，1H)，8.16(dd，1H)，7.86(d，1H)，7.42(m，2H)，3.79(d，2H)，3.64(dd，2H)，3.03(dt，2H)，1.76(m，1H)，1.24(d，2H)，0.94(dq，2H)。MS m/z 407.3(M+H)⁺。

实例68

2-(3-羟基吡啶-2-基)-3-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

¹H NMR(400MHz，dmso-d₆)δ10.68(s，1H)，8.91(d，1H)，8.19(dd，1H)，7.80(d，1H)，7.47(m，2H)，3.86(t，2H)，3.66(dd，2H)，3.12(t，2H)，1.46(q，2H)，1.26(m，3H)，0.86(dq，2H)。MS m/z 421.2(M+H)⁺。

实例69

3-(2-氟-5-甲氧基苯乙基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

MS m/z 461(M+H)⁺。

实例70

3-(2-氟-3-甲氧基苯乙基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.90(d，1H)，8.20(d，1H)，7.89(d，1H)，7.56(m，2H)，6.90(t，1H)，6.76(m，1H)，6.56(d，1H)，4.30(m，2H)，3.64(s，3H)，2.99(m，2H)。MS m/z 461.2(M+H)⁺。

实例71

2-(3-(2-氟苯乙基)-4-氧代-5-(三氟甲基)-3，4-二氢喹唑啉-2-基)苯甲腈

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.68(t，1H)，7.64(t，1H)，7.25(m，6H)，7.14(m，1H)，7.01(t，1H)，6.96(t，1H)，4.32(t，2H)，3.06(t，2H)。MS m/z 438.0(M+H)⁺。

实例72

N-(2-(3-(2-氟苯乙基)-4-氧代-5-(三氟甲基)-3，4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2-基)吡啶-3-基)-2，2，2-三氟乙酰胺

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ11.45(s，1H)，9.99(d，1H)，8.79(d，1H)，8.55(d，1H)，7.76(d，1H)，7.50(m，1H)，7.15(m，1H)，6.90(m，1H)，6.70(m，1H)，4.99(m，2H)，3.05(m，2H)。MS m/z 526.3(M+H)⁺。

实例73

(R)-2，2，2-三氟-N-(2-(4-氧代-3-(1-苯基丙-2-基)-5-(三氟甲基)-3，4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2-基)吡啶-3-基)乙酰胺

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ10.65(s，1H)，9.99(d，1H)，8.79(d，1H)，8.60(d，1H)，7.66(m，1H)，7.44(d，1H)，7.00(m，2H)，6.79(m，2H)，4.69(m，1H)，3.70(m，1H)，2.95(m，1H)，2.01(d，3H)。MS m/z 520.3(M+H)⁺。

实例74

3-环己基-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.99(d，1H)，8.25(d，1H)，7.77(d，1H)，7.43(m，2H)，4.80(m，1H)，2.65(m，2H)，1.50-1.25(m，8H)。MS m/z 391.3(M+H)⁺。

实例75

3-(环己基甲基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ12.39(brs，1H)，8.99(d，1H)，8.30(d，1H)，7.70(d，1H)，7.43(m，2H)，5.0(brs，2H)，1.50-1.25(m，10H)。MS m/z 405.4(M+H)⁺。

实例76

3-苯乙基-5-三氟甲基-2-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-3H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-酮

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ9.02(d，1H)；8.91-8.92(d，1H)；8.25-8.27(d，1H)；7.78-7.79(m，2H)；7.22-7.23(m，3H)；7.0-7.02(d，2H)；3.95(br，2H)，3.10-3.14(t，2H)。MS m/z 465.5(M+H)⁺。

实例77

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.88(d，1H)；8.87(s，1H)；8.22-8.24(d，1H)；7.73，7.72，7.69(t，2H)；7.20，7.19(d，3H)；6.98，6.96(d，2H)；3.88(m，1H)；3.64(br，1H)，3.36(br，1H)；1.59(s，3H)；1.55(br，1H)。LC/MS 479.5(M+H)⁺。

实例78

2-(5-氨基噻唑-4-基)-3-苯乙基-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

向2-(5-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)噻唑-4-基)-3-苯乙基-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮(7mg，0.014mmol)于乙醇中的溶液中添加羟基胺盐酸盐(9.82mg，0.14mmol)且将混合物加热至80℃历时60小时。随后将反应浓缩且经快速层析纯化以提供奶白色固体(1.5mg)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.72(d，1H)，8.02(s，1H)，7.52(d，1H)，7.30(m，5H)，6.93(s，br，2H)，4.89(t，2H)，3.17(t，2H)。MS m/z 418.3(M+H)⁺。

实例79

2-(2-(二氟甲基)苯基)-3-苯乙基-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

类似于实例1，由2-(二氟甲基)苯甲醛及4-氨基-N-苯乙基-2-(三氟甲基)烟酰胺起始制备。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.88(d，1H)，7.77(d，1H)，7.72(d，1H)，7.69(t，1H)，7.61(t，1H)，7.19(m，4H)，6.89(m，2H)，6.77(t，1H)，4.28(m，1H)，3.78(m，1H)，2.95(m，2H)。MS m/z 446.4(M+H)⁺。

实例80

2-(3-(二氟甲基)吡啶-2-基)-3-苯乙基-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

类似于实例1，由2-(二氟甲基)吡啶甲醛及4-氨基-N-苯乙基-2-(三氟甲基)烟酰胺起始制备。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.88(d，1H)，8.19(d，1H)，7.72(d，1H)，7.67(m，1H)，7.19(m，4H)，7.02(m，2H)，4.13(m，2H)，3.12(m，2H)。MS m/z 447.5(M+H)⁺。

实例81

3-(2-环己基乙基)-5-(三氟甲基)-2-(2-(三氟甲基)苯基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δppm 0.55-0.71(m，1H)0.73-0.86(m，1H)1.03-1.19(m，3H)1.24-1.41(m，2H)1.46-1.67(m，5H)1.68-1.83(m，1H)3.38-3.52(m，1H)4.07-4.25(m，1H)7.54(d，1H)7.69-7.84(m，3H)7.90(d，1H)8.89(d，1H)。MS m/z 470.5(M+H)⁺。

实例82

3-(2-环己基乙基)-5-(三氟甲基)-2-(3-(三氟甲基)吡啶-2-基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮

¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δppm 0.66-0.82(m，2H)，1.02-1.20(m，4H)，1.46(d，2H)，1.54-1.71(m，5H)，3.86(br.s.，2H)，7.72(dd，1H)，7.76(d，1H)，8.25(d，1H)，8.89(d，1H)，8.96(d，1H)。MS m/z 471.5(M+H)⁺。

下表提供所示出的实例的FLIPR IC₅₀数据。IC₅₀报导为微摩尔浓度，其中n为检定特定化合物的次数。

FLIPR检定数据表

实例	n＝	FLIPR IC₅₀(μM)
			1	6	0.05
2	6	0.62
			3	4	0.39
4a	11	0.06
			4b	3	0.16
5	4	0.02

6	4	0.05
			6a	5	0.05
6b	3	1.40
			7	6	0.13
8	5	0.09
			9	6	0.29
10	6	0.12
			11	5	0.46
12	12	0.25
			13	8	0.07
14	8	0.17
			15	4	0.16
16	3	10.8
			17	2	11.0
18	5	12.3
			19	1	＞100
20	1	＞100
			21	2	13.8
22	1	＞100
			23	3	13.7
24	1	2.60
			25	1	3.01
26	1	2.99
			27	1	2.26
28	1	4.83
			29	4	0.49
30	6	1.17
			31	3	1.93
32	5	0.57
			33	5	0.52
34	3	1.47
			35	6	0.38
36	2	0.60
			37a	11	0.08
37b	3	2.12
			38a	3	0.02
38b	3	4.69
			39	8	0.11
40	3	0.46
			41	7	0.25
42	3	1.12

43	2	1.12
			43a	2	0.53
43b	4	61.3
			44	4	2.44
45	2	1.87
			46	3	0.29
47	6	0.06
			48a	2	0.16
48b	2	1.69
			49	2	0.48
50	8	0.03
			51	4	0.11
52	2	0.23
			53	6	0.26
54	4	0.71
			55	5	0.72
56	6	1.54
			57	2	1.67
58	4	4.68
			59	4	7.79
60	4	23.2
			61	2	0.50
62	2	4.63
			63	2	0.77
64	2	61.8
			65	4	10.5
65a	4	0.32
			66	2	36.2
67	1	＞1.00
			68	1	＞1.00
69	2	66.9
			70	2	61.9
71	4	0.42
			72	4	0.94
73	4	0.20
			74	2	47.8
75	2	10000
			76	3	6.30
77	7	0.70
			78	2	9.83
79	3	0.39

80	2	0.30
			81	2	7.89
82	2	2.53

本申请案中所引用的所有文献，包括科技出版物、专利及专利申请案均以全文引用的方式并入本文中。

Claims

1.一种化合物，其选自由以下各物组成的组：

3-(1-(3，4-二氟苯基)丙-2-基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

(R)-3-(1-(3，4-二氟苯基)丙-2-基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

(S)-3-(1-(3，4-二氟苯基)丙-2-基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

2-(3-羟基吡啶-2-基)-3-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)-5-(三氟甲基)吡啶并 [4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；

2-(3-(二氟甲基)吡啶-2-基)-3-苯乙基-5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮；及

或它们的医药学上可接受的盐。

2.如权利要求1的化合物，其为(R)-3-(1-(3，4-二氟苯基)丙-2-基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮或(S)-3-(1-(3，4-二氟苯基)丙-2-基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮或其医药学上可接受的盐。

3.(R)-3-(1-(3，4-二氟苯基)丙-2-基)-2-(3-羟基吡啶-2-基)5-(三氟甲基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮或其医药学上可接受的盐。

4.一种医药组合物，其包含如权利要求1的化合物及医药学上可接受的佐剂。

5.如权利要求4的医药组合物，其中所述佐剂为载剂或稀释剂。

6.如权利要求1的化合物或其医药学上可接受的盐在制造药物中的用途，所述药物用于治疗以异常骨胳或矿物质体内平衡为特征的疾病或病症。

7.如权利要求6的用途，其中所述以异常骨胳或矿物质体内平衡为特征的疾病或病症选自由以下各病组成的组：副甲状腺机能减退症、骨质疏松症、骨质减少症、牙周病、佩吉特氏病、骨折、骨关节炎、类风湿性关节炎及恶性肿瘤的体液高钙血症。

8.如权利要求6的用途，其中所述以异常骨胳或矿物质体内平衡为特征的疾病或病症为骨质疏松症。

9.如权利要求1的化合物或其医药学上可接受的盐在制造药物中的用途，所述药物用于增加患者体内血清副甲状腺含量。