CN101541345A

CN101541345A - 稳定化的抗体制剂和其应用

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Publication number: CN101541345A
Application number: CNA2007800436377A
Authority: CN
Inventors: J·卡彭特; H·萨瑟斯; T·伦道夫; B·萨里纳斯; C·阿伦; S·毕晓普
Original assignee: MedImmune Vaccines Inc
Current assignee: MedImmune Vaccines Inc
Priority date: 2006-09-25
Filing date: 2007-09-25
Publication date: 2009-09-23

Abstract

本发明提供了优化免疫特异性结合感兴趣抗原的抗体的某些稳定液体制剂的方法。这类制剂适合经胃肠道外给予对象，稳定性提高、聚集水平较低至不可检测、抗体片段化/降解水平较低至不可检测以及抗体生物活性的损失非常少至无损失，即便长期储存也是如此。与非优化方法产生的制剂相比，本发明方法提供的制剂具有以下多项优点，包括运输和贮存条件严谨性较低或更易实现，在治疗、预防或诊断应用中给药频率较低和/或剂量较小。本发明还提供鉴定具有某些相特性的抗体，以便利用本发明方法配制该抗体的方法。还提供这类抗体制剂的预防、治疗和诊断应用。

Description

稳定化的抗体制剂和其应用

1.介绍

本发明提供了优化免疫特异性结合感兴趣抗原的抗体的某些制剂的方法。这类制剂适合经胃肠道外给予对象，稳定性提高、聚集水平较低至不可检测、抗体片段化/降解水平较低至不可检测以及抗体生物活性的损失非常少至无损失，即便长期储存也是如此。与非优化方法产生的制剂相比，本发明方法提供的制剂具有以下多项优点，包括运输和贮存条件严谨性较低或更易实现，在治疗、预防或诊断应用中给药频率较低和/或剂量较小。本发明还提供鉴定具有某些相特性(phase behavior)的抗体，以便利用本发明方法配制该抗体的方法。还提供这类抗体制剂的预防、治疗和诊断应用。

2.发明背景

蛋白质的不稳定性是蛋白质药物市场开发的主要障碍。具体说，蛋白质聚集(常常由不稳定引起)是所有药物开发阶段中的主要障碍之一。因此，在预测和理解蛋白质聚集时，存在部分解折叠中间体的瞬时群体和形成它们的条件很重要。这对于多结构域蛋白质如单克隆抗体(mAb)特别重要，单克隆抗体由于具有高结合亲和力和特异性、易于靶向特定抗原和总体抗聚集能力而成为非常流行的候选药物。由于以相同方式产生的抗体具有高序列相同性，所以常常认为它们在加工和储存过程中具有相似的相特性和稳定性。

目前，提供的许多抗体是冻干制剂。抗体冻干制剂有许多限制，包括冻干过程长和制造成本高。此外，冻干制剂在给予患者前须由保健工作人员在无菌条件下精确重建。因此，需要液体抗体制剂，其浓度相当于或高于重建的冻干制剂，以便不再需要在给药前重建该制剂。因此，这类制剂使得保健工作人员能够更快和更容易地将抗体给予患者。

而且，现有的某些液体抗体制剂保存期限很短，在储存期间可能由于化学和物理不稳定性而丢失抗体的生物学活性。化学不稳定性可能由以下因素导致：脱酰胺、外消旋、水解、氧化、β消除或二硫键交换，物理不稳定性可能由以下因素导致：抗体变性、聚集、沉淀或吸附。其中，已知聚集、脱酰胺和氧化是最常见的抗体降解的原因(Wang等，1988，J.of Parenteral Science&Technology 42(增刊)：S4-S26；Cleland等，1993，Critical Reviews in TherapeuticDrug Carrier Systems 10(4)：307-377)。因此，需要一种稳定的与感兴趣抗原结合的抗体的液体制剂，即使在长期储存过程中，这类制剂也具有高稳定性、较低至无法检测到的聚集水平、较低至无法检测到的抗体片段化/降解水平且抗体生物学活性下降很小甚至不下降。

3.发明内容

本发明提供稳定的抗体的液体抗体制剂，其含有非两性离子缓冲剂如磷酸盐(phosphate)(如Na₃PO₄)、tris、柠檬酸盐、琥珀酸盐和乙酸盐缓冲剂。在具体实施方式中，本发明提供稳定的含有高浓度抗体的液体制剂。在其它具体实施方式中，将本发明抗体制剂配制成适合胃肠道外给予对象(如皮内、肌肉内、腹膜内、静脉内和皮下)的形式。在另一具体实施方式中，该对象是人。

本发明提供稳定的抗体液体制剂，所述制剂包含浓度范围约为10mM至100mM或更高的磷酸盐，pH范围约为4.0至8.0；浓度范围约为0mM至200mM的NaCl；和浓度约为10mg/ml或更高的感兴趣抗体，例如，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体(包括其抗体片段)，例如，7F3com-2H2。本发明稳定液体制剂还可包含一种或多种赋形剂，如糖、表面活性剂和多元醇。在具体实施方式中，本发明液体制剂包含浓度范围约为0％至0.1％的表面活性剂(如吐温-20或吐温-80)；浓度范围约为0％至10％的蔗糖；和/或浓度范围约为0％至10％的海藻糖。在某些实施方式中，所述稳定液体制剂可用于皮下递送，包含浓度范围约为25mM至75mM(如，浓度约为50mM)的磷酸盐，pH范围约为6.0至6.5；浓度范围约为100mM至200mM(如浓度约为150mM)的NaCl；和浓度范围约为50mg/ml至150mg/ml(如约100mg/ml)的感兴趣抗体，例如免疫特异性结合IL-9多肽的抗体(包括其抗体片段)，如7F3com-2H2。

本发明抗体制剂在室温或4℃下储存较长时间(例如但不限于6个月、1年、2年、3年或5年)或在升高温度如38-42℃储存一段时间(例如但不限于1周、2周、3周、1个月、2个月、3个月、6个月或1年)后，优选保持改进的聚集特性。这类制剂的pH范围为4.0至8.0，如pH 6.2。

可使用本发明方法浓缩和产生任何类型抗体的稳定液体制剂。本发明方法所用的抗体可以是治疗性或预防性抗体，可用于治疗和/或控制各种疾病，包括但不限于：与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9受体(“IL-9R”)或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)、或者其一种或多种症状(如喘鸣)。自身免疫性疾病的例子包括但不限于：糖尿病、桥本病、自身免疫性肾上腺皮质功能不全、真性红细胞性贫血、多发性硬化、类风湿性心脏炎、***性红斑狼疮、类风湿性关节炎、慢性炎症、舍格伦综合征、多肌炎、皮肌炎和硬皮病。炎性疾病的例子包括但不限于：哮喘和***反应(I-IV型)。呼吸道感染的例子包括但不限于：上呼吸道和下呼吸道的感染，包括病毒感染、细菌感染和/或真菌感染。病毒感染的例子包括副流感病毒感染、流感病毒感染、肺炎后病毒感染或呼吸道合胞病毒(RSV)感染。本发明抗体制剂也可用于治疗患有或曾经患有支气管肺发育异常、先天性心脏病、囊性纤维变性或获得性或先天性免疫缺陷的对象。

可以配制并用于本发明方法的治疗性或预防性抗体的非限制性例子列于下述章节5.1.1，包括免疫特异性结合IL-9多肽的抗体或其片段，例如，4D4、4D4 H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F3 22D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4；特异性结合α_vβ₃整联蛋白的抗体，如MEDI-522(维他辛

)；特异性结合RSV抗原的抗体，如

(帕丽珠单抗)、MEDI-524(莫维珠单抗；

)；特异性结合CD2的抗体，如MEDI-507(西利珠单抗)；结合CD19的抗体，如MT-103；结合EphA2的抗体，如EA2、EA5、B233(包括其人和人源化形式)；和结合EphA4的抗体，如EA44(包括其人和人源化形式)。可配制并用于本发明方法的其它治疗性和预防性抗体也参见2006年6月23日提交的美国申请号11/473,537，题为“具有优化聚集和片段化特性的抗体制剂”(Antibody Formulations Having Optimized Aggregationand Fragmentation Profiles)，通过引用将其全文纳入本文。

在具体实施方式中，本发明提供了稳定的抗体(如单克隆抗体)液体制剂，经(例如)高效大小排阻色谱(HPSEC)测定，在生产、制备、运输和储存过程中，所述制剂具有高稳定性、抗体片段化和/或聚集水平较低至无法检测到、抗体(包括其抗体片段)生物学活性下降很少甚至不下降。在具体实施方式中，本发明稳定液体制剂包含抗体，例如，单克隆抗体(如免疫特异性结合IL-9多肽的单克隆抗体，如7F3com-2H2)。在其它实施方式中，本发明稳定液体制剂有利于给予免疫特异性结合IL-9多肽的抗体(包括其抗体片段)(如7F3com-2H2)，以预防、治疗和/或控制与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9受体(“IL-9R”)或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)、或者其一种或多种症状(如喘鸣)。自身免疫性疾病的例子包括但不限于：糖尿病、桥本病、自身免疫性肾上腺皮质功能不全、真性红细胞性贫血、多发性硬化、类风湿性心脏炎、***性红斑狼疮、类风湿性关节炎、慢性炎症、舍格伦综合征、多肌炎、皮肌炎和硬皮病。炎性疾病的例子包括但不限于：哮喘和***反应(I-IV型)。呼吸道感染的例子包括但不限于：上呼吸道和下呼吸道的感染，包括病毒感染、细菌感染和/或真菌感染。病毒感染的例子包括副流感病毒感染、流感病毒感染、肺炎后病毒感染或呼吸道合胞病毒(RSV)感染。本发明抗体制剂也可用于治疗患有或曾经患有支气管肺发育异常、先天性心脏病、囊性纤维变性或获得性或先天性免疫缺陷的对象。具体说，本发明稳定液体制剂使得健康护理人员能够快速给予无菌剂量的抗体(包括其抗体片段)，而无须在给药前精确和无菌地重建该抗体(包括其抗体片段)。

在其它具体实施方式中，本发明包括稳定的抗体液体制剂，所述抗体免疫特异性结合IL-9多肽，包括但不限于4D4、4D4 H2-1 D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4(其氨基酸序列参见2004年4月12日提交且公开为美国专利公开号US2005/0002934 A1的美国申请序列号11/823,253，通过引用将其全文纳入本文)，在生产、制备、运输和长期储存过程中，所述制剂的抗体片段化和/或聚集水平较低至无法检测到，且4D4、4D4H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4的生物学活性下降很少甚至不下降。本发明也包括稳定的抗体液体制剂，所述抗体免疫特异性结合IL-9多肽且与已知抗体相比其体内半衰期延长，包括例如，4D4、4D4H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F3 22D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4，所述制剂的抗体片段化和/或聚集水平较低至无法检测到，且抗体(包括其抗体片段)的生物学活性下降很少甚至不下降。本发明也包括稳定的抗体液体制剂，所述抗体免疫特异性结合IL-9多肽，所述抗体(包括其抗体片段)包含重链可变区(VH)和/或轻链可变区(VL)，其具有4D4、4D4H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F3 22D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4的VH和/或VL区的氨基酸序列，所述制剂的抗体聚集和/或片段化水平较低至无法检测到，且抗体(包括其抗体片段)的生物学活性下降很少甚至不下降。本发明还包括稳定的抗体(包括其抗体片段)液体制剂，所述抗体免疫特异性结合IL-9多肽，所述抗体(包括其抗体片段)包含一个或多个VH互补决定区(CDR)和/或一个或多个VL CDR，其具有下表1所列的一个或多个VH CDR和/或VL CDR的氨基酸序列，所述制剂的抗体聚集和/或片段化水平较低至无法检测到，且抗体(包括其抗体片段)的生物学活性下降很少甚至不下降。在具体实施方式中，本发明不包括稳定的4D4、4D4 H2-1 D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F3 22D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4抗体的液体制剂。

本发明包括稳定的抗体(包括其抗体片段)液体制剂。与相同pH和相同浓度盐存在下利用两性离子缓冲剂(如组氨酸缓冲剂)配制的抗体相比，利用非两性离子缓冲剂(例如，磷酸盐(如Na₃PO₄)、tris、柠檬酸盐、琥珀酸盐或乙酸盐缓冲剂)、在低于该抗体pI的pH和盐(如NaCl)存在下配制的抗体的某些特性(如，形成解折叠的中间体、胶体不稳定性、溶质结合或沉淀)可能下降或降低，经高效大小排阻色谱(HPSEC)测定，所述制剂在38-42时℃具有稳定性。也利用静态光散射(SLS，static light scattering)技术、傅里叶变换红外光谱(FTIR)技术、圆二色性(CD)技术、尿素-诱导的蛋白质解折叠技术、色氨酸固有荧光技术、差示扫描量热法和/或ANS蛋白质结合技术来评估分子的相特性、其它物理特性和稳定性。经HPSEC评估，本发明液体制剂在38-42℃的温度下具有至少15天、但不超过25天的稳定性；在20-24℃的温度下具有至少6个月，但不超过1.5年的稳定性；在2-8℃(特别是4℃)的温度下具有至少1.5年、至少2年、至少2.5年或至少3年的稳定性。本发明也包括抗体(包括其抗体片段)液体制剂，所述抗体免疫特异性结合感兴趣抗原(如IL-9多肽)，经HPSEC测定，所述制剂具有较低至无法检测到的抗体聚集水平。也利用静态光散射(SLS)技术、傅里叶变换红外光谱(FTIR)技术、圆二色性(CD)技术、尿素-诱导的蛋白质解折叠技术、色氨酸固有荧光技术、差示扫描量热法和/或ANS蛋白质结合技术来评估分子的相特性、其它物理特性和稳定性。在一个实施方式中，经HPSEC测定，本发明液体制剂在38-42℃的温度下具有至少15天的稳定性且具有较低至无法检测的抗体聚集水平，且经抗体结合实验，如ELISA测定，与参比抗体相比制剂抗体(包括其抗体片段)的生物学活性下降很少甚至不下降。

本发明提供鉴定抗体，具体是治疗性抗体和预防性抗体的方法，与相同pH和相同浓度盐存在下利用两性离子缓冲剂(如组氨酸缓冲剂)配制的抗体相比，利用非两性离子缓冲剂(例如，磷酸盐(如Na₃PO₄)、tris、柠檬酸盐、琥珀酸盐或乙酸盐缓冲剂)、在低于该抗体pI的pH和盐(如NaCl)存在下配制的该抗体的某些特性(如，形成解折叠的中间体、胶体不稳定性、可溶性结合或沉淀)可能下降或降低，这使其服从使用本发明方法进行配制。这些相特性可能有利于该抗体制剂的稳定。可通过，例如高效大小排阻色谱(HPSEC)测定该抗体制剂的稳定性。也利用静态光散射(SLS)技术、傅里叶变换红外光谱(FTIR)技术、圆二色性(CD)技术、尿素-诱导的蛋白质解折叠技术、色氨酸固有荧光技术、差示扫描量热法和/或ANS蛋白质结合技术来评估抗体分子的相特性、其它物理特性和稳定性。

本发明提供制备稳定的抗体(包括其抗体片段)液体制剂的方法，所述抗体免疫特异性结合感兴趣抗原(如IL-9多肽)，所述方法包括利用适当分子量(MW)截止值(如，30kD截止值用于完整抗体分子和F(ab’)₂片段；和10kD截止值用于抗体片段如Fab片段)的半透膜浓缩含纯化抗体的组分，至抗体终浓度为约1mg/ml、约5mg/ml、约10mg/ml、约15mg/ml、约20mg/ml、约30mg/ml、约40mg/ml、约50mg/ml、约60mg/ml、约70mg/ml、约80mg/ml、约90mg/ml、约100mg/ml、约150mg/ml、约175mg/ml或约200mg/ml，并且用相同膜将浓缩抗体组分渗滤到制剂缓冲液中。本发明制剂缓冲液包含浓度范围为约1mM至100mM、约10mM至100mM、约5mM至50mM、约10mM至25mM或约25至75mM的磷酸盐、tris、柠檬酸盐、琥珀酸盐或乙酸盐。本发明制剂缓冲液还包含浓度范围为约0mM至200mM、约10mM至200mM、约50至200mM、约100至150mM或约100mM至200mM的NaCl。该制剂的pH范围可能约为4.0-8.0，例如约6.0-6.5。

本发明液体制剂可用0.2μ滤器进行过滤除菌。可将灭菌的本发明液体制剂给予对象，以预防、治疗和/或控制疾病或失调，例如，与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)、或者其一种或多种症状。可将本发明液体制剂与其它治疗(如，除免疫特异性结合IL-9多肽的抗体以外的预防性或治疗性药物，如消炎剂、免疫调节剂和抗癌剂)联合给予。

在一个具体实施方式中，本发明提供含有水性载体、磷酸盐和50mg/ml或更高浓度的抗体或抗体片段的抗体制剂，配制用于给予人对象的所述抗体制剂。在另一具体实施方式中，本发明提供一种抗体制剂，其含有水性载体、磷酸盐和10mg/ml或更高浓度的抗体或抗体片段，其中与在相同pH和相同浓度的盐存在下利用组氨酸缓冲液配制的所述抗体相比，利用磷酸盐缓冲液在低于所述抗体pI的pH和盐存在下配制时所述抗体或抗体片段的一种或多种一下相特性下降：(a)形成解折叠的中间体；(b)胶体不稳定性；(c)抗体分子的可溶性结合；或(d)抗体分子的沉淀；其中所述至少一种或多种相特性是通过选自下组的技术测定的：高效大小排阻色谱(HPSEC)技术、切向流过滤(TFF)技术、静态光散射(SLS)技术、傅里叶变换红外光谱(FTIR)技术、圆二色性(CD)技术、尿素-诱导的蛋白质解折叠技术、色氨酸固有荧光技术、差示扫描量热法(DSC)和1-苯胺基-8-萘磺酸(ANS)蛋白质结合技术。

本发明也提供健康护理人员所用的包括稳定的抗体(包括其抗体片段)液体制剂的药盒，所述抗体免疫特异性结合感兴趣抗原(如IL-9多肽)。在其它具体实施方式中，将包括本发明稳定制剂的药盒配制成适合胃肠道外给予人对象(如皮内、肌肉内、腹膜内、静脉内和皮下)的形式。本发明还提供预防、治疗和/或控制疾病或失调的方法，所述疾病和/或失调包括例如，与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)、或者其一种或多种症状。可将本发明稳定的液体制剂经胃肠道外途径(如皮内、肌内、腹膜内、静脉内和皮下)、口服或鼻内途径给予对象(如人对象)，以预防、治疗和/或控制疾病或失调，例如，与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)、或者它们的一种或多种症状。也可利用本发明稳定的液体制剂诊断、检测或监测疾病或失调，例如，与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)、或者它们的一种或多种症状。

3.1.术语

免疫特异性结合感兴趣抗原(如本文所述IL-9多肽)的抗体和/或抗体片段的所有制剂，在本文中统称为“本发明液体制剂”、“高浓度的本发明稳定的液体制剂”、“本发明抗体液体制剂”或“本发明抗体制剂”。

本文所用术语“异常”指偏离正常，例如平均健康对象和/或平均健康对象群体。本文所用术语“异常表达”指与正常的健康细胞或对象和/或正常的健康细胞或对象群体相比，细胞或对象的基因产物(如核糖核酸、蛋白质、多肽或肽)表达异常。这种异常表达可能是基因扩增导致的后果。在一个具体实施方式中，术语“异常表达”指相对于正常的健康细胞或对象和/或正常的健康细胞或对象群体的基因产物表达，细胞或对象的IL-9和/或IL-9R或其亚单位表达异常，包括IL-9和/或IL-9R或其亚单位基因产物在细胞或对象内不寻常的位置上表达、IL-9和/或IL-9R或其亚单位基因产物在细胞或对象中的表达水平改变、突变的IL-9和/或IL-9R或其亚单位基因产物的表达、或它们的组合。本文所用术语“异常活性”指相对于正常的健康细胞或对象和/或正常的健康细胞或对象群体，细胞或对象中的基因产物水平改变、基因产物活性提高或基因产物活性下降。在具体实施方式中，术语“异常活性”指IL-9和/或IL-9R或其亚单位活性偏离了正常的健康细胞或对象和/或正常的健康细胞或对象群体中发现的活性(如，IL-9与IL-9R的亲和力提高)。IL-9活性的例子包括但不限于：IL-9R的磷酸化、Jak3活化、MEK活化、STAT-1活化和STAT-3活化。

在给出数值或范围时，本文所用术语“约”指该数值或范围在给定数值或范围的20％以内、10％以内和5％以内。

在提到蛋白性物质(如蛋白质、多肽、肽和抗体)时，本文所用术语“类似物”指与第二种蛋白性物质的功能相似或相同，但不一定包含与第二种蛋白性物质相似或相同的氨基酸序列，或与第二种蛋白性物质结构相似或相同的蛋白性物质。具有相似氨基酸序列的蛋白性物质指满足一下至少一个条件的第二种蛋白性物质：(a)具有与第二种蛋白性物质的氨基酸序列至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％相同的氨基酸序列的蛋白性物质；(b)在严谨条件下与编码第二种蛋白性物质的至少5个毗连氨基酸残基、至少10个毗连氨基酸残基、至少15个毗连氨基酸残基、至少20个毗连氨基酸残基、至少25个毗连氨基酸残基、至少40个毗连氨基酸残基、至少50个毗连氨基酸残基、至少60个毗连氨基酸残基、至少70个毗连氨基酸残基、至少80个毗连氨基酸残基、至少90个毗连氨基酸残基、至少100个毗连氨基酸残基、至少125个毗连氨基酸残基或至少150个毗连氨基酸残基的核苷酸序列杂交的核苷酸序列编码的蛋白性物质；和(c)与编码第二种蛋白性物质的核苷酸序列至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％相同的核苷酸序列编码的蛋白性物质。与第二种蛋白性物质结构相似的蛋白性物质指二级、三级或四级结构与第二种蛋白性物质相似的蛋白性物质。可通过本领域技术人员已知的方法测定蛋白性物质的结构，这些方法包括但不限于：肽测序、X射线晶体法、核磁共振、圆二色性和结晶电子显微镜检查法。

为了测定两个氨基酸序列或两个核酸序列的相同性百分数，比对序列，以便进行最优比较(例如，可将缺口引入第一个氨基酸序列或核酸序列中，以便与第二个氨基酸或核酸序列实现最优比对)。然后比较相应氨基酸位置或核苷酸位置上的氨基酸残基或核苷酸。当第一个序列中某个位置上的氨基酸或核苷酸残基与第二个序列中对应位置上的氨基酸或核苷酸残基相同时，则这两个分子在这个位置上相同。两个序列的相同性百分数与两个序列共有的相同位置的数量有关(即相同性百分数＝相同的重叠位置数/位置总数x100％)。在一个实施方式中，这两个序列长度相等。

也可采用数学算法确定两个序列的相同性百分数。用于比较两个序列的数学算法的一个非限制性例子是Karlin和Altschul，1990，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.87：2264-2268的算法，该算法在Karlin和Altschul，1993，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.90：5873-5877进行了改良。将这类算法结合到Altschul等，1990，J.Mol.Biol.，215：403的NBLAST和XBLAST程序中。可利用NBLAST核苷酸程序参数组，如评分＝100、字长＝12进行BLAST核苷酸搜索，以获得与本发明核酸分子同源的核苷酸序列。可利用XBLAST程序参数组，例如评分-50，字长＝3进行BLAST蛋白质搜索，以获得与本发明蛋白质分子同源的氨基酸序列。为了进行缺口比对(出于比较目的)，可如Altschul等，1997，NucleicAcids Res.，25：3389-3402所述利用缺口BLAST。或者，可利用PSI-BLAST进行迭代搜索，其用来检测分子之间的远近关系(Id.)。利用BLAST、缺口BLAST和PSI-Blast程序时，可使用各程序(如XBLAST和NBLAST)的默认参数(参见NCBI网站)。用于比较序列的数学算法的另一个优选的非限制性例子是Myers和Miller，1988，CABIOS 4：11-17的算法。将这类算法整合到ALIGN程序(版本2.0)，它是GCG序列比对软件包的一部分。利用ALIGN程序比较氨基酸序列时，可采用PAM120权重残基表、缺口长度罚分12、缺口罚分4。

可利用与上述技术相似的允许或不允许出现缺口的技术确定两个序列的相同性百分数。在相同性百分数的计算中，一般仅对精确匹配进行计数。

在提到非蛋白性类似物时，本文所用术语“类似物”指与第一种有机或无机分子功能相似或相同且与第一种有机或无机分子结构相似的第二种有机或无机分子。

本文所用术语“拮抗剂”指阻断、抑制、降低或中和另一分子的功能、活性和/或表达的任何蛋白质、多肽、肽、肽模拟物、糖蛋白、抗体、抗体片段、糖、核酸、有机分子、无机分子、大分子或小分子。在各种实施方式中，与对照如磷酸缓冲盐水(PBS)相比，拮抗剂将另一分子的功能、活性和/或表达降低至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％。

本文所用术语“抗体片段”指免疫特异性结合感兴趣抗原(如IL-9多肽)的抗体片段。可通过本领域技术人员已知的任何技术产生抗体片段。例如，可利用诸如木瓜蛋白酶(产生Fab片段)或胃蛋白酶(产生F(ab’)2片段)等酶对免疫球蛋白分子进行蛋白酶水解切割，产生Fab和F(ab’)2片段。F(ab’)₂片段含有完整轻链，以及重链的可变区、CH1区和绞链区。抗体片段也可通过重组DNA技术产生。抗体片段可以是抗体的一个或多个互补决定区(CDR)，或者抗体的一个或多个抗原结合片段。

本文所用术语“抗体”指单克隆抗体、多特异性抗体、人抗体、人源化抗体、骆驼化(camelised)抗体、嵌合抗体、单链Fv(scFv)、单链抗体、单结构域抗体、Fab片段、F(ab’)片段、二硫键连接的Fv(sdFv)和抗-独特型(抗-Id)抗体(包括例如本发明抗体的抗-Id抗体)、细胞内抗体和它们的表位结合片段。具体说，抗体包括免疫球蛋白分子和免疫球蛋白分子的免疫学活性片段，即含有抗原结合位点的分子。免疫球蛋白分子可以是任何类型(如IgG、IgE、IgM、IgD、IgA和IgY)、类(如IgG₁、IgG₂、IgG₃、IgG₄、IgA₁和IgA₂)或小类。

本文所用术语“免疫特异性结合感兴趣抗原的抗体或抗体片段”和类似表述指特异性结合感兴趣抗原或其片段，且不特异性结合其它抗原或其片段的抗体或抗体片段。本文所用术语“免疫特异性结合IL-9多肽的抗体或抗体片段”和类似表述指特异性结合IL-9多肽或IL-9多肽片段，且不特异性结合其它多肽的抗体或抗体片段。优选地，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体或抗体片段与IL-9多肽或IL-9多肽片段的亲和力高于与其它多肽或其它多肽片段的亲和力。抗体亲和力是其与特定抗原在某个抗原-抗***点上结合的衡量，本质上是抗体的抗原结合位点和特定表位之间相互作用中存在的所有吸引力和排斥力的总和。抗体与特定抗原(如IL-9多肽或IL-9多肽的片段)的亲和力可表示为平衡常数K，其定义为K＝[Ag Ab]/[Ag][Ab]，它是抗体-结合位点的亲和力，其中[Ag]是游离抗原的浓度，[Ab]是游离抗体的浓度，[Ag Ab]是抗原-抗体复合物的浓度。如果抗原和抗体之间发生强烈反应，那么游离抗原或游离抗体的含量将非常少，因此平衡常数或抗体亲和力就高。发现了抗原和抗体良好配合的高亲和力抗体(有关抗体亲和力的讨论参见Sigal和Ron编，1994，免疫学和炎症-基本机理和临床后果(Immunology and Inflammation-Basic Mechanisms andClinical Consequences)，纽约MH公司(McGraw-Hill，Inc.New York)，第56-57页；和Seymour等，1995，免疫学-健康科学导言(Immunology-An Introductionfor the Health Sciences)，澳大利亚MH图书公司(McGraw-Hill Book Company，Australia)，第31-32页)。优选地，免疫特异性结合IL-9多肽或其片段的抗体或抗体片段不与其它抗原交叉反应。就是说，抗体或抗体片段免疫特异性结合IL-9多肽或其片段的能量高于结合其它多肽或其它多肽的片段的能量(有关抗体特异性的讨论参见例如，Paul编，1989，基础免疫学(FundamentalImmunology)，第2版，纽约拉文出版社(Raven Press，New York)，第332-336页)。可通过以下方法鉴定免疫特异性结合IL-9多肽的抗体或抗体片段，例如，免疫实验如放射性免疫实验(RIA)、酶联免疫吸附实验(ELISA)和BIAcore实验(参见下述章节5.7)或本领域技术人员已知的其它技术(有关各种用于体内测定抗体-抗原相互作用的实验的讨论参见例如，Seymour等，1995，免疫学-健康科学引言(Immunology-An Introduction for the Health Sciences)，澳大利亚MH图书公司(McGraw-Hill Book Company，Australia)，第33-41页)。免疫特异性结合IL-9多肽或其片段的抗体或抗体片段仅拮抗IL-9多肽，不显著拮抗其它活性。

本文所用术语“对照IgG抗体”指不免疫特异性结合感兴趣抗原(如IL-9多肽)且优选不与感兴趣抗原(如IL-9多肽)交叉反应的IgG抗体或其它“对照抗体”。

本文所用术语“细胞因子受体调节剂”指调节细胞因子受体的磷酸化、与细胞因子受体有关的信号转导通路的活化和/或具体蛋白质如细胞因子表达的物质。这类物质可直接或间接调节细胞因子受体的磷酸化、与细胞因子受体有关的信号转导通路的活化和/或具体蛋白质如细胞因子表达。因此，细胞因子受体调节剂的例子包括但不限于：细胞因子、细胞因子片段、融合蛋白和免疫特异性结合细胞因子受体或或细胞因子受体片段的抗体或抗体片段。另外，细胞因子受体调节剂的例子包括但不限于：免疫特异性结合细胞因子或其片段的肽、多肽(如可溶性细胞因子受体)、融合蛋白和抗体。

提到蛋白性物质(如蛋白质、多肽、肽和抗体)时，本文所用术语“衍生物”指包含通过引入氨基酸残基取代、缺失和/或添加而改变的氨基酸序列的蛋白性物质。本文所用术语“衍生物”也指通过将任何类型的分子与该蛋白性物质共价连接而修饰的蛋白性物质。例如但不限于，抗体可通过，例如糖基化、乙酰化、PEG化、磷酸化、酰胺化、通过已知保护/封闭基团衍生化、蛋白水解切割、连接于细胞配体或其它蛋白质等方法进行修饰。可通过化学修饰，利用本领域技术人员已知的技术，包括但不限于特异性化学切割、乙酰化、甲酰化、衣霉素的代谢合成等方法产生蛋白性物质的衍生物。另外，蛋白性物质的衍生物可包含一个或多个非经典氨基酸。蛋白性物质的衍生物具有与产生它的蛋白性物质相似或相同的功能。

提到非蛋白性衍生物时，本文所用术语“衍生物”指根据第一种有机或无机分子的结构形成的第二种有机或无机分子。有机分子的衍生物包括但不限于通过，例如加入或删去羟基、甲基、乙基、羧基、硝基或胺基修饰的分子。有机分子也可以是酯化、烷基化和/或磷酸化的。

本文所用术语“失调”和“疾病”可互换使用，指某对象不同于健康未患病对象的病症。具体说，术语“自身免疫性疾病”与术语“自身免疫失调”可互换使用，指特征是该对象对其自身细胞、组织和/或器官产生免疫反应所致的细胞、组织和/或器官损伤的病症。术语“炎性疾病”可与术语“炎性失调”互换使用，指特征是炎症，例如慢性炎症的对象病症。自身免疫性疾病可能与或不与炎症相关联。而且，炎症可能是或不是由自身免疫性疾病引起的。某些病症可能被鉴定为一种以上疾病。例如，某些病症可能被鉴定为自身免疫性疾病和炎性疾病。

本文所用术语“有效量”指足以降低和/或缓解疾病或失调，例如，与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)、或者它们的一种或多种症状的严重程度和/或持续时间，防止所述疾病或失调进展，引起所述疾病或失调消退，防止与所述疾病或失调有关的一种或多种症状的复发、发展或出现，或增强或改善另一种治疗(如预防剂或治疗剂)的预防性或治疗性效果的治疗(如预防剂或治疗剂)的用量。

本文所用术语“表位”指在动物、优选哺乳动物，最优选人中具有抗原活性或免疫原活性的多肽或蛋白质的片段。具有免疫原活性的表位是能在动物中引发抗体应答的多肽或蛋白质的片段。具有抗原活性的表位是经本领域技术人员熟知的方法，例如免疫实验测定，与抗体免疫特异性结合的多肽或蛋白质的片段。抗原性表位不一定有免疫原性。

本文所用术语“赋形剂”指通常用作药物的稀释剂，运载体，防腐剂，粘合剂或稳定剂，以便给制剂赋予有益物理特性，如提高蛋白质稳定性、提高蛋白质溶解度和降低粘度的惰性物质。赋形剂的例子包括但不限于：蛋白质(如血清白蛋白)、氨基酸(如天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、精氨酸、甘氨酸)、表面活性剂(如SDS、吐温20、吐温80、聚山梨酯和非离子型表面活性剂)、糖(如葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和海藻糖)、多元醇(如甘露糖醇和山梨醇)、脂肪酸和磷脂(如烷基磺酸盐(alkyl sulfonate)和辛酸酯(caprylate))。其它有关赋形剂的信息参见《雷明顿药物科学》(Remington’s Pharmaceutical Sciences)(Joseph P.Remington，第18版，宾夕法尼亚州伊斯顿的马克出版公司(Mack PublishingCo.，Easton，PA))，全文纳入本文。

本文所用术语“片段”指含有第二种不同多肽或蛋白质的氨基酸序列中至少5个毗连氨基酸残基、至少10个毗连氨基酸残基、至少15个毗连氨基酸残基、至少20个毗连氨基酸残基、至少25个毗连氨基酸残基、至少40个毗连氨基酸残基、至少50个毗连氨基酸残基、至少60个毗连氨基酸残基、至少70个毗连氨基酸残基、至少80个毗连氨基酸残基、至少90个毗连氨基酸残基、至少100个毗连氨基酸残基、至少125个毗连氨基酸残基、至少150个毗连氨基酸残基、至少175个毗连氨基酸残基、至少200个毗连氨基酸残基或至少250个毗连氨基酸残基的氨基酸序列的肽或多肽。在另一实施方式中，蛋白质或多肽的片段保留了该蛋白质或多肽的至少一种功能。在另一实施方式中，蛋白质或多肽的片段保留了该蛋白质或多肽的至少两种、三种、四种或五种功能。例如，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的片段保留了免疫特异性结合IL-9多肽的能力。“功能性片段”是保留了蛋白质或多肽的至少一种功能的片段。

本文所用术语“融合蛋白”指包含第一种多肽或蛋白质或者其片段、类似物或衍生物的氨基酸序列，以及异源多肽或蛋白质(即，不同于第一种多肽或蛋白质或者其片段、类似物或衍生物的第二种多肽或蛋白质或者其片段、类似物或衍生物)的氨基酸序列的多肽或蛋白质。在一个实施方式中，融合蛋白包含与异源蛋白质、多肽或肽融合的预防剂或治疗剂。按照这个实施方式，异源蛋白质、多肽或肽可能是或不是不同类型预防剂或治疗剂。例如，具有免疫调节活性的两种不同的蛋白质、多肽或肽可融合在一起，形成融合蛋白。在一个实施方式中，与融合于异源蛋白质、多肽或肽之前的原始多肽或蛋白质的活性相比，融合蛋白保持或提高了活性。

本文所用术语“高浓度”和“浓缩抗体”指抗体制剂中免疫特异性结合感兴趣抗原(如IL-9多肽)的抗体(包括其抗体片段)浓度为50mg/ml或更高，或95mg/ml或更高。

本文所用术语“宿主细胞”包括用核酸分子转染或转化的特定对象细胞，以及这种细胞的后代或潜在后代。由于随后世代中可能发生的突变和环境影响或者核酸分子整合到宿主细胞基因组中，这类细胞的后代可能与核酸分子转染的亲本细胞不完全相同。

本文所用术语“人类儿童”或“儿童”或其变体指24个月至18岁的人。

本文所用术语“老年人”、“老人”或其变体指65岁或更大年龄、或70岁或更大年龄的人。

本文所用术语“人类婴儿”或“婴儿”或其变体指小于24个月、小于12个月、小于6个月、小于3个月、小于2个月或小于1个月大的人。

本文所用术语“早产人类婴儿”、“早产婴儿”或“早产儿”或其变体指孕龄小于40周、小于35周出生的，小于6个月、小于3个月、小于2个月、或小于1个月大的人。

本文所用术语“在严谨条件下杂交”描述使至少30％(至少35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％)相同的核苷酸序列通常保持相互杂交的杂交和洗涤条件。这类严谨条件是本领域技术人员已知的，可参见例如，新编分子生物学实验指南(Current Protocols inMolecular Biology)，纽约约翰韦利森公司(John Wiley&Sons，N.Y.)(1989和更新)，6.3.1-6.3.6。

通常，严谨条件选择为比特定序列在确定离子强度、pH下的解链温度(Tm)低约5-10℃。Tm是50％靶点互补探针与靶序列杂交平衡时的温度(在确定的离子强度、pH和核酸浓度下)(靶序列过量，在Tm时50％探针被平衡地占据)。严谨条件是盐浓度小于约1.0M钠离子，一般约0.01至1.0M钠离子浓度(或其它盐)，pH 7.0至8.3，对短探针(例如，10-50个核苷酸)而言温度至少约为30℃、对长探针(例如大于50个核苷酸)而言至少60℃的条件。也可通过加入去稳定剂，如甲酰胺获得严谨条件。在选择性或特异性杂交中，阳性信号至少是背景杂交信号的两倍，优选10倍。

在一个非限制性例子中，严谨杂交条件是用6X氯化钠/柠檬酸钠(SSC)在约45℃杂交，然后用0.1XSSC、0.2％SDS在约68℃洗涤一次或多次。在一个非限制性例子中，严谨杂交条件是用6XSSC在约45℃杂交，然后用0.2X SSC、0.1％SDS在50-65℃洗涤一次或多次(即，在50℃、55℃、60℃或65℃洗涤一次或多次)。

本文所用术语“IL-多肽”指IL-9，其类似物、衍生物或片段，包括IL-9的成熟和不成熟形式(参见Van Snick等，1989，J Exp.Med.169：363-68和Yang等，1989，Blood 74：1880-84，均通过引用全文纳入本文)，或含有IL-9，其类似物、衍生物或片段的融合蛋白。IL-9多肽可能来自任何物种。IL-9多肽的核苷酸和/或氨基酸序列可参见文献或公共数据库，或者可通过本领域技术人员已知的克隆和测序技术测定核苷酸和/或氨基酸序列。例如，人IL-9的核苷酸序列可参见GenBank数据库(参见例如，登录号NM_000590；图12)。人IL-9的氨基酸序列可参见GenBank数据库(参见例如，登录号A60480、NP_000584和AAC17735；图13)和2003年4月11日提交的美国专利申请号10/412,703，2003年11月27日公开为US 2003/0219439 A1，题为重组抗-白介素-9抗体(Recombinant Anti-Interleukin-9Antibodies)(通过引用特别将第5页上的人IL-9的氨基酸序列纳入本文)。在一个实施方式中，IL-9多肽是人IL-9，其类似物、衍生物或片段。

本文所用术语“IL-9受体”和“IL-9R”指IL-9受体或其类似物、衍生物或片段，或者含有IL-9受体，其类似物、衍生物或片段的融合蛋白。提到IL-9R时，本文所用术语“一种或多种亚单位”和“亚单位”指功能性IL-9R或其类似物、衍生物或片段的IL-9R配体-特异性α亚单位(“IL-9Rα”)和/或共有γ_c链(也出现在IL-2R、IL-4R、IL-7R和IL-15R复合物中)。在一个实施方式中，经本领域技术人员已知的任何细胞增殖实验测定，功能性IL-9R介导IL-9处理的T细胞的增殖性应答(如，[³H]-胸苷掺入实验或己糖胺酶实验)(参见例如，Renauld等，1992，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，89：5690-94和Bauer等，1998，JBiol. Chem.273：9255-60，通过引用将其全文纳入本文)。优选地，经本领域技术人员已知的任何细胞增殖实验测定，用IL-9处理表达功能性IL-9R的T细胞系(如表达人和鼠IL-9Rα的TS1RA3细胞(R&D***公司(R&D Systems)))，导致T细胞增殖发生剂量依赖性增加(参见Renauld等，1992，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，89：5690-94和Bauer等，1998，J Biol.Chem.273：9255-60)。在另一优选实施方式中，包含γ_c和IL-9Rα链的功能性IL-9R通过Janus激酶JAK1和JAK3启动信号转导级联反应，从而激活信号转导物和激活物转录(STAT)因子STAT-1、STAT-3和STAT-5的同源二聚体和异源二聚体(参见Bauer等，1998，J Biol.Chem.273：9255-60)。在另一优选实施方式中，经本领域技术人员已知的凋亡实验测定，功能性IL-9R可通过包括STAT-3和STAT-5的机制防止凋亡(参见Bauer等，1998，J Biol.Chem.273：9255-60)。IL-9R或其一种或多种亚单位可能来自任何物种。IL-9R和其亚单位的核苷酸和/或氨基酸序列可参见文献或公共数据库，或者可通过本领域技术人员已知的克隆和测序技术测定核苷酸和/或氨基酸序列。例如，人IL-9R的核苷酸序列可参见GenBank数据库(参见例如，登录号NM_002186、NM_176786和NM_000206；图14)。人IL9R的氨基酸序列可参见GenBank数据库(参见例如，登录号NP_002177、NP_789743和NP_000197；图15)和2003年4月11日提交的美国专利申请号10/412,703，2003年11月27日公开为US 2003/0219439A1，题为重组抗-白介素-9抗体(Recombinant Anti-Interleukin-9Antibodies)(通过引用特别将第6-7页上的人IL-9R的氨基酸序列纳入本文)。在一个实施方式中，IL-9R或其一种或多种亚单位是人IL-9R或其一种或多种亚单位，其类似物、衍生物或片段。

本文所用术语“免疫调节剂”和其变形包括但不限于：免疫调节剂，免疫调节物或免疫调节药，指调节宿主免疫***的物质。在一个具体实施方式中，免疫调节剂是改变对象免疫应答的某一方面的物质。在某些实施方式中，免疫调节剂是抑制或降低对象的免疫***的物质(即，免疫抑制剂)。在某些其它实施方式中，免疫调节剂是激活或提高对象的免疫***的物质(即免疫刺激剂)。按照本发明，本发明联合治疗中所用的免疫调节剂不包括本发明抗体。免疫调节剂包括但不限于：小分子、肽、多肽、蛋白质、核酸(如RNA和DNA核苷酸，包括但不限于：反义核苷酸序列、三股螺旋、RNAi，以及编码生物活性蛋白质、多肽或肽的核苷酸序列)、抗体、合成或天然无机分子、模拟剂和合成或天然的有机分子。

本文所用术语“联合”指使用一种以上治疗(如，预防剂和/或治疗剂)。所用术语“联合”不限制向患有疾病或失调(如，与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一种或多种亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状)的对象给予治疗(如预防剂和/或治疗剂)的顺序。可以在给予患有疾病或失调(如，与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一种或多种亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状)的对象第二种治疗(如预防剂或治疗剂)之前(如5分钟、15分钟、30分钟、45分钟、1小时、2小时、4小时、6小时、12小时、24小时、48小时、72小时、96小时、1周、2周、3周、4周、5周、6周、8周或12周前)、同时或之后(如5分钟、15分钟、30分钟、45分钟、1小时、2小时、4小时、6小时、12小时、24小时、48小时、72小时、96小时、1周、2周、3周、4周、5周、6周、8周或12周后)给予第一种治疗(如预防剂或治疗剂)。

本文所用术语“免疫特异性结合抗原”和类似术语指特异性结合抗原或片段且不特异性结合其它抗原的肽、多肽、蛋白质、融合蛋白和抗体(包括其抗体片段)。经过(例如)免疫实验、BIAcore或本领域已知的其它实验测定，免疫特异性结合抗原的肽、多肽、蛋白质或抗体可以较低亲和力结合其它肽、多肽或蛋白质。免疫特异性结合抗原的抗体(包括其抗体片段)可能与相关抗原交叉反应。优选地，免疫特异性结合抗原的抗体(包括其抗体片段)不会与其它抗原发生显著的交叉反应(即，在常规免疫实验中检测不到)。利用实验技术，如放射性免疫实验(RIA)和酶联免疫吸附实验(ELISA)测定，抗体与某抗原结合的亲和力高于任何交叉反应抗原时，称该抗体特异性结合于该抗原。参见例如，Paul编，1989，基础免疫学(Fundamental Immunology)，第2版，纽约拉文出版社(Raven Press，New York)，第332-336页有关抗体特异性的讨论。

本文所用术语“联合”指使用一种以上治疗(如，一种以上预防剂和/或治疗剂)。使用术语“联合”不限制向患有呼吸道病症的对象给予治疗(如预防剂和/或治疗剂)的顺序。在给予呼吸道疾病患者第二种(如第二种预防剂或治疗剂)之前(如5分钟、15分钟、30分钟、45分钟、1小时、2小时、4小时、6小时、12小时、24小时、48小时、72小时、96小时、1周、2周、3周、4周、5周、6周、8周或12周前)、同时或之后(如5分钟、15分钟、30分钟、45分钟、1小时、2小时、4小时、6小时、12小时、24小时、48小时、72小时、96小时、1周、2周、3周、4周、5周、6周、8周或12周后)给予第一种(如第一种预防剂或治疗剂)。

本文所用术语“无机盐”指一部分或所有酸氢或酸被金属或类似金属的基团替代的不含碳的任何化合物，它在药物组合物和生物材料制剂中常常用作张力调节性化合物。最常见的无机盐是NaCl、KCl、NaH₂PO₄等。

不同于蛋白性物质或核酸分子，提到有机或无机分子(小分子或大分子)时，本文所用术语“分离”指基本不含不同有机或无机分子的有机或无机分子。优选地，除第二种不同的有机或无机分子外，有机或无机分子占60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或99％。在一个实施方式中，有机和/或无机分子是分离的。

提到蛋白性物质(如肽、多肽、融合蛋白或抗体)时，本文所用术语″分离″指基本不含由其来源细胞或组织产生的细胞物质或污染蛋白质的蛋白性物质，或在化学合成的情况下基本不含化学物质前体或其它化学物质。术语″基本不含细胞物质″包括蛋白性物质与分离或重组产生它的细胞的细胞组分分离开的蛋白性物质制剂。因此，基本不含细胞物质的蛋白性物质包括含有小于约30％、20％、10％或5％(以干重计)异源蛋白质、多肽、肽或抗体(也称为″污染蛋白质″)的蛋白性物质制剂。通过重组产生该蛋白性物质时，可能也基本不含培养基，即在该蛋白质物质制剂中培养基的体积占小于月20％、10％或5％。通过化学合成产生该蛋白性物质时，优选基本不含化学前体或其它化学物质，即它与参与该蛋白性物质合成的化学前体或前体化学物质分离开。因此，这类蛋白性物质制剂中除感兴趣蛋白性物质外的化学前体或化合物的含量小于约30％、20％、10％、5％(以干重计)。在一个具体实施方式中，本文所述的蛋白性物质是分离的。在一个实施方式中，本发明抗体是分离的。在一个具体实施方式中，通过多步纯化方法纯化“分离”抗体，所述方法包括三个色谱步骤(阳离子交换、蛋白A和阴离子交换)、一个纳米过滤步骤和一个低pH处理步骤(详述参见下述章节6)。

提到核酸分子时，本文所用术语″分离″指与该核酸分子天然来源中存在的其它核酸分子分离开的核酸分子。而且，通过重组技术产生时，″分离″核酸分子，如cDNA分子可能基本不含其它细胞物质或培养基，或者通过化学方法合成时基本不含化学物质前体或前体化学物质。在一个具体实施方式中，核酸分子是分离的；然而，“分离”不包括克隆文库如cDNA文库群体的成员。

本文所用术语“较低至无法检测到的聚集水平”指经高效大小排阻色谱(HPSEC)、静态光散射(SLS)技术、傅里叶变换红外光谱(FTIR)技术、圆二色性(CD)技术、尿素-诱导的蛋白质解折叠技术、色氨酸固有荧光技术、差示扫描量热法和1-苯胺基-8-萘磺酸(ANS)蛋白质结合技术测定，以蛋白质重量计，含有不超过5％，不超过4％，不超过3％，不超过2％，不超过1％和不超过0.5％聚集体的样品。

本文所用术语“较低至无法检测到的片段化水平”指经HPSEC测定大于等于80％、85％、90％、95％、98％或99％总蛋白在(例如)一个单峰内，或经还原型毛细管凝胶电泳(rCGE)在两个峰(例如重链和轻链)(或与亚单位数目相同的峰数目)内，代表非降解抗体或非降解片段，且不含大于总蛋白的5％、4％、3％、2％、1％或0.5％的其它单峰的样品。本文所用术语“还原型毛细管凝胶电泳”指在足以还原抗体的二硫键的还原条件下进行的毛细管凝胶电泳。

本文所用术语“控制”指对象从某种治疗(如预防剂或治疗剂)获得的不导致疾病治愈的有益效果。在某些实施方式中，给予对象一种或多种治疗(如一种或多种预防剂或治疗剂)以“控制”疾病，以便防止疾病的进展或恶化。

本文所用术语“肥大细胞调节剂”指调节肥大细胞激活、肥大细胞脱粒和/或具体蛋白质如细胞因子表达的物质。这类物质可直接或间接调节肥大细胞激活、肥大细胞脱粒和/或具体蛋白质如细胞因子表达。肥大细胞调节剂的非限制性例子包括但不限于：抑制和/或减少干细胞因子、肥大细胞蛋白酶、细胞因子(如IL-3、IL-4和IL-9)、细胞因子受体(如IL-3R、IL-4R和IL-9R)和干细胞受体的表达、功能和/或活性的小分子、肽、多肽、蛋白质、核酸(如DNA和RNA核苷酸，包括但不限于：反义核苷酸序列、三股螺旋、RNAi和编码生物活性蛋白质、多肽或肽的核苷酸序列)、融合蛋白、抗体、合成或天然的无机分子、合成或天然的有机分子，或模拟剂。肥大细胞调节剂的其它非限制性例子包括但不限于：抑制和/或减少IgE的表达、功能和/或活性的小分子、肽、多肽、蛋白质、核酸(如DNA和RNA核苷酸，包括但不限于：反义核苷酸序列、三股螺旋、RNAi和编码生物活性蛋白质、多肽或肽的核苷酸序列)、融合蛋白、抗体、合成或天然的无机分子、合成或天然的有机分子或模拟剂。在某些实施方式中，肥大细胞调节剂是在肥大细胞脱粒后防止或减少额外肥大细胞被激活的物质。在其它实施方式中，肥大细胞调节剂是抑制或减少肥大细胞脱粒的物质。

本文所用术语“不反应”和“难治”指用目前可用的治疗(如预防剂或治疗剂)不足以在临床上缓解与其疾病有关的一种或多种症状的患者，所述患者所患的疾病或失调包括例如，与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一种或多种亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状。一般地，这类患者患有严重的持续活动的疾病，且需要额外治疗来缓解与该疾病有关的症状。

本文所用术语“药学上可接受的”指被联邦或州政府管理机构批准，或美国药典、欧洲药典或其它通常接受的药典所列的用于动物，更具体是用于人的。

本文所用术语“多元醇”指与正常糖相比含有许多-OH的糖。

本文所用术语“防止”指向对象给予治疗(如预防剂或治疗剂)或给予联合治疗(如预防剂或治疗剂的联合治疗)后，抑制疾病或失调，例如与IL-9多肽异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)或其一种或多种症状的发展或发病，或者预防呼吸道疾病的一种或多种症状的复发、出现或发展。

本文所用术语“预防剂”指可用于预防防止疾病或失调，例如，与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)或其一种或多种症状的发病、复发或发展的任何物质。在某些实施方式中，术语″预防剂″指免疫特异性结合IL-9多肽的抗体。在某些其它实施方式中，术语“预防剂”指不同于免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的物质。优选地，预防剂是已知可用于或曾用于或正用于预防或防止与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)或者其一种或多种症状的发病、发展、进展和/或严重程度的物质。可根据药剂在体外和/或体内的一种或多种作用，将预防剂鉴定为不同类型。例如，肥大细胞调节剂也可被鉴定为免疫调节剂。

本文所用术语“预防有效量”指足以防止疾病或失调，例如，与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)或者其一种或多种症状的发展、复发或发病，或提高或改善另一治疗(如预防剂)的预防效果的治疗(如预防剂)用量。

本文所用术语“预防方案”指给予具有预防效果的一种或多种治疗(如一种或多种预防剂)的给药和时间方案。

本文所用术语“方案”包括给药计划和给药方案。本文所述方案是使用方法，包括预防和治疗方案。

本文所用术语“糖”指作为多元醇衍生物的一类分子。糖通常称为碳水化合物，可含有不同量的糖单位，如单糖、二糖和多醣。

本文所用术语“副作用”包括预防剂或治疗剂的多余的不良作用。副作用总是多余的，但多余的作用不一定是不良作用。治疗(如预防剂或治疗剂)的不良作用可能是有害的、令人不适的或有风险的作用。本领域了解许多患者感受到的不良作用。《医师案头参考》(Physicians’Desk Reference)(第60版，2006)中描述了许多这类作用。

本文所用术语“小分子”和类似术语包括但不限于：肽、肽模拟物、氨基酸、氨基酸类似物、多核苷酸、多核苷酸类似物、核苷酸、核苷酸类似物、分子量小于约10,000克/摩尔的有机或无机物(即包括异源有机物和有机金属化合物)、分子量小于约5,000克/摩尔的有机或无机物、分子量小于约1,000克/摩尔的有机或无机物、分子量小于约500克/摩尔的有机或无机物，以及这类药物的盐、酯和其它药学上可接受的形式。

提到含有免疫特异性结合感兴趣抗原(如IL-9多肽)的抗体(包括其抗体片段)的液体制剂时，本文所用术语“稳定性”和“稳定”指在给定的生产、制备、运输和贮存条件下制剂中的抗体或(包括其抗体片段)抵抗聚集、降解或片段化的抗性。本发明的“稳定”制剂在给定的生产、制备、运输和贮存条件下能保持生物学活性。可通过HPSEC、静态光散射(SLS)技术、傅里叶变换红外光谱(FTIR)技术、圆二色性(CD)技术、尿素-诱导的蛋白质解折叠技术、色氨酸固有荧光技术、差示扫描量热法和/或ANS结合技术测定所述制剂与参比制剂相比的聚集、降解或片段化程度，从而评估所述抗体(包括其抗体片段)的稳定性。例如，参比制剂可以是-70℃冷冻的参比标准品，由含有150mM NaCl的磷酸盐缓冲液配制的10mg/ml抗体(包括其抗体片段)(如4D4、4D4 H2-1 D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F3 22D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4)，pH 6.0-6.5组成，该参比制剂通常在HPSEC中产生单个单体峰(≥97％面积)。或者，参比制剂可以是-70℃冷冻的参比标准品，由磷酸盐缓冲液配制的10mg/ml抗体(包括其抗体片段)(如4D4、4D4H2-1 D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4)，pH 6.0-6.5组成，该参比制剂通常在HPSEC中产生单个单体峰(≥97％面积)。可通过各种免疫实验，包括例如，利用分离的抗原分子或表达它的细胞进行的ELISA和放射性免疫实验评估含有抗体(包括其抗体片段)的制剂的总体稳定性。

本文所用术语“对象”和“患者”可以互换使用。本文所用术语“对象”指动物，优选哺乳动物，包括非灵长类(如，牛、猪、马、猫、犬、大鼠和小鼠)和灵长类(如猴，如猕猴、黑猩猩和人)，更优选人。在某些实施方式中，所述对象是患有与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状的哺乳动物，优选人。在另一实施方式中，所述对象是患有与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状的家畜(如马、猪或牛)或宠物(如犬或猫)。在另一实施方式中，所述对象是，处于发生与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状的风险中的哺乳动物，优选人(如，免疫削弱的或免疫抑制的哺乳动物)。在另一实施方式中，所述对象不是免疫削弱的或免疫抑制的哺乳动物，优选人。在另一实施方式中，所述对象是淋巴细胞计数不低于约500个细胞/立方毫米的哺乳动物，优选人。在另一实施方式中，所述对象人类婴儿或早产人类婴儿。在另一实施方式中，所述对象是人类儿童或成年人。在另一实施方式中，所述对象是患有支气管肺发育异常、先天性心脏病或囊性纤维变性的人类儿童。在另一实施方式中，所述对象是老年人。在又一实施方式中，所述对象是人机构或群体之家，例如但不限于疗养院的人。

本文所用术语″协同″指比任何两个或多个单独治疗(如一种或多种预防剂或治疗剂)的效应相加更有效的联合治疗(如预防剂或治疗剂)。联合治疗(如联用预防剂或治疗剂)的协同作用允许使用较低剂量的一种或多种治疗(例如，一种或多种预防剂或治疗剂)和/或以较低频率将所述治疗给予患有呼吸道疾病的对象。使用较低剂量的治(如预防剂或治疗剂)和/或以较低频率给予所述治疗能欧降低与将所述治疗给予对象有关的毒性，而不降低所述治疗在预防或治疗呼吸道疾病方面的功效。此外，协同作用可导致治疗(如预防剂或治疗剂)在预防或治疗呼吸道疾病中的功效提高。最后，联合治疗(如预防剂或治疗剂)的协同作用可避免或降低与使用任何单一治疗有关的多余的不良副作用。

本文所用术语“T细胞受体调节剂”指调节T细胞受体的磷酸化、与T细胞受体有关的信号转导通路的激活和/或与T细胞受体活性有关的特定蛋白质如细胞因子的表达的物质。这类物质可直接或间接调节T细胞受体的磷酸化、与T细胞受体有关的信号转导通路的活化和/或与T细胞受体活性有关的特定蛋白质如细胞因子的表达。T细胞受体调节剂的例子包括但不限于：免疫特异性结合于T细胞受体或其片段的肽、多肽、蛋白质、融合蛋白和抗体。另外，T细胞受体调节剂的例子包括但不限于：免疫特异性结合T细胞受体的配体或其片段的蛋白质、肽、多肽(如可溶性T细胞受体)、融合蛋白和抗体。

本文所用术语“治疗剂”指可用于预防、治疗和/或控制疾病或失调，例如，与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状的任何物质。在某些实施方式中，术语“治疗剂”指结合IL-9多肽的抗体。在某些其它实施方式中，术语“治疗剂”指不同于免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的物质。优选地，治疗剂是已知可用于或曾用于或正用于预防、治疗和/或控制与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状的物质。可根据该物质在体内和/或体外所产生的一种或多种作用将治疗剂分为不同类型，例如，消炎剂也可被鉴定为免疫调节剂。

本文所用术语“治疗有效量”指足以降低疾病或失调，例如，与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状的严重程度；降低呼吸道疾病的持续时间；缓解与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状，自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状；引起与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状消退；或者提高或改善另一治疗疗效的治疗(如免疫特异性结合IL-9多肽的抗体)用量。

术语“治疗”可以指可用于预防、治疗和/或控制疾病或失调，例如，与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状的任何方案、方法和/或物质。在某些实施方式中，术语“治疗”指用于预防、治疗和/或控制疾病或失调，例如，与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状的医疗人员已知的抗病毒治疗，抗细菌治疗，抗真菌治疗、生物治疗、支持性治疗和/或其它治疗。

本文所用术语“治疗方案”指给予具有治疗效果的一种或多种治疗(如一种或多种治疗剂)的给药和时间方案。

本文所用术语“治疗”指因给予一种或多种治疗(包括但不限于给予一种或多种预防剂或治疗剂)降低或改善疾病或失调，例如与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状的进展、严重程度和/或持续时间。在某些实施方式中，这类术语指减轻器官或组织的肿胀，或减轻与呼吸道疾病相关的疼痛。在其它实施方式中，这一术语指炎症或哮喘有关的气道收缩减轻。在其它实施方式中，这一术语指感染物复制减少，或者感染物向该对象的其它器官或组织或其它对象的扩散减少。在其它实施方式中，这一术语指肥大细胞释放的炎性物质减少，或这类炎性物质的生物学效应降低。在其它实施方式中，这一术语指过度增殖细胞(如癌细胞)生长、形成和/或数量增加的减少。在其它实施方式中，这一术语指原发性、局部性或转移性癌的根除、消除或控制(如最大程度减少或延迟癌症扩散)。

本文所用术语“生物学活性下降非常少甚至不下降”指抗体活性，包括但不限于：经不同免疫学实验，包括但不限于ELISA和放射性免疫实验测定，抗体(包括其抗体片段)与感兴趣抗原(如IL-9多肽)的特异性结合活性。在一个实施方式中，经本领域技术人员已知或本文所述的免疫实验测定，与参比抗体(包括其抗体片段)(如，4D4、4D4 H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4)相比，本发明制剂的抗体(包括其抗体片段)保持约50％，优选55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％特异性结合抗原多肽的能力。例如，可采用基于ELISA的实验比较抗体(包括其抗体片段)与4D4、4D4 H2-1 D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4参比标准品免疫特异性结合IL-9多肽的能力。在这个称为IL-9结合性ELISA的实验中，用分离的IL-9包被平板，并将一组浓度的4D4、4D4H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4参比标准品的结合信号与相同浓度的测试抗体(包括其抗体片段)的结合信号作比较。本文所用术语“参比标准品”指冷冻于-70℃，由含有150mM NaCl的磷酸盐缓冲液配制的10mg/ml抗体(包括其抗体片段)(如4D4、4D4 H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4)，pH 6.0-6.5组成的抗体(包括其抗体片段)(如，4D4、4D4 H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4)，参比制剂在HPSEC中通常产生单个单体峰(≥97％面积)。在另一实施方式中，本文所用术语“生物学活性下降非常少甚至不下降”指抗体活性，包括抗体的其它效应活性。

在本文中，浓度、含量、细胞计数、百分数和其它数值均可用范围的形式表示。也应理解，使用这种范围形式只是为了方便和简洁，应该被弹性地借读为包括但不限于范围上下限所明确提及的数值，还应包括该范围内包括的所有单个数值或子范围，就好像明确提及各个数值和子范围那样。

附图简述

图1A-B显示(A)4D4的重链可变区的氨基酸序列(SEQ ID NO：7)，其含有从最左边的VH CDR1开始用下划线标出的VH CDR1(SEQ ID NO：1)、VHCDR2(SEQ ID NO：61)和VH CDR3(SEQ ID NO：3)；(B)4D4的轻链可变区的氨基酸序列(SEQ ID NO：8)，其含有从最左边的VL CDR1开始用下划线标出的VL CDR1(SEQ ID NO：4)、VL CDR2(SEQ ID NO：5)和VL CDR3(SEQID NO：6)。

图2A-B显示(A)4D4H2-1D11的重链可变区的氨基酸序列(SEQ ID NO：9)，其含有从最左边的VH CDR1开始用下划线标出的VH CDR1(SEQ IDNO：1)、VH CDR2(SEQ ID NO：10)和VH CDR3(SEQ ID NO：3)；(B)4D4H2-1D11的轻链可变区的氨基酸序列(SEQ ID NO：8)，其含有从最左边的VL CDR1开始用下划线标出的VL CDR1(SEQ ID NO：4)、VL CDR2(SEQ ID NO：5)和VL CDR3(SEQ ID NO：6)。

图3A-B显示(A)4D4com-XF-9的重链可变区的氨基酸序列(SEQ ID NO：15)，其含有从最左边的VH CDR1开始用下划线标出的VH CDR1(SEQ ID NO：11)、VH CDR2(SEQ ID NO：10)和VH CDR3(SEQ ID NO：12)；(B)4D4com-XF-9的轻链可变区的氨基酸序列(SEQ ID NO：16)，其含有从最左边的VL CDR1开始用下划线标出的VL CDR1(SEQ ID NO：13)、VL CDR2(SEQ ID NO：14)和VL CDR3(SEQ ID NO：63)。

图4A-B显示(A)4D4com-2F9的重链可变区的氨基酸序列(SEQ ID NO：17)，其含有从最左边的VH CDR1开始用下划线标出的VH CDR1(SEQ ID NO：1)、VH CDR2(SEQ ID NO：10)和VH CDR3(SEQ ID NO：12)；(B)4D4com-2F9的轻链可变区的氨基酸序列(SEQ ID NO：18)，其含有从最左边的VL CDR1开始用下划线标出的VL CDR1(SEQ ID NO：4)、VL CDR2(SEQ ID NO：14)和VL CDR3(SEQ ID NO：64)。

图5A-B显示(A)7F3的重链可变区的氨基酸序列(SEQ ID NO：21)，其含有从最左边的VH CDR1开始用下划线标出的VH CDR1(SEQ ID NO：19)、VHCDR2(SEQ ID NO：61)和VH CDR3(SEQ ID NO：3)；(B)7F3的轻链可变区的氨基酸序列(SEQ ID NO：22)，其含有从最左边的VL CDR1开始用下划线标出的VL CDR1(SEQ ID NO：4)、VL CDR2(SEQ ID NO：5)和VL CDR3(SEQID NO：20)。

图6A-B显示(A)71A10的重链可变区的氨基酸序列(SEQ ID NO：23)，其含有从最左边的VH CDR1开始用下划线标出的VH CDR1(SEQ ID NO：19)、VH CDR2(SEQ ID NO：2)和VH CDR3(SEQ ID NO：3)；(B)71A10的轻链可变区的氨基酸序列(SEQ ID NO：24)，其含有从最左边的VL CDR1开始用下划线标出的VL CDR1(SEQ ID NO：4)、VL CDR2(SEQ ID NO：5)和VL CDR3(SEQ ID NO：20)。

图7A-B显示(A)7F3 22D3的重链可变区的氨基酸序列(SEQ ID NO：21)，其含有从最左边的VH CDR1开始用下划线标出的VH CDR1(SEQ ID NO：19)、VH CDR2(SEQ ID NO：61)和VH CDR3(SEQ ID NO：3)；(B)7F3 22D3的轻链可变区的氨基酸序列(SEQ ID NO：25)，其含有从最左边的VL CDR1开始用下划线标出的VL CDR1(SEQ ID NO：4)、VL CDR2(SEQ ID NO：14)和VLCDR3(SEQ ID NO：20)。

图8A-B显示(A)7F3com-2H2的重链可变区的氨基酸序列(SEQ ID NO：27)，其含有从最左边的VH CDR1开始用下划线标出的VH CDR1(SEQ ID NO： 26)、VH CDR2(SEQ ID NO：2)和VH CDR3(SEQ ID NO：3)；(B)7F3com-2H2的轻链可变区的氨基酸序列(SEQ ID NO：28)，其含有从最左边的VL CDR1开始用下划线标出的VL CDR1(SEQ ID NO：62)、VL CDR2(SEQ ID NO：65)和VL CDR3(SEQ ID NO：20)。

图9A-B显示(A)7F3com-2H2的重链可变区的核苷酸序列(SEQ ID NO：43)，其含有从最左边的VH CDR1开始用下划线标出的VH CDR1(SEQ ID NO：44)、VH CDR2(SEQ ID NO：45)和VH CDR3(SEQ ID NO：46)；(B)7F3com-2H2的轻链可变区的核苷酸序列(SEQ ID NO：47)，其含有从最左边的VL CDR1开始用下划线标出的VL CDR1(SEQ ID NO：48)、VL CDR2(SEQ ID NO：49)和VL CDR3(SEQ ID NO：50)。

图10A-B显示(A)7F3com-3H5的重链可变区的氨基酸序列(SEQ ID NO：29)，其含有从最左边的VH CDR1开始用下划线标出的VH CDR1(SEQ ID NO：19)、VH CDR2(SEQ ID NO：2)和VH CDR3(SEQ ID NO：3)；(B)7F3com-3H5的轻链可变区的氨基酸序列(SEQ ID NO：30)，其含有从最左边的VL CDR1开始用下划线标出的VL CDR1(SEQ ID NO：4)、VL CDR2(SEQ ID NO：14)和VL CDR3(SEQ ID NO：20)。

图11A-B显示(A)7F3com-3D4的重链可变区的氨基酸序列(SEQ ID NO：31)，其含有从最左边的VH CDR1开始用下划线标出的VH CDR1(SEQ ID NO：26)、VH CDR2(SEQ ID NO：2)和VH CDR3(SEQ ID NO：3)；(B)7F3com-3D4的轻链可变区的氨基酸序列(SEQ ID NO：32)，其含有从最左边的VL CDR1开始用下划线标出的VL CDR1(SEQ ID NO：62)、VL CDR2(SEQ ID NO：14)和VL CDR3(SEQ ID NO：20)。

图12显示位于GenBank数据库(登录号NM_00590)的人IL-9(SEQ IDNO：51)的核苷酸序列。

图13显示位于GenBank数据库(登录号A60480(SEQ ID NO：52)，NP_00584(SEQ ID NO：53)和AAC17735(SEQ ID NO：54))的人IL-9的氨基酸序列。

图14A-C显示发现于GenBank数据库(登录号NM_002186(SEQ ID NO：55)、NM_176786(SEQ ID NO：56)和NM_000206(SEQ ID NO：57))的人IL-9R亚单位的核苷酸序列。(A)登录号NM_002186和(B)登录号NM_176786是人IL-9Rα亚单位同种型前体的核苷酸序列。(C)登录号NM_000206是人IL-9R γ链的核苷酸序列。

图15显示发现于GenBank数据库(登录号NP_002177(SEQ ID NO：58)、NP_789743(SEQ ID NO：59)和NM_000197(SEQ ID NO：60))的人IL-9R的氨基酸序列。登录号NP_002177和NP_789743是人IL-9Rα亚单位同种型前体的氨基酸序列。NP_000197是人IL-9Rγ链的氨基酸序列。

图16是制备免疫特异性结合IL-9多肽的纯化抗体的方案的示意图。

图17A-17B.在不存在盐和存在150mM NaCl的条件下尿素诱导的7F3com-2H2解折叠证明，在只存在组氨酸的条件下，抗体解折叠是一个简单的2步过程，表明所有结构域合作性解折叠，而加入盐时，7F3com-2H2结构域的解折叠是通过形成中间体群体进行的连续过程。(A)图，10mM组氨酸，pH 6.0；(B)图，10mM磷酸盐缓冲液，pH 6.0。

图18A-18B.(A)在不含盐、含25mMNaCl和含150mMNaCl的10mM组氨酸，pH 6.0中；和(B)在不含盐和含150mM NaCl的10mM磷酸盐缓冲液，pH 6.0中，7F3com-2H2的差示扫描量热(DSC)图。

图19A-19B.7F3com-2H2抗体的KI(碘化钾)淬灭研究。(A)在10mM组氨酸，150mM NaCl，pH 6.0中天然和中间体7F3com-2H2的SV图(Stern-Volmerplot)。(B)在10mM磷酸盐，150mM NaCl，pH 6.0中天然和解折叠的7F3com-2H2的SV图(Stern-Volmer plot)。

图20A-20B.(A)按照色氨酸荧光和ANS结合实验测定10mM组氨酸中，pH 8.1时尿素诱导的7F3com-2H2解折叠。所示误差线获自在不同日期进行的三组不同的实验。(B)按照色氨酸荧光和ANS结合实验测定10mM磷酸盐中，pH 8.1时尿素诱导的7F3com-2H2解折叠。

图21.用于分析抗体7F3com-2H2的结构非理想性(non-ideality)的傅里叶变换红外光谱(FTIR)实验的结果。结果表明，单独pH不是造成溶液中7F3com-2H2(pI＝8.1)结合的原因；它强烈依赖于缓冲液类型。

图22.在不存在盐(左图)和存在150mM NaCl(右图)时，10mM组氨酸，pH 6中7F3com-2H2的全长、F_ab片段和F_c片段的尿素诱导的解折叠。通过谱质量中心(center of spectral mass，CSM)随着尿素浓度变化而改变来测定7F3com-2H2的解折叠。实线是用简单的双态或非双态拟合获得的曲线。插图显示在10mM磷酸盐缓冲液pH 6.0中全长7F3com-2H2的解折叠。

图23a和b.(a)用7F3com-2H2的全长、F_ab和F_c片段进行的DSC研究表明，在存在组氨酸和盐时导致全长mAb的结构域-结构域相互作用降低且Fc区的CH2结构域去稳定。(b)用7F3com-2H2的全长和分离的F_ab和F_c片段在磷酸盐缓冲液中进行的DSC研究表明，无论是否存在盐，均不显示任何明显改变。

图24.NaCl的电荷屏蔽作用的动画图。在pH 6时，7F3com-2H2抗体带正电，组氨酸的咪唑侧链有超过50％的概率带正电，从而引起组氨酸和抗体之间的电荷排斥作用。

图25.在pH 6的两种缓冲体系中，7F3com-2H2抗体的粘度。含有或不含NaCl的溶液的离子强度分别为153和2.5mM。所有小于20cP的粘度均在剪切速率为600s^-1时测定。曲线是三阶多项式η＝η₀(1+k₁c+k₂c²+k₃c³...)的拟合曲线。

图26.比浊法浊度(90°的光散射)，它是在与粘度测定法相同的条件下，7F3com-2H2的乳光的衡量。乳光和粘度与这种抗体的离子强度负相关。绘制成线以利于观察。

图27.通过膜渗透压力测定法测定用两种缓冲体系配制的pH为6的7F3com-2H2溶液的渗透压，其离子强度与图25相匹配。离子强度较高的溶液的第二维里系数为负，其表观分子量也大于离子强度较低的缓冲体系。直线代表线性回归。

图28a-c.(a)由渗透压数据计算临界第二维里系数。(b)文献中报道的显示临界维里系数的表格是在-5至-6的范围内。(c)提供图27渗透压数据线性回归至(a，左侧)等式并标准化至(a，右侧)等式中的蛋白质体积的表格。呈乳白的两种条件也具有临界值附近的第二维里系数，这表明乳白色可能与相分离(液相-液相或液相-固相)相关联。

图29.抗-IL-9抗体制剂在40°的稳定性。在40℃培育含有5g/l抗-IL-9抗体的不同抗体制剂最长达75天。通过大小排阻色谱以一定时间间隔评估抗体片段化水平。将测定的单体浓度和抗体片段浓度与时间作图。

图30.在实验过程中用含有2.2mM磷酸钠的抗体制剂获得的代表性谱图。显示的UV吸光度曲线对应于左轴。用市售分子量标记物获得的洗脱数据点对应于右轴。

5.发明详述

本发明的稳定液体制剂提供了感兴趣的治疗性抗体或预防性抗体(包括其抗体片段)，例如，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体(如7F3com-2H2)的即用型制剂，该制剂用于给予对象(如人对象)，无须在将该制剂给予对象之前用精确的无菌技术重建该制剂并等待一段时间直到溶液澄清。此外，这类重建溶液必须在一定时间内使用，这使其成为非常昂贵的废品。它简化了健康护理人员将制剂给予对象的步骤。

而且，由于在储存期间的高稳定性，所以本发明制剂可含有浓度范围约为10mg/ml至300mg/ml的感兴趣的治疗性抗体或预防性抗体(包括其抗体片段)，例如，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体(如7F3com-2H2)。这种稳定性不仅保证了抗体的功效，而且降低了在对象中可能发生不良作用的风险。而且，在制剂中使用较少组分可降低污染的风险。此外，与冻干形式相比，本发明液体制剂的生产过程简单且更有效，因为液体制剂的所有生产阶段均在水溶液中进行，不包括干燥步骤，如冻干和冷冻干燥步骤。因此，其成本更低。

利用含有(例如)组氨酸的两性离子缓冲液配制抗体时，由于组氨酸的两性离子特性，可能通过降低结构域之间的相互作用、可能是分解盐桥而与抗体发生相互作用，因此按照本发明方法配制的抗体的特征包括经由灵敏分析技术测定的某些相特性，如形成解折叠的中间体、胶体不稳定性、抗体分子的可溶性结合和抗体分子的沉淀，这些技术包括但不限于：高效大小排阻色谱(HPSEC)、切向流过滤(TFF)技术、静态光散射(SLS)技术、傅里叶变换红外光谱(FTIR)技术、圆二色性(CD)技术、尿素-诱导的蛋白质解折叠技术、色氨酸固有荧光技术、差示扫描量热法(DSC)和1-苯胺基-8-萘磺酸(ANS)蛋白质结合技术。这种相互作用可能导致胶体稳定性降低、可溶性结合和沉淀，这些现象均可导致蛋白质聚集，造成抗体制剂不稳定的不良结果。因此，本发明提供测定某些缓冲液，如非两性离子缓冲液(如磷酸盐、tris、柠檬酸盐、琥珀酸盐和乙酸盐缓冲液)能否促进具体蛋白质(如单克隆抗体)的某些相特性(如胶体不稳定性、可溶性结合和沉淀)的减少或降低，使其更适合用本发明方法配制的方法。

抗体制剂

本发明的稳定液体制剂提供了在长期储存期间聚集很少甚至布局集的高稳定性抗体制剂。在一个具体实施方式中，这种抗体制剂是均一的。在一个实施方式中，本发明制剂是无菌的。本发明制剂包含水性载体(如蒸馏水)、磷酸盐或其它非两性离子缓冲液，任选包含盐如NaCl和感兴趣的治疗性或预防性抗体(包括其抗体片段)，例如免疫特异性结合IL-9多肽的抗体，只要与两性离子缓冲液相比，该抗体在非两性离子缓冲剂中，在低于pI的pH下、在约10mg/ml至300mg/ml的浓度下更稳定。在一个实施方式中，本发明制剂不含除水和合适溶剂以外的其它成分。在另一优选实施方式中，水是蒸馏水。在一个具体实施方式中，本发明液体制剂中包含的免疫特异性结合IL-9多肽的抗体是4D4、4D4H2-1 D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F3 22D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4或其抗原结合片段。在一个实施方式中，本发明液体制剂中包含的免疫特异性结合IL-9多肽的抗体不是4D4、4D4H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4或其抗原结合片段。在一个实施方式中，本发明液体制剂中包含的免疫特异性结合IL-9多肽的抗体是含有一个或多个上表1所列的VH CDR和/或一个或多个上表1所列的VL CDR的抗体(包括其抗体片段)。在另一实施方式中，本发明液体制剂中包含的免疫特异性结合IL-9多肽的抗体(包括其抗体片段)是偶联于另一个部分的抗体(包括其抗体片段)，所述另一个部分包括但不限于：异源多肽、另一种抗体(包括其抗体片段)、标记序列、诊断剂、治疗剂、放射性金属离子、聚合物、清蛋白和固体支持物。在又一实施方式中，本发明液体制剂包含两种或多种免疫特异性结合IL-9多肽的抗体或(包括其抗体片段)，其中至少一种抗体(包括其抗体片段)是4D4、4D4 H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F3 22D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4或其抗原结合片段。

本发明液体制剂中包含的感兴趣抗体(包括其抗体片段)，如免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的浓度是至少10mg/ml、至少15mg/ml、至少20mg/ml、至少25mg/ml、至少30mg/ml、至少35mg/ml、至少40mg/ml、至少45mg/ml、至少50mg/ml、至少55mg/ml、至少60mg/ml、至少65mg/ml、至少70mg/ml、至少75mg/ml、至少80mg/ml、至少85mg/ml、至少90mg/ml、至少95mg/ml、至少100mg/ml、至少105mg/ml、至少110mg/ml、至少115mg/ml、至少120mg/ml、至少125mg/ml、至少130mg/ml、至少135mg/ml、至少140mg/ml、至少150mg/ml、至少175mg/ml、至少200mg/ml、至少250mg/ml、至少275mg/ml或至少300mg/ml。本发明液体制剂中包含的感兴趣抗体(包括其抗体片段)，例如，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体(如7F3com-2H2)的浓度为10mg/ml或更高、至少15mg/ml或更高、至少20mg/ml或更高、至少25mg/ml或更高、至少30mg/ml或更高、至少35mg/ml或更高、至少40mg/ml或更高、至少45mg/ml或更高、至少50mg/ml或更高、至少55mg/ml或更高、至少60mg/ml或更高、至少65mg/ml或更高、至少70mg/ml或更高、至少75mg/ml或更高、至少80mg/ml或更高、至少85mg/ml或更高、至少90mg/ml或更高、至少95mg/ml或更高、至少100mg/ml或更高、至少105mg/ml或更高、至少110mg/ml或更高、至少115mg/ml或更高、至少120mg/ml或更高、至少125mg/ml或更高、至少130mg/ml或更高、至少135mg/ml或更高、至少140mg/ml或更高、至少150mg/ml或更高、至少175mg/ml或更高、至少200mg/ml或更高、至少250mg/ml或更高、至少275mg/ml或更高或至少300mg/ml或更高。在一个具体实施方式中，本发明液体制剂中包含的感兴趣抗体(包括其抗体片段)，如免疫特异性结合IL-9多肽的抗体(如7F3com-2H2)的浓度是约50mg/ml、75mg/ml、约100mg/ml、约125mg/ml、约150mg/ml、约175mg/ml、约200mg/ml、约225mg/ml、约250mg/ml、约275mg/ml或约300mg/ml。在另一实施方式中，本发明液体制剂中包含的感兴趣抗体(包括其抗体片段)，例如，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体(如7F3com-2H2)的浓度为10-50mg/ml、15-500mg/ml、50-300mg/ml、50-250mg/ml、50-200mg/ml、50-150mg/ml、100-200mg/ml、50-175mg/ml、50-150mg/ml、50-125mg/ml或50-100mg/ml。在一个具体实施方式中，本发明制剂包含约100mg/ml抗-IL-9抗体(如7F3com-2H2)。

可利用磷酸盐缓冲该制剂(但也可使用其它合适的缓冲剂，如tris、柠檬酸盐、琥珀酸盐和乙酸盐缓冲剂)。本发明液体制剂中包含的磷酸盐的浓度范围是1mM至5mM、1mM至100mM、10mM至30mM、25mM至75mM或10mM至100mM。在一个具体实施方式中，本发明液体制剂中包含的磷酸盐的浓度是2mM、5mM、10mM、15mM、20mM、25mM、30mM、35mM、40mM、45mM、50mM、55mM、60mM、65mM、70mM、75mM、80mM、85mM、90mM、95mM或100mM。可采用适合配制和胃肠道外给药的任何形式的磷酸盐。磷酸盐的纯度应该为至少98％、至少99％或至少99.5％。提到磷酸盐时，本文所用术语“纯度”指本领域所理解的磷酸盐的化学纯度，如《默克索引》(The Merck Index)，第13版，O’Neil等编(默克公司(Merck&Co.)，2001)所述。在一个具体实施方式中，本发明制剂包含25mM磷酸盐缓冲剂。除磷酸盐外，本发明制剂中也可采用其它缓冲剂，特别是非两性离子缓冲剂(如tris、柠檬酸盐、琥珀酸盐和乙酸盐缓冲剂)，浓度范围是1mM至100mM、25mM至75mM或10mM至100mM，或者浓度为5mM、10mM、15mM、20mM、25mM、30mM、35mM、40mM、45mM、50mM、55mM、60mM、65mM、70mM、75mM、80mM、85mM、90mM、95mM或100mM。

在某些实施方式中，本发明制剂包含盐。在一个实施方式中，本发明制剂包含选自下组的盐：NaCl、KCl、CaCl₂和MgCl₂。在一个具体实施方式中，盐可以是NaCl。本发明制剂中包含的NaCl的浓度范围可以是10mM至300mM、50mM至200mM、100mM至200mM或125mM至175mM。在一个具体实施方式中，本发明制剂中包含的NaCl的浓度可以是约10mM、约25mM、约50mM、约75mM、约100mM、约125mM、约150mM、约175mM、约200mM、约225mM、约250mM或约300mM。NaCl的纯度可以是至少98％、至少99％或至少99.5％。在一个具体实施方式中，本发明液体制剂中包含的NaCl的浓度可以是约150mM。提到NaCl时，本文所用术语“纯度”指本领域所理解的NaCl的化学纯度，如《默克索引》(The Merck Index)，第13版，O’Neil等编(默克公司(Merck&Co.)，2001)所述。

制剂的pH通常应不等于制剂中所用特定抗体(包括其抗体片段)的等电点(如4D4、4D4 H2-1 D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F3 22D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4的等电点范围是8.65至8.89)，其范围可以是约4.0至8.0，或者范围可以是约6.0至6.5。在一个具体实施方式中，本发明制剂包含抗-IL-9抗体(如7F3com-2H2)，其pH可以为约6.0。

任选地，本发明制剂还可包含其它赋形剂，如糖(如蔗糖、甘露糖、海藻糖等)、多元醇(如甘露糖醇、山梨醇等)和表面活性剂(如吐温-20或吐温-80)。在一个实施方式中，其它赋形剂糖(如蔗糖)。在一个具体实施方式中，糖是蔗糖，其在制剂中的浓度范围为约0％至10％、约1％至20％、约5％至15％或约8％至10％。在一个具体实施方式中，糖是海藻糖，其在制剂中的浓度为约0％至10％、约1％至20％、约5％至15％或约8％至10％。在另一实施方式中，赋形剂是多元醇。在一个具体实施方式中，制剂中多元醇的浓度为0.001％、0.005％、0.01％、0.02％、0.05％、0.08％、0.1％、0.5％或1％。在一个具体实施方式中，多元醇是山梨醇，其在制剂中的浓度范围为约0％至0.1％、约0.001％至1％或约0.01％至0.1％。本发明液体制剂可以含有或不含甘露糖醇。在另一实施方式中，赋形剂是表面活性剂。在具体实施方式中，表面活性剂是吐温-20或吐温-80，其在制剂中的浓度范围为约0％至0.1％、约0.001％至1％或约0.01％至0.1％。在一个具体实施方式中，表面活性剂是吐温-20或吐温-80，其在制剂中的浓度为0.001％、0.005％、0.01％、0.02％、0.05％、0.08％、0.1％、0.5％或1％。

本领域技术人员应理解，本发明制剂可能与人血等渗，即本发明制剂与人血的渗透压基本相等。这类等渗制剂的渗透压通常约为250-350mOSm。可通过(例如)蒸气压或冰冻型渗压计测定等张性。使用张力调节剂调节制剂的张力。″张力调节剂″是可加入制剂以便为制剂提供等张性的药学上可接受的惰性物质。适用于本发明的张力调节剂包括但不限于：糖、盐和氨基酸。

在某些实施方式中，本发明制剂可包含约51mg/ml至150mg/ml的抗-IL-9抗体(如，7F3com-2H2)、约10mM至50mM的磷酸钠、约100mM至200mMNaCl、pH为约5.5至7.0。在另一实施方式中，本发明制剂可包含约100mg/ml抗-IL-9抗体(如7F3com-2H2)、约25mM磷酸钠、约150mM NaCl，且pH为约6.0。在一个具体实施方式中，本发明制剂由约100mg/ml 7F3com-2H2抗-IL-9抗体、约25mM磷酸钠、约50mM NaCl组成，其pH约为6.0。

经高效大小排阻色谱(HPSEC)评价，本发明液体制剂在38℃-42℃的温度范围具有至少15天的稳定性，在一些实施方式中不超过25天的稳定性，在20℃-24℃的温度范围具有至少6个月的稳定性，在2℃-8℃(具体是4℃)的温度范围具有至少6个月、至少1年、至少1.5年、至少2年、至少2.5年、至少3年或至少4年的稳定性，在-20℃的温度下具有至少2年、至少3年、至少4年或至少5年的稳定性。也利用切向流过滤(TFF)技术、静态光散射(SLS)技术、傅里叶变换红外光谱(FTIR)技术、圆二色性(CD)技术、尿素-诱导的蛋白质解折叠技术、色氨酸固有荧光技术、差示扫描量热法(DSC)和/或1-苯胺基-8-萘磺酸(ANS)蛋白质结合技术来评估分子的相特性、其它物理特性和稳定性。即，本发明液体制剂储存上述确定时间后，其聚集和/或片段化水平较低至无法检测。例如，储存上述确定时间后，经HPSEC测定，不超过5％、不超过4％、不超过3％、不超过2％、不超过1％，最优选不超过0.5％的抗体(包括其抗体片段)形成聚集体。

而且，通过不同免疫实验，包括例如，酶联免疫吸附实验(ELISA)和放射性免疫实验测定抗体(包括其抗体片段)免疫特异性结合抗原的能力，确定在上述条件下延长的储存期间，本发明液体制剂中抗体(包括其抗体片段)的生物学活性几乎不下降。在储存上述时间后，与储存前该制剂的初始生物学活性(如结合IL-9多肽的能力)相比本发明液体制剂保持了大于80％、大于85％、大于90％、大于95％、大于98％、大于99％或大于99.5％的生物学活性。在一些实施方式中，与储存之前的参比抗体相比，本发明液体制剂在储存上述确定时间后能保持至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，至少98％，至少99％或至少99.5％的生物学活性(如结合IL-9多肽的能力)。

本发明液体制剂可制备成单位剂型。例如，每瓶单位剂型可包含1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml、7ml、8ml、9ml、10ml、15ml或20ml不同浓度的抗体或抗体片段，所述浓度可以是约15mg/ml至约300mg/ml、约50mg/ml至约300mg/ml、约50mg/ml至约150mg/ml、约75mg/ml至约300mg/ml、约95mg/ml至约300mg/ml、约100mg/ml至约300mg/ml、约150mg/ml至约300mg/ml、约200mg/ml至约300mg/ml、约100mg/ml至约200mg/ml、约100mg/ml至约150mg/ml或约100mg/ml至约175mg/ml。如果需要，可通过向各药瓶添加无菌稀释剂将这些制剂调整之所需浓度。

本发明包括含有感兴趣的单独抗体(包括其抗体片段)，例如，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的稳定液体制剂。本发明也包括含有两种或多种感兴趣抗体(包括其抗体片段)，例如，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的稳定液体制剂。在一个具体实施方式中，本发明稳定液体制剂包含免疫特异性结合IL-9多肽的4D4、4D4H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4或其片段。在另一实施方式中，本发明稳定液体制剂包含两种或多种免疫特异性结合IL-9多肽的抗体(包括其抗体片段)，其中一种抗体(包括其抗体片段)是4D4、4D4 H2-1 D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4或其抗原结合片段。在另一实施方式中，本发明稳定液体制剂包含两种或多种免疫特异性结合IL-9多肽的抗体(包括其抗体片段)，限制条件是：所述抗体(包括其抗体片段)不包括4D4、4D4 H2-1 D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4或其抗原结合片段。

5.1.1.用于本发明制剂的抗体

用于本发明方法的抗体包括但不限于：通过，例如，高效大小排阻色谱(HPSEC)、切向流过滤(TFF)技术、静态光散射(SLS)技术、傅里叶变换红外光谱(FTIR)技术、圆二色性(CD)技术、尿素-诱导的蛋白质解折叠技术、色氨酸固有荧光技术、差示扫描量热法(DSC)和/或1-苯胺基-8-萘磺酸(ANS)蛋白质结合技术测定，与在非两性离子缓冲剂剂液(如磷酸盐缓冲剂)存在下，在相同pH和存在(或不存在)相同浓度的盐的情况下配制的抗体相比，在两性离子缓冲剂(如组氨酸缓冲剂)和盐(如NaCl)存在下，在低于抗体pI的pH下配制时显示出某些相特性，例如，形成不折叠中间体、胶体稳定性降低、可溶性结合和沉淀的抗体。在具体实施方式中，用于本发明方法的抗体(或其片段)包括但不限于：4D4、4D4 H2-1 D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4。优选地，用于本发明方法的抗体(或其片段)是7F3com-2H2。用于本发明方法的其它治疗性或预防性抗体参见例如下述章节5.1.1.1至5.1.1.17。

本发明所用抗体包括但不限于：单克隆抗体、合成抗体、多特异性抗体(包括双特异性抗体)、人抗体、人源化抗体、嵌合抗体、单链Fv(scFv)(包括双特异性scFv)、单链抗体、Fab片段、F(ab’)片段、二硫键连接的Fv(sdFv)和它们的表位结合片段。具体说，本发明抗体包括免疫球蛋白分子和免疫球蛋白分子的免疫活性部分，即含有免疫特异性结合抗原的抗原结合位点的分子。本发明免疫球蛋白分子可以是任何类型(如IgG、IgE、IgM、IgD、IgA和IgY)、类别(如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1和IgA2)或亚类的免疫球蛋白分子。

本发明所用的抗体可来自任何动物来源，包括鸟类和哺乳动物(如人、鼠、驴、绵羊、兔、山羊、豚鼠、骆驼、马或鸡)。优选地，该抗体是人或人源化单克隆抗体。本文所用的“人”抗体包括含有人免疫球蛋白氨基酸序列的抗体，并且包括由人免疫球蛋白文库或由人基因表达抗体的小鼠或其它动物分离的抗体。

本发明所用抗体可以是单特异性、双特异性、三特异性或更多特异性的抗体。多特异性抗体可以免疫特异性结合于多肽的不同表位，或者可以免疫特异性结合于多肽和异源表位，如异源多肽或固体支持物材料。参见例如，国际公开号WO 93/17715、WO 92/08802、WO 91/00360和WO 92/05793；Tutt等，1991，J.Immunol.147：60-69；美国专利号4,474,893、4,714,681、4,925,648、5,573,920和5,601,819；以及Kostelny等，1992，J.Immunol.148：1547-1553。

本发明所用抗体包括抗体的衍生物。可利用本领域技术人员已知的标准技术在编码本发明方法所用抗体的核苷酸序列中引入突变，包括例如，导致氨基酸取代的定点诱变和PCR介导的诱变。优选地，相对于原始分子，该衍生物包括少于25个氨基酸的取代、少于20个氨基酸的取代、少于15个氨基酸的取代、少于10个氨基酸的取代、少于5个氨基酸的取代、少于4个氨基酸的取代、少于3个氨基酸的取代或少于2个氨基酸的取代。在一个实施方式中，该衍生物包含在一个或多个预测的非必需氨基酸残基上产生的保守性氨基酸取代。“保守性氨基酸取代”是氨基酸残基被具有带相似电荷的侧链的氨基酸残基取代。本领域定义了具有带相似电荷的侧链的氨基酸残基家族。这些家族包括，具有碱性侧链的氨基酸(如赖氨酸、精氨酸、组氨酸)、具有酸性侧链的氨基酸(如天冬氨酸、谷氨酸)、具有不带电的极性侧链的氨基酸(如甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、半胱氨酸)、具有非极性侧链的氨基酸(如丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸、色氨酸)、具有β-分支侧链的氨基酸(如苏氨酸、缬氨酸、异亮氨酸)和具有芳族侧链的氨基酸(如酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、组氨酸)。或者，也可沿所有或一部分编码序列随机引入突变(例如通过饱和诱变)，可筛选所得突变体的生物学活性，以鉴定保持活性的突变体。诱变后，可表达编码的蛋白质，并可测定该蛋白的活性。

本发明所用抗体包括修饰的衍生物，即通过将任何类型的分子与该抗体共价连接产生共价连接的衍生物。例如但不限于，抗体衍生物包括通过，例如糖基化、乙酰化、PEG化、磷酸化、酰胺化、通过已知保护/封闭基团衍生化、蛋白水解切割、连接于细胞配体或其它蛋白质等方法修饰的抗体。可通过已知技术进行许多化学修饰，这些技术包括但不限于：特定化学切割、乙酰化、甲酰化、在衣霉素存在时合成等。此外，该衍生物可含有一个或多个非经典氨基酸。

本发明所用抗体或其片段也可包含本领域技术人员已知的构架区。在某些实施方式中，本发明方法所用抗体的一个或多个构架区，优选所有构架区是人构架区。在本发明的某些其它实施方式中，本发明抗体或其片段的片段区是人源化的。在某些实施方式中，本发明方法所用抗体是合成抗体、单克隆抗体、细胞内抗体、嵌合抗体、人抗体、人源化嵌合抗体、人源化抗体、糖基化的抗体、多特异性抗体、人抗体、单链抗体或双特异性抗体。

在本发明的某些实施方式中，本发明所用抗体在哺乳动物，优选人体内的半衰期大于12小时、大于1天、大于3天、大于6天、大于10天、大于15天、大于20天、大于25天、大于30天、大于35天、大于40天、大于45天、大于2个月、大于3个月、大于4个月或大于5个月。可通过本领域技术人员已知的技术产生体内半衰期延长的抗体或其抗原结合片段。例如，可通过修饰(如取代、缺失或加入)经鉴定参与Fc区和FcRn受体相互作用的氨基酸残基，产生体内半衰期延长的抗体或其抗原结合片段(参见例如，国际公开号WO97/34631；和2001年12月12日Johnson等提交的美国专利7,083,784，题为“半衰期延长的分子、组合物和其应用”(Molecules with Extended Half-Lives，Compositions and Uses Thereof)，通过引用将其全文纳入本文)。可利用本领域技术人员已知的方法，例如本文所述的免疫实验检测这类抗体或其抗原结合片段与RSV抗原的结合活性以及体内功效。

另外，可通过将聚合物分子如高分子量聚乙二醇(PEG)连接于所述抗体或抗体片段，产生体内半衰期延长的抗体或其抗原结合片段。可通过PEG与所述抗体或抗体片段的N末端或C末端的位点特异性偶联，或通过赖氨酸残基上的ε-氨基、利用或不利用多功能接头，将PEG连接于所述抗体或抗体片段。可利用导致生物活性损失最小的线型或分支聚合物衍生化。通过SDS-PAGE和质谱密切监测偶联程度，以保证PEG分子适当地偶联于所述抗体。可通过，例如大小排阻或离子交换层析将未反应的PEG与抗体-PEG偶联物分离开。可利用本领域技术人员已知的方法，例如本文所述的免疫实验检测PEG衍生抗体或其抗原结合片段与RSV抗原的结合活性以及体内功效。

本发明所用抗体可以是单链抗体。单链抗体的设计和构建方法参见Marasco等，1993，Proc Natl Acad Sci 90：7889-7893，通过引用将其全文纳入本文。

在某些实施方式中，本发明所用抗体能结合胞内表位，即，是细胞内抗体。细胞内抗体包含能够免疫特异性结合抗原的抗体的至少一部分，优选不含编码其分泌的序列。这类抗体在细胞内结合其抗原。在一个实施方式中，细胞内抗体包括单链Fv(“sFv”)。sFv是含有抗体的VH和VL区的抗体片段，其中这些区域存在于单个多肽链中。通常，Fv多肽的V_H和V_L区之间还包含多肽接头，这使sFv形成所需的抗原结合结构。有关sFv的综述参见Pluckthun，《单克隆抗体的药理学》(The Pharmacology of Monoclonal Antibodies)，第113卷，Rosenburg和Moore编，纽约施普林格出版社(Springer-Verlag，New York)，第269-315页(1994)。

在另一实施方式中，细胞内抗体优选不编码操作性分泌序列，从而保留在细胞内(通常参见Marasco，WA，1998，“细胞内抗体：基础研究和临床基因治疗引用”(Intrabodies：Basic Research and Clinical Gene Therapy Applications)，纽约施普林格出版社(Springer，New York))。

5.1.1.1.IL-9抗体

在具体实施方式中，本发明提供免疫特异性结合IL-9多肽(优选人IL-9多肽)的抗体的制剂。具体说，本发明提供以下免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的制剂：4D4或其抗原结合片段、4D4 H2-1 D11或其抗原结合片段、4D4com-XF-9或其抗原结合片段、4D4com-2F9或其抗原结合片段、7F3或其抗原结合片段、71A10或其抗原结合片段、7F3 22D3或其抗原结合片段、7F3com-2H2或其抗原结合片段、7F3com-3H5或其抗原结合片段和7F3com-3D4或其抗原结合片段。在一个实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体是7F3com-2H2或其抗原结合片段(如7F3com-2H2的一个或多个CDR)。4D4、4D4 H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、71A10、7F322D3、7F3com、7F3com-2H2、7F3com-3H5和7F3com-3D4的恒定区与帕丽珠单抗(米迪缪尼公司(MedImmune，Inc.))IgG₁的恒定区相同(参见1998年10月20日批准的美国专利5,824,307)。

本发明提供免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的制剂，所述抗体包含VH区，所述VH区具有4D4(图1A；SEQ ID NO：7)、4D4H2-1D11(图2A；SEQID NO：9)、4D4com-XF-9(图3A；SEQ ID NO：15)、4D4com-2F9(图4A；SEQID NO：17)、7F3(图5A；SEQ ID NO：21)、71A10(图6A；SEQ ID NO：23)、7F3 22D3(图7A；SEQ ID NO：21)、7F3com-2H2(图8A；SEQ ID NO：27)、7F3com-3H5(图10A；SEQ ID NO：29)或7F3com-3D4(图11A；SEQ ID NO：31)的VH区的氨基酸序列。在一个实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体包含VH区，所述VH区具有7F3com-2H2的VH区的氨基酸序列(图8A；SEQ ID NO：27)。

本发明提供免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的制剂，所述抗体包含VHCDR，所述VH CDR具有上述表1所列任何一个VH CDR的氨基酸序列。具体说，本发明提供免疫特异性结合IL-9多肽的抗体，所述抗体包含一个、两个、三个、四个、五个或更多个具有上述表1所列任何一个VH CDR的氨基酸序列的VH CDR(或者由其组成)。在一个实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体包含VH CDR1，所述VH CDR1具有SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：19或SEQ ID NO：26的氨基酸序列。在另一实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体包含VH CDR2，所述VH CDR2具有SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：10或SEQ ID NO：61的氨基酸序列。在另一实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体包含VH CDR3，所述VH CDR3具有SEQ IDNO：3或SEQ ID NO：12的氨基酸序列。在另一实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体包含VH CDR1和VH CDR2，所述VH CDR1具有SEQ IDNO：1、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：19或SEQ ID NO：26的氨基酸序列，所述VH CDR2具有SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：10或SEQ ID NO：61的氨基酸序列。在另一实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体包含VH CDR1和VH CDR3，所述VH CDR1具有SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：11、SEQ IDNO：19或SEQ ID NO：26的氨基酸序列，所述VH CDR3具有SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：12的氨基酸序列。在另一实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体包含VH CDR2和VH CDR3，所述VH CDR2具有SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：10或SEQ ID NO：61的氨基酸序列，所述VH CDR3具有SEQ IDNO：3或SEQ ID NO：12的氨基酸序列。在另一实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体包含VH CDR1、VH CDR2和VH CDR3，所述VH CDR1具有SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：19或SEQ ID NO：26的氨基酸序列，所述VH CDR2具有SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：10或SEQ IDNO：61的氨基酸序列，所述VH CDR3具有SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：12的氨基酸序列。

本发明提供免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的制剂，所述抗体包含VL区，所述VL区具有4D4(图1B；SEQ ID NO：8)、4D4H2-1 D11(图2B；SEQID NO：8)、4D4com-XF-9(图3B；SEQ ID NO：16)、4D4com-2F9(图4B；SEQID NO：18)、7F3(图5B；SEQ ID NO：22)、71A10(图6B；SEQ ID NO：24)、7F322D3(图7B；SEQ ID NO：25)、7F3com-2H2(图8B；SEQ ID NO：28)、7F3com-3H5(图10B；SEQ ID NO：30)或7F3com-3D4(图11B；SEQ ID NO：32)的VL区的氨基酸序列。在一个实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体包含VL区，所述VL区具有7F3com-2H2的VL区的氨基酸序列(图8B；SEQ ID NO：28)。

本发明也提供免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的制剂，所述抗体包含VLCDR，所述VL CDR具有上述表1所列任何一个VL CDR的氨基酸序列。具体说，本发明提供免疫特异性结合IL-9多肽的抗体，所述抗体包含一个、两个、三个或更多个具有上述表1所列任何一个VL CDR的氨基酸序列的VL CDR(或者由其组成)。在一个实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体包含VLCDR1，所述VL CDR1具有SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：13或SEQ ID NO：62的氨基酸序列。在另一实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体包含VL CDR2，所述VL CDR2具有SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：14或SEQ ID NO：65的氨基酸序列。在另一实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体包含VL CDR3，所述VL CDR3具有SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：63或SEQ ID NO：64的氨基酸序列。在另一实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体包含VL CDR1和VL CDR2，所述VL CDR1具有SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：13或SEQ ID NO：62的氨基酸序列，所述VL CDR2具有SEQ IDNO：5、SEQ ID NO：14或SEQ ID NO：65的氨基酸序列。在另一实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体包含VL CDR1和VL CDR3，所述VLCDR1具有SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：13或SEQ ID NO：62的氨基酸序列，所述VL CDR3具有SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：63或SEQID NO：64的氨基酸序列。在另一实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体包含VL CDR2和VL CDR3，所述VL CDR2具有SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：14或SEQ ID NO：65的氨基酸序列，所述VL CDR3具有SEQ ID NO：6、SEQID NO：20、SEQ ID NO：63或SEQ ID NO：64的氨基酸序列。在另一实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体包含VL CDR1、VL CDR2和VL CDR3，所述VL CDR1具有SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：13或SEQ ID NO：62的氨基酸序列，所述VL CDR2具有SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：14或SEQ ID NO：65的氨基酸序列，所述VL CDR3具有SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：20、SEQID NO：63或SEQ ID NO：64的氨基酸序列，是抗体的一部分。

本发明提供免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的制剂，所述抗体包含本文所述VH区和本文所述VL区，或其它VL区(如，2002年4月12日提交并公开为美国专利公开号US 2003/0219439 A1的美国专利申请号10/412,703(通过引用全文纳入本文)所述的VL区)。本发明也提供免疫特异性结合IL-9多肽的抗体，所述抗体包含本文所述VL区和本文所述VH区，或其它VH区(如，2002年4月12日提交并公开为美国专利公开号US 2003/0219439 A1的美国专利申请号10/412,703(通过引用全文纳入本文)所述的VH区)。

本发明提供免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的制剂，所述抗体包含上述表1所列的VH CDR和2002年4月12日提交并公开为美国专利公开号US2003/0219439 A1的美国专利申请号10/412,703所述的VL CDR(或由其组成)。本发明也提供免疫特异性结合IL-9多肽的抗体，所述抗体包含上述表1所列的VL CDR和2002年4月12日提交并公开为美国专利公开号US 2003/0219439A1的美国专利申请号10/412,703所述的VH CDR(或由其组成)。本发明还提供免疫特异性结合IL-9多肽的抗体，所述抗体包含本文所述和2002年4月12日提交并公开为美国专利公开号US 2003/0219439 A1的美国专利申请号10/412,703公开的VH CDR和VL CDR的组合。

本发明提供免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的制剂，所述抗体包含上述表1所列的一个或多个VH CDR以及一个或多个VL CDR。具体说，本发明提供免疫特异性结合IL-9多肽的抗体、所述抗体包含VH CDR1和VL CDR1；VH CDR1和VL CDR2；VH CDR1和VL CDR3；VH CDR2和VL CDR1；VHCDR2和VL CDR2；VH CDR2和VL CDR3；VH CDR3和VH CDR1；VH CDR3和VL CDR2；VH CDR3和VL CDR3；VH1 CDR1、VH CDR2和VL CDR1；VH CDR1、VH CDR2和VL CDR2；VH CDR1、VH CDR2和VL CDR3；VHCDR2、VH CDR3和VL CDR1、VH CDR2、VH CDR3和VL CDR2；VH CDR2、VH CDR2和VL CDR3；VH CDR1、VL CDR1和VL CDR2；VH CDR1、VLCDR1和VL CDR3；VH CDR2、VL CDR1和VL CDR2；VH CDR2、VL CDR1和VL CDR3；VH CDR3、VL CDR1和VL CDR2；VH CDR3、VL CDR1和VL CDR3；VH CDR1、VH CDR2、VH CDR3和VL CDR1；VH CDR1、VH CDR2、VH CDR3和VL CDR2；VH CDR1、VH CDR2、VH CDR3和VL CDR3；VHCDR1、VH CDR2、VL CDR1和VL CDR2；VH CDR1、VH CDR2、VL CDR1和VL CDR3；VH CDR1、VH CDR3、VL CDR1和VL CDR2；VH CDR1、VHCDR3、VL CDR1和VL CDR3；VH CDR2、VH CDR3、VL CDR1和VL CDR2；VH CDR2、VH CDR3、VL CDR1和VL CDR3；VH CDR2、VH CDR3、VL CDR2和VL CDR3；VH CDR1、VH CDR2、VH CDR3、VL CDR1和VL CDR2；VHCDR1、VH CDR2、VH CDR3、VL CDR1和VL CDR3；VH CDR1、VH CDR2、VL CDR1、VL CDR2和VL CDR3；VH CDR1、VH CDR3、VL CDR1、VL CDR2和VL CDR3；VH CDR2、VH CDR3、VL CDR1、VL CDR2和VL CDR3；或上述表1所列VH CDR和VL CDR的任意组合(或由其组成)。

在一个实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体包含VH CDR1和VL CDR1，所述VH CDR1具有SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：19或SEQ ID NO：26的氨基酸序列，所述VL CDR1具有SEQ ID NO：4、SEQID NO：13或SEQ ID NO：62的氨基酸序列。在另一实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体包含VH CDR1和VL CDR2，所述VH CDR1具有SEQID NO：1、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：19或SEQ ID NO：26的氨基酸序列，所述VL CDR2具有SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：14或SEQ ID NO：65的氨基酸序列。在另一实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体包含VHCDR1和VL CDR3，所述VH CDR1具有SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：19或SEQ ID NO：26的氨基酸序列，所述VL CDR3具有SEQ IDNO：6、SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：63或SEQ ID NO：64的氨基酸序列。

在一个实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体包含VH CDR3和VL CDR1，所述VH CDR3具有SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：12的氨基酸序列，所述VL CDR1具有SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：13或SEQ ID NO：62的氨基酸序列。在另一实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体包含VHCDR3和VL CDR2，所述VH CDR3具有SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：12的氨基酸序列，所述VL CDR2具有SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：14或SEQ IDNO：65的氨基酸序列。在另一实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体包含VH CDR3和VL CDR3，所述VH CDR3具有SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：12的氨基酸序列，所述VL CDR3具有SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：20、SEQID NO：3或SEQ ID NO：64的氨基酸序列。

本发明提供免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的制剂，所述抗体包含免疫特异性结合IL-9多肽的本文所述的VH区、VH CDR、VL区或VL CDR的衍生物。本领域技术人员知道可用于在编码本发明抗体的核苷酸序列中引入突变的标准技术(如缺失、加入和/或取代)包括例如，产生氨基酸取代的定位诱变和PCR介导的诱变。优选地，相对于原始分子，该衍生物包括少于25个氨基酸的取代、少于20个氨基酸的取代、少于15个氨基酸的取代、少于10个氨基酸的取代、少于5个氨基酸的取代、少于4个氨基酸的取代、少于3个氨基酸的取代或少于2个氨基酸的取代。在一个实施方式中，衍生物具有在一个或多个预测的非必需氨基酸残基(即，对抗体与IL-9多肽免疫特异性结合不重要的氨基酸残基)产生的保守性氨基酸取代。“保守性氨基酸取代”是氨基酸残基被具有带相似电荷的侧链的氨基酸残基取代。本领域定义了具有带相似电荷的侧链的氨基酸残基家族。这些家族包括，具有碱性侧链的氨基酸(如赖氨酸、精氨酸、组氨酸)、具有酸性侧链的氨基酸(如天冬氨酸、谷氨酸)、具有不带电的极性侧链的氨基酸(如甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、半胱氨酸)、具有非极性侧链的氨基酸(如丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸、色氨酸)、具有β-分支侧链的氨基酸(如苏氨酸、缬氨酸、异亮氨酸)和具有芳族侧链的氨基酸(如酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、组氨酸)。或者，也可沿所有或一部分编码序列随机引入突变(例如通过饱和诱变)，可筛选所得突变体的生物学活性，以鉴定保持活性的突变体。诱变后，可表达编码的抗体，并可测定该抗体的活性。

在具体实施方式中，本发明提供免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的制剂，所述抗体包含轻链可变区(VL)和/或重链可变区(VH)中含有一个或多个氨基酸残基取代的4D4、4D4H2-1 D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4的氨基酸序列。本发明也提供免疫特异性结合IL-9多肽的抗体，所述抗体包含一个或多个VL CDR和/或一个或多个VH CDR中含有一个或多个氨基酸残基取代的4D4、4D4H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4的氨基酸序列。本发明也提供免疫特异性结合IL-9多肽的抗体，所述抗体包含一个或多个VH构架和/或一个或多个VL构架中包含一个或多个氨基酸残基取代的4D4、4D4 H2-1 D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4或其VH和/或VL区的氨基酸序列。可在体外和/或体内检测通过在VH区、VH CDR、VL区、VL CDR和/或4D4、4D4 H2-1 D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4的构架区中引入取代产生的抗体与IL-9多肽结合的能力，或抑制或降低IL-9介导的细胞增殖的能力，或预防、治疗和/或控制自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或呼吸道感染或者其症状的能力。

在一个实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体包含在严谨条件、高度严谨条件或本领域技术人员已知的其它严谨杂交条件(参见例如，Ausubel，F.M.等编，1989，《新编分子生物学实验指南》(Current Protocols in MolecularBiology)，第I卷，纽约的格林出版联合公司和约翰韦利森公司(Green PublishingAssociates，Inc.and John Wiley&Sons，Inc.，New York)，第6.3.1-6.3.6和2.10.3页)下与编码4D4、4D4 H2-1 D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4或其抗原结合片段的核苷酸序列杂交的核苷酸序列，所述严谨条件包括例如，在6x氯化钠/柠檬酸钠(SSC)中，在约45℃与滤膜结合的DNA杂交，然后用0.2xSSC/0.1％SDS在约50-65℃洗涤一次或多次；所述高度严谨条件包括例如，在6xSSC中，在约45℃与滤膜结合的核酸杂交，然后用0.1xSSC/0.2％SDS在约68℃洗涤一次或多次。

在另一实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体包含核苷酸序列编码的VH区的氨基酸序列或VL区的氨基酸序列，所述核苷酸序列在本文所述的严谨条件或本领域技术人员已知的其它严谨杂交条件下与编码4D4、4D4H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4的VH或VL区的核苷酸序列杂交。在另一实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体包含核苷酸序列编码的VH区的氨基酸序列和VL区的氨基酸序列，所述核昔酸序列在本文所述的严谨条件或本领域技术人员已知的其它严谨杂交条件下与编码4D4、4D4H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4的VH和VL区的核苷酸序列杂交。在另一实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体包含核苷酸序列编码的VH CDR的氨基酸序列或VL CDR的氨基酸序列，所述核苷酸序列在本文所述的严谨条件或本领域技术人员已知的其它严谨杂交条件下与编码上表1所列任一VH CDR或VL CDR的核苷酸序列杂交。在另一实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体包含核苷酸序列编码的VH CDR的氨基酸序列和VL CDR的氨基酸序列，所述核苷酸序列在本文所述的严谨条件或本领域技术人员已知的其它严谨杂交条件下与编码上表1所列任一VH CDR和上表1所列任一VL CDR的核苷酸序列杂交。

在一个具体实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体包含与4D4、4D4 H2-1 D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4或其抗原结合片段的氨基酸序列至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％相同的氨基酸序列。在另一实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体包含与4D4、4D4H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F3 22D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4的VH区至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％相同的VH区的氨基酸序列。在另一实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体包含与4D4、4D4H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4的VL区至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％相同的VL区的氨基酸序列。

在另一实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体包含与上表1所列任何VL CDR至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％相同的一个或多个VL CDR的氨基酸序列。在另一实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体包含与上表1所列任一VL CDR至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％相同的一个或多个VL CDR的氨基酸序列。

本发明包括与本文所述抗体竞争结合IL-9多肽的抗体的制剂。具体说，本发明包括与4D4、4D4 H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4或其抗原结合片段竞争结合IL-9多肽的抗体。在一个具体实施方式中，本发明包括在本文所述的竞争实验或本领域公知的竞争实验中，与对照如PBS相比，使4D4、4D4H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F3 22D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4与IL-9多肽的结合降低至少5％、至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或更多，或者5-15％、10-25％、25％-50％、45-75％或75-99％的抗体。在另一具体实施方式中，本发明包括在ELISA竞争实验中，与对照如PBS相比，使4D4、4D4H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4与IL-9多肽的结合降低至少5％、至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或更多，或者5-15％、10-25％、25％-50％、45-75％或75-99％的抗体的制剂。在一个实施方式中，可通过以下方式进行ELISA竞争实验：用PBS制备浓度为10μg/ml的重组IL-9。将100μl的此种溶液加入ELISA 98-孔微量滴定板的各孔中，4-8℃培育过夜。用补充有0.1％吐温的PBS洗涤ELISA平板，以去除过量重组IL-9。加入100μlPBS制备的终浓度为1％的牛血清白蛋白(BSA)，以封闭非特异性蛋白质-蛋白质相互作用。室温下处理1小时后，洗涤ELISA平板。用封闭溶液制备浓度范围为1μg/ml至0.01μg/ml的未标记的竞争抗体。对照孔仅含封闭溶液或浓度为1μg/ml至0.01μg/ml的对照抗体。向竞争抗体稀释液中加入辣根过氧化物酶标记的受试抗体(如7F3com-2H2)，终浓度固定为1μg/ml。将100μl受试和竞争的混合物一式三份地加入ELISA孔中，室温下培育该平板1小时。洗去残留的未结合抗体。向各孔中加入100μl辣根过氧化物酶底物，以检测结合的测试抗体。室温下培育该平板30分钟，用自动酶标仪读出吸光度。计算三复孔的平均值。与对照孔相比，与受试抗体良好竞争的抗体能降低吸光度测量值。在另一优选实施方式中，本发明包括在ELISA竞争实验(如上所述)中，相对于对照，如PBS，使7F3com-2H2与IL-9多肽的结合降低至少5％、至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或更多，或5-15％、10-25％、25％-50％、45-75％或75-99％的抗体。

在另一实施方式中，本发明包括在本文所述或本领域公知的竞争实验中，与对照如PBS相比，使包含4D4、4D4 H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4的抗原结合片段(如VH区、VH CDR、VL区或VL CDR)(或由其组成)的抗体与IL-9多肽的结合降低至少2％、至少5％、至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或更多，或者5-15％、10-25％、25％-50％、45-75％或75-99％的抗体的制剂。在另一实施方式中，本发明包括在ELISA竞争实验中，与对照如PBS相比，使包含4D4、4D4H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4的抗原结合片段(如VH区、VL区、VH CDR或VL CDR)(或由其组成)的抗体与IL-9多肽的结合降低至少2％、至少5％、至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或更多，或者5-15％、10-25％、25％-50％、45-75％或75-99％的抗体。在一个实施方式中，本发明包括在ELISA竞争实验中，与对照如PBS相比，使包含7F3com-2H2的抗原结合片段(或由其组成)的抗体与IL-9多肽的结合降低至少2％、至少5％、至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或更多，或者5-15％、10-25％、25％-50％、45-75％或75-99％的抗体。

本发明包括含有与4D4、4D4H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4的VH区竞争结合IL-9多肽的VH区(或由其组成)的多肽或蛋白质的制剂。本发明也包括含有与4D4、4D4H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4的VL区竞争结合IL-9多肽的VL区(或由其组成)的多肽或蛋白质的制剂。

本发明包括含有与上表1所列VH CDR竞争结合IL-9多肽的VH CDR(或由其组成)的多肽或蛋白质的制剂。本发明也包括包含与上表1所列VL CDR竞争结合IL-9多肽的VL CDR(或由其组成)的多肽或蛋白质。

免疫特异性结合IL-9多肽的抗体包括修饰的衍生物，即通过将任何类型的分子与该抗体共价连接产生共价连接的衍生物。例如但不限于，抗体衍生物包括通过，例如糖基化、乙酰化、PEG化、磷酸化、酰胺化、通过已知保护/封闭基团衍生化、蛋白水解切割、连接于细胞配体或其它蛋白质等方法修饰的抗体。可通过已知技术进行许多化学修饰，这些技术包括但不限于：特定化学切割、乙酰化、甲酰化、衣霉素的代谢合成等。此外，该衍生物可含有一个或多个非经典氨基酸。

本发明也提供免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的制剂，所述抗体包含本领域技术人员已知的构架区(如人或非人构架区)。构架区可以是天然产生的或共有的构架区。本发明抗体的片段区可以是人片段区(参见例如，通过引用全文纳入本文的Chothia等，1998，J.Mol.Biol.278：457-479中人构架区的列表)。

本发明包括免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的制剂，所述抗体包含构架区含有突变(如，一个或多个氨基酸取代)的4D4、4D4H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4的氨基酸序列。在某些实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体包含VH和/或VL区的构架区中含有一个或多个氨基酸残基取代的4D4、4D4H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4的氨基酸序列。构架区中的氨基酸取代可提高抗体与IL-9多肽的结合。

在一个具体实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的制剂包含4D4、4D4H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4的一个或多个CDR，具有氨基酸序列QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKAS (SEQ ID NO：33)或QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKAS(SEQ ID NO：37)的VH构架区1，具有氨基酸序列WVRQAPGQGLEWMG(SEQ ID NO：34)的VH构架区2，具有氨基酸序列RVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAR(SEQ ID NO：35)或RVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCAR(SEQ ID NO：38)的VH构架区3和具有氨基酸序列WGQGTLVTVSS(SEQ ID NO：36)的VH构架区4的氨基酸序列。在另一实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体包含4D4、4D4 H2-1 D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4的一个或多个CDR，具有氨基酸序列DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITC(SEQ ID NO：39)的VL构架区1，具有氨基酸序列WYQQKPGKAPKLLIY(SEQ ID NO：40)的VL构架区2，具有氨基酸序列GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYC(SEQ ID NO：41)的VL构架区3和具有氨基酸序列FGGGTKVEIK(SEQ ID NO：42)的VL构架区4的氨基酸序列。在又一实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体包含4D4、4D4 H2-1 D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F3 22D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4的一个或多个CDR，具有氨基酸序列SEQ ID NO：33或SEQ ID NO：37的VH构架区1、具有氨基酸序列SEQ IDNO：34的VH构架区2、具有氨基酸序列SEQ ID NO：35或SEQ ID NO：38的VH构架区3、具有氨基酸序列SEQ ID NO：36的VH构架区4、具有氨基酸序列SEQ ID NO：39的VL构架区1、具有氨基酸序列SEQ ID NO：40的VL构架区2、具有氨基酸序列SEQ ID NO：41的VL构架区3和具有氨基酸序列SEQ ID NO：42的VL构架区4的氨基酸序列。

本发明也包括免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的制剂，所述抗体包含可变区和构架区含有突变(如，一个或多个氨基酸残基取代)的4D4、4D4H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4的氨基酸序列。可变区和构架区中的氨基酸取代可提高抗体与IL-9多肽的结合。

本发明也提供含有本领域技术人员已知恒定区的本发明抗体的制剂。本发明抗体的恒定区或其片段可以是人。

本发明包括免疫细胞如活化T细胞或肥大细胞表达的免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的制剂。本发明也包括免疫特异性结合IL-9多肽并调节T细胞、B细胞、肥大细胞、中性粒细胞和/或嗜酸性粒细胞的活性或功能的抗体。本发明还包括免疫特异性结合IL-9多肽并抑制或降低炎性细胞向对象的组织、关节或器官浸润和/或抑制或降低上皮细胞增生的抗体。

本发明包括环境中发现的，即不结合于IL-9R或其亚单位的免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的制剂。本发明也包括结合于可溶性IL-9Rα亚单位的免疫特异性结合IL-9多肽的抗体。本发明还包括结合于与细胞膜结合的IL-9R或其亚单位的免疫特异性结合IL-9多肽的抗体。

在一个实施方式中，在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验(如，免疫实验如ELISA)中，与对照如PBS或IgG对照抗体相比，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体能使IL-9多肽和IL-9R或其亚单位之间的相互作用抑制和/或降低约25％、约30％、约35％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％或约98％。在另一实施方式中，在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验(如免疫实验如ELISA)中，与对照如PBS或IgG对照抗体相比，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体不抑制IL-9多肽和IL-9R或其亚单位之间的相互作用。在另一实施方式中，在(例如)免疫实验如ELISA中，与对照如PBS或IgG对照抗体相比，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体对IL-9多肽和IL-9R之间的相互作用的抑制小于20％、小于15％、小于10％或小于5％。

在一个实施方式中，在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验(例如，采用IL-9依赖性细胞系如表达人IL-9R的IL-9依赖性小鼠T细胞系的细胞增殖实验)中，与对照如磷酸缓冲盐水(“PBS”)或IgG对照抗体相比，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体能将IL-9多肽和IL-9R或其一个或多个亚单位的相互作用抑制或降低至少25％、至少30％、至少35％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％。在另一实施方式中，在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验(例如，利用IL-9依赖性细胞系如表达人IL-9R的IL-9依赖性小鼠T细胞系的细胞增殖实验)中，与对照如PBS或IgG对照抗体相比，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体不抑制IL-9多肽和IL-9R或其一个或多个亚单位之间的相互作用。在另一实施方式中，在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验(例如，利用IL-9依赖性细胞系如表达人IL-9R的IL-9依赖性小鼠T细胞系的细胞增殖实验)中，与对照如PBS或IgG对照抗体相比，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体对IL-9多肽和IL-9R或其一个或多个亚单位之间相互作用的抑制小于20％、小于15％、小于10％或小于5％。

本发明包括在本文所述或本领域熟知的体内和/或体外实验中，相对于对照如PBS或IgG对照抗体，免疫特异性结合IL-9多肽且不诱导或降低细胞因子表达和/或释放的抗体的制剂。在一个实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽且相对于给予对照如PBS或IgG对照抗体的对象血清中这类细胞因子的浓度，不诱导给予这类抗体的对象血清中细胞因子如IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-10、IL-12、IL-15和IL-23浓度增加的抗体。在另一实施方式中，在本文所述或本领域熟知的体外和/或体内实验中，相对于对照如PBS或IgG对照抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体诱导细胞因子表达和/或释放。在一个具体实施方式中，相对于给予对照如PBS或IgG对照抗体的对象血清中这些细胞因子的浓度，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体诱导给予该抗体的对象血清中细胞因子，如IFN-γ、IL-2、IL-12和IL-15浓度增加。在另一具体实施方式中，相对于给予对照如PBS或IgG对照抗体的对象血清中这些细胞因子的浓度，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体在给予这类抗体的对象体内诱导Th1细胞产生的细胞因子，如IFN-γ和IL-12浓度增加。在一个具体实施方式中，相对于给予对照如PBS或IgG对照抗体的对象血清中这些细胞因子的浓度，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体诱导给予该抗体的对象血清中细胞因子，如IL-4、IL-5、IL-10、IL-13和IL-23浓度降低。在另一具体实施方式中，相对于给予对照如PBS或IgG对照抗体的对象血清中这些细胞因子的浓度，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体诱导给予该抗体的对象血清中肥大细胞产生的细胞因子，如TNF-α、IL-4和IL-13浓度降低。在另一具体实施方式中，相对于给予对照如PBS或IgG对照抗体的对象血清中这些细胞因子的浓度，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体诱导给予该抗体的对象血清中Th2细胞产生的细胞因子，如IL-4、IL-5、IL-13和IL-10浓度降低。可通过本领域技术人员熟知的任何技术，例如ELISA或Western印迹实验测定细胞因子的血清浓度。

在一个实施方式中，在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验(如台盼蓝实验或3H-胸苷实验)中，相对于对照如PBS或IgG对照抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体能使炎性细胞(如肥大细胞、T细胞、B细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、嗜碱性细胞和/或嗜酸性粒细胞)的增殖降低和/或抑制至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％。在另一实施方式中，在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验中，相对于对照如PBS或IgG对照抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体使炎性细胞向上呼吸道和/或下呼吸道的浸润减少或抑制至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％。在另一实施方式中，在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验中，相对于对照如PBS或IgG对照抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体使炎性细胞向上呼吸道和/或下呼吸道的浸润减少和/或抑制至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％；并且在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验(如台盼蓝实验或³H-胸苷实验)中，相对于对照如PBS或IgG对照抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体能使炎性细胞增殖降低和/或抑制至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％。

在某些实施方式中，在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验(参见例如，Windmiller和Backer，2003，J.Biol.Chem.278：11874-78中肥大细胞脱粒实验的例子)，相对于对照如PBS或IgG对照抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体能使肥大细胞脱粒减少至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％。在其它实施方式中，在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验中，相对于对照如PBS或IgG对照抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体使肥大细胞活化抑制或减少至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％。在其它实施方式中，在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验中，相对于对照如PBS或IgG对照抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体使肥大细胞活化和/或脱粒产物的表达和/或释放抑制或减少至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％。

在一个具体实施方式中，在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验中，相对于对照如PBS或IgG对照抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体使肥大细胞蛋白酶，如糜蛋白酶和类胰蛋白酶的表达、活性、血清浓度和/或释放抑制或减少至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％。在一个实施方式中，可通过在10ng/ml IL-9存在下体外培养原代肥大细胞或肥大细胞系测定肥大细胞活性。通过市售ELISA试剂盒测定上清液中蛋白酶(如糜蛋白酶和类胰蛋白酶)和白三烯的基线水平。将IL-9-反应性抗体或对照抗体直接加入细胞培养物，使其浓度为1μg/ml，以评估抗体调节蛋白酶或白三烯水平的能力。在24和36小时时间点上评估蛋白酶和白三烯水平。在另一具体实施方式中，在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验中，相对于对照如PBS或IgG对照抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体使肥大细胞白三烯，如C4、D4和E4的表达、活性、血清浓度和/或释放抑制或减少至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％。在另一具体实施方式中，在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验(如ELISA或Western印迹实验)中，相对于对照如PBS或IgG对照抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体使肥大细胞细胞因子，如TNF-α、IL-4和IL-13的表达、活性、血清浓度和/或释放抑制或减少至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％。

在其它实施方式中，在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验中，相对于对照如PBS或对照IgG抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体使肥大细胞浸润抑制或减少至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％。在其它实施方式中，在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验(如台盼蓝实验、FACS或³H胸苷实验)中，相对于对照如PBS或对照IgG抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体使肥大细胞增殖抑制或减少至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％。在又一实施方式中，在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验中，相对于对照如PBS或对照IgG抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体使肥大细胞浸润抑制或减少至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％；并且在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验(如台盼蓝实验、FACS或³H胸苷实验)中，相对于对照如PBS或对照IgG抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体使肥大细胞增殖抑制或减少至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％。在一个实施方式中，用卵清蛋白敏化动物，以便在体内测定肥大细胞浸润的减少。简要说，在第1天和第21天，皮下给予与铝佐剂复合的100μg卵清蛋白。在三周敏化过程中，每5-7天以10mg/kg计量给予动物IL-9反应性抗体或对照抗体。在第29、30和31天，通过气雾剂递送，或通过鼻内滴注100μl 1μg/mlPBS溶液使动物接触不含佐剂的卵清蛋白。在第31天，最后一次用卵清蛋白刺激后6小时，处死动物，通过甲醛灌注固定肺组织。通过对肺上皮组织切片的每个视野下的肥大细胞进行计数，从组织学角度评估肥大细胞浸润。利用这种实验设计，可通过评估(例如)是否出现异染颗粒和/或利用分化依赖性细胞表面标记(如FcεRI)进行免疫组化，将肺上皮中的肥大细胞前体与肥大细胞区分开。

在其它实施方式中，在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验中，相对于对照如PBS或对照IgG抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体使肥大细胞前体向上呼吸道和/或下呼吸道的浸润抑制或减少至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％。在其它实施方式中，在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验(如台盼蓝实验、FACS或³H胸苷实验)中，相对于对照如PBS或对照IgG抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体使肥大细胞前体的增殖抑制或减少至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％。在另一实施方式中，在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验中，相对于对照如PBS或对照IgG抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体使肥大细胞前体向上呼吸道和/或下呼吸道的浸润抑制和/或减少至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％；并且在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验(如台盼蓝实验、FACS或³H-胸苷实验)中，相对于对照如PBS或对照IgG抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体能使肥大细胞前体的增殖抑制和/或降低至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％。在一个实施方式中，如上所述，通过肥大细胞浸润实验在体内测定肥大细胞前体浸润。

在某些实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体通过诱导T细胞，特别是Th2细胞凋亡增加来介导消耗外周血T细胞。在一个实施方式中，可利用卵清蛋白敏化动物，以便在体内测定Th2T淋巴细胞消耗。简要说，在第1天和第21天，皮下给予与铝佐剂复合的100μg卵清蛋白。在三周敏化过程中，每5-7天以10mg/kg计量给予动物IL-9反应性抗体或对照抗体。在第28天，静脉内给予动物100μg加强剂量的不含佐剂的卵清蛋白。静脉内给予加强剂量2天后，处死动物。回收脾细胞，用流式细胞术分析。与对照抗体接受者相比，接受IL-9中和抗体的动物中通过胞质IL-4染色鉴定的脾脏Th2T淋巴细胞应减少。在另一实施方式中，在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验(如FACS)中，相对于对照如PBS或对照IgG抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体使Th1和Th2分化抑制或减少至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％。在某些实施方式中，在本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验中，相对于对照如PBS或对照IgG抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体使上呼吸道和/或下呼吸道中的T细胞浸润，特别是Th2细胞浸润抑制或减少至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％。在其它实施方式中，在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验(如台盼蓝实验、FACS或³H胸苷实验)中，相对于对照如PBS或对照IgG抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体使T细胞增殖抑制或减少至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％。在其它实施方式中，在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验中，相对于对照如PBS或对照IgG抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体使上呼吸道和/或下呼吸道中的T细胞浸润，特别是Th2细胞浸润抑制和/或减少至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％，使T细胞增殖，特别是Th2细胞增殖抑制和/或减少至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％，和/或增加T细胞凋亡。

在某些实施方式中，在本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验中，相对于对照如PBS或对照IgG抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体使巨噬细胞浸润减少至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％。在一个实施方式中，用卵清蛋白敏化动物，以便在体内测定巨噬细胞浸润的减少。简要说，在第1天和第21天，皮下给予与铝佐剂复合的100μg卵清蛋白。在三周敏化过程中，每5-7天以10mg/kg计量给予动物IL-9反应性抗体或对照抗体。在第29、30和31天，通过气雾剂递送，或通过鼻内滴注100μl 1μg/ml PBS溶液使动物接触不含佐剂的卵清蛋白。在第31天，最后一次用卵清蛋白刺激后6小时，处死动物，通过甲醛灌注固定肺组织。通过对肺组织切片的每个视野下的CD14阳性细胞进行计数，通过免疫组化评估巨噬细胞浸润。在其它实施方式中，在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验(如台盼蓝实验、FACS或³H胸苷实验)中，相对于对照如PBS或对照IgG抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体使巨噬细胞增殖抑制或减少至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％。在其它实施方式中，在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验中，相对于对照如PBS或对照IgG抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体能使巨噬细胞浸润抑制和/或减少至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％，并且在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验中，相对于对照如PBS或对照IgG抗体，使巨噬细胞增殖抑制或减少至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％。

在某些实施方式中，在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验中，相对于对照如PBS或对照IgG抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体使B细胞浸润减少至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％。在一个实施方式中，用卵清蛋白全身性敏化动物，以便在体内测定B淋巴细胞浸润的减少。简要说，在第1天和第21天，皮下给予与铝佐剂复合的100μg卵清蛋白。在三周敏化过程中，每5-7天以10mg/kg计量给予动物IL-9反应性抗体或对照抗体。在第29、30和31天，通过气雾剂递送，或通过鼻内滴注100μl 1μg/ml PBS溶液使动物接触不含佐剂的卵清蛋白。在第31天，最后一次用卵清蛋白刺激后6小时，处死动物，通过甲醛灌注固定肺组织。通过对肺组织切片的每个视野下的CD19阳性细胞进行计数，通过免疫组化评估B淋巴细胞浸润。在其它实施方式中，在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验(如台盼蓝实验、FACS或³H胸苷实验)中，相对于对照如PBS或对照IgG抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体使B细胞增殖抑制或减少至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％。在其它实施方式中，在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验中，相对于对照如PBS或对照IgG抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体能使B细胞浸润抑制和/或减少至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％，并且在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验中，相对于对照如PBS或对照IgG抗体，使B细胞增殖抑制或减少至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％。

在某些实施方式中，在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验(参见例如，Li等，2000，Am.J.Respir.Cell Mol.Biol.25：644-51)中，相对于对照如PBS或对照IgG抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体使上呼吸道和/或下呼吸道中嗜酸性粒细胞的浸润减少至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％。在其它实施方式中，在本文所述(参见章节5.6)或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验(如台盼蓝实验、FACS或³H胸苷实验)中，相对于对照如PBS或对照IgG抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体使嗜酸性粒细胞增殖抑制或减少至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％。在其它实施方式中，在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验中，相对于对照如PBS或对照IgG抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体能使嗜酸性粒细胞浸润抑制和/或减少至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％，并且在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验中，相对于对照如PBS或对照IgG抗体，使嗜酸性粒细胞增殖抑制或减少至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％。

在其它实施方式中，在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验中，相对于对照如PBS或对照IgG抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体使中性粒细胞浸润减少至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％。在其它实施方式中，在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验(如台盼蓝实验、FACS或³H胸苷实验)中，相对于对照如PBS或对照IgG抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体使中性粒细胞增殖抑制或减少至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％。在其它实施方式中，在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验中，相对于对照如PBS或对照IgG抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体能使中性粒细胞浸润抑制和/或减少至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％，并且在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验中，相对于对照如PBS或对照IgG抗体，使中性粒细胞增殖抑制或减少至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％。

在一个实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体能中和或抑制IL-9介导的生物学作用，包括但不限于炎性细胞募集，上皮增生，上皮细胞生产粘蛋白和肥大细胞活化、脱粒、增殖和/或浸润。

在一个具体实施方式中，在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验中，相对于对照如PBS或对照IgG抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体与拮抗IgE的表达、功能和/或活性的蛋白性物质(如肽、多肽或蛋白质(包括抗体))和/或非蛋白性物质协同作用，以使肥大细胞的活化、脱粒、增殖和/或浸润减少或抑制至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％。

在另一实施方式中，在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验中，相对于对照如PBS或对照IgG抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体与拮抗肥大细胞蛋白酶的表达、功能和/或活性的蛋白性物质(如肽、多肽或蛋白质(包括抗体))和/或非蛋白性物质协同作用，以使肥大细胞的活化、脱粒、增殖和/或浸润减少或抑制至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％。

在另一实施方式中，在本文所述或本领域技术人员熟知的体内和/或体外实验中，相对于对照如PBS或对照IgG抗体，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体与拮抗干细胞因子的表达、功能和/或活性的蛋白性物质(如肽、多肽和蛋白质(包括抗体))和/或非蛋白性物质协同作用，以使肥大细胞的活化、脱粒、增殖和/或浸润减少或抑制至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％。在一个实施方式中，在1ng/ml IL-9和1ng/ml干细胞因子存在下体外培养原代肥大细胞或肥大细胞系。通过市售ELISA试剂盒测定上清液中蛋白酶(如糜蛋白酶和类胰蛋白酶)和白三烯的基线水平。将IL-9-反应性抗体或对照抗体直接加入细胞培养物，使其浓度为1μg/ml，以评估抗体调节蛋白酶或白三烯水平的能力。在24和36小时时间点上评估蛋白酶和白三烯水平。

免疫特异性结合IL-9多肽的本发明抗体的制剂可以是单特异性、双特异性、三特异性或更多特异性的制剂。多特异性抗体可以是对IL-9多肽的不同表位有特异性，或是对IL-9多肽异源表位，如异源多肽或固体支持材料有特异性。参见例如，国际公开号WO 93/17715、WO 92/08802、WO 91/00360和WO92/05793；Tutt等，J.Immunol.147：60-69(1991)；美国专利号4,474,893、4,714,681、4,925,648、5,573,920和5,601,819；以及Kostelny等，J.Immunol.148：1547-1553(1992)。

本发明提供具有与IL-9多肽的高结合亲和力的抗体。在一个具体实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的结合速率常数或k_结合速率

为至少10⁵M^-1s^-1、至少1.5X10⁵M^-1s^-1、至少2X10⁵M^-1s^-1、至少2.5X10⁵M^-1s^-1、至少5X10⁵M^-1s^-1、至少10⁶M^-1s^-1、至少5X10⁶M^-1s^-1、至少10⁷M^-1s^-1、至少5X 10⁷M^-1s^-1或至少10⁸M^-1s^-1，或者10⁵-10⁸M^-1s^-1、1.5X10⁵M^-1s^-1-1X10⁷M^-1s^-1、2X 10⁵-1X10⁶M^-1s^-1或4.5X10⁵X10⁷M^-1s^-1。在一个实施方式中，经BIAcore实验测定，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的k_结合为至少2X10⁵M^-1s^-1、至少2.5X10⁵M^-1s^-1、至少5X10⁵M^-1s^-1、至少10⁶M^-1s^-1、至少5X10⁶M^-1s^-1、至少10⁷M^-1s^-1、至少5X10⁷M^-1s^-1或至少10⁸M^-1s^-1，该抗体在本文所述的微量中和实验中中和人IL-9。在一个实施方式中，经BIAcore实验测定，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的k_结合为至多10⁸M^-1s^-1、至多10⁹M^-1s^-1、至多10¹⁰M^-1s^-1、至多10¹¹M^-1s^-1或至多10¹²M^-1s^-1，该抗体在本文所述的微量中和实验中中和人IL-9。按照这些实施方式，这类抗体可包含4D4、4D4H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F3 22D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4的VH区和/或VL区，或者4D4、4D4H2-1 D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F3 22D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4的VH CDR和/或VL CDR。

在另一实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的

为小于10^-3s^-1、小于5X10^-3s^-1、小于10^-4s^-1、小于2x10^-4s^-1、小于5X10^-4s^-1、小于10^-5s^-1、小于5X10^-5s^-1、小于10^-6s^-1、小于5X10^-6s^-1、小于10^-7s^-1、小于5X10^-7s^-1、小于10^-8s^-1、小于5X10^-8s^-1、小于10^-9s^-1、小于5X10^-9s^-1或小于10^-10s^-1，或者10^-3-10^-10s^-1、10^-4-10^-8s^-1或10^-5-10^-8s^-1。在一个实施方式中，经BIAcore实验测定，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的k_解离为10^-5s^-1、小于5X10^-5s^-1、小于10^-6s^-1、小于5X10^-6s^-1、小于10^-7s^-1、小于5X10^-7s^-1、小于10^-8s^-1、小于5X10^-8s^-1、小于10^-9s^-1、小于5X10^-9s^-1或小于10^-10s^-1，该抗体在本文所述的微量中和实验中中和人IL-9。在另一优选实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的k_解离大于10^-13s^-1、大于10^-12s^-1、大于10^-11s^-1、大于10^-10s^-1、大于10^-9s^-1或大于10^-8s^-1。按照这些实施方式，这类抗体可包含4D4、4D4 H2-1 D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F3 22D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4的VH区和/或VL区，或者4D4、4D4 H2-1 D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F3 22D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4的VH CDR和/或VLCDR。

在另一实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的亲和常数或K_a(k_结合/k_解离)为至少10²M^-1、至少5X10²M^-1、至少10³M^-1、至少5X10³M^-1、至少10⁴M^-1、至少5X10⁴M^-1、至少10⁵M^-1、至少5X10⁵M^-1、至少10⁶M^-1、至少5X10⁶M^-1、至少10⁷M^-1、至少5X10⁷M^-1、至少10⁸M^-1、至少5X10⁸M^-1、至少10⁹M^-1、至少5X10⁹M^-1、至少10¹⁰M^-1、至少5X10¹⁰M^-1、至少10¹¹M^-1、至少5X10¹¹ M^-1、至少10¹²M^-1、至少5X10¹²M^-1、至少10¹³M^-1、至少5X10¹³M^-1、至少10¹⁴M^-1、至少5X10¹⁴M^-1、至少10¹⁵M^-1或至少5X10¹⁵M^-1，或者10²-5X10⁵M^-1、10⁴-1X10¹⁰M^-1或10⁵-1X10⁸M^-1。在另一实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的K_a为至多10¹¹M^-1、至多5X10¹¹M^-1、至多10¹²M^-1、至多5X10¹²M^-1、至多10¹³M^-1、至多5X10¹³M^-1、至多10¹⁴M^-1或至多5X10¹⁴M^-1。在另一实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的解离常数或K_d(k_解离/k_结合)小于10^-5 M、小于5X10^-5M、小于10^-6M、小于5X10^-6M、小于10^-7M、小于5X10^-7M、小于10^-8M、小于5X10^-8M、小于10^-9M、小于5X10^-9M、小于10^-10M、小于5X10^-10M、小于10^-11M、小于5X10^-11M、小于10^-12M、小于5X10^-12M、小于10^-13M、小于5X10^-13M、小于10^-14M、小于5X 10^-14M、小于10^-15M或小于5X 10^-15M，或者为10^-2M-5X 10^-5M、10^-6-10^-15M或10^-8-10^-14M。在一个实施方式中，经BIAcore实验测定，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的K_d小于10^-9M、小于5X10^-9M、小于10^-10M、小于5X10^-10M、小于1X10^-11M、小于5X10^-11M、小于1X10^-12M、小于5X10^-12M、小于10^-13M、小于5X10^-13M或小于1X10^-14M，或是10^-9M-10^-14M，该抗体在本文所述的微量中和实验中中和人IL-9。在另一优选实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的K_d大于10^-9M、大于5X10^-9M、大于10^-10M、大于5X10^-10M、大于10^-11M、大于5X10^-11M、大于10^-12M、大于5X10^-12M、大于6X10^-12M、大于10^-13M、大于5X10^-13M、大于10^-14M、大于5X10^-14M或大于10^-9M-10^-14M。按照这些实施方式，这类抗体可包含4D4、4D4 H2-1 D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F3 22D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4的VH区和/或VL区，或者4D4、4D4 H2-1 D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F3 22D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4的VH CDR和/或VL CDR。

在某些实施方式中，本发明抗体的制剂不包含本领域已知的免疫特异性结合IL-9多肽的抗体。免疫特异性结合IL-9多肽的已知抗体的非限制性例子包括4D4、4D4 H2-1 D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F3 22D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4。

在具体实施方式中，本发明抗体制剂结合携带抗原性表位的IL-9的肽和多肽，所述携带抗原性表位的肽和多肽包含任何物种中发现的IL-9的至少4个、至少5个、至少6个、至少7个、至少8个、至少9个、至少10个、至少11个、至少12个、至少13个、至少14个、至少15个、至少20个、至少25个、至少30个、至少40个、至少50个毗连氨基酸残基，或约15-30个毗连氨基酸的氨基酸序列，或由其组成。含有免疫原性或抗原性表位的多肽长度可以是至少8个、至少10个、至少15个、至少20个、至少25个、至少30个或至少35个氨基酸残基。

携带IL-9表位的肽、多肽和其片段可通过任何常规方式产生。参见例如，Houghten，R.A.(1985)“快速固相合成大量肽的通用方法：抗原-抗体相互作用在单个氨基酸上皮上的特异性”(General method for the rapid solid-phasesynthesis of large numbers of peptides：specificity of antigen-antibody interaction atthe level of individual amino acids)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 82：5131-5135；此种“多个肽同时合成(SMPS)”的方法还参见美国专利4,631,211，Houghten等(1986)。

本发明提供含有一个或多个本文所述抗体的可变区或高变区的肽、多肽和/或蛋白质的制剂。含有一个或多个本发明抗体的可变区或高变区的肽、多肽和/或蛋白质还包含异源氨基酸序列。在某些实施方式中，这类异源氨基酸序列可包含至少5个毗连氨基酸残基、至少10个毗连氨基酸残基、至少15个毗连氨基酸残基、至少20个毗连氨基酸残基、至少25个毗连氨基酸残基、至少30个毗连氨基酸残基、至少40个毗连氨基酸残基、至少50个毗连氨基酸残基、至少75个毗连氨基酸残基、至少100个毗连氨基酸残基或更多个毗连氨基酸残基。这类肽、多肽和/或蛋白质可称为融合蛋白。

在一个具体实施方式中，含有一个或多个本发明抗体的可变区或高变区的肽、多肽和/或蛋白质制剂的长度是10个氨基酸残基、15个氨基酸残基、20个氨基酸残基、25个氨基酸残基、30个氨基酸残基、35个氨基酸残基、40个氨基酸残基、45个氨基酸残基、50个氨基酸残基、75个氨基酸残基、100个氨基酸残基、125个氨基酸残基、150个氨基酸残基或更多个氨基酸残基。在某些实施方式中，含有一个或多个本发明抗体的可变区或高变区的肽、多肽和/或蛋白质免疫特异性结合IL-9多肽。在其它实施方式中，含有一个或多个本发明抗体的可变区或高变区的肽、多肽和/或蛋白质不免疫特异性结合IL-9多肽。

在一个具体实施方式中，本发明提供含有本文所述抗体之一的VH区和/或VL区(参见上表1)的肽、多肽和/或蛋白质的制剂。在一个实施方式中，本发明提供包含具有上表1所列任何CDR的氨基酸序列的一个或多个CDR的肽、多肽和/或蛋白质。按照这些实施方式，所述肽、多肽或蛋白质还可包含异源氨基酸序列。

含有一个或多个可变区或超变区的肽、多肽或蛋白质可用于，例如生产抗-独特型抗体，进而可用于预防、治疗和/或控制与疾病或失调(如自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染))有关的一种或多种症状。所产生的抗-独特型抗体也可用于免疫实验，如ELISA，以检测含有包含用于生产该抗-独特型抗体的肽、多肽或蛋白质中所含可变区或超变区的抗体。

5.1.1.2.免疫特异性结合RSV抗原的抗体

本发明制剂包含免疫特异性结合RSV抗原的分离抗体。该抗体可以是单克隆抗体、人抗体、人源化抗体或嵌合抗体。在某些实施方式中，抗-RSV抗原抗体是帕丽珠单抗。帕丽珠单抗是人源化单克隆抗体，目前用于预防儿科患者的RSV感染。本发明提供免疫特异性结合一种或多种RSV抗原的抗体的制剂。本发明所用抗体可免疫特异性结合一种或多种RSV抗原，不管是何种RSV毒株。本发明也提供与另一RSV毒株相比，区别或优先结合一种RSV毒株的RSV抗原的抗体。在一个实施方式中，该制剂包含免疫特异性结合结合RSV F糖蛋白、G糖蛋白或SH蛋白的抗体。在另一实施方式中，该制剂包含免疫特异性结合RSV F糖蛋白的抗体。在另一实施方式中，该制剂包含结合于RSV F糖蛋白的A、B或C抗原性位点的抗体。可用本发明方法配制的其它RSV抗体也参见2006年6月23日提交的美国申请号11/473,537，题为“具有优化的聚集和片段化特性的抗体制剂”(Antibody Formulations Having OptimizedAggregation and Fragmentation Profiles)，通过引用将其全文纳入本文。5.1.1.3免疫特异性结合人肺炎后病毒(hMPV)的抗体

本发明制剂可包含特异性结合人肺炎后病毒(hMPV)抗原的分离抗体和包含此抗体的组合物。术语“抗-hMPV-抗原抗体”指免疫特异性结合hMPV抗原的抗体或其抗体片段。hMPV抗原指hMPV多肽或其片段，如hMPV核蛋白、hMPV磷蛋白、hMPV基质蛋白、hMPV小疏水性蛋白质、hMPV RNA-依赖性hMPV聚合酶、hMPV F蛋白和hMPV G蛋白。hMPV抗原也指与hMPV多肽或其片段，如hMPV核蛋白、hMPV磷蛋白、hMPV基质蛋白、hMPV小疏水性蛋白质、hMPV RNA-依赖性hMPV聚合酶、hMPV F蛋白和hMPV G蛋白具有相似氨基酸序列的多肽。

本发明所用的抗-hMPV-抗原抗体可以是单克隆抗体、人抗体、人源化抗体或嵌合抗体。在一些优选实施方式中，本发明抗-hMPV抗体是2003年7月25日提交、2004年5月20日公开物美国专利公开号US 2004/0096451 A1的美国专利申请号10/628,088所述的抗体。

这一章节的抗-hMPV-抗原抗体可按照2003年7月25日提交、2004年5月20日公开物美国专利公开号US 2004/0096451 A1的美国专利申请号10/628,088(通过引用将其全文纳入本文)所述进行制备、配制、给药、治疗性使用或预防性使用。

5.1.1.4.免疫特异性结合整联蛋白α _v β ₃ 的抗体

本发明制剂也可包含特异性结合整联蛋白α_vβ₃的分离抗体和包含此抗体的组合物。该抗体可以是单克隆抗体、人抗体、人源化抗体或嵌合抗体。在一些优选实施方式中，本发明抗-整联蛋白α_vβ₃抗体是MEDI-522(维他辛

和

的组合物或制剂参见例如国际公开号WO98/33919、WO 00/78815和WO 02/070007；2002年3月4日提交、2002年11月12日公开为美国专利公开号US 2002/0168360的美国申请序列号10/091,236，通过引用将其全文纳入本文。

在其它实施方式中，免疫特异性结合整联蛋白α_vβ₃的抗体不是

或

的抗原结合片段。免疫特异性结合整联蛋白α_vβ₃的已知抗体的例子包括但不限于：11D2(Searle)、鼠单克隆LM609(Scripps，国际公开号WO 89/05155和美国专利号5,753,230(通过引用将其全文纳入本文)，国际公开号WO98/33919和WO 00/78815(通过引用将其全文纳入本文))，17661-37E和17661-37E 1-5(USBiological)，MON 2032和2033(CalTag)，ab7166(BV3)和ab7167(BV4)(Abcam)和WOW-1(Kiosses等，Nature Cell Biology，3：316-320)。

已经在新血管上，以及许多实体瘤、活化巨噬细胞，单核细胞和破骨细胞表面上发现α_vβ₃整联蛋白。同样，这一章节的抗-整联蛋白α_vβ₃抗体可用作，例如，研究抗体，或用于预防或治疗若干破坏性疾病。

这一章节的抗-整联蛋白α_vβ₃抗体可按照以下文献所述进行制备、配制、给药、治疗性使用或预防性使用：2002年3月4日提交并于2002年11月12日公开为美国专利公开号US 2002/0168360 A1的美国专利申请号10/091,236；2004年1月30日提交并公开为美国专利公开号US 2004/0208870 A1的美国专利申请号10/769,712；2004年1月30日提交并于2004年9月9日公开为美国专利公开号2004/0176272的美国专利申请号10/769,720；2003年3月4日提交并公开为美国专利公开号US 2005/0084489 A1的美国专利申请号10/379,145；2003年3月4日提交并公开为美国专利公开号US 2004/0001835的美国专利申请号10/379,189；2004年1月30日提交的PCT申请号PCT/US04/02701；国际申请公开号WO 00/78815 A1，题为“抗-α_vβ₃重组人抗体、其编码核酸和方法”(Anti-α_vβ₃ recombinant human antibodies，nucleic acidsencoding same and methods)，Huse等；和国际申请公开号：WO 98/33919 A1，题为“抗-α-V-β-3重组人源化抗体、其编码核酸和使用方法”(Anti-alpha-V-veta-3recombinant humanized antibodies，nucleic acids encoding same and methods ofuse)，Huse等；国际公开号WO 89/05155，通过引用将其全文纳入本文。

5.1.1.5.免疫特异性结合CD2的抗体

本发明制剂也可包含免疫特异性结合CD2的分离抗体和包含此抗体的组合物。该抗体可以是单克隆抗体、人抗体、人源化抗体或嵌合抗体。在一些优选实施方式中，本发明抗-CD2抗体是西利珠单抗(MEDI-507)。西利珠单抗可选择性结合表达CD2抗原的细胞(特别是T细胞、自然杀伤细胞和胸腺细胞)，可用于，例如，预防和治疗T细胞淋巴瘤或其它相关疾病。MEDI-507的描述参见例如，国际公开号WO 99/03502，国际申请号PCT/US02/22273和PCT/US02/06761以及美国专利号6,849,258，公开为US 2003/0068320 A1的美国申请序列号10/091,268和公开为US 2003/0044406A1的10/091,313，通过引用将其全文纳入本文。MEDI-507是人源化IgG1κ类型的单克隆抗体，免疫特异性结合人CD2多肽。MEDI-507的构建方法为，用分子技术将大鼠单克隆抗体LO-CD2a/BTI-322的CDR***人IgG1构架区中。LO-CD2a/BTI-322中的氨基酸序列参见例如，美国专利5,730,979、5,817,311和5,951,983；以及美国申请序列号09/056,072和美国专利号6,849,258(通过引用将其全文纳入本文)，或由1993年7月28日保藏在美国典型培养物保藏中心(

弗吉尼亚州玛纳萨斯大学大街10801号(10801 University Boulevard，Manassas，Virginia20110-2209)，保藏号为HB 11423的细胞系产生的单克隆抗体的氨基酸序列。

这一章节的抗-CD2抗体可按照以下文献所述进行制备、配制、给药、治疗性使用或预防性使用：2002年3月4日提交并于2003年4月15日公开为美国专利公开号US 2003/0068320的美国专利申请号10/091,268；2002年3月4日提交并于2003年3月6日公开为美国专利公开号US 2003/0044406的美国专利申请号10/091,313；和2003年9月5日提交并于2004年12月30日公开为美国专利公开号US 2004/0265315的美国专利申请号10/657,006，通过引用将其全文纳入本文。

5.1.1.6免疫特异性结合CD19的抗体

本发明制剂也可包含免疫特异性结合CD19的分离抗体和包含此抗体的组合物。该抗体可以是单克隆抗体、人抗体、人源化抗体或嵌合抗体。在一些优选实施方式中，本发明抗-CD19抗体是MT-103。MT-103是称为双特异性T细胞结合物(Bi-Specific T Cell Engagers，BiTE^TM)的新型抗体衍生物的最新临床代表。BiTE化合物MT-103指导并激活患者自身的免疫***对抗癌细胞、刺激T细胞(一种非常重要的白细胞类型)以破坏B肿瘤细胞(癌性白细胞)。MT-103特异性靶向特定蛋白质(CD19抗原)，这种抗原存在于癌性B细胞上，而不存在于其它血液细胞类型或健康组织，因此避免了传统化疗的副作用。

这一章节的抗-CD19抗体可按照美国专利6,723,538和美国专利公开号2004/0162411所述进行制备、配制、给药、治疗性使用或预防性使用。

人CD19分子是人B细胞表面上表达的结构不同的细胞表面受体。本发明涉及利用结合人CD19抗原的治疗性抗体预防和治疗人类对象的GVHD、体液排斥和移植后淋巴增殖性疾病；自身免疫疾病和失调；以及癌症的免疫治疗性组合物和方法。

产生HB12a和HB12b抗-CD19抗体的杂交瘤已保藏于ATCC，保藏号为PTA-6580和PTA-6581。也参见待指定的美国申请号(律师案卷号：11605-006-999)和2/15/2006提交的美国申请号11/355,905，通过引用将其全文纳入本文。

5.1.1.7免疫特异性结合EphA2的抗体

本发明制剂也可包含免疫特异性结合EphA2的分离抗体和包含此抗体的组合物。本发明抗体可以是单克隆抗体、人抗体、人源化抗体或嵌合抗体。在一些实施方式中，本发明抗-EphA2抗体是EA2。在一些优选实施方式中，EA2抗体是人或人源化抗体。在其它实施方式中，该抗体是EA5。在一些优选实施方式中，EA5抗体是人或人源化抗体。按照国际承认用于专利程序的微生物保存布达佩斯条约的规定，已将产生本发明抗-EphA2抗体的杂交瘤保藏于美国典型培养物保藏中心(ATCC，邮政信箱1549，玛纳萨斯，弗吉尼亚州，20108)并指定保藏号(通过引用纳入本文)，如表2所示。

表2：抗-EphA2抗体.

EphA2抗体	保藏号	保藏日期
EphA2抗体	保藏号	保藏日期	EA2.31	PTA-4380	2002年5月22日
EA5.12	PTA-4381	2002年5月22日	EA2.31	PTA-4380	2002年5月22日
EA5.12	PTA-4381	2002年5月22日	Eph099B-102.147	PTA-4572	2002年8月7日
Eph099B-208.261	PTA-4573	2002年8月7日	Eph099B-102.147	PTA-4572	2002年8月7日
Eph099B-208.261	PTA-4573	2002年8月7日	Eph099B-210.248	PTA-4574	2002年8月7日
Eph099B-233.152	PTA-5194	2003年5月12日	Eph099B-210.248	PTA-4574	2002年8月7日
Eph099B-233.152	PTA-5194	2003年5月12日	Eph101.530.241	PTA-4724	2002年9月26日

EphA2是人上皮中表达的130kDa受体酪氨酸激酶，它在人上皮中的表达水平低，富集于细胞粘着位点内(Zantek等，Cell Growth&Differentiation10：629，1999；Lindberg，等，Molecular&Cellular Biology 10：6316，1990)。在许多侵袭性癌细胞中EphA2上调。本发明抗-EphA2抗体可用于，例如，治疗各种肿瘤，包括乳腺癌、结肠癌、***癌、肺癌和皮肤癌，以及预防转移。

这一章节的抗-EphA2抗体可按照以下文献所述进行制备、配制、给药、治疗性使用或预防性使用：2004年4月12日提交并于2005年3月3日公开为美国专利公开号US 2005/0049176 A1的美国专利申请号10/823,259；2004年4月12日提交并于2005年3月17日公开为美国专利公开号US 2005/0059592A1的美国专利申请号10/823,254；2003年5月12日提交并于2004年2月12日公开为美国专利公开号2004/0028685的美国专利申请号10/436,782；2003年5月12日提交并于2004年5月13日公开为美国专利公开号2004/0091486的美国专利申请号10/436,783；2004年12月3日提交并于2005年7月14日公开为美国专利公开号US 2005/0153923A1的美国专利申请号11/004,794；2004年11月19日提交并于2005年7月14日公开为美国专利公开号US2005/0152899A1的美国专利申请号10/994,129；2004年12月3日提交并于2005年7月7日公开为美国专利公开号US 2005/0147593A1的美国专利申请号11/004,795；和2004年10月27日提交的美国临时申请号60/662,517、60/622,711、60/622,489，通过引用将其全文纳入本文。

5.1.1.8免疫特异性结合EphA4的抗体

本发明制剂可包含免疫特异性结合EphA4抗原的分离抗体和包含此抗体的组合物。本发明抗体可以是单克隆抗体、人抗体、人源化抗体或嵌合抗体。按照国际承认用于专利程序的微生物保存布达佩斯条约的规定，已于2004年6月4日将产生用于本发明方法的抗-EphA4抗体的杂交瘤保藏于美国典型培养物保藏中心(ATCC，邮政信箱1549，玛纳萨斯，弗吉尼亚州，20108)并指定保藏号PTA-6044(通过引用纳入本文)。

EphA4是脑、心、肺、肌肉、肾、胎盘、胰腺(Fox等，Oncogene 10：897，1995)和黑素细胞(Easty等，Int.J.Cancer 71：1061，1997)中表达的受体酪氨酸激酶。EphA4在许多癌症中过度表达。可利用本章节的抗-EphA4抗体治疗胰腺癌等，降低EphA4表达。

这一章节的抗-EphA4抗体可按照以下文献所述进行制备、配制、给药、治疗性使用或预防性使用：2004年6月7日提交并于2005年1月20日公开为美国专利公开号US 2005/0013819 A1的美国专利申请号10/863,729；2004年12月3日提交并于2005年7月14日公开为美国专利公开号US 2005/0153923A1的美国专利申请号11/004,794；2004年12月3日提交并于2005年7月7日公开为美国专利公开号US 2005/0147593 A1的美国专利申请号11/004,794和11/004,795，通过引用将其全文纳入本文。

5.1.1.9.免疫特异性结合HMG1的抗体

本发明制剂可包含免疫特异性结合HMG1的抗体和包含此抗体的组合物。本发明抗体可以是单克隆抗体、人抗体、人源化抗体或嵌合抗体。

早期促炎细胞因子(如TNF、IL-1等)介导炎症，并诱导高迁移率族蛋白1(HMG1)(也称为HMG-1、HMG1和HMGB1)的晚期释放，HMG1是在血清中累积并介导延迟致死和进一步诱导早期促炎细胞因子的蛋白质。

也已证明，在需要乙酰化该分子的过程中HMG1可由受刺激的巨噬细胞或单核细胞主动分泌，其中HMG1从核转移到分泌溶酶体中，导致分泌乙酰化形式的HMG1。由坏死细胞被动释放参见PCT/IB2003/005718。因此，由坏死细胞被动释放的HMG1和由炎性细胞主动分泌的HMGB1的分子是不同的。

另外，HMG1可能是内毒素血症延迟致死的细胞因子介导物。参见例如，美国专利6,468,533和6,448,223。更具体说，已证明细菌内毒素(脂多糖(LPS))能激活单核细胞/巨噬细胞释放HMG1(作为活化的晚期应答)，导致有毒性的血清HMG1水平升高。已证明HMG1的抗体能防止内毒素致死，即使抗体的给予被延迟到产生早期细胞因子应答后。与其它促炎细胞因子类似，HMG1是单核细胞的有效激活物。气管内施用HMG1引起急性肺损伤，抗-HMG1抗体能防止内毒素-诱导的肺水肿。此外，在败血症或失血性休克垂危患者中，血清HMG1水平升高，非存活者的水平显著高于存活者的水平。

本章节的抗-HMG1抗体可按照以下文献所述进行制备、配制、给药、治疗性使用或预防性使用：2005年10月21日提交的美国专利公开号2006-0099207A1，通过引用将其全文纳入本文。已将三个克隆S6、S16和G4保藏于美国典型培养物保藏中心(弗吉尼亚州玛纳萨斯大学大街10801号(10801 University Boulevard，Manassas，Va.)20110-2209)，分别指定ATCC保藏号PTA-6143(保藏日期2004年8月4日)，PTA-6259(保藏日期2004年10月19日)和PTA-6258(保藏日期2004年10月19日)(在本文中分别称为“S6”、“S16”和“G4”)，如通过引用将其全文纳入本文的2005年10月21日提交的美国专利公开号2006-0099207A1所述。

5.1.1.10免疫特异性结合ALK的抗体

本发明制剂可包含免疫特异性结合ALK的抗体和包含此抗体的组合物。本发明抗体可以是单克隆抗体、人抗体、人源化抗体或嵌合抗体。

ALK的单克隆抗体以及产生ALK单克隆抗体8B10、16G2-3和9C10-5的杂交瘤细胞系(保藏于美国典型培养物保藏中心(弗吉尼亚州玛纳萨斯大学大街10801号，20110-2209)，ATCC保藏号待指定)，如2001年6月14日提交并于2002年3月21日公开为美国专利公开号2002/0034768的美国专利申请号09/880,097(通过引用将其全文纳入本文)所述。

多效生长因子(PTN)是136个氨基酸的分泌型肝素结合细胞因子，它具有多种功能，包括在血管新生中的作用。PTN能特异性结合受体酪氨酸激酶、间变性淋巴瘤酶(ALK)，这种结合导致受体的自身磷酸化，随后导致许多信号转导分子如IRS-1、PLC-γ、PI3激酶和Shc的磷酸化并激活细胞存活途径。参见PCT专利申请公开号WO 01/96364。因此调节ALK-介导的信号转导通路的物质和治疗方法可影响一种或多种ALK调节的功能，包括例如，血管新生。ALK参与各种疾病状态，包括癌症以及与不良或过度血管新生有关的疾病。此外，ALK参与某些过程，如伤口愈合中的某些途径。在许多肿瘤中，ALK和/或PTN常常高水平表达。因此，下调ALK和/或PTN功能的物质可通过直接影响肿瘤细胞、间接影响肿瘤募集的血管新生过程或直接和间接作用的组合而影响肿瘤。

5.1.1.11.免疫特异性结合CD20的抗体

本发明制剂可包含免疫特异性结合CD20的抗体和包含此抗体的组合物。本发明抗体可以是单克隆抗体、人抗体、人源化抗体或嵌合抗体。

CD20仅由B淋巴细胞表达(Stashenko等(1980)J Immunol 125：1678-1685；Tedder等，1988a)。CD20形成同源或异源四聚体复合物，在B淋巴细胞的细胞周期进展和信号转导的调节中有重要功能(Tedder和Engel，1994)。CD20还调节跨膜Ca++传导率，它可能是Ca++-通透性阳离子通道的功能组分(Bubien等，J Cell Biol 121：1121-1132；Kanzaki等(1997a)J Biol Chem 272：14733-14739；Kanzaki等(1997b)J Biol Chem 272：4964-4969；Kanzaki等(1995)J Biol Chem270：13099-13104)。CD20的抗体能有效治疗非霍奇金淋巴瘤(McLaughlin等(1998)Oncology 12：1763-1769；Onrust等(1989)J Biol Chem 264：15323-15327；Weiner(1999)Semin Oncol 26：43-51)。

也参见2003年9月30日提交，2004年7月15日公开为US 20040137566的美国专利申请号10/433,287，通过引用将其全文纳入本文。

5.1.1.12.免疫特异性结合CD22的抗体

本发明制剂可包含免疫特异性结合CD22的抗体和包含此抗体的组合物。本发明抗体可以是单克隆抗体、人抗体、人源化抗体或嵌合抗体。

有关抗-CD22抗体的描述参见例如，美国专利号5,484,892；6,183,744；6,187,287；6,254,868；6,306,393；和Tuscano等，Blood 94(4)：1382-92(1999)(通过引用全文纳入本文)。单克隆抗体，包括抗-CD22抗体在治疗非霍奇金淋巴瘤中的应用的综述参见例如，Renner等，Leukemia 11(增刊2)：S5509(1997)。

已经记载过人源化CD22抗体在治疗自身免疫性疾病(参见Tedder，美国专利申请公开号US2003/0202975)和B细胞恶性肿瘤，如淋巴瘤和白血病(参见Tuscano美国专利申请公开号U.S.2004/0001828)中的应用。已经记载过靶向CD22上特定表位的人源化CD22抗体在治疗癌症的免疫偶联物中的应用(参见Leung的美国专利5,789,554和6,187,287)。

本发明示范性VH和VK抗体区保藏于美国典型培养物保藏中心(ATCC)。具体说，称为RHOv2的编码本发明人源化抗-CD22VH序列的质粒保藏于ATCC，保藏号PTA-7372，保藏日期2006年2月9日。称为RHOv2ACD的编码本发明人源化抗-CD22VH序列的质粒保藏于ATCC，保藏号PTA-7373，保藏日期2006年2月9日。称为编码本发明人源化抗-CD22VK序列的质粒RKA保藏于ATCC，保藏号PTA-7370，保藏日期2006年2月9日。称为编码本发明人源化抗-CD22VK序列的质粒RKC保藏于ATCC，保藏号PTA-7371，保藏日期2006年2月9日。

也参见2006年3月6日提交的美国临时申请号TBA，律师案卷号BC320P1，通过引用将其全文纳入本文。

5.1.1.13.免疫特异性结合壳多糖酶的抗体

本发明制剂可包含免疫特异性结合壳多糖酶的抗体和包含此抗体的组合物。本发明抗体可以是单克隆抗体、人抗体、人源化抗体或嵌合抗体。

有记载称，在体内阻断壳多糖酶/壳多糖酶样蛋白能保护骨和软骨，并减轻小鼠RA模型的体重降低。这些结果支持壳多糖酶/壳多糖酶样蛋白在慢性炎性疾病中的作用，更具体是壳多糖酶/壳多糖酶样蛋白在OCL相关疾病，包括骨代谢以及***失调和疾病中的作用。而且，这些结果炎症，人壳多糖酶/壳多糖酶样蛋白是预防和治疗OCL相关疾病的潜在治疗靶点。

也参见2002年7月23日提交、2003年3月13日公开为US 20030049261的美国专利申请号10/202,436，通过引用将其全文纳入本文。

5.1.1.14.免疫特异性结合干扰素α的抗体

本发明制剂可包含免疫特异性结合干扰素α的抗体和包含此抗体的组合物。本发明抗体可以是单克隆抗体、人抗体、人源化抗体或嵌合抗体。

本发明提供治疗对象的干扰素α-介导的疾病或失调的方法，所述方法包括给予该对象本发明抗-IFN α抗体，以便治疗该对象的干扰素-α介导的疾病。可治疗的疾病的例子包括自身免疫性疾病(如***性红斑狼疮、多发性硬化、胰岛素依赖性糖尿病、炎性肠病、牛皮癣、自身免疫性甲状腺炎、类风湿性关节炎和肾小球肾炎)、移植排斥和移植物抗宿主病。

通过引用将其全文纳入本文的2004年12月10日提交的美国申请序列号11/009,410中也记载了抗-干扰素α单克隆抗体。

5.1.1.15.免疫特异性结合干扰素α受体的抗体

本发明制剂可包含免疫特异性结合干扰素α受体的抗体和包含此抗体的组合物。本发明抗体可以是单克隆抗体、人抗体、人源化抗体或嵌合抗体。

本发明也提供抑制表达干扰素α受体1的细胞上I型干扰素的生物学活性的方法，所述方法包括使所述细胞与本发明抗体相接触，以抑制I型干扰素的生物学活性。本发明也提供在需要治疗的对象中治疗I型干扰素介导的疾病或失调的方法，所述方法包括给予该对象本发明抗体或其抗原结合部分，以治疗该对象的I型干扰素介导的疾病。I型干扰素介导的疾病可以是，例如，干扰素α-介导的疾病。

可用本发明方法治疗的疾病或失调的例子包括***性红斑狼疮、胰岛素依赖性糖尿病、炎性肠病、多发性硬化、牛皮癣、自身免疫性甲状腺炎、类风湿性关节炎、肾小球肾炎、HIV感染、AIDS、移植排斥和移植物抗宿主病。

通过引用全文纳入本文的2005年6月20日提交2006年2月9日公开的美国专利公开号2006-0029601 A1中记载了抗-干扰素受体单克隆抗体。

5.1.1.16.具有治疗用途的抗体

本发明制剂包含具有治疗用途的抗体，包括但不限于表3所列的抗体。

表3：可用于本发明的治疗性抗体

5.1.1.17可用于炎性疾病或自身免疫性疾病的抗体

本发明制剂还包含本领域已知可用于治疗和/或预防自身免疫性疾病或炎性疾病的任何抗体。可按照本发明工程改造的用于治疗或预防炎性疾病的抗体的非限制性例子见表4A，用于治疗或预防自身免疫性疾病的抗体的非限制性例子见表4B。

表4A.按照本发明可用于治疗炎性疾病和自身免疫性疾病的抗体

抗体名称	靶抗原	产物类型	同种型	赞助者	适应症
抗体名称	靶抗原	产物类型	同种型	赞助者	适应症	5G1.1	补体(C5)	人源化	IgG	阿来申制药公司(AlexionPharm Inc)	类风湿性关节炎
5G1.1	补体(C5)	人源化	IgG	阿来申制药公司	SLE	5G1.1	补体(C5)	人源化	IgG	阿来申制药公司(AlexionPharm Inc)	类风湿性关节炎
5G1.1	补体(C5)	人源化	IgG	阿来申制药公司	SLE	5G1.1	补体(C5)	人源化	IgG	阿来申制药公司	肾炎
5G1.1-SC	补体(C5)	人源化	ScFv	阿来申制药公司	心肺分流术	5G1.1	补体(C5)	人源化	IgG	阿来申制药公司	肾炎
5G1.1-SC	补体(C5)	人源化	ScFv	阿来申制药公司	心肺分流术	5G1.1-SC	补体(C5)	人源化	ScFv	阿来申制药公司	心肌梗塞
5G1.1-SC	补体(C5)	人源化	ScFv	阿来申制药公司	血管成形术	5G1.1-SC	补体(C5)	人源化	ScFv	阿来申制药公司	心肌梗塞
5G1.1-SC	补体(C5)	人源化	ScFv	阿来申制药公司	血管成形术	ABX-CBL	CBL	人		阿布吉尼公司	GvHD
ABX-CBL	CD147	鼠	IgG	阿布吉尼公司	同种异体移植物排斥	ABX-CBL	CBL	人		阿布吉尼公司	GvHD
ABX-CBL	CD147	鼠	IgG	阿布吉尼公司	同种异体移植物排斥	ABX-IL8	IL-8	人	IgG2	阿布吉尼公司	牛皮癣
安特金(Antegren)	VLA-4	人源化	IgG	雅典娜公司(Athena)/艾伦公司(Elan)	多发性硬化	ABX-IL8	IL-8	人	IgG2	阿布吉尼公司	牛皮癣
安特金(Antegren)	VLA-4	人源化	IgG	雅典娜公司(Athena)/艾伦公司(Elan)	多发性硬化	抗-CD11a	CD11a	人源化	IgG1	基因泰克公司/索马公司	牛皮癣
抗-CD18	CD18	人源化	Fab’2	基因泰克公司	心肌梗塞	抗-CD11a	CD11a	人源化	IgG1	基因泰克公司/索马公司	牛皮癣
抗-CD18	CD18	人源化	Fab’2	基因泰克公司	心肌梗塞	抗-LFA1	CD18	鼠	Fab’2	PM公司(Pasteur-Merieux)/免疫技术公司(Immunotech)	同种异体移植物排斥
安妥瓦(Antova)	CD40L	人源化	IgG	拜基公司(Biogen)	同种异体移植物排斥	抗-LFA1	CD18	鼠	Fab’2	PM公司(Pasteur-Merieux)/免疫技术公司(Immunotech)	同种异体移植物排斥
安妥瓦(Antova)	CD40L	人源化	IgG	拜基公司(Biogen)	同种异体移植物排斥	安妥瓦	CD40L	人源化	IgG	拜基公司	SLE
BTI-322	CD2	大鼠	IgG	米迪缪尼公司	GvHD，牛皮癣	安妥瓦	CD40L	人源化	IgG	拜基公司	SLE
BTI-322	CD2	大鼠	IgG	米迪缪尼公司	GvHD，牛皮癣	CDP571	TNF-α	人源化	IgG4	塞尔泰克公司(Celltech)	克罗恩病(Crohn’s)
CDP571	TNF-α	人源化	IgG4	塞尔泰克公司	类风湿性关节	CDP571	TNF-α	人源化	IgG4	塞尔泰克公司(Celltech)	克罗恩病(Crohn’s)

抗体名称	靶抗原	产物类型	同种型	赞助者	适应症
抗体名称	靶抗原	产物类型	同种型	赞助者	适应症						炎
CDP850	E-选择素	人源化		塞尔泰克公司	牛皮癣						炎
CDP850	E-选择素	人源化		塞尔泰克公司	牛皮癣	克色文(Corsevin)M	因子VII	嵌合		森托克公司	抗凝剂
D2E7	TNF-α	人		CAT/BASF	类风湿性关节炎	克色文(Corsevin)M	因子VII	嵌合		森托克公司	抗凝剂
D2E7	TNF-α	人		CAT/BASF	类风湿性关节炎	Hu23F2G	CD11/18	人源化		ICOS制药公司	多发性硬化
Hu23F2G	CD11/18	人源化	IgG	ICOS制药公司	中风	Hu23F2G	CD11/18	人源化		ICOS制药公司	多发性硬化
Hu23F2G	CD11/18	人源化	IgG	ICOS制药公司	中风	IC14	CD14			ICOS制药公司	中毒性休克
ICM3	ICAM-3	人源化		ICOS制药公司	牛皮癣	IC14	CD14			ICOS制药公司	中毒性休克
ICM3	ICAM-3	人源化		ICOS制药公司	牛皮癣	IDEC-114	CD80	灵长化		IDEC制药公司/三菱公司(Mitsubishi)	牛皮癣
IDEC-131	CD40L	人源化		IDEC制药公司/卫才公司(Eisai)	SLE	IDEC-114	CD80	灵长化		IDEC制药公司/三菱公司(Mitsubishi)	牛皮癣
IDEC-131	CD40L	人源化		IDEC制药公司/卫才公司(Eisai)	SLE	IDEC-131	CD40L	人源化		IDEC制药公司/卫才公司(Eisai)	多发性硬化
IDEC-151	CD4	灵长化	IgG1	IDEC制药公司/葛兰素史克公司(GlaxoSmithKline)	类风湿性关节炎	IDEC-131	CD40L	人源化		IDEC制药公司/卫才公司(Eisai)	多发性硬化
IDEC-151	CD4	灵长化	IgG1	IDEC制药公司/葛兰素史克公司(GlaxoSmithKline)	类风湿性关节炎	IDEC-152	CD23	灵长化		IDEC制药公司	哮喘/过敏
英利昔单抗	TNF-α	嵌合	IgG1	森托克公司	类风湿性关节炎	IDEC-152	CD23	灵长化		IDEC制药公司	哮喘/过敏
英利昔单抗	TNF-α	嵌合	IgG1	森托克公司	类风湿性关节炎	英利昔单抗	TNF-α	嵌合	IgG1	森托克公司	克罗恩病
LDP-01	β2-整联蛋白	人源化	IgG	千年公司(LS公司(LeukoSite Inc.))	中风	英利昔单抗	TNF-α	嵌合	IgG1	森托克公司	克罗恩病
LDP-01	β2-整联蛋白	人源化	IgG	千年公司(LS公司(LeukoSite Inc.))	中风	LDP-01	β2-整联蛋白	人源化	IgG	千年公司(LS公司)	同种异体移植物排斥
LDP-02	α4β7	人源化		千年公司(LS公司)	溃疡性结肠炎	LDP-01	β2-整联蛋白	人源化	IgG	千年公司(LS公司)	同种异体移植物排斥
LDP-02	α4β7	人源化		千年公司(LS公司)	溃疡性结肠炎	MAK-195F	TNF α	鼠	Fab’2	诺尔制药公司(KnollPharm，BASF)	中毒性休克
MDX-33	CD64(FcR)	人		麦得莱克斯公司/森腾公司(Centeon)	自身免疫性血液病	MAK-195F	TNF α	鼠	Fab’2	诺尔制药公司(KnollPharm，BASF)	中毒性休克
MDX-33	CD64(FcR)	人		麦得莱克斯公司/森腾公司(Centeon)	自身免疫性血液病	MDX-CD4	CD4	人	IgG	麦得莱克斯公司/卫才公司/基麦公司(Genmab)	类风湿性关节炎
MEDI-507	CD2	人源化		米迪缪尼公司	牛皮癣	MDX-CD4	CD4	人	IgG	麦得莱克斯公司/卫才公司/基麦公司(Genmab)	类风湿性关节炎
MEDI-507	CD2	人源化		米迪缪尼公司	牛皮癣	MEDI-507	CD2	人源化		米迪缪尼公司	GvHD
OKT4A	CD4	人源化	IgG	奥索生物技术公司(OrthoBiotech)	同种异体移植物排斥	MEDI-507	CD2	人源化		米迪缪尼公司	GvHD
OKT4A	CD4	人源化	IgG	奥索生物技术公司(OrthoBiotech)	同种异体移植物排斥	奥索克隆(OrthoClone)OKT4A	CD4	人源化	IgG	奥索生物技术公司	自身免疫性疾病
奥索克隆/抗-CD3OKT3	CD3	鼠	mIgG2a	奥索生物技术公司	同种异体移植物排斥	奥索克隆(OrthoClone)OKT4A	CD4	人源化	IgG	奥索生物技术公司	自身免疫性疾病
奥索克隆/抗-CD3OKT3	CD3	鼠	mIgG2a	奥索生物技术公司	同种异体移植物排斥	RepPro/阿昔单抗	gpIIbIIIa	嵌合	Fab	森托克公司/礼来公司(Lilly)	冠状血管成形术并发症
rhuMab-E25	IgE	人源化	IgG1	基因泰克公司/诺华公司(Novartis)/塔诺生物***公司(Tanox Biosystems)	哮喘/过敏	RepPro/阿昔单抗	gpIIbIIIa	嵌合	Fab	森托克公司/礼来公司(Lilly)	冠状血管成形术并发症
rhuMab-E25	IgE	人源化	IgG1	基因泰克公司/诺华公司(Novartis)/塔诺生物***公司(Tanox Biosystems)	哮喘/过敏	SB-240563	IL5	人源化		葛兰素史克公司	哮喘/过敏
SB-240683	IL-4	人源化		葛兰素史克公司	哮喘/过敏	SB-240563	IL5	人源化		葛兰素史克公司	哮喘/过敏

抗体名称	靶抗原	产物类型	同种型	赞助者	适应症
抗体名称	靶抗原	产物类型	同种型	赞助者	适应症	SCH55700	IL-5	人源化		塞尔泰克公司(Celltech)/世林公司(Schering)	哮喘/过敏
Simulect	CD25	嵌合	IgG1	诺华制药公司	同种异体移植物排斥	SCH55700	IL-5	人源化		塞尔泰克公司(Celltech)/世林公司(Schering)	哮喘/过敏
Simulect	CD25	嵌合	IgG1	诺华制药公司	同种异体移植物排斥	SMARTa-CD3	CD3	人源化		蛋白质设计实验室	自身免疫性疾病
SMARTa-CD3	CD3	人源化		蛋白质设计实验室	同种异体移植物排斥	SMARTa-CD3	CD3	人源化		蛋白质设计实验室	自身免疫性疾病
SMARTa-CD3	CD3	人源化		蛋白质设计实验室	同种异体移植物排斥	SMARTa-CD3	CD3	人源化	IgG	蛋白质设计实验室	牛皮癣
Zenapax	CD25	人源化	IgG1	蛋白质设计实验室/罗氏公司(Hoffman-La Roche)	同种异体移植物排斥	SMARTa-CD3	CD3	人源化	IgG	蛋白质设计实验室	牛皮癣

表4B.按照本发明可用于治疗自身免疫性疾病的抗体

抗体	适应症	靶抗原
抗体	适应症	靶抗原	ABX-RB2		T细胞、B细胞和NK细胞上CBL抗原的抗体来自Xeno小鼠的完全人抗体
5c8(抗CD-40配体抗体)	99年10月II期临床实验终止，因为检测到“不良事件”	CD-40	ABX-RB2		T细胞、B细胞和NK细胞上CBL抗原的抗体来自Xeno小鼠的完全人抗体
5c8(抗CD-40配体抗体)	99年10月II期临床实验终止，因为检测到“不良事件”	CD-40	IDEC 131	***性红斑狼疮(SLE)	抗CD40人源化
IDEC 151	类风湿性关节炎	灵长化；抗-CD4	IDEC 131	***性红斑狼疮(SLE)	抗CD40人源化
IDEC 151	类风湿性关节炎	灵长化；抗-CD4	IDEC 152	哮喘	灵长化；抗-CD23
IDEC 114	牛皮癣	灵长化的抗-CD80	IDEC 152	哮喘	灵长化；抗-CD23
IDEC 114	牛皮癣	灵长化的抗-CD80	MEDI-507	类风湿性关节炎；多发性硬化克罗恩氏病牛皮癣	抗-CD2
LDP-02(抗-b7单抗)	炎性肠病克罗恩氏病溃疡性结肠炎	白细胞(白血球)上的a4b7整联蛋白受体	MEDI-507	类风湿性关节炎；多发性硬化克罗恩氏病牛皮癣	抗-CD2
LDP-02(抗-b7单抗)	炎性肠病克罗恩氏病溃疡性结肠炎	白细胞(白血球)上的a4b7整联蛋白受体	SMART抗-γ干扰素抗体	自身免疫性疾病	抗-γ干扰素
伏特葆汀(Verteportin)	类风湿性关节炎		SMART抗-γ干扰素抗体	自身免疫性疾病	抗-γ干扰素
伏特葆汀(Verteportin)	类风湿性关节炎		MDX-33	自身免疫反应引起的血液病特发性血小板减少型紫癜(ITP)自身免疫性溶血	FcRI受体的单克隆抗体
MDX-CD4	治疗类风湿性关节炎和其它自身免疫性疾病	CD4受体分子的单克隆抗体	MDX-33	自身免疫反应引起的血液病特发性血小板减少型紫癜(ITP)自身免疫性溶血	FcRI受体的单克隆抗体
MDX-CD4	治疗类风湿性关节炎和其它自身免疫性疾病	CD4受体分子的单克隆抗体	VX-497	自身免疫性疾病多发性硬化	肌苷一磷酸脱氢酶抑制剂(制备新RNA和DNA所需的酶

抗体	适应症	靶抗原
抗体	适应症	靶抗原		类风湿性关节炎炎性肠病狼疮牛皮癣	用于生产淋巴细胞增殖所需的核苷酸)
VX-740	类风湿性关节炎	ICE抑制剂白介素-1β(转化酶控制导致侵袭性免疫应答的通路)		类风湿性关节炎炎性肠病狼疮牛皮癣	用于生产淋巴细胞增殖所需的核苷酸)
VX-740	类风湿性关节炎	ICE抑制剂白介素-1β(转化酶控制导致侵袭性免疫应答的通路)	VX-745	对炎症特异参与炎症的免疫应答启动和进展的化学信号转导	P38MAP激酶抑制剂促***原活化蛋白激酶
依坦西普(Enbrel)(etanercept)		靶向TNF(肿瘤坏死因子)	VX-745	对炎症特异参与炎症的免疫应答启动和进展的化学信号转导	P38MAP激酶抑制剂促***原活化蛋白激酶
依坦西普(Enbrel)(etanercept)		靶向TNF(肿瘤坏死因子)	IL-8		IL-8(白介素8)的完全人单克隆抗体
阿珀金(Apogen)MP4		重组抗原选择性破坏疾病相关性T细胞诱导凋亡通过程序性细胞死亡消除T细胞不再攻击自身细胞特定阿珀金靶向特定T细胞	IL-8		IL-8(白介素8)的完全人单克隆抗体

5.1.1.18.半衰期延长的抗体

本发明提供体内半衰期延长的免疫特异性结合感兴趣抗原(如IL-9多肽)的抗体和抗体片段的制剂。具体说，本发明提供在动物，优选哺乳动物(如人)体内半衰期大于3天、大于7天、大于10天，优选大于15天、大于25天、大于30天、大于35天、大于40天、大于45天、大于2个月、大于3个月、大于4个月或大于5个月的免疫特异性结合感兴趣抗原(如IL-9多肽)的抗体和抗体片段的制剂。

为了延长抗体(如单克隆抗体和单链抗体)或抗体片段(如Fab片段)的体内血清循环时间，例如，可利用或不利用多功能接头将惰性聚合物分子如高分子量聚乙二醇(PEG)连接于该抗体(包括其抗体片段)，具体是将PEG定点偶联至抗体的N-或C-末端或通过赖氨酸残基上的ε-氨基连接。可利用导致生物活性损失最小的线型或分支聚合物衍生化。通过SDS-PAGE和质谱密切监测偶联程度，以确保PEG分子适当地偶联于所述抗体。可通过大小排阻或离子交换层析将未反应的PEG与抗体-PEG偶联物分离开。可利用本领域技术人员已知的方法，例如本文所述的免疫实验检测PEG-衍生抗体(包括其抗体片段)的结合活性及体内功效。

也可通过在IgG恒定区或其FcRn结合片段(优选Fc或铰链-Fc区片段)中引入一个或多个氨基酸修饰(即取代、***或缺失)，产生体内半衰期延长的抗体。参见例如，国际公开号WO 98/23289；国际公开号WO 97/34631；和美国专利号6,277,375，通过引用将其全文纳入本文。

另外，可将抗体(包括其抗体片段)偶联于清蛋白，以制备体内更稳定或体内半衰期更长的抗体(包括其抗体片段)。本领域熟知这些技术，参见例如国际公开号WO 93/15199、WO 93/15200和WO 01/77137；和欧洲专利号EP 413,622，通过引用将所有这些文献纳入本文。

5.1.1.19.抗体偶联物

本发明提供重组融合或化学偶联(包括共价和非共价偶联)于异源蛋白或多肽(或至少10个、至少20个、至少30个、至少40个、至少50个、至少60个、至少70个、至少80个、至少90个或至少100个氨基酸的多肽片段)以产生融合蛋白的免疫特异性结合感兴趣抗原(如IL-9多肽)的抗体(包括其抗体片段)的制剂。具体说，本发明提供含有本文所述抗体的抗原结合片段(如Fab片段、Fd片段、Fv片段、F(ab)₂片段、VH区、VH CDR、VL区或VL CDR)和异源蛋白质、多肽或肽的融合蛋白的制剂。可与抗体(包括其抗体片段)融合的异源蛋白质、多肽或肽可用于使抗体靶向呼吸道上皮细胞、肥大细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、B细胞、巨噬细胞或活化T细胞。例如，免疫特异性结合特定细胞类型(例如，呼吸道上皮细胞、肥大细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、B细胞、巨噬细胞或活化T细胞)表达的细胞表面受体的抗体可融合或偶联于本发明抗体(包括其抗体片段)。在一个具体实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体融合或偶联于抗-干细胞因子或抗-kit配体。本领域已知将蛋白质、多肽、肽与抗体(包括其抗体片段)融合或偶联的方法。参见例如，美国专利号5,336,603、5,622,929、5,359,046、5,349,053、5,447,851和5,112,946；欧洲专利号EP 307,434和EP 367,166；国际公开号WO 96/04388和WO91/06570；Ashkenazi等，1991，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 88：10535-10539；Zheng等，1995，J.Immunol.154：5590-5600；和Vil等，1992，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 89：11337-11341(所述参考文献通过引用全文纳入本文)。

可通过基因改组、基序改组、外显子改组和/或密码子改组(总称为“DNA改组”)的技术产生其它融合蛋白。可利用DNA改组改变本发明抗体或其片段的活性(如具有较高亲和力和较低解离速率的抗体或其片段)。通常参见美国专利5,605,793；5,811,238；5,830,721；5,834,252；和5,837,458；Patten等，1997，Curr.Opinion Biotechnol.，8：724-33；Harayama，1998，TrendsBiotechnol.16(2)：76-82；Hansson等，1999，J.Mol.Biol.，287：265-76；和Lorenzo和Blasco，1998，Biotechniques 24(2)：308-313(这些专利和发表物各自通过引用纳入本文)。可通过易错PCR、随机核苷酸***或其它方法随机诱变，然后进行重组，从而改变抗体(包括其抗体片段)或编码抗体或其片段。编码抗体(包括其抗体片段)的多核苷酸可与一种或多种异源分子的一个或多个组件、基序、区段、部分、结构域、片段等重组。

而且，可将抗体(包括其抗体片段)与标记序列，如肽融合，以促进纯化。标记氨基酸序列可以是六组氨酸肽，例如pQE载体(凯杰公司(QIAGEN，Inc.)，伊顿大街(Eton Avenue)9259号，查茨沃斯(Chatsworth)，CA，91311)提供的标签等，其中许多标记可购得。如Gentz等，1989，Proc.Natl.Acad.Sci.USA86：821-824所述，六组氨酸提供了方便的融合蛋白纯化方法。用于纯化的其它肽标签包括但不限于：血凝素(“HA”)标签，它对应于衍生自流感血凝素蛋白的表位(Wilson等，1984，Cell 37：767)以及“flag”标签。

在其它实施方式中，本发明抗体或其片段偶联于诊断或检测试剂。这类抗体可作为临床测试程序的一部分用于监测或诊断疾病或失调(如自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染))的出现、发生、进展和/或严重程度，例如测定特定治疗的效果。可通过将该抗体偶联于可检测物质进行这类诊断和检测：所述可检测物质包括但不限于：各种酶，例如但不限于辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、β半乳糖苷酶或乙酰胆碱酯酶；修复基团，例如但不限于链霉亲和素/生物素和亲和素/生物素；荧光物质，例如但不限于伞形酮、荧光素、荧光素异硫氰酸酯、罗丹明、二氯三嗪基胺荧光素、丹酰氯或藻红蛋白；发光物质，例如但不限于，鲁米诺；生物发光物质，例如但不限于荧光素酶、萤光素和发光蛋白；放射性物质，例如但不限于碘(¹³¹I、¹²⁵I、¹²³I和¹²¹I)、碳(¹⁴C)、硫(³⁵S)、氚(³H)、铟(¹¹⁵In、¹¹³In、¹¹²In和¹¹¹In)和锝(⁹⁹Tc)、铊(²⁰¹Ti)、镓(⁶⁸Ga、⁶⁷Ga)、钯(¹⁰³Pd)、钼(99Mo)、氙(¹³³Xe)、氟(¹⁸F)、¹⁵³Sm、¹⁷⁷Lu、¹⁵⁹Gd、¹⁴⁹Pm、¹⁴⁰La、¹⁷⁵Yb、¹⁶⁶Ho、⁹⁰Y、⁴⁷Sc、¹⁸⁶Re、¹⁸⁸Re、¹⁴²Pr、¹⁰⁵Rh、⁹⁷Ru、⁶⁸Ge、⁵⁷Co、⁶⁵Zn、⁸⁵Sr、³²P、¹⁵³Gd、¹⁶⁹Yb、⁵¹Cr、⁵⁴Mn、⁷⁵Se、¹¹³Sn和¹¹⁷Sn；采用各种正电子发射层析成像的正电子发射金属以及无放射性(noradioactive)顺磁金属离子。

本发明还包括使用偶联于治疗部分的抗体或其片段。可将抗体或其片段偶联于治疗部分，例如细胞毒素，如细胞抑制剂和杀细胞剂、治疗剂或放射性金属离子，如α-发射体。细胞毒素或细胞毒剂包括对细胞有害的任何物质。治疗部分包括但不限于抗代谢剂(如甲氨蝶呤、6-巯基嘌呤、6-硫鸟嘌呤、阿糖胞苷、5-氟尿嘧啶、氨烯咪胺)、烷化剂(如双氯乙基甲胺、塞替派(thioepa)苯丁酸氮芥、美法仑、卡莫司汀(BCNU)和洛莫司汀(CCNU)、环磷酰胺、白消安、二溴甘露醇、链脲霉素、丝裂霉素C和顺二氯二胺铂(II)(DDP)和顺铂)、蒽环霉素(如道诺霉素和多柔比星)、抗生素(如d放线菌素、博来霉素、光神霉素和氨茴霉素(AMC))；耳他汀(Auristatin)分子(如耳他汀PHE、苔藓抑素1和索拉他汀(solastatin)10；参见Woyke等，Antimicrob.Agents Chemother.46：3802-8(2002)，Woyke等，Antimicrob.Agents Chemother.45：3580-4(2001)，Mohammad等，Anti Cancer Drugs 12：735-40(2001)，Wall等，Biochem.Biophys.Res.Commun.266：76-80(1999)，Mohammad等，Int.J.Oncol.15：367-72(1999)，上述文献通过引用纳入本文)；激素(如糖皮质激素类、孕激素、雄激素和***)，DNA修复酶抑制剂(如依托泊苷或拓扑替康)，激酶抑制剂(如化合物T1571，甲磺酸伊马替尼(Kantarjian等，Clin Cancer Res.8(7)：2167-76(2002))；细胞毒剂(如紫杉醇、松胞菌素B、短杆菌肽D、溴乙锭、依米丁、丝裂霉素、依托泊苷、替尼泊苷、长春新碱、长春碱、秋水仙碱、多柔比星、柔红霉素、二羟基炭疽菌素二酮、米托蒽醌、光神霉素、放线菌素D、1-去氢睾酮、糖皮质激素、普鲁卡因、丁卡因、利多卡因、***和嘌罗霉素以及它们的类似物或同系物，以及美国专利6,245,759、6,399,633、6,383,790、6,335,156、6,271,242、6,242,196、6,218,410、6,218,372、6,057,300、6,034,053、5,985,877、5,958,769、5,925,376、5,922,844、5,911,995、5,872,223、5,863,904、5,840,745、5,728,868、5,648,239、5,587,459所述的化合物)；法尼基转移酶抑制剂(例如，R115777，BMS-214662和美国专利6,458,935、6,451,812、6,440,974、6,436,960、6,432,959、6,420,387、6,414,145、6,410,541、6,410,539、6,403,581、6,399,615、6,387,905、6,372,747、6,369,034、6,362,188、6,342,765、6,342,487、6,300,501、6,268,363、6,265,422、6,248,756、6,239,140、6,232,338、6,228,865、6,228,856、6,225,322、6,218,406、6,211,193、6,187,786、6,169,096、6,159,984、6,143,766、6,133,303、6,127,366、6,124,465、6,124,295、6,103,723、6,093,737、6,090,948、6,080,870、6,077,853、6,071,935、6,066,738、6,063,930、6,054,466、6,051,582、6,051,574和6,040,305公开的化合物)；拓扑异构酶抑制剂(如喜树碱；伊立替康；SN-38；拓扑替康；9-氨基喜树碱；GG-211(GI 147211)；DX-8951f；IST-622；卢比替康；吡唑啉吖啶；XR-5000；圣托品(saintopin)；UCE6；UCE1022；TAN-1518A；TAN-1518B；KT6006；KT6528；ED-110；NB-506；ED-110；NB-506；和瑞必克霉素(rebeccamycin))；博格雷(bulgarein)；DNA小沟结合剂如Hoescht染料33342和Hoechst染料33258；两面针碱；花椒宁碱；表小檗碱；甲氧檗因；β-拉帕醌；BC-4-1；二膦酸盐(如阿仑膦酸盐、英卡膦酸盐(cimadronte)、氯屈膦酸盐、替鲁膦酸盐、依替膦酸盐、伊班膦酸盐、奈立膦酸盐、奥盘膦酸盐(olpandronate)、利塞膦酸盐、吡膦酸盐、帕米膦酸盐、唑来膦酸盐(zolendronate))，HMG-CoA还原酶抑制剂(如洛伐他汀、辛伐他汀、阿托伐他汀、普伐他汀、氟伐他汀、他汀、西立伐他汀、来适可、力普妥、罗苏伐他汀和阿托伐他汀)；反义寡核苷酸(如美国专利6,277,832、5,998,596、5,885,834、5,734,033和5,618,709所述)；腺苷脱氨酶抑制剂(如磷酸氟达拉滨和2-氯脱氧腺苷)；替伊莫单抗托西莫单抗

)，以及它们的药学上可接受的盐、溶剂合物、包合物和前药。

另外，抗体或其片段可偶联于改变给定生物应答的治疗部分或药物部分。不应认为治疗部分或药物部分仅限于经典化疗剂。例如，药物部分可以是具有生物学活性的蛋白质、肽或多肽。这类蛋白质可包括例如，毒素如相思豆毒蛋白、蓖麻毒蛋白A、假单胞菌外毒素、霍乱毒素或白喉毒素；蛋白质，如肿瘤坏死因子、α-干扰素、β-干扰素、神经生长因子、血小板衍生生长因子、组织纤溶酶原激活物、凋亡剂，如TNF-α、TNF-β、AIM I(参见国际公开号WO97/33899)、AIM II(参见国际公开号WO 97/34911)、Fas配体(Takahashi等、1994、J.Immunol.、6：1567-1574)和VEGF(参见国际公开号WO 99/23105)，抗-血管新生剂，如血管他丁、内皮他丁或凝固途径的组分(如组织因子)；或者生物应答修饰剂，例如，淋巴因子(如干扰素γ(“IFN-γ”)、白介素-1(“IL-1”)、白介素-2(“IL-2”)、白介素-5(“IL-5”)、白介素-6(“IL-6”)、白介素-7(“IL-7”)、白介素-10(“IL-10”)、白介素-12(“IL-12”)、白介素-15(“IL-15”)、白介素-23(“IL-23”)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(“GM-CSF”)和粒细胞集落刺激因子(“G-CSF”))或生长因子(如生长激素(“GH”))或凝固剂(如钙、维生素K、组织因子，例如但不限于哈格曼因子(因子XII)、高分子量激肽原(HMWK)、前激肽释放酶(PK)、凝固蛋白因子II(凝血酶原)、因子V、XIIa、VIII、XIIIa、XI、XIa、IX、IXa、X、磷脂，来自作为纤维蛋白单体的纤维蛋白原的α和β链的血纤肽A和B)。在一个具体实施方式中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体与白三烯拮抗剂(如孟鲁司特、扎鲁司特、普仑司特和齐留通(zyleuton))偶联。

而且，抗体可偶联于治疗部分，例如放射性金属离子如α发射物如²¹³Bi，或者可偶联于用于将放射性金属离子，包括但不限于：¹³¹In、¹³¹L、¹³¹Y、¹³¹Ho、¹³¹Sm与多肽或上述任何物质偶联的大环螯合剂。在某些实施方式中，大环螯合剂是1，4，7，10-四氮杂环十二烷-N，N’，N”，N”’-四乙酸(DOTA)，它可通过接头分子连接于抗体。这些接头分子是本领域公知的，参见Denardo等，1998，ClinCancer Res.4(10)：2483-90；Peterson等，1999，Bioconjua.Chem.10(4)：553-7；和Zimmerman等，1999，Nucl.Med.Biol.26(8)：943-50，通过引用将其全文纳入本文。

将治疗部分偶联于抗体的技术是公知的，参见例如，Arnon等，“在癌症治疗中免疫靶向药物的单克隆抗体”(Monoclonal Antibodies ForImmunotargeting Of Drugs In Cancer Therapy)，刊于《单克隆抗体和癌症治疗》(Monoclonal Antibodies And Cancer Therapy)，Reisfeld等(编)，第243-56页(ARL公司(Alan R.Liss，Inc.)1985)；Hellstrom等，“用于药物递送的抗体”(AntibodiesFor Drug Delivery)，刊于《控制的药物递送》(Controlled Drug Delivery)(第2版)，Robinson等(编)，第623-53页(MD公司(Marcel Dekker，Inc).1987)；Thorpe，“癌症治疗中细胞毒剂的抗体载体：综述”(Antibody Carriers OfCytotoxic AgentsIn Cancer Therapy：A Review)，刊于《单克隆抗体84：生物和临床应用》(Monoclonal Antibodies 84：Biological and Clinical Applications)，Pinchera等(编)，第475-506页(1985)；“放射性标记抗体在癌症治疗中的治疗应用的分析、结果和展望”(Analysis，Results，And Future Prospective Of The Therapeutic UseOf Radiolabeled Antibody In Cancer Therapy)，刊于《用于癌症检测和治疗的单克隆抗体》(Monoclonal Antibodies For Cancer Detection And Therapy)，Baldwin等(编)，第303-16页(学术出版社(Academic Press)1985)和Thorpe等，1982，Immunol.Rev.62：119-58。

或者，抗体可偶联于第二抗体，形成异源抗体偶联物，如Segal在美国专利号4,676,980中所述，通过引用将其全文纳入本文。

应选择偶联于感兴趣抗原(如IL-9多肽)或其片段的治疗部分或药物，以便在对象中实现所需的对特定疾病或失调的预防或治疗效果，所述疾病或失调包括例如，与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状。临床医师或医务人员决定偶联于感兴趣抗体，例如，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体或其片段的治疗部分或药物时，应考虑以下因素：疾病的特性、疾病的严重程度和对象的总体状况。

也可将抗体连接于固体支持物，这在靶抗原的免疫实验或纯化中特别有用。这类固体支持物包括但不限于：玻璃、纤维素、聚丙烯酰胺、尼龙、聚苯乙烯、聚氯乙烯或聚丙烯。

应选择偶联于感兴趣抗体(包括其抗体片段)，如免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的治疗部分或药物，以便在对象中实现所需的对特定疾病的预防或治疗效果。临床医师或医务人员决定偶联于感兴趣抗体，例如，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体(包括其抗体片段)的治疗部分或药物时，应考虑以下因素：疾病的特性、疾病的严重程度和对象的总体状况。

5.2.制备抗体制剂的方法

本发明提供制备免疫特异性结合感兴趣抗原(如IL-9多肽)的抗体或其衍生物、类似物或片段的液体制剂的方法。图16是示意图，显示制备纯化抗-IL-9抗体的方案。制备本发明液体制剂的方法可包括：由条件培养基(单一批次或混合批次的培养基)纯化抗体(包括其抗体片段)和将纯化抗体(包括其抗体片段)组分浓缩至终浓度为约15mg/ml、约20mg/ml、约30mg/ml、约40mg/ml、约50mg/ml、约60mg/ml、约70mg/ml、约80mg/ml、约90mg/ml、约100mg/ml、约150mg/ml、约175mg/ml、约200mg/ml、约250mg/ml或约300mg/ml。可对含有抗体(包括其抗体片段)，例如免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的条件培养基进行CUNO过滤，对经过滤的抗体进行HS50阳离子交换色谱。然后，对来自HS50阳离子交换色谱的组分进行r蛋白A亲和色谱，然后进行低pH处理。低pH处理后，对抗体(包括其抗体片段)组分进行super Q 650阴离子交换色谱，然后进行纳米过滤。然后，将纳米过滤后获得的抗体(包括其抗体片段)组分渗滤和超滤到交换缓冲液中，并用相同膜将抗体(包括其抗体片段)组分浓缩到制剂缓冲液中。制备抗体制剂的详述参见下述章节6。

本发明制剂缓冲液包含浓度范围为约1mM至100mM、约5mM至50mM、约10mM至30mM、约10mM至25mM、约25至75mM或约10至100mM的磷酸根离子(或其它非两性离子，如tris、柠檬酸根离子、琥珀酸根离子和乙酸根离子)。在一个具体实施方式中，本发明制剂缓冲液包含浓度为约10mM、约12mM、约15mM、约20mM、约25mM、约50mM、约55mM、约60mM、约65mM、约70mM、约75mM、约80mM、约90mM、约95mM或约100mM的磷酸根离子(或其它非两性离子，如tris、柠檬酸根离子、琥珀酸根离子和乙酸根离子)。该制剂的pH范围可能约为4.0-8.0，例如约6.0-6.5。

可通过制备含有一次施用的液态制剂等份的药瓶，将本发明液态制剂制备成单位剂型。例如，每药瓶的单位剂量可含有1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml、7ml、8ml、9ml、10ml、15ml或20ml不同浓度的免疫特异性结合IL-9多肽的抗体(包括其抗体片段)，其浓度范围是约10mg/ml至300mg/ml。如果需要，可通过向各药瓶添加无菌稀释剂将这些制剂调整之所需浓度。在一个具体实施方式中，将本发明液体制剂配制成含有50mM磷酸盐缓冲液，pH 6.2和150mM氯化钠的无菌液体，装在单剂药瓶中。每1.0mL溶液在水中含有100mg抗体(包括其抗体片段)、50mg和1mg氯化钠。在一个实施方式中，用3cc USP I型硼硅酸盐琥珀瓶(西部制药服务公司(West PharmaceuticalServices)-部件编号6800-0675)提供100mg/ml的本发明抗体(包括其抗体片段)。目标罐装体积是1.2mL。

本发明液体制剂可通过多种灭菌方法灭菌，包括过滤除菌、放射等。在最优选的实施方式中，用预灭菌的0.2微米滤器对渗滤的(difiltrated)抗体制剂进行过滤除菌。可将灭菌的本发明液体制剂给予对象，以预防、治疗和/或控制疾病或失调(例如，与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染))或其一种或多种症状。

虽然本发明涉及非冻干制剂，但应注意，如果需要也可冻干本发明制剂。因此，本发明包括本发明制剂的冻干形式。

5.3.制备抗体的方法

可通过本领域已知的合成抗体的任何方法，具体是通过化学合成，或优选通过重组表达技术生产免疫特异性结合抗原的抗体(包括其抗体片段)。

可通过本领域熟知的各种方法产生某抗原的免疫特异性多克隆抗体。例如，可将人抗原给予各种宿主动物，包括但不限于兔、小鼠、大鼠等，以诱导产生含有该人抗原特异性多克隆抗体的血清。可根据宿主的种类采用各种佐剂提高免疫应答，这些佐剂包括但不限于：弗氏佐剂(完全或不完全)、矿物质凝胶，如氢氧化铝，表面活性剂，如溶血卵磷脂、普流罗尼多元醇、聚阴离子、肽、油乳剂、匙孔

血蓝蛋白、二硝基酚和可能有用的人佐剂，如BCG(卡介苗)和短小棒状杆菌(corynebacterium parvum)。这些佐剂也是本领域熟知的。

可采用本领域已知的各种技术制备单克隆抗体，这些技术包括使用杂交瘤、重组技术和噬菌体展示技术，或它们的组合。例如，可采用杂交瘤技术产生单克隆抗体，该技术是本领域已知的，参见例如Harlow等，《抗体：实验室手册》(Antibodies：A Laboratory Manual)，(冷泉港实验室出版社(Cold SpringHarbor Laboratory Press)，第2版，1988)；Hammerling等，刊于：《单克隆抗体和T细胞杂交瘤》(Monoclonal Antibodies and T-Cell Hybridomas)563-681(艾思威尔出版社(Elsevier)，纽约，1981以及Harlow等，《使用抗体：实验室手册》(Using Antibodies：A laboratory Manual)，冷泉港实验室出版社(1999)，其全文通过引用纳入本文。本文所用术语“单克隆抗体”不限于通过杂交瘤技术产生的抗体。术语“单克隆抗体”指衍生自单个克隆，包括真核、原核或噬菌体克隆的抗体，并不限定其产生方法。

用杂交瘤技术产生和筛选特定抗体的方法是常规方法，并且为本领域所熟知。简要说，可用非鼠抗原免疫小鼠，一旦检测到免疫应答后，例如在小鼠血清中检测到该抗原的特异性抗体后，就收获小鼠脾脏，分离脾细胞。然后，通过熟知技术将脾细胞融合于任何合适的杂交瘤细胞，例如购自ATCC的细胞系SP20的细胞。选择杂交瘤，通过有限稀释克隆。此外，可利用RIMMS(多位点重复免疫)技术免疫动物(Kilpatrack等，1997，Hybridoma 16：381-9，通过引用全文纳入本文)。然后，用本领域已知方法测定杂交瘤克隆中分泌能够结合本发明多肽的抗体的细胞。可通过用阳性杂交瘤克隆免疫小鼠产生通常含有大量抗体的腹水。

本发明提供产生单克隆抗体的方法以及该方法产生的抗体，所述方法包括培养分泌本发明抗体的杂交瘤细胞，其中优选通过将非鼠抗原免疫小鼠中分离的脾细胞与骨髓瘤细胞融合产生杂交瘤，然后筛选融合得到的杂交瘤选择分泌能够结合该抗原的抗体的杂交瘤克隆。

可通过本领域技术人员已知的任何技术产生特异性识别特定表位的抗体片段。例如，可利用诸如木瓜蛋白酶(产生Fab片段)或胃蛋白酶(产生F(ab’)2片段)等酶对免疫球蛋白分子进行蛋白酶水解切割，产生本发明Fab和F(ab’)2片段。F(ab’)2片段含有可变区、轻链恒定区和重链的CH1结构域。另外，也可通过本领域已知的各种噬菌体展示法产生本发明抗体。

在噬菌体展示法中，功能性抗体结构域展示在携带编码它们的多核苷酸序列的噬菌体颗粒表面上。具体说，由动物cDNA文库(如人或鼠患病组织的cDNA文库)扩增编码V_H和V_L区的DNA序列。通过PCR将编码V_H和V_L区的DNA与scFv接头重组在一起，克隆到噬菌粒载体中。将该载体电穿孔到大肠杆菌中，用辅助噬菌体感染该大肠杆菌。用于这些方法的噬菌体一半是丝状噬菌体，包括fd和M13，通常将VH和VL区重组融合于噬菌体基因III或基因VIII。可以利用抗原，如标记抗原或者结合或捕获在固体表面或珠上的抗原来选择或鉴定表达能够结合特定抗原的抗原结合域的噬菌体。可用于制备本发明抗体的噬菌体展示法的例子包括Brinkman等，1995，J.Immunol.Methods182：41-50；Ames等，1995，J.Immunol.Methods 184：177-186；Kettleborough等，1994，Eur.J.Immunol.24：952-958；Persic等，1997，Gene 187：9-18；Burton等，1994，Advances in Immunology 57：191-280；国际申请号PCT/GB91/01134；国际公开号WO90/02809、WO91/10737、WO92/01047、WO92/18619、WO93/11236、WO95/15982、WO95/20401和WO97/13844；以及美国专利号5,698,426、5,223,409、5,403,484、5,580,717、5,427,908、5,750,753、5,821,047、5,571,698、5,427,908、5,516,637、5,780,225、5,658,727、5,733,743、5,969,108、6,33,187、5,824,520和5,702,892所述的方法，上述文献全文通过引用纳入本文。

如上述参考文献所述，噬菌体选择后，可分离噬菌体的抗体编码区，并用于产生完整抗体，包括人抗体或任何其它所需的抗原结合片段，并在任何所需宿主，包括哺乳动物细胞、昆虫细胞、植物细胞、酵母和细菌中表达，如下所述。也可采用通过本领域已知方法，例如PCT公开号WO 92/22324；Mullinax等，1992，BioTechniques 12(6)：864-869；Sawai等，1995，AJRI 34：26-34；和Better等，1988，Science 240：1041-1043所公开的方法，采用重组产生Fab、Fab’和F(ab’)₂片段的技术(所述文献通过引用以全文纳入本文)。

为了产生完整抗体，可采用PCR引物，包括VH或VL核苷酸序列、限制性位点和用来保护限制性位点的侧接序列，来扩增scFv克隆中的VH或VL序列。可利用本领域技术人员已知的克隆技术将PCR扩增的VH区克隆到表达VH恒定区，如人γ4恒定区的载体中，可将PCR扩增的VL区克隆到表达VL恒定区，如人κ或λ恒定区的载体中。用于表达VH或VL区的载体可包含EF-1α启动子、分泌信号、可变区、恒定区的克隆位点和选择性标记如新霉素。也可将VH和VL区克隆到一个表达所需恒定区的载体中。然后，用本领域技术人员已知的技术将重链转化载体和轻链转化载体共转染到细胞系中，产生表达全长抗体如IgG的稳定或瞬时细胞系。

在一些应用，包括抗体在人体的体内应用和体外检测实验中，可能优选使用人源化抗体或嵌合抗体。人体治疗应用中特别优选完全人抗体和人源化抗体。可通过本领域已知的各种方法制备人抗体，这些方法包括利用人免疫球蛋白序列产生的抗体文库的上述噬菌体展示法。也参见美国专利4,444,887和4,716,111；和国际公开号WO98/46645、WO98/50433、WO98/24893、WO98/16654、WO96/34096、WO96/33735和WO91/10741；各自通过引用全文纳入本文。

也可用不能表达功能性内源免疫球蛋白、但可表达人免疫球蛋白基因的转基因小鼠产生人抗体。例如，可通过随机法或同源重组将人重链和轻链免疫球蛋白基因复合物引入小鼠胚胎干细胞中。或者，除人重链和轻链基因外，可将人可变区、恒定区和多变区引入小鼠胚胎干细胞中。可以通过同源重组引入人免疫球蛋白基因座，分别或同时使小鼠重链和轻链免疫球蛋白基因无功能。具体说，JH区的纯合缺失防止了内源性抗体产生。扩增修饰的胚胎干细胞，并显微注射到胚泡中产生嵌合小鼠。然后，使嵌合小鼠交配产生表达人抗体的纯合子后代。以正常方式用所选抗原，例如本发明多肽的全部或一部分免疫转基因小鼠。可以通过常规杂交瘤技术由免疫的转基因小鼠获得该抗原的单克隆抗体。转基因小鼠携带的人免疫球蛋白转基因在B细胞分化期间重排，随后发生类型转换和体细胞突变。因此，可能利用这种技术产生治疗上有用的IgG、IgA、IgM和IgE抗体。这种产生人抗体的技术的概述参见Lonberg和Huszar(1995，Int.Rev.Immunol.13：65--93)。这种产生人抗体和人单克隆抗体的技术的详细讨论和产生这类抗体的实验方案参见例如国际公开号WO 98/24893、WO96/34096和WO 96/33735；以及美国专利号5,413,923、5,625,126、5,633,425、5,569,825、5,661,016、5,545,806、5,814,318和5,939,598，通过引用全文纳入本文。此外，诸如阿布吉尼公司(加州福利孟德(Freemont，CA))、基法公司(Genpharm)(加州圣何塞(San Jose，CA))等公司能够利用类似于上述技术的技术提供所选抗原的人抗体。

嵌合抗体是抗体的不同部分来源于不同免疫球蛋白分子的分子。制备嵌合抗体的方法是本领域已知的。参见例如，Morrison，1985，Science 229：1202；Oi等，1986，BioTechniques 4：214；Gillies等，1989，J.Immunol.Methods125：191-202；和美国专利号5,807,715、4,816,567、4,816,397和6,311,415，通过引用全文纳入本文。

人源化抗体是能够结合预定抗原并包含基本具有人免疫球蛋白氨基酸序列的构架区和基本具有非人免疫球蛋白氨基酸序列的CDR的抗体或其变体或片段。人源化抗体基本包含至少一个、一般是两个可变区(Fab、Fab’、F(ab’)₂、Fabc、Fv)的全部序列，其中全部或基本上全部CDR区对应于非人免疫球蛋白(即供体抗体)，全部或基本上全部构架区是人免疫球蛋白共有序列的构架区。优选地，人源化抗体也包含至少一部分免疫球蛋白恒定区(Fc)，一般是人免疫球蛋白的恒定区。通常，抗体含有轻链并至少含有重链的可变区。抗体还可包含重链的CH1、铰链、CH2、CH3和CH4区。人源化抗体可选自包括IgM、IgG、IgD、IgA和IgE在内的任何免疫球蛋白类型和包括IgG1、IgG2、IgG3和IgG4在内的任何同种型。通常，需要人源化抗体具有细胞毒活性时，恒定区是补体固定恒定区，类型一般是IgG₁。不需要这种细胞毒活性时，恒定区可以是IgG₂类型。人源化抗体可包含一种以上类型或同种型的序列，选择特定恒定区以优化所需效应功能是在本领域普通技术人员能力范围内。人源化抗体的构架区和CDR区不需要精确对应于母体序列，例如，可通过取代、***或缺失至少一个残基来诱变供体CDR或共有构架区，以使该位点上的CDR或构架区残基不对应于共有或输入抗体。然而，不应广泛发生这类变异。通常，至少75％的人源化抗体残基将对应于母体构架区和CDR序列，更经常是90％和95％以上。可利用本领域已知的各种技术产生人源化抗体，这些技术包括但不限于：CDR移植(参见例如，欧洲专利EP 239,400；国际公开WO 91/09967；和美国专利5,225,539、5,530,101和5,585,089)，镶面(veneering)或表面再造(resurfacing)(欧洲专利EP 592,106和EP 519,596；Padlan，1991，MolecularImmunology 28(4/5)：489-498；Studnicka等，1994，Protein Engineering，7(6)：805-814；和Roguska等，1994，PNAS，91：969-973)，链改组(美国专利5,565,332)以及以下文献所述的技术：美国专利6,407,213，美国专利5,766,886，国际公开WO 9317105，Tan等，J.Immunol.，169：1119--25(2002)，Caldas等，Protein Eng.，13(5)：353--60(2000)，Morea等，Methods，20(3)：267--79(2000)，Baca等，J.Biol.Chem.，272(16)：10678--84(1997)，Roguska等，Protein Eng.，9(10)：895--904(1996)，Couto等，Cancer Res.，55(23增刊)：5973s-5977s(1995)，Couto等，Cancer Res.，55(8)：1717--22(1995)，Sandhu JS，Gene，150(2)：409--10(1994)和Pedersen等，J.Mol.Biol.，235(3)：959--73(1994)。构架区中的构架残基常常被CDR供体抗体的相应残基取代，以改变、优选改进抗原结合。通过本领域熟知的方法鉴定这些构架区取代，例如，通过建立CDR和构架区残基相互作用的模型鉴定对抗原结合非常重要的构架区残基，通过序列比较鉴定特定位置上的不寻常构架残基(参见例如，Queen等，美国专利号5,585,089；和Riechmann等，1988，Nature 332：323，通过引用全文纳入本文)。

可通过本领域熟知方法产生单结构域抗体，例如，缺少轻链的抗体。参见Riechmann等，1999，J.Immuno.231：25-38；Nuttall等，2000，Curr.Pharm.Biotechnol.1(3)：253-263；Muylderman，2001，J.Biotechnol.74(4)：277302；美国专利号6,005,079；和国际公开号WO 94/04678、WO 94/25591和WO01/44301，通过引用将其全文纳入本文。

另外，进而可通过本领域技术人员熟知的技术，利用免疫特异性结合抗原(如IL-9多肽)的抗体产生“模拟”抗原的抗独特型抗体(参见例如，Greenspan和Bona，1989，FASEB J.7(5)：437-444；和Nissinoff，1991，J.Immunol.147(8)：2429-2438)。

5.3.1.抗体的重组表达

本发明制剂中所含抗体(如，本发明抗体的重链或轻链或其片段，或者本发明单链抗体)的重组表达可能需要构建含有编码该抗体的多核苷酸的表达载体。一旦获得编码抗体分子、抗体的重链或轻链、或其片段(优选但不一定含有重链或轻链可变区)的多核苷酸后，可通过本领域熟知的重组DNA技术获得产生抗体分子的载体。因此，本文描述了通过表达含有编码抗体的核苷酸序列的多核苷酸制备蛋白质的方法。可利用本领域技术人员熟知的方法构建含有抗体编码序列和合适的转录和翻译控制信号的表达载体。这些方法包括例如，体外重组DNA技术、合成技术和体内遗传重组。因此，本发明提供包含操作性连接于启动子的编码本发明抗体分子、抗体的重链或轻链、抗体(包括其抗体片段)的重链或轻链可变区、或重链或轻链CDR的核苷酸序列的可复制载体。这种载体可包含编码抗体分子恒定区的核苷酸序列(参见例如，国际公开号WO86/05807和国际公开号WO 89/01036；和美国专利号5,122,464)，可将抗体可变区克隆到这种载体中，以表达整个重链、整个轻链或整个重链和轻链。

通过常规技术将该表达载体转移到宿主细胞中，然后通过常规技术培养该转染细胞，产生本发明抗体。因此，本发明包括含有编码本发明抗体或其片段、或其重链或轻链、或某片段、或本发明单链抗体的多核苷酸的宿主细胞，所述多核苷酸操作性连接于异源启动子。在优选实施方式中，为了表达双链抗体，可以在宿主细胞中共同表达编码重链和轻链的载体，以表达整个免疫球蛋白分子，如下所详述。

可利用各种宿主表达载体***表达本发明抗体分子(参见例如，美国专利号5,807,715)。这类宿主表达***代表可产生并随后纯化感兴趣编码序列的载体，但也代表用合适的核苷酸编码序列转化或转染时，可原位表达本发明抗体分子的细胞。它们包括但不限于微生物，例如用含有抗体编码序列的重组噬菌体DNA、质粒DNA或粘粒DNA表达载体转化的细菌(如大肠杆菌(E.coli)和枯草芽孢杆菌(B.subtilis))；用含有抗体编码序列的重组酵母表达载体转化的酵母(如毕赤酵母(Saccharomyces Pichia))；用含有抗体编码序列的重组病毒表达载体(如杆状病毒)感染的昆虫细胞***；用重组病毒表达载体(如花椰菜花叶病毒，CaMV；烟草花叶病毒，TMV)感染的或用含有抗体编码序列的重组质粒表达载体(如Ti质粒)转化的植物细胞***；或者哺乳动物细胞***(如COS、CHO、BHK、293、NS0和3T3细胞)，其携带含有衍生自哺乳动物细胞基因组(如金属硫蛋白启动子)或哺乳动物病毒(如腺病毒晚期启动子；牛痘病毒7.5K启动子)的启动子的重组表达构建物。利用细菌细胞如大肠杆菌(Escherichia coli)和真核细胞(特别是表达完整重组抗体分子时)表达重组抗体分子。例如，哺乳动物细胞如中华仓鼠卵巢细胞(CHO)与某载体如来自人巨细胞病毒的主要中间体早期基因启动子元件联用，是抗体的有效表达***(Foecking等，1986，基因45：101；和Cockett等，1990，Bio/Technology 8：2)。在一个具体实施方式中，通过组成型启动子、诱导型启动子或组织特异性启动子调节编码本发明抗体，其衍生物、类似物或片段的核苷酸序列的表达。

在细菌***中，可根据所表达抗体分子的指定应用对许多表达载体进行有利地选择。例如，准备产生大量这类抗体时，为了产生抗体分子的药物组合物，可能需要能够介导易于纯化的融合蛋白产物高水平表达的载体。这类载体包括但不限于：大肠杆菌表达载体pUR278(Ruther等，1983，EMBO，12：1791))，其中抗体编码序列可单独连接到载体内，与lacZ编码区位于同一读框内，以产生融合蛋白；pIN载体(Inouye和Inouye，1985，Nucleic Acids Res.13：3101-3109；Van Heeke和Schuster，1989，J.Biol.Chem.，24：5503-5509)；等等。也可采用pGEX载体表达外来多肽与谷胱甘肽5-转移酶(GST)的融合蛋白。通常，这类融合蛋白可溶，并可通过以下方法容易地由裂解细胞纯化：吸附和结合于基质谷胱甘肽琼脂糖珠，然后在游离谷胱甘肽的存在下洗脱。设计pGEX载体，使其包含凝血酶或因子Xa蛋白酶切割位点，以便由GST部分释放克隆的靶基因产物。

在昆虫***中，苜蓿银纹夜蛾(Autographa californica)核多面体病病毒(AcNPV)用作表达外来基因的载体。该病毒在草地贪夜蛾(Spodopterafrugiperda)细胞中生长。可将抗体编码序列单独克隆到病毒的非必需区(如多角体蛋白基因)中，并置于AcNPV启动子(如多角体蛋白启动子)的控制下。

在哺乳动物宿主细胞中，可利用许多基于病毒的表达***。在腺病毒用作表达载体的情况下，可将感兴趣的抗体编码序列连接于腺病毒转录/翻译控制复合物，例如晚期启动子和三联前导序列。然后，可通过体外或体内重组将该嵌合基因***腺病毒基因组中。***病毒基因组的非必需区(如E1或E3区)会产生活的且能够在感染宿主中表达抗体分子的重组病毒(参见例如Logan和Shenk，1984，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 81：355-359)。为使***的抗体编码序列能够有效翻译，可能还需要特定的起始信号。这些信号包括ATG启动密码子和相邻序列。另外，该启动密码子必须与所需编码序列的阅读框同相，以保证完整***物的翻译。这些外源性翻译控制信号和启动密码子可以是各种天然和合成来源。可通过包含合适的转录增强子元件、转录终止子等提高表达效率(参见例如Bittner等，1987，Methods in Enzymol.153：51-544)。

此外，可选择调节***序列表达、或以所需的特定方式修饰和加工该基因产物的宿主细胞系。对蛋白质产物的这种修饰(如糖基化)和加工(如切割)可能对蛋白质功能至关重要。不同宿主细胞具有对蛋白质和基因产物进行翻译后加工和修饰的特征性和特定机制。可选择合适的细胞系或宿主***，以保证对所表达的外来蛋白进行正确的修饰和加工。至此，可采用包含能适当地加工初始转录物、对基因产物进行糖基化和磷酸化的细胞机器的真核宿主细胞。这类哺乳动物宿主细胞包括但不限于：CHO、VERY、BHK、Hela、COS、MDCK、293、3T3、WI38、BT483、Hs578T、HTB2、BT2O和T47D、NS0(不会内源性产生任何免疫球蛋白链的鼠骨髓瘤细胞系)、CRL7O3O和HsS78Bst细胞。

为了长期、高产率地生产重组蛋白，优选稳定的表达。例如，可工程改造稳定表达抗体分子的细胞系。与其使用含有病毒复制起点的表达载体，不如用合适表达控制元件(如启动子、增强子、序列、转录终止子、聚腺苷酸化位点等)控制的DNA和选择性标记来转化宿主细胞。引入外来DNA后，使工程改造细胞在富营养培养基中生长1-2天，然后换到选择性培养基中。重组质粒中的选择性标记对选择压产生抗性，使得细胞能够将该质粒稳定整合到其染色体中，生长形成细胞灶，进而可克隆并扩增成细胞系。可有益地利用这种方法工程改造表达该抗体分子的细胞系。这种工程改造细胞系在筛选和评价与抗体分子直接或间接相互作用的组合物时特别有用。

可采用许多选择***，包括但不限于单纯疱疹病毒胸苷激酶(Wigler等，1977，Cell 11：223)、次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶(Szybalska和Szybalski，1992，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 48：202)和腺嘌呤磷酸核糖基转移酶(Lowy等，1980，Cell 22：8-17)基因，它们分别可用于tk-、hgprt-或aprt-细胞。另外，抗代谢剂抗性可用作选择以下基因的基础：dhfr，产生甲氨蝶呤抗性(Wigler等，1980，Natl.Acad.Sci.USA，77：357；O’Hare等，1981，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，78：1527)；gpt，产生霉酚酸抗性(Mulligan和Berg，1981，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，78：2072)；neo，产生氨基糖苷G-418抗性(Wu和Wu，1991，Biotherapy3：87-95；Tolstoshev，1993，Ann.Rev.Pharmacol.Toxicol.32：573-596；Mulligan，1993，Science 260：926-932；和Morgan和Anderson，1993，Ann.Rev.Biochem.62：191-217；May，1993，TIB TECH 11(5)：155-215)；和hygro，产生潮霉素抗性(Santerre等，1984，Gene，30：147)。通常应用重组DNA技术领域公知的方法以选择所需的重组克隆，这些方法参见例如：Ausubel等(编)，《新编分子生物学实验指南》(Current Protocols in Molecular Biology)，约翰韦利森公司(JohnWiley&Sons)，NY(1993)；Kriegler，《基因转移和表达，实验室手册》(GeneTransfer and Expression，A Laboratory Manual)，斯托克顿出版社(StocktonPress)，NY(1990)；和Dracopoli等(编)，《新编人类基因组实验指南》(CurrentProtocols in Human Genetics)的第12和13章，约翰韦利森公司，NY(1994)；Colberre-Garapin等，1981，J.Mol.Biol.，150：1，通过引用将其全文纳入本文。

可通过载体扩增提高抗体分子的表达水平(综述参见Bebbington和Hentschel，The use of vectors based on gene amplification for the expression ofcloned genes in mammalian cells in DNA cloning(在DNA克隆中基于基因扩增使用载体表达哺乳动物细胞中克隆的基因)，第3卷(学术出版社(Academic Press)，纽约，1987))。当表达抗体的载体***中的标记可扩增时，宿主细胞培养物中存在的抑制剂水平提高会增加标记基因的拷贝数。由于扩增区域与抗体基因相连，所以也会提高抗体的产量(Crouse等，1983，Mol.Cell.Biol.3：257)。

可利用本发明的两个表达载体共同转染宿主细胞，第一个载体编码重链衍生的多肽，第二个载体编码轻链衍生的多肽。这两种载体可含有相同的选择性标记，使得能够等同地表达重链和轻链多肽。或者，可使用编码且能够同时表达重链和轻链多肽的单一载体。在这种情况下，轻链应位于重链之前，以避免产生过多有毒的游离重链(Proudfoot，1986，Nature 322：52；和Kohler，1980，1980，Proc.Natk Acad.Sci.USA，77：2197)。重链与轻链的编码序列可包括cDNA或基因组DNA。

一旦通过重组表达产生本发明抗体分子后，可通过本领域已知的任何免疫球蛋白分子纯化方法进行纯化，这些方法包括例如层析(如离子交换层析，亲和力层析，特别是在蛋白A之后对特定抗原的亲和力层析，以及大小柱层析)、离心、差异溶解度或任何其它蛋白质纯化标准技术。另外，本发明抗体或其片段可与本文所述或本领域已知的异源多肽序列融合，以利于纯化。

5.4.抗体制剂的稳定性和聚集的监测方法

可利用各种方法，根据蛋白质的物理和化学结构以及其生物学活性，评估蛋白质制剂，包括抗体制剂的的稳定性。例如，为了研究蛋白质的变性，可采用方法，如电荷转移吸收、热分析、荧光光谱、圆二色性(CD)、NMR和HPSEC，切向流过滤(TFF)技术、静态光散射(SLS)技术、傅里叶变换红外光谱(FTIR)技术、尿素-诱导的蛋白质解折叠技术、色氨酸固有荧光技术、差示扫描量热法和/或1-苯胺基-8-萘磺酸(ANS)蛋白质结合技术。参见例如，Wang等，1988，J.of Science&Technology 42(增刊)：S4-S26。

rCGE和HPSEC是最常见和最简单的评价蛋白质聚集体形成、蛋白质降解和蛋白质片段化的方法。因此，可通过这些方法评估本发明液体制剂的稳定性。

例如，可通过HPSEC或rCGE评估本发明液体制剂的稳定性，其中锋面积百分数代表未降解的抗体或未降解的抗体片段。具体说，将约250μg抗体(包括其抗体片段)(约25μl含有10mg/ml所述抗体或抗体片段的液体制剂)注入装有TSK SW x1保护柱(6.0mm CX 4.0cm)的TosoH Biosep TSK G3000SW_XL柱(7.8mmx30cm)中。抗体(包括其抗体片段)用含有0.1M硫酸钠和0.05％叠氮化钠的0.1M磷酸二钠等度洗脱，流速为0.8至1.0毫升/分钟。用280am的UV吸光度检测洗脱的蛋白质。参比标准品在该实验中用作对照，结果报道为产物单体峰与除了在约12至14分钟时观察到的内含体积峰之外所有其它峰的面积百分比。将早于单体峰洗脱的峰记载为聚集体百分数。

经上述任何方法测定，本发明液体制剂具有较低至无法监测到的聚集水平，即蛋白质中聚集体重量不超过5％、不超过4％、不超过3％、不超过2％、不超过1％和不超过0.5％，并具有较低至无法检测到的片段化水平，即代表完整抗体(包括其抗体片段)的峰面积占总峰面积的比例为80％或更高、85％或更高、90％或更高、95％或更高、98％或更高或99％或更高或99.5％或更高。在SDS-PAGE的情况下，可测定用放射性同位素染色或标记的各条带的密度或放射性，可获得代表未降解抗体(包括其抗体片段)的条带的％密度或％放射性。

也可通过衡量制剂中抗体的生物学活性的任何实验来评估本发明液体制剂的稳定性。抗体的生物学活性包括但不限于：抗原结合活性、补体活化活性、Fc-受体结合活性等。可通过本领域技术人员已知的任何方法，包括但不限于ELISA、放射性免疫实验、Western印迹等测定抗体(包括其抗体片段)的抗原结合活性。通过C3a/C4a实验在***中测定补体激活活性，其中抗体在补体组分存在下与表达该抗体免疫特异性结合的抗原的细胞发生反应。也参见Harlow等，《抗体：实验室手册》(Antibodies：A Laboratory Manual)，(冷泉港实验室出版社，第2版，1988)(通过引用全文纳入本文)。例如，可采用基于ELISA的实验比较抗体(包括其抗体片段)与4D4、4D4H2-1 D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4(或本发明制剂中的任何其它抗体)参比标准品免疫特异性结合IL-9多肽的能力。在这个称为VnR结合性ELISA的实验中，用分离的IL-9多肽包被平板，并将一组浓度的4D4、4D4 H2-1 D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4参比标准品的结合信号与相同浓度的测试抗体(包括其抗体片段)的结合信号作比较。

可通过本领域技术人员熟知的方法，例如HPSEC测定本发明液体抗体制剂的纯度。如下所述评估液体抗体制剂的无菌性：通过标称孔隙度为0.45μm的无菌滤器过滤液体抗体制剂，用测试液体抗体制剂接种无菌大豆-酪蛋白消化物培养基和液体巯基醋酸盐培养基。使用Sterisure^TM或Steritest^TM方法时，在无菌条件下向各过滤装置中填充约100ml无菌大豆-酪蛋白消化物培养基或液体巯基醋酸盐培养基。使用常规方法时，在无菌条件下将经刺激的过滤物(filter)转移到100ml无菌大豆-酪蛋白消化物培养基或液体巯基醋酸盐培养基中。在合适温度下接种培养基，在14天中观察三次，以确认细菌或真菌生长。

5.5.抗体制剂的预防和治疗应用

本发明也涉及抗体治疗，包括给予对象，优选人，本发明液体抗体制剂(或“抗体制剂”或“液体制剂”)，以预防、治疗和/或控制疾病或失调，例如，与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状(参见2003年6月10日提交且公开为美国专利公开号US 2006/0029601A1的美国临时申请号60/477,801，题为“预防或治疗呼吸道疾病的方法(Methods ofPreventing or Treating Respiratory Conditions)”，2004年4月12日提交并公开为美国专利公开号US 2005/0147607A1的美国申请号10/823810，题为“预防或治疗呼吸道疾病的方法(Methods of Preventing or Treating Respiratory Conditions)”和美国临时申请(律师案卷号10271-113-999)于2004年4月12日与其同时申请，题为“预防或治疗呼吸道疾病的方法(Methods of Preventing or TreatingRespiratory Conditions)”，通过引用将其全文纳入本文)。在具体实施方式中，本发明液体制剂包含溶液中浓度为约10mg/ml至300mg/ml的抗体(包括其抗体片段)，溶液中含有磷酸盐，该抗体(包括其抗体片段)免疫特异性结合IL-9多肽。本发明液体制剂可包含免疫特异性结合IL-9多肽的单一抗体(包括其抗体片段)(如4D4、4D4H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4)。本发明液体制剂也可包含两种或多种免疫特异性结合IL-9多肽的抗体(包括其抗体片段)。在一个具体实施方式中，这类液体制剂中所含的抗体(包括其抗体片段)是4D4、4D4H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4或其片段。在另一实施方式中，这类液体制剂中所含的抗体(包括其抗体片段)不是4D4、4D4 H2-1 D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4或其片段。在又一实施方式中，本发明液体制剂包含免疫特异性结合IL-9多肽的抗体(包括其抗体片段)，该抗体(包括其抗体片段)也偶联于另一部分，包括但不限于：异源蛋白质、肽或多肽，另一抗体(包括其抗体片段)、标记序列、诊断剂、治疗剂、放射性金属离子和固体支持物。

本发明液体制剂作为治疗剂，可局部或全身应用于机体。具体地，本发明液体制剂可用于预防、治疗和/或控制疾病或失调，例如，与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状。本发明制剂可用于调节表达IL-9R的细胞的活性。在一个具体实施方式中，本发明制剂可用于调节机体的各种活性，包括但不限于：免疫功能。本发明制剂也宜与一种或多种其它治疗(如，一种或多种其它预防剂或治疗剂)联用，所述其它治疗优选用于预防、治疗和/或控制疾病或失调，例如，与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状。使用一种或多种其它治疗(如预防剂或治疗剂)时，它们可单独、以任何合适形式和通过任何合适途径给予。治疗剂或预防剂包括但不限于：小分子、合成药物、肽、多肽、蛋白质、核酸(如RNA和DNA核苷酸，包括但不限于：反义核苷酸序列、三重螺旋、RNAi，以及编码生物活性蛋白质、多肽或肽的核苷酸序列)、抗体、合成或天然无机分子、模拟剂和合成或天然的有机分子。

按照本文所述内容，已知可用于、已用于或目前正用于预防、治疗和/或控制一种或多种症状的任何治疗(如预防剂或治疗剂)可与本发明液体抗体制剂联用，所述一种或多种症状是与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)的关联症状。参见例如，Gilman等，《Goodman和Gilman：治疗的药理学基础》(Goodman and Gilman’s：The Pharmacological Basis ofTherapeutics)，第10版，McGraw-Hill，纽约，2001；默克诊断治疗手册(The MerckManual of Diagnosis and Therapy)，Berkow，M.D.等(编)，第17版，默克SD研究实验室(Merck Sharp and Dohme Research Laboratories)，新泽西州拉维(Rahway，NJ)，1999；和Cecil医学教科书(Textbook of Medicine)，第20版，Bennett和Plum(编)，W.B.Saunders，费城，1996中有关已用于或目前正用于预防、治疗和/或控制与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状的治疗，特别是预防剂或治疗剂的信息。预防剂和治疗剂的例子包括但不限于：免疫调节剂、消炎剂(如肾上腺类皮质激素、皮质类固醇(如倍氯米松、布***、氟尼缩松、氟替卡松、曲安西龙、甲泼尼龙、***龙、***、氢化可的松)、糖皮质激素类、类固醇、非甾体消炎药(如阿司匹林、布洛芬、双氯芬酸和COX-2抑制剂)和白三烯拮抗剂(如孟鲁司特、甲基黄嘌呤、扎鲁司特和齐留通)、β2-激动剂(如沙丁胺醇、比特罗(biterol)、非诺特罗、乙基异丙肾上腺素(isoetharie)、奥西那林、吡布特罗、沙丁胺醇、特布他林福莫特罗、沙美特罗和沙丁胺醇特布他林)、抗胆碱能药(如异丙托溴铵和氧托溴铵)、柳氮磺吡啶、青霉胺、氨苯砜、抗组胺剂、抗疟药(如羟氯喹)、抗病毒剂和抗生素(如放线菌素D(以前称为放线菌素)、博来霉素、红霉素、青霉素、光神霉素和安曲霉素(AMC))。

本发明液体制剂可与一种或多种其它治疗(如一种或多种其它预防剂或治疗剂)同时给予哺乳动物，优选人，所述其它治疗可用于预防、治疗和/或控制与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状。术语“同时”不限于精确地同时给予预防剂或治疗剂/治疗，它指本发明液体制剂和其它药剂/治疗以一定时间间隔依次给予哺乳动物，以使液体制剂中所含的免疫特异性结合IL-9多肽的抗体(包括其抗体片段)可与其它药剂/治疗一起起作用，以提供优于其单独给药的疗效。例如，本发明液体制剂和用于预防、治疗和/或控制与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状的一种或多种其它预防剂或治疗剂可以在同一时间给药或是以任何顺序在不同时间点上依次给药；然而，如果不在同一时间给药，它们的给药时间应足够接近，以提供所需的治疗和预防效果。

在各种实施方式中，本发明液体制剂和一种或多种其它治疗(如一种或多种其它预防剂或治疗剂)，优选用于预防、治疗和/或控制与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状的治疗的给药间隔时间小于1小时、约1小时、约1小时至2小时、约2小时至3小时、约3小时至4小时、约4小时至5小时、约5小时至6小时、约6小时至7小时、约7小时至8小时、约8小时至9小时、约9小时至10小时、约10小时至11小时、约11小时至12小时、不超过24小时或不超过48小时。在优选实施方式中，本发明液体制剂和一种或多种其它治疗(如一种或多种其它预防剂或治疗剂)，优选用于预防、治疗和/或控制与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状的治疗在同一次患者就诊期间给药。在其它实施方式中，本发明液体制剂和一种或多种其它治疗(如一种或多种其它预防剂或治疗剂)，优选用于预防、治疗和/或控制与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状的治疗的给药间隔为约2-4天、约4-6天、约1周、约1-2周或2周以上。在优选实施方式中，本发明液体制剂和一种或多种其它治疗(如预防剂或治疗剂)，优选用于预防、治疗和/或控制与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状的治疗在两种药物均有活性的时间框内给药。本领域技术人员能够通过测定所给药物的半衰期确定该时间框。

在某些实施方式中，将本发明液体制剂和一种或多种其它治疗(如一种或多种其它预防剂或治疗剂)，优选用于预防、治疗和/或控制与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状的治疗周期性给予对象。周期性治疗包括给予第一种药剂一段时间，然后给予第二种药剂和/或第三种药剂一段时间，并重复这种给药次序。周期性治疗可减少发生一种或多种治疗的耐药性，避免或降低治疗之一的副作用，和/或提高疗效。

在某些实施方式中，将本发明液体制剂和一种或多种其它治疗(如一种或多种其它预防剂或治疗剂)，优选用于预防、治疗和/或控制与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状的治疗以小于约3周、约两周一次、约每10天一次或约每周一次的周期给予对象。一个周期可包括通过输注给予治疗剂或预防剂，每个周期约约90分钟、约1小时或约45分钟。每个周期可包括至少1周的停药期、至少2周的停药期、至少3周的停药期。所给周期数约为1-12个周期，更通常为2-10个周期，更通常为2-8个周期。

在其它实施方式中，本发明液体制剂和一种或多种其它治疗(如预防剂或治疗剂)，优选用于预防、治疗和/或控制与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状的治疗通过节律给药方案给药，如连续输注或频繁给药而不延长停药期。这种节律给药方案可包括以恒定间隔给药，没有停药期。一般使用较低剂量的预防剂或治疗剂，具体是细胞毒剂。这类给药方案包括在延长时间内长期每天给予相对较低的剂量。在优选实施方式中，使用较低剂量可最大程度降低毒副作用并消除停药期。在某些实施方式中，预防剂和治疗剂通过长期低剂量输注或连续输注递送，输注时间为约24小时至约2天、至约1周、至约2周、至约3周、至约1个月、至约2个月、至约3个月、至约4个月、至约5个月、至约6个月。

在一个实施方式中，本发明液体制剂以将IL-9多肽的免疫特异性抗体(包括其抗体片段)的血浆浓度维持在所需水平(如约0.1至100μg/ml)的给药方案给药，以连续阻断IL-9R活性。在一个具体实施方式中，该抗体(包括其抗体片段)的血浆浓度维持在0.2μg/ml、0.5μg/ml、1μg/ml、2μg/ml、3μg/ml、4μg/ml、5μg/ml、6μg/ml、7μg/ml、8μg/ml、9μg/ml、10μg/ml、15μg/ml、20μg/ml、25μg/ml、30μg/ml、35μg/ml、40μg/ml、45μg/ml或50μg/ml。对象体内的所需血浆浓度取决于几种因素，包括但不限于：疾病或失调的特性、疾病或失调的严重程度以及对象的总体状况。这种给药方案特别适合预防、治疗和/或控制慢性疾病或失调。

在一个实施方式中，利用将免疫特异性结合IL-9多肽的抗体(包括其抗体片段)的血浆浓度维持在阻断至少40％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％或至少95％的IL-9R与IL-9多肽结合的水平的给药方案，将本发明液体制剂给予出现与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状的对象。在一个具体实施方式中，在出现与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状的对象中，免疫特异性结合IL-9多肽的抗体(包括其抗体片段)的血浆浓度维持在约0.1μg/ml至约100μg/ml。

在一些实施方式中，将本发明液体制剂间歇性给予对象，其中所述液体制剂包含偶联于某部分(如治疗剂或毒素)的抗体(包括其抗体片段)。

与用于预防、治疗和/或控制与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状的其它治疗(如预防剂和/或治疗剂)联用时，本发明液体制剂和其它治疗可产生相加作用或协同作用。本发明考虑通过相同或不同给药途径，如口服和胃肠道外途径将本发明液体制剂与其它治疗(如预防剂或治疗剂)联合给药，其它治疗优选用于预防、治疗和/或控制与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状的治疗。在某些实施方式中，本发明液体制剂与可能产生毒副作用(包括但不限于：毒性)的一种或多种治疗(如预防剂或治疗剂)同时给药时，宜以低于引发毒副作用阈值的剂量给予该治疗(如预防剂或治疗剂)。

5.5.1.癌症治疗

可将本发明液体制剂给予需要的对象，以预防、治疗和/或控制癌症或者其一种或多种症状。本发明液体制剂也可与一种或多种其它治疗联合给予需要的对象，以预防、治疗和/或控制癌症或者其一种或多种症状，所述治疗优选用于预防、控制或治疗癌症的治疗(包括但不限于下述章节5.5.1.1所述的预防剂或治疗剂)。在一个具体实施方式中，本发明提供一种预防、治疗和/或控制癌症或其一种或多种症状的方法，所述方法包括给予需要的对象一剂预防或治疗有效量的本发明液体制剂。在另一实施方式中，本发明提供一种预防、治疗和/或控制癌症或其一种或多种症状的方法，所述方法包括给予需要的对象一剂预防或治疗有效量的本发明液体制剂和一剂预防或治疗有效量的一种或多种治疗(例如，除免疫特异性结合IL-9多肽的抗体(包括其抗体片段)以外的预防剂或治疗剂)。

本发明液体制剂可用作一线、二线、三线或四线癌症治疗。本发明提供在用常规治疗难以治疗的对象中预防、治疗和/或控制癌症的一种或多种症状的方法，所述方法包括给予所述对象一剂预防或治疗有效量的本发明液体制剂。当至少有相当一部分癌细胞未被杀死或其细胞***因治疗而受阻时，确定该癌症难以治疗。可以利用本领域接受的“难治”的涵义，通过本领域已知的测定治疗对癌细胞有效性的任何方法，在体内或体外对“难治”加以确定。在一个具体实施方式中，当癌细胞数量未显著减少，或增加时癌症是难治的。

本发明提供在用癌症的现有单一药物治疗难以治疗的对象中预防、治疗和/或控制该癌症或其一种或多种症状的方法，所述方法包括给予所述对象一剂预防或治疗有效量的本发明液体制剂和一剂预防或治疗有效量的治疗(如预防剂或治疗剂)，所述一种或多种治疗是除免疫特异性结合IL-9多肽的抗体(包括其抗体片段)以外的治疗。本发明也提供预防、治疗和/或控制癌症的方法，即将本发明液体制剂与任何其它治疗(如放疗、化疗或手术)联合给予已证明其它治疗难以治疗且不再治疗的患者。本发明也提供控制或治疗患有癌症且由于先前进行的其它癌症治疗而发生免疫抑制的患者的方法。本发明也提供用于预防、治疗和/或控制癌症或其一种或多种症状的其它方法，其中对所治疗对象而言，化疗、放疗、激素治疗和/或生物治疗/免疫治疗的毒性太大或可能毒性太大，导致无法接受或无法承担的副作用。本发明还提供在已经得到治疗且没有活动疾病的患者中通过给予本发明液体制剂防止癌症复发的方法。

可用本发明方法治疗的癌症包括但不限于：瘤、肿瘤、转移或特征为细胞生长不受控制的任何疾病或失调。癌症可以是原发性或转移性癌症。癌症可以表达或不表达IL-9R。可用本发明方法治疗的癌症的具体例子包括但不限于：头部、颈部、眼部、口腔、咽喉、食道、胸部、骨、肺、结肠、直肠、胃、***、乳腺、卵巢、肾脏、肝脏、胰腺和脑部的癌症。其它癌症包括但不限于：白血病，例如但不限于：急性白血病、急性淋巴细胞性白血病、急性髓细胞性白血病，如髓细胞性白血病、早幼粒细胞性白血病、骨髓单核细胞性白血病、单核细胞性白血病、红白血病和骨髓发育异常综合征，慢性白血病，例如但不限于：慢性髓细胞性(粒细胞性)白血病、慢性淋巴细胞性白血病、多毛细胞白血病；真性红细胞增多；淋巴瘤，例如但不限于：霍奇金病、非霍奇金病；多发性骨髓瘤，例如但不限于：郁积型多发性骨髓瘤、非分泌型骨髓瘤、骨硬化性骨髓瘤、浆细胞白血病、孤立性浆细胞瘤和髓外浆细胞瘤；瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症；显著性未确定的单克隆丙种球蛋白病；良性单克隆丙种球蛋白病；重链病；骨癌和***肉瘤，例如但不限于：骨肉瘤、骨髓瘤性骨病、骨肉瘤、软骨肉瘤、尤因肉瘤、佩吉特骨病、恶性巨细胞瘤、骨纤维肉瘤、脊索瘤、骨膜肉瘤、软组织肉瘤、血管肉瘤、纤维肉瘤、卡波济氏肉瘤、平滑肌肉瘤、脂肪肉瘤、***肉瘤、神经鞘瘤、横纹肌肉瘤、滑膜肉瘤；脑瘤，例如但不限于：胶质瘤、星形细胞瘤、脑干神经胶质瘤、室管膜瘤、少突神经胶质瘤、非神经胶质瘤、听神经瘤、颅咽管瘤、髓母细胞瘤、脑脊膜瘤、松果体瘤、成松果体细胞瘤、原发性脑淋巴瘤；乳腺癌，包括但不限于：腺癌、小叶(小细胞)癌、导管内癌、髓样乳腺癌、粘蛋白性乳腺癌、管状乳腺癌、***状乳腺癌、佩吉特病(包括青少年佩吉特病)和炎性乳腺癌；肾上腺癌，例如但不限于：嗜铬细胞瘤和肾上腺皮质癌；

甲状腺癌，例如但不限于：***状或滤泡状甲状腺癌、髓样甲状腺癌和未分化甲状腺癌；胰腺癌，例如但不限于：胰岛素瘤、胃泌素瘤、胰高血糖素瘤、舒血管肠肽瘤、生长抑素-分泌瘤和类癌瘤或胰岛细胞瘤；垂体癌，例如但不限于：库兴病、促乳素-分泌瘤、肢端肥大症和尿崩症；眼癌，例如但不限于：眼黑色素瘤如虹膜黑色素瘤、脉络膜黑色素瘤和睫状体黑色素瘤，以及视网膜母细胞瘤；***癌，如鳞状细胞癌、腺癌和黑色素瘤；***癌，如鳞状细胞癌、黑色素瘤、腺癌、基底细胞癌、肉瘤和佩吉特病；***，例如但不限于：鳞状细胞癌和腺癌；子宫癌，例如但不限于：子宫内膜癌和子宫肉瘤；卵巢癌，例如但不限于：卵巢上皮癌、交界瘤、生殖细胞瘤和间质肿瘤；

食道癌，例如但不限于：鳞状细胞癌、腺癌、腺样囊性癌、粘液表皮样癌、腺鳞癌、肉瘤、黑素瘤、浆细胞瘤、疣状癌和燕麦细胞(小细胞)癌；胃癌，例如但不限于：腺癌、蕈样(息肉状)癌、溃疡癌、浅表扩散癌、广泛扩散癌、恶性淋巴瘤、脂肪肉瘤、纤维肉瘤和癌肉瘤；结肠癌；直肠癌；肝癌，例如但不限于：肝细胞癌和肝毒细胞瘤，胆囊癌，如腺癌；胆管癌，例如但不限于：***状、结节性和弥散性癌；肺癌，如非小细胞肺癌、鳞状细胞癌(表皮样癌)、腺癌、大细胞癌和小细胞肺癌；睾丸癌，例如但不限于：生殖细胞瘤、***瘤、未分化癌、经典(典型)癌、***细胞癌、非***瘤、胚胎癌、畸胎瘤、绒毛膜癌(卵黄囊瘤)，***癌，例如但不限于：腺癌、平滑肌肉瘤和横纹肌肉瘤；***癌；口腔癌，例如但不限于：鳞状细胞癌；基底癌；唾液腺癌，例如但不限于：腺癌，粘液表皮样癌和腺样囊状癌；喉癌，例如但不限于：鳞状细胞癌和疣状癌；

皮肤癌，例如但不限于：基底细胞癌、鳞状细胞癌和黑色素瘤、浅表扩散的黑色素瘤、结节状黑色素瘤、恶性雀斑样痣黑素瘤、肢端黑色素瘤；肾癌，例如但不限于：肾细胞癌症、腺癌、肾上腺样瘤、纤维肉瘤、移行细胞癌(肾盂和/或输尿管(uterer))；肾母细胞瘤；膀胱癌，例如但不限于：移行细胞癌、鳞状细胞癌、腺癌、癌肉瘤。此外，癌症包括肌肉瘤，成骨肉瘤，内皮肉瘤，***内皮肉瘤，间皮瘤，滑膜瘤，成血管细胞瘤，上皮癌，囊腺癌，支气管癌，汗腺癌，皮脂腺癌，***状癌和***状腺癌(这类疾病的综述参见Fishman等，1985，《医学》(Medicine)，第2版，费城JBL公司(J.B.Lippincott Co.，Philadelphia)和Murphy等，1997，知情决定：癌症诊断、治疗和恢复的完整手册(Informed Decisions：The Complete Book of Cancer Diagnosis，Treatment，andRecovery)，维京企鹅(Viking Penguin)，美国企鹅图书公司(Penguin BooksU.S.A.，Inc.，United States of America))。还考虑到，也可利用本发明方法和组合物治疗凋亡异常引起的癌症。这类癌症可包括但不限于：滤泡淋巴瘤，p53突变的癌症，激素依赖性的乳腺肿瘤、***肿瘤和卵巢肿瘤，以及癌前病变，如家族性腺瘤性息肉病和骨髓发育异常综合征。

5.5.1.1.抗癌治疗

本发明提供预防、治疗和/或控制癌症或其一种或多种症状的方法，所述方法包括给予需要的对象本发明液体制剂和一种或多种除免疫特异性结合IL-9多肽的抗体(包括其抗体片段)以外的治疗(如预防剂或治疗剂)。治疗剂或预防剂包括但不限于：肽、多肽、蛋白质、融合蛋白、核酸分子、小分子、模拟剂、合成药物、无机分子和有机分子。已知可用于、已用于或正用于预防、治疗和/或控制癌症或其一种或多种症状的任何药剂或治疗(如化疗、放疗、激素治疗和/或生物治疗/免疫治疗)可与本文所述的本发明液体制剂联用。

在某些实施方式中，抗癌剂是免疫调节剂，如化疗药。在某些其它实施方式中，抗癌剂是除化疗药以外的免疫调节剂。在其它实施方式中，抗癌剂不是免疫调节剂。在具体实施方式中，抗癌剂是抗血管新生药。在其它实施方式中，抗癌剂不是抗血管新生药。在具体实施方式中，抗癌剂是消炎剂。在其它实施方式中，抗癌剂不是消炎剂。

在具体实施方式中，抗癌剂包括但不限于：阿西维辛；阿柔比星；盐酸阿考达唑；阿克罗宁；阿多来新；阿地白介素；六甲蜜胺；安波霉素；乙酸阿美蒽醌；氨鲁米特；安吖啶；阿那曲唑；安曲霉素；门冬酰胺酶；曲林菌素；阿扎胞苷；阿扎替派；阿佐霉素；巴马司他；苯佐替派；比卡鲁胺；盐酸比生群；二甲磺酸双奈法德；二膦酸盐(如帕米膦酸盐(Aredria)、氯屈膦酸钠(Bonefos)、唑来膦酸(Zometa)、阿仑膦酸盐(Fosamax)、依替膦酸盐、伊班膦酸盐、英卡膦酸盐、利塞膦酸盐和替鲁膦酸盐)；比折来新；硫酸博来霉素；布喹那钠；溴匹立明；白消安；放线菌素C；卡普睾酮；卡醋胺；卡贝替姆；卡铂；卡莫司汀；盐酸卡柔比星；卡折来新；西地芬戈；苯丁酸氮芥；西罗霉素；顺铂；克拉屈滨；甲磺酸克立那托；环磷酰胺；阿糖胞苷；达卡巴嗪；放线菌素D；盐酸柔红霉素；地西他滨；右奥马铂；地扎胍宁；甲磺酸地扎胍宁；地吖醌；多西他赛；多柔比星；盐酸多柔比星；屈洛昔芬；柠檬酸屈洛昔芬；丙酸屈他雄酮；达佐霉素；依达曲沙；盐酸依氟鸟氨酸；EphA2抑制剂(如，导致EphA2磷酸化和EphA2降解的抗-EphA2抗体(参见美国专利申请号60/418,213，通过引用将其全文纳入本文)；依沙芦星；恩洛铂；恩普氨酯；依匹哌啶；盐酸表柔比星；厄布洛唑；盐酸依索比星；雌莫司汀；雌莫司汀磷酸钠；依他硝唑；依托泊苷；磷酸依托泊苷；氯苯乙嘧胺；盐酸法倔唑；法扎拉滨；芬维A胺；氮尿苷；磷酸氟达拉滨；氟尿嘧啶；氟西他滨；磷喹酮；福司曲星钠；吉西他滨；盐酸吉西他滨；羟基脲；盐酸伊达比星；异环磷酰胺；伊莫福新；白介素II(包括重组白介素II或rIL2)，干扰素α-2a；干扰素α-2b；干扰素α-n1；干扰素α-n3；干扰素β-Ia；干扰素γ-Ib；异丙铂；盐酸伊立替康；乙酸兰瑞肽；来曲唑；乙酸亮丙瑞林；盐酸利阿唑；洛美曲索钠；洛莫司汀；盐酸洛索蒽醌；马索罗酚；美登素；盐酸氮芥；抗-CD2抗体(如，西利珠单抗(米迪缪尼公司(MedImmune Inc.)；国际公开号WO 02/098370，通过引用将其全文纳入本文))；乙酸基孕甾酮；乙酸美仑孕酮；苯丙氨酸氮芥；美诺立尔；巯嘌呤；氨甲喋呤；氨甲喋呤钠；氯苯氨啶；美妥替哌；米丁度胺；米托卡星；丝裂红素；米托洁林；丝裂马菌素；丝裂霉素；米托司培；米托坦；盐酸米托蒽醌；霉酚酸；诺考达唑；诺拉霉素；奥马铂；奥昔舒仑；紫杉醇；培门冬酶；培利霉素；奈莫司汀；硫酸培洛霉素；培磷酰胺；哌泊溴烷；哌泊舒凡；盐酸吡罗蒽醌；普卡霉素；普洛美坦；卟菲尔钠；泊非霉素；泼尼莫司汀；盐酸丙卡巴肼；嘌罗霉素；盐酸嘌罗霉素；吡唑呋喃菌素；利波腺苷；罗谷亚胺；沙芬戈；盐酸沙芬戈；司莫司汀；辛曲秦；磷乙酰天冬氨酸钠；司帕霉素；盐酸锗螺胺；螺莫司汀；螺铂；链黑霉素；链佐星；磺氯苯脲；他利霉素；替可加兰钠；替加氟；盐酸替洛蒽醌；替莫泊芬；替尼泊苷；替罗昔隆；睾内酪；硫咪嘌呤；硫鸟嘌呤；塞替派；噻唑呋林；替拉扎明；柠檬酸托瑞米芬；乙酸曲托龙；磷酸曲西立滨；三甲曲沙；葡糖醛酸三甲曲沙；曲普瑞林；盐酸妥布氯唑；乌拉莫司汀；乌瑞替派；伐普肽；维替泊芬；硫酸长春碱；硫酸长春新碱；长春地辛；硫酸长春地辛；硫酸长春匹定；硫酸长春甘酯；硫酸长春罗新；酒石酸长春瑞滨；硫酸长春罗定；硫酸长春利定；伏氯唑；折尼铂；净司他丁；盐酸佐柔比星。

其它抗癌药包括但不限于：20-表-1，25二羟基维生素D3；5-乙炔基尿嘧啶；阿比特龙；阿柔比星；酰基富烯；腺环戊醇(adecypenol)；阿多来新；阿地白介素；ALL-TK拮抗剂；六甲蜜胺；氨莫司汀；阿米多克斯(amidox)；氨磷汀；氨基乙酰丙酸；氨柔比星；安吖啶；阿那格雷；阿那曲唑；穿心莲内酯；血管新生抑制剂；拮抗剂D；拮抗剂G；安雷利克斯；抗-背侧化形成蛋白-1；抗雄激素，***癌；抗***；抗瘤酮(antineoplaston)；反义寡核苷酸；甘氨酸阿非迪霉素；凋亡基因调节剂；凋亡调节剂；脱嘌呤核酸；ara-CDP-DL-PTBA；精氨酸脱氨酶；阿苏拉科林(asulacrine)；阿他美坦；阿莫司汀；阿西他汀(axinastatin)1；阿西他汀2；阿西他汀3；阿扎司琼；阿扎毒素；重氮酪氨酸；浆果赤霉素III衍生物；巴拉醇(balanol)；巴马司他；BCR/ABL拮抗剂；苯并二氢卟酚(benzochlorin)；苯甲酰星孢素；β内酰胺衍生物；β-阿里辛(β-alethine)；贝塔克拉霉素(betaclamycin)B；桦木酸；bFGF抑制剂；比卡鲁胺；比生群；双氮丙啶精胺；双奈法德；比特迪尼(bistratene)A；比折来新；贝伏特(breflate)；溴匹立明；布度钛；丁基硫堇亚胺；卡泊三醇；卡弗他丁(calphostin)C；喜树碱衍生物；金丝雀痘IL-2；卡培他滨；羧酰胺-氨基-***；羧基酰胺***；CaRestM3；CARN 700；软骨衍生的抑制剂；卡折来新；酪蛋白激酶抑制剂(ICOS)；澳粟精胺；杀菌肽B；西曲瑞克；双氢叶吩(chlorlns)；氯代喹喔啉磺酰胺；西卡前列素；顺-卟啉；克拉屈滨；恩氯米芬类似物；克霉唑；克利霉素(collismycin)A；克利霉素B；考布他汀A4；考布他汀类似物；克纳宁(conagenin)；科莱贝司丁(crambescidin)816；克立那托；自念珠藻环肽(cryptophycin)8；自念珠藻环肽A衍生物；麻疯树毒蛋白(curacin)A；环戊蒽醌(cyclopentanthraquinone)；环普拉坦(cycloplatam)；塞培霉素(cypemycin)；阿糖胞苷十八烷基磷酸钠；细胞裂解因子；磷酸己烷雌酚(cytostatin)；达昔单抗；地西他滨；脱氢代代宁B；地洛瑞林；***；右异环磷酰胺；右雷佐生；右维拉帕米；地吖醌；代代宁B；二羟基苯并氧肟酸(didox)；二乙基正精胺；二氢-5-氮杂胞苷；二氢紫杉醇，9-；二氧霉素(dioxamycin)；二苯基螺莫斯汀；多西他赛；二十二烷醇；多拉司琼；去氧氟尿苷；屈洛昔芬；屈***酚；多卡霉素SA；依布硒；依考莫司汀；依地福新；依决洛单抗；依氟鸟氨酸；榄香烯；乙嘧替氟；表柔比星；依立雄胺；雌莫司汀类似物；***激动剂；***拮抗剂；依他硝唑；磷酸依托泊甙；依西美坦；法倔唑；法扎拉滨；芬维A胺；非格司亭；非那雄胺；黄皮酮(flavopiridol)；氟卓斯汀；夫卢丝龙(fluasterone)；氟达拉滨；盐酸氟代柔红霉素(fluorodaunorunicin)；福酚美克；福美坦；福司曲星；福莫司汀；德卟啉钆(gadolinium texaphyrin)；硝酸镓；加洛他滨；加尼瑞克；明胶酶抑制剂；吉西他滨；谷胱甘肽抑制剂；HMG CoA还原酶抑制剂(如阿托伐他汀、西立伐他汀、氟伐他汀、来适可、力普妥、洛伐他汀、罗苏伐他汀和辛伐他汀)；赫舒反(hepsulfam)；调蛋白；环己基双乙酰胺；金丝桃蒽酮；伊班膦酸；黄胆素；艾多昔芬；伊决孟酮；伊莫福新；伊洛马司他；咪唑并吖啶酮；咪喹莫特；免疫刺激肽；***-1受体抑制剂；干扰素激动剂；干扰素；白介素；碘苄胍；碘阿霉素；甘薯苦醇，4-；伊罗普拉；伊索拉定；异本格唑(isobengazole)；异高软海绵素(isohomohalicondrin)B；伊他司琼；结丝立得(jasplakinolide)；卡哈拉得(kahalalide)F；片螺素(lamellarin)-N三乙酸；兰瑞肽；雷纳霉素(leinamycin)；来格司亭；硫酸蘑菇多糖；莱托斯汀(leptolstatin)；来曲唑；白血病抑制因子；白细胞α干扰素；亮丙瑞林+***+孕酮；亮丙瑞林；左旋咪唑；LFA-3TIP(马萨诸塞州剑桥的百集公司(Biogen，Cambridge，MA)；国际公开号WO93/0686和美国专利号6,162,432)；利阿唑；直链多胺类似物；亲脂性二糖肽；亲脂性铂化合物；利索纳得(lissoclinamide)7；洛铂；胍乙基磷酸丝氨酸；洛美曲索；氯尼达明；洛索蒽醌；洛伐他汀；洛索立宾；勒托替康；德卟啉镥(lutetium texaphyrin)；莱索菲林(lysofylline)；细胞裂解肽；美坦新；慢诺他汀(mannostatin)A；马立马司他；马索罗酚；马斯平(maspin)；基质溶解因子抑制剂；基质金属蛋白酶抑制剂；美诺立尔；硫巴妥苯胺；美替瑞林；甲硫氨酸酶；甲氧氯普胺；MIF抑制剂；米非司酮；米替福新；米立司亭；错配的双链RNA；米托胍腙；二溴卫矛醇；丝裂霉素类似物；米托萘胺；米托毒素(mitotoxin)成纤维细胞生长因子-皂草毒蛋白；米托蒽醌；莫法罗汀；莫拉司亭；单克隆抗体，人绒毛膜***；单磷酰基脂质A+分支杆菌细胞壁骨架；莫哌达醇；多药耐药基因抑制剂；基于多肿瘤抑制物1的治疗；芥类抗癌剂；印度洋海绵(mycaperoxide)B；分枝杆菌细胞壁提取物；米亚普龙(myriaporone)；N-乙酰基地那林；N-取代的苯甲酰胺；那法瑞林；那瑞替喷(nagrestip)；纳洛酮+镇痛新；纳帕英(napavin)；萘萜二醇(naphterpin)；那托司亭；奈达铂；奈莫柔比星；奈立膦酸；中性内肽酶；尼鲁米特；尼萨霉素(nisamycin)；氮氧化物调节剂；硝基氧抗氧化剂；尼多林(nitrullyn)；O6-苄基鸟嘌呤；奥曲肽；奥可斯酮(okicenone)；寡核苷酸；奥那司酮；昂丹司琼；昂丹司琼；奥莱辛(oracin)；口服细胞因子诱导物；奥马铂；奥沙特隆；奥沙利铂；氧杂奥诺霉素(oxaunomycin)；紫杉醇；紫杉醇类似物；紫杉醇衍生物；帕劳胺(palauamine)；棕榈酰根霉素；帕米磷酸；人参炔三醇；帕诺米芬；副菌铁素(parabactin)；帕折普汀；培门冬酶；培得星；戊聚硫钠；喷司他丁；喷托唑(pentrozole)；全氟溴烷；培磷酰胺；紫苏子醇；苯那霉素(phenazinomycin)；乙酸苯酯(phenylacetate)；磷酸酶抑制剂；皮西巴尼(picibanil)；盐酸匹鲁卡品；吡柔比星；吡曲克辛；胎盘素(placetin)A；胎盘素B；纤溶酶原激活物抑制剂；铂络合物；铂化合物；铂-三胺络合物；卟菲尔钠；泊非霉素；氯***；丙基双吖啶酮；***素J2；蛋白酶体抑制剂；基于蛋白A的免疫调节剂；蛋白激酶C抑制剂；蛋白激酶C抑制剂，微藻(microalgal)；蛋白质酪氨酸磷酸酶抑制剂；嘌呤核苷磷酸化酶抑制剂；红紫素；吡唑啉吖啶；吡哆醛化的血红蛋白聚氧乙烯偶联物；raf拮抗剂；雷替曲塞；雷莫司琼；ras法尼基蛋白转移酶抑制剂；ras抑制剂；ras-GAP抑制剂；去甲基化的瑞替普汀；依替膦酸铼Re186；根霉素；核酶；RII维甲酰胺(retinamide)；罗谷亚胺；罗希吐碱(rohitukine)；罗莫肽；罗喹美克；卢比格酮(rubiginone)B1；卢伯西(ruboxyl)；沙芬戈；伞托平(saintopin)；SarCNU；萨可菲醇(sarcophytol)A；沙格司亭；Sdi 1模拟物；司莫司汀；衰老衍生的抑制剂1；有义寡核苷酸；信号转导抑制剂；信号转导调节剂；单链抗原结合蛋白；西佐喃；索布佐生；硼卡钠；苯基乙酸钠；索尔醇(solverol)；生长调节素结合蛋白；索纳明；膦门冬酸；斯卡霉素(spicamycin)D；螺莫司汀；脾脏五肽(splenopentin)；海绵他汀(spongistatin)1；角鲨胺；干细胞抑制剂；干细胞***抑制剂；斯提酰胺(stipiamide)；基质分解素抑制剂；斯菲诺辛(sulfinosine)；强效血管活性肠肽拮抗剂；素拉迪塔(suradista)；苏拉明；苦马豆碱；合成粘多糖；他莫司汀；5-氟尿嘧啶；亚叶酸；他莫昔芬甲碘化物；牛磺莫司汀；他扎罗汀；替可加兰钠；替加氟；碲吡喃洋(tellurapyrylium)；端粒酶抑制剂；替莫泊芬；替莫唑胺；替尼泊苷；十氧化四氯(tetrachlorodecaoxide)；四佐胺(tetrazomine)；泰立拉汀(thaliblastine)；噻可拉林；血小板生成素；血小板生成素模拟物；胸腺法新；胸腺生成素受体激动剂；胸腺曲南；促甲状腺激素；本紫红素乙酯锡；替拉扎明；二氯环戊二烯钛；拓扑森汀(topsentin)；托瑞米芬；全能干细胞因子；翻译抑制剂；维甲酸；三乙酰基尿苷；曲西立滨；三甲曲沙；曲普瑞林；托烷司琼；妥罗雄脲；酪氨酸激酶抑制剂；酪氨酸磷酸化抑制剂(tyrphostin)；UBC抑制剂；乌苯美司；泌尿生殖窦衍生的生长抑制因子；脲激酶受体拮抗剂；伐普肽；瓦立奥林(variolin)B；载体***，红细胞基因治疗；沙利度胺；维拉雷琐；藜芦明；瓦尔丁(verdins)；维替泊芬；长春瑞滨；威科萨汀(vinxaltine)；维他辛(Vitaxin)^TM(参见美国专利公开号US2002/0168360 A1，2002年11月14日，题为“通过联合给予整联蛋白α_vβ₃拮抗剂和其它预防剂或治疗剂预防或治疗炎性或自身免疫性疾病的方法”(Methodsof Preventing or Treating Inflammatory or Autoimmune Disorders byAdministering Integrin α_vβ₃ Antagonists in Combination With Other Prophylacticor Therapeutic Agents))；伏氯唑；扎诺特隆；折尼铂；亚苄维C；和净司他丁斯酯。在另一优选实施方式中，抗体衍生物，例如MT103，称为双特异性T细胞结合物(BiTE^TM；米迪缪尼公司)的一类抗体衍生物的一部分，也可与一种或多种本发明液体制剂联用。

抗癌药的其它例子包括但不限于：血管新生抑制剂、拓扑异构酶抑制剂和免疫调节剂，(例如化疗药和非治疗性免疫调节剂，包括但不限于：抗T细胞受体抗体(如cM-T412(波林格公司(Boeringer))、IDEC-

(IDEC和SKB)、mAB 4162W94、奥索克隆(Orthoclone)和OKTcdr4a(JC公司(Janssen-Cilag)))，抗-CD3抗体(如努为昂(Nuvion)(产品设计实验室(Product Design Labs))，OKT3(强生公司(Johnson&Johnson))或利妥昔(IDEC))，抗-CD5抗体(如抗-CD5蓖麻毒蛋白-连接的免疫偶联物)，抗-CD7抗体(如CHH-380(诺华公司))，抗-CD8抗体，抗CD40配体单克隆抗体(如IDEC-131(IDEC))，抗-CD52抗体(如坎帕斯1H(Ilex))，抗-CD2抗体(如MEDI-507(米迪缪尼公司，国际公开号WO 02/098370和WO 02/069904)，抗-CD11a抗体(如仙耐林(Xanelim)(基因泰克公司))和抗-B7抗体(如IDEC-114)(IDEC))；抗-细胞因子受体抗体(如抗-IFN受体抗体、抗-IL-2受体抗体(如Zenapax(蛋白质设计实验室))，抗-IL-4受体抗体，抗-IL-6受体抗体，抗-IL-10受体抗体和抗-IL-12受体抗体)，抗-细胞因子抗体(如抗-IFN抗体、抗-TNF-α抗体、抗-IL-1β抗体、抗-IL-6抗体、抗-IL-8抗体(如ABX-IL-8(阿布基尼克斯公司(Abgenix)))和抗-IL-12抗体))；CTLA4-免疫球蛋白；LFA-3TIP(百集公司，国际公开号WO 93/08656和美国专利号6,162,432)；可溶性细胞因子受体(如TNF-α受体的胞外结构域或其片段、IL-1β受体的胞外结构域或其片段和IL-6受体的胞外结构域或其片段)；细胞因子或其片段(如白介素(IL)-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-11、IL-12、IL-15、TNF-α、TNF-β、干扰素(IFN)-α、IFN-β、IFN-γ和GM-CSF)；和抗-细胞因子抗体(如抗-IL-2抗体、抗-IL-4抗体、抗-IL-6抗体、抗-IL-10抗体、抗-IL-12抗体、抗-IL-15抗体、抗-TNF-α抗体和抗-IFN-γ抗体)和免疫特异性结合肿瘤相关抗原的抗体(如

)。

本发明也包括联合给予本发明液体制剂和放疗，放疗包括使用X射线、γ射线和其它放射来源，以摧毁癌细胞。在优选实施方式中，以外束放疗或远距治疗形式给予放疗，其中射线由远程源发出。在其它优选实施方式中，以内部治疗或近程治疗的形式给予放疗，其中放射源放置在体内接近癌细胞或肿瘤的地方。

在具体实施方式中，将预防或治疗有效量的本发明液体制剂与预防或治疗有效量的一种或多种用于治疗乳腺癌的其它药剂联合给予乳腺癌患者，所述其它药剂包括但不限于：多柔比星，表柔比星，多柔比星和环磷酰胺联用(AC)，环磷酰胺、多柔比星和5-氟尿嘧啶联用(CAF)，环磷酰胺、表柔比星和5-氟尿嘧啶联用(CEF)，

他莫昔芬，他莫昔芬和细胞毒性化疗联用。在某些实施方式中，将预防或治疗有效量的一种或多种本发明液体制剂与有效量的紫杉烷如多西他赛和紫杉醇联合给予转移性乳腺癌患者。在其它实施方式中，将预防或治疗有效量的本发明液体制剂与预防或治疗有效量的紫杉烷以及标准多柔比星和环磷酰胺联用，以便辅佐治疗结节阳性的局限性乳腺癌。

在具体实施方式中，将预防或治疗有效量的本发明液体制剂与预防或治疗有效量的一种或多种用于治疗***癌的其它药剂联合给予***癌患者，所述其它药剂包括但不限于：外束放疗，间质植入放射性同位素(即I¹²⁵、钯、铱)，亮丙瑞林或其它LHRH激动剂，非甾体抗雄激素药物(氟他胺、尼鲁米特、比卡鲁胺)，甾体抗雄激素药物(乙酸环丙孕酮)，亮丙瑞林和氟他胺联用，***，如DES、氯烯雌醚、乙炔***、偶联的***U.S.P.、二磷酸DES，放射性同位素如锶-89，外束放疗和锶-89联用，二线激素治疗如氨鲁米特、氢化可的松、氟他胺戒断(withdrawal)，***和酮康唑，低剂量***，或报道能产生主观症状改善和降低PSA水平的其它化疗方案，包括多西他赛、紫杉醇、雌莫司汀/多西他赛、雌莫司汀/依托泊苷、雌莫司汀/长春碱和雌莫司汀/紫杉醇。在具体实施方式中，将预防或治疗有效量的本发明液体制剂与预防或治疗有效量的一种或多种用于治疗卵巢癌的其它药剂联合给予卵巢癌患者，所述其它药剂包括但不限于：腹腔内放疗，如P³²治疗、全腹放疗和骨盆放疗，顺铂、紫杉醇(泰素)或多西他赛(泰索帝)和顺铂或卡铂联用、环磷酰胺和顺铂联用、环磷酰胺和卡铂联用、5-FU和亚叶酸联用、依托泊苷、多柔比星脂质体、吉西他滨或拓扑替康。考虑到，将预防或治疗有效量的本发明液体制剂与泰素联合给予患有铂难治性疾病的患者。难治性卵巢癌患者的治疗包括将异环磷酰胺给予铂难治性性疾病患者，在基于顺铂的联合给药方案失败后将六甲蜜胺(HMM)用作挽救治疗，和将他莫昔芬给予肿瘤上出现可检测水平的胞质***受体的患者。在具体实施方式中，将预防或治疗有效量的本发明液体制剂与预防或治疗有效量的一种或多种用于治疗骨肉瘤的其它药剂联合给予骨肉瘤患者，所述其它药剂包括但不限于：多柔比星、异环磷酰胺、顺铂、高剂量氨甲喋呤、环磷酰胺、依托泊苷、长春新碱、放线菌素D和手术。

在具体实施方式中，将预防或治疗有效量的本发明液体制剂与预防或治疗有效量的一种或多种用于治疗骨转移性肿瘤的其它药剂联合给予肿瘤转移至骨的患者，所述其它药剂包括但不限于：用于从机理上治疗恶性肿瘤的药剂或治疗(非限制性例子是***癌或乳腺癌转移至骨时使用激素抑制剂和手术)，放疗(非限制性例子是锶89和钐153，它们是亲骨性放射性核素，具有抗肿瘤作用并能缓解症状)和二膦酸盐。

本领域了解癌症治疗和其剂量、给药途径和推荐用法，这类文献包括例如《医师案头参考》(Physician’s Desk Reference)(第56版，2006)。

5.5.2.增殖性疾病

本发明液体抗体制剂可用于预防、治疗和/或控制增殖性疾病或其一种或多种症状。在一个具体实施方式中，所述增殖性疾病的特征是IL-9介导其生长的细胞的异常增殖(例如增殖不受控制或缺乏增殖)，这些细胞包括但不限于：T细胞、红系祖细胞、B细胞、肥大细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和胎儿胸腺细胞。

本发明提供预防、治疗和/或控制与IL-9介导的细胞过度增殖有关的非癌疾病(即没有转移潜能的疾病)的一种或多种症状的方法，所述过度增殖的细胞特别是上皮细胞(如哮喘、COPD、肺纤维化、支气管高反应性、牛皮癣、淋巴增殖性疾病和脂溢性皮炎)和内皮细胞(如再狭窄、过度增殖性血管病、贝切特综合征、动脉粥样硬化和黄斑变性)，所述方法包括给予需要的对象有效量的一种或多种本发明抗体。本发明也提供预防、治疗和/或控制与IL-9介导的细胞过度增殖有关的非癌疾病的方法，所述方法包括给予需要的对象有效量的一种或多种本发明抗体和有效量的一种或多种其它治疗(例如，一种或多种预防剂或治疗剂)，该其它治疗不是用于预防、治疗和/或控制所述疾病的本发明抗体。

本发明提供在用常规治疗难以治疗的对象中预防、治疗和/或控制与IL-9介导的细胞过度增殖有关的非癌疾病的一种或多种症状的方法，所述方法包括给予该对象有效量的一种或多种本发明抗体、组合物或联合治疗。在某些实施方式中，当过度增殖未被消除和/或症状未见缓解时，称与IL-9介导的细胞过度增殖有关的非癌疾病的患者难以治疗。可以利用本领域接受的“难治”的涵义，通过本领域已知的测定治疗对非癌性过度增殖疾病有效性的任何方法，在体内或体外确定某患者是否“难治”。在各种实施方式中，当患者的IL-9水平保持异常和/或如果细胞增殖未见降低时，称与IL-9介导的细胞过度增殖有关的非癌疾病患者难治。本发明也提供在用常规治疗难治的对象中预防、治疗和/或控制与IL-9介导的细胞过度增殖有关的非癌疾病的方法，所述方法包括给予需要的对象有效量的一种或多种本发明抗体制剂和有效量的一种或多种其它治疗(例如，一种或多种预防剂或治疗剂)，该其它治疗不是用于预防、治疗和/或控制所述疾病的本发明抗体制剂。

在一个具体实施方式中，将有效量的一种或多种本发明抗体与有效量的含有抗体(包括其抗体片段)(如4D4、4D4 H2-1 D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4)的本发明液体制剂联合给予处于增殖性疾病风险中或患有增殖性疾病的对象。本发明液体抗体制剂或本发明联合治疗可用作当第一次、第二次、第三次、第四次或第五次治疗来预防、治疗和/或控制增殖性疾病或其一种或多种症状。本发明也包括在正在治疗其它疾病或失调的患者中预防、治疗和/或控制增殖性疾病或其一种或多种症状的方法。本发明包括在对本发明抗体以外的治疗产生任何不良反应或不耐受之前，在患者中预防、治疗和/或控制增殖性疾病或其一种或多种症状的方法。本发明也包括在易于对常规治疗产生不良反应的患者中预防、治疗和/或控制增殖性疾病或其症状的方法。

本发明包括在已证明用本发明抗体、组合物或联合治疗以外的治疗难治的患者中预防、治疗和/或控制增殖性疾病或其症状的方法。在某些实施方式中，当增殖性疾病未被消除和/或症状未见缓解时，该增殖性疾病患者难以治疗。可以利用本领域接受的“难治”的涵义，通过本领域已知的测定治疗对增殖性疾病有效性的任何方法，在体内或体外确定某患者是否“难治”。在各种实施方式中，当患者的IL-9水平保持异常和/或细胞增殖未见降低时，称该增殖性疾病患者难治。

本发明提供作为其它常规治疗的替代方案的预防、治疗和/或控制增殖性疾病或其一种或多种症状的方法。在具体实施方式中，按照本发明方法控制或治疗的患者是用其它治疗难治的或用其它治疗易于产生不良反应的患者。该患者可以是免疫***抑制的人(如术后患者、化疗患者和免疫缺陷疾病患者)，肾功能或肝功能受损的人、老年人、儿童、婴儿、患有神经精神病的人或服用精神药物的人、有癫痫病史的人或正在接受与控制或治疗增殖性疾病的常规药物有冲突的药物治疗的人。

预防、治疗和/或控制增殖性疾病或其一种或多种症状的治疗以及治疗的剂量、给药途径和推荐用法是本领域已知的，参见例如《医师案头参考》(Physicians’Desk Reference)(第60版，2006)。

5.5.3.炎性疾病治疗

可将本发明液体制剂给予需要的对象，以预防、治疗和/或控制炎性疾病(如哮喘)或者其一种或多种症状。本发明液体制剂也可与一种或多种其它治疗，优选预防、治疗和/或控制炎性疾病的治疗(包括但不限于下述章节5.5.3.1所列的预防剂或治疗剂)联合给予需要的对象，以预防、治疗和/或控制炎性疾病或其一种或多种症状。在一个具体实施方式中，本发明提供一种预防、治疗和/或控制炎性疾病或其一种或多种症状的方法，所述方法包括给予需要的对象一剂预防或治疗有效量的本发明液体制剂。在另一实施方式中，本发明提供一种预防、治疗和/或控制炎性疾病或其一种或多种症状的方法，所述方法包括给予需要的对象一剂预防或治疗有效量的本发明液体制剂和一剂预防或治疗有效量的一种或多种治疗(例如，除免疫特异性结合IL-9多肽的抗体(包括其抗体片段)以外的预防剂或治疗剂)。

本发明提供在用常规治疗(如甲氨蝶呤和TNF-α拮抗剂(如REMICADE^TM或ENBREL^TM))难以治疗的对象中预防、治疗和/或控制炎性疾病的一种或多种症状的方法，所述方法包括给予所述对象一剂预防或治疗有效量的本发明液体制剂。本发明也提供在用炎性疾病的现有单一药物治疗难以治疗的对象中预防、治疗和/或控制该炎性疾病的一种或多种症状的方法，所述方法包括给予所述对象一剂预防或治疗有效量的本发明液体制剂和一剂预防或治疗有效量的治疗(如预防剂或治疗剂)，所述一种或多种治疗是除免疫特异性结合IL-9多肽的抗体(包括其抗体片段)以外的治疗。本发明也提供控制或治疗炎性疾病的方法，即将本发明液体制剂与任何其它治疗联合给予已证明用其它治疗难治且不再进行这些治疗的患者。本发明也提供在其它治疗对所治疗对象毒性太大或可能毒性太大，即导致无法接受或无法承担的副作用时治疗炎性疾病的替代方法。例如，可将本发明液体制剂给予对象，其中所述对象用TNF拮抗剂或氨甲喋呤难治。本发明还提供在已经得到治疗且没有活动疾病的患者中通过给予本发明液体制剂防止炎性疾病复发的方法。

可用本发明方法治疗的炎性疾病包括但不限于：哮喘、脑炎、炎性肠病、慢性阻塞性肺病(COPD)、变应性疾病、感染性休克、肺纤维化、未分化脊椎关节病、未分化关节病、关节炎、骨关节炎、脊椎关节病(如银屑病关节炎、强直性脊柱炎、莱特尔综合征(活动性关节炎)、炎性骨质溶解、威尔逊病和慢性病毒或细菌感染引起的慢性炎症。如本文章节5.5.4.1所述，一些自身免疫性疾病与炎性病症相关联。

本领域了解抗炎治疗和其剂量、给药途径和推荐用法，这类文献包括例如《医师案头参考》(Physician’s Desk Reference)(第60版，2006)。

5.5.3.1.抗炎治疗

本发明提供预防、治疗和/或控制炎性疾病或其一种或多种症状的方法，所述方法包括给予需要的对象本发明液体制剂和一种或多种除免疫特异性结合IL-9多肽的抗体(包括其抗体片段)以外的治疗(如预防剂或治疗剂)。已知可用于、已用于或正用于预防、治疗和/或控制炎性疾病或其一种或多种症状的任何药剂或治疗可与本文所述的本发明液体制剂联用。

包括本领域技术人员熟知用于治疗炎性疾病的药剂在内的任何消炎剂均可用于本发明组合物和方法中。消炎剂的非限制性例子包括非甾体消炎药(NSAID)，甾体消炎药，抗胆碱能药(如，硫酸阿托品、甲基硝酸阿托品和异丙托溴铵(ATROVENT^TM))、β2-激动剂(如，阿布特罗(abuterol)(VENTOLIN^TM和PROVENTIL^TM)、比托特罗(TORNALATE^TM)、左沙丁胺醇(XOPONEX^TM)、奥西那林(ALUPENT^TM)、吡布特罗(MAXAIR^TM)、特布他林(BRETHAIRE^TM和BRETHINE^TM)、沙丁胺醇(PROVENTIL^TM、REPETABS^TM和VOLMAX^TM)、福莫特罗(FORADILAEROLIZER^TM)和沙美特罗(SEREVENT^TM和SEREVENTDISKUS^TM))和甲基黄嘌呤(如茶碱(UNIPHYL^TM、THEO-DUR^TM、SLO-BID^TM和TEHO-42^TM))。NSAID的例子包括但不限于：阿司匹林、布洛芬、塞来考昔(CELEBREX^TM)、双氯芬酸(VOLTAREN^TM)、依托度酸(LODINE^TM)、非诺洛芬(NALFON^TM)、吲哚美辛(INDOCIN^TM)、酮咯酸(ketoralac)(TORADOL^TM)、奥沙普秦(DAYPRO^TM)、萘丁美酮(RELAFEN^TM)、舒林酸(CLINORIL^TM)、托马酸(tolmentin)(TOLECTIN^TM)、罗非考昔(VIOXX^TM)、萘普生(ALEVE^TM、NAPROSYN^TM)、酮洛芬(ACTRON^TM)和萘丁美酮(RELAFEN^TM)。这类NSAID通过抑制环加氧酶(如COX-1和/或COX-2)起作用。甾体消炎药的例子包括但不限于：糖皮质激素类、***(DECADRON^TM)、皮质类固醇(如甲泼尼龙(MEDROL^TM))、可的松、氢化可的松、***(PREDNISONE^TM和DELTASONE^TM)、***龙(PRELONE^TM和PEDIAPRED^TM)、曲安西龙、柳氮磺吡啶和类花生酸的抑制剂(如***素、血栓烷和白三烯(白三烯的非限制性例子和这类药剂的典型剂量参见下表2))。

在一个具体实施方式中，将有效量的一种或多种本发明抗体和有效量的维他辛^TM(米迪缪尼公司，国际公开号WO 00/78815，国际公开号WO 02/070007A1，2002年9月12日，题为“通过给予整联蛋白α_vβ₃拮抗剂预防或治疗炎性疾病或自身免疫性疾病的方法”(Methods of Preventing or Treating Inflammatoryor Autoimmune Disorders by Administering Integrin AlphaV Beta3 Antagonists)，国际公开号WO 03/075957A1，2003年9月18日，题为“整联蛋白α_vβ₃拮抗剂与其它药剂联合用药以预防或治疗癌症”(The Prevention or Treatment of CancerUsing Integrin AlphaVBeta3Antagonists in Combination With Other Agents)，美国专利公开号US 2002/0168360A1，2002年11月14日，题为“通过联合给予整联蛋白α_vβ₃拮抗剂和其它预防剂或治疗剂预防或治疗炎性疾病或自身免疫性疾病的方法”(Methods of Preventing or Treating Inflammatory or AutoimmuneDisorders by Administering Integrin α_vβ₃ Antagonists in Combination With OtherProphylactic or Therapeutic Agents)和国际公开号WO 03/075741A2，2003年9月18日，题为“通过联合给予整联蛋白α_vβ₃拮抗剂和HMG-CoA还原酶抑制剂或二膦酸盐预防或治疗疾病的方法”(Methods of Preventing or TreatingDisorders by Administering an Integrin α_vβ₃ Antagonist in Combination With anHMG-CoA Reductase Inhibitor or a Bisphosphonate)，通过引用将其全文纳入本文)联合给予对象，以预防、治疗和/或控制炎性疾病或其一种或多种症状。在另一实施方式中，将有效量的一种或多种本发明抗体与有效量的西利珠单抗(米迪缪尼公司，国际公开号WO 02/069904)联合给予对象，以预防、治疗和/或控制炎性疾病或其一种或多种症状。在另一实施方式中，将有效量的一种或多种本发明抗体与有效量的一种或多种EphA2抑制剂(如，一种或多种抗-EphA2抗体(米迪缪尼公司；国际公开号WO 02/102974A4，2002年12月27日，题为“突变蛋白、高效抑制性抗体和FIMCH晶体结构”(Mutant Proteins，HighPotency Inhibitory Antibodies and FIMCH Crystal Structure)，国际公开号03/094859 A2，2003年11月20日，题为“EphA2单克隆抗体和其使用方法”(EphA2 Monoclonal Antibodies and Methods of Use Thereof)，美国申请号10/436,783和美国专利公开号US 2004/0091486A1；以及美国申请号10/994,129和美国专利公开号US 2005/0152899A1，通过引用将其全文纳入本文))联合给予对象，以预防、治疗和/或控制炎性疾病或其一种或多种症状。在另一优选实施方式中，将有效量的一种或多种本发明抗体与有效量的维他辛^TM、西利珠单抗和/或EphA2抑制剂联合给予对象，以预防、治疗和/或控制炎性疾病或其一种或多种症状。

在一个实施方式中，将有效量的一种或多种本发明抗体制剂与肥大细胞蛋白酶抑制剂联合给予处于炎性疾病风险中的或患有炎性疾病的对象。在另一实施方式中，所述肥大细胞蛋白酶抑制剂是类胰蛋白酶激酶抑制剂，例如但不限于：GW-45、GW-58和染料木素。在一个具体实施方式中，所述肥大细胞蛋白酶抑制剂是磷脂酰肌醇-3’(PI3)-激酶抑制剂，例如但不限于：卡弗他丁C。在另一实施方式中，所述肥大细胞蛋白酶抑制剂是蛋白激酶抑制剂，例如但不限于星孢素。按照本实施方式，所述肥大细胞蛋白酶抑制剂优选局部给予病患区域。

可与本发明液体制剂联合给予炎性疾病患者的免疫调节剂的具体例子包括但不限于：甲氨蝶呤、来氟米特、环磷酰胺、环磷酰胺、依木兰、环孢霉素A、二甲胺四环素、硫唑嘌呤、抗生素(如FK506(他克莫司))、甲泼尼龙(MP)、皮质类固醇、类固醇、麦考酚酸吗乙酯、雷帕霉素(西罗莫司)、咪唑立宾、脱氧精胍菌素、布喹那、丙二腈酰胺(如来氟米特(leflunamide))、抗-T细胞受体抗体(例如，抗-CD4抗体(如cM-T412(波林格公司)、IDEC

(IDEC和SKB)、mAB4162W94、奥索克隆和OKTcdr4a(JC公司))、抗-CD3抗体(如努为昂(产品设计实验室)、OKT3(强生公司)或利妥昔(IDEC))、抗-CD5抗体(如抗-CD5蓖麻毒蛋白-连接的免疫偶联物)、抗-CD7抗体(如CHH-380(诺华公司))、抗-CD8抗体、抗CD40配体单克隆抗体(如IDEC-131(IDEC))、抗-CD52抗体(如坎帕斯1H(Ilex))、抗-CD2抗体(如MEDI-507(米迪缪尼公司，国际公开号WO02/098370和WO 02/069904)、抗-CD11a抗体(如仙耐林(基因泰克公司))和抗-B7抗体(如IDEC-114)(IDEC))；抗-细胞因子受体抗体(如抗-IFN受体抗体、抗-IL-2受体抗体(如Zenapax(蛋白质设计实验室))、抗-IL-4受体抗体、抗-IL-6受体抗体、抗-IL-10受体抗体和抗-IL-12受体抗体)、抗-细胞因子抗体(如抗-IFN抗体、抗-TNF-α抗体、抗-IL-1β抗体、抗-IL-6抗体、抗-IL-8抗体(如ABX-IL-8(阿布基尼克斯公司))和抗-IL-12抗体))；CTLA4-免疫球蛋白；LFA-3TIP(百集公司，国际公开号WO93/08656和美国专利号6,162,432)；可溶性细胞因子受体(如TNF-α受体的胞外结构域或其片段、IL-1β受体的胞外结构域或其片段和IL-6受体的胞外结构域或其片段)；细胞因子或其片段(如白介素(IL)-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-11、IL-12、IL-15、TNF-α、TNF-β、干扰素(IFN)-α、IFN-β、IFN-γ和GM-CSF)；和抗-细胞因子抗体(如抗-IL-2抗体、抗-IL-4抗体、抗-IL-6抗体、抗-IL-10抗体、抗-IL-12抗体、抗-IL-15抗体、抗-TNF-α抗体和抗-IFN-γ抗体)。

本领域技术人员熟知的任何TNF-α拮抗剂均可用于本发明组合物和方法。可与本发明液体制剂联合给予炎性疾病患者的TNF-α拮抗剂的非限制性例子包括阻断、降低、抑制或中和TNF-α的功能、活性和/或表达的蛋白质、多肽、肽、融合蛋白、抗体(如，人、人源化、嵌合、单克隆、多克隆抗体，其Fv、ScFv、Fab片段、F(ab)₂片段和抗原结合片段)如免疫特异性结合TNF-α的抗体、核酸分子(如反义分子或三股螺旋)、有机分子、无机分子和小分子。在各种实施方式中，与对照如磷酸缓冲盐水(PBS)相比，TNF-α拮抗剂将TNF-α的功能、活性和/或表达降低至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％。免疫特异性结合TNF-α的抗体的例子包括但不限于：英利昔单抗(REMICADE^TM；森托克公司(Centacor))、D2E7(新泽西州奥利夫山的艾伯特实验室/诺尔制药(Abbott Laboratories/Knoll Pharmaceuticals Co.，Mt.Olive，N.J.))、CDP571(也称为HUMICADE^TM)和CDP-870(均来自英国斯劳的塞尔泰克/法玛西亚(Celltech/Pharmacia，Slough，U.K.))和TN3-19.12(Williams等，1994，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 91：2762-2766；Thorbecke等，1992，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 89：7375-7379)。本发明也包括将以下美国专利公开的免疫特异性结合TNT-α的抗体用于本发明组合物和方法：5,136,021；5,147,638；5,223,395；5,231,024；5,334,380；5,360,716；5,426,181；5,436,154；5,610,279；5,644,034；5,656,272；5,658,746；5,698,195；5,736,138；5,741,488；5,808,029；5,919,452；5,958,412；5,959,087；5,968,741；5,994,510；6,036,978；6,114,517；和6,171,787；通过引用全文纳入本文。可溶性TNF-α受体的例子包括但不限于：sTNF-R1(安进公司(Amgen))，依那西普(ENBREL^TM；因缪尼克斯公司(Immunex))和其大鼠同系物RENBREL^TM，衍生自TNFrI、TNFrII的TNF-α的可溶性抑制剂(Kohno等，1990，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 87：8331-8335)和TNF-αInh(Seckinger等，1990，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 87：5188-5192)。

本发明包括的其它TNF-α拮抗剂包括但不限于：已知能通过干扰素γ-活化的巨噬细胞阻断TNF-α生产的IL-10(Oswald等，1992，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 89：8676-8680)，TNFR-IgG(Ashkenazi等，1991，Proc.Natl.Acad.Sci.USA88：10535-10539)、鼠产物TBP-1(SY公司(Serono/Yeda))、疫苗CytoTAb(普罗塞里公司(Protherics))、反义分子104838(ISIS)、肽RDP-58(SS公司(SangStat))、沙利度胺(塞尔基公司(Celgene))、CDC-801(塞尔基公司)、DPC-333(杜邦公司(Dupont))、VX-745(富泰克斯公司(Vertex))、AGIX-4207(AG公司(AtheroGenics))、ITF-2357(伊塔法马克公司(Italfarmaco))、NPI-13021-31(海神公司(Nereus))、SCIO-469(斯奥斯公司(Scios))、TACE靶点(targeter)(因缪尼克斯(Immunix)/AHP)、CLX-120500(开里克斯(Calyx))、噻唑比林(Thiazolopyrim)(代纳法克斯公司(Dynavax))、金诺芬(Ridaura)(史可必成制药公司(SmithKline Beecham Pharmaceuticals))、喹纳克林(二氯水合米帕林(mepacrinedichlorohydrate))、替尼达普(因纳莱克斯公司(Enablex))、黑素(大规模生物制品公司(Large Scale Biological))和尤里亚齐公司的抗-p38 MAPK药剂。

可与本发明液体制剂联合给予炎性疾病患者的消炎剂的非限制性例子包括非甾体消炎药(NSAID)、甾体消炎药、β-激动剂、抗胆碱能药和甲基黄嘌呤。NSAID的例子包括但不限于：阿司匹林、布洛芬、塞来考昔(CELEBREX^TM)、双氯芬酸(VOLTAREN^TM)、依托度酸(LODINE^TM)、非诺洛芬(NALFON^TM)、吲哚美辛(INDOCIN^TM)、酮咯酸(ketoralac)(TORADOL^TM)、奥沙普秦(DAYPRO^TM)、萘丁美酮(RELAFEN^TM)、舒林酸(CLINORIL^TM)、托马酸(tolmentin)(TOLECTIN^TM)、罗非考昔(VIOXX^TM)、萘普生(ALEVE^TM、NAPROSYN^TM)、酮洛芬(ACTRON^TM)和萘丁美酮(RELAFEN^TM)。这类NSAID通过抑制环加氧酶(如COX-1和/或COX-2)起作用。甾体抗炎药的例子包括但不限于：糖皮质激素类、***(DECADRON^TM)、可的松、氢化可的松、氯***(DELTASONE^TM)、***龙、曲安西龙、柳氮磺吡啶和类花生酸，如***素、血栓烷和白三烯。

在具体实施方式中，将预防或治疗有效量的本发明液体制剂与用于预防、治疗和/或控制骨关节炎的其它药剂或治疗联合给予骨关节炎患者，所述其它药剂或治疗包括但不限于：镇痛药(非限制性例子是对乙酰氨基酚，剂量高达4000mg/d；非那西丁；曲马多，每天剂量范围是200至300mg)；NSAID(非限制性例子包括但不限于：阿司匹林、二氟尼柳、双氯芬酸、依托度酸、灭酸酯类、非诺洛芬、氟比洛芬、布洛芬、吲哚美辛、酮洛芬、甲基水杨酸酯、萘丁美酮、萘普生、哌拉嗪、保泰松、吡罗昔康、舒林酸和托美丁。优选低剂量NSAID，例如，1200mg/d布洛芬，500mg/d萘普生。胃保护剂，如米索前列醇、法莫替丁或奥美拉唑优选与NSAID同时使用；非乙酰化的水杨酸酯包括但不限于双水杨酯；环加氧酶(Cox)-2-特异性抑制剂(CSI)包括但不限于塞来考昔和罗非考昔；关节内或关节周注射长效糖皮质激素制剂；关节内注射透明质酸；辣椒碱乳膏；对骨关节炎膝盖进行充分灌洗(copious irrigation)以冲出纤维蛋白、软骨碎片和其它碎片；和关节置换术。本发明液体制剂也可与预防、治疗和/或控制骨关节炎的其它非药理手段联合使用，这些手段包括但不限于：降低关节负载(非限制性例子是纠正不良姿势、支撑腰椎前凸过度、避免受损关节的负载过大、避免长时间站立、跪和蹲)；对患病关节加热；有氧锻炼和其它物理治疗。

在具体实施方式中，将预防或治疗有效量的本发明液体制剂与用于预防、治疗和/或控制类风湿性关节炎的其它药剂或治疗联合给予类风湿性关节炎患者，所述其它药剂或治疗包括但不限于：NSAID(非限制性例子包括但不限于：阿司匹林、二氟尼柳、双氯芬酸、依托度酸、灭酸酯类、非诺洛芬、氟比洛芬、布洛芬、吲哚美辛、酮洛芬、甲基水杨酸酯、萘丁美酮、萘普生、哌拉嗪、保泰松、吡罗昔康、舒林酸和托美丁)；镇痛药(非限制性例子是对乙酰氨基酚、非那西丁和曲马多)；CSI，包括但不限于：塞来考昔和罗非考昔；糖皮质激素类(优选低剂量口服糖皮质激素、如＜7.5mg/d***、或每月脉冲给予高剂量糖皮质激素类、或关节内糖皮质激素)；疾病调理性抗风湿药(DMARD)，包括但不限于：氨甲喋呤(优选给定间歇性低剂量、如7.5-30mg每周一次)、金化合物(如金盐)、D-青霉胺、抗疟药(如氯喹)和柳氮磺吡啶；TNF-α中和剂，包括但不限于：依那西普和英利昔单抗；免疫抑制剂和细胞毒剂(例子包括但不限于：硫唑嘌呤、来氟米特、环孢霉素和环磷酰胺)和手术(例子包括但不限于：关节成形术、全关节置换术、手重建术、开放或关节内镜滑膜切除术和手腕早期腱鞘切除术)。本发明液体制剂也可与其它手段联合使用，以预防、治疗和/或控制类风湿性关节炎，所述其它手段包括但不限于：静养，用夹板固定法减少发炎关节的不必要活动，锻炼，用多种矫正和辅助装置，以及其它物理治疗。本发明液体制剂也可与预防、治疗和/或控制类风湿性关节炎的一些非传统方法联合使用，这些非传统方法包括但不限于：饮食(例如，用某些食用鱼油中发现的ω-3脂肪酸如二十碳五烯酸取代肉中的ω-6必需脂肪酸)、疫苗、激素和外用制剂。

在具体实施方式中，将预防或治疗有效量的本发明液体制剂与用于预防、治疗和/或控制慢性阻塞性肺病(COPD)的其它药剂或治疗联合给予COPD患者，所述其它药剂或治疗包括但不限于：支气管扩张药，包括但不限于：短效和长效β₂-肾上腺素能激动剂(短效β₂激动剂的例子包括但不限于：沙丁胺醇、吡布特罗、特布他林和奥西那林；长效β₂激动剂的例子包括但不限于：口服缓释沙丁胺醇和吸入沙美特罗)，抗胆碱能药(例子包括但不限于：异丙托溴铵)以及茶碱和其衍生物(茶碱的治疗范围优选为10-20μg/mL)；糖皮质激素类；外源性α₁AT(如，静脉内给予衍生自人血浆集合的α₁AT，每周剂量为60mg/kg)；氧气；肺移植；肺减容积手术；气管内插管、辅助呼吸；每年接种流感疫苗和肺炎球菌疫苗(23-价多醣)；锻炼；和戒烟。

在具体实施方式中，将预防或治疗有效量的本发明液体制剂与有效量的用于治疗肺纤维化的一种或多种其它药剂联合给予肺纤维化患者，所述其它药剂包括但不限于：氧气；皮质类固醇(非限制性例子是每天给予***，从1-1.5mg/kg/d开始(至多100mg/d)，给药6周，用3-6个月逐步降低到最低维持剂量0.25mg/kg/d)；细胞毒性药物(非限制性例子是环磷酰胺，每天口服一次100-120mg；硫唑嘌呤，每天口服一次3mg/kg，至多200mg)；支气管扩张药(非限制性例子是短效和长效β₂-肾上腺素能激动剂、抗胆碱能药和茶碱及其衍生物)；和抗组胺剂(非限制性例子是苯海拉明和多西拉敏)。

在具体实施方式中，将预防或治疗有效量的本发明液体制剂与有效量的用于治疗哮喘的一种或多种其它药剂联合给予哮喘患者。这类药剂的非限制性例子包括肾上腺素能刺激剂(如邻苯二酚胺(如肾上腺素、异丙肾上腺素和乙基异丙肾上腺素)、间苯二酚(如奥西那林、特布他林和非诺特罗)和水杨醇(如沙丁胺醇))、肾上腺类皮质激素、糖皮质激素、皮质类固醇(如倍氯米松(beclomethadonse)、布***、氟尼缩松、氟替卡松、曲安西龙、甲泼尼龙、***龙和***)、其它类固醇、β2-激动剂(如沙丁胺醇(albtuerol)、比托特罗、非诺特罗、乙基异丙肾上腺素、奥西那林、吡布特罗、沙丁胺醇、特布他林、福莫特罗、沙美特罗和沙丁胺醇(albutamol)特布他林)、抗-胆碱能药(如异丙托溴铵和氧托溴铵)、IL-4拮抗剂(包括抗体)、IL-5拮抗剂(包括抗体)、IL-13拮抗剂(包括抗体)、PDE4-抑制剂、NF-κ-β抑制剂、VLA-4抑制剂、CpG、抗-CD23、选择素拮抗剂(TBC1269)、肥大细胞蛋白酶抑制剂(如类胰蛋白酶激酶抑制剂(如GW-45、GW-58和染料木素)、磷脂酰肌醇-3’(PI3)-激酶抑制剂(如卡弗他丁C)和其它激酶抑制剂(如星孢素)(参见Temkin等，2002J Immunol 169(5)：2662-2669；Vosseller等，1997 Mol.Biol.Cell 8(5)：909-922；和Nagai等，1995BiochemBiophys Res Commun 208(2)：576-581))、C3受体拮抗剂(包括抗体)、免疫抑制剂(如甲氨蝶呤和金盐)、肥大细胞调节剂(如色甘酸钠(INTAL^TM)和奈多罗米钠(TILADE^TM))和溶粘蛋白剂(如乙酰基半胱氨酸))。在一个具体实施方式中，消炎剂是白三烯抑制剂(如孟鲁司特(SINGULAIR^TM)、扎鲁司特(ACCOLATE^TM)、普仑司特(ONON^TM)或齐留通(ZYFLO^TM)(参见表5))。

表5：喁语治疗哮喘的白三烯抑制剂。

白三烯改性剂	通常每日剂量
白三烯改性剂	通常每日剂量	孟鲁司特(SINGULAIR^TM)	2-5岁4mg6-15岁5mg15岁以上10mg
扎鲁司特(ACCOLATE^TM)	5-12岁10mg每日两次12岁以上20mg每日两次	孟鲁司特(SINGULAIR^TM)	2-5岁4mg6-15岁5mg15岁以上10mg
扎鲁司特(ACCOLATE^TM)	5-12岁10mg每日两次12岁以上20mg每日两次	普仑司特(ONON^TM)	仅在亚洲使用
齐留通(ZYFLO^TM)	12岁以上600mg每日四次	普仑司特(ONON^TM)	仅在亚洲使用

在具体实施方式中，将预防或治疗有效量的本发明液体制剂与有效量的用于治疗***反应的一种或多种其它药剂联合给予***反应患者。这类药剂的非限制性例子包括抗介导物药(例如抗组胺剂，抗组胺剂的非限制性例子和这类药剂的典型剂量参见下表6)、皮质类固醇、解充血药、拟交感神经药(如α-肾上腺素能和β-肾上腺素能药)、TNX901(Leung等，2003，N Engl J Med348(11)：986-993)、IgE拮抗剂(如抗体rhuMAb-E25奥马珠单抗(参见Finn等，2003J Allergy Clin Immuno 111(2)：278-284；Corren等，2003J Allergy ClinImmuno 111(1)：87-90；Busse和Neaville，2001 Curr Opin Allergy Clin Immuno1(1)：105-108；和Tang和Powell，2001，Eur J Pediatr 160(12)：696-704)、HMK-12和6HD5(参见Miyajima等，2202 Int Arch Allergy Immuno 128(1)：24-32)和mABHu-901(参见van Neerven等，2001Int Arch Allergy Immuno 124(1-3)：400)、茶碱和其衍生物、糖皮质激素类和免疫治疗(如，重复长期注射变应原、短期脱敏和毒液免疫治疗)。

表6：H₁抗组胺剂

化学类型和代表性药物	通常每日剂量
化学类型和代表性药物	通常每日剂量	乙醇胺苯海拉明氯马斯汀	每4-6小时25-50mg每12小时0.34-2.68mg
乙二胺曲吡那敏	每4-6小时25-50mg	乙醇胺苯海拉明氯马斯汀	每4-6小时25-50mg每12小时0.34-2.68mg
乙二胺曲吡那敏	每4-6小时25-50mg	烷基胺溴苯那敏氯苯那敏曲普利啶(1.25mg/5ml)	每4-6小时4mg；或每8-12小时8-12mgSR形式每4-6小时4mg；或每8-12小时8-12mgSR形式每4-6小时2.5mg
吩噻嗪异丙嗪	临睡前25mg	烷基胺溴苯那敏氯苯那敏曲普利啶(1.25mg/5ml)
吩噻嗪异丙嗪	临睡前25mg	哌嗪羟嗪	每6-8小时25mg
哌啶阿司咪唑(无镇静作用)阿扎他定西替利嗪赛庚啶非索非那定(无镇静作用)氯雷他定(无镇静作用)	10mg/d每12小时1-2mg10mg/d每6-8小时4mg每12小时60mg每24小时10mg	哌嗪羟嗪	每6-8小时25mg

5.5.4.自身免疫性疾病的治疗

可将本发明液体制剂给予需要的对象，以预防、治疗和/或控制自身免疫性疾病或者其一种或多种症状。本发明液体制剂也可与一种或多种其它治疗联合给予需要的对象，以预防、治疗和/或控制自身免疫性疾病或者其一种或多种症状，所述治疗优选用于预防、控制或治疗自身免疫性疾病的治疗(包括但不限于下述章节5.5.4.1所述的预防剂或治疗剂)。在一个具体实施方式中，本发明提供一种预防、治疗和/或控制自身免疫性疾病或其一种或多种症状的方法，所述方法包括给予需要的对象一剂预防或治疗有效量的本发明液体制剂。在另一实施方式中，本发明提供一种预防、治疗和/或控制自身免疫性疾病或其一种或多种症状的方法，所述方法包括给予需要的对象一剂预防或治疗有效量的本发明液体制剂和一剂预防或治疗有效量的一种或多种治疗(例如，除免疫特异性结合IL-9多肽的抗体(包括其抗体片段)以外的预防剂或治疗剂)。

本发明提供在用常规治疗难以治疗的对象中预防、治疗和/或控制自身免疫性疾病或其一种或多种症状的方法，所述方法包括给予所述对象一剂预防或治疗有效量的本发明液体制剂。本发明也提供在用自身免疫性疾病的现有单一药物治疗难以治疗的对象中预防、治疗和/或控制该自身免疫性疾病或其一种或多种症状的方法，所述方法包括给予所述对象一剂预防或治疗有效量的本发明液体制剂和一剂预防或治疗有效量的治疗(如预防剂或治疗剂)，所述一种或多种治疗是除免疫特异性结合IL-9多肽的抗体(包括其抗体片段)以外的治疗。本发明也提供预防、治疗和/或控制自身免疫性疾病或其一种或多种症状的方法，即将本发明液体制剂与任何其它治疗联合给予已证明用其它治疗难治且不再进行这些治疗的患者。本发明也提供在其它治疗对所治疗对象毒性太大或可能毒性太大，即导致无法接受或无法承担的副作用时控制或治疗自身免疫性疾病的替代方法。具体说，本发明提供在其它治疗难治的患者中控制或治疗自身免疫性疾病的替代方法。本发明还提供在已经得到治疗且没有活动疾病的患者中通过给予本发明液体制剂防止自身免疫性疾病复发的方法。

在自身免疫性疾病中，免疫***在没有需要抵抗的外来物质时引发免疫应答，机体正常的保护性免疫***因为错误地攻击自身而对自身组织产生损伤。有许多种不同的自身免疫性疾病，它们以不同方式影响机体。例如，多发性硬化个体中脑受影响，克罗恩氏病个体中消化道受影响，类风湿性关节炎个体中各个关节的滑膜、骨和软骨受影响。随着自身免疫性疾病进展，可能导致一种或多种机体组织类型被破坏、器官异常生长或器官功能改变。自身免疫性疾病可能只影响一个器官或组织类型，或是影响多个器官或组织。自身免疫性疾病通常所影响的器官和组织包括红细胞、血管、***、内分泌腺(如甲状腺或胰腺)、肌肉、关节和皮肤。可利用本发明方法治疗的自身免疫性疾病的例子包括但不限于：斑秃、强直性脊柱炎、抗磷脂综合征、自身免疫性艾迪森病、肾上腺的自身免疫性疾病、自身免疫性溶血性贫血、自身免疫肝炎、自身免疫性***和***、自身免疫性血小板减少、贝切特综合征、大疱型类天疱疮、心肌病、口炎性腹泻-皮炎、慢性疲劳免疫功能障碍综合征(CFIDS)、慢性炎性脱髓鞘多神经病、丘-施二氏综合征、疤痕性类天疱疮、CREST综合征、冷凝集素病、克罗恩病、盘状狼疮、特发性混合型冷球蛋白血症、纤维肌痛-纤维肌炎、肾小球肾炎、格拉夫斯病、格-巴二氏综合征、桥本甲状腺炎、特发性肺纤维化、特发性血小板减少性紫癜(ITP)、IgA神经病、青少年关节炎、扁平苔藓、红斑狼疮、美尼尔综合征、混合型***病、多发性硬化、1型或免疫介导的糖尿病、重症肌无力、寻常性天疱疮、恶性贫血、结节性多动脉炎、多软骨炎(polychrondritis)、多腺体综合征、风湿性多肌痛、多肌炎和皮肌炎、原发性无γ球蛋白血症、原发性胆汁性肝硬化、牛皮癣、牛皮癣关节炎、雷诺现象(Raynauld’s phenomenon)、莱特尔综合征、类风湿性关节炎、结节病、硬皮病、斯耶格伦综合征、全身肌强直综合征、***性红斑狼疮、红斑狼疮、高安动脉炎、暂时性动脉炎/巨细胞动脉炎、溃疡性结肠炎、葡萄膜炎、血管炎如疱疹样皮炎血管炎、白癜风和韦格纳肉芽肿病。

本领域了解自身免疫治疗和其剂量、给药途径和推荐用法，这类文献包括例如《医师案头参考》(Physician’s Desk Reference)(第60版，2006)。

5.5.4.1.自身免疫性疾病疗法

本发明提供预防、治疗和/或控制自身免疫性疾病或其一种或多种症状的方法，所述方法包括给予需要的对象本发明液体制剂和一种或多种除免疫特异性结合IL-9多肽的抗体(包括其抗体片段)以外的治疗(如预防剂或治疗剂)。已知可用于、已用于或正用于预防、治疗和/或控制自身免疫性疾病或其一种或多种症状的任何药剂或治疗可与本文所述的本发明液体制剂联用。这类药剂的例子包括但不限于：免疫调节剂、消炎剂和TNF-α拮抗剂。可与本发明液体制剂联用以预防、治疗和/或控制自身免疫性疾病的免疫调节剂、消炎剂和TNF-α拮抗剂的具体例子如上所述。

在具体实施方式中，将预防或治疗有效量的本发明液体制剂与用于预防、治疗和/或控制多发性硬化(MS)的其它药剂或治疗联合给予MS患者，所述其它药剂或治疗包括但不限于：IFN-β1b(Betaseron)(如，每隔一天皮下注射给予八百万国际单位(8.0MIU))；IFN-β1a(Avonex)(如，每周肌肉内注射一次6.0MIU)；乙酸格拉默(克帕松(Copaxone))(如，每天皮下注射给予20mg)；米托蒽醌(如，每三个月静脉内输注给予12mg/m²)；硫唑嘌呤(如，每天口服给予2-3mg/kg体重)；氨甲喋呤(如，每周口服给予一次7.5mg)；环磷酰胺；静脉内免疫球蛋白(如，每月给予0.15-0.2g/kg体重，至多2年)；糖皮质激素类；甲泼尼龙(如，以两个月一次为周期高剂量给药)；2-氯脱氧腺苷(克拉屈滨)；巴氯芬(如，分次给予15-80mg/d，或口服给予最高240mg/d的较高剂量，或通过留置导管鞘内注射)；盐酸环苯扎林(如，5-10mg每日两次或每日三次)；氯硝西泮(如，0.5-1.0mg每日三次，包括临睡前剂量)；盐酸可乐定(如，0.1-0.2mg tid，包括临睡前剂量)；卡马西平(如，分次给予100-1200mg/d，剂量递增)；加巴喷丁(如，300-3600mg/d)；苯妥英(如，300-400mg/d)；阿米替林(如，25-150mg/d)；巴氯芬(如10-80mg/d)；扑米酮(如，125-250mg每日两次或每日三次)；昂丹司琼(如4-8mg每日两次或每日三次)；异烟肼(如，最高1200mg，分次给予)；奥昔布宁(如，5mg每日两次或每日三次)；托特罗定(如，1-2mg每日两次)；丙胺太林(如，7.5-15mg每日四次)；氯贝胆碱(bethanecol)(如，10-50mg每日三次或每日四次)；盐酸特拉唑嗪(如，临睡前给予1-5mg)；柠檬酸昔多芬(如，50-100mg po prn)；金刚烷胺(如，100mg每日两次)；匹莫林(如，37.5mg每日两次)；高剂量维生素；乳清酸钙；更昔洛韦；抗生素；和血浆交换。

在具体实施方式中，将预防或治疗有效量的本发明液体制剂与用于预防、治疗和/或控制牛皮癣的其它药剂或治疗联合给予牛皮癣患者，所述其它药剂或治疗包括但不限于：外用类固醇乳膏或油膏剂；焦油(例子包括但不限于：Estar、Psorigel、Fototar乳膏，以及Nutraderm洗剂中的10％LCD或与曲安西龙0.1％乳膏直接混合)；阻塞(occlusion)；外用维生素D类似物(非限制性例子是卡泊三烯油膏剂)；紫外线；PUVA(补骨脂素和紫外线A照射)；氨甲喋呤(如，最高25mg每周一次，或者每周以12小时为间隔给予三次以便分开给药)；合成类视黄醇(非限制性例子是阿维A酯，如剂量0.5-1mg/kg/d)；免疫调节治疗(非限制性例子是环孢霉素)；柳氮磺吡啶(如，剂量为1g，每天三次)。

在具体实施方式中，将预防或治疗有效量的本发明液体制剂与用于预防、治疗和/或控制克罗恩病的其它药剂或治疗联合给予克罗恩病患者，所述其它药剂或治疗包括但不限于：止泻药(例如，洛哌丁胺2-4mg，至多每天4次；地芬诺酯和阿托品1片，至多每天4次；阿片酊剂8-15滴，至多每天4次；考来烯胺2-4g或考来替泊5g，每天一次或两次)、镇痉剂(例如，丙胺太林15mg、双环维林10-20mg或莨菪碱0.125mg，餐前服用)、5-氨基水杨酸药剂(如，柳氮磺吡啶1.5-2g，每天两次；美沙拉嗪

和其缓释形式

特别是高剂量给药，如

1g每天四次和

0.8-1.2g每天四次)、皮质类固醇、免疫调节药(如硫唑嘌呤(1-2mg/kg)、巯嘌呤(50-00mg)、环孢霉素和氨甲喋呤)、抗生素、TNF抑制剂(如英利昔单抗

)、免疫抑制剂(如他克莫司、麦考酚酸吗乙酯和沙利度胺)、抗炎细胞因子(如IL-10和IL-11)、营养治疗、以要素饮食进行肠道治疗(如维沃，服用4周)和胃肠道外全面营养。

在具体实施方式中，将预防或治疗有效量的本发明液体制剂与用于预防、治疗和/或控制红斑狼疮的其它药剂或治疗联合给予红斑狼疮患者，所述其它药剂或治疗包括但不限于：抗疟药(包括但不限于羟氯喹)；糖皮质激素类(例如，可采用低剂量、高剂量或高剂量静脉内脉冲疗法)；免疫抑制剂(包括但不限于：环磷酰胺、苯丁酸氮芥和硫唑嘌呤)；细胞毒剂(包括但不限于氨甲喋呤和麦考酚酸吗乙酯)；雄激素性类固醇(包括但不限于达那唑)；和抗凝血药(包括但不限于华法林)。

在一个具体实施方式中，将预防或治疗有效量的一种或多种本发明液体抗体制剂和有效量的维他辛^TM(米迪缪尼公司，国际公开号WO 00/78815，国际公开号WO 02/070007A1，2002年9月12日，题为“通过给予整联蛋白α_vβ₃拮抗剂预防或治疗炎性疾病或自身免疫性疾病的方法”(Methods of Preventing orTreating Inflammatory or Autoimmune Disorders by Administering IntegrinAlphaV Beta3 Antagonists)，国际公开号WO 03/075957 A1，2003年9月18日，题为“整联蛋白α_vβ₃拮抗剂与其它药剂联合用药以预防或治疗癌症”(ThePrevention or Treatment of Cancer Using Integrin AlphaVBeta3 Antagonists inCombination With Other Agents)，美国专利公开号US 2002/0168360A1，2002年11月14日，题为“通过联合给予整联蛋白α_vβ₃拮抗剂和其它预防剂或治疗剂预防或治疗炎性疾病或自身免疫性疾病的方法”(Methods of Preventing orTreating Inflammatory or Autoimmune Disorders by Administering Integrin α_vβ₃Antagonists in Combination With Other Prophylactic or Therapeutic Agents)和国际公开号WO 03/075741A2，2003年9月18日，题为“通过联合给予整联蛋白α_vβ₃拮抗剂和HMG-CoA还原酶抑制剂或二膦酸盐预防或治疗疾病的方法”(Methods of Preventing or Treating Disorders by Administering an Integrin α_vβ₃Antagonist in Combination With an HMG-CoA Reductase Inhibitor or aBisphosphonate)，通过引用将其全文纳入本文)联合给予对象，以预防、治疗和/或控制自身免疫性疾病或其一种或多种症状。在另一优选实施方式中，将有效量的一种或多种本发明抗体与有效量的西利珠单抗(米迪缪尼公司，国际公开号WO 02/069904)联合给予对象，以预防、治疗和/或控制自身免疫性疾病或其一种或多种症状。在另一实施方式中，将有效量的一种或多种本发明抗体与有效量的一种或多种EphA2抑制剂(如，一种或多种抗-EphA2抗体(米迪缪尼公司；国际公开号WO 02/102974 A4，2002年12月27日，题为“突变蛋白、高效抑制性抗体和FIMCH晶体结构”(Mutant Proteins，High Potency InhibitoryAntibodies and FIMCH Crystal Structure)，国际公开号03/094859 A2，2003年11月20日，题为“EphA2单克隆抗体和其使用方法”(EphA2 MonoclonalAntibodies and Methods of Use Thereof)，美国申请号10/436,783和美国专利公开号US 2004/0091486 A1；以及美国申请号10/994,129和美国专利公开号US2005/0152899 A1，通过引用将其全文纳入本文))联合给予对象，以预防、治疗和/或控制自身免疫性疾病或其一种或多种症状。在另一实施方式中，将有效量的一种或多种本发明抗体与有效量的维他辛^TM、西利珠单抗和/或EphA2抑制剂联合给予对象，以预防、治疗和/或控制自身免疫性疾病或其一种或多种症状。

本发明抗体制剂或本发明联合治疗可用作当第一次、第二次、第三次、第四次或第五次治疗来预防、治疗和/或控制自身免疫性疾病或其一种或多种症状。本发明也包括在正在治疗其它疾病或失调的患者中预防、治疗和/或控制自身免疫性疾病或其一种或多种症状的方法。本发明包括在对本发明抗体以外的治疗产生任何不良反应或不耐受之前，在患者中预防、治疗和/或控制自身免疫性疾病或其一种或多种症状的方法。本发明还包括在难治患者中预防、治疗和/或控制自身免疫性疾病或其症状的方法。本发明包括在已证明用本发明抗体、组合物或联合治疗以外的治疗难治的患者中预防、治疗和/或控制增殖性疾病或其症状的方法。可以利用本领域接受的“难治”的涵义，通过本领域已知的测定治疗对自身免疫性疾病有效性的任何方法，在体内或体外确定某患者是否“难治”。在某些实施方式中，不能预防、控制和/或缓解自身免疫性疾病的一种或多种症状时，称该自身免疫性疾病患者难以治疗。本发明也包括在易于对常规治疗产生不良反应的患者中预防、治疗和/或控制自身免疫性疾病或其症状的方法。

本发明包括作为其它常规治疗的替代方案的预防、治疗和/或控制自身免疫性疾病或其一种或多种症状的方法。在具体实施方式中，按照本发明方法控制或治疗的患者是用其它治疗难治的或用其它治疗易于产生不良反应的患者。患者可以是免疫***被抑制的人(如术后患者、化疗患者和免疫缺陷病患者、支气管-肺发育异常的患者、先天性心脏病患者、囊性纤维变性患者、获得性或先天性心脏病患者，以及患有感染的患者)、肾功能或肝功能受损的人、老年人、儿童、婴儿、早产婴儿、神经精神病患者或服用精神药物的人、有癫痫病史的人或正在接受与预防、治疗和/或控制病毒性呼吸道感染或其一种或多种症状的常规药物有冲突的药物治疗的人。

5.5.5.病毒感染

可将本发明的一种或多种抗体制剂给予对象，以预防、治疗和/或控制病毒感染或其一种或多种症状。可将一种或多种本发明抗体制剂与一种或多种用于预防、治疗和/或控制病毒感染的除本发明抗体制剂以外的其它治疗(如，一种或多种预防剂或治疗剂)联合给予易患或患有病毒感染，优选呼吸道病毒感染的对象。抗病毒剂的非限制性例子包括抑制和/或降低病毒与其受体的粘附、病毒向细胞内内化、病毒复制、或病毒由细胞释放的蛋白质、多肽、肽、融合蛋白、抗体、核酸分子、有机分子、无机分子和小分子。具体说，抗病毒剂包括但不限于：核苷类似物(例如，齐多夫定、阿昔洛韦、更昔洛韦、阿糖腺苷、碘苷、曲氟尿苷和利巴韦林)、膦甲酸、金刚烷胺、金刚乙胺、沙奎那韦、茚地那韦、利托那韦、α-干扰素和其它干扰素以及AZT。

在具体实施方式中，抗病毒剂是具有病毒抗原免疫特异性的免疫调节剂。本文所用术语“病毒抗原”包括但不限于：能够引发免疫应答的任何病毒肽、多肽和蛋白质(如HIVgp120、HIVnef、RSVF糖蛋白、RSVG糖蛋白、流感病毒神经氨酸酶、流感病毒血凝素、HTLVtax、单纯疱疹病毒糖蛋白(如gB、gC、gD和gE)和乙型肝炎表面抗原)。本发明中用于治疗病毒感染性疾病的抗体包括但不限于：以下致病性病毒的抗原的抗体，包括但不限于：腺病毒科(如哺乳动物腺病毒属和禽腺病毒属)、疱疹病毒科(如单纯疱疹病毒1、单纯疱疹病毒2、单纯疱疹病毒5和单纯疱疹病毒6)、光滑病毒科(如光滑病毒属、肠细菌噬菌体(phase)MS2、异轻小噬菌体属)、痘病毒科(如脊椎动物痘病毒亚科、副痘病毒属、禽痘病毒属、山羊痘病毒属、兔痘病毒属、猪痘病毒属、软疣痘病毒属和昆虫痘病毒亚科)、乳多空病毒科(如多瘤病毒属和***瘤病毒属)、副粘病毒科(如副粘病毒属、副流感病毒1、麻疹病毒病毒属(如麻疹病毒)、腮腺炎病毒属(如腮腺炎病毒)、肺病毒亚科(如肺病毒属、人呼吸道合胞病毒)和肺炎后病毒属(如禽肺病毒和人肺炎后病毒))、小核糖核酸病毒科(如肠道病毒属、鼻病毒属、肝病毒属(如人甲肝病毒)、心病毒属和***病毒属)、呼肠孤病毒科(如正呼肠孤病毒属、环状病毒属、轮状病毒属、质型多角体病毒属、斐济病毒属、植物呼肠病毒属和水稻病毒属)、逆转录病毒科(如哺乳动物B型逆转录病毒属、哺乳动物C型逆转录病毒属、禽C型逆转录病毒属、D型逆转录病毒类群、BLV-HTLV逆转录病毒属、慢病毒属(如人体免疫缺陷病毒1和人体免疫缺陷病毒2)、泡沫病毒属)、黄病毒科(如丙型肝炎病毒)、肝DNA病毒科(如乙型肝炎病毒属)、披膜病毒科(例如α病毒属(如辛德毕斯病毒属)和风疹病毒属(如风疹病毒))、弹状病毒科(如水疱病毒属、狂犬病病毒属、短暂热病毒属、质型弹状病毒属和核型弹状病毒属)、沙粒病毒科(如沙粒病毒、淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒、伊派病毒和拉沙病毒)和冠状病毒科(如冠状病毒属和环状病毒属)。

可用于治疗病毒感染性疾病的抗体的具体例子包括但不限于：PRO542(普罗基尼公司(Progenics))，它是用于治疗HIV感染的CD4融合抗体；Ostavir(加州蛋白质设计实验室公司(Protein Design Labs，Inc.，CA))，它是用于治疗乙型肝炎病毒的人抗体；和Protovir(加州蛋白质设计实验室公司)，它是用于治疗巨细胞病毒(CMV)的人源化IgG1抗体；和帕丽珠单抗(

米迪缪尼公司；国际公开号WO 02/43660)，它是用于治疗RSV的人源化抗体。

在一个具体实施方式中，用于本发明组合物和方法的抗病毒剂能抑制或减轻肺或呼吸道病毒感染、抑制或降低引起肺或呼吸道感染的病毒的复制、或者抑制或降低引起肺或呼吸道感染的病毒传播至其它细胞或对象。在另一优选实施方式中，用于本发明组合物和方法的抗病毒剂能抑制或减轻RSV、hMPV或PIV的感染，抑制或降低RSV、hMPV或PIV的复制，或者抑制或降低RSV、hMPV或PIV传播至其它细胞或对象。治疗RSV、hMPV和/或PIV感染的这类药剂和方法的例子包括但不限于：核苷类似物，如齐多夫定、阿昔洛韦、更昔洛韦、阿糖腺苷、碘苷、曲氟尿苷和利巴韦林，以及膦甲酸、金刚烷胺、金刚乙胺、沙奎那韦、茚地那韦、利托那韦和α-干扰素。参见2003年7月25日提交并公开为美国专利公开号US 2004/0096451 A1的美国专利申请号10/628,088，题为“用抗-RSV、抗-HMPV和抗-PIV抗体治疗和预防RSV、HMPV和PIV的方法(Methods of Treating and Preventing RSV，HMPV，and PIV UsingAnti-RSV，Anti-HMPV，and Anti-PIV Antibodies)”和2003年2月21日提交和公开为美国专利公开号US 2004/0005544A1的美国专利申请号10/371,122，通过引用全文纳入本文。

在优选实施方式中，病毒感染是RSV，抗-病毒抗原的抗体是免疫特异性结合RSV抗原的抗体。在某些实施方式中，抗-RSV-抗原的抗体免疫特异性结合A组RSV的RSV抗原。在其它实施方式中，抗-RSV-抗原的抗体免疫特异性结合B组RSV的RSV抗原。在其它实施方式中，抗体结合某一组RSV的抗原，并与其它组的类似抗原交叉反应。在具体实施方式中，抗-RSV-抗原抗体免疫特异性结合RSV核蛋白、RSV磷蛋白、RSV基质蛋白、RSV小疏水蛋白、RSV RNA-依赖性RNA聚合酶、RSV F蛋白和/或RSV G蛋白。在其它具体实施方式中，抗-RSV-抗原抗体结合于RSV核蛋白、RSV核衣壳蛋白、RSV磷蛋白、RSV基质蛋白、RSV粘附糖蛋白、RSV融合糖蛋白、RSV核衣壳蛋白、RSV基质蛋白、RSV小疏水蛋白、RSV RNA依赖性RNA聚合酶、RSV F蛋白、RSV L蛋白、RSV P蛋白和/或RSV G蛋白的等位基因变体。

应该认识到，本领域已知免疫特异性结合RSV抗原的抗体。例如，

(帕丽珠单抗)是人源化单克隆抗体，目前用于预防儿科患者的RSV感染。在一个具体实施方式中，本发明方法所用抗体是帕丽珠单抗或其抗体结合片段(如，含有帕丽珠单抗的一个或多个互补决定区(CDR)，优选可变区的片段)。帕丽珠单抗的氨基酸序列参见例如，Johnson等，1997，J.Infectious Disease176：1215-1224和美国专利号5,824,307和国际申请公开号WO 02/43660，题为“给予抗-RSV抗体进行预防和治疗的方法(Methods of Administering/DosingAnti-RSV Antibodies for Prophylaxis and Treatment)”，Young等，通过引用全文纳入本文。

本发明也可使用免疫特异性结合RSV抗原的一种或多种抗体或其抗原结合片段，其包含与FcRn受体的亲和力高于帕丽珠单抗Fc区的Fc区。这类抗体参见2001年12月12日提交的美国专利申请号10/020,354，通过引用全文纳入本文。另外，本发明可使用抗-RSV-抗原抗体A4B4；P12f2P12f4；P11d4；A1e9；A12a6；A13c4；A17d4；A4B4；1X-493L1；FR H3-3F4；M3H9；Y10H6；DG；AFFF；AFFF(1)；6H8；L1-7E5；L2-15B10；A13a11；A1h5；A4B4(1)；A4B4-F52S；或A4B4L1FR-S28R。这些抗体参见国际申请公开号WO02/43660，题为“给予抗RSV抗体进行预防和治疗的方法(Methods ofAdministering/Dosing Anti-RSV Antibodies for Prophylaxis and Treatment)”，Young等；和2003年7月25日提交并公开为美国专利公开号US 2004/0096451A1的美国专利申请号10/628,088，题为“用抗-RSV、抗-HMPV和抗-PIV抗体治疗和预防RSV、HMPV和PIV的方法(Methods of Treating and Preventing RSV，HMPV，and PIV Using Anti-RSV，Anti-HMPV，and Anti-PIV Antibodies)”，通过引用全文纳入本文。

在某些实施方式中，抗-RSV-抗原抗体是通过引用全文纳入本文的Young等的2000年11月28日提交的美国申请号09/724,531；2001年11月28日提交的09/996,288；和2001年11月28日提交并公开为美国专利公开号US2003/0091584A1的09/996,265，题目均为“给予抗RSV抗体进行预防和治疗的方法(Methods of Administering/Dosing Anti-RSV Antibodies for Prophylaxis andTreatment)”所述的抗-RSV-抗原抗体或其中所述方法制备的抗-RSV-抗原抗体。可用于本发明方法的稳定抗体制剂的制备方法和组成参见2002年6月14日提交的美国临时申请号60/388,921，和2003年5月7日提交并公开为美国专利公开号US 2004/0018200A1的美国专利申请号10/461,863，通过引用将其全文纳入本文。

本领域了解抗病毒治疗和其剂量、给药途径和推荐用法，这类文献包括例如《医师案头参考》(Physician’s Desk Reference)(第60版，2006)。有关呼吸道病毒感染的其它信息可参见《塞西医学教科书》(Cecil Textbook of Medicine)(第18版，1988)。

5.5.5.1.病毒感染的治疗

在一个具体实施方式中，本发明提供预防、治疗和/或控制病毒性呼吸道感染或其一种或多种症状的方法，所述方法包括给予需要的对象有效量的一种或多种本发明抗体制剂。在另一实施方式中，本发明提供一种预防、治疗和/或控制病毒性呼吸道感染或其一种或多种症状的方法，所述方法包括给予需要的对象有效量的一种或多种本发明抗体制剂和有效量的除本发明抗体制剂以外的一种或多种治疗(如，一种或多种预防剂或治疗剂)。

在某些实施方式中，将有效量的一种或多种本发明抗体制剂与有效量的一种或多种治疗(如，一种或多种预防剂或治疗剂)联合给予需要的对象，所述治疗正用于、已用于或已知可用于预防、治疗和/或控制病毒感染，如病毒性呼吸道感染，或其一种或多种症状。病毒感染，如病毒性呼吸道感染的治疗包括但不限于：抗病毒剂如金刚烷胺、奥塞米韦、利巴韦林、帕丽珠单抗(SYNAGIS^TM)和阿纳米韦(anamivir)。在某些实施方式中，将有效量的一种或多种本发明抗体制剂与一种或多种支持性手段联合给予需要的对象，以预防、治疗和/或控制病毒感染或其一种或多种症状。支持性手段的非限制性例子包括通过超声喷雾器对空气增湿、给予气雾化外消旋肾上腺素、口服***、静脉内液体、插管、解热剂(如布洛芬、对乙酰氨基酚)以及抗菌和/或抗真菌治疗(即，预防或治疗继发性细菌感染)。

可按照本发明方法预防、治疗和/或控制任何类型的病毒感染或者由病毒感染引起或与其相关的病症(如呼吸道病症)，所述方法包括单独或与有效量的另一治疗(如除本发明抗体制剂以外的预防剂或治疗剂)联合给予有效量的一种或多种本发明抗体制剂。引起病毒感染的病毒的例子包括但不限于：逆转录病毒(如I型和II型人T细胞淋巴营养性病毒(HTLV)以及人体免疫缺陷病毒(HIV))、疱疹病毒(如I型和II型单纯疱疹病毒(HSV)、EB病毒、HHV6-HHV8和巨细胞病毒)、沙粒病毒(如拉沙热病毒)、副粘病毒(如麻疹病毒、人呼吸道合胞病毒、腮腺炎病毒、hMPV和肺病毒)、腺病毒、布尼亚病毒(如汉他病毒)、冠状病毒、纤丝病毒(如埃博拉病毒)、黄病毒(如丙型肝炎病毒(HCV)、黄热病病毒和日本脑炎病毒)、肝DNA病毒(如乙型肝炎病毒(HBV))、正粘病毒(如A、B和C型流感病毒和PIV)、乳多空病毒(如***瘤病毒)、小核糖核酸病毒(如鼻病毒、肠道病毒和甲型肝炎病毒)、痘病毒、呼肠病毒(如轮状病毒)、披膜病毒(如风疹病毒)和弹状病毒(如狂犬病病毒)。对病毒感染的生物应答包括但不限于：IgE抗体水平升高、T细胞的增殖和/或浸润增加、B细胞的增殖和/或浸润增加、上皮增生和产生粘蛋白。在一个具体实施方式中，本发明也提供预防、治疗和/或控制病毒性呼吸道感染的方法，所述感染与普通感冒、病毒性咽炎、病毒性喉炎、病毒性哮吼、病毒性支气管炎、流感、副流感病毒(“PIV”)疾病(如哮吼、细支气管炎、支气管炎、肺炎)、呼吸道合胞病毒(“RSV”)疾病、肺炎后病毒疾病和腺病毒疾病(如发热性呼吸道疾病、哮吼、支气管炎、肺炎)有关或引起这些疾病，所述方法包括单独或与有效量的另一治疗联合给予有效量的一种或多种本发明抗体制剂。

在一个具体实施方式中，可按照本发明方法预防、治疗和/或控制流感病毒感染、PIV感染、hMPV感染、腺病毒感染和/或RSV感染，或其一种或多种症状。在一个具体实施方式中，本发明提供预防、治疗和/或控制RSV呼吸道感染或其一种或多种症状的方法，所述方法包括将有效量的一种或多种本发明抗体制剂单独或与一种或多种抗病毒剂联合给予需要的对象，所述抗病毒剂例如但不限于：金刚烷胺、金刚乙胺、奥塞米韦、扎那米韦、利巴韦林、RSV-IVIG(即静脉内免疫球蛋白分子输注)(RESPIGAM^TM)和帕丽珠单抗(SYNAGIS^TM)。在一个具体实施方式中，本发明提供预防、治疗和/或控制PIV感染或其一种或多种症状的方法，所述方法包括将有效量的一种或多种本发明抗体制剂单独或与有效量的一种或多种抗病毒剂联合给予需要的对象，所述抗病毒剂例如但不限于：金刚烷胺、金刚乙胺、奥塞米韦、扎那米韦、利巴韦林、RSV-IVIG(即静脉内免疫球蛋白分子输注)(RESPIGAM^TM)和帕丽珠单抗(SYNAGIS^TM)。在另一具体实施方式中，本发明提供预防、治疗和/或控制hMPV感染或其一种或多种症状的方法，所述方法包括将有效量的一种或多种本发明抗体制剂单独或与有效量的一种或多种抗病毒剂联合给予需要的对象，所述抗病毒剂例如但不限于：金刚烷胺、金刚乙胺、奥塞米韦、扎那米韦、利巴韦林、RSV-IVIG(即静脉内免疫球蛋白分子输注)(RESPIGAM^TM)和帕丽珠单抗(SYNAGIS^TM)。在一个具体实施方式中，本发明提供预防、治疗和/或控制流感的方法，所述方法包括将有效量的一种或多种本发明抗体制剂单独或与有效量的抗病毒剂联合给予需要的对象，所述抗病毒剂例如但不限于：扎那米韦

奥塞米韦

金刚乙胺和金刚烷胺(

)。

本发明提供防止患有或曾患有病毒性呼吸道感染的对象发生哮喘的方法，所述方法包括单独或与有效量的另一治疗联合给予有效量的一种或多种本发明抗体制剂。在一个具体实施方式中，该对象是早产婴儿、婴儿或儿童。在另一具体实施方式中，该对象曾患有或患有RSV感染。

在一个具体实施方式中，本发明提供预防、治疗和/或控制原发性病毒感染的一种或多种继发性反应的方法，所述方法包括单独或与有效量的其它治疗(如其它预防剂或治疗剂)联合给予有效量的一种或多种本发明抗体制剂。原发性病毒感染，特别是原发性病毒性呼吸道感染的继发性反应的例子包括但不限于：对粘膜刺激的哮喘-样反应，总呼吸阻力升高，继发性病毒、细菌和真菌感染的易感性增加，以及发生诸如(但不限于)肺炎、哮吼和发热性支气管炎等病症。

在一个具体实施方式中，本发明提供预防、治疗和/或控制病毒感染或其一种或多种症状的方法，所述方法包括将有效量的一种或多种本发明抗体制剂和有效量的维他辛^TM(米迪缪尼公司，国际公开号WO 00/78815，国际公开号WO 02/070007A1，2002年9月12日，题为“通过给予整联蛋白α_vβ₃拮抗剂预防或治疗炎性疾病或自身免疫性疾病的方法”(Methods of Preventing or TreatingInflammatory or Autoimmune Disorders by Administering Integrin AlphaV Beta3Antagonists)，国际公开号WO 03/075957A1，2003年9月18日，题为“整联蛋白α_vβ₃拮抗剂与其它药剂联合用药以预防或治疗癌症”(The Prevention orTreatment of Cancer Using Integrin AlphaVBeta3 Antagonists in CombinationWith Other Agents)，美国专利公开号US 2002/0168360 A1，2002年11月14日，题为“通过联合给予整联蛋白α_vβ₃拮抗剂和其它预防剂或治疗剂预防或治疗炎性疾病或自身免疫性疾病的方法”(Methods of Preventing or TreatingInflammatory or Autoimmune Disorders by Administering Integrin α_vβ₃Antagonists in Combination With Other Prophylactic or Therapeutic Agents)和国际公开号WO 03/075741A2，2003年9月18日，题为“通过联合给予整联蛋白α_vβ₃拮抗剂和HMG-CoA还原酶抑制剂或二膦酸盐预防或治疗疾病的方法”(Methods of Preventing or Treating Disorders by Administering an Integrin α_vβ₃Antagonist in Combination With an HMG-CoA Reductase Inhibitor or aBisphosphonate)，通过引用将其全文纳入本文)联合给予需要的对象。在另一具体实施方式中，本发明提供预防、治疗和/或控制病毒感染或其一种或多种症状的方法，所述方法包括将有效量的一种或多种本发明抗体与有效量的西利珠单抗(米迪缪尼公司，国际公开号WO 02/069904)联合给予需要的对象。在另一实施方式中，本发明提供预防、治疗和/或控制病毒感染或其一种或多种症状的方法，所述方法包括将有效量的一种或多种本发明抗体与有效量的一种或多种EphA2抑制剂(如，一种或多种抗-EphA2抗体(米迪缪尼公司；国际公开号WO02/102974A4，2002年12月27日，题为“突变蛋白、高效抑制性抗体和FIMCH晶体结构”(Mutant Proteins，High Potency Inhibitory Antibodies and FIMCHCrystal Structure)，国际公开号03/094859A2，2003年11月20日，题为“EphA2单克隆抗体和其使用方法”(EphA2 Monoclonal Antibodies and Methods of UseThereof)，美国申请号10/436,783和美国专利公开号US 2004/0091486A1；以及美国申请号10/994,129和美国专利公开号US 2005/0152899A1，通过引用将其全文纳入本文))给予需要的对象。在又一实施方式中，本发明提供预防、治疗和/或控制病毒感染或其一种或多种症状的方法，所述方法包括将有效量的一种或多种本发明抗体与有效量的维他辛^TM、西利珠单抗和/或EphA2联合给予需要的对象。

在一个实施方式中，将有效量的一种或多种本发明抗体制剂与有效量的一种或多种抗IgE抗体联合给予对象，以预防、治疗和/或控制病毒感染或其一种或多种症状。在一个具体实施方式中，将有效量的一种或多种本发明抗体制剂与有效量的抗IgE抗体TNX901联合给予对象，以预防、治疗和/或控制病毒感染或其一种或多种症状。在一个具体实施方式中，将有效量的一种或多种本发明抗体制剂与有效量的抗IgE抗体rhuMAb-E25奥马佐单抗联合给予对象，以预防、治疗和/或控制病毒感染或其一种或多种症状。在另一实施方式中，将有效量的一种或多种本发明抗体制剂与有效量的抗IgE抗体HMK-12联合给予对象，以预防、治疗和/或控制病毒感染或其一种或多种症状。在一个具体实施方式中，将有效量的一种或多种本发明抗体制剂与有效量的抗IgE抗体6HD5联合给予对象，以预防、治疗和/或控制病毒感染或其一种或多种症状。在另一实施方式中，将有效量的一种或多种本发明抗体制剂与有效量的抗IgE抗体MAbHu-901联合给予对象，以预防、治疗和/或控制病毒感染或其一种或多种症状。

本发明包括在预计会发生病毒感染或发生这类感染的风险提高的患者，如免疫***被抑制的患者(如器官移植接受者、AIDS患者、正在接受化疗的患者、老年人、早产婴儿、婴儿、儿童、发生阻塞的食道癌患者、气管支气管瘘管患者，神经性疾病(如中风、肌萎缩侧索硬化、多发性硬化和肌病引起的疾病)患者和已经发生呼吸道感染的患者)中防止发生病毒感染，如病毒性呼吸道感染的方法。患者可能曾接受过或未曾接受过呼吸道感染治疗。

本发明抗体制剂或本发明联合治疗可用作当第一次、第二次、第三次、第四次或第五次治疗来预防、治疗和/或控制病毒感染，如病毒性呼吸道感染或其一种或多种症状。本发明也包括在正在治疗与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的其它疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状的患者中，预防、治疗和/或控制病毒感染，如病毒性呼吸道感染，或其一种或多种症状的方法。本发明包括在对本发明抗体制剂以外的治疗产生任何不良反应或不耐受之前，在患者中预防、治疗和/或控制病毒感染，如病毒性呼吸道感染或其一种或多种症状的方法。本发明还包括在难治患者中预防、治疗和/或控制病毒感染，如病毒性呼吸道感染或其症状的方法。在某些实施方式中，当感染未被明显消除和/或症状未见明显缓解时，称病毒感染，如病毒性呼吸道感染的患者难以治疗。可以利用本领域接受的“难治”的涵义，通过本领域已知的测定治疗对感染有效性的任何方法，在体内或体外确定某患者是否“难治”。在各种实施方式中，病毒复制未降低或升高时，认为该病毒性呼吸道感染患者难治。本发明也包括在处于发生病毒性呼吸道感染风险中的患者中，防止病毒性呼吸道感染发生或复发的方法。本发明也包括在易于对常规治疗产生不良反应的患者中预防、治疗和/或控制病毒感染，如病毒性呼吸道感染或其症状的方法。本发明还包括预防、治疗和/或控制无抗病毒治疗可用的病毒感染，如病毒性呼吸道感染的方法。

本发明包括在已证明用本发明抗体制剂以外的疗法难以治疗，且不再进行这些疗法的患者中预防、治疗和/或控制病毒感染，如病毒性呼吸道感染，或其症状的方法。在某些实施方式中，按照本发明方法控制或治疗的患者是已经用抗生素、抗病毒剂、抗真菌剂或其它生物疗法/免疫疗法治疗的患者。在这些患者中，过于年轻以至于不适合常规疗法的患者和尽管用现有疗法控制或治疗过但病毒感染复发的患者是难治患者。

本发明包括作为其它常规治疗的替代方案的预防、治疗和/或控制病毒感染，如病毒性呼吸道感染或其一种或多种症状的方法。在具体实施方式中，按照本发明方法控制或治疗的患者是用其它治疗难治的或用其它治疗易于产生不良反应的患者。该患者可以是免疫***抑制的人(如术后患者、化疗患者和免疫缺陷疾病患者)，肾功能或肝功能受损的人、老年人、儿童、婴儿、早产婴儿、患有神经精神病的人或服用精神药物的人、有癫痫病史的人或正在接受与防止、治疗和/或控制病毒感染或其一种或多种症状的常规药物有冲突的药物治疗的人。

本领域了解病毒感染治疗和其剂量、给药途径和推荐用法，这类文献包括例如《医师案头参考》(Physician’s Desk Reference)(第60版，2006)。

5.5.6.细菌感染

本发明提供预防、治疗和/或控制细菌性感染或其一种或多种症状的方法，所述方法包括给予需要的对象有效量的一种或多种本发明抗体制剂。在另一实施方式中，本发明提供一种预防、治疗和/或控制细菌性感染或其一种或多种症状的方法，所述方法包括给予需要的对象有效量的一种或多种本发明抗体制剂和有效量的除本发明抗体制剂以外的一种或多种治疗(如，一种或多种预防剂或治疗剂)。本发明组合物和方法中可以使用本领域技术人员熟知的用于预防、治疗和/或控制细菌感染的抗菌剂和抗菌治疗。抗菌剂的非限制性例子包括能抑制或减少细菌感染、抑制或减少细菌复制或者抑制或减少细菌向其它对象传播的蛋白质、多肽、肽、融合蛋白、抗体、核酸分子、有机分子、无机分子和小分子。具体说，抗菌剂的例子包括但不限于：青霉素、头孢菌素、亚胺培南、奥克特南(axtreonam)、去甲万古霉素、环丝氨酸、杆菌肽、氯霉素、红霉素、克林霉素、四环素、链霉素、妥布拉霉素、庆大霉素、阿米卡星、卡那霉素、新霉素、大观霉素、甲氧苄啶、诺氟沙星、利福平、多粘菌素、两性霉素B、制霉菌素、酮康唑、异烟肼、甲硝唑和喷他脒。

在一个实施方式中，抗菌剂是抑制或减少肺部或呼吸道细菌感染、抑制或减少引起肺部或呼吸道感染的细菌复制或者抑制或减少引起肺部或呼吸道感染的细菌向其它对象传播的物质。在肺部或呼吸道细菌感染是支原体感染的情况下(如咽炎、器官支气管炎和肺炎)，抗菌剂是，例如，四环素、红霉素或大观霉素。在肺部或呼吸道细菌感染是好氧革兰阴性菌(GNB)引起的肺炎时，抗菌剂优选为青霉素、第一代或第三代头孢菌素(如头孢克洛、头孢羟氨苄、头孢氨苄或头孢唑林)、红霉素、克林霉素、氨基糖苷(如庆大霉素、妥布霉素或阿米卡星)或单内酰胺(monolactam)(如氨曲南)。在肺部或呼吸道细菌感染是结核病的情况下，抗菌剂优选为利福平、异烟肼、吡嗪酰胺、乙胺丁醇和链霉素。在呼吸道感染是复发性吸入性的情况下，抗菌剂优选为青霉素、氨基糖苷或者第二代或第三代头孢菌素。

5.5.6.1.细菌感染的治疗

可按照本发明方法预防、治疗和/或控制任何类型的细菌感染或者由细菌感染(如呼吸道感染)引起或与其相关的病症。引起细菌感染的细菌的例子包括但不限于：水螺菌科(Aquaspirillum)、固氮螺菌科(Azospirillum)、固氮菌科(Azotobacteraceae)、类杆菌科(Bacteroidaceae)、巴尔通体(Bartonella)、蛭弧菌科(Bdellovibrio)、弯曲杆菌(Campylobacter)、衣原体(Chlamydia)(如、肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae))、梭状芽胞杆菌(clostridium)、肠杆菌科(Enterobacteriaceae)(如柠檬酸菌(Citrobacter)、爱德华菌(Edwardsiella)、产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)、欧文菌(Erwinia)、大肠杆菌(Escherichia coli)、哈夫尼菌(Hafnia)、克雷伯杆菌(Klebsiella)、摩根菌(Morganella)、普通变形杆菌(Proteus vulgaris)、普罗威登斯菌(Providencia)、沙门菌(Salmonella)、粘质沙雷菌(Serratia marcescens)和弗氏志贺菌(Shigella flexneri))、加特纳菌科(Gardinella)、流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)、盐杆菌科(Halobacteriaceae)、螺杆菌科(Helicobacter)、军团菌科(Legionallaceae)、李斯特菌(Listeria)、甲基球菌科(Methylococcaceae)、分枝杆菌(mycobacteria)(如结核分支杆菌(Mycobacterium tuberculosis))、奈瑟球菌科(Neisseriaceae)、海洋螺菌科(Oceanospirillum)、巴斯德菌科(Pasteurellaceae)、肺炎球菌(Pneumococcus)、假单胞菌(Pseudomonas)、根瘤菌科(Rhizobiaceae)、螺菌科(Spirillum)、螺状菌科(Spirosomaceae)、葡萄球菌属(Staphylococcus)(如甲氧西林抗性金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和致热葡萄球菌(Staphylococcus pyrogenes))、链球菌属(Streptococcus)(如肠炎链球菌(Streptococcus enteritidis)、粪链球菌(Streptococcus fasciae)和肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae))、蝙蝠弧菌螺杆菌科(Vampirovibr Helicobacter)和蝙蝠弧菌科(Vampirovibrio)。

在一个具体实施方式中，本发明提供预防、治疗和/或控制细菌性呼吸道感染或其一种或多种症状的方法，所述方法包括给予需要的对象有效量的一种或多种本发明抗体制剂。在另一实施方式中，本发明提供一种预防、治疗和/或控制细菌性呼吸道感染或其一种或多种症状的方法，所述方法包括给予需要的对象有效量的一种或多种本发明抗体制剂和有效量的除本发明抗体制剂以外的一种或多种治疗(如预防剂或治疗剂)。

在某些实施方式中，本发明提供预防、治疗和/或控制细菌感染，如细菌性呼吸道感染，或一种或多种症状的方法，所述方法包括将一种或多种本发明抗体制剂和有效量的一种或多种治疗(如一种或多种预防剂或治疗剂)联合给予给予需要的对象，所述一种或多种治疗是除本发明抗体制剂以外的用于预防、治疗和/或控制细菌感染的治疗。细菌感染，具体是细菌性呼吸道感染的治疗包括但不限于：抗菌剂(如氨基糖苷(如庆大霉素、妥布霉素、阿米卡星、奈替米星)、氨曲南、头孢菌素(如头孢克洛、头孢羟氨苄、头孢氨苄、头孢唑林)、克林霉素、红霉素、青霉素(如青霉素V、晶体青霉素G、普鲁卡因青霉素G)、大观霉素和四环素(如金霉素、多西环素、土霉素))和支持性呼吸道治疗，如补充性和机械性通风。在某些实施方式中，将一种或多种本发明抗体制剂与一种或多种支持性手段联合给予需要的对象，以预防、治疗和/或控制细菌感染或其一种或多种症状。支持性手段的非限制性例子包括通过超声喷雾器对空气增湿、给予气雾化外消旋肾上腺素、口服***、静脉内液体、插管、解热剂(如布洛芬、对乙酰氨基酚)，更优选抗菌或抗病毒治疗(即，预防或治疗继发性感染)。

本发明提供预防、治疗和/或控制对细菌感染，如细菌性呼吸道感染的生物反应的方法，这些生物反应包括但不限于：IgE抗体水平升高、肥大细胞增殖、脱粒和/或浸润，B细胞增殖和/或浸润增加和T细胞增殖和/或浸润增加，所述方法包括将有效量的一种或多种本发明抗体制剂单独或与有效量的除本发明抗体制剂以外的一种或多种治疗(如预防剂或治疗剂)联合给予需要的对象。本发明也提供预防、治疗和/或控制细菌感染引起或与其相关的呼吸道病症的方法，这些病症包括例如，细菌呼吸道感染，例如但不限于：肺炎球菌性肺炎、好氧革兰阴性菌引起的肺炎、复发性吸入性肺炎、军团菌病、链球菌病、嗜血杆菌(Hemophilus)引起的感染、百日咳、脑膜炎或结核病，所述方法包括将有效量的一种或多种本发明抗体制剂单独或与有效量的另一治疗联合给予需要的对象。

在一个具体实施方式中，用本发明方法预防、治疗和/或控制肺炎球菌(Pneumonococcus)、分枝杆菌(Mycobacteria)、好氧革兰阴性菌、链球菌(Streptococcus)或嗜血杆菌(Hemophilus)引起的细菌性呼吸道感染或其一种或多种症状，所述方法包括将有效量的一种或多种本发明抗体制剂单独或与有效量的除本发明抗体制剂以外的一种或多种其它治疗(如一种或多种预防剂或治疗剂)联合给予需要的对象。

在一个具体实施方式中，本发明提供预防、治疗和/或控制原发性细菌感染，如原发性细菌性呼吸道感染的一种或多种继发性病症或对其产生的反应的方法，所述方法包括将有效量的一种或多种本发明抗体制剂单独或与有效量的其它治疗(如其它预防剂或治疗剂)联合给予需要的对象。原发性细菌感染，特别是细菌性呼吸道感染的继发性病症或反应的例子包括但不限于：对粘膜刺激的哮喘-样反应，总呼吸阻力升高，继发性病毒、细菌和真菌感染的易感性增加，以及发生诸如(但不限于)肺炎、哮吼和发热性支气管炎等病症。

在一个具体实施方式中，用本发明方法预防、治疗和/或控制细菌感染，如细菌性呼吸道感染或其一种或多种症状，所述方法包括将有效量的一种或多种本发明抗体和有效量的维他辛^TM(米迪缪尼公司，国际公开号WO 00/78815，国际公开号WO 02/070007 A1，2002年9月12日，题为“通过给予整联蛋白α_vβ₃拮抗剂预防或治疗炎性疾病或自身免疫性疾病的方法”(Methods ofPreventing or Treating Inflammatory or Autoimmune Disorders by AdministeringIntegrin AlphaV Beta3 Antagonists)，国际公开号WO 03/075957 A1，2003年9月18日，题为“整联蛋白α_vβ₃拮抗剂与其它药剂联合用药以预防或治疗癌症”(The Prevention or Treatment of Cancer Using Integrin AlphaVBeta3Antagonists in Combination With Other Agents)，美国专利公开号US2002/0168360A1，2002年11月14日，题为“通过联合给予整联蛋白α_vβ₃拮抗剂和其它预防剂或治疗剂预防或治疗炎性疾病或自身免疫性疾病的方法”(Methods of Preventing or Treating Inflammatory or Autoimmune Disorders byAdministering Integrin α_vβ₃ Antagonists in Combination With Other Prophylacticor Therapeutic Agents)和国际公开号WO 03/075741A2，2003年9月18日，题为“通过联合给予整联蛋白α_vβ₃拮抗剂和HMG-CoA还原酶抑制剂或二膦酸盐预防或治疗疾病的方法”(Methods of Preventing or Treating Disorders byAdministering an Integrin α_vβ₃ Antagonist in Combination With an HMG-CoAReductase Inhibitor or a Bisphosphonate)，通过引用将其全文纳入本文)联合给予需要的对象。在另一具体实施方式中，用本发明方法预防、治疗和/或控制细菌感染，如细菌性呼吸道感染或其一种或多种症状，所述方法包括将有效量的一种或多种本发明抗体与有效量的西利珠单抗(米迪缪尼公司，国际公开号WO02/069904)联合给予需要的对象。在另一实施方式中，用本发明方法预防、治疗和/或控制细菌感染，如细菌性呼吸道感染或其一种或多种症状，所述方法包括将有效量的一种或多种本发明抗体与有效量的一种或多种EphA2抑制剂(如，一种或多种抗-EphA2抗体(米迪缪尼公司；国际公开号WO 02/102974 A4，2002年12月27日，题为“突变蛋白、高效抑制性抗体和FIMCH晶体结构”(Mutant Proteins，High Potency Inhibitory Antibodies and FIMCH CrystalStructure)，国际公开号03/094859A2，2003年11月20日，题为“EphA2单克隆抗体和其使用方法”(EphA2Monoclonal Antibodies and Methods of UseThereof)，美国申请号10/436,783和美国专利公开号US 2004/0091486A1；以及美国申请号10/994,129和美国专利公开号US 2005/0152899A1，通过引用将其全文纳入本文))联合给予需要的对象。在又一实施方式中，本发明提供预防、治疗和/或控制细菌感染，如细菌性呼吸道感染或其一种或多种症状的方法，所述方法包括联合给予有效量的一种或多种本发明抗体与有效量的维他辛^TM、西利珠单抗和/或EphA2。

本发明包括在预计会发生细菌性呼吸道感染或发生这类感染的风险提高的患者，如免疫***被抑制的患者(如器官移植接受者、AIDS患者、正在接受化疗的患者、老年人、早产婴儿、婴儿、儿童、发生阻塞的食道癌患者、气管支气管瘘管患者，神经性疾病(如中风、肌萎缩侧索硬化、多发性硬化和肌病引起的疾病)患者和已经发生感染，特别是呼吸道感染的患者)中防止发生细菌感染，如细菌性呼吸道感染的方法。患者可能曾接受过或未曾接受过感染治疗。

本发明抗体制剂或本发明联合治疗可用作当第一次、第二次、第三次、第四次或第五次治疗来预防、治疗和/或控制细菌感染，如细菌性呼吸道感染或其一种或多种症状。本发明也包括在正在治疗其它疾病或失调的患者中预防、治疗和/或控制细菌感染，如细菌性呼吸道感染或其一种或多种症状的方法。本发明包括在对本发明抗体制剂以外的治疗产生任何不良反应或不耐受之前，在患者中预防、治疗和/或控制细菌感染，如细菌性呼吸道感染或其一种或多种症状的方法。本发明还包括在难治患者中预防、治疗和/或控制细菌感染，如细菌性呼吸道感染或其症状的方法。在某些实施方式中，当感染未被明显消除和/或症状未见明显缓解时，称细菌性呼吸道感染的患者难以治疗。可以利用本领域接受的“难治”的涵义，通过本领域已知的测定治疗对感染有效性的任何方法，在体内或体外确定某患者是否“难治”。在各种实施方式中，细菌复制未降低或升高时，认为该细菌性呼吸道感染患者难治。本发明也包括在处于发生细菌感染风险中的患者中，防止细菌感染，如细菌性呼吸道感染发生或复发的方法。本发明也包括在易于对常规治疗产生不良反应的患者中预防、治疗和/或控制细菌感染，如细菌性呼吸道感染或其症状的方法。本发明还包括预防、治疗和/或控制无抗菌治疗可用的细菌感染，如细菌性呼吸道感染的方法。

本发明包括在已证明用本发明抗体制剂以外的疗法难以治疗，且不再进行这些疗法的患者中预防、治疗和/或控制细菌感染，如细菌性呼吸道感染，或其症状的方法。在某些实施方式中，按照本发明方法控制或治疗的患者是已经用消炎药、抗生素、抗病毒剂、抗真菌剂或其它生物疗法/免疫疗法治疗的患者。在这些患者中，过于年轻以至于不适合常规疗法的患者和尽管用现有疗法控制或治疗过但细菌感染复发的患者是难治患者。

本发明包括作为其它常规治疗的替代方案的预防、治疗和/或控制细菌感染，如细菌性呼吸道感染或其一种或多种症状的方法。在具体实施方式中，按照本发明方法控制或治疗的患者是用其它治疗难治的或用其它治疗易于产生不良反应的患者。该患者可以是免疫***抑制的人(如术后患者、化疗患者和免疫缺陷疾病患者)，肾功能或肝功能受损的人、老年人、儿童、婴儿、早产婴儿、患有神经精神病的人或服用精神药物的人、有癫痫病史的人或正在接受与防止、治疗和/或控制细菌感染，如细菌性呼吸道感染或其一种或多种症状的常规药物有冲突的药物治疗的人。

本领域了解细菌感染治疗和其剂量、给药途径和推荐用法，这类文献包括例如《医师案头参考》(Physician’s Desk Reference)(第60版，2006)。

5.5.7.真菌感染

本发明组合物和方法中可使用本领域技术人员熟知用于预防、治疗和/或控制真菌感染或其一种或多种症状(如真菌性呼吸道感染)的抗真菌剂和抗真菌治疗。抗真菌剂的非限制性例子包括能抑制和/或减少真菌感染、抑制和/或减少真菌复制或者抑制和/或减少真菌向其它细胞或对象传播的蛋白质、多肽、肽、融合蛋白、抗体、核酸分子、有机分子、无机分子和小分子。抗真菌剂的具体例子包括但不限于：唑类药物(如咪康唑、酮康唑

乙酸卡泊芬净

咪唑、***(如氟康唑

)和伊曲康唑

)、多烯(如制霉菌素、两性霉素B两性霉素B脂质复合物(“ABLC”)

、两性霉素B胶体分散体(“ABCD”)

、脂质体两性霉素B

)、碘化钾(KI)、嘧啶(如、氟胞嘧啶

和伏立康唑

)。具体抗真菌剂和其推荐剂量的列表参见例如，下表7。

表7：抗真菌剂.

在某些实施方式中，抗真菌剂是抑制或减少呼吸道真菌感染、抑制或减少引起肺部或呼吸道感染的真菌复制或者抑制或减少引起肺部或呼吸道感染的真菌向其它对象传播的物质。在肺部或呼吸道真菌感染是皮炎芽生菌(Blastomyces dermatitidis)的情况下，抗真菌剂优选为伊曲康唑、两性霉素B、氟康唑或酮康唑。在肺部或呼吸道真菌感染是肺曲霉肿的情况下，抗真菌剂优选为两性霉素B、脂质体两性霉素B、伊曲康唑或氟康唑。在肺部或呼吸道真菌感染是组织胞浆菌病的情况下，抗真菌剂优选是两性霉素B、伊曲康唑、氟康唑或酮康唑。在肺部或呼吸道真菌感染是球孢子菌病的情况下，抗真菌剂优选是氟康唑或两性霉素B。在肺部或呼吸道真菌感染是隐球菌病的情况下，抗真菌剂优选是两性霉素B、氟康唑或这两种药物联用。在肺部或呼吸道真菌感染是着色真菌病的情况下，抗真菌剂优选是伊曲康唑、氟康唑或氟胞嘧啶。在肺部或呼吸道真菌感染是毛霉菌病的情况下，抗真菌剂优选是两性霉素B或脂质体两性霉素B。在肺部或呼吸道真菌感染是假霉样真菌病的情况下，抗真菌剂优选是伊曲康唑或咪康唑。

本领域已知抗真菌治疗和其剂量、给药途径和推荐用法，参见例如Dodds等，2000Pharmacotherapy 20(11)1335-1355，《医师案头参考》(Physicians’DeskReference)(第60版，2006)和《默克诊断和治疗手册》(Merk Manual of Diagnosisand Therapy)(第17版，1999)。

5.5.7.1.抗真菌治疗

可按照本发明方法将本发明的一种或多种抗体制剂给予对象，以预防、治疗和/或控制真菌感染或其一种或多种症状。也可将一种或多种本发明抗体制剂与用于预防、治疗和/或控制真菌感染或其一种或多种症状的除本发明抗体制剂以外的一种或多种其它治疗(如一种或多种预防剂或治疗剂)联合给予对象，以预防、治疗和/或控制真菌感染和/或其一种或多种症状。

在一个具体实施方式中，本发明提供预防、治疗和/或控制真菌感染或其一种或多种症状的方法，所述方法包括给予需要的对象有效量的一种或多种本发明抗体制剂。在另一实施方式中，本发明提供一种预防、治疗和/或控制真菌感染或其一种或多种症状的方法，所述方法包括给予需要的对象有效量的一种或多种本发明抗体制剂和有效量的除本发明抗体制剂以外的一种或多种治疗(如预防剂或治疗剂)。

可按照本发明方法预防、治疗和/或控制任何类型的真菌感染或者由真菌感染(如呼吸道感染)引起或与其相关的病症。引起真菌感染的真菌的例子包括但不限于：犁头霉(Absidia)(如伞状犁头霉(Absidia corymbifera)和分支犁头霉(Absidia ramosa))、曲霉(Aspergillus)(如、黄曲霉(Aspergillus flavus)、烟曲霉(Aspergillus fumigatus)、构巢曲霉(Aspergillus nidulans)、黑曲霉(Aspergillus niger)和土曲霉(Aspergillus terreus))、蛙粪霉(Basidiobolus ranarum)、皮炎芽生菌、念珠菌(Candida)(如白念珠菌(Candida albicans)、光滑念珠菌(Candida glabrata)、克尔念珠菌(Candida kerr)、克鲁斯念珠菌(Candida krusei)、***滑念珠菌(Candida parapsilosis)、假热带念珠菌(Candida pseudotropicalis)、季也蒙假丝酵母(Candida quillermondii)、皱褶念珠菌(Candida rugosa)、星状念珠菌(Candidastellatoidea)和热带念珠菌(Candida tropicalis))、粗球孢子菌(Coccidioidesimmitis)、耳霉(Conidiobolus)、新形隐球菌(Cryptococcus neoforms)、小克银汉霉(Cunninghamella)、皮肤癣菌、夹膜组织胞浆菌(Histoplasma capsulatum)、石膏样小孢子菌(Microsporum gypseum)、渺小毛霉菌(Mucor pusillus)、巴西副球孢子菌(Paracoccidioides brasiliensis)、波氏假性阿利什利菌(Pseudallescheriaboydii)、西伯鼻孢子菌(Rhinosporidium seeberi)、卡氏肺囊虫(Pneumocystiscarinii)、根霉(Rhizopus)(如无根根霉菌(Rhizopus arrhizus)、稻根霉菌(Rhizopusoryzae)和小孢根霉(Rhizopus microsporus))、酵母菌(Saccharomyces)、申克孢子丝菌(Sporothrix schenckii)、接合菌、以及诸如接合菌纲(Zygomycetes)、子囊菌纲(Ascomycetes)、担子菌纲(Basidiomycetes)、半知菌纲(Deuteromycetes)和卵菌纲(Oomycetes)等真菌纲。

在一个具体实施方式中，本发明提供预防、治疗和/或控制真菌性呼吸道感染或其一种或多种症状的方法，所述方法包括给予需要的对象有效量的一种或多种本发明抗体制剂。在另一实施方式中，本发明提供一种预防、治疗和/或控制真菌性呼吸道感染或其一种或多种症状的方法，所述方法包括给予需要的对象有效量的一种或多种本发明抗体制剂和有效量的除本发明抗体制剂以外的一种或多种治疗(如，一种或多种预防剂或治疗剂)。

在某些实施方式中，将有效量的一种或多种抗体制剂与有效量的除本发明抗体制剂以外的一种或多种治疗(如，一种或多种预防剂或治疗剂)联合给予需要的对象，所述治疗正用于、已用于或已知可用于预防、治疗和/或控制真菌感染，如真菌性呼吸道感染。真菌感染的治疗包括但不限于：抗真菌剂，例如唑类药物，如咪康唑、酮康唑

、乙酸卡泊芬净、咪唑、***(如氟康唑

)和伊曲康唑

多烯(如制霉菌素、两性霉素B胶体分散体、两性霉素B脂质复合物(“ABLC”)两性霉素B胶体分散体(“ABCD”)

、脂质体两性霉素B)、碘化钾(KI)、嘧啶(如氟胞嘧啶

)和伏立康唑

在些实施方式中，将有效量的一种或多种本发明抗体制剂与一种或多种支持性手段联合给予需要的对象，以预防、治疗和/或控制真菌感染或其一种或多种症状。支持性手段的非限制性例子包括通过超声喷雾器对空气增湿、给予气雾化外消旋肾上腺素、口服***、静脉内液体、插管、解热剂(如布洛芬和对乙酰氨基酚)以及抗病毒或抗菌治疗(即，预防或治疗继发性病毒或细菌感染)。

本发明也提供预防、治疗和/或控制对真菌性呼吸道感染的生物反应的方法，所述生物反应包括但不限于：IgE抗体水平升高、神经生长因子(NGF)水平升高、肥大细胞增殖、脱粒和/或浸润、B细胞的增殖和/或浸润增加和T细胞的增殖和/或浸润增加，所述方法包括单独或与一种或多种其它治疗联合给予有效量的一种或多种免疫特异性结合IL-9多肽的抗体制剂。

在一个具体实施方式中，本发明提供预防、治疗和/或控制原发性真菌感染，如原发性真菌性呼吸道感染的一种或多种继发性病症或对其产生的反应的方法，所述方法包括将有效量的一种或多种本发明抗体制剂单独或与有效量的除本发明抗体制剂以外的其它治疗(如其它预防剂或治疗剂)联合给予需要的对象。原发性真菌感染，特别是原发性真菌性呼吸道感染的继发性病症或反应的例子包括但不限于：对粘膜刺激的哮喘-样反应，总呼吸阻力升高，继发性病毒、真菌和真菌感染的易感性增加，以及发生诸如(但不限于)肺炎、哮吼和发热性支气管炎等病症。

在一个具体实施方式中，本发明提供预防、治疗和/或控制真菌感染，如真菌性呼吸道感染或其一种或多种症状的方法，所述方法包括将有效量的一种或多种本发明抗体和有效量的维他辛^TM(米迪缪尼公司，国际公开号WO00/78815，国际公开号WO 02/070007A1，2002年9月12日，题为“通过给予整联蛋白α_vβ₃拮抗剂预防或治疗炎性疾病或自身免疫性疾病的方法”(Methodsof Preventing or Treating Inflammatory or Autoimmune Disorders byAdministering Integrin AlphaV Beta3Antagonists)，国际公开号WO 03/075957A1，2003年9月18日，题为“整联蛋白α_vβ₃拮抗剂与其它药剂联合用药以预防或治疗癌症”(The Prevention or Treatment of Cancer Using IntegrinAlpha VBeta3 Antagonists in Combination With Other Agents)，美国专利公开号US 2002/0168360 A1，2002年11月14日，题为“通过联合给予整联蛋白α_vβ₃拮抗剂和其它预防剂或治疗剂预防或治疗炎性疾病或自身免疫性疾病的方法”(Methods of Preventing or Treating Inflammatory or Autoimmune Disorders byAdministering Integrinα_vβ₃Antagonists in Combination With Other Prophylacticor Therapeutic Agents)和国际公开号WO 03/075741A2，2003年9月18日，题为“通过联合给予整联蛋白α_vβ₃拮抗剂和HMG-CoA还原酶抑制剂或二膦酸盐预防或治疗疾病的方法”(Methods of Preventing or Treating Disorders byAdministering an Integrin α_vβ₃ Antagonist in Combination With an HMG-CoAReductase Inhibitor or a Bisphosphonate)，通过引用将其全文纳入本文)联合给予需要的对象。在另一具体实施方式中，本发明提供预防、治疗和/或控制真菌性呼吸道感染或其一种或多种症状的方法，所述方法包括将有效量的一种或多种本发明抗体与有效量的西利珠单抗(米迪缪尼公司，国际公开号WO 02/069904)联合给予需要的对象。在另一实施方式中，本发明提供预防、治疗和/或控制真菌性呼吸道感染或其一种或多种症状的方法，所述方法包括将有效量的一种或多种本发明抗体与有效量的一种或多种EphA2抑制剂(如，一种或多种抗-EphA2抗体(米迪缪尼公司；国际公开号WO 02/102974A4，2002年12月27日，题为“突变蛋白、高效抑制性抗体和FIMCH晶体结构”(Mutant Proteins，HighPotency Inhibitory Antibodies and FIMCH Crystal Structure)，国际公开号03/094859A2，2003年11月20日，题为“EphA2单克隆抗体和其使用方法”(EphA2 Monoclonal Antibodies and Methods of Use Thereof)，美国申请号10/436,783；以及美国申请号10/994,129和美国专利公开号US 2005/0152899A1，通过引用将其全文纳入本文))给予需要的对象。在又一实施方式中，本发明提供预防、治疗和/或控制真菌感染，如真菌性呼吸道感染或其一种或多种症状的方法，所述方法包括将有效量的一种或多种本发明抗体与有效量的维他辛^TM、西利珠单抗和/或EphA2联合给予需要的对象。

本发明包括在预计会发生真菌感染，如真菌性呼吸道感染，或发生这类感染的风险提高的患者中防止发生真菌性呼吸道感染的方法。这类对象包括但不限于：免疫***被抑制的患者(如器官移植接受者、AIDS患者、正在接受化疗的患者、发生阻塞的食道癌患者、气管支气管瘘管患者，神经性疾病(如中风、肌萎缩侧索硬化、多发性硬化和肌病引起的疾病)患者和已经发生呼吸道病症，特别是呼吸道感染的患者)。在一个具体实施方式中，患者患有支气管肺发育异常、先天性心脏病、囊性纤维变性和/或获得性或先天性免疫缺陷。在另一具体实施方式中，患者是早产婴儿、婴儿、儿童、老年人或者住在***、疗养院或一些其它类型的机构中的人。本发明也包括在易于对呼吸道病症的常规治疗产生不良反应因此无治疗可用的患者中预防、治疗和/或控制呼吸道病症或其一种或多种症状的方法。

本发明抗体制剂或本发明联合治疗可用作当第一次、第二次、第三次、第四次或第五次治疗来预防、治疗和/或控制真菌感染，如真菌性呼吸道感染或其一种或多种症状。本发明也包括在正在治疗其它疾病或失调的患者中预防、治疗和/或控制真菌感染，如真菌性呼吸道感染或其一种或多种症状的方法。本发明包括在对本发明抗体制剂以外的治疗产生任何不良反应或不耐受之前，在患者中预防、治疗和/或控制真菌感染，如真菌性呼吸道感染或其一种或多种症状的方法。本发明还包括在难治患者中预防、治疗和/或控制真菌感染，如真菌性呼吸道感染或其症状的方法。在某些实施方式中，当感染未被明显消除和/或症状未见明显缓解时，称真菌感染，如真菌性呼吸道感染的患者难以治疗。可以利用本领域接受的“难治”的涵义，通过本领域已知的测定治疗对感染有效性的任何方法，在体内或体外确定某患者是否“难治”。在各种实施方式中，真菌复制未降低或升高时，认为该真菌感染，如真菌性呼吸道感染患者难治。本发明也包括在处于发生真菌感染风险中的患者中，防止真菌感染，如真菌性呼吸道感染发生或复发的方法。本发明也包括在易于对常规治疗产生不良反应的患者中预防、治疗和/或控制真菌感染，如真菌性呼吸道感染或其症状的方法。本发明还包括预防、治疗和/或控制无抗真菌治疗可用的真菌感染，如真菌性呼吸道感染的方法。

本发明包括在已证明用本发明抗体制剂以外的疗法难以治疗，且不再进行这些疗法的患者中预防、治疗和/或控制真菌感染，如真菌性呼吸道感染，或其症状的方法。在某些实施方式中，按照本发明方法控制或治疗的患者是已经用抗生素、抗病毒剂、抗真菌剂或其它生物疗法/免疫疗法治疗的患者。在这些患者中，过于年轻以至于不适合常规疗法的患者和尽管用现有疗法控制或治疗过但真菌感染复发的患者是难治患者。

本发明提供作为其它常规治疗的替代方案的预防、治疗和/或控制真菌感染，如真菌性呼吸道感染或其一种或多种症状的方法。在具体实施方式中，按照本发明方法控制或治疗的患者是用其它治疗难治的或用其它治疗易于产生不良反应的患者。该患者可以是免疫***抑制的人(如术后患者、化疗患者和免疫缺陷疾病患者)，肾功能或肝功能受损的人、老年人、儿童、婴儿、早产婴儿、患有神经精神病的人或服用精神药物的人、有癫痫病史的人或正在接受与防止、治疗和/或控制真菌感染，如真菌性呼吸道感染或其一种或多种症状的常规药物有冲突的药物治疗的人。

本领域了解真菌感染治疗和其剂量、给药途径和推荐用法，这类文献包括例如《医师案头参考》(Physician’s Desk Reference)(第60版，2006)。

5.6.给予抗体制剂的方法

本发明提供通过给予对象有效量的本发明液体制剂预防、治疗和/或控制疾病，例如，与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状的方法。已知各种递送***，并可用于给予本发明液体制剂或预防剂或治疗剂。给予本发明抗体液体制剂或治疗(如预防剂或治疗剂)的方法包括但不限于：胃肠道外给药(例如，皮内、肌肉内、腹膜内、静脉内，优选皮下)、硬膜外给药、外用给药和粘膜给药(例如，鼻内和口服途径)。在一个具体实施方式中，肌肉内、静脉内或皮下给予本发明液体制剂。在一个实施方式中，皮下给予本发明液体制剂。可通过任何常规途径，例如输注或推注，通过上皮或粘膜皮肤衬里(如口腔粘膜、直肠和肠粘膜等)吸收给予该制剂，并可与其它生物活性剂一起给药。给药可以是全身给药或局部给药。在一个具体实施方式中，向肿瘤内或在炎症部位给予本发明液体制剂。

在一个具体实施方式中，本发明抗体制剂包含药学上可接受的载体。在一个实施方式中，药学上可接受的载体是注射用水，USP，5％葡萄糖的水溶液(D5W)或盐水。

通常，本发明液体制剂中所含的免疫特异性结合IL-9多肽的抗体(包括其抗体片段)衍生自物种来源或物种反应性与本发明液体制剂接受者相同的对象。因此，在一个实施方式中，将含有免疫特异性结合IL-9多肽的人或人源化抗体的本发明液体制剂给予人患者，以进行治疗或预防。

本发明也提供，将本发明液体制剂包装在密封容器，如安瓿或小药囊中，上面标明抗体(包括其抗体片段)含量。优选地，本发明液体制剂装在标明抗体(包括其抗体片段)的含量和浓度的密封容器中。优选地，本发明液体制剂装载密封容器中，包含至少10mg/ml、15mg/ml、20mg/ml、30mg/ml、40mg/ml、50mg/ml、60mg/ml、70mg/ml、80mg/ml、90mg/ml、100mg/ml、150mg/ml、175mg/ml、200mg/ml、250mg/ml或300mg/ml免疫特异性结合IL-9多肽的抗体(包括其抗体片段)，含量为1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml、7ml、8ml、9ml、10ml、15ml或20ml，最优选1.2ml。在本发明的一个具体实施方式中，本发明液体制剂装在密封容器中，且包含至少15mg/ml、至少20mg/ml、至少25mg/ml、至少50mg/ml、至少100mg/ml、至少150mg/ml、至少175mg/ml、至少200mg/ml、至少250mg/ml或至少300mg/ml用于静脉内注射的免疫特异性结合IL-9多肽的抗体(包括其抗体片段)(例如，4D4、4D4 H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4或其抗原结合片段)和至少15mg/ml、20mg/ml、50mg/ml、80mg/ml、100mg/ml、150mg/ml、175mg/ml、200mg/ml、250mg/ml或300mg/ml用于重复皮下给药的免疫特异性结合IL-9多肽的抗体(包括其抗体片段)(如4D4、4D4H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4或其片段)。在一个具体实施方式中，可通过冻干水性抗体制剂产生本发明抗体制剂。在一个具体实施方式中，可利用药学上可接受的载体重建冻干抗体的水性抗体溶液。在一个具体实施方式中，药学上可接受的载体是注射用水，USP，5％葡萄糖的水溶液(D5W)或盐水。

可通过本领域熟知或本文所述的标准临床技术测定有效预防、治疗和/或控制与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状的本发明液体制剂的用量。制剂所用的准确剂量也取决于给药途径和炎性疾病、自身免疫性疾病或癌症的严重程度，应该按照实施人员的判断和每个患者的情况决定。可由体外或动物模型实验***获得的剂量反应曲线外推获得有效剂量。

就本发明包括的抗体、蛋白质、多肽、肽和融合蛋白制剂而言，可通过以mg/kg表示的给药剂量乘以患者体重的千克数(kg)计算给予患者的剂量。然后，通过所需剂量的毫克数除以抗体制剂的浓度确定给药所需的体积(mL)。通过将所需数量药瓶的内容物收集到注射器中获得最终计算的所需体积，以给予本发明抗体制剂。通过将所需数量药瓶的内容物集合到注射器中获得最终计算的所需体积，以给予药物。每个部位可以注射抗体制剂的最大体积为2.0mL。可用下式计算剂量(mL)：剂量(mL)＝[志愿者体重](kg)x[剂量]mg/kg÷100mg/mL抗体制剂。通常，因为对外来多肽的免疫应答，人抗体在人体内的半衰期比其它来源的抗体长。因此，人抗体的给药剂量和给药频率可能较低。另外，可通过提高制剂中的抗体(包括其抗体片段)浓度、提高抗体(包括其抗体片段)的亲和力和/或亲合力和/或延长抗体(包括其抗体片段)的半衰期降低本发明液体制剂的给药剂量、体积和频率。

在一个具体实施方式中，用患者的体重千克数(kg)乘以mg/kg表示的给药剂量，以计算给予患者的剂量。然后，通过所需剂量的毫克数除以制剂中的抗体(包括其抗体片段)浓度(100mg/mL)确定给药所需的体积(mL)。通过将所需数量药瓶的内容物集合到注射器中获得最终计算的所需体积，以给予药物。每个部位可以注射抗体(包括其抗体片段)制剂的最大体积为2.0mL。

小分子的示范性剂量包括每千克对象或样品重量的小分子的毫克或微克量(如，约1微克/千克至约500毫克/千克、约100微克/千克至约5毫克/千克或约1微克/千克至约50微克/千克)。

在一个具体实施方式中，将0.1-20毫克/千克/周、1-15毫克/千克/周、2-8毫克/千克/周、3-7毫克/千克/周或4-6毫克/千克/周的本发明液体制剂中的免疫特异性结合IL-9多肽的抗体(包括其抗体片段)(如4D4、4D4 H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4或其片段)给予炎性疾病、自身免疫性疾病或癌症患者。在另一实施方式中，给予对象一个或多个剂量的预防或治疗有效量的本发明液体制剂，其中每个剂量中的预防或治疗有效量不相同。

在一个实施方式中，本发明液体制剂以将α_vβ₃的免疫特异性抗体的血浆浓度维持在所需水平(如约0.1至100μg/ml)的给药方案给药，以连续阻断IL-9多肽活性。在一个具体实施方式中，该抗体的血浆浓度维持在0.2μg/ml、0.5μg/ml、1μg/ml、2μg/ml、3μg/ml、4μg/ml、5μg/ml、6μg/ml、7μg/ml、8μg/ml、9μg/ml、10μg/ml、15μg/ml、20μg/ml、25μg/ml、30μg/ml、35μg/ml、40μg/ml、45μg/ml或50μg/ml。对象体内的所需血浆浓度取决于几种因素，包括但不限于：疾病或失调的特性、疾病或失调的严重程度以及对象的总体状况。这种给药方案特别适合预防、治疗和/或控制慢性疾病或失调。

在具体实施方式中，间歇性给予含有IL-9多肽的免疫特异性偶联抗体(包括其抗体片段)的本发明液体制剂。本文所用术语“偶联的抗体或抗体片段”指偶联或融合于另一部分的抗体(包括其抗体片段)，所述部分包括但不限于：异源肽或多肽，另一抗体(包括其抗体片段)、标记序列、诊断剂、治疗部分、治疗药物、放射性金属离子、聚合物、清蛋白和固体支持物。

在另一实施方式中，将一个或多个剂量的预防或治疗有效量的本发明液体制剂中的免疫特异性结合IL-9多肽的抗体(包括其抗体片段)(如，4D4、4D4H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4或其片段)给予对象，优选人，其中随着治疗进行，将给予所述对象的预防或治疗有效量的本发明液体制剂中的抗体(包括其抗体片段)剂量提高，例如，0.01μg/kg、0.02μg/kg、0.04μg/kg、0.05μg/kg、0.06μg/kg、0.08μg/kg、0.1μg/kg、0.2μg/kg、0.25μg/kg、0.5μg/kg、0.75μg/kg、1μg/kg、1.5μg/kg、2μg/kg、4μg/kg、5μg/kg、10μg/kg、15μg/kg、20μg/kg、25μg/kg、30μg/kg、35μg/kg、40μg/kg、45μg/kg、50μg/kg、55μg/kg、60μg/kg、65μg/kg、70μg/kg、75μg/kg、80μg/kg、85μg/kg、90μg/kg、95μg/kg、100μg/kg或125μg/kg。

在另一实施方式中，将一个或多个剂量的预防或治疗有效量的本发明液体制剂中的免疫特异性结合IL-9多肽的抗体(包括其抗体片段)(如，4D4、4D4H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4或其片段)给予对象，优选人，其中随着治疗进行，将给予所述对象的预防或治疗有效量的本发明液体制剂中的抗体(包括其抗体片段)剂量降低，例如，0.01μg/kg、0.02μg/kg、0.04μg/kg、0.05μg/kg、0.06μg/kg、0.08μg/kg、0.1μg/kg、0.2μg/kg、0.25μg/kg、0.5μg/kg、0.75μg/kg、1μg/kg、1.5μg/kg、2μg/kg、4μg/kg、5μg/kg、10μg/kg、15μg/kg、20μg/kg、25μg/kg、30μg/kg、35μg/kg、40μg/kg、45μg/kg、50μg/kg、55μg/kg、60μg/kg、65μg/kg、70μg/kg、75μg/kg、80μg/kg、85μg/kg、90μg/kg、95μg/kg、100μg/kg或125μg/kg。

《医师案头参考》(Physicians’DeskReference)(第60版，2006)中描述了预防剂或治疗剂的剂量。

5.7.生物学实验

可用本领域技术人员熟知的各种方式鉴定本发明液体制剂的抗体(包括其抗体片段)。例如，可测定本发明液体制剂的抗体(包括其抗体片段)免疫特异性结合抗原的能力。这种测定可以在溶液中(如，Houghten，1992，Bio/Techniques13：412-421)、珠上(Lam，1991，Nature 354：82-84)、芯片上(Fodor，1993，Nature364：555-556)、细菌上(美国专利号5,223,409)、孢子上(美国专利5,571,698；5,403,484；和5,223,409)、质粒上(Cull等，1992，Proc.Natl.Acad.Sci.USA89：1865-1869)或噬菌体上(Scott和Smith，1990，Science 249：386-390；Cwirla等，1990，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 87：6378-6382；和Felici，1991，J.Mol.Biol.222：301-310)进行(这些参考文献各自通过引用全文纳入本文)。例如，可测定已鉴定能免疫特异性结合IL-9多肽的抗体(包括其抗体片段)与IL-9多肽的特异性和亲和力。

可通过本领域已知的任何方法测定本发明液体制剂的抗体(包括其抗体片段)与抗原的免疫特异性结合和与其它抗原的交叉反应性。可用于分析免疫特异性结合和交叉反应性的免疫学测定包括但不限于：使用诸如Western印迹、放射性免疫实验、ELISA(酶联免疫吸附实验)、“夹心”免疫实验、免疫沉淀实验、沉淀素反应、凝胶扩散沉淀素反应、免疫扩散实验、凝集实验、补体结合实验、免疫放射分析、荧光免疫分析、蛋白A免疫实验等技术的竞争性和非竞争性测定***。这类实验是本领域公知的常规实验(参见例如，Ausubel等编，1994，《新编分子生物学实验指南》(Current Protocols in Molecular Biology)，第1卷，纽约约翰韦利森公司(John Wiley&Sons，Inc.，New York)，通过引用全文纳入本文)。下面简要描述示范性免疫测定(但不限于此)。

免疫沉淀方案通常包括细胞用补充有蛋白质磷酸酶和/或蛋白酶抑制剂(如乙二胺四乙酸、PMSF、抑肽酶、钒酸钠)的裂解缓冲液如RIPA缓冲液(1％NP-40或曲通X-100、1％脱氧胆酸钠、0.1％SDS、0.15M NaCl、0.01M磷酸钠pH 7.2，1％特斯乐(Trasylol))裂解细胞群，将感兴趣抗体加入该细胞裂解物，40℃培育一段时间(如1-4小时)，将蛋白质A和/或蛋白质G琼脂糖珠加入该细胞裂解物，40℃培育约一小时或更长时间，用裂解缓冲液洗珠，和将珠重悬于SDS/样品缓冲液。可通过，例如Western印迹分析评估感兴趣抗体免疫沉淀特定抗原的能力。本领域技术人员应认识到，可改变参数以提高抗体抗原的结合和降低背景(如，用琼脂糖珠预先清洁细胞裂解物)。有关免疫沉淀方案的进一步讨论参见例如，Ausubel等编，1994，《新编分子生物学实验指南》(Current Protocolsin Molecular Biology)，第1卷，纽约约翰韦利森公司(John Wiley&Sons，Inc.，New York)，10.16.1。

Western印迹分析通常包括：制备蛋白质样品，用聚丙烯酰胺凝胶电泳蛋白质样品(如，根据抗原分子量采用8％-20％SDS-PAGE)，将蛋白质样品从聚丙烯酰胺凝胶中转移到膜如硝酸纤维、PVDF或尼龙膜上，在封闭缓冲液(如，含有3％BSA或脱脂奶粉的PBS)中培育该膜，用洗涤缓冲液(如PBS-吐温20)洗涤该膜，用封闭缓冲液稀释的第一抗体(感兴趣抗体)培育该膜，用洗涤缓冲液洗涤该膜，用封闭缓冲液稀释的偶联于酶底物(如辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶)或放射性分子(如³²p或¹²⁵I)的第二抗体(识别第一抗体，如抗人抗体)培育该膜，用洗涤缓冲液洗涤该膜，和检测抗原的存在。本领域技术人员认识到，可改变参数以提高检测到的信号和降低背景噪声。有关Western印迹方案的进一步讨论参见例如，Ausubel等编，1994，《新编分子生物学实验指南》(CurrentProtocols in Molecular Biology)，第1卷，纽约约翰韦利森公司(John Wiley&Sons，Inc.，New York)，10.8.1。

ELISA包括制备抗原，用该抗原包被96孔微量滴定板的孔，将偶联于可检测化合物如酶底物(如，辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶)的感兴趣抗体加入孔中，培育一段时间并检测抗原的存在。在ELISA中，感兴趣抗体不必偶联于可检测化合物；也可将连接于偶联于可检测化合物的第二抗体(识别感兴趣抗体)加入孔中。另外，除了用抗原包被空以外，还可用抗体包被孔。在这种情况下，可加入偶联于可检测化合物的第二抗体，然后向包被孔中加入感兴趣抗原。本领域技术人员认识到，可改变参数以提高检测到的信号和实现本领域已知的其它ELISA改变。在一个实施方式中，可用2μg/ml rhu-IL-9的PBS溶液包被高结合96孔微量滴定板(克斯塔公司(Costar))过夜，以进行ELISA。用PBS洗涤三次后，用三倍连续稀释的Fab于25℃培育平板1小时。再用PBS洗涤三次后，加入1μg/ml抗-人κ-碱性磷酸酶偶联物，25℃培育该平板1小时。用PBST洗涤三次后，用50μl/AMP/PPMP底物测定碱性磷酸酶活性。终止该反应，用VMAX酶标仪测定560nm的吸光度。有关ELISA的进一步讨论参见例如，Ausubel等编，1994，《新编分子生物学实验指南》(Current Protocolsin Molecular Biology)，第1卷，纽约约翰韦利森公司(John Wiley&Sons，Inc.，New York)，11.2.1。

可通过竞争性结合实验测定抗体与抗原的结合亲和力和抗体-抗原相互作用的解离速率。竞争性结合实验的一个例子是放射性免疫实验，包括在含量递增的未标记抗原存在下用感兴趣抗体培育标记抗原(如³H或¹²⁵I)和检测结合于标记抗原的抗体。可利用斯卡恰特作图分析，由数据确定本发明抗体制剂中所含抗体或其片段与特异性抗原的亲和力和结合解离速率。也可利用放射性免疫实验确定与第二抗体的竞争。在一个例子中，在含量递增的未标记第二抗体存在下用偶联于标记化合物(如³H或¹²⁵I)的抗体培育IL-9多肽。

例如，在一个实施方式中，用BIAcore动力学分析测定本发明液体制剂的抗体与IL-9多肽的结合和解离速率。BIAcore动力学分析包括分析IL-9多肽与芯片表面上固定的本发明抗体的结合和解离。BIAcore动力学研究一般包括在固定有抗原的传感器芯片表面上注射250μL不同浓度的抗体试剂(mAb，Fab)，所述抗体试剂是用含0.005％吐温-20的HBS缓冲液配制的。使流速维持在75μL/min。按照需要，收集15分钟或更长时间的解离数据。每个注射/解离周期后，用稀酸，一般是10-100mM HCl进行1分钟脉冲式短暂处理去除抗原表面上结合的mAb，但其它再生剂用作环境保证(circumstances warrant)。更具体说，为了测量结合速率k_结合和解离速率k_解离，使用标准的胺偶联化学方法，即EDC/NHS法(EDC＝N-二乙基氨基丙基)-碳二亚胺)将抗原直接固定在传感器芯片表面上。简要说，在10mM NaOAc，pH4或pH5中制备5-100nM的抗原溶液，通入EDC/NHS-活化的表面，直到固定约30-50RU值的抗原。然后，通过注射1M Et-NH2“结束”未反应的活性酯。在相同的固定条件下制备不含抗原的空白表面，用作参比目的。制备合适表面后，用HBS/吐温-20制备各抗体的合适的连续稀释液，并通入串联的抗原和参比细胞表面。制备的抗体浓度范围不同，取决于所估计的平衡结合常数KD。如上所述，每个注射/解离周期后，用合适的再生剂去除结合的抗体。

如果本发明液体制剂的抗体(包括其抗体片段)对受体配体有免疫特异性，那么也可利用本领域技术人员已知技术检测该抗体抑制配体与其受体结合的能力。例如，在存在或不存在液体制剂的抗体(包括其抗体片段)时，使表达IL-9受体的细胞与IL-9相接触，可通过，例如，流式细胞术或闪烁实验测定抗体(包括其抗体片段)抑制IL-9结合的能力。IL-9或液体制剂所含的抗体(包括其抗体片段)可用可检测化合物如放射性标记(如³²P、³⁵S和¹²⁵I)或荧光标记(如荧光素异硫氰酸酯、罗丹明、藻红蛋白、藻青蛋白、别藻蓝素、邻苯二醛和荧胺)进行标记，以检测IL-9和其宿主细胞受体之间的相互作用。或者，可通过无细胞实验测定本发明液体制剂的抗体(包括其抗体片段)抑制配体与其受体结合的能力。例如，IL-9多肽可与本发明液体制剂的抗体(包括其抗体片段)相接触，并可测定抗体(包括其抗体片段)抑制IL-9多肽与其宿主细胞受体结合的能力。优选将本发明液体制剂的抗体(包括其抗体片段)固定在固体支持物上，用可检测化合物标记IL-9多肽。或者，将IL-9多肽固定在固体支持物上，用可检测化合物标记本发明液体制剂中所含的抗体(包括其抗体片段)。IL-9可以是部分或完全纯化的(例如，部分或完全不含其它多肽)，或是细胞裂解物的一部分。另外，IL-9多肽可以是含有IL-9，其衍生物、类似物或片段和结构域如谷胱甘肽-S-转移酶的融合蛋白。或者，可利用本领域技术人员熟知的技术(如，生物素化试剂盒，伊利诺斯州罗克福德的皮尔斯化学品公司(Pierce Chemicals；Rockford，IL))生物素化IL-9多肽。

在一个具体实施方式中，可通过细胞增殖实验测定本发明液体制剂的抗体(包括其抗体片段)抑制配体与其宿主细胞受体结合的能力。例如，同时表达人和鼠IL-9Rα的鼠TS1-RA3T细胞系可以在含rhuIL-9(25ng/ml，R&D***公司(R&D Systems))的生长培养基(DMEM)上连续培养。去除rhuIL-9后，TS1-RA3在18-24小时内发生细胞死亡。在补充10％FBS和25ng/ml rHu-IL9的RPMI 1640(ATCC)培养基中培养TS1-RA3细胞。实验前，用不含IL-9的培养基洗涤细胞，以5X10⁵个细胞/毫升重悬于含2ng/ml rhuIL-9的培养基。将细胞分装到黑色透明底的非结合96孔微量滴定板中(100μl细胞/孔)，然后将100ml连续稀释的变异Fab加入平板。37℃，5％CO₂培育该平板72小时。加入20微升/孔阿拉马蓝

再培育细胞4-5小时。用荧光计，以555nm激发和590nm发射定量测定续表代谢。

5.7.1.体外研究

可以在体外和/或体内检测本发明的抗体、组合物或联合治疗调节免疫细胞(如T细胞、中性粒细胞和肥大细胞)、内皮细胞和上皮细胞的生物学活性的能力。可通过以下方法评估本发明的抗体、组合物或联合治疗调节免疫细胞(如T细胞、B细胞、肥大细胞、巨噬细胞、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞)、内皮细胞和上皮细胞的生物学活性的能力：检测抗原(例如，IL-9激活基因，例如但不限于：粘蛋白基因(如MUC2、MUC5AC、MUC5B和MUC6)和参与淋巴细胞活化的基因(如Lγ-6A/E))的表达；检测免疫细胞、内皮细胞和/或上皮细胞的增殖；检测信号转导分子(如Stat2的磷酸化、JAK3的磷酸化或IL-9R的磷酸化)的活化；检测免疫细胞(例如，T细胞、B细胞、肥大细胞、巨噬细胞、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞)、内皮细胞和/或上皮细胞的效应功能；或检测免疫细胞、内皮细胞和/或上皮细胞的分化。可利用本领域技术人员已知的技术测定这些活性。例如，可通过3H-胸苷掺入实验和台盼蓝细胞计数测定细胞增殖。可通过，例如免疫学测定分析抗原表达，这些免疫学测定包括但不限于：使用诸如Western印迹、免疫组化、放射性免疫实验、ELISA(酶联免疫吸附实验)、“夹心”免疫实验、免疫沉淀实验、沉淀素反应、凝胶扩散沉淀素反应、免疫扩散实验、凝集实验、补体结合实验、免疫放射分析、荧光免疫分析、蛋白A免疫实验和FACS分析等技术的竞争性和非竞争性测定***。可通过，例如激酶试验和电泳迁移率变动分析(EMSA)测定信号转导分子的激活。例如，可利用高效液相色谱测量5-羟色胺(5-HT)释放或组胺释放，以分析肥大细胞脱粒(参见例如，Taylor等，1995Immunology 86(3)：427-433和Kurosawa等，1998Clin ExpAllergy 28(8)：1007-1012)。

在用于人之前，优选先在体外，后在体内研究本发明的抗体、组合物或联合治疗的所需治疗或预防活性。例如，可用于确定应给予具体哪种药物组合物的试验包括细胞培养试验，其中培养患者组织样品，使其暴露于或接触药物组合物，并观察这类组合物对组织样品的影响。可通过生物活检获得患者的组织样品。这种测试能够鉴定对各患者个体而言最有疗效的治疗(如预防剂或治疗剂)。在各种具体实施方式中，可利用涉及与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一种或多种亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、炎性疾病、自身免疫性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)的细胞类型的代表性细胞进行体外试验，以确定本发明药物组合物对这些细胞类型是否有所需效果。-{}-

可利用本领域技术人员已知的标准技术监测/评估本发明的抗体、组合物或联合治疗对外周血淋巴细胞计数的影响。可通过，例如，获得对象的外周血样品；利用(例如)菲可希帕克(Ficoll-Hypaque，法玛西亚(Pharmacia))梯度离心将淋巴细胞与外周血的其它组分，如血浆分离开；用台盼蓝对淋巴细胞进行计数，以测定所述对象的外周血淋巴细胞计数。可通过，例如，利用菲可希帕克(Ficoll-Hypaque，法玛西亚(Pharmacia))梯度离心将淋巴细胞与外周血的其它组分，如血浆分离开；用偶联于FITC或藻红蛋白的T细胞抗原的抗体标记T细胞，通过FACS测定T细胞数量，以测定所述对象的外周血T细胞计数。

可在体外试验中检测用于预防、治疗和/或控制病毒性呼吸道感染或其一种或多种症状的本发明方法抑制病毒复制或降低病毒载量的能力。例如，可通过噬斑试验测定病毒复制，参见例如Johnson等，1997，Journal of InfectiousDiseases 176：1215-1224。还可测定按照本发明方法给予的抗体、组合物或联合治疗抑制或下调病毒多肽表达的能力。可利用本领域技术人员已知技术，包括但不限于：Western印迹分析、northern印迹分析和RT-PCR测定病毒多肽的表达。

可以在本领域熟知的体外试验中检测预防、治疗和/或控制呼吸道感染或其一种或多种症状的本发明方法对抗引起呼吸道感染的细菌的活性。也可利用本领域已知的体外试验检测细菌对本发明治疗(如本发明抗体、其它预防剂或治疗剂、其联合治疗或其组合物)的耐受性的存在或发生。这类体外试验参见Gales等，2002，Diag.Nicrobiol. Infect.Dis.44(3)：301-311；Hicks等，2002，Clin.Microbiol.Infect.8(11)：753-757；和Nicholson等，2002，Diagn.Microbiol.Infect.Dis.44(1)：101-107。

用于预防、治疗和/或控制呼吸道感染或其一种或多种症状的本发明治疗(如，本发明液体制剂的抗体单用或与除本发明抗体外的预防剂或治疗剂联用)对不同真菌的抗真菌活性。本领域熟知的任何标准抗真菌试验均可用于评估治疗的抗真菌活性。可检测对不同真菌的抗真菌作用。可利用国家临床实验室委员会(National Committee for Clinical Laboratories，NCCLS)推荐的检测(参见国家临床实验室委员会标准(National Committee for Clinical LaboratoriesStandards)，1995，提议标准M27T，国宾夕法尼亚州维拉诺瓦(Villanova，Pa.)，通过引用将其全文纳入本文)和本领域技术人员已知的其它方法(Pfaller等，1993，Infectious Dis.Clin.N.Am.7：435-444)评估治疗的抗真菌效果。可通过真菌裂解实验以及其它方法测定治疗的抗真菌特性，所述其它方法包括生长抑制实验、基于荧光的真菌活力实验、流式细胞术分析和本领域技术人员已知的其它标准实验等。

例如，可通过大量稀释法和/或微量稀释法，利用本领域技术人员熟知的方法(参见例如，Clancy等，1997Journal of Clinical Microbiology，35(11)：2878-82；Ryder等，1998，Antimicrobial Agents and Chemotherapy，42(5)：1057-61；U.S.5,521,153；U.S.5,883,120，U.S.5,521,169，均通过引用全文纳入本文)检测治疗的抗真菌活性。简要说，根据所用特定真菌菌株，在合适的液体培养基中、合适温度下培养真菌菌株一段时间。然后，通过光度法制备接种体，使悬液浊度与标准品，如麦克法郎德标准品(McFarland standard)相等。通过视觉观察或分光光度法测定治疗对接种体浊度的影响。测定治疗的最小抑制浓度(“MIC”)，它被定义为经培养物浊度测定，先导化合物防止接种体出现可观察到的生长的最低浓度。

也可利用本领域技术人员熟知的基于比色法的试验测定治疗的抗真菌活性。可用于评估治疗的抗真菌活性的一个示范性比色试验参见Pfaller等(1994，Journal of Clinical Microbiology，32(8)：1993-6，通过引用将其全文纳入本文；也参见Tiballi等，1995，Journal ofClinical Microbiology，33(4)：915-7)。该试验使用氧化还原指示剂(加州萨克拉曼多的阿拉马生物科学公司(AlamarBiosciences，Inc.)，Sacramento，CA)确定比色测定终点。

也可利用本领域技术人员熟知的光度法测定分析治疗的抗真菌活性(参见例如，Clancy等，1997Journal of Clinical Microbiology，35(11)：2878-82；Jahn等，1995，Journal ofClinical Microbiology，33(3)：661-667，通过引用将其全文纳入本文)。这种光度法分析的基础是：通过3-(4，5-二甲基-2-噻唑基)-2，5，-二苯基-2H-溴化四唑(MTT)还原成甲，定量分析活真菌的线粒体呼吸。此试验测定的MIC定义为光密度第一次突然下降相关联的测试治疗剂的最高浓度。在一些实施方式中，用大量稀释、微量稀释和MTT实验平行测定治疗的抗真菌活性。

另外，本领域技术人员已知的任何体外实验均可用于评估本文所述的抗体、组合物和联合治疗在呼吸道感染或其一种或多种症状中的预防性和/或治疗性用途。

5.7.2.体内实验

在用于人之前，可以在合适的动物模型中检测本发明抗体、组合物或联合治疗。这类动物模型包括但不限于：大鼠，小鼠，鸡、牛、猴、猪、犬、兔等。可采用本领域熟知的任何动物***。程序步骤的几个方面可以改变；所述方面包括但不限于：给予治疗(如预防剂和/或治疗剂)的时间方案，所述治疗是分开给予还是作为混合物给予，以及给予治疗的频率。

也可采用自身免疫性疾病的动物模型评估本发明抗体、组合物或联合治疗的功效。已经开发了自身免疫性疾病如1型糖尿病、甲状腺自身免疫性疾病、***性红斑狼疮和肾小球肾炎的动物模型(Flanders等，1999，Autoimmunity29：235-246；Krogh等，1999，Biochimie 81：511-515；Foster，1999，Semin.Nephrol.19：12-24)。

可通过，例如，检测本发明抗体、组合物或联合治疗减轻自身免疫性疾病的一种或多种症状、降低淋巴细胞计数绝对值的平均值、降低T细胞活化、降低T细胞增殖、减少细胞因子的产生或调节一种或多种特定的细胞因子特性的能力，来证明预防、治疗和/或控制自身免疫性疾病的功效。可通过，例如，检测本发明抗体或其片段或本发明组合物减轻一种或多种牛皮癣症状、降低淋巴细胞计数绝对值的平均值、、减少细胞因子的产生、调节一种或多种特定的细胞因子特性、减轻脱皮、减少红斑、降低斑块高度、降低患病区域的真皮或表皮中的T细胞活化、减轻T细胞向患病区域的真皮或表皮中浸润、减轻PASI、提高医生的整体评分或提高生活质量的能力，来证明预防或治疗牛皮癣的功效。

可采用癌症动物模型评估本发明抗体、组合物或联合治疗的功效。肺癌动物模型的例子包括但不限于：Zhang和Roth(1994，In vivo 8(5)：755-69)所述的肺癌动物模型和p53功能破坏的转基因小鼠模型(参见例如，Morris等，1998，J La State Med Soc 150(4)：179-85)。乳腺癌动物模型的例子包括但不限于：过度表达细胞周期蛋白D1的转基因小鼠(参见例如，Hosokawa等，2001，TransgenicRes 10(5)：471-8)。结肠癌动物模型的例子包括但不限于：TCR b和p53双敲除小鼠(参见例如，Kado等，2001，Cancer Res 61(6)：2395-8)。胰腺癌动物模型的例子包括但不限于：Panc02鼠胰腺癌转移模型(参见例如，Wang等，2001，IntJ Pancreatol 29(1)：37-46)和皮下产生胰腺肿瘤的nu-nu小鼠(参见例如，Ghaneh等，2001，Gene Ther 8(3)：199-208)。非霍奇金淋巴瘤动物模型的例子包括但不限于：重症联合免疫缺陷(“SCID”)小鼠(参见例如，Bryant等，2000，Lab Invest80(4)：553-73)和IgHmu-HOX11转基因小鼠(参见例如，Hough等，1998，Proc NatlAcad Sci USA 95(23)：13853-8)。食道癌动物模型的例子包括但不限于：人***瘤病毒16型E7癌基因的转基因小鼠(参见例如，Herber等，1996，J Virol70(3)：1873-81)。结直肠癌动物模型的例子包括但不限于：Apc小鼠模型(参见例如，Fodde和Smits，2001，Trends Mol Med 7(8)：369-73和Kuraguchi等，2000，Oncogene 19(50)：5755-63)。

可利用本领域已知和Crofford L.J.和Wilder R.L.，“动物的关节炎和自身免疫”(Arthritis and Autoimmunity in Animals)，《关节炎和联合病症：风湿病手册》(Arthritis and Allied Conditions：A Textbook of Rheumatology)，McCarty(编)，第30章(Lee和Febiger，1993)所述的各种炎性关节炎实验动物模型测定本发明抗体、组合物或联合治疗的抗炎活性。也可利用炎性关节炎和自身免疫性风湿病的实验和自发性动物模型评估本发明抗体、组合物或联合治疗的抗炎活性。

也可利用Winter C.A.等，“角叉聚糖诱导的大鼠后爪水肿用作消炎药测定法”(Carrageenan-Induced Edema in Hind Paw of the Rat as an Assay forAnti-inflammatory Drugs)Proc.Soc.Exp.Biol Med.111，544-547(1962)所述方法的变形，通过测定对角叉聚糖诱导的大鼠爪水肿的抑制，评估本发明抗体、组合物或联合治疗的抗炎活性。该实验已用作大部分NSAID的抗炎活性的体内初步筛选方法，认为它能预测在人体中的功效。测试治疗(如预防剂或治疗剂)的抗炎活性表示为与运载体对照组相比，测试组的后爪重量增加的抑制百分数。

在本发明的具体实施方式中，所用实验动物模型是佐剂诱导的关节炎大鼠模型，可相对于对照组测定体重，以确定本发明抗体、组合物或联合治疗的抗炎活性。

本领域已知***反应和哮喘的动物模型，如Ewart等，1995J Appl Physiol79(2)：560-566所述的带有吸气末闭塞的恒流吹胀(constant-fow inflation withend-inspiratory occlusion)和如Komai等，2003Br J Pharmacol 138(5)：912-920；Kenyon等，2003Toxicol Appl Pharmacol 186(2)：90-100；Path等，2002Am J Respand Critical Care Med 166(6)：818-826；Martins等，1990Crit Care Med 19：515-519；Nicolaides等，1997Proc Natl Acad Sci USA 94：13175-13180；McLane等，1998 19：713-720；和Temann等，1998J Exp Med 188(7)：：1307-1320所述的其它实验。例如，鼠过继转移模型是用于评估本发明的抗体、组合物或联合治疗在预防、治疗和/或控制哮喘中的功效的动物模型。在鼠过继转移模型中，TH1或TH2接受小鼠的气源性致敏原诱发试验导致TH效应细胞迁移到呼吸道，并且与强烈的嗜中性(TH1)和嗜酸性(TH2)肺粘膜炎症反应相关联(Cohn等，1997，J.Exp.Med.1861737-1747)。可以用卵清蛋白(Tomkinson等，2001，J.Immunol.166：5792-5800)或曼氏血吸虫(Schistosoma mansoni)卵抗原(Tesciuba等，2001，J.Immunol.167：1996-2003)诱导小鼠的气道发生超敏反应。

可通过，例如，检测本发明抗体、组合物或联合治疗减轻炎性疾病的一种或多种症状、降低T细胞活化、降低T细胞增殖、调节一种或多种细胞因子特性、减少细胞因子的产生，减轻关节、器官或组织炎症或改善生活质量来证明预防或治疗炎性疾病的功效。

也可通过触痛和肿胀关节计数、患者和医生对疼痛和疾病活性的整体评分以及ESR/CRP来评估炎性疾病活性的改变。可通过对手、手腕和脚的X线照片进行定量评分(Sharp法)，评估结构性关节损伤的进展。可利用健康评估调查问卷(Health Assessment Questionnaire)(HAQ)评价炎性疾病患者的功能状态的改变，用SF评价生活质量的改变。

可通过确定本发明抗体、组合物或联合治疗在体外诱导能抑制IgE与肥大细胞或嗜碱性细胞上的受体结合的抗-IgE抗体的能力，评估它们在预防、治疗和/或控制I型***反应中的功效。可利用免疫实验、凝胶电泳后目测观察、放射性免疫吸附试验(RIST)、放射性变应原吸附试验(RAST)或本领域技术人员已知的任何其它方法测定IgE水平。

也可采用病毒感染的动物模型评估本发明抗体、组合物或联合治疗的功效。已经开发了病毒感染，如EBV-相关疾病、γ疱疹病毒、传染性单核细胞增多症、猿免疫缺陷病毒(“SIV”)、波尔纳病病毒感染、肝炎、水痘病毒感染、病毒性肺炎、EB病毒病、猫免疫缺陷病毒(“FIV”)、1型HTLV感染、人轮状病毒和生殖器疱疹的动物模型(参见例如，Hayashi等，2002，Histol Histopathol17(4)：1293-310；Arico等，2002，J Interferon Cytokine Res 22(11)：1081-8；Flano等，2002，Immunol Res 25(3)：201-17；Sauermann，2001，Curr Mol Med1(4)：515-22；Pletnikov等，2002，Front Biosci 7：d593-607；Engler等，2001，Mol Immunol 38(6)：457-65；White等，2001，Brain Pathol 11(4)：475-9；Davis和Matalon，2001，News Physiol Sci 16：185-90；Wang，2001，Curr Top MicrobiolImmunol.258：201-19；Phillips等，2000，J Psychopharmacol.14(3)：244-50；Kazanji，2000，AIDS Res Hum Retroviruses.16(16)：1741-6；Saif等，1996，ArchVirol增刊12：153-61；和Hsiung等，1984，Rev Infect Dis.6(1)：33-50)。

也可采用病毒性呼吸道感染，例如但不限于：PIV(参见例如，Shephard等，2003Res Vet Sci 74(2)：187-190；Ottolini等，2002J Infect Dis 186(12)：1713-1717)、RSV(参见例如，Culley等，2002J Exp Med 196(10)：1381-1386；和Curtis等，2002Exp Biol Med 227(9)：799-802)的动物模型。在一个具体实施方式中，按照本发明方法给予棉鼠本发明抗体、组合物或联合治疗，用10⁵pfu的RSV刺激，四天或更多天后处死大鼠，测定RSV滴度和抗-RSV抗体血清滴度。因此，与用10⁵pfu RSV刺激但不给予该制剂的棉鼠相比，在用10⁵pfuRSV刺激的棉鼠中导致RSV滴度降低2个对数值或降低99％的剂量是可给予人以便预防、治疗和/或控制与RSV感染有关的一种或多种症状的制剂剂量。另外，按照这个实施方式，可检测处死大鼠的组织(如肺组织)的组织学改变。

可检测本发明抗体、组合物或联合治疗降低病毒感染时程的能力。也可检测本发明抗体、组合物或联合治疗使病毒感染患者的存活时间延长至少25％，至少50％，至少60％，至少75％，至少85％，至少95％，或至少99％的能力。另外，可检测本发明抗体、组合物或联合治疗使病毒感染患者的住院时间减少至少60％、至少75％、至少85％、至少95％或至少99％的能力。可利用本领域技术人员已知技术分析本发明抗体、组合物或联合治疗的体内功能。

也可采用细菌感染的动物模型评估本发明抗体、组合物或联合治疗的功效。已经开发了细菌感染，如幽门螺杆菌(H.pylori)感染，生殖器支原体病，原发性硬化性胆管炎，霍乱，绿脓假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)的慢性肺感染，军团病，胃-十二指肠溃疡，细菌性脑膜炎，胃螺杆菌(Helicobacter)感染，肺炎球菌性中耳炎，实验性变应性神经炎，麻风性神经病，分枝杆菌感染，心内膜炎，气单胞菌相关性肠炎，脆弱拟杆菌(Bacteroides fragilis)感染，梅毒，链球菌性心内膜炎，急性血源性骨髓炎，人丛林斑疹伤寒，中毒性休克综合征，厌氧菌感染，大肠杆菌(Escherichia coli)感染和肺炎支原体(Mycoplasmapneumoniae)感染的动物模型(参见例如，Sugiyama等，2002，J Gastroenterol.37增刊13：6-9；Brown等，2001，Am J Reprod Immunol.46(3)：232-41；Vierling，2001，Best Pract Res Clin Gastroenterol.15(4)：591-610；Klose，2000，TrendsMicrobiol.8(4)：189-91；Stotland等，2000，Pediatr Pulmonol.30(5)：413-24；Brieland等，2000，Immunopharmacology 48(3)：249-52；Lee，2000，Baillieres BestPract Res Clin Gastroenterol.14(1)：75-96；Koedel和Pfister，1999，Infect Dis ClinNorth Am.13(3)：549-77；Nedrud，1999，FEMS Immunol Med Microbiol.24(2)：243-50；Prellner等，1999，Microb Drug Resist.5(1)：73-82；Vriesendorp，1997，J Infect Dis.176增刊2：S164-8；Shetty和Antia，1996，Indian J Lepr.68(1)：95-104；Balasubramanian等，1994，Immunobiology 191(4-5)：395-401；Carbon等，1994，Int J Biomed Comput.36(1-2)：59-67；Haberberger等，1991，Experientia.47(5)：426-9；Onderdonk等，1990，Rev Infect Dis.12增刊2：S169-77；Wicher和Wicher，1989，Crit Rev Microbiol.16(3)：181-234；Scheld，1987，JAntimicrob Chemother.20增刊A：71-85；Emslie和Nade，1986，Rev Infect Dis.8(6)：841-9；Ridgway等，1986，Lab Anim Sci.36(5)：481-5；Quimby和Nguyen，1985，Crit Rev Microbiol.12(1)：1-44；Onderdonk等，1979，Rev Infect Dis.1(2)：291-301；Smith，1976，Ciba Found Symp.(42)：45-72和Taylor-Robinson，1976，Infection.4(增刊1)：4-8)。

可检测本发明抗体、组合物或联合治疗使细菌感染，如细菌性呼吸道感染的时程降低至少25％、至少50％、至少60％、至少75％、至少85％、至少95％或至少99％的能力。也可检测本发明抗体、组合物或联合治疗使细菌感染患者的存活时间延长至少25％，至少50％，至少60％，至少75％，至少85％，至少95％，或至少99％的能力。另外，可检测按照本发明方法给予的抗体、组合物或联合治疗使细菌感染，如细菌性呼吸道感染患者的住院时间减少至少60％、至少75％、至少85％、至少95％或至少99％的能力。可利用本领域技术人员已知技术分析本发明抗体、组合物或联合治疗的体内功能。

可利用感染动物模型评估本发明抗体、组合物或联合治疗在预防、治疗和/或控制真菌感染中的功效。已经开发了真菌感染，如念珠菌(Candida)感染、接合菌病、念珠菌乳腺炎、进行性播散性毛孢子菌病和潜伏性毛孢子菌血症、播散性念珠菌病、肺副球孢子菌病、肺曲霉病、卡氏肺囊虫肺炎、隐球菌性脑膜炎、球孢子菌性脑膜脑炎和脑脊髓血管炎、黑曲霉(Aspergillus niger)感染、镰刀菌(Fusarium)角膜炎、鼻旁窦霉菌病、烟曲霉心内膜炎、胫骨软骨发育不良、光滑念珠菌性***炎、口咽念珠菌病、X-连锁慢性肉芽肿病、脚癣、皮肤念珠菌病、霉菌性胎盘炎、播散性毛孢子菌病、变应性支气管肺曲菌病、真菌性角膜炎、新型隐球菌(Cryptococcus neoformans)感染、真菌性腹膜炎、膝弯孢霉(Curvularia geniculata)感染、葡萄球菌眼内炎、孢子丝菌病和皮肤癣菌病的动物模型(参见例如，Arendrup等，2002，Infection 30(5)：286-91；Kamei，2001，Mycopathologia 152(1)：5-13；Guhad等，2000，FEMS Microbiol Lett.192(1)：27-31；Yamagata等，2000，J Clin Microbiol.38(9)：32606；Andrutis等，2000，J Clin Microbiol.38(6)：2317-23；Cock等，2000，Rev Inst Med Trop Sao Paulo42(2)：59-66；Shibuya等，1999，Microb Pathog.27(3)：123-31；Beers等，1999，J Lab Clin Med.133(5)：423-33；Najvar等，1999，Antimicrob Agents Chemother.43(2)：413-4；Williams等，1988，J Infect Dis.178(4)：1217-21；Yoshida，1988，Kansenshogaku Zasshi.1998年6月；72(6)：621-30；Alexandrakis等，1998，BrJ Ophthalmol.82(3)：306-11；Chakrabarti等，1997，J Med Vet Mycol.35(4)：295-7；Martin等，1997，Antimicrob Agents Chemother.41(1)：13-6；Chu等，1996，AvianDis.40(3)：715-9；Fidel等，1996，J Infect Dis.173(2)：425-31；Cole等，1995，FEMS Microbiol Lett.15；126(2)：177-80；Pollock等，1995，Nat Genet.9(2)：202-9；Uchida等，1994，Jpn J Antibiot.47(10)：1407-12；Maebashi等，1994，J Med VetMycol.32(5)：349-59；Jensen和Schonheyder，1993，J Exp Anim Sci.35(4)：155-60；Gokaslan和Anaissie，1992，Infect Immun.60(8)：3339-44；Kurup等，1992，JImmunol.148(12)：3783-8；Singh等，1990，Mycopathologia.112(3)：127-37；Salkowski和Balish，1990，Infect Immun.58(10)：3300-6；Ahmad等，1986，Am J Kidney Dis.7(2)：153-6；Alture-Werber E，Edberg SC，1985，Mycopathologia.89(2)：69-73；Kane等，1981，Antimicrob Agents Chemother.20(5)：595-9；Barbee等，1977，Am J Pathol.86(1)：281-4；和Maestrone等，1973，Am J Vet Res.34(6)：833-6)。也开发了真菌性呼吸道感染，如白念珠菌(Candidaalbicans)、烟曲霉、侵袭性肺曲霉病、卡氏肺囊虫、肺隐球菌病、绿脓假单胞菌、灰色小克银汉霉(Cunninghamella bertholletia)的动物模型(参见例如，Aratani等，2002Med Mycol 40(6)：557-563；Bozza等，2002Microbes Infect 4(13)：1281-1290；Kurup等，2002Int Arch Allergy Immunol 129(2)：129-137；Hori等，2002Eur J Immuno 32(5)：1282-1291；Rivera等，2002J Immuno 168(7)：3419-3427；Vassallo等，2001，Am J Respir Cell Mol Biol 25(2)：203-211；Wilder等，2002Am J Respir Cell Mol Biol 26(3)：304-314；Yonezawa等，2000J InfectChemother 6(3)：155-161；Cacciapuoti等，2000Antimicrob Agents Chemother44(8)：2017-2022；和Honda等，1998 Mycopathologia 144(3)：141-146)。

可检测本发明抗体、组合物或联合治疗使真菌性呼吸道感染的时程降低至少25％、至少50％、至少60％、至少75％、至少85％、至少95％或至少99％的能力。也可检测本发明抗体、组合物或联合治疗使真菌性呼吸道感染患者的存活时间延长至少25％，至少50％，至少60％，至少75％，至少85％，至少95％，或至少99％的能力。另外，可检测按照本发明方法给予的抗体、组合物或联合治疗使真菌性呼吸道感染患者的住院时间减少至少60％、至少75％、至少85％、至少95％或至少99％的能力。可利用本领域技术人员已知技术分析本发明抗体、组合物或联合治疗的体内功能。

另外，本领域技术人员已知的任何试验均可用于评估本文所述抗体、组合物或联合治疗在预防、治疗、控制和/或缓解与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状中的预防和/或治疗用途。

5.7.3.毒性试验

可通过标准药学方法，在细胞培养物或实验动物中测定LD50(使50％群体死亡的剂量)和ED50(在50％群体中有效治疗的剂量)，以确定本发明预防和/或治疗方案的毒性和/或功效。毒性和疗效的剂量比是治疗指数，可表示为LD50/ED50。优选治疗指数大的疗法。虽然可采用存在毒副作用的治疗，但应仔细设计使这类药物靶向患病组织位点的递送***，以最大程度降低对未感染细胞的潜在损伤，从而降低副作用。

可利用获自细胞培养实验和动物研究的数据制定人用预防剂和/或治疗剂的剂量范围。这类药物的剂量优选属于毒性很小或无毒性的包含ED50在内的循环浓度范围。该剂量可根据所用剂型和所用给药途径在此范围内变化。就本发明方法所用的任何治疗而言，最初可由细胞培养实验估计治疗有效剂量。可以调整动物模型中的剂量，以实现包括IC50(即，受试化合物实现半数最大症状抑制的浓度)的循环血浆浓度范围(经细胞培养测定)。可利用这些信息更精确地确定人用剂量。例如，可通过高效液相色谱测定血浆水平。

另外，本领域技术人员已知的任何试验均可用于评估本文所述抗体、组合物或联合治疗在与IL9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状中的预防和/或治疗用途。

5.8.抗体制剂的诊断应用

免疫特异性结合感兴趣抗原(如IL-9多肽)的本发明液体制剂的抗体(包括含有抗体片段或其变体、或由其组成的分子)可用于诊断目的，以检测、诊断、预测或监测疾病或失调，例如，与IL9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状。本发明提供检测IL-9异常表达的方法，所述方法包括：(a)用免疫特异性结合IL-9多肽的本发明液体制剂的一种或多种抗体测定某个体的生物样品中IL-9的表达；和(b)将IL-9水平与IL-9标准水平，如正常生物样品中的标准水平作比较，与IL-9标准水平相比IL-9测定水平升高或降低表明与患有IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状。在具体实施方式中，IL-9的表达水平异常表明患有自身免疫性疾病，或者与其相关的疾病或病症。在另一具体实施方式中，IL-9的表达水平异常表明患有炎性疾病，或者与其相关的疾病或病症，如哮喘。在优选实施方式中，IL-9的表达水平异常表明患有呼吸道感染，例如但不限于RSV、PVI或hMPV。

在某些实施方式中，将免疫特异性结合IL-9的本发明液体制剂的标记抗体用于诊断目的，以检测、诊断、预测或监测呼吸道感染，如RSV感染、PIV感染或hMPV。本发明提供检测呼吸道感染的方法，所述方法包括：(a)利用免疫特异性结合IL-9的一种或多种抗体检测对象的细胞或组织样品中IL-9的表达；和(b)将IL-9水平与对照水平，例如未感染的正常组织样品中的水平作比较，与IL-9对照水平相比IL-9测定水平升高则表明存在呼吸道感染。

可通过本文所述或本领域技术人员已知的经典免疫组织学方法，用本发明液体制剂的抗体测定生物样品中的IL-9水平(参见例如Jalkanen等，1985，J.Cell.Biol.101：976-985；和Jalkanen等，1987，J.Cell.Biol.105：3087-3096)。用于检测蛋白质基因表达的其它基于抗体的方法包括免疫实验，如酶联免疫吸附实验(ELISA)和放射性免疫实验(RIA)。本领域了解合适的抗体测定标记，包括酶标记，如葡糖氧化酶；放射性同位素，如碘(¹²⁵I、¹²¹I)、碳(¹⁴C)、硫(³⁵S)、氚(³H)、铟(¹²¹In)和锝(⁹⁹Tc)；发光标记，如鲁米诺；和荧光标记，如荧光素和罗丹明，以及生物素。

本发明一方面是在动物，优选哺乳动物，最优选人中检测和诊断与IL-9异常表达有关的疾病或失调。在一个实施方式中，诊断包括：a)给予(例如，胃肠道外、皮下或腹膜内给予)对象有效量的免疫特异性结合IL-9多肽的本发明液体制剂的标记抗体(包括含有抗体片段或其变体、或由其组成的分子)；b)给药后等待一段时间间隔，以便使标记抗体在对象中表达IL-9的部位优先浓缩(并将未结合的标记分子清除至背景水平)；c)测定背景水平；和d)检测对象中的标记抗体，检测到背景水平以上且在未患所述疾病或失调的人的水平以上或以下的标记抗体(包括其抗体片段)表明该对象患有与IL-9异常表达有关的特定疾病或失调。可通过各种方法测定背景水平，包括将检测到的标记分子量与以前测定的特定***的标准值作比较。IL-9的异常表达尤其可发生于淋巴和骨髓细胞类型中。更确定地诊断呼吸道感染可以使健康护理工作人员更早采取预防性措施或主动治疗，从而防止感染的发生或进一步进展。

本领域应理解，对象大小和所用成像***将决定产生诊断图像所需的成像部分(imaging moiety)的用量。在使用放射性同位素部分的情况下，对人对象而言，所注射放射量的范围通常是约5-20毫居里的⁹⁹Tc。然后，标记抗体优先在含有特定蛋白质的细胞部位累积。体内肿瘤成像参见S.W.Burchiel等，“放射性标记抗体和其片段的免疫药动学”(Immunopharmacokinetics of RadiolabeledAntibodies and Their Fragments)(《肿瘤成像：癌症的放射化学检测》(TumorImaging：The Radiochemical Detection ofCancer)，第13章，S.W.Burchiel和B.A.Rhodes编，马森出版公司(Masson Publishing Inc.)(1982))。根据几种变量，包括所用标记类型和给药方式，给药后使标记分子优先浓缩在对象某部位且使未结合的标记分子清除至背景水平的时间间隔是6至48小时、6至24小时或6至12小时。在另一实施方式中，给药后的事件间隔是5至20天或5至10天。

在一个实施方式中，通过重复诊断疾病或失调的方法，例如，在初次诊断后一个月、初次诊断后6个月或初次诊断后1年等重复诊断，从而监测疾病或失调。

可采用本领域已知用于体内扫描的方法检测患者体内是否存在标记IL-9抗体。这些方法依赖所用的标记类型。本领域技术人员能够确定适合检测特定标记的方法。可用于本发明诊断方法的方法和装置包括但不限于：计算断层照相法(CT)、全身扫描如正电子断层照相法(PET)、磁共振成像(MRI)和超声成像术。

在一个具体实施方式中，用放射性同位素标记IL-9抗体，并用辐射响应性手术设备(Thurston等，美国专利号5,441,050)在患者体内检测。在另一实施方式中，用荧光化合物标记IL-9抗体，用荧光响应性扫描设备在患者体内检测。在另一实施方式中，用正电子发射金属标记IL-9抗体，用正电子发射照相术在患者体内检测。在又一实施方式中，用顺磁性标记物标记IL-9抗体，用磁共振成像术(MRI)在患者体内检测。

可利用本发明抗体(包括含有抗体片段或其变体、或由其组成的分子)，根据IL-9表达或IL-9受体表达对细胞系和生物样品进行免疫表型分析。可通过各种技术，利用本发明液体制剂的抗体、片段或变体筛选细胞群体(表达IL-9和/或IL-9受体的细胞群体，特别是免疫细胞，即T和B淋巴细胞、肥大细胞、嗜酸性粒细胞、巨噬细胞、中性粒细胞和上皮细胞或IL-9受体，包括用抗体包被的磁珠进行磁分离、用连接于固体基质(即平板)的抗体和流式细胞术“淘选”(参见例如，美国专利5,985,660；和Morrison等，Cell，96：737-49(1999))。

这些技术能够筛选特定细胞群体，例如血液恶性肿瘤中发现的细胞群体(即，急性白血病患者中的微小残留病(MRD))和移植中的“非自身”细胞，以预防移植物抗宿主病(GVHD)。或者，这些技术可筛选能够发生增殖和/或分化的造血干细胞和祖细胞，例如人脐带血中发现的细胞。

5.9.药盒

本发明提供包括一个或多个装有本发明液体制剂的容器的药物包装或药盒。在一个具体实施方式中，本发明液体制剂包含与另一部分重组融合或化学偶联的抗体(包括其抗体片段)，所述另一部分包括但不限于：异源蛋白、异源多肽、异源肽、大分子、小分子、标记序列、诊断或检测试剂、治疗部分、药物部分、放射性金属离子、第二抗体和固体支持物。本发明也提供包括一个或多个第一容器和一个或多个第二容器的药物包装或药盒，所述第一容器中装有本发明液体制剂，所述第二容器中装有一种或多种其它预防剂或治疗剂，用于预防、控制或治疗疾病或失调，例如，与IL9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状。在一个实施方式中，在单剂量药瓶中配制本发明液体制剂，形成含有50mM磷酸盐缓冲液，pH 6.2和150mM氯化钠的无菌液体。本发明制剂可以装在3cc USP I型硼硅玻璃琥珀色药瓶(西部制药公司(West Pharmaceutical Serices)-编号6800-0675)中，目标体积1.2mL。所述容器任选粘附有关于药品或生物制品的生产、使用或销售的政府机构颁发的告知书，该告知书反映出生产、使用或销售管理机构批准其用于人体。

本发明提供了可用于上述方法的药盒。在一个实施方式中，药盒中所装的一个或多个容器中包含本发明液体制剂。在另一实施方式中，药盒在所装的一个或多个容器中包含本发明液体制剂，在另外一个或多个容器中包含一种或多种用于预防、控制或治疗疾病或失调的其它预防剂或治疗剂，所述疾病或失调可能是与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调，与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状。在一个具体实施方式中，所述液体制剂中所含的抗体(包括其抗体片段)是4D4、4D4H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4，或其抗原结合片段。在另一实施方式中，所述液体制剂中所含的抗体(包括其抗体片段)不是4D4、4D4 H2-1 D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F3 22D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4或其抗原结合片段。优选地，该药盒还包括预防、治疗和/或控制疾病(例如，单独或与另一预防剂或治疗剂联合使用本发明液体制剂或)，以及副作用和给药方法的剂量信息的说明书。

5.10.制品

本发明也包括包装和标记好的最终药品。制备包括在合适器皿或容器，如密封的玻璃药品或其它容器中的单位剂型。在适合胃肠道外给药的剂型的情况下，活性成分，如免疫特异性结合感兴趣抗原(如IL-9多肽)的本发明抗体是无菌的，并且适合以无颗粒溶液的行使给药。换言之，本发明包括无菌的胃肠道外溶液和冻干粉末，后者适合在注射前重建。或者，单位剂型可以是适合口服、透皮、鼻内或局部递送的固体。

在一个实施方式中，单位剂型适合静脉内、肌肉内、鼻内、口服、局部或皮下递送。因此，本发明包括适合各递送途径的溶液，优选无菌溶液。

如同任何药品那样，设计包装材料和容器，以保护该产品在储存和运输过程中的稳定性。另外，本发明产品包括指导医生、技术人员或患者如何适当地预防或治疗所研究的疾病或失调的使用说明书或其它说明材料。换言之，该制品包括表明或提示给药方案的说明材料，包括但不限于：实际剂量、监测步骤、总淋巴细胞、肥大细胞计数、T细胞计数、IgE产生和其它监测信息。

具体说，本发明提供包括包装材料的制品，所述包装材料包括例如：盒、罐、管、小瓶、容器、喷雾器、吹药器、静脉内(i.v.)给药包、封袋等；所述包装材料中含有至少一个单位剂型的药剂，其中所述药剂包括含有抗体的液体制剂。包装材料包括表明可通过给予特定剂量和使用本文所述的特定给药方案，用所述抗体预防、治疗和/或控制与诸如IL-9多肽等的异常表达和/或活性有关的疾病、与IL-9R或其一种或多种亚单位的异常表达和/或活性有关的疾病、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病、感染(如呼吸道感染)的一种或多种症状或者它们的一种或多种症状的说明材料。

本发明还提供包括包装材料，如盒、罐、管、小瓶、容器、喷雾器、吹药器、静脉内(i.v.)给药包、封袋等的制品；所述包装材料中含有至少一个单位剂型的各药剂，其中一种药剂包括含有感兴趣抗体，如免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的液体制剂，另一种药剂包括免疫特异性结合IL-9多肽的第二种不同抗体，其中所述包装材料包括表明可通过给予特定剂量和使用本文所述的特定给药方案，使用所述药剂预防、治疗和/或控制与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关的疾病、与IL-9R或其一种或多种亚单位的异常表达和/或活性有关的疾病、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病、感染(如呼吸道感染)或者它们的一种或多种症状的说明材料。

本发明还提供包括包装材料，如盒、罐、管、小瓶、容器、喷雾器、吹药器、静脉内(i.v.)给药包、封袋等的制品；所述包装材料中含有至少一个单位剂型的各药剂，其中一种药剂包括含有感兴趣抗体，如免疫特异性结合IL-9多肽的抗体的液体制剂，另一种药剂包括除免疫特异性结合IL-9多肽的抗体以外的预防剂或治疗剂，其中所述包装材料包括表明可通过给予特定剂量和使用本文所述的特定给药方案，使用所述药剂预防、治疗和/或控制与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关的疾病、与IL-9R或其一种或多种亚单位的异常表达和/或活性有关的疾病、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病、感染(如呼吸道感染)的一种或多种症状或者它们的一种或多种症状的说明材料。

本发明提供，用于预防、治疗和/或控制与自身免疫性疾病、炎性疾病或感染有关的一种或多种症状的制品中包括的指导材料表明可通过本发明方法减轻或避免不良作用。可通过本发明方法减轻或避免的不良作用包括但不限于：生命征象异常(发热、心动过速、心动过缓、高血压、低血压)、血液问题(贫血、淋巴细胞减少、白细胞减少、血小板减少)、头痛、畏寒、头晕、恶心、虚弱、背痛、胸痛(胸压痛)、腹泻、肌痛、疼痛、瘙痒、牛皮癣、鼻炎、发汗、注射部位反应和血管舒张。

另外，用于预防、治疗和/或控制疾病或失调，例如与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调，与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病、炎性疾病、自身免疫性疾病、增殖性疾病或感染(如呼吸道感染)，或其一种或多种症状的制品中包括的指导材料可表明，外来蛋白质也可导致***反应，包括过敏反应或胞嘧啶释放综合征。该指导材料应说明，***反应可能只表现为轻微的瘙痒性皮疹，或者可能是严重的反应，例如红皮病、斯蒂文斯-约翰逊综合症、血管炎或过敏反应。该指导材料也应说明，过敏反应(过敏)是严重的，有时是致命的超敏反应。任何外来蛋白质注射到人体内时，可能引起***反应，包括过敏反应。它们可包括温和的表现，例如荨麻疹或皮疹，直至致命的全身反应。过敏反应在接触后迅速(通常在10分钟内)发生。患者可能产生感觉异常、低血压、喉水肿、精神状态改变、面部或咽部血管性水肿、气道阻塞、支气管痉挛、荨麻疹和搔痒、血清病、关节炎、变应性肾炎、肾小球肾炎、暂时性关节炎或嗜酸性粒细胞增多。

6.具体实施方式

1.一种抗体制剂，其包含水性载体、磷酸盐和50mg/ml或更高浓度的抗体或抗体片段，所述抗体制剂经配制适合给予人对象。

2.一种经配制适合给予人对象的抗体制剂，所述制剂包含水性载体、磷酸盐和10mg/ml或更高浓度的抗体或抗体片段，其中，在盐存在下用pH低于所述抗体pI的磷酸盐缓冲液配制时，与相同浓度的盐存在下用所述pH的组氨酸缓冲液配制的所述抗体相比，所述抗体或抗体片段的一种或多种以下相特性降低：

a)形成解折叠的中间体；

b)胶体不稳定性；

c)抗体分子的可溶性结合；或

d)抗体分子的沉淀；

其中所述至少一种或多种相特性是通过选自下组的技术测定的：高效大小排阻色谱(HPSEC)技术、切向流过滤(TFF)技术、静态光散射(SLS)技术、傅里叶变换红外光谱(FTIR)技术、圆二色性(CD)技术、尿素-诱导的蛋白质解折叠技术、色氨酸固有荧光技术、差示扫描量热法(DSC)和1-苯胺基-8-萘磺酸(ANS)蛋白质结合技术。

3.如实施方式1或2所述的制剂，其中，所述抗体或抗体片段免疫特异性结合IL-9多肽。

4.如实施方式1或2所述的制剂，其中，所述水性载体是蒸馏水。

5.如实施方式1或2所述的制剂，其中，所述制剂的pH范围是4.0至8.0。

6.如实施方式5所述的制剂，其中，所述pH范围是约6.0至6.5。

7.如实施方式1或2所述的制剂，还包含浓度不超过约200mM的盐。

8.如实施方式7所述的制剂，其中，所述盐的浓度范围是约100mM至约200mM。

9.如实施方式6所述的制剂，还包含浓度范围是约100至约200mM的盐。

10.如实施方式1或2所述的制剂，还包含糖。

11.如实施方式6所述的制剂，还包含糖。

12.如实施方式10所述的制剂，其中，所述糖是蔗糖。

13.如实施方式11所述的制剂，其中，所述糖是蔗糖。

14.如实施方式10所述的制剂，其中，所述糖是海藻糖。

15.如实施方式11所述的制剂，其中，所述糖是海藻糖。

16.如实施方式12所述的制剂，其中，所述蔗糖的浓度最高为10％。

17.如实施方式13所述的制剂，其中，所述蔗糖的浓度最高为10％。

18.如实施方式14所述的制剂，其中，所述海藻糖的浓度最高为10％。

19.如实施方式15所述的制剂，其中，所述海藻糖的浓度最高为10％。

20.如实施方式1或2所述的制剂，还包含表面活性剂。

21.如实施方式6所述的制剂，还包含表面活性剂。

22.如实施方式9所述的制剂，还包含表面活性剂。

23.如实施方式21所述的制剂，其中，所述表面活性剂是吐温-20或吐温-80。

24.如实施方式22所述的制剂，其中，所述表面活性剂是吐温-20或吐温-80。

25.如实施方式23所述的制剂，其中，所述表面活性剂的浓度最高为0.1％。

26.如实施方式24所述的制剂，其中，所述表面活性剂的浓度最高为0.1％。

27.如实施方式1或2所述的制剂，其中，所述抗体或抗体片段的浓度为至少100mg/ml。

28.如实施方式1或2所述的制剂，其中，所述抗体或抗体片段的浓度范围为约50mg/ml至约150mg/ml。

29.如实施方式1或2所述的制剂，其中，磷酸盐的浓度范围为约10mM至约100mM。

30.如实施方式29所述的制剂，其中，磷酸盐的浓度范围为约25mM至约75mM。

31.如实施方式1或2所述的制剂，其中，经高效大小排阻色谱(HPSEC)测定，所述抗体或抗体片段在40℃储存期间，具有至少15天的稳定性。

32.如实施方式1或2所述的制剂，其中，经HPSEC测定，所述抗体或抗体片段在室温储存期间，具有至少6个月的稳定性。

33.如实施方式1或2所述的制剂，其中，经HPSEC测定，所述抗体或抗体片段在4℃储存期间，具有至少1.5年的稳定性。

34.如实施方式1或2所述的制剂，其中，经HPSEC测定，在储存期间小于5％的所述抗体或抗体片段形成聚集体。

35.如实施方式6所述的制剂，其中，经HPSEC测定，在储存期间小于5％的所述抗体或抗体片段形成聚集体。

36.如实施方式9所述的制剂，其中，经HPSEC测定，在储存期间小于5％的所述抗体或抗体片段形成聚集体。

37.如实施方式1或2所述的制剂，其中，经HPSEC测定，在储存期间小于2％的所述抗体或抗体片段形成聚集体。

38.如实施方式6所述的制剂，其中，经HPSEC测定，在储存期间小于2％的所述抗体或抗体片段形成聚集体。

39.如实施方式9所述的制剂，其中，经HPSEC测定，在储存期间小于2％的所述抗体或抗体片段形成聚集体。

40.如实施方式1或2所述的制剂，其中，经HPSEC测定，在储存期间小于1％的所述抗体或抗体片段形成聚集体。

41.如实施方式6所述的制剂，其中，经HPSEC测定，在储存期间小于1％的所述抗体或抗体片段形成聚集体。

42.如实施方式9所述的制剂，其中，经HPSEC测定，在储存期间小于1％的所述抗体或抗体片段形成聚集体。

43.如实施方式1或2所述的制剂，其中，与代表储存前抗体的参比抗体相比，所述抗体或其片段保持至少80％的结合能力。

44.如实施方式6所述的制剂，其中，与代表储存前抗体的参比抗体相比，所述抗体或其片段保持至少80％的结合能力。

45.如实施方式9所述的制剂，其中，与代表储存前抗体的参比抗体相比，所述抗体或其片段保持至少80％的结合能力。

46.如实施方式1或2所述的制剂，其中，与参比抗体相比，所述抗体或其片段保持至少85％的结合能力。

47.如实施方式6所述的制剂，其中，与参比抗体相比，所述抗体或其片段保持至少85％的结合能力。

48.如实施方式9所述的制剂，其中，与参比抗体相比，所述抗体或其片段保持至少85％的结合能力。

49.如实施方式1或2所述的制剂，其中，与参比抗体相比，所述抗体或其片段保持至少90％的结合能力。

50.如实施方式6所述的制剂，其中，与参比抗体相比，所述抗体或其片段保持至少90％的结合能力。

51.如实施方式9所述的制剂，其中，与参比抗体相比，所述抗体或其片段保持至少90％的结合能力。

52.如实施方式1或2所述的制剂，其中，与参比抗体相比，所述抗体或其片段保持至少95％的结合能力。

53.如实施方式6所述的制剂，其中，与参比抗体相比，所述抗体或其片段保持至少95％的结合能力。

54.如实施方式9所述的制剂，其中，与参比抗体相比，所述抗体或其片段保持至少95％的结合能力。

55.如实施方式1或2所述的制剂，其中，所述抗体或抗体片段是4D4、4D4H2-1 D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4，或其抗原结合片段。

56.如实施方式6所述的制剂，其中，所述抗体或抗体片段是4D4、4D4H2-1D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4，或其抗原结合片段。

57.如实施方式9所述的制剂，其中，所述抗体或抗体片段是4D4、4D4H2-1 D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F3 22D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4，或其抗原结合片段。

58.如实施方式57所述的制剂，其中，所述抗体或抗体片段是7F3com-2H2。

59.一种适合胃肠道外给予人的药物单位剂型，其包含装在合适容器中的实施方式1或2所述的抗体制剂。

60.如实施方式59所述的药物单位剂型，其中，所述抗体制剂用于静脉内、皮下或肌肉内注射。

61.一种适合以气雾剂给予人的药物单位剂型，其包含装在合适容器中的实施方式1或2所述的抗体制剂。

62.如实施方式61所述的药物单位剂型，其中，所述抗体制剂是经鼻内给药的。

63.一种抗体制剂，其通过冻干实施方式1或2所述的水性抗体制剂产生。

64.一种密封容器，其含有实施方式1或2所述的制剂。

65.一种密封容器，其含有实施方式9所述的制剂。

66.如实施方式64所述的密封容器，其具有足以用药学上可接受的载体进行重建的容积。

67.如实施方式66所述的密封容器，其中，所述载体是注射用水，USP，5％葡萄糖的水溶液(D5W)或盐水。

68.如实施方式67所述的密封容器，其中，所述容器能维持无菌环境，并在不丧失无菌性的条件下重建所述制剂。

69.一种药盒，其包括装在一个或多个容器中的抗体制剂和该制剂的使用说明书，所述抗体制剂含有水性载体、磷酸盐和50mg/ml或更高浓度的抗体或其片段，并且经配制适合给予人对象。

70.如实施方式69所述的药盒，其中，所述制剂是无菌制剂。

71.如实施方式69所述的药盒，其中，所述水性载体是蒸馏水。

72.如实施方式70所述的药盒，其中，所述抗体或抗体片段是4D4、4D4H2-1 D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F322D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4，或其抗原结合片段。

73.如实施方式72所述的药盒，其中，所述抗体或抗体片段是7F3com-2H2。

74.如实施方式70、72或73所述的药盒，其中，所述制剂是通过冻干水性抗体制剂产生的。

75.如实施方式70或73所述的药盒，其中，所述抗体或抗体片段的浓度为约50mg/ml至约150mg/ml。

76.一种预防、控制、治疗或改善炎性疾病、自身免疫性疾病、与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关的疾病、与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(优选呼吸道感染)，或其一种或多种症状的方法，所述方法包括给予需要的对象预防或治疗有效量的实施方式56所述的抗体制剂。

77.一种预防、控制、治疗或改善与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(优选呼吸道感染)，或其一种或多种症状的方法，所述方法包括给予需要的对象预防或治疗有效量的实施方式57所述的抗体制剂。

78.一种预防、控制、治疗或改善与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(优选呼吸道感染)，或其一种或多种症状的方法，所述方法包括给予需要的对象预防或治疗有效量的实施方式58所述的抗体制剂。

79.如实施方式76所述的方法，其中，经HPSEC测定，所述抗体或其抗体片段多肽在40℃储存期间，具有至少15天的稳定性。

80.如实施方式77所述的方法，其中，经HPSEC测定，所述抗体或其抗体片段多肽在40℃储存期间，具有至少15天的稳定性。

81.如实施方式78所述的方法，其中，经HPSEC测定，所述抗体或其抗体片段多肽在40℃储存期间，具有至少15天的稳定性。

82.如实施方式76所述的方法，其中，经HPSEC测定，在储存期间小于5％的所述抗体或抗体片段形成聚集体。

83.如实施方式77所述的方法，其中，经HPSEC测定，在储存期间小于5％的所述抗体或抗体片段形成聚集体。

84.如实施方式78所述的方法，其中，经HPSEC测定，在储存期间小于5％的所述抗体或抗体片段形成聚集体。

85.如实施方式76所述的方法，其中，与代表储存前抗体或抗体片段的参比抗体相比，所述抗体或其片段保持至少80％与IL-9多肽的结合能力。

86.如实施方式77所述的方法，其中，与代表储存前抗体或抗体片段的参比抗体相比，所述抗体或其片段保持至少80％与IL-9多肽的结合能力。

87.如实施方式78所述的方法，其中，与代表储存前抗体或抗体片段的参比抗体相比，所述抗体或其片段保持至少80％与IL-9多肽的结合能力。

88.如实施方式76所述的方法，其中，所述制剂是经胃肠道外给予的。

89.如实施方式77所述的方法，其中，所述制剂是经胃肠道外给予的。

90.如实施方式78所述的方法，其中，所述制剂是经胃肠道外给予的。

91.如实施方式76所述的方法，其中，所述制剂是经皮下、口服或鼻内给予的。

92.如实施方式77所述的方法，其中，所述制剂是经皮下、口服或鼻内给予的。

93.如实施方式78所述的方法，其中，所述制剂是经皮下、口服或鼻内给予的。

94.如实施方式76所述的方法，其中，所述炎性疾病是哮喘或***反应。

95.如实施方式77所述的方法，其中，所述炎性疾病是哮喘或***反应。

96.如实施方式78所述的方法，其中，所述炎性疾病是哮喘或***反应。

97.一种给予对象的抗体制剂，所述制剂包含水性载体、磷酸盐和50mg/ml或更高浓度的7F3com-2H2或其抗原结合片段。

98.如实施方式97所述的制剂，其中，所述制剂是无菌的。

99.如实施方式97所述的制剂，其中，所述水性载体是蒸馏水。

100.如实施方式97或98所述的制剂，其中，所述制剂的pH范围是4.0至8.0。

101.如实施方式100所述的制剂，其中，所述pH范围是约6.0至6.5。

102.如实施方式97或98所述的制剂，还包含浓度不超过约200mM的盐。

103.如实施方式102所述的制剂，其中，所述盐的浓度范围是约100mM至约200mM。

104.如实施方式101所述的制剂，其中，所述盐的浓度范围是约100mM至约200mM。

105.如实施方式97或98所述的制剂，还包含糖。

106.如实施方式101所述的制剂，还包含糖。

107.如实施方式105所述的制剂，其中，所述糖是蔗糖。

108.如实施方式106所述的制剂，其中，所述糖是蔗糖。

109.如实施方式105所述的制剂，其中，所述糖是海藻糖。

110.如实施方式106所述的制剂，其中，所述糖是海藻糖。

111.如实施方式107所述的制剂，其中，所述蔗糖的浓度最高为10％。

112.如实施方式108所述的制剂，其中，所述蔗糖的浓度最高为10％。

113.如实施方式109所述的制剂，其中，所述海藻糖的浓度最高为10％。

114.如实施方式110所述的制剂，其中，所述海藻糖的浓度最高为10％。

115.如实施方式97或98所述的制剂，还包含表面活性剂。

116.如实施方式101所述的制剂，还包含表面活性剂。

117.如实施方式104所述的制剂，还包含表面活性剂。

118.如实施方式116所述的制剂，其中，所述表面活性剂是吐温-20或吐温-80。

119.如实施方式117所述的制剂，其中，所述表面活性剂是吐温-20或吐温-80。

120.如实施方式118所述的制剂，其中，所述吐温-20或吐温-80的浓度最高为0.1％。

121.如实施方式119所述的制剂，其中，所述吐温-20或吐温-80的浓度最高为0.1％。

122.如实施方式97或98所述的制剂，其中，所述抗体或抗体片段的浓度为至少100mg/ml。

123.如实施方式97或98所述的制剂，其中，所述抗体或抗体片段的浓度范围为约50mg/ml至约150mg/ml。

124.如实施方式97或98所述的制剂，其中，磷酸盐的浓度范围为约10mM至约100mM。

125.如实施方式123所述的制剂，其中，磷酸盐的浓度范围为约25mM至约75mM。

126.如实施方式124所述的制剂，其中，磷酸盐的浓度范围为约25mM至约75mM。

127.如实施方式97或98所述的制剂，其中，经高效大小排阻色谱(HPSEC)测定，所述抗体或抗体片段在40℃储存期间，具有至少15天的稳定性。

128.如实施方式97或98所述的制剂，其中，经HPSEC测定，所述抗体或抗体片段在室温储存期间，具有至少6个月的稳定性。

129.如实施方式97或98所述的制剂，其中，经HPSEC测定，所述抗体或抗体片段在4℃储存期间，具有至少1.5年的稳定性。

130.如实施方式97或98所述的制剂，其中，经HPSEC测定，在储存期间小于5％的所述抗体或抗体片段形成聚集体。

131.如实施方式101所述的制剂，其中，经HPSEC测定，在储存期间小于5％的所述抗体或抗体片段形成聚集体。

132.如实施方式104所述的制剂，其中，经HPSEC测定，在储存期间小于5％的所述抗体或抗体片段形成聚集体。

133.一种预防、治疗或控制疾病或失调的方法，所述方法包括给予需要的对象预防或治疗有效量的实施方式1或2所述的抗体制剂。

134.一种给予对象的抗体制剂，所述抗体制剂包含水性载体、约50mg/ml至150mg/ml 7F3com-2H2抗体、约10mM至约75mM磷酸盐、约100mM至200mM NaCl，其中所述制剂的pH为约5.5至6.5。

135.如实施方式134所述的制剂，其中，所述制剂包含水性载体、约100mg/ml 7F3com-2H2抗体、约25mM磷酸盐、约150mM NaCl，其中所述制剂的pH为约6.0。

136.如实施方式135所述的制剂，其中，所述制剂是等张的。

137.如实施方式135所述的制剂，其中，经高效大小排阻色谱(HPSEC)测定，所述抗体或抗体片段在40℃储存期间，具有至少15天的稳定性。

138.如实施方式135所述的制剂，其中，经HPSEC测定，所述抗体或抗体片段在室温储存期间，具有至少6个月的稳定性。

139.如实施方式135所述的制剂，其中，经HPSEC测定，所述抗体或抗体片段在4℃储存期间，具有至少1.5年的稳定性。

140.如实施方式135所述的制剂，其中，经HPSEC测定，在储存期间小于5％的所述抗体或抗体片段形成聚集体。

141.一种预防、控制、治疗或改善炎性疾病、自身免疫性疾病、与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关的疾病、与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(优选呼吸道感染)，或其一种或多种症状的方法，所述方法包括给予需要的对象预防或治疗有效量的实施方式135所述的抗体制剂。

7.实施例

7.1.抗体纯化和抗体制剂

以下章节描述了纯化抗体，以便用于本发明制剂的方法(见图16)。

7.1.1.缓冲液组分和装备

检测缓冲液的生物负载(bioburden)和内毒素。

缓冲液和加工溶液

0.1M柠檬酸，10mM柠檬酸钠，80mM NaCl，pH 4.6

25mM磷酸钠，pH 6.5

20mM Tris-HCl，40mM NaCl，pH 7.5

0.5M磷酸钠，pH 6.5

5mM磷酸钠，40mM NaCl，pH 6.5

50mM甘氨酸-HCl，30mM NaCl，pH 2.5

50mM甘氨酸-HC，pH 2.35

1.0M Tris碱

清洁和储存溶液

注射用水(WFI)

1.0N NaOH

0.1N NaOH

20％(v/v)乙醇

0.5N NaOH，400ppm次氯酸钠

制剂缓冲液

≥10mg/mL感兴趣抗体

10-100mM磷酸盐缓冲液，pH 4-8

0-200mM NaCl，或0-10％蔗糖或海藻糖

0-0.1％吐温-20或吐温-80

装备(用等价执行材料替换是可接受的)

300kg天平

电导计

搅拌板

pH计

容器：适当尺寸的Stedim^TM袋、缓冲液罐、PETG瓶

Watson Marlow 1700蠕动泵

Wedgewood UV，pH，传导单元

Amersham Pharmacia色谱控制器

填充式POROS HS50阳离子交换凝胶

填充式Pharmaciar蛋白A亲和凝胶

填充式POROS HQ阴离子交换凝胶

无菌、去热原的硅胶管

Integritest滤器完整性检测器II

无菌的Asahi Planova 20N膜病毒去除滤器

Millipore 0.2微米Durapore滤器

Millipore多媒体滤器

CUNO 60LP，10/60SP滤器

CUNO滤器罩

100级通风橱

7.1.2.抗体的纯化和配制

图16概括说明纯化和配制本发明抗体(包括其抗体片段)的工艺步骤。纯化方法包括三个色谱步骤、一个纳米过滤步骤、一个低pH处理步骤和配制步骤。设计这些步骤，以去除宿主细胞蛋白质、DNA和细胞培养组分，如BSA和转铁蛋白。此外，该方法包括控制生物负载和内毒素以及去除和灭活病毒的步骤。

7.1.2.1.条件培养基(步骤1-6)

将来自单个细胞培养批次或由多个细胞培养批次汇集的条件培养基纯化成单一批次。将多个细胞培养批次组合成一个纯化批次的目的是利用根据单一批次大小调整的下游加工步骤并减少纯化批次数量。例如，因为130L和250L细胞培养生物反应器的工作容积分别约为100L和200L，所以可汇集这两个细胞培养批次，并作为一个300L纯化批次运行。利用PicoGreen或定量PCR实验分析加工产物样品的DNA，以检测DNA。通过蛋白A可结合HPLC测定或通过280nm的UV吸光度测定蛋白质浓度。监测含有产物的工业生产液流中的内毒素和生物负载。监测柱流出液中的内毒素。下面小结了对各步骤的描述。

7.1.2.2.条件培养基调整和过滤(步骤7)

用0.1M柠檬酸将条件培养基调整为pH 4.6±0.2。然后，利用串联的CUNO滤器和Millipore 0.2微米Durapore滤器过滤经调整的条件培养基。

7.1.2.3.阳离子交换色谱步骤(步骤8)

将经调整和过滤的条件培养基加载到已用10mM磷酸钠，80mM氯化钠，pH 4.6平衡的阳离子交换柱上。用同一缓冲液洗涤结合的抗体。然后用25mM磷酸钠pH 6.5洗涤该柱，以去除加工杂质，特别是BSA。利用20mM Tris-HCl缓冲液，40mMNaCl，pH 7.5洗脱产物。产物洗脱后，用1.0N NaOH清洁该柱，在0.1NNaOH中室温储存。

7.1.2.4.r蛋白A色谱(步骤9)

将阳离子交换产物直接加载到用20mM Tris-HCl缓冲液，40mM NaCl，pH 7.5平衡的r蛋白A柱上。加载后，用平衡缓冲液洗涤该柱，用50mM甘氨酸，30mM NaCl，pH 3.2洗脱产物。用1.0M Tris碱将r蛋白A产物中和至pH 6.5±0.2。这一色谱步骤去除额外的加工相关杂质。在该步骤结束时，该柱用平衡缓冲液洗涤，用0.1N NaOH清洁，用平衡缓冲液洗涤，在20％(v/v)乙醇中室温储存。

7.1.2.5.阴离子交换色谱(步骤10)

这一色谱步骤是经设计能去除任何痕量加工相关杂质的最终步骤。该柱用0.5M磷酸钠，pH 6.5平衡，然后用5mM磷酸钠、40mM氯化钠，pH 6.5平衡。在这些条件下，将中和的r蛋白A产物加载到平衡的阴离子交换柱上，并且在这些条件下，回收非结合组分中的产物，而加工相关杂质则保留在柱上。该柱用1.0N NaOH清洁，并在0.1N NaOH中室温保存。

7.1.2.6.纳米过滤(步骤11)

通过无菌Planova^TM 20N膜(孔径＝20nm)过滤阴离子交换产物，所述膜是通过先用WFI冲洗、再用5mM磷酸钠、40mM氯化钠pH 6.5冲洗制备的。过滤该产物后，用小体积的5mM磷酸钠、40mM氯化钠，pH 6.5冲洗(chase)滤器，以便最大程度回收产物。过滤后，检测纳米滤器的完整性。

7.1.2.7低pH处理(步骤12)

用50mM甘氨酸，pH 2.35将纳米过滤产物的pH调整至3.4±0.1，并保持该pH 30±10分钟。低pH处理后，用1.0M Tris碱将产物pH调整至6.5±0.2。

7.1.2.8.抗-IL-9抗体的配制

通过4M NaCl母液将氯化钠(150mM)加入药物中间体。然后，进行0.2微米过滤，并通过30kD膜进行切向流过滤以便浓缩至20g/L。然后，将产物渗滤至配制缓冲液中，其中至少更换五次缓冲液。然后，将产物浓缩至100g/L，通过1.2/0.2微米膜过滤至无菌

储存袋中。通过大小排阻色谱(SEC)确认样品纯度。

7.2.缓冲液离子诱导的中间体形成

本实施例表明，组氨酸与全长单克隆抗体相互作用导致结构域-结构域相互作用的降低和一些结构域的去稳定。由于组氨酸的这种作用，蛋白质分子通过形成中间体物质逐步解折叠。相反，在所述条件下，磷酸盐与全长单克隆抗体的相互作用不导致形成中间体物质。

7.2.1.材料和方法

尿素-诱导的解折叠实验

在10mM组氨酸(pH 6.0)或10mM磷酸盐缓冲液(pH 6.0)中，在不存在盐或存在150mM NaCl的情况下，使7F3com-2H2发生尿素诱导的解折叠。通过固有色氨酸荧光监测谱质量中心(CSM)随着尿素浓度变化而改变，来测定7F3com-2H2的解折叠。在293nm激发该蛋白质溶液，记录310至400nm的发射光谱。对激发和发射而言，建立的光谱带宽均为4nm。在解折叠和再折叠实验中，23℃培育样品12小时，然后进行测定。对蛋白质达到解折叠平衡而言，此培育时间是最优的。数据用(Y_U-Y_obs)/(Y_U-Y_F)标准化，其中Y_obs是某尿素浓度下观察到的光谱值，Y_F和Y_U分别是折叠和解折叠的7F3com-2H2的光谱值。所有实验均在23℃、蛋白质浓度0.67μM的条件下进行。

差示扫描量热法(DSC)：

在以下条件下对7F3com-2H2进行DSC：(a)10mM组氨酸，pH 6.0，以及不存在盐、存在25mM NaCl或存在150mM NaCl；(b)10mM磷酸盐缓冲液，pH 6.0，以及不存在盐或存在150mM NaCl。在来自麦克卡尔公司(Microcal)的VP DSC超灵敏量热计上进行DSC实验。用相应缓冲液完全透析蛋白质溶液，至少12小时。将最终透析液用于参比池。通过真空下温和搅拌对所有蛋白质溶液和缓冲液进行脱气，然后加载到量热计中，以保证加热过程中无气泡。在30-100℃的范围，以1.5℃/分钟的扫描速率进行实验。用标准化的热容(Cp)数据校正缓冲液基线。用67μM的蛋白质浓度进行DSC实验。

碘化钾(KI)淬灭实验

产生天然和中间体7F3com-2H2在10mM组氨酸、150mM NaCl、pH 6.0中的SV图，以及天然和解折叠7F3com-2H2在10mM磷酸盐、150mM NaCl、pH 6.0中的SV图。将来自6M母液的逐步递增的KI等份加入各缓冲液配制的0.67μM蛋白质溶液中。用0.2mM硫代硫酸钠制备KI溶液，以防止形成游离碘。293nm激发7F3com-2H2后，测定最大发射值(天然331nm，中间体348，解折叠352nm)的荧光强度。

按照Stern-Volmer和Lehrer等式分析KI诱导的色氨酸荧光淬灭。可通过经典SV关系描述淬灭过程：F₀/F＝1+K_SV[Q]，其中F₀和F是不存在或存在淬灭剂时的荧光强度，[Q]是淬灭剂浓度，K_SV是SV淬灭常数。可由变型的SV曲线，也称为Lehrer曲线计算淬灭剂可及的全部荧光团的分数：F₀/ΔF＝1/K_Qf_aQ]+1/f_a，其中F₀和[Q]与先前定义的涵义相同，ΔF是淬灭引起的荧光全国独改变，K_Q是暴露的色氨酸残基的SV淬灭常数，f_a是淬灭剂可及的初始荧光的分数。由此等式，F₀/ΔF＝f(1/[Q])曲线会生成直线，其外推至1/[Q]＝0时在F₀/ΔF轴上得到值1/f_a。

1-苯胺基-8-萘磺酸(ANS)结合实验

按照色氨酸荧光和ANS结合实验测定10mM组氨酸或10mM磷酸盐中，pH 8.1时尿素诱导的7F3com-2H2解折叠。在所有实验中，所用蛋白质浓度为0.67μM，用前述式子(Y_U-Y_obs)/(Y_U-Y_F)标准化数据。在ANS结合研究中，用不同浓度的尿素在23℃平衡7F3com-2H2过夜。如此，用不同浓度的变性剂平衡蛋白质，然后用新鲜制备的ANS处理。将蛋白质与ANS的比例保持在1∶100，以使溶液中ANS大量过量。23℃培育该混合物2小时。在350nm激发后测量400-600nm的荧光强度，以监测疏水性染料ANS与蛋白质的结合。

7.2.2.结果

尿素-诱导的折叠实验证明，在单独存在组氨酸，pH 6.0时，抗体的解折叠是简单的2步过程，这表明所有结构域合作解折叠，而加入盐后，7F3com-2H2结构域的解折叠是通过形成中间体群体的逐步过程(见图17A)。相反，在存在磷酸盐，pH 6.0时，无论盐是否存在，均不形成这种中间体(见图17B)。

DSC实验揭示出，在不存在盐，pH 6时，DSC热分析图与3个部分重叠的转变峰复合(见图18)。3个转变峰的重叠表明强烈的结构域-结构域相互作用。加入150mM NaCl能使第一个转变峰去稳定，如T_m1降低约3.5℃所示。

KI淬灭研究表明，在7.5M尿素存在下，观察到中间体状态时(见图17)，获得的f_a值为0.82±0.02(见图19A)。这揭示出，在中间体状态中，只有82％色氨酸荧光发射可由碘淬灭，这表明中间体的部分折叠结构(即，含有掩埋的色氨酸残基)。相反，由Lehrer曲线在7.5M尿素和10mM磷酸盐条件下获得的f_a值是1.07±0.02，这表明所有色氨酸荧光发射均被碘淬灭，因此其暴露于溶剂，这表明蛋白质分子的完全解折叠(见图19B)。

ANS结合研究表明，在pH 8.1(pI)时，即使不存在盐，在组氨酸中的解折叠转变也是通过形成稳定中间体物质的多步过程(见图20A)。然而，在这种pH的tris或磷酸盐缓冲液的类似条件下，没有观察到显著的中间体群(见图20B)。而且，这些研究表明，样品中的ANS与大量中间体物质的结合增加，这表明疏水区暴露。

7.3抗体的相特性：组氨酸对稳定性的影响

本实施例显示，某些单抗可具有不同的相特性。这些研究还证明，在某些条件下，某些缓冲液类型，如组氨酸缓冲液与7F3com-2H2相互作用，从而破坏结构域-结构域相互作用，导致分子间吸引和结合。这导致在组氨酸加工过程中，7F3com-2H2的溶解度降低。

7.3.1.材料和方法

静态光散射

用静态光散射技术确定有希望的沉淀条件的第二维里系数。1145AP型电子光学(Electro-Optics)激光器(台湾新店市(Hsintien City，Taiwan))、布鲁克海温仪器公司的测角计(Brookhaven Instruments goniometer)以及BI-200SM和BI-APD型级联光电二极管检测器(纽约霍茨威尔(Holtsville，NY))分别用于测定与633nm入射光束成90°角的过度罗利比(Raleigh ratio)(仅由蛋白质造成的散射)。为了检查罗利散射，也测定60°和120°角的强度。如果所观察到的颗粒是罗利散射波(＜λ/20)，则强度不依赖角度。这里给出用于测定第二维里系数的关系，其衍生自理想渗透压等式的维里解折叠。

\frac{Kc}{R_{90}} = \frac{1}{M} + 2 B_{22} c

其中，

c＝蛋白质浓度(g/mL)

M＝质量平均的蛋白质分子量(克/摩尔)。

R₉₀＝90°的过度罗利比

等式2描述光学常数K。

K = \frac{4 π^{2} {n_{0}}^{2} {(dn / dc)}^{2}}{N_{A} λ^{4}}

其中，

n₀＝溶剂的折射率

dn/dc＝蛋白质-溶剂对的折光指数增量

N_A＝阿伏加德罗常数

λ＝入射光束波长(真空中)

等式3给出了罗利比。

R = \frac{I_{θ} r^{2}}{I_{inc} V_{obs}} = I_{θ} c

其中，

r＝观察体积与检测器的距离

I_inc＝激光束的入射强度

I_θ＝散射光的测定强度

V_obs＝观察体积

可由罗利比已知的***测定常数c，例如甲苯在633nm(14*10^-6厘米^-1)。一旦测定常数c之后，则可将原始强度测量值转变为罗利比，过度罗利比只是样品的罗利比减去纯溶剂的罗利比。

Kc/R₉₀与浓度的曲线的斜率等于第二维里系数(SVC或B₂₂)的两倍。利用280nm吸光度测量测定光散射的各溶液样品的浓度。用0.1μm安妥(Anotop)滤器(英格兰沃特曼公司(Whatman Inc.，England))过滤所有溶液以去除灰尘，蛋白质浓度在0.5至10mg/mL范围内变化，因为SVC是稀溶液参数。用于光散射的所有盐和缓冲液均为购自西格玛奥德里奇公司(Sigma Aldrich)或费氏公司(Fischer)的HPLC级产品。SVC为正表明蛋白质分子之间成对净排斥，而SVC为负表明蛋白质对之间净吸引。已证明，这种成对或稀溶液参数能够有有效帮助预测结晶和估计溶解度，甚至适用于具有高溶解度的蛋白质。

傅里叶变换红外光谱(FTIR)

用Bomem^TM IR光谱仪(加拿大魁北克省(Quebec，Canada))和dTGS检测器测定傅里叶变换红外(FTIR)光谱。具有7.5μm聚酯薄膜(Mylar)间隔物的固定路径长度CaF₂单元和可变路径长度CaF₂单元分别用于液体和固体测量。以4cm^-1分辨率，通过单数方式获得128-扫描干涉图。从溶剂和蛋白质样品中减去背景水蒸气扫描。然后，从各蛋白质谱中减去溶剂谱，拟合7点Savitsky-Golay光滑函数，以便获得二阶导数谱。然后，对该谱进行基线校正，以便建立零点基线。然后，对曲线面积进行积分和标准化，以使所有谱图中的酰胺I区域(1705-1600cm^-1)的面积等于1。这能够直接比较不同浓度的样品，如固体和液体。除基线校正和面积标准化外，所有减法和曲线拟合均是用GRAMS^TM软件(马萨诸塞州沃尔瑟姆的热电公司(Thermo Electron Corp.，Waltham，MA))进行的。所有液体IR扫描中采用10至12mg/mL的蛋白质浓度。

由于沿蛋白质分子的肽主链存在氢键产生碳-氧伸缩和氮-氢伸缩，所以酰胺I区域在约1700-1600cm^-1的范围产生峰，由此测定二级结构。由已知结构的蛋白质凭经验指定特定类型的蛋白质二级结构的一般峰位置，因此，FTIR主要用作定性技术。

7.3.2.结果

由SLS测定的质量平均分子量(MW)表明，与单独的组氨酸缓冲液相比，在10mM组氨酸和150mM NaCl或10mM磷酸盐，pI下，7F3com-2H2的结合程度较低(见下表8)。

表8：通过静态光散射(SLS)测量值确定的质量平均分子量(MW)。

单抗样品(pI＝8.1)	B₂₂	上限95％	下限95％	MW	上限95％	下限95％
单抗样品(pI＝8.1)	B₂₂	上限95％	下限95％	MW	上限95％	下限95％	10mM His，150mMNaCl，pH 6(母液)	3.5E-05	8.8E-05	-1.8E-05	153	161	145
BX至10mM His pH 6	-1.0E-04	-5.2E-05	-1.5E-04	127	131	122	10mM His，150mMNaCl，pH 6(母液)	3.5E-05	8.8E-05	-1.8E-05	153	161	145
BX至10mM His pH 6	-1.0E-04	-5.2E-05	-1.5E-04	127	131	122	BX至10mM His pH 8.1	-5.5E-05	-2.5E-05	-9.2E-05	282	299	262
BX至10mM His，150mM NaCl，pH 8.1	2.0E-05	6.3E-05	-3.7E-05	192	208	175	BX至10mM His pH 8.1	-5.5E-05	-2.5E-05	-9.2E-05	282	299	262
BX至10mM His，150mM NaCl，pH 8.1	2.0E-05	6.3E-05	-3.7E-05	192	208	175	BX至10mM Tris，pH 8.1	-8.9E-05	-4.9E-05	-1.3E-04	147	143	152
BX至10mM磷酸钠，pH 8.1	-1.5E-04	-1.4E-04	-1.7E-04	125	126	124	BX至10mM Tris，pH 8.1	-8.9E-05	-4.9E-05	-1.3E-04	147	143	152

FTIR结果表明，通过SLS观察，单独pH不能引起溶液中7F3com-2H2结合(pI＝8.1)(见图21)。而且，7F3com-2H2能否结合强烈依赖于缓冲液类型。具体说，含有tris和磷酸盐缓冲液的样品中单体蛋白质的比例高于聚集蛋白质。相反，含有组氨酸缓冲液的样品中聚集状态的蛋白质的比例高于单体状态的蛋白质。

6.4组氨酸对抗体结构域稳定性和结构域-结构域相互作用的影响

在本实施例中，用固有色氨酸荧光光谱法和差示扫描量热法测定不同缓冲液物质对抗体7F3com-2H2的结构域稳定性和结构域-结构域相互作用的影响。

6.4.1材料和方法

F _c 和F _ab 片段的产生

通过木瓜蛋白酶消化产生F_c和F_ab片段，用色谱进行纯化。

尿素解折叠研究

通过固有色氨酸荧光测定7F3com-2H2的解折叠。所有实验均在23℃、蛋白质浓度0.67μM的条件下进行。

差示扫描量热法

利用6.7μM的蛋白质浓度进行DSC实验；所有测量均以1.5℃/分钟的扫描速率进行。

6.4.2结果

来自全长7Fcom3-2H2抗体以及该抗体的分离F_ab片段和分离F_c片段的结果表明，在pH 6下，组氨酸与单抗的相互作用似乎需要氯化钠的电荷屏蔽效应。尿素解折叠研究表明，相互作用导致一些结构域去稳定或全长分子中发生结构域-结构域相互作用。参见图22。另外，DSC显示，F_c片段的CH₂结构域是最不稳定的结构域，与组氨酸相互作用后，CH₂区的T_m比对照值70℃降低5℃。参见图23。

总体来看，荧光(图22)和DSC(图23)数据表明：在pH 6时全长7Fcom3-2H2中发生强烈的结构域-结构域相互作用；NaCl调节组氨酸与F_ab区的相互作用；7Fcom3-2H2在组氨酸和盐存在下的解折叠特性表明结构域-结构域相互作用降低，并且优先影响一些结构域的稳定性；F_c片段的CH₂结构域是稳定性最低的结构域；F_c片段中CH₂和CH₃区之间的相互作用很弱；F_ab中存在强烈的亚结构域相互作用；总之，在盐存在下组氨酸似乎能影响CH₂结构域的稳定性和相互作用。

6.5高抗体浓度下蛋白质-蛋白质相互作用、粘度和乳光

本实施例描述了使用粘度测定法、膜渗透压测定法和光散射法测量7Fcom3-2H2在1-100g/L浓度范围内的胶体特性。

6.5.1材料和方法

抗体制剂

7Fcom3-2H2抗体是液体制剂。所有缓冲液条件均在pH 6下，通过完全透析获得，通过280nm的UV吸光度，以消光系数1.61L/g-cm测定蛋白质浓度。

粘度测定法

将带有外部pc控制的布鲁克菲尔德(Brookfield)LVDV-II+Pro型锥形/平板粘度计(马萨诸塞州米德博罗(Middleboro，MA))与CPE 40型芯轴(spindle)联用，以测定单抗溶液的粘度。应用剪切速率常数，***稳定后(约30秒)读取读数。利用外部水浴维持恒定温度23.0±0.1℃。

浊度

在装有温度控制单元(温度维持在23.0±0.1℃)的荧光分光光度计(美国伊利诺伊州乌尔班纳的SLM AMINCO公司(SLM AMINCO，Urbana，IL，US))上测定浊度。将入射光束设定为510nm，而在相同波长下测定90°的散射光强度。利用来自俄亥俄州哥伦布的GFS化学品公司(GFS Chemicals，Inc.，Columbus，Ohio)一组0-100比浊法浊度单位(NTU)的AMCO澄清浊度标准品(目录号#8255和8256)产生校正曲线，以便将蛋白质溶液的强度转换为NTU。

渗透压

在装有分子量截止值为30,000的PM系列膜(编号#SS-030)的韦斯科(Wescor)4420型胶体渗透压计(犹他州洛根(Logan，Utah))上测定渗透压，以确定单抗溶液的第二维里系数和数均分子量。将相应的最终透析物用作参比溶液。也利用来自韦斯科(Wescor)的渗透压已知的BSA标准溶液(编号#SS-025)校正渗透压计/膜***。

6.5.2结果

结果表明，离子强度对高浓度溶液的溶液粘度和乳光特性产生负面影响。组合结果表明，低离子强度时的电荷排斥产生高粘度。在较高离子强度下观察到第二维里系数为负与高浓度(＞20g/L)下的大表观分子量和光散射增加有关。光散射增加产生乳光外观。此外，第二维里系数也提示，乳光外观可能与相转变有关。

总之，粘度(图25)、浊度(图26)和渗透压(图27和28)表明，电荷排斥是低离子强度下高溶液粘度的来源；大表观分子量在这种情况下与第二维里系数为负有关，其导致乳光增加；第二维里系数为正导致较小的表观分子量，因此具有乳光程度较轻的外观；离子强度能逆向调节乳光和粘度；观察结果表明，可通过中间体盐浓度平衡粘度和乳光；经Pellicane等测定，高乳光溶液的第二维里系数接近相分离的临界值，表明乳光增加可能与相转变相关联。

6.6制剂开发

进行制剂研究，以评估蛋白质的化学和物理稳定性以及溶解度。目标是测定最适合长期储存该产品的条件。研究分成三个主要领域：处方设计、浓度和稳定性。利用处方设计筛选研究评估pH、缓冲液浓度和其它赋形剂对蛋白质的化学和物理稳定性的影响。这些研究将蛋白质置于一定缓冲范围、其它赋形剂、以及一定储存温度范围(通常是2-8℃、23-27℃和38-42℃)和pH条件下，利用诸如高压大小排阻色谱(HPSEC)和高效离子交换色谱(HPIEC)等技术评估化学和物理稳定性。浓度研究将提供有关浓缩步骤中原始的蛋白质-蛋白质相互作用的信息以及有关高浓度对长期储存的影响的信息。另外，进行溶液pH研究，以便在生理有用pH范围上检测缓冲液，从而实现高浓度下蛋白质的最佳溶解。

在加速抗体降解的条件下，检测含有5g/L 7F3com-2H2抗-IL-9抗体的四种抗体制剂的稳定性。用标准实验室方法制备下面列出的这四种制剂：

1)10mM组氨酸，150mM NaCl，pH6.0

2)2.2mM磷酸钠，150mM NaCl，pH6.0

3)10mM组氨酸，pH 6.0

4)2.2mM磷酸钠，pH 6.0

将小等份的各制剂密封在玻璃瓶中。将玻璃瓶以直立状态储存于40℃。在不同时间点，通过HPSEC分析单个玻璃瓶。图30显示不同时间点记录的2.2mM磷酸钠，pH 6.0制剂的重叠洗脱图。在培育75天后获得最后一个数据点。图29提供上述四种制剂各自的总单体浓度和抗体片段浓度随时间变化的分析图。

8.等同形式

本领域技术人员应了解或能够确定，使用常规实验即可获得本文所述的本发明具体实施方式的许多等同形式。这类等同形式应包含在所附权利要求书的范围内。

将本说明书中提及的所有发表物、专利和专利申请纳入本说明书作参考，就好像特别和单独将各篇发表物、专利或专利申请纳入本文作参考的那样。将2006年9月25日提交的美国临时申请号60/847,239和2007年7月16日提交的60/949,999的内容通过引用全部纳入本文用于所有目的。

不应认为对本文所述参考文献的引用或讨论意味着承认这些参考文献是本发明的现有技术。

序列表

<110>米迪缪尼有限公司(MedImmune，Inc.)

J.卡彭特(Carpenter，John)

H.萨瑟斯(Sathish，Hasige)

T.伦道夫(Randolph，Theodore W.)

C.阿伦(Allan，Christian)

S.毕晓普(Bishop，Steven)

B.萨里纳斯(Salinas，Branden)

<120>稳定化的抗体制剂和其应用

<130>AE709PCT

<150>60/847,239

<151>2006-09-25

<150>60/949,999

<151>2007-07-16

<160>65

<170>用于Windows的FastSEQ 4.0版

<210>1

<211>10

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>VH CDR1

<400>1

Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr Trp Ile Glu

1 5 10

<210>2

<211>17

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>VH CDR2

<400>2

Glu Ile Leu Pro Gly Ser Gly Thr Thr Asn Pro Asn Glu Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210>3

<211>13

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>VH CDR3

<400>3

Ala Asp Tyr Tyr Gly Ser Asp Tyr Val Lys Phe Asp Tyr

1 5 10

<210>4

<211>11

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>VL CDR1

<400>4

Lys Ala Ser Gln His Val Gly Thr His Val Thr

1 5 10

<210>5

<211>7

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>VL CDR2

<400>5

Ser Thr Ser Tyr Arg Tyr Ser

1 5

<210>6

<211>9

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>VL CDR3

<400>6

Gln His Phe Tyr Ser Tyr Pro Leu Thr

1 5

<210>7

<211>122

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>抗体4D4的VH区

<400>7

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu VaI Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr

20 25 30

Trp Ile Glu Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Glu Ile Leu Pro Gly Ser Gly Thr Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ala Asp Tyr Tyr Gly Ser Asp Tyr Val Lys Phe Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210>8

<211>107

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>抗体4D4和4D4 H2-1 D11的VL区

<400>8

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln His Val Gly Thr His

20 25 30

Val Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Ser Thr Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Phe Tyr Ser Tyr Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210>9

<211>122

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>抗体4D4 H2-1 D11的VH区

<400>9

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr

20 25 30

Trp Ile Glu Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Glu Trp Leu Pro Gly Ser Gly Thr Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr

65 70 70 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ala Asp Tyr Tyr Gly Ser Asp Tyr Val Lys Phe Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210>10

<211>17

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>VH CDR2

<400>10

Glu Trp Leu Pro Gly Ser Gly Thr Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210>11

<211>10

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>VH CDR1

<400>11

Gly Tyr Thr Phe Thr Tyr Tyr Trp Ile Glu

1 5 10

<210>12

<211>13

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>VH CDR3

<400>12

Ala Asp Tyr Tyr Gly Ser Asp His Val Lys Phe Asp Tyr

1 5 10

<210>13

<211>11

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>VL CDR1

<400>13

Leu Ala Ser Gln His Val Gly Thr His Val Thr

1 5 10

<210>14

<211>7

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>VL CDR2

<400>14

Gly Thr Ser Tyr Arg Tyr Ser

1 5

<210>15

<211>122

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>抗体4D4com-XF-9的VH区

<400>15

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Tyr Tyr

20 25 30

Trp Ile Glu Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Glu Trp Leu Pro Gly Ser Gly Thr Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ala Asp Tyr Tyr Gly Ser Asp His Val Lys Phe Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210>16

<211>107

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>抗体4D4com-XF-9的VL区

<400>16

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Leu Ala Ser Gln His Val Gly Thr His

20 25 30

Val Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Gly Thr Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Phe Tyr Asp Tyr Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210>17

<211>122

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>抗体4D4com-2F9的VH区

<400>17

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr

20 25 30

Trp Ile Glu Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Glu Trp Leu Pro Gly Ser Gly Thr Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ala Asp Tyr Tyr Gly Ser Asp His Val Lys Phe Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210>18

<211>107

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>抗体4D4com-2F9的VL区

<400>18

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln His Val Gly Thr His

20 25 30

Val Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Gly Thr Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Phe Tyr Glu Tyr Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210>19

<211>10

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>VH CDR1

<400>19

Gly Gly Thr Phe Ser Gly Tyr Trp Ile Glu

1 5 10

<210>20

<211>9

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>VL CDR3

<400>20

Gln Gln Phe Tyr Glu Tyr Pro Leu Thr

1 5

<210>21

<211>122

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>抗体7F3和7F3 22D3的VH区

<400>21

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Gly Tyr

20 25 30

Trp Ile Glu Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Glu Ile Leu Pro Gly Ser Gly Thr Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ala Asp Tyr Tyr Gly Ser Asp Tyr Val Lys Phe Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210>22

<211>107

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>抗体7F3的VL区

<400>22

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln His Val Gly Thr His

20 25 30

Val Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Ser Thr Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Tyr Glu Tyr Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210>23

<211>122

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>抗体71A10的VH区

<400>23

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Gly Tyr

20 25 30

Trp Ile Glu Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Glu Ile Leu Pro Gly Ser Gly Thr Thr Asn Pro Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ala Asp Tyr Tyr Gly Ser Asp Tyr Val Lys Phe Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210>24

<211>107

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>抗体71A10的VL区

<400>24

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln His Val Gly Thr His

20 25 30

Val Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Ser Thr Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Tyr Glu Tyr Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210>25

<211>107

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>抗体7F3 22D3的VL区

<400>25

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln His Val Gly Thr His

20 25 30

Val Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Gly Thr Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Tyr Glu Tyr Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210>26

<211>10

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>VH CDR1

<400>26

Gly Gly Thr Phe Ser Tyr Tyr Trp Ile Glu

1 5 10

<210>27

<211>122

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>抗体7F3com-2H2的VH区

<400>27

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Tyr Tyr

20 25 30

Trp Ile Glu Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Glu Ile Leu Pro Gly Ser Gly Thr Thr Asn Pro Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ala Asp Tyr Tyr Gly Ser Asp Tyr Val Lys Phe Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210>28

<211>107

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>抗体7F3com-2H2的VL区

<400>28

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln His Val Ile Thr His

20 25 30

Val Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Gly Thr Ser Tyr Ser Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Tyr Glu Tyr Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210>29

<211>122

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>抗体7F3com-3H5的VH区

<400>29

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Gly Tyr

20 25 30

Trp Ile Glu Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Glu Ile Leu Pro Gly Ser Gly Thr Thr Asn Pro Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ala Asp Tyr Tyr Gly Ser Asp Tyr Val Lys Phe Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210>30

<211>107

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>抗体7F3com-3H5的VL区

<400>30

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln His Val Gly Thr His

20 25 30

Val Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Gly Thr Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Tyr Glu Tyr Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210>31

<211>122

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>抗体7F3com-3D4的VH区

<400>31

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Tyr Tyr

20 25 30

Trp Ile Glu Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Glu Ile Leu Pro Gly Ser Gly Thr Thr Asn Pro Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ala Asp Tyr Tyr Gly Ser Asp Tyr Val Lys Phe Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210>32

<211>107

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>抗体7F3com-3D4的VL区

<400>32

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln His Val Ile Thr His

20 25 30

Val Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Gly Thr Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Tyr Glu Tyr Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210>33

<211>25

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>VH构架区1

<400>33

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser

20 25

<210>34

<211>14

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>VH构架区2

<400>34

Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly

1 5 10

<210>35

<211>32

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>VH构架区3

<400>35

Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr Met Glu

1 5 10 15

Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg

20 25 30

<210>36

<211>11

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>VH构架区4

<400>36

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

1 5 10

<210>37

<211>25

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>VH构架区1

<400>37

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser

20 25

<210>38

<211>32

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>VH构架区3

<400>38

Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu

1 5 10 15

Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg

20 25 30

<210>39

<211>23

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>VL构架区1

<400>39

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys

20

<210>40

<211>15

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>VH构架区2

<400>40

Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr

1 5 10 15

<210>41

<211>32

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>VH构架区3

<400>41

Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr

1 5 10 15

Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys

20 25 30

<210>42

<211>10

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>VH构架区4

<400>42

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

1 5 10

<210>43

<211>591

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>7F3com-2H2的VH区

<400>43

ccgctgtcaa gatgcttctg gccatggtcc ttacctctgc cctgctcctg tgctccgtgg 60

caggccaggg gtgtccaacc ttggcgggga tcctggacat caacttcctc atcaacaaga 120

tgcaggaaga tccagcttcc aagtgccact gcagtgctaa tgtgaccagt tgtctctgtt 180

tgggcattcc ctctgacaac tgcaccagac catgcttcag tgagagactg tctcagatga 240

ccaataccac catgcaaaca agatacccac tgattttcag tcgggtgaaa aaatcagttg 300

aagtactaaa gaacaacaag tgtccatatt tttcctgtga acagccatgc aaccaaacca 360

cggcaggcaa cgcgctgaca tttctgaaga gtcttctgga aattttccag aaagaaaaga 420

tgagagggat gagaggcaag atatgaagat gaaatattat ttatcctatt tattaaattt 480

aaaaagcttt ctctttaagt tgctacaatt taaaaatcaa gtaagctact ctaaatcagt 540

atcagttgtg attatttgtt taacattgta tgtctttatt ttgaaataaa t 591

<210>44

<211>30

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>VH CDR1

<400>44

ggaggcacct tcagctatta ctggatagag 30

<210>45

<211>51

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>VH CDR2

<400>45

gagattttac ctggaagtgg tactactaac ccgaatgaga agttcaaggg c 51

<210>46

<211>39

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>VH CDR3

<400>46

gcggattact acggtagtga ttacgtcaag tttgactac 39

<210>47

<211>321

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>7F3com-2H2的VL区

<400>47

gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgca aggcaagtca gcatgtgatt actcatgtaa cctggtatca gcagaaacca 120

gggaaagccc ctaagctcct gatctatggg acatcctaca gctacagtgg ggtcccatca 180

aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240

gaagattttg caacttatta ctgtcagcaa ttttacgagt atcctctcac gttcggcgga 300

gggaccaagg tggagatcaa a 321

<210>48

<211>33

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>VL CDR1

<400>48

aaggcaagtc agcatgtgat tactcatgta acc 33

<210>49

<211>15

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>VL CDR2

<400>49

gggacatcct acagc 15

<210>50

<211>27

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>VL CDR3

<400>50

cagcaatttt acgagtatcc tctcacg 27

<210>51

<211>591

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>51

ccgctgtcaa gatgcttctg gccatggtcc ttacctctgc cctgctcctg tgctccgtgg 60

caggccaggg gtgtccaacc ttggcgggga tcctggacat caacttcctc atcaacaaga 120

tgcaggaaga tccagcttcc aagtgccact gcagtgctaa tgtgaccagt tgtctctgtt 180

tgggcattcc ctctgacaac tgcaccagac catgcttcag tgagagactg tctcagatga 240

ccaataccac catgcaaaca agatacccac tgattttcag tcgggtgaaa aaatcagttg 300

aagtactaaa gaacaacaag tgtccatatt tttcctgtga acagccatgc aaccaaacca 360

cggcaggcaa cgcgctgaca tttctgaaga gtcttctgga aattttccag aaagaaaaga 420

tgagagggat gagaggcaag atatgaagat gaaatattat ttatcctatt tattaaattt 480

aaaaagcttt ctctttaagt tgctacaatt taaaaatcaa gtaagctact ctaaatcagt 540

atcagttgtg attatttgtt taacattgta tgtctttatt ttgaaataaa t 591

<210>52

<211>144

<212>PRT

<213>智人(Homo sapiens)

<400>52

Met Leu Leu Ala Met Val Leu Thr Ser Ala Leu Leu Leu Cys Ser Val

1 5 10 15

Ala Gly Gln Gly Cys Pro Thr Leu Ala Gly Ile Leu Asp Ile Asn Phe

20 25 30

Leu Ile Asn Lys Met Gln Glu Asp Pro Ala Ser Lys Cys His Cys Ser

35 40 45

Ala Asn Val Thr Ser Cys Leu Cys Leu Gly Ile Pro Ser Asp Asn Cys

50 55 60

Thr Arg Pro Cys Phe Ser Glu Arg Leu Ser Gln Met Thr Asn Thr Thr

65 70 75 80

Met Gln Thr Arg Tyr Pro Leu Ile Phe Ser Arg Val Lys Lys Ser Val

85 90 95

Glu Val Leu Lys Asn Asn Lys Cys Pro Tyr Phe Ser Cys Glu Gln Pro

100 105 110

Cys Asn Gln Thr Thr Ala Gly Asn Ala Leu Thr Phe Leu Lys Ser Leu

115 120 125

Leu Glu Ile Phe Gln Lys Glu Lys Met Arg Gly Met Arg Gly Lys Ile

130 135 140

<210>53

<211>808

<212>PRT

<213>智人(Homo sapiens)

<400>53

Met Ala Glu Leu Leu Ala Ser Ala Gly Ser Ala Cys Ser Trp Asp Phe

1 5 10 15

Pro Arg Ala Pro Pro Ser Phe Pro Pro Pro Ala Ala Ser Arg Gly Gly

20 25 30

Leu Gly Gly Thr Arg Ser Phe Arg Pro His Arg Gly Ala Glu Ser Pro

35 40 45

Arg Pro Gly Arg Asp Arg Asp Gly Val Arg Val Pro Met Ala Ser Ser

50 55 60

Arg Cys Pro Ala Pro Arg Gly Cys Arg Cys Leu Pro Gly Ala Ser Leu

65 70 75 80

Ala Trp Leu Gly Thr Val Leu Leu Leu Leu Ala Asp Trp Val Leu Leu

85 90 95

Arg Thr Ala Leu Pro Arg Ile Phe Ser Leu Leu Val Pro Thr Ala Leu

100 105 110

Pro Leu Leu Arg Val Trp Ala Val Gly Leu Ser Arg Trp Ala Val Leu

115 120 125

Trp Leu Gly Ala Cys Gly Val Leu Arg Ala Thr Val Gly Ser Lys Ser

130 135 140

Glu Asn Ala Gly Ala Gln Gly Trp Leu Ala Ala Leu Lys Pro Leu Ala

145 150 155 160

Ala Ala Leu Gly Leu Ala Leu Pro Gly Leu Ala Leu Phe Arg Glu Leu

165 170 175

Ile Ser Trp Gly Ala Pro Gly Ser Ala Asp Ser Thr Arg Leu Leu His

180 185 190

Trp Gly Ser His Pro Thr Ala Phe Val Val Ser Tyr Ala Ala Ala Leu

195 200 205

Pro Ala Ala Ala Leu Trp His Lys Leu Gly Ser Leu Trp Val Pro Gly

210 215 220

Gly Gln Gly Gly Ser Gly Asn Pro Val Arg Arg Leu Leu Gly Cys Leu

225 230 235 240

Gly Ser Glu Thr Arg Arg Leu Ser Leu Phe Leu Val Leu Val Val Leu

245 250 255

Ser Ser Leu Gly Glu Met Ala Ile Pro Phe Phe Thr Gly Arg Leu Thr

260 265 270

Asp Trp Ile Leu Gln Asp Gly Ser Ala Asp Thr Phe Thr Arg Asn Leu

275 280 285

Thr Leu Met Ser Ile Leu Thr Ile Ala Ser Ala Val Leu Glu Phe Val

290 295 300

Gly Asp Gly Ile Tyr Asn Asn Thr Met Gly His Val His Ser His Leu

305 310 315 320

Gln Gly Glu Val Phe Gly Ala Val Leu Arg Gln Glu Thr Glu Phe Phe

325 330 335

Gln Gln Asn Gln Thr Gly Asn Ile Met Ser Arg Val Thr Glu Asp Thr

340 345 350

Ser Thr Leu Ser Asp Ser Leu Ser Glu Asn Leu Ser Leu Phe Leu Trp

355 360 365

Tyr Leu Val Arg Gly Leu Cys Leu Leu Gly Ile Met Leu Trp Gly Ser

370 375 380

Val Ser Leu Thr Met Val Thr Leu Ile Thr Leu Pro Leu Leu Phe Leu

385 390 395 400

Leu Pro Lys Lys Val Gly Lys Trp Tyr Gln Leu Leu Glu Val Gln Val

405 410 415

Arg Glu Ser Leu Ala Lys Ser Ser Gln Val Ala Ile Glu Ala Leu Ser

420 425 430

Ala Met Pro Thr Val Arg Ser Phe Ala Asn Glu Glu Gly Glu Ala Gln

435 440 445

Lys Phe Arg Glu Lys Leu Gln Glu Ile Lys Thr Leu Asn Gln Lys Glu

450 455 460

Ala Val Ala Tyr Ala Val Asn Ser Trp Thr Thr Ser Ile Ser Gly Met

465 470 475 480

Leu Leu Lys Val Gly Ile Leu Tyr Ile Gly Gly Gln Leu Val Thr Ser

485 490 495

Gly Ala Val Ser Ser Gly Asn Leu Val Thr Phe Val Leu Tyr Gln Met

500 505 510

Gln Phe Thr Gln Ala Val Glu Val Leu Leu Ser Ile Tyr Pro Arg Val

515 520 525

Gln Lys Ala Val Gly Ser Ser Glu Lys Ile Phe Glu Tyr Leu Asp Arg

530 535 540

Thr Pro Arg Cys Pro Pro Ser Gly Leu Leu Thr Pro Leu His Leu Glu

545 550 555 560

Gly Leu Val Gln Phe Gln Asp Val Ser Phe Ala Tyr Pro Asn Arg Pro

565 570 575

Asp Val Leu Val Leu Gln Gly Leu Thr Phe Thr Leu Arg Pro Gly Glu

580 585 590

Val Thr Ala Leu Val Gly Pro Asn Gly Ser Gly Lys Ser Thr Val Ala

595 600 605

Ala Leu Leu Gln Asn Leu Tyr Gln Pro Thr Gly Gly Gln Leu Leu Leu

610 615 620

Asp Gly Lys Pro Leu Pro Gln Tyr Glu His Arg Tyr Leu His Arg Gln

625 630 635 640

Val Ala Ala Val Gly Gln Glu Pro Gln Val Phe Gly Arg Ser Leu Gln

645 650 655

Glu Asn Ile Ala Tyr Gly Leu Thr Gln Lys Pro Thr Met Glu Glu Ile

660 665 670

Thr Ala Ala Ala Val Lys Ser Gly Ala His Ser Phe Ile Ser Gly Leu

675 680 685

Pro Gln Gly Tyr Asp Thr Glu Val Asp Glu Ala Gly Ser Gln Leu Ser

690 695 700

Gly Gly Gln Arg Gln Ala Val Ala Leu Ala Arg Ala Leu Ile Arg Lys

705 710 715 720

Pro Cys Val Leu Ile Leu Asp Asp Ala Thr Ser Ala Leu Asp Ala Asn

725 730 735

Ser Gln Leu Gln Val Glu Gln Leu Leu Tyr Glu Ser Pro Glu Arg Tyr

740 745 750

Ser Arg Ser Val Leu Leu Ile Thr Gln His Leu Ser Leu Val Glu Gln

755 760 765

Ala Asp His Ile Leu Phe Leu Glu Gly Gly Ala Ile Arg Glu Gly Gly

770 775 780

Thr His Gln Gln Leu Met Glu Lys Lys Gly Cys Tyr Trp Ala Met Val

785 790 795 800

Gln Ala Pro Ala Asp Ala Pro Glu

805

<210>54

<211>140

<212>PRT

<213>智人(Homo sapiens)

<400>54

Met Val Leu Thr Ser Ala Leu Leu Leu Cys Ser Val Ala Gly Gln Gly

1 5 10 15

Cys Pro Thr Leu Ala Gly Ile Leu Asp Ile Asn Phe Leu Ile Asn Lys

20 25 30

Met Gln Glu Asp Pro Ala Ser Lys Cys His Cys Ser Ala Asn Val Thr

35 40 45

Ser Cys Leu Cys Leu Gly Ile Pro Ser Asp Asn Cys Thr Arg Pro Cys

50 55 60

Phe Ser Glu Arg Leu Ser Gln Met Thr Asn Thr Thr Met Gln Thr Arg

65 70 75 80

Tyr Pro Leu Ile Phe Ser Arg Val Lys Lys Ser Val Glu Val Leu Lys

85 90 95

Asn Asn Lys Cys Pro Tyr Phe Ser Cys Glu Gln Pro Cys Asn Gln Thr

100 105 110

Thr Ala Gly Asn Ala Leu Thr Phe Leu Lys Ser Leu Leu Glu Ile Phe

115 120 125

Gln Lys Glu Lys Met Arg Gly Met Arg Gly Lys Ile

130 135 140

<210>55

<211>2171

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>55

agcagctctg taatgcgctt gtggtttcag atgtgggcgg cctgtgtgaa cctgtcgtgc 60

aaagctcacg tcaccaactg ctgcagttat ctcctgaatc aggctgaggg tctttgctgt 120

gcacccagag atagttgggt gacaaatcac ctccaggttg gggatgcctc agacttgtga 180

tgggactggg cagatgcatc tgggaaggct ggaccttgga gagtgaggcc ctgaggcgag 240

acatgggcac ctggctcctg gcctgcatct gcatctgcac ctgtgtctgc ttgggagtct 300

ctgtcacagg ggaaggacaa gggccaaggt ctagaacctt cacctgcctc accaacaaca 360

ttctcaggat cgattgccac tggtctgccc cagagctggg acagggctcc agcccctggc 420

tcctcttcac cagcaaccag gctcctggcg gcacacataa gtgcatcttg cggggcagtg 480

agtgcaccgt cgtgctgcca cctgaggcag tgctcgtgcc atctgacaat ttcaccatca 540

ctttccacca ctgcatgtct gggagggagc aggtcagcct ggtggacccg gagtacctgc 600

cccggagaca cgttaagctg gacccgccct ctgacttgca gagcaacatc agttctggcc 660

actgcatcct gacctggagc atcagtcctg ccttggagcc aatgaccaca cttctcagct 720

atgagctggc cttcaagaag caggaagagg cctgggagca ggcccagcac agggatcaca 780

ttgtcggggt gacctggctt atacttgaag cctttgagct ggaccctggc tttatccatg 840

aggccaggct gcgtgtccag atggccacac tggaggatga tgtggtagag gaggagcgtt 900

atacaggcca gtggagtgag tggagccagc ctgtgtgctt ccaggctccc cagagacaag 960

gccctctgat cccaccctgg gggtggccag gcaacaccct tgttgctgtg tccatctttc 1020

tcctgctgac tggcccgacc tacctcctgt tcaagctgtc gcccagggtg aagagaatct 1080

tctaccagaa cgtgccctct ccagcgatgt tcttccagcc cctctacagt gtacacaatg 1140

ggaacttcca gacttggatg ggggcccacg gggccggtgt gctgttgagc caggactgtg 1200

ctggcacccc acagggagcc ttggagccct gcgtccagga ggccactgca ctgctcactt 1260

gtggcccagc gcgtccttgg aaatctgtgg ccctggagga ggaacaggag ggccctggga 1320

ccaggctccc ggggaacctg agctcagagg atgtgctgcc agcagggtgt acggagtgga 1380

gggtacagac gcttgcctat ctgccacagg aggactgggc ccccacgtcc ctgactaggc 1440

cggctccccc agactcagag ggcagcagga gcagcagcag cagcagcagc agcaacaaca 1500

acaactactg tgccttgggc tgctatgggg gatggcacct ctcagccctc ccaggaaaca 1560

cacagagctc tgggcccatc ccagccctgg cctgtggcct ttcttgtgac catcagggcc 1620

tggagaccca gcaaggagtt gcctgggtgc tggctggtca ctgccagagg cctgggctgc 1680

atgaggacct ccagggcatg ttgctccctt ctgtcctcag caaggctcgg tcctggacat 1740

tctaggtccc tgactcgcca gatgcatcat gtccattttg ggaaaatgga ctgaagtttc 1800

tggagccctt gtctgagact gaacctcctg agaaggggcc cctagcagcg gtcagaggtc 1860

ctgtctggat ggaggctgga ggctcccccc tcaacccctc tgctcagtgc ctgtggggag 1920

cagcctctac cctcagcatc ctggccacaa gttcttcctt ccattgtccc ttttctttat 1980

ccctgacctc tctgagaagt ggggtgtggt ctctcagctg ttctgccctc atacccttaa 2040

agggccagcc tgggcccagt ggacacaggt aaggcaccat gaccacctgg tgtgacctct 2100

ctgtgcctta ctgaggcacc tttctagaga ttaaaagggg cttgatggct gttaaaaaaa 2160

aaaaaaaaaa a 2171

<210>56

<211>2175

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>56

agcagctctg taatgcgctt gtggtttcag atgtgggcgg cctgtgtgaa cctgtcgtgc 60

aaagctcacg tcaccaactg ctgcagttat ctcctgaatc aggctgaggg tctttgctgt 120

gcacccagag atagttgggt gacaaatcac ctccaggttg gggatgcctc agacttgtga 180

tgggactggg cagatgcatc tgggaagtaa ctgctgcaag aacggacaga cactgctgca 240

gagaacttgc cacggtgttt catgctgtgg ctggtggttc caggctgcac gctccattct 300

aggaaagggg ccctcagccc agtcccttgc aggctggacc ttggagagtg aggccctgag 360

gcgagacatg ggcacctggc tcctggcctg catctgcatc tgcacctgtg tctgcttggg 420

agtctctgtc acaggggaag gacaagggcc aaggtctaga accttcacct gcctcaccaa 480

caacattctc aggatcgatt gccactggtc tgccccagag ctgggacagg gctccagccc 540

ctggctcctc ttcaccaggc tcctggcggc acacataagt gcatcttgcg gggcagtgag 600

tgcaccgtcg tgctgccacc tgaggcagtg ctcgtgccat ctgacaattt caccatcact 660

ttccaccact gcatgtctgg gagggagcag gtcagcctgg tggacccgga gtacctgccc 720

cggagacacg agcaacatca gttctggcca ctgcatcctg acctggagca tcagtcctgc 780

cttggagcca atgaccacac ttctcagcta tgagctggcc ttcaagaagc aggaagaggc 840

ctgggagcag gcccagcaca gggatcacat tgtcggggtg acctggctta tacttgaagc 900

ctttgagctg gaccctggct ttatccatga ggccaggctg cgtgtccaga tggccacact 960

ggaggatgat gtggtagagg aggagcgtta tacaggccag tggagtgagt ggagccagcc 1020

tgtgtgcttc caggctcccc agagacaagg ccctctgatc ccaccctggg ggtggccagg 1080

caacaccctt gttgctgtgt ccatctttct cctgctgact ggcccgacct acctcctgtt 1140

caagctgtcg cccagacttg gatgggggcc cacggggccg gtgtgctgtt gagccaggac 1200

tgtgctggca ccccacaggg agccttggag ccctgcgtcc aggaggccac tgcactgctc 1260

acttgtggcc cagcgcgtcc ttggaaatct gtggccctgg aggaggaaca ggagggccct 1320

gggaccaggc tcccggggaa cctgagctca gaggatgtgc tgccagcagg gtgtacggag 1380

tggagggtac agacgcttgc ctatctgcca caggaggact gggcccccac gtccctgact 1440

aggccggctc ccccagactc agagggcagc aggagcagca gcagcagcag cagcagcaac 1500

aacaacaact actgtgcctt gggctgctat gggggatggc acctctcagc cctcccagga 1560

aacacacaga gctctgggcc catcccagcc ctggcctgtg gcctttcttg tgaccatcag 1620

ggcctggaga cccagcaagg agttgcctgg gtgctggctg gtcactgcca gaggcctggg 1680

ctgcatgagg acctccaggg catgttgctc ccttctgtcc tcagcaaggc tcggtcctgg 1740

acattctagg tccctgactc gccagatgca tcatgtccat tttgggaaaa tggactgaag 1800

tttctggagc ccttgtctga gactgaacct cctgagaagg ggcccctagc agcggtcaga 1860

ggtcctgtct ggatggaggc tggaggctcc cccctcaacc cctctgctca gtgcctgtgg 1920

ggagcagcct ctaccctcag catcctggcc acaagttctt ccttccattg tcccttttct 1980

ttatccctga cctctctgag aagtggggtg tggtctctca gctgttctgc cctcataccc 2040

ttaaagggcc agcctgggcc cagtggacac aggtaaggca ccatgaccac ctggtgtgac 2100

ctctctgtgc cttactgagg cacctttcta gagattaaaa ggggcttgat ggctgttaaa 2160

aaaaaaaaaa aaaaa 2175

<210>57

<211>1451

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>57

gaagagcaag cgccatgttg aagccatcat taccattcac atccctctta ttcctgcagc 60

tgcccctgct gggagtgggg ctgaacacga caattctgac gcccaatggg aatgaagaca 120

ccacagctga tttcttcctg accactatgc ccactgactc cctcagtgtt tccactctgc 180

ccctcccaga ggttcagtgt tttgtgttca atgtcgagta catgaattgc acttggaaca 240

gcagctctga gccccagcct accaacctca ctctgcatta ttggtacaag aactcggata 300

atgataaagt ccagaagtgc agccactatc tattctctga agaaatcact tctggctgtc 360

agttgcaaaa aaaggagatc cacctctacc aaacatttgt tgttcagctc caggacccac 420

gggaacccag gagacaggcc acacagatgc taaaactgca gaatctggtg atcccctggg 480

ctccagagaa cctaacactt cacaaactga gtgaatccca gctagaactg aactggaaca 540

acagattctt gaaccactgt ttggagcact tggtgcagta ccggactgac tgggaccaca 600

gctggactga acaatcagtg gattatagac ataagttctc cttgcctagt gtggatgggc 660

agaaacgcta cacgtttcgt gttcggagcc gctttaaccc actctgtgga agtgctcagc 720

attggagtga atggagccac ccaatccact gggggagcaa tacttcaaaa gagaatcctt 780

tcctgtttgc attggaagcc gtggttatct ctgttggctc catgggattg attatcagcc 840

ttctctgtgt gtatttctgg ctggaacgga cgatgccccg aattcccacc ctgaagaacc 900

tagaggatct tgttactgaa taccacggga acttttcggc ctggagtggt gtgtctaagg 960

gactggctga gagtctgcag ccagactaca gtgaacgact ctgcctcgtc agtgagattc 1020

ccccaaaagg aggggccctt ggggaggggc ctggggcctc cccatgcaac cagcatagcc 1080

cctactgggc ccccccatgt tacaccctaa agcctgaaac ctgaacccca atcctctgac 1140

agaagaaccc cagggtcctg tagccctaag tggtactaac tttccttcat tcaacccacc 1200

tgcgtctcat actcacctca ccccactgtg gctgatttgg aattttgtgc ccccatgtaa 1260

gcaccccttc atttggcatt ccccacttga gaattaccct tttgccccga acatgttttt 1320

cttctccctc agtctggccc ttccttttcg caggattctt cctccctccc tctttccctc 1380

ccttcctctt tccatctacc ctccgattgt tcctgaaccg atgagaaata aagtttctgt 1440

tgataatcat c 1451

<210>58

<211>521

<212>PRT

<213>智人(Homo sapiens)

<400>58

Met Gly Leu Gly Arg Cys Ile Trp Glu Gly Trp Thr Leu Glu Ser Glu

1 5 10 15

Ala Leu Arg Arg Asp Met Gly Thr Trp Leu Leu Ala Cys Ile Cys Ile

20 25 30

Cys Thr Cys Val Cys Leu Gly Val Ser Val Thr Gly Glu Gly Gln Gly

35 40 45

Pro Arg Ser Arg Thr Phe Thr Cys Leu Thr Asn Asn Ile Leu Arg Ile

50 55 60

Asp Cys His Trp Ser Ala Pro Glu Leu Gly Gln Gly Ser Ser Pro Trp

65 70 75 80

Leu Leu Phe Thr Ser Asn Gln Ala Pro Gly Gly Thr His Lys Cys Ile

85 90 95

Leu Arg Gly Ser Glu Cys Thr Val Val Leu Pro Pro Glu Ala Val Leu

100 105 110

Val Pro Ser Asp Asn Phe Thr Ile Thr Phe His His Cys Met Ser Gly

115 120 125

Arg Glu Gln Val Ser Leu Val Asp Pro Glu Tyr Leu Pro Arg Arg His

130 135 140

Val Lys Leu Asp Pro Pro Ser Asp Leu Gln Ser Asn Ile Ser Ser Gly

145 150 155 160

His Cys Ile Leu Thr Trp Ser Ile Ser Pro Ala Leu Glu Pro Met Thr

165 170 175

Thr Leu Leu Ser Tyr Glu Leu Ala Phe Lys Lys Gln Glu Glu Ala Trp

180 185 190

Glu Gln Ala Gln His Arg Asp His Ile Val Gly Val Thr Trp Leu Ile

195 200 205

Leu Glu Ala Phe Glu Leu Asp Pro Gly Phe Ile His Glu Ala Arg Leu

210 215 220

Arg Val Gln Met Ala Thr Leu Glu Asp Asp Val Val Glu Glu Glu Arg

225 230 235 240

Tyr Thr Gly Gln Trp Ser Glu Trp Ser Gln Pro Val Cys Phe Gln Ala

245 250 255

Pro Gln Arg Gln Gly Pro Leu Ile Pro Pro Trp Gly Trp Pro Gly Asn

260 265 270

Thr Leu Val Ala Val Ser Ile Phe Leu Leu Leu Thr Gly Pro Thr Tyr

275 280 285

Leu Leu Phe Lys Leu Ser Pro Arg Val Lys Arg Ile Phe Tyr Gln Asn

290 295 300

Val Pro Ser Pro Ala Met Phe Phe Gln Pro Leu Tyr Ser Val His Asn

305 310 315 320

Gly Asn Phe Gln Thr Trp Met Gly Ala His Gly Ala Gly Val Leu Leu

325 330 335

Ser Gln Asp Cys Ala Gly Thr Pro Gln Gly Ala Leu Glu Pro Cys Val

340 345 350

Gln Glu Ala Thr Ala Leu Leu Thr Cys Gly Pro Ala Arg Pro Trp Lys

355 360 365

Ser Val Ala Leu Glu Glu Glu Gln Glu Gly Pro Gly Thr Arg Leu Pro

370 375 380

Gly Asn Leu Ser Ser Glu Asp Val Leu Pro Ala Gly Cys Thr Glu Trp

385 390 395 400

Arg Val Gln Thr Leu Ala Tyr Leu Pro Gln Glu Asp Trp Ala Pro Thr

405 410 415

Ser Leu Thr Arg Pro Ala Pro Pro Asp Ser Glu Gly Ser Arg Ser Ser

420 425 430

Ser Ser Ser Ser Ser Ser Asn Asn Asn Asn Tyr Cys Ala Leu Gly Cys

435 440 445

Tyr Gly Gly Trp His Leu Ser Ala Leu Pro Gly Asn Thr Gln Ser Ser

450 455 460

Gly Pro Ile Pro Ala Leu Ala Cys Gly Leu Ser Cys Asp His Gln Gly

465 470 475 480

Leu Glu Thr Gln Gln Gly Val Ala Trp Val Leu Ala Gly His Cys Gln

485 490 495

Arg Pro Gly Leu His Glu Asp Leu Gln Gly Met Leu Leu Pro Ser Val

500 505 510

Leu Ser Lys Ala Arg Ser Trp Thr Phe

515 520

<210>59

<211>332

<212>PRT

<213>智人(Homo sapiens)

<400>59

Met His Leu Gly Ser Asn Cys Cys Lys Asn Gly Gln Thr Leu Leu Gln

1 5 10 15

Arg Thr Cys His Gly Val Ser Cys Cys Gly Trp Trp Phe Gln Ala Ala

20 25 30

Arg Ser Ile Leu Gly Lys Gly Pro Ser Ala Gln Ser Leu Ala Gly Trp

35 40 45

Thr Leu Glu Ser Glu Ala Leu Arg Arg Asp Met Gly Thr Trp Leu Leu

50 55 60

Ala Cys Ile Cys Ile Cys Thr Cys Val Cys Leu Gly Val Ser Val Thr

65 70 75 80

Gly Glu Gly Gln Gly Pro Arg Ser Arg Thr Phe Thr Cys Leu Thr Asn

85 90 95

Asn Ile Leu Arg Ile Asp Cys His Trp Ser Ala Pro Glu Leu Gly Gln

100 105 110

Gly Ser Ser Pro Trp Leu Leu Phe Thr Arg Leu Leu Ala Ala His Ile

115 120 125

Ser Ala Ser Cys Gly Ala Val Ser Ala Pro Ser Cys Cys His Leu Arg

130 135 140

Gln Cys Ser Cys His Leu Thr Ile Ser Pro Ser Leu Ser Thr Thr Ala

145 150 155 160

Cys Leu Gly Gly Ser Arg Ser Ala Trp Trp Thr Arg Ser Thr Cys Pro

165 170 175

Gly Asp Thr Ser Asn Ile Ser Ser Gly His Cys Ile Leu Thr Trp Ser

180 185 190

Ile Ser Pro Ala Leu Glu Pro Met Thr Thr Leu Leu Ser Tyr Glu Leu

195 200 205

Ala Phe Lys Lys Gln Glu Glu Ala Trp Glu Gln Ala Gln His Arg Asp

210 215 220

His Ile Val Gly Val Thr Trp Leu Ile Leu Glu Ala Phe Glu Leu Asp

225 230 235 240

Pro Gly Phe Ile His Glu Ala Arg Leu Arg Val Gln Met Ala Thr Leu

245 250 255

Glu Asp Asp Val Val Glu Glu Glu Arg Tyr Thr Gly Gln Trp Ser Glu

260 265 270

Trp Ser Gln Pro Val Cys Phe Gln Ala Pro Gln Arg Gln Gly Pro Leu

275 280 285

Ile Pro Pro Trp Gly Trp Pro Gly Asn Thr Leu Val Ala Val Ser Ile

290 295 300

Phe Leu Leu Leu Thr Gly Pro Thr Tyr Leu Leu Phe Lys Leu Ser Pro

305 310 315 320

Arg Leu Gly Trp Gly Pro Thr Gly Pro Val Cys Cys

325 330

<210>60

<211>369

<212>PRT

<213>智人(Homo sapiens)

<400>60

Met Leu Lys Pro Ser Leu Pro Phe Thr Ser Leu Leu Phe Leu Gln Leu

1 5 10 15

Pro Leu Leu Gly Val Gly Leu Asn Thr Thr Ile Leu Thr Pro Asn Gly

20 25 30

Asn Glu Asp Thr Thr Ala Asp Phe Phe Leu Thr Thr Met Pro Thr Asp

35 40 45

Ser Leu Ser Val Ser Thr Leu Pro Leu Pro Glu Val Gln Cys Phe Val

50 55 60

Phe Asn Val Glu Tyr Met Asn Cys Thr Trp Asn Ser Ser Ser Glu Pro

65 70 75 80

Gln Pro Thr Asn Leu Thr Leu His Tyr Trp Tyr Lys Asn Ser Asp Asn

85 90 95

Asp Lys Val Gln Lys Cys Ser His Tyr Leu Phe Ser Glu Glu Ile Thr

100 105 110

Ser Gly Cys Gln Leu Gln Lys Lys Glu Ile His Leu Tyr Gln Thr Phe

115 120 125

Val Val Gln Leu Gln Asp Pro Arg Glu Pro Arg Arg Gln Ala Thr Gln

130 135 140

Met Leu Lys Leu Gln Asn Leu Val Ile Pro Trp Ala Pro Glu Asn Leu

145 150 155 160

Thr Leu His Lys Leu Ser Glu Ser Gln Leu Glu Leu Asn Trp Asn Asn

165 170 175

Arg Phe Leu Asn His Cys Leu Glu His Leu Val Gln Tyr Arg Thr Asp

180 185 190

Trp Asp His Ser Trp Thr Glu Gln Ser Val Asp Tyr Arg His Lys Phe

195 200 205

Ser Leu Pro Ser Val Asp Gly Gln Lys Arg Tyr Thr Phe Arg Val Arg

210 215 220

Ser Arg Phe Asn Pro Leu Cys Gly Ser Ala Gln His Trp Ser Glu Trp

225 230 235 240

Ser His Pro Ile His Trp Gly Ser Asn Thr Ser Lys Glu Asn Pro Phe

245 250 255

Leu Phe Ala Leu Glu Ala Val Val Ile Ser Val Gly Ser Met Gly Leu

260 265 270

Ile Ile Ser Leu Leu Cys Val Tyr Phe Trp Leu Glu Arg Thr Met Pro

275 280 285

Arg Ile Pro Thr Leu Lys Asn Leu Glu Asp Leu Val Thr Glu Tyr His

290 295 300

Gly Asn Phe Ser Ala Trp Ser Gly Val Ser Lys Gly Leu Ala Glu Ser

305 310 315 320

Leu Gln Pro Asp Tyr Ser Glu Arg Leu Cys Leu Val Ser Glu Ile Pro

325 330 335

Pro Lys Gly Gly Ala Leu Gly Glu Gly Pro Gly Ala Ser Pro Cys Asn

340 345 350

Gln His Ser Pro Tyr Trp Ala Pro Pro Cys Tyr Thr Leu Lys Pro Glu

355 360 365

Thr

<210>61

<211>17

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>VH CDR2

<400>61

Glu Ile Leu Pro Gly Ser Gly Thr Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210>62

<211>11

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>VL CDR1

<400>62

Lys Ala Ser Gln His Val Ile Thr His Val Thr

1 5 10

<210>63

<211>9

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>VL CDR3

<400>63

Gln His Phe Tyr Asp Tyr Pro Leu Thr

1 5

<210>64

<211>9

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>VL CDR3

<400>64

Gln His Phe Tyr Glu Tyr Pro Leu Thr

1 5

<210>65

<211>7

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>VL CDR2

<400>65

Gly Thr Ser Tyr Ser Tyr Ser

1 5

Claims

(a)形成解折叠的中间体；

(b)胶体不稳定性；

(c)抗体分子的可溶性结合；或

(d)抗体分子的沉淀；

3.如权利要求1或2所述的制剂，其特征在于，所述抗体或抗体片段免疫特异性结合IL-9多肽。

4.如权利要求1或2所述的制剂，其特征在于，所述水性载体是蒸馏水。

5.如权利要求1或2所述的制剂，其特征在于，所述制剂的pH范围是4.0至8.0。

6.如权利要求5所述的制剂，其特征在于，所述pH范围是约6.0至6.5。

7.如权利要求1或2所述的制剂，还包含浓度不超过约200mM的盐。

8.如权利要求7所述的制剂，其特征在于，所述盐的浓度范围是约100mM至约200mM。

9.如权利要求6所述的制剂，还包含浓度范围是约100至约200mM的盐。

10.如权利要求1或2所述的制剂，还包含糖。

11.如权利要求6所述的制剂，还包含糖。

12.如权利要求10所述的制剂，其特征在于，所述糖是蔗糖。

13.如权利要求11所述的制剂，其特征在于，所述糖是蔗糖。

14.如权利要求10所述的制剂，其特征在于，所述糖是海藻糖。

15.如权利要求11所述的制剂，其特征在于，所述糖是海藻糖。

16.如权利要求12所述的制剂，其特征在于，所述蔗糖的浓度最高为10％。

17.如权利要求13所述的制剂，其特征在于，所述蔗糖的浓度最高为10％。

18.如权利要求14所述的制剂，其特征在于，所述海藻糖的浓度最高为10％。

19.如权利要求15所述的制剂，其特征在于，所述海藻糖的浓度最高为10％。

20.如权利要求1或2所述的制剂，还包含表面活性剂。

21.如权利要求6所述的制剂，还包含表面活性剂。

22.如权利要求9所述的制剂，还包含表面活性剂。

23.如权利要求21所述的制剂，其特征在于，所述表面活性剂是吐温-20或吐温-80。

24.如权利要求22所述的制剂，其特征在于，所述表面活性剂是吐温-20或吐温-80。

25.如权利要求23所述的制剂，其特征在于，所述表面活性剂的浓度最高为0.1％。

26.如权利要求24所述的制剂，其特征在于，所述表面活性剂的浓度最高为0.1％。

27.如权利要求1或2所述的制剂，其特征在于，所述抗体或抗体片段的浓度为至少100mg/ml。

28.如权利要求1或2所述的制剂，其特征在于，所述抗体或抗体片段的浓度范围为约50mg/ml至约150mg/ml。

29.如权利要求1或2所述的制剂，其特征在于，磷酸盐的浓度范围为约10mM至约100mM。

30.如权利要求29所述的制剂，其特征在于，磷酸盐的浓度范围为约25mM至约75mM。

31.如权利要求1或2所述的制剂，其特征在于，经高效大小排阻色谱(HPSEC)测定，所述抗体或抗体片段在40℃储存至少15天期间是稳定的。

32.如权利要求1或2所述的制剂，其特征在于，经HPSEC测定，所述抗体或抗体片段在室温储存至少6个月期间是稳定的。

33.如权利要求1或2所述的制剂，其特征在于，经HPSEC测定，所述抗体或抗体片段在4℃储存至少1.5年期间是稳定的。

34.如权利要求1或2所述的制剂，其特征在于，经HPSEC测定，在储存期间小于5％的所述抗体或抗体片段形成聚集体。

35.如权利要求6所述的制剂，其特征在于，经HPSEC测定，在储存期间小于5％的所述抗体或抗体片段形成聚集体。

36.如权利要求9所述的制剂，其特征在于，经HPSEC测定，在储存期间小于5％的所述抗体或抗体片段形成聚集体。

37.如权利要求1或2所述的制剂，其特征在于，经HPSEC测定，在储存期间小于2％的所述抗体或抗体片段形成聚集体。

38.如权利要求6所述的制剂，其特征在于，经HPSEC测定，在储存期间小于2％的所述抗体或抗体片段形成聚集体。

39.如权利要求9所述的制剂，其特征在于，经HPSEC测定，在储存期间小于2％的所述抗体或抗体片段形成聚集体。

40.如权利要求1或2所述的制剂，其特征在于，经HPSEC测定，在储存期间小于1％的所述抗体或抗体片段形成聚集体。

41.如权利要求6所述的制剂，其特征在于，经HPSEC测定，在储存期间小于1％的所述抗体或抗体片段形成聚集体。

42.如权利要求9所述的制剂，其特征在于，经HPSEC测定，在储存期间小于1％的所述抗体或抗体片段形成聚集体。

43.如权利要求1或2所述的制剂，其特征在于，与代表储存前抗体的参比抗体相比，所述抗体或其片段保持至少80％的结合能力。

44.如权利要求6所述的制剂，其特征在于，与代表储存前抗体的参比抗体相比，所述抗体或其片段保持至少80％的结合能力。

45.如权利要求9所述的制剂，其特征在于，与代表储存前抗体的参比抗体相比，所述抗体或其片段保持至少80％的结合能力。

46.如权利要求1或2所述的制剂，其特征在于，与参比抗体相比，所述抗体或其片段保持至少85％的结合能力。

47.如权利要求6所述的制剂，其特征在于，与参比抗体相比，所述抗体或其片段保持至少85％的结合能力。

48.如权利要求9所述的制剂，其特征在于，与参比抗体相比，所述抗体或其片段保持至少85％的结合能力。

49.如权利要求1或2所述的制剂，其特征在于，与参比抗体相比，所述抗体或其片段保持至少90％的结合能力。

50.如权利要求6所述的制剂，其特征在于，与参比抗体相比，所述抗体或其片段保持至少90％的结合能力。

51.如权利要求9所述的制剂，其特征在于，与参比抗体相比，所述抗体或其片段保持至少90％的结合能力。

52.如权利要求1或2所述的制剂，其特征在于，与参比抗体相比，所述抗体或其片段保持至少95％的结合能力。

53.如权利要求6所述的制剂，其特征在于，与参比抗体相比，所述抗体或其片段保持至少95％的结合能力。

54.如权利要求9所述的制剂，其特征在于，与参比抗体相比，所述抗体或其片段保持至少95％的结合能力。

55.如权利要求1或2所述的制剂，其特征在于，所述抗体或抗体片段是4D4、4D4H2-1 D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F3 22D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4，或其抗原结合片段。

56.如权利要求6所述的制剂，其特征在于，所述抗体或抗体片段是4D4、4D4H2-1 D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F3 22D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4，或其抗原结合片段。

57.如权利要求9所述的制剂，其特征在于，所述抗体或抗体片段是4D4、4D4H2-1 D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F3 22D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4，或其抗原结合片段。

58.如权利要求57所述的制剂，其特征在于，所述抗体或抗体片段是7F3com-2H2。

59.一种适合胃肠道外给予人的药物单位剂型，其包含装在合适容器中的权利要求1或2所述的抗体制剂。

60.如权利要求59所述的药物单位剂型，其特征在于，所述抗体制剂用于静脉内、皮下或肌肉内注射。

61.一种适合以气雾剂给予人的药物单位剂型，其包含装在合适容器中的权利要求1或2所述的抗体制剂。

62.如权利要求61所述的药物单位剂型，其特征在于，所述抗体制剂是经鼻内给药的。

63.一种抗体制剂，其通过冻干权利要求1或2所述的水性抗体制剂产生。

64.一种密封容器，其含有权利要求1或2所述的制剂。

65.一种密封容器，其含有权利要求9所述的制剂。

66.如权利要求64所述的密封容器，其具有足以用药学上可接受的载体进行重建的容积。

67.如权利要求66所述的密封容器，其特征在于，所述载体是注射用水、USP、5％葡萄糖的水溶液(D5W)或盐水。

68.如权利要求67所述的密封容器，其特征在于，所述容器维持无菌环境，并允许在不丧失无菌性的条件下重建所述制剂。

70.如权利要求69所述的药盒，其特征在于，所述制剂是无菌制剂。

71.如权利要求69所述的药盒，其特征在于，所述水性载体是蒸馏水。

72.如权利要求70所述的药盒，其特征在于，所述抗体或抗体片段是4D4、4D4H2-1 D11、4D4com-XF-9、4D4com-2F9、7F3、71A10、7F3 22D3、7F3com-2H2、7F3com-3H5或7F3com-3D4，或其抗原结合片段。

73.如权利要求72所述的药盒，其特征在于，所述抗体或抗体片段是7F3com-2H2。

74.如权利要求70、72或73所述的药盒，其特征在于，所述制剂是通过冻干水性抗体制剂产生的。

75.如权利要求70或73所述的药盒，其特征在于，所述抗体或抗体片段的浓度为约50mg/ml至约150mg/ml。

76.一种预防、控制、治疗或改善炎性疾病、自身免疫性疾病、与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关的疾病、与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(优选呼吸道感染)，或其一种或多种症状的方法，所述方法包括给予需要的对象预防或治疗有效量的权利要求56所述的抗体制剂。

77.一种预防、控制、治疗或改善与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(优选呼吸道感染)，或其一种或多种症状的方法，所述方法包括给予需要的对象预防或治疗有效量的权利要求57所述的抗体制剂。

78.一种预防、控制、治疗或改善与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(优选呼吸道感染)，或其一种或多种症状的方法，所述方法包括给予需要的对象预防或治疗有效量的权利要求58所述的抗体制剂。

79.如权利要求76所述的方法，其特征在于，经HPSEC测定，所述抗体或其抗体片段多肽在40℃储存至少15天期间是稳定的。

80.如权利要求77所述的方法，其特征在于，经HPSEC测定，所述抗体或其抗体片段多肽在40℃储存至少15天期间是稳定的。

81.如权利要求78所述的方法，其特征在于，经HPSEC测定，所述抗体或其抗体片段多肽在40℃储存至少15天期间是稳定的。

82.如权利要求76所述的方法，其特征在于，经HPSEC测定，在储存期间小于5％的所述抗体或抗体片段形成聚集体。

83.如权利要求77所述的方法，其特征在于，经HPSEC测定，在储存期间小于5％的所述抗体或抗体片段形成聚集体。

84.如权利要求78所述的方法，其特征在于，经HPSEC测定，在储存期间小于5％的所述抗体或抗体片段形成聚集体。

85.如权利要求76所述的方法，其特征在于，与代表储存前抗体或抗体片段的参比抗体相比，所述抗体或其片段保持至少80％与IL-9多肽的结合能力。

86.如权利要求77所述的方法，其特征在于，与代表储存前抗体或抗体片段的参比抗体相比，所述抗体或其片段保持至少80％与IL-9多肽的结合能力。

87.如权利要求78所述的方法，其特征在于，与代表储存前抗体或抗体片段的参比抗体相比，所述抗体或其片段保持至少80％与IL-9多肽的结合能力。

88.如权利要求76所述的方法，其特征在于，所述制剂是经胃肠道外给予的。

89.如权利要求77所述的方法，其特征在于，所述制剂是经胃肠道外给予的。

90.如权利要求78所述的方法，其特征在于，所述制剂是经胃肠道外给予的。

91.如权利要求76所述的方法，其特征在于，所述制剂是经皮下、口服或鼻内给予的。

92.如权利要求77所述的方法，其特征在于，所述制剂是经皮下、口服或鼻内给予的。

93.如权利要求78所述的方法，其特征在于，所述制剂是经皮下、口服或鼻内给予的。

94.如权利要求76所述的方法，其特征在于，所述炎性疾病是哮喘或***反应。

95.如权利要求77所述的方法，其特征在于，所述炎性疾病是哮喘或***反应。

96.如权利要求78所述的方法，其特征在于，所述炎性疾病是哮喘或***反应。

98.如权利要求97所述的制剂，其特征在于，所述制剂是无菌的。

99.如权利要求97所述的制剂，其特征在于，所述水性载体是蒸馏水。

100.如权利要求97或98所述的制剂，其特征在于，所述制剂的pH范围是4.0至8.0。

101.如权利要求100所述的制剂，其特征在于，所述pH范围是约6.0至6.5。

102.如权利要求97或98所述的制剂，还包含浓度不超过约200mM的盐。

103.如权利要求102所述的制剂，其特征在于，所述盐的浓度范围是约100mM至约200mM。

104.如权利要求101所述的制剂，其特征在于，所述盐的浓度范围是约100mM至约200mM。

105.如权利要求97或98所述的制剂，还包含糖。

106.如权利要求101所述的制剂，还包含糖。

107.如权利要求105所述的制剂，其特征在于，所述糖是蔗糖。

108.如权利要求106所述的制剂，其特征在于，所述糖是蔗糖。

109.如权利要求105所述的制剂，其特征在于，所述糖是海藻糖。

110.如权利要求106所述的制剂，其特征在于，所述糖是海藻糖。

111.如权利要求107所述的制剂，其特征在于，所述蔗糖的浓度最高为10％。

112.如权利要求108所述的制剂，其特征在于，所述蔗糖的浓度最高为10％。

113.如权利要求109所述的制剂，其特征在于，所述海藻糖的浓度最高为10％。

114.如权利要求110所述的制剂，其特征在于，所述海藻糖的浓度最高为10％。

115.如权利要求97或98所述的制剂，还包含表面活性剂。

116.如权利要求101所述的制剂，还包含表面活性剂。

117.如权利要求104所述的制剂，还包含表面活性剂。

118.如权利要求116所述的制剂，其特征在于，所述表面活性剂是吐温-20或吐温-80。

119.如权利要求117所述的制剂，其特征在于，所述表面活性剂是吐温-20或吐温-80。

120.如权利要求118所述的制剂，其特征在于，所述吐温-20或吐温-80的浓度最高为0.1％。

121.如权利要求119所述的制剂，其特征在于，所述吐温-20或吐温-80的浓度最高为0.1％。

122.如权利要求97或98所述的制剂，其特征在于，所述抗体或抗体片段的浓度为至少100mg/ml。

123.如权利要求97或98所述的制剂，其特征在于，所述抗体或抗体片段的浓度范围为约50mg/ml至约150mg/ml。

124.如权利要求97或98所述的制剂，其特征在于，磷酸盐的浓度范围为约10mM至约100mM。

125.如权利要求123所述的制剂，其特征在于，磷酸盐的浓度范围为约25mM至约75mM。

126.如权利要求124所述的制剂，其特征在于，磷酸盐的浓度范围为约25mM至约75mM。

127.如权利要求97或98所述的制剂，其特征在于，经高效大小排阻色谱(HPSEC)测定，所述抗体或抗体片段在40℃储存至少15天期间是稳定的。

128.如权利要求97或98所述的制剂，其特征在于，经HPSEC测定，所述抗体或抗体片段在室温储存至少6个月期间是稳定的。

129.如权利要求97或98所述的制剂，其特征在于，经HPSEC测定，所述抗体或抗体片段在4℃储存至少1.5年期间是稳定的。

130.如权利要求97或98所述的制剂，其特征在于，经HPSEC测定，在储存期间小于5％的所述抗体或抗体片段形成聚集体。

131.如权利要求101所述的制剂，其特征在于，经HPSEC测定，在储存期间小于5％的所述抗体或抗体片段形成聚集体。

132.如权利要求104所述的制剂，其特征在于，经HPSEC测定，在储存期间小于5％的所述抗体或抗体片段形成聚集体。

133.一种预防、治疗或控制疾病或失调的方法，所述方法包括给予需要的对象预防或治疗有效量的权利要求1或2所述的抗体制剂。

135.如权利要求134所述的制剂，其特征在于，所述制剂包含水性载体、约100mg/ml 7F3com-2H2抗体、约25mM磷酸盐、约150mM NaCl，其中所述制剂的pH为约6.0。

136.如权利要求135所述的制剂，其特征在于，所述制剂是等张的。

137.如权利要求135所述的制剂，其特征在于，经高效大小排阻色谱(HPSEC)测定，所述抗体或抗体片段在40℃储存至少15天期间是稳定的。

138.如权利要求135所述的制剂，其特征在于，经HPSEC测定，所述抗体或抗体片段在室温储存至少6个月期间是稳定的。

139.如权利要求135所述的制剂，其特征在于，经HPSEC测定，所述抗体或抗体片段在4℃储存至少1.5年期间是稳定的。

140.如权利要求135所述的制剂，其特征在于，经HPSEC测定，在储存期间小于5％的所述抗体或抗体片段形成聚集体。

141.一种预防、控制、治疗或改善炎性疾病、自身免疫性疾病、与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关的疾病、与IL-9多肽的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、与IL-9R或其一个或多个亚单位的异常表达和/或活性有关或以其为特征的疾病或失调、自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病或感染(优选呼吸道感染)，或其一种或多种症状的方法，所述方法包括给予需要的对象预防或治疗有效量的权利要求135所述的抗体制剂。