CH644020A5

CH644020A5 - Procede et dispositif de separation de differentes fractions d'un echantillon de sang.

Info

Publication number: CH644020A5
Application number: CH244980A
Authority: CH
Inventors: Anne Sussi Johansson; Claes Folke Hoegman
Original assignee: Johansson A S; Claes Folke Hoegman
Priority date: 1979-03-28
Filing date: 1980-03-28
Publication date: 1984-07-13
Also published as: ES490057A0; ZA801818B; BE882478A; AU5683980A; ES8100885A1; SE7902761L; US4608178A; SE416378B; GB2047110B; BR8001855A; IL59716A0; FI77158B; DE3012227A1; CA1166214A; IL59716A; FI800949A; FI77158C; JPS55141247A; AU535289B2; FR2452291A1

Description

La présente invention concerne les perfectionnements apportés au procédé de séparation des différentes fractions sanguines. L'invention concerne également un dispositif de sac à sang utilisable 20 pour ces opérations.

Après avoir effectué une prise de sang sur un donneur, le sang est soumis à un procédé de séparation permettant de séparer les composants cellulaires du plasma destinées à un stockage et à une utilisation séparés. La séparation des fractions est effectuée par sédimenta-25 tion, ou plus fréquemment par centrifugation, dont il résulte une couche supérieure de plasma, une couche intermédiaire plus mince jaune grisâtre renfermant les globuljss blancs et éventuellement des thrombocytes, et une couche inférieure renfermant les globules rouges. Il existe à l'heure actuelle un certain nombre de procédés et de 30 dispositifs permettant d'emmagasiner, de séparer, de stocker les différentes fractions sanguines. Le procédé le plus utilisé à l'heure actuelle fait usage d'un dispositif fermé à sac à sang stérile du type Fenwal bien connu. En général, ce dispositif renferme un sac de remplissage relativement grand et un ou plusieurs sacs de transfert, 35 lesquels sont reliés à une ouverture d'évacuation aménagée dans la portion supérieure du sac de remplissage grâce à un certain nombre de tuyaux. Après avoir soutiré le sang et rempli le sac de remplissage par l'intermédiaire d'un tuyau de soutirage relié lui aussi à la portion supérieure du sac de remplissage, le sac de remplissage accompagné 40 du ou des sacs de transfert est centrifugé, après quoi le sac de remplissage est placé dans un dispositif permettant d'en évacuer les différentes fractions par simple compression. Un dispositif simple et utilisé fréquemment est constitué d'une plaque verticale solidaire d'une plaque de pression grâce à une charnière, la plaque de pres-« sion étant pressée contre la plaque verticale sous l'effet d'une tension de ressort. Dans le but d'évacuer le contenu du sac de remplissage, celui-ci est placé entre la plaque verticale et la plaque de pression sous tension de ressort, et c'est ainsi que le plasma sanguin est évacué par l'ouverutre du sac de remplissage pour venir remplir un des 50 sacs de transfert grâce au tuyau de raccordement. Un autre tuyau menant éventuellement vers un deuxième sac de transfert reste fermé pendant ces opérations. Lorsque la couche intermédiaire a atteint le bord supérieur du sac de remplissage, le tuyau du sac de transfert renfermant maintenant le plasma sanguin est fermé, et c'est ainsi que s? la couche intermédiaire initiale est évacuée par compression en direction du second sac de transfert (après que le tuyau de raccordement a été ouvert), ou cette couche intermédiaire est évacuée par le tuyau de soutirage (cela constitue cependant un risque de contamination, étant donné que le dispositif n'est pas entièrement fermé). 60 Etant donné que la couche intermédiaire a une certaine tendance à rester collée contre la paroi du sac à sang, il est nécessaire, dans la plupart des cas, de fournir une assistance manuelle au processus d'évacuation par compression. Dès que la couche intermédiaire est évacuée en majeure partie, l'effort de compression est interrompu, le <•5 plasma sanguin se trouvant alors dans l'un des sacs de transfert, et les globules rouges demeurant dans le sac de remplissage et la couche intermédiaire se trouvant dans le second sac de transfert ou dans un autre récipient.

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Le procédé décrit ci-dessus a plusieurs désavantages et inconvénients. Ainsi, l'assistance manuelle nécessaire pour extraire les différentes fractions de sang entraîne une certaine perte de temps de la part du personnel hospitalier, étant donné que l'opération d'évacuation par compression doit constamment être surveillée et que l'extraction de la couche intermédiaire fait appel à une assistance manuelle. De plus, en pratique il est possible de recueillir seulement 50 à 60% des globules blancs, en raison de l'adhérence de ces globules à la paroi du sac à sang mentionnée ci-dessus. Il est par conséquent souhaitable de disposer d'un procédé d'évacuation par compression plus automatisé. Les dispositifs à sacs à sang et les procédés d'extraction utilisés à l'heure actuelle sont cependant difficiles à rendre plus automatisés. Par conséquent, la présente invention propose un procédé perfectionné utilisant un dispositif à sac à sang modifié permettant de pallier les inconvénients cités ci-dessus.

Les inconvénients et désavantages décrits ci-dessus sont palliés par l'objet de la présente invention, selon laquelle un procédé de séparation de différentes fractions d'un échantillon de sang comprend les étapes décrites par la revendication I, et selon laquelle un dispositif de sacs à sang permettant la mise en œuvre de ce procédé est construit selon la revendication 8.

Après que le sac de remplissage a été rempli de sang fraîchement soutiré, il est centrifugé selon un procédé classique, accompagné de ces sacs de transfert. Afin d'évacuer les différentes fractions de sang obtenues, il suffit ensuite de placer le sac de remplissage dans un dispositif de compression approprié travaillant automatiquement selon le principe énoncé ci-dessus, après que le mécanisme de compression a été déclenché.

Pendant les opérations, il n'est pas nécessaire de surveiller l'appareillage qui se charge de comprimer automatiquement le sac de remplissage et d'évacuer le plasma sanguin dans l'un des sacs de transfert et les globules rouges dans l'autre sac de transfert, tandis que la couche intermédiaire jaune grisâtre demeure dans le sac de remplissage. Les différentes fractions de sang ainsi séparées et recueillies dans différents sacs à sang peuvent ensuite être utilisées ou stockées selon les besoins.

Un troisième sac de transfert peut être relié en option au sac de transfert destiné à recueillir le plasma sanguin, au cas où la centrifugation primaire est conduite de telle manière que la couche supérieure est constituée d'un plasma riche en thrombocytes. Après avoir effectué une centrifugation d'appoint, le nouvau plasma est évacué par compression dans un troisième sac de transfert, tandis qu'un concentré de thrombocytes demeure dans le sac à plasma initial.

Le procédé selon la présente invention peut également être utilisé avantageusement pour les leucophérèses, dans lesquelles les globules blancs sont séparés du sang pouvant être réinjecté dans le patient appauvri de ces globules particuliers. Dans ce but, on utilise un dispositif à sac à sang selon la présente invention renfermant deux sacs à sang essentiellement identiques, les ouvertures d'évacuation supérieure et inférieure d'un des sacs à sang étant reliées aux ouvertures correspondantes de l'autre sac à sang. Après avoir recueilli le sang dans l'un des sacs, les deux sacs à sang sont centrifugés, après quoi le contenu est évacué par compression du sac de remplissage selon le procédé décrit ci-dessus. Après les opérations, seule la couche intermédiaire renfermant les globules blancs demeure dans le sac de remplissage, alors que le plasma sanguin et les globules rouges ont été transférés dans l'autre sac à sang. Ensuite, la couche jaune grisâtre est recueillie pour être soumise à une séparation plus poussée ou pour être utilisée sans tarder, tandis que le contenu du second sac à sang est réinjecté dans le patient. Etant donné que, par ce procédé, jusqu'à 95% des globules blancs peuvent être séparés du sang brut, le nombre de prises de sang requises nécessaires pour enlever une quantité donnée de globules blancs au patient est réduit considérablement par rapport aux techniques de séparation classiques, dans lesquelles la séparation des globules blancs est moins nette, ce qui entraîne une réinjection partielle non souhaitée des globules blancs dans le patient. Il va de soi que le procédé de la présente invention constitue un gain de temps et est plus agréable pour le patient ou pour le donneur.

Une automatisation relativement simple du procédé peut être réalisée grâce au fait que le plasma sanguin et les globules rouges peuvent être évacués simultanément, l'un par l'ouverture d'évacuation supérieure et l'autre par l'ouverture inférieure aménagées respectivement dans la portion supérieure et dans la portion inférieure du sac de remplissage. Dans ces circonstances, le sac de remplissage est de préférence comprimé par une pression uniforme exercée sur toute sa surface, cette compression pouvant être réalisée, par exemple, par deux plaques verticales, essentiellement parallèles. Un dispositif approprié de ce type est décrit plus en détail dans la demande de brevet suédoise N° 7902760-3, et fonctionne selon les principes suivants: étant donné que la viscosité des globules rouges est supérieure à celle de la couche de plasma, celle-ci pourra être évacuée du sac de remplissage plus rapidement que les globules rouges. Pour cette raison, on aménage un dispositif approprié, par exemple une cellule photo-électrique, pouvant détecter l'instant où la couche à cellules a atteint un niveau approprié bien déterminé à l'intérieur du sac de remplissage. Cet organe de détection est conçu et disposé de manière à interrompre l'écoulement du tuyau d'évacuation aménagé dans la portion supérieure du sac de remplissage. A partir de cet instant, le contenu du sac à sang n'est évacué que par l'ouverture d'évacuation inférieure et l'évacuation est arrêtée automatiquement lorsqu'il ne subsiste plus qu'un volume résiduaire dans le sac de remplissage, volume qui correspond essentiellement au volume de la couche intermédiaire additionné d'un petit volume de globules rouges. Le processus de compression du sac de remplissage peut facilement être interrompu, par exemple à l'aide de tampons d'arrêt appropriés réglables d'avance et aménagés sur les plaques entre lesquelles le sac de remplissage est comprimé.

Dans un autre mode de réalisation, les organes de détection (une ou plusieurs cellules photo-électriques, etc.) sont placés essentiellement à la hauteur du niveau de la couche intermédiaire dès le début de l'opération de compression, et les organes de détection sont conçus et disposés de manière à maintenir la couche intermédiaire essentiellement à niveau constant pendant toute l'opération de compression. Selon ce mode de réalisation, l'organe de détection ferme et ouvre en alternance l'ouverture d'évacuation supérieure du sac à sang en fonction des déplacements de la couche intermédiaire. Ainsi, les organes de détection fermeront l'ouverture d'évacuation supérieure (tout en laissant l'ouverture d'évacuation ouverte) quand la couche intermédiaire s'élève trop. De même, les organes de détection ouvriront l'ouverture d'évacuation supérieure lorsque la couche intermédiaire s'abaisse en dessous du niveau de repère détecté. Un avantage important réalisé lors de l'utilisation de ce mode de construction est constitué par le fait qu'il n'y a qu'un contact négligeable entre les globules rouges et les globules blancs collés contre la paroi du sac à sang, d'où il résulte un degré de pureté plus poussé de la couche de globules rouges isolés.

Les dispositifs à sac à sang décrits ci-dessus pouvant être utilisés pour la leucophérèse et renfermant deux sacs à sang reliés entre eux en circuit fermé peuvent également être utilisés avantageusement pour les plasmaphérèses (dans lesquelles le plasma sanguin est séparé des autres constituants du sang) et pour la thrombophérèse (dans laquelle les thrombocytes sont séparés des autres constituants du sang).

Afin d'éviter la coagulation du sang et de prolonger le temps de conservation de celui-ci, le sang est mélangé pendant le soutirage à une solution renfermant des agents anticoagulants et nutritifs. D'habitude, cette solution se trouve dans le sac de remplissage dès le début de l'opération de soutirage. Selon un mode de réalisation préféré de l'invention, au moins l'agent anticoagulant se trouve, au départ, dans un des sacs de transfert et est mélangé au sang dans le sac de remplissage au fur et à mesure du soutirage. Du fait que le sang soutiré est mélangé en continu à de faibles quantités d'agents anticoagulants en fonction du débit de soutirage et s'êcoulant sous l'effet de la

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gravité ou par pompage, on assure un traitement moins violent des constituants du sang recueilli.

A présent, le dispositif de la présente invention est décrit plus en détail à l'aide de certains modes de réalisation préférés, dessins annexés à l'appui, dessins sur lesquels:

la fig. 1 est une représentation schématique d'un dispositif de sac à sang pouvant être utilisé pour les leucophérèses, les plasmaphérè-ses et les thrombophérèses;

la fig. 2 est une représentation schématique d'un dispositif de sac à sang analogue à celui de la fig. 1, mais avec deux sacs à sang reliés entre eux.

Le dispositif représenté sur la fig. 1 renferme un sac de remplissage 1, deux sacs de transfert 2 et 3 et, en option, un sac de transfert 4 supplémentaire. Le sac de remplissage 1 est doté, selon la manière classique, d'une ouverture de soutirage 5 pouvant accueillir un tuyau de soutirage 6 doté d'une canule, d'une ouverture de soutirage 5 et, en ce qui concerne le cas représenté, des raccords aux tuyaux 8 et 9 pouvant être percés. Selon l'invention, le sac de remplissage 1 est également muni d'une ouverture d'évacuation inférieure 10. Le sac de transfert 2 est doté d'une ouverture supérieure 11 reliée, grâce à un tuyau 12, à l'ouverture supérieure 7 du sac de remplissage. Grâce au tuyau 14, l'ouverture inférieure 13 du sac de transfert 2 est en liaison avec l'ouverture supérieure 15 du sac de transfert 3. A son tour, le sac de transfert 3 est relié à l'ouverture inférieure 10 du sac de remplissage 1 par l'intermédiaire de l'ouverture inférieure 16 et du tuyau 17. Analoguement au sac de remplissage 1, les sacs de transfert 2 et 3 sont, dans le cas représenté, dotés de raccords classiques 18,19, 20, 21 pouvant être percés au besoin. Le troisième sac de transfert 4, facultatif, est relié par son ouverture supérieure 22 à un tuyau 23 le reliant à l'ouverture supérieure 24 du sac de transfert 2. Le sac de transfert 4 lui aussi est, dans le cas représenté, doté de raccords à tuyaux 25 et 26 pouvant être percés. Le dispositif à sac à sang décrit ci-dessus, destiné à recueillir, à séparer et à stocker les différents constituants du sang, peut par exemple être utilisé de la manière suivante: le sang est recueilli dans le sac de remplissage 1 par le tuyau de soutirage 6 d'une manière tout à fait classique. Pendant ces opérations, les tuyaux 12,14 et 17 et, lorsqu'on utilise un troisième sac de transfert 4, également le tuyau 23 sont fermés, par exemple à l'aide de pinces appropriées. Une solution stérile d'agents anticoagulants et nutritifs peut se trouver dès le départ dans le sac de remplissage selon la méthode classique. Cependant, on préfère que l'agent anticoagulant se trouve au départ dans le sac de transfert 2, et qu'il soit introduit progressivement dans le sac de remplissage 1 par le tuyau 12 sous l'effet de la gravité ou par pompage, au fur et à mesure que le sang soutiré s'écoule du tuyau 6. Etant donné que les première fractions de sang soutiré ne rencontrent pas un trop grand volume de solution d'agents anticoagulants, il en résulte un traitement nettement moins violent des constituants du sang susceptibles d'être endommagés par une trop grande proportion de cette solution. Dans ce mode de réalisation, le tuyau 12 reliant le sac de remplissage 1 et le sac de transfert 2 est bien sûr ouvert pendant l'opération de soutirage du sang. En agissant sur les portions les plus rapprochées du sac de remplissage 1 des tuyaux 6 et 12 à l'aide d'un dispositif de pompag approprié, par exemple à l'aide d'une pompe à segment ou péristaltique appropriée, et en réalisant deux vitesses de pompage différentes pour les deux tuyaux, on peut engendrer un écoulement mélangé de sang et de solution d'anticoagulants en provenance du sac de transfert 2, le mélange étant recueilli dans le sac de remplissage 1. Dans ce cas, le tuyau de soutirage 6 est de préférence muni d'une portion-tampon 27 susceptible d'être influencée par la pression de l'écoulement de sang et pouvant être surveillée par un détecteur de pression. Ce détecteur peut être utilisé pour régler les vitesses de pompage, de sorte que le pompage du sang et d'agents anticoagulants correspond à l'écoulement de sang à travers le tuyau 6, afin de maintenir des proportions de mélange constantes de sang et de solution anticoagulante. Si, lors de la prise de sang, on procède de la manière décrite ci-dessus, il n'est pas nécessaire d'agiter le sac de remplissage, comme cela se fait couramment pendant les soutirages de sang classiques afin d'obtenir un mélange adéquat du sang et de la solution anticoagulante.

Lorsque le soutirage du sang est achevé, le tuyau 6 est fermé, par exemple scellé, et le tuyau 12 est fermé temporairement à l'aide d'une pince apropriée. Ensuite, le dispositif à sac à sang entier est centrifugé pour obtenir finalement une couche supérieure de plasma sanguin (constituant normalement environ 60% de volume de sang), une couche intermédiaire relativement mince renfermant les globules blancs et éventuellement les thrombocytes, et une couche inférieure renfermant essentiellement les globules rouges. Dans le but d'isoler séparément les différentes couches, le sac de remplissage est placé dans un dispositif approprié de compression destiné à faire évacuer une partie du contenu par les ouvertures supérieure et inférieure, 7 et 10 respectivement. Un tel dispositif approprié est décrit comme mentionné ci-dessus dans la demande de brevet suédoise N° 7902760-3. Dans ce dispositif, le sac de remplissage est placé entre une paroi verticale et une plaque de pression mobile, essentiellement perpendiculaire à la paroi. Les tuyaux 12 et 17 sont ouverts pour permettre au liquide de s'écouler et la compression du sac à sang par déplacement de la plaque de compression est mise en œuvre, ce déplacement étant effectué par un dispositif d'entraînement approprié. Dans ces conditions, le plasma sanguin est évacué du sac de remplissage 1 par le tuyau 12 en direction du sac de transfert 2, tandis que les globules rouges sont évacués simultanément par l'ouverture inférieure 10 et par le tuyau 17 en direction du sac de transfert 3. Etant donné que la viscosité de la couche de globules rouges est supérieure à celle du plasma sanguin, le niveau de la couche de globules rouges s'élèvera lentement pendant la compression du sac à sang. Pour assurer une automatisation partielle du procédé, le dispositif est doté par exemple d'une cellule photo-électrique, aménagée de préférence sur la plaque de pression. Cette cellule photo-électrique est conçue et disposée de manière à pouvoir détecter le niveau supérieur des globules rouges dans le sac de remplissage 1 lorsque celui-ci correspond à un niveau tel qu'essentiellement tout le plasma sanguin a été évacué du sac à sang. La cellule photo-électrique est destinée à déclencher un dispositif de fermeture approprié, tel qu'une vanne à solénoïde, interrompant ainsi la liaison entre le sac de remplissage 1 et le sac de transfert 2 par pinçage du tuyau 12. Par la suite, l'écoulement du sac de remplissage 1 se fait uniquement par l'ouverture 10 et le tuyau 17. De plus, le dispositif de compression est de préférence doté d'un dispositif approprié pouvant empêcher une compression trop poussée du sac de remplissage 1, et notamment lorsque le niveau inférieur de la couche intermédiaire s'approche de l'ouverture 10. Cela peut être réalisé par exemple à l'aide d'un ou de plusieurs tampons d'écarte-ment préréglables, susceptibles d'empêcher un déplacement à fond de la plaque de pression en direction de la portion de paroi lorsque le volume de liquide se trouvant dans le sac de remplissage 1 correspond au volume de la couche intermédiaire additionnée d'un faible volume de globules rouges. Après que les organes de compression ont été déclenchés, l'opérateur n'a plus besoin de surveiller le processus, étant donné que l'extraction continue des différentes fractions de sang est poursuivie et achevée automatiquement. Une condition préalable est bien sûr que le sac de transfert 3 soit maintenu dans une position telle que les niveaux liquides dans les deux sacs à sang se trouvent approximativement à la même élévation à la fin des opérations, étant donné que, autrement, l'écoulement du sac de remplissage est susceptible de continuer. Ainsi, à la fin des opérations, le plasma sanguin se trouve dans le sac de transfert 2 et les globules rouges se trouvent dans le sac de transfert 3, tandis que la couche intermédiaire jaune grisâtre demeure dans le sac de remplissage 1.

Dans un autre mode de réalisation du processus automatisé décrit ci-dessus, la cellule photo-électrique est placée au voisinage du niveau initial de la couche intermédiaire. Comme pour le mode de réalisation précédent, les organes de détection fermeront le tuyau situé entre le sac de remplissage 1 et le sac de transfert lorsque la couche intermédiaire (ou éventuellement le niveau supérieur de la couche de globules rouges) s'élève jusqu'au niveau auquel les organes de détection réagissent. A l'inverse, le tuyau reliant les sacs à sang 1 et 2

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sera ouvert lorsque la couche intermédiaire s'abaisse au-dessus du niveau détecté. Il en résulte que cette couche intermédiaire s'élèvera et s'abaissera au voisinage de la cellule photo-électrique en décrivant un mouvement d'une amplitude relativement faible. Ainsi, on réalise un écoulement continu du sac de remplissage 1 en direction du sac de transfert 3, et un écoulement par intermittence entre le sac à sang 1 et le sac de transfert 2, le niveau de la couche intermédiaire et celui de la couche de globules rouges restant essentiellement constants tout au long. Il en résulte que seule la portion supérieure de la couche de globules rouges entre en contact avec les globules blancs collés contre la paroi du sac à sang. Cela permet d'obtenir des degrés de pureté plus poussés de la couche de globules rouges isolés.

Comme mentionné ci-dessus, la solution nutritive ajoutée destinée à favoriser le stockage prolongé des globules rouges peut, dès le départ, être présente dans le sac de remplissage 1 ; cependant, il est préférable de placer cette solution dans le sac de transfert 3 au départ. De cette manière, la solution n'est pas diluée par le plasma sanguin, et la composition de la solution peut être mieux adaptée au stockage des globules rouges.

Après l'opération de séparation décrite ci-dessus, les tuyaux 12 et 17 sont fermés, par exemple scellés, et le sac de remplissage 1 est éventuellement séparé des sacs de transfert pour permettre le stockage ou un traitement d'appoint des constituants du sang.

Le dispositif à sacs à sang décrit ci-dessus offre une très grande flexibilité d'utilisation. Par exemple, un concentré en thrombocytes peut être recueilli dans le sac de transfert 2, lorsque la centrifugation primaire est conduite de manière que la couche supérierue soit constituée d'un plasma riche en thrombocytes. Après avoir effectué une centrifugation d'appoint, le nouveau plasma sanguin engendré dans le sac de transfert 2 peut être transféré à un troisième sac de transfert 4 grâce au tuyau 23, le tout se passant en circuit fermé. Ou bien, le plasma renfermé dans le sac de transfert 2 peut être extrait par le tuyau d'entrée 12 ou par le tube 23 détaché du sac de transfert, et il peut ensuite être soumis à un fractionnement industriel.

Lorsque la centrifugation est conduite de manière que, après la séparation, le sac de transfert 2 renferme un plasma pauvre en globules, celui-ci peut être isolé, congelé et stocké à des températures appropriées en dessous de — 50° C. Le sac de transfert 2 peut également être maintenu en conjugaison avec le sac de transfert 3. L'ensemble de sacs à sang 2, 3 est ensuite stocké dans un réfrigérateur, le tuyau 14 étant temporairement interrompu, et on obtient ainsi un système permettant la préparation de sang brut pauvre en micro-aggrégats, selon les besoins. Les deux sacs à sang peuvent également être séparés à n'importe quel moment pendant le stockage pour être utilisés ou stockés individuellement.

Comme mentionné ci-dessus, le sac de transfert 3 contient de préférence, dès le départ, les substances nécessaires au stockage optimal des globules rouges. Lors de la préparation d'un plasma riche en thrombocytes, une quantité appropriée de cette solution favorable au stockage peut, selon les besoins, être transférée du sac de transfert 3 dans le sac de transfert 2 avant le début du processus de séparation. De cette manière, il est possible de régler le pH à une valeur souhaitée à l'intérieur du sac de transfert 2.

Les indications données dans ce qui précède montrent très clairement que le nouveau procédé selon la présente invention réalise une économie de temps par le fait que le processus de séparation est réalisé, du moins partiellement, de manière automatique. De plus, un avantage important réside dans le fait qu'une grande netteté de séparation des globules blancs (environ 95%) est réalisée grâce au fait que la couche intermédiaire est maintenue à l'intérieur du sac de remplissage 1 pendant le processus de séparation. De cela on peut tirer profit en ce qui concerne le processus de leucophérèse, c'est-à-dire la séparation des globules blancs et des thrombocytes du sang, comme décrit ci-après en rapport avec la fig. 2.

Le dispositif à sacs à sang de la fig. 2 utilisable pour la leucophérèse renferme comme élément de base deux sacs à sang 28 et 29 reliés entre eux, conçus essentiellement selon le sac à sang 1 de la fig. 1. L'ouverture d'évacuation supérieure 30 du sac à sang 28 est reliée,

grâce à un tuyau 31, à l'ouverture d'évacuation 32 aménagée dans la portion supérieure du sac à sang 29. Analoguement, la portion inférieure du sac à sang 28 est reliée à la portion inférieure du sac à sang 29 grâce aux ouvertures d'évacuation 33 et 34 respectivement, et grâce au tuyau de raccordement 35. De plus, le sac à sang 28 est doté d'un tuyau de soutirage 36, aménagé dans sa portion supérieure. Pour des raisons expliquées ci-après, ce dispositif de base est dédoublé, les organes correspondant étant désignées par le symbole '. La référence 37 désigne une unité de soutirage et de transfusion combinés, dont un mode de réalisation connu en soi renferme une canule de prise de sang et un tuyau doté d'un compartiment d'égouttement permettant l'introduction d'une solution d'électroly-tes et la retransfusion du sang.

Pour son utilisation, le dispsoitif dédoublé à sac à sang jumelé est relié au dispositif combiné 37 de soutirage et de transfusion grâce au tuyau de soutirage 36. Au départ, le tuyau de raccordement 35 situé entre les deux sacs à sang 28 et 29 ainsi que le tuyau de raccordement 36' sont fermés à l'aide d'une pince appropriée ou d'un autre organe de fermeture. Comme cela est le cas pour le dispositif représenté sur la fig. 1, une quantité appropriée de solution d'anticoagulants est de préférence placée dans le sac à sang 29. Cette solution d'anticoagulants s'écoule de manière continue du sac à sang 29 et vient s'ajouter au contenu du sac à sang 28 au fur et à mesure du soutirage, ce qui peut se faire à l'aide d'une pompe, telle que celle mentionnée en rapport avec la fig. 1 (les références 38 et 38' désignent des tampons de pression correspondant à la référence 27 de la fig. 1).

Une fois l'opération de soutirage du sang terminée, le dispositif à sacs à sang 28,29 est séparé en coupant et scellant le tuyau 38 en aval de son point d'embranchement. Ensuite, le tuyau de raccordement 31 situé entre les sacs à sang 28 et 29 est fermé à l'aide d'une pince appropriée, puis le dispositif est soumis à une centrifugation.

Ici de nouveau, on obtient une couche supérieure de plasma, une couche intermédiaire jaune grisâtre et une couche inférieure renfermant les globules rouges. Les différentes fractions sont évacuées par compression du sac à sang 28 de la même manière que celle décrite ci-dessus en rapport avec la fig. 1, après que les tuyaux de raccordement 31 et 35 ont été ouverts. Le plasma sanguin et les globules rouges sont évacués par compression en direction du sac à sang 29 par les tuyaux d'évacuation supérieur 31 et inférieur 35 respectivement, tandis que la couche intermédiaire demeure dans le sac de remplissage 28. Cette couche intermédiaire demeurant dans le sac à sang 28 est recueillie afin d'être soumise à une séparation plus poussée ou afin d'être utilisée directement, tandis que le contenu du sac à sang 29 est réinjecté dans le patient. Ensuite, une nouvelle prise de sang est effectuée de la même manière en utilisant le système à sacs à sang 28', 29'.

En raison de la netteté de séparation des globules blancs, la quantité de sang soutirée peut être réduite considérablement, ce qui, d'une part, constitue une économie de temps et, d'autre part, ménage le patient ou le donneur de sang.

Le dispositif à sacs à sang décrit ci-dessus peut également être utilisé de préférence pour certains autres procédés, par exemple pour la plasmaphérèse et pour la thrombophérèse. Dans le cas de la plas-maphérèse, le sang est soutiré de la même manière que ci-dessus. Après la centrifugation, le sac à sang 28 renferme une couche supérieure de plasma pauvre en thrombocytes, une couche intermédiaire renfermant les globules blancs et des thrombocytes, et une couche inférieure renfermant essentiellement les globules rouges. Pendant le processus de compression, le tuyau de raccordement inférieur 35 est fermé par exemple à l'aide d'une pince appropriée, de sorte que le plasma sanguin est transféré dans le sac à sang 29 par le tuyau supérieur 31, tandis que la couche intermédiaire et les globules rouges demeurent dans le sac à sang 28. Ensuite, le contenu du sac à sang 28 est réinjecté dans le donneur de sang.

En ce qui concerne la thrombophérèse, le soutirage de sang est réalisé analoguement à celui réalisé pour la leucophérèse ou la plas-

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maphérèse, suivi d'une centrifugation réalisée pour former une couche supérieure de plasma riche en thrombocytes. Ensuite, cette couche supérieure est évacuée par compression dans le sac à sang 29 de la même manière que celle décrite ci-dessus en ce qui concerne la plasmaphérèse. Une centrifugation répétée fait apparaître une cou- 5 che supérieure de plasma pauvre en thrombocytes dans le sac à sang

29. Ensuite, cette couche de plasma est transférée du sac à sang 29 dans le sac à sang 28, après quoi le contenu du sac à sang 28 est réinjecté dans le patient ou dans le donneur de sang.

Un autre procédé de thrombophérèse consiste à utiliser le concentré thrombocyte/leucocyte obtenu lors de la leucophérèse décrite ci-dessus, et à séparer ce dernier par centrifugation.

1 feuille dessins

Claims

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REVENDICATIONS

1. Procédé de séparation de différentes fractions d'un échantillon de sang, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes:

a) remplissage d'un sac à sang (1,28) doté d'au moins une ouverture d'évacuation (7, 30) aménagée dans la portion supérieure et d'au moins une ouverture d'évacuation (10, 33) aménagée dans la portion inférieure avec un échantillon de sang;

b) centrifugation du sac à sang (1, 28) dans le but de séparer l'échantillon de sang en une couche supérieure, une couche inférieure et une couche intermédiaire, et c) évacuation par compression de la couche supérieure par l'ouverture de tète (7, 30), cette fraction étant recueillie dans un sac de transfert (2,29), et évacuation par compression de la couche inférieure par l'ouverture de fond (10, 33), cette fraction étant recueillie dans un sac de transfert (3,29), de sorte qu'il ne subsiste plus que la couche intermédiaire dans le sac à sang comprimé (1, 28).
2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la couche supérieure et la couche inférieure sont évacuées par compression par les ouvertures d'évacuation respectives (7, 30; 10, 33) du sac à sang, celui-ci étant comprimé sur toute sa surface, et en ce que le processus de compression du sac à sang (1,28) est arrêté lorsqu'il ne subsiste plus qu'un volume résiduaire prédéterminé dans le sac à sang (1, 28).
3. Procédé selon l'une des revendications 1 ou 2, caractérisé en ce que le débit de la couche supérieure s'écoulant du sac à sang (1, 28) est réglé de manière que le niveau de la couche intermédiaire à l'intérieur du sac à sang (1, 28) reste constant pendant l'opération de compression.
4. Procédé selon la revendication 3, caractérisé en ce qu'un niveau prédéterminé dans le sac à sang (1, 28) est continuellement surveillé, et en ce que l'ouverture d'évacuation de tête (7, 30) est fermée lorsque la couche intermédiaire ou la portion supérieure de la couche inférieure atteint le niveau prédéterminé détecté, et en ce que l'ouverture d'évacuation (7, 30) de tête est ouverte lorsque la couche intermédiaire ou la portion supérieure de la couche inférieure s'abaisse en dessous du niveau prédéterminé détecté.
5. Procédé selon l'une des revendications 1 ou 2, caractérisé en ce que l'écoulement de la couche supérieure est arrêté lorsque la couche intermédiaire ou la portion supérieure de la couche inférieure ont atteint un niveau prédéterminé, et en ce que l'évacuation par compression de la couche inférieure est poursuivie jusqu'à ce qu'il ne subsiste plus qu'un certain volume résiduaire prédéterminé dans le sac à sang comprimé (1,28).
6. Procédé selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisé en ce que les deux sacs de transfert (2, 3) sont reliés entre eux.
7. Procédé selon l'une des revendications 1 à 6, caractérisé en ce qu'un agent anticoagulant est ajouté simultanément au sang frais lorsque celui-ci est introduit dans le sac à sang (1, 28), cet agent d'anticoagulation provenant d'un sac distinct (2,29) relié au sac à sang de remplissage (1,28).
8. Dispositif pour la mise en œuvre du procédé de l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce qu'il comprend :

a) un sac à sang (1, 28) susceptible de recueillir la totalité de l'échantillon sanguin destiné à être séparé par centrifugation en une couche supérieure renfermant du plasma sanguin, une couche inférieure renfermant des globules rouges et une couche intermédiaire renfermant des globules blancs, le sac à sang (1, 28) étant muni d'au moins une ouverture d'évacuation (7, 30) aménagée dans sa portion supérieure, et d'au moins une ouverture d'évacuation (10, 33) aménagée dans sa portion inférieure;

b) un sac de transfert (2, 29) relié à l'ouverture d'évacuation de tête (7, 30) du sac à sang (1, 28) et susceptible de recueillir la couche supérieure renfermant du plasma, suite à une compression du sac à sang(l, 28), et c) un sac de transfert (3,29), relié à l'ouverture d'évacuation de fond (10,33) du sac à sang de remplissage (1, 28) et susceptible de recueillir la couche inférieure renfermant des globules rouges, suite à une compression du sac à sang (1,28).
9. Dispositif selon la revendication 8, caractérisé en ce que les ouvertures d'évacuation de tête et de fond (30, 33) du sac à sang (28)

s sont reliées à un sac de transfert commun (29).
10. Dispositif selon la revendication 8, caractérisé en ce que l'ouverture d'évacuation de tête est reliée à un sac de transfert (2) et que l'ouverture d'évacuation de fond est reliée à un autre sac de transfert (3), l'ouverture d'évacuation de tête (7) du sac à sang de remplissage io étant reliée à l'ouverture de remplissage de tête (11) du premier sac de transfert (2), et l'ouverture d'évacuation de fond (10) du sac de remplissage de fond (16) du second sac de transfert (3), les deux sacs de transfert pouvant être reliés entre eux, si besoin est.

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