BRPI0614100A2 - formulações de imunoconjugado lìquidas - Google Patents

formulações de imunoconjugado lìquidas Download PDF

Info

Publication number
BRPI0614100A2
BRPI0614100A2 BRPI0614100-5A BRPI0614100A BRPI0614100A2 BR PI0614100 A2 BRPI0614100 A2 BR PI0614100A2 BR PI0614100 A BRPI0614100 A BR PI0614100A BR PI0614100 A2 BRPI0614100 A2 BR PI0614100A2
Authority
BR
Brazil
Prior art keywords
formulation
immunoconjugate
polysorbate
antibody
histidine
Prior art date
Application number
BRPI0614100-5A
Other languages
English (en)
Inventor
Wei Zhang
Michael S Flemming
Godfrey Amphlett
Hung-Wei Chih
Elizabeth Bartlett
Original Assignee
Immunogen Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=37727890&utm_source=***_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=BRPI0614100(A2) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Immunogen Inc filed Critical Immunogen Inc
Publication of BRPI0614100A2 publication Critical patent/BRPI0614100A2/pt

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A61K47/68033—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being a maytansine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6849—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a receptor, a cell surface antigen or a cell surface determinant
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
    • A61K47/6863—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell the tumour determinant being from stomach or intestines cancer cell
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A61K47/40—Cyclodextrins; Derivatives thereof

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

FORMULAçõES DE IMUNOCONJUGADO LìQUIDAS. A presente invenção fornece uma formulação de imunoconjugado que é substancialmente livre de partículas, a formulação de imunoconiu- gado compreendendo: um imunoconjugado e um ou mais excipientes selecionados do grupo consistindo em: sacarose, polissorbato 20, polissorbato 80, ciclodextrina, dextrose, glicerol, polietileno glicol, manitol, cloreto de sódio, e um aminoácido, em que a formulação é uma solução aquosa tamponada tendo um pH de 4,5 a 7,6. A presente invenção também fornece uma formulação de imunoconjugado que é substancialmente livre de agregados, a formulação de imunoconjugado compreendendo: um imunoconjugado e um ou mais excipientes selecionados do grupo consistindo em histidina, sa- carose, glicina e cloreto de sódio, em que a formulação é uma solução aquosa tamponada tendo um pH de 4,5 a 7,6. A presente invenção também fornece uma formulação de imunoconjugado que é substancialmente livre tanto de partículas quanto de agregados.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "FORMULAÇÕES DE IMUNOCONJUGADO LÍQUIDAS".
Este pedido reivindica o benefício sob 35 U.S.C. §119(e) paraPedidos n°s: 60/704.902 depositado em 3 de agosto de 2005; 60/707.162depositado em 11 de agosto de 2005; 60/746.454 depositado em 4 de maiode 2006; e 60/746.456 depositado em 4 de maio de 2006, as descrições dosquais são cada qual aqui incorporadas por referência em suas totalidades.
CAMPO DA INVENÇÃO
A presente invenção refere-se aos métodos para a preparaçãode formulações estáveis de imunoconjugados, que são compostos farma-cêuticos que são constituídos de um anticorpo e uma ou várias moléculascovalentemente ligadas de um fármaco.
ANTECEDENTES DA INVENÇÃO
Os imunoconjugados são desenvolvidos como agentes altamen-te potentes e específicos para o tratamento de câncer e outras condições.Um imunoconjugado é composto de um anticorpo que especificamente re-conhece um antígeno de célula alvo, tal como um antígeno de célula de tu-mor, e uma ou várias moléculas covalentemente ligadas de um fármaco, par-ticularmente um fármaco citotóxico tal como um maitansinóide, um taxano,ou um análogo de CC-1065. Outro nome usado para tais imunoconjugados éconjugados de anticorpo-fármaco. Imunoconjugados são inativos durante acirculação, porém ligam-se às superfícies da célula alvo, e então eles sãointernalizados pelas células. Por mecanismos não ainda completamente en-tendidos, os fármacos são subseqüentemente liberados do anticorpo e po-dem exercer seus efeitos farmacológicos.
A liberação alvejada de fármacos citotóxicos para as células al-vo, tais como células que compõem o tecido de câncer, potencialmente me-lhora os índices terapêuticos dos fármacos citotóxicos. Tipicamente, fárma-cos citotóxicos usados como imunoconjugados são 100 a 1000 vezes maispotentes do que fármacos de quimioterapia convencional. Exemplos de taisimunoconjugados são descritos no Pedido de Patente Internacional (PCT)n°s WO 00/02587, 02/060955, e 02/092127; Patente dos Estados Unidosnos. 5.475.092, 6.340.701, 6.171.586, 6.706.708 B2, e 6.756.397 B2; e Charie outro, CancerRes., 52, 127-131 (1992).
Compostos farmacêuticos tais como imunoconjugados são ge-ralmente combinados com um ou mais veículos, excipientes, e/ou estabili-zantes farmaceuticamente aceitáveis para fornecer uma composição farma-cêutica que leva em conta a administração aos pacientes e a armazenageme transporte do composto farmacêutico. Semelhante a outros produtos far-macêuticas de proteína, os imunoconjugados são propensos à degradaçãotal como oxidação, desamidação, bem como formação de agregado e partí-cuia etc. (Manning e outro, Pharm. Res. 6, 903-918 (1989); Ahern e Man-ning, Stability of Protein Pharmaceuticals: Part A, Chemical and Physical pa-thways of Protein Degradation, Plenum, New York, (1992); e Cleland e outro,Crit. Rev. Ther. Drug Carrier Syst. 10, 307-377 (1993)).
A formação de particular em produtos farmacêuticos de proteína,em particular, pode desestabilizar o composto farmacêutico, desse modotornando a formulação menos potente ou ainda prejudicial para uso clínico.Por exemplo, as partículas em formulações farmacêuticas injetadas podemcausar dano significante às veias ou estase venosa prolongada em pacien-tes. Além disso, a formação de agregado é a principal trilha de degradaçãode produtos farmacêuticos de proteína (Chari e outro, Pharm Res. 20, 1325-1336 (2003)), e pode levar a efeitos indesejáveis tais como imunogenicidade.
A conjugação de fármacos, especialmente fármacos citotóxicos,que são freqüentemente hidrofóbicos, moléculas pequenas, a anticorposmonoclonais hidrofílicos, introduz instabilidade adicional aos imunoconjuga-dos. Conferir as propriedades atributáveis ao componente de anticorpo deimunoconjugados é crucial para a geração de líquido estável ou formulaçõesfarmacêuticas liofilizadas. Para esta finalidade, WO 2004/004639 A2 e Pedi-do de Patente dos Estados Unidos ne 2004/0.241.174 A1 descrevem com-posições de imunoconjugados. Entretanto, estas composições não adequa-damente conferem formação de partícula e agregado nas composições far-macêuticas de imunoconjugados.Desse modo, permanence uma necessidade para composiçõesfarmacêuticas de imunoconjugados que são substancialmente livres de par-tículas e/ou agregados, e permanecem substancialmente livres de partículase/ou agregados durante armazenagem e transporte.
A presente invenção fornece composições farmacêuticas de i-munoconjugados que são substancialmente livres de partículas e/ou agre-gados e previnem a formação de partículas e/ou agregados durante arma-zenagem e/ou transporte. Métodos para uso das composições farmacêuticassão também fornecidos. Estas e outras vantagens da invenção, bem comocaracterísticas inventivas adicionais, tornar-se-ão evidentes a partir das des-crições da invenção fornecida aqui.
BREVE SUMÁRIO DA INVENÇÃO
A presente invenção é baseada na descoberta de que a forma-ção de partícula e agregado em composições farmacêuticas de imunoconju-gados pode ser inibida empregando-se certos excipientes. As novas formu-lações produzem maior estabilidade e vidas úteis substancialmente maislongas para os compostos farmacêuticos e fornecem garantia de segurançado paciente.
Um aspecto da presente invenção fornece uma formulação deimunoconjugado que é substancialmente livre de partículas, a formulação deimunoconjugado compreendendo: um imunoconjugado e um ou mais excipi-entes selecionados do grupo consistindo em: sacarose, polissorbato 20, po-lissorbato 80, ciclodextrina, dextrose, glicerol, polietileno glicol, manitol, clo-reto de sódio, e um aminoácido, em que a formulação é uma solução aquosatamponanda tendo um pH de 4,5 a 7,6.
Um segundo aspecto da presente invenção fornece uma formu-lação de imunoconjugado que é substancialmente livre de agregados, a for-mulação de imunoconjugado compreendendo: um imunoconjugado e um oumais excipientes selecionados do grupo consistindo em histidina, sacarose,glicina e cloreto de sódio, em que a formulação é uma solução aquosa tam-ponada tendo um pH de 4,5 a 7,6.
A presente invenção também fornece uma formulação de imu-noconjugado que é substancialmente livre tanto de partículas quanto de a-gregados.
DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO
A presente invenção fornece composições farmacêuticas está-veis de imunoconjugados que são substancialmente livres de partículas e/ouagregados e permanecem substancialmente livres de partículas e/ou agre-gados durante um período prolongado de armazenagem e durante transpor-te. A presente invenção é baseada na descoberta de que a formação de par-tícula e/ou agregado em composições farmacêuticas de imunoconjugadospode ser inibida empregando-se certos excipientes. As novas formulaçõesproduzem maior estabilidade e vidas úteis substancialmente mais longaspara os compostos farmacêuticos e fornecem garantia de segurança do pa-ciente.
Tais formulações são preparadas por inclusão de um excipienteque inibe ou reduz a formação de partículas visíveis (maior do que 50 μιτι) esubvisíveis (maior do que 5 μηι). Como empregado aqui, uma composiçãoque é "substancialmente livre de partículas" passará pelo teste de US Phar-macopeia (USP) <788>, que requer que partículas com tamanho acima de10 μιτι devem estar abaixo de 6000 contas por recipiente e partículas comtamanho acima de 25 μηι devem estar abaixo de 600 contas por recipiente.Veja USP 28, Capítulo 788 "Particulate Matter in Injections," 2004, editadopor United States Pharmacopeia, Rockville, MD. Como empregado aqui,uma composição que é "substancialmente livre de agregados" permanecerálivre de agregados durante armazenagem e transporte de modo que o nívelde monômero de imunoconjugado permaneça acima de 95% durante todavida útil da composição.
Uma vida útil típica para as composições de imunoconjugado dapresente invenção é cerca de 1 a 5 anos, preferivelmente 1 a 4 anos, maispreferivelmente 2 a 4 anos, a 4°C.
Uma formulação de imunoconjugado da invenção que é subs-tancialmente livre de partículas compreende um imunoconjugado e um oumais excipientes selecionados do grupo consistindo em sacarose, polissor-bato 20, polissorbato 80, ciclodextrina, dextrose, glicerol, polietileno glicol,manitol, cloreto de sódio, e um aminoácido, em que a formulação é uma so-lução aquosa tamponada tendo um pH de 4,5 a 7,6. A formulação podecompreender um ou mais excipientes selecionados do grupo consistindo em:(i) 0,1 - 12% de sacarose, (ii) 0,005 - 1,0% de polissorbato 20, (iii) 0,5 - 2%de beta - ciclodextrina, (iv) 2 - 8% de glicerol, (v) 1 - 5% de PEG6000, (vi) 2 -8% de manitol, (vii) 0,005 - 1,0% de polissorbato 80, (viii) 5 - 20 mM de histi-dina, (ix) 100 - 300 mM de glicina, e (x) 50 - 300 mM de cloreto de sódio.
Em certas modalidades preferidas, a formulação da invençãoque é substancialmente livre de partículas preferivelmente compreende umou mais excipientes selecionados do grupo consistindo em: (i) 5 - 10% desacarose; (ii) 0,005 - 0,2 % de polissorbato 20; (iii) 0,5 - 1 % de beta - ciclo-dextrina; (iv) 2 - 5% de glicerol; (v) 2 - 3% de PEG6000; (vi) 3 - 5% de mani-tol; (vii) 0,005 - 0,2 % de polissorbato 80; (viii) 10 - 15 mM de histidina; (ix)130 - 250 mM de glicina, e (x) 100 - 200 mM de cloreto de sódio.
Em modalidades preferidas a solução aquosa tamponada podeconter um ou mais de histidina, succinato, citrato, fosfato, e acetato, e o pH épreferivelmente de 5,0 a 7,0. O pH da formulação é mais preferivelmente de5,0 a 6,0.
Em certas modalidades da invenção, o imunoconjugado da for-mulação compreende um anticorpo humanizado selecionado do grupo con-sistindo em huMy9-6, huC242, huN901, DS6, trastuzumab, bivatuzumab,sibrotuzumab, e rituximab; e/ou o imunoconjugado compreende um fármacocitotóxico selecionado do grupo consistindo em um maitansinóide, um taxa-no, e um CC-1065. A concentração de imunoconjugado na formulação in-ventiva pode variar entre cerca de 0,5 a 20,0 mg por ml. Preferivelmente, aconcentração de imunoconjugado é 0,5 a 10 mg por ml.
Uma formulação de imunoconjugado da invenção que é subs-tancialmente livre de agregados compreende: um imunoconjugado; e um oumais excipientes selecionados do grupo consistindo em histidina, sacarose,glicina e cloreto de sódio, em que a formulação é uma solução aquosa tam-ponada tendo um pH de 4,5 a 7,6. Preferivelmente, a formulação de imuno-conjugado compreende um ou mais excipientes selecionados de 5 - 200 mMde histidina, 100 - 200 mM de glicina, e 2 - 8% de sacarose.
Em certas modalidades preferidas, os excipientes são 5-100mM de histidina ou 100 - 150 mM de glicina, ou a formulação contém 2-8%de sacarose e 100 - 150 mM de glicina. Em certas outras modalidades prefe-ridas, a formulação contém 10 mM de histidina, 5% de sacarose e 130 mMde glicina.
Em modalidades preferidas a solução aquosa tamponada podeconter um ou mais de histidina, succinato, citrato, fosfato, e acetato, e o pH épreferivelmente de 5,0 a 7,0. O pH da formulação é mais preferivelmente de5,0 a 6,0,
Em outro aspecto da invenção, a formulação que é substancial-mente livre de agregados também compreende polissorbato 20 e/ou polis-sorbato 80, de modo que a formulação seja também substancialmente livrede partículas.
Em certas modalidades da invenção, o imunoconjugado da for-mulação compreende um anticorpo humanizado selecionado do grupo con-sistindo em huMy9-6, huC242, huN901, DS6, trastuzumab, bivatuzumab,sibrotuzumab, e rituximab; e/ou o imunoconjugado compreende um fármacocitotóxico selecionado do grupo consistindo em um maitansinóide, um taxa-no, e um CC-1065. A concentração de imunoconjugado na formulação in-ventiva pode variar entre cerca de 0,5 a 20,0 mg por ml. Preferivelmente, aconcentração de imunoconjugado é 0,5 a 10 mg por ml.
Em certas modalidades preferidas da invenção, a formulação deimunoconjugado é substancialmente livre tanto de agregados quanto de par-tículas. Por exemplo, a presente invenção fornece uma formulação de imu-noconjugado consistindo essencialmente de: imunoconjugado huN901-DM1em uma concentração de 0,5-10 mg/ml; 5-15 mM de histidina e/ou 5-15mM de succinato; 0,1 - 10 % de sacarose e/ou 100 - 300 mM de glicina;0,005 - 0,2% de polissorbato 80 e/ou 0,005 - 0,2% de polissorbato 20, emque a formulação é uma solução tamponada aquosa tendo um pH de 5 - 6.Ingredientes adicionais podem ser opcionalmente adicionados contanto quea formulação permaneça substancialmente livre tanto de agregados quantode partículas.
Em outro exemplo, uma formulação de imunoconjugado consisteessencialmente em: (a) imunoconjugado huC242-DM4 em uma concentra-ção de 0,5 - 10 mg/ml; 5-15 mM de histidina; 0,1 - 10 % de sacarose e/ou100 - 300 mM de glicina; 0,005 - 0,2% de polissorbato 80 e/ou 0,005 - 0,2%de polissorbato 20; em que a formulação é uma solução tamponada aquosatendo um pH de 5 - 6. Ingredientes adicionais podem ser opcionalmente adi-cionados, contanto que a formulação permaneça substancialmente livre tan-to de agregados quanto de partículas.
Geralmente, excipientes adequados que podem ser usados emconjunto com a presente invenção podem ser selecionados de uma varieda-de de categorias, incluindo porém não limitados a sais inorgânicos, ácidosorgânicos, sacarídeos, aminoácidos, polissorbatos, polietileno glicol e com-binações dos mesmos. Excipientes preferidos são selecionados do grupoconsistindo em sais inorgânicos, ácidos carboxílicos orgânicos, sacarídeos,aminoácidos, polissorbatos, polietileno glicol, albuminas, glicérol, e combina-ções dos mesmos.
Exemplos de sais inorgânicos adequados incluem porém nãosão limitados a cloreto de sódio, cloreto de cálcio, sulfato de magnésio, clo-reto de magnésio, sulfato de sódio, e combinações dos mesmos. Cloreto desódio é um excipiente preferido para uso na presente invenção.
Exemplos de ácidos carboxílicos orgânicos adequados incluem,porém não são limitados a ácido tartárico (que inclui ácido tartárico racêmi-co, ácido D-tartárico e ácido L-tartárico), ácido maléico, ácido acético, ácidocítrico, ácido sucínico, ácido glucurônico, e combinações dos mesmos. "Áci-do" como empregado aqui refere-se ao ácido e qualquer hidrato e sais dosmesmos, isto é, citratos e succinatos. Ácido succínico é um excipiente prefe-rido para uso na presente invenção.
Exemplos de sacarídeos adequados incluem porém não são li-mitados a sacarose, trealose, dextrose, manitol, ciclodextrina e combinaçõesdos mesmos. Sacarose e ciclodextrina são excipientes preferidos para usona presente invenção.
Exemplos de aminoácidos adequados incluem porém não sãolimitados a histidina, glicina, lisina, arginina e combinações dos mesmos.Histidina e glicina são excipientes preferidos para uso na presente invenção.
Exemplos de albuminas adequadas incluem albumina de sorohumano.
Exemplos de polietileno glicóis adequados são polietileno glicóiscom um peso molecular de cerca de 200 a 20.000 Da. Polietileno glicóis pre-feridos são PEG 4000, PEG 5000, PEG 6000, PEG 8000, e PEG 10000.
Exemplos de polissorbatos adequados são polissorbato 20(TWEEN-20®) e polissorbato 80.
Exemplos de ciclodextrinas adequadas são alfa-, beta-, e gama-ciclodextrina.
A partir dos ensinamentos desta invenção, alguém versado natécnica pode facilmente determinar os excipientes que melhor forneceriamuma formulação que fosse substancialmente livre de partículas e/ou agrega-dos, dado uma solução de imunoconjugado particular.
Preferivelmente, a tonicidade da formulação de imunoconjugadoé em torno daquela do sangue humano (isto é, isotônica).
Exemplos de agentes de tonificação adequados são sais, ami-noácidos, e açúcares. Sais preferíveis incluem sais de sódio monovalentes.Aminoácidos preferíveis incluem histidina, glicina, lisina e arginina. O maispreferido é glicina. Açúcares preferíveis incluem monossacarídeos, dissaca-rídeos, oligossacarídeos lineares, e oligossacarídeos cíclicos. Um dissacarí-deo preferido é sacarose. Quantidades adequadas de sais, sacarídeos, e/ouaminoácidos podem ser adicionadas à formulação inventiva para obter umatonicidade desejável.
O composto farmacêutico é um imunoconjugado constituído deum anticorpo que especificamente reconhece um antígeno de célula alvo, euma ou várias moléculas covalentemente ligadas de um fármaco citotóxico,tal como um maitansinóide, um taxano, ou um análogo de CC-1065.
O anticorpo pode ser específico para qualquer espécie de célula,porém geralmente alveja células que devem ser destruídas, tais como célu-las de tumor (particularmente células de tumor sólido), células infectadas porvírus, células infectadas por microorganismo, células infectadas por parasito,células auto-imunes (células que produzem auto-anticorpos), células ativa-das (aquelas envolvidas em rejeição de enxerto ou doença enxerto vs. hos-pedeiro), ou qualquer outro tipo de células doentes ou anormais.
Anticorpos podem ser de qualquer espécie atualmente conheci-da, ou que se tornou conhecida, e podem incluir qualquer imunoglobulina,qualquer fragmento de imunoglobulina, tal como Fab, F(ab')2, dsFv, sFv, dia-corpos, e triacorpos, ou quimera de imunoglobulina, que pode ligar-se a umantígeno na superfície de uma célula (por exemplo, que contém uma regiãode determinação de complementariedade (CDR)). Qualquer anticorpo ade-quado pode ser usado como o agente de ligação à célula. Alguém versadona técnica apreciará que a seleção de um anticorpo apropriado dependeráda população celular a ser alvejada. A este respeito, o tipo e número de mo-léculas de superfície celular (isto é, antígenos) que são seletivamente ex-pressas em uma população celular particular (tipicamente e preferivelmenteuma população celular doente) regularão a seleção de um anticorpo apropri-ado para uso na composição inventiva. Perfis de expressão de superfíciecelular são conhecidos para uma ampla variedade de tipos de célula, inclu-indo tipos de célula de tumor, ou, se desconhecidos, podem ser determina-dos empregando-se biologia molecular de via e técnicas histoquímicas.
O anticorpo pode ser policlonal ou monoclonal, porém é maispreferivelmente um anticorpo monoclonal. Como empregado aqui, anticorpos"policlonais" referem-se às populações heterogêneas de moléculas de anti-corpo, tipicamente contidas nos soros de animais imunizados. Anticorpos"monoclonais" referem-se às populações homogêneas de moléculas de anti-corpo que são específicas para um antígeno particular. Anticorpos monoclo-nais são tipicamente produzidos por um clone único de linfócitos B ("célulasB"). Anticorpos monoclonais podem ser obtidos empregando-se uma varie-dade de técnicas conhecidas por aqueles versados na técnica, incluindo tec-nologia de hibridoma padrão (veja, por exemplo, Kóhler e Milstein, Eur. J.Imunol., 5: 511-519 (1976), Harlow e Lane (eds.), Antibodies: A LaboratoryManual, CSH Press (1988), e C.A. Janeway e outro (eds.), Imunobiology, 5êEd., Garland Publishing, New York, NY (2001)). Em resumo, o método dehibridoma de produção de anticorpos monoclonais tipicamente envolve inje-ção de qualquer animal adequado, tipicamente e preferivelmente um ca-mundongo, com um antígeno (isto é, um "imunógeno"). O animal é subse-qüentemente sacrificado, e células B isoladas de seu baço são fundidas comcélulas de mieloma humano. Uma célula híbrida é produzida (isto é, um "hi-bridoma"), a qual prolifera indefinidamente e continuamente secreta eleva-dos títulos de um anticorpo com a especificidade desejada in vitro. Qualquermétodo apropriado conhecido na técnica pode ser usado para identificar cé-lulas de hibridoma que produzem um anticorpo com a especificidade deseja-da. Tais métodos incluem, por exemplo, ensaio imunossorvente ligado à en-zima (ELISA), análise Western blot, e rádio-imunoensaio. A população dehibridomas é peneirada para isolar clones individuais, cada um dos quaissecreta uma espécie de anticorpo simples para o antígeno. Porque cada hi-bridoma é um clone derivado da fusão com uma célula B simples, todas asmoléculas de anticorpo que ele produz são idênticas em estrutura, incluindoseu sítio de ligação de antígeno e isotipo. Anticorpos monoclonais tambémpodem ser gerados empregando-se outras técnicas adequadas incluindotecnologia EBV-hibridoma (veja, por exemplo, Haskard e Archer, J. Imunol.Methods, 74(2): 361-67 (1984), e Roder e outro, Methods Enzymol., 121:140-67 (1986)), sistemas de expressão de vetor bacteriófago (veja, por e-xemplo, Huse e outro, Science, 246:1275-81 (1989)), ou bibliotecas de exi-bição de fago compreendendo fragmentos de anticorpo, tais como Fab escFv (região variável de cadeia simples) (veja, por exemplo, Patente dosEstados Unidos nss 5.885.793 e 5.969.108, e Pedidos de Patente Interna-cional WO 92/01.047 e WO 99/06.587).
O anticorpo monoclonal pode ser isolado de ou produzido emqualquer animal adequado, porém é preferivelmente produzido em um ma-mífero, mais preferivelmente um camundongo ou ser humano, e mais prefe-rivelmente um ser humano. Métodos para produção de um anticorpo em ca-mundongos são bem conhecidos por aqueles versados na técnica e sãodescritos aqui. Com respeito aos anticorpos humanos, alguém versado natécnica apreciará que anticorpos policlonais podem ser isolados dos sorosde indivíduos humanos vacinados ou imunizados com um antígeno apropri-ado. Alternativamente, anticorpos humanos podem ser gerados por adapta-ção de técnicas conhecidas para produção de anticorpos humanos em ani-mais não humanos tais como camundongos (veja, por exemplo, Patente dosEstados Unidos n9s 5.545.806, 5.569.825, e 5.714.352, e Publicação de Pe-dido de Patente dos Estados Unidos n9. 2002/0.197.266 A1).
Ao mesmo tempo que sendo a escolha ideal para aplicaçõesterapêuticas em seres humanos, anticorpos humanos, particularmente anti-corpos monoclonais humanos, tipicamente são mais difíceis de gerar do queanticorpos monoclonais de camundongo. Anticorpos monoclonais de ca-mundongo, entretanto, induzem uma resposta de anticorpo em hospedeirorápida quando administrados a seres humanos, que pode reduzir o potencialterapêutico ou diagnóstico do conjugado anticorpo-fármaco. Para evitar es-tas complicações, um anticorpo monoclonal preferivelmente não é reconhe-cido como "estranho" pelo sistema imune humano.
Para esta finalidade, exibição de fago pode ser usada para geraro anticorpo. Neste respeito, bibliotecas de fago que codificam domínios devariável de ligação de antígeno (V) de anticorpos podem ser geradas em-pregando-se técnicas de DNA recombinante e biologia molecular padrão(veja, por exemplo, Sambrook e outro (eds.), Molecular Cloning, A Labora-tory Manual, 3§ Edição, Cold Spring Harbor Laboratory Press, New York(2001)). Fagos codificando uma região variável com a especificidade dese-jada são selecionados para ligação específica ao antígeno desejado, e umanticorpo humano completo é reconstituído compreendendo o domínio vari-ável selecionado. Seqüências de ácido nucléico codificando o anticorpo re-constituído são introduzidas em uma linhagem celular adequada, tal comouma célula de mieloma usada para produção de hibridoma, de modo queanticorpos humanos tendo as características de anticorpos monoclonais se-jam secretados pela célula (veja, por exemplo, Janeway e outro, supra, Husee outro, supra, e Patente dos Estados Unidos nQ. 6.265.150). Alternativa-mente, anticorpos monoclonais podem ser gerados de camundongos quesão transgênicos para genes de imunoglobulina de cadeia leve e pesadahumanos específicos. Tais métodos são conhecidos na técnica e descritosem, por exemplo, Patente dos Estados Unidos nQs 5.545.806 e 5.569.825, eJaneway e outro, supra.
Mais preferivelmente o anticorpo é um anticorpo humanizado.Como empregado aqui, um anticorpo "humanizado" é um em que as regiõesde determinação de complementariedade (CDR) de um anticorpo monoclo-nal de camundongo, que formam as alças de ligação de antígeno do anticor-po, são enxertadas na estrutura de uma molécula de anticorpo humano. De-vido à similaridade das estruturas de anticorpos de camundongo e sereshumanos, é geralmente aceito na técnica que este método produza um anti-corpo monoclonal que é antigenicamente idêntico a um anticorpo humano,porém liga-se ao mesmo antígeno como o anticorpo monoclonal de camun-dongo do qual as seqüências de CDR foram derivadas. Métodos para geraranticorpos humanizados são bem conhecidos na técnica e são descritos emdetalhes em, por exemplo, Janeway e outro, supra, Patente dos EstadosUnidos nes 5.225.539, 5.585.089 e 5.693.761, Patente Européia nQ0.239.400 B1, e Patente do Reino Unido nQ 2.188.638. Anticorpos humani-zados podem também ser gerados empregando-se a tecnologia de recape-amento de anticorpo descrita em Patente dos Estados Unidos nQ 5.639.641 ePedersen e outro, J. Moi Biol., 235:959-973 (1994). Ao mesmo tempo que oanticorpo empregado no imunoconjugado da composição inventiva mais pre-ferivelmente é um anticorpo monoclonal humanizado, um anticorpo mono-clonal humano e um anticorpo monoclonal de camundongo, como descritoacima, incluem-se também no escopo da invenção.
Fragmentos de anticorpo que têm pelo menos um sítio de liga-ção de antígeno, e desse modo reconhecem e ligam-se a pelo menos umantígeno ou receptor presente na superfície de uma célula alvo, também in-cluem-se no escopo da invenção. Neste respeito, clivagem proteolítica deuma molécula de anticorpo intacta pode produzir uma variedade de fragmen-tos de anticorpo que retêm a capacidade de reconhecer e ligar-se aos antí-genos. Por exemplo, digestão limitada de uma molécula de anticorpo com apapaína de protease tipicamente produz três fragmentos, dois dos quais sãoidênticos e são referidos como os fragmentos Fab, quando eles retêm a ati-vidade de ligação ao antígeno da molécula de anticorpo origem. Clivagem deuma molécula de anticorpo com a enzima pepsina normalmente produz doisfragmentos de anticorpo, um dos quais retém ambas as ramificações de li-gação de antígeno da molécula de anticorpo, e é desse modo referido comoo fragmento F(ab')2. Redução de um fragmento F(ab')2 com ditiotreitol oumercaptoetilamina produz um fragmento referido como um fragmento Fab'.
Um fragmento de anticorpo de fragmento de região variável de cadeia única(sFv), que consiste em um fragmento Fab truncado compreendendo o domí-nio variável (V) de uma cadeia pesada de anticorpo ligada a um domínio Vde uma cadeia de anticorpo leve por meio de um peptídeo sintético, pode sergerado empregando-se técnicas de tecnologia de DNA recombinante de via(veja, por exemplo, Janeway e outro, supra). Similarmente, fragmentos deregião variável estabilizada por dissulfeto (dsFv) podem ser preparados portecnologia de DNA recombinante (veja, por exemplo, Reiter e outro, ProteinEngineering, 7: 697-704 (1994)). Fragmentos de anticorpo no contexto dainvenção, entretanto, não são limitados a estes tipos exemplares de frag-mentos de anticorpo. Qualquer fragmento de anticorpo adequado que reco-nhece e liga-se a um receptor de superfície celular desejado ou antígenopode ser empregado. Fragmentos de anticorpo são também descritos em,por exemplo, Parham, J. Imunol., 131: 2895-2902 (1983), Spring e outro, J.Imunol., 113: 470-478 (1974), e Nisonoff e outro, Arch. Biochem. Biophys.,89: 230-244 (1960). Ligação anticorpo-antígeno pode ser ensaiada empre-gando-se qualquer método adequado conhecido na técnica, tal como, porexemplo, rádio-imunoensaio (RIA), ELISA, Western blot, imunoprecipitação,e ensaios de inibição competitivos (veja, por exemplo, Janeway e outro, su-pra, e Publicação de Pedido de Patente dos Estados Unidos nQ2002/0.197.266 A1).
Além disso, o anticorpo pode ser um anticorpo quimérico ou umfragmento de ligação de antígeno do mesmo. Por "quimérico" entende-seque o anticorpo compreende pelo menos duas imunoglobulinas, ou fragmen-tos destas, obtidas ou derivadas de pelo menos duas espécies diferentes(por exemplo, duas imunoglobulinas diferentes, tais como uma região cons-tante de imunoglobulina humana combinada com uma região variável deimunoglobulina de murino). O anticorpo também pode ser um anticorpo dedomínio (dAb) ou um fragmento de ligação de antígeno do mesmo, tal como,por exemplo, um anticorpo de camelid (veja, por exemplo, Desmyter e outro,Nature Struct. Biol., 3: 752, (1996)), ou um anticorpo de tubarão, tal como,por exemplo, um novo receptor de antígeno (IgNAR) (veja, por exemplo,Greenberg e outro, Nature, 374: 168 (1995), e Stanfield e outro, Science,305:1770-1773 (2004)).
Qualquer anticorpo adequado pode ser usado no contexto dainvenção. Por exemplo, o anticorpo monoclonal J5 é um anticorpo lgG2a demurino que é específico para Antígeno de Leucemia Linfoblástica AgudaComum (CALLA) (Ritz e outro, Nature, 283: 583-585 (1980)), e pode ser u-sado para alvejar células que expressam CALLA (por exemplo, células deleucemia linfoblástica aguda). O anticorpo monoclonal MY9 é um anticorpoIgGI de murino que se liga especificamente ao antígeno CD33 (Griffin e ou-tro, Leukemia Res., 8: 521 (1984)), e pode ser usado para alvejar célulasque expressam CD33 (por exemplo, células de leucemia mielógena aguda(AML)).
Similarmente, o anticorpo monoclonal anti-B4 (também referidocomo B4) é um anticorpo IgGI de murino que se liga ao antígeno CD19 emcélulas B (Nadler e outro, J. Imunol., 131:244-250 (1983)), e pode ser usadopara alvejar células B ou células doentes que expressam CD19 (por exem-plo, células de Iinfoma de não Hodgkin e células de leucemia linfoblásticacrônica). N901 é um anticorpo monoclonal de murino que se liga ao antígenoCD56 (molécula de adesão de célula neural) encontrado em células de ori-gem neuroendócrina, incluindo tumor de pulmão de célula pequena, que po-de ser usado no imunoconjugado para alvejar fármacos para as células deorigem neuroendócrina. Os anticorpos J5, MY9, e B4 preferivelmente sãorecapeados ou humanizados antes de seu uso como parte do imunoconju-gado. Recapeamento ou humanização de anticorpos é descrito em, por e-xemplo, Roguska e outro, Proc. Nati Acad. Sei. USA, 91:969-73 (1994).
Além disso, o anticorpo monoclonal C242 liga-se ao antígenoCanAg (veja, por exemplo, Patente dos Estados Unidos n9 5.552.293), e po-de ser usado para alvejar o imunoconjugado para tumores que expressamCanAg, tais como cânceres colorretal, pancreático, de pulmão de célula nãopequena, e gástrico. HuC242 é uma forma humanizada do anticorpo mono-clonal C242 (veja, por exemplo, Patente dos Estados Unidos nQ 5.552.293).O hibridoma do qual HuC242 é produzido é depositado com Número de i-dentificação ECACC 90012601. HuC242 pode ser preparado empregando-se metodologia de enxerto de CDR (veja, por exemplo, Patente dos EstadosUnidos n-s 5.585.089, 5.693.761, e 5.693.762) ou tecnologia de recapea-mento (veja, por exemplo, Patente dos Estados Unidos nõ 5.639.641).HuC242 pode ser usado para alvejar o imunoconjugado para células de tu-mor que expressam o antígeno CanAg, tal como, por exemplo, células decâncer colorretal, pancreático, de pulmão de célula não pequena, e gástrico.
Para alvejar células de câncer de ovário e câncer de próstata,um anticorpo anti-MUC1 pode ser usado como o agente de ligação à célulano imunoconjugado. Anticorpos anti-MUC1 incluem, por exemplo, anti-HMFG-2 (veja, por exemplo, Taylor-Papadimitriou e outro, Int. J. Câncer, 28:17-21 (1981)), hCTMOI (veja, por exemplo, van Hof e outro, Câncer Res.,56: 5179-5185 (1996)), e DS6. Células de câncer de próstata também po-dem ser alvejadas com o imunoconjugado empregando-se um antígeno demembrana específico antipróstata (PSMA) como o agente de ligação à célu-la, tal como J591 (veja, por exemplo, Liu e outro, Câncer Res., 57: 3629-3634 (1997)). Além disso, células de câncer que expressam o antígenoHer2, tais como cânceres de mama, próstata, e ovário, podem ser alvejadasempregando-se o anticorpo trastuzumab. Anticorpos anti-IGF-IR que se Ii-gam ao receptor de fator de crescimento similar à insulina também podemser usados no imunoconjugado.
Anticorpos particularmente preferidos são anticorpos monoclo-nais humanizados, exemplos dos quais incluem huN901, huMy9-6, huB4,huC242, DS6, trastuzumab, bivatuzumab, sibrotuzumab, e rituximab (veja,por exemplo, Patente dos Estados Unidos n9s 5.639.641 e 5.665.357; Publi-cação de Pedido de Patente dos Estados Unidos nQ 2005-0118183 A1, Pe-dido de Patente Internacional WO 02/16,401, Pedersen e outro, supra, Ro-guska e outro, supra, Liu e outro, supra, Nadler e outro, supra, Colomer eoutro, Câncer Invest., 19: 49-56 (2001), Heider e outro, Eur. J. Câncer, 31 A:2385-2391 (1995), Welt e outro, J. Clin. Oncol., 12:1193-1203 (1994), e Ma-loney e outro, Blood, 90:2188-2195 (1997)). Mais preferivelmente, o anticor-po é o anticorpo monoclonal humanizado huN901 ou o anticorpo monoclonalhumanizado huMy9-6. Outros anticorpos monoclonais humanizados são co-nhecidos na técnica e podem ser usados com relação à invenção.
O imunoconjugado pode compreender qualquer fármaco ade-quado, tipicamente um agente citotóxico. Um "agente citotóxico", como em-pregado aqui, refere-se a qualquer composto que resulta na morte de umacélula, induz morte celular, ou diminui a viabilidade celular. Agentes citotóxi-cos adequados incluem, por exemplo, maitansinóides e análogos de maitan-sinóide, taxóides, CC-1065 e análogos de CC-1065, e dolastatina e análogosde dolastatina. Em uma modalidade preferida da invenção, o agente citotóxi-co é um maitansinóide, incluindo maitansinol e análogos de maitansinol. Mai-tansinóides são compostos que inibem a formação de microtúbulo e são al-tamente tóxicos às células de mamífero. Exemplos de análogos de maitansi-nol adequados incluem aqueles tendo um anel aromático modificado e aque-les tendo modificações em outras posições. Tais maitansinóides são descri-tos em, por exemplo, Patente dos Estados Unidos nQs 4.256.746, 4.294.757,4.307.016, 4.313.946, 4.315.929, 4.322.348, 4.331.598, 4.361.650,4.362.663, 4.364.866, 4.424.219, 4.371.533, 4.450.254, 5.475.092,5.585.499, 5.846.545, e 6.333.410.
Exemplos de análogos de maitansinol tendo um anel aromáticomodificado incluem: (1) C 19-decloro (Patente dos Estados Unidos ne4.256.746) (preparado por redução de LAH de ansamitocina P2), (2) C-20-hidróxi (ou C-20-demetil) +/-C-19-decloro (Patente dos Estados Unidos nõs4.361.650 e 4.307.016) (preparado por desmetilação empregando-se Strep-tomyces ou Actinomyces ou desclorinação empregando-se LAH), e (3) C-20-demetóxi, C-20-acilóxi (-OCOR), +/-decloro (Patente dos Estados Unidos n94.294.757) (preparado por acilação empregando-se cloretos de acila).
Exemplos de análogos de maitansinol tendo modificações deposições diferentes de um anel aromático incluem: (1) C-9-SH (Patente dosEstados Unidos nQ 4.424.219) (preparado pela reação de maitansinol comH2S ou P2S5), (2) C-14-alcoximetila (demetóxi/CH2OR) (Patente dos EstadosUnidos nQ 4.331.598), (3) C-14-hidroximetila ou aciloximetila (CH2OH ouCH2OAc) (Patente dos Estados Unidos n- 4.450.254) (preparado de Nocar-dia), (4) C-15-hidróxi/acilóxi (Patente dos Estados Unidos n9 4.364.866)(preparado pela conversão de maitansinol por Streptomyces), (5) C-15-metóxi (Patente dos Estados Unidos n9s 4.313.946 e 4.315.929) (isolado deTrewia nudiflora), (6) C-18-N-demetila (Patente dos Estados Unidos n9s4.362.663 e 4.322.348) (preparado pela desmetilação de maitansinol porStreptomyces), e (7) 4,5-deóxi (Patente dos Estados Unidos n9 4.371.533)(preparado pela redução de tricloreto de titânio/LAH de maitansinol).
Em uma modalidade preferida da invenção, o imunoconjugadoutiliza o maitansinóide DM1 contendo tiol, também conhecido como N2'-deacetil-N2'-(3-mercapto-1-oxopropil)-maitansina, como o agente citotóxico.
Em outra modalidade preferida da invenção, o imunoconjugadoutiliza o maitansinóide DM4 contendo tiol, também conhecido como N-2'-deacetil-N-2'-(4-metil-4-mercapto-1-oxopentil)-maitansina, como o agentecitotóxico. A estrutura de DM4 é representada pela fórmula (II):
<formula>formula see original document page 19</formula>
Outras maitansinas podem ser usadas no contexto da invenção,incluindo, por exemplo, maitansinóides contendo tiol e dissulfeto transpor-tando uma substituição de mono ou dialquila no átomo de carbono transpor-tando o átomo de enxofre. Particularmente preferido é um maitansinóidetendo na posição C3, a funcionalidade de C14 hidroximetila, C15 hidróxi, ouC20 desmetila, uma cadeia lateral de aminoácido acilada com um grupo acilatransportando um grupo sulfidrila impedida, no qual o átomo de carbono dogrupo acila transportando a funcionalidade de tiol tem um ou dois substituin-tes, os referidos substituintes sendo CH3, C2H5, alquenila ou alquila linear ouramificada tendo de 1 a 10 átomos de carbono, alquenila ou alquila cíclicatendo de 3 a 10 átomos de carbono, fenila, fenila substituída, ou radical hete-rocíclico ou aromático heterocíclico, e também no qual um dos substituintespode ser H1 e no qual o grupo acila tem um comprimento de cadeia linear depelo menos três átomos de carbono entre a funcionalidade de carbonila e oátomo de enxofre.
Maitansinas adicionais para uso no contexto da invenção inclu-em compostos representados pela fórmula (III):<formula>formula see original document page 20</formula>
em que Y' representa (CR7R8)I(CR9=CR10)P(CsC)qAr(CR5R6)mDu-(CR11=CR12)r(CsC)sB,(CR3R4)n-CR1 R2SZ1
em que R1 e R2 são cada qual independentemente alquenila oualquila linear tendo de 1 a 10 átomos de carbono, preferivelmente CH3 ouC2H5, alquenila ou alquila cíclica ou ramificada tendo de 3 a 10 átomos decarbono, fenila, fenila substituída ou radical heterocíclico ou aromático hete-rocíclico, e em que R2 também pode ser H,
em que A, B, D são cicloalquila ou cicloalquenila tendo 3-10 á-tomos de carbono, arila substituída ou simples, ou radical heterocíclico, ouaromático heterocíclico,
em que R3, R4, Rs, R6, R7, Re, R9, R10, R11, e Ri2 são cada qualindependentemente H, alquenila ou alquila linear tendo de 1 a 10 átomos decarbono, preferivelmente CH3 ou C2H5, alquenila ou alquila cíclica ou ramifi-cada tendo de 3 a 10 átomos de carbono, fenila, fenila substituída ou radicalheterocíclico, ou aromático heterocíclico,
em que I, m, n, o, p, q, r, s, t e u são cada qual independente-mente
zero ou um número inteiro de 1 a 5, contanto que pelo menosdois de I, m, n, o, p, q, r, s, u, e t não sejam zero ao mesmo tempo, e
em que Z é H, SR ou COR, em que R é alquenila ou alquila line-ar tendo de 1 a 10 átomos de carbono, alquenila ou alquila cíclica ou ramifi-cada tendo de 3 a 10 átomos de carbono, arila substituída ou simples ouradical heterocíclico, ou aromático heterocíclico.Modalidades preferidas de fórmula (III) incluem compostos defórmula (III) em que (a) Ri é metila, R2 é H e Z é H, (b) Ri e R2 são metila eZ é H, (c) Ri é metila, R2 é H, e Z é -SCH3, e (d) Ri e R2 são metila, e Z é -SCH3.
Tais maitansinas adicionais incluem compostos representadospela fórmula (IV-L), (IV-D), ou (IV-D1L):
<formula>formula see original document page 21</formula>
Em que Y representa(CR7R8)I(CR5R6)m(CR3R4)nCRiR2SZ,em que R1 e R2 são cada qual independentemente H, alquila linear, ou al-quenila tendo de 1 a 10 átomos de carbono, preferivelmente CH3 ou C2H5,alquenila ou alquila cíclica ou ramificada tendo de 3 a 10 átomos de carbono,fenila, fenila substituída, ou radical heterocíclico ou aromático heterocíclico,
em que R3, R4, R5, R6, R7, e R3 são cada qual independentemen-te H, alquenila ou alquila Iinear tendo de 1 a 10 átomos de carbono, preferi-velmente CH3 ou C2H5, alquenila ou alquila cíclica ou ramificada tendo de 3 a10 átomos de carbono, fenila, fenila substituída, ou radical heterocíclico ouaromático heterocíclico,
em que I, m, e η são cada qual independentemente um númerointeiro de 1 a 5, e além disso η pode ser zero,
em que Z é H, SR, ou COR em que R é metila, alquenila ou al-quila linear ou ramificada tendo de 1 a 10 átomos de carbono, alquenila oualquila cíclica tendo de 3 a 10 átomos de carbono, ou arila substituída ousimples ou radical heterocíclico ou aromático heterocíclico, e
em que May representa um maitansinóide que transporta a ca-deia lateral em C-3, C-14 hidroximetila, C-15 hidróxi, ou C-20 desmetila.
Modalidades preferidas de fórmulas (IV-L), (IV-D) e (IV-D1L) in-cluem compostos de fórmulas (IV-L), (IV-D) e (IV-D1L) em que (a) Ri é H, R2é metila, R5, R6, R7 , e R8 são cada qual H1Iem são cada qual 1, η é 0, e Zé H, (b) Ri e R2 são metila, R5, R6, R7, R8 são cada qual Η, I e m são 1, η é0, e Z é Η, (c) Ri é H1 R2 é metila, R5, Re. R7, e R8 são cada qual Η, I e msão cada qual 1, η é 0, e Z é -SCH3, ou (d) R1 e R2 são metila, R5, Re, R7, Resão cada qual HJem são 1, η é 0, e Z é -SCH3.
Preferivelmente o agente citotóxico é representado pela fórmula (IV-L).
Maitansinas preferidas adicionais também incluem compostosrepresentados pela fórmula (V):
<formula>formula see original document page 22</formula>
em que Y representa (CR7R8)I(CR5R6)m(CR3R4)nCRiR2SZ,
em que R1 e R2 são cada qual independentemente H, alquilalinear, ou alquenila tendo de 1 a 10 átomos de carbono, preferivelmente CH3ou C2H5, alquenila ou alquila cíclica ou ramificada tendo de 3 a 10 átomos decarbono, fenila, fenila substituída ou radical heterocíclico ou aromático hete-rocíclico, em que R3, R4, R5, Re, R7, e R8 são cada qual independentementeH, alquenila ou alquila linear tendo de 1 a 10 átomos de carbono, preferivel-mente CH3 ou C2H5, alquenila ou alquila cíclica ou ramificada tendo de 3 a10 átomos de carbono, fenila, fenila substituída, ou radical heterocíclico ouaromático heterocíclico,
em que l, m, e η são cada qual independentemente um númerointeiro de 1 a 5, e além disso η pode ser zero, e
em que Z é H, SR ou -COR, em que R é metila, alquenila ou al-quila linear tendo de 1 a 10 átomos de carbono, alquenila ou alquila cíclicaou ramificada tendo de 3 a 10 átomos de carbono, ou arila substituída ousimples ou radical heterocíclico ou aromático heterocíclico.
Modalidades preferidas de fórmula (V) incluem compostos defórmula (V) em que (a) Ri é H1 R2 é metila, R5, R6, R7, e R8 são cada qual H;
l e m são cada qual 1; η é 0; e Z é H1 (b) Ri e R2 são metila; R5, R6, R7, Rssão cada qual Η, I e m são 1; η é 0; e Z é H, (c) Ri é H, R2 é metila, R5, R6,R7, e R8 são cada qual H1Iem são cada qual 1, η é 0, e Z é -SCH3, ou (d)R1 e R2 são metila, R5, R6, R7, Re são cada qual Η, I e m são 1, η é 0, e Z é -SCH3.
Ainda outras maitansinas preferidas incluem compostos repre-sentados pela fórmula (Vl-L), (Vl-D), ou (VI-D1L):
<formula>formula see original document page 23</formula>
em que Y2 representa (CR7R8)I(CR5R6)m(CR3R4)nCR1 R2SZ2,
em que Ri e R2 são cada qual independentemente alquenila oualquila linear tendo de 1 a 10 átomos de carbono, preferivelmente CH3 ouC2H5, alquenila ou alquila cíclica ou ramificada tendo de 3 a 10 átomos decarbono, fenila, fenila substituída ou radical heterocíclico ou aromático hete-rocíclico, e em que R2 também pode ser H,
em que R3, R4, R5, R6, R7, e R8 são cada qual independentemen-te H, alquenila ou alquila cíclica linear tendo de 1 a 10 átomos de carbono,preferivelmente CH3 ou C2H5, alquenila ou alquila cíclica ou ramificada tendode 3 a 10 átomos de carbono, fenila, fenila substituída ou radical heterocícli-co ou aromático heterocíclico,
em que I, m, e η são cada qual independentemente um númerointeiro de 1 a 5, e além disso η pode ser zero,
em que Z2 é SR ou COR, em que R é alquenila ou alquila lineartendo de 1 a 10 átomos de carbono, alquenila ou alquila cíclica ou ramificadatendo de 3 a 10 átomos de carbono, ou arila substituída ou simples ou radi-cal heterocíclico ou aromático heterocíclico, eem que May é um maitansinóide.
Maitansinas preferidas adicionais incluem compostos represen-tados pela fórmula (VII):
<formula>formula see original document page 24</formula>
em que Y2· representa (CR7R8)i(CR9=CRio)p(C=C)qA0(CR5R6)mDu-(CR11=CR12)r(C=C)SBt(CR3R4)nCRiR2SZ2,
em que Ri e R2 são cada qual independentemente H, alquenilaou alquila linear ou ramificada tendo de 1 a 10 átomos de carbono, preferi-velmente CH3 ou C2H5, alquenila ou alquila cíclica tendo de 3 a 10 átomosde carbono, fenila, fenila substituída ou radical heterocíclico ou aromáticoheterocíclico, em que A, B, e D cada qual independentemente é cicloalquilaou cicloalquenila tendo 3 a 10 átomos de carbono, arila substituída ou sim-ples, ou radical heterocíclico ou aromático heterocíclico,
em que R3, R4, R5, R6, R7, Re, Rg, Rio, Rn, e Ri2 são cada qualindependentemente H, alquenila ou alquila linear tendo de 1 a 10 átomos decarbono, preferivelmente CH3 ou C2H5, alquenila ou alquila cíclica ou ramifi-cada tendo de 3 a 10 átomos de carbono, fenila, fenila substituída ou radicalheterocíclico ou aromático heterocíclico,
em que I, m, n, o, p, q, r, s, t, e u são cada qual independente-mente zero ou um número inteiro de 1 a 5, contanto que pelo menos dois deI, m, n, o, p, q, r, s t, e u não sejam zero ao mesmo tempo, e
em que Z2 é SR ou -COR, em que R é alquenila ou alquila lineartendo de 1 a 10 átomos de carbono, alquenila ou alquila cíclica ou ramificadatendo de 3 a 10 átomos de carbono, ou arila substituída ou simples ou radi-cal heterocíclico ou aromático heterocíclico.
Modalidades preferidas de fórmula (VII) incluem compostos defórmula (VII), em que Ri é metila e R2 é H.
Além dos maitansinóides, o agente citotóxico usado no imuno-conjugado pode ser um taxano ou derivado do mesmo. Taxanos são umafamília de compostos que inclui paclitaxel (Taxol®), um produto natural cito-tóxico, e docetaxel (Taxotere®), um derivado semi-sintético, que são ambosamplamente usados no tratamento de câncer. Taxanos são venenos de fusomitótico que inibem a despolimerização de tubulina, resultando em mortecelular. Ao mesmo tempo que docetaxel e paclitaxel são agentes úteis notratamento de câncer, sua atividade antitumor é limitada por causa de suatoxicidade não específica com relação às células normais. Além disso, com-postos tipo paclitaxel e docetaxel por si próprios não são suficientementepotentes para serem usados em imunoconjugados.
Um taxano preferido para uso na preparação de um imunocon-jugado citotóxico é o taxano de fórmula (VIII):
<formula>formula see original document page 25</formula>
Métodos para sintetizar taxanos que podem ser usados no con-texto da invenção, juntamente com métodos para conjugar taxanos aos a-gentes de ligação à célula tais como anticorpos, são descritos em detalhesna Patente dos Estados Unidos n9s 5.416.064, 5.475.092, 6.340.701,6.372.738, 6.436.931, 6.596.757, 6.706.708, e 6.716.821, e na Publicaçãode Pedido de Patente dos Estados Unidos n- 2004/0.024.049 A1.O agente citotóxico também pode ser CC-1065 ou um derivadodo mesmo. CC-1065 é um potente antibiótico anti-tumor isolado do caldo decultura de Streptomyces zelensis. CC-1065 é cerca de 1000 vezes mais po-tente in vitro do que fármacos anticâncer comumente usados, tais como do-xorrubicina, metotrexato, e vincristina (Bhuyan e outro, Câncer Res., 42:3532-3537 (1982)). CC-1065 e seus análogos são descritos na Patente dosEstados Unidos nQs 5.585.499, 5.846.545, 6.340.701, e 6.372.738. A potên-cia citotóxica de CC-1065 foi correlacionada com sua atividade de alquilaçãoe sua atividade de intercalação de DNA ou ligação de DNA. Estas duas ati-vidades residem em partes separadas da molécula. Neste respeito, a ativi-dade de alquilação está contida na subunidade de ciclopropapirroloindol(CPI) e a atividade de ligação de DNA reside nas duas subunidades de pirro-Ioindol de CC-1065.
Diversos análogos de CC-1065 são conhecidos na técnica etambém podem ser usados como o agente citotóxico no imunoconjugado(veja, por exemplo, Warpehoski e outro, J. Med. Chem., 31: 590-603 (1988)).Uma série de análogos de CC-1065 foi desenvolvida na qual a porção deCPI é substituída por uma porção de ciclopropabenzindol (CBI) (Boger e ou-tro, J. Org. Chem., 55: 5823-5833 (1990), e Boger e outro, Bioorg. Med.Chem. Lett., 1: 115-120 (1991)). Estes análogos de CC-1065 mantêm a ele-vada potência in vitro do fármaco de origem, sem causar toxicidade retarda-da em camundongos. Similar a CC-1065, estes compostos são agentes dealquilação que covalentemente ligam-se à menor ranhura de DNA para cau-sar morte celular.
A eficácia terapêutica de análogos de CC-1065 pode ser gran-demente melhorada alterando-se a distribuição in vivo através da liberaçãoalvejada para um sítio de tumor, resultando em toxicidade inferior aos teci-dos não marcados, e desse modo, toxicidade sistêmica inferior. Para estafinalidade, conjugados de análogos e derivados de CC-1065 com agentes deligação à célula que especificamente alvejam células de tumor foram gera-dos (veja, por exemplo, Patente dos Estados Unidos n9s 5.475.092,5.585.499, e 5.846.545). Estes conjugados tipicamente exibem citotoxicida-de específica ao alvo elevada in vitro, e atividade antitumor em modelos dexenoenxerto de tumor humano em camundongos (veja, por exemplo, Chari eoutro, CancerRes., 55: 4079-4084 (1995)).
Métodos para sintetizar análogos de CC-1065 são descritos emdetalhes na Patente dos Estados Unidos n5s 5.475.092, 5.585.499,5.846.545, 6.534.660, 6.586.618, e 6.756.397 e Publicação de Pedido dePatente dos Estados Unidos nQ 2003/0.195.365 A1.
Fármacos tais como metotrexato, daunorrubicina, doxorrubicina,vincristina, vinblastina, melfalan, mitomicina C, clorambucil, caliqueamicina,tubulisina e análogos de tubulisina, duocarmicina e análogos de duocarmici-na, dolastatina e análogos de dolastatina também podem ser usados no con-texto da invenção. Compostos de doxarrubicina e daunorrubicina (veja, porexemplo, Patente dos Estados Unidos nQ 6,630,579) podem também ser u-sados como o fármaco.
Os imunoconjugados podem ser preparados por métodos in vi-tro. A fim de ligar um fármaco ou pró-fármaco ao anticorpo, um grupo de li-gação é usado. Grupos de ligação adequados são bem conhecidos na técni-ca e incluem grupos dissulfeto, grupos lábeis de ácido, grupos fotolábeis,grupos lábeis de peptidase, e grupos lábeis de esterase. Grupos de ligaçãopreferidos são grupos dissulfeto. Por exemplo, imunoconjugados podem serconstruídos empregando-se uma reação de permuta de dissulfeto entre oanticorpo e o fármaco ou pró-fármaco. As moléculas de fármaco tambémpodem ser ligadas a um anticorpo através de uma molécula veículo interme-diária tal como albumina de soro.
O anticorpo pode ser modificado por reação com um reagentede reticulação bifuncional, desse modo resultando na ligação covalente deuma molécula Iigadora ao anticorpo. Como empregado aqui, um "reagentede reticulação bifuncional" é qualquer porção química que covalentementeliga um agente de ligação à célula a um fármaco, tais como os fármacosdescritos aqui. Em uma modalidade preferida da invenção, uma parcela daporção de ligação é fornecida pelo fármaco. Neste respeito, o fármaco com-preende uma porção de ligação que é parte de uma molécula Iigadora maiorque é usada para unir o anticorpo ao fármaco. Por exemplo, para formar omaitansinóide DM1, a cadeia lateral no grupo C-3 hidroxila de maitansina émodificado para ter um grupo sulfidrila livre (SH). Esta forma tiolada de mai-tansina pode reagir com um anticorpo modificado para formar um imunocon-jugado. Portanto, o ligante final é agrupado de dois componentes, um dosquais é fornecido pelo reagente de reticulação, enquanto o outro é fornecidopela cadeia lateral de DM1.
Qualquer reagente de reticulação bifuncional adequado pode serusado com relação à invenção, contanto que o reagente ligante provenha aretenção do produto terapêutico, por exemplo, citotoxicidade, e característi-cas de marcação do fármaco e do anticorpo, respectivamente. Preferivel-mente, a molécula ligadora une o fármaco ao anticorpo através de ligaçõesquímicas (como descrito acima), de modo que o fármaco e o anticorpo sejamquimicamente acoplados (por exemplo, covalentemente ligados) um ao ou-tro. Preferivelmente, o reagente de ligação é um ligante clivável. Mais prefe-rivelmente, o Iigante é clivado sob condições suaves, isto é, condições den-tro de uma célula sob as quais a atividade do fármaco não é afetada. Exem-plos de Iigantes cliváveis adequados incluem Iigantes de dissulfeto, Iiganteslábeis de ácido, Iigantes fotolábeis, Iigantes lábeis de peptidase, e Iiganteslábeis de esterase. Ligantes contendo dissulfeto são Iigantes cliváveis atra-vés de permuta de dissulfeto, que podem ocorrer sob condições fisiológicas.Ligantes lábeis de ácido são ligantes cliváveis em pH ácido. Por exemplo,certos compartimentos intracelulares, tais como endossomos e lisossomos,têm um pH acídico (pH 4-5), e fornecem condições adequadas para clivarligantes lábeis de ácido. Ligantes fotolábeis são úteis na superfície corporale em muitas cavidades do corpo que são acessíveis à luz. Além disso, luzinfravermelha pode penetrar no tecido. Ligantes lábeis de peptidase podemser usados para clivar certos peptídeos dentro ou fora das células (veja porexemplo, Trouet e outro, Proc. Natl. Acad. Sei. USA, 79: 626-629 (1982), eUmemoto e outro, Int. J. Câncer, 43: 677-684 (1989)).
Preferivelmente, o fármaco é ligado a um anticorpo através deuma ligação de dissulfeto. A molécula Iigadora compreende um grupo quími-co reativo que pode reagir com o anticorpo. Grupos químicos reativos prefe-ridos para reação com o anticorpo são ésteres de N-succinimidila e ésteresde N-sulfossuccinimidila. Adicionalmente a molécula Iigadora compreendeum grupo químico reativo, preferivelmente um grupo ditiopiridila, que podereagir com o fármaco para formar uma ligação de dissulfeto. Moléculas Iiga-doras particularmente preferidas incluem, por exemplo, 3-(2-piridilditio)propionato de N-succinimidila (SPDP) (veja, por exemplo, Carls-son e outro, Biochem. J., 173: 723-737 (1978)), 4-(2-piridilditio)butanoato deN-succinimidila (SPDB) (veja, por exemplo, Patente dos Estados Unidos nQ4.563.304), e 4-(2-piridilditio)pentanoato de N-succinimidila (SPP) (veja, porexemplo, número de Registro CAS 341498-08-6).
Ao mesmo tempo que Iigantes cliváveis preferivelmente são u-sados no método inventivo, um Iigante não clivável também pode ser usadopara gerar o imunoconjugado descrito acima. Um Iigante não clivável é qual-quer porção química que é capaz de ligar um fármaco, tal como um maitan-sinóide, um taxano, ou um análogo de CC-1065, a um agente de ligação àcélula, tal como um anticorpo, de uma maneira covalente, estável. Dessemodo, ligantes não cliváveis são substancialmente resistentes à clivageminduzida por ácido, clivagem induzida por luz, clivagem induzida por peptida-se, clivagem induzida por esterase, e clivagem de ligação de dissulfeto, emcondições sob as quais o fármaco ou o anticorpo permanece ativo.
Reagentes de reticulação adequados que formam Iigantes nãocliváveis entre um fármaco e um agente de ligação à célula são bem conhe-cidos na técnica. Exemplos de Iigantes não cliváveis incluem Iigantes tendouma porção de éster de N-succinimidila ou éster de N-sulfosuccinimidila parareação com o agente de ligação à célula, bem como uma porção com baseem maleimido ou haloacetila para reação com o fármaco. Reagentes de reti-culação compreendendo uma porção com base em maleimido incluem 4-(maleimidometil)cicloexanocarboxilato de N-succinimidila (SMCC), N-succinimidil-4-(N-maleimidometil)-cicloexano-1-carbóxi-(6-amidocaproato),que é um análogo de "cadeia longa" de SMCC (LC-SMCC), éster de N-succinimidila de ácido κ-maleimidoundecanóico (KMUA), éster de N-succinimidila de ácido γ-maleimidobutírico (GMBS), éster de N-hidroxissuccinimida de ácido ε-maleimidocapróico (EMCS)1 éster de m-maleimidobenzoil-N-hidroxissuccinimida (MBS), éster de N-(D-maleimidoacetóxi)-succinimida (AMAS), succinimidil-6-(B-maleimidopropionamido)hexanoato (SMPH), 4-(p-maleimidofenil)-butirato deN-succinimidila (SMPB), e N-(p-maleimidofenil)isocianato (PMPI). Reagentesde reticulação compreendendo uma porção com base em haloacetila inclu-em N-succinimidil-4-(iodoacetil)-aminobenzoato (SIAB)1 iodoacetato de N-succinimidila (SIA), bromoacetato de N-succinimidila (SBA), e 3-(bromoacetamido)propionato de N-succinimidila (SBAP).
Outros reagentes de reticulação que não têm um átomo de en-xofre que forma Iigantes não cliváveis podem também ser usados no métodoinventivo. Tais Iigantes podem ser derivados de porções com base em ácidodicarboxílico. Porções com base em ácido dicarboxílico adequadas incluem,porém não são limitadas a, ácidos α,ω-dicarboxílicos da fórmula geral (IX):
<formula>formula see original document page 48</formula>
em que X é um grupo alquila, alquenila, ou alquinila linear ou ramificado ten-do 2 a 20 átomos de carbono, Y é um grupo cicloalquila ou cicloalquenilatransportando 3 a 10 átomos de carbono, Z é um grupo aromático substituí-do ou não substituído transportando 6 a 10 átomos de carbono, ou um grupoheterocíclico substituído ou não substituído em que o heteroátomo é sele-cionado de Ν, O ou S, e em que I, m, e η são cada qual 0 ou 1, contanto queI, m, e η sejam todos não zero ao mesmo tempo.
Muitos dos Iigantes não cliváveis descritos aqui são descritos emdetalhes na Publicação de Pedido de Patente dos Estados Unidos n- 2005-0169933 A1.
Alternativamente, como descrito na Patente dos Estados UnidosnQ 6.441.163 B1, o fármaco pode ser primeiro modificado para introduzir uméster reativo adequado para reagir com um anticorpo. Reação dos mesmosmaitansinóides contendo uma porção Iigadora ativada com um anticorpo for-nece outro método de produção de um conjugado anticorpo-maitansinóideclivável ou não clivável.
Processos para a fabricação de tais composições farmacêuticasenvolvem troca de tampão do produto farmacêutico de carga em tampão deformulação apropriado por cromatografia ou diafiltração e em seguida adiçãode excipientes apropriados em quantidade desejada, ou como solução oucomo sólido. Ajuste final da concentração de proteína e/ou pH pode tambémser realizado para obter a composição desejada.
Os imunoconjugados da invenção são administrados ao pacientena forma de uma formulação farmacêutica descrita neste pedido e um veícu-lo, excipiente ou diluente farmaceuticamente aceitável portanto. Como em-pregado, "farmaceuticamente aceitável" refere-se àqueles agentes que sãoúteis no tratamento ou diagnóstico de mamíferos, preferivelmente ser huma-no. O modo preferido de administração é parenteralmente, particularmentepela via intravenosa, intramuscular, subcutânea, intraperitoneal, ou intralinfá-tica. Veja, por exemplo Remington1S Pharmaceutical Sciences, 16ã ed., 1980,Mack Publishing Company, editado por Osol e outros. Tais composições po-dem incluir proteínas, tais como proteínas de soro, por exemplo, albumina desoro humano, tampões ou substâncias de tamponamento tais como fosfatos,outros sais, ou eletrólitos, e similares. Diluentes adequados podem incluir,por exemplo, água estéril, salina isotônica, dextrose aquosa diluída, um ál-cool poliídrico ou misturas de tais álcoois, por exemplo, glicerina, propilenoglicol, polietileno glicol e similares. As formulações podem conter conservan-tes tais como álcool de fenetila, metil e propil parabenos, e similares. Se de-sejado, a formulação pode incluir 0,05 a cerca de 0,20 percentual por pesode um antioxidante.
A administração pode ser por meio de qualquer via conhecidaser eficaz pelo médico de experiência ordinária. Administração parenteral épreferida. Vias parenterais preferidas para administração das formulações dapresente invenção incluem intravenosa, intramuscular, subcutânea, intraperi-toneal, intra-arterial. Vias intravenosa, intraperitoneal, intramuscular, e sub-cutânea de administração dos compostos usados na presente invenção sãovias parenterais mais preferidas de administração. Vias intravenosa, intrape-ritoneal, e subcutânea de administração das formulações da presente inven-ção são ainda mais altamente preferidas.
Administração por meio de certas vias parenterais pode envolverintrodução das formulações da presente invenção no corpo de um pacienteatravés de uma agulha ou um catéter. Opcionalmente, tal administração po-de ser propelida por uma seringa estéril ou algum outro dispositivo mecânicotal como um sistema de infusão contínua. Uma formulação fornecida pelapresente invenção pode ser administrada empregando-se uma seringa, inje-tar, bomba, ou qualquer outro dispositivo ou por gravidade reconhecido natécnica para administração parenteral. A formulação pode ser administradaparenteralmente, em formas de dosagem líquidas estéreis. Esta formulaçãopode ser administrada intravenosamente como uma infusão em bolus ourápida, que pode, além de seu efeito terapêutico, diagnóstico ou medicinaldesejado, causar a liberação de imunoconjugado.
Os imunoconjugados da invenção são eficazes durante umaampla faixa de dosagem dependendo de fatores tais como o estado da do-ença a ser tratada ou o efeito biológico a ser modificado, a maneira da qual oimunoconjugado é administrado, a idade, peso e condição do paciente bemcomo outros fatores a ser determinados pelo médico que está realizando otratamento. Desse modo, a quantidade administrada a qualquer determinadopaciente pode ser determinada em uma base individual.
A quantidade de uma formulação da presente invenção que éadministrada para tratar um paciente pode depender de vários fatores, entreos quais são inclusos, sem limitação, o sexo, peso e idade do paciente, acausa subjacente da condição ou doença a ser tratada, a via de administra-ção e biodisponibilidade, a persistência do imunoconjugado administrado nocorpo, a formulação, e a potência do imunoconjugado. Onde a administraçãoé intermitente, a quantidade por administração deve também levar em consi-deração o intervalo entre as doses, e a biodisponibilidade do imunoconjuga-do da formulação. A administração da formulação da presente invenção po-de ser contínua. Inclui-se na experiência ordinária do médico titular a dose etaxa de infusão ou freqüência de administração da formulação da presenteinvenção para obter o resultado clínico desejado.
A dosagem administrada, evidentemente, variará dependendodos fatores conhecidos tais como as características farmacodinâmicas doagente particular, e seu modo e via de administração; idade, saúde, e pesodo recipiente; natureza e extensão dos sintomas, tipo de tratamento simultâ-neo, freqüência de tratamento, e o efeito desejado. Usualmente uma dosa-gem diária de composto terapeuticamente significante pode ser cerca de 0,1a 100 miligramas por quilograma de peso corporal.
Formas de dosagem adequadas para administração interna con-têm de cerca de 1 miligrama a cerca de 500 miligramas de composto tera-peuticamente significante por unidade. Nestas composições farmacêuticas ocomposto terapeuticamente significante ordinariamente estará presente emuma quantidade de cerca de 0,05-2% por peso em uma formulação líquida e2-50% na formulação Iiofilizada antes da reconstituição baseada no pesototal da composição.
A presente invenção também provê um pó Iiofilizado da formula-ção descrita acima. Preferivelmente, a formulação Iiofilizada compreende umou mais componentes adicionais, tais como um agente de carga e/ou Iiopro-tetor. O pó Iiofilizado pode ser reconstituído com água para criar uma solu-ção reconstituída. A presente formulação pode ser Iiofilizada e reconstituídacomo descrito no Pedido de Patente dos Estados Unidos n9 2004/0.241.174A1, cuja descrição é por meio do mesmo incorporada por referência, e quedescreve formulações Iiofilizadas compreendendo imunoconjugados.
Antes da reconstituição da composição liofilizada, as quantida-25 des relativas de cada componente compreendendo a composição liofilizadainventiva podem ser descritas em termos de mg de excipiente (por exemplo,tampão, tensoativo, agente de carga, crioprotetor) por mg de conjugado.
Ao mesmo tempo que qualquer agente de tamponamento ade-quado descrito aqui pode ser empregado com relação à composição Iiofiliza-30 da inventiva, a composição liofilizada preferivelmente compreende um tam-pão de succinato de sódio. O agente de tamponamento pode estar presentena composição liofilizada inventiva em qualquer quantidade adequada. Emparticular, a composição Iiofilizada desejavelmente compreende cerca de 0,1mg a cerca de 2 mg do agente de tamponamento por mg do conjugado (porexemplo, cerca de 0,1 mg a cerca de 0,5 mg de agente de tamponamentopor mg do conjugado, cerca de 0,5 mg a cerca de 1 mg de agente de tam-ponamento por mg do conjugado, ou cerca de 1 mg a cerca de 2 mg de a-gente de tamponamento por mg do conjugado). Mais preferivelmente, acomposição liofilizada compreende cerca de 0,3 mg de tampão de succinatode sódio por mg do conjugado.
A composição liofilizada desejavelmente compreende cerca de0,005 mg a cerca de 0,1 mg de polissorbato por mg do conjugado, e preferi-velmente cerca de 0,005 mg a cerca de 0,01 mg de polissorbato por mg doconjugado, 0,01 mg a cerca de 0,05 mg de polissorbato por mg do conjuga-do, ou cerca de 0,05 mg de polissorbato a cerca de 0,1 mg de polissorbatopor mg do conjugado. Quando o polissorbato for polissorbato 20, a composi-ção liofilizada preferivelmente compreenderá cerca de 0,02 mg de polissor-bato 20 por mg do conjugado.
A fim de prevenir a degradação dos ingredientes ativos da com-posição durante congelamento e secagem, a composição liofilizada inventivatambém compreende um crioprotetor, preferivelmente um crioprotetor amor-fo. O termo "crioprotetor", como empregado aqui, refere-se a um excipienteque protege moléculas instáveis durante o congelamento. Crioprotetoresadequados para uso na composição Iiofilizada são conhecidos por aquelesversados na técnica, e incluem, por exemplo, glicerol, sulfóxido de dimetila(DMSO), polietileno glicol (PEG), dextrano, glicose, trealose, e sacarose.Mais preferivelmente, o crioprotetor é sacarose. O crioprotetor pode estarpresente na composição Iiofilizada inventiva em qualquer quantidade ade-quada. A composição Iiofilizada desejavelmente compreende cerca de 0,5mg a cerca de 5 mg, por exemplo, cerca de 0,5 mg a cerca de 2 mg do crio-protetor por mg do conjugado, cerca de 0,8 mg de crioprotetor por mg doconjugado, cerca de 2 mg de crioprotetor por mg do conjugado, ou cerca de4 mg de crioprotetor por mg do conjugado. Quando o crioprotetor for sacaro-se, a composição Iiofilizada preferivelmente compreenderá cerca de 0,5 mga cerca de 2 mg (por exemplo, cerca de 1 mg) de sacarose por mg do conjugado.
A composição Iiofilizada pode também conter um agente de car-ga, preferivelmente um agente de carga cristalizável. Agentes de carga tipi-camente são empregados na técnica para fornecer estrutura e peso à "mas-sa" produzida como um resultado de liofilização. Qualquer agente de cargaadequado conhecido na técnica pode ser empregado com relação à compo-sição Iiofilizada inventiva. Agentes de carga adequados incluem, por exem-plo, manitol, dextrano, e glicina. O agente de carga empregado na composi-ção inventiva mais preferivelmente é glicina. A composição Iiofilizada podeconter qualquer quantidade adequada do agente de carga, porém preferi-velmente a composição Iiofilizada compreende cerca de 2 mg a cerca de 20mg do agente de carga por mg do conjugado, e preferivelmente cerca de 2mg a cerca de 10 mg de agente de carga por mg do conjugado, cerca de 5mg a cerca de 10 mg de agente de carga por mg do conjugado, cerca de 10mg a cerca de 15 mg de agente de carga por mg do conjugado, ou cerca de15 mg a cerca de 20 mg de agente de carga por mg do conjugado. Quandoo agente de carga for glicina, a composição Iiofilizada preferivelmente com-preenderá cerca de 3,8 mg de glicina por mg do conjugado.
Desse modo, de acordo com a invenção, os conteúdos de umacomposição Iiofilizada que deve ser reconstituída para conter 5 mg/mL deconjugado (por exemplo, preferivelmente um conjugado compreendendohuN901 quimicamente acoplado a DM1) preferivelmente compreendem (i)cerca de 0,3 mg de tampão de succinato de sódio por mg do conjugado, (ii)cerca de 0,02 mg de polissorbato 20 por mg do conjugado, (iii) cerca de 1mg de sacarose por mg do conjugado, e (iv) cerca de 3,8 mg de glicina pormg do conjugado. Assim que reconstituída com água, uma tal composiçãoIiofilizada preferivelmente tem um pH de cerca de 5,5. Além disso, quando acomposição Iiofilizada for reconstituída com água, as descrições das concen-trações relativas dos excipientes mencionados acima com relação à formu-lação líquida são aplicáveis à composição Iiofilizada supracitada.
Métodos de liofilização são bem conhecidos na técnica e sãodescritos em, por exemplo, Wang, W., Int. J. Pharm., 203, 1-60 (2000). Porexemplo, a composição Iiofilizada inventiva pode ser produzida empregando-se um ciclo de liofilização compreendendo as seguintes etapas: (1) pré-resfriamento em uma temperatura de prateleira de 4°C e pressão de câmaraambiente durante 2,5 horas, (2) congelamento em uma temperatura de pra-teleira de -50°C e pressão de câmara ambiente durante 14 horas, (3) recris-talização de glicina em uma temperatura de prateleira de -20°C e pressão decâmara ambiente durante 6 horas, (4) recongelamento em uma temperaturade prateleira de -50°C e pressão de câmara ambiente durante 16 horas, (5)secagem primária em uma temperatura de prateleira de -13°C e 13,33 Pa(100 mTorr) de pressão durante 24 horas, (6) secagem secundária em umatemperatura de prateleira de 24°C e 13,33 Pa (100 mTorr) de pressão duran-te 10 horas, e (7) fase de interrupção em uma temperatura de prateleira de24°C e pressão de câmara ambiente. A composição liofilizada, entretanto,não é limitada às composições produzidas pelo método descrito acima. Defato, qualquer método de liofilização adequado pode ser empregado paraproduzir a composição liofilizada, e será evidente para aqueles versados natécnica que os parâmetros de liofilização escolhidos (por exemplo, temposde secagem) variarão dependendo de uma variedade de fatores, incluindo ovolume da solução a ser liofilizada.
Em outra modalidade, a presente invenção é direcionada a umestojo para preparação de uma formulação aquosa, cujo kit contém tanto umprimeiro recipiente contendo um pó Iiofilizado quanto um segundo recipientecontendo uma formulação aquosa compreendendo um estabilizante de re-constituição. A concentração do pó Iiofilizado na solução, o volume de solu-ção que é carregado em cada recipiente, e a capacidade dos recipientes sãotodos parâmetros interrelacionados que podem ser adequadamente modifi-cados, dependendo da concentração desejada de princípio ativo na unidadede dosagem final. Desse modo, estes parâmetros podem variar dentro deamplas faixas.
Todas as patentes, publicações, e outras referências citadas a-qui são expressamente incorporadas por referência em suas totalidades.A presente invenção é também descrita pelos seguintes exem-plos, que são ilustrativos do processo e não devem ser construídos comolimitantes da invenção. Os parâmetros do processo fornecidos abaixo podemser adotados e adaptados pela pessoa experiente para satisfazer a necessi-dade particular.
EXEMPLO 1
Este exemplo mostra o efeito dos seguintes excipientes de for-mulação sobre a aparência visual de amostras de conjugado MAb-DMI for-muladas.
Amostras de huN901-SPP-DM1 foram estabelecidas em 1,0mg/mL em 10 mM de tampão de fosfato pH 6,5 com 140 mM de NaCl comcada dos excipientes listados abaixo. Os excipientes foram adicionados dire-tamente à amostra de huN901-SPP-DM1 em uma base peso/peso % (pesodo excipiente / peso da solução). Imediatamente após a adição do excipien-te, as formulações foram filtradas, e testes de contagem de partícula e apa-rência foram realizados. As amostras foram em seguida armazenadas a 4°Cdurante o tempo do estudo, e foram testadas novamente em pontos de tem-po de 2 semanas e 1 mês. Quanto à aparência, as amostras foram testadasexaminando-se pelo menos 1,0 ml_ de solução em comparação com umabase branca quanto à claridade e em comparação com uma base preta sobluz branca quanto à presença ou ausência de partículas visíveis. Os resulta-dos são relatados como presença ou ausência de partículas visíveis. Partí-culas subvisíveis com o tamanho acima de 5 Gm foram também medidascom uma registradora de partícula HIAC calibrada para medir o tamanho dapartícula entre 2 e 100 μηι.Aparência:
<table>table see original document page 38</column></row><table>
* filtrado concisamente antes do ponto de tempo inicialContagem de partícula (contas > 5 Dm por mL):
<table>table see original document page 38</column></row><table>
Efeitos positivos de sacarose, TWEEN-20®, beta-ciclodextrina,dextrose, glicerol, manitol e polietileno glicol (PEG) foram observados.
EXEMPLO 2
Este exemplo mostra o efeito de aminoácidos sobre a estabilida-de de huN901-SPP-DM1 com respeito à agregação de conjugado.
Amostras de huN901-SPP-DM1 foram estabelecidas em 5,0mg/mL nos seguintes tampões e armazenadas a 2-8 e 25°C durante 12 me-ses. O conteúdo de agregado de conjugado foi testado com um ensaio cro-matográfico em pontos de tempo de 1, 3, 6 e 12 meses.
(1) 10 mM de fosfato de sódio, 140 mM de NaCI, pH 6,5.
(2) 10 mM de citrato de sódio, 135 mM de NaCI, 0,01 % de po-Iissorbato 20, pH 5,5.
(3) 10 mM de citrato de sódio, 130 mM de histidina, 0,01 % depolissorbato 20, pH 5,5.
(4) 10 mM de citrato de sódio, 110 mM de glicina, 80 mM deNaCI, 0,01 % de polissorbato 20, pH 5,5.
<table>table see original document page 39</column></row><table>
Exemplo 1 mostra que histidina melhora a formulação com refe-rência à prevenção de formação de agregado de conjugado. Glicina tambémtem benefícios.
EXEMPLO 3
Este exemplo mostra o efeito de histidina sobre a estabilidade doconjugado huMy9-6-SPDB-DM4 em termos de agregado de conjugado.
O conjugado huMy9-6-SPDB-DM4 foi formulado em 5,0 mg/mLem:
(1) 10 mM de citrato de sódio, 135 mM de NaCI, pH 5,5
(2) 150 mM de histidina/cloreto de histidina, pH 5,5
As amostras foram incubadas a 2-8°C e 25°C durante 6 meses,após o que elas foram testadas quanto ao agregado de conjugado por umensaio cromatográfico.
<table>table see original document page 39</column></row><table>Os dados mostram os efeitos benéficos de histidina sobre a pre-venção de formação de agregado.
EXEMPLO 4
Este exemplo mostra o efeito de agente de tamponamento, açú-car e aminoácido sobre a estabilidade de huC242-SPDB-DM4 com respeitoao agregado de conjugado.
Amostras de huC242-SPDB-DM4 em 5,0 mg/mL em:
(1) 10 mM de citrato de sódio, 135mM de NaCI1 pH 5,5
(2) 10 mM de citrato de sódio, 5% de sacarose, 130 mM de glici-na, 0,1% de polissorbato 80, pH 5,5
(3) 10 mM de histidina/cloreto de histidina, 5% de sacarose, 130mM de glicina, pH 5,5
Teste para conteúdos de agregado e monômero de conjugadoforam realizados em T0, e após 3 meses de armazenagem em 2-8°C e 25°C.
<table>table see original document page 40</column></row><table>
Os dados mostram que sacarose e glicina, juntos na combina-ção acima, melhoram a formulação com referência à proteção contra agre-gação de conjugado. A maior melhora é observada quando a combinação desacarose e glicina é usada com histidina.
EXEMPLO 5
Este exemplo mostra o efeito de várias formulações contendosacarose com e sem glicina sobre o conteúdo de agregado do conjugadohuN901 -SPP-DM1.
Amostras de huN901-SPP-DM1 em concentração de 5,0 mg/mLem cada das seguintes formulações líquidas foram testadas quanto aos con-teúdos de monômero e agregado.
(1)10 mM de citrato de sódio, 135 mM de NaCI, 0,01 % de po-lissorbato 20, pH 5,5(2) 10 mM de citrato de sódio, 60 mM de NaCI, 5 % de sacarose,pH 5,5
(3) 10 mM de citrato de sódio, 60 mM de NaCI, 0,01 % de polis-sorbato 20, 5 % de sacarose, pH 5,5
(4) 10 mM de fosfato de sódio, 140 mM de NaCI, pH 6,5
(5) 10 mM de succinato de sódio, 0,25 M de glicina, 0,01 % depolissorbato 20, 0,5 % de sacarose, pH 5,5
As amostras armazenadas a 25°C foram testadas quanto aosconteúdos de agregado em pontos de tempo de 3, 6 e 12 meses.
Formulação Agregado (%) 3 meses 6 meses 12 mesesComposição 1 6,7 7,3 8,2Composição 2 5,2 5,7 6,2Composição 3 5,6 5,4 6,5Composição 4 10,0 10,4 11,8Composição 5 4,4 4,7 4,4
Em todos os casos as formulações contendo sacarose têm con-teúdo de agregado inferior àquelas sem sacarose. A formulação contendoglicina (composição 5) teve a melhor estabilidade neste exemplo.
EXEMPLO 6
Este exemplo mostra o efeito de polissorbato 80 sobre a forma-ção de partícula induzida por agitação. Esta condição de estresse (agitação)é suposta imitar os estresses encontrados durante expedição e manuseio doconjugado líquido, quando oposta aos estresses encontrados durante arma-zenagem estática (que são tratados no Exemplo 1).
Amostras de huC242-SPDB-DM4 foram estabelecidas em 1mg/mL nos seguintes tampões e colocadas em frasconetes de vidro USPTipo 1 (5mL em um frasconete de 10mL) que foram selados com Flurotec®Stoppers. Os frasconetes foram agitados durante 48 horas em 100 rpm emtemperatura ambiente, empregando-se um Agitador Orbital Lab-Line.
(1)10 mM de citrato de sódio, 135 mM de cloreto de sódio, pH5,5
(2) 10 mM de histidina, 5% de sacarose, 130 mM de glicina, pH5,5
(3) 10 mM de histidina, 5% de sacarose, 130 mM de glicina,0,1% de polissorbato 80, pH 5,5
(4) 10 mM de histidina, 1% de sacarose, 250 mM de glicina, pH 5,5
(5) 10 mM de histidina, 1% de sacarose, 250 mM de glicina,0,1% de polissorbato 80, pH 5,5
(6) 10 mM de histidina, 280 mM de glicina, pH 5,5
(7) 10 mM de histidina, 280 mM de glicina, 0,1% de polissorbato80, pH5,5
(8) 10 mM de histidina, 10% de sacarose, pH 5,5
(9) 10 mM de histidina, 10% de sacarose, 0,1% de polissorbato80, pH 5,5
Após agitação durante 48 horas, todos os frascos foram visual-mente inspecionados. Aqueles que continham polissorbato 80 (Composições3, 5, 7 e 9) permaneceram claros, ao passo que todos aqueles que não con-tinham polissorbato 80 (1, 2, 4, 6 e 8) ficaram turvos. Estes dados demons-tram o efeito benéfico de polissorbato 80 na redução de partículas devido àagitação, tal como pode ser encontrado durante expedição e manuseio doconjugado líquido.

Claims (21)

1. Formulação de imunoconjugado líquida, caracterizada pelofato de que compreende:(a) um imunoconjugado, em que o imunoconjugado é um anti-corpo compreendendo um ou mais pró-fármacos citotóxicos ligados covalen-temente; e(b) um ou mais excipientes selecionados do grupo consistindoem sacarose, polissorbato 20, polissorbato 80, ciclodextrina, dextrose, glice-rol, polietileno glicol, manitol, e um aminoácido,em que a formulação não compreende cloreto de sódio; eem que a formulação é uma solução aquosa tamponada tendoum pH de 4,5 a 7,6.
2. Formulação de acordo com a reivindicação 1, caracterizadapelo fato de que a formulação compreende um ou mais excipientes selecio-nados do grupo consistindo em:pelo fato de que a formulação compreende um ou mais excipientes selecio-nados do grupo consistindo em:(i) 5 -10% de sacarose,(ii) 0,005 - 0,2 % de polissorbato 20,(i) 0,1 -12% de sacarose,(ii) 0,005 - 1,0% de polissorbato 20,(iii) 0,5 - 2% de beta-ciclodextrina,(iv) 2 - 8% de glicerol,(v) 1 - 5% de PEG6000,(vi) 2 - 8% de manitol,(vii) 0,005 - 1,0% de polissorbato 80,(viii) 5-20 mM de histidina, e(ix) 100 - 300 mM de glicina.
3. Formulação de acordo com a reivindicação 2, caracterizada(iii) 0,5 -1% de beta - ciclodextrina,(iv) 2 - 5% de glicerol,(v) 2 - 3% de PEG6000,(vi) 3 - 5% de manitol,(vii) 0,005 - 0,2 % de polissorbato 80,(viii) 10-15 mM de histidina, e(ix) 130 - 250 mM de glicina.
4. Formulação de acordo com a reivindicação 1, caracterizadapelo fato de que a solução aquosa tamponada contém um ou mais de histi-dina, succinato, citrato, fosfato, e acetato.
5. Formulação de acordo com a reivindicação 4, caracterizadapelo fato de que o pH é de 5,0 a 7,0.
6. Formulação de acordo com a reivindicação 5, caracterizadapelo fato de que o pH é de 5,0 a 6,0.
7. Formulação de acordo com a reivindicação 1, caracterizadapelo fato de que o imunoconjugado compreende um anticorpo humanizadoselecionado do grupo consistindo em huMy9 - 6, huC242, huN901, DS6,trastuzumab, bivatuzumab, sibrotuzumab, e rituximab.
8. Formulação de acordo com a reivindicação 1, caracterizadapelo fato de que o imunoconjugado compreende um fármaco citotóxico sele-cionado do grupo consistindo em um maitansinóide, um taxano, e um CC - 1065.
9. Formulação de imunoconjugado líquida, caracterizada pelofato de que compreende:(a) um imunoconjugado, em que o imunoconjugado é um anti-corpo compreendendo um ou mais pró-fármacos citotóxicos ligados covalen-temente; e(b) um ou mais excipientes selecionados do grupo consistindoem histidina, sacarose e glicina,em que a formulação não compreende cloreto de sódio; eem que a formulação é uma solução aquosa tamponada tendoum pH de 4,5 a 7,6.
10. Formulação de acordo com a reivindicação 9, caracterizadapelo fato de que a formulação compreende um ou mais excipientes selecio-nados de 5 - 200 mM de histidina, 100 - 200 mM de glicina, e 2 - 8% de sa-carose.
11. Formulação de acordo com a reivindicação 10, caracterizadapelo fato de que o excipiente é 5 - 100 mM de histidina ou 100 - 150 mM deglicina.
12. Formulação de acordo com a reivindicação 9, caracterizadapelo fato de que a formulação contém 2 - 8% de sacarose e 100 - 150 mMde glicina.
13. Formulação de acordo com a reivindicação 12, caracterizadapelo fato de que a formulação contém 10 mM de histidina, 5% de sacarose e-130 mM de glicina.
14. Formulação de acordo com a reivindicação 9, caracterizadapelo fato de que a solução aquosa tamponada contém um ou mais de histi-dina, succinato, citrato, fosfato, e acetato.
15. Formulação de acordo com a reivindicação 14, caracterizadapelo fato de que o pH é de 5,0 a 7,0.
16. Formulação de acordo com a reivindicação 15, caracterizadapelo fato de que o pH é de 5,0 a 6,0.
17. Formulação de acordo com a reivindicação 9, caracterizadapelo fato de que também compreende polissorbato 20 e/ou polissorbato 80.
18. Formulação de acordo com a reivindicação 9, caracterizadapelo fato de que o imunoconjugado compreende um anticorpo humanizadoselecionado do grupo consistindo em huMy9 - 6, huC242, huN901, DS6,trastuzumab, bivatuzumab, sibrotuzumab, e rituximab.
19. Formulação de acordo com a reivindicação 9, caracterizadapelo fato de que o imunoconjugado compreende um fármaco citotóxico sele-cionado do grupo consistindo em um maitansinóide, um taxano, e um CC -1065.
20. Formulação de imunoconjugado, caracterizada pelo fato deque consiste essencialmente em:(a) imunoconjugado huN901 - DM1 em uma concentração de 0,5-10 mg/ml;(b) 5 -15 mM de histidina e/ou 5-15 mM de succinato;(c) 0,1 -10 % de sacarose e/ou 100 - 300 mM de glicina;(d) 0,005 - 0,2% de polissorbato 80 e/ou 0,005 - 0,2% de polis-sorbato 20,em que a formulação é uma solução tamponada aquosa tendoum pH de 5 - 6, e em que DM1 não é N2'-deacetil-N2'-(3-mercapto-1-oxopropil)-maitansina, e em que a formulação não contém cloreto de sódio.
21. Formulação de imunoconjugado, caracterizada pelo fato deque consiste essencialmente em:(a) imunoconjugado huC242 - DM4 em uma concentração de 0,5-10 mg/ml;(b) 5 -15 mM de histidina;(c) 0,1 -10 % de sacarose e/ou 100 - 300 mM de glicina;(d) 0,005 - 0,2% de polissorbato 80 e/ou 0,005 - 0,2% de polis-sorbato 20;em que a formulação é uma solução tamponada aquosa tendo um pH de 5 - 6, e em que DM4 não é N2'-deacetil-N2'-(4-metil-4-mercapto-1-oxopropil)-maitansina, e em que a formulação não contém cloreto de sódio.
BRPI0614100-5A 2005-08-03 2006-08-02 formulações de imunoconjugado lìquidas BRPI0614100A2 (pt)

Applications Claiming Priority (9)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US70490205P 2005-08-03 2005-08-03
US60/704,902 2005-08-03
US70716205P 2005-08-11 2005-08-11
US60/707,162 2005-08-11
US74645606P 2006-05-04 2006-05-04
US74645406P 2006-05-04 2006-05-04
US60/746,454 2006-05-04
US60/746,456 2006-05-04
PCT/US2006/030295 WO2007019232A2 (en) 2005-08-03 2006-08-02 Immunoconjugate formulations

Publications (1)

Publication Number Publication Date
BRPI0614100A2 true BRPI0614100A2 (pt) 2011-03-09

Family

ID=37727890

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BRPI0614100-5A BRPI0614100A2 (pt) 2005-08-03 2006-08-02 formulações de imunoconjugado lìquidas

Country Status (14)

Country Link
US (1) US9114179B2 (pt)
EP (1) EP1917030A4 (pt)
JP (3) JP2009503105A (pt)
KR (1) KR101566393B1 (pt)
AU (1) AU2006278573A1 (pt)
BR (1) BRPI0614100A2 (pt)
CA (1) CA2615122A1 (pt)
EA (1) EA014513B1 (pt)
EC (1) ECSP088159A (pt)
IL (1) IL188733A (pt)
MX (1) MX336033B (pt)
NO (1) NO20080612L (pt)
NZ (3) NZ564843A (pt)
WO (1) WO2007019232A2 (pt)

Families Citing this family (99)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7138262B1 (en) 2000-08-18 2006-11-21 Shire Human Genetic Therapies, Inc. High mannose proteins and methods of making high mannose proteins
AU2002311919B8 (en) 2001-05-11 2007-03-22 Ludwig Institute For Cancer Research Ltd Specific binding proteins and uses thereof
US20100056762A1 (en) 2001-05-11 2010-03-04 Old Lloyd J Specific binding proteins and uses thereof
US20160279239A1 (en) 2011-05-02 2016-09-29 Immunomedics, Inc. Subcutaneous administration of anti-cd74 antibody for systemic lupus erythematosus and autoimmune disease
US8658773B2 (en) 2011-05-02 2014-02-25 Immunomedics, Inc. Ultrafiltration concentration of allotype selected antibodies for small-volume administration
US20110166319A1 (en) * 2005-02-11 2011-07-07 Immunogen, Inc. Process for preparing purified drug conjugates
US20160355591A1 (en) 2011-05-02 2016-12-08 Immunomedics, Inc. Subcutaneous anti-hla-dr monoclonal antibody for treatment of hematologic malignancies
CA2620343C (en) 2005-08-24 2013-01-08 Immunogen, Inc. Process for preparing antibody maytansinoid conjugates
US7741446B2 (en) 2006-08-18 2010-06-22 Armagen Technologies, Inc. Fusion antibodies that cross the blood-brain barrier in both directions
US7767206B2 (en) 2006-10-02 2010-08-03 Amgen Inc. Neutralizing determinants of IL-17 Receptor A and antibodies that bind thereto
EP2126127B1 (en) * 2007-01-25 2016-09-28 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Use of anti-egfr antibodies in treatment of egfr mutant mediated disease
ES2542152T3 (es) * 2007-03-15 2015-07-31 Ludwig Institute For Cancer Research Ltd. Método de tratamiento que emplea anticuerpos de EGFR e inhibidores de Src y formulaciones relacionadas
CA3184105A1 (en) 2007-07-27 2009-02-05 Armagen Inc. Methods and compositions for increasing alpha-l-iduronidase activity in the cns
ES2609915T3 (es) 2007-08-14 2017-04-25 Ludwig Institute For Cancer Research Ltd. Anticuerpo monoclonal 175 direccionado al receptor de EGF y derivados y usos del mismo
US8883146B2 (en) 2007-11-30 2014-11-11 Abbvie Inc. Protein formulations and methods of making same
PE20091174A1 (es) 2007-12-27 2009-08-03 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Formulacion liquida con contenido de alta concentracion de anticuerpo
US8454960B2 (en) 2008-01-03 2013-06-04 The Scripps Research Institute Multispecific antibody targeting and multivalency through modular recognition domains
CA2711256C (en) 2008-01-03 2019-01-15 The Scripps Research Institute Antibody targeting through a modular recognition domain
US8557243B2 (en) 2008-01-03 2013-10-15 The Scripps Research Institute EFGR antibodies comprising modular recognition domains
US8574577B2 (en) 2008-01-03 2013-11-05 The Scripps Research Institute VEGF antibodies comprising modular recognition domains
US8557242B2 (en) 2008-01-03 2013-10-15 The Scripps Research Institute ERBB2 antibodies comprising modular recognition domains
WO2010005725A2 (en) 2008-06-16 2010-01-14 Bind Biosciences, Inc. Therapeutic polymeric nanoparticles comprising vinca alkaloids and methods of making and using same
DK2774608T3 (da) 2008-06-16 2020-01-13 Pfizer Lægemiddelladede polymere nanopartikler og fremgangsmåder til fremstilling og anvendelse deraf
WO2010005726A2 (en) * 2008-06-16 2010-01-14 Bind Biosciences Inc. Therapeutic polymeric nanoparticles with mtor inhibitors and methods of making and using same
TW201032826A (en) * 2008-11-17 2010-09-16 Genentech Inc Method and formulation for reducing aggregation of a macromolecule under physiological conditions
AU2009319856A1 (en) * 2008-11-28 2010-06-03 Abbvie Inc. Stable antibody compositions and methods for stabilizing same
US8563041B2 (en) * 2008-12-12 2013-10-22 Bind Therapeutics, Inc. Therapeutic particles suitable for parenteral administration and methods of making and using same
WO2010075072A2 (en) * 2008-12-15 2010-07-01 Bind Biosciences Long circulating nanoparticles for sustained release of therapeutic agents
ES2971720T3 (es) 2009-01-09 2024-06-06 Seagen Inc Regímenes de dosificación para conjugados anticuerpo-fármaco anti-CD30 vc-PAB-MMAE
WO2010108048A2 (en) 2009-03-18 2010-09-23 Armagen Technologies, Inc. Compositions and methods for blood-brain barrier delivery of igg-decoy receptor fusion proteins
UY32560A (es) 2009-04-29 2010-11-30 Bayer Schering Pharma Ag Inmunoconjugados de antimesotelina y usos de los mismos
JP2012526121A (ja) * 2009-05-04 2012-10-25 アボツト・バイオテクノロジー・リミテツド ヒト抗ｔｎｆアルファ抗体の安定した高蛋白質濃度製剤
US11020363B2 (en) 2009-05-29 2021-06-01 Cydex Pharmaceuticals, Inc. Injectable nitrogen mustard compositions comprising a cyclodextrin derivative and methods of making and using the same
BRPI1012301A2 (pt) 2009-05-29 2015-09-22 Cydex Pharmaceuticals Inc composições de melfalano injetáveis compreendendo um derivado de ciclodextrina e métodos de preparar e usar o mesmo
KR101947176B1 (ko) 2009-06-03 2019-02-12 이뮤노젠 아이엔씨 접합 방법
MX2012001268A (es) 2009-07-28 2012-09-12 Shire Human Genetic Therapies Composiciones y metodos para tratar enfermedad de gaucher.
US20110076232A1 (en) * 2009-09-29 2011-03-31 Ludwig Institute For Cancer Research Specific binding proteins and uses thereof
EP2485761B1 (en) 2009-10-09 2019-02-27 Armagen, Inc. Methods and compositions for increasing iduronate 2-sulfatase activity in the cns
EP2509634B1 (en) 2009-12-11 2019-03-06 Pfizer Inc Stable formulations for lyophilizing therapeutic particles
EA201290499A1 (ru) 2009-12-15 2013-01-30 Байнд Байосайенсиз, Инк. Композиции терапевтических полимерных наночастиц с высокой температурой стеклования и высокомолекулярными сополимерами
PE20121691A1 (es) 2010-01-15 2012-12-14 Kirin Amgen Inc Formulacion de anticuerpos y regimenes terapeuticos
RU2573994C2 (ru) 2010-02-10 2016-01-27 Иммьюноджен, Инк Антитела против cd20 и их применение
SG10201903166PA (en) 2010-03-01 2019-05-30 Bayer Healthcare Llc Optimized monoclonal antibodies against tissue factor pathway inhibitor (tfpi)
CN106983862A (zh) * 2010-03-22 2017-07-28 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 对于稳定含有蛋白质的制剂有用的组合物和方法
US20120100166A1 (en) 2010-07-15 2012-04-26 Zyngenia, Inc. Ang-2 Binding Complexes and Uses Thereof
CA2810734A1 (en) 2010-09-17 2012-03-22 Baxter International Inc. Stabilization of immunoglobulins through aqueous formulation with histidine at weak acidic to neutral ph
NZ609469A (en) 2010-11-11 2015-02-27 Abbvie Biotechnology Ltd Improved high concentration anti-tnfα antibody liquid formulations
EP2672982B1 (en) * 2011-02-09 2019-09-04 The Scripps Research Institute Ghrelin mimetic polypeptide hapten immunoconjugates having improved solubility and immunogenicity and methods of use thereof
EP2500035A1 (en) * 2011-03-15 2012-09-19 Icon Genetics GmbH Pharmaceutical formulation containing immunglobulin
CN103717262B (zh) 2011-03-29 2017-09-15 伊缪诺金公司 通过一步法制备类美登素抗体缀合物
US9220776B2 (en) 2011-03-31 2015-12-29 Merck Sharp & Dohme Corp. Stable formulations of antibodies to human programmed death receptor PD-1 and related treatments
CA2837169C (en) 2011-05-24 2021-11-09 Zyngenia, Inc. Multispecific complexes comprising angiopoietin-2-binding peptide and their uses
JO3625B1 (ar) 2011-09-22 2020-08-27 Amgen Inc بروتينات رابطة للأنتيجين cd27l
WO2013081706A1 (en) 2011-12-02 2013-06-06 Armagen Technologies, Inc. Methods and compositions for increasing arylsulfatase a activity in the cns
AR091069A1 (es) 2012-05-18 2014-12-30 Amgen Inc Proteinas de union a antigeno dirigidas contra el receptor st2
US9592297B2 (en) 2012-08-31 2017-03-14 Bayer Healthcare Llc Antibody and protein formulations
BR112015005940A2 (pt) 2012-09-17 2017-07-04 Bind Therapeutics Inc processo para a preparação de nanopartículas terapêuticas
WO2014055877A1 (en) 2012-10-04 2014-04-10 Immunogen, Inc. Use of a pvdf membrane to purify cell-binding agent cytotoxic agent conjugates
US9353150B2 (en) 2012-12-04 2016-05-31 Massachusetts Institute Of Technology Substituted pyrazino[1′,2′:1 ,5]pyrrolo[2,3-b]-indole-1,4-diones for cancer treatment
TW201425336A (zh) 2012-12-07 2014-07-01 Amgen Inc Ｂｃｍａ抗原結合蛋白質
EP2948478B1 (en) 2013-01-25 2019-04-03 Amgen Inc. Antibodies targeting cdh19 for melanoma
MX2015011367A (es) 2013-03-13 2015-12-16 Seattle Genetics Inc Ciclodextrina y formulaciones de conjugados anticuerpo-farmaco.
EP3424530A1 (en) 2013-03-15 2019-01-09 Zyngenia, Inc. Multivalent and monovalent multispecific complexes and their uses
PL3971212T3 (pl) 2013-05-30 2024-05-27 Kiniksa Pharmaceuticals, Ltd. Białka wiążące antygen receptora onkostatyny m
TW201605896A (zh) 2013-08-30 2016-02-16 安美基股份有限公司 Gitr抗原結合蛋白
LT3060256T (lt) * 2013-10-25 2019-07-10 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Nauja stabili kompozicija
KR102372245B1 (ko) 2013-11-21 2022-03-08 젠맵 에이/에스 항체-약물 접합체 동결건조 제제
MY178189A (en) 2014-03-14 2020-10-06 Pfizer Therapeutic nanoparticles comprising a therapeutic agent and methods of making and using same
JP2015209384A (ja) * 2014-04-24 2015-11-24 ミレニアム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッドＭｉｌｌｅｎｎｉｕｍ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ， Ｉｎｃ． 医薬製剤
US10538589B2 (en) 2015-01-14 2020-01-21 Armagen Inc. Methods and compositions for increasing N-acetylglucosaminidase (NAGLU) activity in the CNS using a fusion antibody comprising an anti-human insulin receptor antibody and NAGLU
WO2016180941A1 (en) * 2015-05-13 2016-11-17 Sanofi Liquid compositions for anti-cd19 antibody-drug conjugates
KR101873201B1 (ko) 2015-06-11 2018-07-02 주식회사 제넥신 변형된 인터루킨-7 단백질 및 이의 용도
CA2997444A1 (en) 2015-09-29 2017-04-06 Amgen Inc. Asgr inhibitors for reducing cholesterol levels
KR102386735B1 (ko) * 2015-11-06 2022-04-14 주식회사 제넥신 변형된 인터루킨-7 융합 단백질의 제형
FI3380525T3 (fi) * 2015-11-25 2024-01-30 Immunogen Inc Lääkeformulaatioita ja niiden käyttömenetelmiä
US11708399B2 (en) 2015-12-04 2023-07-25 Genexine, Inc. Pharmaceutical composition comprising immunoglobulin Fc-fused interleukin-7 fusion protein for preventing or treating human papillomavirus-caused diseases
CN108697764A (zh) 2015-12-04 2018-10-23 格纳西尼有限公司 含有免疫球蛋白fc融合白细胞介素-7融合蛋白的用于预防或治疗流感病毒感染的药物组合物
EP3397287A1 (en) 2015-12-30 2018-11-07 Genentech, Inc. Formulations with reduced degradation of polysorbate
BR112018014277A2 (pt) 2016-01-13 2018-12-18 Genmab As formulação, e, método de preparação de uma solução injetável de um axl-adc
US10918627B2 (en) 2016-05-11 2021-02-16 Massachusetts Institute Of Technology Convergent and enantioselective total synthesis of Communesin analogs
CN109952375B (zh) 2016-11-18 2022-11-18 安斯泰来制药株式会社 新型抗人MUC1抗体Fab片段
US20210330801A1 (en) * 2017-03-02 2021-10-28 Cadila Healthcare Limited Novel protein drug conjugate formulation
WO2018187074A1 (en) 2017-04-03 2018-10-11 Immunomedics, Inc. Subcutaneous administration of antibody-drug conjugates for cancer therapy
MX2019013072A (es) 2017-05-02 2019-12-16 Merck Sharp & Dohme Formulaciones de anticuerpos anti-lag3 y coformulaciones de anticuerpos anti-lag3 y anticuerpos anti-pd-1.
JOP20190260A1 (ar) 2017-05-02 2019-10-31 Merck Sharp & Dohme صيغ ثابتة لأجسام مضادة لمستقبل الموت المبرمج 1 (pd-1) وطرق استخدامها
US11932650B2 (en) 2017-05-11 2024-03-19 Massachusetts Institute Of Technology Potent agelastatin derivatives as modulators for cancer invasion and metastasis
TWI795415B (zh) 2017-07-07 2023-03-11 日商安斯泰來製藥股份有限公司 新穎的抗人類ＣＥＡＣＡＭ５抗體Ｆａｂ片段
AU2018320470A1 (en) * 2017-08-23 2020-02-13 Daiichi Sankyo Company, Limited Antibody-drug conjugate preparation and lyophilization for same
WO2019044947A1 (ja) 2017-08-31 2019-03-07 第一三共株式会社 抗体－薬物コンジュゲートの改良製造方法
US10640508B2 (en) 2017-10-13 2020-05-05 Massachusetts Institute Of Technology Diazene directed modular synthesis of compounds with quaternary carbon centers
GB201719447D0 (en) 2017-11-23 2018-01-10 Ucb Biopharma Sprl Pharmaceutical composition
US11648317B2 (en) * 2018-04-13 2023-05-16 Genentech, Inc. Stable anti-CD79B immunoconjugate formulations
SG11202103670XA (en) * 2018-10-10 2021-05-28 Astellas Pharma Inc Pharmaceutical composition containing tagged site-antihuman antibody fab fragment complex
CA3129901A1 (en) 2019-02-18 2020-08-27 Eli Lilly And Company Therapeutic antibody formulation
US20220211849A1 (en) * 2019-04-18 2022-07-07 Janssen Biotech, Inc. Sialylated glycoproteins
WO2020234114A1 (en) 2019-05-21 2020-11-26 Bayer Aktiengesellschaft A novel stable high concentration formulation for anetumab ravtansine
WO2020247054A1 (en) 2019-06-05 2020-12-10 Massachusetts Institute Of Technology Compounds, conjugates, and compositions of epipolythiodiketopiperazines and polythiodiketopiperazines and uses thereof
CN111879930A (zh) * 2020-08-04 2020-11-03 上海艾瑞德生物科技有限公司 肌酸激酶同工酶mb检测试剂盒及其制备方法
KR20230066149A (ko) * 2020-08-07 2023-05-12 포티스 테라퓨틱스, 인크. Cd46을 표적화하는 면역접합체 및 이의 사용 방법

Family Cites Families (63)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3890238A (en) * 1972-12-21 1975-06-17 Basf Wyandotte Corp Water solubility of polyoxyalkylene polymers
US3896111A (en) 1973-02-20 1975-07-22 Research Corp Ansa macrolides
US4151042A (en) 1977-03-31 1979-04-24 Takeda Chemical Industries, Ltd. Method for producing maytansinol and its derivatives
US4563304A (en) 1981-02-27 1986-01-07 Pharmacia Fine Chemicals Ab Pyridine compounds modifying proteins, polypeptides or polysaccharides
US4597966A (en) * 1985-01-09 1986-07-01 Ortho Diagnostic Systems, Inc. Histidine stabilized immunoglobulin and method of preparation
GB8607679D0 (en) 1986-03-27 1986-04-30 Winter G P Recombinant dna product
US5225539A (en) 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
US5208020A (en) 1989-10-25 1993-05-04 Immunogen Inc. Cytotoxic agents comprising maytansinoids and their therapeutic use
US5196193A (en) 1989-10-31 1993-03-23 Ophidian Pharmaceuticals, Inc. Antivenoms and methods for making antivenoms
US5545806A (en) 1990-08-29 1996-08-13 Genpharm International, Inc. Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
EP0814159B1 (en) 1990-08-29 2005-07-27 GenPharm International, Inc. Transgenic mice capable of producing heterologous antibodies
EP0563475B1 (en) 1992-03-25 2000-05-31 Immunogen Inc Cell binding agent conjugates of derivatives of CC-1065
US5639641A (en) 1992-09-09 1997-06-17 Immunogen Inc. Resurfacing of rodent antibodies
IL111748A0 (en) 1993-12-03 1995-01-24 Zeneca Ltd Proteins
US6265150B1 (en) 1995-06-07 2001-07-24 Becton Dickinson & Company Phage antibodies
US6267958B1 (en) * 1995-07-27 2001-07-31 Genentech, Inc. Protein formulation
CN100360184C (zh) * 1995-07-27 2008-01-09 基因技术股份有限公司 稳定等渗的冻干蛋白质制剂
US5714352A (en) 1996-03-20 1998-02-03 Xenotech Incorporated Directed switch-mediated DNA recombination
US6306393B1 (en) 1997-03-24 2001-10-23 Immunomedics, Inc. Immunotherapy of B-cell malignancies using anti-CD22 antibodies
DE69810481T2 (de) * 1997-06-13 2003-09-25 Genentech Inc Stabilisierte antikörperformulierung
US6171586B1 (en) 1997-06-13 2001-01-09 Genentech, Inc. Antibody formulation
NZ508873A (en) 1998-07-13 2003-10-31 Univ Texas Cancer treatment methods using therapeutic conjugates that bind to aminophospholipids
PT2283867E (pt) 1999-06-25 2014-08-29 Immunogen Inc Métodos de tratamento usando conjugados de anticorpo antierbb- maitansinóide
CN100540651C (zh) 1999-09-22 2009-09-16 钟渊化学工业株式会社 新的面包酵母和含有该酵母的面团
CA2385528C (en) 1999-10-01 2013-12-10 Immunogen, Inc. Compositions and methods for treating cancer using immunoconjugates and chemotherapeutic agents
ES2309012T3 (es) 1999-10-29 2008-12-16 Genentech, Inc. Composiciones del anticuerpo anti-psca y a sus procedimientos contra celulas cancerigenas que expresen psca.
US6824780B1 (en) 1999-10-29 2004-11-30 Genentech, Inc. Anti-tumor antibody compositions and methods of use
US20020028178A1 (en) 2000-07-12 2002-03-07 Nabil Hanna Treatment of B cell malignancies using combination of B cell depleting antibody and immune modulating antibody related applications
DK1242401T3 (da) 1999-11-24 2007-05-07 Immunogen Inc Cytotoksiske midler, der omfatter taxaner, og den terapeutiske anvendelse deraf
PT1242438E (pt) 1999-12-29 2007-02-28 Immunogen Inc Agentes citotóxicos compreendendo dixorrubicinas e daunorrubicinas modificadas e seu uso terapêutico
EP1257289A1 (en) 2000-02-08 2002-11-20 The Penn State Research Foundation Immunotherapy using interleukin 13 receptor subunit alpha 2
US7097840B2 (en) * 2000-03-16 2006-08-29 Genentech, Inc. Methods of treatment using anti-ErbB antibody-maytansinoid conjugates
US6875441B2 (en) 2000-06-26 2005-04-05 Rxkinetix, Inc. Composition for delivery of hematopoietic growth factor
JP5485489B2 (ja) 2000-08-11 2014-05-07 中外製薬株式会社 抗体含有安定化製剤
US6333410B1 (en) 2000-08-18 2001-12-25 Immunogen, Inc. Process for the preparation and purification of thiol-containing maytansinoids
US6596503B1 (en) 2000-08-18 2003-07-22 East Carolina University Monoclonal antibody DS6, tumor-associated antigen CA6, and methods of use thereof
NZ527283A (en) 2001-01-29 2006-03-31 Biogen Idec Inc Modified antibodies and methods of use
EP1392361A4 (en) 2001-05-11 2009-08-05 Univ Texas THERAPY BASED ON ANTI-CD26 MONOCLONAL ANTIBODIES AGAINST DISORDERS ASSOCIATED WITH CELLS EXPRESSING CD26
US6441163B1 (en) 2001-05-31 2002-08-27 Immunogen, Inc. Methods for preparation of cytotoxic conjugates of maytansinoids and cell binding agents
CA2454587C (en) * 2001-07-25 2012-11-13 Protein Design Labs, Inc. Stable lyophilized pharmaceutical formulation of igg antibodies
WO2003039485A2 (en) * 2001-11-08 2003-05-15 Protein Design Labs Stable liquid pharmaceutical formulation of igg antibodies
US6716821B2 (en) 2001-12-21 2004-04-06 Immunogen Inc. Cytotoxic agents bearing a reactive polyethylene glycol moiety, cytotoxic conjugates comprising polyethylene glycol linking groups, and methods of making and using the same
AU2003201824A1 (en) 2002-01-03 2003-07-24 Smithkline Beecham Corporation Methods for preparing immunoconjugates
US6756397B2 (en) 2002-04-05 2004-06-29 Immunogen, Inc. Prodrugs of CC-1065 analogs
US6596757B1 (en) 2002-05-14 2003-07-22 Immunogen Inc. Cytotoxic agents comprising polyethylene glycol-containing taxanes and their therapeutic use
WO2003099320A1 (en) * 2002-05-24 2003-12-04 Zensun (Shanghai) Sci-Tech.Ltd Neuregulin based methods and compositions for treating viral myocarditis and dilated cardiomyopathy
US6982253B2 (en) * 2002-06-05 2006-01-03 Supergen, Inc. Liquid formulation of decitabine and use of the same
US7132100B2 (en) * 2002-06-14 2006-11-07 Medimmune, Inc. Stabilized liquid anti-RSV antibody formulations
AU2003251592A1 (en) * 2002-06-21 2004-01-06 Biogen Idec Inc. Buffered formulations for concentrating antibodies and methods of use thereof
JP2005532395A (ja) * 2002-07-02 2005-10-27 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション 新規な安定処方
US20040126379A1 (en) * 2002-08-21 2004-07-01 Boehringer Ingelheim International Gmbh Compositions and methods for treating cancer using cytotoxic CD44 antibody immunoconjugates and chemotherapeutic agents
EP1391213A1 (en) * 2002-08-21 2004-02-25 Boehringer Ingelheim International GmbH Compositions and methods for treating cancer using maytansinoid CD44 antibody immunoconjugates and chemotherapeutic agents
US20040247588A1 (en) 2002-08-28 2004-12-09 Johnson Robert E. Formulations of modified antibodies and methods of making the same
EP1578394A4 (en) 2002-12-31 2011-02-23 Nektar Therapeutics ANTIBODY PARTICLES AND COMPOSITIONS
EP1589996A4 (en) 2003-01-30 2009-01-21 Medimmune Inc ANTI-INTEGRIN ALPHA BETA 3 ANTIBODY FORMULATIONS AND ITS USES
US7262045B2 (en) 2003-02-25 2007-08-28 Medimmune Vaccines, Inc. Methods of producing influenza vaccine compositions
EP1626740B1 (en) * 2003-05-14 2014-08-20 ImmunoGen, Inc. Drug conjugate composition
GB0317509D0 (en) * 2003-07-25 2003-08-27 Pfizer Ltd Nicotinamide derivatives useful as PDE4 inhibitors
US7404957B2 (en) * 2003-08-29 2008-07-29 Aerovance, Inc. Modified IL-4 mutein receptor antagonists
TW200517114A (en) * 2003-10-15 2005-06-01 Combinatorx Inc Methods and reagents for the treatment of immunoinflammatory disorders
DE10361599A1 (de) 2003-12-24 2005-07-28 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Flüssigformulierung von Antikörperkonjugaten
WO2005065709A2 (de) 2003-12-24 2005-07-21 Boehringer Ingelheim International Gmbh Gefriergetrocknete formulierung von antikörperkonjugaten

Also Published As

Publication number Publication date
NZ564843A (en) 2012-05-25
AU2006278573A1 (en) 2007-02-15
CA2615122A1 (en) 2007-02-15
EP1917030A2 (en) 2008-05-07
JP6389446B2 (ja) 2018-09-12
KR101566393B1 (ko) 2015-11-05
JP2012211163A (ja) 2012-11-01
WO2007019232A3 (en) 2007-06-28
NZ623901A (en) 2015-10-30
NZ599176A (en) 2014-04-30
MX2008001492A (es) 2008-04-04
KR20080033324A (ko) 2008-04-16
EA014513B1 (ru) 2010-12-30
ECSP088159A (es) 2008-03-26
WO2007019232A2 (en) 2007-02-15
MX336033B (es) 2016-01-07
IL188733A (en) 2015-05-31
JP2009503105A (ja) 2009-01-29
US9114179B2 (en) 2015-08-25
EP1917030A4 (en) 2011-03-09
IL188733A0 (en) 2008-08-07
JP2016020359A (ja) 2016-02-04
NO20080612L (no) 2008-04-30
EA200800233A1 (ru) 2008-08-29
US20070031402A1 (en) 2007-02-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP6389446B2 (ja) 免疫複合体製剤
AU2006213662B2 (en) Process for preparing stable drug conjugates
JP5980989B2 (ja) 有効なコンジュゲートおよび親水性リンカー
ES2390826T3 (es) Procedimiento para preparar conjugados de fármaco purificados
ES2404304T3 (es) Conjugados de maitansinoide DM1 con anticuerpo trastuzumab, unidos mediante un conector no escindible, y su uso en el tratamiento de tumores
US20160045616A1 (en) Process for preparing purified drug conjugates
JP2008538365A (ja) 腫瘍内の不均一または混合細胞集団を排除する方法
NO342209B1 (no) Legemiddelkonjugatblanding og andvendelse derav, samt innpakket sammensetning
CN101237881B (zh) 免疫偶联物剂型
AU2012211479B2 (en) Immunoconjugate formulations
BR112013025225B1 (pt) Preparação de conjugados de anticorpo de maitansinoide por processo de uma etapa

Legal Events

Date Code Title Description
B06F Objections, documents and/or translations needed after an examination request according [chapter 6.6 patent gazette]
B25G Requested change of headquarter approved

Owner name: IMMUNOGEN, INC. (US)

Free format text: ENDERECO DO DEPOSITANTE ALTERADO CONFORME SOLICITADO NA PETICAO NO 020110101858/RJ DE 30/09/2011.

B07D Technical examination (opinion) related to article 229 of industrial property law [chapter 7.4 patent gazette]

Free format text: DE ACORDO COM O ARTIGO 229-C DA LEI NO 10196/2001, QUE MODIFICOU A LEI NO 9279/96, A CONCESSAO DA PATENTE ESTA CONDICIONADA A ANUENCIA PREVIA DA ANVISA. CONSIDERANDO A APROVACAO DOS TERMOS DO PARECER NO 337/PGF/EA/2010, BEM COMO A PORTARIA INTERMINISTERIAL NO 1065 DE 24/05/2012, ENCAMINHA-SE O PRESENTE PEDIDO PARA AS PROVIDENCIAS CABIVEIS.

B07E Notification of approval relating to section 229 industrial property law [chapter 7.5 patent gazette]

Free format text: NOTIFICACAO DE ANUENCIA RELACIONADA COM O ART 229 DA LPI

B07A Application suspended after technical examination (opinion) [chapter 7.1 patent gazette]
B09B Patent application refused [chapter 9.2 patent gazette]
B09B Patent application refused [chapter 9.2 patent gazette]

Free format text: MANTIDO O INDEFERIMENTO UMA VEZ QUE NAO FOI APRESENTADO RECURSO DENTRO DO PRAZO LEGAL