BG66485B1 - Щам lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus с широк спектър на приложение - Google Patents

Щам lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus с широк спектър на приложение Download PDF

Info

Publication number
BG66485B1
BG66485B1 BG109699A BG10969906A BG66485B1 BG 66485 B1 BG66485 B1 BG 66485B1 BG 109699 A BG109699 A BG 109699A BG 10969906 A BG10969906 A BG 10969906A BG 66485 B1 BG66485 B1 BG 66485B1
Authority
BG
Bulgaria
Prior art keywords
strain
delbrueckii subsp
bulgaricus
lactobacillus delbrueckii
product
Prior art date
Application number
BG109699A
Other languages
English (en)
Other versions
BG109699A (bg
Inventor
Мария БАЛТАДЖИЕВА
Original Assignee
Мария БАЛТАДЖИЕВА
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Мария БАЛТАДЖИЕВА filed Critical Мария БАЛТАДЖИЕВА
Priority to BG109699A priority Critical patent/BG66485B1/bg
Priority to AT07719227T priority patent/ATE536102T1/de
Priority to EP07719227A priority patent/EP2076139B1/en
Priority to PCT/BG2007/000004 priority patent/WO2008043161A1/en
Publication of BG109699A publication Critical patent/BG109699A/bg
Publication of BG66485B1 publication Critical patent/BG66485B1/bg

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23CDAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C19/00Cheese; Cheese preparations; Making thereof
    • A23C19/02Making cheese curd
    • A23C19/05Treating milk before coagulation; Separating whey from curd
    • A23C19/054Treating milk before coagulation; Separating whey from curd using additives other than acidifying agents, NaCl, CaCl2, dairy products, proteins, fats, enzymes or microorganisms
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23CDAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C9/00Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/12Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
    • A23C9/123Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
    • A23C9/1238Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt using specific L. bulgaricus or S. thermophilus microorganisms; using entrapped or encapsulated yoghurt bacteria; Physical or chemical treatment of L. bulgaricus or S. thermophilus cultures; Fermentation only with L. bulgaricus or only with S. thermophilus
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/135Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74Bacteria
    • A61K35/741Probiotics
    • A61K35/744Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/747Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205Bacterial isolates
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11Lactobacillus
    • A23V2400/137Delbrueckii
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12RINDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/225Lactobacillus

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Dairy Products (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

Изобретението се отнася до щам Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus, регистриран в НБПМКК под № 8481, с широк спектър на приложение. По-специално, щамът съгласно изобретението, е приложим за получаване на продукти от фармацевтичен и хранителен тип като профилактични, терапевтични и лечебни средства с благоприятно влияние върху човешкия организъм.@

Description

(54) ЩАМ LACTOBACILLUS DELBRUECKII SUBSP. BULGARICUS C ШИРОК СПЕКТЪР HA ПРИЛОЖЕНИЕ
Област на техниката
Изобретението се отнася до щам Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus c широк спектър на приложение, по-специално до щам Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus, регистриран в НБПМКК под № 8481 за получаване на продукти от фармацевтичен и хранителен тип като профилактични, терапевтични и лечебни средства с благоприятно въздействие върху човешкия организъм.
Предшестващо състояние на техниката
Изследванията върху присъщите за човешката храносмилателна система микроорганизми - Lactobacillus, Streptococcus, Bifidobacterium или Enterococcus, показват благоприятното им въздействие върху лактозния интолеранс, серумния холестерол, имунната система, както и способността им да оказват контрол върху инфекции чрез поддържане на здравословен баланс на чревната микрофлора/1/. Същевременно, в много случаи липсват достатъчно статистически достоверни експериментални данни за здравословния ефект на комерсиалните микроорганизми. Основните технически проблеми в тази насока се състоят в подбирането на такива щамове млечнокисели бактерии, с които да могат да се получават продукти, които да са с подходящи органолептични качества и същевременно да оказват ясно изразени диетични, профилактични и терапевтични свойства.
Известно е от патенти UA 63201, UA 63202, UA 64163, че щам Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus 9702, при специфични методи на култивиране води до получаване на биологично активно вещество с хепатопротективни, гастроентерологични и имуномодулиращи свойства. Конкретни данни от клинични изследвания в подкрепа на това твърдение, обаче, не са приведени.
Известно е също от патенти BG 63961, BG 63962 и BG 63963, че конкретни щамове Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus, прилагани в комбинация с конкретни щамове микроорганизми от вида Streptococcus thermophilus при конкретни съотношения, са основа за закваски за българско кисело мляко и други млечнокисели продукти.
Известни са също възможни приложения 5 на щамове Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus в комбинация с различни природни продукти. Така например патент BG 61476 третира възможността от комбиниране на биологично активно вещество, продуцирано от културална течност на щам Lacto10 bacillus delbrueckii subsp. bulgaricus и природни продукти като метарин, хидролизиран млечен казеин, ябълков пектин, балансиран витаминен комплекс, фруктоза, ментол, подсладители и минерални соли за получаване на хранителна 15 добавка.
При всички цитирани по-горе патентни документи, обаче, няма данни за устойчивост на микроорганизмите при различни технологични процеси; насоката на приложение на известните 20 щамове е ограничена до областта на млечнокиселите продукти; културите са изпитани само на млечнокисела база; липсват конкретни данни за развитието им при сирищна и сирищнокиселинна ферментация, което ограничава 25 приложението им само в областта на киселомлечните продукти; липсват конкретни данни за съхраняване на активността на щамовете при различни условия и среди; диапазона на действието им е лимитиран до ограничено време; 30 не са изяснени условията, при които има максимална продължителност на активното им състояние.
Техническа същност на изобретението $ Изобретението се отнася до щам Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus, регистриран в НБПМКК под № 8481 от 20.06.2006 г. с широк спектър на приложение, по-специално за получаване на продукти от фармацевтичен и 4θ хранителен тип като профилактични, терапевтични и лечебни средства с благоприятно въздействие върху човешкия организъм. Щамът е изолиран в района на Стара планина от свежо сирене от краве мляко, ферментирало пет дни, с последваща 45 селекция.
Морфологично щамът се характеризира с пръчковидни клетки със заоблени краища, разположени единично или групирани по двойки или на верижки. Формира бели, плътни колонии, 50 о не образува спори. Щамът е Грам (+), хомоферментативен, факултативен анаероб. Има широк температурен диапазон на развитие - от 35°С до 45°С и е устойчив при съхранение на 2°С до 11 месеца; устойчив е и при лиофилизация, което дава 5 преимуществото, че едновременно с възможността за получаване на стандартизиран продукт, се осигурява достатъчна концентрация на живи клетки в готовия за консумация продукт.
Щамът е каталазоотрицателен и разгражда 10 глюкозата на две молекули млечна киселина ацетилметилкарбинол, ацетоин и диацетил в съотношение 2:1:3; ферментира захарозата и фрукгозата до 60%, лактозата над 65%, манозата до 70%. Характерна особеност за щам Lactobacil- 15 lus delbrueckii subsp. bulgaricus, НБПМКК № 8481
66485 Bl е неговата висока посткиселиннообразуваща способност при сравнително висока активност на клетките при ниско pH (рН<4,0); произвежда широка гама метаболитни продукти, млечна киселина, аминокиселини и ензими с добре изразени протеолитични свойства; развива се много добре в среда мляко със сирищна и сирищнокиселинна коагулация и не се влияе от количеството на присъстващия калциев двухлорид.
Устойчив е на следните антибиотици: Penicylin, Gentamicin, Kanamycin, Streptomycin, Vancomycin, Erythromycin, Chloramphenicol, Quinupristin-Dalfopristin, Fusidic acid, Tetracyclin, Moxifloxacin, Linezolid, Ampicillin, Teicoplaninn др., илюстрирано c данните от приложената Таблица 1.
Табл. 1
Pen Amp Gm Km Sm Fus Tet Ven Tei Er Clor Un Moxi Q/D Ac Desoxi 2% pH-1
<0,0β <0,06 32 16 >64 >64 1 >1024 >32 1 16 <0,6 8 1 расте +
Съкращения: Pen- пеницилин; Amp- ампицилин; Gm- gentamicin; Km- kanamycin; Sm- streptomycin; Fusfusidic add; Tet- tetracyclin; Er- erythromydn; Clor-chloramphenicol; Lin- linezolid; Moxi- moxifloxacin; Q/Dquinupristin/dalfopristin; Van- vancomycin; Tei- teicoplanin;
Качествен анализ c конвенционални PCR (Polymerase chain reaction) и DGGE (Denaturing Gradients Gel Electrophoresis) тестове по отношение млечнокиселата микрофлора на фекални проби от доброволци, приели щама, показва положително нарастване до специфичното за щам Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus НБПМКК № 8481 ниво, съвпадащо с положителната контролна проба, получена от кисело мляко, заквасено с участието на изследвания щам. Това налага извода, че щамът проявява висока преживяемост в стомашночревния тракт (фиг. 1).
Щамът демонстрира преживяемост и при pH равно или по-голямо от 2, което е особено показателно за преживяемостта му в киселата стомашна среда. Експерименти с различни концентрации на жлъчна киселина показват добра преживяемост на щама при концентрация 2% (фиг. 2).
Количествените PCR изследвания относно инхибиращото въздействие на щам Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus, НБПМКК № 8481 върху патогенни микроорганизми от вида Bacteroides, Prevotella и Porphyromonas и Clostridium показват значително понижаване (до 58%) на техния брой в изпражненията на доброволци след прием на щама, а за Bacterius vulgaris процентното намаляване броя на бактериите възлиза на 41%.
Статистическата обработка на резултатите показва стойности на средното статистическо отклонение р<0.01. Последното се дължи на качеството на щам
Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus, НБПМКК № 8481 да продуцира бакгериоцини, които атакуват патогенната микрофлора в организма при различни възпалителни процеси.
Експерименталното определяне броят на късоверижни органични киселини във фекални проби на доброволци, приели щама, показва също така и намаляване съд ържанието на киселини като оцетна, пропионова и бутирова, които имат ефекта да стимулират растежа на чревния епител.
Клетките на щама показват висока
66485 Bl устойчивост на органични добавки в млечната среда като захари, плодови добавки, пектин, танин, витамини, оцветители и ароматизанти.
Описаните по-горе качествени характеристики дават възможност за широк спектър на приложение на щама, съгласно изобретението, както във вид намонокултура, така и като смесена култура с други микроорганизми за изготвяне на продукти от фармацевтичен и хранителен тип като профилактични, терапевтични и лечебни средства с благоприятно влияние върху гастроинтестиналния тракт и върху други органи и системи на човешкия организъм. Продуктите от фармацевтичен тип в качеството им на антихолестеролови и гериагрични препарати, както и препарати срещу умствена и физическа преумора, се изготвят като средства за орално приложение под форма на таблети, капсули, течни суспенсии, сухи орални добавки и други, със съдържание на живи клетки от щам Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus НБПМКК № 8481 между 2 х 109 и 2 х 1011.
Същото количество живи клетки от щама, съгласно изобретението, могат да бъдат включени като активна компонента при производството на разнообразни видове хранителни продукти като млечнокисели продукти, различни видове сирена - пресни, полутвърди и твърди, белтъчни концентрати, синбиотични продукти, продукти за детско хранене, сухи млечни продукти и др. Едновременно с това, щамът влияе благоприятно върху органолептичните качества на получаваните продукти, придавайки им специфичен аромат, дължащ се на активната му метаболитна дейност вследствие разграждането на лактозата; свойството да отделя ензими с протеолитични свойства води до получаване на млечнокисели напитки с хомогенна и вискозна консистенция и понижен синерезис; до подобряване консистенцията на сиренните продукти и по-специално тази на свежите и полутвърди сирена.
Свойството на щама да продуцира бакгериоцини дава възможност за приложението му под формата на продукти от фармацевтичен или хранителен тип като средство срещу патогенните микроорганизми в организма при различни възпалителни процеси, от една страна, а устойчивостта му на антибиотици позволява прилагането му успоредно с тях или като завършващ оздравителния процес фактор.
Пояснение на приложените фигури
Фигура 1 показва преживяемост на щам Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus, НБПМКК 2 № 8481 в среда с pH 2,0 - 3,0 за 180 min;
фигура 2 показва преживяемост на щам Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus, НБПМКК № 8481 в присъствие на жлъчна киселина с концентрация 2%.
Изобретението се илюстрира със следните примерни изпълнения, без да ограничават обхвата на неговото приложение.
Пример 1. Получаване на биологически чиста култура от щам Lactobacillus delbrueckii subsp. U bulgaricus, НБПМКК №8481
Щамът е изолиран от свежо сирене от краве мляко, ферментирало пет дни в района на Стара планина. Бактериалната култура се получава найнапред лабораторно, като за целта 1 g от продукта 20 се суспендира в 9 ml стерилен физиологичен разтвор, правят се многократни разреждания и от разреждане 107 се прави посявка върху MRS-arap среда за лактобацили. Култивирането се осъществява при температура 44-45°С в продължение на 2^ 48 h. Щамът е подбран от получените единични колонии. Той се препосява в 10 ml стерилно обезмаслено мляко до коагулация pH 4,8 за 6 h. От така получената първична култура се изготвят субкултури с цел повишаване броя на клетките от jq чистия щам до получаване на майчини култури, които по-нататък да се използват като инокулант при индустриалното получаване на бактериална култура от щам Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus НБПМКК № 8481.
2 Пример 2. Приложение на щам Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus, НБПМКК № 8481 за получаване на синбиотичен продукт.
Продуктът се предлага в два варианта - в течен и сух, лиофилизирана форма. За получаването 4Q му, 1001 мляко се обезмаслява до 0.05% масленост и се стерилизира на два етапа: при температура 105110°С за 30 min и при температура 119-125°С за 3 0 min, след което се охлажда до температура 45-47°С. Към охладеното мляко се добавят 2 kg 42 предварително приготвена култура, съставена от селекционирани щамове Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus, НБПМКК № 8481 в комбинация със Streptococcus thermophilus НБПМКК № 8357 (в съотношение 1:2) - две части, Lactobacillus aci20 dophilus НБПМКК № 8358 една част и Lactobacillus /I bifidus в три части. Инокулираното мляко ферментира при температурни режими както следва: етап I - при температура 45-47°С за 60 min; етап II - при 40- 4ГС за 30 min и етап III - при 37-38°С до достигане на pH 5,3 за получаване на течен 5 синбиотичен продукт. След това към продукта се добавят фруктово-захарни сиропи до достигане на сухо вещество 60%, бързо се охлажда до 20°С за 20 min, разфасова се в опаковки от по 30 ml и 50 ml и се съхранява при температура 3-4°С. 10
За получаване на сух синбиотичен продукт, коагулиралото мляко с pH 4,9-5,0 се подлага на двуетапно охлаждане: първи етап до 25°С за 20-25 min и втори етап - до 6-7°С за 15 до 20 min, след което се съхранява в продължение на 24 h при 15 температура от -38°С до -40°С и се суши по метода на лиофилно сушене до водно съдържание 4-6%. Пакетира се в опаковки от по 5,10 и 20 g.
Така полученият продукт е синбиотик (прои пребиотик), в който са включени пълноценно 20 протеиновите съставки на млякото, микроелементите, минералните соли и витамините. От друга страна, продуктът има гарантирана трайност при температура от +3°С до +4°С до 6 месеца, а при температура от -8°С до -10°С, 25 трайността нараства до 18 месеца.
Съдържанието на живи клетки в продукта наброява от 2,5x108 до 2x109, измерено по един от стандартните микробиологични методи за бактериално броене, известни на специалистите в 30 областта като този, описан от /son А. Р. and Matthew G. В. /2/.
Пример 3. Приложение на щам Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus НБПМКК № 8481 в стартерна култура за получаване на млечнокисел 35 пробиотичен продукт
За създаване на стартерната култура се създават две симбиотични групи, както следва: симбиотична култура от щам Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus, НБПМКК № 8481 и 40 щам Streptococcus thermophilus НБПМКК № 8357 в съотношение 1:2 се препосяват в продължение на 2,6 месеца до стабилизиране на симбиозата. След това, две части от симбиотичната двойка се смесват с една част от култура на Lactobacillus acidophillus 45 НБПМКК № 8358 и с оглед стабилизиране на културата се правят 16-кратни препосявания в обезмаслено краве мляко при температура 43 °C до коагулация на млякото за време 3 h. В резултат се получава продукт с бакгерийно съдържание средно 5 0
В1
2,8.109 Cfu/g. С оглед повишаване трайността и транспортируемостга на продукта, се провежда лиофилизиране, като за целта състоянието на активните клетки предварително се стабилизира в защитна среда, съдържаща сухо обезмаслено мляко, захароза, глюкоза, лактоза и малтоза с предварително охлаждане най-напред при температура 25°С за 20-25 min и след това при температура 6-7°С за 15-20 min, след което продуктът се съхранява за 24 h при температура от -38°С до -40°С и се лиофилизира до водно съдържание 4-6%. Съхранявани при температура 4-6°С, стартерните култури запазват активността си в продължение на 8 месеца, а при температура -10°С до -18°С запазва активността си 18 месеца.
Освен за получаване на традиционните млечнокисели продукти - кисело мляко и сирене, стартерната култура може да бъде използвана и директно в сухо състояние - насипно или под форма на таблетки, за нуждите на спортисти, диабетици като имуностимулатор, за възстановяване на болни и др. Сухият продукт показва много добър дерматологичен ефект и намира успешно приложение и в козметиката.
Пример 4. Приложение на щам Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus, НБПМКК № 8481 за получаване на млечнокисел пробиотичен продукт.
За получаване на млечнокисел пробиотичен продукт, 1000 1 сурово мляко - краве, биволско, козе или смес от тях, с киселинност 17°Т, окачествено съгласно стандарта, се загрява до температура 35°С и се пречиства чрез сепараторочистител. Нормализира се с обезмаслено краве мляко до масленост 2,3 и 3,6%, загрява се до температура 60°С и се хомогенизира при налягане 18 МРа, пастьоризира се при температура 97°С със задръжка 30 min и се охлажда до 44°С. При тази температура се добавя пектин в количество 0,25% и танин в количество 0,015%, разтворени във вода в съотношение 1:6, обработени термично за 10 min при 68°С. Млякото се заквасва с 2% закваска, състояща се от Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus, НБПМКК № 8481 и Streptococcus thermophilus НБПМКК № 8357 в съотношение 1:2 и се термостатира при 45°С до поява на видима коагулация. Коагулиралото мляко се оставя за междинно охлаждане за 40 min при 20°С и готовият продукт се съхранява при 4°С до реализацията му в търговската мрежа.
Млечнокиселият продукт, съгласно полезния модел, съдържа вещества с протекционни свойства спрямо тежки метали и притежава типичната органолептика и биологични свойства на традиционното кисело мляко. Това го прави 5 подходящ както за консумация от хора, работещи в среда с повишено съдържание на тежки метали, така и за нуждите на рационалното и профилактично хранене.
Пример 5. Приложение на щам Lactobacil- 10 lus delbrueckii subsp. bulgaricus НБПМКК № 8481 за получаване на биологично активен продукт.
Биологично активният млечнокисел продукт, съгласно настоящото примерно изпълнение, съдържа всички съставки на 15 суроватката и е обогатен с ценни метаболити от жизнената дейност на щам Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus НБПМКК № 8481 в подходяща комбинация с тези на лактозоферментиращи дрожди и билкови екстракти. 20
По-специално, биологично активният млечнокисел продукт включва суроватка, предварително пастьоризирана и заквасена със закваска от млечнокиселите бактерии Lactobacterium delbrueckii ssp. bulgaricus НБПМКК № 8481, 25 Streptococcus thermophilus НБПМКК № 8357 и лактозоферментиращи дрожди от типа Saccharomyces lactis в съотношение 4:2:1, билкови екстракти от видовете Teucrium chamaedrae (подьбиче), Flores chamomillae (цвят на лайка), Herba millefolium (бял 3 0 равнец), Hypericum perforatum (жълт кантарион) и Glycyrrhiza glabra (сладко коренче) в съотношение 2:1:1:1:3, захароза и стабилизатор. Получената смес се сгъстява до достигане на съдържание на сухо вещество 45% и готовият продукт се разфасова. 3 5
Микрофлората, съдържаща се в продукта позволява да се приема добре от деца, възрастни и стари хора, както и от болни, чиято ензимна система в храносмилателния тракт е нарушена от липсата на ензима лактаза. Съдържащите се в билковите 40 екстракти вещества - танин, азолеин и др. повишават стомашната секреция, подобряват храносмилането и оказват лечебно въздействие при гастроинтестинални заболявания.
Продуктът се комбинира благоприятно с 45 плодови сокове и плодови напитки. Специфичният аминокиселинен, протеинов и минерален състав му придават качества на хранителен радиопротектор.
Пример 6. Приложение на щам Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus НБПМКК № 8481 50
Bl като лечебен препарат за гастроинтестинални неразположения на деца и възрастни
На основата на ярко изявеното бактерицидно свойство на щам Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus НБПМКК № 8481 е разработен лечебен препарат за гастроинтестинални неразположения на деца и възрастни.
За целта 10001 краве мляко - обезмаслено до 0.5% се подлага на топлинна обработка до температура 105оС-110°С, охлажда се до температура 43°С, прибавят се 1% фруктоза и 0,3% калциеви соли, витамин А и D и Е, ароматизатори и оцветители съобразно ароматите, след което сместа се заквасва със закваска, съдържаща 2,5% от Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus НБПМКК № 8481 в комбинация със Streptococcus thermophillus НБПМКК № 8357 в съотношение 2:1.
Полученият млечнокисел продукт е с нежна консистенция, при разбиване - сметанообразна, с типичен млечнокисел вкус, но по-сладък в сравнение с обикновеното кисело мляко и специфичен аромат, дължащ се на диацетила, резултат от разграждането на глюкозата; микроскопската картина показва богато поле от пръчици с характерна морфология, запазващи жизнеността си в продължение на 30 дни при температура от 3°С до 6°С.
Биологичната стойност на продукта е повишена от съдържащите се ценни за организма метаболити от жизнената дейност щам на Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus НБПМКК № 8481, органични киселини, аминокиселини, ензими, витамини, микроелементи и др. Голяма част от лактозата в продукта е разградена до глюкоза и галакгоза, което позволява приемането му от деца, възрастни и от болни с лактазен дефицит. Участието на щама, съгласно изобретението, с характерната за него висока посткиселиннообразуваща способност води до повишаване на буферния капацитет и оказва бактериостатично действие, което обуславя не само високата съхраняемост на продукта, но и продължителната преживяемост и активност на полезната микрофлора.
Пример 7. Приложение на щам Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus НБПМКК № 8481 за получаване на пробиотично сирене
За получаване на пробиотично сирене, 100 1 мляко се загрявадо температура 45°С, пречиства
«.ο·»·;·:
66485 Bl се, нормализира се до съотношение казеин:мазнини от 0,65 до 0,68, пастьоризира се при температура 70-78°С със задръжка 20 min и се охлажда до температура 30-35°С. Киселинността на пастьоризираното и охладено до 34-37°С мляко се 5 повишава до достигане на 22-23°Т посредством 0.3-0.5% течна стартерна култура, представляваща смес от две групи щамове микроорганизми в съотношение 1:2, първата от които включва щам Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus НБПМКК 10 № 8481 и щам Streptococcus thermophilus НБПМКК № 8357 в съотношение 1:3, а втората включва Streptococcus lactis НБПМКК № 8482 и Lactobacillus casei в съотношение 1:2.
Към така обработеното мляко се прибавя 30 15 ml 50%-ен разтвор калциев двухлорид и сирищна мая в количество, достатъчно за получаване на коагулация за 8 до 11 min. Сместа от суроватка и сиренни зърна се нагрява от 37 до 40°С в продължение на 40 до 50 min. Сиренните зърна, 20 отделени от суроватката се насипват във форми за отцеждане и формуване. Обработката на получената сиренина се осъществява на два етапа в продължение на 60 min, като включва и частично осоляване на зърно, пресуването на сиренината 25 става в блок за време от 30 до 60 min с помощта на тежест от 1,0-1,2 kg/kg, а доосоляването се извършва в опаковките. Продуктът зрее при температура 12-14°С за 20 до 25 дни, след което се пакетира и съхранява при температура 4 до 6°С до момента на реализацията му в търговската мрежа.

Claims (3)

  1. Патентни претенции
    1. Щам Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus, регистриран в НБПМКК под № 8481 от 20.06.2006 г.
  2. 2. Приложение на биологически чиста култура съгласно претенция 1 за получаване на продукти от фармацевтичен и хранителен тип като профилактични, терапевтични и лечебни средства с благоприятно влияние върху човешкия организъм.
  3. 3. Продукти от фармацевтичен и хранителен тип съгласно претенции 1 и 2, характеризиращи се с това, че включват от 2,5 х 109 до 2 х 1011 живи клетки на биологически чиста култура от щам Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus, регистриран в НБПМКК под № 8481 от 20.06.2006 г.
BG109699A 2006-10-09 2006-10-09 Щам lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus с широк спектър на приложение BG66485B1 (bg)

Priority Applications (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
BG109699A BG66485B1 (bg) 2006-10-09 2006-10-09 Щам lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus с широк спектър на приложение
AT07719227T ATE536102T1 (de) 2006-10-09 2007-03-14 Probiotischer stamm von lactobacillus delbrueckii subsp bulgaricus
EP07719227A EP2076139B1 (en) 2006-10-09 2007-03-14 Probiotic strain lactobacillus delbrueckii subsp . bulgaricus
PCT/BG2007/000004 WO2008043161A1 (en) 2006-10-09 2007-03-14 Probiotic strain lactobacillus delbrueckii subsp . bulgaricus

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
BG109699A BG66485B1 (bg) 2006-10-09 2006-10-09 Щам lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus с широк спектър на приложение

Publications (2)

Publication Number Publication Date
BG109699A BG109699A (bg) 2008-04-30
BG66485B1 true BG66485B1 (bg) 2015-03-31

Family

ID=38196589

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BG109699A BG66485B1 (bg) 2006-10-09 2006-10-09 Щам lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus с широк спектър на приложение

Country Status (4)

Country Link
EP (1) EP2076139B1 (bg)
AT (1) ATE536102T1 (bg)
BG (1) BG66485B1 (bg)
WO (1) WO2008043161A1 (bg)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2229060A4 (en) * 2007-05-29 2012-02-08 Hipp & Co METHOD OF MANUFACTURING AND STORING A STARTER FOR A YOGHURTIC FERMENTED MILK PRODUCT MATSONI
ES2386914B1 (es) * 2011-02-09 2013-06-19 José Miguel De Las Heras Del Río Uso de una cepa de lactobacillus bulgaricus para el tratamiento de la inmunosenescencia.
PL226477B1 (pl) * 2013-12-20 2017-07-31 Inst Biotechnologii Przemysłu Rolno Spożywczego Im Prof Wacława Dąbrowskiego Nowy szczep bakterii Lactobacillus delbrueckii oraz jego zastosowanie do wytwarzania pierzgi
US20230000933A1 (en) * 2019-12-02 2023-01-05 Life Quality Institute, Inc. Agent for prevention or remediation of stress disorders and composition containing same

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BG27574A1 (bg) * 1977-12-06 1979-12-12 Baltadzhieva Enzimnorazgraden liofilizat i metod za poluchavaneto mu
US20040047849A1 (en) * 2002-09-11 2004-03-11 Genmont Biotech Inc. Use of some lactobacillus strains in treating allergy

Also Published As

Publication number Publication date
ATE536102T1 (de) 2011-12-15
BG109699A (bg) 2008-04-30
EP2076139B1 (en) 2011-12-07
EP2076139A1 (en) 2009-07-08
WO2008043161A1 (en) 2008-04-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Soccol et al. The potential of probiotics: a review.
Chandan Enhancing market value of milk by adding cultures
US20100166721A1 (en) Probotic compositions and uses thereof
CA2753083C (en) Symbiotic maple product compositions and methods
CA2690058A1 (en) Fermented probiotic beverages and uses thereof
US20070172547A1 (en) Antibacterial compositions
Araújo et al. Probiotics in dairy fermented products
CN112056398A (zh) 一种促进肠道蠕动的牦牛乳冻干酸奶块
CN111955548B (zh) 一种纯益生菌风味发酵乳及其制备方法
US8945641B2 (en) Use of gum arabic for improving the growth and survival of bifidobacteria
RU2720983C2 (ru) Способы приготовления ферментированных продуктов, включающих бифидобактерии
BG66485B1 (bg) Щам lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus с широк спектър на приложение
CN106858261A (zh) 一种用于果蔬汁发酵的乳酸菌发酵促进剂及其应用
RU2130269C1 (ru) Способ получения симбиотического кисломолочного продукта &#34;бифацил&#34;
RU2273662C2 (ru) Консорциум микроорганизмов пробиотического действия
RU2307514C1 (ru) Способ получения кисломолочного продукта типа йогурта
CN108991115A (zh) 一种发酵型合生元羊奶片及其制备方法
Shireeha et al. Development of symbiotic yoghurt
TW201815290A (zh) 優格發酵菌、全菌優格以及全菌優格之製造方法
RU2264114C1 (ru) Кисломолочный продукт и способ его получения
Salma et al. EFFECT OF CASEIN HYDROLYSATE ON THE QUALITY OF LOW FAT YOGURT
Senan et al. Acidophilus milk
CN106135410A (zh) 蜂蜜酸奶及其制备方法
RU2575103C2 (ru) Кисломолочный напиток
Fadawy et al. Improving the Functional Properties of Bio-yogurt by Adding Whey Protein Concentrate and Arabic Gum