WO2022014638A1 - ピリミジン化合物の結晶 - Google Patents

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compound
crystals
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fumaric acid
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浩之 中村
博義 山中
隆宏 浅井
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大鵬薬品工業株式会社
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    • C07B2200/13—Crystalline forms, e.g. polymorphs

Definitions

  • the present invention relates to crystals of a pyrimidine compound useful as an antitumor agent and a pharmaceutical composition containing the crystals.
  • HER2 (also called ErbB2) is a receptor tyrosine kinase belonging to the ErbB family. HER2 is considered to be a cancer-causing gene, and gene amplification, overexpression, mutation, etc. of HER2 have been reported in various cancers. From non-clinical and clinical research data, it can be seen that activation of HER2 and downstream signals plays an important role in the survival and proliferation of cancer cells in cancer cells with these HER2 gene abnormalities and overexpressions. It is considered (Non-Patent Document 1).
  • an inhibitor capable of controlling the kinase activity of HER2 exerts an antitumor effect by inhibiting HER2 and downstream signal transduction in cancer cells having HER2 gene amplification, overexpression, or mutation. Therefore, it is considered to be useful for the treatment, prolongation of life and improvement of QOL of cancer patients.
  • Non-Patent Documents 2 and 3 It has been reported that about 25-40% of lung cancers, about 15-30% of breast cancers, and a certain percentage of other cancers also cause brain metastasis. In fact, it has been reported that about 20-30% of HER2-positive breast cancers develop brain metastases (Non-Patent Document 4).
  • Non-Patent Document 5 As compounds having HER2 inhibitory activity, lapatinib, neratinib and the like have been approved as therapeutic agents for HER2-positive breast cancer. However, since both are substrates of p-gp and Bcrp, it has been reported that the brain transferability is limited in non-clinical studies (Non-Patent Document 5). In fact, in clinical trials of lapatinib and neratinib, sufficient effects on brain metastatic cancer have not been obtained (Non-Patent Documents 6, 7, 8 and 9). From the viewpoint of controlling pathological conditions including brain metastases, a HER2 inhibitor having an inhibitory activity on HER2 and also having brain metastasis is desired.
  • a compound when used as an active ingredient in a pharmaceutical product, the chemical and physical stability of the compound is to maintain stability and / or facilitate storage control. is required. Therefore, a HER2 inhibitor having chemical and physical stability, an inhibitory activity against HER2, and a brain transferability is desired.
  • An object of the present invention is to provide a HER2 inhibitor which has chemical and physical stability, has an inhibitory activity against HER2, and also has a brain transferability.
  • an object of the present invention is to provide a crystal of a HER2 inhibitor which is excellent in stability, has good oral absorbability, and can be obtained with good reproducibility.
  • crystals type I crystal and type II crystal
  • hydrochloric acid as a crystal with an acid (a salt crystal or a co-crystal).
  • Crystals type I crystals with hydrochloric acid, type II crystals with hydrochloric acid, type III crystals with hydrochloric acid
  • crystals with hydrobromic acid crystals with 1 equivalent of tartrate acid, crystals with fumaric acid (0.5 equivalent).
  • Type I crystal with fumaric acid type II crystal with 0.5 equivalent of fumaric acid
  • type I crystal with 1 equivalent of fumaric acid type II crystal with 1 equivalent of fumaric acid, 1 equivalent of fumaric acid
  • Type III crystal IV type crystal with 1 equivalent of fumaric acid, V type crystal with 1 equivalent of fumaric acid
  • crystal with succinic acid crystal with succinic acid.
  • free-form I-type crystals, free-form II-type crystals, 1-equivalent fumaric acid and II-type crystals, and 1-equivalent fumaric acid-based V-type crystals are non-moisture-absorbing and have excellent solid stability.
  • the present invention has been completed by finding an advantageous property in the manufacture of a pharmaceutical substance, and finding that it is excellent in oral absorbability.
  • the present invention includes the following embodiments.
  • the diffraction angles (2 ⁇ ⁇ 0.2 °) are 5.5 °, 6.8 °, 9.3 °, 13.4 °, 15.3 °, 16.3.
  • the crystal according to [6] which has peaks at °, 21.0 °, 22.5 °, 23.0 ° and 26.2 °.
  • the crystal according to [6] or [7] which is a crystal having a powder X-ray diffraction spectrum shown in FIG. [9]
  • the crystal according to any one of [6] to [9] wherein the purity of the crystal is 90% by mass or more.
  • [35] The crystal according to any one of [31] to [34], wherein the purity of the crystal is 90% by mass or more.
  • [36] A pharmaceutical composition containing the crystal according to any one of [1] to [35].
  • [37] A pharmaceutical composition for oral administration containing the crystal according to any one of [1] to [35].
  • [41] The crystal according to any one of [1] to [35] for use in treating a tumor.
  • the crystal according to any one of [1] to [35] for oral administration and use for treating a tumor [43] A method for treating a tumor, which comprises administering to a subject in need thereof an effective amount of the crystal according to any one of [1] to [35]. [44] Use of the crystal according to any one of [1] to [35] for producing a pharmaceutical composition. [45] Use of the crystal according to any one of [1] to [35] for producing an antitumor agent.
  • the free type II crystal and the type II crystal with 1 equivalent of fumaric acid are excellent in oral absorbability, and are a useful form when the compound is used as a drug substance for pharmaceuticals.
  • the I-type crystal with 1 equivalent of fumaric acid is in a form that can be isolated as a solid from acetone (solvent) (after isolation, it is dried to form a V-type crystal), so that it is V with 1 equivalent of fumaric acid. It is also useful as an intermediate in the production of type crystals.
  • a novel crystal of compound (I) or a novel crystal of compound (I) and an acid, a pharmaceutical composition containing the same, an antitumor agent, or an antitumor agent for oral administration is provided. ..
  • compound (I) a type II crystal with 1 equivalent of fumaric acid, a free form II crystal, a free form I crystal, a V type crystal with 1 equivalent of fumaric acid, 0.5 equivalent of fumaric acid.
  • the type I crystal with and the type II crystal with 0.5 equivalent of fumaric acid have at least one of advantageous properties in pharmaceutical production such as non-moisture absorption, acquisition reproducibility, solid stability, and oral absorbability.
  • the powder X-ray diffraction spectrum of the type II crystal with 1 equivalent of fumaric acid of the compound (I) obtained in Example 1 is shown (vertical axis represents intensity (counts), horizontal axis represents diffraction angle (2 ⁇ )). ..
  • the results of differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement (TG-DTA) of the type II crystal with 1 equivalent of fumaric acid of the compound (I) obtained in Example 1 are shown (the left vertical axis is the weight (mg) in the TG curve. ), The right vertical axis represents the heat flux ( ⁇ V) in the DTA curve, and the horizontal axis represents the temperature (° C.)).
  • the powder X-ray diffraction spectrum of the type II crystal of the compound (I) obtained in Example 2 is shown (the vertical axis represents the intensity (counts), and the horizontal axis represents the diffraction angle (2 ⁇ )).
  • the results of differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement (TG-DTA) of the type II crystal of the compound (I) obtained in Example 2 are shown (the left vertical axis is the weight (mg) in the TG curve, and the right vertical axis is the DTA.
  • the powder X-ray diffraction spectrum of the type I crystal of the compound (I) obtained in Example 3 is shown (the vertical axis represents the intensity (counts), and the horizontal axis represents the diffraction angle (2 ⁇ )).
  • the results of differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement (TG-DTA) of the type I crystal of the compound (I) obtained in Example 3 are shown (the left vertical axis is the weight (mg) in the TG curve, and the right vertical axis is the DTA.
  • the powder X-ray diffraction spectrum of the V-type crystal with 1 equivalent of fumaric acid of the compound (I) obtained in Example 4 is shown (vertical axis represents intensity (counts), horizontal axis represents diffraction angle (2 ⁇ )). ..
  • the results of differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement (TG-DTA) of the V-type crystal with 1 equivalent of fumaric acid of the compound (I) obtained in Example 4 are shown (the left vertical axis is the weight (mg) in the TG curve. ), The right vertical axis represents the heat flux ( ⁇ V) in the DTA curve, and the horizontal axis represents the temperature (° C.)).
  • the powder X-ray diffraction spectrum of the type I crystal with 1 equivalent of fumaric acid of the compound (I) obtained in Example 5 is shown (vertical axis represents intensity (counts), horizontal axis represents diffraction angle (2 ⁇ )). ..
  • the results of differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement (TG-DTA) of the type I crystal with 1 equivalent of fumaric acid of the compound (I) obtained in Example 5 are shown (the left vertical axis is the weight (mg) in the TG curve. ), The right vertical axis represents the heat flux ( ⁇ V) in the DTA curve, and the horizontal axis represents the temperature (° C.)).
  • the powder X-ray diffraction spectrum of the type I crystal with 0.5 equivalents of fumaric acid of the compound (I) obtained in Example 6 is shown (vertical axis is intensity (counts), horizontal axis is diffraction angle (2 ⁇ ). show).
  • the results of differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement (TG-DTA) of the type I crystal with 0.5 equivalent of fumaric acid of the compound (I) obtained in Example 6 are shown (the left vertical axis is the weight in the TG curve). (Mg), the right vertical axis represents the heat flux ( ⁇ V) in the DTA curve, and the horizontal axis represents the temperature (° C.)).
  • the powder X-ray diffraction spectrum of the type II crystal with 0.5 equivalent of fumaric acid of the compound (I) obtained in Example 7 is shown (vertical axis is intensity (counts), horizontal axis is diffraction angle (2 ⁇ ). show).
  • the results of differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement (TG-DTA) of the compound (I) obtained in Example 7 with 0.5 equivalent of fumaric acid are shown (the left vertical axis is the weight in the TG curve). (Mg), the right vertical axis represents the heat flux ( ⁇ V) in the DTA curve, and the horizontal axis represents the temperature (° C.)).
  • the powder X-ray diffraction spectrum of the type III crystal with 1 equivalent of fumaric acid of the compound (I) obtained in Reference Example 1 is shown (the vertical axis represents the intensity (counts), and the horizontal axis represents the diffraction angle (2 ⁇ )). ..
  • the results of differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement (TG-DTA) of type III crystal with 1 equivalent of fumaric acid of compound (I) obtained in Reference Example 1 are shown (the left vertical axis is the weight (mg) in the TG curve. ), The right vertical axis represents the heat flux ( ⁇ V) in the DTA curve, and the horizontal axis represents the temperature (° C.)).
  • the powder X-ray diffraction spectrum of the IV type crystal with 1 equivalent of fumaric acid of the compound (I) obtained in Reference Example 2 is shown (the vertical axis represents the intensity (counts), and the horizontal axis represents the diffraction angle (2 ⁇ )). ..
  • the results of differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement (TG-DTA) of the IV type crystal with 1 equivalent of fumaric acid of the compound (I) obtained in Reference Example 2 are shown (the left vertical axis is the weight (mg) in the TG curve. ), The right vertical axis represents the heat flux ( ⁇ V) in the DTA curve, and the horizontal axis represents the temperature (° C.)).
  • the powder X-ray diffraction spectrum of the type I crystal of the compound (I) obtained in Reference Example 3 with hydrochloric acid is shown (the vertical axis represents the intensity (counts), and the horizontal axis represents the diffraction angle (2 ⁇ )).
  • the results of differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement (TG-DTA) of the compound (I) obtained in Reference Example 3 with hydrochloric acid are shown (the left vertical axis is the weight (mg) in the TG curve, and the right vertical axis.
  • the axis represents the heat flux ( ⁇ V) in the DTA curve
  • the horizontal axis represents the temperature (° C)).
  • the powder X-ray diffraction spectrum of the type II crystal of the compound (I) obtained in Reference Example 4 with hydrochloric acid is shown (the vertical axis represents the intensity (counts), and the horizontal axis represents the diffraction angle (2 ⁇ )).
  • the results of differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement (TG-DTA) of the compound (I) obtained in Reference Example 4 with hydrochloric acid are shown (the left vertical axis is the weight (mg) in the TG curve, and the right vertical axis.
  • the axis represents the heat flux ( ⁇ V) in the DTA curve
  • the horizontal axis represents the temperature (° C)).
  • the powder X-ray diffraction spectrum of the type III crystal of the compound (I) obtained in Reference Example 5 with hydrochloric acid is shown (the vertical axis represents the intensity (counts), and the horizontal axis represents the diffraction angle (2 ⁇ )).
  • the results of differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement (TG-DTA) of the type III crystal of compound (I) obtained in Reference Example 5 with hydrochloric acid are shown (the left vertical axis is the weight (mg) in the TG curve, and the right vertical axis.
  • the axis represents the heat flux ( ⁇ V) in the DTA curve
  • the horizontal axis represents the temperature (° C)).
  • the powder X-ray diffraction spectrum of the crystal of the compound (I) obtained in Reference Example 6 with the hydrobromic acid is shown (the vertical axis represents the intensity (counts), and the horizontal axis represents the diffraction angle (2 ⁇ )).
  • the results of differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement (TG-DTA) of the crystal of compound (I) obtained in Reference Example 6 with hydrobromic acid are shown (the left vertical axis is the weight (mg) in the TG curve, and the right.
  • the vertical axis represents the heat flux ( ⁇ V) in the DTA curve, and the horizontal axis represents the temperature (° C.)).
  • the powder X-ray diffraction spectrum of the crystal of the compound (I) obtained in Reference Example 7 with 1 equivalent of L-tartaric acid is shown (the vertical axis represents the intensity (counts), and the horizontal axis represents the diffraction angle (2 ⁇ )).
  • the results of the differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement (TG-DTA) of the crystal obtained with 1 equivalent of L-tartrate of the compound (I) obtained in Reference Example 7 are shown (the left vertical axis is the weight (mg) in the TG curve).
  • the right vertical axis represents the heat flux ( ⁇ V) in the DTA curve
  • the horizontal axis represents the temperature (° C.)).
  • the powder X-ray diffraction spectrum of the crystal of the compound (I) obtained in Reference Example 8 with succinic acid is shown (the vertical axis represents the intensity (counts), and the horizontal axis represents the diffraction angle (2 ⁇ )).
  • the results of differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement (TG-DTA) of the crystal of compound (I) obtained in Reference Example 8 with succinic acid are shown (the left vertical axis is the weight (mg) in the TG curve, and the right vertical axis is Is the heat flux ( ⁇ V) in the DTA curve, and the horizontal axis is the temperature (° C)).
  • the Luciferase gene-introduced HER2-expressing cell line (NCI-N87-luc) of compound (I) shows an antitumor effect on a direct brain transplantation model.
  • the weight gain / loss rate of the Luciferase gene-introduced HER2-expressing cell line (NCI-N87-luc) of compound (I) with respect to the direct brain transplantation model is shown.
  • 7-((3R, 5S) -1-acryloyl-5-methylpyrimidine-3-yl) -4-amino-6- (cyclopropylethynyl) -N- represented by the following formula (I) ((R) -1-phenylethyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine-5-carboxamide crystals, and crystals with an acid thereof (crystals or co-crystals thereof).
  • a type II crystal with 1 equivalent of fumaric acid of compound (I) a free type II crystal, a free type I crystal, a V type crystal with 1 equivalent of fumaric acid, and 1 equivalent of fumal.
  • type I crystal with an acid a type I crystal with 0.5 equivalent of fumaric acid
  • type II crystal with 0.5 equivalent of fumaric acid a type II crystal with 0.5 equivalent of fumaric acid.
  • the description of type I, type II, type III, type IV and type V is a convenient name for distinguishing the crystal form, and the crystal according to the present invention is limited by this name. It's not something.
  • the crystal of compound (I) with an acid may be a salt crystal or a co-crystal, and includes the meanings of both.
  • Crystals show solids in which atoms and molecules have regular repeating structures, which is different from amorphous solids that do not have repeating structures. Examining crystalline or amorphous solids by methods such as powder X-ray diffraction measurement (XRD measurement), differential scanning calorimetry (DSC measurement), thermal weight-differential thermal simultaneous measurement (TG-DTA measurement), and single crystal analysis. Can be done. It is known that a crystal polymorph indicates the same molecule but has a different arrangement of atoms and molecules in the crystal, and the peak obtained by XRD measurement differs depending on the crystal polymorph. It is also known that the solubility, oral absorbability, stability, etc. differ between each polymorph.
  • crystal of compound (I) When referred to as "crystal of compound (I)" in the present specification, a crystal of a free form of compound (I) and a crystal of an acid with compound (I) (a crystal of a salt of compound (I) and a crystal of a salt of compound (I) and It is used in the sense that it includes any of the co-crystals of compound (I).
  • a crystal in which a molecule other than the compound (I) constituting the crystal (a salt or another molecule constituting a co-crystal) is not specified is 7-((3R, 5S) -1-acryloyl-5.
  • the equivalent of the acid to compound (I) can be analyzed, for example, by NMR or ion chromatography.
  • the crystals may be hydrates.
  • a compound in which one or more atoms of compound (I) or a label thereof, that is, a salt of compound (I) or compound (I) is replaced with a radioactive isotope or a non-radioactive isotope is also used. Included in the invention.
  • the crystal may be a single crystal or a polymorphic mixture containing a crystal of another compound (I) as long as it contains a crystal of compound (I).
  • the purity of the crystal is 50% by weight or more, that is, 50% by weight or more is a single crystal, and the purity of the crystal is 75% by weight or more, that is, 75% by weight or more is a single crystal.
  • the crystal has a purity of 90% by weight or more, that is, 90% by weight or more is a single crystal, and the purity of the crystal is 95% by weight or more, that is, 95% by weight. It is more preferable that% or more is a single crystal, and it is particularly preferable that the purity of the crystal is 99% by weight or more, that is, 99% by weight or more is a single crystal.
  • the chemical purity is the purity measured by high performance liquid chromatography (HPLC), and when described as the chemical purity of compound (I), the compound (I) is measured by high performance liquid chromatography. Says the purity of. At that time, the wavelength of the detector used for the purity measurement can be appropriately set.
  • the chemical purity of the crystal of compound (I) is preferably 95% or more, more preferably 98% or more, and particularly preferably 99% or more.
  • the diffraction angle and the overall pattern are important when certifying the crystal identity due to the nature of the data.
  • the relative intensity of the powder X-ray diffraction pattern can vary slightly depending on the direction of crystal growth, particle size, and measurement conditions, and should not be strictly understood.
  • the numerical values obtained from various patterns may have some errors depending on the direction of crystal growth, particle size, measurement conditions, etc. Therefore, in the present specification, the numerical value of the diffraction angle (2 ⁇ ) in the powder X-ray diffraction pattern may have a measurement error in the range of about ⁇ 0.2 °.
  • room temperature usually indicates about 10 ° C to about 35 ° C.
  • the endothermic peak in the differential thermal weight simultaneous measurement (TG-DTA) curve may change depending on the range of temperature rise per minute, the chemical purity of the sample, etc., and is usually ⁇ 5.0 ° C. means. Therefore, the error of the peak (peak top value) of the crystal according to the present invention is considered to be ⁇ 5.0 ° C. (when TG-DTA is measured, the term “near” used at that time is ⁇ 5. It means 0 ° C.
  • One embodiment of the present invention is a free crystal (type I crystal, type II crystal) of compound (I), a crystal with 1 equivalent of fumaric acid of compound (I) (type I crystal, type II crystal, type III crystal). Crystals, IV type crystals, V type crystals), crystals with 0.5 equivalent of fumaric acid of compound (I) (type I crystals, type II crystals).
  • Type II crystal with 1 equivalent of fumaric acid of compound (I) Type II crystals of compound (I) with one equivalent of fumaric acid have the powder X-ray diffraction spectra shown in FIG. 1 and the differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement (TG-DTA) shown in FIG. Has a curve of. Further, in one embodiment of the present invention, the type II crystal with 1 equivalent of fumaric acid of compound (I) has a diffraction angle (2 ⁇ ) and intensity (cts) shown in Table 2 in powder X-ray diffraction.
  • the characteristic peaks in the powder X-ray diffraction spectrum of the type II crystal with 1 equivalent of fumaric acid of compound (I) are 5.5 °, 6. 8 °, 9.3 °, 13.4 °, 15.3 °, 16.3 °, 18.5 °, 19.8 °, 22.0 ° and 24.5 ° can be mentioned.
  • the type II crystal of compound (I) according to the present invention with 1 equivalent of fumaric acid is a crystal having three or more peaks selected from the above characteristic peaks, and is preferably selected from the above characteristic peaks.
  • the endothermic peak (peak top value) determined by the simultaneous measurement of differential heat and thermogravimetric analysis of type II crystal with 1 equivalent of fumaric acid of compound (I) is 173 to 183 ° C, in other words, around 178 ° C. can.
  • the type II crystal of compound (I) has the powder X-ray diffraction spectrum shown in FIG. 3 and the differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement (TG-DTA) curve shown in FIG. Further, in one embodiment of the present invention, the free form II crystal of compound (I) has a diffraction angle (2 ⁇ ) and intensity (cts) shown in Table 3 in powder X-ray diffraction.
  • the characteristic peaks in the powder X-ray diffraction spectrum of the type II crystal of compound (I) are 8.3 °, 14.8 °, and 17.3 ° as the diffraction angles (2 ⁇ ⁇ 0.2 °). , 18.0 °, 19.1 °, 20.3 °, 21.0 °, 22.5 °, 23.0 ° and 26.2 °.
  • the type II crystal of the compound (I) according to the present invention is a crystal having three or more peaks selected from the above characteristic peaks, and preferably four or more peaks selected from the above characteristic peaks.
  • a crystal having nine or more peaks selected from the above-mentioned characteristic peaks is preferable, and a crystal having any of the above-mentioned characteristic peaks is particularly preferable.
  • the endothermic peak (peak top value) determined by the simultaneous measurement of differential heat and thermogravimetric analysis of the type II crystal of compound (I) is 177 to 187 ° C, in other words, around 182 ° C.
  • the type I crystal of compound (I) has the powder X-ray diffraction spectrum shown in FIG. 5 and the differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement (TG-DTA) curve shown in FIG. Further, in one embodiment of the present invention, the free I-type crystal of compound (I) has a diffraction angle (2 ⁇ ) and intensity (cts) shown in Table 4 in powder X-ray diffraction.
  • the characteristic peaks in the powder X-ray diffraction spectrum of the type I crystal of compound (I) are 9.9 °, 11.7 °, and 13.2 ° as the diffraction angles (2 ⁇ ⁇ 0.2 °). , 17.7 °, 18.1 °, 18.8 ° and 20.8 °.
  • the type I crystal of compound (I) according to the present invention is a crystal having three or more peaks selected from the above characteristic peaks, and preferably four or more peaks selected from the above characteristic peaks.
  • the type I crystal of compound (I) is a crystal having any of the above-mentioned characteristic peaks.
  • the characteristic peaks in the powder X-ray diffraction spectrum of the type I crystal of compound (I) are 9.9 °, 11.7 °, and 13.2 ° as the diffraction angles (2 ⁇ ⁇ 0.2 °). , 18.8 ° and 20.8 °.
  • the type I crystal of compound (I) according to the present invention is a crystal having three or more peaks selected from the above-mentioned characteristic peaks, and preferably four or more peaks selected from the above-mentioned characteristic peaks. It is a crystal having any of the above-mentioned characteristic peaks, and particularly preferably a crystal having any of the above-mentioned characteristic peaks.
  • the endothermic peak (peak top value) determined by the simultaneous measurement of differential heat and thermogravimetric analysis of the type I crystal of compound (I) is 178 to 188 ° C, in other words, around 183 ° C.
  • V-type crystal with 1 equivalent of fumaric acid of compound (I) The V-type crystal of compound (I) with one equivalent of fumaric acid has the powder X-ray diffraction spectrum shown in FIG. 7 and the differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement (TG-DTA) shown in FIG. Has a curve of. Further, in one embodiment of the present invention, the V-type crystal of compound (I) with 1 equivalent of fumaric acid has the diffraction angle (2 ⁇ ) and intensity (cts) shown in Table 5 in powder X-ray diffraction.
  • the characteristic peaks in the powder X-ray diffraction spectrum of the V-type crystal with 1 equivalent of fumaric acid of the compound (I) are 6.9 ° and 9.4 as the diffraction angles (2 ⁇ ⁇ 0.2 °). °, 10.2 °, 13.7 °, 21.1 °, 23.6 ° and 26.5 ° can be mentioned.
  • the V-type crystal of compound (I) according to the present invention with 1 equivalent of fumaric acid is a crystal having three or more peaks selected from the above-mentioned characteristic peaks, and is preferably selected from the above-mentioned characteristic peaks.
  • the characteristic peaks in the powder X-ray diffraction spectrum of the V-type crystal with 1 equivalent of fumaric acid of compound (I) are 6.9 ° and 13.7 as the diffraction angles (2 ⁇ ⁇ 0.2 °). °, 21.1 °, 23.6 ° and 26.5 ° can be mentioned.
  • the V-type crystal of compound (I) according to the present invention with 1 equivalent of fumaric acid is a crystal having three or more peaks selected from the above-mentioned characteristic peaks, and is preferably selected from the above-mentioned characteristic peaks. It is a crystal having four or more peaks, and particularly preferably a crystal having any of the above-mentioned characteristic peaks.
  • the endothermic peak (peak top value) determined by the simultaneous measurement of differential heat and thermogravimetric analysis of the V-type crystal with 1 equivalent of fumaric acid of compound (I) is 146 to 156 ° C., in other words, around 151 ° C. can.
  • Type I crystal with 1 equivalent of fumaric acid of compound (I) A type I crystal with 1 equivalent of fumaric acid of compound (I) has a powder X-ray diffraction spectrum shown in FIG. 9 and a differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement (TG-DTA) shown in FIG. Has a curve of. Further, in one embodiment of the present invention, the type I crystal with 1 equivalent of fumaric acid of compound (I) has a diffraction angle (2 ⁇ ) and intensity (cts) shown in Table 6 in powder X-ray diffraction.
  • the type I crystal of compound (I) according to the present invention with 1 equivalent of fumaric acid is a crystal having three or more peaks selected from the above characteristic peaks, and is preferably selected from the above characteristic peaks. It is a crystal having four or more peaks, more preferably a crystal having five or more peaks selected from the above-mentioned characteristic peaks, and further preferably six selected from the above-mentioned characteristic peaks.
  • the endothermic peak (peak top value) determined by the simultaneous measurement of differential heat and thermogravimetric analysis of the type I crystal with 1 equivalent of fumaric acid of compound (I) is 148 to 158 ° C, in other words, around 153 ° C. can.
  • the characteristic peaks in the powder X-ray diffraction spectrum of the type I crystal with 1 equivalent of fumaric acid of compound (I) are 6.4 °, 10. 3 °, 12.8 °, 20.7 °, 23.4 ° and 26.6 ° can be mentioned.
  • the type I crystal of compound (I) according to the present invention with 1 equivalent of fumaric acid is a crystal having three or more peaks selected from the above characteristic peaks, and is preferably selected from the above characteristic peaks.
  • the endothermic peak (peak top value) determined by the simultaneous measurement of differential heat and thermogravimetric analysis of the type I crystal with 1 equivalent of fumaric acid of compound (I) is 148 to 158 ° C, in other words, around 153 ° C. can.
  • Type I crystal with 0.5 equivalent fumaric acid of compound (I) A type I crystal of compound (I) with 0.5 equivalent fumaric acid has the powder X-ray diffraction spectrum shown in FIG. 11 and the differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement (TG-) shown in FIG. It has a curve of DTA).
  • the characteristic peak in the powder X-ray diffraction spectrum of the type I crystal with 0.5 equivalent fumaric acid of compound (I) is 6.4 ° as the diffraction angle (2 ⁇ ⁇ 0.2 °). 7.5 °, 9.7 °, 11.7 °, 15.1 °, 19.6 ° and 23.9 ° can be mentioned.
  • the type I crystal of compound (I) according to the present invention with 0.5 equivalent of fumaric acid is a crystal having four or more peaks selected from the above characteristic peaks, and is preferably the above characteristic peaks.
  • the endothermic peak (peak top value) determined by the simultaneous measurement of differential heat and thermogravimetric analysis of the type I crystal with 0.5 equivalent of fumaric acid of compound (I) is 156 to 166 ° C, in other words, around 161 ° C. be able to.
  • Type II crystals of compound (I) with 0.5 equivalent fumaric acid Type II crystals of compound (I) with 0.5 equivalent fumaric acid have the powder X-ray diffraction spectrum shown in FIG. 13 and the differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement (TG-) shown in FIG. It has a curve of DTA).
  • the characteristic peak in the powder X-ray diffraction spectrum of the type II crystal with 0.5 equivalent fumaric acid of compound (I) is 5.4 ° as the diffraction angle (2 ⁇ ⁇ 0.2 °). 6.4 °, 7.3 °, 12.8 °, 13.4 °, 14.7 ° and 15.4 ° can be mentioned.
  • the type II crystal of compound (I) according to the present invention with 0.5 equivalent of fumaric acid is a crystal having four or more peaks selected from the above characteristic peaks, and is preferably the above characteristic peak.
  • the endothermic peak (peak top value) determined by the simultaneous measurement of differential heat and thermogravimetric analysis of type II crystal with 0.5 equivalent fumaric acid of compound (I) is 157 to 167 ° C, in other words, around 162 ° C. be able to.
  • Type III crystals with 1 equivalent of fumaric acid of compound (I) Type III crystals with 1 equivalent of fumaric acid of compound (I) have the powder X-ray diffraction spectrum shown in FIG. 15 and the differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement (TG-DTA) shown in FIG. Has a curve of.
  • the characteristic peak in the powder X-ray diffraction spectrum of the type III crystal with 1 equivalent of fumaric acid of compound (I) is 8.1 °, 13. as the diffraction angle (2 ⁇ ⁇ 0.2 °). 2 °, 20.4 °, 23.1 °, 24.7 ° and 26.1 ° can be mentioned.
  • the type III crystal of compound (I) according to the present invention with 1 equivalent of fumaric acid is a crystal having three or more peaks selected from the above characteristic peaks, and is preferably selected from the above characteristic peaks.
  • exothermic peak (peak top value) determined by the simultaneous measurement of type III crystal differential thermal-thermogravimetric analysis with 1 equivalent of fumaric acid of compound (I) is 148 to 158 ° C, in other words, around 153 ° C. ..
  • Type IV crystal with 1 equivalent of fumaric acid of compound (I) Type IV crystals of compound (I) with one equivalent of fumaric acid have the powder X-ray diffraction spectra shown in FIG. 17 and the differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement (TG-DTA) shown in FIG. Has a curve of.
  • the characteristic peaks in the powder X-ray diffraction spectrum of the IV type crystal with 1 equivalent of fumaric acid of compound (I) are 6.0 °, 15. 7 ° and 18.8 ° can be mentioned.
  • the type IV crystal of compound (I) according to the present invention with 1 equivalent of fumaric acid is a crystal having any of the above characteristic peaks.
  • the exothermic peak (peak top value) determined by the simultaneous measurement of differential heat and thermogravimetric analysis of the IV type crystal with 1 equivalent of fumaric acid of compound (I) is 125 to 135 ° C., in other words, around 130 ° C. can.
  • a type II crystal of compound (I) with 1 equivalent of fumaric acid can be obtained, for example, by a method including the following two steps.
  • Step 1 A step of adding fumaric acid and the following solvent to the type I crystal of compound (I), and optionally adding a seed crystal.
  • Step 2 A step of stirring the suspension obtained in the above step to obtain crystals of compound (I) with 1 equivalent of fumaric acid. Then it is collected by filtration and the solid is collected. It is preferable to wash the recovered solid with water and dry it.
  • the fumaric acid in step 1 preferably 1.5 to 10 equivalents (more preferably 2 to 5 equivalents, most preferably 3 equivalents) of fumaric acid is added to 1 equivalent of the free form of compound (I).
  • the solvent in step 1 is preferably added in a 5 to 35 times amount (v / w) (more preferably 5 to 30 times amount (v / w), most preferably 10 times amount (v / w)).
  • the solvent used in step 1 is alcohols such as methanol, ethanol, isopropanol and tert-butanol, ethers such as 1,4-dioxane and tetrahydrofuran, ketones such as acetone and methyl ethyl ketone, and aprotonic polar solvents such as acetonitrile.
  • a single solvent such as, or a mixed solvent can be exemplified.
  • the type I crystal of the compound (I) can be obtained by the method described in the section of "(Method for producing a free form I type crystal)" or Example 3 later.
  • the temperature during the reaction in step 2 is preferably room temperature or higher and lower than the boiling point of each solvent as described above, but is not particularly limited and can be appropriately set, preferably 25 to 70 ° C (more preferably 40 to 60 ° C, most preferably 40 to 60 ° C). It is preferably 50 ° C.).
  • the stirring time during the reaction of step 2 is preferably 24-124 hours (more preferably 48-72 hours, most preferably 60-65 hours) stirring of the suspension.
  • the free form II crystal of compound (I) can be obtained, for example, by a method including the following two steps (method A-1).
  • Step 1 A step of adding a mixed solvent of any acid of succinic acid, phosphoric acid, and adipic acid and a rich solvent / poor solvent to the compound (I), and optionally adding a seed crystal.
  • Step 2 A step of stirring the suspension obtained in the above step to obtain crystals of the solid compound (I).
  • an additional solvent for example, 1-propanol as a rich solvent
  • the acid in step 1 is preferably added in an amount of 0.5 to 2 equivalents (more preferably 0.75 to 1.5 equivalents, particularly 1 equivalent) with respect to 1 equivalent of compound (I).
  • the mixed solvent of the rich solvent / poor solvent of Step 1 (for example, 1-propanol / water) is preferably 5 to 50 times (v / w) (more preferably 10 to 30 times) the free form of the compound (I).
  • the temperature during the reaction in step 2 is preferably 25 to 70 ° C. (more preferably 40 to 60 ° C., particularly preferably 50 ° C.).
  • the stirring time during the reaction of step 2 is preferably 2 to 7 days (more preferably 3 to 5 days, particularly 4 days) for suspension stirring.
  • the free form II crystal of compound (I) can be obtained, for example, by a method (method A-2) including the following two steps.
  • Step 1 A step of adding a mixed solvent of a rich solvent / a poor solvent and a seed crystal to the compound (I), and optionally adding any acid of succinic acid, phosphoric acid, and adipic acid.
  • Step 2 A step of stirring the suspension obtained in the above step to obtain crystals of the solid compound (I).
  • an additional solvent for example, 1-propanol as a rich solvent
  • the amount of succinic acid in step 1 is preferably 0.5 to 2 equivalents (more preferably 0.75 to 1.5 equivalents, particularly 1 equivalent) with respect to 1 equivalent of compound (I).
  • the mixed solvent of the rich solvent / poor solvent of step 1 (for example, the mixed solvent of 1-propanol / water) is preferably 1 to 10 times the amount (v / w) (more preferably 2) with respect to the free form of the compound (I). Add up to 5 times (v / w), especially 3 times (v / w)) and seed crystals (eg, seed crystals obtained from either (i) or (ii)).
  • the reaction temperature in step 2 is preferably 25 to 70 ° C. (more preferably 40 to 60 ° C., particularly preferably 50 ° C.).
  • the reaction time of step 2 is preferably 6 to 48 hours (more preferably 12 to 24 hours, particularly preferably 17.5 to 24 hours).
  • the free form II crystal of compound (I) can be obtained, for example, by a method (method B) including the following two steps.
  • Step 1 A step of adding a poor solvent to compound (I) and optionally adding seed crystals.
  • Step 2 A step of adding a rich solvent to the solution obtained in the above step and stirring the obtained suspension to obtain crystals of the solid compound (I).
  • the amount of the poor solvent in step 1 is preferably 2 to 10 times (v / w) (more preferably 3) of the poor solvent (for example, diisopropyl ether) in the compound (I) with respect to the free form of the compound (I).
  • the reaction time of step 1 is preferably 24-96 hours (more preferably 36-72 hours, particularly 44.5 hours) for suspension stirring.
  • the reaction temperature in step 2 is preferably 25 to 70 ° C. (more preferably 40 to 60 ° C., particularly preferably 50 ° C.).
  • the amount of the rich solvent in step 2 is preferably 0.5 to 3 times (v / w) (more preferably 0.8 to 2 times) the amount of the rich solvent (for example, ethanol) with respect to the free form of the compound (I). Add an amount (v / w), especially a 1-fold amount (v / w).
  • the stirring time in step 2 is preferably 6 to 72 hours (more preferably 12 to 48 hours, particularly 21 hours), followed by suspension stirring, filtration, collection of the solid, and drying.
  • additional solvent for example, diisopropyl ether as a poor solvent and / or ethanol as a rich solvent
  • the combination of the rich solvent and the poor solvent used for producing the free form II crystal of the compound (I) includes methanol (rich solvent) and water (poor solvent), methanol (rich solvent) and diisopropyl ether (IPE) ( Poor solvent), methanol (rich solvent) and heptane (poor solvent), ethanol (rich solvent) and IPE (poor solvent), ethanol (rich solvent) and heptane (poor solvent), 1-propanol (rich solvent) and water (poor solvent) Poor solvent), 1-propanol (rich solvent) and IPE (poor solvent), 1-propanol (rich solvent) and heptane (poor solvent), 2-propanol (rich solvent) and heptane (poor solvent), acetone (rich solvent) ) And IPE (poor solvent), acetone (rich solvent) and heptane (poor solvent), dimethylsulfoxide (DMSO) (rich solvent) and water (poor solvent), dimethylacetamide (DMA) (
  • the preferred combinations of the rich solvent and the poor solvent are ethyl acetate (rich solvent) and n-heptane (poor solvent), ethanol (rich solvent) and water (poor solvent), 1-propanol (rich solvent) and water (poor).
  • Solvent a combination of ethanol (rich solvent) and diisopropyl ether (poor solvent).
  • the amount of the poor solvent is preferably 1 to 20 times the amount (v / v) of the rich solvent, and more preferably 1 to 10 times the amount (v / v).
  • the amount of the seed crystal added can be preferably 0.5 to 30 (w / w)%, more preferably 1 to 5 (w / w)% of the compound (I) input amount.
  • the free form I crystal of compound (I) is prepared by suspending, for example, a crude body of compound (I) in a solvent and optionally adding a seed crystal to form a solid compound (a solid compound (I). It is obtained by a method including the step of obtaining the crystal of I).
  • the seed crystal is optionally added in order to promote the crystallization of the free I-type crystal, and as the seed crystal, an appropriate amount of the I-type crystal of the compound (I) or a mixed crystal containing the I-type crystal may be added. can.
  • the type I crystal of compound (I) can be obtained by the above method without adding a seed crystal, but the time for obtaining the compound can be shortened by adding the seed crystal. Further, in order to shorten the crystallization time and control the particle size, crystallization may be carried out with stirring.
  • the seed crystal to be added is 0.5 to 30 (w / w)%, preferably 1 to 10 (w / w)% of the input amount of the compound (I).
  • the temperature can be appropriately set, but is preferably 50 to 65 ° C.
  • Compound (I) can be precipitated at the above dissolution temperature, but if it does not precipitate at the dissolution temperature, free-form I-type crystals can be obtained by cooling to 25 ° C.
  • solvent ethyl acetate, ethanol, acetonitrile, acetone, tert-butyl methyl ether and the like can be used.
  • a V-type crystal of compound (I) with 1 equivalent of fumaric acid can be obtained, for example, by a method consisting of the following two steps.
  • Step 1 In compound (I), 1 to 2 equivalents of fumaric acid and acetone as a solvent are added in an amount of 1 to 2 equivalents to 1 equivalent of the free form of compound (I) to 40 to 60 times the amount (v) of the free form of compound (I). / W) Addition and optional addition of seed crystals.
  • Step 2 A step of stirring the suspension obtained in the above step, filtering it, and recovering the solid.
  • Step 3 A step of drying the solid obtained in the above step under a reduced pressure condition of preferably 20 to 60 ° C. (preferably a pressure of 2 kPa or less) to obtain crystals of compound (I) with 1 equivalent of fumaric acid.
  • the fumaric acid in step 1 is more preferably added in an amount of 2 equivalents to 1 equivalent of the free form of compound (I).
  • Acetone in step 1 is preferably added in a 40 to 60-fold amount (v / w) (more preferably 50-fold amount (v / w)) with respect to the free form of compound (I).
  • the reaction temperature in step 2 is preferably a temperature of 10 to 30 ° C. (preferably 25 ° C.).
  • the reaction time of step 2 is preferably 12 to 96 hours (more preferably 71 hours).
  • the reaction temperature of step 3 is 20 to 60 ° C. (for example, room temperature) for the obtained solid.
  • the depressurization time of step 3 is preferably 6 to 24 hours (more preferably 7.5 hours) for drying (for example, at a pressure of 2 kPa or less).
  • V-type crystals of compound (I) with 1 equivalent fumaric acid are obtained by a method comprising the following steps.
  • Step 1 Dry type I crystals with 1 equivalent of fumaric acid under reduced pressure conditions (preferably at a pressure of 2 kPa or less).
  • the reaction temperature in step 1 is 20 to 60 ° C.
  • a type I crystal of compound (I) with 1 equivalent of fumaric acid can be obtained, for example, by a method consisting of the following two steps.
  • Step 1 A step of adding 1 to 2 equivalents of fumaric acid and 40 to 60 times the amount of acetone as a solvent to the compound (I) with respect to 1 equivalent of the free form of the compound (I), and adding a seed crystal at an arbitrary option.
  • Step 2 A step of stirring the suspension obtained in the above step at 30 ° C. or lower to obtain crystals of compound (I) with fumaric acid. Then it is collected by filtration and the solid is collected.
  • step 1 As for the amount of fumaric acid in step 1, preferably 2 equivalents of fumaric acid is added to 1 equivalent of the free compound (I). Acetone in step 1 is preferably added in an amount of 40 to 60 times (more preferably 50 times) the free form of compound (I).
  • the reaction temperature in step 2 is preferably 10 to 30 ° C. (more preferably 25 ° C.).
  • the reaction time of step 2 is preferably 12 to 24 hours (more preferably 19.5 hours).
  • a type III crystal of compound (I) with 1 equivalent fumaric acid is obtained, for example, by a method comprising the following two steps.
  • Step 1 A step of adding fumaric acid and acetonitrile as a solvent to compound (I), and optionally adding seed crystals.
  • Step 2 A step of stirring the suspension obtained in the above step for a short time of 1.5 hours or less to obtain crystals of compound (I) with 1 equivalent of fumaric acid. Then, it is collected by filtration and the solid is collected.
  • the solvent of step 1 (for example, acetonitrile) is preferably added in an amount of 25 to 35 times (v / w) (more preferably 30 times (v / w)) to the free form of compound (I).
  • the reaction temperature in step 2 is preferably a temperature of 45 to 55 ° C. (particularly preferably 50 ° C.).
  • the reaction time of step 2 is preferably 0.5 to 1.5 hours (more preferably 1 hour).
  • a type IV crystal of compound (I) with 1 equivalent of fumaric acid can be obtained, for example, by a method including the following two steps.
  • Step 1 A step of adding fumaric acid and water as a solvent to compound (I), and optionally adding seed crystals.
  • Step 2 A step of stirring the suspension obtained in the above step for a short time of 2 hours or less to obtain crystals of compound (I) with 1 equivalent of fumaric acid. Then, it is collected by filtration and the solid is collected.
  • preferably 1 to 5 equivalents (more preferably 3 equivalents) of fumaric acid is added to 1 equivalent of the free compound (I).
  • step 1 water is preferably added in an amount of 15 to 25 times (more preferably 20 times) the free form of compound (I).
  • the reaction time of step 2 is preferably 45 to 55 ° C. (particularly preferably 50 ° C.).
  • the reaction temperature in step 2 is preferably 1 to 2 hours (more preferably 1.5 hours).
  • a type I crystal of compound (I) with 0.5 equivalent fumaric acid can be obtained, for example, by a method including the following two steps.
  • Step 1 A step of adding fumaric acid and water as a solvent to compound (I) and optionally adding seed crystals.
  • Step 2 A step of stirring the suspension obtained in the above step at a temperature of preferably room temperature or higher and lower than the boiling point of the solvent to obtain crystals. Then it is collected by filtration, the solid is collected and dried.
  • the fumaric acid in step 1 is preferably 0.5 to 1 equivalent (more preferably 0.5 to 0.75 equivalent, most preferably 0.5) with respect to 1 equivalent of the free form of compound (I).
  • the amount of water as the solvent in step 1 is preferably 10 to 40 times (v / w) (more preferably 15 to 25 times (v / w), most preferably 20 times) the free form of compound (I).
  • Amount (v / w)) is added.
  • the reaction temperature in step 2 is preferably 40 to 60 ° C. (more preferably 45 to 55 ° C., most preferably 50 ° C.).
  • the reaction time of step 2 is preferably 48 to 120 hours (more preferably 72 to 96 hours, most preferably 93.5 hours).
  • a type II crystal of compound (I) with 0.5 equivalent fumaric acid is obtained, for example, by a method comprising the following two steps.
  • Step 1 A step of adding fumaric acid and ethanol to compound (I) and optionally adding seed crystals.
  • Step 2 A step of stirring the suspension obtained in the above step at a temperature of preferably room temperature or higher and lower than the boiling point of the solvent to obtain crystals. Then it is collected by filtration, the solid is collected and dried.
  • the amount of fumaric acid in step 1 preferably 0.5 to 1 equivalent (preferably 1 equivalent) of fumaric acid is added to 1 equivalent of the free compound (I).
  • Ethanol as a solvent in step 1 is preferably 10 to 40 times the amount (v / w) (more preferably 15 to 25 times the amount (v / w), most preferably 20 times the amount (v / w) of the free form of compound (I). Double the amount (v / w)) is added.
  • the reaction temperature in step 2 is preferably 40 to 60 ° C. (more preferably 45 to 55 ° C., most preferably 50 ° C.).
  • the reaction time of step 2 is preferably 6 to 48 hours (more preferably 12 to 24 hours, most preferably 19.5 hours).
  • Type II crystal with 1 equivalent of fumaric acid, free type II crystal, free type I crystal, V type crystal with 1 equivalent of fumaric acid, type I crystal with 0.5 equivalent of fumaric acid Crystals, type II crystals with 0.5 equivalent of fumaric acid have at least one of the advantageous properties in pharmaceutical production such as non-moisture absorption, acquisition reproducibility, solid stability, oral absorbability.
  • the type II crystal with 1 equivalent of fumaric acid of compound (I) the free type II crystal, the free body type I crystal, and the V type crystal with 1 equivalent of fumaric acid are other crystals of compound (I).
  • it has advantageous properties in pharmaceutical production such as non-moisture absorption, acquisition reproducibility, solid stability, and oral absorbability.
  • Type II crystals with 1 equivalent of fumaric acid of compound (I) have low hygroscopicity and acquisition stability.
  • low hygroscopicity and stable acquisition are important for the industrial production of pharmaceuticals.
  • it has properties that are easy to handle as a pharmaceutical product, such as excellent solid stability, solubility, and oral absorbability. Therefore, type II crystals of compound (I) with one equivalent of fumaric acid have excellent properties required as a drug or drug substance.
  • the free form II crystal of compound (I) has low hygroscopicity. This is important for the industrial production of stable quality pharmaceuticals in drug development candidate compounds. In addition, it has properties that are easy to handle as a pharmaceutical product, such as excellent solid stability, solubility, and oral absorbability. Therefore, the free form II crystal of compound (I) has excellent properties required as a drug or drug substance.
  • the free I-type crystal of compound (I) has low hygroscopicity and excellent acquisition stability. It is also important for the industrial production of stable quality pharmaceuticals that the drug development candidate compounds have low hygroscopicity and acquisition stability. Therefore, the type I crystals of compound (I) have excellent properties required as a drug or drug substance.
  • V-type crystals with 1 equivalent of fumaric acid of compound (I) have low hygroscopicity and excellent acquisition stability. It is also important for the industrial production of stable quality pharmaceuticals that the drug development candidate compounds have low hygroscopicity and acquisition stability. Therefore, the V-type crystal of compound (I) according to the present invention with 1 equivalent of fumaric acid has excellent properties required as a drug or drug substance.
  • Type I crystals with 1 equivalent of fumaric acid of compound (I) are excellent in acquisition stability. It is also important for the industrial production of stable quality pharmaceuticals that the drug development candidate compounds have acquisition stability. Therefore, type I crystals of compound (I) with one equivalent of fumaric acid have excellent properties required as a drug or drug substance. Since the I-type crystal of compound (I) with 1 equivalent of fumaric acid can be recovered as a solid, it is also useful as an intermediate for producing a V-type crystal with 1 equivalent of fumaric acid.
  • Type III crystals with 1 equivalent of fumaric acid of compound (I) are excellent in acquisition stability. It is also important for the industrial production of stable quality pharmaceuticals that the drug development candidate compounds have acquisition stability. Therefore, type III crystals of compound (I) with one equivalent of fumaric acid have excellent properties required as a drug or drug substance.
  • Type IV crystals with 1 equivalent of fumaric acid of compound (I) are excellent in acquisition stability. It is also important for the industrial production of stable quality pharmaceuticals that the drug development candidate compounds have acquisition stability. Therefore, type IV crystals of compound (I) with one equivalent of fumaric acid have excellent properties required as a drug or drug substance.
  • Type I crystals of compound (I) with 0.5 equivalent fumaric acid have excellent acquisition stability. It is also important for the industrial production of stable quality pharmaceuticals that the drug development candidate compounds have acquisition stability. Therefore, type I crystals of compound (I) with 0.5 equivalent fumaric acid have excellent properties required as a drug or drug substance.
  • Type II crystals of compound (I) with 0.5 equivalent fumaric acid have excellent acquisition stability. It is also important for the industrial production of stable quality pharmaceuticals that the drug development candidate compounds have acquisition stability. Therefore, the type II crystals of compound (I) according to the present invention with 0.5 equivalent fumaric acid have excellent properties required as a drug or drug substance.
  • Crystals with other acids Other forms of the present invention include crystals of compound (I) with hydrochloric acid (type I crystals, type II crystals, type III crystals), crystals of compound (I) with hydrobromic acid, and compound (I). It relates to a crystal with an equivalent amount of L-tartrate acid or a crystal of compound (I) with succinic acid.
  • the powder X-ray diffraction spectra and the differential heat-thermogravimetric simultaneous measurement (TG-DTA) curves for these crystals are shown in FIGS. 19-30. Characteristic peaks in the powder X-ray diffraction spectra for these crystals are described in Reference Examples 3-7.
  • crystals are crystals having three or more (preferably four or more, and more preferably five or more if present) peaks selected from the characteristic peaks described in the reference examples. It is preferably a crystal having any of the characteristic peaks.
  • the temperature of the endothermic peak determined by the simultaneous measurement of differential heat and thermogravimetric analysis for these crystals is also described in the reference example.
  • the precipitated crystal is separated and purified by a known separation and purification means such as filtration, washing with water, and drying under reduced pressure. It can be isolated and purified from the dissolved solution of the crystals, the mixed solution and the like.
  • the free crystal of compound (I) of the present invention or the crystal with acid (salt crystal or co-crystal) has excellent HER2 inhibitory activity. It also has excellent selectivity for HER2. Therefore, the free crystal of compound (I) of the present invention or the crystal with acid (salt crystal or co-crystal) is suitable for diseases and malignant tumors having HER2 overexpression, HER2 gene amplification, HER2 mutation, etc. On the other hand, it is useful as an antitumor agent and has the advantage of having few side effects.
  • HER2 includes human or non-human mammalian HER2, preferably human HER2. Also, the word "HER2" includes isoforms.
  • the free crystals of compound (I) of the present invention or crystals with an acid (salt crystals or co-crystals) are useful as pharmaceuticals for the treatment of HER2-related diseases due to their excellent HER2 inhibitory activity.
  • Disease involving HER2 includes diseases in which the incidence is reduced, symptoms are ameliorated, alleviated, and / or completely cured by deleting, suppressing and / or inhibiting the function of HER2. Examples of such diseases include, but are not limited to, malignant tumors. Preferably, it is a malignant tumor having HER2 overexpression, HER2 gene amplification, or HER2 mutation.
  • One or more free crystals of compound (I) of the present invention or crystals with an acid are within the HER2 domain such as wild-type HER2 and exon 20 insertion mutations. It selectively inhibits mutant HER2 having an insertion mutation, a point mutation, a deletion mutation, or the like.
  • One embodiment of the present invention is a crystal of a free form of compound (I) having an inhibitory activity against wild-type HER2, HER2 having a YVMA insertion mutation which is one of the exon 20 insertion mutations, and the like, or a free form of compound (I) having an inhibitory activity against mutant HER2.
  • One embodiment of the invention is a wild-type HER2 comprising a free crystal of compound (I) of the invention or a crystal with an acid (crystal or co-crystal of a salt thereof), and HER2 having a YVMA insertion variant.
  • HER2 having a YVMA insertion variant.
  • the human HER2 gene is, for example, those set forth in SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 3, or SEQ ID NO: 5, and the wild-type HER2 protein is derived from, for example, the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4, or SEQ ID NO: 6. Become.
  • the nucleotide sequence information of the human HER2 gene and the amino acid sequence information of the wild-type HER2 protein can be obtained, for example, by accession number NM_004448, NM_0012899936, or NM_001005862.
  • the free crystals of compound (I) of one embodiment of the invention or crystals with an acid are based on the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 2.
  • G309A, S310F, R678Q, L755S, L755_T759del, D769H, A775_G777insYVMA, V777L, V842I, R896C show inhibitory activity against mutant HER2 containing one or more variants.
  • the free crystal of the compound (I) of one embodiment of the present invention or the crystal with an acid is based on the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 2.
  • the free crystals of compound (I) of one embodiment of the invention, or crystals with an acid (salt crystals or co-crystals), are based on the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 4. , G294A, S295F, R663Q, L740S, L740_T744del, D754H, A760_G761insYVMA, V762L, V827I, R881C show inhibitory activity against mutant HER2 containing one or more variants.
  • the free crystal of the compound (I) of one embodiment of the present invention or the crystal with an acid (salt crystal or co-crystal) is based on the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 4. It shows inhibitory activity against mutant HER2 including A760_G761 insYVMA.
  • the compound (I) of one embodiment of the invention, or a crystal with an acid (salt crystal or co-crystal) is G279A, S280F, with respect to the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 6.
  • the free crystal of the compound (I) of one embodiment of the present invention or the crystal with an acid is based on the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 6. It shows inhibitory activity against mutant HER2 including A745_G746insYVMA.
  • the amino acid set forth in SEQ ID NO: 2 may differ from the position of the amino acid set forth in SEQ ID NO: 2 due to deletion or insertion of the amino acid. It is understood to be similar to the mutation of the position corresponding to the position. Therefore, for example, the 309th glycine in HER2 represented by SEQ ID NO: 2 corresponds to the 294th glycine in HER2 consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 4.
  • G309A means that the glycine at position 309 of HER2 represented by SEQ ID NO: 2 is mutated to alanine, but in HER2 consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 4, 294. Since it is the position corresponding to the second amino acid, "G294A” in HER2 consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 4 corresponds to "G309A” in HER2 represented by SEQ ID NO: 2. Whether or not an amino acid of a certain HER2 isoform corresponds to which position of the amino acid shown in SEQ ID NO: 2 can be confirmed by, for example, Multiple Alignment of BLAST.
  • One embodiment of the invention comprises anti-crystals comprising the above-mentioned crystals of compound (I) (ie, crystals of a free form of compound (I) or crystals of compound (I) with an acid (salt crystals or co-crystals)).
  • a tumor agent ie, crystals of a free form of compound (I) or crystals of compound (I) with an acid (salt crystals or co-crystals)).
  • a tumor agent ie, crystals of a free form of compound (I) or crystals of compound (I) with an acid (salt crystals or co-crystals)).
  • One embodiment of the invention is a crystal of compound (I) for producing an antitumor agent (ie, a crystal of a free form of compound (I) or a crystal of compound (I) with an acid (salt crystals or co-crystals).
  • an antitumor agent ie, a crystal of a free form of compound (I) or a crystal of compound (I) with an acid (salt crystals or co-crystals).
  • crystals is provided.
  • one embodiment of the present invention is a crystal of compound (I) for use in the treatment of tumor (that is, a crystal of a free form of compound (I) or a crystal of compound (I) with an acid (crystal of salt). Or co-crystals)) are provided.
  • the crystals of the present invention are used for postoperative adjuvant chemotherapy performed to prevent recurrence after surgical removal of a tumor, but preoperative neoadjuvant chemistry performed for surgical removal of a tumor. It may be used for therapy.
  • the tumor to be the subject of the present invention is not particularly limited, and for example, brain tumor, head and neck cancer, gastrointestinal cancer (esophageal cancer, gastric cancer, duodenal cancer, liver cancer, biliary tract cancer (bile sac / bile duct cancer, etc.), pancreatic cancer, etc.
  • gastrointestinal cancer esophageal cancer, gastric cancer, duodenal cancer, liver cancer, biliary tract cancer (bile sac / bile duct cancer, etc.), pancreatic cancer, etc.
  • Colon-rectal cancer colon cancer, rectal cancer, etc.
  • lung cancer non-small cell lung cancer, small cell lung cancer, mesotheloma, etc.
  • breast cancer genital cancer (ovarian cancer, uterine cancer (cervical cancer, uterine body cancer, etc.))
  • Etc. Urological cancer
  • renal cancer bladder cancer, prostate cancer, testicular tumor, etc.
  • hematopoietic tumor leukemia, malignant lymphoma, multiple myeloma, etc.
  • bone / soft tumor skin cancer, etc.
  • lung cancer, breast cancer, gastric cancer, colorectal cancer, bladder cancer, biliary tract cancer, or uterine cancer more preferably lung cancer, breast cancer, gastric cancer, bladder cancer, or biliary tract cancer.
  • the tumor is a brain tumor.
  • the compounds of the present invention may be useful in the treatment of symptoms of the brain that require crossing the blood-brain barrier.
  • the compound of one embodiment has a favorable passage through the blood-brain barrier for delivery to the brain, i.e., excellent brain transferability.
  • As an index of the transferability of the compound to the brain there are the compound concentration in the brain and the Kp value (brain to plasma drug concentration ratio).
  • Brain tumors treated with the compounds of the invention include metastatic brain tumors and primary brain tumors. Brain tumors are not particularly limited, but are, for example, metastatic brain tumors (eg, brain metastases of lung cancer, breast cancer, gastric cancer, colorectal cancer, bladder cancer, biliary tract cancer, uterine cancer, etc.
  • astrocytoma preferably lung cancer, breast cancer or gastric cancer
  • diffuse astrocytoma oligoastrocytoma / oligoastrocytoma
  • metastatic astrocytoma / oligoastrocytoma oligoastrocytoma
  • oligoastrocytoma oligodendroglioma Sprouting, astrocytoma, degenerative astrocytoma, ganglioma, central neurocytoma, medullary blastoma, germinoma, central nervous system malignant lymphoma, medullary tumor, nerve sheath tumor, under GH production
  • examples thereof include pituitary adenomas, PRL-producing pituitary adenomas, ACTH-producing pituitary adenomas, non-functional pituitary adenomas, cranopharyngeal tumors, spinal cord tumors, hemangioblastomas, and epitheliomas.
  • the term "effective amount" of a compound causes a biological or medical response of a subject, such as a decrease or inhibition of enzyme or protein activity, or ameliorate symptoms, relieve a condition, disease.
  • a biological or medical response of a subject such as a decrease or inhibition of enzyme or protein activity, or ameliorate symptoms, relieve a condition, disease.
  • the term "subject” includes mammalian and non-mammalian animals.
  • mammals include, but are not limited to, humans, chimpanzees, apes, monkeys, cows, horses, sheep, goats, pigs, rabbits, dogs, cats, rats, mice, guinea pigs, halinese, kangaroos, mogras, wild boars, bears. , Tigers, lions, etc.
  • non-mammals include, but are not limited to, birds, fish, reptiles and the like.
  • the subject is a human and may be a human diagnosed as requiring treatment for the symptoms, conditions, or diseases disclosed herein.
  • the crystal (I), a crystal of a salt thereof, or a co-crystal is used as a medicine
  • various administration forms can be adopted depending on the therapeutic purpose without crushing or crushing the crystal, and the form is as the form.
  • oral preparations such as tablets, capsules, granules, fine granules, powders, dry syrups
  • parenteral preparations such as suppositories, inhalants, nasal drops, ointments, patches, injections, etc. good.
  • Pharmaceutical compositions suitable for these dosage forms can be produced by a conventional formulation method known to those skilled in the art using a pharmaceutically acceptable carrier.
  • One embodiment of the invention comprises anti-crystals comprising the above-mentioned crystals of compound (I) (ie, crystals of a free form of compound (I) or crystals of compound (I) with an acid (salt crystals or co-crystals)).
  • a tumor agent ie, crystals of a free form of compound (I) or crystals of compound (I) with an acid (salt crystals or co-crystals)).
  • a tumor agent ie, crystals of a free form of compound (I) or crystals of compound (I) with an acid (salt crystals or co-crystals)).
  • one embodiment of the present invention is a crystal of the above-mentioned compound (I) for producing an antitumor agent (that is, a crystal of a free form of the compound (I) or a crystal of the compound (I) with an acid (that is, a crystal of the compound (I)).
  • an antitumor agent that is, a crystal of a free form of the compound (I) or a crystal of the compound (I) with an acid (that is, a crystal of the compound (I)).
  • salt crystals or co-crystals is provided.
  • One embodiment of the invention comprises oral crystals of compound (I) described above (ie, crystals of a free form of compound (I) or crystals of compound (I) with an acid (salt crystals or co-crystals)).
  • An antitumor agent for administration is provided.
  • one embodiment of the present invention is a method for treating a tumor, and a crystal of the above-mentioned compound (I) (that is, a crystal of a free form of the compound (I) or a compound (I)) is used as a target for the treatment. )
  • a method comprising orally administering an effective amount of crystals (salt crystals or co-crystals) with an acid.
  • one embodiment of the present invention is a crystal of the above-mentioned compound (I) (that is, a crystal of a free form of the compound (I) or an acid of the compound (I) for producing an antitumor agent for oral administration.
  • the use of crystals with and (salt crystals or co-crystals) is provided.
  • one embodiment of the present invention is a crystal of the above-mentioned compound (I) for oral administration and use for treating a tumor (that is, a crystal of a free form of the compound (I) or an acid of the compound (I)). Crystals (salt crystals or co-crystals) with.
  • One embodiment of the present invention comprises a pharmaceutical composition
  • a pharmaceutical composition comprising the above-mentioned crystals of compound (I) (ie, crystals of a free form of compound (I) or crystals of compound (I) with an acid (salt crystals or co-crystals)). Things are provided.
  • the pharmaceutical composition of one embodiment of the present invention is a crystal of the above-mentioned compound (I) (that is, a crystal of a free form of the compound (I) or a crystal of the compound (I) with an acid (a salt crystal or a co-crystal). ), And pharmaceutically acceptable carriers.
  • one embodiment of the present invention is a crystal of the above-mentioned compound (I) for producing a pharmaceutical composition (that is, a crystal of a free form of the compound (I) or a crystal of the compound (I) with an acid (that is, a crystal of the compound (I)).
  • a crystal of compound (I) described above ie, a crystal of a free form of compound (I) or a crystal of compound (I) with an acid (salt) for use as a pharmaceutical. Crystals or co-crystals)) are provided.
  • crystals of compound (I) described above ie, crystals of a free form of compound (I) or crystals of compound (I) with an acid (salt crystals or co-crystals)
  • a kit comprising a pharmaceutical composition comprising (ii) instructions for use of the composition is provided.
  • various conventional organic or inorganic carrier substances are used as the pharmaceutical material, and excipients, binders, disintegrants, lubricants, coating agents in solid formulations, solvents in liquid formulations, etc. It is compounded as a solubilizing agent, a suspending agent, an isotonic agent, a buffering agent, a pain-relieving agent, and the like. Further, if necessary, pharmaceutical additives such as preservatives, antioxidants, colorants, sweeteners and stabilizers can be used.
  • excipient examples include lactose, sucrose, D-mannitol, starch, crystalline cellulose, calcium silicate and the like.
  • binder examples include hydroxypropyl cellulose, methyl cellulose, polyvinylpyrrolidone, candy powder, hypromellose and the like.
  • disintegrant examples include sodium starch glycolate, carmellose calcium, croscarmellose sodium, crospovidone, low-degree-of-substitution hydroxypropyl cellulose, partially pregelatinized starch and the like.
  • lubricant examples include talc, magnesium stearate, sucrose fatty acid ester, stearic acid, and stearyl sodium fumarate.
  • Examples of the coating agent include ethyl cellulose, aminoalkyl methacrylate copolymer RS, hypromellose, sucrose and the like.
  • Examples of the solvent include water, propylene glycol, and physiological saline.
  • Examples of the solubilizing agent include polyethylene glycol, ethanol, ⁇ -cyclodextrin, macrogol 400, polysorbate 80 and the like.
  • Examples of the suspending agent include carrageenan, crystalline cellulose / carmellose sodium, and polyoxyethylene hydrogenated castor oil.
  • Examples of the tonicity agent include sodium chloride, glycerin, potassium chloride and the like.
  • Examples of the pH adjuster / buffering agent include sodium citrate, hydrochloric acid, lactic acid, phosphoric acid, sodium dihydrogen phosphate and the like.
  • Examples of the pain-relieving agent include procaine hydrochloride, lidocaine and the like.
  • Examples of the preservative include ethyl paraoxybenzoate, cresol, benzalkonium chloride and the like.
  • Examples of the antioxidant include sodium sulfite, ascorbic acid, natural vitamin E and the like.
  • Examples of the colorant include titanium oxide, iron sesquioxide, edible blue No. 1, copper chlorophyll and the like.
  • Examples of the flavoring / flavoring agent include aspartame, saccharin, sucralose, l-menthol, mint flavor and the like.
  • Examples of the stabilizer include sodium pyrosulfite, sodium edetate, erythorbic acid, magnesium oxide, dibutylhydroxytoluene and the like.
  • an oral solid preparation When preparing an oral solid preparation, it is shaped into crystals of compound (I) (that is, crystals of free form of compound (I) or crystals of compound (I) with acid (salt crystals or co-crystals)). After adding an agent, a binder, a disintegrant, a lubricant, a colorant, a flavoring / flavoring agent, etc. as necessary, tablets, coated tablets, granules, powders, capsules, etc. can be manufactured by a conventional method. can.
  • a pH adjuster is added to the crystals of compound (I) (that is, the crystals of the free form of compound (I) or the crystals of compound (I) with an acid (salt crystals or co-crystals)).
  • Subcutaneous, intramuscular and intravenous injections can be produced by a conventional method by adding a buffer, a stabilizer, an tonicity agent, a local anesthetic agent and the like.
  • each dosage unit form ie, crystals of the free form of compound (I) or crystals of compound (I) with an acid (salt crystals or co-crystals)
  • each dosage unit form ie, crystals of the free form of compound (I) or crystals of compound (I) with an acid (salt crystals or co-crystals)
  • it is not constant depending on the patient's symptom to which this is applied, or its dosage form, etc., in general, in terms of the free form of compound (I) per administration unit form, about 0.05 to 1000 mg for oral preparations, injections It is desirable to use about 0.1 to 500 mg, and about 1 to 1000 mg for suppositories or external preparations.
  • crystals of compound (I) of a drug having each administration form that is, crystals of a free form of compound (I) or crystals of compound (I) with an acid (salt crystals or co-crystals)
  • the dose of compound (I) varies depending on the patient's symptoms, body weight, age, gender, etc. and cannot be unconditionally determined. It is preferably 0.1 to 1000 mg, and it is preferable to administer this once a day or in divided doses of about 2 to 3 times.
  • silica gel column chromatography use Moritex Prefpack (registered trademark) SI, Biotage KP-Sil® Silka prepacked column, or Biotage HP-Sil® (registered trademark) Silka prepacked column.
  • Moritex Prefpack registered trademark
  • Biotage KP-Sil® Silka prepacked column or Biotage HP-Sil® (registered trademark) Silka prepacked column.
  • basic silica gel column chromatography a prepacked column manufactured by Moritex (registered trademark) NH or KP-NH (registered trademark) manufactured by Biotage was used.
  • KieselgelTM60F254, Art. 5744 or Wako's NH2 silica gel 60F254 plate was used.
  • an AL400 400 MHz; JEOL
  • a Mercury400 400 MHz; Agitate Technology
  • an Inova400 400 MHz; Azilent Technology
  • 400MNMR probe 400MNMR probe
  • Reverse-phase preparative HPLC purification was carried out using a preparative system manufactured by WATERS under the following conditions.
  • Column flow rate 25 mL / min
  • Mobile phase water / acetonitrile (0.1% formic acid)
  • Injection amount 0.1-0.5 mL
  • Powder X-ray diffraction measurement Powder X-ray diffraction was measured according to one of the following test conditions after lightly pulverizing an appropriate amount of a test substance in an agate mortar as needed.
  • TG-DTA measurement In the differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement (TG-DTA measurement), 2 to 3 mg of the test substance was tested according to the following test conditions.
  • Equipment TG / DTA7200 Hitachi High-Tech Science Co., Ltd.
  • Sample container Aluminum Temperature rise rate: Heat up from 25 to 290 ° C at 10 ° C / min
  • Atmospheric gas Air (200 mL / min)
  • Controls Handling of equipment, including empty pan data processing, was in accordance with the methods and procedures instructed by each equipment.
  • Synthesis Example 1 (2) 4-Amino-7-((3R, 5S) -1- (tert-butoxycarbonyl) -5-methylpyrrolidine-3-yl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine- A compound (28.0 g) of Synthesis Example 1 (1), 10% palladium carbon catalyst (720 mg), NMP (84 mL), methanol (26 mL), and triethylamine (17.6 mL) were placed in a 5-carboxylic acid synthetic pressure-resistant tube. After the addition, carbon monoxide was substituted, and the mixture was stirred at 100 ° C. for 2 hours.
  • reaction mixture was cooled to room temperature, 2M aqueous sodium hydroxide solution (79 mL) was added, and the mixture was stirred at 80 ° C. for 2 hours.
  • the reaction mixture was cooled to room temperature, filtered through Celite, washed with methanol, and the filtrate was concentrated under reduced pressure. After adding more water, the aqueous layer was washed with tert-butyl methyl ether.
  • a 1 M aqueous potassium hydrogensulfate solution was added to the aqueous layer to adjust the pH to about 3, and the precipitated solid was collected by filtration, washed with water and dried to obtain the desired product (23.4 g).
  • the obtained compound was used in the next reaction without further purification.
  • Acetonitrile (3 mL) was added to the obtained amine body, the mixture was cooled to 0 ° C., acrylic chloride (99.9 mg) and diisopropylethylamine (713 mg) were added, and the mixture was stirred at 0 ° C. for 1 hour.
  • the reaction mixture was concentrated under reduced pressure, and the obtained residue was purified by silica gel chromatography (ethyl acetate: methanol) to obtain the desired product (281 mg).
  • Example 1 7-((3R, 5S) -1-acryloyl-5-methylpyrrolidine-3-yl) -4-amino-6- (cyclopropylethynyl) -N-((R) -1-phenylethyl) -7H-Pyrrolidine [2,3-d] Pyrimidine-5-Carboxamide (Compound (I)) Production of Type II Crystal with 1 Equivalent Phenylic Acid The following two methods according to Production Method 1 and Production Method 2. Type II crystals with phenylic acid were produced. The free I-type crystal of compound (I) was synthesized by the same method as in Example 3 described later.
  • Powder X-ray diffraction spectrum (method A): Shown in FIG. The powder X-ray diffraction spectrum data is shown in Table 2.
  • the characteristic diffraction angles are as follows. Characteristic diffraction angle (2 ⁇ ⁇ 0.2 °): 5.5 °, 6.8 °, 9.3 °, 13.4 °, 15.3 °, 16.3 °, 18.5 °, 19.8 °, 22.0 ° and 24.5 °
  • Differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement curve shown in FIG. Endothermic peak (peak top value) in the differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement curve: around 178 ° C
  • Example 2 7-((3R, 5S) -1-acryloyl-5-methylpyrrolidine-3-yl) -4-amino-6- (cyclopropylethynyl) -N-((R) -1-phenylethyl) Production of Free Form II Crystal of -7H-Pyrrolidine [2,3-d] Pyrimidine-5-Carboxamide (Compound (I)) Free form by any of the four methods described in the following production methods 1 to 4. Type II crystals were produced.
  • Powder X-ray diffraction spectrum (method A): Shown in FIG. The powder X-ray diffraction spectrum data is shown in Table 3. The characteristic diffraction angles are as follows.
  • Powder X-ray diffraction spectrum (method A): Shown in FIG. The powder X-ray diffraction spectrum data is shown in Table 4.
  • the characteristic diffraction angles are as follows. Characteristic diffraction angle (2 ⁇ ⁇ 0.2 °): 9.9 °, 11.7 °, 13.2 °, 17.7 °, 18.1 °, 18.8 ° and 20.8 °
  • Characteristic diffraction angle (2 ⁇ ⁇ 0.2 °): 9.9 °, 11.7 °, 13.2 °, 17.7 °, 18.1 °, 18.8 ° and 20.8 °
  • Differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement curve shown in FIG. Endothermic peak (peak top value) in the differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement curve: around 183 ° C
  • Example 4 7-((3R, 5S) -1-acryloyl-5-methylpyrrolidine-3-yl) -4-amino-6- (cyclopropylethynyl) -N-((R) -1-phenylethyl) Preparation of V-type crystals with 1 equivalent of -7H-pyrrolidine [2,3-d] pyrimidin-5-carboxamide (compound (I)) with phenylic acid
  • compound (I) obtained according to the method of Synthesis Example 1.
  • 481 mg of phenylic acid and 50 mL of acetone were added, and the mixture was suspended and stirred at 25 ° C. for 71 hours, and then collected by filtration to recover the solid. This was dried under room temperature and reduced pressure conditions for 7.5 hours to obtain 695.0 mg of the title crystal.
  • Powder X-ray diffraction spectrum (method A): Shown in FIG. The powder X-ray diffraction spectrum data is shown in Table 5.
  • the characteristic diffraction angles are as follows. Characteristic diffraction angle (2 ⁇ ⁇ 0.2 °): 6.9 °, 9.4 °, 10.2 °, 13.7 °, 21.1 °, 23.6 ° and 26.5 °
  • Differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement curve shown in FIG. Endothermic peak (peak top value) in the differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement curve: around 151 ° C
  • Example 5 7-((3R, 5S) -1-acryloyl-5-methylpyrrolidine-3-yl) -4-amino-6- (cyclopropylethynyl) -N-((R) -1-phenylethyl) Preparation of type I crystal with 1 equivalent of -7H-pyrrolidine [2,3-d] pyrimidin-5-carboxamide (compound (I)) with phenylic acid
  • compound (I) obtained according to the method of Synthesis Example 1.
  • 481 mg of phenylic acid and 50 mL of acetone were added, and the mixture was suspended and stirred at 25 ° C. for 19.5 hours, and then collected by filtration to recover the solid to obtain 868.8 mg of the title crystal.
  • Powder X-ray diffraction spectrum (method A): Shown in FIG. The powder X-ray diffraction spectrum data is shown in Table 6.
  • the characteristic diffraction angles are as follows. Characteristic diffraction angle (2 ⁇ ⁇ 0.2 °): 6.4 °, 10.3 °, 12.8 °, 15.0 °, 20.7 °, 23.4 ° and 26.6 °
  • Differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement curve shown in FIG. Endothermic peak (peak top value) in the differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement curve: around 153 ° C
  • Example 6 7-((3R, 5S) -1-acryloyl-5-methylpyrimidine-3-yl) -4-amino-6- (cyclopropylethynyl) -N-((R) -1-phenylethyl) Preparation of type I crystal with 0.5 equivalent of fumaric acid of -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-5-carboxamide (compound (I)) Compound (I) obtained according to the method of Synthesis Example 1. To 15 mg, 0.5 equivalent of fumaric acid and 0.3 mL of water were added, and the mixture was suspended and stirred at 50 ° C. for 93.5 hours, collected by filtration, and the solid was collected and dried to obtain the title crystal.
  • Powder X-ray diffraction spectrum (method B): Shown in FIG. Characteristic diffraction angles (2 ⁇ ⁇ 0.2 °): 6.4 °, 7.5 °, 9.7 °, 11.7 °, 15.1 °, 19.6 ° and 23.9 °
  • Characteristic diffraction angles (2 ⁇ ⁇ 0.2 °): 6.4 °, 7.5 °, 9.7 °, 11.7 °, 15.1 °, 19.6 ° and 23.9 °
  • Differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement curve shown in FIG. Endothermic peak (peak top value) in the differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement curve around 161 ° C
  • Example 7 7-((3R, 5S) -1-acryloyl-5-methylpyrrolidine-3-yl) -4-amino-6- (cyclopropylethynyl) -N-((R) -1-phenylethyl) Preparation of type II crystal with 0.5 equivalent of -7H-pyrrolidine [2,3-d] pyrimidin-5-carboxamide (compound (I)) phenylic acid Compound (I) obtained according to the method of Synthesis Example 1. To 300 mg, 1 equivalent of phenylic acid and 6 mL of ethanol were added, suspended and stirred at 50 ° C. for 19.5 hours, naturally cooled for 3 hours, collected by filtration, and the solid was recovered. This was washed with water, collected by filtration, and the solid was collected and dried to obtain 224.6 mg of the title crystal.
  • Powder X-ray diffraction spectrum shown in FIG. Characteristic diffraction angles (2 ⁇ ⁇ 0.2 °): 5.4 °, 6.4 °, 7.3 °, 12.8 °, 13.4 °, 14.7 ° and 15.4 °
  • Differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement curve shown in FIG. Endothermic peak (peak top value) in the differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement curve: around 162 ° C
  • Example 8 Analysis of molar ratio of compound (I) to fumaric acid
  • the measurement results of the NMR spectra of the type I crystal with 1 equivalent of fumaric acid, the type II crystal with 1 equivalent of fumaric acid, and the V type crystal with 1 equivalent of fumaric acid of compound (I) are shown below.
  • the measurement results of the NMR spectra of the free form I crystal and the free form II crystal of compound (I) are also shown below.
  • Powder X-ray diffraction spectrum (method B): Shown in FIG. Characteristic diffraction angles (2 ⁇ ⁇ 0.2 °): 8.1 °, 13.2 °, 20.4 °, 23.1 °, 24.7 ° and 26.1 °
  • Characteristic diffraction angles (2 ⁇ ⁇ 0.2 °): 8.1 °, 13.2 °, 20.4 °, 23.1 °, 24.7 ° and 26.1 °
  • Differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement curve shown in FIG. Heat generation peak (peak top value) in the differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement curve: around 153 ° C
  • Powder X-ray diffraction spectrum (method B): Shown in FIG. Characteristic diffraction angles (2 ⁇ ⁇ 0.2 °): 6.0 °, 15.7 ° and 18.8 °
  • Differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement curve shown in FIG. Heat generation peak (peak top value) in the differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement curve: around 130 ° C
  • Powder X-ray diffraction spectrum (method B): Shown in FIG. Characteristic diffraction angles (2 ⁇ ⁇ 0.2 °): 7.0 °, 7.4 °, 12.6 °, 19.0 ° and 25.4 °
  • Characteristic diffraction angles (2 ⁇ ⁇ 0.2 °): 7.0 °, 7.4 °, 12.6 °, 19.0 ° and 25.4 °
  • Differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement curve shown in FIG. Endothermic peak (peak top value) in the differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement curve: around 51 ° C and 179 ° C
  • Powder X-ray diffraction spectrum (method B): Shown in FIG. Characteristic diffraction angles (2 ⁇ ⁇ 0.2 °): 6.3 °, 7.4 °, 8.0 °, 17.6 °, 22.0 ° and 23.6 °
  • Characteristic diffraction angles (2 ⁇ ⁇ 0.2 °): 6.3 °, 7.4 °, 8.0 °, 17.6 °, 22.0 ° and 23.6 °
  • Differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement curve shown in FIG. Endothermic peak (peak top value) in the differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement curve: around 147 ° C
  • Powder X-ray diffraction spectrum (method B): Shown in FIG. 23. Characteristic diffraction angles (2 ⁇ ⁇ 0.2 °): 5.3 °, 6.5 °, 8.1 °, 15.3 ° and 24.2 ° Differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement curve: shown in FIG. 24. Endothermic peak (peak top value) in the differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement curve: around 156 ° C
  • Powder X-ray diffraction spectrum (method B): shown in FIG. Characteristic diffraction angles (2 ⁇ ⁇ 0.2 °): 7.0 °, 7.4 °, 13.4 °, 15.6 °, 19.2 ° and 25.6 °
  • Characteristic diffraction angles (2 ⁇ ⁇ 0.2 °): 7.0 °, 7.4 °, 13.4 °, 15.6 °, 19.2 ° and 25.6 °
  • Differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement curve shown in FIG. Endothermic peak (peak top value) in the differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement curve: around 204 ° C
  • Powder X-ray diffraction spectrum (method A): Shown in FIG. 27. Characteristic diffraction angles (2 ⁇ ⁇ 0.2 °): 7.2 °, 12.6 °, 17.3 ° and 23.4 ° Differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement curve: shown in FIG. 28. Endothermic peak (peak top value) in the differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement curve: around 121 ° C
  • Powder X-ray diffraction spectrum (method B): shown in FIG. 29. Characteristic diffraction angles (2 ⁇ ⁇ 0.2 °): 6.5 °, 10.7 °, 13.2 °, 14.6 °, 18.7 ° and 23.9 ° Differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement curve: shown in FIG. Endothermic peak (peak top value) in the differential thermal-thermogravimetric simultaneous measurement curve around 148 ° C and 159 ° C
  • Test Example 1 Measurement of HER2 Kinase Activity In Vitro
  • ProfilerPro Peptide 22 was used as a substrate.
  • the purified recombinant human HER2 protein used in the test was purchased from Carna Biosciences.
  • the compound (I) obtained according to the method of Synthesis Example 1 was serially diluted with dimethyl sulfoxide (DMSO).
  • DMSO dimethyl sulfoxide
  • ATP final concentration 5 ⁇ M
  • a DMSO solution of compound (I) final concentration of DMSO is 5%
  • the reaction was stopped by adding EDTA to the final concentration of 30 mM.
  • the non-phosphorylated substrate peptide (S) and the phosphorylated peptide (P) were separated and detected by microchannel capillary electrophoresis.
  • the amount of phosphorylation reaction was determined from the heights of the peaks of S and P, and the concentration of the compound capable of suppressing the phosphorylation reaction by 50% was defined as the IC50 value (nM) and is shown in Table 7 below.
  • Test Example 2 Measurement of Exon 20 Insertion Variant HER2 (HER2ex20insYVMA) In Vitro In Vitro In addition, ProfilerPro Peptide 22 was used as a substrate.
  • the purified recombinant human exon 20 insertion mutant HER2 (A775_G776insYVMA) protein used in the test was purchased from SignalChem.
  • the compound (I) obtained according to the method of Synthesis Example 1 was serially diluted with dimethyl sulfoxide (DMSO).
  • exxon 20 inserted mutant HER2 protein and compound (I) DMSO solution (DMSO in DMSO) in a buffer for kinase reaction (13.5 mM Tris (pH 7.5), 2 mM dithiothreitol, 0.009% Tween 20). The final concentration was 5%) and preincubated at 25 ° C. for 30 minutes. Then, the substrate peptide (final concentration: 1 ⁇ M), manganese chloride (final concentration: 25 mM), magnesium chloride (final concentration: 20 mM), and ATP (final concentration: 200 ⁇ M) were added and incubated at 25 ° C. for 220 minutes for a kinase reaction. rice field.
  • the reaction was stopped by adding EDTA to the final concentration of 30 mM.
  • the non-phosphorylated substrate peptide (S) and the phosphorylated peptide (P) were separated and detected by microchannel capillary electrophoresis.
  • the amount of phosphorylation reaction was determined from the heights of the peaks of S and P, and the concentration of the compound capable of suppressing the phosphorylation reaction by 50% was defined as the IC50 value (nM) and is shown in Table 7 below.
  • compound (I) has an excellent inhibitory activity against HER2 phosphorylation and an exon 20 insertion mutant HER2 phosphorylation.
  • Test Example 3 Measurement of growth inhibitory activity against HER2-expressing cell line SK-BR-3 cells, which are HER2-overexpressing human breast cancer cell lines, were placed in McCoy's 5a medium (manufactured by Life Technologies) containing 10% fetal bovine serum. Suspended. Cell suspensions were seeded in each well of a 384-well flat bottom microplate and cultured for 1 day in an incubator containing 5% carbon dioxide at 37 ° C. Compound (I) obtained according to the method of Synthesis Example 1 was dissolved in DMSO, and the compound was diluted with DMSO to a concentration 500 times the final concentration.
  • a DMSO solution of the compound was diluted with the medium used to suspend the cells, this was added to each well of the cell culture plate so that the final concentration of DMSO was 0.2%, and an incubator containing 5% carbon dioxide gas.
  • the cells were cultured at medium 37 ° C. for another 3 days.
  • the number of cells after culturing for 3 days in the presence of the compound was measured using CellTiter-Glo 2.0 (manufactured by Promega), and the growth inhibition rate was calculated from the following formula.
  • the concentration of the compound capable of inhibiting growth by 50% was defined as IC50 (nM).
  • Growth inhibition rate (%) (CT) / (C) ⁇ 100 T: Emission intensity of wells to which the test compound was added
  • C Emission intensity of wells to which the test compound was not added
  • Table 8 The results are shown in Table 8 below.
  • Test Example 4 Measurement of growth inhibitory activity against exon 20 insertion mutant HER2 expressing cell line
  • the growth inhibition activity against exon 20 insertion mutant HER2 is a mouse B lymphocyte precursor cell line into which the human exon 20 insertion mutant HER2 gene has been introduced. This was done using Ba / F3 cells.
  • Ba / F3 cells are RPMI containing 10% fetal bovine serum (FBS), 100 U / mL penicillin, 100 ⁇ g / mL streptomycin (Thermofisher Scientific) and 1 ng / mL mouse interleukin-3 (mIL-3) (CST).
  • Ba / F3-HER2insYVMA cells were suspended in RPMI-1640 medium containing 10% FBS, 100 U / mL penicillin, 100 ⁇ g / mL streptomycin, and the cell suspension was suspended in 96-well flat-bottomed microplates. The cells were seeded in each well and cultured at 37 ° C. for 1 day in an incubator containing 5% carbon dioxide gas.
  • the compound (I) obtained according to the method of Synthesis Example 1 is dissolved in DMSO, diluted with DMSO or the medium used for cell suspension, and the final concentration of DMSO is set in each well of the cell culture plate. The cells were added to 0.2% and cultured at 37 ° C.
  • the compound (I) also has excellent cell proliferation inhibitory activity in the HER2-expressing cell line (SK-BR-3) and the exon 20-inserted mutant HER2-expressing cell line (Ba / F3-HER2insYVMA). Became clear.
  • Test Example 5 Measurement of growth inhibitory activity against HER2-expressing cell line (NCI-N87) NCI-N87 cells (American Type Culture Collection, Cat No. ATCC®), which is a HER2-overexpressing human gastric cancer cell line, were used. It was suspended in RPMI1640 medium (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) containing 10% fetal bovine serum. The cell suspension was then seeded in each well of a 96-well flat bottom microplate and cultured for 1 day in an incubator containing 5% carbon dioxide at 37 ° C. Compound (I) obtained according to the method of Synthesis Example 1 was dissolved in DMSO, and the test compound was diluted with DMSO to a concentration 1000 times the final concentration.
  • the DMSO solution of compound (I) was diluted with the medium used to suspend the cells and added to each well of the cell culture plate to a final concentration of DMSO of 0.1%.
  • DMSO was diluted with the medium used to suspend the cells, and this was added to each well of the cell culture plate so that the final concentration of DMSO was 0.1%.
  • the cells were cultured at 37 ° C. for another 3 days in an incubator containing 5% carbon dioxide gas.
  • the cell count after culturing for 3 days in the presence of the compound was performed using CellTiter-Glo 2.0 (manufactured by Promega) according to the protocol recommended by Promega.
  • compound (I) also had excellent cell proliferation inhibitory activity in the HER2 overexpressing cell line (NCI-N87).
  • Test Example 6 Evaluation of Oral Absorption
  • the compound (I) obtained according to the method of Synthesis Example 1 was suspended or dissolved in a 0.5% HPMC aqueous solution and 0.1N hydrochloric acid, and BALB / cA mice (Nippon Claire Co., Ltd.) was orally administered at a dose of 50 mg / kg / day.
  • blood was collected from the facial vein 0.5, 1, 2, 4 and 6 hours later to obtain plasma.
  • the compound concentration in the obtained plasma was measured by LC-MS / MS, and the oral absorbability was evaluated. The results are shown in Table 10 below.
  • compound (I) was observed to have a sufficient plasma concentration and showed good oral absorbability.
  • Test Example 7 Evaluation of brain transferability
  • the compound (I) obtained according to the method of Synthesis Example 1 was suspended or dissolved in a 0.5% HPMC aqueous solution and 0.1N hydrochloric acid, and added to BALB / cA mouse Nippon Claire Co., Ltd.). It was orally administered at a dose of 50 mg / kg / day. After 0.5 hours after oral administration, blood was collected from the facial vein, and the entire brain was removed to obtain plasma and brain samples. After adding 3 times the amount of water to the obtained brain sample, homogenization was performed using an ultrasonic homogenizer to obtain a brain homogenate. The compound concentrations in the obtained plasma and brain homogenate were measured by LC-MS / MS, and the brain transferability was evaluated from the brain / plasma compound concentration. The results are shown in Table 11 below.
  • compound (I) showed good transferability to the brain.
  • Test Example 8 An antitumor effect confirmation test (in vivo) for a direct brain transplantation model of a Luciferase gene-introduced HER2-expressing cell line (NCI-N87-luc).
  • NCI-N87-Luc in which the Luciferase gene was introduced into NCI-N87, which is a human gastric cancer tumor cell purchased from American Type Culture Collection, was used.
  • NCI-N87-Luc is 5% CO2 in RPMI-1640 (4.5 g / L glucose, 10 mM HEPES and 1 mM sodium pyruvate) medium containing 10% fetal bovine serum (FBS). Cell lines were cultured at 37 ° C.
  • NCI-N87-Luc cells were resuspended at a concentration of 6.25 ⁇ 10 7 cells / mL in PBS.
  • a nude mouse BALB / cAJcl-nu / nu, Nippon Claire Co., Ltd.
  • An incision was made with a scalpel.
  • a hole was made in the skull using a microdrill, and 4 ⁇ L of the cell suspension was implanted in the brain at 0.8 ⁇ L / min using a needle, manipulator, and syringe pump.
  • Total Flux (Photon / sec) was measured using IVIS (PerkinElmer, Inc., model: Lumina II) for all surviving cases about 3 weeks after transplantation. From the results, 6 animals in each group were assigned using the MiSTAT (Ver. 2.00) grouping program. The test compound was orally administered once a day for 21 days (Day 1-21) from the day after the grouping. For the determination of the presence or absence of the effect, the value obtained by logarithmically transforming (Log 10) the Total Flex on the determination date (Day 22) was used.
  • test compound compound (I) obtained according to the method of Synthesis Example 1 was used, and the compound (I) was administered at a dose of 25 mg / kg / day.
  • a graph was created in which the average Total Flux was logarithmically transformed (Log10) on the vertical axis and the number of days after transplantation (Day) was set on the horizontal axis, and the transition of Total Flux over time during the drug administration period was observed.
  • 0.1N HCl and 0.5% HPMC aqueous solution were used as 0.1N HCl and 0.5% HPMC aqueous solution.
  • BWCn (%) [(Weight on day n)-(Weight on grouping day)] / (Weight on grouping day) x 100 From this test result, it was clarified that compound (I) has an excellent antitumor effect on the HER2-overexpressing cell line (NCI-N87-luc) transplanted into the brain of a nude mouse. In addition, no weight loss of -20% or more was observed in all individuals, indicating that there were no serious side effects.
  • Test Example 9 Solid stability The solid stability of the free form II crystals of compound (I) obtained in the test examples and comparative examples and the type II crystals with 1 equivalent of fumaric acid when stored for 4 weeks was evaluated. .. Storage conditions: 60 ° C (closed system) Storage period: 4 weeks Storage amount: Approximately 30 mg Storage container: Glass bottle The results are shown in Table 12 below. For changes in the amount of related substances (the amount of substances detected other than compound (I)), weigh about 1 mg of the sample, dissolve it in about 1 mL of a water / acetonitrile mixed solution (1: 1), and accurately measure 5 ⁇ L of this solution. Therefore, the analysis was performed by HPLC by the following method.
  • HPLC measurement method (stability test) The amount of related substances in the sample solution was measured by HPLC analysis. The handling of the equipment including data processing was in accordance with the method and procedure instructed by each equipment.
  • Sample concentration 1 mg / mL
  • Mobile phase A 5 mmol / L ammonium formate buffer (pH 6.5) / acetonitrile (9: 1) mixed solution
  • Mobile phase B acetonitrile gradient is shown in Table 13.
  • Test Example 10 Dynamic Moisture Absorption / Desorption (DVS) Test Example and Reference Example A type II crystal with 1 equivalent of fumaric acid of compound (I), a free type II crystal, a free body type I crystal, 1
  • a water absorption / desorption test was carried out using V-type crystals with an equivalent amount of fumaric acid and crystals with an equivalent amount of L-tartaric acid.
  • the moisture absorption / desorption test was measured according to the following conditions. Approximately 10 mg of the sample was packed in a dedicated quartz holder and the weight of the sample at each humidity was continuously measured and recorded under the following conditions. The handling of the equipment including data processing was in accordance with the method and procedure instructed by each equipment.
  • type II crystals of compound (I) with 1 equivalent of fumaric acid gained 0.38% weight in a moisture adsorption / desorption test at 95% relative humidity, less than 1%. Therefore, it was judged that there was almost no hygroscopicity.
  • the mass increase of the free form II crystal, the free form I crystal, and the V type crystal with 1 equivalent of fumaric acid of the compound (I) is satisfied to 1% under a relative humidity of 95% in the water absorption / desorption test. Since there was no moisture absorption, it was judged that there was almost no hygroscopicity (Tables 15 to 17).
  • Test Example 11 Blood concentration measurement With respect to the type I crystal of compound (I) obtained in the test example, the type II crystal of compound (I), and the 1 equivalent of the type II fumarate crystal of compound (I), blood was obtained. A medium concentration measurement test was performed. Specifically, the type I crystal of compound (I) uses 0.5% HPMC containing 0.1N hydrochloric acid, and the type II crystal of compound (I) and 1 equivalent of fumaric acid of compound (I). Using 0.5% HPMC, suspensions of 100 mg / 10 mL and 300 mg / 10 mL of compound (I) (free form) in terms of molecular weight were prepared.
  • the rats were returned to the rat cage and the state after awakening from anesthesia was confirmed.
  • the depth of isoflurane anesthesia was confirmed, and then the limbs were fixed on the back with a small animal experimental fixer, the abdomen was opened, and the abdominal large arteries and veins were euthanized by incision.

Abstract

７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））の結晶、その酸との結晶（塩の結晶又は共結晶）を提供する。粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、５．５°，６．８°，９．３°，１３．４°，１５．３°，１６．３°，１８．５°，１９．８°，２２．０°及び２４．５°から選択される３つ以上に特徴的なピークを有する、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶。 粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、８．３°，１４．８°，１７．３°，１８．０°，１９．１°，２０．３°，２１．０°，２２．５°，２３．０°及び２６．２°から選択される３つ以上に特徴的なピークを有する、化合物（Ｉ）の（フリー体）ＩＩ型結晶。 粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、９．９°，１１．７°，１３．２°，１７．７°，１８．１°，１８．８°及び２０．８°から選択される３つ以上に特徴的なピークを有する、化合物（Ｉ）の（フリー体）Ｉ型結晶。 粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、６．９°，９．４°，１０．２°，１３．７°，２１．１°，２３．６°及び２６．５°から選択される４つ以上に特徴的なピークを有する、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＶ型結晶。 粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、６．４°，１０．３°，１２．８°，１５．０°２０．７°，２３．４°及び２６．６°から選択される４つ以上に特徴的なピークを有する、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶。

Description

ピリミジン化合物の結晶
　本発明は、抗腫瘍剤として有用なピリミジン化合物の結晶及び当該結晶を含む医薬組成物に関する。
　ＨＥＲ２（ＥｒｂＢ２とも呼ばれる）は、ＥｒｂＢファミリーに属する受容体型チロシンキナーゼである。
　ＨＥＲ２は、がん原因遺伝子として考えられ、ＨＥＲ２の遺伝子増幅や過剰発現、変異等が様々ながんで報告されている。非臨床・臨床研究データから、これらＨＥＲ２の遺伝子異常・過剰発現等を伴うがん細胞において、ＨＥＲ２及び下流シグナルの活性化が、がん細胞の生存・増殖等において重要な役割を担っていると考えられている（非特許文献１）。
　従って、ＨＥＲ２のキナーゼ活性を制御できる阻害剤は、ＨＥＲ２の遺伝子増幅や過剰発現、変異を有するがん細胞において、ＨＥＲ２及び下流シグナル伝達を阻害することにより抗腫瘍効果を発揮することが想定されるため、がん患者の治療、延命やＱＯＬ向上に有用であると考えられる。
　肺癌では約２５－４０％、乳癌では約１５－３０％、その他複数のがんにおいても一定の割合で脳転移を生じるとの報告がある（非特許文献２、３）。実際に、ＨＥＲ２陽性の乳癌では、約２０－３０％が脳転移を生じるとの報告がある（非特許文献４）。
　ＨＥＲ２阻害活性を有する化合物としては、ラパチニブ（Ｌａｐａｔｉｎｉｂ）、ネラチニブ（Ｎｅｒａｔｉｎｉｂ）などがＨＥＲ２陽性乳癌に対する治療剤として承認されている。しかしながら、いずれもｐ－ｇｐ、Ｂｃｒｐの基質であることから、非臨床試験では脳移行性は限定的であるとの報告がある（非特許文献５）。実際に、ラパチニブやネラチニブの臨床試験において、脳転移がんに対する十分な効果は得られていない（非特許文献６、７、８、９）。
　脳転移巣も含めた病態のコントロールという観点から、ＨＥＲ２に対して阻害活性を持ち、かつ、脳移行性も有するＨＥＲ２阻害剤が望まれている。
　また、一般的に、医薬品の有効活性成分として化合物が使用されるとき、品質を安定に保持するために及び／又は保管管理を容易にするために、化合物の化学的及び物理学的な安定性が必要である。このため、化学的及び物理学的な安定性を有し、ＨＥＲ２に対して阻害活性を持ち、かつ、脳移行性も有するＨＥＲ２阻害剤が望まれている。
Ｃａｎｃｅｒ　Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　Ｒｅｖｉｅｗｓ，４０，ｐ．７７０－７８０（２０１４） Ｃｕｒｒｅｎｔ　Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，２５，ｐ．Ｓ１０３－Ｓ１１４（２０１８） Ｂｒｅａｓｔ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓｅａｃｈ，１８（１），８，ｐ．１－９（２０１６） Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，２８，ｐ３２７１－３２７７（２０１０） Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，５９，ｐ１００３０－１００６６（２０１６） Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２６，ｐ２９９９－３００５（２００８） Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，２６，ｐ１９９３－１９９９（２００８） Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，２８，ｐ１３０１－１３０７（２０１０） Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，３４，ｐ９４５－９５２（２０１６）
　本発明は、化学的及び物理学的な安定性を有し、ＨＥＲ２に対して阻害活性を持ち、かつ、脳移行性も有するＨＥＲ２阻害剤を提供することを目的とする。特に本発明は、安定性に優れ、経口吸収性が良好で、かつ、再現性良く取得可能なＨＥＲ２阻害剤の結晶を提供することを目的とする。
　本発明者らは、上記の課題を解決すべく鋭意研究を行ったところ、下記式（Ｉ）で表される７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（以下、「化合物（Ｉ）」ともいう）が、ＨＥＲ２阻害活性及び脳移行性を有し、ＨＥＲ２を阻害することによりＨＥＲ２が関与する疾患（特に、悪性腫瘍）の治療剤として有用であることを見出した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000001
　そして、本発明者らは、化合物（Ｉ）にはフリー体として２つの結晶形（Ｉ型結晶、ＩＩ型結晶）、及び酸との結晶（塩体の結晶又は共結晶）として、塩酸との結晶（塩酸とのＩ型結晶、塩酸とのＩＩ型結晶、塩酸とのＩＩＩ型結晶）、臭化水素酸との結晶、１当量の酒石酸との結晶、フマル酸との結晶（０．５当量のフマル酸とのＩ型結晶、０．５当量のフマル酸とのＩＩ型結晶、１当量のフマル酸とのＩ型結晶、１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶、１当量のフマル酸とのＩＩＩ型結晶、１当量のフマル酸とのＩＶ型結晶、１当量のフマル酸とのＶ型結晶）、コハク酸との結晶を見出した。
　その結晶形のうちフリー体Ｉ型結晶、フリー体ＩＩ型結晶、１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶、１当量のフマル酸とのＶ型結晶それぞれにおいて、非吸湿性で優れた固体安定性があるという医薬品製造において有利な性質を見出し、また経口吸収性に優れること等を見出し、本発明を完成させた。
　すなわち、本発明は、下記の実施形態を含む。
〔１〕　粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、５．５°，６．８°，９．３°，１３．４°，１５．３°，１６．３°，１８．５°，１９．８°，２２．０°及び２４．５°から選択される３つ以上にピークを有する、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのフマル酸とのＩＩ型結晶であって、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドとフマル酸のモル比が１：１である、結晶。
〔２〕　粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、５．５°，６．８°，９．３°，１３．４°，１５．３°，１６．３°，１８．５°，１９．８°，２２．０°及び２４．５°にピークを有する、〔１〕に記載の結晶。
〔３〕　図１に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶である、〔１〕又は〔２〕に記載の結晶。
〔４〕　示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピークが１７８℃付近である、〔１〕～〔３〕のいずれか１項に記載の結晶。
〔５〕　結晶の純度が９０質量％以上である、〔１〕～〔４〕のいずれかに記載の結晶。
〔６〕　粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、８．３°，１４．８°，１７．３°，１８．０°，１９．１°，２０．３°，２１．０°，２２．５°，２３．０°及び２６．２°から選択される３つ以上にピークを有する、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのＩＩ型結晶。
〔７〕　粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、８．３°，１４．８°，１７．３°，１８．０°，１９．１°，２０．３°，２１．０°，２２．５°，２３．０°及び２６．２°にピークを有する、〔６〕に記載の結晶。
〔８〕　図３に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶である、〔６〕又は〔７〕に記載の結晶。
〔９〕　示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピークが１８２℃付近である、〔６〕～〔８〕のいずれかに記載の結晶。
〔１０〕　結晶の純度が９０質量％以上である、〔６〕～〔９〕のいずれかに記載の結晶。
〔１１〕　粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、９．９°，１１．７°，１３．２°，１７．７°，１８．１°，１８．８°及び２０．８°から選択される４つ以上にピークを有する、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのＩ型結晶。
〔１２〕　粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、９．９°，１１．７°，１３．２°，１７．７°，１８．１°，１８．８°及び２０．８°にピークを有する、〔１１〕に記載の結晶。
〔１３〕　図５に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶である、〔１１〕又は〔１２〕に記載の結晶。
〔１４〕　示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピークが１８３℃付近である、〔１１〕～〔１３〕のいずれかに記載の結晶。
〔１５〕　結晶の純度が９０質量％以上である〔１１〕～〔１４〕のいずれかに記載の結晶。
〔１６〕　粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、６．９°，９．４°，１０．２°，１３．７°，２１．１°，２３．６°及び２６．５°から選択される４つ以上にピークを有する、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのフマル酸とのＶ型結晶であって、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドとフマル酸のモル比が１：１である、結晶。
〔１７〕　粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、６．９°，９．４°，１０．２°，１３．７°，２１．１°，２３．６°及び２６．５°にピークを有する、〔１６〕に記載の結晶。
〔１８〕　図７に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶である、〔１６〕又は〔１７〕に記載の結晶。
〔１９〕　示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピークが１５１℃付近である、〔１６〕～〔１８〕のいずれかに記載の結晶。
〔２０〕　結晶の純度が９０質量％以上である、〔１６〕～〔１９〕のいずれかに記載の結晶。
〔２１〕　粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、６．４°，１０．３°，１２．８°，１５．０°，２０．７°，２３．４°及び２６．６°から選択される４つ以上にピークを有する、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのフマル酸とのＩ型結晶であって、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドとフマル酸のモル比が１：１である、結晶。
〔２２〕　粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、６．４°，１０．３°，１２．８°，１５．０°，２０．７°，２３．４°及び２６．６°にピークを有する、〔２１〕に記載の結晶。
〔２３〕　図９に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶である、〔２１〕又は〔２２〕に記載の結晶。
〔２４〕　示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピークが１５３℃付近である、〔２１〕～〔２３〕のいずれかに記載の結晶。
〔２５〕　結晶の純度が９０質量％以上である、〔２１〕～〔２４〕のいずれかに記載の結晶。
〔２６〕　粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、６．４°，７．５°，９．７°，１１．７°，１５．１°，１９．６°及び２３．９°から選択される４つ以上にピークを有する、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのフマル酸とのＩ型結晶であって、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドとフマル酸のモル比が１：０．５である、結晶。
〔２７〕　粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、６．４°，７．５°，９．７°，１１．７°，１５．１°，１９．６°及び２３．９°にピークを有する、〔２６〕に記載の結晶。
〔２８〕　図１１に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶である、〔２６〕又は〔２７〕に記載の結晶。
〔２９〕　示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピークが１６１℃付近である、〔２６〕～〔２８〕のいずれかに記載の結晶。
〔３０〕　結晶の純度が９０質量％以上である、〔２６〕～〔２９〕のいずれかに記載の結晶。
〔３１〕　粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、５．４°，６．４°，７．３°，１２．８°，１３．４°，１４．７°及び１５．４°から選択される４つ以上にピークを有する、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのフマル酸とのＩＩ型結晶であって、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドとフマル酸のモル比が１：０．５である、結晶。
〔３２〕　粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、５．４°，６．４°，７．３°，１２．８°，１３．４°，１４．７°及び１５．４°にピークを有する、〔３１〕に記載の結晶。
〔３３〕　図１３に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶である、〔３１〕又は〔３２〕に記載の結晶。
〔３４〕　示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピークが１６２℃付近である、〔３１〕～〔３３〕のいずれかに記載の結晶。
〔３５〕　結晶の純度が９０質量％以上である、〔３１〕～〔３４〕のいずれかに記載の結晶。
〔３６〕〔１〕～〔３５〕のいずれかに記載の結晶を含有する医薬組成物。
〔３７〕〔１〕～〔３５〕のいずれかに記載の結晶を含有する経口投与用の医薬組成物。
〔３８〕〔１〕～〔３５〕のいずれかに記載の結晶を含有する抗腫瘍剤。
〔３９〕　医薬として使用するための〔１〕～〔３５〕のいずれかに記載の結晶。
〔４０〕　経口投与用の抗腫瘍剤を製造するための〔１〕～〔３５〕のいずれかに記載の結晶の使用。
〔４１〕　腫瘍の治療に使用するための〔１〕～〔３５〕のいずれかに記載の結晶。
〔４２〕　経口投与して腫瘍の治療に使用するための〔１〕～〔３５〕のいずれかに記載の結晶。
〔４３〕　腫瘍の治療方法であって、それを必要とする対象に、〔１〕～〔３５〕のいずれかに記載の結晶の有効量を投与することを含む、方法。
〔４４〕　医薬組成物を製造するための〔１〕～〔３５〕のいずれかに記載の結晶の使用。
〔４５〕　抗腫瘍剤を製造するための〔１〕～〔３５〕のいずれかに記載の結晶の使用。
　本発明の化合物（Ｉ）　７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのフリー体Ｉ型結晶、フリー体ＩＩ型結晶、１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶、１当量のフマル酸とのＶ型結晶は、高い安定性、取り扱い性（より低い吸湿性）、品質管理性等の観点から、他の結晶形と比較して優れている。さらにフリー体ＩＩ型結晶、１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は、経口吸収性に優れており、該化合物を医薬品用の原薬として使用する際の有用な形態である。また、１当量のフマル酸とのＩ型結晶はアセトン（溶媒）から固体として単離できる形態（単離後、乾燥してＶ型結晶にする）であるため，１当量のフマル酸とのＶ型結晶の製造の中間体としても有用である。
　本発明によれば、化合物（Ｉ）の新規な結晶もしくは化合物（Ｉ）と酸との新規な結晶、これを含む医薬組成物、抗腫瘍剤、又は経口投与用の抗腫瘍剤が提供される。
　好ましい態様において、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶、フリー体ＩＩ型結晶、フリー体Ｉ型結晶、１当量のフマル酸とのＶ型結晶、０．５当量のフマル酸とのＩ型結晶、０．５当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は、非吸湿性、取得再現性、固体安定性、経口吸収性などの医薬品製造において有利な性質の少なくとも一つを備える。
実施例１で得られた化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルを示す（縦軸は強度（ｃｏｕｎｔｓ）、横軸は回折角（２θ）を表す）。 実施例１で得られた化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶の示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の結果を示す（左縦軸はＴＧ曲線における重量（ｍｇ）、右縦軸はＤＴＡ曲線における熱流束（μＶ）、横軸は温度（℃）を表す）。 実施例２で得られた化合物（Ｉ）のＩＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルを示す（縦軸は強度（ｃｏｕｎｔｓ）、横軸は回折角（２θ）を表す）。 実施例２で得られた化合物（Ｉ）のＩＩ型結晶の示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の結果を示す（左縦軸はＴＧ曲線における重量（ｍｇ）、右縦軸はＤＴＡ曲線における熱流束（μＶ）、横軸は温度（℃）を表す）。 実施例３で得られた化合物（Ｉ）のＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルを示す（縦軸は強度（ｃｏｕｎｔｓ）、横軸は回折角（２θ）を表す）。 実施例３で得られた化合物（Ｉ）のＩ型結晶の示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の結果を示す（左縦軸はＴＧ曲線における重量（ｍｇ）、右縦軸はＤＴＡ曲線における熱流束（μＶ）、横軸は温度（℃）を表す）。 実施例４で得られた化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＶ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルを示す（縦軸は強度（ｃｏｕｎｔｓ）、横軸は回折角（２θ）を表す）。 実施例４で得られた化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＶ型結晶の示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の結果を示す（左縦軸はＴＧ曲線における重量（ｍｇ）、右縦軸はＤＴＡ曲線における熱流束（μＶ）、横軸は温度（℃）を表す）。 実施例５で得られた化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルを示す（縦軸は強度（ｃｏｕｎｔｓ）、横軸は回折角（２θ）を表す）。 実施例５で得られた化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶の示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の結果を示す（左縦軸はＴＧ曲線における重量（ｍｇ）、右縦軸はＤＴＡ曲線における熱流束（μＶ）、横軸は温度（℃）を表す）。 実施例６で得られた化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルを示す（縦軸は強度（ｃｏｕｎｔｓ）、横軸は回折角（２θ）を表す）。 実施例６で得られた化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩ型結晶の示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の結果を示す（左縦軸はＴＧ曲線における重量（ｍｇ）、右縦軸はＤＴＡ曲線における熱流束（μＶ）、横軸は温度（℃）を表す）。 実施例７で得られた化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルを示す（縦軸は強度（ｃｏｕｎｔｓ）、横軸は回折角（２θ）を表す）。 実施例７で得られた化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩＩ型結晶の示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の結果を示す（左縦軸はＴＧ曲線における重量（ｍｇ）、右縦軸はＤＴＡ曲線における熱流束（μＶ）、横軸は温度（℃）を表す）。 参考例１で得られた化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルを示す（縦軸は強度（ｃｏｕｎｔｓ）、横軸は回折角（２θ）を表す）。 参考例１で得られた化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩＩ型結晶の示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の結果を示す（左縦軸はＴＧ曲線における重量（ｍｇ）、右縦軸はＤＴＡ曲線における熱流束（μＶ）、横軸は温度（℃）を表す）。 参考例２で得られた化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＶ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルを示す（縦軸は強度（ｃｏｕｎｔｓ）、横軸は回折角（２θ）を表す）。 参考例２で得られた化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＶ型結晶の示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の結果を示す（左縦軸はＴＧ曲線における重量（ｍｇ）、右縦軸はＤＴＡ曲線における熱流束（μＶ）、横軸は温度（℃）を表す）。 参考例３で得られた化合物（Ｉ）の塩酸とのＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルを示す（縦軸は強度（ｃｏｕｎｔｓ）、横軸は回折角（２θ）を表す）。 参考例３で得られた化合物（Ｉ）の塩酸とのＩ型結晶の示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の結果を示す（左縦軸はＴＧ曲線における重量（ｍｇ）、右縦軸はＤＴＡ曲線における熱流束（μＶ）、横軸は温度（℃）を表す）。 参考例４で得られた化合物（Ｉ）の塩酸とのＩＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルを示す（縦軸は強度（ｃｏｕｎｔｓ）、横軸は回折角（２θ）を表す）。 参考例４で得られた化合物（Ｉ）の塩酸とのＩＩ型結晶の示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の結果を示す（左縦軸はＴＧ曲線における重量（ｍｇ）、右縦軸はＤＴＡ曲線における熱流束（μＶ）、横軸は温度（℃）を表す）。 参考例５で得られた化合物（Ｉ）の塩酸とのＩＩＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルを示す（縦軸は強度（ｃｏｕｎｔｓ）、横軸は回折角（２θ）を表す）。 参考例５で得られた化合物（Ｉ）の塩酸とのＩＩＩ型結晶の示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の結果を示す（左縦軸はＴＧ曲線における重量（ｍｇ）、右縦軸はＤＴＡ曲線における熱流束（μＶ）、横軸は温度（℃）を表す）。 参考例６で得られた化合物（Ｉ）の臭化水素酸との結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルを示す（縦軸は強度（ｃｏｕｎｔｓ）、横軸は回折角（２θ）を表す）。 参考例６で得られた化合物（Ｉ）の臭化水素酸との結晶の示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の結果を示す（左縦軸はＴＧ曲線における重量（ｍｇ）、右縦軸はＤＴＡ曲線における熱流束（μＶ）、横軸は温度（℃）を表す）。 参考例７で得られた化合物（Ｉ）の１当量のＬ－酒石酸との結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルを示す（縦軸は強度（ｃｏｕｎｔｓ）、横軸は回折角（２θ）を表す）。 参考例７で得られた化合物（Ｉ）の１当量のＬ－酒石酸との結晶の示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の結果を示す（左縦軸はＴＧ曲線における重量（ｍｇ）、右縦軸はＤＴＡ曲線における熱流束（μＶ）、横軸は温度（℃）を表す）。 参考例８で得られた化合物（Ｉ）のコハク酸との結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルを示す（縦軸は強度（ｃｏｕｎｔｓ）、横軸は回折角（２θ）を表す）。 参考例８で得られた化合物（Ｉ）のコハク酸との結晶の示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の結果を示す（左縦軸はＴＧ曲線における重量（ｍｇ）、右縦軸はＤＴＡ曲線における熱流束（μＶ）、横軸は温度（℃）を表す）。 化合物（Ｉ）のＬｕｃｉｆｅｒａｓｅ遺伝子導入ＨＥＲ２発現細胞株（ＮＣＩ－Ｎ８７－ｌｕｃ）の脳直接移植モデルに対する抗腫瘍効果を示す。 化合物（Ｉ）のＬｕｃｉｆｅｒａｓｅ遺伝子導入ＨＥＲ２発現細胞株（ＮＣＩ－Ｎ８７－ｌｕｃ）の脳直接移植モデルに対する体重増減率を示す。
　本発明は、下記式（Ｉ）で表される７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドの結晶、及びその酸との結晶（その塩の結晶または共結晶）に関する。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000002
 　具体的には、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶、フリー体のＩＩ型結晶、フリー体のＩ型結晶、１当量のフマル酸とのＶ型結晶、１当量のフマル酸とのＩ型結晶、０．５当量のフマル酸とのＩ型結晶、０．５当量のフマル酸とのＩＩ型結晶に関する。
なお、本明細書中、Ｉ型、ＩＩ型、ＩＩＩ型、ＩＶ型及びＶ型という記載は、結晶形を区別するための便宜的な名称であり、本発明に係る結晶はこの名称で限定されるものではない。
　本明細書において、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））の酸との結晶とは、塩の結晶又は酸との共結晶を示す。
塩の結晶は、化合物（Ｉ）と酸の分子とがイオン結合で結合した結晶であり、共結晶は、化合物（Ｉ）と酸の分子とが非イオン性の相互作用により結合した結晶である。本発明において、化合物（Ｉ）の酸との結晶は、塩の結晶であっても共結晶であってもよく、その両方の意味を包含する。例えば、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのフマル酸とのＩＩ型結晶であれば、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのフマル酸塩の結晶又は７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのフマル酸との共結晶の意を示す。
　結晶は、原子や分子が規則的な繰り返し構造を配置している固体を示し、繰り返し構造を持たないアモルファス（非晶質）の固体とは異なる。粉末Ｘ線回折測定（ＸＲＤ測定）、示差走査熱量測定（ＤＳＣ測定）、熱重量－示差熱同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ測定）、単結晶解析などの方法により、結晶、又はアモルファスの固体を調べることができる。結晶多形は、同一分子であって結晶中の原子や分子の配列が異なるものを示し、ＸＲＤ測定で得られるピークが結晶多形によって異なることが知られている。また、それぞれの結晶多形の間で溶解性、経口吸収性、安定性などが異なることが知られている。
　本明細書中、「結晶」、「非晶質体」なる語は、通常の意味で用いられる。
　本明細書中で単に「化合物（Ｉ）」と記載した場合は、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドを意味し、「非晶質体」、「結晶」のいずれをも含む意味で用いられる。
　本明細書で「化合物（Ｉ）の結晶」と記載した場合は、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶、及び、化合物（Ｉ）との酸との結晶（化合物（Ｉ）の塩の結晶及び化合物（Ｉ）の共結晶）のいずれをも含む意味で用いられる。
　本明細書中で結晶を構成する化合物（Ｉ）以外の分子（塩又は共結晶を構成する他の分子）が特定されていない結晶は、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））のフリー体の結晶を意味する。　本明細書中で当量と書かれていた場合は、モル当量を意味する。
　化合物（Ｉ）と酸との結晶（塩体の結晶又は共結晶）において、化合物（Ｉ）に対する酸の当量は、例えばＮＭＲやイオンクロマトグラフィーで分析できる。
本明細書中で結晶は、水和物であっても良い。
　また、化合物（Ｉ）、又はその塩のラベル体、すなわち、化合物（Ｉ）や化合物（Ｉ）の塩の、１つ以上の原子を放射性同位元素若しくは非放射性同位元素で置換した化合物も、本発明に包含される。
　結晶は、化合物（Ｉ）の結晶を含むものであればよく、単一結晶であってもそれ以外の化合物（Ｉ）の結晶を含む多形混合物であってもよい。具体的には結晶の純度が５０重量％以上である、すなわち５０重量％以上が単一の結晶であることが好ましく、結晶の純度が７５重量％以上である、すなわち７５重量％以上が単一の結晶であることが好ましく、結晶の純度が９０重量％以上である、すなわち９０重量％以上が単一の結晶であることがより好ましく、結晶の純度が９５重量％以上である、すなわち９５重量％以上が単一の結晶であることがさらに好ましく、結晶の純度が９９重量％以上である、すなわち９９重量％以上が単一の結晶であることが特に好ましい。
　本明細書において、化学純度とは高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）で測定した際の純度であり、化合物（Ｉ）の化学純度と記載したときには、化合物（Ｉ）を高速液体クロマトグラフィーで測定した際の純度を言う。その際に、純度測定に用いる検出器の波長は適宜設定することができる。具体的には、化合物（Ｉ）の結晶の化学純度は９５％以上が好ましく、９８％以上がより好ましく、９９％以上が特に好ましい。
　尚、粉末Ｘ線回折パターンは、データの性質上、結晶の同一性を認定する際は、回折角及び全体的なパターンが重要である。粉末Ｘ線回折パターンの相対強度は結晶成長の方向、粒子の大きさ、測定条件によって多少変動し得るものであるから、厳密に解されるべきではない。
　各種パターンから得られる数値は、その結晶成長の方向、粒子の大きさ、測定条件等によって多少の誤差が生じる場合がある。したがって、本明細書中、粉末Ｘ線回折パターンにおける回折角（２θ）の数値は、±０．２°程度の範囲で測定誤差を有し得る。
　本明細書において、「室温」は通常約１０℃から約３５℃を示す。
　また、示差熱熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）曲線における吸熱ピークは、１分あたりの昇温の幅、試料の化学純度等により測定温度が変化することがあり、通常±５．０℃を意味する。よって、本発明に係る結晶を（ＴＧ－ＤＴＡ測定した際には、ピーク（ピークトップ値）の誤差は±５．０℃を考慮する。その際に使用する「付近」という用語は±５．０℃を意味する。
　本発明の一形態は、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶（Ｉ型結晶、ＩＩ型結晶）、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸との結晶（Ｉ型結晶、ＩＩ型結晶、ＩＩＩ型結晶、ＩＶ型結晶、Ｖ型結晶）、化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸との結晶（Ｉ型結晶、ＩＩ型結晶）に関する。
　（化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶）
　化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は、図１に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有し、また、図２に示される示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の曲線を有する。
　また、本発明の一実施形態において、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は、粉末Ｘ線回折において表２に示す回折角（２θ）及び強度（ｃｔｓ）を有する。
　ここで、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルにおける特徴的なピークは、回折角（２θ±０．２°）として、５．５°，６．８°，９．３°，１３．４°，１５．３°，１６．３°，１８．５°，１９．８°，２２．０°及び２４．５°を挙げることができる。
　本発明にかかる化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は、上記特徴的なピークから選択される３つ以上のピークを有する結晶であり、好ましくは上記特徴的なピークから選択される４つ以上のピークを有する結晶であり、より好ましくは上記特徴的なピークから選択される５つ以上のピークを有する結晶であり、さらに好ましくは上記特徴的なピークから選択される６つ以上のピークを有する結晶であり、さらに好ましくは上記特徴的なピークから選択される７つ以上のピークを有する結晶であり、一層好ましくは上記特徴的なピークから選択される８つ以上のピークを有する結晶であり、より一層好ましくは上記特徴的なピークから選択される９つ以上のピークを有する結晶であり、特に好ましくは上記ピークのいずれもを有する結晶である。
　また、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶の示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピーク（ピークトップ値）は１７３～１８３℃、言い換えると１７８℃付近を挙げることができる。
　（化合物（Ｉ）のフリー体ＩＩ型結晶）
　化合物（Ｉ）のＩＩ型結晶は、図３に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有し、また、図４に示される示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の曲線を有する。
　また、本発明の一実施形態において、化合物（Ｉ）のフリー体のＩＩ型結晶は、粉末Ｘ線回折において表３に示す回折角（２θ）及び強度（ｃｔｓ）を有する。
　ここで、化合物（Ｉ）のＩＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルにおける特徴的なピークは、回折角（２θ±０．２°）として、８．３°，１４．８°，１７．３°，１８．０°，１９．１°，２０．３°，２１．０°，２２．５°，２３．０°及び２６．２°を挙げることができる。
　本発明にかかる化合物（Ｉ）のＩＩ型結晶は、上記特徴的なピークから選択される３つ以上のピークを有する結晶であり、好ましくは上記特徴的なピークから選択される４つ以上のピークを有する結晶であり、より好ましくは上記特徴的なピークから選択される５つ以上のピークを有する結晶であり、さらに好ましくは上記特徴的なピークから選択される６つ以上のピークを有する結晶であり、さらに好ましくは上記特徴的なピークから選択される７つ以上のピークを有する結晶であり、一層好ましくは上記特徴的なピークから選択される８つ以上のピークを有する結晶であり、より一層好ましくは上記特徴的なピークから選択される９つ以上のピークを有する結晶であり、特に好ましくは上記特徴的なピークのいずれもを有する結晶である。
　また、化合物（Ｉ）のＩＩ型結晶の示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピーク（ピークトップ値）は１７７～１８７℃、言い換えると１８２℃付近を挙げることができる。
　（化合物（Ｉ）のフリー体Ｉ型結晶）
　化合物（Ｉ）のＩ型結晶は、図５に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有し、また、図６に示される示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の曲線を有する。
　また、本発明の一実施形態において、化合物（Ｉ）のフリー体のＩ型結晶は、粉末Ｘ線回折において表４に示す回折角（２θ）及び強度（ｃｔｓ）を有する。
　ここで、化合物（Ｉ）のＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルにおける特徴的なピークは、回折角（２θ±０．２°）として、９．９°，１１．７°，１３．２°，１７．７°，１８．１°，１８．８°及び２０．８°を挙げることができる。
　本発明にかかる化合物（Ｉ）のＩ型結晶は、上記特徴的なピークから選択される３つ以上のピークを有する結晶であり、好ましくは上記特徴的なピークから選択される４つ以上のピークを有する結晶であり、より好ましくは上記特徴的なピークから選択される５つ以上のピークを有する結晶であり、さらに好ましくは上記特徴的なピークから選択される６つ以上のピークを有する結晶であり、特に好ましくは上記特徴的なピークのいずれもを有する結晶である。
　ここで、化合物（Ｉ）のＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルにおける特徴的なピークは、回折角（２θ±０．２°）として、９．９°，１１．７°，１３．２°，１８．８°及び２０．８°を挙げることができる。
　本発明にかかる化合物（Ｉ）のＩ型結晶は、上記特徴的なピークから選択される３つ以上のピークを有する結晶であり、好ましくは上記特徴的なピークから選択される４つ以上のピークを有する結晶であり、特に好ましくは上記特徴的なピークのいずれもを有する結晶である。
　また、化合物（Ｉ）のＩ型結晶の示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピーク（ピークトップ値）は１７８～１８８℃、言い換えると１８３℃付近を挙げることができる。
（化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＶ型結晶）
　化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＶ型結晶は、図７に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有し、また、図８に示される示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の曲線を有する。
　また、本発明の一実施形態において、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＶ型結晶は、粉末Ｘ線回折において表５に示す回折角（２θ）及び強度（ｃｔｓ）を有する。
　ここで、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＶ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルにおける特徴的なピークは、回折角（２θ±０．２°）として６．９°，９．４°，１０．２°，１３．７°，２１．１°，２３．６°及び２６．５°を挙げることができる。
　本発明にかかる化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＶ型結晶は、上記特徴的なピークから選択される３つ以上のピークを有する結晶であり、好ましくは上記特徴的なピークから選択される４つ以上のピークを有する結晶であり、より好ましくは上記特徴的なピークから選択される５つ以上のピークを有する結晶であり、さらに好ましくは上記特徴的なピークから選択される６つ以上のピークを有する結晶であり、特に好ましくは上記特徴的なピークのいずれもを有する結晶である。
　ここで、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＶ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルにおける特徴的なピークは、回折角（２θ±０．２°）として６．９°，１３．７°，２１．１°，２３．６°及び２６．５°を挙げることができる。
　本発明にかかる化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＶ型結晶は、上記特徴的なピークから選択される３つ以上のピークを有する結晶であり、好ましくは上記特徴的なピークから選択される４つ以上のピークを有する結晶であり、特に好ましくは上記特徴的なピークのいずれもを有する結晶である。
　また、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＶ型結晶の示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピーク（ピークトップ値）は１４６～１５６℃、言い換えると１５１℃付近を挙げることができる。
　（化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶）
　化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶は、図９に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有し、また、図１０に示される示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の曲線を有する。
　また、本発明の一実施形態において、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶は、粉末Ｘ線回折において表６に示す回折角（２θ）及び強度（ｃｔｓ）を有する。
　ここで、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルにおける特徴的なピークは、回折角（２θ±０．２°）として、６．４°，１０．３°，１２．８°，１５．０°，２０．７°，２３．４°及び２６．６°を挙げることができる。
　本発明にかかる化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶は、上記特徴的なピークから選択される３つ以上のピークを有する結晶であり、好ましくは上記特徴的なピークから選択される４つ以上のピークを有する結晶であり、より好ましくは上記特徴的なピークから選択される５つ以上のピークを有する結晶であり、さらに好ましくは上記特徴的なピークから選択される６つ以上のピークを有する結晶であり、特に好ましくは上記特徴的なピークのいずれもを有する結晶である。
　また、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶の示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピーク（ピークトップ値）は１４８～１５８℃、言い換えると１５３℃付近を挙げることができる。
　ここで、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルにおける特徴的なピークは、回折角（２θ±０．２°）として、６．４°，１０．３°，１２．８°，２０．７°，２３．４°及び２６．６°を挙げることができる。
　本発明にかかる化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶は、上記特徴的なピークから選択される３つ以上のピークを有する結晶であり、好ましくは上記特徴的なピークから選択される４つ以上のピークを有する結晶であり、より好ましくは上記特徴的なピークから選択される５つ以上のピークを有する結晶であり、特に好ましくは上記特徴的なピークのいずれもを有する結晶である。
　また、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶の示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピーク（ピークトップ値）は１４８～１５８℃、言い換えると１５３℃付近を挙げることができる。
　（化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩ型結晶）
　化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩ型結晶は、図１１に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有し、また、図１２に示される示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の曲線を有する。
　ここで、化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルにおける特徴的なピークは、回折角（２θ±０．２°）として、６．４°，７．５°，９．７°，１１．７°，１５．１°，１９．６°及び２３．９°を挙げることができる。
　本発明にかかる化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩ型結晶は、上記特徴的なピークから選択される４つ以上のピークを有する結晶であり、好ましくは上記特徴的なピークから選択される５つ以上のピークを有する結晶であり、より好ましくは上記特徴的なピークから選択される６つ以上のピークを有する結晶であり、特に好ましくは上記ピークのいずれもを有する結晶である。
　また、化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩ型結晶の示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピーク（ピークトップ値）は１５６～１６６℃、言い換えると１６１℃付近を挙げることができる。
　（化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩＩ型結晶）
　化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は、図１３に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有し、また、図１４に示される示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の曲線を有する。
　ここで、化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルにおける特徴的なピークは、回折角（２θ±０．２°）として、５．４°，６．４°，７．３°，１２．８°，１３．４°，１４．７°及び１５．４°を挙げることができる。
　本発明にかかる化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は、上記特徴的なピークから選択される４つ以上のピークを有する結晶であり、好ましくは上記特徴的なピークから選択される５つ以上のピークを有する結晶であり、より好ましくは上記特徴的なピークから選択される６つ以上のピークを有する結晶であり、特に好ましくは上記ピークのいずれもを有する結晶である。
　また、化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩＩ型結晶の示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピーク（ピークトップ値）は１５７～１６７℃、言い換えると１６２℃付近を挙げることができる。
　（化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩＩ型結晶）
　化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩＩ型結晶は、図１５に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有し、また、図１６に示される示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の曲線を有する。
　ここで、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルにおける特徴的なピークは、回折角（２θ±０．２°）として、８．１°，１３．２°，２０．４°，２３．１°，２４．７°及び２６．１°を挙げることができる。
　本発明にかかる化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩＩ型結晶は、上記特徴的なピークから選択される３つ以上のピークを有する結晶であり、好ましくは上記特徴的なピークから選択される４つ以上のピークを有する結晶であり、より好ましくは上記特徴的なピークから選択される５つ以上のピークを有する結晶であり、特に好ましくは上記特徴的なピークのいずれもを有する結晶である。
　また、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩＩ型結晶示差熱－熱重量同時測定により決定した発熱ピーク（ピークトップ値）は１４８～１５８℃、言い換えると１５３℃付近を挙げることができる。
　（化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＶ型結晶）
　化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＶ型結晶は、図１７に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有し、また、図１８に示される示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の曲線を有する。
　ここで、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＶ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルにおける特徴的なピークは、回折角（２θ±０．２°）として、６．０°，１５．７°及び１８．８°を挙げることができる。
　本発明にかかる化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＶ型結晶は、上記特徴的なピークのいずれもを有する結晶である。
　また、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＶ型結晶の示差熱－熱重量同時測定により決定した発熱ピーク（ピークトップ値）は１２５～１３５℃、言い換えると１３０℃付近を挙げることができる。
　（１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶の製造方法）
　本明細書中における一実施形態として、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は、例えば以下の２工程を含む方法により得られる。
工程１　化合物（Ｉ）のＩ型結晶にフマル酸及び下記の溶媒を添加し、任意選択で種結晶を添加する工程。
工程２　前記工程で得た懸濁液を攪拌し、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸との結晶を得る工程。
　その後濾取し、固体を回収する。回収された固体を水で洗浄し、乾燥することが好ましい。
　工程１のフマル酸は、化合物（Ｉ）のフリー体１当量に対して、フマル酸を好ましくは１．５～１０当量（より好ましくは２～５当量、最も好ましくは３当量）添加する。
　工程１の溶媒は好ましくは５～３５倍量（ｖ／ｗ）（より好ましくは５～３０倍量（ｖ／ｗ）、最も好ましくは１０倍量（ｖ／ｗ））添加する。
　工程１で使用する溶媒は、メタノール、エタノール、イソプロパノール、ｔｅｒｔ－ブタノールなどのアルコール類、１，４－ジオキサン、テトラヒドロフランなどのエーテル類、アセトン、メチルエチルケトンなどのケトン類、アセトニトリルなどの非プロトン性極性溶媒等の単一溶媒あるいは混合溶媒が例示できる。
　化合物（Ｉ）のＩ型結晶は、「（フリー体Ｉ型の結晶の製造方法）」の項や実施例３で後述する方法にて取得することが可能である。
　工程２の反応中の温度は、上記の通り室温以上各溶媒の沸点以下が好ましいが、特に制限されず適宜設定することができ、好ましくは２５～７０℃（より好ましくは４０～６０℃、最も好ましくは５０℃）である。
　工程２の反応中の攪拌時間は、懸濁液を好ましくは２４～１２４時間（より好ましくは４８～７２時間、最も好ましくは６０～６５時間）撹拌である。
　（フリー体ＩＩ型結晶の製造方法）
　（方法Ａ－１）
　本明細書中における一実施形態として、化合物（Ｉ）のフリー体ＩＩ型結晶は、例えば以下の２工程を含む方法（方法Ａ－１）により得られる。
工程１　化合物（Ｉ）にコハク酸、リン酸、及びアジピン酸のいずれかの酸及び富溶媒／貧溶媒の混合溶媒を添加し、任意選択で種結晶を添加する工程。
工程２　前記工程で得られた懸濁液を攪拌し、固体状の化合物（Ｉ）の結晶を得る工程。
　上記懸濁攪拌中には、溶媒の蒸発量に応じて、追加の溶媒（例えば富溶媒としての１－プロパノール）を必要に応じて複数回に分割して添加してもよい。
　その後、濾取し、固体を回収し、乾燥する。
　工程１の酸は、化合物（Ｉ）１当量に対して好ましくは０．５～２当量（より好ましくは０．７５～１．５当量、特に１当量）添加する。
　工程１の富溶媒／貧溶媒の混合溶媒（例えば１－プロパノール／水）を化合物（Ｉ）のフリー体に対して好ましくは５～５０倍量（ｖ／ｗ）（より好ましくは１０～３０倍量（ｖ／ｗ）、特に２０倍量（ｖ／ｗ））添加する。
　工程２の反応中の温度は、好ましくは２５～７０℃（より好ましくは４０～６０℃、特に好ましくは５０℃）である。
　工程２の反応中の攪拌時間は、好ましくは２～７日間（より好ましくは３～５日間、特に４日間）懸濁撹拌する。
　（方法Ａ－２）
　また本明細書中における別の実施形態として、化合物（Ｉ）のフリー体ＩＩ型結晶は、例えば以下の２工程を含む方法（方法Ａ－２）により得られる。
工程１　化合物（Ｉ）に富溶媒／貧溶媒の混合溶媒および種結晶を添加し、任意選択でコハク酸、リン酸、及びアジピン酸のいずれかの酸を添加する工程。
工程２　前記工程で得られた懸濁液を攪拌し、固体状の化合物（Ｉ）の結晶を得る工程。
　上記懸濁攪拌中には、溶媒の蒸発量に応じて、追加の溶媒（例えば富溶媒としての１－プロパノール）を必要に応じて複数回に分割して添加してもよい。
　その後、濾取し、固体を回収し、乾燥する。
　工程１のコハク酸の量は、化合物（Ｉ）１当量に対して好ましくは０．５～２当量（より好ましくは０．７５～１．５当量、特に１当量）添加する。
　工程１の富溶媒／貧溶媒の混合溶媒（例えば１－プロパノール／水の混合溶媒）を化合物（Ｉ）のフリー体に対して好ましくは１～１０倍量（ｖ／ｗ）（より好ましくは２～５倍量（ｖ／ｗ）、特に３倍量（ｖ／ｗ））及び種結晶（例えば（ｉ）又は（ｉｉ）のいずれかで得られた種結晶）を添加する。
　工程２の反応温度は、好ましくは２５～７０℃（より好ましくは４０～６０℃、特に好ましくは５０℃）である。
　工程２の反応時間は好ましくは６～４８時間（より好ましくは１２～２４時間、特に好ましくは１７．５～２４時間）である。
　（方法Ｂ）
　また本明細書中における別の実施形態として、化合物（Ｉ）のフリー体ＩＩ型結晶は、例えば以下の２工程を含む方法（方法Ｂ）により得られる。
工程１　化合物（Ｉ）に貧溶媒を添加し、任意選択で種結晶を添加する工程。
工程２　前記工程で得られた溶液に、富溶媒を添加し、得られた懸濁液を攪拌し、固体状の化合物（Ｉ）の結晶を得る工程。
　工程１の貧溶媒の量は、化合物（Ｉ）に、貧溶媒（例えばジイソプロピルエーテル）を化合物（Ｉ）のフリー体に対して好ましくは２～１０倍量（ｖ／ｗ）（より好ましくは３～７倍量（ｖ／ｗ）、特に５倍量（ｖ／ｗ））を添加する。
工程１の反応時間は、好ましくは２４～９６時間（より好ましくは３６～７２時間、特に４４．５時間）懸濁攪拌する。
　工程２の反応温度は、好ましくは２５～７０℃（より好ましくは４０～６０℃、特に好ましくは５０℃）である。
　工程２の富溶媒の量は、富溶媒（例えばエタノール）を化合物（Ｉ）のフリー体に対して好ましくは０．５～３倍量（ｖ／ｗ）（より好ましくは０．８～２倍量（ｖ／ｗ）、特に１倍量（ｖ／ｗ））を添加する。
　工程２の攪拌時間は好ましくは６～７２時間（より好ましくは１２～４８時間、特に２１時間）懸濁攪拌した後、濾取し、固体を回収し、乾燥する。
　上記懸濁攪拌中には、溶媒の蒸発量に応じて、追加の溶媒（例えば貧溶媒としてのジイソプロピルエーテル及び／又は富溶媒としてのエタノール）を必要に応じて複数回に分割して添加してもよい。
　化合物（Ｉ）のフリー体ＩＩ型結晶の製造に使用される富溶媒と貧溶媒の組み合わせとしては、メタノール（富溶媒）と水（貧溶媒）、メタノール（富溶媒）とジイソプロピルエーテル（ＩＰＥ）（貧溶媒）、メタノール（富溶媒）とヘプタン（貧溶媒）、エタノール（富溶媒）とＩＰＥ（貧溶媒）、エタノール（富溶媒）とヘプタン（貧溶媒）、１－プロパノール（富溶媒）と水（貧溶媒）、１－プロパノール（富溶媒）とＩＰＥ（貧溶媒）、１－プロパノール（富溶媒）とヘプタン（貧溶媒）、２－プロパノール（富溶媒）とヘプタン（貧溶媒）、アセトン（富溶媒）とＩＰＥ（貧溶媒）、アセトン（富溶媒）とヘプタン（貧溶媒）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）（富溶媒）と水（貧溶媒）、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）（富溶媒）と水（貧溶媒）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）（富溶媒）とＩＰＥ（貧溶媒）、又はＴＨＦ（富溶媒）とヘプタン（貧溶媒）等を使用することができる。
　中でも、富溶媒と貧溶媒の好ましい組み合わせとしては酢酸エチル（富溶媒）とｎ－ヘプタン（貧溶媒）、エタノール（富溶媒）と水（貧溶媒）、１－プロパノール（富溶媒）と水（貧溶媒）、エタノール（富溶媒）とジイソプロピルエーテル（貧溶媒）との組み合わせである。貧溶媒の量は、富溶媒の１～２０倍量（ｖ／ｖ）が好ましく、１～１０倍量（ｖ／ｖ）がより好ましい。
上記方法において、種結晶の添加量は、化合物（Ｉ）投入量の好ましくは０．５～３０（ｗ／ｗ）％、より好ましくは１～５（ｗ／ｗ）％とすることができる。
　（フリー体Ｉ型の結晶の製造方法）
　本明細書中における一実施形態として、化合物（Ｉ）のフリー体Ｉ型結晶は、例えば化合物（Ｉ）の粗体を溶媒に懸濁し、任意選択で種結晶を添加し、固体状の化合物（Ｉ）の結晶を得る工程を含む方法により得られる。
　種結晶は、フリー体Ｉ型結晶の晶析を促すため、任意選択で添加され、種結晶としては、適当量の化合物（Ｉ）のＩ型結晶又はＩ型結晶を含む混合結晶を加えることができる。種結晶を添加しなくとも上記方法により化合物（Ｉ）のＩ型結晶を得ることができるが、種結晶を添加することにより、上記化合物を取得する時間を短縮することができる。また、晶析時間の短縮と粒子径のコントロールのために攪拌しながら晶析させてもよい。
　加える種結晶は、化合物（Ｉ）の投入量の０．５～３０（ｗ／ｗ）％であり、好ましくは１～１０（ｗ／ｗ）％である。
　温度は、適宜設定することができるが、５０～６５℃が好ましい。
　上記の溶解温度にて化合物（Ｉ）を析出させることができるが、溶解温度で析出しない場合は、２５℃まで冷却することによりフリー体Ｉ型結晶を得ることができる。
　溶媒としては、酢酸エチル、エタノール、アセトニトリル、アセトン、ｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテル等を使用することができる。
　（１当量のフマル酸とのＶ型結晶の製造方法）
　本明細書中における一実施形態として、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＶ型結晶は、例えば、以下の２工程からなる方法により得られる。
工程１　化合物（Ｉ）に、化合物（Ｉ）のフリー体１当量に対して１～２当量のフマル酸及び溶媒としてのアセトンを化合物（Ｉ）のフリー体に対して４０～６０倍量（ｖ／ｗ）添加し、任意選択で種結晶を添加する工程。
工程２　前記工程で得られた懸濁液を攪拌し、濾取し、固体を回収する工程。
工程３　前記工程で得た固体を、好ましくは２０～６０℃の減圧条件下（好ましくは、２ｋＰａ以下の圧力）で乾燥し、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸との結晶を得る工程。
　工程１のフマル酸は、化合物（Ｉ）のフリー体１当量に対して、より好ましくは２当量添加する。
　工程１のアセトンは化合物（Ｉ）のフリー体に対して好ましくは４０～６０倍量（ｖ／ｗ）（より好ましくは５０倍量（ｖ／ｗ））添加する。
　工程２の反応温度は、好ましくは１０～３０℃（好ましくは２５℃）の温度である。
　工程２の反応時間は、好ましくは１２～９６時間（より好ましくは７１時間）である。
　工程３の反応温度は、得られた固体を２０～６０℃（例えば、室温）である。
　工程３の減圧時間は、（例えば、２ｋＰａ以下の圧力で、）好ましくは６～２４時間（より好ましくは７．５時間）乾燥する。
　本明細書中における別の実施形態として、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＶ型結晶は、以下の工程を含む方法により得られる。
工程１　１当量のフマル酸とのＩ型結晶を減圧条件下（好ましくは、２ｋＰａ以下の圧力）で乾燥する。
工程１の反応温度は、２０～６０℃である。
　（１当量のフマル酸とのＩ型結晶の製造方法）
　本明細書中における一実施形態として、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶は、例えば以下の２工程からなる方法により得られる。
工程１　化合物（Ｉ）に化合物（Ｉ）のフリー体１当量に対して１～２当量のフマル酸及び溶媒としてのアセトンを４０～６０倍量添加し、任意選択で種結晶を添加する工程。
工程２　前記工程で得られた懸濁液を３０℃以下で攪拌し、化合物（Ｉ）のフマル酸との結晶を得る工程。
　その後濾取し、固体を回収する。
　工程１のフマル酸の量は、化合物（Ｉ）のフリー体１当量に対して、フマル酸を好ましくは２当量添加する。
　工程１のアセトンは化合物（Ｉ）のフリー体に対して好ましくは４０～６０倍量（より好ましくは５０倍量）を添加する。
　工程２の反応温度は、好ましくは１０～３０℃（より好ましくは２５℃）である。
　工程２の反応時間は、好ましくは１２～２４時間（より好ましくは１９．５時間）である。
　（１当量のフマル酸とのＩＩＩ型結晶の製造方法）
　本明細書中における一実施形態として、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩＩ型結晶は、例えば以下の２工程を含む方法により得られる。
工程１　化合物（Ｉ）にフマル酸及び溶媒としてアセトニトリルを添加し、任意選択で種結晶を添加する工程。
工程２　前記工程で得られた懸濁液を１．５時間以下の短時間攪拌し、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸との結晶を得る工程。
　その後、濾取し、固体を回収する。
　工程１の化合物（Ｉ）のフリー体１当量に対して、フマル酸を好ましくは１～５当量（より好ましくは３当量）加える。
　工程１の溶媒（例えばアセトニトリル）を化合物（Ｉ）のフリー体に対して好ましくは２５～３５倍量（ｖ／ｗ）（より好ましくは３０倍量（ｖ／ｗ））を添加する。
　工程２の反応温度は、好ましくは４５～５５℃（特に好ましくは５０℃）の温度である。
　工程２の反応時間は、好ましくは０．５～１．５時間（より好ましくは１時間）である。
　（１当量のフマル酸とのＩＶ型結晶の製造方法）
　本明細書中における一実施形態として、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＶ型結晶は、例えば以下の２工程を含む方法により得られる。
工程１　化合物（Ｉ）にフマル酸及び溶媒として水を添加し、任意選択で種結晶を添加する工程。
工程２　前記工程で得られた懸濁液を２時間以下の短時間攪拌し、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸との結晶を得る工程。
　その後、濾取し、固体を回収する。
　工程１のフマル酸は、化合物（Ｉ）のフリー体１当量に対して、フマル酸を好ましくは１～５当量（より好ましくは３当量）添加する。
工程１の溶媒として水を化合物（Ｉ）のフリー体に対して好ましくは１５～２５倍量（より好ましくは２０倍量）を添加する。
工程２の反応時間は、好ましくは４５～５５℃（特に好ましくは５０℃）である。
工程２の反応温度は、好ましくは１～２時間（より好ましくは１．５時間）である。
　（０．５当量のフマル酸とのＩ型結晶の製造方法）
　本明細書中における一実施形態として、化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩ型結晶は、例えば以下の２工程を含む方法により得られる。
工程１　化合物（Ｉ）にフマル酸及び溶媒としての水を添加し、任意選択で種結晶を添加する工程。
工程２　前記工程で得られた懸濁液を、好ましくは室温以上溶媒の沸点以下の温度で、攪拌し、結晶を得る工程。
　その後濾取し、固体を回収し、乾燥する。
　工程１のフマル酸は、化合物（Ｉ）のフリー体１当量に対して、フマル酸を好ましくは０．５～１当量（より好ましくは０．５～０．７５当量、最も好ましくは０．５当量）添加する。
　工程１の溶媒としての水は化合物（Ｉ）のフリー体に対して好ましくは１０～４０倍量（ｖ／ｗ）（より好ましくは１５～２５倍量（ｖ／ｗ）、最も好ましくは２０倍量（ｖ／ｗ））を添加する。
　工程２の反応温度は、好ましくは４０～６０℃（より好ましくは４５～５５℃、最も好ましくは５０℃）である。
工程２の反応時間は、好ましくは４８～１２０時間（より好ましくは７２～９６時間、最も好ましくは９３．５時間）である。
　（０．５当量のフマル酸とのＩＩ型結晶の製造方法）
　本明細書中における一実施形態として、化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は、例えば以下の２工程を含む方法により得られる。
工程１　化合物（Ｉ）にフマル酸及びエタノールを添加し、任意選択で種結晶を添加する工程。
工程２　前記工程で得られた懸濁液を、好ましくは室温以上溶媒の沸点以下の温度で、攪拌し、結晶を得る工程。
　その後濾取し、固体を回収し、乾燥する。
工程１のフマル酸の量は、化合物（Ｉ）のフリー体１当量に対して、フマル酸を好ましくは０．５～１当量（好ましくは１当量）添加する。
　工程１の溶媒としてのエタノールは、化合物（Ｉ）のフリー体に対して好ましくは１０～４０倍量（ｖ／ｗ）（より好ましくは１５～２５倍量（ｖ／ｗ）、最も好ましくは２０倍量（ｖ／ｗ））を添加する。
　工程２の反応温度は、好ましくは４０～６０℃（より好ましくは４５～５５℃、最も好ましくは５０℃）である。
　工程２の反応時間は、好ましくは６～４８時間（より好ましくは１２～２４時間、最も好ましくは１９．５時間）である。
　化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶、フリー体ＩＩ型結晶、フリー体Ｉ型結晶、１当量のフマル酸とのＶ型結晶、０．５当量のフマル酸とのＩ型結晶、０．５当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は、非吸湿性、取得再現性、固体安定性、経口吸収性などの医薬品製造において有利な性質の少なくとも一つを備える。
　中でも、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶、フリー体ＩＩ型結晶、フリー体Ｉ型結晶、１当量のフマル酸とのＶ型結晶は、化合物（Ｉ）の他の結晶形態と比較して非吸湿性、取得再現性、固体安定性、経口吸収性等の医薬品製造において有利な性質を有する。
　化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は、吸湿性が低く、取得安定性がある。医薬品の開発候補化合物において、吸湿性が低く、安定して取得できることは医薬品の工業的生産の上で重要である。また、固体安定性と溶解性や、経口吸収性に優れるなどの医薬品として取り扱いやすい性質を持つ。したがって、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は、医薬品又は医薬品原薬として必要とされる優れた性質を有する。
　化合物（Ｉ）のフリー体ＩＩ型結晶は吸湿性が低い。これは医薬品の開発候補化合物において、安定した品質の医薬品の工業的生産の上で重要である。また、固体安定性と溶解性や、経口吸収性に優れるなどの医薬品として取り扱いやすい性質を持つ。したがって化合物（Ｉ）のフリー体ＩＩ型結晶は、医薬品又は医薬品原薬として必要とされる優れた性質を有する。
　化合物（Ｉ）のフリー体Ｉ型結晶は、吸湿性が低く、取得安定性に優れる。医薬品の開発候補化合物が低い吸湿性と取得安定性を備えることは、安定した品質の医薬品の工業的生産の上でも重要である。したがって、化合物（Ｉ）のＩ型結晶は、医薬品又は医薬品原薬として必要とされる優れた性質を有する。
　化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＶ型結晶は、吸湿性が低く、取得安定性に優れる。医薬品の開発候補化合物が低い吸湿性と取得安定性を備えることは、安定した品質の医薬品の工業的生産の上でも重要である。したがって、本発明に係る化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＶ型結晶は、医薬品又は医薬品原薬として必要とされる優れた性質を有する。
　化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶は、取得安定性に優れる。医薬品の開発候補化合物が取得安定性を備えることは、安定した品質の医薬品の工業的生産の上でも重要である。したがって、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶は、医薬品又は医薬品原薬として必要とされる優れた性質を有する。
　化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶は固体として回収可能であるため、１当量のフマル酸とのＶ型結晶の製造のための中間体としても有用である。
　化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩＩ型結晶は、取得安定性に優れる。医薬品の開発候補化合物が取得安定性を備えることは、安定した品質の医薬品の工業的生産の上でも重要である。したがって、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩＩ型結晶は、医薬品又は医薬品原薬として必要とされる優れた性質を有する。
　化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＶ型結晶は、取得安定性に優れる。医薬品の開発候補化合物が取得安定性を備えることは、安定した品質の医薬品の工業的生産の上でも重要である。したがって、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＶ型結晶は、医薬品又は医薬品原薬として必要とされる優れた性質を有する。
　化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩ型結晶は、取得安定性に優れる。医薬品の開発候補化合物が取得安定性を備えることは、安定した品質の医薬品の工業的生産の上でも重要である。したがって、化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩ型結晶は、医薬品又は医薬品原薬として必要とされる優れた性質を有する。
　化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は、取得安定性に優れる。医薬品の開発候補化合物が取得安定性を備えることは、安定した品質の医薬品の工業的生産の上でも重要である。したがって、本発明に係る化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩＩ型の結晶は、医薬品又は医薬品原薬として必要とされる優れた性質を有する。
　（その他の酸との結晶）
　本発明の他の形態は、化合物（Ｉ）の塩酸との結晶（Ｉ型結晶、ＩＩ型結晶、ＩＩＩ型結晶）、化合物（Ｉ）の臭化水素酸との結晶、化合物（Ｉ）の１当量のＬ－酒石酸との結晶、又は化合物（Ｉ）のコハク酸との結晶に関する。
　これらの結晶についての粉末Ｘ線回折スペクトル及び示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の曲線は、図１９～３０に示されている。
　これらの結晶についての粉末Ｘ線回折スペクトルにおける特徴的なピークは、参考例３～７に記載されている。これらの結晶は、参考例に記載された特徴的なピークから選択される３つ以上（好ましくは４つ以上、存在する場合にはより好ましくは５つ以上）のピークを有する結晶であり、特に好ましくは特徴的なピークのいずれもを有する結晶である。
　また、これらの結晶についての示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピークの温度についても参考例に記載されている。
　上述した化合物（Ｉ）のフリー体の結晶、酸との結晶（塩の結晶又は共結晶）に関して、析出した結晶は、例えば、ろ過、水による洗浄、減圧乾燥等の公知の分離精製手段によって、前記結晶の溶解溶液、混合溶液等から単離精製することができる。
　本発明の化合物（Ｉ）のフリー体の結晶、又は、酸との結晶（塩の結晶又は共結晶）は、優れたＨＥＲ２阻害活性を有する。また、ＨＥＲ２に対する優れた選択性を有している。したがって、本発明の化合物（Ｉ）のフリー体の結晶、又は、酸との結晶（塩の結晶又は共結晶）は、ＨＥＲ２過剰発現、ＨＥＲ２遺伝子増幅、又はＨＥＲ２変異等を有する疾患や悪性腫瘍に対し、抗腫瘍剤として有用であり、副作用が少ないという利点を有する。
　本明細書において「ＨＥＲ２」とは、ヒト又は非ヒト哺乳動物のＨＥＲ２を含み、好ましくはヒトＨＥＲ２である。また、「ＨＥＲ２」の語にはアイソフォームが含まれる。
　本発明の化合物（Ｉ）のフリー体の結晶、又は、酸との結晶（塩の結晶又は共結晶）は、その優れたＨＥＲ２阻害活性により、ＨＥＲ２が関与する疾患の治療のための医薬として有用である。
　「ＨＥＲ２が関与する疾患」とは、ＨＥＲ２の機能を欠失、抑制及び／又は阻害することによって、発症率の低下、症状の寛解、緩和、及び／又は完治する疾患が挙げられる。このような疾患として、例えば、悪性腫瘍等が挙げられるがこれに限定はされない。好ましくは、ＨＥＲ２過剰発現、ＨＥＲ２遺伝子増幅、又はＨＥＲ２変異を有する悪性腫瘍である。
　本発明の一形態の化合物（Ｉ）のフリー体の結晶、又は、酸との結晶（塩の結晶又は共結晶）は、野生型ＨＥＲ２、及びエクソン２０挿入変異などのＨＥＲ２ドメイン内に１つ以上の挿入変異、点変異、又は欠失変異などを有する変異型ＨＥＲ２を選択的に阻害する。
　本発明の一実施形態は、野生型ＨＥＲ２、及びエクソン２０挿入変異の一つであるＹＶＭＡ挿入変異を有するＨＥＲ２などを含む変異型ＨＥＲ２に対する阻害活性を有する化合物（Ｉ）のフリー体の結晶、又は、酸との結晶（塩の結晶又は共結晶）又はこれを含む医薬もしくは医薬組成物を提供する。
　本発明の一実施形態は、本発明の化合物（Ｉ）のフリー体の結晶、又は、酸との結晶（その塩の結晶又は共結晶）を含む、野生型ＨＥＲ２、及びＹＶＭＡ挿入変異を有するＨＥＲ２などを含む変異型ＨＥＲ２に対する阻害剤を提供する。
　ヒトＨＥＲ２遺伝子は、例えば配列番号１、配列番号３、又は配列番号５に示されるものであり、野生型ＨＥＲ２タンパク質は、例えば配列番号２、配列番号４、又は配列番号６に示されるアミノ酸配列からなる。ヒトＨＥＲ２遺伝子の塩基配列情報及び野生型ＨＥＲ２タンパク質のアミノ酸配列情報は、例えばアクセッション番号ＮＭ＿００４４４８、又はＮＭ＿００１２８９９３６、又はＮＭ＿００１００５８６２などにより得ることができる。
　いくつかの実施形態において、本発明の一形態の化合物（Ｉ）のフリー体の結晶、又は、酸との結晶（塩の結晶又は共結晶）は、配列番号２に示されるアミノ酸配列を基準として、Ｇ３０９Ａ、Ｓ３１０Ｆ、Ｒ６７８Ｑ、Ｌ７５５Ｓ、Ｌ７５５＿Ｔ７５９ｄｅｌ、Ｄ７６９Ｈ、Ａ７７５＿Ｇ７７６ｉｎｓＹＶＭＡ、Ｖ７７７Ｌ、Ｖ８４２Ｉ、Ｒ８９６Ｃのうちの１つ以上の変異を含む変異型ＨＥＲ２に対する阻害活性を示す。他の実施形態では、本発明の一形態の化合物（Ｉ）のフリー体の結晶、又は、酸との結晶（塩の結晶又は共結晶）は、配列番号２に示されるアミノ酸配列を基準として、Ａ７７５＿Ｇ７７６ｉｎｓＹＶＭＡを含む変異型ＨＥＲ２に対する阻害活性を示す。
　いくつかの実施形態において、本発明の一形態の化合物（Ｉ）のフリー体の結晶、又は、酸との結晶（塩の結晶又は共結晶）は、配列番号４に示されるアミノ酸配列を基準として、Ｇ２９４Ａ、Ｓ２９５Ｆ、Ｒ６６３Ｑ、Ｌ７４０Ｓ、Ｌ７４０＿Ｔ７４４ｄｅｌ、Ｄ７５４Ｈ、Ａ７６０＿Ｇ７６１ｉｎｓＹＶＭＡ、Ｖ７６２Ｌ、Ｖ８２７Ｉ、Ｒ８８１Ｃのうちの１つ以上の変異を含む変異型ＨＥＲ２に対する阻害活性を示す。他の実施形態では、本発明の一形態の化合物（Ｉ）のフリー体の結晶、又は、酸との結晶（塩の結晶又は共結晶）は、配列番号４に示されるアミノ酸配列を基準として、Ａ７６０＿Ｇ７６１ｉｎｓＹＶＭＡを含む変異型ＨＥＲ２に対する阻害活性を示す。
　いくつかの実施形態において、本発明の一形態の化合物（Ｉ）、又は、酸との結晶（塩の結晶又は共結晶）は、配列番号６に示されるアミノ酸配列を基準として、Ｇ２７９Ａ、Ｓ２８０Ｆ、Ｒ６４８Ｑ、Ｌ７２５Ｓ、Ｌ７２５＿Ｔ７２９ｄｅｌ、Ｄ７３９Ｈ、Ａ７４５＿Ｇ７４６ｉｎｓＹＶＭＡ、Ｖ７４７Ｌ、Ｖ８１２Ｉ、Ｒ８６６Ｃのうちの１つ以上の変異を含む変異型ＨＥＲ２に対する阻害活性を示す。他の実施形態では、本発明の一形態の化合物（Ｉ）のフリー体の結晶、又は、酸との結晶（塩の結晶又は共結晶）は、配列番号６に示されるアミノ酸配列を基準として、Ａ７４５＿Ｇ７４６ｉｎｓＹＶＭＡを含む変異型ＨＥＲ２に対する阻害活性を示す。
　また、いくつかの実施形態において、あるＨＥＲ２アイソフォームにおける変異において、アミノ酸の欠失や挿入によって、配列番号２で示されるアミノ酸の位置とは異なる場合であっても配列番号２で示されるアミノ酸の位置に相当する位置の変異と同様であると解される。そのため、例えば、配列番号２で表されるＨＥＲ２における３０９番目のグリシンは、配列番号４で示されるアミノ酸配列からなるＨＥＲ２においては、２９４番目のグリシンに相当する。そのため、例えば、「Ｇ３０９Ａ」は、配列番号２で表されるＨＥＲ２の３０９番目のグリシンがアラニンに変異していることを意味するが、配列番号４で示されるアミノ酸配列からなるＨＥＲ２においては、２９４番目のアミノ酸に相当する位置であるため、配列番号４で示されるアミノ酸配列からなるＨＥＲ２における「Ｇ２９４Ａ」は配列番号２で表されるＨＥＲ２における「Ｇ３０９Ａ」に相当する。なお、あるＨＥＲ２アイソフォームのあるアミノ酸が、配列番号２で示されるアミノ酸のどの位置に相当するアミノ酸であるかどうかは、例えば、ＢＬＡＳＴのＭｕｌｔｉｐｌｅ　Ａｌｉｇｎｍｅｎｔにより確認することができる。
配列リスト
［表Ａ］
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000003
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000004
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000005
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000006
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000007
　本発明の一実施形態は、上述した化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））を含む抗腫瘍剤を提供する。また、本発明の一実施形態は、腫瘍の治療方法であって、それを必要とする対象に、上述した化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））の有効量を投与することを含む方法を提供する。本発明の一実施形態は、抗腫瘍剤を製造するための化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））の使用が提供される。また、本発明の一実施形態は、腫瘍の治療に使用するための化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））が提供される。
　本発明の結晶は、腫瘍を外科的に摘出した後に再発防止のために行われる術後補助化学療法に用いるものであっても、腫瘍を外科的に摘出するために事前行われる術前補助化学療法に用いるものであってもよい。
　本発明の対象となる腫瘍は特に制限はされないが、例えば、脳腫瘍、頭頚部癌、消化器癌（食道癌、胃癌、十二指腸癌、肝臓癌、胆道癌（胆嚢・胆管癌等）、膵臓癌、結腸直腸癌（結腸癌、直腸癌等）等）、肺癌（非小細胞肺癌、小細胞肺癌、中皮腫等）、乳癌、生殖器癌（卵巣癌、子宮癌（子宮頚癌、子宮体癌等）等）、泌尿器癌（腎癌、膀胱癌、前立腺癌、精巣腫瘍等）、造血器腫瘍（白血病、悪性リンパ腫、多発性骨髄腫等）、骨・軟部腫瘍、皮膚癌等が挙げられ、好ましくは肺癌、乳癌、胃癌、結腸直腸癌、膀胱癌、胆道癌、又は子宮癌であり、より好ましくは肺癌、乳癌、胃癌、膀胱癌、又は胆道癌である。
　一実施態様において、腫瘍は脳腫瘍である。本発明の化合物は、血液脳関門の通過を必要とする脳の症状の治療に有用であり得る。一実施態様の化合物は、脳への送達のための血液脳関門の好ましい通過性、すなわち優れた脳移行性を有する。化合物の脳への移行性の指標としては、脳内の化合物濃度、Ｋｐ値（脳対血漿中薬物濃度比）がある。
　本発明の化合物で治療される脳腫瘍は、転移性脳腫瘍及び原発性脳腫瘍を含む。
　脳腫瘍は特に制限はないが、例えば、転移性脳腫瘍（例えば、肺癌、乳癌、胃癌、結腸直腸癌、膀胱癌、胆道癌、子宮癌等（好ましくは肺癌、乳癌又は胃癌）の脳転移）、毛様細胞性星状細胞腫、びまん性星細胞腫、乏突起膠腫・乏突起星細胞腫、退形成性星細胞腫・退形成性乏突起膠腫、退形成性乏突起星細胞腫、膠芽腫、上衣腫、退形成性上衣腫、神経節膠腫、中枢性神経細胞腫、髄芽腫、胚腫（ｇｅｒｍｉｎｏｍａ）、中枢神経系悪性リンパ腫、髄膜腫、神経鞘腫、ＧＨ産生下垂体腺腫、ＰＲＬ産生下垂体腺腫、ＡＣＴＨ産生下垂体腺腫、非機能性下垂体腺腫、頭蓋咽頭腫、脊索腫、血管芽腫、類上皮腫等が挙げられる。
　本明細書において、化合物の「有効量」という用語は、対象の生物学的又は医学的応答、例えば、酵素やタンパク質活性の減少もしくは阻害を引き起こし、又は症状を改善し、状態を緩和し、疾患の進行を遅くもしくは遅延させる、などの、本発明の化合物の量（治療有効量）を指す。
　本明細書において、「対象」という用語は、哺乳動物及び非哺乳動物を包含する。哺乳動物の例としては、限定されないが、ヒト、チンパンジー、類人猿、サル、ウシ、ウマ、ヒツジ、ヤギ、ブタ、ウサギ、イヌ、ネコ、ラット、マウス、モルモット、ハリネズミ、カンガルー、モグラ、イノシシ、クマ、トラ、ライオンなどが挙げられる。非哺乳動物の例としては、限定されないが、鳥類、魚類、は虫類などが挙げられる。一実施形態において、対象はヒトであり、本明細書で開示される症状、状態、又は疾患のための処置を必要とすると診断されたヒトであってもよい。
　化合物（Ｉ）、その塩の結晶又は共結晶を医薬として用いるにあたっては、当該結晶を粉砕するか又は粉砕することなく、治療目的に応じて各種の投与形態を採用可能であり、該形態としては、例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤、散剤、ドライシロップ剤等の経口剤；坐剤、吸入剤、点鼻剤、軟膏剤、貼付剤、注射剤等の非経口剤のいずれでもよい。これらの投与形態に適した医薬組成物は、薬学的に許容される担体を用いて、当業者に公知慣用の製剤方法により製造できる。
　本発明の一実施形態は、上述した化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））を含む抗腫瘍剤を提供する。また、本発明の一実施形態は、腫瘍の治療方法であって、それを必要とする対象に、上述した化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））の有効量を投与することを含む方法を提供する。また、本発明の一実施形態は、抗腫瘍剤を製造するための、上述した化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））の使用が提供される。また、本発明の一実施形態は、腫瘍の治療に使用するための、上述した化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））が提供される。
　本発明の一実施形態は、上述した化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））を含む経口投与用の抗腫瘍剤を提供する。また、本発明の一実施形態は、腫瘍の治療方法であって、それを必要とする対象に、上述した化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））の有効量を経口投与することを含む方法を提供する。また、本発明の一実施形態は、経口投与用の抗腫瘍剤を製造するための、上述した化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））の使用が提供される。また、本発明の一実施形態は、経口投与して腫瘍の治療に使用するための、上述した化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））が提供される。
　本発明の一形態は、上述した化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））を含む医薬組成物が提供される。本発明の一実施形態の医薬組成物は、上述した化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））、及び薬学的に許容される担体を含む。また、本発明の一実施形態は、医薬組成物を製造するための、上述した化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））の使用が提供される。本発明の別の一実施形態は、医薬として使用するための、上述した化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））が提供される。本発明の一実施形態では、（ｉ）上述した化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））を含む医薬組成物と（ｉｉ）該組成物の使用説明書とを含むキットが提供される。
　薬学的に許容される担体としては、製剤素材として慣用の各種有機或いは無機担体物質が用いられ、固形製剤における賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、コーティング剤、液状製剤における溶剤、溶解補助剤、懸濁化剤、等張化剤、緩衝剤、無痛化剤等として配合される。また、必要に応じて防腐剤、抗酸化剤、着色剤、甘味剤、安定化剤等の製剤添加物を用いることもできる。
　賦形剤としては、乳糖、白糖、Ｄ－マンニトール、デンプン、結晶セルロース、ケイ酸カルシウム等が挙げられる。
　結合剤としては、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、ポリビニルピロリドン、アメ粉、ヒプロメロース等が挙げられる。
　崩壊剤としては、デンプングリコール酸ナトリウム、カルメロースカルシウム、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、部分アルファー化デンプン等が挙げられる。
　滑沢剤としては、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ショ糖脂肪酸エステル、ステアリン酸、フマル酸ステアリルナトリウム等が挙げられる。
　コーティング剤としては、エチルセルロース、アミノアルキルメタクリレートコポリマーＲＳ、ヒプロメロース、白糖等が挙げられる。
　溶剤としては、水、プロピレングリコール、生理食塩液が挙げられる。
　溶解補助剤としては、ポリエチレングリコール、エタノール、α－シクロデキストリン、マクロゴール４００、ポリソルベート８０等が挙げられる。
　懸濁化剤としては、カラギーナン、結晶セルロース・カルメロースナトリウム、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油が挙げられる。
　等張化剤としては、塩化ナトリウム、グリセリン、塩化カリウム等が挙げられる。
　ｐＨ調節剤・緩衝剤としては、クエン酸ナトリウム、塩酸、乳酸、リン酸、リン酸二水素ナトリウム等が挙げられる。
　無痛化剤としては、プロカイン塩酸塩、リドカイン等が挙げられる。
　防腐剤としては、パラオキシ安息香酸エチル、クレゾール、ベンザルコニウム塩化物等が挙げられる。
　抗酸化剤としては、亜硫酸ナトリウム、アスコルビン酸、天然ビタミンＥ等が挙げられる。
　着色剤としては、酸化チタン、三二酸化鉄、食用青色１号、銅クロロフィル等が挙げられる。
　矯味・矯臭剤としてはアスパルテーム、サッカリン、スクラロース、ｌ－メントール、ミントフレーバー等が挙げられる。
　安定化剤としては、ピロ亜硫酸ナトリウム、エデト酸ナトリウム、エリソルビン酸、酸化マグネシウム、ジブチルヒドロキシトルエン等が挙げられる。
　経口用固形製剤を調製する場合は、化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））に賦形剤、必要に応じて結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味・矯臭剤等を加えた後、常法により錠剤、被覆錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等を製造することができる。
　注射剤を調製する場合は、化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））にｐＨ調整剤・緩衝剤、安定化剤、等張化剤、局所麻酔剤等を添加し、常法により皮下、筋肉内及び静脈内用注射剤を製造することができる。
　各投与単位形態中に配合されるべき化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））の量は、これを適用すべき患者の症状により、或いはその剤形等により一定ではないが、一般に投与単位形態あたり、化合物（Ｉ）のフリー体換算で、経口剤では約０．０５～１０００ｍｇ、注射剤では約０．１～５００ｍｇ、坐剤又は外用剤では約１～１０００ｍｇとするのが望ましい。
　また、各投与形態を有する薬剤の化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））の１日あたりの投与量は、患者の症状、体重、年齢、性別等によって異なり一概には決定できないが、通常成人（体重５０ｋｇ）１日あたり化合物（Ｉ）のフリー体換算で、約０．０５～５０００ｍｇ、好ましくは０．１～１０００ｍｇとすればよく、これを１日１回又は２～３回程度に分けて投与するのが好ましい。
　以下、実施例を挙げて本発明を更に具体的に説明するが、本発明はこれらによって何ら限定されるものではない。本発明は実施例により十分に説明されているが、当業者により種々の変更及び／又は修飾が可能であろうことは理解される。したがって、そのような変更及び／又は修飾が本発明の範囲を逸脱するものでない限り、それらは本発明に包含される。
　以下の化合物の実施例において、％は特記しない限り重量パーセントを示す。
　実施例で用いた各種試薬は、特に記載の無い限り市販品を使用した。シリカゲルカラムクロマトグラフィーには、モリテックス社製プリフパック（登録商標）ＳＩ、バイオタージ社製ＫＰ－Ｓｉｌ（登録商標）Ｓｉｌｉｃａプレパックドカラム、又はバイオタージ社製ＨＰ－Ｓｉｌ（登録商標）Ｓｉｌｉｃａプレパックドカラムを用いた。塩基性シリカゲルカラムクロマトグラフィーにはモリテックス社製プリフパック（登録商標）ＮＨ又はバイオタージ社製ＫＰ－ＮＨ（登録商標）プレパックドカラムを用いた。分取用薄層クロマトグラフィーにはメルク社製ＫｉｅｓｅｌｇｅｌＴＭ６０Ｆ２５４，Ａｒｔ．５７４４又は和光社ＮＨ２シリカゲル６０Ｆ２５４プレートを用いた。ＮＭＲスペクトルは、ＡＬ４００（４００ＭＨｚ；日本電子（ＪＥＯＬ））、Ｍｅｒｃｕｒｙ４００（４００ＭＨｚ；アジレント・テクノロジー）型スペクトロメータ、又は４００ＭＮＭＲプローブ（Ｐｒｏｔａｓｉｓ）を装備したＩｎｏｖａ４００（４００ＭＨｚ；アジレント・テクノロジー）型スペクトロメータを使用し、重溶媒中にテトラメチルシランを含む場合は内部基準としてテトラメチルシランを用い、それ以外の場合には内部基準としてＮＭＲ溶媒を用いて測定し、全δ値をｐｐｍで示した。
　ＬＣＭＳスペクトルはＷａｔｅｒｓ社製ＡＣＱＵＩＴＹ　ＳＱＤ（四重極型）を用いて下記条件にて測定した。
　カラム：Ｗａｔｅｒｓ製　ＡＣＱＵＩＴＹ　ＵＰＬＣ（登録商標）ＢＥＨ　Ｃ１８，２．１Ｘ５０ｍｍ，１．７μｍ
　ＭＳ検出：ＥＳＩ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ
　ＵＶ検出：２５４及び２１０ｎｍ
　カラム流速：０．５ｍＬ／ｍｉｎ
　移動相Ａ：０．１％ギ酸水溶液
　移動相Ｂ：０．１％ギ酸アセトニトリル溶液
　インジェクション量：１μＬ
　グラディエント（表１）
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000008
　逆相分取ＨＰＬＣ精製はＷＡＴＥＲＳ社製分取システムを用いて下記条件にて実施した。
　カラム：ＹＭＣ社製ＹＭＣ－Ａｃｔｕｓ　Ｔｒｉａｒｔ　Ｃ１８，２０×５０ｍｍ，５μｍとＹＭＣ社製ＹＭＣ－Ａｃｔｕｓ　Ｔｒｉａｒｔ　Ｃ１８，２０×１０ｍｍ，５μｍを連結したものを使用した。
　ＵＶ検出：２５４ｎｍ
　ＭＳ検出：ＥＳＩ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ
　カラム流速：２５ｍＬ／ｍｉｎ
　移動相：水／アセトニトリル（０．１％ギ酸）
　インジェクション量：０．１－０．５ｍＬ
　略号の意味を以下に示す。
ｓ：シングレット
ｄ：ダブレット
ｔ：トリプレット
ｄｔ：ダブル　トリプレット
ｍ：マルチプレット
ＤＭＳＯ－ｄ６：重ジメチルスルホキシド
ＣＤＣｌ３：重クロロホルム
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＤＭＡ：Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド
ＮＭＰ：１－メチル－２－ピロリジノン
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
　粉末Ｘ線回折測定
　粉末Ｘ線回折は、試験物質適量を必要に応じてメノウ製乳鉢で軽く粉砕した後、次のいずれかの試験条件に従って測定した。
装置：ＰＡＮａｌｙｔｉｃａｌ製ＥＭＰＹＲＥＡＮ（Ａ法）
反射法（集中法）
ターゲット：Ｃｕ
Ｘ線菅電流：４０ｍＡ
Ｘ線菅電圧：４５ｋＶ
走査範囲　：２θ＝５．０～４０．０°
ステップ　：２θ＝０．０１３１°
平均時間／ステップ：８．６７０ｓ
スキャンスピード：０．００１５°／ｓ
発散スリット：１°
散乱スリット：２．０　ｍｍ
受光スリット：８．０　ｍｍ
 
装置：ＰＡＮａｌｙｔｉｃａｌ製ＥＭＰＹＲＥＡＮ（Ｂ法）
透過法
ターゲット：Ｃｕ
Ｘ線菅電流：４０ｍＡ
Ｘ線菅電圧：４５ｋＶ
走査範囲　：２θ＝２．０～４０．０°
ステップ　：２θ＝０．００６６°
平均時間／ステップ：８．６７０ｓ
スキャンスピード：０．０００８°／ｓ
発散スリット：１／２°
散乱スリット：２．０　ｍｍ
受光スリット：無し
　データ処理を含む装置の取り扱いは、各装置で指示された方法及び手順にしたがった。なお、各種スペクトルから得られる数値は、その結晶成長の方向、粒子の大きさ、測定条件等によって多少変動する場合がある。したがって、それらの数値は厳密に解されるべきではない。
　示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ測定）は、試験物質２～３ｍｇにつき、次の試験条件に従い試験を行った。
装置：ＴＧ／ＤＴＡ７２００
日立ハイテクサイエンス株式会社製
試料容器：　アルミニウム製
昇温速度：２５～２９０℃まで１０℃／分で昇温
雰囲気ガス：空気（２００ｍＬ／分）
対照物質：空パン
　データ処理を含む装置の取り扱いは、各装置で指示された方法及び手順にしたがった。　
合成例１　７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））の合成
合成例１（１）　ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｓ，４Ｒ）－４－（４－アミノ－５－ヨード－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－７－イル）－２－メチルピロリジン－１－カルボキシラートの合成
　ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｓ，４Ｓ）－４－ヒドロキシ－２－メチルピロリジン－１－カルボキシラート（１９．０ｇ）と４－クロロ－５－ヨード－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン（１３．１ｇ）をＴＨＦ（１９０ｍＬ）に溶解して、０℃に冷却後、トリフェニルホスフィン（３７．２ｇ）とジイソプロピルアゾジカルボキシラート（２８．１ｍＬ）を加え、室温に昇温して１時間攪拌した。反応混合物を減圧濃縮した後、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル）にて精製し、対応するカップリング体を得た。得られた化合物はさらに精製することなく次の反応に用いた。
　耐圧管中に、得られたカップリング体とＴＨＦ（１１４ｍＬ）とアンモニア水（１１４ｍＬ）を加え、１００℃にて１４時間攪拌した。反応混合物を室温に冷却した後、水（２８５ｍＬ）に注ぎ込み、室温にて５時間撹拌した。析出した固体をろ取し、水で洗浄し、乾燥することで目的物（３４．５ｇ）を得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：　８．２７（ｓ，１Ｈ）　７．１５（ｓ，１Ｈ）　５．５５－５．７３（ｍ，２Ｈ）　５．１２－５．２５（ｍ，１Ｈ）　３．８６－４．１８（ｍ，２Ｈ）　３．４３－３．５７（ｍ，１Ｈ）　２．５９－２．６９（ｍ，１Ｈ）　１．９２－２．０３（ｍ，１Ｈ）　１．４８（ｓ，９Ｈ）　１．３０－１．４０（ｍ，３Ｈ）
ＥＳＩ－ＭＳ　ｍ／ｚ　４４４（ＭＨ＋）
合成例１（２）　４－アミノ－７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－５－メチルピロリジン－３－イル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボン酸の合成
　耐圧管に、合成例１（１）の化合物（２８．０ｇ）、１０％パラジウム炭素触媒（７２０ｍｇ）、ＮＭＰ（８４ｍＬ）、メタノール（２６ｍＬ）、トリエチルアミン（１７．６ｍＬ）を加えた後、一酸化炭素置換して、１００℃にて２時間攪拌した。反応混合物を室温に冷却し、２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（７９ｍＬ）を加え、８０℃にて２時間攪拌した。反応混合物を室温に冷却し、セライトろ過し、メタノールで洗浄し、ろ液のメタノールを減圧濃縮した。さらに水を加えた後、水層をｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテルで洗浄した。水層に１Ｍ硫酸水素カリウム水溶液を加えｐＨを約３に調整し、析出した固体をろ取し、水で洗浄し、乾燥することで目的物（２３．４ｇ）を得た。
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，　ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：　８．１４（ｓ，１Ｈ）　８．０８
（ｓ，１Ｈ）　５．１６－４．９３（ｍ，１Ｈ）　４．０７－３．７９（ｍ，２Ｈ）　３．６１－３．４５（ｍ，１Ｈ）　２．５３（ｍ，１Ｈ）　２．３３－２．０２（ｍ，１Ｈ）　１．４２（ｓ，９Ｈ）　１．２９（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，３Ｈ）　
ＥＳＩ－ＭＳ　ｍ／ｚ　３６２（ＭＨ＋）
合成例１（３）　ｔｅｒｔ－ブチル　（２Ｓ，４Ｒ）－４－（４－アミノ－６－ブロモ－５－（（（Ｒ）－１－フェニルエチル）カルバモイル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－７－イル）－２－メチルピロリジン－１－カルボキシラートの合成
　合成例１（２）の化合物（１．００ｇ）、（Ｒ）－（＋）－１－フェニルエチルアミン（０．５０３ｇ）、ジイソプロピルエチルアミン（１．７９ｇ）、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）を加え、続いてＨＡＴＵ（１．５８ｇ）を加えて室温にて終夜攪拌した。反応混合物に酢酸エチル、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出し、合わせた有機層を水、次いで飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン：アセトン）にて精製し、アミド体（１．５３ｇ）を得た。得られた化合物はさらに精製することなく次の反応に用いた。
　アミド体（１．５３ｇ）にクロロホルム（１５ｍＬ）を加え、０℃に冷却した後、Ｎ－ブロモスクシンイミド（０．８８ｇ）を加え、０℃にて１時間攪拌した。反応混合物を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル）にて精製し、目的物（１．３９ｇ）を得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：　８．２１（ｓ，１Ｈ）　７．４２－７．２８（ｍ，５Ｈ）　６．９７（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ）　５．３６－５．２９（ｍ，１Ｈ）　５．２０－５．０７（ｍ，１Ｈ）　４．３０（ｔ，Ｊ＝１０．３Ｈｚ，１Ｈ）　４．０４－３．７２（ｍ，２Ｈ）　３．００－２．８６（ｍ，１Ｈ）　２．３８（ｄｔ，Ｊ＝１４．３，６．０Ｈｚ，１Ｈ）　１．６３（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）　１．５３－１．４３（ｍ，１２Ｈ）
ＥＳＩ－ＭＳ　ｍ／ｚ　５４３，５４５（ＭＨ＋）
合成例１（４）７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－ブロモ－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド
　合成例１（３）の化合物（６００ｍｇ）にクロロホルム（３ｍＬ）を加え、０℃に冷却した後、トリフルオロ酢酸（４．４４ｇ）を加え、室温にて１時間攪拌した。反応混合物を減圧濃縮し、残渣にアセトニトリル（５ｍＬ）を加えて再度減圧濃縮し、アミン体を得た。得られた化合物はさらに精製することなく次の反応に用いた。
　得られたアミン体にアセトニトリル（３ｍＬ）を加え、０℃に冷却した後、塩化アクリル（９９．９ｍｇ）、ジイソプロピルエチルアミン（７１３ｍｇ）を加え、０℃にて１時間攪拌した。反応混合物を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル：メタノール）にて精製し、目的物（２８１ｍｇ）を得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：　８．２０（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ）　７．４２－７．３６（ｍ，４Ｈ）　７．３２－７．２８（ｍ，１Ｈ）　７．００－６．９４（ｍ，１Ｈ）　６．５７－６．３３（ｍ，２Ｈ）　５．７６－５．６６（ｍ，１Ｈ）　５．３６－５．２９（ｍ，１Ｈ）　５．１４－５．０８（ｍ，１Ｈ）　４，７１（ｔ，Ｊ＝９．９Ｈｚ，０．７Ｈ）　４．４２－４．２３（ｍ，１．６Ｈ）　３．８３（ｔ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，０．７Ｈ）　３．０３－２．９２（ｍ，１Ｈ）　２．６０－２．５７（ｍ，０．３Ｈ）　２．４４－２．４０（ｍ，０．７Ｈ）　１．６４（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）　１．５６（ｄｄ，Ｊ＝１１．７，６．２Ｈｚ，３Ｈ）
ＥＳＩ－ＭＳ　ｍ／ｚ　４９７，４９９（ＭＨ＋）
合成例１（５）　７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））の合成
　合成例１（４）の化合物（６５ｍｇ）、ジクロロビス（トリフェニルホスフィン）ジパラジウム（９．２ｍｇ）、ヨウ化銅（Ｉ）（５．０ｍｇ）、シクロプロピルアセチレン（１３．０ｍｇ）、トリエチルアミン（３９．７ｍｇ）、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１．３ｍＬ）を加え、系内を窒素置換した後、７０℃にて２．５時間攪拌した。反応混合物に酢酸エチル、飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出し、合わせた有機層を水、次いで飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール）にて精製し、目的物（５０ｍｇ）を得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：　８．２２（ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，１Ｈ）　７．８２（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ）　７．４３－７．３５（ｍ，４Ｈ）　７．３０（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ）　６．５８－６．３４（ｍ，２Ｈ）　５．７７－５．６６（ｍ，１Ｈ）　５．３５－５．２０（ｍ，２Ｈ）　４．５４（ｔ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ，０．７Ｈ）　４．３５－４．２５（ｍ，１．６Ｈ）　３．８８（ｔ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，０．７Ｈ）　２．９０－２．７８（ｍ，１Ｈ）　２．６５－２．５６（ｍ，０．３Ｈ）　２．４９－２．４０（ｍ，０．７Ｈ）　１．６３（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）　１．５６－１．４５（ｍ，４Ｈ）　１．０３－０．９１（ｍ，２Ｈ）　０．８４－０．６９（ｍ，２Ｈ）
ＥＳＩ－ＭＳ　ｍ／ｚ　４８３（ＭＨ＋）　
　実施例１　７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶の製造
　以下製造方法１、製造方法２に記載の２つの方法でフマル酸とのＩＩ型結晶を製造した。なお、化合物（Ｉ）のフリー体のＩ型結晶は後述する実施例３と同様の方法にて合成した。
　（ｉ）製造方法１
　化合物（Ｉ）のフリー体のＩ型結晶３０ｍｇにフマル酸３当量添加し，ｔｅｒｔ－ブタノール０．３ｍＬを添加し、２５℃で懸濁液を約１２４時間撹拌した後、濾取し、固体を回収し、乾燥することで標記結晶を得た。
　（ｉｉ）製造方法２
　化合物（Ｉ）のフリー体のＩ型結晶　２．２０ｇにフマル酸１．０６ｇ及びアセトン２２ｍＬを添加し、５０℃で懸濁液を約６２時間撹拌した後、３０分自然冷却し、濾取し、固体を回収した。これを２－プロパノールで洗浄し、濾取し、固体を回収し、乾燥することで標記結晶を２．２７ｇ得た。
　粉末Ｘ線回折スペクトル（Ａ法）：図１に示した。粉末Ｘ線回折スペクトルデータを表２に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000009
  
　また、特徴的な回折角は以下のとおりである。
　特徴的な回折角（２θ±０．２°）：
５．５°，６．８°，９．３°，１３．４°，１５．３°，１６．３°，１８．５°，１９．８°，２２．０°及び２４．５°
　示差熱－熱重量同時測定曲線：図２に示した。
　示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：１７８℃付近
　実施例２　７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））のフリー体ＩＩ型結晶の製造
　以下製造方法１～製造方法４に記載の４つの方法のいずれかでフリー体ＩＩ型結晶を製造した。
　（ｉ）製造方法１
　合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）　１５ｍｇにコハク酸１当量及び１－プロパノール／水（１：３　ｖ／ｖ）０．３ｍＬを添加し、５０℃で４日間懸濁撹拌した後、濾取し、固体を回収し、乾燥することで標記結晶を得た。
　（ｉｉ）製造方法２
　合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）　３００ｍｇにコハク酸１当量及び１－プロパノール／水（１：３　ｖ／ｖ）１．５ｍＬを添加し、（ｉ）で得られた結晶のうち少量を種結晶として添加し、５０℃で５時間懸濁攪拌した後、１－プロパノール０．３ｍＬを添加し、さらに５０℃で２時間懸濁攪拌した後、１－プロパノール０．３ｍＬを添加し、５０℃で１７時間懸濁撹拌した後、濾取し、固体を回収し、乾燥することで標記結晶を８４．５ｍｇ得た。
　（ｉｉｉ）製造方法３
　合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）　１０００ｍｇにコハク酸１当量及び１－プロパノール／水（１：１　ｖ／ｖ）３ｍＬを添加し、（ｉｉ）で得られた結晶のうち少量を種結晶として添加し、５０℃で１７．５時間懸濁攪拌した後、濾取（ろ過時に水で洗浄）し、固体を回収し、乾燥することで標記結晶を４８７．６ｍｇ得た。
　（ｉｖ）　製造方法４
　合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）　１０００ｍｇにジイソプロピルエーテル５ｍＬを添加し、（ｉｉｉ）で得られた結晶のうち少量を種結晶として添加し、５０℃で懸濁攪拌した。４２．５時間後、溶媒が蒸発していたため、ジイソプロピルエーテル５ｍＬを添加した。５０℃で２時間懸濁攪拌した後、エタノール０．５ｍＬを添加した。さらに５０℃で２時間懸濁攪拌した後、エタノール０．５ｍＬを添加した。さらに、５０℃で１９時間懸濁攪拌した後、３０分かけて自然冷却し、濾取し、固体を回収し、乾燥することで標記結晶を７９８．８ｍｇ得た。
　粉末Ｘ線回折スペクトル（Ａ法）：図３に示した。粉末Ｘ線回折スペクトルデータを表３に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000010
 また、特徴的な回折角は以下のとおりである。
　特徴的な回折角（２θ±０．２°）：
　８．３°，１４．８°，１７．３°，１８．０°，１９．１°，２０．３°，２１．０°，２２．５°，２３．０°及び２６．２°
　示差熱－熱重量同時測定曲線：図４に示した。
　示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：１８２℃付近
　実施例３　７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））のフリー体Ｉ型結晶の製造
　化合物（Ｉ）の粗体（１００ｍｇ）をエタノール（５００μＬ）に懸濁し、５０℃にて終夜攪拌した。溶液を２５℃まで冷却し、得られた懸濁液をろ取することで、化合物（Ｉ）のフリー体I型結晶（３１ｍｇ）を得た。
　粉末Ｘ線回折スペクトル（Ａ法）：図５に示した。粉末Ｘ線回折スペクトルデータを表４に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000011
 　また、特徴的な回折角は以下のとおりである。
　特徴的な回折角（２θ±０．２°）：
　９．９°，１１．７°，１３．２°，１７．７°，１８．１°，１８．８°及び２０．８°
　示差熱－熱重量同時測定曲線：図６に示した。
　示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：１８３℃付近
　実施例４　７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））の１当量のフマル酸とのＶ型結晶の製造
　合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）　１０００ｍｇにフマル酸４８１ｍｇ及びアセトン５０ｍＬを添加し、２５℃で７１時間懸濁撹拌した後、濾取し、固体を回収した。これを室温減圧条件で、７．５時間乾燥することで標記結晶を６９５．０ｍｇ得た。
　粉末Ｘ線回折スペクトル（Ａ法）：図７に示した。粉末Ｘ線回折スペクトルデータを表５に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000012
 　また、特徴的な回折角は以下のとおりである。
　特徴的な回折角（２θ±０．２°）：
６．９°，９．４°，１０．２°，１３．７°，２１．１°，２３．６°及び２６．５°
　示差熱－熱重量同時測定曲線：図８に示した。
　示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：１５１℃付近
　実施例５　７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））の１当量のフマル酸とのＩ型結晶の製造
　合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）　１０００ｍｇにフマル酸４８１ｍｇ及びアセトン５０ｍＬを添加し、２５℃で１９．５時間懸濁撹拌した後、濾取し、固体を回収することで標記結晶を８６８．８ｍｇ得た。
　粉末Ｘ線回折スペクトル（Ａ法）：図９に示した。粉末Ｘ線回折スペクトルデータを表６に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000013
 　また、特徴的な回折角は以下のとおりである。
　特徴的な回折角（２θ±０．２°）：
６．４°，１０．３°，１２．８°，１５．０°，２０．７°，２３．４°及び２６．６°
　示差熱－熱重量同時測定曲線：図１０に示した。
　示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：１５３℃付近
　実施例６　７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））の０．５当量のフマル酸とのＩ型結晶の製造
　合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）　１５ｍｇにフマル酸０．５当量及び水０．３ｍＬを添加し、５０℃で９３．５時間懸濁撹拌した後、濾取し、固体を回収し、乾燥することで標記結晶を得た。
　粉末Ｘ線回折スペクトル（Ｂ法）：図１１に示した。
　特徴的な回折角（２θ±０．２°）：６．４°，７．５°，９．７°，１１．７°，１５．１°，１９．６°及び２３．９°
　示差熱－熱重量同時測定曲線：図１２に示した。
　示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：１６１℃付近
　実施例７　７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））の０．５当量のフマル酸とのＩＩ型結晶の製造
　合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）　３００ｍｇにフマル酸１当量及びエタノール６ｍＬを添加し、５０℃で１９．５時間懸濁撹拌した後、３時間自然冷却し、濾取し、固体を回収した。これを水で洗浄し、濾取し、固体を回収し、乾燥することで標記結晶を２２４．６ｍｇ得た。
　粉末Ｘ線回折スペクトル：図１３に示した。
　特徴的な回折角（２θ±０．２°）：５．４°，６．４°，７．３°，１２．８°，１３．４°，１４．７°及び１５．４°
　示差熱－熱重量同時測定曲線：図１４に示した。
　示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：１６２℃付近　
　実施例８　化合物(Ｉ)とフマル酸のモル比の分析
　化合物(Ｉ)とフマル酸及び化合物(Ｉ)とＬ－酒石酸とのモル比については、１Ｈ－ＮＭＲで確認した。化合物(Ｉ)の1当量のフマル酸とのＩ型結晶、1当量のフマル酸とのＩＩ型結晶、及び1当量のフマル酸とのＶ型結晶のＮＭＲスペクトルの測定結果を以下に示す。また、化合物(Ｉ)のフリー体Ｉ型の結晶、及びフリー体ＩＩ型の結晶のＮＭＲスペクトルの測定結果も以下に示す。
 
（化合物(Ｉ)のフリー体Ｉ型の結晶）
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：　８．３２（ｂｒｄ，Ｊ＝７．３８Ｈｚ，１Ｈ）　８．１４（ｓ，１Ｈ）　７．２５－７．５０（ｍ，５Ｈ）　６．５４－６．７２（ｍ，１Ｈ）　６．１３－６．２３（ｍ，１Ｈ）　５．６５－５．７６（ｍ，１Ｈ）　５．１２－５．３９（ｍ，２Ｈ）　４．３３－４．４０（ｍ，１Ｈ）　４．００－４．２２（ｍ，２Ｈ）　２．４４－２．７０（ｍ，２Ｈ）　１．７３（ｔｔ，Ｊ＝４．９９，８．２７Ｈｚ，１Ｈ）　　１．５１（ｄ，Ｊ＝６．８８Ｈｚ，３Ｈ）　１．３６－１．４３（ｍ，３Ｈ）　０．７８－１．０３（ｍ，４Ｈ）
（化合物(Ｉ)のフリー体ＩＩ型の結晶）
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：　８．３２（ｂｒｄ，Ｊ＝７．３８Ｈｚ，１Ｈ）　８．１４（ｓ，１Ｈ）　７．２７－７．４６（ｍ，５Ｈ）　６．５４－６．７２（ｍ，１Ｈ）　６．１３－６．２３（ｍ，１Ｈ）　５．６５－５．７６（ｍ，１Ｈ）　５．１２－５．３９（ｍ，２Ｈ）　４．３２－４．４０（ｍ，１Ｈ）　４．００－４．２２（ｍ，２Ｈ）　２．４４－２．６９（ｍ，２Ｈ）　１．７３（ｔｔ，Ｊ＝４．９９，８．２７Ｈｚ，１Ｈ）　１．５１（ｄ，Ｊ＝６．８８Ｈｚ，３Ｈ）　１．４０－１．４３（ｍ，３Ｈ）　０．７８－１．０３（ｍ，４Ｈ）
（化合物(Ｉ)の１当量のフマル酸とのＩ型結晶）
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：　１３．１３（ｂｒｓ，２Ｈ）　８．３２（ｂｒｄ，Ｊ＝７．３８Ｈｚ，１Ｈ）　８．１４（ｓ，１Ｈ）　７．２４－７．４８（ｍ，５Ｈ）　６．４６－６．７８（ｍ，３Ｈ）　６．０６－６．３０（ｍ，１Ｈ）　５．６３－５．７７（ｍ，１Ｈ）　５．１１－５．３８（ｍ，２Ｈ）　４．２７－４．４４（ｍ，１Ｈ）　３．９８－４．２３（ｍ，２Ｈ）　２．４２－２．７３（ｍ，２Ｈ）　１．７３（ｔｔ，Ｊ＝５．０２，８．３０Ｈｚ，１Ｈ）　１．５１（ｄ，Ｊ＝６．８８Ｈｚ，３Ｈ）　１．３２－１．４５（ｍ，３Ｈ）　０．７７－１．０２（ｍ，４Ｈ）
（化合物(Ｉ)の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶）
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：　１３．１４（ｂｒｓ，２Ｈ）　８．３２（ｂｒｄ，Ｊ＝７．３８Ｈｚ，１Ｈ）　８．１４（ｓ，１Ｈ）　７．２５－７．４９（ｍ，５Ｈ）　６．３９－６．８９（ｍ，３Ｈ）　６．０７－６．２８（ｍ，１Ｈ）　５．６２－５．７７（ｍ，１Ｈ）　５．１２－５．３９（ｍ，２Ｈ）　４．２７－４．４５（ｍ，１Ｈ）　３．９９－４．２４（ｍ，２Ｈ）　２．４２－２．７５（ｍ，２Ｈ）　１．７４（ｔｔ，Ｊ＝５．０２，８．３０Ｈｚ，１Ｈ）　１．５１（ｄ，Ｊ＝６．８８Ｈｚ，３Ｈ）　１．３７－１．４６（ｍ，３Ｈ）　０．７８－１．０３（ｍ，４Ｈ）
（化合物(Ｉ)の１当量のフマル酸とのＶ型結晶）
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：　１３．１３（ｂｒｓ，２Ｈ）　８．３２（ｂｒｄ，Ｊ＝７．３８Ｈｚ，１Ｈ）　８．１４（ｓ，１Ｈ）　７．２１－７．４９（ｍ，５Ｈ）　６．４７－６．８０（ｍ，３Ｈ）　６．０９－６．２６（ｍ，１Ｈ）　５．６３－５．７７（ｍ，１Ｈ）　５．１１－５．３８（ｍ，２Ｈ）　４．２７－４．４４（ｍ，１Ｈ）　３．９８－４．２３（ｍ，２Ｈ）　２．４２－２．７２（ｍ，２Ｈ）　１．７３（ｔｔ，Ｊ＝４．９９，８．２７Ｈｚ，１Ｈ）　１．５１（ｄ，Ｊ＝６．８８Ｈｚ，３Ｈ）　１．３４－１．４６（ｍ，３Ｈ）　０．７７－１．０２（ｍ，４Ｈ）
 
　参考例１　７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））の１当量のフマル酸とのＩＩＩ型結晶の製造
　合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）　３００ｍｇにフマル酸３当量及びアセトニトリル９ｍＬを添加し、５０℃で１時間懸濁撹拌した後、自然冷却し、濾取し、固体を回収した。これを乾燥することで標記結晶を３０３．７ｍｇ得た。
粉末Ｘ線回折スペクトル（Ｂ法）：図１５に示した。
　特徴的な回折角（２θ±０．２°）：８．１°，１３．２°，２０．４°，２３．１°，２４．７°及び２６．１°
　示差熱－熱重量同時測定曲線：図１６に示した。
　示差熱－熱重量同時測定曲線における発熱ピーク（ピークトップ値）：１５３℃付近
　参考例２　７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））の１当量のフマル酸とのＩＶ型結晶の製造
　合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）　３００ｍｇにフマル酸３当量及び水６ｍＬを添加し、５０℃で１．５時間懸濁撹拌した後、自然冷却し、濾取し、固体を回収した。これを水で洗浄し、濾取し、固体を回収し、乾燥することで標記結晶を３１１．２ｍｇ得た。
　粉末Ｘ線回折スペクトル（Ｂ法）：図１７に示した。
　特徴的な回折角（２θ±０．２°）：６．０°，１５．７°及び１８．８°
　示差熱－熱重量同時測定曲線：図１８に示した。
　示差熱－熱重量同時測定曲線における発熱ピーク（ピークトップ値）：１３０℃付近
　参考例３　７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））の塩酸とのＩ型結晶の製造
　合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）　１５ｍｇに２Ｍ塩酸／エタノール溶液１５μＬ及び２―プロパノール／ヘプタン混液（１：３　ｖ／ｖ）０．３ｍＬを添加し、４日間懸濁撹拌した後、自然冷却し、濾取し、固体を回収した。これを乾燥することで標記結晶を得た。
　粉末Ｘ線回折スペクトル（Ｂ法）：図１９に示した。
　特徴的な回折角（２θ±０．２°）：７．０°，７．４°，１２．６°，１９．０°及び２５．４°
　示差熱－熱重量同時測定曲線：図２０に示した。
　示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：５１℃及び１７９℃付近
　参考例４　７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））の塩酸とのＩＩ型結晶の製造
　合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）　１５ｍｇに２Ｍ塩酸／エタノール溶液１５μＬ及びアセトン／ヘプタン混液（１：３　ｖ／ｖ）０．３ｍＬを添加し、４日間懸濁撹拌した後、自然冷却し、濾取し、固体を回収した。これを乾燥することで標記結晶を得た。
　粉末Ｘ線回折スペクトル（Ｂ法）：図２１に示した。
　特徴的な回折角（２θ±０．２°）：６．３°，７．４°，８．０°，１７．６°，２２．０°及び２３．６°
　示差熱－熱重量同時測定曲線：図２２に示した。
　示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：１４７℃付近
　参考例５　７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））の塩酸とのＩＩＩ型結晶の製造
　合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）　１５ｍｇに２Ｍ塩酸／エタノール溶液１５μＬ及び酢酸エチル０．３ｍＬを添加し、４日間懸濁撹拌した後、自然冷却し、濾取し、固体を回収した。これを乾燥することで標記結晶を得た。
　粉末Ｘ線回折スペクトル（Ｂ法）：図２３に示した。
　特徴的な回折角（２θ±０．２°）：５．３°，６．５°，８．１°，１５．３°及び２４．２°
　示差熱－熱重量同時測定曲線：図２４に示した。
　示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：１５６℃付近
　参考例６　７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））の臭化水素酸との結晶の製造
　合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）　１５ｍｇに臭化水素酸１当量及び２―プロパノール／ヘプタン混液（１：３　ｖ／ｖ）０．３ｍＬを添加し、５日間懸濁撹拌した後、自然冷却し、濾取し、固体を回収した。これを乾燥することで標記結晶を得た。
　粉末Ｘ線回折スペクトル（Ｂ法）：図２５に示した。
　特徴的な回折角（２θ±０．２°）：７．０°，７．４°，１３．４°，１５．６°，１９．２°及び２５．６°
　示差熱－熱重量同時測定曲線：図２６に示した。
　示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：２０４℃付近
　参考例７　７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））の１当量のＬ－酒石酸との結晶の製造
　合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）　５００ｍｇにＬ－酒石酸４６６ｍｇ及びアセトン１０ｍＬを添加し、５０℃で４０分攪拌し，溶解した。この後、室温で１７時間攪拌し、得られた懸濁液を濾取し、固体を回収した。これを乾燥することで標記結晶を５０６．３ｍｇ得た。
　粉末Ｘ線回折スペクトル（Ａ法）：図２７に示した。
　　特徴的な回折角（２θ±０．２°）：７．２°，１２．６°，１７．３°及び２３．４°
　　示差熱－熱重量同時測定曲線：図２８に示した。
　　示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：１２１℃付近
　参考例８　７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））のコハク酸との結晶の製造
　合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）　１５ｍｇにコハク酸３当量及びアセトニトリル０．３ｍＬを添加し、５０℃で３日間懸濁撹拌した後、自然冷却し、濾取し、固体を回収した。これを乾燥することで標記結晶を得た。
　粉末Ｘ線回折スペクトル（Ｂ法）：図２９に示した。
　特徴的な回折角（２θ±０．２°）：６．５°，１０．７°，１３．２°，１４．６°，１８．７°及び２３．９°
　示差熱－熱重量同時測定曲線：図３０に示した。
　示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：１４８℃及び１５９℃付近
試験例１　ＨＥＲ２リン酸化活性阻害作用（ｉｎ　ｖｉｔｒｏ）の測定
　ＨＥＲ２リン酸化活性に対する化合物のインビトロでの阻害活性測定法の条件設定において、パーキンエルマー社のＰｒｏｆｉｌｅｒＰｒｏ　Ｐｅｐｔｉｄｅ　２２と同配列（５－ＦＡＭ－ＥＥＰＬＹＷＳＦＰＡＫＫＫ－ＣＯＮＨ２）のペプチドを基質として用いたＨＥＲ２キナーゼ反応の報告（Ｘｉｅ　Ｈ　ｅｔ　ａｌ．，　ＰＬｏＳ　Ｏｎｅ．２０１１；６（７）：ｅ２１４８７）に基づき、ＰｒｏｆｉｌｅｒＰｒｏ　Ｐｅｐｔｉｄｅ　２２を基質に用いた。試験に用いた精製リコンビナントヒトＨＥＲ２蛋白質はカルナバイオサイエンス社から購入した。化合物の阻害活性測定においては、まず、合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）で段階希釈した。次に、キナーゼ反応用緩衝液（１３．５ｍＭ　Ｔｒｉｓ（ｐＨ　７．５）、２ｍＭ　ジチオトレイトール、０．００９％　Ｔｗｅｅｎ２０）中にＨＥＲ２蛋白質、基質ペプチド（終濃度は１μＭ）、塩化マンガン（終濃度は１０ｍＭ）、ＡＴＰ（終濃度は５μＭ）と化合物（Ｉ）のＤＭＳＯ溶液（ＤＭＳＯの終濃度は５％）を加えて２５℃で３０分間インキュベーションしキナーゼ反応を行った。そこへ終濃度３０ｍＭになるようＥＤＴＡを加えることで反応を停止させた。最後に、ＬａｂＣｈｉｐ（登録商標）　ＥＺ　Ｒｅａｄｅｒ　ＩＩ（パーキンエルマー社）で、リン酸化されなかった基質ペプチド（Ｓ）とリン酸化されたペプチド（Ｐ）をマイクロ流路キャピラリー電気泳動によって分離・検出した。ＳとＰそれぞれのピークの高さからリン酸化反応量を求め、リン酸化反応を５０％抑制することのできる化合物濃度をＩＣ５０値（ｎＭ）と定義し以下の表７に示した。
試験例２　エクソン２０挿入変異型ＨＥＲ２（ＨＥＲ２ｅｘ２０ｉｎｓＹＶＭＡ）リン酸化活性阻害作用（ｉｎ　ｖｉｔｒｏ）の測定
　エクソン２０挿入変異型ＨＥＲ２リン酸化活性に対する化合物のインビトロでの阻害活性測定法の条件設定において、ＨＥＲ２と同様にＰｒｏｆｉｌｅｒＰｒｏ　Ｐｅｐｔｉｄｅ　２２を基質に用いた。試験に用いた精製リコンビナントヒトエクソン２０挿入変異型ＨＥＲ２（Ａ７７５＿Ｇ７７６ｉｎｓＹＶＭＡ）蛋白質は、ＳｉｇｎａｌＣｈｅｍ社から購入した。化合物の阻害活性測定においては、まず、合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）で段階希釈した。次に、キナーゼ反応用緩衝液（１３．５ｍＭ　Ｔｒｉｓ（ｐＨ　７．５）、２ｍＭ　ジチオトレイトール、０．００９％　Ｔｗｅｅｎ２０）中にエクソン２０挿入変異型ＨＥＲ２蛋白質と化合物（Ｉ）ＤＭＳＯ溶液（ＤＭＳＯの終濃度は５％）を加えて２５℃で３０分間プレインキュベーションした。その後、基質ペプチド（終濃度は１μＭ）、塩化マンガン（終濃度は２５ｍＭ）、塩化マグネシウム（終濃度は２０ｍＭ）、ＡＴＰ（終濃度は２００μＭ）を加えて２５℃で２２０分間インキュベーションしキナーゼ反応を行った。そこへ終濃度３０ｍＭになるようＥＤＴＡを加えることで反応を停止させた。最後に、ＬａｂＣｈｉｐ（登録商標）　ＥＺ　Ｒｅａｄｅｒ　ＩＩ（パーキンエルマー社）で、リン酸化されなかった基質ペプチド（Ｓ）とリン酸化されたペプチド（Ｐ）をマイクロ流路キャピラリー電気泳動によって分離・検出した。ＳとＰそれぞれのピークの高さからリン酸化反応量を求め、リン酸化反応を５０％抑制することのできる化合物濃度をＩＣ５０値（ｎＭ）と定義し以下の表７に示した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000014
　以上の結果より、化合物（Ｉ）は、ＨＥＲ２リン酸化の優れた阻害活性およびエクソン２０挿入変異型ＨＥＲ２リン酸化に対して、優れた阻害活性を有することが明らかとなった。
試験例３　ＨＥＲ２発現細胞株に対する増殖阻害活性の測定
　ＨＥＲ２過剰発現ヒト乳癌細胞株であるＳＫ－ＢＲ－３細胞を、１０％ウシ胎児血清を含むＭｃＣｏｙ’ｓ　５ａ培地（ライフテクノロジーズ社製）中に懸濁させた。細胞懸濁液を、３８４ウェル平底マイクロプレートの各ウェルに播種し、５％炭酸ガス含有の培養器中３７℃で１日培養した。合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）をＤＭＳＯに溶解し、ＤＭＳＯを用いて化合物を終濃度の５００倍の濃度になるように希釈した。化合物のＤＭＳＯ溶液を細胞の懸濁に用いた培地で希釈し、これを細胞の培養プレートの各ウェルにＤＭＳＯの最終濃度が０．２％になるように加え、５％炭酸ガス含有の培養器中３７℃でさらに３日培養した。化合物存在下で３日間培養後の細胞数計測をＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ２．０（プロメガ社製）を用いて行い、以下の式より増殖阻害率を算出した。増殖を５０％阻害することのできる化合物濃度をＩＣ５０（ｎＭ）と定義した。
増殖阻害率（％）＝（Ｃ－Ｔ）／（Ｃ）×１００
Ｔ：被検化合物を添加したウェルの発光強度
Ｃ：被検化合物を添加しなかったウェルの発光強度
　結果を以下の表８に示した。
試験例４　エクソン２０挿入変異型ＨＥＲ２発現細胞株に対する増殖阻害活性の測定
　エクソン２０挿入変異型ＨＥＲ２に対する増殖阻害活性は、ヒトエクソン２０挿入変異型ＨＥＲ２遺伝子を導入したマウスＢリンパ球前駆細胞株であるＢａ／Ｆ３細胞を用いて行った。Ｂａ／Ｆ３細胞は１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）、１００Ｕ／ｍＬ　ペニシリン、１００μｇ／ｍＬ　ストレプトマイシン（サーモフィッシャーサイエンティフィック）及び１ｎｇ／ｍＬ　マウスインターロイキン－３（ｍＩＬ－３）（ＣＳＴ）を含むＲＰＭＩ－１６４０培地（サーモフィッシャーサイエンティフィック）にて維持し、ヒトエクソン２０挿入変異型ＨＥＲ２遺伝子（Ａ７７５＿Ｇ７７６ｉｎｓＹＶＭＡ（ＨＥＲ２ｅｘ２０ｉｎｓＹＶＭＡ））、Ｉｎｔｅｒｎａｌ　Ｒｉｂｏｓｏｍｅ　Ｂｉｎｄｉｎｇ　Ｓｅｑｕｅｎｃｅ（ＩＲＥＳ）およびクサビラオレンジ遺伝子を組み込んだｐＣＤＮＡ３．１－ｈｙｇ（＋）ベクターをＡｍａｘａ（登録商標）　Ｃｅｌｌ　Ｌｉｎｅ　Ｎｕｃｌｅｏｆｅｃｔｏｒ　（登録商標）　Ｋｉｔ　Ｖによる電気穿孔法により導入した。ハイグロマイシンＢ（ナカライテスク）にて選択したエクソン２０挿入変異型ＨＥＲ２を発現したＢａ／Ｆ３細胞（Ｂａ／Ｆ３－ＨＥＲ２ｉｎｓＹＶＭＡ）はｍＩＬ－３非依存的な増殖を示した。
　細胞増殖阻害活性の評価に際し、Ｂａ／Ｆ３－ＨＥＲ２ｉｎｓＹＶＭＡ細胞を１０％　ＦＢＳ、１００Ｕ／ｍＬ　ペニシリン、１００μｇ／ｍＬ　ストレプトマイシンを含むＲＰＭＩ－１６４０培地にて懸濁し、細胞懸濁液を９６ウェル平底マイクロプレートの各ウェルに播種し、５％炭酸ガス含有の培養器中３７℃で１日培養した。合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）をＤＭＳＯに溶解し、ＤＭＳＯもしくは細胞の懸濁に用いた培地を用いて希釈し、これを細胞の培養プレートの各ウェルにＤＭＳＯの最終濃度が０．２％になるように加え、５％炭酸ガス含有の培養器中３７℃でさらに３日培養した。化合物存在下で３日間培養後の細胞数計測はＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（プロメガ社製）を用い、以下の式より増殖阻害率を算出した。増殖を５０％阻害することのできる化合物濃度をＩＣ５０（ｎＭ）と定義した。
増殖阻害率（％）＝（Ｃ－Ｔ）／（Ｃ）×１００
Ｔ：被検化合物を添加したウェルの発光強度
Ｃ：被検化合物を添加しなかったウェルの発光強度
　結果を以下の表８に示した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000015
　以上の結果より、化合物（Ｉ）は、ＨＥＲ２発現細胞株（ＳＫ－ＢＲ－３）およびエクソン２０挿入変異型ＨＥＲ２発現細胞株（Ｂａ／Ｆ３－ＨＥＲ２ｉｎｓＹＶＭＡ）においても優れた細胞増殖抑制活性を有することが明らかとなった。
試験例５　ＨＥＲ２発現細胞株（ＮＣＩ－Ｎ８７）に対する増殖阻害活性の測定
　ＨＥＲ２過剰発現ヒト胃がん細胞株であるＮＣＩ－Ｎ８７細胞（Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｔｙｐｅ　Ｃｕｌｔｕｒｅ　Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，Ｃａｔ　Ｎｏ．ＡＴＣＣ（登録商標）　ＣＲＬ－５８２２）を、１０％ウシ胎児血清を含むＲＰＭＩ１６４０培地（和光純薬工業株式会社）中に懸濁させた。次いで、細胞懸濁液を、９６ウェル平底マイクロプレートの各ウェルに播種し、５％炭酸ガス含有の培養器中３７℃で１日培養した。合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）をＤＭＳＯに溶解し、ＤＭＳＯを用いて被検化合物を終濃度の１０００倍の濃度になるように希釈した。化合物（Ｉ）のＤＭＳＯ溶液を細胞の懸濁に用いた培地で希釈し、これを細胞の培養プレートの各ウェルにＤＭＳＯの最終濃度が０．１％になるように加えた。Ｃｏｎｔｒｏｌ用ウェルには、ＤＭＳＯを細胞の懸濁に用いた培地で希釈し、これを細胞の培養プレートの各ウェルにＤＭＳＯの最終濃度が０．１％になるように加えた。薬液を添加後、５％炭酸ガス含有の培養器中３７℃でさらに３日培養した。化合物存在下で３日間培養後の細胞数計測はＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ２．０（プロメガ社製）を用い、プロメガ社の推奨するプロトコールに準じて行った。以下の式より増殖阻害率を算出し、増殖を５０％阻害することのできる被検化合物の濃度をＩＣ５０値（ｎＭ）と定義した。
増殖阻害率（％）＝（Ｃ－Ｔ）／Ｃ×１００
Ｔ：被検化合物を添加したウェルの発光強度
Ｃ：被検化合物を添加しなかったウェルの発光強度
　結果を以下の表９に示した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000016
　以上の結果より、化合物（Ｉ）は、ＨＥＲ２過剰発現細胞株（ＮＣＩ－Ｎ８７）においても優れた細胞増殖抑制活性を有することが明らかとなった。
試験例６　経口吸収性の評価
　合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）を０．５％ＨＰＭＣ水溶液、０．１Ｎ塩酸に懸濁又は溶解し、ＢＡＬＢ／ｃＡマウス（日本クレア株式会社）に５０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの用量にて経口投与した。経口投与後、０．５、１、２、４及び６時間後に顔面静脈より経時採血し血漿を得た。得られた血漿中の化合物濃度をＬＣ－ＭＳ／ＭＳにより測定し、経口吸収性の評価を行った。
　結果を以下の表１０に示した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000017
　以上の結果より、化合物（Ｉ）は十分な血漿中濃度が観測され、良好な経口吸収性を示した。
試験例７　脳移行性の評価
　合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）を０．５％ＨＰＭＣ水溶液、０．１Ｎ塩酸に懸濁又は溶解し、ＢＡＬＢ／ｃＡマウス日本クレア株式会社）に５０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの用量にて経口投与した。経口投与後、０．５時間後に顔面静脈より採血後、全脳を摘出し血漿及び脳サンプルを得た。得られた脳サンプルに３倍量の水を添加後、超音波ホモジナイザーを用いてホモジナイズし、脳ホモジネートを得た。得られた血漿中及び脳ホモジネート中の化合物濃度をＬＣ－ＭＳ／ＭＳにより測定し、脳／血漿中化合物濃度から脳移行性を評価した。
　結果を以下の表１１に示した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000018
　以上の結果より、化合物（Ｉ）は良好な脳移行性を示した。
試験例８　Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ　遺伝子導入ＨＥＲ２発現細胞株（ＮＣＩ－Ｎ８７－ｌｕｃ）の脳直接移植モデルに対する抗腫瘍効果確認試験（ｉｎ　ｖｉｖｏ）
　脳直接移植モデルによる被検化合物の抗腫瘍効果は、Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｔｙｐｅ　Ｃｕｌｔｕｒｅ　Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎから購入したヒト胃癌腫瘍細胞であるＮＣＩ－Ｎ８７にＬｕｃｉｆｅｒａｓｅ　遺伝子を導入した、ＮＣＩ－Ｎ８７－Ｌｕｃを使用した。ＮＣＩ－Ｎ８７－Ｌｕｃは、１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）を含むＲＰＭＩ－１６４０　（４．５ｇ／Ｌ　グルコース、１０ｍＭ　ＨＥＰＥＳ及び１ｍＭピルビン酸ナトリウム含有）（和光純薬株式会社）培地において、５％　ＣＯ２インキュベーター中において３７℃で細胞株を培養した。
　ＮＣＩ－Ｎ８７－Ｌｕｃ細胞をＰＢＳ中に６．２５×１０７　ｃｅｌｌｓ／ｍＬの濃度で再懸濁した。
　マウス用イヤーバーを用いて約６～７週齢のヌードマウス（ＢＡＬＢ／ｃＡＪｃｌ－ｎｕ／ｎｕ、日本クレア株式会社）を脳定位固定装置に固定し、　脳上部の皮膚をアルコール綿にて消毒後に、メスにて切開した。
　マイクロドリルを用いて、頭蓋骨に穴をあけ、針、マニュピュレーター、シリンジポンプを用いて、細胞懸濁液４μＬを　０．８μＬ／ｍｉｎの条件で脳内に移植した。
　脳内腫瘍量の目安として、移植約３週間後に生存例全例について、ＩＶＩＳ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ，Ｉｎｃ．，型式：Ｌｕｍｉｎａ　ＩＩ）を用いてＴｏｔａｌ　Ｆｌｕｘ（Ｐｈｏｔｏｎ／ｓｅｃ）を測定した。その結果から、ＭｉＳＴＡＴ（Ｖｅｒ．２．００）の群分けプログラムを用いて、各群６匹ずつの動物を割り付けた。
　被検化合物は１日１回、群分け翌日から２１日間（Ｄａｙ１－２１）連日経口投与した。
効果の有無の判断には、判定日（Ｄａｙ２２）のＴｏｔａｌ　Ｆｌｕｘを対数変換（Ｌｏｇ１０）した値を用いた。被検化合物としては合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）を用い、２５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの用量にて投与した。
　縦軸に平均Ｔｏｔａｌ　Ｆｌｕｘを対数変換（Ｌｏｇ１０）した値、横軸に移植後の日数（Ｄａｙ）を設定したグラフを作成し、薬剤投与期間中のＴｏｔａｌ　Ｆｌｕｘの経時的推移を観察した。
　コントロール（Ｃｏｎｔｒｏｌ）としては０．１Ｎ　ＨＣｌ，０．５％ＨＰＭＣ水溶液を用いた。
　結果を以下の図３１および図３２に示した。各群Ｄａｙ２２のＴｏｔａｌ　Ｆｌｕｘを対数変換（Ｌｏｇ１０）した値を有意差検定した結果、コントロール群に比して、統計学的に有意（有意水準両側５％）に低いことが示された。また、体重の測定には動物用電子天秤を用いた。ｎ日目の体重（ＢＷｎ）からｎ日目体重変化率（Ｂｏｄｙ　ｗｅｉｇｈｔ　ｃｈａｎｇｅ；ＢＷＣｎ）を下記の式により算出した。
ＢＷＣｎ（％）＝［（ｎ日目の体重）－（群分け日の体重）］／（群分け日の体重）×１００
　この試験結果から、化合物（Ｉ）は、ヌードマウス脳内に移植したＨＥＲ２過剰発現細胞株（ＮＣＩ－Ｎ８７－ｌｕｃ）に対して，優れた抗腫瘍効果を有することが明らかとなった。また、全ての個体で－２０％以上の体重減少は見られなかったため、重篤な副作用はないことが明らかとなった。
　試験例９　固体安定性試験
　実施例及び比較例で得られた化合物（Ｉ）のフリー体ＩＩ型結晶，１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶を４週間保存したときの固体安定性を評価した。
保存条件：６０℃（閉鎖系）
保存期間：４週間
保存量：約３０ｍｇ
保存容器：ガラス瓶
　結果を以下の表１２に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000019
 　類縁物質量（化合物（Ｉ）以外に検出された物質の量）の変化は、試料約１ｍｇを秤量し、水・アセトニトリル混液（１：１）約１ｍＬに溶解させ、この液５μＬを正確に測りとって、以下の方法でＨＰＬＣにて分析を行った。
 
ＨＰＬＣ測定法（安定性試験）
　試料溶液中の類縁物質量をＨＰＬＣ分析にて測定した。なお、データ処理を含む装置の取扱いは、各装置で指示された方法及び手順に従った。
カラム：Ｗａｔｅｒｓ製　ＸＳｅｌｅｃｔ　ＣＳＨ　Ｃ１８　（４．６×１５０ｍｍ，３．５μｍ）
ＵＶ検出：２４６ｎｍ
カラム温度：４０℃
流量：１．０ｍＬ／分
サンプル温度：５℃
サンプル濃度：１ｍｇ／ｍＬ
移動相Ａ：５　ｍｍｏｌ／Ｌ　ギ酸アンモニウム緩衝液（ｐＨ６．５）／アセトニトリル（９：１）混液
移動相Ｂ：アセトニトリル
グラディエントを表１３に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000020
 　その結果、化合物（Ｉ）のフリー体ＩＩ型結晶、１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶ともに粉末Ｘ線回折パターンの変化は認められず、また、類縁物質の増加もほとんど認められず、極めて安定な結晶であることが判明した。
　試験例１０　動的水分吸脱着（ＤＶＳ）試験
　実施例及び参考例で得られた化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶、フリー体ＩＩ型結晶、フリー体Ｉ型結晶、１当量のフマル酸とのＶ型結晶、及び１当量のＬ－酒石酸との結晶を用いて水分吸脱着試験を行った。
　水分吸脱着試験は、次の条件に従って測定した。
　試料およそ１０ｍｇを専用の石英製ホルダーに充填し、以下の条件下に試料の各湿度における重量を連続的に測定し記録した。なお、データ処理を含む装置の取扱いは、各装置で指示された方法及び手順にしたがった。
装置：ＶＴＩ　ＳＡ＋（ティー・エイ・インスツルメント社製）
乾燥温度：６０℃
昇温速度：１℃／ｍｉｎ
乾燥の平衡：３００分を超えない範囲で、５分間で０．０１ｗｔ％減少しないことを確認
測定温度：２５℃
加湿の平衡：１２０分を超えない範囲で、５分間で０．０１ｗｔ％増加しないことを確認
相対湿度プログラム：５～９５％ＲＨまで５％ＲＨずつ上げ、９５％ＲＨ～５％ＲＨまで５％ＲＨずつ下げる
　これらの試験で得られた測定条件範囲における重量変化を表１４～表１８に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000021
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000022
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000023
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000024
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000025
　表１４に示すように化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は水分吸脱着試験において９５％の相対湿度下で０．３８％の重量増加であり、１％に満たないことから、ほとんど吸湿性がないと判断された。同様に化合物（Ｉ）のフリー体ＩＩ型結晶、フリー体Ｉ型結晶、１当量のフマル酸とのＶ型結晶についても水分吸脱着試験において９５％の相対湿度下で質量増加が１％に満たないことから、ほとんど吸湿性がないと判断された（表１５～１７）。一方、化合物（Ｉ）の１当量のＬ－酒石酸との結晶は表１８に示すように、水分吸脱着試験において９５％の相対湿度下で６．４１％もの質量増加が認められ、高い吸湿性を有することが明らかとなった。
　したがって、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶、フリー体ＩＩ型結晶、フリー体Ｉ型結晶、１当量のフマル酸とのＶ型結晶は、化合物（Ｉ）の１当量のＬ－酒石酸との結晶と比較して吸湿性が低く、医薬品の開発候補化合物において、安定した品質の医薬品の工業的生産の観点で優れているといえる。化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶、フリー体ＩＩ型結晶、フリー体Ｉ型結晶、１当量のフマル酸とのＶ型結晶は医薬品又は医薬品原薬として、優れた性質を有することが確認された。
　試験例１１　血中濃度測定試験
　実施例で得られた化合物（Ｉ）のＩ型結晶、化合物（Ｉ）のＩＩ型結晶、及び化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸塩ＩＩ型結晶について、血中濃度測定試験を行った。具体的には、化合物（Ｉ）のＩ型結晶は０．１Ｎ塩酸を含んだ０．５％ＨＰＭＣを用いて、化合物（Ｉ）のＩＩ型結晶、及び化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は０．５％ＨＰＭＣを用いて、それぞれ化合物（Ｉ）（フリー体）に分子量換算して１００ｍｇ／１０ｍＬ及び３００ｍｇ／１０ｍＬの懸濁液を作製した。これらの投与液を摂食条件下にて飼育していた雌性ラット（Ｃｒｌ：ＣＤ（ＳＤ），日本チャールス・リバー株式会社）に体重１ｋｇあたり１０ｍＬの容量で経口投与用ゾンデを用いて経口投与した。投与後、ラット用ケージに戻し状態を確認した。ケージ内では給水及び給餌は自由に取れる状態とした。投与０．５、１、２、４、６時間後にラットをイソフルランにて麻酔し、ヘパリン処理シリンジと注射針（２５Ｇ）を用いて約８０μＬ頸静脈より採血した。
　採血した血液は、氷冷し、遠心操作により血漿を分離した。採血終了後のラットは、ラット用ケージに戻し麻酔覚醒後の状態を確認した。最終採血終了後は、イソフルラン麻酔の深度確認を行った後に、小動物実験固定器で仰向けに四肢を固定し開腹し、腹部大動静脈の切開による放血により安楽死させた。
　ＬＣ／ＭＳ／ＭＳを用いて、ＭＲＭ法で測定し検量線から定量した各血漿中の化合物（Ｉ）の濃度から、Ｐｈｏｅｎｉｘ　ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ（ｖ６．４．０，Ｃｅｒｔａｒａ　ＵＳＡ，Ｉｎｃ．）を用いて、ＡＵＣ０－６ｈｒ（台形法にて算出した投与後０～６時間の血中濃度－時間曲線下面積）、Ｃｍａｘ（最高血中濃度）、Ｔｍａｘ（最高血中濃度到達時間）を算出した。
　結果を表１９に示す。投与量を１００ｍｇ／ｋｇから３００ｍｇ／ｋｇに上げた場合、塩酸を添加した化合物（Ｉ）のＩ型結晶及び化合物（Ｉ）のＩＩ型結晶のＣｍａｘがそれぞれ０．８倍及び１．２倍上昇し、ＡＵＣ０－６ｈｒがそれぞれ１．０倍及び１．５倍上昇したのに対し、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶はＣｍａｘ及びＡＵＣ０－６ｈｒがそれぞれ１．９倍上昇した。また、投与量３００ｍｇ／ｋｇにおける、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶のＣｍａｘは、同用量での酸を添加した化合物（Ｉ）のＩ型結晶及び化合物（Ｉ）のＩＩ型結晶の値と比較して、それぞれ１．７倍及び１．４倍、ＡＵＣ０－６ｈｒはそれぞれ２．４倍高い値を示すことがわかった。したがって、本発明にかかる化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶はより優れた経口吸収性を示すことが確認された。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000026
　なお、本明細書に記載した全ての文献及び刊行物は、その目的にかかわらず参照によりその全体を本明細書に組み込むものとする。また、本明細書は、本願の優先権主張の基礎となる日本国特許出願である特願2020-121520号(2020年7月15日出願)の特許請求の範囲、明細書、および図面の開示内容を包含する。
　本発明のいくつかの実施形態を説明したが、これらの実施形態は、例として提示したものであり、発明の範囲を限定することは意図していない。これら新規な実施形態は、その他の様々な形態で実施されることが可能であり、発明の要旨を逸脱しない範囲で、種々の省略、置き換え、変更を行うことができる。これら実施形態やその変形は、発明の範囲や要旨に含まれるとともに、特許請求の範囲に記載された発明とその均等の範囲に含まれる。

Claims (23)

  1. 　粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、５．５°，６．８°，９．３°，１３．４°，１５．３°，１６．３°，１８．５°，１９．８°，２２．０°及び２４．５°から選択される３つ以上にピークを有する、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのフマル酸とのＩＩ型結晶であって、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドとフマル酸のモル比が１：１である、結晶。
  2. 　粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、５．５°，６．８°，９．３°，１３．４°，１５．３°，１６．３°，１８．５°，１９．８°，２２．０°及び２４．５°にピークを有する、請求項１に記載の結晶。
  3. 　図１に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶である、請求項１又は２に記載の結晶。
  4. 　示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピークが１７８℃付近である、請求項１～３のいずれか１項に記載の結晶。
  5. 　粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、８．３°，１４．８°，１７．３°，１８．０°，１９．１°，２０．３°，２１．０°，２２．５°，２３．０°及び２６．２°から選択される３つ以上にピークを有する、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのＩＩ型結晶。
  6. 　粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、８．３°，１４．８°，１７．３°，１８．０°，１９．１°，２０．３°，２１．０°，２２．５°，２３．０°及び２６．２°にピークを有する、請求項５に記載の結晶。
  7. 　図３に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶である、請求項５又は６に記載の結晶。
  8. 　示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピークが１８２℃付近である、請求項５～７のいずれか１項に記載の結晶。
  9. 　粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、９．９°，１１．７°，１３．２°，１７．７°，１８．１°，１８．８°及び２０．８°から選択される３つ以上にピークを有する、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのＩ型結晶。
  10. 　粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、９．９°，１１．７°，１３．２°，１７．７°，１８．１°，１８．８°及び２０．８°にピークを有する、請求項９に記載の結晶。
  11. 　図５に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶である、請求項９又は１０に記載の結晶。
  12. 　示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピークが１８３℃付近である、請求項９～１１のいずれか１項に記載の結晶。
  13. 　粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、６．９°，９．４°，１０．２°，１３．７°，２１．１°，２３．６°及び２６．５°から選択される４つ以上にピークを有する、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのフマル酸とのＶ型結晶であって、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドとフマル酸のモル比が１：１である、結晶。
  14. 　粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、６．９°，９．４°，１０．２°，１３．７°，２１．１°，２３．６°及び２６．５°にピークを有する、請求項１３に記載の結晶。
  15. 　図７に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶である、請求項１３又は１４に記載の結晶。
  16. 　示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピークが１５１℃付近である、請求項１３～１５のいずれか１項に記載の結晶。
  17. 　粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、６．４°，１０．３°，１２．８°，１５．０°，２０．７°，２３．４°及び２６．６°から選択される４つ以上にピークを有する、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのフマル酸とのＩ型結晶であって、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドとフマル酸のモル比が１：１である、結晶。
  18. 　粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、６．４°，１０．３°，１２．８°，１５．０°，２０．７°，２３．４°及び２６．６°にピークを有する、請求項１７に記載の結晶。
  19. 　図９に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶である、請求項１７又は１８に記載の結晶。
  20. 　示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピークが１５３℃付近である、請求項１７～１９のいずれか１項に記載の結晶。
  21. 　請求項１～２０のいずれか１項に記載の結晶を含有する、医薬組成物。
  22. 　請求項１～２０のいずれか１項に記載の結晶を含有する、経口投与用の医薬組成物。
  23. 　請求項１～２０のいずれか１項に記載の結晶を含有する、抗腫瘍剤。
     
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