WO2021110081A1 - 取代的吡唑并[1,5-a]嘧啶氨基酸衍生物及其用途 - Google Patents

取代的吡唑并[1,5-a]嘧啶氨基酸衍生物及其用途 Download PDF

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WO2021110081A1
WO2021110081A1 PCT/CN2020/133519 CN2020133519W WO2021110081A1 WO 2021110081 A1 WO2021110081 A1 WO 2021110081A1 CN 2020133519 W CN2020133519 W CN 2020133519W WO 2021110081 A1 WO2021110081 A1 WO 2021110081A1
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WO
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pyrazolo
difluorophenyl
ureido
pyrrolidin
pyrimidine
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PCT/CN2020/133519
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孔祥文
张华玲
崔荣
胡祖耀
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杭州华东医药集团新药研究院有限公司
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    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents

Definitions

  • the invention relates to the field of medicinal chemistry, in particular to a substituted pyrazolo[1,5-a]pyrimidine amino acid derivative and its use.
  • Tropomyosin receptor kinase is a high-affinity receptor tyrosine kinase activated by a group of soluble growth factors called neurotrophic factors (NT).
  • the Trk receptor family includes three members, namely TrkA, TrkB and TrkC. Trk is widely expressed in neuronal tissues and is related to the maintenance, signal transduction and survival of neuronal cells (Patapoutian, A. et al, Current Opinion in Neurobiology, 2001, 11:272-280).
  • Trk kinase inhibitors have become a research hotspot.
  • Trk kinase inhibitors have a series of pyrazolo[1,5-a]pyrimidine structures, such as patents WO2010033941, WO2010048314 and WO2011006074. These new inhibitors can effectively inhibit Trk and are effective in the treatment of pain and inflammation, cancer, neurodegenerative diseases and certain infectious diseases.
  • Trk kinase inhibitors have the disadvantages of insufficient inhibitory effect, low safety, and poor water solubility.
  • they are usually made into salts, such as sulfates.
  • the purpose of the present invention is to overcome the shortcomings of insufficient inhibitory effect, low druggability, and low safety of existing compounds, and to provide a substituted pyrazolo [1,5-a] with good inhibitory effect, high druggability, and high safety. ] Pyrimidine amino acid derivatives and their uses.
  • the present invention discloses a compound with general formula I or a pharmaceutically acceptable salt thereof,
  • R 1 is H, (1 ⁇ 4C)alkyl
  • R a is H, (1 ⁇ 4C)alkyl
  • R b is phenyl or phenyl optionally substituted by hydroxy, carboxy, or halogen.
  • the (1 ⁇ 4C) alkyl group includes (1 ⁇ 4C) linear or branched alkyl group and (3 ⁇ 4C) cycloalkyl group;
  • the (1 ⁇ 6C) alkyl group includes (1 ⁇ 6C) Straight-chain or branched alkyl groups and (3-6C) cycloalkyl groups;
  • (3-6C) cycloalkyl groups also include branched cycloalkanes with a total carbon number of 6 or less.
  • R b can be single-substituted or multi-substituted, for example:
  • R 1 is H, methyl or ethyl
  • R a is H, (1 ⁇ 4C)alkyl
  • R b is a phenyl group or a phenyl group optionally substituted with a hydroxyl group or a carboxyl group.
  • the (1 to 4C) alkyl group includes (1 to 4C) straight or branched chain alkyl group and (3 to 4C) cycloalkyl group.
  • R b may be mono-substituted by hydroxy carboxyl group, or may be multi-substituted.
  • R 2 is H, methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl or other butyl groups.
  • the other butyl groups may be neobutyl, cyclobutyl, methylcyclopropyl and the like.
  • R a is H, methyl, ethyl
  • R b is a phenyl group or a phenyl group substituted by a hydroxy group.
  • the hydroxy substitution can be single or multiple substitution, wherein the single substitution can replace the para, meta, and ortho positions. Preference is given to para-monosubstitution.
  • R 2 is -CH 2 COOH, -CH 2 COOCH 3 , -CH 2 COOC 2 H 5 ,-(CH 2 ) 2 COOH,-(CH 2 ) 2 COOCH 3 ,-(CH 2 ) 2 COOC 2 H 5 , -CH 2 Ph, -CH 2 Ph(o-OH).
  • the present invention also discloses the following compounds or their pharmaceutically acceptable salts, pharmaceutically acceptable solvates and stereoisomers thereof:
  • the invention also discloses a preparation method of the compound of formula I, which comprises the following steps:
  • the compounds of formula I include I'compounds that do not contain carboxyl groups and I" compounds that contain carboxyl groups.
  • R 1 is (1 ⁇ 4C)alkyl
  • R b is phenyl or phenyl optionally substituted by hydroxy, carboxy, or halogen;
  • the present invention also discloses a pharmaceutical composition
  • a pharmaceutical composition comprising the compound of formula I or a pharmaceutically acceptable salt thereof and a pharmaceutically acceptable carrier.
  • the present invention also discloses the use of the compound of formula I or a pharmaceutically acceptable salt thereof in the preparation of drugs related to the prevention and/or treatment of Trk kinase inhibition.
  • indications related to Trk kinase inhibition include tumors, cancer, inflammation, pain, and neurodegenerative diseases.
  • the compound of the present invention has the following beneficial effects: 1. It has a strong Trk kinase inhibitory effect; 2.
  • the introduced group or fragment is an essential amino acid for the human body and does not increase side effects; 3.
  • the carboxyl group in the amino acid structure is hydrophilic , Can increase the water solubility of the compound.
  • Figure 1 is a comparison diagram of the inhibitory rates of compounds 1-16 of the present invention on TrkA kinase in Example 17;
  • Figure 2 is a comparison diagram of the inhibition rate of compounds 1-16 of the present invention on TrkB kinase in Example 17;
  • Fig. 3 is a comparison chart of the inhibitory rate of compounds 1-16 of the present invention on TrkC kinase in Example 17.
  • Example 1c the ethyl glycinate was replaced with 0.6 g (5.1 mmol) of ethyl L-alanine to obtain (S)-2-(3-(5-((R)-2-(2, 5-Difluorophenyl)pyrrolidin-1-yl)pyrazolo[1,5-a]pyrimidin-3-yl)ureido) ethyl propionate 1.6g (purity>99%, molar yield: 76.0 %).
  • ESI-MS (m/z): 459.20 ([M+H] + ).
  • Example 1c the ethyl glycinate was replaced with 1.1 g (5.4 mmol) of diethyl L-glutamate to obtain (S)-2-(3-(5-((R)-2-(2 ,5-Difluorophenyl)pyrrolidin-1-yl)pyrazolo[1,5-a]pyrimidin-3-yl)ureido)diethyl glutarate 1.6g (purity>99%, molar yield Rate: 64.0%).
  • ESI-MS (m/z): 545.23 ([M+H] + ).
  • Example 1c the ethyl glycinate was replaced with 1 g (5.2 mmol) of ethyl L-phenylalanine to obtain (S)-2-(3-(5-((R)-2-(2, 5-Difluorophenyl)pyrrolidin-1-yl)pyrazolo[1,5-a]pyrimidin-3-yl)ureido)-3-phenylpropionic acid ethyl ester 1.7g (purity>99%, Molar yield: 69.2%).
  • ESI-MS (m/z): 535.23 ([M+H] + ).
  • Example 1c the ethyl glycinate was replaced with 1.1 g (5.3 mmol) of ethyl L-tyrosine to obtain (S)-2-(3-(5-((R)-2-(2, 5-Difluorophenyl)pyrrolidin-1-yl)pyrazolo[1,5-a]pyrimidin-3-yl)ureido)-3-(4-hydroxyphenyl) ethyl propionate 1.4g ( Purity>98%, molar yield: 47.5%). ESI-MS (m/z): 551.22 ([M+H] + ).
  • HTRF kinEASE-TK kit including TK Sub-Bt, Sa-XL665, TK Ab-Eu 3+ , enzyme buffer, detection buffer), TrkA, TrkB, TrkC kinase (Carna), ATP (Invitrogen), DTT, MnCl 2 (Sigma).
  • kinase buffer Each milliliter of kinase buffer contains 200 ⁇ L enzyme buffer, 5 ⁇ L 1M MgCl 2 , 1 ⁇ L 1M DTT, 1 ⁇ L 1M MnCl 2 , and 793 ⁇ L ddH 2 O.
  • TK Sub-Bt, ATP, Trk kinase and a certain concentration of the compound of formula I are added to the reaction well containing enzyme buffer, and the enzymatic reaction is carried out at room temperature. If other conditions are the same, replace Trk kinase with an equal amount of kinase buffer as the negative group; if other conditions are the same, replace a certain concentration of the compound of formula I with an equal amount of kinase buffer as the positive group.
  • the feeding amount of each reaction well is specifically shown in Table 1.
  • the inhibition of each compound of formula I was measured at two concentrations of 10 ⁇ M and 1 ⁇ M, and staurosporine was selected as the reference compound.
  • Each group of experiments is set up with the same conditions for multiple hole experiments to avoid accidental errors. Then, compare the positive group and the negative group to calculate the inhibition rate of each reaction well, and take the average of the multiple wells.
  • Inhibition rate (ER positive -ER sample )/(ER positive -ER negative ) ⁇ 100%
  • ER positive refers to the light excitation ratio of the positive group
  • ER sample refers to the light excitation ratio of the compound of formula I
  • ER negative refers to the light excitation ratio of the negative group. It can be seen from the formula that the higher the value of the inhibition rate, the better the inhibitory effect of the compound of formula I.
  • the inhibition data of each compound of formula I on Trk A, Trk B, and Trk C are shown in Figure 1, Figure 2, and Figure 3, respectively.

Abstract

本发明公开了一种取代的吡唑并[1,5-a]嘧啶氨基酸衍生物及其用途。该系列化合物保留了吡唑并[1,5-a]嘧啶基团，并且引入具有亲水性基团羧基的人体必需氨基酸。本发明化合物不仅具有较强的Trk激酶抑制效果，而且具有安全性高、水溶性好等特点。

Description

取代的吡唑并[1,5-a]嘧啶氨基酸衍生物及其用途 技术领域
本发明涉及药物化学领域，具体涉及一种取代的吡唑并[1,5-a]嘧啶氨基酸衍生物及其用途。
背景技术
原肌球蛋白受体激酶(Trk)是由一组称为神经营养因子(NT)的可溶性生长因子激活的高亲和性受体酪氨酸激酶。Trk受体家族包括3个成员，即TrkA、TrkB和TrkC。Trk在神经元组织中广泛表达且与神经元细胞的维持、信号传导和存活有关(Patapoutian,A.et al,Current Opinion in Neurobiology,2001,11:272-280)。
文献显示Trk的融合、过度表达、激活、扩增和/或突变与许多癌症有关，而在癌症的临床前模型中，TrkA、B和C的非选择性小分子抑制剂可以有效抑制肿瘤生长和阻止肿瘤转移(Nakagawara,A.Cancer Letters,2001,169:107-114；Meyer,J.et al,Leukemia,2007:1-10；Pierottia,M.A.and Greco,A.Cancer Letters,2006,232:90-98；Eric Adriaenssens,E.et al,Cancer Research,2008,68(2):346-351；Truzzi,et al,Journal of Investigative Dermatology,2008,128(8):2031-2040)。
当前，Trk激酶抑制剂已成为研究的热点。在近几年发现的新型Trk激酶抑制剂中，很多具有吡唑并[1,5-a]嘧啶的系列结构，如专利WO2010033941、WO2010048314和WO2011006074。这些新型的抑制剂能够对Trk产生有效抑制，对治疗疼痛和炎症、癌症、神经变性疾病和某些传染病是有效的。
但现有的Trk激酶抑制剂存在抑制效果不够强、安全性低、水溶性差的缺陷。为增加现有的Trk激酶抑制剂的水溶性，通常会将其制作成盐，例如硫酸盐等。
发明内容
本发明的目的在于克服现有化合物抑制效果不够强、成药性低、安全性低的缺陷，提供一种抑制效果好、高成药性、高安全性的取代的吡唑并[1,5-a]嘧啶氨基酸衍生物及其用途。
为了实现上述发明目的所采取的具体实施方案为：
本发明公开了一种具有通式I的化合物或其药学上可接受的盐，
Figure PCTCN2020133519-appb-000001
其中：
R 1是H、(1～4C)烷基；
R 2是H、(1～6C)烷基、－(1～4C烷基)C(＝O)OR a或－(1～4C烷基)R b；
R a是H、(1～4C)烷基；
R b是苯基或任选地被羟基、羧基、卤素取代的苯基。
所述(1～4C)烷基包括(1～4C)直链或带有支链的烷基以及(3～4C)环烷基；所述(1～6C)烷基包括(1～6C)直链或带有支链的烷基以及(3～6C)环烷基；(3～6C)环烷基还包括总碳数在6以内的带有支链的环烷烃。
在某些具体实施例中R b可以被单取代，也可被多取代，例如：
Figure PCTCN2020133519-appb-000002
作为优选：
R 1是H、甲基或乙基；
R 2是H、(1～4C)烷基、－(1～2C烷基)C(＝O)OR a或－(1～2C烷基)R b；
R a是H、(1～4C)烷基；
R b是苯基或任选地被羟基、羧基取代的苯基。
所述(1～4C)烷基包括(1～4C)直链或带有支链的烷基以及(3～4C)环烷基。在某些具体实施例中R b可以被羟基羧基单取代，也可被多取代。
进一步优选，R 2是H、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基或其他丁基。所述其他丁基可以是新丁基、环丁基、甲基环丙基等。
进一步优选：
R a是H、甲基、乙基；
R b是苯基或被羟基取代的苯基。羟基取代可以是单取代也可以是多取代，其中单取代可以取代对位、间位和邻位。优选对位单取代。
更进一步优选：
R 2是－CH 2COOH、－CH 2COOCH 3、－CH 2COOC 2H 5、－(CH 2) 2COOH、－(CH 2) 2COOCH 3、－(CH 2) 2COOC 2H 5、－CH 2Ph、－CH 2Ph(o-OH)。
本发明还公开了如下化合物或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂合物及其立体异构体：
(R)-2-(3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)乙酸乙酯；
(R)-2-(3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)乙酸；
(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)丙酸乙酯；
(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)丙酸；
(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)-3-甲基丁酸乙酯；
(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)-3-甲基丁酸；
(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)-4-甲基戊酸乙酯；
(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)-4-甲基戊酸；
(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)丁二酸二乙酯；
(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)丁二酸；
(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基) 戊二酸二乙酯；
(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)戊二酸；
(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)-3-苯基丙酸乙酯；
(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)-3-苯基丙酸；
(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)-3-(4-羟基苯基)丙酸乙酯；
(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)-3-(4-羟基苯基)丙酸。
本发明还公开了一种所述式I化合物的制备方法，包括以下步骤：
(R)-5-[2-(2,5-二氟苯基)-1-吡咯烷基]-3-吡唑并[1,5-a]嘧啶基氨基甲酸苯酯与
Figure PCTCN2020133519-appb-000003
反应得到不含羧基的式I’化合物；将式I’化合物进行水解得到含羧基的式I”化合物；
Figure PCTCN2020133519-appb-000004
所述式I化合物包括不含羧基的I’化合物及含羧基的I”化合物。
其中R 1’是(1～4C)烷基；
R 2’是(1～6C)烷基、－(1～4C烷基)C(＝O)O(1～4C烷基)或－(1～4C烷基)R b；
R 2”是(1～6C)烷基、－(1～4C烷基)C(＝O)OH或－(1～4C烷基)R b；
R b是苯基或任选地被羟基、羧基、卤素取代的苯基；
(R)-5-[2-(2,5-二氟苯基)-1-吡咯烷基]-3-吡唑并[1,5-a]嘧啶基氨基甲酸苯酯(VI)根据参考文献TW201625636A方法获得。
5-氯-3-硝基吡唑并[1,5-а]嘧啶(II)和(R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷盐酸盐(III)在三乙胺作用下得到(R)-5-[2-(2,5-二氟苯基)-1-吡咯烷基]-3-硝基-吡唑并[1,5-a]嘧啶(IV)；用Zn还原得到(R)-5-[2-(2,5-二氟苯基)-1-吡咯烷基]-3-氨基-吡唑并[1,5-a]嘧啶(V)；再与氯甲酸苯酯反应得到(R)-5-[2-(2,5-二氟苯基)-1-吡咯烷基]-3-吡唑并[1,5-a]嘧啶基氨基甲酸苯酯(VI)；
反应式如下所示：
Figure PCTCN2020133519-appb-000005
本发明还公开了一种药物组合物，包含上述式I化合物或其药学上可接受的盐及药学上可接受的载体。
本发明还公开了所述式I化合物或其药学上可接受的盐用于制备预防和/或治疗与Trk激酶抑制有关的药物中的用途。
其中，所述Trk激酶抑制相关的适应症包括肿瘤、癌症、炎症、疼痛、神经变性疾病。
本发明化合物具有以下有益效果：1.具有较强的Trk激酶抑制效果；2.所引入的基团或者片段为人体必需的氨基酸，不会增加副作用；3.氨基酸结构中的羧基具有亲水性，可以增加化合物水溶性。
附图说明
图1为实施例17中本发明的化合物1-16对于TrkA激酶的抑制率对比图；
图2为实施例17中本发明的化合物1-16对于TrkB激酶的抑制率对比图；
图3为实施例17中本发明的化合物1-16对于TrkC激酶的抑制率对比图。
具体实施方式
实施例1：化合物1的制备
(a)(R)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-硝基吡唑并[1,5-a]嘧啶
向反应瓶中加入5-氯-3-硝基吡唑并[1,5-а]嘧啶40g(0.20mol)、(R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷盐酸盐46.5g(0.21mol)、无水乙醇320mL和四氢呋喃80mL，搅拌下加入三乙胺71.3g(0.705mol)。将反应混合物加热至50℃搅拌反应约5小时，冷却至室温，加入水，搅拌约1小时。过滤，滤饼用水洗，烘干得固体64.2g(纯度>99％，摩尔收率：92.3％)。ESI-MS(m/z):346.11([M+H] +)。
(b)(R)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-氨基甲酸苯酯
向反应瓶中加入(R)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-硝基吡唑并[1,5-a]嘧啶20g(58mmol)和四氢呋喃200mL，室温搅拌溶解。冷却至低于5℃，加入锌粉38g(581mmol)，然后缓慢滴加HCl(6M)100mL。滴完，升温至室温并搅拌约2小时。反应物中依次加入100mL含16g碳酸钾的水溶液和氯甲酸苯酯11g(70mmol)，室温搅拌约3小时。加入二氯甲烷，萃取分层。有机相分别用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤，滤液减压浓缩得到黄褐色粗品，乙酸乙酯重结晶得黄色化合物21.9g(纯度>99％，摩尔收率：86.8％)。ESI-MS(m/z):436.16([M+H] +)。
(c)(R)-2-(3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)乙酸乙酯
(R)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-氨基甲酸苯酯2g(4.6mmol)和四氢呋喃25mL，室温搅拌溶解。加入甘氨酸乙酯0.6g(5.8mmol)和无水乙醇20mL，减压浓缩。浓缩物中加入无水乙醇20mL，加热至50℃搅拌反应约7小时。冷却至室温，减压浓缩，浓缩物柱层析纯化得(R)-2-(3-(5-(2-(2,5- 二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)乙酸乙酯1.7g(纯度>99％，摩尔收率：83.3％)。ESI-MS(m/z):445.18([M+H] +)。 1H-NMR(CDCl 3,500MHz,δppm):1.26(t,3H,J＝7.0Hz),2.02-2.07(m,4H),2.44-2.48(m,2H),3.75-3.78(m,1H),3.98(d,2H,J＝10Hz),4.11-4.21(m,2H),5.34(t,1H,J＝10Hz),5.90(br s,1H),6.75(s,1H),6.92(d,1H,J＝7.6Hz),7.04(d,1H,J＝7.5Hz),7.17(d,1H,J＝7.5Hz),7.91(d,1H,J＝7.6Hz),8.14(s,1H)。
实施例2：化合物2的制备
(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)丙酸乙酯
参照实施例1c的方法，将甘氨酸乙酯更换为L-丙氨酸乙酯0.6g(5.1mmol)，得到(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)丙酸乙酯1.6g(纯度>99％，摩尔收率：76.0％)。ESI-MS(m/z):459.20([M+H] +)。 1H-NMR(CDCl 3,500MHz,δppm):1.27(t,3H,J＝7.0Hz),1.40(d,3H,J＝7.0Hz),2.02-2.06(m,4H),2.43-2.47(m,2H),3.95-3.98(m,1H),4.11-4.20(m,2H),4.47-4.53(m,1H),5.25-5.35(m,1H),5.99(br s,1H),6.74(s,1H),6.92(d,1H,J＝7.6Hz),7.03(d,1H,J＝7.5Hz),7.19(d,1H,J＝7.5Hz),7.92(d,1H,J＝7.6Hz),8.12(s,1H)。
实施例3：化合物3的制备
(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)-3-甲基丁酸乙酯
参照实施例1c的方法，将甘氨酸乙酯更换为L-缬氨酸乙酯0.8g(5.5mmol)，得到(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)-3-甲基丁酸乙酯1.6g(纯度>98％，摩尔收率：71.6％)。ESI-MS(m/z):487.23([M+H] +)。 1H-NMR(CDCl 3,500MHz,δppm):0.86(d,3H,J＝6.5Hz),0.98(d,3H,J＝6.5Hz),1.27(t,3H,J＝7.0Hz),2.03-2.05(m,4H),2.12-2.16(m,1H),2.43-2.48(m,2H),3.94-3.97(m,1H),4.13-4.21(m,2H),4.47-4.49(m,1H),5.47-5.55(m,1H),5.98(br s,1H),6.71(s,1H),6.92(d,1H,J＝7.6Hz),7.06(d,1H,J＝7.5Hz),7.17(d, 1H,J＝7.5Hz),7.96(d,1H,J＝7.6Hz),8.12(s,1H)。
实施例4：化合物4的制备
(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)-4-甲基戊酸乙酯
参照实施例1c的方法，将甘氨酸乙酯更换为L-亮氨酸乙酯0.9g(5.7mmol)，得到(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)-4-甲基戊酸乙酯1.4g(纯度>99％，摩尔收率：60.9％)。ESI-MS(m/z):501.24([M+H] +)。 1H-NMR(CDCl 3,500MHz,δppm):0.95(d,3H,J＝6.5Hz),0.98(d,3H,J＝6.5Hz),1.28(t,3H,J＝7.0Hz),1.51-1.52(m,1H),1.62-1.66(m,1H),1.72-1.74(m,1H),2.07-2.10(m,4H),2.44-2.50(m,2H),3.93-3.97(m,1H),4.17-4.20(m,2H),4.57-4.59(m,1H),5.27-5.35(m,1H),5.91(br s,1H),6.73(s,1H),6.94(d,1H,J＝7.6Hz),7.08(d,1H,J＝7.5Hz),7.18(d,1H,J＝7.5Hz),7.96(d,1H,J＝7.6Hz),8.15(s,1H)。
实施例5：化合物5的制备
(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)丁二酸二乙酯
参照实施例1c的方法，将甘氨酸乙酯更换为L-天冬氨酸二乙酯1g(5.3mmol)，得到(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)丁二酸二乙酯1.5g(纯度>99％，摩尔收率：61.6％)。ESI-MS(m/z):531.22([M+H] +)。 1H-NMR(CDCl 3,500MHz,δppm):1.26(t,3H,J＝7.0Hz),1.32(t,3H,J＝7.0Hz),1.68-1.70(m,2H),2.04-2.06(m,4H),2.80-2.85(m,1H),3.15-3.18(m,1H),3.89-3.93(m,2H),4.10-4.14(m,1H),4.23-4.27(m,2H),4.54-4.57(m,1H),5.47-5.53(m,1H),6.18(br s,1H),6.74(s,1H),6.90(d,1H,J＝7.6Hz),7.02(d,1H,J＝7.5Hz),7.15(d,1H,J＝7.5Hz),7.89(d,1H,J＝7.6Hz),8.16(s,1H)。
实施例6：化合物6的制备
(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基) 戊二酸二乙酯
参照实施例1c的方法，将甘氨酸乙酯更换为L-谷氨酸二乙酯1.1g(5.4mmol)，得到(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)戊二酸二乙酯1.6g(纯度>99％，摩尔收率：64.0％)。ESI-MS(m/z):545.23([M+H] +)。 1H-NMR(CDCl 3,500MHz,δppm):1.27(t,3H,J＝3.5Hz),1.29(t,3H,J＝3.5Hz),1.69-1.72(m,2H),2.03-2.06(m,4H),2.26-2.29(m,2H),2.60(t,2H,J＝4.0Hz),3.89-3.92(m,2H),4.12-4.18(m,3H),4.33-4.36(m,1H),5.87-5.92(m,1H),6.00(br s,1H),6.74(s,1H),6.92(d,1H,J＝7.6Hz),7.05(d,1H,J＝7.5Hz),7.16(d,1H,J＝7.5Hz),7.89(d,1H,J＝7.6Hz),8.15(s,1H)。
实施例7：化合物7的制备
(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)-3-苯基丙酸乙酯
参照实施例1c的方法，将甘氨酸乙酯更换为L-苯丙氨酸乙酯1g(5.2mmol)，得到(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)-3-苯基丙酸乙酯1.7g(纯度>99％，摩尔收率：69.2％)。ESI-MS(m/z):535.23([M+H] +)。 1H-NMR(CDCl 3,500MHz,δppm):1.23(t,3H,J＝7.0Hz),2.01-2.04(m,4H),2.42-2.45(m,2H),3.13-3.16(m,2H),3.74-3.81(m,1H),4.11-4.15(m,2H),4.80-4.84(m,1H),5.95(br s,2H),6.75(s,1H),6.92(d,1H,J＝7.6Hz),7.05(d,1H,J＝7.5Hz),7.09-7.11(m,2H),7.18-7.20(m,4H),7.83(d,1H,J＝7.6Hz),8.08(s,1H)。
实施例8：化合物8的制备
(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)-3-(4-羟基苯基)丙酸乙酯
参照实施例1c的方法，将甘氨酸乙酯更换为L-酪氨酸乙酯1.1g(5.3mmol)，得到(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)-3-(4-羟基苯基)丙酸乙酯1.4g(纯度>98％，摩尔收率：47.5％)。ESI-MS(m/z):551.22([M+H] +)。 1H-NMR(CDCl 3,500MHz,δppm):1.26(t,3H,J＝7.0Hz),1.98-2.01(m,4H),2.40-2.43(m,2H),3.21-3.23(m,2H),3.72-3.77(m,1H), 4.10-4.13(q,2H,J＝7.0Hz),4.76-4.81(m,1H),5.30(br s,1H),5.82(br s,2H),6.72(d,2H,J＝7.5Hz),6.74-6.77(m,2H),6.99(d,1H,J＝7.5Hz),7.03-7.06(m,3H),7.66(d,1H,J＝7.6Hz),8.11(s,1H)。
实施例9：化合物9的制备(R)-2-(3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)乙酸
将实施例1c所得的(R)-2-(3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)乙酸乙酯1.2g(2.7mmol)、甲醇25mL、水25mL室温搅拌溶解后冷至10℃左右，加入10％氢氧化钠水溶液2.2g(5.5mmol)，加完后升温至室温并搅拌3-4小时。反应结束用甲基叔丁基醚20mL萃取一次，水相冷至0℃左右，缓慢滴加4M HCl调节pH至中性，析出固体。过滤，水洗，真空干燥得(R)-2-(3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)乙酸1.0g(纯度>98％，摩尔收率：89.0％)。ESI-MS(m/z):417.15([M+H] +)。 1H-NMR(CDCl 3,500MHz,δppm):2.03-2.08(m,4H),2.45-2.50(m,2H),3.74-3.78(m,1H),4.01(d,2H,J＝10Hz),5.35(t,1H,J＝10Hz),5.90(br s,1H),6.76(s,1H),6.91(d,1H,J＝7.6Hz),7.03(d,1H,J＝7.5Hz),7.19(d,1H,J＝7.5Hz),7.93(d,1H,J＝7.6Hz),8.16(s,1H),10.88(s,1H)。
实施例10：化合物10的制备
(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)丙酸
参照实施例9的方法，将(R)-2-(3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)乙酸乙酯更换为实施例2所得的(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)丙酸乙酯1.2g(2.6mmol)，10％氢氧化钠水溶液调整为2.1g(5.25mmol)，得到(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)丙酸1.0g(纯度>98％，摩尔收率：88.8％)。ESI-MS(m/z):431.42([M+H] +)。 1H-NMR(CDCl 3,500MHz,δppm):1.43(d,3H,J＝7.0Hz),2.02-2.06(m,4H),2.42-2.46(m,2H),3.96-3.99(m,1H),4.46-4.51(m,1H),5.27-5.34(m,1H),5.97(br s,1H),6.72(s,1H),6.92(d,1H,J＝7.6Hz),7.02(d,1H,J＝7.5Hz),7.16(d,1H,J＝7.5Hz),7.91(d,1H,J＝7.6Hz),8.15(s,1H), 10.86(s,1H)。
实施例11：化合物11的制备
(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)-3-甲基丁酸
参照实施例9的方法，将(R)-2-(3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)乙酸乙酯更换为实施例3所得的(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)-3-甲基丁酸乙酯1.2g(2.5mmol)，10％氢氧化钠水溶液调整为2.0g(5.0mmol)，得到(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)-3-甲基丁酸0.9g(纯度>98％，摩尔收率：79.6％)。ESI-MS(m/z):459.20([M+H] +)。 1H-NMR(CDCl 3,500MHz,δppm):0.88(d,3H,J＝6.5Hz),0.98(d,3H,J＝6.5Hz),2.01-2.04(m,4H),2.13-2.17(m,1H),2.42-2.48(m,2H),3.95-3.98(m,1H),4.48-4.51(m,1H),5.45-5.52(m,1H),5.99(br s,1H),6.73(s,1H),6.93(d,1H,J＝7.6Hz),7.08(d,1H,J＝7.5Hz),7.18(d,1H,J＝7.5Hz),7.94(d,1H,J＝7.6Hz),8.13(s,1H),10.84(s,1H)。
实施例12：化合物12的制备
(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)-4-甲基戊酸
参照实施例9的方法，将(R)-2-(3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)乙酸乙酯更换为实施例4所得的(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)-4-甲基戊酸乙酯1.0g(2.0mmol)，10％氢氧化钠水溶液调整为1.6g(4.0mmol)，得到(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)-4-甲基戊酸0.7g(纯度>97％，摩尔收率：74.2％)。ESI-MS(m/z):473.21([M+H] +)。 1H-NMR(CDCl 3,500MHz,δppm):0.96(d,3H,J＝6.5Hz),0.99(d,3H,J＝6.5Hz),1.52-1.56(m,1H),1.63-1.67(m,1H),1.72-1.75(m,1H),2.07-2.10(m,4H),2.42-2.48(m,2H),3.93-3.97(m,1H),4.53-4.56(m,1H),5.25-5.33(m,1H),5.94(br s,1H),6.70(s,1H),6.93(d,1H,J＝7.6Hz),7.08(d,1H,J＝7.5Hz),7.18(d,1H,J ＝7.5Hz),7.95(d,1H,J＝7.6Hz),8.15(s,1H),10.90(s,1H)。
实施例13：化合物13的制备
(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)丁二酸
参照实施例9的方法，将(R)-2-(3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)乙酸乙酯更换为实施例5所得的(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)丁二酸二乙酯1.1g(2.1mmol)，10％氢氧化钠水溶液调整为3.4g(8.5mmol)，得到(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)丁二酸0.7g(纯度>97％，摩尔收率：71.2％)。ESI-MS(m/z):475.15([M+H] +)。 1H-NMR(CDCl 3,500MHz,δppm):1.67-1.70(m,2H),2.01-2.04(m,4H),2.81-2.86(m,1H),3.17-3.20(m,1H),4.10-4.14(m,1H),4.54-4.59(m,1H),5.47-5.52(m,1H),6.19(br s,1H),6.71(s,1H),6.92(d,1H,J＝7.6Hz),7.02(d,1H,J＝7.5Hz),7.17(d,1H,J＝7.5Hz),7.90(d,1H,J＝7.6Hz),8.16(s,1H),10.86(s,1H),10.92(s,1H)。
实施例14：化合物14的制备
(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)戊二酸
参照实施例9的方法，将(R)-2-(3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)乙酸乙酯更换为实施例6所得的(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)戊二酸二乙酯1.2g(2.2mmol)，10％氢氧化钠水溶液调整为3.6g(9.0mmol)，得到(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)戊二酸0.8g(纯度>97％，摩尔收率：74.3％)。ESI-MS(m/z):489.17([M+H] +)。 1H-NMR(CDCl 3,500MHz,δppm):1.66-1.70(m,2H),2.01-2.05(m,4H),2.25-2.29(m,2H),2.61(t,2H,J＝4.0Hz),4.15-4.18(m,1H),4.31-4.35(m,1H),5.87-5.91(m,1H),6.02(br s,1H),6.75(s,1H),6.94(d,1H,J＝7.6Hz),7.07(d,1H,J＝7.5Hz),7.16(d,1H,J＝7.5Hz),7.88(d,1H,J＝7.6Hz),8.18(s,1H),10.84(s,1H),10.91(s,1H)。
实施例15：化合物15的制备
(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)-3-苯基丙酸
参照实施例9的方法，将(R)-2-(3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)乙酸乙酯更换为实施例7所得的(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)-3-苯基丙酸乙酯1.2g(2.2mmol)，10％氢氧化钠水溶液调整为1.8g(4.5mmol)，得到(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)-3-苯基丙酸0.9g(纯度>98％，摩尔收率：79.2％)。ESI-MS(m/z):507.20([M+H] +)。 1H-NMR(CDCl 3,500MHz,δppm):2.02-2.05(m,4H),2.40-2.44(m,2H),3.15-3.17(m,2H),3.75-3.80(m,1H),4.82-4.86(m,1H),5.97(br s,2H),6.75(s,1H),6.95(d,1H,J＝7.6Hz),7.07(d,1H,J＝7.5Hz),7.10-7.13(m,2H),7.20-7.23(m,4H),7.86(d,1H,J＝7.6Hz),8.10(s,1H),10.89(s,1H)。
实施例16：化合物16的制备
(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)-3-(4-羟基苯基)丙酸
参照实施例9的方法，将(R)-2-(3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)乙酸乙酯更换为实施例8所得的(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)-3-(4-羟基苯基)丙酸乙酯0.9g(1.6mmol)，10％氢氧化钠水溶液调整为1.9g(4.75mmol)，得到(S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)-3-(4-羟基苯基)丙酸0.6g(纯度>98％，摩尔收率：70.2％)。ESI-MS(m/z):523.19([M+H] +)。 1H-NMR(CDCl 3,500MHz,δppm):1.96-2.00(m,4H),2.38-2.41(m,2H),3.23-3.25(m,2H),3.70-3.74(m,1H),4.76-4.81(m,1H),5.36(br s,1H),5.84(br s,2H),6.73(d,2H,J＝7.5Hz),6.75-6.78(m,2H),7.00(d,1H,J＝7.5Hz),7.05-7.08(m,3H),7.69(d,1H,J＝7.6Hz),8.14(s,1H),10.87(s,1H)。
实施例17：Trk激酶抑制实验
(a)材料：
HTRF kinEASE-TK试剂盒(包括TK Sub-Bt、Sa-XL665、TK Ab-Eu 3+、酶缓冲液、检测缓冲液)，TrkA、TrkB、TrkC激酶(Carna)，ATP(Invitrogen)，DTT、MnCl 2(Sigma)。
激酶缓冲液：每毫升激酶缓冲液中含有200μL酶缓冲液、5μL 1M MgCl 2、1μL 1M DTT、1μL 1M MnCl 2、793μL ddH 2O。
(b)实验步骤：
将TK Sub-Bt、ATP、Trk激酶以及一定浓度的式I化合物(包括化合物1-16)加至含有酶缓冲液反应孔中，在室温下进行酶促反应。其他条件一致，将Trk激酶更换为等量的激酶缓冲液作为阴性组；其他条件一致，将一定浓度的式I化合物更换为等量的激酶缓冲液作为阳性组。
40min后，向所有反应孔中加入10μl经检测缓冲液稀释的Sa-XL665和TK Ab-Eu 3+(1:100)混合检测液。室温反应1h后，用多功能微孔酶标仪(SpectraMax i3x)检测荧光信号665及615nm处的荧光信号。
表1
Figure PCTCN2020133519-appb-000006
各反应孔的投料量具体如表1所示，每种式I化合物均测量了10μM以及1μM两种浓度的抑制情况，同时选取staurosporine作为参考化合物。各组实验均 设置条件一致的复孔实验，避免偶然误差。然后，对比阳性组、阴性组计算得到各反应孔的抑制率，复孔取平均值。
计算公式如下：
ER(Emission Ratio)＝Intensity of 665nm/Intensity of 615nm
抑制率＝(ER positive-ER sample)/(ER positive-ER negative)×100％
其中ER positive是指阳性组的光激发比率，ER sample指式I化合物的光激发比率，ER negative指阴性组的光激发比率。由公式可知，抑制率数值越高，式I化合物的抑制效果越好。各式I化合物对于Trk A、Trk B、Trk C的抑制数据分别如图1、图2、图3所示。
以上实施例使用具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些不偏离本发明主旨的修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，这些不偏离本发明主旨基础上所做的修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (10)

  1. 一种具有通式I的化合物或其药学上可接受的盐，
    Figure PCTCN2020133519-appb-100001
    其中：
    R 1是H、(1～4C)烷基；
    R 2是H、(1～6C)烷基、－(1～4C烷基)C(＝O)OR a或－(1～4C烷基)R b；
    R a是H、(1～4C)烷基；
    R b是苯基或任选地被羟基、羧基、卤素取代的苯基。
  2. 如权利要求1所述化合物，其特征在于：
    R 1是H、甲基或乙基；
    R 2是H、(1～4C)烷基、－(1～2C烷基)C(＝O)OR a或－(1～2C烷基)R b；
    R a是H、(1～4C)烷基；
    R b是苯基或任选地被羟基、羧基取代的苯基。
  3. 如权利要求2所述化合物，其特征在于，R 2是H、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基或异丁基。
  4. 如权利要求2所述化合物，其特征在于：
    R a是H、甲基、乙基；
    R b是苯基或被羟基取代的苯基。
  5. 如权利要求4所述化合物，其特征在于：
    R 2是－CH 2COOH、－CH 2COOCH 3、－CH 2COOC 2H 5、－(CH 2) 2COOH、－(CH 2) 2COOCH 3、－(CH 2) 2COOC 2H 5、－CH 2Ph、－CH 2Ph(o-OH)。
  6. 一种如下化合物或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂合物及其立体异构体：
    (R)-2-(3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)乙酸 乙酯；
    (R)-2-(3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)乙酸；
    (S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)丙酸乙酯；
    (S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)丙酸；
    (S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)-3-甲基丁酸乙酯；
    (S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)-3-甲基丁酸；
    (S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)-4-甲基戊酸乙酯；
    (S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)-4-甲基戊酸；
    (S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)丁二酸二乙酯；
    (S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)丁二酸；
    (S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)戊二酸二乙酯；
    (S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)戊二酸；
    (S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)-3-苯基丙酸乙酯；
    (S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)-3-苯基丙酸；
    (S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲基)-3-(4-羟基苯基)丙酸乙酯；
    (S)-2-(3-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲 基)-3-(4-羟基苯基)丙酸。
  7. 一种如权利要求1-6任一所述化合物的制备方法，其特征在于，(R)-5-[2-(2,5-二氟苯基)-1-吡咯烷基]-3-吡唑并[1,5-a]嘧啶基氨基甲酸苯酯与
    Figure PCTCN2020133519-appb-100002
    反应得到不含羧基的式I’化合物；将式I’化合物进行水解得到含羧基的式I”化合物；
    Figure PCTCN2020133519-appb-100003
    所述式I化合物包括不含羧基的I’化合物及含羧基的I”化合物；
    其中R 1’是(1～4C)烷基；
    R 2’是(1～6C)烷基、－(1～4C烷基)C(＝O)O(1～4C烷基)或－(1～4C烷基)R b；
    R 2”是(1～6C)烷基、－(1～4C烷基)C(＝O)OH或－(1～4C烷基)R b；
    R b是苯基或任选地被羟基、羧基、卤素取代的苯基。
  8. 一种药物组合物，其特征在于，包含如权利要求1～6任一所述化合物或其药学上可接受的盐及药学上可接受的载体。
  9. 如权利要求1～6任一所述化合物或其药学上可接受的盐用于制备预防和/或治疗与Trk激酶抑制有关的药物中的用途。
  10. 如权利要求9所述用途，其特征在于，所述Trk激酶抑制相关的适应症包括肿瘤、癌症、炎症、疼痛、神经变性疾病。
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