UA76396C2 - Monoclonal antibody, which is able to be bound with receptor ifn -, block the biological activity of ifn- and ifn- and create higher antiviral titer against fn-, than against ifn- (variants), pharmaceutical composition for modulation or blocking biological activity of ifn-, hybridoma expressing denoted antibody (variants), and set for carrying out elisa-analysis of ifnab-bpi and/or ifnab-bpi - Google Patents
Monoclonal antibody, which is able to be bound with receptor ifn -, block the biological activity of ifn- and ifn- and create higher antiviral titer against fn-, than against ifn- (variants), pharmaceutical composition for modulation or blocking biological activity of ifn-, hybridoma expressing denoted antibody (variants), and set for carrying out elisa-analysis of ifnab-bpi and/or ifnab-bpi Download PDFInfo
- Publication number
- UA76396C2 UA76396C2 UA98116315A UA98116315A UA76396C2 UA 76396 C2 UA76396 C2 UA 76396C2 UA 98116315 A UA98116315 A UA 98116315A UA 98116315 A UA98116315 A UA 98116315A UA 76396 C2 UA76396 C2 UA 76396C2
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- ifn
- iem
- biological activity
- antibody
- antibodies
- Prior art date
Links
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 title claims abstract description 20
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 title claims abstract description 20
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 title claims abstract description 13
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 9
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 title claims description 19
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 title abstract 2
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims abstract description 16
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims abstract description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims description 6
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 claims description 4
- 238000000576 coating method Methods 0.000 claims description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 4
- 238000005497 microtitration Methods 0.000 claims description 3
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 2
- 238000012876 topography Methods 0.000 claims 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 abstract description 5
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 abstract description 5
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 abstract description 4
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 abstract description 4
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 abstract description 4
- 208000037357 HIV infectious disease Diseases 0.000 abstract description 3
- 208000033519 human immunodeficiency virus infectious disease Diseases 0.000 abstract description 3
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 abstract description 3
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 abstract description 2
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 abstract description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 abstract description 2
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 abstract 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 abstract 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 43
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 37
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 37
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 32
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 31
- 238000000034 method Methods 0.000 description 24
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 24
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 24
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 15
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 14
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 14
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 12
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 11
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 10
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 10
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 10
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 9
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 8
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 8
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 8
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 8
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 8
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 8
- -1 DNA or RNA Chemical class 0.000 description 7
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 7
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 7
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 6
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 6
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 6
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 6
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 5
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 5
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 5
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 5
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 5
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 5
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 5
- 102000002227 Interferon Type I Human genes 0.000 description 4
- 108010014726 Interferon Type I Proteins 0.000 description 4
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 210000003567 ascitic fluid Anatomy 0.000 description 4
- 125000003178 carboxy group Chemical class [H]OC(*)=O 0.000 description 4
- 238000009795 derivation Methods 0.000 description 4
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 4
- 241000894007 species Species 0.000 description 4
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 4
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000008733 Citrus aurantifolia Nutrition 0.000 description 3
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 3
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101710186227 S-adenosylmethionine synthase Proteins 0.000 description 3
- 102100026115 S-adenosylmethionine synthase isoform type-1 Human genes 0.000 description 3
- 240000006909 Tilia x europaea Species 0.000 description 3
- 235000011941 Tilia x europaea Nutrition 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 3
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 3
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 3
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 3
- 239000004571 lime Substances 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 208000017972 multifocal atrial tachycardia Diseases 0.000 description 3
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020005187 Oligonucleotide Probes Proteins 0.000 description 2
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 241000711975 Vesicular stomatitis virus Species 0.000 description 2
- 241000405119 Virga Species 0.000 description 2
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical class 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- 102000023732 binding proteins Human genes 0.000 description 2
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 2
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 2
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 2
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 2
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 239000002751 oligonucleotide probe Substances 0.000 description 2
- 239000013600 plasmid vector Substances 0.000 description 2
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 2
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 2
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 2
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 2
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 2
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical class [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 208000032791 BCR-ABL1 positive chronic myelogenous leukemia Diseases 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 235000017399 Caesalpinia tinctoria Nutrition 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical class [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 208000010833 Chronic myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 1
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700626 Cowpox virus Species 0.000 description 1
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 1
- 241000305071 Enterobacterales Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- CWYNVVGOOAEACU-UHFFFAOYSA-N Fe2+ Chemical class [Fe+2] CWYNVVGOOAEACU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 description 1
- 241000545744 Hirudinea Species 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical class C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 102000001617 Interferon Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010054267 Interferon Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 1
- 102000003996 Interferon-beta Human genes 0.000 description 1
- 108090000467 Interferon-beta Proteins 0.000 description 1
- 208000007766 Kaposi sarcoma Diseases 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- MMVYPOCJESWGTC-UHFFFAOYSA-N Molybdenum(2+) Chemical compound [Mo+2] MMVYPOCJESWGTC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 101100380295 Mus musculus Asah1 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000033761 Myelogenous Chronic BCR-ABL Positive Leukemia Diseases 0.000 description 1
- OKIZCWYLBDKLSU-UHFFFAOYSA-M N,N,N-Trimethylmethanaminium chloride Chemical compound [Cl-].C[N+](C)(C)C OKIZCWYLBDKLSU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- 208000025966 Neurological disease Diseases 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000388430 Tara Species 0.000 description 1
- 206010052779 Transplant rejections Diseases 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical class [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003435 aroyl group Chemical group 0.000 description 1
- OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N azane;(2e)-3-ethyl-2-[(e)-(3-ethyl-6-sulfo-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazinylidene]-1,3-benzothiazole-6-sulfonic acid Chemical compound [NH4+].[NH4+].S/1C2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N(CC)C\1=N/N=C1/SC2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N1CC OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003139 biocide Substances 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Chemical class 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 125000001589 carboacyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002837 carbocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 210000005056 cell body Anatomy 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 239000005043 ethylene-methyl acrylate Substances 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003827 glycol group Chemical group 0.000 description 1
- 229910001385 heavy metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 108060003552 hemocyanin Proteins 0.000 description 1
- 235000012907 honey Nutrition 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 238000001114 immunoprecipitation Methods 0.000 description 1
- 230000004957 immunoregulator effect Effects 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000004968 inflammatory condition Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960001388 interferon-beta Drugs 0.000 description 1
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000001638 lipofection Methods 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 125000000311 mannosyl group Chemical group C1([C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 1
- 230000000873 masking effect Effects 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 230000035407 negative regulation of cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 1
- 235000006408 oxalic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 1
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 1
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 1
- MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N procaine Chemical compound CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004919 procaine Drugs 0.000 description 1
- 230000006337 proteolytic cleavage Effects 0.000 description 1
- 210000001938 protoplast Anatomy 0.000 description 1
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 1
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 230000003362 replicative effect Effects 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 239000006152 selective media Substances 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 201000010153 skin papilloma Diseases 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000012916 structural analysis Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 125000000341 threoninyl group Chemical group [H]OC([H])(C([H])([H])[H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 231100000563 toxic property Toxicity 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Chemical class 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Chemical class 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2866—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against receptors for cytokines, lymphokines, interferons
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/42—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/10—Cells modified by introduction of foreign genetic material
- C12N5/12—Fused cells, e.g. hybridomas
- C12N5/16—Animal cells
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/577—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor involving monoclonal antibodies binding reaction mechanisms characterised by the use of monoclonal antibodies; monoclonal antibodies per se are classified with their corresponding antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Hematology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Mycology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
Description
Опис винаходу
Настоящее изобретение относится к антителам против лиганд-связьвающего компонента рецептора 2 интерферона-о/р, которьіе способньі избирательно модулировать активность различньїх интерферонов І типа.
В публикаций ЕР Мо588177 описан растворимьй рецептор ІРМ-5, обладающий молекулярной массой приблизительно 40000, которьйй бьл идентифицирован путем поперечного сшивания со 729І-ІЕМ-д2 и иммунопреципитации с анти-ІЄМ-оу моноклональньми антителами. Будучи получено из сьіворотки, данное 7/0 вещество обладало молекулярной массой 50кДа. В ней также описан указанньй вьіше ІРМ- д-связьівающий белок массой 40000Да (здесь далее "ІЕМАВ-ВР" или ""ЕМАВ-ВРІЇ"), полученньйй из мочи в гомогенном состояний и обладающий последовательностью, которая отлична от таковой любого другого известного белка. ІЕМАВ-ВР связьівается с и блокирует активность множества подтипов ІЕМ-о, равно как и ІЕМ-Д.
В публикации ЕР Моб76413 описаньі клонирование и секвенирование двух молекул кКДНК, кодирующих 75 предшественники ІЕМАВ-ВР. Обе молекульї, возможно, являются продуктами одного гена, например, в результате альтернативного сплайсинга. Также описана продукция двух рекомбинантньїх белков, обозначаемьх как ІЕМАВ-ВРІ и ІРМАВ-ВРІЇ, в клетках млекопитающих и других организмов-хозяев. Также описань поликлональнье и моноклональнье антитела против ІЕМАВ-ВР и применимьсе для блокирования рецептора ІЕМ для иммунологических анализов и иммунологической очистки ІЕМАВ-ВРІ и ІЕМАВ-ВРІЇ.
В настоящем изобретений описаньй две группьі нейтрализующих антител, индуцированньїх против
ІРМАВ-ВРІЇ, которне связьвваются с рецептором интерферона І! типа на человеческих клетках, Антитела одной группь! способньї блокировать активность различньїх подтипов интерферона-о в человеческих клетках без влияния на активность интерферона- р. Таким образом, указаннье антитела одной группь! способнь ингибировать нежелательнье зффекть ІЕМ-о, при очень небольшом воздействий на активность ІЄМ-Д. Ге
Предпосьїілки изобретения. о
Интерферонь І типа (ІЕМ) (ІЕМ-о, ІЕМ-р и ІЕМ-о) составляют семейство структурно родственньїх цитокинов, обьічно определяемьїх по их способности обеспечивать сопротивляемость вирусньмм инфекциям. Сообщалось о множестве других биологических активностей ІЕМ | типа, включая ингибирование клеточной пролиферации, индукциий антигенов МНС | класса и некоторье другие иммунорегуляторнье активности (1). ІРМ- о; и ІЕМ-рД со являются применимьми для лечения некоторьх вирусньїх заболеваний, включая гепатит С (2, 3) и б обьікновенньїх бородавок (4, 5), равно как и определенньїх злокачественньїх опухолей, таких как лейкозньй ретикулозндотелиоз (6), хронический миелолейкоз (7) и саркома Капоши (8). Ше
ІРМ-о определяли в образцах сьіворотки различньїх пациентов, страдающих аутоиммунньми «я заболеваниями, такими как системная красная волчанка (9), равно как и пациентов, страдающих
Зо ВИЧ-инфекцией (10). ІРМ-о, вовлечен в процесс развития юношеского диабета (11). Далее, бьіло показано, что в - некоторьїх случаях терапия при помощи ІЕМ- ж приводит к нежелательньм побочньім зффектам, включая лихорадку и неврологические расстройства (12). Следовательно, существуют патологические состояния, при которьїх нейтрализация активности ІРМ-о, может являться желательной для пациента. « 20 Как и в случае других цитокинов, ІЕМ-о, оказьівает свой биологические зффекть! посредством связьнвания с -в с рецептором на поверхности клетки, которьій является специфичньїм для всех подтипов ІЕМ-о, равно как и ІЕМ-рД . (13). Человеческий рецептор ІЕМ-5 (ІЕМАК) идентифицировали и клонировали на клетках Юацаї (14). "» Клонированньій рецептор состоит из одного трансмембранного домена, внеклеточного и внутриклеточного доменов. Будучи зкспрессирован на мьшиньх клетках, данньй рецептор определяет реактивность по отношению к человеческому ІЕМ-о8В, но не значительно определяєт реактивность по отношению к другим видам -І ІЕМ-о; и ІЕМ-Д, указьівая на то, что в формирование ответа на ІЕМ-Д и на различнье видь! ІЕМ-о могут бьїть вовлеченьі дополнительнье компоненть.
Ф Некоторье другие исследования указьшвают на то, что в процесс связьивания ІРМ- о; и ІРМ-Д вовлечень (95) дополнительнье компонентьії или субьединиць! рецептора (15-17). Однако, сообщалось, что в процесс с 50 связьвания всех видов ІЕМ-о; и ІЕМ-Д (18) вовлечен ранее описанньйй рецептор (14). Действительно, недавно бьл идентифицирован и клонирован второй рецепторньій компонент, так назьшваємьй рецептор ІЕМ-о/р 0 (публикация ЕР Моб76413 и ссьілка 19). Авторами настоящей заявки бьіло продемонстрировано, что рецептор
ІЕМ-о/Д, внеклеточньій домен которого обладаеєт той же последовательностью, что и ІЕМАВ-ВРІ, представляєт собой основной лиганд-связьвающий компонент рецептора интерферона | типа. Более того, рецептор интерферона-о/р и ІЕМАК проявляют кооперативность связьівания лиганда и образуют тройной комплекс с
ГФ) интерферонами І типа на клеточной поверхности (20).
Моноклональнье антитела, направленнье против ЕМАК и способнье блокировать активность о интерферонов !| типа неизбирательньм образом бьли описаньії ранее (21). Бьіло описано другое моноклональное антитело против неидентифицированного рецеторного компонента. Данное антитело 60 блокировало активность интерферонов І типа неизбирательньм образом (22).
Настоящее изобретение обеспечиваєт моноклональнье антитела против рецептора ІРМ- о/р, которьй представляєт собой обьічньій рецептор ІЄМ-о, и ІЕМ-Д. Даннье антитела связьиваются с некоторьми формами рецептора, которье либо зкспрессируются на человеческих клетках, либо существуют в виде растворимьсх форм ІРМАВ-ВРІ и ІРМАВ-ВРІЇ. Бьіли вніработаньї два типа нейтрализующих моноклональньх антител. Вьісокий 65 титр антител одного типа наблюдается при применений для блокирования противовирусной активности как
ІЄМ-о, так и ІЕМ-Д. Вьісокий блокирующий титр антител второго типа неожиданно наблюдаеєтся только в связи с противовирусной активностью ІЕМ-о при очень низком титре, связанном с активностью ІЕМ-Д. Таким образом, неожиданньй второй тип моноклональньїх антител может бьть применен в определенном интервале концентраций для избирательного блокирования активности ІЕМ- ох, тогда как активность ІЕМ-Д изменяться не будет.
Настоящее изобретение также обеспечиваєт гуманизированнье моноклональнье антитела против рецептора ІРМ-о/р, зкспрессированного на человеческих клетках, ІЕМАВ-ВРІ и ІРМАВ-ВРІЇ. Гуманизированнье моноклональнье антитела представляют собой гибриднье молекульі мьішиньх и человеческих антител, в 70 которьїх вариабельнье домень!ї происходят из мьішиньїх антител, тогда как постоянньіе домень! происходят из человеческих антител.
Настоящее изобретение также обеспечиваєт молекульї ДНК, кодирующие моноклональнье антитела и гуманизированнье моноклональньсе антитела против рецептора ІРМ-о/р, ІЕМАВ-ВРІ и ІРМЕВ-ВРІЇ.
Данное изобретение далее обеспечиваєт реплицируемье зкспрессирующие векторьї, содержащие 75 указаннье молекульї ДНК, трансформированнье ими организмь-хозяева и белки, продуцируемье такими трансформированньіми организмами-хозяевами. Термин "молекуль! ДНК" включаєет в себя геномную ДНК, кКДНК, синтетическую ДНК и их комбинации.
Данное изобретение также относится к молекулам ДНК, которье гибридизуются в строго определенньх условиях с указанньіми вьіше молекулами ДНК и кодируют последовательность белков, обладающих такой же биологической активностью, что и моноклональнье антитела и гуманизированнье моноклональнье антитела против рецептора ІЄМ-о/р, ІРМАВ-ВРІ и ІРМАВ-ВРІЇ.
Настоящее изобретение также обеспечивает способь! получения клеток-хозяев, способньїх продуцировать функциональнье моноклональнье антитела и гуманизированнье моноклональнье антитела против рецептора
ІЕМ-о/р, ІЕМАВ-ВРІ и ІРМАВ-ВРІЇ. с 29 Моноклональнье антитела по настоящему изобретению ингибируют биологическую активность г) человеческого интерферона-о в человеческих клетках без воздействия на биологическую активность человеческого интерферона-Д. Биологическую активность определяли путем количественной оценки ингибирующего зффекта антитела при тестировании методом анализа ингибирования цитопатического зффекта с применением человеческих клеток УІЗН и вируса везикулярного стоматита. шо
В соответствии с заявкой на патент МИзрайля Мо106591, ІРМ- о/р-связьвающий белок, обладающий Ге) молекулярной массой 40000кДа, (ІЕМАВ-ВР) вьіделяли из обьічной мочи в две хроматографические стадии.
Неочищенньсєе белки мочи наносили на колонку, состоящую из ІЕМ-о2, пришитого к агарозе. Колонку промьівали со в целях удаления нейинтересующих белков, а связаннье белки затем смьівали при низких значениях рН. Смьітье (( з белки затем разрешали с помощью ЖХВР с разделением по размеру (размероспецифичной ЖХВР) с вьіїходом М нескольких белковьїх фракций, одна из которьх характеризовалась своей способностью специфично взаймодействовать с 722І-ІЕМ-42 и блокировать противовирусную активность ІЕМ-о, и ІЕМ-рД. Данньйй белок бьл далее охарактеризован с о помощью анализа М-концевой микропоследовательности. Полученную последовательность сравнили с и нашли отличной от таковой известного рецептора ІЕМАК (14). Она также « отличалась от таковой любого другого известного белка, и она не кодировалась ни одной из известньх Ше) с последовательностей ДНК, что определяли путем ее сравнения с вводами банков, данньїх Змізергої и (зепебваїйк с применением программь! РавіА (23). ;» Гомогеннье препарать! ІЕМАВ-ВР, вьіделенного из мочи, применяли в качестве иммуногена для получения антител.
Подразумевается, что термин "антитело" включает в себя поликлональнье антитела, моноклональнье -і антитела (МАТ), химернье антитела, антиидиотипические (анти-І4) антитела к антителам, которье могут бьїіть помечень в растворимой или связанной формах, равно как и их активнье участки, полученнье в соответствий с
Ме любой известной методикой, такой как, но не ограничиваясь, ферментативное расщепление, пептидньій синтез 2) или рекомбинантнье методики.
Поликлональнье антитела представляют собой гетерогеннье популяции молекул антител, полученнье из іс, сьіворотки животньїх, иммунизированньх антигеном. Моноклональное антитело содержит, по существу,
Ф гомогенную популяцию антител, специфичньїх к антигенам, причем данная популяция содержит, по существу, идентичнье зпитопсвязььвающие сайтьі. МАТ могут бьіть полученьі в соответствии с методиками, известнь!ми специалистам в данной области. |Смотри, например, Копіег апа Міївіеїп, Майге 256:495-497 (1975); Патент США
Мо4376110; А!йвибреї еї аї., едв., Сийитепі РгоїосоЇїв іп Моіесціаг Віоіоду, Сгеепе Рибіїзпіпд Авзвос. апа Уміеу
Іпіегесіепсе, М.М., (1987-1996); Напом/ апа іапе, Апііїродіев: А Іарогаїгу МапиаІЇ, Соїй Зргіпд Нагрог (Ф, І арогаюгу (1988); и Соїдап еї аї., едв., Сипепі РгоїосоЇїв іп Іттипоіоду, Сгеепе Рибіїзпіпуд Аввос. апа ка УМіеу Іпіегесіепсе, М.У., (1992-1996), причем содержание данньїх ссьілок приводится здесь целиком в качестве ссьІлки). Такие антитела могут являться иммуноглобулинами любого класса, включая Ідс, І9М, І9ЗЕ, ЗА, І О и бо любой их подкласс. Гибридома, продуцирующая МАТ по настоящему изобретению, может бьть вніращена іп мійго, іп зйи или іп мімо. Продукция более вьісоких титров МАТ іп мімо или іп зйШ делаєет даннье методики предпочтительньі!м в настоящее время способом продукции.
Химернье антитела представляют собой молекульі, различньюе части которьїх происходят от животньх разньїх видов, как, например, молекульі, содержащие вариабельньй участок, происходящий из мьішиного МАТ, б5 М постоянньйй участок человеческого иммуноглобулина. Химернье антитела исходно применяли для снижения иммуногенности в применении и для повьішения обьема продукции, например, если мьшинье МАТ продуцируются гибридомами с более вьісоким вьіходом, но с более вьісокой иммуногенностью у людей, такие как человеческие/мьішинье, применяют химернье МАТ. Химерньсе антитела и способь их продукции известнь! в данной области |СаршШу еї аїЇ., Ргос. Май. Асад. сі. ОБА 81:3273-3277 (1984); Моїтізоп еї аї., Ргос. Маї|.
Асай. Зсі. ОБА 81:6851-6855 (1984); Воціаппе еї аіЇ., Майте 312:643-646 (1984); Сарійу еї аїЇ., заявка на
Европейский патент 125023 (опубликованная 14 ноября 1984 года); Меибегдег еї а!., Майиге 314:268-270 (1985);
Тапідиспі е( аі., заявка на Европейский патент 171496 (опубликованная 19 февраля 1985 года); Могтізоп еї аї., заявка на Европейский патент 173494 (опубликованная 5 марта 1986 года); Мешбегоег еї аі., заявка по РСТ УМО 8601533 (опубликованная 13 марта 1986 года); Кидо еї аЇ, заявка на Европейский патент 184187 70 (опубликованная 11 июня 1986 года); Могтізоп еї аІ., заявка на Европейский патент 173494 (опубликованная 5 марта 1986 года); Западап ей аїЇ., У. Іттипої. 137:1066-1074 (1986); Кобріпзоп сеї аї.,, публикация
Международного патента, УМО 9702671 (опубликованная 7 мая 1987 года); Пи еї а!., Ргос. Май). Асад. Зсі. ОБА 84:3439-3443 (1987); Зип сеї аїЇ., Ргос. Май. Асад. Зсі. ОБА 84:214-218 (1987); ВеЧег еї аї., Зсіепсе 240:1041-1043 (1988); и Нагіомж/ апа І апе, Апіірбодієв: А І арогаюгу Мапиаї, зирга). Даннье ссьілки включень! сюда /5 Челиком в качестве ссьрлки.
Антиидиотипическое (анти-І4) антитело представляет собой антитело, которое распознает специфичнье детерминанть, как правило, ассоциированньсе с антигенсвязьвающим сайтом антитела. Анти-Ід антитело может бьіть получено путем иммунизации животного одинакового вида и генотипа как источника МАТ (например, линий мьішей) МАТ, на которое получают анти-іЯ. В организме иммунизированного животного будут проийсходить 2о распознавание и ответ на идиотипические детерминанть! иммунизирующего антитела в виде вьіработки антител на даннье идиотипические детерминанть! (анти-ІА антитело) Смотри, например, патент США Мо4699880, которьїй включен здесь целиком в качестве ссьІлки.
Анти-Іа антитело может бьіть также применено в качестве "иммуногена" для индукции иммунного ответа еще в одном животном с получением так назьіваемого анти-анти-І4 антитела. Анти-ІА антитело может обладать с г Мдентичньми зпитопами с исходньім МАТ, которое индуцировало вьработку анти-іа. Таким образом, с помощью применения антител к идиотипическим детерминантам МАТ можно идентифицировать другие клонь, і) зкспрессирующие антитела идентичной специфичности.
Соответственно, МАТ, вніработаннье против ІЕМАВ-ВРІ, ІРЕМАВ-ВРІЇ и родственньїх белков по настоящему изобретению, могут бьіть примененьі для индукции анти-І4 антител в подходящих животньх, таких как мьіши «о зо ВА В/с. Спленоцитьі таких иммунизированньх мьішей применяют для создания анти-ій гибридом, секретирующих анти-Ій МАТ. Далее, анти-ІА МАТ могут бьіть прикрепленьї к носителю, такому как гемоцианин Ме
Кеупоїе Ітреї (КІН), и примененьі для иммунизации дополнительньїх мьішей ВАЇ В/с. Сьіворотка данньїх мьішей с будет содержать анти-іа антитела, которне обладают параметрами связьнвания исходньїх МАТ, специфичньх к
ІРМАВ-ВРІ или ІРМАВ-ВРІЇ. ісе)
Таким образом, анти-ІїА МАТ содержат собственнье идиотипические зпитопьі, или "идиотопь!", структурно ї- сходнье с зпитопом, подвергающимся оценке, таким как ІЕМАВ-ВРІ или ІЕМАВ-ВРІЇ.
Также подразумевается, что термин "антитело" включает как интактнье молекульї, так и их активньсе участки, такие как, например, Раб и К(аб)», которне способнь! связьівать антиген. Рар- и Е(ар')»-фрагменть! не содержат
Ес-фрагмента интактного антитела, бьістрее вьіводятся из циркуляции и могут в меньшем обьеме осуществлять « Неспецифическое связьшваниє с тканями по сравнению с ин-тактньм антителом Гані еї аї., уУ.. Мисі. Мед. з с 24:316-325 (1983).
Бьіло бьї чрезвьмчайно полезно, если бьі Бар- и Р(ар)»- и другие фрагменть! антител, применимье по ;» настоящему изобретению, могли бьіть применень! для избирательного блокирования биологической активности
ІРМ-о в соответствии с методиками, описанньми здесь для интактньїх молекул антител. Такие фрагменть обьчно получают путем протеолитического расщепления, применяя ферменть, такие как папаин (для -і получения Рар-фрагментов) или пепсин (для получения К(абр')»-фрагментов).
Об антителе говорят, что оно "способно связьшвать" молекулу, если оно способно специфично б взаймодействовать с молекулой, посредством чего молекула связьівается с антителом. Подразумевается, что г) термин "зпитоп" относится к той части любой молекуль!, способной к связьиванию с антителом, которая также 5р может бьіть распознана данньмм антителом. Зпитопьі или "антигеннье детерминанть" обьчно состоят из о химически активньїх поверхностньїх группировок молекул, таких как аминокислоть! или боковье цепи Сахаров, и
Ф обладают специфичньми трехмерньми структурньми характеристиками, равно как и специфичньми зарядовьіми характеристиками. "Антиген" представляет собой молекулу или часть молекуль, способную к связьіванию с антителом, которое 5Б Кк тому же способно индуцировать ответ иммунной системьі животного в виде продуцирования антитела, способного связьіваться с зпитопом данного антигена. Антиген может содержать один или несколько зпитопов. іФ) Подразумевается, что специфичная реакция, относящаяся к указанному вьіше, указьівает на то, что антиген ко будет вьісоко избирательно взаймодействовать с соответствующим ему оантителом и не будет взаймодействовать с множеством других антител, вьіработка которьїх может бьть индуцирована другими бо антигенами.
Антитела, включая фрагменть! антител, применимье по настоящему изобретению, могут бьіть применень для блокирования биологической активности подтипов ІЕМ- у с оказанием незначительного влияния на активность интеферона-р.
Настоящее изобретение также обеспечивает молекуль! ДНК, кодирующие последовательность любого из 65 антител по настоящему изобретению, которне определень! вьіше, реплицмруемье зкспрессирующие векторь, содержащие любье из таких молекул ДНК, клетки-хозяева, трансформированнье любьми из таких зкспрессирующих векторов, включая прокариотические и зукариотические клетки-хозяева.
Данное изобретение далее относится к активньім мутеинам и активньмм участкам указанньїх антител и к гибридньім белкам, состоящим из антител дикого типа, или их активньїх мутейнов или их активньїх участков,
Конденсированньх с другим полипептидом или белком и проявляющих сходную способность блокировать биологическую активность ІЕВ І типа.
ДНК, кодирующую последовательности указанньїх антител, их активньїх участков, мутеинов или гибридньх белков, и оперативно пришитье регуляторнье сигналь! транскрипции и трансляции, вносят в зукариотические векторьі, которне способньі интегрировать последовательность желаемого гена в хромосому клетки-хозяина. В 7/о Челях вьібора клеток, которне устойчиво интегрируют внесенную ДНК в свои хромосомь!, применяют один или несколько маркеров, которне позволяют вьібирать клетки-хозяева, которне содержат зкспрессирующий вектор.
Маркер может обеспечить прототрофность для ауксотрофного хозяина, невосприимчивость к биоцидам, например, к антибиотикам, или невосприйимчивость к тяжель!м металлам, таким как медь, или тому подобное.
Избранньй маркерньй ген может бьть либо непосредственно пришит к последовательностям ДНК генов, /5 подлежащих зкспрессии, или введен в ту же клетку по методу котрансфекции. Дополнительнье злементь! могут также бьіть необходимь!ми для оптимального синтеза одноцепочечной мРНК біпаїпо ргоїеіп. Даннье злементь! могут включать в себя сплайсинг-сигналь, равно как и промоторь), знхансерь транскрипции и сигналь терминации (24).
В целях зкспрессии указанньх антител, их активньїх участков или производньїх молекула ДНК, подлежащая 2ор введению в вьібранньєе клетки, предпочтительно, будет включена в плазмиду или вирусньй вектор, способньй к автономной репликации в хозяине-реципиент.
Представляющие важность факторь в вьіборе конкретной плазмидь или вирусного вектора включают в себя: простоту, с которой клетки-реципиенть, которье содержат вектор, могут бьіть распознань и вьіделень! из тех клеток-реципиентов, которье не содержат вектор; число копий вектора, которое желательно внести в с ов определенного хозяйна; и является ли желаемьм "переносить" вектор между клетками-хозяевами различньїх видов. Предпочтительнье прокариотические векторьї включают плазмидьі, такие как реплицируемье в Е. сої), і) например, рВКЗ322, СоІЕ1, реС101, рАСУС 184 и т.д. (25); плазмидь! Васійш5, такие как рС194, рС221, рТт127 и т.д. (26); плазмидь! бігеріотусез, включая рід101 (27), бактериофаги бігеріотусевз, такие как ІСЗ31 (28) и плазмидьї Рзепдотопаз (29, 30). Ге зо Предпочтительнье зукариотические плазмидьі включают ВРМ, вирус коровьей оспьії, 5М40, 2-микронное кольцо и т.д. или их производнье. Такие плазмидь! хорошо известнь! в данной области (31-35). Ме
Как только вектор или последовательность ДНК, содержащая мотив(ь) подготавливают к зкспрессии, со зкспрессирующий вектор может бьіть введен в подходящую клетку-хозяин посредством любого из множества методов, таких как трансформация, трансфекция, липофекция, коньюгация, слияние протопластов, ісе) з5 Зпектропорирование, кальцийфосфатная преципитация, прямая микроиньекция и т.д. ча
Клетки-хозяева, применимье по данному изобретению, могут являться либо прокариотическими, либо зукариотическими. Предпочтительнье прокариотические хозяева включают бактерии, такие как Е. соїї, ВасіПив,
Зігерютусез, Рзепдотопавз, ЗаІтопега, Зегтайа и т.д. Найболее предпочтительньмм прокариотическим хозяином является Е. соїї. Особенно интересующие бактериальнье хозяева включают штамм 294 Е. соїї К12 (АТСС « 31446), Е. соїї Х1776 (АТСС 31537), Е. соїї МУ3110 (Р-, у, прототрофная (АТСС 27325)) и другие знтеробактерии, ей с такие как ЗаІтопеїйа Турпітигішт или Зегтайа тагсезсепз и различнье видь! Рзепдотопавз. В таких условиях й белок находится в негликозилированном состоянии. Прокариотический хозяин должен бьть совместим с "» последовательностью репликона и контрольной последовательностью в зкспрессирующей плазмиде.
Предпочтительньми зукариотическими хозяевами являются клетки млекопитающих, например, человеческие, обезьяньи, мьшинье клетки и яйцеклетки китайского хомячка (СНО), поскольку они -І обеспечивают посттрансляционнье модификации белковьїх молекул, включая адекватное упорядочивание, адекватное образование дисульфидньїх связей, равно как и гликозилирование по адекватньмм сайтам. Также б посттрансляционнье модификации пептидов, включая гликозилирование большим количеством остатков о маннозь, могут проводить клетки дрожжей и клетки насекомьх. Существует ряд стратегий зкспрессий рекомбинантной ДНК, где применяются вьісокопродуктивнье промоторнье последовательности и большое ї-о количество копий плазмид, которье могут бьіть примененьії для получения желаемьх белков в дрожжевьх
Ф клетках и в клетках насекомьх. В дрожжевьх клетках происходит распознавание лидерньх последовательностей клонированньїх продуктов генов млекопитающего и секреция пептидов, несущих лидернье последовательности. После внесения вектора клетки-хозяева культивируют в селективной среде,
Которая направляет рост векторсодержащих клеток. Зкспрессия клонируемой(ьіх) последовательности(ей) генов приводит к продукции указанньїх антител, гибридньїх белков или мутейнов или их активньїх участков. о Зкспрессированньюе антитела затем вьіделяют и очищают в соответствии с любой традиционной методикой, ко включая зкстракцию, осаждение, хроматографию, злектрофорез и тому подобное, или по методу аффинной хроматографии. во Как здесь используется, термин "мутеинь" относится к аналогам указанньїх антител, в которьїх один или несколько аминокислотньїх остатков указанньх антител или их активньх участков замещеньі различньіми аминокислотньми остатками или удалень, или один или несколько аминокислотньїх остатков добавлень к исходной последовательности указанньїх антител, без существенного изменения активности полученньх продуктов по сравнению с антителами дикого типа или их активньми участками. Даннье мутеинь! получают в 65 соответствии с известньмми методиками синтеза и/или сайт-специфического мутагенеза или в соответствий с любой другой методикой, подходящей для данньх целей.
Любой такой мутеин обладаеєт последовательностью аминокислот, существенно дублирующей таковую указанньїх антител с тем, чтобьі обладать активностью, по существу, идентичной таковой указанньїх антител или их активньїх участков. Одна группа указанньїх антител способна блокировать противовирусную активность Человеческого ІЕМ-52 и человеческого ІЕМ-Д. Другая группа указан-ньх антител способна блокировать противовирусную активность человеческого ІЕМ-52, тогда как активность человеческого ІРМ-Д остается, по большей части, неизменной. Таким образом, с помощью постановки традиционньїх зкспериментов, заключающихся в подверганиий такого мутеина, например, обьічному анализу противовирусной активности, может бьіть определено, обладаєт ли любой данньій мутеийн той же активностью, что и указанное антитело, 70 поскольку мутеин, которьій блокирует зффект любого вида интерферона І типа, в достаточной мере сохраняет активность указанньїх антител и, таким образом, обладаєт, по крайней мере, одним из описанньїх применений указанньїх антител и, таким образом, обладаєт активностью, по существу, идентичной таковой указанньх антител.
В предпочтительном осуществлений любой такой мутеин обладаєт идентичностью или гомологией с 75 последовательностью одного из указанньх антител, составляющей, по крайней мере, 4095. Более предпочтительно, он обладает идентичностью или гомологией с ней, составляющей, по крайней мере, 5095, по крайней мере, 6095, по крайней мере, 7095, по крайней мере, 8095, или, более предпочтительно, по крайней мере, 9096.
Мутеиньї указанньїх антител или их активньїх участков, которье могут бьіть примененьі по настоящему 2о изобретению, или кодирующая их последовательность нуклеиновая кислота, включают ограниченньій набор существенно соответствующих друг другу последовательностей, как, например, замещающие пептидь! или полинуклеотидь!ї, которье могут бьіть традиционно полученьі! специалистом в данной области без постановки каких-либо обширньїх зкспериментов, основьіваясь на учениях и руководствах, представленньїх здесь.
Подробное описание белковой химии и структурьі смотри в |Зспці2, О.Е. еї аї., Ргіпсіріев ої Ргоївіп Зігосішгте, су Зргіпдег-Мепад, Мем Могк, 1978; и Стеідпюоп Т.Е., Ргоїеіпе: Зігисіцге апа МоіІесціаг Ргорегпіевз, МУ.Н. Егеетап 5
Со., Зап Егапсізсо, 1983), которне включень здесь в качестве ссьілки. Представление замен в нуклеотидньмх о последовательностях, таких как предпочтения кодонов, смотри в |А!йзиБбеї еї аї!., вирга, в 55 А. 1.1-А. 1.24, и затргоок еї аі!., вирга, в Приложениях С и 0).
Предпочтительньмми изменениями мутеийнов по настоящему изобретению являются таковье, известнье как (Те) "консервативньсе" заменьї. Консервативнье аминокислотнье замень! в указанньїх антителах, полипептидах или белках или их активньїх участках могут включать в себя синонимичнье аминокислоть! в пределах группьї, б которая обладаєет существенно сходньіми физико-химическими свойствами, так что при замене между членами со группьї биологическая функция молекуль! сохранится, |Сгапіпат, Зсіепсе, Мої. 185, рр.862-864 (1)). Понятно, что вставки и делеции аминокислот также могут бьіть вьіполненьі и в указанньїх вьіше последовательностях без о з5 какого-либо изменения их функции, особенно, если вставки и делеции затрагивают лишь несколько рч- аминокислот, например, до тридцати, и более предпочтительно, до десяти, и если не удаленьї или не замещень аминокислоть, которье обладают принципиальньїм значением для образования функциональной конформации, например, цистеиновье остатки, |Апіїпез, "Ргіпсіріевг Траї Сомегпт Тпе Роїдіпуд ої Ргоївіп Спаїпв", Зсіепсе, «
Мо1.181, рр.223-230 (1973)). Белки и мутеиньї, полученнье в результате таких делеции и/или вставок входят в сферу настоящего изобретения. - с Предпочтительно, синонимичнье аминокислотнье группьі представляют собой таковье, определеннье в ц Таблице І. Более предпочтительно, синонимичнье аминокислотнье группьі представляют собой таковье, "» определенньсе в Таблице ІІ; и наиболее предпочтительно, синонимичнье аминокислотнье группьї представляют собой таковье, определенньсе в Таблице ІІ. -
Ф с я. що с ов щі 6100000 Метт уввште ю во б5 Авр січ, Авп, Авр й
ІЙ
6111 ематунт сч о г)
Фо с
Мо ї- ч и З с 5 ; 67777 ема 00111 -
Ф о
Фо
Ф о Примерь вьіполнения замен аминокислот в белках, которне могут бьіть примененьї для получения мутеийнов указанньїх антител или их активньїх участков для применения по настоящему изобретению включают любье іме) известнье стадии методики, такие как представленнье в патентах США КЕЗ3З3653, 4959314, 4588585 и 4737462, вьіданньїх МагКк еї аіЇ.; 5116943, вьіданном Коїйз: еї аі|;; 4965195, вьіданном Матеп еї аї!.; 4879111, вьіданном 60 Спопад еї аї.; и 5017691, вьіданном Гі ее еї а); и лизин-замещенньїх белках, представленньїх в патенте США
Мо4904584 (ЗНаму еї аї.).
В другом предпочтительном осуществлений настоящего, изобретения любой мутеин указанньїх антител или их активньїх участков обладает аминокислотной последовательностью существенно соответствующей таковой указанньїх., антител. Подразумеваєтся, что термин "существенно соответствующий" охватьваєт белки с 65 минимальньми изменениями, внесенньіми в структуру природного белка, которье не влияют на основнье характеристики природньїх белков, особенно когда речь идет об их способности полностью или избирательно блокировать активность ІЕМ-о; и ІЕМ-Д. Тип изменений, которне как правило, считают подпадающими под определение "существенно соответствующий", представляет собой изменения, которне являются результатом применения традиционньїх методик мутагенеза ДНК, кодирующей последовательности данньїх антител, приводящего к возникновению нескольких минимальньх модификаций, и скрининга на предмет желаємой активности обсуждавшимся вьіше способом.
Мутейиньї по настоящему изобретению включают белки, кодируемье нуклеийновой кислотой, такой как ДНК или РНК, которую гибридизуют с ДНК или РНК, которая кодирует последовательность указанньїх антител по настоящему изобретению, в строго определенньїх условиях. Данное изобретение также включает такую 7/0 нуклеийновую кислоту, которая также применима в качестве зонда для идентификации и очистки желаємой нуклеиновой кислотьі. Кроме того, такая нуклеиновая кислота будет представлять собой главную кандидатуру на определение, кодирует ли она последовательность полипептида, которьій сохраняет функциональную активность указанньїх антител по настоящему изобретению. Термин "строго определеннье условия" относится к условиям гибридизации и последующей промьівки, которне специалисть! в данной области обьічно назьівают 75 "строгими". Смотри (А!йзиреї! еї аі., Ситепі Ргоїосоів іп Моїесціаг Віоіоду, зирга, Іпіегесіепсе, ММ, 55 63 и 6.4 (1987, 1992) и Затьгоок еї аї., зирга). Без какого-либо ограничения примерь! строго определенньїх условий включают в себя условия промьівки при температуре на 12-202С ниже рассчитанной для исследуемого гибрида
Тдл, например, в 2"55С и 0,596 5О5 в течение 5 минут, 2"З5С и 0,196 505 в течение 15 минут; 0,175552 и 0,590
ЗО5 при 372С в течение 30-60 минут и затем 0,1755С и 0,595 ЗОЗ при 689С в течение 30-60 минут. Специалистам в данной области понятно, что строго определеннье условия также зависят от длинь последовательностей ДНК, олигонуклеотидньїх зондов (таких как длиной в 10-40 оснований) или смешанньх олигонуклеотидньїх зондов. При применении смешанньїх зондов предпочтительньм является использование вместо 552 хлорида тетраметиламмония (ТМАС). Смотри А!йзирбеї, зирга.
Термин "гибридньій белок" относится к полипептиду, содержащему указаннье антитела или их активнье «С участки или их мутеиньі, конденсированному с другим белком, которьій, например, обладает продолжительньм о временем циркуляции в жидкостях организма. Указаннье антитела или их активнье участки могут бьть гибридизовань с другим белком, полипептидом и т.п.
Термин "соли" здесь относится как к солям карбоксильньїх групп, так и к солям добавления кислот аминогрупп указанньїх антител, их активньїх участков, мутеинов или их гибридньїх белков. Соли карбоксильной «(о группьі могут образовьіваться известньм в данной области образом и включают в себя неорганические соли, например, соли натрия, кальция, аммония, железа (Ії) или цинка и т.п., и соли органических оснований, как, Ф например, соли, образованнье с аминами, такими как тризтаноламин, аргинин или лизин, пиперидин, прокаийни «о т.п. Соли добавления кислот включают в себя, например, соли минеральньїх кислот, таких как, например, соляная кислота или серная кислота, и соли органических кислот, таких как, например, уксусная кислота или ї-о з5 щавелевая кислота. Разумеется, любье такие соли должньі обладать существенно сходной активностью с - таковой указанньїх антител или их активньїх участков.
Термин "функциональнье производнье", как здесь используется, охватьшает производнье указанньх антител или их активньїх участков и их мутеийнов и гибридньїх белков, которье могут бьїть полученьі из « функциональньх групп, которніе присутствуют в качестве боковьїх цепей остатков или М- или С-концевьїх групп, известньми в данной области способами, и функциональнье производнье включаются в область данного, - с изобретения, поскольку они остаются фармацевтически применимь!іми, т.е. они не нарушают активность белка, ц которая существенно сходна с активностью указанньх антител, и не придают токсичньїх свойств содержащим их "» композициям. Даннье композиции могут, например, содержать полизтиленгликолевье боковье цепи, которье способньії маскировать антигеннье сайть! и продлевать время циркуляции указанньїх антител или их активньх участков в жидкостях организма. Другие производнье включают алифатические зфирь! карбоксильньїхх групп, -і амидь! карбоксильньїх групп, образованнье путем реакциий с аммиаком или с первичньми или вторичньми б» аминами, М-ацильнье производнье свободньх аминогрупп аминокислотньїх остатков, образованнье с ацильньіми радикалами (например, алканоильнье или карбоциклические ароильнье группьї), или О-ацильнье (95) производнье свободньх гидроксильньїх групп (например, таковьїх серильньх и треонильньїх остатков), с 50 образованнье с ацильньми радикалами.
Под "активньіми участками" указанньїх антител, мутейнов и гибридньїх белков в настоящем изобретений 42) имеются в виду любой фрагмент или предшественники полипептидной цепи указанньїх антител, самих по себе или совместно с ассоциированньми молекулами или присоединенньми Кк ним остатками, например, углеводньіми или фосфатньми остатками, или агрегать! любого из указанньїх вьіше антител при условийи, что указанньйй участок обладает существенно сходной активностью с таковой указанньх антител.
Настоящее изобретение далее относится к фармацевтическим композициям, содержащим фармацевтически о приемлемьій носитель и указанное антитело по данному изобретению или их активнье мутейнь, гибриднье іме) белки и их соли, функциональнье производньсе или их активньсе участки.
Фармацевтические композиции по данному изобретению получают для введения путем смешивания бо указанньїх антител или их производньїх с физиологически приемлемьми носителями и/или стабилизаторами и/или наполнителями и готовят в дозированной форме, например, путем лиофилизации в дозировочньх сосудах. Способ введения может представлять собой любой из общепринятьїх способов введения подобньх средств и будет зависеть от подвергающегося лечению состояния, например, внутривенно, внутримьішечно, подкожнНОо, с помощью местной иньекции или местного нанесения, или путем непрерьівной инфузии и т.д. 65 Количество вводимого активного соединения будет зависеть от способа введения, подвергающегося лечению заболевания и состояния пациента. При местной иньекции, например, требуется меньшее количество белка на массу тела, чем требуется при внутривенной инфузии.
Указаннье антитела применимьї для модулирования или блокирования биологической активности различньїх подтипов ІРМ-о, например, при сахарном диабете | типа, различньїх аутоиммунньїх заболеваниях, отторжениий трансплантата, ВИЧ-инфекции и сходньїх заболеваниях, при которьїх имеет место нарушенная зкспрессия ІРМ-о, т.е. указанньюе антитела могут бьїть примененьі при любом состоянии, при котором избьток
ІЕМ-о, зндогенно продуцируется или вводится извне.
Соответственно, указаннье антитела, гуманизированнье антитела, их активнье участки, мутейнь, гибридньсе белки и их соли, функциональнье производньсе и их активнье участки предназначень! для лечения 70 аутоиммунньїх заболеваний, других воспалительньїх состояний в организме млекопитающих, для лечения токсических состояний, вьзванньх введением интерферона-альфа или интерферона-бета, юношеского диабета, системной красной волчанки и ВИЧ-инфекции.
Теперь данное изобретение будет проиллюстрировано следующими неограничивающими примерами:
Пример 1: Иммунизация мьішей ІЕМАВ-ВР и слияние с миеломньми клетками.
Сначала самкам мьішей Ваїр/С (в возрасте З месяцев) вводили 2мкг очищенного ІЕМАВ-ВР в змульсий на основе полного адьюванта Фройнда, а через три недели подкожно в неполном адьюванте Фройнда. Пять дополнительньх иньекций вводили с 10-суточньм интервалом подкожно в ФБР. Сьворотки данньїх мьішей имели титр связьівания 1:100000, что определяли по методу ІзКІА (смотри ниже). Антисьіворотки блокировали противовирусную активность как ІЄМ-о, так и ІЕМ-р, что определяли в соответствии со следующей процедурой:
Предварительно образованнье монослои человеческих клеток УУМІЗН в 96-луночньїх планшетах инкубировали в течение 2ч при 372С с двукратньмми разведениями антисьіворотки (или моноклональньх антител). Затем во все лунки добавляли ІЄМ-а2 или ІЕМ-р (в конечной концентрации 10ЕД/мл; калибровано относительно стандартов
МІН) и далее планшеть! инкубировали в течение 4ч. Затем клетки заражали вирусом везикулярного стоматита (М5М) и инкубировали в течение ночи до тех пор, пока в контрольньїх лунках, не содержащих ІЕМ, неотмечался СМ полньй цитопатический зффект. За нейтрализующий титр антител в лунках, проявляющих 5095 ЦПД, приняли ге)
Зединиц/мл. Следовательно, 1 блокирующая единица/мл представляет собой концентрацию антител, необходимую для блокирования активности 1ЕД/мл ІМ в данньїх условиях анализа. Сьворотка иммунизированньїх мьішей имела нейтрализующий титр 120000ЕД/мл как по ІЕМ-о2, так и по ІЄМ-р.
Окончательнье повторнье иммунизации очищенньім ІЕМАВ-ВР проводили внутрибрюшинно за 4 и за З суток ікс, до слияния. Слияние проводили, применяя в качестве участников слияния миеломную клеточную линию МЗО/1 б и лимфоцить, полученнье как из селезенки, так и из лимфатических узлов иммунизированной мьіши. Слитье клетки распределяли по 96-луночньмм планшетам и гибридомь! отбирали в ОМЕМ, содержащей НАТ и 1595 Ше лошадиную сьіворотку. «я
Пример 2: Скрининг гибридом и характеризация моноклональньх антител. 3о Скрининг гибридом, продуцирующих анти-ІРЕМАВ-ВР моноклональ-нье антитела, проводили следующим - образом: Супернатантьь гибридом тестировали на предмет наличия анти-ІЕМАВ-ВР антител по методу инвертированного твердофазного радисиммунного анализа (ІзКІА) следующим образом. Планшеть! для микротитрования, изготовленнье из ПВХ, (ЮОупаїесп Іарогайгіез, АІехадага, МА) покрьвали афинньми « очищенньми козьими анти-мьішиньми сьівороточньми (аб). антителами (дасквоп ІГарвз, ОА) (1Омкг/мл, 100мкл/лунка). После инкубации при 42С в течение ночи планшеть! промьвали дваждь! ФБР, содержащим БСА З с (0,590) и Тм'ееп 20 (0,0595) и блокировали в промьівающем растворе в течение, по крайней мере, 2ч при 3720. "з Добавляли культуральнье супернатанть! гибридом (10О0мкл/лунка) и планшетьї инкубировали в течение 4ч при 372С. Планшетьі опромьшали З раза промьівньм раствором, и добавляли для дальнейшей инкубации 725І-І(ЕМАВ-ВР (100мкл, 105 срт) в течение 16 часов при 42С. Планшеть: промьвали 3 раза и -І отдельнье лунки вьіделяли и анализировали с помощью гамма-счетчика. Образць, в которьїх подсчет давал результат, по крайней мере, в 5 раз превьшающий значение, полученное на отрицательном контроле,
Ме расценивали как давшие положительньй результат (Таблица ІМ). Все положительнье клоньі отбирали и со субклонировали. Отдельнье субклоньї вводили мьішам Ваїр/С, у которьїх с помощью ргізіапе стимулировали вьіработку асцитической жидкости. Иммуноглобулинь! вбіделяли из асцитической жидкости путем осаждения ісе) сульфатом аммония (5095 насьіщения). Изотипь! антител определяли с применением коммерчески доступного
Ф набора для ЕГІЗА (Атегзпат, ШК).
Различнье моноклональнье антитела, равно как и супернатантьь гибридом, концентрированнье супернатантьі гибридом, асцитическая жидкость или иммуноглобулиньй из асцитической жидкости далее Тестировали на предмет их способности блокировать рецептор и препятствовать противовирусной активности
ІЕМ-а2 и ІЕМ-Д, как описано вьше применительно к сьшворотке иммунизированньїх мьшей. Результать (Ф, приведеньі в Таблице ІМ. Таким образом, бьіло обнаружено, что моноклональнье антитела 16.3, 53.2 и 392.1 ка блокируют противовирусную активность как ІЕМ-и2, так и ІЕМ-Д в сравнимьх титрах, тогда как бьіло неожиданно обнаружено, что титр моноклональньїх антител 35.9, 51.44 и 234.14 против ІЕМ-52 значительно вьіше, чем их бо титр против ІЕМ-Д. Таким образом, моноклинальнье антитела 35.9, 51.44 и 234.14 могут бьть применень! в определенном интервале концентраций для избирательного блокирования активности ІРЕМ- о, тогда как активность ІЕМ-р затронута не будет. вБ Характеризация моноклональньхх антител против рецептора ІЄМ-о/р (ІЕМАВ-ВР)
минуту) (Ед/мл) (Ед/мл) Ід гибридомь
Й гибридомь і гибридомь гибридомь 2 с 25 Пример 3: Применение моноклональньх антител для постановки на ІЕМАВ-ВРІЇ теста Е ІЗА о
Планшетьії для микротитрования (Юупайїесп или Махівогб, БМипс) покрьшвали анти-ІЕМАВ-ВР моноклональньми антителами в течение ночи при 492С. Данное нанесение первого покрьїтия может бьть вьіполнено с применением любого моноклонального антитела Мо46.10 (Ід фракция, 12Омкл/лунка, 1Омкг/мл в
ФБР). Моноклональное антитело Мо46.10 описано в публикации ЕР Моб76413. ікс, 30 Альтернативно, для нанесения первого покрьїтия может бьіть применено моноклональное антитело Мо117.7. Ге!
Планшеть промьівали ФБР, содержащим БСА (0,595), Тмееп 20 (0,0595) и МаМ» (0,0295) (Блокирующий раствор) и блокировали в том же растворе в течение ночи при 372С. Тестируемье образць! подвергали серийному о двукратному разведению (начиная с 1:4) в Блокирующем растворе, содержащем 0,195 МР40О и 0,65М Масі и Ге) добавляли в лунки (10Омкл/лунка) на 4ч при 37". Планшеть! затем промьівали З раза ФБР, содержащим 0,0595 35 Тувеп 20 (ФБР/Гмееп) с последующим добавлением биотинилированного моноклонального антитела Мо234.14 - (1:1000 в Блокирующем растворе, но без Мама 100мкл/лунка) для дальнейшей инкубации в течение ночи при 42. Планшеть! промьшшали З раза ФВР/ жшееп (100мкл/лунка) и в течение 2ч4 при комнатной температуре добавляли коньюгат стрептавидин-пероксидаза хрена (Часквоп І арз, 1110000 в ФБР/Тжееп, 10Омкл/лунка). «
Планшеть! промьівали З раза ФБР/Гмееп, и после добавления в каждую лунку 100мкл свежеприготовленного -о раствора АБТС (2,2'-азино-бис(3-зтилбензтиазолин-б6-сульфоновой кислоть!, Зідта, 1Омг; б4мл НьО; 2,2мл с 0,2М Ма»НРО,, 1,4мл 0,2М лимонной кислоть!; їмкл НО») в качестве субстрата развивалась окраска. Окраска :з» развиваєтся в течение ЗОмин и реакция может бьіть остановлена путем добавления 1О0Омкл/лунка 0,2М лимонной кислоть. Даннье с планшетов бьіли считаньії автоматическим ЕІ ІЗА-ридером при 405нм делая поправку на неспецифическое считьшание при бЗОнм. Нижний предел определения в данном анализе -1 составлял ЗОпг/мл.
Предшествующее описание конкретньїх осуществлений вьіявляет общую природу данного изобретения, так б» что другие могут, применяя даннье знания, с легсостью модифицировать и/или приспосабливать такие с конкретнье осуществления для различньїх приложений без отдаления от основополагающей концепции, и, бро таким образом, такие приспособления и модификации должнь! и предназначень для того, чтобь бьть охвачень іс), значением и кругом зквивалентов описанньїх осуществлений. Следует понимать, что фразеология и
Ф терминология, применяемая здесь, служит цели описания, а не ограничения.
Гидридомь! 46.10, 117.7 и 234.14 бьіли положень на хранение в Равіеиг Іпзійш (СМСМ) под номерами хранения 1-1697, І-1698 и І-1699, соответственно, 23 апреля 1996 года.
Ссьілки 1. Тауюг, 9У.Ї., еї аїЇ., "Кесепі ргодгез5 іп іпіепегоп гезеагс!: птоЇесцаг теспапізтве ої гедшайоп,
ГФ) асійоп апа мігиз сігситмепійоп", Мігив їсеззаіїбПп, 15:1-26. 1990. г 2. Вівседііїс, А.М., еї аїЇ., "КесотбБіпапі іпіепегоп аірпа (ШПпегару їог спгопіс Пераїйів С А гапдотігеа, доцбріе-ріпа, ріасеро-сопігоЇПеа іга!" Мем Епу. ОМеа..321: 1506-1510,1989. во З. МеОоппеїЇ, МУ.М., еї аїЇ.,, "Асше Пераїйів С іпТесіоп: іпіепегоп їпаПйу звиссееайв", Савігоепіегоіоду (05), 103: 1359-1360, 1992. 4. Епедтап-Кіеп, А.Е., еї аїЇ., "Маїига! іпіепегоп аірна ог ігеайтепі ої сопауотайа аситіпайїа", 9. Ат.
Меа. Авгп., 259: 533-538, 1988. 5. Маїпв5, ., еї аї., "Іпіепегоп: сцтепі апа їшиге сіїпісаї вевз іп іптесіоив дізеазе ргасіїсе". пі. ве У. віщша. АІО5. 3:4-9, 1992. б. Вептап, ЄЕ., еї аїЇ., "Іпсідепсе ої гезропве апа пд їегпт їоПомж пр іп райепіз м/йй аїгу сеї
Іеикетіа ігеаіїейд м/йй гесотрбіпапі іпїепегоп АІрпа-2а", Віосад. 75: 839-845, 1990. 7. Тара», М., еї аї., "Сіїпіса! іпмевідайоп ої Питап арпа іпіебегоп іп спгопіс туеіодепои5
Іеикетіа", Вуоса, 69: 1280-1288, 1987. 8. Ое УМ К., еї аїЇ., "Сіїпісаї апа мігоодісаї оеПесів ої пПідп-дозе гесотрБіпапі-іпіепегоп-а іп діззетіпаїей АІЮ5-геїіаіейд Карозіз загсота", І апсеї. 2: 1214-1222, 1988. 9. Кіірреї, 9.Н., ей аїЇ.,, "Зегит аірнпа іпіебегоп апа Іутрпосуїе іпсіивіопе іп вувіетіс прив егуіпетайовзив", Аппаї5 ої (пе Кпешитаїіс Оівеазев. 44: 104-108, 1985. 10. ай, А.5., ей а).,, "Кедшайоп ої їштог песговів Тасіог гесеріог оехргеззіоп Бу асіа-ІабіЦе 70 іптепегоп-аірна їот АЇІО5 зега", АІО5 Кев. Нит. Кеїгомігивсв. 7: 545-552, 1991. 11. ема, Т.А., "Іпаисіоп ої (уре І аіаре(ез Бу іпіепегоп-а іп (гапздепіс тісе", Зсіепсе. 260: 1942-1946, 1993. 12. Твамагів, М., ей аїЇ., "Тгеайтепі ої гепа! сеїЇ сагсіпота м/йй евзсаіайпуд довзев ої аїрна-іпіепегоп".
СпетоїПпегару (Зм йгепіапа), 39: 361-366, 1993. 13. Вгапка, А.А., еї аїЇ.,, "Емідепсе (Шаг їурез | апа | іпліепегопз Ппаме айегепі гесеріогв". Майшге. 75. 294: 768-770, 1981. 14. МОе, 0., еї аїЇ.,, "Сепейіс ігапеїєг ої а їпсіопа! пПитап іпіепбегоп а гесеріог іпіо тоизе сеїв: сіопіпд апа ехргезвіоп ої їз СОМА", Сеїї. 60: 225-234, 1990. 15. СоІатопісі, О.К., еї аї.,, "СНагасіегігайоп ої (йгее топосіопа! апіродіев (Шаг! гесодпіге (Ше тіепегоп-а2 гесеріог", Ргос. Маї). Асад. 5сі. ОБА. 87:7230-7234, 1990. 16. Ріафапіаз, 1.С., еї а), "Ехргезвіоп ої (Пе ІРМ-гесеріог іп о Наійгу сеї! ІеоКетіа", Вій. .
Наетайоіоду. 82: 541-546, 1992. 17. СоІатіпісі ОК., еї аїЇ.,, "Ідепійісайоп ої а опомеі! о8ИиБрипії ої (пе буре | Іпіепегоп гесеріог
Іосаїїлей Ю питап спготозоте 21", .). Віої. Спет., 268: 10895-10899, 1993. 18. Вепоїї, Р., еї аїЇ, "А топосіопа! апіроду йо гесотріпапі питап ІРМ-а гесеріог іппіріїв бБіоіодіс сч ов аснмйу ої земега! зресіез ої питап ІРМ-о ІЕМ-Д апа ІРМ-отеда". у). Іттипої.. 150:707-716, 1993. 19. Моміск, О., еї а), "Те Нитап Іпіепегоп Лирм/ гесеріог СПагасіегігайоп апа тоїіесшіаг сіопіпод", і)
Сеї, 77: 391-400, 1994. 20. Сопеп, В., еї аї., "І ідапа-іплдисед аззосіайоп ої (Ше Туре | іпіебегоп гесеріог сотропепів". Моїес.
Сеї. Віо!., 15: 4208-4214, 1995. Ге) 21. Вепоїї, Р., еї аіЇ,, "А Мопосіопа! Апіроду о Кесотріпапі Нитап ІРМ-аірна Кесеріог Іппіріїв Віоіодіс
Асіїміу ої ЗемегаІ Зресіев ої Нитап ІРМ-аірпа, ІРМ-реба, апа ІРМ-отеда - ЮОефесіоп ої Не(егодепейу ої (пе іа
СеїІшаг Туре-І ІЕМ Кесеріог". 9. Іттипої., 150(3): 707-716, 1993. со 22. СоІатопісі, О.К., еї аї., "Ідепійісайоп ої а Моме! Зирипії ої (Ше Туре-І бБіепегоп Кесеріог
Ї осаіїїгед ю Нитап Спготовзоте-217", .). Віої. Спет., 268(15): 10895-10899, 1993. ікс, 23. Реагвоп, МУ.К., еї аїЇ., "Ітргомей (оів їог Біоіодісаї зедцепсе сотрагівоп", Ргос. Май. Асай. 5бі. ї-
ЗА. 85: 2444-2448, 1988. 24. ОКауата, Н., ек аі,, "А сОМА сіопіпд месіог (Шаї регтіїв ехргезвіоп ої СсОМА іпзегіз іп таттаїап сеїІв", Мої. СеїІ. Віоі!., 3: 280-289, 1983. 25. Мапіаїів, еї аіІ.. Моіесшаг Сіопіпо: А І арогаїогу Мапиаї. Сода Зргіпд Нагброг І арогаїгу, Мем Хогк, 1982. « 26. Сгусгап, Т., Те Моіесціаг Віоіоду ої Пе Васіїїї, Асадетіс Ргезз, МУ (1982), рр.307-329. шщ с 27. Кепааї, К.). еї а/., У. Васіегіо!., 169: 4177-4183, 1987. й 28. Саїйег, К.Р., еї аїЇ.,, іп "Біхій Іпіегпайопа! Зутрозішт оп Асііпотусей(аіез Віоіоду, АКадетіаї Каїдо, «» Видаревзі, Нипдагу (1986), рр.45-54. 29. допп, .РЕ., еї а!ї., (1986) Кем. Іп'тесі. Оів., 8: 693-704.
ЗО. Ігакі, К., (1978) Орп. у. Васісгіо!., 33: 729-742. -і З1. Воївіеїйп, О., еї а!., (1982) Міаті М/іпі. Зміпр., 19:265-274. 32. Вгоасп, У.К., іп "Те Моїіесшіаг Віооду ої (Ше Меаві Засспаготусев: | Ше Сусіе апа Іпнепіапсе", Соїд
Фо Зргіпд Нагбог І арогагу, Соїа Зргіпд Нагрог, МУ. рр.445-470, 1981. г) 33. Вгоаси, 9.К., (1982) СеїІ, 28:203-204. 34. Воіоп, О.Р., еї аї., (1980) 9. Сііп. Нетаїйо!. Опсо)!., 10: 39-48. іс, З5. Мапіайв, Т., іп "Се! Віоїосду: А Сотргепепзіме Тгеайізе, МоІЇ.3: Сепе Ехргезвіоп", Асадетіс Ргевзв,
Ф МУ, рр.563-608, 1980.
Зб. Мігивзпіта, 5., еї аіЇ,, "РЕР-ВО5, а роумепці татітаїйап ехргезвіоп месіог". Мисіеіс Асій Кев., 18: 5322-5328, 1990. 37. Вугп. К.А., еї аї., Майшге їсопдопі 344: 667-670, 1990. 38. Егоптанп, М.А., еї аї., Ргос. Май. Асаа. 5сі. ОБА. 85: 8998-9002, 1988. (Ф, 39. Сгапат, Р.І.., еї аі., Мігоїоду. 52: 456-467, 1973. ко 40. Мипзгоп, Р.У., еї аі., Апа!. Віоспет., 107: 220-239, 1980.
Claims (10)
1. Моноклональне антитіло, яке експресується гібридомою, що зберігається в Інституті Пастера (СМСМ) під номером 1-1698, і здатне зв'язуватися з рецептором ІРМ-с./р і блокувати біологічну активність ІЕМ-с, і ІЕМ-рВ, 65 і створювати більш високий антивірусний блокуючий титр проти ІРМ-о., ніж проти ІРІМ-р
2. Моноклональне антитіло, яке експресується гібридомою, що зберігається в Інституті Пастера (СМСМ) під номером 1-1699, і здатне зв'язуватися з рецептором ІРМ-с./р і блокувати біологічну активність ІЕМ -с і ІЕМ-рВ, і створювати більш високий антивірусний блокуючий титр проти ІБЕМ-о., ніж проти ІНМ-р.
3. Гуманізоване моноклональне антитіло, що містить варіабельні домени антитіла за п. 1 або 2 і константний домен імуноглобуліну людини.
4. Фармацевтична композиція для модуляції або блокування біологічної активності ІРМ-с., що містить антитіло за будь-яким з пп. 1-3 і фармацевтично прийнятний носій.
5. Застосування антитіла за п. 1 для приготування фармацевтичної композиції для модуляції або блокування біологічної активності ІЕМ - о.
6. Застосування антитіла за п. 2 для приготування фармацевтичної композиції для модуляції або блокування біологічної активності ІЕМ - о.
7. Застосування антитіла за п. З для приготування фармацевтичної композиції для модуляції або блокування біологічної активності ІЕМ - о. /5
8. Гібридома, яка експресує антитіло за п. 1, позначена як МОК 2 117.7 і депонована в Інституті Пастера (СМСМ) під номером 1-1698 23 квітня 1996 р.
9. Гібридома, яка експресує антитіло за п. 1, позначена як МОК 2 234.14 і депонована в Інституті Пастера (СМСМ) під номером 1-1699 23 квітня 1996 р.
10. Набір для проведення ЕП ІЗзА-аналізу ІЕМАВ-ВРІ і/або ІЕМАВ-ВРІЇ, який містить промислові планшети для мікротитрування, що містять перше покриття моноклональним антитілом, продукованим гібридомою за п. 8, |і друге покриття моноклональним антитілом, продукованим гібридомою за п. 9. Офіційний бюлетень "Промислоава власність". Книга 1 "Винаходи, корисні моделі, топографії інтегральних мікросхем", 2006, М 8, 15.08.2006. Державний департамент інтелектуальної власності Міністерства освіти і сч науки України. (8) (Се) (22) со (Се) і - -
с . и? -І (22) (95) о 50 42) Ф) іме) 60 б5
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IL11809696A IL118096A0 (en) | 1996-05-01 | 1996-05-01 | Antibodies against interferon alpha/beta receptor |
| PCT/IL1997/000138 WO1997041229A1 (en) | 1996-05-01 | 1997-04-29 | Antibodies against interferon alpha/beta receptor |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA76396C2 true UA76396C2 (en) | 2006-08-15 |
Family
ID=11068814
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UA98116315A UA76396C2 (en) | 1996-05-01 | 1997-04-29 | Monoclonal antibody, which is able to be bound with receptor ifn -, block the biological activity of ifn- and ifn- and create higher antiviral titer against fn-, than against ifn- (variants), pharmaceutical composition for modulation or blocking biological activity of ifn-, hybridoma expressing denoted antibody (variants), and set for carrying out elisa-analysis of ifnab-bpi and/or ifnab-bpi |
Country Status (19)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6136309A (uk) |
| EP (2) | EP0927252B1 (uk) |
| JP (1) | JP4308322B2 (uk) |
| KR (2) | KR100581798B1 (uk) |
| CN (1) | CN1198929C (uk) |
| AT (1) | ATE342981T1 (uk) |
| AU (1) | AU719995B2 (uk) |
| BR (1) | BR9709202A (uk) |
| CA (1) | CA2253239C (uk) |
| DE (1) | DE69736835T2 (uk) |
| DK (1) | DK0927252T3 (uk) |
| EA (1) | EA002543B1 (uk) |
| ES (1) | ES2274542T3 (uk) |
| HK (1) | HK1019339A1 (uk) |
| IL (2) | IL118096A0 (uk) |
| NO (1) | NO324206B1 (uk) |
| PT (1) | PT927252E (uk) |
| UA (1) | UA76396C2 (uk) |
| WO (1) | WO1997041229A1 (uk) |
Families Citing this family (22)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0563487A1 (en) * | 1992-03-31 | 1993-10-06 | Laboratoire Europeen De Biotechnologie S.A. | Monoclonal antibodies against the interferon receptor, with neutralizing activity against type I interferon |
| US6713609B1 (en) | 1996-07-16 | 2004-03-30 | Genentech, Inc. | Monoclonal antibodies to type I interferon receptor |
| US6376067B1 (en) * | 1998-12-21 | 2002-04-23 | Mitsubishi Polyester Film, Llc | Silicone coated film with back side slip control coating and method of controlling slip of such film |
| RU2181297C2 (ru) * | 2000-06-20 | 2002-04-20 | Эпштейн Олег Ильич | Способ лечения патологического синдрома и лекарственное средство |
| DE60239522D1 (de) | 2001-01-09 | 2011-05-05 | Baylor Res Inst Dallas | Verfahren zur behandlung von autoimmunerkrankungen bei einem probanden und diagnostische in-vitro-assays |
| AU2007202840B2 (en) * | 2001-01-09 | 2011-07-28 | Baylor Research Institute | Methods for treating autoimmune diseases in a subject and in vitro diagnostic assays |
| US7087726B2 (en) | 2001-02-22 | 2006-08-08 | Genentech, Inc. | Anti-interferon-α antibodies |
| UA76638C2 (en) | 2002-08-02 | 2006-08-15 | Oleh Illich Epshtein | Homeopathic medication based on anti-interferon antibodies and method for treating a pathological syndrome associated with interferon |
| UA76640C2 (uk) * | 2002-08-02 | 2006-08-15 | Олєг Ільіч Епштєйн | Спосіб корекції патологічних імунних реакцій та гомеопатичний лікарський засіб |
| UA76639C2 (uk) * | 2002-08-02 | 2006-08-15 | Олєг Ільіч Епштєйн | Гомеопатичний лікарський засіб та спосіб лікування еректильних дисфункцій |
| AU2007203559B2 (en) * | 2003-04-23 | 2010-09-02 | E. R. Squibb & Sons, L.L.C. | Compositions and methods for the therapy of inflammatory bowel disease |
| WO2004093908A2 (en) * | 2003-04-23 | 2004-11-04 | Medarex, Inc. | Compositions and methods for the therapy of inflammatory bowel disease |
| CA2546054C (en) | 2003-12-10 | 2014-05-13 | Medarex, Inc. | Interferon alpha antibodies and their uses |
| KR101541658B1 (ko) | 2004-06-21 | 2015-08-07 | 메다렉스, 엘.엘.시. | 인터페론 알파 수용체 1 항체 및 그의 용도 |
| KR101363120B1 (ko) * | 2005-02-10 | 2014-02-13 | 베일러 리서치 인스티튜트 | 항-인터페론 알파 모노클로날 항체 및 사용 방법 |
| US7888481B2 (en) * | 2005-02-10 | 2011-02-15 | Baylor Research Institute | Anti-interferon alpha monoclonal antibodies and methods for use |
| MX2007016343A (es) * | 2005-06-22 | 2008-03-05 | Genentech Inc | Metodos y composiciones para ser blanco en ifnar2. |
| WO2009135861A2 (en) * | 2008-05-07 | 2009-11-12 | Novo Nordisk A/S | Humanized antibodies against human interferon-alpha |
| FR2962656A1 (fr) | 2010-07-15 | 2012-01-20 | Oleg Iliich Epshtein | Procede pour augmenter l'effet d'une forme activee-potentialisee d'un anticorps |
| SG187035A1 (en) | 2010-07-15 | 2013-02-28 | Oleg Iliich Epshtein | Combination pharmaceutical composition and methods of treating functional diseases or conditions of gastrointestinal tract |
| CN108409862B (zh) * | 2016-07-14 | 2021-07-13 | 中国科学院生物物理研究所 | I型干扰素受体抗体及其用途 |
| CN115558027B (zh) * | 2022-12-05 | 2023-02-28 | 北京万泰生物药业股份有限公司 | 一种核酸酶的单克隆抗体及其应用 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0563487A1 (en) * | 1992-03-31 | 1993-10-06 | Laboratoire Europeen De Biotechnologie S.A. | Monoclonal antibodies against the interferon receptor, with neutralizing activity against type I interferon |
| IL106591A (en) * | 1992-09-03 | 2008-03-20 | Yeda Res & Dev | Interferon alpha/beta binding protein, its preparation and pharmaceutical compositions containing it |
| IL108584A (en) * | 1994-02-07 | 2008-03-20 | Yeda Res & Dev | Cloning of the interferon-binding protein ALPHA / BETA |
| EP0725654A1 (en) * | 1993-09-17 | 1996-08-14 | Laboratoire Europeen De Biotechnologie S.A. | Pharmaceutical composition comprising monoclonal antibodies against the interferon receptor, with neutralizing activity against type i interferon |
-
1996
- 1996-05-01 IL IL11809696A patent/IL118096A0/xx unknown
-
1997
- 1997-04-29 CN CNB971951861A patent/CN1198929C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1997-04-29 KR KR1020047011388A patent/KR100581798B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1997-04-29 AU AU24027/97A patent/AU719995B2/en not_active Expired
- 1997-04-29 IL IL126835A patent/IL126835A/en not_active IP Right Cessation
- 1997-04-29 PT PT97919622T patent/PT927252E/pt unknown
- 1997-04-29 AT AT97919622T patent/ATE342981T1/de active
- 1997-04-29 ES ES97919622T patent/ES2274542T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1997-04-29 UA UA98116315A patent/UA76396C2/uk unknown
- 1997-04-29 JP JP53837897A patent/JP4308322B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1997-04-29 CA CA2253239A patent/CA2253239C/en not_active Expired - Lifetime
- 1997-04-29 BR BR9709202A patent/BR9709202A/pt active Search and Examination
- 1997-04-29 EA EA199800968A patent/EA002543B1/ru not_active IP Right Cessation
- 1997-04-29 DK DK97919622T patent/DK0927252T3/da active
- 1997-04-29 KR KR1019980708393A patent/KR20000064953A/ko active Search and Examination
- 1997-04-29 EP EP97919622A patent/EP0927252B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1997-04-29 DE DE69736835T patent/DE69736835T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1997-04-29 EP EP06014510A patent/EP1739177A1/en not_active Withdrawn
- 1997-04-29 WO PCT/IL1997/000138 patent/WO1997041229A1/en active IP Right Grant
-
1998
- 1998-04-29 US US09/171,979 patent/US6136309A/en not_active Expired - Lifetime
- 1998-10-29 NO NO19985050A patent/NO324206B1/no not_active IP Right Cessation
-
1999
- 1999-09-30 HK HK99104252A patent/HK1019339A1/xx not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN1220699A (zh) | 1999-06-23 |
| PT927252E (pt) | 2007-01-31 |
| KR100581798B1 (ko) | 2006-05-25 |
| EP0927252B1 (en) | 2006-10-18 |
| EA002543B1 (ru) | 2002-06-27 |
| JP2000509276A (ja) | 2000-07-25 |
| KR20000064953A (ko) | 2000-11-06 |
| ATE342981T1 (de) | 2006-11-15 |
| EP1739177A1 (en) | 2007-01-03 |
| EA199800968A1 (ru) | 1999-04-29 |
| NO324206B1 (no) | 2007-09-10 |
| DK0927252T3 (da) | 2007-02-05 |
| CN1198929C (zh) | 2005-04-27 |
| DE69736835D1 (de) | 2006-11-30 |
| ES2274542T3 (es) | 2007-05-16 |
| EP0927252A1 (en) | 1999-07-07 |
| BR9709202A (pt) | 1999-08-10 |
| IL118096A0 (en) | 1996-09-12 |
| NO985050L (no) | 1998-12-29 |
| JP4308322B2 (ja) | 2009-08-05 |
| DE69736835T2 (de) | 2007-11-22 |
| WO1997041229A1 (en) | 1997-11-06 |
| AU2402797A (en) | 1997-11-19 |
| IL126835A (en) | 2007-07-24 |
| CA2253239C (en) | 2010-08-10 |
| AU719995B2 (en) | 2000-05-18 |
| US6136309A (en) | 2000-10-24 |
| HK1019339A1 (en) | 2000-02-03 |
| NO985050D0 (no) | 1998-10-29 |
| KR20040075105A (ko) | 2004-08-26 |
| CA2253239A1 (en) | 1997-11-06 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| UA76396C2 (en) | Monoclonal antibody, which is able to be bound with receptor ifn -, block the biological activity of ifn- and ifn- and create higher antiviral titer against fn-, than against ifn- (variants), pharmaceutical composition for modulation or blocking biological activity of ifn-, hybridoma expressing denoted antibody (variants), and set for carrying out elisa-analysis of ifnab-bpi and/or ifnab-bpi | |
| Tanaka et al. | Molecular cloning and expression of a novel adhesion molecule, SC1 | |
| US7455977B2 (en) | Methods of determining the level of human TBP-II with anti-TBP-II antibody | |
| US6555111B2 (en) | Method of inhibiting the cytocidal effect of TNF with TNF receptor-specific antibodies | |
| UA75862C2 (uk) | Виділений поліпептид, що зв'язується з il-18 (il-18bp) (варіанти), виділена молекула нуклеїнової кислоти, що його кодує (варіанти), антитіло, що зв'язується з даним поліпептидом, спосіб очищення il-18bp та композиція, що його містить | |
| US20060247198A1 (en) | TGF-beta type receptor cDNAs encoded products and uses therefor | |
| CA2195868A1 (en) | Antibodies which activate an erythropoietin receptor | |
| IL106271A (en) | Ligand to TNF 75P receptor and its preparation | |
| US6458932B1 (en) | Interferon-α/β binding protein, its preparation and use | |
| AU688430B2 (en) | Interferon-alpha/beta binding protein, its preparation and use | |
| US5879896A (en) | Method of screening for inhibitors of human thyrotropin releasing hormone (TRH) receptor | |
| Hiraishi et al. | Immunohistochemical distribution of human basigin by using a novel monoclonal antibody | |
| WO1994009765A1 (en) | Functional interactions between glial s-100b and central nervous system serotonergic neurons |