TWI671302B - 具有吲哚胺２，３-雙加氧酶抑制活性的稠合咪唑化合物 - Google Patents

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Abstract

本發明涉及一類稠合咪唑化合物、其製備方法及其應用。所述化合物的結構如通式I所示，其中各基團的定義如說明書所述。這些化合物能夠選擇性地抑制吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)。本發明化合物可作為IDO抑制劑用於治療和/或預防具有IDO介導的色胺酸代謝途徑的病理學特徵的疾病，例如癌症、眼部疾病、自身免疫性疾病、心理障礙、抑鬱症、焦慮症及其它疾病。

Description

具有吲哚胺2,3-雙加氧酶抑制活性的稠合咪唑化合物
本發明涉及具有吲哚胺2,3-雙加氧酶(Indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)抑制活性的稠合咪唑化合物、其製備方法及其在治療與吲哚胺-2,3-雙加氧酶活性異常相關的疾病方面的臨床應用。
色胺酸(Trp)是人體必需的一種胺基酸。從飲食中獲得的色胺酸，一部分用來合成蛋白質、煙酸以及神經遞質5-羥色胺，其餘部分則主要藉由犬尿胺酸途徑(kynurenine pathway)進行代謝(Leklem J.E.,Am J Clin Nutr,1971,24(6)：659-672)。吲哚胺2,3-雙加氧酶(Indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)是參與這種代謝途徑的關鍵酶。
吲哚胺2,3-雙加氧酶是一種細胞內含亞鐵血紅素的酶，於1967年首次在兔的腸道中被發現(Yamaoto S.et al.,J Biol Chem,1967,242(22)：5260-5266)，是肝臟以外唯一可催化色胺酸分子中吲哚環氧化裂解、沿犬尿酸途徑進行分解代謝的限速酶(MacKenzie,C.R.et al.Current Drug Metabolism,2007,8：237-244)。
IDO廣泛分佈於肝外組織，特別是黏膜組織表面(如胎盤、肺和小腸)、胸腺髓質和次級淋巴器官T細胞區、胃腸道黏膜、附睪、胎盤及眼前房等成纖維細胞、上皮細胞、巨噬細胞、樹突狀細胞(Dendritic cells,DC)以及小膠質細胞，而在脾臟、淋巴結和胸腺皮質中的表達較低(Fusao Hirta et al.,J Biol Chem,1997 252(13)：4637-4642)。
TDO主要表達在肝臟中，並且控制食物中攝取的色胺酸向血清素和犬尿胺酸路徑的流量。
INF特異性炎性因數如IFN-γ在轉錄水準刺激誘導IDO的表達。其他炎性因數，如IFN-α，IFN-β及LPS也可誘導IDO表達，但誘導效果不如IFN-γ(King N.J.et al.,The Int J Biochem Cell Biol,2007 39(12)：2167-2172)。同時IDO的表達還受到免疫活性分子如***素，細胞表面蛋白細胞毒性T淋巴細胞相關抗原(CTLA24)、CD40、Toll樣受體的調節。
最近的研究表明，IDO參與調節T細胞的調節。IDO藉由降解色胺酸可切斷T細胞的活化，因為T細胞對色胺酸耗竭特別敏感，在色胺酸濃度較低時，T細胞增殖就會靜止在G1期(Munn D.H.etal.,J Exp Med,1999,189(9)：1363-1372)。基於這種機制，在胎盤中表達的IDO保護了胎兒免遭母體排斥(Munn D.H.et al.,Science,1998,281(5380)：1191-1193)；而在腫瘤中表達的IDO介導了腫瘤的免疫逃逸(Friberg M.etal.,Int J Cancer,2002,101(2)：151-155)。抗原呈遞細胞如巨噬細胞、樹突狀細胞(DC)上的IDO均可藉由抑制T細胞增殖來誘導T細胞對腫瘤抗原的免疫耐受(Terness P.et al.,Blood,2005,105(6)：2480-2486)。
IDO與神經系統疾病密切相關，IDO至少可藉由兩種機制影響腦的功能：1)在炎症反應時藉由代謝色胺酸降低迴圈的色胺酸濃度，從而使5-羥色胺水準降低，導致抑鬱；2)催化色胺酸循犬尿胺酸途徑代謝使犬尿胺酸和神經毒性喹啉酸累積(Roy E.J.et al.,Neurosci Lett,2005,387(2)：95-99)。
IDO還涉及與年齡相關的核性白內障的發生。IDO是晶狀體中紫外線濾器生物合成中的第一個酶，並且是限速酶。來自色胺酸降解的紫外線濾器化合物(犬尿胺酸和3-羥基犬尿胺酸葡萄苷)修飾存在於人晶狀體中的蛋白質。這些紫外線濾器化合物的量隨著年齡增長而增加(Takikawa et al.Adv.Exp.Med.Biol.1999,467,241-245)並且已經報導了這些紫外線濾器化合物會導致晶狀體逐漸渾濁，進而導致被稱為與年齡相關的核性白內障。IDO抑制劑會阻斷該自然過程(Takikawa O.et al.Exp.Eye Res.2001,72,271-277)。
習知技術已知，IDO抑制劑可以用於治療或預防具有IDO介導的色胺酸代謝途徑的病理學特徵的疾病，這些疾病包括例如AIDS等病毒的感染、萊姆病和鏈球菌感染等細菌感染、神經退行性病症(例如阿茲海默病、 亨廷頓病和帕金森病)、抑鬱症、癌症(包括T細胞白血病和結腸癌)、眼部疾病(例如白內障和與年齡相關的黃化)以及自身免疫性疾病等(CN1795187A，CN101932325A，CN103054870A)。
目前已有三個IDO抑制劑處於不同的臨床研究階段，包括：1)Incyte公司的Epacadostat，處於臨床II期，用於治療骨髓增生異常綜合症、黑色素瘤和女性生殖系統癌症；2)Newlink公司的Indoximod，處於臨床II期，用於治療乳腺癌、***癌、惡性腦瘤、胰腺癌和黑色素瘤；3)羅氏公司的GDC-0919，處於臨床I期，用於治療晚期實體瘤。
IDO與多種疾病發病機制密切相關，並已被證實是癌症、阿茲海默病、抑鬱症、白內障等重大疾病的靶標(CN101932325B，CN102579452B)，因此IDO抑制劑作為藥物具有廣闊的應用前景。然而，迄今未有合適的IDO抑制劑上市，現有處於臨床研究階段的IDO抑制劑具有使用劑量較高，毒副作用較大的缺點，因此尋找具有更高IDO抑制活性、更低毒性的IDO抑制劑具有重大的理論意義和應用價值。
為了克服習知技術中的缺陷，本發明人進行了大量研究，藉由大量篩選試驗後意外發現，具有以下通式I的化合物具有出乎意料地好的IDO抑制作用：
本發明所述的通式I化合物，可以選擇性地抑制吲哚胺2,3-雙加氧酶，可用於治療和/或預防具有IDO介導的色胺酸代謝途徑的病理學特徵的疾病。這樣的疾病包括但不限於癌症、眼部疾病、自身免疫性疾病、心理障礙、抑鬱症和焦慮症。
一方面，本發明提供了具有吲哚胺2,3-雙加氧酶抑制活性的稠合咪唑 化合物。
另一方面，本發明目提供了製備本發明所述化合物的方法。
本發明所述的化合物包括其任何適當的形式，包括其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、對映體以及外消旋體混合物。
本發明還涉及包含本發明所述化合物(包括其各種適當形式)作為活性成分的藥物組合物。
在另一方面，本發明還提供了本發明化合物在製備用作吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)抑制劑的藥物中的應用。在又一方面，本發明還提供了本發明化合物在製備用於治療或預防癌症、眼部疾病、自身免疫性疾病、心理障礙、抑鬱症和焦慮症等疾病或病症的藥物中的應用。
本發明所說的化合物，其化學結構如通式I所示：
其中，R1為一個或多個取代基，選自氫、羥基、氰基、硝基、鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6烷基羰基和C1-6烷基氨基；R2為羥基或氨基；R3為一個或多個取代基，選自氫、羥基、氰基、鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6烷基羰基和C1-6烷基氨基；X為NR4或O；其中，R4為氫或C1-6烷基；環A為任選經取代的選自以下的基團：苯基；3元到7元飽和或部分不飽和碳環；8元到10元飽和、部分不飽和或芳環雙環或三環；具有1到4個獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的5元到6元單環雜芳基環；具有1 到3個獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的4元到7元飽和或部分不飽和雜環；具有1到5個獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的7元到10元飽和或部分不飽和雜環雙環或三環；或具有1到5個獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的8元到10元雜芳環雙環或三環。
對於上述通式I所示化合物，優選地，R1為一個或多個取代基，選自氫、羥基、氰基、硝基、鹵素和C1-6鹵代烷基；R2為羥基；R3為一個或多個取代基，選自氫、羥基、氰基、硝基、鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基和C1-6鹵代烷基；X為NR4；其中，R4為氫、甲基或乙基；環A為選自以下的基團：苯基；3元到6元飽和碳環；8元到10元芳環雙環或三環；具有1到4個獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的5元到6元單環雜芳基環；具有1到5個獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的7元到10元飽和或部分不飽和雜環雙環或三環；或具有1到5個獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的8元到10元雜芳環雙環或三環。
對於上述通式I所示化合物，較優選地，R1為一個或多個取代基，選自氫、羥基、氰基、硝基和鹵素；R2為羥基；R3為一個或多個取代基，選自氫、羥基、氰基、硝基、鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基和C1-6鹵代烷基；X為NR4；其中，R4為氫或甲基；環A為選自以下的基團：苯基；3元到6元飽和碳環；8元到10元芳環雙環或三環；具有1到4個獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的5元到6元單環雜芳基環；或具有1到5個獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的8元到10元雜芳基環雙環或三環。
對於上述通式I所示化合物，更優選地，R1為一個或多個取代基，選自氫、羥基、氰基和硝基；R2為羥基；R3為一個或多個取代基，選自氫、羥基、氰基、硝基、鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基和C1-6鹵代烷基；X為NR4；其中，R4為氫或甲基；環A為選自以下的基團：苯基；8元到10元芳環雙環或三環；具有1到4個獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的5元到6元單環雜芳基環；或具有1到5個獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的8元到10元雜芳基環雙環或三環。
對於上述通式(I)所示化合物，還更優選地，R1為一個或多個取代基，選自氫、羥基或氰基；R2為羥基；R3為一個或多個取代基，選自氫、羥基、氰基、硝基、鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基和C1-6鹵代烷基；X為NR4；其中，R4為氫或甲基；環A為選自以下的基團：苯基；具有1到4個獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的5元到6元單環雜芳基環；或具有1到5個獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的8元到10元雜芳基環雙環或三環。
對於上述通式(I)所示化合物，最優選地，R1為氫；R2為羥基；R3為一個或多個取代基，選自氫、羥基、氰基、硝基、鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基和C1-6鹵代烷基；X為NR4；其中，R4為氫或甲基； 環A為選自以下的基團：苯基；具有1到4個獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的5元到6元單環雜芳基環；或具有1到5個獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的8元到10元雜芳基環雙環或三環。
本發明所述的“鹵素”為氟、氯、溴、碘。
本發明所述的“烷基”，是指具有1至約20個碳原子、通常為1至12個碳原子、優選為1至8個、1至6個甚至更優選為1至4個碳原子的直鏈和支鏈或環狀烷基。直鏈烷基的實例包括具有1至8個碳原子的那些，比如甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基、正己基、正庚基和正辛基；支鏈烷基的實例包括但不限於異丙基、異丁基、仲丁基、叔丁基、新戊基、異戊基、異己基和2,2-二甲基丙基；環烷基的實例包括但不限於環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基和環辛基。
本發明所述的“鹵代烷基”包括單鹵代烷基和多鹵代烷基(其中所有鹵原子可以相同或不同)。部分鹵代的烷基是本文含義內的“鹵代烷基”。鹵代烷基的實例包括三氟甲基、1,1-二氯乙基、1,2-二氯乙基、1,3-二溴-3,3-二氟丙基等。
本發明所述的“烷氧基”，是指上述烷基與氧原子相連所形成的基團，其中，氧原子具有自由成鍵能力，如甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、戊氧基、異丙氧基、特丁氧基、環丙氧基、環己基氧基等。
本發明所述的“藥學上可接受的鹽”或“可藥用鹽”是指藥學上可接受的酸和鹼加成鹽和溶劑化物。這類藥學上可接受的鹽包括與酸形成的鹽，所述酸包括鹽酸、磷酸、氫溴酸、硫酸、亞磺酸、甲酸、對甲苯磺酸、甲磺酸、硝酸、苯甲酸、檸檬酸、酒石酸、馬來酸、氫碘酸、鏈狀羧酸如乙酸、HOOC-(CH2)n-COOH(n=0-4)等；也包括與鹼形成的鹽，這些鹽的陽離子包括鈉、鉀、鈣、銨離子等。
本發明中，“取代的”指本文中所定義的有機基團(其中包含有與氫原子鍵合的一個或多個鍵)被一個或多個與非氫原子或原子團鍵合的鍵取代，所述非氫原子或原子團即為取代基。
本發明化合物的取代基包括例如鹵素、烷基(優選C1-8烷基、C1-6烷 基或C1-4烷基)、烷氧基(優選C1-8烷氧基、C1-6烷氧基或C1-4烷氧基)、鹵代烷基(優選C1-8鹵代烷基、C1-6鹵代烷基或C1-4鹵代烷基)、鹵代烷氧基(優選C1-8鹵代烷氧基、C1-6鹵代烷氧基或C1-4鹵代烷氧基)、羥基、羥基烷基(優選羥基C1-8烷基、羥基C1-6烷基或羥基C1-4烷基)。
另一方面，本發明還涉及本文所描述化合物的螢光標記、自旋標記、重金屬或同位素標記衍生物，它們不僅可用於成像，還可用於體內和體外的檢測，定位和定量組織樣品(包括人類)中的IDO酶，藉由標記化合物的結合抑制，識別IDO酶配合基。因此，本發明進一步提供了含有這種標記化合物的IDO酶檢測試劑或試劑盒。
本發明進一步提供本發明化合物的同位素標記化合物。所述本發明化合物的“同位素標記化合物”或“同位素標記”的本發明化合物是指本文所描述的化合物，其中一個或多個原子被同位素原子替代，該同位素原子的原子品質或質量數不同於通常在自然界中發現的(即自然發生的)原子品質或質量數。適用的放射性核素可能包括但不限於2H(氘，也寫成D)、3H(氚。也寫成T)、11C、13C、14C、13N、15N、15O、17O、18O、18F、35S、36Cl、82Br、75Br、76Br、77Br、123I、124I、125I和131I。同位素標記的化合物中所含有的放射性同位素種類將取決於該同位素標記的化合物的具體應用。例如，對於體外IDO酶的標記和競爭試驗，包含3H、14C、82Br、125I、131I、35S的化合物通常最有用。對於同位素成像應用，11C、18F、125I、123I、124I、131I、75Br、76Br或77Br一般最有用。
習知技術中已知的用放射性同位素標記有機化合物的方法同樣適用於本發明的化合物。
在另一方面，本發明提供了製備本發明通式I化合物的方法： 所述方法包括使式C化合物 在有機溶劑和還原劑作用下反應形成通式I化合物，其中 R1、R2、R3、X和A如前面所定義。
本發明還提供了製備式C化合物的方法： 包括使式A化合物 與式B化合物
在有機溶劑和耦合試劑的作用下耦合形成式C化合物，其中R1、R3、X和A如前面所定義。
特別地，本發明還提供了所述式C化合物作為用於製備本發明所述通式I化合物的中間體的用途。
式A化合物的製備
此外，本發明進一步提供了製備上述式A化合物的方法，包括以下步驟(a)-(d)：
(a)在鈀催化作用下，化合物1與化合物2進行鈴木交叉耦合得到化合物3；
(b)在鹼的作用下，化合物3與化合物4進行Claisen-Schimidt縮合得到化合物5；
(c)化合物5在醋酸條件下脫去三苯甲基並關環得到化合物6；
(d)將化合物6在酸性條件下脫Boc保護得到中間體A：
上述鈴木交叉耦合反應(a)以鈀為催化劑，如Pd(PPh3)4、Pd(dffp)Cl2、Pd(OAc)2、Pd(dba)3/PCy3、PdCl2、Pd(PPh3)4Cl2等。或者以Ni為催化劑，如NiCl2(dffp)、NiCl2(dffp)/Zn、NiCl2(dffp)/BuLi、NiCl2(PPh3)2/PPh3、NiCl2(NEt3)2、NiCl2(NEt3)2、NiCl(bipy)、Ni(TPPS)3、Ni(COD)2、NiCl2(PPh3)2/n-BuLi、Ni{P(OMe)3}2Cl2、NiCl2(PCy3)2等。以KOAc、K3PO4、K2CO3、NaOH、Ba(OH)2、Na2CO3、CsF或NaHCO3等為鹼，反應溫度為25到140℃，反應時間為4~72小時。反應所用溶劑為常用溶劑，如乙醇、THF、異丙醇、DMSO、DMF、二氧六環、甲苯、水和DME等。
上述Claisen-Schimidt縮合反應(b)可以以NaOH、NaOCH3、NaOEt等鹼為催化劑，或者以酸為催化劑，如硫酸、鹽酸、醋酸等。反應溫度為0~80℃，反應時間為1~24小時。反應所用溶劑可以為常用溶劑，如THF、乙醇、水等。
上述反應(c)以醋酸、鹽酸、三氟醋酸為脫保護和關環試劑，反應溫度為0~90℃，反應時間為2~72小時。反應所用溶劑為常用溶劑，如水、甲醇、乙醇、異丙醇、四氫呋喃、二氯甲烷、丙酮等。
上述脫保護反應(d)以鹽酸、三氟醋酸、對甲苯磺酸、硫酸、甲磺酸、三氟化硼***等為脫保護試劑，反應溫度為25~100℃，反應時間為20分鐘~24小時。反應所用溶劑為常用溶劑，如水、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、二氯甲烷、四氫呋喃、1,4-二氧六環、N,N-二甲基甲醯胺等。
式B化合物的製備
根據式B化合物結構中X的不同，分為兩種情況：X為O；X為NR4。
當X為O時，式B化合物為化合物B(1)： 當X為NR4時，式B化合物為化合物B(2)：
式B(1)化合物可由市場直接購得或由如下合成方法製備：
市場可購得的酚7與市場可購得的化合物8在鹼性條件下發生親核取代反應得到化合物9。該親核取代反應是以NaOH、Na2CO3、K2CO3等鹼為去酸劑，反應溫度為25~140℃，反應時間為2~72小時。反應所用溶劑為常用溶劑，如水、甲醇、乙醇、乙腈、苯、二甲苯、丙酮、N,N'-二甲基甲醯胺、DMSO等。
所得化合物9在NaOH、LiOH等鹼作用下脫乙酯得化合物B(1)。反應溫度為0~60℃，反應時間為0.5~2小時。反應所用常用溶劑為水、甲醇、乙醇、四氫呋喃、N,N'-二甲基甲醯胺等。
式B(2)化合物可由市場直接購得或由如下合成方法製備：
市場可購得的胺10與市場可購得的化合物8在鹼性條件下發生親核取代反應得到化合物11。該親核取代反應是以NaOH、Na2CO3、K2CO3等鹼為去酸劑，反應溫度為25~140℃，反應時間為2~72小時。反應所用溶劑為常用溶劑，如水、甲醇、乙醇、乙腈、苯、四氫呋喃、二甲苯、丙酮、N,N'-二甲基甲醯胺、DMSO等。
所得化合物11在NaOH、LiOH等鹼作用下脫乙酯得式B(2)化合物。反應溫度為0~60℃，反應時間為0.5~2小時。反應所用常用溶劑為水、甲醇、乙醇、四氫呋喃、N,N'-二甲基甲醯胺等。
在一個優選的實施方案中，本發明所述通式I化合物可由如下合成方法製備：
式A化合物與式B化合物經縮合獲得式C化合物。該縮合反應以肽縮合劑為催化劑，如1-乙基-3-(3-二甲胺丙基)碳二亞胺(EDC)、N,N'-二環己基碳二亞胺(DCC)、N,N'-羰基二咪唑(CDI)、O-(7-氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)等。反應溫度為0~60℃，反應時間為2~72小時。反應所用溶劑為常用溶劑，如苯、甲苯、四氫呋喃、二氧六環、二氯甲烷、氯仿、N,N'-二甲基甲醯胺等。必要時，也可以加入 鹼，如氫氧化鈉、三乙胺或吡啶等。
式C中間體經還原劑如NaBH4、KBH4、NaBH(OAc)3、KBH(OAc)3、NaBH3CN等還原得到化合物I(R2=-OH)。反應溫度為0~60℃，反應時間為2~72小時。反應所用溶劑為常用溶劑，如甲醇、乙醇、四氫呋喃等。
通式I(R2=-OH)所示化合物藉由Mitsunobu反應轉化為通式I(R2=-NH2)所示化合物。以偶氮二甲酸二乙酯(DEAD)和三苯基膦為活化試劑，鄰苯二甲醯亞胺作為親核試劑，然後經過肼解，得到通式I(R2=-NH2)所示化合物。反應溫度為0~25℃，反應時間為0.5~16小時。反應所用溶劑為常用溶劑，如四氫呋喃、***、二氯甲烷、甲苯、乙酸乙酯、乙腈、N,N'-二甲基甲醯胺等。
通式(I)所述的化合物可以採用常見的分離方法進行純化，如萃取、重結晶、柱層析等。
本發明所述的代表性化合物如下表1所示，其中化合物編號與實施例部分中的“實施例編號”相一致。
下面結合實例進一步闡明本發明的內容，但本發明的保護範圍並不僅僅局限於這些實例。本發明所述的百分比除特別註明外，均為重量百分比。說明書中所描述的數值範圍，如計量單位、反應條件、化合物物理狀態或百分比，均是為了提供明白無誤的書面參考。本領域具有通常知識者在實踐本專利時，使用在此範圍之外或有別於單個數值的溫度、濃度、數量、碳原子數等，仍然可以得到預期的結果。
實施例中所使用的試劑縮寫所代表的完整名稱如下：
HATU 2-(7-氧化苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯
DIPEA 二異丙基乙基胺
DABCO 1,4-二氮雜二環[2.2.2]辛烷
HOBt 1-羥基苯並***
EDCI.HCl 1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳醯二亞胺鹽酸鹽
DMF N,N-二甲基甲醯胺
THF 四氫呋喃
EA 乙酸乙酯
DCM 二氯甲烷
實施例1
4-碘-1-三苯甲基-1H-咪唑的製備
將4-碘-1H-咪唑(20g,103mmoles)溶於DMF(100mL)中，然後加入三乙胺(15.1mL,108mmoles)和三苯基甲基氯(27.8g,100mmoles)。反應液在室溫下攪拌反應48h，然後傾倒到冰水中(500mL)，析出大量固體，過濾，烘乾，得到白色固體4-碘-1-三苯甲基-1H-咪唑(40g,91.7mmol,88.9%)。
LC-MS(m/z)：437(M+1)。
實施例2
2-(1-三苯甲基-1H-咪唑-4-基)苯甲醛的製備
將4-碘-1-三苯甲基-1H-咪唑(38.7g,88.8mmol),(2-甲醯苯基)硼酸(20.0g,133mmol)和K3PO4(56.4g,266mmol)溶解到1,4-二氧六環(300mL)和水(60mL)中，反應液中鼓入氮氣5min，然後加入Pd(PPh3)4(5.12g,4.44mmol)，並繼續對反應液鼓入氮氣5min。該反應在氮氣保護下，升溫90℃反應16h。反應結束後降溫，墊矽藻土過濾，濾液用水(100mL)和EA(300mL)稀釋，靜置分層，水相用EA(300mL×2萃取；合併有機相，用水(100mL)和飽和食鹽水(100mL×3)洗滌。有機相減壓濃縮得到殘留物，用PE/EA=3/1過柱純化，得到淡棕色黏稠油狀物2-(1-三苯甲基-1H- 咪唑-4-基)苯甲醛(15.0g,40.8%)。LC-MS(m/z)：415(M+1)。
實施例3
(E)-4-(3-(2-(1-三苯甲基-1H-咪唑-4-基)苯基)丙烯醯基)呱啶-1-甲酸叔丁酯的製備
將2-(1-三苯甲基-1H-咪唑-4-基)苯甲醛(4.0g,9.66mmol)溶解於無水THF(20mL)和無水EtOH(20mL)的混合溶液中，降溫到0℃，然後加入EtONa(986mg,14.5mmol),4-乙醯基呱啶-1-甲酸叔丁酯(2.29g,10.1mmol)。然後反應液置於室溫攪拌過夜，LCMS檢測反應完全後，用冰水(30mL)稀釋，減壓蒸出THF，抽濾，濾餅儘量抽乾，得到白色固體粗品(E)-4-(3-(2-(1-三苯甲基-1H-咪唑-4-基)苯基)丙烯醯基)呱啶-1-甲酸叔丁酯(6.0g)，直接用於下一步。
LC-MS(m/z)：624(M+1)。
實施例4
4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-甲酸叔丁酯的製備
將上步所得粗品(E)-4-(3-(2-(1-三苯甲基-1H-咪唑-4-基)苯基)丙烯醯基)呱啶-1-甲酸叔丁酯(6.0g，粗品)溶於MeOH(80mL)中，加入冰乙酸(15mL)，然後升溫到90℃攪拌過夜。反應結束後，降溫到室溫，用飽和碳酸鉀溶液(30mL)調節pH到10。反應液用乙酸乙酯(100mL×3)萃取。 合併有機相，用水(50mL)洗滌，飽和食鹽水(50mL×3)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓回收溶劑，殘留物過柱(淋洗劑：CH2Cl2/MeOH=50/1)純化，得到淡黃色固體4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-甲酸叔丁酯(2.7g,73.4%，兩步總收率)。
LC-MS(m/z)：382(M+1)。
實施例5
2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)-1-(呱啶-4-基)乙基-1-酮鹽酸鹽的製備
將4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-甲酸叔丁酯(1.2g,3.15mmol)溶於1,4-二氧六環(20mL)，然後加入4N HCl/1,4-二氧六環(4mL)。反應在室溫下反應過夜，減壓濃縮得到淡黃色固體粗品2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)-1-(呱啶-4-基)乙基-1-酮鹽酸鹽(1.2g)，直接用於下一步反應。
LC-MS(m/z)：282(M+1)。
實施例6
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-苯氧乙基-1-酮的製備
將2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)-1-(呱啶-4-基)乙基-1-酮鹽酸鹽(360mg,1.14mmol)，DIPEA(0.4mL,2.28mmol)溶於DCM(15mL)，冰浴攪拌，分批加入2-苯氧乙酸酐(340mg,1.18mmol)，慢慢升至室溫反應6小時。反應液中加入飽和碳酸氫鈉調PH至8-10，乙酸乙酯(50mL)萃 取，用飽和食鹽水(20mL)洗滌，20ml水洗滌.有機相用無水Na2SO4乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物用5mL甲醇溶解，滴入50mL水中，析出固體，過濾獲得化合物1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-苯氧乙基-1-酮(250mg，收率52.9%)。
LC-MS(m/z)：416(M+1)。
實施例7
1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-苯氧乙基-1-酮的製備
將1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-苯氧乙基-1-酮(250mg,0.60mmol)溶於20mL甲醇中，降溫到0℃，分批加入NaBH4(68mg,1.8mmol)，室溫反應過夜，加水淬滅，倒入水中，析出固體，過濾，所得固體溶於5mL甲醇中，倒入碳酸氫鈉水溶液(50mL)中，析出固體，過濾獲得1705(87mg，收率34.7%)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )：δ 7.95(s,1H),7.60(d,J=7.5Hz,1H),7.57(d,J=7.5Hz,1H),7.38(t,J=7.5Hz,1H),7.29-7.25(m,3H),7.12(s,1H),6.94-6.89(m,3H),5.41(t,J=6.2Hz,1H),5.02(d,J=5.2Hz,1H),4.81-4.73(m,2H),4.37(t,J=13.0Hz,1H),3.87(t,J=13.0Hz,1H),3.71-3.66(m,1H),2.96(t,J=13.0Hz,1H),2.55(t,J=13.0Hz,1H),2.10-2.02(m,1H),1.90-1.85(m,1H),1.80-1.77(m,1H),1.61-1.51(m,2H),1.34-1.10(m,2H).
LC-MS(m/z)：418(M+1)。
實施例8
2-((四氫呋喃-3-基)氧基)乙酸乙酯的製備
在0℃，NaH(6.81g,170mmol)加入到THF(60mL)，然後加入3-羥基四氫呋喃(5.00g,56.8mmol)後，在0℃攪拌反應0.5h，加入2-溴乙酸乙酯(19.0g,114mmol).反應液在室溫下攪拌過夜，濃縮，殘留物用EA(100mL)稀釋後，用水(50mL)洗滌，飽和食鹽水(50mL)洗滌.有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物用PE/EA=20/1~10/1過柱純化，得到黃色油狀物2-((四氫呋喃-3-基)氧基)乙酸乙酯(3.50g,20.1mmol,35.4%)。
LC-MS(m/z)：175(M+1)。
實施例9
2-((四氫呋喃-3-基)氧基)乙酸的製備
2-((四氫呋喃-3-基)氧基)乙酸乙酯(1.20g,6.90mmol)和KOH(10.4mL,20.7mmol,2.0M in water)溶解到MeOH(30mL)中，在80℃攪拌反應6h.反應液濃縮掉一部分後，用濃鹽酸調節pH=5.0，混合物用DCM/MeOH(v/v,5/1,100mL)萃取。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮得到2-((四氫呋喃-3-基)氧基)乙酸(350mg)，直接用於下一步反應。
LC-MS(m/z)：147(M+1)。
實施例10
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-((四氫呋喃-3-基)氧基)乙基-1-酮的製備
2-((四氫呋喃-3-基)氧基)乙酸(50mg,0.158mmol),2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)-1-(呱啶-4-基)乙基-1-酮鹽酸鹽(50mg，粗品)，HATU(120mg,0.316mmol)和DIPEA(61.1mg,0.474mmol)溶於DMF(5mL)中，室溫攪拌反應過夜，用乙酸乙酯(50mL)稀釋，水(10mL)洗滌，飽和食鹽水(10mL×3)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到殘留物，用DCM/MeOH=10/1過柱純化得到1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-((四氫呋喃-3-基)氧基)乙基-1-酮(100mg)，直接用於下一步反應。
LC-MS(m/z)：410(M+1)。
實施例11
1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-((四氫呋喃-3-基)氧基)乙基-1-酮的製備
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-((四氫呋喃-3-基)氧基)乙基-1-酮(100mg,crude)溶於甲醇(10mL)中，降溫到0℃，緩慢加入硼氫化鈉(18.0mg,0.474mmol)，在該溫度下攪拌反應1h，用水(10mL)淬滅反應。反應液濃縮得到殘留物，用製備色譜製得白色固體化合物1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-((四氫呋喃-3-基)氧基)乙基-1-酮(10.0mg,0.024mmols,2.47%的三步總收率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 7.94和7.91(s,1H),7.60(d,J=7.5 Hz,1H),7.56和7.50(d,J=7.7Hz,1H),7.38(t,J=7.5Hz,1H),7.27(t,J=7.4Hz,1H),7.14和7.12(s,1H),5.48-5.34(m,1H),5.14和5.02(d,J=4.9Hz,1H),4.45-4.29(m,1H),4.19-4.00(m,3H),3.88-3.75(m,1H),3.75-3.56(m,5H),2.88(t,J=12.9Hz,1H),2.45(t,J=12.2Hz,1H),2.26-2.02(m,1H),1.97-1.83(m,3H),1.82-1.71(m,1H),1.61-1.47(m,2H),1.28-1.19(m,1H),1.18-1.04(m,1H)ppm.
LC-MS(m/z)：412(M+1)。
實施例12
3-甲氧基-9H-哢唑的製備
6-甲氧基-2,3,4,9-四氫-1H-哢唑(3.00g,14.9mmol)和I2(948mg,3.73mmol)溶於DMSO(30mL)中，加熱升溫到90℃過夜反應。反應結束後，用乙酸乙酯(300mL)稀釋，有機相用飽和食鹽水(50mL×3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物用PE/EA=10/1~5/1淋洗劑過柱純化，得到白色固體3-甲氧基-9H-哢唑(345mg,1.75mmol,11.8%)。
LC-MS(m/z)：198(M+1)。
實施例13
3-羥基-9H-哢唑的製備
3-甲氧基-9H-哢唑(345mg,1.75mmol)溶於氫溴酸(5mL)和醋酸(20mL)配成的溶液中，加熱回流反應2h，降溫到室溫，濃縮掉部分溶劑，用飽和碳酸氫鈉溶液調節pH=9.0，用乙酸乙酯(50mL)萃取。有機相用飽和食鹽 水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮得到3-羥基-9H-哢唑(300mg,1.64mmol,93.7%)。
LC-MS(m/z)：184(M+1)。
實施例14
2-((9H-哢唑-3-基)氧基)乙酸乙酯的製備
3-羥基-9H-哢唑(300mg,1.64mmol),2-溴乙酸乙酯(329mg,1.97mmol)和K2CO3(272mg,1.97mmol)溶於DMF(10mL)中，室溫攪拌過夜。反應液用乙酸乙酯(80mL)稀釋，用飽和食鹽水(20mL×3)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物用乙酸乙酯/石油醚=1/10的淋洗劑過柱，得到2-((9H-哢唑-3-基)氧基)乙酸乙酯(340mg,1.26mmol,77%)，直接用於下一步反應。
LC-MS(m/z)：270(M+1)。
實施例15
2-((9H-哢唑-3-基)氧基)乙酸的製備
2-((9H-哢唑-3-基)氧基)乙酸乙酯(154mg,0.572mmol)溶於2N氫氧化鈉溶液(0.86mL,1.72mmol)，加入MeOH(5mL)，室溫攪拌反應4h，反應液濃縮掉部分溶劑，用濃鹽酸調節pH=5.0，用乙酸乙酯(30mL)萃取。有機相用食鹽水(15mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到2-((9H-哢唑-3-基)氧基)乙酸粗品(200mg)，直接用於下一步反應。
LC-MS(m/z)：242(M+1)。
實施例16
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-((9H-哢唑-3-基)氧基)乙基-1-酮的製備
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-((9H-哢唑-3-基)氧基)乙基-1-酮(90mg，粗品)是由2-((9H-哢唑-3-基)氧基)乙酸(45.7mg,0.190mmol)和2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)-1-(呱啶-4-基)乙基-1-酮鹽酸鹽(50mg,0.158mmol)按照實施例10中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：505(M+1)。
實施例17
2-((9H-哢唑-3-基)氧基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮的製備
白色固體2-((9H-哢唑-3-基)氧基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮(21mg，兩步收率26.3%)是由1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-((9H-哢唑-3-基)氧基)乙基-1-酮(90mg，粗品)按照實施例11中的類似步驟製備而成。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 11.05(s,1H),8.04(d,J=7.6Hz,1H),7.95和7.92(s,1H),7.66(s,1H),7.63-7.47(m,2H),7.44(d,J=8.1Hz, 1H),7.42-7.31(m,3H),7.27(t,J=7.5Hz,1H),7.18-7.07(m,2H),7.04(d,J=8.8Hz,1H),5.48-5.34(m,1H),5.19-5.01(m,1H),4.90-4.73(m,2H),4.48-4.34(m,1H),4.06-3.90(m,1H),3.76-3.66(m,1H),3.01(t,J=13.2Hz,1H),2.54(t,J=12.7Hz,1H),2.27-2.08(m,1H),1.96-1.50(m,4H),1.43-1.31(m,1H),1.25-1.10(m,1H)ppm.
LC-MS(m/z)：507(M+1)。
實施例18
2-(噠嗪-4-基氧基)乙酸乙酯的製備
將4-羥基噠嗪(2.00g,20.8mmol),2-溴乙酸乙酯(5.21g,31.2mmol)和K2CO3(4.31g,31.2mmol)加入到乙腈(30mL)中，加熱回流反應4h。反應液減壓濃縮，用乙酸乙酯/石油醚=1/10過柱純化，得到2-(噠嗪-4-基氧基)乙酸乙酯(1.40g,7.69mmol,37.0%)。
LC-MS(m/z)：183(M+1)。
實施例19
2-(噠嗪-4-基氧基)乙酸的製備
2-(噠嗪-4-基氧基)乙酸(300mg，粗品)是由2-(噠嗪-4-基氧基)乙酸乙酯(200mg,1.10mmol)按照實施例15中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：155(M+1)。
實施例20
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(噠嗪-4-基氧基)乙基-1-酮的製備
將2-(噠嗪-4-基氧基)乙酸(50mg,0.158mmol),2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)-1-(呱啶-4-基)乙基-1-酮鹽酸鹽(50mg，粗品)，HATU(120mg,0.316mmol)和DIPEA(61.1mg,0.474mmol)加入到5mL DMF中，室溫攪拌過夜。反應液用乙酸乙酯50ml稀釋，接著用10ml水洗滌，飽和食鹽水(10mL×3)洗滌。有機相用無水Na2SO4乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物用二氯甲烷/甲醇=10/1過柱純化，得到化合物粗品1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(噠嗪-4-基氧基)乙基-1-酮(75mg，粗品)，直接用於下一步反應。
LC-MS(m/z)：418(M+1)。
實施例21
1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-(噠嗪-4-基氧基)乙基-1-酮的製備
將實施例20所得的1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(噠嗪-4-基氧基)乙基-1-酮(75mg,crude)溶於10mL甲醇，降溫到0℃，加入NaBH4(18.0mg,0.474mmol)，在該溫度下反應1h，用水(10mL)淬滅反應，減壓濃縮得到殘留物，用製備色譜製得白色固體1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-(噠嗪-4-基氧基)乙基 -1-酮(28.0mg,0.067mmols，兩步總收率20.6%)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 8.10(dd,J=7.8,1.5Hz,1H),7.98-7.89(m,1H),7.73(d,J=3.1Hz,1H),7.61(d,J=7.6Hz,1H),7.57和7.51(d,J=7.9Hz,1H),7.39(t,J=7.5Hz,1H),7.28(t,J=7.5Hz,1H),7.15和7.12(s,1H),6.35(dd,J=7.8,3.1Hz,1H),5.48-5.36(m,1H),5.21-5.01(m,3H),4.42-4.27(m,1H),3.88-3.75(m,1H),3.74-3.67(m,1H),2.98(t,J=13.1Hz,1H),2.55(t,J=12.6Hz,1H),2.27-2.03(m,1H),1.92-1.52(m,4H),1.38-1.25(m,1H),1.20-1.10(m,1H)ppm。
LC-MS(m/z)：420(M+1)。
實施例22
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(喹啉-6-基氧基)乙基-1-酮的製備
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(喹啉-6-基氧基)乙基-1-酮(50mg，粗品)是由2-(喹啉-6-基氧基)乙酸(54mg,0.267mmol)和2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)-1-(呱啶-4-基)乙基-1-酮鹽酸鹽(50mg,0.158mmol)按照實施例20中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：467(M+1)。
實施例23
1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-(喹啉-6-基氧基)乙基-1-酮的製備
白色固體1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-(喹啉-6-基氧基)乙基-1-酮(30mg，兩步收率58%)是由1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(喹啉-6-基氧基)乙基-1-酮(50mg，粗品)按照實施例21中的類似步驟製備而成。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 9.32和9.30(s,1H),8.85(d,J=3.3Hz,1H),8.39(d,J=7.9Hz,1H),8.00(d,J=9.2Hz,1H),7.94-7.92(m,1H),7.87(d,J=7.2Hz,1H),7.74和7.67(d,J=8.0Hz,1H),7.61(dd,J=8.3,4.5Hz,1H),7.58-7.52(m,3H),7.41(d,J=2.5Hz,1H),5.79(t,J=8.0Hz,1H),5.06-4.89(m,2H),4.40(t,J=13.0Hz,1H),4.01-3.86(m,3H),3.03(t,J=12.8Hz,1H),2.65-2.53(m,1H),2.23-2.12(m,1H),2.12-1.99(m,1H),1.81(t,J=15.3Hz,1H),1.69-1.53(m,2H),1.43-1.24(m,1H),1.22-1.06(m,1H)ppm.
LC-MS(m/z)：469(M+1)。
實施例24
2-((1H-吲哚-5-基)氧基)乙酸的製備
將2-((1H-吲哚-5-基)氧基)乙酸乙酯(200mg,0.913mmol)溶於甲醇(10mL)中，降溫到0℃，然後加入2.0M氫氧化鈉溶液(0.915mL,1.83mmol)。反應液在室溫下反應2h，加入20ml水，凍乾，得到白色固體2-((1H-吲哚-5-基)氧基)乙酸(200mg，粗品)，直接用於下一步反應。
LC-MS(m/z)：192(M+1)。
實施例25
2-((1H-吲哚-5-基)氧基)-1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-乙基-1-酮的製備
2-((1H-吲哚-5-基)氧基)-1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-乙基-1-酮(70mg,crude)是由2-((1H-吲哚-5-基)氧基)乙酸(90.4mg,0.473mmol)和2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)-1-(呱啶-4-基)乙基-1-酮鹽酸鹽(50mg,0.158mmol)按照實施例20中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：455(M+1)。
實施例26
2-((1H-吲哚-5-基)氧基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-乙基-1-酮的製備
白色固體2-((1H-吲哚-5-基)氧基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-乙基-1-酮(22mg，兩步收率27%)是由2-((1H-吲哚-5-基)氧基)-1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-乙基-1-酮(70mg，粗品)按照實施例21中的類似步驟製備而成。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 10.91(s,1H),7.94和7.92(s,1H),7.66-7.45(m,2H),7.38(t,J=7.5Hz,1H),7.28-7.25(m,3H),7.14和 7.12(s,1H),7.03(s,1H),6.74(d,J=8.5Hz,1H),6.31(s,1H),5.38(t,J=6.0Hz,1H),5.12-5.00(m,1H),4.77-4.57(m,2H),4.47-4.28(m,1H),4.01-3.85(m,1H),3.72-3.68(m,1H),2.97(t,J=12.3Hz,1H),2.26-1.98(m,1H),1.94-1.72(m,2H),1.67-1.48(m,2H),1.34-1.08(m,2H)ppm.
LC-MS(m/z)457(M+1)。
實施例27
3-(2-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-氧乙氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯的製備
3-(2-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-氧乙氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(60mg,53.6%)是由2-((1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-3-基)氧基)乙酸(59.5mg,0.243mmol)和2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)-1-(呱啶-4-基)乙基-1-酮鹽酸鹽(70mg,0.221mmol)按照實施例10中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：509(M+1)。
實施例28
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(吡咯烷-3-基氧基)乙基-1-酮的製備
3-(2-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-氧乙氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(60mg,0.118mmol)溶於1，4-二氧六環(10mL)中，降溫到0℃，加入1，4-二氧六環的鹽酸溶液(0.118mL,4M,0.472mmol)。反應液在室溫攪拌反應2h，用飽和碳酸氫鈉調節pH=7至8。反應液用乙酸乙酯(30mL×3)萃取，合併有機相，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮得到淡黃色固體產物1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(吡咯烷-3-基氧基)乙基-1-酮粗品(60mg)，直接用於下一步反應。
LC-MS(m/z)：409(M+1)。
實施例29
1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-(吡咯烷-3-基氧基)乙基-1-酮的製備
白色固體1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-(吡咯烷-3-基氧基)乙基-1-酮(19mg，兩步收率39.2%)是由1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(吡咯烷-3-基氧基)乙基-1-酮(60mg,crude)按照實施例21中的類似步驟製備而成。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 7.94和7.90(s,1H),7.60(d,J=7.5Hz,1H),7.57和7.49(d,J=7.5Hz,1H),7.38(t,J=7.5Hz,1H),7.27(t,J=7.6Hz,1H),7.14和7.12(s,1H),5.43和5.39(d,J=7.0Hz,1H),5.02(brs,1H),4.43-4.23(m,1H),4.17-3.94(m,3H),3.90-3.74(m,1H),3.72-3.63(m,1H),3.30-3.12(m,3H),2.94-2.59(m,3H),2.48-2.34(m,1H),2.08-2.07(m,1H),1.97-1.62(m,4H),1.58-1.53(m,2H),1.24-1.10(m,2H).
LC-MS(m/z)：411(M+1)。
實施例30
2-((9H-嘌呤-6-基)氧基)乙酸乙酯的製備
6-氯-9H-嘌呤(3.08g,20.0mmol)和DABCO(6.72g,60.0mmol)溶於DMSO(30mL)中，在20℃攪拌反應4h，然後升溫到35℃反應0.5h。該混合物加入到2-羥基乙酸乙酯(20.8g,200mmol)，NaH(6.40g,160mmol)和DMSO(30mL)生成的反應液中。該反應液在室溫攪拌過夜，濃縮，殘留物用2-甲基四氫呋喃(1L)稀釋，用飽和食鹽水(100mL×3)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，殘留物用EA/PE=1：1過柱純化得到黃色固體化合物2-((9H-嘌呤-6-基)氧基)乙酸乙酯(100mg,0.450mmol,2.25%)。
LC-MS(m/z)：223(M+1)。
實施例31
2-((9H-嘌呤-6-基)氧基)乙酸的製備
將2-((9H-嘌呤-6-基)氧基)乙酸乙酯(100mg,0.450mmol)、2N氫氧化鈉溶液(0.67mL,1.35mmol)加入到甲醇(5mL)中，室溫攪拌過夜，濃縮，殘留物用濃鹽酸調節pH=5.0，濃縮得到2-((9H-嘌呤-6-基)氧基)乙酸粗品(200mg)，直接用於下一步反應。
LC-MS(m/z)：195(M+1)。
實施例32
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-((7H-嘌呤-6-基)氧基)乙基-1-酮的製備
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-((7H-嘌呤-6-基)氧基)乙基-1-酮(90mg，粗品)是由2-((9H-嘌呤-6-基)氧基)乙酸(36.7mg,0.189mmol)和2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)-1-(呱啶-4-基)乙基-1-酮鹽酸鹽(50mg,0.158mmol)按照實施例10中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：458(M+1)。
實施例33
2-((7H-嘌呤-6-基)氧基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮的製備
白色固體2-((7H-嘌呤-6-基)氧基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮(21mg，兩步收率29%)是由1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-((7H-嘌呤-6-基)氧基)乙基-1-酮(90mg，粗品)按照實施例11中的類似步驟製備而成。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 13.44(s,1H),8.42-8.37(m,2H),8.01-7.91(m,1H),7.68-7.47(m,2H),7.39(t,J=7.5Hz,1H),7.28(t,J=7.6Hz,1H),7.15和7.12(s,1H),5.49-5.37(m,1H),5.37-5.23(m,2H),5.17和5.06(t,J=6.0Hz,1H),4.38-4.24(m,1H),3.94-3.80(m,1H), 3.78-3.66(m,1H),3.01(t,J=12.9Hz,1H),2.25-2.05(m,1H),1.95-1.50(m,4H),1.44-1.31(m,1H),1.21-1.08(m,1H)ppm.
LC-MS(m/z)：460(M+1)。
實施例34
2-(苯並[d]惡唑啉-2-基氧基)乙酸乙酯的製備
在0℃下，NaH(1.00g,25.0mmol)加入到THF(30mL)中，然後加入2-羥基乙酸乙酯(2.08g,20.0mmol)。反應液在0℃攪拌0.5h，然後加入2-氯苯並[d]惡唑啉(1.53g,10.0mmol)。反應液加熱回流反應3h，減壓回收部分溶劑後，用乙酸乙酯EA(100mL)稀釋。乙酸乙酯相用水(50mL)洗滌，飽和食鹽水(50mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物用乙酸乙酯/石油醚=1/20-1/10的淋洗劑過柱，得到油狀化合物2-(苯並[d]惡唑啉-2-基氧基)乙酸乙酯(1.11g,5.02mmols,50.2%)。
LC-MS(m/z)：222(M+1)。
實施例35
2-(苯並[d]惡唑啉-2-基氧基)乙酸的製備
取部分2-(苯並[d]惡唑啉-2-基氧基)乙酸乙酯(100mg,0.452mmol)溶於氫氧化鈉溶液(0.23mL,0.452mmol,2.0M)中，加入甲醇(5mL)，室溫攪拌反應過夜。反應液冷凍乾燥得到2-(苯並[d]惡唑啉-2-基氧基)乙酸(200mg,crude)粗品，直接用於下一步反應。
LC-MS(m/z)：194(M+1)。
實施例36
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(苯並[d]惡唑啉-2-基氧基)乙基-1-酮的製備
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(苯並[d]惡唑啉-2-基氧基)乙基-1-酮(90mg,crude)是由2-(苯並[d]惡唑啉-2-基氧基)乙酸(36.7mg,0.190mmol)和2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)-1-(呱啶-4-基)乙基-1-酮鹽酸鹽(50mg,0.158mmol)按照實施例10中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：457(M+1)。
實施例37
2-(苯並[d]惡唑啉-2-基氧基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮的製備
白色固體2-(苯並[d]惡唑啉-2-基氧基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮(14mg，兩步收率19.3%)是由1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(苯並[d]惡唑啉-2-基氧基)乙基-1-酮(90mg，粗品)按照實施例11中的類似步驟製備而成。
1H NMR(500MHz,DMSO-d 6 )δ 7.96和7.93(s,1H),7.62-7.50(m,3H),7.45(d,J=7.5Hz,1H),7.39(t,J=7.5Hz,1H),7.32-7.19(m,3H), 7.15和7.13(s,1H),5.48-5.37(m,1H),5.36-5.24(m,2H),5.16和5.05(t,J=6.9Hz,1H),4.37-4.27(m,1H),3.81-3.66(m,2H),2.99(t,J=12.5Hz,1H),2.54(t,J=12.5Hz,1H),2.26-1.74(m,3H),1.68-1.50(m,2H),1.42-1.28(m,1H),1.19-1.11(m,1H)ppm.
LC-MS(m/z)：459(M+1)。
實施例38
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(3-氯-4-氟苯氧基)乙基-1-酮的製備
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(3-氯-4-氟苯氧基)乙基-1-酮(90mg，粗品)是由2-(3-氯-4-氟苯氧基)乙酸(38.6mg,0.189mmol)和2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)-1-(呱啶-4-基)乙基-1-酮鹽酸鹽(50mg,0.158mmol)按照實施例20中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：468(M+1)。
實施例39
2-(3-氯-4-氟苯氧基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮的製備
白色固體2-(3-氯-4-氟苯氧基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮(10mg，兩步收率13.5%)是由1-(4-(2-(5H- 咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(3-氯-4-氟苯氧基)乙基-1-酮(90mg，粗品)按照實施例21中的類似步驟製備而成。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 7.94和7.91(s,1H),7.60(d,J=7.6Hz,1H),7.56和7.50(d,J=7.5Hz,1H),7.38(t,J=7.4Hz,1H),7.35-7.23(m,2H),7.19-7.07(m,2H),6.94-6.89(m,1H),5.47-5.32(m,1H),5.15-5.01(m,1H),4.91-4.74(m,2H),4.36(t,J=16.6Hz,1H),3.86-3.75(m,1H),3.74-3.64(m,1H),2.94(t,J=12.4Hz,1H),2.26-2.02(m,1H),1.95-1.74(m,2H),1.65-1.48(m,2H),1.37-1.21(m,1H),1.20-1.08(m,1H)ppm.
LC-MS(m/z)：470(M+1)。
實施例40
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(3-氯苯氧基)乙基-1-酮的製備
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(3-氯苯氧基)乙基-1-酮(55mg,86%)是由2-(3-氯苯氧基)乙酸(32mg,0.17mmol)和2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)-1-(呱啶-4-基)乙基-1-酮鹽酸鹽(40mg,0.142mmol)按照實施例20中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：450(M+1)。
實施例41
2-(3-氯苯氧基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮的製備
白色固體2-(3-氯苯氧基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮(13mg,30%)是由1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(3-氯苯氧基)乙基-1-酮(50mg,0.11mmol)按照實施例21中的類似步驟製備而成。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.808(s,1H)7.543(d,J=7.2Hz,1H),7.319-7.418(m,2H),7.238-7.275(m,1H),7.164-7.205(m,2H),6.921-6.959(m,2H),6.816(d,J=8Hz,1H),5.360-5.503(m,1H),4.609-4.695(m,3H),3.701-3.804(m,1H),3.020(t,J=12.8Hz,1H),2.558(t,J=12.8Hz,1H),2.057-2.292(m,2H),1.845-1.883(m,1H),1.52-1.714(m,2H),1.26-1.338(m,2H).
LC-MS(m/z)：452(M+1)。
實施例42
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(4-氟苯氧基)乙基-1-酮的製備
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(4-氟苯氧基)乙基-1-酮(180mg,crude)是由2-(4-氟苯氧基)乙酸(40.8mg,0.24mmol)和2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)-1-(呱啶-4-基)乙基-1-酮鹽酸鹽(63.4mg,0.2mmol)按照實施例20中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：434(M+1)。
實施例43
2-(4-氟苯氧基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮的製備
白色固體2-(4-氟苯氧基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮(20mg，兩步收率23%)是由1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(4-氟苯氧基)乙基-1-酮(100mg，粗品)按照實施例21中的類似步驟製備而成。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 7.94和7.91(s,1H),7.60(d,J=7.5Hz,1H),7.56和7.50(d,J=7.5Hz,1H),7.38(t,J=7.5Hz,1H),7.27(t,J=7.4Hz,1H),7.16-7.03(m,3H),6.92(dd,J=8.3,4.2Hz,2H),5.47-5.33(m,1H),5.17-4.98(m,1H),4.85-4.67(m,2H),4.45-4.31(m,1H),3.92-3.77(m,1H),3.75-3.63(m,1H),2.95(t,J=13.0Hz,1H),2.25-1.99(m,1H),1.93-1.83(m,1H),1.79(d,J=12.9Hz,1H),1.64-1.48(m,2H),1.36-1.22(m,1H),1.20-1.05(m,1H)ppm.
LC-MS(m/z)：436(M+1)。
實施例44
4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-甲酸叔丁酯的製備
4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-甲酸叔丁酯是由4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-甲酸叔丁酯按照實施例11中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：384(M+1)。
實施例45
2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)-1-(呱啶-4-基)-乙基-1-醇鹽酸鹽的製備
將4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-甲酸叔丁酯(380mg,1mmol)溶於二氯甲烷(10mL)，然後加入4N HCl/1,4-二氧六環(5mL)。在0℃下反應4小時，減壓濃縮得到黃色油狀物粗品2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)-1-(呱啶-4-基)-乙基-1-醇鹽酸鹽(241mg,85%)，直接用於下一步反應。
LC-MS(m/z)：284(M-HCl+1)。
實施例46
2-(3,4-二甲基苯氧基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮的製備
黃色固體2-(3,4-二甲基苯氧基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮(40mg,35.7%)是由2-(3,4-二甲基苯氧基) 乙酸(25mg,0.139mmol)和2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)-1-(呱啶-4-基)-乙基-1-醇鹽酸鹽(35.7mg,0.126mmol)按照實施例20中的類似步驟製備而成。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 7.94和7.91(s,1H),7.60(d,J=7.6Hz,1H),7.56和7.50(d,J=7.5Hz,1H),7.38(t,J=7.4Hz,1H),7.30-7.25(m,1H),7.14和7.12(s,1H),6.99(d,J=8.2Hz,1H),6.71(s,1H),6.62(d,J=8.2Hz,1H),5.46-5.35(m,1H),5.17-4.96(m,1H),4.75-4.61(m,2H),4.43-4.27(m,1H),3.95-3.79(m,1H),3.74-3.63(m,1H),3.00-2.90(m,1H),2.15(s,3H),2.11(s,3H),1.89-1.05(m,7H)ppm.
LC-MS(m/z)：446(M+1)。
實施例47
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(3-三氟甲基苯氧基)乙基-1-酮的製備
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(3-三氟甲基苯氧基)乙基-1-酮(90mg，粗品)是由2-(3-三氟甲基苯氧基)乙酸(41.6mg,0.189mmol)和2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)-1-(呱啶-4-基)乙基-1-酮鹽酸鹽(50mg,0.158mmol)按照實施例20中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：484(M+1)。
實施例48
2-(3-三氟甲基苯氧基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮的製備
白色固體2-(3-三氟甲基苯氧基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮(10mg，兩步收率15%)是由1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(3-三氟甲基苯氧基)乙基-1-酮(90mg,crude)按照實施例21中的類似步驟製備而成。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 7.94和7.91(s,1H),7.60(d,J=7.6Hz,1H),7.58-7.47(m,2H),7.38(t,J=7.5Hz,1H),7.30-7.25(m,2H),7.21(d,J=7.6Hz,2H),7.14和7.12(s,1H),5.47-5.34(m,1H),5.17-5.00(m,1H),4.99-4.85(m,2H),4.42-4.31(m,1H),3.92-3.78(m,1H),3.75-3.64(m,1H),2.96(t,J=12.8Hz,1H),2.24-2.02(m,1H),1.92-1.50(m,4H),1.36-1.24(m,1H),1.19-1.04(m,1H)ppm.LC-MS(m/z)486(M+1)。
實施例49
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(環己基氧基)乙基-1-酮的製備
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(環己基氧基)乙基-1-酮(80mg，粗品)是由2-(環己基氧基)乙酸(30mg,0.189mmol)和2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)-1-(呱啶-4-基)乙基-1-酮鹽酸鹽(50mg,0.158mmol)按照實施例20中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：422(M+1)。
實施例50
2-(環己基氧基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮的製備
白色固體2-(環己基氧基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮(10mg，兩步收率15%)是由1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(環己基氧基)乙基-1-酮(80mg，粗品)按照實施例21中的類似步驟製備而成。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 7.93和7.90(s,1H),7.60(d,J=7.5Hz,1H),7.56和7.50(d,J=7.5Hz,1H),7.38(t,J=7.5Hz,1H),7.27(t,J=7.5Hz,1H),7.14和7.11(s,1H),5.47-5.33(m,1H),5.11和5.00(t,J=5.0Hz,1H),4.36(t,J=13.9Hz,1H),4.14-4.00(m,2H),3.95-3.80(m,1H),3.67(t,J=9.9Hz,1H),3.30-3.20(m,1H),2.88(t,J=12.8Hz,1H),2.47-2.39(m,1H),2.25-2.01(m,1H),1.93-1.71(m,4H),1.63(s,2H),1.59-1.48(m,2H),1.48-1.39(m,1H),1.27-1.07(m,7H)ppm.
LC-MS(m/z)：424(M+1)。
實施例51
1-(二苯並[b,d]呋喃-2-基)乙基-1-酮的製備
二苯並[b,d]呋喃(5.0g,29mmol)溶於氯仿(50mL)中，加入三氯化鋁 AlCl3(4.8g,35.6mmol)和乙醯氯(2.8g,35.6mmol)的氯仿(50mL)溶液中。反應液在室溫下攪拌反應45min，傾倒到冰水(100mL)和1N HCl(50mL)配成的溶液中。水相用氯仿(2 x 30mL)萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，真空濃縮，殘留物用石油醚/乙酸乙酯=20：1的淋洗劑過柱純化，得到白色固體1-(二苯並[b,d]呋喃-2-基)乙基-1-酮(5.2g,90%)，直接用於下一步反應。
LC-MS(m/z)：211(M+1)。
實施例52
乙酸二苯並[b,d]呋喃-2-酯的製備
1-(二苯並[b,d]呋喃-2-基)乙基-1-酮(5.2g,24.8mmol)溶於二氯甲烷(150mL)中，降溫到0℃，加入三氟乙酸(8.5g,75mmol)和mCPBA(6.25g,28mmol)。反應液室溫下攪拌反應3d，用硫酸亞鐵淬滅，水洗，有機相用無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得到乙酸二苯並[b,d]呋喃-2-酯粗品。
LC-MS(m/z)：227(M+1)。
實施例53
2-羥基二苯並[b,d]呋喃的製備
乙酸二苯並[b,d]呋喃-2-酯粗品溶於甲醇(100mL)中，加入甲醇鈉(4g,75mmol)，然後室溫攪拌反應20min。反應液用2N HCl(50mL)淬滅，減壓回收有機溶劑，殘留物用水稀釋，用氯仿(2 x 50mL)萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物用石油醚/乙酸乙酯=10/1淋洗劑過柱純化，得到灰黃色固體2-羥基二苯並[b,d]呋喃(3.6g,78%)。
LC-MS(m/z)：185(M+1)。
實施例54
2-(二苯並[b,d]呋喃-2-基氧基)乙酸乙酯的製備
2-羥基二苯並[b,d]呋喃(1.84g,10mmol)，溴乙酸乙酯(2g,12mmol)和K2CO3(2.726g,20mmol)溶於乙腈(50mL)中，室溫攪拌過夜，反應液過濾，濾液濃縮，殘留物用乙酸乙酯/石油醚=1/10過柱，得到2-(二苯並[b,d]呋喃-2-基氧基)乙酸乙酯(2.5g,92%)，直接用於下一步反應。
LC-MS(m/z)：271(M+1)。
實施例55
2-(二苯並[b,d]呋喃-2-基氧基)乙酸的製備
2-(二苯並[b,d]呋喃-2-基氧基)乙酸乙酯(2.5g,9.3mmol)溶於甲醇(30ml)和THF(30ml)的混合物溶劑中，加入氫氧化鈉溶液(30ml,2N,60mmol)，反應液室溫攪拌過夜。停止反應，分出有機相，殘留物中加入水(50ml)，用1N鹽酸調節pH to 2~3，析出固體，過濾，濾餅用水(50ml)洗滌，乾燥得到白色固體2-(二苯並[b,d]呋喃-2-基氧基)乙酸(2g,89%)，直接用於下步反應。
LC-MS(m/z)：243(M+1)。
實施例56
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(二苯並[b,d]呋 喃-2-基氧基)乙基-1-酮的製備
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(二苯並[b,d]呋喃-2-基氧基)乙基-1-酮(90mg,crude)是由2-(二苯並[b,d]呋喃-2-基氧基)乙酸(46mg,0.189mmol)和2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)-1-(呱啶-4-基)乙基-1-酮鹽酸鹽(50mg,0.158mmol)按照實施例20中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：506(M+1)。
實施例57
2-(二苯並[b,d]呋喃-2-基氧基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮的製備
2-(二苯並[b,d]呋喃-2-基氧基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮(36mg，兩步收率45%)是由1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(二苯並[b,d]呋喃-2-基氧基)乙基-1-酮(90mg，粗品)按照實施例21中的類似步驟製備而成。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 8.09(d,J=7.0Hz,1H),7.96和7.92(s,1H),7.69-7.66(m,2H),7.63-7.49(m,4H),7.38(t,J=6.5Hz,2H),7.27(t,J=7.5Hz,1H),7.14-7.10(m,2H),5.41-5.39(m,1H),5.17和5.06(t,J=5.5Hz,1H),4.93-4.85(m,2H),4.41(t,J=14.5Hz,1H),3.93(t,J=16.3Hz,1H),3.72-3.71(m,1H),3.01(t,J=12.8Hz,1H),2.55-2.52(m,1H), 2.11-2.05(m,1H),1.91-1.58(m,4H),1.38-1.33(m,1H),1.23-1.13(m,1H)ppm.
LC-MS(m/z)：508(M+1)。
實施例58
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(甲基(苯基)氨基)乙基-1-酮的製備
2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)-1-(呱啶-4-基)乙基-1-酮鹽酸鹽(500mg,1.58mmol)，N-甲基-N-苯基甘氨酸(420mg,2.07mmol)和DIPEA(0.9mL,4.0mmol)溶於DMF(25mL)中，加入HOBT(250mg,1.85mmol)和EDCI(500mg,2.62mmol)，室溫反應過夜。反應液倒入300mL水中，調節pH值至8-10，析出固體，過濾獲得粗品，用DCM/MeOH=20/1過柱純化獲得1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(甲基(苯基)氨基)乙基-1-酮(390mg，收率57.7%)。
LC-MS(m/z)：429(M+1)。
實施例59
1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-(甲基(苯基)氨基)乙基-1-酮的製備
1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-(甲基 (苯基)氨基)乙基-1-酮(245mg,63%)是由1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(甲基(苯基)氨基)乙基-1-酮(390mg,0.91mmol)按照實施例7中的類似步驟製備而成。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 7.97(s,0.8H),7.94(s,0.2H),7.63~7.51(m,2H),7.41(t,J=7.5Hz,1H),7.30(t,J=7.5Hz,1H),7.17-7.11(m,3H),6.62-6.58(m,3H),5.15(d,J=5.4Hz,0.16H),5.04(d,J=5.4Hz,0.84H),4.37(t,J=13.0Hz,1H),4.23(s,2H),3.92(t,J=14.3Hz,1H),3.73-3.72(m,1H),3.00-2.93(m,4H),2.47-2.44(m,1H),2.22~2.06(m,1H),2.01-1.87(m,1H),1.82~1.79(m,1H),1.63~1.56(m,2H),1.31~1.27(m,1H),1.20-1.10(m,1H).
LC-MS(m/z)：431(M+1)。
實施例60
N-(3-氯苯基)-N-甲基甘氨酸乙酯的製備
往20ml的微波管中加入3-氯-N-甲基苯胺(300mg,2.13mmol)，2-溴乙酸乙酯(426mg,2.55mmol)，二異丙基乙胺(550mg,4.26mmol)和10ml乙腈，混合物在微波下和100攝氏度反應2小時，停止反應，冷卻到室溫，濃縮，剩餘物過柱(展開劑為石油醚：乙酸乙酯=10：1)得到化合物N-(3-氯苯基)-N-甲基甘氨酸乙酯(460mg，收率95%)。
LC-MS(m/z)：228(M+1)。
實施例61
N-(3-氯苯基)-N-甲基甘氨酸的製備
N-(3-氯苯基)-N-甲基甘氨酸乙酯(460mg,2.02mmol)溶解在甲醇(10ml)和四氫呋喃(10ml)，加入10ml氫氧化鋰(1摩爾/升)，混合液室溫反應3小時，停止反應，反應液用1摩爾/升的鹽酸調pH到6，用乙酸乙酯萃取3遍，合併的有機層用飽和食鹽水洗3次，無水硫酸鈉乾燥，過濾並且旋乾，剩餘物過柱(展開劑為石油醚：乙酸乙酯=2：1)得到白色固體N-(3-氯苯基)-N-甲基甘氨酸(260mg,65%)。
LC-MS(m/z)：200(M+1)。
實施例62
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-((3-氯苯基)(甲基)氨基)乙基-1-酮的製備
往100ml的圓底瓶中加入N-(3-氯苯基)-N-甲基甘氨酸(100mg,0.5mmol)，2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)-1-(呱啶-4-基)乙基-1-酮鹽酸鹽(150mg,0.5mmol)，HATU(285mg,0.75mmol)，二異丙基乙胺(322mg，2.5mmol)和二氯甲烷(30ml)，混合液室溫攪拌過夜，停止反應，反應液用水洗滌2遍，無水硫酸鈉乾燥，過濾，旋乾，剩餘物過柱(展開劑為二氯甲烷：甲醇=20：1)得到白色固體1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-((3-氯苯基)(甲基)氨基)乙基-1-酮(100mg,43%)。
LC-MS(m/z)：463(M+1)。
實施例63
2-((3-氯苯基)(甲基)氨基)-1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-乙基-1-酮的製備
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-((3-氯苯基)(甲基)氨基)乙基-1-酮(100mg,0.2mmol)溶解在10ml的甲醇中，冷卻到0℃，加入硼氫化鈉(38mg,1mmol)，0度反應2小時，停止反應，反應液倒入100ml的水中，乙酸乙酯萃取三遍，合併的有機相用飽和氯化鈉水溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，旋乾，剩餘物過柱(展開劑為二氯甲烷：甲醇=15：1)，得化合物白色固體2-((3-氯苯基)(甲基)氨基)-1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-乙基-1-酮(40mg,40%)。
1H NMR(400MHz,MeOD)δ 8.028(s,0.8H)7.973(s,0.2H),7.628(d,J=7.6Hz,1H),7.765(d,J=7.6Hz,0.8H),7.487(d,J=7.6Hz,0.2H),7.425(t,J=7.6Hz,1H),7.318-7.363(m,1H),7.168(s,1H),7.108(t,J=9.6Hz,1H),6.631(s,1H),6.589(t,J=9.6Hz,1H),5.453-5.546(m,1H),4.536(t,J=15.2Hz,1H),4.203-4.336(m,2H),4.002(t,J=15.2Hz,1H),3.725-3.824(m,1H),3.094(t,J=12.4Hz,1H),3.012(s,3H),2.621(t,J=12.4Hz,1H),2.069-2.362(m,2H),1.933(t,J=12Hz,1H),1.622-1.742(m,2H),1.218-1.447(m,2H).
LC-MS(m/z)：465(M+1)。
實施例64
(3-氯-4-氟苯基)甘氨酸乙酯的製備
往20ml的微波管中加入3-氯-4-氟苯胺(1000mg,6.89mmol)，2-溴乙酸乙酯(1720mg,10.3mmol)，二異丙基乙胺(2660mg,20.6mmol)和20ml乙腈，混合物在微波，100℃反應2小時，停止反應，冷卻到室溫，濃縮，剩餘物過柱(展開劑為石油醚：乙酸乙酯=10：1)得到黃色油狀物(3-氯-4-氟苯基)甘氨酸乙酯(820mg,51%)。
LC-MS(m/z)：232(M+1)。
實施例65
N-(3-氯-4-氟苯基)-N-甲基甘氨酸乙酯的製備
(3-氯-4-氟苯基)甘氨酸乙酯(400mg,1.73mmol)溶解在DMF(10ml)中，向其中加入碳酸銫(1680mg,5.19mmol)和碘甲烷(1220mg,8.65mmol)。混合液在50度下攪拌16小時。反應液冷卻到室溫，用乙酸乙酯(30ml)稀釋後用飽和食鹽水(30ml)洗4遍。有機相用無水硫酸鈉乾燥後旋乾，剩餘物過柱(展開劑為石油醚：乙酸乙酯=10：1)得到淡黃色固體N-(3-氯-4-氟苯基)-N-甲基甘氨酸乙酯(360mg,85%)。
LC-MS(m/z)：246(M+1)。
實施例66
N-(3-氯-4-氟苯基)-N-甲基甘氨酸的製備
灰白色固體N-(3-氯-4-氟苯基)-N-甲基甘氨酸(170mg,95%)是由N-(3-氯-4-氟苯基)-N-甲基甘氨酸乙酯(200mg,0.816mmol)按照實施例61中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：218(M+1)。
實施例67
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-((3-氯-4-氟苯基)(甲基)氨基)乙基-1-酮的製備
黃色油狀物1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-((3-氯-4-氟苯基)(甲基)氨基)乙基-1-酮(130mg,51%)是由N-(3-氯-4-氟苯基)-N-甲基甘氨酸(150mg,0.69mmol)和2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)-1-(呱啶-4-基)乙基-1-酮鹽酸鹽(150mg,0.53mmol)按照實施例62中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：481(M+1)。
實施例68
2-((3-氯-4-氟苯基)(甲基)氨基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮的製備
白色固體2-((3-氯-4-氟苯基)(甲基)氨基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮(80mg,61%)是由1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-((3-氯-4-氟苯基)(甲基)氨基)乙基-1-酮(130mg,0.27mmol)按照實施例63中的類似步驟製備而成。
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 8.10(s,1H),7.66~7.49(m,2H),7.43(t,J =8Hz,1H),7.36(t,J=6Hz,1H),7.22(s,1H),7.01(t,J=8Hz,1H),6.69~6.67(m,1H),6.58~6.56(m,1H),5.50~5.47(m,1H),4.56~4.49(t,J=14Hz,1H),4.29~4.17(m,2H),3.98(t,J=16Hz,1H),3.82~3.78(m,1H),3.11~3.04(m,1H),2.98(s,3H),2.61(t,J=14Hz,1H),2.18~2.12(m,2H),1.95~1.92(m,1H),1.70~1.65(m,2H),1.33~1.22(m,2H).
LC-MS(m/z)：483(M+1)。
實施例69
N-(4-氟苯基)-N-甲基甘氨酸乙酯的製備
黃色油狀物N-(4-氟苯基)-N-甲基甘氨酸乙酯(0.8g,95%)是由4-氟-N-甲基苯胺(500mg,4mmol)和2-溴乙酸乙酯(1.33g,8mmol)按照實施例60中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：212(M+1)。
實施例70
N-(4-氟苯基)-N-甲基甘氨酸的製備
黃色油狀物N-(4-氟苯基)-N-甲基甘氨酸(600mg,98%)是由N-(4-氟苯基)-N-甲基甘氨酸乙酯(700mg,3.3mmol)按照實施例61中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：184(M+1)。
實施例71
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-((4-氟苯基)(甲基)氨基)乙基-1-酮的製備
黃色油狀物1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-((4-氟苯基)(甲基)氨基)乙基-1-酮(50mg,24%)是由N-(4-氟苯基)-N-甲基甘氨酸(110mg,0.6mmol)和2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)-1-(呱啶-4-基)乙基-1-酮鹽酸鹽(130mg,0.46mmol)按照實施例62中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：447(M+1)。
實施例72
2-((4-氟苯基)(甲基)氨基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮的製備
白色固體2-((4-氟苯基)(甲基)氨基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮(35mg,70%)是由1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-((4-氟苯基)(甲基)氨基)乙基-1-酮(50mg,0.11mmol)按照實施例63中的類似步驟製備而成。
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 8.00(s,1H),7.64~7.48(m,2H),7.42(t,J=6Hz,1H),7.33(t,J=8Hz,1H),7.15(s,1H),6.90(t,J=8Hz,2H),6.67~6.65(m,2H),5.50~5.44(m,1H),4.53(t,J=14Hz,1H),4.26~4.13(m, 2H),4.01(t,J=16Hz,1H),3.80~3.73(m,1H),3.10~3.03(m,1H),2.98(s,3H),2.60(t,J=14Hz,1H),2.21~2.03(m,2H),1.94~1.89(m,1H),1.72~1.64(m,2H),1.27~1.19(m,2H).
LC-MS(m/z)：449(M+1)。
實施例73
(3,4-二甲基苯基)甘氨酸乙酯的製備
(3,4-二甲基苯基)甘氨酸乙酯(320mg,38%)是由3,4-二甲基苯胺(500mg,4.1mmol)和2-溴乙酸乙酯(897mg,5.4mmol)按照實施例64中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：208(M+1)。
實施例74
N-(3,4-二甲基苯基)-N-甲基甘氨酸乙酯的製備
白色固體N-(3,4-二苯基)-N-甲基甘氨酸乙酯(130mg,40%)是由(3,4-二甲基苯基)甘氨酸乙酯(300mg,1.45mmol)和碘甲烷(1.02g,7.25mmol)按照實施例65中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：222(M+1)。
實施例75
N-(3,4-二甲基苯基)-N-甲基甘氨酸的製備
白色固體N-(3,4-二甲基苯基)-N-甲基甘氨酸(100mg,88%)是由N-(3,4-二甲基苯基)-N-甲基甘氨酸乙酯(130mg,0.59mmol)按照實施例66中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：194(M+1)。
實施例76
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-((3,4-二甲基苯基)(甲基)氨基)乙基-1-酮的製備
黃色油狀物1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-((3,4-二甲基苯基)(甲基)氨基)乙基-1-酮(130mg,50%)是由N-(3,4-二甲基苯基)-N-甲基甘氨酸(100mg,0.65mmol)和2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)-1-(呱啶-4-基)乙基-1-酮鹽酸鹽(160mg,0.5mmol)按照實施例67中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：457(M+1)。
實施例77
2-((3,4-二甲基苯基)(甲基)氨基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮的製備
白色固體2-((3,4-二甲基苯基)(甲基)氨基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮(80mg,60%)是由1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-((3,4-二甲基苯基)(甲基)氨基)乙基-1-酮(130mg,0.29mmol)按照實施例68中的類似步驟製備而成。
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 8.00(s,1H),7.64~7.55(m,2H),7.42(t,J=6Hz,1H),7.33(t,J=8Hz,1H),7.15(s,1H),6.90(d,J=4Hz,1H),6.51(s,1H),6.44(d,J=4Hz,1H),5.45~5.42(m,1H),4.54(t,J=14Hz,1H),4.18~4.06(m,3H),3.80~3.77(m,1H),3.09~3.02(m,1H),2.95(s,3H),2.59(t,J=12Hz,1H),2.18~2.07(m,8H),1.91~1.88(m,1H),1.70~1.63(m,2H),1.37~1.22(m,2H).
LC-MS(m/z)：459(M+1)。
實施例78
N-乙基-N-苯基甘氨酸乙酯的製備
N-乙基-N-苯基甘氨酸乙酯(3.2g,85%)是由N-乙基苯胺(2.0g,16.5mmol)和2-溴乙酸乙酯(4.11g,24.8mmol)按照實施例60中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：208(M+1)。
實施例79
N-乙基-N-苯基甘氨酸的製備
白色固體N-乙基-N-苯基甘氨酸(90mg，粗品)是由N-乙基-N-苯基甘氨酸乙酯(100mg,0.452mmol)按照實施例61中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：180(M+1)。
實施例80
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(乙基(苯基)氨基)乙基-1-酮的製備
褐色固體1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(乙基(苯基)氨基)乙基-1-酮(70mg，粗品)是由N-乙基-N-苯基甘氨酸(79mg,0.442mmol)和2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)-1-(呱啶-4-基)乙基-1-酮鹽酸鹽(70mg,0.221mmol)按照實施例62中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：443(M+1)。
實施例81
2-(乙基(苯基)氨基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮的製備
白色固體2-(乙基(苯基)氨基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮(15mg,21.3%)是由1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(乙基(苯基)氨基)乙基-1-酮(70mg,0.158mmol)按照實施例63中的類似步驟製備而成。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 7.95(s,1H),7.61~7.57(m,2H),7.39(t,J=12Hz,1H),7.29(t,J=12Hz,1H),7.15~7.08(m,3H),6.56~6.52(m,3H),5.41~5.38(m,1H),5.02(s,1H),4.41~4.36(m,1H),4.13(s,2H),3.98~3.90(m,1H),3.71~3.70(m,1H),3.38(s,1H),2.96~2.93(m,1H),2.47~2.45(m,1H),2.08~2.06(m,1H),1.91~1.88(m,1H),1.80~1.78(m,1H),1.58~1.53(m,2H),1.29~1.22(m,1H),1.13~1.07(m,4H).
LC-MS(m/z)：445(M+1)。
實施例82
N-(叔丁氧基羰基)-N-苯基甘氨酸的製備
將苯基甘氨酸(1.51g,10mmol),(Boc)2O(3.27g,15mmol)和碳酸鈉(2.12g,20mmol)溶於甲醇(50mL)和水(20mmol)中，補加碳酸鈉(1.06g,10mmol)使pH值在9-10之間，室溫反應過夜。反應完全後，反應液中加水(40mL)稀釋，鹽酸調pH值1-2，用二氯甲烷(40mL*2)萃取，水洗(20mL*2)，有機相減壓濃縮，獲得棕褐色液體N-(叔丁氧基羰基)-N-苯基甘氨酸(2.49g，收率98%)。
LC-MS(m/z)：252(M+1)。
實施例83
(2-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-氧基乙基)(苯基) 甲酸叔丁酯的製備
(2-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-氧基乙基)(苯基)甲酸叔丁酯(900mg,57%)是由N-(叔丁氧基羰基)-N-苯基甘氨酸(1.0g,4mmol)和2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)-1-(呱啶-4-基)乙基-1-酮鹽酸鹽(837mg,2.64mmol)按照實施例58中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：515(M+1)。
實施例84
2-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-氧基乙基)(苯基)甲酸叔丁酯的製備
(2-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-氧基乙基)(苯基)甲酸叔丁酯(600mg,67%)是由(2-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-氧基乙基)(苯基)甲酸叔丁酯(900mg,1.75mmol)按照實施例7中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：517(M+1)。
實施例85
1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-(苯基氨基)乙基-1-酮的製備
將(2-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-氧基乙基)(苯基)甲酸叔丁酯(600mg,1.45mmol)溶於二氯甲烷(20mL)中，加入濃鹽酸(2mL)室溫反應3小時。減壓濃縮得到殘留物，倒入水(300mL)中，調pH值至8-9，析出固體，過濾獲得固體用DCM/MeOH=10/1過柱純化得到1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-(苯基氨基)乙基-1-酮(225mg，收率46.5%)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 7.96(s,0.8H),7.92(s,0.2H),7.63~7.51(m,2H),7.40(t,J=7.5Hz,1H),7.29(t,J=7.5Hz,1H),7.16(s,0.2H),7.14(s,0.8H),7.08(t,J=7.6Hz,2H),6.66(d,J=7.9Hz,2H),6.57(t,J=7.1Hz,1H),5.51(s,br,1H),5.41(t,J=6.5Hz,1H),5.14(d,J=5.8Hz,0.16H),5.03(d,J=5.8Hz,0.84H),4.45(t,J=13.5Hz,1H),3.97(t,J=14.5Hz,1H),3.88(s,2H),3.71(s,br,1H),2.96(t,J=12.9Hz,1H),2.12~2.05(m,1H),1.93-1.80(m,2H),1.64~1.54(m,2H),1.32~1.15(m,2H).
LC-MS(m/z)：417(M+1)。
實施例86
N-甲基-N-(4-三氟甲基苯基)甘氨酸乙酯的製備
黃色油狀物N-甲基-N-(4-三氟甲基苯基)甘氨酸乙酯(630mg,84%)是由N-甲基-4-三氟甲基苯胺(500mg,2.86mmol)和2-溴乙酸乙酯(0.96g,5.72mmol)按照實施例60中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：262(M+1)。
實施例87
N-甲基-N-(4-三氟甲基苯基)甘氨酸的製備
淡黃色油狀物N-甲基-N-(4-三氟甲基苯基)甘氨酸(470mg,87%)是由N-甲基-N-(4-三氟甲基苯基)甘氨酸乙酯(600mg,2.3mmol)按照實施例61中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：234(M+1)。
實施例88
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(甲基(4-三氟甲基苯基)氨基)乙基-1-酮的製備
黃色油狀物1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(甲基(4-三氟甲基苯基)氨基)乙基-1-酮(60mg,26%)是由N-甲基-N-(4-三氟甲基苯基)甘氨酸(140mg,0.6mmol)和2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)-1-(呱啶-4-基)乙基-1-酮鹽酸鹽(130mg,0.46mmol)按照實施例62中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：497(M+1)。
實施例89
1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-(甲基(4-三 氟甲基苯基)氨基)乙基-1-酮的製備
白色固體1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-(甲基(4-三氟甲基苯基)氨基)乙基-1-酮(35mg,58%)是由1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(甲基(4-三氟甲基苯基)氨基)乙基-1-酮(60mg,0.12mmol)按照實施例63中的類似步驟製備而成。
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 8.28(s,1H),7.69~7.58(m,2H),7.47~7.36(m,4H),7.30~7.28(m,1H),6.73(d,J=8Hz,2H),5.63~5.53(m,1H),4.52(t,J=14Hz,1H),4.40~4.28(m,2H),4.00(t,J=18Hz,1H),3.80~3.69(m,1H),3.13~3.02(m,4H),2.61(t,J=12Hz,1H),2.20~2.15(m,2H),1.94~1.88(m,1H),1.75~1.58(m,2H),1.45~1.37(m,2H).
LC-MS(m/z)：499(M+1)。
實施例90
(3-三氟甲基苯基)甘氨酸乙酯的製備
黃色油狀物(3-三氟甲基苯基)甘氨酸乙酯(850mg,55%)是由3-三氟甲基苯胺(1g,6.2mmol)和2-溴乙酸乙酯(1.55g,9.3mmol)按照實施例64中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：248(M+1)。
實施例91
N-甲基-N-(3-三氟甲基苯基)甘氨酸乙酯的製備
白色固體N-甲基-N-(3-三氟甲基苯基)甘氨酸乙酯(430mg,81%)是由N-甲基-3-三氟甲基苯胺(500mg,2.02mmol)和碘甲烷(1.43g,10.1mmol)按照實施例65中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：262(M+1)。
實施例92
N-甲基-N-(3-三氟甲基苯基)甘氨酸的製備
黃色油狀物N-甲基-N-(3-三氟甲基苯基)甘氨酸(320mg,90%)是由N-甲基-N-(3-三氟甲基苯基)甘氨酸乙酯(400mg,1.5mmol)按照實施例66中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：234(M+1)。
實施例93
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(甲基(3-三氟甲基苯基)氨基)乙基-1-酮的製備
黃色油狀物1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1- 基)-2-(甲基(3-三氟甲基苯基)氨基)乙基-1-酮(60mg,24%)是由N-甲基-N-(3-三氟甲基苯基)甘氨酸(151mg,0.65mmol)和2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)-1-(呱啶-4-基)乙基-1-酮鹽酸鹽(140mg,0.5mmol)按照實施例58中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：497(M+1)。
實施例94
1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-(甲基(3-三氟甲基苯基)氨基)乙基-1-酮的製備
白色固體1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-(甲基(3-三氟甲基苯基)氨基)乙基-1-酮(35mg,58%)是由1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(甲基(3-三氟甲基苯基)氨基)乙基-1-酮(60mg,0.12mmol)按照實施例7中的類似步驟製備而成。
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 8.02(s,1H),7.64~7.56(m,2H),7.44~7.40(m,1H),7.35~7.29(m,2H),7.16(s,1H),6.91~6.86(m,3H),5.54~5.45(m,1H),4.53(t,J=20Hz,1H),4.40~4.26(m,2H),4.02(t,J=18Hz,1H),3.82~3.77(m,1H),3.13~3.06(m,4H),2.62(t,J=12Hz,1H),2.20~2.15(m,2H),1.98~1.90(m,1H),1.75~1.61(m,2H),1.43~1.34(m,2H).
LC-MS(m/z)：499(M+1)。
實施例95
N-(4-腈基苯基)-N-甲基甘氨酸乙酯的製備
黃色油狀物-N-(4-腈基苯基)-N-甲基甘氨酸乙酯(260mg,32%)是由N-甲基-4-腈基苯胺(500mg,3.79mmol)和2-溴乙酸乙酯(759mg,4.55mmol)按照實施例60中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：219(M+1)。
實施例96
N-(4-腈基苯基)-N-甲基甘氨酸的製備
黃色油狀物N-(4-腈基苯基)-N-甲基甘氨酸(250mg,92%)是由N-(4-腈基苯基)-N-甲基甘氨酸乙酯(310mg,1.42mmol)按照實施例61中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)191：(M+1)。
實施例97
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-((4-腈基苯基)(甲基)氨基)乙基-1-酮的製備
白色固體1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-((4-腈基苯基)(甲基)氨基)乙基-1-酮(100mg,63%)是由N-(4-腈基苯 基)-N-甲基甘氨酸(74mg,0.39mmol)和2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)-1-(呱啶-4-基)乙基-1-酮鹽酸鹽(100mg,0.36mmol)按照實施例62中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：454(M+1)。
實施例98
2-((4-腈基苯基)(甲基)氨基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮的製備
白色固體2-((4-腈基苯基)(甲基)氨基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮(45mg,45%)是由1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-((4-腈基苯基)(甲基)氨基)乙基-1-酮(100mg,0.22mmol)按照實施例63中的類似步驟製備而成。
1HNMR(400MHz,CD3OD)δ 8.006(d,1H)7.622(d,J=7.6Hz,1H),7.563(d,J=7.6,1H),7.403-7.504(m,3H),7.335(t,J=7.6Hz,1H),7.157(d,1H),6.703-6.731(m,2H),5.448-5.537(m,1H),4.528(t,J=16Hz,1H),4.325-4.439(m,2H),3.974(t,J=16Hz,1H),3.751-3.819(m,1H),3.078-3.134(m,4H),2.624(t,J=13.6Hz,1H),2.067-2.367(m,2H),1.939(t,J=13.6Hz,1H),1.610-1.802(m,2H),1.212-1.482(m,2H).
LC-MS(m/z)：456(M+1)。
實施例99
N-(3-甲氧基苯基)-N-甲基甘氨酸乙酯的製備
N-(3-甲氧基苯基)-N-甲基甘氨酸乙酯(400mg,49%)是由3-甲氧基-N-甲基苯胺(500mg,3.65mmol)和2-溴乙酸乙酯(731mg,4.38mmol)按照實施例60中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：224(M+1)。
實施例100
N-(3-甲氧基苯基)-N-甲基甘氨酸的製備
N-(3-甲氧基苯基)-N-甲基甘氨酸(300mg,85%)是由N-(3-甲氧基苯基)-N-甲基甘氨酸乙酯(400mg,1.8mmol)按照實施例61中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：196(M+1)。
實施例101
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-((3-甲氧基苯基)(甲基)氨基)乙基-1-酮的製備
白色固體1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-((3-甲氧基苯基)(甲基)氨基)乙基-1-酮(100mg,61%)是由N-(3-甲氧基 苯基)-N-甲基甘氨酸(76mg,0.39mmol)和2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)-1-(呱啶-4-基)乙基-1-酮鹽酸鹽(100mg,0.36mmol)按照實施例62中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：459(M+1)。
實施例102
2-((3-甲氧基苯基)(甲基)氨基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮的製備
白色固體2-((3-甲氧基苯基)(甲基)氨基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮(55mg,55%)是由1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-((3-甲氧基苯基)(甲基)氨基)乙基-1-酮(100mg,0.22mmol)按照實施例63中的類似步驟製備而成。
1HNMR(400MHz,CD3OD)δ 8.032(s,1H),7.629(d,J=7.6Hz,1H),7.580(d,J=7.6Hz,1H),7.427(t,J=7.6Hz,1H),7.339(t,J=7.6Hz,1H),7.172(s,1H),7.056(t,J=8Hz,1H),6.272(t,J=9.6Hz,2H),6.194(s,1H),5.445-5.541(m,1H),4.543(t,J=15.2Hz,1H),4.141-4.290(m,2H),4.023(t,J=15.2Hz,1H),3.764-3.811(m,1H),3.723(s,3H),3.076(t,J=12.8Hz,1H),3.002(s,3H),2.608(t,J=12.8Hz,1H),2.032-2.348(m,2H),1.911(t,J=11.2Hz,1H),1.615-1.783(m,2H),1.192-1.423(m,2H).
ESI LC-MS(m/z)：461(M+1)。
實施例103
N-甲基-N-(4-硝基苯基)甘氨酸的製備
0℃下將NaH(60% in mineral oil,960mg,24mmol)加入N-甲基-4-硝基苯胺(3g,20mmol)的四氫呋喃溶液中(50ml)。0℃下攪拌0.5小時後向此反應液加入2-溴乙酸乙酯(3.65g,22mmol)。在室溫下反應2小時。然後加入NaOH溶液(1N,40ml,40mmol)，繼續反應1小時。停止反應，反應液倒入100ml水中，用乙酸乙酯萃取兩次(100ml X 2)，合併的有機相用飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，旋乾，剩餘物過柱(展開劑為二氯甲烷：甲醇=30：1)得到黃色固體N-(4-硝基苯基)-N-甲基甘氨酸(1.2g,28.6%)。
LC-MS(m/z)：211(M+1)。
實施例104
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(甲基(4-硝基苯基)氨基)乙基-1-酮的製備
黃色固體1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(甲基(4-硝基苯基)氨基)乙基-1-酮(70mg,55%)是由N-甲基-N-(4-硝基苯基)甘氨酸(50mg,0.23mmol)和2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)-1-(呱啶-4-基)乙基-1-酮鹽酸鹽(60mg,0.21mmol)按照實施例62中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：474(M+1)。
實施例105
1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-(甲基(4-硝基苯基)氨基)乙基-1-酮的製備
黃色固體1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-(甲基(4-硝基苯基)氨基)乙基-1-酮(30mg,42%)是由1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(甲基(4-硝基苯基)氨基)乙基-1-酮(70mg,0.15mmol)按照實施例63中的類似步驟製備而成。
1HNMR(400MHz,MeOD)δ 8.079(d,J=9.6Hz,2H)8.015(s,1H),7.627(d,J=7.6Hz,1H),7.590(d,J=7.6Hz,1H),7.426(t,J=7.6Hz,1H),7.340(t,J=7.6Hz,1H),7.162(s,1H),6.702(d,J=9.6Hz,2H),4.462-5.556(m,1H),4.407-4.577(m,2H),3.982(t,J=13.2Hz,1H),3.730-3.830(m,1H),3.091-3.150(m,4H),2.642(t,J=13.2Hz,1H),2.110-2.200(m,1H),1.949(t,J=15.6Hz,1H),1.614-1.762(m,2H),1.278-1.461(m,3H).
LC-MS(m/z)：476(M+1)。
實施例106
N-甲基-N-(吡啶-2-基)甘氨酸乙酯的製備
黃色油狀物N-甲基-N-(吡啶-2-基)甘氨酸乙酯(650mg,60%)是由N-甲基-吡啶-2-胺(600mg,5.5mmol)和2-溴乙酸乙酯(1.39g,8.3mmol)按照實施例60 中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：195(M+1)。
實施例107
N-甲基-N-(吡啶-2-基)甘氨酸的製備
黃色油狀物N-甲基-N-(吡啶-2-基)甘氨酸(160mg,93%)是由N-甲基-N-(吡啶-2-基)甘氨酸乙酯(200mg,1.03mmol)按照實施例61中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：167(M+1)。
實施例108
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(甲基(吡啶-2-基)氨基)乙基-1-酮的製備
黃色油狀物1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(甲基(吡啶-2-基)氨基)乙基-1-酮(70mg,29%)是由N-甲基-N-(吡啶-2-基)甘氨酸(122mg,0.74mmol)和2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)-1-(呱啶-4-基)乙基-1-酮鹽酸鹽(160mg,0.57mmol)按照實施例58中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：430(M+1)。
實施例109
1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-(甲基(吡啶-2-基)氨基)乙基-1-酮的製備
白色固體1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-(甲基(吡啶-2-基)氨基)乙基-1-酮(19mg,27%)是由1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(甲基(吡啶-2-基)乙基-1-酮(70mg,0.16mmol)按照實施例7中的類似步驟製備而成。
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 8.02~7.97(m,2H),7.64~7.62(d,J=8Hz,1H),7.58~7.50(m,2H),7.42(t,J=16Hz,1H),7.33(t,J=16Hz,1H),7.16(s,1H),6.66(d,J=8Hz,1H),6.60(t,J=12Hz,1H),5.48~5.45(m,1H),4.56~4.41(m,3H),4.06~3.98(m,1H),3.87~3.78(m,1H),3.12~3.07(m,4H),2.60(t,J=12Hz,1H),2.18~2.10(m,2H),1.94~1.88(m,1H),1.68~1.59(m,2H),1.43~1.35(m,2H).
LC-MS(m/z)：432(M+1)。
實施例110
喹啉-6-基甘氨酸乙酯的製備
往100ml的梨型燒瓶中加入6-氨基喹啉(2000mg,13.9mmol)，2-溴乙酸乙酯(3479mg,20.8mmol)，二異丙基乙胺(5375mg,41.6mmol)和30ml 乙腈，混合物在50攝氏度反應16小時，停止反應，冷卻到室溫，濃縮，剩餘物過柱(展開劑為石油醚：乙酸乙酯=10：1)得到喹啉-6-基甘氨酸乙酯(1200mg，收率37%)。
LC-MS(m/z)：231(M+1)。
實施例111
N-甲基-N-(喹啉-6-基)甘氨酸的製備
喹啉-6-基甘氨酸乙酯(1200mg,5.21mmol)溶解在甲醇(20ml)中，向其中加入甲醛(1513mg,52.1mmol)，反應液在室溫下攪拌2小時，再向其中加入氰基硼氫化鈉(1643mg,26.1mmol)。混合液在室溫下攪拌16小時。50ml水加入到反應液中，再用乙酸乙酯(30ml)萃取一遍，取水相用1摩爾每升的鹽酸水溶液調節pH值到5~6，再用二氯甲烷/異丙醇(v/v=3/1,30ml)萃取三遍。合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥後旋乾得到黃色油狀物N-甲基-N-(喹啉-6-基)甘氨酸(310mg,28%)。
LC-MS(m/z)：217(M+1)。
實施例112
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(甲基(喹啉-6-基)氨基)乙基-1-酮的製備
黃色油狀物1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(甲基(喹啉-6-基)氨基)乙基-1-酮(45mg,26%)是由N-甲基-N-(喹啉-6-基)甘氨酸(100mg,0.46mmol)和2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)-1-(呱啶-4-基)乙基-1-酮鹽酸鹽(100mg,0.36mmol)按照實施例62中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：480(M+1)。
實施例113
1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-(甲基(喹啉-6-基)氨基)乙基-1-酮的製備
淺黃色固體1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-(甲基(喹啉-6-基)氨基)乙基-1-酮(15mg,33%)是由1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(甲基(喹啉-6-基)乙基-1-酮(45mg,0.09mmol)按照實施例63中的類似步驟製備而成。
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 8.50(s,1H),8.11(d,J=8Hz,1H),8.04(s,1H),7.84(d,J=8Hz,1H),7.64(d,J=8Hz,1H),7.58(d,J=8Hz,1H),7.45~7.32(m,4H),7.17(s,1H),6.91(s,1H),5.49~5.46(m,1H),4.63~4.42(m,3H),4.09~4.02(m,1H),3.82~3.81(m,1H),3.19~3.09(m,4H),2.64(t,J=14Hz,1H),2.22~2.10(m,2H),1.99~1.90(m,1H),1.78~1.62(m,2H),1.47~1.37(m,2H)。
LC-MS(m/z)：482(M+1)。
實施例114
N-甲基-9-(四氫-2H-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-胺的製備
向100ml梨形燒瓶中加入6-氯-9-(四氫-2H-吡喃-2-基)-9H-嘌呤(1500mg,6.3mmol)和甲胺醇溶液(30ml)。反應液在75度下攪拌5小時。旋乾後得到黃色油狀物N-甲基-9-(四氫-2H-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-胺(900mg,61%)。
LC-MS(m/z)：234(M+1)。
實施例115
N-甲基-N-(9-(四氫-2H-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基)甘氨酸乙酯的製備
將N-甲基-9-(四氫-2H-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-胺(900mg，3.86mmol)和DMF(10ml)加入圓底燒瓶中，在0℃下加入氫化鈉(60%含量)(310mg,7.72mmol)。反應液在35度下攪拌1小時。再向反應液中加入2-溴乙酸乙酯(967mg，5.79mmol)。反應液在35度下攪拌3小時。加入20ml水進行粹滅。之後加入乙酸乙酯(50ml)，再用飽和食鹽水(40ml)洗4遍。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並且旋乾，剩餘物過柱(展開劑為二氯甲烷：甲醇=20：1)得到白色固體N-甲基-N-(9-(四氫-2H-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基)甘氨酸乙酯(1100mg，收率：89%)。
LC-MS(m/z)：320(M+1)。
實施例116
N-甲基-N-(9-(四氫-2H-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基)甘氨酸的製備
N-甲基-N-(9-(四氫-2H-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基)甘氨酸乙酯(550mg,1.72mmol)溶解在甲醇(10ml)和四氫呋喃(10ml)，加入10ml氫氧化鋰(1摩爾/升)，混合液室溫反應3小時，停止反應，反應液用1摩爾/升的鹽酸調pH到6，用乙酸乙酯萃取3遍，合併的有機層用飽和食鹽水洗3次，無水硫酸鈉乾燥，過濾並且旋乾得到白色固體N-甲基-N-(9-(四氫-2H-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基)甘氨酸(430mg,86%)。
LC-MS(m/z)：292(M+1)。
實施例117
N-甲基-N-(9H-嘌呤-6-基)甘氨酸的製備
N-甲基-N-(9-(四氫-2H-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基)甘氨酸(170毫克，0.58毫摩爾)溶解在鹽酸/二氧六環溶液(10毫升)和DMF(0.5毫升)中。反應液在室溫下攪拌1小時。旋乾得到黃色油狀物N-甲基-N-(9H-嘌呤-6-基)甘氨酸(130毫克，92%)。LC-MS(m/z)208(M-HCl+1)。
實施例118
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(甲基(7H-嘌呤-6-基)氨基)乙基-1-酮的製備
黃色油狀物1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(甲基(7H-嘌呤-6-基)氨基)乙基-1-酮(60mg,24%)是由N-甲基-N-(9H-嘌呤-6-基)甘氨酸(130mg,0.69mmol)和2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)-1-(呱啶-4-基)乙基-1-酮鹽酸鹽(150mg,0.54mmol)按照實施例62中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：471(M+1)。
實施例119
1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-(甲基(7H-嘌呤-6-基)氨基)乙基-1-酮的製備
白色固體1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-(甲基(7H-嘌呤-6-基)氨基)乙基-1-酮(13mg,22%)是由1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(甲基(7H-嘌呤-6-基)乙基-1-酮(60mg,0.13mmol)按照實施例63中的類似步驟製備而成。
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 8.21(s,1H),8.03~7.90(m,2H),7.64~7.57(m,2H),7.44~7.32(m,2H),7.17(s,1H),5.49~5.46(m,1H),4.51(t,J=14Hz,1H),4.08~4.00(m,1H),3.82~3.77(m,1H),3.50~3.33(m,4H),3.17~3.11(m,1H),2.66~2.60(m,1H),2.23~2.10(m,2H),1.96~1.86(m,4H),1.33~1.25(m,2H)。
LC-MS(m/z)：473(M+1)。
實施例120
二苯並[b,d]呋喃-3-基甘氨酸乙酯的製備
黃色油狀物二苯並[b,d]呋喃-3-基甘氨酸乙酯(570mg,65%)是由3-氨基二苯並[b,d]呋喃(600mg,3.3mmol)和2-溴乙酸乙酯(821mg,4.9mmol)按照實施例64中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：270(M+1)。
實施例121
N-(二苯並[b,d]呋喃-3-基)-N-甲基甘氨酸乙酯的製備
灰白色固體N-(二苯並[b,d]呋喃-3-基)-N-甲基甘氨酸乙酯(350mg,83%)是由二苯並[b,d]呋喃-3-基甘氨酸乙酯(400mg,1.48mmol)和碘甲烷(1.05g,7.43mmol)按照實施例65中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：284(M+1)。
實施例122
N-(二苯並[b,d]呋喃-3-基)-N-甲基甘氨酸的製備
淡黃色固體N-(二苯並[b,d]呋喃-3-基)-N-甲基甘氨酸(200mg,92%)是由N-(二苯並[b,d]呋喃-3-基)-N-甲基甘氨酸乙酯(240mg,0.85)按照實施例66中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：256(M+1)。
實施例123
1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(二苯並[b,d]呋喃-3-基(甲基)氨基)乙基-1-酮的製備
黃色油狀物1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(二苯並[b,d]呋喃-3-基(甲基)氨基)乙基-1-酮(150mg,45%)是由N-(二苯並[b,d]呋喃-3-基)-N-甲基甘氨酸(190mg,0.83mmol)和2-(5H-咪唑並[5,1-a])異吲哚-5-基)-1-(呱啶-4-基)乙基-1-酮鹽酸鹽(180mg,0.64mmol)按照實施例67中的類似步驟製備而成。
LC-MS(m/z)：519(M+1)。
實施例124
2-(二苯並[b,d]呋喃-3-基(甲基)氨基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮的製備
白色固體2-(二苯並[b,d]呋喃-3-基(甲基)氨基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮(70mg,46%)是由1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙醯基)呱啶-1-基)-2-(二苯並[b,d]呋喃-3-基(甲基)氨基)乙基-1-酮(150mg,0.29mmol)按照實施例68中的類似步驟製備而成。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 8.13(s,1H),7.88(d,J=8Hz,1H),7.79(d,J=8Hz,1H),7.66~7.59(m,2H),7.52(d,J=8Hz,1H),7.41(t,J=16Hz,1H),7.33~7.27(m,3H),7.22(s,1H),6.81(s,1H),6.71(d,J=12Hz,1H),5.48~5.44(m,1H),5.09~5.06(m,1H),4.38~4.31(m,3H),3.96~3.89(m,1H),3.73~3.72(m,1H),3.02~2.95(m,4H),2.14~2.06(m,1H),1.96~1.91(m,1H),1.83~1.77(m,1H),1.65~1.55(m,2H),1.36~1.25(m,3H)。
LC-MS(m/z)：521(M+1)。
體外生物學評價
本檢測方法用於本發明所述化合物的體外生物學活性評價，包括體外酶學活性評價和細胞水準酶學活性評價。
本檢測的目的在於綜合評價不同化合物對人吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)的體外酶學抑制活性和對細胞模型的酶學抑制活性。
實施例125 體外酶學活性檢測
實驗原理
體外IDO酶學活性檢測的基本原理是利用IDO酶在體外酶催化反應體 系中將底物L-色胺酸代謝生成產物犬尿胺酸，後者能夠與對二甲氨基苯甲醛的冰乙酸溶液發生顏色反應呈黃色，並在酶標儀492nm處測定吸光度值。藉由與已知濃度的犬尿胺酸標準品曲線對比，計算樣品中產物犬尿胺酸的濃度。當加入不同測試化合物時，其對IDO酶活性的抑制體現為產物犬尿胺酸的減少及顏色反應的改變。
實驗材料與試劑
重組人IDO酶(IDO1酶)購自美國BPS Bioscience公司。檢測試劑如L-色胺酸(生工，A601911-0050)、抗壞血酸(生工，SB0830-100g)、過氧化氫酶(生工，54J15066)、亞甲基藍(天津基準化學試劑有限公司)、犬尿胺酸(sigma，K8625-100MG)、三氯乙酸(生工，A600968-0250)、對二甲氨基苯甲醛(天津市大茂化學試劑廠)。
實驗主要過程
實驗主要流程如下：
(1)實驗準備：按照要求配製2×IDO酶反應緩衝液(工作液)：0.1M磷酸鉀緩衝液(pH=6.5)、400μM L-色胺酸、40mM抗壞血酸、2000U/ml過氧化氫酶、40μM亞甲基藍；用0.1M磷酸鉀緩衝液(pH=6.5)將測試化合物稀釋成不同濃度梯度的工作液(化合物最高濃度均為10μM)。30%(w/v)三氯乙酸溶液。2%對二甲氨基苯甲醛的冰乙酸溶液。
(2)酶學反應體系200μL，包括100μL測試化合物、100μL酶反應緩衝液和0.4μL重組人IDO酶溶液(終濃度為35nM)或1μL重組人IDO酶溶液(終濃度為70nM)。混勻後，IDO酶反應體系在37℃反應30min。
(3)檢測反應同時設置有對照反應，包括未添加測試化合物的0抑制陽性對照和未添加酶的0酶陰性對照。所有檢測採用複孔。
(4)酶學反應結束後，加入40μL預先配製的30%(w/v)三氯乙酸溶液，65℃反應20min，隨後12000rpm離心15min。
(5)吸取100μL離心後的上清液加入96孔平底板中，再加入等體積2%對二甲氨基苯甲醛的冰乙酸溶液混勻，室溫放置10min。
(6)使用酶標儀(ELX800NB)檢測每孔的顏色信號，檢測波長為492nm。
(7)測試化合物的酶學抑制率計算公式：酶活抑制率(%)=(0抑制陽性對照-化合物檢測孔)/(0抑制陽性對照-0酶陰性對照) * 100%。另外，針對不同濃度梯度的測試化合物分別計算出酶學抑制率，然後利用IC50計算器計算酶學半抑制濃度(IC50)。
根據上述實驗方法，以習知技術中已知的化合物NLG919(CAS：1402836-58-1)為陽性對照化合物，在相同條件下將本發明所述化合物進行體外IDO酶學評價(對IDO1檢測，測試化合物濃度為200nM)。數據小結見下表(表1)。
由上表結果可見，本發明化合物具有良好的IDO酶抑制活性，且多數優於對照化合物NLG919。
根據上述實驗方法，以NLG919為陽性對照化合物，將本發明所述化合物進行體外IDO酶學IC50測定。資料小結見下表(表2)，可見本發明代表性化合物具有更低的體外IDOIC50值。
實施例126 細胞水準抑制活性檢測
IDO酶除了在免疫細胞如髓源性抑制細胞(MDSC)中組成性表達外，許多腫瘤細胞也會上調表達IDO，或經細胞因數如IFN-γ誘導表達。在本發明中，我們利用IFN-γ誘導Hela細胞表達IDO酶(IDO1酶)為模型，檢測化合物在細胞水準的IDO酶學抑制活性。
實驗原理
HeLa細胞為人宮頸癌細胞系，在人IFN-γ誘導下可上調表達內源性IDO酶。藉由在細胞培養液中添加底物L-色胺酸，可以對細胞上清進行酶催化產物犬尿胺酸的檢測。實驗採用培養的Hela細胞，在人IFN-γ刺激下，與不同濃度的測試化合物共孵育指定時間後，利用酶產物與對二甲氨基苯甲醛的顏色反應方法，檢測測試化合物處理對細胞IDO酶活性的影響。
實驗材料與試劑
重組人IFN-γ細胞因數購自生工生物公司，細胞培養用無酚紅DMEM購自Gibco公司。檢測試劑如L-色胺酸(生工，A601911-0050)、犬尿胺酸(sigma，K8625-100MG)、三氯乙酸(生工，A600968-0250)、對二甲氨基苯甲醛(天津市大茂化學試劑廠)、細胞培養用96孔平底板(CORNING, costar 3599)。
實驗過程
按常規細胞培養實驗操作流程，在96孔平底板中進行。
(1)Hela細胞按照適當的濃度(約20000個/每孔)接種到96孔培養板中，經過夜貼壁後，換用含200μM L-色胺酸的無酚紅DMEM培養基，同時加入細胞因數人IFN-γ 50ng/ml和不同濃度梯度的測試化合物(最高終濃度25μM)，同時設置溶劑對照(DMSO)以及無細胞因數和L-色胺酸的陰性對照孔，按照3次重複孔設置。細胞繼續培養48小時後進行檢測。
(2)吸出培養孔中的上清200μL，加入40μL預先配製的30%(w/v)三氯乙酸溶液，65℃反應20min。隨後12000rpm離心15min。
(3)吸取100μL離心後的上清液加入96孔平底板中，再加入等體積2%對二甲氨基苯甲醛的冰乙酸溶液混勻，室溫放置10min。
(4)使用酶標儀(ELX800NB)檢測每孔的顏色信號，檢測波長為492nm。
(5)測試化合物的細胞水準酶學抑制率計算公式：酶活抑制率(%)=(0抑制陽性對照-化合物檢測孔)/(0抑制陽性對照-陰性對照) * 100%。另外，針對不同濃度梯度的測試化合物分別計算出細胞酶活抑制率，然後利用EC50計算器計算細胞酶活半抑制濃度(EC50)。
根據上述實驗方法，以NLG919為陽性對照化合物，將本發明所述化合物進行細胞學水準IDO酶學評價(測試化合物濃度為1μM)。數據小結見下表(表3)。由表3結果可見，本發明化合物具有良好的IDO抑制活性，且多數優於對照化合物NLG919。
根據上述實驗方法，以NLG919為陽性對照化合物，將本發明所述化合物進行IDO細胞水準EC50測定。數據小結見下表(表4)。
根據上述結果可見，本發明的代表性化合物均具有較低的IDO細胞水準EC50值，優於對照化合物NLG919。

Claims (19)

  1. 一種通式I化合物，
    Figure TWI671302B_C0001
    或其可藥用鹽，其中，R1為一個或多個取代基，選自氫、羥基、氰基、硝基、鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6烷基羰基和C1-6烷基氨基；R2為羥基或氨基；R3為一個或多個取代基，選自氫、羥基、氰基、鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6烷基羰基和C1-6烷基氨基；X為NR4或O；其中，R4為氫或C1-6烷基；環A為任選經取代的選自以下的基團：苯基；3元到7元飽和或部分不飽和碳環；8元到10元飽和、部分不飽和或芳環雙環或三環；具有1到4個獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的5元到6元單環雜芳基環；具有1到3個獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的4元到7元飽和或部分不飽和雜環；具有1到5個獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的7元到10元飽和或部分不飽和雜環雙環或三環；或具有1到5個獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的8元到10元雜芳環雙環或三環。
  2. 如請求項1所述的通式I化合物，其中：R1為一個或多個取代基，選自氫、羥基、氰基、硝基、鹵素和C1-6鹵代烷基；R2為羥基；R3為一個或多個取代基，選自氫、羥基、氰基、硝基、鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基和C1-6鹵代烷基；X為NR4；其中，R4為氫、甲基或乙基；環A為以下的基團：苯基；3元到6元飽和碳環；8元到10元芳環雙環或三環；具有1到4個獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的5元到6元單環雜芳環；具有1到5個獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的7元到10元飽和或部分不飽和雜環雙環或三環；或具有1到5個獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的8元到10元雜芳環雙環或三環。
  3. 如請求項1所述的通式I化合物，其中：R1為一個或多個取代基，選自氫、羥基、氰基、硝基和鹵素；R2為羥基；R3為一個或多個取代基，選自氫、羥基、氰基、硝基、鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基和C1-6鹵代烷基；X為NR4；其中，R4為氫或甲基；環A為選自以下的基團：苯基；3元到6元飽和碳環；8元到10元芳環雙環或三環；具有1到4個獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的5元到6元單環雜芳基環；或具有1到5個獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的8元到10元雜芳基環雙環或三環。
  4. 如請求項1所述的通式I化合物，其中：R1為一個或多個取代基，選自氫、羥基、氰基、硝基；R2為羥基；R3為一個或多個取代基，選自氫、羥基、氰基、硝基、鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基和C1-6鹵代烷基；X為NR4；其中，R4為氫或甲基；環A為選自以下的基團：苯基；8元到10元芳環雙環或三環；具有1到4個獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的5元到6元單環雜芳基環；或具有1到5個獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的8元到10元雜芳基環雙環或三環。
  5. 如請求項1所述的通式I化合物，其中：R1為一個或多個取代基，選自氫、羥基和氰基；R2為羥基；R3為一個或多個取代基，選自氫、羥基、氰基、硝基、鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基和C1-6鹵代烷基；X為NR4；其中，R4為氫或甲基；環A為選自以下的基團：苯基；具有1到4個獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的5元到6元單環雜芳基環；或具有1到5個獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的8元到10元雜芳基環雙環或三環。
  6. 如請求項1所述的通式I化合物，其中：R1為氫；R2為羥基；R3為一個或多個取代基，選自氫、羥基、氰基、硝基、鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基和C1-6鹵代烷基；X為NR4；其中，R4為氫或甲基；環A為選自以下的基團；苯基；具有1到4個獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的5元到6元單環雜芳基環；或具有1到5個獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的8元到10元雜芳基環雙環或三環。
  7. 如請求項1所述的通式I化合物，其中所述通式I化合物選自：1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-苯氧乙基-1-酮；1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-((四氫呋喃-3-基)氧基)乙基-1-酮；2-((9H-哢唑-3-基)氧基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮；1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-(噠嗪-4-基氧基)乙基-1-酮；1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-(喹啉-6-基氧基)乙基-1-酮；1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-(喹啉-6-基氧基)乙基-1-酮；1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-(吡咯烷-3-基氧基)乙基-1-酮；2-((7H-嘌呤-6-基)氧基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮；2-(苯並[d]惡唑啉-2-基氧基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮；2-(3-氯-4-氟苯氧基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮；2-(3-氯苯氧基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮；2-(4-氟苯氧基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮；2-(3,4-二甲基苯氧基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮；2-(3-三氟甲基苯氧基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮；2-(環己基氧基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮；2-(二苯並[b,d]呋喃-2-基氧基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲除-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮；1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-(甲基(苯基)氨基)乙基-1-酮；2-((3-氯苯基)(甲基)氨基)-1-(4-(2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-乙基-1-酮；2-((3-氯-4-氟苯基)(甲基)氨基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮；2-((4-氟苯基)(甲基)氨基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮；2-((3,4-二甲基苯基)(甲基)氨基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮；2-(乙基(苯基)氨基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮；1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-(苯基氨基)乙基-1-酮；1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-(甲基(4-三氟甲基苯基)氨基)乙基-1-酮；1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-(甲基(3-三氟甲基苯基)氨基)乙基-1-酮；2-((4-腈基苯基)(甲基)氨基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮；2-((3-甲氧基苯基)(甲基)氨基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮；1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-(甲基(4-硝基苯基)氨基)乙基-1-酮；1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-(甲基(吡啶-2-基)氨基)乙基-1-酮；1-(4-(1-羥基-2-(SH-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-(甲基(喹啉-6-基)氨基)乙基-1-酮；1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)-2-(甲基(7H-嘌呤-6-基)氨基)乙基-1-酮；和2-(二苯並[b,d]呋喃-3-基(甲基)氨基)-1-(4-(1-羥基-2-(5H-咪唑並[5,1-a]異吲哚-5-基)乙基)呱啶-1-基)乙基-1-酮。
  8. 一種製備如請求項1所述的通式I化合物的方法，
    Figure TWI671302B_C0002
    包括使式C化合物
    Figure TWI671302B_C0003
    在有機溶劑和還原劑作用下反應形成所述通式I化合物，其中R1、R2、R3、X和A如請求項1中所定義。
  9. 如請求項8所述的製備方法，其中所述還原劑選自NaBH4、KBH4、NaBH(OAc)3、KBH(OAc)3和NaBH3CN。
  10. 如請求項8或9所述的製備方法，其中所述有機溶劑選自甲醇、乙醇、四氫呋喃。
  11. 一種式C化合物：
    Figure TWI671302B_C0004
    其中，R1、R3、X和A如請求項1中所定義。
  12. 一種製備如請求項11所述的式C化合物的方法，包括使式A化合物
    Figure TWI671302B_C0005
    與式B化合物
    Figure TWI671302B_C0006
    在有機溶劑和耦合試劑的作用下耦合形成所述式C化合物，其中，R1、R3、X和A如請求項1中所定義。
  13. 如請求項12所述的方法，其中所述耦合試劑選自1-乙基-3-(3-二甲胺丙基)碳二亞胺(EDC)，N,N'-二環己基碳二亞胺(DCC)，N,N'-羰基二咪唑(CDI)和O-(7-氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)。
  14. 如請求項12或13所述的方法，其中所述有機溶劑選自苯、甲苯、四氫呋喃、二氧六環、二氯甲烷、氯仿和N,N'-二甲基甲醯胺。
  15. 一種如請求項11所述的式C化合物的用途，係用以製備如請求項1至7中任一項所述的通式I化合物的中間體。
  16. 一種藥物組合物，其包含如請求項1至7中任一項所述的通式I化合物以及任選的藥用輔料。
  17. 一種如請求項1至7中任一項所述的通式I化合物的用途，係用以製備具有吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)抑制劑的藥物。
  18. 一種如請求項1至7中任一項所述的通式I化合物的用途，係用以製備用於治療或預防癌症、眼部疾病、自身免疫性疾病、心理障礙、抑鬱症或焦慮症的藥物。
  19. 一種如請求項1至6中任一項所述的通式I化合物及其螢光標記物、自旋標記物、重金屬標記物或同位素標記物。
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