TWI488844B

TWI488844B - Ｌｘｒ調節劑

Info

Publication number: TWI488844B
Application number: TW099117252A
Authority: TW
Inventors: 布萊特Ｂ布區; 威廉Ｃ二世史蒂芬; 艾倫Ｋ奇克; 張海盈; 凡卡塔艾布魯; 理查馬丁; 拉爵摩漢
Original assignee: 埃克塞利希斯專利有限責任公司; 必治妥美雅史谷比公司
Priority date: 2009-05-28
Filing date: 2010-05-28
Publication date: 2015-06-21
Also published as: WO2010138598A2; EP2435410B1; JP2012528180A; MX2011012559A; EA019960B1; US20140163081A1; IL216176A0; TN2011000585A1; TW201109308A; CL2011002972A1; BRPI1013259B1; SG176247A1; CA2761934A1; HRP20170194T1; CY1119407T1; AR078049A1; SI2435410T1; LT2435410T; PE20120797A1; JP5625050B2

Description

LXR調節劑

此發明關於調節肝異受體(liver X receptor，LXRs)活性的化合物。本發明也提供了包含本發明化合物的藥學組成物以及使用那些組成物而用以調節肝異受體活性的方法。特別是，咪唑異構物以及衍生物被提供用以調節LXR的活性。

核受體

核受體是結構上與功能性上相關之調節蛋白的總科超科，且該調節蛋白是例如類固醇、類視色素、維他命D以及甲狀腺激素的受體(見，例如，Evans(1988) Science 240:889 895)。這些蛋白質與結合它們標靶基因之啟動子中的至順式作用元件結合，並對該受體的配位體做出反應而調節基因表現。

核受體可基於它們的DNA結合特性而分類(見，例如，前述的Evans以及Glass(1994) Endocr. Rev. 15:391 407)。例如，核受體的一種種類包括糖皮質素、***、雄激素、黃體激素以及礦皮質素受體，其以同型二聚體而結合至以反向重覆序列組成的激素反應元件(HREs)(見，例如，前述的Glass)。第二種種類的受體，包括那些由視黃酸、甲狀腺激素、維他命D3、脂肪酸/過氧化體增生劑(即，過氧化體增生劑活化受體或PPARs)以及蛻皮激素活化的受體，與共同的伙伴，該類視色素X受體(即，RXRs，也為已知的該9順式視黃酸受體；見，例如，Levin et al.(1992) Natur e 355:359 361以及Heyman et al. (1992) Cell 68:397 406)，而以異型二聚體結合至HREs。

在核受體之中間，RXRs是獨特的，因為它們以同型二聚體而結合DNA，且為許多額外核受體用以結合DNA所需的異型二聚體伙伴(見，例如，Mangelsdorf et al. (1995) Cell 83:841 850)。後者的受體，稱為第II型核受體次家族，包括許多被建立或被暗指為基因表現的重要調節劑。

有3個RXR基因(見，例如，Man凝膠geldorf et al.(1992) Genes Dev. 6:329 344)編碼RXR、β以及，其全部能夠與任何的第II型受體形成二聚體，雖然在活體中似乎伙伴受體對於確切的RXR子型有偏好(見，例如，Chiba et al.(1997) Mol. Cell. Biol. 17:3013 3020)。在成人的肝臟中，RXRα是三種RXRs中最大量的(見，例如，Man凝膠geldorf et al.(1992) Genes Dev. 6:329 344)，這暗示其在受第II型核受體調節有關的肝功能中可能具有重要的角色。也見，Wan et al.(2000) Mol. Cell. Biol. 20:4436 4444。

LXR _α 以及LXR _β

LXR_α 主要發現於肝臟中，少量發現於腎臟、腸、脾臟以及腎上腺組織中(見，例如，Willy,et al.(1995)基因Dev. 9(9):1033 1045)。LXR_β 普遍存在於哺乳類中，且發現於幾乎所有檢驗的組織中。LXRs被特定自然發生的膽固醇氧化衍生物活化(見，例如，Lehmann,et al.(1997) J. Biol. Chem. 272(6):3137 3140)。LXR_α 被羥膽固醇活化，並促進膽固醇的代謝(Peet et al.(1998) Cell 93:693 704)。因此，LXRs似乎在例如膽固醇的代謝中扮演了角色(見，例如，Janowski,et al.(1996) Nature 383:728 731)。

核受體LXR在膽酸、膽固醇與三酸甘油酯代謝的調節控制中扮演了關鍵的角色的，以維持脂肪的體內平衡。LXRs以及膽酸/氧化性膽固醇(oxysterol)調節的基因是用以發展降低血清膽固醇之藥物治療以及治療心血管與肝臟疾病的潛在標的。在LXR具有活性的化合物對於脂肪的體內平衡可具有深刻的作用，且可更有效地控制與LXR有關的疾病或失調。這通過與膽固醇體內平衡有關之多個基因的調節而實現，包括Cyp7a1，細胞色素p450酵素家族的一員，以及膽酸合成中的速率限制步驟，以及ABC細胞膜上轉運子ABCA1、ABCG1、ABCG5以及ABCG8。ABCA1在膽固醇以及磷脂流出至脂肪貧乏的脂蛋白(例如ApoA-I)中是重要的，因此促成了血漿中HDL量的增加。此外，ABCG5以及ABCG8似乎媒介了減少的了膽固醇的腸吸收，並幫助膽固醇從肝細胞流出至膽汁中。不幸的是，除了LXR促效劑之抗粥狀動脈硬化的作用之外，在細胞培養以及動物模型系統中的研究已證明LXR促效劑增加了血漿三酸甘油酯的量以及肝的脂質生成，並促使增加VLDL脂蛋白顆粒的產生。Schultz et al.,Genes ＆ Development 14:2831-2838(2000)；Repa et al. Genes ＆ Development 14:28119-2830(2000)。最小化不想要脂肪作用的策略包括識別LXR選擇性的化合物，該LXR選擇性化合物也是部分促效劑。部分促效劑可顯現組織特異性的核受體活化作用或抑制作用，如同抗***泰莫西芬(tamoxifen)所顯現的，其作用是做為***組織中***訊息傳遞的拮抗劑以及子宮中的促效劑。LXR異構體特異性的缺失的小鼠的特徵指出LXR_α 是肝臟中LXR活性的主要媒介者。然而，在巨噬細胞中，LXR_β 單獨即足以媒介LXR配位體對標靶基因表現的作用。因此，具有有限LXR_α 活性的化合物應具有抗粥狀動脈硬化的活性，同時限制不想要的肝作用。

因此，我們認定有調節LXR核受體活性之化合物、組成物與方法的需要，其以將所對於膽固醇代謝動脈粥狀化形成的所想要作用從增加血漿三酸甘油酯量與增加肝脂質生成分離出的方式而調節LXR核受體活性。雖然LXR的完全促效劑導致想要與不想要的作用，本發明描述了具有在該兩者之間有益分離的化合物，且該化合物在增加的逆向膽固醇運輸以及對血漿三酸甘油酯與LDL-膽固醇的有害作用之間具有改善的醫療指數。

在一方面中，本發明包含化合物或個別的異構物或異構物的混合物、其同位素或藥學上可接受的鹽類，其對於做為肝異受體(LXRs)活性的調節劑是有用的。

提供了用於組成物中的化合物以及用於調節核受體活性的方法。特別是，有用於調節該肝臟X受體、LXR_α 以及LXR_β ，且特別是LXR_β 的本發明化合物。

在一方面中，本文中所提供的該化合物是LXR的促效劑。在另一方面中，本文中所提供的化合物是LXR的拮抗劑。在特定的方面中，展現低功效的促效劑是拮抗劑。

本發明的另一方面是針對治療、抑制或改善疾病或失調症狀的方法，該疾病或失調被LXR活性調節或被LXR活性影響，或其中牽連了LXR活性，該方法包含將醫療有效量的本發明化合物、或個別的異構物、或異構物的混合物、或其藥學上可接受的鹽類投予至需要其的個體。

本發明的另一方面是針對對需要其的個體調節膽固醇代謝的方法，該方法包含投予調節膽固醇代謝有效量的本發明化合物、或個別的異構物、或異構物的混合物、或其藥學上可接受的鹽類。

本發明的另一方面是針對在需要其的個體中預防或治療動脈粥狀硬化的方法，該方法包含投予降低膽固醇量之有效量的本發明化合物、或個別的異構物、或異構物的混合物、或其藥學上可接受的鹽類。

本發明的另一方面是針對對需要其的個體調節LXR活性的方法，包含將該核受體與本發明化合物、或個別的異構物、或異構物的混合物、或其藥學上可接受的鹽類接觸。

本發明的另一方面是針對在需要其的個體中治療、抑制或改善一或更多的低膽固醇血症症狀的方法，該方法包含投予醫療有效量的本發明化合物、或個別的異構物、或異構物的混合物、或其藥學上可接受的鹽類。

本發明的另一方面是針對在增加膽固醇從需要其之個體的細胞流出的方法，該方法包含投予增加膽固醇流出有效量的本發明化合物、或個別的異構物、或異構物的混合物、或其藥學上可接受的鹽類。

本發明的另一方面是針對在需要其的個體的細胞中增加ATP結合卡匣(ATP結合卡匣)A1(ABCA1)以及ATP結合卡匣G1(ABCG1)表現的方法，該方法包含投予增加ABCA1以及ABCG1表現有效量的本發明化合物、或個別的異構物或異構物的混合物、或其藥學上可接受的鹽類。

本發明的另一方面是針對治療、抑制、或改善一或更多疾病或失調之症狀的方法，該一或更多的疾病或失調受膽固醇或膽酸量的影響，該方法包含將醫療有效量的本發明化合物、或個別的異構物、或異構物的混合物、或其藥學上可接受的鹽類投予至需要其的個體。

本發明的另一方面是針對藥學組成物，該藥學組成物包含本發明化合物、或個別的異構物、或異構物的混合物、或其藥學上可接受的鹽類以及至少一藥學上可接受的載體或賦形劑。

本發明的另一方面是針對在需要其的個體中逆向膽固醇運輸以及發炎性訊息傳遞路徑的調節，該逆向膽固醇運輸以及發炎性訊息傳遞路徑牽涉人類疾病病理學，包括動脈粥狀硬化以及有關的疾病，例如心肌梗塞以及缺血性中風，該方法包含投予調節逆向膽固醇運輸以及發炎性訊息傳遞路徑有效量的本發明化合物、或個別的異構物、或異構物的混合物、或其藥學上可接受的鹽類。

本發明的另一方面是針對在需要其的個體中代謝症候群的治療，該代謝症候群包含一群身體代謝的失調，包括肥胖、高血壓、胰島素抗性以及糖尿病，包括導因於衰減代謝與免疫力之疾病的治療，包括動脈粥狀硬化與糖尿病，以及自體免疫失調以及疾病，該治療包含投予醫療有效量的本發明化合物、或個別的異構物、或異構物的混合物、或其藥學上可接受的鹽類。

本發明的另一方面是針對在需要其的個體中治療動脈粥狀硬化、胰島素抗性、骨性關節炎、中風、高血糖症、血脂異常、乾癬、老化以及取決於UV曝露的皮膚皺紋、糖尿病、癌症、阿茲海默氏症、發炎、免疫失調、脂肪失調、肥胖、黃斑部退化、特徵為擾亂表皮屏障功能的症狀、表皮或黏膜分化異常或過度增生的症狀、或心血管疾病，該治療包含投予醫療有效量的本發明化合物、或個別的異構物、或異構物的混合物、或其藥學上可接受的鹽類。

在一方面中，本發明包含分子式I的化合物，

或其藥學上可接受的鹽類，其中：R¹ 是氯、氟、甲基或三氟甲基；R² 是H或甲基；R³ 是H或甲基；R⁴ 是H、氯、氟或甲基；以及n是1或2。

在一些具體實施例中，該分子式1的化合物是一個其中R² 以及R³ 是甲基的化合物。

在一些具體實施例中，該分子式I的化合物是一個其中R¹ 是氯或氟的化合物。在一些這種具體實施例中，R² 以及R³ 是甲基。

在一些具體實施例中，該分子式I的化合物是一個其中R⁴ 是氟的化合物。在一些這種具體實施例中，R¹ 是氯或氟以及R² 以及R³ 是甲基

在一些具體實施例中，該分子式I的化合物是一個其中R² 以及R³ 是H的化合物。在一些這種具體實施例中，R¹ 是氯或氟。

在一些具體實施例中，該分子式I的化合物是一個其中R² 是甲基以及R³ 是H的化合物。在一些這種具體實施例中，n是2，R¹ 是氯以及R⁴ 是氟。

在另一方面中，本發明包含根據任何前述具體實施例的結構分子式1化合物與一或更多的藥學上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑。

在另一方面中，本發明包含治療疾病或失調的方法，包含將醫療有效量的(a)根據任何前述具體實施例的結構分子式I化合物或(b)包含根據任何前述具體實施例的結構分子式I化合物的藥學組成物與一或更多的藥學上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑投予至需要其的個體，其中該疾病或失調是動脈粥狀硬化、高膽固醇血症、高脂蛋白血症、高三酸甘油酯血症、脂肪營養不良、高血糖症、糖尿病、血脂異常、動脈粥狀硬化、膽結石疾病、青春痘、痤瘡皮膚症狀、糖尿病、帕金森氏症、癌症、阿茲海默氏症、發炎、免疫失調、脂肪失調、肥胖、特徵為擾亂表皮屏障功能的症狀、表皮或黏膜分化異常或過度增生的症狀或心血管疾病。

在一些具體實施例中，治療的該疾病或失調是高膽固醇血症、高脂蛋白血症、高三酸甘油酯血症、脂肪營養不良、高血糖症、動脈粥狀硬化、糖尿病或血脂異常。

在另一個具體實施例中，本發明包含化合物、同位素或其藥學上可接受的鹽類，選自：

在另一個具體實施例中，本發明包含化合物、同位素或其藥學上可接受的鹽類，其是2-(1-(3-氯-3'-氟-4'-(羥甲基)-5'-(甲基磺醯基)聯苯-4-基)-2-(2-(2,6-二氯苯基)丙烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)丙烷-2-醇。

在另一個具體實施例中，本發明包含化合物、同位素或其藥學上可接受的鹽類，其是2-(2-(2-(2-氯-3-氟苯基)丙烷-2-基)-1-(3'-氟-4'-(羥甲基)-5'-(甲基磺醯基)聯苯-4-基)-1H-咪唑-4-基)丙烷-2-醇。

在另一個具體實施例中，本發明包含化合物、同位素或其藥學上可接受的鹽類，其是2-(2-(2-(2,6-二氯苯基)丙烷-2-基)-1-(3'-氟-4'-(羥甲基)-5'-(甲基磺醯基)聯苯-4-基)-1H-咪唑-4-基)丙烷-2-醇。

在另一個具體實施例中，本發明包含化合物、同位素或其藥學上可接受的鹽類，其是2-(2-(2-(2,6-二氯苯基)丙烷-2-基)-1-(3,3'-二氟-4'-(羥甲基)-5'-(甲基磺醯基)聯苯-4-基)-1H-咪唑-4-基)丙烷-2-醇。

在另一個具體實施例中，本發明包含化合物、同位素或其藥學上可接受的鹽類，其是2-{2-[1-(2,6-二氯苯基)乙基]-1-[3,3'-二氟-4'-(羥甲基)-5'-(甲基磺醯基)聯苯-4-基]-1H-咪唑-4-基}丙烷-2-醇。

本文中所描述的各種化合物或它們藥學上可接受的鹽類，可包含一或更多的不對稱中心，且可因此引起異構物，例如鏡像異構物、非鏡像異構物以及其他立體異構物形式。依據絕對立體化學，這種形式可被定義為(R )-或(S )-，或對於胺基酸則定義為(D)-或(L)-。本發明意欲包含所有這種可能的個別立體異構物以及其混合物，包括它們的消旋以及光學純鏡像異構物或非鏡像異構物的形式。該化合物通常被製備為消旋物，且可就其本身而方便地被使用，或光學活性(+)以及(-)、(R )-以及(S )-或(D)-以及(L)-異構物或相應的非鏡像異構物可使用對掌性合成組元或對掌性試劑而製備，或它們可使用傳統的技術而從消旋混合物解析出，例如對掌性層析或逆向HPLC。當本文中所描述的化合物包含烯烴的雙鍵或其他幾何不對稱中心時，除非另外具體說明，其意欲該化合物包含E 以及Z 幾何異構物。

本發明也包含同位素標記的本發明化合物，其中一或更多的原子被具有相同原子序、但原子量或質量數與自然界中常發現的原子量或質量數不同的原子所取代。適合包含於本發明化合物中的同位素範例包括氫的同位素，例如² H或D以及³ H或T，碳的同位素，例如¹¹ C、¹³ C以及¹⁴ C，氯的同位素，例如³⁶ Cl，氟的同位素，例如¹⁸ F，碘的同位素，例如¹²³ I以及¹²⁵ I，氮的同位素，例如¹³ N以及¹⁵ N，氧的同位素，例如¹⁵ O、¹⁷ O、以及¹⁸ O，磷的同位素，例如³² P以及硫的同位素，例如³⁵ S。特定的同位素標記之本發明化合物，例如，那些合併了放射性同位素的化合物，有用於藥物及/或受質的組織分布研究。有鑑於它們容易併入以及靈敏的偵測方式，放射性同位素氚(³ H)以及碳-14(¹⁴ C)，特別有用於此目的。以較重的同位素取代，例如氘(² H或D)，可提供導因於較高代謝穩定性的特定醫療優勢，例如，增加活體內半衰期或減低劑量需求，並因此可在一些情況下為較佳的。以正子射出同位素的取代，例如¹¹ C、¹⁸ F、¹⁵ O以及¹³ N，在用於檢驗受質受體佔有的正子放射斷層攝影術(PET)研究中可為有用的。

同位素標記的本發明化合物通常可使用適當的同位素標記試劑取代另外使用的未標記試劑，藉由本領域技術人員已知的傳統技術來製備，或藉由類似於本文中所描述的那些製程來製備。

定義

下述用語以及本文中所使用的措辭具有所指出的意義。

「核受體」意指活化或抑制核中一或更多基因轉錄的受體(但也可具有第二訊息傳遞動作)，典型地與其他的轉錄因子結合。該核受體被該受體的天然同源配位體活化。核受體通常發現於細胞質或核中，而不是膜鍵結的。核受體是調節蛋白質超科的一員，該調節蛋白質是各種內生性小分子的受體，例如，類固醇、類視色素、維他命D以及甲狀腺激素。這些蛋白質結合至它們標靶基因中啟動子的順式作用元件，並對配位體做出反應而調節基因表現。核受體可基於它們的DNA結合特性而分類。例如，糖皮質素、***、雄激素、黃體激素以及礦皮質素受體做為同型二聚體，以反向重覆序列組成而結合至激素反應元件(HREs)。另一個範例是與共同伙伴，類視色素X受體(RXR)，而做為異型二聚體結合至HREs的受體，包括那些被視黃酸、甲狀腺激素、維他命D₃ 、脂肪酸/過氧化體增生劑以及蛻皮激素活化的受體。

「肝臟X受體」或「LXR」意指牽涉膽固醇生物合成的核受體。如同本文中所使用的，該用語LXR意指LXR_α 以及LXR_β ，在哺乳類中所發現之蛋白質的兩種形式。肝臟X受體-α或LXR_α 意指於美國專利號第5,571,696、5,696,233與5,710,004號中以及Willy et al.(1995) Gene Dev. 9(9):1033-1045中所描述的受體。肝臟X受體-β或LXR_β 意指於Peet et al.(1998) Curr. Opin. Genet. Dev. 8(5):571-575;Song et al.(1995) Ann. N.Y. Acad. Sci. 761:38-49；Alberti et al.(2000) Gene 243(1-2):93-103；以及其中所引用的參考文獻；以及美國專利號第5,571,696、5,696,233與5,710,004號中所描述的受體。

「藥學上可接受的」意指在健全的醫學判斷範圍內，適合用於與人類與動物組織接觸而不具過度毒性、刺激性、過敏反應或其他問題或相稱有合理益處/風險比的併發症的那些化合物、材料、組成物及/或劑量形式，或該化合物、材料、組成物及/或劑量形式已被美國食品及藥物管理局核准做為可接受用於人類或家畜。

「藥學上可接受的鹽類」意指酸以及鹼加成鹽。

「藥學上可接受的酸加成鹽」意指那些保留游離鹼之生物有效性與特性的鹽類，其非生物或其他不想要的，且其以無機酸或有機酸形成，無機酸例如氫氯酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸以及諸如此類，有機酸例如醋酸、三氟醋酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、馬來酸、丙二酸、琥珀酸、富馬酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、肉桂酸、杏仁酸、甲磺酸、乙磺酸、對甲苯磺酸、水楊酸以及諸如此類.

「鹼加成鹽」意指那些保留游離酸之生物有效性與特性的鹽類，其非生物或其他不想要的。這些鹽類是從無機鹼或有機鹼加成至該游離酸而製備。衍生自無機鹼的鹽類包括但不限於，鈉鹽、鉀鹽、鋰鹽、銨鹽、鈣鹽、鎂鹽、鐵鹽、鋅鹽、銅鹽、錳鹽、鋁鹽以及諸如此類。較佳的無機鹽類是銨鹽、鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽以及鎂鹽。衍生自有機鹼的鹽類包括但不限於，一級、二級以及三級胺、被取代的胺，包括天然發生的取代胺、環胺以及鹼離子交換樹脂，例如異丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、2-二甲氨基乙醇、2-二乙氨基乙醇、二環己胺、離胺酸、精胺酸、組胺酸、咖啡因、普魯卡因、哈胺、膽鹼、甜菜鹼、乙二胺、葡萄糖胺、甲基還原葡糖胺、可可鹼、嘌呤、哌嗪、哌啶、N-乙基哌啶、多胺樹脂以及諸如此類。特別較佳的有機鹼是異丙胺、二乙胺、乙醇胺、三甲胺、二環己胺、膽鹼以及咖啡因。

「醫療有效量」意指當投予至個體時，足以造成本文中所描述之疾病或失調治療的化合物量。構成「醫療有效量」的化合物量將依據該化合物、該失調與其嚴重程度以及將被治療之個體的年齡而不同，但可被本領域具一般技藝的技術人員常規地決定。

「調節(modulating)」或「調節(modulate)」意指功能、症狀或失調的治療、預防、抑制、增加或誘導。例如，相信該本發明化合物可藉由在人類中刺激膽固醇從動脈粥狀硬化的損害處移除而調節動脈粥狀硬化。

如本文中所使用的，「治療(treating)」或「治療(treatment)」涵蓋本文中所描述之疾病或失調在個體、較佳為人類中的治療，且包括：抑制疾病或失調，即，阻止其發展；或緩和疾病或失調，即，導致該失調的退化。

「個體」意指溫血動物，例如哺乳動物，較佳為人類或人類孩童，其受到或具有潛在可能會受到本文中所描述之一或更多疾病以及失調的折磨。

「動脈粥狀硬化」意指藉由動脈粥狀硬化斑塊在動脈管壁的內層內形成而導致動脈粥狀硬化心血管疾病的過程。動脈粥狀硬化心血管疾病可被從事於醫學相關領域的醫生所辨識並了解，且包括而不限於，再狹窄、冠狀心臟疾病(也已知為冠狀動脈疾病或缺血性心臟疾病)、腦血管疾病，包括缺血性中風、多發性梗塞痴呆以及周邊血管疾病，包括間歇性跛行以及***功能障礙。

「血脂異常」意指在血漿中脂蛋白的不正常量，包括降低及/或升高的脂蛋白量，例如，升高的低密度脂蛋白(LDL)、非常低密度脂蛋白(VLDL)量以及降低的高度脂蛋白(HDL)量。

「EC₅₀ 」意指在特定反應之最大表現的50%引起劑量依賴反應之特定測試化合物的劑量、濃度或量，該特定反應被該特定測試化合物所誘發、誘導或成為潛在可能。

「膽固醇」意指為細胞膜與髓鞘之必要成分的類固醇，且如同本文中所使用的，「膽固醇」併入了其一般的使用。膽固醇也做為類固醇荷爾蒙以及膽酸的前驅物。

「三酸甘油酯」或「TG」意指酯化成甘油分子的三個脂肪酸分子，且用以儲存脂肪酸，該脂肪酸由肌肉細胞使用做為能量產生或由脂肪組織攝入與儲存。

「IC₅₀ 」意指在測量這種反應的分析法中達到最大反應的50%抑制之特定測試化合物的量、濃度或劑量，例如核受體的調節，包括該LXR_α 或LXR_β 活性。

「LXR」或「LXRs」意指LXR_α 以及LXR_β 。

「LXR_α 」(LXR alpha)意指這種受體的所有哺乳動物形式，包括，例如，替代的剪接異構體(splice isoforms)以及自然發生的異構體。代表性的LXR_α 物種包括但不限於該受體的大鼠(Genbank Accession NM_031627)、小鼠(Genbank Accession BC012646)以及人類(GenBank Accession No. U22662)形式。

「LXR_β 」(LXR beta)意指這種受體的所有哺乳動物形式，包括，例如，替代的剪接異構體以及自然發生的異構體。代表性的LXR_β 物種包括但不限於該受體的大鼠(GenBank Accession NM_031626)、小鼠(Genbank Accession NM_009473)以及人類(GenBank Accession No. U07132)形式。

「肥胖的」以及「肥胖」意指男性的身體質量指數(BMI)大於27.8 kg/m² 以及女性的身體質量指數大於27.3 kg/m² (BMI等於重量(kg)/(高度)² (m² ))。

效用

該本發明化合物展現了有用的藥理學特性以及有用於做為LXR促效劑、拮抗劑、反向促效劑、部分促效劑以及拮抗劑，或對LXR_α 或對LXR_β 具選擇性。本發明化合物有用於治療本文中所描述的疾病或失調，例如那些與由改變膽固醇運輸、逆向膽固醇運輸、脂肪酸代謝、膽固醇吸收、膽固醇再吸收、膽固醇分泌、膽固醇***或膽固醇代謝併發症有關的疾病或失調，或具有由該併發症所引起之症狀的疾病或失調。

這些疾病包括，例如，動脈粥狀硬化、動脈粥狀硬化的心血管疾病，(見，例如，國際專利申請公開號第WO 00/57915以及WO 00/37077號)、血脂異常、高血糖症、胰島素抗性、糖尿病、肥胖、X症候群(美國專利申請公開號第20030073614號、國際專利申請公開號第WO 01/82917號)、過多脂肪沉積於周邊組織中，例如皮膚(黃色瘤)(見，例如，美國專利第6,184,215以及6,187,814號)、中風、周邊阻塞性疾病、記憶喪失(Brain Research (1997),Vol. 752,pp. 189-196)、視神經以及視網膜病理學(即，黃斑部退化、視網膜色素變性)、中樞或周邊神經系統外傷性損傷的修復(Trends in Neurosciences (1994),Vol. 17,pp. 525-530)、由於老化造成之退化過程的預防(American Journal of Pathology (1997),Vol. 151,pp. 1371-1377)或阿茲海默氏症(見，例如，國際專利申請公開號第WO 00/17334號；Trends in Neurosciences (1994),Vol.17,pp. 525-530)、發生於疾病中(例如糖尿病的神經病變)之退化性神經病變的預防(見，例如，國際專利申請公開號第WO 01/82917號)、多發性硬化症(Annals of Clinical Biochem. (1996),Vol. 33,No.2,pp. 148-150)以及自體免疫疾病(J. Lipid Res .(1998),Vol. 39,pp. 1740-1743)。

也提供的是增加結合卡匣(ABCA1)表現的方法(見，例如，國際專利申請公開號第WO 00/78972號)，藉此使用申請專利範圍之化合物以及組成物而增加在哺乳類動物細胞中的逆向膽固醇運輸。

因此，在另一方面中，本發明也包括在具有動脈粥狀硬化或由這種疾病的臨床症候所證實之動脈粥狀硬化心血管疾病的個體中從組織沉積移除膽固醇的方法，組織沉積例如動脈粥狀硬化斑塊或黃色瘤，其中該方法包含將醫療有效量的本發明化合物或組成物投予至該個體。此外，本發明也提供了預防或減低動脈粥狀硬化心血管疾病事件的初次或後續發生風險的方法，包括缺血性的心臟疾病、缺血性中風、多發性梗塞痴呆以及間歇性跛行，該方法包含將預防疾病有效量的本發明化合物或組成物投予至具這種事件風險的個體。

本發明化合物也可用於減少高血糖症以及胰島素抗性的方法中，即，用於治療糖尿病的方法中(國際專利申請公開號第WO 01/82917號)，以及用於治療、預防或改善與糖尿病、高血糖症或胰島素抗性相關之失調或糖尿病、高血糖症或胰島素抗性所引起之併發症的失調的方法，包括組成「X症候群」的該群疾病狀態、症狀或失調(見美國專利申請案第20030073614號)，包含將醫療有效量的本發明化合物或組成物投予至需要這種治療的個體中。此外，本發明也提供用於預防或減低在個體中發展高血糖症、胰島素抗性、糖尿病或X症候群之風險的方法，該方法包含將有效量的本發明化合物或組成物投予至具有這種事件風險的個體中。

糖尿病(Diabetes mellitus)，常稱為糖尿病(diabetes)，意指衍生自多種起因因素的疾病過程，且特徵在於升高的血漿葡萄糖(被稱為高血糖症)。見，例如，LeRoith,D. et al.,(eds.),DIABETES MELLITUS(Lippincott-Raven Publishers,Philadelphia,Pa. U.S.A. 1996)。由於大血管疾病風險的增加，包括腎病變、神經病變、視網膜病變、高血壓、腦血管疾病以及冠狀心臟疾病，未控制的高血糖症與增加以及過早的死亡有關。因此，葡萄糖體內平衡的控制是治療糖尿病的關鍵重要方式。

有2種主要形式的糖尿病：第1型糖尿病(從前稱為胰島素依賴型糖尿病或IDDM)以及第2型糖尿病(從前稱為非胰島素依賴型糖尿病或NIDDM)。第2型糖尿病是特徵為胰島素抗性並伴隨相對而非絕對胰島素缺乏的疾病。第2型糖尿病的範圍可從具有相對胰島素缺乏的主要胰島素抗性至具一些胰島素抗性的主要胰島素缺乏。胰島素抗性是胰島素的能力減低，而需橫跨廣範圍的濃度以發揮其生物作用。在胰島素抗性的個體中，該身體分泌異常高量的胰島素以補償此缺陷。當存在不適當量的胰島素以補償胰島素抗性以及葡萄糖的適當控制時，會發展出減弱的葡萄糖耐受性。在許多個體中，胰島素的分泌進一步減少，且血漿葡萄糖量提高，導致糖尿病的臨床狀態。第2型糖尿病的原因可為在主要胰島素敏感的組織中對於葡萄糖以及脂肪代謝之胰島素刺激調節作用的深刻抗性，主要胰島素敏感的組織：肌肉、肝臟以及脂肪組織。此對於胰島素反應性的抗性導致胰島素在肌肉中不足以活化葡萄糖攝入、氧化與儲存活化，且胰島素不適當抑制在脂肪組織中的脂肪分解及在肝臟中葡萄糖的產生與分泌。在第2型糖尿病中，游離的脂肪酸量常於肥胖與一些不肥胖的個體中增加，且脂肪氧化作用是增加的。

動脈粥狀硬化的過早發展以及心血管與周邊血管疾病的增加率是具有糖尿病之個體的特徵。高血脂症是這些疾病的重要加速因素。高血脂症是一種失調，通常特徵為血流中血清脂肪的異常增加，例如，膽固醇以及三酸甘油酯，且高血脂症是發展動脈粥狀硬化以及心臟疾病的重要風險因素。對於脂肪代謝失調的檢閱，見，例如，Wilson,J. et al.,(ed.),Disorders of Lipid Metabolism,Chapter 23,Textbook of Endocrinology,9th Edition,(W. B. Sanders Company,Philadelphia,Pa. U.S.A. 1998)。高血脂症通常被分類為原發性與次發性高血脂症。原發性高血脂症通常由基因缺陷所造成，而次發性高血脂症通常是由其他因素所造成，例如各種疾病狀態、藥物以及飲食因素。或者，高血脂症可導因於高血脂症的原發性與次發性原因的結合。升高的膽固醇量與許多疾病狀態有關，包括冠狀動脈疾病、心絞痛、頸動脈疾病、中風、腦動脈硬化以及黃色瘤。

血脂異常或血漿中的脂蛋白量異常常發生於糖尿病患中，且已顯示為促成糖尿病個體中增加的冠狀事件與死亡發生率的主要因素之一(見，例如，Joslin,E. Ann. Chim. Med.(1927),Vol. 5,pp. 1061-1079)。從那時開始的流行病學研究已確認該關係，且當與非糖尿病個體比較時，已顯示在糖尿病個體中數倍增加的冠狀死亡(見，例如，Garcia,M. J. et al.,Diabetes(1974),Vol. 23，pp. 105-11(1974)；以及Laakso,M. and Lehto,S.,Diabetes Reviews(1997),Vol. 5,No. 4,pp. 294-315)。數種脂蛋白異常已被描述於糖尿病個體中(Howard B.,et al.,Arteriosclerosis(1978),Vol. 30,pp. 153-162)。

本發明進一步提供的是使用本發明化合物以治療肥胖以及肥胖之併發症的方法。肥胖與各種醫學失調有關，包括糖尿病以及高血脂症。肥胖也是發展第2型糖尿病的已知風險因素(見，例如，Barrett-Conner,E.,Epidemol. Rev.(1989),Vol. 11,pp. 172-181；以及Knowler,et al.,Am. J Clin. Nutr.(1991),Vol. 53,pp. 1543-1551)。

投藥投予以及配方

本發明化合物可藉由任何被接受的投予路徑而投予至需要其的個體。可接受的投予路徑包括但不限於，口腔的、皮膚的、子宮頸內的、竇內的、氣管內的、腸內的、硬腦脊膜的、間質的、腹部內的、動脈內的、支氣管內的、囊內的、顱內的、腦池內的、冠狀內的、皮內的、管內的、十二指腸內的、硬腦膜內的、表皮內的、食道內的、胃中的、齒齦內的、迴腸內的、淋巴內的、髓內的、腦膜內的、肌肉內的、卵巢內的、腹膜內的、***內的、肺中的、靜脈洞內、脊椎內的、滑液內的、睪丸內的、鞘內的、小管內的、腫瘤內的、子宮內的、血管內的、靜脈內的、鼻的、鼻胃管的、口服的、非口服的、經皮的(percutaneous)、硬膜外的、直腸的、呼吸的(吸入)、皮下的、舌下的、黏膜下的、局部的、經皮的(transdermal)、經黏膜的、經氣管的、子宮的、尿道的以及***的。

本發明化合物可以任何接受的固態、半固態、液態或氣態劑量形式而被投予。可接受的劑量形式包括但不限於，氣溶膠、膠囊、乳霜、乳化液、氣體、凝膠、顆粒、搽劑、洗劑、軟膏、糊狀物、粉末、溶液、懸浮液、糖漿以及錠劑。可接受的運送系統包括但不限於，生物可分解的植入物(例如，聚(DL-乳酸交酯)、乳酸交酯/乙交酯共聚物以及乳酸交酯/己內酯共聚物)、膠囊、灌洗器、灌腸器、吸入器、子宮內裝置、噴霧器、貼片、幫浦以及栓劑。

本發明的劑量形式可僅包含本發明化合物，或本發明化合物可與傳統的賦形劑、藥學載體、佐劑及/或其他藥用或藥學試劑一起配製。可接受的賦形劑包括但不限於，(a)隔離劑，例如交聯羧甲基纖維素鈉、交聯聚維酮、羧甲基澱粉鈉、微晶型纖維素、澱粉以及滑石；(b)黏結劑，例如纖維素、明膠、羥丙基纖維素、乳糖、麥芽糖醇、聚乙二醇、聚乙烯吡咯啶酮、山梨糖醇、澱粉、糖、蔗糖以及木糖醇；(c)包膜，例如纖維素、蟲膠、玉米醇溶蛋白以及腸溶劑；(d)崩解劑，例如纖維素、交聯聚乙烯吡咯啶酮、羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、微晶型纖維素、羧甲基澱粉鈉以及澱粉；(e)填充劑，例如碳酸鈣、纖維素、磷酸二鈣、葡萄糖、乳糖、甘露糖醇、山梨糖醇以及蔗糖；(f)調味劑；(g)調色劑；(h)助流劑，例如硬脂酸鈣、膠狀二氧化矽、扁油酸甘油酯、單硬脂酸甘油酯、硬脂酸棕櫚酸甘油酯、氫化蔬菜油、硬脂酸鎂、三矽酸鎂、礦物油、聚乙二醇、二氧化矽、澱粉、硬脂酸鹽、硬脂酸、滑石、硬脂富馬酸鈉、苯甲酸鈉以及鋅；(i)潤滑劑，例如硬脂酸鈣、氫化蔬菜油、硬脂酸鎂、礦物油、聚乙二醇、硬脂富馬酸鈉、硬脂、硬脂酸以及滑石；以及(j)防腐劑，例如氯丁醇、檸檬酸、半胱胺酸、甲硫胺酸、對羥苯甲酸甲酯、酚、酚對羥基苯甲酸丙酯、棕櫚酸視黃酯、硒、檸檬酸鈉、山梨酸、維他命A、維他命C以及維他命E。膠囊可包含任何前述所列之賦形劑，且可額外地包含半固態或液態載體，例如聚乙二醇或蔬菜為基礎的油。藥學載體包括可溶的聚合物、由不可溶或生物可分解的天然與合成聚合物所構成的微粒、微膠囊或微球體、脂蛋白、微脂體以及微膠粒。

該藥學組成物可為液體形式，例如，酏劑、糖漿、溶液、乳化液、懸浮液或其他類似形式，或可為乾燥產物而呈現，用於在使用前以水或其他適合的運送工具再溶解。液態的配製品可包含傳統的添加物，例如(a)液體稀釋劑，例如水、食鹽水、林格氏(Ringer’s)溶液、固定油，例如合成的單或雙甘油酯，或聚乙二醇、甘油、丙二醇或其他的溶劑；(b)界面活性劑、懸浮劑或乳化劑，例如聚氧乙烯去水山梨醇脂肪酸酯、飽和的聚乙醇化的甘油酯、單甘油酯、脂肪酸酯、環氧乙烷以及環氧丙烷的塊體共聚合物、聚氧乙烯硬脂酸酯、乙氧基化的蓖麻油以及乙氧基化的羥基硬脂酸；(c)緩衝液，例如醋酸鹽、檸檬酸鹽或磷酸鹽；(d)螫合劑，例如乙二胺四醋酸；(e)抗菌劑，例如苄醇或對羥苯甲酸甲酯；(f)抗氧化劑，例如抗壞血酸或重亞硫酸鈉；(g)等張劑，氯化鈉或右旋葡萄糖；以及甜味劑與調味劑、染料以及防腐劑。

本發明的藥學組成物將包含醫療有效量之為個別立體異構物或立體異構物混合物的本發明化合物、或其藥學上可接受的鹽類，該藥學組成物的剩餘物包含一或更多的藥學上可接受的賦形劑。一般而言，投予為個別立體異構物或立體異構物混合物的本發明化合物、或其藥學上可接受的鹽類將包含從1%至99%重量的藥學上可接受的組成物，該組成物的剩餘物包含一或更多的藥學上可接受的賦形劑。典型地，為個別立體異構物或立體異構物混合物的本發明化合物、或其藥學上可接受的鹽類將包含從5%至75%重量的藥學上可接受的組成物，該組成物的剩餘物包含一或更多的藥學上可接受的賦形劑。對於非口服的投予，為個別立體異構物或立體異構物混合物的本發明化合物、或其藥學上可接受的鹽類將包含從0.01%至1%重量的藥學上可接受的組成物。用以製備本發明劑量形式的方法對本領域的技術人員是已知，或將為顯而易見的；例如，見Remington's Pharmaceutical Sciences,18th Ed.,(Mack Publishing Company,Easton,Pa.,1990)。

醫療有效量的本發明化合物將依據各種因素，包括該化合物的活性、代謝穩定性、***速率與作用持續時間、該個體的年齡、重量、一般健康、性別、飲食與種族、該化合物的投予模式與時間、組成物中佐劑或額外醫療活性成分的存在以及尋求醫療效用之疾病的嚴重程度而不同。

本發明化合物可以範圍為每天約0.1至約10,000 mg的劑量水準而投予至人類個體。具有約70公斤體重的正常成人可被每天投予範圍為每公斤體重約0.15 μg至約150 mg的劑量。典型地，正常成人將每天被投予每公斤體重約0.1 mg至約25 mg或0.5 mg至約10 mg。本發明化合物可以一或更多的單位劑量形式而被投予。該單位劑量一天可被投予一至四次，或一天兩次，或一天一次。在描述有效劑量的替代方法中，口服單位劑量是達到在個體中約0.05至20 μg/ml或約1至20μg/ml的血清含量所需的單位劑量。對於特定個體的本發明化合物最理想之劑量可由本領域具一般技藝之技術人員所決定。

本發明化合物、或個別的異構物或異構物的混合物、或其藥學上可接受的鹽類，也可與一或更多的下述醫療劑的投予同時、在該一或更多的下述醫療劑之前或在該一或更多的下述醫療劑之後投予。這種組合療法包括包含本發明化合物與一或更多的額外活性劑之單一藥學劑量配方的投予，以及本發明化合物與每種活性劑以自己分開的藥學劑量配方的投予。例如，本發明化合物以及HMG-CoA還原酶抑制劑可於單一口服劑量組成物(例如錠劑或膠囊)中而一起投予至該個體，或每種試劑以分開的口服劑量配方而投予。當使用分開的劑量配方時，本發明化合物以及一或更多的額外活性劑可於實質上相同的時間，即同時投予，或於分開交錯的時間，即連續地投予；組合療法是被了解的，以包括所有的這些方案。

在一具體實施例中，本發明化合物與一或更多的下述醫療劑組合，而用於治療動脈粥狀硬化：抗高血脂症劑、血漿HDL提升劑、抗高膽固醇血症劑、膽固醇生物合成抑制劑[例如HMG CoA還原酶抑制劑，例如洛伐他汀(lovastatin)、辛伐他汀(simvastatin)、普伐他汀(pravastatin)、氟伐他汀(fluvastatin)、阿伐他汀(atorvastatin)以及西立伐他汀(rivastatin)]、醯基輔酶A：膽固醇轉醯酶(ACAT)抑制劑、普羅布考(probucol)、雷洛昔芬(raloxifene)、菸鹼酸、菸鹼醯胺、膽固醇吸收抑制劑、膽酸隔離劑[例如陰離子交換樹脂，或四級胺(例如，消膽胺(cholestyramine)或降膽寧(colestipol))]、低密度脂蛋白受體誘導物、安妥明、非諾貝特(fenofibrate)、benzofibrate、環丙貝特(cipofibrate)、吉非貝齊(gemfibrizol)、維他命B₆ 、維他命B₁₂ 、抗氧化維他命、β-阻斷劑、抗糖尿病劑、第II型血管收縮素拮抗劑、血管收縮素轉換酵素抑制劑、血小板聚集抑制劑、纖維蛋白原受體拮抗劑、阿斯匹靈或纖維酸衍生物。

在另一個具體實施例中，本發明化合物用於與一或更多的下述醫療劑結合，以處理膽固醇生物合成抑制劑，特別是HMG-CoA還原酶抑制劑。該用語HMG-CoA還原酶抑制劑意欲包括所有的藥學上可接受鹽類、酯類、游離酸以及內酯形式的化合物，該化合物具有HMG-CoA還原酶抑制活性，以及因此，這種鹽類、酯類、游離酸以及內酯形式的使用包含在本發明的範圍內。具有HMG-CoA還原酶抑制活性的化合物可使用本技術領域所熟知的分析法而立即識別。例如，適合的分析法描述或揭露於美國專利第4,231,938號以及WO 84/02131中。適合HMG-CoA還原酶抑制劑的範例包括但不限於洛伐他汀(MEVACOR；見，美國專利第4,231,938號)；辛伐他汀(ZOCOR；見，美國專利第4,444,784號)；普伐他汀鈉(PRAVACHOL；見，美國專利第4,346,227號)；氟伐他汀鈉(LESCOL；見，美國專利第5,354,772號)；阿伐他汀鈣(LIPITOR；見，美國專利第5,273,995號)以及西立伐他汀[也已知為西立伐他汀(cerivastatin)；見，美國專利第5,177,080號]。可用以與本發明化合物結合的這些以及額外HMG-CoA還原酶抑制劑的結構分子式描述在M. Yalpani,“Cholesterol Lowering Drugs,”Chemistry & Industry, pp. 85-89(5 February 1996)的第87頁中。在目前較佳的具體實施例中，該HMG-CoA還原酶抑制劑選自洛伐他汀以及辛伐他汀。

在額外的具體實施例中，本發明化合物用於與一或更多的下述醫療劑結合，以依據所想要的標靶療法而處理一或更多的額外活性糖尿病劑(見，例如，Turner,N. et al.,Prog. Drug Res.(1998),Vol. 51,pp. 33-94;Haffner,S.,Diabetes Care(1998),Vol. 21,pp. 160-178；以及DeFronzo,R. et al.(eds.),Diabetes Reviews(1997),Vol. 5,No. 4)。許多研究已調查與口服劑之合併療法的益處(見，例如，Mahler,R.,J. Clin. Endocrinol. Metab. (1999),Vol. 84,pp. 1165-71；United Kingdom Prospective Diabetes Study Group: UKPDS 28,Diabetes Care(1998),Vol. 21,pp. 87-92；Bardin,C. W.(ed.),Current Therapy In Endocrinology And Metabolism,6th Edition(Mosby--Year Book,Inc.,St. Louis,Mo. 1997)；Chiasson,J. et al.,Ann. Intern. Med.(1994),Vol. 121,pp. 928-935；Coniff,R. et al.,Clin. Ther.(1997),Vol. 19,pp. 16-26;Coniff,R. et al.,Am. J. Med.(1995),Vol. 98,pp. 443-451；Iwamoto,Y. et al.,Diabet. Med.(1996),Vol. 13,pp. 365-370;Kwiterovich,P.,Am. J. Cardiol(1998),Vol. 82(12A),pp. 3U-17U)。這些研究指出糖尿病以及高血脂症的調節可進一步藉由將第二試劑加至該醫療方案而改善。

在進一步的具體實施例中，本發明化合物用以與一或更多的下述醫療劑結合以治療糖尿病：磺醯基尿素[例如氯磺丙脲、甲苯磺丁脲、乙醯苯磺醯環己脲、妥拉磺脲(tolaz醯胺)、格列苯脲(glyburide)、格列齊特(gliclazide)、glynase、格列美脲(glimepiride)以及格列吡嗪(glipizide)、雙胍類(例如metformin)、噻唑啶二酮類[例如噻格列酮(ciglitazone)、吡格列酮(pioglitazone)、曲格列酮(troglitazone)以及羅格列酮(rosiglitazone)]以及相關的胰島素敏化劑，例如PPARα、PPARβ以及PPARγ的選擇性與非選擇性活化劑；去氫表雄甾酮(也稱為DHEA或其共軛硫酸酯，DHEA-SO4)；抗糖皮質素；TNFα抑制劑；α-葡萄糖苷酶抑制劑[例如阿卡波糖(acarbose)、米格列醇(miglitol)以及伏格列波糖(voglibose)]、普蘭林肽(人類荷爾蒙澱粉素的合成類似物)、其他的胰島素促泌素[例如瑞格列奈(repaglinide)、格列喹酮(gliquidone)以及那格列奈(nateglinide)]、胰島素以及上述所討論用於治療動脈粥狀硬化的醫療劑。

仍在其他的具體實施例中，本發明化合物用以與一或更多的下述醫療劑結合，以治療肥胖或肥胖相關的失調。這種試劑，包括但不限於，苯基丙醇胺、芬他命(phentermine)、二乙胺苯丙酮、馬吲哚(mazindol)、芬芙拉命(fenfluramine)、右芬氟拉明(dexfenfluramine)、非利拉明(phentiramine)、β₃ 腎上腺素受體促效劑；諾美婷(sibutramine)、胃腸的解脂酶抑制劑[例如奧利司他(orlistat)]以及瘦體素。用於治療肥胖或肥胖相關失調的其他試劑包括神經肽Y、腸體制素、膽囊收縮素、鈴蟾素、澱粉素、組織胺H₃ 受體、多巴胺D₂ 受體調節劑、促黑激素、腎皮釋素、甘丙胺素以及γ胺基丁酸(GABA)。

合成

本發明化合物可以本領域的技術人員所熟知的許多方法來製備，包括但不限於那些下面描述的方法，或藉由應用本有機合成領域的技術人員已知的標準技術而經由這些方法的修飾來製備。該化合物使用ChemDraw Ultra 9.0或10.0(CambridgeSoft)來命名。該試劑以及起始材料為商業可得的，或由本領域具一般技藝之技術人員藉由熟知的技術而立即合成的。所了解的是，在下述的描述中，所描繪分子式的取代基及/或變異的組合是可允許的，只要這種貢獻產生穩定的化合物。除非另外指出，與NMR及/或質譜資料相關的所有化合物被製備，且該NMR以及質譜被測量。

(a) Me ₃ Al，甲苯，0℃-80℃；(b) i .　溴丙酮酸乙酯，NaHCO ₃ ，THF，70-80℃；ii. AcOH，甲苯或TFA，EtOH，80℃；(c) R ₃ MgBr，THF或THF/CH ₂ Cl _2， ，0℃-rt；(d) K ₂ CO ₃ ，PdCl ₂ (dppf)，DME/H ₂ O，80℃。

一般而言，分子式(0036) 的化合物在三甲基鋁的存在下，藉由分子式(0032) 苯胺與2-(苯基)-2-甲基丙腈(0031) 的第一反應而製備，以在標準分離程序(方案1)之後產生分子式(0033) 的化合物。在隨後的步驟中，在鹼性環境下，於升高的溫度中，脒(0033) 曝露至鹵酯(例如α-溴丙酮酸乙酯)，接著藉由去氫環境(在乙醇中的三氟醋酸)，在標準分離程序之後提供了分子式(0034) 的1H -咪唑。分子式(0034) 的化合物然後進行功能性轉換，例如從酯轉換成甲醇(carbinol)。在鈀媒介的耦合反應中，例如，鈴木反應，分子式(0035) 的化合物然後與(2-氟-6-(磺醯基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)苯基)甲醇(0017) 反應(見下面方案2)，以在標準分離程序之後提供分子式(0036) 的化合物。

a) i. 1.0 M LHMDS於THF中；ii. R ₄ SNa，回流；b) BH ₃ -THF，0℃-回流；c) mCPBA，CH ₂ Cl ₂ ；d) PdCl ₂ (dppf)，聯硼酸頻那醇酯，KOAc，DMSO，80℃。

方案2：步驟2a 4-溴-2-氟-6-(甲硫基)苯甲酸的製備

將4-溴-2,6-二氟苯甲酸(16.0 g,67.5 mmol)以及無水THF(110 mL)加至附接有冷凝器的500 mL圓底燒瓶中。在逐滴加入1.0M雙 -(三甲基矽基)醯胺鋰(74 mL,1.1當量)之前將該反應燒瓶於冰浴中冷卻。在加入甲氧基硫鈉(5.21 g,74.2 mmol)之前將該反應懸浮液於室溫下攪拌20分鐘。允許該反應溶液在回流下攪拌3小時。在稀釋的aq.HCl中淬熄反應部分以及進行GCMS：發現m/z =265,267母離子之後，決定該反應完成。以H₂ O淬熄冷卻的反應混合物,並將其以EtOAc(200 mL)稀釋。將該反應混合物轉置至分離漏斗，並加入1.0N aq. HCl，以產生pH=2-3的溶液。分離該醋酸乙酯層，將其以鹽水沖洗，通過Na₂ SO₄ 乾燥，並在真空中濃縮，以提供14.6 g(81%產率)為蠟白色固體的該中間產物6-氟-4-溴-2-甲基硫烷基-苯甲酸。¹ H NMR(400 MHz,CDCl₃ )δ7.18(s,1H),7.12(dd,J =8 Hz,1H),2.49(s,3H);GCMSm/z =265,267[M]⁺ 。

或者，如下述而製備該中間產物6-氟-4-溴-2-甲基硫烷基-苯甲酸：將二甲基甲醯胺(14.5 L,10.0體積)裝入20L燒瓶中，接著裝入氫氧化鈉(293.7 g,1.2 eq)，並將該反應物料冷卻至-15至-10℃。在10-15分鐘的期間內，於-15至-10℃加入4-溴-2,6-二氟苯甲酸(1450 g,1.0當量)，並攪拌額外的10-15分鐘。在5-10分鐘的期間內，於-10至-5℃加入甲氧基硫鈉(514.6 g,1.2當量)。加入完成時，該反應的溫度在45至60分鐘的期間內被提升至25-28℃，並維持在那個溫度1.5-2小時。然後該反應的溫度在30-60分鐘的期間內被提升至60-65℃，並維持在60-65℃5小時，直到該反應被視為完成。然後將該反應混合物冷卻20-25℃，並以2N HC1(5.045L的12N HC1於30.3 L的水中)的冷卻(5-10℃)溶液淬熄。在淬熄之後，加入醋酸乙酯(14.5 L，10體積)，並將該混合物攪拌10-15分鐘。分離該相，並以醋酸乙酯(7.25 L,5體積)萃取該水層。分離該兩相，並以鹽水溶液(725 g的NaCl於3.625 L的水中)沖洗合併的有機層。分離該相，並以水(5.0體積，7.25 L)沖洗該有機層。分離該相，並將該有機層通過硫酸鈉(1450g)乾燥。過濾該有機層以移除該硫酸鈉，然後以醋酸乙酯(2.9L,2體積)沖洗。在減壓下於45-50℃/30-40mm Hg將該有機層濃縮至~1至1.2體積，並在15-20分鐘的期間內於40-45℃加入石油醚(7.25L,5體積)。在20-25分鐘的期間內將該溶液冷卻至20-25℃。過濾該固體，並以石油醚(2.9L,2.0體積)沖洗，並在真空下於25-28℃、0.4至0.7 mbar乾燥該產物，以提供1410g(87%,99.40區域%)的該中間產物6-氟-4-溴-2-甲基硫烷基-苯甲酸.

步驟2b (4-溴-2-氟-6-(甲硫基)苯基)甲醇的製備

將6-氟-4-溴-2-甲基硫烷基-苯甲酸(14.6 g,55.0 mmol)以及無水THF(70 mL)加入充入N₂ 附接有冷凝器的500 mL圓底燒瓶中。在逐滴加入在THF中的1.0M BH₃ -THF(83 mL,1.5當量)溶液之前允許該反應溶液冷卻至0℃。於室溫下攪拌該反應溶液，然後回流額外的2小時。在以1:1H₂ O/THF溶液淬熄之前冷卻該反應溶液。將該反應溶液轉置至具有EtOAc(100 mL)的分離漏斗，並加入K₂ CO₃ 的水溶液。分離該醋酸乙酯相，以鹽水沖洗，通過Na₂ SO₄ 乾燥，並在真空中濃縮。使用100%Hx至55%EtOAc的溶劑梯度經由110g SiO₂ 管柱層析該粗產物。獲得為固體白蠟的純化標題產物(13.7 g,99%產率)。¹ H NMR(400 MHz,CDCl₃ )δ7.13(s,1H),7.06(dd,J ₁ =8 Hz,J ₂ =2 Hz,1H),4.77(s,2H),2.51(s,3H),2.20-2.05(br s,1H); GCMSm/z =251,253[M]⁺ 。

或者，如下述而製備該中間產物(4-溴-2-氟-6-(甲硫基)苯基)甲醇：在氮氣下將4-溴-2-氟-6-(甲硫基)苯甲酸(1400 g,1.0 eq)裝入20 L燒瓶中，接著裝入THF(14 L,10體積)。於25-28℃在30-45分鐘的期間內將硼烷-二甲基硫醚複合物(802.41 g,1000 mL)加入至此溶液中。在30-45分鐘的期間內將該反應溫度提升至60-65℃，並維持該溫度直到HPLC顯示<1%的4-溴-2-氟-6-(甲硫基)苯甲酸(~3-4小時)。該反應完成時，在30-40分鐘的期間內將該混合物冷卻至10-15℃。然後在1至1小時的期間內於10-15℃以甲醇(2.1 L,1.5體積)淬熄該反應。然後在真空下於40-50℃/0.4至0.7 mbar將該反應物料濃縮至1至1.5體積。所產生的混合物溶解於DCM(8.4 L,6體積)中。以氯化銨溶液(560 g NH₄ Cl於2.8 L的水中，2體積)沖洗該有機層。分離該相，並以10% NaHCO₃ 溶液(2.8 L,2體積)、飽和的鹽水溶液(2.1 L,1.5體積)以及水(4.2 L,3體積)沖洗該有機層。分離該有機層，並通過硫酸鈉(700 g)乾燥。藉由過濾移除該硫酸鈉，並以DCM(2.8 L,2體積)沖洗。在真空下於40-45℃/0.4至0.7 mbar將該有機層濃縮至1至1.2體積，以提供在真空下於45-50℃/0.4至0.7 mbar乾燥的該產物。以90%產率(1200 g)而獲得具有90.07區域%的該標題產物。

步驟2c (4-溴-2-氟-6-(甲烷磺醯基)苯基)-甲醇的製備

將(4-溴-2-氟-6-(甲硫基)苯基)甲醇(13.7 g，54.6 mmol)以及無水二氯甲烷(125 mL)加入500 mL燒瓶中。在逐批加入3-氯過苯甲酸(77% max.,Aldrich)(18.8 g，2當量)之前將該溶液於冰浴中冷卻至0-3℃。然後允許該反應溶液回溫至室溫，在其中保持18小時。然後在真空中濃縮該反應，以移除二氯甲烷，並以醋酸乙酯以及1 M aq. NaOH而將剩餘物沖洗至分離漏斗中。分離該醋酸乙酯層，以1 M aq. NaOH沖洗，通過Na₂ SO₄ 乾燥，並在真空中濃縮。將該剩餘物藉由快速層析純化(Biotage,65 x 200 mm SiO₂ 管柱，從100%己烷至90%醋酸乙酯梯度洗提)。合併適當的片段，並在真空中濃縮，以提供為無色、半結晶固體的該標題化合物，產量：8.1 g(52%)。¹ H NMR(400 MHz,DMSO-d ₆ )δ 7.98(dd,J =8 Hz,1H),7.91(s,1H),5.45(t,J =8 Hz,1H),4.88(dd,J ₁ =8 Hz,J ₂ =2 Hz,2H),3.42(s,3H);¹⁹ F NMR(400 MHz,DMSO-d ₆ )-111.8 ppm;GCMSm/z =283,285[M]⁺ 。

步驟2d (2-氟-6-(甲基磺醯基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)苯基)甲醇的製備

將充入乾N₂ 的100 mL圓底燒瓶稱重(4-溴-2-氟-6-(甲烷磺醯基)苯基)-甲醇(1.98 g,6.99 mmol)、聯硼酸頻那醇酯(2.13 g 1.2當量)、二氯[1,1’-雙(二苯基膦)二茂鐵]鈀(II)二氯甲烷加成物(560 mg,10 mol%)、碳酸鉀(2.06 g,3當量)以及DMSO(25 mL)。允許所產生的懸浮液於90℃攪拌3小時。如LCMS分析所確定，發現部分的反應溶液不再包含起始的溴化物。以醋酸乙酯(50 mL)以及水(50 mL)稀釋該冷卻反應懸浮液，並經由矽藻土墊的布氏(Buchner)漏斗過濾。將所產生的濾液轉置至分離漏斗，並分離該有機相。以醋酸乙酯萃取該水相，並以鹽水沖洗合併的醋酸乙酯相，通過Na₂ SO₄ 乾燥，並在真空中濃縮。藉由矽膠快速層析(Biotage SP-1，40g SiO₂ 管柱，梯度洗提從100%己烷至60%醋酸乙酯)純化該剩餘物，以提供澄清黏油狀物。藉由溶解於二氯甲烷中，以及加入己烷後所產生的再沉澱而分離為非晶形的白色粉末產物。該標題化合物被分離為固體白色粉末，產量：1.9 g(82%產率)。¹ H NMR(400 MHz,CDCl₃ )δ8.28(s,1H),7.79(d,J =8 Hz,1H),5.03(d,J=8 Hz,2H),3.23(s,3H)3.05(t,J =8 Hz,1H),1.35(s,6H)；¹⁹ F NMR(400 MHz,CDCl₃ )δ-116.3 ppm。

或者，如下述而製備該中間產物(2-氟-6-(甲基磺醯基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)苯基)甲醇：將甲基四氫呋喃(MeTHF)(75 mL,5體積)裝入配備有攪拌子、溫度探針、回流冷凝器以及氮入口的500 mL封套反應器,接著裝入醋酸鉀(5.2 g,52.98 mmoles,1當量)以及(氧基二-2,1-伸苯基)雙(二苯基膦)(322 mg;597.3 μmoles,0.01125當量)以及聯硼酸頻那醇酯(17.51 g,68.95 mmoles,1.3當量)。將該反應燒瓶排空至低於150 Torr,然後以氮回充。重覆3次此去除氣體的程序。將Pd(OAc)₂ (94.2 mg;419.6 μmoles,0.0075當量)裝入至該反應器中，並將該反應燒瓶排空至低於150 Torr，然後以氮回充，並重覆該次序3次。允許所產生的泥漿於20-25℃成熟15分鐘。完成該15分鐘的成熟後，將該泥漿加熱至80℃的內部溫度。當該反應器中的該混合物被加熱至溫度時，在分開的燒瓶中裝入(4-溴-2-氟-6-(甲烷磺醯基)苯基)-甲醇(15.03 g,53.09 mmoles,1當量)，接著裝入MeTHF(75 ml,5體積)。在使用之前，藉由於表面下產生氮氣泡而將所產生的溶液去除氣體至少15分鐘。一旦被催化的混合物已達到回流，將於MeTHF中去除氣體的(4-溴-2-氟-6-(甲烷磺醯基)苯基)-甲醇溶液以單一批次加至該反應中，並允許反應。在加入受質之後，該反應典型地花費~20小時完成。完成之後(典型地<0.75 RAP的起始材料)，將該反應物冷卻至20-25℃。一旦在RT下，以MeTHF(75 ml,5體積)稀釋該反應物，並以5 wt%NaCl溶液(7.5體積,110 mL)沖洗至少15分鐘。分離該相，並經由矽藻土過濾富含上層產物的MeTHF流，以移除不可溶的鈀剩餘物。以MeTHF(75 ml,5體積)沖洗該矽藻土濾餅。以官能化的二氧化矽(30當量)處理該反應物，以移除鈀以及顏色。攪動該泥漿至少60分鐘，然後過濾以移除該二氧化矽。以MeTHF(5體積,75 mL)沖洗所使用的二氧化矽。以水(5體積,75 mL)沖洗所結合的有機相。在真空下(60-70 Torr，30℃的浴溫)將該有機物蒸餾至5體積(75 mL)。當到達該75 ml界標時，停止該蒸餾作用，並逐滴地將庚烷(75 ml,5體積)加入至該反應溶液中。在已加入~35 ml的庚烷之後，該產物開始從該溶液中結晶。在完成加入時，藉由過濾分離該產物，並以MeTHF-庚烷(1:9)溶液(2 x 75 mL)沖洗該濕濾餅，並於50℃乾燥。獲得為白色固體的該標題產物，13.64 g，(78%產率)具有99.58區域%。

範例1 2-(1-(3-氯-3'-氟-4'-(羥甲基)-5'-(甲基磺醯基)聯苯-4-基)-2-(2-(2-氟苯基)丙烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)丙烷-2-醇

範例1a 2-(2-氟苯基)-2-甲基丙腈的製備

將2-氟苯基乙腈(11.0 g,81.4 mmol)以及無水THF(70 mL)加至已充入乾N₂ 、附接有添加漏斗的500 mL 3頸圓底燒瓶中。在逐滴加入於THF中之1.0 M叔丁醇鉀溶液(195 mL,2.4莫耳當量)之前將該反應溶液冷卻至-10℃。在加入碘甲烷(15.2 mL,244 mmol)之前將該反應溶液於-10℃攪拌20分鐘。允許該反應溶液攪拌回溫至室溫4小時。藉由加入aq NH₄ Cl淬熄該反應溶液，並以EtOAc(200 mL)稀釋。分隔該有機相，以aq NH₄ Cl沖洗，通過Na₂ SO₄ 乾燥，將之過濾、在真空中濃縮，並使用100% Hx至50% EtOAc的溶劑梯度經由240 g SiO₂ 管柱在Biotage SP-1上層析，以提供10.1 g(76%產率)的標題產物。GCMS m/z=163[M]⁺ 。

範例1b N-(4-溴苯基)-2-(2-氟苯基)-2-甲基丙脒的製備

將4-溴苯胺(7.31 g,42.5 mmol)以及無水甲苯(40 mL)加至附接有添加漏斗、以烘箱乾燥、充入N₂ 的250 mL圓底燒瓶中。將2.0 M Me₃ Al(32 mL,1.5莫耳當量)溶液加至在0℃的該反應溶液中。將該反應溶液於0℃攪拌30分鐘，然後將於甲苯(25 mL)中之2-(2-氟苯基)-2-甲基丙腈(7.62 g,46.7 mmol)溶液加至該反應燒瓶中。允許該反應溶液於90℃攪拌5小時。以酒石酸鉀鈉溶液淬熄該冷卻的反應溶液。靜置20分鐘之後，分隔該有機相，並以酒石酸鉀鈉溶液沖洗。以1N aqHCl(100 mL x 3)萃取該有機溶液。藉由加入1N aq NaOH而中和合併的aq HCl溶液，並以二氯甲烷(200 mL x 2)萃取。通過Na₂ SO₄ 乾燥該二氯甲烷產物溶液，將其過濾並在真空中濃縮，以提供該標題化合物(5.5 g,39%產率)。GCMS m/z=334,336[M]⁺ 。

範例1c 1-(4-溴苯基)-2-(2-(2-氟苯基)丙烷-2-基)-1H-咪唑-4-羧酸乙酯的製備

將N-(4-溴苯基)-2-(2-氟苯基)-2-甲基丙脒(5.0 g,15 mmol)、無水THF(80 mL)、NaHCO₃ (2.52 g,30 mmol)以及90%溴丙酮酸乙酯(1.90 mL,15.1 mmol)加至附接有冷凝器的250 mL圓底燒瓶中。在藉由LCMS分析之前，將該反應混合物於70℃攪拌2小時。倒出該冷卻的反應混合物，並在真空中濃縮。將移入該剩餘物甲苯(65 mL)以及醋酸(1.8 mL)中。於回流下將該溶液攪拌1小時。以H₂ O(150 mL x 3)沖洗該冷卻溶液，通過Na₂ SO₄ 乾燥，將其過濾、在真空中濃縮，並使用100%Hx至70%EtOAc梯度而經由SiO₂ 管柱層析，以提供純化的標題化合物(4.3 g，67%產率)。LCMS(ES)：m/z =431.3,433.3[M+H]⁺ 。

範例1d 2-(1-(4-溴苯基)-2-(2-(2-氟苯基)丙烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)丙烷-2-醇的製備

將於Et₂ O中的3.0M MeMgBr(12 mL,3.7當量)溶液加至附接有添加漏斗、充入乾N₂ 的250 mL圓底燒瓶中。在逐滴加入於無水二氯甲烷(80 mL)溶液中的1-(4-溴苯基)-2-(2-(2-氟苯基)丙烷-2-基)-1H-咪唑-4-羧酸乙酯(4.22 g,9.78 mmol)之前將該燒瓶冷卻至0℃。允許該反應溶液於1小時的期間內攪拌、回溫至室溫。藉由加入aq NH₄ Cl而淬熄該反應溶液。將該混合物倒入分離漏斗，並分隔該二氯甲烷層，通過Na₂ SO₄ 乾燥，將其過濾、濃縮，並使用100 % Hx至70 % EtOAc的梯度經由40 g SiO₂ 管柱層析，以產出該標題化合物(3.19 g,78%產率)。LCMS(ES):m /z =417.3,419.3[M+H]⁺ .

範例1 2-(1-(3'-氟-4'-(羥甲基)-5'-(甲基磺醯基)聯苯-4-基)-2-(2-(2-氟苯基)丙烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)丙烷-2-醇的製備

將2-(1-(4-溴苯基)-2-(2-(2-氟苯基)丙烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)丙烷-2-醇(380 mg,911 moL)、DME(25mL)以及H₂ O(6 mL)加至50 mL圓底燒瓶中。在加入(2-氟-6-(甲基磺醯基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)苯基)甲醇(360 mg,1.09 mmol)、碳酸鉀(380 mg,2.73 mmol)以及二氯[1,1’-雙(二苯基膦)二茂鐵]鈀(II)二氯甲烷加成物(74 mg,91 moL)之前將N₂ 引入該溶液中10分鐘。允許該反應混合物於80℃攪拌2小時。以EtOAc(30 mL)稀釋該冷卻的反應溶液，並經由矽藻土墊的布氏漏斗過濾。以aq NH₄ Cl(150 mL x 2)沖洗該濾液。通過Na₂ SO₄ 乾燥該有機相，將其過濾並在真空中濃縮。藉由矽膠快速層析(Biotage SP-1，25 g SiO₂ 管柱，從5% EtOAc至100% EtOAc的梯度洗提)純化該剩餘物，以提供該標題化合物(100 mg,20%產率)。¹ H-NMR(400 MHz,CDCl₃ )δ8.02(d,J =2 Hz,1H),7.51(dd,J ₁ =2 Hz,J ₂ =10 Hz,1H),7.29(d,J =9 2H),7.08-7.16(mult,1H),6.85-6.92(mult,3H),6.77-6.84(mult,2H),6.65(s,1H),5.09(d,J =6 Hz,2H),3.35(s,1H),3.30(2,3H),3.02(t,J =6 Hz,1H),1.72(s,6H),1.62(s,6H);¹⁹ F NMR(400 MHz,CDCl₃ )δ-112.1,-113.5 ppm;LCMS(ES)m/z =541.3[M+H]⁺ ,563.2[M+Na]⁺ 。

範例2-8

所有的下述化合物以與範例1中所描述之相似的方式，使用適當的苯胺以及2-(苯基)-2-甲基丙腈而被製造。如果不是商業可得的，腈類是使用對本領域技術人員立即明顯的標準技術來製造。

化合物2具有下列NMR特徵：1H NMR(400 MHz,CDCl₃ )δ8.02(s,1H),7.56-7.49(m,1H),7.35(d,J =2.0,1H),7.12-6.96(m,3H),6.68(d,J =8.2,1H),6.66-6.60(m,1H),6.56(s,1H),5.08(d,J =5.4,2H),3.36(s,1H),3.29(s,3H),2.92(t,J =7.0,1H),2.07(s,3H),1.97(d,J =2.4,3H),1.72(d,J=7.4,3H),1.59(s,6H)。

化合物3具有下列NMR特徵：1H NMR(400 MHz,CDCl₃ )δ8.00(m,1H),7.57(d,J =2.1,1H),7.55-7.49(m,1H),7.13(s,1H),7.11(s,1H),7.07(dd,J =8.3,2.1,1H),7.01-6.95(m,1H),6.81(d,J =8.3,1H),6.59(s,1H),5.09(d,J =5.4,2H),3.30(s,3H),3.26(m,1H),2.89(t,J =7.0,1H),2.06(s,3H),1.92(s,3H),1.61(s,3H),1.59(s,3H)。

化合物4具有下列NMR特徵：1H NMR(400 MHz,CDCl₃ )δ7.97(s,1H),7.47(dd,J =10.0,1.8,1H),7.31-7.20(m,2H),7.00(d,J =8,3,2H),6.92-6.71(m,3H),6.65(s,1H),5.08(dd,J =7.0,1.6,2H),3.29(s,3H),3.27(s,1H),2.90(t,J =7.0,1H),1.82(s,6H),1.60(s,6H)。

化合物5具有下列NMR特徵：1H-NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ7.89-7.90(mult,1H),7.82-7.85(mult,1H),7.52(d,J =8.6 Hz,2H),7.16(d,J =8.6 Hz 2H),7.07-7.09(mult,2H),6.94-6.98(mult,1H),6.80(s,1H),5.55(t,J =5.2 Hz,1H),4.93-4.95(mult,2H),4.65(s,1H),3.45(s,3H),1.96(s,6H),1.45(s,6H)。

化合物6具有下列NMR特徵：1H NMR(400 MHz,CDCl₃ )δ7.97(s,1H),7.46(dd,J =9.9,1.8,1H),7.23-7.18(m,1H),7.12(dd,J =10.3,1.9,1H),6.97(ddd,J =23.4,9.0,4.0,2H),6.88-6.79(m,2H),6.61(s,1H),5.08(d,J =5.4,2H),3.30(s,3H),3.27-3.23(m,1H),2.92(t,J =6.9,1H),1.61(s,12H)。

化合物7具有下列NMR特徵：1H-NMR(DMSO-d6,400 MHz)δ7.95-7.90(m,2H),7.62(dd,1H,J =11,1.5 Hz),7.33(dd,1H,J =9.5,1.5 Hz),7.13-7.08(m,3H),6.85(s,1H),6.80-6.70(m,1H),5.57(t,1H,J =5.3 Hz),4.95(d,2H,J =4.3 Hz),4.71(s,1H),3.47(s,3H),1.85(s,6H),1.46(s,6H)。

化合物8具有下列NMR特徵：1H-NMR(DMSO-d6,400 MHz)δ7.96-7.90(m,2H),7.49(dd,1H,J =11,1.5 Hz),7.34(dd,1H,J =9.5,1.5 Hz),7.20-7.10(m,1H),7.05-6.94(m,2H),6.90-6.75(m,3H),5.57(t,1H,J =5.3 Hz),4.94(d,2H,J =4.3 Hz),4.70(s,1H),3.47(s,3H),1.68(s,6H),1.47(s,6H)。

範例9 2-(2-(2-(2,6-二氯苯基)丙烷-2-基)-1-(3,3'-二氟-4'-(羥甲基)-5'-(甲基磺醯基)聯苯4-基)-1H-咪唑-4-基)丙烷-2-醇

範例9a 2-(2,6-二氯苯基)-2-甲基丙腈的製備

於-66℃(丙酮/乾冰)下將於無水THF(150 mL)中的2-(2,6-二氯苯基)乙腈(25.0 g,134 mmol)緩慢地加至叔丁醇鉀(403 mL,403 mmol)的1 M溶液中。將該混合物於-66℃攪拌20分鐘。然後，於-66℃下在25分鐘的期間內逐滴地加入碘甲烷(33.6 mL,538 mmol)。在此階段，其為放熱的，且觀察到大量的淡黃色沉澱物。將該懸浮液於-60℃攪拌30分鐘。以200 mL冰水淬熄該反應混合物，並以醚萃取(3 x 150 mL)。結合該有機物，以150 mL鹽水沖洗，通過Na₂ SO₄ 乾燥，並在旋轉蒸發器上濃縮。藉由管柱層析(ISCO，330 g二氧化矽，20% EtOAc於己烷中)純化該粗產物(30 g,黃色油狀物)，以提供為淡黃色油狀物的2-(2,6-二氯苯基)-2-甲基丙腈(28.2 g,132 mmol,98%產率)。¹ H-NMR(CDCl₃ ,400 MHz)δ7.35(d,2H,J =8.03 Hz),7.16(t,1H,J =8.0 Hz),2.09(s,6H);¹³ C-NMR(CDCl₃ ,126 MHz)δ134.6,133.8,131.4,129.0,124.1,38.6,29.2;MSm/e 214.10(M+H⁺ );HPLC(XBridge 5μ C18 4.6x50 mm，4 mL/min，溶劑A：10% MeOH/水具有0.2% H₃ PO₄ ，溶劑B：90% MeOH/水具有0.2% H₃ PO₄ ，在4分鐘的期間內以0-100% B梯度)：3.16分鐘。

範例9b N-(4-溴-2-氟苯基)-2-(2,6-二氯苯基)-2-甲基丙脒的製備

將2-(2,6-二氯苯基)-2-甲基丙腈(20 g,93 mmol)以及4-溴-2-氟苯胺(28.4 g,149 mmol)溶解於無水鄰二甲苯(200 mL)中，並在N₂ 下加熱至100℃。當於100℃攪拌該反應混合物的同時，在2.5小時的期間內逐滴地加入(每分鐘~0.9 mL)於甲苯(140 mL,280 mmol)中的三甲基鋁(2 M)。在加入之後，將該反應混合物於100℃攪拌30分鐘，然後冷卻至-5℃。非常小心地以酒石酸鈉鉀(20 g於100 mL水中)淬熄該反應混合物。(小心：氣體以及熱的形成)。經由矽藻土545過濾該反應混合物。以1N HCl(4 X 70 mL)沖洗該濾液。以2N NaOH中和該水溶液，並以EtOAc(4 X 100 mL)萃取。合併該有機物，以鹽水沖洗，以Na₂ SO₄ 乾燥，並在旋轉蒸發器上濃縮，以提供24 g的粗產物。以72 mL的MTBE以及240 mL的己烷再結晶該粗產物，以產生為白色固體的N-(4-溴-2-氟苯基)-2-(2,6-二氯苯基)-2-甲基丙脒(17.5 g,43.3 mmol,46.4%產率)(純度：99%)。¹ H-NMR(MeOD,400 MHz)δ7.42(d,2H,J =8.0 Hz),7.30(m,2H),7.16(t,1H,J =8.0 Hz),6.93(t,1H,J =8.0 Hz),2.11(s,6H);¹³ C-NMR(DMSO-d ₆ ,100 MHz)δ166.5,156.1,153.7,140.6,138.5,135.9,131.4,128.6,128.0,125.7,119.5,112.9,50.0,29.2;MSm/e 403.09(M+H⁺ );HPLC(XBridge 5μ C18 4.6x50 mm，4 mL/min，溶劑A：10%MeOH/水具有0.2 % H₃ PO₄ ，溶劑B：90 % MeOH/水具有0.2 % H₃ PO₄ ，在4分鐘的期間內以0-100 % B梯度)：2.32分鐘。

範例9c 1-(4-溴-2-氟苯基)-2-(2-(2,6-二氯苯基)丙烷-2-基)-4-羥基-4,5-二氫-1H-咪唑-4-羧酸乙酯的製備

在50分鐘的期間內，將於24 mL的THF中的3-溴-2-丙酮酸乙酯(23.3 mL,166 mmol)溶液於55℃下緩慢地加至在甲苯(180 mL)以及THF(180 mL)中之N-(4-溴-2-氟苯基)-2-(2,6-二氯苯基)-2-甲基丙脒(48.0 g,119 mmol)、K₂ CO₃ (41.0 g,297 mmol)的混合物中。將該反應混合物維持在55℃ 1.5小時。觀察到白色泥漿。將該反應混合物冷卻至5℃。逐滴地加入HCl(0.5N,450 mL)(終點pH=9~10)。加入之後，將該懸浮液冷卻至0℃。藉由過濾收集該固體，以水(2 x 50 mL)沖洗，然後在真空箱中於60℃隔夜乾燥。獲得為白色固體的1-(4-溴-2-氟苯基)-2-(2-(2,6-二氯苯基)丙烷-2-基)-4-羥基-4,5-二氫-1H-咪唑-4-羧酸乙酯(59 g,114 mmol,96%產率)。¹ H-NMR(CDCl₃ ,400 MHz)δ7.11(m,3H),6.96(m,2H),6.72(t,1H,J =8.28 Hz),4.35(m,2H),4.25(d,1H,J =10.5 Hz),3.80(d,1H,J =10.8 Hz),1.98(s,3H),1.93(s,3H),1.38(t,3H,J =7.03 Hz);¹³ C-NMR(CDCl₃ ,126 MHz)δ 173.0,171.5,159.8,157.8,137.3,135.7,132.1,131.1,128.1,127.4,125.6,122.2,120.1,93.5,62.5,45.5,30.2,14.0；MSm/e 517.05(M+H⁺ );HPLC(XBridge 5μ C18 4.6x50 mm，4 mL/min，溶劑A：10%MeOH/水具有0.2% H₃ PO₄ ，溶劑B：90% MeOH/水具有0.2% H₃ PO₄ ，在4分鐘的期間內以0-100%B梯度)：2.74分鐘。

範例9d 1-(4-溴-2-氟苯基)-2-(2-(2,6-二氯苯基)丙烷-2-基)-1H-咪唑-4-羧酸乙酯的製備

將TFA(25.0 g,220 mmol)加至在EtOH(200 mL)中的1-(4-溴-2-氟苯基)-2-(2-(2,6-二氯苯基)丙烷-2-基)-4-羥基-4,5-二氫-1H-咪唑-4-羧酸乙酯(38 g,73 mmol)混合物中。隨後將該混合物加熱至95℃。2.5小時後的HPLC分析顯示剩下<1%的醇類中間產物。以300 mL的CH₂ Cl₂ 稀釋該混合物，並以冰浴冷卻至近乎5℃。以1N NaOH(120 mL)中和該混合物，並分離該有機層。以CH₂ Cl₂ (2 x 100 mL)萃取該水層。在旋轉蒸發器上濃縮合併的有機層，以產生粗材料。在EtOH(5 mL/1 g)中的再結晶作用提供了為灰白色固體的32 g的1-(4-溴-2-氟苯基)-2-(2-(2,6-二氯苯基)丙烷-2-基)-1H-咪唑-4-羧酸乙酯(86%產率)。¹ H-NMR(DMSO-d ₆ ,400 MHz)δ7.92(s,1H),7.16(d,1H,J =8.0 Hz),7.22(m,3H),7.11(m,1H),7.04(t,1H,J =12.0 Hz),4.25(q,2H,J =8.0 Hz),1.94(s,6H),1.27(t,3H,J =8.0 Hz);MSm /e 502.68(M+H⁺ );HP LC(XBridge 5μC18 4.6x50 mm，4 mL/min，溶劑A：10% MeOH/水具有0.2% H₃ PO₄ ，溶劑B：90% MeOH/水具有0.2% H₃ PO₄ ，在4分鐘的期間內以0-100%B梯度)：3.87分鐘。

範例9e 2-(1-(4-溴-2-氟苯基)-2-(2-(2,6-二氯苯基)丙烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)丙烷-2-醇的製備

在45分鐘的期間內，將在65 mL的CH₂ Cl₂ 與87 mL的THF中之1-(4-溴-2-氟苯基)-2-(2-(2,6-二氯苯基)丙烷-2-基)-1H-咪唑-4-羧酸乙酯(30 g,60 mmol)溶液緩慢地加至在120 mL以冰/鹽浴冷卻(-15至-17℃)的THF中之甲基溴化鎂(60.0 mL,180 mmol,3M於醚中)的混合物中。將該內部溫度小心地維持在0℃以下。更使用2 X 20 mL的CH₂ Cl₂ 以向前沖洗該剩餘材料。將該反應混合物溫度維持在0℃以下1小時，並同時攪拌。然後以100 mL的CH₂ Cl₂ 稀釋該反應混合物，並緩慢地加入飽和的NH₄ Cl。以CH₂ Cl₂ (2 X 80 mL)萃取所產生的混合物。合併有機物，以鹽水沖洗，以Na₂ SO₄ 乾燥，並在旋轉蒸發器上濃縮，以提供為白色固體的2-(1-(4-溴-2-氟苯基)-2-(2-(2,6-二氯苯基)丙烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)丙烷-2-醇(28.5 g,58.6 mmol,98%產率)。¹ H-NMR(CDCl₃ ,400 MHz)δ7.13(dd,1H,J =9.03,2.01 Hz),7.09(s,1H),7.07(s,1H),6.93(m,2H),6.75(t,1H,J =8.16 Hz),6.55(s,1H),3.18(s,1H),2.00(s,6H),1.58(s,6H)；¹³ C-NMR(CDCl₃ ,126 MHz)δ158.1,156.1,154.5,147.8,139.3,135.7,131.3,130.3,127.8,126.9,122.7,119.8,115.1,68.7,44.8,31.1,29.9;MSm /e 485.05(M+H⁺ );HPLC(XB ridge 5μ C18 4.6x50 mm，4 mL/min，溶劑A：10% MeOH/水具有0.2% H₃ PO₄ ，溶劑B：90% MeOH/水具有0.2% H₃ PO₄ ，在4分鐘的期間內以0-100%B梯度)：2.78分鐘。

範例9 2-(2-(2-(2,6-二氯苯基)丙烷-2-基)-1-(3,3'-二氟-4'-(羥甲基)-5'-(甲基磺醯基)聯苯-4-基)-1H-咪唑-4-基)丙烷-2-醇的製備

在氮氣下將2-(1-(4-溴-2-氟苯基)-2-(2-(2,6-二氯苯基)丙烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)丙烷-2-醇(12.0 g,24.7 mmol)、[2-氟-6-甲烷磺醯基-4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧雜環戊硼烷-2-基)-苯基]-甲醇(9.78 g,29.6 mmol)、K₂ CO₃ (10.2 g,74 mmol)、DME(120 mL)以及水(12 mL)加至1 L 3頸圓底燒瓶中。將該混合物加熱至60℃，然後在氮氣下加入1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵二氯化鈀(II)複合物(4.06 g,4.94 mmol)。將該反應混合物加熱至80℃ 30分鐘。以冰浴冷卻所產生的深色混合物，並分隔於200 mL的CH_2C12 以及200 mL的水中。合併該有機層，並以Na₂ SO₄ 乾燥。在濃縮之後，藉由快速層析(ISCO，330g二氧化矽，0%至100% EtOAc於己烷中)純化該粗產物，以提供為淡黃色固體的12.79 g的粗產物(85%產率)。

藉由將9.5 g的粗產物溶解於65℃的丙酮(80 mL)中而進行再結晶作用。在5小時的期間內，將所產生的溶液緩慢地冷卻至25℃，然後冷卻至0℃額外的30分鐘。在45℃，結晶開始形成。藉由過濾收集該固體，並以冷丙酮潤洗。在烤箱中在真空下於45℃乾燥14小時之後，獲得4.9 g的純產物。為了回收額外的結晶產物，將該母液體濃縮至近乎10 mL，並將其通過二氧化矽墊。使用EtOAc(100 mL)以洗提該化合物。在真空下濃縮該濾液，以產生粗固體。遵從上述程序，在丙酮中再結晶該粗固體，以提供額外的2.5 g的產物。在再結晶作用之後的2次收成合併的回收物為78%產率。¹ H-NMR(DMSO-d ₆ ,400 MHz)δ7.94(m,2H),7.63(dd,1H,J =11.29,1.51 Hz),7.34(d,1H,J =9.54 Hz),7.14(m,3H),7.05(m,1H),6.83(s,1H),5.58(t,2H,J =5.27 Hz),4.96(d,2H,J =4.27 Hz),4.70(s,1H),3.46(s,3H),1.96(s,6H),1.45(s,6H);MSm/e 609.16(M+H⁺ );HPLC(XBridge 5μ C18 4.6x50 mm,4 mL/min,溶劑A：10% MeOH/水具有0.2% H₃ PO₄ ,溶劑B：90% MeOH/水具有0.2% H₃ PO₄ ,在4分鐘的期間內以0-100% B梯度)：2.56分鐘.

或者,範例9如下述而製備：將甲基四氫呋喃(「MeTHF」,6.9 kg)、2-(1-(4-溴-2-氟苯基)-2-(2-(2,6-二氯苯基)丙烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)丙烷-2-醇(1.994 kg,4.1莫耳)以及(2-氟-6-(甲基磺醯基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)苯基)甲醇(1.38 kg,4.19莫耳)加至在氮氣下的1 L 3頸圓底燒瓶中。將該混合物於23℃攪動15分鐘，直到所有的固體溶解。此時期結束時，經由表面下的管線而加入為泥漿的(氧基二-2,1-伸苯基)雙(二苯基膦)(0.022 kg,0.041莫耳)以及Pd(OAc)₂ (0.01 kg,0.045莫耳)。加完之後，以額外的MeTHF(1.65 kg)潤洗該混合物。將所產生的混合物排空至低於80 Torr，並以氮回充。此程序再重覆2次。完成該去除氣體的順序後，將該反應混合物攪動至少15分鐘，並觀察到澄清的金色。在分開的反應容器中，製備在水(10.00 kg)中的氫氧化鉀(0.352 kg)溶液，並在使用之前藉由將氮氣引入至該溶液至少15分鐘而去除氣體。藉由真空而將該KOH溶液(10.35 kg)轉置入該反應器中。該反應溫度展現已知的20℃至29℃的放熱。加完之後，藉由一系列的變壓而將所產生的雙相混合物去除氣體。將該混合物回溫至45-50℃之間，其中其攪拌至少2小時。在此時之後，藉由HPLC分析該反應混合物，其指出該反應完成。將該反應混合物冷卻至23℃，並停止攪拌。允許該混合物分離30分鐘，並移除較低用過的KOH流。將富含產物的有機物通過硫脲官能化的矽膠(0.782 kg)(Silicycle)管柱，以每分鐘~0.1 kg而移除該鈀。以5% NaHCO₃ 溶液(5體積)沖洗該富含產物的有機相，並分離該相。以水(5體積)沖洗該有機相，並分離該有機相以及水相。

該富含產物的有機相精鍊過濾至乾淨的反應容器中，然後在真空下(80 Torr,Tjacket=60℃)濃縮至~8體積(~16 L)。一旦在所指定的體積，允許該反應混合物冷卻至25℃。一旦在所指定的溫度，以2-(2-(2-(2,6-二氯苯基)丙烷-2-基)-1-(3,3'-二氟-4'-(羥甲基)-5'-(甲基磺醯基)聯苯-4-基)-1H-咪唑-4-基)丙烷-2-醇(0.5%,0.008 kg)播種該反應混合物。將所產生的泥漿於25℃攪拌18小時。在此時期結束時，在真空下(150 Torr,Tjacket=60℃)將該反應混合物濃縮至~8 L。一旦在所指定的體積，將該反應混合物加熱至50℃，並在90分鐘的期間將醋酸異丙酯(IPAc,13.90 kg)加至該反應器中。加完之後，在3小時的期間將該反應混合物冷卻至25℃。一旦在所指定的溫度，將該反應混合物於室溫下攪拌16小時。在此時期結束時，過濾該反應混合物，將其去除液體(deliquored)，並以額外的IPAc(10.4 kg)沖洗。在乾氮流下在該濾紙上經由抽吸乾燥該濾餅，以產出白色固體。將該白色固體轉置至乾燥器，並在完全真空下於50℃乾燥，以提供2.03 kg的產物(81%產率,99.40 AP,98 wt%)。

範例10 2-(2-(2-(2,6-二氯苯基)丙烷-2-基)-1-(3,3'-二氟-4'-(羥甲基)-5'-(甲基磺醯基)聯苯-4-基)-1H-咪唑-4基)[( ¹³ CD ₃ ) ² ]丙烷-2-醇

2-(1-(4-溴-2-氟苯基)-2-(2-(2,6-二氯苯基)丙烷-2-基)-1H-咪唑-4-基[( ¹³ CD ₃ ) ₂ ]丙烷-2-醇的製備

在氬下將烘箱乾燥的鎂(86 mg,3.52 mmol)以及無水二***(3.20 mL)轉置至烘箱乾燥的25 mL 14/20圓底燒瓶中。於室溫下加入[¹³ CD₃ ]-碘甲烷(467 mg,3.20 mmol)，並於33℃攪拌1小時。可見的象徵指出格林納(Grignard)試劑形成(澄清的懸浮液變成具有泡沫與放熱的混濁混合物)。將該溶液冷卻至室溫，並在氬下經由插管轉置至於無水二氯甲烷(2.60 mL)中的1-(4-溴-2-氟苯基)-2-(2-(2,6-二氯苯基)丙烷-2-基)-1H-咪唑-4-羧酸乙酯(400 mg,0.800 mmol)冰***液(冰/水浴)中。將製備該格林納試劑的燒瓶以無水醚(2 x 400 μL)潤洗，並經由插管轉置至含有該乙酯的燒瓶中。允許該反應混合物緩慢地回溫至室溫，並攪拌1小時。HPLC分析指出存在<0.3%的起始材料。將該反應冷卻至0℃，以無水二氯甲烷(800 μL)稀釋，並藉由緩慢、小心地加入飽和氯化銨水溶液(8 mL)而淬熄。分離該兩層，並以二氯甲烷(3 x 4 mL)萃取該水層。在真空中濃縮合併的有機萃取物，以獲得443.5 mg為白色固體的粗產物。將上述粗產物與從相似反應獲得的244.3 mg(白色固體)結合。藉由矽膠快速層析(Isco RediSep卡匣，12 g)純化合併的產物，並以於己烷中的10至20% EtOAc洗提。收集30 mL的片段。藉由TLC(二氧化矽，50% EtOAc，50%己烷，R_f =0.41)以及HPLC確認該片段。結合含有純產物的片段，並在真空中濃縮，以產出531.2 mg為白色固體的產物(90%產率)：¹ H-NMR(400 MHz,CD ₃ OD )δppm: 6.47-7.58(m,7H),2.01(br s,6H).HPLC:(YMC ODS-AQ，3 μm，150 x 4.6 mm，移動相A=0.05% TFA於H₂ O中，移動相B=0.05% TFA於ACN中，0分鐘50% B，9分鐘95% B，15分鐘95% B，15.5分鐘50%B。流速=1 ml/min) T_r =9.23分鐘(於220 nm，化學純度=98.8%),LCMS(+ion) m/z=487(0%),493(59%),495(100%),497(47%),498(8%)。

2-(2-(2-(2,6-二氯苯基)丙烷-2-基)-1-(3,3'-二氟-4'-(羥甲基)-5'-(甲基磺醯基)聯苯-4-基)-1H-咪唑-4-基)[( ¹³ CD ₃ ) ₂ ]丙烷-2-醇的製備

在氬下將加入2-(1-(4-溴-2-氟苯基)-2-(2-(2,6-二氯苯基)丙烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)[( ¹³ CD ₃ ) ₂ ]丙烷-2-醇 (0.283 g,0.572 mmol)、(2-氟-6-(甲基磺醯基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)苯基)甲醇(0.227 g,0.686 mmol)、1,1'-雙(二苯基膦)-二茂鐵-二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(0.094 g,0.114 mmol)、碳酸鉀(0.237 g,1.716 mmol)、DME(4.30 mL)以及已事先引入氬的水(0.215 mL)加至25 mL 14/20圓底燒瓶中。將該混合物加熱至80 ℃ 1小時。HPLC以及LCMS分析指出起始材料已被耗盡，以冰水浴冷卻該反應混合物，將其分隔於二氯甲烷(10 mL)以及水(10 mL)之間。以二氯甲烷(3 x 10 mL)萃取該水層。在真空中濃縮合併的有機萃取物，以產生643.6 mg的深色半固體。

先前，該2-(2-(2-(2,6-二氯苯基)丙烷-2-基)-1-(3,3'-二氟-4'-(羥甲基)-5'-(甲基磺醯基)聯苯-4-基)-1H-咪唑-4-基)[(¹³ CD₃ )₂ ]丙烷-2-醇之製備的相似反應已完成，提供了462.3 mg的深色固體。將來自兩個實驗的粗產物結合，並在溶解於二氯甲烷中且預吸收在矽膠上之後藉由矽膠快速層析(Isco RediSep卡匣，80 g)純化。以於己烷中的25-50% EtOAc洗提該快速管柱。收集30 mL片段。在結合包含純產物的片段以及在真空中濃縮之前，藉由TLC(二氧化矽，50% EtOAc，50%己烷，R_f =0.09)以及HPLC確認片段，以產生468.3 mg為黃色固體的2-(2-(2-(2,6-二氯苯基)丙烷-2-基)-1-(3,3'-二氟-4'-(羥甲基)-5'-(甲基磺醯基)聯苯-4-基)-1H-咪唑-4-基)[(¹³ CD₃ )₂ ]丙烷-2-醇。

此材料進一步藉由再結晶而純化，該再結晶在5小時的期間內於65℃的丙酮(4 mL)中緩慢地冷卻至25℃(結晶在40℃開始形成)，然後冷卻至0℃額外的30分鐘。藉由過濾收集該固體，將其以冷丙酮潤洗，並在真空中乾燥，以產生66.2 mg為灰白色固體的該標題化合物。

濃縮來自此第一再結晶作用的母溶液，並使用上述概述的相同程序而從最小量的丙酮(1 mL)再結晶出該剩餘物，以獲得第二收成的276.4 mg為灰白色固體的結晶產物。

濃縮來自該第二再結晶作用的母溶液，並藉由製備型HPLC純化，T_r =15.0分鐘(Prep HPLC條件：Synergi Hydro-RP管柱，4μ,80，21.2 x 250 mm，移動相A=H₂ O，移動相B=ACN，0分鐘30% B，25分鐘100% B。流速=16.0 ml/min。UV在220 nm.)。

結合併該3個純化的分離物，以產生401.1 mg為淡黃色固體的2-(2-(2-(2,6-二氯苯基)丙烷-2-基)-1-(3,3'-二氟-4'-(羥甲基)-5'-(甲基磺醯基)聯苯-4-基)-1H-咪唑-4-基)[(¹³ CD₃ )₂ ]丙烷-2-醇(64%產率)。¹ H-NMR(400 MHz,DMSO -d ₆ ))δ ppm: 7.86-7.96(m,2H),7.62(dd,J=11.33 Hz,2.01 Hz,1H),7.33(dd,J=8.31 Hz,1.76 Hz,1H),7.09-7.19(m,3H),6.99-7.09(m,1H),6.81(s,1H),5.53-5.62(m,1H),4.89-4.99(m,2H),4.67(t,J=3.15 Hz,1H),3.45(s,3H),2.08(剩餘丙酮,8 mol%) ,1.95(s,6H).¹³ C-NMR(400 MHz,D6-DMSO) 29.61(t,J=109.88 Hz)

HPLC:(YMC ODS-AQ，3 μm，150 x 4.6 mm，移動相A=0.05% TFA於H₂ O中，移動相B=0.05% TFA in ACN，0分鐘50% B，9分鐘95% B，15分鐘95% B，15.5分鐘50% B。流速=1 ml/min) T_r =9.66分鐘(於220 nm，化學純度=99.8%)。LCMS(+ion) m/z=609(0%),617(100%),618(31%),619(74%),620(22%),621(16%),622(4.3%),623(1.3%)。

範例11-20

以與範例1中所描述的類似方式，藉由取代苯基乙腈試劑來取代為起始材料的2-(苯基)-2-甲基丙腈而各種製造下述化合物：

範例21

化合物21的範例

將25.0 g(134 mmol)的2,6-二氯苯基乙腈以及250 mL的無水THF稱重至1 L燒瓶中。將所產生的溶液冷卻至-70℃，並加入134 mL於THF中的1.0 M叔丁醇鉀(1.0 M，接著加入8.4 mL的碘甲烷(1.0 eq)。將該反應物於-70℃攪拌1小時，然後允許其在3小時的期間內回溫至室溫。在真空中濃縮該反應物以移除THF，然後以醋酸乙酯以及1 M HCl將其沖洗至分離漏斗中。分離該醋酸乙酯，以重亞硫酸鹽、鹽水沖洗，將其乾燥(Na₂ SO₄ )，並在真空中濃縮。藉由矽膠快速層析(Biotage，300 g SiO₂ ，在1小時的期間內從100%己烷至10%醋酸乙酯的梯度洗提)純化該剩餘物。結合適當的片段，並在真空中濃縮，以提供為無色油狀的產物，~99%純藉由GC，產量：12.2 g(45%)。¹ H NMR(CDCl₃ ,400 MHz)δ7.36(d,J =8 Hz,2H),7.22(t,J =8 Hz,1H),4.84(q,J =7 Hz,1H),1.07(d,J =7 Hz,3H)。

使用適當的苯胺以及2-(苯基)丙腈為起始材料，以類似於範例1中所描述的方式製造化合物21。

化合物11具有下列NMR特徵：1H NMR(400 MHz,CDCl₃ )δ8.10(d,J =1.2,1H),7.59(dd,J =9.9,1.8,1H),7.47-7.37(m,2H),7.24(dd,J =5.3,3.2,2H),7.13(dd,J =8.3,2.1,1H),7.05(d,J =8.4,1H),6.89(s,1H),5.10(d,J =4.4,2H),4.09(s,2H),3.30(s,3H),3.25(d,J =17.4,1H),2.86(s,1H),1.63(s,6H)。

化合物12具有下列NMR特徵：1H NMR(400 MHz,DMSO)δ8.06(d,J =8.7,2H),7.99-7.86(m,1H),7.70(d,J =8.3,1H),7.58(m,3H),7.40(t,J =7.6,1H),7.21(d,J =7.7,1H),7.13(s,1H),5.57(t,J =5.3,1H),4.95(d,J =4.7,2H),4.81(s,1H),4.13(s,2H),3.45(s,3H),1.46(s,6H)。

化合物13具有下列NMR特徵：1H NMR(400 MHz,CDCl₃ )δ8.10(s,1H),7.71(d,J =2.0,1H),7.60(dd,J =9.9,1.8,1H),7.49(dd,J =8.2,2.1,1H),7.22(d,J =8.2,1H),7.12(dd,J =8.6,6.1,1H),6.96(dd,J =8.5,2.6,1H),6.89-6.78(m,2H),5.10(s,2H),4.05(s,2H),3.31(s,3H),3.00(s,1H),2.77(s,1H),1.63(2,J =5.5,6H)。

化合物14具有下列NMR特徵：1H NMR(400 MHz,DMSO)δ7.85(t,J =4.5,2H),7.70(dd,J =11.4,1.8,1H),7.50(dd,J =8.3,1.7,1H),7.35(t,J =8.2,1H),7.09(dd,J =8.8,2.6,1H),7.03-6.80(m,3H),5.35(t,J =5.3,1H),4.73(d,J =4.1,2H),4.56(s,1H),3.80(s,2H),3.38(t,J =6.4,1H),3.23(s,3H),1.21(s,6H)。

化合物15具有下列NMR特徵：1H NMR(400 MHz,CDCl₃ )δ8.11(d,J =1.2,1H),7.72-7.53(m,3H),7.28(dd,J =18.0,4.9,5H),7.15(dd,J =8.3,2.1,1H),7.05(d,J =8.4,1H),6.96(s,1H),5.09(s,2H),4.12(s,2H),3.30(s,3H),3.28(s,1H),2.93(s,1H),1.64(s,6H).

化合物16具有下列NMR特徵：1H NMR(400 MHz,CDCl₃ )δ8.09(s,1H),7.60(dd,J =9.9,1.8,1H),7.39(m,2H),7.23(t,J =8,1H),7.18-7.06(m,2H),7.00(m,1H),6.89-6.81(m,2H),5.10(dd,J =7.0,1.6,2H),4.06(s,2H),3.30(s,3H),2.92(t,J =7.0,1H),2.70(s,1H),1.64(s,6H)。

化合物17具有下列NMR特徵：1H NMR(400 MHz,CDCl₃ )δ8.10(s,1H),7.64-7.55(m,3H),7.25(m,2H),7.16-7.00(m,3H),6.92(s,1H),6.81(d,J =7.5,1H),5.08(dd,J =7.1,1.7,2H),4.02(s,2H),3.28(s,3H),2.90(t,J =7.1,1H),2.76(s,1H),2.16(d,J =8.6,3H),1.64(s,6H)。

化合物18具有下列NMR特徵：1H NMR(400 MHz,CDCl₃ )δ8.12(s,1H),7.70-7.59(m,3H),7.45(d,J =8.4,2H),7.24(d,J =8.0,2H),7.16-7.07(m,1H),6.85(s,1H),5.10(d,J =5.6,2H),4.31(s,2H),3.30(s,3H),3.07(s,1H),2.94(t,J =7.0,1H),1.55(s,6H).

化合物19具有下列NMR特徵：1H NMR(400 MHz,CDCl₃ )δ8.11(d,J =1.1,1H),7.62(ddd,J =12.0,8.4,1.8,3H),7.28-7.26(m,3H),6.97(s,1H),6.93-6.76(m,2H),5.09(s,2H),4.14(s,2H),3.29(br s,4H),2.91(s,1H),1.65(s,6H)。

化合物20具有下列NMR特徵：1H NMR(400 MHz,CDCl₃ )δ8.08(d,J =1.1,1H),7.57(dd,J =9.9,1.8,1H),7.38(ddd,J =10.3,9.2,2.0,2H),7.23-7.17(m,2H),7.18-7.01(m,3H),6.89(d,J =0.7,1H),5.09(s,2H),4.14(s,2H),3.37(s,1H),3.30(s,3H),2.92(s,1H),1.64(s,6H)。

化合物21具有下列NMR特徵：1H NMR(400 MHz,CDCl₃ )δ7.97(s,1H),7.47(dd,J =9.8,1.6,1H),7.18(d,J =10.6,1H),7.12-7.04(m,2H),6.96(d,J =7.9,2H),6.90-6.81(m,1H),6.79(s,1H),5.13(s,2H),4.94(q,J =7.0,1H),3.82(s,1H),3.39(d,J =24.5,1H),3.36(s,3H),1.81(d,J =7.1,3H),1.63(s,6H)。

標準生理學、藥理學以及生化程序可用以測試該化合物，以識別那些具有生物活性以調節該LXR(LXR_α 以及LXR_β )的化合物。這種分析法包括，例如，生化分析法，例如結合分析法、螢光偏極性分析法、FRET為基礎的共活化劑網羅分析法(FRET-based coactivator recruitment分析法)(見，一般而言，Glickman et al.,J. Biomolecular Screening(2002),Vol. 7,No. 1,pp. 3-10)以及細胞基礎的分析法，包括該共轉染分析法，使用LBD-Gal 4嵌合體以及蛋白質-蛋白質交互作用分析法(見，Lehmann. et al.,J. Biol Chem.(1997),Vol. 272,No. 6,pp. 3137-3140)。

本發明化合物顯示優於本領域先前揭露之化合物的預期外優點，例如那些揭露於PCT公開號第WO 2007/002563號中的化合物。在例如下列描述分析法中，本化合物已顯示具有想要的部分LXR促效劑特性，在人類全血中具有增加效力以及具有低LXR功效。此外，在人類肝臟微粒體分析法中，該本發明化合物也展現了代謝穩定性。這種化合物應更有用於治療、抑制或改善本文中所討論之一或更多的疾病或失調。

範例A 親近閃爍檢測法(SPA)

該SPA分析法測量由³ H-24,25-ep羥膽固醇結合至LXR_α -RXR_α 或LXR_β -RXR_α 異型二聚體所產生的放射性訊號。該分析法的基礎是使用包含閃爍物的SPA小珠，使得當結合至該受體將所標記的配位體帶到該小珠近處時，來自該標記的能量刺激該閃爍物放出光線。使用標準微盤閃爍讀取器測量該光線。可藉由估計該化合物可競爭掉放射性標記配位體的程度而測量配位體結合至受體的能力，該放射性標記配位體具有已知的對該受體的親和力。

所需材料：

1.　標記：³ H-24,25-環氧-膽固醇(NEN Life Science Products/Perkin Elemer)

2.　LXR_α 溶解產物：被製造出為粗溶解產物的桿狀病毒表現的LXR_α /RXR異型二聚體，兩者都具有6-HIS標籤

3.　LXR_β 溶解產物：被製造出為粗溶解產物的桿狀病毒表現的LXR_β /RXR異型二聚體，兩者都具有6-HIS標籤

4.　SPA小珠：Ysi銅組胺酸標籤(His-tag) SPA小珠(Amersham)

5.　盤：非結合表面的384孔盤(Corning)

6.　蛋白質溶解產物稀釋緩衝液：(20 mM Tris-HCl pH 7.9,500 mM NaCl,5 mM咪唑)。

7.　2x SPA緩衝液：(40 mM K₂ HPO₄ /KH₂ PO₄ pH7.3，100 mM NaCl，0.05% Tween 20，20%甘油，4 mM EDTA)

8.　2x SPA緩衝液w/o EDTA：(40 mM K₂ HPO₄ /KH₂ PO₄ pH7.3，100mM NaCl，0.05% Tween 20，20%甘油)

儲存溶液

0.5 M K₂ HPO₄ /KH₂ PO₄ pH 7.3

0.5 M EDTA pH 8.0

5 M NaCl

10% Tween-20

甘油 蛋白質　溶解產物的製備

遵從標準程序而藉由將適當的全長cDNA選殖入pBacPakhis2載體(Clontech,CA)以製造出人類RXRα(登錄編號NM_002957)、LXR_α (登錄編號U22662)以及LXR_β (登錄編號U07132)的桿狀病毒表現質體。將該cDNAs***該pBAcPakhis2載體的多酶連接子(polylinker)而創造出該cDNA至存在於pBacPakhis1中之N端多組胺酸標籤的符合讀碼融合(in frame fusion)。藉由限制酶圖譜及/或定序而確認正確的選殖。

藉由以1.25x10⁶ /ml的密度於27℃下感染健康的Sf9昆蟲細胞而製備細胞溶解產物於500 mL的總體積中(每1L大小的旋轉培養瓶)，將其於標準條件下培養。為了製備該LXR_α 溶解產物，將昆蟲細胞共轉染2.0之M.O.I.的該LXR_α 表現卡匣以及近乎1.0之M.O.I.的該RXR表現卡匣。為了製備該LXR_β 溶解產物，將昆蟲細胞共轉染近乎2.0之M.O.I.的該LXR_β 表現卡匣以及近乎1.0之M.O.I.的該RXR表現卡匣。在兩個例子中，在收成之前，將細胞於27℃以不停的晃動培養48小時。

在培養之後，藉由離心收成細胞並將其沉澱。將細胞沉澱物再懸浮於2倍體積之冰冷新鮮製備的萃取緩衝液中[20mM Tris pH 8.0，10mM咪唑，400mM NaCl，每10 ml萃取緩衝液包含一個無EDTA之蛋白酶抑制劑錠劑(Roche目錄編號：1836170)]。

使用Dounce均質機將細胞在冰上緩慢地均質化，以達到80-90%的細胞溶解。將該均質物於預冷的轉子(Ti50或Ti70或相等物)中於4℃以45,000 rpm離心30分鐘。將部分的上清液於乾冰上冷凍，並冷凍儲存於-80℃，直到定量與品管。在該SPA分析法中測試部分的該溶解產物，以確保批次至批次的一致性，並在使用Ni-NTA樹脂(Qiagen)純化之後經由SDS-PAGE分析，並在用於篩檢分析法之前調整蛋白質濃度以及表現量。

篩檢試劑的製備

[³ H]24,25 Ep羥膽固醇(EC)溶液：對單一的384孔盤(或400孔)，將21 μL的[³ H]EC(特異性活性76.5 Ci/mmol，濃度3.2 mCi/mL)加至4.4 mL的2x SPA緩衝液中，以提供200 nM的最終濃度。對於每個額外的384孔盤，將額外19.1 μL的[³ H]EC加至4.0 mL的額外2x SPA緩衝液中。於該孔中的[³ H]EC最終濃度為50 nM。

以蛋白質溶解產物稀釋緩衝液稀釋LXR_α 溶解產物(如上述而製備)。每384孔盤(或200孔)製備1400 μL的稀釋LXR_α 溶解產物，以及對於每個額外的384孔盤製備1120 μL的稀釋LXR_α 溶解產物。

以蛋白質溶解產物稀釋緩衝液稀釋LXR_β 溶解產物(如上述而製備)。每384孔盤(或200孔)製備1400 μL的稀釋LXR_β 溶解產物，以及對於每個額外的384孔盤製備1120 μL的稀釋LXRβ溶解產物。

SPA小珠溶液：對於384孔盤(或400孔)，將3.75 mL的2x SPA緩衝液w/o EDTA、2.25 mL的H₂ O以及1.5 mL的Ysi組胺酸標籤SPA小珠(在取用前劇裂混合好)混合在一起。對於每個額外的384孔盤，將額外的3.5 mL的2x SPA緩衝液w/o EDTA、2.1 mL的H₂ O以及1.4 mL的Ysi組胺酸標籤SPA小珠混合在一起。

程序：

在96孔盤中製備每種化合物的適當稀釋，並將其以吸量管移至384孔盤的適當孔中(每孔3.5 1)。

將9.1 μL的[³ H]EC加至該多孔盤之2-23欄的每個孔中。

將5 μl的稀釋LXR_α 溶解產物加至該多孔盤奇數列上的2-23欄的每個孔中。

將5 μL的稀釋LXR_β 溶解產物加至該多孔盤偶數列上的2-23欄的每個孔中。

將17.5 μL的SPA小珠溶液加至該多孔盤之2-23欄的每個孔中。

以透明的密封物蓋上該盤，並將該盤置於室溫下的培養箱中近乎30分鐘。

在培養之後，使用n ABASE 3H_384DPM程式，使用冷光盤判讀器(MicroBeta,Wallac)分析該盤。n ABASE 3H_384DPM的設定是：計數模式：DPM；樣本類型：SPA；ParaLux模式：低背景；計數時間：30秒。

以相同的方式進行LXR_α 以及LXR_β 的分析法。所決定的Ki代表至少2個獨立劑量反應實驗的平均。每個化合物的結合親和力可使用一側競爭方程式(one site competition formula)而藉由非線性回歸分析來決定，以決定該IC₅₀ ，其中：

Y=底部+(頂部-底部)/(1+10^X-logIC50 )。

然後使用Cheng以及Prusoff等式計算該Ki，其中：

Ki=IC₅₀ /(1+[配位體的濃度]/配位體的Kd)。

對於此分析法，典型地該配位體的濃度=50 nM以及該受體之EC的Kd是200 nM，如同飽和結合所決定。

當在此分析法中測試時，本發明化合物展現了結合至LXR_α 及/或LXR_β 的能力。

範例B 共轉染分析法

為了測量化合物在細胞基礎分析法中活化或抑制LXR轉譯活性的能力，使用了共轉染分析法。已顯示LXR與RXR做為異型二聚體而作用。對於該共轉染分析法，LXRα以及LXRβ的表現質體與螢光素酶報告質體一起經由過渡性轉染而被分別地導入哺乳類動物細胞中，該螢光素酶報告質體包含一份被LXR-RXR異型二聚體鍵結的DNA序列(LXRE ;Willy,P.et. al . 1995)。LXR與內生性的RXR形成異型二聚體。以LXR促效劑處理轉染細胞增加了LXR的轉譯活性，其藉由增加的螢光素酶活性而測量。同樣地，可藉由決定化合物競爭性地抑制LXR促效劑活性的能力而測量LXR拮抗劑活性。

所需材料

CV-1非洲綠猴腎臟細胞

共轉染表現質體，包含全長LXR_α (pCMX-h LXR_α )或LXR_β (pCMX-hLXR_β )，報告質體(LXREx1-Tk-螢光素酶)以及控制組(pCMX-半乳糖苷酶表現載體)(Willey et al. Genes ＆ Development 9 1033-1045(1995))。

轉染試劑，例如FuGENE6(Roche)。

1x細胞溶解緩衝液：

22.4 mM三胺(Tricine) pH 8.0

0.56 mM EGTA pH 8.0

5.6 mM MgSO₄

0.6% Triton X-100

5.6% 甘油

10x 螢光素酶受質溶液：

10 mM HEPES pH 6.5

2.75 mM D-螢光素

0.75 mM輔酶-A

3.7 mM ATP

96 mM DTT

篩檢試劑的製備

在實驗24小時之前，藉由將細胞轉盤至T-175培養瓶或500 cm² 培養皿而準備CV-1細胞，以在轉染當天達到70-80%的密度。將轉染的細胞數藉由將篩選的盤數而決定。384孔盤的每一孔需要~8000個細胞。遵從陽離子脂肪轉染試劑FuGENE6(Roche)中所提供的指示，藉由混合所需的質體DNA與該試劑而製備DNA轉染試劑。每個細胞株的最理想DNA量是憑經驗以及將轉染的容器大小來決定的。對於每個T175 cm² 培養瓶，混合並加入共20 g的DNA、60 1的Fugene 6以及1 ml的Optimem。然後於37℃培養細胞至少5小時，以製備篩檢細胞。

在使用之前藉由結合下述溶液而製備螢光素酶分析法試劑：

1等分10x螢光素酶受質溶液

9等分1X細胞溶解緩衝液。

程序

藉由分配384孔盤每孔5 μL的化合物來準備分析盤，以達到10 μM的最終化合物濃度，且不高於0.5% DMSO。從該篩檢細胞移除培養基，以胰蛋白酶處理該細胞，藉由離心收成細胞，將其計數並以每孔近乎8000個細胞的密度、以約45 μL的體積而轉盤至上述準備的該384孔分析盤中。將包含兩種化合物以及篩檢細胞(總體積50 μL)的分析盤於37℃培養20小時。

在與化合物培養之後，從該細胞移除培養基，並加入螢光素酶分析試劑(30 μL/孔)。在室溫~2分鐘之後，在冷光儀上判讀該分析盤(具有在機上的注射器之PE Biosystems Northstar判讀器或相等物)。

可使用該LXR/LXTE共轉染分析法以建立EC₅₀ /IC₅₀ 的效力以及百分比活性或抑制功效。功效定義了化合物相對於高控制組(N -(3-((4-氟苯基)-(萘-2-磺醯基)氨基)丙基)-2,2-二甲基丙醯胺))或低控制組(DMSO/運送工具)的活性。該劑量反應曲線是從具有LOG單位差異的濃度10點曲線而產生。每個點代表來自384孔盤資料的4孔平均。

來自此分析法的資料符合下列等式，從其該EC₅₀ 值可被解出：

Y=底部+(頂部-底部)/(1+10^{((logEC50-X)*HillSlope)} )。

該EC₅₀ /IC₅₀ 因此被定義為促效劑或拮抗劑引起反應的濃度，該反應是頂部值(最大值)與底部值(基線)之間的半路。所呈現的EC₅₀ /IC₅₀ 值是至少2個、且通常為3個獨立實驗的平均。藉由與((N -(3-((4-氟苯基)-(萘-2-磺醯基)-氨基)丙基)-2,2-二甲基丙醯胺)所達到的最大反應比較，來決定促效劑的相對功效或控制%，該最大反應是在每個劑量反應實驗中個別地測量。

對於該拮抗劑分析法，可將LXR促效劑加至384孔盤的每個孔中，以引起反應。該每個拮抗劑的抑制%因此是該促效劑活性抑制的測量。在此範例中，100%的抑制將代表特定濃度的LXR促效劑活性已被減低至基線水準，該基線水準定義為只存在DMSO的該分析法活性。

本發明化合物在直接上述的LXRα分析法中測試，並顯示具有低於或等於25%該控制組化合物的功效。

本發明化合物在直接上述的LXRβ分析法中測試，並顯示具有高於或等於30%該控制組化合物的功效。

範例C 人類全血分析法

將人類全血收集於含EDTA的管子中，並將0.5 mL的部分與於0.5% DMSO中之測試化合物的適當序列稀釋立即混合於96孔塊中。將化合物與血液於37℃持續地搖動而培養4小時。在培養之後，將細胞溶解於ABI核酸純化溶解溶液(Applied Biosystems目錄編號4305895)中，並冷凍於-80℃中。在細胞溶解之後，根據該製造商所提供的流程使用ABI 6100 RNA準備站(prep station)而純化全RNA。cDNA被合成，並在ABI Prism 7900HT定序偵測系統上使用SYBR綠定量PCR(Q-PCR)以及使用來自Quanta Bioscience Inc(Quanta Bioscience目錄編號95047以及95055)的試劑而定量mRNA。

藉由該ΔΔCT法(Michael W. Pfaffl .A new mathematical model for relative quantification in real-time RT-PCR. Nucleic Acids Research,2001,Vol. 29,No. 9 e45)來決定每個mRNA的量，並標準化成兩個控制組mRNA的量，即核糖體蛋白質L-30(L-30)以及beta-2-微球蛋白(B2M)。由測試化合物誘導的ABCA1以及ABCG1被繪圖成參考化合物的百分比，2-(4-(5-(5-氰基-1-(2,4-二氟苄基)-6-氧代-4-(三氟甲基)-1,6-二氫吡啶-2-基)噻吩-2-基)-3-甲基苯基)醋酸，並藉由符合S形反應曲線而計算效力(EC₅₀ )以及活性(%MAX)，該S形反應曲線為使用XLFit軟體而根據等式y=A+((B-A)/(1+((C/x)^D)))的轉化化合物濃度的對數函數。該全LXRα以及LXRβ作用劑(pan agonist)2-(4-(5-(5-氰基-1-(2,4-二氟苄基)-6-氧代-4-(三氟甲基)-1,6-二氫吡啶-2-基)噻吩-2-基)-3-甲基苯基)醋酸，(EC₅₀ 1-2 μM)被使用為參考化合物，且其最大活性被定義為100%。

將本發明化合物在直接上述的分析法中測試，並顯示在低於1,000 nM具有效力，較佳地，低於100 nM，更佳地為低於20 nM。

範例D 在人類 微粒體中的高產出量(HT)代謝穩定性

在10分鐘的培養之後，該代謝穩定性分析法使用人類肝臟微粒體評估了試管中CYP媒介的代謝穩定性。

接收於100% DMSO中為3.5 mM儲存溶液的測試化合物。稀釋化合物，以產生包含1.4% DMSO的50 μM乙腈(ACN)溶液，然後做為100x儲存物而用於與人類肝臟微粒體培養。每種化合物被二重覆地測試。結合化合物、NADPH以及肝臟微粒體溶液而在3個步驟中培養：152 μl的肝臟微粒體懸浮液，於100 mM NaP_i 中的1.1 mg/ml蛋白質濃度，pH 7.4，5 mM MgCl₂ 緩衝液，於37℃預加溫。

將1.7 μl的50 μM化合物(98.6% ACN,1.4% DMSO)加至相同的管子中，並於37℃中預培養5分鐘。

藉由加入17 μl的預加溫於100 mM NaP_i 、pH 7.4中的10 mM NADPH溶液而起始該反應。

均勻混合反應成分，並立即將75 μl轉置至150 μl的淬熄/終止溶液中(零時間點，T₀ )。將反應於37℃溫育10分鐘，然後將額外的75 μl部分是轉置入150 μl的淬熄溶液中。使用包含100 μM DMN(用於注射品管的UV標準物)的乙腈做為淬熄溶液以終止代謝反應。

將淬熄混合物以1500 rpm(~500 Xg)在Allegra X-12離心機、SX4750轉子(Beckman Coulter Inc.,Fullerton,CA)中離心15分鐘，以沉澱已變性的微粒體。然後將90 μl上清液萃取物的體積，包含母化合物以及其代謝物的混合物，轉置至分開的96孔盤而用以進行UV-LC/MS-MS分析，以決定在該混合物中之剩餘母化合物的百分比。

UV-LC/MS-MS樣本分析-結構完整性預分析

使用代謝穩定性結構完整性預分析以存取被分析之化合物的純度。化合物以57 μl的3.5 mM DMSO溶液被接收於96孔盤中。以包含等體積乙腈、異丙醇以及MilliQ-H₂ O的溶液而將該3.5 mM化合物DMSO儲存溶液稀釋18倍。使用Waters Sentfy 2.1 mm保護管柱以及下表中所描述的LC條件，以5 μl注射以及1 ml/min的流速，藉由LC-UV/MS在Thermo LCQ Deca XP Plus離子阱質譜儀上以分析所產生之溶液(200 μM)的結構完整性。所獲得的資料藉由在220 nm的UV吸收度反映純度。只有那些純度高於50%的化合物的結果被報告。

*移動相的結構完整性預分析：(A) 98%水、具有10 mM醋酸銨的2%乙腈；(B) 10%水、具有10 mM醋酸銨的90%乙腈

樣本分析-培養的樣本

在配備有藉由自動融合的加熱電噴霧(H-ESI)來源的熱TSQ量子三重四極棒質譜儀上實施MS/MS條件最佳化，以獲得SRM轉換以及它們相應的碰撞能量值。在1：1甲醇：水中濃度20 μM的化合物溶液在90 μL/min的流速融合，然後在被導入至該來源之前，在50 μL/min的流速下與該移動相結合。所有的化合物最初使用移動相A以及B(50% A以及50% B)來最佳化，如果需要的話，使用移動相C以及D(也具有50:50的組成物)來最佳化。被最佳化的參數，包括極性、SRM轉換以及碰撞能量，被儲存在Microsoft Access資料庫中。

使用從自動融合獲得的質譜條件以分析來自該代謝穩定性分析法的培養樣本。該注射體積是5 μl，且該流速是0.8 ml/min。所使用的梯度顯示於下表中。所有的樣本最初使用移動相A以及B而以該梯度注射。如果需要的話(例如，用於層析的緣故)，樣本以相同的梯度再次注射，但使用移動相C以及D。所有的LC-MS/MS分析參數在該原始資料檔案中被電子化地擷取。

*移動相的反應樣本分析：(A) 98%水、具有0.1%甲酸的2%乙腈；(B) 2%水、具有0.1%甲酸的98%乙腈；(C) 0.1%在水中的氫氧化銨；(D) 0.1%在乙腈中的氫氧化銨。

以Xcalibur^TM 軟體執行峰的積分。藉由比較每個化合物來自該T_10minute 樣本的LC-MS/MS峰區域與來自該T_0minute 樣本的LC-MS/MS峰區域而進行百分比剩餘計算。

在直接上述的分析法中測試本發明化合物，並已顯示在10分鐘時，其具有剩下高於80%的母化合物。

下述表1呈現了測量LXRα EC50與功效之LXR/LXRE共轉染分析法、測量該化合物結合至LXR能力與相對於參考化合物之誘導ABCA1基因表現能力的人類全血分析法(hWBA)、以及該微粒體代謝穩定性分析法的結果。以其中A是100 nM、B是101 nM至<1,000nM以及C是>1,000 nM的範圍給出EC₅₀ 值。

相較於本技術領域先前揭露之化合物，例如那些揭露於PCT公開號WO 2007/002563中之化合物，上列的代表性資料描繪了本發明化合物非預期的想要部分LXR促效劑特性，在人類全血中的增加效力、低LXR功效以及在人類肝臟微粒體分析法中的代謝穩定性。

範例E 活體內效力以及在石蟹獼猴中的最大ABCG1誘導作用

當口服投藥至石蟹獼猴時，本發明化合物被測試它們在血球細胞中誘導LXR標靶基因ABCG1之mRNA的能力。

藉由研磨而將該測試化合物配製於0.5%羧甲基纖維素(CMC,Sigma)以及2% Tween 80(Sigma)中。每個治療組包含3隻公猴，在該研究開始時，每隻重3.0-6.0 kg。每天早上將測試化合物配製於運送工具中，且在7到7:30 AM之間經由口服藉由強制餵食以按劑量給藥至已在前晚禁食的動物。對於基線血球細胞mRNA的決定，將1 ml的靜脈血收集於EDTA乾塗層管中，並加入1體積不具鈣或鎂的Dulbecco’s磷酸鹽緩衝食鹽水以及2體積的核酸純化溶解溶液(Applied Biosystems,Inc.)。在RNA分離與分析之前，將樣本冷凍於-80℃中。在基線樣本的收集之後，按劑量給藥測試化合物。在按劑量給藥5小時之後，收集靜脈血，並如上述處理RNA的決定。收集額外0.5 ml的血，並用於分析化合物的血漿濃度。

RNA分離 。允許冷凍樣本於室溫下解凍，然後置於冰上。根據製造商的指示(ABI手冊#4332809 Rev. B)，使用預先載入的流程而在ABI 6100上分離總RNA。

cDNA合成以及Q-PCR反應。 使用來自Quanta Biosciences,Inc.的qScript cDNA合成套組，以從每個總RNA樣本中產生第一股cDNA。在96孔的Eppendorf AG twin-tec PCR盤中，在MJ Research,Inc.型號PTC-200 DNA Engine上進行20 μl的反應。對每個反應使用近乎500 ng的總RNA。反應的組成如下：4 μl 5X q-Script反應混合物，加上3-5 μl的無核酸酶的水，加上1 μl q-Script反轉錄酶，加上10-12 μl輸入RNA。在混合之後，於室溫下將反應物以3750 rpm離心2分鐘，並在MJ研究用熱循環機中執行「q-Script」流程(25℃、5分鐘，接著42℃、30分鐘，然後85℃、5分鐘)。將每個反應物以30 μl無核酸酶的水稀釋，並立即使用於SYBR-綠Q-PCR或儲存於-20℃。如下述進行SYBR-綠Q-PCR反應。使用有效的前置/反置引子組[ABCG1(X-Mmul-ABCG1-F1以及X-Mmul-ABCG1-R1)；核糖體蛋白質L30(SYBR-hL30-F1以及SYBR-hL30-R1)]製備該LXR標靶基因、ABCG1以及該內部標準標準化基因核糖體蛋白質L30的反應混合物。這些引子組序列的資訊被獲得，從「引子銀行」網站(http://pga.mgh.harvard.edu/primerbank/index.html )獲得L30(引子銀行#4506631a1)的的資訊，以及從Exelixis,Inc.(南舊金山，加州，USA)獲得ABCG1(Mmul_ABCG1.TaqManF1/R1)的資訊。

引子序列

Mmul_ABCG1.TaqMan.F1

5’-ACGCAGACAGCACTGGTGAA-3’

Mmul_ABCG1.TaqMan.R1

5’-CTTCCCTCCACCTGGAACCT-3’

hL30-F1　5’-GCTGGAGTCGATCAACTCTAGG-3’

hL30-R2　5’-CCAATTTCGCTTTGCCTTGTC-3’

如下述組合SYBR-綠反應。每個反應，將10 μl 2XGreen Supermix(Applied Biosystems Catalog#4367659)加上2 μl的10 μM基因特異前置/反置引子混合物(每個引子的最終濃度是500 nM)、加上4 μl水與4 μl的稀釋RT反應物混合在一起。將反應混合物以3750 rpm於室溫下離心2分鐘，並在Applied Biosystems model 7900HT SDS-Taqman System上進行反應。

相對mRNA量的計算，以及活體內化合物效力與最大活性。 使用第二衍生比較Ct法(2^-ΔΔCt )計算ABCG1 mRNA的相對量。在以核糖體蛋白質L30 mRNA標準化之後獲得量。以二重覆測試每個樣本，並使用平均Ct用於計算。

在石蟹獼猴中化合物活體內效力的計算。 標繪出所有劑量組在按劑量給藥後5小時時來自每個個別動物血漿中測試化合物的濃度，對上誘導倍數，對上按劑量給藥後5小時時每個動物血球細胞中ABCG1 mRNA基線的圖。來自所有劑量組的資料包含在每個化合物的相同標繪圖上。使用S形劑量反應等式(Graphpad Prism 4.03軟體)藉由非線性曲線符合而決定每個化合物在活體內的效力(EC₅₀ )以及ABCG1 mRNA的最大誘導。

藉由LC/MS/MS定量血漿化合物濃度。下述為以 串聯式質譜儀之液相層析(LC/MS/MS)為基礎的生物分析方法的細節，用以定量石蟹獼猴血漿中的測試化合物。

該測試化合物的LC/MS/MS分析針對範圍為1至5000 nM的標準曲線而進行。該標準曲線與以倒數平方(1/x² )權重的線性回歸相符。標準物以單重覆分析。在該標準曲線範圍內的3個濃度在空白生物基質中製備品管樣本，並在每個分析組內以重覆分析。所決定出高於75%QC的濃度是在它們名義值的20%內。

在Janus 8爪以及Janus Mini 96爪自動液體操作儀上執行樣本製備。以包含200 nM之兩個內部標準物(IS)之在水中的1 M碳酸銨(pH 9.2未調整，50 μL)處理來自活體內研究的部分(50 μL)的生物基質(血漿)以及標準物/QC樣本，接著以300 μL甲基t-丁醚(MTBE)處理，並使用forty fill-expel tip重覆近乎3分鐘而藉由液-液萃取(LLE)分隔。然後將該水層以及有機層以3900 rpm離心2分鐘。將該上層有機層萃取溶劑MTBE(250 μL)移至其他的乾淨96孔盤，並放在氮蒸發器中於40℃15分鐘至乾燥。使用部分(100 μL)而以包含1：1乙腈/水的移動相而再溶解該乾萃取物。先將10 μL的部分注射至該高加速流效能液相層析(HTLC)萃取管柱上，然後上第二高效液相層析(HPLC)管柱上洗提，以用於LC/MS/MS為基礎的分析。

所使用用於所有分析的LC系統是Aria TX-2(Thermo Scientific,Waltham,MA,USA)HPLC系統，由具有2 SCL-10AVP系統控制器(Columbia,MD,USA)以及雙臂CTC Analytics HTS PAL自動取樣器(Switzerland)的8 Shimadzu LC10AD幫浦構成，該自動取樣器配備有冷卻塔，該冷卻塔在分析的期間將樣本維持在10℃。該HPLC線上萃取管柱是保持於室溫下的Cyclone-P混合聚合物(0.5 x 50 mm，50 μM顆粒，Thermo Scientific,Waltham,MA,USA)。所使用的該HPLC C18分析管柱是保持於室溫下的XBridge C18(2.1 mm x 50 mm，5 μM顆粒，Waters Corporation,Milford,MA,USA)。該移動相，其由在水中的0.1%甲酸(A)以及在乙腈中的0.1%甲酸(B)組成，以1.5 mL/min的流速被運送至該HTLC線上萃取管柱，並以以0.5 mL/min的流速被運送至該HPLC C18分析管柱。這些流速在0.5至1.0分鐘之間之轉置步驟期間改變。該測試化合物以及內部標準物的滯留時間被記錄。總分析時間是5.0分鐘。該梯度摘述於下列表中。

用於所有分析的質譜儀為Finnigan Quantum Ultra串聯質譜儀(Thermo Scientific,Waltham,MA,USA)，該質譜儀配備有在正與負離子化模式中操作的加熱電子噴霧界面。使用超高純度(UHP)氮做為鞘氣以及輔助氣體，以55 psi的流速做為鞘氣以及25單位做為輔助氣體。該去溶劑化的溫度為350℃，且該來源溫度為350℃。每個分析物的偵測經由所選擇的反應監控(SRM)而達到。使用正離子化模式以定量該測試化合物以及該內部標準物。在1.5x10^-3 托爾壓力的UHP氬被維持在四極2的碰撞室中。本發明化合物以及其內部標準物被監控的轉換被記錄。

測試化合物在石蟹獼猴中的活體內效力，以及從劑量給藥後5小時之血漿化合物濃度對劑量給藥後5小時之mRNA誘導倍數的標繪圖所得到的最大ABCG1誘導顯示於下列表2中。

在石蟹獼猴中劑量給藥之後，比起本技術領域已知的化合物，本發明的範例4以及9有多出4與6倍的效力。同樣地，相較於本技術領域已知化合物的約12倍，範例4以及9將血中的ABCG1mRNA誘導至約6與9倍的最大量，藉此展現在石蟹獼猴血中的部分LXR活性。

所了解的是，本文中所描述的範例以及具體實施例僅用以說明的目的，且按照其的各種修飾與改變將啟發本領域技術人員，且被併入至此申請案的精神與範圍內，以及所附帶之申請專利範圍的範圍內。本文中所引用的所有出版物、專利以及專利申請案為了所有目的而併入於本文中以做為參考。

Claims

其同位素或藥學上可接受的鹽類，選自：
如請求項1的化合物、其同位素或藥學上可接受的鹽類，選自：
如請求項1的化合物、其同位素或藥學上可接受的鹽類，選自：
如請求項1的化合物、其同位素或藥學上可接受的鹽類，選自：
其同位素或藥學上可接受的鹽類，其是2-(1-(3-氯-3'-氟-4'-(羥甲基)-5'-(甲基磺醯基)聯苯-4-基)-2-(2-(2,6-二氯苯基)丙烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)丙烷-2-醇。
其同位素或藥學上可接受的鹽類，其是2-(2-(2-(2-氯-3-氟苯基)丙烷-2-基)-1-(3'-氟-4'-(羥甲基)-5'-(甲基磺醯基)聯苯-4-基)-1H-咪唑-4-基)丙烷-2-醇。
其同位素或藥學上可接受的鹽類，其是2-(2-(2-(2,6-二氯苯基)丙烷-2-基)-1-(3'-氟-4'-(羥甲基)-5'-(甲基磺醯基)聯苯-4-基)-1H-咪唑-4-基)丙烷-2-醇。
其同位素或藥學上可接受的鹽類，其是2-(2-(2-(2,6-二氯苯基)丙烷-2-基)-1-(3,3'-二氟-4'-(羥甲基)-5'-(甲基磺醯基)聯苯-4-基)-1H-咪唑-4-基)丙烷-2-醇。
其同位素或藥學上可接受的鹽類，其是2-{2-[1-(2,6-二氯苯基)乙基]-1-[3,3'-二氟-4'-(羥甲基)-5'-(甲基磺醯基)聯苯-4-基]-1H-咪唑-4-基}丙烷-2-醇。
一種組成物，包含如請求項1至9中任一項的化合物、其同位素或藥學上可接受的鹽類以及一或更多的藥學上可接受的載體。
一種如請求項1至9中任一項的化合物、其同位素或藥學上可接受的鹽類的用途，其係用於製備治療疾病或失調的藥物，其中該疾病或失調是動脈粥狀硬化、胰島素抗性、骨性關節炎、中風、高血糖症、血脂異常、乾癬、老化以及UV曝露相關皮膚皺紋、糖尿病、癌症、阿茲海默氏症、發炎、免疫失調、脂肪失調、肥胖、黃斑點退化、特徵為擾亂表皮屏障功能的症狀、表皮或黏膜分化異常或過度增生的症狀，或心血管疾病。
如請求項11的用途，其中該疾病或失調是動脈粥狀硬化、糖尿病、阿茲海默氏症或血脂異常。
如請求項11的用途，其中該疾病或失調是動脈粥狀硬化。
如請求項11的用途，其中該疾病或失調是糖尿病。
如請求項11的用途，其中該疾病或失調是阿茲海默氏症。