TW548277B - Orally active androgens - Google Patents

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548277 A7 ____B7_ 五、發明說明（1 ) 本發明係關於一種具口服活性雄激素荷爾蒙（更明確 的說是1 9 一降睪酮的△ 1 4衍生物）之領域。 '睪酮衍生物爲一種已知的化合物。睪酮（天然的雄性 荷爾蒙）作爲藥物已知有許多在投藥方法上的缺點。其活 性期短暫、不溶於一般醫藥學上可接受的介質、藥效並不 非常強。更強效的二氫睪酮（睪酮之5 α -還原形式）則 對建康有風險，尤其是對***。 ， 更強效的雄性素是7 請 先 閱 讀 背 面 之 注 意 事 項 再 填 寫 本 頁

甲基一 19 —降睪酮（ME NT)，揭示於FR 4，521 Μ及 US 5 ，342 ，834。MEN 丁的一項重大缺點是 動力學不佳，此則限制了其在作爲活化的雄性素的口服用 途。 在醫藥學製劑的領域上一般須要用口服活化的藥劑。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 口服的劑量形式，例如固體劑量形式（如：藥片及膠囊） 是投藥時較易接受的形式。在男性荷爾蒙領域上，尤其是 須要以口服方式投用雄性避孕劑。由於在女性的避孕領域 上，”口服避孕藥”幾乎是生育控制的代名詞，據此亦需 要具有男性的口服避孕活性，以便能提供男性”口服避孕 藥，，。 此領域中之雄性素是所謂的”西格洛夫（Segaloff ) 類固醇”其爲1 9 一降睪酮衍生物，以Μ E N T爲例，其 具有7 α -甲基，在碳原子1 4及1 5之間帶有雙鍵（ △ 1 4 )。長久以來已知的大部分強效的口服的雄性素在此 特別的位置均有以上之構造。參見Avery et al，Steroids，55, -4- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 548277 A7 B7 _ 五、發明說明（2 ) 5 9 ( 1 9 9 0)。7 α — Η類似物之化合物亦可參見 GB 1，341，601。 '除了位置特別之外’由於臨床上之缺點’ ”西格洛夫 (Segaloff )類固醇”並無實用上之價値。例如，1 9 一降 睪酮在代謝上並不穩定。因此在已知的 G B 1 ，341 ，601中此類化合物易受肝臟中的1 7對-羥基類固醇去氫酶作用有代謝去活化的傾向。此問 題之傳統解決之道是在1 7 α位置引入烷基’但此種作法 據信會產生不盡令人滿意的結果’例如限制其活性。 許多舊文獻中提及此形式類固醇化合物群（包括1 9 -降睪酮衍生物）的其它缺點。沒有參考文獻曾教示其爲 具有口服活性之雄激素類。 FR 1，432，561，發表於 1966，使用 在C 一 7上具有烷基取代基之1 9 -降睪酮（例如 Μ Ε Ν 丁）作爲荷爾蒙藥的起始材料，其係於碳原子5 及6之間具有雙鍵。除了甲基之外的烷基並未揭示。 BE 8 6 1 2 2 4中考慮所有各種1 7 -羥基類 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 固醇之可能的酯類。揭示於1 9 了 6 ，教示延長類固醇活 性之特定的酯類。揭示類固醇係爲***、抗-***、 男性荷爾蒙及合成代謝的激素。並舉出各種位置之許多可 能的取代基，在C- 7上爲甲基及乙基。

Chemical Abstracts 110: 95601y(1989)指出 7 —烯丙基 一 1 9降睪酮之1 7 -羥基乙酸鹽爲合成7 -烯丙基雌二 醇之中間物。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公爱） 548277 A7 -------一__ _B7_____ 五、發明說明（3 ) E P 1 5 9 7 3 9教示雌烷系列之免疫調控劑。 其中尤其是包括△ 4 一及△ 5 ( 1 ◦) 一雌烯衍生物，其在位 置'6或7具有烷基取代基。該烷基取代基爲甲基。 請 先 閱 讀 背 & 之 注 意 事 項 再 填 本 頁 DE 20 43 404指出—類固醇帶有抗 一荷爾蒙的活性。烷基取代基爲甲基，但亦揭示乙基及丙 基。合成7/3 -乙基一 1 9 一降睪酮（其爲依據 DE 20 43 404教示的化合物）時，亦形成 7 α -異構物。彼未教示如何使用此異構物，且此客獻之 教示中並未對大多數的甲基取代基與乙基或丙基加以區別 0 進一步的技藝背景參考文獻可參見Solo et al，Steroids， 40，603-61 4 ( 1 990)。彼揭示畢酮之各種7 α -烷基衍生物 〇 本發明目的之一係提供一種具口服活性之雄激素類， 其可改良西格洛夫（Segaloff)類固醇，較佳者適用於臨床 使用，尤其是具有充分的口服活性及代謝的穩定性。 依據本發明，爲以下之式I化合物。

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -6 - 548277 A7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明說明（4 )烷基、（C 2〜4 )烯基、或（c 需要經鹵素取代；或 R 2爲環丙基、或環丙烯基，各自視需要經（C 1 、或鹵素取代； R3爲氫、（Ci — 2)烷基；或乙烯基； R 4爲（C i — 2 )烷基； Rs爲氫、或（Ci — 15)醯基； 以及點線意指選擇性之鍵結。 本發明包括其醫藥學上可接受的鹽類或酯類、前驅藥 物及上述類固醇之前驅物。 本文式I中（Ci — 6)烷基之定義爲分支的或未分支 的烷基，其係具有1 - 6個碳原子，例如甲基、乙基、丙 基、異丙基、丁基、異丁基、第三丁基、戊基、及己基。 同樣地本文之（C 2 — 4 )烷基爲分支的或未分支的烷基， 其係具有2 - 4個碳原子，本文之（Ci-2)烷基爲烷基 ，其具有1一2個碳原子。 本文之（C 2-4)烯基爲分支的或未分支的烯基，其 係具有至少一個雙鍵及2 - 4個碳原子。較佳的烯基爲2 - 3個碳原子，如乙烯基及丙烯基。 炔基，各自視 烷基 .裝— (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) .

本文之（C 炔基爲分支的或未分支的炔基，其 係具有至少一個三鍵及2 - 4個碳原子。較佳的炔基爲2 - 3個碳原子，如乙炔基及丙炔基。

本文之（C )醯基爲源自羧酸之醯基，其係具有 1 — 6個碳原子’如·甲醯基、乙醯基、丙醯基 醯基 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 548277 A7 _B7 五、發明說明（5 ) 、2 -甲基丙醯基、戊醯基、三甲基乙醯基、及己醯基。 同樣地，本文之（醯基爲源自羧酸之醯基，其係 具、有1一15個碳原子。（Ci-6)醯基或（Ci — 15)醯 基亦包括源自二羧酸之醯基，如半羥丁二醯基、半琥珀醯 基、半戊二醯基等。較佳者爲半號拍醯基。 本文之鹵素爲氟、氯、溴、或碘。當鹵素爲烷基上之 取代基時，C 1及F較佳，F爲最佳。 據瞭解本發明之7 α -經取代△ 1 4 -諾龍衍生物具有 天然的組態 5 α 、8 /3、9 α 、1 〇 /5、1 3 /3 、及 17/3。 本發明7 α -經取代△ 1 4 -諾龍衍生物具有天然的組 態 5α、8冷、9α、 105、13/3、及 17/3，並可 帶有一個或更多個額外的對掌性的碳原子。化合物因此可 爲純非鏡像異構物，或非鏡像異構物混合物。得到純非鏡 像異構物之方法爲已知的技藝，例如結晶或色層分析法。 本發明之化合物可與上述已知的”西格洛夫（Segaloff )類固醇”用7 α取代基之長度加以區別，卻意外地發現 此點可改進該已知的類固醇，並具有令人驚訝的臨床應用 優點。尤其是呈現預期外的較佳口服活性。本發明的較佳 化合物比西格洛夫（Segaloff)類固醇具有更佳的代謝穩定 性。 本發明的較佳化合物，其R 2係選自：乙基、乙烯基、 乙炔基、丙基、1 一丙烯基、2 -丙烯基、1 一丙炔基、 1，2 -丙二炔基、及環丙基。 請 先 閱· 讀 背 面 之 注 意 事 填 寫裝 頁 訂 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） Q- 548277 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 —_____B7 ____ 五、發明說明（6 ) 更佳的化合物中Rl爲酮基，R3爲氫，R4爲甲基， 點線意指△ 4雙鍵。 最佳化合物中R2爲C2，如乙基或乙烯基。 本發明之化合物可由各種已知的常見有機化學技藝方 法製作，而尤佳者爲類固醇化學技藝（參見例如：Fiied， J. et al，Organic Reaction in Steroid Chemistry, Volumes I and 11, Van Nostrand Reinhold Company, New York, 1 972) o 基本原理是引入飽和或不飽和7 α -取代基（視需要 經鹵素取代）至類固醇核心，並引入△ 1 4雙鍵。 製備式I化合物之傳統起始材料其R i爲酮基，R 2、 R 3及R 4如先前之定義，R 5爲氫，點線意指△ 4雙鍵，例 如式I I之腺—4 —烯—3 -酮衍生物，其中R 3及R 4如 先前之定義，R6爲〇X〇、 （17a— Η，17/3 — 〇 R 〇 、或（17α — C = — CH， 17/3-0 R7)， 其中R 7爲羥基保護基團，如醯基，例如：乙醯基、苯甲醯 基或三甲基乙醯基、烷氧基烷基，如：乙氧基乙基或四氫 哌喃基（Τ Η P )、或矽烷基’如··三甲基矽烷基或第三 丁基一甲基砂院基’其可依文獻已知的合成，或可用標準 方法製備。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁}

可能之合成路徑如下。式I I之腺—4 一嫌一 3 —酮衍

548277 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明說明（7 ) 生物可使用標準方法轉換成對應的腺一 4，6 -二烯一 3 -酮衍生物’例如轉變成3 一醯氧基一或3 一烷氧基腺- 3 ，5 —雙烯衍生物，再與2 ，3 ，5，6 —四氯一 1 ， 4 —本并驅反應〔Solyom，S· et al，Steroids 35，361(1980) 〕。然後’經結合加成反應（1 ，6 -加成反應）引入7 α -取代基，或其前驅物。此反應在技藝上有數個已知的 方法，其中包括： 1 ) -有機銅試藥之共軛加成反應〔有機銅試藥之共 軛加成反應’參見 Lipshutz，B.H. et al in Org. Reaction 41， p. 135，Wiley, New York，1 992]。 2 ) —經過渡金屬中介的（T i C 1 4、A 1 C 1 3、 Z r C 1 4等）有機矽化合物反應〔一般爲1，6〜加成反 應；參見例如 Nickisch，K. et al，Tetrahedron Lett. 29, 1533(1988)]。 3) —鹼催化之丙二酸二烷酯、2 ，2 —二甲基一 1 ，3 -二哼烷一 4，6二酮，或氰基乙酸烷酯之共軛加成 反應〔爹見’例如· Cruz, R. et al，Austr. J. Chem. 35, 451(1982)〕。 4 ) 一適當的氰化物（M C ，M爲L i 、N a 、 K、A 1 R2、S i R3等）之共軛加成反應。 一般而言，此類方法主要或僅產生形成7 α〜異構物 〇 依此得到7 α -經取代之腺一 4 一烯一 3 -酮可芳基 化成 3 —羥基腺一 1 ’ 3，5 ( 1 0 )—三烯〔Yuan, S·- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 裝---- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

訂---------m 548277 A7 B7 五、發明說明（8 ) S. et al，Steroids 3 9，27 9( 1 982)〕，然後可甲基化形成 3 — 甲氧基衍生物。亦可直接轉變成3 —甲氧基腺一 1 ，3 ， (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 5 (10)—三燦〔Brito, M. et al, Synth. Commun. 26, 623(1996)〕。當 Re 爲（17α— H， 17/SOR7)，將 17 -羥基去保護，並氧化的產生3 -甲氧基腺一 1 ，3 ，5 (10) -三烯—17 -酮衍生物〔氧化反應反應， 參見：Hudlicky，M.，Oxidations in Organic Chemistry, ACS Monograph 186, Washington，DC, 1 990〕。當 R 6 爲（1 7 a —C二一 CH，17/S — 〇R7)，將17 —羥基再一次去 保護，並將1 7 a -乙炔基一 1 7 /5羥基衍生物轉換成 1 7 -酮，例如與碳酸銀鹽之寅式鹽反應〔Rao, P.N. et al， Steroids 59，621(1994)〕或其它已知技藝的方法。此二案例 中，亦可在芳化之前轉變成1 7 -酮。 如此得到之3 —甲氧基腺—1 ，3 ，5 ( 1 0 )—三 烯一 1 7 -酮衍生物可直接的溴化，例如與溴化銅（I I )之苯/甲醇反應〔西格洛夫（Segaloff ) ， A. et al，

Steroids 22，99(1973)〕 。3 —甲氧基腺一1 ，3 ，5 (1 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 〇 ) -三烯一 1 7 -酮衍生物亦可轉換成烯醇乙酸鹽，然 後用溴處理〔Johnson，W.S. et al，J. Am. Chem. Soc. 79, 2005( 1 957)〕，或轉換成烯醇矽烷基醚接著與例如N -溴琥 拍醯亞胺反應〔Heathcock，C.H· et al，Amer. Chem. Soc. 104, 608 1 (1 982)〕。a —溴酮之去^溴化作用，例如與L i B r / L i 2 C 〇 3/DMF 反應〔Bull, J.R. et al，J. Chem. Soc·，Perkin Trans. 1，241(1990)〕，通常導致（1 4 -11 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 548277 A7 __ B7 五、發明說明（9 ) /3) —3 —甲氧基腺一1 ，3 ，5 (10) ，15 —四烯 一 17 —酮及 3 —甲氧基腺一1 ，3 ，5 (10) ，14 -四烯- 1 7 -酮衍生物之混合物。當後者用硼氫化鈉、 氫化鋁鋰或其它還原劑還原成對應的（1 7Θ) — 3 -甲 氧基腺—1 ，3 ，5 (10) ，14 —四烯—17 —醇衍 生物後彼可加以分離。 7α —經取代3 —甲氧基腺一1 ，3 ，5 (10) — 三烯一 1 7 -酮衍生物亦可轉換成其對應的環1 ，2 -乙 烷二基乙縮醛，然後溴化得到（1 6 a ) 1 6 —溴—3 - 甲氧基腺一 1 ，3 ，5 (10)—三烯一17 —酮環1 ， 2 -乙烷二基乙縮醛衍生物。溴化反應可使用嘧錠三溴化 物、苯基三甲基銨三溴化物或其它溴化劑用已知的技藝加 以完成〔Rasmusson，G.H. et al，Steroids 22，1 07( 1 973)〕。 1 6 α -溴化合物可與鹼（例如第三丁氧化鉀之二甲苯或 二甲基亞砸）進行去氫溴化反應，以生成△ 1 5化合物〔 Johnson ，上述之文獻；Poirier, D. et al，Tetrahedron 47, 775 1 ( 1 99 1 )〕。伸乙基縮酮輕微的水解，例如用對一甲苯磺 酸之丙酮與水之混合物〔Johnson，上述之文獻〕處理，導 致其一甲氧基腺一1 ，3，5 (10) ，15 —四烯一 1 7 —酮衍生物，然後用乙酸酐、異丙烯基乙酸鹽或其它 乙醯化劑進行酸-催化反應轉換成3 -甲氧基腺- 1 ，3 ，5(10) ，14，16 —五烯一17 —醇乙酸〔

Rasmusson，上述之文獻；B u 1 1 ，上述之文獻〕。乙酸 鹽用硼氫化鈉或其它還原劑處理〔Rasmusson，上述之文獻 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -12- 裝------丨丨訂---------' (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

548277 A7 B7 五、發明說明（1〇) 〕可產生形成（17/3) —3 —甲氧基一腺一1 ，3 ，5 (10) ，1 4 —四烯—1 7 —醇衍生物。視需要，3 - (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 甲'氧基腺一 1 ，3 ，5 (10) ，15 —四烯—17 —酮 環1 ，2 -乙烷二基乙縮醛可經酸-催化之異構化反應而 轉換成對應的△ 1 4衍生物〔Ponsold，K, et al, JL Prakt. Chem. 323, 8 1 9 ( 1 98 1 )〕。去除乙縮醛並還原1 7 —酮基產 生（17/3)— 3 —甲氧基腺一1，3，5(1〇）， 1 4 一四烯—1 7 —醇衍生物。3 —甲氧基腺一1 ' 3 ， 5 (10) ，15 —四烯—17 —酮亦可進行異構化反應 以生成（14/3) — 3 —甲氧基腺一1 ，3 ，5 (1〇） ，15 —四烯一 17 —酮及其3 —甲氧基腺一 1 ，3 ，5 (10) ，1 4 —四烯一 1 7 -酮衍生物之混合物，彼可 用上述之方法處理。 · 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 引入△ 1 4雙鍵額外的方法包括：轉變3 -甲氧基腺— 1 ，3，5 ( 1 0 ) —三烯一 1 7 —酮衍生物成烯醇乙酸 鹽並與 IE ( I I )鹽反應〔Takahashi，T. et al，Tetrahedron 41，5747( 1 985)〕，或將烯醇酯與2 —吡啶亞磺酸甲酯反應 〔Dionne, P. et al，Steroids 62，674( 1 997)〕。 經Bkch還原而得到化合物7 α —經取代（1 7 /3 ) -3 —甲氧基腺一 1 ，3 ，5 (10) ，14 —四烯一 17 —醇衍生物〔Caine，D. in 〇rg. Reaction 23，p.l，Wiley，New York, 1 976〕並水解生成的（1 7 Θ ) — 3 —甲氧基腺一2 ,5(10) ，1 4 —三烯—1 7 -醇衍生物，得到本發 明之7 α —經取代（1 7 /3 ) - 1 7 -羥基腺—4，1 4 -13- 本紙張尺度適用宁國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 548277 A7

五、發明說明（11 ) 一二烯一 3 -酮衍生物。此案例中，7 α -取代基係構築 自其前驅物（即不飽和7 α -取代基、丙二酸酯類片段、 或氰基，參見以上之文獻），此操作，其可使用標準方法 完成’經常同時的引入△ 1 4雙鍵。本發明中構築7 α —取 代基及引入△ 1 4雙鍵，其中包括Birch還原及轉變生成的 腺—2，5 (10) -雙烯形成7α取代的（17；S) -17 —羥基腺一 4，14 —二烯一 3 —酮衍生物須要精確 的反應步驟序列之一般合成策略的方法（參見實施例4及 5 ) 〇 本發明之化合物，其中R1爲（H，H) 、 （H，〇R )、N〇R，R係爲氫、（Cl- 6)烷基、（Cl-6)醯 基’係使用已知技藝的方法得自式I化合物，其中R i爲酮 基。 本發明之化合物，其中R 5爲（C i - 5 )醯基，係使用 已知技藝的方法得自式I化合物，其中R 5爲酮基。 本發明之化合物，其中點線意指△ 5 ( 1 ° )雙鍵，係自 △ 2 · 5 ( 1 ^ >二烯經Buch還原之後製成。此外，彼可經異 構化反應由△ 4衍生物製備成。本發明之5 α -還原化合物 係由△ 4衍生物製成。 本發明將進一步用以下實施例說明。 實施例1 (7α ，17卢）一7 —乙基一17 —羥基雌 —4，14 —二烯一 3 -酮（a)及（7α， 17/3) — 7 —乙基一 17 —羥基雌一5 ( 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -14- 裝---- (請先閱讀背面之注咅？事項再填寫本頁) 訂---------Ψ 548277 Α7 Β7 五、發明說明（12 ) 1 0 ) ，14 一二烯一3 —酮（b)。 (請先閱讀背面之注咅？事項再填寫本頁) 1 ) 一在5分鐘內將氯三甲基矽烷（1 9毫升）加入 (17α) — 17 —羥基一 19 —降孕—4，6- 二烯— 20 —炔—3 —酮〔Syntex S.A·，GB 93 5 1 1 6( 1 95 8); 18 · 〇g〕二氯甲烷（300毫升）及吡啶（25毫升 )混合物之懸浮液中，冷卻至0 °C。於0 °C下攪拌2小時 之後，將反應混合物倒入飽和碳酸氫鈉水溶液中。產物用 二氯甲烷萃取；合并有機相，並用水及濃鹽水淸洗，硫酸 鈉乾燥，於減壓之下濃縮，得到（1 7 α ) — 1 7 -〔（ 三甲基矽烷基）氧基〕一 1 9 一降孕—4，6—二烯一 2 0 -炔一 3 —酮（2 2 · 3克）。產物可於以下步驟使 用而無須進一步純化。 1 i)—將鋰（5 . 0克）及無水***（200毫升 )之混合物冷卻至一 3 0 °C。逐滴添加溴基乙烷（ 2 6 · 9毫升），再將所生成的乙基鋰溶液倒至碘化銅（ I ) ( 3 0 · 6克）之無水四氫呋喃（1 4 0毫升）懸浮 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 液中，冷卻至- 3 0 °C。在此溫度下將生成的銅酸鹽溶液 攪拌4 5分鐘，逐滴添加前述步驟所生成的產物（ 2〇· 0克）之無水四氫呋喃（160毫升）溶液。在 一 2 5 °C下攪拌4 5分鐘之後，添加氯三甲基矽烷（2 0 毫升）並繼續攪拌3 0分鐘。將反應混合物倒至飽和氯化 銨水溶液中，產物用乙酸乙酯萃取。合并有機相，用飽和 氯化銨水溶液、濃鹽水淸洗，硫酸鈉乾燥，於減壓之下濃 縮，以生成（7α，17α) — 7 —乙基一3 ，17 -雙 -15- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 548277 A7 B7 五、發明說明（13) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 〔（三甲基矽烷基）氧基〕一 19 一降孕一 3 ，5 —二烯 一20-炔（29 ·5克）。產物可於以下步驟使用而無 須'進一步的純化。 1 i i )—前述步驟得到的產物（2 9 · 5克）之丙 酮（400毫升）溶液用鹽酸（2 · 3M，20毫升）處 理。在室溫下於攪拌1 · 5小時之後，反應混合物用飽和 的碳酸氫鈉水溶液中和。於減壓之下移除丙酮，產物用乙 酸乙酯萃取。合并有機相，用濃鹽水淸洗，硫酸鈉乾燥’ 於減壓之下濃縮，以生成（7α，17α) — 7 —乙基— 1 7羥基一 1 9 一降孕一 4 一烯一 2〇一炔一3 —酮（ 1 9 . 5克）。產物可於以下步驟使用而無須進一步的純 化。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 i ν) —將鹽酸（6Μ，2 40毫升）逐滴添加寅氏 鹽（2 4 0克）之甲醇（1 2 0 0毫升）懸浮液。在室溫 下攪拌2 0分鐘之後，用寅氏鹽過濾收集，用水淸洗直到 中性爲止。然後懸浮於水（9 6 0毫升）。猛烈的攪拌下 、添加硝酸銅（I I )三水合物（1 4 5克），接著小心 的添加碳酸鈉（7 2 · 2克）水溶液（3 6 0毫升）。於 攪拌3 0分鐘之後，過濾收集產物，用水淸洗直到中性爲 止。產物在8 0°C、減壓之下乾燥’以生成含寅氏鹽之碳 酸銅（I I ) ( 3 1 0克）。將1 i i得到之產物（ 19.5克）與含寅氏鹽之碳酸銅（II)(70克）之 苯（3 3 0毫升）混合物回流加熱9小時，使用Dean-Stark 捕獲器去除水。過濾反應混合物，殘餘物徹底用乙酸乙酯 -16- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 548277 A7 ______B7_ 五、發明說明（14 ) 淸洗，濾液於減壓之下濃縮。管柱色層分析法得到（7 α )—7 — 乙基雌—4 —烯一 3 ，17 —二酮（9 · 14 克 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) )° ν ) -前述步驟得到的產物（9 · 1 4克）、溴化銅 (II) (13.6克）、及溴化鋰（2.64克）之乙 腈（2 8 5毫升）溶液在室溫下攪拌4小時。將反應混合 物倒至水中，產物用乙酸乙酯萃取。合并有機相，用飽和 氯化銨水溶液及濃鹽水淸洗，硫酸鈉乾燥，於減壓之下濃 縮。管柱色層分析得到（7 α ) - 7 -乙基一 3 -羥基雌 —1 ，3 ，5 (1〇）一三烯一 17 —酮（6 . 54 克） 〇 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 V i ) -將前述步驟得到的產物（6 · 5 4克）、無 水碳酸鉀（18 . 6克）、碘甲烷（5 · 6毫升）、及無 水二甲基甲醯胺（2 2毫升）之混合物在室溫下攪拌 3 · 5小時。將反應混合物倒至水中，產物用乙酸乙酯萃 取。合并有機相，用水、飽和氯化銨水溶液及濃鹽水淸洗 ，硫酸鈉乾燥，於減壓之下濃縮’以生成（7 α ) - 7 -乙基一 3 —甲氧基雌一1 ，3 ，5 (1〇）一三烯一 17 一酮（6 · 77克）。產物可於以下步驟使用而無須進一 步純化。 ν i i ) —將二異丙基胺（6 · 1 5毫升）之無水四 氫塥喃（7 0毫升）溶液冷卻至一 3 0 °C。逐滴添加η -B u L 1 ( 1 · 6 Μ己烷溶液，2 7 · 5毫升），繼續攪 拌3 0分鐘。將反應混合物冷卻至一 5 0 °C，逐滴添加先 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐) :17- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 548277 A7 ---B7 ___ 五、發明說明（15) 刖步驟得到產物（6 · 9 5克）之無水四氫π夫喃（1〇〇 毫升）溶液。繼續攪拌1小時。待冷卻至一 6 0 °C後， 加氯三甲基矽烷（1 1 · 1毫升）。攪拌混合物2 0分鐘 ’然後用苯基三甲基三溴化銨（1 〇 . 〇克）之無水D比_ (3 1毫升）溶液處理。於一 6 0 t：下攪拌1小時之後， 將混合物倒至水中，產物用乙酸乙酯萃取。合并有機相， 用飽和的碳酸氫鈉水溶液及濃鹽水淸洗，硫酸鈉乾燥，於 減壓之下濃縮。管柱色層分析得到（7 a，1 6 α ) -16 —溴一7 —乙基一3 —甲氧基雌一1 ，3 ，5 (1〇 )—三烯—17 —酮（8·75 克）。 ν i i i ) -將前述步驟得到的產物（8 . 7 5克） 、溴化鋰（1 2 · 7克）及碳酸鋰（1 0 · 9克）之無水 二甲基甲醯胺（7 7毫升）之混合物在回流下加熱 3 · 2 5小時。於冷卻之後，將反應混合物倒至水中，產 物用乙酸乙酯萃取。合并有機相，用水及濃鹽水淸洗，硫 酸鈉乾燥，於減壓之下濃縮。管柱色層分析得到（7 α ) —7 —乙基一3 —甲氧基雌一 1 ，3 ，5 (10) ，14 —四烯一17 —酮（4 · 31 克）及（7α ，14/S) — 7 —乙基一3 —甲氧基雌一 1，3，5(1〇），15 — 四烯一17 —酮（1.0克）。 1 X ) -將硼氫化鈉（0 · 2 1克）及氫氧化鈉（ 0 · 44克）之甲醇（5 0毫升）溶液逐滴添加至（7α )一7 —乙基一3 —甲氧基雌一 1，3，5(1〇）， 14 —四烯一17 —酮（4 · 31克）之二氯甲烷（12 裝—-----訂--------- 「靖先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） •18- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 548277 A7 __ B7 五、發明說明（16) 毫升）及甲醇（2 0毫升）溶液中，冷卻至0 °C。攪拌反 應混合物1 · 5小時，添加丙酮（4毫升）終止反應，然 後倒至飽和氯化銨水溶液。產物用乙酸乙酯萃取；合并有 機相，用濃鹽水淸洗，硫酸鈉乾燥，於減壓之下濃縮，以 生成（7α ，17/5) — 7 —乙基一3 —甲氧基雌—1 ， 3’5(1〇），14 —四烯一17 —醇（4.28 克） 。產物可於以下步驟使用而無須進一步的純化。 X ) —將前述步驟得到之醇（1 · 5克）的無水四氫 塥喃（24毫升）添加至鋰（2 · 12克）之氨水（98 毫升）回流溶液中。於一 3 5 °C下攪拌4 · 5小時之後， 在3 0鐘內添加2 —丙醇。蒸乾氨水。添加水，產物用乙 酸乙酯萃取。合并有機相，用濃鹽水淸洗，硫酸鈉乾燥， 於減壓之下濃縮，以生成（7α，17/3) — 7 -乙基一 3 —甲氧基雌一2 ，5 (1〇），14 —三烯一17 —醇 (1 . 6 5克）。產物可於以下步驟使用而無須進一步的 純化。 xi) -將矽土（5 · 2克）、草酸（0 · 52毫升 )飽和水溶液及二氯甲烷（1 4毫升）之混合物在室溫下 攪拌1 0分鐘。添加前述步驟得到的產物（1 . 6克）之 二氯甲烷（5毫升）溶液並繼續攪拌1 · 5小時。添加固 體碳酸氫鈉，繼續攪拌1 0分鐘。過濾混合物，濾液於減 壓之下濃縮。管柱色層分析得到粗產物（7 a，1 7 /3 ) 一 7 —乙基—17 — 羥基雌—5 (10) ，14 —二烯一 3 -酮（1 · 0 3 克）， 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 裝--------訂i (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

Φ 548277 Α7 ----- Β7 五、發明說明（17) 1r-NMR (CDCls) (55 . 04 (bs ^ 1H)， 4·〇3(ΐ，1Η，； = 8·4Ηζ)， 2.76(bs，2H)，〇.98(s，3H)， 〇.93(t，3H，J = 6.6Hz)。 x i 1 ) -依i 1 1之方法，將前述步驟得到的產物 (Q · 45 克）轉換成（7α ，17/3) — 7 —乙基一 17—羥基雌—4，14 —二烯—3 -酮（0 · 24 克） ，m.P.102 — 105。(：。 實施例2 (7α，17/3) — 7 —乙烯基一 17 —羥基 雌—4 ’ 14 —二烯—3 —酮。 i) 一將（17Θ) — 17 —(乙醯氧基）雌一 4， 6- 二烯—3 —酮〔Syntex，DE 1143199(1963); 5 0 · 0 克〕、噻吩氧化鋰（1 . 0M之四氫呋喃溶液，16毫升 )、溴化二甲基硫化銅（I )複合體（3 . 1 8克）及溴 化鋰（1 · 3 8克）之無水四氫呋喃（1 6 7毫升）溶液 冷卻至- 1 5 °C。逐滴添加乙烯基鎂氯（2M之四氫呋喃 溶液，1 5 9毫升）（T 1 5 t：)，繼續攪拌3 0分 鐘。逐滴添加飽和氯化銨水溶液，繼續攪拌1 5分鐘。用 寅氏鹽過濾反應混合物，產物用乙酸乙酯萃取。合并有機 相，於減壓之下濃縮，殘餘物溶於丙酮（1 0 0 0毫升） 。添加鹽酸（4 Μ，1 0 0毫升），混合物在室溫下攪拌 3 0分鐘。添加飽和的碳酸氫鈉水溶液，於減壓之下移除 丙酮。產物用乙酸乙酯萃取；合并有機相，用濃鹽水淸洗 ------------裝 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ----訂--- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -20- 548277 Α7 _ Β7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明說明（18 ) ’硫酸鈉乾燥，於減壓之下濃縮，以生成（7 a，1 7 /3 )一1 7 — （乙醯氧基）一 7 —乙儲基雌一 4 一矯—3 — 嗣及（7冷’ 17/3) — 17 (乙酸氧基）—7 —乙儲基 雌—4 一烯—3 -酮（57 · 3克，比例85 ·· 15)之 混合物。產物可於以下步驟使用而無須進一步的純化。 i 1 ) 一將氫氧化鉀（2 6 · 7克）分批加入前述步 驟得到的產物（5 7 · 3克）之四氫呋喃（8 3 3毫升） 、甲醇（738毫升）、及水（238毫升）溶液中。反 應混合物在室溫下攪拌4 5分鐘，然後用濃鹽酸（2 0毫 升）中和。於減壓之移除部份的四氫呋喃及甲醇，產物用 乙酸乙酯萃取。合并有機相，用水及濃鹽水淸洗，硫酸鈉 乾燥，於減壓之下濃縮。管柱色層分析得到（7 a，1 7 卢）一 7 —乙烯基一17 —羥基雌一4 一烯一 3 —酮（3 6 · 7 克）。 i 1 i ) 一前述步驟得到的產物（6 6 . 2克）、三 甲基正甲酸酯（8 0毫升）、溴化銅（I I ) (65.2 克）、及甲醇（1 7 8 8毫升）之混合物在回流下加熱 5〇分鐘。於冷卻之後，過濾反應混合物。於減壓之下濃 縮濾液，殘餘物溶於乙酸乙酯。乙酸乙酯溶液用飽和的碳 酸氫鈉水溶液及濃鹽淸洗，硫酸鈉乾燥，於減壓之下濃縮 。管柱色層分析得到（7α，17/3) - 7 -乙烯基一 3 —甲氧基雌—1 ，3 ，5 (10)—三烯—17 —醇（4 2 · 9 克）。 1 ν ) -將四丙基銨過釕酸酯（2 · 7 6克）加入前 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

裝 ----訂---- # 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -21 - 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 548277 A7 B7___ 五、發明說明（19 ) 述步驟得到的產物（4 1 · 1克）及4 一甲基嗎福啉N - 氧化物（46 · 2克）之丙酮（1080毫升）溶液中。 在室溫下攪拌1小時之後，用寅氏鹽及矽土反應混合物過 濾。於減壓之下濃縮濾液。管柱色層分析得到（7 α ) -7 —乙烯基一 3 —甲氧基雌一 1 ，3 ，5 (10) —三烯 —17 —酮（38 · 1 克）。 ν ) -將對甲苯磺酸（3 · 2 1克）加入前述步驟得 到的產物（3 6 · 0 5克）混合物、乙二醇（1 0 8毫升 )及三乙基正甲酸酯（1 8 8毫升）溶液中。反應混合物 在室溫下攪拌2小時。添加水（1 8 0 0毫升），繼續攪 拌1小時。產物用乙酸乙酯萃取；合并有機相，用飽和的 碳酸氫鈉水溶液及濃鹽水淸洗，硫酸鈉乾燥，於減壓之下 濃縮，以生成（7α) — 7 -乙烯基一 3 —甲氧基雌一 1 ，3 ，5 (10)—三烯—17 -酮環1 ，2 —乙烷二基 乙縮醛（4 1 · 3 7克）。產物可於以下步驟使用而無須 進一步的純化。 ν i) -將苯基三甲基三溴化銨（22 · 60克）分 批加入前述步驟得到的產物（2 1 · 3 7克）之無水四氫 呋喃（1 1 4亳升）溶液中。反應混合物攪拌4 0分鐘， 然後用苯基三甲基三溴化銨處理直到反應完全爲止。於 3 0分鐘之後，將攪拌之混合物倒入硫代硫酸鈉水溶液（ 10%)，產物用乙酸乙酯萃取。合并有機相，用飽和的 碳酸氫鈉水溶液及濃鹽水淸洗，硫酸鈉乾燥，於減壓之下 濃縮，以生成（7α，16α) — 16 —溴—7 —乙烯基 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -22- -----------^---- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) . Φ 548277 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 Α7 Β7 五、發明說明（20) —3—甲氧基雌一1 ，3 ，5 (1〇）一三烯一17 —酮 環1 ，2_乙烷二基乙縮醛（34 · 9 1克）。產物可於 以下步驟使用而無須進一步的純化。 v 1 1 ) —前述步驟得到的產物（3 4 · 9 1克）之 無水二甲基亞砸（1 7 8毫升）溶液用第三丁氧化鉀（ 1 3 . 5克）處理，反應混合物在4 0 °C下攪拌3小時。 分別於3 0分鐘及1小時之後添加第三丁氧化鉀（ 1 3 · 5克）。將混合物倒入飽和氯化銨水溶液中，產物 用乙酸乙酯萃取。合并有機相，用飽和氯化銨水溶液及濃 鹽水淸洗，硫酸鈉乾燥，於減壓之下濃縮。管柱色層分析 得到（7α) — 7 —乙烯基一 3 —甲氧基雌—1 ，3 ，5 (10) ，15 —四烯一17 —酮環1，2 —乙烷二基乙 縮醛（1 7 . 5 4克）。 ν i i i )—將前述步驟得到的產物（3 1 · 4 7克 )混合物之丙酮（5 0 7毫升）及水（4 3毫升）溶液用 對一甲苯磺酸（1 . 4 8克）處理，反應混合物在室溫下 攪拌2小時。將反應混合物倒至飽和碳酸氫鈉水溶液中， 產物用乙酸乙酯萃取。合并有機相，用濃鹽水淸洗，硫酸 鈉乾燥，於減壓之下濃縮。管柱色層分析得到（7 α ) -7 —乙烯基一3 —甲氧基雌一1 ，3 ，5 (10) ，15 一四烯—17 —酮（23 .92 克）。 1 X ) -將前述步驟得到的產物（2 3 · 9克）之無 水甲苯（9 7 0毫升）溶液用對一甲苯磺酸（1 3 · 5克 )處理，在回流下加熱1 5分鐘。於冷卻之後，將反應混 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -23-

1Τ--------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 548277 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 B7___五、發明說明（21 ) 合物倒至飽和的碳酸氫鈉水溶液中，產物用乙酸乙酯萃取 。合并有機相，用濃鹽水淸洗，硫酸鈉乾燥，於減壓之下 濃縮。管柱色層分析得到（7 α ) — 7 —乙烯基一 3 —甲 氧基雌一1 ，3 ，5 (1〇），14 一四烯一17 —酮（ 14 · 9 克）及（7α ，14/3) — 7 —乙烯基一3 — 甲 氧基雌一1 ，3 ，5 (1〇），15 —四烯一17 —酮（ 7 · 3 2 克）。 X ) -將硼氫化鈉（1 · 4 7克）添加於前述步驟得 到之（7α) — 7 —乙烯基一 3 —甲氧基雌一 1 ，3 ，5 (10) ，14 —四烯—17 —酮（1.50克）混合物 之四氫呋喃（27 · 8毫升）中、乙醇（27 · 8毫升） 及水（4 . 5 5毫升）溶液。反應混合物攪拌5 0分鐘， 然後倒至水中。產物用乙酸乙酯萃取。合并有機相，用水 及濃鹽水淸洗，硫酸鈉乾燥及濃縮，得到（7 α，1 7 /3 )—7 -乙烯基一3 —甲氧基雌一1 ，3 ，5 (10)， 1 4 一四烯—1 7 —醇（1 · 4 7克）。產物可於以下步 驟使用而無須進一步的純化。 X i ) -將前述步驟得到的產物（1 · 4 7克）之無 水四氫呋喃（2 6毫升）溶液加入回流之氨水（1 0 5毫 升）中。添加粒狀鋰（〇 · 9 5克），將反應混合物攪拌 1 · 2 5小時。添加無水第三—丁醇（9 · 2毫升）’反 應混合物再攪拌.3 0分鐘。添加固體氯化銨，蒸發氨水。 添加水，產物用乙酸乙酯萃取。合并有機相，用飽和氯化 錢水溶液及。濃鹽水淸洗，硫酸鈉乾燥，於減壓之下濃縮’ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） ~^24 - ^ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝----- ---訂---- Φ 548277 A7 ---___ 五、發明說明（22 ) 得到（7α ’ 17A) — 7〜乙烯基一 3 一甲氧基雌一 2 ，5(10)，14一三燏〜17一醇（1.48克）。 產物可於以下步驟使用而無須進_步的純化。 χ 1 1 ) 一依實施例1中i i之方法將前述步驟得到 的產物（1 · 4 8克）水解，於管柱色層分析及結晶之後 ，得到（7α ’ 17/3)〜7〜乙烯基一 I? 一羥基雌— 4，14—二烯一 3—酮（0·419 克），m.p. 1 2 9 - 1 3 6。。。 實施例3 (7α ’ 17々）〜17 -羥基—7 —丙基雌 —4，14一 二烯〜3 -酮。 標題化合物之製備方法類似實施例1之方法。 NMR(CDCl3)55 “（bs，iH)， 5.08(m’lH)，4.〇〇（q，ih，J = 7·2Ηζ) ，1.〇〇（S，3H) ，〇·89(ΐ， 3H，卜 6·2Ηζ)。 實施例 4 (7α，17/5) - 17 —羥基—7 — (2 — 丙烯基）雌一 4，14 一二烯—3 -酮。 i) 一將粒狀鋰（其中內含〇 · 5%鈉；5 · 60克 )之無水***（2 5 0毫升）之混合物冷卻至一 3 0 °C。 在4 5分鐘內添加1—溴一 3 —〔〔 （1 ’ 1—二甲基乙 基）二甲基矽烷基〕氧基〕丙烷（1 0 1 · 2克）。維持 溫度低於0 °C。於添加溴化物之後，將反應混合物在 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -25 - (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝·丨丨丨丨—丨丨訂·—I—I— 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 548277 Α7 Β7 五、發明說明（23) 2 0 °C下再攪拌4 5分鐘。於第二個燒瓶中，將碘化銅（ 1 ) ( 3 8 · 1克）之無水四氫呋喃（2 0 0毫升）懸浮 液冷卻至- 3 0 °C。在5分鐘內添加有機鋰化合物溶液。 (-20 ^_T <_1 0 °C )，並繼續再攪拌5分鐘。然後， 在5分鐘內添加（17α)— 17 —〔（三甲基矽烷基） 氧基〕一 19 —降孕一 4，6 —二烯—20 —炔—3 —酮 (實施例1，步驟i ; 5 1 · 6克）之無水四氫呋喃（ 2 0 0毫升）溶液。反應混合物在一 2 0 °C下攪拌1小時 。將混合物倒入飽和氯化銨水溶液及濃縮氨水（9 : 1 ) 中，產物用乙酸乙酯萃取。合并有機相，用飽和碳酸氫鈉 水溶液及濃鹽水淸洗，硫酸鈉乾燥，濃縮。將殘餘物溶於 丙酮（500毫升）。添加鹽酸（6M，25毫升），反 應混合物在室溫下攪拌2小時。添加飽和的碳酸氫鈉水溶 液並移除丙酮。產物用乙酸乙酯萃取，合并有機相，用濃 鹽水淸洗，硫酸鈉乾燥，濃縮。管柱色層分析得到（7 α ，17α) - 17 -羥基—7 -（3 —羥基丙基）19 — 降孕一4 —燃一 2 0—炔一3 —酮（39.4克）。 i i ) 一將前述步驟得到的產物（3 8 · 4克）混合 物之吡啶（2 1 5毫升）及乙酸酐（1 0 8毫升）溶液在 室溫下攪拌1小時。將反應混合物倒至水（1 0 0 0毫升 )中並繼續攪拌1小時。產物用乙酸乙酯萃取，合并有機 相，用水及濃鹽水淸洗，硫酸鈉乾燥，於減壓之下濃縮， 以生成（7α，17α) — 17 —羥基—7 —〔3 —(乙 醯基氧基）丙基〕—19 —降孕—4 —烯一 2 0—炔一 3 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -26- 裝--------訂i (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) Φ 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 548277 A7 B7______ 五、發明說明（24 ) 一酮（40 · 5克）。產物可於以下步驟使用而無須進一 步的純化。 :i 1 1 ) 一依據類似實施例1步驟i v記·述之方法， 將前述步驟得到的產物（4 0 · 5克）轉換成（7 α ) -7 —〔3—(乙醯基氧基）丙基〕雌一 4烯—3 ，17 -二酮（3 9 · 0 克）。 i ν ) -依據類似實施例1步驟ν記述之方法，將前 述步驟得到的產物（3 9 · 0克）轉換成（7 ^ ) - 7 - 〔3—(乙醯基氧基）丙基〕—3羥基雌一 1 ，3，5 ( 10) - 三烯一 17 —酮（36.8 克）。 ν ) -依據類似實施例1步驟v i記述之方法，將前 述步驟得到的產物（3 6 . 8克）轉換成（7 α ) — 7 - 〔3 —（乙醯基氧基）丙基〕一 3甲氧基雌—1 ，3 ，5 (10) - 三烯一 17 —酮（19.3 克）。 ν i ) -依據類似實施例2步驟ν記述之方法，將前 述步驟得到的產物（1 9 · 3克）轉換成（7 α ) - 7 - 〔3 —（乙醯基氧基）丙基〕—3甲氧基雌一 1 ，3 ，5 (10)—三烯一17 —酮環1 ，2 —乙烷二基乙縮醛（ 2 1 · 8 克）。 ν i i ) -將前述步驟得到的產物（2 1 · 8克）之 無水四氫呋喃（2 2 4毫升）溶液逐滴加入氫化鋁鋰（ 6 · 5 8克）之無水四氫呋喃（4 4 8毫升）懸浮液中， 冷卻至0 °C。於攪拌1小時之後，添加飽和硫酸鈉水溶液 以終止反應。添加乙酸乙酯，混合物用寅氏鹽過濾。於減 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -27- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) --------^---------· 548277 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 Α7 Β7 五 '發明說明（25) 壓之下濃縮濾液以生成（7 α ) - 7 -（ 3 -羥基丙基） 一 3 —甲氧基雌一 1 ，3 ，5 (1〇)—三烯一 17 —酮 環1 ，2 —乙烷二基乙縮醛（18 · 9克）。產物可於以 下步驟使用而無須進一步的純化。 v i i i ) -將前述步驟得到的產物（1 8 · 7克） 之無水二甲氧基乙烷（8 0毫升）溶液逐滴加入三溴吡錠 (35 · 9克）混合物之無水二甲氧基乙烷（80毫升） 及乙二醇（2 8毫升）溶液中，避免溫度上升至室溫以上 。於攪拌1小時之後，將混合物倒至硫代硫酸鈉（ 27 · 1克）之水（159毫升）溶液中，產物用乙酸乙 酯萃取。合并有機相，用水、飽和的碳酸氫鈉水溶液及濃 鹽水淸洗，硫酸鈉乾燥，於減壓之下濃縮，以生成（7 ^ ，16α) —16 —溴一7 —（3 —羥基丙基）一3 —甲 氧基雌一 1 ，3，5 (10)—三烯一 17-酮環1 ，2 —乙烷二基乙縮醛（2 4 · 3克）。產物可於以下步驟使 用而無須進一步的純化。 i X ) -依據類似實施例2步驟ν i i記述之方法， 將前述步驟得到的產物（2 4 . 3克）轉換成（7 ^ ) -7 — (3 —羥基丙基）一3甲氧基雌一1 ，3 ，5 (1〇 )，15 —四烯—17 —酮環1 ，2 —乙烷二基乙縮醛（ 1 3 · 1 克）。 X ) -依據類似實施例2步驟ν i i i記述之方法， 將前述步驟得到的產物（5 · 4 6克）轉換成（7 α ) -7 — （3 —羥基丙基）一3甲氧基雌一1 ，3 ，5 (1〇 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） --------訂--- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) % Φ -28- 548277 A7 _____JB7_ 五、發明說明（26 ) )，15 —四烯一17 —酮（5.01 克）。 X i ) -將前述步驟得到之酮（3 · 1 9克）溶液及 p —甲苯磺酸嘧錠（〇 · 9 4克）之異丙烯基乙酸鹽（ 9 4毫升）在回流下加熱1 . 5小時。於冷卻之後，將反 應混合物倒至飽和的碳酸氫鈉水溶液中。產物用***萃取 ，合并有機相，用濃鹽水淸洗，硫酸鈉乾燥，於減壓之下 濃縮，以生成（7α) - 7 -〔3 -（乙醯基氧基）丙基 〕一3 —甲氧基雌一 1，3，5(1〇），14，16 — 五烯—17 —醇乙酸鹽（3 · 69克）。產物可於以下步 驟使用而無須進一步的純化。 X i i ) -依據類似實施例2步驟X記述之方法，將 前述步驟得到的產物（3 , 6 9克）轉換成（7 α， 17/3) — 7 — 〔3 — （乙醯基氧基）丙基〕一 3甲氧基 雌一1，3，5 (10) ，14 —四烯一 17 —醇（ 2 · 4 9 克）。 X i i i ) -將前述步驟得到之醇（2 · 4 9克）溶 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 液及咪唑（2 . 20克）之無水二氯甲烷（13毫升）用 第三丁基二甲基矽烷基氯（1·46克）處理。在室溫下 攪拌2小時之後，將反應混合物倒至飽和碳酸氫鈉水溶液 中。產物用***萃取，合并有機相，用水及濃鹽水淸洗’ 硫酸鈉乾燥，於減壓之下濃縮，以生成（7 a，1 7 Θ ) —7 —〔3 —（乙醯基氧基）丙基〕一 17 —〔〔 （1 ’ 1 —二甲基乙基）二甲基矽烷基〕氧基〕—3 —甲氧基雌 一1，3，5(1〇），14一四烯（3·43克）。產 -29- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 548277 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 B7_五、發明說明（27 ) 物可用於下一步驟無須進一步的純化。 X i v ) -依據類似步驟v i i記述之方法，將前述 步驟得到的產物（3 · 4 3克）轉換成（7 a，1 7 /3 ) 一 17 —〔〔 （1 ，1二甲基乙基）二甲基矽烷基〕氧基 〕一 7 -（3 -趨基丙基）一 3 —甲氧基雌一 1 ，3 ，5 (10) ， 14一四嫌（1·96克）。 χν) -將碘（〇 · 292克）加入三苯基膦（ ◦ · 32克）及咪唑（0 · 082克）之無水二氯甲烷（ 7 . 5毫升）溶液中。於挪完全反應之後，添加前述步驟 得到的產物（0 · 2 5克）之無水二氯甲烷（3毫升）溶 液，混合物在室溫下攪拌3 0分鐘。然後倒入飽和硫代硫 酸鈉水溶液，產物用***萃取。合并有機相，用水、飽和 的碳酸氫鈉水溶液及濃鹽水淸洗，硫酸鈉乾燥，於減壓之 下濃縮。管柱色層分析得到（7 α，1 7 /5 ) - 1 7 -〔 〔（1 ，1 一二甲基乙基）二甲基矽烷基〕氧基〕一 7 — (3 —碘丙基）一3 —甲氧基雌一1 ，3 ，5 (1〇）， 14 —四烯（〇，29克）。 X ν i ) -將前述步驟得到之碘化物（0 · 1 7克） 的二甲基亞硕（5毫升）溶液用第三丁氧化鉀（1 · 62 克）處理，反應混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物倒 至飽和氯化銨水溶液中，產物用***萃取。合并有機相， 用水及濃鹽水淸洗，硫酸鈉乾燥，於減壓之下濃縮。管柱 色層分析得到（7α ，17/3) — 3 —甲氧基一7 — （2 丙烯基）雌一 1 ，3，5 (10) ，14 —四烯—17 — (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) % 裝 訂i Φ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -30 - 548277 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明說明（28) 醇（0 ·〇7 5克）。 X v i i )—將前述步驟得到之醇（〇 · 1 5克）的 無’水四氫呋喃（5毫升）加入含鋰（〇 · 4 2克）之液體 氨水（3 0毫升）回流溶液中。於一 4 0 °C下攪拌1小時 之後，添加第三丁醇（4毫升）並繼續攪拌3 0分鐘。添 加乙醇（8毫升），蒸發氨水。將混合物倒至水中，產物 用乙酸乙酯萃取。合并有機相，用濃鹽水淸洗，硫酸鈉乾 燥，於減壓之下濃縮，以生成（7a，17/S) — 3 —甲 氧基—7-（2 —丙烯基）雌—2，5 (10) ，14 一 三烯一 17 —醇及（7α ，17冷）一3 —甲氧基一 7 — 丙基雌一 2，5 (10) ，14 —三烯一 17 —醇之混合 物（0 · 1 4 4 g，比例 2 : 3 )。 X v i i i ) -依據類似實施例1步驟i i i記述之 方法，將前述步驟得到的產物（0 . 1 4 4克）水解，經 管柱色層分析及製備型Η P L C (逆相）之後得到（7 α ，17 6) — 17 —羥基一7 — (2 —丙烯基）雌一4， 14 —二烯一 3 —酮（0·〇18 克），〔a〕D20 = +6.2°(c=0.89，二哼烷）。 實施例5 (7a ，17/S) — 7 — 丁基一 17 —羥基雌 —4，14 —二烯一 3 -酮（a)及（7α， 17/3) — 7 -（3 — 丁烯基）一 17 羥基雌 —4，14 —二烯—3 -酮（b)。 i ) 一依據類似實施例2步驟i v記述之方法’將（ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210x 297公釐） -31 - 裝--------訂-丨 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 雌一1 ， 3 ， 5 ( 1 〇） 548277 A7 ____ B7 __ 五、發明說明（29 ) 7α ，17/3) — 17 〔〔 （1 ，1 一二甲基乙基）二甲 基5夕院基〕氧基〕一 7 -（3 -經基丙基）一 3 -甲氧基 1 4 一四烯（實施例4，步驟 χιν;〇·40克）轉換成3—〔 （70C， 17Θ) 一 17 —〔〔 （1 ，1二甲基乙基）二甲基矽烷基氧基— 3 —甲氧基雌一1 ，3 ，5 (10) ，14 一四烯一7 — 基〕丙醛（0·40克）。 i i ) 一將甲基三苯基鱗溴化物（0 · 9 4克）、第 三丁氧化鉀（0 · 2 6克）及無水甲苯（1 0毫升）之混 合物在回流下加熱1小時。添加前述步驟得到之醛（ ◦ · 4 0克）的無水甲苯（5毫升）溶液，繼續加熱1小 時。於冷卻之後，將反應混合物倒至飽和氯化銨水溶液。 產物用乙酸乙酯萃取，合并有機相，用濃鹽水淸洗，硫酸 鈉乾燥，於減壓之下濃縮。管柱色層分析得到（7 α， 17 点）一7— (3 — 丁烯基）一17 — 〔 〔 （1 ，1 — 二甲基乙基）二甲基矽烷基〕氧基〕一 3 —甲氧基雌一 1 ，3，5(10)，14一 四烯（0.40 克）。 i 1 1 ) 一依據類似實施例1步驟i i i記述之方法 ，將前述步驟得到的產物（〇 · 4 0克）轉換至（7 α， 170) — 7 —（3 — 丁烯基）一3 —甲氧基雌一 1 ，3 ，5 (1〇），14 一四烯一17 —醇（〇· 39 克）。 i ν ) -依據類似實施例4步驟X ν i i記述之方法 ，將敘述於前述步驟之產物（〇 · 39克）轉換成（7α ，17/3) — 7 — 丁基一 3 甲氧基雌一2 ，5 (10)， 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐）

訂

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -32- 548277 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明說明（3〇 ) 14 一 三嫌一 17 —醇及（7α，17/3) - 7 — (3 — 丁烯基）一 3 —甲氧基雌一 2，5 (10) ，14 —三烯 〜'1 7 —醇之混合物（0 · 3 7 g，比例3 : 1 )。 v ) -依據類似實施例1步驟i 1 i記述之方法，將 前述步驟得到的產物（0 · 3 7克）’於管柱色層分析及 製備HPLC (逆相）之後以生成（7α，17β) - 7 一 丁基一 17 -羥基雌—4，14 一二烯—3 -酮（ 0.0 4 3 9 )，〔a〕D20 = + 7.6o(c = 〇，185，二口等烷），及（7α，17/3) — 7 — （3 一 丁烯基）—17 —羥基雌一 4，14 一二烯一 3 —酮（ 〇，〇77 克），〔a〕D20 = + 4*4°(c = 〇· 4 7 5 ，二噚烷）。 實施例 6 (7a ，17/3D) — 7 ，13 —二乙基一1 7 -羥基腺一 4，14 —二烯一 3 —酮。 i ) 一將對一甲苯磺酸吡錠（5 · 0克）加入1 3 -乙基腺-4 —烯一 3，17 二酮〔Hoffinann-LaRocheand Co.;AG，DE 1 8064 1 0( 1 967) ; 1 0 0 · 0 g〕之乙醇（ 600毫升）、二噚烷（800毫升）及三乙基正甲酸酯 (1 9 9毫升）之混合溶液中。在室溫下攪拌4 · 5小時 之後，添加吡啶（1 0 0毫升）’將反應混合物倒至飽和 的碳酸氫鈉水溶液中。產物用乙酸乙酯萃取’合并有機相 ，用水及濃鹽水淸洗，硫酸鎂乾燥’於減壓之下濃縮’以 生成3 —乙氧基一 13 —乙基腺一 3 ，5 —二嫌一 17 — 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -33- 裝---- (請先閱讀背面之注意事:填寫本頁) 訂ί 548277 A7 B7 五、發明說明（31 酮（1 4 6 · 3克）。產物可於以下步驟使用而無須進一 步的純化。 i i )—依據類似實施例4步驟v i 1記述之方法， 將前述步驟得到的產物（7 3 · 2克）轉換成（1 7 /3 ) —3 —乙氧基一1 3 —乙基腺一3 ，5二烯一 1 7 —醇（ 5 8 · 0 克） iii) 將前述步驟得到的產物 8 0克）之 四氫呋喃（2 1 5毫升）溶液（其中內含吡啶（2 · 5毫 升））加入四氯一1 ，4 一苯并醌（49 · 6克）之乙醇 (5 2 5毫升）及水（6 0毫升）的混合懸浮液中。在室 溫下攪拌反應混合物4 . 5小時，然後用亞硫酸氫鈉（ 2 6 · 7克）水（3 8 5毫升）溶液處理。於攪拌3 0分 鐘之後，添加飽和亞硫酸鈉水溶液，產物用乙酸乙酯萃取 。合并有機相，用飽和亞硫酸鈉水溶液、水及濃鹽水淸洗 ，硫酸鎂乾燥，於減壓之下濃縮，以生成棕色油狀物（ 81 ·〇克）。以57 . Og的3 ，5 —雙烯重覆反應以 生成7 9 · 0 g的粗產物。管柱色層分析後合并粗產物得 到（17冷）一1 3 —乙基一17羥基腺一4 ，6 —二烯 請 先 閱· 讀 背 之 注 意 事 項丨

I裝 頁I 填 訂 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 3 —酮 .3克） i v ) -依據類似實施例4步驟X i i i記述之方法 將前述步驟得到的產物（5 6 · 3克）轉換成（1 7泠 一 1 7 — 〔 〔 （ 1 1二甲基乙基）二甲基矽烷基氧基 13 —乙基腺—4，6 —二烯—3 —酮（65 · 6克 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -34- 548277 A7 _ B7______五、發明說明（32 ) v ) -依據類似實施例2步驟i記述之方法，使用乙 基溴化鎂將前述步驟得到的產物（2 5 · 0克）轉換成（ 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 α 7 3 1-1 7 I Nxy 7 克 3 r—I 8 /(\ 酮 I 3 I 烯 y 步 述 前 將 例 施 實C 似物 類產 據的 依到 I 得 8 4 I 腺 基 羥 I 7 一—I I 基 乙 7 3 烯 三 7 2 驟 步 法 方 之 述 記 α 7 /(\ 成 換 轉 克 4 2 基 乙 醇 6 腺 基 氧 甲 3 2 克 8 步克 I 2 2 腺 例 7 基 施 ·氧 實 5 甲 似 C | 類物 3 據產 I 依的基 一 到 乙 } 得二 i 驟 I i 步 3 V 述1 前 ， 將 7 克 6 5 /IV 酮 I 7 IX I 烯 三

V 步 3 1 述 1 烯 前，三 將 7 一 克 3 5 法 3 ο 方 α 1 之 7 C 述 C 5 記成， V換 3 i 轉 ， (請先閱讀背面之注咅？事項再填寫本頁) 裝----- ---訂i 似 類 據 依 法 方 之 述 記 V 驟 步 2 例 施 ΤΧ 成，醛 換 3 縮 轉，乙 } 1 基 克-二 1 腺院 6 基乙 •氧 1 5 甲 CN3 ( I ， 物 CO 1—-1 產 I 環 的基酮 到乙 I 得 一 7 \)/ α1—I 7 ( ( 5 6 /ίν 9 ο 9

將 法 方 之 述 記 *1 V 驟 步 2 例 施 實 似 類 據 依 I \)/ X 物溴 產一 的 6 ^_ 到1 < 得 | 5 驟}， 步 α 3 述 6 ， 前 1 1 ο 克 7 4 8 醛 縮 乙 基 .Φ α 7 /IV 成 換 轉 \)/ 克 7 2 6 3 7 7 1 1 烯 三 腺烷 基乙 氧| 甲 2 3 ， I 1 基環 乙丽 將 7 J I 法} 方 α 之 7 述C 記成 i換 •1 轉 V \)y 驟克 步 7 2 4 例 · 施 8 實 C 似物 類產 據的 依到 I 得 ) 驟 X 步 述 前 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -35- 548277 A7 B7 五、發明說明（33 ) ，13 — 二乙基·一 3 — 甲氧基腺一1 ，3 ，5 (10)， 1 5 —四烯—1 7 -酮環1 ，2 —乙烷二基乙縮醛（ 5 · · 2 1 克）。 X 1 ) -將前述步驟得到的產物（4 · 6 1克）之無 水甲苯（1 2 0毫升）溶液用對一甲苯磺酸嘧錠（ 3 · 1 8克）處理，在回流下加熱1小時。於冷卻之後， 反應混合物倒至飽和的碳酸氫鈉水溶液中，產物用乙酸乙 酯萃取。合并有機相，用水及濃鹽水淸洗，硫酸鎂乾燥， 於減壓之下濃縮，以生成（7α) — 7，13 —二乙基一 3 —甲氧基腺一 1 5(10) ，14 一四烯一17 請 先 閱 讀 背 之 注 意 事 項j

重裝 頁I 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 一酮環1 ，2 —乙烷二基乙縮醛（4 · 44克）。產物可 於以下步驟使用而無須進一步的純化。 X i 1 ) —將前述步驟得到的產物（4 · 4 4克）之 無水甲苯（1 2 0毫升）溶液用對一甲苯磺酸（2 · 2 9 克）處理，在回流下加熱4 5分鐘。於冷卻之後，將反應 混合物倒至飽和的碳酸氫鈉水溶液中，產物用乙酸乙酯萃 取。合并有機相，用水及濃鹽水淸洗，硫酸鎂乾燥，於減 壓之下濃縮，以生成（7α) — 7，13 —二乙基一 3 -甲氧基腺一 1 ，3 ，5 (10) ，14 一四烯一 17 —酮 (3 · 8 9克）。產物可於以下步驟使用而無須進一步的 純化。 X i i i )—依據類似實施例4步驟ν i i記述之方 法，將前述步驟得到的產物（3 · 8 9克）轉換成（7 α ，1了/3) — 了 ，13 —二乙基一 3 甲氧基腺一 1 ，3 ， 訂 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -36 - 548277 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明說明（35 ) i i i )〜依據類似實施例2步驟i v記述之方法， 將前述步驟得到的產物（5 . 4 3克）轉換成（7 α ) -7'—乙烯基一 13 —乙基一 3甲氧基腺一1 ，3 ，5 ( 1〇)—三烯—17 —酮（5.08 克）。 i ν ) -依據類似實施例2步驟ν記述之方法，將前 述步驟得到的產物（4 · 9 2克）轉換成（7 α ) - 7 - 乙烯基一 13 —乙基一 3 —甲氧基腺一1 ，3 ，5 (10 )—三烯一 17 —酮環1，2 —乙烷二基乙縮醛（ _ 5 · 4 2 克）。 ν ) -依據類似實施例2步驟ν i記述之方法，將前 述步驟得到的產物（5 · 0 8克）轉換成（7 α，1 6 α )一 16 —溴一 7 —乙烯基一 13乙基一 3 —甲氧基腺一 1 ，3，5 (10)—三烯一17 —酮環 1 ，2 —乙烷二 基乙縮醛（7.41克）。 v i ) -依據類似實施例2步驟v i i記述之方法， 將前述步驟得到的產物（7 · 4 1克）轉換成（7 α )— 7 -乙烯基一 13 —乙基—3甲氧基腺一 1 ，3，5 ( 10) ，15 —四烯—17 —酮環1 ，2 -乙烷二基乙縮 醛（3 · 8 7 克）° ν i i ) -依據類似實施例6步驟X i記述之方法， 將前述步驟得到的產物（3 · 4 2克）轉換成（7 α ) -7 —乙烯基一 13 —乙基—3甲氧基腺一1 ，3 ，5 ( 10) ，14 一四烯一 17 —酮環1 ，2 —乙烷二基乙縮 醛（3 · 3 0 克）° 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐）-- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 崎裝----- 111 訂· —--1111 Φ 548277 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 B7五、發明說明（36) V 1 1 i ) -依據類似實施例6步驟X 1 1記述之方 法，將前述步驟得到的產物（3 · 3 0克）轉換成（7 α )—7 —乙烯基一13 —乙基—3甲氧基腺一1 ，3 ，5 (1〇），14 —四烯一17 —酮（3·〇克）。 i X ) -依據類似實施例4步驟ν X i i記述之方法 ，將前述步驟得到的產物（3 · 0 0克）轉換成（7 α ’ 17/5) — 7 —乙烯基一13 —乙基一3甲氧基腺一1 ， 3 ，5 (1〇），14 一四烯一17 —醇（1 · 7〇克） 〇 X ) -依據類似實施例4步驟X ν i i記述之方法， 將前述步驟得到的產物（1 · 4 9克）轉換成（7 α ’ 17/3) — 7 —乙烯基一13 —乙基一3甲氧基腺一2 ， 5 (10) ，14 —三烯一17 —醇（1 · 6〇克）。 X i ) -依據類似實施例1步驟1 i i記述之方法， 將前述步驟得到的產物（1 · 6 0克）轉換成（7 α， 17/3) — 7 —乙烯基一13 —乙基一17羥基腺一 4 ， 14 —二烯一 3 —酮（〇· 47 克），m.p.l41 — 14 5。。。 實施例 8 (3/3 ，7α，17/3)— 7 —乙基雌一4, 1 4 一雙烯—3，1 7 —二醇。 依據類似實施例4步驟ν i i記述之方法，（7α， 17/3) — 7 — 乙基—17 —羥基雌—4，14 —二烯— 3 -酮（實施例1 a )製備標題化合物。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝----- 訂·丨 # 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -39 - 548277 A7 -------- B7 _ _ 五、發明說明（37 ) 'H^NMR (CDC 13) 55.39 (m，I Η )， 5.〇l(m，lH)，4·21(ιή，1Η)，3·96 ，〇.98(s，3H)，〇.87(t， 3H，j=7.6Hz)。 實施例9 (5α ，17/3) — 7 —乙基一17 -羥基雌 —14 一烯—3 —酮· 將（7α ’ 17冷）一7 —乙基一 17 —羥基雌一 4 ’ 14 一二嫌一 3 -酮（實施例ia ; 〇 · 67克）之無 水四氫咲喃（1 3毫升）溶液加入鋰（〇 · 3 1克）之液 體氨水（4 4毫升）的回流溶液中。於一 4 〇 °c下攪拌 3 0分鐘之後，添加固體氯化銨，蒸發氨水。添加水，產 物用乙酸乙酯萃取。合并有機相，用飽和氯化銨水溶液、 濃鹽水淸洗，硫酸鈉乾燥，於減壓之下濃縮。管柱色層分 析得到（5α ，7α ，17/5) — 7 — Z基一 17 —羥基 雌一14 —烯一 3 —酮（〇·21克）， 'H-NMR (CDC 13) (5 5.0 2 ( s，1 Η )， 3.98(t，lH，J = 8.4Hz) ，0.99(s ，3H)，〇.89(t，3H，J = 7.5Hz)。 實施例1 0 L H抑制測定：測定口服的活性 經去勢的成熟雄性老鼠模式身上測定本發明數個男性 荷爾蒙於活體中的效力，並與西格洛夫（Segaloff)化合物 比較。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝----- 訂i 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -40- 548277 A7 ____ B7___ _ 五、發明說明（38 ) 此模式中血淸L Η高（由於對睪九的睪酮缺少負迥饋 ’所以高於完整的老鼠5 Ο X倍）。將此類老鼠每日用本 發明化合物之花生油懸浮預處理4天。在給予劑量之前以 及最後之口服服用3小時之後，從尾靜脈收集血液，測定 血淸中之L Η。男性荷爾蒙之效力（E D 5。）用抑制血淸 LH 50% (±10%)之雄性素量（毫克/公斤）表 不° 進行老鼠L Η時間解析之免疫螢光測定（T R — 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 I F Μ A )係使用自製的試藥，抗人類絨毛膜性腺激素/3 次單元（hCG，會與老鼠交互反應）單株的捕捉抗體及 生物素標記的偵測抗體（兔子抗重組老鼠L Η α -次單元 的多株抗體）。重組老鼠L Η之製備係依據描述於Hakola et al( 1997)之方法。在此二位點I F Μ A中，最終與抗生蛋 白鏈菌素-銪反應測定完整的老鼠L Η。I F Μ A之偵測 係基於相當長時期的激發後鑭醯胺銪發出之螢光。老鼠 LH之標準濃度範圍爲0 · 00 1 - 10ng/毫升，爲 了達成測定血淸L Η之最適準確度，將血淸樣品用測定緩 衝溶液稀釋 8 —倍〔Hakola，Κ.，Boogaart，P.V·，Mulders， J·，de Leeuw, R., Schoonen, W·，Heyst, J. V., S wolfs, A., Casteren， J. V., Huhtaniemi, I·， and Kloosterboer， H. J.,

Recombinant rat luteinizing hormone;production by Chinese hamster ovary cells, purification and functional characterization, Molecular & Cellular Endocrinology 128, 47(1997)〕。 本紙張尺度適用> 國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐） 「41 - 548277 A7 _____B7 五、發明說明（39 ) 結果 表：。本發明男性荷爾蒙抑有 时血淸L Η之E D 5 〇 ( ρ〇） 實施例 ED5。(毫克/公斤） 1 a 0.2 2 0.5 西格洛夫（Segaloff ) ^ 5 , -寸— 化合物* * (7 α，17 /3 )-7-甲基-17-羥基雌-4,14-二烯-3-酮 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝----- 實施例1 1 測定本發明男性荷爾蒙與人類肝細胞培育後 之 t 1 / 2。 與人類肝細胞接觸後化合物之半生期爲代謝穩定性的 指標。據熟知，此類類固醇之吸收高，此測定提供人類口 服活性的活體外模式。據瞭解較短之半生期顯示化合物之 代謝較快，反之亦然，較長之半生期代表口服投用至人體 後化合物可有較佳的效應。 從健康的年輕（2 5 — 4 5歲）男子收集肝細胞，損 助之器官冷凍保存於液體氮，保持到使用爲止。將彼在 3 7 °C之水浴中解凍，立刻置於冰中，用一倍體積之冰冷 (4 °C )培育培養液淸洗兩次〔William’s培養液E (不含 酉分紅），內含Glutamax I®、慶大黴素5 0微克/毫升、胰 島素1微莫耳濃度、氫皮質酮半琥珀酸鹽1 〇微莫耳濃度 、胎牛血淸0 % ( v / v )〕，計數並用錐蟲藍排除法檢 . 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

548277 A7 B7 五、發明說明（4〇 ) 查生存之細胞。懸浮於1 2 - 2 6孔（非塗覆的）平板的 細胞在密度0 · 5 X 1 0 6細胞/孔之1 · 5毫升培養液中 ，'3 7°C、空氣/〇2/C〇2混合氣體之下（5 5/4〇 /5 )進行培育。將平板置於大約1 〇 r Pm之軌道搖動 器。 肝細胞與最終濃度1 〇毫莫耳濃度之測試化合物反應 。於0 · 5、1及3小時之後將全部培育混合物吸至玻璃 管停止反應，並添加一倍體積之冰丙酮。丙酮於在室溫、 氮氣之下乾燥，將體積調至1 · 5毫升’試管在4 °C、 1〇· OOOxg下離心30分鐘。收集去除蛋白質之上 淸液進行L C — M S /M S分析。 裝------ (請先閱讀背面之注意事填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 結果 表·本發明男性荷爾蒙與人類肝細胞培育後之t 1 / 2。 實施例 tl/2(分鐘） 1 a 157 2 40 西格洛夫（Segaloff) 60 化合物* * (7 α，17 /3 )-7-甲基-17-羥基雌-4,14-二烯-3-酮 ^^ 11111111 -43- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐）

Claims (1)

1. 548277 修正 月日丨 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 附件一（A): 第89 1 1 2646號專利申請案 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 中文申請專利範圍修正本 民國91年10月17日修正 1 . 一種結構爲式I之化合物：

   其中 Ri爲一〇或一〇H ; R 2 爲（C 2 - 4 )烷基、（C 2 - 4 )烯基、或（C 2 _ 4 )炔 基； Rs爲氫、（Cl-2)院基、或乙烯基； R 4爲（C i - 2 )烷基； R 5爲氣，且 點線意指選擇性之鍵結。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 2 .如申請專利範圍第1項之化合物，其中R 2係選自 乙基、乙烯基、乙炔基、丙基、1 一丙烯基、2 -丙烯基 、或1 一丙炔基。 . 3 .如申請專利範圍第2項之化合物，其中R 2是C 2 〇 4 . 一種治療與雄性素功能不足相關的病症之醫藥組 合物，其包含藥學上可接受的載體，並包含作爲醫藥活性 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） 548277 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 劑之結構式I的類固醇化合物：

   其中 R 1爲一〇或一〇Η ; R 2 爲（C 2 - 4 )烷基、C C 2 - 4 )烯基、或（C 2 - 4 )炔 基； R3爲氮、（Cl-2)院基、或乙燦基； R 4爲（C i - 2 )烷基； R 5爲氫；且 點線意指選擇性之鍵結。 5 .如申請專利範圍第4項之醫藥組合物，其中該類 固醇化合物中之R 2係選自乙基、乙烯基、乙炔基、丙基、 1 一丙烯基、2 -丙烯基、或1 一丙炔基。 6 .如申請專利範圍第4項之醫藥組合物，其中該類 固醇化合物爲（7α ，17/3) — 7 —乙基一17 —羥基 雌一4 ，14 —二烯一3 —酮或（7α ，17/5) — 7 — 乙烯基—1 7 —羥基雌—4，1 4 —·二烯—3 —酮。 7 .如申請專利範圍第5至6項中任一項之醫藥組合 物，其係適用於口服投藥。 8 .如申請專利範圍第1項之化合物，其係用於製備 可治療雄性素功能不足之藥物。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） 。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ”裝· 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製