TW444001B

TW444001B - 1,25-dihydroxy-16,22,23-trisdehydro-cholecalciferol derivatives

Info

Publication number: TW444001B
Application number: TW086103109A
Authority: TW
Inventors: Bernard Michael Hennessy; Jerome Anthony Lacobelli; Milan Radoje Uskokovic
Original assignee: Hoffmann La Roche
Priority date: 1996-03-21
Filing date: 1997-03-13
Publication date: 2001-07-01
Also published as: EP0796843B1; CN1110477C; HUP9700609A3; HRP970162A2; CN1172793A; TR199700219A2; TR199700219A3; CZ85897A3; ATE240941T1; AU708679B2; ES2198512T3; ID16285A; PT796843E; AR006315A1; AU1513597A; EP0796843A2; CA2199893A1; PL319070A1; DK0796843T3; KR970065495A

Description

<7^109號專利申請案 iL 444 气明書修正頁(87年12月) Λ' ίΓ 五、發明説明（1 ) 本發明係關於下式之化合物

a

經濟部中央標準局負工消费合作社印製其中R是經基’丑Ri是HACH2’或良是氩或氟，且 CH2。如本文使用之「低級烷基」一詞指的是含有丨至4個碳原子之直鏈或枝鏈烷基，例如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、第三丁基及其類似物。「芳基_低級烷基」指的是對位-甲苯基、苯甲基、苯乙基、苯丙基及其類似物。「芳基」—詞指的是衍生自可以不被或可被一或多個低碳烷基取代之芳烴基。Γ芳基」的實施例為苯基和對位 -甲基笨基。上述的式I之化合物可用來做為治療過度増生性皮虜疾病，如牛皮廯的治劑。式丨之化合物也可用來做為治療贅生性疾病，如白血病的治劑□式丨之化合物亦可用來做為治療皮脂腺疾病，如粉刺和皮脂漏皮膚炎的治劑。式！之化合物也可用來做為治療需要調節免疫系統之疾病如移植排斥作用、移植物對宿主疾病及其類似者之治劑。本發明係關於一種特別是做為抑制皮膚過度增生和腫瘤 -4 本紐尺舰财關家鮮（ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁}

丨

第86103109號專利申請案 444 0 f說明—畫修正頁⑹年iUQ A 7 ΒΊ 五、發明説明（2 修a 經濟部 k 標嗥局員工消合作社印 % 細胞尤其是治療過度増生性皮膚疾病，如牛皮癬，贊生性疾病，纟白血病，和皮脂腺疾病，如粉刺和皮脂漏皮膚炎之醫樂组合物’冑醫藥組合物含有幻之化合物或是二或多個式I之化合物的混合物。本發明也係關於使用式!之化合物來製備具有抗過度增生活性和腫瘤細胞抑制活性，特別是用來治療上述疾病狀態之醫藥組合物。本發明也係關於製備式〗之化合物和敘述於下之式ιχ ’ X ’ Via ’ VIb ’ π ’ ΙΠ ’ Χ%ΧΙΙ之中間產物的方法D 在式1之化合物的較佳具體實施例中，R是羥基和/或Ri 是CH2。於另一個具體實施例中，Ri是H2。最好是l525-二輕-I6,22S，23 -三烯-膽鈣化错醇和ι，25_二羥_ 16，22R，23 -三稀-膽鈣化留醇。在製備式I之化合物的方法之最後步騾中，包含去除式j 相對應的甲矽烷基化二蒔或三醇中的甲矽烷基保護基’該甲矽烷基保護基最好是Si (R4，R5，R6) ’其中…和民6是低級烷基，而R5是低級烷基、芳基或芳基_低級烷基，而藉由於極性有機溶液中與氟鹽反應可以方便地完成去除該甲矽烷基保護基。如下文所述’特別參考配製流程圖I _ I〗丨和以下的實施例製備式I之化合物的22S異構物。 -5- 本紙裱尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（2丨0Χ297公艰） (請先Μ讀背面之注意事項再填K本頁) 丁 ·-0 '4 备 ;，444〇〇] 五、發明説明（3

經濟部中央糅準局負工消费合作社印裳

(請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

本紙張尺度適用中國困家標準（〇阳>厶4规格（210父297公釐} 444 Ο Ο 1 Α7 Β7 五、發明説明（4 )

I I 圖程流製己 S

Rs R4—si—R6

Ia VI (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) ¾衣

Γ S

5 ,R R4—siifle ο-V Η νΙ 訂經濟部中央標準局員工消费合作社印製

Rs I R4丨si丨Rs Π 本紙張尺度適用中國國家樣车（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐>

ΪΟ Ο 1 Α7 Β7 五、發明説明（5 ) HO. vni

配製流程圖111 R4 :CH-- R5 _ Si- 〇一^ CH

R4 R6

OH X

R4 (請先閱讀背面之注意事項再填鸾本頁)

1T

Re 經濟部中夬標率局負工消費合作社印裝在上述的配製流程圖I中.，式II之化合物在室溫下，於惰性溶劑，如乾的四氫呋喃或較佳之乾的二氣甲烷中，與氧化劑，如2,2 ’ -二吡啶鑌氣化鉻酸鹽或吡啶錆二氣化鉻酸鹽處理後氧化成爲式III之化合物。 -8 本紙張尺度適用中國國家棣牟（CNS ) A4规格（210X297公釐） ./i - - ^ 444001 五、發明説明（6 ) 所生成之式ΠΙ之化合物與相對應的下式化合物反應，轉化成式IVa，IVb或IVc。

Ph2P=〇

R6 其中Ph是苯基；且Ri，R4,尺5和如上所述；R7是鼠、氟或 OSi (R4，R5，R6)。 {请先閣讀背面之注意事項再填寫本頁) r裝· 經硃部中央標準局貝工消费合作社印策該反應係於-6 0 °C至· 9 0。(：，最好是-7 8 *C下，在極性、操極性、有機;谷劑’如乾的鍵或較佳之乾的四氫咬喃中，於強驗如燒基链’像是丁基鋰存在下完成。已知式乂之化合物或許可以根據已知之方法來製備。式IVa，IVb或IVc之化合物的保護基係藉與一種溶於有機溶劑，如鲢，或較佳之四氫呋喃中的氟鹽，如四丁基 -氟化銨反應而去除’以生成相對應之式Ia，ib*lc之化合物。如上所述之式II的中間產物係特別參考配製流程圖以下實施例製備：於配製流程圖II中，式VIa之化合物藉與苯磺醯氣和三乙胺反應而轉化爲式VII之化合物。<VlI之化合物藉與甲醇和第三丁基鋰反應而轉化爲式π之化合物。 ___9 ·_ 本紙張尺度逋用t闽國家標準（CNS ) A4规格（210X297公ft > 訂 -Ii n 4 Add ίί-η ^ ·τ Λ-γ Lr 1/

444 0 〇 I 五、發明説明（7 ) 如上所述之式VI a的中間產物係如下文所述，且特別參考配製流程圖111和以下之實施例製備：在上述之配製流程圖III中，已知式VIII之化合物於驗，如咪峻和情性溶劑’如乾的N，N -二甲基甲酿胺存在下，藉與三坑基甲碎娱•基氣，如第三丁二平基甲碎虎基氣反應而轉化爲式IX之化合物》式IX之化合物藉與險，如正-丁基兹，和N N -二甲基甲醯胺，於做爲溶劑之無水四氫吱喃中，最好爲_781下反應，轉化爲式X之化合物。式X之化合物與[3aR-Z ’ 3aa ’ 4b，7ab]-i_亞乙基-八氮· 7a-甲基-1H-4 -茚酚乙酸鹽和做爲露易斯（Lewis)酸之氣化二甲基招’於氣化碳氫化合物溶劑，如二氣甲坑中，最好在-78 C的溫度下反應。經處理棱，將所-生成以化合物分離出其異構物，以生成式VI a之化合物和式vib之化合物。式I之化合物的22R異構物如下文所述’特別參考配製流程圖IV - V及以下實施例製備。經濟部中央標準局負工消費合作社印裝 _-10- 本紙張尺度逋用t國囷家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） '-44X0-0-0v 444 0 〇 1 A7 五、發明説明（8 )

配製流程圖I V

ΧΪ ΧΙΓ

本紙張尺度逋用中國繭家梯準（CNS ) A4洗格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

經濟部中央輮準局貝工消费合作社印家 A7 B7

VIb p\ s-> o

XIV

R5

XI 在上述之配製流程囷IV中，式XI之化合物如上述化合物II經氧化作用成爲化合物ΙΠ般，氧化成式XII之化合物。所生成之式XII之化合物與相對應的下式化合物反應轉 __-12-_ 本紙張尺度遑用中®國家橾隼（CNS > Μ洗格U10X297公金) ： (請先閱讀背面之注意事項再填寫本I )

Λ-ΛΑΔΟβ Α7 4440 〇 ] Β7 五、發明説明（10 ) 化爲式 xilla ’ xillb 或 XIIIc

R6 如上所述，化合物III轉化爲化合物IVa，IVb或IVc。如上所述的式la，lb或Ic之化合物般去除式Xllla， Xlllb或XIIIc之化合物的保護基，以生成式Id，le或If 之化合物β 如上述之式XI的中間產物係特別凑考ΐε製-流程論乂和以下實施例而製備：在上述配製流程圖ν中，式vib之化合物藉與苯磺醯氣和三乙胺反應轉化爲式XIV之化合物。式XIV之化合物藉與甲醇和第三丁基鋰反應轉化爲式XI之化合物。經濟部中央標準局貝工消費合作社印裝如上所述，式VI b之中間產物係特別參考以上的配製流程圖III和以下的實施例而製備。如上所述，式I之化合物可以以口服施予需要此等治療的溫血動物 a) 以治療過度增生性皮膚疾病例如牛皮癖，基質細胞腫瘤，角寶變性和角化病° b) 以治療赞生性疾病’例如白血病。 _____ -13- 本紙張尺度遢用中國®家榇準（CNS ) A4規格（210X297公釐) \444^-Β〇^ 444 0 〇 ] Α7 Β7 經濟部中央橾隼局員工消貧合作社印装五、發明説明（11 ) c )以治療皮脂腺疾病’例如粉刺或皮脂漏皮膚炎，或 d)以治療需要調節免疫系統之疾病，例如移植排斥，移植物對宿主疾病及其類似者。更特別的疋’如上所述之式I之化合物可以以每天〇 . 5至 50毫克的劑量範圍，口服施予成人以治療上述疾病。如上所述之式I之化合物可以局部施予需要此等治療的溫血動物， a) 以治療過度増生性皮膚疾病，例如牛皮癬，或 b) 以治療皮脂腺疾病，例如粉刺或皮脂漏皮膚炎，更特別的是，如上所述之式【之化合物可以以每天每克局部配方約0，5至5 0毫克的劑量範園局部施予，以治療上述疾病。式I之化合物的劑量依待治療之疾病、·病入年‘和個人情況及给藥模式不同而變化很大，不過當然也要符合每個特殊案例中個人需求。式I之化合物做爲治療過度增生性皮膚疾病治劑之有效活性顯示於下。抑制角質細胞之增生作用 HaCaT細胞株-利用經免疫後的人類細胞株HaCaT (最初獲自N.E. Fusenig，德國癌症研究中心，海德堡，德國）。在測試混合物存在下培養6天後，測量其與3H-胸腺核苷結合呈指數生長之情形。 - 細胞培養-在含有4.5克葡萄糖的〇11比6(^〇、改良式£3816 培養基和營養混合物Hara‘ s Π 2，以3:1 (v/v)混合之混合物 -- __· 14 - 本紙张尺度逋用中國國家揉率（CNS > A4规格（2>0X297公釐） (讀先閔讀背面之注意事項再填寫本頁) r裝. 444〇〇1 五、發明説明（12 ) 中培養HaCaT細胞。在此混合物中添加1 〇 %胎牛血清 (FCS)，2毫莫耳L-麩胺酸’ 50UI/毫升青黴素，50毫克 /毫升鏈黴素，10毫微克/毫升EGF，400毫微克/毫升氛皮脂酮’ 8.5毫微克/毫升霍亂毒素和5毫微克/毫升胰島素。將細胞保持於含有5% (：02和9 5 %空氣之潮濕環境下，並且每3-4天轉種入培養基内。抑制3H-胸腺核苷攝取-將HaCaT細胞（在180毫升添加的混合物中含有250個細胞）種入96洞培養盤内，於37。(：與 5% C〇2和9 5 %空氣下培養。接種後，馬上將在含有1 %乙醇之添加的混合物中稀釋的2 0毫升下表;[I中所列之測試化合物’加入該洞中以使其最終濃度介於〗0-9和丨0·6莫耳間（由1毫莫溶於乙醇中，儲存於-20°C，且避免光照的儲備溶液開始）^ 6天後，以1毫居里/润的濃度將3ff-胸腺核苷（5居里/毫莫耳）加入洞内。在生長期間的最後6小時以脈沖標定細胞。然後在3 7 °C下細胞與胰蛋白酶作用} 〇分鐘’經激烈搖動後使細胞溶解，並使用細胞收集器在96 洞過濾盤上收集。於40 °C，在眞空下乾燥後20-30分鐘後，加入2 0毫升閃爍劑，然後計數濾器所結合的放射活性。經濟部中央棵準局員工消費合作社印裝數値以控制组（不含測試化合物之檢體）的百分比表示。由圏形決定達到控制组濃度的50 %之數値，並於表I中訂爲IC50(抑制濃度）。 u -15- 本纸张尺度逋用中固®家標準（CNS M4规格（2丨〇··<297公釐） 4440 00 A7 B7 五、發明説明（13 )

表I 化合物 ic50(毫微蔞耳、 1,25-二羥-膽鈣化甾醇 55.0 lv25-二經-16,22S，23-三烯-膽鈣化甾醇 40.0 1,25-二經-16,221^23-三烯-膽鈣化甾醇 0.01 由以上結果得知’式I之化合物會抑制角化細胞過度増生。此外，式I之化合物可用於治療過度增生性皮膚疾病，如牛皮癬。式I之化合物做爲治療贅生性疾病的治劑之有效活性說明於以下之測試方法中。誘導HL-60細臉辨別藉由氮藍四坐（NBT)還原作用來測量HL-60細胞發生氧化之可能性，以分析其辨別之謗導作用Γ _ 經濟部中央樣準局貝工消費合作社印製 HL-60細胞係保存於添加了 10% pcs，2毫莫耳L -越胺酸，1毫莫耳丙酮酸鈉，1°/。非必需胺基酸，50U /毫升青徽素和50毫克/毫升鏈黴素之rjpmI-1640培養基内。將HL_ 60細胞（90毫升經添加的RPMI培養基内含有30,000個細胞）種入平底微滴定盤之洞中。種入後，馬上將10毫升於已添加之RPMI培養基中稀釋之表11所列的測試化合物加入該洞’以使其最終濃度成爲介於1〇-"和10_6莫耳間（由1〇-2 莫耳於乙醇中，儲存於-20 ·(：，且避免光照的儲備溶液開始）β 3天後，以多道吸管去除洞-内的培養基，並以1 〇〇毫升ΝΒΤ溶液（1毫克/毫升溶有200毫微莫耳佛坡醇肉豆蔑酸乙酯之磷酸緩衝鹽水中）置換。在37 *C下再培養1小時 _ -16- ^紙張尺度適用中國國家搮準（CNS > A4规格（2i〇X297公釐) ' ^4 4 0 0 0 A? ' 4 4 4 0Q.J_ _ B7 五、發明説明（14 ) 後’去除NBT溶液’然後加入100毫升溶有1〇%硫酸十二烷基鈉之0.01 N HC1。利用自動化讀盤機於54〇微米下以計光定量出被還原的NB T量。計算3個洞的平均値。 S.E.M.介於5和10%間。數値以在相同試驗中與1〇〇_1〇〇〇毫微莫耳鈣化醇達到最大辨別作用之百分比表示。由圖中定出達到此最大數値之5 0%的濃度做爲ΕΕ>5。，並列於表 II »

表II 化合物 ED5〇(毫微寞耳） 1,25-二羥-膽鈣化甾醇 6.0 1，25-二羥-16,22S，23-三烯-膽鈣化甾醇 4.8 1,25-二羥-16,22民23-三烯-膽鈣化甾醇 0.22 由以上結果得知’式I之化合物會誘導HL-60細胞之辨別’因此使得這些腫瘤細胞停止生長。此外，式j之化合物可用於治療贅生性皮膚疾病，如白血病。式I之化合物做爲治療皮脂腺疾病，例如皮脂漏皮廣炎治劑之有效活性説明於以下的測試方法中。抑制皮脂細胞之增生經濟部中央橾準局員工消费合作社印«. 將衍生自臉部皮膚細胞之成人皮脂腺，於美容手街期間取出’並分離出皮脂細胞。此方法敘述於J lnvest Dermatol. 96:341-348 (1991)，Doran等人之文章中。於含有1 0 %胎牛血清和4 -毫克/毫升*** (dexamethasone)的Iscove’s培養基中，在一層生長被制動的3T3老鼠纖維母細胞上培養該細胞》 -17- 本紙張尺度逋用中酉國家橾準（CNS ) A4規格（210X297公嫠）

經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 ED 5。(微莫士） _0.05 0.01

五、發明説明（15 ) 將細胞置於不含測試化合物之培養基平盤中，然後在最 W種入後24-48小時，加入含有該化合物之新鮮培養基。每48小時將含有測試化合物之新鮮培養基加入培養物中。在收集曰時，以〇·〇3〇/0溶有乙二胺四乙酸（EDTA)之鱗酸緩衝鹽水（PBS)潤濕該培養物，僅去除3 τ 3纖維母細胞。剩餘的皮脂細胞菌株置於〇〇5%胰蛋白酶/〇〇3〇/。 EDTA中培養，以形成皮脂細胞之單一細胞懸浮液。該細胞經懸浮後，激烈混合以製備單一細胞懸浮液，並置於血球計數器上計數。所有的化合物皆由以下方法處理。在已脱氣的1〇〇%乙醇中製造102莫耳的儲備溶液’並儲存於_2〇。〇，置於黑暗下。勿使用儲存後超過1個月的溶液β實驗期間所用的溶液爲水狀的，經一次融解後，直接稀踔成-適當氣度的完成培養基於體外試驗以下濃度10-7和1〇·6莫耳化合物對皮脂細胞增生的抑制作用。其結果摘錄於下表111，以需要抑制5 〇 %毫莫耳皮脂細胞增生之化合物的量（Eh。）和只有以媒液培養之控制二= 比較。

___表 III __化合物_ 1,25-二羥-膽鈣化甾醇_ la，25-二禮-16,22S，23-三烯膽鈣化甾醇 la，25-二羥-16,22艮23-三嫌-膽鈣化甾醇 -18 - 本紙張尺度適用中®國家標準（CNS ) A4規格（2丨0><297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

經濟部中央橾準局負工消费合作社印裝五、發明説明（16 ) 由以上結果得知’式I之化合物會抑制皮脂細胞的增生作用》此外’式I之化合物可用於治療皮脂腺疾病，如粉刺和皮脂漏皮膚炎。式I之化合物做爲治療需要調節免疫系統疾病之治劑的有效活性説明於下。抑制人類T-細胞釋出r -干擾棄將取自健康供給者之靜脈血的單核細胞以離心方法於 Ficoll-Paque上端分離出血塊黃層中的白血球。該淋巴球 (70-80%T-細胞）於RPMI 1640培養基中懸浮，並添加1〇〇/〇 FCS’然後調整至每毫升1〇6個細胞β將1〇〇微升此細胞懸浮液種入平底微滴定盤内，並以i毫克/毫升τ-細胞有絲 ***具特異性之植物性血球凝集素（PHA)使其激活。種入後’馬上加入列於下表IV之測斌化合物以使真最後濃度介於1 X 10·11莫耳·1 X 莫耳間。全部的試驗皆重覆操作四次。在第3和第4天時，去除洞中的培養基’並以ELISA分析 IFN-g之含量。數値以控制组（不含測試化合物之檢體）的百分比表示》由圖找出會導致控制组濃度値呈5〇 %之數値’並於表IV中定爲IC50(抑制濃度）》

表IV 化合物 IC5〇(毫微莫耳 1,25-二獲-膽鈣化甾醇 0.8 1，25-二經-16,225,23-三烯-膽鈣化甾醇 3 1,25-二羥-16,22心23-三烯-檐鈣化甾醇 0.05 _ -___· 19 - 本紙張从適用中關家搞率（CNS > Μ胁（21())<297公着} (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

”44 0 m 5 -、發明説明（17 ) 抑制人類T -細胞之增生將取自健康供給者之靜脈血的單核細胞以離心方法於 Ficoll-Paque上端分離出血塊黃廣中的白血球。該淋巴球 (7〇·8〇%Τ細胞）於RPMI 164〇培養基中懸浮，並添加10% FCS，然後調整至1 〇6個細胞/毫升〇將1 〇〇毫升此細胞懸浮液種入平底俾滴定盤的洞内，並以1毫克/毫升之植物性血球凝集素（ΡΗΑ)使其激活。種入後，馬上加入列於下表 V之測試化合物，以生成最終濃度介於1 x 1(r"莫耳d x 106莫耳間。全部的試驗皆重覆操作四次a 在第3和第4天後，將3H-胸腺核苷（5居里/毫莫耳）以2 毫居里/洞的濃度加入洞内。在生長期間的最後6小時内，以脈沖標定細胞。然後使用細胞收集器將細胞收集至96 洞的濾器上《在4 (TC於眞空下乾燥2 〇 - _3 〇夯鐘彳^，加入 20微升閃爍劑，然後計算其與濾器結合之放射活性。數値以控制組（不含測試化合物之檢體）的百分比來表示。由圖定出會導致控制组數値呈50 %之濃度，並於表v中訂爲 IC5〇(抑制濃度）》經濟部中央標隼局負工消费合作社印裝表V 4匕合物 ---—- _ ic5〇(毫微莫耳、 10 〇 1,25-二羥-膽鈣化甾醇 1，25-二羥-16,22S,23-三烯-膽鈣化甾醇 ----- 6,0 1,25-二獲-16,22Κ23-三烯-膽鈣化甾醇 - P----- ' 一 .n 0.55 由以上結果得知，式I之化合物會抑制人類τ細胞釋出 r-干擾素和抑制人類Τ-細胞之增生。此外，式Γ之化人 -20-

444〇〇 A7 B7

五、發明説明（18 ) 物可用於治療需要調節疫系統之疾病，如移植排斥、移植物對宿主疾病和其類似者。考鼠對鈣的耐受性試驗顯著改變老鼠體内鈣之恆定情形會強烈地影響其體重發展。 ' 老鼠（禮重25-30克）連續4天每天接受皮下施予化合物。在5天治療期間之初和結束時皆記錄其體重。「最高时受劑量」（HTD)爲造成此治療期間體重增加之劑量。其結果説明於表VI。 — 表VI 化合物 1,25-二經-膽鈣化甾醇 L25-二羥-16,22S，23-三烯-膽鈣化甾醇 1，25-二羥-16,22良23-三烯·膽鈣化甾醇 HTD(微克/公斤、 0.5 50.0 2.5 經濟部中央標準局員工消費合作杜印製由以上結果得知，式I之化合物的耐受性較丨，2 5二羥膽鈣化络醇爲佳。含有本發明之式I之化合物的口服劑量型態可以與醫藥上可接受之載體物質混合成膠囊、藥片和其類似物。可以混合成膠囊和其類似物之醫藥上可接受的載體的例證如下：結合劑，如黃蓍樹膠、***樹膠、玉米粉或凝膠；賦形劑’如畴酸二鈣鹽；分解劑，如玉米粉、馬鈐菩粉、阿眞尼（algenic)酸及其類似-物；潤滑劑，如硬脂酸錢；增甜劑，如蔑糖、乳糖或糖精；香料，如薄荷、白株樹油或櫻桃。各式各樣其他的物質可以以塗被劑存在或另 -21 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

- ί- »- ϊ S T Ja 44400, A7 B7___ 五、發明説明（19 ) 外改良該劑量單位的物理型態。舉例來説，藥片可以以蟲漆、糖或兩者塗被。糖漿或酏劑可以含有蔗糖做爲增甜劑’羥苯甲酸甲酯和丙酯做爲防腐劑，染料，及香料，如櫻桃或柳燈味道等活性化合物。含有本發明之式I化合物的局部劑量型態包括：具備含有油腻、可吸收、水溶性和乳劑型態爲主，例如石油、羊毛脂、聚二乙醇和其類似物之配方的藥膏和乳霜β 乳液是液態製備物，而其變化可以由單一溶液至水狀或含有細微分離物質之氫醇製備物。乳液可含有懸浮或分散劑’例如，纖維素衍生物’如乙基纖維素、甲基纖維素和其類似物：凝或樹膠，與由水、酒精、甘油和其類似物組成之媒液中的活性成份混合〇凝膠係將載體媒液中的活性成份乏溶液或-懸浮焱勝化之半固體製備物。該媒液可以是含有水或無水的，使用膠化劑，如羧基聚亞甲晞使其膠化，並JL利用鹼，如氫氣化鈉和胺，如聚乙烯可可胺中和成適當的凝膠黏度。如本文使用之「局部」一詞指的是利用活性成份與適當的醫藥載體混合後，並應用於疾病的部位上使其產生局部作用。此外，包括該些醫藥上的型態的局部組合物，其中該化合物係藉與皮廣接觸而提供外用。局部劑量型態包括凝膠、乳霜、乳液、藥膏、粉末、喷霧和其它便利之型態，以利藉由混合式I之化合物與已知之醫藥上局部載體物質生成乏該藥其應用於皮膚上。以下實施例係進一步敘述本發明，但並不受任何方法侷 •22- ------.----^裝-- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂經濟部中央標準局貝工消费合作社印裝本紙張尺度適用中國國家搮隼（CNS ) Α4規格（210X297公嫠) — ν' 444001 A7 B7 經濟部中央榇準局貝工消费合作社印繁五、發明説明（2〇 ) 限於此β 實施例1 3 -甲基-3 -第三丁二甲基甲矽烷氧基-丁炔（式IX) 將44.5克（0.65莫耳）之咪唑加至50毫升溶有25克（0-29 莫耳）3 -甲基-3-羥基-丁炔之無水Ν，Ν -二曱基甲醯胺溶液中。反應後，於冰浴中冷卻該混合物，然後加入50克 (0.33莫耳）之第三丁二甲基甲矽烷氧氣。將冰浴中的混合物攪拌15分鐘並靜置於室溫下整夜。然後加入250毫克二甲基氨基吡啶，且在7 0 °C下加熱2小時《將1升冷水倒入該反應混合物内，並以5 X 150毫升醚萃取。以水和鹽水沖洗其醚萃取物，在硫酸鎂上乾燥，而且蒸發至乾，以 FLASH層析法在矽膠管柱上利用戊烷進行純化作用，且在室内眞空下（沸點120eC)蒸餾，生成31.8Ϊ克（54%)之標题化合物。1H-NMR (CDC13): 0_87 (s，9H)，1.47 (s，6H)， 2.39 (s, 1H) » 分析· Calcd CuH22OSi: C 66.60，Η 11.18 ;發現：C 66.13，Η 11.46。實施例2 4-甲基-4-第三丁二甲基甲矽烷氧基-戊烷（式χ) 將40毫升（63毫莫耳）溶有1.6Μ正-丁基鋰之己燒在4〇分鐘的期間内逐滴加至已冷卻至_78。{:的25毫升溶有10 克（50毫莫耳）3 -甲基-3 -第三丁基-二甲基-甲碎垸氧_丁炔之無水四氮呋喃溶液中。在·78〇C下攪拌、時後逐滴加入3 1毫升（4 00毫莫耳）的N，N-二甲基曱醢胺，且繼續攙拌1 /2小時。然後將3 〇〇毫升的水和鹽水倒入該反應 ------ -23- 本紙張;適用中ϋ®輪‘（CNS }嫩格（21()><297公着) ~ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

經濟部中失樣準局員工消资合作社印装 444ο 〇 7 a? ___ Β7 五、發明説明（21 ) 混合物内，並以4 X 75毫升戌烷萃取。以氣化銨溶液水和鹽水沖洗該萃取物，在硫酸鈉上乾燥，並蒸發至乾。利用蒸餾完成純化作用，生成888克（78%)之標題化合物’在8毫米水銀柱下其沸點爲92_94。〇 (CDC13): d 0.87 (s, 9H) > 1.54 (s, 6H) . 9.24 (s, 1H) 〇實施例3 異構混合物 3aR-[l(R*)，3aor，4/5 , 7α b]-3-3a, 5, 6, 7, 7a-六氫-7a -甲基-1[2(R，S)·羥基-5_(第三丁基_二甲基甲矽烷氧基）-1,5 -二甲基-3-己炔基]_4H -茚酚乙酸鹽（式vj) 將20毫升（20毫莫耳之二甲基氣化銨溶液於1〇分鐘期間内加至冷卻至- 70°C下5毫升溶有2克（9毫莫耳）[3811-Z, 3aa，4卢，亞乙基·八氫_7a-甲基_ih-4 -印紛乙酸鹽和2.25克（9毫莫耳）4 -甲基-4-第—兰亍基-三甲基甲矽燒氧基-戊規之無水二氣甲垸溶液。由於以TLC進行反應2小時後僅完成一半的反應，因此須額外加入225克乙趁和20毫升二甲基氯化鋁。再攪拌1小時後才完成反應。倒入600毫升2N碳酸氫钾後，以4x100毫升乙酸乙酯萃取；用水和II水沖洗萃取物，在硫酸鈉上乾燥，並蒸發至乾。首先以二氣甲烷，然後再用己烷-乙酸乙酯（3:1)在矽膠管柱上進行FLASH層析法，生成4.16克（100%)之標題異構混合物。利用己烷-乙酸乙酯10:1藉釭HPLC完成分離出異構物J生成3.25克（78%)之2R-異構物，熔點爲47-48°C ; + 7.20。（c 0.555 EtOH) ; h-NMR (CDC13):占 0.15 (s, 3H， -24 - 本紙張Λ度適用中國國家揉牵（CNS ) Α4规格（2丨ΟΧ297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

經濟部中央樣隼局貝工消费合作社印製 Α7 Β7 五、發明説明（22 )

SiCH3)，0.16 (s，3H, SiCH3)，0.86 (s, 9H, SitBu)，1，04 (S， 3H，CH3)，1.14(d，3H，J=6.9 Hz，CH3)，1.44 (s，6H，2CH3)， 2.05 (s，3H，CH3CO) ’ 2.40 (p，1H，J=6.4赫茲，CH)，4.43 (t. 1H，J=6.3赫茲，CH)，5.21 (brs，1H，CHOAc)，5.68 (brs，1H， =CH-);分析：Calcd C26H44〇4Si: C 69.59，H 9.88 ;發現· C 69.85，H 9.74)。和 0.754 克（1 8 %)之 2 S -異構物，溶點爲 77_79。〇 ; [α]^5 +

18_12。（c 0.524 EtOH) ; W-NMR (CDC13): 0.17 (2s 6H 2SiCH3)，0.87 (s，9Η，Sit.Bu) ’ ΐ·〇3 (s，3Η, CH3)，ι.14 (d 3H, J=6.9 赫茲，CH3)，1.47 (s，6H，2CH3)，2.05 (s 3H CH3CO)，2_37 (p，1H, CH)，4,40 (dd，1H，J=3.7和7‘8赫兹 CH) ’ 5.21 (brs，1H，CHOAc)，5.54 (brs，1H，· v 析：Calcd C26H44〇4Si: C 69.59，H 9.88 ;養或：c 42 , Ή 10.15)。實施例4 3aS-[3(lS*, 2S*)，3aa , 7or，7« 点]-3-[5-[[(1，1-二甲基乙基）二甲基-甲矽烷氧基-1，5-二甲基-4-(苯亞磺眭）-2,3_己_ 晞基]-3a, 4，5，6，7，7a-rt 氯- 3a·甲基-1Η -雖-7,齡·乙酸n (式 VII) 將0,5毫升（3.6毫莫耳）三乙胺加至20毫升溶有8〇2毫克（1 8 毫莫耳）[3aS-[3(lR*，2S*)，3a π，7 沈，7 ey? (乙醯氧基）-α-[3-[[(1，1-二甲基乙基）二曱基甲矽烷氧基]氧基 -3 -甲基-1-丁块]-3a，4, 5，6，7，7a-7Τ 氮-々，3 a-二甲基 1H -茚幷-3-乙醇之無水醚中。於乾冰浴中冷卻至_78β(： _-25- ___ 本紙張尺度遑ϋ國國家標率（CNS ) Α4規格（210X297公ϋ '~~~~~ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

A7 A7 ^ 444 0 Ο ί 經濟部中央樣準扃員工消費合作社印装 B7_ 五、發明説明（23 ) 後，在2小時的期間内加入8毫升（4毫莫耳）新鮮製備的苯亞績酿氣。然後以水稀釋該反應混合物，並用醚萃取。先以2 N碳酸氫鉀，接著以水使其中和後，再用鹽水沖洗該醚萃取物。在硫酸鈉上乾燥後，將醚溶液蒸發至乾。以己烷-乙酸乙酯4 : 1利用FLASH層析法純化粗製品，然後以己烷-乙酸乙酯3 : 1利用製備的HPLC，生成878毫克（882 %) 做爲二種異構亞風混合物之標題化合物。實施例5 [3aS-[3(lS*，2R*)，3aa，7α，7« 点]-3-[5-[[(1，1_二甲基乙基 -乙基）二甲基甲矽烷氧基]氧基]-1,5-二甲基-2,3 -己二婦基]_3a，4，5，6，7，氮- 3a -甲基- ΙΗ-έί^-7 -齡'(式 ϊ ί) 將0.432毫升（11.174毫莫耳）無水甲醇加至550毫升溶有1.68克（3.02毫莫耳）[388-[3(18*,28‘），^13£^，7(3(，7<? θ ]Η-[5-[[(1，1-二甲基乙基）二甲基甲矽烷氧基卜二甲基-4-苯亞磺基]-2,3 -己二烯基]-3a，4, 5, 6, 7, 7a-六氫_ 3a -甲基-1H -茚_7_齡·乙酸乙酯之無水链中。將因而獲得的混合物置於戊烷-液態氮浴内冷卻至dOOT，而且在1〇分鐘期間内逐滴加入10.6毫升（18.12毫莫耳）1.7M之第三丁基兹。由TLC顯示反應已完成。以8.〇毫升甲醇使該反應樣冷’先用水然後用鹽水沖洗其醚層，在硫酸鎂上乾燥並蒸發《將殘餘物溶解於12毫升乙醇中，在添加7毫升 2N氫氧化鈉後於70。(：下加熱3小時。以水鹽水1.1稀釋該反應混合物，而JL以乙酸乙酯萃取。用水和鹽水沖洗該萃取物，於硫酸鎂上乾燥並蒸發到乾。以己烷_乙酸乙酯 — ^ 26 本紙張尺度逋用中國國家樣準（CNS ) A4规格（2I0X297公;¢1 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

Α7 Β7 經濟部中央樣準扃員工消费合作社印繁 444001 五、發明説明（24 ) 7 : 1利用製備的HPL C純化該粗製品《生成5 9 3毫克 (5 0.% )於冷藏時會結晶，熔點爲6 4 - 6 5 °C之標題化合物：[α]ζ> + 99.62°C (c 0.5 EtOH) ; i-NMR (CDC13): d 0.07 (s， 6H, SiMe2)，0,85 (s，9H，Si-第三丁基），1.09 (s，3H，CH3)， 1.11 (d，3H，J=7赫茲，CH3)，1.29 (s，3H，CH3)，1.30 (s，3H.， CH3)，1.98 ’ 2.27 (m, 2H, CH2)，2.83 (brm, 1H，CH)，4.18 (brs，1H，CH)，5.28 (t. 1H. J=6.3赫茲，=CH-)，5‘32 (dd，1H， J=2.8和 6.3赫茲，=CH-)，5.43 (brs，1H，=CH-);分析：Calcd C24H4202Si2: C 73.78，H 10.84 :發現：C 73.89 ’ H 11.08)。實施例6 [3aS-[3(lS*，2R*)，3aa，7從 A]-3-[5-[[(l，l-二甲基-乙基）二甲基甲矽烷氧基]氧基]-1,5-二甲基-2,3 -己二烯基]-3a，4, 5，6，7，7a-六氫-3 α-甲基-1H -辟-7-網（^ΙΪΙ) 將1.694克（4.5毫莫耳）吡啶鑌重咯酸鹽和85毫克之吡啶鑕對-甲苯磺酸鹽分批添加至8毫升溶有390毫克（1毫莫耳）[3aS-[3(lS*，2R*)，3aa，7α /3 ]]-3-[5-[[(1，1-二甲基乙基）二甲基甲矽烷氧基]氧基]-1,5-二甲基-2,3 -己二烯基]-3a, 4, 5, 6, 7, 7a-六氫-3 a -甲基-1 Η -茚-7-酚之無水二氣甲烷溶液中。在室溫下攪拌反應混合物4.5小時。添加20毫升醚後，攪拌該混合物20分鐘，然後在矽藻土上過濾，以3 χ50毫升醚沖洗其殘餘物。用20毫升冰冷的1NHC1、水、4 0毫升2 Ν碳酸氫鉀及水--鹽水混合物沖洗該過濾物。用2 X 100毫升乙酸乙酯萃取水狀層α在硫酸鎂上乾燥結合的有機層並蒸發到乾。以己烷-乙酸乙酯1 5 : 1利用 __-27-___ — 本紙張尺度通用中國國家標準（CNS ) Α4規格（2丨们公釐> (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

10 01 A7 B7 經濟部中央標準局負工消费合作社印褽五、發明説明（25 ) FLASH層析法純化該粗製品，生成350毫克（90%)之標題化合物。實施例7 I，25 -二羥-16,22S，23 -三烯-膽鈣化甾醇將0.856毫升（1.37毫莫耳）溶有1.6M正-丁基鋰之己烷逐滴加至-78 °C下之8毫升溶有820毫克（0,141毫莫耳）[3S-(1Z，3a，5b)]-2p，5-雙二甲基）二甲基甲矽烷氧基]氧基]-2 -亞甲基-環-亞己基]-乙基-二-苯膦氧化物之無水四氫呋喃内。經攪拌5分鐘後，在1 〇分鐘期間内，將5毫升溶有350毫克（0.9毫莫耳）[3aS-[3(lS*，2R*)，3aa， 7 a b]-3-[5-[[(l，l-二甲基乙基）二甲基甲矽烷氧基]氧基卜 - — 甲基-2,3 -己一烯基]-3 a，4·，5，6，7，7a-六氫- 3a -甲基-1 Η -茚-7 -酮之無水四氫呋喃溶液逐滴加-至因而形成的紅色溶液中〇在_78*C下於氬氣環境中攪拌該反應9〇分鐘，然後藉由添加10毫升1:1之2N酒石酸鈉鉀水溶液和 2N KHCCh水溶液混合物使其驟冷，並且以3 χ ι25毫升乙酸乙醋萃取。用鹽水沖洗該有機層，在硫酸鎂上乾燥並蒸發到乾。以己烷.乙酸乙酯40:1藉由FLASH層析法純化其殘餘物，生成475毫克三甲基矽烷氧化的標題化合物，該化合物係溶解於6毫升無水四氫it夫喃中，並在氬氣下以 6.4毫升溶有1M四丁基氟化銨之四氫呋喃處理。在室溫下攪拌該反應混合物45.5小時。以5毫升水使反應驟冷，而在眞空下移除四氫呋喃後，以3 X 120毫升乙酸乙酷萃取。利用水和鹽水之混合物沖洗有機層，在硫酸鎂上乾燥 -28 本紙張尺度適用中_家轉（CNS )从胁（2ωχ297公瘦 . -----^------II------ (請先55讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印策 444〇〇；五 '發明説明（26) 並蒸發到乾。以己燒-乙酸乙醋1:3藉由FLASH層析法純|匕該粗製品，以生成172毫克（46.5%)之標題化合物。[a]D + 67.5°C (c 0.2 EtOH)。最大紫外線（EtOH):258-259微米（e 11520) » 'H-NMR (20:1, CDCl3DMSO-d6); ό 0.73 (s, 3H, CH3)，1.16 (d, 3H，J=6.7赫茲，CH3)，1.34 (s, 6H, 2CH3), 4.22 (bnn，1H, CH)，4.43 (brm，1H，CH)，4.98 (s，1H·，CH 〇f=CH2)，5.34-5.42 (m，4H，CH of=CH2，allene，=CH-)，6,14 (d 1H，J=ll赫茲，=CH-)，6.35 (d, 1H，J=ll赫茲，=CH-)。實施例8 [3aS-[3(lS*，2R*)，3aa, 7π，7e/?]]-3-[5-[[(l，l-二甲基乙基）二甲基甲矽烷氧基]氧基]-1，5-二甲基-4-(苯亞續醯卜 2,3 -己二烯基]-3 a, 4，5，6，7，7a-六氫- 3a -甲基，1H -莽. 7 -酚乙酸鹽（式XIV) ' · 將0.42 3毫升（3.04毫莫耳）三乙胺加至40毫升溶有681 毫克（1 . 52 毫莫耳）[3aS-[3(lR*，2R*)，3aa a 7 a，7a万]]-7- (乙醯氧基）-α [3-[[(l，l-二甲基乙基）二甲基-曱矽烷氧基] 氧基]-3-甲基-1-丁炔]-3a, 4，5，6，7, 7 a-六氫-冷- 3a -二曱基-1H -茚-3-乙醇之無水鍵中〇在-78 Ό下將新鮮製備之苯亞確酸氣逐滴加入此授拌混合物内，直到黃色不變爲止。額外攪拌1小時後，將該反應混合物回溫至室溫，以水稀釋並用醚萃取。以2Ν碳酸氫鉀、水和鹽水沖洗該醚萃取物，在硫酸鎂上乾燥，奠且蒸發到乾《首先利用 FLASH層析法以乙酸乙酯，然後用HPLC以己烷-乙酸乙醋 3 : 1純化該粗製品，生成655毫克（5 1 %)之標題異構亞 __ - 29 - 本紙張尺度巾家料（CN〗）( 210X297公釐) ' — . 衣------訂------^ {請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) "444001 A7 __ B7 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製五、發明説明（27 ) 楓。實施例9 [3aS-[3(lS*，2S*)，3aa，7«，7a〜]-3-[5-[[(l，l-二甲基乙基）二甲基甲矽烷氧基]氧基]d，％二甲基·23_己二烯基]-3a，4, 5, 6, 7, 7a-六氫-3 a -甲基-1 Η-茚-7-酚（式 XI 將〇. 176毫升（4.35毫莫耳）無水曱醇加至2〇〇毫升溶有 6 5 5 毫克（1.18 毫莫耳）[3aS_[3(1S*, 2R*)，3a“，？£V，7a卢]]_ 3-[5-[[(l，l-二甲基乙基）二甲基曱矽烷氧基]氧基]_15_二甲基-4-(苯亞磺醯）_2,3_己二烯基卜3a，4, 5, 6, 7, 7a•六氫 -3a -甲基-1H -茚-7-紛乙酸鹽之無水链中。將因此獲得的混合物置於戊烷-液態氮浴内冷卻至·1〇crc，而且在當顏色轉變爲棕黃色時，逐滴加入8毫升（14.1毫莫耳）1.7M 之第三丁基鋰。TLC顯示反應已完成。以4_毫升争醇使該反應驟冷，並先用水沖洗使反應中和，然後用鹽水沖洗，在硫酸鈉上乾燥並蒸發β將殘餘物（730毫克）溶解於8毫升乙醇中，在添加4毫升2Ν氫氧化鈉後，於70 °C下加熱 1 - 1 / 2小時。以鹽水-水稀釋後，以乙酸乙酯萃取。用水沖洗該萃取物直到中和爲止，然後再用鹽水沖洗，接著置於硫酸鈉上乾燥並蒸發到乾。以己烷-乙酸乙酯7 : 1利用 1^1^純化該粗製品^610毫克），生成208毫克（45,2%) 之標題化合物；[e】z> + 10.82°C (c 0.5% EtOH) ; W-NMR(CDC13): β 0.08 (s，CH，SiMe2)，0,S6 (s，9H，Si-第三丁基）， 1.09 (s，3H; CH3)，1·33 (d，3H，J=6.9赫茲，CH3)，1.99，2.27 (m，2H，CH2)，2.83 (m, 1H.，CH)，4.18 (brs，1H, CH) ’ 5.21 — _____-30-_______ 本紙張尺度遑用中®國家標隼（CNS ) A4说格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

經濟部中央標準局員工消費合作社印製 444001 A7 __ B7 五 '發明説明（28 ) (t，1H，J=6.4 赫兹，=CH-)，5.34 (dd，1H，J=2.7和 6.4 赫兹， =CH-)，5.44 (brs，1H, =C-) 0 實施例1 0 [3aS-[3(lS*，2S*)，3aa，7ab]]-3-[5-[[(l，l-二甲基乙基）二曱基甲矽烷氧基]氧基]-1，5-二甲基-2,3-己二烯基]-3a，4, 5， 6, 7, 7a-六氫-3这-甲基-1 Η-茚-7-酚（式XII) 將1.2克（3.19毫莫耳）吡啶鏘重咯酸鹽和60毫克之吡啶鑌對-甲苯磺酸鹽加至9毫升溶有415毫克（1,06毫莫耳）[3aS-[3(lS*，2S*)，3aa，7a，7ab]]-3-[5-[[(l，l-二甲基乙基）二甲基甲矽烷氧基]氧基]-1,5-二甲基-2,3 -己二烯基]-3a， 4，5，6，7，7a-六氫- 3a -甲基-1H -茚-7-紛之無水二氦甲燒溶液中。在室溫下攪拌2小時後，添加564毫克（1.5毫莫耳）吡啶鑕重咯酸鹽和2 8毫克之吡啶錯封-申苯績酸鹽，在室溫下攪拌該混合物2.5小時之久，然後加入25毫升醚，經攪拌2 0分鐘後，在矽藻土上過濾該混合物，並以醚（3x50毫升）沖洗。用20毫升冰冷的IN HC1、水、2N KHC03 (40毫升）及水和鹽水之混合物沖洗該過濾物。用乙酸乙酯萃取水狀層在硫酸鈉上乾燥其結合的有機層並蒸發到乾〇以己烷-乙酸乙酯1 5 : 1利用FLASH層析法純化該粗製品，生成310毫克（75%)之標題化合物。實施例1 1 1,2 5-二羥-16,22尺，23-三烯-膽-鈣化甾醇將0,79毫升（1.26毫莫耳）溶有1.6M正-丁基鋰之己烷在氬氣下逐滴加至_781之8毫升溶有755毫克（1.3毫莫-. ___-31 ·___ ^纽逋财(⑽）A4胁（210X297公釐）： {請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

444001 A7 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 B7 五、發明説明（29 ) 耳）[3S-(1Z，3α，5/?)]-2[3,5·雙[[(1，卜二甲基）二甲基甲矽氧基]氧基]-2 -亞甲基-環-亞己基]-乙基-二苯膦氧化物之無水四氫呋喃内。經攪拌5分鐘後，在10分鐘内，將 4 毫升溶有310毫克（0.8 毫莫耳）[3aS-[3(lS*，2S*), 3aa，7a 点]]-3-[5-[[(l,l-二甲基乙基）二甲基甲矽烷氧基]氧基]·1，5-二甲基- 2,3 -己二締基]-3a, 4, 5, 6, 7, 7a-六氫-3 a -甲基-1 Η ·茚-7 -酮之無水四氫呋喃溶液逐滴加至因而形成的紅色溶液中。在-78 eC下於氬氣環境中再攪拌該反應90分鐘，然後藉由添加10毫升1:1之2N酒石酸鈉鉀水溶液和 2N KHC03水溶液混合物使其驟冷，並且以3x 120毫升乙酸乙酯萃取。用鹽水沖洗其有機相，在硫酸鈉上乾燥並蒸發到乾。以己烷-乙酸乙酯4 0 : 1藉由FLASH層析法純化其粗製之三甲矽氧化最終產物。將因此被鉍也的434毫克中間產物溶解於5·5毫升無水四氫嗅喃中，並在氬氣下以 9.96毫升溶有1Μ四丁基氟化銨之四氫呋喃處理，在室溫下攪拌71小時。以5毫升水使反應驟冷，並在眞空下去除四氫呋喃後，用水稀釋該殘餘物，而且以3x120毫升乙酸乙酯萃取。利用水和鹽水之混合物沖洗有機層，在破酸鈉上乾燥並蒸發到乾β以己烷-乙酸乙酯1:3藉由FLASH層析法純化該粗製品，以生成215毫克（6父5°/。）由四氫呋喃和甲酸曱酯（1 _ 7) $混合物中結晶而成的標題化合物；这點：174-176 Ό。[a]D + οχ; (c 0._2 EtOH)。最大紫外線 (£1〇扣：2 64 微米（6 17080)。111以^111(〇〇3〇〇):(?0.74(8, 3H，CH3) ’ 1.18 (d，3H，J=6.9赫茲，CH3)，1.30 (s，3H， ------ —_-32-____ 本紙張尺度適用中國困家搞準（CNS } A4規格（210X297公釐） -----------衣-- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 A7 444001

7 B 據本質上已知之方法製備以下之醫藥型態：實施例1 2 五、發明説明（30 ) CH3)，1.31 (s，3H，CH3)，1‘52 (m，1H, CH或CH2)，1.89 (t， 2H，J=5.6赫茲，CH2)，4.13 (q，1，J=5.3赫茲，CH)，4.36 (t， 1H，J=5.8赫茲，CH)，5.21 (t，1H, J=6.7赫茲，=CH-)，5.30 (s， 1H，CH of =CH2)，5.33 (dd，1H，J=2,3和 6.2 赫茲，=CH-)， 5.45 (s，1H，=CH-)，6‘17 (d，1H，J= 1 1 . 2 赫茲，=CH-)， 6.3fd，1H，J=ll々赫茲，=CH-)。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 實施例1 3 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製口服劑量型態之軟明膠膠囊毫克/膝囊化合物A 0.005-0.050 α -托可芬若(Tocopherol) 0.016 適量米格里若(Myglycolf _ 812 160 -33- 口服劑量型態之軟明膠膠囊毫克/勝囊 1,25-二經-16,22艮23-三烯-膽鈣化甾醇 (化合物A) 0.005-0.050 丁基化羥基苯甲苯(BHT) -α.οΐ6 - 丁基化羥基苯甲醚(BHT) 0.016 適量米格里若(Myglycol)®-812 160 本紙張尺度適用中國囷家標準（CNS ) A4規格（210X297公蝥） 444001 Α7 Β7 五、發明説明h ) 實施例1 4 局部劑量型態之乳液重量百分比％化合物A 0.00001-0.10 一六烷醇 1.50 十八烷醇 2.50 脱水山梨醇單硬脂酸g&(Span 60) 2.00 礦油 2.00 單硬脂酸甘油酯 4.00 聚氧乙二醇硬脂酸酯布藍德(Blend) (Arlacel 165) 多乙氧基链60 (Tween 60) 1.00 辛基/癸基三酸甘油@旨 5.00 山梨醇溶液 4.00 乙二胺四乙酸二鈉 0.10 丁基化羥基苯甲醚(BHA) 0.02 山梨酸 0.20 山梨酸奸鹽 0.1-0.2 適量水至 100.00 (請先聞讀背面之注意事項再本頁)

--° 經濟部中央標準局員工消費合作社印製實施例1 5 局部劑量型態之凝膠重量百分比％化合物A 0.00001-0.10 丁基化羥基苯甲靆(BHA) 0.02 經丙基纖維素， 3.00 乙醇，USP 45.00 適量水至 100.00 -34- ........ 本紙張尺度適用中菌國家棋準（CNS ) Α4规格（210Χ297公釐） A7 經濟部中央樣準局員工消費合作社印製

^ 444 0 0 I B7 五、發明説明（32 ) 實施例1 6 局部劑量型態之凝膠重量百分比％化合物A 0.00001-0.10 丙二醇 10.00 辛基/癸基三酸甘油酯 30.00 丁基化羥基苯曱醇(BHA) 0.02 適量絕對乙醇至 100.00 -35- 本紙張尺度適用中國國家橾準（CNS > A4规格（2丨0><297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

Claims

444 0 #ι86103109號專利申請案 u %文中請專利範团條正灿 A8 B8 請專利範圍修正本(88年11月）結 Mil 2 WM 六、申請專利範圍 1. 一種下式化合物，

其中R是羥基且兩個R1均是Η或合為CH2，或R是氫或氟基且兩個R1合為CH2。 2. 根據申請專利範圍第j項之化合物，其中兩個Ri合為 CH24R是羥基且其中兩個RI結合為ch2。 3. 根據申請專利範圍第2項之化合物，其係為 1，25-二羥-16,22S，23-三婦·膽鈣化甾醇或 1，25-二羥-16,22R，23-三婦-膽鈣化甾鞟β 4. —種下式化合物， (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂經濟部中央橾準局負工消费合作社印製

• # —^1 444001 as C8 D8 六、申請專利範圍

其中R4和R6是低碳烷基，且R5是低碳烷基、苯基或苯基-低碳烷基。 5. —種下式化合物， R* R5-Si-〇->^CH DC R* (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 1 經中夬橾準局 Ά 工消费合作社印 X ο Η c/fl // ο R4IsIRe I 其中R4和R6是低碳烷基，且R5是低碳烷基、苯基或苯基-低碳烷基》6. —種下式化合物，

Η Χί_ 訂. rr. 本紙ft尺度逍用中國«家橾丰（CNS ) Μ洗格（210X297公釐）

XIK

HO H R4 1 ..0 - Si- Rs Π (請先Μ讀背面之注項再填寫本頁)

ΠΙ 訂_ 經濟部中央樣率局負工消费合作社印«. 其中R4和R6係獨立為低碳烷基，且R5係獨立為是低碳烷基、笨基或苯基-低碳烷基。 7. —種用以抑制腫瘤細胞，及用於治療過度增生性皮膚疾病’贅生性疾病及皮脂腺疾病之醫藥组合物，其含有效量根據申請專利範圍第I，2或3項之化合物及惰性載劑。 8. 根據申請專利範圍第7項之醫藥组合物，其中過度增生性皮廣疾病係牛皮癖。 9. 根據申請專利範圍第7項之發藥组合物，其中赞生性疾 -3- 本紙張尺度遴用中痛困家樣率< CNS ) A4规格（210X297公釐） 444〇〇i A8 -------- -Df__ 六、申請專利^^— "~' - 病係白血病a 10-根據申請專利範圍第7項之醫藥組合物，其中皮脂腺疾病係粉刺和皮脂漏皮膚炎。 11_ 一種製備根據申請專利範圍第1項之化合物之方法其包括自相對應之該化合物矽烷基化二醇或三醇中的移除硬燒基保護基，該矽烷基保護基是Si(R4，R5,R6), 其中R4和R6是低碳烷基，且R5是低碳烷基、苯基或苯基-低碳烷基，而矽烷基保護基之移除，可合宜地藉由於極性有機溶劑中與氟鹽反應而達成。 (請先《讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂. 镍經濟部中央揉準局男工消费合作社印製本紙張尺度遢用中«Β家#率（CNS ) A4«格（210X297公釐）

<7^109號專利申請案 iL 444 气明書修正頁(87年12月) Λ' ίΓ 五、發明説明（1 ) 本發明係關於下式之化合物

a

經濟部中央標準局負工消费合作社印製其中R是經基’丑Ri是HACH2’或良是氩或氟，且 CH2。如本文使用之「低級烷基」一詞指的是含有丨至4個碳原子之直鏈或枝鏈烷基，例如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、第三丁基及其類似物。「芳基_低級烷基」指的是對位-甲苯基、苯甲基、苯乙基、苯丙基及其類似物。「芳基」—詞指的是衍生自可以不被或可被一或多個低碳烷基取代之芳烴基。Γ芳基」的實施例為苯基和對位 -甲基笨基。上述的式I之化合物可用來做為治療過度増生性皮虜疾病，如牛皮廯的治劑。式丨之化合物也可用來做為治療贅生性疾病，如白血病的治劑□式丨之化合物亦可用來做為治療皮脂腺疾病，如粉刺和皮脂漏皮膚炎的治劑。式！之化合物也可用來做為治療需要調節免疫系統之疾病如移植排斥作用、移植物對宿主疾病及其類似者之治劑。本發明係關於一種特別是做為抑制皮膚過度增生和腫瘤 -4 本紐尺舰财關家鮮（ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁}

丨第86103109號專利申請案 444 0 f說明—畫修正頁⑹年iUQ A 7 ΒΊ 五、發明説明（2 修a 經濟部 k 標嗥局員工消合作社印 % 細胞尤其是治療過度増生性皮膚疾病，如牛皮癬，贊生性疾病，纟白血病，和皮脂腺疾病，如粉刺和皮脂漏皮膚炎之醫樂组合物’冑醫藥組合物含有幻之化合物或是二或多個式I之化合物的混合物。本發明也係關於使用式!之化合物來製備具有抗過度增生活性和腫瘤細胞抑制活性，特別是用來治療上述疾病狀態之醫藥組合物。本發明也係關於製備式〗之化合物和敘述於下之式ιχ ’ X ’ Via ’ VIb ’ π ’ ΙΠ ’ Χ%ΧΙΙ之中間產物的方法D 在式1之化合物的較佳具體實施例中，R是羥基和/或Ri 是CH2。於另一個具體實施例中，Ri是H2。最好是l525-二輕-I6,22S，23 -三烯-膽鈣化错醇和ι，25_二羥_ 16，22R，23 -三稀-膽鈣化留醇。在製備式I之化合物的方法之最後步騾中，包含去除式j 相對應的甲矽烷基化二蒔或三醇中的甲矽烷基保護基’該甲矽烷基保護基最好是Si (R4，R5，R6) ’其中…和民6是低級烷基，而R5是低級烷基、芳基或芳基_低級烷基，而藉由於極性有機溶液中與氟鹽反應可以方便地完成去除該甲矽烷基保護基。如下文所述’特別參考配製流程圖I _ I〗丨和以下的實施例製備式I之化合物的22S異構物。 -5- 本紙裱尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（2丨0Χ297公艰） (請先Μ讀背面之注意事項再填K本頁) 丁 ·-0 444 0 #ι86103109號專利申請案 u %文中請專利範团條正灿 A8 B8 請專利範圍修正本(88年11月）結 Mil 2 WM 六、申請專利範圍 1. 一種下式化合物，

其中R是羥基且兩個R1均是Η或合為CH2，或R是氫或氟基且兩個R1合為CH2。 2. 根據申請專利範圍第j項之化合物，其中兩個Ri合為 CH24R是羥基且其中兩個RI結合為ch2。 3. 根據申請專利範圍第2項之化合物，其係為 1，25-二羥-16,22S，23-三婦·膽鈣化甾醇或 1，25-二羥-16,22R，23-三婦-膽鈣化甾鞟β 4. —種下式化合物， (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂經濟部中央橾準局負工消费合作社印製

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