TW202227452A - 氮雜並環化合物、其製備方法、抑制酪氨酸激酶的方法、藥物組成物及其用途 - Google Patents

氮雜並環化合物、其製備方法、抑制酪氨酸激酶的方法、藥物組成物及其用途 Download PDF

Info

Publication number
TW202227452A
TW202227452A TW110145234A TW110145234A TW202227452A TW 202227452 A TW202227452 A TW 202227452A TW 110145234 A TW110145234 A TW 110145234A TW 110145234 A TW110145234 A TW 110145234A TW 202227452 A TW202227452 A TW 202227452A
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
alkyl
compound
membered
halogenated
independently selected
Prior art date
Application number
TW110145234A
Other languages
English (en)
Inventor
邱關鵬
鄧代國
雷曾榮
Original Assignee
大陸商廣州費米子科技有限責任公司
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 大陸商廣州費米子科技有限責任公司 filed Critical 大陸商廣州費米子科技有限責任公司
Publication of TW202227452A publication Critical patent/TW202227452A/zh

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/438—The ring being spiro-condensed with carbocyclic or heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/02—Nasal agents, e.g. decongestants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/04—Artificial tears; Irrigation solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A61P31/22—Antivirals for DNA viruses for herpes viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/14—Drugs for disorders of the endocrine system of the thyroid hormones, e.g. T3, T4
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/44—Iso-indoles; Hydrogenated iso-indoles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/52—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring condensed with a ring other than six-membered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D217/00—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems
    • C07D217/02—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems with only hydrogen atoms or radicals containing only carbon and hydrogen atoms, directly attached to carbon atoms of the nitrogen-containing ring; Alkylene-bis-isoquinolines
    • C07D217/06—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems with only hydrogen atoms or radicals containing only carbon and hydrogen atoms, directly attached to carbon atoms of the nitrogen-containing ring; Alkylene-bis-isoquinolines with the ring nitrogen atom acylated by carboxylic or carbonic acids, or with sulfur or nitrogen analogues thereof, e.g. carbamates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D471/14—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Otolaryngology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本發明涉及一種氮雜並環化合物、其製備方法、抑制酪 氨酸激酶的方法、藥物組成物及其用途。所述氮雜並環化合物具有通式(I)所示結構。該氮雜並環化合物具有優異的酪氨酸激酶JAK抑制活性，可以作為酪氨酸激酶JAK抑制劑，解決多種JAK-STAT信號通路相關的炎症性疾病或腫瘤性疾病。通式(I)的具體細節如說明書中所定義。

Description

氮雜並環化合物、其製備方法、抑制酪氨酸激 酶的方法、藥物組成物及其用途
本發明涉及醫藥技術領域，特別是一種氮雜並環化合物、其製備方法、抑制酪氨酸激酶的方法、藥物組成物及其用途。
酪氨酸激酶JAK(Janus kinase)為細胞內非受體酪氨酸激酶家族，介導細胞因數產生的信號，並通過JAK-STAT信號通路傳遞下去。酪氨酸激酶JAK既能磷酸化與其相結合的細胞因數受體，又能磷酸化多個含特定SH2結構域的信號分子。JAK蛋白家族共包括4個成員：JAK1、JAK2、JAK3以及Tyk2，它們在結構上有7個JAK同源結構域(JAK homology domain，JH)，其中JH1結構域為激酶區、JH2結構域是“假”激酶區、JH6和JH7是受體結合區域。已知JAK3和γc亞單位與連鎖嚴重聯合免疫(SCID)有關。JAK2對紅細胞和血小板的生成至關重要，JAK2突變還可導致骨 髓增生性疾病。而JAK1與真性紅細胞增多症有關。
JAK-STAT信號通路是一條由細胞因數刺激的信號轉導通路，參與細胞的增殖、分化、凋亡以及免疫調節等許多重要的生物學過程。JAK-STAT信號通路是細胞外信號(細胞因數)膜受體和細胞核之間的快速細胞內通訊途徑。與其它信號通路相比，JAK-STAT信號通路的傳遞過程相對簡單，它主要由三個成分組成，即酪氨酸激酶相關受體、酪氨酸激酶JAK和轉錄因數STAT。JAK-STAT信號通路被已知的50多種不同的細胞因數受體啟動，這些信號來自於促炎細胞因數，抗炎細胞因數，造血細胞生長因數和代謝因數。目前與疾病及藥物創新相關的研究都集中於炎症性疾病及腫瘤性疾病。其中，炎症性疾病主要包括類風濕性關節炎、犬皮炎、銀屑病、潰瘍性結腸炎及克羅恩病；而腫瘤性疾病則主要涉及骨髓纖維化、真性紅細胞增多症及原發性血小板增多症。
因此，新型酪氨酸激酶JAK抑制劑的研發具有廣闊應用前景並且也是迫切需要的。現有技術披露了一些JAK抑制劑，然而，本領域對於具有高選擇性的JAK抑制劑仍存在需求。
基於此，本發明提供了一種氮雜並環化合物，該氮雜並環化合物具有優異的酪氨酸激酶JAK抑制活性，可以作為酪氨酸激酶JAK抑制劑，解決多種JAK-STAT信號通路相關的炎症性疾 病或腫瘤性疾病。
具體技術方案如下：
具有通式(I)所示結構的氮雜並環化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥：
Figure 110145234-A0101-12-0003-344
其中，L0選自單鍵和NR1；
X1選自CH和N；
X2選自CR4和N；
R4為氰基，
R1選自-H和C1-C3烷基，或R1可以與R4一起形成5~6元飽和或不飽和環；所述5~6元飽和或不飽和環任選被R6取代；
R6選自-H、=O、-OH、C1-C4烷基和C1-C4烷基羥基；
X3選自CH和N；
n選自1和2；
m=2；兩個R0取代於同一碳原子之上或取代於相鄰碳原子之上，且兩個R0互相連接形成4~6元飽和氮雜環或4~6元飽和碳環；所述4~6元飽和氮雜環和4~6元飽和碳環分別獨立地任選被R2取代；
R2選自-S(O)2(C1-C6烷基)、-S(O)2(CH2)q-(3-6元環烷基)、 -C(O)CH2CN、-NH-S(O)2(C1-C6烷基)、-NH-S(O)2(CH2)q-(3-6元環 烷基)、-NH-C(O)CH2CN、
Figure 110145234-A0101-12-0004-345
和
Figure 110145234-A0101-12-0004-346
；
R5選自C1-C5烷基、氰基、3-5元的飽和環烷基、C1-C5烷氧基、-S-C1-C5烷基、-O-(CH2)p-(3-6元環烷基)和-S-(CH2)p-(3-6元環烷基)；
q、p分別獨立選自0、1、2和3；
條件是，當X2為N時，R2不為-C(O)CH2CN；當X2為N，且兩個R0取代於相鄰碳原子之上時，兩個R0互相連接形成4~6元飽和碳環。
在其中一個示例中，式(I)中，L0選自單鍵和NR1；R1選自-H和C1-C3烷基。在另外一個示例中，L0還可以選自烷基、環烷基和雜環基。在另外一個示例中，R1還可以選自其它烷基、環烷基和雜環基。
在其中一個示例中，式(I)中，X1選自CH和N。
在其中一個示例中，式(I)中，X2選自CR4和N。其中，R4選自氰基。在另外一個示例中，R4還可以選自烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基。
在其中一個示例中，R1與R4一起形成5~6元不飽和環；所述5~6元不飽和環被R6取代；R6選自-H、=O、-OH、C1-C4烷基和C1-C4烷基羥基。更進一步地，R1與R4一起形成的5~6元不飽和環包括但不限於如下基團之一：
Figure 110145234-A0101-12-0005-347
其中，X5、X7、X9、X10分別獨立地選自NR6、CHR6和C(R6)2；
X6、X8、X11分別獨立地選自N和CR6。
在其中一個示例中，式(I)中，X3選自CH和N。
在其中一個示例中，式(I)中，m=2；兩個R0取代於同一碳原子之上或取代於相鄰碳原子之上，且兩個R0互相連接形成4~6元飽和氮雜環或4~6元飽和碳環。
在其中一個實施方案中，所述4~6元飽和氮雜環和4~6元飽和碳環選自如下基團中的一種，環原子中有1或2個碳原子 為與基團
Figure 110145234-A0101-12-0005-348
n所共有的碳原子：
Figure 110145234-A0101-12-0005-349
、
Figure 110145234-A0101-12-0005-350
、
Figure 110145234-A0101-12-0005-351
。
在另外一個示例中，兩個R0還可以互相連接形成雜環基或環烷基。
進一步地，4~6元飽和氮雜環和4~6元飽和碳環分別獨立地被R2取代；
R2選自-S(O)2(C1-C6烷基)、-S(O)2(CH2)q-(3-6元環烷基)、-C(O)CH2CN、-NH-S(O)2(C1-C6烷基)、-NH-S(O)2(CH2)q-(3-6元環烷基)、-NH-C(O)CH2CN和如下基團：
Figure 110145234-A0101-12-0006-352
R5選自C1-C5烷基、氰基、3-5元的飽和環烷基、C1-C5烷氧基、-S-C1-C5烷基、-O-(CH2)p-(3-6元環烷基)和-S-(CH2)p-(3-6元環烷基)；q、p分別獨立選自0、1、2和3。
在另外一個示例中，R2還可以選自烷基、環烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基。作為優選地，前述R2中包含-S-或-S(O)2-，或者被至少一個氰基或巰基取代。
在其中一個實施方案中，所述的化合物具有如下式(I-1)所示的結構特徵：
Figure 110145234-A0101-12-0006-354
在其中一個實施方案中，R2選自
Figure 110145234-A0101-12-0006-353
；
其中，R5選自-S-(3-5元環烷基)、C1-C3烷氧基或-S-C1-C3烷基。
在其中一個示例中，式(I-1)中，X1選自CH和N。進一步地，X1選自CH。
在其中一個示例中，式(I-1)中，R4選自氰基。
在其中一個示例中，式(I-1)中，R1選自-H和C1-C3烷基。進一步地R1選自C1-C2烷基。更進一步地，R1選自甲基。在另外一個示例中，R1還可以選自其它烷基、環烷基和雜環基。
在其中一個示例中，式(I-1)中，R2選自-S(O)2(C1-C6烷基)、-S(O)2(CH2)q-(3-6元環烷基)、-C(O)CH2CN和如下基團：
Figure 110145234-A0101-12-0007-355
R5選自C1-C5烷基、氰基、3-5元的飽和環烷基、C1-C5烷氧基、C1-C5烷基巰基、-O-(CH2)p-(3-6元環烷基)和-S-(CH2)p-(3-6元環烷基)；q、p分別獨立選自0、1、2和3。
在其中一個實施方案中，R1選自C1-C2烷基。
在其中一個實施方案中，X1選自CH。
更進一步地，R2選自如下基團：
Figure 110145234-A0101-12-0007-356
在另外一個示例中，R2還可以選自烷基、環烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基。作為優選地，前述R2中包含-S-或-S(O)2-，或者被至少一個氰基或巰基取代。
在其中一個實施方案中，所述的化合物具有如下式(I-2)或所述結構特徵：
Figure 110145234-A0101-12-0007-357
在其中一個示例中，式(I-2)中，X1選自CH和N。進一 步地，X1選自CH。
在其中一個示例中，式(I-2)中，X2選自CR4和N。其中，R4選自氰基。在另外一個示例中，R4還可以選自烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基。進一步地，X2選自C-CN。進一步地，X2選自N。
在其中一個示例中，式(I-2)中，R2選自-S(O)2(C1-C6烷基)、-S(O)2(CH2)q-(3-6元環烷基)、-C(O)CH2CN和如下基團：
Figure 110145234-A0101-12-0008-358
R5選自C1-C5烷基、氰基、3-5元的飽和環烷基、C1-C5烷氧基、C1-C5烷基巰基、-O-(CH2)p-(3-6元環烷基)和-S-(CH2)p-(3-6元環烷基)；q、p分別獨立選自0、1、2和3。
在其中一個實施方案中，X2為N；R2選自-S(O)2(C1-C3 烷基)、-S(O)2CH2-(3-4元環烷基)和
Figure 110145234-A0101-12-0008-359
；其中，R5選自 -S-(3-5元環烷基)、C1-C3烷氧基和-S-C1-C3烷基。
更進一步地，R2選自如下基團中的一種：
-S(O)2-丙基、-S(O)2-O-環丙基、
Figure 110145234-A0101-12-0008-360
、
Figure 110145234-A0101-12-0008-361
、
Figure 110145234-A0101-12-0008-362
在另外一個示例中，R2還可以選自烷基、環烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基。作為優選地，前述R2中包 含-S-或-S(O)2-，或者被至少一個氰基或巰基取代。
在其中一個實施方案中，X2為CR4；
R2選自-S(O)2(C1-C3烷基)、-S(O)2CH2-(3-4元環烷基)、 -C(O)CH2CN和
Figure 110145234-A0101-12-0009-363
；R5選自C1-C3烷氧基。
更進一步地，R2選自如下基團中的一種：
-S(O)2-丙基、-S(O)2-O-環丙基和-C(O)CH2CN。
在另外一個示例中，R2還可以選自烷基、環烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基。作為優選地，前述R2中包含-S-或-S(O)2-，或者被至少一個氰基或巰基取代。
在其中一個實施方案中，X1選自CH。
在其中一個實施方案中，所述的化合物具有如下式(I-3)所述結構特徵：
Figure 110145234-A0101-12-0009-364
在其中一個示例中，式(I-3)中，X1選自CH和N。進一步地，X1選自CH。
在其中一個示例中，式(I-3)中，X2選自CR4和N。其中，R4選自氰基。在另外一個示例中，R4還可以選自烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基。進一步地，X2為N。
在其中一個示例中，式(I-3)中，R1選自-H和C1-C3烷基。 在另外一個示例中，R1還可以選自其它烷基、環烷基和雜環基。進一步地，R1選自CH3。
在其中一個示例中，式(I-3)中，R2選自-S(O)2(C1-C6烷基)、-S(O)2(CH2)q-(3-6元環烷基)、-C(O)CH2CN、-NH-S(O)2(C1-C6烷基)、-NH-S(O)2(CH2)q-(3-6元環烷基)、-NH-C(O)CH2CN和如下基團：
Figure 110145234-A0101-12-0010-365
R5選自C1-C5烷基、氰基、3-5元的飽和環烷基、C1-C5烷氧基、-S-C1-C5烷基、-O-(CH2)p-(3-6元環烷基)和-S-(CH2)p-(3-6元環烷基)；q、p分別獨立選自0、1、2和3。
在另外一個示例中，R2還可以選自烷基、環烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基。作為優選地，前述R2中包含-S-或-S(O)2-，或者被至少一個氰基或巰基取代。
在其中一個實施方案中，X2為N；
R2選自
Figure 110145234-A0101-12-0010-366
；其中，R5選自C1-C3烷氧基和-S-C1-C3 烷基。
更進一步地，R2選自如下基團：
Figure 110145234-A0101-12-0010-367
在另外一個示例中，R2還可以選自烷基、環烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基。作為優選地，前述R2中包 含-S-或-S(O)2-，或者被至少一個氰基或巰基取代。
在其中一個實施方案中，R1選自CH3。
在其中一個實施方案中，X1選自CH。
在其中一個實施方案中，所述的化合物具有如下式(I-4)所述結構特徵：
Figure 110145234-A0101-12-0011-369
在其中一個示例中，式(I-4)中，X1選自CH和N。進一步地，X1選自CH。
在其中一個示例中，式(I-4)中，X2選自CR4和N。其中，R4選自氰基。在另外一個示例中，R4還可以選自烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基。進一步地，X2為N。
在其中一個示例中，式(I-4)中，R1選自-H和C1-C3烷基。在另外一個示例中，R1還可以選自其它烷基、環烷基和雜環基。進一步地，R1選自CH3。
在其中一個示例中，式(I-4)中，R2選自-S(O)2(C1-C6烷基)、-S(O)2(CH2)q-(3-6元環烷基)、-C(O)CH2CN和如下基團：
Figure 110145234-A0101-12-0011-368
R5選自C1-C5烷基、氰基、3-5元的飽和環烷基、C1-C5烷氧基、-S-C1-C5烷基、-O-(CH2)p-(3-6元環烷基)和-S-(CH2)p-(3-6 元環烷基)；q、p分別獨立選自0、1、2和3。
在另外一個示例中，R2還可以選自烷基、環烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基。作為優選地，前述R2中包含-S-或-S(O)2-，或者被至少一個氰基或巰基取代。
在其中一個實施方案中，X2為N；R2選自-S(O)2(C1-C3烷基)或如下基團：
Figure 110145234-A0101-12-0012-370
；其中，R5選自C1-C3烷氧基或-S-C1-C3烷 基。更進一步地，R2選自S(O)2-丙基和如下基團：
Figure 110145234-A0101-12-0012-371
在另外一個示例中，R2還可以選自烷基、環烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基。作為優選地，前述R2中包含-S-或-S(O)2-，或者被至少一個氰基或巰基取代。
在其中一個實施方案中，R1選自CH3。
在其中一個實施方案中，X1選自CH。
在其中一個實施方案中，所述的化合物具有如下式(I-5)所述結構特徵：
Figure 110145234-A0101-12-0012-372
X4選自CH或N；
環A表示所述5~6元飽和或不飽和環。
在其中一個實施方案中，環A選自如下基團之一：
Figure 110145234-A0101-12-0013-373
其中，X5、X7、X9、X10分別獨立地選自NR6、CHR6或C(R6)2；
X6、X8、X11分別獨立地選自N或CR6。
進一步地，環A選自
Figure 110145234-A0101-12-0013-374
。
在其中一個示例中，式(I-5)中，X1選自CH和N。進一步地，X1選自CH。
在其中一個示例中，式(I-5)中，X4選自CH。在另外一個實施方案中，X4選自N。
在其中一個示例中，式(I-5)中，R6選自-H、-OH、C1-C4烷基和C1-C4烷基羥基。
進一步地，式(I-5)中，R6選自-H、-OH、C1-C3烷基和C1-C3烷基羥基。更進一步地，R6選自-H、-OH、甲基和-CH(CH3)OH。
在其中一個示例中，式(I-5)中，R2選自-S(O)2(C1-C6烷基)、-S(O)2(CH2)q-(3-6元環烷基)、-C(O)CH2CN、-NH-S(O)2(C1-C6烷基)、-NH-S(O)2(CH2)q-(3-6元環烷基)、-NH-C(O)CH2CN和如下 基團：
Figure 110145234-A0101-12-0013-375
、
Figure 110145234-A0101-12-0013-376
；
R5選自C1-C5烷基、氰基、3-5元的飽和環烷基、C1-C5烷氧基、-S-C1-C5烷基、-O-(CH2)p-(3-6元環烷基)和-S-(CH2)p-(3-6元環烷基)；q、p分別獨立選自0、1、2和3。
進一步地，R2選自如下基團：
Figure 110145234-A0101-12-0014-377
R5選自C1-C3烷氧基。
更進一步地，R2選自如下基團中的一種：
Figure 110145234-A0101-12-0014-378
在另外一個示例中，R2還可以選自烷基、環烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基。作為優選地，前述R2中包含-S-或-S(O)2-，或者被至少一個氰基或巰基取代。
在其中一個實施方案中，R6選自-H、-OH、C1-C3烷基、C1-C3烷基羥基。
在其中一個實施方案中，R2選自如下基團：
Figure 110145234-A0101-12-0014-379
R5選自C1-C3烷氧基或-S-C1-C3烷基。
在其中一個實施方案中，X1選自CH。
在其中一個實施方案中，所述氮雜並環化合物選自如下化合物中的一種：
Figure 110145234-A0101-12-0015-380
本發明還提供一種氮雜並環化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥的製備方法，所述的化合物的製備方法包括如下步驟：
Figure 110145234-A0101-12-0016-381
中間體1
Figure 110145234-A0101-12-0016-382
中間體2
Figure 110145234-A0101-12-0016-385
中間體1與中間體2進行取代反應，製備式(I)化合物；
式(I)化合物與包含R2的化合物進行取代或縮合反應；
作為選擇，L0中的R1可以與X2中的R4一起形成5~6元不飽和環；所述5~6元不飽和環被R6取代；
其中包含R2的化合物選自如下化合物中的一種：
R2-X、R2-H、
Figure 110145234-A0101-12-0016-383
和
Figure 110145234-A0101-12-0016-384
；
X表示鹵素，L0、R1、R0、R2、R6、X1、X2、R4、X3、n和m的定義同上所述。
本發明還提供一種藥物組成物，所述藥物組成物包含如上所述的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥。
本發明還提供如上所述的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、 多晶型、前藥在製備具有酪氨酸激酶JAK抑制活性的藥物中的應用。
本發明還提供如上所述的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥在製備具有預防或治療自身免疫性疾病、皮膚病、變應性疾病、器官排斥、癌症、乾眼病、骨髓纖維化、紅細胞增多症的功效的藥物中的應用。
在其中一個實施方案中，所述自身免疫性疾病為狼瘡、多發性硬化、類風濕性關節炎、青少年關節炎、銀屑病、潰瘍性結腸炎、克羅恩氏病或自體免疫性甲狀腺疾病；所述皮膚病為牛皮癬、皮疹或特應性皮炎；所述變應性病症為哮喘或鼻炎病；所述器官移植排斥為異體抑制排斥或移植物抗宿主疾病；所述癌症為腎癌、肝癌、胰腺癌、胃癌、乳腺癌、***癌、頭頸部癌、甲狀腺癌、肺癌、膠質母細胞瘤、黑素瘤、淋巴瘤或白血病。
與現有技術相比較，本發明具有如下有益效果中的一種或多種：
本發明提供了一種氮雜並環化合物，其可以作為新型的酪氨酸激酶JAK抑制劑，發揮較佳的酪氨酸激酶JAK抑制活性，能夠解決多種JAK-STAT信號通路相關的炎症性疾病或腫瘤性疾病。同時，在研究過程中發現，該氮雜並環化合物對JAK1具有良好的選擇性抑制活性。在大鼠關節炎模型(CIA)研究中，與對照相比，本發明化合物顯著降低CIA大鼠後肢足容積和關節炎指數 (AI)。另外，本發明化合物具有明顯的藥代動力學優勢。
圖1、每天1次連續2周經口灌胃給予化合物對CIA大鼠體重的影響。
圖2、每天1次連續2周經口灌胃給予化合物對CIA大鼠後足足容積的影響(n=10)。
圖3、每天1次連續2周經口灌胃給予化合物對CIA大鼠關節炎指數的影響(n=10)。
圖4、每天1次連續2周經口灌胃給予化合物對CIA大鼠後足足容積的影響。
圖5、每天1次連續2周經口灌胃給予化合物對CIA大鼠關節炎指數的影響。
以下結合具體實施例對本發明的氮雜並環化合物、其製備方法及其用途作進一步詳細的說明。本發明可以以許多不同的形式來實現，並不限於本文所描述的實施方式。相反地，提供這些實施方式的目的是使對本發明公開內容理解更加透徹全面。
除非另有定義，本文所使用的所有的技術和科學術語與屬於本發明的技術領域的技術人員通常理解的含義相同。本文在說明書中所使用的術語只是為了描述具體的實施例的目的，不是 旨在於限制本發明。文所使用的術語“和/或”意指一個或多個相關的所列專案中的任意一種和所有專案的組合。
術語“光學異構體”如果沒有特殊說明，應包括所有異構體中的一種或它們的混合物，例如，雙鍵、環中的幾何異構體(E型、Z型、順式的(cis)、反式的(trans))，直鏈烷基和支鏈烷基中由存在不對稱碳原子等而產生的光學異構體(R型、S型)及它們任意比例的混合物。外消旋混合物以及所有的由互變異構體產生的異構體均包括在本發明中。另外，每種化合物結構均可以為具有相同分子式的不同立體異構體，其中的立體異構體還包括對映異構體和非對映異構體，對映異構體即為光學異構體，非對映異構體為不成手性對映的立體異構體，與本發明化合物具有相同分子式的不同異構體也在本發明的保護範圍內。
術語“藥學上可接受的鹽”是指化合物可以通過傳統的方法轉化為相應的鹽，其在化學上或物理上與構成某藥物劑型的其它成分相相容，並在生理上與受體相相容。該鹽可以為化合物與無機和/或有機酸和/或與無機和/或有機堿形成的酸式和/或鹼式鹽，也包括兩性離子鹽(內鹽)，還包括季銨鹽，例如烷基銨鹽。這些鹽可以是在化合物的最後分離和純化中直接得到。也可以是通過將本發明的化合物或其立體異構體或溶劑合物，與一定數量的酸或堿適當混合而得到的。這些鹽可能在溶液中形成沉澱而以過濾方法收集，或在溶劑蒸發後回收而得到，或在水介質中反應後冷卻乾燥制得。具體地，鹽優選為水溶性的藥學上可接受的無毒 酸加成鹽，實例為氨基與無機酸(如鹽酸、氫溴酸、磷酸、硫酸以及高氯酸)或與有機酸(如乙酸、草酸、順丁烯二酸、酒石酸、檸檬酸、琥珀酸或丙二酸)形成的鹽，或通過使用本領域中傳統的其他方法(例如離子交換法)形成的鹽。其他藥學上可接受的鹽包括己二酸鹽、藻酸鹽、抗壞血酸鹽、天冬氨酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、硫酸氫鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、檸檬酸鹽、環戊烷丙酸鹽、二葡糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙烷磺酸鹽、甲酸鹽、富馬酸鹽、葡庚糖酸鹽、甘油磷酸鹽、葡糖酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、氫碘化物、2-羥基-乙烷磺酸鹽、乳糖酸鹽、乳酸鹽、月桂酸鹽、月桂基硫酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、丙二酸鹽、甲烷磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、硝酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、磷酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、硬脂酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、對-甲苯磺酸鹽、十一烷酸鹽、戊酸鹽等。適當時，另外的藥學上可接受的鹽還可以包括衍生自適當堿的鹽，包括鹼金屬鹽、鹼土金屬鹽以及銨鹽。代表性鹼金屬或鹼土金屬鹽包括鈉鹽、鋰鹽、鉀鹽、鈣鹽、鎂鹽等。適當時，另外的藥學上可接受的鹽包括使用如鹵離子、氫氧根、羧酸根、硫酸根、磷酸根、硝酸根、低級烷基磺酸根以及芳基磺酸根等平衡離子與無毒銨、季銨以及胺陽離子形成的鹽。
術語“溶劑化物”也可以稱為“溶劑化合物”、“溶劑合物”，指的是含有溶劑分子的化合物，其中溶劑分子可以以包括配位 鍵、共價鍵、範德華力、離子鍵、氫鍵等方式與化合物分子相結合。常規溶劑包括包括水、甲醇、乙醇、乙酸、DMSO、THF、***等。本文所述的化合物可製備成，例如，結晶形式，且可被溶劑化。合適的溶劑化物包括藥學上可接受的溶劑化物且進一步包括化學計量的溶劑化物和非化學計量的溶劑化物。在一些情況下，所述溶劑化物將能夠分離，例如，當一或多個溶劑分子摻入結晶固體的晶格中時。“溶劑化物”包括溶液狀態的溶劑化物和可分離的溶劑化物。代表性的溶劑化物包括水合物、乙醇合物和甲醇合物。
術語“前藥”是指當被施用至生物體時由於自發化學反應、酶催化的化學反應、光解和/或代謝化學反應而產生藥物，即活性成分的任何化合物。前藥因此是治療活性化合物的共價改性的類似物或潛在形式。合適的實例包括但不限於：化合物的羧酸酯、碳酸酯、磷酸酯、硝酸酯、硫酸酯、碸酯、亞碸酯、氨基化合物、氨基甲酸鹽、偶氮化合物、磷醯胺、葡萄糖苷、醚、乙縮醛等形式。
"任選的"或"任選地"意味著隨後所描述的事件或環境可以但不必發生，包括該事件或環境發生或不發生的場合。例如，“芳基任選被烷基取代”意味著烷基可以但不必須存在，該術語包括芳基被烷基取代的情形和芳基不被烷基取代的情形。
“藥學上可接受的載體”指藥學上可接受的材料、組成物或媒劑，例如液體或固體填充劑、稀釋劑、賦形劑、溶劑或囊封 材料。如本文所用，術語“藥學上可接受的載體”包括與藥物施用相容的緩衝劑、注射用無菌水、溶劑、分散介質、包衣、抗細菌劑及抗真菌劑、等滲劑及吸收延遲劑及諸如此類。在與配製物中其他成分相容且對患者無害的意義上，每種載體必須為“藥學上可接受的”。合適的實例包括但不限於：(1)糖，例如乳糖、葡萄糖及蔗糖；(2)澱粉，例如玉米澱粉、馬鈴薯澱粉及經取代或未經取代的β-環糊精；(3)纖維素及其衍生物，例如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素及乙酸纖維素；(4)粉狀黃蓍膠；(5)麥芽；(6)明膠；(7)滑石；(8)賦形劑，例如可哥脂及栓劑蠟；(9)油類，例如花生油、棉籽油、紅花油、芝麻油、橄欖油、玉米油及大豆油；(10)二醇，例如丙二醇；(11)多元醇，例如甘油、山梨醇、甘露醇及聚乙二醇；(12)酯類，例如油酸乙酯及月桂酸乙酯；(13)瓊脂；(14)緩衝劑，例如氫氧化鎂及氫氧化鋁；(15)海藻酸；(16)無熱原水；(17)等滲鹽水；(18)林格氏溶液；(19)乙醇；(20)磷酸鹽緩衝液；及(21)藥物配製物中所採用的其他無毒相容物質。
術語“代謝產物”是指物質包括本發明化合物在體內新陳代謝中產生的產物，包括中間代謝產物和最終代謝產物。
術語“多晶型”是指特定晶體堆積排列的化合物的結晶形式(或其鹽、水合物或溶劑化物)。所有的多晶型物具有相同的元素組成。不同的結晶形式通常具有不同的X射線衍射圖、紅外光譜、熔點、密度、硬度、晶體形狀、光電性質、穩定性和溶解度。重結晶溶劑、結晶速率、貯存溫度和其他因素可導致一種結晶形式 占優。化合物的各種多晶型物可在不同的條件下通過結晶製備。
術語“烷基”是指包含伯(正)碳原子、或仲碳原子、或叔碳原子、或季碳原子、或其組合的飽和烴。烷基優選為例如C1-C6烷基、C1-C5烷基、C1-C4烷基和C1-C3烷基。以“C1-C3烷基”為例，其是指包含1~3個碳原子的烷基，每次出現時，可以互相獨立地為C1烷基、C2烷基、C3烷基。合適的實例包括但不限於：甲基(Me、-CH3)、乙基(Et、-CH2CH3)、1-丙基(n-Pr、n-丙基、-CH2CH2CH3)、2-丙基(i-Pr、i-丙基、-CH(CH3)2)。
“烯基”是本發明定義的烷基中包含至少一個碳-碳雙鍵。在其中一個實例中，所述烯基含有2至20個碳原子，優選2至12個碳原子，進一步優選2至8個碳原子，更進一步優選為2至6個碳原子。烯基的非限定實例包括取代或未取代的乙烯基、2-丙烯基、3-丁烯基、2-丁烯基、4-戊烯基、3-戊烯基、2-己烯基、3-己烯基、2-庚烯基、3-庚烯基、4-庚烯基、3-辛烯基、3-壬烯基或4-癸烯基等。當被取代時，取代基優選為1至5個，並且取代基獨立地選自F、Cl、Br、I、=O、烷基、烯基、炔基、烷氧基、羥基、硝基、氰基和氨基。
“炔基”是本發明定義的烷基中包含至少一個碳-碳三鍵。在其中一個實例中，所述炔基含有2至20個碳原子，優選2至12個碳原子，進一步優選2至8個碳原子，更進一步優選2-6個碳原子。炔基的非限定實例包括取代或未取代的乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基、3-丁炔基、4-戊炔基、3-戊炔基、 2-己炔基、3-己炔基、3-丁炔基、2-庚炔基、3-庚炔基、4-庚炔基、3-辛炔基、3-壬炔基或4-癸炔基等，當被取代時，取代基優選為1至5個，並且取代基獨立地選自F、Cl、Br、I、=O、烷基、烯基、炔基、烷氧基、羥基、硝基、氰基和氨基。
術語“飽和或不飽和環”包括如下定義的碳環基、雜環基、芳基和雜芳基。
“碳環基”或“環烷基”是指飽和或者部分不飽和的環狀含碳基團，例如4-6元(例如5-6元)的飽和碳環和5-6元的部分不飽和碳環。在其中一個實施方案中，碳環基是3至4元的單環、3至5元的單環、3至6元的單環、3至8元的單環、3至10元的單環、5至8元的單環、5至6元的單環、4至12元雙環或者10至15元三環系統。碳環包括橋環或者螺環。碳環基的非限制性實例包括環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環己烯基、環庚基、環戊烯基、環己二烯基、環庚三烯基、苯並環戊基、二環[3.2.1]辛烷基、二環[5.2.0]壬烷基、三環[5.3.1.1]十二烷基、金剛烷基或螺[3.3]庚烷基等。碳環基可以任選被取代。當被取代時，取代基優選為1至5個，並且所述取代基獨立地選自F、Cl、Br、I、=O、烷基、烯基、炔基、烷氧基、羥基、硝基、氰基和氨基。
進一步，術語“飽和環烷基”包含環碳原子的非芳香族烴，可以為單環烷基或橋環烷基。包含該術語的短語，例如，“3-6元的飽和環烷基”是指包含3~6個碳原子的環烷基，每次出現時，可以互相獨立地為C3環烷基、C4環烷基、C5環烷基或C6環烷基。 合適的實例包括但不限於：環丙基、環丁基、環戊基和環己基。優選地，飽和環烷基為4-6元飽和碳環，進一步優選為5-6元飽和碳環。
相應地，術語“飽和氮雜環基”是指飽和環烷基中至少一個環碳原子被N取代。
術語“鹵素”是指-F、-Cl、-Br或-I。進一步，術語“鹵代烷基”是指經鹵素基團取代的烷基，其中烷基如上文所定義，優選為鹵代C1-6烷基、鹵代C1-5烷基、鹵代C1-4烷基、鹵代C1-3烷基和鹵代C1-2烷基。
術語“氰基”是指-CN。
術語“巰基”是指-SH。
術語“羥基”是指-OH。進一步，術語“烷基羥基”是指經羥基取代的烷基，其中烷基如上文所定義，優選為C1-6烷基羥基、C1-5烷基羥基、C1-4烷基羥基、C1-3烷基羥基和C1-2烷基羥基。
術語“烷氧基”是指具有-O-烷基的基團，即如上所定義的烷基經由氧原子連接至母核結構。包含該術語的短語，例如，“C1-C5烷氧基”是指烷基部分包含1~5個碳原子，“C1-C3烷氧基”是指烷基部分包含1~3個碳原子。
術語“芳基”是指在芳香環化合物的基礎上除去一個氫原子衍生的芳族烴基，可以為單環芳基、或稠環芳基、或多環芳基，優選為6-10元芳基。對於多環的環種，至少一個是芳族環系。包含該術語的短語，例如，“5-6元芳基”是指芳香環系包含5-6個環 原子。優選地，芳基為苯基。
術語“雜芳基”是指含有雜原子的芳基，其可為單環或稠合環，所述雜原子獨立地選自N、O和S，優選為5-12元雜芳基，優選為5-8元雜芳基，更優選為5-6元雜芳基，更優選為5元雜芳基。雜芳基包括但不限於吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噁唑基、異噁唑基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、噠嗪基、喹啉基、異喹啉基、***基、四氫吡咯基和噻二唑基。在某一方案中，典型地含1個或多個，優選1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-6元單環雜芳基。除非另外說明，“5-元雜芳基”為包含一個雜原子的示例性5-元雜芳基基團包括但不限於，吡咯基、呋喃基以及噻吩基；包含兩個雜原子的示例性5-元雜芳基基團包括但不限於，咪唑基、吡唑基、噁唑啉基、異噁唑啉基、噻唑基以及異噻唑基；包含三個雜原子的示例性5-元雜芳基基團包括但不限於，噻唑基、噁二唑基以及噻二唑基；包含四個雜原子的示例性5-元雜芳基基團包括但不限於，四唑基。
“雜環基”或“雜環”是指取代的或未取代的飽和或者部分不飽和的含雜原子的環狀基團，所述雜原子選自N、O和S。進一步，術語“雜環基”指的是非芳香環的一個或多個構成環的原子是雜原子、其餘為碳的穩定的3-10元飽和雜環系統的基團。所述的雜原子包括而不限於氮原子、氧原子和硫原子等。所述雜環基可以是3至8元的單環、5至8元的單環、5至6元的單環、4至12元雙環或者10至15元三環系統，優選3至10元雜環基，且包含 至少1個，優選1至4個選自N、O或S的雜原子。除非本說明書中另外特別指明，否則雜環烷基基團可以是單環的(“單環的雜環烷基”)，或者是雙環、三環或更多環的環體系，其可包括並環的(稠合的)、橋聯的(橋環的)或螺的環系統(例如二環系統(“二環的雜環烷基”)。二環雜環烷基的環系統可以在一個或兩個環中包括一個或多個雜原子；並且是飽和的。示例性3-元雜環基基團包括但不限於，氮雜環丙基、環氧乙烷基以及硫雜環丙烷基，或者其立體異構體；示例性4-元雜環基基團包括但不限於，氮雜環丁烷基，環氧丙烷基，硫雜環丁烷基，或者其同分異構體和立體異構體；示例性5-元雜環基基團包括但不限於，四氫呋喃基，四氫噻吩基，吡咯烷基，噻唑烷基，異噻唑烷基，噁唑烷基，異噁唑烷基，咪唑烷基，吡唑烷基，二氧戊環基，氧雜硫雜環戊基，二硫雜環戊基，或者其同分異構體和立體異構體。示例性6-元雜環基基團包括但不限於，呱啶基，四氫吡喃基，硫雜環己烷基，嗎啉基，硫嗎啉基，二噻烷基，二噁烷基，呱嗪基，三嗪烷基，或者其同分異構體和立體異構體；示例性7-元雜環基基團包括但不限於，氮雜環庚烷基，氧雜環庚烷基，硫雜環庚烷基，以及二氮雜環庚烷基，或者其同分異構體和立體異構體。在某一方案中，典型的雜環基為含1個或多個，優選1-4個，更優選1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-6元單環雜環基。在一個實施方案中，“雜環烷基”為4-6元雜環烷基，其中雜原子選自N、O和S中的一種或多種，雜原子數為1、2或3個。
在本發明的各部分，描述了連接取代基。當該結構清楚地需要連接基團時，針對該基團所列舉的馬庫什變數應理解為連接基團。例如，如果該結構需要連接基團並且針對該變數的馬庫什基團定義列舉了“烷基”或“芳基”，則應該理解，該“烷基”或“芳基”分別代表連接的亞烷基基團或亞芳基基團。在一些具體的結構中，當烷基基團清楚地表示為連接基團時，則該烷基基團代表連接的亞烷基基團，例如，基團“-C1-C3鹵代烷基”中的烷基應當理解為亞烷基。
除非另有規定，本文使用的所有技術術語和科學術語具有要求保護主題所屬領域的標準含義。倘若對於某術語存在多個定義，則以本文定義為准。應該理解，在本發明中使用的單數形式，如“一種”，包括複數指代，除非另有規定。
此外，術語“包括”、“包含”是開放性限定並非封閉式，即包括本發明所指明的內容，但並不排除其他方面的內容。
除非另有說明，本發明採用質譜、核磁等傳統方法鑒定化合物，各步驟和條件可參照本領域常規的操作步驟和條件。
除非另有指明，本發明採用分析化學、有機合成化學和光學的標準命名及標準實驗室步驟和技術。在某些情況下，標準技術被用於化學合成、化學分析、發光器件性能檢測。
另外，需要說明的是，除非以其他方式明確指出，在本發明中所採用的描述方式“...分別獨立地”應做廣義理解，是指所描述的各個個體之間是相互獨立的，可以獨立地為相同或不同的具 體基團。更詳細地，描述方式“...分別獨立地”既可以是指在不同基團中，相同符號之間所表達的具體選項之間互相不影響；也可以表示在相同的基團中，相同符號之間所表達的具體選項之間互相不影響。
本領域技術人員可以理解，根據本領域中使用的慣例， 本申請描述基團的結構式中所使用的“
Figure 110145234-A0101-12-0029-386
”是指，相應的基團通過 該位點與化合物中的其它片段、基團進行連接。在不違背本領域常識的基礎上，上述各優選條件，可任意組合，即得本發明各較佳實例。
本發明所用試劑和原料均市售可得。
本發明涉及如下技術方案：
在一個實施方案中，本發明提供具有通式(I)所示結構的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥：
Figure 110145234-A0101-12-0029-387
其中，L0選自單鍵和NR1；
X1選自CH和N；
X2選自CR4和N；
R4為氰基，R1選自-H和C1-C3烷基，或R1與R4一起形成5~6元飽和或不飽和環；所述5~6元飽和或不飽和環被R6取代；
R6選自-H、=O、-OH、C1-C4烷基和C1-C4烷基羥基；
X3選自CH和N；
n選自1和2；
m=2；兩個R0取代於同一碳原子之上或取代於相鄰碳原子之上，且兩個R0互相連接形成4~6元飽和氮雜環或4~6元飽和碳環；所述4~6元飽和氮雜環或4~6元飽和碳環分別獨立地被R2取代；
R2選自-S(O)2(C1-C6烷基)、-S(O)2(CH2)q-(3-6元環烷基)、-C(O)CH2CN、-NH-S(O)2(C1-C6烷基)、-NH-S(O)2(CH2)q-(3-6元環 烷基)、-NH-C(O)CH2CN、
Figure 110145234-A0101-12-0030-388
和
Figure 110145234-A0101-12-0030-389
；
R5選自C1-C5烷基、氰基、3-5元飽和環烷基、C1-C5烷氧基、-S-C1-C5烷基、-O-(CH2)p-(3-6元環烷基)和-S-(CH2)p-(3-6元環烷基)；
q、p分別獨立選自0、1、2和3；
條件是，當X2為N時，R2不為-C(O)CH2CN；當X2為N，且兩個R0取代於相鄰碳原子之上時，兩個R0互相連接形成4~6元飽和碳環。
在一個實施方案中，本發明提供如上式(I)所示的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其特徵在於，所述4~6元飽和氮雜環、4~6元飽和碳環選自如下基團中的一種，環原子中有 1或2個碳原子為與基團
Figure 110145234-A0101-12-0031-390
所共有的碳原子：
Figure 110145234-A0101-12-0031-391
在一個實施方案中，本發明提供如上式(I)所示的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其特徵在於，所述的化合物具有如下式(I-1)或所述結構特徵：
Figure 110145234-A0101-12-0031-393
在一個實施方案中，本發明提供如上式(I-1)所示的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其特徵在於，R2選自
Figure 110145234-A0101-12-0031-392
其中，R5選自-S-(3-5元環烷基)、C1-C3烷氧基和-S-C1-C3烷基。
在一個實施方案中，本發明提供如上式(I-1)所示的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其特徵在於，R1選自C1-C2烷基。
在一個實施方案中，本發明提供如上式(I-1)所示的化合 物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其特徵在於，X1選自CH。
在一個實施方案中，本發明提供如上式(I)所示的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其特徵在於，所述的化合物具有如下式(I-2)所述結構特徵：
Figure 110145234-A0101-12-0032-396
在一個實施方案中，本發明提供如上式(I-2)所示的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其特徵在於，X2為N；
R2選自-S(O)2(C1-C3烷基)、-S(O)2CH2-(3-4元環烷基)和
Figure 110145234-A0101-12-0032-394
；其中，R5選自-S-(3-5元環烷基)、C1-C3烷氧基和 -S-C1-C3烷基。
在一個實施方案中，本發明提供如上式(I-2)所示的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其特徵在於，X2為CR4；
R2選自-S(O)2(C1-C3烷基)、-S(O)2CH2-(3-4元環烷基)、 -C(O)CH2CN和
Figure 110145234-A0101-12-0032-395
；R5選自C1-C3烷氧基。
在一個實施方案中，本發明提供如上式(I-2)所示的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其特徵在於，X1選自CH。
在一個實施方案中，本發明提供如上式(I)所示的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其特徵在於，所述的化合物具有如下式(I-3)所述結構特徵：
Figure 110145234-A0101-12-0033-398
在一個實施方案中，本發明提供如上式(I-3)所示的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其特徵在於，X2為N；
R2選自
Figure 110145234-A0101-12-0033-397
；
其中，R5選自C1-C3烷氧基和-S-C1-C3烷基。
在一個實施方案中，本發明提供如上式(I-3)所示的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其特徵在於，R1選自CH3。
在一個實施方案中，本發明提供如上式(I-3)所示的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其特徵在於，X1選自CH。
在一個實施方案中，本發明提供如上式(I)所示的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其特徵在於，所述的化合物具有如下式(I-4)所述結構特徵：
Figure 110145234-A0101-12-0034-400
在一個實施方案中，本發明提供如上式(I-4)所示的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其特徵在於，X2為N；
R2選自-S(O)2(C1-C3烷基)和如下基團：
Figure 110145234-A0101-12-0034-399
；其中，R5選自C1-C3烷氧基和-S-C1-C3烷基。
在一個實施方案中，本發明提供如上式(I-4)所示的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其特徵在於，R1選自CH3。
在一個實施方案中，本發明提供如上式(I-4)所示的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其特徵在於，X1選自CH。
在一個實施方案中，本發明提供如上式(I)所示的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其特徵在於，所述的化合 物具有如下式(I-5)所述結構特徵：
Figure 110145234-A0101-12-0035-402
X4選自CH或N；
環A表示所述5~6元飽和或不飽和環。
在一個實施方案中，本發明提供如上式(I-5)所示的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其特徵在於，環A選自如下基團之一：
Figure 110145234-A0101-12-0035-401
其中，X5、X7、X9、X10分別獨立地選自NR6、CHR6和C(R6)2；
X6、X8、X11分別獨立地選自N和CR6。
在一個實施方案中，本發明提供如上式(I-5)所示的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其特徵在於，R6選自-H、-OH、C1-C3烷基和C1-C3烷基羥基。
在一個實施方案中，本發明提供如上式(I-5)所示的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、 藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其特徵在於，R2選自如下基團：
Figure 110145234-A0101-12-0036-403
R5選自C1-C3烷氧基和-S-C1-C3烷基。
在一個實施方案中，本發明提供如上式(I-5)所示的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其特徵在於，X1選自CH。
在一個實施方案中，本發明提供如上式(I-5)所示的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其特徵在於：
X4為N；
環A為
Figure 110145234-A0101-12-0036-404
或
Figure 110145234-A0101-12-0036-405
；
R2為
Figure 110145234-A0101-12-0036-406
；
R5選自C1-C3烷氧基和-S-C1-C3烷基；
X5各自獨立地為NR6或CHR6；
X6各自獨立地為N或CR6；
R6選自-H、-OH、C1-C3烷基和C1-C3烷基羥基。
在一個實施方案中，本發明提供如上式(I-5)所示的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其特徵在於：
X4為N；
環A
Figure 110145234-A0101-12-0037-407
；
R2為
Figure 110145234-A0101-12-0037-408
；
R5為C1-C3烷氧基；
X6之一為N，另一個為CR6；
R6為C1-C3烷基。
在一個實施方案中，本發明提供具有通式(a)所示結構的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥：
Figure 110145234-A0101-12-0037-409
其中：
L為NRc或鍵；
Y1選自CH或N；
Y2選自CH或N；
Y3選自CH或N；
Ra選自-C(O)R7、-C(O)NR8R9、-S(O)2R10和-S(O)2NR10R11；
Rb選自-H、-CN、鹵素、C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、-NR’R”、-ORx和-SRx；
Rc為H或C1-6烷基；
R7為含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜芳基，其任選經1-3個獨立選自以下的取代基取代：-H、-ORx、-SRx、-CN、鹵素、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
R8選自6-10元芳基、5-8元環烷基、含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜芳基和含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜環基；所述芳基、環烷基、雜芳基和雜環基各自任選經1-3個獨立選自以下的取代基取代：-H、-ORx、-SRx、-CN、鹵素、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
R9選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
R10選自C1-6烷基、6-10元芳基、5-8元環烷基、含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜芳基和含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜環基；所述芳基、環烷基、雜芳基和雜環基各自任選經1-3個獨立選自以下的取代基取代：-H、-ORx、-SRx、-CN、鹵素、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
R11選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
Rx選自-H、C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、C2-6烯基和-C2-6炔基；
R’和R”各自獨立地選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
m1為0、1、2或3；
m2為0、1、2或3；
n1為1、2或3；
n2為1、2或3。
在一個實施方案中，本發明提供具有通式(b)、(b-1)或(b-2)所示結構的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥：
Figure 110145234-A0101-12-0039-410
Figure 110145234-A0101-12-0039-411
其中：
Y1選自CH和N，其中當Y1為CH時，其取代有Rb；
Rb選自-H、-CN、鹵素、C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、-NR’R”、-ORx和-SRx；
Ra選自-C(O)R7、-C(O)NR8R9、-S(O)2R10和-S(O)2NR10R11；
R7為含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜 芳基，其任選經1-3個獨立選自以下的取代基取代：-H、-ORx、-SRx、-CN、鹵素、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
R8選自6-10元芳基、5-8元環烷基、含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜芳基和含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜環基；所述芳基、環烷基、雜芳基和雜環基各自任選經1-3個獨立選自以下的取代基取代：-H、-ORx、-SRx、-CN、鹵素、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
R9選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
R10選自C1-6烷基、6-10元芳基、5-8元環烷基、含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜芳基和含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜環基；所述芳基、環烷基、雜芳基和雜環基各自任選經1-3個獨立選自以下的取代基取代：-H、-ORx、-SRx、-CN、鹵素、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
R11選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
Rx選自-H、C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、C2-6烯基和-C2-6炔基；
m1為0、1、2或3；
m2為0、1、2或3；
n1為1、2或3；
n2為1、2或3。
在一個實施方案中，本發明提供上述具有通式(b)、(b-1)或(b-2)所示結構的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、 溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其中：
Y1為N；
Ra選自-C(O)NR8R9；
R9為-H；
R8選自6-10元芳基、含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜芳基和含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜環基；所述芳基、雜芳基和雜環基各自任選經1-3個獨立選自以下的取代基取代：-H、-ORx、-SRx、-CN、鹵素、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
Rx選自-H、C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、C2-6烯基和-C2-6炔基；
m1為0、1、2或3；
m2為0、1、2或3；
n1為1、2或3；
n2為1、2或3。
在一個實施方案中，本發明提供上述具有通式(b)、(b-1)或(b-2)所示結構的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其中：
Y1為N；
Ra選自-C(O)NR8R9；
R9為-H；
R8選自苯基和含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-6元雜芳基；所述苯基和雜芳基各自任選經1-3個獨立選自以下的取代基取代：-ORx、-SRx和-CN；
Rx選自C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
m1為0、1、2或3；
m2為0、1、2或3；
n1為1、2或3；
n2為1、2或3。
在一個實施方案中，本發明提供上述具有通式(b)、(b-1)或(b-2)所示結構的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其中：
Y1為N；
Ra選自-C(O)NR8R9；
R9為-H；
R8為含有1-3個獨立選自N和S的雜原子的5-6元雜芳基；所述雜芳基任選經1-2個獨立選自以下的取代基取代：-ORx和-SRx；
Rx為C1-4烷基；
m1為0、1、2或3；
m2為0、1、2或3；
n1為1、2或3；
n2為1、2或3。
在一個實施方案中，本發明提供上述具有通式(b)、(b-1)或(b-2)所示結構的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其中：
Y1為N；
Ra選自-C(O)NR8R9；
R9為-H；
R8為含有3個獨立選自N和S的雜原子的5元雜芳基；所述雜芳基經獨立選自以下的取代基取代：-ORx和-SRx；
Rx為C1-4烷基，優選為甲基或乙基；
m1為0；
m2為3；
n1為2；
n2為1。
在一個實施方案中，本發明提供具有通式(c)所示結構的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥：
Figure 110145234-A0101-12-0044-412
其中：
Ra選自-C(O)R7、-C(O)NR8R9、-S(O)2R10和-S(O)2NR10R11；
Rb選自-H、-CN、鹵素、C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、-NR’R”、-ORx和-SRx；
R7為含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜芳基，其任選經1-3個獨立選自以下的取代基取代：-H、-ORx、-SRx、-CN、鹵素、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
R8選自6-10元芳基、5-8元環烷基、含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜芳基和含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜環基；所述芳基、環烷基、雜芳基和雜環基各自任選經1-3個獨立選自以下的取代基取代：-H、-ORx、-SRx、-CN、鹵素、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
R9選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
R10選自C1-6烷基、6-10元芳基、5-8元環烷基、含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜芳基和含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜環基；所述芳基、環烷基、雜芳基和雜環基各自任選經1-3個獨立選自以下的取代基取代：-H、 -ORx、-SRx、-CN、鹵素、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
R11選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
Rx選自-H、C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、C2-6烯基和-C2-6炔基；
R’和R”各自獨立地選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
m1為0、1、2或3；
m2為0、1、2或3；
n1為1、2或3；
n2為1、2或3。
在一個實施方案中，本發明提供上述具有通式(c)所示結構的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其中：
Ra選自-S(O)2R10和-S(O)2NR10R11；
Rb選自-CN、鹵素、-ORx和-SRx；
R10選自C1-6烷基和含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜芳基；所述雜芳基任選經1-3個獨立選自以下的取代基取代：-ORx、-SRx、-CN、鹵素、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
R11選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
Rx選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
m1為0、1、2或3；
m2為0、1、2或3；
n1為1、2或3；
n2為1、2或3。
在一個實施方案中，本發明提供上述具有通式(c)所示結構的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其中：
Ra選自-S(O)2R10；
Rb為-CN；
R10為C1-6烷基；
m1為0、1、2或3；
m2為0、1、2或3；
n1為1、2或3；
n2為1、2或3。
在一個實施方案中，本發明提供上述具有通式(c)所示結構的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其中：Ra為-S(O)2R10；
Rb為-CN；
R10為C1-4烷基，優選為丙基；
m1為0；
m2為2；
n1為2；
n2為1。
在一個實施方案中，本發明提供具有通式(d)、(d-1)或(d-2) 所示結構的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，
Figure 110145234-A0101-12-0047-413
Figure 110145234-A0101-12-0047-414
其中：
Y1選自CH和N；
R8選自6-10元芳基、5-8元環烷基、含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜芳基和含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜環基；所述芳基、環烷基、雜芳基和雜環基各自任選經1-3個獨立選自以下的取代基取代：-H、-ORx、-SRx、-CN、鹵素、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
Rb選自-H、-CN、鹵素、C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、-NR’R”、-ORx和-SRx；
Rc選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
Rd選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
Re選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
Rx選自-H、C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、C2-6烯基和-C2-6炔基；
R’和R”各自獨立地選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
p1為0、1或2；
p2為0、1或2；
q1為0、1或2；
q2為0、1或2。
在一個實施方案中，本發明提供具有通式(e)、(e-1)或(e-2)所示結構的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，
Figure 110145234-A0101-12-0048-415
Figure 110145234-A0101-12-0048-416
其中：
R8選自6-10元芳基、5-8元環烷基、含有1-3個獨立選 自N、O和S的雜原子的5-8元雜芳基和含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜環基；所述芳基、環烷基、雜芳基和雜環基各自任選經1-3個獨立選自以下的取代基取代：-H、-ORx、-SRx、-CN、鹵素、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
Rc選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
Rd選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
Re選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
Rx選自-H、C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、C2-6烯基和-C2-6炔基；
p1為0、1或2；
p2為0、1或2；
q1為0、1或2；
q2為0、1或2。
在一個實施方案中，本發明提供上述具有通式(e)、(e-1)或(e-2)所示結構的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其中：
R8選自苯基和含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-6元雜芳基；所述苯基和雜芳基各自任選經1-3個獨立選自以下的取代基取代：-ORx、-SRx、-CN和鹵素；
Rc選自-H和C1-6烷基；
Rd選自-H和C1-6烷基；
Re選自-H和C1-6烷基；
Rx選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
p1為0、1或2；
p2為0、1或2；
q1為0、1或2；
q2為0、1或2。
在一個實施方案中，本發明提供上述具有通式(e)、(e-1)或(e-2)所示結構的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其中：
R8為含有1-3個獨立選自N和S的雜原子的5-6元雜芳基；所述雜芳基任選經1-3個獨立選自以下的取代基取代：-ORx和-SRx；
Rc選自-H和C1-4烷基；
Rd選自-H和C1-4烷基；
Re選自-H和C1-4烷基；
Rx為C1-4烷基；
p1為1或2；
p2為1或2；
q1為1或2；
q2為1或2。
在一個實施方案中，本發明提供上述具有通式(e)、(e-1) 或(e-2)所示結構的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其中：
R8為含有3個獨立選自N和S的雜原子的5元雜芳基；所述雜芳基經-ORx取代；
Rc為C1-4烷基，優選為甲基；
Rd為-H；
Re為-H；
Rx為C1-4烷基，優選為甲基；
p1為1；
p2為1；
q1為1；
q2為1。
在一個實施方案中，本發明提供具有通式(f)、(f-1)或(f-2)所示結構的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，
Figure 110145234-A0101-12-0051-417
Figure 110145234-A0101-12-0052-418
R8選自6-10元芳基、5-8元環烷基、含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜芳基和含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜環基；所述芳基、環烷基、雜芳基和雜環基各自任選經1-3個獨立選自以下的取代基取代：-H、-ORx、-SRx、-CN、鹵素、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
Rc和Rf與它們所連接的原子一起形成含有1-2個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜芳基或含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜環基；所述雜芳基或雜環基經獨立選自以下的取代基取代：-H、氧代、-ORx、-SRx、-CN、鹵素、C1-6烷基、鹵代C1-6烷基和羥基取代的C1-6烷基；
Rd選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
Re選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
Rx選自-H、C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、C2-6烯基和-C2-6炔基；
p1為0、1或2；
p2為0、1或2；
q1為0、1或2；
q2為0、1或2。
在一個實施方案中，本發明提供上述具有通式(f)、(f-1)或(f-2)所示結構的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其中：
R8選自苯基和含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-6元雜芳基；所述苯基和雜芳基各自任選經1-3個獨立選自以下的取代基取代：-ORx、-SRx、-CN和鹵素；
Rc和Rf與它們所連接的原子一起形成含有1-2個獨立選自N、O和S的雜原子的5-6元雜芳基；所述雜芳基經1-2個獨立選自以下的取代基取代：-ORx、-SRx、C1-4烷基和羥基取代的C1-4烷基；
Rd選自-H和C1-4烷基；
Re選自-H和C1-4烷基；
Rx選自-H、C1-4烷基和鹵代C1-4烷基；
p1為0、1或2；
p2為0、1或2；
q1為0、1或2；
q2為0、1或2。
在一個實施方案中，本發明提供上述具有通式(f)、(f-1)或(f-2)所示結構的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其 中：
R8為含有1-3個獨立選自N和S的雜原子的5-6元雜芳基；所述雜芳基任選經1-3個-ORx取代；
Rc和Rf與它們所連接的原子一起形成含有2個N原子的5-6元雜芳基；所述雜芳基經1-2個選自-H、C1-4烷基和羥基取代的C1-4烷基的取代基取代；
Rd為-H；
Re為-H；
Rx為C1-4烷基；
p1為1；
p2為1；
q1為1；
q2為1。
在一個實施方案中，本發明提供上述具有通式(f)、(f-1)或(f-2)所示結構的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其中：
R8為含有3個獨立選自N和S的雜原子的5元雜芳基；所述雜芳基經-ORx取代；
Rc和Rf與它們所連接的原子一起形成含有2個N原子的5元雜芳基；所述雜芳基經C1-4烷基優選甲基取代；
Rd為-H；
Re為-H；
Rx為C1-4烷基，優選為甲基；
p1為1；
p2為1；
q1為1；
q2為1。
在其中一個具體的實施方案中，所述的化合物選自如下結構：
Figure 110145234-A0101-12-0056-502
本發明的實施方案還提供所述化合物的製備方法，包括如下步驟：
Figure 110145234-A0101-12-0057-420
中間體1
Figure 110145234-A0101-12-0057-421
中間體2
Figure 110145234-A0101-12-0057-424
中間體1與中間體2進行取代反應，製備式(I)化合物；
式(I)化合物與包含R2的化合物進行取代或縮合反應；
作為選擇，L0中的R1可以與X2中的R4一起形成5~6元不飽和環；所述5~6元不飽和環被R6取代；
其中包含R2的化合物選自如下化合物中的一種：
R2-X、R2-H、
Figure 110145234-A0101-12-0057-422
和
Figure 110145234-A0101-12-0057-423
；
X表示鹵素，L0、R1、R0、R2、R6、X1、X2、R4、X3、n和m如上面所定義。
可以理解地，當R2-X時，式(I)化合物與包含R2的化合物進行取代反應；
當包含R2的化合物為R2-H時，式(I)化合物與包含R2的化合物進行縮合反應。具體地，採用的試劑可以為N,N’-羰基二咪唑(CDI)。
當包含R2的化合物為
Figure 110145234-A0101-12-0058-426
或
Figure 110145234-A0101-12-0058-425
時，式(I)化合物 與包含R2的化合物進行酯交換反應。
在其中一個示例中，R4為-NH2，R1為-H；L0中的R1可以與X2中的R4一起形成5~6元不飽和環是指進行環化反應。
本發明的實施方案還提供一種藥物組成物，其特徵在於，所述藥物組成物包含如上所述的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥。
本發明的實施方案還提供如上所述的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥在製備具有酪氨酸激酶JAK抑制活性的藥物中的應用。
本發明的實施方案還提供如上所述的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥在製備具有預防或治療自身免疫性疾病、皮膚病、變應性疾病、器官排斥、癌症、乾眼病、骨髓纖維化、紅細胞增多症的功效的藥物中的應用。
本發明的實施方案還提供如上所述的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥或如上所述的藥物組成物，其用於抑制酪氨酸激酶JAK。
本發明的實施方案還提供如上所述的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥或如上所述的藥物組成物，其用於預防或治療選自以下的疾病：自身免疫性疾病、皮膚病、變應性疾病、器官排斥、癌症、乾眼病、骨髓纖維化和紅細胞增多症。
本發明的實施方案還提供一種抑制酪氨酸激酶JAK的方法，其包括給予如上所述的化合物或其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型或前藥或如上所述的藥物組成物。
本發明的實施方案還提供一種預防或治療選自以下的疾病的方法：自身免疫性疾病、皮膚病、變應性疾病、器官排斥、癌症、乾眼病、骨髓纖維化和紅細胞增多症，其包括給予如上所述的化合物或其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型或前藥或如上所述的藥物組成物。
在一個具體的實施方案中，所述自身免疫性疾病為狼瘡、多發性硬化、類風濕性關節炎、青少年關節炎、銀屑病、潰瘍性結腸炎、克羅恩氏病或自體免疫性甲狀腺疾病；所述皮膚病為牛皮癬、皮疹或特應性皮炎；所述變應性病症為哮喘或鼻炎病；所述器官移植排斥為異體抑制排斥或移植物抗宿主疾病；所述癌症為腎癌、肝癌、胰腺癌、胃癌、乳腺癌、***癌、頭頸部癌、甲狀腺癌、肺癌、膠質母細胞瘤、黑素瘤、淋巴瘤或白血病。
以下通過具體實施例詳細說明本發明的實施過程和產生的有益效果，旨在幫助閱讀者更好地理解本發明的實質和特點，不作為對本案可實施範圍的限定。
化合物的結構是通過核磁共振(NMR)或(和)質譜(MS)來確定的。NMR位移(δ)以10-6(ppm)的單位給出。NMR的測定是用(Bruker Avance III 400和Bruker Avance 300)核磁儀，測定溶劑為氘代二甲基亞碸(DMSO-d6)，氘代氯仿(CDCl3)，氘代甲醇(CD3OD)，內標為四甲基矽烷(TMS)。
MS的測定用(Agilent 6120B(ESI)和Agilent 6120B(APCI))。
HPLC的測定使用安捷倫1260DAD高壓液相色譜儀(Zorbax SB-C18 100×4.6mm)。
薄層層析矽膠板使用煙臺黃海HSGF254或青島GF254矽膠板，薄層色譜法(TLC)使用的矽膠板採用的規格是0.15mm~0.20mm，薄層層析分離純化產品採用的規格是0.4mm~0.5mm。
柱層析一般使用煙臺黃海矽膠200~300目矽膠為載體。
本發明的己知的起始原料可以採用或按照本領域已知的方法來合成，或可購買於泰坦科技、安耐吉化學、上海德默、成都科龍化工、韶遠化學科技、百靈威科技等公司。
氮氣氛是指反應瓶連接一個約1L容積的氮氣氣球。
氫氣氛是指反應瓶連接一個約1L容積的氫氣氣球。
氫化反應通常抽真空，充入氫氣，反復操作3次。
實施例中無特殊說明，反應在氮氣氛下進行。
實施例中無特殊說明，溶液是指水溶液。
實施例中無特殊說明，反應的溫度為室溫。
室溫為最適宜的反應溫度，為20℃~30℃。
化學合成相關縮寫：
Et：乙基；
Me：甲基；
Bn：苄基；
Bz：苯甲醯基；
TBSOTf：叔丁基二甲基甲矽烷基三氟甲磺酸酯；
DIEA：N,N-二異丙基乙胺；
i-PrOH：異丙醇；
EA：乙酸乙酯；
HPLC：高效液相色譜；
SEMCl：(2-(氯甲氧基)乙基)三甲基矽烷
TFA：三氟乙酸；
CDI：N,N'-羰基二咪唑；
DCM：二氯甲烷；
rt：室溫；
h：小時
overnight：過夜；
THF：四氫呋喃；
DMF：二甲基甲醯胺；
TsOH：對甲苯磺酸；
TsCl：4-甲基苯磺醯氯；
Pd/C：鈀/炭；
EtOAc：乙酸乙酯。
實施例1
4-(1-(2-氰基乙醯基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-6-基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-5-甲腈(化合物1)
Figure 110145234-A0101-12-0062-427
第一步：6-(5-氰基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-1-羧酸叔丁酯(1B)
Figure 110145234-A0101-12-0062-428
將4-氯-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-5-甲腈1A(300mg,1.69mmol)，1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-1-羧酸叔丁酯(323mg,1.52mmol)和N,N-二異丙基乙胺(439mg,3.38mmol)溶於異丙醇(8mL)中，並 將混合物在氮氣保護下在100℃攪拌反應16小時。反應結束後旋乾溶劑，粗產品用矽膠柱色譜分離提純(甲醇/二氯甲烷(v/v)=0-5%)，得到白色固體化合物6-(5-氰基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-1-羧酸叔丁酯1B(400mg，產率：67%)。
MS m/z(ESI)：354.0[M+1].
第二步：4-(1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-6-基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-5-甲腈(1C)
Figure 110145234-A0101-12-0063-429
將6-(5-氰基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-1-羧酸叔丁酯1B(400mg,1.13mmol)溶於氯化氫的乙酸乙酯溶液中(10mL,1.5mol/L)，並將溶液在室溫下攪拌反應過夜。反應結束後旋乾溶劑，粗產品用矽膠柱色譜分離提純(甲醇/二氯甲烷(v/v)=0-10%)，得到黃色固體化合物4-(1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-6-基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-5-甲腈1C(280mg，產率：98%)。
MS m/z(ESI)：254.0[M+1].
第三步：4-(1-(2-氰基乙醯基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-6-基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-5-甲腈(化合物1)
Figure 110145234-A0101-12-0064-430
將4-(1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-6-基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-5-甲腈1C(100mg，0.39mmol)、2-氰基乙酸2,5-二氧代吡咯烷-1-基酯(85mg,0.47mmol)和三乙胺(80mg,0.79mmol)溶於乙醇(5mL)中，並將混合物在室溫下攪拌反應過夜。反應結束後旋乾溶劑。粗產品通過製備型HPLC純化，凍乾得到白色固體化合物4-(1-(2-氰基乙醯基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-6-基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-5-甲腈(化合物1)(14mg，收率：11.2%)。
取12mg化合物1用手性SFC分離(SFC150；手性柱AD，250×25mm，10um；超臨界CO2/甲醇+甲醇氨0.1%=55：45；80mL/min)得到化合物1-P1(Rt=1.27min,2.2mg)和化合物1-P2(Rt=1.81min,3.2mg)均為白色固體。
MS m/z(ESI)：321.0[M+1].
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 11.80(d,1 H),8.04(s,1 H),7.26-7.18(d,1 H),6.75(d,1 H),4.22(dd,1 H),4.06-3.98(m,3 H),3.71(s,2 H),2.70(dd,1 H),2.66-2.60(m,1 H),2.54(t,1 H),2.40(t,1 H),2.31(m,1 H),2.24-2.14(m,1 H).
實施例2
4-(1-(丙基磺醯基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-6-基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶(化合物2)
Figure 110145234-A0101-12-0065-431
第一步：4-氯-7-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶(2B)
Figure 110145234-A0101-12-0065-432
在250mL的三口圓底燒瓶中加入氫化鈉(60%)(7.81g,97mmol)，溶於THF(30mL)中，氮氣保護下降溫至0℃。將4-氯-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶2A(10g,65.12mmol)溶於THF中，然後緩慢加入到上述混合物中，並在0℃反應30分鐘。然後緩慢加入(2-(氯甲氧基)乙基)三甲基矽烷(13.03g，78.14mmol)，在室溫反應2小時。加入飽和NH4Cl(100mL)溶液，用乙酸乙酯(100mL×3)萃取。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過矽膠柱純化(石油醚：乙酸乙酯=1：20-1：10)得到無色油狀的化合物4-氯-7-((2-(三 甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶2B(11g，收率59.52%)。
MS m/z(ESI)：284.0[M+1].
第二步：6-(7-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-1-甲酸叔丁基酯2C
Figure 110145234-A0101-12-0066-433
將4-氯-7-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶2B(650mg，2.29mmol)和1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-1-甲酸叔丁酯(437mg,2.06mmol)溶於i-PrOH(10mL)，然後加入三乙胺(347mg，3.44mmol)，氮氣保護下反應16h。反應完畢後，濃縮反應液，加水(20mL)，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過矽膠柱純化(石油醚：乙酸乙酯=1：5-1：3)得到無色油狀的化合物6-(7-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-1-甲酸叔丁基酯2C(900mg，收率85.5%)。
MS m/z(ESI)：460.0[M+1].
第三步：4-(1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-6-基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶(2D)
Figure 110145234-A0101-12-0067-434
將6-(7-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-1-甲酸叔丁基酯2C(300mg,0.65mmol)溶於MeOH(3mL)，然後加入TFA(1mL)，攪拌4h。真空旋乾反應混合物得到粗品。將粗品溶於MeOH(2mL)，加入氨水(2mL)，攪拌15min。反應結束後真空旋乾反應混合物，得到粗品4-(1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-6-基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶2D(260mg)。
MS m/z(ESI)：230.0[M+1]。
第四步：4-(1-(丙基磺醯基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-6-基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶(化合物2)
Figure 110145234-A0101-12-0067-435
將4-(1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-6-基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶(2D)(260mg，1.13mmol)溶於DCM(2mL)，在氮氣保護下加入三乙胺(172mg,1.70mmol)和丙烷-1-磺醯氯(194mg，1.36mmol)，室溫反應6小時。濃縮反應液，然後通過製備型HPLC純化，凍 乾得白色固體狀的化合物4-(1-(丙基磺醯基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-6-基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶(化合物2)(15mg，產率3.94%)。
取13.6mg化合物2用手性SFC分離(SFC150；手性柱IC，250×25mm，10um；超臨界CO2/甲醇+甲醇氨0.1%=55：45；80mL/min)得到化合物2-P1(Rt=5.15min,2.6mg)和化合物2-P2(Rt=5.47min,2.8mg)均為白色固體。
MS m/z(ESI)：336.0[M+1].
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 8.16(s,1 H),7.27(d,1 H),6.87(d,1 H),4.43(s,1 H),4.28-3.80(m,5 H),3.00(m,2 H),2.86-2.75(m,1 H),2.58-2.38(m,3 H),1.79(q,2 H),1.02(t,3 H).
實施例3
N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-1-羧醯胺(化合物3)
Figure 110145234-A0101-12-0068-436
第一步：6-(7-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-1-羧酸叔丁基酯(3A)
Figure 110145234-A0101-12-0069-437
將4-氯-7-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶2B(413mg,1.46mmol)，1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-1-羧酸叔丁酯(300mg,1.33mmol)和N,N-二異丙基乙胺(0.66mL,3.98mmol)溶於異丙醇(5mL)，然後將混合物在氮氣保護下在80℃攪拌16小時。反應結束後濃縮反應液，粗產品用矽膠柱色譜分離提純(乙酸乙酯/石油醚(v/v)=0-15%)得到無色油狀的化合物6-(7-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-1-羧酸叔丁基酯3A(590mg，產率93.9%)。
MS m/z(ESI)：474.0[M+1].
第二步：4-(1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-6-基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶(3B)
Figure 110145234-A0101-12-0069-438
將6-(7-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-1-羧酸叔丁基酯3A(150 mg，0.31mmol)溶於二氯甲烷(3mL)，並在攪拌下加入三氟乙酸(1mL)。將混合物在室溫下攪拌2小時。然後旋乾。將旋乾後的混合物溶於四氫呋喃(3mL)並加入氨水(1mL)，在室溫下攪拌30分鐘。旋乾得到4-(1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-6-基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶3B(100mg，粗產品)。
MS m/z(ESI)：244.0[M+1].
第三步：N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-1-羧醯胺(化合物3)
Figure 110145234-A0101-12-0070-439
將5-氨基-3-甲氧基-1,2,4-噻唑(35mg，0.27mmol)溶於二氯甲烷(3mL)，並於攪拌下加入N,N'-羰基二咪唑(47mg，0.29mmol)和三乙胺(0.23mL，1.61mmol)。將混合物在室溫攪拌下反應2小時。然後加入4-(1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-6-基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶3B(100mg，粗產品)，並將混合物在室溫攪拌下繼續反應16小時。反應結束後，濃縮反應混合物，殘餘物通過製備型HPLC純化。凍乾得到白色固體化合物N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-1-羧醯胺(化合物3)(12mg，收率9.4%)。
MS m/z(ESI)：401.2[M+1].
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 8.13(s,1 H),7.14(d,1 H),6.66(d,1 H),5.06(d,1 H),4.69(d,1 H),4.19-4.03(m,2 H),3.96(s,3 H),3.69(d,1 H),3.11(t,1 H),2.62-2.44(m,1 H),2.27-2.15(m,1 H),2.09(m,2 H),1.96-1.83(m,1 H),1.71(d,1 H).
取10.8mg化合物3用手性SFC分離(SFC150；手性柱IC，250×25mm，10um；超臨界CO2/甲醇+甲醇氨0.1%=45：55；80mL/min)得到3-P1(Rt=2.44min,3.1mg)和3-P2(Rt=3.24min,3.5mg)均為白色固體。
實施例4
4-(1-(丙基磺醯基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-6-基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-5-甲腈(化合物4)
Figure 110145234-A0101-12-0071-440
第一步：6-(5-氰基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-1-羧酸叔丁酯(4B)
Figure 110145234-A0101-12-0071-441
將4-氯-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-5-甲腈1A(300mg,1.69mmol)，1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-1-羧酸叔丁酯(323mg,1.52mmol)和N,N-二異丙基乙胺(439mg,3.38mmol)溶於異丙醇(8mL)中，並將混合物在氮氣保護下在100℃攪拌反應16小時。反應結束後旋乾溶劑，粗產品通過矽膠柱色譜分離提純(二氯甲烷/甲醇(v/v)=0-20%)，得到白色固體化合物6-(5-氰基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-1-羧酸叔丁酯4B(400mg，產率：67%)。
MS m/z(ESI)：354.0[M+1].
第二步：4-(1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-6-基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-5-甲腈(4C)
Figure 110145234-A0101-12-0072-442
將6-(5-氰基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-1-羧酸叔丁酯1B(400mg,1.13mmol)溶於氯化氫的乙酸乙酯溶液中(10mL,1.5mol/L)，並將溶液在室溫下攪拌反應過夜。反應結束後旋乾溶劑，粗產品用矽膠柱色譜分離提純(二氯甲烷/甲醇(v/v)=0-50%)，得到黃色固體化合物4-(1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-6-基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-5-甲腈4C(280mg，產率：98%)。
MS m/z(ESI)：254.0[M+1].
第三步：4-(1-(丙基磺醯基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-6-基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-5-甲腈(化合物4)
Figure 110145234-A0101-12-0073-443
將4-(1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-6-基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-5-甲腈4C(100mg，0.39mmol)和三乙胺(80mg,0.79mmol)溶於二氯甲烷(5mL)中，並在攪拌條件下將丙烷-1-磺醯氯(62mg,0.43mmol)滴加到反應液中。將混合物在室溫下攪拌反應過夜。反應結束後旋乾溶劑，粗產品通過製備型HPLC純化，凍乾得到白色固體化合物4-(1-(丙基磺醯基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-6-基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-5-甲腈(化合物4)(12mg，收率：8.6%)。
取10mg化合物4用手性SFC分離(SFC150；手性柱IG，250×25mm，10um；超臨界CO2/甲醇+甲醇氨0.1%=45：55；70mL/min)得到化合物4-P1(Rt=2.58min,1.1mg)和化合物4-P2(Rt=3.08min,1.9mg)均為白色固體。
MS m/z(ESI)：360.0[M+1].
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 11.87(s,1 H),8.05(s,1 H),7.24(d,1 H),6.74(d,1 H),4.34(d,1 H),4.22-4.10(m,2 H),4.01-3.79(m,3 H),3.17-2.97(m,2 H),2.59-2.52(m,1 H),2.48- 2.42(m,1 H),2.38-2.26(m,2 H),1.77-1.64(q,2 H),0.97(t,3 H).
實施例5
4-(1-(丙基磺醯基)-1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-6-基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶(化合物5)
Figure 110145234-A0101-12-0074-444
第一步：6-(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-1-羧酸叔丁酯(5B)
Figure 110145234-A0101-12-0074-445
將4-氯-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶5A(200mg,0.65mmol)，1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-1-羧酸叔丁酯(147mg,0.65mmol)和N,N-二異丙基乙胺(180mg,1.3mmol)溶於異丙醇(8mL)中，並將混合物在氮氣保護下在100℃攪拌反應16小時。反應結束後旋乾溶劑，粗產品用矽膠柱色譜分離提純(甲醇/二氯甲烷(v/v)=0-5%)，得到白色固體化合物6-(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-1-羧酸叔丁酯5B(130mg，產率：40%)。
MS m/z(ESI)：498.0[M+1].
第二步：4-(1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-6-基)-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶(5C)
Figure 110145234-A0101-12-0075-446
將6-(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-1-羧酸叔丁酯5B(130mg,0.26mmol)溶於二氯甲烷溶液(10mL)中，加入TBSOTf(103mg,0.39mmol)，將溶液在室溫下攪拌，反應過夜。反應結束後旋乾溶劑，粗產品用矽膠柱色譜分離提純(甲醇/二氯甲烷(v/v)=0-10%)，得到黃色固體化合物4-(1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-6-基)-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶5C(90mg，產率：90.5%)。
MS m/z(ESI)：398.0[M+1].
第三步：4-(1-(丙基磺醯基)-1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-6-基)-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶5D
Figure 110145234-A0101-12-0075-447
將4-(1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-6-基)-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶5C(90mg，0.234mmol)和三乙胺(50mg,0.5mmol)溶於二氯甲烷(5mL)中，並在攪拌條件下將丙烷-1-磺醯氯(62mg, 0.43mmol)滴加到反應液中。混合物在室溫下攪拌反應過夜。反應結束後旋乾溶劑，粗產品通過製備型TLC純化，得到白色固體化合物4-(1-(丙基磺醯基)-1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-6-基)-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶5D(91mg，收率：86.4%)。
MS m/z(ESI)：504.0[M+1].
第四步：4-(1-(丙基磺醯基)-1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-6-基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶(化合物5)
Figure 110145234-A0101-12-0076-448
將4-(1-(丙基磺醯基)-1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-6-基)-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶5D(91mg，0.201mmol)和1N NaOH溶液(1mL)溶於THF/水(4mL/1mL)中，並將混合物在室溫下攪拌反應過夜。反應結束後旋乾溶劑，粗產品通過製備型HPLC純化，凍乾得到白色固體化合物4-(1-(丙基磺醯基)-1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-6-基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶(化合物5)(22mg，收率：16.6%)。
取20mg產品用手性SFC分離(SFC150；手性柱IG，250×25mm，10um；超臨界CO2/乙醇+甲醇氨0.1%=45：55；70mL/min)得到化合物5-P1(Rt=2.28min,5.1mg)和化合物5-P2(Rt=2.952min,4.9mg)均為白色固體。
MS m/z(ESI)：350.1[M+1].
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 8.16(s,1 H),7.17(d,1 H),6.66(d,1 H),5.12(d,1 H),4.64(d,1 H),3.89-3.85(m,2 H),3.55(d,1 H),3.15-3.06(m,1 H),3.06-2.95(m,2 H),2.33-2.00(m,4 H),1.94-1.87(m,1 H),1.82-1.78(m,2 H),1.77-1.63(m,1 H),1.07(t,3 H).
實施例6
N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-7-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-羧醯胺(化合物6)
Figure 110145234-A0101-12-0077-449
第一步：7-(甲基氨基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-羧酸叔丁酯(6B)
Figure 110145234-A0101-12-0077-450
在一個50mL的三口圓底燒瓶中加入7-氧代-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-羧酸叔丁酯(500mg,2.4mmol)，甲胺水溶液(5mL)和NaBH3CN(630mg,10mmol)於DCE(10mL)中，並在室溫反應16小時。用乙酸乙酯(10mL×3)萃取反應混合物，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，得到無色油狀的7-(甲基氨基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-羧酸叔丁酯6B(500mg，粗產品)。
MS m/z(ESI)：255.0[M+1].
第二步：7-(甲基(7-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-羧酸叔丁基酯(6C)
Figure 110145234-A0101-12-0078-451
將7-(甲基氨基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-羧酸叔丁酯6B(500mg，粗產品)，4-氯-7-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶(561mg,2mmol)和DIEA(278mg,2mmol)溶於DMF(10mL)中，並在氮氣保護下於130℃反應6h。加入30mL水，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過矽膠柱純化(石油醚：乙酸乙酯=1：5-1：3)得到化合物7-(甲基(7-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-羧酸 叔丁基酯6C(180mg，收率25.1%)。
MS m/z(ESI)：502.0[M+1].
第三步：N-甲基-N-(2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)-7-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-胺(6D)
Figure 110145234-A0101-12-0079-452
將7-(甲基(7-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-羧酸叔丁基酯6C(180mg,0.32mmol)溶於HCL/MeOH(3mL)，並在室溫攪拌16h。然後真空旋乾反應混合物，得到粗品N-甲基-N-(2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)-7-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-胺6D(200mg，粗產品)。
MS m/z(ESI)：402.0[M+1].
第四步：N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-7-(甲基(7-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-羧醯胺(6E)
Figure 110145234-A0101-12-0079-453
將N-甲基-N-(2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)-7-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-胺6D粗品(200mg，粗產品)溶於THF(2mL)，並在氮氣保護下加入三乙胺(41mg, 0.4mmol)和(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基甲酸苯基酯(175mg，0.3mmol)，於60℃反應6小時。濃縮反應液，加入水10mL，用乙酸乙酯(10mL×3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物用矽膠柱純化(石油醚：乙酸乙酯=1：5-1：3)得到N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-7-(甲基(7-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-羧醯胺6E為白色固體(180mg，產率50.4%)。
MS m/z(ESI)：559.0[M+1].
第五步：N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-7-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-羧醯胺(化合物6)
Figure 110145234-A0101-12-0080-454
將N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-7-(甲基(7-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-羧醯胺6E(180mg，0.32mmol)溶於DCM(4mL)，加入TFA(2mL)，室溫反應2小時。濃縮反應液，經製備型HPLC純化後凍乾得到N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-7-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-羧醯胺(化合物6)為白色固體(5mg，收率3.6%)。
MS m/z(ESI)：429.1[M+1].
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 11.77(s,1 H),11.59(s,1 H),8.09(s,1 H),7.14-7.10(m,1 H),6.54(d,1 H),4.66(s,1 H),3.89(s,3 H),3.78(d,4 H),3.14(s,3 H),2.00(d,2 H),1.66-1.62(m,6 H).
實施例7
N-(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-1-羧醯胺(化合物7)
Figure 110145234-A0101-12-0081-455
第一步：3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-胺(7B)
Figure 110145234-A0101-12-0081-456
將硫氰酸鈉(15.5g,192mmol)溶於甲醇(100mL)，並於0℃攪拌下加入甲脒基甲基硫醚7A(13.9g,73mmol)和三乙胺(15.4mL，87.6mmol)。將混合物在0℃在攪拌下同時滴加三乙胺(14mL，73mmol)和液溴(16.3g，146mmol)。室溫反應2小時後，濃縮反應液，粗產品用矽膠柱色譜分離提純(乙酸乙酯/石油醚(v/v)=0-30%)得到黃色固體3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-胺7B(8.5g，37.4%)。
MS m/z(ESI)：148.0[M+1].
第二步：(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基甲酸苯基酯 (7C)
Figure 110145234-A0101-12-0082-457
將3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-胺7B(500mg，3.4mmol)溶於二氯甲烷(10mL)，並於攪拌下加入三乙胺(0.71mL,5.09mmol)。將混合物在0℃在攪拌下加入氯甲酸苯酯(584mg，3.74mmol)。混合物在氮氣保護下在室溫攪拌2小時。反應結束後加入水(15mL)，經二氯甲烷萃取(15mL×3)。有機相經無水硫酸鈉乾燥，粗產品用矽膠柱色譜分離提純(乙酸乙酯：石油醚(v/v)=0-10%)得到黃色固體化合物(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基甲酸苯基酯7C(250mg，產率27.5%)。
第三步：N-(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-1-羧醯胺(7D)
Figure 110145234-A0101-12-0082-458
將4-(1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-6-基)-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶5C(200mg，0.5mmol)，(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑 -5-基)氨基甲酸苯基酯7C(201mg，0.75mmol)，三乙胺(101mg，1.0mmol)溶於DMF(5mL)。將混合物在60℃攪拌下繼續反應2小時。反應結束後濃縮，粗產品用矽膠柱色譜分離提純(乙酸乙酯/石油醚(v/v)=0-40%)得到白色固體化合物N-(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-1-羧醯胺7D(160mg，產率55.7%)。
MS m/z(ESI)：571.0[M+1]。
第四步：N-(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-1-羧醯胺(化合物7)
Figure 110145234-A0101-12-0083-459
將化合物N-(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-1-羧醯胺7D(160mg，0.28mmol)溶於四氫呋喃(3mL)，加入1M的氫氧化鈉溶液(1.4mL，1.4mmol)，並將混合物在60℃攪拌2小時。反應結束後濃縮反應液，通過製備型HPLC純化，凍乾得到白色固體化合物N-(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-1-羧醯胺(化合物7)(35mg，收率29.9%)。
取32mg化合物7用手性SFC分離(SFC150；手性柱IC，250×25mm，10um；超臨界CO2/甲醇+甲醇氨0.1%=45：55；100mL/min)得到化合物7-P1(Rt=1.18min,14mg)和化合物7-P2(Rt=1.54min,16mg)均為白色固體。
MS m/z(ESI)：417.1[M+1].
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 8.18(s,1 H),7.19(d,1 H),6.74(d,1 H),4.98(d,1 H),4.63(d,1 H),4.26-4.02(m,2 H),3.82(d,1 H),3.27-3.17(m,1 H),2.58(s,3 H),2.57-2.47(m,1 H),2.29-2.18(m,1 H),2.17-2.06(m,2 H),2.00-1.92(m,1 H),1.81-1.66(m,1 H).
實施例8
N-(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-1-羧醯胺(化合物8)
Figure 110145234-A0101-12-0084-460
第一步：3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-胺(8B)
Figure 110145234-A0101-12-0084-461
將硫氰酸鈉(3.86g,47.57mmol)溶於甲醇(40mL)，然後在0℃攪拌下加入甲脒基乙基硫醚8A(3.7g,18.29mmol)和三乙胺(3.06mL，21.95mmol)。將混合物在0℃在攪拌下同時滴加三乙胺 (2.55mL，18.29mmol)和液溴(5.85g，36.59mmol)。室溫反應2小時後，濃縮反應液，粗產品用矽膠柱色譜分離提純(乙酸乙酯/石油醚(v/v)=0-30%)得到黃色固體化合物3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-胺8B(2.3g，77.9%)。
第二步：(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基甲酸苯基酯(8C)
Figure 110145234-A0101-12-0085-462
將3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-胺8B(2.3g，14.26mmol)溶於二氯甲烷(20mL)，然後在攪拌下加入三乙胺(2.98mL,21.4mmol)。在0℃攪拌下向混合物中加入氯甲酸苯酯(2.46g，15.69mmol)。將混合物在氮氣保護下室溫攪拌2小時。反應結束後加入水(15mL)，用二氯甲烷萃取(15mL×3)。無水硫酸鈉乾燥有機相，粗產品用矽膠柱色譜分離提純(乙酸乙酯/石油醚(v/v)=0-10%)得到黃色固體化合物(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基甲酸苯基酯8C(1.2g，產率29.9%)。
MS m/z(ESI)：282.1[M+1].
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 13.19(s,1 H),7.49-7.45(m,2 H),7.35-7.30(m,3 H),3.20-3.14(q,2 H),1.37-1.33(t,3 H).
第三步：N-(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-1-羧醯胺(8D)
Figure 110145234-A0101-12-0086-463
將4-(1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-6-基)-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶5C(200mg，0.5mmol)，(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基甲酸苯基酯8C(201mg，0.75mmol)和三乙胺(101mg，1.0mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5mL)。將混合物在60℃攪拌下繼續反應2小時。反應結束後濃縮反應混合物，粗產品用矽膠柱色譜分離提純(乙酸乙酯/石油醚(v/v)=0-40%)得到白色固體化合物N-(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-1-羧醯胺8D(230mg，產率73.7%)。
MS m/z(ESI)：584.0[M+1].
第四步：N-(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-1-羧醯胺(化合物8)
Figure 110145234-A0101-12-0086-464
將化合物N-(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-1-羧醯 胺8D(230mg，0.39mmol)溶於四氫呋喃(3mL)，然後加入1M的氫氧化鈉溶液(1.95mL，1.95mmol)。將混合物在60℃攪拌2小時。反應結束後濃縮反應液，通過製備型HPLC純化，凍乾得到白色固體化合物N-(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-1-羧醯胺(化合物8)(60mg，收率35.4%)。
取55mg化合物8用手性SFC分離(SFC150；手性柱OJ，250×25mm，10um；超臨界CO2/甲醇+甲醇氨0.1%=45：55；80mL/min)得到化合物8-P1(Rt=1.18min,24mg)和化合物8-P2(Rt=2.09min,23mg)均為白色固體。
MS m/z(ESI)：431.2[M+1].
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 8.15(s,1H),7.16(d,1H),6.69(d,1H),5.03(d,1H),4.67(d,1H),4.22-4.01(m,2H),3.75(d,1H),3.21-3.12(m,3H),2.58-2.49(m,1H),2.26-2.17(m,1H),2.16-2.04(m,2H),1.99-1.85(m,1H),1.81-1.66(m,1H),1.38(t,3H).
實施例9
N-((2s,3aR,5r,6aS)-5-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)丙烷-1-磺醯胺(化合物9)
Figure 110145234-A0101-12-0088-465
第一步：(3aR,6aS)-5’,5’-二甲基四氫-1H-螺[並環戊二烯-2,2'-[1,3]二噁烷]-5(3H)-酮(9B)
Figure 110145234-A0101-12-0088-466
將(3as,6as)-四氫並環戊二烯-2,5(1H，3H)-二酮9A(2g,14.48mmol)溶於甲苯(toluene)(15mL)，然後在攪拌下加入2,2-二甲基丙烷-1,3-二醇(1.51g,14.48mmol)和一水合對甲苯磺酸(25mg，0.14mmol)。將混合物在110℃下攪拌6小時。反應結束後濃縮反應液，粗產品用矽膠柱色譜分離提純(乙酸乙酯/石油醚(v/v)=0-10%)得到白色固體化合物(3aR,6aS)-5’,5’-二甲基四氫-1H-螺[並環戊二烯-2,2'-[1,3]二噁烷]-5(3H)-酮9B(1.5g，產率46.2%)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 3.48(s,2 H),3.45(s,2 H),2.90-2.76(m,2 H),2.53-2.37(m,2 H),2.35-2.25(m,2 H),2.23- 2.11(m,2 H),1.87-1.77(m,2 H),0.96(s,6 H).
第二步：(3aR,5s,6aS)-5’,5’-二甲基六氫-1H-螺[並環戊二烯-2,2'-[1,3]二噁烷]-5-醇(9C)
Figure 110145234-A0101-12-0089-467
將化合物(3aR,6aS)-5’,5’-二甲基四氫-1H-螺[並環戊二烯-2,2'-[1,3]二噁烷]-5(3H)-酮9B(1.5g，6.69mmol)溶於乙酸乙酯(15mL)，然後在0℃攪拌下加入1M的三叔丁氧基氫化鋁鋰(13.4mL,13.37mmol)。將混合物在0℃攪拌下2小時。反應結束後加入水(20mL)，乙酸乙酯萃取(30mL×3)，無水硫酸鈉乾燥有機相。粗產品用矽膠柱色譜分離提純(乙酸乙酯/石油醚(v/v)=0-10%)得到白色固體化合物(3aR,5s,6aS)-5’,5’-二甲基六氫-1H-螺[並環戊二烯-2,2'-[1,3]二噁烷]-5-醇9C(1.5g，產率99%)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 4.25-4.18(m,1 H),3.50(s,2 H),3.47(s,2 H),2.62-2.46(m,2 H),2.27-2.17(m,2 H),2.13-2.06(m,2 H),1.96-1.86(m,2 H),1.58-1.47(m,2 H),0.96(s,6 H).
第三步：甲磺酸(3aR,5s,6aS)-5’,5’-二甲基六氫-1H-螺[並環戊二烯-2,2'-[1,3]二噁烷]-5-基酯(9D)
Figure 110145234-A0101-12-0090-468
將化合物(3aR,5s,6aS)-5’,5’-二甲基六氫-1H-螺[並環戊二烯-2,2'-[1,3]二噁烷]-5-醇(0.5g，2.2mmol)9C溶於二氯甲烷(5mL)，然後在攪拌下加入三乙胺(0.5mL,2.4mmol)。混合物在0℃攪拌下加入甲基磺醯氯(0.3g，2.6mmol)。混合物在氮氣保護下於室溫攪拌3小時，反應結束後濃縮反應液得到白色固體化合物甲磺酸(3aR,5s,6aS)-5’,5’-二甲基六氫-1H-螺[並環戊二烯-2,2'-[1,3]二噁烷]-5-基酯9D(700mg，粗產品)。
第四步：(3aR,5r,6aS)-N,5’,5’-三甲基六氫-1H-螺[並環戊二烯-2,2'-[1,3]二噁烷]-5-胺(9E)
Figure 110145234-A0101-12-0090-469
將白色固體化合物甲磺酸(3aR,5s,6aS)-5’,5’-二甲基六氫-1H-螺[並環戊二烯-2,2'-[1,3]二噁烷]-5-基酯9D(700mg，2.3mmol)溶於甲醇(3mL)，然後在0℃在攪拌下加30%的甲胺乙醇溶液(5mL，11.5mmol)，混合物在室溫攪拌下繼續反應16小時。反應結束後濃縮，粗產品用矽膠柱色譜分離提純(甲醇/二氯甲烷(v/v)=0-10%)得到黃色油狀的化合物(3aR,5r,6aS)-N,5’,5’-三甲基六氫 -1H-螺[並環戊二烯-2,2'-[1,3]二噁烷]-5-胺9E(90mg，產率16.3%)。
第五步：N-((3aR,5r,6aS)-5’,5’-二甲基六氫-1H-螺[並環戊二烯-2,2'-[1,3]二噁烷]-5-基)-N-甲基-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-胺(9F)
Figure 110145234-A0101-12-0091-470
將化合物(3aR,5r,6aS)-N,5’,5’-三甲基六氫-1H-螺[並環戊二烯-2,2'-[1,3]二噁烷]-5-胺9E(90mg，0.37mmol)，4-氯-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶(115mg，0.37mmol)和N,N-二異丙基乙胺(0.2mL,1.13mmol)溶於異丙醇(5mL)。將混合物在氮氣保護下於100℃攪拌16小時。反應結束後濃縮反應液，粗產品用矽膠柱色譜分離提純(乙酸乙酯/石油醚(v/v)=0-20%)得到白色固體化合物N-((3aR,5r,6aS)-5’,5’-二甲基六氫-1H-螺[並環戊二烯-2,2'-[1,3]二噁烷]-5-基)-N-甲基-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-胺9F(140mg，產率72.9%)。
MS m/z(ESI)：511.0[M+1].
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 7.23(s,1 H),7.01(d,2 H),6.57(d,1 H),6.40(d,2 H),5.91(d,1 H),4.40(s,1 H),2.55(d,4 H),2.19(s,3 H),1.68(s,2 H),1.48-1.33(m,5 H),1.02-0.90(m, 2 H),0.72-0.55(m,4 H).
第六步：(3aR,5r,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)六氫並環戊二烯-2(1H)-酮(9G)
Figure 110145234-A0101-12-0092-471
將化合物N-((3aR,5r,6aS)-5’,5’-二甲基六氫-1H-螺[並環戊二烯-2,2'-[1,3]二噁烷]-5-基)-N-甲基-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-胺9F(140mg，0.27mmol)溶於丙酮(acetone)：水=40：1(3mL)，然後於攪拌下加入一水合對甲苯磺酸(5.2mg,0.027mmol)。將混合物在室溫下攪拌16小時。旋乾，殘餘物中加入水(5mL)，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)。無水硫酸鈉乾燥有機相得到(3aR,5r,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)六氫並環戊二烯-2(1H)-酮9G(110mg，粗產品)。
第七步：(2r,3aR,5r,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-醇(9H)
Figure 110145234-A0101-12-0092-472
將(3aR,5r,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)六氫並環戊二烯-2(17H)-酮9G(110mg，0.25mmol) 溶於乙酸乙酯(3mL)，然後在0℃於攪拌下加入三叔丁氧基氫化鋁鋰(1M,0.51mL,0.5mmol)。將混合物在0℃攪拌下2小時。反應結束後加入水(10mL)，用乙酸乙酯萃取(15mL x 3)，用無水硫酸鈉乾燥得到(2r,3aR,5r,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-醇9H(120mg，粗產品)。
第八步：甲磺酸(2r,3aR,5r,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基酯(9I)
Figure 110145234-A0101-12-0093-473
將(2r,3aR,5r,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-醇9H(120mg，0.28mmol)溶於二氯甲烷(3mL)，然後於攪拌下加入三乙胺(56mg,0.56mmol)。將混合物在0℃攪拌下加入甲基磺醯氯(38mg，0.33mmol)。將混合物在氮氣保護下於室溫攪拌3小時。反應結束後濃縮反應液得到黃色油狀甲磺酸(2r,3aR,5r,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基酯9I(150mg，粗產品)。
第九步：N-((2r,3aR,5s,6aS)-5-疊氮基八氫並環戊二烯-2-基)-N-甲基-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-胺(9J)
Figure 110145234-A0101-12-0094-474
將甲磺酸(2r,3aR,5r,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基酯9I(80mg，0.198mmol)溶於乙腈(3mL)，然後於攪拌下加入四丁基疊氮化胺(112mg,0.396mmol)。將混合物在氮氣保護下於90℃攪拌3小時。反應結束後濃縮反應混合物，粗產品用矽膠柱色譜分離提純(乙酸乙酯/石油醚(v/v)=0-10%)得到無色油狀化合物N-((2r,3aR,5s,6aS)-5-疊氮基八氫並環戊二烯-2-基)-N-甲基-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-胺9J(60mg，產率83.8%)。
第十步：(2s,3aR,5r,6aS)-N2-甲基-N2-(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)八氫並環戊二烯-2,5-二胺(9K)
Figure 110145234-A0101-12-0094-475
將化合物N-((2r,3aR,5s,6aS)-5-疊氮基八氫並環戊二烯-2-基)-N-甲基-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-胺9J(60mg，0.13mmol)溶於乙酸乙酯(3mL)，然後於攪拌下加入10%的濕鈀/炭(10mg)。混合物在氫氣下於室溫攪拌16小時。反應結束後過濾濃縮反應混合物，粗產品用矽膠板色譜分離提純(甲醇/二氯甲烷 (v/v)=5%+0.5%氨水)得到白色固體化合物(2s,3aR,5r,6aS)-N2-甲基-N2-(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)八氫並環戊二烯-2,5-二胺9K(37mg，產率65.4%)。
第十一步：N-((2s,3aR,5r,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)丙烷-1-磺醯胺(9L)
Figure 110145234-A0101-12-0095-476
將(2s,3aR,5r,6aS)-N2-甲基-N2-(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)八氫並環戊二烯-2,5-二胺9K(150mg，0.35mmol)溶於二氯甲烷(3mL)，然後於攪拌下加入三乙胺(71mg，0.7mmol)和丙基磺醯氯(75mg，0.52mmol)。將混合物在室溫攪拌下反應4小時。反應結束後濃縮反應混合物，粗產品用矽膠柱色譜分離提純(甲醇/二氯甲烷(v/v)=0-5%)得到N-((2s,3aR,5r,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)丙烷-1-磺醯胺9L(200mg，收率88.9%)。
MS m/z(ESI)：532.0[M+1].
第十二步：N-((2s,3aR,5r,6aS)-5-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)丙烷-1-磺醯胺(化合物9)
Figure 110145234-A0101-12-0096-477
將N-((2s,3aR,5r,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)丙烷-1-磺醯胺9L(200mg，0.37mmol)溶於四氫呋喃(2mL)，攪拌下加入氫氧化鈉溶液(1M,2mL)，將混合物在60℃下攪拌2小時。反應結束後濃縮，通過製備型HPLC純化，凍乾得到白色固體化合物N-((2s,3aR,5r,6aS)-5-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)丙烷-1-磺醯胺(化合物9)(48.5mg，收率33.8%)。
MS m/z(ESI)：378.3[M+1].
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 8.13(s,1 H),7.12(d,1 H),6.67(d,1 H),5.32-5.15(m,1 H),3.99-3.83(m,1 H),3.23(s,3 H),3.11-2.95(m,2 H),2.80(s,2 H),2.15-1.90(m,4 H),1.88-1.60(m,6 H),1.07(t,3 H).
實施例10
6-(5-氰基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-1-甲醯胺(化合物10)
Figure 110145234-A0101-12-0097-478
第一步：4-氯-1-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-5-甲腈(10A)
Figure 110145234-A0101-12-0097-479
在一個1000mL的三口圓底燒瓶中加入氫化鈉(60%)(337mg,8.45mmol)，溶於THF(10mL)中，氮氣保護下降溫至0℃。將4-氯-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-5-甲腈1A(1g,5.63mmol)溶於THF中，緩慢加入其中，於0℃反應30分鐘。然後緩慢加入(2-(氯甲氧基)乙基)三甲基矽烷(1.13g，6.76mmol)，於室溫反應2小時。加入飽和NH4Cl(100mL)溶液，用乙酸乙酯(100mL×3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過矽膠柱純化(石油醚：乙酸乙酯=1：20-1：10)得到黃色油狀的化合物4-氯-1-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-5-甲腈10A(1.2g，收率69.22%)。
MS m/z(ESI)：308.0[M+1].
第二步：6-(5-氰基-1-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-1-羧酸叔丁基酯(10B)
Figure 110145234-A0101-12-0098-480
將4-氯-1-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-5-甲腈10A(700mg，2.27mmol)和1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-1-羧酸叔丁酯(463mg,2.05mmol)溶於DMF(10ml)，然後加入DIEA(0.82mL，4.55mmol)，氮氣保護下於100℃反應16h。反應完畢後，濃縮反應液，殘餘物中加入乙酸乙酯(30mL)，用水(20mL×3)洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥。過濾，濃縮，殘留物通過矽膠柱純化(石油醚：乙酸乙酯=1：5-1：3)得到黃色油狀的化合物6-(5-氰基-1-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-1-羧酸叔丁基酯10B(830mg，收率73.34%)。
MS m/z(ESI)：498.0[M+1].
第三步：4-(1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-6-基)-1-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-5-甲腈(10C)
Figure 110145234-A0101-12-0098-481
將6-(5-氰基-1-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-1-羧酸叔丁基酯10B(830mg,1.67mmol)溶於HCl/EA(3mL)，反應16h。反應結束後真空旋乾反應混合物，得到4-(1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-6-基)-1-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-5-甲腈10C(600mg，粗品)。
MS m/z(ESI)：398.0[M+1].
第四步：6-(5-氰基-1-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-1-甲醯胺(10D)
Figure 110145234-A0101-12-0099-482
將4-(1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-6-基)-1-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-5-甲腈10C(300mg，0.75mmol)溶於DMF(10mL)，然後加入(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基甲酸苯基酯(284mg，1.13mmol)和三乙胺(0.21mL，1.51mmol)。將混合物在60℃攪拌下反應2小時。濃縮反應混合物，粗產品用矽膠柱色譜分離提純(石油醚/乙酸乙酯(v/v)=30-50%)得到無色油狀的化合物6-(5-氰基-1-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5- 基)-1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-1-甲醯胺10D(180mg，收率43%)。
MS m/z(ESI)：555.0[M+1].
第五步：6-(5-氰基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-1-甲醯胺(化合物10)
Figure 110145234-A0101-12-0100-483
將6-(5-氰基-1-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-1-甲醯胺10D(180mg，0.33mmol)溶於二氯甲烷(2mL)，然後在攪拌下加入三氟乙酸(1mL)。將混合物在室溫下攪拌2小時，然後旋乾。將旋乾後的混合物溶於四氫呋喃(3mL)並加入氨水(1mL)，在室溫下攪拌30分鐘。反應結束後濃縮，通過製備型HPLC純化，凍乾得到白色固體化合物6-(5-氰基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-1-甲醯胺(化合物10)(8.6mg，6.24%)。
MS m/z(ESI)：425.2[M+1].
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 12.06(s,1H),11.63(s,1H),8.26(s,1H),7.46-7.37(m,1H),6.63-6.57(m,1H),4.12(d,J =11.6Hz,1H),4.03(t,J=7.2Hz,2H),3.88(d,J=11.6Hz,5H),3.18(t,J=11.2Hz,1H),2.38-2.29(m,1H),2.13-2.03(m,3H),1.83(s,2H).
實施例11
(3aR,5s,6aS)-5-((5-氰基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)(甲基)氨基)-N-(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺(化合物11)
Figure 110145234-A0101-12-0101-484
第一步：4-氯-1-甲苯磺醯基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-5-甲腈(11A)
Figure 110145234-A0101-12-0101-485
在一個250mL的三口圓底燒瓶中加入氫化鈉(60%)(495mg,12.4mmol)，溶於THF(10mL)中，於氮氣保護下降溫至0℃，將4-氯-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-5-甲腈1A(1.1g,6.2mmol)溶於THF 中，然後緩慢加入，於0℃反應30分鐘。緩慢加入4-甲基苯磺醯氯(1.54g，8.01mmol)，室溫反應2小時。加入飽和NH4Cl(20mL)溶液，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過矽膠柱純化(石油醚：乙酸乙酯=1：20-1：10)得到白色固體的化合物4-氯-1-甲苯磺醯基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-5-甲腈11A(1.8g，收率87%)。
MS m/z(ESI)：332.0[M+1].
第二步：(3aR,5s,6aS)-5-((5-氰基-1-甲苯磺醯基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)(甲基)氨基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁基酯(11B)
Figure 110145234-A0101-12-0102-486
將4-氯-1-甲苯磺醯基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-5-甲腈11A(450mg，1.36mmol)和(3aR,5s,6aS)-5-(甲基氨基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁酯(359mg，1.49mmol)溶於DMF(5mL)，然後加入DIEA(0.36mL，2.03mmol)，氮氣保護下於100℃反應16h。反應完畢後，濃縮反應液，加水(20mL)，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過矽膠柱純化(石油醚：乙酸乙酯=1：4-1：3)得到白色固體的化合物(3aR,5s,6aS)-5-((5-氰基-1-甲苯磺醯基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶 -4-基)(甲基)氨基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁基酯11B(420mg，收率57.8%)。
MS m/z(ESI)：536.0[M+1].
第三步：4-(甲基((3aR,5s,6aS)-八氫環戊二烯並[c]吡咯-5-基)氨基)-1-甲苯磺醯基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-5-甲腈(11C)
Figure 110145234-A0101-12-0103-487
將(3aR,5s,6aS)-5-((5-氰基-1-甲苯磺醯基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)(甲基)氨基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁基酯11B(420mg,0.78mmol)溶於DCM(3mL)，加入叔丁基二甲基甲矽烷基三氟甲磺酸酯(0.25mg,0.94mmol)，室溫攪拌3h。真空旋乾反應混合物，殘留物通過矽膠柱純化(二氯甲烷：甲醇=1：15-1：10)得到白色固體的化合物4-(甲基((3aR,5s,6aS)-八氫環戊二烯並[c]吡咯-5-基)氨基)-1-甲苯磺醯基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-5-甲腈11C(280mg，收率82%)。
MS m/z(ESI)：436.0[M+1].
第四步：(3aR,5s,6aS)-5-((5-氰基-1-甲苯磺醯基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)(甲基)氨基)-N-(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺(11D)
Figure 110145234-A0101-12-0104-488
將4-(甲基((3aR,5s,6aS)-八氫環戊二烯並[c]吡咯-5-基)氨基)-1-甲苯磺醯基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-5-甲腈11C(140mg，0.32mmol)和(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基甲酸苯基酯(95mg，0.35mmol)溶於DMF(3mL)，然後加入三乙胺(0.1mL，0.64mmol)，氮氣保護下於60℃反應3h。濃縮反應混合物，粗產品用矽膠柱色譜分離提純(二氯甲烷/甲醇(v/v)=1：50-1：20)得到白色固體的化合物(3aR,5s,6aS)-5-((5-氰基-1-甲苯磺醯基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)(甲基)氨基)-N-(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺11D(118mg，收率60%)。
MS m/z(ESI)：609.0[M+1].
第五步：(3aR,5s,6aS)-5-((5-氰基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)(甲基)氨基)-N-(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺(化合物11)
Figure 110145234-A0101-12-0104-489
將(3aR,5s,6aS)-5-((5-氰基-1-甲苯磺醯基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)(甲基)氨基)-N-(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)六 氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺11D(118mg，0.19mmol)溶於四氫呋喃(3mL)，攪拌下加入氫氧化鈉(1M)溶液(1mL)，然後加入甲醇(0.1mL)，在60℃下攪拌1小時。反應結束後濃縮反應混合物，殘餘物通過製備型HPLC純化，凍乾得到白色固體化合物：(3aR,5s,6aS)-5-((5-氰基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)(甲基)氨基)-N-(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺(化合物11)(3.5mg，3.9%)。
MS m/z(ESI)：455.1[M+1].
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 11.93(s,1 H),11.64(s,1 H),8.15(s,1 H),7.28-7.27(m,1 H),6.66-6.64(m,1H),4.78-4.70(q,1 H),3.68-3.66(d,2 H),3.20(s,2 H),2.88(m,2 H),2.56(s,2 H),2.19-2.08(m,2H),1.91-1.85(m,2 H).
實施例12
(3aR,5s,6aS)-5-((5-氰基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)(甲基)氨基)-N-(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺(化合物12)
Figure 110145234-A0101-12-0105-490
第一步：(3aR,5s,6aS)-5-((5-氰基-1-甲苯磺醯基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)(甲基)氨基)-N-(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基) 六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺(12A)
Figure 110145234-A0101-12-0106-234
將4-(甲基((3aR,5s,6aS)-八氫環戊二烯並[c]吡咯-5-基)氨基)-1-甲苯磺醯基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-5-甲腈11C(140mg，0.32mmol)和(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基甲酸苯基酯(99mg，0.35mmol)溶於DMF(3mL)，然後加入三乙胺(0.1mL，0.64mmol)，氮氣保護下於60℃反應3h。濃縮，粗產品用矽膠柱色譜分離提純(二氯甲烷/甲醇(v/v)=1：50-1：20)得到白色固體的化合物(3aR,5s,6aS)-5-((5-氰基-1-甲苯磺醯基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)(甲基)氨基)-N-(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺12A(120mg，收率60%)。
MS m/z(ESI)：623.0[M+1].
第二步：(3aR,5s,6aS)-5-((5-氰基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)(甲基)氨基)-N-(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺(化合物12)
Figure 110145234-A0101-12-0106-491
將(3aR,5s,6aS)-5-((5-氰基-1-甲苯磺醯基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)(甲基)氨基)-N-(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺12A(120mg，0.19mmol)溶於四氫呋喃(3mL)，於攪拌下加入氫氧化鈉溶液(1M,1mL)，然後加入甲醇(0.1mL)，在60℃攪拌1小時。反應結束後濃縮反應混合物，殘餘物通過製備型HPLC純化，凍乾得到白色固體化合物(3aR,5s,6aS)-5-((5-氰基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)(甲基)氨基)-N-(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺(化合物12)(8.5mg，9.4%)。
MS m/z(ESI)：469.1[M+1].
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 11.93(s,1 H),8.15(s,1 H),7.27(s,1 H),6.65(d,1 H),4.80-4.69(m,1 H),3.67(s,2 H),3.35(s,2 H),3.20(s,3 H),3.14-3.08(m,2 H),2.87(s,2 H),2.21-2.11(m,2 H),1.91-1.83(m,2 H),1.32(t,3 H).
實施例13
(3aR,5s,6aS)-5-(咪唑並[4,5-d]吡咯並[2,3-b]吡啶-1(6H)-基)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺(化合物13)
Figure 110145234-A0101-12-0108-284
第一步：(3aR,5r,6aS)-5-羥基六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁酯(13B)
Figure 110145234-A0101-12-0108-236
將5-氧代六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁酯13A(2g，8.88mmol)溶於THF(15mL)，降溫至0℃，慢慢加入三叔丁氧基氫化鋰鋁(8.8mL，17.76mmol)，室溫反應3h。向反應混合物中加入水(30mL)，用乙酸乙酯(30mL×3)萃取。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，得到粗品無色油狀化合物(3aR,5r,6aS)-5-羥基六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁酯13B(2.4g，粗品)。
第二步：(3aR,5r,6aS)-5-((甲磺醯基)氧基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁酯(13C)
Figure 110145234-A0101-12-0109-237
將(3aR,5r,6aS)-5-羥基六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁酯13B(2.4g，10.56mmol)溶於DCM(25mL)，降溫至0℃，加入三乙胺(2.23mL，15.84mmol)，然後慢慢加入甲烷磺醯氯(1.45g，12.67mmol)，室溫反應2h。濃縮反應混合物，得到粗品無色油狀化合物(3aR,5r,6aS)-5-((甲磺醯基)氧基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁酯13C(3g，粗品)。
第三步：(3aR,5s,6aS)-5-疊氮基六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁基酯(13D)
Figure 110145234-A0101-12-0109-238
將(3aR,5r,6aS)-5-((甲磺醯基)氧基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁酯13C(7.2g，粗品)和四丁基疊氮化銨(4.02g，14.15mmol)溶於乙腈(30mL)，氮氣保護下於90℃反應4h。反應完畢後，濃縮反應液，殘留物通過矽膠柱純化(石油醚：乙酸乙酯=1：15-1：10)得到黃色油狀化合物(3aR,5s,6aS)-5-疊氮基六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁基酯13D(3.5g)。
第四步：(3aR,5s,6aS)-5-氨基六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁酯(13E)
Figure 110145234-A0101-12-0110-239
將(3aR,5s,6aS)-5-疊氮基六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁基酯13D(3.5g，13.87mmol)溶於甲醇(30mL)，加入Pd/C(350mg，10%)，氫氣保護下反應16h。反應完畢後用矽藻土過濾掉Pd/C，濃縮濾液。殘留物通過矽膠柱純化(二氯甲烷：甲醇=1：10~1：8)得到黃色油狀化合物(3aR,5s,6aS)-5-氨基六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁酯13E(2.9g，92.38%)。
第五步：(3aR,5s,6aS)-5-((5-硝基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)氨基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁基酯(13G)
Figure 110145234-A0101-12-0110-240
將(3aR,5s,6aS)-5-氨基六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁酯13E(1.1g，4.86mmol)和4-氯-5-硝基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶13F(1.81g，5.35mmol)溶於異丙醇(30mL)，然後加入DIEA(1.31mL，7.29mmol)，氮氣保護下100℃反應16h。反應完畢後，濃縮反應液，加水(50mL)，用乙酸乙酯(50mL× 3)萃取。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮。殘留物通過矽膠柱純化(石油醚/乙酸乙酯=1：4~1：3)得到黃色固體的化合物(3aR,5s,6aS)-5-((5-硝基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)氨基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁基酯13G(990mg，收率38.6%)。
MS m/z(ESI)：528.0[M+1].
第六步：5-硝基-N-((3aR,5s,6aS)-八氫環戊二烯並[c]吡咯-5-基)-1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-胺(13H)
Figure 110145234-A0101-12-0111-241
將(3aR,5s,6aS)-5-((5-硝基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)氨基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁基酯13G(300mg,0.57mmol)溶於DCM(3mL)，然後加入叔丁基二甲基甲矽烷基三氟甲磺酸酯(180mg,0.68mmol)，室溫攪拌3h。然後真空旋乾，殘留物通過矽膠柱純化(二氯甲烷：甲醇=1：15-1：10)得到白色固體的化合物5-硝基-N-((3aR,5s,6aS)-八氫環戊二烯並[c]吡咯-5-基)-1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-胺13H(240mg，收率98%)。
MS m/z(ESI)：427.0[M+1].
第七步：(3aR,5s,6aS)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5- 基)-5-((5-硝基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)氨基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺(13I)
Figure 110145234-A0101-12-0112-242
將5-硝基-N-((3aR,5s,6aS)-八氫環戊二烯並[c]吡咯-5-基)-1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-胺13H(240mg，0.562mmol)和(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基甲酸苯基酯(155mg，0.62mmol)溶於DMF(3mL)，然後加入三乙胺(0.12mL，0.84mmol)，氮氣保護下於60℃反應3h。濃縮反應混合物，粗產品用矽膠柱色譜分離提純(二氯甲烷/甲醇(v/v)=1：50-1：25)得到黃色固體的化合物(3aR,5s,6aS)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5-((5-硝基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)氨基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺13I(275mg，收率83.8%)。
MS m/z(ESI)：585.0[M+1].
第八步：(3aR,5s,6aS)-5-((5-氨基-1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)氨基)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺(13J)
Figure 110145234-A0101-12-0113-243
將(3aR,5s,6aS)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5-((5-硝基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)氨基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺13I(275mg，0.47mmol)，鐵粉(131mg，2.35mmol)溶於乙醇(5mL)，然後加入飽和氯化銨水溶液(2mL)，在60℃下攪拌3小時。用矽藻土過濾反應液，濃縮，殘餘物用矽膠柱色譜分離提純(二氯甲烷/甲醇(v/v)=1：12-1：10)得到淡黃色固體的化合物(3aR,5s,6aS)-5-((5-氨基-1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)氨基)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺13J(160mg，收率61.3%)。
MS m/z(ESI)：555.0[M+1].
第九步：(3aR,5s,6aS)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5-(6-(苯磺醯基)咪唑並[4,5-d]吡咯並[2,3-b]吡啶-1(6H)-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺(13K)
Figure 110145234-A0101-12-0113-244
將(3aR,5s,6aS)-5-((5-氨基-1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)氨基)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺13J(120mg，0.22mmol)，原甲酸三乙酯(Triethoxymethane)(160mg，1.08mmol)和對甲苯磺酸(7.45mg，0.043mmol)溶於甲苯(3mL)，在105℃下攪拌4小時。反應結束後濃縮反應混合物，殘餘物用矽膠柱色譜分離提純(二氯甲烷：甲醇(v/v)=1：20-1：15)得到淡黃色固體的化合物(3aR,5s,6aS)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5-(6-(苯磺醯基)咪唑並[4,5-d]吡咯並[2,3-b]吡啶-1(6H)-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺13K(65mg，收率53.2%)。
MS m/z(ESI)：565.0[M+1].
第十步：(3aR,5s,6aS)-5-(咪唑並[4,5-d]吡咯並[2,3-b]吡啶-1(6H)-基)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺(化合物13)
Figure 110145234-A0101-12-0114-104
將(3aR,5s,6aS)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5-(6-(苯磺醯基)咪唑並[4,5-d]吡咯並[2,3-b]吡啶-1(6H)-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺13K(65mg，0.12mmol)溶於四氫呋喃(2mL)，攪拌下加入氫氧化鈉溶液(1M,1mL)，並加入甲醇 (0.1mL)，在60℃下攪拌1小時。反應結束後濃縮反應混合物，殘餘物通過製備型HPLC純化，凍乾得到白色固體化合物(3aR,5s,6aS)-5-(咪唑並[4,5-d]吡咯並[2,3-b]吡啶-1(6H)-基)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺(化合物13)(9.2mg，18.8%)。
MS m/z(ESI)：425.1[M+1].
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 11.85(s,1 H),8.57(s,1 H),8.31(s,1 H),7.43(s,1 H),6.71(s,1H),5.28(m,1 H),3.88(s,3H),3.70(s,2H),3.52(s,3H),3.04(s,2H),2.40(s,2H),2.20(s,2H).
實施例14
(3aR,5s,6aS)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5-(2-甲基咪唑並[4,5-d]吡咯並[2,3-b]吡啶-1(6H)-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺(化合物14)
Figure 110145234-A0101-12-0115-285
第一步：(3aR,5s,6aS)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5-(2-甲基-6-(苯磺醯基)咪唑並[4,5-d]吡咯並[2,3-b]吡啶-1(6H)-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺(14A)
Figure 110145234-A0101-12-0116-245
將((3aR,5s,6aS)-5-((5-氨基-1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)氨基)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺13J(220mg，0.39mmol)，原乙酸三乙酯(triethyl orthoacetate)(322mg，1.98mmol)和對甲苯磺酸(13.7mg，0.079mmol)溶於甲苯(3mL)，在105℃下攪拌4小時。反應結束後濃縮反應混合物，殘餘物用矽膠柱色譜分離提純(二氯甲烷/甲醇(v/v)=1：20-1：15)得到淡黃色固體的化合物(3aR,5s,6aS)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5-(2-甲基-6-(苯磺醯基)咪唑並[4,5-d]吡咯並[2,3-b]吡啶-1(6H)-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺14A(60mg，收率26.1%)。
MS m/z(ESI)：579.0[M+1].
第二步：(3aR,5s,6aS)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5-(2-甲基咪唑並[4,5-d]吡咯並[2,3-b]吡啶-1(6H)-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺(化合物14)
Figure 110145234-A0101-12-0117-105
將(3aR,5s,6aS)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5-(2-甲基-6-(苯磺醯基)咪唑並[4,5-d]吡咯並[2,3-b]吡啶-1(6H)-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺14A(60mg，0.10mmol)溶於四氫呋喃(2mL)，然後在攪拌下加入氫氧化鈉溶液(1M,1mL)，並加入甲醇(0.1mL)，在60℃下攪拌1小時。反應結束後濃縮反應混合物，通過製備型HPLC純化，凍乾得到白色固體化合物(3aR,5s,6aS)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5-(2-甲基咪唑並[4,5-d]吡咯並[2,3-b]吡啶-1(6H)-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺(化合物14)(4.3mg，9.46%)。
MS m/z(ESI)：439.1[M+1].
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 11.82(s,1 H),8.46(s,1 H),7.44(s,1 H),6.50(s,1 H),5.32-5.18(m,1 H),3.90(s,3 H),3.83(s,2 H),3.47(d,2 H),3.23(s,3 H),2.63(s,3 H),2.56(d,2 H),2.16-2.06(m,2 H).
實施例15
(3aR,5s,6aS)-5-(2-((R)-1-羥乙基)咪唑並[4,5-d]吡咯並[2,3-b]吡啶-1(6H)-基)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)六氫環戊二 烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺(化合物15)
Figure 110145234-A0101-12-0118-286
第一步：(3aR,5s,6aS)-5-(2-((R)-1-羥乙基)-6-(苯磺醯基)咪唑並[4,5-d]吡咯並[2,3-b]吡啶-1(6H)-基)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺(15A)
Figure 110145234-A0101-12-0118-246
將3aR,5s,6aS)-5-((5-氨基-1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)氨基)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺13J(150mg，0.27mmol)溶於(R)-乳酸((R)-lactate)(0.5mL)，然後在125℃下攪拌3小時。反應結束後加水(10mL)，用乙酸乙酯(10mL×3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥。過濾，濃縮，殘餘物用矽膠柱色譜分離提純(二氯甲烷/甲醇(v/v)=1：12-1：10)得到白色固體的化合物(3aR,5s,6aS)-5-(2-((R)-1-羥乙基)-6-(苯磺醯基)咪唑並[4,5-d]吡咯並[2,3-b]吡啶-1(6H)-基)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)六氫環戊 二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺15A(40mg，收率24.3%)。
MS m/z(ESI)：609.0[M+1].
第二步：(3aR,5s,6aS)-5-(2-((R)-1-羥乙基)咪唑並[4,5-d]吡咯並[2,3-b]吡啶-1(6H)-基)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺(化合物15)
Figure 110145234-A0101-12-0119-106
攪拌下，將(3aR,5s,6aS)-5-(2-((R)-1-羥乙基)-6-(苯磺醯基)咪唑並[4,5-d]吡咯並[2,3-b]吡啶-1(6H)-基)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺15A(40mg，0.067mmol)溶於四氫呋喃(1mL)，然後加入氫氧化鈉溶液(1M,1mL)並加入甲醇(0.1mL)，在60℃下攪拌1小時。反應結束後濃縮，通過製備型HPLC純化，凍乾得到白色固體化合物(3aR,5s,6aS)-5-(2-((R)-1-羥乙基)咪唑並[4,5-d]吡咯並[2,3-b]吡啶-1(6H)-基)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺(化合物15)(2.2mg，7.15%)。
MS m/z(ESI)：469.1[M+1].
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 11.88(s,1 H),8.56(s,1 H),7.47(s,1 H),6.50(s,1 H),5.65(d,2 H),5.17(s,1 H),3.87(s,6 H),3.17(s,2 H),2.66(s,2 H),2.62(s,4H),2.07(s,2 H),1.61(d,3 H).
實施例16
1-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-((2r,3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)脲(化合物16)
Figure 110145234-A0101-12-0120-287
第一步：1-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-((2r,3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)脲(16A)
Figure 110145234-A0101-12-0120-248
攪拌下將(2s,3aR,5r,6aS)-N2-甲基-N2-(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)八氫並環戊二烯-2,5-二胺9K(150mg，0.35mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(3mL)，然後加入三乙胺(71mg，0.7mmol)和(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基甲酸苯基酯(88mg，0.35mmol)。將混合物在60℃攪拌下反應數小時。反應結束後濃縮，粗產品用矽膠柱色譜分離提純(乙酸乙酯/石油醚(v/v)= 0-40%)得到1-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-((2r,3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)脲16A(150mg，收率73%)。
MS m/z(ESI)：583.0[M+1].
第二步：1-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-((2r,3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)脲(化合物16)
Figure 110145234-A0101-12-0121-107
攪拌下，將1-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-((2r,3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)脲16A(150mg，0.25mmol)溶於四氫呋喃(2mL)，然後加入氫氧化鈉溶液(1M,1mL)。然後將混合物在60℃下攪拌2小時。反應結束後濃縮，通過製備型HPLC純化，凍乾得到白色固體化合物1-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-((2r,3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)脲(化合物16)(34mg，收率30.8%)。
MS m/z(ESI)：429.2[M+1].
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 11.66(s,1 H),10.87(s,1 H),8.13(s,1 H),7.20-7.12(m,1 H),6.79(s,1 H),6.58(s,1 H), 5.29(s,1 H),4.14(d,1 H),3.88(s,3 H),3.16(s,3 H),2.68(s,2 H),2.06-1.92(m,2 H),1.90-1.77(m,2 H),1.67-1.50(m,4 H).
實施例17
(3aR,5s,6aS)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5-(2-氧代-3,6-二氫咪唑並[4,5-d]吡咯並[2,3-b]吡啶-1(2H)-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-甲醯胺(化合物17)
Figure 110145234-A0101-12-0122-288
第一步：(3aR,5s,6aS)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5-(2-氧代-6-(苯基磺醯基)-3,6-二氫咪唑[4,5-d]吡咯並[2,3-b]吡啶-1(2H)-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺17A
Figure 110145234-A0101-12-0122-249
將(3aR,5s,6aS)-5-((5-氨基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)氨基)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-甲醯胺13J(250mg,0.45mmol)和三光氣(triphosgene)(268mg,0.90mmol)溶於DCM(6mL)中，並將反應 溶液在氮氣保護下在冰浴0℃攪拌反應3小時。反應結束後旋乾溶劑，粗產品用矽膠柱色譜分離提純(二氯甲烷/甲醇(v/v)=0-10%)，得到白色固體化合物(3aR,5s,6aS)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5-(2-氧代-6-(苯基磺醯基)-3,6-二氫咪唑[4,5-d]吡咯並[2,3-b]吡啶-1(2H)-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺17A(160mg，產率：61%)
MS m/z(ESI)：581.1[M+1]
第二步：(3aR,5s,6aS)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5-(2-氧代-3,6-二氫咪唑並[4,5-d]吡咯並[2,3-b]吡啶-1(2H)-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-甲醯胺(化合物17)
Figure 110145234-A0101-12-0123-108
將(3aR,5s,6aS)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5-(2-氧代-6-(苯基磺醯基)-3,6-二氫咪唑[4,5-d]吡咯並[2,3-b]吡啶-1(2H)-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺17A(160mg，0.28mmol)和氫氧化鈉(22mg,0.55mmol)溶於四氫呋喃/水(1v/1v,10mL)中。將混合物在油浴60℃下攪拌反應1h。反應結束後旋乾溶劑，粗產品通過製備型HPLC純化，凍乾得到白色固體化合物(3aR,5s,6aS)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5-(2-氧代-3,6-二氫 咪唑並[4,5-d]吡咯並[2,3-b]吡啶-1(2H)-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-甲醯胺(化合物17)(63mg，收率：51%)。
MS m/z(ESI)：441.3[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 11.59(s,1 H),10.92(s,1 H),7.92(s,1 H),7.43-7.37(m,1 H),6.53(dd,1 H),5.18-5.09(m,1 H),3.90(s,3 H),3.72-3.68(m,2 H),3.46-3.43(m,2 H),3.10(s,2 H),2.63-2.54(m,3 H),1.99-1.90(m,2 H).
實施例18
N-((2r,3aR,5r,6aS)-5-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)丙烷-1-磺醯胺(化合物18)
Figure 110145234-A0101-12-0124-289
第一步：(2s,3aR,5s,6aS)-N2-甲基-N2-(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)八氫並環戊二烯-2,5-二胺18A
Figure 110145234-A0101-12-0124-250
將(3aR,5r,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)六氫並環戊二烯-2(1H)-酮9G(680mg，1.60mmol) 溶於甲醇(5mL)，於室溫攪拌下加入甲酸銨(200mg,3.20mmol)，將混合物在室溫攪拌下2小時。然後加入氰基硼氫化鈉(503mg，8.0mmol)，並將混合物在室溫下攪拌16小時。反應結束後旋乾。加入水(10mL)，乙酸乙酯萃取(15mL x 3)，無水硫酸鈉乾燥有機相。粗產品用矽膠柱色譜分離提純(甲醇/二氯甲烷(v/v)=0-5%)得到無色油狀化合物(2s,3aR,5s,6aS)-N2-甲基-N2-(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)八氫並環戊二烯-2,5-二胺18A(500mg，產率73.3%)。
MS m/z(ESI)：426.1[M+1]
第二步：N-((2r,3aR,5r,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)丙烷-1-磺醯胺18B
Figure 110145234-A0101-12-0125-251
將(2s,3aR,5s,6aS)-N2-甲基-N2-(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)八氫並環戊二烯-2,5-二胺18A(500mg，1.17mmol)溶於二氯甲烷(5mL)，於攪拌下加入三乙胺(0.33mL，2.35mmol)和丙基磺醯氯(251mg，1.76mmol)，將混合物在室溫攪拌下反應16小時。反應結束後濃縮，加入水(10mL)，乙酸乙酯萃取(15mL x 3)，無水硫酸鈉乾燥有機相。粗產品用矽膠柱色譜分離 提純(乙酸乙酯/石油醚(v/v)=0-50%)得到N-((2r,3aR,5r,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)丙烷-1-磺醯胺18B(200mg，收率32%)。
MS m/z(ESI)：532.2[M+1]
第三步：N-((2r,3aR,5r,6aS)-5-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)丙烷-1-磺醯胺(化合物18)
Figure 110145234-A0101-12-0126-110
將N-((2r,3aR,5r,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)丙烷-1-磺醯胺18B(200mg，0.37mmol)溶於四氫呋喃(2mL)，於攪拌下加入1M的氫氧化鈉溶液(2mL)，並將混合物在60℃下攪拌2小時。反應結束後濃縮，通過製備型HPLC純化，凍乾得到白色固體化合物N-((2r,3aR,5r,6aS)-5-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)丙烷-1-磺醯胺(化合物18)(23mg，收率16%)。
MS m/z(ESI)：378.3[M+1]
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 11.62(s,1 H),8.11(s,1 H),7.25(d,1 H),7.13(d,1 H),6.58(d,1 H),5.35(s,1 H),3.14(s,3 H),3.02-2.90(m,2 H),2.48-2.40(m,2 H),2.23-2.12(m,2 H),1.92- 1.80(m,2 H),1.74-1.62(m,2 H),1.56-1.48(m,2 H),1.26-1.15(m,2 H),0.98(t,3 H).
實施例19
1-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-((2s,3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)脲(化合物19)
Figure 110145234-A0101-12-0127-290
第一步：1-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-((2s,3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)脲19A
Figure 110145234-A0101-12-0127-252
將化合物((2s,3aR,5s,6aS)-N2-甲基-N2-(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)八氫並環戊二烯-2,5-二胺18A(280 mg，0.65mmol)，(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基甲酸苯基酯(250mg，0.98mmol)，三乙胺(0.18mL,1.32mmol)溶於DMF(5mL)，並將混合物在氮氣保護下在60℃攪拌2小時。反應結束後濃縮反應液，加入水10mL水，乙酸乙酯萃取(10mL x 3)，無水硫酸鈉乾燥有機相。粗產品用矽膠柱色譜分離提純(乙酸乙酯/石油醚(v/v)=0-50%)得到白色固體化合物1-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-((2s,3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)脲19A(80mg，產率20.8%)。
MS m/z(ESI)：583.1[M+1]
第二步：(1-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-((2s,3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)脲(化合物19)
Figure 110145234-A0101-12-0128-111
將1-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-((2s,3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)脲19A(80mg,0.13mmol)溶於四氫呋喃(1mL)，於攪拌下加入1M的氫氧化鈉溶液(1mL)，並將混合物在60℃下攪拌2小時。反應結束後濃縮，通過製備型 HPLC純化，凍乾得到白色固體化合物(1-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-((2s,3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)脲(化合物19)(8mg，收率13.6%)。
MS m/z(ESI)：429.2[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 11.66(s,1 H),11.02(s,1 H),8.13(s,1 H),7.15-7.12(m,1 H),7.12-7.05(m,1 H),6.59(d,1 H),5.39(s,1 H),3.88(s,3 H),3.84-3.72(m,1 H),3.16(s,3 H),2.57-2.51(m,2 H),2.26-2.10(m,2 H),1.94-1.80(m,2 H),1.62-1.46(m,2 H),1.20-1.16(m,2 H).
實施例20
1-((2r,3aR,5s,6aS)-5-(咪唑並[4,5-d]吡咯並[2,3-b]吡啶-1(6H)-基)八氫並環戊二烯-2-基)-3-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)脲(化合物20)
Figure 110145234-A0101-12-0129-291
第一步：(3aR,5r,6aS)-5-疊氮基-5',5'-二甲基六氫-1H-螺[並環戊二烯-2,2'-[1,3]二噁烷]20A
Figure 110145234-A0101-12-0130-253
將甲磺酸(3aR,5s,6aS)-5',5’-二甲基六氫-1H-螺[並環戊二烯-2,2'-[1,3]二噁烷]-5-基酯9D(16g，粗品)和四丁基疊氮化銨(22.4g，78.84mmol)溶於乙腈(30mL)，於氮氣保護下在90℃反應4h。反應完畢後，濃縮反應液，殘留物通過矽膠柱純化(石油醚/乙酸乙酯=1：15~1：10)得到黃色油狀化合物(3aR,5r,6aS)-5-疊氮基-5',5'-二甲基六氫-1H-螺[並環戊二烯-2,2'-[1,3]二噁烷]20A(7.08g，收率：53.8%)。
第二步：(3aR,5r,6aS)-5’,5’-二甲基六氫-1H-螺[並環戊二烯-2,2'-[1,3]二噁烷]-5-胺20B
Figure 110145234-A0101-12-0130-255
將(3aR,5r,6aS)-5-疊氮基-5',5'-二甲基六氫-1H-螺[並環戊二烯-2,2'-[1,3]二噁烷]20A(7.08g，28.2mmol)溶於甲醇(50)，加入Pd/C 700mg，10%)，並在氫氣保護下反應16h。反應完畢後， 用矽藻土過濾掉Pd/C，濃縮濾液，得到黃色油狀化合物(3aR,5r,6aS)-5’,5’-二甲基六氫-1H-螺[並環戊二烯-2,2'-[1,3]二噁烷]-5-胺20B(6.3g，粗產品)。
第三步：N-((3aR,5r,6aS)-5’,5’-二甲基六氫-1H-螺[並環戊二烯-2,2'-[1,3]二噁烷]-5-基)-5-硝基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-胺20C
Figure 110145234-A0101-12-0131-256
將(3aR,5r,6aS)-5’,5’-二甲基六氫-1H-螺[並環戊二烯-2,2'-[1,3]二噁烷]-5-胺20B(6.3g，28mmol)和4-氯-5-硝基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶(10.4g，30.85mmol)溶於異丙醇(50mL)，然後加入DIEA(7.51mL，41.9mmol)，於氮氣保護下在100℃反應16h。反應完畢後，濃縮反應液，加水(50mL)，用乙酸乙酯(50mL x 3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘留物通過矽膠柱純化(石油醚/乙酸乙酯=1：4~1：3)得到黃色固體的化合物N-((3aR,5r,6aS)-5’,5’-二甲基六氫-1H-螺[並環戊二烯-2,2'-[1,3]二噁烷]-5-基)-5-硝基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-胺20C(6.2g，收率42.1%)。
MS m/z(ESI)：527.1[M+1]
第四步：(3aR,5r,6aS)-5-((5-硝基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)氨基)六氫並環戊二烯-2(1H)-酮20D
Figure 110145234-A0101-12-0132-257
將N-((3aR,5r,6aS)-5’,5’-二甲基六氫-1H-螺[並環戊二烯-2,2'-[1,3]二噁烷]-5-基)-5-硝基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-胺20C(6.2g,11.7mmol)溶於丙酮(30mL)，加入水(10mL)和TsOH(203mg,1.18mmol)，並於室溫攪拌15h。然後真空旋乾，殘留物通過矽膠柱純化(二氯甲烷/甲醇=1：30~1：20)得到白色固體的化合物得到(3aR,5r,6aS)-5-((5-硝基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)氨基)六氫並環戊二烯-2(1H)-酮20D(4.8g，收率93%)。
MS m/z(ESI)：441.1[M+1]
第五步：(2r,3aR,5r,6aS)-5-((5-硝基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-醇20E
Figure 110145234-A0101-12-0133-258
將(3aR,5r,6aS)-5-((5-硝基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)氨基)六氫並環戊二烯-2(1H)-酮20D(2.2g，4.99mmol)溶於乙酸乙酯(3mL)，於0℃在攪拌下加入1M的三叔丁氧基氫化鋁鋰(9.99mL,9.99mmol)，將混合物在0℃攪拌下2小時。反應結束後加入水(20mL)，乙酸乙酯萃取(20mL x 3)，真空旋乾，殘留物通過矽膠柱純化(二氯甲烷/甲醇=1：10~1：15)得到白色固體的化合物得到(2r,3aR,5r,6aS)-5-((5-硝基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-醇20E(2.1g，收率95%)。
MS m/z(ESI)：442.1[M+1]
第六步：甲磺酸(2r,3aR,5r,6aS)-5-((5-硝基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基酯20F
Figure 110145234-A0101-12-0133-259
將(2r,3aR,5r,6aS)-5-((5-硝基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並 [2,3-b]吡啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-醇20E(2.1g，4.75mmol)溶於二氯甲烷(15mL)，於攪拌下加入三乙胺(1mL,7.12mmol)。將混合物在0℃在攪拌下加入甲基磺醯氯(7.07mg，6.17mmol)，並將混合物在氮氣保護下在室溫攪拌3小時。反應結束後濃縮反應液得到黃色油狀甲磺酸(2r,3aR,5r,6aS)-5-((5-硝基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基酯20F(3.5g，粗產品)。
MS m/z(ESI)：521.1[M+1]
第七步：N-((2r,3aR,5s,6aS)-5-疊氮基八氫並環戊二烯-2-基)-5-硝基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-胺20G
Figure 110145234-A0101-12-0134-260
將甲磺酸(2r,3aR,5r,6aS)-5-((5-硝基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基酯20F(3.5g，6.72mmol)溶於DMF(20mL)，於攪拌下加入疊氮化鈉(874mg,13.45mmol)。將混合物在氮氣保護下90℃攪拌3小時。反應結束後濃縮，粗產品用矽膠柱色譜分離提純(乙酸乙酯/石油醚(v/v)=1：1~1：3)得到無色油狀化合物N-((2r,3aR,5s,6aS)-5-疊氮基八氫並環戊二烯-2-基)-5-硝基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-胺20G(380mg，產率12%)。
MS m/z(ESI)：468.1[M+1]
第八步：(2s,3aR,5r,6aS)-N2-(5-硝基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)八氫並環戊二烯-2,5-二胺20H
Figure 110145234-A0101-12-0135-261
將化合物N-((2r,3aR,5s,6aS)-5-疊氮基八氫並環戊二烯-2-基)-5-硝基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-胺20G(380mg，0.813mmol)溶於THF/H2O(5：1)(10mL)，於攪拌下加入三甲基磷(309mg，4.06mmol)，在室溫攪拌16小時。反應結束後過濾濃縮，粗產品用矽膠板色譜分離提純(甲醇/二氯甲烷(v/v)=5%+0.5%氨水)得到白色固體化合物(2s,3aR,5r,6aS)-N2-(5-硝基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)八氫並環戊二烯-2,5-二胺20H(230mg，產率64.1%)。
MS m/z(ESI)：442.1[M+1]
第九步：1-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-((2s,3aR,5r,6aS)-5-((5-硝基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)脲20I
Figure 110145234-A0101-12-0136-262
將(2s,3aR,5r,6aS)-N2-(5-硝基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)八氫並環戊二烯-2,5-二胺20H(230mg，0.521mmol)和(3-(甲氧基)-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基甲酸苯基酯(170mg，0.77mmol)溶於DMF(3mL)，然後加入三乙胺(0.15mL，1.044mmol)，於氮氣保護下在60℃反應3h。然後濃縮，粗產品用矽膠柱色譜分離提純(二氯甲烷/甲醇(v/v)=1：50-1：25)得到黃色固體的化合物1-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-((2s,3aR,5r,6aS)-5-((5-硝基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)脲20I(220mg，收率71%)。
MS m/z(ESI)：599.1[M+1]
第十步：1-((2s,3aR,5r,6aS)-5-((5-氨基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)-3-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)脲20J
Figure 110145234-A0101-12-0137-263
攪拌下，向1-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-((2s,3aR,5r,6aS)-5-((5-硝基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)脲20I(220mg，0.37mmol)中加入10%的濕鈀/炭(30mg)。將混合物在氫氣下在室溫攪拌16小時。然後用矽藻土過濾反應液，濃縮，用矽膠柱色譜分離提純(二氯甲烷/甲醇(v/v)=1：12-1：10)得到淡黃色固體的化合物1-((2s,3aR,5r,6aS)-5-((5-氨基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)-3-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)脲20J(140mg，收率67%)。
MS m/z(ESI)：569.1[M+1]
第十一步：1-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-((2r,3aR,5s,6aS)-5-(6-(苯磺醯基)咪唑並[4,5-d]吡咯並[2,3-b]吡啶-1(6H)-基)八氫並環戊二烯-2-基)脲20K
Figure 110145234-A0101-12-0138-264
將1-((2s,3aR,5r,6aS)-5-((5-氨基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)-3-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)脲20J(140mg，0.25mmol)，原甲酸三乙酯(182mg，1.23mmol)和對甲苯磺酸(8.48mg，0.049mmol)溶於甲苯(3mL)，在105℃下攪拌4小時。反應結束後，濃縮，用矽膠柱色譜分離提純(二氯甲烷/甲醇(v/v)=1：20-1：15)得到淡黃色固體的化合物1-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-((2r,3aR,5s,6aS)-5-(6-(苯磺醯基)咪唑並[4,5-d]吡咯並[2,3-b]吡啶-1(6H)-基)八氫並環戊二烯-2-基)脲20K(95mg，收率66.72%)。
MS m/z(ESI)：579.1[M+1]
第十二步：1-((2r,3aR,5s,6aS)-5-(咪唑並[4,5-d]吡咯並[2,3-b]吡啶-1(6H)-基)八氫並環戊二烯-2-基)-3-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)脲(化合物20)
Figure 110145234-A0101-12-0139-112
將1-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-((2r,3aR,5s,6aS)-5-(6-(苯磺醯基)咪唑並[4,5-d]吡咯並[2,3-b]吡啶-1(6H)-基)八氫並環戊二烯-2-基)脲20K(95mg，0.16mmol)溶於四氫呋喃(2mL)，於攪拌下加入氫氧化鈉(1M)溶液(1mL)，並加入甲醇(0.1mL)，在60℃下攪拌1小時。反應結束後，濃縮，通過製備型HPLC純化，凍乾得到白色固體化合物1-((2r,3aR,5s,6aS)-5-(咪唑並[4,5-d]吡咯並[2,3-b]吡啶-1(6H)-基)八氫並環戊二烯-2-基)-3-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)脲(化合物20)(2mg，2.78%)。
MS m/z(ESI)：439.2[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 11.92(s,1H),10.96(s,1 H),8.60(s,1 H),7.50(d,1 H),7.31(d,1 H),6.86(m,1 H),6.72(m,1 H),5.23-5.13(m,1 H),4.21(d,1 H),3.88(s,3 H),2.81(s,2 H),2.46-2.37(m,2 H),2.03-2.00(m,2 H),1.80-1.78(m,4 H)
實施例21
1-((2s,3aR,5s,6aS)-5-(咪唑並[4,5-d]吡咯並[2,3-b]吡啶 -1(6H)-基)八氫並環戊二烯-2-基)-3-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)脲(化合物21)
Figure 110145234-A0101-12-0140-293
第一步：(2s,3aR,5s,6aS)-N2-(5-硝基-1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)八氫並環戊二烯-2,5-二胺21A
Figure 110145234-A0101-12-0140-265
將化合物(3aR,5r,6aS)-5-((5-硝基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)氨基)六氫並環戊二烯-2(1H)-酮20D(2.3g，5.22mmol)溶於甲醇(20mL)，攪拌下加入甲酸銨(1.65g,26.11mmol)。將混合物在室溫在氮氣保護下攪拌16小時，然後加入氰基硼氫化鈉繼續攪拌16小時。旋乾反應混合物，加入水(20mL)，用乙酸乙酯萃取(20mL x 3)，無水硫酸鈉乾燥有機相。粗產品用矽膠柱色譜分離提純(甲醇/二氯甲烷(v/v)=0-10%)得到黃色油狀化合物(2s,3aR,5s,6aS)-N2-(5-硝基-1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯並 [2,3-b]吡啶-4-基)八氫並環戊二烯-2,5-二胺21A(920mg，產率39.9%)。
MS m/z(ESI)：442.1[M+1]
第二步：1-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-((2r,3aR,5r,6aS)-5-((5-硝基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)脲21B
Figure 110145234-A0101-12-0141-266
將化合物(2s,3aR,5s,6aS)-N2-(5-硝基-1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)八氫並環戊二烯-2,5-二胺21A(920mg，2.08mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(10mL)，室溫攪拌下加入(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基甲酸苯基酯(785mg,3.13mmol)和三乙胺(0.58mL,4.17mmol)，將混合物在60℃攪拌下2小時。反應結束後，向反應混合物中加入水(10mL)，乙酸乙酯萃取(15mL x 3)，無水硫酸鈉乾燥有機相。粗產品用矽膠柱色譜分離提純(乙酸乙酯/石油醚(v/v)=0-40%)得到黃色油狀化合物1-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-((2r,3aR,5r,6aS)-5-((5-硝基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)脲21B(1.1g，產率88.1%)。
MS m/z(ESI)：599.0[M+1]
第三步：1-((2r,3aR,5r,6aS)-5-((5-氨基-1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)-3-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)脲21C
Figure 110145234-A0101-12-0142-267
將化合物1-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-((2r,3aR,5r,6aS)-5-((5-硝基-1-(苯磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)脲21B(1.1g，1.84mmol)溶於乙醇/水=4/1(10mL)，攪拌下加入還原鐵粉(513mg,9.19mmol)和氯化銨(491mg,9.19mmol)。將混合物在60℃攪拌16小時。反應結束後過濾旋乾，粗產品用矽膠柱色譜分離提純(二氯甲烷/甲醇(v/v)=0-10%)得到1-((2r,3aR,5r,6aS)-5-((5-氨基-1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)-3-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)脲21C(420mg，產率40.19%)。
MS m/z(ESI)：569.0[M+1]
第四步：1-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-((2s,3aR,5s,6aS)-5-(6-(苯磺醯基)咪唑並[4,5-d]吡咯並[2,3-b]吡啶-1(6H)-基)八氫並環戊二烯-2-基)脲21D
Figure 110145234-A0101-12-0143-268
將1-((2r,3aR,5r,6aS)-5-((5-氨基-1-(苯基磺醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)-3-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)脲21C(120mg，0.217mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(3mL)，攪拌下加入原甲酸三乙酯(80mg,0.52mmol)和一水合對甲苯磺酸(5mg,0.02mmol)。將混合物在氮氣保護下在110℃攪拌2小時。反應結束後濃縮，粗產品用矽膠柱色譜分離提純(二氯甲烷/甲醇(v/v)=0-10%)得到無色油狀化合物1-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-((2s,3aR,5s,6aS)-5-(6-(苯磺醯基)咪唑並[4,5-d]吡咯並[2,3-b]吡啶-1(6H)-基)八氫並環戊二烯-2-基)脲21D(120mg，產率98%)。
MS m/z(ESI)：579.1[M+1]
第五步：1-((2s,3aR,5s,6aS)-5-(咪唑並[4,5-d]吡咯並[2,3-b]吡啶-1(6H)-基)八氫並環戊二烯-2-基)-3-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)脲(化合物21)
Figure 110145234-A0101-12-0144-113
將化合物1-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-((2s,3aR,5s,6aS)-5-(6-(苯磺醯基)咪唑並[4,5-d]吡咯並[2,3-b]吡啶-1(6H)-基)八氫並環戊二烯-2-基)脲21D(120mg，0.2mmol)溶於四氫呋喃(2mL)，攪拌下加入1M的氫氧化鈉溶液(1mL)。將混合物在60℃下攪拌2小時。反應結束後濃縮，通過製備型HPLC純化，凍乾得到白色固體化合物1-((2s,3aR,5s,6aS)-5-(咪唑並[4,5-d]吡咯並[2,3-b]吡啶-1(6H)-基)八氫並環戊二烯-2-基)-3-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)脲(化合物21)(5.6mg，收率6.1%)。
MS m/z(ESI)：439.3[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 11.88(s,1 H),11.35(s,1 H),8.59(s,1 H),8.31(s,1 H),7.49(t,1 H),7.08(s,1 H),6.72(s,1 H),5.18(s,1 H),3.87(s,4 H),2.68(s,2 H),2.34-2.16(m,4 H),2.15-2.01(m,2 H),1.50-1.35(m,2 H).
實施例22
1-((2r,3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)-3-(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)脲 (化合物22)
Figure 110145234-A0101-12-0145-294
第一步：1-((2r,3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)-3-(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)脲22A
Figure 110145234-A0101-12-0145-269
將化合物(2s,3aR,5r,6aS)-N2-甲基-N2-(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)八氫並環戊二烯-2,5-二胺9K(200mg，0.47mmol)，(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基甲酸苯基酯(150mg，0.56mmol)，三乙胺(0.13mL,0.96mmol)溶於DMF(5mL)，混合物在氮氣保護下在60℃攪拌2小時。反應結束後濃縮反應液，加入水10mL，乙酸乙酯萃取(10mL x 3)，無水硫酸鈉乾燥有機相。粗產品用矽膠柱色譜分離提純(乙酸乙酯/石油醚(v/v)=0-40%)得到黃色油狀化合物1-((2r,3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)-3-(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)脲22A(220mg，產率78%)。
MS m/z(ESI)：599.1[M+1]
第二步：1-((2r,3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)-3-(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)脲(化合物22)
Figure 110145234-A0101-12-0146-114
將1-((2r,3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)-3-(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)脲22A(220mg，0.36mmol)溶於四氫呋喃(2mL)，攪拌下加入1M的氫氧化鈉溶液(2mL)，將混合物在60℃下攪拌2小時。反應結束後濃縮反應混合物，通過製備型HPLC純化，凍乾得到白色固體化合物1-((2r,3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)-3-(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)脲(化合物22)(83mg，收率50.8%)。
MS m/z(ESI)：445.3[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 11.64(s,1 H),10.92(s,1 H),8.12(s,1 H),7.14-7.10(m,1 H),6.86(s,1 H),6.57(d,1 H),5.30(m,1 H),4.18-4.13(m,1 H),3.15(s,3 H),2.69(m,2 H),2.55(s,3 H),2.03-1.93(m,2 H),1.89-1.84(m,2 H),1.65-1.53(m,4 H).
實施例23
1-((2s,3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)-3-(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)脲(化合物23)
Figure 110145234-A0101-12-0147-295
第一步：1-((2s,3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)-3-(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)脲23A
Figure 110145234-A0101-12-0147-270
將化合物(2s,3aR,5s,6aS)-N2-甲基-N2-(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)八氫並環戊二烯-2,5-二胺18A(200mg，0.46mmol)，(3-甲硫基-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基甲酸苯基酯(188mg，0.70mmol)，三乙胺(0.13mL,0.93mmol)溶於DMF(3mL)，並將混合物在氮氣保護下在60℃攪拌2小時。反應結束後濃縮反應液，加入水10mL，乙酸乙酯萃取(10mL x 3)，無水硫酸鈉乾燥有機相。粗產品用矽膠柱色譜分離提純(乙酸乙酯/石油醚(v/v)=0-50%)得到白色固體化合物1-((2s,3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2- 基)-3-(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)脲23A(180mg，產率63.9%)。
MS m/z(ESI)：599.1[M+1]
第二步：1-((2s,3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)-3-(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)脲(化合物23)
Figure 110145234-A0101-12-0148-115
將1-((2s,3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)-3-(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)脲23A(180mg，0.30mmol)溶於四氫呋喃(2mL)，於攪拌下加入1M的氫氧化鈉溶液(2mL)。將混合物在60℃下攪拌2小時。反應結束後濃縮，通過製備型HPLC純化，凍乾得到白色固體化合物1-((2s,3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)-3-(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)脲(化合物23)(26mg，收率19.4%)。
MS m/z(ESI)：445.3[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 11.61(s,1 H),11.08(s,1 H),8.12(s,1 H),7.13(m,2 H),6.58(d,1 H),5.40(m,1 H),3.87-3.80(m,1 H),3.16(s,3 H),2.54(s,3 H),2.51(m,2 H),2.23-2.20 (m,2H),1.91-1.86(m,2 H),1.57-1.53(m,2 H),1.26-1.18(m,2 H).
實施例24
1-(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-((2r,3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)脲(化合物24)
Figure 110145234-A0101-12-0149-296
第一步：1-(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-((2r,3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)脲24A
Figure 110145234-A0101-12-0149-271
將(2s,3aR,5r,6aS)-N2-甲基-N2-(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)八氫並環戊二烯-2,5-二胺9K(200mg，0.47mmol)和(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基甲酸苯基酯(145mg，0.52mmol)溶於DMF(3mL)，然後加入三乙胺(0.1mL，0.70mmol)，氮氣保護下60℃反應3h。濃縮反應混合物，粗產品用矽膠柱色譜分離提純(二氯甲烷/甲醇(v/v)=1：50-1：20)得到白色固體的化合物 1-(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-((2r,3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)脲24A(230mg，收率79.8%)。
MS m/z(ESI)：613.2[M+1]
第二步：1-(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-((2r,3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)脲(化合物24)
Figure 110145234-A0101-12-0150-116
將1-(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-((2r,3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)脲24A(230mg，0.19mmol)溶於四氫呋喃(3mL)，攪拌下加入氫氧化鈉(1M)溶液(1mL)，並加入甲醇(0.1mL)，並在60℃下攪拌1小時。反應結束後濃縮反應混合物，通過製備型HPLC純化，凍乾得到白色固體化合物1-(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-((2r,3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)脲(化合物24)(55mg，23.9%)。
MS m/z(ESI)：459.1[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 11.69(s,1 H),10.94(s,1 H),8.14(s,1 H),7.18-7.13(m,1 H),6.85(m,1 H),6.58(d,1 H),5.28(m,1 H),4.16(m,1 H),3.16(s,3 H),3.12(q,2 H),2.69(m,2 H),2.01-1.94(m，2 H),1.91-1.84(m,2 H),1.64-1.54(m,4 H),1.33(t,3 H).
實施例25
1-(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-((2s,3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)脲(化合物25)
Figure 110145234-A0101-12-0151-297
第一步：1-(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-((2s,3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)脲25A
Figure 110145234-A0101-12-0151-272
將化合物((2s,3aR,5s,6aS)-N2-甲基-N2-(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)八氫並環戊二烯-2,5-二胺18A(230mg，0.54mmol),(3-乙硫基-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基甲酸苯基酯(228mg，0.81mmol)，三乙胺(0.15mL,1.08mmol)溶於DMF(3mL)， 並將混合物在氮氣保護下在60℃攪拌2小時。反應結束後濃縮反應液，加入水10mL，乙酸乙酯萃取(10mL x 3)，無水硫酸鈉乾燥有機相。粗產品用矽膠柱色譜分離提純(乙酸乙酯/石油醚(v/v)=0-50%)得到白色固體化合物1-(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-((2s,3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)脲25A(180mg，產率36.2%)。
MS m/z(ESI)：613.2[M+1]
第二步：1-(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-((2s,3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)脲(化合物25)
Figure 110145234-A0101-12-0152-117
將1-(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-((2s,3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)脲25A(120mg，0.19mmol)溶於四氫呋喃(2mL)，攪拌下加入1M的氫氧化鈉溶液(2mL)，並將混合物在60℃下攪拌2小時。反應結束後濃縮反應液，通過製備型HPLC純化，凍乾得到白色固體化合物1-(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-((2s,3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)八氫並環戊二烯-2-基)脲(化合物25)(32mg，收率35.6%)。
MS m/z(ESI)：459.3[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 11.64(s,1 H),11.14(s,1 H),8.13(s,1 H),7.13(m,2 H),6.58(d,1 H),5.41(m,1 H),3.81(s,1 H),3.16(s,3 H),3.10(q,2 H),2.51(m,2 H),2.21-2.11(m,2 H),1.91-1.83(m,2 H),1.57-1.53(m,2 H),1.31(t,3 H),1.26-1.18(m,2 H).
實施例26
(3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)-N-(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-甲醯胺(化合物26)
Figure 110145234-A0101-12-0153-298
第一步：(3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7-對甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁基酯26B
Figure 110145234-A0101-12-0153-273
將(3aR,5s,6aS)-5-(甲胺基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁基酯26A(1.0g,4.16mmol),4-氯-7-甲苯磺醯基 -7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶(1.9g,6.24mmol)和N,N-二異丙基乙胺(1.6g,12.48mmol)溶於異丙醇(20mL)中，將混合物在氮氣保護下在100℃攪拌反應16小時。反應結束後旋乾溶劑，粗產品用矽膠柱色譜分離提純(石油醚/乙酸乙酯(v/v)=0-60%)，得到白色固體化合物(3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7-對甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁基酯26B(1.35g，產率：63%)
MS m/z(ESI)：512.2[M+1]
第二步：N-甲基-N-((3aR,5s,6aS)-八氫環戊二烯並[c]吡咯-5-基)-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-胺26C
Figure 110145234-A0101-12-0154-274
將(3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7-對甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁基酯26B(1.35g,2.64mmol)溶於氯二氯甲烷中(10mL,1.5mol/L)，冰浴條件下，將叔丁基二甲矽基三氟甲磺酸酯(1.31.4g,5.28mmol)滴加到反應液中。滴加完畢後撤去冰浴，溶液在室溫下攪拌反應過夜。反應結束後旋乾溶劑，粗產品用矽膠柱色譜分離提純(二氯甲烷/甲醇(v/v)=0-20%)，得到白色固體化合物N-甲基-N-((3aR,5s,6aS)-八氫環戊二烯並[c]吡咯-5-基)-7-甲苯磺醯基-7H- 吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-胺26C(900mg，產率：83%)
MS m/z(ESI)：412.2[M+1]
第三步：(3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)-N-(3-(甲基硫)-1,2,4-噻二唑-5-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺26D
Figure 110145234-A0101-12-0155-275
將N-甲基-N-((3aR,5s,6aS)-八氫環戊二烯並[c]吡咯-5-基)-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-胺26C(300mg，0.73mmol)，(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基甲酸苯基酯(234mg,0.87mmol和三乙胺(148mg,1.46mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(10mL)中。混合物在油浴60℃下攪拌反應過夜。反應結束後旋乾溶劑，粗產品用矽膠柱色譜分離提純(石油醚/乙酸乙酯(v/v)=0-60%)，得到白色固體化合物(3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)-N-(3-(甲基硫)-1,2,4-噻二唑-5-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺26D(360mg，產率：84%)
MS m/z(ESI)：585.1[M+1]
第四步：(3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)-N-(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)六氫環戊二烯並[c]吡 咯-2(1H)-甲醯胺(化合物26)
Figure 110145234-A0101-12-0156-118
將(3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)-N-(3-(甲基硫)-1,2,4-噻二唑-5-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-羧醯胺26D(360mg，0.62mmol)和氫氧化鈉(49mg,1.23mmol)溶於四氫呋喃/水(1v/1v,16mL)中。混合物在油浴60℃下攪拌反應1h。反應結束後旋乾溶劑，粗產品通過製備型HPLC純化，凍乾得到白色固體化合物(3aR,5s,6aS)-5-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)-N-(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-甲醯胺(化合物26)(157mg，收率：59%)。
MS m/z(ESI)：431.3[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 11.67(s,1 H),11.60(s,1 H),8.08(s,1 H),7.12-7.04(m,1 H),6.53(d,1 H),5.46(m,1 H),3.71-3.66(m,2 H),3.39(m,2 H),3.15(s,3 H),2.89(s,2 H),2.57(s,3 H),2.03-2.00(m,2 H),1.80-1.75(m,2 H).
實施例27
(3aR,5s,6aS)-N-(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-5-(甲基 (7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-甲醯胺(化合物27)
Figure 110145234-A0101-12-0157-299
第一步：(3aR,5s,6aS)-N-(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-甲醯胺27A
Figure 110145234-A0101-12-0157-276
將N-甲基-N-((3aR,5s,6aS)-八氫環戊二烯並[c]吡咯-5-基)-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-胺26C(300mg，0.73mmol)，(3-(乙基硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基甲酸苯基酯(246mg,0.88mmol和三乙胺(148mg,1.46mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(10mL)中。混合物在油浴60℃下攪拌反應過夜。反應結束後旋乾溶劑，粗產品用矽膠柱色譜分離提純(石油醚/乙酸乙酯(v/v)=0-60%)，得到白色固體化合物(3aR,5s,6aS)-N-(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-甲醯胺27A(370mg，產率：85%)
MS m/z(ESI)：599.1[M+1]
第二步：(3aR,5s,6aS)-N-(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-5-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-甲醯胺(化合物27)
Figure 110145234-A0101-12-0158-119
將((3aR,5s,6aS)-N-(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-5-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-甲醯胺27A(370mg，0.62mmol)和氫氧化鈉(49mg,1.23mmol)溶於四氫呋喃/水(1v/1v,16mL)中。混合物在油浴60℃下攪拌反應2h。反應結束後旋乾溶劑，粗產品通過製備型HPLC純化，凍乾得到白色固體化合物(3aR,5s,6aS)-N-(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-5-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)六氫環戊二烯並[c]吡咯-2(1H)-甲醯胺(化合物27)(267mg，收率：97%)。
MS m/z(ESI)：445.3[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d6 δ 11.59(s,1 H),8.08(s,1 H),7.04(m,1 H),6.52(d,1 H),5.46(m,1 H),3.67(m,2 H),3.36-3.34(m,2 H),3.17(s,3 H),3.13(q,2 H),2.89(m,2 H),2.05-1.97 (m,2 H),1.80-1.75(m,2 H),1.34(t,3 H).
實施例28
7-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)-N-(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-羧醯胺(化合物28)
Figure 110145234-A0101-12-0159-300
第一步：7-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-羧酸叔丁基酯28A
Figure 110145234-A0101-12-0159-277
將粗產品化合物7-(甲基氨基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-羧酸叔丁酯6B(2.2g)溶於DMF(30mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(1.62g,12.55mmol)攪拌5分鐘，加入4-氯-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶(1.93g,6.28mmol)，混合物攪拌下5小時。反應結束後加入水(20mL)，乙酸乙酯萃取(30mL x 3)，無水硫酸鈉乾燥有機相。有機相真空濃縮得到粗品化合物7-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-羧酸叔丁基酯28A(2.3g，粗產品)。
第二步：N-甲基-N-(2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)-7-甲苯磺醯 基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-胺28B
Figure 110145234-A0101-12-0160-278
將粗品化合物7-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-羧酸叔丁基酯28A(800mg)溶於二氯甲烷(20mL)，攪拌下加入叔丁基二甲矽基三氟甲磺酸酯(2g,7.61mmol)。混合物在室溫攪拌2小時，反應結束後濃縮反應液得到粗產品用矽膠柱色譜分離提純(二氯甲烷/甲醇(v/v)=0-10%)得到得到白色固體化合物N-甲基-N-(2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-胺28B(490mg，產率：75%)。
第三步：7-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)-N-(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-羧醯胺28C
Figure 110145234-A0101-12-0160-279
將白色固體化合物N-甲基-N-(2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-胺28B(250mg，0.59mmol)溶於DMF(5mL)，加入三乙胺(178mg，1.76mmol)，攪拌 下加入(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基甲酸苯基酯(235mg，0.88mmol)，混合物在60℃攪拌下繼續反應2小時。反應結束後加入水(20mL)，乙酸乙酯萃取(30mL x 3)，無水硫酸鈉乾燥有機相。有機相真空濃縮，得到的粗品用矽膠柱色譜分離提純(乙酸乙酯/石油醚(v/v)=0-20%)得到白色固體化的化合物7-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)-N-(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-羧醯胺28C(310mg，產率88.13%)。
第四步：7-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)-N-(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-羧醯胺(化合物28)
Figure 110145234-A0101-12-0161-120
將化合物7-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)-N-(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-羧醯胺28C(310mg，0.52mmol)溶於四氫呋喃(5mL)中，攪拌下加入1M/L鹽酸溶液(3mL)，混合物60℃攪拌1小時。反應結束後濃縮反應液，通過製備型HPLC純化，凍乾得到白色固體化合物7-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)-N-(3-(甲硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-羧醯胺(化合物 28)(20mg，收率8.69%)。
MS m/z(ESI)：445.1[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 11.83(s,1 H),11.59(s,1 H),8.09(s,1 H),7.14-7.10(m,1 H),6.54(s,1 H),4.66(m,1 H),3.86-3.69(m,4 H),3.14(s,3 H),2.55(s,3 H),2.00(m,2 H),1.63(m,6 H).
實施例29
N-(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-7-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-羧醯胺(化合物29)
Figure 110145234-A0101-12-0162-301
第一步：N-(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-7-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-羧醯胺29A
Figure 110145234-A0101-12-0162-280
將白色固體化合物N-甲基-N-(2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-胺28B(250mg，0.59mmol)溶於DMF(5mL)，加入三乙胺(178mg，1.76mmol)，攪拌 下加入(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基甲酸苯基酯(150mg，0.53mmol)，混合物在60℃攪拌下繼續反應2小時。反應結束後加入水(20mL)，乙酸乙酯萃取(30mL x 3)，無水硫酸鈉乾燥有機相。有機相真空濃縮得到粗品用矽膠柱色譜分離提純(乙酸乙酯/石油醚(v/v)=0-20%)得到白色固體化的化合物N-(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-7-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-羧醯胺29A(120mg，產率33.33%)。
第二步：N-(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-7-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-羧醯胺(化合物29)
Figure 110145234-A0101-12-0163-121
將化合物N-(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-7-(甲基(7-甲苯磺醯基-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-羧醯胺29A(120mg，0.20mmol)溶於四氫呋喃(5mL)中，攪拌下加入1M/L鹽酸溶液(3mL)，混合物60℃攪拌1小時。反應結束後濃縮反應液，通過製備型HPLC純化，凍乾得到白色固體化合物N-(3-(乙硫基)-1,2,4-噻二唑-5-基)-7-(甲基(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-羧醯胺(化合物29)(20mg，收 率22.27%)。
MS m/z(ESI)：459.0[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 11.85(s,1 H),11.59(s,1 H),8.09(s,1 H),7.11(t,1 H),6.54(s,1 H),4.66(m,1 H),3.88-3.75(m,4 H),3.16-3.10(m,5 H),2.00(m,2 H),1.63(m,6 H),1.33(t,3 H).
實施例30
N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-1-羧醯胺(化合物30)
Figure 110145234-A0101-12-0164-302
第一步：N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-(7-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-1-甲醯胺30B
Figure 110145234-A0101-12-0164-281
將5-氨基-3-甲氧基-1,2,4-噻唑(73mg，0.56mmol)溶於 二氯甲烷(3mL)攪拌下加入N,N'-羰基二咪唑(99mg，0.61mmol)和DIEA(0.39mL，2.78mmol)，混合物在室溫攪拌下反應2小時後加入4-(1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-6-基)-7-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶30A(200mg，粗產品)，混合物在室溫攪拌下繼續反應16小時。反應結束後濃縮，粗產品用矽膠柱色譜分離提純(石油醚/乙酸乙酯(v/v)=30-50%)得到無色油狀的化合物N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-(7-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-1-甲醯胺30B(110mg，收率38%)。
MS m/z(ESI)：517.2[M+1]
第二步：N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-1-羧醯胺(化合物30)
Figure 110145234-A0101-12-0165-122
將N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-(7-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-1-甲醯胺30B(110mg，0.21mmol)溶於二氯甲烷(2mL)，攪拌下加入三氟乙酸(1mL)，混合物在室溫下攪拌2小時後旋乾。旋乾後的混合物溶於四氫呋喃(3mL)並加入氨水(1mL)，在室溫下 攪拌30分鐘，反應結束後濃縮，通過製備型HPLC純化，凍乾得到白色固體化合物N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-(7H-吡咯並[2,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-1-羧醯胺(化合物30)(19mg，收率23.3%)。取17.8mg產品用手性SFC分離(SFC150；手性柱IC 250*25mm 10um；超臨界CO2/甲醇+甲醇氨0.1%=50：50；80mL/min)得到化合物30-P 1 (Rt=3.43min,3.6mg)和化合物30-P 2 (Rt=3.94min,4.1mg)均為白色固體。
MS m/z(ESI)：387.1[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.67(s,1 H),11.60(s,1 H)8.08(s,1H),7.12-7.08(m,1H),6.61-6.60(m,1 H),4.28-4.18(m,1 H),4.08(d,J=7.2Hz,2H),3.96(s,2H),3.88(s,3H),2.74-2.63(m,1 H),2.45-2.29(m,3 H),2.26-2.16(m,1H)
實施例31
6-(5-氰基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-1-甲醯胺(化合物31)
Figure 110145234-A0101-12-0166-303
第一步：6-(5-氰基-1-甲苯磺醯基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-1- 羧醯胺31B
Figure 110145234-A0101-12-0167-282
將4-(1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-6-基)-1-甲苯磺醯基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-5-甲腈31A(300mg,0.73mmol),(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基甲酸苯基酯(222mg,0.88mmol)和三乙胺(372mg,3.68mmol)溶於DMF(6mL)中，反應溶液在氮氣保護下60℃攪拌反應16小時。反應結束後旋乾溶劑，粗產品用矽膠柱色譜分離提純(石油醚/乙酸乙酯(v/v)=0-60%)，得到白色固體化合物6-(5-氰基-1-甲苯磺醯基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-1-羧醯胺31B(250mg，產率：61%)
MS m/z(ESI)：565.1[M+1]
第二步：6-(5-氰基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-1-甲醯胺(化合物31)
Figure 110145234-A0101-12-0168-123
將6-(5-氰基-1-甲苯磺醯基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-1-羧醯胺31B(250mg，0.44mmol)和氫氧化鈉(35mg,0.88mmol)溶於四氫呋喃/水(1v/1v,8mL)中。混合物在油浴60℃下攪拌反應1h。反應結束後旋乾溶劑，粗產品通過製備型HPLC純化，凍乾得到白色固體化合物6-(5-氰基-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-4-基)-N-(3-甲氧基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-1-甲醯胺(化合物31)(90mg，收率：50%)。取88mg產品用手性SFC分離(SFC150；手性柱OD 250*25mm 10um；超臨界CO2/甲醇+甲醇氨0.1%=75：25；70mL/min)得到化合物31-P 1 (Rt=0.92min,8mg)和化合物31-P 2 (Rt=1.28min,11mg)均為白色固體。
化合物31-P 1 ：
MS m/z(ESI)：411.3[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 11.85(s,1 H),11.72(s,1 H),8.05(s,1 H),7.23(m,1 H),6.79(m,1 H),4.50(d,1 H),4.11(m,2 H),4.05(m,2 H),3.89(s,3 H),2.72-2.67(m,1 H),2.45-2.22(m,4 H).
化合物31-P 2 ：
MS m/z(ESI)：411.3[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 11.85(s,1 H),11.72(s,1 H),8.05(s,1 H),7.23(m,1 H),6.79(m,1 H),4.49(d,1 H),4.10(m,2 H),4.05-4.02(m,2 H),3.88(s,3 H),2.72-2.67(m,1 H),2.33-2.21(m,4 H).
測試例1、JAK激酶抑制活性的測定
體外JAK1激酶活性的抑制通過以下的方法進行測試。
1.1 試劑配製
1.1.1 1X激酶反應緩衝液
Figure 110145234-A0101-12-0169-304
1.1.2 JAK1酶溶液
Figure 110145234-A0101-12-0169-305
1.1.3 底物混合物配方
Figure 110145234-A0101-12-0169-306
Figure 110145234-A0101-12-0170-307
1.2 實驗步驟：
a)用DMSO將待測化合物(10mM儲液)稀釋10倍，在384稀釋板中以1：3進行等比稀釋，10+0劑量；
b)用Echo轉移0.1μL的待測化合物(a步驟中準備)到384反應板中，每個濃度兩個複孔。1000rpm/min，離心1min；
c)轉移5μL的激酶到384反應板中，1000rpm/min，離心1min，25℃孵育15min；
d)轉移5μL底物混合物到384反應板中，1000rpm/min，離心1min，25℃孵育60min；PF-06700841終濃度10,3.33,1.11,0.37,0.12,0.04,0.014,0.0046,0.0015,0.0005,0μM。待測化合物終濃度：10,3.33,1.11,0.37,0.12,0.04,0.014,0.0046,0.0015,0.0005,0μM。DMSO終濃度均為1%；
e)轉移10μL ADP-Glo試劑到384反應板中，1000rpm/min，離心1min，25℃孵育60min；
f)轉移20μL檢測試劑到384反應板中，1000rpm/min，離心1min，25℃孵育60min；
g)使用Envision多功能讀板機讀取螢光信號。
1.3 資料分析
a)化合物抑制率(%抑制)=(陰性對照平均值-化合物)/(陰性對照平均值-陽性對照平均值)*100%
陰性對照：DMSO
陽性對照：10μM PF-06700841
PF-06700841(CAS號：1883299-62-4)結構如下：
Figure 110145234-A0101-12-0171-308
b)利用以下非線性擬合公式來得到化合物的IC50(半數抑制濃度)：
Y=底部+(頂部-底部)/(1+10^((LogIC50-X)*HillSlope))
X：化合物濃度log值
Y：化合物抑制率(%抑制)
以相同的方法來進行JAK2、JAK3、TYK2激酶的活性測定。
表1.本發明的化合物對JAK1、JAK2、JAK3、TYK2激酶的抑制活性
Figure 110145234-A0101-12-0171-310
Figure 110145234-A0101-12-0172-311
Figure 110145234-A0101-12-0173-312
以上的結果表明本發明的化合物對JAK1具有良好的抑制活性和選擇性。
測試例2、藥代動力學評價
以大鼠為受試動物，應用LC/MS/MS法測定了大鼠口服和靜脈注射給予化合物3-P1、4-P2、7-P1、8-P1和16後不同時刻血漿中的藥物濃度。研究本發明化合物在大鼠體內的藥代動力學行為，評價其藥動學特徵。
試驗藥品：
化合物3-P1、4-P2、7-P1、8-P1和16。
試驗動物：
健康成年SD大鼠，雄性，共10組，每組3只，購自上海西普爾-必凱實驗動物有限公司，實驗動物生產許可證號：SCXK(滬)2018-0006。
藥物配製：
稱取一定量藥物溶於5%二甲基乙醯胺(DMA)+5%聚乙二醇-15羥基硬脂酸酯(solutol)+90%鹽溶液配置成0.2mg/mL溶液用於靜脈注射。
稱取一定量藥物溶於5%二甲基乙醯胺(DMA)+5%聚乙二醇-15羥基硬脂酸酯(solutol)+90%鹽溶液配置成0.5mg/mL或0.3mg/mL溶液用於口服給藥。
給藥：
SD大鼠禁食過夜後口服和靜脈注射給藥，口服給藥劑量為5.0mg/kg或3.0mg/kg，靜脈注射給藥劑量均為1.0mg/kg。
試驗操作：
大鼠口服和靜脈注射給藥化合物3-P1、4-P2、7-P1、8-P1和16，於給藥後0.083,0.25,0.5,1,2,4,8和24小時由頜下靜脈或其他合適血管采血0.2mL，置於K2-EDTA試管中後儲存於冰上，在一小時內2-8℃、6800g離心6分鐘分離血漿，於-80℃保存，進行LC/MS/MS分析，大鼠在給藥後4小時進食。
表2、大鼠IV藥代動力學參數
Figure 110145234-A0101-12-0174-313
Figure 110145234-A0101-12-0175-314
表3、大鼠PO藥代動力學參數
Figure 110145234-A0101-12-0175-315
結論：本發明化合物的藥代吸收良好，具有明顯的藥代動力學優勢。
測試例3.化合物在II型膠原誘導的大鼠關節炎模型(CIA)的單劑量藥效學研究
1.摘要
檢測多個化合物在大鼠CIA模型的抗關節炎藥效。
2.試驗方案
2.1 試驗藥物
Abrocitinib(陽性化合物)、化合物3-P1、化合物4-P2、化合物7-P1、化合物8-P1。
Abrocitinib(CAS號：1622902-68-4)結構如下：
Figure 110145234-A0101-12-0176-333
2.2 實驗動物
Wistar大鼠，雄性，SPF級別，購自上海斯萊克實驗動物有限責任公司
2.3 試驗方法
2.3.1 造模
實驗動物適應環境5天后，除正常組(n=10)外，其餘大鼠在第0天於尾根部皮內注射0.2mL等體積混合CII(II型膠原，2mg/mL)和CFA(完全氟氏佐劑，4mg/mL)製備的乳劑進行第一次免疫，在第7天進行第二次增強免疫，以誘發大鼠CIA模型。
2.3.2 動物分組與給藥
二免後6天(即第13天)，動物發病足達2分左右時，根據體重、足容積和AI評分情況選取大鼠，共6組，每組10只，隨後開始給予相應藥物治療，連續給藥2周。分組及給藥資訊如下表4：
表4.試驗分組資訊與給藥資訊
Figure 110145234-A0101-12-0176-316
Figure 110145234-A0101-12-0177-317
p.o：口服給藥；q.d：每天一次
2.3.3 檢測指標
1)體重監測：2次/周
2)足趾腫脹測定：第二次免疫後3天開始，每週2次測量雙側後足足趾容積並記錄。測量前，用記號筆在大鼠踝關節處畫線標記位置，儀器內加入乾淨清水後儀器數值清零準備測量。將大鼠後肢放入水中使踝關節處的標記線位於液體表面，此時踩下腳踏讀數，為大鼠足容積。測量結束後再次踩下腳踏清零準備測量下一隻。
3)關節炎指數(AI)：第二次免疫後，每週2次測量足容積，同時對四個足趾腫脹按表5進行評分，每只足評0~4分，每只大鼠最高評分為16分。
表5.關節炎指數(Arthritis Index)評分標準
Figure 110145234-A0101-12-0177-318
Figure 110145234-A0101-12-0178-319
3.試驗結果
3.1 每天1次連續2周經口灌胃給予化合物對CIA模型大鼠體重的影響
模型組動物在第11天開始出現四肢腫脹，第13天發病足達到2分左右，體重顯著低於正常組，第22~29天逐漸升高。與模型組相比，15mg/kg的化合物3-P1和化合物7-P1在第18~29天動物體重顯著升高，Abrocitinib、化合物4-P2和化合物8-P1在15mg/kg的劑量下亦可一定程度的增加CIA動物體重，但未出現統計學差異。
同等劑量下(15mg/kg)，化合物3-P1和化合物7-P1組動物體重在第18~29天均顯著高於陽性對照組Abrocitinib組(圖1，表6)。
表6.每天1次連續2周經口灌胃給予化合物對CIA大鼠體重的影響(n=10，
Figure 110145234-A0101-12-0178-339
±s)
Figure 110145234-A0101-12-0178-320
Figure 110145234-A0101-12-0179-321
3.2 每天1次連續2周經口灌胃給予化合物對CIA模型大鼠後足足容積的影響
與正常組相比，模型組大鼠後足足趾容積顯著升高；各給藥組在第15~29天后足足趾容積均明顯低於模型組，說明Abrocitinib、化合物3-P1、化合物4-P2、化合物7-P1和化合物8-P1在15mg/kg的劑量下均可有效抑制CIA大鼠雙後足足腫脹，且抑制作用相當(表7，圖2)。
表7.每天1次連續2周經口灌胃給予受試物對CIA大鼠後足足容積的影響
Figure 110145234-A0101-12-0179-322
Figure 110145234-A0101-12-0180-323
3.3 每天1次、連續2周經口灌胃給予化合物對CIA大鼠四肢關節炎指數(AI)的影響
實驗動物在第11天開始出現四肢腫脹，在第13天發病足達到2分左右時，開始分組給予藥物治療。結果顯示：15mg/kg的Abrocitinib、化合物3-P1、化合物4-P2和化合物7-P1組動物AI評分在第15~29天均顯著低於模型組；化合物8-P1組在第18~29天CIA大鼠AI評分亦顯著降低，所有給藥組中化合物3-P1組大鼠AI評分始終最低(表8，圖3)。
表8.每天1次連續2周經口灌胃給予化合物對CIA大鼠關節炎指數的影響
Figure 110145234-A0101-12-0180-324
 ****P<0.0001 vs.模型組，使用two-way ANOVA統計
4.試驗結論
在CIA大鼠模型中，Abrocitinib、化合物3-P1、化合物4-P2、化合物7-P1和化合物8-P1在15mg/kg的劑量下，每天一次經口灌胃連續給藥14天均可有效降低大鼠後足足趾容積及關節炎指數(AI)評分，對CIA大鼠均具有良好的治療作用。化合物3-P1在改善模型大鼠體重和AI評分的藥效上優於陽性化合物Abrocitinib，化合物7-P1在改善模型大鼠體重分的藥效上優於陽性化合物。
測試例4.化合物在II型膠原誘導的大鼠關節炎模型(CIA)的劑量探索藥效學研究
1、摘要
檢測兩個化合物在大鼠CIA模型的抗關節炎藥效。
2、試驗方案
2.1 試驗藥物
Abrocitinib(陽性化合物)、化合物3-P1、化合物16
2.2 實驗動物
Wistar大鼠，雄性，SPF級別，購自浙江維通利華實驗動物技術有限公司
2.3 試驗方法
2.3.1 造模
實驗動物適應環境6天后，除正常組(n=6)外，其餘大鼠在第0天於尾根部皮內注射0.2mL等體積混合CII(2mg/mL)和CFA(4mg/mL)製備的乳劑進行第一次免疫，在第7天進行第二次增強免疫，以誘發大鼠CIA模型。
2.3.2 動物分組與給藥
在第14天，即二免後7天，發病足AI評分在1~2分時，造模動物選取根據體重、足容積和AI評分分成7組，每組8只，加上正常一共8組，隨後開始給予相應藥物治療，連續給藥2周。分組及給藥資訊如下表9：
表9.試驗分組資訊與給藥資訊
Figure 110145234-A0101-12-0182-325
p.o：口服給藥；q.d：每天一次
2.3.3 檢測指標
1)體重監測：2次/周
2)足趾腫脹測定：第二次免疫後3天開始，每週2次測量 雙側後足足趾容積並記錄。測量前，用記號筆在大鼠踝關節處畫線標記位置，儀器內加入乾淨清水後儀器數值清零準備測量。將大鼠後肢放入水中使踝關節處的標記線位於液體表面，此時踩下腳踏讀數，為大鼠足容積。測量結束後再次踩下腳踏清零準備測量下一隻。
3)關節炎指數(AI)：第二次免疫後，每週2次測量足容積，同時對四個足趾腫脹按表5進行評分，每只足評0~4分，每只大鼠最高評分為16分。
3、試驗結果
3.1 化合物對模型大鼠體重的影響
第一次免疫後14天實驗動物分組開始給藥。正常組動物體重在實驗期間穩定增長。模型組動物體重也逐漸增高，但增長幅度小，體重在第14~28天均顯著低於正常組。其餘各給藥組大鼠體重在實驗期間輕微波動，與模型組動物體重相比均無統計學上的顯著性差異(表10)。
表10 每天1次連續2周經口灌胃給予化合物對CIA大鼠體重的影響(Mean±SEM)
Figure 110145234-A0101-12-0183-326
Figure 110145234-A0101-12-0184-327
3.2 化合物對模型大鼠後足足容積的影響
與正常組相比，模型組動物足容積在一免後第18~28天均顯著升高。大鼠後肢腫脹程度逐漸加重，第25天足容積達到最高值，第28天足容積略有降低。
Abrocitinib 3mg/kg組動物足容積在第18~28天與模型組相比均顯著降低。
化合物3-P1 3mg/kg、1mg/kg和0.3mg/kg劑量組動物足容積在第18~28天與模型組相比均顯著降低。其中化合物3-P1 3mg/kg和化合物3-P1 1mg/kg對CIA大鼠後肢腫脹的治療作用均優於Abrocitinib 3mg/kg。化合物3-P1 0.3mg/kg對CIA大鼠後足腫脹的治療作用與Abrocitinib 3mg/kg相近。化合物3-P1對降低CIA大鼠後肢足容積的作用與其劑量呈正相關。
化合物16 10mg/kg和3mg/kg組動物足容積在第21~28天與模型組相比均顯著降低，且與劑量呈正相關(表11，圖4)。
表11 每天1次連續2周經口灌胃給予化合物對CIA大鼠後足足容積的影響(平均值(mean)±SEM)
Figure 110145234-A0101-12-0184-328
Figure 110145234-A0101-12-0185-330
3.3 化合物對實驗大鼠四肢關節炎指數(AI)的影響
實驗動物在一免後第14天發病足評分達到1~2分，開始分組給予藥物治療。結果顯示，模型組動物AI評分在第14~25天持續升高，第28天略有下降，在第14~28天均顯著高於正常組。
Abrocitinib 3mg/kg動物AI評分在第18~28天與模型組相比均顯著降低。
化合物3-P1 3mg/kg、1mg/kg和0.3mg/kg劑量組動物AI評分在第18~28天與模型組相比均顯著降低，且化合物3-P1三個劑量對CIA大鼠四肢腫脹的治療作用均優於Abrocitinib 3mg/kg。化合物3-P1對降低CIA大鼠AI評分的作用與其劑量呈正相關。
化合物16 10mg/kg和3mg/kg劑量組動物AI評分在第21~28天與模型組相比均顯著降低，藥效與劑量呈正相關(表12，圖5)。
表12. 每天1次連續2周經口灌胃給予化合物對CIA大 鼠關節炎指數的影響
Figure 110145234-A0101-12-0186-332
4、試驗結論
化合物每天1次經口灌胃給藥，連續2周，化合物3-P1和化合物16均可不同程度的改善CIA大鼠關節炎症狀，且其治療作用呈現較強的劑量相關性。
其中所有化合物對CIA大鼠後肢足容積腫脹的治療作用從強到弱依次為：化合物3-P1 3mg/kg>化合物3-P1 1mg/kg>Abrocitinib 3mg/kg
Figure 110145234-A0101-12-0186-340
化合物3-P1 0.3mg/kg>化合物16 10mg/kg>化合物16 3mg/kg。所有化合物對降低CIA大鼠關節炎指數的治療作用從強到弱依次為：化合物3-P1 3mg/kg>化合物3-P1 1mg/kg>化合物3-P1 0.3mg/kg>Abrocitinib 3mg/kg>化合物16 10mg/kg>化合物16 3mg/kg。
綜上所述，同等給藥劑量下，化合物3-P1在CIA大鼠關節炎模型上藥效強於陽性對照化合物Abrocitinib。
以上所述實施例的各技術特徵可以進行任意的組合，為使描述簡潔，未對上述實施例中的各個技術特徵所有可能的組合都進行描述，然而，只要這些技術特徵的組合不存在矛盾，都應當認為是本說明書記載的範圍。
以上所述實施例僅表達了本發明的幾種實施方式，其描述較為具體和詳細，但並不能因此而理解為對發明專利範圍的限制。應當指出的是，對於本領域的普通技術人員來說，在不脫離本發明構思的前提下，還可以做出若干變形和改進，這些都屬於本發明的保護範圍。因此，本發明專利的保護範圍應以所附申請專利範圍為准。
Figure 110145234-A0101-11-0002-343

Claims (16)

  1. 一種氮雜並環化合物，具有通式(I)所示結構的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥：
    Figure 110145234-A0101-13-0001-124
    其中，L0選自單鍵和NR1；
    X1選自CH和N；
    X2選自CR4和N；
    R4為氰基，R1選自-H和C1-C3烷基，或R1與R4一起形成5~6元飽和或不飽和環；所述5~6元飽和或不飽和環被R6取代；
    R6選自-H、=O、-OH、C1-C4烷基和C1-C4烷基羥基；
    X3選自CH和N；
    n選自1和2；
    m=2；兩個R0取代於同一碳原子之上或取代於相鄰碳原子之上，且兩個R0互相連接形成4~6元飽和氮雜環或4~6元飽和碳環；所述4~6元飽和氮雜環或4~6元飽和碳環分別獨立地被R2取代；
    R2選自-S(O)2(C1-C6烷基)、-S(O)2(CH2)q-(3-6元環烷基)、-C(O)CH2CN、-NH-S(O)2(C1-C6烷基)、-NH-S(O)2(CH2)q-(3-6元環 烷基)、-NH-C(O)CH2CN、
    Figure 110145234-A0101-13-0001-125
    和
    Figure 110145234-A0101-13-0001-126
    ；
    R5選自C1-C5烷基、氰基、3-5元飽和環烷基、C1-C5烷氧基、-S-C1-C5烷基、-O-(CH2)p-(3-6元環烷基)和-S-(CH2)p-(3-6元環烷基)；
    q、p分別獨立選自0、1、2和3；
    條件是，當X2為N時，R2不為-C(O)CH2CN；當X2為N，且兩個R0取代於相鄰碳原子之上時，兩個R0互相連接形成4~6元飽和碳環；
    優選地，所述4~6元飽和氮雜環、4~6元飽和碳環選自如下基 團中的一種，環原子中有1或2個碳原子為與基團
    Figure 110145234-A0101-13-0002-131
    所共有的 碳原子：
    Figure 110145234-A0101-13-0002-492
    進一步優選地，所述化合物具有如下式(I-1)或所述結構特徵：
    Figure 110145234-A0101-13-0002-493
    優選地，R2選自
    Figure 110145234-A0101-13-0002-129
    ；
    其中，R5選自-S-(3-5元環烷基)、C1-C3烷氧基和-S-C1-C3烷基；
    優選地，R1選自C1-C2烷基；
    優選地，X1選自CH；
    進一步優選地，所述化合物具有如下式(I-2)所述結構特徵：
    Figure 110145234-A0101-13-0003-494
    優選地，X2為N；
    R2選自-S(O)2(C1-C3烷基)、-S(O)2CH2-(3-4元環烷基)和
    Figure 110145234-A0101-13-0003-133
    ；其中，R5選自-S-(3-5元環烷基)、C1-C3烷氧基和 -S-C1-C3烷基；
    優選地，X2為CR4；
    R2選自-S(O)2(C1-C3烷基)、-S(O)2CH2-(3-4元環烷基)、 -C(O)CH2CN和
    Figure 110145234-A0101-13-0003-134
    ；R5選自C1-C3烷氧基；
    優選地，X1選自CH；
    進一步優選地，所述化合物具有如下式(I-3)所述結構特徵：
    Figure 110145234-A0101-13-0003-495
    優選地，X2為N；
    R2選自
    Figure 110145234-A0101-13-0003-136
    ；
    其中，R5選自C1-C3烷氧基和-S-C1-C3烷基；
    優選地，R1選自CH3；
    優選地，X1選自CH；
    進一步優選地，所述化合物具有如下式(I-4)所述結構特徵：
    Figure 110145234-A0101-13-0004-498
    優選地，X2為N；
    R2選自-S(O)2(C1-C3烷基)和如下基團：
    Figure 110145234-A0101-13-0004-137
    ；其中，R5選自C1-C3烷氧基和-S-C1-C3烷基；
    優選地，R1選自CH3；
    優選地，X1選自CH；
    進一步優選地，所述化合物具有如下式(I-5)所述結構特徵：
    Figure 110145234-A0101-13-0004-497
    X4選自CH或N；
    環A表示所述5~6元飽和或不飽和環；
    優選地，環A選自如下基團之一：
    Figure 110145234-A0101-13-0004-496
    其中，X5、X7、X9、X10分別獨立地選自NR6、CHR6和C(R6)2；
    X6、X8、X11分別獨立地選自N和CR6；
    優選地，R6選自-H、-OH、C1-C3烷基和C1-C3烷基羥基；
    優選地，R2選自如下基團：
    Figure 110145234-A0101-13-0005-499
    R5選自C1-C3烷氧基和-S-C1-C3烷基；
    優選地，X1選自CH；
    優選地：
    X4為N；
    環A為
    Figure 110145234-A0101-13-0005-142
    或
    Figure 110145234-A0101-13-0005-143
    ；
    R2為
    Figure 110145234-A0101-13-0005-144
    ；
    R5選自C1-C3烷氧基和-S-C1-C3烷基；
    X5各自獨立地為NR6或CHR6；
    X6各自獨立地為N或CR6；
    R6選自-H、-OH、C1-C3烷基和C1-C3烷基羥基；
    優選地：
    X4為N；
    環A
    Figure 110145234-A0101-13-0005-145
    ；
    R2為
    Figure 110145234-A0101-13-0005-146
    ；
    R5為C1-C3烷氧基；
    X6之一為N，另一個為CR6；
    R6為C1-C3烷基。
  2. 一種氮雜並環化合物，具有通式(a)所示結構的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥：
    Figure 110145234-A0101-13-0006-147
    其中：
    L為NRc或鍵；
    Y1選自CH或N；
    Y2選自CH或N；
    Y3選自CH或N；
    Ra選自-C(O)R7、-C(O)NR8R9、-S(O)2R10和-S(O)2NR10R11；
    Rb選自-H、-CN、鹵素、C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、-NR’R”、-ORx和-SRx；
    Rc為H或C1-6烷基；
    R7為含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜芳基， 其任選經1-3個獨立選自以下的取代基取代：-H、-ORx、-SRx、-CN、鹵素、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
    R8選自6-10元芳基、5-8元環烷基、含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜芳基和含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜環基；所述芳基、環烷基、雜芳基和雜環基各自任選經1-3個獨立選自以下的取代基取代：-H、-ORx、-SRx、-CN、鹵素、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
    R9選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
    R10選自C1-6烷基、6-10元芳基、5-8元環烷基、含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜芳基和含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜環基；所述芳基、環烷基、雜芳基和雜環基各自任選經1-3個獨立選自以下的取代基取代：-H、-ORx、-SRx、-CN、鹵素、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
    R11選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
    Rx選自-H、C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、C2-6烯基和-C2-6炔基；
    R’和R”各自獨立地選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
    m1為0、1、2或3；
    m2為0、1、2或3；
    n1為1、2或3；
    n2為1、2或3。
  3. 一種氮雜並環化合物，具有通式(b)、(b-1)或(b-2)所示結構的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥：
    Figure 110145234-A0101-13-0008-148
    其中：
    Y1選自CH和N，其中當Y1為CH時，其取代有Rb；
    Rb選自-H、-CN、鹵素、C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、-NR’R”、-ORx和-SRx；
    Ra選自-C(O)R7、-C(O)NR8R9、-S(O)2R10和-S(O)2NR10R11；
    R7為含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜芳基，其任選經1-3個獨立選自以下的取代基取代：-H、-ORx、-SRx、-CN、鹵素、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
    R8選自6-10元芳基、5-8元環烷基、含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜芳基和含有1-3個獨立選自N、O和S 的雜原子的5-8元雜環基；所述芳基、環烷基、雜芳基和雜環基各自任選經1-3個獨立選自以下的取代基取代：-H、-ORx、-SRx、-CN、鹵素、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
    R9選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
    R10選自C1-6烷基、6-10元芳基、5-8元環烷基、含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜芳基和含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜環基；所述芳基、環烷基、雜芳基和雜環基各自任選經1-3個獨立選自以下的取代基取代：-H、-ORx、-SRx、-CN、鹵素、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
    R11選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
    Rx選自-H、C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、C2-6烯基和-C2-6炔基；
    m1為0、1、2或3；
    m2為0、1、2或3；
    n1為1、2或3；
    n2為1、2或3；
    優選地，其中：
    Y1為N；
    Ra選自-C(O)NR8R9；
    R9為-H；
    R8選自6-10元芳基、含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜芳基和含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜環基；所述芳基、雜芳基和雜環基各自任選經1-3個獨立 選自以下的取代基取代：-H、-ORx、-SRx、-CN、鹵素、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
    Rx選自-H、C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、C2-6烯基和-C2-6炔基；
    m1為0、1、2或3；
    m2為0、1、2或3；
    n1為1、2或3；
    n2為1、2或3；
    優選地，其中：
    Y1為N；
    Ra選自-C(O)NR8R9；
    R9為-H；
    R8選自苯基和含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-6元雜芳基；所述苯基和雜芳基各自任選經1-3個獨立選自以下的取代基取代：-ORx、-SRx和-CN；
    Rx選自C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
    m1為0、1、2或3；
    m2為0、1、2或3；
    n1為1、2或3；
    n2為1、2或3；
    優選地，其中：
    Y1為N；
    Ra選自-C(O)NR8R9；
    R9為-H；
    R8為含有1-3個獨立選自N和S的雜原子的5-6元雜芳基；所述雜芳基任選經1-2個獨立選自以下的取代基取代：-ORx和-SRx；
    Rx為C1-4烷基；
    m1為0、1、2或3；
    m2為0、1、2或3；
    n1為1、2或3；
    n2為1、2或3；
    優選地，其中：
    Y1為N；
    Ra選自-C(O)NR8R9；
    R9為-H；
    R8為含有3個獨立選自N和S的雜原子的5元雜芳基；所述雜芳基經獨立選自以下的取代基取代：-ORx和-SRx；
    Rx為C1-4烷基，優選為甲基或乙基；
    m1為0；
    m2為3；
    n1為2；
    n2為1。
  4. 一種氮雜並環化合物，具有通式(c)所示結構的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥：
    Figure 110145234-A0101-13-0012-149
    其中：
    Ra選自-C(O)R7、-C(O)NR8R9、-S(O)2R10和-S(O)2NR10R11；
    Rb選自-H、-CN、鹵素、C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、-NR’R”、-ORx和-SRx；
    R7為含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜芳基，其任選經1-3個獨立選自以下的取代基取代：-H、-ORx、-SRx、-CN、鹵素、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
    R8選自6-10元芳基、5-8元環烷基、含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜芳基和含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜環基；所述芳基、環烷基、雜芳基和雜環基各自任選經1-3個獨立選自以下的取代基取代：-H、-ORx、-SRx、-CN、鹵素、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
    R9選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
    R10選自C1-6烷基、6-10元芳基、5-8元環烷基、含有1-3個 獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜芳基和含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜環基；所述芳基、環烷基、雜芳基和雜環基各自任選經1-3個獨立選自以下的取代基取代：-H、-ORx、-SRx、-CN、鹵素、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
    R11選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
    Rx選自-H、C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、C2-6烯基和-C2-6炔基；
    R’和R”各自獨立地選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
    m1為0、1、2或3；
    m2為0、1、2或3；
    n1為1、2或3；
    n2為1、2或3；
    優選地，其中：
    Ra選自-S(O)2R10和-S(O)2NR10R11；
    Rb選自-CN、鹵素、-ORx和-SRx；
    R10選自C1-6烷基和含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜芳基；所述雜芳基任選經1-3個獨立選自以下的取代基取代：-ORx、-SRx、-CN、鹵素、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
    R11選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
    Rx選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
    m1為0、1、2或3；
    m2為0、1、2或3；
    n1為1、2或3；
    n2為1、2或3；
    優選地，其中：
    Ra選自-S(O)2R10；
    Rb為-CN；
    R10為C1-6烷基；
    m1為0、1、2或3；
    m2為0、1、2或3；
    n1為1、2或3；
    n2為1、2或3；
    優選地，其中：Ra為-S(O)2R10；
    Rb為-CN；
    R10為C1-4烷基，優選為丙基；
    m1為0；
    m2為2；
    n1為2；
    n2為1。
  5. 一種氮雜並環化合物，具有通式(d)、(d-1)或(d-2)所示結構的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，
    Figure 110145234-A0101-13-0015-150
    其中：
    Y1選自CH和N；
    R8選自6-10元芳基、5-8元環烷基、含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜芳基和含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜環基；所述芳基、環烷基、雜芳基和雜環基各自任選經1-3個獨立選自以下的取代基取代：-H、-ORx、-SRx、-CN、鹵素、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
    Rb選自-H、-CN、鹵素、C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、-NR’R”、-ORx和-SRx；
    Rc選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
    Rd選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
    Re選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
    Rx選自-H、C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、C2-6烯基和-C2-6炔基；
    R’和R”各自獨立地選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
    p1為0、1或2；
    p2為0、1或2；
    q1為0、1或2；
    q2為0、1或2。
  6. 一種氮雜並環化合物，具有通式(e)、(e-1)或(e-2)所示結構的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，
    Figure 110145234-A0101-13-0016-151
    其中：
    R8選自6-10元芳基、5-8元環烷基、含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜芳基和含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜環基；所述芳基、環烷基、雜芳基和雜環基各自任選經1-3個獨立選自以下的取代基取 代：-H、-ORx、-SRx、-CN、鹵素、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
    Rc選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
    Rd選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
    Re選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
    Rx選自-H、C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、C2-6烯基和-C2-6炔基；
    p1為0、1或2；
    p2為0、1或2；
    q1為0、1或2；
    q2為0、1或2；
    優選地，其中：
    R8選自苯基和含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-6元雜芳基；所述苯基和雜芳基各自任選經1-3個獨立選自以下的取代基取代：-ORx、-SRx、-CN和鹵素；
    Rc選自-H和C1-6烷基；
    Rd選自-H和C1-6烷基；
    Re選自-H和C1-6烷基；
    Rx選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
    p1為0、1或2；
    p2為0、1或2；
    q1為0、1或2；
    q2為0、1或2；
    優選地，其中：
    R8為含有1-3個獨立選自N和S的雜原子的5-6元雜芳基；所述雜芳基任選經1-3個獨立選自以下的取代基取代：-ORx和-SRx；
    Rc選自-H和C1-4烷基；
    Rd選自-H和C1-4烷基；
    Re選自-H和C1-4烷基；
    Rx為C1-4烷基；
    p1為1或2；
    p2為1或2；
    q1為1或2；
    q2為1或2；
    優選地，其中：
    R8為含有3個獨立選自N和S的雜原子的5元雜芳基；所述雜芳基經-ORx取代；
    Rc為C1-4烷基，優選為甲基；
    Rd為-H；
    Re為-H；
    Rx為C1-4烷基，優選為甲基；
    p1為1；
    p2為1；
    q1為1；
    q2為1。
  7. 一種氮雜並環化合物，具有通式(f)、(f-1)或(f-2)所示結構的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，
    Figure 110145234-A0101-13-0019-152
    R8選自6-10元芳基、5-8元環烷基、含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜芳基和含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜環基；所述芳基、環烷基、雜芳基和雜環基各自任選經1-3個獨立選自以下的取代基取代：-H、-ORx、-SRx、-CN、鹵素、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
    Rc和Rf與它們所連接的原子一起形成含有1-2個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜芳基或含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-8元雜環基；所述雜芳基或雜環基經獨立選自 以下的取代基取代：-H、氧代、-ORx、-SRx、-CN、鹵素、C1-6烷基、鹵代C1-6烷基和羥基取代的C1-6烷基；
    Rd選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
    Re選自-H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基；
    Rx選自-H、C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、C2-6烯基和-C2-6炔基；
    p1為0、1或2；
    p2為0、1或2；
    q1為0、1或2；
    q2為0、1或2；
    優選地，其中：
    R8選自苯基和含有1-3個獨立選自N、O和S的雜原子的5-6元雜芳基；所述苯基和雜芳基各自任選經1-3個獨立選自以下的取代基取代：-ORx、-SRx、-CN和鹵素；
    Rc和Rf與它們所連接的原子一起形成含有1-2個獨立選自N、O和S的雜原子的5-6元雜芳基；所述雜芳基經1-2個獨立選自以下的取代基取代：-ORx、-SRx、C1-4烷基和羥基取代的C1-4烷基；
    Rd選自-H和C1-4烷基；
    Re選自-H和C1-4烷基；
    Rx選自-H、C1-4烷基和鹵代C1-4烷基；
    p1為0、1或2；
    p2為0、1或2；
    q1為0、1或2；
    q2為0、1或2；
    優選地，其中：
    R8為含有1-3個獨立選自N和S的雜原子的5-6元雜芳基；所述雜芳基任選經1-3個-ORx取代；
    Rc和Rf與它們所連接的原子一起形成含有2個N原子的5-6元雜芳基；所述雜芳基經1-2個選自-H、C1-4烷基和羥基取代的C1-4烷基的取代基取代；
    Rd為-H；
    Re為-H；
    Rx為C1-4烷基；
    p1為1；
    p2為1；
    q1為1；
    q2為1；
    優選地，其中：
    R8為含有3個獨立選自N和S的雜原子的5元雜芳基；所述雜芳基經-ORx取代；
    Rc和Rf與它們所連接的原子一起形成含有2個N原子的5元雜芳基；所述雜芳基經C1-4烷基優選甲基取代；
    Rd為-H；
    Re為-H；
    Rx為C1-4烷基，優選為甲基；
    p1為1；
    p2為1；
    q1為1；
    q2為1。
  8. 如請求項1所述的氮雜並環化合物，其特徵在於，所述氮雜並環化合物選自如下化合物中的一種：
    Figure 110145234-A0101-13-0022-154
    Figure 110145234-A0101-13-0023-501
  9. 一種氮雜並環化合物的製備方法，所述氮雜並環化合物具有通式(I)所示結構的化合物或者其立體異構體、N-氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可以接受的鹽、多晶型、前藥，其特徵在於，所述製備方法包括如下步驟：
    Figure 110145234-A0101-13-0023-156
    中間體1
    Figure 110145234-A0101-13-0023-157
    中間體2
    Figure 110145234-A0101-13-0023-158
    中間體1與中間體2進行取代反應，製備式(I)化合物；
    式(I)化合物與包含R2的化合物進行取代或縮合反應；
    作為選擇，L0中的R1可以與X2中的R4一起形成5~6元不飽和環；所述5~6元不飽和環被R6取代；
    其中包含R2的化合物選自如下化合物中的一種：
    R2-X、R2-H、
    Figure 110145234-A0101-13-0024-159
    和
    Figure 110145234-A0101-13-0024-160
    ；
    X表示鹵素，L0、R1、R0、R2、R6、X1、X2、R4、X3、n和m的定義同請求項1~8中任一項所述。
  10. 一種藥物組成物，其特徵在於，所述藥物組成物包含請求項1~8任一項所述的氮雜並環化合物。
  11. 一種如請求項1~8任一項所述的氮雜並環化合物在製備具有酪氨酸激酶JAK抑制活性之藥物的用途。
  12. 一種如請求項1~8任一項所述的氮雜並環化合物在製備具有預防或治療自身免疫性疾病、皮膚病、變應性疾病、器官排斥、癌症、乾眼病、骨髓纖維化、紅細胞增多症的功效之藥物的用途；
    優選地，所述自身免疫性疾病為狼瘡、多發性硬化、類風濕性關節炎、青少年關節炎、銀屑病、潰瘍性結腸炎、克羅恩氏病或自體免疫性甲狀腺疾病；所述皮膚病為牛皮癬、皮疹或特應性皮炎；所述變應性病症為哮喘或鼻炎病；所述器官移植排斥為異體抑制排斥或移植物抗宿主疾病；所述癌症為腎癌、肝癌、胰腺癌、胃癌、乳腺癌、***癌、頭頸部癌、甲狀腺癌、肺癌、膠質母細胞瘤、黑素瘤、淋巴瘤、白血病。
  13. 如請求項1-8中任一項所述的氮雜並環化合物或如請求項10所述的藥物組成物，其用於抑制酪氨酸激酶JAK。
  14. 如請求項1-8中任一項所述的氮雜並環化合物或如請求項10所述的藥物組成物，其用於預防或治療選自以下的疾病：自身免疫性疾病、皮膚病、變應性疾病、器官排斥、癌症、乾眼病、骨髓纖維化和紅細胞增多症。
  15. 如請求項14所述的氮雜並環化合物或如請求項14所述的組成物，其中所述自身免疫性疾病為狼瘡、多發性硬化、類風濕性關節炎、青少年關節炎、銀屑病、潰瘍性結腸炎、克羅恩氏病或自體免疫性甲狀腺疾病；所述皮膚病為牛皮癬、皮疹或特應性皮炎；所述變應性病症為哮喘或鼻炎病；所述器官移植排斥為異體抑制排斥或移植物抗宿主疾病；所述癌症為腎癌、肝癌、胰腺癌、胃癌、乳腺癌、***癌、頭頸部癌、甲狀腺癌、肺癌、膠質母細胞瘤、黑素瘤、淋巴瘤或白血病。
  16. 一種抑制酪氨酸激酶JAK的方法，其包括給予如請求項1~8中任一項所述的氮雜並環化合物或如請求項10所述的藥物組成物。
TW110145234A 2020-12-04 2021-12-03 氮雜並環化合物、其製備方法、抑制酪氨酸激酶的方法、藥物組成物及其用途 TW202227452A (zh)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202011403119 2020-12-04
CN202011403119.5 2020-12-04
CN202110838597 2021-07-23
CN202110838597.7 2021-07-23

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TW202227452A true TW202227452A (zh) 2022-07-16

Family

ID=81813944

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW110145234A TW202227452A (zh) 2020-12-04 2021-12-03 氮雜並環化合物、其製備方法、抑制酪氨酸激酶的方法、藥物組成物及其用途

Country Status (3)

Country Link
CN (1) CN114591321A (zh)
TW (1) TW202227452A (zh)
WO (1) WO2022117075A1 (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN117586285B (zh) * 2024-01-19 2024-04-05 英矽智能科技(上海)有限公司 三并环类化合物

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN100351253C (zh) * 2000-06-26 2007-11-28 辉瑞产品公司 作为免疫抑制剂的吡咯并[2,3－d]嘧啶化合物
TWI466885B (zh) * 2009-07-31 2015-01-01 Japan Tobacco Inc 含氮螺環化合物及其醫藥用途
JP6075736B2 (ja) * 2011-12-21 2017-02-08 ジエンス ヘンルイ メデイシンカンパニー リミテッドＪｉａｎｇｓｕ Ｈｅｎｇｒｕｉ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｃｏ．，Ｌｔｄ． ピロール−６員ヘテロアリール環誘導体、その合成法およびその医薬用途
EP3417861B1 (en) * 2016-02-19 2020-09-23 Jiangsu Hengrui Medicine Co., Ltd. Pharmaceutical composition containing jak kinase inhibitor or pharmaceutically acceptable salt thereof
MX2019005319A (es) * 2016-11-23 2019-06-20 Jiangsu Hengrui Medicine Co Método de preparación e intermediario de derivado de un anillo heteroaromático de seis miembros pirrolo.
CN108570048B (zh) * 2017-03-10 2021-06-08 广东东阳光药业有限公司 取代的杂芳基化合物及其组合物和用途
CN111662295B (zh) * 2019-03-05 2021-09-10 珠海宇繁生物科技有限责任公司 一种irak4激酶抑制剂及其制备方法
CN113631557B (zh) * 2019-03-14 2024-03-15 上海华汇拓医药科技有限公司 Jak激酶抑制剂及其制备方法和在医药领域的应用

Also Published As

Publication number Publication date
WO2022117075A1 (zh) 2022-06-09
CN114591321A (zh) 2022-06-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2016203348B2 (en) Macrocyclic compounds as trk kinase inhibitors
CN105732636B (zh) 杂芳化合物及其在药物中的应用
CN109970743B (zh) 为jak抑制剂的5-氯-2-二氟甲氧基苯基吡唑并嘧啶化合物
CN107011348B (zh) 作为btk活性的抑制剂的杂芳基吡啶酮和氮杂-吡啶酮化合物
CN111153901A (zh) 一类含氮稠杂环类shp2抑制剂化合物、制备方法和用途
WO2023061294A1 (zh) 含氮杂环类衍生物调节剂、其制备方法及应用
BR112020003783A2 (pt) macrociclo contendo aminopirazol e pirimidina e composição farmacêutica e uso da mesma
WO2022111526A1 (zh) 一种苯环衍生物及其组合物和药学上的应用
WO2022134641A1 (zh) 芳香杂环类化合物、药物组合物及其应用
CN112566915A (zh) 噻二唑irak4抑制剂
CN115867346A (zh) 激酶抑制剂
CN115368383A (zh) 稠合含氮杂环类化合物、其制备方法及其在医药上的应用
WO2022117075A1 (zh) 氮杂并环化合物、其制备方法及其用途
TWI841200B (zh) 雜環類化合物、藥物組成物及其應用
WO2023143384A1 (zh) 一种抑制或降解hpk1激酶的化合物及其在医药中的用途
WO2024002284A1 (zh) 五元并六元含氮化合物、其中间体、制备方法和应用
WO2022223022A1 (zh) 一种并环杂环衍生物及其在医药上的应用
US20240034731A1 (en) Aza-quinazoline compounds and methods of use
WO2023151635A1 (zh) 基于喹唑啉取代戊二酰亚胺骨架的化合物及其应用