TW202220961A - Ｐｈｄ抑制劑化合物、組成物及使用方法 - Google Patents

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湯馬士 Ｐ 布雷斯黛爾
杉卡拉 拉烏 雅魯
保羅 Ｅ 佛來明
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Abstract

本發明的一部分係提供具有依據式(I)及其子式之結構的新穎小分子PHD抑制劑：

Description

PHD抑制劑化合物、組成物及使用方法
缺氧為一種氧氣供應不足以維持正常生活功能之情況或狀態，例如，低動脈供氧的情況。缺氧可導致細胞功能性損傷及結構組織損傷。缺氧期間的細胞防禦機制活化係由HIF (缺氧誘導性因子)蛋白介導。因應缺氧情況，由於HIFα脯胺醯基羥化的降低，提高了大部分細胞中的HIFα。HIFα脯胺醯基羥化係藉由以含有脯胺醯基羥化酶結構域的蛋白(PHD1、2及3)（也稱為HIF脯胺醯基羥化酶(HPH-3、2及1)或EGLN-2、1及3）為不同命名的蛋白質家族來實現。該等PHD蛋白為氧感測器，並以氧氣依存性方式調節HIF的穩定性。這三種PHD同功異型體在其調節HIF中係以不同方式作用，且可能有其他非HIF相關的調節作用。
事實上，許多研究顯現出HIF的穩定可減弱組織發炎並促進組織修復。因此，可抑制PHD蛋白活性之化合物可能是特別有益的療法(Lee等人 (2019) Exp. Mol. Med. 51:68)。
文係描述對以下疾病的治療有效用之新穎小分子PHD抑制劑，所述疾病包括(但不限於)心臟疾病(例如缺血性心臟病、鬱血性心臟衰竭及心臟瓣膜疾病)、肺臟疾病(例如肺臟發炎、肺炎、急性肺損傷、肺動脈高血壓、肺部纖維化及慢性阻塞性肺病)、呼吸道疾病(例如呼吸道感染、急性呼吸窘迫症候群)、肝臟疾病(例如急性肝衰竭及肝纖維化及肝硬化)、及腎臟疾病(例如急性腎損傷及慢性腎病)、發炎性腸道疾病(IBD)、缺血性再灌注損傷（例如中風）、及早產兒視網膜病變(ROP)。
本發明尤其提供對以下疾病的治療有效用之新穎小分子PHD抑制劑，所述疾病包括(但不限於)心臟疾病(例如缺血性心臟病、鬱血性心臟衰竭及心臟瓣膜疾病)、肺臟疾病(例如肺臟發炎、肺炎、急性肺損傷、肺動脈高血壓、肺部纖維化及慢性阻塞性肺病)、呼吸道疾病(例如呼吸道感染、急性呼吸窘迫症候群)、肝臟疾病(例如急性肝衰竭及肝纖維化及肝硬化)、及腎臟疾病(例如急性腎損傷及慢性腎病)、發炎性腸道疾病(IBD)、缺血性再灌注損傷（例如中風）、及早產兒視網膜病變(ROP)。
在一態樣中，本文提供具有依據式(I)結構之化合物，
Figure 02_image004
(I) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： R 1為視情況經取代之C 1-3烷基、視情況經取代之C 3-6環烷基、或視情況經取代之3至6員雜環烷基； R 2為氫、視情況經取代之C 1-3烷基、鹵素、CN、或視情況經取代之環烷基； R 3為氫、視情況經取代之烷基、視情況經取代之雜芳基、視情況經取代之環烷基、視情況經取代之雜環烷基、羰基、***、硫醚、視情況經取代之芳磺醯基、視情況經取代之雜芳磺醯基、視情況經取代之芳烷基、視情況經取代之炔基、或視情況經取代之雜炔基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基；且 R 6為OH或酯(例如，本文所述之OR 18)。
在實施例中，化合物具有依據式(I)之結構
Figure 02_image006
(I) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，且其中R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基，或者R 1為C 3-6環烷基或3至6員雜環烷基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 3係選自以下組成之群組： 氫；
Figure 02_image008
，其中X為共價鍵、O、S、SO 2、C 1‑4亞烷基、C 2-4亞炔基、或C 2-4雜亞炔基；每個A獨立地為N或CR 9、R 8及R 9獨立地為氫、鹵素、OR 10、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，而R 10為C 1-3烷基或芳基；
Figure 02_image010
，其中B為N或CR 11，D為N、NH或CR 11，E為N、CR 11或CHR 12，而R 11及R 12獨立地為氫或C 1-3烷基，且其中虛線圓圈代表共軛系統的存在或不存在；
Figure 02_image012
，其中每個G獨立地為N、NH、NR 13或CR 14；R 13為C 3-6環烷基、3至6員雜環烷基、視情況經一或多個鹵素所取代之芳基、視情況經一或多個視情況取代的C 1-3烷基所取代之芳基、雜芳基、視情況經t-丁氧基羰基所取代之雜環烷基、視情況經芳基所取代之C 1-4烷基且該芳基視情況經一或多個鹵素取代，而R 14為氫、鹵素、C 3-6環烷基、3至6員雜環烷基、或C 1-3烷基；
Figure 02_image014
，其中I為O、S或CH，J為N或CH，R 15為氫、C 3-6環烷基、3至6員雜環烷基、或C 1-3烷基，而R 19為氫、C 3-6環烷基、3至6員雜環烷基、或芳基； OR 16，其中R 16為芳基；
Figure 02_image016
，其中X 1為N或CH，而R 20為視情況經取代之芳基；以及 COR 17，其中R 17為芳基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基；且 R 6為OH或OR 18，其中R 18為C 1-6烷基。
在實施例中，式(I)化合物具有依據式(II)之結構
Figure 02_image018
(II) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，且其中R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基，或者R 1為C 3-6環烷基或3至6員雜環烷基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 3係選自以下組成之群組： 氫；
Figure 02_image020
，其中X為共價鍵、O、S、SO 2、C 1‑4亞烷基、C 2-4亞炔基、或C 2-4雜亞炔基；每個A獨立地為N或CR 9、R 8及R 9獨立地為氫、鹵素、OR 10、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，而R 10為C 1-3烷基或芳基；
Figure 02_image022
，其中B為N或CR 11，D為N、NH或CR 11，E為N、CR 11或CHR 12，而R 11及R 12獨立地為氫或C 1-3烷基，且其中虛線圓圈代表共軛系統的存在或不存在；
Figure 02_image024
，其中每個G獨立地為N、NR 13、CR 14，R 13為C 3-6環烷基、3至6員雜環烷基、視情況經一或多個鹵素所取代之芳基、視情況經一或多個視情況取代的C 1-3烷基所取代之芳基、雜芳基、視情況經t-丁氧基羰基所取代之雜環烷基、視情況經芳基所取代之C 1-4烷基且該芳基視情況經一或多個鹵素取代，而R 14為氫、鹵素、C 3-6環烷基、3至6員雜環烷基、或C 1-3烷基；
Figure 02_image026
，其中I為O、S或CH，J為N或CH，R 15為氫、C 3-6環烷基、3至6員雜環烷基、或C 1-3烷基，而R 19為氫、C 3-6環烷基、3至6員雜環烷基、或芳基； OR 16，其中R 16為芳基；
Figure 02_image028
，其中X 1為N或CH，而R 20為視情況經取代之芳基；以及 COR 17，其中R 17為芳基； 且 R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基。
在實施例中，R 1為視情況經取代之C 1-3烷基；及/或 R 3為氫、視情況經取代之芳基、視情況經取代之雜芳基、視情況經取代之環烷基、視情況經取代之雜環烷基、羰基或醚。
在實施例中，R 1為視情況經OR 7或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，且其中R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基；及/或 R 3係選自以下組成之群組：氫、
Figure 02_image029
、
Figure 02_image031
、
Figure 02_image032
、或
Figure 02_image033
。
在實施例中，R 3為
Figure 02_image035
、
Figure 02_image037
、
Figure 02_image039
、
Figure 02_image041
、
Figure 02_image043
、
Figure 02_image045
、
Figure 02_image047
、
Figure 02_image049
、或
Figure 02_image051
。
在實施例中，R 1為未經取代之C 1-3烷基，R 2為氫，R 4及R 5各為氫，而R 6為OH。
在實施例中，R 1及R 2各為未經取代之C 1-3烷基，R 4及R 5各為氫，而R 6為OH。
在實施例中，R 2為未經取代之C 1-3烷基，R 3為氫，R 4及R 5各為氫，而R 6為OH。
在實施例中，化合物具有依據式(III)之結構
Figure 02_image053
(III) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中 每個A獨立地為N或CR 9； R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基； R 8及R 9獨立地為氫、鹵素、OR 10、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基；且 R 10為C 1-3烷基或芳基。
在實施例中，化合物具有依據式(IV)之結構
Figure 02_image055
(IV) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中 R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基； R 8及R 9獨立地為氫、鹵素、OR 10、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基；且 R 10為C 1-3烷基或芳基。
在實施例中，化合物具有依據式(V)之結構
Figure 02_image057
(V) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基； R 8及每個R 9獨立地為氫、鹵素、OR 10、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基；且 R 10為C 1-3烷基或芳基。
在實施例中，化合物具有依據式(VI)之結構
Figure 02_image059
(VI) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中 B為N或CR 11； D為N、NH或CR 11； E為N、CR 11或CHR 12； R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基； R 11及R 12獨立地為氫或C 1-3烷基；且 其中虛線圓圈代表共軛系統的存在或不存在。
在實施例中，化合物具有依據式(VII)之結構
Figure 02_image061
(VII) 或其醫藥學上可接受之鹽。
在實施例中，化合物具有依據式(VIII)之結構
Figure 02_image063
(VIII) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： B為N或CR 11； R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基；且 R 12為氫或C 1-3烷基。
在實施例中，化合物具有依據式(IX)之結構
Figure 02_image065
(IX) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： 每個G獨立地為N、NH、NR 13或CR 14； R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，且其中R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； R 13為環丙基、視情況經一或多個鹵素所取代之芳基、視情況經一或多個視情況取代的C 1-3烷基所取代之芳基、雜芳基、視情況經t-丁氧基羰基所取代之雜環烷基、視情況經芳基所取代之C 1-4烷基且該芳基視情況經一或多個鹵素取代；且 R 14為氫、鹵素、環丙基、或C 1-3烷基。
在實施例中，化合物具有依據式(X)之結構
Figure 02_image067
(X) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： 每個G獨立地為N、NR 13或CR 14； R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，且其中R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； R 13為環丙基、視情況經一或多個鹵素所取代之芳基、視情況經一或多個視情況取代的C 1-3烷基所取代之芳基、雜芳基、視情況經t-丁氧基羰基所取代之雜環烷基、視情況經芳基所取代之C 1-4烷基且該芳基視情況經一或多個鹵素取代；且 R 14為氫、鹵素、環丙基、或C 1-3烷基。
在實施例中，化合物具有依據式(XI)之結構
Figure 02_image069
(XI) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中 每個G獨立地為N或NR 13； R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，且其中R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； R 13為環丙基、雜芳基、視情況經一或多個鹵素所取代之芳基、視情況經一或多個視情況取代的C 1-3烷基所取代之芳基、視情況經t-丁氧基羰基所取代之雜環烷基、視情況經芳基所取代之C 1-4烷基且該芳基視情況經一或多個鹵素取代；且 R 14為氫、鹵素、環丙基、或C 1-3烷基。
在實施例中，化合物具有依據式(XIIa)或式(XIIb)之結構
Figure 02_image071
Figure 02_image073
(XIIa)                                            (XIIb) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基； R 13為環丙基、雜芳基、視情況經一或多個鹵素所取代之芳基、視情況經一或多個視情況取代的C 1-3烷基所取代之芳基、視情況經t-丁氧基羰基所取代之雜環烷基、視情況經芳基所取代之C 1-4烷基且該芳基視情況經一或多個鹵素取代；且 R 14為氫、鹵素、環丙基、或C 1-3烷基。
在實施例中，化合物具有依據式(XIII)之結構
Figure 02_image075
(XIII) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基；且 R 13為芳基或雜芳基。
在實施例中，化合物具有依據式(XIV)之結構
Figure 02_image077
(XIV) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： I為O、S或CH； J為N或CH； R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，且其中R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； R 15為氫或C 1-3烷基；且 R 19為氫或芳基。
在實施例中，化合物具有依據式(XV)之結構
Figure 02_image079
(XV) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： I為O、S或CH； R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基；且 R 15為氫或C 1-3烷基。 R 19為氫或芳基。
在實施例中，化合物具有依據式(XVI)之結構
Figure 02_image081
(XVI) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中 X為O、S或SO 2； R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基； R 8及R 9獨立地為氫、鹵素、OR 10、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基；且 R 10為C 1-3烷基或芳基。
在實施例中，化合物具有依據式(XVII)之結構
Figure 02_image083
(XVII) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中 R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基； R 8及R 9獨立地為氫、鹵素、OR 10、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基；且 R 10為C 1-3烷基或芳基。
在實施例中，化合物具有依據式(XVIII)之結構
Figure 02_image085
(XVIII) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中 R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基； R 8及R 9獨立地為氫、鹵素、OR 10、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基；且 R 10為C 1-3烷基或芳基。
在實施例中，化合物具有依據式(XIX)之結構
Figure 02_image087
(XIX) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基；且 R 13為環丙基、視情況經一或多個鹵素所取代之芳基、視情況經一或多個視情況取代的C 1-3烷基所取代之芳基、雜芳基、視情況經t-丁氧基羰基所取代之雜環烷基、視情況經芳基所取代之C 1-4烷基且該芳基視情況經一或多個鹵素取代。
在實施例中，化合物具有依據式(XX)之結構
Figure 02_image089
(XX) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基；且 R 13為環丙基、視情況經一或多個鹵素所取代之芳基、視情況經一或多個視情況取代的C 1-3烷基所取代之芳基、雜芳基、視情況經t-丁氧基羰基所取代之雜環烷基、視情況經芳基所取代之C 1-4烷基且該芳基視情況經一或多個鹵素取代。
在實施例中，化合物具有依據式(XXI)之結構
Figure 02_image091
(XXI) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基；且 R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基。
在實施例中，化合物具有依據式(XXII)之結構
Figure 02_image093
(XXII) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基；且 R 20為視情況經取代之芳基。
在實施例中，化合物具有依據式(XXIII)之結構
Figure 02_image095
(XXIII) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基；且 R 20為視情況經取代之芳基。
在實施例中，R 3不是氫。
在實施例中，R 3為未經取代之苯基、氟苯基、氯苯基、二氟苯基、二氯苯基或三氟甲苯基。
在實施例中，R 3為OR 16、SR 16、SO 2R 16、CH 2R 16、CH 2CH 2R 16、C≡CR 16、或C≡CCH 2OR 16，且其中R 16為芳基。在實施例中，R 16為苯基。
在實施例中，R 3為吡咯基、四唑基、***基或吡唑基，其視情況經芳基或環烷基取代。
在實施例中，R 3為哌啶基或哌嗪基，其視情況經芳基取代。
在實施例中，R 3係未經取代或經環丙基取代、或為未經取代之苯基、氟苯基、氯苯基、二氟苯基、二氯苯基或三氟甲苯基。
在實施例中，R 3為COR 17，且其中R 17為芳基。在實施例中，R 17為苯基。
在實施例中，R 1為環丙基或經取代之C 1-3烷基。
在實施例中，R 1為環丙基或二氟甲基。
在實施例中，R 1為C 1-3烷基。在實施例中，R 1為CH 2CH 3。在實施例中，R 1為CH 3。在實施例中，R 1為經芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基經鹵素取代。在實施例中，R 1為
Figure 02_image097
。在實施例中，R 1為經OBn所取代之C 1-3烷基。在實施例中，R 1為CH 2CH 2OBn。
在實施例中，R 2為氫。在實施例中，R 2為C 1-3烷基。在實施例中，R 2為CH 3。
在實施例中，R 4為氫且R 5為氫。在實施例中，R 4為氫且R 5為C 1-3烷基。在實施例中，R 5為CH 3。在實施例中，R 4為C 1-3烷基且R 5為C 1-3烷基。在實施例中，R 4為CH 3且R 5為CH 3。
在實施例中，R 4及R 5連同其連接的碳一起形成環烷基或雜環烷基。在實施例中，該環烷基為環丙基。在實施例中，該環烷基為環丁基。在實施例中，該雜環烷基為
Figure 02_image099
。
在實施例中，該化合物為化合物1至50中之任一者：
化合物編號 結構 化合物編號 結構
1
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 26
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2
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7
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或其醫藥學上可接受之鹽。
在實施例中，化合物為化合物51至70中之任一者，
化合物編號 結構 化合物編號 結構
51
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 52
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53
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 54
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或其醫藥學上可接受之鹽。
在實施例中，式(I)–(XXIII)之化合物（諸如化合物1–70中之任一者）中的至少一個氫原子被氘原子取代。
在另一態樣中，本發明的特點為一種包含有本文所述之任何化合物（例如式(I)–(XXIII)之化合物，諸如化合物1–70中之任一者）或其醫藥學上可接受之鹽以及醫藥學上可接受之賦形劑的醫藥組成物。
在另一態樣中，本發明的特點為一種用於治療PHD活性所介導之疾病的方法，其包含向一個體投與本文所述之任何化合物（例如式(I)–(XXIII)之化合物，諸如化合物1–70中之任一者）或其醫藥學上可接受之鹽。
在實施例中，PHD活性所介導之疾病為缺血性再灌注損傷（例如中風、心肌梗塞或急性腎損傷）。
在實施例中，PHD活性所介導之疾病為發炎性腸道疾病（例如潰瘍性結腸炎或克隆氏(Crohn’s)病）。
在實施例中，PHD活性所介導之疾病為癌症（例如大腸直腸癌）。
在實施例中，PHD活性所介導之疾病為肝臟疾病。
在實施例中，PHD活性所介導之疾病為動脈粥狀硬化症。
在實施例中，PHD活性所介導之疾病為心血管疾病。
在實施例中，PHD活性所介導之疾病為眼睛之疾病或病況（例如放射線視網膜病變、早產兒視網膜病變、糖尿病性視網膜病變、老年性黃斑部病變及眼部缺血）。
在實施例中，PHD活性所介導之疾病為貧血（例如與慢性腎病相關的貧血）。
在實施例中，PHD活性所介導之疾病為慢性腎病。
在實施例中，PHD活性所介導之疾病係與高氧症有關。
在實施例中，PHD活性所介導之疾病為早產兒視網膜病變。
在實施例中，PHD活性所介導之疾病為肺支氣管發育不全(BPD)。
在實施例中，PHD活性所介導之疾病為缺血性心臟病、心臟瓣膜疾病、鬱血性心臟衰竭、急性肺損傷、肺部纖維化、肺動脈高血壓、慢性阻塞性肺病(COPD)、急性肝衰竭、肝纖維化及肝硬化。
在實施例中，PHD活性所介導之疾病為呼吸道疾病、肺部疾病、呼吸道病毒感染或肺部病毒感染。
在實施例中，該呼吸道疾病係選自於呼吸道感染、急性呼吸窘迫症候群、肺部發炎、肺炎及急性肺損傷。
在實施例中，該肺部疾病為急性肺損傷(ALI)、支氣管炎、肺炎、肺纖維化、氣喘或急性呼吸窘迫症候群(ARDS)。
在實施例中，PHD活性所介導之疾病為一或多個器官的損傷及/或衰竭（例如急性器官損傷，或器官衰竭）。
[相關申請案之交互參考]
本申請案主張2020年8月14日提申之美國臨時申請案第63/065,642號的優先權，其全部內容經由引用合併於此。 定義
為使本發明更易於理解，首先在下文定義某些術語。隨附術語及其他術語之額外定義貫穿本說明書記載。本文引用之描述本發明背景且提供關於其實踐之額外細節之出版物及其他參考材料以引用之方式併入本文中。
動物：如本文所使用之術語「動物」係指動物界之任何成員。在一些實施例中，「動物」係指處於發育之任何階段之人類。在一些實施例中，「動物」係指處於發育之任何階段之非人類動物。在某些實施例中，非人類動物為哺乳動物(例如齧齒動物、小鼠、大鼠、兔、猴子、犬、貓、綿羊、牛、靈長類動物及/或豬)。在一些實施例中，動物包括但不限於哺乳動物、鳥、爬蟲類、兩棲動物、魚、昆蟲及/或蠕蟲。在一些實施例中，動物可為基因轉殖動物、經基因工程改造之動物及/或純系。
大約或約：如本文所使用，如應用於所關注之一或者多個值之術語「大約」或者「約」係指類似於所陳述參考值之值。在某些具體例中，除非另外說明或者另外自上下文顯而易見，否則術語「大約」或者「約」係指在任一方向(大於或者小於)上處於所陳述參考值之25%、20%、19%、18%、17%、16%、15%、14%、13%、12%、11%、10%、9%、8%、7%、6%、5%、4%、3%、2%、1%或者更小百分比之內之一系列值(但該等數值將超出可能性值之100%的情況除外)。
於說明及所附申請專利範圍中使用時，除非上下文清楚地作其它規，單數型式「一種」、「一」及「此」包括複數個提及物。因此，例如，提及“組成物”包括兩個或多個此種組成物的混合物。
於本說明書及其後之申請專利範圍中，會提及多個術語，其等需被定義具有下列意義：於本說明書之說明及申請專利範圍各處，「包含」一辭及此用辭之其它型式，諸如，「包含了」及「包含有」，係意指不受限地包括且並不打算排除，例如，其它添加劑、組份、整數，或步驟。
「視情況」或「視情況地」意謂後續描述的事件或環境可以或不可以發生，並且說明包括事件或環境發生的例子以及事件或環境沒有發生的例子。
改善、增加或減少：如本文所用，術語「改善」、「增加」或「降低」或語法等同物指示相對於基線量測結果的值，該基線量測結果例如在開始本文所述之治療之前在同一個體中之量測結果，或在不存在本文所述之治療的情況下在對照受試者(或多個對照受試者)中之量測結果。「對照個體」為罹患與所治療個體相同之疾病形式、年齡與所治療個體大約相同之個體。
活體外：如本文所用，術語「活體外(in vitro)」係指在人為環境中發生之事件，例如在試管或反應容器中、在細胞培養物等中，而非在多細胞有機體中。
活體內：如本文所使用之術語「活體內(in vivo)」係指事件發生在諸如人類及非人類動物之多細胞生物體內。在基於細胞之系統之情形下，該術語可用於指事件發生在活細胞內(與例如活體外系統相反)。
患者：如本文所用，術語「患者」或「個體」係指可以投與經提供之組成物的任何生物體，以用於(例如)實驗、診斷、預防、化妝、及/或治療目的。典型的患者包括動物(例如，哺乳動物，諸如小鼠、大鼠、兔、非人靈長類、及/或人類)。在一些實施例中，患者為人類。人類包括出生前及出生後的形式。
醫藥學上可接受：如本文所用之術語「醫藥學上可接受」係指在合理醫學判斷之範圍內適合與人類及動物組織接觸使用而無過量毒性、刺激、過敏性反應或其他問題或併發症，與合理效益/風險比率相稱之物質。
醫藥學上可接受的鹽：醫藥學上可接受的鹽在本技術領域中是為人熟知的。例如，S. M. Berge等人在J. Pharmaceutical Sciences (1977) 66:1–19中詳細描述了醫藥學上可接受的鹽。本發明化合物之醫藥學上可接受的鹽包括衍生自適宜無機及有機酸及鹼之鹽。醫藥學上可接受之無毒性酸加成鹽之實例為胺基與無機酸(諸如鹽酸、氫溴酸、磷酸、硫酸及過氯酸)或有機酸(諸如乙酸、三氟乙酸、草酸、順丁烯二酸、酒石酸、檸檬酸、丁二酸或丙二酸)形成之鹽、或藉由使用此項技術中所用之其他方法(諸如離子交換)形成之鹽。其他醫藥學上可接受之鹽包括己二酸鹽、海藻酸鹽、抗壞血酸鹽、天冬胺酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、硫酸氫鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、檸檬酸鹽、環戊烷丙酸鹽、二葡萄糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙烷磺酸鹽、甲酸鹽、反丁烯二酸鹽、葡庚糖酸鹽、甘油磷酸鹽、葡萄糖酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基-乙烷磺酸鹽、乳糖酸鹽、乳酸鹽、月桂酸鹽、月桂基硫酸鹽、蘋果酸鹽、順丁烯二酸鹽、丙二酸鹽、甲烷磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、菸鹼酸鹽、硝酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽(pamoate)、果膠酸鹽、過硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、磷酸鹽、苦味酸鹽、特戊酸鹽、丙酸鹽、硬脂酸鹽、丁二酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、對甲苯磺酸鹽、十一烷酸鹽、戊酸鹽及其類似物。衍生自適當鹼之鹽包括鹼金屬鹽、鹼土金屬鹽、銨鹽及N+(C1–4 烷基)4鹽。代表性鹼金屬或鹼土金屬鹽包括鈉鹽、鋰鹽、鉀鹽、鈣鹽、鎂鹽及其類似物。其他醫藥學上可接受之鹽適當時包括無毒銨、四級銨及使用平衡離子形成之胺陽離子，該等平衡離子諸如鹵化物、氫氧化物、羧酸根、硫酸根、磷酸根、硝酸根、磺酸根及芳基磺酸根。進一步的醫藥學上可接受的鹽包括使用適當的親電子劑(例如烷基鹵化物)從胺的季銨化所形成的鹽，以形成季銨化的烷基化胺基鹽。
個體：如本文所用，術語「個體」係指人類或任何非人類動物(例如，小鼠、大鼠、兔、犬、貓、牛、豬、綿羊、馬或靈長類動物)。人類包括出生前及出生後的形式。在許多實施例中，個體為人類。個體可以是患者，此係指前往醫療服務提供者為診斷或治療疾病的人類。術語「個體」在本文中可與「個人」或「患者」互換使用。個體可罹患或易患疾病或病症，但可能顯示或可能不顯示該疾病或病症之症狀。
實質上：如本文所用，術語「實質上」係指展現所關注的特徵或性質之全部或接近全部範圍或程度的定性條件。生物學領域中具有通常技藝者將會理解，生物及化學現象很少(若有)達到完成及/或進行至完全或實現或避免絕對的結果。因此，術語「實質上」在本文中用於包羅許多生物及化學現象中固有之潛在缺乏的完全性。
治療有效量：如本文所用，治療劑之術語「治療有效量」意謂在投與至罹患或易患疾病、病症及/或病狀之個體時，足以治療、診斷、預防及/或延遲該疾病、病症及/或病狀的發作。普通熟習此項技術者應認識到治療有效量通常經由包含至少一個單位劑量之給藥方案來投與。
治療：如本文所用，術語「治療(treat/treatment/treating)」係指用於部分或完全地減輕、改善、緩和、抑制、預防特定疾病、病症及/或病狀之一或多個症狀或特徵、延遲其發作、降低其嚴重性及/或降低其發生率的任何方法。治療可投與未展現疾病之體征及/或僅展現疾病之早期體征的受試者以便降低患上與疾病相關之病狀的風險。
脂族：如本文所用，術語脂族係指C 1–C 40烴，並且包括飽和烴和不飽和烴。脂族基可以是直鏈、支鏈或環狀的。例如，C 1–C 20脂族基可包括C 1–C 20烷基(例如，直鏈或支鏈的C 1–C 20飽和烷基)，C 2–C 20烯基(例如，直鏈或支鏈的C 4–C 20二烯基、直鏈或支鏈的C 6–C 20三烯基等)和C 2–C 20炔基(例如，直鏈或支鏈的C 2–C 20炔基)。C 1–C 20脂族可包括C 3–C 20環狀脂族(例如，C 3–C 20環烷基、C 4–C 20環烯基或C 8–C 20環炔基)。在某些實施例中，脂族基可包含一或多個環狀脂族基及/或一或多個雜原子（諸如氧、氮或硫），且可視情況被一或多個取代基（諸如烷基、鹵素、烷氧基、羥基、胺基、芳基、醚、酯或醯胺）取代。脂族基團是未經取代的或被一或多個如本文所述之取代基取代。例如，脂族基可被鹵素、-COR’、-CO 2H、-CO 2R’、-CN、-OH、-OR’、-OCOR’、-OCO 2R’、-NH 2、-NHR’、-N(R’) 2、-SR’或-SO 2R’中之一或多個（例如1、2、3、4、5或6個獨立選擇的取代基)取代，其中 R’的每個例子獨立地為C 1–C 20脂族基(例如，C 1–C 20烷基、C 1–C 15烷基、C 1–C 10烷基或C 1–C 3烷基）。在一些實施例中， R’獨立地為未經取代的烷基（例如，未經取代的C 1–C 20烷基、C 1–C 15烷基、C 1–C 10烷基或C 1–C 3烷基）。在一些實施例中， R’獨立地為未經取代的C 1–C 3烷基。在一些實施例中，脂族基是未經取代的。在一些實施例中，脂族基不包括任何雜原子。
烷基：如本文所用，術語「烷基」係指無環的直鏈和支鏈烴基，例如，「C 1–C 20烷基」係指具有1-20個碳的烷基。烷基可為直鏈或分支鏈。烷基的實例包括(但不限於)甲基、乙基、正丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、異戊基、叔戊基、己基、異己基等。術語「低級烷基」係指直鏈或支鏈烷基具有1至6個碳原子之烷基基團。鑒於本發明之益處，其他烷基將容易地對於熟習此項技術者為顯而易見的。烷基可未經取代或經如本文所描述之一或多個取代基取代。例如，烷基可以被鹵素、-COR’、-CO 2H、-CO 2R’、-CN、-OH、-OR’、-OCOR’、-OCO 2R’、-NH 2、-NHR’、-N(R’) 2、-SR’或-SO 2R’中之一或多個（例如1、2、3、4、5或6個獨立選擇的取代基）取代，其中 R’的每個例子獨立地為C 1–C 20脂族基（例如，C 1–C 20烷基、C 1–C 15烷基、C 1–C 10烷基或C 1–C 3烷基）。在一些實施例中， R’獨立地為未經取代的烷基(例如，未經取代的C 1-C 20烷基、C 1–C 15烷基、C 1–C 10烷基或C 1–C 3烷基）。在一些實施例中， R’獨立地為未經取代的C 1–C 3烷基。在一些實施例中，烷基是經取代的（例如，被1、2、3、4、5或6個如本文所述的取代基取代）。在一些實施例中，烷基被–OH基團取代且在本文中亦可稱為「羥烷基」基團，其中的字首表示–OH基團而「烷基」係如本文所述。在一些實施例中，烷基被-OR’基團取代且在本文中亦可稱為「烷氧基」基團。
將字尾「-ene」附加到基團上表示該基團是二價部分，例如，亞芳基是芳基的二價部分，而雜亞芳基是雜芳基的二價部分。
亞烷基：如本文所用，術語「亞烷基」表示飽和的二價直鏈或支鏈烴基，並且以亞甲基、亞乙基、異亞丙基等為例。同樣地，如本文所用，術語「亞烯基」表示具有一或多個不飽和碳-碳雙鍵的不飽和二價直鏈或支鏈烴基，該不飽和碳-碳雙鍵可以存在於沿著鏈的任何穩定點，術語「亞炔基」在本文中表示具有一或多個不飽和碳-碳三鍵的不飽和二價直鏈或支鏈烴基，該不飽和碳-碳三鍵可存在於沿著鏈的任何穩定點。在某些實施例中，亞烷基、亞烯基或亞炔基可包含一或多個環狀脂族基及/或一或多個雜原子（諸如氧、氮或硫），且可視情況被一或多個取代基（諸如烷基、鹵素、烷氧基、羥基、胺基、芳基、醚、酯或醯胺）取代。例如，亞烷基、亞烯基或亞炔基可被鹵素、-COR’、-CO 2H、-CO 2R’、-CN、-OH、-OR’、-OCOR’、-OCO 2R’、-NH 2、-NHR’、-N(R’) 2、-SR’或-SO 2R’中之一或多個（例如1、2、3、4、5或6個獨立選擇的取代基）取代，其中 R’的每個例子獨立地為C 1–C 20脂族基（例如，C 1–C 20烷基、C 1–C 15烷基、C 1–C 10烷基或C 1–C 3烷基）。在一些實施例中， R’獨立地為未經取代的烷基（例如，未經取代的C 1–C 20烷基、C 1–C 15烷基、C 1–C 10烷基或C 1–C 3烷基）。在一些實施例中， R’獨立地為未經取代的C 1–C 3烷基。在某些實施例中，亞烷基、亞烯基或亞炔基是未經取代的。在某些實施例中，亞烷基、亞烯基或亞炔基不包括任何雜原子。
烯基：如本文所用，「烯基」係指具有一或多個不飽和碳-碳雙鍵的任何直鏈或支鏈烴鏈，該不飽和碳-碳雙鍵可存在於沿著鏈的任何穩定點，例如，「C 2-C 20烯基」係指具有2-20個碳的烯基。舉例而言，烯基包括丙-2-烯基、丁-2-烯基、丁-3-烯基、2-甲基丙-2-烯基、己-2-烯基、己-5-烯基、2,3-二甲基丁-2-烯基及其類似者。在一些實施例中，烯基包含1、2或3個碳-碳雙鍵。在一些實施例中，烯基包含單個碳-碳雙鍵。在一些實施例中，多個雙鍵（例如2或3個）是共軛的。烯基可未經取代或經一或多個如本文所描述之取代基取代。例如，烯基可被鹵素、-COR’、-CO 2H、-CO 2R’、-CN、-OH、-OR’、-OCOR’、-OCO 2R’、-NH 2、-NHR’、-N(R’) 2、-SR’或-SO 2R’中之一或多個（例如1、2、3、4、5或6個獨立選擇的取代基）取代，其中 R’的每個例子獨立地為C 1–C 20脂族基（例如，C 1–C 20烷基、C 1–C 15烷基、C 1–C 10烷基或C 1–C 3烷基）。在一些實施例中， R’獨立地為未經取代的烷基(例如，未經取代的C 1–C 20烷基、C 1–C 15烷基、C 1–C 10烷基或C 1–C 3烷基)。在一些實施例中， R’獨立地為未經取代的C 1–C 3烷基。在一些實施例中，烯基是未經取代的。在一些實施例中，烯基是經取代的（例如，被1、2、3、4、5或6個如本文所述的取代基取代）。在一些實施例中，烯基被–OH基團取代且在本文中亦可稱為「羥烯基」基團，其中的字首表示–OH基團而「烯基」係如本文所述。
炔基：如本文所用，「炔基」係指直鏈或支鏈構型的任何烴鏈，其在沿鏈的任何穩定點具有一或多個碳-碳三鍵，例如，「C 2-C 20炔基」係指具有2-20個碳的炔基。炔基的實例包括丙-2-炔基、丁-2-炔基、丁-3-炔基、戊-2-炔基、3-甲基戊-4-炔基、己-2-炔基、己-5-炔基等等。在一些實施例中，炔基包含一個碳-碳三鍵。炔基可未經取代或經一或多個如本文所描述之取代基取代。例如，炔基可以被鹵素、-COR’、-CO 2H、-CO 2R’、-CN、-OH、-OR’、-OCOR’、-OCO 2R’、-NH 2、-NHR’、-N(R’) 2、-SR’或-SO 2R’中之一或多者(例如1、2、3、4、5或6個獨立選擇的取代基)取代，其中 R’的每個例子獨立地為C 1–C 20脂族基(例如，C 1–C 20烷基、C 1–C 15烷基、C 1–C 10烷基或C 1–C 3烷基)。在一些實施例中， R’獨立地為未經取代的烷基(例如，未經取代的C 1–C 20烷基、C 1–C 15烷基、C 1–C 10烷基或C 1–C 3烷基)。在一些實施例中， R’獨立地為未經取代的C 1–C 3烷基。在一些實施例中，炔基是未經取代的。在一些實施例中，炔基是經取代的(例如，被1、2、3、4、5或6個如本文所述的取代基取代)。
芳基：術語「芳基」在單獨使用或作為「芳烷基」中較大部分的一部分使用時係指單環、雙環或三環碳環環系，總共具有六至十四個環成員，其中所述環系具有與分子的其餘部分的單一連接點，環系中的至少一個環是芳族的，且其中環系中的每個環含有4至7個環成員。在一些實施例中，芳基有6個環炭原子（「C 6芳基」，例如苯基）。在一些實施例中，芳基有10個環炭原子（「C 10芳基」，例如萘基，諸如1-萘基及2-萘基）。在一些實施例中，芳基有14個環炭原子（「C 14芳基」，例如蒽環基）。「芳基」亦包括其中如上文所定義之芳基環與一或多個碳環基或雜環基稠合之環系統，其中附接基團或附接點在芳基環上，且在該等情況下，碳原子數目繼續指示芳基環系統中之碳原子數目。例示性芳環包括苯基、萘基及蒽。
亞芳基：如本文所用之術語「芳基」係指二價的芳基（亦即，與分子有兩個連接點）。例示亞芳基包括亞苯基（例如，未經取代的亞苯基或經取代的亞苯基）。
鹵素或鹵基：如本文所用，術語「鹵素」或「鹵基」係指氟、氯、溴或碘。
醯胺：術語「醯胺」或「醯胺基」係指具有式C(O)N(R’) 2、-C(O)N(R’)-、-NR’C(O)R’、-NR’C(O)N(R’) 2-或-NR’C(O)-之化學部分，其中各個R’係獨立地選自氫、烷基、烯基、炔基、鹵烷基、雜烷基(經鏈碳鍵結)、環烷基、芳基、芳烷基、雜芳基(經環碳鍵結)、雜芳基烷基或雜環烷基(經環碳鍵結)，除非本說明書中另有規定，否則各部分自身可如本文所述視情況經取代，或兩個R’可與氮原子組合形成3員、4員、5員、6員或7員環。
胺基：術語「胺基」或「胺」係指-N(R’) 2基團，其中各個R’係獨立地選自氫、烷基、烯基、炔基、鹵烷基、雜烷基(經鏈碳鍵結)、環烷基、芳基、芳烷基、雜芳基(經環碳鍵結)、雜芳基烷基、雜環烷基(經環碳鍵結)、磺醯基、醯胺或羰基基團，除非本說明書中另有規定，否則各部分自身可如本文所述視情況經取代，或兩個R’可與氮原子組合形成3員、4員、5員、6員或7員環。在實施例中，胺基為–NHR’，其中R’為芳基(「芳基胺基」)、雜芳基(「雜芳基胺基」)、醯胺或烷基(「烷胺基」)。
醚：術語「醚」係指R’-O-R’基團，其中R’係獨立地選自烷基、雜烷基(經鏈碳鍵結)、芳烷基、雜芳烷基、雜環烷基(經環碳鍵結)、環烷基、芳基、雜芳基(經環碳鍵結)，除非本說明書中另有規定，否則各部分自身可如本文所述視情況經取代。
酯：術語「酯」係指R’-C(=O)O-R基團，其中R’係獨立地選自烷基、雜烷基(經鏈碳鍵結)、芳烷基、雜芳烷基、雜環烷基(經環碳鍵結)、環烷基、芳基、雜芳基(經環碳鍵結)，除非本說明書中另有規定，否則各部分自身可如本文所述視情況經取代。
磺醯基：術語「磺醯基」係指-S(=O) 2R’或-S(=O) 2-基團，其中R’係選自氫、烷基、烯基、炔基、鹵烷基、雜烷基(經鏈碳鍵結)、胺基、環烷基、芳基、芳烷基、雜芳基(經環碳鍵結)、雜芳基烷基、雜環烷基(經環碳鍵結)，除非本說明書中另有規定，否則各部分自身可如本文所述視情況經取代。例如，在一實施例中，該磺醯基基團為-SO 2R’，其中R’為經羰基基團取代之烷基。
亞磺醯基：術語「亞磺醯基」係指具有式-S(=O)R’、-S(=O)-或-S(=O)(=NR’)-之化學部分，其中R’係選自氫、烷基、烯基、炔基、雜烷基(經鏈碳鍵結)、環烷基、芳基、芳烷基、雜芳基(經環碳鍵結)、雜芳基烷基、雜環烷基(經環碳鍵結)，除非本說明書中另有規定，否則各部分自身可如本文所述視情況經取代。
羰基：術語「羰基」係指-C(=O)R’或-C(=O)-基團，其中R’係選自氫、烷基、烯基、炔基、雜烷基(經鏈碳鍵結)、環烷基、芳基、芳烷基、雜芳基(經環碳鍵結)、雜芳基烷基、雜環烷基(經環碳鍵結)，除非本說明書中另有規定，否則各部分自身可如本文所述視情況經取代。
磷氧基：術語「磷氧基」係指-P(=O)(R’) 2或-P(=O)(R’)-基團，其中R’係選自氫、烷基、烯基、炔基、雜烷基(經鏈碳或雜原子鍵結)、環烷基、芳基、芳烷基、胺基、羥基、雜芳基(經環碳鍵結)、雜芳基烷基或雜環烷基(經環碳鍵結)，除非本說明書中另有規定，否則各部分自身可如本文所述視情況經取代，或兩個R’可與氮原子組合形成3員、4員、5員、6員或7員環。
雜烷基：術語「雜烷基」係指具有1-14個碳原子的支鏈或直鏈烷基、烯基或炔基基團，還具有1、2、3或4個獨立地選自由N、O、S及P組成之群的雜原子。雜烷基包括叔胺、仲胺、醚、硫醚、醯胺、硫醯胺、胺基甲酸酯、硫代胺基甲酸酯、腙、亞胺、磷酸二酯、胺基膦酸酯(phosphoramidate)、磺醯胺及二硫化物。雜烷基可視情況包括單環、雙環或三環狀環，其中每個環期望有3-6員。雜烷基的實例包括聚醚，諸如甲氧基甲基及乙氧基乙基。
雜亞烷基：如本文所用之術語「雜亞烷基」係表示如本文所述之雜烷基的二價形式。
雜芳基：如本文所用之術語「雜芳基」係指單環、雙環或三環碳環環系，總共具有六至十四個環成員，其中所述環系具有與分子的其餘部分的單一連接點，其中在環系中的至少一個環是芳族的，其中在環系中的每個環含有4至7個環成員，且其中至少一個環原子為雜原子，諸如(但不限於)氮及氧。
雜環烷基：如本文所用之術語「雜環烷基」係指其中至少一原子為雜原子之非芳環，該雜原子諸如為(但不限於)氮、氧、硫或磷，且其餘原子為碳。雜環烷基可以是經取代的或未經取代的。
氘：術語「氘」（「D」或「 2H」）也稱為重氫。氘是氫的同位素，具有由一個質子及一個中子組成的原子核，其質量是普通氫（一個質子）核的兩倍。
同位素：術語「同位素」係指一種特定化學元素的變體，其中子數不同，因此核子數也不同。一給定元素的所有同位素在每個原子中具有相同數量的質子，但具有不同數量的中子。
術語「經取代」意指指定基團或部分具有一或多個取代基。術語「未經取代」意指指定基團不具取代基。術語「視情況經取代」意指指定基團未經取代或經一或多個取代基取代。在使用術語「經取代」來描述結構系統時，取代意欲發生在系統上原子價允許之任何位置處，例如，取代導致了一個穩定的化合物（例如，不會自動進行發生轉化（諸如通過重排、環化、消除或其他反應）的化合物）。在未對指定部分或基團明確指出經任何指定取代基視情況取代或取代的情形下，應理解為這類該部分或基團意欲未經取代。
當以一些在明確定義之範圍內變化的取代基取代環系統（例如環烷基、雜環烷基、芳基或雜芳基）時，取代基的總數當然不超過在現存條件下的正常可利用價數。亦應理解，假定氫原子存在以填充環系的剩餘原子價。經取代的基團僅涵蓋會導致穩定或化學上可行的化合物的取代基與變量的組合。穩定的化合物或化學上可行的化合物為除其他因素外具有足以允許其製備及檢測的穩定性的化合物。
多種取代基為熟知的且其形成及引入多種親本基團之方法亦為熟知的。代表性取代基包括但不限於烷基、環烷基、烯基、環烯基、炔基、芳烷基、烷芳基、芳基、芳烷氧基、芳胺基、雜芳胺基、雜芳基、雜芳烷氧基、雜環烷基、羥烷基、胺烷基、鹵烷基、硫代烷基、烷基硫代烷基、羧烷基、咪唑烷基、吲哚烷基、單鹵烷基、二鹵烷基及三鹵烷基、單鹵烷氧基、二鹵烷氧基及三鹵烷氧基、胺基、烷胺基、二烷胺基、醯胺、氰基、烷氧基、羥基、磺醯胺、鹵基(例如，—Cl及—Br)、硝基、羥亞胺基、—COOR 50、—COR 50、—SO 0-2R 50、—SO 2NR 50R 51、NR 52SO 2R 50、═C(R 50R 51)、═N—OR 50、═N—CN、═C(鹵基) 2、═S、═O、—CON(R 50R 51)、—OCOR 50、—OCON(R 50R 51)、—N(R 52)CO(R 50)、—N(R 52)COOR 50及—N(R 52)CON(R 50(R 51)，其中R 50、R 51及R 52可獨立地選自以下各者：氫原子及分支或直鏈、C 1–6-烷基、C 3–6-環烷基、C 4–6-雜環烷基、雜芳基及芳基基團，且其具有或沒有取代基。允許時，R 50及R 51可連接一起以形成碳環或雜環環系。
在較佳實施例中，取代基係選自鹵素、-COR’、-CO 2H、-CO 2R’、-CN、-OH、-OR’、-OCOR’、-OCO 2R’、-NH 2、-NHR’、-N(R’) 2、-SR’及-SO 2R’，其中 R’的每個例子獨立地為C 1–C 20脂族基(例如，C 1–C 20烷基、C 1–C 15烷基、C 1–C 10烷基或C 1–C 3烷基)。在某些實施例中， R’獨立地為未經取代的烷基(例如，未經取代的C 1–C 20烷基、C 1–C 15烷基、C 1–C 10烷基或C 1–C 3烷基)。較佳地， R’獨立地為未經取代的C 1–C 3烷基。
本文給出之任何式係意欲表示具有結構式所描繪之結構以及特定變體或形式之化合物。詳言之，本文給出之任何式之化合物可具有不對稱中心且因此以不同對映異構形式存在。通式化合物之所有光學異構體及立體異構體及其混合物視為屬於該式之範疇內。因此，本文給出之任何式意欲表示外消旋物、一或多個對映異構形式、一或多個非對映異構形式、一或多個滯轉異構形式及其混合物。此外，某些結構可以幾何異構體(亦即順及反式異構體)形式、以互變異構體形式或以滯轉異構體形式存在。另外，本文給出之任何式係意欲包括這類化合物之水合物、溶劑合物及同素異形體，以及其混合物。 本發明之化合物
本文係揭露PHD的強效抑制劑。在一些實施例中，本發明之化合物對於PHD1、PHD2及PHD3中之任一者的酶促半數最大抑制濃度(IC 50)值小於100 µM。在一些實施例中，本發明之化合物對於PHD1、PHD2及PHD3中之任一者的IC 50值小於50 µM。在一些實施例中，本發明之化合物對於PHD1、PHD2及PHD3中之任一者的IC 50值小於25 µM。在一些實施例中，本發明之化合物對於PHD1、PHD2及PHD3中之任一者的IC 50值小於20 µM。在一些實施例中，本發明之化合物對於PHD1、PHD2及PHD3中之任一者的IC 50值小於15 µM。在一些實施例中，本發明之化合物對於PHD1、PHD2及PHD3中之任一者的IC 50值小於10 µM。在一些實施例中，本發明之化合物對於PHD1、PHD2及PHD3中之任一者的IC 50值小於5 µM。在一些實施例中，本發明之化合物對於PHD1、PHD2及PHD3中之任一者的IC 50值小於1 µM。在一些實施例中，本發明之化合物對於PHD1、PHD2及PHD3中之任一者的IC 50值約3 nM至約5 nM。在一些實施例中，本發明之化合物對於PHD1、PHD2及PHD3中之任一者的IC 50值約5 nM至約10 nM。在一些實施例中，本發明之化合物對於PHD1、PHD2及PHD3中之任一者的IC 50值約10 nM至約20 nM。在一些實施例中，本發明之化合物對於PHD1、PHD2及PHD3中之任一者的IC 50值約20 nM至約50 nM。在一些實施例中，本發明之化合物對於PHD1、PHD2及PHD3中之任一者的IC 50值約50 nM至約100 nM。在一些實施例中，本發明之化合物對於PHD1、PHD2及PHD3中之任一者的IC 50值約100 nM至約200 nM。在一些實施例中，本發明之化合物對於PHD1、PHD2及PHD3中之任一者的IC 50值約200 nM至約500 nM。在一些實施例中，本發明之化合物對於PHD1、PHD2及PHD3中之任一者的IC 50值約500 nM至約1000 nM。
此類別的代表性實例顯示出在活體外對於PHD1、PHD2及PHD3的抑制活性。
本文描述了例示性化合物。 式(I)–(XXIII)之化合物
尤其，本文所述之PHD抑制劑的特點為3-羥基吡啶醯胺部分，
Figure 02_image241
。申請人出人意料地發現到，取代掉R 1(R 1不為氫)位置的3-羥基吡啶醯胺可顯著地增加該抑制劑的效價。這類的取代實例包括(但不限於)經取代或未經取代的烷基。
在一態樣中，本文提供具有依據式(I)結構之化合物：
Figure 02_image243
(I) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： R 1為視情況經取代之C 1-3烷基、視情況經取代之C 3-6環烷基、或視情況經取代之3至6員雜環烷基； R 2為氫、視情況經取代之C 1-3烷基、鹵素、CN、或視情況經取代之環烷基； R 3為氫、視情況經取代之烷基、視情況經取代之雜芳基、視情況經取代之環烷基、視情況經取代之雜環烷基、羰基、***、硫醚、視情況經取代之芳磺醯基、視情況經取代之雜芳磺醯基、視情況經取代之芳烷基、視情況經取代之炔基、或視情況經取代之雜炔基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基；且 R 6為OH或酯(例如，本文所述之OR 18)。
在實施例中，R 1為未經取代之C 1-3烷基。在實施例中，R 1為經取代之C 1-3烷基（例如，包含有1、2或3個取代基之C 1-3烷基）。
在實施例中，R 1為未經取代之C 3-6環烷基（例如，未經取代之環丙基）。在實施例中，R 1為經取代之C 3-6環烷基（例如，包含有1、2或3個取代基之C 3-6環烷基）。
在實施例中，R 1為未經取代之3至6員雜環烷基。在實施例中，R 1為經取代之3至6員雜環烷基（例如，包含有1、2或3個取代基之3至6員雜環烷基）。
在實施例中，R 2為氫。在實施例中，R 2為視情況經取代之C 1-3烷基。在實施例中，R 2為未經取代之C 1-3烷基。在實施例中，R 2為未經取代之C 1-3烷基（例如，包含有1、2或3個取代基之C 1-3烷基）。在實施例中，R 2為鹵素。在實施例中，R 2為CN。在實施例中，R 2為視情況取代之環烷基（例如，C 3-6環烷基）。在實施例中，R 2為未經取代之環烷基。在實施例中，R 2為經取代之環烷基（例如，包含有1、2或3個取代基之環烷基）。
在實施例中，R 3為氫。在實施例中，R 3為未經取代之芳基（例如，苯基、萘）。在實施例中，R 3為經取代之芳基（例如，苯基、萘）。在實施例中，R 3為未經取代之雜芳基（例如，喹啉酮、異喹啉酮、吡啶、吡唑、吡咯、***、四唑、噁唑、噻唑）。在實施例中，R 3為經取代之雜芳基（例如，喹啉酮、異喹啉酮、吡啶、吡唑、吡咯、***、四唑、噁唑、噻唑）。在實施例中，R 3為未經取代之環烷基。在實施例中，R 3為經取代之環烷基。在實施例中，R 3為未經取代之雜環烷基（例如，含N雜環烷基）。在實施例中，R 3為經取代之雜環烷基（例如，含N雜環烷基）。在實施例中，R 3為羰基（例如，COR 17，其中R 17係依據本文所述任一實施例）。在實施例中，R 3為醚（例如，OR 16，其中R 16係依據本文所述任一實施例）。在實施例中，R 3為硫醚（例如，SR 16，其中R 16係依據本文所述任一實施例）。在實施例中，R 3為未經取代之芳磺醯基（例如，苯磺醯基）。在實施例中，R 3為經取代之芳磺醯基。在實施例中，R 3為未經取代之雜芳磺醯基。在實施例中，R 3為經取代之雜芳磺醯基。在實施例中，R 3為未經取代之芳烷基（例如，苯烷基）。在實施例中，R 3為經取代之芳烷基（例如，苯烷基）。在實施例中，R 3為未經取代之炔基。在實施例中，R 3為經取代之炔基（例如，經芳基取代之炔基）。在實施例中，R 3為未經取代之雜炔基。在實施例中，R 3為經取代之雜炔基（例如，經芳基取代之雜炔基）。在實施例中，R 3為OR 16、SR 16、SO 2R 16、CH 2R 16、CH 2CH 2R 16、C≡CR 16、或C≡CCH 2OR 16，且其中R 16為芳基。
在實施例中，R 4及R 5係獨立地為氫或視情況取代之C 1-3烷基。在實施例中，R 4及R 5係獨立地為氫或未經取代之C 1-3烷基。在實施例中，R 4及R 5各為氫。在實施例中，R 4及R 5中之一者為氫而另一者為未經取代之C 1-3烷基。在實施例中，R 4及R 5各為未經取代之C 1-3烷基。在實施例中，R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基（例如，C 3-6環烷基）。在實施例中，R 4及R 5連同其連接的碳一起形成未經取代之環烷基（例如，未經取代之C 3-6環烷基）。在實施例中，R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之雜環烷基（例如，3至6員雜環烷基）。在實施例中，R 4及R 5連同其連接的碳一起形成未經取代之雜環烷基（例如，未經取代之3至6員雜環烷基）。
在實施例中，R 6為氫。在實施例中，R 6為酯（例如，如本文所述之OR 18）。在實施例中，R 6為OR 18，其中R 18為C 1-6烷基。
在實施例中，R 1為視情況經取代之C 1-3烷基；及/或R 3為氫、視情況經取代之芳基、視情況經取代之雜芳基、視情況經取代之環烷基、視情況經取代之雜環烷基、羰基或醚。
在實施例中，R 1為未經取代之C 1-3烷基(例如，CH 3或CH 2CH 3)。在實施例中，R 1為CH 3。在實施例中，R 2為氫。在實施例中，R 4及R 5各為氫。在實施例中，R 6為OH。
在實施例中，R 1及R 2各為未經取代之C 1-3烷基。在實施例中，R 1及R 2各為CH 3。在實施例中，R 4及R 5各為氫。在實施例中，R 6為OH。
在實施例中，R 2為未經取代之C 1-3烷基(例如，CH 3或CH 2CH 3)。在實施例中，R 2為CH 3。在實施例中，R 3為氫。在實施例中，R 4及R 5各為氫。在實施例中，R 6為OH。
在實施例中，化合物具有依據式(I)之結構，
Figure 02_image245
(I)， 或其醫藥學上可接受之鹽，其中 R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，且其中R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基，或者R 1為視情況經取代之C 3-6環烷基或視情況經取代之3至6員雜環烷基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 3係選自以下組成之群組： 氫；
Figure 02_image247
，其中X為共價鍵、O、S、SO 2、C 1‑4亞烷基、C 2-4亞炔基、或C 2-4雜亞炔基；每個A獨立地為N或CR 9、R 8及R 9獨立地為氫、鹵素、OR 10、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，而R 10為C 1-3烷基或芳基；
Figure 02_image249
，其中B為N或CR 11，D為N、NH或CR 11，E為N、CR 11或CHR 12，而R 11及R 12獨立地為氫或C 1-3烷基，且其中虛線圓圈代表共軛系統的存在或不存在；
Figure 02_image251
，其中每個G獨立地為N、NH、NR 13或CR 14；R 13為C 3-6環烷基、3至6員雜環烷基、視情況經一或多個鹵素所取代之芳基、視情況經一或多個視情況取代的C 1-3烷基所取代之芳基、雜芳基、視情況經t-丁氧基羰基所取代之雜環烷基、視情況經芳基所取代之C 1-4烷基且該芳基視情況經一或多個鹵素取代，而R 14為氫、鹵素、C 3-6環烷基、3至6員雜環烷基、或C 1-3烷基；
Figure 02_image253
，其中I為O、S或CH，J為N或CH，R 15為氫、C 3-6環烷基、3至6員雜環烷基、或C 1-3烷基，而R 19為氫、C 3-6環烷基、3至6員雜環烷基、或芳基； OR 16，其中R 16為芳基；
Figure 02_image255
，其中X 1為N或CH，而R 20為視情況經取代之芳基；以及 COR 17，其中R 17為芳基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基；且 R 6為OH或OR 18，其中R 18為C 1-6烷基。
在實施例中，R 1為未經取代之C 1-3烷基。在實施例中，R 1為CH 3，或CH 2CH 3。
在實施例中，R 1為經取代之C 1-3烷基。在實施例中，R 1為經OR 7所取代之C 1-3烷基。在實施例中，R 7為未經取代之C 1-3烷基。在實施例中，R 7為經取代之C 1-3烷基。在實施例中，R 7為經芳基取代之C 1-3烷基。在實施例中，芳基為苯基。在實施例中，R 7為經苯基所取代之C 1-3烷基。在實施例中，R 1為經OBn所取代之C 1-3烷基。在實施例中，R 1為CH 2CH 2OBn。
在實施例中，R 1為經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基（例如，F、Cl、Br或I）。在實施例中，R 1為二氟甲基。
在實施例中，R 1為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代。在實施例中，該視情況經取代之芳基為視情況經取代之苯基。在實施例中，該芳基或苯基為未經取代之芳基或未經取代之苯基。在實施例中，該芳基或苯基係經一或多個鹵素所取代。在實施例中，R 1為
Figure 02_image257
。
在實施例中，R 1為視情況取代之C 3-6環烷基（例如，視情況經取代之環丙基）。在實施例中，R 1為C 3-6環烷基（例如，未經取代之環丙基）。在實施例中，R 1為經取代之C 3-6環烷基（例如，包含有1、2或3個取代基之C 3-6環烷基）。
在實施例中，R 1為視情況取代之3至6員雜環烷基。在實施例中，R 1為未經取代之3至6員雜環烷基。在實施例中，R 1為經取代之3至6員雜環烷基（例如，包含有1、2或3個取代基之3至6員雜環烷基）。
在實施例中，R 2為氫。
在實施例中，R 2為CN。
在實施例中，R 2為鹵素。在實施例中，鹵素為F、Cl、Br或I。
在實施例中，R 2為未經取代之C 1-3烷基。在實施例中，R 2為CH 3。
在實施例中，R 2為經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基。
在實施例中，R 3為氫。在實施例中，R 3不是氫。
在實施例中，R 3為
Figure 02_image259
，其中 X為共價鍵、O、S、SO 2、C 1‑4亞烷基、C 2-4亞炔基、或C 2-4雜亞炔基； 每個A獨立地為N或CR 9； R 8及R 9獨立地為氫、鹵素、OR 10、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基；且 R 10為C 1-3烷基或芳基。
在實施例中，R 3為未經取代之苯基、氟苯基、氯苯基、二氟苯基、二氯苯基或三氟甲苯基。
在實施例中，R 3為
Figure 02_image261
，其中 B為N或CR 11； D為N、NH或CR 11； E為N、CR 11或CHR 12；且 R 11及R 12獨立地為氫或C 1-3烷基；且其中 虛線圓圈代表共軛系統的存在或不存在。
在實施例中，R 3為
Figure 02_image263
，其中 每個G獨立地為N、NH、NR 13或CR 14； R 13為C 3-6環烷基、3至6員雜環烷基、視情況經一或多個鹵素所取代之芳基、視情況經一或多個視情況取代的C 1-3烷基所取代之芳基、雜芳基、視情況經t-丁氧基羰基所取代之雜環烷基、視情況經芳基所取代之C 1-4烷基且該芳基視情況經一或多個鹵素取代；且 R 14為氫、鹵素、C 3-6環烷基、3至6員雜環烷基、或C 1-3烷基。
在實施例中，R 3為吡咯基、四唑基、***基或吡唑基，其視情況經芳基或環烷基取代。在實施例中，R 3（例如，吡咯基、四唑基、***基或吡唑基）係經環丙基取代、或為未經取代之苯基、氟苯基、氯苯基、二氟苯基、二氯苯基或三氟甲苯基。
在實施例中，R 3為
Figure 02_image264
，其中 I為O、S或CH； J為N或CH； R 15為氫、C 3-6環烷基、3至6員雜環烷基、或C 1-3烷基；且 R 19為氫、C 3-6環烷基、3至6員雜環烷基、或芳基。
在實施例中，R 3為OR 16，其中R 16為芳基。在實施例中，該芳基為苯基。在實施例中，R 3為OPh。
在實施例中，R 3為
Figure 02_image265
其中 X 1為N或CH；且 R 20為視情況經取代之芳基。
在實施例中，R 3為哌啶基或哌嗪基，其視情況經環丙基或芳基取代。在實施例中，R 3（例如，哌啶基或哌嗪基）係經環丙基取代、或為未經取代之苯基、氟苯基、氯苯基、二氟苯基、二氯苯基或三氟甲苯基。
在實施例中，R 3為COR 17，其中R 17為芳基。在實施例中，該芳基為苯基。在實施例中，R 3為COPh。
在實施例中，R 3為
Figure 02_image266
、
Figure 02_image268
、
Figure 02_image270
、
Figure 02_image272
、
Figure 02_image274
、
Figure 02_image276
、
Figure 02_image278
、
Figure 02_image280
、或
Figure 02_image282
。
在實施例中，R 4及R 5皆為氫。
在實施例中，R 4及R 5中之一者為氫，而另一者為C 1-3烷基。在實施例中，該C 1-3烷基係未經取代。在實施例中，該C 1-3烷基係經一或多個鹵素取代。在實施例中，該C 1-3烷基為CH 3。
在實施例中，R 4及R 5皆為C 1-3烷基。在實施例中，該C 1-3烷基係未經取代。在實施例中，該C 1-3烷基係經一或多個鹵素取代。在實施例中，該C 1-3烷基為CH 3。
在實施例中，R 4及R 5連同其連接的碳一起形成環烷基或雜環烷基。在實施例中，該環烷基或雜環烷基係未經取代。在實施例中，該環烷基或雜環烷基係未經取代（例如，包含有1、2或3個取代基之環烷基或雜環烷基）。在實施例中，該環烷基或雜環烷基為3員環。在實施例中，該環烷基或雜環烷基為4員環。在實施例中，該雜環烷基為含氧雜環烷基。在實施例中，該環烷基或雜環烷基係選自由環丙基、環丁基及
Figure 02_image284
所組成之群組。
在實施例中，R 6為OH。
在實施例中，R 6為OR 18，其中R 18為C 1-6烷基。
在實施例中，R 1為未經取代之C 1-3烷基(例如，CH 3或CH 2CH 3)。在實施例中，R 1為CH 3。在實施例中，R 2為氫。在實施例中，R 4及R 5各為氫。在實施例中，R 6為OH。
在實施例中，R 1及R 2各為未經取代之C 1-3烷基。在實施例中，R 1及R 2各為CH 3。在實施例中，R 4及R 5各為氫。在實施例中，R 6為OH。
在實施例中，R 2為未經取代之C 1-3烷基(例如，CH 3或CH 2CH 3)。在實施例中，R 2為CH 3。在實施例中，R 3為氫。在實施例中，R 4及R 5各為氫。在實施例中，R 6為OH。
在實施例中，R 1為視情況經OR 7或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，且其中R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基；及/或R 3係選自以下組成之群組：氫、
Figure 02_image286
、
Figure 02_image288
、
Figure 02_image290
、或
Figure 02_image292
。
在實施例中，式(I)化合物具有以下結構，
Figure 02_image294
(II),或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 1、R 2、R 3、R 4及R 5係如本文中任一處所定義。
在實施例中，式(I)或式(II)化合物具有以下結構，
Figure 02_image296
(III)，或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 1、R 2、R 4及R 5係如本文中任一處所定義，且其中 每個A獨立地為N或CR 9； R 8及R 9獨立地為氫、鹵素、OR 10、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基；且 R 10為C 1-3烷基或芳基。
在實施例中，A為N。在實施例中，A為CR 9。在實施例中，所有三個A群組皆為CR 9。在實施例中，一個A為CR 9，而另兩個A群組為N。在實施例中，一個A為N，而另兩個A群組為CR 9。在實施例中，所有三個A群組皆為N。
在實施例中，R 8及R 9中之至少一者為氫。在實施例中，R 8及R 9中之一者為氫。
在實施例中，R 8及R 9皆不是氫。
在實施例中，R 8為氫。
在實施例中，R 8為鹵素。在實施例中，鹵素為F、Cl、Br或I。在實施例中，R 8為Cl。
在實施例中，R 8為OR 10，其中R 10為C 1-3烷基。在實施例中，R 8為OMe。
在實施例中，R 8為OR 10，其中R 10為芳基。在實施例中，該芳基為苯基。在實施例中，R 8為OPh。
在實施例中，R 8為未經取代之C1-3烷基。在實施例中，R 8為經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基。
在實施例中，R 9為氫。
在實施例中，R 9為鹵素。在實施例中，鹵素為F、Cl、Br或I。在實施例中，R 9為Cl。
在實施例中，R 9為OR 10，其中R 10為C 1-3烷基。在實施例中，R 9為OMe。
在實施例中，R 9為OR 10，其中R 10為芳基。在實施例中，該芳基為苯基。在實施例中，R 9為OPh。
在實施例中，R 9為未經取代之C 1-3烷基。在實施例中，R 9為經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基。在實施例中，R 9為CH 3 。在實施例中，R 9為CF 3。
在實施例中，式(I)、式(II)或式(III)化合物具有以下結構，
Figure 02_image298
(IV)，或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 1、R 2、R 4、R 5、R 8及R 9係如本文中任一處所定義。
在實施例中，式(I)、式(II)或式(III)化合物具有以下結構，
Figure 02_image300
(V)，或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 1、R 2、R 4、R 5、R 8及R 9係如本文中任一處所定義。
在實施例中，
Figure 02_image302
為
Figure 02_image304
。在實施例中，R 9為鹵素、OR 10、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基。在實施例中，R 9為鹵素。
在實施例中，
Figure 02_image306
為
Figure 02_image308
。在實施例中，R 9為鹵素、OR 10、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基。在實施例中，R 9為鹵素。
在實施例中，
Figure 02_image310
為
Figure 02_image312
。在實施例中，R 8為鹵素、OR 10、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基。在實施例中，R 8為鹵素。
在實施例中，式(I)或式(II)化合物具有以下結構，
Figure 02_image314
(VI)，或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 1、R 2、R 4及R 5係如本文中任一處所定義，且其中 B為N或CR 11； D為N、NH或CR 11； E為N、CR 11或CHR 12；且 R 11及R 12獨立地為氫或C 1-3烷基；且 虛線圓圈代表共軛系統的存在或不存在。
在實施例中，該虛線圓圈係存在且R 3為
Figure 02_image316
，其中B為N或CR 11，D為N或CR 11，而E為N或CR 12。
在實施例中，D為CR 11，E為CR 12，而B為N。
在實施例中，B為CR 11，E為CR 12，而D為N。
在實施例中，B及D皆為CR 11，而E為N。
在實施例中，B及D皆為CR 11，而E為CR 12。
在實施例中，該虛線圓圈不存在且R 3為
Figure 02_image318
，其中B為N或CR 11；D為NH；而E為CHR 12。
在實施例中，B為CR 11，而E為CHR 12。
在實施例中，R 11為氫。
在實施例中，R 11為C 1-3烷基。在實施例中，R 11為CH 3。
在實施例中，R 12為氫。
在實施例中，R 12為C 1-3烷基。在實施例中，R 12為CH 3。
在實施例中，式(I)、式(II)或式(VI)化合物具有以下結構，
Figure 02_image320
(VII)，或其醫藥學上可接受之鹽，其中B、D、E、R 1、R 2、R 4及R 5係如本文中任一處所定義。
在實施例中，
Figure 02_image322
為
Figure 02_image324
。
在實施例中，
Figure 02_image326
為
Figure 02_image327
。
在實施例中，
Figure 02_image329
為
Figure 02_image330
。在實施例中，R 12為氫或C 1-3烷基。在實施例中，R 12為氫。在實施例中，R 12為CH 3。
在實施例中，
Figure 02_image332
為
Figure 02_image333
。
在實施例中，式(I)、式(II)或式(VI)化合物具有以下結構，
Figure 02_image335
(VIII)，或其醫藥學上可接受之鹽，其中B、R 1、R 2、R 4、R 5及R 12係如本文中任一處所定義。
在實施例中，
Figure 02_image337
為
Figure 02_image339
。在實施例中，R 12為C 1-3烷基。在實施例中，R 12為CH 3。
在實施例中，式(I)或式(II)化合物具有以下結構，
Figure 02_image341
(IX)，或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 1、R 2、R 4及R 5係如本文中任一處所定義，且其中 每個G獨立地為N、NH、NR 13或CR 14； R 13為環丙基、視情況經一或多個鹵素所取代之芳基、視情況經一或多個視情況取代的C 1-3烷基所取代之芳基、雜芳基、視情況經t-丁氧基羰基所取代之雜環烷基、視情況經芳基所取代之C 1-4烷基且該芳基視情況經一或多個鹵素取代；且 R 14為氫、鹵素、環丙基、或C 1-3烷基。
在實施例中，G為N。在實施例中，G為NH。在實施例中，G為NR 13。在實施例中，G為CR 14。
在實施例中，R 13為環丙基。
在實施例中，R 13為未經取代之芳基。在實施例中，R 13為經一或多個鹵素所取代之芳基。在實施例中，R 13為經一或多個視情況取代的C 1-3烷基（例如，經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基）所取代之芳基。在實施例中，芳基為苯基。在實施例中，R 13為未經取代之苯基。在實施例中，R 13為經一或多個鹵素所取代之苯基。在實施例中，R 13為經一或多個視情況取代的C 1-3烷基（例如，經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基）所取代之苯基。在實施例中，R 13係選自由以下組成之群組：p-三氟甲基苯基、m-氟苯基、p-氟苯基、p-氯苯基、2,4-二氯苯基、及3,5-二氯苯基。
在實施例中，R 13為雜芳基。在實施例中，該雜芳基係未經取代。在實施例中，該雜芳基係經取代。在實施例中，該雜芳基為吡啶基。在實施例中，R 13為2-吡啶基、3-吡啶基、或4-吡啶基。
在實施例中，R 13為未經取代之雜環烷基。在實施例中，R 13為經t-丁氧基羰基所取代之雜環烷基。在實施例中，該雜環烷基為6員雜環烷基。在實施例中，該雜環烷基為含氮雜環烷基。在實施例中，該雜環烷基為含氧雜環烷基。在實施例中，R 13為
Figure 02_image343
、或
Figure 02_image345
。
在實施例中，R 13為未經取代之C 1-4烷基。在實施例中，R 13為
Figure 02_image347
或
Figure 02_image349
。
在實施例中，R 13為經芳基取代之C 1-4烷基。在實施例中，該芳基係未經取代。在實施例中，該芳基係經一或多個鹵素取代。在實施例中，芳基為苯基。在實施例中，該苯基為未經取代之苯基。在實施例中，該苯基係經一或多個鹵素取代。在實施例中，R 13為
Figure 02_image351
或
Figure 02_image353
。
在實施例中，R 14為氫。
在實施例中，R 14為鹵素。在實施例中，鹵素為F、Cl、Br或I。在實施例中，R 14為F。
在實施例中，R 14為環丙基。
在實施例中，R 14為C 1-3烷基。在實施例中，R 14為CH 3。
在實施例中，
Figure 02_image355
為
Figure 02_image357
。
在實施例中，
Figure 02_image359
為
Figure 02_image361
。在實施例中，R 13為環丙基、視情況經一或多個鹵素所取代之芳基、視情況經一或多個視情況取代的C 1-3烷基所取代之芳基、雜芳基、視情況經t-丁氧基羰基所取代之雜環烷基、視情況經芳基所取代之C 1-4烷基且該芳基視情況經一或多個鹵素取代。在實施例中，R 13為未經取代之芳基。在實施例中，R 13為Ph。在實施例中，R 13為經一或多個鹵素所取代之芳基。在實施例中，R 13為
Figure 02_image363
或
Figure 02_image365
。在實施例中，R 13為環丙基。
在實施例中，
Figure 02_image367
為
Figure 02_image368
。在實施例中，R 13為環丙基、視情況經一或多個鹵素所取代之芳基、視情況經一或多個視情況取代的C 1-3烷基所取代之芳基、雜芳基、視情況經t-丁氧基羰基所取代之雜環烷基、視情況經芳基所取代之C 1-4烷基且該芳基視情況經一或多個鹵素取代。在實施例中，R 13為視情況經一或多個鹵素所取代之芳基。在實施例中，R 13為經芳基所取代之C 1-4烷基且該芳基經一或多個鹵素取代。在實施例中，R 13為視情況經一或多個鹵素所取代之芳基。在實施例中，R 13為Ph、
Figure 02_image370
、
Figure 02_image372
、或
Figure 02_image374
。
在實施例中，
Figure 02_image376
為
Figure 02_image378
。在實施例中，
Figure 02_image380
為
Figure 02_image381
、
Figure 02_image383
、或
Figure 02_image385
。在實施例中，R 13為環丙基、視情況經一或多個鹵素所取代之芳基、視情況經一或多個視情況取代的C 1-3烷基所取代之芳基、雜芳基、視情況經t-丁氧基羰基所取代之雜環烷基、視情況經芳基所取代之C 1-4烷基且該芳基視情況經一或多個鹵素取代。在實施例中，R 13為芳基。在實施例中，R 13為Ph。在實施例中，R 13為Ph、
Figure 02_image387
、
Figure 02_image389
、
Figure 02_image390
、
Figure 02_image392
、
Figure 02_image394
、
Figure 02_image396
、
Figure 02_image397
、2-吡啶基、
Figure 02_image399
、
Figure 02_image401
或
Figure 02_image403
。
在實施例中，R 14為氫、鹵素、環丙基、或C 1-3烷基。在實施例中，R 14為C 1-3烷基(例如，甲基)。
在實施例中，
Figure 02_image405
為
Figure 02_image407
。在實施例中，R 13為環丙基、視情況經一或多個鹵素所取代之芳基、視情況經一或多個視情況取代的C 1-3烷基所取代之芳基、雜芳基、視情況經t-丁氧基羰基所取代之雜環烷基、視情況經芳基所取代之C 1-4烷基且該芳基視情況經一或多個鹵素取代。在實施例中，R 13為芳基。在實施例中，R 13為Ph。
在實施例中，式(I)、式(II)或式(IX)化合物具有以下結構，
Figure 02_image409
(X)，或其醫藥學上可接受之鹽，其中G、R 1、R 2、R 4及R 5係如本文中任一處所定義。
在實施例中，
Figure 02_image411
為
Figure 02_image413
。在實施例中，R 13為環丙基、視情況經一或多個鹵素所取代之芳基、視情況經一或多個視情況取代的C 1-3烷基所取代之芳基、雜芳基、視情況經t-丁氧基羰基所取代之雜環烷基、視情況經芳基所取代之C 1-4烷基且該芳基視情況經一或多個鹵素取代。在實施例中，R 13為視情況經一或多個鹵素所取代之芳基。在實施例中，R 13為經芳基所取代之C 1-4烷基且該芳基經一或多個鹵素取代。在實施例中，R 13為視情況經一或多個鹵素所取代之芳基。在實施例中，R 13為Ph、
Figure 02_image415
、
Figure 02_image417
、或
Figure 02_image419
。
在實施例中，式(I)、式(II)、式(IX)或式(X)化合物具有以下結構，
Figure 02_image420
(XI)，或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 1、R 2、R 4、R 5及R 14係如本文中任一處所定義。
在實施例中，式(I)、式(II)、式(IX)、式(X)或式(XI)化合物具有以下結構，
Figure 02_image422
(XIIa)，或
Figure 02_image424
(XIIb)，或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 1、R 2、R 4、R 5、R 13及R 14係如本文中任一處所定義。
在實施例中，R 14為鹵素或C 1-3烷基。在實施例中，R 14為甲基。在實施例中，R 14為F。
在實施例中，R 13為環丙基、視情況經一或多個鹵素所取代之芳基、視情況經一或多個視情況取代的C 1-3烷基所取代之芳基、雜芳基、視情況經t-丁氧基羰基所取代之雜環烷基、視情況經芳基所取代之C 1-4烷基且該芳基視情況經一或多個鹵素取代。在實施例中，R 13為視情況經一或多個鹵素所取代之芳基。在實施例中，R 13為Ph、3-氟苯基、或4-氟苯基。
在實施例中，R 14為氫且
Figure 02_image426
為
Figure 02_image428
。在實施例中，R 14為氫且
Figure 02_image430
為
Figure 02_image432
。在實施例中，R 13為環丙基、視情況經一或多個鹵素所取代之芳基、視情況經一或多個視情況取代的C 1-3烷基所取代之芳基、雜芳基、視情況經t-丁氧基羰基所取代之雜環烷基、視情況經芳基所取代之C 1-4烷基且該芳基視情況經一或多個鹵素取代。在實施例中，R 13為C 1-4烷基。在實施例中，R 13為雜芳基。在實施例中，R 13為雜環烷基。在實施例中，R 13為經一或多個鹵素所取代之芳基。在實施例中，R 13為經視情況取代的C 1-3烷基（例如，經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基）所取代之芳基。在實施例中，R 13為Ph、
Figure 02_image434
、
Figure 02_image435
、
Figure 02_image437
、
Figure 02_image438
、
Figure 02_image440
、
Figure 02_image442
、2-吡啶基、
Figure 02_image443
、
Figure 02_image445
或
Figure 02_image447
。
在實施例中，式(I)、式(II)、式(IX)、式(X)、式(XI)或式(XIIa)化合物具有以下結構，
Figure 02_image449
(XIII)，或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 2、R 4、R 5及R 13係如本文中任一處所定義。
在實施例中，R 13為環丙基、視情況經一或多個鹵素所取代之芳基、視情況經一或多個視情況取代的C 1-3烷基所取代之芳基、雜芳基、視情況經t-丁氧基羰基所取代之雜環烷基、視情況經芳基所取代之C 1-4烷基且該芳基視情況經一或多個鹵素取代。在實施例中，R 13為經t-丁氧基羰基所取代之雜環烷基。在實施例中，R 13為芳基。在實施例中，R 13為經一或多個鹵素所取代之芳基。在實施例中，R 13為經視情況取代的C 1-3烷基（例如，經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基）所取代之芳基。在實施例中，R 13為Ph、
Figure 02_image451
、
Figure 02_image453
、
Figure 02_image454
、
Figure 02_image455
、
Figure 02_image456
、2-吡啶基、
Figure 02_image457
、
Figure 02_image459
、
Figure 02_image461
、或
Figure 02_image463
。
在實施例中，式(I)、式(II)、式(IX)、式(X)或式(XI)化合物具有以下結構，
Figure 02_image464
(XIX)，或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 1、R 2、R 4、R 5及R 13係如本文中任一處所定義。
在實施例中，R 13為環丙基、視情況經一或多個鹵素所取代之芳基、視情況經一或多個視情況取代的C 1-3烷基所取代之芳基、雜芳基、視情況經t-丁氧基羰基所取代之雜環烷基、視情況經芳基所取代之C 1-4烷基且該芳基視情況經一或多個鹵素取代。在實施例中，R 13為未經取代之芳基。在實施例中，R 13為Ph。
在實施例中，式(I)、式(II)或式(IX)化合物具有以下結構，
Figure 02_image466
(XX)，或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 1、R 2、R 4、R 5及R 13係如本文中任一處所定義。
在實施例中，R 13為環丙基、視情況經一或多個鹵素所取代之芳基、視情況經一或多個視情況取代的C 1-3烷基所取代之芳基、雜芳基、視情況經t-丁氧基羰基所取代之雜環烷基、視情況經芳基所取代之C 1-4烷基且該芳基視情況經一或多個鹵素取代。在實施例中，R 13為未經取代之芳基。在實施例中，R 13為Ph。在實施例中，R 13為經一或多個鹵素所取代之芳基。在實施例中，R 13為
Figure 02_image468
或
Figure 02_image470
。在實施例中，R 13為環丙基。
在實施例中，式(I)、式(II)或式(IX)化合物具有以下結構，
Figure 02_image471
(XXI)，或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 1、R 2、R 4及R 5係如本文中任一處所定義。
在實施例中，式(I)或式(II)化合物具有以下結構，
Figure 02_image473
(XIV)，或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 1、R 2、R 4及R 5係如本文中任一處所定義，且其中 I為O、S或CH； J為N或CH； R 15為氫或C 1-3烷基；且 R 19為氫或芳基。
在實施例中，I為O。在實施例中，I為S。在實施例中，I為CH。
在實施例中，J為N。在實施例中，J為CH。
在實施例中，R 15為氫。
在實施例中，R 15為C 1-3烷基。在實施例中，R 15為CH 3。
在實施例中，R 19為氫。
在實施例中，R 19為芳基。在實施例中，R 19為苯基。
在實施例中，式(I)、(II)或(XIV)化合物具有以下結構，
Figure 02_image475
(XV)，或其醫藥學上可接受之鹽，其中I、R 1、R 2、R 4、R 5、R 15及R 19係如本文中任一處所定義。
在實施例中，
Figure 02_image477
為
Figure 02_image479
。在實施例中，R 19為芳基。在實施例中，R 19為苯基。在實施例中，R 15為氫或C 1-3烷基。在實施例中，R 15為氫或CH 3。
在實施例中，
Figure 02_image481
為
Figure 02_image482
。在實施例中，R 19為芳基。在實施例中，R 19為苯基。
在實施例中，式(I)或式(II)化合物具有以下結構，
Figure 02_image484
(XVI)，或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 1、R 2、R 4、R 5、R 8及 9係如本文中任一處所定義，且其中X為O、S、或SO 2。
在實施例中，X為O。在實施例中，X為S。在實施例中，X為SO 2。
在實施例中，式(I)或式(II)化合物具有以下結構，
Figure 02_image486
(XVII)，或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 1、R 2、R 4、R 5、R 8及R 9係如本文中任一處所定義。
在實施例中，式(I)或式(II)化合物具有以下結構，
Figure 02_image488
(XVIII)，或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 1、R 2、R 4、R 5、R 8及R 9係如本文中任一處所定義。
在實施例中，式(I)或式(II)化合物具有以下結構，
Figure 02_image490
(XXII)，其中R 1、R 2、R 4及R 5係如本文中任一處所定義，且R 20為視情況經取代之芳基。
在實施例中，R 20為經取代之芳基（例如，包含有1、2或3個取代基）。在實施例中，R 20為未經取代之芳基。在實施例中，芳基為苯基。在實施例中，R 20為Ph。
在實施例中，式(I)或式(II)化合物具有以下結構，
Figure 02_image492
(XXIII)，或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 1、R 2、R 4及R 5係如本文中任一處所定義，且R 20為視情況經取代之芳基。
在實施例中，R 20為經取代之芳基（例如，包含有1、2或3個取代基）。在實施例中，R 20為未經取代之芳基。在實施例中，芳基為苯基。在實施例中，R 20為Ph。 例示性化合物
在一些實施例中，該PHD抑制劑化合物為化合物1-50之任一者或其醫藥學上可接受之鹽。
化合物編號 結構 化合物編號 結構
1
Figure 02_image494
 26
Figure 02_image496
2
Figure 02_image498
 27
Figure 02_image500
3
Figure 02_image502
 28
Figure 02_image503
4
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 29
Figure 02_image507
5
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 30
Figure 02_image511
6
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 31
Figure 02_image515
7
Figure 02_image517
 32
Figure 02_image519
8
Figure 02_image521
 33
Figure 02_image523
9
Figure 02_image525
 34
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10
Figure 02_image529
 35
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11
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 36
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12
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 37
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13
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 38
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14
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 39
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15
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 40
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16
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 41
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17
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 43
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21
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 46
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 47
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Figure 02_image581
 48
Figure 02_image583
24
Figure 02_image585
 49
Figure 02_image587
25
Figure 02_image589
 50
Figure 02_image591
在一些實施例中，該PHD抑制劑化合物為化合物51‑70之任一者或其醫藥學上可接受之鹽。
化合物編號 結構 化合物編號 結構
51
Figure 02_image593
 52
Figure 02_image595
53
Figure 02_image597
 54
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55
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 56
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57
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59
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 68
Figure 02_image627
69
Figure 02_image629
 70
Figure 02_image631
類同位素分子
應理解，在本文所述化合物（例如，式(I)–(XXIII)中之任一化合物，諸如化合物1–70中之任一者）中，原子可展現其天然同位素豐度，或一或多個原子可人工增濃特定同位素，同位素與自然界主要存在之元素具有相同原子數，但原子質量或質量數不同於自然界主要存在之原子質量或質量數。本發明欲包括本文所述化合物（例如，式(I)–(XXIII)中之任一化合物，諸如化合物1–70中之任一者）之化合物之所有適合同位素變化形式。例如，氫(H)之不同同位素形式包括氕( 1H)、氘( 2H)及氚( 3H)。氕為自然界中存在的主要氫同位素。
在一些實施例中，本文所述化合物（例如，式(I)–(XXIII)中之任一化合物，諸如化合物1–70中之任一者）中之一或多個氫係被氘取代。對氘進行增濃可產生某些治療優勢，諸如提高活體內半衰期或降低劑量要求，或可提供適用作表徵生物樣品之標準物的化合物。在一些實施例中，本文所述化合物（例如，式(I)–(XXIII)中之任一化合物，諸如化合物1–70中之任一者）中之一或多個氫係被氚取代。氚具有放射性且因而可提供放射性標記的化合物，可在代謝或動力學研究中用作示蹤劑。
本文所揭露之同位素增濃化合物（例如，式(I)–(XXIII)中之任一化合物，諸如化合物1–70中之任一者）可藉由熟習此項技術者所熟知的習知技術或藉由與本文流程及實例中所述之方法類似的方法，使用適當同位素增濃試劑及/或中間物不經過度實驗來實現。
術語「類同位素分子」係指除了在一或多個位置之同位素取代的位置及/或同位素增濃 程度之外，具有與本文所提供之特定化合物相同的化學結構及化學式的物質，例如氫與氘。因此，如本文所用之術語「化合物」係涵蓋具有相同化學結構之分子之集合，但在該等分子之組成原子之間也具有同位素變化。因此，對於熟習此項技術者顯而易見，由特定化學結構表示之含有指定氘原子之化合物亦含有較少量在該結構之一或多個指定氘位置處具有氫原子之類同位素分子。所提供之化合物中該等類同位素分子之相對量係視多種因素而定，該等因素包括(但不限於)用於製備該化合物之氘化試劑之同位素純度及用於製備該化合物之多個合成步驟中氘之併入效率。
當一位置特別地指定為「H」或「氫」時，該位置應視為具有為天然豐度同位素組成之氫。當一位置特別地指定為「D」或「氘」時，該位置應視為具有大於氘天然豐度(其為0.015%)至少3340倍之豐度的氘(亦即，術語「D」或「氘」係指併入至少50.1%的氘)。
在實施例中，本文所提供之化合物對於存在於指定為化合物上氘化潛在位點之位點處之各氘的 同位素富集因子為至少3500 (併入52.5%氘)、至少4000 (併入60%氘)、至少4500 (併入67.5%氘)、至少5000 (75%氘)、至少5500 (併入82.5%氘)、至少6000 (併入90%氘)、至少6333.3 (併入95%氘)、至少6466.7 (併入97%氘)、至少6600(併入99%氘)、或至少6633.3 (併入99.5%氘)。 本發明化合物之合成
本文所述化合物（例如，式(I)–(XXIII)中之任一化合物，諸如化合物1–70中之任一者）可 根據本領域中已知的方法來製備，包括本文所提供之實例的例示性合成。
本文所用之縮寫及首字母縮略詞包括以下各者：
術語 首字母縮略詞
4-二甲胺基吡啶 DMAP
乙醯基 Ac
水溶液 aq.
六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯啶 PyBOP
苯甲基 Bn
1,1’-雙(二苯基膦基)二茂鐵 dppf
第三丁氧基羰基 Boc
表寬單峰 brs
二氯甲烷 DCM
二甲基亞碸 DMSO
雙峰 d
電噴灑游離法 ESI
等效物 eq
乙酸乙酯 EtOAc
公克 g
己烷 Hex
高效能液相層析法 HPLC
小時 hr
異丙基 i-Pr
液相層析儀質譜儀 LCMS
兆赫 MHz
間-氯過氧苄酸 m-CPBA
甲醇 MeOH
毫克 mg
毫升 mL
分鐘 min
莫耳濃度 M
多重峰 m
N,N-二異丙基乙胺 DIPEA
N,N-二甲基甲醯胺 DMF
N,N-二甲基甲醯胺二甲縮醛 DMF-DMA
正常的 N
核磁共振 NMR
鈀碳 Pd/C
五重峰 p
石油醚 PE
苯基 Ph
製備型 Prep
四重峰 q
室溫 RT
單峰 s
四氫呋喃 THF
薄層層析法 TLC
三乙胺 TEA
三氟乙酸 TFA
三甲基矽基 TMS
三重峰 t
組成物及方法
本發明提供了式(I)–(XXIII)中之任一化合物在製造用於治療本文所述的各種病況或病症的藥物的用途。在一實施例中，提供了包含有式(I)–(XXIII)中之任一者的至少一化合物或其醫藥學上可接受之鹽以及醫藥學上可接受之賦形劑或載劑的醫藥組成物。在各個實施例中，該藥物或醫藥組成物可進一步包含至少一種額外的治療劑，或者與其結合使用。
本發明之該等化合物、或包含有該等化合物之藥物或組成物，可用於抑制PHD活性。抑制PHD可特別有益於治療以下疾病：包括心臟疾病(例如缺血性心臟病、鬱血性心臟衰竭及心臟瓣膜疾病)、肺臟疾病(例如肺臟發炎、肺炎、急性肺損傷、肺動脈高血壓、肺部纖維化及慢性阻塞性肺病)、呼吸道疾病(例如呼吸道感染、急性呼吸窘迫症候群)、肝臟疾病(例如急性肝衰竭及肝纖維化及肝硬化)、及腎臟疾病(例如急性腎損傷及慢性腎病)、發炎性腸道疾病(IBD)、缺血性再灌注損傷（例如中風）、及早產兒視網膜病變(ROP)。
在一實施例中，本發明之方法包含向有需要之患者投與治療有效量之式(I)–(XXIII)中之任一化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或是包含有式(I)–(XXIII)中之任一者之一或多種化合物的醫藥組成物。
本發明亦涉及抑制PHD活性的方法。在一實施例中，該方法包含使PHD接觸有效量之選自包含有式(I)–(XXIII)中之任一化合物之群組的一或多種化合物，或其醫藥學上可接受之鹽。
又在其他實施例中，本文所揭露之化合物（例如，式(I)–(XXIII)中之任一化合物，諸如化合物1–70中之任一者）或其醫藥學上可接受之鹽係有用於治療或預防貧血症，包括治療與以下疾病有關的貧血病症：慢性腎病、多囊性腎病、再生障礙性貧血、自身免疫性溶血性貧血、骨髓移植貧血、Churg-Strauss症候群、先天性純紅細胞再生障礙性貧血(Diamond Blackfan anemia)、范可尼氏(Fanconi's)貧血、Felty症候群、移植物抗宿主病、造血幹細胞移植、溶血性***候群、骨髓增生異常症候群、夜間陣發性血紅蛋白尿症、骨髓纖維化、全部血細胞減少症、純紅細胞再生障礙性貧血、Schoenlein-Henoch紫癜、原始細胞增多性難治性貧血、類風濕性關節炎、Shwachman症候群、鐮形細胞病、重型地中海貧血、輕型地中海貧血、血小板減少性紫癜、進行外科手術的貧血症或非貧血症患者、創傷相關或次生的貧血症、鐵粒幼細胞貧血、其他治療次生的貧血，包括：治療HIV的反轉錄酶抑制劑、皮質類固醇激素、含環狀順鉑的化療藥物或不含順鉑的化療藥物、長春花生物鹼、有絲***抑制劑、拓撲異構酶II抑制劑、蒽環黴素、安慈拉環素、烷基化劑，特別是發炎、衰老及/或慢性疾病次生的貧血。PHD的抑制還可用於治療貧血的症狀，包括慢性疲勞、臉色蒼白及頭昏眼花。
在其他實施例中，本文所揭露之化合物（例如式(I)–(XXIII)之化合物，諸如化合物1–70中之任一者）或其醫藥學上可接受之鹽係有用於治療或預防代謝失調疾病，包括但不限於糖尿病及肥胖症。
又在其他實施例中，本文所揭露之化合物（例如式(I)–(XXIII)之化合物，諸如化合物1–70中之任一者）或其醫藥學上可接受之鹽係有用於治療或預防血管疾病。這些疾病包括但不限於與缺氧或傷口癒合相關之需要促血管生成介質進行血管生成、血管新生及動脈新生的疾病。
又在其他實施例中，本文所揭露之化合物（例如式(I)–(XXIII)之化合物，諸如化合物1–70中之任一者）或其醫藥學上可接受之鹽係有用於治療或預防局部缺血再灌注。這些疾病包括但不限於中風、心肌梗塞及急性腎損傷。
在其他實施例中，本文所揭露之化合物（例如式(I)–(XXIII)之化合物，諸如化合物1–70中之任一者）或其醫藥學上可接受之鹽係有用於治療發炎性腸道疾病。這些疾病包括但不限於潰瘍性結腸炎及柯氏症(Crohn’s disease)。
在其他實施例中，本文所揭露之化合物（例如式(I)–(XXIII)之化合物，諸如化合物1–70中之任一者）或其醫藥學上可接受之鹽係有用於治療癌症，諸如大腸癌。
在其他實施例中，本文所揭露之化合物（例如式(I)–(XXIII)之化合物，諸如化合物1–70中之任一者）或其醫藥學上可接受之鹽係有用於治療動脈粥狀硬化症。
在其他實施例中，本文所揭露之化合物（例如式(I)–(XXIII)之化合物，諸如化合物1–70中之任一者）或其醫藥學上可接受之鹽係有用於治療心血管疾病。
在其他實施例中，本文所揭露之化合物（例如式(I)–(XXIII)之化合物，諸如化合物1–70中之任一者）或其醫藥學上可接受之鹽係有用於治療眼睛疾病或病狀。這些疾病包括但不限於放射線視網膜病變、早產兒視網膜病變(ROP)、糖尿病視網膜病變、老年性黃斑部病變及眼部缺血。
在其他實施例中，本文所揭露之化合物（例如式(I)–(XXIII)之化合物，諸如化合物1–70中之任一者）或其醫藥學上可接受之鹽係有用於治療與高氧症相關的疾病。
在其他實施例中，本文所揭露之化合物（例如式(I)–(XXIII)之化合物，諸如化合物1–70中之任一者）或其醫藥學上可接受之鹽係有用於治療肺支氣管發育不全(BPD)。
又在其他實施例中，本文所揭露之化合物（例如式(I)–(XXIII)之化合物，諸如化合物1–70中之任一者）或其醫藥學上可接受之鹽係有用於治療心臟疾病。這些病狀包括但不限於胰臟手術後的心肌缺血、經皮冠狀動脈介入治療(PCI)後的心肌損傷、非心臟手術後的心肌損傷、腹主動脈瘤選擇性手術的手術全期心肌缺血、PCI後的心肌損傷、接受冠狀動脈旁路移植(CABG)手術之患者的心肌損傷、微創二尖瓣(MIMV)修補或更換、接受開心手術之成年患者、慢性心臟衰竭、NYHA分類II–IV級。
在其他實施例中，本文所揭露之化合物（例如式(I)–(XXIII)之化合物，諸如化合物1–70中之任一者）或其醫藥學上可接受之鹽係有用於治療肺臟疾病，諸如肺臟發炎、肺炎、支氣管炎、急性肺損傷(ALI)、肺動脈高血壓、肺部纖維化、氣喘、急性呼吸窘迫症候群(ARDS)、或慢性阻塞性肺病。這些病狀包括但不限於選擇性肺葉切除術期間的肺損傷、接受冠狀動脈旁路移植手術(CABG手術)期間的肺損傷、及肺臟移植。
在其他實施例中，本文所揭露之該等化合物（例如式(I)–(XXIII)之化合物，諸如化合物1–70中之任一者）或其醫藥學上可接受之鹽係有用於治療呼吸道疾病。該等病狀包括(但不限於)呼吸道感染、急性呼吸窘迫症候群(ARDS)、肺部發炎、肺炎及急性肺損傷。
在其他實施例中，本文所揭露之化合物（例如式(I)–(XXIII)之化合物，諸如化合物1–70中之任一者）或其醫藥學上可接受之鹽係有用於治療肝臟疾病。這些病狀包括但不限於非酒精性肝炎(NASH)。
在其他實施例中，本文所揭露之化合物（例如式(I)–(XXIII)之化合物，諸如化合物1–70中之任一者）或其醫藥學上可接受之鹽係有用於治療腎臟疾病。這些病狀包括但不限於顯影劑引起之急性腎損傷、接受計劃性冠狀動脈血管攝影術之第III–IV期慢性腎病、接受心臟瓣膜手術之患者的急性腎損傷、非透析依存性慢性腎病、開始透析之慢性腎病患者、非透析依存性慢性腎病。
在其他實施例中，本文所揭露之化合物（例如式(I)–(XXIII)之化合物，諸如化合物1–70中之任一者）或其醫藥學上可接受之鹽係有用於治療一或多個器官的損傷及/或衰竭（例如肺臟、心臟、肝臟或腎臟之損傷或衰竭）。該等病症包括(但不限於)急性器官損傷或器官衰竭、及誘發性器官失調。
在其他實施例中，本文所揭露之化合物（例如式(I)–(XXIII)之化合物，諸如化合物1–70中之任一者）或其醫藥學上可接受之鹽係有用於治療呼吸道病毒（例如冠狀病毒）感染或肺部病毒（例如冠狀病毒）感染。
此外，本文所揭露之化合物（例如，式(I)–(XXIII)中之任一化合物，諸如化合物1–70中之任一者）或其醫藥學上可接受之鹽可與額外的活性成分組合使用於治療上述病狀。該額外的化合物可與本文所揭露之化合物（例如，式(I)–(XXIII)中之任一化合物，諸如化合物1–70中之任一者）或其醫藥學上可接受之鹽分開進行共投與，或者與額外的活性成分一起包括在根據本發明的醫藥組成物中。在一例示性實施例中，額外的活性成分為那些已知或被發現能有效治療由PHD酶介導的病狀、病症或疾病的活性成分，或者對與該特定病狀、病症或疾病有關的另一靶標有活性的活性成分，諸如替代性PHD調節劑。該組合可有助於提高功效（例如通過在該組成物中包括能增強本發明化合物之功效或有效性的化合物)，減少一或多種副作用、或者減少本發明化合物的所需劑量。
本發明的化合物係單獨使用或者與一或多種其他活性成分組合使用，以配製本發明之醫藥組成物。本發明之醫藥組成物包含：(a)有效量之本文所揭露之化合物（例如，式(I)–(XXIII)中之任一化合物，諸如化合物1–70中之任一者）或其醫藥學上可接受之鹽、醫藥學上可接受之前藥、或其醫藥活性代謝物；及(b)醫藥學上可接受之賦形劑。
「醫藥學上可接受之賦形劑」係指無毒的、生物學上可耐受的或另外來講在生物學上適於投與受試者的物質，諸如惰性物質，其被加到醫藥組成物或另外來講用作載劑、載體或稀釋劑以促進藥劑的投與，且其與該藥劑相容。賦形劑的實例包括碳酸鈣、磷酸鈣、各種糖類及各種類型的澱粉、纖維素衍生物、明膠、植物油及聚乙二醇。合適的賦形劑還可包括抗氧化劑。這類抗氧化劑可用於醫藥組成物中或者用於儲存介質中以延長該藥物製品的儲放時限。 醫藥製劑及投與途徑
如本領域已知的，本發明之化合物及組成物可直接遞送或以與合適載體或賦形劑一起的醫藥組成物或藥物遞送。本發明之治療方法可包括對有需要的個體投與有效量之本發明化合物。在一較佳實施例中，該個體為哺乳動物個體，在一最佳實施例中，該個體為人類個體。
所述化合物、組成物或藥物的有效量可通過常規實驗容易地測定，最有效和方便的投與途徑以及最適當的製劑也可如此測定。在本領域中存在各種製劑及藥物遞送系統。參見例如，Gennaro, A.R.編 (1995)雷氏藥學大全(Remington's Pharmaceutical Sciences)，見上。
例如，合適的給藥途徑可包括口服、直腸、局部、鼻、肺、眼睛、腸和非經腸給藥。用於非經腸給藥的主要途徑包括靜脈內、肌肉內和皮下給藥。次要給藥途徑包括腹膜內、動脈內、關節內、心內、腦池內、皮內、病灶內、眼內、胸膜內、鞘內、子宮內和心室內給藥。待治療的適應症以及藥物的物理、化學和生物特性決定製劑的類型和所用的給藥途徑，以及將會首選局部給藥還是全身性給藥。
本發明的化合物的醫藥劑型可以快釋、控釋、緩釋或靶藥物傳遞系統形式提供。例如，常用劑型包括溶液和懸浮液、(微)乳液、軟膏、凝膠和貼片、脂質體、片劑、糖衣藥丸、軟殼或硬殼膠囊、栓劑、胚珠、植入物、非晶形或結晶粉末、氣溶膠和凍乾製劑。視所用的給藥途徑而定，可能需要特殊裝置來施用或投與藥物，例如注射器和針、吸入器、泵、注射筆、塗藥器或專用瓶(special flask)。藥物劑型常常由藥物、賦形劑和容器/密封系統組成。可將一種或多種賦形劑(又稱為非活性成分)添加到本發明的化合物中來改善或促進藥物的製造、穩定性、給藥和安全性，並且可提供獲得所需藥物釋放曲線的方法。因此，添加到藥物中的賦形劑類型可視各種因素而定，例如藥物的物理和化學特性、給藥途徑和製備步驟。在該領域中存在藥用賦形劑並且包括各種藥典中所列的那些。參見例如，美國藥典(USP)、日本藥典(JP)、歐洲藥典(EP)和英國藥典(BP)；美國食品與藥品
管理局(www.fda.gov)藥物評價與研究中心(CEDR)出版物，例如，非活性組分指南(1996)；Ash及Ash編著 (2002)藥物添加劑手冊，聯合資訊資源公司(Synapse Information Resources公司，Endicott NY等)。[0149]本發明的化合物的藥物劑型可通過此項技術中熟知的任一種方法來製造，例如通過常規混合、篩分、溶解、熔化、造粒、製造糖衣藥丸、壓片、懸浮、擠壓、噴霧乾燥、研磨、乳化、(奈米/微米級)囊封、包理或凍乾工藝。如上文所述，本發明的組成物可包括一種或一種以上生理學上可接受的非活性成分，這些非活性成分會促進活性分子被加工成用於醫藥用途的製劑。
適當的製劑視所需的給藥途徑而定。例如，對於靜脈注射來說，組成物可配製於水溶液中，必要時使用生理上相容的緩衝劑，包括例如，用於調整製劑pH值的磷酸鹽、組胺酸或檸檬酸鹽，和滲透劑，例如氯化鈉或右旋糖。對於透黏膜或鼻給藥來說，可首選半固體、液體製劑或者貼片，可能含有滲透增強劑。所述滲透劑通常為本領域所已知。對於口服給藥來說，化合物可配製成液體或固體劑型並作為快釋或控釋/緩釋製劑。用於個體口服攝取的合適劑型包括片劑、藥丸、糖衣藥丸、硬殼和軟殼膠囊、液體、凝膠、糖漿、膏劑、懸浮液和乳液。化合物也可以被配製在直腸組成物中，如栓劑或保留灌腸劑，例如含有常規的栓劑基質如可可脂或其它甘油酯。
固體口服劑型可使用賦形劑獲得，所述賦形劑對包括填充劑、崩解劑、黏合劑(乾和濕)、溶解延緩劑、潤滑劑、助流劑、抗黏劑、陽離於***換樹脂、濕潤劑、抗氧化劑、防腐劑、著色劑和調味劑。這些賦形劑可具有合成或天然來源。所述賦形劑的實例包括纖維素衍生物、檸檬酸、磷酸二鈣、膠質、碳酸鎂、月桂基硫酸鎂/月桂基硫酸鈉、甘露糖醇、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、矽酸鹽、二氧化矽、苯甲酸鈉、山梨糖醇、澱粉、硬脂酸或其鹽、糖(即右旋糖、蔗糖、乳糖等)、滑石、西黃蓍膠漿(tragacanth mucilage)、植物油(氫化)和蠟。乙醇和水可用作造粒助劑。在某些情況下，需要用例如掩味膜、抗胃酸膜或延緩釋放膜來塗覆片劑。常常將天然和合成的聚合物與著色劑、糖和有機溶劑或水組合用於塗覆片劑，從而產生糖衣藥丸。當膠囊優於片劑時，可以用相容的硬殼或軟殼膠囊形式遞送其藥物粉末、懸浮液或溶液。
在一實施例中，本發明的化合物可局部給藥，例如通過皮膚貼片、半固體或液體製劑，如凝膠、(微)乳液、軟膏、溶液、(奈米/微米級)懸浮液或泡沫。藥物的皮膚和下層組織滲透可通過以下方式來調節：例如，使用滲透增強劑；使用親脂性、親水性和兩系媒性賦形劑的適當選擇和組合，包括水、有機溶劑、蠟、油、合成和天然的聚合物、表面活性劑、乳化劑；通過調整pH值；和使用錯合劑。例如離子電滲法的其它技術也可以用於調節本發明的化合物的皮膚滲透。例如在需要以最小全身性暴露局部給藥的情形下，將首選透皮或局部給藥。
對於通過吸入給藥或鼻給藥來說，根據本發明使用的化合物以溶液、懸浮液、乳液或半固體氣溶膠的形式從加壓包或噴霧器中方便地給藥，通常借助於推進劑，例如衍生自甲烷和乙烷的鹵化碳、二氧化碳或任何其它合適的氣體。對於局部氣溶膠來說，如丁烷、異丁烯和戊烷等烴是適用的。在加壓氣溶膠的情況下，適當的劑量單位可通過提供閥門傳遞計量量來測定。可配製用於吸入器或吹入器中的具有例如明膠的膠囊和藥筒。這些通常含有化合物與合適粉末基質(如乳糖或澱粉)的粉末混合物。
為通過注射非經腸給藥而配製的化合物及組成物通常是無菌的並且可以用單位劑型提供，例如安瓿瓶、注射器、注射筆，或多劑量容器，後者通常含有防腐劑。組成物可採用在油性或水性介質中的懸浮液、溶液或乳液等形式，並且可含有配製試劑，例如緩衝劑、滲透劑、黏度增強劑、表面活性劑、懸浮劑和分散劑、抗氧化劑、生物相容性聚合物、螯合劑和防腐劑。視注射部位而定，所述媒劑可含有水、合成或植物油和/或有機共溶劑。在某些情況下，例如對於凍乾產物或濃縮物，會在給藥之前將非經腸製劑重組或加以稀釋。提供本發明的化合物的控釋或緩釋的儲庫型製劑可包括奈米/微米級微粒，或者奈米/微米級或非微細化晶體的可注射懸浮液。例如聚(乳酸)、聚(乙醇酸)或其共聚物等聚合物可被用作控釋/緩釋基質，也可使用此項技術中其它的熟知基質。可以用需要切口的植入物和泵的形式提供其它的儲庫型給藥系統。
用於靜脈注射本發明化合物的合適的載劑為此項技術所熟知並且包括含有用於形成離子化合物的鹼(如氫氧化鈉)、作為滲透劑的蔗糖或氯化鈉的水基溶液，例如緩衝劑含有磷酸鹽或組胺酸。可添加如聚乙二醇的共溶劑。這些水基系統有效溶解本發明的化合物並且在全身性給藥後產生低毒性。在不破壞溶解性和毒性特徵之下，可大大改變溶液系統的組分的比例。此外，可改變組分的本性。舉例來說，可使用低毒性表面活性劑如聚山梨醇酯或泊洛沙姆，也可使用聚乙二醇或其它共溶劑，可添加生物相容性聚合物如聚乙烯毗略烷酮，並且可用其它糖和多元醇來替代右旋糖。
治療有效劑量可首先使用此項技術中熟知的各種技術來估算。用於動物研究的初始劑量可根據細胞培養測定中所確立的有效濃度。適合於人個體的劑量範圍例如可使用從動物研究和細胞培養測定所獲得的資料來確定。在某些實施例中，本發明之化合物係調配用於口服投與。在用於口服投與之醫藥製劑中，本發明之化合物的例示性劑量為約0.5至約10 mg/kg個體體重。在一些實施例中，醫藥製劑包含約0.7至約5.0 mg/kg個體體重，或者約1.0至約2.5 mg/kg個體體重。口服投與之一般給藥方案會是投與該口服投與之醫藥製劑每周三次、每周兩次、每周一次或每天。
藥劑(例如本發明的化合物)的有效量或治療有效量或劑量指的是引起個體症狀改善或存活延長的藥劑或化合物的量。所述分子的毒性和治療功效可在細胞培養物或實驗動物中通過標準醫藥程式來測定，例如通過測定LD50 (使群體的50%致命的劑量)和ED50 (對群體的50%治療有效的劑量)。毒性作用與治療作用的劑量比是治療指數，可表示為LD50/ ED50比率。顯示高治療指數的藥劑是優選的。
有效量或治療有效量是將會引發研究人員、獸醫、醫生或其它臨床醫生所探求的組織、系統、動物或人類的生物或醫學反應的化合物或醫藥組成物的量。劑量優選在極小毒性或無毒性的包括ED50的迴圈濃度的範圍內。劑量可在這個範圍內變化，視所用的劑型和/或所用的給藥途徑而定。應根據此項技術中已知的方法，鑒於個體狀況的特殊性來選擇準確的製劑、給藥途徑、劑量和給藥間隔時間。
給藥量和間隔時間可個別地加以調整以提供足以獲得所需效果的活性部分血漿含量；即最小有效濃度(MEC)。各化合物的MEC將有所不同，但可以例如從活體外資料和動物實驗估算。獲得MEC所必需的劑量將視個體特徵和給藥途徑而定。在局部給藥或選擇吸收的情況下，藥物的有效局部濃度可能與血漿濃度無關。
所施予的藥劑或組成物的量可視各種因素而定，包括所治療個體的性別、年齡和體重、病痛的嚴重性、給藥方式和處方醫師的判斷。
在需要時，本發明之化合物及組成物可以用含有一個或一個以上單位劑型(含有活性成分)的包裝或分配裝置提供。舉例來說，所述包裝或裝置可包含金屬或塑膠箔(如發泡包裝)或玻璃和橡皮塞，如在小瓶中。所述包裝或分配裝置可附有用藥說明書。也可以製備包含在相容性醫藥載劑中配製的本發明化合物的組成物，將其置於適當容器中，並且加上用於治療指定病狀的標籤。
鑒於本文所公開內容，本發明的這些和其它實施例將容易由所屬領域的技術人員想到且其被本發明明確涵蓋。 範例 整體方法
大部分的化學品係購自Sinopharm Chemical Reagent公司(SCRC)、Sigma-Aldrich公司、Alfa公司或其他供應商。
1H NMR或 19F NMR光譜係記錄於Bruker AVⅢ 400或Bruker AVⅢ 500上。
LCMS量測係於Agilent 1200 HPLC/6100 SQ系統上使用下列條件運行：
方法 A：移動相：A：水(0.01% TFA) B: 乙腈(0.01% TFA)；梯度相：在1.4分鐘內由5%B增加至95%B，95%B維持1.6分鐘(總運行時間：3分鐘)；流速：2.3 mL/分鐘；管柱：SunFire C18，4.6*50 mm，3.5 µm ；管柱溫度: 50 ºC。偵測器：ADC ELSD，DAD (214 nm和254 nm),ES-API。
方法 B：移動相：A：水(10 mM NH 4HCO 3) B：乙腈；梯度相：在1.5分鐘內由5%B增加至95%B，95%B維持1.5分鐘(總運行時間：3分鐘)；流速：2.0 mL/分鐘；管柱：XBridge C18，4.6*50mm，3.5um；管柱溫度：40 ºC。偵測器：ADC ELSD，DAD (214 nm和254 nm)，MSD (ES-API)。 合成式(I)化合物之整體流程
式(I)化合物係依據 流程 A使用市售材料來製備。鹵化吡啶(化合物 a)與氧化劑的反應產生了化合物( b)的N-氧化物吡啶化合物。化合物( b)的氰化提供了化合物( c)。化合物( c)與硼酸的交叉偶聯產生了化合物( e)。使用苯甲醇置換化合物( e)的鹵素提供了化合物( f)。化合物( f)的腈水解且隨後以胺酯進行醯胺形成產生了醯胺(化合物( i))。苯甲基脫除保護基提供了式(I)化合物，且該酯隨後皂化提供了化合物( j)。 流程A：式(I)化合物之合成
Figure 02_image633
例示性化合物之合成實例1：化合物1之製備
3,5-二氯-4-甲基吡啶1-氧化物
Figure 02_image635
在0 °C下向3,5-二氯-4-甲基-吡啶(5.0 g, 30.8 mmol)之二氯甲烷(70.0 mL)溶液添加3-氯過氧基苯甲酸(8.12 g, 40.11 mmol, 85%)。將該混合物在室溫下攪拌18.0小時並添加碳酸鉀(4.42 g, 32.0 mmol)。將該混合物再攪拌1小時並過濾掉不溶固體。將濾液濃縮以得到呈白色固體之3,5-二氯-4-甲基吡啶1-氧化物(4.7 g, 26.4 mmol，產率85.1%)。LC-MS: m/z= 178.1 [M+H] +，滯留時間1.47分鐘(方法A)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
3,5-二氯-4-甲基氰吡啶
Figure 02_image637
將於乙腈(90.0 mL)中之3,5-二氯-4-甲基-吡啶 1-氧化物(5.0 g, 28.4 mmol)、三甲矽基氰化物(5.0 g, 40.3 mmol)及三乙胺(4.28 g, 42.3 mmol)混合物在85 oC下攪拌24.0小時。將該混合物以水稀釋並以乙酸乙酯萃取。有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 10/1)純化，得到呈黃色油狀物之3,5-二氯-4-甲基氰吡啶(4.96 g，26.8 mmol，產率94.5%)。LC-MS: m/z= 187.2 [M+H] +，滯留時間1.74分鐘(方法A)。
3-氯-5-(3-氟苯基)-4-甲基氰吡啶
Figure 02_image639
向於 N,N-二甲基甲醯胺/水(5.0 mL/0.5 mL)中之3,5-二氯-4-甲基氰吡啶(500 mg, 2.67 mmol)、(3-氟苯基)硼酸(374 mg  2.67 mmol)及碳酸鉀(443 mg, 3.21 mmol)溶液添加[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (78 mg, 0.11 mmol)。將該混合物在45 °C於氮氣下攪拌16.0小時並冷卻至室溫。將乙酸乙酯及水加入至該溶液中，並分離各層。將有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮至乾燥。殘餘物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 2/1)純化，得到呈黃色固體之3-氯-5-(3-氟苯基)-4-甲基氰吡啶(400 mg, 1.63 mmol，產率61%)。LC-MS: m/z= 247.1 [M+H]+，滯留時間=1.83分鐘(方法A)。
3-(苯甲氧基)-5-(3-氟苯基)-4-甲基氰吡啶
Figure 02_image641
在0°C於氮氣下向於 N,N-二甲基甲醯胺(10.0 mL)中之3-氯-5-(3-氟苯基)-4-甲基氰吡啶(400.0 mg, 1.62 mmol)溶液添加氫化鈉(78 mg, 1.94 mmol，於礦物油中之60% w/w懸浮液)。將該混合物在0 °C下攪拌10分鐘且接著添加苯甲醇(210 mg, 1.94 mmol)。在0 °C下攪拌該溶液1.0小時並用乙酸乙酯及水稀釋。有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 3/1)純化，得到呈黃色固體之3-(苯甲氧基)-5-(3-氟苯基)-4-甲基氰吡啶(378 mg，1.18 mmol，產率73%)。LC-MS: m/z= 319.1 [M+H]+，滯留時間=2.21分鐘(方法A)。
3-(苯甲氧基)-5-(3-氟苯基)-4-甲基吡啶甲酸
Figure 02_image643
向於乙醇(10.0 mL)中之3-(苯甲氧基)-5-(3-氟苯基)-4-甲基氰吡啶(378 mg, 1.19 mmol)溶液添加30%氫氧化鈉水溶液(5.0 mL)。將該混合物在100 °C下攪拌5.0小時，冷卻並濃縮以去除乙醇。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾並乾燥以得到呈白色固體之3-(苯甲氧基)-5-(3-氟苯基)-4-甲基吡啶甲酸(340 mg, 1.01 mmol，產率85%)。LC-MS: m/z= 338.1 [M+H] +，滯留時間2.00分鐘(方法A)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
(3-(苯甲氧基)-5-(3-氟苯基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image645
將於二氯甲烷(5.0 mL)中之3-(苯甲氧基)-5-(3-氟苯基)-4-甲基吡啶甲酸(170 mg, 0.50 mmol)、甘胺酸乙酯鹽酸鹽(70 mg, 0.50 mmol)、六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯啶基鏻(288 mg, 0.55 mmol)及三乙胺(254 mg, 2.52 mmol)混合物在室溫下攪拌過夜。以水終止反應，並以二氯甲烷萃取。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 1/1)純化，得到呈白色固體之(3-(苯甲氧基)-5-(3-氟苯基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(200 mg, 0.47 mmol，產率94%)。LC-MS: m/z= 423.1 [M+H] +，滯留時間2.15分鐘(方法A)。
(5-(3-氟苯基)-3-羥基-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image647
將於四氫呋喃(10.0 mL)中之(3-(苯甲氧基)-5-(3-氟苯基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(200 mg, 0.47 mmol)及10%鈀碳(20.0 mg)混合物於氫氣環境下攪拌18.0小時。過濾掉不溶固體並將濾液濃縮以得到呈黃色固體之(3-羥基-4-甲基-5-(1-苯基-1 H-吡唑-4-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(150 mg, 0.45 mmol，產率95%)。LC-MS: m/z= 333.1 [M+H] +，滯留時間2.19分鐘(方法A)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
(5-(3-氟苯基)-3-羥基-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸
Figure 02_image649
向於四氫呋喃/水(8.0 mL/2.0 mL)中之(3-羥基-4-甲基-5-(1-苯基-1 H-吡唑-4-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(150 mg, 0.45 mmol)溶液添加氫氧化鋰單水合物(164 mg, 4.0 mmol)。將該混合物攪拌過夜並濃縮以去除四氫呋喃。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾，以水洗滌並乾燥以得到呈白色固體之(5-(3-氟苯基)-3-羥基-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸(24.0 mg, 0.06 mmol，產率13%)。LC-MS: m/z= 305.1 [M+H] +，滯留時間4.37分鐘(方法A)。 1HNMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ12.81 (s, 1H), 9.38 (t, J= 5.9 Hz, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.57 (dd, J= 14.1, 7.8 Hz, 1H), 7.42 – 7.16 (m, 3H), 4.01 (d, J= 6.1 Hz, 2H), 2.16 (s, 3H)。 實例2：化合物2之製備
3-氯-5-(3-甲氧基苯基)-4-甲基氰吡啶
Figure 02_image651
向於N,N-二甲基甲醯胺/水(2.0 mL/0.2 mL)中之3,5-二氯-4-甲基氰吡啶(600 mg, 3.21 mmol)、(3-甲氧基苯基)硼酸(487.7 mg, 3.21 mmol)及碳酸鉀(531.34 mg, 3.85 mmol)溶液添加[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (117.27 mg, 0.05 mmol)。將該混合物在45 °C於氮氣下攪拌12.0小時並冷卻至室溫。將乙酸乙酯及水加入至該溶液中，並分離各層。將有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮至乾燥。殘餘物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 2/1)純化，得到呈黃色固體之3-氯-5-(3-甲氧基苯基)-4-甲基氰吡啶(500 mg, 1.94 mmol，產率61%)。LC-MS: m/z= 259 [M+H] +，滯留時間2.13分鐘(方法B)。
3-(苯甲氧基)-5-(3-甲氧基苯基)-4-甲基氰吡啶
Figure 02_image653
在0°C於氮氣下向於N,N-二甲基甲醯胺(10.0 mL)中之3-氯-5-(3-甲氧基苯基)-4-甲基氰吡啶(500 mg, 1.94 mmol)溶液添加氫化鈉(100.8 mg, 2.52 mmol，於礦物油中之60% w/w懸浮液)。將該混合物在0 °C下攪拌10分鐘且接著添加苯甲醇(172.1 mg, 2.52 mmol)。將該溶液在室溫下攪拌2.0小時並用乙酸乙酯及水稀釋。有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 3/1)純化，得到呈黃色固體之3-(苯甲氧基)-5-(3-甲氧基苯基)-4-甲基氰吡啶(350 mg, 1.06 mmol，產率54.6%)。LC-MS: m/z= 331.0 [M+H] +，滯留時間1.91分鐘(方法A)。
3-(苯甲氧基)-5-(3-甲氧基苯基)-4-甲基吡啶甲酸
Figure 02_image655
向於乙醇(10.0 mL)中之3-(苯甲氧基)-5-(3-甲氧基苯基)-4-甲基氰吡啶(350 mg, 1.06 mmol)溶液添加30%氫氧化鈉水溶液(5.0 mL)。將該混合物在100 °C下攪拌3.0小時，冷卻並濃縮以去除乙醇。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾並乾燥以得到呈白色固體之3-(苯甲氧基)-5-(3-甲氧基苯基)-4-甲基吡啶甲酸(350 mg, 1.0 mmol，產率94.61%)。LC-MS: m/z= 350.0 [M+H] +，滯留時間1.38分鐘(方法B)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
(3-(苯甲氧基)-5-(3-甲氧基苯基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image657
將於二氯甲烷(5.0 mL)中之3-(苯甲氧基)-5-(3-甲氧基苯基)-4-甲基吡啶甲酸(180 mg, 0.52 mmol)、甘胺酸乙酯鹽酸鹽(86.0 mg, 0.62 mmol)、六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯啶基鏻(321.8 mg, 0.62 mmol)及三乙胺(260.5 mg, 2.58 mmol)混合物在室溫下攪拌12.0小時。以水終止反應，並以二氯甲烷萃取。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 1/1)純化，得到呈白色固體之(3-(苯甲氧基)-5-(3-甲氧基苯基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(180 mg, 0.41 mmol，產率79.76%)。LC-MS: m/z= 435.0 [M+H] +，滯留時間2.18分鐘(方法B)。
(3-羥基-5-(3-甲氧基苯基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image659
將於四氫呋喃(10.0 mL)中之(3-(苯甲氧基)-5-(3-甲氧基苯基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(180 mg, 0.42 mmol)及10%鈀碳(20.0 mg)混合物於氫氣環境下攪拌過夜。過濾掉不溶固體並將濾液濃縮以得到呈黃色固體之(3-羥基-5-(3-甲氧基苯基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(180 mg，粗製)。LC-MS: m/z= 345.0 [M+H]+，滯留時間1.88分鐘(方法A)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
(3-羥基-5-(3-甲氧基苯基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸
Figure 02_image661
向於四氫呋喃/水(10.0 mL/4.0 mL)中之(3-羥基-5-(3-甲氧基苯基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(160 mg, 0.47 mmol)溶液添加氫氧化鈉(160 mg, 4.0 mmol)。將該混合物在40 °C下攪拌12.0小時並濃縮以去除四氫呋喃。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾，以水洗滌並乾燥以得到呈白色固體之(3-羥基-5-(3-甲氧基苯基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸(62 mg, 0.20 mmol，產率42%)。LC-MS: m/z= 317.0 [M+H] +，滯留時間4.40分鐘(方法A)。 1HNMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.78 (s, 1H), 9.37 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.44 (dd, J = 10.1, 6.1 Hz, 1H), 7.03 (dt, J = 7.4, 3.8 Hz, 1H), 6.99 (dd, J = 3.7, 1.9 Hz, 2H), 4.02 (t, J = 7.9 Hz, 2H), 3.82 (s, 3H), 2.17 (s, 3H)。 實例3：化合物3的製備
6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)異喹啉
Figure 02_image663
向於1,4-二噁烷(15.0 mL)中之6-溴異喹啉(1.04 g, 5.0 mmol)、雙(頻哪醇合)二硼(2.54 g, 10.0 mmol)及醋酸鉀(1.96 g, 20.0 mmol)溶液添加[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (365 mg, 0.5 mmol)。將該混合物在90 °C於氮氣下攪拌2.0小時並冷卻至室溫。將乙酸乙酯及水加入至該溶液中，並分離各層。將有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮至乾燥。殘餘物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 2/1)純化，得到呈白色固體之6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)異喹啉(0.79 g, 3.1 mmol，產率62%)。LC-MS: m/z= 256.0 [M+H] +，滯留時間1.41分鐘(方法B)。
3-氯-5-(異喹啉-6-基)-4-甲基氰吡啶
Figure 02_image665
向於N,N-二甲基甲醯胺/水(5.0 mL/0.5 mL)中之3,5-二氯-4-甲基氰吡啶(400 mg, 2.16 mmol)、6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)異喹啉(550 mg, 2.16 mmol)及碳酸鉀(358 mg, 2.59 mmol)溶液添加[1,1’-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (146 mg, 0.2 mmol)。將該混合物在45 °C於氮氣下攪拌過夜並冷卻至室溫。將乙酸乙酯及水加入至該溶液中，並分離各層。將有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮至乾燥。殘餘物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 1/1)純化，得到呈黃色固體之3-氯-5-(異喹啉-6-基)-4-甲基氰吡啶(500 mg, 1.79 mmol，產率83%)。LC-MS: m/z= 280.0 [M+H] +，滯留時間1.58分鐘(方法B)。
5-(異喹啉-6-基)-3-((4-甲氧基苯甲基)氧基)-4-甲基氰吡啶
Figure 02_image667
在0°C於氮氣下向於N,N-二甲基甲醯胺(10.0 mL)中之3-氯-5-(異喹啉-6-基)-4-甲基氰吡啶(500.0 mg, 1.79 mmol)溶液添加氫化鈉(86 mg, 2.15 mmol，於礦物油中之60% w/w懸浮液)。將該混合物在0 °C下攪拌10分鐘且接著添加(4-甲氧基苯基)甲醇(296 mg, 2.15 mmol)。在0 °C下攪拌該溶液1.0小時並用乙酸乙酯及水稀釋。有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 1/1)純化，得到呈黃色固體之5-(異喹啉-6-基)-3-((4-甲氧基苯甲基)氧基)-4-甲基氰吡啶(250 mg, 0.66 mmol，產率37%)。LC-MS: m/z= 382.1 [M+H]+，滯留時間=2.21分鐘(方法A)。
3-羥基-5-(異喹啉-6-基)-4-甲基吡啶甲酸
Figure 02_image669
向於乙醇(10.0 mL)中之5-(異喹啉-6-基)-3-((4-甲氧基苯甲基)氧基)-4-甲基氰吡啶(250 mg, 0.66 mmol)溶液添加30%氫氧化鈉水溶液(4.0 mL)。將該混合物在100 °C下攪拌5.0小時，冷卻並濃縮以去除乙醇。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾並乾燥以得到呈白色固體之3-羥基-5-(異喹啉-6-基)-4-甲基吡啶甲酸(250 mg，粗製)。LC-MS: m/z= 401.1 [M+H] +，滯留時間2.00分鐘(方法A)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
(3-羥基-5-(異喹啉-6-基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image671
將於二氯甲烷(5.0 mL)中之3-羥基-5-(異喹啉-6-基)-4-甲基吡啶甲酸(250 mg, 0.62 mmol)、甘胺酸乙酯鹽酸鹽(87 mg, 0.62 mmol)、六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯啶基鏻(390 mg, 0.75 mmol)及三乙胺(254 mg, 2.52 mmol)混合物在室溫下攪拌過夜。以水終止反應，並以二氯甲烷萃取。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 1/1)純化，得到呈白色固體之(3-羥基-5-(異喹啉-6-基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(140 mg, 0.38 mmol，產率43%)。LC-MS: m/z= 366.1 [M+H] +，滯留時間2.15分鐘(方法A)。
(3-羥基-5-(異喹啉-6-基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸
Figure 02_image673
向於四氫呋喃/水(8.0 mL/2.0 mL)中之(3-羥基-5-(異喹啉-6-基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(140 mg, 0.38 mmol)溶液添加氫氧化鋰單水合物(164 mg, 4.0 mmol)。將該混合物攪拌過夜並濃縮以去除四氫呋喃。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾，以水洗滌並用逆相製備型HPLC純化以得到呈白色固體之(3-羥基-5-(異喹啉-6-基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸(72.6 mg, 0.22 mmol，產率56%)。LC-MS: m/z= 338.1 [M+H] +，滯留時間2.28分鐘(方法A)。 1HNMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 12.88 (s, 1H), 9.71 (s, 1H), 9.45 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 8.68 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 8.47 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.24 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.95 (dd, J = 8.5, 1.4 Hz, 1H), 4.04 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 2.20 (s, 3H)。 實例4：化合物4的製備
3-氯-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)氰吡啶
Figure 02_image675
向於N,N-二甲基甲醯胺/水(10.0 mL/1.0 mL)中之3,5-二氯-4-甲基-吡啶-2-甲腈(550 mg, 2.96 mmol)、1-苯基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(800 mg  2.96 mmol)及碳酸鉀(490 mg, 3.55 mmol)溶液添加[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (86.5 mg, 0.12 mmol)。將該混合物在50 °C於氮氣下攪拌16.0小時並冷卻至室溫。將乙酸乙酯及水加入至該溶液中，並分離各層。將有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮至乾燥。殘餘物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 2/1)純化，得到呈黃色固體之3-氯-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)氰吡啶(400 mg, 1.36 mmol，產率46%)。LC-MS: m/z= 295.3 [M+H]+，滯留時間=1.909分鐘(方法A)。
3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)氰吡啶
Figure 02_image677
在0°C於氮氣下向於N,N-二甲基甲醯胺(10.0 mL)中之3-氯-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)氰吡啶(600.0 mg, 2.04 mmol)溶液添加氫化鈉(90 mg, 2.24mmol，於礦物油中之60% w/w懸浮液，於礦物油中之60% w/w懸浮液)。將該混合物在0 °C下攪拌10分鐘且接著添加苯甲醇(220.2 mg, 2.04 mmol)。在0 °C下攪拌該溶液1.0小時並用乙酸乙酯及水稀釋。有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 3/1)純化，得到呈黃色固體之3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)氰吡啶(300 mg, 0.82 mmol，產率40.2%)。LC-MS: m/z= 367.1 [M+H]+，滯留時間=2.20分鐘(方法A)。
3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲酸
Figure 02_image679
向於乙醇(5.0 mL)中之3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)氰吡啶(300 mg, 0.82 mmol)溶液添加30%氫氧化鈉水溶液(5.0 mL)。將該混合物在100 °C下攪拌5.0小時，冷卻並濃縮以去除乙醇。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾並乾燥以得到呈白色固體之3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲酸(290 mg, 0.75 mmol，產率91.4%)。LC-MS: m/z= 386.4 [M+H] +，滯留時間1.74分鐘(方法A)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image681
將於二氯甲烷(8.0 mL)中之3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲酸(290 mg, 0.75 mmol)、甘胺酸乙酯鹽酸鹽(104 mg, 0.75 mmol)、六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯啶基鏻(430 mg, 0.83 mmol)、三乙胺(380 mg, 3.75 mmol)混合物在室溫下攪拌過夜。以水終止反應，並以二氯甲烷萃取。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 1/1)純化，得到呈黃色固體之(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(200 mg, 0.42 mmol，產率56.5%)。LC-MS: m/z= 471.1 [M+H] +，滯留時間2.13分鐘(方法A)。
(3-羥基-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image683
將於四氫呋喃(10.0 mL)中之(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(200 mg, 0.42 mmol)及10%鈀碳(20.0 mg)混合物於氫氣環境下攪拌18小時。過濾掉不溶固體並將濾液濃縮以得到呈白色固體之(3-羥基-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(150 mg, 0.39 mmol，產率94%)。LC-MS: m/z= 381.0 [M+H] +，滯留時間2.16分鐘(方法A)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
(3-羥基-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醯基)甘胺酸
Figure 02_image685
向於四氫呋喃/水(6.0 mL/3.0 mL)中之(3-羥基-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(150 mg, 0.39 mmol)溶液添加氫氧化鋰單水合物(164 mg, 4.0 mmol)。將該混合物攪拌過夜並濃縮以去除四氫呋喃。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾，以水洗滌並乾燥以得到呈白色固體之(3-羥基-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醯基)甘胺酸(121.6 mg, 0.35 mmol，產率88.5%)。LC-MS: m/z= 353.1 [M+H] +，滯留時間4.534分鐘(方法A)。 1HNMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 12.80 (s, 1H), 9.32 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 8.94 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.94 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.55 (t, J = 7.9 Hz, 2H), 7.37 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 4.01 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 2.38 (s, 3H)。 實例5：化合物5的製備
2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)喹啉
Figure 02_image687
向於1,4-二噁烷(15.0 mL)中之6-溴-2-甲基喹啉(2.0 g, 9.01 mmol)、雙(頻哪醇合)二硼(2.6 g, 10.28 mmol)及醋酸鉀(2.65 g, 27 mmol)溶液添加[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (660 mg, 0.9 mmol)。將該混合物在100 °C於氮氣下攪拌2.0小時並冷卻至室溫。將乙酸乙酯及水加入至該溶液中，並分離各層。將有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮至乾燥。得到粗製2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)喹啉(2.1 g, 7.81 mmol，產率87.5%)。LC-MS: m/z= 270.2 [M+H] +，滯留時間2.08分鐘(方法B)。將產物直接用於下一步驟中。
3-氯-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)氰吡啶
Figure 02_image689
向於N,N-二甲基甲醯胺/水(10.0 mL/1.0 mL)中之3,5-二氯-4-甲基-吡啶-2-甲腈(1.2 g, 6.42 mmol)、2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)喹啉(1.73 g, 6.42 mmol)及碳酸鉀(1.16 g, 7.70 mmol)溶液添加[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (234.5 mg, 0.32 mmol)。將該混合物在45 °C於氮氣下攪拌過夜並冷卻至室溫。將乙酸乙酯及水加入至該溶液中，並分離各層。將有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮至乾燥。殘餘物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 1/1)純化，得到呈黃色固體之3-氯-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)氰吡啶(900 mg, 3.07 mmol，產率47.9%)。LC-MS: m/z= 294.0 [M+H] +，滯留時間1.61分鐘(方法A)。
3-((4-甲氧基苯甲基)氧基)-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)氰吡啶
Figure 02_image691
在0°C於氮氣下向於N,N-二甲基甲醯胺(10.0 mL)中之3-氯-5-(異喹啉-6-基)-4-甲基氰吡啶(500 mg, 1.71 mmol)溶液添加氫化鈉(95.6 mg, 2.39 mmol，於礦物油中之60% w/w懸浮液)。將該混合物在0 °C下攪拌10分鐘且接著添加(4-甲氧基苯基)甲醇(329.7 mg, 2.39 mmol)。在0 °C下攪拌該溶液2.0小時並用乙酸乙酯及水稀釋。有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 2/1)純化，得到呈黃色固體之3-((4-甲氧基苯甲基)氧基)-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)氰吡啶(400 mg, 1.01 mmol，產率59.2%)。LC-MS: m/z= 396.0 [M+H] +，滯留時間1.49分鐘(方法A)。
3-羥基-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)吡啶甲酸
Figure 02_image693
向於乙醇(10.0 mL)中之3-((4-甲氧基苯甲基)氧基)-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)氰吡啶(400 mg, 0.47 mmol)溶液添加30%氫氧化鈉水溶液(4.0 mL)。將該混合物在100 °C下攪拌5.0小時，冷卻並濃縮以去除乙醇。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾並乾燥以得到呈白色固體之3-羥基-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)吡啶甲酸(400 mg，粗製)。LC-MS: m/z= 295.2 [M+H] +，滯留時間1.15分鐘(方法B)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
(3-羥基-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image695
將於二氯甲烷(10.0 mL)中之3-羥基-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)吡啶甲酸(200.0 mg, 0.68 mmol)、甘胺酸乙酯鹽酸鹽(113.5 mg, 0.82 mmol)、六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯啶基鏻(424.5 mg, 0.82 mmol)及三乙胺(343.5 mg, 3.40 mmol)混合物在室溫下攪拌過夜。以水終止反應，並以二氯甲烷萃取。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 1/2)純化，得到呈白色固體之(3-羥基-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(120 mg, 0.32 mmol，產率47.1%)。LC-MS: m/z= 380.1 [M+H] +，滯留時間1.60分鐘(方法A)。
(3-羥基-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)吡啶甲醯基)甘胺酸
Figure 02_image697
向於四氫呋喃/水(8.0 mL/2.0 mL)中之(3-羥基-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(120 mg, 0.33 mmol)溶液添加氫氧化鋰單水合物(140 mg, 3.3 mmol)。將該混合物攪拌過夜並濃縮以去除四氫呋喃。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾，以水洗滌並用逆相製備型HPLC純化以得到呈白色固體之(3-羥基-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)吡啶甲醯基)甘胺酸(5.9 mg, 0.017 mmol, 5.09%)。LC-MS: m/z= 352.1 [M+H] +，滯留時間2.05分鐘(方法B)。 1HNMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 9.04 (s, 1H), 8.32 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.15 (s, 1H), 8.03 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.78 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.72 (d, J = 4.3 Hz, 2H), 2.70 (s, 3H), 2.20 (s, 3H)。 實例6：化合物6之製備
4-(4-(5-氯-6-氰基-4-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image699
向於N,N-二甲基甲醯胺/水(10.0 mL/1.0 mL)中之3,5-二氯-4-甲基-吡啶-2-甲腈(561 mg, 3.0 mmol)、4-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(1.13  3.0 mmol)及碳酸鉀(497 mg, 3.6 mmol)溶液添加[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (110 mg, 0.15 mmol)。將該混合物在50 °C於氮氣下攪拌16.0小時並冷卻至室溫。將乙酸乙酯及水加入至該溶液中，並分離各層。將有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮至乾燥。殘餘物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 2/1)純化，得到呈黃色固體之4-(4-(5-氯-6-氰基-4-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(400 mg, 1.0 mmol，產率33%)。LC-MS: m/z= 346.2[M-56] +，滯留時間2.078分鐘(方法A)。
4-(4-(5-(苯甲氧基)-6-氰基-4-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image701
在0°C於氮氣下向於N,N-二甲基甲醯胺(10.0 mL)中之4-(4-(5-氯-6-氰基-4-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(600 mg, 1.49 mmol)溶液添加氫化鈉(72 mg, 1.79 mmol，於礦物油中之60% w/w懸浮液)。將該混合物在0 °C下攪拌10分鐘且接著添加苯甲醇(194 mg, 1.79 mmol)。在0 °C下攪拌該溶液1.0小時並用乙酸乙酯及水稀釋。有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 3/1)純化，得到呈黃色固體之4-(4-(5-(苯甲氧基)-6-氰基-4-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(330 mg, 0.70 mmol，產率46%)。LC-MS: m/z= 474.0 [M+H] +，滯留時間2.21分鐘(方法A)。
3-(苯甲氧基)-5-(1-(1-(第三丁氧基羰基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基吡啶甲酸
Figure 02_image703
向於乙醇(15.0 mL)中之4-(4-(5-(苯甲氧基)-6-氰基-4-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(330 mg, 0.70 mmol)溶液添加30%氫氧化鈉水溶液(5.0 mL)。將該混合物在100 °C下攪拌1.0小時，冷卻並濃縮以去除乙醇。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾並乾燥以得到呈白色固體之3-(苯甲氧基)-5-(1-(1-(第三丁氧基羰基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基吡啶甲酸(330 mg, 0.33 mmol，產率96%)。LC-MS: m/z= 493.2 [M+H] +，滯留時間1.97分鐘(方法A)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
4-(4-(5-(苯甲氧基)-6-((2-乙氧基-2-側氧基乙基)胺甲醯基)-4-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image705
將於二氯甲烷(10.0 mL)中之3-(苯甲氧基)-5-(1-(1-(第三丁氧基羰基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基吡啶甲酸(165 mg, 0.33 mmol)、甘胺酸乙酯鹽酸鹽(47 mg, 0.33 mmol)、六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯啶基鏻(192 mg, 0.37 mmol)及三乙胺(167 mg, 1.67 mmol)混合物在室溫下攪拌過夜。以水終止反應，並以二氯甲烷萃取。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 1/1)純化，得到呈白色固體之4-(4-(5-(苯甲氧基)-6-((2-乙氧基-2-側氧基乙基)胺甲醯基)-4-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(165 mg, 0.29 mmol，產率85%)。LC-MS: m/z= 578.0 [M+H] +，滯留時間2.14分鐘(方法A)。
4-(4-(6-((2-乙氧基-2-側氧基乙基)胺甲醯基)-5-羥基-4-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image707
將於四氫呋喃(10.0 mL)中之4-(4-(5-(苯甲氧基)-6-((2-乙氧基-2-側氧基乙基)胺甲醯基)-4-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(165 mg, 0.29 mmol)及10%鈀碳(20.0 mg)混合物於氫氣環境下攪拌18.0小時。過濾掉不溶固體並將濾液濃縮以得到呈黃色固體之4-(4-(6-((2-乙氧基-2-側氧基乙基)胺甲醯基)-5-羥基-4-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(135 mg, 0.27 mmol，產率97%)。LC-MS: m/z= 460.1[M+H] +，滯留時間2.19分鐘(方法A)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
(5-(1-(1-(第三丁氧基羰基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)-3-羥基-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸
Figure 02_image709
向於四氫呋喃/水(8.0 mL/2.0 mL)中之4-(4-(6-((2-乙氧基-2-側氧基乙基)胺甲醯基)-5-羥基-4-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(135 mg, 0.27 mmol)溶液添加氫氧化鋰單水合物(164 mg, 4.0 mmol)。將該混合物攪拌過夜並濃縮以去除四氫呋喃。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾，以水洗滌並乾燥以得到呈白色固體之(5-(1-(1-(第三丁氧基羰基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)-3-羥基-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸
(85.5 mg, 0.18 mmol，產率67%)。LC-MS: m/z= 502.1 [M+H] +，滯留時間5.33分鐘(方法A)。 1HNMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.75 (s, 1H), 9.62 – 9.10 (m, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 4.56 – 4.30 (m, 1H), 4.15 – 4.03 (m, 2H), 4.00 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 2.93 (br s, 2H), 2.29 (d, J = 8.5 Hz, 3H), 2.14 – 2.00 (m, 2H), 1.92 – 1.77 (m, 2H), 1.43 (s, 9H)。 實例7：化合物7之製備
2-苯基-5-(三丁基錫烷基)噻唑
Figure 02_image711
在-78°C於氮氣下向於無水四氫呋喃(200.0 mL)中之2-苯基噻唑(10.0 g, 62.03 mmol)溶液添加n-丁基鋰(30.98 mL, 77.54 mmol, 2.5 M於己烷中)。將該混合物在-78°C下攪拌30分鐘且接著添加氯三丁基錫(20.8 mL, 71.34 mmol)。使混合物升溫至0 oC，並再攪拌1小時。以飽和氯化銨溶液終止該反應，並以乙酸乙酯萃取兩次。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 5/1)純化，得到呈黃色固體之2-苯基-5-(三丁基錫烷基)噻唑(27.7 g, 61.6 mmol，產率99%)。LC-MS: m/z= 451.2 [M+H] +，滯留時間2.30分鐘(方法A)。
3-氯-4-甲基-5-(2-苯基噻唑-5-基)氰吡啶
Figure 02_image713
向於N,N-二甲基甲醯胺(20.0 mL)中之3,5-二溴-4,6-二甲基氰吡啶(2.9 g, 15.55 mmol)、2-苯基-5-(三丁基錫烷基)噻唑(5.0 g, 11.10 mmol)、氟化銫(5.06 g, 33.31 mmol)及碘化亞銅(423 mg, 2.22 mmol)溶液添加四(三苯基膦)鈀(1.28 g, 1.11 mmol)。將該混合物在40 °C於氮氣下攪拌16.0小時並冷卻至室溫。將乙酸乙酯及水加入至該溶液中，並分離各層。將有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮至乾燥。殘餘物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 2/1)純化，得到呈綠色固體之3-氯-4-甲基-5-(2-苯基噻唑-5-基)氰吡啶(150 mg, 0.48 mmol，產率10%)。LC-MS: m/z= 312.1 [M+H] +，滯留時間=1.909分鐘(方法A)。
3-羥基-4-甲基-5-(2-苯基噻唑-5-基)氰吡啶
Figure 02_image715
向於N,N-二甲基乙醯胺(10.0 mL)中之3-氯-4-甲基-5-(2-苯基噻唑-5-基)氰吡啶(1.50 g, 4.81 mmol)及碳酸鉀(2.0 g, 14.43 mmol)溶液添加苯甲醇(780 mg, 7.22 mmol)。將該混合物在120 °C下攪拌2.0小時並濃縮。使殘餘物分溶於乙酸乙酯及水之間。有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物係以逆相製備型HPLC純化以得到呈白色固體之3-羥基-4-甲基-5-(2-苯基噻唑-5-基)氰吡啶(200 mg, 0.68 mmol，產率14%)。LC-MS: m/z= 294.1 [M+H] +，滯留時間1.40分鐘(方法A)。
3-羥基-4-甲基-5-(2-苯基噻唑-5-基)吡啶甲酸
Figure 02_image717
向於乙醇(10.0 mL)中之3-羥基-4-甲基-5-(2-苯基噻唑-5-基)氰吡啶(200 mg, 0.68 mmol)溶液添加30%氫氧化鈉水溶液(3.0 mL)。將該混合物在100 °C下攪拌3.0小時，冷卻並濃縮以去除乙醇。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾並乾燥以得到呈白色固體之3-羥基-4-甲基-5-(2-苯基噻唑-5-基)吡啶甲酸(200 mg, 0.64 mmol，產率94%)。LC-MS: m/z= 313.4 [M+H] +，滯留時間1.74分鐘(方法A)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
(3-羥基-4-甲基-5-(2-苯基噻唑-5-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image719
將於二氯甲烷(20.0 mL)中之3-羥基-4-甲基-5-(2-苯基噻唑-5-基)吡啶甲酸(200 mg, 0.64 mmol)、甘胺酸乙酯鹽酸鹽(150 mg, 1.08 mmol)、六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯啶基鏻(420 mg, 0.77 mmol)及三乙胺(380 mg, 3.75 mmol)混合物在室溫下攪拌過夜。以水終止反應，並以二氯甲烷萃取。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 1/2)純化，得到呈白色固體之(3-羥基-4-甲基-5-(2-苯基噻唑-5-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(140 mg, 0.35 mmol，產率55%)。LC-MS: m/z= 398.1 [M+H] +，滯留時間2.13分鐘(方法A)。
(3-羥基-4-甲基-5-(2-苯基噻唑-5-基)吡啶甲醯基)甘胺酸
Figure 02_image721
向於四氫呋喃/水(8.0 mL/4.0 mL)中之(3-羥基-4-甲基-5-(2-苯基噻唑-5-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(140 mg, 0.35 mmol)溶液添加氫氧化鋰單水合物(164 mg, 4.0 mmol)。將該混合物在40 °C下攪拌過夜並濃縮以去除四氫呋喃。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾，以水洗滌並乾燥以得到呈白色固體之(3-羥基-4-甲基-5-(2-苯基噻唑-5-基)吡啶甲醯基)甘胺酸(106.6 mg，產率82%)。LC-MS: m/z= 370.0 [M+H] +，滯留時間4.92分鐘(方法A)。 1HNMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.91 (s, 1H), 9.41 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.12 – 7.87 (m, 2H), 7.78 – 7.38 (m, 3H), 4.02 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 2.38 (s, 3H)。 實例8：化合物8之製備
4,4,5,5-四甲基-2-(3-苯氧基苯基)-1,3,2-二氧雜環戊硼烷
Figure 02_image723
向於1,4-二噁烷(15.0 mL)中之1-溴-3-苯氧基苯(1.5 g, 6.02 mmol)、雙(頻哪醇合)二硼(3.06 g, 12.04 mmol)及醋酸鉀(2.36 g, 24.1 mmol)溶液添加[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (438 mg, 0.6 mmol)。將該混合物在90 °C於氮氣下攪拌2.0小時並冷卻至室溫。將乙酸乙酯及水加入至該溶液中，並分離各層。將有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮至乾燥。得到粗製物4,4,5,5-四甲基-2-(3-苯氧基苯基)-1,3,2-二氧雜環戊硼烷(1.0 g, 3.37 mmol，產率56.1%)。LC-MS: m/z= 297.0 [M+H] +，滯留時間2.41分鐘(方法B)。將產物直接用於下一步驟中。
3-氯-4-甲基-5-(3-苯氧基苯基)氰吡啶
Figure 02_image725
向於N,N-二甲基甲醯胺/水(10.0 mL/1.0 mL)中之3,5-二氯-4-甲基-吡啶-2-甲腈(626 mg, 3.37 mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(3-苯氧基苯基)-1,3,2-二氧雜環戊硼烷(1.0 g, 3.37 mmol)及碳酸鉀(697 mg, 5.05 mmol)溶液添加[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (123 mg, 0.17 mmol)。將該混合物在50 °C於氮氣下攪拌過夜並冷卻至室溫。將乙酸乙酯及水加入至該溶液中，並分離各層。將有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮至乾燥。殘餘物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 3/1)純化，得到呈黃色固體之3-氯-4-甲基-5-(3-苯氧基苯基)氰吡啶(450 mg, 1.41 mmol，產率41.7%)。LC-MS: m/z= 321.0 [M+H] +，滯留時間2.30分鐘(方法A)。
3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(3-苯氧基苯基)氰吡啶
Figure 02_image727
在0°C於氮氣下向於N,N-二甲基甲醯胺(10.0 mL)中之3-氯-4-甲基-5-(3-苯氧基苯基)氰吡啶(450 mg, 1.41 mmol)溶液添加氫化鈉(113 mg, 2.82 mmol，於礦物油中之60% w/w懸浮液)。將該混合物在0 °C下攪拌10分鐘且接著添加苯甲醇(152 mg, 1.41 mmol)。在0 °C下攪拌該溶液1.0小時並用乙酸乙酯及水稀釋。有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 2/1)純化，得到呈黃色固體之3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(3-苯氧基苯基)氰吡啶(350 mg, 0.89 mmol，產率63.3%)。LC-MS: m/z= 352.0 [M+H] +，滯留時間1.70分鐘(方法A)。
3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(3-苯氧基苯基)吡啶甲酸
Figure 02_image729
向於乙醇(10.0 mL)中之3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(3-苯氧基苯基)氰吡啶(350 mg, 0.89 mmol)溶液添加30%氫氧化鈉水溶液(4.0 mL)。將該混合物在100 °C下攪拌過夜，冷卻並濃縮以去除乙醇。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾並乾燥以得到呈白色固體之3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(3-苯氧基苯基)吡啶甲酸(300 mg, 0.73 mmol，產率82.0%)。LC-MS: m/z= 393.0 (M+H) +，滯留時間2.35分鐘(方法B)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(3-苯氧基苯基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image731
將於二氯甲烷(10.0 mL)中之3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(3-苯氧基苯基)吡啶甲酸(300 mg, 0.73 mmol)、甘胺酸乙酯鹽酸鹽(152 mg, 1.09 mmol)、六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯啶基鏻(456 mg, 0.88 mmol)及三乙胺(370 mg, 3.65 mmol)混合物在室溫下攪拌過夜。以水終止反應，並以二氯甲烷萃取。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 1/2)純化，得到呈白色固體之(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(3-苯氧基苯基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(210 mg, 0.42 mmol，產率58.0%)。LC-MS: m/z= 497.0 (M+H) +，滯留時間2.26分鐘(方法A)。
(3-羥基-4-甲基-5-(3-苯氧基苯基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image733
將於四氫呋喃(10.0 mL)中之(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(3-苯氧基苯基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(210 mg, 0.42 mmol)及10%鈀碳(20.0 mg)混合物在40 °C於氫氣環境下攪拌5.0小時。過濾掉不溶固體並將濾液濃縮以得到呈黃色固體之(3-羥基-4-甲基-5-(3-苯氧基苯基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(140 mg, 0.34 mmol，產率81%)。LC-MS: m/z= 407.0 (M+H) +，滯留時間2.32分鐘(方法A)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
(3-羥基-4-甲基-5-(3-苯氧基苯基)吡啶甲醯基)甘胺酸
Figure 02_image735
向於四氫呋喃/水(8.0 mL/2.0 mL)中之(3-羥基-4-甲基-5-(3-苯氧基苯基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(140 mg, 0.34 mmol)溶液添加氫氧化鋰單水合物(164 mg, 4.0 mmol)。將該混合物攪拌過夜並濃縮以去除四氫呋喃。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾，以水洗滌並用逆相製備型HPLC純化以得到呈白色固體之(3-羥基-4-甲基-5-(3-苯氧基苯基)吡啶甲醯基)甘胺酸(38.7 mg, 0.10 mmol，產率30%)。LC-MS: m/z= 379.0 [M+H] +，滯留時間5.76分鐘(方法A)。 1HNMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.82 (s, 1H), 9.46 – 9.14 (m, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.53 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.47 – 7.38 (m, 2H), 7.25 – 7.14 (m, 2H), 7.13 – 7.04 (m, 4H), 3.96 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 2.16 (s, 3H)。 實例9：化合物9之製備
5-氯-4-甲基-6'-(三氟甲基)-[3,3'-聯吡啶]-6-甲腈
Figure 02_image737
向於N,N-二甲基甲醯胺/水(10.0 mL/1.0 mL)中之3,5-二氯-4-甲基-吡啶-2-甲腈(500.00 mg, 2.67 mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-2-(三氟甲基)吡啶(730.03 mg, 2.67 mmol)及碳酸鉀(443.41 mg, 3.21 mmol)溶液添加[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (78.25 mg, 0.11 mmol)。將該混合物在50 °C於氮氣下攪拌過夜並冷卻至室溫。將乙酸乙酯及水加入至該溶液中，並分離各層。將有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮至乾燥。殘餘物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 5/1)純化，得到呈黃色固體之5-氯-4-甲基-6'-(三氟甲基)-[3,3'-聯吡啶]-6-甲腈(577 mg, 1.94 mmol，產率72%)。LC-MS: m/z= 298 [M+H] +，滯留時間2.052分鐘(方法A)。
5-(苯甲氧基)-4-甲基-6'-(三氟甲基)-[3,3'-聯吡啶]-6-甲腈
Figure 02_image739
在0°C於氮氣下向於N,N-二甲基甲醯胺(20.0 mL)中之5-氯-4-甲基-6'-(三氟甲基)-[3,3'-聯吡啶]-6-甲腈(500.00 mg, 1.68 mmol)溶液添加氫化鈉(80.8 mg, 2.02 mmol，於礦物油中之60% w/w懸浮液)。將該混合物在0 °C下攪拌10分鐘且接著添加苯甲醇(217.97 mg, 2.02 mmol, 0.21 mL)。在0 °C下攪拌該溶液50分鐘並用乙酸乙酯及水稀釋。有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 5/1)純化，得到5-(苯甲氧基)-4-甲基-6'-(三氟甲基)-[3,3'-聯吡啶]-6-甲腈(306 mg，產率49%)。LC-MS: m/z= 370 [M+H] +，滯留時間2.190分鐘(方法B)。
5-(苯甲氧基)-4-甲基-6'-(三氟甲基)-[3,3'-聯吡啶]-6-羧酸
Figure 02_image741
向於乙醇(10.0 mL)中之5-(苯甲氧基)-4-甲基-6'-(三氟甲基)-[3,3'-聯吡啶]-6-甲腈(306.00 mg, 0.83 mmol)溶液添加30%氫氧化鈉水溶液(4.0 mL)。將該混合物在100 °C下攪拌3.0小時，冷卻並濃縮以去除乙醇。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾並乾燥以得到呈白色固體之5-(苯甲氧基)-4-甲基-6'-(三氟甲基)-[3,3'-聯吡啶]-6-羧酸(353 mg，粗製)。LC-MS: m/z= 389 [M+H] +，滯留時間1.977分鐘(方法A)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
(5-(苯甲氧基)-4-甲基-6'-(三氟甲基)-[3,3'-聯吡啶]-6-羰基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image743
將於二氯甲烷(20.0 mL)中之5-(苯甲氧基)-4-甲基-6'-(三氟甲基)-[3,3'-聯吡啶]-6-羧酸(300.00 mg, 0.77 mmol)、甘胺酸乙酯鹽酸鹽(107.83 mg, 0.77 mmol)、六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯啶基鏻(442.21 mg, 0.85 mmol)及三乙胺(390.85 mg, 3.86 mmol, 0.54 mL)混合物在室溫下攪拌過夜。以水終止反應，並以二氯甲烷萃取。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 2/1)純化，得到(5-(苯甲氧基)-4-甲基-6'-(三氟甲基)-[3,3'-聯吡啶]-6-羰基)甘胺酸乙酯(257 mg, 0.54 mmol，產率70%)。LC-MS: m/z= 474 [M+H] +，滯留時間1.810分鐘(方法A)。
(5-羥基-4-甲基-6'-(三氟甲基)-[3,3'-聯吡啶]-6-羰基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image745
將於四氫呋喃(10.0 mL)中之(5-(苯甲氧基)-4-甲基-6'-(三氟甲基)-[3,3'-聯吡啶]-6-羰基)甘胺酸乙酯(230.00 mg, 0.49 mmol)及10%鈀碳(20.0 mg)混合物在室溫於氫氣環境下攪拌過夜。過濾掉不溶固體並將濾液濃縮以得到呈黃色固體之(5-羥基-4-甲基-6'-(三氟甲基)-[3,3'-聯吡啶]-6-羰基)甘胺酸乙酯(230 mg，粗製)。LC-MS: m/z= 384 [M+H] +，滯留時間2.116分鐘(方法A)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
(5-羥基-4-甲基-6'-(三氟甲基)-[3,3'-聯吡啶]-6-羰基)甘胺酸
Figure 02_image747
向於甲醇/水(10.0 mL/2.0 mL)中之(5-羥基-4-甲基-6'-(三氟甲基)-[3,3'-聯吡啶]-6-羰基)甘胺酸乙酯(200.00 mg, 0.52 mmol)溶液添加氫氧化鋰單水合物(219 mg, 5.22 mmol)。將該混合物在40 °C下攪拌過夜並濃縮以去除甲醇。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾，以水洗滌並用逆相製備型HPLC純化以得到呈黃色固體之(5-羥基-4-甲基-6'-(三氟甲基)-[3,3'-聯吡啶]-6-羰基)甘胺酸(甲酸酯) (48.2 mg, 0.14 mmol，產率26%)。LC-MS: m/z= 356 [M+H] +，滯留時間=4.420分鐘(方法A)。 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 12.88 (br, 2H), 9.43 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 8.90 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.24 (dd, J = 8.5 Hz, J = 2.0 Hz, 1H), 8.16 (s, 1H), 8.07 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.01 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 2.18 (s, 3H)。 實例10：化合物10之製備
5-氯-4-甲基-[3,3'-聯吡啶]-6-甲腈
Figure 02_image749
向於N,N-二甲基甲醯胺/水(5.0 mL/0.5 mL)中之3,5-二氯-4-甲基-吡啶-2-甲腈(500 mg, 2.67 mmol)、吡啶-3-基硼酸(329 mg  2.67 mmol)及碳酸鉀(443 mg, 3.21 mmol)溶液添加[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (78 mg, 0.11 mmol)。將該混合物在45 °C於氮氣下攪拌過夜並冷卻至室溫。將乙酸乙酯及水加入至該溶液中，並分離各層。將有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮至乾燥。殘餘物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 1/1)純化，得到呈黃色固體之5-氯-4-甲基-[3,3'-聯吡啶]-6-甲腈(300 mg, 1.31 mmol，產率49%)。LC-MS: m/z= 230.1 [M+H] +，滯留時間=1.83分鐘(方法A)。
5-(苯甲氧基)-4-甲基-[3,3'-聯吡啶]-6-甲腈
Figure 02_image751
在0°C於氮氣下向於N,N-二甲基甲醯胺(10.0 mL)中之5-氯-4-甲基-[3,3'-聯吡啶]-6-甲腈(300.0 mg, 1.31 mmol)溶液添加氫化鈉(78 mg, 1.94 mmol，於礦物油中之60% w/w懸浮液)。將該混合物在0 °C下攪拌10分鐘且接著添加苯甲醇(152 mg, 1.41 mmol)。在0 °C下攪拌該溶液1.0小時並用乙酸乙酯及水稀釋。有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 3/1)純化，得到呈黃色固體之5-(苯甲氧基)-4-甲基-[3,3'-聯吡啶]-6-甲腈(300 mg, 0.99 mmol，產率76%)。LC-MS: m/z= 302.1 [M+H] +，滯留時間2.21分鐘(方法A)。
5-(苯甲氧基)-4-甲基-[3,3'-聯吡啶]-6-羧酸
Figure 02_image753
向於乙醇(10.0 mL)中之5-(苯甲氧基)-4-甲基-[3,3'-聯吡啶]-6-甲腈(300 mg, 0.99 mmol)溶液添加30%氫氧化鈉水溶液(4.0 mL)。將該混合物在100 °C下攪拌3.0小時，冷卻並濃縮以去除乙醇。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾並乾燥以得到呈白色固體之5-(苯甲氧基)-4-甲基-[3,3'-聯吡啶]-6-羧酸(300 mg, 0.94 mmol，產率94%)。LC-MS: m/z= 321.1 [M+H] +，滯留時間2.00分鐘(方法A)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
(5-(苯甲氧基)-4-甲基-[3,3'-聯吡啶]-6-羰基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image755
將於二氯甲烷(10.0 mL)中之5-(苯甲氧基)-4-甲基-[3,3'-聯吡啶]-6-羧酸(300 mg, 0.94 mmol)、甘胺酸乙酯鹽酸鹽(144 mg, 1.03 mmol)、六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯啶基鏻(536 mg, 1.03 mmol)及三乙胺(473 mg, 4.68 mmol)混合物在室溫下攪拌過夜。以水終止反應，並以二氯甲烷萃取。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 1/1)純化，得到呈白色固體之(5-(苯甲氧基)-4-甲基-[3,3'-聯吡啶]-6-羰基)甘胺酸乙酯(240 mg, 0.59 mmol，產率63%)。LC-MS: m/z= 406.1 [M+H] +，滯留時間2.15分鐘(方法A)。
(5-羥基-4-甲基-[3,3'-聯吡啶]-6-羰基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image757
將於四氫呋喃(10.0 mL)中之(5-(苯甲氧基)-4-甲基-[3,3'-聯吡啶]-6-羰基)甘胺酸乙酯(240 mg, 0.59 mmol)及10%鈀碳(20.0 mg)混合物在室溫於氫氣環境下攪拌18.0小時。過濾掉不溶固體並將濾液濃縮以得到呈白色固體之(5-羥基-4-甲基-[3,3'-聯吡啶]-6-羰基)甘胺酸乙酯(185 mg, 0.59 mmol，產率99%)。LC-MS: m/z= 316.1 [M+H] +，滯留時間2.19分鐘(方法A)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
(5-羥基-4-甲基-[3,3'-聯吡啶]-6-羰基)甘胺酸
Figure 02_image759
向於四氫呋喃/水(8.0 mL/2.0 mL)中之(5-羥基-4-甲基-[3,3'-聯吡啶]-6-羰基)甘胺酸乙酯(185 mg, 0.59 mmol)溶液添加氫氧化鋰單水合物(164 mg, 4.0 mmol)。將該混合物攪拌過夜並濃縮以去除四氫呋喃。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾，以水洗滌並用逆相製備型HPLC純化以得到呈白色固體之(5-羥基-4-甲基-[3,3'-聯吡啶]-6-羰基)甘胺酸(甲酸酯) (34.0 mg, 0.118 mmol，產率20%)。LC-MS: m/z= 288.1 [M+H] +，滯留時間2.20分鐘(方法A)。 1HNMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.83 (s, 2H), 9.41 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 8.84 – 8.50 (m, 2H), 8.13 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 8.04 – 7.81 (m, 1H), 7.73 – 7.41 (m, 1H), 4.01 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 2.17 (s, 3H)。 實例11：化合物11之製備
5-氯-4-甲基-[3,4'-聯吡啶]-6-甲腈
Figure 02_image761
向於N,N-二甲基甲醯胺/水(10.0 mL/1.0 mL)中之3,5-二氯-4-甲基-吡啶-2-甲腈(500.00 mg, 2.67 mmol)、吡啶-4-基硼酸(328.63 mg, 2.67 mmol)及碳酸鉀(443.41 mg, 3.21 mmol)溶液添加[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (78.25 mg, 0.11 mmol)。將該混合物在50 °C於氮氣下攪拌16.0小時並冷卻至室溫。將乙酸乙酯及水加入至該溶液中，並分離各層。將有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮至乾燥。殘餘物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 1/1)純化，得到5-氯-4-甲基-[3,4'-聯吡啶]-6-甲腈(292 mg, 1.27 mmol，產率48%)。LC-MS: m/z= 230 [M+H] +，滯留時間1.599分鐘(方法A)。
5-(苯甲氧基)-4-甲基-[3,4'-聯吡啶]-6-甲腈
Figure 02_image763
在0°C於氮氣下向於N,N-二甲基甲醯胺(10.0 mL)中之5-氯-4-甲基-[3,4'-聯吡啶]-6-甲腈(250.00 mg, 1.09 mmol)溶液添加氫化鈉(52.3 mg, 1.31 mmol，於礦物油中之60% w/w懸浮液)。將該混合物在0 °C下攪拌10分鐘且接著添加苯甲醇(141.25 mg, 1.31 mmol, 0.14 mL)。在0 °C下攪拌該溶液50分鐘並用乙酸乙酯及水稀釋。有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 1/1)純化，得到5-(苯甲氧基)-4-甲基-[3,4'-聯吡啶]-6-甲腈(86 mg, 0.29 mmol，產率26%)。LC-MS: m/z= 302 [M+H] +，滯留時間1.895分鐘(方法B)。
5-羥基-4-甲基-[3,4'-聯吡啶]-6-羧酸
Figure 02_image765
向於乙醇(5.0 mL)中之35-(苯甲氧基)-4-甲基-[3,4'-聯吡啶]-6-甲腈(86.00 mg, 0.29 mmol)溶液添加30%氫氧化鈉水溶液(4.0 mL)。將該混合物在100 °C下攪拌3.0小時，冷卻並濃縮以去除乙醇。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾並乾燥以得到呈白色固體之5-羥基-4-甲基-[3,4'-聯吡啶]-6-羧酸(160 mg，粗製)。LC-MS: m/z= 231 [M+H] +，滯留時間1.020分鐘(方法A)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
(5-羥基-4-甲基-[3,4'-聯吡啶]-6-羰基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image767
將於二氯甲烷(10.0 mL)中之5-羥基-4-甲基-[3,4'-聯吡啶]-6-羧酸(130.00 mg, 0.56 mmol)、甘胺酸乙酯鹽酸鹽(78.82 mg, 0.56 mmol)、六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯啶基鏻(323.24 mg, 0.62 mmol)及三乙胺(285.70 mg, 2.82 mmol, 0.4 mL)混合物在室溫下攪拌過夜。以水終止反應，並以二氯甲烷萃取。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 3/2)純化，得到(5-羥基-4-甲基-[3,4'-聯吡啶]-6-羰基)甘胺酸乙酯(36 mg, 0.114 mmol，產率20%)。LC-MS: m/z= 316 [M+H] +，滯留時間1.586分鐘(方法A)。
(5-羥基-4-甲基-[3,4'-聯吡啶]-6-羰基)甘胺酸
Figure 02_image769
向於甲醇/水(4.0 mL/1.0 mL)中之(5-羥基-4-甲基-[3,4'-聯吡啶]-6-羰基)甘胺酸乙酯(30.00 mg, 0.10 mmol)溶液添加氫氧化鋰單水合物(22.79 mg, 0.95 mmol)。將該混合物在40 °C下攪拌16.0小時並濃縮以去除甲醇。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾，以水洗滌並乾燥以得到呈白色固體之(5-羥基-4-甲基-[3,4'-聯吡啶]-6-羰基)甘胺酸(13.2 mg，產率46%)。LC-MS: m/z= 288 [M+H] +，滯留時間=2.159分鐘(方法A)。 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 12.85 (br, 2H), 9.42 (s, 1H), 8.72 (dd, J = 4.5 Hz, J = 1.5 Hz, 2H), 8.08 (s, 1H), 7.51 (dd, J = 4.0 Hz, J = 1.5 Hz, 2H), 4.01 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 2.17 (s, 3H)。 實例12：化合物12的製備
5'-氯-4'-甲基-[2,3'-聯吡啶]-6'-甲腈
Figure 02_image771
向於 N,N-二甲基甲醯胺(15.0 mL)中之3,5-二溴-4,6-二甲基氰吡啶(1.86 g, 10 mmol)、2-(三丁基錫烷基)吡啶(4.42 g, 12 mmol)、氟化銫(302 mg, 2.0 mmol)及碘化亞銅(380 mg, 2.0 mmol)溶液添加四(三苯基膦)鈀(116 mg, 0.1 mmol)。將該混合物在50 °C於氮氣下攪拌16.0小時並冷卻至室溫。將乙酸乙酯及水加入至該溶液中，並分離各層。將有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮至乾燥。殘餘物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 10/1)純化，得到呈黃色固體之5'-氯-4'-甲基-[2,3'-聯吡啶]-6'-甲腈(460 mg, 2.0 mmol，產率20%)。LC-MS: m/z= 230.0 [M+H] +，滯留時間1.704分鐘(方法A)。
5'-(苯甲氧基)-4'-甲基-[2,3'-聯吡啶]-6'-甲腈
Figure 02_image773
在0°C於氮氣下向於 N,N-二甲基甲醯胺(5.0 mL)中之5'-氯-4'-甲基-[2,3'-聯吡啶]-6'-甲腈(160.0 mg, 0.70 mmol)溶液添加氫化鈉(33 mg, 0.84 mmol，於礦物油中之60% w/w懸浮液)。將該混合物在0 °C下攪拌10分鐘且接著添加苯甲醇(90 mg, 0.84 mmol)。在0 °C下攪拌該溶液1.0小時並用乙酸乙酯及水稀釋。有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 1/2)純化，得到呈黃色固體之5'-(苯甲氧基)-4'-甲基-[2,3'-聯吡啶]-6'-甲腈(120 mg, 0.40 mmol，產率57%)。LC-MS: m/z= 302.1 [M+H] +，滯留時間2.21分鐘(方法A)。
5'-羥基-4'-甲基-[2,3'-聯吡啶]-6'-羧酸
Figure 02_image775
向於乙醇(10.0 mL)中之5'-(苯甲氧基)-4'-甲基-[2,3'-聯吡啶]-6'-甲腈(120 mg, 0.40 mmol)溶液添加30%氫氧化鈉水溶液(4.0 mL)。將該混合物在100 °C下攪拌5.0小時，冷卻並濃縮以去除乙醇。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾並乾燥以得到呈白色固體之5'-羥基-4'-甲基-[2,3'-聯吡啶]-6'-羧酸(140 mg，粗製)。LC-MS: m/z= 321.1 [M+H] +，滯留時間2.00分鐘(方法A)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
(5'-羥基-4'-甲基-[2,3'-聯吡啶]-6'-羰基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image777
將於二氯甲烷(5.0 mL)中之5'-羥基-4'-甲基-[2,3'-聯吡啶]-6'-羧酸(140 mg, 0.44 mmol)、甘胺酸乙酯鹽酸鹽(61 mg, 0.44 mmol)、六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯啶基鏻(250 mg, 0.48 mmol)、三乙胺(254 mg, 2.52 mmol)混合物在室溫下攪拌過夜。以水終止反應，並以二氯甲烷萃取。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 1/2)純化，得到呈白色固體之(5'-羥基-4'-甲基-[2,3'-聯吡啶]-6'-羰基)甘胺酸乙酯(50 mg, 0.16 mmol，產率26%)。LC-MS: m/z= 406.1 [M+H] +，滯留時間2.15分鐘(方法A)。
(5'-羥基-4'-甲基-[2,3'-聯吡啶]-6'-羰基)甘胺酸
Figure 02_image779
向於四氫呋喃/水(8.0 mL/2.0 mL)中之(5'-羥基-4'-甲基-[2,3'-聯吡啶]-6'-羰基)甘胺酸乙酯(50 mg, 0.16 mmol)溶液添加氫氧化鋰單水合物(164 mg, 4.0 mmol)。將該混合物攪拌過夜並濃縮以去除四氫呋喃。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾，以水洗滌並用逆相製備型HPLC純化以得到呈白色固體之(5'-羥基-4'-甲基-[2,3'-聯吡啶]-6'-羰基)甘胺酸(9.6 mg，產率21%)。LC-MS: m/z= 288.0 [M+H] +，滯留時間2.54分鐘(方法A)。 1HNMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ12.82 (s, 2H), 9.42 (t, J= 6.0 Hz, 1H), 8.76 (d, J= 4.3 Hz, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.99 (td, J= 7.8, 1.7 Hz, 1H), 7.68 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 7.50 (dd, J= 6.8, 4.9 Hz, 1H), 4.02 (d, J= 6.2 Hz, 2H), 2.24 (s, 3H)。 實例13：化合物13之製備
3-氯-5-(3-氯苯基)-4-甲基氰吡啶
Figure 02_image781
向於N,N-二甲基甲醯胺/水(5.0 mL/0.5 mL)中之3,5-二氯-4-甲基氰吡啶(500 mg, 2.67 mmol)、(3-氯苯基)硼酸(418 mg  2.67 mmol)及碳酸鉀(443 mg, 3.21 mmol)溶液添加[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (78 mg, 0.11 mmol)。將該混合物在45 °C於氮氣下攪拌16.0小時並冷卻至室溫。將乙酸乙酯及水加入至該溶液中，並分離各層。將有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮至乾燥。殘餘物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 2/1)純化，得到呈黃色固體之3-氯-5-(3-氯苯基)-4-甲基氰吡啶(640 mg, 2.43 mmol，產率91%)。LC-MS: m/z= 264.1 [M+H] +，滯留時間=1.83分鐘(方法A)。
3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基氰吡啶
Figure 02_image783
在0°C於氮氣下向於N,N-二甲基甲醯胺(40.0 mL)中之3-氯-5-(3-氯苯基)-4-甲基氰吡啶(3.2 g, 12.16 mmol)溶液添加氫化鈉(584 mg, 14.60 mmol，於礦物油中之60% w/w懸浮液)。將該混合物在0 °C下攪拌10分鐘且接著添加苯甲醇(1.58 g, 14.60 mmol)。在0 °C下攪拌該溶液1.0小時並用乙酸乙酯及水稀釋。有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 3/1)純化，得到呈黃色固體之3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基氰吡啶(3.2 g, 9.56 mmol，產率80%)。LC-MS: m/z= 335.1 [M+H] +，滯留時間2.21分鐘(方法A)。
3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基吡啶甲酸
Figure 02_image785
向於乙醇(60.0 mL)中之3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基氰吡啶(3.2 g, 9.56 mmol)溶液添加30%氫氧化鈉水溶液(20.0 mL)。將該混合物在100 °C下攪拌5.0小時，冷卻並濃縮以去除乙醇。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾並乾燥以得到呈白色固體之3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基吡啶甲酸(2.1 g, 5.96 mmol，產率64%)。LC-MS: m/z= 354.1 [M+H] +，滯留時間2.00分鐘(方法A)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
2-(3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基吡啶醯胺基)-2-甲基丙酸甲酯
Figure 02_image787
將於二氯甲烷(5.0 mL)中之3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基吡啶甲酸(100 mg, 0.28 mmol)、2-胺基-2-甲基丙酸甲酯鹽酸鹽(44 mg, 0.28 mmol)、六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯啶基鏻(162 mg, 0.31 mmol)及三乙胺(143 mg, 1.41 mmol)混合物在室溫下攪拌過夜。以水終止反應，並以二氯甲烷萃取。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 1/1)純化，得到呈白色固體之2-(3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基吡啶醯胺基)-2-甲基丙酸甲酯(110 mg, 0.24 mmol，產率87%)。LC-MS: m/z= 453.1 [M+H] +，滯留時間2.15分鐘(方法A)。
2-(5-(3-氯苯基)-3-羥基-4-甲基吡啶醯胺基)-2-甲基丙酸甲酯
Figure 02_image789
將於四氫呋喃(10.0 mL)中之2-(3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基吡啶醯胺基)-2-甲基丙酸甲酯(500 mg, 1.10 mmol)及10%鈀碳(50.0 mg)混合物於氫氣環境下攪拌18.0小時。過濾掉不溶固體並將濾液濃縮以得到呈白色固體之2-(5-(3-氯苯基)-3-羥基-4-甲基吡啶醯胺基)-2-甲基丙酸甲酯(240 mg, 0.66 mmol，產率60%)。LC-MS: m/z= 363.1 [M+H] +，滯留時間2.19分鐘(方法A)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
2-(5-(3-氯苯基)-3-羥基-4-甲基吡啶醯胺基)-2-甲基丙酸
Figure 02_image791
向於四氫呋喃/水(10.0 mL/2.0 mL)中之2-(5-(3-氯苯基)-3-羥基-4-甲基吡啶醯胺基)-2-甲基丙酸甲酯(240 mg, 0.66 mmol)溶液添加氫氧化鋰單水合物(164 mg, 4.0 mmol)。將該混合物攪拌過夜並濃縮以去除四氫呋喃。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾，以水洗滌並乾燥以得到呈白色固體之2-(5-(3-氯苯基)-3-羥基-4-甲基吡啶醯胺基)-2-甲基丙酸(176.3 mg, 0.51 mmol，產率77%)。LC-MS: m/z= 349.0 [M+H] +，滯留時間5.36分鐘(方法A)。 1HNMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.93 (br s, 1H), 12.70 (s, 1H), 9.07 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.67 – 7.45 (m, 3H), 7.47 – 7.18 (m, 1H), 2.14 (s, 3H), 1.59 (s, 6H)。 實例14：化合物14之製備
1-(3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基吡啶醯胺基)環丙烷-1-甲酸乙酯
Figure 02_image793
將於二氯甲烷(5.0 mL)中之3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基吡啶甲酸(來自實例13的中間產物) (100 mg, 0.28 mmol)、1-胺基環丙烷-1-甲酸乙酯鹽酸鹽(43 mg, 0.28 mmol)、六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯啶基鏻(162 mg, 0.31 mmol)及三乙胺(143 mg, 1.41 mmol)混合物在室溫下攪拌過夜。以水終止反應，並以二氯甲烷萃取。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 1/1)純化，得到呈白色固體之1-(3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基吡啶醯胺基)環丙烷-1-甲酸乙酯(110 mg, 0.24 mmol，產率85%)。LC-MS: m/z= 465.1 [M+H] +，滯留時間2.15分鐘(方法A)。
1-(5-(3-氯苯基)-3-羥基-4-甲基吡啶醯胺基)環丙烷-1-甲酸乙酯
Figure 02_image795
將於四氫呋喃(10.0 mL)中之1-(3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基吡啶醯胺基)環丙烷-1-甲酸乙酯(500 mg, 1.08 mmol)及10%鈀碳(50.0 mg)混合物於氫氣環境下攪拌18.0小時。過濾掉不溶固體並將濾液濃縮以得到呈白色固體之1-(5-(3-氯苯基)-3-羥基-4-甲基吡啶醯胺基)環丙烷-1-甲酸乙酯(250 mg, 0.67 mmol，產率62%)。LC-MS: m/z= 375.1 [M+H] +，滯留時間2.19分鐘(方法A)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
1-(5-(3-氯苯基)-3-羥基-4-甲基吡啶醯胺基)環丙烷-1-羧酸
Figure 02_image797
向於四氫呋喃/水(10.0 mL/2.0 mL)中之1-(5-(3-氯苯基)-3-羥基-4-甲基吡啶醯胺基)環丙烷-1-甲酸乙酯(250 mg, 0.67 mmol)溶液添加氫氧化鋰單水合物(164 mg, 4.0 mmol)。將該混合物攪拌過夜並濃縮以去除四氫呋喃。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾，以水洗滌並乾燥以得到呈白色固體之1-(5-(3-氯苯基)-3-羥基-4-甲基吡啶醯胺基)環丙烷-1-羧酸(133.0 mg, 0.38 mmol，產率58%)。LC-MS: m/z= 347.0 [M+H] +，滯留時間4.93分鐘(方法A)。 1HNMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.93 (s, 1H), 12.57 (s, 1H), 9.71 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.67 – 7.46 (m, 3H), 7.45 – 7.36 (m, 1H), 2.14 (s, 3H), 1.44 (dd, J = 7.8, 4.6 Hz, 2H), 1.25 (dd, J = 7.9, 4.6 Hz, 2H)。 實例15：化合物15之製備
1-(3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基吡啶醯胺基)環丁烷-1-甲酸甲酯
Figure 02_image799
將於二氯甲烷(15.0 mL)中之3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基吡啶甲酸(用於實例13的中間產物) (400 mg, 1.13 mmol)、1-胺基環丁烷-1-甲酸甲酯鹽酸鹽(187 mg, 1.13 mmol)、六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯啶基鏻(647 mg, 1.24 mmol)及三乙胺(571 mg, 5.65 mmol)混合物在室溫下攪拌過夜。以水終止反應，並以二氯甲烷萃取。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 1/1)純化，得到呈白色固體之1-(3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基吡啶醯胺基)環丁烷-1-甲酸甲酯(500 mg, 1.08 mmol，產率95%)。LC-MS: m/z= 465.1 [M+H] +，滯留時間2.15分鐘(方法A)。
1-(5-(3-氯苯基)-3-羥基-4-甲基吡啶醯胺基)環丁烷-1-甲酸甲酯
Figure 02_image801
將於四氫呋喃(10.0 mL)中之1-(3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基吡啶醯胺基)環丁烷-1-甲酸甲酯(500 mg, 1.08 mmol)及10%鈀碳(50.0 mg)混合物於氫氣環境下攪拌18.0小時。過濾掉不溶固體並將濾液濃縮以得到呈白色固體之1-(5-(3-氯苯基)-3-羥基-4-甲基吡啶醯胺基)環丁烷-1-甲酸甲酯(250 mg, 0.67 mmol，產率62%)。LC-MS: m/z= 375.1 [M+H] +，滯留時間2.19分鐘(方法A)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
1-(5-(3-氯苯基)-3-羥基-4-甲基吡啶醯胺基)環丁烷-1-羧酸
Figure 02_image803
向於四氫呋喃/水(10.0 mL/2.0 mL)中之1-(5-(3-氯苯基)-3-羥基-4-甲基吡啶醯胺基)環丁烷-1-甲酸甲酯(250 mg, 0.67 mmol)溶液添加氫氧化鋰單水合物(164 mg, 4.0 mmol)。將該混合物攪拌過夜並濃縮以去除四氫呋喃。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾，以水洗滌並乾燥以得到呈白色固體之1-(5-(3-氯苯基)-3-羥基-4-甲基吡啶醯胺基)環丁烷-1-羧酸(93.0 mg, 0.26 mmol，產率39%)。LC-MS: m/z= 361.0 [M+H] +，滯留時間5.37分鐘(方法A)。 1HNMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ δ 12.80 (s, 1H), 12.69 (br s, 1H), 9.63 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.75 – 7.44 (m, 3H), 7.49 – 7.26 (m, 1H), 2.76 – 2.38 (m, 6H), 2.14 (s, 3H), 2.03 – 1.85 (m, 2H)。 實例16：化合物16之製備
3-(3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基吡啶醯胺基)氧雜環丁烷-3-甲酸甲酯
Figure 02_image805
將於二氯甲烷(15.0 mL)中之3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基吡啶甲酸(來自實例13的中間產物) (450 mg, 1.27 mmol)、3-胺基氧雜環丁烷-3-甲酸甲酯鹽酸鹽(213 mg, 1.27 mmol)、六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯啶基鏻(728 mg, 1.40 mmol)、三乙胺(571 mg, 5.65 mmol)混合物在室溫下攪拌過夜。以水終止反應，並以二氯甲烷萃取。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 1/1)純化，得到呈白色固體之3-(3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基吡啶醯胺基)氧雜環丁烷-3-甲酸甲酯(500 mg, 1.07 mmol，產率84%)。LC-MS: m/z= 467.1 [M+H] +，滯留時間2.15分鐘(方法A)。
3-(5-(3-氯苯基)-3-羥基-4-甲基吡啶醯胺基)氧雜環丁烷-3-甲酸甲酯
Figure 02_image807
將於四氫呋喃(10.0 mL)中之3-(3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基吡啶醯胺基)氧雜環丁烷-3-甲酸甲酯(500 mg, 1.07 mmol)及10%鈀碳(50.0 mg)混合物於氫氣環境下攪拌18小時。過濾掉不溶固體並將濾液濃縮以得到呈白色固體之3-(5-(3-氯苯基)-3-羥基-4-甲基吡啶醯胺基)氧雜環丁烷-3-甲酸甲酯(300 mg, 0.80 mmol，產率74%)。LC-MS: m/z= 377.1 [M+H] +，滯留時間2.19分鐘(方法A)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
3-(5-(3-氯苯基)-3-羥基-4-甲基吡啶醯胺基)氧雜環丁烷-3-羧酸
Figure 02_image809
向於四氫呋喃/水(10.0 mL/2.0 mL)中之3-(5-(3-氯苯基)-3-羥基-4-甲基吡啶醯胺基)氧雜環丁烷-3-甲酸甲酯(300 mg, 0.80 mmol)溶液添加氫氧化鋰單水合物(164 mg, 4.0 mmol)。將該混合物攪拌過夜並濃縮以去除四氫呋喃。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾，以水洗滌並乾燥以得到呈白色固體之3-(5-(3-氯苯基)-3-羥基-4-甲基吡啶醯胺基)氧雜環丁烷-3-羧酸(71.4 mg, 0.20 mmol，產率25%)。LC-MS: m/z= 363.0 [M+H] +，滯留時間4.85分鐘(方法A)。1HNMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.53 (s, 1H), 10.18 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.58 – 7.53 (m, 3H), 7.45 – 7.37 (m, 1H), 4.94 – 4.80 (m, 4H), 2.14 (s, 3H)。 實例17：化合物17之製備
3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)氰吡啶
Figure 02_image811
在0°C於氮氣下向於N,N-二甲基甲醯胺(10.0 mL)中之3-氯-4-甲基-5-(3-苯氧基苯基)氰吡啶(來自實例8的中間產物) (700 mg, 2.39 mmol)溶液添加氫化鈉(114.80 mg, 2.87 mmol，於礦物油中之60% w/w懸浮液)。將該混合物在0 °C下攪拌10分鐘且接著添加苯甲醇(309.6 mg, 2.87 mmol)。在0 °C下攪拌該溶液1.0小時並用乙酸乙酯及水稀釋。有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 4/1)純化，得到3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)氰吡啶(400 mg, 1.09 mmol，產率45.87%)。LC-MS: m/z= 366.0 [M+H] +，滯留時間1.72分鐘(方法A)。
3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)吡啶甲酸
Figure 02_image813
向於乙醇(10.0 mL)中之3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)氰吡啶(400 mg, 1.09 mmol)溶液添加30%氫氧化鈉水溶液(8.0 mL)。將該混合物在100 °C下攪拌3.0小時，冷卻並濃縮以去除乙醇。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾並乾燥以得到呈白色固體之3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)吡啶甲酸(350 mg, 0.91 mmol，產率75.32%)。LC-MS: m/z= 385.0 [M+H] +，滯留時間1.51分鐘(方法A)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image815
將於二氯甲烷(5.0 mL)中之3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)吡啶甲酸(350 mg, 0.91 mmol)、甘胺酸乙酯鹽酸鹽(73.84 mg, 0.53 mmol)、六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯啶基鏻(276.25 mg, 0.53 mmol)及三乙胺(223.57 mg, 2.21 mmol)混合物在室溫下攪拌過夜。以水終止反應，並以二氯甲烷萃取。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 1/2)純化，得到呈白色固體之(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(150 mg, 0.32 mmol，產率72.69%)。LC-MS: m/z= 470.0 [M+H] +，滯留時間2.04分鐘(方法B)。
(3-羥基-4-甲基-5-(2-甲基-1,2,3,4-四氫喹啉-6-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image817
將於四氫呋喃(10.0 mL)中之(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(150 mg, 0.32 mmol)及10%鈀碳(20.0 mg)混合物在室溫於氫氣環境下攪拌過夜。過濾掉不溶固體並將濾液濃縮以得到呈黃色固體之(3-羥基-4-甲基-5-(2-甲基-1,2,3,4-四氫喹啉-6-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(120 mg, 0.31 mmol，產率97.91%)。LC-MS: m/z= 384.3 [M+H]+，滯留時間2.27分鐘(方法B)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
(3-羥基-4-甲基-5-(2-甲基-1,2,3,4-四氫喹啉-6-基)吡啶甲醯基)甘胺酸
Figure 02_image819
向於四氫呋喃/水(8.0 mL/2.0 mL)中之(3-羥基-4-甲基-5-(2-甲基-1,2,3,4-四氫喹啉-6-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(100 mg, 0.26 mmol)溶液添加氫氧化鋰單水合物(164 mg, 4.0 mmol)。將該混合物攪拌過夜並濃縮以去除四氫呋喃。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾，以水洗滌並用逆相製備型HPLC純化以得到呈白色固體之(3-羥基-4-甲基-5-(2-甲基-1,2,3,4-四氫喹啉-6-基)吡啶甲醯基)甘胺酸(甲酸酯) (17.9 mg, 0.05 mmol, 19.39%)。LC-MS: m/z= 356.1 [M+H] +，滯留時間3.91分鐘(方法A)。 1HNMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.73 (s, 1H), 9.17 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 6.94 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 6.56 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 5.93 (br s, 1H), 3.95 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 2.82 – 2.60 (m, 3H), 2.58 – 2.53 (m, 1H), 2.18 (s, 3H), 1.93 – 1.81 (m, 1H), 1.56 – 1.37 (m, 1H), 1.17 (d, J = 6.1 Hz, 3H)。 實例18：化合物18之製備
2-(4-溴-1H-吡唑-1-基)吡啶
Figure 02_image821
向於乙酸(20 mL)中之2-(1H-吡唑-1-基)吡啶(1.0 g, 6.89 mmol)溶液逐滴添加溴(3302.54 mg, 20.67 mmol, 1.06 mL)。該混合物係於室溫下攪拌30分鐘。將反應物用水稀釋並用乙酸乙酯萃取兩次。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮。得到呈黃色固體之粗製2-(4-溴-1H-吡唑-1-基)吡啶(1.35 g，粗製)。LC-MS: m/z= 224 [M+H] +，滯留時間1.941分鐘(方法B)。將產物直接用於下一步驟中。
2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1H-吡唑-1-基)吡啶
Figure 02_image823
向於1,4-二噁烷(15.0 mL)中之2-(4-溴-1H-吡唑-1-基)吡啶(1.2 g, 5.36 mmol)、雙(頻哪醇合)二硼(6.8 g, 26.78 mmol)及醋酸鉀(2.63 g, 26.78 mmol)溶液添加[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (391.88 mg, 0.54 mmol)。將該混合物在90 °C於氮氣下攪拌16.0小時並冷卻至室溫。將乙酸乙酯及水加入至該溶液中，並分離各層。將有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮至乾燥。殘餘物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 10/1)純化，得到2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1H-吡唑-1-基)吡啶(1.38 g, 5.09 mmol，產率95%)。LC-MS: m/z= 272 [M+H] +，滯留時間2.000分鐘(方法B)。
3-氯-4-甲基-5-(1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)氰吡啶
Figure 02_image825
向於N,N-二甲基甲醯胺/水(10.0 mL/1.0 mL)中之3,5-二氯-4-甲基氰吡啶(862.2 mg, 4.61 mmol)、2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1H-吡唑-1-基)吡啶(1.25 g, 4.61 mmol)及碳酸鉀(764.6 mg, 5.53 mmol)溶液添加[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (134.9 mg, 0.18 mmol)。將該混合物在45 °C於氮氣下攪拌16.0小時並冷卻至室溫。將乙酸乙酯及水加入至該溶液中，並分離各層。將有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮至乾燥。殘餘物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 5/1)純化，得到3-氯-4-甲基-5-(1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)氰吡啶(342 mg, 1.16 mmol，產率25%)。LC-MS: m/z= 296 [M+H] +，滯留時間2.090分鐘(方法A)。
3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)氰吡啶
Figure 02_image827
在0°C於氮氣下向於N,N-二甲基甲醯胺(10.0 mL)中之3-氯-4-甲基-5-(1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)氰吡啶(300.0 mg, 1.01 mmol)溶液添加氫化鈉(48.8 mg, 1.22 mmol，於礦物油中之60% w/w懸浮液)。將該混合物在0 °C下攪拌10分鐘且接著添加苯甲醇(131.6 mg, 1.22 mmol, 0.127 mL)。在0 °C下攪拌該溶液50分鐘並用乙酸乙酯及水稀釋。有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 5/1)純化，得到3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)氰吡啶(82 mg, 0.22 mmol，產率22%)。LC-MS: m/z= 368 [M+H] +，滯留時間2.138分鐘(方法B)。
3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶甲酸
Figure 02_image829
向於乙醇(3.0 mL)中之3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)氰吡啶(70.0 mg, 0.19 mmol)溶液添加30%氫氧化鈉水溶液(1.0 mL)。將該混合物在100 °C下攪拌5.0小時，冷卻並濃縮以去除乙醇。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾並乾燥以得到呈白色固體之3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶甲酸(72 mg，粗製)。LC-MS: m/z= 387 [M+H] +，滯留時間1.290分鐘(方法B)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image831
將於二氯甲烷(5.0 mL)中之3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶甲酸(60. 0 mg, 0.16 mmol)、甘胺酸乙酯鹽酸鹽(26.41 mg, 0.19 mmol)、六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯啶基鏻(88.89 mg, 0.17 mmol)及三乙胺(78.56 mg, 0.78 mmol)混合物在室溫下攪拌過夜。以水終止反應，並以二氯甲烷萃取。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 3/2)純化，得到(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(70 mg, 0.15 mmol，產率93%)。LC-MS: m/z= 472 [M+H] +，滯留時間2.028分鐘(方法B)。
(3-羥基-4-甲基-5-(1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image833
將於四氫呋喃(10.0 mL)中之(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(60.0 mg, 0.13 mmol)及10%鈀碳(20.0 mg)混合物於氫氣環境下攪拌5.0小時。過濾掉不溶固體並將濾液濃縮以得到呈白色固體之(3-羥基-4-甲基-5-(1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(50 mg，粗製)。LC-MS: m/z= 382 [M+H] +，滯留時間2.127分鐘(方法A)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
(3-羥基-4-甲基-5-(1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醯基)甘胺酸
Figure 02_image835
向於四氫呋喃/水(10.0 mL/2.0 mL)中之(3-羥基-4-甲基-5-(1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(50.0 mg, 0.13 mmol)溶液添加氫氧化鋰單水合物(55.0 mg, 1.31 mmol)。將該混合物攪拌過夜並濃縮以去除四氫呋喃。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾，以水洗滌並用逆相製備型HPLC純化以得到呈白色固體之(3-羥基-4-甲基-5-(1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醯基)甘胺酸(甲酸酯) (28.5 mg, 0.08 mmol，產率62%)。LC-MS: m/z= 354 [M+H] +，滯留時間=4.255分鐘(方法A)。 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 12.84 (br, 1H), 9.27 (br, 1H), 9.01 (s, 1H), 8.53 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 8.35 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.08-8.00 (m, 2H), 7.44-7.41 (m, 1H), 3.97 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 2.37 (s, 3H)。 實例19：化合物19之製備
4-溴-1-(4-氟苯基)-1H-吡唑
Figure 02_image837
將於乙腈(20.0 mL)中之4-溴-1H-吡唑(1.47 g, 10.0 mmol)、1-氟-4-碘苯(2.44 g, 11.0 mmol)、碳酸銫(6.50 g, 20.0 mmol)、碘化亞銅(380 mg, 2.0 mmol)及N,N'-二甲基-1,2-乙二胺(176 mg, 2.0 mmol)混合物於密封管中在80 °C下攪拌過夜。將該溶液冷卻至室溫並過濾。將乙酸乙酯及水加入至該溶液中，並分離各層。將有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮至乾燥。殘餘物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 5/1)純化，得到呈黃色固體之4-溴-1-(4-氟苯基)-1H-吡唑(1.30 g, 5.39 mmol，產率53.9%)。LC-MS: m/z= 243.0 [M+H] +，滯留時間2.01分鐘(方法A)。
1-(4-氟苯基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1H-吡唑
Figure 02_image839
向於1,4-二噁烷(15.0 mL)中之4-溴-1-(4-氟苯基)-1H-吡唑(1.30 g, 5.39 mmol)、雙(頻哪醇合)二硼(1.21 g, 4.78 mmol)及醋酸鉀(2.11 g, 21.6 mmol)溶液添加[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (395 mg, 0.54 mmol)。將該混合物在90 °C於氮氣下攪拌16.0小時並冷卻至室溫。將乙酸乙酯及水加入至該溶液中，並分離各層。將有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮至乾燥。殘餘物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 4/1)純化，得到1-(4-氟苯基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(1.21 g, 4.20 mmol，產率77.9%)。LC-MS: m/z= 289.1 [M+H] +，滯留時間2.14分鐘(方法A)。
3-氯-5-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基氰吡啶
Figure 02_image841
向於N,N-二甲基甲醯胺/水(10.0 mL/1.0 mL)中之3,5-二氯-4-甲基氰吡啶(785 mg, 4.20 mmol)、1-(4-氟苯基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(1.21 g, 4.20 mmol)及碳酸鉀(869.4 mg, 6.30 mmol)溶液添加[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (307 mg, 0.42 mmol)。將該混合物在50 °C於氮氣下攪拌16.0小時並冷卻至室溫。將乙酸乙酯及水加入至該溶液中，並分離各層。將有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮至乾燥。殘餘物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 2/1)純化，得到3-氯-5-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基氰吡啶(180 mg, 0.58 mmol，產率13.8%)。LC-MS: m/z= 313.0 [M+H] +，滯留時間2.13分鐘(方法A)。
3-(苯甲氧基)-5-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基氰吡啶
Figure 02_image843
在0°C於氮氣下向於N,N-二甲基甲醯胺(5.0 mL)中之3-氯-5-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基氰吡啶(180 mg, 0.58 mmol)溶液添加氫化鈉(27.8 mg, 0.70 mmol，於礦物油中之60% w/w懸浮液)。將該混合物在0 °C下攪拌10分鐘且接著添加苯甲醇(62.6 mg, 0.58 mmol)。在0 °C下攪拌該溶液1.0小時並用乙酸乙酯及水稀釋。有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 5/1)純化，得到3-(苯甲氧基)-5-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基氰吡啶(35 mg, 0.09 mmol，產率15.7%)。LC-MS: m/z= 385.1 [M+H] +，滯留時間2.194分鐘(方法A)。
3-(苯甲氧基)-5-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基吡啶甲酸
Figure 02_image845
向於乙醇(3.0 mL)中之3-(苯甲氧基)-5-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基氰吡啶(35 mg, 0.09 mmol)溶液添加30%氫氧化鈉水溶液(1.0 mL)。將該混合物在100 °C下攪拌5.0小時，冷卻並濃縮以去除乙醇。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾並乾燥以得到呈白色固體之3-(苯甲氧基)-5-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基吡啶甲酸(32 mg，粗製)。LC-MS: m/z= 404.1 [M+H] +，滯留時間2.014分鐘(方法A)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
(3-(苯甲氧基)-5-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image847
將於二氯甲烷(5.0 mL)中之3-(苯甲氧基)-5-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基吡啶甲酸(32 mg，粗製)、甘胺酸乙酯鹽酸鹽(13.9 mg, 0.1 mmol)、六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯啶基鏻(62.4 mg, 0.12 mmol)及三乙胺(50.5 mg, 0.5 mmol)混合物在室溫下攪拌過夜。以水終止反應，並以二氯甲烷萃取。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 1/1)純化，得到(3-(苯甲氧基)-5-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(40 mg, 0.08 mmol，產率91%)。LC-MS: m/z= 489.1 [M+H] +，滯留時間2.128分鐘(方法A)。
(5-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)-3-羥基-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image849
將於四氫呋喃(5.0 mL)中之(3-(苯甲氧基)-5-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(40 mg, 0.08 mmol)及10%鈀碳(10.0 mg)混合物於氫氣環境下攪拌過夜。過濾掉不溶固體並將濾液濃縮以得到呈黃色固體之(5-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)-3-羥基-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(30 mg, 0.08 mmol，產率100%)。LC-MS: m/z= 399.0 [M+H] +，滯留時間2.15分鐘(方法A)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
(5-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)-3-羥基-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸
Figure 02_image851
向於四氫呋喃/水(5.0 mL/1.0 mL)中之(5-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)-3-羥基-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(30 mg, 0.08 mmol)溶液添加氫氧化鋰單水合物(42 mg, 1.0 mmol)。將該混合物攪拌過夜並濃縮以去除四氫呋喃。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾，以水洗滌並乾燥以得到呈白色固體之(5-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)-3-羥基-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸(20.1 mg, 0.05 mmol，產率67.9%)。LC-MS: m/z= 371.0 [M+H] +，滯留時間4.641分鐘(方法A)。 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 12.88 (s, 1H), 9.21 (s, 1H), 8.91 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 8.07 – 7.84 (m, 2H), 7.53 – 7.28 (m, 2H), 3.92 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 2.37 (s, 3H)。 實例20：化合物20之製備
4-溴-1-異丙基-1H-吡唑
Figure 02_image853
在0°C於氮氣下向於N,N-二甲基甲醯胺(10.0 mL)中之4-溴-1H-吡唑(1.47 g, 10.0 mmol)溶液添加氫化鈉(480 mg, 12.0 mmol，於礦物油中之60% w/w懸浮液)。將該混合物在0 °C下攪拌20分鐘且接著添加2-碘丙烷(1.7 g, 10.0 mmol)。將該溶液在室溫下攪拌18.0小時並用乙酸乙酯及水稀釋。有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 10/1)純化，得到4-溴-1-異丙基-1H-吡唑(1.47 g, 7.8 mmol，產率78%)。LC-MS: m/z= 189.0 [M+H] +，滯留時間1.90分鐘(方法B)。
1-異丙基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1H-吡唑
Figure 02_image855
向於1,4-二噁烷(15.0 mL)中之4-溴-1-異丙基-1H-吡唑(1.47 g, 7.8 mmol)、雙(頻哪醇合)二硼(3.96 g, 15.6 mmol)及醋酸鉀(3.06, 31.2 mmol)溶液添加[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (570 mg, 0.78 mmol)。將該混合物在90 °C於氮氣下攪拌16.0小時並冷卻至室溫。將乙酸乙酯及水加入至該溶液中，並分離各層。將有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮至乾燥。殘餘物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 5/1)純化，得到1-異丙基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(1.18 g, 5.0 mmol，產率64.1%)。LC-MS: m/z= 237.0[M+H] +，滯留時間1.96分鐘(方法B)。
3-氯-5-(1-異丙基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基氰吡啶
Figure 02_image857
向於N,N-二甲基甲醯胺/水(15.0 mL/1.5 mL)中之3,5-二氯-4-甲基氰吡啶(1.5 g, 8.02 mmol)、1-異丙基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(1.9 g, 8.02 mmol)及碳酸鉀(1.3 g, 9.63 mmol)溶液添加[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (235 mg, 0.32 mmol)。將該混合物在50 °C於氮氣下攪拌過夜並冷卻至室溫。將乙酸乙酯及水加入至該溶液中，並分離各層。將有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮至乾燥。殘餘物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 2/1)純化，得到呈黃色固體之3-氯-5-(1-異丙基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基氰吡啶(580 mg, 2.22 mmol，產率29%)。LC-MS: m/z= 261.1 [M+H]+，滯留時間=1.83分鐘(方法A)。
3-(苯甲氧基)-5-(1-異丙基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基氰吡啶
Figure 02_image859
在0°C於氮氣下向於N,N-二甲基甲醯胺(5.0 mL)中之3-氯-5-(1-異丙基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基氰吡啶(580.0 mg, 2.22 mmol)溶液添加氫化鈉(108 mg, 2.67 mmol，於礦物油中之60% w/w懸浮液)。將該混合物在0 °C下攪拌10分鐘且接著添加苯甲醇(288 mg, 2.67 mmol)。在0 °C下攪拌該溶液50分鐘並用乙酸乙酯及水稀釋。有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 3/1)純化，得到呈黃色固體之3-(苯甲氧基)-5-(1-異丙基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基氰吡啶(180 mg, 0.54 mmol，產率24%)。LC-MS: m/z= 333.1 [M+H]+，滯留時間=2.21分鐘(方法A)。
3-(苯甲氧基)-5-(1-異丙基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基吡啶甲酸
Figure 02_image861
向於乙醇(5.0 mL)中之3-(苯甲氧基)-5-(1-異丙基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基氰吡啶(180 mg, 0.54 mmol)溶液添加30%氫氧化鈉水溶液(1.0 mL)。將該混合物在100 °C下攪拌5.0小時，冷卻並濃縮以去除乙醇。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾並乾燥以得到呈白色固體之3-(苯甲氧基)-5-(1-異丙基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基吡啶甲酸(100 mg, 0.28 mmol，產率53%)。LC-MS: m/z= 352.1 [M+H] +，滯留時間2.00分鐘(方法A)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
(3-(苯甲氧基)-5-(1-異丙基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image863
將於二氯甲烷(5.0 mL)中之3-(苯甲氧基)-5-(1-異丙基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基吡啶甲酸(100 mg, 0.28 mmol)、甘胺酸乙酯鹽酸鹽(40 mg, 0.28 mmol)、六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯啶基鏻(178 mg, 0.34 mmol)、三乙胺(254 mg, 2.52 mmol)混合物在室溫下攪拌過夜。以水終止反應，並以二氯甲烷萃取。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 1/1)純化，得到呈白色固體之(3-(苯甲氧基)-5-(1-異丙基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(100 mg, 0.18 mmol，產率81%)。LC-MS: m/z= 437.1 [M+H] +，滯留時間2.15分鐘(方法A)。
(3-羥基-5-(1-異丙基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image865
將於四氫呋喃(10.0 mL)中之(3-(苯甲氧基)-5-(1-異丙基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(100 mg, 0.18 mmol)及10%鈀碳(20.0 mg)混合物於氫氣環境下攪拌18小時。過濾掉不溶固體並將濾液濃縮以得到呈黃色固體之(3-羥基-5-(1-異丙基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(80 mg，粗製)。LC-MS: m/z= 347.1 [M+H] +，滯留時間2.19分鐘(方法A)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
(3-羥基-5-(1-異丙基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸
Figure 02_image867
向於四氫呋喃/水(8.0 mL/2.0 mL)中之(3-羥基-5-(1-異丙基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(80 mg，粗製)溶液添加氫氧化鋰單水合物(164 mg, 4.0 mmol)。將該混合物攪拌過夜並濃縮以去除四氫呋喃。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾，以水洗滌並乾燥以得到呈白色固體之(3-羥基-5-(1-異丙基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸(45.7 mg，產率62%)。LC-MS: m/z= 319.1 [M+H] +，滯留時間3.81分鐘(方法A)。 1HNMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ δ 12.75 (s, 1H), 9.24 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 8.23 (s, 2H), 7.86 (s, 1H), 4.58 (dt, J = 13.3, 6.6 Hz, 1H), 3.99 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 2.31 (s, 3H), 1.48 (d, J = 6.7 Hz, 6H)。 實例21：化合物21之製備
4-溴-1-(四氫-2H-哌喃-4-基)-1H-吡唑
Figure 02_image869
在0°C於氮氣下向於N,N-二甲基甲醯胺(10.0 mL)中之4-溴-1H-吡唑(1.47 g, 10.0 mmol)溶液添加氫化鈉(480 mg, 12.0 mmol，於礦物油中之60% w/w懸浮液)。將該混合物在0 °C下攪拌20分鐘且接著添加甲烷磺酸四氫-2H-哌喃-4-基酯(1.8 g, 10.0 mmol)。在10 °C下攪拌該溶液2.0小時並用乙酸乙酯及水稀釋。有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 10/1)純化，得到4-溴-1-(四氫-2H-哌喃-4-基)-1H-吡唑(1.16 g, 5.0 mmol，產率50%)。LC-MS: m/z= 231.0 [M+H] +，滯留時間1.76分鐘(方法B)。
1-(四氫-2H-哌喃-4-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1H-吡唑
Figure 02_image871
向於1,4-二噁烷(15.0 mL)中之4-溴-1-(四氫-2H-哌喃-4-基)-1H-吡唑(2.8 g, 12.10 mmol)、雙(頻哪醇合)二硼(3.7 g, 14.50 mmol)及醋酸鉀(3.6 g, 36.30 mmol)溶液添加[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (443 mg, 0.61 mmol)。將該混合物在90 °C於氮氣下攪拌16.0小時並冷卻至室溫。將乙酸乙酯及水加入至該溶液中，並分離各層。將有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮至乾燥。殘餘物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 5/1)純化，得到呈白色固體之1-(四氫-2H-哌喃-4-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(2.5 g, 8.99 mmol，產率74%)。LC-MS: m/z= 279.1 [M+H]+，滯留時間=1.83分鐘(方法A)。
3-氯-4-甲基-5-(1-(四氫-2H-哌喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)氰吡啶
Figure 02_image873
向於N,N-二甲基甲醯胺/水(6.0 mL/0.6 mL)中之3,5-二氯-4-甲基氰吡啶(1.51 g, 8.09 mmol)、1-(四氫-2H-哌喃-4-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(2.25 g, 8.09 mmol)及碳酸鉀(1.34 g, 9.71 mmol)溶液添加[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (237 mg, 0.32 mmol)。將該混合物在50 °C於氮氣下攪拌16.0小時並冷卻至室溫。將乙酸乙酯及水加入至該溶液中，並分離各層。將有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮至乾燥。殘餘物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 2/1)純化，得到呈黃色固體之3-氯-4-甲基-5-(1-(四氫-2H-哌喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)氰吡啶(1.0 g, 3.31 mmol，產率37%)。LC-MS: m/z= 303.1 [M+H]+，滯留時間=1.83分鐘(方法A)。
3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-(四氫-2H-哌喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)氰吡啶
Figure 02_image875
在0°C於氮氣下向於N,N-二甲基甲醯胺(10.0 mL)中之3-氯-4-甲基-5-(1-(四氫-2H-哌喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)氰吡啶(900.0 mg, 2.97 mmol)溶液添加氫化鈉(143 mg, 3.57 mmol，於礦物油中之60% w/w懸浮液)。將該混合物在0 °C下攪拌10分鐘且接著添加苯甲醇(386 mg, 3.57 mmol)。在0 °C下攪拌該溶液1.0小時並用乙酸乙酯及水稀釋。有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 3/1)純化，得到呈黃色固體之3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-(四氫-2H-哌喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)氰吡啶(100 mg, 0.27 mmol，產率8%)。LC-MS: m/z= 375.1 [M+H]+，滯留時間=2.21分鐘(方法A)。
3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-(四氫-2H-哌喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶甲酸
Figure 02_image877
向於乙醇(5.0 mL)中之3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-(四氫-2H-哌喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)氰吡啶(100 mg, 0.27 mmol)溶液添加30%氫氧化鈉水溶液(1.5 mL)。將該混合物在100 °C下攪拌5.0小時，冷卻並濃縮以去除乙醇。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾並乾燥以得到呈白色固體之3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-(四氫-2H-哌喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶甲酸(90 mg, 0.23 mmol，產率86%)。LC-MS: m/z= 394.1 [M+H] +，滯留時間2.00分鐘(方法A)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-(四氫-2H-哌喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image879
將於二氯甲烷(5.0 mL)中之3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-(四氫-2H-哌喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶甲酸(90 mg, 0.23 mmol)、甘胺酸乙酯鹽酸鹽(32 mg, 0.23 mmol)、六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯啶基鏻(143 mg, 0.27 mmol)、三乙胺(254 mg, 2.52 mmol)混合物在室溫下攪拌過夜。以水終止反應，並以二氯甲烷萃取。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 1/1)純化，得到呈白色固體之(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-(四氫-2H-哌喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(90 mg, 0.19 mmol，產率82%)。LC-MS: m/z= 479.1 [M+H] +，滯留時間2.15分鐘(方法A)。
(3-羥基-4-甲基-5-(1-(四氫-2H-哌喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image881
將於四氫呋喃(10.0 mL)中之(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-(四氫-2H-哌喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(90 mg, 0.19 mmol)及10%鈀碳(20.0 mg)混合物於氫氣環境下攪拌18小時。過濾掉不溶固體並將濾液濃縮以得到呈黃色固體之(3-羥基-4-甲基-5-(1-(四氫-2H-哌喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(70 mg, 0.18 mmol，產率96%)。LC-MS: m/z= 389.1 [M+H] +，滯留時間2.19分鐘(方法A)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
(3-羥基-4-甲基-5-(1-(四氫-2H-哌喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醯基)甘胺酸
Figure 02_image883
向於四氫呋喃/水(8.0 mL/2.0 mL)中之(3-羥基-4-甲基-5-(1-(四氫-2H-哌喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(70 mg, 0.18 mmol)溶液添加氫氧化鋰單水合物(164 mg, 4.0 mmol)。將該混合物攪拌過夜並濃縮以去除四氫呋喃。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾，以水洗滌並用逆相製備型HPLC純化以得到呈白色固體之(3-羥基-4-甲基-5-(1-(四氫-2H-哌喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醯基)甘胺酸(10.8 mg, 0.03 mmol，產率17%)。LC-MS: m/z= 361.1 [M+H] +，滯留時間3.45分鐘(方法A)。 1HNMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 12.76 (s, 2H), 9.25 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 4.69 – 4.32 (m, 1H), 3.98 (d, J = 6.2 Hz, 4H), 3.58 – 3.43 (m, 3H), 2.31 (s, 3H), 2.07 – 1.93 (m, 4H)。 實例22：化合物22之製備
4-溴-1-異丁基-1H-吡唑
Figure 02_image885
向於N,N-二甲基甲醯胺(10.0 mL)中之4-溴-1H-吡唑(1.0 g, 6.80 mmol)及1-溴-2-甲基丙烷(1118.68 mg, 8.16 mmol)溶液添加碳酸鉀(2.82 g, 20.41 mmol)。將該混合物在90 °C下攪拌18.0小時並用乙酸乙酯及水稀釋。有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 20/1)純化，得到4-溴-1-異丁基-1H-吡唑(1.15 g, 5.69 mmol，產率83%)。LC-MS: m/z= 203 [M+H] +，滯留時間1.861分鐘(方法B)。
1-異丁基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1H-吡唑
Figure 02_image887
向於1,4-二噁烷(15.0 mL)中之4-溴-1-異丁基-1H-吡唑(1.1 g, 5.42 mmol)、雙(頻哪醇合)二硼(6.88 g, 27.08 mmol)及醋酸鉀(1.59 g, 16.25 mmol)溶液添加[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (396 mg, 0.54 mmol)。將該混合物在90 °C於氮氣下攪拌16.0小時並冷卻至室溫。將乙酸乙酯及水加入至該溶液中，並分離各層。將有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮至乾燥。殘餘物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 10/1)純化，得到1-異丁基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(1.1 g, 4.39 mmol，產率81%)。LC-MS: m/z= 251 [M+H] +，滯留時間2.047分鐘(方法A)。
3-氯-5-(1-異丁基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基氰吡啶
Figure 02_image889
向於N,N-二甲基甲醯胺/水(10.0 mL/1.0 mL)中之3,5-二氯-4-甲基氰吡啶(411.2 mg, 2.20 mmol)、1-異丁基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(550.0 mg, 2.20 mmol)及碳酸鉀(364.7 mg, 2.64 mmol)溶液添加[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (64.4 mg, 0.09 mmol)。將該混合物在50 °C於氮氣下攪拌過夜並冷卻至室溫。將乙酸乙酯及水加入至該溶液中，並分離各層。將有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮至乾燥。殘餘物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 3/1)純化，得到3-氯-5-(1-異丁基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基氰吡啶(732 mg, 2.67 mmol，產率87%)。LC-MS: m/z= 275 [M+H] +，滯留時間2.065分鐘(方法A)。
3-(苯甲氧基)-5-(1-異丁基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基氰吡啶
Figure 02_image891
在0°C於氮氣下向於N,N-二甲基甲醯胺(10.0 mL)中之3-氯-5-(1-異丁基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基氰吡啶(650.00 mg, 2.37 mmol)溶液添加氫化鈉(113.6 mg, 2.84 mmol，於礦物油中之60% w/w懸浮液)。將該混合物在0 °C下攪拌10分鐘且接著添加苯甲醇(307.0 mg, 2.84 mmol, 0.3 mL)。在0 °C下攪拌該溶液50分鐘並用乙酸乙酯及水稀釋。有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 3/1)純化，得到3-(苯甲氧基)-5-(1-異丁基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基氰吡啶(105 mg, 0.30 mmol，產率13%)。LC-MS: m/z= 347 [M+H] +，滯留時間2.089分鐘(方法B)。
3-(苯甲氧基)-5-(1-異丁基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基吡啶甲酸
Figure 02_image893
向於乙醇(3.0 mL)中之3-(苯甲氧基)-5-(1-異丁基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基氰吡啶(95.0 mg, 0.27 mmol)溶液添加30%氫氧化鈉水溶液(1.0 mL)。將該混合物在100 °C下攪拌5.0小時，冷卻並濃縮以去除乙醇。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾並乾燥以得到呈白色固體之3-(苯甲氧基)-5-(1-異丁基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基吡啶甲酸(90 mg，粗製)。LC-MS: m/z= 366 [M+H] +，滯留時間1.391分鐘(方法B)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
(3-(苯甲氧基)-5-(1-異丁基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image895
將於二氯甲烷(10.0 mL)中之3-(苯甲氧基)-5-(1-異丁基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基吡啶甲酸(90.00 mg, 0.25 mmol)、甘胺酸乙酯鹽酸鹽(41.7 mg, 0.30 mmol)、六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯啶基鏻(140.98 mg, 0.27 mmol)及三乙胺(124.6 mg, 1.23 mmol)混合物在室溫下攪拌過夜。以水終止反應，並以二氯甲烷萃取。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 1/1)純化，得到(3-(苯甲氧基)-5-(1-異丁基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(30 mg, 0.067，產率27%)。LC-MS: m/z= 451 [M+H] +，滯留時間2.008分鐘(方法B)。
(3-羥基-5-(1-異丁基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image897
將於四氫呋喃(10.0 mL)中之(3-(苯甲氧基)-5-(1-異丁基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(25.0 mg, 0.06 mmol)及10%鈀碳(20.0 mg)混合物於氫氣環境下攪拌18.0小時。過濾掉不溶固體並將濾液濃縮以得到呈黃色固體之(3-羥基-5-(1-異丁基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(30.0 mg，粗製)。LC-MS: m/z= 361 [M+H] +，滯留時間1.966分鐘(方法B)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
(3-羥基-5-(1-異丁基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸
Figure 02_image899
向於四氫呋喃/水(8.0 mL/2.0 mL)中之(3-羥基-5-(1-異丁基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(25.00 mg, 0.07 mmol)溶液添加氫氧化鋰單水合物(164 mg, 4.0 mmol)。將該混合物攪拌過夜並濃縮以去除四氫呋喃。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物用逆相製備型HPLC純化以得到呈黃色固體之(3-羥基-5-(1-異丁基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸(甲酸酯) (6.4 mg, 0.02 mmol，產率27%)。LC-MS: m/z= 333 [M+H] +，滯留時間=4.188分鐘(方法A)。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.75 (s, 1H), 9.27-9.25 (m, 1H), 8.22 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 4.00 (s, 2H), 3.98 (d, J = 2.4 Hz, 2H), 2.30 (s, 3H), 2.19-2.15 (m, 1H), 0.88 (d, J = 6.8 Hz, 6H)。 實例23：化合物23之製備
3-側氧基庚-6-烯酸甲酯
Figure 02_image901
在0 °C下向於無水四氫呋喃(120 mL)中之氫化鈉(1.89 g, 47.30 mmol，於礦物油中之60% w/w懸浮液)懸浮液添加3-側氧基丁酸甲酯(3.23 g, 27.82 mmol)。在0 °C下攪拌該溶液30分鐘並添加n-丁基鋰(17.8 mL, 44.52 mmol, 2.5 M於正己烷中)。在攪拌30分鐘之後，添加3-溴丙-1-烯(3.70 g, 30.61 mmol)。使該反應混合物升溫至20 °C並再攪拌2.0小時。藉由添加飽和氯化銨水溶液終止反應，並用乙酸乙酯萃取。將有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮至乾燥。殘餘物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 100/3)純化，得到呈黃色油狀物之3-側氧基庚-6-烯酸甲酯(2.74 g, 17.6 mmol，產率63%)。LC-MS: m/z= 157 [M+H] +，滯留時間1.446分鐘(方法B)。
4-(2-(苯甲氧基)乙基)-3-側氧基庚-6-烯酸甲酯
Figure 02_image903
在0 °C下向於無水四氫呋喃(15.0 mL)中之3-側氧基庚-6-烯酸甲酯(800.0 mg, 5.12 mmol)溶液添加新配製的二異丙胺鋰(11.2 mmol, 5.63 mL, 2.0 M於正己烷中)。將該混合物在0 °C下攪拌15分鐘且添加((2-溴乙氧基)甲基)苯(1.32 g, 6.15 mmol)。使該混合物升溫至20 °C並保持攪拌3.0小時。以飽和氯化銨溶液終止該反應，並以乙酸乙酯萃取兩次。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 10/1)純化，得到呈黃色油狀物之4-(2-(苯甲氧基)乙基)-3-側氧基庚-6-烯酸甲酯(729 mg, 2.51 mmol，產率49%)。LC-MS: m/z= 313 [M+Na] +，滯留時間2.080分鐘(方法A)。
2,2-二疊氮基-4-(2-(苯甲氧基)乙基)-3-側氧基庚-6-烯酸甲酯
Figure 02_image905
將於二甲亞碸/水(30.0 mL/15.0 mL)中之4-(2-(苯甲氧基)乙基)-3-側氧基庚-6-烯酸甲酯(700.0 mg, 2.41 mmol)、疊氮化鈉(626.9 mg, 9.64 mmol)、碳酸氫鈉(607.6 mg, 7.23 mmol)及碘(1.25 g, 4.94 mmol)混合物在室溫下攪拌16.0小時。以飽和氯化銨溶液終止反應，並用乙酸乙酯萃取。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 10/1)純化，得到2,2-二疊氮基-4-(2-(苯甲氧基)乙基)-3-側氧基庚-6-烯酸甲酯(330 mg, 0.89 mmol，產率37%)。LC-MS: m/z= 395 [M+Na] +，滯留時間2.314分鐘(方法A)。
4-(2-(苯甲氧基)乙基)-3-羥基-6-甲基吡啶甲酸甲酯
Figure 02_image907
於一密封管中將於甲苯(5.0 mL)中之2,2-二疊氮基-4-(2-(苯甲氧基)乙基)-3-側氧基庚-6-烯酸甲酯(300.0 mg, 0.81 mmol)混合物在110 oC下攪拌16.0小時。將該溶液冷卻並濃縮至乾燥。所得殘餘物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 3/1)純化，得到4-(2-(苯甲氧基)乙基)-3-羥基-6-甲基吡啶甲酸甲酯(65 mg, 0.22 mmol，產率27%)。LC-MS: m/z= 302 [M+H] +，滯留時間1.991分鐘(方法A)。
4-(2-(苯甲氧基)乙基)-3-羥基-6-甲基吡啶甲酸
Figure 02_image909
向於甲醇/水(4.0 mL/1.0 mL)中之4-(2-(苯甲氧基)乙基)-3-羥基-6-甲基吡啶甲酸甲酯(60.0 mg, 0.20 mmol)溶液添加氫氧化鋰單水合物(83.6 mg, 1.99 mmol)。將該混合物攪拌過夜並濃縮以去除甲醇。所得水溶液係藉由添加10%鹽酸(5.0 mL)酸化並用乙酸乙酯萃取兩次。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。得到呈黃色固體之粗製4-(2-(苯甲氧基)乙基)-3-羥基-6-甲基吡啶甲酸(55 mg, 0.19 mmol，產率96%)。LC-MS: m/z= 288 [M+H] +，滯留時間1.626分鐘(方法A)。將粗產物用於下一步。
(4-(2-(苯甲氧基)乙基)-3-羥基-6-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image911
將於二氯甲烷(10.0 mL)中之4-(2-(苯甲氧基)乙基)-3-羥基-6-甲基吡啶甲酸(50.00 mg, 0.17 mmol)、甘胺酸乙酯鹽酸鹽(21.53 mg, 0.21 mmol)、六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯啶基鏻(99.62 mg, 0.19 mmol)及三乙胺(88.05 mg, 0.87 mmol)混合物在室溫下攪拌過夜。以水終止反應，並以二氯甲烷萃取。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 4/1)純化，得到呈白色固體之(4-(2-(苯甲氧基)乙基)-3-羥基-6-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(48 mg, 0.13 mmol，產率76%)。LC-MS: m/z= 373 [M+H] +，滯留時間2.179分鐘(方法A)。
(4-(2-(苯甲氧基)乙基)-3-羥基-6-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸
Figure 02_image913
向於甲醇/水(4.0 mL/1.0 mL)中之(4-(2-(苯甲氧基)乙基)-3-羥基-6-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(48.0 mg, 0.13 mmol)溶液添加氫氧化鋰單水合物(54.2 mg, 1.29 mmol)。將該混合物攪拌過夜並濃縮以去除甲醇。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物用逆相製備型HPLC純化以得到呈紅色固體之(4-(2-(苯甲氧基)乙基)-3-羥基-6-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸(甲酸酯) (29.7 mg, 0.09 mmol，產率66%)。LC-MS: m/z= 345 [M+H] +，滯留時間=4.596分鐘(方法A)。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6 ) δ12.75 (br, 1H), 12.40 (s, 1H), 9.11 (t, J= 6.0 Hz, 1H), 7.34-7.31 (m, 3H), 7.28-7.25 (m, 3H), 4.48 (s, 2H), 3.99 (d, J= 6.0 Hz, 2H), 3.69 (t, J= 6.5 Hz, 2H), 2.87 (t, J= 6.5 Hz, 2H), 2.42 (s, 3H)。 實例24：化合物24之製備
4-(4-氟苯甲基)-3-側氧基庚-6-烯酸甲酯
Figure 02_image915
在0 °C下向於無水四氫呋喃(20.0 mL)中之3-側氧基庚-6-烯酸甲酯(用於實例22的中間產物) (500.0 mg, 3.20 mmol)溶液添加新配製的二異丙胺鋰(7.04 mmol, 3.52 mL, 2.0 M於正己烷中)。將該混合物在0 °C下攪拌30分鐘且添加1-(溴甲基)-4-氟苯(726.2 mg, 3.84 mmol)。使該混合物升溫至20 °C並保持攪拌3.0小時。以飽和氯化銨溶液終止該反應，並以乙酸乙酯萃取兩次。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 10/1)純化，得到呈黃色油狀物之4-(4-氟苯甲基)-3-側氧基庚-6-烯酸甲酯(650 mg, 2.46 mmol，產率77%)。LC-MS: m/z= 265 [M+H] +，滯留時間1.934分鐘(方法B)。
2,2-二疊氮基-4-(4-氟苯甲基)-3-側氧基庚-6-烯酸甲酯
Figure 02_image917
將於二甲亞碸/水(20.0 mL/10.0 mL)中之4-(4-氟苯甲基)-3-側氧基庚-6-烯酸甲酯(500.0 mg, 1.89 mmol)、疊氮化鈉(369.2 mg, 5.68 mmol)、碳酸氫鈉(476.7 mg, 5.68 mmol)及碘(984.3 mg, 3.88 mmol)混合物在室溫下攪拌16.0小時。以飽和氯化銨溶液終止反應，並用乙酸乙酯萃取。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 10/1)純化，得到呈黃色固體之2,2-二疊氮基-4-(4-氟苯甲基)-3-側氧基庚-6-烯酸甲酯(310 mg, 0.89 mmol，產率47%)。LC-MS: m/z= 369 [M+Na] +，滯留時間2.279分鐘(方法A)。
4-(4-氟苯甲基)-3-羥基-6-甲基吡啶甲酸甲酯
Figure 02_image919
於一密封管中將於甲苯(5.0 mL)中之2,2-二疊氮基-4-(4-氟苯甲基)-3-側氧基庚-6-烯酸甲酯(300.0 mg, 0.87 mmol)混合物在110 oC下攪拌2.0小時。將該溶液冷卻並濃縮至乾燥。所得殘餘物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 10/3)純化，得到呈黃色油狀物之4-(4-氟苯甲基)-3-羥基-6-甲基吡啶甲酸甲酯(64 mg, 0.23 mmol，產率27%)。LC-MS: m/z= 276 [M+H] +，滯留時間2.006分鐘(方法A)。
4-(4-氟苯甲基)-3-羥基-6-甲基吡啶甲酸
Figure 02_image921
向於甲醇/水(4.0 mL/1.0 mL)中之4-(4-氟苯甲基)-3-羥基-6-甲基吡啶甲酸甲酯(60.0 mg, 0.22 mmol)溶液添加氫氧化鋰單水合物(91.5 mg, 2.18 mmol)。將該混合物攪拌過夜並濃縮以去除甲醇。所得水溶液係藉由添加10%鹽酸(5.0 mL)酸化並用乙酸乙酯萃取兩次。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。得到呈黃色固體之粗製4-(4-氟苯甲基)-3-羥基-6-甲基吡啶甲酸(34 mg, 0.13 mmol，產率59%)。LC-MS: m/z= 262 [M+H] +，滯留時間1.626分鐘(方法A)。將粗產物用於下一步。
(4-(4-氟苯甲基)-3-羥基-6-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image923
將於二氯甲烷(3.0 mL)中之4-(4-氟苯甲基)-3-羥基-6-甲基吡啶甲酸(30.0 mg, 0.11 mmol)、甘胺酸乙酯鹽酸鹽(14.21 mg, 0.14 mmol)、六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯啶基鏻(65.73 mg, 0.13 mmol)及三乙胺(58.10 mg, 0.57 mmol)混合物在室溫下攪拌過夜。以水終止反應，並以二氯甲烷萃取。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 85/15)純化，得到呈黃色固體之(4-(4-氟苯甲基)-3-羥基-6-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(26 mg, 0.08 mmol，產率68%)。LC-MS: m/z= 347 [M+H] +，滯留時間2.180分鐘(方法A)。
(4-(4-氟苯甲基)-3-羥基-6-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸
Figure 02_image925
向於甲醇/水(4.0 mL/1.0 mL)中之(4-(4-氟苯甲基)-3-羥基-6-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(26.00 mg, 0.08 mmol)溶液添加氫氧化鋰單水合物(31.53 mg, 0.75 mmol)。將該混合物攪拌過夜並濃縮以去除甲醇。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物用逆相製備型HPLC純化以得到呈白色固體之(4-(4-氟苯甲基)-3-羥基-6-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸(甲酸酯) (11.2 mg, 0.04 mmol，產率47%)。LC-MS: m/z= 319 [M+H] +，滯留時間=4.616分鐘(方法A)。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.85 (br, 1H), 12.47 (s, 1H), 9.15-9.11 (m, 1H), 7.32-7.25 (m, 3H), 7.11 (t, J = 8.8 Hz, 2H), 3.98 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.93 (s, 2H),   2.41 (s, 3H)。 實例25：化合物25之製備
3,5-二溴-2,4-二甲基吡啶 1-氧化物
Figure 02_image927
在0 °C下向3,5-二溴-2,4-二甲基吡啶(400 mg, 1.51 mmol)之二氯甲烷(10.0 mL)溶液添加3-氯過氧基苯甲酸(400 mg, 1.96 mmol, 85%)。將該混合物在室溫下攪拌18.0小時並添加碳酸鉀(400 mg, 3.20 mmol)。將該混合物再攪拌1小時並過濾掉不溶固體。將濾液濃縮以得到呈白色固體之3,5-二溴-2,4-二甲基吡啶 1-氧化物(400 mg, 1.43 mmol，產率94%)。LC-MS: m/z= 281.1 [M+H] +，滯留時間1.47分鐘(方法A)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
3,5-二溴-4,6-二甲基氰吡啶
Figure 02_image929
將於乙腈(10.0 mL)中之3,5-二溴-2,4-二甲基吡啶 1-氧化物(400 mg, 1.42 mmol)、三甲矽基氰化物(2.0 mL)及三乙胺(2.0 mL)混合物在85 oC下攪拌24.0小時。將該混合物以水稀釋並以乙酸乙酯萃取。有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 10/1)純化，得到呈黃色油狀物之3,5-二溴-4,6-二甲基氰吡啶(240 mg, 0.69 mmol，產率46%)。LC-MS: m/z= 291.2 [M+H] +，滯留時間1.74分鐘(方法A)。
3-溴-4,6-二甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)氰吡啶
Figure 02_image931
向於N,N-二甲基甲醯胺/水(3.0 mL/0.3 mL)中之3,5-二溴-4,6-二甲基氰吡啶(600 mg, 2.07 mmol)、1-苯基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(559 mg  2.07 mmol)及碳酸鉀(343 mg, 2.48 mmol)溶液添加[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (239 mg, 0.21 mmol)。將該混合物在45 °C於氮氣下攪拌16.0小時並冷卻至室溫。將乙酸乙酯及水加入至該溶液中，並分離各層。將有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮至乾燥。殘餘物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 2/1)純化，得到呈黃色固體之3-溴-4,6-二甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)氰吡啶(95 mg, 0.27 mmol，產率32%)。LC-MS: m/z= 354.3 [M+H]+，滯留時間=1.909分鐘(方法A)。
3-羥基-4,6-二甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)氰吡啶
Figure 02_image933
將於N,N-二甲基乙醯胺(3.0 mL)中之3-溴-4,6-二甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)氰吡啶(90.0 mg, 0.25 mmol)、碳酸鉀(106 mg, 0.76 mmol)及苯甲醇(270 mg, 2.5 mmol)混合物在120°C下攪拌72.0小時。將混合物冷卻並進行蒸發以乾燥。所得殘餘物係以逆相製備型HPLC純化以得到呈白色固體之3-羥基-4,6-二甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)氰吡啶(20 mg, 0.07 mmol，產率27%)。LC-MS: m/z= 291.1 [M+H]+，滯留時間=1.40分鐘(方法A)。
3-羥基-4,6-二甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲酸
Figure 02_image935
向於乙醇(5.0 mL)中之3-羥基-4,6-二甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)氰吡啶(20 mg, 0.07 mmol)溶液添加30%氫氧化鈉水溶液(1.0 mL)。將該混合物在100 °C下攪拌3.0小時，冷卻並濃縮以去除乙醇。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾並乾燥以得到呈白色固體之3-羥基-4,6-二甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲酸(25 mg，粗製)。LC-MS: m/z= 310.4 [M+H] +，滯留時間1.74分鐘(方法A)。產物純度足夠且直接用於下一步驟。
(3-羥基-4,6-二甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image937
將於二氯甲烷(8.0 mL)中之3-羥基-4,6-二甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲酸(25 mg, 0.08 mmol)、甘胺酸乙酯鹽酸鹽(17 mg, 0.12 mmol)、六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯啶基鏻(50 mg, 0.10 mmol)及三乙胺(380 mg, 3.75 mmol)混合物在室溫下攪拌過夜。以水終止反應，並以二氯甲烷萃取。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 1/2)純化，得到呈白色固體之(3-羥基-4,6-二甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(20 mg, 0.05 mmol，產率63%)。LC-MS: m/z= 395.1 [M+H] +，滯留時間2.13分鐘(方法A)。
(3-羥基-4,6-二甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醯基)甘胺酸
Figure 02_image939
向於甲醇/水(6.0 mL/3.0 mL)中之(3-羥基-4,6-二甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(20 mg, 0.05 mmol)溶液添加氫氧化鋰單水合物(164 mg, 4.0 mmol)。將該混合物攪拌過夜並濃縮以去除甲醇。所得水溶液係以10%鹽酸溶液酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾，以水洗滌並乾燥以得到呈白色固體之(3-羥基-4,6-二甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醯基)甘胺酸(6.4 mg, 0.017 mmol，產率36%)。LC-MS: m/z= 367.0 [M+H] +，滯留時間4.81分鐘(方法A)。 1HNMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.49 (s, 1H), 9.18 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.01 – 7.81 (m, 3H), 7.54 (t, J = 7.9 Hz, 2H), 7.35 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 4.02 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 2.39 (s, 3H), 2.12 (s, 3H)。 實例26：化合物26之製備
3,5-二氯-4-甲基吡啶1-氧化物
Figure 02_image941
在室溫下向於DCM (150 mL)中之3,5-二氯-4-甲基吡啶(9.4 g, 57.7 mmol)溶液經2分鐘逐份添加m-CPBA (12.9 g, 74.7 mmol)。反應物係於室溫下攪拌過夜。在TLC分析指示反應已完成之後，向反應物一次添加K 2CO 3(12 g, 87 mmol)並在室溫下攪拌約2小時。在過濾所得懸浮液之後，將濾液濃縮至乾燥。殘餘物係於混合溶劑(PE:EtOAc=50:1, 50 mL)中漿化，得到7.4 g之標題化合物。LC-MS (ESI+): m/z 178(M+H) +。
3,5-二氯-4-甲基氰吡啶
Figure 02_image943
在室溫下向於MeCN (150 mL)中之3,5-二氯-4-甲基吡啶1-氧化物(8 g, 44.94 mmol)溶液添加TMS-CN (9 g, 89.88 mmol)及TEA (9.4 mL)。使反應物回流過夜。在TLC分析指示反應已完成之後，以鹽水(150 mL)終止反應，並用EA萃取(150 mL x 3)。將合併的有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4(60 g)乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物經矽膠管柱層析法(PE:EtOAc=10:1)純化，得到6.8 g之標題化合物。 1H-NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 8.52 (s, 1H), 2.57 (s, 3H))。
3-氯-4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)氰吡啶
Figure 02_image945
於氮氣保護下，將於二噁烷(100 mL)中之3,5-二氯-4-甲基氰吡啶(3.72 g, 20 mmol)、B 2Pin 2(7.62 g, 30 mmol)、Pd(dppf)Cl 2(1.4 g, 2 mmol)及KOAc (5.88 g, 60 mmol)混合物在100°C下攪拌過夜。在TLC指示反應已完成之後，將所得懸浮液過濾。將濾餅以EtOAc (200 mL)洗滌，將合併的濾液濃縮至乾燥。將所得殘餘物溶解於NaOH水溶液(60 mL, 1N)並攪拌半小時。將水溶液以EtOAc (100 mL)洗滌。在分離後，將有機相再以NaOH水溶液(30 mL,1N)處理。在分離後，合併的水相係以稀HCl溶液(2N)酸化至pH=4~5，且沉澱出大量固體。將懸浮液過濾以得到407 mg之標題化合物。 1H-NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 8.68 (s, 1H), 2.61 (s, 3H), 1.34 (s, 12H)。
3-氯-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)氰吡啶
Figure 02_image947
於氮氣保護下，將於二噁烷(7 mL)及H 2O (0.4 mL)中之3-氯-4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)氰吡啶(270 mg, 0.97 mmol)、5-溴-2-苯基噁唑(280 mg, 1.2 mmol)、Pd(PPh3)4 (138 mg, 0.12 mmol)及K 3PO 4.H 2O (958 g, 3.6 mmol)混合物在100°C下攪拌過夜。在TLC分析指示反應已完成之後，以H 2O (10 mL)終止反應，並用DCM萃取(25 mL x 3)。將合併的有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4(30 g)乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物經矽膠管柱層析法(DCM)純化，得到250 mg之標題化合物。LC-MS (ESI+): m/z 296 (M+H) +。
3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)氰吡啶
Figure 02_image949
在室溫下向於THF (12.5 mL)中之3-氯-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)氰吡啶(250 mg, 0.85 mmol)溶液添加BnOH (184 mg, 1.7 mmol)及t-BuOK (184 mg, 1.7 mmol)。該反應物係於40°C下攪拌3小時。在TLC分析指示反應已完成之後，以H 2O (20 mL)終止反應，並用DCM萃取(10 mL x 3)。將合併的有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4(5 g)乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物經矽膠管柱層析法(PE/EtOAc = 5/1)純化，得到157 mg之標題化合物。LC-MS (ESI+): m/z 368 (M+H) +; 1H-NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 8.84 (s, 1H), 8.14-8.11 (m, 2H), 7.54-7.50 (m, 6H), 7.44-7.26 (m, 3H), 2.25 (s, 2H), 2.44 (s, 3H)。
3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)吡啶甲酸
Figure 02_image951
在室溫下向於EtOH (15 mL)中之3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)氰吡啶(167 mg, 0.45 mmol)溶液添加NaOH水溶液(1.6 mL, 30wt%)。該反應物係於回流溫度下攪拌過夜。在LCMS分析指示反應已完成之後，將反應物冷卻至室溫並以稀鹽酸溶液酸化至pH 4~5。沉澱出大量固體。將懸浮液過濾以得到158 mg之標題化合物。LC-MS (ESI+): m/z 387 (M+H) +。
(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)吡啶甲醯基)甘胺酸甲酯
Figure 02_image953
在室溫下向於DMF (5 mL)中之3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)吡啶甲酸(158 mg, 0.41 mmol)溶液添加甘胺酸甲酯鹽酸鹽(62 mg, 0.49 mmol)、DIEA (212 mg, 1.64 mmol)及HATU (234 mg, 0.45 mmol)。反應物係於室溫下攪拌過夜。在TLC分析指示反應已完成之後，以H 2O (20 mL)終止反應，並用DCM萃取(10 mL x 3)。將合併的有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4(5 g)乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物經矽膠管柱層析法(PE/DCM = 1/1)純化，得到115 mg之標題化合物。LC-MS (ESI+): m/z 458 (M+H) +; 1H-NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 8.77 (s, 1H), 8.37 (brs, 1H), 8.14-8.11 (m, 2H), 7.55-7.49 (m, 6H), 7.42-7.35 (m, 3H),5.13 (s, 2H), 4.29 (d, J = 6 Hz, 2H), 3.81 (s, 3H), 2.44 (s, 3H)。
(3-羥基-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)吡啶甲醯基)甘胺酸甲酯
Figure 02_image955
在室溫下向於MeOH (6 mL)及DCM (3 mL)中之溶液(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)吡啶甲醯基)甘胺酸甲酯(167 mg, 0.45 mmol)添加Pd/C (10wt%, 34 mg)。該反應物係於來自氣球的大氣氫氣壓力下攪拌45分鐘。在TLC分析指示反應已完成之後，使反應物過濾通過矽藻土。將濾液真空濃縮以得到80 mg之標題化合物。 1H-NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 12.27 (s, 1H), 8.47 (s, 2H), 8.14-8.11 (m, 2H), 7.51 (d, J = 3.6 Hz, 4H), 4.27 (d, J = 6 Hz, 2H), 3.83 (s, 3H), 2.50 (s, 3H)。
(3-羥基-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)吡啶甲醯基)甘胺酸
Figure 02_image957
在室溫下向於THF (5 mL)及H 2O (2 mL)中之(3-羥基-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)吡啶甲醯基)甘胺酸甲酯(80 mg, 0.22 mmol)溶液添加LiOH. H 2O (92 mg, 2.2 mmol)。該反應物係於50°C下攪拌2小時。在TLC分析指示反應已完成之後，以稀鹽酸溶液(1N)將反應物酸化至pH 4~5。沉澱出大量固體。將懸浮液過濾以得到45 mg之標題化合物。HPLC純度為99.1%；LC-MS (ESI+): m/z 354 (M+H) +; 1H-NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 12.95 (s, 1H), 12.85 (brs, 1H), 9.38 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.15-8.12 (m, 2H), 7.95 (s, 1H), 7.64-7.58 (m, 3H), 4.03 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 2.67 (s, 3H)。 實例27：化合物27之製備
5-氯-4,6'-二甲基-[3,3'-聯吡啶]-6-甲腈
Figure 02_image959
該化合物係根據3-氯-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)氰吡啶之製備程序使用5-溴-2-甲基吡啶來合成。LC-MS (ESI+): m/z 244 (M+H) +。
5-(苯甲氧基)-4,6'-二甲基-[3,3'-聯吡啶]-6-甲腈
Figure 02_image961
該化合物係根據3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)氰吡啶之製備程序來合成。LC-MS (ESI+): m/z 316 (M+H) +; 1H-NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 8.45 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.55-7.48 (m, 3H), 7.55-7.42 (m, 3H), 7.37-7.28 (m, 1H), 5.28 (s, 2H), 2.65 (s, 3H), 2.17 (s, 3H)。
5-(苯甲氧基)-4,6'-二甲基-[3,3'-聯吡啶]-6-羧酸
Figure 02_image963
該化合物係根據3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)吡啶甲酸之製備程序來合成。LC-MS (ESI+): m/z 335 (M+H) +; 1H-NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 13.45 (brs, 1H), 8.53 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.81 (dd, J = 7.8, 2.1 Hz, 1H), 5.03 (s, 2H), 2.55 (s, 3H), 2.15 (s, 3H)。
(5-(苯甲氧基)-4,6'-二甲基-[3,3'-聯吡啶]-6-羰基)甘胺酸甲酯
Figure 02_image965
該化合物係根據(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)吡啶甲醯基)甘胺酸甲酯之製備程序來合成。LC-MS (ESI+): m/z 406 (M+H) +。
(5-羥基-4,6'-二甲基-[3,3'-聯吡啶]-6-羰基)甘胺酸甲酯
Figure 02_image967
該化合物係根據(3-羥基-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)吡啶甲醯基)甘胺酸甲酯之製備程序來合成。LC-MS (ESI+): m/z 316 (M+H) +; 1H-NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 12.16 (s, 1H), 8.49 (d, J = 1.8 Hz, 2H), 7.96 (s, 1H), 7.56 (dd, J = 8.1 Hz, 2.1 Hz, 1H), 7.29(s, 1H), 4.26 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 3.82 (s, 3H), 2.64 (s, 3H), 2.23 (s, 3H)。
(5-羥基-4,6'-二甲基-[3,3'-聯吡啶]-6-羰基)甘胺酸
Figure 02_image969
該化合物係根據(3-羥基-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)吡啶甲醯基)甘胺酸之製備程序來合成。LC-MS (ESI+): m/z 302 (M+H) +; 1H-NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 12.80 (s, 1H), 9.38 (t, J = 6 Hz, 1H), 8.53 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.82-7.79 (m, 1H), 7.42 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 4.01 (d, J = 6.6 Hz, 2H),  2.55 (s, 3H), 2.16 (s, 3H)。 實例28：化合物28之製備
Figure 02_image971
該化合物係根據(3-羥基-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)吡啶甲醯基)甘胺酸之製備程序來合成。LC-MS (ESI+): m/z 338 (M+H) +; 1H-NMR (300 MHz, DMSO- d 6 ) δ12.86 (s, 1H), 12.80 (brs, 1H), 9.45 (t, J= 6.Hz, 1H), 9.00 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 8.10 (t, J= 8.1 Hz, 2H), 7.88-7.73 (m, 1H), 7.71-7.68 (m, 1H), 4.03 (d, J= 6 Hz, 2H), 2.50 (s, 3H)。 實例29：化合物29之製備
Figure 02_image973
該化合物係根據(3-羥基-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)吡啶甲醯基)甘胺酸之製備程序來合成。LC-MS (ESI+): m/z 302 (M+H) +; 1H-NMR (300 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.80 (s, 1H), 9.39 (t, J= 6.5 Hz, 1H), 8.55 (dd, J= 4.9, 1.8 Hz, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.62 (dd, J= 7.6, 1.8 Hz, 1H), 7.36 (dd, J= 7.7, 4.9 Hz, 1H), 4.00 (d, J= 6.0 Hz, 2H), 2.25 (s, 3H), 1.96 (s, 3H)。 實例30：化合物30之製備
Figure 02_image975
該化合物係根據(3-羥基-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)吡啶甲醯基)甘胺酸之製備程序來合成。LC-MS (ESI+): m/z 367 (M+H) +; 1H-NMR (300 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.88 (brs, 1H), 12.78 (s, 1H), 9.17 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 8.92 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.94 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 7.55 (t, J= 7.8 Hz, 2H), 7.37 (t, J= 7.4 Hz, 1H), 4.51 (t, J= 7.2 Hz, 1H), 2.37 (s, 3H), 1.47 (d, J= 7.2 Hz, 3H)。 實例31：化合物31之製備
Figure 02_image977
該化合物係根據(3-羥基-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)吡啶甲醯基)甘胺酸之製備程序來合成。LC-MS (ESI+): m/z 367 (M+H) +; 1H-NMR (300 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.90 (brs, 1H), 12.77 (s, 1H), 9.17 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 8.93 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.94 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 7.55 (t, J= 7.8 Hz, 2H), 7.37 (t, J= 7.4 Hz, 1H), 4.51 (t, J= 7.4 Hz, 1H), 2.37 (s, 3H), 1.47 (d, J= 7.2 Hz, 3H)。 實例32：化合物32之製備
3,5-二氯-4-甲基吡啶1-氧化物
Figure 02_image979
將3,5-二氯-4-甲基-吡啶(5 g, 30.86 mmol)溶解於DCM (70 mL)中並冷卻至0 °C。在0 °C下分批添加m-CPBA (7.85 g, 40.11 mmol)。將該反應混合物在室溫下攪拌過夜。LCMS指示已完全轉換為所要產物(MS/ 178)。添加K 2CO 3(4.427 g, 32.08 mmol)。將該混濁反應混合物攪拌1小時。將白色沉澱物通過矽藻土墊過濾，將濾餅用DCM (50 mL)沖洗。將濾液濃縮以得到白色固體(5.0 g)。LC-MS (ESI+): m/z 179.0 (M+H) +。
3,5-二氯-4-甲基氰吡啶
Figure 02_image981
將於乙腈(90 mL)中之3,5-二氯-4-甲基-吡啶 1-氧化物(5 g, 28.087 mmol)、TMS-氰化物(5 g, 50.38 mmol)及三乙胺(5.8 mL, 42.29 mmol)混合物加熱至回流(85 oC)持續7小時。將該反應物冷卻至室溫並攪拌過夜。以NaHCO 3水溶液(50 mL)終止反應。將該混合物以乙酸乙酯(100 mL)稀釋。分離各層，將有機層以濃鹽水(50 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗製物係以管柱(12 g管柱，於己烷中之0-100%乙酸乙酯)純化以得到淡褐色液體(4.09 g)。LC-MS (ESI+): m/z 186.0 (M+H) +。
3-氯-5-(3-氯苯基)-4-甲基氰吡啶
Figure 02_image983
在室溫下將Pd(dppf)Cl 2(0.178 g, 0.243 mmol)添加至於DMF (10 mL)及1 mL水中之3,5-二氯-4-甲基-吡啶-2-甲腈(1.2 g, 6.416 mmol)、(3-氯苯基)硼酸(1 g, 6.416 mmol)及K 2CO 3((1.06 g, 7.699 mmol)攪拌混合物。將所得混合物於氮氣下加熱45 °C持續17小時。TLC (於己烷中之30% EtOAc)指示起始材料已有90%消耗。將該反應混合物以水(20 mL)及乙酸乙酯(30 mL)稀釋，均勻攪拌。分離各層，將有機層以濃鹽水(20 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗製物係以管柱(24 g管柱，於己烷中之0-50%乙酸乙酯)純化以得到白色固體產物。1H-NMR指示有3:8之位置異構物混合物。使該混合物進行下一步反應。LC-MS (ESI+): m/z 263.0 (M+H) +。
3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基氰吡啶
Figure 02_image985
將4-氯-6-(3-氯苯基)-5-甲基-吡啶-3-甲腈(1.35 g, 5.130 mmol)溶解於DMF (10 mL)，將反應混合物冷卻至0 oC。添加NaH (於礦物油中之60%懸浮液，246 mg, 6.156 mmol)。在3分鐘之後，在0 oC下逐滴添加苯甲醇(0.637 mL, 6.156 mmol)。將紅色反應物在0 oC下攪拌。在50分鐘之後，TLC (於己烷中之10%乙酸乙酯)顯示90%已轉換。以水(20 mL)終止反應。將混合物用乙酸乙酯(30 mL)萃取。有機層係經Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗製物係以管柱(20 g，於己烷中之0-40%乙酸乙酯)純化，分離出兩種位置異構物（由先前的反應）。主產物(1.16 g, 67%)。主產物展現出很強的NOE（介於8.40 ppm與7.57-7.42 ppm之間），指示為所要產物。LC-MS (ESI+): m/z 335.0 (M+H) +。
3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基吡啶甲酸
Figure 02_image987
將於乙醇(11 mL)及30% NaOH水溶液(14 mL)中之4-苯甲基氧基-6-(3-氯苯基)-5-甲基-吡啶-3-甲腈(1.1 g, 3.3 mmol)混合物加熱至100 oC持續3小時。LCMS指示已完全轉換為所要的高極性。將反應物冷卻至室溫。在減壓下將乙醇蒸發。所得殘餘物係以濃HCl (pH~2)酸化，將淡褐色固體粉碎。將該固體藉由過濾分離出，以水洗滌並於空氣中乾燥，得到淡褐色固體(1.2 g, 100%)。將粗製材料用於下一反應中。LC-MS (ESI+): m/z 354.0 (M+H) +。
(3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image989
在室溫下將PyBOP (323 mg, 0.621 mmol)及三乙胺(0.39 mL, 2.862 mmol)添加至於DCM (5 mL)中之4-苯甲基氧基-6-(3-氯苯基)-5-甲基-吡啶-3-羧酸(200 mg, 0.565 mmol)及2-胺基乙酸乙酯鹽酸鹽(79 mg, 0.565 mmol)攪拌混合物。將所得混合物在室溫下攪拌2小時。LCMS指示起始材料已完全消耗掉。將反應物直接濃縮。粗製物係以管柱(於己烷中之0-100%乙酸乙酯)純化，得到白色固體(201 mg, 81%)。LC-MS (ESI+): m/z 439.0 (M+H) +。
(5-(3-氯苯基)-3-羥基-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image991
將於甲醇(1 mL)及乙酸乙酯(1 mL)中之2-[[4-苯甲基氧基-6-(3-氯苯基)-5-甲基-吡啶-3-羰基]胺基]乙酸乙酯(201 mg, 0.458 mmol)及10% Pd-碳(5 mg)攪拌混合物用氫氣脫氣2分鐘且接著在室溫於氫氣環境下攪拌12小時。LCMS指示已完全轉換為所要產物。將反應物通過矽藻土墊過濾，用乙酸乙酯(15 mL)沖洗。將濾液濃縮。粗產物(151 mg, 0.429 mmol)未經進一步純化即進行下一步反應。LC-MS (ESI+): m/z 349.0 (M+H) +。
(5-(3-氯苯基)-3-羥基-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸
Figure 02_image993
在室溫下將1N NaOH水溶液(0.5 mL)添加至於THF (1.5 mL)及甲醇(1.5 mL)中之2-[[5-(3-氯苯基)-3-羥基-4-甲基-吡啶-2-羰基]胺基]乙酸乙酯(132 mg, 0.378 mmol)攪拌溶液。該反應物係於40 oC下攪拌1.5小時。將反應物直接濃縮以去除THF及甲醇。殘餘物係以 1 N HCl水溶液(0.6 mL)酸化。將沉澱物過濾，以水洗滌，並於空氣中乾燥。粗製物係以製備型HPLC (於水中之30-80% MeCN，經25分鐘)純化。LC-MS (ESI+): m/z 321.0 (M+H)+; 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.79 (s, 2H), 9.38 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 7.60 – 7.46 (m, 3H), 7.46 – 7.35 (m, 1H), 4.00 (d, J = 6.2 Hz, 2H), 2.14 (s, 3H)。 實例33：化合物33之製備
3-氯-4-甲基-5-(萘-2-基)氰吡啶
Figure 02_image995
在室溫下將Pd(dppf)Cl 2(0.032 g, 0.0248 mmol)添加至於DMF (8 mL)及水(0.8 mL)中之3,5-二氯-4-甲基-吡啶-2-甲腈(0.4 g, 2.14 mmol)、2-萘基硼酸(368 mg, 2.14 mmol)及K 2CO 3((354 mg, 2.57 mmol)攪拌混合物。將所得混合物於氮氣下加熱45 °C持續17小時。TLC (於己烷中之30%乙酸乙酯)指示起始材料已完全消耗掉。將該反應物以乙酸乙酯(20 mL)及水(15 mL)稀釋。分離各層。將有機層以濃鹽水(10 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗製物係以管柱(24 g管柱，於己烷中之0-50%乙酸乙酯)純化，得到呈白色固體之兩種位置異構物(520 mg, 87%)。使該混合物進行下一步反應。LC-MS (ESI+): m/z 279.0 (M+H) +。
3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(萘-2-基)氰吡啶
Figure 02_image997
將3-氯-4-甲基-5-(2-萘基)吡啶-2-甲腈(520 mg, 1.87 mmol)溶解於DMF (10 mL)中並冷卻至0 oC。在0 °C下添加NaH (於礦物油中之60%懸浮液，90 mg, 2.24 mmol)並攪拌3分鐘。在0 oC下添加苯甲醇(0.23 mL, 2.24 mmol)。使該反應混合物升溫至室溫並攪拌30分鐘。以NH 4Cl水溶液(50 mL)終止反應，且將該混合物用乙酸乙酯萃取(20 mL X 3)。將有機層以濃鹽水(20 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗製物係以管柱(20 g，於己烷中之0-50%乙酸乙酯)純化，得到呈白色固體之產物(344 mg, 52%)。LC-MS (ESI+): m/z 351.0 (M+H) +。
3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(萘-2-基)吡啶甲酸
Figure 02_image999
將於乙醇(3.4 mL)中之3-苯甲基氧基-4-甲基-5-(2-萘基)吡啶-2-甲腈(344 mg, 0.98 mmol)及30% NaOH水溶液(4.1 mL, 9 mmol)混合物加熱至100 °C持續3小時。以LCMS監測反應進展。將反應物直接濃縮以去除乙醇。該混合物係以濃HCl (4 mL)酸化。將該固體藉由過濾分離出，以水洗滌並於空氣中乾燥，以得到黃色固體(360 mg, 100%)。粗製物未經進一步純化即進行下一步反應。LC-MS (ESI+): m/z 370.0 (M+H) +。
(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(萘-2-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image1001
將三乙胺(0.7 mL, 5.01 mmol)添加至於DCM (5 mL)中之3-苯甲基氧基-4-甲基-5-(2-萘基)吡啶-2-羧酸(185 mg, 0.50 mmol)、2-胺基乙酸乙酯鹽酸鹽(0.7512 mmol)及PyBOP (390 mg, 0.7512 mmol)混合物。將該反應混合物在室溫下攪拌。以LCMS監測反應進展。直接將反應物濃縮並將粗製材料以管柱(4 g管柱，於己烷中之0-100%乙酸乙酯)純化，得到黏性油(132 mg, 58%)。LC-MS (ESI+): m/z 455.0 (M+H) +。
(3-羥基-4-甲基-5-(萘-2-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image1003
將於EtOAc (1 mL)及甲醇(1 mL)中之2-[[3-苯甲基氧基-4-甲基-5-(2-萘基)吡啶-2-羰基]胺基]乙酸乙酯(132 mg, 0.2904 mmol)及10%鈀碳(5 mg)混合物用氫氣脫氣3分鐘且接著在室溫於氫氣環境下攪拌6小時。將該反應物以乙酸乙酯(20 mL)稀釋並過濾。將濾液濃縮以得到呈褐色油狀物之粗產物(100 mg, 100%)。粗製物未經進一步純化即用於下一反應中。LC-MS (ESI+): m/z 365.0 (M+H) +。
(3-羥基-4-甲基-5-(萘-2-基)吡啶甲醯基)甘胺酸
Figure 02_image1005
將於THF (1 mL)及甲醇(1 mL)中之粗製2-[[3-羥基-4-甲基-5-(2-萘基)吡啶-2-羰基]胺基]乙酸乙酯(105 mg, 0.2882 mmol)及1 N NaOH水溶液(1 mL)混合物加熱至45 °C持續1小時。LCMS指示起始材料已完全消耗掉。將反應物直接濃縮。殘餘物係以1 N HCl酸化並將沉澱物過濾。將固體溶解於DMSO中並以製備型HPLC (於水中之40-85% MeCN，經25分鐘)純化，得到呈白色固體之產物(52 mg, 52%)。LC-MS (ESI+): m/z 337.0 (M+H) +; 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.81 (s, 2H), 9.38 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 8.15 (s, 1H), 8.10 – 7.95 (m, 4H), 7.64-7.54 (m, 3H), 4.01 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 2.21 (s, 3H)。 實例34：化合物34之製備
3-氯-4-甲基-5-(喹啉-6-基)氰吡啶
Figure 02_image1007
在室溫下將Pd(dppf)Cl 2(0.032 g, 0.0248 mmol)添加至於DMF (8 mL)及0.8 mL水中之3,5-二氯-4-甲基-吡啶-2-甲腈(0.4 g, 2.14 mmol)、6-喹啉基硼酸(402 mg, 2.35 mmol)及K 2CO 3((354 mg, 2.57 mmol)攪拌混合物。將所得混合物於氮氣下加熱45 °C持續15小時。將該反應物以乙酸乙酯(20 mL)稀釋並過濾。將濾液濃縮並將所得粗製殘餘物以管柱(12 g，於己烷中之0-100%乙酸乙酯)純化，得到混合產物(360 mg，60%，位置異構物混合物)。LC-MS (ESI+): m/z 280.0 (M+H) +。
3-((4-甲氧基苯甲基)氧基)-4-甲基-5-(喹啉-6-基)氰吡啶
Figure 02_image1009
在室溫下將氫化鈉(於礦物油中之60%懸浮液，107.68 mg, 2.69 mmol)添加至於DMF (8.97 mL)中之3-氯-4-甲基-5-(6-喹啉基)吡啶-2-甲腈(502 mg, 1.79 mmol)、(4-甲氧基苯基)甲醇(0.33 mL, 2.69 mmol)攪拌溶液。將所得混合物在室溫下攪拌。在2小時之後，在0 °C下以水(20 mL)終止反應。將混合物用乙酸乙酯(20 mL)萃取。將有機層以濃鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗製物係以管柱(於己烷中之0-100%乙酸乙酯)純化，得到呈褐色液體之主產物(610 mg, 89%)。LC-MS (ESI+): m/z 382.0 (M+H) +。
3-羥基-4-甲基-5-(喹啉-6-基)吡啶甲酸
Figure 02_image1011
將於乙醇(6.1 mL)中之3-[(4-甲氧基苯基)甲氧基]-4-甲基-5-(6-喹啉基)吡啶-2-甲腈(610 mg, 1.6 mmol)及 30% NaOH水溶液(6.67 mL, 50.03 mmol)混合物加熱至100 °C持續3小時。將反應物直接濃縮以去除乙醇。將該混合物冷卻至0 °C並係以濃HCl酸化。藉由過濾將黃色固體分離。將固體溶解於甲醇(20 mL)中並濃縮得到黃色固體(160 mg)。LCMS指出MS/281。粗製物未經進一步純化即用於下一反應中。LC-MS (ESI+): m/z 281.0 (M+H) +。
(3-羥基-4-甲基-5-(喹啉-6-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image1013
在室溫下將三乙胺(0.79 mL, 5.71 mmol)添加至於DCM (10 mL)中之3-羥基-4-甲基-5-(6-喹啉基)吡啶-2-羧酸(160 mg, 0.57 mmol)、PyBOP (356 mg, 0.69 mmol)及2-胺基乙酸乙酯鹽酸鹽(96 mg, 0.69 mmol)攪拌混合物。該反應混合物係於室溫下攪拌過夜。將反應物直接濃縮。將粗製殘餘物以管柱(4 g，於己烷中之0-100%乙酸乙酯)純化，得到黃色發泡固體(58 mg, 28%)。LC-MS (ESI+): m/z 366.0 (M+H) +。
(3-羥基-4-甲基-5-(喹啉-6-基)吡啶甲醯基)甘胺酸
Figure 02_image1015
在室溫下將1N NaOH水溶液(0.4 mL, 0.40 mmol)添加至於THF (1 mL)中之2-[[3-羥基-4-甲基-5-(6-喹啉基)吡啶-2-羰基]胺基]乙酸乙酯(58 mg, 0.160 mmol)攪拌溶液。所得反應物係於室溫下攪拌2小時。LCMS指示起始材料已完全消耗掉。將反應混合物直接濃縮以去除THF。殘餘物係以 1 N HCl水溶液(0.5 mL)酸化並將黃色沉澱物過濾，以水洗滌。將固體懸浮於DMSO中，超音波震盪10分鐘。將該DMSO溶液過濾，產生白色固體，且將其在乙酸乙酯中進一步濕磨。再次過濾，得到白色固體(22 mg, 40%)。LC-MS (ESI+): m/z 338.0 (M+H) +; 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.84 (s, 1H), 9.42 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 8.97 (dd, J = 4.2, 1.7 Hz, 1H), 8.45 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 8.17 (s, 1H), 8.13 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.09 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 8.7, 2.0 Hz, 1H), 7.61 (dd, J = 8.3, 4.2 Hz, 1H), 4.01 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 2.21 (s, 3H)。 實例35：化合物35之製備
3,5-雙(苯甲氧基)-4-甲基氰吡啶
Figure 02_image1017
在0 °C下將苯甲醇(2.55 mL, 24.59 mmol)逐滴添加至於DMF (21.38 mL)中之NaH (於礦物油中之60%懸浮液，984 mg，24.59 mmol)攪拌懸浮液。該反應混合物係於0 °C下攪拌15分鐘。在0 °C下添加於DMF (2 mL)中之3,5-二氯-4-甲基-吡啶-2-甲腈(2 g, 10.69 mmol)。將所得紅色反應混合物在室溫下攪拌1小時。LCMS指示已完全轉換為所要產物質量(MS/331)。將反應物冷卻至0 °C並以水(50 mL)終止反應。將沉澱物過濾。將固體以管柱(於己烷中之0-100%乙酸乙酯)純化，得到白色固體(3.5 g, 99%)。LC-MS (ESI+): m/z 331.0 (M+H) +。
3,5-雙(苯甲氧基)-4-甲基吡啶甲酸
Figure 02_image1019
將於乙醇(35 mL)中之3,5-二苯甲氧基-4-甲基-吡啶-2-甲腈(3.5 g, 10.59 mmol)及30% NaOH水溶液(45 mL, 10.59 mmol)混合物加熱至100 °C持續2小時。將反應物直接濃縮以去除乙醇。將該混合物冷卻至0 °C並係以濃HCl (pH~3)酸化。將褐色沉澱物過濾，得到固體，將其以水(20 mL)洗滌並真空乾燥，得到淡褐色固體(3.2 g, 86%)。粗製物未經進一步純化即用於下一反應中。LC-MS (ESI+): m/z 350.0 (M+H) +。
(3,5-雙(苯甲氧基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image1021
在室溫下將PyBOP (5.72 g, 10.99 mmol)添加至於DCM (18.3 mL)中之3,5-二苯甲氧基-4-甲基-吡啶-2-羧酸(3.2 g, 9.16 mmol)懸浮液。將該混合物冷卻至0 °C，添加三乙胺(6.36 mL, 45.8 mmol)。在5分鐘之後，在0 °C下添加2-胺基乙酸乙酯鹽酸鹽(1.92 g, 13.74 mmol)。所得反應混合物係於室溫下攪拌過夜。直接將反應物濃縮並將粗製殘餘物以管柱(20 g，於己烷中之0-100%乙酸乙酯)純化，得到褐色液體(3.6 g, 90%)。LC-MS (ESI+): m/z 435.0 (M+H) +。
(3,5-二羥基-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image1023
將於THF (20.7 mL)及甲醇(20.7 mL)中之2-[(3,5-二苯甲氧基-4-甲基-吡啶-2-羰基)胺基]乙酸乙酯(3.6 g, 8.29 mmol)及10%鈀碳(0.26 mg, 8.29 mmol)混合物用氫氣脫氣5分鐘且在氫氣壓力下攪拌3小時。LCMS指示已完全轉換為MS/255。將反應混合物過濾，用甲醇沖洗，並將濾液濃縮以得到白色固體(2.1 g, 97%)。粗產物未經進一步純化即進行下一步反應。LC-MS (ESI+): m/z 255.0 (M+H) +。
(3-羥基-4-甲基-5-苯氧基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image1025
將於DMF (2 mL)中之2-[(3,5-二羥基-4-甲基-吡啶-2-羰基)胺基]乙酸乙酯(42 mg, 0.17 mmol)、碘苯(33.7 mg, 0.17 mmol)及K 2CO 3(68.3 mg, 0.50 mmol)混合物加熱至90 °C持續48小時。將反應物冷卻至室溫，以DCM (10 mL)稀釋並過濾。將濾液濃縮。粗製物經管柱(4 g，於己烷中之0-100%乙酸乙酯)純化，得到褐色油狀物(6 mg, 11%)。LC-MS (ESI+): m/z 331.0 (M+H) +。
(3-羥基-4-甲基-5-苯氧基吡啶甲醯基)甘胺酸
Figure 02_image1027
在室溫下將1 N NaOH水溶液(0.5 mL, 12.5 mmol)添加至於THF (2 mL)中之2-[(3-羥基-4-甲基-5-苯氧基-吡啶-2-羰基)胺基]乙酸乙酯(6 mg, 0.02 mmol)攪拌溶液。將所得反應混合物在室溫下攪拌2小時。將反應物濃縮並以5 M HCl (0.1 mL)酸化。將該混合物濃縮。將粗製殘餘物溶解於DMSO (1 mL)中並以製備型HPLC純化，得到白色固體(2.5 mg, 42%)。LCMS (ESI+): m/z 303.0 (M+H) +; 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.92 (s, 2H), 9.12 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.45 – 7.31 (m, 2H), 7.16 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.09 – 6.96 (m, 2H), 3.89 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 2.10 (s, 3H)。 實例36：化合物36之製備
(3-羥基-4-甲基-5-(((三氟甲基)磺醯基)氧基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image1029
在室溫下將三乙胺(1.34 mL, 9.68 mmol)及1,1,1-三氟-N-苯基-N-(三氟甲基磺醯基)甲烷磺醯胺(3.17 g, 8.87 mmol)依序添加至於乙醇(26.9 mL)中之2-[(3,5-二羥基-4-甲基-吡啶-2-羰基)胺基]乙酸乙酯(2.05 g, 8.06 mmol)攪拌懸浮液。所得反應混合物係於32 °C下攪拌過夜。該反應混合物轉變為澄清褐色均質溶液。TLC (於己烷中之30%乙酸乙酯)指示已完全轉換。直接將反應物濃縮，並將粗製物以管柱(12 g，於DCM中之0-10% MeOH)純化，得到褐色液體。由於持續有雜質，產物再以管柱(12 g，於己烷中之0-70%乙酸乙酯)純化以得到淡黃色液體。LC-MS (ESI+): m/z 387.0 (M+H) +。
(3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-5-((((三氟甲基)磺醯基)氧基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image1031
在0 °C下將DIPEA (2.52 mL, 14.24 mmol)及氯(甲氧基)甲烷(0.65 mL, 8.54 mmol)依序添加至於DCM (32.4 mL)中之2-[[3-羥基-4-甲基-5-(三氟甲基磺醯基氧基)吡啶-2-羰基]胺基]乙酸乙酯(2.2 g, 5.7 mmol)攪拌溶液。將所得反應混合物在0 °C下攪拌15分鐘且接著使其升溫至室溫持續1小時。TLC (於己烷中之30%乙酸乙酯)指示起始材料已完全消耗掉。以冷水(20 mL)終止反應。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗製物係以管柱(12 g，於己烷中之0-100%乙酸乙酯)純化，得到白色固體(1.5 g, 62%)。LC-MS (ESI+): m/z 431.0 (M+H) +。
(5-(3,5-二氯苯基)-3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image1033
將於1,4-二噁烷(2 mL)及水(0.5 mL)中之(3,5-二氯苯基)硼酸(33.3 mg, 0.17 mmol)、2-[[3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-5-(三氟甲基磺醯基氧基)吡啶-2-羰基]胺基]乙酸乙酯(50 mg, 0.12 mmol)及Pd(dppf)Cl 2(8.5 mg, 0.01 mmol)混合物加熱至85 °C持續20小時。LCMS指出存在有所要產物(MS/428)。將該反應物以甲醇(10 mL)稀釋並過濾。將濾液濃縮。粗產物係以管柱(於己烷中之0-100%乙酸乙酯)純化，得到期望產物與脫保護的產物。合併此二產物並濃縮以得到23 mg。使該混合物進行下一步反應。LC-MS (ESI+): m/z 428.0 (M+H) +。
(5-(3,5-二氯苯基)-3-羥基-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸
Figure 02_image1035
在室溫下將TFA (0.1 mL, 0.05 mmol)添加至於DCM (2 mL)中之2-[[5-(3,5-二氯苯基)-3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-吡啶-2-羰基]胺基]乙酸乙酯(23 mg, 0.05 mmol)攪拌溶液。所得混合物係於室溫下攪拌過夜。LC-MS指示已完全轉換。將反應物直接濃縮至乾燥。在室溫下將殘餘物溶解於THF (2 mL)中並以 1 N NaOH水溶液(0.2 mL, 0.05 mmol)處理3小時。LCMS指示已完全轉換。將反應物濃縮，以5 N HCl (0.11 mL)酸化，並濃縮至乾燥。將殘餘物溶解於DMSO (1 mL)中並過濾。濾液係以HPLC純化，得到白色固體(7.6 mg, 36%)。LC-MS (ESI+): m/z 356.0 (M+H) +; 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.83 (s, 1H), 9.36 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.77 (dd, J = 5.2, 3.1 Hz, 2H), 7.45 (dd, J = 8.3, 2.1 Hz, 1H), 3.96 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 2.14 (s, 3H)。 實例37：化合物37之製備
(3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-5-(4-甲基-2-苯基噻唑-5-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image1037
將於1,4-二噁烷(3 mL)及水(1 mL)中之4-甲基-2-苯基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)噻唑(162.8 mg, 0.54 mmol)、2-[[3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-5- (三氟甲基磺醯基氧基)吡啶-2-羰基]胺基]乙酸乙酯(155.1 mg, 0.36 mmol)、Pd(dppf)Cl 2(26.4 mg, 0.04 mmol)及K 3PO 4(114.7 mg, 0.54 mmol)混合物加熱至85 °C持續16小時。將反應物冷卻至室溫，過濾並用乙酸乙酯沖洗。將濾液濃縮並將粗製殘餘物以管柱(4 g，於己烷中之0-100%乙酸乙酯)純化，得到淡褐色油狀物(64 mg, 39%)。LC-MS (ESI+): m/z 456.0 (M+H) +。
(3-羥基-4-甲基-5-(4-甲基-2-苯基噻唑-5-基)吡啶甲醯基)甘胺酸
Figure 02_image1039
在室溫下將1 N NaOH (0.6 mL, 15 mmol)添加至於THF (3 mL)及甲醇(1 mL)中之2-[[3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-5-(4-甲基-2-苯基-噻唑-5-基)吡啶-2-羰基]胺基]乙酸乙酯(64 mg, 0.14 mmol)攪拌溶液並將所得反應混合物在室溫下攪拌30分鐘。LCMS指出已完全酯水解(MS/428)。以1 N HCl (0.8 mL)將反應物酸化並攪拌30分鐘。將反應物直接濃縮以去除THF及甲醇。將沉澱物過濾。固體係以製備型HPLC (於水中之30-85% MeCN，經25分鐘)純化，得到白色固體(11 mg, 20%)。LC-MS (ESI+): m/z 384.0 (M+H) +; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.08 (s, 1H), 8.00 – 7.90 (m, 1H), 7.55 – 7.46 (m, 2H), 7.55 – 7.46 (m, 3H), 4.16 (s, 2H), 2.31 (s, 3H), 2.22 (s, 3H)。 實例38：化合物38之製備
(5-(1-(4-氟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image1041
將於1,4-二噁烷(3 mL)及水(1 mL)中之2-[[3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-5-(三氟甲基磺醯基氧基)吡啶-2-羰基]胺基]乙酸乙酯(200 mg, 0.46 mmol)、1-(4-氟苯基)-3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)吡唑(281 mg, 0.93 mmol)、Pd(dppf)Cl 2(34 mg, 0.05 mmol)及K 3PO 4(148 mg, 0.70 mmol)混合物加熱至80 °C過夜。將反應物冷卻至室溫，以乙酸乙酯(20 mL)稀釋，通過矽藻土墊過濾。將濾液濃縮，粗製物經管柱(於己烷中之0-100%乙酸乙酯)純化，得到褐色殘餘物(80 mg, 38%)。LC-MS (ESI+): m/z 384.0 (M+H) +。
(5-(1-(4-氟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-羥基-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸
Figure 02_image1043
使2-[[5-[1-(4-氟苯基)-3-甲基-吡唑-4-基]-3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-吡啶-2-羰基]胺基]乙酸乙酯(80 mg, 0.18 mmol)於甲醇(1 mL)中懸浮並添加5 N HCl (0.1 mL, 0.50 mmol)。將該反應混合物在室溫下攪拌1小時。將反應物直接濃縮。將粗製物溶解於THF (3 mL)中並添加1 N NaOH (1.5 mL, 37.5 mmol)。該反應混合物係於室溫下攪拌過夜。反應物係以5 N HCl水溶液酸化並直接濃縮。將殘餘物溶解於DMSO (1.5 mL)中，過濾並以製備型HPLC純化，得到灰白色固體(8 mg, 12%)。LC-MS (ESI+): m/z 385.0 (M+H) +; 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.77 (s, 1H), 9.34 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 8.72 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.73 (dd, J = 9.0, 1.3 Hz, 2H), 7.54 (dd, J = 14.8, 8.0 Hz, 1H), 7.24 – 7.05 (m, 1H), 3.98 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 2.22 (s, 3H), 2.18 (s, 3H)。 實例39：化合物39之製備
(5-(1-(3-氟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image1045
將於1,4-二噁烷(3 mL)及水(1 mL)中之2-[[3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-5-(三氟甲基磺醯基氧基)吡啶-2-羰基]胺基]乙酸乙酯(200 mg, 0.46 mmol)、1-(3-氟苯基)-3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)吡唑(281 mg, 0.93 mmol)、Pd(dppf)Cl 2(34 mg, 0.05 mmol)及K 3PO 4(296 mg, 1.40 mmol)混合物加熱至80 °C過夜。將反應物冷卻至室溫，以乙酸乙酯(20 mL)稀釋，並通過矽藻土墊過濾。將濾液濃縮，粗製殘餘物經管柱(於己烷中之0-100%乙酸乙酯)純化，得到褐色油狀物(110 mg, 59%)；LC-MS (ESI+): m/z 457.0 (M+H) +。
(5-(1-(3-氟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-羥基-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸
Figure 02_image1047
在室溫下將5 N HCl (0.1 mL, 0.24 mmol)添加至於甲醇(2 mL)中之2-[[5-[1-(3-氟苯基)-3-甲基-吡唑-4-基]-3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-吡啶-2-羰基]胺基]乙酸乙酯(110 mg, 0.24 mmol)攪拌溶液。將該反應混合物在室溫下攪拌1小時。將該反應物濃縮至乾燥。在室溫下將粗製殘餘物溶解於THF (3 mL)中並添加 1 N NaOH水溶液(1.5 mL, 37.5 mmol)。所得反應混合物係於室溫下攪拌過夜。反應物係以5 N HCl酸化並直接濃縮。將粗產物溶解於DMSO (1.5 mL)中，過濾，並以製備型HPLC純化，得到白色固體(8 mg, 8.4%)。LC-MS (ESI+): m/z 385.0 (M+H) +; 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.75 (s, 1H), 9.35 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.89 (ddd, J = 6.9, 5.2, 2.8 Hz, 2H), 7.39 – 7.31 (m, 2H), 4.00 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 2.21 (s, 3H), 2.18 (s, 3H)。 實例40：化合物40之製備
(3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-5-(1-苯基乙烯基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image1049
將於1,4-二噁烷(3 mL)中之1-苯基乙烯基硼酸(77.4 mg, 0.52 mmol)、2-[[3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-5-(三氟甲基磺醯基氧基)吡啶-2-羰基]胺基]乙酸乙酯(150 mg, 0.35 mmol)、Pd(dppf)Cl 2(25.5 mg, 0.03 mmol)、K 3PO 4(222 mg, 1.05 mmol)及水(0.03 mL, 1.74 mmol)混合物加熱至80 °C過夜。將反應物冷卻至室溫，以稀釋乙酸乙酯(20 mL)並過濾。將濾液濃縮。所得粗製殘餘物經管柱(於己烷中之0-100%乙酸乙酯)純化，得到褐色油狀物(32 mg, 24%)；LC-MS (ESI+): m/z 385.0 (M+H) +。
(5-苯甲醯基-3-羥基-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image1051
在室溫下向於THF (2 mL)、丙酮(1 mL)及水(1 mL)中之(3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-5-(1-苯基乙烯基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(32 mg, 0.09 mmol)及NaIO 4(201 mg, 0.94 mmol)攪拌混合物添加於tBuOH (0.12 mL)中之2.5% OsO 4。將所得反應混合物在室溫下攪拌3天。將反應物用乙酸乙酯(20 mL)稀釋，過濾，並用乙酸乙酯(20 mL)沖洗。將濾液以濃鹽水(15 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗產物(32 mg)未經進一步純化即進行下一步反應；LC-MS (ESI+): m/z 343.0 (M+H) +。
(5-苯甲醯基-3-羥基-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸
Figure 02_image1053
在室溫下將1 N NaOH水溶液(0.5 mL, 12.5 mmol)添加至於THF (2 mL)中之2-[(5-苯甲醯基-3-羥基-4-甲基-吡啶-2-羰基)胺基]乙酸乙酯(32 mg, 0.090 mmol)攪拌溶液。該反應混合物係於室溫下攪拌1小時。反應物係以5 N HCl (0.11 mL)酸化並直接濃縮。將殘餘物溶解於DMSO (1 mL)中並以製備型HPLC純化，得到白色固體(7 mg，21%，經2步驟)。LC-MS (ESI+): m/z 315.0 (M+H) +; 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.90 (s, 1H), 12.81 (bs, 1H), 9.49 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.83 – 7.77 (m, 2H), 7.73 (dd, J = 10.5, 4.3 Hz, 1H), 7.57 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 4.01 (d, J = 6.2 Hz, 2H), 2.07 (s, 3H)。 實例41：化合物41之製備
(3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-5-((三甲矽基)乙炔基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image1055
在室溫下將三乙胺(0.81 mL, 5.81 mmol)及乙炔基(三甲基)矽烷(0.32 mL, 2.32 mmol)添加至於THF (11.6 mL)中之2-[[3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-5-(三氟甲基磺醯基氧基)吡啶-2-羰基]胺基]乙酸乙酯(500 mg, 1.16 mmol)、Pd(PPh 3) 2Cl 2(81.6 mg, 0.12 mmol)及CuI (44.3 mg, 0.23 mmol)攪拌混合物。所得反應混合物係於室溫下攪拌2小時。將該反應混合物以乙酸乙酯(25 mL)稀釋並通過矽藻土墊過濾。將濾液濃縮。將粗製殘餘物溶解於乙酸乙酯(25 mL)中，以水(10 mL)、濃鹽水(10 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，並濃縮。粗產物係以管柱(12 g，於己烷中之0-70%乙酸乙酯)純化，得到褐色油狀物(421 mg, 97%)；LC-MS (ESI+): m/z 378.0 (M+H) +。
(5-乙炔基-3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image1057
在0 °C下將K 2CO 3(15.4 mg, 0.11 mmol)添加至於甲醇(5.56 mL)中之2-[[3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-5-(2-三甲矽基乙炔基)吡啶-2-羰基]胺基]乙酸乙酯(421 mg, 1.11 mmol)攪拌溶液。將所得反應混合物在0 °C下攪拌30分鐘。將該反應物以乙酸乙酯(10 mL)稀釋並過濾。將濾液濃縮並將粗製殘餘物以管柱(4 g，於己烷中之0-100%乙酸乙酯)純化，得到無色油狀物(265 mg, 77%)；LC-MS (ESI+): m/z 307.0 (M+H) +。
(5-(1-(4-氟苯基)-1H-1,2,3-***-4-基)-3-羥基-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image1059
在室溫下將抗壞血酸鈉(5.3 mg, 0.03 mmol)及CuSO 4(2.1 mg, 0.01 mmol)添加至於三級丁醇(1 mL)、甲醇(1 mL)及水(0.5 mL)中之2-[[5-乙炔基-3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-吡啶-2-羰基]胺基]乙酸甲酯(39.1 mg, 0.13 mmol)、於第三丁基甲基醚中之(4-氟苯基)疊氮(0.27 mL, 0.130 mmol)攪拌混合物。將所得反應混合物在室溫下攪拌過夜。LCMS指示已完全轉換為MS/386。將該反應物以乙酸乙酯(15 mL)稀釋並過濾。將濾液濃縮並將所得粗製殘餘物以管柱(4 g，於己烷中之0-100%乙酸乙酯)純化，得到白色固體(50 mg, 69%)；LC-MS (ESI+): m/z 400.0 (M+H) +。
(5-(1-(4-氟苯基)-1H-1,2,3-***-4-基)-3-羥基-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸
Figure 02_image1061
在室溫下將1 N NaOH水溶液(0.41 mL, 0.41 mmol)添加至於THF (3 mL)及甲醇(1 mL)中之2-[[5-[1-(4-氟苯基)***-4-基]-3-羥基-4-甲基-吡啶-2-羰基]胺基]乙酸甲酯(18.5 mg, 0.05 mmol)攪拌混合物。將所得白色混濁混合物在室溫下攪拌1小時。LCMS指示起始材料已完全消耗掉。將反應物直接濃縮，殘餘物係以1 N HCl (0.6 mL)酸化。將沉澱物過濾並以水洗滌。固體係於高真空下乾燥以得到白色固體(16 mg, 85%)。LC-MS (ESI+): m/z 371.0 (M+H) +; 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 12.88 (s, 1H), 12.80 (s, 1H), 9.40 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 9.27 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.08 – 8.00 (m, 2H), 7.58 – 7.45 (m, 2H), 4.01 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 2.47 (s, 3H)。 實例42：化合物42之製備
(5-(1-(4-氯苯乙基)-1H-1,2,3-***-4-基)-3-羥基-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image1063
將於甲醇(1 mL)、三級丁醇(1 mL)及水(0.5 mL)中之2-[[5-乙炔基-3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-吡啶-2-羰基]胺基]乙酸乙酯(50 mg, 0.16 mmol)、2-(4-氯苯基)乙基亞胺基-亞胺基-銨(59.6 mg, 0.33 mmol)、CuSO 4(2.6 mg, 0.02 mmol)及抗壞血酸鈉(12.9 mg, 0.07 mmol)混合物於室溫下攪拌過夜。反應混合物係以於DCM (20 mL)中之50% MeOH稀釋並過濾。將濾液濃縮。粗產物(145 mg)未經進一步純化即進行下一步反應。LC-MS (ESI+): m/z 444.0 (M+H) +。
(5-(1-(4-氯苯乙基)-1H-1,2,3-***-4-基)-3-羥基-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸
Figure 02_image1065
在室溫下將1N NaOH水溶液(0.24 mL, 6.03 mmol)添加至於THF (3 mL)中之2-[[5-[1-[2-(4-氯苯基)乙基]***-4-基]-3-羥基-4-甲基-吡啶-2-羰基]胺基]乙酸乙酯(70 mg, 0.16 mmol)攪拌溶液。該反應混合物係於室溫下攪拌1小時。以1 N HCl (0.52 mL)終止反應。將混合物直接濃縮至乾燥。將固體溶解於DMSO (1 mL)中並以製備型HPLC純化，得到呈白色固體之所要產物(8 mg, 12%)。LC-MS (ESI+): m/z 416.0 (M+H) +; 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.23 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.19 – 7.12 (m, 2H), 7.03 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 4.63 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 4.02 (s, 2H), 3.19-3.13 (m, J = 7.0 Hz, 2H), 2.16 (s, 3H)。 實例43：化合物43之製備
(5-(1-(3-(4-氯苯基)丙基)-1H-1,2,3-***-4-基)-3-羥基-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image1067
將於三級丁醇(1 mL)、甲醇(1 mL)及水(0.50 mL)中之2-[[5-乙炔基-3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-吡啶-2-羰基]胺基]乙酸乙酯(50 mg, 0.16 mmol)、3-(4-氯苯基)丙基亞胺基-亞胺基-銨(64.2 mg, 0.33 mmol)、CuSO 4(2.6 mg, 0.02 mmol)及抗壞血酸鈉(12.9 mg, 0.07 mmol)混合物於室溫下攪拌過夜。將該反應物以DCM (20 mL)稀釋並過濾。將濾液濃縮，且所得粗產物(150 mg)未經進一步純化即進行下一步反應；LC-MS (ESI+): m/z 458.0 (M+H) +。
(5-(1-(3-(4-氯苯基)丙基)-1H-1,2,3-***-4-基)-3-羥基-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸
Figure 02_image1069
在室溫下將1N NaOH水溶液(0.5 mL, 12.5 mmol)添加至於THF (3 mL)中之2-[[5-[1-[3-(4-氯苯基)丙基]***-4-基]-3-羥基-4-甲基-吡啶-2-羰基]胺基]乙酸乙酯(75 mg, 0.16 mmol)攪拌溶液。攪拌該反應混合物1小時。LCMS指示已完全轉換。以1 N HCl (0.52 mL)終止反應。將該混合物濃縮至乾燥。將固體溶解於DMSO (1 mL)中並以製備型HPLC純化，得到白色固體(36 mg, 49%)。LC-MS (ESI+): m/z 430.0 (M+H) +; 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.84 (s, 1H), 9.37 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 8.66 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 7.38 – 7.30 (m, 2H), 7.26 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 4.46 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 3.99 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 2.67 – 2.58 (m, 2H), 2.38 (s, 3H), 2.26 – 2.15 (m, 2H)。 實例44：化合物44之製備
(3-羥基-4-甲基-5-(1-苯基-1H-1,2,3-***-4-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image1071
在室溫下將CuSO 4(2.8 mg, 0.02 mmol)及抗壞血酸鈉(14.0 mg, 0.07 mmol)添加至於三級丁醇(2 mL)、甲醇(2 mL)及水(1 mL)中之2-[[5-乙炔基-3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-吡啶-2-羰基]胺基]乙酸乙酯(54 mg, 0.18 mmol)及0.5 M於第三丁基甲基醚中之疊氮苯(0.71 mL, 0.350 mmol)攪拌混合物。所得反應混合物係於室溫下攪拌過夜。LCMS指出產物已形成(MS/382)。將該反應物以DCM (20 mL)稀釋，過濾，並將濾液濃縮。將所得粗製殘餘物以管柱(4 g，於己烷中之0-100%乙酸乙酯)濃縮，得到白色固體(46 mg, 68%)。LCMS指出產物為甲酯與乙酯之混合物(MS/368及/MS/382)。
(3-羥基-4-甲基-5-(1-苯基-1H-1,2,3-***-4-基)吡啶甲醯基)甘胺酸
Figure 02_image1073
在室溫下將1N NaOH水溶液(1 mL, 25 mmol)添加至於THF (3 mL)及甲醇(1 mL)中之2-[[3-羥基-4-甲基-5-(1-苯基***-4-基)吡啶-2-羰基]胺基]乙酸乙酯(46 mg, 0.12 mmol)攪拌溶液。所得反應混合物係於室溫下攪拌2小時。以 1 N HCl水溶液(1.2 mL)終止反應，並在減壓下濃縮。將粗製物懸浮於水(10 mL)中並藉由過濾將所形成的固體分離。將該固體懸浮於乙酸乙酯(2 mL)中，以超音波震盪，藉由過濾將固體分離，得到灰白色固體(35 mg, 78%)。LC-MS (ESI+): m/z 354.0 (M+H) +; 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.89 (s, 1H), 12.82 (bs, 1H), 9.43 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 9.30 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.00 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.65 (t, J = 7.9 Hz, 2H), 7.54 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 4.01 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 2.47 (s, 3H)。 實例45：化合物45之製備
(3-羥基-4-甲基-5-乙烯基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image1075
將於DMF (5 mL)中之2-[[3-(2-甲氧基乙氧基甲氧基)-4-甲基-5-(三氟甲基磺醯基氧基)吡啶-2-羰基]胺基]乙酸乙酯(300 mg, 0.63 mmol)、三丁基(乙烯基)錫烷(0.22 mL, 0.76 mmol)、LiCl (80.4 mg, 1.9 mmol)及Pd(PPh 3) 2Cl 2(22.5 mg, 0.03 mmol)混合物加熱至69 °C持續2小時。將反應物冷卻至室溫，並在室溫下保持攪拌3天。將反應物濃縮並將所得粗製殘餘物以管柱(4 g，於己烷中之0-100%乙酸乙酯)純化，得到呈褐色油狀物之產物 (152 mg, 91%)；LC-MS (ESI+): m/z 265.0 (M+H) +。
(5-甲醯基-3-羥基-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image1077
在室溫下將2.5 M OsO 4之叔丁醇(0.2 mL)溶液添加至於丙酮(1 mL)、THF (2 mL)及水(1 mL)中之2-[(3-羥基-4-甲基-5-乙烯基-吡啶-2-羰基)胺基]乙酸乙酯(152 mg, 0.58 mmol)、吡啶(0.1 mL, 0.58 mmol)及NaIO 4(615 mg, 2.88 mmol)攪拌混合物。所得反應混合物係於室溫下攪拌24小時。將該反應物以乙酸乙酯(20 mL)稀釋並過濾。將濾液濃縮並將所得粗製物以管柱(於己烷中之0-100%乙酸乙酯)純化，得到白色固體(120 mg, 78%)；LC-MS (ESI+): m/z 267.0 (M+H) +。
(5-(2-(3,5-二氯苯基)-2H-四唑-5-基)-3-羥基-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image1079
將於DCM (10 mL)中之2-[(5-甲醯基-3-羥基-4-甲基-吡啶-2-羰基)胺基]乙酸乙酯(120 mg, 0.45 mmol)及4-甲基苯磺醯肼(100 mg, 0.54 mmol)在室溫下攪拌30分鐘(形成澄清溶液)。將反應物直接濃縮並將粗製殘餘物溶解於吡啶(4 mL)中且冷卻至-5 °C。在-5 °C至0 °C下逐滴添加於乙醇(4 mL)及水(2.5 mL)中之[(E)-(3,5-二氯苯基)偶氮基]-四氟-硼(235 mg, 0.90 mmol)。將所得反應混合物在室溫下攪拌過夜。將該反應物以水(20 mL)稀釋並以乙酸乙酯萃取(20 mL X 2)。將有機層濃縮並將粗製殘餘物以管柱(4 g，於DCM中之0-100%乙酸乙酯)純化，得到紅色固體(94 mg, 46%)；LC-MS (ESI+): m/z 452.0 (M+H) +。
(5-(2-(3,5-二氯苯基)-2H-四唑-5-基)-3-羥基-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸
Figure 02_image1081
在室溫下將1N NaOH水溶液(0.5 mL, 12.5 mmol)添加至於THF (3 mL)中之2-[[5-[2-(3,5-二氯苯基)四唑-5-基]-3-羥基-4-甲基-吡啶-2-羰基]胺基]乙酸乙酯(94 mg, 0.21 mmol)攪拌溶液。反應物係於室溫下攪拌30分鐘。添加甲醇(1 mL)並將該反應混合物於室溫下再攪拌30分鐘。LCMS指示已完全轉換。將反應物直接濃縮。粗製殘餘物係以1 N HCl酸化並將所得沉澱物過濾。將固體懸浮於乙醇(10 mL)中，加熱至90 °C持續30分鐘，冷卻至室溫，並藉由過濾收集。將純固體在真空下乾燥，得到白色固體(9.5 mg, 10%)。LC-MS (ESI+): m/z 424.0 (M+H) +; 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 13.02 (s, 1H), 12.86 (bs, 1H), 9.54 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 8.77 (s, 1H), 8.27 (d, J = 1.8 Hz, 2H), 7.98 (t, J = 1.8 Hz, 1H), 4.01 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 2.59 (s, 3H)。 實例46：化合物46之製備
3,5-二氯-4-乙基吡啶1-氧化物
Figure 02_image1083
在室溫下將3-氯苯甲過氧酸(1.41 g, 8.2 mmol)溶解於DCM (20 mL)中並逐滴添加至於DCM (15.8 mL)中之3,5-二氯-4-乙基-吡啶(1.11 g, 6.31 mmol)攪拌溶液。所得混合物係於室溫下攪拌過夜。以固體K 2CO 3(1.13 g, 8.2 mmol)終止反應並攪拌1小時。將沉澱物過濾並用DCM (25 mL)沖洗。將濾液濃縮以得到白色固體(1.2 g, 99%)。粗製物未經進一步純化即進行下一步反應；LC-MS (ESI+): m/z 193.0 (M+H) +。
3,5-二氯-4-乙基氰吡啶
Figure 02_image1085
將於MeCN (20 mL)中之3,5-二氯-4-乙基-吡啶1-氧化物(1.2 g, 6.25 mmol)、三乙胺(1.3 mL, 9.37 mmol)及三甲矽基甲腈(1.17 mL, 9.37 mmol)混合物加熱至80 °C過夜。將反應物冷卻至室溫，並以NaHCO 3水溶液(10 mL)終止反應。將該混合物以乙酸乙酯(20 mL)稀釋。分離各層，將有機層以濃鹽水(10 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗製物係以管柱(12 g管柱，於己烷中之0-50%乙酸乙酯)純化得到淡褐色液體(1.03 g, 82%)；LC-MS (ESI+): m/z 202.0 (M+H) +。
3-氯-5-(3-氯苯基)-4-乙基氰吡啶
Figure 02_image1087
將於DMF (5 mL)及水(0.50 mL)中之3,5-二氯-4-乙基-吡啶-2-甲腈(490 mg, 2.44 mmol)、(3-氯苯基)硼酸(381 mg, 2.44 mmol)、Pd(dppf)Cl 2(89 mg, 0.12 mmol)及K 2CO 3(504 mg, 3.66 mmol)混合物用氮氣脫氣且加熱至45 °C過夜。將反應物用乙酸乙酯(20 mL)稀釋，通過矽藻土墊過濾，並用乙酸乙酯(20 mL)沖洗。將濾液濃縮。粗產物係以管柱(12 g，於己烷中之0-100%乙酸乙酯)純化，得到淡褐色油狀物(670 mg, 99%)；LC-MS (ESI+): m/z 278.0 (M+H) +。
5-(3-氯苯基)-4-乙基-3-((4-甲氧基苯甲基)氧基)氰吡啶
Figure 02_image1089
在0 °C下將於礦物油中之60%氫化鈉懸浮液(193.4 mg, 4.83 mmol)添加至於DMF (7 mL)中之(4-甲氧基苯基)甲醇(0.6 mL, 4.83 mmol)及3-氯-5-(3-氯苯基)-4-乙基-吡啶-2-甲腈(670 mg, 2.42 mmol)冰***液。攪拌所得反應混合物2小時。以冷水(20 mL)終止反應。將混合物用乙酸乙酯萃取(20 mL X 3)。合併的有機層係經Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗產物係以管柱(12 g，於己烷中之0-60%乙酸乙酯)純化，得到白色發泡固體(560 mg, 61%)；LC-MS (ESI+): m/z 379.0 (M+H) +。
5-(3-氯苯基)-4-乙基-3-((4-甲氧基苯甲基)氧基)吡啶甲酸
Figure 02_image1091
將於乙醇(5 mL)中之5-(3-氯苯基)-4-乙基-3-[(4-甲氧基苯基)甲氧基]吡啶-2-甲腈(560 mg, 1.48 mmol)及 30%水溶液(6.27 mL, 47.02 mmol)混合物加熱至100 °C持續2小時。將反應物冷卻至室溫並直接濃縮以去除乙醇。反應混合物係以6 N HCl酸化並將所得沉澱物過濾。將固體溶解於甲醇中並濃縮以得到褐色殘餘物(610 mg)。粗製物未經進一步純化即進行下一步反應。LC-MS (ESI+): m/z 398.0 (M+H) +。
(5-(3-氯苯基)-4-乙基-3-((4-甲氧基苯甲基)氧基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image1093
在室溫下將三乙胺(0.52 mL, 3.77 mmol)添加至於DCM (5 mL)中之5-(3-氯苯基)-4-乙基-3-[(4-甲氧基苯基)甲氧基]吡啶-2-羧酸(300 mg, 0.75 mmol)、2-胺基乙酸乙酯鹽酸鹽(210 mg, 1.51 mmol)及PyBOP (470 mg, 0.90 mmol)混合物。將所得反應混合物在室溫下攪拌3天。將反應物濃縮，將粗製殘餘物以管柱(4 g，於己烷中之0-100%乙酸乙酯)純化，得到淡褐色液體(240 mg, 65%)；LC-MS (ESI+): m/z 483.0 (M+H) +。
(5-(3-氯苯基)-4-乙基-3-羥基吡啶甲醯基)甘胺酸
Figure 02_image1095
在室溫下將濃HCl (0.1 mL, 1.2 mmol)添加至於乙醇(1.5 mL)中之2-[[5-(3-氯苯基)-4-乙基-3-[(4-甲氧基苯基)甲氧基]吡啶-2-羰基]胺基]乙酸乙酯(140 mg, 0.29 mmol)攪拌溶液。所得反應混合物係於室溫下攪拌2小時。LCMS指出PMB已完全脫保護。將反應物於減壓下直接濃縮。在室溫下將殘餘物溶解於THF (1 mL)及甲醇(1 mL)中並以 1 N NaOH (1.5 mL)處理2小時。LCMS指示已完全轉換為所要產物。將反應物直接濃縮以去除THF及甲醇。該水溶液係以1 N HCl (1.52 mL)酸化，並將所得沉澱物過濾。將粗製固體溶解於DMSO (2 mL)中並以製備型HPLC (於水中之30-85%乙腈，經25分鐘)純化，得到白色固體(62 mg, 60%)。LC-MS (ESI+): m/z 335.0 (M+H)+; 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 12.84 (s, 2H), 9.39 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.60 – 7.53 (m, 2H), 7.50 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 7.41 – 7.35 (m, 1H), 4.01 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 2.59 – 2.53 (q, J = 5.4 Hz ,2H), 1.05 (t, J = 7.5 Hz, 3H)。 實例47：化合物47之製備
(3-羥基-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醯基)-L-丙胺酸
Figure 02_image1097
該化合物係根據(3-羥基-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)吡啶甲醯基)甘胺酸之製備程序來合成。LC-MS (ESI+): m/z 367 (M+H)+; 1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.90 (brs, 1H), 12.77 (s, 1H), 9.17 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 8.93 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.94 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.55 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 7.37 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 4.51 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 2.37 (s, 3H), 1.47 (d, J = 7.2 Hz, 3H)。 實例48：化合物48之製備
(3-羥基-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醯基)-D-丙胺酸
Figure 02_image1099
該化合物係根據(3-羥基-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)吡啶甲醯基)甘胺酸之製備程序來合成。LC-MS (ESI+): m/z 367 (M+H)+; 1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.88 (brs, 1H), 12.78 (s, 1H), 9.17 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 8.92 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.94 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.55 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 7.37 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 4.51 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 2.37 (s, 3H), 1.47 (d, J = 7.2 Hz, 3H)。 實例49：化合物49之製備
(5-(5-氟-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-3-((2-甲氧基乙氧基)甲氧基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image1101
將於1,4-二噁烷(3 mL)及水(0.2000 mL)中之2-[[3-(2-甲氧基乙氧基甲氧基)-4-甲基-5-(三氟甲基磺醯基氧基)吡啶-2-羰基]胺基]乙酸乙酯(200 mg, 0.4200 mmol)、5-氟-1-苯基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)吡唑(240 mg, 0.830 mmol)、Pd(dppf)Cl 2.DCM (34.4 mg, 0.040 mmol)及K 3PO 4(268 mg, 1.26 mmol)混合物用氮氣脫氣且加熱至95 °C過夜。LCMS指出MS/487。將反應物冷卻至室溫。將反應物用甲醇(10 mL)稀釋並過濾，將濾液濃縮，將粗製物以管柱(4 g，於己烷中之0-100%乙酸乙酯)純化，得到褐色油狀物(60 mg, 39%)。LC-MS (ESI+): m/z 487.0 (M+H) +。
(5-(5-氟-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-3-羥基-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸
Figure 02_image1103
在室溫下將於二噁烷(0.2 mL, 0.1200 mmol)中之4 M HCl添加至於乙醇(2 mL)中之2-[[5-(5-氟-1-苯基-吡唑-4-基)-3-(2-甲氧基乙氧基甲氧基)-4-甲基-吡啶-2-羰基]胺基]乙酸乙酯(60 mg, 0.120 mmol)攪拌溶液。將所得反應混合物在室溫下攪拌1小時。LCMS指示MEM已完全脫保護。將反應物直接濃縮，將粗製物溶解於THF (2 mL)及甲醇(1 mL)中，並添加 1 N NaOH水溶液(0.5 mL)。反應物係於室溫下攪拌2小時。LCMS指出已完全酯水解。將反應物直接濃縮，以 1 N HCl水溶液酸化，並將沉澱物過濾。將固體溶解於DMSO中並以製備型HPLC純化，得到灰白色固體(11 mg, 23%)。LC-MS (ESI+): m/z 371.0 (M+H) +; 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.80 (s, 2H), 9.36 (t, J= 6.2 Hz, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.06 (d, J= 3.1 Hz, 1H), 7.73 (d, J= 8.3 Hz, 2H), 7.59 (t, J= 7.9 Hz, 2H), 7.47 (t, J= 7.4 Hz, 1H), 4.00 (d, J= 6.1 Hz, 2H), 2.29 (d, J= 1.1 Hz, 3H)。 實例50：化合物50之製備
(3-羥基-4-甲基-5-(5-甲基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯
Figure 02_image1105
將於1,4-二噁烷(5 mL)及水(0.25 mL)中之2-[[3-(2-甲氧基乙氧基甲氧基)-4-甲基-5-(三氟甲基磺醯基氧基)吡啶-2-羰基]胺基]乙酸乙酯(309 mg, 0.650 mmol)、5-甲基-1-苯基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)吡唑(250 mg, 0.880 mmol)、Pd(dppf)Cl 2(47.68 mg, 0.070 mmol)及K 3PO 4(276.6 mg, 1.3 mmol)混合物加熱至90 °C過夜。將反應物冷卻至室溫，以乙酸乙酯(10 mL)及 1 N HCl水溶液(5 mL)稀釋。分離出有機層。有機層係經Na 2SO 4乾燥並濃縮。將粗製物溶解於乙醇(10 mL)中，以於二噁烷(0.3 mL)中之4 N HCl處理2小時。LCMS指出MEM已完全脫保護。將反應物直接濃縮。粗製物係以管柱(4 g，於己烷中之0-100%乙酸乙酯)純化以得到黃色固體(40 mg， 16%，經2步驟)。LC-MS (ESI+): m/z 395.0 (M+H) +。
(3-羥基-4-甲基-5-(5-甲基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醯基)甘胺酸
Figure 02_image1107
在室溫下將1N NaOH水溶液(0.5 mL)添加至於THF (5 mL)及甲醇(2 mL)中之2-[[3-羥基-4-甲基-5-(5-甲基-4-苯基-吡唑-1-基)吡啶-2-羰基]胺基]乙酸乙酯(40 mg, 0.100 mmol)攪拌溶液。所得反應混合物係於室溫下攪拌2天並加熱至45 °C持續2小時。反應物係以1 N HCl水溶液酸化並直接濃縮。將殘餘物溶解於DMSO (2 mL)中並以製備型HPLC純化，得到灰白色固體(20 mg, 52%)。LC-MS (ESI+): m/z 367.0 (M+H) +; 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.73 (s, 2H), 9.33 (t, J= 6.1 Hz, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.65 – 7.53 (m, 4H), 7.51 – 7.38 (m, 1H), 4.00 (d, J= 6.2 Hz, 2H), 2.26 (s, 2H), 2.20 (s, 2H)。 實例51：化合物51之製備
化合物51之製備(AKE-7595)。
Figure 02_image1109
步驟1:
Figure 02_image1111
將於ACN (20 mL)中之1-苯基哌啶(1 g, 6.2 mmol)、Cu(OAc) 2(2.25 g, 12.40 mmol)、I 2(1575 mg, 6.20 mmol)及DMAP (758 mg, 6.20 mmol)溶液在80 °C於氧氣環境下攪拌5.5小時。在TLC指示反應已完成之後，將反應物冷卻至室溫，以飽和NH 4Cl水溶液(250 mL)終止反應，並用EtOAc萃取(100 mL x 3)。將合併的有機相乾燥，過濾並濃縮。殘餘物係以管柱層析法(EA: PE = 1:50)純化以得到74 mg之標題化合物。 1H-NMR (300 MHz, CDCl 3) δ7.48-7.22 (m, 5H), 7.15 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 6.95 (dd, J=3.0, 1.8 Hz, 1H), 6.43 (d, J=3.0 Hz, 1H)。
步驟2:
Figure 02_image1113
於氮氣保護下，將於二噁烷(10 mL)中之5-溴-3-甲氧基-4-甲基氰吡啶(160 mg, 0.71 mmol)、B 2Pin 2(269 mg, 1.06 mmol)、KOAc (138 mg, 1.41 mmol)及Pd(dppf)Cl 2(26 mg, 0.035 mmol)溶液在100°C下攪拌約6小時。在TLC分析指示大部分的5-溴-3-甲氧基-4-甲基氰吡啶已消耗掉之後，直接將反應物濃縮並將殘餘物以管柱層析法純化，得到185 mg呈白色固體之標題化合物。LC-MS (ESI+): m/z 275(M+H) +。
步驟3:
Figure 02_image1115
於氮氣保護下，將於二噁烷(15 mL)及H 2O (3 mL)中之3-甲氧基-4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)氰吡啶(185 mg, 0.68 mmol)、3-碘基-1-苯基-1H-吡咯(294 mg, 1.09 mmol)、Pd(dppf)Cl 2(25 mg, 0.034 mmol)、K 3PO 4∙3H 2O (540 mg, 2.026 mmol)溶液在75°C下攪拌約3小時。在TLC分析指示反應已完成之後，直接將反應物濃縮至乾燥並將殘餘物以管柱層析法純化，得到48 mg呈黃色油狀物之標題化合物。LC-MS (ESI+): m/z 289(M+H) +。
步驟4:
Figure 02_image1117
該化合物係根據AKB-7588 (化合物57)之製備中的步驟5來合成。LC-MS (ESI+): m/z 309(M+H) +。
步驟5:
Figure 02_image1119
該化合物係根據AKB-7588 (化合物57)之製備中的步驟6來合成。LC-MS (ESI+): m/z 380(M+H) +。
步驟6:
Figure 02_image1121
該化合物係根據AKB-7588 (化合物57)之製備中的步驟7來合成。LC-MS (ESI+): m/z 366(M+H) +。
步驟7:
Figure 02_image1123
該化合物係根據AKB-7588 (化合物57)之製備中的步驟8來合成。LC-MS (ESI+): m/z 352 (M+H) +; 1H-NMR (300 MHz, DMSO- d 6 ) δ12.82 (brs, 1H), 12.78 (s, 1H), 9.25 (t, J= 6.0 Hz, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.75 (d, J= 3.0 Hz, 1H), 7.70 (m, 2H), 7.60-7.50 (m, 3H), 7.40-7.32 (m, 1H), 6.88 (s, 1H), 4.00 (d, J= 6.0 Hz, 2H), 2.40 (s, 3H)。 實例52：化合物52之製備
化合物52之製備(AKE-7562)。
Figure 02_image1125
步驟1:
Figure 02_image1127
向於THF中之(3-羥基-4-甲基-5-(2H-四唑-5-基)吡啶甲醯基)甘胺酸甲酯(69 mg, 0.24 mmol)及PivCl (34 mg, 0.28 mmol)溶液一次添加TEA (36 mg, 0.36 mmol)。將所得混合物在室溫下攪拌約6小時。在TLC分析指示反應已完成之後，直接將反應物濃縮至乾燥以用於管柱純化。得到70 mg呈油狀物之標題化合物。LC-MS (ESI+): m/z 377 (M+H) +。
步驟2:
Figure 02_image1129
將於DCE (0.75 mL)中之2-((2-甲氧基-2-側氧基乙基)胺甲醯基)-4-甲基-5-(2H-四唑-5-基)吡啶-3-基新戊酸酯(30 mg, 0.08 mmol)、環丙基硼酸(14 mg, 0.16 mmol)、Cu(OAc) 2(8 mg, 0.04 mmol)、2,2'-聯吡啶(19 mg, 0.12 mmol)及Na 2CO 3(21 mg, 0.20 mmol)懸浮液於回流下攪拌約36小時。在LCMS分析指示反應已完成之後，直接將反應物濃縮至乾燥。殘餘物係以管柱層析法(DCM : PE = 1:1至1:0)純化，得到10 mg之標題化合物。LC-MS (ESI+): m/z 417 (M+H) +。
步驟3:
Figure 02_image1131
該化合物係根據AKB-7560 (化合物65)之製備中的步驟12來合成。LC-MS (ESI+): m/z 319 (M+H) +; 1H-NMR (300 MHz, DMSO- d 6 ) δ12.95 (brs, 1 H), 12.88 (brs, 1H), 9.54 (t, J= 6.3 Hz, 1H), 8.63 (s, 1H), 4.52 (m, 1H), 4.02 (d, J= 6.3 Hz, 2 H), 2.52 (s, 3H), 1.50-1.40 (m, 2H), 1.40-1.33 (m, 2H)。 實例53：化合物54之製備
化合物54之製備(AKE-7590)。
Figure 02_image1133
步驟4:
Figure 02_image1135
在室溫下向於DCM (5 mL)中之(3-甲氧基-4-甲基-5-(苯硫基)吡啶甲醯基)甘胺酸甲酯(180 mg, 0.52 mmol)溶液經5分鐘逐份添加m-CPBA (269 mg, 1.56 mmol)。反應物係於室溫下攪拌約5小時。在TLC分析指示反應已完成之後，將所得混合物以水(10 mL)稀釋並用DCM萃取(10 mL x 2)。將合併的有機相以Na 2SO 4(10 g)乾燥，過濾並濃縮。殘餘物經急驟矽膠層析法(EA: Hex= 1: 2至1:1)純化，得到190 mg之標題化合物。LC-MS (ESI+): m/z 379 (M+H) +; 1H-NMR (300 MHz, CDCl 3) δ9.03 (s, 1H), 8.20 (brs, 1H), 7.98-7.88 (m, 2H), 7.70-7.50 (m, 3H), 4.25 (d, J= 6.3 Hz, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.80 (s, 3H), 2.46 (s, 3H)。
步驟5:
Figure 02_image1137
該化合物係根據AKB-7589 (化合物59)之製備中的步驟4來合成。LC-MS (ESI+): m/z 365 (M+H) +。
步驟6:
Figure 02_image1139
LC-MS (ESI+): m/z 351 (M+H) +; 1H-NMR (300 MHz, DMSO- d 6 ) δ13.08 (s, 1H), 12.88 (s, 1H), 9.67 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.05-7.90 (m, 2H), 7.80-7.61 (m, 3H), 4.01 (d, J= 6.3 Hz, 2H), 2.30 (s, 3H)。 實例54：化合物55之製備
Figure 02_image1141
化合物55 (AKE-7597)係根據AKB-7560 (化合物65)之製備來製備。LC-MS (ESI+): m/z 371 (M+H) +。 1H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ7.97 (s, 1H), 7.35-7.25 (m, 2H), 7.06-7.01 (m, 2H), 6.88 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 4.12 (s, 2H), 3.35-3.30 (m, 4H), 3.28-3.20 (m, 4H), 2.21 (s, 3H)。 實例55：化合物56之製備
化合物56之製備(AKE-7596)。
Figure 02_image1143
步驟1:
Figure 02_image1145
於氮氣保護下，向於t-BuOH (20 ml)中之3,5-二氯-4-甲基氰吡啶(2.18 g, 11.78 mmol)溶液添加4-苯基哌啶(950 mg, 5.89 mmol)、RuPhos (412 mg, 0.88 mmol)、Cs 2CO 3(5.76 g, 17.67 mmol)及Pd(OAc) 2(198 mg, 0.88 mmol)。該反應物係於110°C下攪拌過夜。在LCMS指示反應已完成之後，將所得混合物冷卻至室溫，以水(50 mL)稀釋並用EtOAc萃取(50 mL x 3)。將合併的有機相以Na 2SO 4(50 g)乾燥，過濾並濃縮。殘餘物經急驟矽膠層析法(EA: Hex = 1: 50至1:2)純化，得到310 mg呈黃色固體之標題化合物。LC-MS (ESI+): m/z 312 (M+H) +; 1H-NMR (300 MHz, DMSO- d 6 ) δ8.38 (s, 1H), 7.40-7.31 (m, 4H), 7.28-7.18 (m, 1H), 3.48-3.36 (m, 2H), 3.07-2.95 (m, 2H), 2.80-2.68 (m, 1H), 2.38 (s, 3H), 1.95-1.78 (m, 4H)。
步驟2:
Figure 02_image1147
該化合物係根據AKB-7588 (化合物57)之製備中的步驟3來合成。LC-MS (ESI+): m/z 308 (M+H) +; 1H-NMR (300 MHz, CDCl 3) δLC-MS (ESI+): m/z 308 (M+H) +; 1H-NMR (300 MHz, CDCl 3) δ8.15 (s, 1H), 7.40-7.25 (m, 5H), 4.04 (s, 3H), 3.49-3.31 (m, 2H), 3.05-2.85 (m, 4H), 2.78-2.64 (m, 1H), 2.27 (s, 3H), 2.05-1.80 (m, 4H)。
步驟3:
Figure 02_image1149
該化合物係根據AKB-7588 (化合物57)之製備中的步驟5來合成。LC-MS (ESI+): m/z 327 (M+H) +; 1H-NMR (300 MHz, DMSO- d 6 ) δ8.11 (s, 1H), 7.40-7.15 (m, 5H), 3.80 (s, 3H), 3.35 (m, 2H), 2.98-2.90 (m, 2H), 2.79-2.62 (m, 1H), 2.27 (s, 3H), 1.99-1.78 (m, 4H)。
步驟4:
Figure 02_image1151
該化合物係根據AKB-7588 (化合物57)之製備中的步驟6來合成。LC-MS (ESI+): m/z 398 (M+H) +; 1H-NMR (300 MHz, CDCl 3) δ8.28 (t, J= 5.4 Hz, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.41-7.20 (m, 5H), 4.32-4.24 (d, J= 5.4 Hz, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.79 (s, 3H), 3.43-3.31 (m, 2H), 3.01-2.90 (m, 2H), 2.77-2.65 (m, 1H), 2.30 (s, 3H), 2.05-1.86 (m, 4H)。
步驟5:
Figure 02_image1153
該化合物係根據AKB-7588 (化合物57)之製備中的步驟7來合成。LC-MS (ESI+): m/z 384 (M+H) +。
步驟6:
Figure 02_image1155
該化合物係根據AKB-7588 (化合物57)之製備中的步驟8來合成。LC-MS (ESI+): m/z 370 (M+H) +; 1H-NMR (300 MHz, DMSO- d 6 ) δ12.81 (s, 1H), 12.55 (s, 1H), 9.13 (t, J= 5.4 Hz, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.39-7.18 (m, 5H), 3.96 (d, J= 5.4 Hz, 2H), 3.01-2.90 (m, 2H), 2.80-2.68 (m, 1H), 2.16 (s, 3H), 1.98-1.75 (m, 4H)。 實例56：化合物57之製備
化合物57之製備(AKE-7588)。
Figure 02_image1157
步驟1:
Figure 02_image1159
在80°C下向於ACN (200 mL)中之5-溴-4-甲基-3-硝基吡啶-2-胺(8.75 g, 0.038 mol)溶液添加CuBr 2(10.18 g, 0.046 mol)。在80 °C下攪拌所得混合物20分鐘之後，經5分鐘將t-BuONO (6.22 g, 0.060 mol)逐滴添加至反應物。反應物繼續在80 °C下攪拌1小時。在TLC分析指示反應已完成之後，將反應物冷卻至室溫，以水(200 mL)終止反應，並用EtOAc萃取(200 mL x 2)。將合併的有機相以無水Na 2SO 4(50 g)乾燥，過濾並在真空下濃縮。殘餘物經矽膠管柱層析法(EA: Hex = 1: 30 ~ 1:20)純化，得到4.6 g呈黃色固體之所要產物。LC-MS (ESI+): m/z 295 (M+H) +; 1H-NMR (300 MHz, CDCl 3) δ8.58 (s, 1H), 2.42 (s, 3H)。
步驟2:
Figure 02_image1161
將於DMF (100 mL)中之2,5-二溴-4-甲基-3-硝基吡啶(4.4 g, 0.015 mol)及CuCN (2.68 g, 0.030 mol)懸浮液在120°C下攪拌2小時。在TLC分析指示反應已完成之後，將反應物冷卻至室溫，以水(200 mL)終止反應，並用EtOAc萃取(200 mL x 2)。將合併的有機相用水(100 mL)及鹽水(100 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4(100 g)乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物經矽膠管柱層析法(EA: Hex= 1: 30至1:10)純化，得到1.29呈黃色固體之標題化合物。 1H-NMR (300 MHz, CDCl 3) δ8.91 (s, 1H), 2.54 (s, 3H)。
步驟3:
Figure 02_image1163
在室溫下向於甲醇(30 mL)中之5-溴-4-甲基-3-硝基氰吡啶(1.33 g, 5.52 mmol)溶液添加於MeOH中之MeONa溶液(993 mg, 5.52 mmol, 30 wt%)。該反應物係於50°C下攪拌7小時。在TLC分析指示反應已完成之後，將反應物冷卻至室溫，以水(50 mL)終止反應，並用EtOAc萃取(50 mL x 2)。將合併的有機相以無水Na 2SO 4(100 g)乾燥，過濾並在真空下濃縮。殘餘物經矽膠管柱層析法(EA: Hex= 1: 30至1:10)純化，得到640 mg呈黃色固體之標題化合物。LC-MS (ESI+): m/z 227, 229 (M+H) +; 1H-NMR (300 MHz, CDCl 3) δ8.50 (s, 1H), 4.09 (s, 3H), 2.41 (s, 3H)。
步驟4:
Figure 02_image1165
於氮氣保護下，在室溫下向於DMF (3 mL)中之酚(100 mg, 1.06 mmol)溶液經2分鐘逐份添加NaH (71 mg, 1.77 mmol)。在室溫下攪拌該溶液30分鐘之後，將反應混合物經5分鐘逐滴加入5-溴-3-甲氧基-4-甲基氰吡啶(200 mg, 0.86 mmol)之DMF (2 mL)溶液。該反應物係於100°C下攪拌2小時。在TLC分析指示反應已完成之後，將反應物冷卻至室溫，以鹽水(5 mL)終止反應，並用EtOAc萃取(5 mL x 3)。將合併的有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物經矽膠管柱層析法(PE: EtOAc = 20:1)純化，得到110 mg呈淺黃色油狀物之粗製標題化合物。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ7.91 (s, 1H), 7.41 (t, J= 7.9 Hz, 2H), 6.93 (t, J= 7.4 Hz, 1H), 6.84 (d, J= 7.6 Hz, 2H), 4.11 (s, 3H), 2.29 (s, 3H)。
步驟5:
Figure 02_image1167
在室溫下向於EtOH (3 mL)及H 2O (2 mL)中之3-甲氧基-4-甲基-5-苯氧基氰吡啶(100 mg, 0.42 mmol)溶液一次添加NaOH (167 mg, 4.17 mmol)。該反應物係於80°C下攪拌7小時。在LCMS分析指示反應已完成之後，以稀鹽酸溶液(2N)將反應物調整至pH 2~3。沉澱出大量固體。藉由過濾收集固體並在乙醇中漿化1小時。在過濾及乾燥之後，得到74 mg呈黃色油狀物之標題化合物。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ7.94 (s, 1H), 7.42 (t, J= 7.7 Hz, 2H), 7.18 (t, J= 7.7 Hz, 1H), 7.04 (d, J= 8.1 Hz, 2H), 3.83 (s, 3H), 2.18 (s, 3H)。
步驟6:
Figure 02_image1169
在室溫下向於DCM (2 mL)中之3-甲氧基-4-甲基-5-苯氧基吡啶甲酸(74 mg, 0.29 mmol)溶液添加甘胺酸甲酯鹽酸鹽(54 mg, 0.43 mmol)、EDCl (110 mg, 0.57 mmol)、HOBt (77 mg, 0.57 mmol)及DIEA (74 mg, 0.57 mmol)。反應物係於室溫下攪拌2小時。在TLC分析指示反應已完成之後，將反應物冷卻至室溫，以鹽水(2 mL)終止反應，並用CH 2Cl 2萃取(2 mL x 3)。將合併的有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物經矽膠管柱層析法(PE: EtOAc = 3:1)純化，得到31 mg之標題化合物。LC-MS (ESI+): m/z 331 (M+H) +。
步驟7:
Figure 02_image1171
將於DMA (1 mL)中之2-(3-甲氧基-4-甲基-5-苯氧基吡啶醯胺基)乙酸甲酯(29 mg, 0.09 mmol)及LiCl (74 mg, 1.76 mmol)懸浮液在85°C下攪拌6小時。在TLC分析指示反應已完成之後，將反應物冷卻至室溫，以鹽水(2 mL)終止反應，並用DCM萃取(2 mL x 3)。將合併的有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾並真空濃縮，得到29 mg呈黃色油狀物之標題化合物。LC-MS (ESI+): m/z 317 (M+H) +。
步驟8:
2-(3-羥基-4-甲基-5-苯氧基吡啶醯胺基)乙酸
Figure 02_image1173
該化合物係根據AKB-7560 (化合物65)之製備中的步驟12來合成。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ12.86 (s, 1H), 12.79 (brs, 1H), 9.23 (t, J= 6.2 Hz, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.45 - 7.36 (m, 2H), 7.17 (t, J= 7.4 Hz, 1H), 7.05 (d, J= 7.9 Hz, 2H), 3.97 (d, J= 6.2 Hz, 2H), 2.11 (s, 3H)。 實例57：化合物58之製備
化合物58之製備(AKE-7591)。
Figure 02_image1175
步驟1:
Figure 02_image1177
於氮氣保護下，將於二噁烷(10 mL)及H 2O (1 mL)中之5-溴-3-甲氧基-4-甲基氰吡啶(157 mg, 0.691)、苯甲基Bpin (226 mg, 1.04 mmol)、Pd(dppf)Cl 2(26 mg, 0.035 mmol)及K 3PO 4∙3H 2O (553 mg, 2.074 mmol)反應混合物在75°C下攪拌約7小時。在TLC指示反應已完成之後，將反應物濃縮至乾燥，殘餘物係以管柱層析法純化，得到170 mg呈油狀物之標題化合物。LC-MS (ESI+): m/z 239(M+H) +。
步驟2:
Figure 02_image1179
該化合物係根據AKB-7588 (化合物57)之製備中的步驟5來合成。LC-MS (ESI+): m/z 258(M+H) +。
步驟3:
Figure 02_image1181
該化合物係根據AKB-7588 (化合物57)之製備中的步驟6來合成。LC-MS (ESI+): m/z 329 (M+H) +。
步驟4:
Figure 02_image1183
該化合物係根據AKB-7588 (化合物57)之製備中的步驟7來合成。LC-MS (ESI+): m/z 315(M+H) +。
步驟5:
Figure 02_image1185
該化合物係根據AKB-7588 (化合物57)之製備中的步驟8來合成。LC-MS (ESI+): m/z 301(M+H) +; 1H-NMR (300 MHz, DMSO- d 6 ) δ12.86 (brs, 1H), 12.64 (s, 1H), 9.13 (t, J= 5.7 Hz, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.39-7.18 (m, 5H), 4.05 (s, 2H), 3.99 (d, J= 5.7 Hz, 2H), 2.10 (s, 3H)。 實例58：化合物59之製備
化合物59之製備(AKE-7589)。
Figure 02_image1187
步驟1:
Figure 02_image1189
在室溫下向於THF (3 mL)中之苯硫酚(88 mg, 0.80 mmol)溶液一次添加氫化鈉(53 mg, 1.32 mmol)。反應物係於室溫下攪拌約0.5小時。將於THF (2 mL)中之5-溴-3-甲氧基-4-甲基氰吡啶(150 mg, 0.66 mmol)溶液經5分鐘逐滴添加至上述溶液。反應混合物繼續在室溫下攪拌1小時。在TLC分析指示反應已完成之後，將反應物冷卻至室溫，以水(5 mL)終止反應，並用EtOAc萃取(3 x 5 ml)。將合併的有機相以無水Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮。殘餘物經矽膠管柱層析法(EA: Hex= 1: 50至1:30)純化，得到140 mg呈白色固體之標題化合物。LC-MS (ESI+): m/z 257 (M+H) +; 1H-NMR (300 MHz, CDCl 3) δ7.82 (s, 1H), 7.55-7.42 (m, 5H), 4.09 (s, 3H), 2.35 (s, 3H)。
步驟2:
Figure 02_image1191
該化合物係根據AKB-7588 (化合物57)之製備中的步驟5來合成。 1H-NMR (300 MHz, DMSO- d 6 ) δ13.35 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.50-7.35 (m, 5H), 3.80 (s, 3H), 2.31 (s, 3H)。
步驟3:
Figure 02_image1193
在室溫下向於DCM (5 ml)中之3-甲氧基-4-甲基-5-(苯硫基)吡啶甲酸(110 mg, 0.40 mmol)溶液添加甘胺酸甲酯(75 mg, 0.60 mmol)、EDCl (154 mg, 0.80 mmol)、HOBt (108 mg, 0.80 mmol)及DIEA (103 mg, 0.80 mmol)。該反應物係於45°C下攪拌過夜。在TLC指示反應已完成之後，將所得混合物以水(10 mL)稀釋並用DCM萃取(10 mL x 3)。將合併的有機相以Na 2SO 4(10 g)乾燥，過濾並濃縮。殘餘物經急驟矽膠層析法(EA: Hex = 1: 3至1:2)純化，得到105 mg呈黃色固體之標題化合物。LC-MS (ESI+): m/z 347 (M+H) +; 1H-NMR (300 MHz, CDCl 3) δ8.15 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.39 (s, 5H), 4.22 (d, J= 6.3 Hz, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.78 (s, 3H), 2.38 (s, 3H)。
步驟4:
Figure 02_image1195
向於AcOH (8 ml)中之(3-甲氧基-4-甲基-5-(苯硫基)吡啶甲醯基)甘胺酸甲酯(100 mg, 0.29 mmol)添加HBr/AcOH溶液(1 mL, 30 %)。該反應物係於60°C下攪拌過夜。在TLC分析指示反應已完成之後，將所得混合物濃縮至乾燥以得到250 mg之粗製標題化合物。LC-MS (ESI+): m/z 333 (M+H) +。
步驟5:
Figure 02_image1197
該化合物係根據AKB-7560 (化合物65)之製備中的步驟12來合成。LC-MS (ESI+): m/z 319 (M+H) +; 1H-NMR (300 MHz, DMSO- d 6 ) δ13.00-12.61 (m, 2H), 9.30 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.51-7.35 (m, 5H), 4.01-3.90 (m, 2H), 2.31 (s, 3H)。 實例59：化合物60之製備
化合物60之製備(AKE-7566)。
Figure 02_image1199
步驟1:
Figure 02_image1201
在室溫下向於DMF (20 mL)中之4-溴吡唑(1.00 g, 6.80 mmol)溶液添加2-氯-1-氟-4-硝基苯(1.44 g, 8.16 mmol)及Cs 2CO 3(3.33 g, 10.20 mmol)。該反應物係於100°C下攪拌3小時。在TLC分析指示反應已完成之後，將反應物冷卻至室溫，以鹽水(20 mL)終止反應，並用EtOAc萃取(20 mL x 3)。將合併的有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物係於Et2O (20 mL)中漿化1小時。在過濾之後，得到1.61 g呈白色固體之標題化合物。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ8.44 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 8.26 (dd, J= 8.9, 2.5 Hz, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.88 (d, J= 8.9 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H)。
步驟2:
Figure 02_image1203
在60 °C下向飽和NH 4Cl溶液(8 mL)添加鐵粉(1.49 g, 26.67 mmol)。該懸浮液係於80°C下攪拌30分鐘。將於乙醇(30 mL)及THF (15 mL)中之4-溴-1-(2-氯-4-硝基苯基)-1H-吡唑(1.61 g, 5.33 mmol)溶液經5分鐘逐滴添加至上述反應物。使反應物繼續在回流下攪拌2小時。在TLC分析指示反應已完成之後，使反應混合物過濾通過矽藻土墊。在真空下將濾液濃縮至乾燥。將殘餘物以水(30 mL)稀釋並用EtOAc萃取(20 mL x 3)。將合併的有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，得到1.67 g呈黃色固體之粗製標題化合物。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ7.71 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.23 (d, J= 8.5 Hz, 2H), 6.76 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 6.60 (dd, J= 8.5, 2.5 Hz, 1H), 3.58 (brs, 2H)。
步驟3:
Figure 02_image1205
於氮氣保護下，在50 °C下向於無水DMF (20 mL)中之CuCl 2(1.43 g, 8.38 mmol)及 t-BuONO (921 mg, 8.94 mmol)懸浮液經20分鐘添加於無水DMF (10 mL)中之4-(4-溴-1H-吡唑-1-基)-3-氯苯胺(1.52 g, 5.59 mmol)溶液。在添加後，繼續將反應物在50 °C下攪拌1.5小時。在TLC分析指示反應已完成之後，將反應物冷卻至室溫，以鹽水(30 mL)終止反應，並用EtOAc萃取(30 mL x 3)。將合併的有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物經矽膠管柱層析法(PE: EtOAc = 150 : 1)純化，得到970 mg呈白色固體之標題化合物。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ7.89 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.57 - 7.48 (m, 2H), 7.37 (dd, J= 8.6, 2.3 Hz, 1H)。
步驟4:
Figure 02_image1207
於氮氣保護下，在室溫下向於二噁烷(15 mL)中之4-溴-1-(2,4-二氯苯基)-1H-吡唑(430 mg, 1.47 mmol)溶液添加雙(頻哪醇合)二硼(748 mg, 2.95 mmol)、Pd(dppf)Cl 2(108 mg, 0.15 mmol)及KOAc (433 mg, 4.42 mmol)。該反應物係於100°C下攪拌過夜。在TLC分析指示反應已完成之後，將反應物冷卻至室溫，以鹽水(20 mL)終止反應，並用EtOAc萃取(20 mL x 3)。將合併的有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物經矽膠管柱層析法(PE: EtOAc = 20:1至5:1)純化，得到345 mg呈灰白色物體之粗製標題化合物。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ8.14 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.56 - 7.48 (m, 2H), 7.35 (dd, J= 8.6, 2.3 Hz, 1H), 1.34 (s, 12H)。
步驟5:
Figure 02_image1209
於氮氣保護下，在室溫下向於二噁烷(4 mL)及水(0.2 mL)中之2-(3-羥基-4-甲基-5-(((三氟甲基)磺醯基)氧基)吡啶醯胺基)乙酸甲酯(137 mg, 0.37 mmol)溶液添加1-(2,4-二氯苯基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(400 mg, 1.18 mmol)、Pd(dppf)Cl 2(32 mg, 0.04 mmol)及K 3PO 4(234 mg, 1.11 mmol)。該反應物係於90°C下攪拌24小時。在TLC分析指示反應已完成之後，將反應物冷卻至室溫，以鹽水(5 mL)終止反應，並用EtOAc萃取(5 mL x 3)。將合併的有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物經矽膠管柱層析法(PE: EtOAc = 5:1至3:1)純化，得到64 mg之粗製標題化合物。粗製標題化合物係於MeOH (0.5 mL)中漿化1小時。在過濾及乾燥之後，得到24 mg呈白色固體之標題化合物。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ12.16 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.67 - 7.56 (m, 2H), 7.42 (dd, J= 8.6, 2.3 Hz, 1H), 4.26 (d, J= 5.7 Hz, 2H), 3.82 (s, 3H), 2.39 (d, J= 1.2 Hz, 3H), 1.56 (s, 3H)。
步驟6:
Figure 02_image1211
該化合物係根據AKB-7560 (化合物65)之製備中的步驟12來合成。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ12.81 (s, 2H), 9.33 (t, J= 6.2 Hz, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.95 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 7.75 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 7.65 (dd, J= 8.6, 2.2 Hz, 1H), 4.00 (d, J= 6.1 Hz, 2H), 2.36 (s, 3H)。 實例60：化合物61之製備
化合物61之製備(AKE-7593)。
Figure 02_image1213
步驟1:
Figure 02_image1215
將於EtOAc (8 mL)及MeOH (2 mL)中之(3-羥基-4-甲基-5-(苯基乙炔基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(130 mg, 0.40 mmol)及Pd/C (20 mg, 10 wt%)懸浮液在室溫於1 Mpa氫氣壓力下攪拌過夜。在TLC指示反應已完成之後，將懸浮液過濾通過矽藻土墊。將濾液濃縮至乾燥以得到150 mg之呈褐色油狀物的標題化合物。LC-MS (ESI+): m/z 329(M+H) +。
步驟2:
Figure 02_image1217
該化合物係根據AKB-7588 (化合物57)之製備中的步驟8來合成。LC-MS (ESI+): m/z 315(M+H) +; 1H-NMR (300 MHz, DMSO- d 6 ) δ12.86 (brs, 1H), 12. 70 (s, 1H), 9.26 (t, J= 6.0 Hz, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.32-7.15 (m, 5H), 3.97 (d, J= 6.0 Hz, 2H), 2.95 (t, J= 6.3 Hz, 2H), 2.85 (t, J= 6.3 Hz, 2H), 2.40 (s, 3H)。 實例61：化合物62之製備
化合物62之製備(AKE-7592)。
Figure 02_image1219
步驟1:
Figure 02_image1221
於氮氣保護下，將於DMF (8 mL)中之(3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-5-(((三氟甲基)磺醯基)氧基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(248 mg, 0.6 mmol)、乙炔苯(122 mg, 1.20 mmol)、Pd(pph 3) 2Cl 2(21 mg, 0.030 mmol)、CuI (6 mg, 0.030 mmol)及TEA (302 mg, 2.98 mmol)反應混合物在85 °C下攪拌約16小時。在TLC指示反應已完成之後，將反應物冷卻至室溫，以水(30 mL)終止反應，並用EtOAc萃取(30 mL x 3)。將合併的有機相用水(20 mL)洗滌，乾燥並濃縮。殘餘物經管柱層析法(EA: PE = 1: 20)純化，得到165 mg呈黃色固體之標題化合物。LC-MS (ESI+): m/z 325 (M+H) +。
步驟2:
Figure 02_image1223
該化合物係根據AKB-7588 (化合物57)之製備中的步驟8來合成。LC-MS (ESI+): m/z 339(M+H) +; 1H-NMR (300 MHz, DMSO- d 6 ) δ12.86 (s, 2H), 9.43 (t, J= 6.0 Hz, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.72-7.64 (m, 2H), 7.59-7.48 (m, 3H), 3.99 (d, J= 6.0 Hz, 2H), 2.40 (s, 3H)。 實例62：化合物63之製備
Figure 02_image1225
化合物63 (AKE-7563)係根據AKB-7560 (化合物65)之製備來製備。LC-MS (ESI+): m/z 389 (M+H) +。 1H-NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ13.10-12.82 (m, 2 H), 9.55 (d, J = 6.6 Hz, 1 H), 8.76 (s, 1 H), 8.25 (d, J = 8.7 Hz, 2 H), 7.80 (d, J = 8.7 Hz, 2 H), 4.02 (d, J = 6 Hz, 2 H), 2.80 (s, 3 H)。 實例63：化合物64之製備
化合物64之製備(AKE-7561)。
Figure 02_image1227
步驟1:
Figure 02_image1229
將於甲醇(2 mL)中之(5-甲醯基-3-羥基-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸甲酯(200 mg, 0.79 mmol)、NH 2OH. HCl (82 mg, 1.2 mmol)及NaHCO 3(166 mg, 2 mmol)懸浮液在室溫下攪拌3小時。在TLC分析指示反應已完成之後，將反應物以水(5 mL)稀釋，調整pH到4並用DCM萃取(10 mL x 2)。將合併的有機相乾燥，過濾並濃縮，以得到180 mg呈白色固體之標題化合物。 1H-NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ12.70 (s, 1 H), 11.85 (s, 1H), 9.52 (brs, 1H), 8.41 (s , 1H), 8.39 (s 1H), 4.08 (d, J= 6.3 Hz, 2 H), 3.67 (s, 3H)。
步驟2:
Figure 02_image1231
將於DCM (8 mL)中之(E)-(3-羥基-5-((羥基亞胺基)甲基)-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸甲酯(180 mg, 0.67 mmol)及CDI (164 mg, 1.01 mmol)溶液在回流下攪拌約2小時。在TLC指示反應已完成之後，將反應物冷卻至室溫，以水(5 mL)終止反應，並用DCM萃取(10 mL x 3)。將合併的有機相乾燥並濃縮以得到207 mg之粗產物。粗產物係進一步於EtOAc (2 mL)中漿化並過濾，得到105 mg之所要產物。 1H-NMR (300 MHz, CDCl 3) δ8.55 (brs, 1 H), 8.25 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 4.48 (d, J= 6 Hz, 2 H), 3.82 (s, 3H), 2.55 (s, 3H)。
步驟3:
Figure 02_image1233
將於DMF (1 mL)中之(5-氰基-3-羥基-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸甲酯(85 mg, 0.34 mmol)、NH 4Cl (55 mg, 1.02 mmol)及NaN­ 3(67 mg, 1.02 mmol)懸浮液在100 °C下攪拌過夜。在TLC指示反應已完成之後，將反應物冷卻至室溫，以水(5 mL)終止反應，並用稀釋HCl溶液調整至pH 3。沉澱出大量黃色固體。藉由過濾收集固體，得到55 mg之標題化合物。LC-MS (ESI+): m/z 293 (M+H) +。
步驟4:
Figure 02_image1235
該化合物係根據AKB-7560 (化合物65)之製備中的步驟12來合成。LC-MS (ESI+): m/z 279 (M+H) +; 1H-NMR (300 MHz, DMSO- d 6 ) δ12.95 (s, 1 H), 12.88 (brs, 1H), 9.55 (t, J= 6.3 Hz, 1H), 8.51 (s, 1H), 4.03 (d, J= 6.3 Hz, 2 H), 2.45 (s, 3H)。 實例64：化合物65之製備
化合物65之製備(AKE-7560)。
Figure 02_image1237
步驟1:
3,5-二氯-4-甲基吡啶1-氧化物
Figure 02_image1239
在室溫下向於DCM (150 mL)中之3,5-二氯-4-甲基吡啶(9.4 g, 57.7 mmol)溶液經2分鐘逐份添加m-CPBA (12.9 g, 74.7 mmol)。反應物係於室溫下攪拌過夜。在TLC分析指示反應已完成之後，向反應物一次添加K 2CO 3(12 g, 87 mmol)並在室溫下攪拌約2小時。在過濾所得懸浮液之後，將濾液濃縮至乾燥。殘餘物係於混合溶劑(PE:EtOAc=50:1, 50 mL)中漿化並過濾，得到7.4 g之標題化合物。LC-MS (ESI+): m/z 178 (M+H) +。
步驟2:
3,5-二氯-4-甲基氰吡啶
Figure 02_image1241
在室溫下向於MeCN (150 mL)中之3,5-二氯-4-甲基吡啶1-氧化物(8 g, 44.94 mmol)溶液添加TMS-CN (9 g, 89.88 mmol)及TEA (9.4 mL)。使反應物回流過夜。在TLC分析指示反應已完成之後，將反應物冷卻至室溫，以鹽水(150 mL)終止反應，並用EA萃取(150 mL x 3)。將合併的有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4(60 g)乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物經矽膠管柱層析法(PE:EtOAc=10:1)純化，得到6.8 g之標題化合物。 1H-NMR (300 MHz, CD 3Cl) δ8.52 (s, 1H), 2.57 (s, 3H))。
步驟3:
3,5-雙(苯甲氧基)-4-甲基氰吡啶
Figure 02_image1243
於氮氣保護下，在0 °C下向於DMF (200 mL)中之NaH (60 wt%, 13.6 g, 0.34 mol)懸浮液經20分鐘逐滴添加BnOH (36.8 g, 0.34 mol)。在添加後，繼續將所得混合物在0 °C下攪拌15分鐘。將於DMF (40 mL)中之3,5-二氯-4-甲基-吡啶-2-甲腈(21.2 g, 113.37mmol)溶液經20分鐘逐滴添加至上述懸浮液。反應物係於室溫下攪拌過夜。在LCMS分析指示反應已完成之後，將反應物再冷卻至0 °C，並以水(3 L)慢慢終止反應。沉澱出大量固體。藉由過濾收集固體並以管柱層析法(PE : EtOAc = 1:0至5:1)純化以得到15 g之標題化合物。LC-MS (ESI+): m/z 331(M+H) +。
步驟4:
Figure 02_image1245
將於乙醇(400 mL)及H 2O (150 mL)中之3,5-二苯甲氧基-4-甲基-吡啶-2-甲腈(15 g, 45.4 mmol)及NaOH (18.16 g, 454.0 mmol)溶液在70°C下攪拌過夜。在LCMS分析指示反應已完成之後，先將反應物濃縮以去除過量的乙醇。將殘餘物用濃鹽酸酸化至 pH~3且沉澱出大量固體。藉由過濾收集白色固體，以EtOAc (100 mL)洗滌，真空乾燥，以得到15.3 g之標題化合物。LC-MS (ESI+): m/z 350 (M+H) +。
步驟5:
Figure 02_image1247
在室溫下向於DCM (500 mL)中之3,5-二苯甲氧基-4-甲基-吡啶-2-羧酸(15.3 g, 43.76 mmol)懸浮液一次添加PyBOP (27.35 g, 52.55 mmol)及TEA (22.16g, 218.95 mmol)。在攪拌該懸浮液5分鐘之後，觀察到澄清溶液。接著向該溶液經2分鐘逐份添加2-胺基乙酸甲酯鹽酸鹽(8.25 g, 65.69 mmol)。將所得混合物在室溫下攪拌過夜。在LCMS分析指示反應已完成之後，將反應混合物直接濃縮，殘餘物係以管柱層析法(PE: EtOAc = 1:0至1:1)純化，得到3.6 g之標題化合物。LC-MS (ESI+): m/z 421 (M+H) +。
步驟6:
Figure 02_image1249
將於THF (300 ml)及甲醇(200 mL)中之2-[(3.5-二苯甲氧基-4-甲基-吡啶-2-羰基)胺基]乙酸甲酯(16.9 g, 40.24 mmol)及Pd/C (1.1g, 10 wt%)懸浮液用氫氣吹洗3次並在大氣壓氫氣壓力下攪拌過夜。在LCMS指示反應已完成之後，將懸浮液過濾通過矽藻土墊。將濾液直接濃縮以得到9.6 g呈白色固體之標題化合物。LC-MS (ESI+): m/z 241(M+H) +。
步驟7:
Figure 02_image1251
向於甲醇(500 mL)中之2-(3,5-二羥基-4-甲基-吡啶-2-羰基)胺基]乙酸甲酯(9.6 g, 40.0 mmol)懸浮液一次添加TEA (6.08 g, 60.0 mmol)及1,1,1-三氟-N-苯基-N- (三氟甲基磺醯基)甲烷磺醯胺(17.15 g, 48.0 mmol)。反應物於室溫下攪拌過夜之後，觀察到澄清褐色均質溶液。依靠TLC分析判斷反應已完成。直接將反應物濃縮並以管柱層析法(PE : EtOAc = 1:0至1:1)純化，得到14.2 g之標題化合物。LC-MS (ESI+): m/z 373 (M+H) +。
步驟8:
Figure 02_image1253
在0°C下向於DCM (350 mL)中之(3-羥基-4-甲基-5-(((三氟甲基)磺醯基)氧基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(14.2 g, 38.14mmol)攪拌溶液依序添加DIPEA (12.3g, 95.36 mmol)及MOMCl (4.61g, 57.22 mmol)。反應物係繼續在0°C下攪拌15分鐘並在室溫下攪拌約1小時。在TLC分析指示反應已完成之後，以冷水(180 mL)終止反應。在分離之後，有機相係經Na 2SO 4乾燥並濃縮。殘餘物經管柱層析法(PE : EtOAc = 1:0至1:1)純化，得到6.61 g之標題化合物。LC-MS (ESI+): m/z 417(M+H) +。
步驟9:
Figure 02_image1255
將於DMF (250 mL)中之(3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-5-(((三氟甲基)磺醯基)氧基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(5.15 g, 13.83 mmol)、三丁基(乙烯基)錫烷(5.26 g, 16.60 mmol)、LiCl (1.76 g, 41.50 mmol)及Pd(PPh 3) 2Cl 2(243 mg, 0.35 mmol)反應物在70°C下攪拌6小時。在TLC分析指示反應已完成之後，將反應物濃縮至乾燥。殘餘物經管柱層析法(PE : EtOAc = 1:0至1:1)純化，得到1.84 g呈白色固體之標題化合物。LC-MS (ESI+): m/z 251(M+H) +。
步驟10:
Figure 02_image1257
將於丙酮(20 mL)、THF (40 mL)及水(20 ml)中之(3-羥基-4-甲基-5-乙烯基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(1.74g, 6.95 mmol)、OsO 4(50 mg)、吡啶(550 mg, 6.95 mmol)及NaIO 4(7.44 g, 34.77 mmol)溶液在室溫下攪拌16小時。在TLC指示(3-羥基-4-甲基-5-乙烯基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯已消耗掉之後，將反應物用EtOAc萃取(100 mL x 2)。將合併的有機相乾燥並濃縮。殘餘物經管柱層析法(PE : EtOAc = 1:0至1:1)純化，得到1.5 g呈白色固體之標題化合物。LC-MS (ESI+): m/z 285(M+Na) +; 1H-NMR (300 MHz, CDCl 3) δ12.27 (s, 1 H), 10.42 (s, 1H), 8.55 (brs, 1H), 8.42 (s, 1H), 4.25 (d, J= 6.3 Hz, 2 H), 3.82 (s, 3H), 2.61 (s, 3H)。
步驟11:
Figure 02_image1259
將於DCM (8 mL)及THF (4 mL)中之(5-甲醯基-3-羥基-4-甲基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(100 mg, 0.396 mmol)及4-甲基苯磺醯肼(89 mg, 0.476 mmol)溶液攪拌過夜。接著將反應物濃縮至乾燥。在-5 °C下向於吡啶(5 mL)中之殘餘物經5分鐘逐滴添加於乙醇(4 mL)及水(3 mL)中之(E)-1-苯基-2-(四氟-λ 5-硼烷)二氮烯(153 mg, 0.793 mmol)溶液。將所得反應混合物在室溫下攪拌3小時。在TLC分析指示反應已完成之後，將反應物以水(40 mL)稀釋，用乙酸乙酯萃取(20 mL x 3)。將有機相乾燥並濃縮。殘餘物經管柱層析法(於DCM中之0-100%乙酸乙酯)純化，得到158 mg之標題化合物。LC-MS (ESI+): m/z 369 (M+H)+。
步驟12:
Figure 02_image1261
向於THF (6 mL)及MeOH (6 mL)中之(3-羥基-4-甲基-5-(2-苯基-2H-四唑-5-基)吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(158 mg, 0.429 mmol)溶液添加於4 mL水中之NaOH (86 mg)溶液。反應物係於室溫下攪拌3.5小時。在TLC分析指示反應已完成之後，以稀鹽酸溶液(1N)將反應物酸化至pH 3。沉澱出大量固體。藉由過濾收集固體。在乾燥之後，得到94 mg之標題化合物。LC-MS (ESI+): m/z 355 (M+H) +; 1H-NMR (300 MHz, DMSO- d 6 ) δ13.10-12.82 (m, 2 H), 9.55 (t, J= 6.6 Hz, 1 H), 8.77 (s, 1 H), 8.25 (d, J= 8.7 Hz, 2 H), 7.76-7.64 (m, 3 H), 4.01 (d, J= 6.6 Hz, 2 H), 2.60 (s, 3 H)。 實例65：化合物66之製備
Figure 02_image1263
化合物66 (AKE-7567)係根據化合物65 (AKB-7560)之製備來製備。LC-MS (ESI+): m/z  421(M+H)+。 1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ12.82 (s, 2H), 9.34 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 9.07 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.07 (d, J = 1.9 Hz, 2H), 7.62 (s, 1H), 4.00 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 2.37 (s, 3H)。 實例66：化合物67之製備
Figure 02_image1265
化合物67 (AKE-7568)係根據化合物65 (AKB-7560)之製備來製備。LC-MS (ESI+): m/z 421 (M+H)+。 1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ12.85 (s, 1H), 9.38-9.30 (m, 1H), 9.09 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.18 (d, J = 8.4 Hz , 2H), 7.95 (d, J = 8.4 Hz , 2H ), 4.01 (d, J = 6.0 Hz , 2H ), 2.38 (s, 3H)。 實例67：化合物68之製備
化合物68之製備(AKE-7565)。
Figure 02_image1267
步驟1:
Figure 02_image1269
在室溫下向於DCM (10 mL)中之4-溴吡唑(500 mg, 3.40 mmol)溶液添加4-氯苯基硼酸(1.06 g, 6.80 mmol)、Cu(OAc) 2(1.24 g, 6.80 mmol)及吡啶(806 mg, 10.20 mmol)。反應物係於室溫下攪拌過夜。在TLC分析指示反應已完成之後，使懸浮液過濾通過矽藻土墊。濾液係以鹽水(10 mL)終止反應，並用DCM萃取(10 mL x 3)。將合併的有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物經矽膠管柱層析法(PE : EtOAc=100:1至50:1)純化，得到800 mg呈白色固體之標題化合物。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ7.91 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.59 (d, J= 8.9 Hz, 2H), 7.43 (d, J= 8.9 Hz, 2H)。
步驟2:
Figure 02_image1271
於氮氣保護下，在室溫下向於二噁烷(20 mL)中之4-溴-1-(4-氯苯基)-1H-吡唑(1.00 g, 3.90 mmol)溶液添加雙(頻哪醇合)二硼(2.48 g, 9.76 mmol)、Pd(dppf)Cl 2(286 mg, 0.39 mmol)及KOAc (1.15 g, 11.72 mmol)。該反應物係於100°C下攪拌2小時。在TLC分析指示反應已完成之後，將反應物冷卻至室溫，以鹽水(20 mL)終止反應，並用EtOAc萃取(20 mL x 3)。將合併的有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物經矽膠管柱層析法(PE : EtOAc = 20 : 1)純化，得到1.4 g呈黃色固體之粗製標題化合物。LC-MS (ESI+): m/z 305 (M+H) +。
步驟3:
Figure 02_image1273
於氮氣保護下，在室溫下向於二噁烷(5 mL)及水(0.25 mL)中之2-(3-羥基-4-甲基-5-(((三氟甲基)磺醯基)氧基)吡啶醯胺基)乙酸甲酯(100 mg, 0.27 mmol)溶液添加粗製1-(4-氯苯基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(98 mg, 0.32 mmol)、Pd(dppf)Cl 2(20 mg, 0.03 mmol)及K 3PO 4(114 mg, 0.54 mmol)。該反應物係於100°C下攪拌24小時。在TLC分析指示反應已完成之後，將反應物冷卻至室溫，以鹽水(5 mL)終止反應，並用EtOAc萃取(5 mL x 3)。將合併的有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物經矽膠管柱層析法(PE: EtOAc = 5 : 1)純化，得到28 mg呈白色固體之標題化合物。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ12.24 (s, 1H), 8.53 (t, J= 5.8 Hz, 1H), 8.19 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.78 (d, J= 8.9 Hz, 2H), 7.55 (d, J= 8.9 Hz, 2H), 4.34 (d, J= 5.8 Hz, 2H), 3.90 (s, 3H), 2.47 (s, 3H)。
步驟4:
Figure 02_image1275
在室溫下向於THF (0.25 mL)及水(0.25 mL)中之2-(5-(1-(4-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)-3-羥基-4-甲基吡啶醯胺基)乙酸甲酯(28 mg, 0.07 mmol)溶液添加LiOH .H 2O (6 mg, 0.14 mmol)。該反應物係於40°C下攪拌1小時。在LCMS分析指示反應已完成之後，以水(5 mL)終止反應，並用EtOAc萃取(5 mL x 2)。水相係以稀鹽酸溶液(2N)調整至pH 3~4。沉澱出大量固體。在過濾及乾燥之後，得到7.8 mg呈淺褐色固體之標題化合物。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ12.81 (s, 2H), 9.33 (t, J= 6.2 Hz, 1H), 8.97 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.98 (d, J= 8.9 Hz, 2H), 7.63 (d, J= 8.9 Hz, 2H), 4.01 (d, J= 6.1 Hz, 3H), 2.38 (s, 3H)。 實例68：化合物69之製備
化合物69之製備(CP-0285)。
Figure 02_image1277
步驟1: 4-環丙基吡啶-2-胺：
Figure 02_image1279
向於1,4-二噁烷/水(50.0 mL/10.0 mL)中之4-溴吡啶-2-胺(10.0 g, 58.0 mmol)、環丙基硼酸(7.5 g, 87.0 mmol)及碳酸鉀(16.0 g, 116 mmol)溶液添加[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (4.3 g, 5.8 mmol)。將該混合物在90 °C於氮氣下攪拌12.0小時並冷卻至室溫。將乙酸乙酯及水加入至該溶液中，並分離各層。將有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮至乾燥。殘餘物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 3/1)純化，得到呈黃色固體之4-環丙基吡啶-2-胺(5.5 g，產率70.5%)。LC-MS: m/z= 135.0 [M+H] +，滯留時間1.47分鐘(方法A)。
步驟2: 3,5-二氯-4-環丙基吡啶-2-胺：
Figure 02_image1281
向於 N,N-二甲基甲醯胺(100.0 mL)中之4-環丙基吡啶-2-胺(5.0 g, 37.3 mmol)溶液添加 N-氯琥珀醯亞胺(9.9 g, 74.0 mmol)。該混合物係於50 °C下攪拌2.0小時。將反應物用水稀釋並用乙酸乙酯萃取兩次。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮。殘餘物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 5/1)純化，得到呈黃色固體之3,5-二氯-4-環丙基吡啶-2-胺(4.9 g，產率66%)。LC-MS: m/z= 203.0 (M+H) +，滯留時間1.94分鐘(方法A)。
步驟3: 3,5-二氯-4-環丙基氰吡啶：
Figure 02_image1283
向於二甲基亞碸(30.0 mL)中之3,5-二氯-4-環丙基吡啶-2-胺(2.0 g, 10.0 mmol)及氰化銅(I)溶液添加亞硝酸叔丁酯(1.55 g, 15.0 mmol)。該混合物係於40 °C下攪拌12.0小時。將反應物用水稀釋並用乙酸乙酯萃取兩次。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮。得到呈黃色固體之3,5-二氯-4-環丙基氰吡啶(1.25 g，產率57.1%)。LC-MS: m/z= 213.0 (M+H) +，滯留時間2.05分鐘(方法A)。
步驟4:  3-氯-5-(3-氯苯基)-4-環丙基氰吡啶：
Figure 02_image1285
向於 N,N-二甲基甲醯胺/水(20.0 mL/5.0 mL)中之3,5-二氯-4-環丙基氰吡啶(1.0 g, 4.7 mmol)、(3-氯苯基)硼酸(0.68 g, 4.7 mmol)及碳酸鉀(1.2 g, 8.7 mmol)溶液添加[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (0.32 g, 0.44 mmol)。將該混合物在50 °C於氮氣下攪拌12.0小時並冷卻至室溫。將乙酸乙酯及水加入至該溶液中，並分離各層。將有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮至乾燥。殘餘物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 3/1)純化，得到呈黃色固體之3-氯-5-(3-氯苯基)-4-環丙基氰吡啶(800 mg，產率59.2%)。LC-MS: m/z= 289.0 (M+H) +，滯留時間2.25分鐘(方法A)。
步驟5:  3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-環丙基氰吡啶：
Figure 02_image1287
在0 °C下向於 N,N-二甲基甲醯胺(10.0 mL)中之3-氯-5-(3-氯苯基)-4-環丙基氰吡啶(0.8 g, 2.8 mmol)溶液添加氫化鈉(0.14 g, 3.4 mmol, 60%於油中)。將該混合物在0 °C下攪拌20分鐘且添加苯甲醇(0.3 g, 2.8 mmol)。使該混合物升溫至室溫並保持攪拌再0.5小時。以冰水終止反應，並以乙酸乙酯萃取兩次。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 5/1)純化，得到呈黃色油狀物之3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-環丙基氰吡啶(600 mg，產率60.5%)。LC-MS: m/z= 361.0 (M+H) +，滯留時間2.29分鐘(方法A)。
步驟6: 3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-環丙基吡啶甲酸：
Figure 02_image1289
向於四氫呋喃/水(20.0 mL/10.0 mL)中之3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-環丙基氰吡啶(400 mg, 1.1 mmol)溶液添加氫氧化鉀(200 mg, 3.6 mmol)。將該混合物在室溫下攪拌過夜並濃縮以去除四氫呋喃。所得水溶液係以3N/L鹽酸酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾，以水洗滌並乾燥以得到呈白色固體之3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-環丙基吡啶甲酸(296 mg，產率71.4%)。LC-MS: m/z= 380.0 (M+H) +，滯留時間1.68分鐘(方法A)。
步驟7: (3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-環丙基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯：
Figure 02_image1291
將於二氯甲烷(10.0 mL)中之3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-環丙基吡啶甲酸(296 mg, 0.8 mmol)、甘胺酸乙酯鹽酸鹽(140 mg, 0.96 mmol)、六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯啶基鏻(500 mg, 0.96 mmol)及三乙胺(404 mg, 4.0 mmol)混合物在室溫下攪拌過夜。以水終止反應，並以二氯甲烷萃取。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。殘餘物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 2/1)純化，得到呈黃色固體之(3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-環丙基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(306 mg，產率81.7%)。LC-MS: m/z= 465.0 (M+H) +，滯留時間2.26分鐘(方法A)。
步驟8: (5-(3-氯苯基)-4-環丙基-3-羥基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯：
Figure 02_image1293
將於四氫呋喃(20.0 mL)中之(3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-環丙基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(300 mg, 0.64 mmol)及10%鈀碳(20.0 mg)混合物在室溫於氫氣環境下攪拌5.0小時。將該混合物過濾並將濾液濃縮。得到呈白色固體之(5-(3-氯苯基)-4-環丙基-3-羥基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(210 mg，產率82.6%)。LC-MS: m/z= 376.0 (M+H) +，滯留時間2.55分鐘(方法A)。
步驟9: (5-(3-氯苯基)-4-環丙基-3-羥基吡啶甲醯基)甘胺酸：
Figure 02_image1295
向於四氫呋喃/水(10.0 mL/5.0 mL)中之(5-(3-氯苯基)-4-環丙基-3-羥基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(200 mg, 0.52 mmol)溶液添加氫氧化鋰單水合物(210 mg, 5.0 mmol)。將該混合物在室溫下攪拌過夜並濃縮以去除四氫呋喃。所得水溶液係以3N/L鹽酸酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾，以水洗滌並乾燥以得到呈白色固體之(5-(3-氯苯基)-4-環丙基-3-羥基吡啶甲醯基)甘胺酸 (106.5 mg，產率57.5%)。LC-MS: m/z= 347.0 (M+H) +，滯留時間5.03分鐘(方法A)。 1H NMR  (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ12.88 (s, 1H), 9.37 (t, J= 6.1 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.55 – 7.51 (m, 2H), 7.50 – 7.44 (m, 1H), 4.01 (t, J= 10.3 Hz, 2H), 1.84 (tt, J= 8.7, 5.7 Hz, 1H), 0.81 – 0.67 (m, 2H), 0.67 – 0.52 (m, 2H)。 實例69：化合物70之製備
化合物70之製備(CP-0287)。
Figure 02_image1297
步驟1: 3,5-二氯-4-(二氟甲基)吡啶：
Figure 02_image1299
在-20 °C下向3,5-二氯異菸鹼酸醛(1.75 g, 10.0 mmol)之二氯甲烷(25.0 mL)溶液逐滴添加三氟化二乙基胺基硫(3.2 g, 20  mmol)。該混合物係於室溫下攪拌12.0小時。將反應物以冰水稀釋並用二氯甲烷萃取兩次。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮。得到呈黃色固體之所要產物(1.05 g, 70.4%)。LC-MS: m/z= 198.0 (M+H) +，滯留時間1.95分鐘(方法A)。
步驟2: 3,5-二氯-4-(二氟甲基)吡啶1-氧化物：
Figure 02_image1301
向3,5-二氯-4-(二氟甲基)吡啶(1.0 g, 5.0 mmol)之二氯甲烷(25.0 mL)溶液逐滴添加3-氯苯過氧酸(2.02 g, 10 mmol, 85%)。該混合物係於室溫下攪拌過夜。將反應物以水稀釋並用二氯甲烷萃取兩次。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮。殘餘物經急驟層析法(二氯甲烷/甲醇= 100/3)純化，得到呈黃色固體之3,5-二氯-4-(二氟甲基)吡啶1-氧化物(0.8 g，產率74.1%)。LC-MS: m/z= 214.0 (M+H) +，滯留時間1.57分鐘(方法A)。
步驟3: 3,5-二氯-4-(二氟甲基)氰吡啶：
Figure 02_image1303
在0 °C下向於乙腈(30.0 mL)中之3,5-二氯-4-(二氟甲基)吡啶1-氧化物(0.8 g, 3.7 mmol)及三乙胺(0.75 g, 7.4 mmol)溶液逐滴添加三甲基矽烷甲腈(0.74g, 7.4 mmol)。該混合物係於80 °C下攪拌過夜。將反應物用水稀釋並用乙酸乙酯萃取兩次。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮。殘餘物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 10/1)純化，得到呈黃色油狀物之3,5-二氯-4-(二氟甲基)氰吡啶(0.35 g，產率61%)。LC-MS: m/z= 223.0 (M+H) +，滯留時間1.93分鐘(方法A)。
步驟4:  3-氯-5-(3-氯苯基)-4-(二氟甲基)氰吡啶：
Figure 02_image1305
向於 N,N-二甲基甲醯胺/水(20.0 mL/5.0 mL)中之3,5-二氯-4-(二氟甲基)氰吡啶(0.49 g, 2.2 mmol)、(3-氯苯基)硼酸(0.37 g, 2.2 mmol)及碳酸鉀(0.6g, 4.4mmol)溶液添加[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (0.15 g, 0.22 mmol)。將該混合物在50 °C於氮氣下攪拌12.0小時並冷卻至室溫。將乙酸乙酯及水加入至該溶液中，並分離各層。將有機層以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並濃縮至乾燥。殘餘物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 3/1)純化，得到呈黃色固體之3-氯-5-(3-氯苯基)-4-(二氟甲基)氰吡啶(0.48 g，產率74.2%)。LC-MS: m/z= 299.0 (M+H) +，滯留時間2.10分鐘(方法A)。
步驟5：3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-(二氟甲基)氰吡啶：
Figure 02_image1307
在0 °C下向於 N,N-二甲基甲醯胺(10.0 mL)中之3-氯-5-(3-氯苯基)-4-(二氟甲基)氰吡啶(0.48 g , 1.6 mmol)溶液添加氫化鈉(76.8 mg, 1.92 mmol, 60%於油中)。將該混合物在0 °C下攪拌20分鐘且添加苯甲醇(0.18 g, 1.6 mmol)。使該混合物升溫至室溫並保持攪拌再0.5小時。以冰水終止反應，並以乙酸乙酯萃取兩次。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。粗產物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 10/1)純化，得到呈黃色油狀物之3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-(二氟甲基)氰吡啶(400 mg，產率64.5%)。LC-MS: m/z= 371.0 (M+H) +，滯留時間2.20分鐘(方法A)。
步驟6: 5-(3-氯苯基)-4-(二氟甲基)-3-羥基吡啶甲酸：
Figure 02_image1309
將於50%硫酸(10.0 mL)中之3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-(二氟甲基)氰吡啶(370 mg, 1.0 mmol)混合物在100°C下攪拌3.0小時。將該溶液以冰水稀釋。將所得固體過濾，以水洗滌並乾燥，以得到呈灰色固體之5-(3-氯苯基)-4-(二氟甲基)-3-羥基吡啶甲酸(200 mg，產率61.7%)。LC-MS: m/z= 300.0 (M+H) +，滯留時間2.09分鐘(方法A)。
步驟7: (5-(3-氯苯基)-4-(二氟甲基)-3-羥基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯：
Figure 02_image1311
將於二氯甲烷(10.0 mL)中之5-(3-氯苯基)-4-(二氟甲基)-3-羥基吡啶甲酸(200 mg, 0.66 mmol)、甘胺酸乙酯鹽酸鹽(100 mg, 0.75 mmol)、六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯啶基鏻(390 mg, 0.75 mmol)及三乙胺(0.34 g, 3.3 mmol)混合物在室溫下攪拌過夜。以水終止反應，並以二氯甲烷萃取。分離出有機層，以濃鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。殘餘物經急驟層析法(石油醚/乙酸乙酯= 1/1)純化，得到呈黃色固體之(5-(3-氯苯基)-4-(二氟甲基)-3-羥基吡啶甲醯基)甘胺酸乙酯(150 mg，產率58.8%)。LC-MS: m/z= 385.0 (M+H) +，滯留時間2.14分鐘(方法A)。
步驟8: (5-(3-氯苯基)-4-(二氟甲基)-3-羥基吡啶甲醯基)甘胺酸：
Figure 02_image1313
向於四氫呋喃/水(10.0 mL/5.0 mL)中之(5-(3-氯苯基)-4-(二氟甲基)-3-羥基吡啶甲醯基)-甘胺酸乙酯(130 mg, 0.33 mmol)溶液添加氫氧化鋰單水合物(138 mg, 3.3 mmol)。將該混合物在室溫下攪拌過夜並濃縮以去除四氫呋喃。所得水溶液係以3N/L鹽酸酸化至pH=3~4。將沉澱物過濾，以水洗滌並乾燥以得到呈白色固體之(5-(3-氯苯基)-4-(二氟甲基)-3-羥基吡啶甲醯基)甘胺酸(38.1 mg，產率31.5%)。LC-MS: m/z= 357.0 (M+H) +，滯留時間4.91分鐘(方法A)。 1H NMR  (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ13.35 (s, 1H), 9.66 – 9.44 (m, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.64 – 7.47 (m, 3H), 7.40 (d, J= 7.3 Hz, 1H), 7.21 – 6.81 (m, 1H), 4.03 (d, J= 6.1 Hz, 2H)。 活體外測定法展現PHD抑制作用
判定本發明所選化合物之酶最大半抑制濃度(IC 50)值。
利用時間解析螢光共振能量轉移(TR-FRET)測定法判定PHD抑制劑對於全長人類脯胺醯基-4-羥化酶結構域(PHD)酶PHD1、PHD2及PHD3之酶最大半抑制濃度(IC 50)值。TR-FRET測定法係基於羥基化HIF-1α肽與由VHL、EloB及EloC所形成之複合體(VBC)的特定結合而開發，以產生螢光信號。TR-FRET之鋱(Tb)-供體（單株抗體抗6His-Tb-穴狀化合物Gold）及D2-受體（鏈黴親合素[SA]-D2）係分別連結VBC複合體及HIF-1α肽。VBC複合體在被羥基化時會特異性地結合HIF-1α肽，使能量可從TR-FRET供體轉移到受體（ 圖 1）。 材料及方法
除非另有說明，所有的化學品與材料皆為標準實驗室等級且購自Sigma-Aldrich公司 (St. Louis, MO, USA)。 試劑 TR-FRET試劑
單株抗體抗6His-Tb-穴狀化合物Gold (目錄編號61HI2TLA)及鏈黴親合素(SA)-D2 (目錄編號610SADLA)係購自CisBio國際公司(Bedford, MA, USA)。
代表胺基酸547至581且包含脯胺酸564 PHD2羥化位置之N-端生物素化HIF-1α C35合成肽係購自California Peptide Research公司(Salt Lake City, UT, USA)。
重組蛋白
VBC複合體
His標記之重組VHL蛋白，EloB及EloC複合體(His-VBC)，係由Axxam公司(Milan, Italy)供應。重組人類(美國國家生物技術資訊中心[NCBI]登錄號NP_00542.1)在胺基酸55至213的C端係含有His標記且稱為VHL-His。VHL-His在 E. coli中係與全長人類EloB (NCBI登錄號Q15370.1)及全長人類EloC (NCBI登錄號Q15369.1)一起表現，且藉由親和性層析法在鎳-氮基三乙酸(Ni-NTA)管柱上呈His-VBC複合體純化出。以十二烷基磺酸鈉聚丙烯醯胺凝膠電泳(SDS-PAGE)評估純度(~80%)。
PHD1
重組人類PHD1蛋白(目錄編號81064，批號24717001)係購自Active Motif公司(Carlsbad, CA, USA)。PHD1係於一桿狀病毒表現系統中以具有N-端FLAG標籤(分子量44.9 kDa)之全長蛋白表現(NCBI登錄號NP_542770.2)。以SDS-PAGE評估純度(＞90%)。
PHD2
全長人類PHD2酶係由Beryllium公司(Bedford, MA, USA)以桿狀病毒感染的昆蟲細胞(BIIC)表現系統產生。該PHD2構築體含有PHD2的胺基酸1至426 (UniProt Knowledgebase[UniProtKB]/Swiss-Prot accession編號Q9GZT9.1)，與His標籤及在N-端的Tobacco Etch Virus (TEV)蛋白酶裂解位置。該構築體係於Sf9昆蟲細胞中表現，藉由Ni-NTA管柱純化並用TEV蛋白酶酶切移除His標籤。以SDS-PAGE評估最終切割蛋白純度且發現純度＞94 %。
PHD3
重組人類PHD3蛋白(分子量31.1 kDa)係購自Active Motif公司(Carlsbad, CA, USA)。其係於 E. coli中以具有N-端6-His標籤(目錄號81033，批號24417001)之全長蛋白表現(NCBI登錄號NP_071356.1)。以SDS-PAGE評估純度且發現純度＞75%。
PHD抑制劑。
合成小分子PHD抑制劑且其身分係如本文所述確認。 TR-FRET測定法流程
PHD抑制劑化合物係於白色384孔Optiplate微量盤(目錄編號6007290, Perkin Elmer, Waltham, MA, USA)中以10 μL反應體積與PHD酶預培育。為此，用稀釋緩衝液(50 mM HEPES [4-(2-羥基乙基)-1-哌嗪乙烷磺酸] pH 7.5, 50 mM氯化鈉[NaCl], 0.01% Tween-20, 0.01%純化牛血清蛋白[BSA])將5 μL PHD抑制劑連續稀釋並與5 μL PHD酶混液（在含有PHD酶(60 nM PHD1, 20 nM PHD2, 140 nM PHD3)、40 µM硫酸亞鐵銨(FAS)、4 mM抗壞血酸鈉(Na)之稀釋緩衝液中製備成4X濃縮液）混合。在不旋轉情況下將微量盤在室溫下培育30分鐘。
接著添加將5微升的VBC/抗6His-Tb-穴狀化合物Gold混合液（在含有20 nM His-VBC、1.32 nM單株抗體抗6His-Tb-穴狀化合物Gold之稀釋緩衝液中製備成4X濃縮液）。此步驟之後立即添加5 μL的HIF-1α C35基質混合液（在含有120 nM經生物素標記的HIF-1α C35、132 nM SA-D2、4 μM 2-側氧基戊二酸鹽(2-OG)之稀釋緩衝液中製備成4X濃縮液）以達到20 μL的最終濃度。
最終測定反應物含有50 mM HEPES，pH 7.5，50 mM NaCl、1 μM 2-OG、10 μM FAS、1 mM抗壞血酸鈉、0.01% Tween-20、0.01%純化BSA、30 nM經生物素標記的HIF-1α C35、5 nM His-VBC、0.33 nM單株抗體抗6His-Tb-穴狀化合物Gold、33 nM SA-D2及PHD酶(15 nM PHD1、5 nM PHD2、或35 nM PHD3)與稀釋化合物。
至於PHD抑制劑化合物之IC 50量測，係將反應物在室溫下培育10分鐘並接著在Perkin Elmer EnVision (Waltham, MA, USA)上以激發波長340 nm及發射波長615 nm及665 nm進行讀數。數據表示在615 nm及665 nm的信號強度係數，自動由Envision Manager軟體(Perkin Elmer, Waltham, MA, USA)計算。使用四參數曲線擬合利用GraphPad Prism 7.0 (GraphPad, La Jolla, CA, USA)判定IC 50值(平均值、標準差、平均值標準誤差、幾何平均數及95%信賴區間)，並呈現出針對665 nm及615 nm的計算比率所繪示的化合物濃度。將各濃度化合物以三重複進行TR-FRET測定法，並獨立重複三次。
由基於鄭-普魯薩福(Cheng Prussoff)方程式之IC 50計算Ki： Ki= IC50/(1+ [2-OG]/Km)
PHD1及PHD2測定法中的2-OG最終濃度皆為1 uM。在PHD1測定中2-OG的Km係判定為12.7 nM，而在PHD2測定中2-OG的Km係判定為22.6 nM。
例示性化合物的IC 50數據係描述於 表 1中。 表1. 例示性化合物的IC 50數據
化合物編號 結構 PHD1 IC 50(nM) PHD2 IC 50(nM) PHD3 IC 50(nM)
1.      
Figure 02_image1315
 A A --
2.      
Figure 02_image1317
 A A A
3.      
Figure 02_image1319
 A A A
4.      
Figure 02_image1321
 A A --
5.      
Figure 02_image1323
 A A A
6.      
Figure 02_image1325
 A A --
7.      
Figure 02_image1327
 A A A
8.      
Figure 02_image1329
 A A --
9.      
Figure 02_image1331
 A A A
10.   
Figure 02_image1333
 A A A
11.   
Figure 02_image1335
 A A --
12.   
Figure 02_image1337
 A A --
13.   
Figure 02_image1339
 D D --
14.   
Figure 02_image1341
 C C --
15.   
Figure 02_image1343
 D D --
16.   
Figure 02_image1345
 C D --
17.   
Figure 02_image1347
 A A --
18.   
Figure 02_image1349
 A A A
19.   
Figure 02_image1351
 A A A
20.   
Figure 02_image1353
 A A A
21.   
Figure 02_image1355
 A A A
22.   
Figure 02_image1357
 A A A
23.   
Figure 02_image1359
 B B --
24.   
Figure 02_image1361
 B B --
25.   
Figure 02_image1363
 A A A
26.   
Figure 02_image1365
 A A A
27.   
Figure 02_image1367
 A A B
28.   
Figure 02_image1369
 A A A
29.   
Figure 02_image1371
 B B --
30.   
Figure 02_image1373
 C C --
31.   
Figure 02_image1375
 A A A
32.   
Figure 02_image1377
 A A A
33.   
Figure 02_image1379
 A A A
34.   
Figure 02_image1381
 A A --
35.   
Figure 02_image1383
 B B --
36.   
Figure 02_image1385
 A A A
37.   
Figure 02_image1387
 A A A
38.   
Figure 02_image1389
 A A A
39.   
Figure 02_image1391
 A A A
40.   
Figure 02_image1393
 B B --
41.   
Figure 02_image1395
 A A A
42.   
Figure 02_image1397
 A A A
43.   
Figure 02_image1399
 A A A
44.   
Figure 02_image1401
 A A A
45.   
Figure 02_image1403
 A A --
46.   
Figure 02_image1405
 A A --
47.      
Figure 02_image1407
 A A A
48.      
Figure 02_image1409
 C C --
49.      
Figure 02_image1411
 A A --
50.   
Figure 02_image1413
 B B --
51.   
Figure 02_image1415
 A B --
52.   
Figure 02_image1417
 A A --
53.   
Figure 02_image1419
 A A --
54.   
Figure 02_image1421
 B B --
55.   
Figure 02_image1423
 A B --
56.   
Figure 02_image1425
 A A --
57.   
Figure 02_image1427
 C B --
58.   
Figure 02_image1429
 C B --
59.   
Figure 02_image1431
 C B --
60.   
Figure 02_image1433
 A A --
61.   
Figure 02_image1435
 B B --
62.   
Figure 02_image1437
 A A --
63.   
Figure 02_image1439
 A A --
64.   
Figure 02_image1441
 B B --
65.   
Figure 02_image1443
 A A --
66.   
Figure 02_image1445
 A A --
67.   
Figure 02_image1447
 A A --
68.   
Figure 02_image1449
 A A --
69.   
Figure 02_image1451
 B B --
70.   
Figure 02_image1453
 B B --
   符號說明：A = IC 50＜ 100 nM                       B = 100 nM ≤ IC 50＜ 1000 nM                       C = 1000 nM ≤ IC 50＜ 10000 nM                       D = IC 50≥ 10000 nM
熟習此技藝者可由進行的說明而容易確認本發明之必須特性，且在不偏離其精神與範圍下，可施行本發明之各種改變與修飾以使其適合各種用途與條件。
所有於本申請案中所提及之美國或外國參考文獻、專利或專利申請案係如同在本文寫入般以全文引用方式併入本文中。若出現任何不一致之處，以本文字面意義上揭露的資料為準。
圖 1為顯現用於PHD酶(PHD1、PHD2及PHD3)之TR-FRET測定法原理之例示性示意圖。在2-側氧基戊二酸鹽及O 2存在下，PHD酶將生物素標記之HIF-1α肽之脯胺酸564羥化而導致生物素標記之HIF-1α-羥脯胺酸、琥珀酸鹽及CO 2的生成。與His標記之VHL蛋白、EloB、EloC複合體(His-VBC)結合之供體螢光團複合體單株抗體抗6His-鋱(Tb)-穴狀化合物Gold與HIF-1α-羥脯胺酸結合之受體螢光團SA-D2複合體所產生的近接導致了螢光共振能量轉移信號可被偵測及定量。
Figure 110129908-A0101-11-0002-3

Claims (90)

  1. 一種式(I)化合物，
    Figure 03_image1455
    (I) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： R 1為視情況經取代之C 1-3烷基、視情況經取代之C 3-6環烷基、或視情況經取代之3至6員雜環烷基； R 2為氫、視情況經取代之C 1-3烷基、鹵素、CN、或視情況經取代之環烷基； R 3為氫、視情況經取代之烷基、視情況經取代之雜芳基、視情況經取代之環烷基、視情況經取代之雜環烷基、羰基、***、硫醚、視情況經取代之芳磺醯基、視情況經取代之雜芳磺醯基、視情況經取代之芳烷基、視情況經取代之炔基、或視情況經取代之雜炔基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基；且 R 6為OH或酯。
  2. 如請求項1之化合物，其具有依據式(I)之結構
    Figure 03_image1457
    (I) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，且其中R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基，或者R 1為C 3-6環烷基或3至6員雜環烷基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 3係選自以下組成之群組： 氫；
    Figure 03_image1459
    ，其中X為共價鍵、O、S、SO 2、C 1‑4亞烷基、C 2-4亞炔基、或C 2-4雜亞炔基；每個A獨立地為N或CR 9、R 8及R 9獨立地為氫、鹵素、OR 10、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，而R 10為C 1-3烷基或芳基；
    Figure 03_image1461
    ，其中B為N或CR 11，D為N、NH或CR 11，E為N、CR 11或CHR 12，而R 11及R 12獨立地為氫或C 1-3烷基，且其中虛線圓圈代表共軛系統的存在或不存在；
    Figure 03_image1463
    ，其中每個G獨立地為N、NH、NR 13或CR 14；R 13為C 3-6環烷基、3至6員雜環烷基、視情況經一或多個鹵素所取代之芳基、視情況經一或多個視情況取代的C 1-3烷基所取代之芳基、雜芳基、視情況經t-丁氧基羰基所取代之雜環烷基、視情況經芳基所取代之C 1-4烷基且該芳基視情況經一或多個鹵素取代，而R 14為氫、鹵素、C 3-6環烷基、3至6員雜環烷基、或C 1-3烷基；
    Figure 03_image1465
    ，其中I為O、S或CH，J為N或CH，R 15為氫、C 3-6環烷基、3至6員雜環烷基、或C 1-3烷基，而R 19為氫、C 3-6環烷基、3至6員雜環烷基、或芳基； OR 16，其中R 16為芳基；
    Figure 03_image1467
    ，其中X 1為N或CH，而R 20為視情況經取代之芳基；以及 COR 17，其中R 17為芳基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基；且 R 6為OH或OR 18，其中R 18為C 1-6烷基。
  3. 如請求項1或2之化合物，其具有依據式II之結構
    Figure 03_image1469
    (II) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，且其中R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基，或者R 1為C 3-6環烷基或3至6員雜環烷基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 3係選自以下組成之群組： 氫；
    Figure 03_image1471
    ，其中X為共價鍵、O、S、SO 2、C 1‑4亞烷基、C 2-4亞炔基、或C 2-4雜亞炔基；每個A獨立地為N或CR 9、R 8及R 9獨立地為氫、鹵素、OR 10、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，而R 10為C 1-3烷基或芳基；
    Figure 03_image1473
    ，其中B為N或CR 11，D為N、NH或CR 11，E為N、CR 11或CHR 12，而R 11及R 12獨立地為氫或C 1-3烷基，且其中虛線圓圈代表共軛系統的存在或不存在；
    Figure 03_image1475
    ，其中每個G獨立地為N、NR 13、CR 14，R 13為C 3-6環烷基或3至6員雜環烷基、視情況經一或多個鹵素所取代之芳基、視情況經一或多個視情況取代的C 1-3烷基所取代之芳基、雜芳基、視情況經t-丁氧基羰基所取代之雜環烷基、視情況經芳基所取代之C 1-4烷基且該芳基視情況經一或多個鹵素取代，而R 14為氫、鹵素、C 3-6環烷基、3至6員雜環烷基、或C 1-3烷基；
    Figure 03_image1476
    ，其中I為O、S或CH，J為N或CH，R 15為氫、C 3-6環烷基、3至6員雜環烷基、或C 1-3烷基，而R 19為氫、C 3-6環烷基、3至6員雜環烷基、或芳基； OR 16，其中R 16為芳基；
    Figure 03_image1478
    ，其中X 1為N或CH，而R 20為視情況經取代之芳基；以及 COR 17，其中R 17為芳基； 且 R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基。
  4. 如請求項1至3中任一項之化合物，其中 R 1為視情況經取代之C 1-3烷基；及/或 R 3為氫、視情況經取代之芳基、視情況經取代之雜芳基、視情況經取代之環烷基、視情況經取代之雜環烷基、羰基或醚。
  5. 如請求項1至3中任一項之化合物，其中 R 1為視情況經OR 7或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，且其中R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基；及/或 R 3係選自以下組成之群組：氫、
    Figure 03_image1480
    、
    Figure 03_image1482
    、
    Figure 03_image1484
    、或
    Figure 03_image1486
    。
  6. 如請求項1至3中任一項之化合物，其中R 3為
    Figure 03_image1488
    、
    Figure 03_image1490
    、
    Figure 03_image1492
    、
    Figure 03_image1494
    、
    Figure 03_image1496
    、
    Figure 03_image1498
    、
    Figure 03_image1500
    、
    Figure 03_image1502
    、或
    Figure 03_image1504
    。
  7. 如請求項1至6中任一項之化合物，其中R 1為未經取代之C 1-3烷基，R 2為氫，R 4及R 5各為氫，而R 6為OH。
  8. 如請求項1至6中任一項之化合物，其中R 1及R 2各為未經取代之C 1-3烷基，R 4及R 5各為氫，而R 6為OH。
  9. 如請求項1至6中任一項之化合物，其中R 2為未經取代之C 1-3烷基，R 3為氫，R 4及R 5各為氫，而R 6為OH。
  10. 如請求項1至3中任一項之化合物，其具有依據式(III)之結構
    Figure 03_image1506
    (III) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中 每個A獨立地為N或CR 9； R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基； R 8及R 9獨立地為氫、鹵素、OR 10、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基；且 R 10為C 1-3烷基或芳基。
  11. 如請求項1至3及請求項10中任一項之化合物，其具有依據式(IV)之結構
    Figure 03_image1508
    (IV) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中 R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基； R 8及R 9獨立地為氫、鹵素、OR 10、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基；且 R 10為C 1-3烷基或芳基。
  12. 如請求項1至3及請求項10中任一項之化合物，其具有依據式(V)之結構
    Figure 03_image1510
    (V) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基； R 8及每個R 9獨立地為氫、鹵素、OR 10、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基；且 R 10為C 1-3烷基或芳基。
  13. 如請求項1至3中任一項之化合物，其具有依據式(VI)之結構
    Figure 03_image1512
    (VI) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： B為N或CR 11； D為N、NH或CR 11； E為N、CR 11或CHR 12； R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基； R 11及R 12獨立地為氫或C 1-3烷基；且 其中虛線圓圈代表共軛系統的存在或不存在。
  14. 如請求項13之化合物，其具有依據式(VII)之結構
    Figure 03_image1514
    (VII) 或其醫藥學上可接受之鹽。
  15. 如請求項13之化合物，其具有依據式(VIII)之結構
    Figure 03_image1516
    (VIII) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： B為N或CR 11； R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基；且 R 12為氫或C 1-3烷基。
  16. 如請求項1至3中任一項之化合物，其具有依據式(IX)之結構
    Figure 03_image1518
    (IX) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： 每個G獨立地為N、NH、NR 13或CR 14； R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，且其中R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； R 13為環丙基、視情況經一或多個鹵素所取代之芳基、視情況經一或多個視情況取代的C 1-3烷基所取代之芳基、雜芳基、視情況經t-丁氧基羰基所取代之雜環烷基、視情況經芳基所取代之C 1-4烷基且該芳基視情況經一或多個鹵素取代；且 R 14為氫、鹵素、環丙基、或C 1-3烷基。
  17. 如請求項16之化合物，其具有依據式(X)之結構
    Figure 03_image1520
    (X) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： 每個G獨立地為N、NR 13或CR 14； R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，且其中R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； R 13為環丙基、視情況經一或多個鹵素所取代之芳基、視情況經一或多個視情況取代的C 1-3烷基所取代之芳基、雜芳基、視情況經t-丁氧基羰基所取代之雜環烷基、視情況經芳基所取代之C 1-4烷基且該芳基視情況經一或多個鹵素取代；且 R 14為氫、鹵素、環丙基、或C 1-3烷基。
  18. 如請求項16或17之化合物，其具有依據式(XI)之結構
    Figure 03_image1522
    (XI) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中 每個G獨立地為N或NR 13； R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，且其中R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； R 13為環丙基、雜芳基、視情況經一或多個鹵素所取代之芳基、視情況經一或多個視情況取代的C 1-3烷基所取代之芳基、視情況經t-丁氧基羰基所取代之雜環烷基、視情況經芳基所取代之C 1-4烷基且該芳基視情況經一或多個鹵素取代；且 R 14為氫、鹵素、環丙基、或C 1-3烷基。
  19. 如請求項16至18中任一項之化合物，其具有依據式(XIIa)或式(XIIa)之結構
    Figure 03_image1524
    Figure 03_image1526
    (XIIa)                                            (XIIb) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基； R 13為環丙基、雜芳基、視情況經一或多個鹵素所取代之芳基、視情況經一或多個視情況取代的C 1-3烷基所取代之芳基、視情況經t-丁氧基羰基所取代之雜環烷基、視情況經芳基所取代之C 1-4烷基且該芳基視情況經一或多個鹵素取代；且 R 14為氫、鹵素、環丙基、或C 1-3烷基。
  20. 如請求項16至19中任一項之化合物，其具有依據式(XIII)之結構
    Figure 03_image1528
    (XIII) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基；且 R 13為芳基或雜芳基。
  21. 如請求項1至3中任一項之化合物，其具有依據式(XIV)之結構
    Figure 03_image1530
    (XIV) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： I為O、S或CH； J為N或CH； R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，且其中R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； R 15為氫或C 1-3烷基；且 R 19為氫或芳基。
  22. 如請求項21之化合物，其具有依據式(XV)之結構
    Figure 03_image1532
    (XV) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： I為O、S或CH； R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基；且 R 15為氫或C 1-3烷基。 R 19為氫或芳基。
  23. 如請求項1至3及請求項10中任一項之化合物，其具有依據式(XVI)之結構
    Figure 03_image1534
    (XVI) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中 X為O、S或SO 2； R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基； R 8及R 9獨立地為氫、鹵素、OR 10、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基；且 R 10為C 1-3烷基或芳基。
  24. 如請求項1至3及請求項10中任一項之化合物，其具有依據式(XVII)之結構
    Figure 03_image1536
    (XVII) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中 R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基； R 8及R 9獨立地為氫、鹵素、OR 10、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基；且 R 10為C 1-3烷基或芳基。
  25. 如請求項1至3及請求項10中任一項之化合物，其具有依據式(XVIII)之結構
    Figure 03_image1538
    (XVIII) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中 R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基； R 8及R 9獨立地為氫、鹵素、OR 10、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基；且 R 10為C 1-3烷基或芳基。
  26. 如請求項16之化合物，其具有依據式(XIX)之結構
    Figure 03_image1540
    (XIX) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基；且 R 13為環丙基、視情況經一或多個鹵素所取代之芳基、視情況經一或多個視情況取代的C 1-3烷基所取代之芳基、雜芳基、視情況經t-丁氧基羰基所取代之雜環烷基、視情況經芳基所取代之C 1-4烷基且該芳基視情況經一或多個鹵素取代。
  27. 如請求項16之化合物，其具有依據式(XX)之結構
    Figure 03_image1542
    (XX) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基；且 R 13為環丙基、視情況經一或多個鹵素所取代之芳基、視情況經一或多個視情況取代的C 1-3烷基所取代之芳基、雜芳基、視情況經t-丁氧基羰基所取代之雜環烷基、視情況經芳基所取代之C 1-4烷基且該芳基視情況經一或多個鹵素取代。
  28. 如請求項16之化合物，其具有依據式(XXI)之結構
    Figure 03_image1544
    (XXI) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基；且 R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基。
  29. 如請求項1至3中任一項之化合物，其具有依據式(XXII)之結構
    Figure 03_image1546
    (XXII) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基；且 R 20為視情況經取代之芳基。
  30. 如請求項1至3中任一項之化合物，其具有依據式(XXIII)之結構
    Figure 03_image1548
    (XXIII) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： R 1為視情況經OR 7、鹵素或芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基視情況經鹵素取代，或者R 1為環丙基； R 2為氫、鹵素、CN、或視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基； R 4及R 5獨立地為氫、視情況經一或多個鹵素所取代之C 1-3烷基，或者R 4及R 5連同其連接的碳一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； R 7為視情況經芳基所取代之C 1-3烷基；且 R 20為視情況經取代之芳基。
  31. 如請求項1至6中任一項之化合物，其中R 3不是氫。
  32. 如請求項1至6中任一項之化合物，其中R 3為未經取代之苯基、氟苯基、氯苯基、二氟苯基、二氯苯基或三氟甲苯基。
  33. 如請求項1至6中任一項之化合物，其中R 3為OR 16、SR 16、SO 2R 16、CH 2R 16、CH 2CH 2R 16、C≡CR 16、或C≡CCH 2OR 16，且其中R 16為芳基。
  34. 如請求項33之化合物，其中R 16為苯基。
  35. 如請求項1至6中任一項之化合物，其中R 3為吡咯基、四唑基、***基或吡唑基，其視情況經芳基或環烷基取代。
  36. 如請求項1至6中任一項之化合物，其中R 3為哌啶基或哌嗪基，其視情況經芳基取代。
  37. 如請求項35或36之化合物，其中R 3係未經取代或經環丙基取代、或為未經取代之苯基、氟苯基、氯苯基、二氟苯基、二氯苯基或三氟甲苯基。
  38. 如請求項1至6中任一項之化合物，其中R 3為COR 17，且其中R 17為芳基。
  39. 如請求項38之化合物，其中R 17為苯基。
  40. 如請求項1至39中任一項之化合物，其中R 1為環丙基或經取代之C 1-3烷基。
  41. 如請求項40之化合物，其中R 1為環丙基或二氟甲基。
  42. 如請求項1至39中任一項之化合物，其中R 1為未經取代之C 1-3烷基。
  43. 如請求項42之化合物，其中R 1為CH 2CH 3。
  44. 如請求項42之化合物，其中R 1為CH 3。
  45. 如請求項1至6及請求項9至39中任一項之化合物，其中R 1為經芳基所取代之C 1-3烷基且該芳基經鹵素取代。
  46. 如請求項45之化合物，其中R 1為
    Figure 03_image1549
    。
  47. 如請求項1至6及請求項9至39中任一項之化合物，其中R 1為經OBn所取代之C 1-3烷基。
  48. 如請求項47之化合物，其中R 1為CH 2CH 2OBn。
  49. 如請求項1至7及請求項10至48中任一項之化合物，其中R 2為氫。
  50. 如請求項1至6及請求項8至48中任一項之化合物，其中R 2為未經取代之C 1-3烷基。
  51. 如請求項50之化合物，其中R 2為CH 3。
  52. 如請求項1至51中任一項之化合物，其中R 4為氫且R 5為氫。
  53. 如請求項1至6及請求項10至51中任一項之化合物，其中R 4為氫且R 5為C 1-3烷基。
  54. 如請求項53之化合物，其中R 5為CH 3。
  55. 如請求項1至3及請求項10至51中任一項之化合物，其中R 4為C 1-3烷基且R 5為C 1-3烷基。
  56. 如請求項55之化合物，其中R 4為CH 3且R 5為CH 3。
  57. 如請求項1至6及請求項10至51中任一項之化合物，其中R 4及R 5連同其連接的碳一起形成環烷基或雜環烷基。
  58. 如請求項57之化合物，其中該環烷基為環丙基。
  59. 如請求項57之化合物，其中該環烷基為環丁基。
  60. 如請求項57之化合物，其中該雜環烷基為
    Figure 03_image1551
    。
  61. 如請求項1至6中任一項之化合物，其具有依據化合物1至50中之任一者之結構： 化合物編號 結構 化合物編號 結構 1
    Figure 03_image1553
     26
    Figure 03_image1555
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    Figure 03_image1571
         6
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     50
    Figure 03_image1651
    或其醫藥學上可接受之鹽。
  62. 如請求項1至6中任一項之化合物，其具有依據化合物51至70中之任一者之結構： 化合物編號 結構 化合物編號 結構 51
    Figure 03_image1653
     52
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     70
    Figure 03_image1689
    或其醫藥學上可接受之鹽。
  63. 如請求項1至62中之任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中至少一個氫原子被氘原子取代。
  64. 一種包含有如請求項1至62中之任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽以及醫藥學上可接受之賦形劑的醫藥組成物。
  65. 一種用於治療PHD活性所介導之疾病的方法，包括向一個體投與如請求項1至62中之任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
  66. 如請求項65之方法，其中該PHD活性所介導之疾病為缺血性再灌注損傷。
  67. 如請求項66之方法，其中該缺血性再灌注損傷係選自中風、心肌梗塞及急性腎損傷。
  68. 如請求項65之方法，其中該PHD活性所介導之疾病為發炎性腸道疾病。
  69. 如請求項68之方法，其中該發炎性腸道疾病為潰瘍性結腸炎。
  70. 如請求項68之方法，其中該發炎性腸道疾病為克隆氏疾病。
  71. 如請求項65之方法，其中該PHD活性所介導之疾病為癌症。
  72. 如請求項71之方法，其中該癌症為大腸直腸癌。
  73. 如請求項65之方法，其中該PHD活性所介導之疾病為肝臟疾病。
  74. 如請求項65之方法，其中該PHD活性所介導之疾病為動脈粥狀硬化症。
  75. 如請求項65之方法，其中該PHD活性所介導之疾病為心血管疾病。
  76. 如請求項65之方法，其中該PHD活性所介導之疾病為眼睛之疾病或病況。
  77. 如請求項76之方法，其中該眼睛之疾病或病況係選自放射線視網膜病變、早產兒視網膜病變、糖尿病性視網膜病變、老年性黃斑部病變及眼部缺血。
  78. 如請求項65之方法，其中該疾病為貧血。
  79. 如請求項78之方法，其中該貧血為與慢性腎病相關的貧血。
  80. 如請求項65之方法，其中該疾病為慢性腎病。
  81. 如請求項65之方法，其中該疾病係與高氧症有關。
  82. 如請求項81之方法，其中該疾病為早產兒視網膜病變。
  83. 如請求項81之方法，其中該疾病為肺支氣管發育不全(BPD)。
  84. 如請求項65之方法，其中該疾病係選自缺血性心臟病、心臟瓣膜疾病、鬱血性心臟衰竭、急性肺損傷、肺部纖維化、肺動脈高血壓、慢性阻塞性肺病(COPD)、急性肝衰竭、肝纖維化及肝硬化。
  85. 如請求項65之方法，其中該疾病為呼吸道疾病、肺部疾病、呼吸道病毒感染或肺部病毒感染。
  86. 如請求項85之方法，其中該呼吸道疾病係選自於呼吸道感染、急性呼吸窘迫症候群、肺部發炎、肺炎及急性肺損傷。
  87. 如請求項85之方法，其中該肺部疾病為急性肺損傷(ALI)、支氣管炎、肺炎、肺纖維化、氣喘或急性呼吸窘迫症候群(ARDS)。
  88. 如請求項65之方法，其中該疾病為一或多個器官的損傷及/或衰竭。
  89. 如請求項88之方法，其中該疾病為急性器官損傷。
  90. 如請求項88之方法，其中該疾病為器官衰竭。
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