TW200800194A - Kinase inhibitors - Google Patents

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200800194 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明提供一種可用於治療源自細胞激素過度產生之病 況之p3 8激酶之新穎抑制劑。 【先前技術】 p38激酶為屬於絲胺酸/蘇胺酸激酶超族群之有絲***原 活化之蛋白質（MAP)激酶。此激酶藉細胞外應力如加熱、 UV光、及滲透應力以及藉發炎刺激如脂多糖所活化。當 ® 被活化時，p38激酶將細胞間蛋白質受質予以磷醯化（該受 質可調節發炎原細胞激素腫瘤壞死因子a(TNFa)及介白素-Ιβ(ΙΙ-Ιβ)之生物合成）。該等細胞激素與數種慢性發炎疾 病（Lee，et al··，Ann· Ν.Υ· Acad· Sci·，696，149-170 (1993); Muller-Ladner， Curr. Opin. Rheumatol·， 8， 210-220

(1996))、心臟血管及中樞神經系統幛礙（Salituro，et al·， Current Medicinal Chemistry，6，807-823 (1999))、及自我 免疫障礙（Pargellis，et al·，Nature Structural Biology，9(4)， 268-272 (2002))之病理學有關連。此外，有絲***原活化 之蛋白質激酶2(或pMAPKAPK2)之磷醯化形式亦為該p38 MAPK路徑中之激酶且可能藉p38 MAPK直接活化。 MAPKAPK2之基因敲除小鼠的研究顯示細胞激素產生減 少，提示MAPKAPK2可能為發炎反應之主要調節物且亦可 能為抗發炎治療之潛在標的（WO 2005120509)。 數種脲化合物（例如於WO 9923091 ; WO 01012188 ; WO 04004720 ； WO 04037789 ； WO 99/32111 ； US 2004/0058961 ； 114874.doc 200800194 —89 , W〇 〇3〇72569及臂〇 0043384)已被鑑定出為 p38 激酶抑制劑或細胞激素抑制劑。p38激酶抑制劑或細胞激 素抑制劑可能生產成本昂貴，且可能在生物利用性及吸收 ^有問題而限制了體内效果及治療用途。因此，極需有新 穎的小刀子細胞激素壓抑藥物，即，能以改良之效力及更 大之生物利用性來抑制p3 8激酶之化合物。 本發明提供一種可用於治療源自細胞激素過度產生之病 況之p3 8激酶之新穎抑制劑。 【發明内容】 本發明提供式I之化合物：

其中： X係遘自下列所組成之組群：

〇 (0 (ί〇 R1為Ci-c4烷基、視情況經一或兩個選自c】-c4烷氧基、 甲基及三氟甲基所組成組群之取代基取代之c3-c4環烷 基；或CVC4烷基鹵基； R2為視情況經烷基取代之苯基、或視情況經 烷基取代之吡啶基； 114874.doc 200800194 R3為胺基、C!-C4烷基、Cl-C4烷氧基、CrC4烷基鹵基、 視情況經選自曱基、三氟甲基或鹵基之取代基取代之c3_ C4環烧基；苯基或噻吩基，各視情沉經選自下列之第一取 代基取代··鹵基、CrC4烷基及CrQ烷氧基，及視情況進 一步經選自鹵基之第二取代基取代；或其醫藥可接受性 鹽。 本發明又提供一種於哺乳類中抑制p38激酶之方法，包

括對需此治療之哺乳類投與有效量之式I化合物或其醫藥 可接受性鹽。 本發明又提供一種於哺乳類中壓抑腫瘤壞死因子α (TNFa)產生之方法，包括對需此治療之哺乳類投與有效量 之式I化合物或其醫藥可接受性鹽。 本發明又提供一種於哺乳類中壓抑介白素-1β (IL-Ι β)產 生之方法，包括對需此治療之哺乳類投與有效量之式I化 合物或其醫藥可接受性鹽。 本發明又提供—德、a * & 仏種治療哺乳類之源自細胞激素過度產生 病況之方法，包括對需此治療之哺乳類投與有效量之式 I化合物或其醫藥可接受性鹽。 不贫明亦提供一 、 種於哺乳類中抑制敏感性賢瘤生長 法’包括對需此治療之者 ^ σ縻之南礼類投與P38抑制量之式I化 或其醫藥可接受性鹽c 本發明亦提供_絲# I， ，、種於哺乳類中抑制腫瘤遷移之方法 括對需此治療之 蘊叮拉/ ’、 _礼類技與PM抑制量之式I化合物或 樂可接受性鹽。 Λ 114874.doc 200800194 本發明亦提供一種於哺乳類中治療風濕 法，包括對需此治療之哺乳 p火之方 或其醫藥可接受性鹽 抑制量之式1化合物 荜一種醫藥調配物’包括式1化合物或其醫 ，本發明亦提供-種式1化合物或其醫藥可接受性鹽用於

製造供抑制p38激酶之醫藥之 、

卜本發明提供式I 藥可接受性鹽用於哺乳類中抑制p3 8激酶之 用途》再者’本發明提供—種適用於抑制p38激酶之醫藥 組合物’包括式1化合物或其醫藥可接受性鹽組合有醫藥 可接受性賦型劑、載劑或稀釋劑。 、 本V明亦提供一種式丨化合物或其醫藥可接受性鹽用於 製造供壓抑腫瘤壞死因子α (TNFa)產生之醫藥之用途。此 外，本發明提供式；[化合物或其醫藥可接受性鹽用於哺乳 類中供壓抑腫瘤壞死因子a (TNFa)產生之用途。再者，本 發明提供一種適用於壓抑腫瘤壞死因子a (tnf…產生之醫 藥組合物，包括式1化合物或其醫藥可接受性鹽組合有醫 藥可接受性賦型劑、载劑或稀釋劑。 本發明亦提供一種式Ϊ化合物或其醫藥可接受性鹽用於 製造供壓抑介白素-U 產生之醫藥之用途。此外， 本發明提供式I化合物或其醫藥可接受性鹽用於哺乳類中 供壓抑介白素-1β 產生之用途。再者，本發明提供 一種適用於®抑介白素·U (^^β)產生之醫藥組合物，包 114874.doc 200800194 括式i化合物或其醫藥可接受性鹽組合有醫藥可接受性賦 型劑、載劑或稀釋劑。 本發明亦提供一種式I化合物或其醫藥可接受性鹽用於 製造供治療源自細胞激素過度產生之病況之醫藥之用途。 此外，本發明提供式化合物或其醫藥可接受性鹽用於哺 乳類中供治療源自細胞激素過度產生之病況之用途。再 者，本發明提供一種適用於治療源自細胞激素過度產生之 病況之醫藥組合物，包括式I化合物或其醫藥可接受性鹽 組合有醫藥可接受性賦型劑、載劑或稀釋劑。 本發明亦提供一種式I化合物或其醫藥可接受性鹽用於 製造供抑制敏感性贅瘤生長之醫藥之用途。此外，本發明 提供式I化合物或其醫藥可接受性鹽用於哺乳類中供抑制 敏感性贅瘤生長之用途。再者，本發明提供一種適用於抑 制敏感性贅瘤生長之醫藥組合物，包括式J化合物或其醫 藥可接受性鹽組合有醫藥可接受性賦型劑、載劑或稀釋 劑。 本發明亦提供一種式Ϊ化合物或其醫藥可接受性鹽用於 製造供抑制腫瘤遷移之醫藥之用途。此外，本發明提供式 I化合物或其醫藥可接受性鹽用於哺乳類中供抑制腫瘤遷 移之用途。再者，本發明提供一種適用於抑制腫瘤遷移之 醫藥組合物，包括式][化合物或其醫藥可接受性鹽組合有 醫藥可接受性賦型劑、載劑或稀釋劑。 本發明亦提供一種式I化合物或其醫藥可接受性鹽用於 製造供治療風濕性關節炎之醫藥之用途。此外，本發明提 114874.doc 200800194 供式I化合物或其醫藥可接受性鹽用於哺乳類中供治療風 濕性關節炎之用途。再者，本發明提供一種適用於治療風 濕性關節炎之醫藥組合物，包括式j化合物或其醫藥可接 叉性鹽組合有醫藥可接受性賦型劑、載劑或稀釋劑。 【實施方式】 名詞"p38激酶’’意指ρ38α及/或ρ38β激酶等型。 名詞"壓抑TNFa (IL-ip、細胞激素）產生"意指降低哺乳 類中過度體内TNFa、IL-1 β或其他細胞激素的量至正常值 或低於正常值。此係藉由下列而完成：抑制所有細胞包含 巨嗜菌之TNFa、IL-Ιβ、或其他細胞激素之體内釋出；藉 由在基因組成度，向下調節哺乳類中TNFa、IL lJ3、或^ 他細胞激素之過度體内量至至正常值或低於正常值；以轉 譯後事件抑制TNFa、IL]p、或其他細胞激素之合成；或 在轉譯程度向下調節TNFa、IL_ip、或其他細胞激素。 熟知本技藝者將了解本發明化合物可形成酸加成鹽。所 有例中，所有化合物之醫藥可接受性鹽均包含於該名稱 中。本發明化合物為胺類且據此將與任何多種無機及有機 酸反應，形成醫藥可接受性酸加成鹽。本文所用之名詞 "醫藥可接受性鹽"代表對活體有機體實f上無毒之式ι化合 物之鹽類。典型的醫藥可接受性鹽包含由本發明化合物血 醫藥可接受性有機或無機酸反應所製備者。此等鹽包含列 於―of Pharmaceutical ―⑽，66，219 ο,之醫 藥可接受性鹽，其為熟知本技藝者所知者。最佳為幻化 合物之甲磺酸鹽。 114874.doc 200800194 式I化合物為p38激酶之抑制劑。因此，本發明亦提供一 種抑制哺乳類中P38激酶之方法，其包括對需該治療：哺 乳類投與P38激酶抑制量之Si化合物。較好欲藉投與式以匕 合物而治療之哺乳類為人類。 由於為P38激酶之抑制劑，因此本發明化合物可用於壓 抑發炎原細胞激素腫瘤壞死因子α (ΤΝΡα)及介白素·ι β (IL· 1 β)產生且因此可用於治療源自細胞激素過度產生之障 φ 礙。因此相信本化合物可用於治療發炎障礙，包含濕疹、 特應性皮膚炎、風濕性關節炎、骨關節炎、發炎性腸疾病 .及毒性休克症候群。本發明化合物亦相信可用於治療心血 管障礙如心肌梗塞、慢性心臟衰竭、動脈硬化、病毒性心 肌《、心臟異體移植排斥及敗血病相_之心臟功能不全。 再者，本發明化令物亦相信可用於治療中樞神經系統障 礙，如流行性腦脊婕膜炎、阿茲海默氏疾病、帕金森氏疾 病及多發性硬化。WO 99/32111、W0 9923091、wo • 04004720、WO 03072569。 大多數腫瘤經由惡性細胞及間質細胞包含内皮細胞的增 生而使體激增加。就腫瘤而言為了生長至直徑大於毫 米，其必須形成血官網路，一種稱為血管形成之過程。藉 由血管斯達汀（angi〇statin)及内皮斯達订（end〇statin)已被 報導可產生抗腫瘤活性（0，Reilly，et al.，CeU，88, 277_285 (1997))。選擇性P38激酶抑制劑SB22〇25已顯示可抑制血 管形成（J.R· Jackson, et al·，j. Pharmac〇1· Εχρ Therapemics， 284，687 (1998))。由於血管形成為大多數實心腫瘤體積擴 114874.doc •12- 200800194 大之重要成分，因此對於抑制此過裎之新穎p38激酶抑制 劑之發展代表抗腫瘤療法之保證方案。此對腫瘤療法之方 案可能缺乏習知化學療法之毒性副作用或藥物抗性所誘發之 性質（Judah Folkman，Endogenous Inhibitors of Angiogenesis, The Harvey Lectures，Series 92，pages 65-82，Wiley-Liss Inc” (1998)) 〇

作為p3 8激酶之抑制劑，因此本發明之化合物亦可用於抑 制敏感性贅瘤生長。Schultz，R· Μ· ΡοίΜίζ’α/ <9/M/4P kinase inhibitors in the treatment of cancer. In: E. Jucker (ed·)，Progress in Drug Research，60，59-92，（2003)。敏感性 贅瘤定義為視p38激酶就其存活、生長或腫瘤遷移而定之 贅瘤。敏感性贅瘤包含腦、生殖泌尿道、淋巴系統、胃、 咽喉及肺的腫瘤（美國專利號5,717,100)。較好本發明中所 用之名詞”敏感性腫瘤”包含人類癌症，包含非小細胞肺癌 瘤（（A. Greenberg, et al·，Am· J· Respir· Cell Mol. Biol·，26, 558 (2002))、乳癌瘤（J· Chen，et al·，J· Biol· Chem·，276, 47901 (2001); B. Salh, et al·，Int. J· Cancer, 98，148 (2002); 及 S· Xiong，et al·，Cancer Res·，61，1727 (2001))、胃癌瘤 (Y.D· Jung，et al·，Proc. Am· Assoc· Cancer Res·，43，9 (2002))、結直腸癌瘤（S· Xiong，et al·，Cancer Res” 61， 1727 (2001))及惡性黑色素瘤（(^〇6111^1^56{&1.，(：1丨11.£乂卩· Metastasis，19，79 (2002)) o 藉壓抑TNFa而抑制血管形成亦已教示可用於抑制或預 防腫瘤遷移（美國專利號6,414,150 ;美國專利號35，336)。 114874.doc -13- 200800194 再者，壓抑TNFa顯示可治療及預防惡質病，為一種由所有 癌症病患中約一半病患所經歷之衰弱症候群（T· Y〇nda，以 J. Clin. Invest., 87, 977 (1991)) 〇 再者，抑制P38激酶可有效治療某種病毒病況如流感（K.

Kujime, et al·, J· Immunology·，164，3222-3228 (2000))、鼻 病毋（S· Griego，et al·，J· Immunology，165，5211-5220 (2000)) AHIV(L.Shapiro，etal.，Proc. Natl Acad.SCi· USA，95, 7422-7426,（1998)) 〇 本文所用之名詞’’CrCU烧基’’代表含i至4個碳原子之直鏈 或刀支、早價、飽和脂族鍵且包含（但不限於）甲基、乙 基、丙基、異丙基、丁基、異丁基及第三丁基。 本文所用之名詞”C〗-C4烧氧基M代表附揍至氧原子之含工 至4個碳原子之直鏈或分支烧基。典型的C〗-C4烧氧基包含 曱氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、第三丁氧 基等。名詞"CrC4烷氧基”其定義内包含名詞”Ci_c3院氧 基”。 本文所用之名詞"鹵基”代表氯、溴、碘或氟原子，除非 另有說明。 本文所用之名詞” C1 - C4烧鹵基"代表經而達5個鹵原子取 代之Ci-C4烷基。典型的Ci-C4烷鹵基包含曱鹵基、三氨甲 基、乙鹵基、雙氟甲基乙基、丙鹵基、異丙鹵基、丁齒 基、第三丁鹵基等。名詞C1-C4烧_基”其定義内包含名气 詞 ’’ C 1 - C 3 烧 _ 基”。 本文所用之名詞’’CyC：4環烷基’’意指包括碳及氫原子之非 114874.doc -14- 200800194 芳族環且包含環丙基及環丁基。 本文所用之”1-曱基環丙基”代表下式基：

某些類式I化合物為較佳之p3 8激酶抑制劑。下列段落描 述此較佳類： a) X為：

b) R1為視情況經選自甲基、三氟甲基或鹵基之取代基 取代之C3-C4環烷基； c) R為1-甲基-1-環丙基； d) R1為2-氟-1，1-二甲基乙基； e) R1為2-氟-1·氟甲基-1-甲基乙基： Φ f) R2為視情況經甲基取代之苯基或視情況經甲基取代 之吡啶基； g) R2為4-甲苯基； h) R為視情況經Cr-C4烷基取代之c3-C4環烷基；或視情 況經甲基取代之噻吩基；或視情況經選自下列之第一取代 基取代：鹵基、CVC4烷基及cvc4烷氧基，及視情況進一 步經鹵基取代之苯基； i) 式I化合物為游離驗； j) 式I化合物為鹽； 114874.doc 200800194 k)式I化合物為甲石黃酸鹽。 其 他較佳 本發明較佳具體例包含段落a)-k)之所有組八 式1化合物為該等化合物，其中X為 °

nyr3 0 R1如段落C)所述；且R2如段落g)所述 亦較佳為X係： 、/〇

NYR3 0 R如段洛C)所述；且R2如段落g)所述；且R3如段落h)所 述。 尤其佳為X係 、/〇

ntr3 0 R為在4位置經C1-C4烧基取代之苯基 最佳為X係

nyr3 0 下列化合物亦為最隹 114874.doc -16. 200800194

曱基-環丙烷羰基）-哌啶_4_基氧基]異喹啉 基}-3-[5-(1-甲基·環丙基）_2_對_曱苯基_2Η_σ比唑基]- 脲。

本發明化合物可藉各種程序製備，其有些說明於下列反 應圖。熟知本技藝者將了解下列反應圖中個別步驟可經變 化以提供式I化合物。製造式丨化合物所需之步驟特定順序 將隨欲合成之特定化合物及經取代基團的相對反應性而 異。有些取代基為了清楚起見在下列反應圖中已被消去且 不以任何方式限制該反應圖的教示。 式I化合物及其中間物可如下列反應圖所說明般製備， 其中R1、R2及X如前述定義：

反應圖1

式I 胺（a)與適宜異氰酸酯或胺基甲酸酯如胺基甲酸吼嗤基— 2,2,2-三氯乙酯反應，以提供式][化合物。例如，使胺（1當 量）、胺基曱酸三氯乙酯（1當量）及適宜鹼如二異丙基乙基 114874.doc 17 200800194 月女（2當夏）或碳酸鉀，於適宜溶劑如乙腈或二曱基亞砜 (DMSO)中之溶液予以加熱。接著單離所需化合物且，若 需要且若所需，使用本技藝悉知之技術如層析法純化，獲 得式I化合物。 必要的胺如下列反應圖2所說明般製備，其中χ如前述定 義： 反應圖2

硝基團（b)在標準還原條件下還原，式I ^氫在鈀觸媒 存在下，於適宜溶劑如低碳焼醇或乙酸乙酯中還原，以獲 得對應胺（a)。此還原步驟為本技藝已知且了解者。參見

Larock，R·，Comprehensive Organic Transformations，” 412, VCH Publishing，Inc·，New York，1989 〇 φ 必要的硝基化合物如下列反應圖3所說明般製備，其中 R3如前述定義且X’為C(〇)R3或適宜保護基: 反應圖3 -18- 114874.doc 200800194

1-氯-4_硝基異喧琳（e)於適宜有機溶劑如THF中與N-保護 (PG)之羥基哌啶及氫化鈉反應，獲得對應的經取代略咬 b(i)。若需要或若所需，可利用適宜胺基保護基"pg，，如第 二丁氧羰基（BOC)基團。導入該等基團之技術為熟知本技 藝者已知。熟知本技藝者將了解氮保護基可在本發明化合 物合成之任何合宜時點移除。移除胺基保護基之方法為本 技藝已知（例如參見 T· W· Greene，"Protective Groups in

Organic Synthesis, John Wiley and Sons, New York, N.Y.? 1999) 〇 或者’ 1-氯-4-硝基異喹啉（e)與义B0(^護之哌嗪在碳 酉文鉀中於極性溶劑如乙腈中反應，獲得對應的經取代裱嗪 b(ii) 〇 所需之胺基曱酸吡唑基酯可如下列反應圖所述般製備， 其中R1及R2如前述定義： 反應圖4 114874.doc -19- 200800194 h2n、

NH R2

'N NH,

c,A

Cl 3-胺基吡唑（m)經由本技藝已知條件形成；Lar〇ck，R.， ^Comprehensive Organic Transformations，V 79， VCH Publishing, Inc” New York，1989。例如，〇e-氰基酮（j)及適

且聯fee或聯胺鹽（k)於適宜有機溶劑如乙醇中在升溫下反應 且可使用標準技術如在矽膠管柱上層析而純化。 氯甲酸2,2,2-三氯乙酯（n)與適宜經取代之3·胺基吡唑 及鹼例如碳酸鈉於適宜溶劑如THF中反應，獲得對應之胺 基甲酸2,2,2-三氯乙酯⑷。熟知本技藝者將了解對應的胺 基甲酸ϋ可藉由3_胺基吼嗤與其他活性碳酸醋反應而製 備。 式I(i)化合物可如下列反應圖5所證明.般製備，其中Ri、 R2、R3及PG如前述定義： 反應圖5

(0 去保護

式1« 護ίΓ::物=技藝已知條件下去保護。例如，當該保 、，容;UΦ氧*基時’式（f)化合物溶於適宜有機溶劑或 中’如二氯㈣，並以酸如鹽酸在二減或 鼠文處理。N-保護之娘咬取代之脲（f)的去保護獲得 114874.doc -20- 200800194 經取代 定（g) ’其在對有機酸及有機胺之標準偶合條件 下，在偶合劑如N-(3-二曱胺基丙基），，_乙基碳二醯亞胺 (EDCI)、催化量之4_二曱胺基吡啶羥基笨并三 唑（HOBt)存在下，與經取代之羧酸反應，獲得式“ο。熟 知本技藝者將了解式I(i)化合物實例可藉由以其他經保護 哌啶包含不同的N-保護基如曱醯基開始而製備，該保護基 可能需要其他去保護程序以形成中間物（g)。 热知本技藝者亦將了解式1化合物中之所有取代基將可 耐受用以合成該化合物之某些反應條件。該等基團可在合 成合宜時點導入或若需要或若所需可經保護且接著去保 護。熟知本技藝者將了解該保護基可在合成本發明化合物 之任何合宜時點移除。導入及移除氮及氧保護基之方法為 本技云‘矣者，例如參見Greene and Pr〇tective

Groups in Organic Synthesis, John Wiley and Sons, New

York，（1999)。再者，熟知本技藝者將了解許多狀況下， 基團導人順序並不重要。製造勢I化合物所需之步驟特定 順序係視欲合成之特定化合物、起始化合物及取代基團相 對反應性而定。 貝例及刀析中所用之縮寫、符號及名詞具有下列意義。 AcOH=乙酸’· DCO二環己基碳二醯亞胺；mEA=N，氺二 異丙基乙月女’ DMS〇=二甲基亞砜；DMF=n，n•二甲基甲醯 月女，上―小時，H〇Bt===；U經基笨并***；LDA=二異丙基醯 月女鐘，EDCI-1·(3·二甲胺基丙基）'3_乙基碳二醯亞胺鹽酸 鹽，EtOAc-乙酸乙酯；Et〇H=乙醇；甲醇； I14874.doc 21 200800194

NaBH(OAc)3=三乙醯氧基硼氫化鈉·，TBAF=氟化四丁基 銨；Tf20=三氟甲烷磺酸酐；THF=四氫呋喃。 製備例1 1-三氟曱基-環丙烷羧酸甲酯

於1-三氟甲基環丙烧-1-魏酸（3.65g，23·7 mmol·)之甲醇· 己烷（2·5 mL-22.5 mL)溶液中添加2 Μ重氮甲烷之己烷溶液 (14.2 mL，28·45 mmol)。減壓移除溶劑且蒸餾該殘留物獲 得黃色油（2.93 g，73%產率）。 製備例2 3-(1-甲氧基-環丙基）-3-氧代-丙腈

0 CN 於1-甲氧基-環丙烷羧酸甲酯（102005/014577X3.45 g，

26.5 mmol)及乙腈（2.17 mL，53·0 mmol)之 THF(3〇 mL)的 乾冰冷卻溶液中，添加2MLDA之THF溶液（29J mL，58·3 mmol)。反應混合物在-78°C攪拌丨小時且接著在22它攪拌 0.5小時。蒸發溶劑獲得棕色㈣。過據並以己炫洗務。 添加2 N鹽酸並以二***萃取三次（各5〇 。使合併之有 機相以硫酸鈉脫水。移除溶劑獲得紅色油（3 55㊂，％%產 率，ES + (m/z) 140.1 [M+H]) 〇 依實質上類似上述程序之方式製備下列化合物。 114874.doc -22- 200800194 製備例 化合物 製備例3 4,4,5,5,5-五氟-3-氧代-戍赌 製備例4 :3-氧代各(1-三氟甲基-環丙基)_丙腈 製備例5 3-輕基-2-經基曱基-2-甲基-丙酸甲酯 Ο H0> 將H2S〇4(4.5 g)添加於3-經基-2-羥基曱基-2-曱基丙酸 (100 g)之MeOH(l L，HPLC等級溶劑）之懸浮液中並在室溫 攪拌約70小時。移除溶劑且使殘留物分溶於玢〇八411^)及 H2〇(100 rnL)之間。水層以EtOAc再萃取並以MgS〇4使合併 之有機部份脫水。過濾並減壓濃縮。粗製混合物可就此使 用不進一步純化。1H NMR (CDC135 300 ΜΗζ): δ ppm 3·9 (d5 2Η，J=ll.l Ηζ)，3.76 (s，3Η)，3·71 (d，2Η, J=iu Ηζ)， 2·8 (bs，2H)5 1·1 (s5 3H) 〇 依^質上類似上述程序之方式製備下列化合物。 製備例 化合物 — 製備例6 3,3-雙-羥基曱基-戊酸乙^~~' 製備例7 3-經基-2，2-二甲基丙酸苄酯 添加氫氧化鉀（486.7 mmol，32.1 g)添加於2,3·二經基_2_ 甲基-丙酸（423.2 mmo卜50 g)之300 mL以乂巧容液中。在 100°C攪拌i小時。接著添加苄基溴（584.〇4 , μ判 mL)並攪拌隔夜。冷卻混合物且以乙酸乙酯稀釋。有機層 以水洗滌。水層以乙酸乙酯洗滌數次。合併有機層且以硫 114874.doc -23- 200800194 酸鈉脫水，過濾並減壓濃縮。4 NMR (CDC13，300 δ ppm : 7·36·7·32 (m，5 Η), 5·1 (s，2H)，3·5 (s5 2H)，1.21 (s， 6H) 〇 製備例8 5-五氟/乙基-2-對-甲苯基-2Hm·3·基胺

使4,4,5,5,5-五氟-3-氧代-戊腈（48，21.4111111〇1)及對-甲 苯基聯胺（10 g，64.1 mmol)於乙醇（20 mL)之混合物於密封 管裝置中加熱至9 5 °C歷時15小時。冷卻至室溫後，減壓移 除溶劑獲得棕色殘留物。此殘留物進行矽膠層析以乙酸乙 @曰及己烧〉谷離’獲得標題化合物（3.2 4 g，5 2 %產率， ES + (m/z) 292.1 [M+H]) 〇 里實質上類似上述程序之方式製備下列化合物。 製備例 化合物 Ώ ° 數據 MS (ES+): m/z 製備例9 對-甲苯基三氟甲基-環丙基)·2从吡 唑-3-基胺 282.3 [M+H] 製備例10

5-(1-氟甲基-環丙基）-2-對-甲笨基-2H·吡唑-3-基胺 添加AgF(4.5 eq，4·56 g)添加至1-氟-環丁烷羧酸乙酯 (1.6 g，8 mmol)之含274 mL水的22 mL·乙腈溶液中。混合 114874.doc -24- 200800194 物在80C於雄'封官中激烈攪拌加熱2〇小時。使混合物冷卻 並經石夕藻土過ϋ。減壓移除溶劑獲得油狀之卜氟甲基_環丙 烷緩酸乙醋化合物（0.81 g ’ 61%產率）。Es+(以）i47 i [M+1] ° 使 i-Pr2NH (1·7 mL， 2·2 eq，12.1 mmol)及 n-BuLi (1.6 Μ 於己烧 7·5 mL，2.2 eq，12· 1 mmol)於 12 mL THF 中在-78 C在％下攪拌30分鐘，接著添加^氟甲基_環丙烷羧酸乙

S曰(〇·81 g，5.5 mmol)之7 mL· THF溶液至該LDA溶液中。

攪拌並使混合物自_78它溫至室溫，接著在室溫攪拌5小 時。添加10 mL飽和NhCl水溶液。添加Ac0Et分離有機 層，以飽和氯化鈉水溶液洗滌，以Na2S〇4脫水並移除溶 劑，獲得棕色油（0.42 g，54%產率）。使化合物溶於1〇 mL

EtOH中並添加對-甲苯基聯胺（〇·47 g，1 eq，3 mm〇1)。使 混合物於密封管中在9〇°c加熱隔夜。接著使混合物冷卻並 移除溶劑獲得殘留物。藉層析（己烷/Ac〇Et，15_8〇%)純 化’獲得油狀化合物（〇·336 g，45%產率）。ES+(m/z): 246.1 [M+1] ° 製備例11

5-(1 -甲氧基-環丙基）-2-對-曱苯基嗤-3-基胺 使3-(1-甲氧基-環丙基）-3-氧代-丙腈（製備例2 ; 3.55 g 114874.doc -25- 200800194 25·5ΐ^〇1)及對-甲苯基聯胺鹽酸鹽〇2.15g,76.5_⑷ 於乙私(50 mL)中之混合物在9〇。。於密封管中加熱财 時。移除溶劑後，使殘留物進行㈣層析以。_5%甲醇之二 氯甲烧溶離’獲得黃色固體之標題化合物（3 29 g，挪產 率，ES + (m/z) 244.2 [M+H])。 述程序 製備例 ___ --—----:_______

〇 2-(6·甲基比口定-3-基V5-H -二翁田 f f 283.2[M+H] 製備例13 [5-(1-曱氧基-環丙基）-2-對-甲苯基_2H•吼唑_3_基]胺基

甲酸2,2,2-三氣乙基酉旨 OMe

於5-(1-甲氧基-環丙基）-2-對-曱苯基基胺（製 備例 11，2.43 g，10 mmol)及吡啶（0·9 mL，n mmol)之 THF (30 mL)之冰鹽冷卻的溶液中，滴加氣曱酸2,2,2_三氯 乙基酯（2.12 g，10 mmol)之 THF (1〇 mL)溶液。在·15°C 攪 拌0.5小時，接著在22°C攪拌1小時。使反應混合物分溶於 二氯甲烧（50 mL)及飽和碳酸氫鈉（50 mL)溶液之間。分離 水層並以二氯甲烷（各25 mL)萃取。使合併之有機相以硫 酸鈉脫水並濃縮。使殘留物進行矽膠層析以己烷及乙酸乙 114874.doc -26- 200800194 酯溶離，獲得白色固體（3.73 g，89%產率，ES + (m/V) 418.1 [M+H]) 〇 依實質上類似上述程序之方式製備下列化合物。 製備例 化合物 數據 MS (ES+): m/z 製備例14 [2-對-甲苯基-5-(1-三氟曱基-環丙基)-2乐吡 唑-3-基]-胺基甲酸2, 2, 2-三氯乙基酯 458.2 [M+H] 製備例15 [2-(6-甲基-0比〇定-3-基)-5-(1-二氣曱基-緣丙 基)-2私吡唑-3-基]-胺基曱酸2, 2, 2-三氯乙 酯 403.2 [M+H] 製備例16 (5-五氟乙基-2-對-曱苯基-2//·-比唑-3-基)-胺 基曱酸2, 2, 2-三氯乙酯 466.1 [M+H] 製備例17

1-(5-第三丁基-2-對-甲苯基-2Η-吡唑-3-基）-胺基甲酸 2,2,2-三氣乙酯 於5-第三丁基-2-對·甲苯基-2H_吡唑-3·基胺（Regan et al· J. Med. Chem. 2002，45，2994-3008，400 g，1.74 mol)之 THF (8 L)溶液中，添加飽和碳酸鈉溶液（2.4 L)並使混合物 冷卻至0°C。接著滴加氯曱酸2,2,2-三氟乙酯（406.77 g， 1.92 mmol)且混合物在0°C攪拌2小時。反應混合物以乙酸 乙酯（3x6.5 L)萃取，以無水硫酸鎂脫水並蒸發溶劑。固體 溶於最小量的乙酸乙S旨中並添加過量己烧使固體沉殿。過 濾收集固體並乾燥獲得灰白色固體之標題化合物（586 g， 83%產率）。（ES + ): m/z 406.1 (M+H)。 製備例1 8 [5-(1-甲基-環丙基）-2-對-曱苯基-2Η^比唑-3-基]-胺基甲 酸2,2,2-三氯乙酯 114874.doc -27- 200800194

在室溫下將乙腈（87 mL ’ 1.6 m〇l)添加至氫化鈉（66 g， 1·6 mol)之THF (700 mL)懸浮液中並授拌ι〇分鐘。接著添 加1 -甲基-J衣丙烧繞酸曱酉旨（9 0 · 0 g，〇 · 7 8 m ο 1)且使該白色聚 液回流3小時。冷卻混合物，接著添加曱醇（200 mL)並將 混合物倒入水（500 mL)中。分離相且以u n HC1使水相pH 降低至pH 3·4。水相以二***（2x350 mL)萃取，合併有機 相並以氯化鈉水溶液洗滌。以硫酸納脫水，過濾並減壓濃 縮，獲得黃色油之3-(1-曱基-環丙基）_3_氧代-丙腈。ιΗ NMR (CDC13): 3.59 (s5 2H)5 1.37 (s5 3H)5 1.30 (q5 y = 4Hz5 2H)，0.86 (q，J = 4Hz，2H)。 或者，於配備頂端攪拌器、熱偶、回流冷凝器及添加漏 斗之5L 一，員圓底瓶中，添加第三丁氧化鉀之(3 .⑽ L，3.00莫耳）。使^甲基-環丙基羧酸乙酯（264 〇〇 ^2 莫耳）與乙腈（123.00 g，3.00莫耳）混合，接著經由添加漏 斗以0.5小~添加至該丁氧化物溶液中。使所得混合物加 熱回流。回流2小時，接著藉添加甲醇（96.00 g，3.00莫耳） 冷部至<4(TC。混合物攪拌1〇分鐘，接著將内容物移至含 有水（3.96 g，219·81 莫耳）及 MTBE (3.96 L，33·32 莫耳）之 激烈攪拌混合物的12 L分離漏斗中。分離層且以Μ咖 (3.96 L » 33 32^ 'w \ ^ •莫耳）卒取水層。使用5N HC1 (61〇 〇〇 ， 114874.doc •28- 200800194 3·05莫耳）使水層的PW 12·5調整至3.5β以ΜΤΒΕ (2χ1 32 L，HU)萃取。人 γ # 士 · 5併该有機層，以硫酸鈉脫水（62.00 g， 莫耳）並過濾獲得3-(l-曱基-環丙基）-3-氧代·丙腈。 使甲基-環丙基>3-氧代-丙腈（60 g，487.2 mmol)及 、皆甲本基聯私鹽酸鹽（78 g，478.2 mm〇1)於乙醇（975㈤乙） 之冷液加熱回流4小時。蒸發溶劑並使剩餘固體溶於水 使用1 ·0 N鼠氧化鋼溶液增加溶液之pH至pH 8。過濾 沉澱獲得白色固體之5_(1•曱基_環丙基）_2_對_曱苯基_2H- 吡唑-3-基胺。lH NMR (DMSO): 7·39 (d，= 8Hz，2H)， 7·22 (d5 J = 8Hz，2H)，5.12 (s，2H)5 2.31 (s，3H)，1·30 (s, 3H)，0.80 (q，4Hz，2H)，〇 61 (q，J= 4Hz，2H)。 在〇°C將氣曱酸2,2,2-三氯乙酯（3.0 mL，23 mmol)滴加至 5-(1-甲基-環丙基）-2-對-甲苯基-211-吼吐-3-基胺（4.75 g， 21 mmol)之四氫呋喃（105 mL)及飽和碳酸鈉水溶液（32 mL) 中。在此溫度攪拌2小時。將混合物倒入水中並分離相。 以乙酸乙酯萃取水相。 操作A :合併有機層並以氯化納水溶液洗務，以硫酸鈉 脫水’過濾、並減壓濃縮，獲得黃色固體。使固體溶於最小 量的乙酸乙酯中並添加己烷直至霧濁同時攪拌。結晶出標 題化合物並過濾獲得白色固體。1H NMR (DMSO): 9.89 (br s? 1H)? 7.31 (d? J = 8Hz5 2H)5 7.23 (d5 J = 8Hz5 2H)? 6.12 (s，1H)，4.82 (s，2H)，2.31 (s，3H)，1.37 (s，3H)，0.89 (q，= 4Hz, 2H)，0_71 (q5 J = 4Hz，2H) 〇 操作B :將乙酸乙酯溶劑交換成異丙醇（91.56莫耳）。漿 114874.doc •29· 200800194 料在<0°C攪拌2小時，過濾，以冷卻之異丙醇（13·08莫耳） 洗務並在40°C減壓下乾燥隔夜，獲得白色結晶固體之標題 化合物。 製備例19 [5 (2-氟-1-氟甲基4 -甲基'乙基）_2_對_甲苯基-2H-°比u坐· 3-基]-胺基曱酸252,2-三氯乙酯 將Tf2〇 (80 rnL)滴加至3-羥基-2-羥基曱基-2-甲基-丙酸 曱_ (製備例5，32.:5g)之二氯曱烷（4〇〇 mL)及2,6-二甲基吡 咬（80 mL)之冷卻溶液（_78°C)中。使該反應達室溫並攪拌 約2小時。以二氯曱烷（4〇〇皿“稀釋並以hC1(3%水溶液）洗 務。有機層以MgS〇4脫水，過濾並濃縮。使殘留物進行石夕 膠層析以己烧/乙酸乙g旨5 %溶離，獲得無色油之2 ·曱基_ 2,3-雙-三氟曱烷磺醯氧基-丙酸甲酯。iH NMR (CDC13, 300 MHz): δ ppm 4·7 (d，2H，J=l〇.3 Ηζ)，4·5 (d5 2H，J=l〇.3

Hz)，3.8 (s5 3H)，1.4 (s，3H) 〇 使 TBAF 1 M (132 mmol，132 mL)添力 至冷卻至 〇°c 之 2- 甲基-2,3·雙-三氟甲烷磺醯氡基-丙酸曱酯（65 9 mm〇1， 26.3 g)之500 mL無水THF溶液中。減壓濃縮並添加二氯甲 烧。有機層以飽和氯化鈉水溶液洗滌。合併有機層並以硫 酸鈉脫水，過濾並減壓濃縮，獲得3-氟-2-氟曱基-2-甲基- 丙酸甲酯。1H NMR (CDC13, 300 ΜΗζ): δ ppm: 4.7-4.4 (m， 4Η)，3.5 (s，3Η)，0.98 (t，3H，J=1.7Hz)。 將 LDA 2.0 M (62.0 mmol，3 l mL)添加至冷卻至- 7g°c 之 3-氟-2-氟甲基-2-甲基-丙酸甲酯（28·2 mmol，4.3 g)之100 114874.doc -30- 200800194 mL無水THF溶液中接著添加無水乙腈（56 4 mm〇i，2.9 mL)。在-781攪拌2小時且接著使溶液溫至室溫隔夜。減 壓》辰縮並添加二氯甲烷。有機層以飽和氣化鈉及10% HC1 洗務。合併有機層且以硫酸鈉脫水，過濾並減壓濃縮，獲 得殘留物。 使對-甲苯基聯胺鹽酸鹽（15.5 mmol，2.5 g)及上述所得 殘留物（15·5 mm〇i，2.5 g)於31 mL乙醇中在90°C攪拌隔

仪。瘵發溶劑且將殘留物溶於水中。添加丨〇%氫氧化鈉溶 液並以乙酸乙酯萃取。合併有機層並以硫酸鈉脫水，過濾 並減壓濃縮，獲得5-(2_氨氟曱基曱基_乙基）_2_對-甲 苯基-2H-吡唑-3-基胺。使殘留物進行矽膠層析以己烷/乙 酸乙酯作為溶離液（自15%至5〇%)。LCMS ES+ (所句266 [M+H]) 〇

將氣甲酸2,2,2-三氯乙酯（8.1 mm〇i，u mL)及碳酸鈉水 溶液（4·8 mL)添加於含5-(2_氟氟甲基甲基-乙基）_2_ 對-甲苯基-2H-口比嗤-3-基胺（7.3 mmo卜ι·9 g)之37 mL THF 溶液中。攪拌24小時。將溶液倒入水中並以乙酸乙醋萃 取。合併有機層並以飽和氣化鈉水溶液洗條。以硫酸鈉脫 水，過濾並減壓濃縮，獲得[5-(2-氟-丨_氟甲基甲基·乙 基）-2-對-甲 苯基-2H-吼唑-3-基]-胺基 甲酸2,2,2·三氯乙 酯。LCMS ES+ (m/z) 440 [M+H]。 依貫質上類似上述程序之方式製備下列化合物 114874.doc '31 · 200800194 製備例 化合物 數據 MS (ES+): m/z [M+Hl 製備例20 [5-(1，1-雙-氟曱基··丙基^^7^~ 基-2好-°比0坐各基]-胺基甲酸2,2,2-三氯乙酯 ’ ’ 454 製備例21 [5-(2-氟-1，1 -二曱基-乙基)-2-對-甲 苯基-：2//-°比峻I-3-基]-胺基甲酸 2,2,2-三氣乙酯 424 製備例22 4-(4-胺基-異喧琳-1-基氧基）-略。定小魏酸第三丁酯

使用冰/丙酮浴將硫酸（900 mL)冷卻至5 °C，接著以斤時 45分鐘添加1-胺基異喹啉（208.8 g，1448 mmol)並維持混 合物内溫<20t：。使該暗混合物在氮氣中機械攪拌下冷卻 至〇 C接著以KN03 (149.4 g，1477 mmol)逐次處理45分鐘 同時維持混合物溫度<l〇°C。使混合物攪拌2小時同時溫至 1 5 C。將混合物倒入水/冰（3 kg)中接著以額外水（6 L)稀 釋。漿液攪拌45分鐘接著過濾、。渡餅以水（6χ 1.5 l)洗條。 藉空氣部份乾燥該金色物質隔夜接著放置於真空烘箱中 (5〇-55t：，約10托耳，氮氣吹入24 h)，獲得^胺基硝 基-異喹啉 H2S04 (256.8 g，62%產率）。（ES+):所/2 19〇 (M++H) ο 將1-胺基_4_硝基異喹啉H2S〇4 (120 g，418 mmol)之Hci 水溶液（6 N，2 L)漿液在氮氣及35t下機械攪拌。添加

NaN〇2 (72.1 g，1044 mmol)之水（300 mL)溶液歷時！小時 114874.doc -32· 200800194 同時使漿液溫至50°C。使混合物又加熱30分鐘接著冷q i 室溫並攪拌隔夜。使混合物加熱至50°C，接著以3〇分鐘、添 加NaN〇2 (3 6 g於150 mL水中）溶液。混合物攪拌2小時接著 加熱至60°C，使其以3小時緩慢冷卻至室溫。過濾所得毁 液且濾餅以水（3x600mL)洗膝。經空氣部份乾燥（：gQg)。 使濕固體於i-PrOH (1 L)及EtOH (1 L)中回流漿液化，添加 THF (350 mL)以進行完全溶解。於此溶液中添加水（4〇〇 mL)並以3小時冷卻至l〇°C。過濾並以EtOH (2x300 mL)洗 ’/條接著以二乙(3 X 1 50 mL)洗滌。空氣乾燥隔夜獲得淺掠 色固體之1 -經基-4-硝基異喧琳（62.62 g，79%產率）。 (ES + ): m/z 191 (M++H) 〇 使 1 基-4-硝基異噎琳（62.2 g，327 mmol)之 p〇ci3 (1 80 mL)漿液在氮氣中機械攪拌並加熱至1〇〇-1〇5〇c歷時1小 時，獲得均質暗棕色溶液。將冷凝物交換至短路徑蒸餾 頭’並減壓移除過量P〇Cl3(約1〇-3〇托耳）導致鍋溫為55 C。於此混合物中添加i，2_二氯乙烷（15〇 mL)並使混合物 溫至70°C獲得均質溶液。使溶液冷卻至15。〇，接著以$分 鐘添加i-PrOH (450 mL)導致放熱至33°C。漿料在15°C攪拌 3.5小時接著過濾並以(3xl〇〇 mL)洗滌。空氣乾燥 該所得固體隔夜，獲得褐色固體之1—氯-4-硝基異喹啉 (52.08 g，76%產率）。（ES + ): m/z 2〇9/211 (M.+H)。 逐份添加NaH (60%於礦油中，未洗滌；6.23 g，156 mmol)至1-氯-4-硝基異喹啉（26 〇 g，125 mmol)及1-第三丁 氧 Μ 基-4-經基哌啶（27·6 g，137 mmol)之THF (350 mL)在 I14874.doc •33- 200800194 室溫及氮氣流下攪拌的溶液中。在4〇t攪拌該暗紅色混合 物丨·5小時接著在55。〇攪拌L5小時。添加額外NaH (1·3 g) 亚在55 t：攪拌該所得混合物2小時，接著冷卻至室溫隔 仪。添加己院（75 mL)接著缓慢添加水（600 mL)。以HC1 (1 N)水，谷液调整反應混合物至pH 7，接著分離層。丟棄水層 並於有機層中添加己烷（200 mL)。減壓部分濃縮該混合物 至體積50-100 mL。添加二***（15〇 mL)及己烷（25〇 mL)， 接著過濾该所得漿料。濾餅以二***/己烷：i)洗滌並以 空氣乾燥獲得褐色固體之4-(4-硝基-異喹啉-i-基氧基）_哌 啶-1-羧酸第三丁酯（33·84 g，73%產率）。（ES+): w/z 374 (M++H) 〇 於4-(4-硝基-異喹啉-丨_基氧基 >哌啶-^羧酸第三丁酯 (33·5 g，89.7 mmol)之 THF (300 mL)及乙醇（300 mL)漿料 中添加 10% Pd/C (1·80 g，1·69 mmol)於乙醇（25 mL)中的 毁料。將混合物置入parr搖晃瓶中在氫氣壓下（25_4〇、psi) 在至溫放置8小時。經矽藻土墊過濾該混合物並以乙醇洗 條直至濾、液無色。減壓濃縮濾液獲得暗色油。使殘留物進 行石夕膠層析以1%接著25% Me〇H/二氯甲烷溶離，獲得橘 色玻璃質標題化合物（30.3g，98%產率）。（ES + ): m/z 344 (M++H) 〇 製備例23 [4-(4-胺基-異喹啉基氧基）_哌啶q _基]-(卜甲基-環丙 基）-曱酮 114874.doc -34· 200800194

將異喹琳（500.00 g，3.75 7 缺 人及乙酸乙酯（7·60 L， 77.62莫耳）添加至配備有頂端攪拌器、 — …、1雨、氮氣入口 /出 口及添基漏斗之22 L三頸圓底瓶中。撸姓你孙 欖件使其溶解。在室 溫以0.5小時滴加過乙酸（ι·25 L，5 94笪甘、 一 > 吳斗）。在室溫攪拌 隔仪。將反應瓶於冰水浴中冷卻，葬4 s八 曰^刀鐘滴加二甲基硫 醚（525.0 mL，7.14莫耳）使反應驟冷。糌 欖袢隔仪同時溫至 室溫。試驗反應混合物的過氧化物。 組合兩批反應混合物。將反應混合物移至5〇 l分離瓶中 並添加水（2.00L，rn.02莫耳）及二氯甲烷（i2〇〇L，18721 莫耳）。逐份添加碳酸鈉（2.07 kg，19 53篁五、奸#、 6 旲耳），接著分離 層。水層以m(3x4 L)萃取，合併該有機層並以硫酸 鈉脫水。過濾並減壓移除溶劑獲得粗製暗紅色油/液體。 添加乙酸乙醋（8.00 L，81·76莫耳）至該暗紅色油/液體 中’接著減壓擾拌直至移除6.8乂乙酸乙醋。過遽該沉殿固 體，以冷卻乙酸乙酯（750.00 mL，7.66莫耳）洗滌，接著以 庚貌（800.00 mL ’ 5.46莫耳）洗務。使固體乾燥獲得似細砂 固體之異喹啉-2-氧化物，714·2〇 g (64%)。 至於另一操作，係在庚烷洗滌之前，自該濾液移除丨乙 /合η1丨。使濾液靜置隔夜並以冷卻的乙酸乙酯（5〇〇 〇〇， 5·η莫耳）洗滌接著以庚烷（500 00 mL，3·41莫耳）洗滌。使 固體乾燥獲得似細砂狀固體之異喧琳氧化物，11〇 l〇 g 114874.doc -35- 200800194 (10%)-收量編號2(總產率74%)。 添加異啥琳I氧化物（4.82 mol ; 699.1 g)及乙酸酐 (73.95 mol ; 6.99 L)至配備有％入口、蒸餾頭及熱偶之22 L瓶中。使反應混合物加熱至溫和回流並藉蒸餾移除揮發 物。繼續加熱並收集蒸餾物2小時（移除總反應體積之約一 半體積）。使反應混合物冷卻至5〇°c。滴加曱醇（2丄）並使 反應溫至7 0 °C。使反應混合物在室溫攪拌隔夜。使異喧 琳-1-醇自该 >谷液結晶’過濾、分離並在5 〇 t減壓下乾燥。產 量=246.7克（35%)。 將異啥琳-1-醇（2.3 5 mol ; 341.0 g)及1705 mL的水與乙 酸之1:4混合物添加至5L瓶中。使反應混合物加熱至6〇 C。以3小時滴加硝酸（7·04 mol ; 443.0 mL)之1705 mL的 水與乙酸之1:4混合物。添加硝酸期間反應溫度維持在68_ 70°C。3小時後，使反應冷卻至室溫。添加水（5564㈤“至 反應混合物中接者過濾。濾、餅以水（1 L)清洗並在5 〇真空 乾燥。產量=196.8克（44%)。 添加1-羥基-4-硝基異喹啉（880.3 mmol; 167.4克）及 P0C13 (4·95 mol ; 460 mL)至配備有N2入口、冷凝器及熱 偶之2 L瓶中。使所得漿料加熱至i〇〇°C約丨小時。使用旋 轉蒸發器濃縮反應混合物至乾燥。殘留物於1，2_二氯乙烧 (402 mL)中成漿液並冷卻至15°C。滴加i-PrOH (1015 mL) 同時維持锅溫低於30°C。使反應混合物在20°C攪拌2小時 並在10 °C攪拌1小時。過濾該反應混合物且濾餅以異丙醇 (1〇〇1111^)清洗。在50°(：減壓乾燥。產量=118.5克（65%)。 114874.doc -36- 200800194 1-曱基-環丙基羧酸乙酯（405.0 g，3.16莫耳）、5 N氮氧 化鈉（1.0 L，5.00莫耳）及甲醇（400.0 mL，9,88莫耳）添加至 3 L三頸圓底瓶中。使反應混合物於50°C至6(rc間加熱$小 日守’接者使其冷卻至週圍溫度。移除有機溶劑並以mtbe (2x5〇0 mL)萃取該鹼性溶液。使用600 mL濃HC1.整水溶 液pH至pH 1並以MTBE (4x500 mL)萃取。合併有機層，以 飽和氯化鈉水溶液洗滌，以硫酸鎂脫水，過濾並減壓移除 溶劑。使殘留物固化，接著添加1 〇〇而乙庚烷並在擾 拌該所得漿料。過濾該漿料，接著使減壓下乾燥的所得固 體乾燥。濃縮濾液並於冰浴中冷卻獲得額外的白色固體物 質。組合後回收265 g (84〇/〇)白色固體之i•甲基_環丙烷羧 酸。 將1-曱基-環丙烷羧酸（260·0 g，2.60莫耳）、2-丁酮（2·5 !^’27.92莫耳）及;^-曱基嗎啉（325.〇1111^，2.95莫耳）添加至 配備有頂端攪拌器之5 l三頸圓底瓶中。使混合物在〇它攪 拌並以30分鐘逐份添加2_氣_4,6_二曱氧基三嗪 (5 10 · 0 g，2.8 6莫耳）。在〇 c繼續攪拌15分鐘，接著在週圍 溫度攪拌2小時。過濾所得之N-甲基嗎啉鹽酸鹽並以2χ2〇〇 mL 丁酮洗滌。濃縮濾液並使殘留物溶於1500 mL THF中 獲得溶液A 〇 將含碳酸鉀（550.0 g，3·94莫耳）之2 L水添加至5 L三頸 圓底瓶中。添加4-羥基哌啶（275.0 g，2.66莫耳）獲得溶液 B 〇 冷液B於冰水浴中冷卻並滴加溶液A。移除該冷卻浴並 114874.doc '37· 200800194 使反應混合勿在室溫q 、1、γ 撹拌2小時。減壓移除有機溶劑。剩 餘驗性水溶液以6x2 L二氯甲烧萃取。合併該有機層，以 1.5 L飽和氯化鋼水溶液與2〇〇紅濃删之混合物洗滌。酸 性水溶液以3X1丄二氯甲烷萃取。合併有機層並以500 g硫 酸鎖及1GG g碳酸鉀脫水隔夜。遽除乾燥劑並移除溶劑直 至留有約500 mL溶劑。添加i L庚烷並移除溶劑直至發生 釔曰曰。過濾固體’以庚烷充分洗滌並減壓乾燥獲得白色結 晶固體之（4-羥基-哌啶·甲基_環丙基）甲酮，33〇 g (69%) 〇 將氫化鈉（3 8.40 g，960.09 莫耳）及 THF (1.54 L，18.92莫 耳）添加至配備有頂端攪拌器、添加漏斗及熱偶之5 L Morton瓶中。攪拌數分鐘，接著添加（4_經基_哌啶小基）_ (1-甲基-環丙基）甲酮（149.00 g，813 09莫耳）。攪拌〇 5小 時。以1小時添加1-氯-4-硝基-異喹啉（154·〇〇 g，738以莫 耳）之THF(1.54L，18.92莫耳）。使反應混合物在室溫攪拌 2小時，接著在4(rc攪拌6小時後’冷卻至室溫隔夜。滴加 水（500 mL; 27·78莫耳）至反應混合物中。藉由倒入水（25 L，U8.89莫耳）及ΜΤΒΕ (3·08 L’ 25 92莫耳）之激烈攪拌 混合物中而驟冷該反應混合物/分離層，有機層以水（3 〇8 L ’ 170.97莫耳）洗滌並以硫酸鈉（142·〇〇 g，999 7〇莫耳）洗 滌。濾除乾燥劑獲得濾液編號1。 重複上述程序獲得濾液編號2。合併濾液編號〗及編號 2。減壓移除溶劑（約150 mm)並收集蒸氣溫2〇-28<t的蒸餾 物直至留有約L5 L。於蒸餾瓶中添加異丙醇（4.62 l， 114874.doc -38 - 200800194 60.43莫耳）且重複減塵蒸餾（約12〇随），收集蒸氣溫3544 °C的蒸餾物直至留有約！ L。於冰中冷;東剩餘聚料。過濾 固體並以冷卻異丙醇（300.00 mL，3 92莫耳）清洗，接著以 3x100 mL庚烷（300.00 mL，2.05莫耳）清洗。固體在4〇<t減 壓乾燥隔夜，獲得橘色固體之（1_甲基_環丙基）[4_(4_硝基-異口圭琳-1-基氧基旅咬-1-基]-曱酮，368 g (72%-合併）。 於3加侖高壓鍋中饋入（1_曱基^裏丙基H4_(4_硝基-異喹 琳-1-基氧基）-旅咬-1-基]-曱酮（368 〇 g，i 〇4莫耳）、THF (4.42 1^’54.32莫耳）及5%?4/(：(乾燥，40.50 §，19.03莫 耳）。密封該高壓鍋並導入氫氣至5〇 psi。在1〇〇〇 rpm及室 /孤在50 psi氫氣下攪拌内容物4·5小時。過濾並以額外thf (2·0 L ’ 24.58莫耳）清洗。濾液以碳（2〇·4〇網目，42 〇〇 g)並 加熱至40°C歷時1小時。添加額外碳（6〇網目，47 〇〇 g)並繼 續加熱1小時。經微纖維紙及Hyfi〇 super Cel®床過濾並以 最小量THF洗滌。移除溶劑獲得暗橘紅色油之[4·(4_胺基-異喹琳-1-基氧基）·哌啶-1-基-甲基_環丙基 > 甲酮，348 g (103%) 〇 ]H NMR (500 MHz, CDC13)： δ 0.59 (t5 J = 6.0 Hz5 2H)? 0.96 (t5 J = 6.0 Hz, 2H)? 1.34 (s? 3H)5 1.88-1.94 (m，2H)，2.06-2.10 (m，2H)，3·61-3·70 (m，2H)，3.93-4.00 (m? 2H)? 5.48-5.50 (m5 1H)3 7.52 (s? 1H)? 7.58 (t5 J = 7.0

Hz3 1H)3 7.73 (t3 J = 7.0 Hz5 1H)? 7.81 (d5 J = 7.0 Hz, 1H)5 8.27 (d5 J = 8.5 Hz, 1H) 〇 製備例24 [4-(4-胺基-異喹啉-1-基氧基）_哌啶小基H2-氣-苯基）甲酮 114874.doc -39- 200800194

於4-(4-硝基-異喹啉-1-基氧基 > 哌啶羧酸第三丁酯 (9·68 g ’ 25·9 mmol ’ 0°C)之DCM (100 mL)冷卻溶液中添 加TFA (80 mL)。在22χ；攪拌2小時，接著減壓移除溶劑I 殘留物溶於DCM並以1 N氫氧化鈉處理至pH約14。分離水 相並以DCM萃取兩次。合併該有機相並以無水硫酸鈉脫 水。移除溶劑獲得（4-硝基-異喹啉-卜基氧基）_哌啶（7〇6 g ’ 99%產率，ES+(m/z) 274·3 [M+H])。 使心(心硝基-異喹啉小基氧基分哌啶（4 〇g，14 6 mmol)、2-氟苯甲酸（2·45 g，17.5 mmol)、DCC (3.6 g， 17·5 mmol)及 HOBt (2.37 g，17·5 mmol)之 THF (100 mL)之 反應混合物在22°C攪拌隔夜。過濾接著濃縮。使殘留物進 行石夕膠層析以己烧及乙酸乙酯溶離，獲得黃色固體之（2_氟 苯基H4-(4-硝基-異喹啉-1-基氧基）_哌啶-卜基]-甲酮（6.82 g，92%產率，ES+〇/z) 396·3 [M+H])。 使（2-氟苯基）-[4-(4-硝基-異喹啉-1-基氧基）-哌啶-1-基]-曱酉同（5.85 g，14.8 mmol)及鈀/碳（10%，2.9 g)於甲醇（250 mL)之懸浮液在氳氣中攪拌隔夜。過濾移除觸媒。濃縮濾 液獲得淺黃色固體（4.7 g，87%產率，ES + (m/z) 366.3 [M+H]) ο 依實質上類似上述程序之方式製備下列化合物。 114874.doc -40- 200800194 製備例 化合物 數據 MS (ES+): m/z [M+Hl 製備例25 [4-(4-胺基-異喧琳-1-基氧基)-σ底 。定-1-基]-(1-曱基-壞丙基)曱嗣 326.3 製備例26 4 -硝基-1-旅嗓-1-基-異啥琳

以固體略►嘻（5.2 g ’ 60 πηποΙ)處理1 -氣-4-硝基-異p奎琳 (2.5 g，12 mmol)之乙腈（100 mL)漿料。使所得黃色混合物 在60°C加熱隔夜。冷卻至周圍溫度後，使反應混合物分溶 於乙酸乙酯及飽和碳酸氫鈉溶液之間。添加MeOH、二氯 甲烷及乙酸乙酯，並過濾整個混合物獲得亮黃色固體（2.1 5 g，69% ; LCMS ES+ (m/z) 259 [M+H])。 製備例27 壞丙基-[4 - ( 4 -硝基-異17查琳-1 -基）-旅嘻-1 -基]-甲酉同

〇，· 1 0 以 EDCI (5 75 mg，3 mmol)處理 4-硝基-1 -略嗓-1 -基-異口I： 琳（製備例26，5 1 7 mg，2 mmol)、環丙烧魏酸（258 mg，3 mmol)及催化量之DM AP (24 mg，0.2 mmol)於二氯曱烧（20 mL)之溶液或漿料。所得混合物在周圍溫度攪動隔夜，接 著以飽和碳酸氫鈉溶液洗滌。有機層以硫酸鈉脫水並減壓 濃縮。使殘留物進行矽膠層析使用0-2% 2 Μ氨-甲醇之二 114874.doc -41 - 200800194 氯甲烧之梯度及0-70%乙酸乙酯之己烧梯度溶離，兩次純 化後獲得黃色固體（513 11^，79°/〇產率，1^]\48丑8+〇/2) 327 [M+H])。 依實質上類似上述程序之方式製備下列化合物。 製備例 化合物 數據 MS (ES+): _ 製備例28 (1-曱基-環丙基)-[4-(4-硝基-異喧琳-1-基)-ϋ底 °秦-1-基]-曱酉同 76%產率 341 [M+H] 製備例29 (2,6-二氟-苯基)-[4-(4-硝基-異喧琳-1-基)-旅 嗪小基]-曱酮 50 %產率 399.1 [M+H] 製備例30 2,2-二曱基-1-[4-(4-硝基-異喧琳小基)-派嘻-1 -基]-丙炫-嗣 66%產率 343.2 [M+H] 製備例3 1

1 - [4-(4 -胺基-異啥琳-1 -基）-旅唤-1 -基]-壞丙基-甲酉同

0¾ 壞丙基-[4-(4-硝基-異啥淋-1 -基）-旅σ秦-1 -基]-甲顚1 (製備 例27 ; 513 mg，1.57 mmol)及5%!巴/碳（9 1 mg)之乙酸乙酉旨 (50 mL)漿料於Parr搖晃器中於周圍溫度接受60 psi氫氣 壓。8小時後，過濾反應混合物並減壓濃縮獲得棕色泡沫 (定量產率；LCMS ES+ (m/z) 297 [M+H])。 依實質上類似上述程序之方式製備下列化合物。 114874.doc -42- 200800194 製備例 化合物 數據 MS (ES+)： m/z 製備例32 Η4·(4_胺基-異喹啉小基)-略嗪·1·基]-2,2-二曱 基-丙焼rl-酉同 (反應時間24小時） 313 [M+H] 製備例33 [4_(4·胺基-異喹啉-1-基)-派嗪小基K2,6-二氟-苯基)-曱S同 (反應時間24小時） 369 [M+H] 製備例34 [4-(4-胺基-異喹啉-1-基)·哌嗪-μ基]-(μ曱基· 環丙基)-曱酮 311 [M+H] 製備例35 [4-(4-胺基-異喹琳-1-基）-哌嗪-i-基]_(2-氟-苯基）-甲酮

0 F

於哌嗪-1-羧酸第三丁酯（10 g，53.7 mmol)之二氯甲烷 (300 mL)溶液中，添加三乙胺（15.i mL，107.4 mmol)及 2-氟苯甲醢氣（6.4 mL，53·7 mmol)。混合物在室溫擾拌隔 夜。接著添加水（200 mL)並分離有機層，以硫酸鈉脫水， 過濾並減壓蒸發溶劑，獲得17.3 g之4-(2-氟-苯甲醯基）-哌 嗪-1-羧酸第三 丁酯。ES+ (m/z) 309[M+H]。 於4-(2-氟-苯曱醯基）_旅唤-ΐ·魏酸第三丁酯（16·3 g，53 mmol)之二氣曱烧（loo mL)溶液中，添加4 M只^之込‘二 噁烷（40 mL，159 mmol)溶液並使反應混合物在室溫攪拌 隔仪。添加EhO於所得白色懸浮液中並減壓蒸發溶劑獲得 12.6 g之（2-氟-笨基）_哌嗪_；[•基·甲酮鹽酸鹽。ES+ (所△) 209[M+H]) 〇 將（2-說-苯基）“底嗪_卜基·甲酮（316 g，129匪叫及 K2C03 (8·9 g，64.5 mmol)添加於丨-氯·心硝基異喹啉（2.85 114874.doc -43 - 200800194 g ’ 13·7 mmol)之乙腈（1〇〇 mL)中並攪拌24小時。過瀘不溶 固體且瀘、餅以AcOEt洗滌。減壓蒸發溶劑獲得殘留物。使 殘留物進行矽膠層析以己烷：AcOEt 20-90%溶離，獲得 3.72 gg]體之（2_默·苯基H4_(4^肖基_異喹啉小基哌嗪小 基]-甲酮。LCMS ES+ (m/z) 3 81.2 [M+H]。 添力口 Na2S2〇4(6.87 g，39.4 mmol)於（2-氟-苯基）-[4-(4-硝 基-異啥啉-1-基）-哌嗪小基]-甲酮(3 g，7.89 mmol)之170 mL的THF:H20 1:1混合物中，接著添加nh4OH 32% (15 mL)並攪拌90分鐘。以水稀釋並以AcOEt萃取數次。合併 有機相並以飽和氯化鈉溶液洗滌，以Na2S04脫水並減壓蒸 發，獲得1.8 g固體之標題化合物。LCMS ES+ (m/z) 351.2 [M+H]。 製備例36 1-[5-(1-甲基-環丙基兴2_對-曱苯基-21^吡唑-3-基]-3-[1- (旅咬-4-基氧基）-異喧琳-4-基]-脲二鹽酸鹽

將[5-(1-曱基-環丙基）-2-對-甲笨基比唑_3_基]-胺基 甲酸2,2,2-三氣乙酯（製備例18，3.20 g，7.94 mmol及2.0當 里）及4-(4-月女基異哇淋-1-基氧基）·0辰咬緩酸第三丁醋（製 備例22，1.37 g，3.97 mmo卜ΐ·〇當量）溶於7 mL無水 114874.doc -44- 200800194 DMSO中，添加二異丙基乙胺（DIPea，1.36 mL，7.94 mmol，2·〇當量）並在密封管中在㈣^加熱攪拌2〇小時。將 溶液倒入二氯曱烷及冰水之1:1 ν/ν混合物中。水相以二氯 曱焼（2x5 0 mL)萃取，並以水（2x5OmL)及氯化鈉水溶液 (100 mL)洗條該合併之有機層。有機溶液以硫酸鈉脫水並 減壓蒸發。使殘留物進行矽膠層析以15%至80% EtOAc之 己烧梯度溶離’獲得1 · 4 0 g純發泡乳色固體之4 _(4 - {3 - [ 5 _ (1 -曱基-1 -環丙基）-2-對-甲苯基-2Η-ϋ比唾-3-基]-脲基卜異喧 琳基氧基）-哌啶-1-羧酸第三丁酯。：59%產率。ES+(m/z) 597.4 [M+H] 〇 在室溫下，將HC1 4 Μ於二噁烷（2.4 mL，9.36 mmol)添 加至4_(4-{3-[5-(l-甲基-1-環丙基）-2-對-曱苯基-2H-吡唑-3- 基]-脲基卜異喧嘛-1-基氧基）_旅咬-1_魏酸第三丁酯（丨4 g， 2.34 mmol)之二氯曱烷（2〇 mL)中並攪拌隔夜。減壓蒸發溶 劑獲得白色固體之標題化合物（1.3 gy(定量）。ES+ (m/z): 497·4(Μ+Η) 〇 製備例37 1-[5-(2-氟-1-氟曱基甲基-乙基對-曱苯基_2]9[_吡 唾-3·基]-3-[1〜(哌啶-4-基氧基）-異喹啉-4-基]-脲鹽酸鹽 將[5-(2-氟小氟甲基]-甲基-乙基）-2-對-甲苯基_2Η•吡 峻-3-基]-胺基曱酸2,2,2-三氯乙酯（製備例27，2.7 mmol， 1.2 g)及 DIPEA (2·9 mmol，〇·5 mL)添加至 4-(4-胺基異喹 琳-1-基氧基）-派啶-1'羧酸第三丁酯（製備例22，2 9 mmol，1·〇 g)之4 mL無水DMSO中並在85°C攪拌隔夜。冷 114874.doc -45- 200800194 卻’添加水並以二氣甲烷萃取。合併有機層並以飽和氯化 鈉水溶液洗滌。以硫酸鈉脫水，過濾並減壓濃縮獲得殘留 物。此殘留物進行矽膠層析以己烷/乙酸乙酯梯度（自15至 70〇/〇)溶離，獲得4-(4-{3-[5-(2-氟-1-氟甲基-1-甲基-乙基）_ 2-對-甲苯基-2H-吡唑-3-基]-脲基卜異喹啉小基氧基）_哌 啶小魏酸第三 丁酯。LCMS ES+ (w/z) 635 [M+H]。 使4-(4-{3-[5-(2-氟-1-氟曱基_1_甲基_乙基）_2-對-甲笨基· 2H^比峻-3-基]-脲基}-異喧琳-1-基氧基卜旅唆_1_魏酸第三 丁 S旨（1.1 mmol，0.6 g)在室溫下攪拌並溶解於5 mL二氯甲 烷及氣化氫4.0 Μ之二噁烷（5·3 mmol，1.3 mL)中隔夜。減 壓濃縮。使所形成之白色固體分散於二***中。lcms ES+ (m/z) 535 [M+H] 〇 依實質上類似上述程序之方式製備下列化合物。 製備例 化合物 數據 MS (ES+): m/z fM+Hl 製備例38 雙-氟曱基-丙基)-2-對-甲苯基· 2払吡唑各基]-HH略啶I基氧基)·異 喹啉-4-基]-脲鹽酸鹽 549 製備例39 氟-1，1·二甲基·乙基-2-對·甲苯 基-2//* °比嗤-3 -基]-3 - [ 1 ·(派咬-4-基氧基)-異噎琳-4-基]"脈 517 製備例40 1-(5-第三丁基-2-對-甲苯基-21^吡唾-3-基）-3-[1-(哌啶-4-基氧基）-異喹琳-4-基]-脲 114874.doc -46- 200800194

將氮氣通入1-(5-第三丁基-2-對-曱苯基-2H-吡唑-3-基）-月女基曱西文2,2,2-二氯乙酉旨（製備例17，589 mg，1.456 mmol) 及4-(4-胺基-異喹啉_r_基氧基）_哌啶4_羧酸第三丁酯（製備

例 22，500 mg，1.456 mmol)之 DMSO (5 mL)溶液中歷時5 分鐘。接著添加二異丙基乙胺（507 pL，2.912 mmol)。在60 C攪拌6小時接著冷卻至室溫隔夜。反應混合 物分溶於200 mL CH2Cl2&1〇〇 mL蒸餾水之間。以水 (lxl00 mL)洗滌’接著合併水層並以CH2C12 (3x50 mL)萃 取。合併有機層並以飽和氯化鈉水溶液（2χ〗〇〇 mL)洗滌。 使合併之有機相以硫酸鈉脫水並濃縮。使殘留物進行矽膠 層析以己烷及乙酸乙酯溶離，獲得棕色固體之4·{4〇(5_ 第二丁基-2-對-甲苯基·2Η_吡唑基）_脲基卜異喹啉·丨_基 氧基}-哌夂-1-羧酸第三丁酯。LCMS Es+(所a) 599·5 [Μ+Η] 〇 於4-{4·[3-(5-第三丁基上對·曱苯基.“比唑·3_基）·脈 基l·異喹琳基氧基卜底咬+緩酸第三丁醋（82〇 mg，137 随叫之二氯甲烧（50 mL)冷卻溶液中/添加三氣乙酸（15 社）。使反應混合物在坑攪拌15小時。移除溶劑後，殘 留物以經NaCl飽和之1 N氫氧化鈉（5〇社）處理並以二氯甲 114874.doc •47- 200800194 烷萃取5次（各次50 mL)。合併之有機相以硫酸鈉脫水。過 濾混合物並使殘留物進行石夕膠層析以二氯曱烧及曱醇溶 離，獲得白色固體（515 mg，57%產率，LCMS ES+(m/z) 499.5 [M+H]) 〇 依實質上類似上述程序之方式製備下列化合物。 表3 製備例 化合物 數據 MS (ES+): m/z 製備例41 1-(5-五氟乙基-2-對-曱苯基_2私 吡唑々基)各[1七瓜啶斗基氧基> 異啥琳-4-基]•服 561.3 [M+H] 製備例42 HK派啶基氧基)-異喹啉斗」 基]-3-[2-對-曱苯基-5-(1-三氟甲 基-¾丙基)-2//-吼。坐·3-基服 551.4 [M+H] 實例1 1-[1-(4-環丙烧戴基-娘嗓-1-基）-異喧琳基]-3-[5-(1-曱 基-環丙基）-2-對-曱苯基- 基]-脲

使[4-(4_胺基-異啥琳-1-基）-派嗪-1-基]-環丙基曱g同（製備 例 29，214 mg，0.722 mmol)，[5-(1-曱基-環丙基 >2_對·甲 苯基-2H-吡唑-3-基]-胺基甲酸2,2,2-三氯乙酯（製備例18， 290 mg，0.722 111111〇1)及《 — 異丙基乙胺（0.264 mL)之 4 mL DMS Ο溶液在6 0 C加熱5小時。冷卻所得混合物至室溫並添 加水。過濾沉澱物，以水洗滌，接著以戊烷洗滌並在⑼^ 114874.doc -48- 200800194 真空烘箱中乾燥。使殘留物進行矽膠層析以2以氨―甲醇之 二氯甲烷（0至2%)梯度溶離、，獲得2〇6 mg產物（藉lcms. 測純度為93%)。 洛於少置二氣甲烷及MeOH中，以1當量2 Μ甲烷磺酸之 一氯甲烧處理並在氮氣流中濃縮。所得固體以數毫升 DMSO/MeOH/水分散並過濾獲得145 mg游離鹼（LCMS ES + (m/z) 550 [M+H]) 〇 依貫質上類似上述程序之方式製備下列化合物，隨後進 一步藉逆相在Xterra 30x75 mm 5微米MS C18管柱上使用 10 mM碳酸氫銨水溶液之乙腈梯度溶離純化〇 實例 ......./又✓分两芦地° 化合物 數據 MS (ES+)： [M+H] 實例2 曱基-環丙烷羰基)-派嗪]-基]-異 喧淋_4-基}-3-[5-(1-甲基-環丙基)-2-對-曱苯 基-2i/-吼唑；基]•脲 564 實例3 1-{1-[4-(2,6-二氟-苯甲醯基）-略嗪-1_基]_異喧琳_4_基卜 3-[5-(1-曱基-J哀丙基）-2-對-曱笨基- 2H-0比°坐-3-基]-脲 使-[4-(4-胺基-異喹啉-1-基）-哌嗪-1-基]_(2,6-二氟-苯基-甲酮（製備例32，約0·88 mmol)、[5-(1-甲基-環丙基）_2_對· 甲苯基-2Η^比唑-3-基]•胺基曱酸2,2,2-三氯乙酯（製備例

18，362 mg，0·9 mmol)及二異丙基乙胺（〇·314 mL)之 5 mL DMSO溶液在60°C加熱5小時。冷卻所得混合物至室溫並分 溶於水及乙酸乙酯之間，使用飽和氯化鈉水溶液以助於相 114874.doc -49- 200800194 刀離。水層以乙酸乙酯萃取，且合併之有機層以硫酸鈉脫 水。減壓濃縮。使殘留物進行矽膠層析以2 M氨-甲醇之二 氯甲烷（0至2%)梯度溶離。溶於少量二氯曱烷&Me〇H中， 以1當置2 Μ曱烷磺酸之二氯甲烷處理並在氮氣流中濃縮❹ 進一步藉逆相在Xteira 3〇x75mm 5微米MS C18管柱上使用 10 mM碳酸氫銨水溶液之乙腈梯度溶離純化，獲得73 mg 游離鹼。LCMS ES+(m/z) 622 [M+H]。 使用貝貝上類似上述之程序製備下列化合物之游離驗。 接著溶解0/13 g於1 mL DCM中並添加甲烷磺酸1 N之DCM D當量）溶液。減壓蒸發溶劑獲得〇· i 5 g下述化合物。 實例 化合物 數據 MS (ES+): m/z [M+H] 實例4 1-{1-[4-(2-氟-苯曱醢基)-〇底嗪-1-基]-異啥琳· 冬基}-3-[5-(1-曱基-環丙基)-2-對-曱苯基-2私 吡唑-3-基]-脲曱烷磺酸鹽 604 實例5 1-(5-弟二丁基-2-對-甲苯基°坐-3-基]-3-{l-[l-(l-甲基-環丙烧幾基）-旅咬-4-基氧基]-異喧琳-4-基}-脲 將氮氣通入1-(5-第三丁基-2-對-甲苯基-2H-吡唑-3-基）-胺基甲酸2，2,2-三氯乙酉旨（製備例17，203 mg，0.5 mmol)及 [4-(4-胺基-異喹啉-1-基氧基）_哌啶_1_基-甲基_環丙基） 甲酮（163 mg，0.5 mmol)之DMSO (2 mL)溶液中歷時5分 鐘。接著添加N，N-二異丙基乙胺(200 ，1.1 mm〇i)。在 60°C攪拌隔夜，使反應混合物分溶於二氣曱烷（15 mL)及 114874.doc '50 · 200800194 飽和碳酸氫鈉（50 mL)之間。分離水相並以二氯曱烷萃取2 次（各次15 mL)。使合併之有機相以硫酸鈉脫水並濃縮。 使殘留物進行矽膠層析以己烷及乙酸乙酯溶離，獲得白色 固體（226 mg，78%產率，ES+(m/z) 581·3 [M+H])。 使用實質上類似上述之程序製備下列化合物之游離鹼。 接著溶解於1 mL DCM中並添加曱烷磺酸1 N之DCM(1當 量）溶液。減壓蒸發溶劑獲得下述化合物。

實例 化合物 MS(ES+):m/z tM+Hl 實例6 1-{ 1-[4-(2,2-二曱基-¾丙基)-ϋ瓜嗓-1-基]-異喧琳-4， 基}-3-[5-(1-甲基-環丙基)-2-對·甲苯基-27/-吡唑-3-基]-脲甲烷磺酸鹽 566 實例7 1-[5-第三丁基-2·(6-甲基-吡啶-3-基)-2私吡唑-3-基ΗΗ1-(1-曱基-環丙烷羰基)-略啶-4-基氧基]-異 喹啉斗基}-脲甲烷磺酸鹽 582.3 實例8 1-{1-[1·(2-氟苯曱醯基)-哌啶-4-基氧基]-異喹啉斗 基}-3-[5-(1-曱氧基-環丙基)-2-對-曱苯基-2/ί^比唑- 3-基]-脲曱烷磺酸鹽 635.0 實例9 1-[5-(1 -甲氧基-環丙基)-2·對-甲苯基-2杯。比唑各 基]-3-{ 1-[1-(1-曱基-環丙烷羰基)-哌啶-4-基氧基]-異喹啉-4-基}-脲甲烷磺酸鹽 595.3 實例10 1-[2-(6-甲基-。比17定-3-基)-5-(1-三氟^曱基·環丙基)-21"1-°比哇-3-基]-3-{1-[1-(3-甲基-〇塞吩-2-叛基)-派〇定· 4-基氧基]-異喹啉-4-基}-脲曱烷磺酸鹽 634.0 實例11

1-(5-第三丁基-2-對-曱苯基-211-吡唑-3-基]-3-{1-[4-(2,2-二曱基-丙酸基）-旅嘻-1-基]-異喧琳-4-基}-脈甲烧石黃酸鹽 使1-[4-(4-胺基-異啥琳-1-基）-旅嗓-1-基]-2,2-二曱基-丙 烷-1-酮（製備例3，0.9 mmol，0.3 g)溶於18 mL乙腈中並攪 拌。添加碳酸鉀（〇·99 mmol，0.1 g)及1-(5-第三丁基-2-對-曱苯基-2H-吡唑-3-基）-胺基曱酸2,2,2-三氯乙酯（製備例 17，0.9 mmol，0.4 g)並在室溫授拌隔夜。接著添加1 mL 114874.doc -51 - 200800194 DMF並在60。⑽拌24小日ι冷卻，添加水並以二氯甲烧萃 取。合併有機層並㈣和氯化財溶液絲，以硫酸納脫 水，過濾並減壓濃縮’獲得殘留物。使殘留物進行矽膠層 析以己烷/乙酸乙酯梯度溶離（自5%至2〇%)。於所獲得之油 上添加二氯甲烧並過濾所形成之沉澱，獲得第三丁 基-2-對-甲苯基韻“比嗤_3_基）_3_{1_[4_(2,2•二甲基-丙醯 基）哌秦-1-基]-異喹啉冰基卜脲。ES+(所△) 568[m+h]。 1 (5 第 一丁基 _2-對-甲苯基 _2H-吡唑 _3_基）_3_u_[4_(2,2_ 二曱基-丙醯基）-哌嗪―丨-基卜異喹啉_4_基卜脲在室溫攪拌。 添加i ”烷磺酸溶液於二氯甲烷溶液，形成標題化合 物。LCMS ES+ (m/2) 568 [M+H]。 實例12 1 甲基-環丙烷羰基）_哌啶基氧基]-異喹啉_4_

基}-3-[5-(1-曱基-環丙基）_2_對_甲苯基_2h_d比唑·3_基]_脲 甲烷磺酸鹽

將 EDCI (〇·147 g，〇·77 mm〇l)、HOBt (0.10 g，0.77 _〇i)、[[5-g•曱基_環丙基>2_對_甲苯基基]- 3 Π-(哌啶-4-基氧基異喹啉_4_基卜脲二鹽酸鹽（製備例 3 6

0·16 g，0·64 mmol)及1-甲基二!·環丙基羧酸（Κ1 eq)在 2下放入反應瓶中。添加二氯曱烷（5 mL)接著添加DIPEA H4874.doc -52· 200800194 (0.22 mL，i.28 mmol)並在室溫攪拌隔夜。蒸發溶劑獲得 殘留物。使殘留物進行發膠層析以己|:AeQEt 5()_1()〇%溶 離，獲得游離驗之甲基-環丙烷羰基）♦定·心基 氧基]-異喹啉-4-基}-3-[5-(1_甲基_環丙基）_2_對_甲苯基_ 2H-吼。坐-3-基]-脲。ES + (m/z) 579.3 (M+H)。 將0.3 g 曱基-環丙烷羰基）_哌啶基氧基]-異 啥琳-4'基}-3-[5-(1-曱基-環丙基）·2令甲苯基_2H•吼唑·3· 基]-脲溶於1 mL二氯甲烷中並添加321吣曱烷磺酸！ 二氯曱烷溶液。減壓蒸發溶劑獲得〇 357 g白色固體之標題 化合物（定量）。ES+ (m/z) 579.3 (M+H)。 貫jg似上述製備方式製備下列化合物

實例 化合物 數據 MS (ES+): m/z [M+H] 實例13 1 {HH2*·氟-苯甲醯基)-略啶+基氧基]_異喹琳· 4_基}-3-[5-(1-甲基-環丙基普甲苯基·2//•吡 。坐-3-基]-脲曱烷磺酸鹽 619.3 實例14 ΐ-[ι·(ι·%丙烷羰基-略啶斗基氧基·異喹啉斗基> 3-[5-(1-曱基-環丙基)-2-對-甲苯基κ唑-3-基]-脲曱烷磺酸鹽 565.3 實例15 1-{1-[1-(2,6-二氟-苯甲醯基)_派啶冰基氧基】_異 啥啉冰基}-3-[5_(1-曱基-環丙基峰對-曱苯基· 2私°比唑-3-基V腽曱烷磺酸鹽 637.3 實例16 1-{1-[1-(2·甲基-苯曱醯基)-哌啶冬基氧基[異喹 琳-4-基}各[5-〇曱基-環丙基)·2-對-曱苯基·2//-吼唑-3-基V服曱烷磺酸鹽 615.4 實例Π Ηΐ-[ΐ-(2·氣-6-1苯曱醯基)-哌啶冰基氧基]-異 嗜琳-4-基}-3-[5-(1-曱基-環丙基)-2-對-曱苯基-___吡唑-3-基1·腽甲烷磺酸鹽 653.3 實例18 1-{1-[1-(2-曱氧基-苯甲醯基)·哌啶-4-基氧基]-異 啥啉4-基}各[5-(1-甲基-環丙基>2-對-曱苯基· . 2杯°比唑-3-基V脲甲烷磺酸鹽 631.3 實例19 1-〇(1-甲基-環丙基)_2-對-曱苯基-2//-吡唾-3-基]·Η^·[1-(1-三氣曱基-環丙烷羰基)-略啶-4-基 一 氧基]•異喹啉冬基[脲曱烷磺酸鹽 , 634.3 1 114874.doc -53- 200800194 實例 化合物 數據 MS (ES+): m/z [M+H] 實例20 1-{1-[1-(3氣-2-說曱基-2-甲基-丙酿基)-異嗤琳-4-基]-異1?奎琳-4-基}-3-[5-(1-曱基-壞丙基)-2-對-甲 苯基-2杯吡唑-3-基脲曱烷磺酸鹽 618,4 實例21 1-[5-(2-鼠-l-氟*曱基-1-曱基-乙基)-2-對·曱苯基-2乐吡唑-3-基]-3-{ 1-[1-(1-曱基-環丙烷羰基)-哌 σ定-4-基氧基]-異啥嚇^-4-基}-腺曱烧石黃酸鹽 617 實例22 1-[5-(2-氟-1，1-二曱基-乙基）-2-對-甲苯基·2Η-吡 σ坐-3-基]-3-{1甲基-環丙烧叛基)-略咬-4-基 氧基]-異啥琳-4-基}-脲甲烷磺酸鹽 599 實例23

4_{4-[3-(5-第三丁基-2-對-甲苯基-2H-吼唑-3-基）-脲基]-異啥琳-1-基氧基}-略嗓-1 -魏酸醯胺

將氮氣通入1-(5-第三丁基-2-對-甲苯基-2H-吡唑-3-基）-3-[1-(哌啶-4-基氧基）-異喹啉-4-基]-脲（製備例39，100 mg，0.2 mmol)及胺基曱酸苯酉旨（32.9 mg，0·24 mmol)之 DMSO (1 mL)溶液中歷時5分鐘。接著添加N，N-二異丙基 乙胺（200 μΐ/，1.1 mmol)。在85°C攪拌隔夜，反應混合物 分溶於乙酸乙酯（15 mL)及飽和碳酸氫鈉（50 mL)之間。分 離水層並以乙酸乙酯萃取2次（各次1 5 mL)。合併之有機相 以硫酸鈉脫水並濃縮。使殘留物進行矽膠層析以己烷及乙 酸乙酯溶離，獲得白色固體（40 mg，37%產率，ES+(m/z) 542.3 [M+H]) 〇 114874.doc -54· 200800194 實例24 1-(5-第三丁基-2-對-甲苯基基）-3·{1-[1-(2-氟-苯甲酿基）-旅咬-4-基氧基]-異啥琳-4-基卜脈曱烧續酸鹽 使1-(5 -第三丁基-2-對-曱苯基-2Η-σ比°圭-3 -基）-3-[1十辰 咬-4-基氧基）-異啥琳-4-基]-脲（製備例39，110 mg，〇.221 mmol)、2-氟苯甲酸（37.1 mg，0.265 mmol)、HOBt (35·8 mg，0.265 mmol)及 DCC (54·6 mg，0·265 mmol)之 THF (3

mL)之反應混合物在22°C攪拌18小時。過濾混合物並將遽 液倒入含CHhChClOO mL)之分液漏斗中。以in Na〇H (2x20 mL)洗滌，合併水層並以ch2C12(2x50 mL)萃取，接 著以飽和氯化鈉水溶液（1x50 mL)洗滌合併的有機層。合 併之有機相以硫酸鈉脫水，過濾混合物並使殘留物進行矽 膠層析以二氯曱烷及甲醇溶離，獲得白色固體（1〇98 mg， 80%產率 ’ ES+(m/z) 621.5 [M+H])。 將〇·107 g之1_(5-第三丁基_2_對_甲苯基_2H•吡唑基卜 3_{3-氯-1气2-氟·苯甲醯基哌啶基氧基異喹啉基卜 脲’合於一氯甲烷（2 mL)及甲醇（2 mL)中並添加甲烷磺酸 (16·56 mg，〇·1723 mm〇1)。減壓蒸發溶劑獲得白色固體之標 題化合物（119.7 mg，97%，ES+(m/Z) 621·5 [M+H-MsOH]) 依實質上類似上述程序之方式製備下列化合物。 114874.doc -55- 200800194

實例 化合物 數據 MS (ES+): m/z fM+Hl 實例25 1-[5-第三丁基-2-(6-曱基-吡啶-3·基)-2//-吡唑各 基]-3-{ 1-[1-(3-曱基-嗔吩-2-魏基)-略0定-4-基乳 基]-異喹啉-4-基}-脲甲烷磺酸鹽 624.0 實例26 H5-第三丁基-2-(6-曱基-吡啶-3-基)-2私吡唑-3-基]-3-{1-[1-(2-氯-苯曱醯基)-哌啶-4-基氧基]-異 喹啉-4-基}-脲曱烷磺酸鹽 638.0 實例27 H5-第三丁基-2-(6-曱基-吼啶-3-基)-2//-吡唑-3-基]-3-{ 1-[1-(2-氟-苯曱醯基)-派啶冰基氧基]-異 喹啉斗基}-脲曱烷磺酸鹽 622.3 實例28 1 -[5-第三丁基-2-(6-曱基-吡啶-3-基)-2ii«吡唑-3-基]-3-{Hl-(2,6-二氟-苯甲醯基)-哌啶4-基氧 基]-異喹啉斗基}-脲曱烷磺酸鹽 640.3 實例29 1-[2-(6-甲基-°比咬-3-基)-5-(1-二氣甲基-¾丙基)· 2//-吡唑-3-基]-3-{ 1-[1-(3-曱基-噻吩-2-羰基)-哌 啶斗基氧基]-異喹啉-4-基卜脲曱烷磺酸鹽 676.0 實例30 氯·苯曱醯基)-哌啶-4-基氧基]-異喹啉-4-基}-3-[2-(6-甲基-吼啶-3-基)-5-(1-三氟曱基-環 丙基)-2//-吡唑-3-基脲甲烷磺酸鹽 690.0 實例31 氟-苯曱醯基)-哌啶-4-基氧基]•異喹啉-4-基}-3-[2-(6-曱基-吡啶-3-基)-5-(1-三氟曱基-環 丙基)-2H-吡唑各基]-脲甲烷磺酸鹽 674.0 實例32 ΗΗ1-(2,6-二氟-苯曱醯基)-哌啶-4-基氧基]-異 喹琳-4-基}-3-[2-(6-曱基-吼咬-3-基)-5-(1-三氟曱 基-環丙基)-2H-吼唑；基]-脲甲烷磺酸鹽 692.0 114874.doc 56- 200800194 實例 化合物 數據 MS (ES+): m/z [M+H】 (偵測游離鹼 MW) 實例33 1-(5-第二丁基-2-對-曱苯基-2/]^比0坐-3-基)-3-{1-[1-(3-曱基塞吩-2-羰基)-略°定-4_基氧基]-異啥淋· 4-基}_脲曱烷磺酸鹽 623.5 實例34 1-(5-第三丁基-2-對-曱苯基-2//·吼唑-3-基)_3-[1-(1-環丙烷羰基-哌啶斗基氧基)-異喹啉-4-基]-脲 甲烷磺酸鹽 567.5 實例35 1-{1·[1-(2-敦-苯曱酿基)-派°定-4-基氧基]-異哇琳-4-基}-3-(5-五氣乙基-2-對-曱苯基-27?*0比°坐-3- 基)-脲甲烷磺酸鹽 683.0 實例36 曱基-環丙烷羰基)-哌啶-4-基氧基]-異 喧琳-4-基}-3-(5-五氯t乙基-2-對-甲苯基-2//·σι^σ坐-3-基)-脲甲烷磺酸鹽 643.0 實例37 1-{Η1-(2-氣-苯曱醯基)·哌啶-4-基氧基]-異喹啉-4-基}-3-[2-對-甲苯基-5-(1-二氣曱基-¾丙基)-2//-吡唑-3-基]-脲甲烷磺酸鹽 673.0 實例38 1-{1-[1-(2,6-二氣-苯曱酿基)-0瓜°定-4-基乳基]-異 喹啉-4-基}-3-[2-對-曱苯基-5-(1-三氟曱基-環丙 基)-2//-吡唑-3-基]-脲曱烷磺酸鹽 691.0 實例39 1-{ 1-[1-(1-曱基-環丙烷羰基)-哌啶-4-基氧基]-異 喹啉-4-基}-3-[2-對-甲苯基-5-(1-三氟曱基-環丙 基)-2//-吡唑-3-基]-脲曱烷磺酸鹽 633.3

實例40 1-{1-[1-(2,6_二氟-苯甲醯基）-哌啶-4-基氧基]-異喹啉-4-基}-3-[5-(2 -氣-1-敗曱基-1-曱基-乙基）-2-對-曱苯基- 2H-11比 唑-3-基]-脲 使1-[5-(2·氟-1-氟甲基-1-曱基-乙基）-2-對-曱苯基-2H-吡 唑-3-基]-3-[1-(哌啶-4-基氧基）-異喹啉-4-基]-脲鹽酸鹽（製 備例 37，0.6 mmol，0.3 g)、2,6-二氟苯甲醯氯（0.6 mmol， 0.07 mL)及三乙胺（1.7 mmol，0.2 mL)於5 mL二氯甲烧中 在室溫攪拌隔夜。添加些許水並以二氯曱烷萃取。有機層 乙飽和氯化納水溶液洗務。以無水硫酸納脫水並減壓濃 114874.doc -57- 200800194 縮。使殘留物進行石夕膠層析以己烷/乙酸乙酯作為溶離液 (30°/。：70%) ° LCMS ES+ (m/z) 675 [M+H]。 依實質上類似上述程序之方式製備下列化合物。 實例 化合物 數據 MS (ES+)： m/z [M+H] 實例41 1-[5-(2-氟-1-氟曱基-1 -甲基'乙基)·2-對·曱苯基-2杯咖坐各基]各{曱基-環丙烷羰基)-略 啶基氧基1-異喹啉-4-基卜脲 617 實例42 l-[5-(U-雙-氟甲基-丙基)-2-對-甲苯基-2/^比唑-3-基]各{1-[1-(1,2_二1_苯曱醯基)4啶·4·基氧 ___ 基l·異喹啉-4-基}-脲 689 實例43 1-{1-[1-(2,6-二氟-苯甲醯基)-哌啶冬基氧基;μ異 喹啉-3-基}-4-[5-(1-氟-1，1-二甲基-乙基)·1·對-曱 苯基-If/-吡唑-3-基]-脲 657 實例44 1-[5-(2_氟-1,1-二曱基-乙基)_2·對-甲苯基-2//-«比 唾-3-基]-3-{ 曱基-環丙烧羰基)_略咬-4-基 氧基]-異哇琳_4_基}-腺 599 實例45 114874.doc -58- 1 基卜3-[5-(2-氟-1-氟甲基-1-曱基-乙基）-2-對-甲苯基-2H-口比 2 依實質上類似上述程序之方式製備下列化合物。 3 _ 使0.6^(〇.19111111〇1)1-{1-[1-(2,6-二氟-苯甲醯基）-哌啶-4- 4 唑-3-基]-脲曱烷磺酸鹽 5 基氧基]-異喹啉-4-基}-3-[5-(2-氟-1-氟甲基-1-曱基-乙基）_ 2-對·曱苯基吐-3-基]-腺溶於二氯甲烧（2 mL)中並添 加0.19 mL甲烷磺酸1 N之二氯曱烷溶液。減壓蒸發溶劑獲 得〇·〇9 g白色固體之標題化合物。ES+ (m/z) 675 (M+H)。 6 * {1 - [ 1 - (2,6 - 一氣-本甲酿基）-旅咬-4 -基氧基]-異啥淋-4 - 200800194 實例 化合物 數據 MS (ES+): m/z [M+H] 實例46 Η5·(1，1-雙-氟甲基-丙基)-2-對-曱苯基·2ί/-σ比唾_ 3_基]-3-{1-[1-(2,6·二氟-苯曱醯基)-哌啶斗基氧 基]-異喹啉-4-基}-脲甲烷磺酸鹽 689 實例47 1-{1-[1-(2,6-二氟-苯甲醯基)-哌啶冰基氧基]-異 喹啉冰基}-3-[5-(2-氟-1，1-二曱基-乙基)-2-對-甲 苯基-2F-吡唑各基]-脲曱烷磺酸鹽 657 實例48 1-{卜[1-(1-甲基-環丙烧魏基）-旅咬-4-基氧基卜異啥琳 基}-3-[5-(1-甲基-環丙基）_2_對-甲苯基坐-3-基]-脈 甲烷磺酸鹽 將[4-(4-胺基-異喹啉-]μ基氧基）_哌啶基]_(1-曱基-環 丙基）-甲酮（製備例 23，331.00 g，1·02 莫耳）、THF (3·97 L，48·79莫耳）、[5-(1-甲基·環丙基）_2-對_曱苯基。仏吡 。坐-3-基]-胺基曱酸2,2,2-三氯乙酯（製備例18，41〇 〇〇 g， 1·〇2莫耳）及DIPE (159.00 g，1.22莫耳）添加於配備有頂端 攪拌器、熱偶及回流冷凝管之丨2 L Morton反應瓶中。混合 物回流22小時。冷卻至<5(rc並以碳（Darc〇 g_6〇 ; 33 〇〇 g，2.75莫耳）處理。漿料在43-5{rc攪拌3〇分鐘，接著經微 纖維濾紙及Hyflo Super Cel® (27.00 g)過濾。播種晶至該 濾液中並在沉澱期間使其冷卻至周圍溫度。將所得漿料填 入冰中並攪拌隔夜。過濾固體，以THF (300.00 mL，3.69 莫耳）處理並在40°C減壓乾燥。使殘留物進行矽膠層析以 1:3丙酮/DCM溶離，接著以3〇%丙酮iDCM溶離，獲得 4〇lg (68%)白色固體之[卜〇•甲基_環丙烷羰基）_哌啶· 114874.doc -59- 200800194 心基氧基l·異喹啉-4-基[5-(1-甲基-環丙基）-2-對-甲苯 基-2H·吡唑-3'基;μ 脲。NMR (300 MHz，DMSO-d6): δ 〇·56 (t5 j = 6.0 Hz, 2Η)5 〇·73 (t，J = 6.0 Hz，2H)，0.84 (t， J ^ 6.0 Hz5 2H)5 0.92 (t, J - 6.0 Hz? 2H)? 1.27 (s3 3H), 1.41 (s，3H)，1·73-1·81 (m，2H)，ι·99_2·〇8 2H)5 2.41 (s5 3H)， 3·52-3·65 (m，2H)，3·83_3·96 (m3 2H)，5.47-5.58 (m, 1H)， 6-22 (s5 1H)5 7.37 (d? J - 8.1 Hz? 2H), 7.44 (d3 J - 8.1 Hz? 2H)，7·65-7·71 (m，1H)，7.78-7.83 (m，2H)，8.12 (s，lH)， 8.27 (d，J = 8·4 Hz，1H)，8·58 (s5 1H)，8.69 (s，1H)。 將游離鹼（400.00 g，6·91莫耳）及二氣甲烷（3·〇〇 L， 46·80莫耳）饋入配備有頂端攪拌器之5乙反應瓶中。在室溫 滴加曱烷磺酸（72.00 g，7.49莫耳）。反應攪拌丨小時。過濾 並減壓移除溶劑。添加二***（4 L)並攪拌隔夜。過濾並減 壓乾燥獲得標題化合物，467.8 g。4 NMR (DMS〇d6): δ 0.52 (t5 J = 2.5 Hz? 2H)3 0.7〇 (t5 j = 2.5 Hz? 2H)? 0.80 (t5 J =2.5 Hz，2H)，0.90 (t，J = 2·5 Hz，2H)，1.24 (s5 3H)，1·38 (s，3H)，1.76 (br，2H)，2·02 (br5 2H)，2.38 (s5 3H)，2·40 (s， 3H)，3.55 (br，2H)，3.85 (br，2H)，5.49 (m，1H)，6·20 (s， 1H)? 7.34 (d? 8,5 Hz, 2H)5 7.42 (d? J= 8.5 Hz, 2H)； 7.64 (dd? J = 8.5 Hz5 1H)5 7.77 (s5 1H), 7.79 (s? 1H)? 8.08 (s? 1H), 8.24 (d，J = 8·5 Hz, 1H)，8·62 (s，1H)，8.72 (s，1H)。 實例49 l-[5-(l-氟甲基-環丙基）-2-對-曱苯基-2H-吼唑-3-基]-3-{ 1 - [ 1 -(1 -甲基-環丙烧魏基）-σ底。定_4-基氧基]-異啥淋-4-基}- 114874.doc -60- 200800194 脲曱烷磺酸鹽

將溶於1 mL DCM之5-( 1 -氟甲基·環丙基）_2_對-甲笨基_ 2H-吡唑|基胺（16〇.〇〇 mg，652 26微莫耳）緩慢添加至丨，卜 羰基二咪唑（158.65 mg，978.39微莫耳）2DCM溶液中。混 合物於40°C攪拌7小時。接著添加[4_(4_胺基-異喹啉_丨_基 氧基)一哌啶基H1-曱基-環丙基l·甲酮（製備例23，212.25 mg，6 52.26微莫耳，ι·〇〇當量）之} mL DCM。混合物攪拌 隔夜。在N2下蒸發溶劑。首先藉hlb匣（6 g)使用 NH4C〇3/MeOH (100:0 至 〇:i〇0)純化接著最後以 HpLC (Kromasil C 18 管柱（100x21.2 nun，5 m) (Hi-Chrom))純 化。移動相為水（溶劑A)及乙腈（溶劑B)，均含0.05%三呋 乙酸（TFA)。梯度模式：以4〇% b歷時2分鐘，自40至60% B歷時6分鐘。最後，95% B歷時2分鐘。流速：25 mL/min，獲得固體之氟曱基·環丙基>2-對-甲苯基- 2Η^比嗤-3-基]-3-{1-[ΐ-(κ甲基-環丙炼羰基）_哌啶_4-基氧 基l·異喹啉-4-基}·脲（19 mg ， 5%產率）。 ES + (m/z) :597[M+1] 〇 添加甲烷磺酸1 Μ (30·17微莫耳；30·17 μί)至l-[5-(l-氟 曱基·環丙基）-2-對-曱笨基比唑|基卜3-μ-Κ^曱基_ 環丙烧羰基）-哌啶-4-基氧基]·異喹啉-4-基}-脲（18.00 mg， 114874.doc -61 · 200800194 30.17微莫耳）之0·5 rnL二氯曱烷溶液中。混合物在室溫攪 拌1小時。氮氣下蒸發溶劑獲得固體之標題化合物（20 mg，96%產率）。ES + (m/z): 597·4·[Μ+1]。 ρ38激酶之抑制作用 標準溶液製備

藉由組合 2.5 mL 1 M Tris-HCl (pH 7.5)、0.1 mL 1 Μ二 硫蘇糠醇、l.OmL 1 M氯化鎂及300μί 1% Triton X-100並 以水稀釋至100 mL而製備激酶緩衝溶液。84 mL之此激酶 緩衝溶液與16 mL DMSO組合以製備16% DMSO溶液。 藉由添加 102.6 10 mM ATP水溶液、25pL33P-ATP及 163.5 4乙4 1111^表皮生長因子肽661-681 (61〇111〇1，目錄編 號P-121)之5 mL激酶緩衝溶液而製備200 μΜ ATP溶液。 藉由溶解9.5 μί濃酵素溶液（250 ng ρ38酵素/pL激酶緩衝 溶液）於1536 激酶緩衝溶液中而製備p38激酶酵素溶 液。 樣品製備 於Costar 96-孔微滴定盤中藉由將2 pL 1 OmM個別化合物 於二甲基亞颯之料液溶液溶於248 16% DMSO溶液中而 製備80 μΜ各試驗化合物及對照化合物溶液。將該盤放置 在Tecan Genesis自動化液體處理器上以1 : 3連續稀釋。 分析 1 0 μι連續稀釋之化合物以Beckman Multimek 96-孔自動 化液體處理器放置在分析盤上。以Titertek Multidrop 8-通 道液體處理器添加20 pL之200 μΜ ATP溶液。將10 μί p3 8 114874.doc -62 - 200800194 激酶酵素溶液使用該Multimek移至該分析盤上。使混合物 在30°C反應40分鐘接著藉Multidrop添加60 μΐ^新鮮製備之 5%冰醋酸而停止反應。將80 此溶液使用Multimek移至 一 "MAPH"盤上。使該等盤在室溫放置3〇分鐘且接著在 丁如价1^1^八？萃取器以新鮮製備之〇.5%冰醋酸（1\3 0〇41^， 2x200 μ!〇洗滌/吸除。使該盤墨點並以Multidrop添加100 gL MicroScint-20閃爍流體（Packard Bioscience)。使該等盤 放置30分鐘並在PE/Wallac Microbeta Trilux閃爍計數器上 計數33P-同位素。 實例12中所例舉之化合物最初試驗10個濃度（20 μΜ- 1 ηΜ，使用1 : 3連續稀釋）。具有IC5()值低於25 ηΜ之化合物 以2 μΜ之起始濃度至0.1 ηΜ (1 ·· 3連續稀釋）再度試驗。使 用非線性回歸對各化合物計算1C 值（IDBS Activity Base軟 體）。實例12基本上如上述試驗並發現以34 ηΜ之IC5G抑制 p 3 8激酶酵素。 P-MAPKAPK2之體外抑制作用 RAW 264·7細胞（一種嚅齒類單細胞/巨嗟細胞株ATCC)以 5 0,000個細胞/孔之密度接種於96-孔盤中，盤中含有RPMI-1 640培養基加上10%胎牛血清（FBS)並使其沉降並黏附至孔 底部48小時。達融合後，細胞以10次連續稀釋之不同化合 物處理2小時。通常添加對照化合物。2小時後，添加窗香 黴素（100 ug/ml)且細胞在37°C及5% C〇2氛圍中培育3〇分 鐘。接著，固定細胞並以過氧化氫處理以移除内生性過氧 化酶。最後，該盤以FBS阻斷’洗務教使用抗填醯- 114874.doc -63- 200800194 MAPKAPK2 (Thr 334 ’ Cell Signalling，批次編號 3041)抗 體及ahP-共軛二次抗體進行ELISA分析。此反應使用 FEMTO (Pierce)偵測，其係導致快速動力學光輸出及高訊 號強度之增強化學發光受質ahp。實例丨2所列舉之化合物 基本上如上述般處理且發現以IC5Q為7 nM抑制 PMAPKAPK2酵素產生。

小鼠腹膜巨嗟菌

舉例之化合物基本上如上述般處理且發現具有小於或等 於200 nM之1€：^值。下列化合物基本上如上述般處理且發 現具有下列活性： 實例 IC5〇 (nM) 1 44 3 25 9 ^οΓ~~ 23 125 TNFoc之體外抑制作用 1 mL硫代乙醇酸醋湯汁（5.〇g酵母萃取液，i5 〇g路腺或 騰路腺’ 5.〇 8右旋糖，2·5 g氣化鈉，0.75 g L-胱胺酸， 0.5㈣代乙醇酸鈉’刃天t(resa^in)，纽 膠於U L蒸餚水中）注射入Balb/C雌性小鼠之腹腔内。注 射後苐4天或第5天’殺死小鼠且接著以&注射*机 R讓-购培養基（Bi。偷如）且姻筒抽出腹膜 囷〇 細胞激素產生 以血球計數器計算小鼠腹膜 E嗟菌且在96-孔盤中 ，於 114874.doc • 64 - 200800194 含10%胎牛血清之RPMI-1640培養基中調整至5x 105個細胞/ 孔。於96-孔盤中舖上200 μί/孔且使細胞沉降並黏附於該 孔底部至少3小時。試驗化合物或標準ρ38激酶抑制劑使用 一系列8濃度在37 °C預處理1小時（20 pL/孔）。細胞以50 ng/mL脂多糖（LPS)及10 U/mL干擾素-7之混合物在37°C處 理18小時（20 μΐ^/孔）。收取經調整之培養基並使用Luminex 偵測程序分析TNFoc產生。 TNFa/Luminex偵測分析（Bio-Rad Bio-Plex Kit'目錄編號 171-G12221) 凍乾之預混合TNFoc標準品（1標準試管/兩個96-孔盤）以 5〇0!^無菌水復水（5〇〇,〇〇〇口£/111[)。使樣品滿轉5秒，在冰 上培育30分鐘，並在使用前渦轉5秒。一組12根15 mL試 管才示號為編號1至編號12且接著將下列所示細胞培養基小 量地添加至適宜試管内（標準濃度如下·· 5〇5〇〇〇; 25,000; 12,500; 63250; 3,125; 1,562.5; 781.3; 390.6; 195.3; 97.7; 48.8;及24.4 pg/mL)。該預混合之抗細胞激素共輛之珠粒經 激烈渴轉（25X)30秒。抗細胞激素共軛之珠粒使用lx Bi〇-Plex分析緩衝液稀釋至1X濃度。對每一盤，將24〇吣該預 混合珠粒添加至5760 μ]：之Bio-Plex分析缓衝液中。 Millipore 96-孔過濾盤以100 μί/孔阻斷緩衝液阻斷。該阻 斷緩衝液使用MiUipore過濾系統過濾接著以面紙吸著乾 燥。該過濾盤上以100 μΐ/孔之Bi〇_plex分析緩衝液進行2次 洗務並以面紙吸著乾燥。該1χ抗細胞激素共軛之珠粒渦轉 1 5秒並添加50 μί至各孔中。此經過濾並以面紙吸著乾 114874.doc -65- 200800194 燥、。該過濾盤上以100 μ1/孔之Bi0_Plex洗滌緩衝液進行2次 洗滌。再度過濾並以面紙吸著乾燥。5〇 _樣品或標準品 添加至各樣品孔中。在室溫於搖晃器上避光下在裝置 (setting%培育60秒且接著在裝置3培育儿分鐘且接著置入 冰櫃中隔夜◊以Bi〇-Plex洗滌緩衝液進行3次洗滌。過濾並 以面紙吸著乾燥。對每一盤製備細胞激素偵測抗體（約在 使用妯1〇分麵）並將60 μί該預混合之細胞激素偵測抗體料 液添加至5940 pL之Bio-Plex偵測抗體稀釋液中。 添加50 μί細胞激素偵測抗體並在室溫於搖晃器上避光 下在裝置6培育60秒且接著在裝置3培育3〇分鐘。以 Plex洗條緩衝液進行3次洗滌。過濾並以面紙吸著乾燥。 對每一盤製備Strept-PE(約在使用前10分鐘）並將6〇 _添加 至5940吣之Bio-Plex分析緩衝液中。於各孔中添加鏈黴親 和素-PE並在室溫於搖晃器上避光下在裝置6培育秒且接 著在裝置3培育10分鐘。以Bio-Plex洗滌緩衝液進行3次洗 滌。過濾。該珠粒再以100 μ17孔之Bi〇-Plex分析緩衝液懸 浮。在Luminex機器上讀取標準品及樣品。該等強度讀數 接著基於使用4-參數邏輯回歸方法（Bi〇-Plex ManageT 2 Q B i ο - Rad)重複兩次所產生之12 -點標準曲線而轉化成皮克/ 毫升單位並計算IC5G。 實例12舉例之化合物基本上如上述般處理且發現在小於 9nM之IC5()值壓抑體外TNFα。 TNFa體内抑制作用 對雌性Balb/c小鼠（6隻小鼠/劑量）以P.O·投與化合物（3〇、 114874.doc •66- 200800194 1 0、3及1 rng/kg)。1小時投與4次下列化合物（以體積〇 . 1 mL/小鼠 Ρ·0.投藥；載體：1% NaCMC/0.25°/。Tween-80 於 水中）；小鼠以400 pg/kg經IP_注射LPS。LPS挑釁1·5小時 後，以異氟烧使小鼠麻醉並經心臟穿孔採血。使用得自 R&D系統之ELIS Α測定血浆中TNFoc量並測定劑量反應 ED50 〇

實例12舉例之化合物基本上如上述般處理且在1 ·0 mg/kg 之TMED50可壓抑體内TNFa。該閥值最小有效劑量 (TMED)50為達到大於或等於50%抑制作用之劑量且統計學 上不同於對照組/安慰劑。 口服投藥 於雄性Fischer 344大鼠中篩選口服投藥之化合物。動物 禁食隔夜並投與經製備成在含Tween 80(0.25% v/v)及消泡 劑（0.1% w/v)之羧曱基纖維素鈉中的懸浮液之試驗化合物 (1% w/v)。投藥懸浮液製備為1 mg/mL並藉灌食以1 mL/kg投 藥。投藥後0,5小時及7小時之間採取血液樣品並藉離心製 備血漿。使用線上固相萃取及LC/MS/MS分析血漿樣品。 實例12舉例之化合物基本上如上述般處理且該Cmax在 36800 ng.h/mL之 AUC(0-7h)為 9390 ng/mL。 對關節内LPS誘發之TNFa的效果 於大鼠腳踝關節内注射LPS誘發TNFa合成，其可於關節 液中測量。在2小時内可偵測到高量的TNFa。由於關節為 關節炎發生的部位，因此此模型可快速測定口服投與化合 物對滑膜中的發炎反應是否具有效果。 114874.doc -67- 200800194 將六隻雌性Lewis大鼠（150-200 g)放至於各處置組。該 等動物口服投與載劑（1 %羧甲基纖維素鈉-0·25 % Tween 80) 或試驗化合物（1 mg/kg，3 mg/kg5 10 mg/kg及30 mg/kg)。1 小時後，於各大鼠右腳踝經關節内投與10 μ1 LPS (10 gg)，同時左腳踝接受10 pL食鹽水。2小時後，各腳踝以 100 μΕ鹽水灌洗。收集灌洗液並儲存在_8〇它。 第1組：載體（1%羧曱基纖維素鈉-0.25% Tween 80，1 mL，PO) 弟2組：試驗化合物（1 mg/kg，1 mL，ΡΟ) 第3組··試驗化合物（3 mg/kg，1 mL，PO) 弟4組：試驗化合物（1 〇 mg/kg，1 mL，PO) 弟5組：試驗化合物（3〇 mg/kg，1 mL，PO) 使市售ELISA套組（R&D，RTA00)測量TNFa。以實例12 所例舉化合物處置產生TNFa合成之劑量反應抑制作用， 如於滑膜液中測量得TMED50=2.54 mg/kg所示。 使用流式細胞計對茴香黴素刺激之小鼠體外磷醯· MAPKAPK2抑制作用分析 8-10週齡之雌性^3^|；)/〇小鼠購自丁&(：〇11丨(^公司並以0.2 1111^ 體積的化合物以濃度30、10、3、1 mg/kg經p〇投藥。2小 時後或其他所示時間後自心臟穿孔獲得血液並收集於含 EDTA的試管中。1〇〇 血液在37°C培育10分鐘。接著全 血與FITC-共輛之大鼠抗小鼠Ly-6G mAb (1:250)及APC-共 輛之大鼠抗小鼠〇〇1113 111八13(1:1〇〇)混合並以1〇42/1111茴香 Μ素刺激。兩細胞表面抗原著色及茴香黴素刺激作用在3 7 ! I4874.doc -68 - 200800194 C進行15分鐘接著以Lyse/Fix緩衝液（BD Bioscience，目錄 編號558049)在室溫進行ι〇分鐘。溶胞之血液樣品在室溫 600xg旋轉8分鐘並以4 mL PBS再洗滌一次。於血液細胞中 添加2〇0 pL稀釋的抗-磷醯·ΜΑΡΑΡΚ·2 抗體（1:1〇〇 稀釋度）（Cell Signaling，目錄編號3041)及小鼠BDFc阻斷 劑（1:100稀釋度）(BD Bioscience，目錄編號553 141)之預滲 透之培養基B(目錄編號GAS 002 S-5)並在室溫培育3〇分鐘。 培育後，添加3 mL著色/洗滌緩衝液且細胞如上述旋轉並 以3 ml著色/洗滌緩衝液洗滌。細胞接著使用Beckman Coulter F500進行流式細胞計分析。在經控制之 CD 11 b+Ly6G-細胞上測量磷醯-MapKap-K2著色之平均螢 光。藉JMP程式進行數據分析。以實例12舉例之化合物處 理在TMED50= 2.20 mg/kg產生P-MAPKAPK2合成之劑量反 應抑制作用。 大鼠膠原誘發之關節炎效率模型 雖性 Lewis大鼠（約 19〇 g，Charies Rivei· Labs)以經等體 積佐劑（氫氧化鋁）乳化之胎牛Η型膠原（2 mg/mL)免疫。在 大鼠月部罪近尾部基部處以約〇·3 mg該乳液經皮内免疫。 所有動物依據相同方案7天後再度免疫。該等大鼠在第一 -人免疫後第12至14天開始發展出關節炎（特徵為腳踝之一 或兩者腫脹及紅腫）。大鼠以第一個關節炎徵候均等分配 成5個處置組且各大鼠開始以bid投藥14天。 處置組： 第1組：載體（1%羧甲基纖維素鈉_0·25〇/〇 丁weeri 8〇)，i 114874.doc -69- 200800194 mL，P〇，Bid χ 14天 第 2組：試驗化合物，5 mg/kg，i mL，p〇，Bid x 14 第 3 組：試驗化合物，15 mg/kg，i mL，p〇，Bid x 14 第 4組：試驗化合物 ’ 30 mg/kg，i mL , p〇，Bid x 14 第 5 組：試驗化合物，10 mg/kg，i mL，p〇，qd x 14 以測徑器一週測量5天腳踝直徑並記錄。數據表示為自該 複合發炎分數及所進行的統計學分析所產生之曲線下面積 (AUC) 〇 口服投與本發明化合物較佳。然而，口服投藥並非唯一 路徑或甚至為唯一較佳路徑。例如，經皮投藥可能對可能 忘記或易忘記口服藥物之病患非常需要，且因相對於口服 投藥之便利性或避免潛在順應性方面，靜脈内路徑可能較 佳。式I化合物亦可藉經皮穿刺、肌肉内、鼻内或尤其是 直腸内路徑投藥。投藥路徑可以任何方式改變，受限於藥 物物理性質、病患及看護者便利性及其他相關環境而定 (Remington’s Pharmaceutical Sciences，18th Edition，Mack

Publishing Co· (1990)) 〇 本發明之醫藥組合物係依醫藥領域所悉知之方式製備。 載劑或賦型劑可為固體、半固體或液體物質，其可作為活 性成分之載體或介質。適宜載劑或賦型劑為本領域所悉 知。該醫藥組合物可採用口服、吸入、非經腸道或局部使 用且可以錠劑、膠囊、氣溶膠、吸入劑、栓劑、溶液:懸 浮液等對病患投藥。 本發明化合物可例如以惰性稀釋劑或膠囊或壓縮成錠劑 114874.doc -70 - 200800194 經口服投藥。就口服治療投藥目的而古 σ ’该專化合物可4莽 入賦3L劑且以鍵劑、***錠、膠、 ^ 趴、曰η . / ·τ蜊、懸浮液、糖 骖 日日0、口嚼膠等形式使用。該〜 &寺製劑應含有至少 之本發明化合物、活性成分，但可 ^、 特疋形式而改變且可 能宜在單位的4%至約70%之間。组人弘 n 一 、、且D物中本發明化合物之 ΐ係使付可獲得適宜劑量。本發 ,^ 較佳組合物及製劑可

由熟知本技藝者決定。 ^ ^ J 該等錠劑、膠囊、***錠等 今丨· 3有一或多種下列佐 背J ·黏合劑如聚維酮、羥丙基纖 Π23 牙、 械晶纖維辛或明 膠，賦型劑或稀釋劑如：澱粉、 '一 -叙.山Λ 礼搪政晶纖維素或磷酸 二I:1交聯幾甲基纖維素、交聯聚維_、殿粉 、典石子二、玉米殿粉等；潤滑劑如：硬脂酸鎮、硬月旨酸、 仴石或虱化植物油；滑澤劑如·· 如.R ^ w 胗饈—乳化矽；濕潤劑 :·月桂基硫酸鈉及聚山梨糖醇醋8〇;及甜味劑如：斧 、匕阿斯巴甜或糖精可被添加，或續味劑如薄荷、水揚酸 甲酯或橘子矯味劑。者兮罝- J田5亥早位劑型為膠囊時，除了上述種 :!貝以外’其可含有液體载劑如聚乙二醇或脂肪油。其 劑型可含有可改善單位劑型物理形式之其他各種物 :衣膜。因此’錠劑或丸劑可經糖、㈣基τ基纖維 ^聚尹基丙稀酸醋或其他包衣劑包覆。糖漿除了本發明 :=以外可含有薦糖作為甜味劑及某些保存劑、顏料及 者色劍及構味齋|。 I備该等各種組合物之物質應為醫 条上純的且於所用的詈盔主 lno/ x 里…母性。較佳之調配物係藉由添加 ° 1基"所需劑量之式I化合物甲，接著添 Π 4874.doc 200800194 加由20%經丙基n糊精、5 跑齊ij 及肥㈣^心計）所構成二料纖維素、㈣消 式I化口物大體上在廣範圍劑量下為 劑量通常落於約0.0001至約 ⑽效。例如，每夭 中，劑量低ΜΠτ _體重之範圍。有些例 釗里低於上述耗圍下限可能更適合， ^ 台匕刹田Φ古曰 而八他例中亦可 Γ更❹而不會引起任何有害副㈣，且因此上述劑 里耗圍不欲U任何方式限制本發明範圍。將了解確實投與 的化合物量將由醫師鑒於相關環境包含欲治療病況、所選 擇的投藥路徑、投與的確實化合物、個體病換之年齡、體 重及反應*m及病患病徵嚴重性等而決定。 114874.doc 72·

Claims (1)

1. 200800194 十、申請專利範圍： 1. 一種式I之化合物，

   其中： X係選自下列所組成之組群：

   ① (ϋ) R為c广C4烷基、視情況經一或兩個選自Ci-c4烷氧 基、甲基及三氟甲基所組成組群之取代基取代之〇：3_(：：4環 燒基；或（Vc4烷基鹵基; r2為視情況經CrC4烷基取代之苯基、或視情況經Cl-C4院基取代之吼咬基； • R3為胺基、CrC4烧基、Ci-C4烧氧基、CVC4烷基鹵 基、視情況經選自曱基、三氟曱基或鹵基之取代基取代 之<^3-^4環烧基；苯基或噻吩基，各視情況經選自下列之 第一取代基取代：鹵基、Cl-C4烷基及CVC4烷氧基，及 視情況進一步經選自鹵基之第二取代基取代；或其醫藥 可接受性鹽。 2·如請來項^化合物，其中X為： 114874.doc 200800194

   3·如請求項之化合物，其中R2為4_甲笨基。 4·如請求項丨或]之化合物，其中以為丨_甲基小環丙基、2_ 氣-1，1-二甲基乙基或2_氟-卜氟曱基甲基乙基。 5·如請求項1或2之化合物，其中R3為1-甲基-；μ環丙基。 6. 一種式I之化合物，

   啶-4-基氧基]異喹啉-苯基-2Η-ϋ比嗤·3-基]- 1气^[1…(1-甲基_環丙烷羰基）_哌 4基卜3-[5-(卜甲基-環丙基）_2_對·甲 脲，

   或其醫藥可接受性鹽。 一種醫藥組合物，包括 及醫藥可接受性賦型劑 如請求項1-6中任一項之化合物以 、載劑或稀釋劑。 114874.doc 200800194 七、指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：（無） (二) 本代表圖之元件符號簡單說明：

   八、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式：

   式I 114874.doc