TW200413377A

TW200413377A - Novel pyrazolopyrimidines as cyclin dependent kinase inhibitors

Info

Publication number: TW200413377A
Application number: TW092124349A
Authority: TW
Inventors: Timothy J Guzi; Kamil Paruch; Michael P Dwyer; Ronald J Doll; Viyyoor Moopil Girijavallabhan; W Dillard Lawrence; D Tran Vinh; Min He Zhen; Anthony James Ray; Park Haengsoon
Original assignee: Schering Corp; Pharmacopeia Inc
Priority date: 2002-09-04
Filing date: 2003-09-03
Publication date: 2004-08-01
Also published as: CN1738821A; DE60314427T2; CN1310918C; KR20050058507A; AU2003268357A1; WO2004022559A1; EP1534709B1; AR041134A1; EP1534709A1; DE60314427D1; CA2497444A1; US7470695B2; ATE364608T1; MY139336A; US7078525B2; NZ539162A; ZA200501851B; HK1071570A1; US20060235025A1; JP2006501260A

Description

200413377 玖、發明說晛：【發明所屬之技術領域】本發明有關可作為蛋白質激酶抑制劑之吡唑并[1，5-a]嘧淀化合物、含此化合物之醫藥組合物、及使用此化合物或醫藥組合物治療例如癌症、發炎、關節炎、病毒疾病、神經退化疾病如阿茲海默氏（Alzheimer’s)疾病、心臟血管疾病及真菌疾病之治療方法。本申請案主張2002年9月4曰申請之美國專利臨時申請號60/408,030之優先權。【先前技術】週期素依賴性激酶（CDKs)為絲胺酸/蘇胺酸蛋白質激酶，其為細胞週期及細胞增殖背後之驅動力。個別CDK’s如 CDta、CDK2、CDK3、CDK4、CDK5、CDK6 及 CDK7、CDK8 及類似物在細胞週期漸進中扮演不同角色且可歸類為Gl、S 或G2M期酵素。非控制之增殖作用為癌細胞之檢驗印記且在許多重要實心瘤中高頻率發生CDK功能錯調節。CDK2及 CDK4由於其活性在廣泛種類之人類癌症中經常錯調節而特別受到注意。CDK2活性對細胞週期油G1其漸進至S期而言為必須者，且CDK2為G1檢核點之重要成分之一。檢核點作用為維持細胞週期事件之適當順序且使細胞對傷害或對增殖訊號反應，同時在癌細胞中喪失適當之檢核點控制造成腫瘤形成。該CDK2路徑以腫瘤抑制劑功能（如p52、RB及 p27)及癌基因活化作用（週期素E)之程度影響腫瘤形成。許多報導已證明CDK2之輔活化劑（週期素E)及抑制劑（p27)兩者分別於乳癌、結腸炎、非小細胞肺癌、胃癌、***癌 87251.doc 200413377 、膀胱癌、非-荷葛金（non-Hodgkin’s)淋巴癌、卵巢癌及其他癌症中過度表現或表現不足。它們的改變表現已顯示與增加之CDK2活性量及不良之總存活率有關。此觀察使 CDK2及其調節路徑為近年來發展之必要標的，數種腺甞5、三磷酸酯（ATP)競爭性小有機分子以及肽於文獻中已報導作為有潛力治療癌症之CDK抑制劑。US 6,413,974第1欄第 23行-第15欄第10行提供對各種CDKs及其與各種癌症關聯性之良好描述。 CDK抑制劑為已知。例如黃素比多醇（flavopiridol)(式I) 為目前經歷人J員臨床試驗之非選擇性CDK抑制劑。A. M. Sanderowicz等人，J· Clin· Oncol· (1998) 16_9 2986-2999 〇 ch3

其他已知之CDKs之抑制劑包含例如歐樂姆辛（olomoucine) (J Vesely等人，Eur· J· Biochem·，（1994) 2245 771-786)及羅可維汀（rocsovitine)(I。Meijer等人，Eur. J. Biochem·，（1997) 243, 527-536)。US 6，1〇7,305描述某種吡唑并[3,4-b]吡啶化合物為CDK抑制劑。該’305專利之例舉化合物具有式II : 87251.doc

200413377

式II K. S. Kim等人，J. Med. Chem· 11(2002) 3905-3927及WO 02/10162揭示某種胺基嘧唑化合物為CDK抑制劑。 _ 吡唑并嘧啶為已知。例如WO 92/18504、WO 02/50079、 WO 95/35298、WO 02/40485、EP 94304104.6、EP 0628559 (相當於 US 專利 5,602，136; 5,602，137 及 5,571，813)、US 6,383,790 > Chem. Pharm. Bull., (1999) 47? 928 - J. Med.

Chem.，（1997)扭，296、J. Med. Chem·，（1976) ϋ，517及 Chem.

Pharm. Bull·，（1962) i_Q_620 揭示各種口比口坐并口密咬。仍需要一種新穎化合物、調配物、治療方法以治療與 CDKs有關之疾病及失調。因此，本發明之目的係提供一種 ® 可用以治療或預防或舒緩此疾病及失調之化合物。 · 【發明内容】 · 許多具體例中，本發明提供作為週期素依賴性激酶之抑制劑之新一類峨峻并[1，5-a]喃淀化合物、製備此化合物之方法、含一或多種此化合物之醫藥組合物、製備包括一或多種此化合物之醫藥調配物之方法、及使用此化合物或醫藥組合物治療、預防、抑制或舒緩與CDKs有關之一或多種 87251.doc -9- 200413377 疾病之方法_〇一方面，本發明揭示一種化合物、或該化合物之醫藥可接受性鹽或溶劑化物，該化合物具有式III所示通武：

式III 其中： R為雜芳基，其中該雜芳基可為未經取代或視情況經一或多個可相同或不同之基團取代，各基團獨立選自由鹵素、燒基、芳基、環烷基、-CF3、_ocf3、CN、_〇R5、-nr5r6 、-C(R4R5)n〇R5、_c(〇2)R5、-C(〇)R5、-C(0)NR5R6、-SR6 、-s(o2)r7、_s(o2)nr5r6、-n(r5)s(02)r7、-n(r5)c(0)r7 及-n(r5)c(o)nr5r6所組成之組群； R2係選自由R9、烷基、炔基、芳基、雜芳基、_CF3、雜環基烷基、炔基烷基、環烷基、-C(〇)〇R4、經1-6個R9基取代之烷基（該R9基可相同或不同且各R9基係獨立選自後述所列之R9)、卜(CH2)m—N n—r8 \^芳基及

其中R2之上述定義中該芳基可為未經取代或視情況經一或多個基團取代，該基團可相同或不同且獨立選自由鹵素、 CN、-OR5、SR5、-CH2OR5、-C(0)R5、s〇3H、s(〇2)r6、s(〇2)nr5r6 87251.doc -10 - 200413377 、-nr5r6、-c(o)nr5r6、-CF3及-0CF3所組成之組群； R3係選自〜由下列所組成之組群：Η、鹵素、_NR5R6、 -c(o)(m4、_c(o)nr5r6、烷基、炔基、環烷基、環烷基烷

基、芳基、芳基烷基、雜環基、雜環基烷基、雜芳基、

環基烷基、雜芳基及雜芳基烷基及對上述r3剛顯示之結構之雜環基團各可經或視情況可獨立經一或多個可相同或不同之基團取代，各基團獨立選自下列所組成之組群：鹵素、烷基、芳基、環烷基、CF3、CN、-〇CF3、、-OR5、-NR5R6、_(CR4R5)nNR5R6、_c(〇2)r5、_c⑼r5、麵C(0)NR5R6、-SR6、-S(〇2)R6、_s(〇2)nr5r6、_n(r5)s(〇2)r7 、-n(r5)c(o)r7及-n(r5)c(o)nr5r6 ; R4為H、鹵基或烷基； R5為H或烷基； R6係選自由Η、烷基、芳基、芳基烷基、環烷基、雜環基、雜環基烷基、雜芳基及雜芳基烷基所組成之組群，其中該燒基、芳基、芳基燒基、環燒基、雜環基、雜環基燒基、雜芳基及雜芳基烷基可為未經取代或視情況經一或多個可相同或不同之基團取代，各基團獨立選自下列所組成之 -11 -

87251.doc 200413377 、、且群·鹵素、燒基、芳基、環燒基、Cp3、_qcf3、cn、-OR5 ^ . rN(R5)Boc > -(CR4R5)nOR5 > -C(02)R5 ^ -C(0)R5 、_c(o)nr5r10、_S03H、_SR10、_S(02)R7、_S(〇2)NR5R10、 ’(R5)S(〇2)R7、_N(R5)c(〇)R7及·n(r5)c(〇)nr5r10 ; R係選自由H、烷基、芳基、芳基烷基、環烷基、雜環基、雜環基燒基、雜芳基及雜芳基燒基所組成之組群，其中該烷基、芳基、芳基烷基、環烷基、雜環基、雜環基烷基、雜芳基及雜芳基烷基可為未經取代或視情況經一或多個可相同或不同之基團取代，各基團獨立選自下列所組成之組群：鹵素、燒基、芳基、環燒基、CF3、-〇CF3、CN、 -OR5、-NR4R5、-N(R5)B〇c、-(CR4R5)n〇R5、{(〇2)Κ5、 -c(o)nr4r5、-C(0)R5、_s〇3H、_SR5、_s(〇2)r7、-s(〇2)nr4r5 、-n(r5)s(〇2)r7、-n(r5)c(o)r7及-n(r5)c(o)nr4r5 ; 或視情況（i)基團-NR5R10中之R5及R10或（ii)基團_NR5R> 之R5及R6可一起形成環烷基或雜環基基團，該環烷基或雜環燒基基團各為未經取代或視情況獨立經一或多個R9基取代； R係選自由燒基、環燒基、芳基、雜芳基、芳基燒基及雜芳基烷基所組成之組群，其中R7之該烷基、環烷基、雜务基燒基、芳基、雜芳基及芳基燒基可為未經取代或視情況獨立經一或多個可相同或不同之基團取代，各基團獨立選自下列所組成之組群·· 素、烷基、芳基、環烷基、cf3 、賴 ocf3、cn、-or5、-nr5r1g、-ch2or5、-c(o2)r5、-c(o)nr5r10 、-c(o)r5、-sr1g、-s(o2)r1g、-s(o2)nr5r1()、_n(r5)s(o2)r10 、-n(r5)c(o)r1g及-n(r5)c(o)nr5r10 ; R8係選自由 R6、-C(O)NR5R10、-CH2OR4、-C(O)〇R6、-C(O)R7 及-S(〇2)R7所組成之組群； -12- 87251.doc 200413377 R9係選自痼素、CN、-NR5R6、-(CH2)nOR4、-C(02)R6、 -C(0)NR5R1Q'、-OR6、_SR6、-S(〇2)R7、s(〇2)NR5R6、 -N(R5)S(〇2)R7、-N(R5)C(0)R7及-N(R5)C(0)NR5R6 ; m為0至4 ;及 n為1至4。式III化合物可作為蛋白酶激酶抑制劑且可用以治療及預防增殖性疾病例如癌症、發炎及關節炎。其亦可用於治療神經退化疾病如阿茲海默氏（Alzheimer，s)疾病、心臟血管疾病、病毒疾病及真菌疾病。【實施方式i 一具體例中，本發明揭示由結構式ΠΙ所示之吡唑并 [l，5-a]喊淀化合物，或其醫藥可接受性鹽或溶劑化物，其中各種基團如前述定義。另一具體例中，R為2-吡啶基、4-吡啶基、3-吡啶基、4-吡哫基-N-氧離子、3-吡啶基氧離子、ι，3-嘍唑-2-基、嘧淀-5-基、峨畊-3-基及嗒畊-3-基，其中該吡啶基、嘍唑基、嘧啶基、吡畊基及嗒啡基基團可為未經取代或視情況經一或多個基團取·代，該基團可相同或不同且獨立選自由鹵素、烷基、芳基、-CF3、-OCF3、CN、-or5、-NR5R6、-CH2OR5 、-C(02)R5、-C(0)NR5R6、-S(〇2)NR5R6及-N(R5)S(〇2)R7所組成之組群。另一具體例中，R2為鹵素、CF3、CN、低碳烷基、環烷基、-OR6、-C(〇)OR4、-CH2OR6、芳基或雜芳基。另一具體例中，R3為Η、鹵素、低碳烷基、芳基、雜芳基、_C(0)0R4、環烷基、-NR5R6、雜環基烷基、環烷基烷基、 • 13 · 87251.doc

200413377 其中R之该烷基、芳基、雜芳基、雜環基及環烷基為未經取代或視情況獨立經一或多個可相同或不同之基團取代，各基團獨i選自下列所組成之組群：商素、cf3、〇cf3、低碳烷基、CN及〇r5。另一具體例中，R4為H、_基或低碳烷基。另一具體例中，R5為Η或低碳烷基。另一具體例中，m為0至2。另一具體例中，η為1至2。又一具體例中，&為2-吡啶基、4-吡啶基、3-吡啶基、4-吡哫基氧離子、3-吡啶基-Ν-氧離子、1，3-嘍唑-2-基、嘧呢-5-基、吡畊_3•基及嗒畊_3_基。又一具體例中，R2為F、c卜Br、Cf3、CN、低碳烷基、環烷基、或_(CH2)n〇R6。又一具體例中，R3為Η、低碳烷基、環烷基、_C(0)〇R4 芳基、雜芳基、環烷基烷基、

87251.doc -14- 200413377 、低碳烷基、OMe及CN。另一具體例中，R3為：

另一具體例中，R4為Η。另一具體例中，R5為H。另一具體例中，m為0。另一具體例中，η為0。本發明化合物群示於表1。

表1

87251.doc -15- 200413377

87251.doc -16- 200413377

Br

Br Br

87251.doc -17- 200413377

上述及整個揭示中所用之下列名詞除非另有説明’否則應了解為具有下列意義：病患’’包含人類及動物。约1至约20個哺乳類”意指人類及其他哺乳類動物。烷基”意指可為直鏈或分支且在鏈中包捂 87251.doc -18 - 200413377 碳原子之脂族烴基。較佳之烷基在鏈中含約1至約12個碳原子。更佳之烷基在鏈中含約1至約6個碳原子。分支意指_ 或多個低碳烷基如甲基、乙基或丙基鍵結至直鏈烷基鏈上。’’低碳烷基”意指鏈中含約1至約6個碳原子且可為直鏈或分支之基。”經取代烷基”意指該烷基可經一或多個可相同或不同之取代基取代，各取代基係獨立選自由基、烷基、芳基、環烷基、氰基、羥基、烷氧基、烷硫基、胺基、-NH(烷基）、-NH(環烷基）、-N(烷基h、羧基及_◦(〇)〇_烷基所組成之組群。適宜烷基之非限制性實例包含甲基、乙基、正丙 _ 基、異丙基及第三-丁基。 ’’玦基"意指含至少一個碳-碳參鍵且可為直鏈或分支且在鏈中包括約2至約15個碳原子之脂族烴基。較佳之炔基在鏈中具有約2至約12個碳原子；且更好鏈中含約2至約4個碳原子。分支意指一或多個低碳烷基如甲基、乙基或丙基鍵結至直鏈块基鏈上。”低碳炔基”意指鏈中約2至約6個碳原子且可為直鏈或分支之基。適宜炔基之非限制性實例包含乙块基、丙炔基_、2-丁炔基及3_甲基丁炔基。”經取代炔基”鲁思指炔基可經一或多個可相同或不同之取代基取代，各取 -代基係獨立選自烷基、芳基及環烷基所組成之組群。 - ’’芳基”意指包括約6至約14個碳原子、較好約6至約1〇個奴原子 < 方族單環或多環系統。該芳基可視情況經一或多個可相同或不同且如本文定義之，，環系統取代基"所取代。適宜芳基之非限制性實例包含苯基及萘基。雜方基”意指包括約5至約14個環原子、較好約5至約1〇 87251.doc -19- 200413377 個％原子且其中一或多個環原子為非碳之元素例如氮、氧或硫之單獨或組合狀況之芳族單環或多環系統。較好雜芳基含約5至約6個環原子。該"雜芳基，，可視情況經一或多個可相同或不同且如本文定義之”環系統取代基，，取代。雜芳基命名前之字首氮雜、氧雜或硫雜分別意指存在有至少一個氮、氧或硫原子作為環原子。雜芳基之氮原子可視情況氧化成對應之N-氧化物。適宜雜芳基之非限制性實例包含吡啶基、吡啩基、呋喃基、嘧吩基、嘧啶基、異呤唑基、異噻唑基、呤唑基、嘧唑基、吡唑基、呋咕基、吡咯基、鲁 ***基、1，2,4,嘧二唑基、嗒畊基、喳嘮啉基、酞畊基、咪吐并[l，2-a]p比淀基、咪吐并[2，l-b]p塞峻基、苯并吱咕基、κ丨噪基、氮雜吲哚基、苯并咪唑基、苯并嘧吩基、喹啉基、咪吐基、嘧吩并吡啶基、喳唑啉基、嘧吩并嘧啶基、吡咯并吡啶基、咪唑并吡啶基、異喹啉基、苯并氮雜㈤哚基、 1，2,4-三畊基、苯并嘧唑基等。 ’’芳烷基”或”芳基烷基”意指芳基-烷基_，其中芳基及烷基如前述。較佳之芳燒基包括低碳燒基。適宜芳燒基之非限鲁制實例包含苄基、2-苯乙基及莕基甲基。經由烷基與母基 _ 團鍵結。， π燒基芳基π意指燒基-芳基，其中燒基及芳基如前述。較佳之烷基芳基包括低碳烷基。適宜烷基芳基之非限制實例為甲苯基。經由芳基與母基團鍵結。 π環烷基”意指包括約3至約10個碳原子，較好約5至約1〇個碳原子之非芳族單-或多環系統。較佳之環燒基虎含有約 -20- 87251.doc 200413377 5至約7個環原子。環烷基可視情況經一或多個"環系統取代基”取代’其可相同或不同且如前述定義。適宜單環環烷基 <非限制實例包含環丙基、環戊基、環己基、環庚基等。適宜多環環烷基之非限制實例包含丨_十氫萘基、原冰片基、金剛烷基等。鹵素'昆、指氟、氯、溴或琪。較佳為氟、氯及溴。系統取代基”意指附接至芳族或非芳族環系統之取代基，其可置換在例如環系統所提供之氮上。環系統取代基 -可相同或不同，各獨立選自芳基、雜芳基、芳烷基、烷基 φ 芳基、雜芳烷基、烷基雜芳基、羥基、羥基烷基、烷氧基、万氧基、芳烷氧基、醯基、芳醯基、自基、硝基、氰基、羧基、烷氧基羰基、芳氧基羰基、芳烷氧基羰基、烷基磺醯基、芳基磺醯基、雜芳基磺醯基、烷硫基、芳硫基、雜芳硯基、芳烷硫基、雜芳烷硫基、環烷基、雜環基、ΥΐΥ2Ν· 、Υ^Ν-烷基…YiY2NC(〇)及YiY2NS〇2_，其中 1及丫2可相同或不同且獨立選自氫、烷基、芳基及芳烷基所成之組群。參才隹裒基思和包括約3至約1 〇個環原子，較好約$至約1 〇 -個環原子之非芳族飽和單環或多環系統，其中環系統中一 · 或多個原子為碳以外之元素，例如氮、氧或硫（單獨或組合）。環系統中不存在相鄰氧及/或硫原子。較佳之雜環基含有 t 5至約6個環原子。雜環基名稱之字首氮雜、氧雜或硫雜刀別…、和存在有氮、氧或硫原子作為環原子。雜環基環中任何_NH可以經保護方式存在例如-N(Boc)、_N(CBz)、 87251.doc • 21 - 200413377 -N(Tos)基等此經保護基團亦視為本發明之一部分。該雜 ί哀基可視情況經一或多個”環系統取代基,，取代，其可相同或不同且如本文足義。雜環基之氮或硫原子可視情況氧化成對應之Ν-氧化物、S-氧化物或s，S-二氧化物。適宜單環雜 %基環之非限制實例包含哌啶基、吡咯啶基、哌畊基、嗎啉基、硫嗎啉基、嘧唑啶基、丨，4_二氧環己基、四氫呋喃基、四氫嘧吩基等。品注意本發明之含雜原子之環系統中，在相鄰於N、0或 S之碳原子上無羥基且在相鄰其他雜原子之碳上無n或s基 _ 。因此，例如，下列環中：

-OH基不直接鍵結至標記為2及5之碳上。 π炔基烷基”意指炔基-烷基-，其中炔基及烷基如前述。較佳之炔基含有低碳炔基及低碳烷基。經由烷基鍵結至母基團上。適宜炔基烷基之非限制實例包含炔丙基甲基。 _ ”雜芳烷基11意指雜芳基-烷基-，其中該雜芳基及烷基如前 -述。較佳之雜芳烷基含有低碳烷基。適宜芳烷基之非限制 . 實例包含吡啶基甲基及喳啉-3-基甲基。經烷基鍵結至母基團上。 π羥基烷基”意指Η0-烷基-，其中烷基如前述。較佳之羥基烷基含低碳烷基。適宜羥基烷基之非限制實例包含羥基甲基及2-羥基乙基。 87251.doc -22- 200413377 π醯基’’意指H-C(O)-、烷基-C(O)-或環烷基-C(O)-基，其中各種基如前述。經由該羰基鍵結至母基團。較佳之醯基含低碳燒基。適宜醯基之非限制實例包含甲si基、乙BS基及丙驢基。 ”芳醯基’’意指芳基-c(o)-基，其中芳基如前述。經由該羰基键結至母基團。適宜芳醯基之非限制實例包含苯甲醯基及1-莕甲醯基。 π烷氧基’’意指烷基-0-基，其中烷基如前述。適宜烷氧基之非限制實例包含甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基及正丁氧基。係經該醚氧键結至母基團。 ’’芳氧基”意指芳基基，其中芳基如前述。適宜芳氧基之非限制實例包含苯氧基及莕氧基。係經由該醚氧鍵結至母基團。 π芳烷氧基”意指芳烷基-0-基，其中芳烷基如前述。適宜芳烷氧基之非限制實例包含芊氧基及1-或2-莕基甲氧基。係經由醚氧鍵結至母基團。 π烷硫基”意指烷基-S-基，其中烷基如前述。適宜烷硫基之非限制實例包含甲硫基及乙硫基。係經由該硫鍵結至母基團。 ’’芳硫基”意指芳基-S-基，其中芳基如前述。適宜芳硫基之非限制實例包含苯硫基及萘硫基。係經由該硫键結至母基團。 π芳烷硫基”意指芳烷基-S-基，其中芳烷基如前述。適宜芳硫基之非限制實例為苄硫基。係經由該硫键結至母基團。 -23- 87251.doc 200413377 ”烷氧基羰-基”意指烷基-0-C0-基。適宜烷氧基羰基之非限制實例包含甲氧基羰基及乙氧基羰基。係經由該羰基鍵結至母基團。 ”芳氧基羰基”意指芳基-o-c(o)-基。適宜芳氧基羰基之非限制實例包含苯氧基羰基及莕氧基羰基。係經由該羰基鍵結至母基團。 ”芳烷氧基羰基n意指芳烷基-o-c(o)-基。適宜芳烷氧基羰基之非限制實例為苄氧基羰基。係經由該羰基鍵結至母基團。 ’’烷基磺醯基”意指烷基-s(o2)-基。較佳之基為其中烷基為低碳烷基者。係經由該磺醯基鍵結至母基團。 ”芳基磺醯基”意指芳基-s(o2)-。係經由該磺醯基鍵結至母基團。 π經取代π意指在所指定之原子上之一或多個氫經選自所示基置換，但在既有環境下不超過所指定原子之正常價數，且該取代產生穩定化合物。適宜取代基及/或變數之組合若可導致穩定化合物則均可行。π安定化合物π或”安定結構’f 意指化合物充分穩定而可自反應混合物單離至可用程度之純度並調配成有效之治療劑。 ”視情況經取代π意指經特定基、殘基或基團之視情況取代。需了解說明書、反應圖、實例及表中之具未滿足價數之任何雜原子係假設具有氫原子以滿足該價數。當化合物中之官能基稱為’’經保護f’時，此意指該基為經 -24- 87251.doc 200413377 改質態以在化合物進行反應時，排除在所保護位置上不需要之副反應？適宜保護基將可由熟知本技藝者所了解且可參考標準教科書如T.W· Greene等人，有機合成之保護基 (1991)，Wiley，紐約。當任何變數（如芳基、雜環基，R2等）在任何構成或式in 中出現一次以上時，其各次出現之定義在每一次其他出現時各有其獨立之定義。本文所用之”组合物"欲包含包括特定量之特定成分之產品，以及直接或間接源自組合特定量之特定成分之任何產物0 本發明化合物之前藥及溶劑化物亦包含於本文。本文所用之”前藥，，代表為藥物前驅物且在對個體投藥後經代謝或化學過程歷經化學轉換產生式m化合物或其鹽及/或溶劑化物之化。物。則藥之討論見於τ·出即咖及V.如叫研讶a系列之作為新穎遞送系統之前藥（1987) 14及藥物汉计中〈生物可逆載劑，(198乃Ed_d B· R〇che編輯 ’吴國醫藥協會及派拉蒙出版社，兩者均併於本文供參考。 ”溶劑化物”意指本發明化合物與一或多種溶劑分子之物㈣合。此物理結合包含變化程度之離子及共價鍵結，包氫鍵某二例中，洛劑化物在例如一或多種溶劑分子併入結晶固體之晶格時，將可單離。，,溶劑化物，，包含溶液相及：單離溶劑化物兩者。適宜溶劑化物之非限制實例醇-T醇鹽等。”水合物,,為其中溶劑分子為出〇之溶劑 87251.doc 25- 200413377 物 $ & /σ療有政！··意欲描述本發明化合物或組合 =效抑制CDK⑷且因此可產生所需治療、㈣預防效果之量。 ^ 、式ΠΙ化合物可形成鹽，其亦在本發明範圍内。有關本文《式ΠΙ化合物應了解有關其鹽類，除非另有說明。本文所用^鹽（類），，代表與無機及/或有機酸形成之酸性鹽以及盘無機及/或有機驗形成之驗性鹽。此外，當式m化合物同時含有驗性基團如（但不限於）錢或咪錢酸性基圏如（但不限於）¾酸時，可形成兩性離子（，·内鹽"）且包含在本文所用之，，鹽（類）"名1司中。〃醫藥可接受性（亦即非毒性生理可接受)鹽較佳，但亦可使用其他鹽。式職合物之鹽可例如藉式III化合物與某量之酸或鹼，例如等當量之酸或鹼，在介質如其中鹽可沉澱之介質中或在水性介質中反應，接著凍乾而形成。一般被視為適合自鹼性（或酸性）醫藥化合物形成醫藥可接受性鹽之酸（及鹼）討論於例如s. Berge等人，醫藥科學期刊（1977) MU1 1-19 ; P. Gould，國際醫藥期刊（1986) 11 201-217 ; Anderson等人，醫藥化學實務（1996)，學院出版社，紐約；及橘皮書（食品藥物管理局，華盛頓D C•之網站）；及P· Heinrich Stahl，Camille G. Wermuth (編輯），醫藥鹽手冊：性質、選擇及用途（2002)，國際聯合純化學及應用化學第330-331頁。該等揭示併入本文供參考。例舉之酸加成鹽包含乙酸鹽、己二酸鹽、褐藻酸鹽、抗壞血酸鹽、天門冬胺酸鹽、苯甲酸鹽、苯績酸鹽、硫酸氫鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、擰檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽 -26- 87251.doc 200413377 、環戊烷丙酸鹽、二葡糖酸鹽、十二烷硫酸鹽、乙烷磺酸鹽、反丁缔二酸鹽、葡糖庚酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫破酸鹽、2-#呈基乙烷磺酸鹽、乳酸鹽、順丁晞二酸鹽、甲烷磺酸鹽、甲基硫酸鹽、2-莕績酸鹽、菸鹼酸鹽、硝酸鹽、草酸鹽、雙羥莕酸鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、磷酸鹽、苦味酸鹽、三甲基乙酸鹽、丙酸鹽、水楊酸鹽、丁二酸鹽、硫酸鹽、磺酸鹽（如本文所述者）、酒石酸鹽、硫代氰酸鹽、甲苯磺酸鹽、十一烷酸鹽等。例舉之鹼性鹽包含銨鹽、驗金屬鹽如鈉、經及鉀鹽、鹼土金屬鹽如鈣及鎂鹽、鋁鹽、鋅鹽、與有機鹼（例如有機胺）如苄星（benzathines)、二乙胺、二環己基胺、水化胺 (hydrabamine)(與N，N-雙（脫氫松香基）乙二胺所形成）、N-甲基-D-葡糖胺、N-甲基葡糖醯胺、第三-丁基胺、哌畊、本基環己胺、膽固酵、丁醇胺（tromethamine)之鹽、及與胺基酸如精胺酸、離胺酸等之鹽。鹼性含氮基可以例如低碳烷基li (如甲基、乙基、及丁基氯化物、溴化物及碘化物）、硫酸二烷酯（如硫酸二甲酯、二乙酯及二丁酯）、長鏈卣化物（如癸基、月桂基、肉苴蔻基及硬脂基氯化物、溴化物及碘化物）、芳烷基齒化物（如芊基及苯乙基溴化物）等予以四級化。所有此酸鹽及驗鹽欲在本發明範圍内之醫藥可接受㈣且所有酸及㈣被視柄等於游_、之本發明目的之對應化合物。 87251.doc -27- 200413377 式III化合物及其鹽、溶劑化物及前藥可存在為其互變體 (例如醯胺或〜亞胺基醚）。所有此互變態在本文中為本發明之一部分。本化合物（包含該化合物之鹽、溶劑化物及前藥以及前藥之鹽及溶劑化物）之所有立體異構物（例如幾何異構物、光學異構物等）例如因各種取代基之不對稱碳而存在之異構物 (包含對映異構物，其甚至可在無不對稱碳時亦存在）、旋轉異構物、拓樸異構物及非對映異構物均在本發明範圍内。本發明化合物之個別立體異構物可為例如實質上不含其他異構物或可與例如消旋異構物或與所有其他或其他所選擇之立體異構物混合。本發明之對掌中心可具有如IUPAC 1974 命名法所定義之S或R組態。使用”鹽”、”溶劑化物”、”前藥” 等名詞欲同等地應用於本發明化合物之對映異構物、立體異構物、旋轉異構物、互變體、位置異構物、消旋物或前藥之鹽、溶劑化物及前藥。本發明化合物具有藥理性質；尤其，式III化合物可能為蛋白質激酶如週期素依賴性激酶（CDKs)例如CDC2 (CDK1) 、CDK2、CDK4、CDK5、CDK6、CDK7及 CDK8之抑制劑。式III之新穎化合物預期可用於治療增殖性疾病如癌症、自動免疫疾病、病毒及病、真菌疾病、神經學/神經退化失調、關節炎、發炎、抗-增殖（如眼睛視網膜病）、神經元、禿髮及心臟血管疾病。該等疾病及失調許多列於前面引述之 US 6,413,974，其揭示併於本文供參考。更詳言之，式III化合物可用於治療各種癌症，包含（但不 -28- 87251.doc 200413377 限於）下列：癌瘤包含（但不限於）膀胱癌、乳癌、結腸癌、腎癌、肝癌'肺癌（包含小細胞肺癌）、食道癌、膽囊癌、卵巢癌、胰癌、胃癌、頸癌、甲狀腺癌、***癌及皮膚癌（包含鱗狀細胞癌）；淋巴樣系之造血腫瘤，包含白血癌、急性淋巴白血癌、急性淋巴胚細胞白血癌、B-細胞淋巴癌、T-細胞淋巴癌、霍金氏（Hodgkins)淋巴癌、非霍金氏淋巴癌、髮細胞淋巴癌及布克特氏（Burkett，s)淋巴癌；骨髓系之造血腫瘤，包含急性及慢性骨髓性白血癌、脊髓發育不良徵候群及前骨髓細胞白血癌；間葉源腫瘤，包含纖維肉瘤及橫紋肌肉瘤；中樞及末梢神經系統之腫瘤，包含星細胞瘤、神經母細胞瘤、神經膠瘤及神經鞘瘤；及其他腫瘤，包含黑色瘤、精細胞瘤、畸胎瘤、骨肉瘤、外生性色素頸瘤、keratoctanthoma、甲狀腺卵胞癌及卡波西氏（Kaposi’s)肉瘤。由於CDKs —般在調節細胞增殖上之主要角色，因此抑制劑可作為可逆之制細胞劑，其可用於治療具有異常細胞增殖特徵之任何疾病，如良性***肥大、家族性腺瘤息肉病、神經纖維瘤、動脈硬化、肺纖維化、關節炎、牛皮癖、絲球體腎炎、血管造型術或血管手術後之再阻塞、肥大瘢形成、發炎性腸疾病、移植排斥、内毒素休克及真菌感染。式III化合物亦可用於治療阿茲海默氏疾病，如最近發現 87251.doc -29- 200413377 CDK5與腦脊-髓（tau)蛋白質之磷醯化有關所教示（生物化學期刊（1995) 741-749)。式III化合物可誘發或抑制細胞凋亡。細胞凋亡反應為各種人類疾病之異常現象。式III化合物作為細胞凋亡之調節劑將可用以治療癌症（包含但不限於前述類型者）、病毒感染 (包§但不限於泡參病母、症病毒、非洲淋巴細胞瘤病毒、 Smdbis病毒及腺病毒）、預防HIV-感染之個體之AIDS發展、自動免疫疾病（包含但不限於全身性狼瘡、紅斑、自動免疫调節之絲球體腎炎、風濕性關節炎、牛皮癬、發炎性腸疾病及自動免疫糖尿病）、神經退化疾病（包含但不限於阿茲海默氏疾病、AIDS-相關痴呆、帕金森氏（parkinson，s)疾病、肌萎縮性側索硬化、色素性視網膜癌、脊肌肉萎縮及小腦退化）、脊髓發育不良徵候群、成血不全性貧血、與心肌梗墓有關之缺血性損傷及再灌注損傷、節律不整、動脈硬化、毒素誘發或酒精相關性肝疾病、血液學疾病（包含但不限於慢性貧血及成血不全性貧血）、肌肉骨骼系統之退化疾病 (包含但不限#骨質疏鬆症及關節炎）、阿斯匹靈敏感性鼻竇炎、囊腫纖維化、多發性硬化、腎疾病及癌疼痛。式III化合物作為CDKs抑制劑可調節細胞rna及DNA合成量。該等藥劑因此可用於治療病毒感染（包含但不限於 HIV、人類乳頭狀瘤病毒、泡疹病毒、痘病毒、非洲淋巴細胞瘤病毒、Sindbis病毒及腺病毒）。式III化合物亦可用於化學預防癌症。化學預防定義為藉阻斷起始之突變事件或藉阻斷已被傷害之惡性瘤細胞前之 -30- 87251.doc 200413377 發展而抑制侵入性癌發展或抑制腫瘤復發。式III化合物亦可用以抑制腫瘤血管形成及遷移。式III化合鉍亦可作為其他蛋白質激酶如蛋白質激酶c、 her2、rafl、MEK1、MAP激酉每、EGF受體、PDGF受體、IGF 受體、PI3激酶、weel激酶、Src、Abl之抑制劑且因此可有效治療與其他蛋白質激酶有關之疾病。本發明另一目的係治療患有受CDKs調節之疾病或病況之哺乳類（如人類）之方法，係對該哺乳類投與治療有效量之至少一種式III化合物或該化合物之醫藥可接受性鹽或溶劑化物。式III化合物之較佳劑量約0.001至500毫克/公斤體重/天。特佳之劑量約0.01至25毫克/公斤體重/天之式in化合物或遠化合物之醫樂可接受性鹽或溶劑化物。本發明化合物亦可與一或多種抗癌症療法如放射療法及 /或一或多種抗癌劑組合（一起或依序投予）投藥，該抗癌劑係選自制細胞劑、細胞毒素劑（例如但不限於DNA相互作用藥劑（如順鼠胺銘或多索鹵賓（doxorubicin)));坦燒（taxanes)(如坦羅特（taxotere)、坦醇（taxol));拓樸異構酶II抑制劑（如依拢塞（etoposide));拓樸異構酶I抑制劑（如艾諾泰肯 (irinotecan)(或 CPT-11)、肯拢斯塔（Campt〇star)或托譜泰肯 (topotecan))，小管相互作用劑（如帕克利坦（paciitaxel)、多基坦（docetaxel)或艾譜塞酮（ep〇thil〇ne));荷爾蒙劑（如坦墨希分（tamoxifen));胸腺嘧啶脫氧核苷酸合成酶抑制劑（如5-氟尿喊淀）；抗-代謝劑（如胺甲喋呤（methoxtrexate));燒化劑 -31- 87251.doc 200413377 (如泰默醯胺（temozolomide)(TEMODARTM 購自 Schering· Plough公司，〜Kenilworth，紐澤西州）、環磷酸胺）；法呢基蛋白質轉移酶抑制劑（如 SARASARTM(4-[2-[4_ [(11R)_3,10· 二溴-8-氯-6，11-二氫-51^苯并[5,6]環庚并[1，2-1)]吡啶-11-基] -1-哌啶基]-2-氧代乙基]-1-哌啶羧醯胺）或SCH 66336購自 Schering-Plough公司，Kenilworth，、紐澤西州）、替普法尼 (tipifarnib)(Zarnestra®或 R115777，購自 Janssen醫藥公司）、 L778,123 (法呢基蛋白質轉移酶抑制劑，購自Merck公司，白宮區，紐澤西州），BMS 214662 (法呢基蛋白質轉移酶抑制劑，購自 Bristol-Myers Squibb醫藥公司，Princeton，紐澤西州）、訊號傳導抑制劑（如愛利沙（Iressa)(購自Astra Zeneca醫藥公司，英國）、塔希瓦（Tarceva) (EGFR激酶抑制劑）、對EGFR 之抗體（如C225)、GLEEVECTM (C-abl激酶抑制劑，購自 Novartis醫藥公司，East Hanover，紐澤西州）、干擾素如干擾酮（intron)(購自 Schering-Plough 公司）、Peg-干擾酮（Peg-Intron)(購自Schering-Plough公司）、荷爾蒙治療組合、芳族酶組合、ara-C、阿霉素（adriamycin)、胞色燒（cytoxan)及葛希塔賓（gemcitabine)。其他抗癌劑（亦稱為抗贅瘤劑），包含（但不限於）尿嘧啶氮芥、氮芥（Chlormethine)、艾法酸胺（Ifosfamide)、美法侖 (Melphalan)、苯丁酸氮芥（Chlorambucil)、柏溴燒 (Pipobroman)、曲他胺（Triethylenemelamine)、三伸乙基硫代磷酸胺（Triethylenethiophosphoramine)、馬利蘭（Busulfan)、卡默斯汁（Carmustine)、羅姆斯汀（Lomustine)、斯特峻辛 -32- 87251.doc 200413377

(Streptozocin)、達卡貝畊（Dacarbazine)、氟索利淀 (Floxuridine>、塞塔賓（Cytarabine)、6·氫硫基嘌呤、6-硫代胍、磷酸氟達賓（Fludarabine phosphate)、崎利銘（oxaliplatin) 、雷可瓦寧（leucovorin)、吟利銘（ELOXATIN™，購自 Sanofi-Synthelabo 醫藥公司，法國）、分妥斯達汀（Pentostatine) 、長春驗、長春新驗、長春地辛（Vindesine)、平陽黴素 (Bleomycin)、更生黴素（Dactinomycin)、柔紅黴素（Daunorubicin) 、多索鹵賓（Doxorubicin)、艾比鹵賓（Epirubicin)、艾達鹵賓 (Idarubicin)、光輝黴素（Mithramycin)、去氧助間型黴素 (Deoxycoformycin)、絲裂黴素-C (Mitomycin-C)、L-門冬醯胺酶、替尼泊（Teniposide) 17α·乙決基***、已晞雌酴、睪酮、潑尼松（Prednisone)、氟甲睪酮（Fluoxymesterone)、多莫斯坦酮丙酸鹽（Dromostanolone propionate)、睪内酉旨 (Testolactone)、甲地孕酮乙酸鹽（Megestrolacetate)、甲基潑尼松、甲基睪丸酮、強的松（Prednisolone)、鼻浪花 (Triamcinolone)、氯婦雌醚（Chlorotrianisene)、經孕酮 (Hydroxyprogesterone)、胺鹵米特（Aminoglutethimide)、雌莫斯、;丁（Estramustine)、甲經孕酮乙酸鹽（Medroxyprogesteroneacetate) 、利普胺（Leuprolide)、福特胺（Flutamide)、技瑞米分 (Toremifene)、高瑞林（goserelin)、順氯胺銘、破胺銘 (Carboplatin)、經基尿素、胺沙林（Amsacrine)、普卡貝_ (Procarbazine)、米多坦（Mitotane)、米托山酮（Mitoxantrone) 、左米梭（Levamisole)、納瓦賓（Navelbene)、胺斯塔峻 (Anastrazole)、雷塔吐（Letrazole)、卡配晞塔賓（Capecitabine) 87251.doc -33- 200413377 、雷羅色分(Reloxafine)、多羅塞分（Droloxafine)或六甲蜜胺。右洞配為固足劑量，此組合產物利用本文所述劑量範圍内（本發明化合物及其他在其劑量範圍内之醫藥活性劑。例如，CDC2抑制劑歐樂姆辛（〇1〇mucine)已發現與已知之細胞毒素劑在誘發細胞凋亡中有相乘作用（細胞科學期刊 (1995) M，2897)。式in化合物與已知抗癌劑或細胞毒素劑當不適合調配在一起時，可依序投藥。本發明不限於依序才又樂，式III化合物可在已知抗癌劑或細胞毒素劑投藥前後才又藥。例如’週期素依賴性激酶抑制劑黃素比多醇 (flavopiridol)之細胞毒素活性受抗癌劑投藥順序之影響。

Cancer Research，（1997) 3375。此技術為熟知本技藝者以及參予之醫師所悉知。據此，本發明一目的係包含組合物，其包括某量之至少一種式III化合物或其醫藥可接受性鹽或溶劑化物及某量之一或多種抗癌療法及選自上述之抗癌劑，其中化合物/治療之量導致所需之治療效果。本發明化合物之醫藥性質可藉數種藥理分析確認。後述此例舉之藥理分析已利用本發明化合物及其鹽進行。本發明又有關醫藥組合物，其包括至少一種式化合物或該化合物之醫藥可接受性鹽或溶劑化物及至少一種醫藥可接受性載劑。就自本發明所述化合物製備醫藥組合物而言，惰性之醫藥可接受性載劑可為固體或液體。固體劑型包含粉劑、銳劑、可分散顆粒劑、膠囊、藥囊及栓劑。該粉劑及錠劑可 87251.doc -34- 200413377 包括約5至終95%活性成分。適宜之固體載劑為本技藝已知 ’例如碳酸鎂、硬脂酸鎂、滑石、糖或乳糖。錠劑、粉劑、藥囊及膠囊可使用為適合經口投藥之固體劑型。醫藥可接受性載劑及製造各種組合物之方法實例可見於Α· Gemiaro (編輯），雷明頓藥理科學第18版（199〇)，施仏出版公司，Easton，賓州。液怨製劑包含溶液、懸浮液及乳液。實例可述及水或水_ 丙一醇溶液用以非經腸道注射或添加甜味劑及霧濁劑供口服溶液、懸浮液及乳液。液態製劑亦可包含鼻内投藥之溶液。適用於吸入之氣溶膠製劑可包含溶液及粉劑固體，其可與醫藥可接受性載劑如惰性壓縮氣體如氮氣組合。亦包含固態製劑，其在欲使用前才轉化成液體劑型供口服或非經腸道投藥。此液態劑型包含溶液、懸浮液及乳液。本發明化合物亦可經皮遞送。該經皮組合物可製成乳霜、乳劑、氣溶膠及/或乳液且可包含於基質或儲存形式之經皮貼片中，如本領域就本目的所習知者。本發明化合物亦可經皮下遞送。較好該化合物口服投藥。較好’該醫藥組合物呈單位劑型。此劑型中，該製劑次分成含適當量活性成分之式一大小劑型，如達到所需目的之有效量。單位製劑中活性化合物之量可自約1毫克至約ι〇〇毫克，較好約1毫克至約5〇毫克，更好自約1毫克至約。毫克之間 87251.doc -35- 200413377 變化或調整」依據特定用途而定。所用確實劑I可視病患需求及欲治療病況之嚴重度而定。對特足狀況決定適當劑量療程在本領$熟知範圍内。為便利起見，總日劑量可分成數次且如所需在一天内分次投藥。本發明化合物及/或其醫藥可接受性鹽之投藥量及次數將可依據臨床醫師考慮如病患年齡、病況及大小以及欲治療病徵嚴重性等因素而調整。對口服投藥之典型推薦日劑 1可自約1笔克/天至約500毫克/天間之範圍，較好1毫克/天至200毫克/天，分兩次至四次投藥。本發明另一目的係包括醫藥有效量之至少一種式m化合物或該化合物之醫藥可接受性鹽或溶劑化物及醫藥可接受性載劑、載體或稀釋劑之套組。本發明另一目的係包括有效量之至少一種式ΙΠ化合物或該化合物之醫藥可接受性鹽或溶劑化物及至少一種上述抗癌療法及/或抗癌劑之套組，其中該兩種或多種成分之量導致所需治療效果。本文揭示之發明由下列製劑及實例加以舉例，但非用以限制本發明。其他機制路徑及類似結構將為本技藝者所悉知0 當提出 NMR數據時，在 Varian VXR-200 (200 ΜΗζ，、 Varian Gemini-300 (300 MHz)或 XL-400 (400 MHz)上獲得 4 光譜並以自Me4Si之下磁場ppm數表示，括弧内為質子數、多重峰及偶合常數（赫茲，Hz)。當報導LC/MS數據時，使用 87251.doc -36- 200413377 應用生物系統八卩1-100質譜儀及島津80^-10人1^管柱進行分析：Altech鉑C18，3微米，33毫米x 7毫米ID ;梯度流速 :0分鐘-10% CH3CN、5分鐘-95% CH3CN、7分鐘-95% CH3CN 、7.5分鐘-10% CH3CN、9分鐘-停止。提供駐留時間及所觀察之母離子。下列溶劑及試劑可藉其縮寫表示於括弧内：薄層層析：TLC 二氯甲烷：CH2C12 乙酸乙酯：AcOEt或EtOAc 甲醇：MeOH 三氟乙酸：TFA 三乙胺：Et3N或TEA 丁氧基羰基·· n-Boc或Boc 核磁共振分光計：NMR 液體層析質譜儀：LCMS 高解析質譜儀：HRMS 毫升：mL 毫莫耳：mmol 微升：μΐ 克：g 毫克：mg 室溫或rt (周圍）：約25°C。實例通常，本發明化合物可經由下述反應圖1所述之一般路徑 87251.doc -37- 200413377 製備。反應圖1

2 3 一丁醇鉀及甲酸乙酯處理起始物腈獲得中間物晞醇 2 ’其以聯胺處理獲得所需3_胺基吡唑。號數3之化合物與號數週當官能基化酮酯縮合獲得吡啶酮6,如反應圖3所不。此一般路徑中所用之酮基酯為市售或可如反應圖2所說明般製得。反應圖2

rnh2 k2co3； ch3cn 當R2等於號數9之氯化物可藉pocu處理吡啶酮8而製備 87251.doc -38- 200413377 Η，此位置之取代對號數9之化合物而士，π 阳&可能藉親電子性鹵化、醯化及各種其他親電子性芳族取代作用進/一 N7-胺基官能基之併入可經由號數9之化合物與適當胺反應而置換該氯化物，如反應圖3所示。當唬數6之化合物中R3 = 0Et，則號數12之二氯化物易藉反應圖4所述般製備。7-氯化物之選擇性置換可獲得號數13之化a物’其可易於轉化成號數14之產物。反應圖4

13 14 製備例^ 製備你u

87251.doc -39- 200413377 依循德國專利DE 19834047A1第19頁之程序。於KOtBu (6.17克，0·055莫耳）之無水THF(4〇毫升）溶液中，滴加環丙基乙腈（2.0克，0.025毫莫耳）及甲酸乙酯（4 〇7克，〇〇55毫莫耳）之無水THF(4毫升）溶液。立即形成沉澱。此混合物攪拌 12小時。在真空下濃縮且殘留物與Et2〇 (5〇毫升）攪拌。傾析且所得殘留物以玢2〇 (2 χ 5〇毫升）洗滌且真空自殘留物移除EhO。殘留物溶於冷卻之η2〇 (2〇毫升）中並以12nhci 調整至pH 4-5。混合物以CH2C12(2 χ 5〇毫升）萃取。合併有機層，以MgSCU脫水並真空濃縮獲得褐色液體之醛。步驟B :

(1.95克’ 0.039莫耳）及ι·8克（0 029莫耳）冰醋酸（丨8克，〇〇29 莫耳）溶於EtOH (1〇毫升）中。回流6小時並真空濃縮。殘留物於CH^Cl2 (150毫升）中攪拌且pH以1N Na〇H調整至9。有製備例1步驟A之產物（2·12克，〇〇195莫耳）、ΝΗ2ΝΗ2·Η2〇機層以良鹽水洗;條，以MgS〇4脫水並真空濃、縮，獲得蝶質橘色固體產物。製備例2-3 基本上同製備例1所述程序，僅以表2攔2所示之腈替代，獲得表2欄3之化合物： 87251.doc 200413377 製備例4

OEt 此反應如（Κ·0· Olsen，有機化學期刊（198乃公，453卜 4536)所述般進行。因此，於二異丙基酸胺麵之thf攪;拌溶液中在-65°C至-70°C滴加剛蒸餾之乙酸乙酯。所得溶液攪拌 30分鐘且以THF溶液添加醯氯。反應混合物在巧〗^至刀攪拌30分鐘接著藉添加1 n HC1溶液終止。所得兩相混合物溫至周圍溫度。所得混合物以Et0Ac (100毫升）稀釋且收集有機層。水層以EtOAc (1〇〇毫升）萃取。合併有機層，以食鹽水洗滌，脫水（Naecu)並真空濃縮，獲得粗製/3-酮基酯，其用於隨後縮合反應。製備例5-1 0 : 基本上同製備例4所述程序，僅以表3攔2所示之醯氯替代 ’獲知表3攔3之-g同基酯： 87251.doc -41 - 200413377 表3 製備例襴2 欄3 數據 5 OC^1 〇〇 ^^OMe 產率=99% LCMS: MH+ = 223 6 χγ^α MeO'^Y OMe OMe 產率=99% LCMS:MH+ = 253 7 '(fCci Cl C^°Et Cl 產率= 80% LCMS: MH+ = 261 8 c/ci 產率=93% MH+ = 199 9 从 I 〇〇 ^^〇Et 產率=93% 10 Ο1。1 OC^0" 產奉=100% 製備例11 :

R 叉。Η

〇Et 於酸之THF溶液中添加Et3N，接著在-20至-30°C添加氯甲酸異丁酯。混合物在-20至-30°C攪拌30分鐘後’在氬氣中濾除三乙胺鹽酸鹽，且濾液添加至-65至-70°C之LDA-EtOAc -42- 87251.doc 200413377 反應混合物如方法A所述般製備）中。添加IN HC1後’接著例行操作反應混合物並蒸發溶劑，單離粗製之万基醋。該粗製物質用於隨後縮合反應。制備例 12-13.12 基本上同製備例11所述相同條件，僅以表4欄2所示之叛酸替代，獲得表4欄3之化合物：表4 製備—例攔2 欄3 數據 12 err errr 產率= 99% MH+ = 213 13 άτ ότχ0Β 產率=70% MH+ = 275 13.10 c/01 〇 o Q^oe 產率=99 MH+=199 13.11 ⑽Ο1。1 〇〇 r-AAoB CbzN^J 產率=99 MH+ = 334 13.12 〇 cbzrj^j^ci 〇〇 Cbz〔^^^OEt 產率=99 MH+ = 334 43- 87251.doc 200413377 製備例14 : 一

3-胺基峨唆（2.0克’ 24.07¾莫耳）及笨甲驢基乙酸乙酯 (4·58毫升，1.1當量）之AcOH(15毫升）溶液回流加熱3小時。反應混合物冷卻至室溫並真空濃縮。所得固體以Et〇Ac稀釋並過濾獲得白色固體（2·〇4克，4〇%產率）。製備例15-32.15 ： ’僅以表5欄2所示之胺得表5攔4之化合物：基本上同製備例14所述相同程序基吡唑及表5欄3所示之酯替代，庐

87251.doc -44- 200413377 16 nh2 Η 〇 17 NH〇 Η 〇〇 cf3 cf3 〜〇 18 νη2 Η 〇〇〇 19 νη2 Η 〇 Ο >j^^O^CH3 〇 20 Η 〇〇〇 21 -Χ/ΝΗ2 Η- 〇〇 (〇^^^〇八(^3 〇 22 ch3 {νη2 Η 〇〇八 ch3 〇 23 νη2 Η dJO^H3 〇 -45- 87251.doc 200413377

87251.doc -46-

3 3 直備製

NC

:N

NH 2

奉甲醯基乙酸乙酯（U6毫升，ι·ι當量）及3-胺基-4-氰吡唑（1·〇克，9·25φ 莫耳）<Ac〇H (5〇毫升）&Η2〇 (1〇毫 j 溶液回流加熱72小時。所得溶液冷卻至室溫，真空濃縮並以EtOAc稀釋。過濾所得沉澱，以£(〇人(；洗滌且真空乾; 8725 Ldoc -47- 200413377 (0·47克，21%產率）。製備例33.10、：

依循US專利3,907,799之程序。鈉（2.3克，2當量）逐次添加至EtOH (150毫升）中。當鈉完全溶解時，添加3-胺基吡唑2 克，0.05莫耳）及丙二酸二乙酯（8.7克，1.1當量）且所得溶液加熱回流3小時。所得懸浮液冷卻至室溫並過滤。濾餅以 EtOH (100毫升）洗滌並溶於水（250毫升）中。所得溶液於冰浴中冷卻且pH以濃HC1調整至1-2。過濾所得懸浮液，並以水（1〇〇毫升）洗滌及真空乾燥獲得白色固體（4 75克，63%產率）。製備例33.H-U 19 : 僅以表5.1欄2所示基本上同製備例33· 1〇所述相同程序，僅以之化合物替代，獲得表51攔3之化合物：表5·1

87251.doc -48- 200413377 製備例34:—

製備例14所製備之化合物（1·〇克，4·73毫莫耳）<p〇ci3(5 耄升）及吡啶（〇·25毫升）溶液在室溫攪拌3天。所得漿液以 EhO稀釋，過滤且固體殘留物以玢2〇洗滌。合併之玢2〇洗液冷卻至(TC並以冰處理。當發生激烈反應，所得混合物2以H2〇稀釋、，分離且水層以Et2〇萃取。合併之有機相以Η2〇及飽和 NaCl洗滌，以NajO4脫水，過濾及濃縮，獲得淡黃色固體 (〇·86克，79%產率）。LCMS: MH+=230。製備例35-53.15 : 基本上同製備例34所述相同程序，僅以表6欄2所示之化合物替代’獲得表6欄3之化合物：表6

87251.doc -49- 200413377

87251.doc -50- 200413377

87251.doc -51 -

製備例53JA ci

Cl POCh (62毫升）在氮氣下冷卻至及添加二甲基苯胺 (11.4克，2.8當量）及製備例33.10製備之化合物（4.75克’ 0.032莫耳）。反應混合物溫至6〇°C並攪拌隔夜。反應混合物冷卻至30°C並減壓蒸除POCU。殘留物溶於CH2C!2 (300毫升） 87251.doc -52- 200413377 並倒入冰上-。攪拌15分鐘後，混合物之PH以固體NaHC03 调整至7-8。分離層且有機層以h2〇 (3 X 2〇〇毫升）洗滌，以 MgSCU脫水，遍濾並濃縮。粗產物藉快速層析純化使用5〇:5〇 CH2C12:己燒溶液作為溶離液，溶離該二甲基苯胺。溶離液接著改變成75:25 CH2C12:己烷以溶離所需產物（4.58克，77% 產率）。MS MH+=188。

复i例 53.17'、V1R 基本上同製備例53· 16所述相同程序，僅以表6.10欄2所示之化合物替代，獲得表6.10欄3之化合物：表 6.10

製備例54 :

製備例34所製備之化合物（〇1〇克，〇·435毫莫耳 (3¾升）溶液以N_溴丁二醯亞胺（“nbs，，）（〇〇85克，1;1當量）處理。反應混合物在室溫攪拌丨小時且減壓濃縮。粗產物藉 87251.doc -53- 200413377 快速層析純化使用20% EtOAc之己烷溶液作為溶離液（0.13 克，100%產率）。LCMS: MH+=308。製備例55-68.15 : 基本上同製備例54所述相同程序，僅以表7欄2所示之化合物替代，獲得表7欄3之化合物：表7

87251.doc -54- 200413377

87251.doc -55-

200413377 锲備例69 :

製備例35所製備之化合物（0·3克，1.2耄莫耳）之CH3CN (15毫升）溶液以NCS (0·18克，1.1當量）處理且所得溶液加熱回流4小時。添加其他NCS (0.032克，0.2當量）且所得溶液回流攪拌隔夜。反應混合物冷卻至室溫，真空濃縮且殘留 87251.doc -56- 200413377 物藉快速層析使用20% EtAc之己烷溶液作為溶離液純化 (0·28克，83%產率）。LCMS: ΜΗ+=282。製備例70 : 基本上同製備例69所述相同程序，僅以表8欄2所示之化合物替代，獲得表8欄3之化合物：表8 製備例攔2 攔3 數據 70 Cl σχχί Cl ~ Yield = 82% LCMS: MH+ = 286 製備例71 :

於製備例34之化合物（1.0克，4.35毫莫耳）之DMF (6毫升）溶液中添加P0C13 (1·24毫升，3.05當量）且所得混合物在室溫攪拌隔夜。反應混合物冷卻至0°C並藉添加冰捕捉過量之 P0C13。所得溶液以1 N NaOH中和，以H20稀釋並以CH2C12 萃取。合併之有機層以Na2S04脫水，過濾並真空濃縮。粗產物藉快速層析純化使用5% MeOH之CH2C12溶液作為溶離液（0.95 克，85%產率）。LCMS: MH+=258。製備例72 :

CI CI 87251.doc -57- 200413377 於製備例71之產物（0.25克，0.97毫莫耳）之THF溶液中添加NaBH4 (0.041克，1.1當量）且所得溶液在室溫攪拌隔夜。反應混合物籍添加H20騾冷並以CH2C12萃取。合併之有機層以Na2S04脫水，過濾並減壓濃縮。粗產物藉快速層析純化使用60:40之己烷：EtOAc混合物作為溶離液（0」7克，69%產率）。LCMS: MH+=260 0 製備例73 :

製備例72之化合物（0.12克，0.462毫莫耳）、硫酸二甲酯 (0.088毫升，2.0當量）、50% NaOH (0.26毫升）及催化量之 Bu4NBr之CH2C12(4毫升）之溶液在室溫攪拌隔夜。反應混合物以H20稀釋並以CH2C12萃取。合併之有機物以Na2S04脫水，過濾並減壓濃縮。粗產物藉快速層析使用30% EtOAc之己烷溶液作為溶離液（0.062克，48%產率）。製備例74 :

製備例35製備之化合物（0.3克，1.2毫莫耳）、K2C03 (0.33 克，2當量）及4-胺基吡啶（1.1當量）於5毫升CH3CN中反應2 87251.doc -58- 200413377 天並減壓濃縮。殘留物分配於H2〇及CH2C12之間。有機層以 Na2S04脫水！過滤並濃縮。粗產物藉快速層析純化使用5% (10%NH4OH乏MeOH)溶液之CHKl2作為溶離液，獲得所需產物。製備例75 :

製備例74之化合物（0.91毫莫耳）、B0C20 (〇·22克，ΐ·ι當量）及DMAP (0.13克，1·1當量）於二哼烷（10毫升）中在室溫反應3天。添加額外BOC2〇 (0.10克，0.5當量）並攪拌4小時。接著真空濃縮，以飽和NaHC03 (15毫升）稀釋並以ch2C12 ^ X 100毫升）萃取。合併之有機層以NajCU脫水，過濾並減壓濃縮。粗產物藉快速層析純化使用5% (10% NH4〇H之 MeOH)溶液之CH2C12作為溶離液，獲得所需產物。製備例76 :

貝負上以製備例5 4所述相同程序’僅替代製備例7 5製備之化合物，獲得上述產物。製備例77 : 87251.doc -59- 200413377

製備例76之產物（〇·3毫莫耳）、苯基硼酸（〇〇73克，2〇當里）、1^〇4(〇.19克，3.0當量）及？(1(??}13)4(〇.〇17克，5莫耳 %)於回流之DME (16毫升）及出0 (4毫升）中反應7小時。所得洛液冷卻至室溫，以Η" (1〇毫升）稀釋並以(3 X 5〇毫升）萃取 '合併之有機相以NajCU脫水，過濾並濃縮。粗產物藉快速層析純化使用2.5% (i〇〇/0 Nh4〇h之Me〇H)之 CHei2溶液作為溶離液，獲得產物。製備例78

CI

產物藉快速層析純化。製備例79-81 : 製備例53.15中製備之化合物（〇.25克，13毫莫耳）之二呤垸（5毫升）溶液中添加听2_(0.47毫升，2〇當量）及3_胺基甲基峨淀（〇.15毫升’ u當量）。所得溶液在室溫揽掉η小時。反應混合物以H2〇稀釋並以Et0Ac萃取。合併之有機相以 H2〇及飽和NaC1洗條’以Na2S〇4脫水，過滤並真空濃縮。粗僅以表8 · 1 〇搁2所示之基本上同製備例7 8所述相同程序 87251.doc -60- 200413377 化合物替代獲得表8·1〇欄3之化合物··

Br B「

實質上如製備例75所述之相同程序，僅替代製備例80之化合物，製備上述化合物。實例1 :

87251.doc 200413377 製備例54之產物（0.875毫莫耳）、4-胺基吡啶（0.12克，1 3 當量）及K2CO3(0.24克，2當量）於CH3CN (5毫升）中，如製備 74所述般反應，獲得產物。眚例 2-46.18 : 基本上同實例1所述相同程序，僅使用表9欄2及欄3所示之反應物，製備欄4之化合物：表9

-62- 87251.doc 200413377

87251.doc -63- 200413377

87251.doc 64- 200413377

87251.doc -65 - 200413377

87251.doc 66- 200413377

87251.doc 67- 200413377

87251.doc 68- 200413377

87251.doc 69- 200413377

87251.doc 70- 200413377 87251.doc 46.11 46.12 46.13 46.14 46.15 46.16

200413377

實例47 :

TFA (0·5毫升）添加至製備例76所製備之化合物（0.16毫莫耳)之CH2C12 (2.0毫升）之〇°C溶液中且溶液攪拌2.5小時。在4。〇儲存隔夜，該時又添加額外TFA (0·5毫升）。攪;拌4小時並真空濃縮。以1 N NaOH中和並以CH^Cl2萃取。合併之有機層以NajO4脫水，過濾及減壓濃縮。粗產物藉快速層析純化使用2.5% (10% NH4OH之MeOH)之CH2C1J|液作為溶離液，獲得產物。實例48 :

Cl

M

BocN

Br

N σ j ^ hn'

N

N 步驟A 步驟B

Br

NV

87251.doc -72- 200413377 步騾A : ^ 一於5-氯加成物之二呤烷/mpEA (2·5/1 ·〇)之溶液中在以滴加裱戊胺（1.2當量）。所得溶液回流攪拌16小時，冷卻至rt 並減壓濃縮。粗物質藉製備性薄層層析（8 χ 1〇〇〇 μΜ)純化。步驟Β : _ 於實例48步驟Α製備之化合物之CH2Cl2溶液中，在η滴加 TJA (5¾ !)。所得落液在η攪拌18小時且減壓濃縮。粗物

貝再合#、CH2C12中且有機層依序以飽和NaHcc^水溶液（2 X 升）及良鹽水（1 X 2¾升）洗滌。有機層脫水（Na2S〇4)，過滤及減壓濃縮。粗㈣藉製備㈣層層析（8 χ麵化。實例49-58: 基本上同實例48所述相同程序，僅以表_2所示之氯化物替代，製備表10攔3之化合物： 4^0

87251.doc -73. 200413377

87251.doc -74- 200413377

實例59 :

N

於貫例46.14中製備之化合物之無水乙腈溶液中，在周圍溫度下滴加TMSI (4當量）。10分鐘後，真空移除乙腈。所得黃色泡沫以2 N HC1溶液（7毫升）處理接著立即以Et20 (5X) 洗滌。水相之pH以50% NaOH (aq)調整至10且藉NaCl (s)使溶液飽和接著以CH2C12(5X)萃取，獲得產物。實例60-62 : 基本上同實例58所述相同程序，僅以表丨丨欄2所示之化合物替代，製備表11欄3之化合物： 87251.doc •75- 200413377

分析：對本發明化合物之分析可如下進行。桿病毒架構：週期素E藉PCR選殖入pVL1393 (Pharmingen， La Jolla，加州），而在胺基端添加5個組胺殘基而在錄樹脂上純化。表現之蛋白質約為45 kDa。CDK2藉PCR選殖入 PVL1393，而在羧基端添加凝血素抗原決定基tag (YDVPDYAS)。表現之蛋白質大小約為34 kDa。 _素製造:表現週期素E及CDK2之重組桿病毒以相等多價感染力（M0I=5)共同感染至SF9細胞中48小時。藉1000 RPM離心1〇分鐘收取細胞，接著粒片在冰上於5倍粒片體積之含 50 mM Tris pH 8·0、150 mM NaCl、1% NP40、1 mM DTT 及蛋白酶抑制劑（Roche診斷GmbH，Mannheim，德國）之溶 87251.doc -76- 200413377 胞緩衝液中溶胞30分鍾。溶胞物在15000 RPM旋轉10分鐘且保留上澄液？ 5毫升鎳珠粒（對一升SF9細胞而言）以溶胞緩衝液（Qiagen 0mbH，德國）洗滌3次。於桿病毒上澄液中添加咪唑至終濃度20 mM，接著以鎳珠粒在4°C培育45分鐘。蛋白質以含250 mM咪唑之溶胞緩衝液溶洗。溶離液於2升含50 mM Tris pH 8.0、1 mM DTT、10 mM MgCl2、100 uM原釩酸鈉及20%甘油脂激酶緩衝液終滲析隔夜。酵素整份在-70°C 儲存。

體外激酶分析：於低蛋白質結合之96_洞盤（Corning公司，Corning，紐約）中進行週期素E/CDK2激酶分析。酵素於含 50 mM Tris pH 8.0、10 mM MgCl2、1 mM DTT及 0.1 mM 原釩酸鈉之激酶緩衝液中稀釋至終濃度50微克/毫升。該等反應中所用之受質為衍生自Histon H1 (購自Amersham，英國）之生物素化之肽。該受質在冰上解凍並於激酶緩衝液中稀釋至2 μΜ。化合物於10% DMSO中稀釋至所需濃度。對各激酶反應而言，使20微升50微克/毫升之酵素溶液（1微克酵素）及20微升2 μΜ受質溶液混合，接著於各洞中與10微升稀釋化合物混合供測試。激酶反應藉添加50微升2 μΜ ΑΤΡ 及0.1 pCi之33Ρ-ΑΤΡ (購自Amersham，英國）起始。反應在室溫進行1小時。反應藉添加200微升含0.1% Triton X-100 、1 mM ATP、5 mM EDTA及5毫克/毫升鏈黴肽塗佈之SPA 珠粒（購自Amersham，英國）之終止緩衝液停止15分鐘。該 SPA珠粒接著使用Filtermate環球收取機（Packard/Perkin Elmer生命科學公司）捕捉至96-洞GF/B過濾盤（Packard/ 87251.doc -77- 200413377

Perkin Elmer-生命科學公司）上。藉2 M NaCl洗鲦該珠粒2次接著以含1%磷酸之2 M NaCl洗滌2次而消除非專一訊號。接著使用TopCount 96洞液體閃爍計數器（購自Packard/Perkin Elmer生命科學公司）測量放射活性訊號。 ICw測定：自所產生之抑制數據（各重複2次）自8個連續稀釋抑制化合物之點繪製劑量-相關曲線。化合物濃度相對％激酶活性（藉經處理樣品之CPM除以未經處理樣品之CPM 所計算）作圖。為了產生IC5〇值，接著將劑量相關曲線套入標準S型曲線並藉非線性回歸分析衍生IC5G值。雖然本發明已藉上述特定具體例加以描述，但對熟知本技藝者而言之許多選擇、改質及其他變化將為易於推知者。所有該等選擇、改質及其他變化欲落入本發明之精神及範圍内。 78- 87251.doc

Claims

200413377 拾、申請專利範圍： 1 · 一種下列結構式所示之化合物

其中= R為雜芳基，其中該雜芳基可為未經取代或視情況經一或多個可相同或不同之基團取代，各基團獨立選自由 _素、燒基、芳基、環烷基、-CF3、-〇CF3、CN、-OR5 、-NR5r6、_c(R4R5)n〇R5、-C(02)R5、-C(0)R5、-C(0)NR5R6 、-SR6、_s(〇2)R7、_s(〇2)nr5r6、_n(r5⑼⑹r7、 _n(r5)c(0)r7 及-N(R5)C(0)NR5R6所組成之組群； R係選自由r9、烷基、炔基、芳基、雜芳基、-CF3、雜壤基烷基、炔基烷基、環烷基、-C(〇)〇R4、經1-6個R9 基取代之燒基（該R9基可相同或不同且各R9基係獨立選自後述所列之R9)、 θ r(CH2)m〇叫—芳基-N〜8 及〜，，^ 其中R2之上述定義中該芳基可為未經取代或視情況經一或多個基團取代，該基團可相同或不同且獨立選自ϋ 由鹵素、CN、-OR5、SR5 …CH2〇R5、弋（〇)r5、、 -S(02)R6、_S(02)NR5R6、-NR5R6、-C(〇)NR5R6、_CF 及 -OCF3所組成之組群； 87251.doc 3200413377 R係選4由下列所組成之組群·· η、函素、-nr5r6、 -C(0)〇R4'、-C(0)NR5R6、烷基、炔基、環烷基、環烷基烷基、芳基、芳基烷基、雜環基、雜環基烷基、雜芳基、

其中R3之該·烷基、環烷基、芳基、芳基烷基、雜環基、雜環基坑基、雜芳基及雜芳基烷基及對上述R3剛顯示之結構之雜環基團各可經或視情況可獨立經一或多個可相同或不同之基團取代，各基團獨立選自下列所組成之組群·鹵素、烷基、芳基、環烷基、CF3、CN、-OCF3 、-(CR R )n〇R5、-〇R5、-NR5R6、_(CR4R5)nNR5R6、-C(〇2)R5 、-C(0)R5、-C(0)NR5r6、_SR6、_s(〇2)r6、，⑹nr5r6

、-N(R5)S(〇2)R7、-N(R5)C(0)R7及-N(R5)C(〇)NR5R6 ; R為H、齒基或坑基； R為H或纟克基； R6係選自由Η、烷基、芳基、芳基烷基、環烷基、雜環基、雜環基烷基、雜芳基及雜芳基烷基所組成之組群，其中該烷基、芳基、芳基烷基、環烷基、雜環基、雜環基燒基、雜芳基及雜芳基烷基可為未經取代或視情^ 經一或多個可相同或不同之基團取代，各基團獨立選 87251.doc -2 · 200413377 下列所組減之組群：鹵素、烷基、芳基、環烷基、cf3 、-OCF3、CN、-OR5、-NR5R1()、-N(R5)Boc、-(CR4R5)n〇R5 、-C(〇2)R5、-C(0)R5、-c(o)nr5r10、-S03H、-SR1G、-S(02)R7 、_S(02)NR5R1()、_N(r5)S(02)R7、_n(R5)C(0)R7 及 -n(r5)c(o)nr5r10 ; R1G係選自由H、烷基、芳基、芳基烷基、環烷基、雜每基、雜環基烷基、雜芳基及雜芳基烷基所組成之組群，其中該烷基、芳基、芳基烷基、環烷基、雜環基、雜環基烷基、雜芳基及雜芳基烷基可為未經取代或視情況二暴經一或多假可相同或不同之基團取代，各基圈獨立選自下列所組成之組群：_素、燒基、芳基、環燒基、CF3 ^ -〇CF3 ^ CN > -OR5 > -NR4R5 . -N(R5)Boc ^ -(CR4R5)nOR5 ^ -C(02)R^ .C(0)NR4R5^C(0)R^ .s〇3H, .SR5^S(02)R7 -S(02)NR R 、_N(R5)S(〇2)r7、_n(r5)c(〇)r7 及 -N(R5)C(0)NR4R5 ；或視h況⑴基團_NR5R10中之R5及Rio或（ii)基團中之Rw可—起形成環燒基或雜環基基團，該· 環燒基或雜環燒基基圈各為未經取代或視情況獨立經-一或多個R9基取代； . R7係選自由燒基、環燒基、芳基、雜芳基、芳基燒基及雜芳基燒基所組成之組群，其中r7之該燒基、環燒基、雜芳基燒基、芳基、雜芳基及芳基燒基可為未經取代或視情況獨立經一或多個可相同或不同之基團取代，各基團獨立選自下列所組成之组群：_素、燒基、芳基、 87251.doc 200413377 環烷基、cf3、-OCF3、CN、-OR5、-NR5R1G、-CH2OR5 、-C(02)R5、_C(0)NR5R10、-C(0)R5、-SR10、-S(02)R10 、-s(o2)nr5r10、_n(r5)s(o2)r10、_n(r5)c(o)r10 及 -n(r5)c(o)nr5r10 ; R8係選自由 R6、-C(0)NR5R10、-CH2OR4、-C(0)0R6、 -C(0)R7及-S(02)R7所組成之組群； R9係選自 _ 素、CN、-NR5R6、-(CH2)n〇R4、-C(02)R6 、-C(0)NR5R1()、-OR6、-SR6、-S(〇2)R7、-S(〇2)NR5R6、 -n(r5)s(o2)r7、-n(r5)c(o)r7及-n(r5)c(o)nr5r6 ; m為0至4 ;及 n為1至4。 2·如申請專利範圍第1項之化合物，其中r係選自2_吡啶基、4-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基-Ν-氧離子、3-吡啶基 -Ν-氧離子、1，3-嘧唑-2-基、嘧啶-5-基、吡畊_3_基及嗒畊-3-基所組成之組群，其中該吡啶基、魂吐基、嘧啶基、吡畊基及嗒畊基基團可為未經取代或視情況經一或多個基團取代，該基團可相同或不同且獨立選自由南素、义元基、方基、-CF3、-OCF3、CN、-OR5、-NR5R6、-CH2OR5 、-c(o2)r5、-c(0)nr5r6、-s(o2)nr5r6及-n(R5)s(〇2)r7 所組成之組群； R為_素、CF3、CN、低碳燒基、環燒基、_qr6、_c(〇)〇r4 、-ch2or6、芳基或雜芳基； R3為Η、_素、低碳烷基、芳基、雜芳基、_c(〇)〇r4 、環烷基、-NR5r6、雜環基烷基、環烷基烷基、 87251.doc -4- 200413377

其中R3之該烷基、芳基、雜芳基、雜環基及環烷基為未經取代或視情況獨立經一或多個可相同或不同之基團取代，各基團獨立選自下列所組成之組群：鹵素、CF3 、OCF3、低碳烷基、CN及OR5 ; R4為Η或低碳烷基； R5為Η或低碳烷基； m為0至2 ;及 η為1至2。 3·如申請專利範圍第2項之化合物，其中r係選自2_吡啶基、4-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基-Ν-氧離子、3-吡淀基 -Ν-氧離子、ι，3-嘧唑-2-基及嘧啶-5-基所組成之組群。 4·如申請專利範圍第2項之化合物，其中R2為F、C卜Br、 CF3、CH、低碳烷基、環烷基或_(CH2)nOR6。 5·如申請專利範圍第2項之化合物，其中R3為Η、低碳烷基、環烷基、-C(0)〇R4、芳基、雜芳基、環烷基烷基、 1-2 R8

N

1-2 87251.doc 200413377

其中R3所示之各該低碳烷基、芳基、環烷基、雜芳基及雜環基為未經取代或視情況獨立經一或多個可相同或不同之基團取代，各基團獨立選自_素、CF3、低碳烷基、-och3、_CH2OH、_CH2CH2〇H及 CN。 •如申請專利範圍第2項之化合物，其中r4為η。如申請專利範圍第2項之化合物，其中r5為η。如申睛專利範圍第2項之化合物，其中爪為〇。 9·如申請專利範圍第2項之化合物，其中η為1。 10。如申請專利範圍第2項之化合物，其中R為吡啶基。 1 ·如申請專利範圍第2項之化合物，其中r為3_吡啶基。 12·如申請專利範圍第2項之化合物，其中r為4_吡啶基。 13· ^申請專利範圍第2項之化合物，其中以為4-吡啶基之冰氧》離子。 14·如申請專剎範圍第4項之化合物，其中R2為汾。 15·如申請專利範圍第4項之化合物，其中R2為C1。 16·如申請專利範園第4項之化合物，其中r2為異丙基或乙基。戈申明專利範園第4項之化合物，其中R2為_CH2〇H或 -CH2〇CH3 〇 18·如申請專利範圍第4項之化合物，其中R2為環丙基。 19·如申請專利範圍第4項之化合物，其中R2為CN。 20.如申請專利範圍第2項之化合物，其中r3為低碳燒基、環 87251.doc 200413377 烷基、環烷基烷基、芳基、-NR5r6、

21 ·如申請專利範圍第20項之化合物，其中尺3為異 22.如申請專利範圍第21項之化合物，其中汉3為

23·如申請專利範圍第20項之化合物，其中R3為未經取代之苯基或經一或多個選自F、Br、CU、OMe、CH3及CF3所組成之組群之基團取代之苯基。 24·如申請專利範園第2〇項之化合物，其中R3為環己基甲基。 25· —種選自下列所成組群之化合物， 87251.doc 200413377

87251.doc 200413377

87251.doc -9- 200413377

87251.doc -10- 200413377

或其醫藥可接受性鹽或溶劑化物。 26· —種選自下列所成組群之化合物’

-11 - 87251.doc 200413377

或其醫藥可接受性鹽或溶劑化物。種用於抑制一或多種週期素依賴性激酶之醫藥組合物G括療有效量I至少一種如申請專利範圍第1項之化合物以及至少一種藥可接受性載劑。 27. 28. 29. —種用於治療-或多種與週期素依賴性激酶有關之疾病之醫藥組合物，包括治療有效量之至少—種如申請專利範圍第！項之化合物以及至少—種藥可接受性載劑。如申請專利範圍第28項之醫藥組合物，其中該週期素依 87251.doc -12- 200413377 賴性激酶為CDK2。 30·如申請專利範圍第28項之醫藥組合物，其中該疾病係選自膀胱癌、乳癌、結腸癌、腎癌、肝癌、肺、小細胞肺癌、食道癌、膽囊癌、卵巢癌、胰癌、胃癌、頸癌、甲狀腺癌、***癌及皮膚癌、鱗狀細胞癌；白血癌、急性淋巴白血癌、急性淋巴胚細胞白血癌、B-細胞淋巴癌、T_細胞淋巴癌、霍金氏（Hodgkins)淋巴癌、非霍金氏淋巴癌、髮細胞淋巴癌及布克特氏（Burkett’s)淋巴癌；急性及慢性骨髓性白血癌、脊髓發育不良徵候群及前骨髓細二鲁胞白血癌；纖維肉瘤、橫紋肌肉瘤；星細胞瘤、神經母細胞瘤、神經膠瘤及神經鞘瘤；黑色瘤、精細胞瘤、畸胎瘤、骨肉瘤、外生性色素頸瘤、kerat〇ctanthoma、甲狀腺卵胞癌及卡波西氏（Kaposi，s)肉瘤。 31· —種用於治療一或多種與週期素依賴性激酶有關之疾病之醫藥組合’包括對需治療之哺乳類投予下列治療：某量之第一種化合物，其為申請專利範圍第1項之化合物或其醫·藥可接受鹽或其溶劑化物；及 # 某量之至少一種第二種化合物，該第二種化合物為抗 · 癌劑； _ 其中該量之第一種化合物及該第二種化合物可產生治療效果；與至少一種醫藥可接受性載劑。 32·如申請專利範圍第31項之醫藥組合，另包括放射療法。从如申請專利範圍第31項之醫藥組合，其中該抗癌劑係選自下列所組成之組群：制細胞劑、順氯胺鉑、多索鹵賓 87251.doc •13- 200413377

(doxorubicin) ^ 坦羅特（taxotere)、坦醇（taxol)、依技塞 (etoposide)、艾諾泰肯（irinotecan)(或 CPT-11)、肯托斯塔 (camptostar)、技譜泰肯（topotecan)、帕克利坦（paclitaxel) 、多塞坦（docetaxel)、艾譜塞酮（epothilone)、坦墨希分 (tamoxifen)、5-氟尿。密淀、胺甲噪呤（methoxtrexate)、泰默酸胺（temozolomide)、環磷酿胺、4-[2_[4-[(llR)-3，10-二溴-8-氯-6，11-二氫-5H_苯并[5,6]環庚并[l，2-b]吡啶-11-基]-1-喊淀基]-2-氧代乙基]-1-旅淀叛酸胺、替普法尼 (tipifarnib)、L778，123 (法呢基蛋白質轉移酶抑制劑）、 BMS 214662 (法呢基蛋白質轉移酶抑制劑）、愛利沙 (Iressa)、塔希瓦（Tarceva)、對 EGFR之抗體（如 C225)、 Gleevec、干擾酮（intron)、ara-C、阿霉素（adriamycin)、胞色燒（cytoxan)、葛希塔賓（gemcitabine)、尿喊淀氮芥、氮芥（Chlormethine)、艾法酸胺（Ifosfamide)、美法侖 (Melphalan)、苯丁酸氮芥（Chlorambucil)、柏溴燒 (Pipobroman)、曲他胺（Triethylenemelamine)、三伸乙基硫代構醯胺（Triethylenethiophosphoramine)、馬利蘭 (Busulfan)、卡默斯汀（Carmustine)、羅姆斯；丁（Lomustine) 、斯特唆辛（Streptozocin)、達卡貝 _ (Dacarbazine)、氟索利淀（Floxuridine)、塞塔賓（Cytarabine)、6-氫硫基漂吟、6-硫代胍、磷酸氟達賓（Fludarabine phosphate)、吟利銘（oxaliplatin)、雷可瓦寧（leucovorin)、分妥斯達 ί丁 (Pentostatine)、長春驗、長春新驗、長春地辛（Vindesine) 、平陽黴素（Bleomycin)、更生黴素（Dactinomycin)、柔紅 87251.doc -14- 200413377 黴素（Daunorubicin)、多索 _ 賓（Doxorubicin)、艾比鹵賓 (Epirubicin)、艾達 _ 賓（Idarubicin)、光輝黴素(Mithramycin) 、去氧助間型黴素（Deoxycoformycin)、絲裂黴素_C (Mitomycin-C)、L-門冬醯胺酶、替尼泊（Teniposide) 17 α -乙炔基***、已烯雌酚、睪酮、潑尼松（Prednisone) 、氟甲睪嗣（Fluoxymesterone)、多莫斯坦酮丙酸鹽 (Dromostanolone propionate)、畢内酉旨（Testolactone)、甲地孕酮乙酸鹽（Megestrolacetate)、甲基潑尼松、甲基睪丸酮、強的松（Prednisolone)、鼻浪花（Triamcinolone)、氯晞雄酸（Chlorotrianisene)、經孕酮（Hydroxyprogesterone) 、胺鹵米特（Aminoglutethimide)、雌莫斯汀（Estramustine) 、甲經孕酮乙酸鹽（Medroxyprogesteroneacetate)、利普胺 (Leuprolide)、福特胺（Flutamide)、技瑞米分（Toremifene) 、高瑞林（goserelin)、順氯胺銘、碳胺銘（Carboplatin)、輕基尿素、胺沙林（Amsacrine)、普卡貝_ (Procarbazine) 、米多坦（Mitotane)、米技山酮（Mitoxantrone)、左米梭 (Levamiso^)、納瓦賓（Navelbene)、胺斯塔唆（Anastrazole) 、雷塔吐（Letrazole)、卡配晞塔賓（Capecitabine)、雷羅色分（Reloxafine)、多羅塞分（Droloxafine)或六甲蜜胺。 34. —種醫藥組合物，包括治療有效量之如申請專利範圍第 1項之化合物及至少一種醫藥可接受性載劑。 35.如申請專利範圍第34項之醫藥組合物，又包括一或多種抗癌劑，係選自下列所組成之組群：制細胞劑、順氯胺銘、多索鹵賓（doxorubicin)、坦羅特（taxotere)、坦醇（taxol) -15-

87251.doc 200413377

、依托塞（etoposide)、CPT-l 1、艾諾泰肯（irinotecan)、肯技斯塔（camptostar)、托譜泰肯（topotecan)、帕克利坦 (paclitaxel)、多塞坦（docetaxel)、艾譜塞酮（epothilone) 、坦墨希分(tamoxifen)、5_氟尿口密淀、胺甲噪呤(methoxtrexate) 、泰默酸胺（temozolomide)、環磷醯胺、4_[2-[4-[(1111)_3，10-二溴-8-氣_6，11_二氫-511-苯并[5,6]環庚并 [l，2-b]p比淀-11-基]-1-喊淀基]-2_氧代乙基]-1-喊淀幾酸胺、Zarnestra⑧（替普法尼（tipifarnib))、L778，123 (法呢基蛋白質轉移酶抑制劑）、BMS 214662 (法呢基蛋白質轉移酶抑制劑）、愛利沙（Iressa)、塔希瓦（Tarceva)、對EGFR 之抗體、Gleevec、干擾酮（intron)、ara-C、阿霉素 (adriamycin)、胞色虎（cytoxan)、葛希塔賓（gemcitabine) 、尿喊淀氮芥、氮芥（Chlormethine)、艾法醯胺（Ifosfamide) 、美法侖（Melphalan)、苯丁酸氮芬（Chlorambucil)、柏溴燒（Pipobroman)、曲他胺（Triethylenemelamine)、三伸乙基硫代磷酸胺（Triethylenethiophosphoramine)、馬利蘭 (Busulfan)^ (Carmustine) ^ ^ >τ (Lomustine) 、斯特哇辛（Streptozocin)、達卡貝 p井（Dacarbazine)、象索利淀（Floxuridine)、塞塔賓（Cytarabine)、6-氫硫基嗓呤、6-硫代胍、磷酸氟達賓（Fludarabine phosphate)、分妥斯達汀（Pentostatine)、長春驗、長春新驗、長春地辛 (Vindesine)、平陽黴素(Bleomycin)、更生黴素(Dactinomycin) 、柔紅黴素（Daunorubicin)、多索 _ .(Doxorubicin)、艾比鹵賓（Epirubicin)、艾達鹵賓（Idarubicin)、光輝黴素 87251.doc -16- 200413377

(Mithramycin)、去氧助間型黴素（Deoxycoformycin)、絲裂黴素_C(Mitomycin-C)、L-門冬醯胺酶、替尼泊 (Teniposide) 17α-乙块基***、已烯雌驗、睪酮、潑尼松（Prednisone)、氟甲睪酮（Fluoxymesterone)、多莫斯坦酮丙酸鹽（Dromostanolone propionate)、睪内酉旨（Testolactone) 、甲地孕酮乙酸鹽（Megestrolacetate)、甲基潑尼松、甲基睪丸酮、強的松（Prednisolone)、鼻浪花（Triamcinolone) 、氯晞雌醚（Chlorotrianisene)、經孕酮(Hydroxyprogesterone) 、胺鹵米特（Aminoglutethimide)、雌莫斯：?丁（Estramustine) 、甲羧孕酮乙酸鹽（Medroxyprogesteroneacetate)、利普胺 (Leuprolide)、福特胺（Flutamide)、技瑞米分（Toremifene) 、高瑞林（goserelin)、順氯胺鉑、碳胺鉑（Carboplatin)、經基尿素、胺沙林（Amsacrine)、普卡貝p井（Procarbazine) 、米多坦（Mitotane)、米托山酮（Mitoxantrone)、左米梭 (Levamisole)、納瓦賓（Navelbene)、胺斯塔唆（Anastrazole) 、雷塔吐（Letrazole)、卡配烯塔賓（Capecitabine)、雷羅色分（Reloxafine)、多羅塞分（Droloxafine)或六甲蜜胺。 36.如申請專利範圍第1項之化合物，係呈單離及純化態。 87251.doc 17- 200413377 柒、指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：第（）圖。 (二) 本代表圖之元件代表符號簡單說明：

捌、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式：式III 87251.doc