SU1090713A1 - Питательна среда дл культивировани продуцентов целлюлолитических ферментов и ксиланазы - Google Patents
Питательна среда дл культивировани продуцентов целлюлолитических ферментов и ксиланазы Download PDFInfo
- Publication number
- SU1090713A1 SU1090713A1 SU823554000A SU3554000A SU1090713A1 SU 1090713 A1 SU1090713 A1 SU 1090713A1 SU 823554000 A SU823554000 A SU 823554000A SU 3554000 A SU3554000 A SU 3554000A SU 1090713 A1 SU1090713 A1 SU 1090713A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- citric acid
- nitrogen
- potassium
- xylanase
- activity
- Prior art date
Links
Landscapes
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ПРОДУЦЕНТОВ ЦЕЛЛЮЛОЛИТИЧЕСКИХ ФЕРМЕНТОВ И КСИЛАНАЗЫ, содержаща источники углерода, азота, витаминов, аминокислот, источник минерального азота - азотнокислый ... / рий, а также минеральные соли - однозамещенный фосфорнокислый калий, сернокислый магний и воду, отличающа с тем, что, с целью повышени активности продуцентов и 1 удешевлени среды, она дополнительно содержит в качестве источника углерода, азота, витаминов и аминокислот солодовые ростки при следую.щем соотношении компонентов, мас.%: Азотнокислый натрий0,3 Однозамещенный фосфорнокислый каший0,2 Сернокислый i магний0,05 Солодовые ростки1,5-4 (Л Вода, млДо 100
Description
со о
:
i
Изобретение относитс к микробио логической промышленности и касаетс питательных сред дл выращивани продуцентов цел кшолитических ферме тов и ксиланазы культуры-Tric ioderm lignorum 60-24, содержаща пшеничны отруби, свекловичный жом, солодовые ростки f 1J . Недостатками этой среды влйютс . сложный составj содержащий большой набор минеральных солей и vмкpoэлeМентов , что значительно ее удорожает , а также низка активность ксила . назы. Наиболее близкой к изобретению л етс питательна среда дл выраади вани продуцента целлюлолитических ферментов и ксиланазы Aspergillus terreus llf 2, где в качестве ист ника углерода используют измельченную пшеничную солому 2%,. в качестве источника углерода, азота, витамино аминокислот - кукурузный экстракт 1,5%, как источник минерального азо та NaNOj 0,3%, а также КН2РО4 0,2% ;MgSO4 7Н,О 0,05%, водопроводна во |да рН 4, 5. I На этой среде ферментативна ак гивность гриба Asp. terreus. 17р характеризуетс следующими величинами единица активности (миллилитр культураль1|ой жидкости) j эндоглюканаза 25 экзоцеллобиогидролаза 1,0; целлобиаза 0,5; ксиланаза 73. Недостатками этой среды вл ютс ее многокомпонентность, высока стоимость и недостаточно высока ферментативна активность выращивае мых на ней продуцентов. Целью изобретени вл етс повышение активности продуцентов и удешевление среды. Поставленна цель достигаетс те что питательна среда дл культивировани продуцентов целлюлолитических ферментов и ксиланазы, содержаща источники углерода, азота, вита минов, аминокислот., источник мине рального азота - азотнокислый натри а также минеральные соли - однозаме щенный фосфорнокислый калий, сернокислый магний и воду, содержит в ка честве источника углерода, азота, витаминов и аминокислот солодовые |ростки при следующем соотношении ко понентов, мас.%: Азотнокислый натрий0,3.1 Однозамещенный фосфорнокислый калий0,2 Сернокислый магний0,05 Солодовые ростки 1,5-4,0 Вода, млДо 100 Ферментативна активность продуцентов , выращенных на.предлагаемой среде, отличаетс высокими показатал ми и составл ет дл Aspergillus terreus I7p и Myceliophthora thermophila no эндоглюканазе 40-42 ед/мл, экзоцеллобиогидролазе 1,0-3,8 ед/мп, целлобиазе 1,2-2,7 ед/мл, ксиланаз 95-420 ед/мп. Преимущество предлагаемой среды заключаетс в том, что в качестве единственного и одновременного источника углерода, витаминов, аминокислот , а также азота среда содержит солодовые ростки в количестве 1,54 ,0 мас.%. Солодовые ростки вл ютс дешевым отходом пивоваренного производства и могут быть непосредственно без дбполнительной обработки введены в состав питательной среды. Содержание солодовых ростков менее 1,5 мас.% приводит к снижению активности ферментов, а более 4 мас.% приводит к удорожанию среды без достаточного повышени активности всех ферментов . Пример 1, Берут питательную среду следующего состава, мас.%; солодовые ростки 1,5; NaNOg 0,3; КН2РО4 0,2; МдЗО47НгО 0,5; вода водопроводна рН 4,5, и на ней провод т выращивание продуцента Myceliophtora thermophila ИНМИ PA 1-8, который депонирован под BKM-F-2148 Д. Спорами, полученными при вьаращи ,вании культуры на перловой крупе в течение 6 сут, засевают/ колбы емкост ю 250 мл, содержащие 50 мл пред лагаемой среды. Вь защивание про- вод т на круговой качалке (180 об/мин) в течение 72 ч при 45. Мицелий с твердыни остатками среды отдел ют центрифугированием. Центрифугат используют дл определени активности ферментов. Активность целлюлолитических ферментов определ ют по известной методике Мэндельс и Вебера в модификации, измер количество образовавшимис редуцирующих веществ (в перерасчете на глюкозу) при действии целлюлаз на соотвествующие субстраты (Na карбоксиметилцеллюлозу , фильтровальную бумагу, целлобиозу). Редуцирующие вещества определ ют колориметрическим методом ШЬмоди-Нельсона при длине волны 660 нм в кювете с толщиной сло раствора 5 мм« За единицу активности целлюлаз прин то такое количество ферментов, под действием которого при услови х опыта образуетс 1 мг редуцирующих веществ в перерасчете на глюкозу. Активность ксиланазы определ ют по действию фермента на 1%-ный раствор ксилана. Реакционна смесь состоит из 0/72 мл ксилана, 0,25 мл культуральной жидкости соответствующего разведени . Инкубацию провод т в течение 1 ч. Редуцирующие вещества определ ют методом Шомоди-Нельсона . Калибровочную кривую (Стро т по ксилозе. За единицу активности ксиланазы принимают, такое количество фермента, под действием которого образуетс 1 мг ксилозы в услови х опыта .
Ферментативна активность продуцента имеет следующие показатели, ед/мп: эндоглюканаза 38; экзоцеллобиогидролаза 3,8 целлобиаза 2,3; ксиланаза 370.Пример 2. Берут питательную среду следующего состава, мас.%: солодовые ростки 4; NaNOg 0,3; 0,2; 7Н4О 0,05; водопроводна вода рН 4,5, и на ней провод т выращивание штамма Myceliophthora thermophila ИНМИ РА-1-8.
Посев, услови выращивани и определение активности ферментов осуществл ют по примеру 1.
Ферментативна активность продуцента за 72 ч роста достигает следующих показателей, ед/мл: эндоглюканаза 42; экзоцеллобиогидролаза 3,9; целлобиаза 2,7; ксиланаза 420.
Пример 3. Берут питательную среду следующего состава, мас.%: солодовые ростки 2,5; NaNOj 0,3; , 0,2; 0,05; водопроводна вода рН 4,5, и на ней провод т выращивание штамма Aspergillus terreus 17 р, депонированного под -F-1862.
Суспензией спор, полученной с№звом с поверхности плотной питательной среды, содержащей (%: NaNO. 0,3;
NHjPq, 0,2; MgS04- 0,05, с полос .кой фильтровальной бумаги в качестве источника углерода, засевают 100 мл предлагаемой среды.Продуцент культивируют в колбах на 250 мл на круговой качалке (220 об/мин) при 40 в течение 96 ч. Активность ферментов определ ют в культуральной жидкости после отделени центрифугированием мицели и твердых остатков согласно примеру 1,.
При культивировании гриба Asp. terreus 17р на предлагаемой среде получены следующие результаты, ед/м ; Эндоглюканаза 40; экзоцеллобиогидролаза 1,0; целлобиаза 1,2; ксиланаза
,96,...
I I Как видно из приведенных результатов , предлагаема среда обеспечивает
.более активный биосинтез целлюлолитических ферментов и ксиланазы.
Солодовые ростки в качестве источника азота, углерода, витаминов и аминокислот замен ют одновременно два компонента - дорогосто щий кукуруз ный экстракт, получает ый из пищевого сырь , и солому, на размол и усиленный режим стерилизации которой требуетс значительный расход энергии
; Солодовые ростки очень богаты углеводами , аминокислотами, азотисты ,ми и минеральными веществами, витакйнами , содержат до 12% целлюлозы и
|Ксилан. Целлюлоза и ксилан вл ютс индукторами биосинтеза указанных ферментов . Солодовые ростки вл ютс отходом .пивоваренного производства,
,их стоимость в 2,4 раза ниже куку;рузного экстракта.
Myceliophthora thermophila синтезирует ксиланазу с активностью 370;420 ед/мп, котора значительно превышает активность известной. Нар ду с ксиланазой образуетс комплекс . целлюлоз с особенно активной эндоглюканазой , накапливаетс значительна биомасса гриба.
В насто щее врем известна питательна среда дл культивировани Asp.niger 15 в опытно-промышленном масштабе. Получены партии ферментного препарата. Недостатком этой среды вл етс ее сложный состав и довольно низка активность ксиланазы (20 ед/мп) при длительном культивировании продуцента (7 сут).
В заводских услови х получена высокоактивна культуральна жидкость гриба Asp.terreus 17р, котора испытываетс в сельском хоз йстве при облагораживании грубых кормов дл животных . В опытно-промышленных услови х также получены партии ферментного препарата, которые будут переданы дл .-дальнейшей очистки во ВНИТИАФ медицинского назначени (г.Ленинград) с целью создани полиферментной лекарственной формы.
Claims (1)
- ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ПРОДУЦЕНТОВ ЦЕЛЛЮЛОЛИТИЧЕСКИХ ФЕРМЕНТОВ И КСИЛАНАЭЫ, содержащая источники углерода, азота, витаминов, аминокислот, источник минерального азота - азотнокислый нат- рий, а также минеральные соли - однозамещенный фосфорнокислый калий, сернокислый магний и воду, отличающаяся тем, что, с целью повышения активности продуцентов и 1 удешевления среды, она дополнительно содержит в качестве источника углерода, азота, витаминов и аминокислот солодовые ростки при следую щем соотношении компонентов, мас.%: Азотнокислый
натрий 0,3 Однозамещенный фосфорнокислый калий 0,2 Сернокислый • магний 0,05 Q 5g Солодовые ростки 1,5-4 Вода, мл До 100 ω значительно ее удорожанизкая активность ксилаблизкой к изобретению яв-
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU823554000A SU1090713A1 (ru) | 1982-12-29 | 1982-12-29 | Питательна среда дл культивировани продуцентов целлюлолитических ферментов и ксиланазы |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU823554000A SU1090713A1 (ru) | 1982-12-29 | 1982-12-29 | Питательна среда дл культивировани продуцентов целлюлолитических ферментов и ксиланазы |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SU1090713A1 true SU1090713A1 (ru) | 1984-05-07 |
Family
ID=21050176
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU823554000A SU1090713A1 (ru) | 1982-12-29 | 1982-12-29 | Питательна среда дл культивировани продуцентов целлюлолитических ферментов и ксиланазы |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
SU (1) | SU1090713A1 (ru) |
-
1982
- 1982-12-29 SU SU823554000A patent/SU1090713A1/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
1. Авторское свидетельство CCCIP № 482494, кл. С 12 N 9/42, 1973. 2. Логинова Л.Г. и др. Целлюлоза микроорганизмов. М., Наука, 1981, с. 94 (прототип). * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Esterbauer et al. | Production of Trichoderma cellulase in laboratory and pilot scale | |
KR101261666B1 (ko) | 진균 배양물의 제조 방법 | |
CA1202921A (en) | Hyperproducing cellulase microorganism | |
Updegraff | Utilization of cellulose from waste paper by Myrothecium verrucaria | |
US4762788A (en) | Process for producing cellulolytic enzymes | |
CN107022493B (zh) | 一种高产饲用复合酶的米曲霉菌株及其应用 | |
KR100513218B1 (ko) | 효소복합체 | |
CN103004659A (zh) | 一种四大家鱼鱼苗养殖方法 | |
US20120190093A1 (en) | Method for producing b-glucanase and xylanase using fungus body debris, and liquid culture medium | |
CN102246890A (zh) | 利用玉米芯生产生物蛋白饲料的制作方法 | |
CN101855973B (zh) | 一种漆酶产生真菌菌株白耙齿菌及其培养方法和应用 | |
WO2018159573A1 (ja) | 糖化酵素の製造方法およびオリゴ糖の製造方法 | |
Sim et al. | Spent brewery grains as substrate for the production of cellulases by Trichoderma reesei QM9414 | |
CN111944788B (zh) | 一种诱导里氏木霉产纤维素酶的方法 | |
Ali et al. | Screening and statistical optimization of physiochemical parameters for the production of xylanases from agro-industrial wastes | |
CN104789491A (zh) | 地衣芽孢杆菌菌株及其应用 | |
CN101638645A (zh) | 一种固态机械发酵生产木聚糖酶方法 | |
Aziz et al. | Bioconversion of acid-and gamma-ray-treated sweet potato residue to microbial protein by mixed cultures | |
US3734831A (en) | Production of cellulase | |
SU1090713A1 (ru) | Питательна среда дл культивировани продуцентов целлюлолитических ферментов и ксиланазы | |
PT97565B (pt) | Processo para a prparacao de xilanase | |
CN103571811B (zh) | 一种木聚糖酶及生产方法 | |
CN105838761A (zh) | 一种提高纳他霉素发酵产量的方法 | |
Paranthaman et al. | Effects of fungal co-culture for the biosynthesis of tannase and gallic acid from grape wastes under solid state fermentation | |
CN112143770A (zh) | 一种海洋红酵母及其在以秸秆为原料生产β-胡萝卜素中的应用 |