SK23394A3 - New isosteric peptides - Google Patents
New isosteric peptides Download PDFInfo
- Publication number
- SK23394A3 SK23394A3 SK233-94A SK23394A SK23394A3 SK 23394 A3 SK23394 A3 SK 23394A3 SK 23394 A SK23394 A SK 23394A SK 23394 A3 SK23394 A3 SK 23394A3
- Authority
- SK
- Slovakia
- Prior art keywords
- arg
- pro
- dcha
- group
- phenyl
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/06—Dipeptides
- C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
- C07K5/06078—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Hematology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
Oblasť techniky
Tento vynález sa týka nových kompetitívnych inhibítorov trombínu, spôsobov ich syntézy, farmaceutických prostriedkov obsahujúcich tieto zlúčeniny ako účinné látky a použitia zlúčenín ako antikoagulantov pre profylaxiu a ošetrovanie tromboembolických ochorení, ako je trombóza žíl, plúcna embólia, arteriálna trombóza, predovšetkým infarkt myokardu a mozgová trombóza, všeobecne hyperkoagulovatelné stavy a miestne hyperkoagulovatelné stavy, napríklad po angioplastických operáciách a koronárnyych operáciách premostením.
Doterajší stav techniky
Koagulácia krvi je klúčovým procesom zahrňujúcim ako hemostázu (to znamená prevenciu straty krvi z poškodenej cievy), tak trombózu (to znamená patologické uzatvorenie krvnej cievy krvnou zrazeninou). Koagulácia je výsledkom komplexného radu enzymatických reakcií naznačených v schéme 1 ďalej, kde rôzne faktory sú označené rímskymi číslicami.
Trombín hrá stredovú úlohu pri koagulácii, pokial sa proces iniciuje' vnútornou alebo vonkajšou cestou: táto látka aktivuje krvné doštičky, transformuje fibrinogén na monomérny fibrín, ktorý spontánne polyméruje na vlákna a aktivuje koagulačný faktor XIII, ktorý naopak zosieťuje polymér na nerozpustný fibrín. Trombín ďalej aktivuje koagulačné faktory V a VIII v reakcii s pozitívnou spätnou väzbou.
Preto sa očakáva, že inhibítory trombínu budú účinnými antikoagulantmi.
VNÚTORNÝ
SYSTÉM
FII
SCHÉMA 1
Prvé inhibítory trombínu založené na elekrofilných ketónoch boli vyvinuté ako popísal M. Szelke a D. M. Jones v EP-A1-0118280 A1, s britským dátumom priority 4. marca 1983. Tieto skoršie zlúčeniny sú odvodené od P3 - P2' pentapeptidovej sekvencie fibrinogénového Aa reťazca, v ktorom lahko odštiepitelná P-jl - P j' peptidová väzba je nahradená zvyškom -CO-CH2~ f ktorý tvorí keto izoster ku zodpovedajúcim peptidom.
Iné známe príklady serín proteinázových inhibítorov, založených na elektrofilných ketónoch, sú uvedené v týchto prácach:
a) M. Kôlb a kol. (Merrel-Dow), EP-A2-0 195 212 (dátum priority
4.februára 1986), popisujúci peptidické α-ketoestery a a-ketoamidy,
b) B. Imperiáli a R. H. Abeles, Biochemistry 25, 3760 (1986) (peptidylfluóralkylketóny),
c) Ueda a kol., Biochem. J. 265. 539 (1990) (peptidylfluóralkylketóny ),
d) D. Schirlin a kol. (Merrel-Dow) EP-A1-0 362 002 (dátum priority 1. septembra 1988), popisujúci fluóralkylamidketóny,
e) P. Bey a kol. (Merrel-Dow), EP-A2-0 364 344 (dátum priority
7. októbra 1988), popisujúci α,β,δ-triketozlúčeniny a
f) E. N. Shaw a kol. (Research Corporation), US 4 318 904 (dátum priority 25. apríla 1980), popisujúci peptidchlórmetylketóny, napríklad H-DPhe-Pro-Arg-CH2Cl.
Inhibítory trombínu založené na peptidaldehydoch uvádza S. Bajusz a kol. v J. Med. Chem.. 33, 1729 (1990) a Richter Gedeon
Vegyeszeti Gyar R T v EP-A 0 185 390 (dátum priority 21. decembra 1984). Trombínové inhibítory ako peptidy zahrňujúce C-terminálne deriváty kyseliny ortoboritej odvodené od arginínových a izotiouróniových analógov popisuje A. D. Kettner a kol. (Du Pont), EP A2-0 293 881 (dátum priority 5. júna 1987 a 6. apríla 1988).
Príklady trombínového inhibítora na báze arginínových derivátov alebo analógov, ktoré neobsahujú elektrofilné ketóny, uvádzajú napríklad:
a) S. Okamoto a kol. (Mitsubishi Chemical Industries Ltd.) v EP Al-0 008 746 (dátum priority 31. augusta 1978), kde sa popisujú arylsulfonylarginínamidy, napríklad argatroban a
b) J. Sturzbecher a kol., Pharmazie 36, 639 (1981) (arylsulfonyl-p-amidinofenylalanínamidy).
Predmet tohoto vynálezu sa týka nových a účinných trombínových inhibítorov s kompetitívnym inhibítorovým účinkom proti svojmu enzýmu, to znamená, že je spôsobená reverzibilná inhibícia. Ďalším znakom je získanie inhibítorov, ktoré sú orálne biologicky dostupné a selektívne pri inhibícii trombínu viac ako iné serínové proteázy. Stabilita, trvanie účinku a nízka toxicita pri terapeutických dávkach sú ešte ďalšie znaky tohoto vynálezu.
Podstata vynálezu
Zlúčeniny
Zistilo sa, že zlúčeniny všeobecného vzorca 1 buď ako také alebo vo forme fyziologicky prijateľných solí a vrátane stereomérov, sú účinnými inhibítormi trombínu.
Zlúčeniny majú všeobecný vzorec 1
Vo všeobecnom vzorci 1 a texte, pokial ďalej nebude významy:
taktiež v prípade výskytu v ďalšom
I uvedené inak, platia nasledujúce
A predstavuje skupinu vzorca -CH2-, -CH=CH-, -CH2~CH2- alebo -CH2-CH2-CH2-,
R1 a R2 sú rovnaké alebo rozdielne a každý z nich predstavuje atóm vodíka alebo skupinu vzorca X-B-, kde B znamená priamu alebo rozvetvenú alkylénovú skupinu obsahujúcu 1 až 3 atómy uhlíka a X znamená atóm vodíka, metyl, etyl, cykloalkylovú skupinu obsahujúcu 3 až 6 atómov uhlíka alebo skupinu vzorca R'CO-, kde R' znamená hydroxyskupinu, priamu alebo rozvetvenú alkoxyskupinu obsahujúcu 1 až 4 atómy uhlíka, aminoskupinu alebo skupinu vzorca NHR'', kde R'' znamená priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 atómy uhlíka alebo
X znamená zvyšok karboxylovej skupiny známy ako taký, zvolený z -PO(OR')2, -SO3H alebo 5-(lH)-tetrazolyl a
R'''znamená atóm vodíka, metyl alebo etyl alebo
B predstavuje skupinu vzorca -S02~ a
X znamená metyl alebo etyl, m predstavuje číslo 0, 1 alebo 2,
R3 znamená cyklohexylovú skupinu a r3A predstavuje atóm vodíka alebo m predstavuje číslo 1,
R3 znamená cyklohexylovú alebo fenylovú skupinu a
R3A tvorí etylénový mostík spolu s R1,
Y znamená atóm kyslíka alebo skupinu vzorca S(O)p, kde p predstavuje číslo 0, 1 alebo 2 a
R4 znamená atóm vodíka, priamu alebo rozvetvenú alkylovú alebo cylkoalkylovú skupinu obsahujúcu od 1 do 6 atómov uhlíka, ne substituovanú alebo substituovanú jedným alebo väčším počtom atómov fluóru a/alebo substituovanú fenylovú skupinu, substituovaný alebo nesubstituovaný aromatický kruh zvolený z fenylu,4-metoxyfenylu, 4-terc.-butylfenylu, 4-metylfenylu,
2-, 3- alebo 4-trifluórmetylfenylu a fenylu substituovaného 1 až 5 atómami uhlíka, alebo znamená -CH(CF3)-fenyl.
Zlúčeniny všeobecného vzorca 1 sa vzťahujú ku peptidovej sekvencii ľudského fibrinogénového Aa reťazca, predstavujúceho modifikované polohy P3 - Pj':
H-Ala-Asp-Ser-Gly-Glu-Gly-Asp-Phe-Leu-Ala-Glu-Gly-Gly-
1 | 5 | 10 | ||
P3 P2 | P1 | Pl' P2' | P3 ' | |
-Gly-Val· | -Arg— | —Gly-Pro· | -Arg-Val- | |
14 15 | 16 | 17 | 20 |
Táto sekvencia súhlasí so SEQ ID čís. 1 v súhrne sekvencii.
Podľa výhodného uskutočnenia sa tento vynález týka zlúčenín všeobecného vzorca 1, v ktorom
A znamená skupinu vzorca -CH2-CH2“ alebo -CH2“CH2-CH2-,
R1 predstavuje atóm vodíka,
R2 predstavuje skupinu vzorca HOCO(CH2)n- alebo
CH3ch2oco(ch2)n-, n je 1 alebo 2,
Y znamená atóm kyslíka, m znamená číslo 1,
R predstavuje cyklohexylovu skupinu a r3A predstavuje atóm vodíka.
Predovšetkým výhodné uskutočnenia vynálezov predstavujú zlúčeniny vzorcov:
H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-CH2-CF3 , HOOC-CH2-DCha-Pic-Arg-CH2-O-CH2-CF3, HOOC-CH2-DCha-Pic-Arg-CH2-O-nBu, H00C-CH2-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-nBu, H00C-CH2-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-CH2-CF3 a H00C-CH2~DCha-Pro-Arg-CH2-0-nBu.
Lekárske a farmaceutické použitie
Podľa ďalšieho stelesnenia sa tento vynález týka ošetrovania ľudského alebo zvieracieho organizmu pri stavoch, ktoré vyžadujú inhibíciu trombínu. Predpokladá sa, že zlúčeniny podľa tohoto vynálezu sú vhodné predovšetkým u živočíchov, vrátane človeka na ošetrovanie alebo profylaxiu trombózy a hyperkoagulovateľnosti v krvi a tkanivách. Chorobné stavy, pri ktorých zlúčeniny majú potenciálnu využiteľnosť pri ošetrovaní a/alebo profylaxii, zahrňujú trombózu žíl, pľúcnu embóliu, arteriálnu trombózu, ako pri infarkte myokardu, nestabilnej angíne, mŕtvici na základe trombózy a periférnej arteriálnej trombóze. Ďalej sa očakáva použitie v profylaxii arterosklerotických ochorení, ako sú koronárne arteriálne choroby. Ďalej sa pri zlúčeninách očakáva, že sú použiteľné spolu s trombolytikami pri infarkte myokardu. Okrem toho sa u zlúčeninín predpokladá, že sú využiteľné v profylaxii po reoklúzii po trombolýze, perkutánnej transluminárnej angioplastike (PTCA) a koronárnych operačných premosteniach. Ďalej sa u zlúčenín očakáva ich použiteľnosť pri prevencii retrombózy po drobných chirurgických zákrokoch. Ešte ďalej sa predpokladá, že zlúčeniny sú vhodné pri antikoagulačnom ošetrovaní v súvislosti s umelými náhradami orgánov a srdcových chlopní. Pre zlúčeniny sa ďalej očakáva, že sú použiteľné pri antikoagulačnom ošetrovaní pri hemodialýze a pri roztrúsenej intravaskulárnej koagulácii. Denná dávka účinnej látky búde zvyčajne v rozmedzí od 0,1 do 10 g. Intravenózne roztoky s výhodou obsahujú od 0,1 do 100 mg/ml účinnej látky, zatiaľ čo dávkové jednotky s výhodou obsahujú od 1 do 1000 mg účinnej látky a s výhodou sa podávajú jeden až štyrikrát denne.
Ďašie očakávané použitie je pri preplachovani cievok a mechanických zariadení používaných u pacientov in vivo, a ako antikoagulačný prostriedok pri uchovávaní krvi, plazmy a iných krvných produktov in vitro.
Spôsob výroby zlúčenín
Ďalším predmetom tohoto vynálezu je spôsob výroby zlúčenín podía vynálezu. Vynález sa ďalej týka spôsobu výroby zlúčenín všeobecného vzorca 1, pričom tento spôsob spočíva v tom, že (spôsob I) atóm halogénu sa nahradí skupinou R4Y“ (kde Y predstavuje atóm kyslíka alebo síry) v halogénmetylketóne všeobecného vzorca
v ktorom
W1 znamená koncovú chrániacu skupinu aminoskupiny, ako je terc.-butoxykarbonyl a
W2 znamená chrániacu skupinu, ako je benzyloxykarbonyl, 1 i (ako je ilustrované na spôsoboch A, D a F), ketón sa. redukuje na alkohol, odstráni sa koncová chrániaca skupina aminoskupiny, uskutoční sa zvyčajná peptidová kopulácia, potom sa alkohol oxiduje a získa sa chránený tripeptidketón, odstráni sa koncová chrániaca skupina aminoskupiny, potom sa vykoná N-alkylácia (ako je ilustrované spôsobmi A, B, G a H) a odstránia chrániace skupiny alebo sa nahradí chránený dipeptid pri kopulačnej reakcii uvedenej vyššie a ilustrovanej (napríklad spôsobom A iii) amino-koncovým N-alkylovaným-N-trifluóracylom chráneným dipeptidom (spôsob
K), potom sa uskutočni oxidácia a odstránenie chrániacej skupiny, alebo (spôsob II) uskutoční sa alkylácia R4-halogenidom α-ketolu všeobecného vzorca
W1 a W2 majú významy uvedené vyššie, (ako je ilustrované v spôsobe E) a potom sa uskutočnia ďalšie reakcie ako pri spôsobe I, alebo (spôsob III) pri použití modifikovanej Dakin-Westovej reakcie (Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 8, 981 /1969/), ktorá sa aplikuje na tripeptidy (J. Org. Chem. 50, 1112 /1985/), sa nechá reagovať zlúčenina (alebo pri inom uskutočnení sa priamo použije amino-koncový N-alkylovaný N-trifluóracylom chránený dipeptid) všeobecného vzorca
O v ktorom
Ί O
W a W maju významy uvedene vyššie, so zlúčeninou všeobecného vzorca (T-CH2-CO)2O, v ktorom
T predstavuje atóm halogénu, skupinu vzorca R4O alebo R4S, a 4-dimetylaminopyridínom a potom sa nechá reagovať, ako je popísané pri spôsobe I.
V tých prípadoch, kedy výsledkom reakcie je zmes stereomérov, tieto stereoméry sa poprípade delia zvyčajnými chromátografickými alebo rekryštalizačnými technickými postupmi, a ak je to žiadúce, izoluje sa jediný stereomér.
Teraz sa uvádza podrobný popis vynálezu.
Ďalší popis je ilustráciou znakov vynálezu.
Spôsob syntézy a farmácie
Chemické postupy používané pri výrobe inhibítorov v tomto patente nárokovaných sú naznačené na schémach syntézy (spôsoby A až H) a v postupoch I a K. Potrebné alkoxymetylketóny alebo fenoxymetylketóny arginínu sa vyrábajú predovšetkým
I) náhradou atómu brómu v brómmetylketónoch skupinou vzorca R4O-, budí pri použití zlúčeniny vzorca NaOR4 (spôsob A) alebo pri použití fluoridu draselného (spôsoby D a F) alebo
II) alkyláciou arginínu α-ketolom pri použití oxidu strieborného a zlúčeniny vzorca R4I (pozri spôsob E).
Zvyčajné peptidové kopulačné reakcie sa používajú pre zavedenie DCha, Pro a ich analógov. Karboxyalkylová skupina na koncovom atóme dusíka sa zavádza buď alkyláciou pri použití brómacetátov, Michaelovou adíciou na terciárny butylakrylát (spôsoby A a B) alebo použitím preinkorporácie karboxylalkylu do peptidovej časti (pozri spôsob K). Všetky chrániace skupiny sa potom odstránia (pozri spôsoby odstraňovania chrániacej skupiny a) až c) uvedené ďalej).
Všeobecné experimentálne spôsoby
Zvyčajné spracovanie sa vzťahuje na extrakcie uskutočnené etylacetátom, bežné premývanie 0,3-molárnym roztokom hydrogensíranu sodného, 1-molárnym roztokom hydrogenuhličitanu draselného, vodou a roztokom chloridu sodného, potom filtráciou cez filtračný papier Whatman Phase Separatory Páper a vysušenie azeotropickou destiláciou s toluénom. Chromatografia na tenkej vrstve sa uskutočňuje na komerčne dostupných poťahovaných sklenených doštičkách Merck Silikagél 60F254. Vizualizácia sa dosahuje kombináciou ultrafialového žiarenia, zahriatia s nasledujúcim postrekom fluoreskamínom alebo zahriatím s nasledujúcou chloráciou (zásobník chlóru) a postriekaním s 1 % škrobovým roztokom jodidu draselného. Velmi rýchla chromagrafia sa uskutočňuje na silikagéle (Merck Silikagél 60 ; 40 až 63 μη) za tlaku dusíka.. Analýza aminokyselín sa uskutočňuje za použitia systému Beckman Gold. Peptidy sa hydrolyzujú (6-normálnou kyselinou chlorovodíkovou a fenolom pri teplote 110 ’C počas 22 hodín), potom sa injekčné zavedú a kvantitatívne sa stanoví prolínový pík. Strednotlaková kvapalinová chromatografia sa uskutočňuje v sklenenej kolóne (Anachem) naplnenej oxidom kremičitým (Vydac C18, 15 až 25 μπι), pri použití gradientu od 1 % kyseliny trifluóroctovej v acetonitrile do 1 % kyseliny trifluóroctovej vo vode, s kontrolou pri vlnovej dĺžke 226 nm. Frakcie sa analyzujú vysokotlakovou kvapalinovou chromatograf iou a čisté frakcie sa spoja a lyofilizujú. Vysokotlaková kvapalinová chromatografia sa uskutočňuje pri použití chromatograf ického zariadenia Spectra-Physics 8700 Šerieš. Rozpúšťadlový systém, tak ako pre strednotlakovú kvapalinovú chromatografiu, sa podrobuje detekcii pri vlnovej dĺžke 210 nm a prietoku 1,5 ml/min na kolóne naplnenej Novapack C18 (4 μπι, patróna 8 x 100 mm, Wa12 ters). Všetky medziprodukty sú charakterizované NMR (zariadenie Hitachi-Perkin Elmer R24, 60 Hz alebo Jeol 270 MHz). Všetky finálne peptidy sú charakterizované svojimi FAB hmotnostnými spektrami (na zariadení M-Scan Ascot, Berks., Velká Británia).
Spôsob výroby východiskových zlúčenín
Boc-Arg (Z 2) -CH2Br
i) 10 mmol Boc-Arg(Z2)-0H v 50 ml suchého tetrahydrofuránu a 10 mmol N-metylmorfolínu sa ochladí na teplotu -10 ’C a prikvapká sa 10 mmol izobutylchloroformiátu pri udržiavaní teploty -10 ’C počas 45 minút. Po ďalších 10 minútach sa pri teplote -10 ’C zmesný anhydrid vyleje na zmes 25 mmol CH2N2 v 150 ml éteru. Po 3 hodinách sa prebytok CH2N2 rozloží kyselinou octovou a roztok sa trikrát premyje vodou a potom roztokom chloridu sodného. Vysušením a odparením sa získa diazoketón vo forme žltého oleja. IČ spektrum 2100 cnT^ (000ΗΝ2).
ii) 10 mmol diazoketónu v 200 ml suchého etylacetátu sa ochladí na teplotu -15 ’C a potom sa prikvapká približne 11 ml 1-molárnej kyseliny bromovodíkovej v etylacetáte KedĹ žltá farba zmizne, chromatografia na tenkej vrstve (zmes etylacetátu a hexánu) ukáže úplnú konverziu diazoketónu na brómmetylketón. Roztok sa rýchle prenesie do deliaceho lievika a premyje 1-molárnym roztokom hydrogénuhličitanu sodného, roztokpm chloridu sodného, vysuší a odparí, čím poskytne tuhú látku. Rozpúšťaním v horúcom etanole a ochladením sa získa brómmetylketón, ktorý je tvorený amorfným bielym práškom.
NMR spektrum (CDCI3): 8 1,3 (5, 9H) , 1,5 až 1,85 (m, 4H) , 3,75 až 3,95 (m + s, 4H), 4,3 (m, 1H), 5,05 (s, 2H), 5,15 (s, 2H), 5,65 (d, 2H), 7,30 (m, 10H), 9,2 (široký singlet, 1H), 9,3 (široký singlet, 1H) ppm. Teplota topenia: mäknutie pri 50 ’C, potom pomalý rozklad pri > 70 ’C.
Boc-DCha-X-ONSu (X = Pro, Pic alebo Aze)
i) 10 mmol Boc-DCha-OH v 50 ml zmesi metylénchloridu a dime13 tylformamidu v pomere 1 : 5 sa spracuje s 11 mmol N-hydroxysukcínimidu, ochladí na teplotu 0 °C a pridá sa 13 mmol karbodiimidu rozpustného vo vode. Po 30 minútach sa reakčná zmes zahreje na laboratórnu teplotu. Po ďalších 3 hodinách chromatografia na tenkej vrstve ukáže kvantitatívny vznik Boc-DCha-ONSu. K reakčnej zmesi sa pridá 200 ml dietyléteru a všetko sa premyje trikrát vodou, roztokom chloridu sodného a vysuší. Získa sa ester vo forme bezfarebnej peny.
ii) 10 mmol N-hydroxysukcínimidoesteru v 50 ml metylénchloridu sa spracuje s 11 mmol H-Pro-OBzl.HC1, H-Pic-OBzl.HC1 alebo H-Aze-OBzl.HC1 a 20 mmol diizopropyletylamínu. Všetko sa mieša počas 3 hodín a potom spracuje zvyčajným spôsobom s etylacetátom a 0,3-molárnym hydrogensíranom draselným. Získa sa dipeptidester, ktorý je dostatočne čistý pre použitie v nasledujúcom stupni.
iii) Boc-DCha-X-OBzl v tetrahydrofuráne sa hydrogenuje na 5 % paládiu na uhlí pri laboratórnej teplote a normálnom tlaku počas 4 hodín. Filtráciou a odparením sa získa kyselina, ako tuhá látka alebo pena. Rekryštalizáciou z diizopropyléteru alebo zmesi dietyléteru a hexánu sa získajú čisté zlúčeniny.
Boc-DCha-Pro-OH (tuhá látka, teplota topenia 163 až 166 ’C): NMR spektrum (CDC13): δ 0,8 až 2,05 (m + s, pri 1,4, 26H), 3,4 (m, 1H), 3,85 (m, 1H), 4,5 (m, 2H), 5,2 (m, 1H) ppm.
Boc-DCha-Pic-OH (tuhá látka, teplota topenia 121 až 122 ’C): NMR spektrum (CDC13): δ 0,8 až 2,05 (m + s, pri 1,45, 28H), 3,35 (m, 1H), 3,95 (m, 1H), 4,6 až 4,9 (m, 1H), 5,4 (m, 1H), 5,6 (m, 1H), 8,8 (široký singlet, 1H) ppm.
Boe-(Me)DCha-Pro-ONSu
Boc-(Me)DPhe-OH sa hydrogenuje na 5 % ródiu na uhlí v 90 % vodnej kyseline octovej pri tlaku 410 kPa počas 3 dní. V kvantitatívnom výťažku sa získa Boc-(Me)DCha-OH. 10 mmol
Boc-(Me)DCha-OH a 10 mmol N-metylmorfolínu v 50 ml metylénchloridu sa ochladí na teplotu -15 ’C a pridá sa 10 mmol Ph2PO-Cl. Po minútach sa pridá 11 mmol H-Pro-OBzl .HC1 a 20 mmol
- 14 N-metylmorfolínu. Po jednej hodine sa reakčná zmes nechá zahriať na laboratórnu teplotu a po dvojhodinovom odstátí sa reakčná zmes spracuje zvyčajným spôsobom. Veľmi rýchlou chromatografiou (pri eluovaní zmesou 40 % etylacetátu v hexáne) sa získa Boc-(Me)DCha-Pro-OBzl ako bezfarebný olej (80 % teórie).
NMR spektrum (CDC13): δ 0,5 až 2,2 (m + s, pri 1,4, 26H), 2,65 (s, 3H), 3,5 (m, 2H), 4,3 až 5,0 (m, 2H), 5,1 (s, 2H), 7,30 (s, 5H) ppm.
Táto zlúčenina sa konvetuje na N-hydroxysukcínimidoester ako je popísané ďalej pre Boc-DCha-X-ONSu.
Schéma syntézy
Spôsob A
Boc-Arg(Z2)-CH2Br + “OR4 (i)
DMF
-----> Boc-Arg(Z 2)-CH2OR4 -20 e napríklad R4 = CH2CF3, CH(Ph)CF3, aryl
(ii) | NaBH4 | |||
MeOH, 0 °C | ||||
(iii) | r | |||
R* | 1) HCl-dioxán | R* , | ||
Boc-DCha-X-N | OR4 <-------------------- | Boc-N | OR4 | |
H OH | 2) Boc-DCha-X-ONSu alebo | H | OH | |
[Boe-(Me)DCha-X-ONSu] |
(iv)
Dess-Martinov perjodistan (v)
1) HCl-dioxán
2) RO2CCH2Br
Boc-DCha-X-Arg(Z 2)-CH2OR4 ----------------->
alebo iPr2NEt,MeCN,a [Boe-(Me)DCha-X-Arg(Z 2)-CH2OR4]
Y'-DCha-X-Arg(Z 2)CH2OR4
X = Pro, Pic, Aze
R = (CH2)3-NZ-C(NH)-NHZ alebo vynechané alebo spôsob G alebo spôsob H Y'= H, RO2CCH2 (R02CCH2)2 (R-Bzl, tBu alebo Et)
Spôsob B
1) HCl-dioxán
2) EtOAc/
IM KHCO3
Boc-DCha-X-Arg(z2 )-CH2OR4 -------------> tBuO2CCH2CH2-DCha-X-Arg(Z2 )CH2OR
3) tBu-akrylát
MeOh,Δ napríklad R4 = nBu,CH2F3
Spôsob C
Rh2(OAo)4 Boc-Arg(Z2)CHN2 + HOR4 -----------> Boc-Agr(Z2)-CH2OR4
Potom sa pokračuje ako pri spôsobe A napríklad R4 = CH2CF3, CH(Ph)CF3, CH(CF3)2
Spôsob D (i) C13CCH2-OH ch2ci2 Boc-Arg(Z2)-OH -----------WSCDI (ii)
1) HCl-dioxán
2) Boc-DCha-X-ONSu > Boc-Arg(Z2)-OTce
4-DMAP
D
2)
Boc-DCha-X-Arg(Z2)-OH (iv)
DMF
R4YH
--------------> Boc-DCha-X-Arg(Z 2)-CH2YR4
KF, laboratórna teplota, 24 hodín Potom sa pokračuje ako pri spôsobe A
Y = o, S
R4 = nBu, aryl, pre príklad 1: R4YH = HO2CCOPh
Spôsob E (i)
KF
Boc-Arg(Z2)-CH2Br + HO2CCOPh ----DMF > Boc-Arg(Z2)-CH2O2CC0Ph hod.
(ii)
THF
IM KHCO3
--------------> Boc-Arg(Z 9)-CH^OH 24 hod.
(iii)
Ag2° ch2ci2
--------—> Boc-Arg(Z 2)-CH2OR4 r4i napríklad
R4 = Me, Et, nPr, nBu Potom sa pokračuje ako pri spôsobe A
Spôsob F
KF
Boc-Arg(Z2)-CH2Br + R4OH ----------->
DMF, 24 hod.
Boc-Arg(Z 2)-CH2OR4 napríklad r4 = ch2cf3, ch2(cf2)2cf3,
Ph(4-0Me)
Potom sa pokračuje ako pri spôsobe A
Spôsob G
Boc-DCha-X-Arg-(Z2)-CH2OR4
1) HCl-dioxán
------------> Me-SO2-DCha-X-Arg(Z2)-CH2OR4
2) MeSO2Cl napríklad R4 = CH2CF3 napríklad R4 = CH2CF3
Spôsob H
1) HCl-dioxán
Boc-DCha-X-Arg-(Z2)-CH2OR4 ------------> ChCH2-DCha-X-Arg(Z2)-CH2OR4
2) ChCHO/NaCNBH3
Spôsob výroby finálnych zlúčenín
Ďalej uvedené spôsoby výroby ilustrujú vyššie popísané spôsoby I až II rovnako ako nasledujúce stupne až do získania finálnych zlúčenín.
Spôsob A mmol Boc-Arg(Z2)-CH2Br sa pridá ako tuhá látka k vopred pripravenému roztoku alkoxidu alebo fenoxidu (10 mmol alkoholu alebo fenolu a 10 mmol 80 % nátriumhydridu v oleji) v 40 ml dimetylformamidu pri teplote -20 ’C pod dusíkovou atmosférou. Po 2 hodinách sa k reakčnej zmesi pridá 0,3-molárny roztok hydrogensíranu draselného pre neutralizáciu poprípade zostávajúcej časti alkoxidu a potom sa dimetylformamid odparí za zníženého tlaku. Surová látka sa rozdelí medzi acetát a vodu, etylacetátová vrstva sa premyje roztokom chloridu sodného, vysuší a odparí. Veľmi rýchlou chromatografiou alebo kryštalizáciou sa získajú čisté alkoxyketóny.
Boc-Arg(Z2)-CH2OPh (tuhá látka): NMR spektrum (CDC13): δ 1,41 (s, 10H), 1,64 až 1,68 (m, 3H) , 3,92 (dd, 2H), 4,5 (m, 1H) , 4,62 (q, 2H), 5,1 (s, 2H), 5,2 (s, 2H), 5,5 (d, 1H), 6,8 (d, 2H), 6,95 (t, 1H), 7,2 až 7,45 (m, 12H), 9,2 (široký singlet, 1H), 9,3 (široký singlet, 1H) ppm. Teplota topenia: 115 až 118 ’C.
Boc-Arg(Z2)-CH2OCH2CF3 (tuhá látka): NMR spektrum (CDC13): δ
1.35 (S, 10H), 1,55 až 1,75 (m, 3H), 3,7 (q, 2H) 3,85 (m, 2H),
4,2 (q + m, 3H), 5,05 (s, 2H), 5,15 (s, 2H), 5,7 (d, 1H), 7,15 až
7.35 (m, 10H), 9,15 (široký singlet, 1H), 9,3 (široký singlet,
1H) ppm. Teplota topenia: 87 až 90 ’C.
ii) Alkoxymetylketón alebo fenoxymetylketón v zmesi metanolu a tetrahydrofuránu v pomere 1 : 1 sa pri teplote 0 'C spracuje s 1 ekvivalentom nátriumbórhydridu. Po 10 minútach sa k reakčnej zmesi pridáva 0,3-molárny roztok hydrogensíranu draselného až do hodnoty pH 7 a zmes sa odparí, aby sa odstránil metanol a tetrahydrofurán. K odparku sa pridá etylacetát a po zvyčajnom spracovaní (s etylacetátom a 0,3-molárnym roztokom hydrogensíranu dra- selného) sa izoluje alkohol ako zmes diastereomérov.
iii) Alkohol sa spracuje so 4-molárnou kyselinou chlorovodíkovou v dioxáne počas 15 minút pri laboratórnej teplote a rozpúšťadlo sa odparí. 1 mmol odparku sa rozpustí v 5 ml metylénchloridu a spracuje s 1 ekvivalentom Boc-DCha-X-ONSu a diizopropylamínom (do hodnoty pH 9 podlá vlhkého indikátorového papierika). Po 3 hodinách státia sa zvyčajným spracovaním získa modifikovaný tripeptid, ktorý sa čistí velmi rýchlou chromatografiou (pri eluovaní zmesou etylacetátu a hexánu, ktorá obsahujew 1 % kyseliny octovej). Výťažok zodpovedá 50 až 85 % teórie.
iv) Tripeptidalkohol v metylénchloride sa spracuje s 3 ekvivalentami Dess-Martinovho perjodátu (D. B. Dess a J. C. Martin, J. Org. Chem. 48, 4155 - 4156 /1983/). Reakčná zmes sa nechá stáť pri laboratórnej teplote počas 2 hodín a po zvyčajnom spracovaní (s etanolom, 1-molárnym roztokom hydrogénuhličitanu draselného a tiosiričitanom sodným) sa získajú surové tripeptidketóny, ktoré sa čistia velmi rýchlou chromatografiou (pri eluovaní zmesou etylacetátu a hexánu).
v) Ketón sa spracuje so 4-molárnym dioxánovým roztokom chlorovodíka počas 15 minút pri laboratórnej teplote a odparí sa.
mmol odparku v 5 ml acetonitrilu sa spracuje s 1,2 ekvivalentu benzylbrómacetátu alebo terc.-butylbrómacetátu a 3 ekvivalentami diizopropyletylamínu. Všetko sa varí pod spätným chladičom počas hodín, roztok sa odparí a podrobí velmi rýchlej chromatografii (eluovanie zmesou etylacetátu a hexánu). Získajú sa benzyloxykarbonylmetylpeptidy alebo terc.-butoxykarbonylmetylpeptidy vo forme oleja. Výťažok zodpovedá 40 až 50 % teórie.
V príkladoch 30 a 31 sa používa 2,5 ekvivalentu brómacetátu na dosiahnutie bis-alkylácie.
Spôsob B
Peptid-alkoxymetylketón sa spracuje s prebytkom 4-molárneho dioxánového roztoku chlorovodíka počas 15 minút pri laboratórnej teplote. Odparením sa získa hydrochlorid a táto sol sa rozdelí medzi etylacetát a 1-molárny roztok hydrogénuhličitanu draselného. Etylacetátová fáza sa oddelí, vysuší a odparením poskytne voľný amín, ktorý sa vyberie do metanolu a pridá sa 1,5 ekvivalentu čerstvo destilovaného terc.-butylakrylátu. Všetko sa varí pod spätným chladičom počas 4 hodín a získa sa terc.-butoxykarbonyletylpeptid, ktorý sa čistí veľmi rýchlou chromatografiou pri použití zmesi etylacetátu a hexánu na eluovanie.
Spôsob c mmol Boc-Arg(Z2)-CHN2 sa rozpustí v 5 ml alkoholu všeobecného vzorca R4OH a spracuje sa s octanom rodičitým ako katalyzátorom. Po niekoľkých hodinách pri laboratórnej teplote sa podľa analytického stanovenia chromatografiou na tenkej vrstve stanoví, že nie je prítomný žiaden diazoketón. Alkohol sa odparí za zníženého tlaku a zlúčenina sa izoluje veľmi rýchlou chromatografiou, za použitia zmesi etylacetátu a hexánu na eluovanie.
Spôsob D mmol Boc-Arg( Z2)-0H v 50 ml suchého metylénchloridu sa spracuje s 11 mmol 2,2,2-trichlóretanolu a 1 mmol 4-dimetylaminopyridínu, ochladí na teplotu 0 °C a pridá sa 13 mmol karbodiimidu rozpustného vo vode. Po 30 minútach sa reakčná zmes nechá zahriať na laboratórnu teplotu a mieša sa počas 24 hodín. Odparením, rozdelením odparku medzi etylacetát a 0,3-molárny roztok hydrogensíranu draselného, potom trojnásobným premytím 0,3-molárnym hydrogensíranom draselným, jedným premytím vodou a jedným premytím roztokom chloridu sodného, vysušením a odparením sa získa
2,2,2-trichlóretylester, ktorý sa použije ako taký.
ii) 10 mmol 2,2,2-trichlóretylesteru sa spracuje s 50 ml
4-molárneho dioxánového roztoku chlorovodíka pri laboratórnej teplote počas 20 minút a potom sa odparí. Po vysušení sa odparok v 50 ml metylénchloridu spracuje postupne s 10 mmol Boc-DCha-X-ONSu (X znamená Pro, Pic) a diizopropyletylamínu (do hodnoty pH 9 podľa vlhkého indikátorového papierika). Všetko sa nechá stáť počas 3 hodín, potom sa spracuje zvyčajným spôsobom (etylacetát, 0,3-molárny roztok hydrogensíranu draselného) a zís- ka sa tripeptid ako olej. 10 mmol 2,2,2- trichlóretylesteru v 50 ml 90 % vodnej kyseline octovej sa spracováva v 5 minútových intervaloch s malými podielmi čerstvo aktivovaného zinku počas 1 hodiny. Po ďalšej hodine sa zmes filtruje a filtrát sa odparí. Zvyčajným spracovaním (s etylacetátom a 0,3-molárnym roztokom hydrogensíranu draselného) sa získa tripeptid a táto kyselina sa čistí velmi rýchlou chromátografiou na oxide kremičitom (eluovanie zmesou 2 % kyseliny octovej v etylacetáte). Získa sa tripeptid-kyselina ako bezfarebná pena (výťažok 80 % teórie v 3 stupňoch).
iii) Tripeptid-kyselina sa konvertuje v brómmetylketóne za použitia rovnakého spôsobu, ako je popísaný pre Boc-Arg(Z2)-CH2Br. Tripeptid-brómmetylketón sa získa ako bezfarebný olej veľmi rýchlou chromátografiou pri použití zmesi etylacetátu a hexánu na eluovanie.
NMR spektrum (CDC13): δ 0,9 (m), 1,15 (m), 1,25 (m), 1,35 (s), 1,6 (m), 1,85 (m), 2,1 (m) (celkom 30H), 3,3 (m, 1H), 3,7 (m, 1H), 3,95 {m, 2H), 4,15 (s, 2H) , 4,25 (m, 1H) , 4,4 (m, 1H) , 4,5 (m, 1H), 5,0 (d, 1H) , 5,1 (dd, 2H), 5,2 (s, 2H), 7,2 až 7,4 (s, m, 10H), 9,2 až 9,5 (2 široké singlety, 2H) ppm.
iv) 1 mmol tripeptidbrómmetylketónu v 5 ml suchého dimetylformamidu sa spracuje s 1,2 mmol fluórovaného alkoholu, fenolu alebo tiolu a 1,5 mmol bezvodého fluoridu draselného a mieša pri laboratórnej teplote počas 24 hodin. Odparením, potom zvyčajným spracovaním a velmi rýchlou chromátografiou sa získajú tripeptidketóny.
Boc-DCha-Pro-Arg(Z2)-CH20-Ph(4-Me): NMR spektrum (CDC13): δ 0,9 (m), 1,15 (m), 1,25 (m), 1,35 (s), 1,6 (m), 1,85 (m), 2,1 (m) (celkom 30H), 2,38 (s, 3H), 3,4 (m, 1H), 3,9 (m, 1H), 4,1 (široký singlet, 2H) , 4,4 (m, 1H), 4,6 (m, 1H), 4,7 (m, 1H) , 4,9 (q, 2H) ,
6,9 (d, 1H), 7,15 (d, 1H), 7,4 až 7,5 (m, 2H), 7,45 (s, 10H), 9,4 (široký singlet, 1H), 9,6 ( široký singlet, 1H) ppm.
V príklade 37 sa chránený sulfid oxiduje na sulfón pri použití kyseliny m-chlórperbenzoovej v metylénchloride pri laboratórnej teplote.
Spôsob E
i) 10 mmol Boc-Arg(Z2)-CH2Br a 12 mmol kyseliny benzoylmravčej v 40 ml dimetylformamidu sa uvedie do styku so 14 mmol fluoridu draselného. Všetko sa mieša počas 3 hodín, dimetylformamid sa odparí a produkt sa rozdelí medzi etylacetát a vodu. Vyysušením a odparením sa získa surový ester, benzoylformiát, ktorý sa čistí kryštalizáciou zo zmesi metylénchloridu a hexánu. Získa sa pripravovaná zlúčenina ako biela tuhá látka. Výťažok zodpovedá 86 % teórie.
NMR spektrum (CDC13): δ 1,4 (s, 9H), 1,65 až 1,9 (m, 4H), 3,95 (m, 2H), 4,3 (m, 1H), 4,95 (q, 2H), 5,15 (ABq, 2H), 5,25 (s, 2H), 5,9 (d, 1H), 7,35 (m, 10H), 7,5 (t, 2H), 7,65 (t, 1H), 8,15 (t, 2H), 9,25 (široký singlet, 1H), 9,45 (široký singlet, 1H) ppm. Teplota topenia: 130 až 132 ’C.
ii) 5 mmol benzoylformiátu v 200 ml tetrahydrofuránu a 200 ml 1-molárneho roztoku hydrogénuhličitanu draselného sa intenzívne mieša pri laboratórnej teplote počas 24 hodín. Tetrahydrofuránová fáza sa oddelí a odparí a vodná fáza sa extrahuje etylacetátom. Extrakt sa spojí s látkou získanou po odparení tetrahydrofuránu. Kryštalizáciou zo zmesi metylénchloridu a hexánu sa získa α-ketol vo forme bielej tuhej látky. Výťažok zodpovedá 90 % teórie.
NMR spektrum (CDC13): δ 1,4 (s, 9H), 1,7 (m, 4H), 2,95 (t, 1H), 3,95 (m, 2H), 4,25 (m, 2H), 5,15 (s, 2H), 5,25 (s, 2H), 5,6 (d, 1H), 7,35 (m, 10H), 9,25 (široký singlet, 1H), 9,4 (široký singlet, 1H) ppm. Teplota topenia: 101 až 103 ’C.
iii) 1 mmol α-ketolu v 5 ml suchého metylénchloridu sa spracuje s 5 až 10 mmol alkyljodidu a 2 mmol oxidu strieborného. Zmes sa varí pod spätným chladičom v tme počas 2 až 17 hodín (napríklad v prípade metyljodidu, etyljodidu a n-propyljodidu počas 2 hodín a v prípade n-butyljodidu počas 5 hodín). Odparením a potom veľmi rýchlou chromatografiou (za eluovania zmesou etylacetátu a hexánu) sa získajú alkoxymetylketóny, ako bezfarebný olej. Výťažok zodpovedá 50 až 85 % teórie.
Boc-Arg(Z2)-CH2OEt (olej): NMR spektrum (CDC13): δ 1,15 (t, 3H), 1,4 (s, 9H), 1,5 až 1,8 (m, 4H), 3,4 (q, 2H), 3,95 (t, 2H), 4,1 (q, 2H), 4,45 (m, 1H), 5,15 (s, 2H), 5,25 (s, 2H), 5,4 (d, 1H) , 7,35 (m, 10H), 9,25 (široký singlet, 1H), 9,4 (široký singlet, 1H) ppm.
Boc-Arg(Z2)-CH2NBu (olej): NMR spektrum (CDC13): δ 0,9 (t, 3H), 1,25 až 1,8 (m) + 1,4 (s) (17H), 3,3 (dd, 2H), 3,95 (t, 2H), 4,05 (q, 2H), 4,45 (m, 1H), 5,1 (s, 2H), 5,2 (s, 2H), 5,35 (d, 1H), 7,35 (m, 10H), 9,25 (široký singlet, 1H), 9,4 (široký singlet, 1H) ppm.
Spôsob F
Boc-Arg(Z2)-CH2Br sa spracuje s CF3CH2OH, CF3(CF2)2CH2OH alebo Ar-OH a fluoridom draselným v dimetylformamide pri použití postupu vyznačeného v spôsobe D iv).
Spôsob G
Peptidy chránené Boe sa spracujú so 4-molárnym dioxánovým roztokom chlorovodíka pri leboratórnej teplote počas 15 minút a odparia. Odparok sa rozpustí v metylénchloride a uvedie do styku s 1 ekvivalentom metylsulfonylchloridu a 2,5 ekvivalentami diizopropylamínu. Reakčná zmes sa nechá stáť počas 1 hodiny, spracuje sa zvyčajným spôsobom a podrobí veľmi rýchlej chromátografii. Odstránenie chrániacej skupiny sa uskutoční ako je popísané pri spôsobe chrániacej skupiny a).
Spôsob H
Peptidy sa zbavia chrániacej skupiny Boe ako je uvedené vyššie, premyjú kyselinou chlorovodíkovou a potom sa rozdelia medzi etylacetát a 1-molárny roztok hydrogénuhličitanu draselné23 ho. Voľné ámíny v studenom metanole sa ochladia na teplotu 0 °C a spracujú s 1,5 ekvivalentom aldehydu všeobecného vzorca Ch-CHO a 1 ekvivalentom nátriumkyánbórhydridu. Po jednej hodine sa reakčná zmes odparí za studená a podrobí veľmi rýchlej chromatograf ii, aby sa získal N-alkylovaný peptid. Odstránenie chrániacej skupiny sa uskutoční za použitia spôsobu ako pre odstránenie chrániacej skupiny a).
Spôsob I
Boc-(3-trans-fenyl)-D,L-prolin sa vyrobí ako popísal Chung a kol. v J. Org. Chem. 55, 270 (1990) a kopuluje s H-Pro-OBzl, ako je popísané vyššie pre Boc-(Me)DCha-Pro-OBzl. Dipeptid sa potom konvertuje na -ONSu ester ako je popísané ďalej.
Boc-(3-trans-cyklohexyl)-D,L-prolín sa vyrobí z fenylového analógu hydrogenáciou na 5 % ródiu na uhlí v 90 % vodnej kyseline octovej pri tlaku 410 kPa počas 3 dní.
Spôsob K
Spôsob syntézy medziproduktu
N-(BzlO2C-CH2-),N-(CF3CO)-DCha-Pro-ONSu (i) H2 -Pd/C (ii) BZ1O2C-CHO NaCNBHg
Z-DCha-Pro-OtBu ----------------> N-(BzlO2C-CH2-) ,N-(CF3CO)DCha-Pro-ONSu (iii) (CF3CO)2O (ÍV) TFA (v) HONSu, WSCDI
i) Z-DCha-Pro-OtBu (vyrobený zvyčajnou kopulačnou reakciou pre výrobu peptidov) sa hydrogenuje v tetrahydrofuráne v prítomnosti 5 % paládia na uhlí pri zvyčajnej teplote a normálnom tlaku počas 24 hodín. Filtráciou a odparením sa vo výťažku 100 % teórie získa požadovaný H-DCha-Pro-OtBu, ktorý tvorí olej.
ii) Zmes 2 mmol vyššie uvedenej zlúčeniny a 1 ekvivalent benzylglyoxylátu v benzéne sa pre odstránenie vody podrobí trojnásobnému odparovaniu, pričom vždy sa pridá čerstvý benzén. 2 mmol výsledného imínu v 8 ml 1 % kyseliny octovej v metanole sa spracujú s 2 mmol nátriumkyánbórhydridu. Po jednej hodine sa reakčná zmes odparí a odparok sa podrobí veľmi rýchlej chromatografii na oxide kremičitom, pri eluovaní 60 % etylacetátom v hexáne. Získa sa 385 mg Bzl02C-CH2-DCha-Pro-0tBu. Výťažok zodpovedá 41 % teórie.
iii) 380 mg vyššie uvedenej zlúčeniny v 8 ml suchého metylénchloridu sa spracuje s 2 ekvivalentami trietylamínu a 1,2 ekvivalentom anhydridu kyseliny trifluóroctovej. Po 40 minútach sa reakčná zmes odparí a odparok sa podrobí veľmi rýchlej chromatografii. Vo forme oleja sa získa 390 mg N-(BzlO2C-CH2-), N-(CF3CO)-DCha-Pro-OtBu. Výťažok zodpovedá 86 % teórie.
spektrum (CDC13) - komplex v dôsledku prítomnosti 4 rotamérov - napríklad terc.-butylovej skupiny pri & 1,4 až 1,5 sa štyrikrát štiepi v pomere 1 : 0,25 : 0,8 : 0,4 ; 0,9 (m), 1,1 (m), 1,65 (m), 1,95 (m), 2,2 (m) (17H), 1,4 až 1,5 (4xs, 9H), 3,1 (m), 3,5 (m), 3,7 (m), (2H), 4,3 až 4,6 (m, 3H), 5,05 až 5,4 (m, 3H), 7,35 (S, 5H) ppm.
iv) 335 mg vyššie uvedenej zlúčeniny sa spracuje s 8 ml zmesi metylénchloridu a kyseliny trifluóroctovej v pomere 1 : 1 pri laboratórnej teplote počas 2,5 hodiny. Reakčná zmes sa odparí a potom ešte trikrát odparí s toluénom. Získa sa voľná kyselina vo výťažku zodpovedajúcom 100 % teórie.
v) Vyššie uvedená kyselina sa konvertuje na svoj -ONSu ester vo výťažku 100 % teórie za použitia N-hydroxysukcínimidu, ako je popísané vyššie pre Boc-DCha-OH.
Medziprodukt sa môže kopulovať na H-Arg(Z2)-CH2-Y-R4 za použitia všeobecných spôsobov, ktoré už boli uvedené. Spôsob odstránenia chrániacich skupín poskytne peptid chránený skupinou vzorca -N-CF3-CO-. Táto skupina sa odstráni spôsobom popísaným pod d).
Spôsoby odstránenia chrániacej skupiny
a) Chránený peptid v zmesi metanolu a vody v pomere 3:1, ktorá obsahuje 2 ekvivalenty 1-molárnej kyseliny chlorovodíkovej, sa hydrogenuje v prítomnosti 5 % paládia na uhlí, pri zvyčajných teplotných a tlakových podmienkach počas 40 minút. Filtráciou (0,2 μπι) a odparením s následujúcou lyofilizáciou z vody sa získajú peptidy ako vločkové tuhé látky. Čistenie, pokial je potrebné, sa uskutočňuje strednotlakovou kvapalinovou chromatografiou (pozri všeobecné spôsoby).
b) Chránený peptid sa najskôr uvádza do styku so zmesou kyseliny trifluóroctovej a metylénchloridu v pomere 1 : 1 počas 1 hodiny a odparí. Potom sa uskutoční hydrogenácia, ako je popísané pod a).
c) Skupina vzorca COCOPh sa najskôr hydrolyzuje, ako je popísané pod E ii), a potom hydrogenuje vodíkom v prítomnosti paládia na uhlí, ako je popísané pod a).
d) Odstránenie N-CF3-CO-(N-trifluóracetylu)
N-Trifluóracetylpeptid sa rozpustí v zmesi acetonitrilu, vody a amoniaku s hustotou 0,880 v pomere 1:1:1a udržuje pri laboratórnej teplote počas 24 hodín. Odparením a potom čistením, pokiaľ je to potrebné, sa získa požadovaný peptid.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Príklady uvedené ďalej ilustrujú podrobnejšie podstatu tohto vynálezu.
Príklady zlúčenín sú uvedené v tabuľke 1. Tabuľka 2 uvádza spôsoby použité pri ich výrobe v časti označenej nadpisom spôsob výroby. Tabuľka 3 obsahuje charakterizujúce hodnoty zhrnutých zlúčenín.
Príklady 1 až 37
- 26 Tabuľka 1
Príklad č.
Vzorec
H-DCha-Pro-D,LArg-CH2-OH
H-DCha-Pro-D,LArg-CH2-O-Me
H-DCha-Pro-Arg-CH2-0-CH2-CF3
H-DCha-Pro-Arg-CH2-0-CH(CF3)2
H-DCha-Pro-Arg-CH2-0-C*H(Ph)-CF3
HOOC-CH2-DCha-Pro-D,LArg-CH2-O-CH2-CF3
Et-00C-CH2-DCha-Pro~D,LArg-CH2-0-CH2-CF3
HOOC-CH2-DCha-Pro-D,LArg-CH2-O-CH2-CF2-CF2-CF3
H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-Ph HOOC-CH2-DCha-Pro-D, LArg-CH2-O-Ph( 4-OMe) H00C-CH2-DCha-Pro-D,LArg-CH2-0-Ph( 4-tBu) HOOC-CH2-DCha-Pro-D, LArg-CH2-O-Ph (4-Me) HOOC-CH2-DCha-Pro-D,LArg-CH2-O-Ph(4-F) HOOC-CH2-DCha-Pro-D,LArg-CH2-0-Ph(3-F) HOOC-CH2-DCha-Pro-D,LArg-CH2-O-Ph(2-F) H00C-CH2-DCha-Pro-D,LArg-CH2-0-Ph( 3-CF3) HOOC-CH2-DCha-Pro-D, LArg-CH2-O-Ph (4-CF3) H00C-CH2-DCha-Pro-D,LArg-CH2-0-Ph( 2-CF3) HOOC-CH2-DCha-Pro-D, LArg-CH2-O-CgH5 HOOC-CH2-DCha-Pro-D,LArg-CH2-O-Et H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-nPr H00C-CH2-DCha~Pro-Arg-CH2-0-nBu H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-iBu HOOC-CH2-DCha-Aze-D,LArg-CH2-O-CH2-CF3 HOOC-CH2-DCha-PÍC-D,LArg-CH2-O-CH2-CF3 HOOC-CH2-DCha-Pic-Arg-CH2-O-nBu Me-DCha-Pro-D,LArg-CH2-O-CH2-CF3 Me-S02-DCha-Pro-D,LArg-CH2-O-CH2-CF3 Ch-CH2-DCha-Pro-D,LArg-CH2-O-CH2-CF3 (HOOC-CH2)2-DCha-Pro-D,LArg-CH2-O-CH2-CF3 (HOOC-CH2)2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-iBu HOOC-CH2-CH2-DCha-Pro-D,LArg-CH2-O-nBu H00C-CH2-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-CH2-CF3 H-(3-trans-Ph)-D,LPro-D,LArg-CH2-O-CH2-CF3 H- ( 3-trans-Ch) -D, LPro-D, LArg-CH2-O-CH2-CF3 .T.’
HOOC-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-S-nBu
HOOC-CH2-DCha-Pro-D,LArg-CH2-SO2~nBu * absolútna konfigurácia R alebo S
Tabulka 2
Príklad č
Spôsob výroby
Spôsob odstránenia chrániacej skupiny alebo alebo alebo alebo
29 | A a | H | a |
30 | A | a | |
31 | E | a | |
32 | E a | B | b |
33 | A a | B | b |
34 | I a | A | b |
35 | I a | A | b |
36 | D | a | |
37 | D | a |
Tabuľka 3
Mol. hmôt.
Príklad | retencia** | FAB MS | AAA:peptid | HPLC |
č. | (min)/systém | (M +1) | Obsah (%)* | čas |
1 | 438,57 | 439 | 56/Pro | 10,3/E |
2 | 452,60 | 453 | 65/Pro | 9,9/E |
3 | 520,6 | 521 | 59/Pro | 8,6/A |
4 | 588,6 | 589 | 60/Pro | 10,7/A |
5 | 596,7 | 597 | 61/Pro | 12,2/A |
6 | 578,64 | 579 | 72/Pro | 14,8/C |
7 | 606,69 | 607,7 | 65/Pro | 22,0/B |
8 | 678,65 | 679,8 | 76/Pro | 18,2/G |
9 | 572,71 | 573,3 | 73/Pro | 19,9/B |
10 | 602,74 | 603,8 | 76/Pro | 13,4/G |
11 | 628,82 | 629,5 | 77/Pro | 22,0/G |
12 | 586,74 | 587,2 | 75/Pro | 16,0/G |
13 | 590,70 | 591,4 | 76/Pro | 15,2/G |
14 | 590,70 | 591,4 | 63/Pro | 15,0/G |
15 | 590,70 | 591,4 | 54/Pro | 14,0/G |
16 | 640,71 | 641,5 | 68/Pro | 19,0/G |
17 | 640,71 | 641,6 | 70/Pro | 20,0/G |
1.8 | 640,71 | 641,4 | 65/Pro | 18,4/G |
19 | 662,66 | 663 | 49/Pro | 21,0/G |
20 | 524,67 | 525,4 | 79/Pro | 15,5/B |
21 | 538,69 | 539 | 67/Pro | 9,2/F |
22 | 552,72 | 553 | 69/Pro | 19,3/B |
23 | 552,72 | 553,4 | 56/Pro | 9,2/F |
24 | 564,61 | 565 | 67/Aze | 13,6/D |
25 | 592,66 | 593 | 90/Pic | 8,4/D |
26 | 566,75 | 567,4 | 86/Pic | 17,0/G |
27 | 534,63 | 535,6 | 70/Pro | 18,8/B |
28 | 598,69 | 599 | 71/Pro | 11,2/D |
29 | 616,77 | 617 | 64/Pro | 14,5/C |
30 | 636,67 | 637,6 | 70/Pro | 12,0/A |
31 | 610,76 | 611,2 | 67/Pro | 10,0/F |
32 | 566,75 | 567,5 | 65/Pro | 19,7/B |
33 | 592,66 | 593 | 46/Pro | 10,6/F |
34 | 540,59 | 541 | 56/Pro | 14,3/C |
35 | 546,64 | 547 | 49/Pro | 15,9/C |
36 | 568,78 | 569,4 | 45/Pro | 17,4/G |
37 | 600,78 | 601,3 | 62/Pro | 14,6/G |
* ** | Vztiahnuté na aminokyselinu, ako je uvedené. Pozri všeobecné experimentálne postupy. Časy sú | uvedené pre | ||
epiméry L-Arg. D- | -epiméry (minoritné | zložky) zvyčajne pretekajú |
približne o 30 sekúnd skôr.
Systém A: 20 - 80 %, 25 min (z 20 % sa zvyšuje na 80 %, 1 % kyselina trifluóroctová/acetonitril v 1 % kyseline trifluóroctovej /voda, počas 25 minút),
Systém | B: | 10 - 60 | %, | 30 min. |
Systém | C: | 10 - 90 | %, | 30 min. |
Systém | D: | 30 - 100 | %, | 30 min. |
Systém | E: | 10 - 90 | %, | 20 min. |
Systém | F: | 20 - 100 | 20 min. | |
Systém | B: | 20 - 70 | 30 min. |
Príklad 38
Roztok pre kontinuálne intravenózne podanie
Roztok sa pripraví z týchto zložiek:
Inhibítor trombínu Chlorid sodný pre Voda pre injekcie injekcie mg
4,5 g do 500 ml
Účinná látka roztok filtruje, ciou cez sterilný do sterilných flaštičiek pre infúziu.
a chlorid sodný sa rozpustia vo vode a potom sa ďalej sterilizuje autoklávovaním filter 0,2 μιη a plní za alebo filtráaseptických podmienok
Príklad 39
Roztok pre injekcie
Roztok sa pripraví z týchto zložiek:
Inhibítor trombínu Chlorid sodný pre Voda pre injekcie injekcie do
1000 g g ml
Účinná látka roztok filtruje, ciou cez sterilný do sterilných ampúl s objemom 5 ml.
a chlorid sodný sa rozpustia vo vode a potom sa ďalej sterilizuje autoklávovaním filter 0,2 μιη a plní alebo filtráza aseptických podmienok
Príklad 40
Roztok pre nasálne podanie
Roztok sa pripraví z týchto zložiek:
Inhibítor trombínu
Glycerol
Metyl-p-hydroxybenzoát
Propyl-p-hydroxybenzoát
Voda pre injekcie g
200 g g
0,2 g do 1000 ml
Účinná látka a konzervačné prostriedky sa rozpustia v glycerole a hlavnej podiele vody. Potom sa objem upraví na 1000 ml a roztok sa plní do sterilných polyetylénových zásobničkov.
Príklad 41
Tablety pre orálne podanie
1000 tabliet sa pripraví z týchto zložiek:
Inhibítor trombínu
Laktóza
Polyvinylpyrolidón Mikrokryštalická celulóza Stearát hoŕečnatý
100 g
200 g g
g g
Účinná látka a laktóza sa zmiešajú s vodným roztokom polyvinylpyrolidónu. Zmes sa suší a melie za vzniku granúl. K zmesi sa potom primieša mikrokryštalická celulóza a potom stearát horečnatý. Potom sa zmes lisuje na tabletovacom stroji a získa sa 1000 tabliet, z ktorých každá obsahuje 100 mg účinnej látky.
Príklad 42
Želatínové kapsule pre orálne podanie
Želatínové kapsule sa naplnia zmesou, ktorá pozostáva z týchto zložiek:
Inhibítor trombínu 50g
Stearát hoŕečnatý 3g
Laktóza 100g
Biologické hodnotenie
Stanovenie zrážanlivosti trombínu a IC5QTT
Ľudský trombín (T 6769, Sigma Chem. Co.) v 100 μΐ tlmivého roztoku s hodnotou pH 7,4 a 100 μΐ inhibítorového roztoku sa inkubuje počas 1 minúty. K roztoku sa potom pridá 100 μΐ zásobnej normálnej íudskej plazmy spracovanej s citrátom a zrážanlivosť sa meria na automatickom prístroji KC 10 (Amelung).
Zrážanlivosť vyyjadrená v sekundách sa vynesie oproti koncentrácii inhibítora a hodnoty IC5QTT sa stanovia interpoláciou.
IC50TT predstavuje koncentráciu inhibítora, ktorá vedie k dvojnásobnej trombínovej zrážanlivosti pre ľudskú plazmu. ρΙΟ^θΤΤ je -log 10 z IC50TT v mol/1. Výsledky sú uvedené v tabuľke 4.
Tabuľka 4
Príklad č.
pIC50TT
1 | 7,71 |
2 | 7,81 |
3 | 7,92 |
4 | 7,38 |
5 | 7,77 |
6 | 8,04 |
7 | 7,70 |
8 | 7,64 |
9 | 8,45 |
10 | 7,90 |
11 | 7,86 |
12 | 8,25 |
13 | 8,22 |
14 | 8,15 |
15 | 8,12 |
16 | 7,77 |
17 | 8,68 |
18 | 7,30 |
19 | 8,27 |
20 | 8,17 |
21 | 8,14 |
22 | 8,69 |
23 | 7,64 |
24 | 8,01 |
25 | 8,00 |
26 | 7,89 |
27 | 7,52 |
28 | 6,85 |
29 | 6,47 |
30 | 7,38 |
31 | 6,88 |
32 | 7,63 |
33 | 7,78 |
34 | 7,03 |
35 | 7,25 |
36 | 7,57 |
37 | 7,72 |
Vysvetlenie skratiek
V popisnej časti, patentových nárokoch a predovšetkým v schémach a tabuľkách sa používajú skratky, ktoré majú tieto významy:
4-DMAP = | 4-dimetylaminopyridín |
AAA = | analýza aminokyseliny |
Arg = Arg(Z2) = Aze = | L-arginín ÚN, N-dibenzyloxykarbonyl-L-arginín kyselina L-azetidín-2-karboxylová |
Boe = | terc.-butoxykarbonyl |
Bu = | butyl |
Bzl = | benzyl |
Ch = | cyklohexyl |
Cha = | L-p-cyklohexylalanín |
DMF = | dimetylformamid |
Et = | etyl |
EtOAc = | etylacetát |
FAB = | bombardovanie rýchlymi atómami |
FI až FXIII = koagulačný faktor I až XIII
FIla až FXIIIa = aktivovaná forma koagulačných faktorov II až
Gly = HMW-K = ' | XIII glycín kininogén s vysokou molekulovou hmotnosťou |
HOAc = | kyselina octová |
HONSu = | N-hydroxysukcínimid |
ÍBC = | izobutylchloroformiát |
Kalí = | kalíikrein |
Me = | metyl |
NMM = | N-metylmorfolín |
Nph = | naftyl |
Ph = | fenyl |
Pic = | kyselina L-pipekolínová |
PL = | fosfolipidy |
Pr = | propyl |
Prekall = | prekallikrein |
Pro = | L-prolín |
Tce = | 2,2,2-trichlóretyl |
TFA = | kyselina trifluóroctová |
THF = | tetrahydrofurán |
Val = | L-valín |
WSCDI = | karbiimid rozpustný vo vode |
Z = | benzyloxykarbonyl |
Prefixy n, izo a terc, majú svoje zvyčajné významy a znamenajú normálny, izo a terciárny.
Prehlad sekvencií
Počet sekvencií: 1 (1) Informácie pre SEQ ID čís.: 1 (i) Charakteristika sekvencie:
(A) dĺžka: 20 aminokyselín (B) typ: aminokyselina (D) topológia: lineárna (ii) Molekulárny typ: peptid (iii) Hypoteticky: nie (vij Pôvod zdroja:
- 35 (A) Organizmus: Homo sapiens (ix) Znaky:
(A) Názov/kíúč: peptid (B) Poloha: 1..20 (D) Ďalšie informácie:/poznámka = Peptidová sekvencia obsahujúca miesto štiepenia trombínu v ludskom fibrinogénovom Α-α-reťazci.
(ix) Znaky:
(A) Názov/kľúč: štiepiace miesto (B) Poloha: 16..17 (xi) Popis sekvencie: SEQ ID čís. 1 =
Ala Asp Ser Gly Glu Gly Asp Phe Leu Ala Glu Gly Gly Gly Val Arg
10 15
Gly Pro Arg Val pľ 12'5-77
Claims (12)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Zlúčenina všeobecného vzorca 1 v ktoromA predstavuje skupinu vzorca -CH2-, -CH=CH~, -CH2-CH2- alebo-ch2-ch2-ch2-,R1 a R2 sú rovnaké alebo rozdielne a každý z nich predstavuje atóm vodíka alebo skupinu vzorca X-B-, kde B znamená priamu alebo rozvetvenú alkylénovú skupinu obsahujúcu 1 až 3 atómy uhlíka aX znamená atóm vodíka, metyl, etyl, cykloalkylovú skupinu obsahujúcu 3 až 6 atómov uhlíka alebo skupinu vzorca R'CO-, kde R' znamená hydroxyskupinu, priamu alebo rozvetvenú alkoi xyskupinu obsahujúcu 1 až 4 atómy uhlíka, aminoskupinu alebo skupinu vzorca NHR'', kde R' · znamená priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 atómy uhlíka aleboX znamená zvyšok karboxylovej skupiny známy ako taký, zvolený z -PO(OR''')2, -SO^H alebo 5-(lH)-tetrazolyl aR'''znamená atóm vodíka, metyl alebo etyl aleboB predstavuje skupinu vzorca -S02- aX znamená metyl alebo etyl, m predstavuje číslo 0, 1 alebo 2,R3 znamená cyklohexylovú skupinu a r3A predstavuje atóm vodíka alebo m predstavuje číslo 1,R3 znamená cyklohexylovú alebo fenylovú skupinu aR3A tvorí etylénový mostík spolu s R1,Y znamená atóm kyslíka alebo skupinu vzorca S(0)p, kde p predstavuje číslo 0, 1 alebo 2 aR4 znamená atóm vodíka, priamu alebo rozvetvenú alkylovú alebo cylkoalkylovú skupinu obsahujúcu od 1 do 6 atómov uhlíka, nesubstituovanú alebo substituovanú jedným alebo väčším počtom atómov fluóru a/alebo substituovanú fenylovú skupinu, substituovaný alebo nesubstituovaný aromatický kruh zvolený z fenylu, 4-metoxyfenylu, 4-terc.-butylfenylu,4-metylfenylu, 2-, 3- alebo 4-trifluórmetylfenylu a fenylu substituovaného 1 až 5 atómami uhlíka, alebo znamená -CH(CF3)-fenyl.buď alebo ako taká alebo vo forme fyziologicky prijateľnej soli a zahrňujúcej stereoméry.
- 2. Zlúčenina podľa nároku 1, kdeA znamená skupinu vzorca -CH2-CH2- alebo -CH2-CH2-CH2-,R1 predstavuje atóm vodíka,R2 predstavuje skupinu vzorca HOCO(CH2)n- alebo ch3ch2oco(ch2)n-, n je 1 alebo 2,Y znamená atóm kyslíka, m znamená číslo 1,R3 predstavuje cyklohexylovú skupinu a r3A predstavuje atóm vodíka.
- 3. Zlúčenina podľa nároku 1, ktorá je zvolená zH-DCha-Pro-Arg-CH2-OH H-DCha-Pro-Arg-CH2-0-Me H-DCha-Pro-Arg-CH2-0-CH2-CF3 H-DCha-Pro-Arg-CH2-0-CH(CF3)2H-DCha-Pro-Arg-CH2-0-(R aleebo S)CH(Ph)-CF3 H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-CH2-CF3 Et-00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-CH2-CF3 H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-CH2-CF2-CF2-CF3 H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-Ph H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-Ph(4-OMe) H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-Ph(4-tBu) H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-Ph(4-Me) H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-Ph(4-F) H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-Ph(3-F) H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-Ph( 2-F) H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-Ph(3-CF3) H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-Ph(4-CF3) H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-Ph(2-CF3) H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-C6H5 H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-Et H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-nPr H00C-CH2~DCha-Pro-Arg-CH2-0-nBu H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-iBu HOOC-CH2-DCha-Aze-Arg-CH2-O-CH2-CF3 HOOC-CH2-DCha-Pic-Arg-CH2-O-CH2-CF3 HOOC-CH2-DCha-Pic-Arg-CH2-O-nBu Me-DCha-Pro~Arg-CH2-0~CH2-CF3Me-S02-DCha-Pro-Arg-CH2-0-CH2-CF3Ch-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-CH2-CF3 (HOOC-CH2)2-DCha-Pro-Arg-CH2~0-CH2-CF3 (HOOC-CH2)2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-ÍBu H00C-CH2-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-nBu H00C-CH2-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-CH2-CF3H-(3-trans-Ph)-Pro-Arg-CH2-0-CH2-CF3H-(3-trans-Ch)-Pro-Arg-CH2-0-CH2-CF3HOOC-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-S-nBu H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-S02-nBu buď ako taká alebo vo forme fyziologicky prijateľnej soli vrátane stereomérov.
- 4. Zlúčenina podía nároku 1, ktorá je zvolená zHOOC-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-CH2-CF3,HOOC-CH2-DCha-Pic-Arg-CH2-O-CH2-CF3, HOOC-CH2-DCha-Pic-Arg-CH2-O-nBu,HOOC-CH2-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-nBu, H00C-CH2-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-CH2-CF3 aH00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-nBu.buď ako taká alebo vo forme fyziologicky prijateínej soli vrátane stereomérov.
- 5. Zlúčenina podía niektorého z nárokov 1 až 4 pre použitie v terapii.
- 6. Spôsob výroby zlúčeniny podía niektorého z nárokov 1 až 4, vyznačujúci sa tým, že (spôsob I) atóm halogénu sa nahradí skupinou R4Y” (kde Y predstavuje atóm kyslíka aleebo síry) v halogénmetylketóne všeobecného vzorca v ktorom ηW znamená koncovú chrániacu skupinu aminoskupiny aW2 znamená chrániacu skupinu, ketón sa redukuje na alkohol, odstráni sa koncová chrániaca skupina aminoskupiny, uskutoční sa zvyčajná peptidová kopulácia, potom sa alkohol oxiduje a získa sa chránený tripeptidketón, odstráni sa koncová chrániaca skupina aminoskupiny, potom sa uskutoční N-alkylácia a odstránia chrániace skupiny alebo sa nahradí chránený dipeptid pri kopulačnej reakcii uvedenej vyššie dipeptidom chráneným amino-koncovým N-alkylovaným N-trifluóracylom, potom sa uskutoční oxidácia a odstránenie chrániacej skupiny, alebo (spôsob II) uskutoční sa alkylácia R4-halogenidom a-ketolu všeobecného vozrca v ktoromΊ P ,W a W majú významy uvedene vyššie, a potom sa uskutočnia ďalšie reakcie ako pri spôsobe I, alebo (spôsob III) nechá sa reagovať zlúčenina všeobecného vzorca v ktoromW1 a W2 majú významy uvedené vyššie, so zlúčeninou všeobecného vzorca (t-ch2co)2o, v ktoromT predstavuje atóm halogénu, skupinu vzorca R4 O alebo R4S, a 4-dimetylaminopyridinom a potom sa uskutočnia reakcie ako je popísané pri spôsobe I a pokial je to žiadúce, vyrobí sa fyziologicky prijatreíná sol a v tých prípadoch, keď výsledkom reakcie je zmes stereomérov, tieto stereoméry sa poprípade delia zvyčajnými chromátografickými alebo rekryštalizačnými technickými postupmi, a pokiaí je to žiadúce, izoluje sa jediný stereomér.
- 7. Farmaceutický prostriedok, vyznačujúci sa týmf že obsahuje účinné množstvo niektorej zlúčeniny podlá nárokovI až 4a okrem toho najmenej jednu farmaceutický prijatelnú nosnú látku.
- 8. Použitie zlúčeniny podlá niektorého z nárokov 1 až 4 ako účinnej zložky pre výrobu farmaceutického prostriedku pre inhibíciu trombínu v ludskom alebo zvieracom organizme.
- 9. Použitie zlúčeniny podlá niektorého z nárokov 1 až 4 ako antikoagulačného prostriedku.
- 10.Spôsob dosahovania inhibície trombínu v ludskom alebo zvieracom organizme vyžadujúcom takúto inhibíciu, vyznačujúci sa t ý m, že sa tomuto organizmu podáva inhibične účinné množstvo zlúčeniny podlá niektorého z nárokov 1 až 4.
- 11.Spôsob ošetrovania lebo profylaxie trombózy a hyperkoagulovatelnosti v krvi a tkanivách ludského alebo zvieracieho organizmu, vyznačujúci sa tým, že sa podáva pacientovi vyžadujúcemu takéto ošetrenie alebo profylaxiu účinné množstvo zlúčeniny podlá niektorého z nárokov 1 až 4.
- 12.Zlúčenina, spôsob, farmaceutický prostriedok, použitie a spôsob použitia, ako sú nárokované v ktoromkoľvek z nárokov 1 ažII a ako sú v podstate popísané.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SE9102462A SE9102462D0 (sv) | 1991-08-28 | 1991-08-28 | New isosteric peptides |
PCT/SE1992/000584 WO1993005069A1 (en) | 1991-08-28 | 1992-08-25 | New isosteric peptides |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SK23394A3 true SK23394A3 (en) | 1994-08-10 |
Family
ID=20383557
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SK233-94A SK23394A3 (en) | 1991-08-28 | 1992-08-25 | New isosteric peptides |
Country Status (27)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US5424291A (sk) |
EP (2) | EP0530167A1 (sk) |
JP (1) | JP3353297B2 (sk) |
CN (1) | CN1069736A (sk) |
AP (1) | AP313A (sk) |
AT (1) | ATE212643T1 (sk) |
AU (1) | AU2499092A (sk) |
BG (1) | BG98583A (sk) |
CA (1) | CA2116527A1 (sk) |
CZ (1) | CZ38094A3 (sk) |
DE (1) | DE69232394T2 (sk) |
DZ (1) | DZ1613A1 (sk) |
FI (1) | FI940945A (sk) |
HU (1) | HUT66060A (sk) |
IL (1) | IL102840A0 (sk) |
IS (1) | IS3906A (sk) |
MA (1) | MA22632A1 (sk) |
MX (1) | MX9204767A (sk) |
NO (1) | NO940669L (sk) |
NZ (1) | NZ243675A (sk) |
SE (1) | SE9102462D0 (sk) |
SI (1) | SI9200193A (sk) |
SK (1) | SK23394A3 (sk) |
TN (1) | TNSN92076A1 (sk) |
TW (1) | TW221816B (sk) |
WO (1) | WO1993005069A1 (sk) |
ZA (1) | ZA925737B (sk) |
Families Citing this family (54)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CZ333492A3 (en) * | 1991-11-12 | 1993-09-15 | Lilly Co Eli | Dipeptide of l-azetidine-2-carboxylic acids and l-argininaldehyde, process of its preparation and pharmaceutical preparation in which said dipeptide is comprised |
SE9103612D0 (sv) * | 1991-12-04 | 1991-12-04 | Astra Ab | New peptide derivatives |
JPH06329627A (ja) * | 1993-05-03 | 1994-11-29 | Bristol Myers Squibb Co | グアニジニル−またはアミジニル−置換ヘテロ環トロンビンインヒビター |
US6984627B1 (en) | 1993-06-03 | 2006-01-10 | Astrazeneca Ab | Peptide derivatives |
US5783563A (en) * | 1993-06-03 | 1998-07-21 | Astra Aktiebolag | Method for treatment or prophylaxis of venous thrombosis |
SE9301916D0 (sv) * | 1993-06-03 | 1993-06-03 | Ab Astra | New peptides derivatives |
US5705487A (en) * | 1994-03-04 | 1998-01-06 | Eli Lilly And Company | Antithrombotic agents |
US5488037A (en) * | 1994-03-04 | 1996-01-30 | Eli Lilly And Company | Antithrombotic agents |
IL112795A (en) * | 1994-03-04 | 2001-01-28 | Astrazeneca Ab | Derivatives of peptides as antithrombotic drugs, their preparation, and pharmaceutical preparations containing them |
US5602101A (en) * | 1994-03-04 | 1997-02-11 | Eli Lilly And Company | Antithrombotic agents |
US5484772A (en) * | 1994-03-04 | 1996-01-16 | Eli Lilly And Company | Antithrombotic agents |
US5885967A (en) * | 1994-03-04 | 1999-03-23 | Eli Lilly And Company | Antithrombotic agents |
US5726159A (en) * | 1994-03-04 | 1998-03-10 | Eli Lilly And Company | Antithrombotic agents |
US5439888A (en) * | 1994-03-04 | 1995-08-08 | Eli Lilly And Company | Antithrombotic agents |
CA2143533A1 (en) * | 1994-03-04 | 1995-09-05 | Kenneth D. Kurz | Antithrombotic agents |
US5707966A (en) * | 1994-03-04 | 1998-01-13 | Eli Lilly And Company | Antithrombotic agents |
ZA951618B (en) * | 1994-03-04 | 1996-08-27 | Lilly Co Eli | Antithrombotic agents |
US5436229A (en) * | 1994-03-04 | 1995-07-25 | Eli Lilly And Company | Bisulfite adducts of arginine aldehydes |
DE4421052A1 (de) | 1994-06-17 | 1995-12-21 | Basf Ag | Neue Thrombininhibitoren, ihre Herstellung und Verwendung |
SE9404196D0 (sv) * | 1994-12-02 | 1994-12-02 | Astra Ab | New antithrombotic formulation |
JPH11500120A (ja) * | 1995-02-17 | 1999-01-06 | ビーエーエスエフ アクチェンゲゼルシャフト | 新規なトロンビンインヒビター |
US5710130A (en) * | 1995-02-27 | 1998-01-20 | Eli Lilly And Company | Antithrombotic agents |
US5914319A (en) * | 1995-02-27 | 1999-06-22 | Eli Lilly And Company | Antithrombotic agents |
SA96170106A (ar) | 1995-07-06 | 2005-12-03 | أسترا أكتيبولاج | مشتقات حامض أميني جديدة |
TWI238827B (en) | 1995-12-21 | 2005-09-01 | Astrazeneca Ab | Prodrugs of thrombin inhibitors |
SE9602263D0 (sv) | 1996-06-07 | 1996-06-07 | Astra Ab | New amino acid derivatives |
US5840733A (en) * | 1996-07-01 | 1998-11-24 | Redcell, Canada, Inc. | Methods and compositions for producing novel conjugates of thrombin inhibitors and endogenous carriers resulting in anti-thrombins with extended lifetimes |
SE9602646D0 (sv) | 1996-07-04 | 1996-07-04 | Astra Ab | Pharmaceutically-useful compounds |
AR013084A1 (es) | 1997-06-19 | 2000-12-13 | Astrazeneca Ab | Derivados de amidino utiles como inhibidores de la trombina, composicion farmaceutica, utilizacion de dichos compuestos para la preparacion demedicamentos y proceso para la preparacion de los compuestos mencionados |
SE9704543D0 (sv) | 1997-12-05 | 1997-12-05 | Astra Ab | New compounds |
WO1999037668A1 (de) | 1998-01-26 | 1999-07-29 | Basf Aktiengesellschaft | Thrombininhibitoren |
US6417161B1 (en) | 1998-04-24 | 2002-07-09 | 3-Dimensional Pharmaceuticals, Inc. | Amino acid amidinohydrazones, alkoxyguanidines and aminoguanidines as protease inhibitors |
SE9802973D0 (sv) | 1998-09-03 | 1998-09-03 | Astra Ab | Immediate release tablet |
SE9804313D0 (sv) | 1998-12-14 | 1998-12-14 | Astra Ab | New compounds |
DE60037183T2 (de) | 1999-01-13 | 2008-10-09 | Astrazeneca Ab | Neue amidinbenzylamin-derivate und ihre verwendung als thrombin-inhibitoren |
AR023510A1 (es) | 1999-04-21 | 2002-09-04 | Astrazeneca Ab | Un equipo de partes, formulacion farmaceutica y uso de un inhibidor de trombina. |
US6353032B1 (en) * | 1999-11-09 | 2002-03-05 | Alcon Universal Ltd. | Phospholipids of hydroxyeicosatetraenoic acid-like derivatives and methods of use |
SE0001803D0 (sv) | 2000-05-16 | 2000-05-16 | Astrazeneca Ab | New compounds i |
US6433186B1 (en) | 2000-08-16 | 2002-08-13 | Astrazeneca Ab | Amidino derivatives and their use as thormbin inhibitors |
US7129233B2 (en) | 2000-12-01 | 2006-10-31 | Astrazeneca Ab | Mandelic acid derivatives and their use as thrombin inhibitors |
AR035216A1 (es) | 2000-12-01 | 2004-05-05 | Astrazeneca Ab | Derivados de acido mandelico ,derivados farmaceuticamente aceptables, uso de estos derivados para la fabricacion de medicamentos, metodos de tratamiento ,procesos para la preparacion de estos derivados, y compuestos intermediarios |
AR034517A1 (es) | 2001-06-21 | 2004-02-25 | Astrazeneca Ab | Formulacion farmaceutica |
SE0201661D0 (sv) | 2002-05-31 | 2002-05-31 | Astrazeneca Ab | New salts |
SE0201659D0 (sv) | 2002-05-31 | 2002-05-31 | Astrazeneca Ab | Modified release pharmaceutical formulation |
US7781424B2 (en) | 2003-05-27 | 2010-08-24 | Astrazeneca Ab | Modified release pharmaceutical formulation |
US7795205B2 (en) | 2004-04-12 | 2010-09-14 | Canyon Pharmaceuticals, Inc. | Methods for effecting regression of tumor mass and size in a metastasized pancreatic tumor |
TW200827336A (en) | 2006-12-06 | 2008-07-01 | Astrazeneca Ab | New crystalline forms |
RU2728785C2 (ru) | 2014-10-06 | 2020-07-31 | Кортексим, Инк. | Ингибиторы лизинспецифичного гингипаина |
JP6877424B2 (ja) | 2015-11-09 | 2021-05-26 | コーテクシーミー, インコーポレイテッド | アルギニンジンジパインの阻害剤 |
WO2017156071A1 (en) | 2016-03-09 | 2017-09-14 | Blade Therapeutics, Inc. | Cyclic keto-amide compounds as calpain modulators and methods of production and use thereof |
WO2018009417A1 (en) | 2016-07-05 | 2018-01-11 | Blade Therapeutics, Inc. | Calpain modulators and therapeutic uses thereof |
TWI787202B (zh) | 2016-09-16 | 2022-12-21 | 美商昆斯治療公司 | 離胺酸牙齦蛋白酶(gingipain)之酮抑制劑 |
KR20190063473A (ko) | 2016-09-28 | 2019-06-07 | 블레이드 테라퓨틱스, 인크. | 칼페인 조정자 및 그 치료학적 용도 |
WO2019190885A1 (en) * | 2018-03-28 | 2019-10-03 | Blade Therapeutics, Inc. | Calpain modulators and therapeutic uses thereof |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4318904A (en) * | 1980-04-25 | 1982-03-09 | Research Corporation | Peptide affinity labels for thrombin and other trypsin-like proteases |
GB8305985D0 (en) * | 1983-03-04 | 1983-04-07 | Szelke M | Enzyme inhibition |
DE3505555A1 (de) * | 1985-02-18 | 1986-09-11 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | Neue oligopeptidylargininolderivate und deren homologe, verfahren zu deren herstellung, deren verwendung und diese enthaltende mittel |
IL99527A (en) * | 1990-09-28 | 1997-08-14 | Lilly Co Eli | Tripeptide antithrombotic agents |
-
1991
- 1991-08-28 SE SE9102462A patent/SE9102462D0/xx unknown
-
1992
- 1992-07-22 NZ NZ243675A patent/NZ243675A/xx unknown
- 1992-07-30 ZA ZA925737A patent/ZA925737B/xx unknown
- 1992-08-17 IL IL102840A patent/IL102840A0/xx unknown
- 1992-08-17 AP APAP/P/1992/000418A patent/AP313A/en active
- 1992-08-18 MX MX9204767A patent/MX9204767A/es unknown
- 1992-08-18 DZ DZ920109A patent/DZ1613A1/fr active
- 1992-08-19 TW TW081106578A patent/TW221816B/zh active
- 1992-08-25 WO PCT/SE1992/000584 patent/WO1993005069A1/en active IP Right Grant
- 1992-08-25 EP EP92850201A patent/EP0530167A1/en active Pending
- 1992-08-25 JP JP50513493A patent/JP3353297B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1992-08-25 CZ CS94380A patent/CZ38094A3/cs unknown
- 1992-08-25 DE DE69232394T patent/DE69232394T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-25 SK SK233-94A patent/SK23394A3/sk unknown
- 1992-08-25 EP EP92918722A patent/EP0605462B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-25 HU HU9400589A patent/HUT66060A/hu unknown
- 1992-08-25 AT AT92918722T patent/ATE212643T1/de not_active IP Right Cessation
- 1992-08-25 CA CA002116527A patent/CA2116527A1/en not_active Abandoned
- 1992-08-25 AU AU24990/92A patent/AU2499092A/en not_active Abandoned
- 1992-08-26 MA MA22922A patent/MA22632A1/fr unknown
- 1992-08-27 TN TNTNSN92076A patent/TNSN92076A1/fr unknown
- 1992-08-27 SI SI19929200193A patent/SI9200193A/sl unknown
- 1992-08-27 IS IS3906A patent/IS3906A/is unknown
- 1992-08-28 CN CN92109600A patent/CN1069736A/zh active Pending
-
1994
- 1994-02-25 BG BG98583A patent/BG98583A/bg unknown
- 1994-02-25 NO NO940669A patent/NO940669L/no unknown
- 1994-02-28 FI FI940945A patent/FI940945A/fi not_active Application Discontinuation
- 1994-08-10 US US08/288,657 patent/US5424291A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
BG98583A (bg) | 1994-09-30 |
TNSN92076A1 (fr) | 1993-06-08 |
HU9400589D0 (en) | 1994-05-30 |
DZ1613A1 (fr) | 2002-02-17 |
WO1993005069A1 (en) | 1993-03-18 |
CZ38094A3 (en) | 1994-08-17 |
NO940669L (no) | 1994-04-19 |
NZ243675A (en) | 1994-06-27 |
AP313A (en) | 1994-02-10 |
FI940945A0 (fi) | 1994-02-28 |
IL102840A0 (en) | 1993-01-31 |
IS3906A (is) | 1993-03-01 |
DE69232394D1 (de) | 2002-03-14 |
CA2116527A1 (en) | 1993-03-18 |
JPH06510059A (ja) | 1994-11-10 |
SE9102462D0 (sv) | 1991-08-28 |
MX9204767A (es) | 1993-05-01 |
EP0605462A1 (en) | 1994-07-13 |
EP0605462B1 (en) | 2002-01-30 |
ZA925737B (en) | 1993-03-01 |
AU2499092A (en) | 1993-04-05 |
FI940945A (fi) | 1994-02-28 |
SI9200193A (en) | 1993-06-30 |
US5424291A (en) | 1995-06-13 |
MA22632A1 (fr) | 1993-04-01 |
TW221816B (sk) | 1994-03-21 |
DE69232394T2 (de) | 2002-08-22 |
ATE212643T1 (de) | 2002-02-15 |
HUT66060A (en) | 1994-09-28 |
EP0530167A1 (en) | 1993-03-03 |
AP9200418A0 (en) | 1992-10-31 |
NO940669D0 (no) | 1994-02-25 |
JP3353297B2 (ja) | 2002-12-03 |
CN1069736A (zh) | 1993-03-10 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
SK23394A3 (en) | New isosteric peptides | |
US5055451A (en) | Aryloxy and arylacyloxy methyl ketones as thiol protease inhibitors | |
US6162828A (en) | Cysteine protease inhibitor | |
EP0183398B1 (en) | Angiotensin converting enzyme inhibitors and their production and use as pharmaceuticals | |
SK63194A3 (en) | Peptide derivatives | |
TW487708B (en) | Acylguanidine derivatives and their use as serine protease inhibitors | |
AU691243B2 (en) | Novel mercaptoacetylamido 1,3,4,5-tetrahydro-benzo(c)azepin-3-one disulfide derivatives useful as inhibitors of enkephalinase and ace | |
JPH02202898A (ja) | ジペプチドの酵素‐阻害尿素誘導体 | |
FR2518088A1 (fr) | Nouveaux derives d'aminoacides, et leur application therapeutique | |
JPH11503455A (ja) | トロンビン阻害剤 | |
TW442452B (en) | Serine protease inhibitors having an alkynylamino side chain | |
CA2005337A1 (en) | Use of peptide isosteres as retroviral protease inhibitors | |
CZ277998A3 (cs) | Inhibitory serinproteázy a farmaceutický prostředek | |
US5158936A (en) | Aryloxy and arylacyloxy methyl ketones as thiol protease inhibitors | |
HU207508B (en) | Process for producing renin-inhibiting glycolic acid derivatives and pharmaceutical compositions containing them | |
JPH05222005A (ja) | 3(s)−アミノ−4−シクロヘキシル−2(r)−ヒドロキシ酪酸若しくは4−シクロヘキシル−(2r,3s)−ジヒドロキシ酪酸又は関連類似体を含む環状レニン阻害剤 | |
CA2074967A1 (en) | Hexapeptide | |
US9045524B2 (en) | Selective caspase inhibitors and uses thereof | |
JPH02503799A (ja) | メルカプト‐アシルアミノ酸抗高血圧剤 | |
HU196609B (en) | Process for producing new peptides and pharmaceutics comprising them | |
HU208427B (en) | Process for producing renine-inhibiting amino-acid derivatives and pharmaceutical compositions containing them | |
EP0158947A2 (en) | Amino thiol dipeptides | |
JPH09295996A (ja) | システインプロテアーゼ阻害化合物 | |
HUT51291A (en) | Process for production of new derivatives of dipeptide with inhibitor effect | |
IE65539B1 (en) | Trifluoromethyl mercaptan and mercaptoacyl derivatives and method of using same |